JPS633576B2

JPS633576B2 -

Info

Publication number: JPS633576B2
Application number: JP58151847A
Authority: JP
Inventors: Hidekazu Naeshiro; Akira Hashimoto; Yasuhiro Katsuragi; Yasunori Niino; Yoshiko Saiga
Original assignee: Sunstar Inc
Current assignee: Sunstar Inc
Priority date: 1983-08-19
Filing date: 1983-08-19
Publication date: 1988-01-25
Also published as: JPS6043356A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明はマンネンタケエキス、その製法および
該エキスを有効成分とする健康食品に関する。マンネンタケはヒダナシタケ目サルノコシカケ
科に属する担子菌で、霊芝ともいわれ、古くから
中国においてすぐれた生薬として珍重されてい
る。近年、我国においても、マンネンタケの有効
成分を科学的に解明する研究がさかんに行なわれ
るようになり、その制ガン作用、抗高血圧作用、
抗高脂血症作用等が次第に明らかにされつつあ
り、有効成分を単離して医薬として用いたり、マ
ンネンタケそのものをいわゆる健康食品等として
用いるなどの試みが種々なされている。しかしながら、元来、マンネンタケは中国でも
天然に極く希にしか生育せず、入手が著しく困難
で非常に高価なものである。最近、我国において
は、マンネンタケの人工栽培が可能となり、入手
が比較的容易となつたものの、依然として高価で
あり、しかも、生育に２〜５年の長期間を必要と
する。そのうえ、人工栽培で得られるマンネンタ
ケには天然のものと比較して含有成分が異なつて
いるものが多いという問題がある。このような事情にかんがみ、本発明者らは容易
に、かつ、安価に、しかも、天然のものと同等も
しくは近似した含有成分を有するマンネンタケを
得るべく鋭意研究を重ねる間に、意外にも、特定
の組成を有する液体培地がマンネンタケの菌糸体
培養に極めて有効であり、短期間で収率よく、安
価に、天然のマンネンタケ含有成分に近似した成
分を含有するマンネンタケ菌糸体が得られ、しか
も、該成分が培養液中にも蓄積され、これらを濃
縮あるいは特定の溶媒で抽出したエキスが健康食
品に好適であることを見出した。前記のごとく、
マンネンタケの人工栽培がすでに行なわれている
が、これはマンネンタケ子実体の栽培であり、本
発明のごとく、マンネンタケの菌糸体を効率よく
液体培養した例や、得られた培養液、菌糸体のエ
キス、それを用いた健康食品は従来見当らない。かくして、本発明は特定の組成の液体培地中で
マンネンタケ菌糸体を液体培養して得られる培養
物または分離した菌糸体を特定の溶媒で抽出する
か、菌糸体を分離した培養液を濃縮した新規マン
ネンタケエキス、その製法および該エキスを有効
成分とする健康食品を提供するものである。本発
明によれば、グルコース0.2〜10W／Ｖ％および
小麦胚芽0.2〜2W／Ｖ％を必須成分とする液体培
地中でマンネンタケ菌糸体を液体培養することに
より、短期間で、安価に収率よく、天然のマンネ
ンタケ子実体含有成分と近似した成分を含有する
マンネンタケ菌糸体が得られ、また、培養液中に
も該成分を蓄積させることができ、培養終了後、
培養物、すなわち、菌糸体と培養液の混合物また
は分離した菌糸体を、水、アルコール、クロロホ
ルム、エーテル、酢酸エチル、ベンゼン、ヘキサ
ンおよびこれらの混合溶媒からなる群から選ばれ
る溶媒で抽出するか、菌糸体を分離した培養液を
濃縮することにより、マンネンタケエキスが得ら
れる。得られたエキスはそのまま、あるいは、常
法に従つて公知の形態の健康食品とすることがで
き、これは、天然のマンネンタケ子実体を用いた
健康食品と同等に使用することができる。すなわち、本発明のマンネンタケエキスを得る
には、まず、マンネンタケ種菌糸を、グルコース
および小麦胚芽を必須成分とする液体培地中で液
体培養する。該培地成分として用いるグリコースおよび小麦
胚芽は培地成分として通常入手しうるものであれ
ばいずれでもよい。グルコースは培地全量に基い
て0.2〜10W／Ｖ％、好ましくは、１〜8W／Ｖ％
の割合で用いる。グルコースの量が0.2W／Ｖ％
より低くても、また、10W／Ｖ％を超えても菌糸
体の収量が低下する。小麦胚芽は培地全量に基い
て0.2〜2W／Ｖ％、好ましくは、0.5〜1.0W／Ｖ
％の割合で用いる。小麦胚芽の量も0.2W／Ｖ％
より低いと菌糸体の収量が低下し、また、2W／
Ｖ％を超えると経済的に不利となる。ことに、本
発明においては、該液体培地中の小麦胚芽：グル
コースの重量比を１：１〜８とすることが好まし
く、これにより、マンネンタケ菌糸体の収率が向
上する。所望により、該液体培地には、リン、マンガ
ン、マグネシウム、カルシウム、鉄などの塩類の
ごときミネラル成分や、他の穀類胚芽、米ぬか、
コーン・ステイープ・リカー、ビタミン類、核酸
類、澱粉、アミノ酸類、酵母エキス、ペプトンな
どのごとき他の栄養成分を適宜添加してもよい。該液体培地は常法に従つて調製することができ
例えば、所定の各成分を滅菌水に添加し、分散、
溶解させる。得られた培地は、通常、120〜130℃
で、15〜30分間滅菌処理した後、マンネンタケ菌
糸体の培養に用いられる。マンネンタケ菌糸体の培養は、該液体培地に適
当量の種菌糸を接種し、好気的条件下に行なわれ
る。用いる種菌糸は担子菌類に属するヒダナシタケ
目サルノコシカケ科マンネンタケのものであれば
いずれでもよく、例えば、(株)河村式椎茸研究所
（静岡県藤枝市青葉町１―１―11）より入手でき
る。通常、種菌糸の接種量は約５〜10mg／100ml培
地で充分であり、200〜300r.p.m.の撹拌下、温度
25〜30℃、通気量0.5〜3.0V.V.m.で７〜21日間暗
所において培養を行なうことにより、天然のマン
ネンタケ子実体含有成分に近似した成分を有する
マンネンタケ菌糸体が高収率で得られ、また、培
地中に該成分を蓄積させることができる（例え
ば、この培養によれば、従来のマンネンタケ人工
栽培用の種菌培養に用いられるポテト・デキスト
ローズ・ブロス（PDB）培地と比べて９〜50培
もの菌糸体収量を達成することができる）。培養終了後、得られた培養物（菌糸体と培養液
の混合物）を直接または培養物から分離した菌糸
体を溶媒で抽出するか、培養物から菌糸体を分離
した残りの培養液を濃縮して本発明のマンネンタ
ケエキスを得る。培養物からの菌糸体の分離は、過、遠心分離
などの常法に従つて行なうことができる。培養物または分離した菌糸体の溶媒による抽出
は、必要により、適宜菌糸体を切断した後、水、
アルコール（例えば、メタノール、エタノール、
ｎ―ブタノールなど、クロロホルム、エーテル、
酢酸エチル、ベンゼン、ヘキサンおよびこれらの
混合液溶媒（例えば、50％エタノール水溶液、80
％メタノール水溶液など）からなる群から選ばれ
る溶媒を用いて行なわれる。該抽出は、一般に、
被抽出物に対して重量比約10〜100倍の溶媒を用
い、15℃〜溶媒の沸点までの温度で１〜24時間行
なう。通常、この操作を１〜３回行なえば充分で
ある。得られた抽出液を、好ましくは、減圧下に
40〜50℃で濃縮し、要すれば、減圧下に40〜50℃
で乾燥して本発明のマンネンタケエキスが得られ
る。また、菌糸体を分離した残りの培養液の濃縮は
前記の抽出液と同様にして行なうことができ、要
すれば、同様に乾燥して本発明のマンネンタケエ
キスが得られる。得られたエキスは、一般に、茶色〜褐色のペー
スト状〜粉末状を呈し、味はやや甘く、不快な風
味はなく、小麦胚芽の香ばしい風味を有し、粉末
状のものは、やや吸湿性のある無晶性で、水にわ
ずかに溶解する。該エキスは約60℃まで比較的安
定で、後記するごとく、天然のマンネンタケ子実
体の成分と極めて近似した成分を含有する。ま
た、該エキスは、ニンヒドリン反応、α―ナフト
ール反応、フエーリング反応、フエニルヒドラジ
ン試薬反応、アンスロン―硫酸試薬反応、ビウレ
ツト反応および塩化第二鉄試薬反応においていず
れも陽性を示し、エルソン・モルガン反応におい
て擬陽性を示す。これらの性質や各種のスペクト
ル分析およびクロマトグラフイー分析の結果か
ら、本発明のマンネンタケエキスは多糖類および
糖蛋白を主成分とするものと考えられる。添付の第１図〜第３図に、本発明のマンネンタ
ケエキスの代表例（後記実施例１に従つて製造
し、酢酸エチルで再抽出）のガスクロマトグラ
ム、薄層クロマトグラムおよび高速液体クロマト
グラムを示す。各クロマトグラフイーの条件はつ
ぎのとおりである。ガスクロマトグラフイー使用機種：島津製作所製GC―7A；カラム：２
％OV―１、ユニポートHP（60〜80メツシユ）、
３mm×200cm；カラム温度：150℃で８分間保持、
ついで、80分で230℃まで上昇；気化室温度：280
℃；検出器：FID。なお、試料は常法に従つて
TMS化した。薄層クロマトグラフイープレート：メルク社製シリカゲル；展開溶媒：
クロロホルム―メタノール（９：１）；発色：I₂
および紫外線（第２図中、点線で示すスポツトは
I₂で発色、実線で示すスポツトは紫外線ランプ下
で発色し、かつ、I₂で強く発色）。高速液体クロマトグラフイー使用機種：島津製作所製LC―3A；検出器：
SCP―2A；カラム：YMC―PACK Ａ―311、６
×100mm（山村化学研究所）；流速：1.0ml／分；
移動層：35％アセトニトリル／0.2M酢酸緩衝液
（PH3.5）；内部標準：ｐ―アミノ安息香酸エチ
ル；検出波長：254nm。第１図および第２図中、クロマトグラムＡは天
然のマンネンタケ子実体の熱水抽出物を酢酸エチ
ルで再抽出したもののクロマトグラム、Ｂは本発
明エキスの酢酸エチル抽出物のクロマトグラムで
あり、これらのクロマトグラムは、本発明のマン
ネンタケエキスが天然のマンネンタケ子実体と極
めて近似した成分を含有することを示している。かくして得られたマンネンタケエキスは毒性が
ほとんどなく、連用によつても副作用を示さず、
そのまま、あるいは、常法に従つて食品として許
容される担体と合して、例えば、錠剤、丸剤、顆
粒剤、カプセル剤、飲料、キヤンデー、チヨコレ
ート、パン、クツキーなどの形態の健康食品とす
ることができる。該健康食品には、その形態にも
よるが、通常、１日のエキス摂取量（粉末状エキ
スとして）が0.1〜10mg／Kg体重となるごとく本
発明のマンネンタケエキスを配合する。本発明の該マンネンタケエキス含有健康食品
は、これを連用することにより、滋養、強壮、健
脳、消炎、利尿等のすぐれた効果を発揮する。つぎに参考例および実施例を挙げて本発明をさ
らに詳しく説明する。参考例１ポテト・デキストロース寒天培地（デイフコ社
製）39ｇを水1000mlに分散、溶解させ、100mlフ
ラスコに20mlづつ分注し、120℃で30分間オート
クレーブ処理した後、冷却してPDA培地を調製
した。これに、マンネンタケ種菌糸（(株)河村式椎
茸研究より入手）１白金耳接種し、暗所におい
て、25℃で14日間静置培養してマンネンタケ菌糸
体の種培養を得た。一方、つぎの第１表に示す割合でグルコースお
よび小麦胚芽を滅菌水に分散、溶解し、500ml容
の三角フラスコに150mlづつ分注し、綿栓をし、
アルミホイルで覆つた後、121℃で30分間オート
クレーブ処理し、ついで、室温まで冷却して液体
培地を調製した。この各液体培地に、無菌条件下、前記の種培養
を３白金耳づつ接種し、25℃の暗所にて、振盪培
養器（220r.p.m.）上で２週間培養した。培養終了後、培養液を10000r.p.m.で10分間遠
心分離し、上清を除き、沈澱物に適当量のエタノ
ールを加え、激しく振盪した。これをブフナー
斗上で吸引過し、さらに、エタノールで洗浄
し、充分過し、重量を測定して菌糸体の収量と
した。結果を第１表に示す。なお、第１表には、
対照として、液体培地としてポテト・デキストロ
ース・ブロスを用いて同様にマンネンタケ菌糸体
を培養した場合の結果も示す。

【表】この結果から明らかなごとく、本発明の液体培
地を用いると、非常に高い菌糸体収量が得られ、
ことに、小麦胚芽：グルコースの比を１：１〜８
にすると収量が高くなる。実施例１ジヤーフアーメンターを用いてマンネンタケ菌
糸体の培養をつぎのとおり行なつた。ジヤーフアーメンター（10容）のジヤー中で
グルコース100ｇおよび小麦胚芽25ｇを、沸騰冷
却した水道水５と混合し、ついで、ジヤを密栓
して121℃で30分間オートクレーブ処理して液体
培地を調製した。ジヤーをジヤーフアーメンター
に取り付け、同じ培地で25℃、14日間振盪培養し
た種菌糸培養物150mlを無菌条件下に接種した。
300r.p.m.の撹拌下、3.0／分の流速で空気を通
気しながら、28℃にて14日間培養した。得られた
培養物をガーゼで過して菌糸体0.84Kg（湿潤重
量）および培養液3.5を得た。分離した菌糸体に水２を加え、90〜100℃で
３時間加熱抽出し、抽出液を減圧下、40℃で濃縮
乾固して茶褐色無晶性の粉末状マンネンタケエキ
ス25ｇを得た。また、分離した培養液を減圧下、40℃で濃縮乾
固し、茶褐色無晶性の粉末状マンネンタケエキス
55ｇを得た。これらのエキスはガスクロマトグラフイー、高
速液体クロマトグラフイー、薄層クロマトグラフ
イー、ペーパークロマトグラフイー、紫外線吸収
スペクトル分析および各種の定性反応において差
異が認められなかつた。実施例２つぎの処方により、常法に従つて錠剤の形態の
健康食品を得た。成分量マンネンタケエキス（実施例１）５ｇ精製水 80ml 乳糖 795ｇ３％ヒドロキシプロピルセルロール―乳糖
600ｇ結晶セルロース 400ｇ馬鈴薯澱粉 160ｇステアリン酸タルク 40ｇこの処方より、マンネンタケエキス0.25mg／個
を含有する錠剤20000個を得た。実施例３つぎの処方により、常法に従つて丸剤の形態の
健康食品を得た。成分量マンネンタケエキス（実施例１） 0.05ｇブドウ糖 2.5ｇ澱粉 1.5ｇアラビアガム 0.8ｇこの処方より、丸剤100個を得た。実施例４つぎの処方により、常法に従つて顆粒剤の形態
の健康食品を得た。成分量マンネンタケエキス（実施例１） 300ｇ乳糖 2000ｇ澱粉 670ｇゼラチン 30ｇ

【図面の簡単な説明】

第１図〜第３図は、各々、本発明のマンネンタ
ケエキスのガスクロマトグラム、薄層クロマトグ
ラムおよび高速液体クロマトグラムである。

Claims

【特許請求の範囲】１グルコース0.2〜10W／Ｖ％および小麦胚芽
0.2〜2W／Ｖ％を必須成分とする液体培地中でマ
ンネンタケ菌糸体を培養して得られる培養物また
はそれから分離した菌糸体の水、アルコール、ク
ロロホルム、エーテル、酢酸エチル、ベンゼン、
ヘキサンおよびこれらの混合溶媒からなる群から
選ばれる溶媒による抽出物あるいは菌糸体を分離
した培養液の濃縮物であつて、ニンヒドリン反
応、α―ナフトール反応、フエーリング反応、フ
エニルヒドラジン試薬反応、アンスロン―硫酸試
薬反応、ビウレツト反応および塩化第二鉄試薬反
応がいずれも陽性、エルソン・モルガン反応が擬
陽性であるマンネンタケエキス。２該培地中の小麦胚芽：グルコースの重量比が
１：１〜８である前記第１項のエキス。３分離した菌糸体の溶媒抽出物である前記第１
項または第２項のエキス。４菌糸体を分離した培養液の濃縮物である前記
第１項または第２項のエキス。５グルコース0.2〜10W／Ｖ％および小麦胚芽
0.2〜2W／Ｖ％を必須成分とする液体培地中でマ
ンネンタケ菌糸体を培養し、得られた培養物また
は分離した菌糸体を、水、アルコール、クロロホ
ルム、エーテル、酢酸エチル、ベンゼン、ヘキサ
ンおよびこれらの混合溶媒からなる群から選ばれ
る溶媒で抽出するか、菌糸体を分離した培養液を
濃縮することを特徴とするマンネンタケエキスの
製法。６該培地中の小麦胚芽：グリコースの重量比が
１：１〜８である前記第５項の製法。７分離した菌糸体を溶媒で抽出する前記第５項
または第６項の製法。８菌糸体を分離した培養液を濃縮する前記第５
項または第６項の製法。９グルコース0.2〜10W／Ｖ％および小麦胚芽
0.2〜2W／Ｖ％を必須成分とする液体培地中でマ
ンネンタケ菌糸体を培養して得られる培養物また
はそれから分離した菌糸体の水、アルコール、ク
ロロホルム、エーテル、酢酸エチル、ベンゼン、
ヘキサンおよびこれらの混合溶媒からなる群から
選ばれる溶媒による抽出物あるいは菌糸体を分離
した培養液の濃縮物であつて、ニンヒドリン反
応、α―ナフトール反応、フエーリング反応、フ
エニルヒドラジン試薬反応、アンスロン―硫酸試
薬反応、ビウレツド反応および塩化第二鉄試薬反
応がいずれも陽性、エルソン・モルガン反応が擬
陽性であるマンネンタケエキスを有効成分として
なる健康食品。１０該エキスが分離菌糸体の溶媒抽出物である
前記第９項の健康食品。１１該エキスが菌糸体を分離した培養液の濃縮
物である前記第９項の健康食品。