JPS6313679B2 - - Google Patents
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- JPS6313679B2 JPS6313679B2 JP4562883A JP4562883A JPS6313679B2 JP S6313679 B2 JPS6313679 B2 JP S6313679B2 JP 4562883 A JP4562883 A JP 4562883A JP 4562883 A JP4562883 A JP 4562883A JP S6313679 B2 JPS6313679 B2 JP S6313679B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- yeast
- oligosaccharides
- maltotriose
- yeast cells
- immobilized
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
本発明はオリゴ糖、特にマルトトリオース
（G3）以下の低分子オリゴ糖を含有しないマルト
テトラオース（G4）以上のマルトオリゴ糖の製
造法に関するものである。さらに詳しくは、酵母
にマルトトリオース（G3）以下の低分子オリゴ
糖を分解するα―グルコシダーゼ活性を誘導蓄積
せしめた後、これを固定化処理して得られた固定
化酵母菌体を、オリゴ糖を含有する糖液に添加し
て作用させることにより糖液中のマルトトリオー
ス（G3），マルトース（G2），グルコース（G1）
を資化し、マルトテトラオース（G4）以上から
なるマルトオリゴ糖液を製造する方法に関するも
のである。 従来、オリゴ糖の調製には多くの方法が試みら
れている。例えばペーパークロマトグラフイ，セ
ルロースカラムクロマトグラフイ，カーボンカラ
ムクロマトグラフイ，ポリアクリルアミドゲルカ
ラムクロマトグラフイ等による分離法が試みられ
ている。 しかしながら、これらのクロマト式分離による
オリゴ糖の調製においては、試料の負荷量が小さ
く、多量に分取するには分離装置の規模も大きく
なり問題点が多い。 また、最近、オリゴ糖の製造方法としてサツカ
ロマイセス属の酵母とマルターゼの両者を添加し
てマルトテトラオース（G4）以下のオリゴ糖を
分解（資化）する方法が提案されている（特公昭
56−12437号）。上記方法は、酵母菌体の有する低
分子オリゴ糖資化能を促進させるために酵母由来
のマルターゼを酵母菌体と併用するものであり、
マルトテトラオース以下の低分子オリゴ糖を実質
的に含有しないオリゴ糖の製法として優れた一方
法であるが、酵母菌体をそのまま使用するために
糖液中からの菌体の除去や菌体内から溶出する色
素などの夾雑物の除去精製が困難であるばかりで
なく、共存させるマルターゼによる逆合成反応が
起りやすく、不必要な分岐構造を有する各種オリ
ゴ糖が生成するなどの問題点を有する。 また、市販酵母菌体単独で低分子オリゴ糖を資
化させた場合には、当然その有する資化能力が低
いために多量の菌体が必要であり、かつ長時間の
反応が必要である。 一方、最近、澱粉に作用してマルトトリオース
（G3），マルトテトラオース（G4），マルトペンタ
オース（G5）およびマルトヘキサオース（G6）
をそれぞれ生成する新しい酵素が相ついで発見さ
れ、それらアミラーゼを使用する方法がオリゴ糖
の工業的生産の為には最も効率良い方法と考えら
れている（澱粉科学第28巻，第２号，P92，
1981）。 しかしながら、上記オリゴ糖生成酵素は澱粉あ
るいはアミロースに作用してそれぞれのオリゴ糖
を主成分として生成するが、生成物そのものも分
解する作用があるため、最終的生産物として、グ
ルコース（G1），マルトース（G2）およびマルト
トリオース（G3）等の低分子オリゴ糖の生成が
避けられず、したがつて、この低分子オリゴ糖の
除去が、高純度マルトオリゴ糖の製造には不可欠
である。 以上の如く、従来の方法においては、目的とす
る各種オリゴ糖を高純度でかつ効率よく経済的有
利に製造することは困難であつた。 したがつて、本発明の目的は医薬品，食品ある
いはアミラーゼ分析用基質として有用な高純度マ
ルトオリゴ糖を簡易にかつ効率よく経済的有利に
製造することにある。 上記目的達成のため、本発明者らは鋭意研究し
た結果、サツカロマイセス属の酵母菌体を、炭素
源としてマルトースおよび／またはマルトトリオ
ースを含有する栄養培地にて該酵母が実質的に増
殖しない程度の時間培養し、該酵母菌体内にマル
トトリオース（G3）以下の低分子オリゴ糖を分
解する能力を有するα―グルコシダーゼを誘導蓄
積せしめた後、これを固定化処理して得られる固
定化酵母菌体は、未処理の生酵母菌体に比し、至
適PH，至適温度が改善されることおよびこの酵母
菌体をオリゴ糖含有糖液に添加して作用させると
マルトトリオース（G3）以下の低分子オリゴ糖
をほとんど含まない高純度のマルトオリゴ糖を効
率よく製造することができることを見い出し、本
発明を完成した。 すなわち本発明は、サツカロマイセス属の酵母
菌体を、炭素源としてマルトースおよび／または
マルトトリオースを含む栄養培地にて好気的に培
養し、該酵母菌体内にα―グルコシダーゼ活性を
誘導蓄積せしめた後、これを固定化処理して得ら
れた固定化酵母菌体を、オリゴ糖を含有する糖液
に添加作用させることにより、糖液中のマルトト
リオース（G3），マルトース（G2）およびグルコ
ース（G1）を資化せしめてマルトテトラオース
（G4）以上の高純度マルトオリゴ糖を製造する方
法に係るものである。 以下本発明を詳細に説明する。 本発明で使用する酵母菌体は、サツカロマイセ
ス・セレビシエ（Saccharomyces cerevisiae），
サツカロマイセス・カールスベルゲンシス
（Saccharomyces carlsbergensis），サツカロマ
イセス・イタリクス（（Saccharomyces
italicus），サツカロマイセス・ウバルム
（Saccharomyces uvarum）等のサツカロマイセ
ス属の酵母のいずれも用いることができるが、本
発明においてはこれら酵母菌体を炭素源としてマ
ルトースおよび／またはマルトトリオースを含む
培地にて30℃で約５〜15時間好気的に培養するこ
とによりマルトトリオース（G3）以下の低分子
オリゴ糖を分解するα―グルコシダーゼ活性を増
大せしめるとともに、得られた酵母菌体を固定化
することが必要とされる。酵母菌体の固定化は既
知の手法によつて行なえばよく、例えば酵母菌体
をアルギン酸ソーダ，ゼラチン，寒天，カラギー
ナン、アクリルアミドゲル等の包括剤によつて包
埋するか、あるいは包埋中または包埋後に、さら
にグルタルアルデハイド等の架橋剤により架橋処
理することによつて行なうことができる。例えば
アルギン酸ソーダを用いる場合には、酵母を2.5
％のアルギン酸ソーダ溶液に１：１の割合で添加
し充分に混合した後、撹拌しながら約２％の
CaCl2溶液中に滴下させることにより約２〜３mm
の球状の固定化酵母を得ることができる。 次に本発明においては、上記固定化酵母菌体を
オリゴ糖を含有する糖液に添加して作用させる。
ここでオリゴ糖を含む糖液とは、澱粉，アミロー
ス，アミロペクチンのいずれかを糊化あるいは軽
度に液化した後、各種オリゴ糖生成酵素を作用さ
せることにより得られるものである。オリゴ糖生
成酵素としてはシユードモナス・スタツチエリ
（Pseudomonas stuzeri）の生産するマルトテト
ラオース（G4）生成酵素，バチルス・リケニホ
ルミス（Bacillus licheniformis）の生産するマ
ルトペンタオース（G5）生成酵素，エアロバク
ター・エアロゲネス（Aerobacter aerogenes）
の生産するマルトヘキサオース（G6）生成酵素
等から目的とするオリゴ糖の種類により適宜選択
して用いればよい。 本発明により前記固定化酵母菌体をオリゴ糖含
有糖液に添加して作用させた場合、該酵母菌体内
に蓄積されたα―グルコシダーゼ活性によりマル
トトリオース（G3）以下の低分子オリゴ糖が分
解資化されてマルトテトラオース（G4）以上の
マルトオリゴ糖が高純度にて得られる。また、酵
母菌体が固定化されているため、遊離酵母菌体の
除去という操作を必要とすることなく、効率よく
目的とするオリゴ糖を製造することができる。 以下、本発明を実施例をもつて、具体的に説明
する。なお、実施例において使用した材料および
分析方法は以下の通りである。 (1) 分析法 オリゴ糖の定量分析は、貝沼らの方法
（Journal of chromatography，212.126―
131.1981）に準じ、高速液体クロマトグラフイ
（HPLC）によつた。また、定性分析は、ｎ―ブ
タノール／ピリジン／水＝６／４／４の展開剤を
用いた高温（60℃）上昇法によつた。展開後グル
コアミラーゼ処理し、アルカリ硝酸銀法によつて
発色検出した。 (2) 酵母 酵母は市販のパン酵母（オリエンタル酵母工業
(株)製，圧搾酵母）を次の組織培地で好気的に振と
う処理した後、遠心分離した菌体を集めた。 チアミン塩酸塩 20mg ピリドキシン塩酸塩 20mg ニコチン酸 20mg MgSO4・7H2O 10ｇ （NH4）2SO4 10ｇ CO（NH2）2 20ｇ マルトース 75ｇ マルトトリオース 75ｇ 1/10Ｍリン酸緩衝液（PH６） 500ml 酵 母 100ｇ 以上の組成で５の三角フラスコを用いてロー
タリー振とう機（30℃，200r.p.m.）で５時間振
とう処理した。本条件では添加した酵母菌体は実
質的に増殖しなかつた。 上記方法により調製した酵母菌体のマルトトリ
オース以下の低分子オリゴ糖に対する資化速度を
処理前の酵母と比較した結果、下記第１表に示す
ように資化速度（特に、マルトース，マルトトリ
オース）が著しく改善されていることがわかる。
（G3）以下の低分子オリゴ糖を含有しないマルト
テトラオース（G4）以上のマルトオリゴ糖の製
造法に関するものである。さらに詳しくは、酵母
にマルトトリオース（G3）以下の低分子オリゴ
糖を分解するα―グルコシダーゼ活性を誘導蓄積
せしめた後、これを固定化処理して得られた固定
化酵母菌体を、オリゴ糖を含有する糖液に添加し
て作用させることにより糖液中のマルトトリオー
ス（G3），マルトース（G2），グルコース（G1）
を資化し、マルトテトラオース（G4）以上から
なるマルトオリゴ糖液を製造する方法に関するも
のである。 従来、オリゴ糖の調製には多くの方法が試みら
れている。例えばペーパークロマトグラフイ，セ
ルロースカラムクロマトグラフイ，カーボンカラ
ムクロマトグラフイ，ポリアクリルアミドゲルカ
ラムクロマトグラフイ等による分離法が試みられ
ている。 しかしながら、これらのクロマト式分離による
オリゴ糖の調製においては、試料の負荷量が小さ
く、多量に分取するには分離装置の規模も大きく
なり問題点が多い。 また、最近、オリゴ糖の製造方法としてサツカ
ロマイセス属の酵母とマルターゼの両者を添加し
てマルトテトラオース（G4）以下のオリゴ糖を
分解（資化）する方法が提案されている（特公昭
56−12437号）。上記方法は、酵母菌体の有する低
分子オリゴ糖資化能を促進させるために酵母由来
のマルターゼを酵母菌体と併用するものであり、
マルトテトラオース以下の低分子オリゴ糖を実質
的に含有しないオリゴ糖の製法として優れた一方
法であるが、酵母菌体をそのまま使用するために
糖液中からの菌体の除去や菌体内から溶出する色
素などの夾雑物の除去精製が困難であるばかりで
なく、共存させるマルターゼによる逆合成反応が
起りやすく、不必要な分岐構造を有する各種オリ
ゴ糖が生成するなどの問題点を有する。 また、市販酵母菌体単独で低分子オリゴ糖を資
化させた場合には、当然その有する資化能力が低
いために多量の菌体が必要であり、かつ長時間の
反応が必要である。 一方、最近、澱粉に作用してマルトトリオース
（G3），マルトテトラオース（G4），マルトペンタ
オース（G5）およびマルトヘキサオース（G6）
をそれぞれ生成する新しい酵素が相ついで発見さ
れ、それらアミラーゼを使用する方法がオリゴ糖
の工業的生産の為には最も効率良い方法と考えら
れている（澱粉科学第28巻，第２号，P92，
1981）。 しかしながら、上記オリゴ糖生成酵素は澱粉あ
るいはアミロースに作用してそれぞれのオリゴ糖
を主成分として生成するが、生成物そのものも分
解する作用があるため、最終的生産物として、グ
ルコース（G1），マルトース（G2）およびマルト
トリオース（G3）等の低分子オリゴ糖の生成が
避けられず、したがつて、この低分子オリゴ糖の
除去が、高純度マルトオリゴ糖の製造には不可欠
である。 以上の如く、従来の方法においては、目的とす
る各種オリゴ糖を高純度でかつ効率よく経済的有
利に製造することは困難であつた。 したがつて、本発明の目的は医薬品，食品ある
いはアミラーゼ分析用基質として有用な高純度マ
ルトオリゴ糖を簡易にかつ効率よく経済的有利に
製造することにある。 上記目的達成のため、本発明者らは鋭意研究し
た結果、サツカロマイセス属の酵母菌体を、炭素
源としてマルトースおよび／またはマルトトリオ
ースを含有する栄養培地にて該酵母が実質的に増
殖しない程度の時間培養し、該酵母菌体内にマル
トトリオース（G3）以下の低分子オリゴ糖を分
解する能力を有するα―グルコシダーゼを誘導蓄
積せしめた後、これを固定化処理して得られる固
定化酵母菌体は、未処理の生酵母菌体に比し、至
適PH，至適温度が改善されることおよびこの酵母
菌体をオリゴ糖含有糖液に添加して作用させると
マルトトリオース（G3）以下の低分子オリゴ糖
をほとんど含まない高純度のマルトオリゴ糖を効
率よく製造することができることを見い出し、本
発明を完成した。 すなわち本発明は、サツカロマイセス属の酵母
菌体を、炭素源としてマルトースおよび／または
マルトトリオースを含む栄養培地にて好気的に培
養し、該酵母菌体内にα―グルコシダーゼ活性を
誘導蓄積せしめた後、これを固定化処理して得ら
れた固定化酵母菌体を、オリゴ糖を含有する糖液
に添加作用させることにより、糖液中のマルトト
リオース（G3），マルトース（G2）およびグルコ
ース（G1）を資化せしめてマルトテトラオース
（G4）以上の高純度マルトオリゴ糖を製造する方
法に係るものである。 以下本発明を詳細に説明する。 本発明で使用する酵母菌体は、サツカロマイセ
ス・セレビシエ（Saccharomyces cerevisiae），
サツカロマイセス・カールスベルゲンシス
（Saccharomyces carlsbergensis），サツカロマ
イセス・イタリクス（（Saccharomyces
italicus），サツカロマイセス・ウバルム
（Saccharomyces uvarum）等のサツカロマイセ
ス属の酵母のいずれも用いることができるが、本
発明においてはこれら酵母菌体を炭素源としてマ
ルトースおよび／またはマルトトリオースを含む
培地にて30℃で約５〜15時間好気的に培養するこ
とによりマルトトリオース（G3）以下の低分子
オリゴ糖を分解するα―グルコシダーゼ活性を増
大せしめるとともに、得られた酵母菌体を固定化
することが必要とされる。酵母菌体の固定化は既
知の手法によつて行なえばよく、例えば酵母菌体
をアルギン酸ソーダ，ゼラチン，寒天，カラギー
ナン、アクリルアミドゲル等の包括剤によつて包
埋するか、あるいは包埋中または包埋後に、さら
にグルタルアルデハイド等の架橋剤により架橋処
理することによつて行なうことができる。例えば
アルギン酸ソーダを用いる場合には、酵母を2.5
％のアルギン酸ソーダ溶液に１：１の割合で添加
し充分に混合した後、撹拌しながら約２％の
CaCl2溶液中に滴下させることにより約２〜３mm
の球状の固定化酵母を得ることができる。 次に本発明においては、上記固定化酵母菌体を
オリゴ糖を含有する糖液に添加して作用させる。
ここでオリゴ糖を含む糖液とは、澱粉，アミロー
ス，アミロペクチンのいずれかを糊化あるいは軽
度に液化した後、各種オリゴ糖生成酵素を作用さ
せることにより得られるものである。オリゴ糖生
成酵素としてはシユードモナス・スタツチエリ
（Pseudomonas stuzeri）の生産するマルトテト
ラオース（G4）生成酵素，バチルス・リケニホ
ルミス（Bacillus licheniformis）の生産するマ
ルトペンタオース（G5）生成酵素，エアロバク
ター・エアロゲネス（Aerobacter aerogenes）
の生産するマルトヘキサオース（G6）生成酵素
等から目的とするオリゴ糖の種類により適宜選択
して用いればよい。 本発明により前記固定化酵母菌体をオリゴ糖含
有糖液に添加して作用させた場合、該酵母菌体内
に蓄積されたα―グルコシダーゼ活性によりマル
トトリオース（G3）以下の低分子オリゴ糖が分
解資化されてマルトテトラオース（G4）以上の
マルトオリゴ糖が高純度にて得られる。また、酵
母菌体が固定化されているため、遊離酵母菌体の
除去という操作を必要とすることなく、効率よく
目的とするオリゴ糖を製造することができる。 以下、本発明を実施例をもつて、具体的に説明
する。なお、実施例において使用した材料および
分析方法は以下の通りである。 (1) 分析法 オリゴ糖の定量分析は、貝沼らの方法
（Journal of chromatography，212.126―
131.1981）に準じ、高速液体クロマトグラフイ
（HPLC）によつた。また、定性分析は、ｎ―ブ
タノール／ピリジン／水＝６／４／４の展開剤を
用いた高温（60℃）上昇法によつた。展開後グル
コアミラーゼ処理し、アルカリ硝酸銀法によつて
発色検出した。 (2) 酵母 酵母は市販のパン酵母（オリエンタル酵母工業
(株)製，圧搾酵母）を次の組織培地で好気的に振と
う処理した後、遠心分離した菌体を集めた。 チアミン塩酸塩 20mg ピリドキシン塩酸塩 20mg ニコチン酸 20mg MgSO4・7H2O 10ｇ （NH4）2SO4 10ｇ CO（NH2）2 20ｇ マルトース 75ｇ マルトトリオース 75ｇ 1/10Ｍリン酸緩衝液（PH６） 500ml 酵 母 100ｇ 以上の組成で５の三角フラスコを用いてロー
タリー振とう機（30℃，200r.p.m.）で５時間振
とう処理した。本条件では添加した酵母菌体は実
質的に増殖しなかつた。 上記方法により調製した酵母菌体のマルトトリ
オース以下の低分子オリゴ糖に対する資化速度を
処理前の酵母と比較した結果、下記第１表に示す
ように資化速度（特に、マルトース，マルトトリ
オース）が著しく改善されていることがわかる。
【表】
(3) 固定化酵母の製造方法
(2)で調製した酵母を遠心分離により集め、2.5
％のアルギン酸ソーダ溶液に１対１の割合で添加
して充分に混合した後、撹拌しながら約２％の
CaCl2溶液中に滴下して約２mm〜３mmの球状の固
定化酵母を得た。次いで、東洋濾紙（No.5B）で
濾過して試験に供した。 上記の固定化酵母は(2)で調製した酵母とマルト
トリオース以下の低分子オリゴ糖に対する資化能
を比較した結果、下記第２表に示す如く、ほぼ同
等の資化能を有し、固定化操作による悪影響はほ
とんど観察されなかつた。
％のアルギン酸ソーダ溶液に１対１の割合で添加
して充分に混合した後、撹拌しながら約２％の
CaCl2溶液中に滴下して約２mm〜３mmの球状の固
定化酵母を得た。次いで、東洋濾紙（No.5B）で
濾過して試験に供した。 上記の固定化酵母は(2)で調製した酵母とマルト
トリオース以下の低分子オリゴ糖に対する資化能
を比較した結果、下記第２表に示す如く、ほぼ同
等の資化能を有し、固定化操作による悪影響はほ
とんど観察されなかつた。
【表】
さらに、第１図および第２図から明らかなよう
に、本固定化酵母は生酵母に比し広いPH範囲で安
定であり、かつ耐熱性に優れ、工業的な使用に十
分耐え得るものである。 実施例 １ 短鎖長アミロース（林原生物化学研究所製，平
均重合度（）＝23）10ｇを200mlの熱水に溶解
し、Robytらの方法（Archives.Biochem.
Biophys.，145，105，1971）により調製したマ
ルトテトラオース生成酵素（1IU／ｇ基質）をPH
6.7，50℃で48時間作用させてグルコース3.1％，
マルトース7.5％，マルトトリオース12.3％，マ
ルトテトラオース77.1％の糖組成を有するオリゴ
糖含有糖液を調製した。 次いで、前記(3)で得た固定化酵母５ｇ（酵母量
2.5ｇ）を添加し、45℃，PH5.5で20時間撹拌しつ
つ反応させた。 なお、比較のため、前記(2)で使用した市販パン
酵母を上記オリゴ糖含有糖液に2.5ｇ，５ｇ，10
ｇ，20ｇずつ各々添加し40℃，PH4.5で各々20時
間撹拌しつつ反応させた。 このようにして得られた本発明品および比較品
の糖組成は下記第３表の通りである。
に、本固定化酵母は生酵母に比し広いPH範囲で安
定であり、かつ耐熱性に優れ、工業的な使用に十
分耐え得るものである。 実施例 １ 短鎖長アミロース（林原生物化学研究所製，平
均重合度（）＝23）10ｇを200mlの熱水に溶解
し、Robytらの方法（Archives.Biochem.
Biophys.，145，105，1971）により調製したマ
ルトテトラオース生成酵素（1IU／ｇ基質）をPH
6.7，50℃で48時間作用させてグルコース3.1％，
マルトース7.5％，マルトトリオース12.3％，マ
ルトテトラオース77.1％の糖組成を有するオリゴ
糖含有糖液を調製した。 次いで、前記(3)で得た固定化酵母５ｇ（酵母量
2.5ｇ）を添加し、45℃，PH5.5で20時間撹拌しつ
つ反応させた。 なお、比較のため、前記(2)で使用した市販パン
酵母を上記オリゴ糖含有糖液に2.5ｇ，５ｇ，10
ｇ，20ｇずつ各々添加し40℃，PH4.5で各々20時
間撹拌しつつ反応させた。 このようにして得られた本発明品および比較品
の糖組成は下記第３表の通りである。
【表】
さらに、本発明で得られた固定化酵母を上記と
同一条件で10回繰返して使用し、得られた製品の
糖組成を検討した結果、下記第４表に示す通り、
酵母は殆んど失活することなく、長期間安定に使
用可能であることがわかつた。 以上の結果から明らかなように、本発明による
固定化酵母は、温度やPHに安定でマルトトリオー
ス以下の低分子オリゴ糖の資化能力に優れている
ばかりでなく、繰返し再使用可能である。したが
つて、これを用いることにより高純度のオリゴ糖
を経済的有利に製造することができる。
同一条件で10回繰返して使用し、得られた製品の
糖組成を検討した結果、下記第４表に示す通り、
酵母は殆んど失活することなく、長期間安定に使
用可能であることがわかつた。 以上の結果から明らかなように、本発明による
固定化酵母は、温度やPHに安定でマルトトリオー
ス以下の低分子オリゴ糖の資化能力に優れている
ばかりでなく、繰返し再使用可能である。したが
つて、これを用いることにより高純度のオリゴ糖
を経済的有利に製造することができる。
【表】
実施例 ２
もちとうもろこし澱粉１Kgを約20の熱水中で
溶解させ、水酸化カルシウムでPH7.0に調整した
後、バチルス・リケニホルミスの生産する細菌液
化型α―アミラーゼ（Novo社製，商品名ターマ
ミル120L，132.4KNu／ｇ）を0.4KNu／ｇ澱粉
およびエアロバクター・エアロゲネスの生産する
枝切り酵素プルラナーゼ（1500U／ｇ）を1.5U／
ｇ澱粉添加し、55℃で30時間反応せしめ、グルコ
ース４％，マルトース16％，マルトトリオース23
％，マルトテトラオース11％，マルトペンタオー
ス40％，マルトヘキサオース３％，その他マルト
オルゴ糖３％の糖組成を有するオリゴ糖含有糖液
を調製した。 次いで、上記糖液に(3)で得た固定化酵母300ｇ
を添加し、45℃、PH5.5で50時間撹拌しつつ反応
させ、マルトテトラオース19.3％，マルトペンタ
オース70.2％，マルトヘキサオース5.3％，その
他の高分子オリゴ糖5.2％からなるオリゴ糖液を
得た。 実施例 ３ 馬鈴しよ澱粉５Kgを約100の熱水中で溶解さ
せ、水酸化カルシウムでPH6.5に調整した後、バ
チルス・ズフチリスの生産する細菌液化型α―ア
ミラーゼ（大和化成工業(株)製，商品名クライスタ
ーゼＬ―１，10000U／ｇ）を20U／ｇ澱粉およ
びエアロバクター・エアロゲネスの生産する枝切
り酵素プルラナーゼを1.5U／ｇ澱粉添加し、55
℃で20時間反応せしめた後、常法により活性炭脱
色，イオン交換処理などの精製を行ない、グルコ
ース３％，マルトース17％，マルトトリオース19
％，マルトテトラオース10％，マルトペンタオー
ス16％，マルトヘキサオース27％，その他のマル
トオリゴ糖８％の糖組成からなるオリゴ糖含有糖
液を調製した。 次いで、該糖液のPHを5.5に調整した後、(3)に
より調製した固定化酵母15Kgを予め充填し、40℃
に保温したカラム（直径25cm，高さ１ｍ，内容量
約50）にSV＝0.2の流速で通過させ、マルトテ
トラオース16％，マルトペンタオース26％，マル
トヘキサオース44％，その他のマルトオリゴ糖13
％からなるオリゴ糖液を得た。
溶解させ、水酸化カルシウムでPH7.0に調整した
後、バチルス・リケニホルミスの生産する細菌液
化型α―アミラーゼ（Novo社製，商品名ターマ
ミル120L，132.4KNu／ｇ）を0.4KNu／ｇ澱粉
およびエアロバクター・エアロゲネスの生産する
枝切り酵素プルラナーゼ（1500U／ｇ）を1.5U／
ｇ澱粉添加し、55℃で30時間反応せしめ、グルコ
ース４％，マルトース16％，マルトトリオース23
％，マルトテトラオース11％，マルトペンタオー
ス40％，マルトヘキサオース３％，その他マルト
オルゴ糖３％の糖組成を有するオリゴ糖含有糖液
を調製した。 次いで、上記糖液に(3)で得た固定化酵母300ｇ
を添加し、45℃、PH5.5で50時間撹拌しつつ反応
させ、マルトテトラオース19.3％，マルトペンタ
オース70.2％，マルトヘキサオース5.3％，その
他の高分子オリゴ糖5.2％からなるオリゴ糖液を
得た。 実施例 ３ 馬鈴しよ澱粉５Kgを約100の熱水中で溶解さ
せ、水酸化カルシウムでPH6.5に調整した後、バ
チルス・ズフチリスの生産する細菌液化型α―ア
ミラーゼ（大和化成工業(株)製，商品名クライスタ
ーゼＬ―１，10000U／ｇ）を20U／ｇ澱粉およ
びエアロバクター・エアロゲネスの生産する枝切
り酵素プルラナーゼを1.5U／ｇ澱粉添加し、55
℃で20時間反応せしめた後、常法により活性炭脱
色，イオン交換処理などの精製を行ない、グルコ
ース３％，マルトース17％，マルトトリオース19
％，マルトテトラオース10％，マルトペンタオー
ス16％，マルトヘキサオース27％，その他のマル
トオリゴ糖８％の糖組成からなるオリゴ糖含有糖
液を調製した。 次いで、該糖液のPHを5.5に調整した後、(3)に
より調製した固定化酵母15Kgを予め充填し、40℃
に保温したカラム（直径25cm，高さ１ｍ，内容量
約50）にSV＝0.2の流速で通過させ、マルトテ
トラオース16％，マルトペンタオース26％，マル
トヘキサオース44％，その他のマルトオリゴ糖13
％からなるオリゴ糖液を得た。
第１図は本発明による固定化酵母と市販生酵母
のPHの変化によるグルコース（G1），マルトース
（G2）およびマルトトリオース（G3）の資化状態
を示すグラフである。図中●――●は固定化酵母
によるG1〜G3の資化を、Γ――Γは市販生酵母に
よるG2の資化を示す。第２図は本発明による固
定化酵母と市販生酵母の温度変化によるグルコー
ス，マルトースおよびマルトトリオースの資化状
態を示すグラフである。図中、●――●は固定化
酵母によるG1〜G3の資化を、Γ――Γは市販生酵
母によるG2の資化を示す。
のPHの変化によるグルコース（G1），マルトース
（G2）およびマルトトリオース（G3）の資化状態
を示すグラフである。図中●――●は固定化酵母
によるG1〜G3の資化を、Γ――Γは市販生酵母に
よるG2の資化を示す。第２図は本発明による固
定化酵母と市販生酵母の温度変化によるグルコー
ス，マルトースおよびマルトトリオースの資化状
態を示すグラフである。図中、●――●は固定化
酵母によるG1〜G3の資化を、Γ――Γは市販生酵
母によるG2の資化を示す。
Claims (1)
- １ サツカロマイセス属の酵母菌体を、炭素源と
してマルトースおよび／またはマルトトリオース
を含む栄養培地にて好気的に培養し、該酵母菌体
内にα―グルコシダーゼ活性を誘導蓄積せしめた
後、これを固定化処理して得られる固定化酵母菌
体を、オリゴ糖を含有する糖液に添加することに
より糖液中のマルトトリオース（G3）以下の低
分子オリゴ糖を資化せしめてマルトテトラオース
（G4）以上のマルトオリゴ糖液を得ることを特徴
とする高純度マルトオリゴ糖の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4562883A JPS59173092A (ja) | 1983-03-18 | 1983-03-18 | 高純度マルトオリゴ糖の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4562883A JPS59173092A (ja) | 1983-03-18 | 1983-03-18 | 高純度マルトオリゴ糖の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59173092A JPS59173092A (ja) | 1984-09-29 |
| JPS6313679B2 true JPS6313679B2 (ja) | 1988-03-26 |
Family
ID=12724631
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4562883A Granted JPS59173092A (ja) | 1983-03-18 | 1983-03-18 | 高純度マルトオリゴ糖の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS59173092A (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP4889317B2 (ja) * | 2006-02-17 | 2012-03-07 | オリエンタル酵母工業株式会社 | マルトトリオース高含有組成物及びその製造方法 |
-
1983
- 1983-03-18 JP JP4562883A patent/JPS59173092A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS59173092A (ja) | 1984-09-29 |
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