PL174426B1 - Sposób wytwarzania kompozycji do przeszczepu tkankowego, kompozycja do przeszczepu tkankowego i przeszczep tkankowy - Google Patents

Abstract

1 . Sposób wytwarzania kompozycji do przeszczepu tkankowego, znamienny tym, ze prowadzi sie etapy rozdrabniania tkanki jelita zawierajacej blone podsluzówkowa i czesci podstawne blony sluzowej, która to blona podsluzówkowa i czesci podstawne blony sluzowej sa oddzielone od blony miesniowej i czesci blony sluzowej jelit cieplokrwistych kregowców od strony swiatla jelita, i nastepnie uwodnia sie te rozdrobniona tkanke jelit z wytworzeniem kompozycji przeszczepu tkankowego w formie cieczy o lepkosci od okolo 2 mPa s do okolo 300000 mPa s w temperaturze 25°C. 11. Kompozycja do przeszczepu tkankowego stanowiaca zawiesine rozdrobnionej tkanki, znamienna tym, ze jako zawiesine zawiera zawiesine rozdrobnionej tkanki jelitowej majaca lepkosc od okolo 2 mPa s do okolo 300000 mPa s w temperaturze 25°C, przy czym tkanka jelita zawiera blone podsluzówkowa i czesci podstawne blony sluzowej odcinka jelita cienkiego cieplokrwistych kregowców, która to blona podsluzówkowa i czesci podstawne blony sluzowej sa oddzielone od blony miesniowej i czesci blony sluzowej tego odcinka jelita cienkiego od strony swiatla jelita. 13. Przeszczep tkankowy, znamienny tym, ze zawiera tkanke jelitowa uformowana w postaci zamknietej torebki w której znajduje sie uplynniona kompozycja do przeszczepu tkankowego stanowiaca zawiesine rozdrobnionej tkanki jelitowej, która to tkanka jelitowa zawiera blone podsluzówkowa i czesci podstawne blony sluzowej, i która to blona podslu zówkowa i czesci podstawne blony sluzowej sa oddzielone od blony miesniowej i czesci blony sluzowej odcinka jelita cieplokrwistych kregowców od strony swiatla jelita. PL PL PL

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania kompozycji do przeszczepu, kompozycja tkankowa do przeszczepu i przeszczep tkankowy. Kompozycje do przeszczepu są nadającymi się do wstrzykiwań, nieimmunogennymi kompozycjami przeszczepu tkankowego pochodzącymi z podśluzówkowej warstwy jelit. Po umieszczeniu in vivo w miejscu ubytku tkanki, upłynnione kompozycje do przeszczepu tkankowego według wynalazku wzmagają wzrost tkanki endogennej naprawiając uszkodzenie.

W piśmiennictwie (opis patentowy Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 4,902,508) są doniesienia o tym, że kompozycje zawierające warstwę podśluzówkową i części podstawne błony śluzowej jelit kręgowców ciepłokrwistych mogą być użyte jako materiały do przeszczepów tkankowych w formie arkuszy. Opisane i zastrzeżone w tym patencie kompozycje arkuszy trój warstwowych charakteryzują się doskonałymi własnościami mechanicznymi, włącznie z wysoką podatnością, wysoką wytrzymałością na rozrywanie i wysokim współczynnikiem efektywnej porowatości, co pozwala na korzystne użycie tych kompozycji jako konstrukcji przeszczepów naczyniowych. Materiały przeszczepowe ujawnione w tym opisie patentowym są również użyteczne do wymiany ścięgien i wiązadeł. Przy użyciu w tego typu zastosowaniach takie korzystne przeszczepowe konstrukcje trójwarstwowe służą jako matryce, na których odrastają tkanki zastąpione tymi konstrukcjami przeszczepu. W powyższym opisie patentowym uznano, że te właściwości wywodzą się z unikalnych trój warstwowych struktur arkuszowych konstrukcji przeszczepów pochodzących z tkanki jelit.

Nieoczekiwanie odkryto, że podśluzówkową warstwę jelit można upłynniać na drodze rozdrobnienia i/lub trawienia proteazą bez ujemnego wpływu na jej widoczne właściwości biotropowe i stosować w mniej inwazyjnych metodach wprowadzenia (np. przez wstrzyknięcie lub podanie miejscowe) do wymagającej naprawy tkanki gospodarza.

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania kompozycji do przeszczepu tkankowego, polegający na tym, że prowadzi się etapy rozdrabniania tkanki jelita zawierającej błonę podśluzówkową i części podstawne błony śluzowej, która to błona podśluzówkową i części podstawne błony śluzowej są oddzielone od błony mięśniowej i części błony śluzowej jelit ciepłokrwistych kręgowców od strony światła jelita, i uwodnią się tą rozdrobnioną tkankę jelit z wytworzeniem kompozycji przeszczepu tkankowego w formie cieczy o lepkości od około 2 mPa s do około 3Οθ0θΟ mPa s w temperaturze 25°C.

Korzystnie w sposobie według wynalazku w etapie rozdrabniania zamraża się tkankę jelit i miele się zamrożoną podśluzówkową warstwę jelit, lub też korzystnie liofilizuje się tkankę jelit i miele się tę tkankę jelit w stanie liofilizowanym. Można także w etapie rozdrabniania przetwarzać tkankę jelit w mieszarce o wysokich siłach ścinania.

Kompozycję do przeszczepu tkankowego przeprowadza się korzystnie przez etap sterylizacji.

Jako tkankę jelita, korzystnie w sposobie według wynalazku, stosuje się tkankę jelita zawierającą błonę podśluzówkową, blaszkę mięśniową błony śluzowej i warstwę zbitą (stratum compactum) odcinka jelita kręgowca.

W sposobie według wynalazku ponadto prowadzi się etap trawienia rozdrobnionej tkanki jelit proteazą w czasie wystarczającym do solubilizacji tej tkanki. Korzystnie, po etapie trawienia rozdrobnionej tkanki jelit proteazą, prowadzi się etap zobojętniania zasadniczo jednorodnego roztworu dla inaktywacji proteazy.

Jeszcze bardziej korzystnie w przypadku stosowania trawienia proteazą a następnie prowadzenia etapu zobojętniania stosuje się tkankę jelita zawierającą błonę podśluzówkową blaszki mięśniowej błony śluzowej i warstwę zbitą (stratum compactum) odcinka jelita kręgowca.

W sposobie według wynalazku ponadto prowadzi się etap oddzielenia solubilizowanej tkanki od zasadniczo jednorodnego roztworu.

Przedmiotem wynalazku jest także kompozycja tkankowa do przeszczepu stanowiąca zawiesinę rozdrobnionej tkanki, charakteryzująca się tym, że jako zawiesinę, zawiera zawiesinę rozdrobnionej tkanki jelitowej mającą lepkość od około 2 mPa· s do około 300000 mPa· s w temperaturze 25°C, przy czym tkanka jelita zawiera błonę podśluzówkową i części podstawne błony śluzowej odcinka jelita ciepłokrwistych kręgowców, która to błona podśluzówkową i części podstawne błony śluzowej są oddzielone od błony mięśniowej i części błony śluzowej tego odcinka jelita cienkiego od strony światła jelita.

174 426

W kompozycji według wynalazku korzystnie tkanka jelit zawiera błonę podśluzówkową i blaszkę mięśniową i warstwę zbitą (stratum compactum) odcinka jelita kręgowca.

Przedmiotem wynalazku jest także przeszczep tkankowy, charakteryzujący się tym, że zawiera tkankę jelitową uformowaną w postaci zamkniętej torebki, w której znajduje się upłynniona kompozycja do przeszczepu tkankowego stanowiąca zawiesinę rozdrobnionej tkanki jelitowej, która to tkanka jelitowa zawiera błonę podśluzówkową i części podstawne błony śluzowej i która to błona podśluzówkową i części podstawne błony śluzowej są oddzielone od błony mięśniowej i części błony śluzowej odcinka jelita ciepłokrwistych kręgowców od strony światła jelita.

W korzystnym wykonaniu przeszczepu, według wynalazku, jako tkankę jelitową przeszczep zawiera tkankę jelitową obejmującą błonę podśluzówkową, blaszkę mięśniową błony śluzowej i warstwę zbitą (stratum compactum) odcinka jelita kręgowca.

Taką upłynnioną kompozycję stosuje się w sposobie indukowania tworzenia się tkanek endogennych, w tym kości i tkanek miękkich, takich jak tkanka mięśniowa i tkanki łączne u ciepłokrwistych kręgowców. Metoda ta obejmuje etap wstrzyknięcia do organizmu kręgowca kompozycji według wynalazku zawierającej zawiesinę rozdrobnionej podśluzówkowej warstwy jelit albo produktu jej trawienia proteazą w ilości skutecznie indukującej wzrost tkanki endogennej w miejscu wstrzyknięcia tej upłynnionej kompozycji przeszczepu tkankowego. Do endogennych tkanek łącznych pobudzanych do wzrostu przy zastosowaniu kompozycji według wynalazku należą kolagen, elastyna i mięśnie. Kompozycja do przeszczepu według wynalazku znajduje także swoje zastosowanie w metodzie wzmacniania funkcji zwieracza u ssaków ciepłokrwistych, który to sposób polega na wstrzyknięciu do tkanki tworzącej ten zwieracz skutecznej ilości kompozycji przeszczepu tkankowego zawierającej zawiesinę wodną rozdrobnionej podśluzówkowej warstwy jelit. Inna metoda wzmocnienia funkcji zwieracza polega na wstrzyknięciu podśluzówkowej warstwy jelit trawionej proteazą.

Nadające się do wstrzykiwań albo upłynnione kompozycje według wynalazku mogą być stosowane do wielu różnych zastosowań polegających na naprawie lub rekonstrukcji tkanek. Mogą być stosowane same lub w kombinacji z materiałem przeszczepowym ujawnionym w opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 4,902, 308. Przykładowo, kompozycje według wynalazku można stosować do chirurgicznej rekonstrukcji łąkotki kolagenowej w przestrzeni granicznej kości połączonych stawem. W rekonstrukcji tego typu, formuje się warstwę pierwszej kompozycji do przeszczepu tkankowego, korzystnie zawierającej podśluzówkową warstwę jelit kręgowca ciepłokrwistego, w postać zamkniętej torebki i napełnia się ją upłynnioną kompozycją do przeszczepu tkankowego według wynalazku.

Dodatkowe cele, cechy i korzyści z wynalazku okażą się oczywiste dla specjalistów z tej dziedziny na podstawie szczegółowego opisu korzystnych rozwiązań stanowiących przykłady najlepszych dróg wykorzystania wynalazku.

Szczegółowy opis korzystnych rozwiązań wynalazku

Korzystnym materiałem wyjściowyn dla kompozycji według wynalazku jest błona podśluzówkowa wraz z częściami podstawnymi błony śluzowej odcinka tkanki jelitowej kręgowców ciepłokrwistych. Korzystnym materiałem wyjściowym jest błona podśluzówkową wraz z blaszką mięśniową błony śluzowej i warstwą zbitą (stratum compactum) odcinka jelita cienkiego, które to warstwy są oddzielone od błony mięśniowej i części błony śluzowej tego odcinka od strony światła jelita. Materiał ten nazwany jest w niniejszym opisie podśluzówką z jelita cienkiego (SIS”) albo trójwarstwą SIS.

Wytwarzanie podśluzówki z jelita cienkiego SIS z odcinka jelita cienkiego jest ujawnione w opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 4,902,508, włączonym do niniejszego opisu jako odnośnik. Taki odcinek jelita początkowo poddaje się ścieraniu, wykonując ruchy ścierające wzdłużne w celu usunięcia obydwu warstw zewnętrznych (zwłaszcza błony surowiczej i błony mięśniowej) i warstw wewnętrznych (części błony śluzowej od strony światła jelita). Na ogół, SIS przemywa się solą fizjologiczną i ewentualnie, do następnego użycia, przechowuje się w stanie uwodnionym lub odwodnionym, co jest opisane w dalszej części.

Upłynnione kompozycje według wynalazku przygotowuje się w postaci roztworów albo zawiesin podśluzówkowej warstwy jelit przez rozdrobnienie i/lub trawienie tej warstwy podślu174 426 zówkowej proteazą, taką jak trypsyna albo pepsyna, w czasie wystarczającym do solubilizacji tej tkanki i utworzenia zasadniczo homogennego roztworu. Materiał wyjściowy podśluzówkowej warstwy jelit rozdrabnia się przez rozdzieranie, cięcie, mielenie, ścinanie lub w podobnych procesach. Korzystne jest mielenie podśluzówki w stanie zamrożonym Iub liofilizowanym, jakkolwiek można również uzyskać dobre wyniki poddając zawiesinę skrawków tej podśluzówki działaniu wysokich sił ścinania w mieszarce szybkoobrotowej i odwodnić o ile to potrzebne, przez odwirowanie i dekantację nadmiaru wody. Rozdrobnioną podśluzówkową warstwęjelit można suszyć uzyskując proszek podśluzówki. Następnie, możnająuwodnić, to znaczy połączyć z wodą albo z buforowaną solą fizjologiczną i ewentualnie innymi dodatkami dopuszczalnymi farmaceutycznie, wytwarzając kompozycję przeszczepu tkankowego w postaci cieczy o lepkości od około 2 mPa· s do około 300000 mPa · s w temperaturze 25°C. Kompozycje do przeszczepu tkankowego o wyższej lepkości mogą mieć konsystencję żelu lub pasty. Kompozycje te można sterylizować stosując znane techniki sterylizacji, takie jak sterylizacja promieniowaniem jonizującym.

Upłynnione kompozycje do przeszczepu tkankowego według wynalazku można stosować do wytwarzania przeciwciał przeciw materiałowi przeszczepu tkankowego ujawnionych w opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 4,902,508 z wykorzystaniem znanej w technice technologii hybridoma (fuzji komórki szpiczaka i komórki śledziony uczulonego zwierzęcia). Upłynnioną warstwę podśluzówkową pochodzącą z SIS wstrzykuje się zwierzęciu doprowadzonemu do stanu kompetencji immunologicznej w celu wywołania wytwarzania w śledzionie tego zwierzęcia limfocytów produkujących przeciwciała. Limfocyty te poddaje się fuzji z komórkami szpiczka i powstałe komórki hybrydowe (hybrydoma) poddaje się skaningowi na wytwarzanie przeciwciał przeciw warstwie podśluzówkowej. Te przeciwciała raonoklonalne produkowane w procesie hodowli wyselekcjonowanych komórek hybrydoma wyodrębnia się i stosuje do wykrywania tkanki podśluzówkowej in vivo i in vitro.

Upłynniona warstwa podśluzówkową według wynalazku znajduje również zastosowanie jako iniekcyjny hetero-przeszczep dla tkanek, np. dla kości Iub tkanek miękkich wymagających naprawy bądź wzmocnienia, najczęściej po urazach Iub uszkodzonych w wyniku procesów chorobowych. Upłynnione kompozycje przeszczepu tkankowego według wynalazku stosuje się również korzystnie jako napełniacz do konstrukcji implantowanych, zawierających między innymi, jeden Iub większą ilość warstw SIS uformowanych w postać zamkniętych (zszytych) torebek albo poduszek dostosowanych do użycia podczas operacji kosmetycznych albo podczas chirurgicznego leczenia urazów.

Przykład 1. Zawiesina podśluzówki z jelita cienkiego SIS

Próbki SIS przygotowane w sposób opisany powyżej miele się albo sieka na dowolnie małe kawałeczki, stosując nożyczki do tkanek, ostrze brzytwy jednostronnej albo inne narzędzia do cięcia. Próbki umieszcza się w płaskodennym pojemniku ze stali nierdzewnej i do pojemnika wprowadza się ciekły azot w celu zamrożenia próbek i przygotowania ich do rozdrabniania.

Zamrożone próbki SIS rozdrabnia się z wytworzeniem gruboziarnistego proszku SIS. Tę operację można prowadzić przykładowo w ręcznej prasie montażowej z cylindrycznym mosiężnym blokiem umieszczonym na powierzchni zamrożonych próbek. Blok służy jako warstwa rozdzielająca materiał próbki i trzpieni a prasy. Na ogół, do próbek SIS należy co pewien okres czasu dodać ciekłego azotu w celu utrzymania ich w stanie zamrożenia.

Dla wytworzenia proszku SIS nadającego się do użycia zgodnie z wynalazkiem można zastosować inne sposoby rozdrabniania. Przykładowo, próbki SIS można liofilizować i następnie mleć wykorzystując w tym celu ręczną prasą montażową Iub inne urządzenia do mielenia. Alternatywnie, SIS można przerabiać w mieszarce szybkoobrotowej o dużych siłach ścinania, wytwarzając po odwodnieniu i wysuszeniu proszek SIS.

W celu wytworzenia jednorodnego produktu o wyższym stopniu rozdrobnienia, proszek SIS można dalej mleć stosując do tego celu uprzednio oziębiony moździerz z pistlem. W tym procesie również stosuje się w miarę potrzeby ciekły azot w celu utrzymania cząstek podczas końcowego mielenia w stanie zamrożonym. Ten proszek można łatwo uwodnić, stosując np. buforowaną sól fizjologiczną, otrzymując upłynniony materiał przeszczepu tkankowego według wynalazku o żądanej lepkości.

174 426

Przykład 2. Roztwór podśluzówki z jelita cienkiego SIS

Proszek SIS przesiewa się przez sito druciane do dowolnego naczynia. Proszek ten poddaje się następnie trawieniu proteolitycznemu otrzymując zasadniczo jednorodny roztwór. W jednym rozwiązaniu proszek trawi się ilością 1 mg/ml pepsyny (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO) w 0,1M roztworze kwasu octowego doprowadzonym do pH = 2.5 za pomocą HCl. Proces trawienia prowadzi się przez 48 godzin w temperaturze pokojowej. Następnie środowisko reakcji zobojętnia się wodorotlenkiem sodowym w celu inaktywacji aktywności pepsyny. Solubilizowaną warstwę podśluzówkową można następnie zatężać przez strącenie z roztworu solą i wyodrębniać w celu dalszego oczyszczania i/lub liofilizacji uzyskując solubilizowaną proteazą podśluzówkową warstwę jelit w postaci proszku.

Lepkość upłynnionych kompozycji warstwy podśluzówkowej według wynalazku można regulować przez dobór odpowiedniego stężenia składnika warstwy podśluzówkowej i stopnia uwodnienia. Lepkość można ustawiać w zakresie wartości od około 2 mPa s do około 300000 mPa· s w temperaturze 25°C. Kompozycje warstwy podśluzówkowej o niskiej lepkości lepiej nadają się do stosowania dostawowego albo do stosowania do jam ciała. Formy o wyższej lepkości, np. żele, można wytwarzać z trawionych roztworów SIS przez doprowadzenie pH tych roztworów do wartości od około 6.0 do około 7.0. Do stosowania podskórnego albo domięśniowego z użyciem strzykawek albo kateterów na ogół korzystne są formy żelowe kompozycji według wynalazku, takie jak zawiesiny warstwy podśluzówkowej albo trawione roztwory warstwy podśluzówkowej.

Przykład 3. Zastosowania

A. SIS w postaci zawiesiny zastosowano jako łąkotkę u pięciu psów. Łąkotki przyśrodkowe stawu kolanowego normalnych dorosłych psów, mieszańców usuwano i wstawiano nowo skonstruowane łąkotki SIS. Taka łąkotka SIS składała się z warstwy SIS (z warstwą zbitą wewnątrz) uformowanej w półkolistą poduszkę. Poduszkę tę napełniano zawiesiną SIS i przymocowano linię szwu poduszki do wiązadła przyśrodkowego pobocznego. W ten sposób substancja zawarta w poduszce służyła jako pochłaniacz uderzeń podczas dźwigania masy ciała między kłykciem udowym przyśrodkowym a powierzchnią szczytową kości piszczelowej. Trzy psy uśmiercono. Psa numer 1 uśmiercono po 4 miesiącach i 4 dniach od operacji chirurgicznej. Zwierzę numer 2 uśmiercono po 3 miesiącach i 21 dniach od operacji chirurgicznej a psa numer 4 uśmiercono po 4 miesiącach i 3 dniach od operacji. Wyniki badania wszystkich trzech psów były podobne. SIS/łąkotka utworzyła częściowo zorganizowany materiał chrząstki włóknistej niemożliwy do odróżnienia metodami histologicznymi od chrząstki włóknistej normalnej łąkotki. Kształt tej nowo utworzonej łąkotki był niepodobny do naturalnej łąkotki ale celem tego badania było po prostu sprawdzenie, czy mogła nastąpić przebudowa tkanki łącznej i czy miały miejsce czy nie reakcje niepożądane. Nie zaobserwowano żadnych dowodów odrzutu, stanu zapalnego ani infekcji. Psy - trzeci i piąty nadal żyją. W powyższych badaniach użyto SIS wieprzowy jak wszczep do organizmu psa.

B. Roztwór SIS wstrzykiwano psu, podskórnie, do czterech oddzielnych miejsc. Ponadto, roztwór ten (pH = 8.0) wstrzyknięto do warstwy podśluzówkowej ściany pochewki i do strefy wiązadła pobocznego przyśrodkowego w kolanie. Nie było objawów odrzutu, zakażenia ani nienormalnej odpowiedzi fizjologicznej u zwierzęcia - gospodarza. Wystąpiły zgrubienia w miejscach iniekcji. W miejscach kontrolnych, gdzie jako materiał iniekcyjny użyto sól fizjologiczną nastąpiła całkowita resorpcja tego materiału bez objawów zgrubień tkanki łącznej.

C. Użyto zawiesinę SIS do wzmocnienia zwieracza cewki moczowej u trzech oddzielnych świń. Zawiesinę materiału SIS wstrzykiwano metodą endoskopii i drogą laparoskopii do miejsc w warstwie podśluzówkowej i podsurowiczej pęcherza moczowego świń. Ponadto wstrzykiwano iniekcje tego materiału (około 4 ml) do miejsc w warstwie podśluzówkowej wokół ujścia moczowodu, dwustronnie i do ściany pęcherza moczowego. Jedną świnię uśmiercono po 9 tygodniach od początkowej iniekcji. Wykazano przebudowę tkanki łącznej z naciekami miofibroblastów o kształcie wrzecionowatym, co jest korzystne dla pracy mięśni gładkich. Ten typ odpowiedzi tkanki łącznej jest bardzo podobny do tego, jaki obserwuje się przy stosowaniu rurek SIS w tętnicach. W miejscach kontrolnych, gdzie jako materiał iniekcyjny podano sól fizjologiczną nie wystąpiła odpowiedź. Z powyższych obserwacji wynika, że SIS

174 426 stymuluje przebudowę odpowiedniej tkanki łącznej, a więc, za pomocą materiału zawiesiny SIS można dokonać wzmocnienia ściany pęcherza moczowego i/lub zwieracza pęcherza moczowego.

Upłynnione kompozycje warstwy podśluzówkowej według wynalazku znajdują szerokie zastosowanie w operacjach zastępowania i naprawy tkanek. Te upłynnione kompozycje warstwy podśluzówkowej stosuje się zgodnie z niniejszym sposobem do pobudzania odrastania naturalnej tkanki łącznej lub kości w obszarze istniejącego uszkodzenia. Przez wstrzyknięcie skutecznej ilości upłynnionej kompozycji warstwy podśluzówkowej do miejsca uszkodzenia tkanki albo rany wymagającej leczenia można łatwo wykorzystać właściwości biotropowe kompozycji przeszczepu bez potrzeby stosowania bardziej inwazyjnych technik chirurgicznych.

Najbardziej godną uwagi właściwością kompozycji według wynalazku jest ich zdolność do pobudzania odrastania naturalnej tkanki w obszarze uszkodzenia. Przez wstrzyknięcie skutecznej ilości upłynnionej kompozycji warstwy podśluzówkowej do miejsca uszkodzenia tkanki albo rany wymagającej leczenia można łatwo odnieść korzyści z tej wyjątkowej właściwości bez potrzeby stosowania bardziej inwazyjnych operacji chirurgicznych.

174 426

Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 90 egz. Cena 2,00 zł

Claims (14)

1. Zastrzeżenia patentowe

   1. Sposób wytwarzania kompozycji do przeszczepu tkankowego, znamienny tym, że prowadzi się etapy rozdrabniania tkanki jelita zawierającej błonę podśluzówkową i części podstawne błony śluzowej, która to błona podśluzówkową i części podstawne błony śluzowej są oddzielone od błony mięśniowej i części błony śluzowej jelit ciepłokrwistych kręgowców od strony światła jelita, i następnie uwodnią się tę rozdrobnioną tkankę jelit z wytworzeniem kompozycji przeszczepu tkankowego w formie cieczy o lepkości od około 2 mPa· s do około 300000 mPa· s w temperaturze 25°C.
2. 2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że w etapie rozdrabniania zamraża się tkankę jelit i miele się zamrożoną podśluzówkową warstwę jelit.
3. 3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że w etapie rozdrabniania liofilizuje się tkankę jelit i miele się tę tkankę jelit w stanie liofilizowanym.
4. 4. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że w etapie rozdrabniania przetwarza się tkankę jelit w mieszarce o wysokich siłach ścinania.
5. 5. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że ponadto prowadzi się etap sterylizowania kompozycji do przeszczepu tkankowego.
6. 6. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że stosuje się tkankę jelita zawierającą błonę podśluzówkową, blaszkę mięśniową błony śluzowej i warstwę zbitą (stratum compactum) odcinka jelita kręgowca.
7. 7. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że ponadto prowadzi się etap trawienia rozdrobnionej tkanki jelit proteazą w czasie wystarczającym do solubilizacji tej tkanki.
8. 8. Sposób według zastrz. 7, znamienny tym, że ponadto prowadzi się etap zobojętniania zasadniczo jednorodnego roztworu dla inaktywacji proteazy.
9. 9. Sposób według zastrz. 8, znamienny tym, że stosuje się tkankę jelita zawierającą błonę podśluzówkową, blaszkę mięśniową błony śluzowej i warstwę zbitą (stratum compactum) odcinka jelita kręgowca.
10. 10. Sposób według zastrz. 8, znamienny tym, że ponadto prowadzi się etap oddzielenia solubilizowanej tkanki od zasadniczo jednorodnego roztworu.
11. 11. Kompozycja do przeszczepu tkankowego stanowiąca zawiesinę rozdrobnionej tkanki, znamienna tym, żejako zawiesinę zawiera zawiesinę rozdrobnionej tkanki jelitowej mającą lepkość od około 2 mPa· s do około 300000 mPa· s w temperaturze 25°C, przy czym tkanka jelita zawiera błonę podśluzówkową i części podstawne błony śluzowej odcinka jelita cienkiego ciepłokrwistych kręgowców, która to błona podśluzówkową i części podstawne błony śluzowej są oddzielone od błony mięśniowej i części błony śluzowej tego odcinka jelita cienkiego od strony światła jelita.
12. 12. Kompozycja według zastrz. 11, znamienna tym, że tkankajelit zawiera błonę podśluzówkową, blaszkę mięśniową i warstwę zbitą (stratum compactum) odcinka jelita kręgowca.
13. 13. Przeszczep tkankowy, znamienny tym, że zawiera tkankę jelitową uformowaną w postaci zamkniętej torebki w której znajduje się upłynniona kompozycja do przeszczepu tkankowego stanowiąca zawiesinę rozdrobnionej tkanki jelitowej, która to tkanka jelitowa zawiera błonę podśluzówkową i części podstawne błony śluzowej, i która to błona podśluzówkową i części podstawne błony śluzowej są oddzielone od błony mięśniowej i części błony śluzowej odcinka jelita ciepłokrwistych kręgowców od strony światła jelita.
14. 14. Przeszczep, według zastrz. 13, znamienny tym, że jako tkankę jelitową zawiera tkankę jelitową składającą się z błony podśluzówkowej, blaszki mięśniowej błony śluzowej i warstwy zbitej (stratum compactum) odcinka jelita kręgowca.

    * * *

    174 426