PL175557B1 - Aktywne immunologicznie chimeryczne przeciwciało anty-CD20 - Google Patents

Aktywne immunologicznie chimeryczne przeciwciało anty-CD20

Info

Publication number
PL175557B1
PL175557B1 PL93320526A PL32052693A PL175557B1 PL 175557 B1 PL175557 B1 PL 175557B1 PL 93320526 A PL93320526 A PL 93320526A PL 32052693 A PL32052693 A PL 32052693A PL 175557 B1 PL175557 B1 PL 175557B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
antibody
antibodies
cells
human
cell
Prior art date
Application number
PL93320526A
Other languages
English (en)
Inventor
Darrell R. Anderson
Nabil Hanna
John E. Leonard
Roland A. Newman
Mitchell E. Reff
Original Assignee
Idec Pharma Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=25526490&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=PL175557(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Idec Pharma Corp filed Critical Idec Pharma Corp
Priority claimed from PCT/US1993/010953 external-priority patent/WO1994011026A2/en
Publication of PL175557B1 publication Critical patent/PL175557B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2887—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against CD20
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6849—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a receptor, a cell surface antigen or a cell surface determinant
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S424/00—Drug, bio-affecting and body treating compositions
    • Y10S424/80—Antibody or fragment thereof whose amino acid sequence is disclosed in whole or in part
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S424/00—Drug, bio-affecting and body treating compositions
    • Y10S424/801—Drug, bio-affecting and body treating compositions involving antibody or fragment thereof produced by recombinant dna technology
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/867—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof involving immunoglobulin or antibody produced via recombinant dna technology

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Aktywne immunologicznie, chimeryczne przeciwcialo anty-CD20 produko- wane przez transfektome zawierajaca anty-CD20 w TCAE 8 (w depozycie ATCC o numerze 69119). P L 175557 B 1 PL PL

Description

Przedmiotem wynalazku jest aktywne immunologicznie chimeryczne przeciwciało anty-CD20.
Układ odpornościowy kręgowców (np. naczelnych, co obejmuje ludzi, oraz człekokształtne itp.) składa się z wielu narządów i rodzajów komórek które ewoluowały do: ' dokładnie i specyficznie rozpoznających obce mikroorganizmy (antygen) dokonujące inwazji na gospodarza-kręgowca; specyficznie wiążących się ze wspomnianym obcym mikroorganizmem; i eliminujących/niszczących ów mikroorganizm.
Limfocyty, między innymi stanowią ogniwo kluczowe układu odpornościowego. Limfocyty powstają w grasicy, śledzionie i szpiku (u dorosłych) i stanowią około 30% całkowitej liczby białych krwinek obecnych w układzie krążenia ludzi (dorosłych). Wyróżniamy dwie główne subpopulacje limfocytów: limfocyty T i limfocyty B. Limfocyty T odpowiedzialne są za odporność komórkową, podczas gdy limfocyty B odpowiadają za produkcję przeciwciał (odporność humoralna). Jakkolwiek, limfocyty T i B mogą być rozważane jako niezależne w typowej odpowiedzi odpornościowej, limfocyty T aktywowane są, gdy receptor limfocyta T zwiąże się z fragmentem antygenu związanym z glikoproteiną głównego układu zgodności tkankowej (MHC) na powierzchni komórki prezentującej antygen; aktywacja ta powoduje uwolnienie mediatorów (interleukiny), które, pokrótce, pobudzają limfocyty B do różnicowania i produkcji przeciwciał (Immunoglobuliny) skierowanych przeciwko antygenowi.
Każdy z limfocytów B gospodarza ekspresjonuje odrębne przeciwciało na swej powierzchni, stąd, jeden limfocyt B ekspresjonuje przeciwciało specyficzne dla jednego antygenu, podczas gdy, inny limfocyt B ekspresjonuje przeciwciało specyficzne dla innego antygenu. Oznacza ’to, że limfocyty B są różnorodne, zaś ta różnorodność jest kluczowa dla układu odpornościowego. U ludzi/ każdy limfocyt B może produkować olbrzymią liczbę cząsteczek przeciwciał (tzn. od około 107 do 108). Ta produkcja przeciwciał na ogół ustaje (lub istotnie się zmniejsza), gdy obcy antygen zostaje zneutralizowany. Czasami, jednakże, proliferacja szczególnego limfocyta B utrzymuje się nadmiernie; proliferacja taka może spowodować nowotwór określany jako chłoniak wywodzący się z limfocyta B.
Limfocyty T i limfocyty B posiadają białka powierzchniowe, które mogą być używane jako znaczniki (markery) różnicowania i identyfikacji. Jednym z markerów ludzkich limfocytów B jest ludzki antygen różnicowania ograniczony do limfocytów B Bp35, oznaczony jako CD20. CD20 ekspresjonowany jest podczas wczesnego rozwoju limfocytów pre-B i utrzymuje się do momentu różnicowania się w komórkę plazmatyczną. W szczególności, cząsteczka CD20 może regulować etap w procesie aktywacji, niezbędny dla zapoczątkowania cyklu pobudzenia i różnicowania i jest zwykle ekspresjonowana w znacznym stopniu na nowotworowych limfocytach B. CD20, z definicji, obecny jest na, zarówno normalnych limfocytach B, jak i złośliwych limfocytach B, tzn. tych limfocytach B, których niekontrolowana proliferacja może prowadzić do chłoniaka z limfocytów B. Stąd, antygen powierzchniowy CD20 jest potencjalnym kandydatem na cel u chłoniaka z limfocytów B.
175 557
Pokrótce, celowanie takie może być określone następująco: przeciwciała specyficznie rozpoznające antygen powierzchniowy CD20 limfocytu B, są wstrzykiwane pacjentowi. Przeciwciała te, anty-CD20, wiążą się specyficznie z antygenem CD20 na powierzchni zarówno, normalnych jak i nowotworowych limfocytów B; przeciwciało anty CD20 związane z antygenem powierzchniowym CD20 może prowadzić do zniszczenia i usunięcia nowotworowych limfocytów B.
Dodatkowo, z przeciwciałem anty-CD20 sprzężone mogą zostać czynniki chemiczne lub znaczniki radioaktywne zdolne zniszczyć nowotwór, mogą być wiązane z przeciwciałem anty CD20 tak, że czynnik może być specyficznie dostarczony do np. nowotworowych limfocytów B. Niezależnie od podejścia, celem pierwszorzędnym jest zniszczenie nowotworu: konkretne wykonanie może być określone przez użyte przeciwciało anty-CD20, a stąd dostępne możliwości kierowania na antygen CD20 mogą się bardzo różnić.
Przykładowo, opisano próby wykorzystujące kierowanie na antygen CD20. Mysie przeciwciało monoklonalne 1F5 (przeciwciało anty-CD20) podawano w ciągłym wlewie dożylnym pacjentom z chłoniakiem z limfocytów B. Opisywano, że aby usunąć krążące komórki nowotworowe wymagane są niezwykle duże ilości (>2 gramy) przeciwciała lF5, zaś wynik określono jako przejściowy. Press i in. Monoclonal Antibody 1F5 (Anti-CD20) Serotherapy of Human B-Celł Lymphomas. Blood 69:584-591 (1987). Potencjalnym problemem przy tym podejściu jest fakt, że przeciwciała monoklonalne nie pochodzące od człowieka (np. mysie przeciwciała monoklonalne) zwykle pozbawione są funkcjonalności efektorowej, tzn. nie są -zdolne do, m.in. zapoczątkowania lizy zależnej od dopełniacza czy lizy ludzkich komórek docelowych poprzez cytotoksyczność komórkową zależną od przeciwciał czy fagocytozy - z udziałem receptora Fc. Ponadto, przeciwciała monoklonalne nie pochodzące od człowieka mogą być rozpoznawane przez organizm gospodarza jako obce białko; stąd, powtórne iniekcje obcych przeciwciał mogą prowadzić do powstania odpowiedzi odpornościowej prowadzącej do ciężkich reakcji nadwrażliwości. Dla przeciwciał monoklonalnych pochodzących od myszy, określa się to jako odpowiedź na przeciwciała mysie lub HAMA (Human Anti-Mouse Antibody response). Dodatkowo, takie obce przeciwciała mogą być atakowane przez układ odpornościowy gospodarza tak, że w efekcie są neutralizowane zanim osiągną cel. Limfocyty i komórki chłoniaka są wrażliwe na radioterapię z kilku powodów: miejscowa misja promieniowania jonizującego z przeciwciała ze znacznikiem radioaktywnym może niszczyć komórki - z i bez antygenu stanowiącego cel (np. CD20) z powodu niewielkiej odległości od przeciwciała związanego z antygenem; przenikające promieniowanie może zlikwidować problem ograniczonego dostępu przeciwciała w przypadku guzów o znacznej wielkości lub słabo unaczynionych; oraz całkowita ilość potrzebnego przeciwciała może być zmniejszona. Radioizotop emituje cząsteczki radioaktywne które są zdolne zniszczyć komórkowe DNA w stopniu uniemożliwiającym komórkowym mechnizmom naprawczym utrzymanie komórki przy życiu; stąd, gdy komórkami docelowymi są komórki guza, znacznik radioaktywny w sposób dobroczynny zabija komórki nowotworowe. Przeciwciała ze znacznikiem radioaktywnym, z definicji, są przeciwciałami zawierającymi substancje radioaktywne, które mogą wymagać podjęcia środków ostrożności zarówno w stosunku do pacjenta (np. możliwy przeszczep szpiku) jak i pracownika służby zdrowia (np. konieczność zachowania szczególnej ostrożności podczas pracy z radioaktywnością).
Stąd, celem polepszenia efektywności stosowania mysich przeciwciał monoklonalnych w leczeniu chorób limfocytów B, staje się sprzęganie znacznika radioaktywnego lub toksyny z przeciwciałem, tak by wspomniany znacznik lub toksyna koncentrowały się w guzie. Przykładowo wspomniane powyżej przeciwciało IF5 znakowano jodem131 (1311) i opisano badanie ich rozmieszczenia u dwóch pacjentów. Patrz Eary. J. F. i in., Imaging and Treatment of B-Cell Lymphoma J. Nuc. Med. 31/8:1257-1268 (1990); Patrz również, Press, O. W. -i in., 'Treatment of Refraktory Non-Hodgkin's Lymphoma with radiolabeled MB-1 (Anti CD37) Antibody J. Clin. One. 7/8:1027-1038 (1989) (podkreśla się, że jeden z pacjentów leczony IF-5 znakownanym 1311 osiągnął częściową poprawę); Goldenberg, D. M. i in., 'Targeting, Dosimetry and Radioimmunotherapy of B-Cell Lympho4
175 557 mas with lodine-131-Labeled LL2 Monoclonal Antibody: J. Clin. One. 9/4; 548-564 )1991) (trzech spośród ośmiu pacjentów otrzymujących wielokrotne iniekcje rozwinęło odpowiedź HAMA); Appelbaum, F. R. RadiolabeledMonoclonal Antibodies in the Treatment of Non-Hodgkin's Lymphoma Hem./Onc. Clinics of N.A. 5/5: 1013-1025 (1991) (artykuł przeglądowy); Press, O. W. i in., Radiolabeled-Antibody Therapy of B-Cell Lymphoma with Autologous Bonę Marrow Support. New England Journal of Medicine 329/17: 1219-12223 (1993) (przeciwciała IF5 i BI anty CD20 znakowane jodem 131); i Kamiński, M. G. i in., Radioimmunotherapy of B-Cell Lymphoma with [1311] Anti-Bl (Anti-CD20) Antibody. NEJM 329/7 (1993) (przeciwciało BI anty CD20 znakowane jodem 131, za Kamiński'm).
Toksyny (np. leki chemioterapeutyczne jak doksorubicyna czy mitomycyna C) również łączono z przeciwciałami. Patrz, przykładowo, opublikowane zgłoszenie patentowe PCT WO 92/07466 (z dnia 14 maja 1992 roku).
Przeciwciała chimeryczne tzn. przeciwciała zawierające części od dwóch lub więcej różnych gatunków (np. myszy i człowieka) opracowano jako alternatywę dla przeciwciał skoniugowanych. przykładowo, Liu, A. Y. i in., Production of a Mouse-Human Chimeric Monoclonal Antibody to CD20 with Potent Fc-Dependent Biologie Activity J. Immun. 139/10:3521-3526 (1987). opisuje przeciwciało chimeryczne mysio-ludzkie skierowane przeciwko antygenowi CD20. Patrz również, publikację PCT Nr. WO 88/04936. Jednakże, nie dostarczono informacji co do zdolności, efektywności i strony praktycznej użycia takich przeciwciał chimerycznych do leczenia chorób limfocytów B. Podkreśla się, że testy in vitro (np. ADCC) nie potrafią przewidzieć zdolności in vivo przeciwciał chimerycznych do zniszczenia i usunięcia komórek docelowych ekspresjonujących określony antygen. Patrz, przykładowo, Robinson, R. D. i in., Chimeric mouse-human anti-carcinoma antibodies that mechate different anti-tumor cell biological activities, Hum. Antibod. Hybridomas 2:8493(1991) (przeciwciała chimeryczne mysio-ludzkie nie posiadały wykrywalnej aktywności ADCC), stąd potencjalna efektywność leczenia przeciwciał chimerycznych może być prawdziwie oceniona wyłącznie przez doświadczenie in vivo.
Istnieje potrzeba, której zaspokojenie stanowiłoby istotny postęp w stanie wiedzy, podejścia terapeutycznego wykorzystującego kierowanie na antygen CD20 w leczeniu chłoniaków z limfocytów B u naczelnych, w tej liczbie, choć nie wyłącznie, człowieka.
Wynalazek zaspakaja tę potrzebę przez dostarczenie aktywnego immunologicznie chimerycznego przeciwciała anty-CD20. Przeciwciało według wynalazku produkowane jest przez transfektomę zawierającą anty-CD20 w TCAE8 (w depozycie ATCC o numerze 69119).
Figura 1. jest diagramem przedstawiającym wektor ekspresjonujący przeciwciało chimeryczne, służący do wytwarzania aktywnych immunologicznie przeciwciał chimerycznych anty-CD20 (TCAE 8).
Figury od 2A do 2E przedstawiają sekwencję kwasu nukleinowego wektora z figury 1;
Figury od 3A do 3F przedstawiają sekwencje kwasu nukleinowego wektora z figury 1, zawierającego mysie regiony zmienne łańcucha lekkiego i ciężkiego (anty-CD20 w TCAE 8);
Figura 4 przedstawia sekwencję kwasu nukleinowego i sekwencję amino-kwasową (włączywszy CDR i regiony zrębowe) mysiego fragmentu zmiennego łańcucha lekkiego otrzymanego z mysiego przeciwciała monoklonalnego 2B8 anty-CD20.
Figura 5 przedstawia sekwencję kwasu nukleinowego i sekwencję aminokwasową (włączywszy CDR i regiony zrębowe) mysiego regionu zmiennego łańcucha ciężkiego uzyskanego z mysiego przeciwciała monoklonalnego 2B8 anty-CD20;
Figura 6 przedstawia wyniki badania metodą cytometrii przepływowej pokazujące wiązanie znakowanego fluorescencyjnie ludzkiego Clq z chimerycznym przeciwciałem anty-CD20, zawierającym, jako kontrola znakowane Clq; znakowane Clq mysie przeciwciało monoklonalne 2B8 anty-CD20; i znakowane Clq i ludzkie IgGl,k;
Figura 7 przedstawia wyniki badania lizy opartej na dopełniaczu, porównującego przeciwciało chimeryczne anty-CD20 i mysie przeciwciało monoklonalne 2B8 anty-CD20;
175 557
Figura 8 przedstawia wyniki badania cytotoksyczności komórkowej zależnej od przeciwciał z użyciem ludzkich komórek efektorowych in vivo, porównującego chimeryczne przeciwciało anty-CD20 i 2B8;
Figura 9A, 9B i 9C przedstawia wyniki usuwania limfocytów B krwi obwodowej naczelnego nie będącego człowiekiem po podaniu 0,4 mg/kg (A); 1.6 mg/kg (B); i 6,4 mg/kg (C) immunologicznie aktywnego przeciwciała chimerycznego anty-CD20;’
Figura 10 przedstawia wyniki, m. in. usuwania limfocytów B krwi obwodowej u naczelnego nie będącego człowiekiem po podaniu 0.01 mg/kg immunologicznie aktywnego chimerycznego przeciwciała anty-CD20;
Figura 11 przedstawia wyniki wpływu przeciwnowotworowego Y 2B8 w mysim modelu xenogenicznym wykorzystującym guz z limfoblastów B;
Figura 12 przedstawia wyniki wpływu przeciwnowotworowego C2B8 w mysim modelu ksenogenicznym wykorzystującym guz z limfoblastów B;
Figura 13 przedstawia wyniki wpływu przeciwnowotworowego połączenia Y2B8 i C2B8 w mysim modelu ksenogenicznym wykorzystującym guz z limfoblastów B; i
Figury 14A i 14B przedstawiają wyniki badania klinicznego Fazy I/II C2B8, pokazujące usuwanie populacji limfocytów B w czasie u pacjentów przejawiających częściową remisję choroby (14A) i małą remisję choroby (14B).
Ogólnie, przeciwciała zbudowane są z dwóch łańcuchów lekkich i dwóch łańcuchów ciężkich,; łańcuchy te tworzą Y, łańcuchy lekkie i ciężkie tworząc ramiona Y, zaś same łańcuchy ciężkie tworzą podstawę Y. Łańcuchy lekkie i ciężkie tworzą domeny homologii struktury i funkcji. Domeny zmienne zarówno łańcuchów lekkich (VL) jak i ciężkich (VH) odpowiadają za rozpoznawanie i specyficzność. Regiony stale łańcuchów lekkich (CL) i ciężkich )CH) zapewniają ważne właściwości biologiczne, np. łącznie się przeciwciał, wydzielanie, zdolność do przenikania bariery łożyskowej, wiązanie z receptorem Fc, wiązanie dopełniacza itp. Seria zdarzeń prowadzących do ekspresji genu immunoglobuliny w komórce produkującej przeciwciała jest złożona. Sekwencje genu regionu zmiennego położone są w oddzielnych segmentach genu określonych jako VH, D i JH, lub VL i JL. Segmenty te są łączone przez rearanżację DNA co powoduje ekspresję kompletnego regionu V łańcuchów lekkich i ciężkich. Poddane rearanżacji, połączone fragmenty V (VL-JL i VH-D-JH) kodują kompletne regiony lub domeny wiążące antygen łańcuchów lekkich i ciężkich.
Seroterapię ludzkich chłoniaków z limfocytów B przy użyciu mysich przeciwciał monoklonalnych anty-CD20 (1F5) opisał Press i in., (69 Blood 584,1987, patrz powyżej); opisane jednak wyniki lecznicze były niestety przejściowe. Dodatkowo, 25% badanych pacjentów rozwinęło odpowiedź na mysie przeciwciała (HAMA) w wyniku seroterapii. Press i in., sugeruje, że przeciwciała te skoniugowane z toksyną lub radioizotopem, zapewnić mogłyby dłużej działającą poprawę kliniczną w porównaniu z samym przeciwciałem.
Będąc pod wrażeniem wyniszczającego efektu chłoniaka z limfocytów B i istotnej potrzeby zapewnienia adekwatnego leczenia tej choroby, postanowiono wypróbować różnych podejść posiadając szczególne przeciwciało, 2B8, jako ogniwo łączące różne podejścia. Jedno z podejść korzystnie wykorzystuje zdolność ssaczego układu do szybkiego i efektywnego odnawiania limfocytów B krwi obwodowej; przy pomocy tego podejścia próbuje się, najogólniej, oczyszczać i usuwać limfocyty B z krwi obwodowej i tkanek iimfatycznych i w ten sposób usuwać chłoniaka z limfocytów B. Postanowiono uzyskać to przez użycie, m. in., immunologicznie aktywnych chimerycznych przeciwciał anty-CD20. W innym podejściu, próbowano ukierunkować znaczniki radioaktywne na komórki nowotworowe w celu ich zniszczenia.
W znaczeniu tu użytym, przeciwciało anty-CD20 określa przeciwciało, które rozpoznaje specyficznie nieglikozylowane białko powierzchniowe o masie 35000 Da, zwykle określane jako antygen różnicowania ograniczony do limfocytów B tzw. Bp35, określany powszechnie jako CD20. W znaczeniu tu użytym, chimeryczne użyte w stosunku do przeciwciał anty CD20, oznacza przeciwciała uzyskane w najkorzystniejszym wykonaniu drogą techniki rekombinacji DNA, i które zawierają zarówno ludzkie ( w ' tym gatunków
175 557 pokrewnych immunologicznie np. szympansie) i nie pochodzące od człowieka składowe: region stały przeciwciała chimerycznego jest w najkorzystniejszym wykonaniu praktycznie identyczny z regionem stałym natywnego przeciwciała ludzkiego; region zmienny przeciwciała chimerycznego w najkorzystniejszym wykonaniu pochodzi ze źródła innego niż ludzkie i posiada pożądaną specyficzność antygenową w stosunku do antygenu powierzchniowego CD20. Źródłem innym niż ludzkie może być każdy kręgowiec, którego można użyć do wytworzenia przeciwciał przeciwko ludzkiemu antygenowi powierzchniowemu CD20 lub materiałowi zawierającemu ludzki antygen powierzchniowy CD20. Takim źródłem mogą być, choć nie wyłącznie, gryzonie (np. królik, szczur, mysz itp.) i naczelne nie będące ludźmi (np. małpy Starego Świata, itp.). W najkorzystniejszym wykonaniu składowa nie pochodząca od człowieka (region zmienny) uzyskana jest od myszy. W znaczeniu tu użytym, określenie aktywne immunologicznie w odniesieniu do przeciwciał chimerycznych antyCD20, oznacza przeciwciało chimeryczne wiążące się z ludzkim C1q, pośredniczące w lizie zależnej od dopełniacza (CDC) ludzkich linii limfoidalnych B i powodujące lizę ludzkich komórek docelowych przez cytotoksyczność komórkową zależną od przeciwciał (ADCC). W znaczeniu tu użytym, określenia znakowanie pośrednie i podejście polegające na znakowaniu pośrednim oznaczają, że do przeciwciała przyłączony jest kowalencyjnie czynnik chelatujący i co najmniej jeden radioizotop przyłączony jest do czynnika chelatującego. Najkorzystniejsze czynniki chelatujące i radioizotopy wyszczególnione są przez Srivagtava, S. C. i Mease, R. C. Progress in Research on Ligands, Nuclides and Techniques for Labeling Monoclonal Antibodies Nucl. Med. Bio. 18/6:589-603 (1991) )Srivagtava) umieszczone tu jako odnośnik. Szczególnie korzystnym czynnikiem chelatującym jest związek zwany l-isothiocycmatobenzyl-3-methyldiothelene triaminepent acetic acid (MX-DTPA); szczególnie korzystnymi radioizotopami do znakowania pośredniego są ind [111] i ytr [90]. W znaczeniu tu użytym określenia znakowanie bezpośrednie i podejście polegające na znakowaniu bezpośrednim oznaczają, że radioizotop związany jest bezpośrednio z przeciwciałem kowalencyjnie (zwykle przez resztę aminokwasową). Najkorzystniejsze radioizotopy dostarczone są przez Srivagtava; szczególnie korzystnym radioizotopem do znakowania bezpośredniego jest jod [131] związany kowalencyjnie z resztą tyrozyny. Podejście polegające na znakowaniu pośrednim jest szczególnie korzystne.
Ujawnione tu podejścia lecznicze opierają się na zdolności układu odpornościowego naczelnych do szybkiej odnowy lub odmłodzenia limfocytów B we krwi obwodowej. Dodatkowo, ponieważ główna odpowiedź odpornościowa u naczelnych realizowana jest przez limfocyty T, gdy układ odpornościowy cierpi na niedobór limfocytów B we krwi obwodowej, nie ma potrzeby użycia nadzwyczajnych środków ostrożności (np. izolacji pacjenta itp.). Z powodu tych i innych szczególnych cech układu odpornościowego naczelnych, zaprezentowane tu podejście terapeutyczne leczenia zaburzeń limfocytów B pozwala na oczyszczenie krwi obwodowej z limfocytów B przy użyciu aktywnych immunologicznie chimerycznych przeciwciał anty-CD20. Ponieważ choroby limfocytów B krwi obwodowej, z definicji, wymagają dostępu do krwi w celu leczenia, droga podania aktywnych immunologicznie chimerycznych przeciwciał anty-CD20 i znakowanych radioaktywnie przeciwciał antyCD20 jest najkorzystniej pozajelitowa; co w znaczeniu tu użytym oznacza podanie dożylne, domięśniowe, podskórne, doodbytnicze, dopochwowe czy dootrzewnowe. Spośród wymienionych najkorzystniejsze jest podanie dożylne.
Aktywne immunologicznie chimeryczne przeciwciała anty-CD20 i znakowane radioaktywnie przeciwciała anty-CD20 dostarczane są techniką standardową w farmaceutycznie dopuszczalnym buforze, przykładowo, sterylnym roztworze fizjologicznym soli, sterylnej buforowanej wodzie, glikolu polipropylenowym, połączeniu wyżej wymienionych itp. Sposoby przygotowania środków do podania pozajelitowego opisane są w Pharmacutical Carriers & Formulations Martin, Remington's Pharmaceutical Sciences, 15th Ed. (Mack Pub. Co., Easton, PA 1975). Odpowiednia, efektywna terapeutycznie ilość aktywnego immunologicznie chimerycznego przeciwciała anty-CD20 koniecznego do wywarcia efektu leczniczego u danego pacjenta może być określona standardowymi technikami dobrze znanymi specjalistom.
175 557
Efektywne dawkowanie (tzn. ilość efektywna terapeutycznie) aktywnego immunologicznie chimerycznego przeciwciała anty-CD20 zawiera się od około 0.001 do około 30 mg/kg masy ciała, korzystniej od około 0.01 do około 25 mg/kg masy ciała, zaś najkorzystniej od około 0.4 do około 20.0 mg/kg masy ciała. Dopuszczalne są również inne dawki; czynnikami wpływającymi na dawkę są choć nie tylko, ciężkość choroby; poprzednie podejścia lecznicze; stan ogólny pacjenta; choroby współistniejące itp. Oceny konkretnego pacjenta i określenia odpowiedniej dawki w obrębie podanych wartości lub poza nimi może dokonać specjalista w tym zakresie.
Wprowadzenie aktywnego immunologicznie chimerycznego przeciwciała anty-CD20 w podanym zakresie dawek, może być przeprowadzone jako pojedyncze leczenie lub jako seria. W odniesieniu do przeciwciał chimerycznych, korzystnym jest by podawanie nastąpiło w serii; to najkorzystniejsze podejście przewidziane zostało na podstawie metodologii leczenia niniejszej choroby. Nie pragnąc wiązać się z żadną szczególną teorią, ponieważ aktywne immunologicznie chimeryczne przeciwciała anty-CD20 są zarówno aktywne immunologicznie jak i wiążą się z CD20, po pierwszym podaniu pacjentowi aktywnych immunologicznie chimerycznych przeciwciał anty-CD20 rozpoczyna się usuwanie limfocytów B z krwi obwodowej; obserwowano niemal całkowite usunięcie w ciągu około 24 godzin po podaniu. W związku z tym oczekuje się, że ponowne podanie(a) aktywnych immunologicznie chimerycznych przeciwciał anty-CD20 (lub znakowanych radioaktywnie przeciwciał anty-CD20) pacjentowi: a) usunie pozostałe limfocyty B krwi obwodowej; b) rozpocznie oczyszczanie węzłów chłonnych z limfocytów B; c) rozpocznie oczyszczanie innych tkanek z limfocytów B, na szpiku, guza itp. jak to już wcześniej wspomniano, przez zastosowanie kilkakrotnych podań aktywnych immunologicznie chimerycznych przeciwciał anty-CD20, ma miejsce seria wydarzeń z których każde wydaje się być ważne dla efektywnego leczenia choroby. Za pierwsze wydarzenie więc, może być uważane nadrzędnie ukierunkowane gruntowne oczyszczenie krwi obwodowej pacjenta z limfocytów B; następujące po tym wydarzenia’ mogą być uważane zarówno za nadrzędnie ukierunkowane do równoczesnego lub następowego usuwania limfocytów B z układu, oczyszczającego węzły chłonne z limfocytów B lub oczyszczającego inne tkanki.
W efekcie, mimo iż pojedyncza dawka zapewnia korzyść i może być używana do leczenia/kontrolowania choroby, najkorzystniejszy kurs leczenia składa się z kilku etapów: w najkorzystniejszym wykonaniu dawka około 0.4 do około 20 mg/kg masy ciała aktywnych immunologicznie przeciwciał chimerycznych anty-CD20 podawana jest pacjentowi raz w tygodniu przez 2 do 10 tygodni, najkorzystniej przez 4 tygodnie.
Stwierdzono, że przeciwciała chimeryczne mają znacznie dłuższy okres półtrwania w stosunku do mysich przeciwciał, zatem korzystne byłoby stosowanie chimerycznych przeciwciał anty CD20 nieznakowanych radioaktywnie, bowiem z powodu dłuższego okresu półtrwania radioizotop jest dłużej obecny w organizmie pacjenta). Jednakże, znakowane radioaktywnie przeciwciała chimeryczne mogą być korzystnie używane z mniejszymi dawkami mili Curie (mCi) sprzęganymi z przeciwciałami chimerycznymi w stosunku do mysich przeciwciał. Scenariusz ten pozwala zmiejszyć toksyczność wywieraną na szpik do dopuszczalnych poziomów, przy zachowaniu użyteczności terapeutycznej.
Do znakowania przeciwciał stosować można różne radioizotopy, przy czym specjalista może dobrać radioizotop najużyteczniejszy przy uwzględnieniu różnych czynników. Przykładowo, jod [131] jest dobrze znanym radioizotopem używanym w immunoterapii kierowanej, jednakże, użyteczność kliniczna jodu [131] może być ograniczona przez kilka czynników, w tym: fizyczny okres półtrwania wynoszący osiem dni, dehalogenację jodowanego przeciwciała we krwi i w guzie, charakterystyka emisji (tzn. olbrzymia składowa gamma) która może być suboptymalna dla umiejscowionej w guzie dawki. Wraz z wprowadzeniem doskonalszych czynników chelatujących, możliwość przyłączenia grup chelatujących metale do białek zwiększyła możliwość stosowania innych radioizotopów jak ind [111] i itr [90]. Stosowanie itru [90] w radioimmunoterapii dostarcza wielu korzyści: 64 godzinny okres półtrwania itru [90] jest wystarczająco długi by umożliwić akumulację przeciwciała w guzie; w przeciwieństwie do jodu [131] itr [90] jest czystym emiterem beta o wysokiej energii,
175 557 bez towarzyszącego rozkładowi promieniowania gamma, o zasięg rzędu 100 do 1000 średnic komórkowych. Ponadto, minimalna -ilość przenikliwego promieniowania pozwala podawać przeciwciała znakowane itrem [90] w trybie ambulatoryjnym. Ponadto do zabicia komórki nie jest konieczna internalizacja przeciwciała, zaś miejscowa emisja promieniowania powinna być śmiercionośna dla otaczających komórek nowotworowych nie posiadających antygenu docelowego.
Jednym z ograniczeń nie leczniczych itru [90] jest brak znaczącego promieniowania gamma co czyni obrazowanie trudnym. W celu uniknięcia tego problemu, do określania położenia i względnej wielkości guza przed podaniem dawek leczniczych przeciwciała anty-CD20 znakowanego itrem [90], można używać radioizotopu do obrazowania diagnostycznego jak np. ind [111]. Ind [111] jest szczególnie korzystny jako radioizotop diagnostyczny ponieważ: od 1 do około 10 mCi może być bezpiecznie podane bez zauważalnej toksyczności; a uzyskane obrazy są zwykle zgodne z rozmieszczeniem podanego następnie przeciwciała znakowanego itrem [90]. W większości badań wykorzystuje się przeciwciała znakowane 5 mCi indu [111] ponieważ ta dawka jest zarówno bezpieczna jak i posiada zwiększoną wydajność obrazowania w porównaniu z dawkami mniejszymi, z optymalnym obrazowaniem występującym w trzy do sześciu dni po podaniu przeciwciał. Patrz, przykładowo, Murray, J. L. 26 J. Nuc. Med. 3328 (1985) i Carraguillo, J. A. 26 J. Nuc. med. 67 (1985).
Efektywne dawki jednorazowe (tzn. dawki efektywne terapeutycznie) przeciwciał anty-CD20 znakowanych itrem [90] zawierają się pomiędzy około 5 do około 75 mCi, korzystniej pomiędzy około 10 a około 40 mCi. Efektywna pojedyncza dawka przeciwciała anty-CD20 znakowanego jodem [131], nie powodująca ablacji szpiku, zawiera się pomiędzy 5 a około 70 mCi, korzystniej pomiędzy 5 a około 40 mCi. Efektywna pojedyncza dawka ablacyjna (tzn. która może wymagać autologicznego przeszczepienia szpiku) przeciwciała anty-CD20 znakowanego jodem [131] zawiera się pomiędzy 30 a około 600 mCi, korzystniej pomiędzy 50 a około 500 mCi. W połączeniu z chimerycznym przeciwciałem anty-CD20, dzięki dłuższemu okresowi półtrwania w stosunku do mysich przeciwciał, efektywna pojedyncza dawka chimerycznych przeciwciał anty-CD20 znakowanych jodem [131] nie powodująca ablacji szpiku, zawiera się pomiędzy około 5 a około 40 mCi, korzystniej zaś mniej niż 30 mCi. Dawka obrazująca dla np. znacznika jakim jest ind [111], wynosi zwykle mniej niż 5 mCi.
W przypadku stosowania przeciwciał anty-CD20 znakowanych radioaktywnie, terapię można prowadzić przy użyciu pojedynczej dawki jak i dawek wielokrotnych. Z powodu składowej radioaktywnej, korzystnie od pacjent, który będzie narażony na potencjalnie śmiertelne w skutkach uszkodzenie szpiku wynikające z napromieniowania, pobiera się krążące komórki macierzyste )PSC) lub szpik (BM) przed zastosowaniem leczenia. BM i/lub PSC zbierane są przy użyciu standardowych technik, po czym oczyszczane i zamrażane do czasu ewentualnej reinfuzji. Dodatkowo, niezwykle korzystnym jest, by przed leczeniem wykonać u pacjenta badanie dozymetryczne przy użyciu przeciwciał znakowanych znacznikiem diagnostycznym (np. indem [111] w celu upewnienia się, że przeciwciało znaczone terapeutycznie (np. ytrem [90] nie zostanie zgromadzone niepotrzebnie w innym normalnym narządzie czy tkance.
Opisano przeciwciała chimeryczne mysio-ludzkie. patrz, przykładowo, Morrison, S. L. i in., PNAS 11:6851-6854 (Nov 1984); European Patent Publication No. 173494; Boulianne, G. L. i in., Nature 312:642 (Dec 1984); Neubeiger, M. S. i in., Nature 314:268 (mar 1985); European Patent Publication No. 125023; Tan i in., J. Immunol. 135:8564 (Nov 1985); Sun, L. K. i in., Hybridoma 5/1:517 (1986); Sahagan i in., J. Immunol. 137:1066-1074 (1986). Patrz ogólnie, Muron, Nature 312:597 (Dec 1984); Dickson, Genetic Ingineering News 5/3 (Mar 1985); Marx, Science 229, 455 (Aug 1985); i Morrison, Science 229:1202-1207 (Sep 1985). Robinson i in., w PCT Publicatation Number WO 88/04936 opisuje chimeryczne przeciwciało z ludzkim regionem stałym i mysim regionem zmiennym, posiadające specyficzność w stosunku do epitopu CD20; mysia część przeciwciała chimerycznego Robinsona uzyskana została z mysiego przeciwciała monoklonalnego 2H7 (gamma 2b, kappa). Aczkolwiek w cytowanej publikacji podkreśla się, że przeciwciało chimeryczne jest
175 557 pierwszym kandydatem do leczenia zaburzeń limfocytów B. stwierdzenie to może być odbierane jedynie jako sugestia dla osoby kompetentnej by stwierdzić czy ta sugestia jest trafna czy nie dla poszczególnego przeciwciała, zwłaszcza że w publikacji brakj akichkolwiek danych podpierających stwierdzenie o efektywności trapeutycznej, i, co ważne, danych pochodzących od wyższych ssaków jak naczelne czy ludzie.
Metodologie dla wytworzenia przeciwciał chimerycznych są dostępne specjalistom. Przykładowo, łańcuchy lekkie i ciężkie mogą być ekspresjonowane osobno, przy użyciu, przykładowo, osobnych plazmidów. Mogą one być oczyszczane i łączone in vitro w kompletne przeciwciała: metodologie dla wykonania takiego łączenia opisano. Patrz, przykładowo, Scharff. M., Harvey Lectures 69:125 (1974). Parametry reakcji in vitro tworzenia przeciwciał IgG ze zredukowanych, izolowanych łańcuchów lekkich i ciężkich również zostały opisane. Patrz, przykładowo, Beychok, S. Cells of Immunoglobulin Synthesis, Academic Press, New York, str. 69,1979. Możliwa jest również koekspresj a łańcuchów ciężkich i lekkich w tej samej komórce w celu wewnątrzkomórkowego łączenia łańcuchów ciężkich i lekkich w kompletne przeciwciała H2L2 IgG. Koekspresja taka może być uzyskana przy użyciu jednego lub rożnych plazmidów w tej samej komórce gospodarza.
Inne podejście, i jedno z najkorzystniejszych podejść w opracowaniu chimerycznych ludzkich-nie ludzkich przeciwciał anty-CD20, oparte j est na wykorzystaniu wektora ekspresyjnego zawierającego, ab initio, DNA kodujące regiony stałe łańcuchów ciężkich i lekkich pochodzących od człowieka. Wektor taki umożliwia wprowadzanie DNA kodującego regiony zmienne pochodzące nie od człowieka, tak, że mogą być wytworzone, wybrane i badane na różne charakterystyki (np. typ specyfiki wiązania, regiony wiązania epitopu itp.) różnorodne nie ludzkie przeciwciała anty-CD20, a następnie cDNA kodujące regiony zmienne łańcuchów ciężkich i lekkich z najkorzystniejszego i pożądanego przeciwciała anty-CD20 może być wprowadzone do wektora. Określa się taki typ wektora jako Tandem Chimeric Antibody Expression vector (TCAE). Najkorzystniejszym wektorem TCAE użytym do wytworzenia immunologicznie aktywnych przeciwciał chimerycznych anty-CD20 do zastosowań leczniczych w chłoniakach, jest TCAE 8. TCAE 8 jest pochodną wektora, będącego w posiadaniu osób podpisanych pod niniejszym wnioskiem patentowym, oznaczonego jako TCAE 5.2 tym jednak się różniącą od TCAE 5.2, że w tym ostatnim miejsce zapoczątkowania translacji znacznika umożliwiającego selekcję (fosfotransferazy neomycynowej, NEO) stanowi konsensus sekwencji Kozaka, podczas gdy w TCAE 8 w miejscu tym jest częściowo zmieniona sekwencja Kozaka. Szczegóły dotyczące wpływu miejsca zapoczątkowania translacji markera umożliwiającego selekcję wektorów TCAE (określanych również jako wektory ANEX) w stosunku do ekspresji białka ujawnione są szczegółowo w równolegle zgłoszonym zgłoszeniu. TCAE 8 zawiera cztery (4) kasety transkrypcyjne, w układzie tandemowym, tzn. ludzki łańcuch ciężki immunoglobuliny pozbawiony części zmiennej; ludzki łańcuch ciężki immunoglobuliny pozbawiony części zmiennej; DHFR i NEO. Każda z kaset zawiera własny promotor eukariotyczny i region poliadenylacji (patrz Figura 1, będąca schematyczną reprezentacją wektora TCAE 8). Szczegółowo:
1) promotor-wzmacniacz CMV z przodu łańcucha ciężkiego immunoglobuliny jest okrojoną wersją promotora-wzmacniacza z przodu łańcucha lekkiego, od miejsca Nhel w pozycji -350 do miejsca Sstl w pozycji -16 (patrz, 41 Cell 521,1985).
2) część stałą ludzkiego łańcucha lekkiego immunoglobuliny uzyskano drogą amplifikacji cDNA w reakcji PCR. W TCAE 8 był to region stały ludzkiego łańcucha lekkiego kappa immunoglobuliny (numeracja Kabata, aminokwasy od 108 do 214, allotyp Km 3 (patrz, Kabat, E. A. Seąuences of proteins of immunological interest, NIH Publication, Fifth Ed. No. 91-3242,1991)), i region stały ludzkiego łańcucha ciężkiego gamma 1 immunoglobuliny (numeracja Kabata aminokwasy od 114 do 478, allotyp Gmila, Gmlz). Łańcuch lekki wyizolowano z normalnej ludzkiej krwi (IDEC Pharmaceutical Corporation, La Jolla, CA); RNA zeń użyto do syntezy cDNA, które następnie amplifikowano przy użyciu PR. (startery otrzymano w oparciu o sekwencje z Kabata). Łańcuch ciężki wyizolowano (przy użyciu techniki PR.) z cDNA przygotowanego z RNA uzyskanego z komórek transfekownych
175 557 wektorem ludzkiej IgG (patrz, 3 Prot. Eng. 531, 1990; wektor pNgamma 162). Dwa aminokwasy zmieniono w izolowanej ludzkiej IgG w celu dopasowani do consensusu sekwencji aminokwasowej z Kabata, jak następuje: aminokwas 225 zmieniono z waliny na alaninę (GTT na GCA) i aminokwas 287 zmieniono z metioniny na lizynę (ATG na AAG);
3) kasety ludzkich łańcuchów lekkich i ciężkich immunoglobuliny zawierają syntetyczne sekwencje sygnałowe do wydzielania przeciwciał;
4) kasety ludzkich łańcuchów lekkich i ciężkich immunoglobulin zawierają specyficzne miejsca restrykcyjne umożliwiające wprowadzanie regionów zmiennych łańcuchów ciężkich i lekkich immunoglobulin zapewniające translacyjną ramkę odczytu i nie zmieniające sekwencji aminokwasów normalnie spotykanych w łańcuchach immunoglobuliny;
5) Kaseta DHFR zawiera własny eukariotyczny promotor (mysi promotor większy beta globiny BETA) i region poliadenylacji (miejsce poliadenylacji wołowego hormonu wzrostu bGh); i
6) Kaseta NEO zawiera jej własny promotor eukariotyczny (BETA) i region poliadenylacji (SV40 wczesny sygnał poliadenylacji, ''SV).
W przypadku wektora TCAE 8 i kasety NEO, region Kozaka stanowiła częściowo zmieniona sekwencja Kozaka (zawierająca powyżej miejsce Clal):
Clal -3+1
GGGAGCTTGG ATCGAT ccTct ATG Gtt (W wektorze TCAE 5.2, zmiana jest pomiędzy Clal i regionu ATG i brzmi ccAcc)
Kompletna lista sekwencji TCAE 8 (zawierająca specyficzne składniki czterech kaset ekspresyjnych) wyszczególniona jest na figurze 2 (Identyfikator Sekw. Nr. 1:0)
Specjaliści doceniają fakt, że wektory TCAE pozwalają zmniejszyć ilość czasu wymaganego do wytworzenia aktywnych immunologicznie chimerycznych przeciwciał anty-CD20. Wytworzenie i izolacja nie pochodzących od człowieka regionów zmiennych łańcucha lekkiego i ciężkiego, po czym wprowadzenie ich do kasety transkrypcyjnej części stałej ludzkiego łańcucha lekkiego i kasety transkrypcyjnej części stałej ludzkiego łańcucha ciężkiego, pozwoliło wyprodukować aktywne immunologicznie chimeryczne przeciwciała anty-CD20.
Przy użyciu technologii hybrydomy i mysiego źródła uzyskano najkorzystniejszy region zmienny, nie pochodzący od człowieka, ze specyficznością do antygenu CD20. Przy użyciu reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR.), mysie regiony zmienne łańcucha lekkiego i ciężkiego wklonowano bezpośrednio do wektora TCAE 8 - jest to najkorzystniejsza droga wbudowywania regionu zmiennego nie pochodzącego od człowieka, do wektora TCAE. Preferencja ta jest głównie spowodowana wydajnością reakcji PCR. i dokładnością wprowadzania. Jednakże, możliwe i dostępne są inne procedury zamienne do wykonania tego zadania. Przykładowo, używając TCAE 8 (lub zamiennego wektora) sekwencja regionu zmiennego przeciwciała anty-CD20 nie pochodząca od człowieka, może być uzyskana, w następstwie syntezy oligonukleotydów części sekwencji lub jeżli to konieczne, całej sekwencji; a następnie, części lub cała sekwencja może zostać wprowadzona w odpowiednie miejsce w obrębie wektora. Osobom kompetentnym powierza się wykonanie tego zadania.
Najkorzystniejsze aktywne immunologicznie chimeryczne przeciwciała anty-CD20 uzyskano przez użycie wektora TCAE 8, zawierającego mysie regiony zmienne uzyskane z przeciwciała monoklonalnego przeciwko CD20; przeciwciało to (dyskutowane szczegółowo, poniżej) oznaczono 2B8. Kompletna sekwencja regionu zmiennego uzyskanego z 2B8 w TCAE 8 )anty-CD20 w TCAE 8) podana jest w Figurze 3)Identyfikator Sekw. Nr. 2).
Komórka gospodarcza użyta do ekspresji białka jest najkorzystniej pochodzenia ssaczego; osobom kompetentnym powierza się określenie szczególnej linii komórkowej najlepiej odpowiadającej pożądanemu produktowi genu, który ma być w niej ekspresjonowany. Przykładowe linie komórkowe obejmują, choć nie są do nich ograniczone: DG44 i DUXBII (linie jajnika chomika, DHFR negatywne), HeLa (ludzki rak szyjki macicy), CVI (linia małpiej nerki), COS (pochodna CVI z antygenem T SV40), R1610 (fibroblasty chomika), BALB/3T3 (mysie fibroblasty),HAK (linia nerki chomika), Sp2/0 (mysi szpiczak), P3x63Ag3.653 (szpiczak mysi), BFAIcIBPT (wołowe komórki śródbłonka), RAJI
175 557 (limfocyty ludzkie) i 293 (ludzka nerka), linie gospodarza dostępne są zwykle ze źródeł handlowych, ATCC lub z publikowanej literatury.
Korzystnie linią gospodarza jest DG44 (CHO) lub SP2/0. patrz Urland, G. i in., Effect of gamma rays and the dihydrofolate reductase locus: deletions and inversions’'. Som.Cell&Mol. Gen 12/6:555-556 (1986), i Shulman, M. i in., A better cell line for making hybridomas secreting specific antibodies. Nature 276:269 (1987). Najkorzystniej linią gospodarza jest DG44. Transfekcja plazmidu do komórki gospodarza może być wykonana dowolną techniką dostępną osobom kompetentnym. Techniki te obejmują, choć nie są ograniczone do: trasfekcji (w tym elektroforezę i elektroporację), fuzję komórek z opłaszczonym DNA, mikroiniekcję i zakażenie wirusem. Patrz, Ridgway, A. A. G. Mammalian Expression Vectors, rozdział 24. 2, str. 470-472 Vectors, Rodriguez i Denhardt, Eds. (Butterworths, Boston, MA 1988). Najkorzystniejsze jest wprowadzanie plazmidu do komórki gospodarza drogą elektroporacji.
PRZYKŁADY
Celem poniższych przykładów nie jest ograniczanie zakresu wynalazku. Przykłady podano w celu zilustrowania aktywnych immunologicznie chimerycznych przeciwciał antyCD20 (C2B8) uzyskanych przy użyciu specyficznego wektora (TCAE 8) i regionów zmiennych uzyskanych z mysiego przeciwciała monoklonalnego anty-CD20 (2B8).
I. WYTWORZENIE CHIMERYCZNYCH PRZECIWCIAŁ ANTY-CD20 (C2B8)
A. Konstruowanie wektora ekspresjonującego DNA chimerycznej Immunoglobuliny anty-CD20.
RNA wyizolowano z komórek hybrydomy mysiej 2B8 (tak jak to opisano Chomczynski. P. i in., 1 Single step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenolchloroform extraction. Anal. Biochem. 162: 156-159 (1987)). i przygotowano z niego cDNA. Z cDNA Wyizolowano DNA regionu zmiennego łańcucha lekkiego mysiej immunoglobuliny przez reakcję łańcuchową polimerazy z użyciem zestawu starterów DNA o homologii z sekwencjami sygnałowymi mysiego łańcuch lekkiego na końcu 5' i regionu J łańcucha lekkiego na końcu 3'. Sekwencje starterów przedstawiono poniżej:
1. VL Sensowny (Identyfikator Sekw. Nr. 3)
5' ATC AC AGATCCTC ACC ATG GAT TTT CAG GTG CAG ATT ATC AGC
TTC 3'
Podkreślona część stanowi miejsce restrykcyjne BgI II, zaznaczono start kodon.
VL Antysensowny (Identyfikator Sekw. Nr. 4)
5' TGC AGC ATC CGTACG TTT GAT TTC CAG CTT 3'
Podkreślone miejsce stanowi miejsce Bsi WI.
Patrz, Figura 1 i 2 odpowiednie miejsce BgI II i Bsi WI w TCAE 8, i Figura 3 odpowiednie miejsce w anty-CD20 w TCAE 8.
Powstałe w wyniku fragmenty DNA wklonowano bezpośrednio do wektora z przodu domeny stałej ludzkiego łańcucha lekkiego kappa i sekwencjonowano. Określona sekwencja DNA dla regionu zmiennego mysiego łańcucha lekkiego podana jest w Figurze 4. (Identyfikator Sekw. Nr 5); patrz również Figura 3, nukleotydy od 978 do 1362. Figura 4 dostarcza dalej sekwencję aminokwasową z mysiego regionu zmiennego i regionów CDR i zrębowych. Region zmienny mysiego łańcuch lekkiego z 2B8 należy do rodziny VI kappa. Patrz, Kabat, powyżej.
Region zmienny mysiego łańcucha ciężkiego wyizolowano w podobny sposób i wklonowano z przodu domen stałych ludzkiej IgG1. Startery były jak następuje:
1. VH Sensowny (Identyfikator Sekw. Nr. 6)
5' GCG GCT CCC ACGCGT GTC CTG TCC CAG 3' (Podkreślona część stanowi miejsce restrykcyjne MIu I).
2. VH Antysensowny (Identyfikator Sekw. Nr. 7)
5' GG(G/C) TGT TGT GCTAGC TG(A/C) (A/G)GA GAC (G/A)GT GA 3
Podkreślona część stanowi miejsce Nhe I).
Patrz, Figura 1 i 2 odpowiednie miejsca MIu I i Nhe I w TCAE 8, i Figur 3 odpowiednie miejsca w anty-CD20 w TCAE 8.
175 557
Sekwencja mysiego łańcucha ciężkiego pokazana jest w figurze 5 (Identyfikator Sekw. Nr. 8); patrz również figura 3, nukleotydy od 2401 do 2820. Figura 5 dostarcza również sekwencji aminokwasowej mysiego regionu zmiennego, oraz regionów CDR i zrębowych. Region zmienny mysiego łańcucha ciężkiego z 2B8 należy do mysiej rodziny VH 2B. Patrz, Kabat, powyżej. B. Tworzenie Transfektom CHO i SP2/0 Produkujących chimeryczne Anty-CD20.
Komórki DG44 jajnika chomika (CHO) hodowano w pożywce SSFM II bez hipoksantyny i tymidyny (Gibco, Grand Island, NY, Nr 91-0456PK); komórki SP2/0 mysiego szpiczaka hodowano w pożywce Dulbecco's Modified Eagles Medium (DMEM) (Irvine Scientific, Santa ANA, Ca., Cat. Nr. 9024) z 5% wołową surowicą płodową i dodatkiem 20 ml/l glutaminy. Cztery miliony komórek poddano elektroporacji, z 25 mig CHO bądź 50 mig SP2/0 plazmidowego DNA przeciętego przy użyciu Not I, za pomocą zestawu do elektroporacji BTX 600 (BTX, San Diego, CA) w 0.4 ml kuwetach jednorazowych. Warunki były następujące 210 wolt dla CHO bądź 180 wolt dla SP2/0,400 mikrofaradów, 13 omów. Każdą z reakcji wysiewano na płytki 96 studzienkowe (około 7000 komórek/studzienkę). Płytki odżywiano pożywką zwierającą G418 (GENETICIN, Gibco, Cat. Nr. 860-1811) w stężeniu 400 mig/ml dla CHO (pożywka ponadto zawierała 50 miM hipoksantyny i 8 miM tymidyny) lub 800 mig/ml dla SP2/0, dwa dni po elektroporacji a następnie co 2-3 dni dopóki nie pojawiły się kolonie. Nadsącza z kolonii badano na obecność immunoglobulin chimerycznych metodą ELISA specyficznego dla ludzkich przeciwciał. Kolonie produkujące największe ilości immunoglobuliny rozpropagowano i wysiano na płytki 96 studzienkowe zawierające pożywkę z metotreksatem (25 nM dla SP2/0 i 5 nM dla CHO) i odżywiano co dwa lub trzy dni. Supernatanty badano jak powyżej i badano kolonie produkujące największe ilości immunoglobuliny. Chimeryczne przeciwciało anty-CD20 oczyszczano z nadsączy przy użyciu chromatografii opartej na powinowactwie białka A.
Oczyszczone chimeryczne przeciwciało anty-CD20 badano przez elektroforezę na żelu poliakrylamidowym i oceniono, że jest w ponad 95% czyste. Powinowactwo i specyficzność przeciwciała chimerycznego oznaczano w odniesieniu do 2B8. Chimeryczne przeciwciało anty-CD20 badane w teście bezpośrednim i współzawodnictwie o miejsce wiązania, w porównaniu z mysim przeciwciałem monoklonalnym 2B8 anty-CD20, wykazywało porównywalne powinowactwo i specyficzność w stosunku do licznych komórek posiadających CD20 (dane nie pokazane). Stałą powinowactwa (Kap) określono przez bezpośrednie wiązanie znakowanego 1125 chimerycznego przeciwciała anty-CD20 i porównano ze znakowanym radioaktywnie 2B8 wykresem Scatchard'a; obliczona Kap dla chimerycznego przeciwciała anty-CD20 produkowanego przez CHO wynosiła 5.2x10-9 M i dla przeciwciała produkowanego przez SP2/0 7.4x10-9 M. Obliczona Kap dla 2B8 wynosiła 3.5x10-9 M. Bezpośrednie współzawodnictwo w teście radioimmunologicznym wykonano w celu potwierdzenia zarówno specyficzności jak i zachowania immunoreaklywności chimerycznego przeciwciała przez porównanie jego zdolności do efektywnego współzawodnictwa z 2B8. Mniej więcej równe ilości chimerycznego przeciwciała anty-CD20 i 2B8 potrzebne były do 50% zahamowania wiązania z antygenem CD20 na limfocytach B (wyniki nie pokazane), tzn przeciwciała w minimalnym stopniu utraciły zdolność do zahamowania, prawdopodobnie na skutek chimeryzacji.
Wyniki uzyskane w Przykładzie I. B wskazują, m. in., że wytworzono przy pomocy transfektom CHO i SP2/0 z użyciem wektorów TCAE 8, chimeryczne przeciwciała antyCD20, i że przeciwciała te posiadają praktycznie tą samą specyficzność i zdolność wiązania jak mysie przeciwciało monoklonalne 2B8 anty-CD20.
C. Oznaczenie Aktywności Immunologicznej chimerycznych przeciwciał Anty-CD20
i. Badanie z użyciem Ludzkiego C1q
Chimeryczne przeciwciała anty-CD20 produkowane przez CHO i SP2/0 badane były na zdolność wiązania ludzkiego C1q w badaniu cytofluorymetrią przepływową przy użyciu C1q znakowanego fluoresceiną (C1q otrzymano z Quidel, Mira Mesa, CA, Nr. prod. A400 zaś znacznik FITC z Sigmy, St. Louis, Mo, nr. prod. F-7250; FITC). Znakowanie C1q wykonano zgodnie z protokołem opisanym w Selected Methods in Cellular Immunology
175 557
Michell & Shigii, Ed. (W. H. Freeman & Co., San Francisco, CA, 1980, str. 292). Wyniki uzyskano przy użyciu fluorymetru przepływowego Becton Dickinson FACScan (fluoresceinę mierzono w zakresie 515-545 nm). Porównywalne ilości chimerycznego przeciwciała anty-CD20, białka ludzkiego szpiczaka IgG1, K (Binding Site, Dan Diego, CA, Nr. prod. BP078), i 2B8 inkubowano z podobną liczbą komórek SB posiadających antygen CD20, a następnie przepłukano buforem FACs (0,2% BSA w PBS, pH 7.4, 0.025 azydku sodu) w celu usunięcia niezwiązanego przeciwciała, a następnie inkubowano z C1q znakowanym FITC. Po 30-60 minutach inkubacji komórki ponownie przepłukiwano. Zawiesiny komórek analizowano na FACScanie zgodnie z instrukcją producenta, używając C1q znakowanego FITC jako kontroli. Wyniki przedstawiono w figurze 6.
Jak wskazują wyniki w figurze 6, istotny wzrost fluorescencji obserwowano wyłącznie stosując chimeryczne przeciwciało anty-CD20; tzn tylko komórki SB ze związanymi chimerycznymi przeciwciałami anty-CD20 wiązały C1q, podczas gdy inne warunki powodowały wzorzec podobny do kontroli.
ii. Liza Komórkowa Zależna od Dopełniacza
Chimeryczne przeciwciało anty-CD20 badano na zdolność do lizy komórek linii chłoniaka w obecności ludzkiej surowicy (jako źródła dopełniacza). Komórki SB posiadające antygen CD20 znakowane były Cr51 przez dodanie 100 miCi 51 Cr do 1x106 komórek SB przez 1 godzinę w temp. 37°C; znakowane komórki SB inkubowano w obecności porównywalnych ilości ludzkiego dopełniacza i porównywalnych iloś<^i_(0-50 mig/ml) chimerycznego przeciwciała anty-CD20 bądź 2B8 przez 4 godziny w temp. 37°C (patrz, Brunner, K.T. i in., Quantitative assay of the lytic action of immune lymphoid cells on Cr51-labeled allogeneic target cells in vitro Immunology 14:181-189 (1968). Wyniki umieszczono w figurze 7.
Wyniki zamieszczone w figurze 7 wskazują, że m.in., chimeryczne przeciwciało antyCD20 powoduje znaczną lizę (49%) w użytych warunkach.
iii. Test Cytotoksyczności Komórek Efektorowych Zależnej od Przeciwciał
Do badania tego używano komórek z antygenem CD20 (SB) i nie posiadających CD20 (linia białaczki HSB z limfocytów T; patrz Adams, R. Formal Discussion Can. Res. 27:2479-2482 (1967); depozyt ATCC CCL 120. 1); znakowanych Cr51. Badanie przeprowadzono w sposób opisany w Brunner, K.T. i in., Quantitative assay of the lytic action of immune lymphoid cells on Cr51-labeled allogeneic target cells in vitro Immunology 14:181189 (1968); obserwując znaczącą lizę komórek SB (znakowanych Cr51) w której pośredniczyły chimeryczne przeciwciała anty-CD20 pod koniec 4 godziny inkubacji w temp. 37°C, zarówno dla przeciwciał produkowanych przez CHO jak i SP2/0 (komórkami efektorowymi były ludzkie limfocyty obwodowe; stosunek komórek efektorowych do docelowych wynosił 100:1). Wydajną lizę komórek docelowych uzyskano przy 3.9 mig/ml. W przeciwieństwie, w tych samych warunkach mysie przeciwciało monoklonalne 2B8 anty-CD20 nie wywierało znaczącego efektu, zaś komórki HSB nie posiadające antygenu CD20 nie uległy lizie. Wyniki przedstawiono w figurze 8.
Wyniki uzyskane w Przykładzie I wskazują, m.in., że chimeryczne przeciwciała antyCD20 z Przykładu I były aktywne immunologicznie.
II. USUWANE UMFOCYTÓW B IN VI VO PRZYUŻYCIU CHIMERYCZNYCH ANTY-CD20
A. Badanie z Użyciem Naczelnych Nie Będących Ludźmi.
Przeprowadzono trzy osobne badania z użyciem naczelnych. Dla wygody określane one są tu jako: Chimeryczne anty-CD20: CHO i SP2/0; Chimeryczne anty-CD20: CHO i 'Duża Dawka Chimerycznych Anty CD20. Warunki badania były następujące: Chimeryczne anty-CD20: CHO i SP/20
Sześć małp cynomolgus o wadze od 4.5 do 7 kilogramów (White Sands Research Center, Alamogordo, NM) podzielono na trzy grupy po dwie małpy w każdej. Oba zwierzęta w każdej grupie otrzymały tę samą dawkę immunologicznie aktywnych chimerycznych przeciwciał anty-CD20. Jedno ze zwierząt w każdej grupie otrzymało oczyszczone przeciwciało wyprodukowane przez transfektomę CHO; drugie otrzymało przeciwciało wyprodukowane przez SP2/0. Trzy grupy otrzymały dawki przeciwciał odpowiadające 0.1 mg/kg,
175 557
0,4 mg/kg i 1.6 mg/kg dziennie przez cztery kolejne dni. Immunologicznie aktywne chimeryczne przeciwciało anty-DC20 podawano w roztworze fizjologicznym soli drogą infuzji dożylnej; pobierając próbki krwi przed podaniem. Dodatkowe próbki pobrano począwszy od 24 godziny po ostatnim podaniu (T=0) a potem dnia 1,3,7 i 28; próbki krwi pobierano również później w odstępach dwutygodniowych do zakończenia badania dnia 90. Około 5 ml krwi pełnej od każdego zwierzęcia odwirowano przy 200 RPM przez 5 minut. Osocze pobrano do badania na rozpuszczone chimeryczne przeciwciała anty-CD20. Peletkę (zawierającą leukocyty krwi obwodowej i czerwone krwinki) zawieszono w wołowej surowicy płodowej do badania przy użyciu przeciwciał znakowanych fluoresceiną (patrz, Fluorescent Antibody Labeling of Lymphoid Celi Population, poniżej).
Chimeryczne Anty-CD20; CHO
Sześć małp cynomolgus ważących od 4 do 6 kilogramów (White Sands) podzielono na trzy grupy po dwie w każdej. Wszystkim zwierzętom podano immunologicznie aktywne chimeryczne przeciwciała anty-CD20 produkowane przez CHO (w sterylnym roztworze soli), trzy grupy podzielono następująco: podgrupa 1 otrzymywała codziennie iniekcje dożylne przeciwciała 0.01 mg/kg przez cztery dni, podgrupa 2. otrzymywała codziennie iniekcje dożylne przeciwciała 0,4 mg/kg przez cztery dni, podgrupa 3 otrzymała pojedynczą iniekcję przeciwciała 6.4 mg/kg. Od wszystkich trzech grup pobierano próbki krwi przed rozpoczęciem podawania; dodatkowo próbki krwi pobierano dnia 0, 1, 3, 7, 14 i 28 po ostatnim wstrzyknięciu, tak jak to opisano powyżej, i próbki te poddawano badaniu z użyciem przeciwciał znakowanych fluoresceiną (patrz Fluorescent Antibody Labeling of Lymphoid Celi Population, poniżej). Dodatkowo, oprócz lic:z^nia limfocytów B krwi obwodowej, pobierano biopsje węzłów chłonnych dnia 7, 14 i 28 po ostatniej iniekcji, i zawiesiny jednokomórkowe barwiono do liczenia populacji limfocytów metodą cytometrii przepływowej.
Duża Dawka Chimerycznych anty-CD20
Dwóm małpom cynomolgus (White Sands) przetoczono po 16.8 mg/kg immunologicznie aktywnego chimerycznego przeciwciała anty-CD20 pochodzącego z transfektomy CHO (w sterylnym roztworze soli) cotygodniowo, w ciągu czterech kolejnych tygodni. Na zakończenie podawania oba zwierzęta znieczulono do pobrania szpiku; pobrano również biopsje węzłów chłonnych. Oba zestawy tkanek barwiono na obecność limfocytów B przy użyciu Leu 16 i analizowano cytometrią przepływową w oparciu o protokół opisany przez Ling, N. R. i in., B-cell and plasma celi antigens Leucocyte Typing III White Celi Differentation Antigens, A. J. McMichael, ed. (Oxford University Press, Oxford UK, 1987), str. 302.
Znakowanie Fluorescencyjne Przeciwciałami Populacji komórek Limfoidalnych.
Po usunięciu osocza, leukocyty przemywano dwukrotnie HBSS i zawieszano w wołowej surowicy płodowej (inaktywowanej ciepłem przy 56°C przez 30 min), o objętości równej usuniętemu osoczu. 0.1 ml objętości zawiesiny komórek dodano do każdej z sześciu 15 ml stożkowych probówek wirowniczych. Znakowane fluorescencyjnie przeciwciała monoklonalne specyficzne w stosunku do markerów powierzchniowych ludzkich limfocytów CD2 (AMAC, Westbrook, ME), CD20 (Becton Dickinson) i ludzkich IgM (Binding Site, San Diego, CA) dodano do trzech z probówek w celu identyfikacji populacji limfocytów T i B. Uprzednio, wszystkie odczynniki z powodzeniem sprawdzono w stosunku do odpowiednich antygenów małpich. Chimeryczne przeciwciało anty-CD20 związane z CD20 na powierzchni małpich limfocytów B mierzono w czwartej probówce przy użyciu poliklonalnych przeciwciał kozich przeciwko ludzkim IgG sprzężonych z fikoerytryną (AMAC). Odczynnik ten preadsorbowano na kolumnie z sefarozy sprzężonej z małpimi Ig w celu uniknięcia reakcji krzyżowej z małpią Ig, co umożliwiło specyficzne wykrycie i zmierzenie chimerycznych przeciwciał anty-CD20 związanych z komórkami. Piąta· probówka zawierała odczynniki anty-IgM i Anty-ludzkie IgG do oznaczenia podwójnie dodatnich populacji limfocytów' B. Szósta probówka nie zawierała żadnych przeciwciał i służyła do określenia autofluorescencji. Komórki inkubowano z przeciwciałami znakowanymi fluorescencyjnie przez 30 minut, odpłukano i utrwalono 0,5 ml buforu do utrwalania (0,15 M NaCl, 1% paraformaldehydu, pH 7.4) i analizowano na urządzeniu Becton Dickinson FACScan. Populacje limfocytów identyfikowano przez porównanie obrazów, przy rozproszeniu światła ' 1 na
175 557 wprost w stosunku do rozproszenia światła z boku, jako standardu używając nie znakowanych leukocytów. Wyizolowano całkowitą populację limfocytów przez wybramkowanie pozostałych komórek. Stąd pomiar fluorescencji uwzględniał wyłącznie zjawiska charakterystyczne dla limfocytów.
Usunięcie Limfocytów B Krwi Obwodowej
Nie było żadnej zauważalnej różnicy pomiędzy przeciwciałami produkowanymi przez CHO i SP2/, w efektywności usuwania limfocytów B in vivo, jednakże obserwowano lekki wzrost w odnowie limfocytów B, począwszy od siódmego dnia u małp którym podano chimeryczne przeciwciała uzyskane od transfektomy CHO przy poziomie dawki 1.6 mg/kg i 6.4 mg/kg, oraz u małp którym podano przeciwciało od SP2/0 w dawce 0.4 mg/kg. figury 9A, B i C przedstawiają wyniki uzyskane z badania anty-CD20: CHO i SP2/0, z figurą 9A odnoszącą się do poziomu dawki 0.4 mg/kg., figurą 9B odnoszącą się do poziomu dawki 1.6 mg/kg i figurą 9C odnoszącą się do poziomu dawki 6.4 mg/kg.
Jak to w sposób oczywisty wynika z figury 9, obserwowano dramatyczne zmniejszenie (>95%) poziomu limofcytów B krwi obwodowej po leczeniu, we wszystkich zakresach dawek, i poziomy te utrzymywały się przez siedem dni po przetoczeniu, po którym to czasie rozpoczynała się odnowa limfocytów B, i że czas rozpoczęcia odnowy był zależny od poziomu dawki.
W badaniu Chimeryczne anty-CD20: CHO, używano dziesięciokrotnie niższego dawkowania (0.01 mg/kg) w trakcie czterech codziennych iniekcji (dawka całkowita 0.04 mg/kg). Figura 10 przedstawia wyniki tego badania. Dawkowanie to usuwało populację limfocytów krwi obwodowej w 50% normalnych poziomów co określano bądź przeciwciałem przeciwko powierzchniowym IgM lub Leu 16. Wyniki wskazują, że wysycenie antygenu CD20 na powierzchni populacji limfocytów B nie zostało osiągnięte użyciem aktywnych immunologicznie chimerycznych przeciwciał anty-CD20 w stosowanej dawce w okresie stosowania, u naczelnych nie będących ludźmi; limfocyty B opłaszczone przeciwciałami wykrywane były w próbkach krwi podczas pierwszych trzech dni po rozpoczęciu leczenia. Jednakże siódmego dnia komórki opłaszczone przeciwciałami były nie wykrywalne. Tabela I podsumowuje wyniki wpływu pojedynczej i licznych dawek immunologicznie aktywnych chimerycznych przeciwciał anty-CD20 na populacje krwi obwodowej; warunkiem dla pojedynczej dawki było 6.4 mg/kg; dla dawki wielokrotnej było 0.4 mg/kg przez cztery kolejne dni (wyniki te uzyskano na małpach opisanych powyżej).
Tabela 1
POPULACJA KRWI OBWODOWEJ Z BADANIA C2B8 NA NACZELNYCH
Małpa Dawka Dzień CD2 Anty-Ludzkie
IgG
A 0.4 mg/kg przed podaniem 81.5 -
(4 dawki) 0 86.5 0.2
7 85.5 0.2
21 93.3 -
28 85.5 -
B 0.4 mg/kg przed podaniem 81.7 -
(4 dawki) 0 94.6 0.1
7 92.2 0.1-
21 84.9 -
28 84.1 -
C 6.4 mg/kg przed podaniem 77.7 0.0
(1 dawka) 7 85.7 0.1
21 86.7 -
28 76.7 -
D 6.4 mg/kg przed podaniem 85.7 0.1
(1 dawka) 7 94.7 0.1
21 85.2 -
28 85.9 -
175 557
Anty ludzkie IgG+
Małpa Anty Ludzkie IgM Leu-6 % Usunięcia Limfocytów B
A - 9.4 0
0.3 0.0 97
0.1 1.2 99
- 2.1 78
- 4.1 66
B - 14.8 0
0.2 0.1 99
0.1 0.1 99
- 6.9 53
- 87 41
C 0.2 17.0 0
0.1 0.0 99
- 14.7 15
- 8.1 62
D 0.1 14.4 0
0.2 0.0 99
- 9.2 46
- 6.7 53
* Populaq'a wybarwiona podwójnie co wskazuje na nadmiar limfocytów B opłaszczonych chimerycznym anty-CD20.
Dane zebrane w tabeli 1 wskazują, że usunięcie limfocytów B z krwi obwodowej w warunkach nadmiaru przeciwciała zachodzi szybko i efektywnie, niezależnie od pojedynczego czy wielokrotnego dawkowania. Dodatkowo, usunięcie obserwowano przez co najmniej siedem dni po ostatniej iniekcji, z częściową odnową limfocytów B obserwowaną dnia 21.
Tabela 2 podsumowuje efekt aktywnych immunologicznie chimerycznych przeciwciał anty-CD20 na populacje węzłów chłonnych przy zastosowaniu schematu podawania według tabeli 1 (4 dawki codzienne 0.4 mg/kg; jedna dawka rzędu 6.4 mg/kg); umieszczone są również wartości porównawcze dla normalnych węzłów chłonnych (małpa kontrolna, węzły pachowe lub pachwinowe) i normalnego szpiku (dwie małpy).
Tabela 2
POPULACJE KOMÓREK WĘZŁA CHŁONNEGO
Małpa Dawka Dzień CD2 Anty-Ludzkie
IGM
A 0,4 mg/kg 7 66.9 -
(4 dawki) 21 76.9 19.6
28 61.6 19.7
B 0.4 mg/kg 7 59.4 -
(4 dawki) 21 83.2 9.9
28 84.1 15.7
C 6.4 mg/kg 7 75.5 -
(4 dawki) 21 74.1 17.9
28 66.9 23.1
D 6.4 mg/kg 7 83.8 -
4 dawki) 21 74.1 17.9
28 84.1 12.8
175 557
Anty ludzkie IgG+
Małpa Anty Ludzkie IgM Leu-6 % Usunięcia Limfocytów B
A. 7.4 40.1 1
0,8 22.6 44
- 26.0 36
B 29.9 52.2 0
0.7 14.5 64
- 14.6 64
C 22.3 35.2 13
1.1 23.9 41
- 21.4 47
D 12.5 19.7 51
0.2 8.7 78
- 12.9 68
Tabela II (ciąg dalszy)
Anty-ludzkie IgG+ % usunięcia limfocytów
CD2 Anty-ludzkie IgM Anty-ludzkie IgM Leu-16
Normalne Węzły Chłonne
Kontrola 1
Pachowe 55.4 25.0 - 41.4 N.B.
Pachwinowe 52.1 31.2 - 39.5 N.B.
Normalny Szpik
Kontrola 1 65.3 19.0 - 11.4 N.B.
Kontrola 2 29.8 28.0 - 16.6 N.B.
Wyniki umieszczone w Tabeli II dowodzą efektywnego usuwania limfocytów B dla obu schematów dawkowania. Tabela II pokazuje dalej, że dla naczelnych nie będących ludźmi całkowite wysycenie limfocytów B w tkankach limfatycznych używając aktywnego immunologicznie chimerycznego przeciwciała anty-CD20 nie zostało osiągnięte; dodatkowo, komórki opłaszczone przeciwciałem obserwowane były przez siedem dni po podaniu, po czym następowało znaczne usuwanie limfocytów B z węzłów chłonnych, obserwowane dnia 14.
W oparciu o te dane, przeprowadzono badania pojedynczej Dużej Dawki Chimerycznego anty-CD20, przedewszystkim w celu określenia farmakologii/toksykologii. Inaczej, badanie przeprowadzono w celu zbadania jakiejkolwiek toksyczności związanej z podawaniem przeciwciała chimerycznego, jak również efektywności usuwania limfocytów B ze krwi obwodowej, węzłów chłonnych i szpiku. Dodatkowo, ponieważ dane w Tabeli II wskazują, że dla tego badania większość limfocytów B węzłów chłonnych usuwana była między 7 a 14 dniem po podaniu, cotygodniowy schemat dawkowania może dostarczyć bardziej przekonywujących wyników. Tabela III podsumowuje wyniki badania Dużej Dawki Chimerycznego anty-CD20.
175 557
Tabela 3
POPULACJE KOMÓREK WĘZŁÓW CHŁONNYCH I SZPIKU Populacje Limfocytów (%)
Małpa CD2 CD20a mIgM+anty-C2B8b C2B8c Dzieńd
Węzeł Chłonny Pachwinowy E 90.0 5.3 4.8 6.5 22
F 91.0 6.3 5.6 6.3 22
G 89.9 5.0 3.7 5.8 36
H 85.4 12.3 1.7 1.8 36
Szpik E 46.7 4.3 2.6 2.8 22
F 41.8 3.0 2.1 2.2 22
G 35.3 0.8 1.4 1.4 36
H 25.6 4.4 4.3 4.4 36
pod względem powierzchniowych IgM Dni po iniekcji całkowitej dawki 16,8 a Oznacza populację wyznakowaną Leu-16 b Oznacza populację wyznakowaną podwójnie, pozytywnie na IgM powierzchniowe i opłaszczone chimerycznymi przeciwciałami anty-CD20 c Oznacza całkowitą populaq'ę wyznakowaną na chimeryczne przeciwciała obejmujące komórki pozytywne i pojedynczo wyznakowane (IgM-powierzchniowe negatywne) mg/kg
Oba zwierzęta badane dnia 22 po zakończeniu podawania posiadały mniej niż 5% limfocytów B, w porównaniu z 40% w kontrolnych węzłach chłonnych (patrz, Tabela II, powyżej). Podobnie, w szpiku zwierząt poddanych działaniu chimerycznych przeciwciał anty-CD20 komórki pozytywne stanowiły mniej niż 3% w porównaniu z 11-15% u normalnych zwierząt, (patrz Tabela II, powyżej). U zwierząt badanych 36 dnia po zakończeniu podawania, jedno ze zwierząt (H) posiadało około 12% limfocytów B w węźle chłonnym i 4.4% limfocytów B w szpiku, podczas gdy drugie (G) posiadało około 5% limfocytów B w węźle chłonnym i 0,8% w szpiku- co stanowi wynik wskazujący na znaczne usunięcie limfocytów B.
Wyniki uzyskane w Przykładzie III. A. wskazują, m.in., że małe - dawki immunologicznie aktywnego chimerycznego przeciwciała anty-CD20 prowadzą do długotrwałego usunięcia limfocytów B z krwi obwodowej naczelnych. Dane wskazują również, że znaczące usunięcie populacji limfocytów B w węzłach chłonnych i szpiku uzyskano stosując powtarzane duże dawki przeciwciała. Długoczasowa obserwacja poczyniona na badanych zwierzętach -wskazuje, że nawet przy tak ciężkim usunięciu obwodowych limfocytów B podczas pierwszego tygodnia podawania, nie obserwowano żadnych negatywnych dla zdrowia skutków. Ponadto, obserwowano odnowę populacji limfocytów B, z czego wyciągnięto wniosek, że komórki macierzyste badanych naczelnych nie zostały uszkodzone.B. Badanie kliniczne C2B8
i. Próba kliniczna C2B8 CaB8 Uli: Badanie LeczeniaPojedynczą Dawką
Piętnastu pacjentów z histologicznie udokumentowanym nawrotem chłoniaka z limfocytów B poddano leczeniu C2B8 w badaniu klinicznym Fazy I/II. każdy z pacjentów otrzymał pojedynczą dawkę C2B8 w badaniu zwiększania dawki; Było trzech pacjentów na dawkę: 10 mg/m2, 50 mg/m2; 100 mg/m2; 250 mg/m2 i 500 mg/m2. Leczenie polegało na podaniu i. v. przez filtr 0.22 mikrona, C2B8 rozcieńczonego do objętości końcowej 250 ml lub maksymalnego stężenia 1mg/ml w normalnym roztworze fizjologicznym soli. Początkowe tempo podawania wynosiło 50 ml/h przez pierwszą godzinę; jeżeli nie obserwowano toksyczności tempo podawania zwiększano do maksimum 200 ml/h.
Toksyczność (określana przez lekarza) zawierała się od żadnej do gorączki, ponadto dwóch z pacjentów wykazywało toksyczność umiarkowaną a jeden poważną; wszyscy pacjenci ukończyli badanie. Limfocyty krwi obwodowej badano w celu zbadania wpływu C2B8 na limfocyty T i B. Podobnie, dla wszystkich pacjentów Limfocyty Krwi Obwodowej usunięto po infuzji C2B8 i usunięcie to utrzymywano przez dwa tygodnie.
175 557
U jednego z pacjentów (otrzymującego 100 mg/m C2B8) stwierdzono częściową poprawę po leczeniu C2B8 (redukcję większą niż 50% sumy wszystkich średnic utrzymująca się dłużej niż cztery tygodnie, podczas których nie powstają nowe guzy, jak również stare się nie powiększają) wszystkich zdolnych do mierzenia ubytków nowotworowych, przynajmniej jeden z pacjentów (otrzymujący 500 mg/m2) wykazywał poprawę mniejszą po leczeniu C2B8 (redukcja mniej niż 50% ale nie mniejsza niż 25% sumy dwóch dłuższych wymiarów wszystkich mierzalnych ognisk. Dla wygody prezentacji wyniki PBL pokazano na figurze 14; dane pacjenta wykazującego poprawę częściową (PR) pokazano na figurze 14 A; dane pacjenta wykazującego poprawę mniejszą (MR) pokazano na figurze 14B. Na figurze 14 pokazano następujące dane:Q= Limfocyty; O = limfocyty CD3+ (limfocyty T); = komórki CD20+;O= komórki CD19+;O = Kappa; = lambda i-0-= C2B8. Jak to wykazano, markery limfocytów B CD20 i CD19, Kappa i Lambda, zostały usunięte na okres dwóch tygodni; po czym następowała powolna redukcja liczby limfocytów T; powracający do poziomu podstawowego we względnie krótkim czasie.
ii. Próba kliniczna C2B8 Fazy I/II: Badanie Leczenia Dawką Wielokrotną
Do badania włączani są pacjenci z histologicznie potwierdzonym chłoniakiem z limfocytów B z mierzalną, postępującą chorobą; badanie podzielone jest na dwie części; w pierwszej w Fazie I składającej się z badania zwiększania dawki w celu scharakteryzowania toksyczności ograniczającej dawkę i oznaczenie poziomu tolerowanej aktywnej biologicznie dawki, grupy po trzech pacjentów otrzymają cotygodniowo infuzję i. v. z C2B8 w liczbie czterech. Dawka kumulatywna na każdym z trzech poziomów dawki wynosi: 500 mg/m2 (125 mg/m2/ podanie); 1000 mg/m2 (250 mg/m2/podanie; 1500 mg/m2 (375 mg/m2/podanie). Tolerowana biologicznie aktywna dawka jest zdefiniowana i będzie określona, jako najniższa dawka o tolerowanej toksyczności i odpowiedniej aktywności; w Fazie II, dodatkowi pacjenci otrzymają tolerowaną biologicznie aktywną dawkę z naciskiem położonym na oznaczenie aktywności czterech dawek C2B8.
TERAPIA POŁĄCZONA: C2B8 i Y2B8
Podejście terapeutyczne łączące C2B8 i Y2B8 badane było na mysim modelu xenogenicznym (myszy nu/nu, samice, w wieku około 10 tygodni) z użyciem guza limfoblastycznego z limfocytów B (guz Ramos'a). W celu porównania dodatkowe myszy otrzymały C2B2 i Y2B8.
Komórki guza Ramos'a (ATCC CRL 1596) hodowane były w pożywce RPMI1640 z dodatkiem 10% wołowej surowicy płodowej i glutaminy w temperaturze 37°C i 5% CO2. Guzy wywołano u dziewięciu myszy nagich około 7-10 tygodniowych, przez wstrzyknięcie podskórne 1,7x106 komórek Ramos w objętości 0.1 ml (HBSS) przy użyciu 1 ml strzykawki zaopatrzonej w igłę 25G. Wszystkie zabiegi na zwierzętach wykonywano w boksie laminarnym zaś klatki, podściółka, pasza i woda były autoklawowane. Komórki guza pasażowano przez wycinanie guza i przepuszczenie go przez sito 40; po czym komórki płukano dwukrotnie w lxHBSS (50 ml) i odwirowywanie przy 1300 RPM, zawieszanie komórek w lxHBSS. Komórki zostały zawieszone w lxHBSS w gęstości 10x106 komórek ml i zamrożone w -70°C.
Do doświadczenia komórki z kilku partii rozmrażano, odwirowywano (1300RPM) i przepłukiwano dwukrotnie lxHBSS. Komórki zawieszono w gęstości 2.0x106 komórek/ml. Około 9 do 12 myszom wstrzyknięto 0.1 ml zawiesiny komórek (s.c.) przy użyciu strzykawki 1 ml wyposażonej w igłę 25G; wstrzyknięcia wykonywano w lewy bok zwierzęcia, w środek tułowia. Guzy tworzyły się po około dwóch tygodniach. Guzy wycinano i poddawano obróbce jak to opisano powyżej. Badane myszy nastrzyknięto jak to opisano powyżej przy użyciu 1.67x106 komórek w 0.1 ml HBSS.
W oparciu o wstępne wyniki, określono, że użyte zostanie do tego badania 200 mg C2B8 i 100 miCi Y2B8. Dziewięćdziesiąt samic myszy nu/nu (około dziesięciotygodniowe) nastrzyknięto komórkami guza. W około dziesięć dni później 24 myszy wybrano do czterech grup badanych (po sześć w każdej) próbując zachować podobne wielkości guza w każdej z grup (średnia wielkość guza, wyrażona jako iloczyn długości i szerokości guza; wynosiła około 80 mm2. Poniższe grupy leczone były jak opisano drogą zastrzyków do żyły ogonowej przy użyciu strzykawki Hamiltona wyposażonej w igłę 25G:
175 557
A Roztwór fizjologiczny soli
B Y2B8 (100 miCi)
C C2B8 (200 mig) i
D Y2B8 (100 miCi) + C2B8 (200 mig)
Grupy otrzymujące C2B8 otrzymywały drugą iniekcję C2B8 (200 mig/mysz) siedem dni po pierwszej iniekcji. Pomiary guza wykonywano co dwa lub trzy dni.
Materiał do leczenia przygotowano w oparciu o poniższy protokół:
A. Przygotowanie Y2B8
Chlorek itru [90] (6 mCi) przeniesiono do polipropylenowej probówki i doprowadzono do pH 4.1-4.4 przy użyciu 2M octanu sodu wolnego od metali. 2B8-M.X-DtPa (0.3 mg w roztworze fizjologicznym soli: patrz powyżej przygotowanie 2B8-MX-DTPA) dodano i delikatnie mieszano przez wirowanie. Po 15 minutach inkubacji, reakcja była przerywana przez dodanie 0.05 objętości 20 mM EDTA i 0,05 objętości 2 M octanu sodu. Stężenie radioaktywności oznaczano przez rozcieńczenie 5 mil mieszaniny reakcyjnej w 2.5 ml lxPBS zawierającego 75 mg/ml HSA i 1 mM DTPA (bufor do przygotowywania); pomiar wykonywano przez oddanie 10 mil do 20 ml koktajlu scyntylacyjnego Ecolume. Pozostałą mieszaninę reakcyjną dodawano do 3.0 ml buforu do przygotowywania, filtrowano sterylnie, i przechowywano w temperaturze 2-8°C do momentu użycia. Aktywność właściwą obliczano (14 mCi/mg w momencie wstrzyknięcia) obliczona została przy użyciu stężenia radiaktywności i obliczonego stężenia białka, w oparciu o ilość przeciwciała dodanego do mieszaniny reakcyjnej. Radioaktywność związaną z białkiem oznaczono przy pomocy szybkiej chromtografii cienkowarstwowej. Wbudowywanie radioaktywności wynosiło 95%. Y2B8 rozcieńczano buforem do przygotowywania bezpośrednio przed użyciem, sterylnie filtrowano (końcowe stężenie radioaktywności wynosiło 1.0 mCi/mg).
B. Przygotowanie C2B8
C2B8 przygotowano tak jak to opisano powyżej. C2B8 dostarczono jako sterylny odczynnik w roztworze fizjologicznym soli w stężeniu 5 mg/ml. Bezpośrednio przed użyciem C2B8 rozcieńczano roztworem fizjologicznym soli do 2 mg/ml i filtrowano sterylnie.
C. Wyniki
W następstwie leczenia, wielkości guza wyrażona jak iloczyn długości i szerokości, pomiarów dokonywano w dni oznaczona na Figurze 1 (Y2B8 w stosunku do soli fizjologicznej); Figurze 2 (C2B8 w stosunku do soli fizjologicznej) i Figurze 3 (Y2B8 + C2B8 w stosunku do soli fizjologicznej).
Jak to zaznaczono na Figurze 3, połączenie Y2B8 z C2B8 wykazywało efekt niszczący na guza porównywalny z efektem wywieranym przez zarówno Y2B8 jak i C2B8.
III. ALTERNATYWNE STRATEGIE LECZNICZE
Alternatywne strategie lecznicze dostrzegalne w świetle opisanych przykładów są oczywiste. Jedna ze strategii wykorzystuje użycie dawki terapeutycznej C2B8 a następnie w ciągu tygodnia podanie połączenia 2B8 ze znakowanym radioaktywnie 2B8 (tzn. Y2B8); 2B8, C2B8 i np. Y2B8; czy C2B8 i np. Y2B8. Dodatkową strategią jest wykorzystanie znakowanego radioaktywnie C2B8 - strategia taka umożliwia wykorzystanie zalet aktywnej immunologicznie części C2B8 i korzyści płynących ze znacznika radioaktywnego. Najkorzystniejszym znacznikiem jest itr[90] o przedłużonym, dzięki C2B8, okresie półtrwania w krążeniu w stosunku do mysiego 2B8. Z powodu zdolności C2B8 do usuwania limfocytów B oraz korzyści płynących ze znacznika radioaktywnego. Najkorzystniejszą strategią alternatywną jest leczenie pacjenta przy pomocy C2B8 (w dawce pojedynczej bądź wielokrotnej) do momentu usunięcia prawie wszystkich lub wszystkich limfocytów B z obwodu. W następstwie tego powinno się użyć znakowanego radioaktywnie przeciwciała 2B8; z powodu usunięcia limfocytów B znakowane radioaktywnie 2B8 zwiększa szansę nakierowania na komórkę nowotworową. Najkorzystniejszym znacznikiem jest tu jod [131], na podstawie wyników opisanych w literaturze z użyciem tego znacznika (patrz, Kamiński). Wybór alternatywny uwzględnia użycie znakowanego radioaktywnie 2B8 (lub C2B8) w celu zwiększenia przepuszczalności guza, a następnie pojedyncze lub wielokrotne podanie C2B8; celem tej strategii jest zwiększyć szansę C2B8 na
175 557 osiągnięcie zarówno z zewnątrz jak i wnętrza masy guza. Dalsza strategia wymaga użycia leku chemioterapeutycznego w połączeniu z C2B8. Strategie takie obejmują leczenie tzw. wstrząsowe tzn. leczenie lekiem chemioterapeutycznym, następnie leczenie C2B8 i powtórzenie całego protokołu. Możliwe jest również, wstępne leczenie jedną lub wieloma dawkami C2B8, po czym leczenie chemioterapeutyczne. Najkorzystniejsze leki chemioterapeutyczne obejmują, choć nie są ograniczone do: cyklofosfamidu, doksorubicyny, winkrystyny i prednizonu, patrz, Armitage, J. O., i in., Cancer 50:1695 (1982), zamieszczone tu jako odnośnik.
Opisane alternatywne strategie terapeutyczne przedstawiono nie w celu ograniczenia wynalazku ale z powodu ich reprezenaatywności.
175 557
G. LISTA SEKWENCJI
INFORMACJE PODSTAWOWE (i) ZGŁASZAJCY: Darell Anderson, Nabil Hanna, John Leonard, Roland Newman And Mitchell Reff And William H. Rastetter (ii) TYTUŁ WYNALAZKU: ZASTOSOWANIE TERAPEUTYCZNE CHIMERYCZNYCH I ZNAKOWANYCH RADIOAKTYWNIE PRZECIWCIAŁ SKIEROWANYCH PRZECIWKO LUDZKIEMU ANTYGENOWI RÓŻNICOWANIA OGRANICZONEMU DO LUDZKICH LIMFOCYTÓW B, DO LECZENIA CHŁONIAKA Z LIMFOCYTÓW B.
(iii) LICZBA SEKWENCJI: 8 (iv) ADRES DO KORESPONDENCJI:
(A) ADRES: IDEO Pharmaceuticals Corporaoion
(B) ULICA: 1101 1 Torreanaa Radd
(C) MIASTO: Sa: Dieoo
(D) KRJJ: Saanj Zjednocooej Ameekki Półocnnej
(E) : 92101
(v) POSTAĆ AKCEPTOWANA PRZEZ KOMPUTER (A) RODZAJ NOŚNIKA : dyskietki, 3,,5 cala, 1.44 Mb (B) KOMPUTER : Macintosh (C) SYSTEM OPERAYYJNY: MS.DOS (D) OPROGRAMOWANIE: Microsoft WorS 5 0 (vi) DANE DOTYCZĄCE AKTUALNEGO ZGŁOSZENIA (A) NUMER APLIKACJL (B) DATA ZGŁOSZENIA (C) KLASYFIKACJA:
(viii) INFORMACJA O RZECZNIKU/PEŁNOMOCNIKU (A) NAZWISKO: Burgoon, Richard P.Jr.
(B) NUMER REJESTRACYJNY: 34,787 (C) NUMER SPRAWY (ix) INFORMACJA TELEKOMUNIKACYJNA.
(A) TELEFON: (619) 550-8500 (B) TELEFAX: (619) 550-8750
175 557 (2) INFORMACJA DLA IDENTYFIKATORA SEKW. NR 1.
(I) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 8540 (B) TYP: kwas nukleinowy (C) NICIOWOŚĆ: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: kolista (ii) TYP CZĄSTECZKI: DNA ( genomowy) (iii) HIPOTETYCZNIE: tak (vi) ANTYSENS: nie (ix) OPIS SEKWENCJI: IDENTYFIKATOR SEKW. NR 1
GACGTCGCGG CCGCTCTAGG CCTCCAAAAA AGCCTCCTCA CTACTTCTGG AATAGCTCAG eo
AGGCCGAGGC GGCCTCGGCC TCTGCATAAA TAAAAAAAAT TAGTCAGCCA TGGATGGGGC 420
GGAGAATGGG CGGAACTGGG CGGAGTTAGG GGCGGGATGG GCGGAGTTAG GGGCGGGACT 430
ATGGTTGCTG ACTAATTGAG ATGCATGCTT TGCATACTTC TGCCTGCTGG GGAGCCTGGG 240
GACTTTCCAC ACCTGGTTGC TGACTAATTG AGATGCATGC TTTGCATACT TCTGCCTGCT 300
GGGGAGCCTG GGGACTTTCC ACACCCTAAC TGACACACAT TCCACAGAAT TAATTCCCCT 300
AGTTATTAAT AGTAATCAAT TACGGGGTCA TTAGTTCATA GCCCATATAT GGAGTTCCGC 42Ó
GTTACATAAC TTACGGTAAA TGGCCCGCCT GGCTGACCGC CCAACGACCC CCGCCCATTG W
ACGTCAATAA TGACGTATGT TCCCATAGTA ACGCCAATAG GGACTTTCCA TTGACGTCAA 540
TGGGTGGACT ATTTACGGTA AACTGCCCAC TTGGCAGTAC ATCAAGTGTA TCATATGCCA 600
AGTACGCCCC CTATTGACGT CAATGACGGT AAATGGCCCG CCTGGCATTA TGCCCAGTAC
ATGACCTTAT GGGACTTTCC TACTTGGCAG TACATCTACG TATTAGTCAT CGCTATTACC 720
ATGGTGATGC GGTTTTGGCA GTACATCAAT GGGCGTGGAT AGCGGTTTGA CTCACGGGG^ no
TTTCCAAGTC TCCACCCCAT TGACGTCAAT GGGAGTTTGT TTTGGCACCA AAATCAACGG
GACTTTCCAA AATGTCGTAA CAACTCCGCC CCATTGACGC AAATGGGCGG TAGGCGTGTA
CGGTGGGAGG TCTATATAAG CAGAGCTGGG TACGTGAACC GTCAGATCGC CTGGAGACGC <360
CATCACAGAT CTCTCACCAT GAGGGTCCCC GCTCAGCTCC TGGGGCTCCT GCTGCTCTGG 402&
CTCCCAGGTG CACGATGTGA TGGTACCAAG GTGGAAATCA AACGTACGGT GGCTGCACCA 40$O
TCTGTCTTCA TCTTCCCGCC ATCTGATGAG CAGTTGAAAT CTGGAACTGC CTCTGTTGTG
TCCCTGCTGA ATAACTTCTA TCCCAGAGAG GCCAAAGTAC AGTGGAAGGT GGATAACGCC 4200
CTCCAATCGG GTAACTCCCA GGAGAGTGTC ACAGAGCAGG ACAGCAAGGA CAGCACCTAC 4260
175 557
AGCCTCAGCA GCACCCTGAC GCTGAGCAAA GCAGACTACG AGAAACACAA AGTCTACGCC 1320
TGCGAAGTCA CCCATCAGGG CCTGAGCTCG CCCGTCACAA AGAGCTTCAA CAGGGGAGAG 1380
TGTTGAATTC AGATCCGTTA ACGGTTACCA ACTACCTAGA CTGGATTCGT GACAACATGC 1440
GGCCGTGATA TCTACGTATG ATCAGCCTCG ACTGTGCCTT CTAGTTGCCA GCCATCTGTT 1500
GTTTGCCCCT CCCCCGTGCC TTCCTTGACC CTGGAAGGTG CCACTCCCAC TGTCCTTTCC 1560
TAATAAAATG AGGAAATTGC ATCGCATTGT CTGAGTAGGT GTCATTCTAT TCTGGGGGGT 1620
GGGGTGGGGC AGGACAGCAA GGGGGAGGAT TGGGAAGACA ATAGCAGGCA TGCTGGGGAT 1680
GCGGTGGGCT CTATGGAACC AGCTGGGGCT CGACAGCTAT GCCAAGTACG CCCCCTATTG 1740
ACGTCAATGA CGGTAAATGG CCCGCCTGGC ATTATGCCCA GTACATGACC TTATGGGACT 1800
TTCCTACTTG GCAGTACATC TACGTATTAG TCATCGCTAT TACCATGGTG ATGCGGTTTT 1660
GGCAGTACAT CAATGGGCGT GGATAGCGGT TTGACTCACG GGGATTTCCA agtctccacc 1920
CCATTGACGT CAATGGGAGT TTGTTTTGGC ACCAAAATCA ACGGGACTTT CCAAAATGTC 1980
GTAACAACTC CGCCCCATTG ACGCAAATGG GCGGTAGGCG TGTACGGTGG GAGGTCTATA 2C4:
TAAGCAGAGC TGGGTACGTC CTCACATTCA GTGATCAGCA CTGAACACAG ACCCGTCGAC 2100
ATGGGTTGGA GCCTCATCTT GCTCTTCCTT GTCGCTGTTG CTACGCGTGT CGCTAGCACC 2163
AAGGGCCCAT cggtcttccc CCTGGCACCC TCCTCCAAGA GCACCTCTGG GGGCACAGCG 2220
GCCCTGGGCT GCCTGGTCAA GGACTACTTC CCCGAACCGG TGACGGTGTC GTGGAACTCA 22 8 0
GGCGCCCTGA CCAGCGGCGT GCACACCTTC CCGGCTGTCC TACAGTCCTC AGGACTCTAC 22 4 3
TCCCTCAGCA GCGTGGTGAC CGTGCCCTCC AGCAGCTTGG GCACCCAGAC CTACATCTGC 2402
AACGTGAATC ACAAGCCCAG CAACACCAAG GTGGACAAGA AAGCAGAGCC CAAATCTTGT 246 2-
GACAAAACTC ACACATGCCC ACCGTGCCCA GCACCTGAAC TCCTGGGGGG ACCGTCAGTC 2Ξ20
TTCCTCTTCC CCCCAAAACC CAAGGACACC CTCATGATCT CCCGGACCCC TGAGGTCACA 2580
TGCGTGGTGG TGGACGTGAG CCACGAAGAC CCTGAGGTCA AGTTCAACTG GTACGTGGAC
GGCGTGGAGG TGCATAATGC CAAGACAAAG CCGCGGGAGG AGCAGTACAA CAGCACGTAC 2700
CGTGTGGTCA GCGTCCTCAC CGTCCTGCAC CAGGACTGGC TGAATGGCAA GGAGTACAAG 27 60·
TGCAAGGTCT CCAACAAAGC CCTCCCAGCC CCCATCGAGA AAACCATCTC CAAAGCCAAA 252 0
GGGCAGCCCC GAGAACCACA GGTGTACACC CTGCCCCCAT CCCGGGATGA GCTGACCAAG 288 0
AACCAGGTCA GCCTGACCTG CCTGGTCAAA GGCTTCTATC CCAGCGACAT CGCCGTGGAG 2 5 4 0
TGGGAGAGCA ATGGGCAGCC GGAGAACAAC TACAAGACCA CGCCTCCCGT GCTGGACTCC 3 0' o
GACGGCTCCT TCTTCCTCTA CAGCAAGCTC ACCGTGGACA AGAGCAGGTG GCAGCAGGGG 2060
AACGTCTTCT CATGCTCCGT GATGCATGAG gctctgcaca ACCACTACAC GCAGAAGAGC 3120
CTCTCCCTGT CTCCGGGTAA ATGAGGATCC GTTAĄCGGTT ACCAACTACC TAGACTGGAT 2180
175 557
TCGTGACAAC ATGCGGCCGT ' GATATCTACG 1 TATGATCAGC ' CTCGACTGTG , CCTTCTAGTT 3240
GCCAGCCATC • TGTTGTTTGC CCCTCCCCCG TGCCTTCCTT ' GACCCTGGAA GGTGCCACTC 3300
CCACTGTCCT TTCCTAATAA . AATGAGGAAA TTGCATCGCA TTGTCTGAGT AGGTGTCATT 3360
CTATTCTGGG GGGTGGGGTG GGGCAGGACA GCAAGGGGGA GGATTGGGAA GACAATACCA 3420
GGCATGCTGG GGATGCGGTG GGCTCTATGG AACCAGCTGG GGCTCGACAG CGCTGGATCT 3480
CCCGATCCCC agctttgctt CTCAATTTCT TATTTGCATA ATGAGAAAAA AAGGAAAATT 3540
AATTTTAACA CCAATTCAGT AGTTGATTGA GCAAATGCGT TGCCAAAAAG gatgctttag 3600
AGACAGTGTT CTCTGCACAG ATAAGGACAA ACATTATTCA GAGGGAGTAC CCAGAGCTGA 3660
GACTCCTAAG CCAGTGAGTG GCACAGCATT CTAGGGAGAA ATATGCTTGT CATCACCGAA 3720
GCCTGATTCC GTAGAGCCAC ACCTTGGTAA GGGCCAATCT GCTCACACAG GATAGAGAGG 3780
GCAGGAGCCA GGGCAGAGCA TATAAGGTGA GGTAGGATCA GTTGCTCCTC ACATTTGCTT 3840
CTGACATAGT TGTGTTGGGA GCTTGGATAG CTTGGACAGC TCAGGGCTGC GATTTCGCGC 3900
CAAACTTGAC GGCAATCCTA GCGTGAAGGC TGGTAGGATT TTATCCCCGC TGCCATCATG 3 9 6 C
GTTCGACCAT TGAACTGCAT CGTCGCCGTG TCCCAAAATA TGGGGATTGG CAAGAACGGA 4020
GACCTACCCT GGCCTCCGCT CAGGAACGAG TTCAAGTACT TCCAAAGAAT GACCACAACC 4080
TCTTCAGTGG AAGGTAAACA GAATCTGGTG ATTATGGGTA GGAAAACCTG gttctccatt 414 0
CCTGAGAAGA ATCGACCTTT AAAGGACAGA ATTAATATAG TTCTCAGTAG AGAACTCAAA 4 2 00
GAACCACCAC GAGGAGCTCA TTTTCTTGCC AAAAGTTTGG ATGATGCCTT AAGACTTATT 4 2 6 0
GAACAACCGG AATTGGCAAG TAAAGTAGAC ATGGTTTGGA TAGTCGGAGG CAGTTCTGTT 432C
TACCAGGAAG CCATGAATCA ACCAGGCCAC CTTAGACTCT TTGTGACAAG GATCATGCAG 4 3 80
GAATTTGAAA GTGACACGTT TTTCCCAGAA ATTGATTTGG GGAAATATAA ACTTCTCCCA 4 4 40
GAATACCCAG GCGTCCTCTC TGAGGTCCAG GAGGAAAAAG GCATCAAGTA TAAGTTTGAA 4 5 00
GTCTACGAGA AGAAAGACTA ACAGGAAGAT gctttcaagt TCTCTGCTCC CCTCCTAAAG 4 5601
CTATGCATTT TTATAAGACC ATGGGACTTT TGCTGGCTTT AGATCAGCCT CGACTGTGCC 4620
TTCTAGTTGC CAGCCATCTG TTGTTTGCCC CTCCCCCGTG CCTTCCTTGA CCCTGGAAGG 4680
TGCCACTCCC ACTGTCCTTT CCTAATAAAA TGAGGAAATT GCATCGCATT GTCTGAGTAG 4 7 4 0
GTGTCATTCT ATTCTGGGGG GTGGGGTGGG GCAGGACAGC AAGGGGGAGG ATTGGGAAGA 4800
CAATAGCAGG CATGCTGGGG ATGCGGTGGG CTCTATGGAA ccagctgggg CTCGAGCTAC 4860
TAGCTTTGCT TCTCAATTTC TTATTTGCAT AATGAGAAAA AAAGGAAAAT TAATTTTAAC 492C
ACCAATTCAG TAGTTGATTG AGCAAATGCG TTGCCAAAAA GGATGCTTTA GAGACAGTGT 4980
TCTCTGCACA ' GATAAGGACA AACATTATTC AGAGGGAGTA CCCAGAGCTG AGACTCCTAA 5040
175 557
GCCAGTGAGT GGCACAGCAT TCTAGGGAGA AATATGCTTG TCATCACCGA AGCCTGATTC 5100
CGTAGAGCCA CACCTTGGTA AGGGCCAATC TGCTCACACA GGATAGAGAG GGCAGGAGCC 5160
AGGGCAGAGC ATATAAGGTG AGGTAGGATC AGTTGCTCCT CACATTTGCT TCTGACATAG 5220
TTGTGTTGGC AGCTTGGATC GATCCTCTAT GGTTGAACAA GATGGATTGC ACGCAGGTTC 5280
TCCOGCCGCT TCOCTGGAGA GCCTATTCGG CTATGACTGG GCACAACACA CAATCGGCTG 5340
CTCTGATGCC GCCGTGTTCC GGCTGTCAGC GCAGGGGCGC CCGGTTCTTT TTGTCAAGAC 5400
CGACCTGTCC GGTGCCCTGA ATGAACTGCA GGACGAGGCA GCGCGGCT-AT CGTGGCTGGC 5460
CACGACGGGC gttccttgcg CAGCTGTGCT CGACCTTGTC ACTGAAGCGG GAAGGGACTG 5520
GCTOCTATTG GGCGAAGTGC CGGGGCAGGA TCTCCTGTCA TCTCACCTTG CTCCTGCCGA 5580
GAAAGTATCC ATCATGGCTG atgcaatgcg GCOGCTGCAT ACGCTTGATC CGGCTACCTG 564G
CCCATTCGAC CACCAAGCGA AACATCGCAT CGAGCGAGCA CGTACTCGGA 7GGAAGCCGG 57CC
TCTTGTCGAT CAGGATGATC TGGACGAAGA GCATCAGGGG CTCGCGCCAG CCGAACTGTT 5760
CGCCAGGCTC AAGGCGCGCA TGCCCGACGG CGAGGATCTC GTCGTGACCC ATGGCGATGC 5820
CTGCTTGCCG AATATCATGG TGGAAAATGG CCGCITTTCT GGATTCATCG ACTGTGGCCG 5880
GCTOOGTGTG GCGGACCGCT ATCAGGACAT AGCGTTGGCT ACCCGTGATA TTGCTGAAGA 5940
GCTTGGCGGC GAATGGGCTG accgcttcct CGTOCTTTAC GGTATCGCCG CTCCCGATTC 6000
GCAOCGCATC GCCTTCTATC GCCTTCTTGA CGAGTTCTTC tgagcgggac TCTGGGGTTC 6080
GAAATGACCG ACCAAGCGAC GCCCAACCTG ccatcacgag ATTTCGATTC CACCGCCGCC 6120
TTCTATaAAA GGTTGCGCTT CGGAATCGTT TTCCGGOACG CCGGCTGGAT GATCCTCCAG 6180
CGCGGOGATC TCATGCTGGA gttcttcgcc CACCCCAACT TGTTTATTGC AGCTTATAAT 6240
GGTTACAAAT AAAGCAATAG CATCACAAAT TTCACAAATA AAGCATTTTT TTCACTGCAT 6300
TCTAGTTGTG GTTTGTCCAA ACTCATCAAT CTATCTTATC ATGTCTGGAT CGCGGCCGCG 6360
ATCCCGTCGA GAGCTTGGCG TAATCATGGT CATAGCTGTT TCCTGTGTGA AATTGTTATC 6420
CGCTCACAAT TCCACACAAC ATACGAGCCG GAAGCATAAA GTGTAAAGCC TGGGGTGCCT 6480
AATGAGTGAG CTAACTCACA TTAATTGCGT TGCGCTCACT GCCCGCTTTC CAGTCGGGAA 6540
ACCTGTCGTG CCAGCTGCAT TAATGAATCG GCCAACGCGC GGGGAGAGGC GGTTTGCGTA 6630
TTGGGCGCTC TTCCGCTTCC TCGCTCACTG ACTCGCTGCG CTCGGTCGTT CGGCTGCGGC 6660
GACCCGTATC AGCTCACTCA AAGaCGGTAA TACGGTTATC CACAGAATCA GGGGATAACG 6720
CAGaAAAGAA CATCTGAGCA aaaggccagc AAAACCCCAG GAACCGTAAA AAGGCCGCGT 6780
TGCTOGCGTT TTTCCATAGG CTCCGCCCCC CTGACGAGCA TCACAAAAAT CGACGCTCAA 6840
CTCAGAGGTG GCGAAACCCG ACAGGACTAT AAAGATACCA GOCGTTTCCC CCTGGAAGCT 6560
CCCTCGTGCG CTCTCCTGTT CCGACCCTGC CGCTTACCGG ATACCTGTCC GCCTTTCTCC 6560
175 557
CBBCGGGLAG CCTOGCCCTT TCTCAATGCT CLGCCTCTLG OTATCTCAGT ΤΩΟΟΤΟΊΆΟΟ 7020
TCGTTCOCTC C^O^^GOJGC TOTOTOCACO ALCCCCCCGT TCAGGGCGLC COCTOCOCCT 7080
TAT^O^AA CTATCOTCTT GAOTCCALGC CGGTLAGLCA CGACTTATCO CCACTOGCAG 7140
CAGCCACTaa BLACAGGATB AOCAOLGGOL OOTATOTAOG CGOI^^GA O^OTTCTTGA 7200
AGTOOTOGCC TLACTLCGOC TACACTLOLA TOOTATCTOC Od^OdGA 7260
LOCCLO1TLC CTTCGOALLA AGAGTTGOTA GCTCTTGATC COOCALLCLA ACCLGCGC1G 7320
OTAOCOOTOO tttttttott TGCAAGCAGC AGATTACOCG CLGALLLLAL OGA^^AKO 7 36 C
aagatccttt OATCTITTCT ACOGGOTCTO ACOCTCAGTO OLLCOLALLC TCLGGTTLAG 7 4 4 0
OOATTTTGOT CATOAGATTA TCLAALAOOA TCTTCACCTA OATCCTTTTA AATTLAALAT 7500
GLLG,BBBBLA LTCLATGTAL AOTATATATO LOTALLCTTG TLCCLATOCT 7560
TLATCLOTOL GGCACCTATC TCAGCGATCT OTCTATTTCG TTCLTCCATL OTTOCCTOAC 7620
TCCCCGTCCB GTAGATAACT LCOLTACGGO A0OOCTTLCC LTC10GCGCG AOTGCTGCLA 7660
TGATACCGCG LGLCCCLCGC TOLCCGGCTC CA^ATITATC LOCLLTLLAC CLGGCLOGCG 7740
0.AL00CCCCL OCGCLGALOT GCTCCTGCLA CITTATCCGC GTCCLTGCLG TCTAT1ALTT 7600
GTTGCCGOGA LOGTAGAOTL AOTAGTTCGC GAGTTLA1LG TTTGCGCAAC ottgttgcca 7860
TTOCTLGLCO CATCGTOGTO TCACGCTCGT COITTOOTAT OO^^TTCATTC LGCTCGG0T1 7920
CCCLACGLBC AAGGCGAGTT LCLTOATGGC CCATOTTOTO GAALALLOCG OTTAOCTCCT 79S0
TCCCTCCTCC OATCOTTOTC LGAAGTALCT TOOCCGCAOT GTTATCACTC λT0GT1L10C 8040
GAGO^^TO^A. TA^TTCTCTT ACTOTCATGC CATCCGTLAG ATGCTTITCT OTGACTOGTG 6100
LGBLCBCLAC ^tAGrCATTC TOAOALTLGT OTATOCOOCG ACCG^GTTOC TCTTOCCCOO 8160
CGTCALTLCG GGArAATACC GGOCCACATL Ο^Ο^^ΤΙ ,LAALGTGCTC λTCLTTOGLL 8220
ALCaTTCBBC GGGGCGAALL GTCTGLLGOL TCTTACCCCT OTTO^A^C LCTTCGLTGT 8260
ALCCCLCBGG TGGLGGCLAC TOATCTTCAG TTTCACCLOC OTTTCTGGGT 8340
OLOCLAAAAC A00AL0GCAL ^TGCCGCAA LALLOOOLLT ^ΟΟΟ^ΟΜ^ COGAA^TOTT 8400
OAATLCTCAT ACTCTTCCTT TTIC^lATATT LTTGLLOCLT Τ^Ι^ΟΟ-Οΐ TATTOTCTCA 8460
BGAGCGGATA GATATTTGLA TGTLTTTLOL LALLTALLCL .^^000011 CCOCOCLCLT 8520
BBCGCGGLAL. L0ToCGLGCT 8540
(3) INFORMACJA DLA IDENTYFIKATORA SEKW. NR 2.
(I) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI (A) DŁUGOŚĆ: 9209 casad
175 557 (B) TYP: kwas nukleinowy (C) NICIOWOŚĆ: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: kolista (ii) TYP CZĄSTECZKI: DNA ( genomowy) (iii) HIPOTETYCZNIE: tak (vi) ANTYSENS : nie (ix) OPIS EKKWNCCJ liIDNNYYFIAATOREKKW. NR 2
GACGTCGCGG CCGCTCTAGG CCTCCAAAAA AGCCTCCTCA CTACTTCTGG AATAGCTCAG 60
AGGCCGAGGC GGCCTCGGCC TCTGCATAAA TAAAAAAAAT TAGTCAGCCA TGCATGGGGC 120
GGAGAATGGG CGGAACTGGG CGGAGTTAGG GGCGGGATGG GCGGAGTTAG GGGCGGGACT 180
ATGGTTGCTG ACTAATTGAG ATGCATGCTT TGCATACTTC TGCCTGCTGG GGAGCCTGGG 240
GACTTTCCAC ACCTGGTTGC TGACTAATTG AGATGCATGC TTTGCATACT TCTGCCTGCT 300
GGGGAGCCTG GGGACTTTCC ACACCCTAAC TGACACACAT TCCACAGAAT TAATTCCCCT 360
AGTTATTAAT AGTAATCAAT TACGGGGTCA TTAGTTCATA GCCCATATAT GGAGTTCCGC 420
GTTACATAAC TTACGGTAAA TGGCCCGCCT GGCTGACCGC CCAACGACCC CCGCCCATTG 480
ACGTCAATAA TGACGTATGT TCCCATAGTA ACGCCAATAG GGACTTTCCA TTGACGTCAA 540
TGGGTGGACT ATTTACGGTA AACTGCCCAC TTGGCAGTAC ATCAAGTGTA TCATATGCCA 600
AGTACGCCCC CTATTGACGT CAATGACGGT AAATGGCCCG CCTGGCATTA TGCCCAGTAC 660
ATGACCTTAT GGGACTTTCC TACTTGGCAG TACATCTACG TATTAGTCAT CGCTATTACC 720
ATGGTGATGC ggttttggca GTACATCAAT GGGCGTGGAT AGCGGTTTGA CTCACGGGGA 780
TTTCCAAGTC TCCACCCCAT TGACGTCAAT GGGAGTTTGT TTTGGCACCA AAATCAACGG 840
GACTTTCCAA AATGTCGTAA CAACTCCGCC CCATTGACGC AAATGGGCGG TAGGCGTGTA 900
CGGTGGGAGG TCTAiTATAAG CAGAGCTGGG TACGTGAACC GTCAGATCGC CTGGAGACGC 960
CATCACAGAT CTCTCACTAT GGATTTTCAG GTGCAGATTA TCAGCTTCCT GCTAATCAGT 1020
GCTTCAGTCA TAATGTCCAG AGGACAAATT GTTCTCTCCC AGTCTCCAGC AATCCTGTCT 1080
GCATCTCCAG GGGAGAAGGT CACAATGACT TGCAGGGCCA GCTCAAGTGT AAGTTACATC 1140
CACTGGTTCC AGCAGAAGCC AGGATCCTCC CCCAAACCCT GGATTTATGC CACATCCAAC 1200
CTGGCTTCTG GAGTCCCTGT TCGCTTCAGT GGCAGTGGGT CTGGGACTTC TTACTCTCTC 12 60
ACAATCAGCA GAGTGGAGGC TGAAGATGCT GCCACTTATT ACTGCCAGCA GTGGACTAGT 1320
AACCCACCCA CGTTCGGAGG GGGGACCAAG CTGGAAATCA AACGTACGGT GGCTGCACCA 1380
TCTGTCTTCA TCTTCCCGCC ATCTGATGAG CAGTTGAAAT CTGGAACTGC CTCTGTTGTG 14 4 0
175 557
TGCCTGCTGA ATAACTTCTA TCCCAGAGAG GCCAAAGTAC AGTGGAAGGT 1 GGATAACGCC 1500
CTCCAATCGG GTAACTCCCA GGAGAGTGTC ACAGAGCAGG ACAGCAAGGA CAGCACCTAC 1560
AGCCTCAGCA GCACCCTGAC GCTGAGCAAA GCAGACTACG AGAAACACAA AGTCTACGCC 1620
TGCGAAGTCA CCCATCAGGG CCTGAGCTCG CCCGTCACAA AGAGCTTCAA CAGGGGAGAG 1680
TGTTGAATTC AGATCCGTTA ACGGTTACCA ACTACCTAGA CTGGATTCGT GACAACATGC 1740
GGCCGTGATA TCTACGTATG ATCAGCCTCG ACTGTGCCTT CTAGTTGCCA GCCATCTGTT 1800
GTTTGCCCCT CCCCCGTGCC TTCCTTGACC CTGGAAGGTG CCACTCCCAC TGTCCTTTCC 1860
TAATAAAATG AGGAAATTGC ATCGCATTGT CTGAGTAGGT GTCATTCTAT TCTGGGGGGT 1920
GGGGTGGGGC AGGACAGCAA GGGGGAGGAT TGGGAAGACA ATAGCAGGCA TGCTGGGGAT 1980
GCGGTGGGCT CTATGGAACC AGCTGGGGCT CGACAGCTAT GCCAAGTACG CCCCCTATTG 2040
ACGTCAATGA CGGTAAATGG CCCGCCTGGC ATTATGCCCA GTACATGACC TTATGGGACT 2100
TTCCTACTTG GCAGTACATC TACGTATTAG TCATCGCTAT TACCATGGTG ATGCGGTTTT 2160
GGCAGTACAT CAATGGGCGT GGATAGCGGT TTGACTCACG GGGATTTCCA AGTCTCCACC 2220
CCATTGACGT CAATGGGAGT TTGTTTTGGC ACCAAAATCA ACGGGACTTT CCAAAATGTC 2280
GTAACAACTC CGCCCCATTG ACGCAAATGG GCGGTAGGCG TGTACGGTGG GAGGTCTATA 2340
TAAGCAGAGC TGGGTACGTC CTCACATTCA GTGATCAGCA CTGAACACAG ACCCGTCGAC 2 4 00
ATGGGTTGGA GCCTCATCTT GCTCTTCCTT GTCGCTGTTG CTACGCGTGT CCTGTCCCAG 2460
gtacaactGc AGCAGCCTGG GGCTGAGCTG GTGAaAGCCTG GGGCCTCAGT GAAGATGTCC 2520
TGCAAGGCTT CTGGCTACAC ATTTACCAGT TACAATATGC ACTGGGTAAA ACAGACACCT 2580
GGTCGGGGCC TGGAATGGAT TGGAGCTATT TATCCCGGAA ATGGTGATAC TTCCTACAAT 2 64 0
CAGAAGTTCA AAGGCAAGGC CACATTGACT GCAGACAAAT CCTCCAGCAC AGCCTACATG 2 7 00
CAGCTCAGCA GCCTGACATC TGAGGACTCT GCGGTCTATT ACTGTGCAAG ATCGACTTAC 276C
TACGGCGGTG ACTGGTACTT CAATGTCTGG GGCGCAGGGA CCACGGTCAC CGTCTCTGCA 2820
GCTAGCACCA AGGGCCCATC GGTCTTCCCC CTGGCACCCT CCTCCAAGAG CACCTCTGGG 2880
GGCACAGCGG CCCTGGGCTG CCTGGTCAAG GACTACTTCC CCGAACCGGT GACGGTGTCG 2940
TGGAACTCAG GCGCCCTGAC CAGCGGCGTG CACACCTTCC CGGCTGTCCT ACAGTCCTCA 3000
GGACTCTACT CCCTCAGCAG CGTGGTGACC GTGCCCTCCA GCAGCTTGGG CACCCAGACC 3060
TACATCTGCA ACGTGAATCA CAAGCCCAGC AACACCAAGG TGGACAAGAA AGCAGAGCCC 312C
aaatcttgtg ACAAAACTCA CACATGCCCA CCGTGCCCAG CACCTGAACT CCTGGGGGGA 318 0
CCGTCAGTCT TCCTCTTCCC CCCAAAACCC AAGGACACCC TCATGATCTC CCGGACCCCT 3240
GAGGTCACAT GCGTGGTGGT GGACGTGAGC CACGAAGACC CTGAGGTCAA GGrTCAACTGG 3300
TACGTGGACG GCGTGGAGGT GCATAATGCC AAGACAAAGC CGCGGGAGGA GCAGTACAAC 3360
175 557
AGCACGTACC GTGTGGTCAG CGTCCTCACC GTCCTGCACC AGGACTGGCT GAATGGCAAG 3420
GAGTACAACT GCAAGGTCTC caacaaagcc CTCCCAGCCC CCATCGAGAA AACCATCTCC 3480
AAAGCCAAAG GGCAGCCCCG agaaccagag GTOTACACCC TGCCCCCATC CCGGGATGAG 3540
CTGACCAACA ACCAGCTCAG CCTGACCTGC CTGGTCAAAG GGTTCTATCC CAGCGACATC 3600
GCCGTGGAGT GCGAGAGCAA TGGGCAGCCG GAGAACAACT ACAAGACCAC GCCTCCCGTG 3660
CTGGACTCCG ACGGCTCCTT CTTCCTCTAC AGCAAGCTCA CCGTGGACAA GAGCAGGTGG 3720
CAGCACGGGA ACGTCTTCTC ATGCTCCGTG ATGCATGAGG CTCTGCACAA CCACTACACG 3780
CAGAAGAGCC TCTCCCTGTC TCCGGGTAAA TGAGGATCCG TTAACGGTTA CCAACTACCT 3840
agactggatt CGTGACAACA TGCGGCCGTG ATATCTACGT ATCATCAGCC TCGACTGTGC 3900
CTTCTACTTG CCAGCCATCT GTTGTTTGCC CCTCCCCCGT gccttccttg ACCCTGGAAG 3960
GTGCCACTCC CACTGTCCTT TCCTAATAAA ATGAGGAAAT TGCATCGCAT TGTCTGAGTA 4020
GGTGTCATTC TATTCTGGGG GGTGGGGTGG GGCAOGACAG CWGGGGGAG GATTGGGAAG 4080
ACAATAGCAG GCATGCTGGG GATGCGGTGG GCTCTATGGA ACCAGCTGGG GCTCGACAGC 4140
GCTGGATCTC CCGATCCCCA GCTTTGCTTC TCAATTTCTT ATTTGCATAA TGAGAAAAAA 4200
AGGAAAATTA attttaacac CAATTCAGTA GTTGATTCAG CAAATGCGTT GCCAAAAAGG 4260
ATGCTTTAGA GACAGTGTTC TCTGCACAGA TAAGGACAAA CATTATTCAG AGGGAGTACC 4320
CAGAGCTGAG ACTCCTAAGC CAGTGAGTGG CACAGCATTC TAGGGAGAAA TATGCTTGTC 4380
ATCACCGAAG CCTGATTCCG TAGAGCCACA CCTTGGTAAG GGCCAATCTG CTCACACAGG 4440
atagagaggg CAGGAGCCAG aaCAGAGCAT ATAAGGTGAG GTAGGATCAG TTGCTCCTCA 4500
CATTTCCTTC TGACATAGTT GTGTTGGGAG CTTGGATAGC TTGGACAGCT CAGGGCTGCG 4560
ATTTCGCGCC AAACTTGACG GCAATCCTAG CGTGAAGGCT GGTAGCATTT TATCCCCGCT 4620
GCCATCATGG TTCGACCATT GAACTGCATC GTCGCCCTCT CCCAAAATAT GOGGATTGGC 4600
AAGAACGGAG ACCTACCCTG gcctccgctc AGGAACGAGT TCAAGTACTT CCAAAGAATG 474C
ACCACAACCT CTTCAGTGGA ACGTAAACAG AATCTGGTGA TTATGGGTAG GAAAACCTGG 4800
TTCTCCATTC CTGAGAAGAA TCGACCTTTA AAGGACAGAA TTAATATAGT TCTCACTAGA 4860
GAACTCAAAG AACCACCACG AGGAGCTCAT TTTCTTGCCA AAAGTTTGGA TGATGCCTTA 4920
AGACTTATTG AACAACCGGA attggcaagt AAACTAGACA TGGTTTGGAT ACTCGGAGGC 4980
AGTTCTGTTT ACCAGGAAGC CATGAATCAA CCAGGCCACC TTAGACTGTT TGTGACAAGG 5040
ATCATGCAGG aatttgaaag TGACACGTTT TTCCCAGAAA TTGATTTGGG GAAATATAAA 510C
CTTCTCCCAG AATACCCAGG CGTCCTCTCT GAGGTCCAGG AGGAAAAAGG CATCAAGTAT 516C
AAGTTTGAAG TCTACGAGAA GAAA3ACTAA CAGGAAGATG CTTTCAAGTT CTCTGCTCCC 5220
175 557
CTCCTAAAGC TATGCATTTT TATAAGACCA TGGGACTTTT GCTGGCTTTA GATGAGGGTC 5280
GACTGTGCCT TCTAGTTGCC AGCCATCTGT TGTTTGCCCC TCCCCCGTGC CTTCCTTGAC 5340
CCTGGAAGGT GCCACTCCCA CTGTCCTTTC CTAATAAAAT GAGGAAATTG CATCGCATTG 5400
TCTGAGTAGG TGTCATTCTA TTCTGGGGGG TGGGGTGGGG CAGGACAGCA AGGGGGAGGA 5460
TTGGGAAGAC AATAGCAGGG ATGCTGGGGA TGCGGTGGGC TCTATGGAAC CAGCTGGGGC 5520
TCGAGCTACT AGCTTTGCTT CTCAATTTCT TATTTGCATA ATGAGAAAAA AAGGAAAATT 5580
aattttaaca CCAATTCAGT AGTTGATTGA GCAAATGCGT TGCCAAAAAG GATGCTTTAG 5640
AGACAGTGTT CTCTGCACAG ATAAGGACAA ACATTATTGA GAGGGAGTAC CCAGAGCTGA 5700
GACTCCTAAG CCAGTGAGTG GGACAGCATT CTAGGGAGAA ATATGCTTGT CATCACGGAA 5760
GCCTGATTCC GTAGAGCCAC ACCTTGGTAA GGGCCAATGT GCTGACACAG GATAGAGAGG 5820
GCAGGAGCCA GGGCAGAGCA TATAAGGTGA GGTAGGATCA GTTGCTCCTC acatttgctt 5880
CTGACATAGT TGTGTTGGGA GCTTGGATCG ATCCTCTATG GTTGAACAAG ATGGATTGCA 5940
CGCAGGTTCT CCGGCCGCTT GGGTGGAGAG gctattcggc TATGAGTGGG CACAACAGAG 6000
AATCGGCTGC TCTGATGCCG CCGTGTTCCG GCTGTCAGGG CAGGGGCGCC CGGTTCTTTT 6060
TGTCAAGACC GACCTGTCCG GTGCCCTGAA TGAACTGCAG GACGAGGCAG CGCGGGTATG 6120
GTGGCTGGCC ACGACGGGCG TTCCTTGCGC AGCTGTGCTC GACGTTGTCA CTGAAGGGGG 6180
AAGGGACTGG CTGCTATTGG GCGAAGTGCC GGGGCAGGAT CTGGTGTGAT CTCACCTTGG 6240
TCCTGCCGAG AAAGTATCCA TCATGGCTGA TGCAATGCGG CGGGTGCATA CGCTTGATGC 6300
GGCTACCTGC CCATTCGACC ACCAAGCGAA ACATCGCATC GAGGGAGCAC GTACTCGGAT 6360
GGAAGCCGGT CTTGTCGATC AGGATGATGT GGACGAAGAG GATGAGGGGC TCGCGGCAGG 6420
CGAACTGTTC GCCAGGCTCA AGGCGCGCAT GCCCGACGGC GAGGATCTCG TCGTGACCGA 6480
TGGCGATGCC TGCTTGCCGA ATATCATGGT GGAAAATGGC CGGTTTTCTG GATTCATCGA 6540
CTGTGGCCGG CTGGGTGTGG CGGACCGCTA TCAGGACATA GCGTTGGCTA CCCGTGATAT 6600
TGCTGAAGAG CTTGGCGGCG AATGGGCTGA CCGCTTCGTG gtggtttacg GTATGGGCGC 6660
TCCCGATTCG CAGCGCATCG CCTTCTATCG CCTTCTTGAC GAGTTCTTCT GAGCGGGACT 6720
CTGGGGTTCG AAATGACCGA CCAAGGGACG CCGAACCTGG GATGACGAGA TTTCGATTCG 6780
ACCGCCGCCT TCTATGAAAG GTTGGGCTTG GGAATCGTTT TCCGGGACGC CGGGTGGATG 6840
ATCCTCCAGC GCGGGGATCT CATGCTGGAG TTGTTCGCGG ACGGGAACTT gtttattgca 6900
gcttataatg GTTACAAATA AAGCAATAGC ATGAGAAATT TCAGAAATAA AGCATTTTTT 6960
TCACTGCATT CTAGTTGTGG TTTGTCCAAA CTCATCAATG TATCTTATCA TGTCTGGATC 7020
GCGGCCGCGA TCCCGTCGAG AGCTTGGCGT AATCATGGTG ATAGCTGTTT CCTGTGTGAA 7080
ATTGTTATCC GCTCACAATT CCACACAACA TACGAGCCGG AAGCATAAAG TGTAAAGCCT 7140
175 557
GGGGTGCCTA ATGAGTGAGC TAACTCACAT TAATTGCGTT GCGCTCACTG CCCGCTTTCC 7200
AGTCGGGAAA CCTGTCGTGC CAGCTGCATT AATGAATCGG CCAACGCGCG GGGAGAGGCO 7260
GTTTCCCTAT TGGGCGCTCT TCCGCTTCCT CGCTCACTGA CTCGCTGCGC TCGGTCGTTC 7320
GGCTGCGGCG AGCGGTATCA GCTCACTCAA AGGCGGTAAT ACGGTTATCC ACAGAATCAG 7300
GGGATAACGC AGGAAAGAAC ATGTGAGCAA AAGCCCAGCA AAAGGCCAGG aaccgtaaaa 7440
AGGCCGCGTT GCTGGCGTTT TTCCATAGGC TCCGCCCCCC TOACGAGCAT CACAAAAATC 7500
GACGCTCAAG TCAGAGGTGG CGAAACCCGA CAGGACTATA AAGATACCAG GCGTTTCCCC 7560
CTGGAAGCTC CCTCGTGCGC TCTCCTGTTC CGACCCTGCC GCTTACCGGA TACCTGTCCG 7620
CCTTTCTCCC TTCGGGAAGC GTGGCGCTTT CTCAATGCTC ACGCTGTAGG TATCTCAGTT 7680
CGGTOTACGT CGTTCGCTCC aagctgggct GTCTGCACGA ACCCCCCGTT CAGCCCGACC 7740
GCTGCGCCTT ATCCGGTAAC TATCGTCTTG AGTCCAACCC GGTAAGACAC GACTTATCGC 7800
CACTCGCAGC AGCCACTGGT AACAGGATTA GCAGAGCGAC GTATGTAGCC GGTGCTACAG 7860
AGTTCTTGAA GTGGTGGCCT AACTACOGCT ACACTAGAAG GACAGTATTT GGTATCTGCG 7920
CTCTGCTGAA GCCAGTTACC TTCGGAAAAA GAGTTGGTAG CTCTTGATCC GGCAAACAAA 7980
CCACCGCTGC TAGCGGTGGT TTTTTTGTTT GCAAGCAGCA GATTACGCGC AGAAAAAAAG 8040
GATCTCAAGA AGATCCTTTG ATCTTTTCTA CGGGGTCTGA CGCTCAGTGG AACGAAAACT 8100
CACCTTAAGG gattttggtc ATGAGATTAT CAAAAAGGAT CTTCACCTAG atccttttaa 8160
ATTAAAAATG AAGTTTTAAA TCAATCTAAA GTATATATGA GTAAACTTOG TCTGACAGTT 8220
ACCAATGCTT AATCAGTGAG GCACCTATCT CAGCGATCTG TCTATTTCGT TCATCCATAG 8280
TTGCCTGACT CCCCGTCOTG TAGATAACTA CGATACGGGA ggocttacca TCTGGCCCCA 8340
GTGCTGCAAT GATACCGCGA GACCCACGCT CACCCCCTCC AGATTTATCA GCAATAAACC 8400
AGCCAGCCGG AAGGGCCGAG CGCAGAAGTG GTCCTGCAAC TTTATCCGCC TCCATCCAGT 8460
CTATTAATTG TTGCCGGGAA GCTAGAGTAA GTAGTTCGCC AGTTAATAGT TTGCGCAACC 8520
TTGTTGCCAT TGCTACAGGC ATCGTGGTGT CACGCTCGTC GTTTGGTATG GCTTCATTCA 8580
GCTCCGGTTC CCAACGATCA AGGCOAGTTA CATGATCCCC CATGTTGTGC AAAAAAGCGG 8640
TTAGCTCCTT CGGTCCTGCG ATCGTTGTCA GAAGTAAGTT GGCCGCAGTG TTATCACTCA 8700
TGGTTATGGC AGCACTCCAT AATTCTCTTA CTGTCATOCC ATCCGTAAGA TGCTTTTCTG 8760
TGACTGGTCA GTACTCAACC AAGTCATTCT GAGAATAGTG TATGCGGCGA CCGAGTTGCT 8820
CTTGCCCGGC GTCAATACGG GATAATACCG CGCCACATAG CAGAACTTTA AAACTGCTCA 8880
TCATTGGAAA ACGTTCTTCG GGGCGAAAAC TCTCAAGGAT CTTACCGCTG TTGAGATCCA 8940
GTTCGATGTA ACCCACTCGT GCACCCAACT GATCTTCAGC ATCTTTTACT TTCACCAGCG 9000
175 557
TTTCTGGGTG AGCAAAAACA GGAAGGCAAA ATGCCGCAAA AAAGGGAATA AGGGCGACAC 9060
GGAAATGTTG AATACTCATA CTCTTCCTTT TTCAATATTA TTGAAGCATT TATCAGGGTT 9120
attgtctcat GAGCGGATAC atatttgaat gtatttagaa AAATAAACAA ATAGGGGTTC 9180
CGCGCACATT TCCCCGAAAA GTGCCACCT 9209
(4) INFORMACJA DLA IDENTYFIKATORA SEKW. NO 3:
(I) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 54 zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) NICIOWOŚĆ: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: DNA ( genomowy) (iii) HIPOTETYCZNIE: tak (vi) ANTYSENS: nie (ix) OP^ SEKWENCJ l: IDENTFFIKTTOR SEKW. NR 3
5' ATC ACA GAT CTC TCA CCA TGG ATT TTC AGG TBC AGA TTA TCA GCT TC 3' (5) INFORMACJA DLA IDENTYFIKATORA SEKW. NR 4:
(i) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 30 zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) NICIOWOŚĆ: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: DNA ( genomowy) (iii) HIPOTETYCZNIE:
(vi) ANTYSENS: nie (ix) OPIS ^^K^V^^r^<JIj:: IDENTFFIATTOR SEKW. NR 4
5' TGC AGC ATC CGT ACG TTT GAT TTC CAG CTT 3’ 3 o (6) INFORMACJA DLA IDENTYFIKATORA SEKW. NR 5:
(i) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
175 557 (A) DŁUGOŚĆ: 384 zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) NICIOWOŚĆ: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: DNA ( genomowy) (iii) HIPOTETYCZNIE: ak (vi) ANTYSENS : me (ix) OPIS SEKWENCJI: IDENTYFIKATOR SEKW. NR 5
ATG GAT TTT CAG GTG CAG ATT ATC AGC TTC CTG CTA ATC AGT GCT TCA GTC 51
ATA ATG TCC AGA GGG CAA ATT GTT CTC TCC CAG TCT CCA GCA ATC CTG TCT 102
GCA TCT CCA GGG GAG AAG GTC ACA ATG ACT TGC AGG GCC AGC TCA AGT GTA 153
AGT TAC ATC CAC TGG TTC CAG CAG AAG CCA GGA TCC TCC CCC AAA CCC TGG 204
ATT TAT GCC ACA TCC AAC CTG GCT TCT GGA GTC CCT GTT CGC TTC AGT GGC 255
AGT GGG TCT GGG ACT TCT TAC TCT CTC ACA ATC AGC AGA GTG GAG GCT GAA 306
GAT GCT GCC ACT TAT TAC TGC CAG CAG TGG ACT AGT AAC CCA CCC ACG TTC 357
GGA GGG GGG ACC AAG CTG GAA ATC AAA 384
(7) INFORMACJA DLA IDENTYFIKATORA SEKW. NR 6:
(I) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 27 zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) NICIOWOŚĆ: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: DNA ( genomowy) (iii) ΗΙΡΟΤΕΤΎΟΖΝΙΕ: tak (vi) ANPSSENS : nie (ix) OPI S EEWEENJIJ IiIDETTYFIKATO R EEKW. NR 6
5' GCG GCT CCC ACG CGA GAC CTG ACC CAG 3'
175 557 (8) INFORMACJA DLA IDENTYFIKATORA SEKW. NR 7:
(I) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 29 zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) NICIOWOŚĆ: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: DNA ( genomowy) (iii) HIPOTETYCZNIE: aak (vi) ANTYSENS: tak (ix) OPIS SEKWENCJ S: IDENTYFIKATOR SEKW. NR 7 5' GCS TGT TGT GCT AGC TGM GRA GAC RGT GA 3' 29 (9) INFORMACJA DLA IDENTYFIKATORA SEKW NR 8' (I) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 420 zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (n) NICIOWOŚĆ: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP- CZĄSTECZKI: DNA ( genomowy) (iii) HIPOTETYCZNIE: tak (vi) ANTYSENS: nie (ix) OPiS SERWNCJ S: IDENTYFIKATOR NR N
ATG GGT TGG AGC CTC ATC TTG CTC TTC CTT GTC GCT GTT GCT ACG CGT GTC 51
CTG TCC CAG GTA CAA CTG CAG CAG CCT GGG GCT GAG CTG GTG AAG CCT GGG 102
GCC TCA GTG AAG ATG TCC TGC AAG GCT TCT GGC TAC ACA ttt ACC AG? TAC 153
AAT ATG CAC TGG GTA AAA CAG ACA CCT GGT CGG GGC CTG GAA TGG A TT t~. - . GGA .2 0 4
GCT ATT TAT CCC GGA AAT GGT GAT ACT TCC TAC AAT CAG AAG TTC AAA GGC 255
AAG GCC ACA TTG ACT GCA GAC AAA TCC TCC AGC ACA GCC TAC ATG CAG CTC 3 06
AGC AGC CTG ACA TCT GAG GAC TCT GCG GTC TAT TAC TGT GCA AGA TCG ACT '5Ύ
TAC TAC GGC GGT GAC TGG TAC TTC AAT GTC TCG GGC GCA CCG ACC ACG GTC 4 0K
ACC GTC TCT GCA 420
175 557
OT
-Ί
C5 >
O V) __ l Cn cn CO cn O
Q — 1 Ό s. I to cn
I cn K. 04 to
1 cn A +*·
1 cn \
cn 04 CD \
ΓΟ o
04
CD
1 a. ΐ ro ' L. CD W 3 CT o
-r^ co w\> CD CT z: z ω -i >
z
175 557
TŁUMACZENIE HASEŁ WYSTĘPUJĄCYCH NAD SEKWENCJAMI PRZEDSTAWIONYMI NA ZAŁĄCZONYCH FIGURACH :
H
Z co
U
o
Z
!O Z
o >< CO
z Q
Z O Z
z Z Z
o CJ 01
•śT <- Q Z
2 1—1 O
>3 K' co Z <
CO z z
1 < z
z z Z Q
01 o O O
Eh Eh z z
< o ω
to 2 Z z
O o z 01
O z 01 o
Oj z co
(X oi o
%
A ω
z o
Q o
o
Q I—I O
O z,
H
Z
Z
Z co z
o o
Oj < O Z Z co w ό z
CO O OT Q to o O 84
Z &
Z z
t-t
CQ
o o
O o z
o 01 o
o Ol z z
o t-ł o z
01 *·» z z z z
Z z •co o 01 Q
z o OT 2 00
-tO z Z CJ
OT co CJ 1—I z ω
Z 2 o I—I
CJ Z O z z
O z o o
Q o Z 2 z
z O z Z - o
CJ Z o z z z z
oi z
Q O u 'Z
z z t—1
o z z
co o o
z z Q z
o ω o
z z z z z
01 < o o
z z z z 1—i
z o Z o o
01 o z z z
co z p? co z
ω z q co Z O Z tO 2 Z
Oj Z
Z 2 to o co z Z CO OT z
Z
H
CO 01 Z Z
Z
z o o z
z 01 < z 2
1—1 Eh Cu z > Q z O
o o Cu z t-t > z
1—1 2 o 01 o o
z o 1—1 z 01
z c z z Z z z z
ω z 01 01 z o 2
z O Q 2 Z Q z z Oj z
z O z O >
1—i > 2 01 r> Z 01 z 2 Z o
z co o z ή CO z co Ξς CO oo
Z
CJ
REGION__
2
O
t—t
Z
z z
z ω
T7 z
01 o
Q 2
O
Z z
1 1-[ z
o
z z z
o o
Q ω o
O z
O o
2
Z Z
O z o 1—1 z
Z 1—1 ZUj Z z
co < O
Z Z Q
O
Q < 01
Pj Eh Ol 00
CO co z
o
START DHFR - START KODON DHFR
175 557
Ο
> Ο Ω Ο
ω Ο Ο Ο
ω Ζ Ω
1—I ο Ω ω Ω
Ω ο ζ s Ζ
Ο ω Σδ ζ ζ -οα
ο 1-1 ο ω Μ Ω
ζ Ω Ω ζ Ω Ω Ω 1—1
Ω Ω Ω ζ ω Ο
Ο Ζ Ω ω Ω
Ω Ω 2 Ω Μ Ζ Ζ
2 ο Ω Ω Ω Ο Ω Ζ
Ο Ω Ω Ω ρ£ Ο
Ω H ι—ι H Ζ Ζ < Ο (X Ω
Ζ Ζ Ω Ω Ο Ω '2 Ω Ο
Ο Ο Ο Ω Ω Ο P? Ω 'Ζ
Ζ Ω (Ζ Ο Ζ Ω
Ω Ω ζ Ω Ω ω Ζ Ω
Ω Ω ο Ω Ω H Ω ίΞπ Ω Ω
Ω Ω Ω 2 Ο Ω ω Ω 5 Ζ 1—1
Ω ω Ζ Ω Ζ Ω ω Ζ V. Ζ
Ω 12 Ο Ω ζ Ζ ω Ω ζ < Ζ
Ζ ω Ζ Ο Ω Ω ο Ο Μ -ο Ζ Ω
Ο 2 ο Ω ω Ω Ω 2 ω Ω Μ
Ω ;τ Ω ω Ζ Ο Ο ζ Ω Ο 2
Ο (X Ο Ζ Ω ω Ζ Ζ Ω Σ2 Ω 5 Ω
Ζ Ω Ζ Ζ Ω Ω Ζ Ζ Ω ο
Ο Ω ω < Ω Ω Ω ο Ο ω Ω Ό
Ω Ω Ω ω Ω Ω Ω Ω Ω Ζ Ω Ω Ώ
Ο ω Ο Ω Ω Ο Ω ο 1—1 ζ Ω Ω
Ω Ο Ω Μ ο Ο Ω Ω < Ω 2 Ω u Ω
ω Ω ω Ζ S Ω ω ω Ζ Ω Ω ω Ω υ
ω
Z
Ο ι—ι Η < Ο ι—ι Ω Oj ω
Ω
Ω
Ω !—I
Ο <
Ο ζ
ο
1—1
Ο ω
Ω ω
ω ω
Ω Ω ο Ζ
Ο ο Ω 1—1 ι—ι
ζ ω Ω ζ Ω < Ω
Ω Ζζ Ω—< 1—1 ο,· Ζ Ω Ζ
Ω Ω Ο ο Ω Σχί
Ο Ω 1—I Ω Ω
Ζ Ω Ω Ω Ζ
Ω Ω Ο Ζ Ω I—I
Ω Ω Ω ο Ω
Ω Ζ Ο Ω Ω Ω 1—1 Ζ
Ζ Ω ω ω Ο 1—1 ω Ω Ω Ο
Ω Ο 2 ζ Ω Ω
Ω Ω Ω Ω Ω Ω Ω
Ω 2 Ω ρ? Ο Ω Ω Ω Ω Ζ
Ο Ο Ο Ω ^r Ο < Ω Ο
Ω Ω Ω Ζ > Ω Ω < 1—1
03 Ζ ω Ω ω m Μ ω Ζ Ω
ω ω
Ω <
ω
Ω
Ω
Ś
Ο
Ω
Ω ω
Ζ
Ω ζ
><
Ω
Ω ω
i—1
Ω ζ
ί—ί <
Ω
U
Ω
ΩΖ
175 557 łącznik #1=15pz początek SV40=332pz
GACGTCGCGG CCGCTCTAGG CCTCCAAAAA AGCCTCCTCA CTACTTCTGG AATAGCTCAG AGGCCGAGGC GGCCTCGGCC TCTGCATAAA TAAAAAAAAT TAGTCAGCCA TGCATGGGGC
GGAGAATGGG CGGAACTGGG CGGAGTTAGG GGCGGGATGG GCGGAGTTAG GGGCGGGACT
ATGGTTGCTG ACTAATTGAG ATGCATGCTT TGCATACTTC TGCCTGCTGG GGAGCCTGGG
GACTTTCCAC ACCTGGTTGC TGACTAATTG AGATGCATGC TTTGCATACT TCTGCCTGCT ; łącznik #2= 13pz
GGGGAGCCTG GGGACTTTCC ACACCCTAAC TGACACACAT TCCACAGAAT TAATTCCCCT 347 8 360
AGTTATTAAT AGTAATCAAT TACGGGGTCA TTAGTTCATA GCCCATATAT GGAGTTCCGC
GTTACATAAC TTACGGTAAA TGGCCCGCCT GGCTGACCGC CCAACGACCC CCGCCCATTG promotor-wzmacniacz CMV=567pz
ACGTCAATAA TGACGTATGT tcccatagta acgccaatag ggactttcca ttgacgtcaa tgggtggact atttacggta aactgcccac ttggcagtac atćaagtgta tcatatgcca AGTACGCCCC CTATTGACGT CAATGACGGT AAATGGCCCG CCTGGCATTA TGCCCAGTAC
ATGACCTTAT GGGACTTTCC TACTTGGCAG TACATCTACG TATTAGTCAT CGCTATTACC
ATGGTGATGC GGTTTTGGCA GTACATCAAT GGGCGTGGAT AGCGGTTTGA CTCACGGGGA
TTTCCAAGTC TCCACCCCAT TGACGTCAAT GGGAGTTTGT TTTGGCACCA AAATCAACGG
GACTTTCCAA AATGTCGTAA CAACTCCGCC CCATTGACGC AAATGGGCGG TAGGCGTGTA , łącznik #3=76pz[
CGGTGGGAGG TCTATATAAG CAGAGCTlGGG TACGjTĆAACC GTCAGATCGC CTGGAGACGC Bgl π 727 ® lider 60pz
CATCACAGAT CTCTCACC^T GAGGGTCCCC GCTCAGCTCC TGGGGCTCCT GCTGCTCTGG 978 ‘+1J101102 Ą0Ą108 □A tggJaccaag gtggaaatca^aacgTacggt ggctgcacca 9~“ 1062’3 Bsi WI
CTCCCAGGTG CACGATGT 1038
TCTGTCTTCA TCTTCCCGCC ATCTGATGAG CAGTTGAAAT CTGGAACTGC CTCTGTTGTG
TGCCTGCTGA ATAACTTCTA TCCCAGAGAG GCCAAAGTAC AGTGGAAGGT GGATAACGCC część stała .ludzkiego łańcucha κ 324 pz 107 aminokwasów i kodon stop
CTCCAATCGG GTAACTCCCA GGAGAGTGTC ACAGAGCAGG ACAGCAAGGA CAGCACCTAC
AGCCTCAGCA GCACCCTGAC GCTGAGCAAA GCAGACTACG AGAAACACAA AGTCTACGCC
TGCGAAGTCA CCCATCAGGG CCTGAGCTCG CCCGTCACAA AGAGCTTCAA CAGGGGAGAG kodon stop łańcucha lekkiego łącznik #4=85pz
Eco RI
TGT|TGA^TTC AGATCCGTTA acggttacca actacctaga CTGGATTCGT gacaacatgc 1386 ggccgtgata tctacgtatg atcagcctcg aJctgtgcctt ctagttgcca gccatctgtt 1471
120
180
240
300
360
420
480
540
600
660
720
780
840
900
960
1020 <080
140
1200
1260
132C
1380
4-4C
1500
FIG. 2A
175 557
GTTTGCCCCT
TAATAAAATG
GGGGTGGGGC
GCGGTGGGCT
CCCCCGTGCC TTCCTTGACC CTGGAAGGTG CCACTCCCAC TGTCCTTTCC poliadenylacja BGH=23 lpz
AGGAAATTGC ATCGCATTGT CTGAGTAGGT GTCATTCTAT TCTGGGGGGT
AGGACAGCAA GGGGGAGGAT TGGGAAGACA ATAGCAGGCA TGCTGGGGAT łącznik #5=15 pz j
CTATGGAACC AGJĆTGGGGCT CGACAGuTAT GCCAAGTACG CCCCCTATTG
I fl
1702
1717'8
ACGTCAATGA CGGTAAATGG CCCGCCTGGC ATTATGCCCA GTACATGACC TTATGGGACT
TTCCTACTTG gcagtacatc TACGTATTAG TCATCGCTAT taccatggtg atgcggtttt promotor-wzmacniacz CMV=334pz ggcagtacat caatgggcgt ggatagcggt ttgactcacg gggatttcca agtctccacc ccattgacgt caatgggagt ttgttttggc accaaaatca acgggacttt ccaaaatgtc gtaacaactc cgccccattg acgcaaatgg gcggtaggcg tgtacggtgg gaggtctata . łącznik #6=7pz .
TAAGCAGAGC^GGTACGffC STCACATTCA GTGATCAGCA 2051*2 2058*9 lider=51pz
TGlGGTTGGA GCCTCATCTT GCTCTTCCTT GTCGCTGTTG
Sal I
CTGAACACAG ACCCGTCGAC
Mlu I 2151 CTACgCGJGT
początek łańcucha ciężkiego AAGGGCCCAT CGGTCTTCCC CCTGGCACCC TCCTCCAAGA GCACCTCTGG GGGCACAGCG
GCCCTGGGCT GCCTGGTCAA GGACTACTTC CCCGAACCGG TGACGGTGTC GTGGAACTCA
GGCGCCCTGA CCAGCGGCGT GCACACCTTC CCGGCTGTCC TACAGTCCIC AGGACTCiAC część stała ludzkiego łańcucha yl
TCCCTCAGCA GCGTGGTGAC CGTGCĆCTCC AGCAGCTTGG GCACCCAGAC CTACATCTGC
-5 -4 -3 114 115
AACGTGAATC
GACAAAACTC
TTCCTCTTCC
TGCGTGGTGG
GGCGTGGAGG
CGTGTGGTCA
TGCAAGGTCT
GGGCAGCCCC
AACCAGGTCA
TGGGAGAGCA
ACAAGCCCAG
ACACATGCCC
CCCCAAAACC
TGGACGTGAG
TGCATAATGC
GCGTCCTCAC
CCAACAAAGC
GAGAACCACA
GCCTGACCTG
ATGGGCAGCC
993pz=330 aminokwasów i kodon stop
CAACACCAAG
ACCGTGCCCA
CAAGGACACC
CCACGAAGAC
CAAGACAAAG
CGTCCTGCAC
CCTCCCAGCC
GGTGTACACC
CCTGGTCAAA
GGAGAACAAC
GTGGACAAGA
GCACCTGAAC
CTCATGATCT
CCT6AGGTCA
CCGCGGGAGG
CAGGACTGGC
CCCATCGAGA
CTGCCCCCAT
AAGCAGAGCC
TCCTGGGGGG
CCCGGACCCC
AGTTCAACTG
AGCAGT ACAA
TGAATGGCAA
AAACCATCTC
CCCGGGATGA
GGCTTCTATC CCAGCGACAT
TACAAGACĆA CGCCTCCCGT
CAAATCTTGT
ACCGTCAGTC
TGAGGTCACA
GTACGTGGAC
CAGCACGTAC
GGACTACAAG
CAAAGCCAAA
GCTGACCAGC
CGCCGTGGAG
GCTGGACTCC
1560
1620
1680
1740
1800
1860
1920
1980
2U40
2100
2160
2220
2280
2340
2400
2460
2520
2580
2640
2700
2760
2820
2880
2940
3000
FIG. 2B
175 557
GACGGCTCCT TCTTCCTCTA CAGCAAGCTC ACCGTGGACA
AACGTCTTCT CATGCTCCGT GATGCATGAG GCTCTGCACA koniec łańcucha ciężkiego
Barn HI
AGAGCAGGTG GCAGCAGGGG
ACCACTACAC GCAGAAGAGC łącznik #7=8 lpz
CTCTCCCTGT CTCCGGGTAA AfTGAGGATCC GTTAACGGTT 3144i5
TCGTGACAAC ATGCGGCCGT GATATCTACG TATGATCAGC
GCCAGCCATC TGTTGTTTGC CCCTCCCCCG TGCCTTCCTT
ACCAACTACC
CTCGACTGTG
322516
GACCCTGGAA
TAGACTGGAT
CCTTCTAGTT
GGTGCCACTC region poliadenylaęji wołowego hormonu wzrostu - 23 lpz CCACTGTCCT TTCCTAATAA AATGAGGAAA TTGCATCGCA TTGTCTGAGT AGGTGTCATT
CTATTCTGGG GGGTGGGGTG GGGCAGGACA GCAAGGGGGA GGATTGGGAA GACAATAGCA
GGCATGCTGG
CCCGATCCCC
3490
AATTTTAACA
GGATGCGGTG
AGCTTTGCTT
CCAATTCAGT
GGCTCTATGG
CTCAATTTCT
AGTTGATTGA
AACCAGCTGG 3456* 7 TATTTGCATA
GCAAATGCGT łącznik #8=3 4pz GGCTCGACAG CGCTGGA7CT
ATGAGAAAAA AAGGAAAATT
TGCCAAAAAG GATGCTTTAG mysi większy promotor P~globiny=366pz
AGACAGTGTT CTCTGCACAG ATAAGGACAA ACATTATTCA GAGGGAGTAC CCAGAGCTGA
GACTCCTAAG CCAGTGAGTG GCACAGCATT CTAGGGAGAA ATATGCTTGT CATCACCGAA
GCCTGATTCC GTAGAGCCAC ACCTTGGTAA GGGCCAATCT GCTCACACAG GATAGAGAGG
GCAGGAGCCA GGGCAGAGCA TATAAGGTGA GGTAGGATCA GTTGCTCCTC ACATTTGCTT
CTGACATAGT
CAAACTTGAC łącznik #9= 19pz
TGTGTTjGGGA GCTTGGATAG 3856*7
GGCAATCĆTA GCGTGAAGGC
5’ nietranslowany DHFR—82pz
CTTGGjACAGC - TCAGGGCTGC GATTTCGCGĆ 3875 6 iSTART DHFR
TGGTAGGATT TTATCCCCGC TGCCATCJąTUI
3957^6
GTTCGACCAT
GACCTACCCT
TCTTCAGTGG
CCTGAGAAGA
GAACCACCAC
GAACAACCGG
TACCAGGAAG
GAATTTGAAA
GAAT ACCCAG
TGAACTGCAT CGTCGCCGTG TCCCAAAATA TGGGGATTGG
GGCCTCCGCT CAGGAACGAG TTCAAGTACT TCCAAAGAAT
AAGGTAAACA GAATCTGGTG ATTATGGGTA GGAAAACCTG mysi DHFR=564pz=187 aminokwasów i kodon stop
ATCGACCTTT
GAGGAGCTCA
AATTGGCAAG
CCATGAATCA
GTGACACGTT
GCGTCCTCTC
AAAGGACAGA
TTTTCTTGCC
TAAAGTAGAC
ACCAGGCCAC
TTTCCCAGAA
TGAGGTCCAG
ATTAATATAG
AAAAGTTTGG
ATGGTTTGGA
CTTAGACTCT
ATTGATTTGG
GAGGAAAAAG
TTCTCAGTAG
ATGATGCCTT
TAGTCGGAGG
TTGIGACAAG
GGAAATATAA
GCATCAAGTA
CAAGAACGGA
GACCACAACC
GTTCTCCATT
AGAACTCAAA
AAGACTTATT
CAGTTCTGTT
GATCATGCAG
ACTTCTCCCA
TAAGTTTGAA
3060
3120
3180
3240
3300
3360
3420
3480
3540
3600
3660
3720
3780
3840
3900
3960
4020
4080
40
4200
4260
4320
4380
444G
4500
FIG. 2C
175 557
STOP DHFRi
GTCTACGAGA AGAAAGAClTA ACAGGAAGAT 452Ϊ1 2
3’ nietranslowany DHFR=82pz TCaiGCATTT ttataagacc atgggacttt
GCTTTCAAGT TCTCTGCTCC CCTCCTAAAG łącznik #10=10pz
TGCTGGCTTT AGaItCAGĆCT CGAETGTGCr. 4603*4 4613*4
TTCTAGTTGC CAGCCATCTG TTGTTTGCCC
CTCCCCCGTG CCTTCCTTGA CCCTGGAAGG region poliadenylacji wołowego hormonu wzrostu = 23 lpz TGCCACTCCC ACTGTCCTTT CCTAATAAAA TGAGGAAATT GCATCGCATT GTĆTGAGTAG
GTGTCATTCT ATTCTGGGGG GTGGGGTGGG GCAGGACAGC AAGGGGGAGG ATTGGGAAGA łącznik #ll=17pz
CAATAGCAGG CATGCTGGGG ATGCGGTGGG CTCTATGGAA CCAGCTGGGG CTCGAGCTAC 4844*5
11AGCTTTGCT TCTCAATTTC TTATTTGCAT AATGAGAAAA AAAGGAAAAT TAATTTTAAC
4560
4620
4680
4740
4800
4860
4920
ACCAATTCAG
TCTCTGCACA
GCCAGTGAGT
CGTAGAGCCA
AGGGCAGAGC
TTGTGTTCGG
5227*8
TCCGGCCGCT
CTCTGATGCC
CGACCTGTCC
CACGACGGGC
GCTGCTATTG
GAAAGTATCC
CCCATTCGAC
TCTTGTCGAT
CGCCAGGCTC
CTGCTTGCCG
GCTGGGTGTG
GCTTGGCGGC
TAGTTGATTG AGCAAATGCG TTGCCAAAAA GGATGCTTTA mysi większy promotor 3-globiny=366pz
GATAAGGACA AACATTATTC AGAGGGAGTA CCCAGAGCTG
GGCACAGCAT TCTAGGGAGA AATATGCTTG TCATCACCGA
CACCTTGGTA AGGGCCAATC TGCTCACACA GGATAGAGAG
ATATAAGGTG AGGTAGGATC AGTTGCTCCT CACATTTGCT łącznik #12=2lpz
AGCTTGGATC GATCCTCTEt-GjGTTGAACAA GATGGATTGC 5248 *9
TGGGTGGAGA GGCTATTCGG CTATGACTGG GCACAACAGA
GCCGTGTTCC GGCTGTCAGC GCAGGGGCGC CCGGTTCTTT
START NEO _ fosfotransferaza neomycynowa _ ggtgccctga'atgaactgćaggacgaggca gcgcggctat
795pz=264 aminokwasy i kodon stop
GTTCCTTGCG
GGCGAAGTGC
ATCATGGCTG
CACCAAGCGA
CAGGATGATC
AAGGCGCGCA
AATATCATGG
GCGGACCGCT
GAAT GGGC TG
CAGCTGTGCT
CGGGGCAGGA
ATGGAATGCG
AACATCGCAT
T GGACGAAGA
TGCCCGACGG tggaaaatgg
AT CAGGACAT
ACCGCTTCCT
CGACGTTGTC
TCTCCTGTCA
GCGGCTGCAT
CGAGCGAGCA
GCATCAGGGG
CGAGGATCTC
CCGCTTTTCT
AGCGTTGGCT
CGTGCTTTAC
ACTGAAGCGG
TCTCACCTTG
ACGCTTGATC
CGTACTCGGA
CTCGCGCCAG
GTCGTGACCC
GGATTCATCG
ACCCGTGATA
GGTATCGCCG
GAGACAGTGT 4980
AGACTCCTAA 5040
AGCCTGATTC 5100
GGCAGGAGCC 5160
TCTGACATAG 5220
ACGCAGGTTC 5280
CAATCGGCTG 5540
TTGTCAAGAC 5400
CGTGGCTGGC 5460
GAAGGGACTG 5520
C-TCCTGCCGA 5580
CGGCTACCTG 5640
TGGAAGCCGG 5700
CCGAACTGTT 5760
ATGGCGATGC 5820
ACTGTGGCCG 5880
TTGCTGAAGA 5940
CTTCCCGATTC6000
FIG. 2D
175 557
GCAGCGCATC
GAAATGACCG
TTCTATGAAA
CGCGGGGATC
GGTTACAAAT
TCTAGTTGTG
ATCCCGTuGA 6368* 9
CGCTCACAAT
AATGAGTGAG
ACCTGTCGTG
TTGGGCGCTC
GAGCGGTATC
CAGGAAAGAA
TGCTGGCGTT
GTCAGAGuTG
CCCTCGTGCG
CTTCGGGAAG
TCGTTCGCTC
TATCCGGTAA
CAGCCACTGG
AGTGGTGGCC
AGCCAGTTAC
GTAGCGGTGG
AAGATCCTTT
GGATTTTGGT
STOP ΝΕΟΙ
GCCTTCTATC GCCTTCTTGA CGAGTTCTTC [TGAjCGGGAC TCTGGGGTTC 604314
ACCAAGCGAC GCCCAACCTG CCATCACGAG ATTTCGATTC CACCGCCGCC 3’ metranslowany NEO=173pz
GGTTGGGCTT CGGAATCGTT TTCCGGGACG CCGGCTGGAT GATCCTCCAG
TCATGCTGGA GTTCTTCGCC CACCCC^ACT TGTTTATTGC AGCTTATAAT 6216'7
AAAGCAATAG CATCACAAAT TTCACAAATA AAGCATTTTT TTCACTGCAT wczesny sygnał poliadenylacji SV40=133pz t łącznik #13=19pz
GTTTGTCCAA ACTCATCAAT CTATCTTATC’ ATGTCTGGćJt CGCGGCCGCG 6349'50
GAGCTTGGCG TAATCATGGT CATAGCTGTT TCCTGTGTGA AATTGTTATC
TCCACACAAC ATACGAGCCG GAAGCATAAA GTGTAAAGCC TGGGGTGCCT
CTAACTCACA TTAATTGCGT TGCGCTCACT GCCCGCTTTC CAGTCGGGAA
CCAGCTGCAT TAATGAATCG GCCAACGCGC GGGGAGAGGC GGTTTGCGTA
PVC 19
TTCCGCTTCC TCGCTCACTG ACTCGCTGCG CTCGGTCGTT CGGCTGCGGC
AGCTCACTCA AAGGCGGTAA TACGGTTATC CACAGAATCA GGGGATAACG
CATGTGAGCA AAAGGCCAGC AAAAGGCCAG GAACCGTAAA AAGGCCGCGT bakteryjny początek replikaęji=6792
T0TCCATAGG CTCCGCCCCC CTGACGAGCA TCACAAAAAT CGACGCTCAA GCGAAACCCG ACAGGACTAT AAAGATACCA GGCGTTTCCC CCTGGAAGCT
CTCTCCTGTT CCGACCCTGC CGCTTACCGG ATACCTGTCC GCCTTTCTCC
CGTGGCGCTT TCTCAATGCT CACGCTGTAG GTATCTCAGT TCGGTGTAGG
CAAGCTGGGC TGTGTGCACG AACCCCCCGT TCAGCCCGAC CGCTGCGCCT
CTATCGTCTT GAGTCCAACC CGGTAAGACA CGACTTATCG CCACTGGCAG
TAACAGGATT AGCAGAGCGA GGTATGTAGG CGGTGCTACA GAGTTCTTGA
TAACTACGGC TACACTAGAA GGACAGTATT TGGTATCTGC GCTCTGCTGA
CTTCGGAAAA AGAGTTGGTA GCTCTTGATC CGGCAAACAA ACCACCGCTG
TTTTTTTGTT TGCAAGCAGC AGATTACGCG CAGAAAAAAA GGATCTCAAG
GATCTTTTCT ACGGGGTCTG ACGCTCAGTG GAACGAAAAC TCACGTTAA&
CATGAGATTA TCAAAAAGGA TCTTCACCTA GATCCTTTTA AATTAAAAAT
6060
6120
6180
6240
6300
6360
6420
6480
6340
6600
6660
6720
6780
6840
6900
6960
7020
7080
7140
7200
7260
7320
7380
7440
7500
FIG. 2E
175 557 kodon stop β-laktamazy
GAAGTTTTAA ATCAATCTAA agtatatatg AGTAAACTTG GTCTGACAGfT '7 taJccaatgct 550 7560
TAATCAGTGA GGCACCTATC TCAGCGATCT GTCTATTTCG TTCATCCATA gttgcctgac 7620
TCCCCGTCGT GTAGATAACT ACGATACGGG AGGGCTTACC ATCTGGCCCC agtgctgcaa 7680
TGATACCGCG AGACCCACGC TCACCGGCTC CAGATTTATC ^-bktamaT-a-Rń lpz AGCAATAAAC cagccagccg 7740
GAAGGGCCGA GCGCAGAAGT GGTCCTGCAA CTTTATCCGC CTCCATCCAG 286 aminokwasów i kodon stop tctat-taatt 7800
GTTGCCGGGA AGCTAGAGTA AGTAGTTCGC CAGTTAATAG TTTGCGCAAC gttgttgcca 7860
TTGCTACAGG CATCGTGGTG TCACGCTCGT CGTTTGGTAT GGCTTCATTC agctccggtt 7920
CCCAACGATC AAGGCGAGTT ACATGATCCC CCATGTTGTG CAAAAAAGCG gttagctcct 7980
TCGGTCCTCC GATCGTTGTC AGAAGTAAGT TGGCCGCAGT GTTATCACTC atggttatgg 8040
CAGCACTGCA TAATTCTCTT ACTGTCATGC CATCCGTAAG ATGCTTTTCT GTGACTGGTG 8100
AGTACTCAAC CAAGTCATTC TGAGAATAGT GTATGCGGCG ACCGAGTTGC TCTTGCCCGG 8160
CGT CAATACG GGATAATACC GCGCCACATA GCAGAACTTT AAAAGTGCTC atcattggaa 8220
AACGTTCTTC GGGGCGAAAA CTCTCAAGGA TCTTACCGCT GTTGAGATCC AGTTCGATGT 8280
AACCCACTCG TGCACCCAAC TGATCTTCAG GATCTTTTAC TTTCACCAGC GTTTCTGGGT 8340
GAGCAAAAAC AGGAAGGCAA AATGCCGCAA kodon start β-laktamazy AAAAGGGAAT AAGGGCGACA CGGAAATGTT 8400
GAATACTCAT| ACTCTTCCTT 8410 TTTCAATATT ATTGAAGCAT TTATCAGGGT TATTGTCTCĄ 8460
TGAGCGGATA CATATTTGAA TGTATTTAGA AAAATAAACA AATAGGGGTT CCGCGCACAT 8520
TTCCCCGAAA AGTGCCACCT
FIG. 2F
175 557 łącznik #l=15pz
GACGTCGCGG CCGCłlCTAGG CCTCCAAAAA AGCCTCCTCA CTACTTCTGG AATAGCTCAG 15 6
AGGCCGAGGC GGCCTCGGCC TCTGCATAAA TAAAAAAAAT TAGTCAC-CCA TGCATGGGGC początek SV40=332pz
GGAGAATGGG CGGAACTGGG CGGAGTTAGG GGCGGGATGG GCGGAGTTAG GGGCGGGACT
ATGGTTGCTG ACTAATTGAG ATGCATGCTT TGCATACTTC TGCCTGCTGG GGAGCCTGGG
GACTTTCCAC ACCTGGTTGC TGACTAATTG AGATGCATGC TTTGCATACT TCTGCCTGCT , łącznik #2=13pz
GGGGAGCCTG GGGACTTTCC ACACCCTAAC TGACACACAT TCCACAGlAAT TAATTCCCCT 347:8 1
AGTTATTAAT AGTAATCAAT TACGGGGTCA TTAGTTCATA GCCCATATAT GGAGTTCCGC
GTTACATAAC TTACGGTAAA .TGGCCCGCCT GGCTGACCGC CCAACGACCC CCGCCCATTG
ACGTCAATAA TGACGTATGT TCCCATAGTA ACGCCAATAG GGACTTTCCA TTGACGTCAA promotor-wzmacniacz CMV=567pz
TGGGTGGACT ATTTACGGTA AACTGCCCAC TTGGCAGTAC ATCAAGTGTA TCATATGCCA
AGTACGCCCC CTATTGACGT CAATGACGGT AAATGGCCCG CCTGGCATTA TGCCCAGTAC
ATGACCTTAT GGGACTTTCC TACTTGGCAG TACATCTACG TATTAGTCAT CGCTATTACC
ATGGTGATGC GGTTTTGGCA GTACATCAAT GGGCGTGGAT AGCGGTTTGA CTCACGGGGA
TTTCCAAGTC TCCACCCCAT TGACGTCAAT GGGAGTTTGT TTTGGCACCA AAATCAACGG
GACTTTCCAA AATGTCGTAA CAACTCCGCC CCATTGĄCGCAAATGGGCGG TAGGCGTGTA t łącznik #3=7pz_ [
CGGTGGGAGG TCTATATAAG CAGAGCllGGG TACGFrGAACC GTCAGATCGC CTGGAGACGC 927*8 934*5
Bgl 2 początek łańcucha lekkiego naturalny lider=66pz
AT GpATTTTCAG GTGCAGATTA TCAGCTTCCT GCTAATCAGT
CATCACAGAT CTCTCACT)
978
GCTTCAGTCA TAATGTCCAG AGGĄpAAATT GTTCTCTCCC AGTCTCCAGC AATCCTGTCT
1044+7
GCATCTCCAG GGGAGAAGGT CACAATGACT TGCAGGGCCA GCTGAAGTGT AAGTTACATC
CACTGGTTCC AGCAGAAGCC AGGATCCTCC CCCAAACCCT GGATTTATGC CACATCCAAC region zmienny łańcucha lekkiego 318pz 106 aminokwasów
CTGGCTTCTG GAGTCCCTGT TCGCTTCAGT GGCAGTGGGT CTGGGACTTC TTACTCTCTC
ACCATCAGCA GAGTGGAGGC TGAAGATGCT GCCACTTATT ACTGCCAGCA GTGGACTAGT iBsiWI
AACCCACCCA CGTTCGGAGG GGGGACCAAG CTGGAAATCA AACGTACGGT GGCTGCACCA 1362*3
TCTGTCTTCA TCTTCCCGCC ATCTGATGAG CAGTTGAAAT CTGGAACTGC CTCTGTTGTG
TGCCTGCTGA ATAACTTCTA TCCCAGAGAG GCCAAAGTAC AGTGGAAGGT GGATAACGCC
120
180
240
300
360
120
480
540
600
660
720
780
840
900
960
1020
1080
1140
1200
1260
1320
1380
440
1500
FIG. 3A
175 557 część stała ludzkiego łańcucha κ 324pz 107 aminokwasów i kodon stop
GGAGAGTGTC ACAGAGCAGG ACAGCAAGGA CAGCACCTAC
GCTGAGCAAA GCAGACTACG AGAAACACAA AGTCTACGCC
CCTGAGCTCG CCCGTCACAA AGAGCTTCAA CAGGGGAGAG łącznik #4=8 lpz
ACGGTTACCAACTACCTAGA CTGGATTCGT GACAACATGC
ATCAGCCTCG ACTGTGCCTT CTAGTTGCCA GCCATCTGTT 177112
TTCCTTGACC CTGGAAGGTG CCACTCCCAC TGTCCTTTCC
ATCGCATTGT CTGAGTAGGT GTCATTCTAT TCTGGGGGGT region poliadenylacji wołowego hormonu wzrostu = 23 lpz GGGGTGGGGC AGGACAGCAA GGGGGAGGAT TGGGAAGACA ATAGCAGGCA TGĆTGGGGAT łącznik #5=15pz
GCGGTGGGCT CTATGGAACC AGCTGGGGCT CGACAGCITAT GCCAAGTACG CCCCCTATTG 2002^3 2017 8
ACGTCAATGA CGGTAAATGG CCCGCCTGGC ATTATGCCCA GTACATGACC TTATGGGACT
TTCCTACTTG GCAGTACATC TACGTATTAG TCATCGCTAT TACCATGGTG ATGCGGTTTT
CTCCAATCGG GTAACTCCCA
AGCCTCAGCA GCACCCTGAC
TGCGAAGTCA CCCATCAGGG koniec łańcucha lekkiego
Eco RI
TGTpGAATTC AGATCCGTTA 1646*7
GGCCGTGATA TCTACGTATG
GTTTGCCCCT CCCCCGTGCC
TAATAAAATG AGGAAATTGC
GGCAGTACAT
CCATTGACGT
GTAACAACTC
CAATGGGCGT
CAATGGGAGT
CGCCCCATTG promotor-wzmacniacz CMV=334pz
GGATAGCGGT
TTGTTTTGGC
ACGCAAATGG
TTGACTCACG
ACCAAAATCA
GCGGTAGGCG łącznik #6=7pz
TAAGCAGAGCĄtaGGTACGffC CTCACATTCA GTGATCAGCA początek 2351'2 2358*9 .
łańcucha ciężkiego syntetyczny i naturalny lider
GGGATTTCCA AGTCTCCACC
ACGGGACTTT CCAAAATGTC
TGTACGGTGG GAGGTCTATA Sal I
CTGAACACAG ACCCGTC&AĆ
Mlu I
IATGIGGTTGGA GCCTCATCTT GCTCTTCCTT GTCGCTGTTG W401
GTACAACTGC AGCAGCCTGG GGCTGAGCTG GTGAAGCCTG
TGCAAGGCTT CTGGCTACAC ATTTACCAGT TACAATATGC
2457
CTflCŁCGTGT ŁCTGTCC CAG -5 -4 -3 -2 τηττί
GGGCCTCAGT GAAGATGTCC
ACTGGGTAAA ACAGACACCT
GGTCGGGGCC
CAGAAGTTCA
CAGCTCAGCA
TACGGCGGTG Nhe I
GCT AGCACCA
GGCACAGCGG
TGGAACTCAG część zmienna łańcucha ciężkiego=363pz=121 aminokwasów
TGGAATGGAT
AAGGCAAGGC
GCCTGACATC
ACTGGTACTT
AGGGCCCATC
CCCTGGGCTG
TGGAGCTATT
CACATTGACT
TGAGGACTCT
CAATGTCTGG
GGTCTTCCCC
CCTGGTCAAG
TATCCCGGAA
GCAGACAAAT
GCGGTCTATT
GGCGCAGGGA
CTGGCACCCT
GACTACTTCC
ATGGTGATAC
CCTCCAGCAC
ACTGTGCAAG
CCACGGTCAC
CCTCCAAGAG
CCGAACCGuT część stała ludzkiego łańcucha yl GCGCCCTGAC CAGCGGCGTG CACACCTTCC CGGCTGTCCT
TTCCTACAAT
AGCCTACATG
ATCGACTTAC cgtctctgca)
CACCTCTGGG
GACGGTGiCG
ACAGTCCTCA
1560 1620
1680
1740 1800
1860
1920
1980
2040
2100
2160
2220
2280
2340
2400
2460
2520
2580
2640
2700
2760
2820
2280
2940
3000
FIG. 3B
175 557
GGACTCTACT
TACATCTGCA
AAATCTTGTG
CCGTCAGTCT
GAGGTCACAT
TACGTGGACG
AGCACGTACC
GAGTACAACT
AAAGCCAAAG
CTGACCAAGA
GCCGTGGAGT
CTGGACTCCG
CAGCAGGGGA
CAGAAGAGCC
AGACTGGATT
CTTCTAGTTG
GTGCCACTCC
GGTGTCATTC
ACAATAGCAG
GCTGGATCTC
AGGAAAATTA
ATGCTTTAGA
CAGAGCTGAG
ATCACCGAAG
ATAGAGAGGG
330 aminokwasów i kodon stop CCCTCAGCAG CGTGGTGACC GTGCCCTCCA
ACGTGAATCA CAAGCCCAGC AACACCAAGG
ACAAAACTCA CACATGCCCA CCGTGCCCAG
TCCTCTTCCC CCCAAAACCC AAGGACACCC
GCGTGGTGGT GGACGTGAGC CACGAAGACC
GCGTGGAGGT GCATAATGCC AAGACAAAGC
GTGTGGTCAG CGTCCTCACC GTCCTGCACC
GCAAGGTCTC CAACAAAGCC CTCCCAGCCC
GGCAGCCCCG AGAACCACAG GTGTACACCC
ACCAGCTCAG CCTGACCTGC CTGGTCAAAG
GGGAGAGCAA TGGGCAGCCG GAGAACAACT
ACGGCTCCTT CTTCCTCTAC AGCAAGCTCA
ACGTCTTCTC ATGCTCCGTG ATGCATGAGG kodon stop łańcucha ciężkiego [Bam m
TCTCCCTGTC TCCGGGTAAA ITGA3GATCCG
3813
CGTGACAACA TGCGGCCGTG ATATCTACGT
CCAGCCATCT GTTGTTTGCC CCTCCCCCGT
CACTGTCCTT TCCTAATAAA ATGAGGAAAT
TATTCTGGGG GGTGGGGTGG
GGCAGGACAG region poliadenylaęji wołowego hormonu wzrostu = 23 lpz
GCATGCTGGG ccgatccccJa
ATTTTAACAC
GACAGTGGTC
ACTCCTAAGC
CCTGATTCCG
CAGGAGCCAG
GATGCGGTGG GCTCTATGGA
GCTTTGCTTC TCAATTTCTT
CAATTCAGTA GTTGATTCAG łącznik #7=8 lpz TTAACGGTTA CCAACTACCT
ATGATCAGCC TCGACTGTGC 3894 5
GCCTTCCTTG ACCCTGGAAG
TGCATCGCAT TGTCTGAGTA
CAAGGGGGAG GATTGGGAAG ,! łącznik #8=3 4pz
ACCAGCTGGG GCTCGACAGC 4125*6
ATTTGCATAA TGAGAAAAAA
CAAATGCGTT GCCAAAAAGG mysi większy promotor P-globiny=366pz
TCTGCACAGA
CAGTGAGTGG
T AGAGCCACA
GGCAGAGCAT
TAAGGACAAA
CACAGCATTC
CCTTGGTAAG
ATAAGGTGAG
GCAGCTTGGG tggacaagaa
CACCTGAACT
TCATGATCTC
CTGAGGTCAA
CGCGGGAGGA
AGGACTGGCT
CCATCGAGAA
TGCCCCCATC
GCTTCTATCC
ACAAGACCAC
CCGTGGACAA
CTCTGCACAA
CATTATTCAG
TAGGGAGAAA
GGCCAATCTG
GTAGGATCAG
CACCCAGACC
AGCAGAGCCC
CCTGGGGGGA
CCGGACCCCT
GTTCAACTGG
GCAGTACAAC
GAATGGCAAG
AACCATCTCC
CCGGGATGAG
CAGCGACATC
GCCTCCCGTG
GAGCAGGTGG
CCACTACACG
AGGGAGT ACC
TATGCTTGTC
CTCACACAGG
TTGCTCCTCA
3060
3120
3:80
3240
3300
3360
3420
3480
3540
3600
3660
3720
3780
3840
3900
3960
4020
4080
40
4200
4260
4220
4380
z.440
4500
FIG. 3C
175 557 [ łącznik #9=19pz 5’ nietranslowany DHFR=82pz
CATTTGCTTC TGACATAGTT GTGTTlGGGAG CTTGGATAGĆ TTGGAĆAGCT CAGGGCTGCG 4525*6 4544*5
ATTTCGCGCC AAACTTGACG GCAATCCTAG CGTGAAGGC7 GGTAGGATTT TATCCCCGCT i START DHFR
GCCATCgT^G TTCGACCATT GAACTGCATC GTCGCCGTGT CCCAAAATAT GGGGATTGGC 4626 *7
AAGAACGGAG ACCTACCCTG GCCTCCGCTC AGGAACGAGT TCAAGTACTT CCAAAGAATG
ACCACAACCT CTTCAGTGGA AGGTAAACAG AATCTGGTGA TTATGGGTAG GAAAACCTGG mysi DHFR=564pz=187 aminokwasów i kodon stop
TTCTCCATTC CTGAGAAGAA fCGACCTTTA AAGGACAGAA TTAATATAGT TCTCAGTAGA GAACTCAAAG AACCACCACG AGGAGCTCAT TTTCTTGCCA AAAGTTTGGA TGATGCCTTA
AGACTTATTG AACAACCGGA.ATTGGCAAGT AAAGTAGACA TGGTTTGGAT AGTCGGAGGC
AGTTCTGTTT ACCAGGAAGC CATGAATCAA CCAGGCCACC TTAGACTCTT TGTGACAAGG
ATCATGCAGG AATTTGAAAG TGACACGTTT TTCCCAGAAA TTGATTTGGG GAAATATAAA
CTTCTCCCAG AATACCCAGG CGTCCTCTCT GAGGTCCAGG AGGAAAAAGG CATCAAGTAT STOP DHFR i 3’ nietranslowany DHFR=82pz
AAGTTTGAAG TCTACGAGAA GAAAGACfTAAl| CAGGAAGATG CTTTCAAGTT CTCTGĆTCCC 5140 1 f łącznik #10
CTCCTAAAGC TATGCATTTT TATAAGACCA TGGGACTTTT GCTGGCTTTA G^TCAGCCTC =10pz 527213
GAprŚTGCCT tctagttgcc agccatctgt tgtttgcccc tcccccgtgc cttccttgac region poliadenylacji wołowego hormonu wzrostu = 23 lpz cctggaaggt gccactccca ctgtcctttc ctaataaaat gaggaaattg* catcgcattg tctgagtagg tgtcattcta ttctgggggg tggggtgggg caggacagca agggggagga łącznik #11
TTGGGAAGAC AATAGCAGGC ATGCTGGGGA TGCGGTGGGC TCTATGGAAC CAOCTGGGGC = 17pz . 5513 4
TCGAGCTACT AGCTTTGCTT CTCAATTTCT TATTTGCATA ATGAGAAAAA AAGGAAAATT 5530 11
AATTTTAACA CCAATTCAGT AGTTGATTGA GCAAATGCGT TGCCAAAAAG GATGCTTTAG mysi większy promotor 3-głobiny=366pz agacagtgtt ctctgcacag ataaggacaa ctagggagaa atatgcttgt catcaccgaa
GACTCCTAAG CCAGTGAGTG GCACAGCATT CTAGGGAGAA ATATGCTTGT CATCACCGAA
GCCTGATTCC GTAGAGCCAC ACCTTGGTAA GGGCCAATCT GCTCACACAG GATAGAGAGG
GCAGGAGCCA GGGCAGAGCA TATAAGGTGA GGTAGGATCA GTTGCTCCTC ACATTTGCTT , łącznik #12=2 lpz iSTART NEO
CTGACATAGT TGTGTTGGGA GCTTGGATCG ATCCTCT^TGl GTTGAACAAG ATGGATTGCA 5896*7 5917*8
CGCAGGTTCT CCGGCCGCTT GGGTGGAGAG GCTATTCGGC TATGACTGGG CACAACAGAC
4560
4620
4680
4740
4800
4860
4920
4380
5040
5100
5160
5220
5280
5340
5400
5460
5520
5580
5640
5700
5760
5820
5880
5940
6000
FIG. 3D
175 557
AATCGGCTGC TCTGATGCCG CCGTGTTCCG GCTGTCAGCG CAGGGGCGCC CGGTTCTTTT fosfotransferaza neomycynowa=795pzF:264 aminokwasów i kodon stop
TGTCAAGACC GACCTGTCCG GTGCCCTGAA
GTGGCTGGCC ACGACGGGCG TTCCTTGCGC
AAGGGACTGG CTGCTATTGG GCGAAGTGCC
TCCTGCCGAG AAAGTATCCA TCATGGCTGA
GGCTACCTGC CCATTCGACC ACCAAGCGAA
GGAAGCCGGT CTTGTCGATC AGGATGATCT
CGAACTGTTC GCCAGGCTCA AGGCGCGCAT
TGGCGATGCC TGCTTGCCGA ATATCATGGT
CTGTGGCCGG CTGGGTGTGG CGGACCGCTA
TGCTGAAGAG CTTGGCGGCG AATGGGCTGA
TCCCGATTCG CAGCGCATCG CCTTCTATCG
CTGGGGTTCG AAATGACCGA CCAAGCGACG
3’ nietranslowany DHFR=173pz
ACCGCCGCCT TCTATGAAAG GTTGGGCTTC GGAATCGTTT TCCGGGACGC
ATCCTCCAGC GCGGGGATCT CATGCTGGAG TTCTTCGCCC ACCCOAACTT 6805 *6
GCTTATAATG GTTACAAATA AAGCAATAGC ATCACAAATT TCACAAATAA wczesny sygnał poliadenylacji SV40=133pz
TCACTGCATT CTAGTTGTGG TTTGTCCAAA CTCATCAATC TATCTTATCA łącznik #13=19pz
GCGGCCGCGA TCCCGTCGAG AGCTTGGCGT AATCATGGTC ATAGCTGTTT 7037 *8
PUC 19
ATTGTTATCC GCTCACAATT CCACACAACA TACGAGCCGG AAGCATAAAG
GGGGTGCCTA ATGAGTGAGC TAACTCACAT TAATTGCGTT GCGCTCACTG
AGTCGGGAAA CCTGTCGTGC CAGCTGCATT AATGAATCGG CCAACGCGCG
GTTTGCGTAT TGGGCGCTCT TCCGCTTCCT CGCTCACTGA CTCGCTGCGC
GGCTGCGGCG AGCGGTATCA GCTCACTCAA AGGCGGTAAT ACGGTTATCC
GGGATAACGC AGGAAAGAAC ATGTGAGCAA AAGGCCAGCA AAAGGCCAGG bakteryjny początek replikacji=7461
AGGCCGCGTT GCTGGCGTTT 0TCCATAGGC TCCGCCCCCC TGACGAGCAT
TGAACTGCAG GACGAGGCAG CGCGGCTATC
AGCTGTGCTC GACGTTGTCA CTGAAGCGCG
GGGGCAGGAT CTCCTGTCAT CTCACCTTGC
TGCAATGCGG CGGCTGCATA CGCTTGATCC
ACATCGCATC GAGCGAGCAC GTACTCGGAT
GGACGAAGAG CATCAGGGGC TCGCGCCAGC
GCCCGACGGC GAGGATCTCG TCGTGACCCA
GGAAAATGGC CGCTTTTCTG GATTCATCGA
TCAGGACATA GCGTTGGCTA CCCGTGATAT
CCGCTTCCTC GTGCTTTACG GTATCGCCGC STOP ΝΕΟΙ ccttcttgac gagttcttcOągcgggact 6712*3
CCCAACCTGC CATCACGAGA TTTCGATTCC
CGGCTGGATG
GTTTATTGCA
AGCATTTTTT
TGTCTGGAITC
7018*9
CCTGTGTGAA
TGTAAAGCCT
CCCGCTTTCC gggagaggcg
TCGGTCGTTC
ACAGAATCAG
AACCGTAAAA
CACAAAAATC
6060
6120
6180
6240
6300
6360
6420
6480
6540
6600
6560
6720
6780
6840
6900
6360
7020
7080
7140
7200
7260
7320
7380
7440
7500
FIG. 3E
175 557
GACGCTCAAG TCAGAGGTGG CGAAACCCGA CAGGACTATA AAGATACCAG GCGTTTCCCC 7560
CTGGAAGCTC CCTCGTGCGC TCTCCTGTTC CGACCCTGCC GCTTACCGGA TACCTGTCCG 7620
CCTTTCTCCC TTCGGGAAGC GTGGCGCTTT CTCAATGCTC ACGCTGTAGG TATCTCAGTT 7650
CGGTGTAGGT CGTTCGCTCC AAGCTGGGCT GTGTGCACGA ACCCCCCGTT CAGCCCGACC 7740
GCTGCGCCTT ATCCGGTAAC TATCGTCTTG AGTCCAACCC GGTAAGACAC GACTTATCGC 7800
CACTGGCAGC AGCCACTGGT AACAGGATTA GCAGAGCGAG GTATGTAGGC GGTGCTACAG 7860
AGTTCTTGAA GTGGTGGCCT AACTACGGCT ACACTAGAAG GACAGTATTT ggtatctgcg 7920
CTCTGCTGAA GCCAGTTACC TTCGGAAAAA GAGTTGGTAG CTCTTGATCC GGCAAACAAA 7980
CCACCGCTGG TAGCGGTGGT TTTTTTGTTT GCAAGCAGCA GATTACGCGC agaaaaaaag 8040
GATCTCAĄGA AGATCCTTTG ATCTTTTCTA CGGGGTCTGA CGCTCAGTGG aacgaaaact 8100
CACGTTAAGG GATTTTGGTC ATGAGATTAT CAAAAAGGAT CTTCACCTAG ATCCTTTTAA 8160
kodon stop
ATTAAAAATG β-laktamazy AAGTTTTAAA -----I 'TCAATCTAAA GTATATATGA GTAAACTTGG TCTGACAGnT 8220
TJccaatgctt AATCAGTGAG GCACCTATCT CAGCGATCTG TCTATTTCGT TCATCCATAG 8280
TTGCCTGACT CCCCGTCGTG TAGATAACTA CGATACGGGA GGGCTTACCA TCTGGCCCCA 8340
GTGCTGCAAT GATACCGCGA GACCCACGCT CACCGGCTCC AGATTTATCA GCAATAAACC S400
3-laktamaza=86 lpz=286 aminokwasów i kodon stop
AGCCAGCCGG AAGGGCCGAG CGCAGAAGTG GTCCTGCAAC TTTATCCGCC TCCATCCAGT 8460
CTATTAATTG TTGCCGGGAA GCTAGAGTAA GTAGTTCGCC AGTTAATAGi TTGCGCAACG 8520
TTGTTGCCAT TGCTACAGGC ATCGTGGTGT CACGCTCGTC GTTTGGTATG GCTTCATTCA 8580
GCTCCGGTTC CCAACGATCA AGGCGAGTTA CATGATCCCC CATGTTGTGC AAAAAAGCGG 8640
TTAGCTCCTT CGGTCCTCCG ATCGTTGTCA GAAGTAAGTT GGCCGCAGTG TTATCACTCA 8700
TGGTTATGGC AGCACTGCAT AATTCTCTTA CTGTCATGCC ATCC G TAAGA TGCTTTTCTG 8760
TGACTGGTGA GTACTCAACC AAGTCATTCT GAGAATAGTG TATGCGGCGA CCGAGTTGCT 8820
CTTGCCCGGC .GTCAAT ACGG GATAATACCG CGCCACATAG CAGAACTTTA AAAGTGCTCA 8880
TCATTGGAAA ACGTTCTTCG GGGCGAAAAC TCTCAAGGAT CTTACCGCTG TTGAGATCCA 8940
GGTCGATGTA ACCCACTCGT GCACCCAACT GATCTTCAGC ATCTTTTACT TTCACCAGCG 9000
TTTCTGGGTG AGCAAAAACA aatact|cat)a GGAAGGCAAA ATGCCGCAAA kodon start β-laktamazy AAAGGGAATA AGGGCGACAC 9060
GGAAATGTTG CTCTTCCTTT TTCAATATTA TTGAAGCATT TATCAGGGTT 9120
ATTGTCTCAT GAGCGGATAC ATATTTGAAT GTATTTAGAA AAATAAACAA ataggggttc 9180
CGCGCACATT TCCCCGAAAA GTGCCACCT
UIG. 3U
175 557
LIDER
RAMKA i Met ATG -20 Asp Phe Gln CAG Val GTG Gln CAG 996 Ile ATT -15 Ile ATC Ser Phe Leu Leu CTA 1014 -10 Ile ATC Ser AGT Ala GCT 1023 Ser TCA Val GTC
GAT TTT 987 AGC 1005 TTC CTG
-5 -1 +1 FR1 10
Ile Met Ser Arg Gly Gln Ile Val Leu Ser Gln Ser Pro Ala Ile Leu Ser Ala Ser
ATA ATG TCC AGA GGA CAA ATT GTT CTC TCC CAG TCT CCA GCA ATC CTG TCT GCA TCT
1038 1047 1056 1065 1074 1083
20 23 24 CDR1 27/ 29 30 34
Pro Gly Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser T yr Ile His
CCA GGG GAG AAG GTC ACA ATG ACT TGC AGG GCC AGC TCA AGT GTA AGT TAC ATC CAC
1095 1104 1113 1122 1131 1140
35 FR2 40 45 49 50 CDR2
T rp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Ser Ser Pro Lys Pro Trp Ile T yr Ala Thr Ser Asn
TGG TTC CAG CAG AAG CCA GGA TCC TCC CCC AAA CCC TGG ATT TAT GCC ACA TCC AAC
1152 1161 1170 1179 1188 1197
55 56 57 60 FR3 65 70
Leo Ala Ser Gly Val Pro Val Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly T hr Ser Tyr Ser
CTG GCT TCT GGA GTC CCT GTT CGC TTC AGT GGC AGI GGG TCT GGG ACT TCT TAC TCT
1209 1218 1227 1236 1245 I25a
75 80 85 88 80 90
Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr T yr I yr Cys Gln Glp Trp
CTC ACC ATC AGC AGA GTG GAG GCT GAA GAT GCT GCC ACT TAT TAC TGC CAG CAG TGG
1266 1275 1284 1293 1302 131!
CDR3 95 97 98 100 FR4 105 107
Thr Ser Asn Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
ACT AGT AAC CCA CCC ACG TTC GGA GGG GGG ACC AAG CTG GAA ATC AAA
1323 1332 1341 1350 1359
FIG. 4
175 557
LIDER
-19 -15 -10 -5
RAMKA : l Met Gly Trp Ser Leu Ile Leu Leu Phe Leu Val Ala Val Ala Thr Arg Val
ATG GGT TGG AGC CTC ATC TTG CTC TTC CTT GTC GCT GTT GCT ACG CGT GTC
2409 2418 2427 2436 2445
-1 +1 FR1 10 15
Leu Ser Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Lys Ala Gly Ala Ser
CTG TCC CAG GTA CAA CTG CAG CAG CCT GGG GCT GAG CTG GTG AAG CCT GGG GCC TCA
2460 2469 2478 2487 2496 2505
20 25 30 31 CDR1 35 36
Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Asn Met His Trp
GTG AAG ATG TCC TGC AAG GCT TCT GGC TAC ACA TTT ACC AGT TAC AAT ATG CAC TGG
2517 2526 2536 2544 2553 2562
40 FR2 45 49 50 52 52A 53 54
Val Lys Gln Thr Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Ile Gly Ala Ile Tyr PrG Gly Asn
GTA AAA CAG ACA CCT GGT CGG GGC CTG GAA TGG ATT GGA GCT ATT TAT CCC GGA AAT
2574 2583 2592 2601 2610 2619
55 CDR2 60 65 66 FR3 70
Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys
GGT GAT ACT TCC TAC AAT CAG AAG TTC AAA GGC AAG GCC ACA TTG ACT GCA GAC AAA
2631 2640 2649 2658 2667 2676
75 80 82 82A 82B 82C 83 85
Ser Ser Ser Thr Ala T yr Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala \zal
TCC TCC AGC ACA GCC TAC ATG CAG CTC AGC AGC CTG ACA TCT GAG GAC TCT GCG GTC
2688 2697 2706 2715 2724 2733
90 94 95 CDR3 100 100A 100B 100C 100D 101 102 103
Tyr T yr Cys Ala Arg Ser Thr Tyr Tyr Gly Gly Asp Trp Tyr Phe Asn Val Trp Gly
TAT TAC TGT GCA AGA TCG ACT TAC TAC GGC GGT GAC TGG TAC TTC AAT GTC TGG GGC
2745 2754 2763 2772 2781 Ξ^9Γ
105 FR4 110 113
Ala Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ala
GCA GGG ACC ACG GTC ACC GTC TCT GCA
2802 2811 2820
FIG. 5
175 557
FIG. 6 <-> i
PRZECIWCIAŁO (ug/ml) FIG. 7
175 557 Γ~~''ι
UJ
Μ
UJ
Μ o
60—i
(Z) 1“
(Z) 50-
>-
_l 40-
o 30-
Ll. -
O 20-
Ul -
CL ω 10-
o- -••o-
< ι ii K,rnvr-7Mr CHIMERIC ANTI CHIMERIC ΑΝΤΙ 2B8
CHIMERYCZNE CD20 antibody CD20 antibodyqΗIIMERYCZNE <CH°) (SP2/2)\ PRZECIWCIAŁO
C3>
ANTY-CD20 ANTIBODY ANTY-CD2
PRZECIWCIAŁO
FIG. 8
175 557
DN\ PO INFUZJI
FIG. 9C
175 557
O
I—
ΤΟ
O
CHIMERYCZNE ANTYtCD20
O
M
O
Cc ero
O >^4
CA 120-t
LiJ 100-^
O
CD 80-
O
22 60-
22 -
< 40-
-
LJ 02 20-
o--
TIME (DAYS)
CZAS (DNIJ
FIG. 10
FIG. 1 1 o
175 557
WIELKOŚĆ GUZAfmrrś) W I E LKO ŚĆ GUZA(mm2)
ROZTWOR
FIG. 12
ROZTWÓR
FIG. 13
175 557
(8/12/93)
OWI OD RX
FIG. 14A
(8/12/93)
DNI OD R/
FIG. 14B
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 90 egz. Cena 6,00 zł

Claims (1)

  1. Zastrzeżenie patentowe
    Aktywne immunologicznie, chimeryczne przeciwciało anty-CD20 produkowane przez transfektomę zawierającą anty-CD20 w TCAE 8 (w depozycie ATCC o numerze 69119).
    * * *
PL93320526A 1992-11-13 1993-11-12 Aktywne immunologicznie chimeryczne przeciwciało anty-CD20 PL175557B1 (pl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US97889192A 1992-11-13 1992-11-13
PCT/US1993/010953 WO1994011026A2 (en) 1992-11-13 1993-11-12 Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human b lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of b cell lymphoma

Publications (1)

Publication Number Publication Date
PL175557B1 true PL175557B1 (pl) 1999-01-29

Family

ID=25526490

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL93320526A PL175557B1 (pl) 1992-11-13 1993-11-12 Aktywne immunologicznie chimeryczne przeciwciało anty-CD20

Country Status (23)

Country Link
US (2) US5736137A (pl)
EP (1) EP2000149B1 (pl)
KR (1) KR100365632B1 (pl)
CN (5) CN1270774C (pl)
AT (2) ATE431158T1 (pl)
BR (1) BR1100622A (pl)
CA (1) CA2626445A1 (pl)
DE (3) DE122009000070I1 (pl)
DK (2) DK2000149T3 (pl)
ES (2) ES2321567T3 (pl)
FR (1) FR04C0018I2 (pl)
GE (3) GEP20074162B (pl)
HU (1) HU219264B (pl)
IL (1) IL107591A (pl)
LU (1) LU91620I2 (pl)
MY (1) MY111196A (pl)
NL (1) NL300424I1 (pl)
PL (1) PL175557B1 (pl)
PT (2) PT1005870E (pl)
SG (1) SG45294A1 (pl)
TW (1) TW376320B (pl)
UA (1) UA27946C2 (pl)
ZA (1) ZA938466B (pl)

Families Citing this family (765)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
DE69303494T2 (de) 1992-11-13 1997-01-16 Idec Pharma Corp Therapeutische verwendung von chimerischen und markierten antikörper gegen menschlichen b lymphozyt beschränkter differenzierung antigen für die behandlung von b-zell-lymphoma
US7744877B2 (en) * 1992-11-13 2010-06-29 Biogen Idec Inc. Expression and use of anti-CD20 Antibodies
US5736137A (en) * 1992-11-13 1998-04-07 Idec Pharmaceuticals Corporation Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma
US5595721A (en) 1993-09-16 1997-01-21 Coulter Pharmaceutical, Inc. Radioimmunotherapy of lymphoma using anti-CD20
US5885574A (en) * 1994-07-26 1999-03-23 Amgen Inc. Antibodies which activate an erythropoietin receptor
AU3272695A (en) * 1994-08-12 1996-03-07 Immunomedics Inc. Immunoconjugates and humanized antibodies specific for b-cell lymphoma and leukemia cells
US8771694B2 (en) * 1994-08-12 2014-07-08 Immunomedics, Inc. Immunoconjugates and humanized antibodies specific for B-cell lymphoma and leukemia cells
US20030180290A1 (en) * 1995-06-07 2003-09-25 Idec Pharmaceuticals Corporation Anti-CD80 antibody having ADCC activity for ADCC mediated killing of B cell lymphoma cells alone or in combination with other therapies
US6373497B1 (en) * 1999-05-14 2002-04-16 Zight Corporation Time sequential lookup table arrangement for a display
US7033589B1 (en) * 1997-02-20 2006-04-25 Biogen Idec Ma Inc. γ-1 anti-human CD23 monoclonal antibodies and use thereof as therapeutics
US6893636B2 (en) * 1997-02-20 2005-05-17 Biogen Idec Ma Inc. Gamma-1 and gamma-3 anti-human CD23 monoclonal antibodies and use thereof as therapeutics
US6171586B1 (en) * 1997-06-13 2001-01-09 Genentech, Inc. Antibody formulation
US6991790B1 (en) * 1997-06-13 2006-01-31 Genentech, Inc. Antibody formulation
US6562950B2 (en) * 1997-09-02 2003-05-13 Insight Strategy & Marketing Ltd. Heparanase activity neutralizing anti-heparanase monoclonal antibody
US20010006630A1 (en) * 1997-09-02 2001-07-05 Oron Yacoby-Zeevi Introducing a biological material into a patient
US6699672B1 (en) * 1997-09-02 2004-03-02 Insight Biopharmaceuticals Ltd. Heparanase specific molecular probes and their use research and medical applications
US20020088019A1 (en) * 1997-09-02 2002-07-04 Oron Yacoby-Zeevi Methods of and pharmaceutical compositions for improving implantation of embryos
US20030161823A1 (en) * 1998-08-31 2003-08-28 Neta Ilan Therapeutic and cosmetic uses of heparanases
US20040213789A1 (en) * 1997-09-02 2004-10-28 Oron Yacoby-Zeevi Heparanase activity neutralizing anti-heparanase monoclonal antibody and other anti-heparanase antibodies
US6177545B1 (en) * 1997-09-02 2001-01-23 Insight Strategy & Marketing Ltd. Heparanase specific molecular probes and their use in research and medical applications
US6528624B1 (en) 1998-04-02 2003-03-04 Genentech, Inc. Polypeptide variants
US6194551B1 (en) 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
US6242195B1 (en) 1998-04-02 2001-06-05 Genentech, Inc. Methods for determining binding of an analyte to a receptor
AU3657899A (en) 1998-04-20 1999-11-08 James E. Bailey Glycosylation engineering of antibodies for improving antibody-dependent cellular cytotoxicity
PL195870B1 (pl) * 1998-08-11 2007-11-30 Biogen Idec Inc Zastosowanie przeciwciała anty-CD20, zastosowanieznakowanego radioaktywnie przeciwciała anty-CD20,zastosowanie przeciwciała anty-CD20 do przygotowania leku zwierającego przeciwciało i chemioterapięoraz zastosowanie przeciwciała anty-CD20 do przygotowania leku zawierającego przeciwciało i szpik kostny
US20030217375A1 (en) * 1998-08-31 2003-11-20 Eyal Zcharia Transgenic animals expressing heparanase and uses thereof
US20010033839A1 (en) * 1999-10-04 2001-10-25 Emilio Barbera-Guillem Vaccine and immunotherapy for solid nonlymphoid tumor and related immune dysregulation
US6224866B1 (en) 1998-10-07 2001-05-01 Biocrystal Ltd. Immunotherapy of B cell involvement in progression of solid, nonlymphoid tumors
DK1616572T3 (da) * 1998-11-09 2010-12-06 Biogen Idec Inc Kimært anti-CD20-antistof, rituxan, til anvendelse i behandling af kronisk lymfatisk leukæmi
HK1041811A1 (zh) * 1998-11-09 2002-07-26 Idec药物公司 接受bmt或pbsc移植患者的抗cd20嵌合抗体治疗
AU1727500A (en) * 1998-11-17 2000-06-05 Tanox, Inc. Bispecific molecules cross-linking itim and itam for therapy
US7183387B1 (en) 1999-01-15 2007-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
US6737056B1 (en) * 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
KR100940380B1 (ko) * 1999-01-15 2010-02-02 제넨테크, 인크. 효과기 기능이 변화된 폴리펩티드 변이체
AU2878600A (en) * 1999-03-01 2000-09-21 Hadasit Medical Research Services & Development Company Ltd Polynucleotide encoding a polypeptide having heparanase activity and expression of same in genetically modified cells
MY133346A (en) * 1999-03-01 2007-11-30 Biogen Inc Kit for radiolabeling ligands with yttrium-90
US20020102208A1 (en) 1999-03-01 2002-08-01 Paul Chinn Radiolabeling kit and binding assay
ATE311199T1 (de) * 1999-05-07 2005-12-15 Genentech Inc Behandlung von autoimmunkrankheiten mit antagonisten die oberflächenmarker von b zellen binden
EP1645292A1 (en) 1999-05-07 2006-04-12 Genentech, Inc. Treatment of autoimmune diseases with antagonists which bind to B cell surface markers
EP1194167B1 (en) * 1999-06-09 2009-08-19 Immunomedics, Inc. Immunotherapy of autoimmune disorders using antibodies which target b-cells
ITMI991299A1 (it) * 1999-06-11 2000-12-11 Consiglio Nazionale Ricerche Uso di anticorpi contro antigeni di superficie per il trattamento della malattia trapianto contro ospite
US20030086924A1 (en) * 1999-06-25 2003-05-08 Genentech, Inc. Treatment with anti-ErbB2 antibodies
JP4579471B2 (ja) * 1999-06-25 2010-11-10 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ＥｒｂＢ２抗体を用いる前立腺癌の処置
US7041292B1 (en) 1999-06-25 2006-05-09 Genentech, Inc. Treating prostate cancer with anti-ErbB2 antibodies
US20040013667A1 (en) * 1999-06-25 2004-01-22 Genentech, Inc. Treatment with anti-ErbB2 antibodies
US6949245B1 (en) * 1999-06-25 2005-09-27 Genentech, Inc. Humanized anti-ErbB2 antibodies and treatment with anti-ErbB2 antibodies
AU778863B2 (en) * 1999-07-12 2004-12-23 Genentech Inc. Blocking immune response to a foreign antigen using an antagonist which binds to CD20
US8557244B1 (en) 1999-08-11 2013-10-15 Biogen Idec Inc. Treatment of aggressive non-Hodgkins lymphoma with anti-CD20 antibody
US6451284B1 (en) * 1999-08-11 2002-09-17 Idec Pharmaceuticals Corporation Clinical parameters for determining hematologic toxicity prior to radioimmunotheraphy
AU6929100A (en) * 1999-08-23 2001-03-19 Biocrystal Limited Methods and compositions for immunotherapy of b cell involvement in promotion ofa disease condition comprising multiple sclerosis
US20020028178A1 (en) * 2000-07-12 2002-03-07 Nabil Hanna Treatment of B cell malignancies using combination of B cell depleting antibody and immune modulating antibody related applications
CA2390412A1 (en) * 1999-11-08 2001-05-17 Idec Pharmaceuticals Corporation Treatment of b cell malignancies using anti-cd40l antibodies in combination with anti-cd20 antibodies and/or chemotherapeutics and radiotherapy
AU2048501A (en) * 2000-02-16 2001-08-27 Genentech Inc. Uses of agonists and antagonists to modulate activity of tnf-related molecules
US20030185796A1 (en) * 2000-03-24 2003-10-02 Chiron Corporation Methods of therapy for non-hodgkin's lymphoma
CN1981868A (zh) * 2000-03-31 2007-06-20 拜奥根Idec公司 抗细胞因子抗体或拮抗剂与抗－cd20在b细胞淋巴瘤治疗中的联合应用
AU2001247616B2 (en) 2000-04-11 2007-06-14 Genentech, Inc. Multivalent antibodies and uses therefor
CA2399940A1 (en) * 2000-04-13 2001-10-25 The Rockefeller University Enhancement of antibody-mediated immune responses
EP1286692A4 (en) * 2000-04-25 2004-11-17 Idec Pharma Corp INTRATHECAL ADMINISTRATION OF RITUXIMAB FOR THE TREATMENT OF LYMPHOMAS OF THE CENTRAL NERVOUS SYSTEM
EP1280923A2 (en) * 2000-04-28 2003-02-05 Millennium Pharmaceuticals, Inc. 14094, a human trypsin family member and uses thereof
CN1447696A (zh) * 2000-05-19 2003-10-08 杰南技术公司 用于提高对ErbB拮抗剂癌症治疗的有效应答可能性的基因检测试验
AU6836301A (en) * 2000-06-20 2002-01-02 Idec Pharma Corp Treatment of b-cell associated diseases such as malignancies and autoimmune diseases using a cold anti-cd20 antibody/radiolabeled anti-cd22 antibody combination
AU6541801A (en) * 2000-06-22 2002-01-02 Idec Pharma Corp Bispecific fusion protein and method of use for enhancing effector cell killing of target cells
US20060029604A1 (en) * 2000-06-28 2006-02-09 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a GlcNAc2Man3GlcNAc2 glycoform
US20060034830A1 (en) * 2000-06-28 2006-02-16 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a GalGlcNAcMan5GLcNAc2 glycoform
US20060024304A1 (en) * 2000-06-28 2006-02-02 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a Man5GlcNAc2 glycoform
US20060034828A1 (en) * 2000-06-28 2006-02-16 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a GlcNAcMAN5GLCNAC2 glycoform
KR20030031957A (ko) * 2000-07-12 2003-04-23 아이덱 파마슈티칼즈 코포레이션 Ｂ 세포 고갈 항체 및 면역 조절 항체 관련 적용의 조합을이용한 ｂ 세포 악성종양의 치료
US20020058029A1 (en) * 2000-09-18 2002-05-16 Nabil Hanna Combination therapy for treatment of autoimmune diseases using B cell depleting/immunoregulatory antibody combination
US20020128448A1 (en) * 2000-10-20 2002-09-12 Idec Pharmaceuticals Corporation Variant IgG3 Rituxan and therapeutic use thereof
US7906492B2 (en) * 2001-01-16 2011-03-15 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Therapy-enhancing glucan
US7507724B2 (en) * 2001-01-16 2009-03-24 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Therapy-enhancing glucan
US7829084B2 (en) * 2001-01-17 2010-11-09 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Binding constructs and methods for use thereof
US20030133939A1 (en) * 2001-01-17 2003-07-17 Genecraft, Inc. Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
US7754208B2 (en) 2001-01-17 2010-07-13 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
AU2008200400B2 (en) * 2001-01-17 2012-06-07 Aptevo Research And Development Llc Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
CN101684158A (zh) * 2001-01-17 2010-03-31 特鲁比昂药品公司 结合域-免疫球蛋白融合蛋白
AU2002237972B2 (en) 2001-01-31 2007-11-29 Biogen Idec Inc. Use of CD23 antagonists for the treatment of neoplastic disorders
RU2306952C2 (ru) * 2001-01-31 2007-09-27 Байоджен Айдек Инк. Лечение в-клеточных злокачественных опухолей с использованием комбинации применений, связанных с антителами, уменьшающими количество b-клеток, и с иммуномодулирующими антителами
US20020159996A1 (en) 2001-01-31 2002-10-31 Kandasamy Hariharan Use of CD23 antagonists for the treatment of neoplastic disorders
US20030103971A1 (en) * 2001-11-09 2003-06-05 Kandasamy Hariharan Immunoregulatory antibodies and uses thereof
CN100574803C (zh) 2001-01-31 2009-12-30 拜奥根Idec公司 免疫调节抗体在治疗肿瘤性疾病中的用途
US20030211107A1 (en) * 2002-01-31 2003-11-13 Kandasamy Hariharan Use of CD23 antagonists for the treatment of neoplastic disorders
US20070065436A1 (en) * 2001-01-31 2007-03-22 Biogen Idec Inc. Anti-cd80 antibody having adcc activity for adcc mediated killing of b cell lymphoma cells alone or in combination with other therapies
ES2364816T3 (es) * 2001-04-02 2011-09-14 Genentech, Inc. Terapia de combinación.
AU2002307037B2 (en) * 2001-04-02 2008-08-07 Biogen Idec Inc. Recombinant antibodies coexpressed with GnTIII
US20040136908A1 (en) * 2001-04-09 2004-07-15 Olson William C. Anti-cd19 immunotoxins
US20020193569A1 (en) * 2001-06-04 2002-12-19 Idec Pharmaceuticals Corporation Bispecific fusion protein and method of use for enhancing effector cell killing of target cells
WO2002101019A2 (en) * 2001-06-13 2002-12-19 Genentech, Inc. Methods of culturing animal cells and polypeptide production in animal cells
NZ581474A (en) 2001-08-03 2011-04-29 Glycart Biotechnology Ag Antibody glycosylation variants having increased antibody-dependent cellular cytotoxicity
CA2453995A1 (en) * 2001-08-03 2003-02-20 Genentech, Inc. Tacis and br3 polypeptides and uses thereof
AU2002326581A1 (en) * 2001-08-10 2003-03-03 University Of Virginia Patent Foundation Enhancing the efficacy of immunotherapies by supplementing with complement
US7205048B2 (en) * 2001-09-17 2007-04-17 Invitrogen Corporation Functionalized fluorescent nanocrystal compositions and methods of making
US7214428B2 (en) * 2001-09-17 2007-05-08 Invitrogen Corporation Highly luminescent functionalized semiconductor nanocrystals for biological and physical applications
DE60234382D1 (de) * 2001-09-17 2009-12-24 Life Technologies Corp Nanokristalle
ATE443259T1 (de) 2001-09-20 2009-10-15 Univ Texas Bestimmung der zirkulierenden therapeutischen antikörper, antigene sowie antigen-antikörper- komplexe mit elisa-tests
EP2042196B1 (en) 2001-10-10 2016-07-13 ratiopharm GmbH Remodelling and glycoconjugation of Granulocyte Colony Stimulating Factor (G-CSF)
US20050069962A1 (en) 2001-10-12 2005-03-31 Archer Robert M Antibody complexes and methods for immunolabeling
US8323903B2 (en) * 2001-10-12 2012-12-04 Life Technologies Corporation Antibody complexes and methods for immunolabeling
DE02782887T1 (de) * 2001-10-19 2005-01-13 Centre Hospitalier Regional et Universitair de Tours Methoden und kompositionen, antikörper behandlung zu bewerten
KR100988949B1 (ko) * 2001-10-25 2010-10-20 제넨테크, 인크. 당단백질 조성물
US6671189B2 (en) * 2001-11-09 2003-12-30 Minebea Co., Ltd. Power converter having primary and secondary side switches
DE60230918D1 (de) 2001-11-16 2009-03-05 Biogen Idec Inc Polycistronische expression von antikörpern in cho zellen
US20060024292A1 (en) * 2001-12-27 2006-02-02 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a Gal2GlcNAc2Man3GlcNAc2 glycoform
CA2473144C (en) 2002-02-05 2013-05-28 Genentech, Inc. Protein purification
EP2034009B1 (en) 2002-02-08 2014-01-15 Life Technologies Corporation Compositions and methods for restoring immune responsiveness in patients with immunological defects basing on cd3/cd28 costimulation
RU2004127458A (ru) * 2002-02-14 2005-10-27 Иммуномедикс, Инк. (Us) Анти-cd20 антитела, их гибридные белки и способы их использования
US8287864B2 (en) * 2002-02-14 2012-10-16 Immunomedics, Inc. Structural variants of antibodies for improved therapeutic characteristics
US20040002587A1 (en) * 2002-02-20 2004-01-01 Watkins Jeffry D. Fc region variants
US8361464B2 (en) 2002-03-01 2013-01-29 Immunomedics, Inc. Anthracycline-Antibody Conjugates for Cancer Therapy
JP4472351B2 (ja) * 2002-03-01 2010-06-02 イミューノメディクス、インコーポレイテッド インターナライジング抗ｃｄ７４抗体およびその使用方法
US20090042291A1 (en) * 2002-03-01 2009-02-12 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
US20160279239A1 (en) 2011-05-02 2016-09-29 Immunomedics, Inc. Subcutaneous administration of anti-cd74 antibody for systemic lupus erythematosus and autoimmune disease
US20040132101A1 (en) 2002-09-27 2004-07-08 Xencor Optimized Fc variants and methods for their generation
US7662925B2 (en) * 2002-03-01 2010-02-16 Xencor, Inc. Optimized Fc variants and methods for their generation
US20030180292A1 (en) * 2002-03-14 2003-09-25 Idec Pharmaceuticals Treatment of B cell malignancies using anti-CD40L antibodies in combination with anti-CD20 antibodies and/or chemotherapeutics and radiotherapy
DK1501369T3 (en) 2002-04-26 2015-09-28 Genentech Inc Non-affinity purification of proteins
US20050043516A1 (en) * 2002-07-25 2005-02-24 Genentech, Inc. TACI antibodies and uses thereof
US8044180B2 (en) * 2002-08-14 2011-10-25 Macrogenics, Inc. FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof
US8193318B2 (en) * 2002-08-14 2012-06-05 Macrogenics, Inc. FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof
US8946387B2 (en) * 2002-08-14 2015-02-03 Macrogenics, Inc. FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof
US8968730B2 (en) 2002-08-14 2015-03-03 Macrogenics Inc. FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof
US8187593B2 (en) * 2002-08-14 2012-05-29 Macrogenics, Inc. FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof
WO2004029207A2 (en) 2002-09-27 2004-04-08 Xencor Inc. Optimized fc variants and methods for their generation
KR20110017020A (ko) * 2002-10-17 2011-02-18 젠맵 에이/에스 Ｃｄ20에 대한 인간 모노클로날 항체
JP4033390B2 (ja) * 2002-10-30 2008-01-16 独立行政法人科学技術振興機構 不死化ナチュラルキラー細胞株
WO2004048525A2 (en) * 2002-11-21 2004-06-10 Genentech, Inc. Therapy of non-malignant diseases or disorders with anti-erbb2 antibodies
SE0203731D0 (sv) * 2002-12-13 2002-12-13 Mitra Medical Technology Ab Reagent
EP1944320A1 (en) * 2002-12-16 2008-07-16 Genentech, Inc. Immunoglobulin variants and uses thereof
EP2368578A1 (en) 2003-01-09 2011-09-28 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
US7960512B2 (en) 2003-01-09 2011-06-14 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
JP4177123B2 (ja) * 2003-01-10 2008-11-05 富士通株式会社 配線図形検証方法、プログラム及び装置
US20040202666A1 (en) * 2003-01-24 2004-10-14 Immunomedics, Inc. Anti-cancer anthracycline drug-antibody conjugates
MXPA05007940A (es) * 2003-01-27 2007-06-14 Biogen Idec Inc Composiciones y metodos para el tratamiento del cancer usando igsf9 y liv-1.
US8388955B2 (en) * 2003-03-03 2013-03-05 Xencor, Inc. Fc variants
US20090010920A1 (en) * 2003-03-03 2009-01-08 Xencor, Inc. Fc Variants Having Decreased Affinity for FcyRIIb
SI1613350T1 (sl) * 2003-04-09 2009-08-31 Genentech Inc Zdravljenje avtoimunske bolezni pri bolniku z neustreznim odzivom na inhibitor TNF-alfa
TWI353991B (en) 2003-05-06 2011-12-11 Syntonix Pharmaceuticals Inc Immunoglobulin chimeric monomer-dimer hybrids
KR101351122B1 (ko) * 2003-05-09 2014-01-14 듀크 유니버시티 Ｃｄ２０-특이적 항체 및 이를 이용한 방법
US20050163775A1 (en) * 2003-06-05 2005-07-28 Genentech, Inc. Combination therapy for B cell disorders
PT2272868E (pt) * 2003-06-05 2015-07-07 Genentech Inc Terapêutica de combinação para distúrbios de células b
US20060269552A1 (en) * 2003-06-09 2006-11-30 Oron Yacoby-Zeevi Heparanase activity neutralizing anti-heparanase monclonal antibody and other anti-heparanase antibodies
US7754209B2 (en) 2003-07-26 2010-07-13 Trubion Pharmaceuticals Binding constructs and methods for use thereof
HUE029951T2 (en) 2003-07-28 2017-04-28 Genentech Inc Reduction of Protein A Dissolution in Protein A Affinity Chromatography
CA2532556A1 (en) * 2003-07-29 2005-02-24 Genentech, Inc. Assay for human anti cd20 antibodies and uses therefor
BRPI0412629A (pt) * 2003-08-29 2006-09-26 Genentech Inc método de tratamento de disfunção ocular em mamìferos
US20070148170A1 (en) 2005-10-03 2007-06-28 Desjarlais John R Fc Variants With Optimized Fc Receptor Binding Properties
US8101720B2 (en) * 2004-10-21 2012-01-24 Xencor, Inc. Immunoglobulin insertions, deletions and substitutions
US8399618B2 (en) 2004-10-21 2013-03-19 Xencor, Inc. Immunoglobulin insertions, deletions, and substitutions
US20060134105A1 (en) * 2004-10-21 2006-06-22 Xencor, Inc. IgG immunoglobulin variants with optimized effector function
US8883147B2 (en) 2004-10-21 2014-11-11 Xencor, Inc. Immunoglobulins insertions, deletions, and substitutions
US9714282B2 (en) 2003-09-26 2017-07-25 Xencor, Inc. Optimized Fc variants and methods for their generation
ZA200601699B (en) 2003-10-16 2007-05-30 Micromet Ag Multispecific deimmunized CD3-binders
WO2005044307A2 (en) 2003-11-04 2005-05-19 Chiron Corporation Methods of therapy for b cell-related cancers
CN1878568A (zh) * 2003-11-05 2006-12-13 盘林京有限公司 Cdim结合抗体的增强的b细胞细胞毒性
PT1692182E (pt) 2003-11-05 2010-05-13 Roche Glycart Ag Anticorpos de cd20 com uma afinidade de ligação acrescida ao receptor fc e uma função efectora acrescida
EP2385069A3 (en) 2003-11-12 2012-05-30 Biogen Idec MA Inc. Neonatal Fc rReceptor (FcRn)- binding polypeptide variants, dimeric Fc binding proteins and methods related thereto
CN1914226B (zh) * 2003-11-25 2012-02-01 达纳-法伯癌症研究院有限公司 SARS-CoV抗体及其使用方法
US20050186206A1 (en) * 2003-12-19 2005-08-25 Genentech, Inc. Detection of CD20 in therapy of autoimmune diseases
KR20060107555A (ko) * 2003-12-19 2006-10-13 제넨테크, 인크. 이식 거부에서 ｃｄ20의 검출
FR2867982B1 (fr) * 2004-03-26 2007-07-20 Jean Marie Andrieu Procede pour amplifier l'activite de vaccins therapeutiques
WO2005115453A2 (en) * 2004-04-16 2005-12-08 Genentech, Inc. Treatment of polychondritis and mononeuritis multiplex with anti-cd20 antibodies
RU2006145450A (ru) * 2004-04-16 2008-06-27 Дженентек, Инк. (Us) Анализ на антитела
EP1735000A2 (en) * 2004-04-16 2006-12-27 Genentech, Inc. Method for augmenting b cell depletion
WO2005103081A2 (en) * 2004-04-20 2005-11-03 Genmab A/S Human monoclonal antibodies against cd20
EP1773393A2 (en) * 2004-05-05 2007-04-18 Genentech, Inc. Preventing autoimmune disease by using an anti-cd20 antibody
WO2005113001A1 (en) 2004-05-20 2005-12-01 Zymogenetics, Inc. Methods of treating cancer using il-21 and monoclonal antibody therapy
EP1753455A2 (en) 2004-06-04 2007-02-21 Genentech, Inc. Method for treating multiple sclerosis
CA2568336A1 (en) * 2004-06-04 2005-12-22 Genentech, Inc. Method for treating lupus
US9109255B2 (en) * 2004-06-18 2015-08-18 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and compositions for determining responsiveness to antibody therapy
EP3342782B1 (en) 2004-07-15 2022-08-17 Xencor, Inc. Optimized fc variants
JP2008507555A (ja) * 2004-07-22 2008-03-13 ジェネンテック・インコーポレーテッド シェーグレン症候群の治療方法
MX2007000891A (es) 2004-07-23 2007-04-18 Genentech Inc Cristalizacion de anticuerpos o fragmentos de ellos.
EA012464B1 (ru) 2004-08-04 2009-10-30 Эпплайд Молекьюлар Эволюшн, Инк. Антитело против cd20 и его применение
EP1797224B1 (en) * 2004-08-17 2012-10-03 Life Technologies Corporation Synthesis of highly luminescent colloidal particles
WO2006031370A2 (en) * 2004-08-19 2006-03-23 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
US7662926B2 (en) * 2004-09-02 2010-02-16 Genentech, Inc. Anti-Fc-gamma receptor antibodies, bispecific variants and uses therefor
US7655229B2 (en) * 2004-09-02 2010-02-02 Chan Andrew C Anti-FC-gamma RIIB receptor antibody and uses therefor
ZA200701783B (en) * 2004-09-02 2009-10-28 Genentech Inc Anti-Fc-gamma RIIB receptor antibody and uses therefor
US20090175854A1 (en) * 2004-09-08 2009-07-09 Genentech, Inc. Methods of using death receptor ligands and CD20 antibodies
JP2008513367A (ja) * 2004-09-08 2008-05-01 ジェネンテック・インコーポレーテッド デスレセプターリガンド及びｃｄ２０抗体の使用方法
RU2411956C2 (ru) * 2004-10-05 2011-02-20 Дженентек, Инк. Способ лечения васкулита
JO3000B1 (ar) 2004-10-20 2016-09-05 Genentech Inc مركبات أجسام مضادة .
ATE556126T1 (de) 2004-10-29 2012-05-15 Life Technologies Corp Funktionalisierte fluoreszierende nanokristalle und verfahren zu deren herstellung und verwendung
WO2007024249A2 (en) * 2004-11-10 2007-03-01 Macrogenics, Inc. Engineering fc antibody regions to confer effector function
US8546543B2 (en) 2004-11-12 2013-10-01 Xencor, Inc. Fc variants that extend antibody half-life
BRPI0517837A (pt) 2004-11-12 2008-10-21 Xencor Inc variantes fc com ligação alterada a fcrn
US20070135620A1 (en) * 2004-11-12 2007-06-14 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US8802820B2 (en) 2004-11-12 2014-08-12 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US8367805B2 (en) * 2004-11-12 2013-02-05 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
GB2420976B (en) * 2004-11-19 2006-12-20 Zvi Finkelstein Therapeutic implant
SV2006002342A (es) * 2004-12-17 2006-06-01 Genentech Inc Terapia de antiogenesis para enfermedades autoinmunes en pacientes que tuvieron la terapia anterior interrumpida
KR20070100307A (ko) 2004-12-22 2007-10-10 제넨테크, 인크. 가용성 다중 막관통 단백질의 생산 방법
EP1674479A1 (en) * 2004-12-22 2006-06-28 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Modulation of Fc Gamma receptors for optimizing immunotherapy
ATE503187T1 (de) * 2004-12-23 2011-04-15 Hoffmann La Roche Nachweis eines therapeutischen antikörpers in einem versuchstier
ES2327840T3 (es) 2004-12-23 2009-11-04 Gpc Biotech Ag Derivados de acido escuarico con actividad antiproliferativa.
AU2006203889A1 (en) 2005-01-05 2006-07-13 Biogen Idec Ma Inc. CRIPTO binding molecules
GT200600020A (es) * 2005-01-13 2006-11-08 Procedimiento de tratamiento
DOP2006000029A (es) * 2005-02-07 2006-08-15 Genentech Inc Antibody variants and uses thereof. (variantes de un anticuerpo y usos de las mismas)
TW200714289A (en) * 2005-02-28 2007-04-16 Genentech Inc Treatment of bone disorders
US20160355591A1 (en) 2011-05-02 2016-12-08 Immunomedics, Inc. Subcutaneous anti-hla-dr monoclonal antibody for treatment of hematologic malignancies
US8349332B2 (en) 2005-04-06 2013-01-08 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Multiple signaling pathways induced by hexavalent, monospecific and bispecific antibodies for enhanced toxicity to B-cell lymphomas and other diseases
US8475794B2 (en) 2005-04-06 2013-07-02 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy with anti-CD74 antibodies provides enhanced toxicity to malignancies, Autoimmune disease and other diseases
US9963510B2 (en) 2005-04-15 2018-05-08 Macrogenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
AR053579A1 (es) * 2005-04-15 2007-05-09 Genentech Inc Tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal (eii)
US11254748B2 (en) 2005-04-15 2022-02-22 Macrogenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
ES2707152T3 (es) 2005-04-15 2019-04-02 Macrogenics Inc Diacuerpos covalentes y usos de los mismos
US9284375B2 (en) * 2005-04-15 2016-03-15 Macrogenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
WO2006116369A2 (en) * 2005-04-22 2006-11-02 Genentech, Inc. Method for treating dementia or alzheimer's disease with a cd20 antibody
WO2006117782A2 (en) * 2005-05-04 2006-11-09 Quark Pharmaceuticals, Inc. Recombinant antibodies against cd55 and cd59 and uses thereof
JP2008539753A (ja) * 2005-05-09 2008-11-20 グリクアート バイオテクノロジー アクチェンゲゼルシャフト 修飾ｆｃ領域およびｆｃ受容体との結合変更を有する抗原結合分子
CN1865275B (zh) * 2005-05-17 2011-06-15 长春华普生物技术有限公司 对人b细胞肿瘤有治疗作用的人工合成的单链脱氧核苷酸
ZA200709956B (en) * 2005-05-20 2009-02-25 Genentech Inc Pretreatment of a biological sample from an autoimmune disease subject
KR20080039844A (ko) * 2005-05-24 2008-05-07 아베스타 겐그레인 테크놀로지스 피브이티 리미티드 Ｂ―세포 림프종 치료를 위한 ｃｄ20에 대한 모노클로날항체의 제조 방법
CA2902070A1 (en) 2005-07-08 2007-01-18 Biogen Idec Ma Inc. Sp35 antibodies and uses thereof
EP2295080A3 (en) * 2005-07-25 2011-06-22 Emergent Product Development Seattle, LLC B-cell reduction using CD37-specific and CD20-specific binding molecules
BRPI0614183A2 (pt) 2005-07-25 2011-03-15 Trubion Pharmaceuticals Inc uso de dose única de moléculas de ligação especìficas para cd20
US20080279850A1 (en) * 2005-07-25 2008-11-13 Trubion Pharmaceuticals, Inc. B-Cell Reduction Using CD37-Specific and CD20-Specific Binding Molecules
HUE029465T2 (en) 2005-08-10 2017-02-28 Macrogenics Inc Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
US7612181B2 (en) 2005-08-19 2009-11-03 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
EP2500353A3 (en) 2005-08-19 2012-10-10 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
JP5364870B2 (ja) 2005-08-19 2013-12-11 アッヴィ・インコーポレイテッド 二重可変ドメイン免疫グロブリン及びその使用
US20090215992A1 (en) * 2005-08-19 2009-08-27 Chengbin Wu Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
EP1942935A4 (en) * 2005-09-02 2009-12-23 Glycofi Inc IMMUNOGLOBULINS CONTAINING PRESENTLY A GLCNACMAN3GLCNAC2 GLYCOFORM
WO2007056411A2 (en) * 2005-11-08 2007-05-18 Genentech, Inc. Method of producing pan-specific antibodies
MY149159A (en) 2005-11-15 2013-07-31 Hoffmann La Roche Method for treating joint damage
US9726673B2 (en) * 2005-11-23 2017-08-08 Genentech, Inc. Methods and compositions related to B cell assays
WO2007064911A1 (en) * 2005-12-02 2007-06-07 Biogen Idec Inc. Anti-mouse cd20 antibodies and uses thereof
US8323644B2 (en) * 2006-01-17 2012-12-04 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Therapy-enhancing glucan
WO2007102200A1 (ja) 2006-03-07 2007-09-13 Osaka University 抗ｃｄ２０モノクローナル抗体
EP1999470A4 (en) * 2006-03-10 2009-08-19 Macrogenics Inc IDENTIFICATION AND GENETIC MODIFICATION OF ANTIBODIES WITH HEAVY CHAINS OF VARIANTS AND METHODS OF USE THEREOF
CN101437536A (zh) 2006-03-23 2009-05-20 诺华有限公司 抗肿瘤细胞抗原抗体治疗
WO2007127936A2 (en) 2006-04-27 2007-11-08 Pikamab, Inc. Methods and compositions for antibody therapy
US20080118978A1 (en) 2006-04-28 2008-05-22 Takashi Sato Anti-tumor agent
US7727525B2 (en) * 2006-05-11 2010-06-01 City Of Hope Engineered anti-CD20 antibody fragments for in vivo targeting and therapeutics
CA2660592C (en) 2006-05-26 2016-07-12 Macrogenics, Inc. Humanized fc.gamma.riib-specific antibodies and methods of use thereof
CN105837690A (zh) * 2006-06-12 2016-08-10 新兴产品开发西雅图有限公司 具有效应功能的单链多价结合蛋白
AU2007281876B2 (en) 2006-06-26 2013-09-05 Macrogenics, Inc. FcgammaRIIB-specific antibodies and methods of use thereof
CA2656224C (en) * 2006-06-26 2018-01-09 Macrogenics, Inc. Combination of fc.gamma.riib antibodies and cd20-specific antibodies and methods of use thereof
FR2902799B1 (fr) 2006-06-27 2012-10-26 Millipore Corp Procede et unite de preparation d'un echantillon pour l'analyse microbiologique d'un liquide
US8372399B2 (en) * 2006-08-31 2013-02-12 Cardiac Pacemakers, Inc. Bispecific antibodies and agents to enhance stem cell homing
US8636995B2 (en) * 2006-08-31 2014-01-28 Cardiac Pacemakers, Inc. Methods and devices to regulate stem cell homing
US20080058922A1 (en) * 2006-08-31 2008-03-06 Cardiac Pacemakers, Inc. Methods and devices employing vap-1 inhibitors
US20080112961A1 (en) * 2006-10-09 2008-05-15 Macrogenics, Inc. Identification and Engineering of Antibodies with Variant Fc Regions and Methods of Using Same
US9382327B2 (en) 2006-10-10 2016-07-05 Vaccinex, Inc. Anti-CD20 antibodies and methods of use
WO2008140603A2 (en) 2006-12-08 2008-11-20 Macrogenics, Inc. METHODS FOR THE TREATMENT OF DISEASE USING IMMUNOGLOBULINS HAVING FC REGIONS WITH ALTERED AFFINITIES FOR FCγR ACTIVATING AND FCγR INHIBITING
US8362217B2 (en) 2006-12-21 2013-01-29 Emd Millipore Corporation Purification of proteins
WO2008079280A1 (en) 2006-12-21 2008-07-03 Millipore Corporation Purification of proteins
US8569464B2 (en) * 2006-12-21 2013-10-29 Emd Millipore Corporation Purification of proteins
PT2099826E (pt) 2007-01-05 2014-01-09 Univ Zuerich Anticorpo anti-beta-amilóide e suas utilizações
DE102007001370A1 (de) * 2007-01-09 2008-07-10 Curevac Gmbh RNA-kodierte Antikörper
CN101636168B (zh) 2007-01-09 2013-05-29 比奥根艾迪克Ma公司 Sp35抗体及其用途
JP5361738B2 (ja) 2007-01-22 2013-12-04 ジェネンテック， インコーポレイテッド 多価電解質沈殿物及びタンパク質の精製
US8450348B2 (en) * 2007-02-21 2013-05-28 Forma Tm, Llc Derivatives of squaric acid with anti-proliferative activity
CN103275216B (zh) 2007-03-12 2015-05-06 艾斯巴技术-诺华有限责任公司 单链抗体的基于序列的工程改造和最优化
US7960139B2 (en) 2007-03-23 2011-06-14 Academia Sinica Alkynyl sugar analogs for the labeling and visualization of glycoconjugates in cells
WO2008122039A2 (en) * 2007-04-02 2008-10-09 The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Selenocysteine mediated hybrid antibody molecules
FR2915398B1 (fr) * 2007-04-25 2012-12-28 Lab Francais Du Fractionnement "ensemble de moyens pour le traitement d'une pathologie maligne, d'une maladie auto-immune ou d'une maladie infectieuse"
EP1995309A1 (en) * 2007-05-21 2008-11-26 Vivalis Recombinant protein production in avian EBx® cells
EP2019101A1 (en) * 2007-07-26 2009-01-28 GPC Biotech AG Pyrazol[3,4-d]pyrimidin-4-one useful as Kinase Inhibitor
KR101530723B1 (ko) * 2007-06-25 2015-06-22 에스바테크 - 어 노바티스 컴파니 엘엘씨 단일 쇄 항체의 서열에 기초한 공학처리 및 최적화
DK2158315T3 (en) 2007-06-25 2016-06-06 Esbatech Alcon Biomed Res Unit Methods of modifying antibodies and modified antibodies with improved functional properties
US20090324596A1 (en) * 2008-06-30 2009-12-31 The Trustees Of Princeton University Methods of identifying and treating poor-prognosis cancers
US10745701B2 (en) 2007-06-28 2020-08-18 The Trustees Of Princeton University Methods of identifying and treating poor-prognosis cancers
HUE037162T2 (hu) 2007-07-09 2018-08-28 Genentech Inc Diszulfidkötés redukciójának megelõzése polipeptidek rekombináns elõállítása során
BRPI0813985B1 (pt) 2007-07-31 2022-05-10 Regeneron Pharmaceuticals, Inc Anticorpos humanos ou fragmentos de ligação a antígenos, composição farmacêutica dos mesmos e método para produzir um anticorpo anti-cd20 humana ou fragmento de ligação a antígeno de um anticorpo
US20110243931A1 (en) * 2007-09-02 2011-10-06 Thomas Friess Combination therapy with type i and type ii anti-cd20 antibodies
WO2009045370A2 (en) 2007-09-28 2009-04-09 Intrexon Corporation Therapeutic gene-switch constructs and bioreactors for the expression of biotherapeutic molecules, and uses thereof
US20090098118A1 (en) * 2007-10-15 2009-04-16 Thomas Friess Combination therapy of a type ii anti-cd20 antibody with an anti-bcl-2 active agent
WO2009052293A1 (en) 2007-10-16 2009-04-23 Zymogenetics, Inc. Combination of blys inhibition and anti-cd 20 agents for treatment of autoimmune disease
EP2211880A4 (en) * 2007-10-22 2012-11-14 Oncolytics Biotech Inc TREATMENT PROCEDURE FOR PROLIFERATIVE DISEASES
US20090110688A1 (en) * 2007-10-24 2009-04-30 Georg Fertig Combination therapy of type ii anti-cd20 antibody with a proteasome inhibitor
CN105315323A (zh) * 2007-10-30 2016-02-10 健泰科生物技术公司 通过阳离子交换层析进行的抗体纯化
AU2008345242B2 (en) 2007-10-31 2014-02-27 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
WO2009117030A2 (en) * 2007-12-19 2009-09-24 Macrogenics, Inc. Improved compositions for the prevention and treatment of smallpox
CN101945667A (zh) * 2007-12-21 2011-01-12 健泰科生物技术公司 利妥昔单抗不应性类风湿性关节炎患者的疗法
EP2077281A1 (en) 2008-01-02 2009-07-08 Bergen Teknologioverforing AS Anti-CD20 antibodies or fragments thereof for the treatment of chronic fatigue syndrome
US7914785B2 (en) 2008-01-02 2011-03-29 Bergen Teknologieverforing As B-cell depleting agents, like anti-CD20 antibodies or fragments thereof for the treatment of chronic fatigue syndrome
ES2382058T3 (es) 2008-01-17 2012-06-04 Philogen S.P.A. Combinación de una proteína de fusión de un anticuerpo dirigido contra el EDB de la fibronectina-IL-2, y una molécula de unión a los linfocitos B, progenitores de los linfocitos B y/o sus homólogos cancerosos
ES2613963T3 (es) 2008-01-18 2017-05-29 Medimmune, Llc Anticuerpos manipulados con cisteína para conjugación específica de sitio
US8883155B2 (en) * 2008-01-28 2014-11-11 The Regents Of The University Of California Methods for treating hematopoietic malignancies
US12492253B1 (en) 2008-02-25 2025-12-09 Xencor, Inc. Anti-human C5 antibodies
KR101280716B1 (ko) * 2008-03-25 2013-07-01 로슈 글리카트 아게 비-호지킨 림프종의 치료를 위한, 시클로포스파미드, 빈크리스틴 및 독소루비신과 조합으로의 증가된 항체 의존성 세포 세포독성 (ａｄｃｃ) 을 갖는 유형 ⅱ 항-ｃｄ20 항체의 용도
HUE029925T2 (en) 2008-04-02 2017-04-28 Macrogenics Inc HER2 / neu-specific antibodies and methods using them
JP5785490B2 (ja) 2008-04-02 2015-09-30 マクロジェニクス，インコーポレーテッド Ｂｃｒ複合体特異的抗体およびその使用方法
PT2132228E (pt) * 2008-04-11 2011-10-11 Emergent Product Dev Seattle Imunoterapia de cd37 e sua combinação com um quimioterápico bifuncional
EP2112152A1 (en) 2008-04-22 2009-10-28 GPC Biotech AG Dihydropteridinones as Plk Inhibitors
EP2112150B1 (en) 2008-04-22 2013-10-16 Forma Therapeutics, Inc. Improved raf inhibitors
US20100260668A1 (en) * 2008-04-29 2010-10-14 Abbott Laboratories Dual Variable Domain Immunoglobulins and Uses Thereof
WO2009134738A1 (en) * 2008-04-29 2009-11-05 Genentech, Inc. Responses to immunizations in rheumatoid arthritis patients treated with a cd20 antibody
JP5646457B2 (ja) 2008-04-29 2014-12-24 アッヴィ・インコーポレイテッド 二重可変ドメイン免疫グロブリン及びその使用
EP3002299A1 (en) 2008-06-03 2016-04-06 AbbVie Inc. Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
PE20100054A1 (es) * 2008-06-03 2010-03-03 Abbott Lab Inmunoglobulina con dominio variable dual
CA2726845C (en) * 2008-06-04 2017-09-26 Macrogenics, Inc. Antibodies with altered binding to fcrn and methods of using same
WO2009151514A1 (en) * 2008-06-11 2009-12-17 Millipore Corporation Stirred tank bioreactor
US9556265B2 (en) 2008-06-25 2017-01-31 Esbatech, An Alcon Biomedical Research Unit Llc Solubility optimization of immunobinders
KR101054362B1 (ko) 2008-07-03 2011-08-05 재단법인 목암생명공학연구소 재조합 단백질의 푸코스 함량을 감소시키는 방법
WO2010003057A2 (en) 2008-07-03 2010-01-07 Mayo Foundation For Medical Education And Research Treating cancer
MX2010014574A (es) * 2008-07-08 2011-04-27 Abbott Lab Inmunoglobulinas de dominio variable dual para prostaglandina e2 y usos de las mismas.
JP2011527572A (ja) 2008-07-09 2011-11-04 バイオジェン・アイデック・エムエイ・インコーポレイテッド Ｌｉｎｇｏ抗体または断片を含む組成物
KR101030978B1 (ko) * 2008-07-10 2011-04-28 (주) 에이프로젠 동물세포용 재조합 발현벡터
TW201016233A (en) * 2008-07-15 2010-05-01 Genentech Inc Methods of treating autoimmune diseases using CD4 antibodies
JP5986745B2 (ja) 2008-07-15 2016-09-06 アカデミア シニカＡｃａｄｅｍｉａ Ｓｉｎｉｃａ Ｐｔｆｅ様のアルミニウム・コート・ガラススライド上のグリカンアレイおよび関連する方法
WO2010011697A1 (en) * 2008-07-21 2010-01-28 Immunomedics Inc. Structural variants of antibodies for improved therapeutic characteristics
WO2010011281A2 (en) * 2008-07-22 2010-01-28 The Research Foundation Of State University Of New York Methods and compositions for the diagnosis and treatment of cancer
ES2978373T3 (es) 2008-08-14 2024-09-11 Genentech Inc Métodos para eliminar un contaminante usando cromatografía de membrana de intercambio iónico de desplazamiento de proteínas indígenas
MX2011002372A (es) 2008-09-10 2011-04-04 Genentech Inc Composiciones y metodos para la prevencion de la degradacion oxidativa de proteinas.
TW201438738A (zh) 2008-09-16 2014-10-16 建南德克公司 治療進展型多發性硬化症之方法
AU2009309387A1 (en) * 2008-10-28 2010-05-06 Avesthagen Limited An expression vector and processes thereof
US20100233079A1 (en) * 2008-12-04 2010-09-16 Abbott Laboratories Dual Variable Domain Immunoglobulins and Uses Thereof
GB2466025A (en) 2008-12-08 2010-06-09 Univ Francois Rabelais De Tour C3/ITGAM polymorphisms and cancer prognosis
US8775090B2 (en) 2008-12-12 2014-07-08 Medimmune, Llc Crystals and structure of a human IgG Fc variant with enhanced FcRn binding
SG171764A1 (en) * 2008-12-16 2011-07-28 Millipore Corp Purification of proteins
US20100190963A1 (en) 2008-12-16 2010-07-29 Millipore Corporation Stirred Tank Reactor And Method
WO2010069603A1 (en) 2008-12-19 2010-06-24 Neurimmune Therapeutics Ag Human anti-alpha-synuclein autoantibodies
ES2468391T3 (es) 2008-12-22 2014-06-16 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Combinación de inhibidores de cinasas Aurora y anticuerpos anti-CD20
WO2010075249A2 (en) 2008-12-22 2010-07-01 Genentech, Inc. A method for treating rheumatoid arthritis with b-cell antagonists
EP2382238A1 (en) 2008-12-31 2011-11-02 Biogen Idec MA Inc. Anti-lymphotoxin antibodies
US20110142836A1 (en) * 2009-01-02 2011-06-16 Olav Mella B-cell depleting agents for the treatment of chronic fatigue syndrome
JP5828151B6 (ja) 2009-01-06 2018-09-19 アンスティチュ ナショナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシュ メディカル アテローム性動脈硬化の処置のためのｂ細胞枯渇剤
SG173812A1 (en) 2009-02-27 2011-09-29 Genentech Inc Methods and compositions for protein labelling
TW201613969A (en) * 2009-03-05 2016-04-16 Abbvie Inc IL-17 binding proteins
KR101589785B1 (ko) 2009-03-10 2016-01-28 바이오젠 엠에이 인코포레이티드 항-ｂｃｍａ 항체
CN102369011A (zh) 2009-03-12 2012-03-07 健泰科生物技术公司 用于治疗造血恶性肿瘤的磷酸肌醇3-激酶抑制剂化合物与化学治疗剂的组合
EP2233500A1 (en) 2009-03-20 2010-09-29 LFB Biotechnologies Optimized Fc variants
WO2010111180A1 (en) 2009-03-24 2010-09-30 Teva Biopharmaceuticals Usa, Inc. Humanized antibodies against light and uses thereof
US20100247484A1 (en) 2009-03-31 2010-09-30 Heinrich Barchet Combination therapy of an afucosylated antibody and one or more of the cytokines gm csf, m csf and/or il3
US8815242B2 (en) * 2009-05-27 2014-08-26 Synageva Biopharma Corp. Avian derived antibodies
AU2010262087B9 (en) 2009-06-15 2015-07-30 Icon Genetics Gmbh Nicotiana benthamiana plants deficient in xylosyltransferase activity
CA2766405A1 (en) 2009-06-22 2011-01-13 Medimmune, Llc Engineered fc regions for site-specific conjugation
WO2011000543A1 (en) * 2009-06-30 2011-01-06 Philochem Ag Murine antibody display library
TW201109438A (en) * 2009-07-29 2011-03-16 Abbott Lab Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
WO2011019619A1 (en) 2009-08-11 2011-02-17 Genentech, Inc. Production of proteins in glutamine-free cell culture media
TWI409079B (zh) 2009-08-14 2013-09-21 Roche Glycart Ag 非典型岩藻醣化ｃｄ２０抗體與苯達莫斯汀（ｂｅｎｄａｍｕｓｔｉｎｅ）之組合療法
RU2012109451A (ru) 2009-08-14 2013-09-27 Роше Гликарт Аг Комбинированная терапия на основе афукозилированного антитела к cd20 в сочетании с флударабином и/или митоксантроном
AR078254A1 (es) 2009-09-01 2011-10-26 Abbott Lab Inmunoglobulinas con dominio variable dual y usos de las mismas
EP3736338A1 (en) 2009-09-01 2020-11-11 F. Hoffmann-La Roche AG Enhanced protein purification through a modified protein a elution
WO2011028952A1 (en) 2009-09-02 2011-03-10 Xencor, Inc. Compositions and methods for simultaneous bivalent and monovalent co-engagement of antigens
BR112012004777A2 (pt) 2009-09-03 2019-09-24 Genentech Inc métodos para tratar diagnósticar e monitorar artrite reumatoide
AR078161A1 (es) 2009-09-11 2011-10-19 Hoffmann La Roche Formulaciones farmaceuticas muy concentradas de un anticuerpo anti cd20. uso de la formulacion. metodo de tratamiento.
AU2010303415B2 (en) 2009-10-07 2015-02-19 Macrogenics, Inc. Fc region-containing polypeptides that exhibit improved effector function due to alterations of the extent of fucosylation, and methods for their use
MX2012004415A (es) 2009-10-15 2012-05-08 Abbott Lab Inmunoglobulinas de dominio variable doble y usos de las mismas.
CN105624118B (zh) * 2009-10-19 2019-08-13 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 非交叉反应性抗IgG抗体
EP2325185A1 (en) 2009-10-28 2011-05-25 GPC Biotech AG Plk inhibitor
UY32979A (es) * 2009-10-28 2011-02-28 Abbott Lab Inmunoglobulinas con dominio variable dual y usos de las mismas
US10087236B2 (en) 2009-12-02 2018-10-02 Academia Sinica Methods for modifying human antibodies by glycan engineering
US11377485B2 (en) 2009-12-02 2022-07-05 Academia Sinica Methods for modifying human antibodies by glycan engineering
WO2011097527A2 (en) 2010-02-04 2011-08-11 Xencor, Inc. Immunoprotection of therapeutic moieties using enhanced fc regions
EP2531592A1 (en) 2010-02-04 2012-12-12 Vivalis Fed-batch process using concentrated cell culture medium for the efficient production of biologics in eb66 cells
US20110189178A1 (en) * 2010-02-04 2011-08-04 Xencor, Inc. Immunoprotection of Therapeutic Moieties Using Enhanced Fc Regions
AR080155A1 (es) * 2010-02-10 2012-03-14 Immunogen Inc Anticuerpos anti-cd20 y su utilizacion
US9173961B2 (en) * 2010-02-10 2015-11-03 Immunogen, Inc. CD20 antibodies and uses thereof
EP2543727B1 (en) 2010-03-02 2016-08-31 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Modified antibody composition
PH12018501083A1 (en) 2010-03-04 2019-02-18 Macrogenics Inc Antibodies reactive with b7-h3, immunologically active fragments thereof and uses thereof
PH12012501751A1 (en) 2010-03-04 2012-11-12 Macrogenics Inc Antibodies reactive with b7-h3, immunologically active fragments thereof and uses thereof
CA2792125C (en) 2010-03-22 2019-02-12 Genentech, Inc. Compositions and methods useful for stabilizing protein-containing formulations
WO2011118739A1 (ja) 2010-03-26 2011-09-29 協和発酵キリン株式会社 新規修飾部位導入抗体および抗体フラグメント
US9169328B2 (en) 2010-03-26 2015-10-27 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Antibodies to MUC16 and methods of use thereof
JP2013528357A (ja) 2010-03-29 2013-07-11 ザイムワークス，インコーポレイテッド 強化又は抑制されたエフェクター機能を有する抗体
EP4450523A3 (en) 2010-04-02 2025-03-12 Amunix Pharmaceuticals, Inc. Binding fusion proteins, binding fusion protein-drug conjugates, xten-drug conjugates and methods of making and using same
WO2011130332A1 (en) 2010-04-12 2011-10-20 Academia Sinica Glycan arrays for high throughput screening of viruses
MX342590B (es) 2010-04-27 2016-10-05 Roche Glycart Ag Terapia de combinacion de un anticuerpo cd20 afucosilado con un inhibidor mtor.
CN102958538A (zh) 2010-05-03 2013-03-06 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 用于降低含有蛋白质的制剂的粘度的组合物和方法
EP2568976B1 (en) 2010-05-10 2015-09-30 Academia Sinica Zanamivir phosphonate congeners with anti-influenza activity and determining oseltamivir susceptibility of influenza viruses
AU2011252883B2 (en) 2010-05-14 2015-09-10 Abbvie Inc. IL-1 binding proteins
EP2571903B1 (en) 2010-05-17 2019-09-04 EMD Millipore Corporation Stimulus responsive polymers for the purification of biomolecules
EP4492053A3 (en) 2010-05-25 2025-03-19 F. Hoffmann-La Roche AG Methods of purifying polypeptides
WO2011150241A2 (en) 2010-05-28 2011-12-01 Genentech, Inc. Decreasing lactate level and increasing polypeptide production by downregulating the expression of lactate dehydrogenase and pyruvate dehydrogenase kinase
MY184736A (en) 2010-06-24 2021-04-20 Genentech Inc Compositions and methods containing alkylglycosides for stabilizing protein-containing formulations
WO2012006500A2 (en) 2010-07-08 2012-01-12 Abbott Laboratories Monoclonal antibodies against hepatitis c virus core protein
UY33492A (es) 2010-07-09 2012-01-31 Abbott Lab Inmunoglobulinas con dominio variable dual y usos de las mismas
HRP20191305T1 (hr) 2010-07-09 2019-10-18 Bioverativ Therapeutics Inc. Preradive jednolančane molekule i polipeptidi izrađeni koristeći iste
EP2409993A1 (en) 2010-07-19 2012-01-25 International-Drug-Development-Biotech Anti-CD19 antibody having ADCC function with improved glycosylation profile
EP2409712A1 (en) 2010-07-19 2012-01-25 International-Drug-Development-Biotech Anti-CD19 antibody having ADCC and CDC functions and improved glycosylation profile
CA2806252C (en) 2010-07-29 2019-05-14 Xencor, Inc. Antibodies with modified isoelectric points
MX339622B (es) 2010-08-02 2016-06-02 Macrogenics Inc Diacuerpos covalentes y sus usos.
WO2012017925A1 (ja) 2010-08-02 2012-02-09 協和発酵キリン株式会社 物質の製造方法
BR112013002535A2 (pt) 2010-08-03 2019-09-24 F. Hoffmann - La Roche Ag biomarcadores de leucemia linfocítica crônica (cll)
US8735546B2 (en) 2010-08-03 2014-05-27 Abbvie Inc. Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
CA2807552A1 (en) 2010-08-06 2012-02-09 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
CN104474546A (zh) 2010-08-13 2015-04-01 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 用于疾病治疗的针对IL-1β和IL-18的抗体
AR082693A1 (es) 2010-08-17 2012-12-26 Roche Glycart Ag Terapia de combinacion de un anticuerpo anti-cd20 afucosilado con un anticuerpo anti-vegf
WO2012022682A1 (en) * 2010-08-17 2012-02-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-human igg1 antibody
PH12013500337A1 (en) 2010-08-26 2017-08-23 Abbvie Inc Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
WO2012030512A1 (en) 2010-09-03 2012-03-08 Percivia Llc. Flow-through protein purification process
ES3005233T3 (en) 2010-10-01 2025-03-14 Modernatx Inc Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof
SG189174A1 (en) 2010-10-11 2013-05-31 Biogen Idec Internat Neuroscience Gmbh Human anti-tau antibodies
EP2787007A3 (en) 2010-11-08 2015-03-11 F. Hoffmann-La Roche AG Subcutaneously administered ANTI-IL-6 receptor antibody
PT2653540T (pt) 2010-12-15 2018-02-27 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd Processo de produção de proteínas
JP2014507384A (ja) 2010-12-16 2014-03-27 ロシュ グリクアート アーゲー Ｍｄｍ２阻害剤とのアフコシル化ｃｄ２０抗体の併用療法
JP6067575B2 (ja) 2010-12-17 2017-01-25 ニューリミューン ホールディング エイジー ヒト抗ｓｏｄ１抗体
WO2012121775A2 (en) 2010-12-21 2012-09-13 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
EP3147355B1 (en) 2010-12-27 2020-07-22 Kyowa Kirin Co., Ltd. Method for preparing aqueous solution containing culture medium and chelating agent
WO2012095514A1 (en) 2011-01-14 2012-07-19 Vivalis Recombinant protein production system
US9433686B2 (en) 2011-01-31 2016-09-06 The Regents Of The University Of California Methods for treating castration resistant prostate cancer and metastasis by reducing B-cell number and/or function
WO2012118750A2 (en) 2011-02-28 2012-09-07 Genentech, Inc. Biological markers and methods for predicting response to b-cell antagonists
TWI838039B (zh) 2011-03-28 2024-04-01 法商賽諾菲公司 具有交叉結合區定向之雙重可變區類抗體結合蛋白
ES2692268T5 (en) 2011-03-29 2025-02-26 Roche Glycart Ag Antibody fc variants
JP2014511687A (ja) 2011-03-31 2014-05-19 モデルナ セラピューティクス インコーポレイテッド 工学操作された核酸の送達および製剤
EP2506015A1 (en) 2011-04-01 2012-10-03 Universität Regensburg A prognostic and therapeutic signature for malignant melanoma
EP2699598B1 (en) 2011-04-19 2019-03-06 Pfizer Inc Combinations of anti-4-1bb antibodies and adcc-inducing antibodies for the treatment of cancer
HRP20200793T1 (hr) 2011-05-09 2020-10-16 Mayo Foundation For Medical Education And Research Liječenje raka
US8679767B2 (en) 2011-05-12 2014-03-25 Genentech, Inc. Multiple reaction monitoring LC-MS/MS method to detect therapeutic antibodies in animal samples using framework signature peptides
WO2012158818A2 (en) 2011-05-16 2012-11-22 Fabion Pharmaceuticals, Inc. Multi-specific fab fusion proteins and methods of use
US9587021B2 (en) 2011-05-21 2017-03-07 Macrogenics, Inc. CD3-binding molecules capable of binding to human and non-human CD3
EA201391753A1 (ru) 2011-05-21 2014-08-29 Макродженикс, Инк. Домены, связывающиеся с деиммунизованной сывороткой, и их применение для увеличения времени полужизни в сыворотке
RU2011122942A (ru) 2011-06-08 2012-12-20 Общество С Ограниченной Ответственностью "Асинэкс Медхим" Новые ингибиторы киназ
CN103796679B (zh) 2011-06-23 2016-10-19 比奥根国际神经科学公司 抗-α突触核蛋白结合分子
EP2537933A1 (en) 2011-06-24 2012-12-26 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) An IL-15 and IL-15Ralpha sushi domain based immunocytokines
CN103827143A (zh) 2011-07-06 2014-05-28 莫弗系统股份公司 抗cd20抗体和抗gm-csf抗体的治疗性组合产品及其用途
ES2809211T3 (es) 2011-07-08 2021-03-03 Emd Millipore Corp Filtros de profundidad mejorados para procesos biotecnológicos desechables
WO2019071023A1 (en) 2017-10-04 2019-04-11 Yale University COMPOSITIONS AND METHODS FOR MAKING POLYPEPTIDES CONTAINING SELENOCYSTEINE
WO2013009868A1 (en) 2011-07-11 2013-01-17 Yale University Compositions and methods for making selenocysteine containing polypeptides
US9738707B2 (en) 2011-07-15 2017-08-22 Biogen Ma Inc. Heterodimeric Fc regions, binding molecules comprising same, and methods relating thereto
EP2550975A1 (en) 2011-07-29 2013-01-30 Sanofi Combination therapy for the treatment of CD19+ B-cell malignancies symptoms comprising an anti-CD19 maytansinoid immunoconjugate and rituximab
EP2551348B1 (en) 2011-07-29 2014-09-24 Icon Genetics GmbH Production of galactosylated N-glycans in plants
WO2013022855A1 (en) 2011-08-05 2013-02-14 Xencor, Inc. Antibodies with modified isoelectric points and immunofiltering
US9464124B2 (en) 2011-09-12 2016-10-11 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
WO2013049362A2 (en) 2011-09-27 2013-04-04 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services Method of treating multiple sclerosis by intrathecal depletion of b cells and biomarkers to select patients with progressive multiple sclerosis
EP2763701B1 (en) 2011-10-03 2018-12-19 Moderna Therapeutics, Inc. Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof
CA2850571C (en) 2011-10-04 2021-01-05 Icon Genetics Gmbh Nicotiana benthamiana plants deficient in fucosyltransferase activity
US10851178B2 (en) 2011-10-10 2020-12-01 Xencor, Inc. Heterodimeric human IgG1 polypeptides with isoelectric point modifications
US12466897B2 (en) 2011-10-10 2025-11-11 Xencor, Inc. Heterodimeric human IgG1 polypeptides with isoelectric point modifications
CA3182462A1 (en) 2011-10-10 2013-04-18 Xencor, Inc. A method for purifying antibodies
EP2771360A1 (en) 2011-10-24 2014-09-03 AbbVie Inc. Immunobinders directed against sclerostin
AU2012328819B2 (en) 2011-10-26 2017-08-03 Elanco Tiergesundheit Ag Monoclonal antibodies and methods of use
US20130302274A1 (en) 2011-11-25 2013-11-14 Roche Glycart Ag Combination therapy
JP2015501844A (ja) 2011-12-16 2015-01-19 モデルナ セラピューティクス インコーポレイテッドＭｏｄｅｒｎａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｉｎｃ． 修飾ヌクレオシド、ヌクレオチドおよび核酸組成物
US10364268B2 (en) 2011-12-22 2019-07-30 Genentech, Inc. Ion exchange membrane chromatography
US9120870B2 (en) 2011-12-30 2015-09-01 Abbvie Inc. Dual specific binding proteins directed against IL-13 and IL-17
US20130243750A1 (en) 2012-01-31 2013-09-19 Genentech, Inc. Anti-ige antibodies and methods using same
IN2014MN01642A (pl) 2012-02-16 2015-07-03 Atyr Pharma Inc
RU2017139267A (ru) 2012-03-27 2019-02-12 Дженентек, Инк. Усовершенствованные способы выделения рекомбинантных белков
US9254311B2 (en) 2012-04-02 2016-02-09 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of proteins
US9283287B2 (en) 2012-04-02 2016-03-15 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins
US9572897B2 (en) 2012-04-02 2017-02-21 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins
WO2013151663A1 (en) 2012-04-02 2013-10-10 modeRNA Therapeutics Modified polynucleotides for the production of membrane proteins
US10130714B2 (en) 2012-04-14 2018-11-20 Academia Sinica Enhanced anti-influenza agents conjugated with anti-inflammatory activity
MX381731B (es) 2012-05-14 2025-03-13 Biogen Ma Inc Antagonistas de proteina que interactua con el receptor nogo 2 que contiene repeticion rica en leucina y dominio de inmunoglobulina (lingo-2) para el tratamiento de afecciones que involucran neuronas motoras.
EP2863940A4 (en) 2012-06-08 2016-08-10 Biogen Ma Inc Chimeric clotting factors
JP6498600B2 (ja) 2012-06-08 2019-04-10 ストロ バイオファーマ インコーポレーテッド 部位特異的な非天然アミノ酸残基を含む抗体、その調製方法、及びその使用方法
TW201402608A (zh) 2012-07-12 2014-01-16 Abbvie Inc Ｉｌ－１結合蛋白質
LT3495387T (lt) 2012-07-13 2021-11-25 Roche Glycart Ag Bispecifiniai anti-vegf / anti-ang-2 antikūnai ir jų panaudojimas akių kraujagyslių ligoms gydyti
WO2014031498A1 (en) 2012-08-18 2014-02-27 Academia Sinica Cell-permeable probes for identification and imaging of sialidases
AU2013305827A1 (en) 2012-08-21 2015-03-05 Academia Sinica Benzocyclooctyne compounds and uses thereof
DK2890402T3 (da) 2012-08-31 2019-07-15 Sutro Biopharma Inc Modificerede aminosyrer omfattende en azidogruppe
JOP20200236A1 (ar) 2012-09-21 2017-06-16 Regeneron Pharma الأجسام المضادة لمضاد cd3 وجزيئات ربط الأنتيجين ثنائية التحديد التي تربط cd3 وcd20 واستخداماتها
US9777067B2 (en) 2012-09-27 2017-10-03 Massachusetts Institute Of Technology HER2- and VEGF-A-binding proteins with enhanced stability
CA2917407C (en) 2012-10-01 2023-03-14 Mayo Foundation For Medical Education And Research Complexes containing albumin-containing nanoparticles and antibodies to treat cancer
CN104870014A (zh) 2012-10-09 2015-08-26 比奥根Ma公司 联合治疗及用于治疗脱髓鞘病症的用途
ES2738310T3 (es) 2012-10-12 2020-01-21 Medimmune Ltd Pirrolobenzodiazepinas y conjugados de las mismas
AU2013337644A1 (en) 2012-11-01 2015-05-07 Abbvie Inc. Stable Dual Variable Domain Immunoglobulin protein formulations
AU2013337775B2 (en) 2012-11-01 2017-03-30 Abbvie Inc. Anti-VEGF/DLL4 dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
EP3756686A1 (en) 2012-11-02 2020-12-30 TG Therapeutics Inc. Combination of anti-cd20 antibody and pi3 kinase selective inhibitor
ES2921623T3 (es) 2012-11-26 2022-08-30 Modernatx Inc ARN modificado terminalmente
EP2934602B1 (en) 2012-12-19 2019-02-27 Genentech, Inc. Methods and compositions for radiohalogen protein labeling
HRP20201422T1 (hr) 2012-12-21 2021-02-19 Biogen Ma Inc. Ljudska anti-tau antitijela
CN104936980B (zh) 2012-12-31 2019-06-07 生物控股有限公司 用于治疗和预防多瘤病毒相关的疾病的重组人抗体
US11053316B2 (en) 2013-01-14 2021-07-06 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
CA2898100C (en) 2013-01-14 2023-10-10 Xencor, Inc. Novel heterodimeric proteins
US10487155B2 (en) 2013-01-14 2019-11-26 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US9701759B2 (en) 2013-01-14 2017-07-11 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10968276B2 (en) 2013-03-12 2021-04-06 Xencor, Inc. Optimized anti-CD3 variable regions
US9605084B2 (en) 2013-03-15 2017-03-28 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10131710B2 (en) 2013-01-14 2018-11-20 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
CA2897987A1 (en) 2013-01-15 2014-07-24 Xencor, Inc. Rapid clearance of antigen complexes using novel antibodies
WO2014116051A1 (ko) * 2013-01-24 2014-07-31 스크립스코리아 항체연구원 단백질 조합 기반의 Fv 라이브러리 및 이의 제조 방법
JP2016513098A (ja) 2013-02-07 2016-05-12 イミューノメディクス、インコーポレイテッドＩｍｍｕｎｏｍｅｄｉｃｓ， Ｉｎｃ． 癌の標的治療用抗体と抱合した極めて強力なプロドラック形態の２−ピロリノドキソルビシン（ｐ２ｐｄｏｘ）
FI3889173T3 (fi) 2013-02-15 2023-10-02 Bioverativ Therapeutics Inc Optimoitu tekijä viii:n geeni
US9487587B2 (en) 2013-03-05 2016-11-08 Macrogenics, Inc. Bispecific molecules that are immunoreactive with immune effector cells of a companion animal that express an activating receptor and cells that express B7-H3 and uses thereof
CA2905181C (en) 2013-03-13 2020-06-02 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof for providing targeted therapy
CN105209069B (zh) 2013-03-13 2019-08-23 豪夫迈·罗氏有限公司 抗体配制剂
CN111925437A (zh) 2013-03-14 2020-11-13 宏观基因有限公司 与表达激活受体的免疫效应细胞具有免疫反应性的双特异性分子
US8980864B2 (en) 2013-03-15 2015-03-17 Moderna Therapeutics, Inc. Compositions and methods of altering cholesterol levels
EP2970459A2 (en) 2013-03-15 2016-01-20 AbbVie Inc. Dual specific binding proteins directed against il-1beta and il-17
US10519242B2 (en) 2013-03-15 2019-12-31 Xencor, Inc. Targeting regulatory T cells with heterodimeric proteins
EP2970486B1 (en) 2013-03-15 2018-05-16 Xencor, Inc. Modulation of t cells with bispecific antibodies and fc fusions
US10106624B2 (en) 2013-03-15 2018-10-23 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10858417B2 (en) 2013-03-15 2020-12-08 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
TWI828269B (zh) 2013-03-15 2024-01-01 美商百歐維拉提夫治療公司 因子ix多肽調配物
BR112015022119A2 (pt) 2013-03-15 2017-08-29 Abbvie Biotherapeutics Inc Polipeptídeo, composto conjugado, composição farmacêutica, ácido nucleico, vetor, células hospedeiras procariótica e eucariótica, método de produção de um polipeptídeo, e, método de tratamento
KR20150139955A (ko) 2013-04-09 2015-12-14 보스톤 바이오메디칼, 인크. 암 치료에 사용하기 위한 2-아세틸나프토[2,3-b]푸란-4,9-디온
KR102539359B1 (ko) 2013-04-19 2023-06-02 싸이튠 파마 감소된 혈관 누출 증후군에 대한 사이토카인 유도체 치료
EP2805730A1 (en) 2013-05-21 2014-11-26 Bergen Teknologioverforing AS Nitric oxide donor for the treatment of chronic fatigue syndrome
RU2655439C2 (ru) 2013-05-31 2018-05-28 Займворкс Инк. Гетеромультимеры с уменьшенной или подавленной эффекторной функцией
US10086054B2 (en) 2013-06-26 2018-10-02 Academia Sinica RM2 antigens and use thereof
WO2014210564A1 (en) 2013-06-27 2014-12-31 Academia Sinica Glycan conjugates and use thereof
WO2015006555A2 (en) 2013-07-10 2015-01-15 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising multiple site-specific non-natural amino acid residues, methods of their preparation and methods of their use
US11384149B2 (en) 2013-08-09 2022-07-12 Macrogenics, Inc. Bi-specific monovalent Fc diabodies that are capable of binding CD32B and CD79b and uses thereof
UA116479C2 (uk) 2013-08-09 2018-03-26 Макродженікс, Інк. БІСПЕЦИФІЧНЕ МОНОВАЛЕНТНЕ Fc-ДІАТІЛО, ЯКЕ ОДНОЧАСНО ЗВ'ЯЗУЄ CD32B I CD79b, ТА ЙОГО ЗАСТОСУВАННЯ
EP2840091A1 (en) 2013-08-23 2015-02-25 MacroGenics, Inc. Bi-specific diabodies that are capable of binding gpA33 and CD3 and uses thereof
EP2839842A1 (en) 2013-08-23 2015-02-25 MacroGenics, Inc. Bi-specific monovalent diabodies that are capable of binding CD123 and CD3 and uses thereof
WO2015035044A2 (en) 2013-09-04 2015-03-12 Abbvie Biotherapeutics Inc. Fc VARIANTS WITH IMPROVED ANTIBODY-DEPENDENT CELL-MEDIATED CYTOTOXICITY
JP6486368B2 (ja) 2013-09-06 2019-03-20 アカデミア シニカＡｃａｄｅｍｉａ Ｓｉｎｉｃａ 改変されたグリコシル基を含む糖脂質を用いたヒトｉＮＫＴ細胞の活性化
IL312865B2 (en) 2013-09-11 2025-06-01 Eagle Biologics Inc Liquid protein formulations containing viscosity-lowering agents
WO2015048744A2 (en) 2013-09-30 2015-04-02 Moderna Therapeutics, Inc. Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides
KR20160067219A (ko) 2013-10-03 2016-06-13 모더나 세라퓨틱스, 인코포레이티드 저밀도 지단백질 수용체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드
US9840493B2 (en) 2013-10-11 2017-12-12 Sutro Biopharma, Inc. Modified amino acids comprising tetrazine functional groups, methods of preparation, and methods of their use
US20160256460A1 (en) 2013-11-01 2016-09-08 Bergen Teknologioverføring As Activators or stimulators of soluble guanylate cyclase for use in treating chronic fatigue syndrome
EP3068798B1 (en) 2013-11-12 2020-10-07 OGD2 Pharma Human igg1 derived antibody with pro-apoptotic activity
BR112016013741A2 (pt) 2013-12-17 2017-10-03 Genentech Inc Usos de antagonistas de ligação de eixo de pd-1 e um anticorpo de anti-cd20, e kit compreendendo os mesmos
US10150818B2 (en) 2014-01-16 2018-12-11 Academia Sinica Compositions and methods for treatment and detection of cancers
TW201620939A (zh) 2014-01-16 2016-06-16 中央研究院 治療及檢測癌症之組合物及方法
CA2935748A1 (en) 2014-02-25 2015-09-03 Immunomedics, Inc. Humanized rfb4 anti-cd22 antibody
EP2915569A1 (en) 2014-03-03 2015-09-09 Cytune Pharma IL-15/IL-15Ralpha based conjugates purification method
TWI754319B (zh) 2014-03-19 2022-02-01 美商再生元醫藥公司 用於腫瘤治療之方法及抗體組成物
EP3129767B1 (en) 2014-03-27 2021-09-01 Academia Sinica Reactive labelling compounds and uses thereof
JP6775422B2 (ja) 2014-03-28 2020-10-28 ゼンコー・インコーポレイテッドＸｅｎｃｏｒ、 Ｉｎｃ． Ｃｄ３８及びｃｄ３に結合する二重特異性抗体
IL313845A (en) 2014-04-23 2024-08-01 Juno Therapeutics Inc Methods for enriching or producing immune cell populations for adoptive therapy
WO2015164758A1 (en) 2014-04-25 2015-10-29 University Of Florida Research Foundation, Inc. Methods of permitting a subject to receive multiple doses of recombinant adeno-associated virus
KR20170003720A (ko) 2014-05-27 2017-01-09 아카데미아 시니카 항-ｃｄ20 글리코항체 및 이의 용도
AU2015267045B2 (en) 2014-05-27 2021-02-25 Academia Sinica Anti-HER2 glycoantibodies and uses thereof
US10118969B2 (en) 2014-05-27 2018-11-06 Academia Sinica Compositions and methods relating to universal glycoforms for enhanced antibody efficacy
DK3149045T3 (da) 2014-05-27 2023-03-06 Academia Sinica Sammensætninger og fremgangsmåder vedrørende universelle glycoformer til forbedret antistofeffekt
JP7063538B2 (ja) 2014-05-28 2022-05-09 アカデミア シニカ 抗ＴＮＦα糖操作抗体群およびその使用
CA2950926A1 (en) 2014-06-13 2015-12-17 Mayo Foundation For Medical Education And Research Albumin-bound paclitaxel nanoparticle/rituximab complexes for treatment of cd20-expressing lymphomas
JP6600651B2 (ja) 2014-06-16 2019-10-30 マヨ ファウンデーション フォー メディカル エデュケーション アンド リサーチ 骨髄腫の治療
WO2016004113A1 (en) 2014-06-30 2016-01-07 Biogen Ma Inc. Optimized factor ix gene
WO2016007752A1 (en) 2014-07-09 2016-01-14 Genentech, Inc. Ph adjustment to improve thaw recovery of cell banks
CN107074937B (zh) 2014-07-29 2021-07-27 神经免疫控股公司 人源抗亨廷顿蛋白(htt)抗体及其用途
EP3191500A4 (en) 2014-09-08 2018-04-11 Academia Sinica HUMAN iNKT CELL ACTIVATION USING GLYCOLIPIDS
EP3191527B1 (en) 2014-09-10 2020-01-15 F.Hoffmann-La Roche Ag Galactoengineered immunoglobulin 1 antibodies
US10188746B2 (en) 2014-09-10 2019-01-29 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
SG11201701821QA (en) 2014-09-15 2017-04-27 Genentech Inc Antibody formulations
DK3262071T3 (da) 2014-09-23 2020-06-15 Hoffmann La Roche Fremgangsmåde til anvendelse af anti-CD79b-immunkonjugater
EP3201227A4 (en) 2014-09-29 2018-04-18 Duke University Bispecific molecules comprising an hiv-1 envelope targeting arm
NZ729808A (en) 2014-09-30 2022-02-25 Neurimmune Holding Ag Human-derived anti-dipeptide repeats (dprs) antibody
SG11201702614SA (en) 2014-10-01 2017-04-27 Eagle Biolog Inc Polysaccharide and nucleic acid formulations containing viscosity-lowering agents
US9446148B2 (en) 2014-10-06 2016-09-20 Mayo Foundation For Medical Education And Research Carrier-antibody compositions and methods of making and using the same
MA40835A (fr) 2014-10-23 2017-08-29 Biogen Ma Inc Anticorps anti-gpiib/iiia et leurs utilisations
MA40861A (fr) 2014-10-31 2017-09-05 Biogen Ma Inc Anticorps anti-glycoprotéines iib/iiia
ES2809455T3 (es) 2014-11-17 2021-03-04 Regeneron Pharma Métodos para tratamiento tumoral usando anticuerpo biespecífico CD3xCD20
SG11201704283PA (en) 2014-11-26 2017-06-29 Xencor Inc Heterodimeric antibodies that bind cd3 and tumor antigens
JP2017536830A (ja) 2014-11-26 2017-12-14 ゼンコー・インコーポレイテッドＸｅｎｃｏｒ、 Ｉｎｃ． Ｃｄ３及びｃｄ３８に結合するヘテロ二量体抗体
US10259887B2 (en) 2014-11-26 2019-04-16 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens
US10093733B2 (en) 2014-12-11 2018-10-09 Abbvie Inc. LRP-8 binding dual variable domain immunoglobulin proteins
WO2016105450A2 (en) 2014-12-22 2016-06-30 Xencor, Inc. Trispecific antibodies
AR103173A1 (es) 2014-12-22 2017-04-19 Novarits Ag Productos farmacéuticos y composiciones líquidas estables de anticuerpos il-17
JP2018504400A (ja) 2015-01-08 2018-02-15 バイオジェン・エムエイ・インコーポレイテッドＢｉｏｇｅｎ ＭＡ Ｉｎｃ． Ｌｉｎｇｏ‐１拮抗薬及び脱髄障害の治療のための使用
US9975965B2 (en) 2015-01-16 2018-05-22 Academia Sinica Compositions and methods for treatment and detection of cancers
US10495645B2 (en) 2015-01-16 2019-12-03 Academia Sinica Cancer markers and methods of use thereof
US10342858B2 (en) 2015-01-24 2019-07-09 Academia Sinica Glycan conjugates and methods of use thereof
CA2977687C (en) 2015-02-24 2024-02-13 Hwai Wen Chang Conditionally active proteins
US10227411B2 (en) 2015-03-05 2019-03-12 Xencor, Inc. Modulation of T cells with bispecific antibodies and FC fusions
WO2016149485A1 (en) 2015-03-17 2016-09-22 The Regents Of The University Of California Novel chemoimmunotherapy for epithelial cancer
CA2979976A1 (en) 2015-03-17 2016-09-22 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Anti-muc16 antibodies and uses thereof
CN107592812A (zh) 2015-05-11 2018-01-16 豪夫迈·罗氏有限公司 治疗狼疮性肾炎的组合物和方法
HUE051246T2 (hu) 2015-05-30 2021-03-01 Molecular Templates Inc Deimmunizált shigatoxin alegység vázak és azokat tartalmazó, sejthez irányító molekulák
WO2016196935A1 (en) 2015-06-03 2016-12-08 Boston Biomedical, Inc. Compositions comprising a cancer stemness inhibitor and an immunotherapeutic agent for use in treating cancer
TW201710286A (zh) 2015-06-15 2017-03-16 艾伯維有限公司 抗ｖｅｇｆ、ｐｄｇｆ及／或其受體之結合蛋白
EP3108897A1 (en) 2015-06-24 2016-12-28 F. Hoffmann-La Roche AG Antibodies against human csf-1r for use in inducing lymphocytosis in lymphomas or leukemias
CR20210429A (es) 2015-06-24 2021-09-24 Hoffmann La Roche ANTICUERPOS ANTI-RECEPTOR DE TRANSFERRINA CON AFINIDAD DISEÑADA (Divisional 2017-0562)
EP3313885A1 (en) 2015-06-29 2018-05-02 H. Hoffnabb-La Roche Ag Type ii anti-cd20 antibody for use in organ transplantation
IL257231B (en) 2015-08-03 2022-09-01 Bioverativ Therapeutics Inc Factor ix fusion proteins and methods of making and using same
MA42613A (fr) 2015-08-13 2018-06-20 Amgen Inc Filtration en profondeur chargée de protéines de liaison à un antigène
TW201707725A (zh) 2015-08-18 2017-03-01 美國馬友醫藥教育研究基金會 載體－抗體組合物及其製造及使用方法
IL319047A (en) 2015-08-28 2025-04-01 Amunix Operating Inc Chimeric polypeptide composition and methods for its preparation and use
KR102784293B1 (ko) 2015-09-21 2025-03-20 압테보 리서치 앤드 디벨롭먼트 엘엘씨 Cd3 결합 폴리펩타이드
AR106189A1 (es) 2015-10-02 2017-12-20 Hoffmann La Roche ANTICUERPOS BIESPECÍFICOS CONTRA EL A-b HUMANO Y EL RECEPTOR DE TRANSFERRINA HUMANO Y MÉTODOS DE USO
TWI819458B (zh) 2015-10-02 2023-10-21 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 雙特異性抗‐人類cd20/人類轉鐵蛋白受體抗體及使用方法
TW201713360A (en) 2015-10-06 2017-04-16 Mayo Foundation Methods of treating cancer using compositions of antibodies and carrier proteins
EP3371349A4 (en) 2015-11-02 2018-09-12 Bioatla, LLC Conditionally active polypeptides
JP7058219B2 (ja) 2015-12-07 2022-04-21 ゼンコア インコーポレイテッド Ｃｄ３及びｐｓｍａに結合するヘテロ二量体抗体
EP3397287B8 (en) 2015-12-30 2025-07-23 F. Hoffmann-La Roche AG Formulations with reduced degradation of polysorbate
EP3399861A4 (en) 2016-01-07 2019-08-07 Mayo Foundation for Medical Education and Research METHOD FOR THE TREATMENT OF CANCER WITH INTERFERON
KR20180118659A (ko) 2016-02-01 2018-10-31 바이오버라티브 테라퓨틱스 인크. 최적화된 viii 인자 유전자
US11351254B2 (en) 2016-02-12 2022-06-07 Mayo Foundation For Medical Education And Research Hematologic cancer treatments
JP2019515874A (ja) 2016-03-01 2019-06-13 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 改変された細胞死誘導を有するオビヌツズマブ変異体
WO2017149018A1 (en) 2016-03-02 2017-09-08 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and kits for predicting the risk of relapse in patients suffering from idiopathic nephrotic syndrome
AU2017231749A1 (en) 2016-03-08 2018-09-20 Academia Sinica Methods for modular synthesis of N-glycans and arrays thereof
MA43773B1 (fr) 2016-03-14 2026-01-30 Universitetet I Oslo Immunoglobulines génétiquement transformées ayant une liaison à fcrn altérée
JP7034489B2 (ja) 2016-03-15 2022-03-14 アイタブメッド （エイチケイ） リミテッド 多重特異性Ｆａｂ融合タンパクおよびその使用
CA3018340A1 (en) 2016-03-21 2017-09-28 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods for improving the therapeutic index for a chemotherapeutic drug
EP3432926A4 (en) 2016-03-21 2019-11-20 Mayo Foundation for Medical Education and Research METHOD FOR REDUCING THE TOXICITY OF CHEMOTHERAPEUTICS
CN109312299A (zh) 2016-03-29 2019-02-05 格尔托公司 蛋白质在具有0.5:1至10:1的周质体积与细胞质体积比的革兰氏阴性菌中的表达
US10618969B2 (en) 2016-04-06 2020-04-14 Mayo Foundation For Medical Education And Research Carrier-binding agent compositions and methods of making and using the same
CA3020864A1 (en) 2016-04-15 2017-10-19 Macrogenics, Inc. Novel b7-h3-binding molecules, antibody drug conjugates thereof and methods of use thereof
WO2017182608A1 (en) 2016-04-22 2017-10-26 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and vaccine compositions for the treatment of b-cell malignancies
EA201892284A1 (ru) 2016-05-27 2019-08-30 Тг Терапьютикс, Инк. Комбинация антитела против cd20, селективного ингибитора pi3-киназы-дельта и ингибитора btk для лечения b-клеточных пролиферативных расстройств
MA45255A (fr) 2016-06-14 2019-04-17 Xencor Inc Anticorps inhibiteurs de points de contrôle bispécifiques
WO2017218698A1 (en) 2016-06-15 2017-12-21 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies with engineered ch2 domains, compositions thereof and methods of using the same
KR20190020341A (ko) 2016-06-28 2019-02-28 젠코어 인코포레이티드 소마토스타틴 수용체 2에 결합하는 이종이량체 항체
JP2018035137A (ja) 2016-07-13 2018-03-08 マブイミューン ダイアグノスティックス エイジーＭａｂｉｍｍｕｎｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ａｇ 新規な抗線維芽細胞活性化タンパク質（ｆａｐ）結合薬剤およびその使用
US20200031924A1 (en) 2016-07-13 2020-01-30 Biogen Ma Inc. Dosage Regimens of Lingo-1 Antagonists and Uses for Treatment of Demyelinating Disorders
GB201613167D0 (en) 2016-07-29 2016-09-14 Univ Southampton Cancer and b-cell related disease therapy
AU2017316663B2 (en) 2016-08-22 2024-02-22 CHO Pharma Inc. Antibodies, binding fragments, and methods of use
US10793632B2 (en) 2016-08-30 2020-10-06 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
CN107384932B (zh) 2016-08-31 2020-10-20 北京天广实生物技术股份有限公司 抗人cd20人源化单克隆抗体mil62、其制备方法及用途
JP7525999B2 (ja) 2016-09-01 2024-07-31 マヨ ファウンデーション フォー メディカル エデュケーション アンド リサーチ キャリアー－ｐｄ－ｌ１結合剤組成物及び癌を処置する為にそれを使用する方法
EP3506950A1 (en) 2016-09-01 2019-07-10 Mayo Foundation for Medical Education and Research Methods and compositions for targeting t-cell cancers
CN109843924A (zh) 2016-09-06 2019-06-04 梅约医学教育与研究基金会 治疗表达pd-l1的癌症的方法
EP3509635A1 (en) 2016-09-06 2019-07-17 Vavotar Life Sciences LLC Methods of treating triple-negative breast cancer using compositions of antibodies and carrier proteins
RU2756892C2 (ru) 2016-09-06 2021-10-06 Мэйо Фаундейшн Фор Медикал Эдьюкейшн Энд Рисерч Композиции с паклитакселом, альбумином и связывающим средством и способы их применения и получения
AU2017322501A1 (en) 2016-09-09 2019-03-28 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Combination of an anti-CD20 antibody, PI3 kinase-delta inhibitor, and anti-PD-1 or anti-PD-L1 antibody for treating hematological cancers
CN108421048B (zh) * 2016-09-28 2021-04-20 首都医科大学附属北京世纪坛医院 纳米活性碳靶向药物递送系统、制备方法及其用途
US11498977B2 (en) 2016-09-29 2022-11-15 Beijing Hanmi Pharmaceutical Co., Ltd. Heterodimeric immunoglobulin constructs and preparation methods thereof
WO2018069289A1 (en) 2016-10-11 2018-04-19 Medimmune Limited Antibody-drug conjugates with immune-mediated therapy agents
BR112019007281A2 (pt) 2016-10-14 2019-07-09 Xencor Inc proteína heterodimérica, composições de ácido nucleico e de vetor de expressão, vetor de expressão, célula hospedeira, e, métodos para produzir proteína heterodimérica e para tratar câncer em um paciente
AU2017364077A1 (en) 2016-11-22 2019-06-20 Elektrofi, Inc. Particles comprising a therapeutic or diagnostic agent and suspensions and methods of use thereof
JP7106563B2 (ja) 2016-11-29 2022-07-26 スミトモ ファーマ オンコロジー， インコーポレイテッド ナフトフラン誘導体、その調製、および使用方法
WO2018100096A1 (en) 2016-12-01 2018-06-07 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) Use of anti-uchl1 igg plasma concentration for diagnosing idiopathic steroid sensitive nephrotic syndrome
MX2019006444A (es) 2016-12-02 2019-10-30 Bioverativ Therapeutics Inc Métodos de tratamiento de artropatía hemofílica utilizando factores de coagulación quiméricos.
JP2019536794A (ja) 2016-12-02 2019-12-19 バイオベラティブ セラピューティクス インコーポレイテッド 凝固因子に対する免疫寛容を誘導する方法
WO2018144623A1 (en) 2017-01-31 2018-08-09 Bioverativ Therapeutics Inc. Factor ix fusion proteins and methods of making and using same
CN108452319A (zh) 2017-02-20 2018-08-28 浙江特瑞思药业股份有限公司 靶向cd20的抗体偶联药物制剂
GB201703876D0 (en) 2017-03-10 2017-04-26 Berlin-Chemie Ag Pharmaceutical combinations
CN110352201A (zh) 2017-04-03 2019-10-18 免疫医疗公司 用于癌症疗法的抗体药物缀合物的皮下施用
WO2018211517A1 (en) 2017-05-16 2018-11-22 Bhami's Research Laboratory, Pvt. Ltd. High concentration protein formulations with reduced viscosity
WO2018213424A1 (en) 2017-05-17 2018-11-22 Boston Biomedical, Inc. Methods for treating cancer
AU2018291497A1 (en) 2017-06-30 2020-01-16 Xencor, Inc. Targeted heterodimeric Fc fusion proteins containing IL-15/IL-15Ra and antigen binding domains
EP3652206A1 (en) 2017-07-10 2020-05-20 International-Drug-Development-Biotech Treatment of b cell malignancies using afucosylated pro-apoptotic anti-cd19 antibodies in combination with anti cd20 antibodies or chemotherapeutics
WO2019023392A1 (en) 2017-07-25 2019-01-31 Elektrofi, Inc. FORMATION OF PARTICLES COMPRISING AGENTS
JP2020528061A (ja) 2017-07-26 2020-09-17 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト ＢＥＴ阻害剤、Ｂｃｌ−２阻害剤及び抗ＣＤ２０抗体を用いた併用療法
BR112020002394A2 (pt) 2017-08-09 2020-07-28 Bioverativ Therapeutics Inc. moléculas de ácidos nucleicos e usos das mesmas
US10759865B2 (en) 2017-08-22 2020-09-01 Eyal Levit Treatment of diabetes mellitus
US11180541B2 (en) 2017-09-28 2021-11-23 Geltor, Inc. Recombinant collagen and elastin molecules and uses thereof
WO2019077123A1 (en) 2017-10-20 2019-04-25 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) METHODS AND KITS FOR IDENTIFYING WHETHER A SUBJECT IS REACHED OR RISK OF BEING WITH AUTOIMMUNE MYOPATHY
US10981992B2 (en) 2017-11-08 2021-04-20 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
AU2018366199A1 (en) 2017-11-08 2020-05-28 Xencor, Inc. Bispecific and monospecific antibodies using novel anti-PD-1 sequences
CN111344402A (zh) 2017-12-14 2020-06-26 Ezy生物科技有限公司 受试者特异性肿瘤抑制细胞及其用途
AU2018390418B2 (en) 2017-12-19 2023-12-21 Xencor, Inc. Engineered IL-2 Fc fusion proteins
WO2019154776A1 (en) 2018-02-06 2019-08-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Treatment of ophthalmologic diseases
CA3092002A1 (en) 2018-03-13 2019-09-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Therapeutic combination of 4-1 bb agonists with anti-cd20 antibodies
KR102824112B1 (ko) 2018-03-28 2025-06-24 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 인터루킨-2/인터루킨-2 수용체 알파 융합 단백질 및 사용 방법
AU2019247415A1 (en) 2018-04-04 2020-10-22 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind fibroblast activation protein
CA3097593A1 (en) 2018-04-18 2019-10-24 Xencor, Inc. Pd-1 targeted heterodimeric fusion proteins containing il-15/il-15ra fc-fusion proteins and pd-1 antigen binding domains and uses thereof
CN112004924A (zh) 2018-04-18 2020-11-27 Ucl商务有限公司 增强treg细胞抑制特性的方法
JP2021520829A (ja) 2018-04-18 2021-08-26 ゼンコア インコーポレイテッド ＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲＡ Ｆｃ融合タンパク質およびＴＩＭ−３抗原結合ドメインを含む、ＴＩＭ−３標的化ヘテロ二量体融合タンパク質
KR20210018807A (ko) 2018-04-27 2021-02-18 바이오젠 엠에이 인코포레이티드 인간-유래 항-(폴리-ga) 디펩타이드 반복 (dpr) 항체
SG11202010469QA (en) 2018-05-23 2020-11-27 Adc Therapeutics Sa Molecular adjuvant
US12115262B2 (en) 2018-05-24 2024-10-15 Elektrofi, Inc. Particles comprising a therapeutic or diagnostic agent and suspensions and methods of use thereof
RS65472B1 (sr) 2018-07-03 2024-05-31 Bristol Myers Squibb Co Postupak proizvodnje rekombinantnih proteina
US12097199B2 (en) 2018-07-09 2024-09-24 Takeda Pharmaceutical Company Limited Administration of SUMO-activating enzyme inhibitor and anti-CD20 antibodies
WO2020028909A1 (en) 2018-08-03 2020-02-06 Brown University Oral formulations with increased uptake
CN109273050B (zh) * 2018-08-03 2021-07-13 五邑大学 一种用于解析复杂多聚体蛋白受体的脉冲电子顺磁共振数据的系统及方法与应用
KR102925832B1 (ko) 2018-08-09 2026-02-11 바이오버라티브 테라퓨틱스 인크. 핵산 분자 및 비바이러스 유전자 치료를 위한 이의 용도
PT3844189T (pt) 2018-08-31 2025-01-29 Regeneron Pharma Estratégia de dosagem que mitiga a síndrome de libertação de citocinas para anticorpos bisepecíficos contra cd3/c20
US12460000B2 (en) 2018-09-07 2025-11-04 Itabmed (Hk) Limited Anti-CD19 and anti-CD3 bispecific antigen binding proteins and uses thereof
EP3852788A1 (en) 2018-09-17 2021-07-28 The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Bicistronic chimeric antigen receptors targeting cd19 and cd20 and their uses
SG11202103192RA (en) 2018-10-03 2021-04-29 Xencor Inc Il-12 heterodimeric fc-fusion proteins
US12415980B2 (en) 2018-10-10 2025-09-16 Boehringer Ingelheim International Gmbh Method for membrane gas transfer in high density bioreactor culture
GB201816553D0 (en) 2018-10-10 2018-11-28 Centauri Therapeutics Ltd Novel compounds and therapeutic uses thereof
GB201816554D0 (en) 2018-10-10 2018-11-28 Centauri Therapeutics Ltd Novel compounds and therapeutic uses thereof
WO2020076849A1 (en) 2018-10-11 2020-04-16 The Scripps Research Institute Antibody compounds with reactive arginine and related antibody drug conjugates
KR102262012B1 (ko) 2018-10-15 2021-06-09 연세대학교 산학협력단 생산성이 향상된 항체 및 이의 제조방법
SG11202103064YA (en) 2018-10-29 2021-05-28 Hoffmann La Roche Antibody formulation
RU2724469C2 (ru) 2018-10-31 2020-06-23 Закрытое Акционерное Общество "Биокад" Моноклональное антитело, которое специфически связывается с cd20
JP7453151B2 (ja) 2018-11-02 2024-03-19 協和キリン株式会社 液体培地の調製方法
WO2020106886A1 (en) 2018-11-20 2020-05-28 Cornell University Macrocyclic complexes of radionuclides and their use in radiotherapy of cancer
KR20210100668A (ko) 2018-12-06 2021-08-17 제넨테크, 인크. 항-CD79b 면역접합체, 알킬화제 및 항-CD20 항체를 포함하는 미만성 큰 B-세포 림프종의 조합 요법
WO2020115262A1 (en) 2018-12-07 2020-06-11 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Use of cd26 and cd39 as new phenotypic markers for assessing maturation of foxp3+ t cells and uses thereof for diagnostic purposes
WO2020132810A1 (en) 2018-12-24 2020-07-02 Generon (Shanghai) Corporation Ltd. Multispecific antigen binding proteins capable of binding cd19 and cd3, and use thereof
CN113365609A (zh) 2019-01-31 2021-09-07 伊勒卓菲公司 颗粒形成和形态
JP7588080B2 (ja) 2019-02-13 2024-11-21 ザ ブリガム アンド ウィメンズ ホスピタル インコーポレイテッド 抗末梢リンパ節アドレッシン抗体およびその使用
KR102398485B1 (ko) 2019-02-18 2022-05-16 에이티비 테라퓨틱스 식물 세포 또는 식물 전체에서 결합제-독소 융합 단백질의 생산 방법
BR112021016923A2 (pt) 2019-02-27 2021-11-03 Genentech Inc Métodos para tratar um paciente com câncer hematológico, métodos para tratar um paciente com mm recidivante ou refratário, métodos para tratar um paciente tendo um lnh recidivante ou refratário e kits
WO2020180726A1 (en) 2019-03-01 2020-09-10 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind enpp3 and cd3
AU2020254582B2 (en) 2019-04-01 2025-12-18 Genentech, Inc. Compositions and methods for stabilizing protein-containing formulations
TW202104254A (zh) 2019-04-12 2021-02-01 美商格爾托公司 重組彈性蛋白及其生產
CN114206340A (zh) 2019-05-14 2022-03-18 豪夫迈·罗氏有限公司 使用抗cd79b免疫缀合物治疗滤泡性淋巴瘤的方法
CN114269749B (zh) 2019-06-10 2024-10-01 苏特罗生物制药公司 5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-2,4-二氨基化合物及其抗体偶联物
EP3983410A1 (en) 2019-06-17 2022-04-20 Sutro Biopharma, Inc. 1-(4-(aminomethyl)benzyl)-2-butyl-2h-pyrazolo[3,4-c]quinolin-4-amine derivatives and related compounds as toll-like receptor (tlr) 7/8 agonists, as well as antibody drug conjugates thereof for use in cancer therapy and diagnosis
EP4007808A1 (en) 2019-08-01 2022-06-08 Bristol-Myers Squibb Company Methods of improving protein productivity in fed-batch cell cultures
CA3149049A1 (en) 2019-08-30 2021-03-04 Vestlandets Innovasjonsselskap As Method for the treatment of chronic fatigue syndrome using an inhibitory or cytotoxic agent against plasma cells
EP4438057A3 (en) 2019-09-12 2025-01-01 F. Hoffmann-La Roche AG Compositions and methods of treating lupus nephritis
WO2021050953A1 (en) 2019-09-13 2021-03-18 Elektrofi, Inc. Compositions and methods for the delivery of therapeutic biologics for treatment of disease
US12403164B2 (en) 2019-09-30 2025-09-02 Bioverativ Therapeutics Inc. Lentiviral vector formulations
TW202122114A (zh) 2019-10-18 2021-06-16 美商建南德克公司 使用抗CD79b 免疫偶聯物治療彌漫性大B 細胞淋巴瘤的方法
WO2021100034A1 (en) 2019-11-19 2021-05-27 Protalix Ltd. Removal of constructs from transformed cells
KR20220146488A (ko) 2020-01-31 2022-11-01 씨젠 인크. 항-cd30 항체-약물 컨쥬게이트 및 비-호지킨 림프종의 치료를 위한 그의 용도
WO2021168271A1 (en) 2020-02-19 2021-08-26 Elektrofi, Inc. Droplet formation and particle morphology
JP2023516028A (ja) 2020-02-28 2023-04-17 ザ ブリガム アンド ウィメンズ ホスピタル インコーポレイテッド 多重特異性抗体を介したトランスフォーミング増殖因子ベータスーパーファミリーシグナル伝達の選択的調節
US20230095053A1 (en) 2020-03-03 2023-03-30 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising site-specific glutamine tags, methods of their preparation and methods of their use
US12377050B2 (en) 2020-04-17 2025-08-05 Elektrofi, Inc. Methods of forming particles by continuous droplet formation and dehydration
JP7785016B2 (ja) 2020-04-24 2025-12-12 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ＣＤ７９ｂ免疫抱合体の使用方法
CA3179891A1 (en) 2020-04-26 2021-11-04 Biocytogen Pharmaceuticals (Beijing) Co., Ltd Modified immunoglobulins
US20230293709A1 (en) 2020-05-03 2023-09-21 Shanghai Miracogen Inc. Antibody-drug conjugate and preparation thereof
BR112022022730A2 (pt) 2020-05-08 2023-02-14 Genmab As Método para tratar um linfoma não hodgkin de células b em um indivíduo humano
WO2021231976A1 (en) 2020-05-14 2021-11-18 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind prostate specific membrane antigen (psma) and cd3
GB202007842D0 (en) 2020-05-26 2020-07-08 Quell Therapeutics Ltd Polypeptide useful in adoptive cell therapy
KR20230074703A (ko) 2020-06-24 2023-05-31 바이오버라티브 테라퓨틱스 인크. 유리 인자 viii을 상기 단백질이 발현되도록 변형된 렌티바이러스 벡터의 제제로부터 제거하는 방법
AU2021309966A1 (en) 2020-07-15 2023-02-09 Biogen Ma Inc. Medical system including two access ports
WO2022031749A1 (en) 2020-08-03 2022-02-10 Genentech, Inc. Diagnostic and therapeutic methods for lymphoma
GB202012331D0 (en) 2020-08-07 2020-09-23 Petmedix Ltd Therapeutic antibodies
CA3192204A1 (en) 2020-08-19 2022-02-24 Xencor, Inc. Anti-cd28 and/or anti-b7h3 compositions
CN112062855B (zh) 2020-08-26 2024-08-30 北京天诺健成医药科技有限公司 一种含有衔接器的药物治疗剂的开发和应用
GB202013477D0 (en) 2020-08-27 2020-10-14 Quell Therapeutics Ltd Nucleic acid constructs for expressing polypeptides in cells
WO2022043415A1 (en) 2020-08-27 2022-03-03 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for detecting the presence of pemphigus-specific autoantibodies in a sample
EP4210746A1 (en) 2020-09-10 2023-07-19 Genmab A/S Bispecific antibodies against cd3 and cd20 for treating chronic lymphocytic leukemia
US20240034812A1 (en) 2020-09-10 2024-02-01 Genmab A/S Bispecific antibody against cd3 and cd20 in combination therapy for treating diffuse large b-cell lymphoma
US20230312758A1 (en) 2020-09-10 2023-10-05 Genmab A/S Bispecific antibody against cd3 and cd20 in combination therapy for treating follicular lymphoma
BR112023004216A2 (pt) 2020-09-10 2023-04-11 Genmab As Método para tratar linfoma folicular em um sujeito humano
EP4210744A1 (en) 2020-09-10 2023-07-19 Genmab A/S Bispecific antibody against cd3 and cd20 in combination therapy for treating diffuse large b-cell lymphoma
US12486525B2 (en) 2020-09-22 2025-12-02 Bristol-Myers Squibb Company Methods for increasing productivity of therapeutic proteins
WO2022074646A1 (en) 2020-10-05 2022-04-14 Protalix Ltd. Dicer-like knock-out plant cells
US20230372528A1 (en) 2020-10-16 2023-11-23 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Glycoconjugates
WO2022103983A2 (en) 2020-11-11 2022-05-19 Sutro Biopharma, Inc. Fluorenylmethyloxycarbonyl and fluorenylmethylaminocarbonyl compounds, protein conjugates thereof, and methods for their use
WO2022104150A1 (en) 2020-11-12 2022-05-19 Tg Therapeutics, Inc. Triple combination to treat b-cell malignancies
GB202102396D0 (en) 2021-02-19 2021-04-07 Adc Therapeutics Sa Molecular adjuvant
KR20230156079A (ko) 2021-03-09 2023-11-13 젠코어 인코포레이티드 Cd3과 cldn6에 결합하는 이종이량체 항체
US11859012B2 (en) 2021-03-10 2024-01-02 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and GPC3
BR112023018621A2 (pt) 2021-03-15 2023-10-24 Hoffmann La Roche Métodos para tratar nefrite lúpica, esgotar células b periféricas, kits para tratar nefrite lúpica e anticorpos anti-cd20 tipo ii
WO2022204282A1 (en) 2021-03-24 2022-09-29 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Bicistronic chimeric antigen receptors designed to reduce retroviral recombination and uses thereof
EP4327831A4 (en) 2021-04-20 2026-02-11 Nihon Mediphysics Co Ltd RADIOACTIVE ANTI-CD20 ANTIBODY COMPLEX, AND RADIOPHARMACEUTICAL PRODUCT
US20240262917A1 (en) 2021-05-06 2024-08-08 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Antibodies against alk and methods of use thereof
MX2023013264A (es) 2021-05-12 2023-11-30 Genentech Inc Metodos para usar inmunoconjugados anti-cd79b para tratar linfoma difuso de linfocitos b grandes.
EP4347647A1 (en) 2021-06-01 2024-04-10 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) Use of b cell depleting agents for the treatment of rheumatic heart disease
KR20240018435A (ko) 2021-06-08 2024-02-13 사이포스 바이오사이언시스 인코포레이티드 항체-nkg2d 리간드 도메인 융합 단백질
US20240277845A1 (en) 2021-06-08 2024-08-22 Xyphos Biosciences Inc. Antibody-nkg2d ligand domain fusion protein
JP2024526122A (ja) 2021-06-17 2024-07-17 ペットメディックス・リミテッド 抗イヌｃｄ２０抗体
CA3220318A1 (en) 2021-06-17 2022-12-22 Glaxosmithkline Intellectual Property Limited Anti-baff antibodies for use in a method of treatment of long covid and/or post-acute sequelae sars-cov-2 infection (pasc)
JP2024527977A (ja) 2021-07-27 2024-07-26 ノヴァブ， インコーポレイテッド 免疫エフェクター機能を有する操作されたｖｌｒｂ抗体
US20250115666A1 (en) 2021-08-05 2025-04-10 Bristol-Myers Squibb Company Cell culture methods for producing therapeutic proteins
CA3228830A1 (en) 2021-08-06 2023-02-09 Petmedix Ltd Antibody fc variants
US20240336697A1 (en) 2021-08-07 2024-10-10 Genentech, Inc. Methods of using anti-cd79b immunoconjugates to treat diffuse large b-cell lymphoma
AR126845A1 (es) 2021-08-23 2023-11-22 Bioverativ Therapeutics Inc Producción de adn de extremo cerrado con secuencias repetidas de terminal invertida
IL310997A (en) 2021-08-23 2024-04-01 Bioverativ Therapeutics Inc Factor VIII gene optimization
US20240390869A1 (en) 2021-09-21 2024-11-28 Bristol-Myers Squibb Company Methods of controlling the level of dissolved oxygen (do) in a solution comprising a recombinant protein in a storage container
WO2023056403A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 Genentech, Inc. Methods for treatment of hematologic cancers using anti-tigit antibodies, anti-cd38 antibodies, and pd-1 axis binding antagonists
EP4408874A1 (en) 2021-09-30 2024-08-07 Bioverativ Therapeutics Inc. Nucleic acids encoding factor viii polypeptides with reduced immunogenicity
CN117980327A (zh) 2021-11-03 2024-05-03 杭州多禧生物科技有限公司 抗体的特异性偶联
EP4433506A1 (en) 2021-11-16 2024-09-25 Genentech, Inc. Methods and compositions for treating systemic lupus erythematosus (sle) with mosunetuzumab
EP4436998A1 (en) 2021-11-24 2024-10-02 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Antibodies against ctla-4 and methods of use thereof
US20250051755A1 (en) 2021-12-17 2025-02-13 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Platform for antibody discovery
WO2023114544A1 (en) 2021-12-17 2023-06-22 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Antibodies and uses thereof
EP4469083A1 (en) 2022-01-28 2024-12-04 Genmab A/S Bispecific antibody against cd3 and cd20 in combination therapy for treating diffuse large b-cell lymphoma
US20250381277A1 (en) 2022-02-04 2025-12-18 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Compositions and methods for treatment of neurological disorders
IL314314A (en) 2022-02-09 2024-09-01 Petmedix Ltd Therapeutic antibodies
US12605537B2 (en) 2022-02-15 2026-04-21 Biogen Ma Inc. Implantable medical device for use with or having recording electrode
US20250144042A1 (en) 2022-02-22 2025-05-08 Brown University Compositions and methods to achieve systemic uptake of particles following oral or mucosal administration
EP4508080A1 (en) 2022-04-11 2025-02-19 Astrazeneca AB T cell binding proteins
AU2023260936A1 (en) 2022-04-29 2024-12-05 Halozyme Hypercon, Inc. Injectable suspensions
US11807689B1 (en) 2022-06-01 2023-11-07 Tg Therapeutics, Inc. Anti-CD20 antibody compositions
US11965032B1 (en) 2022-06-01 2024-04-23 Tg Therapeutics, Inc. Anti-CD20 antibody compositions
US11814439B1 (en) 2022-06-01 2023-11-14 Tg Therapeutics, Inc. Anti-CD20 antibody compositions
US11884740B1 (en) 2022-06-01 2024-01-30 Tg Therapeutics, Inc. Anti-CD20 antibody compositions
CA3258164A1 (en) 2022-06-27 2024-01-04 Sutro Biopharma, Inc. β-GLUCURONIDE BINDER PAYLOADS, THEIR PROTEIN CONJUGATES AND ASSOCIATED METHODS
JP2025523752A (ja) 2022-07-15 2025-07-25 ストロ バイオファーマ インコーポレーテッド プロテアーゼ／酵素切断可能リンカー－ペイロードおよびタンパク質コンジュゲート
AU2023324667A1 (en) 2022-08-15 2025-02-13 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Antibodies against cldn4 and methods of use thereof
WO2024039672A2 (en) 2022-08-15 2024-02-22 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Antibodies against msln and methods of use thereof
IL320029A (en) 2022-11-08 2025-06-01 Genentech Inc Compositions and methods for treating childhood idiopathic nephrotic syndrome
WO2024153636A1 (en) 2023-01-17 2024-07-25 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Vasorin as a biomarker and biotarget in nephrology
WO2024182516A1 (en) 2023-02-28 2024-09-06 Juno Therapeutics, Inc. Cell therapy for treating systemic autoimmune diseases
TW202504641A (zh) 2023-06-08 2025-02-01 美商建南德克公司 用於淋巴瘤之診斷及治療方法的巨噬細胞特徵
WO2025021782A1 (en) 2023-07-24 2025-01-30 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Methods of determining whether a subject suffering from lupus nephritis (ln) will achieve a response with an induction therapy
AU2024315750A1 (en) 2023-07-31 2026-03-05 Sutro Biopharma, Inc. Sting agonist compounds and conjugates
WO2025045894A1 (en) 2023-08-28 2025-03-06 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Methods and kits for diagnosing cause of nephrotic syndrome and guiding therapy
WO2025054552A1 (en) 2023-09-08 2025-03-13 Elektrofi, Inc. Particles and suspensions comprising hyaluronan degrading agents and methods of use thereof
WO2025078400A1 (en) 2023-10-10 2025-04-17 Astrazeneca Ab T cell binding compositions and methods
WO2025080711A1 (en) 2023-10-13 2025-04-17 Sutro Biopharma, Inc. Dual payload antibody drug conjugates
TW202528347A (zh) 2023-11-15 2025-07-16 瑞士商紐立慕公司 抗運甲狀腺素蛋白抗體、包含所述抗體之組成物及用於治療或預防運甲狀腺素蛋白介導之澱粉樣變性的方法
US20250179207A1 (en) 2023-11-30 2025-06-05 Genzyme Corporation Methods for treating digitally-identified cd20-related disorders
TW202604943A (zh) 2024-04-24 2026-02-01 美商建南德克公司 治療狼瘡性腎炎之組成物及方法
US20250383333A1 (en) 2024-06-12 2025-12-18 Elektrofi, Inc. Determination of particulate contaminants in particles and compositions
WO2025264647A1 (en) 2024-06-18 2025-12-26 Sutro Biopharma, Inc. Oxoadenine tlr7 agonist compounds and conjugates
WO2026003017A1 (en) 2024-06-25 2026-01-02 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Methods and kits for the simultaneous detection of auto-antibodies directed against the dermo-epidermal junction proteins in autoimmune bullous skin diseases
WO2026043823A2 (en) 2024-08-19 2026-02-26 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising site-specific non-natural amino acid residues, methods of preparation and uses thereof
WO2026050339A1 (en) 2024-08-27 2026-03-05 Halozyme Hypercon, Inc. Methods of preparing samples for analytical testing
WO2026050426A2 (en) 2024-08-28 2026-03-05 Juno Therapeutics, Inc. Cd19-directed chimeric antigen receptor cell therapy for treating autoimmune and neurological diseases
WO2026072685A1 (en) 2024-09-25 2026-04-02 Genentech, Inc. Compositions and methods of treating lupus nephritis
WO2026080688A1 (en) 2024-10-09 2026-04-16 Sutro Biopharma, Inc. Dual mechanism of action payload antibody drug conjugates
WO2026080697A1 (en) 2024-10-09 2026-04-16 Sutro Biopharma, Inc. Antibody conjugates with high payload to antibody ratios, compositions comprising the same, and methods of their use
WO2026080692A1 (en) 2024-10-09 2026-04-16 Sutro Biopharma, Inc. Branched beta-glucuronide linker-payloads, protein conjugates thereof, and methods thereof
WO2026089759A1 (en) 2024-10-21 2026-04-30 Sonnet BioTherapeutics, Inc. Docking peptides and related antibody-based drug conjugates
WO2026097015A1 (en) 2024-11-01 2026-05-07 Eindura Therapeutics, Inc. Targeted therapeutics with an electrophilic group for covalent attachment and methods of use and manufacture thereof

Family Cites Families (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US206903A (en) * 1878-08-13 Improvement in cultivators
US163708A (en) * 1875-05-25 Improvement in harvester-rakes
US197255A (en) * 1877-11-20 Improvement in receivers and stench-traps for street-sewers
US9444A (en) * 1852-12-07 Hot-air furnace
US21781A (en) * 1858-10-12 Improved method o f lighting street-lamps by electricity
US95963A (en) * 1869-10-19 Improvement in fence
US147885A (en) * 1874-02-24 Improvement in the manufacture of halters and bridles
US186205A (en) * 1877-01-16 Improvement in buffing-rolls for thesoles of boots andshoes
US26804A (en) * 1860-01-10 Bridle-bit
US213784A (en) * 1879-04-01 Improvement in inlaying metallic scroll-ornaments in hard rubber and allied gums
US4816567A (en) * 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
EP0173494A3 (en) * 1984-08-27 1987-11-25 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Chimeric receptors by dna splicing and expression
USRE38008E1 (en) * 1986-10-09 2003-02-25 Neorx Corporation Methods for improved targeting of antibody, antibody fragments, hormones and other targeting agents, and conjugates thereof
US6893625B1 (en) * 1986-10-27 2005-05-17 Royalty Pharma Finance Trust Chimeric antibody with specificity to human B cell surface antigen
IL85035A0 (en) * 1987-01-08 1988-06-30 Int Genetic Eng Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same
US4975278A (en) * 1988-02-26 1990-12-04 Bristol-Myers Company Antibody-enzyme conjugates in combination with prodrugs for the delivery of cytotoxic agents to tumor cells
US5204244A (en) * 1987-10-27 1993-04-20 Oncogen Production of chimeric antibodies by homologous recombination
US5439665A (en) * 1988-07-29 1995-08-08 Immunomedics Detection and treatment of infectious and inflammatory lesions
IL162181A (en) * 1988-12-28 2006-04-10 Pdl Biopharma Inc A method of producing humanized immunoglubulin, and polynucleotides encoding the same
CA2095141A1 (en) * 1990-11-05 1992-05-06 Ingegerd Hellstrom Synergistic therapy with combinations of anti-tumor antibodies and biologically active agents
MX9204374A (es) * 1991-07-25 1993-03-01 Idec Pharma Corp Anticuerpo recombinante y metodo para su produccion.
US5686072A (en) * 1992-06-17 1997-11-11 Board Of Regents, The University Of Texas Epitope-specific monoclonal antibodies and immunotoxins and uses thereof
US5736137A (en) * 1992-11-13 1998-04-07 Idec Pharmaceuticals Corporation Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma
US5648267A (en) * 1992-11-13 1997-07-15 Idec Pharmaceuticals Corporation Impaired dominant selectable marker sequence and intronic insertion strategies for enhancement of expression of gene product and expression vector systems comprising same
DE69303494T2 (de) * 1992-11-13 1997-01-16 Idec Pharma Corp Therapeutische verwendung von chimerischen und markierten antikörper gegen menschlichen b lymphozyt beschränkter differenzierung antigen für die behandlung von b-zell-lymphoma
US5595721A (en) * 1993-09-16 1997-01-21 Coulter Pharmaceutical, Inc. Radioimmunotherapy of lymphoma using anti-CD20
US5678180A (en) * 1995-06-07 1997-10-14 Hughes Electronics Communication system and method providing dispatch and cellular interconnect communications
US6306393B1 (en) * 1997-03-24 2001-10-23 Immunomedics, Inc. Immunotherapy of B-cell malignancies using anti-CD22 antibodies
US6183744B1 (en) * 1997-03-24 2001-02-06 Immunomedics, Inc. Immunotherapy of B-cell malignancies using anti-CD22 antibodies

Also Published As

Publication number Publication date
PT1005870E (pt) 2009-04-28
ZA938466B (en) 1994-06-20
GEPI20105119B (en) 2010-11-25
HK1109633A1 (en) 2008-06-13
UA27946C2 (uk) 2000-10-16
CN1094965A (zh) 1994-11-16
CN101007851A (zh) 2007-08-01
CN1270774C (zh) 2006-08-23
LU91620I2 (fr) 2010-01-11
CA2626445A1 (en) 1994-05-26
US20030082172A1 (en) 2003-05-01
CN1607006A (zh) 2005-04-20
CN1607006B (zh) 2012-09-19
FR04C0018I1 (pl) 2008-09-26
HK1125574A1 (en) 2009-08-14
IL107591A (en) 2000-02-17
HUT72914A (en) 1996-06-28
US5736137A (en) 1998-04-07
DE122009000070I1 (de) 2010-02-11
EP2000149B1 (en) 2009-05-13
TW376320B (en) 1999-12-11
SG45294A1 (en) 1998-01-16
CN101007850B (zh) 2012-05-30
CN1912111A (zh) 2007-02-14
ES2321567T3 (es) 2009-06-08
ATE421335T1 (de) 2009-02-15
NL300424I1 (nl) 2010-01-04
GEP20074162B (en) 2007-07-10
CN101007851B (zh) 2012-09-12
DK1005870T3 (da) 2009-05-18
FR04C0018I2 (pl) 2009-11-20
MY111196A (en) 1999-09-30
DK2000149T3 (da) 2009-08-03
HK1109634A1 (en) 2008-06-13
ES2326144T3 (es) 2009-10-01
DE69334285D1 (de) 2009-06-25
CN101007850A (zh) 2007-08-01
GEP20105119B (en) 2010-11-25
HU9501410D0 (en) 1995-06-28
EP2000149A1 (en) 2008-12-10
DE69334259D1 (de) 2009-03-12
IL107591A0 (en) 1994-02-27
PT2000149E (pt) 2009-07-14
CN1912111B (zh) 2010-05-26
HU219264B (en) 2001-03-28
KR100365632B1 (ko) 2003-08-02
BR1100622A (pt) 2000-04-18
ATE431158T1 (de) 2009-05-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU688743B2 (en) Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma
CN101007851B (zh) 抗人类b淋巴细胞限制分化抗原的嵌合及放射标记抗体
US20030147885A1 (en) Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma
HK1109633B (en) Chimeric and radiolabeled antibodies to human b lymphocyte restricted differentiation antigen
HK1109634B (en) Chimeric and radiolabeled antibodies to human b lymphocyte restricted differentiation antigen