MC2071A1

MC2071A1 - Procedes pour la preparation de derives de nucleosides antiviraux et de formulations pharmaceutiques les contenant

Info

Publication number: MC2071A1
Application number: MC892078A
Authority: MC
Inventors: Rahim Saad
Original assignee: Wellcome Found
Priority date: 1988-11-23
Filing date: 1989-11-22
Publication date: 1990-10-03
Also published as: CN1022570C; GB8827339D0; DK586489A; PT92375A; AU4544289A; YU47096B; DD289534A5; FI895572A7; JPH0327394A; NZ231478A; PT92375B; NO894658L; EP0375164A1; ATE104676T1; IE893731L; DE68914809T2; NO171168B; NO171168C; YU221289A; MY104976A

Description

2

iLa présente invention concerne un nucléoside 5-propynyl-pyrimidique estérifié, ses sels pharmaceutique-ment acceptables# l'utilisation du nucléoside et de ses sels en thérapie médicale/ notamment pour le traitement ou la 5 prophylaxie d ' infectio.ns virales/ en particulier des infections à herpèsvirus/ et des procédés pour la préparation du nucléoside et de ses sels.

Dans la classe des virus à ADN/ ceux du groupe herpès représentent la cause des nombreuses maladies virales 10 chez l'homme. Ce groupe englobe le virus de l'herpès (HSV)/ le virus de la varicelle-zona (VVZ), le cytomégalovirus (CMV) et le virus Epstein-Barr (VEB).

Le virus de la varicelle-zona (VVZ) est un herpèsvirus qui provoque la varicelle et le zona. La vari-15 celle est la forme primaire de la maladie provoquée chez un hôte dépourvu d'immunité et chez les jeunes enfants/ et c'est en général .une maladie bénigne caractérisée par une éruption vésiculeuse et de la fièvre. Le zona est la forme récidivante de la maladie survenant chez les adultes qui 20 ont été antérieurement- infectés par le virus. Les manifestations cliniques'du zona sont caractérisées par des névralgies et une éruption vésiculeuse cutanée dont la distribution est unilatérale et radiculaire. L'extension de l'inflammation peut conduire à une paralysie ou des convulsions. 25 Un coma peut survenir si les méninges viennent à être atteintes ; et une infection à VVZ généralisée peut être mortelle.

d'une infection à VVZ peut également être observée chez des sujets présentant un déficit■immunitaire consécutif à une 30 maladie ou à une thérapie immuno-modulatrice/ par exemple après une greffe d'organe. Les malades présentant un déficit immunitaire pour cause de maladie s'observent actuellement en nombres croissants avec l'apparition du Syndrome d'Immuno-Déficience Acquise (SIDA)/ une affection qui affai-35 blit gravement le système immunitaire/ en laissant le malade vulnérable à des infections opportunistes.

La réapparition des manifestations cliniques

10

15

20

25

30

Une infection à cytomégalovirus (CMV) peut provoquer une sensibilité aux infections de l'oreille et de lia poitrine# une stagnation du développement pondéro-statural ou des états pathologiques plus graves/ tels que la micro-céphalie/ 1'hépatosplénomégalie/ l'ictère ou l'arriération mentale. Une infection à CMV peut être mortelle/ en particulier chez les individus présentant un déficit immunitaire.

Le virus Epstein-Barr (VEB) provoque la mononucléose infectieuse et il est également suggéré que ce soit un agent causal du cancer rhinopharyngien/ du lymphome immunoblastique/ du lymphome de 'Burkitt et.de leucoplasie villeuse.

La publication de brevet européen N° 272065 décrit la synthèse et l'utilisation de nucléosides l-((3-D-arabinofurannosyl)-5-alcynylpyrimidiques et de leurs dérivés pharmaceutiquement acceptables en thérapie médicale/ en particulier dans le traitement ou la prophylaxie d'infections virales de l'homme'/ telles que les infections herpétiques.

La Demanderesse a maintenant découvert qu'un certain nucléoside 5-propynyl-pyrimidique estérifié présente par administration orale des propriétés avantageuses qui rendent ce nucléoside d'un intérêt particulier en thérapie médicale/ notamment pour le traitement d'infections virales de 1 * homme.

La présente invention fournit donc le composé de formule I :

o

C H CCH-z

(ch^jCCO

35

(I)

OH

et ses sels pharmaceutiquement acceptables,

iLe composé de formule I est également caractérisé par le nom de 5-prop-l-ynyl-l-(5-0-triméthylacétyl-p-D-*arabinof urannosyl ) uracile.

La formule I ci-dessus décrit le composé sous sa forme cétonique/ mais on se rendra compte que le composé peut également bxister sous sa forme tautomère énolique correspondante et l'expression ci-après "un composé de formule I" est employée pour désigner tant la forme cétonique que la forme énolique. Ci-après également/ le composé de formule I et ses sels pharmaceutiquement acceptables seront appelés les "composés de l'invention.

.. ... Des essais sur des rats ont été effectués avec les composés de l'invention pour déterminer leur biodisponibilité en mesurant le taux de récupération urinaire après administration orale/ exprimé en pourcentage de la dose administrée. Des taux élevés du composé d'origine/ le 1-((3-D-arabinofurannosyl)-5-prop-l-y.nyluracile/ dans l'urine témoignent d'une bonne absorption par l'intestin. Comparativement au composé d'origine/ les composés de l'invention manifestent un accroissement d'absorption de plus de 6 fois.

La meilleure biodisponibilité des composés de l'invention offre un moyen pour parvenir à des taux élevés du composé d'origine actif dans le plasma/ après administration de doses d'un composé de l'invention qui sont nettement inférieures aux doses du composé d'origine qui seraient nécessaires pour atteindre les mêmes taux élevés dans le plasma. Tous effets secondaires ou complications à long terme qui peuvent être associés à une administration répétée de médicament à des doses élevées/ sont ainsi fortement atténués.

La présente invention fournit également :

a) Les composés de l'invention pour leur.emploi en thérapie médicale/ par exemple dans le traitement ou la prophylaxie d'une infection virale/ en particulier une infection à herpèsvirus.

b) Un procédé de traitement d'un mammifère/ y compris un

5

être humain/ atteint d'une infection virale/ par exemple une infection à herpèsvirus/ qui consiste à traiter le mammifère avec, une quantité à effet antiviral d'un composé de l'invention.

5 c) L'utilisation d'un composé de l'invention dans la fabrication d'un médicament destiné au traitement ou à la prophylaxie d'une infection virale/ par exemple une infection a herpèsvirus.

Les composés de l'invention sont tout particule lièrement applicables au traitement ou a la prophylaxie d'infections par le virus de la varicelle-zona et des états cliniques qui en résultent/ évoqués ci-dessus. Les composés de l'invention sont particulièrement avantageux dans le traitement de la varicelle et du zona. 15 Les sels pharmaceutiquement acceptables du com posé de formule I qui peuvent être commodément utilisés en thérapie médicale comprennent les sels de bases pharmaceutiquement acceptables/ par exemple ceux qui dérivent d'une base appropriée/ tels que les sels de métaux alcalins( par 20 exemple le sodium)/ de métaux alcalino-terreux (par exemple le magnésium) et d'ammonium et NX^ (où X est un groupe alkyle en C^-C^). Les.sels contenant des anions non pharmaceutiquement acceptables entrent dans le cadre de l'invention en tant que composés intermédiaires utiles pour la 25 préparation de sels pharmaceutiquement acceptables et/ou pour leur utilisation dans des études non thérapeutiques/ par exemple "in vitro".

Les composés de 1'invention, peuvent être administrés à un mammifère/ y compris un être humain ("le re-30 ceveur") par toute voie appropriée à l'état clinique à traiter t des voies convenables comprennent les voies orale/ rectale/ nasale/ topique (y compris buccale et sublinguale)/ vaginale et parentérale (y compris sous-cutanée/ intramusculaire/ intraveineuse/ .intradermique/ 35 intrathécale et épidurale).

On comprendre que la voie préférée peut diffé-

rer selon/ par exemple/ l'âge/ le poids et le sexe du receveur/ et la nature et la gravité de l'état clinique à traiter.

La quantité du composé de.11 invention qui est requise pour le traitement ou la prophylaxie d'une infection virale dépend d'un certain nombre de facteurs incluant la gravité de l'état à traiter et l'identité du receveur/ et sera en fin de compte laissée à l'appréciation du médecin traitant. Cependant/ en général/ pour chacun des états cliniques/ une dose efficace convenable se situe dans l'intervalle de 1 à 100 mg par kilogramme-de poids corporel et par jour/ et le plus avantageusement dans l'intervalle de 5-à 30 mg par kilogramme de poids corporel et par jour/ une dose optimale étant d'environ 15 mg par kilogramme de poids corporel et par jour. La dose efficace peut être présentée en deux/ trois/ quatre doses fractionnées ou plus/ administrées à intervalles appropriés au cours de la journée. Ces doses fractionnées peuvent être administrées dans des formes posologiques unitaires/ contenant par exemple 10 à 2000 mg/ de préférence 20 à 500. mg et/ le plus avantageusement 100 à 400 mg d'un composé de:1'invention par forme posologique unitaire. En variante/ si l'état du receveur le nécessite/ la dose peut être administrée par perfusion continue.

Les composés de 11 invention peuvent être administrés pour le traitement ou la prophylaxie d'infections virales/ seuls ou en association avec d'autres agents thérapeutiques/ par exemple avec d'autres agents antiviraux tels que la 9-(^-hydroxy-éthoxyméthyl)guanine (acyclovir) utilisés pour traiter les infections à herpèsvirus/ en particulier à HSV/ et tout spécialement celles impliquant la variété HSV (1)/ avec la 31-désoxy-31-azidothymidine (zidovudine) ou un 2'/3'-didésoxynucléoside/. par exemple la 2'/3'-didésoxycytidine/ la 2',3'-didésoxyinosine/ la 2',3'-didésoxyadénosine ou la 2'/3'-didésoxyguanosine/ utilisés pour traiter des infections rétrovirales/ en particulier

les infections causées par le virus de 1'immuno-déficience humaine (VIH)/ des interférons/ en particulier le a-interféron/ et des protéines solubles telles que CD4/ ou de quelconques autres agents tels que des analgésiques ou antipyrétiques qui/ en association avec un composé de l'invention/ exercent un effet thérapeutique avantageux.

Il est préférable de présenter, les composés de l'invention sous forme de formulations pharmaceutiques contenant au moins un composé de l'invention (1'"ingrédient actif")/ ainsi qu'un ou plusieurs supports pharmaceutiquement acceptables pour celui-ci et/ facultativement/ d'autres ingrédients thérapeutiques. Le ou les supports doivent être Vacceptables" en ce sens qu'ils doivent sêtre compatibles avec les autres1 ingrédients des formulations et ne pas être nocifs pour leurs receveurs.

Les formulations de 1'invention comprennent celles qui sont adaptées à l'administration par l'une quelconque des voies susmentionnées/ qui peuvent commodément être présentées sous des formes posologiques unitaires préparées par 1'un quelconque des procédés bien connus dans l'art de la pharmacie. Ces procédés comprennent l'étape qui consiste à mettre l'ingrédient actif en association avec le support qui se compose d'un ou plusieurs ingrédients secondaires. En général/, les formulations sont préparées en mettant uniformément et intimement l'ingrédient actif en association avec des véhicules liquides ou des supports solides finement divisés/ ou les deux/ puis/ si nécessaire/ en conformant le produit.

Les formulations de la présente invention qui sont adaptées à l'administration orale peuvent être présentées sous forme d'unités discrètes telles que des gélules/ capsules/ cachets ou comprimés/ contenant chacun une quantité déterminée de l'ingrédient actif ; sous forme d'une poudre ou de granulés ; sous forme d'une solution ou d'une suspension dans un liquide aqueux ou un liquide non aqueux ; sous forme d'une mousse ou crème fouettée comestible ; ou

8

10

sous forme d'une émulsion liquide de type huile-dans-eau ou d'une émulsion liquide de type eau-dans-huile. L'ingrédient actif peut également être présenté sous forme d'une boulette ou d'une pâte, ou peut être contenu dans des liposomes.

Un comprimé peut être fabriqué par compression ou moulage# facultativement avec un ou.tplusieurs ingrédients secondaires. Des comprimés pressés peuvent être fabriqués en comprimant/ dans une machine appropriée/ l'ingrédient actif sous une forme s'écoulant librement telle qu'une poudre ou des granulés/ facultativement en mélange avec un liant (par exemple la polyvinylpyrrolidone/ la gélatine/ 1'hydroxypropylméthylcellulose)/ un lubrifiant/ un diluant inerte/ un délitant (par exemple 1'amidon-glycolate de sodium/ la polyvinylpyrrolidone réticulée/ la carboxyméthyl-cellulose sodique réticulée)/ un agent tensio-actif ou un agent dispersant. Des comprimés moulés peuvent être fabriqués en moulant/ dans une machine appropriée/ un mélange de l'ingrédient actif réduit en poudre/ humidifié avec un diluant liquide inerte. Les comprimés peuvent facultative-20 ment être enrobés ou entaillés et ils peuvent être formulés de façon à assurer une libération lente ou réglée de l'ingrédient actif qu'ils renferment/ en utilisant/ par exemple/ 1'hydroxypropylméthylcellulose en différentes proportions pour obtenir le profil de libération désiré/ 25 ou de façon à être solubles ou effervescents lorsqu'ils sont ajoutés à un liquide.

Une gélule; petit être fabriquée par remplissage avec une poudre meuble ou comprimée sur une machine de remplissage appropriée/ facultativement avec un ou plusieurs 30 additifs. Des exemples d'additifs convenables comprennent des liants tels que la polyvinylpyrrolidone/ la gélatine/ des lubrifiants/ des diluants inertes et des délitants comme pour les comprimés. Les gélules peuvent également être formulées pour contenir des granules ou sous-unités discrè-35 tes capables de produire une libération lente ou réglée de l'ingrédient actif. On peut y parvenir en extrudant et en

9

granulant sous forme sphérique un mélange humide du médicament avec un adjuvant d'extrusion (par exemple de la cellulose microcristalline) et un diluant tel que le lactose. Les sphéroïdes ainsi produits peuvent être enrobés d'une 5 membrane semi-perméable (par exemple en éthylcellulose/

Eudragit WE30D) pour acquérir des propriétés de libération prolongée.

comestible contient idéalement : 50 à 70 % d'une huile co-10 mestible/ en particulier une huile végétale/ y compris l'huile de mais, l'huile d'arachide/ l'huile de tournesol/ l'huile d'olive et l'huile de soja ; 2 à 10 % d'un ou plusieurs agents tensio-actifs, en particulier la lécithine/ des polyols/ des esters polymères de pol.yols/ y compris des 15 esters glycéryliques d'acides gras/ des esters polyglycéry-liques d'acides gras (par exemple le tétraoléate de déca-glycérol)/ ou des esters d'acides gras du sorbitanne (par exemple le monostéarate de sorbitanne) ; 1 à 4 % d'un gaz propulseur convenant pour.1'ingestion/ notamment un gaz 20. propulseur comprimé/ en particulier l'azote/ l'oxyde nitreux ou l'anhydride carbonique/ ou un hydrocarbure gazeux/ en particulier le propane/ le butane ou l'isobutane -, 0,5 à 30 % d'un ou plusieurs agents modificateurs de viscosité d'un diamètre particulaire de 10 à 5.0 micromètres/ en 25 particulier des sucres en poudre ou du bioxyde de silicium colloïdal ; et facultativement 0,5 à 1 % d'un ou plusieurs colorants/ aromatisants ou édulcorants non toxiques appropriés. L'ingrédient actif est de préférence présent dans ces formulations en une concentration de 10 à 46 %/ avantageu-30 sement de 30 %. Une formulation de mousse ou de crème fouettée comestible telle que décrite ci-dessus peut être préparée d'une manière classique/ par exemple en mélangeant l'huile comestible/ le ou les agents tensio-actifs et tous les autres ingrédients solubles/ en ajoutant le ou les 35 agents modificateurs de viscosité et en broyant le mélange pour former une dispersion et une suspension homogènes.

Une formulation de mousse ou de crème fouettée

10

L'ingrédient actif est ajouté et mélangé dans le mélange broyé jusqu'à dispersion uniforme. Enfin, une quantité dosée de gaz propulseur est incorporée au mélange après que ce dernier a été introduit en une quantité prédétermi-5 née dans un récipient distributeur approprié.

Pour des infections de l'oeil ou d'autres tissus externes, par exemple de la bouche ou la peau, les formulations sont de préférence appliquées sous forme d'une pommade ou crème à usage topique contenant l'ingrédient actif en 10 une proportion de, par exemple, 0,075 à 20 % en poids, de préférence 0,2 à 15 % en poids, et mieux encore 0,5 à 10 % en poids. Lorsqu'ils sont formulés en pommade, les ingrédients actifs peuvent être employés avec une base de pommade soit paraffinique, soit miscible à l'eau. En variante, 15 les ingrédients actifs peuvent être formulés en crème avec une base de crème du type huile-dans-eau ou eau-dans-huile.

Si on le désire, la phase aqueuse de la base de crème peut comprendre, par exemple, au moins 40 à 45 % en poids d'un polyalcool, c'est-à-dire un alcool comportant 20 deux ou plusieurs groupes hydroxyle tel que le propylène-glycol, le butane-1,3-diol, le mannitol,. le sorbitol, le glycérol, un polyéthylène-glycol et leurs mélanges. Les formulations à usage topique peuvent avantageusement contenir un composé qui favorise l'absorption ou la pénétra-25 tion de l'ingrédient actif à travers la peau ou autres zones affectées. Des exemples de ces activateurs de pénétration dermique comprennent le diméthylsulfoxyde et des composés analogues apparentés.

La phase huileuse d'une formulation en émulsion 30 selon l'invention .peut . contenir uniquement un agent émulsionnant (également appelé un émulgateur), mais elle contient avantageusement un mélange d'au moins un agent émulsionnant avec une graisse ou une huile, ou avec à la fois une graisse et une huile. De préférence, un agent 35 émulsionnant hydrophile est incorporé en même temps qu'un émulsionnant lipophile qui agit comme stabilisant. Il est

_ - - 11

également préférable d'inclure à la fois une huile et une graisse. Le ou les agents émulsionnants/ avec ou sans stabilisants/ constituent ensemble ce qui est appelé la cire émulsionnante/ et la cire/ associée.à l'huile et/ou la 5 graisse/ constitue ce qui est appelé la base de pommade

émulsionnante/ |qui forme la phase huileuse des formulations de crème.

Des émulgateurs et les stabilisants d'émulsion qui conviennent pour être utilisés dans la formulation de la présente invention comprennent Tween 60/ Span 80/ l'alcool cétostéarylique/ l'alcool myristy.lique/ le mono-stéarate de glycéryle et le laurylsulfate de sodium.

Le choix d'huiles ou de graisses appropriées pour la formulation se fait en fonction des .propriétés cosméti-15 ques que l'on désire obtenir/ étant donné que l'ingrédient actif présente une très faible solubilité dans la plupart des huiles susceptibles d'être utilisées dans les formulations pharmaceutiques en émulsion. La crème doit de préférence être un produit non gras. / non tachant et pouvant s ' en-20 lever par lavage/ ayant une consistance appropriée pour éviter qu'il s'échappe de tubes ou autres- récipients. On peut utiliser des mono- ou diesters alk.yl.iques à chaîne droite ou ramifiée tels que le diisoadipate/ le stéarate d'isocétyle/ le diester de propylène-glycol d'acides gras 25 de coprah/ le myristate d'isopropyle/ l'oléate de décyle7 le palmitate d'isopropyle/ le stéarate de butyle/ le pal-mitate de 2-éthylhexyle ou un mélange d'eaters à chaîne ramifiée connu sous la désignation Crodamol CAP/ les trois derniers esters étant préférés. Ceux-ci. peuvent être uti-30 lisés seuls ou en association selon les propriétés requises. En variante/ on peut utiliser des lipides à haut point de fusion tels que la vaseline pure et/ou l'huile de paraffine ou d'autres huiles minérales.

Les formulations adaptées à l'administration 35 topique à l'oeil comprennent également des gouttes pour instillations oculaires dans lesquelles l'ingrédient actif

12

se trouve dissous ou en suspension dans un véhicule approprié/ notamment un solvant aqueux. L'ingrédient actif est de préférence présent dans ces formulations en. une concen- • tration de 0/5 à 20 %/ avantageusement de 0/5 à 10 %/ et 5 notamment d'environ 1/5 % en poids.

topique dans la bouche comprennent des pastilles renfermant l'ingrédient actif dans une base aromatisée/ habituellement le saccharose et la gomme arabique ou adragante ;

10 des pastilles renfermant l'ingrédient actif dans une base inerte telle que la gélatine avec la glycérine/ ou le saccharose avec la gomme arabique ; et des bains.de bouche où l'ingrédient actif est contenu dans un véhicule liquide approprié.

15 Les formulations adaptées à l'administration par voie rectale peuvent être présentées sous forme d'un suppositoire avec une base appropriée comprenant/ par exemple/ du beurre de cacao ou un alcool gras supérieur (par exemple la cire dure/ Pharmacopée Européenne) ou des triglycé-

20 rides et acides gras saturés (par exemple Witepsol).

voie nasale dans lesquelles le support est une. matière solide comprennent une poudre à gros grains dont la dimension particulaire se situe par exemple dans l'intervalle de 25 20 à 500 micromètres/ qui est administrée à la manière dont on prend une prise/ c'est-à-dire par inhalation rapide par le passage nasal de la poudre contenue dans, un récipient maintenu tout près du nez. Des formulations appropriées dans lesquelles le support est un liquide/ .par exemple pour 30 une administration en pulvérisation nasale ou en gouttes nasales/ comprennent des solutions aqueuses ou huileuses de l'ingrédient actif.

voie vaginale peuvent être présentées sous forme de pessai-35 res/ tampons/ crèmes/ gels/ pâtes/ produits-moussants ou produits à pulvériser/ contenant/ en plus de l'ingrédient

Les formulations adaptées à l'administration

Les formulations adaptées à l'administration par

13

actif/ des supports tels que ceux connus dans l'art pharmaceutique comme étant appropriés.

voie parentérale comprennent des solutions injectables sté-5 riles aqueuses et non aqueuses/ qui peuvent contenir des antioxydants/ tampons/ bactériostats et solutés qui rendent la formulation isotonique vis-à-vis du sang du receveur considéré ; et des suspensions stériles, aqueuses et non aqueuses qui peuvent contenir des agents suspendants et des 10 agents épaississants. Les formulations peuvent être présentées dans des récipients à dose unique où à doses multiples/ par exemple des ampoules scellées et des flacons/ et peuvent être conservées à l'état lyophilisé en ne nécessitant que l'addition du véhicule liquide stérile/ par exemple de 15 l'eau pour injections/ immédiatement avant l'emploi. Des solutions et suspensions injectables ext-emporanées peuvent être préparées à partir de poudres/ granules et comprimés stériles du genre précédemment décrit.

20 celles qui contiennent l'ingrédient actif- en une dose ou une sous-dose unitaire quotidienne/ telle, que décrite ci-dessus / ou une fraction appropriée de celle-ci.

mentionnés en particulier ci-dessus/ les formulations de 25 la présente invention peuvent contenir d'autres, agents classiques dans l'art pharmaceutique eu- égard au type de formulation en question ; par exemple/ les formulations adaptées à l'administration par voie-orale peuvent contenir des agents aromatisants.

30 Les composés de l'invention peuvent être prépa rés par tout procédé connu dans la technique pour la préparation de composés similaires (des exemples en sont les procédés décrits dans le brevet du Royaume-Uni N°1 601 020 et les publications de brevet européen N° 61 283 et 27 065/ 35 ou par M.J. Robins et P.J. Barr dans J. Org. Chem. (1983) 48/ 1854-1862)/ ainsi que les procédés décrits dans les Exemples donnés ci-après.

Les formulations adaptées à l'administration par

Les formulations à dose unitaire préférées sont

Il est bien entendu qu'en plus des ingrédients

10

15

14

La présente invention fournit également des procédés pour la préparation d'un composé de l'invention/ consistant :

A. à faire réagir un composé de formule II

HO

CECCH

(II)

OH

avec un composé servant à apporter le groupe triméthyl-acétyle à la position 5 du fragment sucre ; ou B. à faire réagir un composé de formule III

20

25

30

35

O

(III)

OH

dans laquelle B est une base purique ou pyrimidique (autre que le 5-prop-l-ynyluracile) avec le 5-prop-l-ynyluracile j et# facultativement# par la suite ou en même temps/ lorsque le composé résultant est un composé de formule 1/ à le convertir en l'un de ses sels ; ou bien/ lorsque le composé résultant est un sel/ à le convertir en un sel différent ou en un composé de formule I.

En ce qui concerne le procédé A/ on peut préparer un composé de formule I à partir d'un composé de formule II/ dont la préparation est décrite dans la publica-

15

tion de brevet européen N° 272 065/ par exemple par acyla-tion en utilisant un agent acylant approprié tel qu'un halogénure de triméthylacétyle (par exemple le chlorure) ou l'anhydride triméthylacétique/ avantageusement en pré-5 sence d'une base telle que la pyridine ou la triéthylamine qui peut également servir de milieu dissolvant pour la réaction/ à une température comprise dans l'intervalle de 0 à 70°C/ avantageusement de 0 à 30°C/ de préférence entre 0 et 15°C.'Le rapport de l'agent acylant au composé de for-10 mule II est de préférence de 1/2:1 en poids.

De plus/ un composé de formule I. peut être préparé à partir d'un composé de formule II par transestérifi-cation en utilisant un ester approprié de l'acide triméthylacétique (par exemple l'ester de méthyle) en présence d'une 15 base telle que la pyridine ou la triéthylamine qui peut également servir de milieu dissolvant pour la réaction.

En outre/ la réaction d'estérification peut être effectuée par exemple dans un solvant tel que la pyridine ou le diméthylformamide en présence d'un agent de couplage 20 tel que le N/N'-dicyclohexylcarbodiimide/ facultativement en présence d'une base, catalytique telle .que la 4-diméthyl-aminopyridine en utilisant les agents acylants indiqués ci-dessus. Ensuite/ l'ester obtenu comme produit réactionnel peut être isolé par des moyens classiques.

25 En ce qui concerne le procédé B/ le groupe B est de préférence une base purique ou pyrimidique capable de céder le sucre estérifié à du 5-prop-l-ynyluracile base au moyen/ par exemple/ d'un enzyme tel qu'une phosphorylase en présence d'un phosphate à un pH de 5/0 à 9/0 et à une tem-30 pérature de 15° à 90°C/ avantageusement 40° à 60°C.

Des sels selon l'invention peuvent également être préparés de manière classique/ par exemple par la réaction d'un composé de formule II avec une base appropriée pour former le sel de base correspondant/ ce qui est suivi par 35 une acylation. On peut encore préparer les.sels par réaction du composé estérifié avec une base telle que l'hydrure de

16

sodium correspondant. D'autres dérivés selon l'invention peuvent également être préparés de manière classique.

Les exemples non limitatifs suivants illustrent l'invention.

i

5 Exemple 1

5-p.rop-l-ynyl-l-( 5-O-trimé thy lacé tyl-|3-D-arabinof urannosyl ) -uracile

A une solution sous agitation de 0/28 g (1 mmole) de 1-(p-D-arabinofurannosyl)-5-prop-l-ynyluracile (synthé-10 tisé par le procédé décrit dans la publication de brevet européen N° 272 065) dans 5 ml de pyridine anhydre à 0°C sous azote anhydre/ on ajoute goutte à goutte une solution de 0/15 ml (0/14 q, 1,2 mmole) de chlorure de triméthylacé-tyle dans 5 ml de dichlorométhane anhydre en .une période de 15 10 minutes. On agite le mélange à 0°C pendant 90 minutes/ puis à la température ambiante pendant 2 heures. On évapore le solvant sous pression réduite et l'on évapore la pyridine résiduelle conjointement à 3 portions de 25 ml d'éthanol pour obtenir une huile. La séparation par chromatographie 20 sur une colonne de gel de silice/ en éluant avec 8 % de méthanol dans le dichlorométhane donne un produit pur que l'on triture à l'éther pour obtenir un solide blanc identifié comme étant le composé du titre.

P.F. 204-210°C.

25 Analyse : Calculé : C-55,74, H-6,011, N-7,65%

Trouvé : C—55»95, H-6,006, N-7,525%.

S(d6DMS0) ll,55(lH,6s,NH), 7,58(1H,s,H-6), 6,0(lHrd,H-l'), 5,72(lH,d,0H-2'), 5,62(lHIm,0H-3'), 4,4-4,13(2H,m,H-5'),

30 4,08-3,89 (3H,m,H-2',H-3',H-4'), l,97(3HfsfOCCH3), l,19ppm(9H,s,tBu).

Exemple 2

Sel de sodium du 5-prop-l-ynyl-l-( 5-triméthylacétyl-P-D-arabinofurannosyl)uracile

On ajoute 0/05 g d'une suspension d'hydrure de 35 sodium (suspension à 80 % en poids/volume dans l'huile/

1/66 mmole/ lavée plusieurs fois avec du tétrahydrofuranne

10

15

20

25

30

17

anhydre) dans 4 ml de tétrahydrofuranne anhydre à une solution sous agitation de 0/06 g (1/64 mmole) de 5-prop-l-ynyl-1-( 5-triméthylacétyl-(3-D-arabinof urannosyl ) uracile dans du tétrahydrofuranne anhydre/ en s'assurant, d'une exclusion totale de l'humidité. On évapore le solvant au bout de 1 heure pour obtenir 0/1 g du sel de sodium désiré.

Exemple A

Ingrédient actif

Chlorure de sodium/ qualité analytique

Thiomersal

Eau purifiée/ jusqu'à' pH/ ajusté à

Solution à usage ophtalmique 0/5 g

0/9 g 0,001 g 100 ml 7/5

Exemple B : Formulations de Comprimés

On prépare les formulations A, B et C suivantes par granulation par voie humide des ingrédients avec une solution de polyvinylpyrrolidone/ puis addition de stéarate de magnésium et pressage.

Formulation A

(a) Ingrédient actif

(b) Lactose B.P. (Pharmacopée britannique)

(c) Polyvinylpyrrolidone B.P.

(d) Amidon-glycolate de -sodium

(e) Stéarate de magnésium

Formulation B

(a) Ingrédient actif

(b) Lactose

(c) Avicel PH 101

(d) Polyvinylpyrrolidone B.P.

(e) Amidon-glycolate de sodium

(f) Stéarate de magnésium mg/comprimé 250

210 15 20 5

mg/comprimé 250

26 9 12 3

500

300

mg/comprimé 250 150 60 15 20

5

500

mg/comprimé 250

26 9 12 3

300

35

18

Formulation G mg/comprimé

Ingrédient actif 100

Lactose 200

Amidon 50

5 Polyvinylpyrrolidone 5

Stéarate de magnésium 4

359

On prépare les formulations D et E suivantes en 10 comprimant directement les ingrédients mélangés. Le lactose utilisé dans la formulation E est du type" pour pressage direct.

Formulation D mg/comprimé

Ingrédient actif 250

15 Amidon prégélatinisé NF15 150

400

Formulation E mg/comprimé

Ingrédient actif 250

Lactose i. 150

Avicel . 100

500

20

Formulation F (Formulâti0,11 à Libération Réglée)

On prépare la formulation par granulation par voie 25 humide des ingrédients-(ci-rdessous ) avec une solution de polyvinylpyrrolidone/ puis addition de stéarate de magnésium et pressage.

mg/comprimé

30

35

(a)

Ingrédient actif

500

(b)

Hydroxypropylméthylcellulose (Methocel K4M Premium)

112

(c)

Lactose B.P.

53

(d)

Polyvinylpyrrolidone B.P.

28

(e)

Stéarate de magnésium

7

700

La libération du médicament s'effectue sur une période d'environ 6 à 8 heures et elle est terminée au bout de 12 heures.

a

19

15

Exemple C : Formulations de gélules et capsules Formulation A

On prépare une formulation de gélule en mélangeant les ingrédients non comprimés de la Formulation D de 5 l'Exemple B ci-dessus et en les introduisant dans une gélule de gélatine dure en deux parties. On prépare la formulation B (ci-dessous) d'.une manière similaire. Formulation B

mg/gélule

10 (a) Ingrédient actif 250

(b) Lactose B.P. 143

(c) Amidon-glyccjlate de sodium 25

(d) Stéarate de magnésium 2

420

Formulation C mg/gélule

(a) Ingrédient actif 250

(b) Macrogol 4000 BP 350

600

On prépare les gélules en faisant fondre Macrogol 4000 BPt en dispersant l'ingrédient actif dans la masse fondue et en introduisant la masse fondue dans une gélule de gélatine dure en deux parties.

Formulation D 25 mg/capsule

Ingrédient actif 250

Lécithine 100

Huile d'arachide 100

450

30 on prépare des capsules en dispersant l'ingré

dient actif dans la lécithine et l'huile d'arachide et en introduisant la dispersion dans des capsules de gélatine élastique molle.

Formulation E (Gélule à Libération Réglée) 35 on prépare l'a formulation suivante de gélule à

libération réglée en extrudant les ingrédients (a)/ (b) et

20

15

(c) ci-dessous/ en utilisant une extrudeuse/ puis en granu-lant l'extrudat sous forme sphérique et en le séchant. On recouvre ensuite les granules séchés avec la membrane (d) régulatrice de libération et les introduit dans une gélule 5 de gélatine dure en deux parties.

mg/gélule

(a) Ingrédient actif 250

(b) Cellulose microcristalline 125

(c) Lactose BP 125 10 (d) Ethyl-cellulose 13

513

Formulation Injectable Exemple D :

Ingrédient actif 0/200 g

Tampon phosphate stérile apyrogène (pH 7/0) jusqu'à 10 ml

On dissout l'ingrédient actif dans la plus grande partie du tampon phosphate (35-40°C)/ on complète au volume et l'on filtre à travers un filtre microporeux stérile en remplissant un flacon de verre ambré de 10 ml (type 1) que l'on bouche au moyen d'éléments d'obturation stériles et de capuchons protecteurs.

Exemple E : Injection Intramusculaire Ingrédient actif 0/20 g

Alcool benzylique 0/10 g

Glycofurol 75 1/45 g

Eau pour injections/ q.s. pour 3/00 ml

On dissout l'ingrédient actif dans le glycofurol. On ajoute ensuite l'alcool benzylique et le dissout et l'on ajoute de l'eau jusqu'à 3 ml. On filtre ensuite le mélange à travers un filtre microporeux stérile et l'introduit dans des flacons de.verre stériles de 3 ml (type 1) que l'on bouche.

35

20

25

30

21

Exemple F : Suspension dans un Sirop Ingrédient actif Solution de sorbitol Glycérol

0,2500 g 1,5000 g 2,0000 g 0,0750 g 0,0050 g 0,0125 ml 5,0000 ml

5 Cellulose dispersable. Benzoate de sodium

Arôme, pêche 17.42.3169 Eau purifiée, q.s. pour

On dissout le benzoate de sodium dans une partie de l'eau purifiée et l'on ajoute la solution de sorbitol. On ajoute et disperse l'ingrédient actif. On disperse 1'épaississant (cellulose dispersable) dans le glycérol. On mélange les deux dispersions et l'on porte au volume désiré avec l'eau purifiée.

Exemple H : Suppositoire mg/suppositoire

Ingrédient actif (63 jum)* 250

Graisse Dure, BP (Witepsol H15 -

Dynamit NoBel) 1770

* L'ingrédient actif est utilisé sous forme d'une poudre dont au moins 90 % des particules ont un diamètre égal ou inférieur à 63 pm.

On fait fondre un cinquième du Witepsol H15 dans un bac à chemise .de vapeur ;d'eau à une température de 45°C 25 au maximum. On passe l'ingrédient actif à travers un tamis à mailles de 200 pm et l'.ajoute: à la base fondue tout en mélangeant, en utilisant un appareil de Sil.verson équipé d'une tête coupante, jusqu'à.obtention d'une dispersion homogène. Tout en maintenant le mélange à 45°C, on ajoute 30 le reste du Witepsol H15 à la suspension et l'on agite pour assurer un mélange homogène. On fait passer la totalité de la suspension à travers, un tamis en acier inoxydable de 250 jum et, tout en agitant constamment, on laisse refroidir jusqu'à 40°C. On' introduit 2,02 g du mélange à 35 une température de 38° à 40°C dans des moules appropriés en matière plastique. On laisse les suppositoires refroi-

i dir à la température ambiante.

2020

22

10

15

20

25

30

35

Exemple H : Fessaires mg/pessaire

Ingrédient actif. (63 pm) 250

Dextrose anhydre 380

Fécule de pomme de terre 363

Stéarate de magnésium 7

1000

On mélange directement les ingrédients ci-dessus et l'on prépare les pessa.ires par compression directe du mélange résultant.

Exemple I : Formulation, à Usage Topique

Crème

Composé actif 5,00 g

Glycérol 2,00 g

Alcool cétostéarylique 6,75 g

Laurylsulfate de sodium 0,75 g

Vaseline pure 12,50 g

Huile de paraffine " 5,00 g

Chlorocrésol 0,10 g

Eau purifiée, jusqu'à 100,00 g

On dissout lé composé actif dans un mélange de l'eau purifiée et du glycérol et le chauffe à 70°C. On chauffe ensemble les ingrédients restants à 70°C. On ajoute les deux parties l'une à l'autre et les émulsionne. On refroidit et introduit dans des récipients.

Détermination de la Biodisponibilité par Voie Orale

On administre le composé de l'Exemple 1 ou le composé d'origine à des rats Long Evans par gavage à une dose de 50 mg/kg. On recueille l'urine pendant 24 et 48 heures après l'administration de la dose, la soumet à une ultrafiltration et l'analyse par chromatographie liquide à haute pression à phases inversées. La biodisponibilité par voie orale du composé de.l'Exemple 1 et du composé d'origine est exprimée par le pourcentage de la dose qui a été excrété dans l'urine dans la période de collecte de fi

*

23

48 heures, sous la forme.du l-(p-D-arabinofurannosyl)-5-prop-l—ynyluracile/ c'est-à-dire le composé d'origine. Composé Taux de récupération urinaire (% de la dose)

Exemple 1 64/89

Composé d'origine 9/70

Toxicité

La cytoxicité est évaluée dans un essai d'inhibition de croissance cellulaire. On expose à différentes dilutions du médicament des cultures sous-confluentes de cellulels Vero cultivées sur des plaques de microtitrage à 96 alvéoles et l'on détermine quotidiennement la viabilité des cellules sur des cultures faites en double en utilisant l'absorption d'un colorant de tétrazolium (MTT). La concentration nécessaire pour inhiber à 50 % la viabilité des cellules au bout de 96 heures est appelée la CCID^q.

Exemple CCID^q (uM) au bout de 96 heures

1 477

10

24

Claims

REVENDICATIONS 1. Procédé pour la préparation d'un composé de formule I :

CECCH.

10

O 11

(chj^cco d)

OH

15 ou d'un sel de ce composé, caractérisé en ce qu'il consiste: A. à faire réagir un composé de formule II

20

j-lKl' \^C = CCH3

(II)

Ho

25

Y

30

oh avec un composé servant à apporter le groupe triméthyl-acétyle à la position 5 du fragment sucre : ou B: à faire réagir un composé de formule III

O

1!

(ch3)3cco

(III)

35

OH

25

10

dans laquelle B est une base purique ou pyrimidique •(autre que le 5-prop-l-ynyluracile) avec le 5-prop-l-ynyluracile ;

et/ facultativement/ par la suite ou en même temps/ lorsque le composé résultant est un composé de formule !/ à le convertir en l'un de ses sels î ou bien, lorsque le composé résultant est un sel/ à le convertir en un sel différent ou en un composé de'formule I.

2. Procédé selon la revendication 1/ caractérisé en ce qu'il est destiné à la préparation du 5-prop^l-ynyl-1-(5-O-triméthylacétyl-3-D-arabinofurannosyl)uracile.

3. Procédé pour la préparation d'une formulation pharmaceutique contenant un composé de formule I :

15

20

(CHj^cca

O

oh

C = CCH-

(I)

25 ou un sel pharmaceutiquement acceptable de ce composé/

caractérisé en ce qu'il consiste à préparer un composé de formule 1/ ou un .sel pharmaceutiquement acceptable de ce composé :

30

35

A. en faisant réagir un composé de formule II

O

C H C C H-

(II)

oh

26

avec un composé servant à apporter le groupe triméth^l-acétyle à la position 5 du fragment sucre ; ou B. en faisant réagir un composé de formule III

dans laquelle B est une base purique ou pyrimidique (autre que lç 5-prop-l-ynyluracile) avec le 5-prop-l-ynyluracile ;

et/ facultativement/ par la suite ou en même temps/ lorsque 15 le composé résultant est un composé de formule I, en le convertissant en l'un de ses sels pharmaceutiquement acceptables ; ou bien/ lorsque le composé résultant est un sel/ en le convertissant en un sel pharmaceutiquement acceptable différent ou en un composé de formule I ; puis 20 en mettant en association le composé résultant avec un support pharmaceutiquement acceptable pour ce composé.

5

O

(III)

OH

10

25

30

35