JPS6319155B2

JPS6319155B2 -

Info

Publication number: JPS6319155B2
Application number: JP15989580A
Authority: JP
Inventors: Nobuki Ashizawa; Yoshio Tsujita; Kyoshi Hamano; Akira Terahara
Original assignee: Sankyo Co Ltd
Current assignee: Sankyo Co Ltd
Priority date: 1980-11-13
Filing date: 1980-11-13
Publication date: 1988-04-21
Also published as: JPS5783290A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は微生物変換によりML―236B（ラクト
ン型または金属塩）よりML―236A（ラクトン型
または金属塩）を製造する方法に関するものであ
る。 ML―236Bは既知物質であり、青カビの一種ペ
ニシリウム・チトリヌムの代謝産物より分離、精
製された物質で、実験動物から分離した酵素系や
培養細胞系においてコレステロールの生合成をそ
の律速酵素の３―ヒドロキシ―３―メチルグルタ
リルコエンザイムＡリダクターゼと競合すること
により阻害し、動物の個体レベルにおいても強力
な血清コレステロールの低下作用を示すことが知
られている（特開昭50−155690号、ジヤーナル・
オブ・アンチビオテイクス29巻1346〜1348頁
1976年）。 ML―236Bは次の化学構造を有する。

【式】または

【式】なお、本発明において「ML―236B」にはその
金属塩（特開昭53−56314号）も含む。ML―
236Aもまた既知物質であり、次の化学構造を有
し、同様にラクトン型および酸型が知られている
（特開昭51−136885）。

【式】または

【式】そして、本発明において「ML―236A」にはそ
の金属塩も含む。本発明は微生物変換によりML―236B（ラクト
ン型または金属塩）よりML―236A（ラクトン型
または金属塩）を製造する方法に関するものであ
る。本発明を実施するには、ML―236B（ラクトン
型または金属塩）をML―236A（ラクトン型また
は金属塩）に変換せしめ得る能力を有するペニシ
リウム属、フザリウム属、ヘルミントスポリウム
属、ムコール属またはリゾプス属に属する微生物
を、ML―236B（ラクトン型または金属塩）を含
有する培地で培養するか或いはこれらの微生物の
無細胞抽出液をML―236B（ラクトン型または金
属塩）に作用せしめればよい。本発明において用いうる微生物としてはML―
236B（ラクトン型または金属塩）をML―236A
（ラクトン型または金属塩）に変換せしめ得る能
力を有するペニシリウム属、フザリウム属、ヘル
ミントスポリウム属、ムコール属またはリゾプス
属に属する微生物が用いられるが、本発明者らが
特に有効であると認める菌株はペニシリウム・クリソゲナム（Penicillium
chrysogenum） ATCC 10002 フザリウム・リニ（Fusarium Iini） SANK
10561 （微工研菌寄第5768号）フザリウム・ソラニ（Fusarium solani）
SANK 23073 （微工研菌寄第5770号）ヘルミントスポリウム・サテイバム
（Helminthosporium sativum） SANK
11558 （微工研菌寄第5767号）ムコール・グリゼオシアヌス（Mucor griseo
−cyanus） IFO 4563 リゾプス・ニグリカンス（Rhizopus
nigricans） NRRL 45 ペニシリウム・チトリヌム（Penicillum
citrinum） SANK 18767 （微工研菌寄第
2609号）があげられる。これらの菌株はいづれも微工研に
寄託されているか、もしくは公的な菌保存機関
（ATCC，IFOもしくはNRRL）より入手可能で
ある。なお、微生物変換により得られた化合物は化学
的常法に従つて、例えば金属塩を酸で処理するこ
とによりラクトン型に変換することができる。本発明の方法において得られるML―236Aは側
鎖に適当なアシル基を導入することにより、ML
―236Bに優るコレステロール阻害活性の増強が
期待されるので、動脈硬化、高脂血症など体内に
おけるコレステロールの蓄積が原因の一つである
疾病の予防あるいは治療用医薬の原料として有用
である。次に実施例を示す。実施例１下記組成の培地100mlを含有する500ml容坂口フ
ラスコ20本にペニシリウム・クリソゲナムATCC
10002を植菌し、26℃、120s.p.mで振盪培養し、
４日後、ML―236B Na塩を最終濃度で0.05％に
なるように添加して更に３日間26℃、120s.p.m.
で培養する。培地組成グルコース 2.0％ K₂HPO₄ 0.15 MgSO₄・7H₂O 0.15 NH₄NO₃ 0.1 ペプトン 0.1 C.S.L 0.2 イーストエキストラクト 0.1 ZnSO₄ 0.001 水道水残（PH7.0に調整）得られた培養液を過し、液1.9を得た。
これを6N―HClでPH4.0として、２の酢酸エチ
ルで抽出した。抽出液を硫酸ナトリウムを用いて
脱水し、次いで触媒量のトリフルオロ酢酸を添加
してラクトン化した。次いで抽出液を５％炭酸水
素ナトリウム水溶液で洗浄後、濃縮乾固して得た
油状物934mgを10ｇのシリカゲル（ワコーゲルＣ
―200）のカラムに吸着させた。カラムをｎ―ヘ
キサン100ml、ｎ―ヘキサン：アセトン（85：15）
200mlの順で展開した。さらにカラムを200mlのア
セトンで展開するとML―236A画分が溶出され
る。この画分を濃縮乾固してML―236A（ラクト
ン型）435mgを採取した。本化合物は薄層クロマトグラフイー（TLC）
（TLCプレート；メルク社製シリカゲルArt5715、
溶媒；ｎ―ヘキサン：アセトン＝１：１）では
R_f0.21を示す。 ML―236A（ラクトン型）の物理化学的性質は
以下に記述する如くである。本物質は白色粉末状の中性物質で、質量分析に
よる分子量は306で分子式はC₁₈H₂₆O₄である。本
物質の紫外部吸収スペクトルを第１図に、赤外部
吸収スペクトルを第２図に示す。これらの物理化
学的データは既に報告されている特開昭51−
136885号のML―236A（ラクトン型）のデータと
全て一致した。実施例２フザリウム・リニ SANK 10561を用い、実
施例１と同様に操作してML―236A（ラクトン型）
を得た。実施例３フザリウム・ソラニ SANK 23073を用い、
実施例１と同様に操作してML―236A（ラクトン
型）を得た。実施例４ヘルミントスポリウム・サテイバム
SANK11558を用い、実施例１と同様に操作して
ML―236A（ラクトン型）を得た。実施例５ムコール・グリゼオシアヌス IFO 4563を用
い、実施例１と同様に操作してML―236A（ラク
トン型）を得た。実施例６リゾプス・ニグリカンス NRRL 45を用いて
実施例１と同様に操作してML―236A（ラクトン
型）を得た。なお、実施例２乃至実施例６で用いた培地は実
施例１で用いた培地と同じである。実施例７ペニシリウム・クリソゲナム ATCC10002を
実施例１の培地に植菌し、26℃、120spmで振盪
培養し、２日後４℃で集菌した。次いで、リン酸
緩衝液（PH7.5、0.1M）に懸濁し、ケイ砂で摩砕
し、冷却遠心機（5000×ｇ）に付し、上清を得
た。得られた上清を無細胞抽出液として以下の反
応に供した。無細胞抽出液0.5mlおよびML―236BNa塩１ｍ
Ｍを30℃で２時間反応後、薄層クロマトグラフイ
ー（吸着剤；シリカゲルプレートArt5715（メル
ク社製）、展開溶剤；クロロホルム：エタノー
ル：酢酸＝５：１：１）に付して展開するとRf
値0.5にML―236ANa塩のスポツトが確認され
た。紫外部吸収スペクトル（H₂O） λmax （nm）＝229，236，245

【図面の簡単な説明】

第１図はML―236A（ラクトン型）の紫外部吸
収スペクトルを示し、第２図は同物質の赤外部吸
収スペクトルを示す。

Claims

【特許請求の範囲】

１ ML―236B（ラクトン型または金属塩）を
ML―236A（ラクトン型または金属塩）に変換せ
しめ得る能力を有するペニシリウム属、フザリウ
ム属、ヘルミントスポリウム属、ムコール属また
はリゾプス属に属する微生物をML―236B（ラク
トン型または金属塩）を含有する培地で培養する
か、或いは該微生物の無細胞抽出液をML―236B
（ラクトン型または金属塩）に作用せしめること
を特徴とするML―236A（ラクトン型または金属
塩）の製造法。