PL191812B1 - Materiał roślinny z buraka cukrowego składający się ze zmutowanych komórek, sposób wytwarzania oporności na herbicyd w buraku cukrowym, sposób uzyskiwania oporności na herbicyd w buraku, sposób zwalczania chwastów rosnących razem z burakami cukrowymi - Google Patents

Materiał roślinny z buraka cukrowego składający się ze zmutowanych komórek, sposób wytwarzania oporności na herbicyd w buraku cukrowym, sposób uzyskiwania oporności na herbicyd w buraku, sposób zwalczania chwastów rosnących razem z burakami cukrowymi

Info

Publication number
PL191812B1
PL191812B1 PL331175A PL33117597A PL191812B1 PL 191812 B1 PL191812 B1 PL 191812B1 PL 331175 A PL331175 A PL 331175A PL 33117597 A PL33117597 A PL 33117597A PL 191812 B1 PL191812 B1 PL 191812B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
cells
resistance
sugar beet
herbicide
imidazolinone
Prior art date
Application number
PL331175A
Other languages
English (en)
Other versions
PL331175A1 (en
Inventor
Donald Penner
Terry R. Wright
Original Assignee
Univ Michigan State
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from US08/761,197 external-priority patent/US5859348A/en
Application filed by Univ Michigan State filed Critical Univ Michigan State
Publication of PL331175A1 publication Critical patent/PL331175A1/xx
Publication of PL191812B1 publication Critical patent/PL191812B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
    • C12N15/102—Mutagenizing nucleic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/88—Lyases (4.)

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

1. Materia l ro slinny z buraka cukrowego, znamienny tym, ze sk lada si e ze zmutowanych ko- mórek ze zmutowanym genem syntazy acetomleczanowej koduj acym syntaz e, w którym nukleotydy s a zmodyfikowane z cytozyny na tymin e w pozycji 562 i z guaniny na adenin e w pozycji 337, przy czym zmutowane komórki maj a opornosc zarówno na herbicydy imidazolinonowe jak i sulfonylo- mocznikowe, a oporno sc mo ze by c przenoszona poprzez konwencjonalne krzy zowanie ro slin wytwo- rzonych z komórek. PL PL PL

Description

Przedmiotem wynalazku jest materiał roślinny z buraka cukrowego składający się ze zmutowanych komórek, sposób wytwarzania oporności na herbicyd w buraku cukrowym, sposób uzyskiwania oporności na herbicyd w buraku, sposób zwalczania chwastów rosnących razem z burakami cukrowymi.
Zgodnie z wynalazkiem można wytworzyć buraki cukrowe (Beta vulgaris L.), które są oporne zarówno na herbicydy imidazolinonowe, jak i sulfonylomocznikowe, stosowane do zwalczania chwastów. W sposobie wytwarzania oporności na herbicydy w burakach cukrowych, według wynalazku, wykorzystuje się mutację genu kodującego syntazę acetomleczanową (ALS), znaną również jako syntaza acetohydroksykwasów (AHAS), przy zastosowaniu herbicydów kolejno wobec komórek w pożywce hodowlanej.
Uprzednio opisano zmianę genetyczną genu syntazy acetomleczanowej przy zastosowaniu metod inżynierii genetycznej, jak pokazane w patentach USA Nr 5013659; 5141870 i 5378824. Ten typ modyfikacji buraków cukrowych jest przedstawiony w Przykładzie IV patentu 5378824. Wyniki te były mniej niż satysfakcjonujące przy wytwarzaniu roślin, które rozmnażały się przekazując oporność na herbicyd.
Saunders i wsp. w Crop Science 32:1357-1360 (1992) również opisują wytwarzanie buraka cukrowego (CR1-B), który jest oporny na sulfonylomoczniki, z podatnego, zdolnego do samozapylenia klonu (REL-1), poprzez selekcję zmutowanych komórek w pożywce hodowlanej zawierającej herbicyd. Wytworzono i krzyżowano różne oporne rośliny. Hart i wsp. (Weed Sci. 40: 378-383 (1992); oraz Weed Sci. 41:317-324 (1993)) scharakteryzowali dalej linię oporną i stwierdzili, że oporność była skutkiem zmienionej aktywności ALS i wykazali brak oporności krzyżowej wobec innych herbicydów hamujących ALS oraz, że była ona kodowana przez pojedynczy, częściowo dominujący gen.
Nie istnieją publikacje opisujące oporność na imidazolinon otrzymaną poprzez modyfikowanie ALS w burakach cukrowych. Nie istnieją w piśmiennictwie opisy roślin, które są oporne zarówno na herbicydy imidazolinonowe, jak i sulfonylomocznikowe. Uzyskano różne linie kukurydzy z opornością na imidazolinon, jak opisali Newhouse i wsp., Theotetical and Applied Genetics 83:65-70 (1991).
Handlowym sposobem ochrony roślin uprawnych jest stosowanie klinicznych „czynników zabezpieczających, takich jak opisane w patencie europejskim nr 375875. Metoda ta wprowadza inny związek chemiczny do gleby. Korzystną metodą jest uzyskanie buraków cukrowych, które są oporne na herbicydy imidazolinonowe i sulfonylomocznikowe.
Celem niniejszego wynalazku jest zatem dostarczenie sposobu uzyskania oporności na herbicydy imidazolinonowe i sulfonylomocznikowe w burakach cukrowych przez mutację genu syntazy acetomleczanowej kodującego taką oporność. Ponadto, celem niniejszego wynalazku jest dostarczenie buraków cukrowych, które są oporne na te herbicydy. Te i inne cele staną się bardziej oczywiste poprzez odniesienie się do następującego dalej opisu i rysunków.
Fig. 1 jest schematycznym przedstawieniem sposobu według niniejszego wynalazku wytwarzania buraków cukrowych 93R30A lub B opornych na imidazolinon i sulfonylomocznik. R = oporny; IM = imidazolinon; S = wrażliwy; SU = sulfonylomocznik; Sur = allel ALS dominujący wobec SU-R, TP-R oraz IM-S; SB = allel ALS dominujący wobec SU-R, TP-R i IM-R; TP = triazolopirymidyna. 93R30B jest SU-R i IM-R i TP-R. 93R30A (ale nie 93R30B) jest homozygotyczny wobec allela Sur (SU-R, IM-S). Był to wyjściowy materiał dla uzyskania oporności na imidazolinon.
Fig. 2 jest diagramem przedstawiającym szczegółowo kolejne etapy wytwarzania zmutowanego buraka cukrowego.
Fig. 3 jest wykresem przedstawiającym test ALS dla oporności na imazetapir 93R30B.
Fig. 4 jest wykresem pokazującym podstawienia aminokwasowe obserwowane dla typu dzikiego (wt) trzech zmutowanych buraków cukrowych (Sir-13, Sur i SB) i odpowiadające im oporności na herbicyd. Uwzględnione są jedynie reszty aminokwasowe, które opisano w piśmiennictwie, jako odpowiadające za oporność na herbicyd. W jednoliterowym kodzie aminokwasowym A = alanina, P = prolina, W = tryptofan, S = seryna oraz T = treonina. Litery w ramce oznaczają zmiany wobec sekwencji typu dzikiego.
Fig. 5A do 5D są fotografiami pokazującymi odpowiedź całej rośliny buraka cukrowego na imazetapir zastosowany powschodowo.
Fig. 6A do 6D są fotografiami pokazującymi odpowiedź całej rośliny buraka cukrowego na AC 299263 zastosowany powschodowo.
PL 191 812 B1
Fig. 7 jest fotografią pokazującą odpowiedź enzymu ALS na imazetapir in vitro.
Fig. 8 jest fotografią pokazującą odpowiedź enzymu ALS na flumetsulam in vitro.
Fig. 9A do 9D są fotografiami pokazującymi odpowiedź całej rośliny buraka cukrowego na chlorosulfuron zastosowany powschodowo.
Fig. 10 jest fotografią pokazującą odpowiedź enzymu ALS na chlorosulfuron in vitro.
Niniejszy wynalazek dotyczy materiału roślinnego z buraka cukrowego składającego się ze zmutowanych komórek ze zmutowanym genem syntazy acetomleczanowej kodującym syntazę, w którym nukleotydy są zmodyfikowane z cytozyny na tyminę w pozycji 562 i z guaniny na adeninę w pozycji 337, przy czym zmutowane komórki maj ą oporność zarówno na herbicydy imidazolinonowe jak i sulfonylomocznikowe, a oporność może być przenoszona poprzez konwencjonalne krzyżowanie roślin wytworzonych z komórek.
Korzystnie materiałem jest materiał otrzymany z komórek wrażliwych rodzicielskiego buraka cukrowego, oznaczonego jako CR1-B, którego nasiona zdeponowano jako ATCC 97961 i mającego oporność na herbicydy sulfonylomocznikowe, ale nie mającego oporności na herbicydy imidazolinonowe, poprzez hodowanie komórek wrażliwych w pożywce hodowlanej z herbicydem imidazolinonowym w celu wyselekcjonowania zmutowanych komórek.
Korzystnie materiałem jest nasienie lub materiał wywodzący się z nasienia.
Ponadto, niniejszy wynalazek dotyczy sposobu wytwarzania oporności na herbicyd w burakach cukrowych, który obejmuje:
a) poddanie działaniu herbicydu imidazolinonowego w pożywce hodowlanej wyjściowych komórek buraka cukrowego ze zmutowanym genem syntazy acetomleczanowej kodującym syntazę, w którym nukleotydy są zmodyfikowane z cytozyny na tyminę w pozycji 562, przy czym wyjściowe komórki mają homozygotyczną cechę oporności na herbicyd sulfonylomocznikowy w pożywce hodowlanej; oraz
b) selekcjonowanie drugich komórek mających oporność na obydwa herbicydy, przy czym oporność może być przenoszona poprzez krzyżowanie roślin zawierających drugie komórki.
Korzystnie drugie komórki otrzymano z wyjściowych komórek buraka cukrowego, oznaczonego jako 93R30 (SurSur), zdeponowanego jako ATCC 97961, poprzez poddanie komórek 93R30 działaniu herbicydu imidazolinonowego.
Korzystnie drugie komórki znajdują się w depozycie nasion pod numerem ATCC 97535 (93R30B).
Niniejszy wynalazek dotyczy też sposobu uzyskiwania oporności na herbicyd w burakach, który obejmuje:
a) poddanie wyjściowych komórek buraka cukrowego działaniu herbicydu imidazolinonowego w pożywce hodowlanej, przy czym wyjściowe komórki mają homozygotyczną cechę oporności na herbicyd sulfonylomocznikowy w pożywce hodowlanej;
b) selekcjonowanie drugich komórek mających oporność na obydwa herbicydy;
c) wyhodowanie z drugich komórek pierwszej rośliny, która ma oporność na herbicydy oraz zmutowany gen syntazy acetomleczanowej kodujący syntazę, w którym nukleotydy są zmodyfikowane z cytozyny na tyminę w pozycji 562 i z guaniny na adeninę w pozycji 337; oraz
d) krzyżowanie pierwszej rośliny z drugą rośliną w celu wytworzenia rośliny krzyżówkowej, która ma oporność na herbicydy.
Korzystnie w sposobie według wynalazku wyjściowe komórki w etapie (a) są otrzymane z buraka cukrowego oznaczonego jako 93R30, zdeponowanego jako ATCC 97961, poprzez poddanie komórek 93R30 działaniu herbicydu imidazolinonowego.
Korzystnie też drugie komórki znajdują się w depozycie nasion i są oznaczone jako ATCC 97535 (93R30B).
Ponadto wynalazek dotyczy sposobu zwalczania chwastów rosnących razem z burakami cukrowymi, który sposób obejmuje:
a) obsianie pola nasionami buraków cukrowych zawierającymi komórki ze zmutowanym genem syntazy acetomleczanowej kodującym syntazę, w którym nukleotydy są zmodyfikowane z cytozyny na tyminę w pozycji 562 i z guaniny na adeninę w pozycji 337, przy czym zmutowane komórki mają oporność zarówno na herbicydy imidazolinonowe, jak i sulfonylomocznikowe, a oporność może być przenoszona poprzez konwencjonalne krzyżowanie roślin wytworzonych z komórek; oraz
b) zastosowanie herbicydu imidazolinonowego wobec rośliny na polu w celu kontrolowania chwastów.
PL 191 812 B1
Korzystnie roślina pochodzi z wrażliwych komórek rodzicielskiego buraka cukrowego, oznaczonego jako CR1-B, zdeponowanego jako ATCC 97961 i mającego oporność na herbicydy sulfonylomocznikowe, ale nie mającego oporności na herbicydy imidazolinonowe, poprzez hodowanie komórek wrażliwych w pożywce hodowlanej z herbicydem imidazolinonowym w celu wyselekcjonowania zmutowanych komórek.
Korzystnie roślina pochodzi z nasienia zdeponowanego jako ATCC 97535 (93R30B).
Burak cukrowy REL-1 (Regenerating, East Lansing-1) jest dostępny od Dr Josepha Saundersa, genetyka, US Department of Agriculture, East Lansing, Michigan i został ujawniony w 1987. Jest on dostępny bez opłat. REL-1 jest wrażliwy (S) na herbicydy: imidazolinon (IM-S), sulfonylomocznik (SU-S) oraz triazolopirymidynosulfonoanilid (TP-S), jak pokazano na Fig. 1.
Przy zastosowaniu hodowli kalusowych i zawiesinowych uzyskano linię, która była heterozygotyczna pod względem oporności na imidazolinon i sulfonylomocznik (IM-R i SU-R). Tę linię komórkową (nasiono) zdeponowano w American Type Culture Collection jako ATCC 97535 6 maja, 1996 zgodnie z Traktatem Budapeszteńskim i jest tu określana jako 93R30B. Linia komórkowa jest dostępna po złożeniu zapotrzebowania według nazwy i numeru. Poprzez krzyżowanie z lepszymi liniami buraka cukrowego, a w szczególności Beta vulgaris L, można wytworzyć opornego buraka niezwykle przydatnego handlowo.
Buraki cukrowe oporne na herbicydy imidazolinonowe, a w szczególności imazetapir oraz herbicydy sulfonylomocznikowe (chlorosulfuron) rozwiązują problem pozostałości w glebie po zastosowaniu tego herbicydu na obszarach upraw buraka cukrowego. Obecnie, stosuje się 40miesięczny okres spoczynkowy pomiędzy zastosowaniem takiego herbicydu i użyciem takiego pola pod uprawę buraka cukrowego. Ponadto, wysoki poziom oporności na imidazolinon i sulfonylomocznik umożliwia zastosowanie herbicydów imidazolinonowych do kontrolowania chwastów w przypadku buraków cukrowych.
W następujących przykładach przedstawiono izolację i krzyżowanie nowego buraka cukrowego 93R30B, jak zilustrowano na Fig. 1.
P r z y k ł a d l
1. Selekcja odmiany buraka cukrowego, 93R30B, opornej na imidazolinon i sulfonylomocznik
Opis materiału. Rel-1 (Regenerating East Lansing-1) jest męską płodną linią buraka cukrowego zdolną do wysokiej regeneracji, używaną do wstępnej selekcji komórek mutanta opornego na herbicydy sulfonylomocznikowe oraz używaną jako wrażliwa linia kontrolna w większości eksperymentów.
CR1-B. Ten izolat buraka cukrowego wytworzono poprzez hodowanie komórek Rel-1 na pożywce zawierającej chlorosulfuron. Odmiana ta jest oporna na sulfonylomocznik, posiada niewielką oporność na herbicyd triazolopirymidynowy, flumetsulam lecz nie jest oporna na imidazolinon. Została ona opisana przez Saundersa i wsp. (Crop Sci. 32:1357-1360) i Hart i wsp. (Weed Sci. 40:378-383 i 41:317-324). Gen opornoś ci na SU nazwano Sur. 93R30B
Ten izolat wytworzono poprzez hodowanie komórek o wysokiej zdolności do regeneracji, rośliny buraka cukrowego będącej homozygotą Sur (pochodzącej z CR1-B), na pożywce zawierającej imazetapir.
EL-49 East Lansing 49, ujawniony przez USDA w 1993.
Homozygotyczna, pod względem genu Sur, linia buraka cukrowego stosowana jako kontrola oporności na sulfonylomocznik i wrażliwości na imazetapir.
a. Jako materiał wyjściowy wybierano rośliny do selekcji somaklonalnej, w oparciu o ich zdolność do wytwarzania kalusa w obecności wysokich stężeń cytokinin (w pożywce B1) lub do regeneracji pędów z kalusa.
Przepis na pożywkę B1:
g l-1 sacharozy
100 mg l-1 mioinozytol
1, 65 g l-1 NH4NO3
1, 90 g l-1 KNO3
0, 44 g l-1 CaCl2 x 2H2O
0,37 g l-1 MgSO4 x 7H2O
0,17 g l-1 KH2PO4
6,2 mg l-1 H3BO3
16,8 mg l-1 MnSO4 x H2O
PL 191 812 B1
10, 6 mg l-1 ZnSO4 x 7H2O
0,88 mg l-1 KI
0,25 mg l-1 Na2MoO4 x 2H2O
0,025 mg l-1 CuSO4 x 5H2O
0,025 mg l-1 CoCl2 x 6H2O
37, 3 mg l-1 Na2EDTA
27,8 mg l-1 FeSO4 x 7H2O mg l-1 tiamina
0,5 mg l-1 pirydoksyna
0,5 mg l-1 kwas nikotynowy mg l-1 benzyloaminopuryna pH 5,95.
Stałą pożywkę B1 autoklawowano z 9 g l-1 agaru, do hodowli roślinnych, i uzupełniano sterylizowanym przez filtr, podstawowym roztworem herbicydu wymaganego przez schemat selekcji. Pożywkę zawierającą agar wylewano na plastikowe szalki Petri'ego 15 x 100 mm.
Płynną pożywkę B1 rozporcjowywano po 40 ml do kolb typu Erlenmeyera na 125 ml i autoklawowano, aby użyć do hodowli płynnych zawiesin.
Materiałem wyjściowym do wyselekcjonowania odmiany opornej na imidazolinon, 93R30B, był 93R30 (homozygotyczny pod względem Sur, pochodzący z CR1-B).
W szczegółach:
1. Komórki z Rel-1 (SU-S, IM-S, TP-S) umieszczano w hodowlach selekcjonujących je pod względem zdolności do wzrostu na chlorosulfuronie i regenerowano roślinę, CR1-B (opisano w Saunders i wsp. Crop Sci. 32:1357-1360 (1992)).
2. CR1-B krzyżowano z 293 (bardziej typowy burak), pokolenie F1 krzyżowano wsobnie i identyfikowano rośliny homozygotyczne pod względem SU-R, IM-S oraz TP-R. Roślina, znana jako EL-49, o takich samych cechach, była ujawniona w 1993 przez Saunders (gen nazwano Sur, a roślina była homozygotyczna pod względem tego genu).
3. Później, homozygoty pod względem genu Sur, pochodzące z CR1-B, selekcjonowano pod względem ich zdolności do regeneracji roślin z hodowli. Stosowano je jako materiał wyjściowy (np. 93R30), w hodowli, do selekcji na imazetapir.
4. Z powyższej selekcji pochodzą izolaty znane jako 93R30A i 93R30B oraz zregenerowane rośliny. Te posiadają właściwości CR1-B i IM-R. Gen odpowiedzialny za IM-R wydaje się być zmienioną formą Sur i daje identyczność z SB.
Z szybko rozwijających się liści wyjściowej rośliny (93R30) wytwarzano eksplantaty liścia w postaci krążków. Powierzchnię liści sterylizowano (etap 1) poprzez dwa kolejne 20 min. płukania 15% handlowym środkiem bielącym z 0,025% Tritonem X-100 (T-9284, Sigma Chemical Co., St. Louis, MO). Liście spłukiwano dwukrotnie sterylną wodą dejonizowaną. Krążki liści wycinano przy użyciu sterylizowanego w płomieniu korkobora #3.
Krążki liści umieszczano jałowo na stałej pożywce B1 (etap 2). Krążki inkubowano w ciemności w 30°C przez 4-8 tygodni aż do wyrośnięcia z krążka liściowego kruchej, białej tkanki kalusa. Tkankę kalusa oddzielano mechanicznie szczypcami, a następnie przenoszono do 125 ml kolb Erlenmeyera (etap 3) zawierających 40 ml płynnej pożywki B1. Kolby wkładano do wytrząsarki obrotowej przy 50 Hz w niskim natężeniu światła fluoroscencyjnego (30 μΕ/m^). Po 1 tygodniu płynne hodowle przenoszono do ś wie ż ej po ż ywki B1.
Dwa tygodnie od założenia płynnej hodowli kłaczki komórek oddzielano za pomocą sita do rozdzielania komórek (Sigma CD-1) o gęstości 60 (60 mesh). Po osadzeniu się komórek około dwie trzecie objętości płynnej pożywki usuwano.
W etapie 4, komórki zawieszano ponownie w pozostawionej pożywce i 1 ml próbki rozprowadzano równomiernie na stałej pożywce B1 uzupełnionej 50 nM herbicydem, imazetapir (PURSUIT, American Cyanamid, Wayne, NJ). Płytki owinięto i inkubowano w świetle fluoroscencyjnym (5-10 μΕ/rms) przez 8-12 tygodni.
b. Przy 50 nM stężeniu imazetapiru wszystkie wrażliwe komórki ginęły. Kłaczki komórek, które przeżyły i rosły w tym stężeniu identyfikowano jako możliwe odmiany oporne. W etapie 5 kłaczki komórek (o średnicy 1-3 mm) przenoszono do świeżej, stałej pożywki B1, bez herbicydu, i pozwalano na ich wzrost w niskim natężeniu światła (10-20 μΕ/m^). Indywidualnie identyfikowano każdą przypuszczalnie oporną odmianę i hodowano osobno.
PL 191 812 B1
c. W etapie 6, biały, kruchy kalus przenoszono co 4-6 tygodni do świeżej stałej pożywki B1, dopóki nie wyrosły z niego pojedyncze pędy (lub pęd). Pędy te przenoszono do pożywki pozwalającej na hodowlę pędów (M20).
Przepis na pożywkę M20:
g l-1 sacharozy
100 mg l-1 mioinozytol
1,65 g l-1 NH4NO3
1,90 g l-1 KNO3
0,44 g l-1 CaCl2 x 2H2O
0,37 g l-1 MgSO4 x 7H2O
0,17 g l-1 KH2PO4
6,2 mg l-1 H3BO3
16,8 mg l-1 MnSO4 x H2O
10,6 mg l-1 ZnSO4 x 7H2O
0,88 mg l-1 KI
0,25 mg l-1 Na2MoO4 x 2H2O
0,025 mg l-1 CuSO4 x 5H2O
0,025 mg l-1 CoCl2 x 6H2O
37,3 mg l-1 Na2EDTA
27,8 mg l-1 FeSO4 x 7H2O mg l-1 tiamina
0,5 mg l-1 pirydoksyna
0,5 mg l-1 kwas nikotynowy
0,25 mg l-1 benzyloaminopuryna pH 5,95
Stałą pożywkę M20 autoklawowano z 9 g l-1 agaru, do hodowli roślinnych i uzupełniano, sterylizowanym przez filtr, podstawowym roztworem herbicydu wymaganego przez schemat selekcji. Pożywkę zawierającą agar wylewano na plastykowe szalki Petri'ego 20 x 100 mm.
Hodowle pędów prowadzono przy oświetleniu lampą fluorescencyjną o 10-20 μΕ/m^ i rozmnażano przez cięcie hodowli pędu ostrzem skalpela. Wybrane hodowle pędu rozmnażano i oceniano ich poziom oporności, jak opisano poniżej.
2. Poziom oporności na imidazolinon, sulfonylomocznik i triazopirymidynosulfoanilid hodowli pędu.
W etapie 7, oceniano oporność hodowli pędu na herbicyd przez umieszczenie trzech małych skrawków pędów, o podobnych wielkościach, na każdej z szalek zawierających pożywkę M20 uzupełnioną logarytmicznie wzrastającym stężeniem herbicydu imidazolinonowego, sulfonylomocznika lub triazopirymidyno-sulfonanilidu, w zakresie 1 nM do 0,1 mM. Odpowiedzi hodowli 93R30 porównywano z hodowlami pędów kontroli wrażliwej (Rel-1) i kontroli opornej na chlorosulfuron i wrażliwej na imidazolinon (EL-49). Hodowle pędu prowadzono przy natężeniu światła 20 μΕ/m^ w 25°C przez 3 tygodnie. Odpowiedź hodowli pędu określano oceniając uszkodzenie pędu i świeżą masę, 3 tygodnie po przeniesieniu na selekcyjną pożywkę. Wielkość oporności na herbicyd określano na podstawie stosunku wartości oporności do wrażliwości I50 (stężenie herbicydu wywołujące 50 procentowe uszkodzenie).
Charakterystykę oporności krzyżowej, dla każdej odmiany, określano w sposób podany powyżej, zmieniając użyty w pożywce herbicyd. Hodowla pędu 93R30B wykazywała 3600-krotny poziom oporności na imazetapir, 10000-krotny poziom oporności na chlorosulfuron i wykazywała 60-krotną oporność krzyżową na herbicyd triazolopirymidynosulfonanilidowy, flumetsulam, jak pokazano w Tabeli 1. Dla porównania, EL-49 wykazuje jedynie 3-krotny poziom oporności na imazetapir.
PL 191 812 B1
T a b e l a 1
Wielkość oporności hodowli pędu i oporność krzyżowa
Herbicyd Rodzina herbicydów6 Rel-1 93R30B EL-49
I505 (pM) I50 (pM) R/S4 I50 (pM) R/S
Imazetapir IM 0,018 64 3600X 0,053 3X
Imazametabenzometyl IM 0,80 >100 >125X 20 25X
Imazakwin IM 0,040 16 400X 0,040 1X
AC299/2631 IM 0,030 40 1400X 0,070 3X
Chlorosulfuron2 SU 0,0025 25 10000X 25 10000Χ
Flumetsulam3 TP 0,028 1,7 60X 1,1 40X
1 - Imidazolinon RAPTOR (American Cyanamid, Wayne, NJ) 2 - Sulfonylomocznik - Glean (Dupont, Wilmington, DE) 3 - Triazolopirymidynosulfoanilid (BROADSTRIKE, Dow Elanco, Indianapolis, IN).
4 - R/S = stosunek wartości oporności do wrażliwoś ci kontroli I50 dla okreś lonego testowanego herbicydu 5 - I50 jest stężeniem herbicydu wymaganym do wywołania 50% uszkodzenia w hodowli pędu 6 - Klasyfikacja rodziny herbicydów: IM, imidazolinon; SU, sulfonylomocznik oraz TP, triazolopirymidynosulfonanilid
3. Regeneracja roślin i hodowla
W etapie 8, hodowle pę du z 93R30B regenerowano w całe roś liny w podobny sposób. Dwa tygodnie po pierwszym przeniesieniu hodowli, pędy 93R30B przenoszono do 125 ml kolb Erlenmeyera zawierających 40 ml pożywki N3 pozwalającej na wytwarzanie korzeni.
Przepis na pożywkę N3:
g l-1 sacharozy
100 mg l-1 mioinozytol
1, 65 g l-1 NH4NO3
1, 90 g l-1 KNO3
0,44 g l-1 CaCl2 x 2H2O
0,37 g l-1 MgSO4 x 7H2O
0,17 g l-1 KH2PO4
6,2 mg l-1 H3BO3
16,8 mg l-1 MnSO4 x H2O
10,6 mg l-1 ZnSO4 x 7H2O
0,88 mg l-1 KI
0,25 mg l-1 Na2MoO4 x 2H2O
0,025 mg l-1 CuSO4 x 5H2O
0,025 mg l-1 CoCl2 x 6H2O
37, 3 mg l-1 Na2EDTA
27,8 mg l-1 FeSO4 x 7H2O mg l-1 tiamina
0,5 mg l-1 pirydoksyna -1
0,5 mg l-1 kwas nikotynowy mg l-1 kwasu naftalenoctowego pH 5,95
Do każdej 125 ml kolby Erlenmeyera, zawierającej po 40 ml pożywki N3, dodano 9 g l-1 agaru (0,45 g) i pożywkę autoklawowano, aby użyć do hodowli pozwalającej na ukorzenianie pędów.
Hodowle następnie umieszczano w świetle dziennym 24 godz o średnim natężeniu światła (40-60 μΕ/m^) w 25 °C. Korzenie zasadniczo tworzyły się 6-8 tygodni później.
W etapie 9, ukorzenione pędy (pokolenie R0) przenoszono do podłoża doniczkowego Baccto (Michigan Peat Co., Huston, TX) w szklarni. W etapie 10, rośliny R0 z regeneratów 93R30B krzyżowano z burakiem cukrowym o gładkich korzeniach nazwanym 293 lub z REL-1. Nasiona F1 z tych krzyżówek samozapylano i otrzymywano nasiona F2.
PL 191 812 B1
Zakładano, że oporność na imidazolinon jest dominującą lub półdominującą cechą monogeniczną. Pokolenie roślin F2, powstałe przez samozapylenie opornych na imidazolinon i sulfonylomocznik roś lin F1, powinno segregować w stosunku 1 homozygota oporna : 2 heterozygoty oporne : 1 homozygota wrażliwa zarówno na imidazolinon jak i sulfonylomocznik.
Dowody sugerują, że oporność na imidazolinon jest w 93R30B cechą dominującą. Ten wniosek pochodzi z wyniku analizy potomstwa F1, z krzyżówek pomiędzy 93R30B i wrażliwymi na herbicyd, męskimi płodnymi liniami buraka cukrowego 293 lub Rel-1, które segregują w stosunku 1:1 dla IM-R lub IM-S. Ponadto we wszystkich F2 i krzyżówkach wstecznych (BC1) testowanych do tej pory roślin, IM-R i SU-R segregują wspólnie. Sugeruje to, że te dwie oporności są ze sobą sprzężone i odpowiadają niezależ nym zmianom tego samego allelu ALS. Oporność lub wraż liwość roś lin F1 na imazetapir i chlorosulfuron określono przy użyciu nie uszkadzającego roślin testu rozrostu krążka liścia.
Protokół testu:
Protokół ten jest nie uszkadzającym roślin testem zaprojektowanym do wczesnego badania segregacji oporności buraków na herbicydy, w celu ustalenia ich statusu jako opornych lub wrażliwych, bez konieczności spryskiwania buraków po wyrośnięciu w szklarni.
1. Z rośliny ucinano nowo rozwinięty liść (przynajmniej czwarty prawdziwy liść).
2. Powierzchnię liścia sterylizowano poprzez dwa 20 min. płukania 15% handlowym środkiem bielącym z 0,025% Tritonem X-100, a następnie opłukiwano dwukrotnie sterylną wodą dejonizowaną.
3. Eksplantaty krążka liścia wycinano przy użyciu sterylizowanego w płomieniu korkobora #3.
4. Krążki liścia przenoszono do pożywki B1 nie zawierającej herbicydu, zawierającej 100 nM imazetapiru lub 100 nM chlorosulfuronu. Szalki dzielono na cztery sektory, tak, że cztery próbki można było testować na pojedynczej szalce. Cztery do pięciu krążków liści układano na każdej płytce, dla każdej próbki.
5. Szalki owijano i inkubowano w 25°C przez 4-7 dni w słabym świetle (około 10 μΕ/rms).
6. Oporne próbki identyfikowano na podstawie ich zdolności do życia i rozrostu na pożywce selekcyjnej. Wrażliwe próbki nie rozrastały się i stawały się żółte do brązowych. Wyniki porównywano z rozrostem krążków liści umieszczonych na podłożu bez herbicydu dla potwierdzenia dokładnego określenia spodziewanego poziomu rozrostu krążka.
4. Odpowiedź na imazetapir docelowego enzymu ALS
Dla częściowego oczyszczenia ALS, z szybko rozwijających się liści hodowanych w szklarni roślin buraka cukrowego, zastosowano standardowe procedury (Hart i wsp., Weed Science 40:378-383 (1992)). Ekstrakty z heterozygotycznych roślin pokolenia F1 93R30B i nasion S1 Rel-1 badano pod względem aktywności ALS, w obecności logarytmicznie wzrastających stężeń imazetapiru. Aktywność ALS określano dla ekstraktów z liści linii buraka cukrowego REl-1 i 93R30B. Rośliny hodowano w szklarniach, jak opisano powyżej, do stadium czwartego do szóstego liścia. Aktywność ALS, ze świeżych ekstraktów, określano w obecności imazetapiru i chlorosulfuronu w logarytmicznie wzrastających stężeniach. Metody i procedury były zmodyfikowane w stosunku do przedstawionych przez Ray (Plant Physiol. 75:827-831 (1984)) i Shaner i wsp. (Plant Physiol. 76:545-546 (1984)). Dziesięć gramów liści buraka cukrowego homogenizowano w 40 ml zimnego buforu do homogenizacji (0,1 M K2HPO4), pH 7,5, 1 mM pirogronianu sodu, 0,5 mM MgCl2, 0,5 mM pirofosforanu tiaminy, 10 μΜ dinukleotydu flawino-adeninowego, 10%, objętościowo, glicerolu) z 2,5 g poliwinylopirolidonu. Homogenat filtrowano przez osiem warstw gazy i wirowano przy 27 000 g przez 20 min. Supernatant zbierano i doprowadzano do 50% nasycenia przez (NH4)2SO4. Tak nasycony roztwór trzymano w 0°C przez 1 godz., następnie wirowano przy 18000 g przez 15 min., osad zawieszano w 1 ml buforu do zawieszania (0,1 M K2HPO4, pH 7,5, 20 mM pirogronian sodu, 0,5 mM MgCl2) i odsalano na kolumnie z Sephadex G-25 PD-105. Ekstrakty enzymatyczne natychmiast badano.
Aktywność ALS mierzono przez dodanie 0,2 ml preparatu enzymatycznego (rozcieńczonego 3:1 w buforze do zawieszania) do 1,3 ml buforu do reakcji (25 mM K2HPO4, pH 7,0, 0,625 mM MgCl2, 25 mM pirogronianu sodu, 0,625 mM pirofosforanu tiaminy, 1,25 μΜ dinukleotydu flawinoadeninowego i inkubowano w 35°C przez 1 godzinę. Mieszanina reakcyjna zawierała końcowe stężenie 0, 4, 40, 400, 4000, 40000, 400000 lub 4000000 nM imazetapiru lub 0, 0,9, 9, 90, 900, 9000, 90000 nM chlorosulfuronu. Reakcję hamowano przez dodanie 50 μl 6N H2SO4 i inkubowanie w 60°C przez 15 min. Procedura ta, jak opisał Westerfield (J. Biol. Chem. 16:495-502 (1945)) pozwala także na dekarboksylację produktu enzymu ALS, acetomleczanu, z wytworzeniem acetoiny. Zabarwiony
PL 191 812 B1 kompleks acetoiny wytwarza się poprzez dodanie 1 ml 2,5%, wagowo, α-naftolu i 0,25%, wagowo, kreatyny w 2,5 N NaOH i inkubację w 60°C przez 15 min.
Jako wzorzec w reakcji kolorymetrycznej stosowano handlową acetoinę. Stężenia acetoiny określano na podstawie pomiaru absorpcji mieszaniny reakcyjnej przy 530 nm. Dla każdego herbicydu doświadczenia prowadzono w trzech powtórzeniach. Stężenia białka w ekstraktach określano metodą według Bradford (Anal. Biochem. 72:248-254 (1976)) stosując albuminę surowiczą wołu dla krzywej wzorcowej.
Eksperymenty prowadzono dwukrotnie i stosując trzykrotne powtórzenia. Na Fig. 3 przedstawiono odpowiedzi ekstraktów ALS z 93R30B homozygoty i wrażliwego Rel-1. 93R30B wykazuje, na poziomie enzymu, 1750-krotny poziom oporności na imazetapir (jak określono na podstawie stosunku wartości I50 dla linii opornych i wrażliwych).
5. Liczba kopii genu ALS
W celu ustalenia liczby kopii genu obecnej we wrażliwym buraku cukrowym prowadzono analizę typu Southern. Genomowy DNA izolowano z wrażliwych roślin F3 pochodzących z wyjściowego mutanta Sir-13 i analizowano stosując powszechnie stosowane techniki (Current Protocols in Molecular Biology, J. Wiley & Sons, Nowy Jork (1991)). Podobnie analizowano genomowy DNA z handlowo dostępnej odmiany buraka cukrowego. W obu liniach buraka cukrowego wykryto pojedynczą kopię genu ALS. Dane te wskazywałyby na to, że cała aktywność enzymu ALS pochodząca z homozygotycznego typu mutanta buraka cukrowego składałaby się z opornej formy enzymu. Potwierdza to również przypuszczenie, że zmiana SB obserwowana w izolacie 93R30B jest zmienioną formą ALS allelu Sur. Potwierdzono to w sposób opisany poniżej.
6. Mutacja w genie ALS
Dla ustalenia molekularnych podstaw oporności enzymu ALS, zastosowano standardowe techniki do zsekwencjonowania dwóch obszarów genu ALS, gdzie występowały wszystkie mutacje nadające oporność na herbicydy, opisywane wcześniej (Current Protocols in Molecular Biology, J. Wiley & Sons, Nowy Jork (1991)). Gen ALS z buraka cukrowego był wcześniej zsekwencjonowany (patent USA nr 5378824) i zaprojektowano startery do łańcuchowej reakcji polimerazy (ang. Polymerase Chain Reaction, PCR) dla powielenia dwóch obszarów tego genu odpowiedzialnych za wcześniej opisane przypadki oporności na herbicydy u roślin. Porównanie otrzymanych sekwencji z buraków cukrowych SU-R IM-S TP-R (Sur), SU-R IM-R TP-R (SB) i wrażliwego (Rel-1) wykazało, że cecha oporności na herbicydy linii 93R30B wywołana jest dwiema niezależnymi mutacjami w genie ALS.
Mutacja wywołująca SU-R IM-S TP-R (Sur) jest wynikiem zamiany pojedynczego nukleotydu z cysteiny w tyminę w pozycji 562 w sekwencji nukleotydowej, w wyniku której zachodzi podstawienie proliny przez serynę w pozycji 188 sekwencji aminokwasowej ALS buraka cukrowego. Z miejscem tym związana była oporność na sulfonylomocznik w Arabidopsis thaliana (Haughn i wsp., Molecular and General Genetics 211:266-271 (1988), tytoniu (Lee i wsp., EMBO J. 7:1241-1248 (1988) oraz drożdży (patent USA nr 5378824). Nie zaobserwowano żadnych innych zmian zasad w stosunku do sekwencji nukleotydowej dzikiego typu w dwóch badanych obszarach genu ATS.
Mutacja wywołująca SU-R IM-R TP-R (SB) jest wynikiem dwóch niezależnych mutacji w sekwencji nukleotydowej ALS dających w wyniku zmiany dwóch różnych aminokwasów. Pierwsza zmiana jest identyczna z mutacją Sur, opisaną powyżej. Spodziewano się tego, ponieważ jako wyjściowy materiał do selekcji IM-R stosowano roślinę buraka cukrowego (93R30). Dodatkowo do tej punktowej mutacji obserwowano dodatkową zmianę pojedynczego nukleotydu z guaniny na adeninę w pozycji 337. Wynikiem tej drugiej mutacji jest podstawienie alaniny przez treoninę w pozycji 113 w sekwencji aminokwasowej ALS z buraka cukrowego. Miejsce to wcześniej wskazywano jako związane z opornością na imidazolinon w łopianie (Bernasconi i wsp., J. Biol. Chem. 270:17381-17385 (1995)) i opornością na sulfonylomocznik w drożdżach (patent USA nr 5378824). Nie zaobserwowano żadnych innych zmian zasad, w stosunku do sekwencji nukleotydowej typu dzikiego, w obu badanych obszarach genu ATS.
Następująca informacja pokazuje synergizm oporności na herbicyd możliwych mutacji Ala113--Thr i Pro188--Ser
Gen ALS buraka cukrowego SB, podwójny mutant, daje oporność na herbicyd, który jest kombinacją rodzin substancji chemicznych, którą ma każdy pojedynczy mutant buraka cukrowego oddzielnie (tzn. Sur lub Sir-13). Na Fig. 4 przedstawiono oporność krzyżową na podstawowe rodziny charakterystyczną dla dwóch pojedynczych mutantów (Sur i Sir-13) i podwójnego mutanta (SB). Aminokwasy przedstawione na Fig. 4 obrazują 5 ściśle konserwowanych reszt opisanych w literaturze,
PL 191 812 B1 jako zaangażowanych w oporność na herbicyd hamujący ALS w roślinach. Oddziaływanie niezależnych mutacji w enzymie podwójnego mutanta (i odpowiadających roślin) jest unikatowe. Kombinacja oporności specyficznej dla IM, obserwowanej w substytucji aminokwasowej Sir-13 (Ala113- -Thr) i oporności SU i TP obserwowanej w substytucji Sur (Pro188-Ser) daje w buraku cukrowym 93R30B (a. k. a. SB) oporność na wszystkie trzy klasy chemicznych herbicydów.
Jednakże oporność, nie jest addytywna. W zamian mutacje są synergistyczne w odniesieniu do oporności na herbicydy imidazolinonowe, imazetapir i AC 299263. Zjawisko to można zaobserwować na Fig. 5 i 6, a ilościowo w Tabeli 2.
T a b e l a 2
Odpowiedź całych roślin buraka cukrowego na herbicydy hamujące ALS powschodowo
Linia buraka cukrowego
Rel-1 Sir-13 Sur 93R30B
Herbicyd Klasa I50 (g ha-1) R/S R/S R/S
Imazetapir IMI 0,5 100X 3X 300X
AC299, 263 IMI 1,1 130X 4X >250X
Chlorosulfuron SU 0,07 1X >1000X 20X
Sulfometuron SU 0,2 1X 23X 4X
Pojedyncza mutacja w burakach cukrowych, Sur i Sir-13, wykazuje 3 i 100-krotne oporności na imazetapir; podczas gdy podwójny mutant SB wykazuje 300-krotną oporność na herbicyd, kiedy stosowany jest powschodowo na całe rośliny. Potwierdzenie tego synergizmu dostarczają obserwowane odpowiedzi enzymu ALS z każdego z mutantów na imazetapir (Fig. 7). Ponadto, synergistyczna jest oporność na herbicyd w podwójnym mutancie SB (>1000X) versus w pojedynczych mutantach, Sur (1X) i Si-13 (40X).
Podobny synergizm jest widoczny dla klasy herbicydów TP. Oporność pędów pojedynczych mutantów Sur i Sir-13 wynosi 40X i 1X odpowiednio i 60X dla podwójnego mutanta, SB. Dane dotyczące enzymu ALS potwierdzają obserwację synergizmu z 50X i 3X opornością na flumetsulam w pojedynczych mutantach Sur i Sir-13, odpowiednio, oraz 200X dla podwójnego mutanta, SB (Fig. 8). Druga mutacja obserwowana w SB faktycznie obniża oporność na chlorosulfuron (klasa herbicydów SU) obserwowaną na poziomie całej rośliny (Fig. 9). Dla chlorosulfuronu, oporność całej rośliny podwójnego mutanta SB (20X) jest zmniejszona ponad 50 razy poprzez dodanie odpowiednika mutacji Sir-13 (Ala113- Thr) (1X oporność) do genu oporności na SU, Sur (Pro188- Ser) (>1000X oporność) (Tab. 2). Przyczyna antagonizmu pomiędzy pojedynczym mutantem Sur i podwójnym mutantem SB nie jest jeszcze poznana. Na poziomie enzymu ALS, synergistyczna oporność jest także obserwowana dla chlorosulfuronu (Fig. 10).
Należy brać pod uwagę, że selekcja na oporność na imidazolinon powinna być dokonywana jako pierwsza, a następnie powinna być wykonywana selekcja na oporność na chlorosulfuron.
Powyższy opis jest jedynie ilustracją niniejszego wynalazku, a niniejszy wynalazek ograniczony jest zamieszczonymi poniżej zastrzeżeniami.
Sekwencje aminokwasowe na Fig. 4 przedstawiono jako SEK NR ID: 1,2,3 i 4.

Claims (12)

1. Materiał roślinny z buraka cukrowego, znamienny tym, że składa się ze zmutowanych komórek ze zmutowanym genem syntazy acetomleczanowej kodującym syntazę, w którym nukleotydy są zmodyfikowane z cytozyny na tyminę w pozycji 562 i z guaniny na adeninę w pozycji 337, przy czym zmutowane komórki mają oporność zarówno na herbicydy imidazolinonowe jak i sulfonylomocznikowe, a oporność może być przenoszona poprzez konwencjonalne krzyżowanie roślin wytworzonych z komórek.
2. Materiał według zastrz. 1, który został otrzymany z komórek wrażliwych rodzicielskiego buraka cukrowego, oznaczonego jako CR1-B, którego nasiona zdeponowano jako ATCC 97961 i mającego oporność na herbicydy sulfonylomocznikowe, ale nie mającego oporności na herbicydy imidazolinonowe, poprzez hodowanie komórek wrażliwych w pożywce hodowlanej z herbicydem imidazolinonowym w celu wyselekcjonowania zmutowanych komórek.
3. Materiał roślinny według zastrz. 1, jako nasienie albo materiał wywodzący się z nasienia.
4. Sposób wytwarzania oporności na herbicyd w buraku cukrowym, znamienny tym, że obejmuje:
a) poddanie działaniu herbicydu imidazolinonowego w pożywce hodowlanej wyjściowych komórek buraka cukrowego ze zmutowanym genem syntazy acetomleczanowej kodującym syntazę, w którym nukleotydy są zmodyfikowane z cytozyny na tyminę w pozycji 562, przy czym wyjściowe komórki mają homozygotyczną cechę oporności na herbicyd sulfonylomocznikowy w pożywce hodowlanej; oraz
b) selekcjonowanie drugich komórek mających oporność na obydwa herbicydy, przy czym oporność może być przenoszona poprzez krzyżowanie roślin zawierających drugie komórki.
5. Sposób według zastrz. 4, znamienny tym, że drugie komórki otrzymano z wyjściowych komórek buraka cukrowego, oznaczonego jako 93R30 (SurSur), zdeponowanego jako ATCC 97961, poprzez poddanie komórek 93R30 działaniu herbicydu imidazolinonowego.
6. Sposób według zastrz. 4, znamienny tym, że drugie komórki znajdują się w depozycie nasion pod numerem ATCC 97535 (93R30B).
7. Sposób uzyskiwania oporności na herbicyd w buraku, znamienny tym, że obejmuje:
a) poddanie wyjściowych komórek buraka cukrowego działaniu herbicydu imidazolinonowego w pożywce hodowlanej, przy czym wyjściowe komórki mają homozygotyczną cechę oporności na herbicyd sulfonylomocznikowy w pożywce hodowlanej;
b) selekcjonowanie drugich komórek mających oporność na obydwa herbicydy;
c) wyhodowanie z drugich komórek pierwszej rośliny, która ma oporność na herbicydy oraz zmutowany gen syntazy acetomleczanowej kodujący syntazę, w którym nukleotydy są zmodyfikowane z cytozyny na tyminę w pozycji 562 i z guaniny na adeninę w pozycji 337; oraz
d) krzyżowanie pierwszej rośliny z drugą rośliną w celu wytworzenia rośliny krzyżówkowej, która ma oporność na herbicydy.
8. Sposób według zastrz. 7, znamienny tym, że wyjściowe komórki w etapie (a) są otrzymane z buraka cukrowego oznaczonego jako 93R30, zdeponowanego jako ATCC 97961, poprzez poddanie komórek 93R30 działaniu herbicydu imidazolinonowego.
9. Sposób według zastrz. 7, znamienny tym, że drugie komórki znajdują się w depozycie nasion i są oznaczone jako ATCC 97535 (93R30B).
10. Sposób zwalczania chwastów rosnących razem z burakami cukrowymi, znamienny tym, że obejmuje:
(a) obsianie pola nasionami buraków cukrowych zawierającymi komórki ze zmutowanym genem syntazy acetomleczanowej kodującym syntazę, w którym nukleotydy są zmodyfikowane z cytozyny na tyminę w pozycji 562 i z guaniny na adeninę w pozycji 337, przy czym zmutowane komórki mają oporność zarówno na herbicydy imidazolinonowe, jak i sulfonylomocznikowe, a oporność może być przenoszona poprzez konwencjonalne krzyżowanie roślin wytworzonych z komórek; oraz (b) zastosowanie herbicydu imidazolinonowego wobec rośliny na polu w celu kontrolowania chwastów.
11. Sposób według zastrz. 10, znamienny tym, że roślina pochodzi z wrażliwych komórek rodzicielskiego buraka cukrowego, oznaczonego jako CR1-B, zdeponowanego jako ATCC 97961 i mającego oporność na herbicydy sulfonylomocznikowe, ale nie mającego oporności na herbicydy
PL 191 812 B1 imidazolinonowe, poprzez hodowanie komórek wrażliwych w pożywce hodowlanej z herbicydem imidazolinonowym w celu wyselekcjonowania zmutowanych komórek.
12. Sposób według zastrz. 10, znamienny tym, że roślina pochodzi z nasienia zdeponowanego jako ATCC 97535 (93R30B).
PL331175A 1996-07-17 1997-07-08 Materiał roślinny z buraka cukrowego składający się ze zmutowanych komórek, sposób wytwarzania oporności na herbicyd w buraku cukrowym, sposób uzyskiwania oporności na herbicyd w buraku, sposób zwalczania chwastów rosnących razem z burakami cukrowymi PL191812B1 (pl)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US68353396A 1996-07-17 1996-07-17
US08/761,197 US5859348A (en) 1996-07-17 1996-12-06 Imidazolinone and sulfonyl urea herbicide resistant sugar beet plants
PCT/US1997/011834 WO1998002527A1 (en) 1996-07-17 1997-07-08 Imidazolinone herbicide resistant sugar beet plants

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL331175A1 PL331175A1 (en) 1999-06-21
PL191812B1 true PL191812B1 (pl) 2006-07-31

Family

ID=27103130

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL331175A PL191812B1 (pl) 1996-07-17 1997-07-08 Materiał roślinny z buraka cukrowego składający się ze zmutowanych komórek, sposób wytwarzania oporności na herbicyd w buraku cukrowym, sposób uzyskiwania oporności na herbicyd w buraku, sposób zwalczania chwastów rosnących razem z burakami cukrowymi

Country Status (15)

Country Link
EP (1) EP0960190B1 (pl)
JP (1) JP3842299B2 (pl)
CN (1) CN1230217A (pl)
AT (1) ATE342960T1 (pl)
AU (1) AU3596697A (pl)
BG (1) BG65035B1 (pl)
CZ (1) CZ295392B6 (pl)
DE (1) DE69736841T2 (pl)
DK (1) DK0960190T3 (pl)
EA (1) EA003297B1 (pl)
ES (1) ES2274546T3 (pl)
PL (1) PL191812B1 (pl)
SK (1) SK286030B6 (pl)
TR (1) TR199900115T2 (pl)
WO (1) WO1998002527A1 (pl)

Families Citing this family (235)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE19821614A1 (de) 1998-05-14 1999-11-18 Hoechst Schering Agrevo Gmbh Sulfonylharnstoff-tolerante Zuckerrübenmutanten
DE19821613A1 (de) 1998-05-14 1999-11-18 Hoechst Schering Agrevo Gmbh Transgene Sulfonylharnstoff-tolerante Zuckerrübenmutanten
DE19836673A1 (de) 1998-08-13 2000-02-17 Hoechst Schering Agrevo Gmbh Herbizide Mittel für tolerante oder resistente Zuckerrübenkulturen
US7019196B1 (en) 1998-11-05 2006-03-28 Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Herbicide resistant rice
AU2001261358B2 (en) 2000-05-10 2006-07-13 Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Resistance to acetohydroxyacid synthase-inhibiting herbicides
US12570965B2 (en) 2005-03-02 2026-03-10 Instituto Nacional De Technologia Agropecuaria Herbicide-resistant rice plants, polynucleotides encoding herbicide-resistant acetohydroxyacid synthase large subunit proteins, and methods of use
MX2009004323A (es) 2006-11-10 2009-05-05 Basf Se Nueva modificacion cristalina.
NZ576524A (en) 2006-11-10 2012-01-12 Basf Se Crystalline modification of fipronil
UA110598C2 (uk) 2006-11-10 2016-01-25 Басф Се Спосіб одержання кристалічної модифікації фіпронілу
AU2007316640B2 (en) 2006-11-10 2012-11-29 Basf Se Crystalline modification of fipronil
UA108733C2 (uk) 2006-12-12 2015-06-10 Толерантна до гербіциду рослина соняшника
EP2109366A2 (en) 2007-02-06 2009-10-21 Basf Se Pesticidal mixtures
CA2682349C (en) * 2007-04-04 2017-08-22 Basf Plant Science Gmbh Ahas mutants
US10017827B2 (en) 2007-04-04 2018-07-10 Nidera S.A. Herbicide-resistant sunflower plants with multiple herbicide resistant alleles of AHASL1 and methods of use
CN108402068B (zh) 2007-04-12 2021-12-03 巴斯夫欧洲公司 包含氰基亚磺酰亚胺基化合物的农药混合物
EA020203B1 (ru) 2007-09-20 2014-09-30 Басф Се Композиции и агенты, содержащие фунгицидный штамм и активное соединение
JP2010540495A (ja) 2007-09-26 2010-12-24 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア ボスカリド及びクロロタロニルを含む三成分殺菌組成物
KR20110036633A (ko) 2008-07-29 2011-04-07 바스프 에스이 제초 효과를 갖는 피페라진 화합물
EP2183969A3 (en) 2008-10-29 2011-01-05 Basf Se Method for increasing the number of seedlings per number of sowed grains of seed
BRPI0919576A2 (pt) 2008-10-02 2015-08-18 Basf Se Composto de piperazina, e, método para controlar vegetação indesejada
ES2524819T3 (es) 2009-01-27 2014-12-12 Basf Se Procedimiento de tratamiento de semillas
WO2010089244A1 (en) 2009-02-03 2010-08-12 Basf Se Method for dressing seeds
WO2010092031A2 (en) 2009-02-11 2010-08-19 Basf Se Pesticidal mixtures
BRPI1005355A2 (pt) 2009-02-11 2016-02-10 Basf Se misturas, composição pesticida, método para o controle de pragas e/ou para aprimorar a saúde de plantas, método para a proteção do material de propagação de planta contra pragas e material de propagação de planta
WO2010092014A2 (en) 2009-02-11 2010-08-19 Basf Se Pesticidal mixtures
US20110319263A1 (en) 2009-02-11 2011-12-29 Basf Se Pesticidal mixtures
AR075573A1 (es) 2009-02-11 2011-04-20 Basf Se Dimethomorph como protector de plaguicidas con efectos fitotoxicos
AR075717A1 (es) 2009-03-04 2011-04-20 Basf Se Compuestos de 3- aril quinazolin -4- ona para combatir plagas de invertebrados
WO2010103065A1 (en) 2009-03-11 2010-09-16 Basf Se Fungicidal compositions and their use
EP2408301B1 (en) 2009-03-16 2013-05-15 Basf Se Fungicidal compositions comprising fluopyram and metrafenone
HUE030498T2 (en) 2009-03-20 2017-05-29 Basf Se A method of treating sowing with an encapsulated pesticide
PE20120536A1 (es) 2009-03-26 2012-05-05 Basf Se Combinacion de un agente fungicida sintetico y bacillus subtilis qst 173 para el control de hongos fitopatogenos
EP2414353A1 (en) 2009-04-01 2012-02-08 Basf Se Isoxazoline compounds for combating invertebrate pests
AU2010233985B2 (en) 2009-04-02 2015-11-19 Basf Se Method for reducing sunburn damage in plants
WO2010142779A1 (en) 2009-06-12 2010-12-16 Basf Se Antifungal 1,2,4-triazolyl derivatives having a 5- sulfur substituent
WO2010146113A1 (en) 2009-06-18 2010-12-23 Basf Se Antifungal 1, 2, 4-triazolyl derivatives having a 5- sulfur substituent
WO2010146116A1 (en) 2009-06-18 2010-12-23 Basf Se Triazole compounds carrying a sulfur substituent
US20120088660A1 (en) 2009-06-18 2012-04-12 Basf Se Antifungal 1,2,4-triazolyl Derivatives
AU2010261822A1 (en) 2009-06-18 2012-01-19 Basf Se Triazole compounds carrying a sulfur substituent
WO2010146115A1 (en) 2009-06-18 2010-12-23 Basf Se Triazole compounds carrying a sulfur substituent
PE20120625A1 (es) 2009-06-18 2012-05-20 Basf Se Mezclas fungicidas
US20120108422A1 (en) 2009-06-18 2012-05-03 Basf Se Antifungal 1,2,4-triazolyl Derivatives
DK2443102T3 (da) 2009-06-19 2013-07-08 Basf Se Herbicidale benzoxazinoner
WO2010149758A1 (en) 2009-06-25 2010-12-29 Basf Se Antifungal 1, 2, 4-triazolyl derivatives
EP2451804B1 (en) 2009-07-06 2014-04-30 Basf Se Pyridazine compounds for controlling invertebrate pests
WO2011003775A2 (de) 2009-07-09 2011-01-13 Basf Se Substituierte cyanobutyrate mit herbizider wirkung
WO2011003776A2 (de) 2009-07-09 2011-01-13 Basf Se Substituierte cyanobutyrate mit herbizider wirkung
BR112012001001A2 (pt) 2009-07-14 2016-11-16 Basf Se compositos azol das formulas i e ii, compostos das formulas i e i, compostos de formula ix, composição agricola, uso de um composto farmaceutica, metodo para tratar infecções de câncer ou virus para combater fungos zoopatigênicos ou humanopatogenicos
JP2013500246A (ja) 2009-07-24 2013-01-07 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア 無脊椎動物系害虫防除用ピリジン誘導体化合物
KR20120107068A (ko) 2009-07-28 2012-09-28 바스프 에스이 다년생 식물의 저장 조직에서 유리 아미노산의 수준을 증가시키는 방법
CA2767283C (en) 2009-07-28 2017-06-20 Basf Se Pesticidal suspo-emulsion compositions
BR112012002164B1 (pt) 2009-07-30 2021-04-20 Merial, Inc compostos inseticidas de 4-amino-tieno[2,3-d]-pirimidina e métodos para seu uso
WO2011018486A2 (en) 2009-08-14 2011-02-17 Basf Se Herbicidally active composition comprising benzoxazinones
WO2011036074A1 (en) 2009-09-24 2011-03-31 Basf Se Aminoquinazoline compounds for combating invertebrate pests
NZ598965A (en) 2009-09-25 2013-03-28 Basf Se Method for reducing pistillate flower abortion in plants using at least one strobilurin
CN102548416B (zh) 2009-09-29 2013-11-13 巴斯夫欧洲公司 农药混合物
WO2011042378A1 (de) 2009-10-09 2011-04-14 Basf Se Substituierte cyanobutyrate mit herbizider wirkung
DE102010042867A1 (de) 2009-10-28 2011-06-01 Basf Se Verwendung heterozyklischer Verbindungen als Herbizide
WO2011051212A1 (de) 2009-10-28 2011-05-05 Basf Se Verwendung heteroaromatischer verbindungen als herbizide
DE102010042866A1 (de) 2009-10-30 2011-05-05 Basf Se Substituierte Thioamide mit herbizider Wirkung
CN102686583A (zh) 2009-11-02 2012-09-19 巴斯夫欧洲公司 除草的四氢邻苯二甲酰亚胺类
US8329619B2 (en) 2009-11-03 2012-12-11 Basf Se Substituted quinolinones having herbicidal action
CN102595879B (zh) 2009-11-06 2014-08-06 巴斯夫欧洲公司 4-羟基苯甲酸和选定农药的结晶配合物
WO2011057989A1 (en) 2009-11-11 2011-05-19 Basf Se Heterocyclic compounds having herbicidal action
WO2011057942A1 (en) 2009-11-12 2011-05-19 Basf Se Insecticidal methods using pyridine compounds
WO2011058036A1 (en) 2009-11-13 2011-05-19 Basf Se Tricyclic compounds having herbicidal action
MX2012005501A (es) 2009-11-13 2012-07-10 Basf Se Compuestos 3- (3, 4- dihidro-2h-benzo [1, 4] -oxazin-6-il)-1h-piri midin-2, 4-diona como herbicidas.
AU2010321038C1 (en) 2009-11-17 2015-04-30 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. Fluorinated oxa or thia heteroarylalkylsulfide derivatives for combating invertebrate pests
WO2011064188A1 (en) 2009-11-27 2011-06-03 Basf Se Insecticidal methods using nitrogen-containing heteroaromatic compounds
WO2011067184A1 (de) 2009-12-01 2011-06-09 Basf Se 3- (4, 5 -dihydroisoxazol- 5 -yl) benzoylpyrazolverbindungen und ihre mischungen mit safenern
ES2546100T3 (es) 2009-12-04 2015-09-18 Merial, Inc. Compuestos pesticidas bis-organosulfurados
WO2011069955A1 (en) 2009-12-07 2011-06-16 Basf Se Sulfonimidamide compounds for combating animal pests
WO2011069912A1 (de) 2009-12-07 2011-06-16 Basf Se Triazolverbindungen, ihre verwendung sowie sie enthaltende mittel
WO2011069894A1 (de) 2009-12-08 2011-06-16 Basf Se Triazolverbindungen, ihre verwendung sowie sie enthaltende mittel
WO2011069916A1 (de) 2009-12-08 2011-06-16 Basf Se Triazolverbindungen, ihre verwendung als fungizide sowie sie enthaltende mittel
US8748342B2 (en) 2009-12-08 2014-06-10 Basf Se Pesticidal mixtures
NZ600886A (en) 2009-12-08 2013-06-28 Basf Se An agrochemical pesticidal mixture for increasing the yield and health of a plant
US20120291159A1 (en) 2009-12-18 2012-11-15 Basf Se Azoline Compounds for Combating Invertebrate Pests
WO2011073143A1 (en) 2009-12-18 2011-06-23 Basf Se Substituted cyanobutyrates having herbicidal action
JP5940457B2 (ja) 2010-01-18 2016-06-29 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピアＢａｓｆ Ｓｅ 殺有害生物剤及び２−プロピルヘプチルアミンのアルコキシレートを含む組成物
JP2013518084A (ja) 2010-02-01 2013-05-20 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア 有害動物を駆除するための置換されたケトン性イソオキサゾリン化合物および誘導体
WO2011098417A1 (en) 2010-02-10 2011-08-18 Basf Se Substituted cyanobutyrates having herbicidal action
WO2011101303A2 (de) 2010-02-16 2011-08-25 Basf Se Zusammensetzung umfassend ein pestizid und ein alkoxylat von iso-heptadecylamin
WO2011110583A2 (en) 2010-03-10 2011-09-15 Basf Se Fungicidal mixtures comprising triazole derivatives
KR20130051927A (ko) 2010-03-17 2013-05-21 바스프 에스이 살충제 및 분지형 노닐 아민의 알콕실레이트를 포함하는 조성물
WO2011117210A1 (en) 2010-03-23 2011-09-29 Basf Se Substituted pyridines having herbicidal action
CN102858780A (zh) 2010-03-23 2013-01-02 巴斯夫欧洲公司 具有除草作用的取代哒嗪
AR081526A1 (es) 2010-03-23 2012-10-03 Basf Se Piridazinas sustituidas que tienen accion herbicida
CA2791612A1 (en) 2010-03-23 2011-09-29 Basf Se Pyridothiazines having herbicidal action
WO2011117195A1 (en) 2010-03-23 2011-09-29 Basf Se Substituted pyridines having herbicidal action
WO2011117198A2 (en) 2010-03-23 2011-09-29 Basf Se Pyridazine compounds for controlling invertebrate pests
WO2011117286A1 (en) 2010-03-23 2011-09-29 Basf Se Pyridazine compounds for controlling invertebrate pests
WO2011117213A1 (en) 2010-03-23 2011-09-29 Basf Se Pyridazine compounds for controlling invertebrate pests
CN102822179A (zh) 2010-03-23 2012-12-12 巴斯夫欧洲公司 具有除草作用的吡嗪并噻嗪
WO2011148886A1 (ja) 2010-05-24 2011-12-01 Ｍｅｉｊｉ Ｓｅｉｋａファルマ株式会社 有害生物防除剤
ES2567266T3 (es) 2010-05-28 2016-04-21 Basf Se Mezclas de pesticidas
EP2575471B1 (en) 2010-05-28 2014-11-19 Basf Se Pesticidal mixtures
US20130078297A1 (en) 2010-06-16 2013-03-28 Basf Se Aqueous Active Ingredient Composition
WO2012007426A1 (en) 2010-07-13 2012-01-19 Basf Se Azoline substituted isoxazoline benzamide compounds for combating animal pests
DE102011080568A1 (de) 2010-08-16 2012-02-16 Basf Se Substituierte Cyanobutyrate mit herbizider Wirkung
BR112013005484B1 (pt) 2010-09-13 2018-05-15 Basf Se Método para controlar pragas invertebradas, método para proteger material de propagação de planta e composição agrícola
BR112013005869A2 (pt) 2010-09-13 2019-09-24 Basf Se ''método para controlar pragas invertebradas, uso de um composto, método, material de propagação vegetal e composição agrícola''
JP2013542918A (ja) 2010-09-13 2013-11-28 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア 無脊椎有害生物を防除するためのピリジン化合物ｉ
MX355432B (es) 2010-09-14 2018-04-18 Basf Se Composiciones que contienen un insecticida de piripiropeno y una base.
ES2534745T3 (es) 2010-09-14 2015-04-28 Basf Se Composición que contiene un insecticida de piripiropeno y un adyuvante
KR20130143047A (ko) 2010-10-01 2013-12-30 바스프 에스이 살충제로서의 이민 치환된 2,4-디아릴-피롤린 유도체
CN103237789A (zh) 2010-10-01 2013-08-07 巴斯夫欧洲公司 亚胺化合物
CN103221409B (zh) 2010-10-01 2016-03-09 巴斯夫欧洲公司 除草的苯并*嗪酮类
PL2627183T5 (pl) 2010-10-15 2024-02-05 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Zastosowanie herbicydów inhibitorów ALS do kontroli niechcianej roślinności w roślinach Beta vulgaris z tolerancją herbicydów inhibitorów ALS
UA113721C2 (uk) * 2010-10-15 2017-03-10 Баєр Інтеллекчуел Проперті Гмбх Толерантний до інгібуючого als гербіциду мутант буряку звичайного
US20130253012A1 (en) 2010-12-10 2013-09-26 Basf Se Pyrazole Compounds for Controlling Invertebrate Pests
BR112013014913A2 (pt) 2010-12-20 2016-07-19 Basf Se misturas pesticidas, composição pesticida ou parasiticida, método para proteger os vegetais do ataque ou da infestação por insetos, para o controle dos insetos, para o controle dos fungos fitopatogênicos prejudiciais, para a proteção dos vegetais dos fungos fitopatogênicos prejudiciais, para a proteção do material de propagação dos vegetais, para a proteção dos animais contra a infestação ou infecção por parasitas, para o tratamento dos aminais infectados ou infectados por parasitas e utilização
WO2012085081A1 (en) 2010-12-22 2012-06-28 Basf Se Sulfoximinamide compounds for combating invertebrate pests ii
EP2481284A3 (en) 2011-01-27 2012-10-17 Basf Se Pesticidal mixtures
CA2825609C (en) 2011-02-28 2019-04-09 Basf Se Composition comprising a pesticide, a surfactant and an alkoxylate of 2-propylheptylamine
WO2012127009A1 (en) 2011-03-23 2012-09-27 Basf Se Compositions containing polymeric, ionic compounds comprising imidazolium groups
WO2012136724A1 (en) 2011-04-06 2012-10-11 Basf Se Substituted pyrimidinium compounds for combating animal pests
AR085872A1 (es) 2011-04-08 2013-10-30 Basf Se Derivados heterobiciclicos n-sustituidos utiles para combatir parasitos en plantas y/o animales, composiciones que los contienen y metodos para combatir dichas plagas
WO2013010946A2 (en) 2011-07-15 2013-01-24 Basf Se Pesticidal methods using substituted 3-pyridyl thiazole compounds and derivatives for combating animal pests i
WO2013024006A1 (en) 2011-08-12 2013-02-21 Basf Se Anthranilamide compounds and their use as pesticides
KR20140064849A (ko) 2011-08-12 2014-05-28 바스프 에스이 아닐린 유형 화합물
CA2842858A1 (en) 2011-08-12 2013-02-21 Basf Se N-thio-anthranilamide compounds and their use as pesticides
CN103827092A (zh) 2011-08-12 2014-05-28 巴斯夫欧洲公司 N-硫代邻氨基苯甲酰胺化合物及其作为农药的用途
EP2742036A1 (en) 2011-08-12 2014-06-18 Basf Se N-thio-anthranilamide compounds and their use as pesticides
WO2013024003A1 (en) 2011-08-12 2013-02-21 Basf Se N-thio-anthranilamide compounds and their use as pesticides
JP2014522873A (ja) 2011-08-12 2014-09-08 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア アントラニルアミド化合物および殺虫剤としてのその使用
US20140243197A1 (en) 2011-08-18 2014-08-28 Basf Se Carbamoylmethoxy- and carbamoylmethylthio- and carbamoylmethylamino benzamides for combating invertebrate pests
CN103889960A (zh) 2011-08-18 2014-06-25 巴斯夫欧洲公司 用于防治无脊椎动物害虫的氨基甲酰基甲氧基-和氨基甲酰基甲硫基-及氨基甲酰基甲基氨基苯甲酰胺
US20140243196A1 (en) 2011-08-18 2014-08-28 Basf Se Carbamoylmethoxy- and Carbamoylmethylthio- and Carbamoylmethylamino Benzamides for Combating Invertebrate Pests
CN103987261A (zh) 2011-09-02 2014-08-13 巴斯夫欧洲公司 包含芳基喹唑啉酮化合物的农业混合物
CN104023535A (zh) 2011-09-02 2014-09-03 巴斯夫欧洲公司 农药活性的3-芳基喹唑啉-4-酮衍生物在土壤施用方法中的用途
JP2014529618A (ja) 2011-09-02 2014-11-13 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピアＢａｓｆ Ｓｅ アリールキナゾリノン化合物を含む殺虫活性混合物
RS57157B1 (sr) 2011-11-11 2018-07-31 Gilead Apollo Llc Acc inhibitori i njihove primene
AR088857A1 (es) 2011-11-14 2014-07-10 Basf Se Compuestos de 1,2,5-oxadiazol sustituido y su uso como herbicidas
CA2853340A1 (en) 2011-11-16 2013-05-23 Basf Se Substituted 1,2,5-oxadiazole compounds and their use as herbicides ii
BR112014011685A2 (pt) 2011-11-18 2017-05-30 Basf Se composto, utilização de um composto e método
JP2015502966A (ja) 2011-12-21 2015-01-29 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピアＢａｓｆ Ｓｅ Ｎ−チオ−アントラニルアミド化合物、及び殺有害生物剤としてのそれらの使用
WO2013113789A1 (en) 2012-02-02 2013-08-08 Basf Se N-thio-anthranilamide compounds and their use as pesticides
EP2819511A1 (en) 2012-03-01 2015-01-07 Basf Se Adjuvants based on optionally alkoxylated reaction products of glycerol carbonate and alkylamines
JP6174057B2 (ja) 2012-03-12 2017-08-02 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピアＢａｓｆ Ｓｅ ピリピロペン殺虫剤の水性懸濁濃厚製剤の調製方法
KR102055551B1 (ko) 2012-03-12 2019-12-13 바스프 에스이 피리피로펜 살충제 ｉ 함유 액체 농축 제형
MX360700B (es) 2012-03-12 2018-11-14 Basf Se Formulacion concentrada liquida que contiene un insecticida de piripiropeno ii.
CN104168770B (zh) 2012-03-13 2016-06-01 巴斯夫欧洲公司 含有啶南平杀虫剂的液体浓缩物配制剂iii
WO2013144228A1 (en) 2012-03-29 2013-10-03 Basf Se Pesticidal methods using heterocyclic compounds and derivatives for combating animal pests
US20150065347A1 (en) 2012-03-29 2015-03-05 Basf Se Co-crystals of dicamba and a co-crystal former b
WO2013144223A1 (en) 2012-03-30 2013-10-03 Basf Se N-substituted pyrimidinylidene compounds and derivatives for combating animal pests
CN104202981B (zh) 2012-03-30 2018-01-30 巴斯夫欧洲公司 防治动物害虫的n‑取代的吡啶亚基化合物和衍生物
WO2013149903A1 (en) 2012-04-03 2013-10-10 Basf Se N- substituted hetero - bicyclic furanone derivatives for combating animal
WO2013150115A1 (en) 2012-04-05 2013-10-10 Basf Se N- substituted hetero - bicyclic compounds and derivatives for combating animal pests
CN104428297A (zh) 2012-04-27 2015-03-18 巴斯夫欧洲公司 取代的n-(四唑-5-基)-和n-(三唑-5-基)芳基羧酰胺化合物及其作为除草剂的用途
EP2841427A2 (en) 2012-04-27 2015-03-04 Basf Se Substituted n-(tetrazol-5-yl)- and n-(triazol-5-yl)pyridin-3-yl-carboxamide compounds and their use as herbicides
BR112014026823A2 (pt) 2012-04-27 2017-06-27 Basf Se compostos de n-(tetrazol-5-il) e n-(triazol-5-il)arilcarboxamida substituída e seu uso como herbicidas.
BR112014026787A2 (pt) 2012-04-27 2017-06-27 Basf Se compostos de n-(tetrazol-5-il) e n-(triazol-5 il)hetarilcarboxamida substituída e uso dos mesmos como herbicidas.
CA2868385A1 (en) 2012-05-04 2013-11-07 Basf Se Substituted pyrazole-containing compounds and their use as pesticides
US9533968B2 (en) 2012-05-24 2017-01-03 Basf Se N-thio-anthranilamide compounds and their use as pesticides
BR112014030412A2 (pt) 2012-06-14 2017-06-27 Basf Se método para combater ou controlar pragas, método para proteger culturas, compostos, processo para a preparação de compostos, uso de um composto, composição agrícola ou veterinária e semente.
EP3646731A1 (en) 2012-06-20 2020-05-06 Basf Se Pesticidal mixtures comprising a pyrazole compound
EP2863743B1 (en) 2012-06-21 2018-04-11 Basf Se Adjuvant comprising a 2-propylheptylamine alkoxylate, sugar-based surfactant, and drift-control agent and humectant
EP2684879A1 (en) 2012-07-09 2014-01-15 Basf Se Substituted mesoionic compounds for combating animal pests
MX2015003659A (es) 2012-09-21 2015-09-21 Basf Se Insecticida piretroide para la protección de plantas y semillas.
KR20150067270A (ko) 2012-10-01 2015-06-17 바스프 에스이 안트라닐아미드 화합물을 포함하는 살충적으로 활성인 혼합물
WO2014053401A2 (en) 2012-10-01 2014-04-10 Basf Se Method of improving plant health
WO2014053407A1 (en) 2012-10-01 2014-04-10 Basf Se N-thio-anthranilamide compounds and their use as pesticides
AR093772A1 (es) 2012-10-01 2015-06-24 Basf Se Metodo para controlar insectos resistentes a insecticidas moduladores de rianodina
WO2014053403A1 (en) 2012-10-01 2014-04-10 Basf Se Method of controlling insecticide resistant insects
WO2014053405A1 (en) 2012-10-01 2014-04-10 Basf Se Pesticidally active mixtures comprising anthranilamide compounds
RS57806B2 (sr) * 2012-12-13 2022-07-29 Bayer Cropscience Ag Upotreba als inhibitora herbicida za kontrolu neželjene vegetacije kod beta vulgaris biljaka tolerantnih na als inhibitore herbicida
SI2931902T1 (sl) 2012-12-13 2019-04-30 Sesvanderhave N.V. Postopek za razvoj na herbicid odpornih rastlin sladkorne pese
AU2013357564A1 (en) 2012-12-14 2015-07-02 Basf Se Malononitrile compounds for controlling animal pests
CN105007739A (zh) 2012-12-21 2015-10-28 巴斯夫欧洲公司 用于防治无脊椎动物害虫的环棒麦角素及其衍生物
WO2014128136A1 (en) 2013-02-20 2014-08-28 Basf Se Anthranilamide compounds and their use as pesticides
BR112015020194A2 (pt) 2013-03-07 2017-07-18 Basf Se co-cristais, processo para a preparação dos co-cristais, formulação agrícola, métodos para controle de pragas, para melhoria da saúde das plantas e para a proteção de material de propagação de planta contra pragas e material de propagação de planta
CN105324374B (zh) 2013-04-19 2018-12-04 巴斯夫欧洲公司 用于对抗动物害虫的n-取代酰基-亚氨基-吡啶化合物和衍生物
EP2994139B1 (en) 2013-05-10 2019-04-10 Gilead Apollo, LLC Acc inhibitors and uses thereof
JP6417402B2 (ja) 2013-05-10 2018-11-07 ギリアド アポロ， エルエルシー Ａｃｃ阻害剤及びその使用
JP6426714B2 (ja) 2013-05-15 2018-11-21 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピアＢａｓｆ Ｓｅ 置換型ｎ−（テトラゾール−５−イル）−およびｎ−（トリアゾール−５−イル）アリールカルボキサミド化合物ならびに除草剤としてのそれらの使用
WO2014184014A1 (en) 2013-05-15 2014-11-20 Basf Se N-(1,2,5-oxadiazol-3-yl)carboxamide compounds and their use as herbicides
WO2014184019A1 (en) 2013-05-15 2014-11-20 Basf Se N-(1,2,5-oxadiazol-3-yl)carboxamide compounds and their use as herbicides
WO2014184058A1 (en) 2013-05-15 2014-11-20 Basf Se Substituted 1,2,5-oxadiazole compounds and their use as herbicides
EP2815649A1 (en) 2013-06-18 2014-12-24 Basf Se Fungicidal mixtures II comprising strobilurin-type fungicides
WO2015007564A1 (en) 2013-07-18 2015-01-22 Basf Se Substituted n-(1,2,4-triazol-3-yl)arylcarboxamide compounds and their use as herbicides
EP2835052A1 (en) 2013-08-07 2015-02-11 Basf Se Fungicidal mixtures comprising pyrimidine fungicides
WO2015021991A1 (en) 2013-08-16 2015-02-19 Cheminova A/S Combination of 2-methylbiphenyl-3-ylmethyl (z)-(1r)-cis-3-(2-chloro-3,3,3-trifluoroprop-1-enyl)-2,2-dimethylcyclopropanecarboxylate with at least one insecticide, acaricide, nematicide and/or fungicide.
WO2015040116A1 (en) 2013-09-19 2015-03-26 Basf Se N-acylimino heterocyclic compounds
BR112016007065A2 (pt) 2013-10-10 2017-08-01 Basf Se composto, composição, utilização de um composto e método para o controle da vegetação
WO2015052178A1 (en) 2013-10-10 2015-04-16 Basf Se 1,2,5-oxadiazole compounds and their use as herbicides
WO2015052173A1 (en) 2013-10-10 2015-04-16 Basf Se Tetrazole and triazole compounds and their use as herbicides
UA121106C2 (uk) 2013-10-18 2020-04-10 Басф Агрокемікал Продактс Б.В. Застосування пестицидної активної похідної карбоксаміду у способах застосування і обробки насіння та ґрунту
EP2868197A1 (en) 2013-11-05 2015-05-06 Basf Se Herbicidal compositions
EP2868196A1 (en) 2013-11-05 2015-05-06 Basf Se Herbicidal compositions
WO2015091649A1 (en) 2013-12-18 2015-06-25 Basf Se N-substituted imino heterocyclic compounds
AR100304A1 (es) 2014-02-05 2016-09-28 Basf Corp Formulación de recubrimiento de semillas
EP2907807A1 (en) 2014-02-18 2015-08-19 Basf Se Benzamide compounds and their use as herbicides
JP6708557B2 (ja) 2014-05-06 2020-06-10 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピアＢａｓｆ Ｓｅ 殺有害生物剤及びヒドロキシアルキルポリオキシレングリコールエーテルを含む組成物
EA201892682A1 (ru) 2014-06-25 2019-04-30 Басф Агро Б.В. Пестицидные композиции
EP2962567A1 (en) 2014-07-01 2016-01-06 Basf Se Ternary mixtures comprising biopesticides and at least two chemical insecticides
WO2016008740A1 (en) 2014-07-14 2016-01-21 Basf Se Pesticidal compositions
WO2016034615A1 (en) 2014-09-02 2016-03-10 BASF Agro B.V. Aqueous insecticide formulation containing hyperbranched polymer
AU2016218108B2 (en) 2015-02-10 2020-03-05 Basf Se Composition comprising a pesticide and an alkoxylated ester
EP3061346A1 (en) 2015-02-26 2016-08-31 Bayer CropScience AG Use of fluopyram and biological control agents to control harmful fungi
BR112017020457C8 (pt) 2015-03-31 2020-09-08 Basf Se composição, método para tratar plantas, controlar fungos fitopatogênicos e/ou crescimento indesejável de plantas e/ou infestação indesejável de insetos ou ácaros e/ou para regular o crescimento de plantas, e método para produzir uma composição
WO2016174042A1 (en) 2015-04-27 2016-11-03 BASF Agro B.V. Pesticidal compositions
EA201890949A1 (ru) 2015-11-25 2018-12-28 Джилид Аполло, Ллс СЛОЖНОЭФИРНЫЕ ИНГИБИТОРЫ АЦЕТИЛ-КоА-КАРБОКСИЛАЗЫ И ВАРИАНТЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
AU2016361412A1 (en) 2015-11-25 2018-05-24 Gilead Apollo, Llc Pyrazole ACC inhibitors and uses thereof
PL3380479T3 (pl) 2015-11-25 2023-05-08 Gilead Apollo, Llc Triazolowe inhibitory acc i ich zastosowania
CN108473444A (zh) 2015-12-17 2018-08-31 巴斯夫欧洲公司 苯甲酰胺化合物及其作为除草剂的用途
UY40429A (es) 2016-02-24 2023-10-13 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc Compuestos antiparasitarios de isoxazolina, formulaciones inyectables de acción prolongada que los comprenden, métodos y usos de los mismos
WO2017153200A1 (en) 2016-03-10 2017-09-14 Basf Se Fungicidal mixtures iii comprising strobilurin-type fungicides
EP3245872A1 (en) 2016-05-20 2017-11-22 BASF Agro B.V. Pesticidal compositions
WO2017207368A1 (en) 2016-06-02 2017-12-07 BASF Agro B.V. Fungicidal compositions
US10820589B2 (en) 2017-02-01 2020-11-03 Basf Se Emulsifiable concentrate
WO2018219935A1 (en) 2017-05-30 2018-12-06 Basf Se Benzamide compounds and their use as herbicides
AU2018276360A1 (en) 2017-05-30 2019-12-19 Basf Se Benzamide compounds and their use as herbicides II
AR112112A1 (es) 2017-06-20 2019-09-18 Basf Se Compuestos de benzamida y su uso como herbicidas
EP3641544B1 (en) 2017-06-23 2025-08-06 Basf Se Pesticidal mixtures comprising a pyrazole compound
US11659837B2 (en) 2017-07-10 2023-05-30 Basf Se Mixtures comprising an urease inhibitor (UI) and a nitrification inhibitor such as 2-(3,4-dimethyl-1H-pyrazol-1-yl)succinic acid (DMPSA) or 3,4-dimethyl pyrazolium glycolate (DMPG)
AR112342A1 (es) 2017-07-21 2019-10-16 Basf Se Compuestos de benzamida y su uso como herbicidas
CA3081961A1 (en) 2017-11-15 2019-05-23 Basf Se Tank-mix
CA3080432A1 (en) 2017-11-29 2019-06-06 Basf Se Benzamide compounds and their use as herbicides
WO2019106639A1 (en) 2017-12-03 2019-06-06 Seedx Technologies Inc. Systems and methods for sorting of seeds
US11541428B2 (en) 2017-12-03 2023-01-03 Seedx Technologies Inc. Systems and methods for sorting of seeds
WO2019106641A2 (en) 2017-12-03 2019-06-06 Seedx Technologies Inc. Systems and methods for sorting of seeds
WO2019122347A1 (en) 2017-12-22 2019-06-27 Basf Se N-(1,2,5-oxadiazol-3-yl)-benzamide compounds and their use as herbicides
WO2019122345A1 (en) 2017-12-22 2019-06-27 Basf Se Benzamide compounds and their use as herbicides
EP3508480A1 (en) 2018-01-08 2019-07-10 Basf Se Benzamide compounds and their use as herbicides
WO2019162309A1 (en) 2018-02-21 2019-08-29 Basf Se Benzamide compounds and their use as herbicides
WO2019162308A1 (en) 2018-02-21 2019-08-29 Basf Se Benzamide compounds and their use as herbicides
WO2020058010A1 (en) 2018-09-19 2020-03-26 Basf Se Pesticidal mixtures comprising a mesoionic compound
AU2019348280A1 (en) 2018-09-28 2021-04-22 Basf Se Method of controlling pests by seed treatment application of a mesoionic compound or mixture thereof
EP3680223A1 (en) 2019-01-10 2020-07-15 Basf Se Mixture comprising an urease inhibitor (ui) and a nitrification inhibitor (ni) such as an ni mixture comprising 2-(3,4-dimethyl-1h-pyrazol-1-yl)succinic acid (dmpsa) and dicyandiamide (dcd)
WO2021130143A1 (en) 2019-12-23 2021-07-01 Basf Se Enzyme enhanced root uptake of agrochemical active compound
BR112022013894A2 (pt) 2020-01-16 2023-01-10 Basf Se Mistura, composição agroquímica, método para aumentar a eficiência de uso de fertilizante e uso da mistura
CA3163984A1 (en) 2020-01-16 2021-07-22 Basf Se Mixtures comprising nitrification inhibitors and carriers
AU2021305962A1 (en) 2020-07-06 2023-03-09 Pi Industries Ltd. A pesticidally active mixture comprising thietanyloxy compound, oxides or salts thereof
AR123052A1 (es) 2020-07-27 2022-10-26 Pi Industries Ltd Una mezcla pesticidamente activa que comprende el compuesto de pirazolopiridina antranilamida, sus óxidos o sales de los mismos

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0154204B1 (en) * 1984-03-06 1994-01-12 Mgi Pharma, Inc. Herbicide resistance in plants
US5378824A (en) * 1986-08-26 1995-01-03 E. I. Du Pont De Nemours And Company Nucleic acid fragment encoding herbicide resistant plant acetolactate synthase

Also Published As

Publication number Publication date
WO1998002527A1 (en) 1998-01-22
DE69736841D1 (de) 2006-11-30
EA003297B1 (ru) 2003-04-24
BG65035B1 (bg) 2006-12-29
JP3842299B2 (ja) 2006-11-08
DK0960190T3 (da) 2007-02-19
CZ295392B6 (cs) 2005-07-13
SK286030B6 (sk) 2008-01-07
EA199900123A1 (ru) 1999-08-26
CZ14599A3 (cs) 1999-08-11
EP0960190A4 (en) 2003-03-12
DE69736841T2 (de) 2007-02-01
JPH11513895A (ja) 1999-11-30
CN1230217A (zh) 1999-09-29
ES2274546T3 (es) 2007-05-16
PL331175A1 (en) 1999-06-21
ATE342960T1 (de) 2006-11-15
BG103177A (en) 1999-12-30
SK4399A3 (en) 2000-04-10
EP0960190B1 (en) 2006-10-18
TR199900115T2 (xx) 1999-04-21
EP0960190A1 (en) 1999-12-01
AU3596697A (en) 1998-02-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL191812B1 (pl) Materiał roślinny z buraka cukrowego składający się ze zmutowanych komórek, sposób wytwarzania oporności na herbicyd w buraku cukrowym, sposób uzyskiwania oporności na herbicyd w buraku, sposób zwalczania chwastów rosnących razem z burakami cukrowymi
US5859348A (en) Imidazolinone and sulfonyl urea herbicide resistant sugar beet plants
PL191810B1 (pl) Materiał roślinny z buraka cukrowego, sposób wytwarzania oporności na herbicyd w buraku cukrowym i sposób wytwarzania krzyżówkowej rośliny buraka
BG66416B1 (bg) Устойчиви към сулфонилурея слънчогледови растения
CN107245480B (zh) 具有除草剂抗性的乙酰乳酸合酶突变蛋白及其应用
JP7746166B2 (ja) トバモウイルスであるトマト褐色しわ果実ウイルスに対するトマトの植物体の抵抗力
EP0472573B1 (en) Herbicide resistant maize
CN105745320A (zh) 产生 acc 酶抑制剂抗性水稻的方法和组合物
RU2551781C2 (ru) Устойчивые к гербицидам растения подсолнечника
US20240229062A9 (en) Shade tolerant lettuce
ES2972475T3 (es) Genes R en fase de acoplamiento
HUP9903919A2 (hu) Imidazolinon-herbicid-rezisztens cukkorépa növények
Weller et al. Biotechnologies of obtaining herbicide tolerance in potato
Nelson Plant regeneration from protoplasts of Solanum tuberosum and Solanum brevidens

Legal Events

Date Code Title Description
RECP Rectifications of patent specification