Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania nowyoh pochodnych kwasu 7/5 -/7z/-2-/2-ami- notiazolilo-4/-2-oksyiminoacetamidoJ-3-cefemokarboksylowego-4 o ogólnym wzorze 1, w którym R1 oznacza atom wodoru lub nizsza grupe alkilowa, R2 oznacza grupe /1-*netylo-1H-tetrazoli- lo-5/tiof a R* oznacza grupe karboksylowa, albo R oznacza grupe o ogólnym wzorze 2, w któ¬ rym Y oznacza atom wodoru, grupe hydroksymetylowa lub karbamoilowa, a R^ oznacza grupe -£00" zas n oznacza 2 lub 3, lub farmakologicznie dopuszczalnyoh soli tych zwiazków.Nowe zwiazki oefalosporynowe o wzorze 1 i ich farmakologicznie dopuszczalne sole wykazu¬ ja silne dzialanie mikrobobójoze wobec wielu róznorodnych drobnoustrojów, w tym bakterii Gram-dodatnich i Gram-ujemnych. Sa one przydatne jako srodki przeoiwbakteryjne, dodatki od¬ zywcze do pasz dla zwierzat oraz jako srodki chemioterapeutyczne dla zwierzat cieplokrwistyc w tym ludzi, stosowane w leczeniu chorób zakaznych powodowanych przez bakterie Gram-dodatnlc i Gram-ujemne.Sposród zwiazków wytwarzanych sposobem wedlug wynalazku korzystne sa zwiazki o wzorze 1, w którym R1 oznacza atom wodoru, nizsza grupe alkilowa, taka jak grupa metylowa, etylowa lut propylowa, R2 oznacza grupe (1-oetylo-lH-tetrazolilo-5)tio, a R^ oznacza grupe karboksylowa, albo R2 oznacza grupe o wzorze 2, w którym Y oznacza atom wodoru, grupe hydroksymetylowa lut karbamoilowa, a R* oznacza grupe C00", zas n oznacza 2 lub 3. Bardziej korzystne sa zwiazki o wzorze 1, w którym R1 oznacza atom wodoru lub grupe metylowa, R2 oznacza grupe /1-metylo- -1H-tetrazolilo-5/tiof a R^ oznaoza grupe karboksylowa, albo R2 oznacza grupe o wzorze 2f w którym Y oznacza atom wodoru lub grupe 4-hydroksymetylowa, 3-hydroksymetylowa lab 4-karba¬ moilowa, a R* oznacza grupe COO", zas n oznaoza 2 lub 3. Dalszymi korzystnymi zwiazkami sa zwiazki o wzorze 1, w którym R* oznaoza atom wodoru, R2 oznacza grupe o wzorze 2, w którym Y oznaoza atom wodoru, a R* oznaoza grupe COO"", zas n oznaoza 2* Najkorzystniejszym zwiaz¬ kiem jest lewoskretay izomer zwiazku o wzorze 1, w którym R^ oznaoza atom wodoru, R2 oznacza2 140 023 grupe o wzorze 2, w którym Y oznacza atom wodoru, a R* joznaoza grupe COO", zas n oznacza 2.Wzór 1 nalezy uwazac za przedstawiajacy grupe oksyiminowa w konfiguracji Z, to Jest konfi- guraoji syn. Chociaz izomery Z, to Jest syn, wytwarzane sposobem wedlug wynalazku sa korzy¬ stne i wykazuja najlepsze wlasciwosci biologiczne, moga one wspólistniec z mala iloscia izomeru Ef to Jest anti, które moze wystepowac wskutek izomeryzacji podczas syntezy chemiczne Sposób wytwarzania nowych zwiazków cefalosporynowych o ogólnym wzorze 1 polega wedlug wynalazku na tym, ze zwiazek o ogólnym wzorze 3, w którym R' oznacza atom wodoru lub grupe zabezpieczajaca, a R i n maja wyzej podane znaczenie, lub jego sól, poddaje sie reakcji ze zwiazkiem pirydynowym o ogólnym wzorze 4, w którym T ma wyzej podane znaczenie, z /1-mety- lo-5-merkapto/tetrazolem badz ich solami i w przypadku gdy R? oznacza grupe zabezpieczajaca, grupe te usuwa sie, po czym otrzymany produkt ewentualnie przeprowadza sie w farmakologicz¬ nie dopuszczalna sól* Zgodnie z korzystnym wariantem sposobu wedlug wynalazku w przypadku wytwarzania 7 3^ |/Z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-^2-pirolW^ lo/-3-cefemokarboksylanu-4 lub jego farmakologicznie dopuszczalnej soli zwiazek o wzorze 5, w którym r" oznacza atom wodoru lub grupe zabezpieczajaca, lub jego sól, poddaje sie reakcji z pirydyna lub jej sola i w przypadku gdy R' oznacza grupe zabezpieczajaca, grupe te usuwa sie, po czym otrzymany produkt ewentualnie przeprowadza sie w farmakologicznie dopuszczalna sól* Zgodnie z innym korzystnym wariantem sposobu wedlug wynalazku w przypadku wytwarzania 7^ «//Z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-£(3S^ niometylo/-3-oefemokarboksylanu-4 lub jego farmakologicznie dopuszozalnej soli kwas 7($ - [/Z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-^( 3S)-2-pirolidonylo-3/oksyiminoJ acetamidoj -cefalosporanowy o wzorze 5, w którym R' oznacza atom wodoru lub grupe zabezpieczajaca, lub jego sól podda¬ je sie reakcji z pirydyna lub jej sola i w przypadku gdy R' oznacza grupe zabezpieczajaca, grupe te usuwa sie, po czym otrzymany produkt ewentualnie przeprowadza siew farmakologicznie dopuszczalna sól.W powyzej okreslonych reakojach jako grupy zabezpieczajace R wykorzystuje sie rózno¬ rodne grupy zabezpieczajace zwykle stosowane do zabezpieczania grup aminowych w syntezie peptydów. Przykladami takich grup zabezpieczajacych sa nizsza grupa alkanoilowa, taka jak fermyIowa, acetylowa i piwaloilowa, grupa jedno-, dwu- lub trójchlorowcoalkanoilowa, taka jak ohloroaoetylowa i trójfluoroacetylowa, nizsza grupa alkoksykarbonylowa, taka jak meto- ksykarbonylowa, etoksykarbonylowa 1 III-rz.butoksykarbonylowa, podstawiona lub niepodsta¬ wiona grupa benzyloksykarbonylowa, taka jak benzyloksykarbonyIowa i p-metoksybenzyloksykar- bonylowa, podstawiona lub niepodstawiona nizsza grupa fenyloalkilowa, taka jak p-metokey- benzylowa i 3t4-dwumetoksybenzylowa, oraz nizsza grupa dwu- lub trójfenyloalkilowa, taka jek benzyhydrylowa i trityIowa* Odpowiednimi przykladowymi solami zwiazku o wzorze 3 i /lHnetylo-5-merkapto/tetrazolu sa sole nieorganiczne, takie jak sól z trójmetyloamina i z trójetyloamina.W niniejszym opisie okreslenie "izomer lewoskretny" zwiazku o wzorze 1 lub 3, w których to wzorach H' oznacza atom wodoru, a n oznaoza 2, oznaoza, ze absolutna konfiguracja zwiaz¬ ku na asymetrycznym atomie wegla jest konfiguracja S, a okreslenie "izomer prawoskretny" oznaoza, ze absolutna konfiguracja na asymetrycznym atomie wegla jest konfiguracja R. Reak¬ cje zwiazku o wzorze 3 lub jego soli ze zwiazkiem pirydynowym o wzorze 4 lub /1-metylo- 5-merkapto/-tetrazolem lub jego sola mozna latwo przeprowadzic w rozpuszczalniku. Odpowied¬ nimi rozpuszczalnikami sa woda, dwumetyloformamid i N,N,-dwumetyloacetamid. Korzystnie, re- akoje prowadzi sie w temperaturze 0 - 100°C, zwlaszcza 20 - 80°C. Korzystnie Jest prowadzic Ja w obecnosci jodku sodowego, jodku potasowego, wodoroweglanu sodowego lub roztworu buforu fosforanowego.W przypadku gdy R' oznaoza grupe zabezpieczajaca, usuwa sie ja z tak otrzymanego produk¬ tu postepujac w znany sposób, np. prowadzac hydrolize, solwolize, dzialajac kwasem lub pro- wadzao reakoje, Ha przyklad, gdy grupa zabezpieczajaca R? oznacza grupe formylowa, acetylowa, Ill-rzed.-butoksykarbonyIowa, benzyhydrylowa lub trityIowa, to grupe te mozna usunac dziala-140 023 3 jac kwasem. Odpowiednimi przykladami takich kwasów sa np. kwas mrówkowy, trójfluorooctowy, benzenosulfonowy, p-toluenosulfonowy, solny lub bromowodorowy, zwlaszcza kwas trójfluoro- octowy. Reakcje te mozna prowadzic z uzyciem lub bez uzycia rozpuszczalnika. Przykladami rozpuszczalników sa woda, metanol, etanol, kwas octowy lub dioksan. Korzystnie reakcje pro¬ wadzi sie w temperaturze od -30 do 70°C, zwlaszcza 0 - 30°C. W przypadku, gdy jako kwas stosuje sie kwas trójfluorooctowy, reakcje korzystnie prowadzi sie w obecnosci anizolu* Gdy grupa zabezpieczajaca R? oznacza grupe benzyloksykarbonylowa, p-metoksybenzyloksykarbony- lowa, benzylowa, p-metoksybenzylowa lub 3,4-dwumetoksybenzylowa, to grupe te mozna usunac przez katalityczne uwodornienie produktu gazowym wodorem w obecnosci katalizatora* Uwodor¬ nienie katalityczne korzystnie prowadzi sie w temperaturze 0 - 100°C, zwlaszcza 10 - 40 C, pod cisnieniem atmosferycznym lub zwiekszonym. Korzystnymi przykladami katalizatorów sa pallad - BaCO,, pallad - wegiel drzewny i czern palladowa. Odpowiednimi rozpuszczalnikami stosowanymi w reakcji sa metanol, etanol, tetrahydrofuran i woda. Gdy grupa zabezpieczaja¬ ca R? stanowi grupe trójfluoroacetylowa, piwaloilowa, metoksykarbonylowa lub etoksykarbo- nylowa, to grupe te mozna usunac przez hydrolize* Hydrolize te mozna prowadzic znanymi spo¬ sobami, np. dzialajac srodkiem alkalicznym, takim jak wodorotlenek sodowy lub potasowy, al¬ bo kwasem, takim jak kwas solny lub bromowodorowy. Korzystnie hydrolize prowadzi sie w tem¬ peraturze 0 - 70°C, zwlaszcza 10 -'30°C. Gdy grupa zabezpieczajaca R' stanowi grupe chloro- acetylowa, grupe te mozna usunac dzialajao tiomocznikiem w rozpuszczalniku. Odpowiednim rozpuszczalnikiem jest metanol, etanol i woda* Reakcje prowadzi sie korzystnie w temperatu¬ rze 20 - 80°C, zwlaszcza 40 - 80°C.Zwiazki wyjsciowe o wzorze 3 mozna wytwarzac w ten sposób, ze zwiazek o wzorze 6, w któ- 4 1 rym R oznacza grupe zabezpieczajaca, a R ma wyzej podane znaczenie, lub jego reaktywna pochodna poddaje sie kondensaoji ze zwiazkiem o wzorze 7, w którym R* oznacza grupe karbo¬ ksylowa lub zabezpieozona grupe karboksylowa, lub jego sole, otrzymujac zwiazek o wzorze 8, w którym R f R i R^ maja wyzej podane znaczenie, 1 z tego zwiazku ewentualnie usuwa sie grupe zabezpieczajaca lub grupy zabezpieczajace* Jako grupy zabezpieczajace R mozna stosowac takie same grupy jak grupy zabezpieczaja¬ ce Gdy R^ w zwiazku o wzorze 7 lub 8 oznacza zabezpieczona grupe karboksylowa, grupa zabezpieczajaca grupe karboksylowa powinna byc taka grupa, która mozna latwo usunac znanymi sposobami, takimi jak hydroliza, dzialanie kwasem lub redukcja* Przykladami takich grup za¬ bezpieczajacych sa nizsza grupa alkilowa, taka jak metylowa, etylowa lub III-rz.-butyIowa, podstawiona lub niepod stawiona nizsza grupa feny loalkilowa, taka jak benzylowa, p-metoksyben- zylowa i p-nitrdbenzylowa, grupa benzyhydrylowa, nizsza grupa trójalkilosililowa taka jak trój- metylosiliIowa, i tym podobne grupy. Gdy R oznacza grupe karboksylowa, korzystnie jest prze¬ ksztalcic zwiazek o wzorze 8 w sól przed przeprowadzeniem reakcji kondensacji. Poniewaz zwiazek o wzorze 6 moze istniec w postaci dwóch izomerów optycznych ze wzgledu na obecnosc asymetrycz¬ nego atomu wegla w grupie 9, w którym gwiazdka wskazuje asymetryczny atom wegla, w sposobie tym mozna stosowac kazdy z izomerów optycznych zwiazku o wzorze 6 lub jego racemat.Reakcje kondensacji zwiazku o wzorze 6 lub jego reaktywnej pochodnej ze zwiazkiem o wzo¬ rze 7 lub jego sola przeprowadza sie w znany sposób* Ha przyklad, kondensacje zwiazku o wzo¬ rze 6 w wolnej postaoi ze zwiazkiem o wzorze 7 prowadzi sie w obecnosoi srodka odwadniajace¬ go w rozpuszczalniku* Odpowiednimi przykladami srodków odwadniajacych sa dwucykloheksylokar- bodwulmid, N-oykloheksylo-N'-morfolinokarbodwuimid, N-etylo-N'-/3-dwumetyloaminopropylo/kar- bodwulmid, tlenochlorek fosforu, trójchlorek fosforu, chlorek tionylu, chlorek oksalllu, trójfenylofosfina i tym podobne. Jako srodek odwadniajacy mozna równiez stosowac odczynnik Yllsmeiera wytworzony z dwumetyloformamida i tlenochlorku fosforu, z dwumetyloformamidu i chlorku oksalllu, z dwumetyloformamidu i fosgenu lub z dwumetyloformamidu i chlorku tionylu.Korzystnie, reakcje prowadzi sie w temperaturze od -50 do 50°C, zwlaszcza od -30 do 20°C.Odpowiednimi rozpuszczalnikami sa dioksaa, tetrahydrofuran, aoetonitryl, chloroform, chlorek metylenu, dwumetyloformamid, N,N-dwumetyloaoetamid, octan etylu, pirydyna, aceton i woda*4 140 023 Reakoje kondensaoji reaktywnej pochodnej zwiazku o wzorze 6 ze zwiazkiem o wzorze 7 lub jego sola mozna prowadzic z uzyciem lub bez uzycia akceptora kwasu w rozpuszczalniki/. Odpo¬ wiednimi przykladami reaktywnych pochodnych zwiazku o wzorze 6 sa ohlorki kwasowe, rlp* chlorek i bromek, mieszane bezwodniki, np. mieszany bezwodnik zwiazku o wzorze 6 z/weglanem elkilu, aktywne estry, np. ester p-nitrofenylowy, 2,4-dwunitrofenylowy, sukcynimid limidowy, benzotriazolowy i 2-pirolidonylowy-1, azydki kwasowe, oraz amidy kwasowe ^np. amid imidazolu, amid 4-podstawionego imidazolu i amid triazolu. Odpowiednimi rozpuszczalnikami sa dioksan, tetrahydrofuran, acetonitryl, chloroform, chlorek metylenu, dwumetyloformamid, N,N-dwumetyloacetamid, ootan etylu, pirydyna, aceton i woda* Odpowiednimi przykladami akcep¬ torów kwasu sa wodorotlenki metali alkalicznych, np. wodorotlenek potasowy i sodcwy, weglany lub wodoroweglany metali alkalicznych, np. weglan sodowy, wodoroweglan sodowy, weglan pota¬ sowy i wodoroweglan potasowy, trójalkiloaminy np. trójmetyloamina i tróje tyloamina, N,N-dwu- alkiloaniliny, np. N,N-dwume tyloanilina i N,N-dwuetyloanilina, pirydyna oraz N-alkilomorfo- liny, np. N-metylomorfolina. Korzystnie, reakcje prowadzi sie w temperaturze od -50 do 50°C, zwlaszcza od -30 do 20°C.Grupe zabezpieczajaca lub grupy zabezpieczajace (R i/lub R^) z otrzymanego produktu mozna usunac w sposób opisany powyzej. Na przyklad, grupe zabezpieozajaoa R mozna usunac w taki sam sposób jak grupe zabezpieczajaca R', a gdy grupa zabezpieczajaca grupe karboksy¬ lowa oznacza grupe Ill-rz. -buty Iowa lub benzyhydryIowa, to mozna ja usunac dzialajao kwasem.Gdy grupa zabezpieczajaca grupe karboksylowa stanowi grupe benzylowa, p-metoksybenzylowa lub p-nitrobenzylowa, mozna ja usunac przez katalityczne uwodornienie gazowym wodorem w obecnosci katalizatora. Gdy grupa zabezpieczajaca grupe karboksylowa oznacza grupe metylowa lub etylowa, mozna ja usunac przez hydrolize.Zwiazki o wzorze 6 mozna wytwarzac przez reakcje zwiazku o wzorze 10, w którym R ma wy¬ zej podane znaozenie, ze zwiazkiem o wzorze 11, w którym X oznacza atom ohlorowca, a R1 i n maja wyzej podane znaczenie, w obecnosci srodka alkalioznego, np. weglanu potasowego, w roz¬ puszczalniku np. w dwume tylosulfotlenku, w temperaturze 10 - 50°C, otrzymujao zwiazek o wzo¬ rze 12, w którym R , R i n maja wyzej podane znaczenie, a nastepnie hydrolize zwiazku o wzorze 12. Zwiazki o wzorze 6 mozna wytworzyc przez hydrolize zwiazku o wzorze 10, otrzymu¬ jac zwiazek o wzorze 13, w którym R* ma wyzej podane znaczenie, a nastepnie reakcje tego zwiazku ze zwiazkiem o wzorze 11, w którym R', n i X maja wyzej podane znaczenie, w obecno- soi akoeptora kwasu np. wodorotlenku sodowego, w temperaturze 10 - 40°C, w rozpuszczalniku np. w dwumetyloformamidzie. Jak juz wspomniano powyzej, zwiazek o wzorze 6 moze wystepowac w postaci dwóoh izomerów optycznych ze wzgledu na obecnosc asymetrycznego atomu wegla w gru¬ pie o wzorze 9t w którym gwiazdka wskazuje asymetryczny atom wegla. Jednak w razie potrzeby takie izomery optyozne mozna rozdzielic na poszozególne izomery optyozne. Na przyklad, zwia¬ zek o wzorze 6, w którym R' oznacza atom wodoru, n oznacza 2, a R* oznacza grupe tritylowa, mozna latwo rozdzielic na izomery optyozne poddajac raoemat zwiazku o wzorze 3 reakcji z estrem motylowym L - lub 2 -fenyloalaniny w rozpuszczalniku, np. w mieszaninie metanolu i dioksanu, z wytworzeniem diastereoizomeryoznych soli, a nastepnie rozdzielajac te diastereo- izomery na poszczególne skladniki droga selektywnej rekrystalizacji. W wynika rekrystali¬ zacji najslabiej rozpuszczalny diastereoizomer wyodrebnia sie w postaci krysztalów z miesza¬ niny reakcyjnej, a bardziej rozpuszczalny diastereoizomer pozostaje w niej rozpuszozony. Ko¬ rzystnie krystalizacje selektywna prowadzi sie w temperaturze 10 - 40°C.Zwiazki oefalosporynowe o wzorze 1 i ich farmakologicznie dopuszczalne sole wykazuja sil¬ ne dzialanie mikrobobójoze wobeo wielu róznorodnych drobnoustrojów, miedzy innymi nalezacych do rodzaju Streptoooccus, np. St. faeoalis i St. pneumoniae, Staphylooooous, np* S. aureus i 3. epidermidis, oraz Pseudomonas, np. Ps. aeruginosa, Ps. putida 1 Pe. stutzeri, a takze odznaozaja sie silnym dzialaniem mikrobobójczym wobeo zarówno bakterii Gram-dodatnioh jak i Gram-ujemnych. Na przyklad, 7j3 -{/Z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-^2^irolidonylo-3/oksyimino7 aoetamido]-3-./i-piiydyniometylo/-3-cefemokarboksylan-4 (izomer L) i kwas 7f ^{/Z/^2W2^axalno~ tiazolilo-4/-2-£/1-metylo-2-piTOlidonylo-3/^ tiometyloj -3-oefemokarboksylowy-4 wykazuja minimalne stezenie hamujace (MIC) odpowiednio 12,5140 023 5 i 25 ug/ml (metoda rozcienczen w agarze, hodowla w ciagu 20 godzin w temperaturze 37 C), przeciwko Streptoooccus faecalis CN 478, natomiast w przypadku zwiazku o nazwie handlowej cefmenorime, to jest kwasu 7£ -^Z/-2V2-andnotiazolilo-4/-2-/metoksyimino/acetamidoy-3- //1-metylo-1H-tetrazolilo-5/ tiometylo]-3-cefemokarboksylowego-4 i zwiazku o nazwie cefta- zidime, to jest 7fi «^Z/-2V2-aininotiazolilo^/-2V2-karboksypropylo-2-^ksyimino/aceta- mido]-3-/1-pirydyniometylo/-3-oefemokarboksylanu-4, stezenie to wynosi ponad 100 jug/ml wo- beo tego drobnoustroju. Dzialanie mikrobobójcze kwasu 7fi -^/Z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2- r/2-pirolidonylo-3/oksyiminoJ acetamidoj -3-//1-metylo-1H-tetrazolilo-5/tiometylo] -3-cefemo- karboksylowego-4 wobeo Staphylococcus aureus 252R jest równiez ponad 16 razy silniejsze niz dzialanie zwiazków o nazwach cefmenoxime i oeftazidime. Ponadto, zwiazki o wzorze 1 i ich sole wykazuja silne dzialanie mikrobobójcze wobeo bakterii nalezacych do rodzaju Ba- cillus, np. B. subtilis, Eecherichia, np. E. coli, Klebsiella, np. K. pneumoniae, Entero- baoter, np. E. aerogenes iE, cloacae, oraz Serratia, np* S. marcescens.Zwiazki cefalosporynowe o wzorze 1 wykazuja takze silne dzialanie mikrobobójcze wobec innych bakterii nalezacych do rodzaju Citrobacter, Proteus, Shigella, Hemophllus i Salmo¬ nella. Odznaczaja sie tez tym, ze wykazuja dzialanie oohronne przeciwko zakazeniom bakte¬ ryjnym powodowanym przez rózne bakterie, w tym zarówno Staphylococcus aureus jak i Pseudo- monas aeruginosa, z powodu dobrego wchlaniania 1 dlugotrwalego dzialania leczniczego w zy¬ wych tkankaoh, oraz wykazuja trwalosc wobec róznych drobnoustrojów wytwarzajacych fi -lak- tamazy, zwlaszcza wobeo Jb -laktamaz wytwarzanych przez Proteus vilgaris9 a takze wykazuja niska toksycznosc. Na przyklad, szczury nie umieraja nawet po podskórnym podaniu samcom SD 7j5 -f/Z/-2-/2-aininotiazolilo-4/-2-^2-pirolidonylo-3/oksyiminoJ acetamidoj -3-/1-pirydy- niometylo/-3-oefemokarboksylanu-^t (izomeru 1) w dawoe 1000 mg/kg w oiagu 14 kolejnych dni.Zwiazki cefalosporynowe o wzorze 1 moga miec zastosowanie farmaceutyczne albo w posta- oi wolnej albo w postaci soli. Farmakologicznie dopuszczalne sole zwiazków o wzorze 1 sa to na przyklad nietoksyczne sole z metalami, takie jak sól sodowa, potasowa, wapniowa lub glinowa, sól amonowa, sole z nietoksycznymi aminami, takimi jak trójalkiloaminy, np. trój- etyloamina i prokaina, sole z kwasami nieorganicznymi, takimi jak kwas solny lub bromowodo- rowy, sole z kwasami organioznymi, takimi jak kwas szczawiowy lub winowy, itd. Te sole lat¬ wo wytwarza sie dzialajao na zwiazek o wzorze 1 stechiometryoznie równomolowa iloscia odpo¬ wiedniego srodka alkalicznego albo kwasu w poblizu temperatury pokojowej, w rozpuszczalniku wodnym. Zwiazki cefalosporynowe o wzorze 1 i ich sole mozna podawac albo doustnie albo poza- jelitowo, np. dozylnie, domiesniowo, podskórnie. Dzienna dawka zwiazku o wzorze 1 lub jego soli moze zmieniac sie w szerokim zakresie w zaleznosci od wieku, wagi lub stanu pacjenta oraz przebiegu leczonej choroby. Na ogól, korzystna dawka dzienna zwiazku o wzorze 1 lub je¬ go soli moze wynosic od okolo 0,002 do okolo 0,2 g, zwlaszcza 0,01 - 0,04 g na kg wagi oiala dziennie. Zwiazki o wzorze 1 i ich sole moga byc stosowane w postaci preparatów farmakologi¬ cznych zawierajacych zwiazek stanowiacy substancje czynna w polaczeniu z zarobkami odpowied¬ nimi do podawania doustnego lub pozajelitowego. Odpowiednimi zarobkami sa np. zelatyna, lak¬ toza, glukoza, chlorek sodowy, skrobia, stearynian magnezowy, talk, olej roslinny i inne znane zarobki stosowane do sporzadzania leków. Preparaty farmakologiczne moga byc wytwarzane w postaci stalej, takiej jak tabletki,tabletki powlekane, pigulki lub kapsulki, albo w postaci cieklej, takiej jak roztwory, zawiesiny lub emulsje. Preparaty te moga byc sterylizowane i moga zawierac srodki pomocnicze, takie jak srodki stabilizujace, zwilzajace lub emulgujace.Praktyczne i obecnie stosowane warianty sposobu wedlug wynalazku przedstawione sa w przykladach podanych w dalszej czesci opisu. W opisie i zastrzezeniach patentowych okresle¬ nie "nizsza grupa alkilowa*1 powinno byc rozumiane jako odnoszace sie do grupy alkilowej 0 1-4 atomach wegla.Dzialanie mikrobobójcze in vitro Minimalne stezenie hamujace MIC ug/ml badanego zwiazku okreslono metoda rozcienczen na plytce agarowej (opartej na metodzie opracowanej przez Japan Sooiety of Chemotherapy). W do¬ swiadczeniach tych stosowano agar Muellera-Hintona (KlU, Nieaui) • Wyniki podano w tabeli 1.140 023 Badany drobnoustrój 1 Staphylocoocus aureus Terajima Staphylocoocus aureus I 2521 Streptoooccus faecalis CN-478 Bacillus subtilis 1 STCC 6633 Klebsiella pneumoniae 1 5038 Enterobacter cloacae TU-680 Serratia marcescens 1 7006 Fseudomonas aeruginosa 1 4096 Pseudomonas putida ATCC 12633 Tabela 1 mc Zwiazek wytworzony sposobem wedlug wynalazku ) 2 0,78 25 12.5 0,2 0,05 ^0,05 £0,05 0,39 1,56 [ug/mlj Cefmeno- xime2) 3 1,56 100 100 1,56 0,1 0,1 0,2 6,25 100 \. i\ - - ii i r i rn I !"| Cefta- \l zidime3) i 4 \ 12,5 I 100 I 100 I 3,13 0,1 0,2 0,2 | 0,78 | 12,5 1) 7£ -^/Z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-^2-pirolidonylo-3/-oksyimino7acetamidoJ -3-/1-piry- dyniometylo /-3-cefemo karboksylan-4 (izomer 1). 2) Kwas 7 fi -/?Z/-2V2-aminotiazolilo-4/-2-/metoksylmino/-acetamido7 -3-^/1-metylo-1H-tetra- zolilo-5/-tiometylo7 -3-cefemokarboksylowy-4. 3) 7P -»^?V-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-/2-karboksypropylo -2-oksyimino/acetamido/-3-/1-piry¬ dyniometylo/-3-cefemokarboksylan-4.Dzialanie ochronne przed zakazeniem bakteryjnym u myszy Badania przeprowadzono stosujac 10 myszy plci meskiej o wadze 20 ± 1 g w przypadku kaz¬ dej dawki zwiazku. Myszy zakazono sródotrzewnowo bakteriami w ilosci wystarczajacej dla usmiercenia ich w oiagu 24 godzin, wprowadzajac bakterie w 60 mucynie. Badany zwiazek poda¬ no sródmiesniowo w godzine po zakazeniu* W 7 dni po zakazenia oceniano stopien przezycia i okreslono srednia skuteczna dawke BDcq mg/kg. Wyniki podano w tablioy 2, przy czym w nawia¬ sach podano równiez wartosoi minimalnego stezenia hamujacego MIC (^jg/ml) dla kazdego bada¬ nego zwiazku, okreslone jak opisano w poprzednim tescie.140023 7 Tabela 2 Badany drobnoustrój 1 Staphylococcus aureus Smith Escherichla ooli KC-14 Serratla marcescena | 7006 Citrobaoter freudii | 916 Enterobaoter aerogenes 816 P ED5Q [wgltg] "| Zwiazek wytworzony sposobem wedlug wynalazku ) 2 1,71 (1,56) 0,05 (0,05) 0,14 (0,05) 0,06 (0,1) 1,37 (0,39) Cefmeno- jrime2) 3 5,32 (1,56) 0,16 (0,025) 0,88 (0,2) 0,19 (0,05) 23,85 (1t56) Cefta- zidime3) 4 7,85 (12,5) 0,08 (0,05) 0,54 (0,2) 0,15 (0,39) 26,38 (6,25) 1) - 3) Nazwy zwiazków sa takie same jak wymienione pod tabela 1.Wynalazek ilustruja nastepujace przyklady, przy czym przyklady I - VII dotycza wytwa¬ rzania produktów, a przyklad VIII dotyczy wytwarzania substratów.Przyklad I. (1) W 60 ml tetrahydrofuranu dysperguje sie 3,2 g kwasu /Z/-2-/ 2- trityloaminotiazolilo -A/-2-^72-pirolidonylo-3/okayiminoJoctowego i dodaje sie 2,05 g 7-aminocefalosporanianu III-rz.butylu i 1,93 g dwuoykloheksylodwuimidu. Mieszanine miesza sie w temperaturze pokojowej w ciagu 3 godzin. Substancje nierozpuszczalne odsacza sie, a przesacz zateza sie do sucha pod zmniejszonym cisnieniem. Pozostalosó rozpuszcza sie w ootanie etylu, a roztwór kolejno przemywa sie 1% kwasem solnym, 5% wodnym roztworem wodo¬ roweglanu sodowego i woda. Roztwór w octanie etylu auszy sie i zateza do sucha pod zmniej¬ szonym cisnieniem. Tak otrzymana pozostalosó oczyszcza sie metoda chromatografii ha zelu krzemionkowym stosujao jako rozpuszczalnik mieszanine chloroform - metanol 98,5 t 1,5* Otrzymuje sie 4,3 g 7fi -{/Z/-2-/2- trityloaminotiazolilo -4/-2-^?2-pirolidonylo-3/oksy- iminojacetamidoj-cefalosporanianu III-rz.-butylu w postaci jasnozóltego proszku o tempera¬ turze topnienia 135 ~ 145°0 (z rozkladem). Widmo BUR (CDC1,) Jt 1,52 (9H,s), 2,02 (3H,s), 2,2 - 2,7 (2H,m), 3,0 - 3,5 (4H,m), 4,5 - 5,3 (4H,m), 5,6 - 6,0 (1H, m), 6,70 (1H,s), 6,9 - 7,5 (17H,m), 8,4 - 8,7 (1H, szeroki). (2) Do mieszaniny 20 ml kwasu trójfluorooctowego i 1 ml anizolu dodaje sie 1,0 g 7y5- [/Z/-2-/2-trityloaminotiazolilo-4/-2-[/2-pirolidonylo-3/oksyiminojaoe tamidoj cefalosporania- nu Ill-rz.-butylu, po czym mieszanine miesza sie w temperaturze pokojowej w olagu 20 minut.Mieszanine zateza sie pod zmniejszonym cisnieniem usuwajac kwas "trójfluoroootowy. Do pozo¬ stalosci dodaje sie eter, a osad oddziela sie przez odsaczenie. Osad ten dyoperuje sie w 10 ml wody i dodaje wodoroweglan sodowy rozpuszczajac osad. Roztwór przemywa sie octanem etylu i poddaje chromatografii w kolumnie wypelnionej niejonowa zywica polimeryczna o naz¬ wie handlowej Amberlite XAD-2 (wytwarzana przez Rohm and Haas Cc. USA), stosujao wode jako eluent. Frakcje zawierajace zwiazek cefalosporynowy zbiera sie i zateza pod zmniejszonym cisnieniem usuwajac rozpuszczalnik. Do tak otrzymanej pozostalosci dodaje sie aceton, a osad8 140 023 oddziela sie przez odsaczenie. Otrzymuje sie 320 mg 7^-^/Z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2- //2-pirolidonylo-3/ok3yiminoJ ace temido] cefalosporanianu sodowego w postaci bezbarwnego proszku. Widmo NMR (DgO) cT : 2,10 (3H, s) , 2,2 - 2,7 (2H, m) , 3,15 - 3,85 (4H, m), ' 4,6 - 5,00 (2H, m)f 5,01 (1H, t, J = 7 Hz), 5,16 (1H, d, J = 5 Hz), 5,77 (1Hf d, J = 5 Hz), 6,98 (1H,s). i (3) Mieszanine 13 g jodku sodowego i 4 ml wody miesza sie w temperaturze 80°C i do tej / mieszaniny dodaje sie 3,6 g pirydyny i 3,2 g kwasu 7£ -f/Z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2- .' r/2-pirolidonylo-3/oksyimino]acetamidoJ-cefalosporanowego, po czym mieszanine miesza sie . w temperaturze 75 - 80°C w ciagu 1 godziny. Po ochlodzeniu mieszanine reakcyjna wlewa sie j do 150 ml wody i zateza do sucha pod zmniejszonym cisnieniem. Pozostalosc rozpuszcza sie ( w 150 ml wody i roztwór doprowadza sie do pH = 1 2n kwasem solnym. Substancje nierozpusz- i czalne odsacza sie, a przesacz przemywa sie octanem etylu i doprowadza sie do pH = 6 2n i roztworem wodorotlenku sodowego i zateza do objetosci 30 ml pod zmniejszonym cisnieniem.Otrzymany roztwór poddaje sie chromatografii w kolumnie wypelnionej niejonowa zywica poli^ meryozna Diaion HP-20 (Mitsubishi Chemical Industries Ltd., Japonia). Kolumne przemywa sie woda, a nastepnie eluuje 20% wodnym roztworem metanolu. Frakcje zawierajace pochodna cefa- losporyny zbiera sie i zateza do sucha pod zmniejszonym cisnieniem. Do otrzymanej pozosta¬ losci dodaje sie aceton i odsacza sie osad. Otrzymuje sie 0,67 8 7fi -{/Z/-2-/2-aminotia- zolilo-4/-2-f/2-pi^lidonylo-3/oksyimino]acetamidoj 3-/1-pirydyniometylo/-3-cefemokarboksy- lan-3 o temperaturze topnienia powyzej 250°C Widmo NMR (DgO) S % 2,2 - 2,27 (2H, m), 3,1 - 3,7 (4H, m), 4,9 - 5,5 (4H, m), 5,80 (1H, d, J = 5 Hz), 6,92 (1H, s) , 7,8-9,1 (5H,m), [oC]D = + 13,4° (G = 1,0, H20).Przyklad II. (1) W mieszaninie 30 ml tetrahydrofuranu i 10 ml N,N-dwumetylo- acetamidu rozpuszcza sie 4,0 g kwasu /Z/-2-/2-trityloaminotiazolilo-4/-2-£/2-pirolidonylo-3/ oksyiminojoctowego 1 dodaje sie 1,27 g 1-hydroksybenzotriazolu i 1,93 g dwucykloheksylo¬ karbodwuimidu. Mieszanine miesza sie w temperaturze 0° - 5°C w ciagu 2 godzin, po czym do¬ daje sie ja do 30 ml mieszaniny N,N-dwumetyloacetamid-woda (o zawartosci 15% wody) zawiera¬ jacej 2,12 g kwasu 7-aminocefalosporanowego i 4 g tróje tyloaminy, chlodzac lodem podczas dodawania. Nastepnie mieszanine miesza sie w tej samej temperaturze w ciagu 1,5 godziny.Substancje nierozpuszczalne odsaoza sie, a przesacz zateza sie pod zmniejszonym cisnieniem usuwajao rozpuszczalnik. Pozostalosc wlewa sie do 300 ml wody. Mieszanine doprowadza sie do pH = 8 dodajac wodoroweglan sodowy, przemywa sie octanem etylu, doprowadza do pH = 3 do¬ dajaj 2n kwas solny, po ozym ekstrahuje ootanem etylu. Ekstrakt suszy sie i zateza do sucha pod zmniejszonym cisnieniem. Do tak otrzymanej pozostalosci dodaje sie eter, a osad oddziela sie przez odsaczenie. Otrzymuje sie 3,1 g kwasu 7/8 -//Z/-2-/2-trityloaminotiazolilo-4/-2- ^/2-pirolidonylo-3/oksyiminoJacetamidojcefalosporanowego. Widmo NMR /DMSO-dg/cf :2,03 (3H, s), 2,1 - 2,5 (2H, m), 3,0 - 3,7 (4H, m), 4,4 - 5,2 (4H, m), 5,5 - 5,9 (1H, m), 6,71 (1H, fl), 7,0 - 7,6 (15H, m), 7,84 (1H, s), 8,80 (1H, szeroki s), 9,50 (1H, szeroki d). (2) Do 3,0 g kwasu 7/3 -{/Z/-2-/2-trityloaminotiazolilo-4/-2-y72-pirolidonylo-3/oksy- imincjacatamidojccfaloaporanowego dodaje sie 40 ml 80$ wodnego roztworu kwasu mrówkowego, po czym mieszanine miesza sie w oiagu 2 godzin. Substancje nierozpuszczalne odsacza sie, a prze¬ sacz zateza sie do sucha pod zmniejszonym cisnieniem. Do pozostalosci dodaje sie wode, miesza¬ nine wodna neutralizuje sie wodoroweglanem sodowym 1 przemywa eterem. Nastepnie mieszanine wodna poddaje sie chromatografii w kolumnie wypelnionej niejonowa zywica polimeiyozna o naz¬ wie handlowej Diaion HP-20 (wytworzona przez Mitsubishi Chemical Industries Ltd., Japonia), stosujao wode jako eluent. Frakcje zawierajace zwiazek cefalosporynowy zbiera sie i zateza do sucha pod zmniejszonym cisnieniem. Otrzymuje sie 1,55 g 7/3-//Z/-2-/2-aminotiazolilo-4/ -2-//2-pirolidonylo-3/oksylinin^acetaiiiidoJ-cefalosporanianu sodowego. Wlasnosci fizykochemi¬ czne tego produktu sa Identyczne jak w przypadku próbki otrzymanej w przykladzie I. (3) Produkt uzyskany w punkcie (2) poddaje sie dalszej obróboe w sposób opisany w prze¬ kladzie I, otrzymujac 7/3 -//Z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-//^ midoj -3-/1-pirydyniometylo/-3-cefemokarboksylan-4.140 023 9 Przyklad III. (1) Do 9,2 ml dwumetyloformamidu ohlodzonego lodem wkrapla sie 18,2 ml tlenochlorku fosforu, po czym, mieszanine miesza sie w temperaturze 25 - 35 0 w ciagu 30 minut. Po ochlodzeniu do temperatury 0°C dodaje sie do mieszaniny 100 ml chlo¬ roformu i mieszanine chlodzi sie do temperatury -35°C. Do tej mieszaniny, w temperaturze -35 do -25°C, wkrapla sie roztwór 20 g kwasu /Z/-2-/2-trityloaminotiazolilo-4/-2-/72-pirolido- nylo-3/oksyimincJ octowego (izomeru 1) i 5,6 ml trójetyloaminy w 160 ml, po czym mieszanine miesza sie w tej samej temperaturze w ciagu 20 minut. Do tej mieszaniny reakcyjnej, miesza¬ jac w temperaturze -35 do -20°C, wkrapla sie roztwór kwasu 7-aminocefalosporanowego, wytwo¬ rzony przez mieszanie mieszaniny 16 g kwasu 7-aminocefalosporanowego, 48 g trójcietylochlo- rosilanu, 35,6 ml pirydyny i 160 ml N,N-dwumetyloacetamidu w temperaturze 10 - 20°C w cia¬ gu 2 godzin. Otrzymana mieszanine miesza sie w tej samej temperaturze w ciagu 20 minut i mieszanine reakcyjna wlewa sie do 2 litrów wody z lodem, energicznie mieszajac. Krystalicz¬ ny osad odsacza sie, przemywa woda, octanem etylu i eterem, po czym suszy pod próznia. Otrzy¬ muje sie 26,5 S kwasu 7p -//Z/-2-/2-trityloaminotiazolilo-4/-2-/2-pirolidonylo-3/oksyimi- nojacetoamidojcefalosporanowego (izomeru 1) w postaci bezbarwnego proszku. Widmo NUR (DMS0-d6/ d :2,06 (3H, s), 2,1 - 2,5 (2H, m), 3,1 - 3,4 (2H, m), 3,45 (1H, d, J = 18 Hz), 3,75 (1H, d, J = 18 Hz), 4,6 - 5,02 (3H, m), 5,17 (_1H, d, J = 5 Hz), 5,6 - 5,9 (1H, m), 6,81 (1H, s), 7,1 - 7,6 (15H, m), 7,97 (1H, s), 8,88 (1H, br, s), 9,64 (1H, d, J = 6 Hz). (2) Do mieszaniny 18 ml wody i 18 ml dwume tyloformamidu dodaje sie 67,5 S jodku sodowe¬ go-i 10,9 £ pirydyny, po czym mieszanine ogrzewa sie do temperatury 80 0. Do tej mieszaniny dodaje sie 11,5 g kwasu 7/3 -[/Z/-2-/2-trityIoaminotiazolilo-4/-2-y72-pirolidonylo-3/oksy- iminojacetamidojcefalosporanowego (izomeru 1) i mieszanine miesza sie w temperaturze 80°C w ciagu 35 minut. Po ochlodzeniu do mieszaniny reakcyjnej dodaje sie 90 ml wody z lodem i przamywa te mieszanine ootanem etylu. Nastepnie mieszanine reakcyjna odparowuje sie pod zmniejszonym cisnieniem usuwajac octan etylu i doprowadza sie do pH = 2 10% kwasem solnym* Krystaliczny osad odsaoza sie, przemywa woda i suszy pod próznia. Otrzymuje sie 11,9 g 7(3 -f/Z/-2V2-trityloaminotiazolilo-4/-2-y/2-pirolidonylo-3/oksyiminoJacetamidoJ-3-/1-piry- dyniometylo/-3-cefemokarboksylanu-4 (izomeru 1) w postaci surowego jasnozóltego proszku. (3) W 90 ml 80% kwasu mrówkowego rozpuszoza sie 5,5 g JA -^/Z/-2-/2-trityloaminotiazo- lilo-4/-2-^2-pirolidonylo-3/oksyiminoJacetamidoJ-3-/1-pirydyniometylo/-3-cefemokarboksy- lanu-4 (izomeru 1) otrzymanego powyzej. Roztwór miesza sie w temperaturze pokojowej w ciagu 1 godziny. Roztwór reakcyjny zateza sie pod zmniejszonym cisnieniem i do pozostalosci dodaje sie 200 ml wody. Odsacza sie substancje nierozpuszczalne. Przesacz wodny przemywa sie octa¬ nem etylu, zateza pod zmniejszonym cisnieniem usuwajac octan etylu i wprowadza do kolumny wypelnionej 200 ml niejonowej zywicy adsorpcyjnej Diaion HP - 20 (Mitsubishi Chemical In¬ dustries Ltd.,/. Kolumne przemywa sie woda, a nastepnie eluuje 20% wodnym roztworem meta¬ nolu. Eluat zateza sie pod zmniejszonym cisnieniem, do pozostalosci dodaje sie wode i odsa¬ oza sie osad. Otrzymuje sie 1,6 g 7/3 -f/Z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-///2-pirolidonylo-3/oksy- iminoj acetamidoj-3-/1-pirydyniometylo/-3-oefemokarboksylanu-4/(izomeru 1) w poataoi jasno¬ zóltego proszku. Widmo NMR (DgO) f i 2,2 - 2,7 (2H, m), 3,1 - 3,8 (4H, m), 5,05 (1H, t, Js 7 Hz), 5,28 (1H, d, J = 5 Hz), 5,36 (1H, d, J = 14 Hz), 5,63 (1H, d, J = 14 Hz), 5,87 (1H, d, J* 5 Hz) 6,98 (1H, s), 8,10 (2H, t, J = 7,5 Hz), 8,57 (1H, t, J = 7,5 Hz), 8,98 (1H, d, J = 7,5 Hz) /cCjf0 = -38,0° (C = 1 H20).Przyklad IV. W 50 ml 80% kwasu mrówkowego rozpuszcza sie 2,5 g kwasu 7/3^ £/Z/-2-/2-trityloaminotiazolilo-4/-2-^2-pirolidonyl^ go (izomeru 1) otrzymanego w taki sam sposób jak w przykladzie III. (1), po czym roztwór mie¬ sza sie w temperaturze pokojowej w ciagu 1 godziny. Substancje nierozpuszczalne odsaoza sie.Przesacz zateza sie poc zmniejszonym cisnieniem, do pozostalosci dodaje sie wode i mieszanine wodna neutralizuje sie wodoroweglanem sodowym. Nastepnie mieszanine przemywa sie octanem ety¬ lu, zateza sie pod zmniejszonym cisnieniem i wprowadza do kolumny wypelnionej 200 ml niejono¬ wej zywicy adsorpcyjnej Diaion HP-20* Kolumne przemywa sie woda i dalej postepuje sie jak w przykladzie IH. (3). Otrzymuje sie 1,0 g 7^-//Z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-2?2-pirolidony- lo-3/oksyiminoJacetamidoj-oefalosporanianu (izomeru 1) sodowego w poataoi jasnozóltego proszku.10 140 023 Ten izomer lewoskretny okresla aie tez inna nazwa jako 7p -[/Z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-<( [/(3 S)-2-pirolidon;7lo-3/oksyljiiino]acetamido}cefalosporanian sodowy. Widmo NMR (D20)tf:2, |2 (3H, s), 2,3 - 2,6 (2Hf m), 3,2 - 3,9 (4H, m) f /|f75 (1H, d, J = 13 Hz), 4,95 (1Hf d, J=13|Hz), 5,10 (1H, t, J = 7 Hz), 5,25 (1H, d, J = 5 Hz), 5,85 (1Hf d, J =» 5 Hz), 7,08 (1H, a). \ Otrzymany produkt poddaje sie dalszej obróbce w sposób opisany w przykladzie I, otrzyj mujac 7(3 -f/Z/-2V2-afliinotiazolilo^/-2-[2-pirolidonylo-.3/oksyimino]acetamidoj -3-/1-pirydyV- niometylo/-3-oefemokarboksylan-4 (izomer1). [ Przyklad V, Mieszanine 960 mg kwasu 7p -[/Z/-2-/2~aminotiazolilo-4/-2-//2-piJp- lidonylo-3/oksyljninoJ acetamido}cefalosporanowego, 730 mg izonikotynoamidu, 4,5 S jodku so- i dowego i 3 ml wody miesza sie w temperaturze 65 - 70°C w ciagu 6 godzin. Po ochlodzeniu do ; mieszaniny reakcyjnej dodaje sie 20 ml wody i odsacza sie substancje nierozpuszczalne. PrzeW saoz wprowadza sie do kolumny wypelnionej 100 ml niejonowej zywicy adsorpcyjnej Diaion HP-rfo.Kolumne przemywa sie woda, a nastepnie eluuje 20$ wodnym roztworem metanolu, a eluat zatezaj sie pod zmniejszonym cisnieniem. Otrzymuje sie 175 mg 70 - I /Z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2- ) f/2-pirolidonylo-3/oksyimino| acetamidoJ-3-/il-karbamoilo-1-.pirydyniometylo/-3-oefemokarboks^- lanu-4 w postaci jasnozóltego proszku o temperaturze topnienia 163 - 166°C (z rozkladem).Widmo NMR (CPjCO^cT: 2,5 - 3,0 (2H, m) f 3,5 - 4,0 (4H, m), 5,2 - 5,5 (3Hf m), 5,5 - 5,8 (1H, m), 5,9 - 6,2 (1H, m), 7,35 (1H, s) f 8,4 - 8,7 (2H, m), 9,1 - 9,4 (2H, m).Przyklad VI. Mieszanine 960 mg kwasu 7/5 -f/Z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-^/2-pi- rolidonylo-3/oksyiminoJ acetamidoj cefalosporanowego, 650 mg 4-hydroksymetylopirydyny, 4,5 g jodku sodowego i 3 ml wody miesza sie w temperaturze 65 - 70°C w ciagu 7 godzin. Na¬ stepnie mieszanine reakcyjna poddaje sie obróbce w sposób opisany w przykladzie V. Otrzy¬ muje sie 150 mg 7 |3-f/Z/-2V2-aininotiazolilo^/-2-r/2-pirolidonylo-3/oksyimino/ acetamidoj -3-/4-.hydroksymetylo-1-pirydyniometylo/-3-cefemokarboksylanu w postaci jasnozóltego proszku o temperaturze topnienia 162 - 184°C (z rozkladem). Widmo NMR (D20)cT: 2,3 - 2,7 (2H, m), 3,1 - 3,7 (4H, m), 4,8 - 5,0 (2H, m), 5,03 (2H, s), 5,24 (1H, d, J = 5 Hz), 5,3 - 5,6 (1H,m), 5,83 (1H, d J = 5 Hz), 6,81 (1H, s), 7,8 - 8,2 (2H, m), 8,6 - 9,0 (2H, m).Przyklad VII. Mieszanine 960 mg kwasu 7/3 -/,/Z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-y5r2-pi- rolidonylo-3/0ksyimino7 acetamidoj cefalosporanowego, 650 mg 3-hydroksymetylopirydyny, 4,5g jod¬ ku sodowego 1 3 ml wody poddaje sie obróbce w sposób opisany w przykladzie V. Otrzymuje sie 83 mg 7fi -//Z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-^/2-pirolidon^ metylo-1-pirydyniometylo/-3-cefemokarbokaylanu-4 o temperaturze topnienia 128-135°C (z roz¬ kladem). Widmo NMR (DgO) cf : 2,1 - 2,8 (2H, m), 3,1 - 3,8 (4H, m), 4,86 (2H, s), 4,9 - 5,1 (2H, m), 5,27 (1H, d, J 3 5 Hz), 5,3 - 5,6 (1H, m), 5,83 (1H, d, J = 5 Hz), 6,96 (1H, a), 7,7 - 8,2 (1H, m), 8,3 - 8,6 (1H, m), 8,6 - 9,1 (2H, m).W taki sam sposób jak w poprzednich przykladach wytwarza sie nastepujace zwiazki: 7/9^ [/Z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-^/2-piroli^ zolilo-5/tiometyloJ-3-oefemokarboksylan-4 sodowy* Widmo NMR (DMSO-dg) <5 t 2,1 - 2,5 (2H, m), 3,1 - 3,5 (2H, m), 3,94 (3H, s), 4,2 - 4,5 (2H, m), 4,6 - 4,8 (1H, m), 5,03 (1H, d,J=:5 Hz), 5,5 - 5,8 (1H, m), 6,76 (1H, s), 7,3 (2H, szeroki s), 8,00 (1H, e), 9,55 (1H, szeroki). 7/3 -^/Z/-2-/2-aminotiazolilo-4/2- //2-pirolidonylo-3/oksyiminoJacetamidoJ-3-/1-pirydyniome- tylo/-3-oefemokarboksylan-4 (izomer d). Ten izomer prawo skretny okresla sie tez inna nazwa jako 7£ -[/Z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-^7(3 R)-2-pirolidonylo-3/oksyimino7aoetamidoJ3-/l-pi- rydyniometylo/-3-cefemokarboksylan-4. Widmo NMR (D20)ef: 2,1 - 2,7 (2H, m), 3,1-3,7 (4H, m), 4,9 - 5,5 (4H, m), 5,79 (1H, d, J = 5 Hz), 6,92 (1H, a), 7,8 - 9,1 (5H, m). [oC]§° = +45,7° (0-1. H20) 7/3 -j/Z/-2-/2«-andnotiazolilo-4/-2-£/1^etyl^ tylo-lH-tetrazolilo-5/tiometylo7-3-cafemokarboksylan-4 aodowy. Widmo NMR (DpO)cfj 2,1 - 2,7 (2H, m), 2,89 (2H, o), 3,2 - 3,8 (4H, m), 4,05 (3H, e), 4,05 -l4,3 (2H, m), 4,9-5,3 (2H, m), 5,73 (1H, d, J = 5 Hz), 7,00 (1H, a). 7? -//Z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-^2-piperydonylo-3/ oksyiminojaoetamidoj-3-//l-metylo-1H-tetrazolilo-5/tiometylo7-3-cefemokarboksylan-4 aodowy? Widmo NMR (D20)^i 1,5 - 2,3 (4H, m), 3,0 - 3,4 (2H, m), 3,4 - 3,6 (2H, m), 3,90 (3H, m), 4,0 - 4,2 (2H, m), 5,03 (1H, d, J = 5 Hz), 5,63 (1 H, d, J • 5 Hz), 5,85 (1H, fl).140 023 11 Przyklad VIII. (1) W 70 ml dwumetylosulfotlenku rozpuszcza sie 15,8 g /Z/-2-/ 2-trityloaininotiazolilo-4/-2-hydroksyiminooctanu etylu i do roztworu dodaje sie 5,8 g bez¬ wodnego weglanu potasowego, po czym miesza w temperaturze pokojowej w ciagu 20 minut. Do tej mieszaniny dodaje sie 6,6 g 3-bromo-2-pirolidonu i miesza w temperaturze pokojowej w ciagu 20 godzin. Mieszanine wlewa sie do 600 ml wody, a krystaliczny osad odsacza sie i przeiaywa woda. Kiysztaly rozpuszcza sie w chloroformie, przemywa woda i suszy. Roztwór chlorofoaanowy odparowuje sie pod zmniejszonym cisnieniem usuwajac rozpuszczalnik. Do pozo¬ stalosci dodaje sie 100 ml octanu etylu i pozostawia w temperaturze pokojowej. Krystalicz¬ ny osad odsacza sie i suszy. Otrzymuje sie 16,0 g /Z/-2-/2-trityloaminotiazolilo-4/-2- //2-pirolidonylo-3/oksyiminoyoctanu etylu o temperaturze topnienia 209 - 210°C Widmo NMR (CDCl^cT. 1,30 (3H, t, J = 7 Hz), 2,1 - 2,6 (2Hf m), 3,1 - 3,6 (2H, m), 4,34 (2H, q, J = 7 Hz), 4,90 (1H, t, J = 7 Hz), 6,53 (1H, s) , 7.0 - 7,6 (17H, m) .Do mieszaniny 160 ml metanolu i 30 ml wodnego 2n roztworu wodorotlenku sodowego dodaje sie 16,0 g /Z/-2-/2-trityloaminotiazolilo-4/-2-/?2-pirolidonylo-3/oksylmino7ootan etylu, po czym mieszanine ogrzewa sie w temperaturze wrzenia pod chlodnica zwrotna w oiagu 30 mi¬ nut. Po ochlodzeniu krystaliczny osad odsacza sie i przemywa metanolem. Krysztaly dyeperuje sie w 30 ml wody i doprowadza zawiesine do pH = 3 2n kwasem solnym. Krystaliczny osad odsa¬ cza sie i suszy. Otrzymuje sie 11,4 g kwasu /Z/-2-/2-trityloaminotiazolilo-4/-2-^?2-piroli- donylo-3/oksyimino/octowego o temperaturze topnienia 150 - 153°C (z rozkladem).Widmo NUR (DMS0-d6) S \ 1,8 - 2,4 (2H, m), 2,9 - 3,4 (2Hf m), 4,63 (1Hf t, J = 7 Hz), 6,76 (1H, s), 6,9 - 7,6 (15H, m), 7,85 (1H, S), 8,70 (1Hf szeroki s). (2) Do 100 ml dioksanu zawierajacego 10,5 S L-fenyloalaninlanu metylu dodaje sie 30 g kwasu /Z/-2-/2-trltyloaminotiazolilo-4/-2-^72-pirolidonylo-3/oksyimlnoyoctowego w 60, ml me¬ tanolu, po czym mieszanine ogrzewa sie w temperaturze 50°C rozpuszczajac kwas* Do roztworu dodaje sie 700 ml dioksanu i mieszanine miesza sie w temperaturze pokojowej w oiagu 5 godzin.Krystaliczny osad odsacza sie, otrzymujao przesacz (okreslony jako przesacz I). 14,3 S tak otrzymanego produktu rozpuszcza sie w 24 ml metanolu i do roztworu metanolowego dodaje sie 280 ml dioksanu. Mieszanine miesza sie w temperaturze pokojowej w ciagu 4 godzin, a krysta¬ liczny osad odsacza sie, otrzymujao przesacz (okreslony jako przesacz II). Otrzymuje sie 12,2 g soli kwasu /Z/-2-/2-trityloaminotiazolllo-4/-2-y?2-pirolidonylo-3/oksyimino7octowego z L-fenyloalaninianem metylu* [cC]p = -14,0° (C = 1, metanol). 12,2 g powyzszej soli rozpuszoza sie w 120 ml metanolu i do roztworu dodaje sie 176 ml 0,1n kwasu solnego, po czym mieszanine miesza sie w ciagu 2 godzin chlodzac lodem. Krysta¬ liczny osad odsacza sie i przemywa metanolem. Otrzymuje sie 7,5 g kwasu /Z/-2-/2-tritylo- aminotiazolilo-4/-2-^2-pirolidonylo-3/oksyimlnoJoctowego (izomer 1). Ten izomer lewoskret- ny okresla sie tez inna nazwa Jako kwas /Z/-2-/2-trityloaminotiazolilo-4/-2-^?(3 S)-2-plro- lidonylo-3/oksyiminoyoctowy o temperaturze topnienia 142 - 143° (z rozkladem). [oC]^ = -38,8 (C s 1, dwumetyloformamid). (3) PrzesaczeI i II otrzymane powyzej zateza sie do sucha pod zmniejszonym olsnieniem.Pozostalosc rozpuszcza sie w 250 ml metanolu i wkrapla sie 450 ml 0,1n kwasu solnego. Mie¬ szanine miesza sie w oiagu 2 godzin chlodzac lodem. Otrzymany krystaliczny osad odsacza sie, przemywa metanolem i suszy. Otrzymuje sie 20 g kwasu /Z/-2-/2-trityloaminotiazolilo-4/-2- //2-pirolidonylo-3/okeyiminoJoctowego zawierajacego nadmiar izomeru d. 20 g tego kwasu i 40 ml metanolu dodaje sie do 70 ml dioksanu zawierajacego 7,0 g D-fenyloalaninianu metylu, po czym mieszanine ogrzewa sie w temperaturze 50°C rozpuszczajao kwas. Do tego roztworu do¬ daje sie 450 ml dioksanu* Nastepnie mieszanine miesza sie w temperaturze pokojowej w ciagu 4 godzin, a krystaliozny osad odsaoza sie. 13,3 g tak otrzymanego surowego produktu rozpusz¬ cza sie w 20 ml metanolu i dodaje sie 260 ml dioksanu, po czym miesza sie w temperaturze po¬ kojowej w oiagu 4 godzin. Krystaliczny osad odsaoza sie. Otrzymuje sie 12,0 g soli kwasu /Z/-2-/2-trityloaminotiazolilo-4/-2-^,2-pirolidonylo-3/oksyimino7octowego (izomeru d) z D-fe- nyloalaninianem metylu. /oGjl5 » +13,9° (C = 1, metanol).12 140 023 12,0 g powyzszej soli rozpuszcza sie w 120 ml metanolu i dodaje sie 174 ml 0,1n kwasu solnego, po czym mieszanine miesza sie w ciagu 2 godzin chlodzac lodem. Krystaliczny osad odsacza sie i przemywa metanolem. Otrzymuje sie 7,3 g kwasu /Z/-2-/2-trityloaminotiazoli- lo-4/-2-^2-pirolidonylo-3/oksyiminoJoctowego (izomeru d). Ten izomer prawoskretny okresla sie tez inna nazwa jako kwas /Z/^-^-trityloaminotiazolilo^/^-^/?^ R)-2-pirolidonylo-3/ oksyiminojoctowy o temperaturze topnienia 143 - 144°C (z rozkladem). [dCffi = 37.4° (C = 1, dwumetyloformamid), (4) W 12 ml dwumetylosulfotlenku rozpuszcza sie 2,7 g /Z/-2-/2-trityloaminotiazolilo-4/ -2-hydroksyiminooctanu etylu i dodaje sie 1,0 g bezwodnego weglanu potasowego w atmosferze azotu. Mieszanine miesza sie w temperaturze pokojowej w ciagu 10 minut. Do tej mieszaniny dodaje sie 1,2 g 1-metylo-3-bromo-2-pirolidonu i miesza ja w temperaturze pokojowej w cia¬ gu 5 godzin. Mieszanine reakcyjna wlewa sie do 100 ml 7/ody i odsacza sie krystaliczny osad.Krysztaly rozpuszcza sie w octanie etylu, roztwór przemywa sie woda i suszy. Roztwór zateza sie pod zmniejszonym cisnieniem usuwajac rozpuszczalnik* Nastepnie pozostalosc krystalizuje sie z eteru izopropylowego i odsacza sie osad. Otrzymuje sie 2,1 g /Z/-2-/2-trityloamino- tiazolilo-4/-2-y/1-metylo-2-piroIidonylo-3/oksyiminoJoctanu etylu. Widmo KER (CDC1,)cf:1,30 (3H, t, J = 7 Hz), 2,0 - 2,7 (2Ht m), 2,88 (3Hf s), 3,0 - 3,6 (2H, m), 4,34 (2H, q, J=7 Hz), 4,92 (1H, t, J = 7 Hz), 6,54 (1H, s) , 6,87 (1H, a), 7,0 - 7.5 (15H, m). 2,7 g /Z/-2V2-trityloaminotiazolilo^/-2-^1-metylo-2-pirolidonylo-3/oksyimino/octanu etylu dysperguje sie w 27 ml metanolu 1 dodaje sie 4,9 ml 2n roztworu wodorotlenku sodowe¬ go. Mieszanine ogrzewa sie w temperaturze wrzenia pod chlodnica zwrotna w ciagu 20 minut.Po ochlodzeniu mieszanine zateza sie pod zmniejszonym cisnieniem usuwajac metanol. Pozosta¬ losc doprowadza sie do pH = 3 2n kwasem solnym i ekstrahuje sie octanem etylu. Ekstrakt su¬ szy sie i odparowuje pod zmniejszonym cisnieniem usuwajac rozpuszczalnik. Tak otrzymana po¬ zostalosc krystalizuje sie z eteru i odsacza sie. Otrzymuje sie 2,15 6 kwasu /Z/-2-/2-trity- loaminotiazolilo-4/-2-/l-metylo-2-pirolidonylo-3/oksyiminoJoctowego w temperaturze topnie¬ nia 142 - 145°C (z rozkladem). Widmo NMR (DMS0-d6)cf: 2,0 - 2,5 (2H, m), 2,77 (3H, s), 3,1 - 3,4 (2H, m), 4,78 (1H, t, J = 8 Hz), 6,87 (1H, s), 6,9 - 7,5 (16H, m) . (5) 1,3 g kwasu /Z/-2-/2-trityloaminotiazolilo-4/-2-hydroksyiminoootowego rozpuszcza sie w 10 ml dwume tyloformamidu i dodaje sie 0,24 g wodorku sodowego w postaci 60# olejowej dyspersji. Mieszanine miesza sie w temperaturze pokojowej w ciagu 15 minut. Do mieszaniny dodaje sie 0,65 £ 3-bromo-2-piperydonu i miesza sie ja w temperaturze pokojowej w ciagu 1,5 godziny. Mieszanine reakcyjna wlewa sie do wody i przemywa mieszanina octanu etylu i tetrahydrofuranu 1:1. Warstwe wodna doprowadza sie do pH = 3 10% kwasem solnym i ekstra¬ huje mieszanina octanu etylu i te trahydrofuranu 1:1. Ekstrakt suszy sie 1 zateza do sucha pod zmniejszonym cisnieniem. Do pozostalosci dodaje sie eter i odsacza sie osad. Osad w ilo¬ sci 1,3 g oczyszcza sie metoda chromatografii na zelu krzemionkowym stosujac jako rozpusz¬ czalnik mieszanine metano1-ohloroform 1:4. Otrzymuje sie 0,85 g kwasu /Z/-2-/2-tritylo- aminotiazolilo-4/-2-^?2-piperydonylo-3/oksyimiiioyoctowego o temperaturze topnienia 145-150°C (z rozkladem).Zastrzezenia patentowe 1. Sposób wytwarzania nowych pochodnych kwasu 7/S-/5rZ/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-oksy- iminoacetamido/-3-cefemokarboksylowego-4 o ogólnym wzorze 1, w którym R*1 oznacza atom wodo¬ ru lub nizsza grupe alkilowa, R2 oznacza grupe /1-*netylo-1H-tetrazolilo-5/tio, a R^ oznacza grupe karboksylowa, albo R2 oznacza grupe o ogólnym wzorze 2, w którym Y oznacza atom wodo¬ ru, grupe hydrokaymetylowa lub karbamoilowa, a R^ oznacza grupe C00~, zas n oznacza 2 lub 3, lub farmakologicznie dopuszczalnych soli ty oh zwiazków, znamienny tym, ze zwia¬ zek o ogólnym wzorze 3, w którym R' oznacza atom wodoru lub grupe zabezpieczajaca, a R1 1 n maja wyzej podane znaczenie, lub jego sól, poddaje sie reakcji ze zwiazkiem pirydynowym o ogólnym wzorze 4, w którym Y ma wyzej podane znaczenie, lub z /1-metylo-5-merkapto/tetrazo-140 023 13 lem badz ich solami i w przypadku gdy R' oznacza grupe zabezpieczajaca, grupe te usuwa sie, po czym otrzymany produkt ewentualnie przeprowadza sie w farmakologicznie dopuszczalna sól* 2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze w przypadku wytwarzania 7^9- ^/Z/-2V2-aminotiazolilo^/-2-^2-pirolidonylo-3/oksyimino/acetamid^-3Vl-pix7dyniometylo^ -3-cefemokarboksylanu-4 lub jego farmakologicznie dopuszczalnej soli zwiazek o wzorze 5, w którym R' oznacza atom wodoru lub grupe zabezpieczajaca, lub jego sól, poddaje sie reak¬ cji z pirydyna lub jej sola i w przypadku gdy R' oznacza grupe zabezpieczajaca, grupe te usuwa sie, po czym otrzymany produkt ewentualnie przeprowadza sie w farmakologicznie dopusz¬ czalna sól. 3. Sposób W8dlug zastrz. 1, znamienny tym, ze w przypadku wytwarzania 7/3 -[/Z/-2-/2-aminotiazolilo-i»/-2-/?( 3 S)-2-pirolidonjlo-3/oksyijnino/aoetamido/-3-/1-plry- dyniometylo/3- cefemokarboksylanu-4 lub jego farmakologicznie dopuszczalnej soli kwas 7fi - £/Z/-2-/2-aminotiazolilo-V-2-^?( 3 S)-2-pirolidonylo-3/oksyimino7 acetamido^cefalosporanowy o wzorze 5, w którym R' oznacza atom wodoru lub grupe zabezpieczajaca, lub jego sól poddaje sie reakcji z pirydyna lub jej sola i w przypadku gdy R7 oznacza grupe zabezpiecza¬ jaca, grupe te usuwa sie, po czyni otrzymany produkt ewentualnie przeprowadza sie w farmakolo¬ gicznie dopuszczalna sól.140 025 N-t-C-CONH NH~-/ II ¦ 0=L—N -i ¦ 2\J N < CHj-R2 I ICHojn 0=C-N^ R; R1 Wzór 1 Wzór 2 N R7-NH-< C-CONH- r SJ N \ 0 0=^NY^CH20C0CH3 C00H \ i (CH2)n 0 = C-N^ n i i Wzór 3 N" R7-NH^( C-CONH- II N ^S 0=^—N \ 0 Wzór 4 CHoOCOCH, COOH r/^H^ Wzór 5 H140 023 R^-NH^ N- C-C02H SJ N NHf rh i ACH2)n 0=0-1^ R< Wzór 6 0=^—N^-CH2-R2 R5 Wzór 7 N^c-coNH-r-rs 0=^-N \ R5 ^(CHjln 0=C-N-' i i Wzór 8 _d2 CH2-R Wzór 9 /(CH2)n CHCT J^N-R1 ^C0^140 023 R4-NH-< 0 N SJ C~C02C,Hc ii L z 5 N \ OH Wzór 10 X-CH. ^N-R co"" Wzór 11 N R—NHHf C-C02C2H5 S-» N \ \ CH- . (CH2)n R< Wzór 12 R4-NHnf N // S-J C- C02H ii £ N \ Wzór 13 OH Pracownia Poligraficzna UP PRL. Naklad 100 egz.Cena 130 zl PL PL PL PL PL PL PL PL PL PL PL