JPS6399094A

JPS6399094A - ダンマラン系化合物

Info

Publication number: JPS6399094A
Application number: JP22887987A
Authority: JP
Inventors: Tsunematsu Takemoto; 竹本　常松; Shigenobu Arihara; 在原　重信; Toshio Odajima; 小田島　粛夫; Shinichi Hayashi; 林　信一; Kiju Nishimoto; 西本　喜重; Noriko Takagi; 典子高木; Yoshie Watanabe; 渡辺　由恵
Original assignee: ROOTO SEIYAKU KK; Rohto Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: ROOTO SEIYAKU KK; Rohto Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1987-09-11
Filing date: 1987-09-11
Publication date: 1988-04-30
Also published as: JPH0368040B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】本発明は抗癌作用を有する新規ダンマラン系化合物に関
する。

本発明に係る化合物は以下の式（ｆ）で表わされろ：［式中、ｇｌｕはβ−Ｄ−グルコピラノシル基を表わす
］。

本発明者らは、副作用の少ない優れた抗癌剤を得る目的
で種々検討した結果、アマチャヅルに含まれるダンマラ
ン系のサポニン類に優れた抗腫瘍活性を示す物質°が存
在することを見い出し先に特許出願したが（特願昭５６
−１５７９２５号、昭和５６年ＩＯ月２日出願）、更に
研究を続けた結果、これらのサポニン類を酸、アルカリ
あるいは酵素などで加水分解して得られるプロサボゲニ
ンあるいはサボゲニンの内、前記式（１）で示される化
合物が強い抗腫瘍活性を有することを見い出し、本発明
を完成するに至った。

式（１）で示される化合物は本発明者らによって見い出
された新規化合物である。この化合物（１）は、本発明
老らにより、Ｍｈ−２と命名された。

現在臨床に用いられている多くの抗癌剤は、いわゆる細
胞毒であって、腫瘍細胞を殺滅するほか、正常細胞にも
大きな損傷を与えるので、強い副作用を避けることがで
きない。本発明に係る式（１）で示される化合物は、後
に詳述する槌に、子宮頚部癌細胞、黒色腫瘍細胞、肺癌
細胞の増殖を１０μ９／ｍＱ以下の微量で顕著に抑制し
、また腹水癌細胞を移植したマウスに連続投与すると対
照群に比較して明らかな延命効果を示すほか、腫瘍細胞
の増殖を抑制する１０μ９／Ｊ１２の濃度では、はとん
ど細胞に損傷を与えないという顕著な特徴を宵するもの
である。

式（Ｉ）で示される化合物は、既述した様に、アマチャ
ヅルサポニンを加水分解して得られるプロサボゲニンで
あって、これらは極めて毒性の低い化合物である。この
ことは、アマチャヅルが古（から食用、飲用に供せられ
て来たことから明らかである。即ち、アマチャヅルは中
国の明の時代から救荒本草に記載されてきた植物で、飢
謹の時の食糧として、野菜として、あるいはアマチャの
代用品として用いられてきた。その毒性は極めて低く、
アマチャヅル乾燥エキスの急性毒性をラットを用いて調
べた結果、経口投与のＬＤｓｏは１０９／に９、腹腔内
投与でも１．８５９７に９であり、また８９／に９／日
の割合で１力月間連続投与しても、一般症状、体重、飼
料摂取量、飲水量、尿、血液、組織体重、病理学的所見
などに何ら異常は認められなかった。この様に、アマチ
ャヅルエキスの毒性の低い事は、その主成分たるサポニ
ン、およびそれが生体内で酸や酵素類によって加水分解
されて生じるプロサボゲニンやサボゲニンの毒性が極め
て低いことを示すものである。

式（１）の化合物は、後記実施例！に記載した方法で製
造することができる。

式（１）の化合物は、極めて安定であり、経口および非
経口用の種々の剤型、例えば錠剤、丸剤、カプセル剤、
顆粒剤、液剤、注射剤、シロップ剤、軟膏剤などに製剤
化することができる。これらの製剤を製造するには、有
効成分としての式（１）の化合物を、乳糖、ブドウ糖、
デンプン、ショ糖、デキストリン、セルロース類、カン
テン、ステアリン酸マグネシウム、ケイ酸アルミニウム
、タルク、アラビアゴム、ゼラチン、トラガント、水、
ベジタブルオイル、ポリアルキレンゲリコール、流動パ
ラフィン、ラノリン、ワセリン等の常用される医薬的担
体と混合して適宜の剤型にすればよい。必要に応じて保
存剤、安定化剤、乳化剤、溶解補助剤などを混合しても
よい。式（１）の化合物の投与量は、低音の年令、疾病
の状態、体重、年令、投与方法などによって左右される
が、成人に対する経口投与量は通常約５０ｍ９〜５００
ｍｇ７日である。腹腔内投与、筋肉内投与、あるいは腫
瘍部位に直接投与する場合には、上記の用量を基準とし
て、適宜増減すればよい。

本発明に係る化合物の適用範囲としては、皮膚癌、子宮
癌、肝癌、肺癌、胃癌、腹水癌などが挙げられる。

以下に本発明に係る式（１）の化合物の薬理実験につい
て記載する。

試験！　子宮頚部癌細胞に対する作用培養液：培養液はＩ−Ｉ　Ａ　Ｍの合成培地Ｆ−１０お
よびＬ−１５の３＝１の混液に、牛胎児血清を添加して
用いた。血清濃度は、培養細胞数が最大値のｌ／２にな
るように予め検討し、２％に設定した。

操作方法：各種濃度の被験試料の培養液溶液４゜５好を
径６０＋ｎｍの培養皿に取り、これに子宮頚部癌細胞（
ＨｅＬａ　　Ｓ３）培養液懸濁液０．５ｍＱＣ細胞　。

数５ＸＩＯ’個を含む）を加え、５％ＣＯ，インキュベ
ーター内で４日間、３７℃で培養した。培養液を吸引し
て除き、生理食塩水で洗浄後、０．１２５％トリプシン
−Ｈａｎｋ’ｓ溶液０．５次Ｑを剥離液として加え、培
養皿に付着した細胞を剥離し、更に４．５ｍＣの生理食
塩水を加えて細胞を懸濁させ、トーア自動血球装置を用
いて細胞数を測定した。

結果を第１図に示す。図から明らかな様に、化合物（１
）は、ＩＯμ９／ｍＱ以下の濃度で顕著な子宮頚部癌細
胞の増殖を抑制することがわかる。

試験２　黒色腫瘍細胞に対する作用黒色腫瘍細胞（ＢｌＢ）培養液懸濁液Ｑ　、　５　ｍＱ
ｃ細胞数Ｉ　Ｘ　１０’個を含む）を使用するほかは試
験１と同様の実験を行なった。結果を第２図に示す。

延望主　　肺癌細胞に対する作用肺癌細胞（３Ｌ　Ｌ）培養液懸濁液０　、５　ｍＱｃ細
胞数ｌＸｌ０’個を含む）を使用するほかは試験１と同
様の実験を行なった。結果を第３図に示す。

虱ｕ±　腹水癌に対する作用２−メチルコランスレンを用いて白色マウス（ＢＡＬＢ
／ｃ　　５ｒＣＬ）に誘導した腹水癌細胞の腹水＠濁液
０　、５　ｍＱ（細胞数１ｘｌｏａ個を含む）を白色マ
ウス（ＢＡＬＢ／ｃ、５ｒＣＬ　　６迎合、雄）の腹腔
内に注入し、翌日より実験終了まで隔日に被験試料の生
理食塩水溶液（ａ度：　４０Ｈ／　５０ｍＱ）０．５ｍ
ｇを腹腔内に注入しく投与量２０肩９／に９／　２日）
、マウスの生存日数を調べた。対照群には生理食塩水を
注入した。結果を第４図に示す。図から明らかな様に、
式（Ｉ）の化合物投与群には、対照群に比べて明らかな
延命効果が認められた。

試験５　細胞障害作用試験４の場合と同様にして得た腹水癌細胞のＩＩａｎｋ
’　ｓ溶液懸濁液（Ｉ　Ｘ　１０＠個の細胞を含む）を
調製し、この懸濁液５酎に被験試料のエタノール溶液（
１０μ９／ｙｎＱ’）　ｌ　ＯμＱを加え、３７℃でイ
ンキュベートした。インキュベート開始３０分後から１
時間毎に細胞懸洞′ｇｆＬ１００μＣを採取し、０．２
５％のトリパンブルー溶液１００μＱを加えて染色し、
ヘモサイトを用いて総細胞数および染色され゛ない生存
細胞数をカウントし、細胞生存率を求めた。結果を第５
図に示す。図から明らかな様に、被験試料濃度がＩＯμ
ｙ／ｙｔ（ｌの場合、細胞の増殖は抑制するものの、細
胞損傷作用はほとんど認められなかった。

以下に本発明に係る化合物（ＩＸＭｈ−２）の製造実施
例およびこの化合物を含有する抗癌剤組成物の実施例を
挙げる。

実施例【　化合物（１）（Ｍｈ−２）の製造２−α−ヒ
ドロキシプロトパナキサジオール系サポニンを主成分と
して含有するアマチャヅル総サポニン２ｇを０．００５
Ｍ−ＮａＨ，ＰＯ，水溶液（ｐＨ４，０）ｌｏＯｉＱに
溶解し、セルラーゼ１ｇを加え、３７〜３８℃で２４時
間攪拌した後、１０％水性メタノール２００ｘ（Ｊおよ
びセルラーゼ２ｇを加えて６日間攪拌する。この反応液
をμボンダパックＣ１，（ロ本つオターズ社製）２０ｇ
のカラムに入れ、５０％水性メタノール２Ｑで洗浄した
後１００％メタノール２Ｑで溶出する。溶出液を減圧濃
縮すると１，２ｇの残留物が得られる。この残留物を、
シリカゲル１００ｇを用いてカラムクロマトグラフィー
（展開溶剤ニジクロロメタン／メタノール／酢酸エチル
／水（２：２：４：Ｉ））すると、Ｍｈ−２化合物（１
）４３＋ｇおよびギノサボニンＴＮ−１７８０ｍｇが得
られる。

Ｍｈ−２は無色の結晶性粉末であり、その物理化学的性
状は以下の通りである。

融点：　１８４〜６°Ｃ旋光度＝［α］Ｄ＝＋２０．６°（Ｃ＝１．７、メタノ
ール）溶解性：水、メタノールおよびエタノールに可溶、酢酸
エチルに難溶、ベンゼンおよびヘキサンに不溶。

ＢｒＩＲ（ν　　　　ｃｍ一つ：　　３４００．１６４５、
ａＸ１１５５．１０７５．１０３０．９８５（第６図参照）元素分析（ＣｓｓＨｅｔＯｅ＠　２Ｈ，Ｏとしテ）：」
と　　　　」Ｌ計算値（％）：　　６４．０７　　９．８６実測値（％
）：　　６４．３５　　９．８１実施例２　錠剤Ｍｈ−２５，０９乳糖　　　　　　　１２．４９微結晶セルロース　　　　　　　　　１２．４９コーン
スターチ　　　　　　　　　　　０．１２ステアリン酸
マグネシウム　　　　　　０．１９上記成分をよく混合
し、直打法に上り裸錠１００錠を製する。１錠（３００
ｍｇ）当たりＭｈ−２５０Ｈを含有する。

実施例３　カプセル剤Ｍｈ−２５，０９乳ｆｒｑ　　　　　　　４５．０９上記成分をよく混和し、常法によりカプセル剤２５０個
を製する。カプセル１個は２０肩９のＭｈ−２を含有す
る。

実施例４　顆粒剤Ｍｈ−２２０，０９乳糖　　　　　　３７６．０９ステアリン酸マグネシウム　　　　　　４．０ｇ上記の
成分をよく混合し、乾式顆粒機により顆粒４００ｇを製
する。顆粒１９はＭｈ−２５０１を含有ずろ。

【図面の簡単な説明】

第１図、第２図および第３図はそれぞれ子宮頚部癌細胞
、黒色腫瘍細胞および肺癌細胞の増殖に対する化合物（
１）の抑制効果を示すグラフ、第４図は腹水癌マウスに
対する化合物（１）の延命効果を示すグラフ、第５図は
化合物（１）の細胞障害作用の程度を示すグラフ、第６
図はＫＢｒ法による化合物（りの赤外吸収スペクトルで
ある。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、ｇｌｕはβ−Ｄ−グルコピラノシル基を表わす
］で示される化合物。