PL202227B1 - Związek będący pochodną pirolidyny, kompozycja zawierająca ten związek i jego zastosowanie - Google Patents

Związek będący pochodną pirolidyny, kompozycja zawierająca ten związek i jego zastosowanie

Info

Publication number
PL202227B1
PL202227B1 PL355988A PL35598800A PL202227B1 PL 202227 B1 PL202227 B1 PL 202227B1 PL 355988 A PL355988 A PL 355988A PL 35598800 A PL35598800 A PL 35598800A PL 202227 B1 PL202227 B1 PL 202227B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
hydroxyethyl
methoxyphenyl
methylpyrrolidinyl
methyl
cyclopropylmethoxy
Prior art date
Application number
PL355988A
Other languages
English (en)
Other versions
PL355988A1 (pl
Inventor
Timothy J. Martins
Kerry W. Fowler
Joshua Odingo
Edward A. Kesicki
Amy Oliver
Laurence E. Burgess
John J. Gaudino
Zachary S. Jones
Bradley J. Newhouse
Stephen Schlachter
Original Assignee
Icos Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Icos Corp filed Critical Icos Corp
Publication of PL355988A1 publication Critical patent/PL355988A1/pl
Publication of PL202227B1 publication Critical patent/PL202227B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon radicals, substituted by hetero atoms, attached to ring carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/08—Bronchodilators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/10—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for impotence
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/22—Anxiolytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A61P33/06—Antimalarials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/06—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)

Abstract

Przedmiotem wynalazku jest zwi azek b ed a- cy pochodn a pirolidyny o wzorze (II), w którym znaczenie podstawników podano w zg loszeniu. Nowe zwi azki pirolidynowe s a silnymi i selek- tywnymi inhibitorami PDE4. Wynalazek dotyczy równie z kompozycji farmaceutycznych zawiera- jacej zwi azki o wzorze 1 oraz zastosowania tych nowych zwi azków do wytwarzania leków do leczenia chorób zapalnych i innych chorób zwi azanych z podwy zszonymi poziomami cyto- kin jak równie z zaburze n centralnego uk ladu nerwowego (CNS). PL PL PL PL PL PL PL

Description

Dziedzina wynalazku
Niniejszy wynalazek dotyczy związków będących pochodnymi pirolidyny, kompozycji zawierających te związki i ich zastosowania. Wynalazek dotyczy szeregu związków, które są silnymi i selektywnymi inhibitorami fosfodiesterazy specyficznej dla cyklicznego 3',5'-monofosforanu adenozyny (PDE specyficzna względem cAMP). W szczególności, niniejszy wynalazek dotyczy szeregu nowych związków pirolidynowych, które są przydatne do inhibitowania czynności PDE specyficznej względem cAMP, w szczególności PDE4, jak i sposobów ich wytwarzania, kompozycji farmaceutycznych ją zawierających, i ich stosowania jako środków leczniczych, np. w leczeniu chorób zapalnych i innych chorób związanych z podwyższonymi poziomami cytokin i mediatorów prozapalnych.
Stan techniki
Przewlekłe zapalenie jest wieloczynnikowym powikłaniem chorobowym cechującym się aktywowaniem wielu typów komórek zapalnych, w szczególności komórek rodu limfoidalnego (włączając limfocyty T) i rodu odnoszącego się do szpiku (włączając granulocyty, makrofagi i monocyty). Przez te aktywowane komórki są wytwarzane prozapalne mediatory, włączając cytokiny, takie jak czynnik martwicy nowotworu (TNF) i interleukin-1 (IL-L). Zgodnie z tym, w terapii chorób zapalnych i innych chorób związanych z podwyższonymi poziomami cytokin byłby przydatny czynnik, który hamuje aktywowanie tych komórek, lub wytwarzanie przez nie prozapalnych cytokin.
Cykliczny monofosforan adenozyny (cAMP) jest drugim nośnikiem, który pośredniczy w reakcjach biologicznych komórek na szeroki zakres bodźców pozakomórkowych. Gdy odpowiedni agonista wiąże się ze specyficznymi receptorami powierzchni komórki, cyklaza adenylanowa jest aktywowana, poddając przemianie trifosforan adenozyny (ATP) w cAMP. Istnieje teoria, że w działaniach cAMP indukowanych przez agonistę w obrębie komórki pośredniczy przeważnie działanie kinaz proteinowych zależnych od cAMP. Na koniec wewnątrzkomórkowego działania cAMP następuje transport nukleotydu na zewnątrz komórki lub rozszczepienie enzymatyczne przez cykliczne fosfodiesterazy nukleotydowe (PDE), które hydrolizują wiązanie 3'-fosfodiestru tworząc monofosforan 5'-adenozyny (5'-AMP). 5'-AMP jest nieaktywnym metabolitem. Budowę cAMP i 5'-AMP przedstawiono poniżej.
PL 202 227 B1
Podwyższone poziomy cAMP w ludzkich komórkach rodu limfoidalnego i szpikowego są związane z hamowaniem aktywacji komórek. Rodzina enzymów wewnątrzkomórkowych PDE reguluje poziom cAMP w komórkach. PDE4 stanowi dominujący izotyp PDE w tych komórkach, i stanowi główny wkład do degradacji cAMP. Zgodnie z tym, hamowanie czynności PDE zapobiegłoby przemianie cAMP w nieaktywny metabolit 5'-AMP i, w konsekwencji, utrzymało wyższe poziomy cAMP, i, zgodnie z tym, powstrzymało aktywację komórek (patrz Beavo i in., „Cyclic Nucleotide Fosfodiesterases: Structure, Regulation and Drug Action”, Wiley and Sons, Chichester, str. 3-14, (1990)); Torphy i in., Drug
News and Perspectives, 6, str. 203-214 (1993); Giembycz i in., Clin. Exp. Alergia, 22, str. 337-344 (1992)).
W szczególności, wykazano, że inhibitory PDE4, takie jak rolipram, inhibitują wytwarzanie TNFa oraz częściowo inhibitują uwalnianie IL-I/β przez monocyty (patrz Semmler i in., Int. J. Immunopharmacol., 15, str. 409-413, (1993); Molnar-Kimber i in., Mediators of Inflammation, 1, str. 411-417, (1992)). Wykazano także, że inhibitory PDE4 inhibitują wytwarzanie grup nadtlenkowych z ludzkich leukocytów polimorfojądrowych (patrz Verghese i in., J. Mol. Cell. Cardiol., 21 (Suppl. 2), S61 (1989); Nielson i in., J. Allergy Immunol., 86, str. 801-808, (1990)); inhibitują uwalnianie naczyniowoczynnych amin i prostanoidów z ludzkich leukocytów zasadochłonnych (patrz Peachell i in., J. Immunol., 148, str. 2503-2510, (1992)); inhibitują impulsy oddechowe w eozynofilach (patrz Dent i in., J. Pharmacol., 103, str. 1339-1346, (1991)); i inhibitują aktywowanie ludzkich limfocytów T (patrz Robicsek i in., Biochem. Pharmacol., 42, str. 869-877, (1991)).
Zapalna aktywacja komórek oraz nadmierne lub nieregulowane wytwarzanie cytokin (np. TNFa i IL-1 β) wiąże się z chorobami i zaburzeniami alergicznymi, autoagresyjnymi, i zapalnymi, takimi jak reumatoidalne zapalenie stawów, zapalenie kości i stawów, ostre dnawe zapalenie stawów, zapalenie kręgosłupa, oftalmopatia związana z tarczycą, choroba Behceta, posocznica, wstrząs septyczny, wstrząs endotoksynowy, posocznica gram-ujemna, posocznica gram-dodatnia, syndrom wstrząsu toksycznego, astma, przewlekłe zapalenie oskrzeli, zespół ostrego wyczerpania oddechowego dorosłych, przewlekła zapalna choroba płucna, taka jak przewlekła czopująca choroba płucna, krzemica, sarkoidoza płucna, uszkodzenie w wyniku reperfuzji mięśnia sercowego, mózgu i kończyn, zwłóknienie, zwłóknienie torbielowate, tworzenie bliznowca, tworzenie blizn, miażdżyca tętnic, zaburzenia związane z odrzuceniem przeszczepu, takie jak reakcja przeszczepu przeciw komórkom biorcy i odrzucenie aloprzeszczepu, przewlekłe zapalenie kłębuszków nerwowych, toczeń, zapalna choroba jelit, taka jak choroba Crohna i wrzodziejące zapalenie okrężnicy, proliferacyjne choroby limfocytów, takie jak białaczka, i zapalne choroby skóry, takie jak atopowe zapalenie skóry, łuszczyca i pokrzywka.
Inne stany cechujące się podwyższonymi poziomami cytokin obejmują uszkodzenia mózgu wskutek umiarkowanego urazu (patrz Dhillon i in., J. Neurotrauma, 12, str. 1035-1043 (1995); Suttorp i in., J. Clin. Invest., 91, str. 1421-1428 (1993)), kardiomiopatie, takie jak zastoinowa niewydolność serca (patrz Bristow i in., Circulation, 97, str. 1340-1341 (1998)), charłactwo, charłactwo wtórne po infekcji lub nowotworze, charłactwo wtórne po zespole nabytego niedoboru odpornościowego (AIDS), ARC (kompleks związany z AIDS), mięśniobóle z gorączką wskutek infekcji, powikłania mózgowe w malarii, osteoporozę i choroby związane z resorpcją kości, tworzenie bliznowca, tworzenie tkanki blizny i gorączka.
W szczególności, TNFa zidentyfikowano jako odgrywające rolę względem ludzkiego zespołu nabytego niedoboru odpornościowego (AIDS). AIDS wynika z infekcji limfocytów ludzkim wirusem niedoboru odpornościowego (HIV). Chociaż HIV także infekuje i utrzymuje się w komórkach rodu odnoszącego się do szpiku, wykazano, że TNF reguluje „w dół” infekcję HIV w komórkach limfocytowych T i monocytowych (patrz Poli i in., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87, str. 782-785, (1990)).
Szereg właściwości TNFa, takich jak stymulowanie kolagenaz, stymulowanie angiogenezy in vivo, stymulowanie resorpcji kości, i zdolność zwiększania przylegania komórek nowotworowych do śródbłonka, jest zgodnych z rolą TNF w rozwoju i przerzutowym rozprzestrzenianiu raka w organizmie gospodarza. Ostatnio TNFa bezpośrednio wiąże się ze sprzyjaniem wzrostowi i przerzutom komórek raka (patrz Orosz i in., J. Exp. Med., 177, str. 1391-1398, (1993)).
PDE4 ma rozległe rozprzestrzenienie w tkankach. Istnieją co najmniej cztery geny dla PDE4, z których wielokrotne transkrypty z jakiegokolwiek danego genu mogą dać szereg różnych protein o identycznych miejscach katalitycznych. Identyczność aminokwasów między czterema możliwymi miejscami katalitycznymi wynosi ponad 85%. Ich wspólna wrażliwość na inhibitory oraz ich podobieństwo kinetyczne jest odbiciem funkcjonalnego aspektu tego poziomu identyczności aminokwasów. Istnieje teoria, że rola tych alternatywnie ekspresjonowanych protein PDE4 umożliwia mechanizm, dzięki któremu komórka może w sposób zróżnicowany lokalizować te enzymy wewnątrzkomórkowo i/lub regulować wydajność katalityczną poprzez posttranslacyjną modyfikację. Jakikolwiek dany typ
PL 202 227 B1 komórki, która ekspresjonuje enzym PDE4 w typowym przypadku ekspresjonuje więcej niż jeden z czterech moż liwych genów kodują cych te proteiny.
Badacze wykazują znaczne zainteresowanie stosowaniem inhibitorów PDE4 jako środków przeciwzapalnych. Dawny dowód wskazuje, że inhibitowanie PDE4 ma korzystny wpływ na rozmaite komórki zapalne, takie jak monocyty, makrofagi, komórki T rodu Th-1 i granulocyty. Syntezę i/lub uwalnianie wielu prozapalnych mediatorów, takich jak cytokiny, mediatory lipidów, nadtlenki i aminy biogenne, takie jak histamina, osłabiono w tych komórkach przez działanie inhibitorów PDE4. Inhibitory PDE4 wpływają także na inne funkcje komórkowe, włączając proliferację komórek T, transmigrację granulocytów w reakcji na substancje chemotoksyczne, i integralność połączeń komórek śródbłonkowych w układzie naczyniowym.
Opisano projektowanie, syntezę i skrining różnych inhibitorów PDE4. Metyloksantyny, takie jak kofeina i teofilina, były pierwszymi odkrytymi inhibitorami PDE, lecz związki te są nieselektywne względem inhibitowanego PDE. Lek rolipram, środek przeciwdepresyjny, był jednym z pierwszych opisanych specyficznych inhibitorów PDE4. Rolipram, o poniższym wzorze strukturalnym, wykazuje stężenie inhibitujące 50% (IC50) około 200 nM (nanomoli) względem inhibitowania rekombinacyjnego ludzkiego PDE4.
Badacze kontynuowali poszukiwanie inhibitorów PDE4 bardziej selektywnych względem inhibitowania PDE4, o niższym IC50 niż rolipram, i nie mających niepożądanych efektów ubocznych wpływających na ośrodkowy układ nerwowy (OUN), takich jak odruchy wymiotne, wymioty i uspokojenie polekowe, związanych podawaniem rolipramu. Jedną klasę związków ujawniono w Opisie patentowym USA nr. 5665754 (Feldman i in.). Związki tam ujawnione są podstawionymi pirolidynami o budowie podobnej do rolipramu. Jeden szczególny związek, o wzorze strukturalnym (I) ma IC50 względem ludzkiego rekombinacyjnego PDE4 równe około 2 nM. W stopniu w jakim zaobserwowano korzystne oddzielenie efektu ubocznego wymiotów od skuteczności, związki te nie wykazywały zmniejszenia niepożądanych wpływów na OUN.
Ponadto, szereg firm podejmuje obecnie próby kliniczne innych inhibitorów PDE4. Jednak problemy związane ze skutecznością i niekorzystnymi efektami ubocznymi, takimi jak wymioty i zaburzenia OUN, pozostają nierozwiązane.
PL 202 227 B1
Zgodnie z tym związki, które selektywnie inhibitują PDE4 i obniżają lub eliminują niekorzystne efekty uboczne OUN związane z dotychczasowymi inhibitorami PDE4, byłyby przydatne w leczeniu chorób alergicznych i zapalnych oraz innych chorób związanych z nadmiernym lub nieregulowanym wytwarzaniem cytokin, takich jak TNF. Ponadto, selektywne inhibitory PDE4 byłyby przydatne w leczeniu chorób, które są związane z podwyższonymi poziomami cAMP lub czynnością PDE4 w konkretnej tkance docelowej.
Streszczenie wynalazku
Niniejszy wynalazek jest ukierunkowany na silne i selektywne inhibitory PDE4 przydatne w leczeniu chorób i stanów, tam gdzie hamowanie aktywności PDE4 jest uważane za korzystne. Niniejsze inhibitory PDE4 nieoczekiwanie obniżają lub eliminują niekorzystne efekty uboczne względem OUN związane z dotychczasowymi inhibitorami PDE4.
Niniejszy wynalazek także jest ukierunkowany na kompozycje farmaceutyczne zawierające jeden lub więcej związków o wzorze strukturalnym (II), na stosowanie związków i kompozycji zawierających te związki do wytwarzania leków do leczenia choroby lub zaburzenia, i na sposoby wytwarzania związków i półproduktów związanych z syntezą związków o wzorze strukturalnym (II).
Niniejszy wynalazek jest także ukierunkowany na zastosowanie związków do wytwarzania leków do leczenia sposoby (a) leczenia ssaka będącego w stanie, w którym hamowanie PDE4 przynosi korzyść, (b) modulowania poziomów cAMP u ssaka, (c) obniżania poziomów TNFa u ssaka, (d) powstrzymywania aktywacji komórek zapalnych u ssaka, i (e) inhibitowania funkcji PDE4 u ssaka przez podawanie ssakowi terapeutycznie skutecznej ilości związku o wzorze strukturalnym (II) lub kompozycji zawierającej związek o wzorze strukturalnym (II).
Przedmiotem wynalazku jest związek będący pochodną pirolidyny o wzorze (II):
w którym R1 jest wybrany spośród atomu wodoru, C1-6alkilu i z grupy obejmującej:
PL 202 227 B1
PL 202 227 B1 r\u'CH;
AA γ,_Y\
yycH2)4'
Y-
PL 202 227 B1
PL 202 227 B1
PL 202 227 B1
PL 202 227 B1 (CH3)2— <j?-(CH2)2OCH3
CH3CH2x „ch2-
PL 202 227 B1
PL 202 227 B1
2
R2 jest wybrany z grupy obejmującej atom wodoru, metyl i fluorowcopodstawiony metyl;
PL 202 227 B1
R3 jest wybrany z grupy obejmującej:
PL 202 227 B1
C-NH(CH2)2-C (ch2)2-n ch2o-c-nhch2—c o—c-nhch2-cH2NC(CH3)2C—c—ch2ch2 ^Y/CH2o ch2o-c—ch2 och2-cCH(CH3)2
PL 202 227 B1
PL 202 227 B1
PL 202 227 B1
PL 202 227 B1
PL 202 227 B1
PL 202 227 B1
HOCH2-CH-C
NH
CH2 tBuOC
O
HS-CH2-C— ch3so2nhch2-c o
cf3so2nh-ch2-c—
AcS
CH2 hoch2chc
HN-C-OtBu
CH3\
CH-CH-C
NH2
O
AcO—CH2-C—
ZX/-CH2°
PL 202 227 B1
PL 202 227 B1
R4 jest wybrany z grupy obejmującej: atom wodoru, C1-6alkil, fluorowcoC1-6alkil, C3-10cykloalkil, fenyl i benzyl;
R5 jest wybrany z grupy obejmującej: atom wodoru, C1-6alkil, C2-6alkinyl, fluorowco C1-6alkil, hydroksyC1-6alkil, C3-10cykloalkil, fenyl i benzyl;
R6 jest wybrany z grupy obejmującej: atom wodoru, C1-6alkil i C(=O)R7,
R7 jest wybrany z grupy obejmującej: C1-6alkil;
R10 jest wybrany z grupy obejmującej: atom wodoru, C1-6alkil, fluorowcoC1-6alkil, C3-10cykloalkil, i jego sole i solwaty.
PL 202 227 B1
Korzystnie związek stanowi związek o wzorze (III)
Związek korzystnie charakteryzuje się tym, że R4 jest wybrany z grupy obejmującej: atom wodoru, metyl, trifluorometyl i cyklopropyl.
Związek korzystnie charakteryzuje się tym, że R5 oznacza C1-6alkil.
Związek korzystnie charakteryzuje się tym, że R6 jest wybrany z grupy obejmującej: atom wodoru, acetyl.
Związek korzystnie charakteryzuje się tym, że jest wybrany z grupy obejmującej:
Ester metylowy kwasu 4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-(1-hydroksy-1-metyloetylo)-3-metylopirolidyno-1-karboksylowego;
1-[4-(S)-(3-Cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(1-hydroksy-1-metyloetylo)-3-(S)-metylopirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon;
Ester metylowy kwasu trans-(±)-3-(1-hydroksyetylo)-4-[3-(indan-2-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidyno-1-karboksylowego;
Ester metylowy kwasu trans 4-[3-exo-(bicyklo[2.2.1]hept-2-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-(1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyno-1-karboksylowego;
Ester metylowy kwasu trans-3-(1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(1-metylo-3-fenylopropoksy)fenylo]-3-metylopirolidyno-1-karboksylowego;
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-(fenylometoksy)etan-1-on;
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksyetan-1-on;
N-{3-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-3-oksopropylo}(fenylometoksy)karboksyamid;
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-3-aminopropan-1-on;
4-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-4-oksobutanoan fenylometylu;
kwas 4-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksy-fenylo)-3-metylopirolidynylo]-4-okso-butanowy;
N-{2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-oksoetylo}(fenylometoksy)karboksyamid;
1-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-aminoetan-1-on;
keton 3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylowo-4-metylo-piperazynylowy;
keton 3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylowo-morfolin-4-ylowy;
1-[3-((1S)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-[(2S,1R,5R)-5-metylo-2-(metyloetylo)cykloheksyloksy]-etan-1-on;
keton 3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylowo-2-metylo-(1,3-tiazol-4-ilo)-owy;
3-{[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]sulfonylo}-pirydyna;
PL 202 227 B1
1-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-(fenylometoksy)etan-1-on;
1-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksyetan-1-on;
2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-oksooctan metylu;
1-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-amino-2-metylopropan-1-on;
3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu;
kwas 4-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2,2-dimetylo-4-oksobutanowy;
keton 3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylowo-2-metylo(1,3-tiazol-4-ilo)-owy;
keton 3-((1R)-1-hydroksyetylo)(4S,3R)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylocyklopentylowo-oksolan-3-ylowy;
N-{2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-oksoetylo}(fenylometoksy)karboksyamid;
1-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-aminoetan-1-on;
(1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-(2-pirydylo)pirolidyn-3-ylo]etan-1-ol;
(1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-(3-pirydylo)pirolidyn-3-ylo]etan-1-ol;
(1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-pirymidyn-2-ylopirolidyn-3-ylo]etan-1-ol;
(1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-(2-pirydylo)pirolidyn-3-ylo]etan-1-ol;
(1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-(3-pirydylo)pirolidyn-3-ylo]etan-1-ol;
3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(4-fenoksyfenoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu;
3-((1S)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(4-fenoksyfenoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu;
3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(4-fenylofenoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu;
3-((1S)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(4-fenylofenoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu;
3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(4-metoksy-3-fenoksyfenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu; 3-((1S)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(4-metoksy-3-fenoksyfenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu; 3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(4-fluorofenoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu;
3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu;
3-((1S)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu;
3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(4-metoksy-3-(1,3-tiazol-2-iloksy)fenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu;
3-((1S)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(4-metoksy-3-(1,3-tiazol-2-iloksy)fenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu;
3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-benzimidazol-2-iloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu;
3-((1S)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-benzimidazol-2-iloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu;
3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenylopropoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu;
3-((1S)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenylopropoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu;
3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(4-fenylobutoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu;
PL 202 227 B1
3-((1S)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(4-fenylobutoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu;
3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(2-fenyloetoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu;
3-((1S)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(2-fenyloetoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu;
(1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-(2-pirydylometylo)pirolidyn-3-ylo]etan-1-ol; (1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-(3-pirydylometylo)pirolidyn-3-ylo]etan-1-ol; (1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-(4-pirydylometylo)pirolidyn-3-ylo]etan-1-ol; 3-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]propanoan fenylometylu;
kwas 3-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]propanowy;
2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]octan fenylometylu;
kwas 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]octowy;
octan 2-[(3R)-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-okso-1-fenyloetylu;
1-[(3R)-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksy-2-fenyloetan-1-on;
1-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-(fenylometoksy)etan-1-on;
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksyetan-1-on;
Octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo](1S)-1-metylo-2-oksoetylu;
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo](2S)-2-hydroksypropan-1-on;
octan {[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]karbonylo}-cyklopropylu;
keton 3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylowo-hydroksycyklopropylowy;
octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-1,1-dimetylo-2-oksoetylu;
1-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksy-2-metylopropan-1-on;
2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-oksooctan metylu;
kwas 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-okso-octowy;
2-[3-{(1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-okso-acetamid;
2-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)-fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}-2-okso-acetamid;
2-((3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-{4-metoksy-3-[3-(4-trifluorometylo-fenylo)prop-2-ynyloksy]-fenylo}-3-metylopirolidyn-1-ylo)-2-okso-acetamid;
2-[(3S,4S)-4-{3-[3-(4-fluorofenoksy)propoksy]-4-metoksyfenylo}-3-((R)-1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-okso-acetamid;
2-[(3S,4S)-4-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-okso-acetamid;
2-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[3-(indan-2-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}-2-okso-acetamid;
2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-N-metylo-2-oksoacetamid;
PL 202 227 B1
1- [3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-piperydyloetano-1,2-dion;
2- [3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-N-cyklopentylo-2-oksoacetamid;
2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-okso-N-benzyloacetamid;
N-{(1R)-2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3metylopirolidynylo]-1-butylo-2-oksoetylo}(fenylometoksy)karboksyamid;
(2R)-1-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-aminoheksan-1-on;
N-{(1R)-2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-1-(metyloetylo)-2-oksoetylo}(fenylometoksy)-karboksyamid;
(2R)-1-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-amino-3-metylobutan-1-on;
octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-(1S)-1-cykloheksylo-2-oksoetylu;
1-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo](2S)-2-cykloheksylo-2-hydroksyetan-1-on;
1-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo](2R)-2-cykloheksylo-2-acetoksyetan-1-on;
(2R)-1-[3-{(1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-cykloheksylo-2-hydroksyetan-1-on;
N-{2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-(1S)-1-butylo-2-oksoetylo}(fenylometoksy)karboksyamid;
1-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo](2S)-2-aminoheksan-1-on;
Octan (1R)-2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-1-butylo-2-oksoetylu;
(2R)-1-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksyheksan-1-on
N-{2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-(1S)-2-okso-1-benzyloetylo}(fenylometoksy)karboksyamid;
1-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo](2S)-2-amino-3-fenylopropan-1-on;
N-{(1R)-2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-okso-1-benzyloetylo}(fenylometoksy)karboksyamid;
(2R)-1-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-amino-3-fenylopropan-1-on;
octan 2-{(3S,4S)-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-okso-1-propylo-etylu;
1-{(3S,4S)-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksypentan-1-on;
1-{(3S,4S)-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-(2S)-2-(fenylometoksy)propan-1-on;
1-{(3S,4S)-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-(2S)-2-(hydroksy)propan-1-on;
N-((1R)-2-{(3S,4S)-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3metylopirolidynylo}-1-(tertbutylo)-2-oksoetylo)(tert-butoksy)karboksyamid;
(2R)-1-{(3S,4S)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-amino-3,3-dimetylobutan-1-on;
N-{2-[(3S,4S)-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo](1R)-2-okso-1-[(fenylometoksy)metylo]etylo}(tert-butoksy)karboksyamid;
N-(2-{(3S,4S)-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-2-okso-1-[(fenylometoksy)metylo]etylo)-(tert-butoksy)karboksyamid;
N-(2-{(3S,4S)-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1R)-1-(hydroksymetylo)-2-oksoetylo)(tert-butoksy)karboksyamid;
PL 202 227 B1 chlorowodorek 1-{(3S,4S)-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2R)-2-amino-3-hydroksypropan-1-onu;
octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-cykloheksylo-2-oksoetylu;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-cykloheksylo-2-hydroksyetan-1-on;
octan (1R)-2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-1-cykloheksylo-2-oksoetylu;
(2R)-1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-cykloheksylo-2-hydroksyetan-1-on;
N-((1R)-2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-1-butylo-2-oksoetylo)(fenylometoksy)karboksyamid;
(2R)-1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-aminoheksan-1-on;
N-((1R)-2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-1-(metyloetylo)-2-oksoetylo)(fenylometoksy)karboksyamid;
(2R)-1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-amino-3-metylobutan-1-on;
1-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-acetylotietan-1-on;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-acetylotioetan-1-on;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-sulfanyloetan-1-on;
N-(2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-oksoetylo)(fenylometoksy)karboksyamid;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-aminoetan-1-on;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-[(metylosulfonylo)amino]etan-1-on;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-{[(trifluorometylo)sulfonylo]amino}etan-1-on;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-(dimetylamino)etan-1-on;
N-(2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-metylo-2-oksoetylo)(fenylometoksy)-karboksyamid;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-aminopropan-1-on;
N-((1R)-2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-1-metyl-2-oksoetylo)(fenylometoksy)-karboksyamid;
(2R)-1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-aminopropan-1-on;
N-(2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-(metyloetylo)-2-oksoetylo)(fenylometoksy)karboksyamid;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-amino-3-metylobutan-1-on;
N-(2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-(2-metylopropylo)-2-oksoetylo)(fenylometoksy)karboksyamid;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-amino-4-metylopentan-1-on;
N-((1R)-2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-1-(2-metylopropylo)-2-oksoetylo)(fenylometoksy)karboksyamid;
(2R)-1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-amino-4-metylopentan-1-on;
N-(2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-butylo-2-oksoetylo)(fenylometoksy)karboksyamid;
PL 202 227 B1
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-aminoheksan-1-on;
N-((1R)-2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-(1R)-cykloheksylo-2-oksoetylo)(fenylometoksy)karboksyamid;
(2R)-1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-amino-2-cykloheksyloetan-1-on;
N-((1R)-2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-(1S)-cykloheksylo-2-oksoetylo)(fenylometoksy)karboksyamid;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-amino-3,3-dimetylobutan-1-on;
1-{(3R)-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-[3-(tert-butoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-(fenylometoksy)etan-1-on;
1-[(3R)-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-(fenylometoksy)-etan-1-on;
2-benzyloksy-1-(3-((1R)-1-hydroksyetylo)-(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(1-metylocyklopropylometoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo)etanon;
1-((3R)-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-{4-metoksy-3-[(metylocyklopropylo)metoksy]fenylo}-3-metylopirolidynylo)-2-hydroksyetan-1-on;
2-benzyloksy-1-[(3S,4S)-4-[3-(2-cyklopropyloetoksy)-4-metoksyfenylo]-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]etanon;
1-{(3R)-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-[3-(2-cyklopropyloetoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksyetan-1-on;
1-{(3R)-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-[3-(2-cyklopentyloetoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksyetan-1-on;
1-[(3S,4S)-4-[3-(2-cyklopentyloetoksy)-4-metoksyfenylo]-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon;
2-benzyloksy-1-[4-(S)-[3-(bicyklo[4.1.0]hept-7-ylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]etanon;
1-[4-(S)-[3-(bicyklo[4.1.0]hept-7-ylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon;
2-benzyloksy-1-[4-(S)-[3-(bicyklo[3.1.0]heks-6-ylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]etanon;
1-[4-(S)-[3-(bicyklo[3.1.0]heks-6-ylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon;
2-benzyloksy-1-[4-(S)-[3-(4-tert-butylocykloheksyloksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]etanon;
1-[4-(S)-[3-(4-tert-butylocykloheksyloksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon;
2-benzyloksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(4-metylocykloheksyloksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}-etanon;
2-hydroksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(4-metylocykloheksyloksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}-etanon;
2-benzyloksy-1-[4-(S)-[3-(dekahydronaftalen-2-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]etanon;
1-[4-(S)-[3-(dekahydronaftalen-2-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon;
2-benzyloksy-1-[4-(S)-[3-(bicykloheksylo-4-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]etanon;
1-[4-(S)-[3-(bicykloheksylo-4-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon;
2-benzyloksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(4-trifluorometylocykloheksyloksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon;
2-hydroksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(4-trifluorometylocykloheksyloksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon;
2-benzyloksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(3-metoksy-3-metylobutoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon;
PL 202 227 B1
2-hydroksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(3-metoksy-3-metylobutoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}-etanon;
2-benzyloksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(1-fenylocyklopentylometoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon;
2-hydroksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(1-fenylocyklopentylometoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon;
2-benzyloksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(1-fenylocyklopropylometoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon;
2-hydroksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(1-fenylocyklopropylometoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon;
2-benzyloksy-1-[(3S,4S)-4-3-(3-etylo-oksetan-3-ylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]etanon;
1-((3R)-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-{3-[(3-etylo-oksetan-3-ylo)metoksy]-4-metoksyfenylo}-3-metylopirolidy-nylo)-2-hydroksyetan-1-on;
octan (2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(tert-butoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-oksoetylu;
octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-oksoetylu;
2-benzyloksy-1-[(3S,4S)-4-[3-(2-bifenylo-4-yloetoksy)-4-metoksyfenylo]-3-((R)-1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo] etanon;
1-[(3S,4S)-4-[3-(2-bifenylo-4-yloetoksy)-4-metoksyfenylo]-3-((R)-1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon;
octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-oksoetylu;
octan 2-(3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-{3-[3-(4-fluoro fenylo)prop-2-ynyloksy]-4-metoksyfenylo}-3-metylopirolidynylo)-2-oksoetylu;
octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(dicyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-oksoetylu;
octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-{[3-(4-chlorofenylo)(1,2,4-oksadiazol-5-ilo)]metoksy}-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-oksoetylu;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksyetan-1-on;
1-(3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-{3-[3-(4-fluoro-fenylo)prop-2-ynyloksy]-4-metoksyfenylo}-3-metylopirolidynylo)-2-hydroksyetan-1-on;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(dicyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksyetan-1-on;
1-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-{[3-(4-chlorofenylo)(1,2,4-oksadiazol-5-ilo)]metoksy}-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksyetan-1-on;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(3,3-dimetylobutoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-(fenylometoksy)etan-1-on;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(3,3-dimetylobutoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksyetan-1-on;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-(fenylometoksy)etan-1-on;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksyetan-1-on;
N-(2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-oksoetylo)-(fenylometoksy)karboksyamid;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-aminoetan-1-on;
octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-1,1-dimetylo-2-oksoetylu;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksy-2-metylopropan-1-on;
octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-metylo-2-oksoetylu;
PL 202 227 B1
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-hydroksypropan-1-on;
octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-okso-1-fenyloetylu;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksy-2-fenyloetan-1-on;
octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-1-(4-fluorofenylo)-2-oksoetylu;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo}(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-(4-fluorofenylo)-2-hydroksyetan-1-on;
octan ({3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-karbonylo)cyklopropylu;
keton 3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylowo-hydroksycyklopropylowy;
octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-(metylopropylo)-2-oksoetylu;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-hydroksy-3-metylopentan-1-on;
octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-(2-metylopropylo)-2-oksoetylu;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-hydroksy-4-metylopentan-1-on;
octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-2-okso-1-benzyloetylu;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-hydroksy-3-fenylopropan-1-on;
octan (1R)-2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-okso-1-benzyloetylu;
((2R)-1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksy-3-fenylopropan-1-on;
octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(tert-butoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-metylo-2-oksoetylu;
octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo](1S)-1-metylo-2-oksoetylu;
octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-metylo-2-oksoetylu;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidynylo}-(2S)-2-hydroksypropan-1-on;
octan 2-(3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-{3-[3-(4-fluoro-fenylo)prop-2-ynyloksy]-4-metoksyfenylo}-3-metylopirolidynylo)-2-oksoetylu;
1-(3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-{3-[3-(4-fluorofenylo)prop-2-ynyloksy]-4-metoksyfenylo}-3-metylopirolidynylo)(2S)-2-hydroksypropan-1-on;
octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(4-metoksy-3-{3[4-(trifluorometylo)fenylo]prop-2-ynyloksy}fenylo)-3-metylopirolidynylo](1S)-1-metylo-2-oksoetylu; 1-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(4-metoksy-3-{3-[4-(trifluorometylo)fenylo]prop-2-ynyloksy}fenylo)-3-metylopirolidynylo](2S)-2-hydroksypropan-1-on;
octan 2-[3-{(1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-{[3-(4-chlorofenylo)(1,2,4-oksadiazol-5-ilo)]metoksy}-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo](1S)-1-metylo-2-oksoetylu; 1-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-{[3-(4-chlorofenylo)(1,2,4-oksadiazol-5-ilo)]metoksy}-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo](2S)-2-hydroksypropan-1-on;
octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-1-(4-fluorofenylo)-2-oksoetylu;
1-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-(4-fluorofenylo)-2-hydroksyetan-1-on;
octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-1-metylo-2-oksoetylu;
PL 202 227 B1
1-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksypropan-1-on;
octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-1,1-dimetylo-2-oksoetylu;
1-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksy-2-metylopropan-1-on;
(3R)-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-[3-(tert-butoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu; 2-hydroksy-1-((3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-{4-metoksy-3-[2-(tetrahydrofuran-2-ylo)etoksy]fenylo}-3-metylopirolidyn-1-ylo)etanon;
2-hydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(tetrahydrofuran-3-ylometoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon;
(3R)-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-[3-((3S)-oksolan-3-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu;
(3R)-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-[3-((3R)-oksolan-3-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu;
3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-{3-[2-(4-fluorofenoksy)-etoksy]-4-metoksyfenylo}-3-metylopirolidynokarbo-ksylan metylu;
3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-{3-[3-(4-fluorofenoksy)-propoksy]-4-metoksyfenylo}-3-metylopirolidynokarboksylan metylu;
3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(4-metoksy-3-prop-2-ynyloksyfenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu;
3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-but-2-ynyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu;
3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu;
3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-{3-[3-(4-fluorofenylo)prop-2-ynyloksy]-4-metoksyfenylo}-3-metylopirolidynokarboksylan metylu;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-acetylotioetan-1-on;
1-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-sulfanyloetan-1-on;
ester tert-butylowy kwasu (2-[(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-okso-etylo)karbaminowego;
2-amino-1-((3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-{4-metoksy-3-[3(4-trifluorometylofenylo)-prop-2-ynyloksy]fenylo}-3-metylopirolidyn-1-ylo)etanon;
2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(tert-butoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-oksooctan metylu;
2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-oksooctan metylu;
2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-oksooctan metylu;
ester metylowy kwasu 4-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(1,2-dihydroksyetylo)-3-metylopirolidyno-1-karboksylowego;
[4-(S)-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-(2,2-dimetylo-[1,3]-dioksolan-4-(S)-ylo)metanon;
1-[4-(S)-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2(S)-3-dihydroksypropan-1-on;
(R)-2,3-dihydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[3-(indan-2-ylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}propan-1-on;
(R)-1-[(3S,4S)-4-{3-[3-(4-fluorofenoksy)propoksy]-4-metoksyfenylo}-3-((R)-1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2,3-dihydroksypropan-1-on;
1-((R)-2,2-dimetylo-1,3-dioksolan-4-ylo)-1-((3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-{4-metoksy-3-[3-(4-trifluoro-metylofenylo)-prop-2-ynyloksy]fenylo}-3-metylopirolidyn-1-ylo)metanon;
(R)-2,3-dihydroksy-1-((3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-{4-metoksy-3-[3-(4-trifluorometylofenylo)-prop-2-ynyloksy]fenylo}-3-metylopirolidyn-1-ylo)-propan-1-on;
PL 202 227 B1
2-benzyloksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(2-tiofen-3-ylo-etoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}-etanon;
2-hydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-((R)-2-fenylocyklopropylometoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon;
1- [(3S,4S)-4-[3-(3-cyklopentylopropoksy)-4-metoksyfenylo]-3((R)-1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon;
2- hydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3(3-fenylopropoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon;
2-hydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[3-(1-hydroksyindan-2-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon;
2-hydroksy-1-((3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-{4-metoksy-3[2-(4-metoksyfenylo)etoksy]fenylo}-3-metylopirolidyn-1-ylo)-etanon;
2-hydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3((R)-2-metylocyklopropylometoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon;
1- (R)-[1-(2-benzyloksyetylo)-4-(S)-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)-metylopirolidyn-3-ylo]etanol;
2- benzyloksy-1-[4-(S)-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)-hydroksymetylo-3-metylopirolidyn-1-ylo]etanon;
1-((R)-2,2-dimetylo-1,3-dioksolan-4-ylo)-1-[(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]metanon;
1-((R)-2,2-dimetylo-1,3-dioksolan-4-ylo}-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}metanon;
(R) -2,3-dihydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}propan-1-on;
1-((S)-2,2-dimetylo-1,3-dioksolan-4-ylo)-1-[(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidon-1-ylo]metanon;
1- ((S)-2,2-dimetylo-1,3-dioksolan-4-ylo)-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)-fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}metanon;
(S) -2,3-dihydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}propan-1-on;
ester (S)-1-benzylo-2-{(3S,4S)-3-{(R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}-2-oksoetylowy kwasu octowego;
(S)-2-hydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}-3-fenylopropan-1-on;
3- ((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu.
Związek korzystnie charakteryzuje się tym, że ma IC50 względem ludzkiego rekombinacyjnego
PDE4 około 700 pM do około 15 liM.
Związek korzystnie charakteryzuje się tym, że ma EC50 względem PBL/TNFa około 1 nM do około 20 l M.
Związek korzystnie charakteryzuje się tym, że ma IC50 względem ludzkiego rekombinacyjnego PDE4 około 700 pM do około 15 lM i EC50 względem PBL/TNFa około 1 nM do około 20 lM.
Związek korzystnie charakteryzuje się tym, że ma IC50 względem ludzkiego rekombinacyjnego PDE4 około 100 x 10-9 M lub mniej.
Związek korzystnie charakteryzuje się tym, że ma IC50 względem ludzkiego rekombinacyjnego PDE4 około 50 x 10-9 M lub mniej.
Związek korzystnie charakteryzuje się tym, że ma EC50 względem PBL/TNFa około 500 x 10-9 M lub mniej.
Związek korzystnie charakteryzuje się tym, że ma EC50 względem PBL/TNFa około 100 x 10-9 M lub mniej.
Związek korzystnie charakteryzuje się tym, że ma IC50 względem ludzkiego rekombinacyjnego PDE4 około 100 x 10-9 lub mniej i EC50 względem PBL/TNFa około 500 x 10-9 M lub mniej.
Związek korzystnie charakteryzuje się tym, że ma IC50 względem ludzkiego rekombinacyjnego PDE4 około 50 x 10-9 lub mniej i EC50 względem PBL/TNFa około 100 x 10-9 M lub mniej.
Związek korzystnie charakteryzuje się tym, że jest wybrany z grupy obejmującej: (±)-[1-benzylo-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidyn-3-ylo]metanol;
2- [1-benzylo-4-(S)-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)-metylopirolidyn-3-ylo]propan-2-ol; 2-[4-(S)-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)-metylopirolidyn-3-ylo]propan-2-ol;
PL 202 227 B1
2-benzyloksy-1-[4-(S)-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo-)-3-(1-hydroksy-1-metyloetylo)-3-(S)-metylopirolidyn-1-ylo]etanon;
(1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-benzylopirolidyn-3-ylo]etan-1-ol;
(1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidyn-3-ylo]etan-1-ol;
(1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-benzylopirolidyn-3-ylo]etan-1-ol;
(1S)-1-[(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-benzylopirolidyn-3-ylo]etan-1-ol;
(1S)-1-{(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(fenylometoksy)-fenylo]-3-metylo-1-benzylopirolidyn-3-ylo}etan-1-ol;
(1R)-1-{(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(fenylometoksy)-fenylo]-3-metylo-1-benzylopirolidyn-3-ylo}etan-1-ol;
1-R-[1-benzylo-4-S-(3-tert-butoksy-4-metoksyfenylo)-3-S-metylopirolidyn-3-ylo]etanol;
3-[1-benzylo-4-(S)-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)-metylopirolidyno-3-karbonylo]-4-(R)-fenylooksazolidyn-2-on;
1-[1-benzylo-4-(S)-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)-metylopirolidyn-3-ylo]etanol;
(1R)-1-{(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidyn-3-ylo}etan-1-ol;
(1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidyn-3-ylo]etan-1-ol;
(1S)-1-[(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidyn-3-ylo]etan-1-ol;
5-[4-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-metylopirolidyn-3-ylo]-2-metoksyfenol;
(1R)-1-{(3R)-4-[3-(tert-butoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylo-1-benzylopirolidyn-3-ylo}etan-1-ol;
5-[(4R)-4-((1S)-1-hydroksyetylo)-4-metylo-1-benzylopirolidyn-3-ylo]-2-metoksyfenol;
[4-(S)-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)-metylopirolidyn-3-ylo]metanol.
Przedmiotem wynalazku jest kompozycja farmaceutyczna charakteryzująca się tym, że zawiera związek jak określono wyżej, farmaceutycznie dopuszczalny nośnik i ewentualnie drugi przeciwzapalny środek leczniczy.
Kompozycja korzystnie zawiera drugi przeciwzapalny środek leczniczy zdolny do ukierunkowywania się na TNFa.
Przedmiotem wynalazku jest także zastosowanie związku jak określono wyżej, do wytwarzania leku do leczenia ssaka w stanie, w którym inhibitowanie PDE specyficznego dla cAMP daje korzyść terapeutyczną.
Przedmiotem wynalazku jest też zastosowanie związku jak określono wyżej, do wytwarzania leku do modulowania poziomów cAMP u ssaka.
W zastosowaniu korzystnie stan jest chorobą alergiczną, chorobą autoagresyjną, chorobą zapalną, chorobą zapalenia stawów lub zapaleniem skóry.
W zastosowaniu korzystnie stan jest reumatoidalnym zapaleniem stawów, zapaleniem kości i stawów, ostrym dnawym zapaleniem stawów lub zapaleniem kręgosłupa.
W zastosowaniu korzystnie stan jest oftalmopatią związaną z tarczycą, chorobą Behceta, posocznicą, wstrząsem septycznym, wstrząsem endotoksynowym, posocznicą gram-ujemną, posocznicą gram-dodatnią, syndromem wstrząsu toksycznego, alergicznym zapaleniem spojówek, wiosennym zapaleniem spojówek lub ziarniakiem kwasochłonnym.
W zastosowaniu korzystnie stan jest astmą, przewlekłym zapaleniem oskrzeli, alergicznym nieżytem nosa, zespołem ostrego wyczerpania oddechowego dorosłych, przewlekłą chorobą zapalną płuc, przewlekłą czopującą chorobą płuc, krzemicą lub sarkoidozą płucną.
W zastosowaniu korzystnie stan jest uszkodzeniem związanym z reperfuzją mięśnia sercowego, mózgu lub kończyn, takim jak uszkodzenie mózgu lub rdzenia kręgowego wskutek urazu.
W zastosowaniu korzystnie stan jest zwłóknieniem, tworzeniem bliznowca lub tworzeniem tkanki bliznowatej.
W zastosowaniu korzystnie stan jest układowym toczeniem rumieniowatym, zaburzeniem związanym z odrzuceniem przeszczepu, reakcją przeszczepu przeciw komórkom biorcy lub odrzuceniem aloprzeszczepu.
W zastosowaniu korzystnie stan jest przewlekłym zapaleniem kłębuszków nerwowych, nefropatią przypisaną cukrzycy Typu 2, zapalną chorobą jelit, chorobą Crohna lub wrzodziejącym zapaleniem okrężnicy.
W zastosowaniu korzystnie stan jest proliferacyjną choroba limfocytową lub białaczką.
W zastosowaniu korzystnie stan jest zapalną chorobą skóry, atopową chorobą skóry, łuszczycą lub pokrzywką.
W zastosowaniu korzystnie stan jest kardiomiopatią, zastoinową niewydolnością serca, miażdżycą tętnic, gorączką, charłactwem, charłactwem wtórnym po infekcji lub nowotworze, charłactwem wtórnym po zespole nabytego niedoboru odpornościowego, ARC, powikłaniami mózgowymi w malarii,
PL 202 227 B1 osteoporozą, chorobą resorpcji kości, gorączką i mięśniobólami wskutek infekcji, zaburzeniem erekcji, bezpłodnością męską lub żeńską, moczówką prostą, zaburzeniem ośrodkowego układu nerwowego, reakcją niepokoju lub napięcia, niedokrwieniem mózgowym, późną dyskinezą, chorobą Parkinsona lub zespołem napięcia przedmiesiączkowego.
W zastosowaniu korzystnie stan jest depresją lub demencją poudarową .
W zastosowaniu korzystnie etap leczenia ssaka dodatkowo obejmuje leczenie przy uż yciu drugiej terapii przeciwdepresyjnej.
W zastosowaniu korzystnie druga terapia przeciwdepresyjna jest wybrana z grupy obejmują cej: procedurę elektrowstrząsów, inhibitor oksydazy monoaminowej, selektywny inhibitor powtórnego wychwytu serotoniny i selektywny inhibitor powtórnego wychwytu norepinefryny.
W zastosowaniu korzystnie stan jest otyłością .
W zastosowaniu korzystnie leczenie ponadto obejmuje podawanie inhibitora PDE3.
Przedmiotem wynalazku jest również zastosowanie związku jak określono wyżej, do wytwarzania leku do obniżania poziomów TNF u ssaka.
Przedmiotem wynalazku jest także zastosowanie związku jak określono wyżej, do wytwarzania leku do hamowania aktywacji komórek zapalnych u ssaka.
Przedmiotem wynalazku jest też zastosowanie związku jak określono wyżej, do wytwarzania leku do inhibitowania czynności PDE4 u ssaka.
Niniejszy wynalazek ujawnia także sposoby (a) leczenia ssaka będącego w stanie, w którym hamowanie PDE4 przynosi korzyść, (b) modulowania poziomów cAMP u ssaka, (c) obniżania poziomów TNFa u ssaka, (d) powstrzymywania aktywacji komórek zapalnych u ssaka, i (e) inhibitowania funkcji PDE4 u ssaka przez podawanie ssakowi terapeutycznie skutecznej ilości związku o wzorze strukturalnym (II) lub kompozycji zawierającej związek o wzorze strukturalnym (II).
Niniejszy wynalazek obejmuje wszelkie możliwe stereoizomery i geometryczne izomery związków o wzorze strukturalnym (II), i obejmuje nie tylko związki racemiczne lecz także izomery optycznie czynne. Gdy związek o wzorze strukturalnym (II) jest pożądany jako pojedynczy enancjomer, można go otrzymać bądź przez rozdział produktu końcowego bądź przez syntezę stereospecyficzną z dowolnej izomerycznie czystej substancji wyjściowej lub zastosowanie chiralnego odczynnika pomocniczego, np. patrz Z. Ma i in., Tetrahedron: Asymmetry, 8(6), strony 883-888 (1997). Rozdział produktu końcowego, półproduktu lub substancji wyjściowej może być osiągnięty jakimkolwiek odpowiednim sposobem znanym według stanu techniki. Ponadto, w przypadkach gdy są możliwe tautomery związków o wzorze strukturalnym (II), niniejszy wynalazek obejmuje w zamierzeniu wszystkie formy tautomeryczne związków. Jak wykazano poniżej, szczególne stereoizomery wykazują wyjątkową zdolność, by inhibitować PDE4 bez uwidaczniania niekorzystnych efektów ubocznych w odniesieniu do OUN w typowym przypadku związanych z inhibitorami PDE4.
W szczególności, zazwyczaj przyjmuje się, że układy biologiczne mogą wykazywać aktywność bardzo wrażliwą względem bezwzględnej stereochemii związków. (patrz: E.J. Ariens, Medicinal Research Reviews, 6:451-466 (1986); E.J. Ariens, Medicinal Research Reviews, 7:367-387 (1987); K.W. Fowler, Handbook of Stereoisomers: Therapeutical Drugs, CRC Press, red. Donald P. Smith, str. 35-63 (1989); i S.C. Stinson, Chemical and Engineering News, 75:38-70 (1997).)
Np. rolipram jest stereospecyficznym inhibitorem PDE4 zawierającym jedno centrum chiralne. (-)-Enancjomer rolipramu ma wyższą moc farmakologiczną niż (+)-enancjomer, co można by powiązać z jego potencjalnym działaniem przeciwdepresyjnym. Schultz i in., Naunyn-Schmiedeberg's Arch Pharmacol, 333:23-30 (1986). Ponadto, metabolizm rolipramu okazuje się stereospecyficzny w przypadku (+)-enancjomeru wykazującego szybszy klirens niż (-)-enancjomer. Krause i in., Xenobiotica, 18:561-571 (1988). Na koniec, ostatnie obserwacje wskazały, że (-)-enancjomer rolipramu (R-rolipram) ma działanie wymiotne około dziesięciokrotnie silniejsze niż (+)-enancjomer (S-rolipram). A. Robichaud i in., Neuropharmacology, 38:289-297 (1999). Tych obserwacji nie można łatwo pogodzić z różnicami u zwierząt doświadczalnych co do dyspozycji na izomery rolipramu i zdolność rolipramu, by inhibitować enzym PDE4. Związki według niniejszego wynalazku mogą mieć trzy lub więcej centra chiralne. Jak przedstawiono poniżej, związki o szczególnej orientacji stereochemicznej wykazują podobną aktywność jako inhibitory PDE4 oraz aktywność farmakologiczną, lecz zmienioną toksyczność OUN oraz potencjał odnoszący się do działania wymiotnego.
Zgodnie z tym, korzystne związki według niniejszego wynalazku mają wzór strukturalny (III):
PL 202 227 B1
Związki o wzorze strukturalnym (III) są silnymi i selektywnymi inhibitorami PDE4 i nie uwidaczniają niekorzystnych efektów względem OUN ani potencjału wymiotnego, wykazywanych przez stereoizomery związku o wzorze strukturalnym (III).
Związki o wzorze strukturalnym (II), które zawierają ugrupowania kwasowe mogą tworzyć farmaceutycznie dopuszczalne sole z odpowiednimi kationami. Odpowiednie farmaceutycznie dopuszczalne kationy obejmują kationy metali alkalicznych (np. sodu lub potasu) i metali ziem alkalicznych (np. wapnia lub magnezu). Farmaceutycznie dopuszczalne sole związków o wzorze strukturalnym (II), które zawierają centrum zasadowe, są solami addycyjnymi z kwasami, utworzonymi z farmaceutycznie dopuszczalnymi kwasami. Przykłady obejmują chlorowodorek, bromowodorek, siarczan lub dwusiarczan, fosforan lub wodorofosforan, octan, benzoesan, bursztynian, fumaran, maleinian, mleczan, cytrynian, winian, glukonian, metanosulfonian, benzenosulfonian i p-toluenosulfonian. W świetle powyższego, jakiekolwiek odniesienie do związków niniejszego wynalazku pojawiające się w niniejszym tekście obejmuje w zamierzeniu związki o wzorze strukturalnym (II), jak i ich farmaceutycznie dopuszczalne sole i solwaty.
Związki według niniejszego wynalazku mogą być terapeutycznie podawane jako sam związek chemiczny, lecz jest korzystne, by podawać związki o wzorze strukturalnym (II) jako farmaceutyczną kompozycję lub preparat. Zgodnie z tym, niniejszy wynalazek ponadto dostarcza preparatów farmaceutycznych obejmujących związek o wzorze strukturalnym (II), razem z jednym lub więcej farmaceutycznie dopuszczalnymi nośnikami i, ewentualnie, innymi składnikami terapeutycznymi i/lub profilaktycznymi. Nośniki są „dopuszczalne” w sensie bycia zgodnymi z innymi składnikami preparatu oraz nieszkodliwymi dla jego biorcy.
W szczególności, selektywny inhibitor PDE4 według niniejszego wynalazku jest przydatny sam lub w połączeniu z drugim przeciwzapalnym środkiem terapeutycznym, np. środkiem terapeutycznym ukierunkowanym na TNFa, takim jak ENBREL® lub REMICADE®, który jest przydatny w leczeniu reumatoidalnego zapalenia stawów. Podobnie, terapeutyczną przydatność antagonizmu IL-1 wykazano także w modelach zwierzęcych reumatoidalnego zapalenia stawów. Zatem, można sobie wyobrazić, że antagonizm IL-1, w połączeniu z inhibitowaniem PDE4, co osłabia TNFa, byłby skuteczny.
Niniejsze inhibitory PDE4 są przydatne w leczeniu wielu chorób alergicznych, autoagresyjnych i zapalnych.
Termin „leczenie” obejmuje zapobieganie, obniżanie, zatrzymywanie lub odwracanie postępu ostrości stanu lub objawów poddawanych kuracji. Jako taki, termin „leczenie” obejmuje zarówno medyczne podawanie terapeutyczne i/lub profilaktyczne, gdy ma to zastosowanie.
W szczególności, zapalenie stanowi umiejscowioną, ochronną reakcję wyzwoloną przez uszkodzenie lub zniszczenie tkanek, które służy do zniszczenia, rozcieńczenia lub wyizolowania zarówno czynnika uszkadzającego jak i uszkodzonej tkanki.
Termin „choroba zapalna”, tak jak to jest stosowane w niniejszym tekście, oznacza jakąkolwiek chorobę, w której nadmierna lub nieregulowana reakcja zapalna prowadzi do nadmiernych objawów zapalnych, uszkodzenia tkanki gospodarza lub utraty czynności tkanki. Ponadto, termin „choroba autoagresyjna”, tak jak to jest stosowane w niniejszym tekście, oznacza jakąkolwiek grupę zaburzeń, w której uszkodzenie tkanki jest związane z reakcjami humoralnymi lub pośredniczonymi przez komórkę względem własnych składników ciała. Termin „choroba alergiczna”, tak jak to jest stosowane w niniejszym tekście, oznacza jakiekolwiek objawy, uszkodzenie tkanki, lub utratę czynności tkanki
PL 202 227 B1 wynikające z alergii. Termin „choroba zapalenia stawów”, tak jak to jest stosowane w niniejszym tekście, oznacza jakąkolwiek z dużej rodziny chorób, które cechują się zapalnymi uszkodzeniami stawów przypisywanymi rozmaitym etiologiom. Termin „zapalenie skóry”, tak jak to jest stosowane w niniejszym tekście, oznacza jakąkolwiek z dużej rodziny chorób skóry które cechują się zapaleniem skóry przypisywanym rozmaitym etiologiom. Termin „odrzucenie przeszczepu”, tak jak to jest stosowane w niniejszym tekście, oznacza jakąkolwiek reakcję immunologiczną skierowaną przeciwko przeszczepionej tkance (włączając organ i komórkę (np. szpik kostny)), cechującą się utratą czynności tkanki przeszczepionej i tkanek otaczających, bólem, obrzękiem, leukocytozą i trombocytopenią.
Niniejszy wynalazek ujawnia także sposób modulowania poziomów cAMP u ssaka, jak i sposób leczenia chorób cechujących się podwyższonymi poziomami cytokin.
Termin „cytokina”, tak jak to jest stosowane w niniejszym tekście, oznacza jakikolwiek wydzielany polipeptyd, który wpływa na czynności innych komórek i który moduluje oddziaływania między komórkami w reakcji immunologicznej lub zapalnej. Cytokiny obejmują (lecz nie są ograniczone do): monokiny, limfokiny i chemokiny, bez względu na to, które komórki je wytwarzają. Np. monokina jest zazwyczaj określana jako wytwarzana i wydzielana przez monocyt, jednak wiele innych komórek wytwarza monokiny, takie jak naturalne komórki - krwinki białe o działaniu cytotoksycznym, fibroblasty, leukocyty zasadochłonne, neutrofile, komórki śródbłonkowe, astrocyty mózgowe, komórki zrębowe szpiku kostnego, keratynocyty naskórkowe i limfocyty B. Limfokiny są zazwyczaj określane jako wytwarzane przez komórki limfocytów. Przykłady cytokin obejmują (lecz nie są ograniczone do): interleukin-1 (IL-1), interleukin-6 (IL-6), czynnik martwicy nowotworu alfa (TNFa), i czynnik martwicy nowotworu beta (TNFe).
Niniejszy wynalazek ponadto ujawnia sposób obniżania poziomów TNF u ssaka, obejmujący podawanie ssakowi skutecznej ilości związku o wzorze strukturalnym (II). Termin „obniżanie poziomów TNF”, tak jak to jest stosowane w niniejszym tekście, oznacza bądź:
a) obniżanie nadmiernych poziomów TNF in vivo u ssaka do poziomów normalnych lub poniżej poziomów normalnych przez hamowanie uwalniania in vivo TNF przez wszystkie komórki, włączając (lecz nie ograniczając się do): monocyty lub makrofagi; lub
b) wywoływanie regulacji „w dół”, na poziomie translacji lub transkrypcji, nadmiernych poziomów TNF in vivo u ssaka do poziomów normalnych lub poniżej poziomów normalnych; lub
c) wywoływanie regulacji „w dół”, przez inhibitowanie bezpośredniej syntezy TNF jako zdarzenia postranslacyjnego.
Ponadto, związki według niniejszego wynalazku są przydatne w tłumieniu zapalnej aktywacji komórek. Termin „zapalna aktywacja komórek”, tak jak to jest stosowane w niniejszym tekście, oznacza wywoływanie indukowania przez bodziec włączając (lecz nie ograniczając się do): cytokiny, antygeny lub auto-przeciwciała) proliferacyjnej reakcji komórkowej, wytwarzanie rozpuszczalnych mediatorów (włączając (lecz nie ograniczając się do): cytokiny, rodniki tlenowe, enzymy, prostanoidy lub aminy naczyniowoczynne) lub ekspresję na powierzchni komórek nowych lub większej liczby mediatorów (włączając (lecz nie ograniczając się do): główne antygeny histokompatybilności lub cząsteczki adhezji komórkowej) w komórkach zapalnych (włączając (lecz nie ograniczając się do): monocyty, makrofagi, limfocyty T, limfocyty B, granulocyty, leukocyty polimorfojądrowe, komórki tuczne, leukocyty zasadochłonne, eozynofile, komórki dendrytowe i komórki śródbłonkowe). Biegli w sztuce ocenią, że aktywowanie jednego lub kombinacji tych fenotypów w tych komórkach może się przyczyniać do zapoczątkowania, trwania lub nasilania stanu zapalnego.
Związki według niniejszego wynalazku są także przydatne w powodowaniu zwiotczenia mięśni gładkich dróg oddechowych, rozszerzenia oskrzeli i zapobieganiu zwężeniu oskrzeli.
Związki według niniejszego wynalazku są zatem przydatne w leczeniu takich chorób, jak choroba zapalenia stawów (taka jak reumatoidalne zapalenie stawów), zapalenie kości i stawów, ostre dnawe zapalenie stawów, zapalenie kręgosłupa, oftalmopatia związana z tarczycą, choroba Behceta, posocznica, wstrząs septyczny, wstrząs endotoksynowy, posocznica gram-ujemna, posocznica gramdodatnia, syndrom wstrząsu toksycznego, astma, przewlekłe zapalenie oskrzeli, alergiczny nieżyt nosa, alergiczne zapalenie spojówek, wiosenne zapalenie spojówek, ziarniak kwasochłonny, zespół ostrego wyczerpania oddechowego dorosłych (ARDS), przewlekła zapalna choroba płucna (taka jak przewlekła czopująca choroba płucna), krzemica, sarkoidoza płucna, uszkodzenie w wyniku reperfuzji mięśnia sercowego, mózgu lub kończyn, uszkodzenie mózgu lub rdzenia kręgowego wskutek mniejszego urazu, zwłóknienie włączając zwłóknienie torbielowate, tworzenie bliznowca, tworzenie tkanki blizny, miażdżycę tętnic, choroby autoagresyjne, takie jak układowy toczeń rumieniowaty (SLE) i zaburzenia
PL 202 227 B1 związane z odrzuceniem przeszczepu (np. reakcja przeszczepu przeciw komórkom biorcy (GvH) i odrzucenie aloprzeszczepu), przewlekłe zapalenie kłębuszków nerwowych, zapalne choroby jelit, takie jak choroba Crohna i wrzodziejące zapalenie okrężnicy, proliferacyjne choroby limfocytowe, takie jak białaczki (np. przewlekła białaczka limfocytowa; CLL) (patrz Mentz i in., Blood 88, str. 2172-2182 (1996)), i zapalne choroby skóry, takie jak atopowe zapalenie skóry, łuszczyca lub pokrzywka.
Związki według niniejszego wynalazku są także przydatne w leczeniu otyłości, same lub w połączeniu z inhibitorem PDE3, i w leczeniu i zapobieganiu nefropatii w cukrzycy Typu 2 (patrz Mora i in., New England Journal of Medicine, 342, s,441 (2000)). Inhibitory PDE3 są znane biegłym w sztuce.
Inne przykłady takich chorób lub stanów pokrewnych obejmują kardiomiopatie, takie jak zastoinowa niewydolność serca, gorączka, charłactwo, charłactwo wtórne po infekcji lub nowotworze, charłactwo wtórne po zespole nabytego niedoboru odpornościowego (AIDS), ARC (kompleks związany z AIDS), powikłania mózgowe w malarii, osteoporozę i choroby związane z resorpcją kości, oraz gorączki i mięśniobóle wskutek infekcji. Ponadto, związki według niniejszego wynalazku są przydatne w leczeniu zaburzeń erekcji, zwłaszcza impotencji pochodzenia naczyniowego (Doherty, Jr. i in. Opis patentowy USA nr. 6127363), moczówki prostej i zaburzeń OUN, takich jak depresja i demencja poudarowa.
Związki według niniejszego wynalazku są także przydatne poza typowymi przypadkami znanymi jako terapeutyczne. Np. niniejsze związki mogą także działać jako środki konserwujące przy przeszczepie narządów (patrz: Pinsky i in., J. Clin. Invest., 92, str. 2994-3002 (1993)).
Selektywne inhibitory PDE4 mogą także być przydatne w leczeniu zaburzeń erekcji, zwłaszcza impotencji pochodzenia naczyniowego (Doherty, Jr.i in. Opis patentowy USA. 6127363), moczówki prostej (Kidney Int., 37, s. 362, (1990); Kidney Int., 35, s. 494, (1989)), i zaburzeń OUN, takich jak demencja poudarowa (Nicholson, Psychopharmacology, 101, s. 147 (1990)), depresja (Eckman i in., Curr. Ther. Res., 43, s. 291 (1988)), reakcje w postaci niepokoju i stresu (Neuropharmacology, 38, s. 1831 (1991)), niedokrwienie mózgowe (Eur. J. Pharmacol., 272, s. 107 (1995)), późna dyskineza (J. Clin. Pharmocol., 16, s,304 (1976)), choroba Parkinsona (patrz Neurology, 25, s. 722 (1975); Clin. Exp. Pharmacol, Physiol., 26, s. 421 (1999)) i zespół napięcia przedmiesiączkowego. W odniesieniu do depresji, inhibitory selektywne względem PDE4 wykazują skuteczność w różnych zwierzęcych modelach depresji, takich jak „desperacja w zachowaniu” lub próby Porsolta (Bur. J. Pharmacol., 47, s. 379 (1978); Eur. J. Pharmacol., 57, s. 431 (1979); Antidepressants: neurochemical, behavioral and clinical prospectives, Enna, Malick, Richelson (red.), Raven Press, s. 121 (1981)), i „próba zawieszenia ogona” (Psychopharmacology, 85, s. 367 (1985)). Ostatnie wyniki badań pokazują, że przewlekłe leczenie in vivo rozmaitymi środkami przeciwdepresyjnymi zwiększa pochodzącą z mózgu ekspresję PDE4 (J. Neuroscience, 19, s. 610 (1999)). Zatem, selektywny inhibitor PDE4 może być stosowany sam lub w połączeniu z drugim środkiem terapeutycznym w leczeniu dla czterech głównych klas przeciwdepresantów: procedur elektrowstrząsów, inhibitorów oksydazy monoaminowej i selektywnych inhibitorów powtórnego wychwytu serotoniny lub norepinefryny. Selektywne inhibitory PDE4 mogą także być przydatne w zastosowaniach modulujących aktywność rozszerzania oskrzeli poprzez bezpośrednie działanie na oskrzelowe komórki mięśnia gładkiego w leczeniu astmy.
Selektywne inhibitory PDE4 zgodnie z niniejszym wynalazkiem można także stosować w leczeniu bezpłodności zarówno u kobiet jak i u mężczyzn. Niniejsze inhibitory PDE4 podwyższają poziomy cAMP w komórkach warstwy ziarnistej pęcherzyka Graffa, i tym samym zwiększają wywoływanie gonadotropiny przy owulacji oraz dojrzewaniu oocytów (Tsafriri i in., Dev. Biol., 178, str. 393-402 (1996)). Ponadto, niniejsze inhibitory PDE4 mogą być stosowane w leczeniu par bezpłodnych mających anormalne parametry nasienia poprzez zwiększenie ruchliwości nasienia bez wpływania na reakcję akrosomów (patrz Fosch i in., Hum. Reprod., 13, str. 1248-1254 (1998)).
Związki i kompozycje farmaceutyczne odpowiednie dla stosowania w niniejszym wynalazku obejmują te, w których składnik aktywny jest podawany ssakowi w skutecznej ilości, by osiągnąć zamierzony cel. W szczególności, „terapeutycznie skuteczna ilość” oznacza ilość skuteczną do zapobiegania rozwojowi, lub łagodzenia istniejących objawów, u osobnika poddawanego leczeniu. Określenie skutecznej ilości mieści się w zakresie zdolności biegłego w sztuce, zwłaszcza w świetle tu podanego szczegółowego opisu.
Termin „ssak”, tak jak to jest stosowane w niniejszym tekście, obejmuje samców i samice, i obejmuje ludzi, zwierzęta domowe (np. koty, psy), zwierzęta gospodarskie (np. bydło, konie, świnie) oraz dzikie zwierzęta (np. naczelne, duże koty, okazy z zoo).
PL 202 227 B1 „Terapeutycznie skuteczna dawka” oznacza ilość związku prowadzącą do osiągnięcia żądanego efektu. Toksyczność i skuteczność terapeutyczną takich związków można oznaczyć przy użyciu standardowych procedur farmaceutycznych w hodowlach komórkowych lub u zwierząt doświadczalnych, np. dla oznaczenia LD50 (dawka śmiertelna dla 50% populacji) i ED50 (dawka terapeutyczna skuteczna w przypadku 50% populacji). Stosunek dawek odnoszących się do efektów toksycznych i terapeutycznych stanowi indeks terapeutyczny, który jest wyrażany jako stosunek LD50 i ED50. Związki wykazujące wysokie indeksy terapeutyczne są korzystne. Dane uzyskane z takich wartości można stosować przy zestawianiu zakresu dawkowania dla stosowania u ludzi. Dawkowanie takich związków korzystnie mieści się w zakresie stężeń w obiegu obejmujących ED50 przy nieznacznej toksyczności lub przy jej braku. Dawkowanie może się zmieniać w tym zakresie zależnie od stosowanej formy dawkowania oraz od użytej drogi podawania.
Dokładną recepturę, drogę podawania i dawkowanie może wybrać dany lekarz uwzględniając stan pacjenta. Wielkość dawki i przedział można dostosować indywidualnie uzyskując poziomy w osoczu ugrupowania aktywnego, które są wystarczające do utrzymania efektów terapeutycznych.
Tak jak to uznają biegli w sztuce, odniesienie w niniejszym tekście do leczenia rozszerza się na profilaktykę, jak i na leczenie ustalonych chorób lub objawów. Jest ponadto uznane, że ilość związku według wynalazku wymagana do stosowania w leczeniu zmienia się wraz z charakterem stanu poddawanego leczeniu, oraz z wiekiem i stanem pacjenta, i jest ostatecznie określana przez prowadzącego lekarza lub weterynarza. Zazwyczaj jednak dawki stosowane w leczeniu ludzi dorosłych w typowym przypadku są w zakresie 0,001 mg/kg do około 100 mg/kg dziennie. Żądaną dawkę można dogodnie podawać w pojedynczej dawce, lub jako dawki wielokrotne podawane w odpowiednich przedziałach, np. jako dwie, trzy cztery lub więcej poddawek dziennie. W praktyce, lekarz określa aktualny tryb dawkowania, który jest najbardziej odpowiedni dla poszczególnego pacjenta, i dawkowanie zmienia się z wiekiem, wagą i reakcją konkretnego pacjenta. Powyższe dawki są przykładowymi dawkami w przeciętnym przypadku, lecz mogą być indywidualne przypadki, w których są uzasadnione wyższe lub niższe dawki, i są one w zakresie niniejszego wynalazku.
Preparaty zgodnie z niniejszym wynalazkiem mogą być podawane w standardowy sposób w leczeniu wskazanych chorób, taki jak doustny, pozajelitowy, przezśluzówkowy (np. podjęzykowo lub przez podawanie dopoliczkowe), miejscowy, przezskórny, doodbytniczy, przez inhalację (np. inhalację donosową lub do płuc). Podawanie pozajelitowe obejmuje (lecz nie jest ograniczone do): podawanie dożylne, dotętnicze, śródotrzewnowe, podskórne, domięśniowe, dooponowe i dostawowe. Podawanie pozajelitowe można także wykonać stosując technikę wysokociśnieniową, taką jak POWDERJECT™.
W przypadku podawania dopoliczkowego, kompozycja może być w postaci tabletek lub pastylek do ssania zestawionych w typowy sposób. Np. tabletki i kapsułki dla podawania doustnego mogą zawierać typowe zarobki, takie jak substancje wiążące (np. syrop, gumę arabską, żelatynę, sorbitol, tragakant, kleistą masę skrobi lub poliwinylopirolidony), wypełniacze (np. laktozę, cukier, celulozę mikrokrystaliczną, skrobię kukurydzianą, fosforan wapnia lub sorbitol), substancje smarujące (np. stearynian magnezu, kwas stearynowy, talk, glikol polietylenowy lub krzemionkę), substancje rozsadzające (np. skrobię ziemniaczaną lub glikolan sodowy skrobi), lub środki zwilżające (np. laurylosiarczan sodowy). Tabletki można powlekać zgodnie ze sposobami dobrze znanymi według stanu techniki.
Alternatywnie, związki według niniejszego wynalazku można włączyć w doustne preparaty ciekłe, takie jak np. zawiesiny wodne lub oleiste, roztwory, emulsje, syropy lub nalewki. Ponadto, preparaty zawierające te związki mogą występować jako suchy produkt do zestawiania przed użyciem z wodą lub innym odpowiednim nośnikiem. Takie preparaty ciekłe mogą zawierać typowe dodatki, jak środki ułatwiające tworzenie zawiesin, takie jak syrop sorbitolu, metylceluloza, glukoza, syrop cukrowy, żelatyna, hydroksyetyloceluloza, hydroksypropylometyloceluloza, karboksymetyloceluloza, stearynian glinu (żel) i uwodornione tłuszcze jadalne; środki emulgujące, takie jak lecytyna, monooleinian sorbitanu lub guma arabska; nośniki niewodne (które mogą obejmować oleje jadalne), takie jak olej migdałowy, frakcjonowany olej kokosowy, estry oleiste, glikol propylenowy i alkohol etylowy; oraz konserwanty, takie jak p-hydroksybenzoesan metylu lub propylu i kwas sorbinowy. Takie preparaty można także zestawiać jako czopki, np. zawierające typową podstawę czopka, taką jak masło kakaowe lub inne glicerydy. Kompozycje do inhalacji w typowym przypadku mogą być w formie roztworu, zawiesiny lub emulsji, którą można podawać jako suchy proszek lub w postaci aerozolu stosując typowy propelent, taki jak dichlorodifluorometan lub trichlorofluorometan. Typowe miejscowe i przeskórne preparaty obejmują typowe nośniki wodne lub niewodne, takie jak krople do oczu, kremy, maści, lotiony i pasty, lub są w formie plastra, łaty lub błony.
PL 202 227 B1
Ponadto, kompozycje według niniejszego wynalazku można zestawiać do podawania pozajelitowego przez iniekcję lub ciągły wlew. Preparaty do iniekcji mogą być w formie zawiesin, roztworów lub emulsji w nośnikach oleistych lub wodnych, i mogą zawierać środki stosowane przy zestawianiu formy, takie jak środki tworzące zawiesinę, stabilizujące i/lub dyspergujące. Alternatywnie, składnik aktywny może być w postaci proszku do zestawiania z odpowiednim nośnikiem (np.sterylną, apirogenną wodą) przed użyciem.
Kompozycja zgodnie z niniejszym wynalazkiem także może być zestawiona jako preparat typu „depot”. Takie długotrwale działające preparaty można podawać przez implantowanie (np. podskórnie lub domięśniowo) lub przez iniekcję domięśniową. Zgodnie z tym, związki według wynalazku można zestawiać z odpowiednimi materiałami polimerowymi lub hydrofobowymi (np. emulsją w dopuszczalnym oleju), żywicami jonowymiennymi, lub jako trudnorozpuszczalne pochodne (np. trudnorozpuszczalną sól).
W przypadku zastosowania weterynaryjnego, związek o wzorze (II), lub jego nietoksyczna sól jest podawana jako odpowiednio dopuszczalny preparat zgodnie z normalną praktyką weterynaryjną. Weterynarz może łatwo określić tryb dawkowania i drogę podawania najbardziej odpowiednią dla konkretnego zwierzęcia.
Zatem wynalazek dostarcza w dodatkowym aspekcie kompozycję farmaceutyczną obejmującą związek o wzorze (II), razem z jego farmaceutycznie dopuszczalnym rozcieńczalnikiem lub nośnikiem. Ponadto niniejszy wynalazek dostarcza sposób wytwarzania kompozycji farmaceutycznej obejmującej związek o wzorze (II), który to sposób obejmuje mieszanie związku o wzorze (II), razem z jego farmaceutycznie dopuszczalnym rozcieńczalnikiem lub nośnikiem.
Szczególne, nieograniczające przykłady związków o wzorze strukturalnym (II) według wynalazku (a także niektóre przykłady związków spoza zakresu objętego ochroną), podano poniżej, których syntezę wykonano zgodnie z procedurami przedstawionymi poniżej.
Zazwyczaj związki o wzorze strukturalnym (II) można wytworzać zgodnie z poniższymi schematami syntezy. Na każdym schemacie opisanym poniżej, należy rozumieć - zgodnie ze stanem techniki - że można zastosować grupy zabezpieczające - tam gdzie zachodzi potrzeba - według ogólnych zasad syntezy chemicznej. Te grupy zabezpieczające są usuwane w ostatnich etapach syntezy w warunkach zasadowych, kwasowych, lub wodorolitycznych, które są łatwo widoczne dla biegłych w sztuce. Stosowanie odpowiednich manipulacji, zabezpieczanie jakichkolwiek funkcji chemicznych oraz synteza związków o wzorze strukturalnym (III) nie są szczególnie przedstawiane w niniejszym tekście i mogą być wykonane sposobami analogicznymi do schematów przedstawionych poni ż ej.
O ile nie zaznaczono inaczej, wszystkie substancje wyjściowe otrzymano od dostawców handlowych i użyto bez dalszego oczyszczania. Wszystkie mieszaniny reakcyjne i frakcje chromatograficzne analizowano metodą chromatografii cienkowarstwowej na płytkach z żelem krzemionkowym 250 mm wizualizowanych w świetle UV (nadfiolet) w oparach I2 (jod). Produkty i półprodukty oczyszczano przez chromatografię typu „flash” lub HPLC z odwróconymi fazami.
Związki o ogólnym wzorze strukturalnym (II) można wytworzyć, np. przez poddanie najpierw dwupodstawionego benzaldehydu (1) reakcji z 2-butanonem, a następnie według schematu reakcji przedstawionego poniżej. Inne drogi syntezy są także znane i dostępne biegłym w sztuce. Np. patrz Feldman i in., Opis patentowy USA nr 5665754, włączony do niniejszego tekstu jako odniesienie, odnośnie różnych poszczególnych reakcji i metod syntezy ujawnionych przy Półproduktach i Przykładach przedstawionych poniżej.
PL 202 227 B1 /CH2OCH3 XCH2Si(CH3)3
C2HjOH ch3 cch2ch3 cf3co2h
CH2Cl2
0°C coch3 ch3cn
NaBHi
THF
HCl(g)
-4°C
Powyższy schemat reakcji dostarcza związku (5) o wzorze strukturalnym (II), w którym R1 i R2 3 4 5 są określone przez wyjściowy benzaldehyd, R3 oznacza C(=O)OCH3, R4 oznacza atom wodoru, R5 oznacza metyl, R6 oznacza atom wodoru, R7 oznacza metyl, a R10 oznacza atom wodoru. Odpowiedni wybór substancji wyjściowych, lub wykonanie reakcji przemiany związku (5) daje związki o ogólnym
7 10 wzorze strukturalnym (II) mającym inne podawane podstawniki R1 do R7 i R10.
Poniższe ilustruje syntezę różnych półproduktów i związków o wzorze strukturalnym (II). Poniższe przykłady podano dla ilustracji i nie należy ich rozumieć jako ograniczających.
We wzorach w niniejszym zgłoszeniu, w przypadku wiązania nie mającego podstawnika, podstawnik oznacza metyl, np.:
PL 202 227 B1
W przypadku, gdy nie wskazano podstawnika przyłączonego do atomu węgla lub azotu, należy rozumieć, że atom węgla zawiera odpowiednią liczbę atomów wodoru.
Stosuje się także skróty dobrze znane osobie o zwykłej biegłości w sztuce, np. „Me” oznacza metyl, „OMs” - mezylan, „Ph” - fenyl, „CH2CI2” - chlorek metylenu „NaOH” wodorotlenek sodu, „EtOAc” - octan etylu, „NH4OH” wodorotlenek amonu, „Mech” - metanol, „LiOH” - wodorotlenek litu, „CsCO3” - węglan cezu, „H2” - wodór - gaz, „TFA” - kwas trifluorooctowy, „OAc” - octan, „Ac” - acetyl, „t-Bu” - trzeciorzędowy butyl, „sat.” - nasycony, „h” - godz., „g” - gram”, „mmol” - milimol, „równ.” - równoważnik, „M” - molowy, i „N” - normalny.
PL 202 227 B1
I
Ogólny schemat syntezy dla szeregu indanylowego
Półprodukt 45
PL 202 227 B1
Ogólny schemat syntezy dla zmiennych podstawników
Związki VII i VIII Półprodukt 51
PL 202 227 B1
Półprodukt 1.
3-Cyklopropylometoksy-4-metoksybenzaldehyd
Roztwór 3-hydroksy-4-metoksybenzaldehydu (400 g, 2,63 moli) i bromometylocyklopropanu (426 g, 3,2 moli) w 1 L dimetyloformamidu (DMF) mieszano z węglanem potasu (K2CO3) (483 g, 3,5 moli) w 55°C przez 3,5 h. Następnie dodano 1 litr wody, mieszaninę ochłodzono na lodzie i Półprodukt 1 przesączono jako białe ciało stałe (535 g, 99%). m/z 207 (MH+).
3-(Indan-2-yloksy)-4-metoksybenzaldehyd
Procedura Mitsunobu
Roztwór 3-hydroksy-4-metoksybenzaldehydu (15,2 g, 100 mmoli, 1 równ.), 2-indanolu (12,1 g, 90 mmoli, 0,9 równ.) i trifenylfosfiny (26,2 g, 100 mmoli, 1 równ.) w suchym THF (300 ml) poddano działaniu diizopropylazodikarboksylanu (DIAC) (19,6 ml, 100 mmoli, 1 równ.) kroplami. Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze wrzenia przez 16 h, następnie ochłodzono i rozcieńczono eterem dietylowym (500 ml). Roztwór przemyto wodą (2 x 150 ml), 1 M NaOH (4 x 125 ml) i nasyconym roztworem chlorku sodu (NaCl) (2 x 100 ml), osuszono siarczanem sodu (Na2SO4) i zatężono do syropu, który zestalił się po odstawieniu. Substancję stałą zawieszono w Et2O (350 ml) i mieszano przez noc uzyskując małe cząstki. Substancję stałą zebrano przez sączenie próżniowe i rekrystalizowano z etanolu/wody (21,4 g). Przesącz eterowy zatężono i oczyszczono przez chromatografię typu „flash” (żel krzemionkowy, kolumna 7,5 x 35 cm Biotage KP-Sil, wymywana 25% EtOAc w heptanie) uzyskując dodatkowe 5 g Półproduktu 2.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 9,35 (s, 1H), 7,49-7,44 (m, 2H), 7,25-7,16 (m, 4H), 5,97 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 5,29-5,22 (m, 1H), 3,89 (s, 1H), 3,45 (dd, J = 16,7, 6,6 Hz, 2H), 3,24 (dd, J = 16,7, 3,6 Hz, 2H).
13C NMR (75 MHz, CDCl3) δ: 190,9, 155,5, 147,9, 140,4, 130,0, 126,9, 126,8, 124,7, 112,1, 111,0, 78,9, 56,1, 39,7.
PL 202 227 B1
Półprodukt 3
3-(tert-Butoksy)-4-metoksybenzaldehyd
Do poddawanego mieszaniu roztworu izowaniliny (30,4 g, 200 mmoli) w CH2Cl2 (200 ml) w temperaturze pokojowej w atmosferze azotu dodano (2-aza-1-(tert-butoksy)-3-metylobut-1-enylo)(metyloetylo)aminę (nieoczyszczone 40 ml, około 200 mmoli) jako środek alkilujący. Co 2 h dodawano dalszy molowy równoważnik środka alkilującego aż dodano ogółem 5 równoważników. Mieszaninę reakcyjną mieszano jeszcze przez 16 h. TLC w układzie 3/7 EtOAc/heksan wskazało, że reakcja przebiegła w przybliżeniu w 80%. Mieszaninę rozcieńczono CH2Cl2 (500 ml) i przemyto 3 M NaOH (4 x 3 00 ml) by usunąć nieprzereagowaną izowanilinę. Substancje organiczne osuszono nad siarczanem magnezu MgSO4, przesączono i zatężono in vacuo do nieoczyszczonego brązowego oleju, który poddano chromatografii typu „flash” w układzie 3/1 heksan/EtOAc i osuszono in vacuo uzyskując czysty Półprodukt 3 (22,6 g, 54%).
1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 9,84 (s, 1H), 7,60 (d, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,00 (d, 1H), 3,36 (s, 3H), 1,39 (s, 9H).
Półprodukt 4
Ester etylowy kwasu (2E)-3-(3-tert-butoksy-4-metoksyfenylo)-2-metylo-akrylowego
Procedura Hornera-Emmonsa
Do poddawanego mieszaniu roztworu 2-fosfonopropionianu trietylu (25,6 ml, 119,4 mmoli) w THF (120 ml) w 0°C w atmosferze azotu dodano kroplami przez strzykawkę heksametylodisililamid litu (1 M roztwór w THF, 114 ml, 114 mmoli). Po 30 minutach, dodano przez kaniulowanie roztwór Półproduktu 3 (22,6 g, 108 mmoli) w THF (40 ml). Po 2 h w 0°C, TLC w układzie 4/1 heksan/EtOAc wskazało na kompletność reakcji. Mieszaninę reakcyjną częściowo zatężono na wyparce rotacyjnej i podzielono mię dzy EtOAc (500 ml) i wodę (500 ml). Substancje organiczne przemyto nasyconym roztworem NaCl (500 ml), osuszono (MgSO4), przesączono i zatężono in vacuo. Surowy produkt poddano chromatografii typu „flash” w układzie 9/1 heksan/EtOAc uzyskując, po zatężeniu in vacuo, Półprodukt 4 (34,1 g, 93%).
1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 7,60 (s, 1H), 7,16 (d, 1H), 7,12 (s, 1H), 6,91 (d, 1H), 3,83 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 1,37 (s, 9H).
PL 202 227 B1
Półprodukt 5
Kwas (2E)-3-(3-tert-butoksy-4-metoksyfenylo)-2-metylo-akrylowy
Procedura hydrolizy wodorotlenkiem litu
Do poddawanego mieszaniu roztworu Półproduktu 4 (34,1 g, 115 mmoli) w dioksanie (116 ml) w temperaturze pokojowej w atmosferze azotu dodano roztwór monohydratu LiOH (5,87 g, 140 mmoli) w wodzie (116 ml). Mieszaninę reakcyjną ogrzewano w 80°C przez 2 h, następnie pozostawiono do ochłodzenia do temperatury pokojowej. Następnie mieszaninę reakcyjną podzielono między EtOAc (400 ml) i 1 M kwas fosforowy (H3PO4) (400 ml). Substancje organiczne wyodrębniono, przemyto H2O (400 ml) i nasyconym NaCl (400 ml), osuszono (MgSO4), przesączono i zatężono in vacuo uzyskując Półprodukt 5 jako białe ciało stałe (28,2 g, 92%).
1H-NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 7,66 (s, 1H), 7,20 (d, 1H), 7,18 (s, 1H), 6,92 (d, 1H), 3,83 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 1,38 (s, 9H).
Półprodukt 6 (E)-4-(3-Benzyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylobut-3-en-2-on
Procedura katalizowanej kwasem kondensacji aldolowej
Roztwór handlowo dostępnego 3-benzyloksy-4-metoksybenzaldehydu (34 g, 0,14 moli, 1 równ.) i 2-butanonu (50 ml, 0,56 moli, 4 równ.) w suchym THF (50 ml) ochłodzono do -4°C. Gazowy chlorowodór przepuszczano przez szereg minut przez dobrze mieszany roztwór i mieszaninę reakcyjną przykryto i przechowywano w -4°C przez 16 h. Mieszaninę wlano do dobrze poddawanego mieszaniu roztworu chłodzonego lodem nasyconego roztworu wodorowęglanu sodu (NaHCO3) (około 2 l). Jeśli zachodziła potrzeba, pH doprowadzono do >7 stosując nasycony roztwór NaHCO3 i mieszaninę wyekstrahowano EtOAc (3 x 300 ml).
Warstwę EtOAc przemyto NaHCO3 (2 x 200 ml), wodą (2 x 200 ml) i nasyconym NaCl (2 x 200 ml), osuszono Na2SO4 i zatężono do syropu. Surową mieszaninę oczyszczono przez chromatografię typu „flash” (żel krzemionkowy, kolumna 7,5 x 36 cm Biotage KP-Sil, wymywana 25% EtOAc w heptanie) uzyskując Półprodukt 6 (29,1 g, 70%).
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7,46-7,27 (m, 6H), 7,06-6,91 (m, 3H), 3,93 (s, 3H), 2,41 (s, 3H),
1,92 (d, J = 1,1 Hz, 3H).
PL 202 227 B1
Półprodukt 7 (E)-4-[3-(Indan-2-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylo-but-3-en-2-on
Wytworzony z Półproduktu 2 według procedury katalizowanej kwasem kondensacji aldolowej jak dla Półproduktu 6.
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 323,4 (m+1).
Półprodukt 8 (E)-4-(3-Bromo-4-metoksyfenylo)-3-metylobut-3-en-2-on
Wytworzono z 3-bromo-4-metoksybenzaldehydu według katalizowanej kwasem kondensacji aldolowej jak dla Półproduktu 6.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7,66 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,36-7,41 (m, 2H), 6,94 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 3,94 (s, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,06 (d, J = 1,1 Hz, 3H).
Półprodukt 9 (E)-4-(3-Cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-but-3-en-2-on
Wytworzono z Półproduktu 1 przez katalizowaną kwasem kondensację aldolową jak dla Półproduktu 6.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7,45 (br s, 1H), 7,05-6,99 (m, 2H), 6,90 (d, J = 8,26 Hz, 1H), 4,81-4,75, m, (d, 1H), 3,89 (s, 3H), 2,46 (s, 3H), 3H), 1,33-1,79 (m, 6H), 1,56-1.50 (m, 2H).
PL 202 227 B1
Półprodukt 10 (2E)-3-(3-Cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-2-metyloprop-2-enoan etylu
Wytworzono z dostępnego handlowo 3-cyklopentylo-oksy-4-metoksybenzaldehydu według procedury Homera-Emmonsa jak w przypadku Półproduktu 4 uzyskując brązową ciecz (53,4 g, 100%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,64 (s, 1H), 7,01-6,96 (c, 2H), 6,87 (m, 1H), 4,77 (m, 1H), 4,26 (q, 2H), 3,87 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 1,81-1,96 (c, 6H), 1,59-1,53 (c, 2H), 1,34 (t, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 305,3 (m+1).
Półprodukt 11
Kwas (2E)-3-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-2-metyloprop-2-enowy.
Półprodukt 10 (68,4 g; 225 mmoli) shydrolizowano według procedury hydrolizy z użyciem LiOH jak w przypadku Półproduktu 5 uzyskując Półprodukt 11 jako pomarańczowe ciało stałe (55 g, 88%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,76 (s, 1H), 7,06-7,00 (c, 2H), 6,89 (m, 1H), 4,78 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 1,97-1,83 (c, 6H), 1,64-1,61 (c, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, ujemne): Da/e 275,3 (M-1).
Półprodukt 12
Chlorek (2E)-3-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-2-metyloprop-2-enoilowy
Procedura chlorku kwasowego
Do ochłodzonej (0°C), mieszanej zawiesiny Półproduktu 11 (55 g, 199 mmoli) w bezwodnym CH2Cl2 (400 ml) dodano roztwór chlorku oksalilu w CH2Cl2 (109 ml 2,0 M roztworu, 218 mmoli, 1,1 równ.) strzykawką przez 10 minut w atmosferze osuszanej przez chlorek wapnia. Zaobserwowano intensywne wydzielanie pęcherzyków. Uzyskany ciemny roztwór mieszano w 0°C przez 15 minut, następnie strzykawką dodano katalityczną ilość DMF (0,3 ml). Uzyskany roztwór mieszano w 0°C przez 0,5 h, podczas gdy wydzielanie pęcherzyków stało się mniej intensywne, następnie roztwór pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej i mieszano przez noc (17 h). Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono EtOAc (500 ml) i ostrożnie szybko schłodzono wodą (250 ml). Po intensywnym mieszaniu przez 1 h, warstwy rozdzielono i warstwę organiczną przemyto wodą (400 ml) i solanką (400 ml), następnie osuszono (MgSO4), przesączono i zatężono in vacuo uzyskując Półprodukt 12 jako brązowe ciało stałe (57,5 g, 98%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,98 (s, 1H), 7,11-7,02 (s, 2H), 6,92 (m, 1H), 4,79 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 2,01-1,82 (c, 6H), 1,68-1,62 (c, 2H).
PL 202 227 B1
(2E)-3-(3-Indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-2-metyloprop-2-enoan etylu
Wytworzono według procedury Hornera-Emmonsa jak w przypadku Półproduktu 4 z Półproduktu 2.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,64 (d, 1H), 7,28-7,17 (m, 4H), 7,06 (dd, 1H), 7,03 (d, 1H), 6,90 (d, 1H), 5,20 (c, 1H), 4,28 (q, 2H), 3,85 (s, 3H), 3,39 (dd, 2H), 3,26 (dd, 2H), 2,16 (d, 3H), 1,36 (t, 3H).
Półprodukt 14
Kwas (2E)-3-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-2-metylo-prop-2-enowy.
Wytworzono z Półproduktu 13 według procedury hydrolizy z użyciem LiOH jak w przypadku
Półproduktu 5.
1H NMR (d6-DMSO, 400 MHz) δ: 7,56 (s, 1H), 7,25-7,11 (m, 5H), 7,06 (d, 1H), 6,99 (d, 1H), 5,22 (c, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,34 (dd, 2H), 3,03 (d, 2H), 2,06 (s, 3H).
Półprodukt 15
Chlorek (2E)-3-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-2-metyloprop-2-enoilowy
Wytworzono z Półproduktu 14 według procedury chlorku kwasowego jak w przypadku Półproduktu 12.
1H MMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8,01 (s, 1H), 7,29-6,93 (m, 7H), 5,23 (c, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,42 (dd, 2H), 3,23 (dd, 2H), 2,26 (s, 3H).
PL 202 227 B1
3-[(2E)-3-(3-Cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-2-metyloprop-2-enoilo](4R)-4-fenylo-1,3-oksazolidyn-2-on
Procedura acylowania z użyciem oksazolidynonu
Do chłodzonego (-78°C), od góry poddawanego mechanicznie mieszaniu roztworu R-fenylooksazolidynonu (10,0 g, 61,3 mmoli) w suchym tetrahydrofuranie (400 ml) dodano strzykawką w atmosferze azotu roztwór n-butylolitu w mieszaninie heksanów (27 ml 2,5 M roztworu, 1,1 równ.). Uzyskany roztwór mieszano w -78°C przez 0,8 h, następnie dodano przez kaniulę roztwór Półproduktu 12 (19,9 g, 67,4 mmoli, 1,1 równ.) w THF (100 ml). Po mieszaniu w -78°C przez 15 minut, mieszaninę reakcyjną pozostawiono do powolnego ogrzania do 0°C przez 40 minut; w tym czasie mieszanina reakcyjna stała się gęstą zawiesiną. Po mieszaniu w 0°C przez 2,5 h, mieszaninę reakcyjną szybko schłodzono nasyconym, wodnym roztworem chlorku amonu (NH4Cl) (300 ml) i zasadniczą część THF usunięto pod obniżonym ciśnieniem. Pozostałość następnie wyekstrahowano chloroformem (CHCl3) (3 x 700 ml). Połączone warstwy organiczne przemyto wodą (300 ml) i solanką (300 ml), następnie osuszono (MgSO4), przesączono i zatężono in vacuo uzyskując około 33 g jasnopomarańczowego ciała stałego. Substancję zawieszono w 10% EtOAc w heksanie (1,2 l) i intensywnie mieszano przez noc. Uzyskane substancje stałe w postaci drobnego proszku zebrano na lejku Buchnera przy użyciu ssania, następnie osuszono in vacuo uzyskując Półprodukt 16 jako żółtawobrązowy proszek (21,8 g, 88%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,41-7,37 (c, 5H), 7,06 (s, 1H), 7,01-6,97 (c, 2H), 6,86 (m, 1H), 5,54 (t, 1H), 4,77-4,73 (c, 2H), 4,29 (t, 1H), 3,87 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 1,97-1,82 (c, 6H), 1,62-1,56 (c, 2H).
Półprodukt 17
3-[(2E)-3-(3-Indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-2-metyloprop-2-enoil](4R)-4-fenylo-1,3-oksazolidyn-2-on
Wytworzono z Półproduktu 15 według procedury acylowania oksazolidynonu jak w przypadku Półproduktu 16.
PL 202 227 B1 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,43-7,33 (m, 5H), 7,25-7,16 (m, 4H), 7,07-7,03 (m, 2H), 6,39 (d, 1H), 5,54 (dd, 1H), 5,19 (c, 1H), 4,74 (t, 1H), 4,28 (dd, 1H), 3,84 (s, 3H), 3,38 (dd, 2H), 3,24 (ddd, 2H), 2,19 (d, 3H).
(2E)-3-[4-Metoksy-3-(fenylometoksy)fenylo]-2-metyloprop-2-enoan etylu
Wytworzono z 3-benzyloksy-4-metoksybenzaldehydu stosując procedurę Hornera-Emmonsa jak podano dla Półproduktu 4.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,56 (s, 1H), 7,44 (t, 2H), 7,36 (t, 2H), 7,30 (t, 1H), 7,01 (dd, 1H), 6,95 (d, 1H), 6,90 (d, 1H), 5,18 (s, 2H), 4,24 (q, 2H), 3,92 (s, 3H), 1,98 (d, 3H), 1,33 (t, 3H).
Półprodukt 19
Kwas (2E)-3-[4-metoksy-3-(fenylometoksy)fenylo]-2-metyloprop-2-enowy
Wytworzono z Półproduktu 18 według procedury hydrolizy z użyciem LiOH jak w przypadku
Półproduktu 5 i użyto bez charakteryzowania.
Półprodukt 20
Chlorek (2E)-3-[4-metoksy-3-(fenylometoksy)fenylo]-2-metyloprop-2-enoiIowy Wytworzono z Półproduktu 19 według procedury chlorku kwasowego jak w przypadku Półproduktu 12.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,91 (s, 1H), 7,47-7,29 (m, 5H), 7,10 (dd, 1H), 7,00 (d, 1H), 6,95 (d, 1H), 5,20 (s, 2H), 3,95 (s, 3H), 2,04 (s, 3H).
PL 202 227 B1
Półprodukt 21
3-{(2E)-3-[4-Metoksy-3-(fenylometoksy)fenylo]-2-metyloprop-2-enoil}(4R)-4-fenylo-1,3-oksazolidyn-2-on
Wytworzono z Półproduktu 19 według procedury acylowania oksazolidynonu jak w przypadku Półproduktu 16.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,44-7,29 (m, 11H), 7,03-6,39 (m, 3H), 5,52 (dd, 1H), 5,11 (s, 2H),
Półprodukt 22 (2E)-3-[3-(3-tert-Butoksy-4-metoksyfenylo)-2-metyloakryloilo]-4-R-fenyloksazolidyn-2-on Wytworzono z Półproduktu 5 (25,7 g, 97,2 mmoli) według procedury acylowania oksazolidynonu jak w przypadku Półproduktu 16 uzyskując Półprodukt 22 jako prawie białe ciało stałe (39,8 g, wydajność ilościowa).
1H-NMR (CDCl3), 400 MHz) δ: 7,42-7,33 (m, 5H), 7,16 (d, 1H), 7,02 (s, 1H), 6,87 (d, 1H), 5,55 (dd, 1H), 4,73 (dd, 1H), 4,26 (dd, 1H), 3,81 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 1,38 (s, 9H).
PL 202 227 B1
Półprodukt 23 trans-(±)-1-[1-Benzylo-4-(3-benzyloksy-4-metoksy-fenylo)-3-metylopirolidyn-3-ylo]etanon
Cyklizacja ylidu azometyny
Roztwór Półproduktu 6 (15 g, 50,6 mmoli, 1 równ.) i N-(metoksymetylo)-N-(trimetylosililometylo)benzylo-aminy (11,9 g, 50,6 mmoli, 1 równ.) w CH2Cl2 (85 ml) w 0°C poddano działaniu roztworu TFA (1 M roztwór w CH2Cl2, 5 ml, 5,1 mmoli, 0,1 równ.) dodając ten roztwór kroplami. Po mieszaniu w 0°C przez 30 min, mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 16 h. Roztwór poddano działaniu dodatkowej ilości N-(metoksymetylo)-N-(trimetylosililometylo)benzylaminy (6 g, 25,3 mmoli, 0,5 równ.), mieszano 1 h w temperaturze pokojowej i poddano po raz trzeci działaniu N-(metoksymetylo)-N-(trimetylosililometylo)benzylo-aminy (6 g, 25,3 mmoli, 0,5 równ.). Mieszaninę reakcyjną zatężono i pozostałość rozpuszczono w EtOAc (500 ml). Roztwór przemyto 1 N HCl (2 x 60 ml z dodanymi 10 ml nas. NaCl), wodą (250 ml), 1 M NaOH (250 ml), wodą (250 ml), nas. NaCl (2 x 100 ml), osuszono nad Na2SO4 i zatężono in vacuo. Pozostałość oczyszczono przez chromatografię typu „flash” (żel krzemionkowy, kolumna 7,5 x 36 cm Biotage KP-Sil, wymywana 5-10% eteru dietylowego w dichlorometanie) uzyskując Półprodukt 23 jako jasny żółty syrop (17,4 g, 80%).
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7,44-7,22 (m, 10 H), 6,81-6,72 (m, 3H), 5,14 (s, 2H), 3,86 (s, 3H),
3,72-3,67 (m, 2H), 3,58 (d, J = 13,0 Hz, 1H), 3,08 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 2,99 (dd, J = 8,9, 7,8 Hz, 1H), 2,74 (dd, J = 9,1, 7,4 Hz, 1H), 2,33 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 2,15 (S, 3H), 0,68 (s, 3H).
13C NMR (75 MHz, CDCl3) δ: 211,3, 148,4, 147,4, 139,2, 137,2, 132,7, 128,51, 128,50, 128,3, 127,8,. 127,4, 127,0, 121,6, 115,5, 111,2, 71,0, 63,8, 60,0, 59,5, 57,9, 56,0, 47,7, 25,6, 20,6.
Półprodukt 24 trans-(±)-1-{1-Benzylo-4-[3-(indan-2-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidyn-3-ylo}etanon
Wytworzono z Półproduktu 7 według procedury cyklizacji azometyny jak w przypadku Półproduktu 23.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7,38-7,16 (m, 9 H), 6,88 (br 3, 1H), 6,78 (br s, 2H), 5,18-5,13 (m, 1H), 3,82-3,73 (m, 2H), 3,79 (s, 3H), 3,60 (d, J = 13,0 Hz, 1H), 3,41-3,17 (m, 4H), 3,14 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 3,05 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 2,84 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 2,44 (d, J=9,7 Hz, 1H), 2,24 (3, 3H), 0,86 (s, 3H).
PL 202 227 B1
Półprodukt 25
Ester etylowy kwasu (±)-1-benzylo-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidyno-3-karboksylowego.
Wytworzono z Półproduktu 10 według reakcji cyklizacji ylidu azometyny jak w przypadku Półproduktu 23 uzyskując bursztynowy olej (16,7 g, 61% wydajność).
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7,39-7,23 (m, 5H, aromatyczny), 6,91 (s, 1H, aromatyczny), 6,78 (m, 2H, aromatyczny), 4,75 (m, 1H), 4,18 (q, 2H, OEt), 3,86 (m, 1H), 3,81 (s, 3H, OCH3), 3,75 (d, 1H, J = 13,2 Hz), 3,62 (d, 1H, J = 13,2 Hz) 3,20 (d, 1H, J = 9,5 Hz) 3,01 (m, 1H), 2,91 (m, 1H), 2,51 (d, 1H, J = 9,5 Hz), 1,93-1,53 (m, 8H, cyklopentyl), 1,28 (t, 3H, OEt), 0,9 (s, 3H, CH3).
trans-(±)-1-[1-Benzylo-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidyn-3-ylo]etanon Wytworzono według procedury podanej w Opisie patentowym USA Nr 5655754.
(±)-[1-Benzylo-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidyn-3-ylo]metanol
Do mieszanego magnetycznie roztworu Półproduktu 25 (9,32 g, 21,3 mmoli) w suchym toluenie (10 ml) w 0°C dodano wodorek diizobutyloglinu (64 ml, 1,0 M roztwór w CH2Cl2, 63,9 mmoli). Mieszaninę mieszano przez 30 minut w 0°C, następnie w temperaturze pokojowej przez 1 h, i na koniec szybko schłodzono MeOH (20 ml). Następnie dodano 1,0 N roztwór kwasu solnego (HCl) (100 ml) i mieszaninę mieszano jeszcze 30 minut. Fazy rozdzielono i fazę wodną wyekstrahowano CH3Cl (2 x 20 ml). Fazy organiczne przemyto nasyconym roztworem NH4Cl, osuszono nad bezwodnym Na2SO4, a nastę pnie zat ężono uzyskując produkt jako jasnoż ó ł ty olej (8,28g, wydajność 98%).
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7,31-7,14 (m, 5H, aromatyczny), 6,78-6,71 (m, 3H, aromatyczny), 4,76-4,73 (Br, m, 1H), 3,79 (s, 3H, OCH3), 3,71-3,55 (m, 3H), 3,47-3,10 (m, 3H), 2,92 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 2,62 (m, 1H), 3,35-2,33 (m, 2H), 1,89-1,58 (m, 8H, cyklopentyl), 0,52 (s, 3H, CH3).
PL 202 227 B1
Półprodukt 28 (±)-1-Benzylo-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidyno-3-karboksyaldehyd
Roztwór chlorku oksalilu (4,87 ml, 9,73 mmoli) w suchym CH2Cl2 (20 ml) ochłodzono do -78°C w atmosferze azotu i mieszano poddają c działaniu roztworu dimetylosulfotlenku (DMSO, 1,38 ml, 19,5 mmoli) w CH2Cl2 (5 ml). Zaobserwowano wydzielanie gazu. Gdy zakończono dodawanie, roztwór mieszano przez 5 minut, następnie w ciągu 10 minut dodawano roztwór Półproduktu 27 (3,5 g, 8,85 mmoli) w CH2Cl2 (10 ml). Mieszaninę mieszano przez 30 minut, poddano działaniu trietyloaminy (Et3N) (6,7 ml, 44,3 mmoli) i pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej. Do mieszaniny dodano wodę i uzyskane fazy rozdzielono. Fazę wodną wyekstrahowano CH2Cl2 (2 x 50 ml). Połączone fazy organiczne przemyto solanką, osuszono (Na2SO4) i zatężono uzyskując oleisty produkt (3,2 g, 92%).
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 9,63 (s, 1H, CHO), 7,34-7,21 (m, 5H, aromatyczny), 6,78-6,68 (m, 3H, aromatyczny), 4,73 (br. m, 1H), 3,80 (s, 3H, OCH3), 3,78-3,61 (m, 3H), 3,18-3,11 (m, 2H), 2,86-2,81 (m, 1H), 2,58-2,52 (m, 1H), 2,43-2,34 (m, 2H), 1,87-1,59 (m, 8H, cyklopentylo), 0,74 (s, 3H, CH3).
Półprodukt 29 (±)-1-[1-Benzylo-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidyn-3-ylo]-1-hydroksypropan-2-on
Do roztworu eteru etylowo-winylowego (0,95 ml, 9,91 mmoli) w suchym THF (4 ml) w -78°C dodano 1,7M t-butylolitu w pentanie (5,25 ml, 8,93 mmoli) i uzyskany roztwór ogrzano do 0°C. Barwa roztworu zmieniła się z żółtego na bezbarwną. Uzyskany anion winylowy następnie ochłodzono do -78°C i dodano kroplami roztwór Półproduktu 28 (1,95 g, 4,96 mmoli) w THF (10 ml). Uzyskaną mieszaninę mieszano przez 45 minut, szybko schłodzono nasyconym NH4Cl (15 ml) i wyekstrahowano
PL 202 227 B1
Et2O (3 x 30 ml). Połączone ekstrakty organiczne osuszono nad Na2SO4 i zatężono. Surowy produkt rozpuszczono w Et2O i poddano działaniu stężonego kwasu siarkowego (H2SO4) w rozdzielaczu intensywnie wstrząsając. Roztwór Et2O przemyto wodą (30 ml), nasyconym roztworem NaHCO3 (30 ml), osuszono nad Na2SO4 i zatężono. Pozostałość oczyszczono przez chromatografię typu „flash” (żel krzemionkowy, 20% EtOAc-mieszanina heksanów) uzyskując Półprodukt 29 jako pomarańczowy olej (1,36 g, 62% wydajność).
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7,34-7,27 (m, 5H, aromatyczny), 6,77-6,68 (m, 3H, aromatyczny), 4,75-4,72 (br. m, 1H), 4,13-4,08 (m, 1H), 3,81 (s, 3H, OCH3), 3,79-3,57 (m, 3H), 3,26 (m, 1H), 2,99 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 2,69-2,64 (m, 1H), 2,39 (d, 1H, J = 9,2 Hz) 2,25 (s, 3H, OCH3), 1,94-1,59 (m, 8H, cyklopentylo), 0,69 (s, 3H, CH3).
P r z y k ł a d 1
Ester metylowy kwasu (±)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-(1-hydroksy-1-metyloetylo)-3-metylopirolidyno-1-karboksylowego
Do 3,0 M roztworu bromku metylowomagnezowego (0,6 ml, 1,8 mmoli) w Et2O w 0°C dodano roztwór Półproduktu 36 (0,65 g, 1,73 mmoli) w suchym THF (5 ml), kroplami stosując pompę ze strzykawką. Uzyskaną mieszaninę mieszano w 0°C przez 30 minut, a następnie w temperaturze pokojowej przez 1 h. Mieszaninę reakcyjną następnie szybko schłodzono nasyconym NH4Cl (15 ml) i wyekstrahowano Et2O (2 x 10 ml). Połączone ekstrakty organiczne osuszono nad Na2SO4 i zatężono. Pozostałość oczyszczono przez chromatografię typu „flash” (żel krzemionkowy, 20% EtOAc-mieszanina heksanów, następnie 50%) uzyskując związek tytułowy Przykładu 1 jako pomarańczowy olej (0,37 g, 55%).
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 6,83-6,77 (m, 3H, aromatyczny), 4,75-4,74 (br. m, 1H), 3,83 (s, 3H, OCH3), 3,96-3,50 (m,4H), 3,73 (s, 3H, OCH3), 3,37-3,25 (m, 1H), 1,96-1,59 (m, 8H, cyklopentyl), 1,22 (s, 3H, CH3), 1,07 (s, 6H, CH3).
PL 202 227 B1
Półprodukt 30
2-[1-Benzylo-4-(S)-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksy-fenylo)-3-(S)-metylopirolidyn-3-ylo]propan-2-ol
Półprodukt 33 (0,992 g, 2,52 mmoli) rozpuszczono w THF (7,5 ml) i roztwór ochłodzono do 0°C. Dodano jodek metylowomagnezowy (3,0 M roztwór w eterze, 2,52 ml, 7,6 mmoli) i mieszaninę reakcyjną mieszano w 0°C przez 1,5 h. Dodano nasycony NH4Cl i mieszaninę reakcyjną zatężono in vacuo. Pozostałość rozcieńczono EtOAc i warstwę organiczną przemyto trzykrotnie nasyconym NaHCO3, nasyconym NaCl, następnie osuszono nad Na2SO4 i zatężono in vacuo (0,96 g, 93%).
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 7,33-7,24 (m, 5H), 6,83-6,77 (m, 3H), 3,86-3,74 (m, 7H), 3,68-3,59 (dd, 2H), 3,32 (dd, 1H), 3,24 (d, 1H), 2,48 (dd, 1H), 2,16 (d, 1H), 1,35-1,28 (m, 1H), 1,21-1,18 (m, 5H), 0,66-0,60 (m, 2H), 0,56 (s, 3H), 0,38-0,33 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 410,5 (m+1).
Półprodukt 31
2-[4-(S)-(3-Cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)-metylopirolidyn-3-ylo]propan-2-ol
Półprodukt 30 (0,96 g, 2,3 mmoli) rozpuszczono w metanolu (10 ml) i roztwór poddano działaniu katalizatora Pearlmana (20% Pd(OH)2 na węglu, 200 mg) i mrówczanu amonu (1,0 g, 15,8 mmoli). Roztwór ogrzewano w temperaturze wrzenia przez 6 h. Katalizator usunięto przez sączenie i roztwór zatężono in vacuo. Pozostałość rozpuszczono w EtOAc i przemyto trzykrotnie wodą, nasyconym NaCl, osuszono nad Na2SO4 i zatężono in vacuo, (384 mg, 52%).
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) 5: (6,83-6,79 (m, 3H), 3,86-3,80 (m, 5H), 3,75-3,66 (m, 2H), 3,57-3,51 (m, 2H), 3,22-3,17 (m, 1H), 2,78-2,67 (m, 1H), 1,34-1,21 (m, 7H), 0,69 (s, 3H), 0,66-0,60 (m, 2H), 0,37-0,33 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 320,3(m+1).
PL 202 227 B1
Półprodukt 32
2-Benzyloksy-1-[4-(S)-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(1-hydroksy-1-metyloetylo)-3-(S)-metylopirolidyn-1-ylo]etanon
Półprodukt 31 (75 mg, 0,23 mmoli) rozpuszczono w CH2Cl2 (1 ml) i roztwór poddano działaniu
N,N-diizopropyloetylaminy (DIEA) (61 pl, 0,35 mmoli), a następnie ochłodzono do 0°C. Dodano chlorek benzyloksyacetylu (55,6 pl, 0,23 mmoli) i roztwór mieszano w 0°C przez 3 h. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono CH2Cl2 i przemyto trzykrotnie 1 N HCl, jeden raz wodą, trzykrotnie 6% NaHCO3, następnie osuszono Na2SO4 i zatężono in vacuo. Surowy produkt (103 mg) poddano chromatografii z użyciem układu EtOAc/heksan (1:1) uzyskując Półprodukt 32 (21 mg, 19%).
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 7,41-7,27 (m, 5H), 6,85-6,76 (m, 3H), 4,66-4,61 (m, 2H), 4,13-4,07 (m, 2H), 3,94-3,59 (m, 7H), 3,53-3,47 (m, 1H), 3,28-3,22 (m, 1H), 1,34-1,24 (m, 2H), 1,24-1,19 (m, 2H), 1,14-1,11 (m, 2H), 1,07-0,98 (m, 6H), 0,66-0,59 (m, 2H), 0,36-0,31 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 468,3 (m+1).
P r z y k ł a d 2
1-[4-(S)-(3-Cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(1-hydroksy-1-metyloetylo)-3-(S)-metylopirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon
Półprodukt 32 (21 mg, 45 pmoli) rozpuszczono w etanolu (95%, 2 ml) i poddano działaniu katalizatora Pearlmana (20% Pd(OH)2 na węglu, 20 mg). Roztwór poddano działaniu 1 atm H2 przez 20 h. Katalizator usunięto przez sączenie i zatężono in vacuo, uzyskując związek tytułowy Przykładu 2 (15 mg, 88%).
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 6,87-6,80 (m, 3H), 4,20-4,09 (m, 2H), 3,89-3,62 (m, 9H), 3,58-3,51 (m, 1H), 3,13-2,87 (m, 2H), 1,35-1,01 (m, 10H), 0,67-0,61 (m, 2H), 0,39-0,33 (2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 378,4 (m+1).
PL 202 227 B1
Półprodukt 33
1-[1-Benzylo-4-(S)-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksy-fenylo)-3-(S)-metylopirolidyn-3-ylo]etanon Chlorek oksalilu (2,0 M roztwór w CH2Cl2, 1,35 ml, 2,7 mmoli) dodano do CH2Cl2 (4 ml) i roztwór ochłodzono do -60°C. Powoli dodano roztwór DMSO (0,36 ml, 5,0 mmoli) w CH2Cl2 (1,5 ml). Roztwór ten mieszano przez 5 minut, następnie dodano do roztworu Półproduktu 66 (1,06 g, 2,7 mmoli) rozpuszczonego w CH2Cl2 (7,5 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 30 minut w -60°C, następnie szybko schłodzono Et3N (1,9 ml). Mieszaninę pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej, rozcieńczono wodą i po intensywnym mieszaniu przez kilka minut, warstwy rozdzielono. Warstwę organiczną przemyto trzykrotnie 1 N HCl, trzykrotnie 6% NaHCO3, następnie osuszono nad Na2SO4 i zatężono in vacuo. Półprodukt 33 odzyskano i użyto bez oczyszczania (0,992 g, 93%).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 392,4 (m+1).
Półprodukt 34
Ester metylowy kwasu trans-(±)-[3-acetylo-4-(3-benzyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo]pirolidyno-1-karboksylowego
Roztwór Półproduktu 23 (17,4 g, 40,5 mmoli, 1 równ.) w acetonitrylu (150 ml) poddano działaniu chloromrówczanu metylu (15,6 ml, 202,5 mmoli, 5 równ.), następnie mieszano w temperaturze wrzenia przez 1 h. Mieszaninę reakcyjną zatężono i pozostałość oczyszczono przez chromatografię typu „flash” (żel krzemionkowy, kolumna 7,5 x 36 cm Biotage KP-Sil, wymywana 50-60% EtOAc w heptanie) uzyskując Półprodukt 34 jako bezbarwny syrop (13,7 g, 85%).
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7,42-7,27 (m, 5H), 6,82 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,69 (br d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,63 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 5,15 (s, 2H), 3,88 (s, 3H), 3,84 (dd, J = 16,3, 11,0 Hz, 1H), 3,73 (br s, 3H), 3,24/3,12 (2 d, J = 11, 31/11,0 Hz, 1H), 2,09/2,01 (2s, 3H), 0,84 (s, 3H).
13C NMR (75 MHz, CDCl3) δ: 210,0/209,8, 155,2, 149,0, 147,5, 137,0, 130,5/130,0, 123,5, 127,8, 127,2/127,1, 121,2/121,0, 114,9/114,8, 111,5, 70,9, 58,1/57,2, 55,9, 54,4/54,0, 52,5, 50,2/50,0, 48,4/48,0, 26,3, 17,5.
Półprodukt 35
Ester metylowy kwasu trans-(±)-3-acetylo-4-[3-(indan-2-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidyno-1-karboksylowego
Wytworzono z Półproduktu 24 według procedury chloromrówczanu metylu jak w przypadku Półproduktu 34.
PL 202 227 B1 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7,24-7,16 (m, 4H), 6,82 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,75-6,72 (m, 2H), 5,18-5,10 (m, 1H), 3,91 (t, J = 11,2 Hz, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,77-3,65 (m, 3H), 3,74 (s, 3H), 3,42-3,16 (m, 5H), 2,17 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,04 (s, 3H).
13C NMR (75 MHz, CDCl3) δ: 210,1/209,9, 155,3, 149,4, 146,9/146,8, 140,5/140,4, 130,5/130,0, 126,7, 124,7, 121,3/121,1, 116,1/115,8, 111,9, 79,2, 58,2/57,4, 55,9, 54,7/54,2, 52,6, 50,2/50,0, 48,5/48,1, 39,7, 26,6/26,5, 17,8.
Półprodukt 36
Ester metylowy kwasu trans-(±)-3-acetylo-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksy-fenylo)-3-metylopirolidyno-1-karboksylowego
Wytworzono według procedury podanej w Opisie patentowym USA Nr 5665754. Racemiczna forma Półproduktu 46.
Półprodukt 37
Ester metylowy kwasu trans-(±)-[3-acetylo-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo]pirolidyno-1-karboksylowego
Roztwór Półproduktu 34 (8,7 g, 21,9 mmoli) w etanolu (50 ml) wytrząsano przez 16 h pod ciśnieniem H2 (50 psi) w obecności katalizatora palladu na węglu (0,5 g, 10% Pd/C). Katalizator odsączono przez warstwę ziemi okrzemkowej, a następnie filtr membranowy 0,22 μm. Przesącz zatężono in vacuo uzyskując Półprodukt 37 jako klarowny syrop (6,5 g, 97%).
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 6,79 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,74 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 6,63 (br d, J = = 8,3 Hz, 1H), 6,04 (br s, 1H), 3,96-3,85 (m, 1H), 3,87 (s, 3H), 3,75/3,73 (2 s, 3H), 3,74-3,59 (m, 3H), 3,36/3,26 (2 d, J = 11,2/11,0 Hz, 1H), 2,17/2,15 (2 s, 3H), 1,01 (s, 3H).
13C NMR (75 MHz, CDCl3) δ: 210,0/209,8, 155,3, 145,9/145,8, 145,5, 131,2/130,8, 119,9, 114,5,
110,6, 58,1/57,2, 55,8, 54,4/53,9, 52,5, 50,3/50,1, 48,4/48,0, 26,3, 17,6.
PL 202 227 B1
Półprodukt 38
Ester metylowy kwasu trans-3-acetylo-4-[exo-3-(bicyklo[2,2,1]hept-2-ylo-oksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidyno-1-karboksylowego
Wytworzono według procedury Mitsunobu jak w przypadku Półproduktu 2 z Półproduktu 37 i endo-norborneolu (wydajność 36%).
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 6,80 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,66 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 6,62 (s, 1H), 4,15-4,08 (m, 1H), 3,95-3,86 (m, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,74 (s, 3H), 3,73-3, 60 (m, 3H), 3,37/3,28 (2 d, J = = 11,2/10,8 Hz, 1H), 2,47 (br s, 1H), 2,32 (brs, 1H), 2,17/2,15 (2s, 3H), 1,76-1,66 (m, 2H), 1,63-1,45 (m, 3H), 1,28-1,08 (m, 3H), 1,02/1,01 (2 s, 3H).
13C NMR (75 MHz, CDCl3) δ: 210,5/210,3, 155,7, 149,6, 147,4, 130,8/130,76, 130,3, 120,9/120,7/ /120,5, 115,6/115,4/115,3/115,2, 112,2, 81,5, 58,6/57,8, 56,4, 54,9/54,6, 52,9, 50,6/50,5, 49,1/49,0/48,7, 41,5, 40,4, 35,8/35,7, 28,8, 26,9/26,8, 24,7/24,6, 18,2.
Ester metylowy kwasu trans-[3-acetylo-4-[4-metoksy-3-(1-metylo-3-fenylo-propoksy)fenylo]-3-metylopirolidyno-1-karboksylowego
Wytworzono według procedury Mitsunobu jak w przypadku Półproduktu 2 z Półproduktu 37 i 4-fenylo-2-butanolu.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7,29-7,15 (m, 5H), 6,82 (d, J = 8,3 Hz), 6,72-6,63 (m, 2H), 4,33-4,25 (m, 1H), 3,94-3,59 (m, 4H), 3,84 (s, 3H), 3,74 (br s, 3H), 3,36/3,27 (2 dd, J = 11,2, 3,0/10,9, 3,9 Hz, 1H), 2,88-2,69 (m, 2H), 2,18-2,06 (m, 4H), 1,95-1,82 (m, 1H), 1,33/1,31 (2d, J = 2,3/2,3 Hx, 3H), 1,01/0,99 (2s, 3H).
13C NMR (75 MHz, CDCl3) δ: 209,9, 155,4, 149,8, 147,1, 141,9, 130,4/129,9, 128,5, 128,4, 125,8, 121,2, 116,9, 111,9, 74,8, 58,1/57,3, 55,9, 54,6/-54,3, 52,6, 50,2/50,1, 48,6/48,2, 38,1, 31,8,
26,6, 19,9, 17,7.
PL 202 227 B1
Półprodukt 40
Ester metylowy kwasu trans-(+)-3-acetylo-4-(4-metoksy-3-fenetyloksy-fenylo)-3-metylopirolidyno-1-karboksylowego
Wytworzono według procedury Mitsunobu jak w przypadku Półproduktu 2 z Półproduktu 37 i 2-fenyloetanolu.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7,36-7,23 (m, 5H), 6,82 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,66 (s, 1H), 4,18 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 3,92-3,81 (m, 1H), 3,86 (s, 3H), 3,76-3,61 (m, 3H), 3,73 (s, 3H), 3,40/3,27 (2 d, J = 11,2/10,9 Hz, 1H), 3,15 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 2,16/2,12 (2 s, 3H), 1,00 (s, 3H).
Półprodukt 41
Ester metylowy kwasu trans-3-acetylo-4-[4-metoksy-3-(tetrahydrofuran-3-yloksy)fenylo]-3-metylopirolidyno-1-karboksylowego
Wytworzono według procedury Mitsunobu jak w przypadku Półproduktu 2 z Półproduktu 37 i 3-hydroksytetrahydrofuranu.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 6,85-6,63 (m, 3H), 4,92-4,88 (m, 1H), 4,07-3,62 (m, 8H), 3,84 (s, 3H), 3,75 (s, 3H), 3,39/3,29 (2 d, J = 11,2/10,2 Hz, 1H), 2,19-2,14 (m, 5H), 1,02 (br s, 3H).
13C NMR (75 MHz, CDCl3) δ: 210,0/209,9, 155,4, 149,5, 146,5, 130,0, 121,6/121,5, 116,5/116,4//116,3, 112,0, 111,0, 78,9, 73,0, 67,2, 58,1/57,3, 55,9, 54,7/54,3, 52,6, 50,1/50,0, 48,4/48,0, 33,0,
26,6, 17,8.
PL 202 227 B1
Półprodukt 42 (4R)-3-{[(3S,4S)-4-(3-Cyklopentyloksy-4-metoksy-fenylo)-3-metylo-1-benzylopirolidyn-3-ylo]karbonylo}-4-fenylo-1,3-oksazolidyn-2-on
Do ochłodzonej (-4°C), poddawanej mieszaniu zawiesiny acylooksazolidynonu (9,30 g, 22,8 mmoli) i N-(metoksymetylo)-N-(trimetylsililometylo)benzylaminy (11,7 ml, 45,6 mmoli, 2 równ.) w CHCl3 (65 ml) dodano strzykawką w atmosferze azotu roztwór TFA w CHCl3 (4,6 ml 1,0 M roztworu, 4,6 mmoli, 0,2 równ.). Uzyskaną zawiesinę mieszano w około 0°C przez 4 h, następnie w około 15°C przez noc (łaźnia wodna). Uzyskany nieprzeźroczysty roztwór następnie ponownie ochłodzono do -4°C, poddano działaniu dodatkowej porcji N-(metoksymetylo)-N-(trimetylsililometylo)benzylaminy (5,9 ml, 22,8 mmoli, 1 równ.) podanej strzykawką i pozostawiono mieszając jeszcze przez 5 h; w tym czasie mieszanina reakcyjna stała się jednorodna. TLC (5% Et2O w CH2Cl2) wykazała, że reakcja była zupełna. Zasadniczą część CHCl3 usunięto pod obniżonym ciśnieniem, a pozostałość rozcieńczono EtOAc (250 ml) i przemyto kolejno 1 N wodnym HCl (2 x 50 ml), 1 N wodnym NaOH (50 ml) i solanką (50 ml). Warstwę organiczną następnie osuszono (MgSO4), przesączono i zatężono in vacuo uzyskując pomarańczową substancję pół-stałą (13,9 g). Oczyszczanie przez chromatografię typu „flash” na żelu krzemionkowym (2% eteru w CH2Cl2) dało główny diastereizomer jako białą piankę (8,25 g, 65%). Selektywność diastereizomeryczna: około 10:1 (HPLC).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,42-7,21 (c, 10H), 6,95 (s, 1H), 6,81 (s, 2H), 5,55 (dd, 1H), 4,74 (t, 1H), 4,68 (m, 1H), 4,10 (dd, 1H), 3,93 (t, 1H), 3,70 (d, 1H), 3,68 (s, 3H), 3,56 (d, 1H), 3,42 (d, 1H), 2,72 (m, 2H), 2,64 (d, 1H), 2,48 (m, 1H), 1,85-1,78 (c, 2H), 1,75-1,61 (c, 4H), 1,57-1,53 (c, 2H), 0,96 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 555,2 (m+1).
Półprodukt 43
Kwas (3S,4S)-1-benzylo-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksy-fenylo)-3-metylopirolidyno-3-karboksylowy
Zawiesinę nadtlenku litu (0,5 g, 10,8 mmoli) w wodzie-THF (1:1, 6 ml) dodano do roztworu Półproduktu 42 (3,0 g, 5,4 mmoli) w wodzie-THF (3:1, 30 ml) w 0°C w atmosferze azotu. Zawiesina uległa natychmiast solubilizacji. Po 1 h mieszania w 0°C, dodano wodny roztwór siarczynu sodu (Na2SO3) (1,5 N, 12 ml), by „zgasić” nadmiar nadtlenku i usunięto THF pod obniżonym ciśnieniem. Pozostałość zasadową wyekstrahowano trzema porcjami 30 ml CH2Cl2. Fazę wodną zakwaszono do pH 1 wodnym 1,0 N roztworem HCl i wyekstrahowano trzema porcjami 30 ml Et2O. Ekstrakty eterowe osuszono (Na2SO4), zatężono pod obniżonym ciśnieniem i użyto bez dalszego oczyszczania.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 10,73 (br. s, 1H, COOH), 7,69 (br. s, 2H, aromatyczny), 7,38-7,36 (m, 3H, aromatyczny), 6,78 (s, 1H, aromatyczny), 6,69 (m, 2H, aromatyczny), 4,71 (br. s, 1H), 4,51-4,48 (m, 2H), 4,24-4,11 (br. s, 2H), 4,08-3,88 (br. s, 1H), 3,76 (s, 3H, OCH3), 3,54 (br. s, 1H), 3,1 (br. s, 1H), 1,83-1,52 (m, 8H, cyklopentylo), 1,05 (br. s, 3H, CH3).
PL 202 227 B1
Półprodukt 44
Metoksymetyloamid kwasu (3S,4S)-1-benzylo-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksy-fenylo)-3-metylopirolidyno-3-karboksylowego
Półprodukt 44 wytworzono z Półproduktu 43 (2,1 g, 4,98 mmoli), 1,1'-karbonylodiimidazolu (0,89 g, 5,47 mmoli) i chlorowodorku N,O-dimetylohydroksylaminy (0,73 g, 7,47 mmoli) uzyskując Półprodukt 44 (0,9 g, 40%) jako biały krystaliczny proszek.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7,4-7,3 (m, 5H, aromatyczny), 7,06 (d, 1H, J = 1,7 Hz, aromatyczny), 6,89 (dd, 1H, J = 8,3 Hz, aromatyczny), 6,73 (d, 1H, J = 8,3 Hz, aromatyczny), 4,77-4,75 (m, 1H), 4,16-4,06 (m, 1H), 3,81 (s, 3H, OCH3), 3,81-3,71 (m, 2H), 3,60 (s, 3H, OCH3), 3,21(3, 3H, NCH3), 2,96 (d, 1H, J = 9,6 Hz,), 2,91 (m, 1H) , 2,78 (d, 1H, J=9,6 Hz,), 2,77 (m, 1H), 2,04 (s, 3H, CH3), 1,92-1,59 (m, 8H, cyklopentyl), 0,94 (s, 3H, CH3).
Półprodukt 45
1-[(3S,4S)-1-Benzylo-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidyn-3-ylo]etanon
Roztwór Półproduktu 44 (0,17 g, 0,43 mmoli) w THF (8 ml) ochłodzono do -78°C i poddano działaniu metylolitu (1,5 M roztwór w THF, 0,315 ml, 0,47 mmoli) w atmosferze azotu. Roztwór mieszano przez 40 minut w -78°C, następnie szybko schłodzono zimnym nasyconym wodnym roztworem NH4Cl (8 ml). Dodano mieszaninę heksanów/CH2Cl2 (3:1, 8 ml) przy intensywnym mieszaniu. Po dalszym rozcieńczeniu dalszą ilością heksanów/CH2Cl2 (3:1, 10 ml), dodano solankę (10 ml) i dwie warstwy rozdzielono. Warstwę wodną przemyto CH2Cl2 (8 ml), a połączone ekstrakty organiczne przemyto solanką, osuszono (Na2SO4), przesączono i zatężono pod obniżonym ciśnieniem do produktu w postaci oleju (154 mg, 89%).
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7,39-7,24 (m, 5H, aromatyczny), 6,82-6,70 (m, 3H, aromatyczny), 4,74 (br. s, 1H), 3,81 (s, 3H, OCH3), 3,78-3,58 (m, 3H), 3,14 (d, 1H, J = 9,7 Hz ), 3,05 (m, 1H), 2,84 (m, 1H), 2,40 (d, 1H, J = 9,7 Hz), 2,23 (s, 3H, CH3), 1,92-1,59 (m, 8H, cyklopentylo), 0,83 (s, 3H, CH3).
o,
o .0 o
PL 202 227 B1
Półprodukt 46
Ester metylowy kwasu (3S,4S)-3-acetylo-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksy-fenylo)-3-metylopirolidyno-1-karboksylowego
Do poddawanego mieszaniu roztworu Półproduktu 45 (0,154 g, 0,38 mmoli) w bezwodnym acetonitrylu (10 ml) dodano chloromrówczan metylu (0,146 ml, 1,89 mmoli). Roztwór ogrzewano do 80°C oraz ogrzewano w temperaturze wrzenia przez 3 h. Roztwór następnie ochłodzono do temperatury pokojowej i zatężono pod obniżonym ciśnieniem. Oczyszczanie przez HPLC z odwróconymi fazami dało Półprodukt 46 jako olej (93 mg, 65%). Skręcalność właściwa: [a]25923 = +2, 5 (c = 1,0, EtOH).
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 6,8 (d, 1H, J = 8,0 Hz, aromatyczny), 6,66 (d, 1H, J=8,0 Hz, aromatyczny), 6,66 (s, 1H, aromatyczny), 4,73 (s, 1H), 3,95-3,64 (m, 4H), 3,83 (s, 3H, OCH3), 3,74 (s, 3H, OCH3), 3,37 i 3,27 (s, 3H, CH3), 2,17 i 2,14 (s, 3H, CH3), 1,92-1,59 (m, 3H, cyklopentylo), 1,03 i 1,02 (s, 3H, CH).
Półprodukt 47 (3S,4S)-4-(3-Cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-benzylopirolidyno-3-karboaldehyd
Ogólna procedura redukcji/utleniania oksazolidynonu
Do ochłodzonego (-78°C), poddawanego mieszaniu roztworu Półproduktu 42 (15,09 g, 27,2 mmoli) w toluenie (250 ml) dodano strzykawką w atmosferze azotu roztwór wodorku litowo-glinowego w tetrahydrofuranie (16,3 ml 1,0 M roztworu, 16,3 mmoli, 0,6 równ.). Zaobserwowano intensywne wydzielanie pęcherzyków. Uzyskany roztwór mieszano w -78°C przez 2 h, po którym to czasie łaźnię chłodzącą usunięto. Mieszaninę reakcyjną szybko schłodzono kolejnym dodawaniem wody (0,62 ml), 15% wodnego roztworu NaOH (0,62 ml) i wody (1,9 ml). Uzyskaną mieszaninę pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej, mieszano przez 30 minut, a następnie rozcieńczono Et2O (500 ml) i osuszono (MgSO4). Sączenie i zatężenie in vacuo dało alkohol (z obecnością pewnej ilości aldehydu) w postaci substancji półstałej (14,8 g). Substancję tę użyto bezpośrednio bez dalszego oczyszczania.
Do ochłodzonego (-78°C), poddawanego mieszaniu roztworu chlorku oksalilu w CH2Cl2 (10,9 ml 2,0 M roztworu, 21,8 mmoli, 0,8 równ.) w dalszej ilości CH2Cl2 (75 ml) dodano strzykawką w atmosferze azotu DMSO (3,1 ml, 43,5 mmoli, 1,6 równ.). Po mieszaniu w -78°C przez 20 minut, dodano przez kaniulę roztwór surowego alkoholu w CH2Cl2 (75 ml). Uzyskany żółty roztwór mieszano w -78°C przez 20 minut, następnie dodano przez strzykawkę Et3N (15,2 ml, 109 mmoli, 4 równ.). Mieszaninę reakcyjną mieszano w -78°C przez 20 minut, następnie ogrzano do temperatury pokojowej i mieszano przez dodatkową 1 h. Mieszaninę reakcyjną szybko schłodzono przez dodanie solanki (150 ml), a następnie wyekstrahowano CH2Cl2 (2 x 100 ml). Połączone warstwy organiczne osuszono (MgSO4), przesączono i zatężono in vacuo uzyskując surowy aldehyd. Oczyszczanie przez chromatografię typu „flash” na żelu krzemionkowym (25% EtOAc w mieszaninie heksanów) dało aldehyd jako klarowny, bezbarwny olej (9,8 g, 92%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 9,64 (s, 1H), 7,37-7,26 (c, 5H), 6,78-6,76 (c, 2H), 6,70 (m, 1H), 4,74 (m, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,70 (m, 1H), 3,64-3,62 (c, 2H), 3,18-3,13 (c, 2H), 2,84 (t, 1H), 2,41 (d, 1H), 1,94-1,83 (c, 6H), 1,63-1,59 (c, 2H), 0,74 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 394,3 (m+1).
PL 202 227 B1
Półprodukt 48 (4R)-3-{[(3S,4S)-4-(3-Indan-2-yloksy-4-metoksy-fenylo)-3-metylo-1-benzylopirolidyn-3-ylo]karbonylo}-4-fenylo-1,3-oksazolidyn-2-on
Wytworzono według procedury cykloaddycji azometyny jak w przypadku Półproduktu 23 z Półproduktu 17.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,45-7,12 (m, 15H), 6,95 (d, 1H), 6,78 (d, 1H), 5,54 (dd, 1H), 5,17 (c, 1H), 4,69 (t, 1H), 4,22 (dd, 1H), 4,11 (t, 1H), 3,84-3,60 (m, 5H), 3,51 (d, 1H), 3,37 (dt, 2H), 3,21 (dd, 2H), 2,90 (d, 1H), 2,85 (dd, 1H), 2,76 (dd, 1H), 1,12 (s, 3H).
Półprodukt 49 (3S,4S)-4-(3-Indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-benzylopirolidyno-3-karboaldehyd
Wytworzono z Półproduktu 48 według procedury redukcji/utleniania jak w przypadku Półproduktu 47.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 9,65 (s, 1H), 7,36-7,17 (m, 9H), 6,84 (d, 1H), 6,79 (d, 1H), 6,76 (dd, 1H), 5,16 (c, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,76 (d, 1H), 3,68-3,63 (c, 1H), 3,40-3,31 (m, 2H), 3,24-3,13 (m, 2H), 2,85 (dd, 1H), 2,43 (d, 1H), 0,77 (s, 3H).
PL 202 227 B1
Półprodukt 50 (1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-Indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-benzylopirolidyn-3-ylo]etan-1-ol Żądany, bardziej polarny diastereizomer.
Wytworzono według procedury addycji Grignarda jak w przypadku Półproduktu 56 z Półproduktu 49. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,39-7,17 (m, 9H), 6,84-6,77 (m, 3H), 5,17 (c, 1H), 3,80 (s, 3H),
3,72-3,57 (m, 4H), 3,38-3,19 (m, 5H), 3,11 (d, 1H), 2,57 (t, 1H), 2,12 (d, 1H), 1,15 (d, 3H), 0,51 (s, 3H).
Półprodukt 51 (1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-Indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidyn-3-ylo]etan-1-ol Wytworzono według procedury debenzylowania jak w przypadku Półproduktu 31 z Półproduktu 50. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,26-7,16 (m, 4H), 6,81 (s, 3H), 5,19 (c, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,74-3,68 (m, 2H), 3,44-3,17 (m, 8H), 2,66 (d, 1H), 2,51 (brs, 1H), 1,18 (d, 3H), 0,63 (s, 3H).
Półprodukt 52 (4R)-3-({(3S,4S)-4-[4-Metoksy-3-(fenylometoksy)-fenylo]-3-metylo-1-benzylopirolidyn-3-yl}karbonylo)-4-fenylo-1,3-oksazolidyn-2-on (Główny diastereizomer)
Wytworzono według procedury cykloaddycji jak w przypadku Półproduktu 23 z Półproduktu 21.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,49-7,23 (m, 15H), 7,09 (d, 1H), 6,94 (dd, 1H), 6,80 (d, 1H), 5,49 (dd, 1H), 5,17 (s, 2H), 4,66 (t, 1H), 4,19 (dd, 1H), 4,09 (t, 1H), 3,87 (s, 3H), 3,68 (q, 2H), 3,51 (d, 1H), 2,85-2,79 (m, 2H), 2,69 (dd, 1H), 0,99 (s, 3H).
PL 202 227 B1
Półprodukt 53 (3S/4S)-4-(4-Metoksy-3-(fenylometoksy)fenylo)-3-metylo-1-benzylopirolidyno-3-karboaldehyd
Wytworzono według procedury redukcji/utleniania jak w przypadku Półproduktu 47 z Półproduktu 52.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 9,56 (s, 1H), 7,43-7,22 (m, 10H), 6,79 (d, 1H), 6,77 (d, 1H), 6,71 (dd, 1H), 5,14 (dd, 2H), 3,86 (s, 3H), 3,71 (d, 1H), 3,62 (d, 1H), 3,57 (d, 1H), 3,13-3,08 (m, 2H), 2,73 (dd, 1H), 2,30 (d, 1H), 0,58 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): m/z 416,3 (m+1).
Półprodukt 54
3-[1-Benzylo-4-S-(3-tert-butoksy-4-metoksyfenylo)-3-S-metylopirolidyno-3-karbonylo]-4-R-fenylo-oksazolidyn-2-on
Do poddawanego mieszaniu roztworu Półproduktu 22 (39,8 g, 97 mmoli) w CHCl3 (292 ml) w 0°C w atmosferze azotu dodano N-(metoksymetylo)-N-(trimetylo-sililometylo)benzylaminę (49,5 ml, 194 mmoli), a następnie kwas TFA (1 M w CHCl3, 9,7 ml, 9,7 mmoli). Zawiesinę pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej przez noc. TLC w układzie 2/3 EtOAc/heksan wskazało częściową przemianę substancji wyjściowej do produktu o nieznacznie wyższym Rf. Uzyskany roztwór poddano działaniu dalszej ilości N-(metoksymetylo)-N-(trimetylsililometylo)-benzylaminy (25 ml, 97 mmoli) zużywając resztkową substancję wyjściową. Po 3 h w temperaturze pokojowej, reakcja okazała się zupełna według TLC. Roztwór zatężono na wyparce rotacyjnej, następnie ponownie rozpuszczono w EtOAc (500 ml). Substancje organiczne przemyto 2 N HCl (2 x 500 ml), 1 N NaOH (2 x 500 ml) i nasyconym NaCl (1 x 500 ml). Substancje organiczne osuszono (MgSO4), przesączono i zatężono in vacuo uzyskując Półprodukt 54 jako w przybliżeniu 12:1 stosunek diastereizomerów. Chromatografia na kolumnie 110 mm x 8'' przy zastosowaniu układu 1/3 EtOAc/heksan dała, po zatężeniu in vacuo zebranych frakcji, Półprodukt 54 (40 g, 76%) jako żółtą piankę.
1H-NMR. (CDCl3, 400 MHz) δ: 7,42-7,20 (m, 10H), 7,11 (s, 1H), 7,05 (d, 1H), 6,76 (d, 1H), 5,53 (dd, 1H), 4,65 (dd, 1H), 4,20 (dd, 1H), 4,08 (dd, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,65 (dd, 2H), 3,51 (d, 1H), 2,82 (dd, 1H), 2,81 (d, 1H), 2,71 (dd, 1H), 1,34 (s, 9H), 1,06 (s, 3H).
PL 202 227 B1
Półprodukt 55 (3R)-4-[3-(tert-Butoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylo-1-benzylopirolidyno-3-karboaldehyd
Do poddawanego mieszaniu roztworu Półproduktu 54 (21,5 g, 39,7 mmoli) w toluenie (400 ml) w -78°C w atmosferze azotu dodano kroplami przez strzykawkę w cią gu 10 minut wodorek litowoglinowy (1 M w THF, 24 ml, 24 mmoli). Po 15 minutach, TLC w układzie 4/1 CH2Cl2/Et2O wykazało całkowite zużycie substancji wyjściowej i pojawienie się substancji o niższym Rf. Ostrożnie przez strzykawkę w -78°C dodano metanol (4 ml) w toluenie (40 ml) przy wydzielaniu gazu. Gdy wydzielanie gazu zakończyło się, mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej, a następnie poddano kolejno działaniu wody (1 ml), 3 N NaOH (2 ml) i wody (1 ml). Po 10 minutach, mieszaninę reakcyjną rozcieńczono Et2O (300 ml) i mieszano przez 15 minut. Dodano siarczan magnezu i mieszaninę przesączono przez bibułę filtracyjną GF/F z Et2O. Surowy produkt zatężono in vacuo i okazało się przy użyciu 1H-NMR, że jest to mieszanina w przybliżeniu 4:1 żądanego aldehydu i zredukowanego alkoholu. Surowy produkt rozpuszczono w CH2Cl2 (40 ml). Oddzielnie, chlorek oksalilu (2 M w CH2Cl2, 11,2 ml, 22,4 mmoli) mieszano w -60°C w atmosferze azotu i poddano działaniu DMSO (3,1 ml, 44 mmoli) w CH2Cl2 (15 ml) (wprowadzonego kroplami przez strzykawkę). Po 5 minutach, roztwór mieszaniny aldehyd/alkohol dodano przez kaniulę do roztworu chlorku oksalilu/DMSO. Mieszaninę reakcyjną mieszano w -60°C przez 45 minut, a następnie poddano działaniu Et3N (13,8 ml, 100 mmoli) i pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej. Roztwór rozcieńczono do 200 ml przy użyciu CH2Cl2 i przemyto wodą (1 x 200 ml), 2 N HCl (2 x 200 ml), nasyconym NaHCO3 (2 x 200 ml) i nasyconym NaCl (1 x 200 ml). Warstwy organiczne osuszono (MgSO4), przesączono i zatężono in vacuo do żółtego oleju, który rozpuszczono w mieszaninie 3/1 heksan/EtOAc. Po rozpuszczeniu, odszczepiony fenylooksazolidynon wytrącił się i usunięto go przez sączenie. Przesącz poddano chromatografii na kolumnie 70 mm x 8 stosując układ 3/1 heksan/EtOAc i uzyskując (po zatężeniu in vacuo frakcji zawierających produkt) czysty Półprodukt 55 jako żółty olej (13,7 g, 90%).
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 9,62 (s, 1H), 7,37-7,22 (m, 5H), 6,32 (s, 1H), 6,84 (d, 1H), 6,79 (d, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,71 (dd, 2H), 3,62 (dd, 1H), 3,17 (dd, 1H), 2,30 (dd, 1H), 2,38 (d, 1H), 1,35 (s, 9H), 0,73 (s, 3H).
Półprodukt 56 (1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-Cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-benzylopirolidyn-3-ylo]etan-1-ol
Procedura addycji Grignarda
Do ochłodzonego (0°C), poddawanego mieszaniu roztworu Półproduktu 47 (0,96 mg, 2,45 mmoli) w suchym Et2O (10 ml) dodano strzykawką w atmosferze azotu roztwór jodku metylowomagnezowego (lub inny odczynnik Grignarda) w eterze (2,45 ml 3,0 M roztworu, 7,35 mmoli, 3 równ.). Po mieszaniu w 0°C przez 15 minut, mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej i mieszano przez 2 h. Następnie mieszaninę reakcyjną ostroż nie „zgaszono” nasyconym wodnym NH4Cl (40 ml) i wyekstrahowano EtOAc (3 x 50 ml). Połączone warstwy organiczne przemyto solanką, osuszono (Na2SO4), przesączono i zatężono in vacuo uzyskując 990 mg pomarańczowego oleju.
PL 202 227 B1
Oczyszczanie przez chromatografię typu „flash” na żelu krzemionkowym (CH2Cl2 do 5% metanolu w CH2Cl2) dało mniej polarny diastereizomer (419 mg, 42%) i bardziej polarny diastereizomer (375 mg, 37%) jako bezbarwne, lepkie oleje.
Mniej polarny diastereizomer:
(1S)-1-[(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksy-fenylo)-3-metylo-1-benzylopirolidyn-3-ylo]etan-1-ol 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,34-7,28 (c, 5H), 6,79-6,73 (c, 3H), 4,74 (m, 1H), 3,82 (s, 3H),
3,74 (q, 1H), 3,65 (q, 2H), 3,53 (t, 1H), 3,40 (t, 1H), 2,99 (d, 1H), 2,50 (t, 1H), 2,35 (d, 1H), 1,94-1,81 (c, 6H), 1,63-1,59 (c, 2H), 1,10 (d, 3H), 0, 52 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 410,3 (m+1).
Bardziej polarny Diastereizomer:
(1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-Cyklopentyloksy-4-metoksy-fenylo)-3-metylo-1-benzylopirolidyn-3-ylo]etan-1-ol 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,33-7,31 (c, 5H), 6,79-6,72 (c, 3H), 4,74 (m, 1H), 3,82 (s, 3H),
3,69-3,56 (c, 4H), 3,29 (t, 1H), 3,10 (d, 1H), 2,56 (t, 1H), 2,09 (d, 1H), 2,04 (s, 3H), 1,92-1,81 (c, 6H), 1,62-1,59 (c, 2H), 1,13 (d, 3H), 0,47 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 410,3 (m+1).
Półprodukt 57 (1S)-1-{(3S,4S)-4-[4-Metoksy-3-(fenylometoksy)-fenylo]-3-metylo-1-benzylopirolidyn-3-ylo}etan-1-ol
Mniej polarny diastereizomer. Wytworzono według procedury Grignarda jak w przypadku Półproduktu 56 z Półproduktu 53.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,44-7,22 (m, 10H), 6,80 (d, 1H), 6,75 (dd, 1H), 6,67 (d, 1H), 5,17 (s, 2H), 3,88 (s, 3H), 3,66 (q, 1H), 3,60 (d, 2H), 3,43 (t, 1H), 2,92 (d, 1H), 2,38 (t, 1H), 2,22 (d, 1H), 0,98 (d, 3H), 0,32 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): m/z 432,5 (m+1).
PL 202 227 B1
Półprodukt 58 (1R)-1-{(3S,4S)-4-[4-Metoksy-3-(fenylometoksy)-fenylo]-3-metylo-1-benzylopirolidyn-3-ylo}etan-1-ol Bardziej polarny, żądany diastereizomer. Wytworzono według procedury Grignarda jak w przypadku Półproduktu 56 z Półproduktu 53.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,43-7,21 (m, 10H), 6,79 (d, 1H), 6,75-6,70 (m, 2H), 5,16 (dd, 2H), 3,87 (s, 3H), 3,64-3,49 (m, 4H), 3,23 (t, 1H), 3,06 (d, 1H), 2,46 (t, 1H), 1,99 (d, 1H), 1,07 (d, 3H),
0,28 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): m/z 432,5 (m+1).
Półprodukt 59
1-R-[1-Benzylo-4-S-(3-tert-butoksy-4-metoksyfenylo)-3-S-metylopirolidyn-3-ylo]etanol
Do poddawanego mieszaniu roztworu trimetyloglinu (2 M w toluenie, 59,4 ml, 119 mmoli) w 0°C w atmosferze azotu dodano jodek metylowomagnezowy (3 M w Et2O, 36 ml, 108 mmoli). Po 30 minutach w 0°C, roztwór metaloorganiczny dodano przez kaniulę do roztworu Półproduktu 55 (13,7 g, 36 mmoli) w CH2Cl2 (360 ml) w -78°C w atmosferze azotu. Po zakończeniu dodawania, mieszaninę reakcyjną mieszano w -78°C przez 6 h. Następnie mieszaninę reakcyjną ogrzano do 0°C i ostrożnie wlano do lodowatego 1 M roztworu winianu potasowo-sodowego (1500 ml) w warunkach szybkiego mieszania i rozcieńczono przy użyciu EtOAc (1500 ml). Po mieszaniu przez 15 minut, warstwy rozdzielono i fazę organiczną przemyto 1 M roztworem winianu potasowo-sodowego (1 x 1000 ml) i nasyconym NaCl (1 x 1000 ml). Substancje organiczne osuszono (MgSO4), przesączono i zatężono in vacuo uzyskując mieszaninę 2,5:1 diastereizomerów oraz w przybliżeniu 10% resztkowego wyjściowego aldehydu (wg „surowego” 1H-NMR). Surowy produkt poddano chromatografii na kolumnie 110 mm x 8 przy użyciu układu 3/7/0,4 EtOAc/heksan/MeOH uzyskując, po zebraniu i zatężeniu in vacuo frakcji zawierających żądany diastereizomer o niższym Rf, Półprodukt 59 (8,1 g, 57%) jako pomarańczowy olej.
1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 7,34-7,23 (m, 5H), 6,86 (m, 3H), 6,79 (d, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,65 (dd, 1H), 3,62 (s, 2H), 3,58 (dd, 1H), 3,29 (dd, 1H), 3,10 (d, 1H), 2,53 (dd, 1H), 2,07 (d, 1H), 1,35 (s, 9H), 1,12 (d, 3H), 0,45 (s, 3H).
PL 202 227 B1
Półprodukt 60
Ester etylowy kwasu 3-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-2-metylo-E-akrylowego
W kolbie okrą gł odennej umieszczono THF (850 ml) i 2-fosfonopropionian trietylu (97,2 g,
0,408 moli) i uzyskaną mieszaninę ochłodzono do 0°C. Następnie dodano kroplami heksametyldisilazydek litu (1,0 M roztwór w THF, 489 ml, 0,489 moli). Mieszaninę mieszano przez 30 minut w 0°C, a następnie dodano roztwór Półproduktu 1 (70 g, 0,34 moli) w THF (100 ml). Po dodaniu kroplami, mieszaninę reakcyjną utrzymywano w 22°C przez 62 h. Mieszaninę reakcyjną szybko schłodzono nasyconym NaCl i rozcieńczono EtOAc. Po rozdzieleniu, warstwę organiczną przemyto nasyconym NaCl, osuszono nad Na2SO4 i zatężono in vacuo. Zielony olej oczyszczono chromatograficznie przez warstwę SiO2 (650 g) stosując EtOAc/mieszaninę heksanów (1:10) jako eluent, (40,8 g).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,67-7,61 (m, 1H), 7,07-7,02 (m, 1H), 6,98-6,95 (m, 1H), 6,92-6,89 (m, 1H), 4,32-4,25 (m, 2H), 3,92 (s, 3H), 3,90-3,85 (m, 2H), 2,15 (s, 3H), 1,38-1,32 (m, 4H), 0,70-0,63 (m, 2H), 0,41-0,37 (m, 2H).
Półprodukt 61
Kwas 3-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksy-fenylo)-2-metylo-E-akrylowy
Półprodukt 60 (26,9 g, 93 mmoli) rozpuszczono w 1,4-dioksanie (95 ml) i poddano działaniu roztworu monohydratu LiOH (4,6 g, 111 mmoli) rozpuszczonego w wodzie (95 ml). Uzyskany roztwór ogrzewano w 80°C przez 3 h, następnie mieszano przez noc w temperaturze pokojowej. Mieszaninę reakcyjną wlano do wody (350 ml) i wyekstrahowano dwukrotnie Et2O (ogółem 500 ml). Warstwę wodną rozcieńczono EtOAc (350 ml) i pH dobrano stężonym H3PO4 (24 ml). Warstwy rozdzielono, warstwę EtOAc przemyto wodą i nasyconym NaCl, osuszono nad MgSO4 i zatężono in vacuo (20,4 g).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,77 (s, 1H), 7,11-7,07 (dd, 1H), 7,02-6,98 (d, 1H), 6,93-6,90 (d, 1H),
3,93 (s, 3H), 3,86 (d, 2H), 2,18 (s, 3H), 1,39-1,31 (m, 1H), 0,69-0,63 (m, 2H), 0,39-0,35 (m, 2H).
Półprodukt 62
Chlorek 3-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-2-metylo-E-akryloilu
Półprodukt 61 (55,8 g, 0,213 moli) rozpuszczono w CH2Cl2 (300 ml) i ochłodzono do 0°C z użyciem przyłączonej rury suszącej.
Dodano chlorek oksalilu (2,0 M roztwór w CH2Cl2, 117 ml, 0,234 moli), a następnie dodano DMF (1,0 ml). Mieszaninę reakcyjną utrzymywano w 22°C przez szereg godzin. Mieszaninę rozcieńczono CH2Cl2 i przemyto wodą, nasyconym NaCl, a następnie osuszono nad Na2SO4 i zatężono in vacuo (65,1 g żółtego ciała stałego).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,97 (s, 1H), 7,16-7,11 (dd, 1H), 7,03-7,00 (d, 1H), 6,95-6,91 (dd, 1H), 3,93 (s, 3H), 3,87 (d, 2H), 2,23 (s, 3H), 1,39-1,31 (m, 1H), 0,69-0,64 (m, 2H), 0,40-0,37 (m, 2H).
PL 202 227 B1
Półprodukt 63
3- [3-(3-Cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-2-metylo-E-akryloilo]-4-(R)-fenyloksazolidyn-2-on
4- (R)-Fenyloksazolidyn-2-on (33,0 g, 0,202 moli) rozpuszczono w THF (1 l) i ochłodzono do -78°C. Dodano n-butylolit (2,5 M roztwór w mieszaninie heksanów, 79,5 ml, 0,198 moli) i uzyskaną mieszaninę reakcyjną mieszano przez 20 minut. Roztwór Półproduktu 62 (65,1 g, 0,213 moli) w THF (200 ml) dodano kroplami przez 15 minut. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 1 h w -78°C, a następnie powoli ogrzano do 0°C.
Mieszanina reakcyjna zgęstniała i pojawiły się beżowe substancje stałe. Mieszaninę zneutralizowano w 0°C nasyconym NH4Cl (600 ml) i wodą (300 ml). Roztwór szybko ogrzano do 22°C i wlano do CHCl3 (2400 ml). Po wytrząsaniu i rozdzieleniu, warstwę organiczną przemyto wodą (1 l), nasyconym NaCl (1 l), osuszono nad Na2SO4 i zatężono in vacuo do bladopomarańczowego ciała stałego (94,4 g).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,41-7,32 (m, 5H), 7,07-6,98 (m, 2H), 6,95-6,93 (d, 1H), 6,90-6,86 (d, 1H), 5,55-5,51 (dd, 1H), 4,77-4,71 (dd, 1H), 4,30-4,26 (dd, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,85 (d, 2H), 2,17 (s. 3H), 1,38-1,29 (m, 1H), 0,66-0,62 (m, 2H), 0,39-0,34 (m, 2H).
Półprodukt 64
3-[1-Benzylo-4-(S)-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksy-fenylo)-3-(S)-metylopirolidyno-3-karbonylo]-4-(R)-fenyloksazolidyn-2-on
Półprodukt 63 (94,4 g, 0,21 moli) rozpuszczono w CHCl3 (640 ml), a następnie ochłodzono do 0°C. Dodano benzylometoksymetylotrimetylsilanylometylaminę (95 g, 0,40 moli) i mieszaninę reakcyjną poddano działaniu kropli roztworu TFA (3,08 ml) w CHCl3 (40 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc ogrzewając do 22°C. Dodano dalszą ilość benzylometoksymetylo-trimetylsilanylometylaminy (71,2 g, 0,3 moli), a następnie mieszaninę mieszano przez dodatkowe 68 h. Mieszaninę reakcyjną szybko schłodzono nasyconym NH4Cl (600 ml) i rozdzielono. Warstwę organiczną przemyto dwukrotnie 1 N HCl (500 ml), jeden raz wodą, jeden raz 1 N NaOH (500 ml), jeden raz wodą, jeden raz 6% NaHCO3, jeden raz nasyconym NaCl, osuszono nad Na2SO4 i zatężono in vacuo. Surowy materiał
PL 202 227 B1 poddano chromatografii na SiO2 (1,2 kg) w dwóch porcjach stosując mieszaninę heksanów/EtOAc (2:1) jako eluent (62,3 g).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,44-7,20 (m, 10H), 7,07(d, 1H), 6,94-6,91 (dd, 1H), 6,78-6,76 (d, 1H), 5,56-5,50 (dd, 1H), 4,69-4,63 (dd, 1H), 4,21-4,16 (dd, 1H), 3,83-3,80 (m, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,74-3,70 (d, 1H), 3,64-3,59 (d, 1H), 3,50-3,46 (d, 1H), 2,90-2,86 (d, 1H), 2,83-2,71 (m, 2H), 1,36-1,29 (m, 1H), 0,64-0,60 (m, 2H), 0,38-0,32 (m, 2H).
Półprodukt 65
1-Benzylo-4-(S)-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksy-fenylo)-3-(S)-metylopirolidyno-3-karboaldehyd
Półprodukt 64 (62,3 g, 0,115 moli) rozpuszczono w toluenie (1 1) , a następnie ochłodzono do -78°C. Roztwór poddano działaniu wodorku litowo-glinowego (1,0 M roztwór w THF, 69 ml, 69 mmoli) przez powolne jego dodawanie. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 0,5 h, następnie szybko schłodzono w -78°C dodając kroplami MeOH (13 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 5 minut w -78°C, ogrzano do 0°C, a następnie dodano wodę (2,62 ml), 15% NaOH (2,62 ml) i wodę (7,85 ml). Roztwór mieszano przez 10 minut, następnie dodano Et2O (1,5 l) i uzyskaną mieszaninę mieszano przez noc w 22°C. Dodano siarczan magnezu i po mieszaniu przez 15 minut, roztwór przesączono przez MgSO4 i zatężono in vacuo. NMR pokazało, że produktami tej reakcji była mieszanina żądanego aldehydu i alkoholu pierwszorzędowego (około 4:1). Substancję tę użyto bez dalszego oczyszczania w poniższej reakcji utleniania Swerna. Chlorek oksalilu (2,0 M roztwór w CH2Cl2, 25 ml, 50 mmoli) dodano do CH2Cl2 (75 ml) i ochłodzono do -60°C. Kroplami dodano dimetylosulfotlenek (7,1 ml, 100 mmoli) jako roztwór w CH2Cl2 (30 ml). Po 5 minutach dodano kroplami roztwór mieszaniny aldehydu/alkoholu (4:1, -0,115 moli (ok. 0,05 moli alkoholu) rozpuszczony w CH2Cl2. Mieszaninę mieszano przez 30 minut, następnie dodano Et3N (31 ml, 222 mmoli), roztwór ogrzano do 22°C i mieszano przez noc. Mieszaninę reakcyjną szybko schłodzono wodą i mieszano intensywnie przez 20 minut, a następnie rozdzielono. Warstwę wodną przemyto CH2Cl2. Połączone warstwy organiczne przemyto nasyconym NaCl, osuszono nad Na2SO4 i zatężono in vacuo. Półprodukt 65 oczyszczono przez chromatografię filtracyjną stosując mieszaninę heksanów/EtOAc (4:1) jako eluent (42 g).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 9,64 (s, 1H), 7,39-7,23 (m, 5H), 6,81-6,71 (m, 3H), 3,83 (s, 3H), 3,83-3,81 (m, 2H), 3,80-3,75 (d, 1H), 3,67-3,61 (m, 2H), 3,19-3,11 (m, 2H), 2,86-2,81 (m, 1H), 2,43-2,40 (m, 1H), 1,38-1,29 (m, 1H), 0,76 (s, 3H), 0,68-0,62 (m, 2H), 0,30-0,37 (m, 2H).
PL 202 227 B1
Półprodukt 66
1-[1-Benzylo-4-(S)-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksy-fenylo)-3-(S)-metylopirolidyn-3-ylo]etanol
Trimetyloglin (2,0 M roztwór w toluenie, 2,1 ml, 4,2 mmoli) ochłodzono do 0°C i dodano kroplami jodek metylowomagnezowy (3,0 M roztwór w eterze etylowym, 1,3 ml, 3,95 mmoli). Tę szarą zawiesinę mieszano w 0°C przez 30 minut, a następnie dodano przez kaniulę do roztworu Półproduktu 65 (0,5 g, 1,3 mmoli) rozpuszczonego w CH2Cl2 (6,6 ml), który ochłodzono do -78°C. Mieszaninę reakcyjną mieszano w -78°C przez 6 h, a następnie wlano bezpośrednio do rozdzielacza zawierającego sól Rochelle (1 M, 150 ml). Pozostałość wypłukano EtOAc do lejka. Mieszaninę rozcieńczono EtOAc i rozdzielono. Warstwę organiczną przemyto po raz drugi solą Rochelle, a nastę pnie nasyconym NaCl, osuszono nad MgSO4 i zatężono in vacuo. Surowy produkt był mieszaniną (1:1) dwóch diastereomerycznych alkoholi i małej ilości aldehydu. Substancje te były rozdzielalne przez chromatografię na SiO4 stosując układ EtOAc/mieszanina heksanów (1:1). Żądany bardziej polarny karbinol:
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,36-7,30 (m, 3H), 7,28-7,24 (m, 2H), 6,81-6,74 (m, 3H), 3,85 (s, 3H), 3,84-3,79 (m, 2H), 3,71-3,56 (m, 4H), 3,33-3,25 (dd, 1H), 3,12-3,09 (d, 1H), 2,59-2,53 (dd, 1H), 2,16-2,08 (d, 1H), 1,38-1,25 (m, 1H), 1,16 (d, 3H), 0,69-0,61 (m, 2H), 0,49 (s, 3H), 0,39-0,35 (m, 2H).
Półprodukt 67 (1R)-1-{(3S,4S)-4-[3-(Cyklopropylometoksy)-4-metoksy-fenylo]-3-metylopirolidyn-3-ylo}etan-1-ol Wytworzono z Półproduktu 66 według procedury debenzylowania jak w przypadku Półproduktu 31. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ: 6,88-6,71 (m, 3H), 11H), 3,14-3,05 (m, 1H), 1,37-1,25 (m, 1H),
0,72 (s, 3H), 0,63 (d, 2H), 0,37 (d, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 306,2 (m+1).
Półprodukt 68 (1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-Cyklopentyloksy-4-metoksy-fenylo)-3-metylopirolidyn-3-ylo]etan-1-ol Wytworzono według procedury debenzylowania jak w przypadku Półproduktu 31 z izomeru 1-(R) karbinolu (bardziej polarny diastereizomer) Półproduktu 56.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,81 (d, 1H), 6,75-6,73 (m, 2H), 4,80 (c, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,79-3,68 (m, 5H), 3,61 (t, 1H), 3,10 (d, 1H), 1,96-1,80 (m, 6H), 1,63-1,57 (m, 2H), 1,21 (d, 3H), 0,72 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 320,4 (m+1).
PL 202 227 B1
Półprodukt 69 (1S)-1-[(3S,4S)-4-(3-Cyklopentyloksy-4-metoksy-fenylo)-3-metylopirolidyn-3-ylo]etan-1-ol Wytworzono według procedury debenzylowania jak w przypadku Półproduktu 31 z izomeru 1-(S) (mniej polarny półprodukt) Półproduktu 56.
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 320,4 (m+1).
Półprodukt 70
5-[4-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-metylopirolidyn-3-ylo]-2-metoksyfenol
Wytworzono z Półproduktu 58 według procedury debenzylowania jak w przypadku Półproduktu {10% pallad na węglu; stosowany zamiast octanu palladu).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,72 (d, 1H), 6,67 (d, 1H), 6,59 (dd, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,60 (qd,
1H), 3,29-3,17 (m, 6H), 3,10 (t, 1H), 2,55 (d, 1H), 1,06 (d, 3H), 0,56 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): m/z 252,1 (m+1).
PL 202 227 B1
Półprodukt 71
1-R-[1-Benzylo-4-S-(3-tert-butoksy-4-metoksyfenylo)-3-S-metylopirolidyn-3-ylo]-etanol
Do poddawanego mieszaniu roztworu trimetyloglinu (2 M w toluenie, 59,4 ml, 119 mmoli) w 0°C w atmosferze azotu dodano jodek metylowomagnezowy (3 M w Et2O, 36 ml, 108 mmoli). Po 30 minutach w 0°C, roztwór metaloorganiczny dodano przez kaniulę do roztworu Półproduktu 55 (13,7 g, 36 mmoli) w CH2Cl2 (360 ml) w -78°C w atmosferze azotu. Po zakończeniu dodawania, mieszaninę reakcyjną mieszano w -78°C przez 6 h. Następnie mieszaninę reakcyjną ogrzano do 0°C i ostrożnie wlano do lodowatego 1 M winianu potasowo-sodowego (1500 ml) w warunkach szybkiego mieszania i rozcień czono EtOAc (1500 ml). Po mieszaniu przez 15 minut, warstwy rozdzielono i warstwy organiczne przemyto 1 M winianem potasowo-sodowym (1 x 1000 ml) i nasyconym NaCl (1 x 1000 ml). Warstwy organiczne osuszono (MgSO4), przesączono i zatężono in vacuo uzyskując 2,5:1 mieszaninę diastereizomerów oraz w przybliżeniu 10% resztkowego wyjściowego aldehydu (według „surowego” 1H-NMR). Surowy produkt poddano chromatografii na kolumnie 110 mm x 8 przy użyciu układu 3/7/0,4 EtOAc/heksan/MeOH uzyskując, po zebraniu i zatężeniu in vacuo frakcji zawierających żądany diastereizomer o niższym Rf, Półprodukt 71. (8,1 g, 57%) jako pomarańczowy olej.
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,34-7,23 (m, 5H), 6,86(m, 3H), 6,79 (d, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,65 (dd, 1H), 3,62 (s, 2H), 3,58 (dd, 1H), 3,29 (dd, 1H), 3,10 (d, 1H), 2,53 (dd, 1H), 2,07 (d, 1H), 1,35 (s, 9H), 1,12(d, 3H), 0,45 (s, 3H).
Półprodukt 72
5-[(4R)-4-((1S)-1-Hydroksyetylo)-4-metylo-1-benzylopirolidyn-3-ylo]-2-metoksyfenol
Do poddawanego mieszaniu roztworu Półproduktu 71 (2,3 g, 5,8 mmoli) w CH2Cl2 (18 ml) w 0°C pod rurą suszącą dodano kwas trifluorooctowy (2,7 ml, 35 mmoli). Łaźnię chłodzącą usunięto i mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej, a nastę pnie mieszano przez 3,5 h. Mieszaninę reakcyjną zatężono na wyparce rotacyjnej, by usunąć nadmiar kwasu trifluorooctowego, ponownie rozpuszczono w CH2Cl2 (50 ml), a następnie przemyto 10% Na2CO3 (2 x 50 ml) i nasyconym NaCl (1 x 50 ml). Warstwy organiczne osuszono (MgSO4), przesą czono i zatężono in vacuo uzyskując Półprodukt 72 jako białą piankę (1,9 g, 96%).
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,36-7,20 (m, 5H), 6,82 (s, 1H), 6,77 (d, 1H), 6,66 (d, 1H), 5,57 (s, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,70-3,56 (m, 4H), 3,30 (dd, 1H), 3,13 (d, 1H), 2,55 (dd, 1H), 2,04 (d, 1H), 1,12 (d, 3H), 0,45 (s, 3H).
PL 202 227 B1
Półprodukt 73 (1R)-1-{(3R)-4-[3-(tert-Butoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidyn-3-ylo}etan-1-ol
Wytworzono z Półproduktu 71 (1 g, 2,53 mmoli) według procedury debenzylowania jak w przypadku Półproduktu 31 uzyskując 775 mg Półproduktu 73.
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,92-6,79 (m, 3H), 3,78 (s, 3H), 3,51-3,42 (m, 4H), 3,29 (dd, 1H),
2,77 (d, 1H), 1,35 (s, 9H), 1,17 (d, 3H), 0,62 (s, 3H),
Półprodukt 74
R1=H
3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
Procedura acylowania przy pomocy zasady Huniga
Do ochłodzonego (0°C), poddawanego mieszaniu roztworu Półproduktu 70 (670 mg, 2,67 mmoli) i zasady Huniga (1,4 ml, 8,0 mmoli) w suchym CH2Cl2 (10 ml), 1,4-dioksanie (5 ml) i MeOH (1 ml) dodano strzykawką w atmosferze azotu chloromrówczan metylu (0,41 ml, 5,3 mmoli). Uzyskany roztwór mieszano w 0°C przez 1 h, następnie rozcieńczono CH2Cl2 (90 ml), przemyto kolejno 1 N wodnym HCl (2 x 20 ml) i solanką (20 ml) i osuszono (Na2SO4), przesączono i zatężono in vacuo.
Pozostałość (737 mg) rozpuszczono w THF (3 ml) i wodzie (2 ml), następnie poddano działaniu roztworu LiOH (112 mg, 2,67 mmoli w 2 ml wody) w temperaturze pokojowej. Po mieszaniu przez 4 h, mieszaninę reakcyjną rozcieńczono EtOAc (100 ml) i przemyto kolejno 1 N wodnym HCl (2 x 50 ml), nasyconym wodnym NaHCO3 (30 ml) i solanką (30 ml), następnie osuszono (Na2SO4), przesączono i zatężono in vacuo. Pozostałość oczyszczono przez chromatografię radialną (płytka 4 mm z 3% MeOH w CH2Cl2) uzyskując Półprodukt 74 jako jasną żółtawobrązową piankę (250 mg, 30%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,84 (d, 1H), 6,78 (d, 1H), 6,72 (dd, 1H), 5,57 (d, 1H), 3,90-3,54 (m, 1H), 3,30 (d, 0,5H), 3,20 (d, 0,5H), 1,35 (br d, 1H), 1,14 (t, 3H), 0,75 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, ujemne): m/z 308,6 (m-1).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): m/z 310,5 (m+1).
PL 202 227 B1
Półprodukt 75
Z Półproduktu 57 według procedury debenzylowania jak w przypadku Półproduktu 31 i Procedury acylowania przy pomocy zasady Huniga jak w przypadku Półproduktu 74.
LRMS (Elektrorozpylanie, ujemne): m/z 3 08,6 (m-1).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): m/z 310,5 (m+1).
Półprodukt 76
Kwas (2R)-2-hydroksyheksanowy
Do ochłodzonego (0°C), poddawanego mieszaniu roztworu D-norleucyny (500 mg, 3,81 mmoli) w 10 ml 1 N wodnego roztworu kwasu siarkowego dodano kroplami w czasie 2 0 minut azotyn sodu (421 mg, 6,10 mmoli) w 3 ml wody. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do powolnego ogrzania do temperatury pokojowej przez okres 16 h. Mieszaninę następnie wyekstrahowano EtOAc (2 x 25 ml), osuszono (Na2SO4) i zatężono uzyskując 200 mg (40%) białego woskowatego ciała stałego.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 4,28 (dd, 1H), 1,92-1,81 (m, 1H), 1,76-1,64 (m, 1H), 1,51-1,29 (m, 4H), 0,92 (t, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, ujemne): Da/e 131,1 (m-1).
Półprodukt 77
Octan (1R)-1-(chlorokarbonylo)pentylu
Procedura acylowania/hydrolizy/tworzenia chlorku kwasowego
Do ochłodzonego (0°C) roztworu Półproduktu 76 (200 mg, 1,51 mmoli) i zasady Huniga (657 ml, 3,78 mmoli) w CH2Cl2 (6 ml) dodano przez strzykawkę chlorek acetylu (215 ul, 3,03 mmoli). Uzyskaną mieszaninę pozostawiono do powolnego ogrzania do temperatury pokojowej przez okres 16 h. Mieszaninę reakcyjną następnie przemyto 1 N HCl (2 x 20 ml), osuszono (Na2SO4) i zatężono do pomarańczowobrązowego oleju, który według NMR okazał się substancją bis-acylowaną. Do substancji tej dodano 5 ml mieszaniny 4:1 THF:woda i mieszaninę mieszano przez 16 h w temperaturze pokojowej, wyekstrahowano EtOAc, osuszono (Na2SO4) i zatężono do 186 mg (71%) pomarańczowego oleju. NMR i spektrometria masowa potwierdziły acetoksykwas. Do tej substancji w 5 ml CH2Cl2 dodano chlorek oksalilu (1,07 ml, 2,14 mmoli, 2 M roztworu w CH2Cl2) i kroplę DMF. Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 4 h, a następnie zatężono pod obniżonym ciśnieniem uzyskując Półprodukt 77.
PL 202 227 B1 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 5,17 (dd, 1H), 2,18 (s, 3H), 2,04-1,86 (m, 2H), 1,50-1,30 (m, 4H), 0,93 (t, 3H).
Półprodukt 78
Octan (chlorokarbonylo)(4-fluorofenylo)metylu
Wytworzono według procedury acylowania/hydrolizy/tworzenia chlorku kwasowego jak w przypadku Półproduktu 77 z kwasu 2-(4-fluorofenylo)-2-hydroksyoctowego.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,48 (q, 2H), 7,14 (t, 2H), 6,06 (s, 1H), 2,21 (s, 3H).
Półprodukt 79
Octan (chlorokarbonylo)cyklopropylu
Wytworzono według procedury acylowania/hydrolizy/tworzenia chlorku kwasowego jak w przypadku Półproduktu 77 z kwasu 1-hydroksycyklopropanokarboksylowego.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 2,13 (s, 3H), 1,89-1,84 (m, 2H), 1,46-1,42 (m, 2H).
Półprodukt 80
Octan (1S)-1-(chlorokarbonylo)-2-metylobutylu
Wytworzono według procedury acylowania/hydrolizy/tworzenia chlorku kwasowego jak w przypadku Półproduktu 77 z kwasu (2S)-2-hydroksy-3-metylopentanowego.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 5,01 (d, 1H), 2,24-2,17 (m, 1H), 2,17 (s, 3H), 1,57-1,47 (m, 1H), 1,39-1,28 (m, 1H), 1,03 (d, 3H), 0,94 (t, 3H).
Półprodukt 81
Octan (1S)-1-(chlorokarbonylo)-3-metylobutylu
Wytworzono według procedury acylowania/hydrolizy/tworzenia chlorku kwasowego jak w przypadku Półproduktu 77 z kwasu (2S)-2-hydroksy-4-metylopentanowego.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 5,12 (d, 1H), 2,16 (s, 3H), 1,88-1,75 (m, 3H), 0,97 (dd, 6H). Półprodukt 82 (1R)-1-(Chlorokarbonylo)-2-fenylooctan etylu
Wytworzono według procedury acylowania/hydrolizy/tworzenia chlorku kwasowego jak w przypadku Półproduktu 77 z kwasu (2R)-2-hydroksy-3-fenylopropanowego.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,38-7,21 (m, 5H), 5,33 (dd, 1H), 3,33 (dd, 1H), 3,18 (dd, 1H), 2,11 (s, 3H).
Półprodukt 83
Octan (1S)-1-(chlorokarbonylo)-2-fenyloetylu
Wytworzono według procedury acylowania/hydrolizy/tworzenia chlorku kwasowego jak w przypadku Półproduktu 77 z kwasu (2S)-2 -hydroksy-3-fenylopropanowego.
PL 202 227 B1 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,38-7,21 (m, 5H), 5,33 (dd, 1H), 3,33 (dd, 1H), 3,18 (dd, 1H), 2,11 (s, 3H).
Półprodukt 84 (4-Chlorofenylo)(hydroksyimino)metylamina
Roztwór 4-chlorobenzonitrylu (10 g, 0,073 moli), chlorowodorku hydroksylaminy i NaOH (3,5 g, 0,087 moli) w etanolu (300 ml) i wodzie (80 ml) ogrzewano w temperaturze wrzenia przez 10 h, a następnie zatężono pod obniżonym ciśnieniem. Uzyskane prawie białe ciało stałe wprowadzono do wody/4:1 EtOAc:CH2Cl2. Warstwy organiczne wyodrębniono, przemyto jeden raz wodą, osuszono (Na2SO4) i zatężono do 10,4 g białego ciała stałego (84%).
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ: 9,71 (s, 1H), 7,66 (d, 2H), 7,41 (d, 2H), 5,85 (brs, 2H).
Półprodukt 85
Octan [3-(4-chlorofenylo)-1,2,4-oksadiazol-5-ilo]metylu
Do ochłodzonego (0°C) roztworu Półproduktu 84 (4,5 g, 0,026 moli) w suchej pirydynie (20 ml) dodano kroplami w czasie 1 h chlorek acetoksyacetylu (6 ml, 0,056 moli). Po zakończeniu dodawania, mieszaninę ogrzewano w 90°C przez 3 h, a następnie pozostawiono do ochłodzenia do temperatury pokojowej. Pirydynę usunięto pod obniżonym ciśnieniem i uzyskaną ciemną substancję oleistą wprowadzono do CH2Cl2 i przesączono przez bibułę filtracyjną GF/F. Przesącz przemyto solanką (2 x 100 ml), osuszono (Na2SO4) i zatężono. Oczyszczanie przy użyciu Biotage (ładunek 40 M, 20% EtOAc/heksan) dało 1,93 g Półproduktu 85 jako białe ciało stałe (29%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8,01 (d, 2H), 7,46 (d, 2H), 5,35 (s, 2H), 2,21 (s, 3H).
Półprodukt 86
[3-(4-Chlorofenylo)-1,2,4-oksadiazol-5-ilo]metan-1-ol
Do roztworu Półproduktu 85 (1 g, 3,96 mmoli) w MeOH (50 ml) dodano wodny roztwór K2CO3 (0,56 M, 7 ml, 3,96 mmoli) i mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 2 h. Rozpuszczalniki następnie usunięto pod obniżonym ciśnieniem i pozostałość umieszczono w EtOAc (75 ml), przemyto wodą (2 x 75 ml), osuszono (Na2SO4) i zatężono do 820 mg (98%) Półproduktu 86 jako białego ciała stałego.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8,02 (d, 2H), 7,47 (d, 2H), 4,97 (s, 2H), 2, 52 (br s, 1H).
PL 202 227 B1
Półprodukt 87
Metylosulfonian [3-(4-chlorofenylo)-1,2,4-oksadiazol-5-ilo]-metylu
Wytworzono według procedury mezylowania jak w przypadku Półproduktu 90.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8,02 (d, 2H), 7,47 (d, 2H), 5,49 (s, 2H), 3,24 (s, 3H).
Półprodukt 88
3-[4-(Trifluorometylo)fenylo]prop-2-yn-1-ol
Procedura sprzęgania katalizowana palladem
Roztwór 4-jodobenzotrifluorku (5 g, 0,018 moli), alkoholu propargilowego (1,07 ml, 0,018 moli), jodku miedzi (I) (17, 5 mg, 0,092 mmoli) i chlorku bis-trifenylfosfinopalladu (II) (129 mg, 0,184 mmoli) w 50 ml dietylaminy mieszano w temperaturze pokojowej przez szereg godzin. Dietylaminę następnie usunięto pod obniżonym ciśnieniem i pozostałość umieszczono w CH2Cl2 (150 ml), którą przemyto 1 N HCl (3 x 150 ml), osuszono (Na2SO4) i zatężono do 3,1 g Półproduktu 88 jako pomarańczowego/brązowego oleju (84%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,55 (q, 4H), 4,52 (d, 2H), 1,74 (br s, 1H).
Półprodukt 89
3-(4-Fluorofenylo)prop-2-yn-1-ol
Wytworzono według procedury jak w przypadku Półproduktu 88.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,42 (q, 2H), 7,01 (t, 2H), 1,70 (t, 1H).
Półprodukt 90
Metylosulfonian 3-fenyloprop-2-ynylu Procedura mezylowania
Do roztworu 3-fenylo-2-propyn-1-olu (100 g, 0,757 moli) i Et3N (158 ml, 1,13 moli) w 3 litrach suchego CH2Cl2 ochłodzonego do 5°C dodano chlorku metanosulfonylu (59 ml, 0,757 moli) przez
PL 202 227 B1 rozdzielacz, utrzymując wewnętrzną temperaturę około 5°C (zakończenie dodawania po w przybliżeniu 45 minutach). Po 1 h w 5°C, TLC wskazało zużycie większości substancji wyjściowej. Dodano 1 ml chlorku metanosulfonylu i mieszaninę reakcyjną mieszano przez dodatkowe 30 minut w 5°C. TLC wskazało na całkowite zużycie substancji wyjściowej. Mieszaninę następnie przemyto 1 N HCl (3 x 250 ml), osuszono (Na2SO4) i zatężono uzyskując 113 g Półproduktu 90 jako żółtą ciecz (71%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,48-7,45 (m, 2H), 7,39-7,34 (m, 3H), 5,09 (s, 2H), 3,16 (s, 3H).
Półprodukt 91
Metylosulfonian 3-(4-fluorofenylo)prop-2-ynylu
Wytworzono z Półproduktu 89 według sposobu mezylowania jak w rzypadku Półproduktu 90. 1 NMR (400 MHz, CDCl3) δ : 7,47-7,44 (q, 2H), 7,04 (t, 2H), 5,07 (s, 2H), 3,15 (s, 3H).
Półprodukt 92
Metylosulfonian 3-[4-(trifluorometylo)fenylo]prop-2-ynylu
Wytworzono z Półproduktu 88 według sposobu mezylowania jak w przypadku Półproduktu 90.
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 3
Wytwarzanie czterech stereoizomerów przez redukcję Półproduktu 36.
Borowodorek sodu (2,0 mmoli, 0,075g) dodano do Półproduktu 36 (1,3mmoli, 0,50g) rozpuszczonego w 10 ml etanolu. Mieszaninę po całkowitym zajściu reakcji osuszono in vacuo po 1 h. Uzyskany olej wyekstrahowano trzykrotnie EtOAc z wody, następnie połączone ekstrakty przemyto solanką i osuszono nad MgSO4. Mieszaninę dwóch racematów otrzymano jako olej.
1H NMR δ: 6,80 (d, 1H); 6,67 (d, 2H); 4,72 (bd, 1H); 3,86-3,95 (bm, 1H); 3,83 (s, 3H); 3,64-3,78 (bm, 1H); 3,74 (s, 3H); 3,33 (dd, 1H); 2,16 (d, 3H); 1,79-1,92 (bm, 4H); 1,59-1,63 (bm, 2H); 1,01 (sd, 3H).
Mieszaninę racematów rozpuszczono w 50% acetonitrylu i 50% wody w stężeniu 50 mg/ml i oczyszczono porcjami na kolumnie C-18 (250 x 10 mm) stosując gradient woda/acetonitryl/0,5% TFA. Odpowiednie frakcje zebrano, połączono i osuszono do uzyskania oleju.
1H NMR dla pobocznego racematu δ: 6,75-6,82 (bm, 3H); 4,75 (bd, 1H); 3,83 (s, 3H); 3,64-3,81 (bm, 1H); 3,74 (s, 3H); 3,54-3,61 (bm, 2H); 3,28 (dd, 1H); 1,81-1,94 (bm, 5H); 1,58-1,65 (bm, 4H); 1,15 (dd, 3H); 0,75 (s, 3H).
1H NMR dla głównego racematu δ: 6,76-6,83 (bm, 3H); 4,74 (bd, 1H); 3,77-3,89 (bm, 1H); 3,83 (s, 3H); 3,73 (s, 3H); 3,65 (kwin., 1H); 3,25-3,32 (bm, 3H); 1,77-1, 96 (bm, 7H); 1,58-1,61 (bm, 2H); 1,13 (d, 3H); 0,92 (s, 3H).
Chiralne rozdzielanie alkoholi
Dwie kolumny były wymagane do rozdzielenia czterech diastereizomerów za pomocą HPLC. Pierwszą opartą na dekstrozie kolumnę (8 x 30 cm) użyto, by rozdzielić izomer R,R,S od innych. 10 ml (roztwór macierzysty 7,1 mg/ml) nieoczyszczonej mieszaniny w buforze kolumny wprowadzono, a nastę pnie wymywano przy 1 ml/min izokratyczną mieszaniną heksanów (85%) i izopropanolu (15%), zbierając odpowiednie frakcje. Pozostałe diastereizomery oczyszczono na różnej, opartej na dekstrozie kolumnie (10 x 50 cm). Ponownie wstrzyknięto 10 ml (roztwór macierzysty 7,1 mg/ml), a następnie wymywano przy 1 ml/min izokratyczną mieszaniną heksanów (95%) i izopropanolu (5%). Odpowiednie frakcje zebrano, połączono i osuszono do otrzymania oleju.
P r z y k ł a d 4
R1=2-indanyl; R3=CO2CH3
Ester metylowy kwasu trans-(±)-3-(1-hydroksyetylo)-4-[3-(indan-2-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidyno-1-karboksylowego (2 diastereizomery karbinolu)
Roztwór Półproduktu 35 (racemiczny) (3 00 mg, 0,71 mmoli, 1 równ.) w etanolu (10 ml) poddano działaniu borowodorku sodu (54 mg, 1,42 mmoli, 2 równ.). Mieszaninę mieszano 10 min w temperaturze pokojowej, poddano działaniu 1 N HCl (50 ml) i wyekstrahowano EtOAc (3 x 2 5 ml). Połączone ekstrakty organiczne przemyto 1 N HCl (25 ml), wodą, nas. NaHCO3 (25 ml), wodą (25 ml) i solanką (25 ml), osuszono nad Na2SO4 i zatężono in vacuo. Część nieoczyszczonej pozostałości oczyszczono przez HPLC (Kolumna Vydac 20 x 250 mm C18 „Protein and Peptide”, 8 min. gradient 50-75% acetonitrylu w wodzie, przy czym każdy rozpuszczalnik zawierał 0,05% TFA, przepływ 20 ml/min) uzyskując rozdzielone diastereizomery w stosunku 2:1 jako bezbarwne syropy (75 i 37 mg, odpowiednio, w kolejności wymywania z kolumny).
Izomer 1: 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7,24-7,15 (m, 4H), 6,83 (br s, 3H), 5,21-5,12 (m, 1H), 3,91-3,59(m, 3H), 3,81 (s, 3H), 3,73 (s, 3H), 3,40-3,18 (m, 7H), 1,14 (d, J = 6,3 Hz, 3H), 0,94 (s, 3H).
Izomer 2: 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7,23-7,15 (m, 4H), 6,85-6,82 (m, 3H), 5,22-5,10 (m, 1H), 3,89-3, 67 (m, 3H), 3,81 (s, 3H), 3,75 (s, 3H), 3,64-3,52 (m, 2H), 3,40-3,15 (m, 5H), 1,20-1,13 (m, 3H), 0,78 (s, 3H).
Związki z Przykładów 5 i 6 wytworzono w ten sam sposób jak w Przykładzie 4:
PL 202 227 B1
R1=2 -norbornyl; R3=CO2CH3
Ester metylowy kwasu trans 4-[3-Exo-(bicyklo[2,2,1]hept-2-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-(1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyno-1-karboksylowego (2 diastereomery karbinolu)
Półprodukt 38 zredukowano i rozdzielono jak powyżej uzyskując dwa izomery:
Izomer 1: 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 6,82-6,72 (m, 3H), 4,15 (br s, 1H), 3,88-3,59 (m, 3H), 3,87 (s, 3H), 3,73 (s, 3H), 3,32-3,24 (m, 3H), 2,50-2,47 (m, 1H), 2,34-2,28 (m, 1H), 1,77-1,50 (m, 5H), 1,21-1,12 (m, 6H), 0,92 (3, 3H).
Izomer 2: 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 6,82-6,72 (m, 3H), 4,19-4,15 (m, 1H), 3,85-3,54 (m, 5H), 3,83 (s, 3H), 3,74 (s, 3H), 3,30/3,23 (2 d, J = 10,4/10,4 Hz, 1H), 2,49-2,46 (m, 1H), 2,32 (brs, 1H), 1,76-1,70 (m, 2H), 1,65-1,44 (m, 3H), 1,21-1,14 (m, 6H), 0,75 (s, 3H).
P r z y k ł a d 6
R1=PhCH2CH2CH(CH3); R3=CO2CH3
Ester metylowy kwasu trans-3-(1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(1-metylo-3-fenylopropoksy)fenylo]-3-metylopirolidyno-1-karboksylowego (2 diastereizomery karbinolu)
Półprodukt 39 zredukowano i rozdzielono jak powyżej uzyskując dwa izomery:
Izomer 1: 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7,30-7,25 (m, 3H), 7,22-7,15 (m, 3H), 6,85-6,69 (m, 3H), 4,34-4,27 (m, 1H), 3,87-3,54 (m, 3H), 3,84 (s, 3H), 3,73/3,72 (2 s, 3H), 3,31-3,20 (m, 3H), 2,832,75 (m, 2H), 2,18/2,08 (m, 1H), 1, 95-1, 84 (m, 1H), 1,34/1,31 (2s, 3H), 1,12 (d, J = 6,3 Hz, 3H), 0,89 (br s, 3H).
13C NMR (75 MHz, CDCl3) δ: 156,0, 150,3, 147,8, 142,2, 131,3/131,1, 128,9, 128,8, 126,2,121,7, 117,1, 112,5, 77,6, 75,3/75,1, 74,1/74,0, 56,3, 56,2/55,8, 52,9, 52,0/51,5/51,2, 49,9/49,1, 38,5/38,4,
32,2, 20,3, 19,0/18,9, 14,6/14,5.
Izomer 2: 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7,29-7,24 (m, 2H), 7,20-7,14 (m, 3H), 6,84-6,69 (m, 3H), 4,35-4,24 (m, 1H), 3,85/3,84 (2 s, 3H), 3,83-3,45 (m, 5H), 3,75 (s, 3H), 3,31-3,23 (m, 1H), 2,88-2,76 (m, 2H), 2,21-2,07 (m, 1H), 1,95-1,83 (m, 1H), 1,34/1,32 (2s, 3H), 1,15-1,11 (m, 3H), 0,73 (brs, 3H).
13C NMR (75 MHz, CDCl3) δ: 156,1, 149,9, 147,4, 142,3, 129,5/129,4, 128,9, 128,7, 126,2, 122. 1/121,8, 117,9/117,7/117,4, 112,0, 77,6, 75,3/75,0/74,9, 69,4/69,3, 56,3, 53,2, 53,1, 49,5/49,3/49,1/48,6, 46,5/46,0, 38,5/38,4/38,3, 32,1, 20,3, 20,0, 17,7.
Poniższe związki wytworzono z pozbawionego chiralności pirolidynowego Półproduktu 68.
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 7
R1=C5H9; R3=COCH2OCH2Ph
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-(fenylometoksy)etan-1-on
Procedura N-acylowania
Do poddawanego mieszaniu roztworu Półproduktu 68 (42,6 mg, 0,13 mmoli) w 1,4-dioksanie (0,4 ml) dodano, kolejno, wodny roztwór K2CO3 (0,8 ml 0,65 M roztworu, 4 równ.) i roztwór chlorku kwasowego (R3-Cl) (21 μ|, 0,13 mmoli) w 1,4-dioksanie (0,4 ml) w temperaturze pokojowej. Uzyskany roztwór mieszano w temperaturze pokojowej przez 4 h. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono EtOAc (30 ml), następnie przemyto kolejno wodą (20 ml) i solanką (20 ml), osuszono (MgSO4), przesączono i zatężono in vacuo uzyskując związek tytułowy Przykładu 7 jako nieznacznie żółtawobrązową piankę (46,5 mg, 99%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,40-7,31 (m, 5H), 6,80-6,72 (m, 3H), 4,73 (c, 1H), 4,67 (s, 2H), 4,14 (s, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,79-3,45 (m, 5H), 3,22 (d, 1H), 1,92-1,80 (c, 6H), 1,61-1,55 (c, 2H), 1,14 (dd, 3H), 0,73 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 468,4 (m+1).
P r z y k ł a d 8
R1 = C5H9; R3=COCH2OH
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksyetan-1-on
Związek tytułowy Przykładu 7 (35 mg, 75 μmoli) poddano Procedurze debenzylowania jak w przypadku Półproduktu 31 uzyskując związek tytułowy Przykładu 8 (24 mg, 84%).
1H NMR (CD3OD, 400 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 6,91-6,82 (m, 3H), 4,83 (c, 1H), 4,22 (c, 1H), 3,87-3,22 (m, 11H), 1,93-1,73 (m, 6H), 1,69-1,59 (m, 2H), 1,11 (dd, 3H), 0,75 (br s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 378,4 (m+1).
P r z y k ł a d 9
R1=C5H9; R3=COCH2CH2N(H)CO2CH2Ph
N-{3-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-3-oksopropylo}(fenylometoksy)karboksyamid
Wytworzono z Półproduktu 68 według Procedury acylowania jak w przypadku Przykładu 7. p-Nitrofenylester N-Cbz-beta-alaniny użyto w miejsce chlorku kwasowego.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,38-7,28 (m, 5H), 6,92-6,83 (m, 3H), 5,06 (c, 2H), 4,86 (s, 2H), 4,84 (c, 1H), 3,81-3,27 (m, 10H), 2,59 (c, 2H), 1,98-1,69 (c, 6H), 1,64-1,57 (c, 2H), 1,09 (d, 3H), 0,73 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 525,3 (m+1).
P r z y k ł a d 10
R1=C5H9; R3=COCH2CH2NH2
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-3-amino-propan-1-on
PL 202 227 B1
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 9 według Procedury debenzylowania jak w przypadku Pół produktu 31.
1H NMR (CD3OD, 400 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 6,91-6,79 (m, 3H), 4,81 (c, 1H), 3,92-3,29 (m, 11H), 3,01 (br s, 2H), 2,61-2,58 (m, 2H), 1,95-1,73 (m, 6H), 1,68-1,58 (m, 2H), 1,10 (dd, 3H), 0,76 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 391,4 (m+1).
P r z y k ł a d 11
R1=C5H9; R3=COCH2CH2CO2CH2Ph
4-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-4-oksobutanoan fenylometylu
Wytworzono z Półproduktu 68 według Procedury acylowania jak w przypadku Przykładu 7.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,41-7,31 (m, 5H), 6,84-6,75 (m, 3H), 5,14 (d, 2H), 4,74 (c, 1H), 3,94-3,44 (m, 8H), 3,27 (d, 1H), 2,80-2,73 (m, 2H), 2,67-2,58 (m, 2H), 1,96-1,81 (m, 6H), 1,68-1,56 (m, 2H), 1,15 (dd, 3H), 0,75 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 510,3 (m+1).
P r z y k ł a d 12
R1=C5H9; R3=COCH2CH2CO2H
Kwas 4-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-4-okso-butanowy
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 11 stosując Procedurę debenzylowania jak w przypadku Pół produktu 31.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,80-6,72 (m, 3H), 4,74 (c, 1H), 3,98-3,54 (m, 10H), 3,40 (d, 1H), 3,24 (d, 1H), 2,69 (c, 2H), 1,95-1,74 (m, 6H), 1,69-1,51 (m, 2H), 1,14 (dd, 3H), 0,74 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 420,3 (m+1).
P r z y k ł a d 13
R1=C5H9; R3=COCH2N(H)CO2CH2Ph
N-{2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-oksoetylo}(fenylometoksy)karboksyamid
Wytworzono z Półproduktu 68 stosując Procedurę acylowania jak w przypadku Przykładu 7. Ester p-nitrofenylowy N-Cbz-glicyny użyto w miejsce chlorku kwasowego.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,40-7,25 (m, 5H), 6,92-6,81 (m, 3H), 5,11 (s, 2H), 4,87 (s, 2H), 4,82 (c, 1H), 4,11-3,28 (m, 9H), 1,95-1,70 (m, 6H), 1,65-1,55 (m, 2H), 1,10 (br s, 3H), 0,76 (br s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 511,6 (m+1).
P r z y k ł a d 14
R1=C5H9; R3=COCH2NH2
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-amino-etan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 13 stosując Procedurę debenzylowania jak w przypadku Pół produktu 31.
1H NMR (CD3OD, 400 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 6,91-6,82 (m, 3H), 4,80 (c, 1H), 3,91-3,28 (m, 11H), 1,90-1,75 (m, 6H), 1,66-1,57 (m, 2H), 1,09 (dd, 3H), 0,74 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 377,2 (m+1).
P r z y k ł a d 15
R1=C5H9; R3=CO-4-Metyl-piperazyna
Keton 3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynlo-4-metylo-piperazynylowy
Półprodukt 68 (30,2 mg, 94 mmoli) rozpuszczono w 1,2-dichloroetanie (400 gl) i ochłodzono do 0°C, a następnie dodano karbonylo-diimidazol (16 mg, 94 μmoli). Mieszaninę reakcyjną mieszano w 0°C przez 1,5 h, a następnie dodano 1-metylopiperazynę (21 gl, 180 gmoli). Roztwór ogrzewano do 80°C przez 60 h. Po ochłodzeniu, mieszaninę reakcyjną rozcieńczono CH2Cl2 i przemyto trzy razy 6% NaHCO3, osuszono nad Na2SO4 i zatężono in vacuo. Pozostałość poddano chromatografii on SiO2 z użyciem EtOAc (15,5 mg).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,83-6,78 (m, 3H), 4,76 (c, 1H), 4,06-3,77 (m, 18H), 3,61 (q, 1H), 3,39 (br s, 1H), 1,93-1,78 (m, 6H), 1,63-1,57 (m, 2H), 1,15 (br s, 3H), 0,81 (br s, 3H).
PL 202 227 B1
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 446,4 (m+1).
P r z y k ł a d 16
R1=C5H9; R3=CO-N-morfolina
Keton 3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylowo-morfolin-4-ylowy
Wytworzono z Półproduktu 68 stosując morfolinę i karbonylodiimidazol jako odczynnik sprzęgający według Procedury podanej w Przykładzie 15.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,84-6,77 (m, 3H), 4,76 (c, 1H), 3,88-3,52 (m, 12H), 3,41 (dd, 1H), 3,38 (dd, 1H), 3,28 (dd, 1H), 3,25(dd, 1H), 3,10 (d, 1H), 1,95-1,81 (m, 6H), 1,62-1,54 (m, 2H), 1,15 (d, 3H), 0,75 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 433,3 (m+1).
P r z y k ł a d 17
R1=C5H9; R3=COCH2O-Mentol; izomer (1S)-karbinolu
1-[3-((1S)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-[(2S,1R,5R)-5-metylo-2-(metyloetylo)cykloheksyloksy]-etan-1-on
Wytworzono z izomeru S-karbinolu Półproduktu 69 według Procedury acylowania przy pomocy zasady Huniga jak w przypadku Półproduktu 69.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,82-6,75 (m, 3H), 4,74 (c, 1H), 4,19 (dd, 1H), 4,04(dd, 1H), 3,92-3,76 (m, 5H), 3,47-3,19 (m, 5H), 2,26 (c, 1H), 2,13 (c, 1H), 1,94-1,80 (m, 6H), 1,65-1,53 (m, 4H), 1,51-1,19 (m, 4H), 1,14 (d, 3H), 0,95-0,84(m, 9H), 0,79 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 516,3 (m+1).
P r z y k ł a d 18
R1=C5H9; R3=CO-4-(2-metylotiazol)
Keton 3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylowo-2-metylo-(1,3-tiazol-4-ylo)-owy
Wytworzono z Półproduktu 68 według Procedury sprzęgania EDCI jak w przypadku Przykładu 27 z kwasu 2-metylo-1,3-tiazolo-4-karboksylowego.
1H NMR (CD3OD, 400 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 7,98 (dd, 1H), 6,92-6,82 (m, 3H), 4,84 (c, 1H), 4,27 (t, 0,5H), 4,16 (t, 0,5H), 4,08 (t, 0,5H), 3,96 (d, 0,5H), 3:85-3,47 (m, 7H), 2,72 (dd, 3H), 1,88-1,72 (m, 6H), 1,68-1,56 (m, 2H), 1,14 (dd, 1,5H), 1,08 (dd, 1,5H), 0,82 (d, 1,5H), 0,73 (d, 1,5H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 445,4 (m+1).
P r z y k ł a d 19
R1=C5H9; R3=SO2-3-pirydyl
3-{[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]sulfonylo}-pirydyna
Do poddawanego mieszaniu roztworu Półproduktu 68 (32 mg, 0,1 mmoli) w dioksanie (0,3 ml) dodano, kolejno, wodny roztwór K2CO3 (0,6 mL 0,65 M roztworu, 4 równ.) i roztwór chlorku R3-sulfonylu (26 mg, 0,12 mmoli) w dioksanie (0,3 ml) w temperaturze pokojowej. Uzyskany roztwór mieszano w temperaturze pokojowej przez 2 h. Mieszaninę reakcyjną rozcień czono mieszaniną 1:1 heksany:EtOAc (30 ml) i przemyto kolejno wodą (20 ml) i solanką (20 ml), następnie osuszono (MgSO4), przesączono i zatężono in vacuo uzyskując związek tytułowy Przykładu 19 jako nieznacznie pomarańczową piankę (36 mg, 78%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 9,11 (d, 1H, J = 2,2 Hz), 8,83 (dd, 1H, J = 1,6, 4,8 Hz), 8,17 (ddd, 1H, J = 1,5, 2,4, 8,1 Hz), 7,50 (ddd, 1H, J = 0,8, 4,9, 8,0 Hz), 6,74 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 6,68 (d, 1H, J = 2,1 Hz), 6,62 (dd, 1H, J = 2,1, 8,3 Hz), 4,70 (c, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,66-3,62 (m, 2H), 3,51-3,43 (m, 3H), 3,24 (d, 1H, J = 13,3 Hz), 1,91-1,62 (m, 6H), 1,60-1,55 (m, 2H), 1,08 (d, 3H, J = 6,4 Hz), 0,62 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 461,2 (m+1).
PL 202 227 B1
R1=2-indanyl; R3=COCH2OCH2Ph
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-(fenylometoksy)etan-1-on
Wytworzono z Półproduktu 51 (50 mg, 0,14 mmoli) według Procedury acylowania z użyciem zasady Huniga jak w przypadku Półproduktu 74 stosując chlorek benzyloksyacetylu (22,5 pl, 0,14 mmoli) i uzyskując związek tytułowy Przykładu 20 jako klarowny olej (48 mg, 68%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,41-7,16 (m, 9H), 6,84-6,79 (m, 3H), 5,17 (c, 1H), 4,66 (d, 2H), 4,19-4,11 (m, 2H), 3,96 (dd, 0,5H), 3,83-3,54 (m, 7H), 3,47 (d, 0,5H), 3,38-3,29 (m, 2H), 3,24-3,17 (m, 3H), 1,57 (br t, 1H), 1,15 (dd, 3H), 0,75 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 516,8 (m+1).
P r z y k ł a d 21
R1=2-indanyl; R3=COCH2OH
1- [3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksyetan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 20 według procedury debenzylowania jak w przypadku Pół produktu 31.
1H NMR (CD3OD, 400 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 7,24-7,18 (m, 2H), 7,14-7,12 (m, 2H), 6,92-6,86 (m, 3H), 5,20 (c, 1H), 4,27-4,14 (m, 2H), 3, 90-3,50 (m, 6H), 3,41 (d, 1H), 3,34-3,24 (m, 4H), 3,13-3,08 (m, 2H), 1,12 (dd, 3H), 0,77 (br s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 426,5 (m+1).
P r z y k ł a d 22
R1=2-indanyl; R3=COCO2CH3
2- [3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-oksooctan metylu
Wytworzono z Półproduktu 51 i chlorku metylooksalilu według Procedury sprzęgania z użyciem zasady Huniga jak w przypadku Półproduktu 74.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,82-6,75 (m, 3H), 4,74 (c, 1H), 4,01 (d, 1H), 3, 98-3,56 (m, 10H), 3,50 (dd, 1H), 1, 93-1,84 (m, 6H), 1, 64-1,56 (m, 2H), 1,45 (dd, 1H), 1,16 (dd, 3H), 0,79 (s, 1,5H), 0,75 (s, 1,5H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 406,2 (m+1).
P r z y k ł a d 23
R1=2-indanyl; R3=COC(CH3)2N(H)CO2CH2Ph
N-{2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-1,1-dimetylo-2-oksoetylo}(fenylometoksy)karboksyamid
PL 202 227 B1
Procedura sprzęgania PyBrOP
Do poddawanego mieszaniu roztworu heksafluorofosforanu bromotris-pirolidyno-fosfoniowego (PyBrOP, 70 mg, 0,15 mmoli), N-karbobenzyloksy-2-metylalaniny (35,5 mg, 0,15 mmoli) i zasady Huniga (78 μ|, 0,45 mmoli) w suchym dimetyloformamidzie (1 ml) dodano Półprodukt 51 (50 mg, 0,14 mmoli) w temperaturze pokojowej w atmosferze azotu. Uzyskany roztwór mieszano w temperaturze pokojowej przez 16 h, a następnie ogrzewano do 70°C przez 5 h. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ochłodzenia do temperatury pokojowej, następnie zatężono in vacuo. Pozostałość oczyszczono przez chromatografię radialną (płytka 1 mm z 3% MeOH w CH2Cl2) uzyskując związek tytułowy Przykładu 23 jako białą piankę (20 mg, 24%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,43-7,15 (m, 9H), 6,82-6,62 (m, 3H), 5,64 (br s, 0,5H), 5,51 (br a, 0,5H), 5,15-5,08 (m, 3H), 3,97-3,15 (m, 13H), 1,58 (br s, 6H), 1,13 (br d, 3H), 0,68 (br s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 604,9 (m+18).
P r z y k ł a d 24
R1=2-indanyl; R3=COC(CH3)2NH2
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-amino-2-metylopropan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 23 według Procedury debenzylowania jak w przypadku Półproduktu 31.
1H NMR (CD3OD, 400 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 7,21-7,16 (m, 2H), 7,15-7,12 (m, 2H), 6,94-6,87 (m, 3H), 5,22 (c, 1H), 4,05 (d, 1H), 3,88 (c, 1H), 3,77-3, 69 (m, 4H), 3,60-3,52 (c, 2H), 3,40-3,29 (c, 2H), 3,22 (q, 1H), 3,13-3,09 (c, 2H), 1,37 (d, 6H), 1,13 (br s, 3H), 0,80 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 453,5 (m+1).
P r z y k ł a d 25
R1=2-indanyl; R3=CO2CH3
3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
Wytworzono z Półproduktu 51 według Procedury acylowania przy pomocy zasady Huniga jak w przypadku Półproduktu 74 stosując chloromrówczan metylu.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,24-7,16 (m, 4H), 6,86-6,82 (m, 3H), 5,18 (c, 1H), 3,85-3,56 (m, 8H), 3,38-3,30 (m, 3H), 3,25-3,19 (m, 3H), 1,51 (d, 0,5H), 1,47 (d, 0,5H), 1,16 (t, 3H), 0,77 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 426,5 (m+1), 443,3 (m+18).
P r z y k ł a d 26
R1=2-indanyl; R3=COCH2C(CH3)2CO2H
Kwas 4-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2,2-dimetylo-4-oksobutanowy
W szklanej rurce o grubych ściankach wyposażonej w gwintowane zamknięcie umieszczono Półprodukt 51 (20 mg, 0,05 mmoli) i bezwodnik 2,2-dimetylobursztynowy (25,8 mg, 0,05 mmoli). Rurkę zatopiono, następnie ogrzewano w 150°C przez 30 minut. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ochłodzenia do temperatury pokojowej uzyskując związek tytułowy Przykładu 26 (zawierający około 15-20% innego regioizomeru) jako brązowe ciało stałe (22 mg, 82%).
1H NMR (CD3OD, 400 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 7,22-7,20 (m, 2H), 7,15-7,12 (m, 2H), 6,96-6,85 (m, 3H), 5,23 (c, 1H), 3,92-3,49 (m, 7H), 3,37-3,28 (m, 4H), 3,13-3,09 (m, 2H), 2,73-2,55 (m, 2H), 1,30 (br s, 6H), 1,12 (t, 3H), 0,76 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, ujemne): Da/e 494,5 (m-1).
P r z y k ł a d 27
R1=2-indanyl; R3=CO-4-(2-metylotiazol)
Keton 3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylowo-2-metylo-(1,3-tiazol-4-ilo)-wy
Procedura sprzęgania EDCI
Do poddawanego mieszaniu roztworu chlorowodorku 1-(3-dimetylaminopropylo)-3-etylkarbodiimidu (42,3 mg, 0,214 mmoli) w suchym CH2Cl2 (1 ml) dodano kwas 2-metylo-1,3-tiazolo-4-karboksylowy (30,7 mg, 0,214 mmoli) w temperaturze pokojowej w atmosferze azotu. Uzyskaną jasnoczerwoną mieszaninę mieszano przez 1 h, następnie dodano w jednej porcji Półprodukt 51 (75 mg, 0,204 mmoli). Po mieszaniu w temperaturze pokojowej przez noc, mieszaninę
PL 202 227 B1 reakcyjną zatężono pod obniżonym ciśnieniem i pozostałość oczyszczono przez chromatografię radialną (płytka 1 mm z 3% MeOH w CH2Cl2) uzyskując związek tytułowy Przykładu 27 jako klarowną warstewkę (21 mg, 2 0%).
1H NMR (400 MHz, CDCI3; mieszanina rotamerów) δ: 7,91 (s, 0,5H), 7,88 (s, 0,5H), 7,25-7,20 (m, 2H), 7,18-7,16 (m, 2H), 6,90-6,82 (m, 3H), 5,19 (c, 1H), 4,33 (dd, 0,5H), 4,23 (t, 0,5H), 4,15 (d, 0,5H), 4,10 (dd, 0,5H), 3,99 (t, 0,5H), 3,85 (d, 0,5H), 3,81 (s, 3H), 3,77-3,58 (m, 3H), 3,38-3,31 (m, 2H), 3,24-3,20 (m, 2H), 2,74 (s, 1,5H), 2,71 (s, 1,5H), 1,93 (s, 0,5H), 1,61 (d, 0,5H), 1,22 (d, 1,5H), 1,18 (d, 1,5H), 0,86 (S, 1,5H), 0,75 (s, 1,5H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 493,6 (m+1).
P r z y k ł a d 28
R1=2-indanyl; R3=CO-3-tetrahydrofuranyl
Keton 3-{(1R)-1-hydroksyetylo)(4S,3R)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylocyklopentylowo-oksolan-3-ylowy (mieszanina 2 diastereizomerów w punkcie przyłączenia tetrahydrofuranylu)
Wytworzono z Półproduktu 51 według Procedury sprzęgania zasady Huniga jak w przypadku Półproduktu 74 stosując chlorek tetrahydrofurano-3-karbonylu.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,40-7,20 (m, 2H), 7,19-7,16 (m, 2H), 6,86-6,83 (m, 3H), 5,18 (c, 1H),4,15-4,04 (m,1H), 3,98-3,15 (m, 13H), 2,31-2,09 (m, 2H), 1,75 (br s, 1H), 1,26 (t, 1,5H), 1,17 (t, 1,5H), 0,80 (d, 1,5H), 0,78 (s, 1,5H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 466,3 (m+1).
P r z y k ła d 29
R1=2-indanyl; R3=COCH2N(H)CO2CH2Ph
N-{2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-oksoetylo)-(fenylometoksy)karboksyamid
Wytworzono z Półproduktu 51 według Procedury sprzęgania PyBrOP jak w przypadku Przykładu 23 stosując N-benzyloksykarbonyloglicynę.
1H NMR (CD3OD, 400 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 7,35-7,20 (m, 9H), 6,91-6,88 (m, 3H), 5,22 (br s, 1H), 5,10 (s, 2H), 4,07-3,09 (m, 15H), 1,13 (t, 3H), 0,78 (s, 3H).
P r z y k ł a d 30
R1=2-indanyl; R3=COCH2NH2
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-aminoetan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 29 według Procedury debenzylowania jak w przypadku Pół produktu 31.
1H NMR (400 MHz, CDCl3 mieszanina rotamerów) δ: 7,22-7,19 (m, 2H), 7,18-7,15 (m, 2H), 6,84 (d, 1H), 6,81 (d, 2H), 5,17 (c, 1H), 3,96 (dd, 0,5H), 3,81-3,43 (m, 9H), 3,37-3,30 (m, 1,5H), 3,23-3,13 (m, 2H), 2,99 (br s, 2H), 1,15 (t, 3H), 0,75 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 425,5 (m+1).
P r z y k ł a d 31
R1=2-indanyl; R3=2-pirydyl (1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-Indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-(2-pirydylo)pirolidyn-3-ylo]etan-1-ol
Procedura sprzęgania z bromkiem arylu
Do poddawanej mieszaniu mieszaniny Półproduktu 51 (115 mg, 0,31 mmoli) i K2CO3 (173 mg,
1,2 mmoli) w suchym DMF (2 ml) dodano strzykawką w temperaturze pokojowej w atmosferze azotu
2-bromopirydynę (0,12 ml, 1,2 mmoli). Uzyskaną mieszaninę ogrzewano w 90°C przez 22 h, następnie pozostawiono do ochłodzenia do temperatury pokojowej. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono wodą (60 ml) i wyekstrahowano EtOAc (3 x 30 ml). Połączone ekstrakty organiczne przemyto solanką, osuszono (Na2SO4), przesączono i zatężono in vacuo.
Pozostałość oczyszczono przez chromatografię typu „flash” na żelu krzemionkowym (100% EtOAc) uzyskując związek tytułowy Przykładu 31 (73,4 mg, 53%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8,18 (ddd, 1H), 7,45 (ddd, 1H), 7,26-7,21 (m, 2H), 7,19-7,16 (m, 2H), 6,92-6,88 (m, 2H), 6,83 (d, 1H), 6,54 (ddd, 1H), 6,40 (d, 1H), 5,17 (c, 1H, 3,86-3,78 (m, 5H), 3,70(d, 1H), 3,67 (d, 1H), 3,38-3,30 (m, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 445,4 (m+1).
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 32
R1=2-indanyl; R3=3-pirydyl (1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-Indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-(3-pirydylo)pirolidyn-3-ylo]etan-1-ol
Procedura sprzęgania katalizowana palladem
Do poddawanego mieszaniu roztworu Półproduktu 51 (79,3 mg, 0,22 mmoli) i t-butanolanu sodu (29 mg, 0,31 mmoli) w suchym toluene (3 ml) dodano, kolejno, 3-bromopirydynę (22,9 ml, 0,24 mmoli), tris(dibenzylidenoacetono)dipallad (0) (3,9 mg, kat.) i (R)-(+)-1,1'-bi-2-naftol (5,4 mg, kat.) w temperaturze pokojowej w atmosferze azotu. Uzyskaną mieszaninę ogrzewano w 80°C przez 3 h, następnie pozostawiono do ochłodzenia do temperatury pokojowej. Następnie mieszaninę reakcyjną rozcieńczono EtOAc (40 ml), przemyto solanką, osuszono (Na2SO4), przesączono i zatężono in vacuo. Pozostał o ść oczyszczono przez chromatografię typu „flash” na ż elu krzemionkowym (40% EtOAc w mieszaninie heksanów) uzyskując związek tytułowy Przykładu 32 (72,1 mg, 75%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,98 (d, 1H), 7,91 (d, 1H), 7,24-7,15 (m, 4H), 7,11 (dd, 1H), 6,90-6,82 (m, 4H), 5,15 (c, 1H), 3,81-3,72 (m, 4H), 3,70-3,62 (m, 4H), 3,35-3,11 (m, 5H), 1,24 (d, 3H), 0,84 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 445,3 (m+1).
P r z y k ł a d 33
R1=2-indanyl; R3=2-pirymidyl (1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-Indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-pirymidyn-2-ylopirolidyn-3-ylo]-etan-1-ol
Wytworzono z Półproduktu 51 według Procedury sprzęgania z bromkiem arylu jak w przypadku Przykładu 31.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8,34 (dd, 2H), 7,24-7,18(m, 2H), 7,16 (dd, 2H), 6,94-6,84 (m, 2H), 6,82 (c, 1H), 6,48 (t, 1H), 5,16 (c, 1H), 4,12-3,75 (m, 7H), 3,64 (br d, 1H), 3,52 (d, 1H), 3,36 (d, 1H), 3,32(d, 1H), 3,24 (t, 1H), 3,20 (t, 1H), 1,23 (d, 3H), 0,83 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 446,4 (m+1).
P r z y k ł a d 34 R1=C5H9; R3=2-pirydyl (1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-Cyklopentyloksy-4-metoksy-fenylo)-3-metylo-1-(2-pirydylo)pirolidyn-3-ylo]etan-1-ol
Wytworzono z Półproduktu 68 według Procedury sprzęgania bromkiem arylu jak w przypadku Przykładu 31.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8,18 (ddd, 1H), 7,46 (ddd, 1H) 6,89-6,82 (m, 3H), 6,54 (ddd, 1H), 6,40 (d, 1H), 4,75 (c 1H), 3,92-3,65 (m, 8H), 3,36 (d, 1H), 1,94-1,80 (m, 6H), 1,66-1,55 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 397,4 (m+1).
P r z y k ł a d 35 R1=C5H9; R3=3-pirydyl (1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-Cyklopentyloksy-4-metoksy-fenylo)-3-metylo-1-(3-pirydylo)pirolidyn-3-ylo]etan-1-ol
PL 202 227 B1
Wytworzono z Półproduktu 68 według Procedury sprzęgani katalizowanej palladem jak w przypadku Przykładu 32.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8,00 (d, 1H), 7,93 (d, 1H), 7,12 (dd, 1H), 6,86-6,78 (m, 4H),
4,73 (c, 1H), 3,85-3,59 (m, 8H), 3,12 (d, 1H), 1,90-1,79 (m, 6H), 1,60-1,54 (m, 2H), 1,22 (d, 3H), 0,82 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 397,2 (m+1).
P r z y k ł a d 36
R1=(4-PhO)-Ph; R3=CO2CH3
3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(4-fenoksyfenoksy)fenylo]-3-metylopirolidyno-karboksylan metylu
Procedura eteryfikacji Cryptanda
Do poddawanej mieszaniu zawiesiny wodorku sodu (16 mg 60% dyspersji w oleju mineralnym, 0,40 mmoli) w suchym anizolu (2 ml) dodano Półprodukt 74 (100 mg, 0,32 mmoli), porcjami, przez 5 minut z wydzielaniem H2, w temperaturze pokojowej w atmosferze azotu. Po mieszaniu przez 30 minut, dodano tris[2(2-metoksyetoksy)etylo]aminę (10 ml, 0,03 mmoli), chlorek miedzi (I) (10 mg, 0,10 mmoli) i eter 4-bromo-bifenylowy i uzyskaną mieszaninę ogrzewano w temperaturze wrzenia przez 20 h. Anizol następnie usunięto przy użyciu destylacji próżniowej. Pozostałość rozpuszczono w EtOAc (25 ml) i przesączono przez bibułę filtracyjną GF/F. Przesącz przemyto 1 N aq. HCl (20 ml), osuszono (Na2SO4), przesączono i zatężono in vacuo. Pozostałość oczyszczono przez chromatografię radialną (płytka z krzemionką 2 mm z 1:1 mieszaniną heksany:EtOAc) uzyskując związek tytułowy Przykładu 36 jako żółtawobrązowy olej (40 mg, 26%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3; mieszanina rotamerów) δ: 7,30 (dd, 2H), 7,09-6,86 (m, 10H), 3,88-3,49 (m, 11H), 3,28 (d, 0,5H), 3,19 (d, 0,5H), 1,93 (br s, 0,5H), 1,83 (br s, 0,5H), 1,12 (dd, 3H), 0,71 (br s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 478,2 (m+1).
P r z y k ł a d 37
R1=(4-PhO)-Ph; R3=CO2CH3: inny diastereizomer karbinolu
3-((1S)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(4-fenoksyfenoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
Wytworzono z izomeru (1S)-karbinolu Półproduktu 75 według Procedury eteryfikacji Cryptanda jak w przypadku Przykładu 36.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,32 (t, 2H), 7,07 (dt, 1H), 7,03-6,74 (m, 9H), 3,91-3,55 (m, 9H), 3,35-3,17 (m, 3H), 2,16 (d, 0,5H), 1,38 (br s, 0,5H), 1,12 (d, 3H), 0,85 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 478,2 (m+1).
P r z y k ł a d 38
R1=(4-Ph)-Ph; R3=CO2CH3
3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(4-fenylofenoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
PL 202 227 B1
Wytworzono z Półproduktu 74 według Procedury eteryfikacji Cryptanda jak w przypadku Przykładu 36.
1H NMR (400 MHz, CDCl3; mieszanina rotamerów) δ; 7,55 (d, 2H), 7,51 (d, 2H), 7,42 (t, 2H),
7.31 (t, 1H), 7,05 (dt, 1H), 6,98-6,92 (m, 4H), 3,87-3,54 (m, 11H), 3,29 (d, 0,5H), 3,19 (d, 0,5H), 1,64 (brs, 0,5H), 1,57 (br s, 0,5H), 1,14 (dd, 3H), 0,74 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 462,2 (m+1).
P r z y k ł a d 39
R1=(4-Ph)-Ph; R3=CO2CH3: inny diastereizomer karbinolu
3-((1S)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(4-fenylofenoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
Wytworzono z izomeru (1S)-karbinolu Półproduktu 75 według Procedury eteryfikacji Cryptanda jak w przypadku Przykładu 36.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,56 (d, 2H), 7,52 (dt, 2H), 7,42 (t, 2H),
7.32 (t, 1H), 7,10-6,94 (m, 5H), -3,93-3,58 (m, 9H), 3,38-3,18 (m, 3H), 1,13 (d, 3H), 0,88 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 462,2 (m+1).
P r z y k ł a d 40
R1=Ph; R3=CO2CH3
3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(4-metoksy-3-fenoksyfenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
Wytworzono z Półproduktu 74 według Procedury eteryfikacji Cryptanda jak w przypadku Przykładu 36.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotametrów) δ: 7,32-7,26 (m, 3H), 7,02 (t, 2H), 6,94-6,88 (m, 3H), 3,85-3,49 (m, 11H), 3,27 (d, 0,5H), 3,18 (d, 0,5H), 1,12 (t, 3H), 0,71 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 386,3 (m+1).
P r z y k ł a d 41
R1=Ph; R3=CO2CH3: inny diastereizomer karbinolu
3-((1S)-1-Hydroksyetylo)(3S,43)-4-(4-metoksy-3-fenoksyfenylo)-3-metylopirolidlnokarboksylan metylu
Wytworzono z izomeru (1S)-karbinolu Półproduktu 75 według Procedury eteryfikacji Cryptanda jak w przypadku Przykładu 36.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotametrów) δ: 7,29 (t, 2H), 7,08-6,85 (m, 6H), 3,87-3,52 (m, 9H), 3,34-3,16 (m, 3H), 1,11 (d, 3H), 0,85 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 386,3 (m+1).
P r z y k ł a d 42
R1=4-fluorofenyl; R3=CO2CH3
3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(4-fluorofenoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
Wytworzono z Półproduktu 74 według Procedury eteryfikacji Cryptanda jak w przypadku Przykładu 36.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,05-6,84 (m, 7H), 3,89-3,45 (m, 11H), 3,28 (d, 0,5H), 3,18 (d, 0-,5H), 1,13 (t, 3H), 0,71 (brs, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 404,4 (m+1).
P r z y k ł a d 43
R1=CH2C3H5; R3=CO2CH3
3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
Procedura eteryfikacji z użyciem K2CO3
Do poddawanej mieszaniu mieszaniny Półproduktu 74 (50 mg, 0,16 mmoli) i sproszkowanego K2CO3 (24, 6 mg, 0,18 mmoli) w suchym DMF (1 ml) dodano strzykawką w temperaturze pokojowej w atmosferze azotu bromometylocyklopropan (16,5 pl, 0,17 mmoli). Uzyskaną mieszaninę ogrzewano w 65°C przez 24 h, następnie pozostawiono do ochłodzenia do temperatury pokojowej. Następnie mieszaninę reakcyjną rozcieńczono wodą (5 ml) i wyekstrahowano Et2O (3 x 20 ml). Połączone warstwy organiczne osuszono (MgSO4), przesączono i zatężono in vacuo. Pozostałość oczyszczono przez chromatografię radialną (płytka z krzeminką 1 mm z 30% EtOAc w mieszaninie heksanów) uzyskując związek tytułowy Przykładu 43 jako klarowny olej (30 mg, 51%).
PL 202 227 B1 1H NMR (400 MHz, CDCl3; mieszanina rotamerów) δ: 6,84-6,75 (m, 3H), 3,94-3,54 (m, 13H), 3,29 (d, 0,5H), 3,21 (d, 0,5H), 1,72 (br s, 0,5H), 1,65 (br s, 0,5H), 1,30 (c, 1H), 1,13 (t, 3H), 0,73 (s, 3H), 0,61 (c, 2H), 0,34 (c, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 364,3 (m+1).
P r z y k ł a d 44
R1=CH2C3H5; R3=CO2CH3 Diastereizomer
3-((1S)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidyno-karboksylan metylu
Wytworzono z izomeru (1S)-karbinolu Półproduktu 75 według Procedury eteryfikacji z użyciem K2CO3 jak w przypadku Przykładu 43 stosując bromometylocyklopropan.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,84-6,75 (m, 3H), 3,89-3,58 (m, 11H), 3,33-3,20 (m,3H), 1,52 (br s, 1H), 1,31 (c, 1H), 1,11 (d, 3H), 0,89 (s, 3H), 0,62 (m, 2H), 0,33 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 364,3 (m+1).
P r z y k ł a d 45
R1=2-tiazol; R3=CO2CH3
3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(4-metoksy-3-(1,3-tiazol-2-iloksy)fenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
Wytworzono z Półproduktu 74 według Procedury eteryfikacj i z użyciem K2CO3 jak w przypadku Przykładu 43 stosując 2-bromotiazol.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,24-7,12 (m, 3H), 6,96 (d, 1H), 6,75 (d, 1H), 3,89-3,52 (m, 11H), 3,29 (d, 0,5H), 3,20 (d, 0,5H), 1,74 (br s, 1H), 1,14 (t, 3H), 0,74 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 393,2 (m+1).
P r z y k ł a d 46
R1=2-tiazol; R3=CO2CH3, Diastereizomer
3-((1S)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(4-metoksy-3-(1,3-tiazol-2-iloksy)fenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
Wytworzono z izomerów (1S)-karbinolu Półproduktu 75 według Procedury eteryfikacji z użyciem K2CO3 jak w przypadku Przykładu 43.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,17 (d, 1H), 7,16 (d, 1H), 7,11 (dd, 1H), 6,97 (d, 1H), 6,75 (d, 1H), 3,86-3,59 (m, 9H), 3,42-3,19 (m, 3H), 1,52 (br s, 1H), 1,14 (d, 3H), 0,87 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 393,2 (m+1).
P r z y k ł a d 47
R1=2-(N-Metylo)benzimidazol; R3=CO2CH3
3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-benzimidazol-2-iloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
Wytworzono z Półproduktu 74 według Procedury eteryfikacji z użyciem K2CO3 jak w przypadku Przykładu 43 stosując 2-chloro-N-metylobenzimidazol.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,50 (d, 1H), 7,29-7,10 (m, 5H), 6,95 (d, 1H), 3,80-3,66 (m, 13H), 3,57 (t, 1H), 3,29 (d, 0,5H), 3,20 (d, 0,5H), 2,04 (br s, 1H), 1,13 (t, 3H), 0,77 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 440,2 (m+1).
P r z y k ł a d 48
R1=2-(N-Metylo)benzimidazol; R3=CO2CH3: Diastereizomer
3-((1S)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-benzimidazol-2-iloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
Wytworzono z izomeru (1S)-karbinolu Półproduktu 75 według Procedury eteryfikacji z użyciem K2CO3 jak w przypadku Przykładu 43 stosując 2-chloro-1-metylo-1H-benzimidazol.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,50 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 7,30-7,09 (m, 5H), 6,96 (d, 1H), 3,87-3,63 (m, 12H), 3,40-3,21 (m, 3H), 1,15 (d, 3H), 0,91 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 440,2 (m+1).
P r z y k ł a d 49
R1=CH2CH2CH2Ph; R3=CO2CH3
3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenylo-propoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
Wytworzono z Półproduktu 74 według Procedury eteryfikacji z użyciem K2CO3 jak w przypadku Przykładu 43 stosując chlorek 3-fenylo-propylu.
PL 202 227 B1 1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,35-7,17 (m, 5H), 6,85-6,77 (m, 3H), 4,02 (dt, 2H), 3,90-3,52 (m, 11H), 3,30 (d, 0,5H), 3,21 (d, 0,5H), 2,82 (t, 2H), 2,14 (p, 2H), 1,54 (br s, 0,5H), 1,49 (br s, 0,5H), 1,13 (t, 3H), 0,72 (s, 3H).
P r z y k ł a d 50
R1=CH2CH2CH2Ph; R3=CO2CH3, inny diastereizomer karbinolu
3-((1S)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenylo-propoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
Wytworzono z izomeru (1S)-karbinolu Półproduktu 75 według Procedury eteryfikacji z użyciem K2CO3 jak w przypadku Przykładu 43 stosując izomer (1S)-karbinolu Półproduktu 75.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,33-7,19 (m, 5H), 6,84-6,78 (m, 2H), 6,72 (br s, 1H), 4,01 (t, 2H), 3,90-3,56 (m, 9H), 3,34-3,23 (m, 3H), 2,82 (t, 2H), 2,15 (p, 2H), 1,11 (d, 3H), 0,89 (s, 3H).
P r z y k ł a d 51
R1=CH2CH2CH2CH2Ph; R3=CO2CH3
3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(4-fenylo-butoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
Wytworzono z Półproduktu 74 według Procedury eteryfikacji z użyciem K2CO3 jak w przypadku Przykładu 43 stosując 1-chloro-4-fenylobutan.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,32-7,15 (m, 5H), 6,84-6,74 (m, 3H), 4,00 (t, 2H), 3,89-3,51 (m, 11H), 3,30 (d, 0,5H), 3,22 (d, 0,5H), 2,69 (t, 2H), 1,90-1,79 (m, 4H), 1,41 (dd, 1H), 1,13 (t, 3H), 0,73 (s, 3H).
P r z y k ł a d 52
R1=CH2CH2CH2CH2Ph; R3=CO2CH3, inny diastereizomer karbinolu
3-((1S)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(4-fenylo-butoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
Wytworzono z Półproduktu 74 według Procedury eteryfikacji z użyciem K2CO3 jak w przypadku Przykładu 43 stosując 1-chloro-5-fenylopentan.
1H NMR (400 MHz, CDCl3 mieszanina rotamerów) δ: 7,32-7,16 (m, 5H), 6,83-6,70 (m, 3H), 3,99 (t, 2H), 3,90-3,58 (m, 9H), 3,34-3,21 (m, 3H), 2,69 (t, 2H), 1,90-1,77 (m, 4H), 1,45 (br s, 1H), 1,12 (d, 3H), 0,90 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 442,4 (m+1).
P r z y k ł a d 53
R1=CH2CH2Ph; R3=CO2CH3
3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(2-fenylo-etoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
Wytworzono z Półproduktu 74 według Procedury eteryfikacji z użyciem K2CO3 jak w przypadku Przykładu 43 stosując bromek 2-fenetylu.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,39-7,23 (m, 5H), 6,84-6,78 (m, 3H), 4,20 (t, 2H), 3,87-3,52 (m, 11H), 3,30 (d, 0,5H), 3,21 (d, 0,5H), 3,15 (t, 2H), 1,13 (t, 3H), 0,73 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 414,3 (m+1).
P r z y k ł a d 54
R1=CH2CH2Ph; R3=CO2CH3, inny diastereizomer karbinolu
3-((1S)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(2-fenylo-etoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
Wytworzono z izomeru (1S)-karbinolu Półproduktu 75 według Procedury eteryfikacji z użyciem K2CO3 jak w przypadku Przykładu 43.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,34-7,24 (m, 5H), 6,83 (d, 1H), 6,79 (dd, 1H),
6,73 (br s, 1H), 4,18 (t, 2H), 3,89-3,56 (m, 9H), 3,31-3,20 (m, 3H), 3,15 (t, 2H), 1,11 (d, 3H), 0,89 (s, 3H);
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 55
R1=C5H9; R3=CH2-2-pirydyl (1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-Cyklopentyloksy-4-metoksy-fenylo)-3-metylo-1-(2-pirydylometylo)pirolidyn3-ylo]etan-1-ol
Procedura aminowania redukującego
Do poddawanego mieszaniu roztworu Półproduktu 68 (32 mg, 0,1 mmoli) i 2-karboksyaldehydu pirydyny (10 ml, 0,1 pmoli) w suchym 1,2-dichloroetanie (0,3 ml) dodano triacetoksy-borowodorek sodu (30 mg, 0,14 mmoli) w atmosferze azotu w temperaturze pokojowej. Po mieszaniu przez 3 h, mieszaninę reakcyjną szybko schłodzono nasyconym wodnym NaHCO3 (0,1 ml) i mieszano przez 5 minut. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono EtOAc (20 ml), przemyto nasyconym wodnym roztworem NaHCO3 (20 ml) i solanką (20 ml), następnie osuszono (MgSO4), przesączono i zatężono in vacuo uzyskując związek tytułowy Przykładu 55 jako żółty olej (40,4 mg, 98%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8,54 (ddd, 1H), 7,68 (dt, 1H), 7,43 (d, 1H), 7,18 (ddd, 1H), 6,796,73 (m, 3H), 4,75 (c, 1H), 3,89-3,77 (m, 5H), 3,69 (q, 1H), 3,59 (t, 1H), 3,33 (t, 1H), 3,16 (d, 1H), 2,70 (t, 1H), 2,21 (d, 1H), 1,92-1,80 (m, 6H), 1,64-1,57 (m, 2H), 1,14 (d, 3H), 0,50, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 411,4 (m+1).
P r z y k ł a d 56
R1=C5H9; R3=CH2-3-pirydyl (1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-Cyklopentyloksy-4-metoksy-fenylo)-3-metylo-1-(3-pirydylometylo)pirolidyn3-ylo]etan-1-ol
Wytworzono z Półproduktu 68 według Procedury aminowania redukującego jak w przypadku Przykładu 55 stosując pirydyno-3-karboksyaldehyd.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8,54 (d, 1H), 8,51 (dd, 1H), 7,68 (d, 1H), 7,26 (dd, 1H), 6,78-6,71 (m, 3H), 4,74 (c, 1H), 3,86-3,78 (m, 4H), 3,68 (q, 1H), 3,64 (d, 1H), 3,53 (t, 1H), 3,22 (t, 1H), 3,05 (d, 1H), 2,62 (t, 1H), 2,14 (d, 1H), 1,92-1,78 (m, 6H), 1,64-1,56 (m, 2H), 1,12 (d, 3H), 0,50 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 411,4 (m+1).
P r z y k ł a d 57
R1=C5H9; R3=CH2-4-pirydyl (1R)-1-[(3S,43)-4-(3-Cyklopentyloksy-4-metoksy-fenylo)-3-metylo-1-(4-pirydylometylo)pirolidyn3-ylo]etan-1-ol
Wytworzono z Półproduktu 68 według Procedury aminowania redukującego jak w przypadku Przykładu 55 stosując pirydyno-4-karboksyaldehyd.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8,54 (d, 2H), 7,27 (d, 2H), 6,79-6,72 (m, 3H), 4,74 (c, 1H), 3,863,74 (m, 4H), 3,70 (q, 1H), 3,64 (d, 1H), 3,55 (t, 1H), 3,23 (t, 1H), 3,06 (d, 1H), 2,64 (t, 1H), 2,15 (d, 1H), 1,92-1,80 (m, 6H), 1,65-1,58 (m, 2H), 1, 14 (d, 3H), 0,52 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 411,4 (m+1).
P r z y k ł a d 58
R1=C5H9; R3=CH2CH2CO2CH2Ph
3-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-propanoan fenylometylu
Do poddawanego mieszaniu roztworu akrylanu benzylu (19,4 mg, 0,12 mmoli) w suchym DMF (0,1 ml) dodano Półprodukt 68 (12,8 mg, 0,04 mmoli) i sproszkowany K2CO3 (26,5 mg, 0,18 mmoli)
PL 202 227 B1 w atmosferze azotu. Uzyskaną mieszaninę mieszano w 80°C przez 16 h, następnie pozostawiono do ochłodzenia do temperatury pokojowej. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono CH2Cl2 (20 ml), przemyto wodą, nasyconym wodnym NaHCO3 i solanką, następnie osuszono (Na2SO4), przesączono i zatężono in vacuo. Pozostałość oczyszczono przez chromatografię typu flash (2:1 EtOAc: mieszanina heksanów na żelu krzemionkowym) uzyskując związek tytułowy Przykładu 58 (11,7 mg, 60%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,37-7,31 (m, 5H), 6,81-6,72 (m, 3H), 5,14 (q, 2H), 4,76 (c, 1H), 3,87-3,81 (m, 4H), 3,65 (q, 1H), 3,54 (t, 1H), 3,31 (t, 1H), 3,15 (d, 1H), 2,82 (dt, 2H), 2,62-2,54 (m, 3H), 2,08 (d, 1H), 1,91-1,81 (m, 6H), 1,66-1,56 (m, 2H), 1,15 (d, 3H), 0,48 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 482,3 (m+1).
P r z y k ł a d 59
R1=C5H9; R3=CH2CH2CO2H
Kwas 3-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]propanowy
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 58 według Procedury debenzylowania jak w przypadku Półproduktu 31.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,82-6,71 (m, 3H), 4,80 (c, 1H), 4,06-3,15 (m, 11H), 2,73 (br s, 2H), 1,91-1,74 (m, 6H), 1,63-1,53 (m, 2H), 1,14 (d, 3H), 0,68 (s, 3H).
P r z y k ł a d 60
R1=C5H9; R3=CH2CH2CH2Ph
2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]octan fenylometylu
Wytworzono z Półproduktu 68 według Procedury sprzęgania z użyciem zasady Huniga jak w przypadku Półproduktu 74 stosując bromooctan benzylu.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,41-7,32 (m, 5H), 6,82-6,73 (m, 3H), 5,18 (q, 2H), 4,77 (c, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,68 (q, 1H), 3,59 (t, 1H), 3,52 (d, 1H), 3,36-3,30 (m, 2H), 3,24 (d, 1H), 2,88 (t, 1H), 2,31 (d, 1H), 1,93-1,80 (m, 6H), 1,65-1,56 (m, 2H), 1,16 (d, 3H), 0,53 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 468,3 (m+1).
P r z y k ł a d 61
R1=C5H9; R3=CH2CO2H
Kwas 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]octowy
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 60 według Procedury debenzylowania jak w przypadku Półproduktu 31.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,77-6, 68 (m, 3H), 5,56 (br s, 1H), 4,77 (c, 1H), 3,99-3,85 (m, 4H), 3,82-3,59 (m, 7H), 2,88 (br s, 1H), 1,91-1,75 (m, 6H), 1,59-1,51 (m, 2H), 11,1 (d, 3H), 0,67 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, ujemne): Da/e 376,2 (m-1).
100
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 62
R1=C5H9; R3=COCH(OAc)Ph
Octan 2-[(3R)-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-okso-1-fenyloetylu
Wytworzono z Półproduktu 68 (104 mg, 0,33 mmoli) i chlorku kwasu O-acetylomigdałowego (75 pj,
0,33 mmoli) według Procedury acylowania jak w przypadku Przykładu 7 uzyskując związek tytułowy
Przykładu 62 (149 mg, 100%).
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,60-7,37 (m, 5H), 6,82-6,70 (m, 3H), 6,08 (m, 1H), 4,76 (m, 1H), 4,05-3,32 (m, 7H), 3,81 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 1,95-1,53 (br m, 5H), 1,13 i 0,51 (dublety, 3H, rotamery), 0,79 i 0,41 (singlety, 3H, rotamery).
P r z y k ł a d 63
R1=C5H9; R3=COCH(OH)Ph
1-[(3R)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksy-2-fenyloetan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 62 według procedury hydrolizy LiOH jak w przypadku Półproduktu 5 uzyskując związek tytułowy Przykładu 63 jako białą piankę (99 mg, 66%).
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,41-7,26 (m, 5H), 6,80-6,41 (m, 3H), 5,16-5,07 (m, 1H), 4,754,54 (multiplety, 1H, rotamery i diastereizomery), 4,06-2,80 (m, 7H), 3,81 i 3,79 i 3,78 (singlety, 3H, rotamery i diastereizomery), 1,95-1,55 (br m, 5R), 1,15 i 1,02 (dublety, 3H, rotamery), 0,77 i 0,75 i 0,46 i 0,38 (singlety, 3H, rotamery i diastereizomery).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 454,5 (m+1).
PL 202 227 B1
101
P r z y k ł a d 64 R1=C5H9; R3=COCH2OCH3Ph
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-(fenylometoksy)etan-1-on
Wytworzono z Półproduktu 68 (176 mg, 0,574 mmoli) według procedury z użyciem zasadu Huniga jak w przypadku Półproduktu 74 stosując chlorek benzyloksyacetylu (31 pl, 0,22 mmoli, 2 równ.), otrzymując klarowny, bezbarwny olej (79 mg, 29%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,33-7,28 (m, 5H), 6,77-6,73 (m, 3H), 4,73-4,71 (m, 1H), 4,65-4,64 (m, 2H), 4,14-3,19 (c, 12H), 2,07-1,56 (m, 8H), 1,16-1,09 (dd, 3H), 0,72 (s, 3H).
P r z y k ł a d 65
R1=C5H9; R3=COCH2OH
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksyetan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 64 według Procedury debenzylowania jak w przypadku Półproduktu 31 dając białe ciało stałe (47 mg, 73%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,82-6,76 (m, 3H), 4,75-4,73 (m, 1H), 4,15-3,04 (c, 12H), 1,92-1,61 (m, 9H), 1,27-1,24 (dd, 3H), 0,76 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 378,2 (m+1).
P r z y k ł a d 66
R1=C5H9; R3=(S)-COCH(OAc)CH3
Octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyl-oksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo](1S)-1-metylo-2-oksoetylu
Wytworzono z Półproduktu 68 (106 mg, 0,330 mmoli) według Procedury acylowania jak w przypadku Przykładu 7 stosując chlorek (S)-(-)-2-acetoksypropionylu (84 pl, 0,66 mmoli, 2 równ.), otrzymując klarowny, bezbarwny olej, którego dalej nie oczyszczano.
102
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 67
R1=C5H9; R3=(S)-COCH(OH)CH3
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-(2S)-2-hydroksypropan-1-on
Surowy związek Przykładu 66 odbezpieczono według Procedury z użyciem LiOH jak w przypadku Półproduktu 5 uzyskując związek tytułowy Przykładu 67 jako białe ciało stałego (22 mg, 17% dla dwóch etapów).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,82-6,76 (m, 3H), 4,75-4,73 (m, 1H), 4,38-4,35 (m, 1H), 3,88-3,55 (c, 9H), 3,39-3,25 (dd, 1H), 1,92-1,58 (m, 9H), 1,41-1,36 (dd, 3H), 1,18-1,14 (dd, 3H), 0,77-0,76 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 392,3 (m+1).
P r z y k ł a d 68
R1=C5H9; R3=CO(CH2CH2)OAc
Octan {[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]karbonylo}-cyklopropylu
Półprodukt 68 (97,6mg, 0,306 mmoli) acylowano według Procedury acylowania jak w przypadku Przykładu 7 stosując chlorek 2-acetoksy-2-cyklopropanetanoilu (99 mg, 0,61 mmoli, 2 równ.), otrzymując klarowny, bezbarwny olej (77 mg, 56%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,78-6,71 (m, 3H), 4,72-4,71 (m, 1H), 3,80-3,36 (c, 10H), 2,08 (s, 3H), 1,90-1,50 (m, 11H), 1,16-1,11 (d, 3H), 0,96 (br s, 1H), 1,18-1,14 (dd, 3H), 0,70 (s, 3H).
PL 202 227 B1
103
P r z y k ł a d 69
R1=C5H9; R3=CO(CH3CH2)OH
Keton 3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylowo-hydroksycyklopropylowy
Związek ze związku tytułowego Przykładu 68 (77 mg) shydrolizowano według Procedury z użyciem LiOH jak w przypadku Półproduktu 5 uzyskując związek tytułowy Przykładu 69 jako białe ciało stałe (34 mg, 44% dla dwóch etapów).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,80-6,75 (m, 3H), 4,74-3,33 (c, 10H), 2,30 (br s, 1H), 1,93-1,56 (m, 8H), 1,37-0,89 (m, 8H), 0,74-0,72 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 404,4 (m+1).
P r z y k ł a d 70
R1=C5H9; R3=COCH(OAc)(CH3)CH3
Octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-1,1-dimetylo-2-oksoetylu
Półprodukt 68 (124 mg, 0,0,389 mmoli) acylowano według Procedury acylowania jak w przypadku Przykładu 7 stosując chlorek (+)-2-acetoksy-2-metylopropionylu (11 gl, 0,78 mmoli, 2 równ.).
Uzyskany olej nie był dalej oczyszczany.
104
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 71
R1=C5H9; R3=COCH(OH)(CH3)CH3
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksy-2-metylopropan-1-on
Surowy produkt Przykładu 70 poddano przemianie według procedury hydrolizy LiOH jak w przypadku Półproduktu 5 uzyskując związek tytułowy Przykładu 71 jako białe ciało stałe (47 mg, 30%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,79-6,75 (m, 3H), 4,75 (br s, 1H), 4,49 (br s, 1H), 3,91-3,48 (c, 10H), 1,90-1,46 (m, 14H), 1,18-1,14 (dd, 3H), 0,77-0,74 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 406,3 (m+1).
P r z y k ł a d 72
R1=C5H9; R3=COCO2CH3
2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-oksooctan metylu
Półprodukt 68 (57,5 mg, 0,180 mmoli) poddano przemianie według procedury DIEA jak w przypadku Półproduktu 32 stosując chlorek metylooksalilu i uzyskując związek tytułowy Przykładu 72 jako klarowny, bezbarwny olej (26,8 mg, 36%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,81-6,77 (m, 3H), 4,75-4,74 (m, 1H), 4,12-3,45 (c, 13H), 1,91-1,52 (m, 8H), 1,18-1,13 (dd, 3H), 0,78-0,75 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 406,4 (m+1).
PL 202 227 B1
105
P r z y k ł a d 73
R1=C5H9; R3=COCO2H
Kwas 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-okso-octowy
Związek tytułowy Przykładu 72 (46,8 mg, 0,116 mmoli) poddano przemianie według Procedury z uż yciem LiOH jak w przypadku Półproduktu 5 uzyskując związek tytułowy Przykładu 73 jako klarowną, bezbarwną warstewkę (34 mg, 76%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,82-6,76 (m, 3H), 4,75-4,73 (m, 1H), 4,43-3,49 (c, 10H), 1,92-1,58 (m, 8H), 1,19-1,16 (dd, 3H), 0,78-0,76 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, ujemne): Da/e 390,2 (m-1).
P r z y k ł a d 74
R1=C5H9; R3=COCONH2
2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo-]-2-okso-acetamid
Związek tytułowy Przykładu 72 (7,1 mg, 0,014 mmoli) rozpuszczono w THF (0,5 ml), dodano NH4OH (0,5 ml) i przyrząd szczelnie zamknięto i mieszano przez 2 h w temperaturze pokojowej. TLC (1:1 EtOAc: mieszanina heksanów) wykazało całkowite zużycie substancji wyjściowej. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono EtOAc (20 ml) i warstwy organiczne przemyto solanką (2 x 15 ml). Warstwę organiczną osuszono nad Na2SO4 i zatężono in vacuo uzyskując klarowny, bezbarwny olej (6,6 mg, 117%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,36 (br s, 1H), 6,82-6,79 (m, 3H), 5,53 (brs, 1H), 4,76-4,75 (m, 1H), 4,44-3,47 (c, 10H), 1,92-1,58 (m, 8H), 1,18-1,17 (d, 3H), 0,78-0,74 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, ujemne): Da/e 389,1 (m-1).
106
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 75
R1=PhC CCH2; R3=COCONH2
2-{(3S,4S)-3-((R)-1-Hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)-fenylo]-3-metylopirolidyn-1-yl}-2-okso-acetamid
Wytworzono przez acylowanie Półproduktu 73 chlorkiem metylooksalilu według Procedury DIEA jak w przypadku Półproduktu 32, usunięcie grupy t-butylowej według Procedury jak w przypadku Półproduktu 72, O-alkilowanie Półproduktu 90 według Procedury eteryfikacji z użyciem K2CO3 jak w przypadku Przykładu 43 i amidowanie według Procedury jak w przypadku Przykładu 74.
1H NMR δ: 7,28-7,42 (m, 5H); 7,08 (sd, 1H); 6,83-6,87 (m, 2H); 5,45 (bs, 1H); 5,0 (s, 2H); 4,424,48 (2d, 0,5H); 4,26 (t, 0,5H); 3,72-4,01 (m, 3,5H); 3,89 (s, 3H); 3,50-3,70 (m, 1H); 3,44 (d, 0,5H); 0,96-0,99 (dd, 3H); 0,71 (d, 3H).
P r z y k ł a d 76
R1=4-CF3PhC CCH2; R3=COCONH2
2-((3S,4S)-3-((R)-1-Hydroksyetylo)-4-{4-metoksy-3-[3-(4-trifluorometylo-fenylo)prop-2-ynyloksy]-fenylo}-3-metylo-pirolidyn-1-ylo)-2-okso-acetamid
Wytworzono jak opisano w Przykładzie 75, stosując Półprodukt 92 jako odczynnik O-alkilujący. 1H NMR δ: 7,61 (m, 4H); 7,04 (s, 1H); 6,85-6,91 (m, 2H); 5,69 (bs, 1H); 5,00 (s, 2H); 4,42-4,49 (2d,
0,5H); 4,26 (t, 0,5H); 3,69-4,07 (m, 5H); 3,90 (s, 3H); 3,45-3,58 (m, 1H); 1,04-1,07 (dd, 3H); 0,73 (d, 3H).
PL 202 227 B1
107
R1=4-FPhOCH2CH2CH2; R3=COCONH2
2-[(3S,4S)-4-{3-[3-(4-Fluorofenoksy)propoksy]-4-metoksy-fenylo}-3-((R)-1-hydroksyetylo)-3-metyl-pirolidyn-1-ylo]-2-okso-acetamid
Wytworzono jak opisano w Przykładzie 75, stosując 1-(3-chloropropoksy)-4-fluorobenzen jako odczynnik alkilujący.
1H NMR δ: 6,93-6,99 (m, 2H); 6,82-6,88 (m, 5); 5,44 (s, 1H); 4,40 (dd, 0,5H); 4,14-4,22 (m, 5H); 3,83 (s, 3H); 3,69-4,04 (m, 5H); 3,56 (d, 0,5H); 2,28 (kwint., 2H); 1,16 (dd, 3H): 0,75 (d, 3H).
P r z y k ł a d 78
R1=CH2C3H5; R3=COCONH2
2-[(3S,4S)-4-(3-Cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-okso-acetamid
Wytworzono jak opisano w Przykładzie 75, stosując bromek cyklopropylometylu jako odczynnik alkilujący.
1H NMR δ: 6,80-6,81 (m, 3H); 5,50 (bs, 1H); 4,40 (2d, 0,5H); 4,23 (t, 0,5H); 3,68-4,05 (m, 7H); 3,84 (s, 3H); 1,40 (t, 1H); 1,17 (sd, 3H); 0,76 (d, 3H); 0,61-0,67 (m, 2H); 0,33-0,38 (m, 2H).
108
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 79 R1=2-indanyl; R3=COCONH2
2-{(3S,4S)-3-((R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-(indan-2-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}-2-okso-acetamid
Wytworzono jak opisano w Przykładzie 75, stosując 2-bromoindan jako odczynnik alkilujący.
1H NMR δ: 7,16-7,24 (m, 4H); 6,84-6,87 (m, 3H); 5,51 (3, 1H); 5,17-5,20 (m, 1H); 4,42-4,5 (2d,
0,5H); 4,24 (t, 0,5H); 3,60-4,06 (m, 6H); 3,81 (s, 3H); 3,20-3,40 (m, 4H); 1,20 (sd, 3H); 0,78 (d, 3H)
P r z y k ł a d 80
R1=C5H9; R3=COCONHCH3
2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-N-metylo-2-oksoacetamid
Związek tytułowy Przykładu 72 (17,3 mg, 0,0427 mmoli) rozpuszczono w THF (0,8 ml). Dodano metylaminę (40% w wodzie, 0,5 ml) i przyrząd szczelnie zamknięto i mieszano przez 1 h w temperaturze pokojowej. TLC (3:1 EtOAc: mieszanina heksanów) wykazało całkowite zużycie substancji wyjściowej. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono EtOAc (20 ml) i warstwy organiczne przemyto solanką (2 x 15 ml). Warstwę organiczną osuszono nad Na2SO4 i zatężono in vacuo uzyskując klarowny, bezbarwny olej (16, 9 mg, 97%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,59 (br s, 1H), 6,80-6,79 (m, 3H), 4,75-4,73 (m, 1H), 4,47-3,46 (c, 10H), 2,89-2,87 (dd, 3H), 1,91-1,57 (m, 8H), 1,18-1,16 (dd, 3H), 0,76-0,73 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 405,1 (m+1).
PL 202 227 B1
109
P r z y k ł a d 81 R1=C5H9; R3=COCO-piperydyna
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-piperydyloetano-1,2-dion
Związek tytułowy Przykładu 72 (25,4 mg, 0,0626 mmoli) rozpuszczono w THF (0,8 ml). Dodano piperydynę (213 ^, 2,15 mmoli, 34 równ.), przyrząd szczelnie zamknięto i ogrzewano w 53°C przez 12 h.
TLC (100% EtOAc) wykazało tworzenie małej ilości produktu. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono
EtOAc (20 ml), warstwy organiczne przemyto 2N HCl (2 x 15 ml), 1 N NaOH (15 ml) i solanką (2 x 15 ml). Warstwę organiczną osuszono nad Na2SO4 i zatężono in vacuo uzyskując klarowny, bezbarwny olej (1,2 mg, 4%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,82-6,76 (m, 3H), 4,75 (m, 1H), 4,01-3,27 (c, 14H), 1,89-1,59 (m, 14H), 1,18-1,13 (dd, 3H), 0,78-0,74 (d, 3H).
P r z y k ł a d 82
R1=C5H9; R3=COCONHC5H9
2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-N-cyklopentylo-2-oksoacetamid
Związek tytułowy Przykładu 72 (20,9 mg, 0,0515 mmoli) rozpuszczono w THF (0,8 ml). Dodano cyklopentylaminę (211 ^, 2,13 mmoli, 41 równ.) i mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 42 h. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono EtOAc (20 ml) i warstwy organiczne przemyto 2 N HCl (2 x 15 ml), 1 N NaOH (15 ml) i solanką (2 x 15 ml). Warstwę organiczną osuszono nad Na2SO4 i zatężono in vacuo. Uzyskany olej oczyszczono przez chromatografię na krzemionce (100% EtOAc) uzyskując klarowny, bezbarwny olej (14,0 mg, 59%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,57-7,53 (br s, 1H), 6,8-6,78 (m, 3H), 4,76-4,73 (brs, 1H), 4,48-3,44 (c, 9H), 2,04-1,48 (m, 18H), 1,18-1,16 (d, 3H), 0,77-0,73 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, ujemne): Da/e 457,2 (m-1).
110
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 83
R1=C5H9; R3=COCONHCH2Ph
2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-okso-N-benzyloacetamid
Związek tytułowy Przykładu 83 wytworzono sposobem z Przykładu 82 stosując benzylaminę i uzyskując klarowny, bezbarwny olej (9,4 mg, 47%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,96-7,92 (br s, 1H), 7,36-7,25 (m, 3H), 4,75 (br s, 1H), 4,49-4,47 (d, 2H), 4,28-3,46 (c, 9H), 1,93-1,61 (m, 8H), 1,19-1,16 (dd, 3H), 0,78-0,74 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 481,4 (m+1).
R1=C5H9; R3=(R)-COCH(C4H9)NHCO2CH2Ph
N-{(1R)-2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-1-butylo-2-oksoetylo}(fenylometoksy)karboksyamid
Półprodukt 68 (39,5 mg, 0,129 mmoli) poddano przemianie według Procedury DIEA jak w przypadku Półproduktu 32 uzyskując klarowny, bezbarwny olej (59,0 mg, 80%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,36-7,26 (m, 5H), 6,82-6,71 (m, 3H), 5,71-5,68 (dd, 1H), 5,12-5,06 (m, 2H), 4,73 (m, 1H), 4,49-4,47 (m, 1H), 4,12-2,58 (c, 8H), 2,03-1,25 (m, 16H), 1,16-1,14 (dd, 3H), 0,92-0,84 (m, 3H), 0,73-0,72 (d, 3H).
PL 202 227 B1
111
P r z y k ł a d 85
R1=C5H9=(R)-COCH(NH2)C4H9 (2R)-1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklo-pentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-aminoheksan-1-on
Związek tytułowy Przykładu 84 (59 mg, 0,10 mmoli) poddano przemianie według Procedury debenzylowania jak w przypadku Półproduktu 31 uzyskując związek tytułowy Przykładu 85 jako biały proszek (43 mg, 95%).
1H NMR (CD3OD, 400 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 6,90-6,83 (m, 3H), 3,85-3,30 (c, 10H), 2,00-1,37 (m, 14H), 1,14-1,11 (dd, 3H), 1,10-0,92 (dt, 3H), 0,77 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 433,5 (m+1).
P r z y k ł a d 86
R1=C5H9; R3=(R)-COCH(i-Pr)NHCO2CH2Ph
N-{(1R)-2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-1-(metyloetylo)-2-oksoetylo)(fenylometoksy)-karboksyamid
Półprodukt 68 (43,7 mg, 0,143 mmoli) acylowano sposobem z użyciem zasady Huniga jak w przypadku Pół produktu 74 stosują c Z-D-Val-OSu (54,6 mg, 0,15 mmoli, 1,1 równ.), otrzymują c klarowny, bezbarwny olej (38,9 mg, 49%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,36-7,33 (m, 5H), 6,80-6,71 (m, 3H), 5,62-5,59 (d, 1H), 5,10-5,06 (m, 2H), 5,84-5,72 (m, 1H), 4,12-2,68 (c, 10H), 2,03-1,52 (m, 9H), 1,18-1,14 (dd, 3H), 1,04-0,92 (m, 7H), 0,73-0,70 (d, 3H).
112
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 87
R1=C5H9; R3=(R)-COCH(i-Pr)NH2 (2R)-1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklo-pentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-amino-3-metylobutan-1-on
Związek tytułowy Przykładu 86 (38,9 mg, 0,070 mmoli) poddano przemianie według Procedury debenzylowania jak w przypadku Półproduktu 31 uzyskując związek tytułowy Przykładu 87 jako klarowne ciało stałe (26 mg, 88%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,42-6,33 (m, 3H), 4,36 (m, 1H), 3,62-2,80 (c, 10H), 2,81-2,68 (m, 1H), 1,42-1,08 (m, 9 H), 0,78-0,65 (m, 9H), 0,24 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 419,5 (m+1).
P r z y k ł a d 88
R1=C5H9; R3=(S)-COCH(OAc)C6H11
Octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo](1S)-1-cykloheksylo-2-oksoetylu
Półprodukt 68 (41,2 mg, 0,129 mmoli) acylowano według Procedury z użyciem zasady Huniga jak w przypadku Półproduktu 74 stosując chlorek kwasu (S)-(+)-acetoksyheksahydromigdałowego (625 p 0,4121 M roztwór w CH2Cl2, 2 równ.) uzyskując związek tytułowy Przykładu 88 jako klarowny, bezbarwny olej (40,5 mg, 63%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ; 6,78-6,77 (m, 3H), 4,84-4,72 (m, 2H),
4,12-3,11 (m, 9H), 2,10 (d, 3H), 2,02-1,68 (m, 1 5H), 1,38-0,99 (m, 10H), 0,81-0,74 (d, 3H).
PL 202 227 B1
113
P r z y k ł a d 89
R1=C5H9; R3= (S)-COCH(OH)C6H11
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-(2S)-2-cykloheksylo-2-hydroksyetan-1-on
Związek tytułowy Przykładu 88 (40,5 mg, 0,0807 mmoli) poddano przemianie według procedury hydrolizy LiOH jak w przypadku Półproduktu 5 uzyskując związek tytułowy Przykładu 89 jako klarowny, bezbarwny olej (26,9 mg, 72%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,80-6,78 (m, 3H), 4,73 (m, 1H), 4,14-4,05 (m, 1H), 3,83-2,99 (c, 9H), 1,91-1,36 (m, 17H), 1,35-1,11 (m, 7H), 0,79-0,78 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 460,3 (m+1).
P r z y k ł a d 90
R1=C5H9; R3= (R)-COCH(OAc)C6H11
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-(2R)-2-cykloheksylo-2-acetoksyetan-1-on
Półprodukt 68 (43,1 mg, 0,135 mmoli) poddano przemianie według Procedury z użyciem zasady Huniga jak w przypadku Półproduktu 74 stosując chlorek kwasu (R)-(-)-acetoksyheksahydromigdałowego (368 ^, 0,734 M roztwór w CH2Cl2, 2 równ.) uzyskując klarowny, bezbarwny olej (59,9 mg, 88%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,84-6,64 (m, 3H), 4,78-4,76 (m, 2H),
4,12-2,65 (c, 9H), 2,11 (d, 3H), 2,10-1,51 (m, 15H), 1,38-0,98 (m, 10H), 0,73-0,65 (d, 3H).
114
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 91
R1=C5H9; R3=(R)-COCH(OH)C6H11 (2R)-1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklo-pentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-cykloheksylo-2-hydroksyetan-1-on
Związek tytułowy Przykładu 90 (59,9 mg, 0,119 mmoli) poddano przemianie według procedury hydrolizy LiOH jak w przypadku Półproduktu 5 uzyskując klarowną, bezbarwną warstewkę (46,6 mg, 84%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,85-6,74 (m, 3H), 4,79-4,72 (m, 1H),
4,13-4,07 (m, 1H), 3,87-3,01 (c, 9H), 1,96-1,34 (m, 1 7H), 1,34-1,08 (m, 7H), 0,78-0,77 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 460,4 (m+1).
P r z y k ł a d 92
R1=C5H9; R3=(S)-COCH(C4H9)NHCO2CH2Ph
N-{2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-(1S)-1-butylo-2-oksoetylo}(fenylometoksy)karboksyamid
Półprodukt 68 (40,6 mg, 0,125 mmoli) poddano przemianie według Procedury z użyciem zasady Huniga jak w przypadku Półproduktu 74 stosując Z-L-Nle-ONp (53 mg, 0,15 mmoli, 1,1 równ.) uzyskując związek tytułowy Przykładu 92 jako klarowny, bezbarwny olej (50,4 mg, 71%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszaninę rotamerów) δ: 7,36-7,25 (m, 5H), 6,80-6,75 (m, 3H), 5,74-5,72 (dd, 1H), 5,10-5,06 (m, 2H), 4,74-4,53 (m, 1H), 4,13 (m, 1H), 4,13-3,35 (c, 8H), 1,95-1,24 (m, 16H), 1,14-1,13 (d, 3H), 0,93-0,87 (m, 3H), 0,74 (s, 3H),
PL 202 227 B1
115
P r z y k ł a d 93
R1=C5H9; R3=(S)-COCH(C4H9)NH2
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-(2S)-2-aminoheksan-1-on
Związek tytułowy Przykładu 92 (50,4 mg, 0,0889 mmoli) poddano Procedurze debenzylowania jak w przypadku Półproduktu 31 uzyskując związek tytułowy Przykładu 93 jako białe ciało stałe (31,7 mg, 82%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,89-6,74 (m, 3H), 4,83-4,75 (m, 1H), 4,40-3,32 (c, 10H), 1,99-1,68 (m, 14H), 1,14-1,12 (m, 3H), 1,04-0,95 (d, 3H), 0,91-0,88 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 433,5 (m+1).
P r z y k ł a d 94
R1=C5H9; R3=(R)-COCH(OAc)(CH2)3CH3
Octan (1R)-2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklo-pentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-1-butylo-2-oksoetylu
Wytworzono z Półproduktu 68 według Procedury sprzęgania z użyciem zasady Huniga jak w przypadku Półproduktu 74 stosując octan (1R)-1-(chlorokarbonylo)pentylu.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,81 (m, 2H), 6,79-6,69 (m, 3H), 5,105,02 (m, 1H),4,79-4,73 (m, 1H), 4,14-3,18 (c, 9H), 2,14 (d, 3H), 1,94-1,76 (m, 8H), 1,53-1,34 (m, 4H), 1,20 (dd, 2H), 0,96-0,86 (m, 3H), 0,74 (d, 3H).
P r z y k ł a d 95
R1=C5H9; R3=(R)-COCH(OH)(CH2)3CH3 (2R)-1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklo-pentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksyheksan-1-on
Związek tytułowy Przykładu 94 (5 mg, 0,011 mmoli) poddano hydrolizie za pomocą LiOH uzyskując związek tytułowy Przykładu 95 (2,5 mg, 55%) jako klarowny film.
1H NMR (Metanol-d4, 400 MHz) δ: 6,91-6,80 (m, 3H), 4,34-4,28 (m, 1H), 4,04-3,35 (c, 9H), 1,90-1,77 (m, 8H), 1,74-1,62 (m, 2H), 1,55-1,23 (m, 4H), 1,12 (d, 3H), 0, 97-0,87 (m, 3H), 0,74 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 434,2 (m+1).
P r z y k ł a d 96
R1=C5H9; R3=(S)-COCH(NHCBZ)CH2Ph
N-{2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklo-pentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-(1S)-2-okso-1-benzylo-etylo}(fenylometoksy)karboksyamid
Wytworzono z Półproduktu 68 według Procedury acylowania z użyciem zasady Huniga jak w przypadku Półproduktu 74 stosując ester p-nitrofenylowy N-CBZ-(S)-fenylalaniny.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,41-7,26 (m, 10H), 6,78-6,42 (m, 3H),
5.78- 5,74 (m, 1H), 5,14-5,05 (m, 2H), 4,76-4,70 (m, 2H), 3,81 (s, 3H), 3,75-2,66 (c, 10H), 1,94-1,80 (m, 6H), 1,65-1,57 (m, 2H), 1, 08-0,99 (dd, 3H), 0,64 i 0,33 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 601,2 (m+1).
P r z y k ł a d 97
R1=C5H9; R3=(S)-COCH(NH2)CH2Ph
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-(2S)-2-amino-3-fenylopropan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 96 według Procedury debenzylowania jak w przypadku Półproduktu 31.
1H NMR (Metanol-d4, 400 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 7,47-7,31 (m, 5H), 6,88-6,47 (m, 3H),
4.78- 4,76 (m, 1H), 4,48-4,44 (m, 1H), 3,80-3,06 (c, 13H), 1,88-1,80 (m, 6H), 1,67-1,64 (m, 2H), 1,02 (d, 3H), 0,75 i 0,34 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 467,5 (m+1).
P r z y k ł a d 98
R1=C5H9; R3=(R)-COCH(NHCBZ)CH2Ph
N-{(1R)-2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-okso-1-benzyloetylo)(fenylometoksy)karboksyamid
Wytworzono z Półproduktu 68 według Procedury acylowania z użyciem zasady Huniga jak w przypadku Półproduktu 74 stosując ester p-nitrofenylowy N-CBZ-(R)-fenylalaniny.
116
PL 202 227 B1 1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,41-7,19 (m, 10H), 6,77-6,46 (m, 3H), 5,70 (d, 1H), 5,14-5,04 (m, 2H), 4,76-4,69 (m, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,93-2,99 (c, 6H), 2,53 (d, 1H), 1,93-1,81 (m, 6H), 1,62-1,56 (m, 2H), 1,06 (dd, 3H), 0,67 i 0,28 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 602,3 (m+1).
P r z y k ł a d 99
R1=C5H9; R3=(R)-COCH(NH2)CH2Ph (2R)-1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklo-pentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-amino-3-fenylopropan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 98 według Procedury debenzylowania jak w przypadku Pół produktu 31.
1H NMR (Metanol-d4, 400 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 7,42-7,26 (m, 5H), 6,88-6,65 (m, 3H), 4,80-4,78 (m, 1H), 4,42-4,39 (m, 1H), 3,89-2,42 (c, 13H), 1,89-1,79 (m, 6H), 1,64-1,62 (m, 2H), 0,99 (dd, 3H), 0,69 i 0,21 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 467,0 (m+1).
P r z y k ł a d 100
R1=CH2C3H5; R3=COCH(OAc)C4H9
Octan 2-{(3S,4S)-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-okso-1-propylo-etylu
Półprodukt 67 (46 mg, 0,15 mmoli) poddano przemianie według Procedury z użyciem zasady Huniga jak dla Półproduktu 74 stosując chlorek (+)-2-acetoksypropionylu (29 mg, 0,165 mmoli) uzyskując związek tytułowy Przykładu 100 (36 mg, 54%).
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,86-6,69 (m, 3H), 5,30-5,02 (m, 1H), 4,17-4,00 (m, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,82-3,18 (m, 5H), 3,08 i 2,97 (singlety, 2H, rotamery), 2,13 i 2,11 (singlety, 3H, rotamery), 1,95-1,23 (m, 5H), 1,20-1,14 (m, 2H), 1,00-0,92 (m, 3H), 0,76 i 0,72 (dublety, 3H, rotamery), 0,62 (m, 2H), 0,36 (m, 2H).
PL 202 227 B1
117
P r z y k ł a d 101
R1=CH2C3H5; R3=COCH(OH)C4H9
1-{(3S,4S)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksypentan-1-on
Przykład 100 (36 mg, 80 gmoli) poddano Procedurze hydrolizy z użyciem LiOH jak dla Półproduktu 5 uzyskując związek tytułowy Przykładu 101 jako klarowną warstewkę (30 mg, 90%).
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,85-6,73 (m, 3H), 4,23 (m, 1H), 4,07-2,98 (m, 6H), 3,83 (s, 3H), 1,71-1,23 (m, 5H), 1,16 (m, 3H), 0,96 (m, 3H), 0,77 (s, 3H), 0,62 (m, 2H), 0,37 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 406,5 (m+1).
P r z y k ł a d 102
R1=CH2C3H5; R3=(S)-COC(CH3)OCH2Ph
1-{(3S,4S)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-(fenylometoksy)propan-1-on
Półprodukt 67 (46 mg, 0,15 mmoli) poddano przemianie według Procedury z użyciem zasady Huniga jak dla Półproduktu 74 stosując chlorek (2S)-2-(fenylometoksy)propanoilu (59 mg, 0,3 mmoli) uzyskując związek tytułowy Przykładu 102 (54 mg, 77%).
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,40-7,25 (m, 5H), 6,82-6,77 (m, 2H), 6,72 (s, 1H), 4,63 (dd, 1H), 4,49 (dd, 1H), 4,22 (m, 1H), 3,98-3,38 (m, 8H), 3,82 (s, 3H), 3,07 i 2,96 (singlety, 1H, rotamery), 1,43 (m, 3H), 1,31 (m, 1H), 1,17 i 1,10 (dublety, 3H, rotamery), 0,72 i 0,70 (singlety, 3H, rotamery), 0,62 (m, 2H), 0,37 (m, 2H).
P r z y k ł a d 103
R1 = CH2C3H5; R3=(S)-COC(CH3)OH
1-{(3S,4S)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-(hydroksy)propan-1-on
118
PL 202 227 B1
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 102 (54 mg, 0,12 mmoli) według Procedury debenzylowania jak dla Półproduktu 31 uzyskując związek tytułowy Przykładu 103 jako klarowny olej (45 mg, 100%).
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,84-6,73 (m, 3H), 4,44 (m, 1H), 4,06-3,16(m, 8H), 3,82 (s, 3H), 2,99 (d, 1H), 1,38 (m, 3H, rotamery), 1,30 (m, 1H), 1,18 (m, 3H, rotamery), 0,78 i 0,76 (singlety, 3H, rotamery), 0,62 (m, 2H), 0,36 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 378,7 (m+1).
P r z y k ł a d 104
R1=CH2C3H5; R3=(R)-COCH(t-Bu)NHCO2t-Bu
N-((1R)-2-{(3S,4S)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylo-pirolidynylo}-1-(tert-butylo)-2-oksoetylo)(tert-butoksy)karboksyamid
Półprodukt 67 (46 mg, 0,15 mmoli) poddano przemianie według Procedury sprzęgania EDCI Przykładu 27 stosując Boc-D-t-butyloglicynę (35 mg, 0,15 mmoli) i uzyskując związek tytułowy Przykładu 104 jako białą piankę (62 mg, 80%).
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,85-6,79 (m, 2H), 6,72-6,64 (m, 1H), 4,36-4,00 (m, 3H, rotamery), 3,83 (s, 3H), 3,79 (d, 2H), 3,67-3,12 (m, 4H, rotamery), 1,44 i 1,41 (singlety, 9H, rotamery), 1,32 (m, 1H), 1,22-1,16 (m, 3H), 1,06 i 1,01 (singlety, 9H, rotamery), 1,02 (m, 3H), 0,73 i 0,63 (singlety, 3H, rotamery),
0,61 (m, 2H), 0,36 (m, 2H).
PL 202 227 B1
119
P r z y k ł a d 105
R1=CH2C3H5; R3=(R)-COCH(t-Bu)NH2 (2R)-1-{(3S,4S)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo} -2-amino-3,3-dimetylobutan-1-on
Do poddawanego mieszaniu roztworu związku z Przykładu 104 (62 mg, 0,12 mmoli) w CH2Cl2 (1,5 ml) w temperaturze pokojowej w zamkniętej kolbie dodano kwas trifluorooctowy (77 ^, 1 mmoli).
Po mieszaniu przez noc, mieszaninę reakcyjną zatężono in vacuo uzyskując nieoczyszczony produkt, co do którego okazało się, że zawiera jako zanieczyszczenie ester trifluorooctan. Surowy produkt rozpuszczono w 3:2 THF:H2O (1,5 ml) w temperaturze pokojowej, mieszano w zamkniętej kolbie i poddano działaniu monohydratu LiOH (42 mg, 1 mmol). Po 1 h, mieszaninę podzielono między EtOAc (15 ml) i wodę (15 ml). Warstwy organiczne wyodrębniono, osuszono (MgSO4), przesączono i zatężono in vacuo uzyskując związek tytułowy Przykładu 105 jako białą piankę (35 mg, 70%).
1H-MMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,35-6,32 (m, 2H), 6,78-6,73 (im, 1H), 4,01-3,30 (m, 9H), 3,83 (3,3H), 1,18 i 1,12 (dublety, 3H, rotamery), 1,06 i 1,02 (singlety, 3H, rotamery), 0,78 i 0,68 (singlety, 3H, rotamery), 0,063 (m, 2H), 0,37 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 419,4 (m+1).
P r z y k ł a d 106
R1=H; R3=(R)-COCH(CH2OCH2Ph)NHCO2t-Bu
N-{2-[(3S,4S)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-(1R)-2-okso-1-[(fenylometoksy)metylo]etylo}(tert-butoksy)karboksyamid
Do poddawanego mieszaniu roztworu N-Boc-O-benzylo-D-seryny (2,95 g, 10 mmoli) w THF (50 ml) w -78°C w atmosferze azotu dodano N-metylomorfolinę (3,3 ml, 30 mmoli), a następnie chloromrówczan izobutylu (1,3 ml, 10 mmoli). Po mieszaniu przez 30 minut, dodano przez kaniulę roztwór/zawiesinę Półproduktu 70 (2,51 g, 10 mmoli) w THF (50 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 2 h w -78°C, a następnie ogrzewano do 0°C przez 2 h. Następnie mieszaninę reakcyjną częściowo zatężono na wyparce rotacyjnej do w przybliżeniu 25 mL i podzielono między EtOAc (250 ml) i 2 N HCl (250 ml) . Warstwy organiczne przemyto 2N HCl (2 x 250 ml), nasyconym NaHCO3 (3 x 250 ml) i nasyconym NaCl (1 x 250 ml). Warstwy organiczne osuszono (MgSO4), przesączono i zatężono in vacuo uzyskując związek tytułowy Przykładu 106 jako żółty olej (4,2 g, 79%).
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,36-7,21 (m, 5H), 6,81-6,63 (m, 3H), 5,81 (br s, 1H), 5,47 (m, 1H), 4,73 (m, 1H), 4,51 (m, 2H), 4,00-3,40 (m, 83,83H), 3,84 i 3,82 (singlety, 3H, rotamery), 1,43 i 1,41 (singlety, 9H, rotamery), 1,13 i 1,06 (dublety, 3H, rotamery), 0,95 (m, 1H), 0,73 i 0,045 (singlety, 3H, rotamery).
120
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 107
R1=CH2C3H5; R3=(R)-COCH(CH2OCH3Ph)NHCO2t-Bu
N-(2-{(3S,4S)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-2-okso-1-[(fenylometoksy)metylo]etylo)-(tert-butoksy)karboksyamid
Do poddawanego mieszaniu roztworu związku z Przykładu 106 (4,2 g, 7,9 mmoli) w DMF (24 ml) w temperaturze pokojowej w atmosferze azotu dodano sproszkowany K2CO3 (5,45 g, 39,5 mmoli), a następnie bromometylocyklopropan (1,53 ml, 15,8 mmoli). Zawiesinę ogrzano do 65°C przez 4 h, następnie poddano działaniu dalszej ilości bromometylocyklopropanu (1,53 ml, 15,8 mmoli). Mieszaninę reakcyjną mieszano dalsze 16 h w 65°C, następnie ochłodzono do temperatury pokojowej i podzialono między EtOAc (500 ml) i wodę (500 ml). Warstwy organiczne przemyto wodą (3 x 500 ml) i nasyconym NaCl (1 x 500 ml), osuszono (MgSO4), przesą czono i zatężono in vacuo. Surowy produkt podzielono na dwie części i poddano chromatografii na kolumnie Biotage 40M stoując układ 1/1 EtOAc/heksan i uzyskując po zebraniu i zatężeniu in vacuo frakcji zawierających produkt, związek tytułowy Przykładu 107 (2,11 g, 46%). Dialkilowany produkt o wysokim Rf zidentyfikowano jako główne zanieczyszczenie.
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,36-7,22 (m, 5H), 6,81-6,71 (m, 3H), 5,42 (m, 1H), 4,73 (m, 1H), 4,51 (m, 2H), 4,04-3,44 (m, 10H), 3,83 i 3,81 (singlety, 3H, rotamery), 1,42 i 1,43 (singlety, 9H, rotamery), 1,32 (m, 1H), 1,16 i 1,06 (dublety, 3H, rotamery), 0,76 i 0,45 (singlety, 3H, rotamery), 0,62 (m,
2H), 0,37 (m, 2H)
PL 202 227 B1
121
P r z y k ł a d 108
R1=CH2C3H5; R3=(R)-COCH(CH2OH)NHCO2t-Bu
N-(2-{(3S,4S)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1R)-1-(hydroksymetylo)-2-oksoetylo) (tert-butoksy)karboksyamid
Przykład 107 (2,1 g, 3,6 mmoli) poddano Procedurze debenzylowania jak dla Półproduktu 31 uzyskując związek tytułowy Przykładu 108 jako białą piankę (1,75 g, 100%).
1H-NMR (CDCI3)/CD3OD, 400 MHz) δ: 6,83-6,71 (m, 3H), 5,70 (br d, 1H), 4,55 (m, 1H), 4,09-3,38 (m, 10H), 3,83 (s, 3H), 1,44 (s, 9H), 1,33 (m, 1H), 1,18 (m, 3H), 0,73 (d, 3H), 0,62 (m, 2H), 0,37 (m, 2H).
P r z y k ł a d 109
R1=CH2C3H5; R3=(R)-COCH(CH2OH)NH2
Chlorowodorek 1-{(3S,4S)-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylo-metoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2R)-2-amino-3-hydroksypropan-1-onu
Do poddawanego mieszaniu roztworu związku z Przykładu 108 (1,75 g, 3,6 mmoli) w dioksanie (16 ml) w temperaturze pokojowej pod rurą suszącą dodano 4 N HCl w dioksanie (16 ml). Klarowny roztwór mieszano przez 4 h, a następnie zatężono in vacuo uzyskując związek tytułowy Przykładu 109 jako żółtawobrązową piankę (1,5 g, 97%).
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,85-6,76 (m, 3H), 4,36 (m, 1H), 4,13-3,31 (m, 10H), 3,84 (s, 3H), 1,29 (m, 1H), 1,17 i 1,12 (dublety, 3H, rotamery), 1,77 i 1,75 (singlety, 3H, rotamery), 0,62 (m, 2H), 0,3 6 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 393,4 (m+1).
122
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 110
R1=CH2C3H5; R3=(S)-COCH(OAc)C6H11
Octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-cykloheksylo-2-oksoetylu
Półprodukt 67 (91 mg, 0,6 mmoli) sprzężono według Procedury z użyciem zasady Huniga jak dla Półproduktu 74 stosując chlorek kwasu (S)-(+)-acetoksyheksahydromigdałowego (100 ^, 4,98 M roztwór w CH2Cl2, 1,7 równ.) uzyskując związek tytułowy Przykładu 110 jako klarowny, bezbarwny olej (89 mg, 61%).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 488,6 (m+1).
P r z y k ł a d 111
R1=CH2C3H5; R3=(S)-COCH(OH)C6H11
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-cykloheksylo-2-hydroksyetan-1-on
Przykład 110 (89 mg, 0,18 mmoli) poddano Procedurze hydrolizy z użyciem LiOH jak dla Półproduktu 5 uzyskując związek tytułowy Przykładu 111 jako klarowną, bezbarwną warstewkę (44 mg, 54%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,80-6,78 (m, 3H), 3,88-3,52 (c, 10H), 3,34-3,26 (dd, 1H), 2,98 (d, 1H), 2,12 (br s, 1H), 1,77-1,10 (c, 16H), 0,75-0,73 (d,3H), 0,62-0,59 (m, 2H), 0, 34-0,31 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 446,6 (m+1).
P r z y k ł a d 112
R1=CH2C3H5; R3=(R)-COCH(OAc)C6H11
PL 202 227 B1
123
Octan (1R)-2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3metylopirolidynylo}-1-cykloheksylo-2-oksoetylu
Półprodukt 67 (76 mg, 0,25 mmoli) sprzężono według procedury z użyciem zasadu Huniga jak dla Półproduktu 74 z chlorkiem kwasu (R)-(-)-acetoksyheksahydromigdałowego (100 pl, 4,16 M roztwór w CH2Cl2, 1,7 równ.) uzyskując związek tytułowy Przykładu 112 jako klarowny, bezbarwny olej (75 mg, 62%).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 488,7 (m+1).
P r z y k ł a d 113
R1=CH2C3H5; R3=(R)-COCH (OH)C6H11 (2R)-1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-cykloheksylo-2-hydroksyetan-1-on
Przykład 112 (75 mg, 0,15 mmoli) poddano Procedurze hydrolizy z użyciem Półproduktu 5 uzyskując związek tytułowy Przykładu 113 jako klarowną, bezbarwną warstewkę (35 mg, 51%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,81-6,73 (m, 3H), 3,85-3,59 (c, 11H), 2,99-2,98 (d, 1H), 2,03-1,15 (c, 17H), 0,73 (s, 3H), 0,64-0,60 (m, 2H), 0,35-0,32 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 446,5 (m+1).
R1=CH2C3H5; R3=(R)-COCH(C4H9) NHCO2CH2Ph
N-((1R)-2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-mety-lopirolidynylo}-1-butylo-2-oksoetylo)(fenylometoksy)-karboksyamid
124
PL 202 227 B1
Półprodukt 67 (41 mg, 0,013 mmoli) sprzężono według Procedury z użyciem zasady Huniga jak dla Półproduktu 74 z Z-D-Nle-ONp (57 mg, 0,15 mmoli, 1,1 równ.) uzyskując związek tytułowy Przykładu 114 jako klarowny, bezbarwny olej (29,9 mg, 40%).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 553,6 (m+1).
P r z y k ł a d 115
R1=CH2C3H5; R3=(R)-COCH(C4H9)NH2 (2R)-1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylo-pirolidynylo}-2-aminoheksan-1-on
Przykład 114 (29,9 mg, 0,054 mmoli) poddano Procedurze debenzylowania jak dla Półproduktu 31 uzyskując związek tytułowy Przykładu 115 jako biały proszek (18,8 mg, 83%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,83-6,62 (m, 3H), 4,17-4,08 (m, 2H), 3,85-3,61 (c, 9H), 3,32-3,29 (t, 1H), 3,13-3,11 (d, 1H), 2,04-1,78 (m, 3H), 1,52-1,21 (c, 10H), 0,92-0,88 (t, 3H), 0,62-0,58 (m, 5H), 0,34-0,30 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 419,4 (m+1).
R1=CH2C3H5; R3=(R)-COCH(i-Pr)NHCO2CH2Ph
N-((1R)-2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylo-pirolidynylo}-1-(metyloetylo)-2-oksoetylo)(fenylo-metoksy)karboksyamid
PL 202 227 B1
125
Półprodukt 67 (41 mg, 0,13 mmoli) sprzężono według Procedury z użyciem zasady Huniga jak dla Półproduktu 74 z Z-D-Val-OSu (52,2 mg, 0,15 mmoli, 1,1 równ.) uzyskując związek tytułowy Przykładu 116 jako klarowny, bezbarwny olej (64,8 mg, 89%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,35-7,32 (m, 5H), 6,81-6,69 (m, 3H), 5,65-5,61 (t, 3H), 5,28-5,01 (m, 2H), 4,34-2,78 (m, 10H), 2,08-1,98 (m, 1H), 1,31-0,91 (c, 8H), 0,71-0,68 (d, 3H), 0,64-0,59 (m, 2H), 0,38-0,31 (m, 2H).
P r z y k ł a d 117
R1=CH2C3H5; R3=(R)-COCH(i-Pr)NH2 (2R)-1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylo-pirolidynylo}-2-amino-3-metylobutan-1-on
Przykład 116 (64,8 mg, 0,120 mmoli) poddano Procedurze debenzylowania jak dla Półproduktu 31 uzyskując związek tytułowy Przykładu 117 jako klarowne ciało stałe (38,9 mg, 80%).
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,77-6,59 (m, 3H), 4,41 (s, 1H), 4,23-4,12 (m, 2H), 3,85-3,60 (c, 9H), 3,24 (s, 1H), 3,15-3,13 (d, 1H), 2,40 (br s, 1H), 1,29-1,14 (m, 11H), 0,62-0,58 (m, 5H), 0,33-0,29 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 405,5 (m+1).
P r z y k ł a d 118 R1=H; R3=COCH2SAc
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-acetylotioetan-1-on
Półprodukt 70 (173 mg, 0,694 mmoli) rozpuszczono w dioksanie (2 ml) i dodano kroplami 1 M
K2CO3 (1 ml). Dodano chlorek kwasu acetoksymerkaptooctowego (100 ^, 13,9 M roztwór w dioksanie, 2 równ.) i roztwór intensywnie mieszano przez 1 h. Roztwór rozcieńczono EtOAc (30 ml) i warstwy organiczne przemyto 1 M K2CO3 (20 ml), a następnie solanką (20 ml). Warstwę organiczną osuszono nad Na2SO4 i zatężono in vacuo. Uzyskany olej poddano chromatografii na kolumnie z krzemionką (1:1 EtOAc/mieszanina heksanów), otrzymując klarowny, bezbarwny olej (34 mg, 13%).
126
PL 202 227 B1 1H NMR (400 MHz, CDCI3, mieszanina rotamerów) δ: 6,85-6,82 (m, 3H), 3,92-2,98 (c, 12H), 2,39 (s, 3H), 1,15-1,11 (t, 3H), 0,75-0,73 (d, 3H).
P r z y k ł a d 119
R1=CH2C3H5; R3=COCH2SAc
1-{3-((IR)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2- acetylotioetan-1-on
Do kolby zawierającej bezwodny K2CO3 (52 mg, 0,37 mmoli, 4,0 równ.) w atmosferze azotu dodano roztwór Przykładu 118 (34 mg, 0,093 mmoli, 1 równ.) w bezwodnym DMF (1 ml). Do mieszaniny dodano strzykawką bromek cyklopropylometylu (40 μΙ, 0,37 mmoli, 4,0 równ.). Zawiesinę przez noc mieszano w 65°C. Mieszaninę reakcyjną ochłodzono do temperatury pokojowej, a następnie rozcieńczono wodą (50 ml). Wodny roztwór wyekstrahowano EtOAc (3 x 30 ml) i połączone warstwy organiczne przemyto solanką (50 ml), a następnie osuszono nad Na2SO4, przesączono i zatężono in vacuo. Uzyskany olej oczyszczono na płytce preparatywnego TLC (100% EtOAc), otrzymując klarowny, bezbarwny olej (13,9 mg, 36%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,10-6,75 (m, 3H), 3,91-3,32 (c, 11H), 2,64-2,61 (m, 2H), 2,38-2,30 (d, 3H), 1,32-1,50 (brs, 2H), 1,38-1,04 (m, 2H), 0,75 (a, 3H), 0,58-0,55 (m, 2H), 0,27-0,23 (m, 2H).
P r z y k ł a d 120
R1=CH2C3H5; R3=COCH2SH
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-sulfanyloetan-1-on
Przykład 119 (13,9 mg, 0,0329 mmoli) poddano Procedurze hydrolizy z użyciem LiOH jak dla Półproduktu 5 uzyskując klarowny, bezbarwny olej (7,2 mg, 58%).
1H NMR (CD3OH, 400 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 6,86-6,75 (m, 3H), 3,83-3,11 (c, 13H), 2,60-2,56 (d, 2H), 1,39-0,85 (m, 4H), 0,76-0,74 (m, 3H), 0,58-0,56 (m, 2H), 0,35-0,24 (m, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 380,5 (m+1).
PL 202 227 B1
127
P r z y k ł a d 121
R1=CH2C3H5; R3=COCH2NHCO2CH2Ph
N-(2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-oksoetylo)(fenylometoksy)-karboksyamid
Półprodukt 67 acylowano według Procedury z użyciem zasady Huniga jak dla Półproduktu 74 stosując ester p-nitrofenylowy N-CBZ-glicyny i uzyskując związek tytułowy Przykładu 121.
1H-NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,42-7,28 (m, 5H), 6,83-6,75 (m, 3H), 5,87-5,80 (m, 1H), 5,13 (s, 2H), 4,08-3,15 (c, 13H), 1,39-1,24 (m, 1H), 1,14 (t, 3H), 0,73 (d, 3H), 0,66-0,59 (m, 2H), 0,39-0,31 (m, 2H).
P r z y k ł a d 122
R1=CH2C3H5; R3=COCH2NH2
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-aminoetan-1-on
Przykład 121 poddano Procedurze debenzylowania jak dla Półproduktu 31 uzyskując związek tytułowy Przykładu 122.
1H NMR (Metanol-d4, 400 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 6,94-6,84 (m, 3H), 4,01-3,27 (c, 13H), 1,29-1,18 (m, 3H), 0,79-0,73 (m, 3H), 0,62-0,55 (m, 2H), 0,35-0,29 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 363,2 (m+1).
128
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 123
R1=CH2C3H5; R3=COCH2NHSO2CH3
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-[(metylosulfonylo)amino]etan-1-on
Acylowanie związku Przykładu 122 według Procedury sprzęgania jak dla Półproduktu 74 z użyciem zasady Huniga stosując chlorek metano-sulfonylu dało związek tytułowy Przykładu 123.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,86-6,75 (m, 3H), 5,48-5,42 (m, 1H), 4,00-3,57 (c, 11H), 3,46 i 3,15 (d i d, 1H), 3,00 (s, 3H), 1,67 (dd, 1H), 1,36-1,24 (m, 1H), 1,16 (t, 3H), 0,76 (d, 3H), 0,66-0,60 (m, 2H), 0,39-0,32 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 441,3 (m+1).
P r z y k ł a d 124
R1=CH2C3H5; R3=COCH2NHSO2CF3
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-{[(trifluorometylo)sulfonylo]amino}etan-1-on
Sulfonowanie związku Przykładu 122 według Procedury sprzęgania jak dla Półproduktu 74 z użyciem zasady Huniga stosując chlorek trifluorometanosulfonylu dało związek tytułowy Przykładu 124.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,85-6,77 (m, 3H), 4,11-3,10 (c, 13H), 1,15 (t, 3H), 0,76 (d, 3H), 0,66-0,60 (m, 2H), 0,40-0,32 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 495,3 (m+1).
PL 202 227 B1
129
P r z y k ł a d 125
R1=CH2C3H5; R3=COCH2NMe2
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-(dimetylamino)etan-1-on
Reakcja sprzęgania BDCI w fazie stałej
W fiolce reakcyjnej wyposaż onej w łopatkę do mieszania umieszczono ż ywicę EDC (164 mg, 0,082 mmoli, 0,5 mmoli/g), NMP (2 ml) i N,N-dimetyloglicynę (20 mg, 0,143 mmoli). Uzyskaną mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez jedną h. Następnie dodano Półprodukt 67 i mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 20 h, a następnie przesączono. Żywicę przemyto kilkoma porcjami NMP. Wszystkie przemywki i przesącz połączono i poddano działaniu obniżonego ciśnienia, by usunąć rozpuszczalnik. Oczyszczanie pozostałości przez Biotage (ładunek 12S, 5% MeOH/CH2Cl2/, 1% NH4OH) dało 8 mg (25%) klarownej warstewki.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 5,37-6,72 (m, 3H), 4,07-2,97 (c, 13H), 2,35 (d, 6H), 1,35-1,25 (m, 1H), 1,17 (t, 3H), 0,74 i 0,64 (s i s, 3K), 0,55-0,60 (m, 2H), 0,37-0,32 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 391,5 (m+1).
R1=CH2C3H5; R3=(S)-COCH(Me) NHCO2CH2Ph
N-(2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-metylo-2-oksoetylo)(fenylometoksy)-karboksyamid
Acylowanie Półproduktu 67 według Procedury EDCI w fazie stałej Przykładu 125 stosując Z-Ala-ONp dało związek tytułowy Przykładu 126.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,38-7,26 (m, 5H), 6,84-6,74 (m, 3H), 5,86 (dd 1H), 5,14-5,08 (m, 2H), 4,56 (kwintuplet, 1H), 3,87-3,32 (c, 11H), 1,43-1,34 (dd, 3H), 1,33-1,24 (m, 1H), 1,13 (d, 3H), 0,74 (s, 3H), 0,66-0,59 (m, 2H), 0,37-0,32 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 511,7 (m+1).
130
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 127
R1=CH2C3H5; R3=(S)-COCH(CH3)NH2
1-{3-{(1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-aminopropan-1-on
Przykład 126 poddano Procedurze jak dla Półproduktu 31 uzyskując związek tytułowy Przykładu 127.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 8,44-8,16 (br s, 2H), 6,82-6,56 (m, 3H), 4,53-3,02 (c, 12H), 1,43-1,34 (dd, 3H), 1,33-1,24 (m, 1H), 1,13 (d, 3H), 0,74 (s, 3H), 0,66-0,59 (m, 2H), 0,37-0,32 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 377,3 (m+1).
P r z y k ł a d 128
R1=CH2C3H5; R3=(R)-OCH(CH3) NHCO2CH2Ph
N-((1R)-2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-1-metylo-2-oksoetylo)(fenylometoksy)-karboksyamid
Wytworzono z Półproduktu 67 według Procedury acylowania Przykładu 7 stosując Z-D-Ala-OSu. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,40-7,28 (m, 5H), 6,85-6,74 (m, 3H),
5,80 (t 1H), 5,10 (d, 2H), 4,57-4,47 (m, 1H), 3,99-3,12 (c, 11H), 1,40-1,24 (m, 4H), 1,14 (d, 3H), 0,73 (s, 3H), 0,66-0,59 (m, 2H), 0,38-0,31 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 511,6 (m+1).
PL 202 227 B1
131
P r z y k ł a d 129
R1=CH2C3H5; R3=(R)-COCH(CH3)NH2 (2R)-1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-aminopropan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 128 według Procedury debenzylowania jak dla Półproduktu 31.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 8,60-8,27 (br m, 3H), 6,87-6,58 (m, 3H), 4,75-3,10 (c, 12H), 1,74-1,59 (m, 3H), 1,33-1,05 (m, 4H), 0,66-0,55 (m, 5H), 0,35-0,27 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 377,2 (m+1).
P r z y k ł a d 130
R1=CH2C3H5; R3=(S)-COCH(i-Pr) NHCO2CH2Ph
N-(2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-(metyloetylo)-2-oksoetylo)(fenylometoksy)karboksyamid
Wytworzono z Półproduktu 67 według Procedury acylowania Przykładu 7 stosując Z-Val-ONp. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,42-7,27 (m, 5H), 6,84-6,75 (m, 3H),
5,63 (dd 1H), 5,15-5,02 (m, 2H), 4,40-4,4,07 (dm, 1H), 3,87-3,33 (c, 12H), 2,08-1,95 (m, 1H), 1,34-1,25 (m, 1H), 1,14 (t, 3H), 1,04-0,90 (m, 6H), 0,73 (s, 3H), 0,66-0,59 (m, 2H), 0,38-0,31 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 539,5 (m+1).
132
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 131
R1=CH2C3H5; R3=(S)-COCH(i-Pr)NH2
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-amino-3-metylobutan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 130 stosując Procedurę debenzylowania Półproduktu 31.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 8,37 (br s, 3H), 6,82-6,63 (m, 3H), 4,24-3,53 (c, 11H), 3,19 (d, 1H), 2,45-2,32 (m, 2H), 1,34-1,04 (m, 10H), 0,64 (s, 3H), 0,63-0,56 (m, 2H), 0,36-0,29 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 405,4 (m+1).
R1=CH2C3H5; R3=(3)-COCH(CH2CH(CH3)CH3)NHCO2CH2Ph
N-(2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylmetoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-(2-metylopropylo)-2-oksoetylo)(fenylometoksy)karboksyamid
Wytworzono z Półproduktu 67 według Procedury acylowania z użyciem zasady Huniga jak dla Półproduktu 74 stosując Z-Leu-ONp.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,43-7,26 (m, 5H), 6,84-6,75 (m, 3H), 5,61 (dd 1H), 5,16-5,04 (m, 2H), 4,63-4,55 (m, 1H), 3,90-3,34 (c, 12H), 1,80-1,68 (m, 1H), 1,64-1,40 (m, 2H), 1,36-1,24 (m, 1H), 1,14 (d, 3H), 1,05-0,92 (m, 6H) 0,74 (d, 3H), 0,65-0,59 (m, 2H), 0,37-0,32 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 553,7 (m+1).
PL 202 227 B1
133
P r z y k ł a d 133
R1=CH2C3H5; R3=(S)-COCH(CH2CH(CH3)CH3)NH2;
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-amino-4-metylopentan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 132 według Procedury debenzylowania jak dla Półproduktu 31.
1H NMR (Metanol-d4, 400 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 6,96-6,86 (m, 3H), 4,33-4,28 (m, 1H), 4,03-3,28 (c, 11H), 1,87-1,65 (m, 3H), 1,29-1,18 (m, 1H), 1,14-0,96 (m, 9H), 0,76 (d, 3H), 0,61-0,55 (m, 2H), 0,36-0,29 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 419,5 (m+1).
R1=CH2C3H5; R3=(R)-COCH(CH2CH(CH3)CH3)NHCO2CH2Ph
N-((1R)-2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-1-(2-metylopropylo)-2-oksoetylo)(fenylo-metoksy)karboksyamid
Wytworzono z Półproduktu 67 według Procedury acylowania z użyciem zasady Huniga jak dla Półproduktu 74 stosując Z-D-Leu-ONp.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,40-7,28 (m, 5H), 6,85-6,70 (m, 3H), 5,57 (dd 1H), 5,14-5,04 (m, 2H), 4,58-4,49 (m, 1H), 4,11-3,19 (c, 11H), 1,78-1,66 (m, 1H), 1,60-1,22 (m, 3H), 1,15 (dd, 3H), 1,03-0,85 (m, 6H) 0,72 (d, 3H), 0,65-0,57 (m, 2H), 0,38-0,30 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 553,7 (m+1).
134
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 135
R1=CH2C3H5; R3=(R)-COCH(CH2CH(CH3)CH3)NH2 (2R)-1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-amino-4-metylopentan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 134 według Procedury debenzylowania jak dla Półproduktu 31.
1H NMR (Metanol-d4, 400 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 6,97-6,91 (m, 2H), 6,88-6,83 (m, 1H), 4,29-3,25 (c, 11H), 1,85-1,59 (m, 3H), 1,30-1,19 (m, 1H), 1,10 (dd, 3H), 1,06-0,93 (m, 6H), 0,77 (dd, 3H), 0,62-0,55 (m, 2H), 0,36-0,29 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 419,5 (m+1).
R1=CH2C3H5; R3=COCH(C4H9)NHCO2CH2Ph
N-(2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-butylo-2-oksoetylo)(fenylometoksy)karboksyamid
Wytworzono z Półproduktu 67 według sposobu acylowania Przykładu 7 stosując Z-NLeu-ONp. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,40-7,25 (m, 5H), 6,85-6,75 (m, 3H),
5,69 (dd 1H), 5,14-5,05 (m, 2H), 4,56-4,50 (m, 1H), 3,87-3,34 (c, 11H), 1,80-1,54 (m, 2H), 1,43-1,24 (m, 5H), 1,14 (m, 3H), 0,96-0,85 (m, 3H) 0,74 (s, 3H), 0,65-0,61 (m, 2H), 0,37-0,32 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 553,8 (m+1).
P r z y k ł a d 137
R1=CH2C3H5; R3=COCH(C4H9)NH2
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-aminoheksan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 136 według sposobu debenzylowania jak dla Półproduktu 31.
PL 202 227 B1
135 1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,93-6,85 (m, 3H), 4,33-4,25 (m, 1H), 4,02-3,47 (c, 11H), 1,96-1,79 (m, 2H), 1,51-1,35 (m, 4H), 1,30-1,19 (m, 1H), 1,11 (dd, 3H), 1,03-0,93 (m, 3H), 0,77 (d, 3H), 0,62-0,56 (m, 2H), 0,35-0,30 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 419,5 (m+1) .
P r z y k ł a d 138
R1=CH2C3H5; R3=(R)-COCH(C6H11)NH2CO2CH2Ph
N-((1R)-2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylo-pirolidynylo}-(1R)-cykloheksylo-2-oksoetylo)(fenylo-metoksy)karboksyamid
Procedura sprzęgania EDCI/HOBT
W fiolce reakcyjnej wyposażonej w łopatkę do mieszania umieszczono N-karboksybenzylo-D-cykloheksyloglicynę (23,8 mg, 0,0819 mmoli), suchy CH2Cl2 (350 μιΐ), EDCI (15,7 mg, 0,0819 mmoli) i hydroksybenzotriazol (HOBT) (12,5 mg, 0,0819 mmoli). Mieszaninę tę mieszano w temperaturze pokojowej przez 0,1 h, i dodano w jednej porcji Półprodukt 67 (25 mg, 0,0819 mmoli). Po mieszaniu w temperaturze pokojowej przez 48 h, mieszaninę reakcyjną rozcieńczono CH2Cl2 (5 ml), przemyto 1 N HCl (2 x 20 ml), nasyconym roztworem NaHCO3 (1 x 20 ml), osuszono (Na2SO4) i zatężono do 27 mg (57%) białej pianki.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,39-7,29 (m, 5H), 6,86-6,78 (m, 2H), 6,75-6,68 (m, 1H), 5,54 (dd, 1H), 4,37-3,25 (c, 12H), 1,81,1,56 (m, 5H), 1,36-0,95 (m, 10H), 0,71 (d, 3H), 0,66-0,59 (m, 2H), 0,39-0,31 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 580,2 (m+1).
P r z y k ł a d 139
R1=CH2C3H5; R3=(S)-COCH(C6H11)NH2 (2R)-1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-amino-2-cykloheksyloetan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 138 według Procedury debenzylowania jak dla Półproduktu 31.
1H NMR (Metanol-d4, 400 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 6,95-6,78 (m, 3H), 4,10-3,20 (c, 12H), 1,96-1,62 (m, 5H), 1,39-1,02 (m, 10H), 0,75 (d, 3H), 0,62-0,51 (m, 2H), 0,35-0,23 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 445,5 (m+1).
P r z y k ł a d 140
R1=CH2C3H5; R3=(S)-COCH(t-Bu)NHCO2CH2Ph
N-((1R)-2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-(1S)-cykloheksylo-2-oksoetylo)(fenylometoksy)karboksyamid
Wytworzono z Półproduktu 67 według Procedury sprzęgania EDCI/HOBT Przykładu 138 stosując N-karboksybenzylo-L-t-butyloglicynę.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,39-7,29 (m, 5H), 6,84-6,76 (m, 3H), 5,59-5,53 (m, 1H), 5,14-5,02 (m, 2H), 4,34 (dd, 1H), 3,87-3,33 (c, 10H), 1,34-1,24 (m, 1H), 1,14 (dd, 3H), 0,74 (d, 3H), 0,66-0,59 (m, 2H), 0,39-0,31 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 554,2 (m+1).
136
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 141
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-amino-3,3-dimetylobutan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 140 według Procedury debenzylowania jak dla Półproduktu 31.
1H NMR (Metanol-d4, 400 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 6,98-6,86 (m, 3H), 4,16-3,33 (c, 12H), 1,29-1,20 (m, 1H), 1,15-0,97 (m, 12H), 0,75 (d, 3H), 0,62-0,56 (m, 2H), 0,36-0,30 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 419,5 (m+1).
P r z y k ł a d 142
1-{(3R)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-(tert-butoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-(fenylo-metoksy)etan-1-on
Półprodukt 73 (775 mg, 2,53 mmoli) sprzężono z chlorkiem benzyloksyacetylu (497 pl, 3,16 mmoli) według Procedury z użyciem zasady Huniga jak dla Półproduktu 74 uzyskując związek tytułowy Przykładu 134 jako brązową piankę (978 mg, 85%).
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,41-7,30 (m, 5H), 6,90 (m, 2H), 6,81 (d, 1H), 4,64 (dd, 2H), 4,15 (dd, 2H), 3,95 (dd, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,62 (dd, 1H), 3,57 (m, 2H), 3,44 (d, 1H), 3,21 (d, 1H), 1,33 (s-, 9H), 1,16 i 1,11 (dwa dublety, 3H, rotamery), 0,73 (d, 3H, rotamery).
P r z y k ł a d 143
R1=H; R3=COCH2OCH2Ph
1-[(3R)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-(fenylometoksy)-etan-1-on
Do poddawanego mieszaniu roztworu związku z Przykładu 142 (750 mg, 1,65 mmoli) w CH2Cl2 (6,6 ml) w 0°C pod rurą suszącą dodano kwas trifluorooctowy (763 pl, 9,9 mmoli). Usunięto chłodzenie mieszaniny reakcyjnej i pozostawiono ją do ogrzania do temperatury pokojowej, a następnie mieszano przez 3,5 h. Mieszaninę reakcyjną zatężono na wyparce rotacyjnej, by usunąć nadmiar kwasu trifluorooctowego, a następnie rozcieńczono CH2Cl2 (30 ml) i przemyto 10% Na2CO3 (2 x 30 ml). Warstwy organiczne osuszono (MgSO4), przesączono i zatężono in vacuo uzyskując związek tytułowy
PL 202 227 B1
137
Przykładu 143. Chromatografia typu flash w EtOAc dała, po zebraniu i zatężeniu in vacuo frakcji zawierających produkt, związek tytułowy Przykładu 143 jako białą piankę (650 mg, 98%).
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,42 (m, 5H), 6,83-5,70 (m, 3H), 4,64 (s, 2H), 4,16 (s, 2H), 3,93 (dd, 1H), 3,35 (s, 3H), 3,78 (d, 1H), 3,74 (dd, 2H), 3,67-3,52 (m, 4H), 3,44 (d, 1H), 3,20 (d, 1H), 1,16 i 1,10 (dublety, 3H, rotamery), 0,73 (s, 3H).
/ ο
P r z y k ł a d 144
R1=CH2C(CH3)(CH2CH2); R3=COCH2OCH2Ph
2-Benzyloksy-1-(3-((1R)-1-hydroksyetylo)-(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(1-metylocyklopropylometoksy)-fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo)etanon
Procedura Mitsunobu w fazie stałej
Do poddawanego mieszaniu roztworu związku z Przykładu 143 (40 mg, 0,1 mmoli) w THF (1,5 ml) w temperaturze pokojowej w zakrytej stożkowej fiolce reakcyjnej dodano PS-trifenylo-fosfinę (1,65 mmoli/g, 182 mg, 0,3 mmoli). Po pozostawieniu zawiesiny do powolnego mieszania przez 5 minut, by umożliwić pęcznienie żelu, dodano 1-metylocyklopropano-metanol (29 gl, 0,3 mmoli) i mieszaninę reakcyjną ochłodzono do 0°C.
Następnie zawiesinę poddano działaniu DIAC (59 gl, 0,3 mmoli) i mieszaninę reakcyjną ogrzano do 65°C.
Po powolnym mieszaniu przez noc, mieszaninę reakcyjną ochłodzono do temperatury pokojowej i przesączono przez frytę polistyrenową z THF (30 ml). Przesącz zatężono in vacuo i poddano chromatografii typu flash na kolumnie 15 mm x 6 stosując układ 1/1/0,1 EtOAc/heksan/metanol, frakcje zawierające produkt zebrano i zatężono in vacuo uzyskując związek tytułowy Przykładu 144 jako żółty olej (40 mg, 86%).
1H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ: 7,42-7,25 (m, 5H), 6,83-6,77 (m, 3H), 4,63 (s, 2H), 4,15 (dd, 2H), 3,96-3,20 (m, 6.H, rotamery), 3,81 (s, 3H), 1,74 (m, 1H), 1,24 (s, 3H), 1,17 i 1,10 (dublety, 3H, rotamery), 0,72 (d, 3H, rotamery), 0,53 (m, 2H), 0,41 (m, 2H).
P r z y k ł a d 145
R1=CH2C(CH3)(CH2CH2); R3=COCH2OH
1-((3R)-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-(3S,4S)-4-{4-metoksy-3-[(metylocyklopropylo)metoksy]fenylo}-3-metylopirolidynylo)-2-hydroksyetan-1-on
138
PL 202 227 B1
Surowy produkt Przykładu 144 (40 mg, 0,086 mmoli) poddano Procedurze debenzylowania jak dla Półproduktu 31 uzyskując związek tytułowy Przykładu 145 jako klarowny olej (32,5 mg, 100%).
1H-NMR (CDCl3, CD3OD, 400 MHz) δ: 6,87-6,79 (m, 3H), 3,97-3,18 (m, 7H, rotamery), 3,83 (s, 3H), 1,23 (s, 3H), 1,14 i 1,11 (dublety, 3H, rotamery), 0,77 (s, 3H), 0,56 (m, 2H), 0,42 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 378,2 (m+1).
R1=CH2CH2C3H5; R3=COCH2OCH2Ph
2-Benzyloksy-1-[(3S,4S)-4-[3-(2-cyklopropyloetoksy)-4-metoksyfenylo]-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-3-metylo-pirolidyn-1-ylo]etanon
Przykład 143 poddano Procedurze Przykładu 144 stosując 2-cyklopropyloetanol (2 6 mg, 0,3 mmoli) i uzyskując związek tytułowy Przykładu 14 6 (41 mg, 88%).
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,41-7,25 (m, 5H), 6,82-6,74 (m, 3H), 4,63 (s, 2H), 4,15 (dd, 2H), 4,04 (dd, 2H), 3,98-3,20 (m, 5H, rotamery), 3,81 (s, 3H), 1,82 i 1,79 (m, 1H, rotamery), 1,72 (dd, 2H), 1,40-1,20 (m, 1H), 1,18 i 1,12 (d, 3H, rotamery), 0,82 (m, 1H), 0,74 (3, 3H), 0,46 (m, 2H), 0,12 (m, 2H).
P r z y k ł a d 147
R1=CH2CH2C3H5; R3=COCH2OH
1-{(3R)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-(2-cyklopropylo-etoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksyetan-1-on
Przykład 146 poddano Procedurze debenzylowania jak dla Półproduktu 31 uzyskując związek tytułowy Przykładu 147 jako klarowny olej (27,4 mg, 82%).
1H-NMR (CDCl3)/CD3OD, 400 MHz) δ: 6,91-6,80 (m, 3H), 4,19 (m, 2H), 4,10 (m, 2H), 3,97-3,15 (m, 5H, rotamery), 3,82 (s, 3H), 1,73 (dd, 2H), 1,25 (m, 1H), 1,14 i 1,12 (dublety, 3H, rotamery), 0,85 (m, 1H), 0,78 (s, 3H), 0,46 (m, 2H), 0,14 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 378,5 (m+1).
PL 202 227 B1
139
R1=CH2CH2C3H9; R3=COCH2OH
1-{(3R)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-(2-cyklopentyloetoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksyetan-1-on
Wytworzono stosując Procedurę Przykładu 144 stosując związek tytułowy Przykładu 143 i 2-cyklopentyloetanol (34 mg, 0,3 mmoli) i uzyskując związek tytułowy Przykładu 148 (41 mg, 100%).
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,41-7,25 (m, 5H), 6,82-6,74 (m, 3H), 4,63 (s, 2H), 4,15 (dd, 2H), 3,99 (dd, 2H), 3,98-3,20 (m, 5H, rotamery), 3,81 (s, 3H), 2,00-1,20 (m, 11H), 1,18 i 1,12 (d, 3H, rotamery), 0,74 (s, 3H).
P r z y k ł a d 149
1-[(3S,4S)-4-[3-(2-cyklopentyloetoksy)-4-metoksy-fenylo]-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon
Związek z Przykładu 14 8 poddano Procedurze debenzylowania jak dla Półproduktu 31 uzyskując produkt jako klarowny olej (34,7 mg, 86%).
1H-NMR (CDCl3)/CD3OD, 400 MHz) δ: 6,87-6,80 (m, 3H), 4,18 (m, 2H), 4,03 (m, 2H), 3,99-3,11 (m, 5H, rotamery), 3,84 (s, 3H), 2,01-1,15 (m, 11H), 1,14 i 1,11 (dublety, 3H, rotamery), 0,77 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 406,4 (m+1).
140
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 150
2-Benzyloksy-1-[4-(S)-[3-(bicyklo[4,1,0]hept-7-ylo-metoksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksy-etylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]etanon
Wytworzono ze 143 przez reakcję Mitsunobu Przykładu 144 stosując bicyklo[4.1.0]hept-7-ylo-metanol i uzyskując mieszaninę 80:20 izomerów cis i trans (wydajność 34%).
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 7,42-7,23 (m, 5H), 6,85-6,72 (m, 3H), 5,06-4,89 (m, 1H), 4,67 (s, 2H), 4,15 (s, 2H), 4,07-3,56 (m, 9H), 2,09-1,56 (m, 8H), 1,36-0,87 (m, 8H), 0,73 (m, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 508,6 (m+1).
P r z y k ł a d 151
1-[4-(S)-[3-(Bicyklo[4.1.0]hept-7-ylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylo-pirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon
Związek z Przykładu 150 (15 mg, 30 mmoli) rozpuszczono w 95% etanolu (1 ml) i roztwór poddano działaniu katalizatora Pearlmana (20% Pd(OH), na węglu, 15 mg). Mieszaninę reakcyjną poddano wodorolizie przy 1 atm (lub 50 psi) wodoru przez 16 h. Mieszaninę reakcyjną przesączono, by usunąć katalizator, a następnie rozpuszczalnik usunięto przy użyciu strumienia azotu. Produkt, jeśli zaszła potrzeba, oczyszczono przez chromatografię na żelu krzemionkowym stosując układ EtOAc/heksany/metanol (1:1:0,2). (wydajność 76%).
1H NMR (CDCl3), 400 MHz) δ: 6,73-6,66 (m, 3H), 4,04-3,99 (m,2H), 3,94-3,87 (m, 4H), 3,83-3,20 (m, 7H), 3,15-2,73 (m, 1H), 1,78-1,47 (m, 5H), 1,14-0,69 (10H), 0,63-0,60 (3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 418,3 (m+1).
P r z y k ł a d 152
2-Benzyloksy-1-[4-(S)-[3-(bicyklo[3.1.0]heks-6-ylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksy-etylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]etanon
Wytworzono z 143 według metody Mitsunobu Przykładu 144 stosując bicyklo[3.1.0]heks-6-ylo-metanol. Produkt był nierozdzielalną mieszaniną izomerów w łańcuchu bocznym alkoholu (wydajność 32%).
1H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 7,45-7,29 (m, 5H), 6,84-6,72 (m, 3H), 5,02-4,94 (m,1H), 4,66 (s, 2H), 4,16 (s, 2H), 4,08-3,44 (m, 8H), 1,96-1,51 (m, 4H), 1,26 (d, 6H), 1,18-1,08 (dd, 5H), 0,72 (m, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 494,4 (m+1)
PL 202 227 B1
141
P r z y k ł a d 153
1-[4-(S)-[3-(Bicyklo[3.1.0]heks-6-ylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylo-pirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 152 przez dibenzylowanie jak w Przykładzie 151 (wydajność 90%).
1H NMR (CD3OD, 400 MHz) δ: 6,87-6,79 (m, 3H), 4,97-4,90 (m, 1H), 4,19-4,14 (m, 2H), 3,99-3,36 (m, 7H), 3,30-2,89 (m, 1H), 1,92-1,52 (m, 4H), 1,28 (d, 6H), 1,16-1,06 (m, 6H), 0,77 (m, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 404,3(m+1).
P r z y k ł a d 154
2-Benzyloksy-1-[4-(S)-[3-(4-tert-butylocykloheksyloksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]etanon
Wytworzono sposobem Mitsunobu Przykładu 144 stosując związek tytułowy Przykładu 143 i 4-tert-butylo-cykloheksanol (wydajność 11%).
1H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 7,43-7,28 (m, 5H), 6,85-6,73 (m, 3H), 6,37 (brd s, 1H), 5,02-4,93 (m, 2H), 4,67 (s, 2H), 4,13 (m, 2H), 3,89-3,43 (m, 7H), 2,19-1,36 (m, 8H), 1,26 (d, 9H), 1,18-1,08 (dd, 1H), 0,92-0,81 (m, 6H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 538,8 (m+1).
142
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 155
1-[4-(S)-[3-(4-tert-Butylocykloheksyloksy)-4-metoksy-fenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 154 według Procedury dibenzylowania Przykładu 151 (wydajność 89%).
1H NMR (CD3OD, 400 MHz) δ: 6,82-6,74 (m, 3H), 4,91-4,85 (m, 3H), 3,82-3,78 (m, 4H), 3,76-3,30 (m, 4H), 2,14-1,34 (m, 2H), 1,22-1,18 (m, 10H), 1,08-0,99 (m, 3H), 0,86-0,78 (m, 9H), 0,79-0,75 (m, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 448,8 (m+1).
P r z y k ł a d 156
2-Benzyloksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(4-metylocykloheksyloksy)fenylo]-3-metylo-pirolidyn-1-ylo}etanon
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 143 według Procedury Mitsunobu stosując 4-metylocykloheksanol (mieszanina izomerów) (wydajność 10%).
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 7,42-7,28 (m, 5H), 6,83-6,74 (m, 3H), 4,67 (s, 2H), 4,40-4,36 (m, 1H), 4,15-4,12 (m, 2H), 3,97-3,44 (m, 8H), 1,98-1,91 (m, 2H), 1,60-0,85 (m, 15H), 0,74-0,71 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 496,7 (m+1).
PL 202 227 B1
143
P r z y k ł a d 157
2-Hydroksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(4-metylocykloheksyloksy)fenylo]-3-metylo-pirolidyn-1-ylo}etanon
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 156 według Procedury debenzylowania Przykładu 151 (wydajność ilościowa).
1H NMR (CD3OD, 400 MHz) δ: 6,87-6,79 (m, 3H), 4,18-4,11 (m, 2H), 3,98-3,70 (m, 1H), 3,69-3,36 (m, 10H), 3,09-2,89 (m, 1H), 1,99-1,92 (m, 1H), 1,61-1,43 (m, 6H), 1,28-1,25 (m, 2H), 1,14-1,10 (m, 3H), 0,97-0,86 (m, 3H), 0,78-0,76 (m, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 406,6 (m+1).
P r z y k ł a d 158
2-Benzyloksy-1-[4-(S)-[3-(dekahydronaftalen-2-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]etanon
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 143 według Procedury Mitsunobu stosując dekahydronaftalen-2-ol (mieszanina izomerów) (wydajność 10%).
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 7,42-7,29 (m, 5H), 6,85-6,74 (m, 3H), 5,03-4,95 (m, 1H), 4,68 (s, 2H), 3,98-3,45 (m, 7H), 1,90-1,10 (m, 22 H), 0,75-0,72 (m, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 536,7 (m+1).
144
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 159
1-[4-(S)-[3-(Dekahydronaftalen-2-yloksy)-4-metoksy-fenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 158 według Procedury debenzylowania Przykładu 151 (wydajność ilościowa).
1H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 6,85-6,79 (m, 3H), 5,02-4,94 (m, 1H), 4,23-4,12 (m, 2H), 4,03-3,48 (m, 10H), 3,08-2,89 (m, 1H), 1,89-1,80 (m, 2H), 1,78-1,13 (m, 17H), 0,77-0,75 (m, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 446,1 (m+1).
P r z y k ł a d 160
2-Benzyloksy-1-[4-(S)-[3-(bicykloheksylo-4-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]etanon
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 143 według Procedury Mitsunobu stosując bicykloheksylo-4-ol (mieszaninę izomerów)(wydajność 12%).
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 7,42-7,29 (m, 5H), 6,84-6,74 (m, 3H), 5,03-4,95 (m, 1H), 4,68 (s, 2H), 4,17-4,11 (m, 2H), 3,98-3,45 (m, 7H), 1,90-1,10 (m, 26H), 0,75-0,72 (m, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 564,8 (m+1).
P r z y k ł a d 161
1-[4-(S)-[3-(Bicykloheksylo-4-yloksy)-4-metoksyfenylo]3-(S)(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo] 2-hydroksyetanon
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 160 według Procedury debenzylowania Przykładu 151 (wydajność ilościowa).
1H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 6,85-6,79 (m, 3H), 5,02-4,93 (m, 1H), 4,20-4,15 (m, 2H), 4,07-3,47 (m, 8H), 3,07-2,88 (m, 1H), 2,17-1,94 (m, 2H), 1,82-0,82 (m, 23H), 0,77-0,74 (brd s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 474,6 (m+1).
PL 202 227 B1
145
2-Benzyloksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(4-trifluorometylocykloheksyloksy)-fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 143 według Procedury Mitsunobu stosując 4-trifluorometylocykloheksanol (mieszaninę izomerów) (wydajność 40%).
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 7,46-7,24 (m, 5H), 6,88-6,77 (m, 3H), 4,72-4,61 (brd S, 2H), 5,03-4,89 (brd m, 1H), 4,19-3,18 (m, 10H), 2,26-0,80 (m, 14H), 0,75-0,68 (brd, 3H).
P r z y k ł a d 163
2-Hydroksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(4-trifluorometylocykloheksyloksy)-fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 162 według Procedury debenzylowania Przykładu 151 (wydajność ilościowa).
1H NMR (CDCI3, 400 MHz.) δ: 6,85-6,83 (m, 3H), 5,03-4,90 (m, 1H), 4,26-4,15 (m, 2H), 4,13-3,95 (m, 2H), 3,89-3,37 (m, 7H), 3,10-2,90 (m, 1H), 2,26-2,18 (m, 2H), 2,08-2,01 (m, 3H), 1,55-0,86 (m, 7H), 0,75 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 460,3 (m+1).
146
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 164
2-Benzyloksy-1{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(3-metoksy-3-metylobutoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 143 według Procedury Mitsunobu stosując
3-metoksy-3-metylobutanol (wydajność 78%).
1H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 7,42-7,29 (m, 5H), 6,85-6,72 (m, 3H), 4,67 (s, 2H), 4,17-4,13 (m, 3H), 3,97-3,45 (m, 9H), 3,23 (d, 4H), 2,07-2,01 (m, 2H), 1,23 (s, 6H), 1,16-1,09 (dd, 4H), 0,72 (d, 3H).
P r z y k ł a d 165
2-Hydroksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(3-metoksy-3-metylobutoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 164 według sposobu debenzylowania Przykładu 151 (wydajność 97%).
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 6,83-6,72 (m, 3H), 4,19-4,11 (m, 4H), 4,01-3,79 (m, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,72-3,46 (m, 7H), 3,22 (s, 3H), 2,05-1,99 (m, 2H), 1,22 (brd s, 7H), 1,16-1,11 (m, 3H), 0,73 (brd s, 3H).
LRMS-(Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 410,2 (m+1).
PL 202 227 B1
147
P r z y k ł a d 166
2-Benzyloksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(1-fenylocyklopentylometoksy)-fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 143 według Procedury Mitsunobu stosując (1-fenylocyklopentylo)metanol (wydajność 25%).
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 7,46-7,13 (m, 10H), 6,78-6,37 (m, 3H), 5,01-4,93 (m, 1H), 4,66 (s, 2H), 4,15-4,10 (m, 2H), 3,92-3,41 (m, 7H), 2,24-2,15 (m, 1H), 2,04-1,97 (m, 2H), 1,84-1,70 (m, 4H), 1,26 (d, 6H), 1,13-1,05 (dd, 3H), 0,87-0,85 (m, 1H), 0,65 (2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 558,5 (m+1).
P r z y k ł a d 167
2-Hydroksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(1-fenylocyklopentylometoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 166 według Procedury debenzylowania Przykładu 151 (wydajność 26%).
1H-NMR (CDCI3), 400 MHz) δ: 7,46-7,43 (m, 2H), 7,34-7,27 (m, 2H) 7,23-7,18 (m, 1H), 6,81-6,71 (m, 3H), 6,53-6,48 (m, 1H), 4,15-4,09 (m, 2H), 3,93-3,88 (m, 2H), 3,78-3,46 (m, 7H), 2,25-0,68 (m, 17H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 468,7 (m+1).
148
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 168
2-Benzyloksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(1-fenylocyklopropylometoksy)-fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 143 według Procedury Mitsunobu stosując (1-fenylocyklopropylo)metanol (wydajność 90%).
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 7,46-7,16 (m, 10H), 6,79-6,72 (m, 2H), 6,64-6,59 (m, 1H), 4,66 (s, 2H), 4,14-4,12 (m, 2H), 4,10-4,02 (m, 2H), 3,91-3,42 (m, 9H), 1,28-1,25 (m, 1H), 1,14-1,06 (m, 3H), 1,04-0,95 (m, 4H), 0,66 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 530,7 (m+1).
P r z y k ł a d 169
2-Hydroksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(1-fenylocyklopropylometoksy)-fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 168 według Procedury debenzylowania Przykładu 151 (wydajność 44%).
1H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 7,47-7,21 (m, 5H), 6,84-6,60 (m, 3H), 4,15-4,04 (m, 4H), 3,99-3,46 (m, 8H), 3,05-2,99 (m, 1H), 2,11-2,04 (m, 1H), 1,74-1,59 (m, 2H), 1,29-0,96 (m, 4H), 0,88-0,68 (m, 4H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 440,1 (m+1).
P r z y k ł a d 170
R1=CH2C(CH2CH3)(CH2OCH2) ; R3=COCH2OCH2Ph
2-Benzyloksy-1-[(3S,4S)-4-3-(3-etyloksyetan-3-ylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]etanon
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 143 według Procedury w Przykładzie 144 stosując
3-etylo-3-oksetanometanol (34 ml, 0,3 mmoli) i uzyskując związek tytułowy Przykładu 150 (44 mg, 88%).
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,41-7,25 (m, 5H), 6,84-6,30 (m, 3H), 4,64 (s, 2H), 4,58 (dd, 2H), 4:49 (d, 2H), 4,17-4,11 (m, 3H), 3,99 (dd, 2H), 3,98-3,20 (m, 5H, rotamery), 3,80 (s, 3H), 1,91 (dd, 2H), 1,80 (d, 1H), 1,24 (dd, 1H), 1,17 i 1,13 (dublety, 3H, rotamery), 0,94 (t, 3H), 0,73 (s, 3H).
PL 202 227 B1
149
P r z y k ł a d 171
R1=CH2C(CH2CH3)(CH2OCH2) ; R3=COCH2OH
1-((3R)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-{3-[(3-etylo-oksetan-3-ylo)metoksy]-4-metoksyfenylo}-3-metylo-pirolidynylo)-2-hydroksyetan-1-on
Związek z Przykładu 170 odbezpieczono stosując debenzylowanie jak dla Półproduktu 31 i uzyskując związek tytułowy Przykładu 171 jako klarowny olej (28,6 mg, 80%).
1H-NMR (CDCl3, CD3OD, 400 MHz) δ: 6,91-6,83 (m, 3H), 4,64 (d, 1H), 4,19 (m, 2H), 4,12 (m, 1H), 4,00-3,14 (m, 12H), 3,83 (s, 3H), 1,15 (m, 3H), 0,96 (m, 3H), 0,78 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 408,5 (m+1).
P r z y k ł a d 172
R1=t-Bu; R3=COCH2OAc
Octan (2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(tert-butoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-oksoetylu
Wytworzono z Półproduktu 73 według Procedury sprzęgania jak dla Półproduktu 74 z użyciem zasady Huniga stosując chlorek acetoksyacetylu.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,94-6,81 (m, 3H), 4,72-4,58 (m, 2H), 3,80 (m, 3H), 3,97-3,17 (m, 6H), 2,19 (s, 3H), 1,33 (d, 9H), 1,15 (t, 3H), 0,76 (d, 3H).
150
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 173 R1=H; R3=COCH2OAc
Octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-oksoetylu
Związek z Przykładu 172 odbezpieczono sposobem TFA z Przykładu 143 uzyskując związek tytułowy Przykładu 173 jako żółtawobrązową piankę (173 mg, 80%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,86-6,70 (m, 3H), 5,64 (brs, 1H), 4,72-4,62 (m, 2H), 3,88 (m, 3H), 3,95-3,18 (c, 6H), 2,20 (d, 3H), 1,15 (t, 3H), 0,77 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 352,2 (m+1).
2-Benzyloksy-1-[(3S,4S)-4-[3-(2-bifenylo-4-yloetoksy)-4-metoksyfenylo]-3-((R)-1-hydroksyetylo)-3-metylo-pirolidyn-1-ylo]etanon
Przykład 143 (60 mg, 0,15 mmoli) poddano Procedurze Mitsunobu jak dla Przykładu 144 stosując 4-hydroksy-etylobifenyl (90 mg, 0,45 mmoli) i użyto bez dalszego oczyszczania ani charakterystyki (73 mg, 84%).
P r z y k ł a d 175
R1=4-Ph-Ph-CH2CH2; R3=C(=O)CH2OH
PL 202 227 B1
151
1-[(3S,4S)-4-[3-1(2-Bifenylo-4-yloetoksy)-4-metoksy-fenylo]-3-((R)-1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon
Związek z Przykładu 174 poddano Procedurze debenzylowania jak dla Półproduktu 31 uzyskując związek tytułowy Przykładu 175.
1H NMR (300 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,58 (br t, 7,4 Hz, 3H), 7,47-7,27 (m, 6H), 6,86-6,77 (m, 3H), 4,24 (dt, J = 3,0, 7,4 Hz, 2H), 4,11 (br t, J = 4,1 Hz, 2 H), 4,01-3,47 (m, 5,5H, rotamery), 3,87 (s, 3H), 3,20 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 3,03 (d, J = 9,8 Hz, 0,5 H, rotamer), 1,36/1,32 (2d, J = 3,6/3,7 Hz, 1H), 1,16/1,13 (2D, J = 6,5/6,4 Hz, 3H), 0,74 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): m/e 490 (m+H)+.
P r z y k ł a d 176
R'=CH2C CPh; R3=COCH2OAc
Octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-oksoetylu
W kolbie okrągłodennej wyposażonej w mieszadło i chłodnicę umieszczono w atmosferze azotu związek z Przykładu 173 (270 mg, 0,769 mmoli), aceton (5 ml), CsCO3 (376 mg, 1,15 mmoli) i Półprodukt 90 (242 mg, 1,15 mmoli). Mieszaninę ogrzewano w temperaturze wrzenia przez 4 h, a następnie pozostawiono do ochłodzenia do temperatury pokojowej. Aceton usunięto pod obniżonym ciśnieniem i pozostałość umieszczono w mieszaninie EtOAc/woda. Uzyskaną mieszaninę wyekstrahowano EtOAc (2 x 100 ml), osuszono (Na2SO4) i zatężono. Oczyszczanie za pomocą Biotage (ładunek 40 M, 1:1:, 1 EtOAc:heksan:MeOH) dało 146 mg Przykładu 176 jako białą piankę (41%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,41-7,26 (m, 5H), 7,05 (dd, 1H), 6,85 (d, 2H), 5,05-4,95 (m, 2H), 4,70-4,58 (m, 2H), 3,88 (d, 3H), 3,95-3,13 (c, 6H), 2,19 (s, 3H), 0,97-0,92 (dd, 3H), 0,71 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 466,4 (m+1).
P r z y k ł a d 177
R'=CH:;C C-4-FPh; R^COCAOAc
Octan 2-(3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-{3-[3-(4-fluoro-fenylo)prop-2-ynyloksy]-4-metoksyfenylo}-3-metylopirolidynylo)-2-oksoetylu
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 173 sposobem Przykładu 176 stosując Półprodukt 91 jako środek alkilujący.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,40-7,36 (m, 2H), 7,04-6,97 (m, 3H), 6,86-6,85 (m, 2H), 4,98-4,97 (m, 2H), 4,71-4,59 (m, 2H), 3,88 (d, 3H), 3,96-3,16 (c, 6H), 2,20-2,18 (m, 3H), 1,01 (t, 3H), 0,72 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 484,8 (m+1).
P r z y k ł a d 178
R1=CH(C3H5)C3H5; R3=COCH2OAc
Octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(dicyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-oksoetylu
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 173 sposobem Mitsunobu Przykładu 144 stosując dicyklopropylkarbinol.
152
PL 202 227 B1 1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,26-6,78 (m, 3H), 4,74-4,60 (m, 2H), 3,96-3,46 (m, 9H), 3,21-3,10 (m, 2H), 2,20 (s, 3H), 1,26 (d, 1H), 1,19-1,11 (m, 4H), 0,75 (d, 3H), 0,55-0,41 (m, 4H), 0,33-0,24 (m, 4H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 446,5 (m+1).
P r z y k ł a d 179
R1=3-(4-chlorofenylo)(1,2,4-oksadiazol-5-ilo)metyl; R3=COCH2OAc
Octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-{[3-(4-chlorofenylo)(1,2,4-oksadiazol-5-ilo)]metoksy}-4-metoksy-fenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-oksoetylu
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 173 według Procedury CsCO3 Przykładu 176 stosując Półprodukt 87.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 8,02 (d, 2H), 7,46 (d, 2H), 6,95-6,85 (m, 3H), 5,40 (d, 2H), 4,70-4,58 (m, 2H), 3,94 (d, 3H), 3,95-3,12 (c, 6H), 2,19 (s, 3H), 1,04-1,00 (dd, 3H), 0,64 (d, 3H).
P r z y k ł a d 180
R'=CH2C CPh; R3=COCH2OH
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksyetan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 176 według Procedury hydrolizy LiOH jak dla Półproduktu 5.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,40-7,26 (m, 5H), 7,07-7,06 (m, 1H), 6,85-6,84 (m, 2H), 5,05-4,94 (m, 2H), 3,89 (s, 3H), 4,13-2,99 (c, 8H), 0,98-0,92 (dd, 3H), 0,71 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 424,6 (m+1).
P r z y k ł a d 181
R'=CH2C C-4-FPh; R3=COCH2OH
1-(3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-{3-[3-(4-fluorofenylo)prop-2-ynyloksy]-4-metoksyfenylo}-3-metylo-pirolidynylo)-2-hydroksyetan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 177 według Procedury hydrolizy LiOH jak dla Półproduktu 5.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,39-7,36 (m, 2H), 7,03-6,98 (m, 3H), 6,85 (s, 2H), 5,02-4,93 (m, 2H), 3,89 (s, 3H), 4,15-3,01 (c, 8H), 1,04-0,99 (dd, 3H), 0,72 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 442,7 (m+1).
P r z y k ł a d 182
R1=C3H5CHC3H5; R3=COCH2OH
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(dicyklopropylo-metoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksyetan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 178 według Procedury hydrolizy z użyciem LiOH jak dla Półproduktu 5.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,90-6,78 (m, 3H), 4,17-3,44 (c, 11H),
3,15-3,03 (m, 2H), 1,32-1,20 (m, 1H), 1,19-1,09 (m, 4H), 0,75 (d, 3H), 0, 54-0, 39 (m, 4H), 0,34-0,23 (m, 4H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 404,5 (m+1).
PL 202 227 B1
153
P r z y k ł a d 183
R1=3-(4-chlorofenylo)(1,2,4-oksadiazol-5-ilo)metyl; R3=COCH2OH
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-{[3-(4-chlorofenylo)(1,2,4-oksadiazol-5-ilo)]metoksy}-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksyetan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 179 według procedury hydrolizy z użyciem LiOH jak dla Półproduktu 5.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 8,03 (d, 2H), 7,47 (d, 2H), 6,95-6,86 (m, 3H), 5,40 (s, 2H), 3,88 (s,'3H), 4,12-2,98 (c, 8H), 1,05-0,99 (dd, 3H), 0,64 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 502,4 (m+1).
R1=CH2CH2t-Bu; R3=COCH2OCH2Ph
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(3,3-dimetylo-butoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-(fenylometoksy)etan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 143 według Procedury Mitsunobu Przykładu 144 stosując 3,3-dimetylo-1-butanol.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) mieszanina rotamerów) δ: 7,41-7,31 (m, 5H), 6,80-6,75 (m, 3H), 4,70-4,63 (m, 2H), 4,15-3,21 (c, 13H), 1,80-1,73 (m, 2H), 1,17-1,10 (m, 2H), 0,98 (s, 9H), 0,74 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 484,6 (m+1).
P r z y k ł a d 185
R1=CH2CH2t-Bu; R3=COCH2OH
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(3,3-dimetylo-butoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksyetan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 184 według Procedury debenzylowania jak dla Półproduktu 31.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,88-6,71 (m, 3H), 4,38-2,99 (c, 13H), 1,82-1,73 (m, 2H), 1,19-1,08 (m, 3H), 0,97 (s, 9H), 0,80-0,69 (m, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 394,4 (m+1).
154
PL 202 227 B1 /
ο
X \ ο
Ν
R
P r z y k ł a d 186
R1=CH2C3H5; R3=COCH2OCH2Ph
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-(fenylometoksy)etan-1-on
Wytworzono z Półproduktu 67 według Procedury sprzęgania z użyciem zasady Huniga jak dla Półproduktu 74 stosując chlorek benzyloksyacetylu.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,40-7,29 (m, 5H), 6,82-6,74 (m, 3H), 4,66 (s, 2H), 4,15-3,20 (c, 11H), 1,71-1,57 (brs, 1H), 1,35-1,23 (m, 1H), 1,16-1,07 (dd, 3H), 0,71 (s, 3H), 0,62 (d, 2H), 0,34 (d, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 454,6 (m+1).
P r z y k ł a d 187
R1=CH2C3H5; R3=COCH2OH
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksy-etan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 186 według Procedury debenzylowania jak dla Półproduktu 31.
1H NMR (Metanol-'d1, 400 MHz) δ: 6,95-6,84 (m, 3H), 4,31-4,22 (m, 2H), 3,91-3,23 (c, 11H), 1,30-1,19 (m, 1H), 0,74 (s, 3H), 0,62-56 (m, 2H), 0,35-0,28 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 364,2 (m+1).
P r z y k ł a d 188
R1=CH2C3H5; R3=COCH2NHCO2CH2Ph
N-(2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-okso-etylo)(fenylometoksy)karboksyamid
Wytworzono z Półproduktu 67 według Procedury acylowania Przykładu 7 stosując Z-Gly-ONp.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,45-7,30 (m, 5H), 6,85-6,76 (m, 3H), 5,81 (brs, 1H), 5,13 (s, 2H), 4,10-3,43 (c, 12H), 3,17 (d, 1H), 1,68 (br s, 1H), 1,36-1,26 (m, 1H), 1,14 (t, 3H), 0,73 (d, 3H), 0,66-0,60 (m, 2H), 0,38-0,31 (m, 2H).
P r z y k ł a d 189
R1=CH2C3H5; R3=COCH2NH2
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-aminoetan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 188 według Procedury debenzylowania jak dla Półproduktu 31.
1H NMR (Metanol-d4, 400 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 6,96-6,81 (m, 3H), 4,00-3,27 (c, 13H), 1,29-1,18 (m, 1H), 1,13-1,07 (m, 3H), 0,75 (m, 3H), 0,62-54 (m, 2H), 0,35-0,28 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 363,2 (m+1).
P r z y k ł a d 190
R1=CH2C3H5; R3=COC(CH3)2OCOCH3
Octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-1,1-dimetylo-2-oksoetylu
Wytworzono z Półproduktu 67 według Procedury sprzęgania z użyciem zasady Huniga jak dla Półproduktu 74 stosując chlorek 2-acetoksyizobutyrylu.
PL 202 227 B1
155 1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,87-6,70 (m, 3H), 3,93-3,32 (c, 11H), 2,08 (d, 3H), 1,81-1,65 (br m, 1H), 1,65-1,53 (m, 6H), 1,35-1,23 (m, 1H), 1,19-1,11 (t, 3H), 0,68 (d, 3H), 0,65-0,57 (m, 2H), 0,37-0,30 (m, 2H).
P r z y k ł a d 191
R1=CH2C3H5; R3=COC(CH3)2OH
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksy-2-metylopropan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 190 według procedury hydrolizy LiOH jak dla Półproduktu 5.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,84-6,75 (m, 3H), 4,43 (br s, 1H), 4,01-3,41 (c, 11H), 1,52-1,41 (m, 6H), 1,32-1,17 (m, 1H), 1,16-1,08 (t, 3H), 0,73 (d, 3H), 0,63-0,57 (m, 2H), 0,37-0,29 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 392,5 (m+1).
P r z y k ł a d 192
R1=CH2C3H5; R3=(S)-COCH(CH3)OAc
Octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-metylo-2-oksoetylu
Wytworzono z Półproduktu 67 według Procedury sprzęgania z użyciem zasady Huniga jak dla Półproduktu 74 stosując chlorek (S)-2-acetoksypropionylu.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,83-6,76 (m, 3H), 5,25-5,17 (m, 1H), 4,08-3,35 (c, 12H), 2,15-2,09 (m, 3H), 1,50-1,44 (m, 3H), 1,35-1,23 (m, 1H), 1,15 (d, 3H), 0,79-0,71 (m, 3H), 0,65-0,60 (m, 2H), 0,37-0,30 (m, 2H).
P r z y k ł a d 193
R1=CH2C3H5; R3=(S)-COCH(CH3)OH
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-hydroksypropan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 192 według procedury hydrolizy LiOH jak dla Półproduktu 5.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,84-6,73 (m, 3H), 4,39-4,28 (m, 1H), 3,88-3,48 (c, 10H), 3,29 (dd, 1H), 1,40-1,20 (m, 4H), 1,12 (t, 3H), 0,73 (d, 3H), 0,64-0,55 (m, 2H), 0,37-0,29 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 378,7 (m+1).
P r z y k ł a d 194
R1=CH2C3H5; R3=COCH(Ph)OAc
Octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-okso-1-fenyloetylu
Wytworzono z Półproduktu 67 według Procedury sprzęgania z użyciem zasady Huniga jak dla Półproduktu 74 stosując chlorek kwasu O-acetylomigdałowego.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów i diastereizomerów) δ: 7,57-7,35 (m, 5H), 6,84-6,51 (m, 3H), 6,11-6,04 (m, 1H), 4,08-3,05 (c, 11H), 2,21-2,14 (m, 3H), 1,36-1,20 (m, 1H), 1,14-1,06 (dd, 3H), 0,78 i 0,48 (s i d, 3H), 0,67-0,57 (m, 2H), 0,37-0,28 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 482,6 (m+1).
P r z y k ł a d 195
R1=CH2C3H5; R3=COCH(Ph)OH
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksy-2-fenyloetan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 194 według Procedury hydrolizy z użyciem LiOH jak dla Półproduktu 5.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów i diastereizomerów) δ: 7,40-7,28 (m, 5H), 6,81-6,42 (m, 3H), 5,13-4,61 (m, 1H), 4,07-3,29 (c, 10H), 3,21-2,79 (m, 1H), 1,36-1,20 (m, 1H), 1,15-0,97 (dd, 3H), 0,73 i 0,47 (d i s, 3H), 0,65-0,56 (m, 2H), 0,37-0,28 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 440,2 (m+1).
P r z y k ł a d 196
R1=CH2C3H5; R3=COCH(4-FPh)OAc
Octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-1-(4-fluorofenylo)-2-oksoetylu
156
PL 202 227 B1
Wytworzono z Półproduktu 67 według Procedury sprzęgania z użyciem zasady Huniga jak dla Półproduktu 74 stosując octan (chlorokarbonylo)(4-fluorofenylo)metylu.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów i diastereizomerów) δ: 7,60-7,46 (m, 2H),
7,15-7,03 (m, 2H), 6,85-6,54 (m, 3H), 6,09-5,99 (m, 1H), 4,07-2,87 (c, 11H), 2,19-2,12 (m, 3H), 1,33-1,20 (m, 1H), 1,15-1,03 (dd, 3H), 0,78 i 0,52 (d i d, 3H), 0,65-0,57 (m, 2H), 0,38-0,27 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 501,0 (m+1).
P r z y k ł a d 197
R1=CH2C3H5; R3=COCH(4-FPh)OH
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,43)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-(4-fluorofenylo)-2-hydroksyetan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 196 według Procedury hydrolizy LiOH jak dla Półproduktu 5.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów i diastereizomerów) δ: 7,60-7,25 (m, 2H), 7,12-7,00 (m, 2H), 6,84-6,48 (m, 3H), 5,11-4,59 (m, 1H), 4,04-2,79 (c, 11H), 1,35-1,23 (m, 1H), 1,15-1,00 (dd, 3H), 0,75 i 0,48 (d i s, 3H), 0,66-0,60 (m, 2H), 0,37-0,30 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 458,2 (m+1).
P r z y k ł a d 198
R1=CH2C3H5; R3=COC(CH2CH2)OAc
Octan ({3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-karbonylo)cyklopropylu
Wytworzono z Półproduktu 67 według Procedury sprzęgania z użyciem zasady Huniga jak dla Półproduktu 74 stosując octan (chlorokarbonylo)cyklopropylu.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,85-6,72 (m, 3H), 4,06-3,31 (c, 11H), 2,10 (s, 3H), 1,74-1,62 (m, 1H), 1,59-1,47 (m, 1H), 1,35-1,19 (m, 2H), 1,14 (d, 3H), 1,02-0,93 (m, 1H), 0,71 (s, 3H), 0,65-0,59 (m, 2H), 0,37-0,30 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 432,5 (m+1).
P r z y k ł a d 199
R1=CH2C3H5; R3=COC(CH3CH2)OH
Keton 3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylo-metoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylowo-hydroksycyklopropylowy.
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 198 według Procedury hydrolizy LiOH jak dla Półproduktu 5.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,88-6,78 (m, 3H), 4,42-3,30 (c, 11H), 1,42-1,22 (m, 3H), 1,16 (d, 3H), 1,11-0,88 (m, 3H), 0,74 (d, 3H), 0,66-0,59 (m, 2H), 0,39-0,31 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 390,5 (m+1).
P r z y k ł a d 200
R1=CH2C3H5; R3=(S)-COCH(OAc)CH(CH3)CH2CH3
Octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-(metylopropylo)-2-oksoetylu
Wytworzono z Półproduktu 67 według Procedury sprzęgania z użyciem zasady Huniga jak dla Półproduktu 74 stosując octan (1S)-1-(chlorokarbonylo)-2-metylobutylu.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów i diastereizomerów) δ: 6,85-6,72 (m, 3H), 4,84 (dd, 1H), 3,89-3,31 (c, 11H), 2,12 (d, 3H), 2,09-1,95 (m, 1H), 1,75-1,62 (m, 1H), 1,35-1,19 (m, 2H), 1,15 (t, 3H), 1,00-0,86 (m, 6H), 0,75 (d, 3H), 0,65-0,56 (m, 2H), 0,37-0,30 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 462,5 (m+1).
P r z y k ł a d 201
R1=CH2C3H5; R3=(S)-COCH(OH)CH(CH3)CH2CH3
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-hydroksy-3-metylopentan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 200 według procedury hydrolizy LiOH jak dla Półproduktu 5.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów i diastereizomerów) δ: 6,85-6,76 (m, 3H), 4,18-4,11 (m, 1H), 3,94-3,26 (c, 11H), 1,75-1,66 (m, 1H), 1,54-1,19 (m, 4H), 1,15 (dd, 3H), 1,07 (m, 3H), 0,94-0,85 (m, 3H), 0,76 (d, 3H), 0,66-0,60 (m, 2H), 0,38-0,32 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 420,5 (m+1).
PL 202 227 B1
157
P r z y k ł a d 202
R1=CH2C3H5; R3=(S)-COCH(OAc)CH2CH(CH3)2
Octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-(2-metylopropylo)-2-oksoetylu
Wytworzono z Półproduktu 67 według Procedury sprzęgania z użyciem zasady Huniga jak dla Półproduktu 74 stosując octan (1S)-1-(chlorokarbonylo)-3-metylobutylu.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,84-6,74 (m, 3H), 5,19-5,10 (m, 1H),
4,15-2,95 (c, 11H), 2,13 (d, 3H), 1,95-1,72 (m, 2H), 1,58-1,39 (m, 2H), 1,34-1,23 (m, 1H), 1,18-1,12 (m, 3H), 1,00-0,88 (m, 6H), 0,75 (d, 3H), 0,68-0,57 (m, 2H), 0,37-0,30 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 462,5 (m+1).
P r z y k ł a d 203
R1=CH2C3H5; R3=(S)-COCH(OH)CH2CH(CH3)2
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-hydroksy-4-metylopentan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 202 według procedury hydrolizy LiOH jak dla Półproduktu 5.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,86-6,77 (m, 3H), 4,32-4,25 (m, 1H), 3,88-2,97 (c, 11H), 2,05-1,93 (m, 1H), 1,73-1,21 (m, 5H), 1,14 (dd, 3H), 1,02-0,93 (m, 6H), 0,76 (d, 3H), 0,66-0,60 (m, 2H), 0,38-0,32 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 420,3 (m+1).
P r z y k ł a d 204
R1=CH2C3H5; R3=(S)-COCH(OAc)CH2Ph
Octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-2-okso-1-benzyloetylu
Wytworzono z Półproduktu 67 według Procedury sprzęgania z użyciem zasady Huniga stosując octan (1S)-1-(chlorokarbonylo)-2-fenyloetylu.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,40-7,26 (m, 5H), 6,82-6,70 i 6,52-6,47 (m i m, 3H), 5,30-5,18 (m, 1H), 3,90-2,79 (c, 13H), 2,11 (d, 3H), 1,35-1,25 (m, 1H), 1,05 (dd, 3H), 0,66 i 0,33 (s i s, 3H), 0,68-0,60 (m, 2H), 0, 39-0,32 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 497,0 (m+1).
P r z y k ł a d 205
R1=CH2C3H5; R3=(S)-COCH(OH)CH2Ph
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo)(2S)-2-hydroksy-3-fenylopropan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 204 (20 mg, 0,040 mmoli) według procedury hydrolizy LiOH jak dla Półproduktu 5 uzyskując 14,5 mg (79%) Przykładu 205 jako bezbarwną warstewkę.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,40-7,26 (m, 5H), 6,82-6,75 i 6,56-6,53 (m i m, 3H), 4,51-4,43 (m, 1H), 3,90-2,70 (c, 13H), 1,35-1,25 (m, 1H), 1,09 (dd, 3H), 0,69 i 0,52 (s i s, 3H), 0,68-0,60 (m, 2H), 0,39-0,32 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 454,3 (m+1).
P r z y k ł a d 206
R1=CH2C3H5; R3=(R)-COCH(OAc)CH2Ph
Octan (1R)-2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-okso-1-benzyloetylu
Wytworzono z Półproduktu 67 według Procedury sprzęgania z użyciem zasady Huniga jak dla Półproduktu 74 stosując octan (1R)-1-(chlorokarbonylo)-2-fenyloetylu.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,37-7,22 (m, 5H), 6,82-6,72, 6,64, 6,45 (m, d i dd, 3H), 5,27 i 5,18 (dd, t, 1H), 3,99-2,56 (c, 13H), 2,12 (s, 3H), 1,34-1,24 (m, 1H), 1,13-1,02 (dd, 3H), 0,68 i 0,34 (s i s, 3H), 0,65-0,58 (m, 2H), 0,37-0,30 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 496,6 (m+1).
P r z y k ł a d 207
R1=CH2C3H5; R3=(R)-COCH(OH)CH2Ph ((2R)-1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksy-3-fenylopropan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 206 według sposobu z użyciem nadtlenku litu jak dla Półproduktu 43.
158
PL 202 227 B1 1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,35-7,18 (m, 5H), 6,84-6,67 (m, 3H), 4,48-4,40 (m, 1H), 4,04-2,70 (c, 13H), 1,34-1,24 (m, 1H), 1,08 (dd, 3H), 0,71 i 0,49 (s i s, 3H), 0,65-0,58 (m, 2H), 0,38-0,31 (m, 2H).
P r z y k ł a d 208
R1=t-Bu; R3=(S)-COCH(OAc)CH3
Octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(tert-butoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-metylo-2-oksoetylu
Wytworzono z Półproduktu 73 według Procedury sprzęgania z użyciem zasady Huniga jak dla Półproduktu 74 stosując chlorek (S)-2-acetoksypropionylu.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,95-6,81 (m, 3H), 5,24-5,11 (m, 1H), 3,80 (m, 3H), 4,08-3,38 (m, 6H), 2,15-2,12 (d, 3H), 1,49-1,46 (dd, 3H), 1,33 (d, 9H), 1,14 (d, 3H), 0,76 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 422,4 (m+1).
P r z y k ł a d 209
R1=H; R3=(S)-COCH(OAc)CH3
Octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-(1S)-1-metylo-2-oksoetylu
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 208 według Procedury odbezpieczania TFA Przykładu 143.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,88-6,70 (m, 3H), 5,73-5,69 (brd, 1H), 5,25-5,19 (m, 1H), 3,88 (d, 3H), 4,06-3,38 (m, 6H), 2,12 (d, 3H), 1,49-1,46 (d, 3H), 1,16-1,14 (dd, 3H), 0,75 (d, 3H)
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 366,3 (m+1).
P r z y k ł a d 210
R'=CH7C CPh; R3=(S)-COCH(OAc)CH3
PL 202 227 B1
159
Octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidynylo}-(1S)-1-metylo-2-oksoetylu
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 209 według Procedury z użyciem Cs2CO3 z Przykł adu 176 stosują c Pół produkt 90.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,39-7,26 (m, 5H), 7,05 (d, 1H), 6,85 (s, 2H), 5,23-5,17 (m, 1H), 5,05-4,95 (m, 2H), 3,86 (s, 3H), 4,07-3,36 (d, 6H), 2,15-2,12 (d, 3H), 1,47-1,40 (t, 3H), 1,36-1,33 (m, 1H), 0,99-0,95 (m, 3H), 0,75-0,71 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e (m+1).
P r z y k ł a d 211
R1=CH2C CPh; R3=(S)-COCH(OH)CH3
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidynylo}-(2S)-2-hydroksypropan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 210 według sposobu odbezpieczania O-octanu z Przykładu 95.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,41-7,26 (m, 5H), 7,07 (d, 1H), 6,86 (s, 2H), 5,05-4,94 (m, 1H), 4,36-4,30 (m, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,91-3,48 (c, 5H), 3,28 (dd, 1H), 1,37-1,32 (m, 3H), 0,99-0,92 (dd, 3H), 0,73-0,70 (d,3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 438,2 (m+1).
P r z y k ł a d 212
R1=CH2C C-4-FPh; R3=(S)-COCH(OAc)CH3
Octan 2-(3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-{3-[3-(4-fluorofenylo)prop-2-ynyloksy]-4-metoksyfenylo}-3-metyl-pirolidynylo)-2-oksoetylu
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 209 według metody z użyciem Cs2CO3 z Przykładu 176 stosując Półprodukt 91.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,40-7,36 (m, 2H), 7,03-6,96 (m, 3H), 5,22-5,20 (q, 1H), 4,98-4,96 (m, 2H), 4,07-3,53 (c, 6H), 3,88-3,86 (m, 3H), 2,14-2,11 (d, 3H), 1,47-1,42 (t, 3H), 1,06-1,01 (m, 3H), 0,75-0,72 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 498,5 (m+1).
P r z y k ł a d 213
R1=CH2C C-4-FPh; R3=(S)-COCH(OH)CH3
1-(3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-{3-[3-(4-fluoro-fenylo)prop-2-ynyloksy]-4-metoksyfenylo}-3-metylopirolidynylo)(2S)-2-hydroksypropan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 212 według sposobu odbezpieczania O-octanu z Przykładu 95.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,40-7,26 (m, 2H), 7,04-6,98 (m, 3H), 6,86 (s, 2H), 5,03-4,97 (m, 2H), 4,40-4,30 (m, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,94-3,52 (c, 5H), 3,29 (dd, 1H), 1,39-1,28 (d, 3H), 1,04-1,00 (m, 3H), 0,74-0,72 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 456,5 (m+1).
P r z y k ł a d 214
R1=CH2C C-4-CF3Ph; R3=(S)-COCH(OAc)CH3.
Octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(4-metoksy-3-{3-[4-(trifluorometylo)fenylo]prop-2-ynyloksy}fenylo)-3-metylopirolidynylo](1S)-1-metylo-2-oksoetylu
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 209 według sposobu z użyciem Cs2CO3 z Przykładu 176 stosując Półprodukt 92.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,57-7,45 (m, 4H), 7,01 (d, 1H), 6,88-6,83 (m, 2H), 5,22-5,17 (m, 1H), 5,00 (s, 2H), 4,07-3,35 (c, 6H), 3,88 (d, 3H), 2,13-2,11 (d, 3H), 1,47-1,42 (dd, 3H), 1,12 (d, 3H), 0,75-0,71 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 548,8 (m+1).
P r z y k ł a d 215
R1=CH2C C-4-CF3Ph; R3=(S)-COCH(OH)CH3
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(4-metoksy-3-{3-[4-(trifluorometylo)fenylo]prop-2-ynyloksy}fenylo)-3-metylopirolidynylo](2S)-2-hydroksypropan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 214 według sposobu odbezpieczania O-octanu z Przykładu 95.
160
PL 202 227 B1 1HNMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,56 (d, 2H), 7,50 (d, 2H), 7,03 (s, 1H), 6,87 (s, 2H), 5,01 (s, 2H), 4,36-4,33 (m, 1H), 3,89 (s, 3.H), 3,91-3,49 (c, 5H), 3,30 (dd, 1H), 1,37-1,35 (dd, 3H), 1,04-1,01 (t, 3H), 0,74-0,71 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 505,9 (m+1).
P r z y k ł a d 216
R1=3-(4-chlorofenylo)(1,2,4-oksadiazol-5-ilo)metyl; R3=(S)-COCH(OAc)CH3
Octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-{[3-(4-chlorofenylo)(1,2,4-oksadiazol-5-ilo)]metoksy}-4-metoksy-fenylo) -3-metylopirolidynylo](1S)-1-metylo-2-oksoetylu
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 209 według sposobu z użyciem Cs2CO3 z Przykładu 176 stosując Półprodukt 87.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 8,01 (d, 2H), 7,46 (d, 1H), 6,96-6,85 (m, 3H), 5,45-5,36 (m, 2H), 5,21-5,14 (m, 1H), 4,02-3,36 (c, 6H), 3,84 (m, 3H), 2,11 (d, 3H), 1,47-1,42 (m, 3H), 1,04-1,02 (d, 3H), 0,67-0,65 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 558,2 (m+1).
P r z y k ł a d 217
R1=3-(4-chlorofenylo)(1,2,4-oksadiazol-5-ilo)metyl; R3=(S)-COCH(OH)CH3
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-{[3-(4-chlorofenylo)(1,2,4-oksadiazol-5-ilo)]metoksy}-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo](2S)-2-hydroksypropan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 216 według sposobu odbezpieczania O-octanu z Przykładu 95.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 8,06-8,00 (m, 2H), 7,49-7,45 (m, 2H), 6,97-6,86 (m, 3H), 5,41 (m, 2H), 4,35-4,32 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,86-3,19 (c, 5H), 1,3,8-1,32 (m, 3H), 1,05-1,00 (dd, 3H), 0,56-0,63 (d, 3H).
P r z y k ł a d 218
R1=2-indanyl; R3=COCH(OAc)4-FPh
Octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-ylo-oksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-1-(4-fluorofenylo)-2-oksoetylu
Półprodukt 51 (72,8 mg, 0,198 mmoli) acylowano według Procedury z użyciem K2CO3 z Przykładu 7 stosując chlorek kwasu 2-acetoksy-fluoromigdałowego (120 mg, 0,297 mmoli, 1,5 równ.) i uzyskując klarowny, bezbarwny olej (84,2 mg, 75%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,53-7,47 (m, 2H), 7,26-7,03 (m, 6H), 6,87-6,59 (m, 3H), 6,09-6,04 (m, 1H), 5,28-5,01 (m, 1H), 4,14-3,03 (c, 13H), 2,16 (s, 3H), 1,27-1,06 (m, 3H), 0,82-0,80 (d, 1,5H), 0,55-0,52 (d, 1,5H).
PL 202 227 B1
161
P r z y k ł a d 219
R1=2-indanyl; R3=COCH(OH)4-FPh
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-(4 -fluorofenylo)-2-hydroksyetan-1-on
Związek z Przykładu 218 (19 mg, 0,034 mmoli, 1 równ.) poddano Procedurze hydrolizy z użyciem LiOH jak dla Półproduktu 5 uzyskując biały proszek (6,1 mg, 35%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,97-6,80 (c, 7H), 4,19 (m, 2H), 4,13 (t, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 3,83-3,48 (c, 4H), 3,25 (dd, 1H), 2,27 (kwintuplet, 2H), 1,70 (s, 1H), 1,56 (br d, 1H), 1,13 (t, 3H), 0,73 (s, 3H).
P r z y k ł a d 220
R1=2-indanyl; R3=COCH(OAc)CH3
Octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-1-metylo-2-oksoetylu;
Półprodukt 51 (27 mg, 0,074 mmoli) acylowano według Procedury z użyciem K2CO3 z Przykładu 7 stosując chlorek (+)-2-acetoksypropionylu (12,1 pL, 0,110 mmoli, 1,5 równ.) uzyskując klarowny, bezbarwny olej (16,7 mg, 47%).
162
PL 202 227 B1 1H NMR (400 MHz, CDCl3 mieszanina rotamerów) δ; 7,27-7,17 (m, 4H), 6,85-6,83 (m, 3H), 5,30-5,17 (m, 2H), 4,13-3,19 (c, 9H), 2,14 (s, 3H), 1,72 (br s, 1H), 1,51-1,47 (m, 4H), 1,19-1,17 (d, 3H), 0,82-0,78 (d, 3H).
P r z y k ł a d 221
R1=2-indanyl; R3=COCH(OH)CH3
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksypropan-1-on
Związek z Przykładu 220 (16,7 mg, 0,0347 mmoli, 1 równ.) poddano Procedurze hydrolizy z uż yciem LiOH jak dla Pół produktu 5 uzyskują c biał e ciał o stał e (4,7 mg, 31%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,27-7,17 (m, 4H), 6,85-6,84 (m, 3H), 5,19-5,15 (m, 1H), 4,39-4,35 (m, 1H), 3,90-3,18 (c, 14H), 1,57-1,37 (m, 3H), 1,28-1,15 (m, 3H), 0,80-0,78 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 440,4 (m+1).
P r z y k ł a d 222
R1=2-indanyl; R3=COC(CH3)(OAc)CH3
Octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-1,1-dimetylo-2-oksoetylu
Półprodukt 51 (40 mg, 0,11 mmoli) acylowano według Procedury z użyciem K2CO3 z Przykładu 7 stosując chlorek 2-acetoksy-2-metylopropionylu (31 μL, 0,22 mmoli, 2 równ.) uzyskując klarowny, bezbarwny olej (22 mg, 40%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,26-7,16 (m, 4H), 6,85-6,77 (m, 3H), 4,17 (m, 1H), 3,95-3,19 (c, 14H), 2,10 (s, 3H), 1,65-1,57 (m, 6H), 1,20-1,17 (m, 3H), 0,73 (s, 3H).
PL 202 227 B1
163
OH
Ο
Ν'
P r z y k ł a d 223
R1=2-indanylo; R3=COC(CH3)(OH)CH3
1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksy-2-metylopropan-1-on
Związek z Przykładu 222 (22 mg, 0,044 mmoli) poddano Procedurze hydrolizy LiOH jak dla Półproduktu 5 uzyskując produkt jako białe ciało stałe (4,3 mg, 22%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,26-7,17 (m, 4H), 6,83 (m, 3H), 5,18-5,17 (m, 1H), 4,45-4,44 (m, 1H), 3,89-3,19 (c, 14H), 1,53-1,48 (m, 6H), 1,19-1,17 (m, 3H), 0,79-0,78 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 454,4 (m+1).
-Ο
Ο
ΟΗ
P r z y k ł a d 224
R1=t-Bu; R3=CO2CH3 (3R)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-(tert-butoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidyno-karboksylan metylu Półprodukt 73 (6,5 μL, 0,084 mmoli) acylowano sposobem z użyciem zasady Huniga jak dla Półproduktu 74 stosując chloromrówczan metylu i uzyskując związek tytułowy Przykładu 224 jako żółty olej (19 mg, 94%).
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,96 (d, 1H), 6,84 (s, 1H), 6,83 (d, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,77-3,58 (m, 4H), 3,06 (d, 1H), 1,36 (s, 9H), 1,16 (d, 3H), 0,76 (s, 3H).
164
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 225
2-Hydroksy-1-((3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-{4-metoksy-3-[2-(tetrahydrofuran-2-ylo)etoksy]-fenylo}-3-metylopirolidyn-1-ylo) etanon
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 143 według Procedury Mitsunobu Przykładu 144 stosując 2-tetrahydrofuran-2-yloetanol, a następnie według Procedury debenzylowania jak dla Półproduktu 31.
1H NMR δ: 6,75-6,87 (m, 3H); 4,16-4,20 (m, 2H) 4,15 (s, 3H); 3,49-4,13 (m, 11H); 3,05 (d, 1H); 1,97-2,10 (m, 2H) 1,88-1,96 (t, 2H); 1,56-1,63 (m, 2H); 1,3-1,17 (t, 3H); 0,75 (s, 3H).
2-Hydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksy-etylo)-4-[4-metoksy-3-(tetrahydrofuran-3-ylometoksy)-fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 143 sposobem Mitsunobu jak dla Przykładu 144 stosując tetrahydrofuran-3-ylometanol, a następnie według Procedury debenzylowania jak dla Półproduktu 31.
1H NMR δ: 6,79-6,82 (m, 3H); 4,13-4,16 (m, 2H); 3,48-3,98 (m, 11H); 3,84 (s, 3H); 3,05 (d, 1H); 2,80 (bt; 1H); 2,07-2,15 (M, 2H); 1,72-1,79 (m, 1H); 1,16 (t, 3H); 0,76 (s, 3H).
P r z y k ł a d 227
R1=(S)-CH(CH2OCH2CH2); R3=CO2CH3 (3R)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-((3S)-oksolan-3-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
Wytworzono z Półproduktu 74 (146 mg, 0,47 mmoli) według Procedury Mitsunobu w fazie stałej z Przykładu 144 stosując (S)-(+)-3-hydroksytetrahydrofuran (38 μL), 0,47 mmoli) i uzyskując związek tytułowy Przykładu 227 jako klarowny olej (95 mg, 53%).
PL 202 227 B1
165 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,82 (m, 2H), 6,78 (m, 1H), 4,95 (m, 1H), 4,03-3,20 (m, 10H), 3,82 (s, 3H), 3,66 (s, 3H), 2,17 (m, 2H), 1,17 (t, 3H), 0,73 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 379,8 (m+1).
P r z y k ł a d 228
R1=(R)-CH(CH2OCH2CH2); R3=CO2CH3 (3R)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-((3R)-oksolan-3-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
Wytworzono z Półproduktu 74 stosując reakcję Mitsunobu w fazie stałej z Przykładu 144 i (R)-(-)-3-hydroksytetrahydrofuran (46 pL), 0,57 mmoli) i uzyskując związek tytułowy Przykładu 228 jako klarowny olej (27 mg, 37%).
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,82 (m, 2H), 6,78 (m, 1H), 4,95 (m, 1H), 4,03-3,20 (m, 10H), 3,82 (s, 3H), 3,66 (s, 3H), 2,17 (m, 2H), 1,17 (t, 3H), 0,73 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 380,3 (m+1).
3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-{3-[2-(4-fluoro-fenoksy)etoksy]-4-metoksyfenylo}-3-metylo-pirolidyno-karboksylan metylu
Wytworzono według Procedury eteryfikacji z użyciem K2CO3 jak dla Przykładu 43 stosując Półprodukt 74 (21,2 mg, 0,0685 mmoli, 1 równ.) i bromek 4-fluorofenoksyetylu (60 mg, 0,27 mmoli, 4,0 równ.), otrzymując klarowny, bezbarwny olej (15,2 mg, 49,7%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,99-6,83 (c, 7H), 4,35 (t, 2H), 4,29 (t, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 3,83-3,48 (c, 4H), 3,25 (dd, 1H), 1,64 (s, 1H), 1,42 (br d, 1H), 1,13 (t, 3H), 0,73 (s, 3H).
166
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 230
R1=CH2CH2CH2O-4-FPh; R3=CO2CH3
3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-{3-[3-(4-fluorofenoksy)propoksy]-4-metoksyfenylo}-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
Wytworzono z Półproduktu 74 (25,2 mg, 0,0815 mmoli, 1 równ.) według procedury eteryfikacji z użyciem K2CO3 z Przykładu 43 stosując 1-(3-chloropropoksy)-4-fluorobenzen (62 mg, 0,33 mmoli, 4,0 równ.) i uzyskując związek tytułowy Przykładu 230 jako klarowny, bezbarwny olej (19,0 mg, 50,5%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,97-6,80 (c, 7H), 4,19 (m, 2H), 4,13 (t, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 3,83-3,48 (c, 4H), 3,25 (dd, 1H), 2,27 (kwintuplet, 2H), 1,70 (s, 1H), 1,56 (br d, 1H), 1,13 (t, 3H), 0,73 (s, 3H).
P r z y k ł a d 231
R=CHL CH R3=CO2CH3
3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(4-metoksy-3-prop-2-ynyloksyfenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
Wytworzono z Półproduktu 74 według Procedury eteryfikacji użyciem K2CO3 z Przykładu 43 stosując bromek propargilu.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,97 (s, 1H), 6,87-6,82 (m, 2H) 4,76 (s, 2H), 3,86 (s, 3H), 3,73 (s, 3H), 3,90-3,55 (m, 5H) 3,27 (dd, 1H), 2,48 (s, 1H), 1,49-1,46 (m, 1H), 1,14 (t, 3H) 0,75 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 348,1 (m+1).
P r z y k ł a d 232
R1=CH2 CCH3; R3=CO2CH3
3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-but-2-ynyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
Wytworzono z Półproduktu 74 według Procedury eteryfikacji użyciem K2CO3 z Przykładu 43 stosując 1-bromo-2-butyn.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,96 (s, 1H), 6,85-6,82 (m, 2H) 4,72-4,71 (m, 2H), 3,86 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 3,90-3,55 (m 5H), 3,27 (dd, 1H), 2,48 (s, 1H), 1,81 (s, 3H), 1,52-1,48 (m 1H), 1,14 (t, 3H), 0,77 (s,3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 362,2 (m+1).
P r z y k ł a d 233
R1=CH2C CPh; R3=CO2CH3
3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
Wytworzono z Półproduktu 74 przez reakcję Mitsunobu jak dla Przykładu 144 stosując 3-fenylo2-propyn-1-ol.
1H NMR (400 MHz, CDCl3 mieszanina rotamerów) δ: 7,41-7,38 (m, 2H), 7,32-7,27 (m, 3H), 7,07 (d, 1H), 6,84 (s, 2H), 5,00-4,94 (m, 2H), 3,88 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 3,80-3,69 (m, 3H), 3,57-3,50 (m, 2H), 3,23 (dd, 1H), 1,35-1,32 (m, 1H), 0,98-0,94 (dd, 3H), 0,70(d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 424,2 (m+1).
P r z y k ł a d 234
R1=CH2C C-4-FPh; R3=CO2CH3
3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-{3-[3-(4-fluorofenylo)prop-2-ynyloksy]-4-metoksyfenylo}-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
PL 202 227 B1
167
Wytworzono z Półproduktu 74 według Procedury reakcj i Mitsunobu w fazie stałej z Przykładu 144 stosując Półprodukt 89.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,40-7,36 (m, 2H), 7,04-6,97 (m, 3H), 6,85 (s, 2H), 4,97 (s, 2H), 3,88 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 3,86-3,65 (m, 3H), 3,58-3,48 (m, 2H), 3,24 (dd, 1H), 1,013 (t, 3H), 1,14 (t, 3H), 0,71 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 442,5 (m+1).
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-acetylotioetan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 118 (30 mg, 0,082 mmoli, 1,0 równ.) według Procedury z użyciem Cs2CO3 z Przykładu 176 stosując mezylan fenylopropargilu (17,4 mg, 0,082 mmoli, 1,0 równ.) otrzymując klarowny, bezbarwny olej (13,2 mg, 33%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,45-6,86 (m, 8H), 4,13-3,49 (c, 12H), 2,31 (s, 3H), 1,60 (s, 1H), 1,28-1,24 (dd, 1H), 1,15-1,08 (dd, 3H), 0,73 (s, 3H).
1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-sulfanyloetan-1-on
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 235 (13,2 mg, 0,0274 mmoli) według Procedury hydrolizy z użyciem LiOH jak dla Półproduktu 5 uzyskując klarowny, bezbarwny olej (10,5 mg, 87%).
1H NMR (CD3OH, 400 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 7,41-7,20 (m, 5H), 6,91-6,75 (m, 3H), 4,01-3,29 (c, 12H), 3,21 (s, 1H), 1,88 (s, 1H), 1,38-1,21 (m, 1H), 1,07-1,03 (m, 3H), 0,73-0,72 (m, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 440,4 (m+1).
Półprodukt 93
168
PL 202 227 B1
Ester tert-butylowy kwasu (2-[(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-okso-etylo)karbamidowego.
Do kolby zawierającej roztwór Półproduktu 70 (67,2 mg, 0,27 mmoli) w dioksanie (2,0 ml) dodano 1,0 M wodnego roztworu K2CO3 (1,0 ml, 1,0 mmol). Do mieszaniny dodano strzykawką roztwór estru p-nitrofenylowego N-Boc-glicyny (236 mg, 0,79 mmoli) w dioksanie (100 ml). Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 30 minut, a następnie mieszaninę reakcyjną rozcieńczono EtOAc (100 ml), przemyto wodnym NaHCO3 (3 x 50 ml) i solanką (50 ml), osuszono nad Na2SO4, przesączono i zatężono in vacuo uzyskując żółty proszek (43 mg, wydajność 84%).
1H NMR (CDCl3, 300 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 6,88-6,77 (m, 2H, aromatyczny), 6,75-6,65 (m, 1H, aromatyczny), 5,56 (br, s, 1H, NH), 4,07-3,83 (m, 3H), 3,39 (s, 3H, OMe), 3,82-3,68 (m, 2H), 3,67-3,52 (m, 2H), 3,46 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 3,19 (d, 1H, J = 11,5 Hz), 1,46 (s, 9H), 1,16-1,05 (m, 3H), 0,74 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 353,151 (m+1).
P r z y k ł a d 237
2-Amino-1-((3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-{4-metoksy-3-[3-(4-trifluorometylofenylo)-prop-2-ynyloksy]fenylo}-3-metylopirolidyn-1-ylo)etanon.
Wytworzono z Półproduktu 93 według metody z użyciem Cs2CO3 z Przykładu 176 oraz Procedury z Przykładu 109 otrzymując produkt jako bursztynowy olej (12,7 mg, wydajność 4,1%).
1H NMR (CDCl3, 300 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 7,55-7,4 (m, 4H, aromatyczny), 7,93 (s, 1H, aromatyczny), 6,85-6,7 (m, 2H, aromatyczny), 4,96 (s, 2H), 4,38 (br. s, 2H), 4,0-3,4 (m, 7H), 3,83 (d, 3H, OMe), 3,2 (dd, 1H), 1,0-0,88 (m, 3H), 0,65 (m, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 491,20 (m+1).
P r z y k ł a d 238 R1=t-Bu; R3=COCO2CH3
2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(tert-butoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-oksooctan metylu.
Wytworzono z Półproduktu 73 według Procedury sprzęgania z użyciem zasady Huniga jak dla Półproduktu 74 stosując chlorek metylooksalilu.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,93-6,81 (m, 3H), 4,01-3,44 (c, 12H), 1,32 (s, 9H), 1,16-1,12 (dd, 3H), 0,77-0,74 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 394,0 (m+1).
PL 202 227 B1
169
P r z y k ł a d 239 R1=H; R3=COCO2CH3
2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-oksooctan metylu.
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 238 według metody odbezpieczania TFA z Przykładu 143.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 6,85-6,70 (m, 3H), 5,60-5,56 (br m, 1H), 4,00-3,46 (c, 12H), 1,17-1,13 (dd, 3H), 0,79-0,76 (d i d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 338,1 (m+1).
P r z y k ł a d 240 R1=CH2C=CPh; R3=COCO2CH3
2-(3-((1R)-1-Hydroksyetylo) (3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylo-pirolidynylo}-2-oksooctan metylu
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 239 według Procedury Mitsunobu jak dla Przykładu 144 stosując 3-fenylo-2-propyn-1-ol.
1H NMR (400 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,41-7,26 (m, 5H), 7,07 (s, 1H), 6,86-6,85 (m, 2H), 5,05-4,95 (m, 2H), 4,06-3,43 (c, 12H), 0,98-0,91 (dd, 3H), 0,74-0,71 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 452,7 (m+1).
170
PL 202 227 B1
Półprodukt 94
1-Benzylo-4-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-3-winylopirolidyna
W kolbie okrągłodennej wyposażonej w mieszadło i przegrodę gumową umieszczono w atmosferze azotu suchy eter dietylowy (10 ml) i bromek metylotrifenylofosfoniowy (1,88 g, 5,27 mmoli). Następnie dodano przez strzykawkę butylolit (2,32 ml, 5,80 mmoli, 2,5 M roztwór w mieszaninie heksanów) otrzymując pomarańczowo/żółtą zawiesinę, którą mieszano w temperaturze pokojowej przez 3 h. Następnie dodano roztwór Półproduktu 65 w Et2O (2,0 g, 5,27 mmoli w 10 ml eteru), natychmiast usuwając zabarwienie. Po mieszaniu w temperaturze pokojowej przez 2 h, mieszaninę reakcyjną szybko schłodzono nasyconym roztworem NH4Cl, wyekstrahowano EtOAc (2 x 50 ml), osuszono (Na2SO4) i zatężono. Chromatografia kolumnowa (układ Biotage, ładunek 40 M, 25% EtOAc/heksan) dała 850 mg (43%) pomarańczowego oleju).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7,42-7,23 (m, 5H), 6,80-6,53 (m, 3H), 5,05 (dd, 1H), 4,95 (dd, 1H), 4,87 (dd, 1H), 4,87 (dd, 1H), 3,35-3,73 (m, 6H), 3,71 (dd, 2H), 3,22 (t, 1H), 3,04-2,96 (m, 2H), 2,81 (d, 1H), 2,52 (d, 1H), 1,37-1,26 (m, 1H), 0,77 (g, 3H), 0,66-0,60 (m, 2H), 0,37-0,32 (m, 2H).
Półprodukt 95
Ester metylowy kwasu 4-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-3-winylopirolidyno-1-karboksylowego
Roztwór Półproduktu 94 (480 mg, 1,27 mmoli) w 10 ml acetonitrylu poddano działaniu chloromrówczanu metylu (491 μΙ 6,36 mmoli) i mieszaninę ogrzewano w temperaturze wrzenia przez 6 h.
Mieszaninę reakcyjną następnie zatężono pod obniżonym ciśnieniem i pozostałość oczyszczono przez chromatografię (układ Biotage, ładunek 40 s, 10% EtOAc/heksan do 20% EtOAc/heksan) uzyskując 237 mg żółtego oleju (54%).
1H NMR (400 MHZ, CDCl3) δ: 6,81 (d, 1H), 6,72-6,67 (m, 2H), 5,37 (dd, 1H), 5,09 (d, 1H), 4,95 (dd, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,84-3,68 (m, 7H), 3,52-3,32 (m, 2H), 3,14 (t, 1H), 1,35-1,25 (m, 1H), 0,35 (s, 3H), 0,66-0,50 (m, 2H), 0,37-0,32 (m, 2H).
PL 202 227 B1
171
P r z y k ł a d 241
R1=CH2C3H5; R3=CO2CH3; R4=H; R5=CH2OH; R6=H
Ester metylowy kwasu 4-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksy-fenylo)-3-(1,2-dihydroksyetylo)-3-metylopirolidyno-1-karboksylowego
W fiolce reakcyjnej wyposażonej w łopatkę do mieszania umieszczono Półprodukt 95 (46 mg,
0,133 mmoli), aceton (250 μθ, wodę (500 μθ i N-tlenek N-metylomorfoliny (17,1 mg, 0,146 mmoli). Do tej mieszaniny dodano tetratlenek osmu w t-butanolu (50 pl, 0,004 mmoli, roztwór 2,5% wag.). Uzyskaną mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 24 h, a następnie rozcieńczono 10% wodnym roztworem tiosiarczanu sodu (5 ml), przesączono przez bibułę filtracyjną GF/F. Przesącz wyekstrahowano EtOAc (2 x 10 ml), osuszono (Na2SO4) i zatężono. Oczyszczanie przy użyciu układu Biotage (ładunek 12 S, 1:1:,1 EtOAc/heksan/MeOH) dało 18 mg Przykładu 241 (36%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6,81 (d, 1H), 3,86 (s, 3H), 3,85-3,36 (c, 15H), 3,23 (dd, 1H), 1,35-1,27 (m, 1H), 0,75 (s, 3H), 0,66-0,59 (m, 2H), 0,38-0,32 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 380,2 (m+1).
P r z y k ł a d 242
R1=CH2C3H5; R3=(S)-COCH(CH2OC(CH3)(CH3)O)
[4-(S)-(3-Cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)(1-(R) hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-(2,2-dimetylo-[1,3]dioksolan-4-(S)-ylo)metanon
Półprodukt 67 acylowano według Procedury z użyciem zasady Huniga jak dla Półproduktu 74 stosując chlorek 2,2-dimetylo-[1,3]dioksolano-4-(S)-karbonylu i uzyskując związek tytułowy Przykładu 242 (22%).
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 6,83-6,78, m, 4H), 4,71-4,65 (m, 1H), 4,37-4,32 (m, 1H), 4,23-4,15 (m, 1H), 3,95-3,44 (m, 10H), 1,72-1,15 (m, 10H), 0,76 (s,3H), 0,67-0,62 (m, 2H), 0,38-0,33 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 434,4 (m+1).
P r z y k ł a d 243
R1=CH2C3H5; R3=(S)-COCH(OH)CH2OH
1-[4-(S)-(3-Cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-(S)-3-dihydroksypropan-1-on
172
PL 202 227 B1
Związek z Przykładu 242 (9 mg, 20 gmoli) rozpuszczono w roztworze kwasu octowego/wody (3:1, 0,9 ml); Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 72 h. Roztwór zneutralizowano przez wlanie do roztworu NaHCO3. Roztwór zatężono do sucha, a następnie substancje stałe wyekstrahowano pięć razy CH2Cl2. Połączoną fazę organiczną osuszono nad Na2SO4 i zatężono in vacuo (5,1 mg, 62%).
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 6,84-6,76 (m, 3H), 4,40-4, 37 (m, 1H), 3,89-3,32 (m, 11H), 2,33-1,95 (m, 1H), 1,34-1,12 (m, 7H), 0,89-0,81 (m, 1H), 0,78-0,73 (m, 3H), 0,66-0,61 (m, 2H), 0,37-0,32 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 394,0 (m+1).
P r z y k ł a d 244
R1=2-indanyl; R3=(R)-COCH(OH)CH2OH (R)-2,3-Dihydroksy-1-((3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[3-(indan-2-ylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylo-pirolidyn-1-ylo}propan-1-on
Wytworzono z Półproduktu 96 według Procedury opisanej w Przykładzie 75 i odbezpieczono jak w Przykładzie 243.
1H NMR (CDCl3, 300 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 7,26-7,16 (m, 4H, aromatyczny), 6,83-6,82 (br. s, 3H, aromatyczny), 5,19-5,15 (m, 1H), 4,45-4,32 (m, 1H), 4,10-3,50 (m, 8H), 3,80 (d, 3H, OMe), 3,45-3,12 (m, 5H), 1,27-1,25 (m, 1H), 1,20-1,15 (m, 3H), 0,79-0,77 (m, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/s 470,58 (m+1).
PL 202 227 B1
173
P r z y k ł a d 245
R1=4-F-OCH2CH2CH2; R3=(R)-COCH(OH)CH2OH) (S)-1-[(3S,4S)-4-{3-[3-(4-Fluorofenoksy)propoksy]-4-metoksyfenylo}-3-((R)-1-hydroksyetylo)-3-metylo-pirolidyn-1-ylo]-2,3-dihydroksypropan-1-on
Wytworzono według Procedury podanej w Przykładzie 243.
1H NMR (CDCl3, 300 MHz, mieszanina rotametrów) δ: 6,99-6,92 (m, 2H, aromatyczny), 6,87-6,79 (m, 5H, aromatyczny), 4,39 (s, 1H), 4,22-4,12 (m, 4H), 4,0 (d, 1H), 3,89-3,56 (m, 7H), 3,83 (s, 3H, OMe), 3,4-3,3 (dd, 1H), 2,32-2,24 (m, 2H), 1,17-1,12 (m, 3H), 0,7 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 492,25 (m+1).
Półprodukt 96
1-((R)-2,2-Dimetylo-1,3-dioksolan-4-ylo)-1-[(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo)metanon
W kolbie okr ą g ł odennej wyposaż onej w mieszadł o i gumową przegrodę umieszczono w atmosferze azotu 5-[4-(1-hydroksyetylo)-4-metylopirolidyn-3-ylo)-2-metoksyfenol (2,4 g, 9,55 mmoli), suchy CH2Cl2 (50 ml) i DIEA (3,49 ml, 20,1 mmoli). Mieszaninę ochłodzono do 0°C i dodano kroplami przez strzykawkę chlorek (S)-2,2-dimetylo-[1,3]dioksolano-4-karbonylu (3,14 g, 19,1 mmoli) w 15 ml CH2Cl2. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do stopniowego ogrzania do temperatury pokojowej przez okres 16 h, a nastę pnie rozcień czono 50 ml CH2Cl2, przemyto 1N HCl (2 x 50 ml), nasyconym wodnym roztworem NaHCO3 (1 x 50 ml), osuszono nad Na2SO4 i zatężono do 3,9 g żółtawobrązowej pianki. Substancję tę wprowadzono do 100 ml CH3OH i ochłodzono do 0°C. Następnie dodano trzy równoważniki wodnego roztworu 1N LiOH (29 ml, 29,0 mmoli), mieszaninę mieszano w 0°C przez 2 h, a potem ogrzano do temperatury pokojowej w ciągu 2 h. Następnie mieszaninę reakcyjną zatężono pod obniżonym ciśnieniem przy temperaturze łaźni 30°C, by usunąć CH3OH. Pozostałą fazę wodną zneutralizowano nasyconym roztworem NH4Cl do pH 7 i wyekstrahowano EtOAc (2 x 100 ml). Ekstrakty osuszono nad Na2SO4 i zatężono do 2,74 g żółtawobrązowej pianki (76%).
1H NMR (CDCl3, 400 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 6,90-6,70 (m, 3H), 5,66 (br, s, 1H), 4,68 (t, 1H), 4,34 (t, 1H), 4,23-4,09 (m, 6H), 3,89 (s, 3H), 3,94-3,42 (m, 5H), 1,49-1,37 (m, 6H), 1,17 (d, 3H), 0,76 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 378,3 (m-1).
174
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 246
R1=F3C-Ph-CECCH2; R3=CO-2,2-dimetylo-1,3-dioksolan-4-yl
1-((R)-2,2-Dimetylo-1,3-dioksolan-4-ylo)-1-((3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-(4-metoksy-3-[3-(4-trifluoro-metylofenylo)prop-2-ynyloksy]fenylo}-3-metylo-pirolidyn-1-ylo)metanon
Do kolby zawierającej bezwodny Cs2CO3 (67 mg, 0,206 mmoli, 1,1 równ.) w atmosferze azotu dodano roztwór Półproduktu 96 (71 mg, 0,187 mmoli, 1,0 równ.) w bezwodnym acetonie (1 ml). Do mieszaniny dodano strzykawką Półprodukt 92 (52,1 mg, 0,187 mmoli, 1,0 równ.). Następnie mieszaninę reakcyjną ogrzewano i mieszano przez 4 h w 65°C, po czym ją ochłodzono do temperatury pokojowej i rozcieńczono wodą (50 ml). Wodny roztwór wyekstrahowano EtOAc (3 x 30 ml) i połączone fazy organiczne przemyto solanką (50 ml), a następnie osuszono nad Na2SO4, przesączono i zatężono in vacuo uzyskując produkt - białą piankę (104 mg).
1H NMR (CDCl3, 300 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 7,5-7,35 (m, 4H, aromatyczny), 6,96 (d, 1H, aromatyczny), 6,85-6,75 (m, 2H, aromatyczny), 4,92 (d, 2H, CH2), 4,65-4,50 (m, 1H), 4,35-4,20 (m, 1H), 4,15-4,00 (m, 1H), 3,85-3,40 (m, 5H), 3,8 (d, 3H, OMe), 3,35-3,30 (dd, 1H), 1,45-1,25 (2d, 6H, Me), 1,0-0,9 (m, 3H), 0,63 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 562,25 (m+1).
P r z y k ł a d 247
R1=F3C-Ph-CECCH2; R3=CO-CH(OH)CH2OH (R)-2,3-Dihydroksy-1-((3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-{4-metoksy-3-[3-(4-trifluorometylofenylo)prop-2-ynyloksy]fenylo}-3-metylopirolidyn-1-ylo)propan-1-on
Do fiolki reakcyjnej zawierającej związek tytułowy Przykładu 246 (104 mg, 0,185 mmoli) dodano kwas octowy (3,0 ml) i wodę (1,0 ml). Następnie fiolkę zatopiono, ogrzewano do 50°C i mieszano przez 2 h. Mieszaninę reakcyjną zatężono in vacuo i oczyszczono przez HPLC z odwróconymi fazami na kolumnie C18 (Luna 10:, C18, 250 x 10 mm). Gradient wymywania 50-100% acetonitryl-woda (0,05% TFA) dostarczył produkt w postaci bursztynowego oleju (27,8 mg, wydajność 28,5%).
1H NMR (CDCI3, 300 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 7,6-7,45 (m, 4H, aromatyczny), 7,69 (d, 1H, aromatyczny), 6,9-6,82 (m, 2H, aromatyczny), 5,0 (m, 2H), 4,4-4,32 (m, 1H), 4,1-3,2 (m, 7H), 3,89 (d, 3H, OMe), 1,05 (s, 3H), 0,72 (m, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 522,15 (m+1).
PL 202 227 B1
175
P r z y k ł a d 248
R1=3-tienylo-CH2CH2; R3=COCH2OCH2Ph
2-Benzyloksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(2-tiofen-3-ylo-etoksy)fenylo]-3-metylo-pirolidyn-1-ylo}etanon
Wytworzono przez alkilowanie związku Przykładu 143 według Procedury z użyciem K2CO3 z Przykładu 7 stosując bromek 2-(3-tienylo)etylu.
1H NMR δ: 7,27-7,38 (m, 6H); 7,05-7,07 (m, 1H); 7,12-7,13 (m, 1H); 6,74-6,84 (m, 3H); 6,05 (s, 2H); 4,15-4,22 (m, 4H); 3,44-3,93 (m, 6,5H); 3,86 (s, 3H); 3,14-3,24 (m, 2,5H); 1,13 (dd, 3H); 0,72 (s, 3H).
P r z y k ł a d 249
R1=Ph(cyklo-C3H4)CH2; R3=COCH2OH
2-Hydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-((R)-2-fenylocyklopropylometoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon
Wytworzono przez alkilowanie związku Przykładu 143 według Procedury Mitsunobu jak dla Przykładu 144 stosując 2-fenylocyklopropanol i usuwając grupę benzylową według Procedury debenzylowania jak dla Półproduktu 31.
1H NMR δ: 7,17-7,30 (m, 5H); 6,72-6,85 (m, 3H); 4,00-4,14 (m, 2H); 3,49-3,98 (m, 8,5H); 3,86 (s, 3H); 3,05 (d, 0,5H); 2,86-2,93 (m, 1H); 2,51-2,60 (m, 1H); 2,27-2,34 (m, 1H); 1,02-1,05 (dd, 3H); 0,74 (sd, 3H).
176
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 250
R1=C5H9CH2CH2CH2; R3=COCH2OH
1-[(3S,4S)-4-[3-(3-Cyklopentylopropoksy)-4-metoksy-fenylo]-3-((R)-1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 143 według Procedury Mitsunobu Przykładu 144 stosując 3-cyklopentylopropan-1-ol i usuwając grupę benzylową według Procedury debenzylowania jak dla Półproduktu 31.
1H NMR δ: 6,75-6,83 (m, 3H); 4,12-4,15 (m, 2H); 3,96-4,01 (m, 2,5H); 3,86 (s, 3H); 3,79-3,86 (m, 1H); 3,59-3,70 (m, 4H); 3,06 (d, 0,5H); 1,75-1,88 (m, 5H); 1,44-1,61 (m, 6H); 1,16 (t, 5H); 0,77 (sd, 3H).
P r z y k ł a d 251
R1=PhCH2CH2CH2; R3=COCH2OH
2-Hydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(3-fenylopropoksy)fenylo]-3-metylo-pirolidyn-1-ylo}etanon
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 143 według Procedury z użyciem K2CO3 z Przykładu 7 stosując chlorek 3-fenylopropylu i usuwając grupę benzylową według Procedury debenzylowania jak dla Półproduktu 31.
1H NMR δ: 7,16-7,31 (m, 5H); 6,74-6,85 (m, 3H); 4,13-4,15 (m, 2H); 3,94-4,04 (m, 2H); 3,86 (s, 3H); 3,76-3,83 (m, 1H); 3,47-3,70 (m, 4H); 3,04-3,07 (m, 3H); 2,80-2,85 (t, 2H), 2,10-2,20 (kwintuplet, 2H); 1,14 (t, 3H); 0,74 (s, 3H).
PL 202 227 B1
177
P r z y k ł a d 252
R1=1-hydroksyindan-2-yl; R3=COCH2OH
2-Hydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[3-(1-hydroksyindan-2-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylo-pirolidyn-1-ylo}etanon
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 143 według Procedury z użyciem K2CO3 z Przykładu 7 stosując tlenek indenu i usunięcie grupy benzylowej według Procedury debenzylowania jak dla Półproduktu 31.
1H NMR δ: 7,48-7,51 (m, 1H); 7,24-7,32 (m, 3H); 6,85-6,96 (m, 3H), 5,11-5,14 (m, 1H); 4,84-4,89 (m, 1H); 3,98-4,15 (m, 3H); 3,84-3,86 (m, 1H); 3,83 (s, 3H); 3,50-3,78 (m, 4,5H); 3,16-3,32 (m, 2H);
3,06 (d, 0,5H); 1,15-1,20 (m, 3H); 0,77 (s, 3H).
P r z y k ł a d 253
R1=4-CH3OPhCH2CH2; R3=COCH3OH
2-Hydroksy-1-((3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-{4-metoksy-3-[2-(4-metoksyfenylo)etoksy]fenylo}-3-metylopirolidyn-1-ylo)etanon
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 143 według Procedury z użyciem K2CO3 z Przykładu 7 stosując 1-(2-chloroetylo)-4-metoksybenzen i usuwając grupę benzylową według Procedury debenzylowania jak dla Półproduktu 31.
1H NMR δ: 7,20-7,23 (d, 2H); 6,74-6,88 (m, 5H); 4,10-4,18 (m, 1H); 3,72-3,91 (m, 2H); 3,86 (s, 3H);
3,80 (s, 3H); 3,48-3,64 (m, 4H); 3,02-3,11 (m, 2H); 1,12-1,17 (m, 3H); 0,74 (s, 3H).
178
PL 202 227 B1
P r z y k ł a d 254
R1=CH3 (cyklo-C3H4)CH2; R3=COCH2OH
2-Hydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-((R)-2-metylocyklopropylometoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 143 według Procedury z użyciem K2CO3 z Przykładu 7 stosując 1-(2-chloroetylo)-4-metoksybenzen i usuwając grupę benzylową według Procedury debenzylowania jak dla Półproduktu 31.
1H NMR δ: 6,77-6,84 (m, 3H); 4,15-4,18 (m, 2H); 3,78-3,99 (m, 4H); 3,86 (s, 3H); 3,49-3,71 (m, 3,5H); 3,08 (d, 0,5H); 1,14-1,19 (m, 3H); 1,07 (sd, 3H); 0,92-1,03 (m, 1H); 0,76-0,77 (m, 4H); 0,50-0,52 (m, 1H); 0,37-0,41 (m, 1H).
P r z y k ł a d 255
1-(R)-[1-(2-Benzyloksyetylo)-4-(S)-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)-metylopirolidyn-3-ylo]-etanol
Półprodukt 68 (86,4 mg, 0,27 mmoli) rozpuszczono w 1,2-dichloroetanie (1 ml) i roztwór poddano działaniu benzyloksyacetaldehydu (38 μL, 0,27 mmoli), a następnie triacetoksyborowodorku sodu (81 mg, 0,38 mmoli). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 18 h w temperaturze pokojowej. Dodano jeszcze triacetoksyborowodorek sodu (40 mg, 0,19 mmoli) i mieszanie kontynuowano przez 8 h. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono 1,0 M NaOH (0,5 ml) i mieszano intensywnie przez 15 minut. Warstwy rozdzielono, fazę wodną przemyto CH2Cl2 i warstwy organiczne połączono. Po przemyciu NaHCO3, substancje organiczne osuszono Na2SO4, a następnie zatężono in vacuo. Surową substancję (129 mg) poddano chromatografii na żelu krzemionkowym stosując CHCl3/95% etanol/stęż. NH4OH (170:15:1), otrzymując związek tytułowy Przykładu 255 (27 mg, 22%).
PL 202 227 B1
179 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 7,36-7,26 (m, 5H), 6,81-6,73 (m, 3H), 4,79-4,73 (m, 1H), 4,54 (s, 1H),
3,82 (s, 3H), 3,71-3,54 (m, 4H), 3,40-3,35 (m, 1H), 3,24-3,21 (m, 1H), 2,80-2,67 (m, 2H), 2,63-2,56 (m, 1H), 2,16-2,09 (m, 1H), 1,95-1,33 (m, 8H), 1,65-1,57 (m, 2H), 1,22-1,10 (m, 3H), 0,49 (m, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): 454,5 Da/e (m+1).
P r z y k ł a d 256
1-(R)-[4-(S)-(3-Cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-1-{2-hydroksyetylo}-3-(S)-metylopirolidyn-3-ylo]etanol
Związek Przykładu 255 (25 mg, 55 mmoli) poddano Procedurze debenzylowania jak dla Półproduktu 31 uzyskując związek tytułowy Przykładu 256 (7,4 mg, 28%) jako sól TFA po oczyszczaniu za pomocą HPLC.
1H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 6,84-6,65 (m, 3H), 5,40-4,90 (brd, 2H), 4,74 (brd s, 1H), 4,26-3,21 (m, 11H), 1,97-1,73 (m, 6H), 1,66-1,56 (m, 3H), 1,33-0,77 (m, 4H), 0,69 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): 364,4 Da/e.
P r z y k ł a d 257
2-Benzyloksy-1-[4-(S)-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)-hydroksymetylo-3-metylopirolidyn-1-ylo]etanon
[4-(S)-(3-Cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)-metylopirolidyn-3-ylo]metanol (100 mg, 0,34 mmoli) rozpuszczono w CH2Cl2 (1,7 ml) i roztwór ochłodzono do 0°C. Dodano DIEA (144 μL, 0,82 mmoli), a następnie chlorek benzyloksyacetylu (114 μL, 0,72 mmoli). Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do powolnego ogrzania do temperatury pokojowej i mieszano przez 18 h. Dodano wodę
180
PL 202 227 B1 (0,25 ml) i mieszaninę reakcyjną mieszano przez 1,5 h. Dodano CH2Cl2 i mieszaninę przemyto jeden raz wodą, dwukrotnie 1N HCl, jeden raz wodą, dwukrotnie 6% NaHCO3, a następnie osuszono nad Na2SO4 i zatężono in vacuo. Pozostałość rozpuszczono w THF (1 ml) i ochłodzono do 0°C. Dodano roztwór LiOH w wodzie (1,36M, 1 ml, 1,36 mmoli) i uzyskaną mieszaninę pozostawiono przez 4 h w 0°C, by zaszła hydroliza. Mieszaninę reakcyjną szybko schłodzono nasyconym roztworem NH4Cl i THF usunięto przez zatężenie in vacuo. Pozostałość ponownie zawieszono w CH2Cl2 i przemyto dwukrotnie 5% NaHCO3, osuszono nad Na2SO4 i zatężono in vacuo.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 7,40-7,28 (m, 5H), 6,83-6,79 (m, 1H), 6,73-6,66 (m, 2H), 4,66 (s, 2H), 4,16-4,13 (m, 2H), 3,86 (s, 3H), 3,83-3,78 (m, 3H), 3,63-3,26 (brd m, 4H), 3,06-3,00 (m, 1H), 2,50-2,45 (brd m, 1H), 1,34-1,12 (m, 1H), 1,03-0,99. (m, 2H), 0,73 (s, 3H), 0,66-0,61 (m, 2H), 0,36-0,32 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 440,3 (m+1).
Półprodukt 97
[4-(S)-(3-Cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)-metylopirolidyn-3-ylo]metanol
Półprodukt 65 (0,99 g, 2,6 mmoli) rozpuszczono w etanolu (9,5%, 10 ml) i roztwór poddano działaniu katalizatora Pearlmana (20% Pd(OH)2 na węglu, 250 mg). Mieszaninę uwodorniono pod ciśnieniem 1 atm H2 przez 15 h. Dodano dalszą ilość katalizatora (250 mg) i reakcję kontynuowano jeszcze przez 24 h. Katalizator usunięto przez odsączenie i mieszaninę reakcyjną zatężono in vacuo (0,63 g, 89%).
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 6,84-6,73 (m, 3H), 3,37-3,83 (m, 4H), 3,59-3,47 (m, 3H), 3,30-3,20 (m, 3H), 2,85 (d, J=10,6, 1H), 2,35-2,12 (brd m, 1H), 1,35-1,27 (m, 1H), 0,64-0,60 (m, 4H), 0,37-0,31 (m, 2H), 0,36-0,32 (m, 2H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 377,3 (m+1).
PL 202 227 B1
181
P r z y k ł a d 258
1-(2-Benzyloksyacetylo)-4-(S)-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)-metylopirolidyno-3-karbaldehyd
Do CH2Cl2 (0,52 ml) dodano chlorek oksalilu (2,0 M roztwór w CH2Cl2, 0,175 ml, 0,35 mmoli). Uzyskany roztwór ochłodzono do -60°C. Następnie dodano kroplami roztwór DMSO (47 ml, 0,66 mmoli) w CH2Cl2 (0,18 ml). Roztwór mieszano przez 5 minut i związek tytułowy Przykładu 257 (rozpuszczony w 1,0 ml CH2Cl2) dodano do mieszaniny utleniającej Swerna. Po mieszaniu mieszaniny reakcyjnej przez 30 minut w -60°C, dodano Et3N (0,25 ml) i mieszaninę reakcyjną ogrzano do temperatury pokojowej. Po 30 minutach dodano wodę i roztwór mieszano intensywnie przez 15 minut. Warstwy rozdzielono, fazę wodną przemyto jeden raz CH2Cl2, następnie połączone warstwy organiczne przemyto nasyconym NaCl, osuszono nad Na2SO4 i zatężono in vacuo. Surową substancję poddano chromatografii na SiO2 stosując układ EtOAc/mieszanina heksanów (2:1) (76 mg, 50%).
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 9,62-9,57 (m, 1H), 7,41-7,30 (m, 5H), 6,84-6,78 (m, 1H), 6,68-6,56 (m, 2H), 4,68-4,63 (m, 2H), 4,20-4,10 (m, 2H), 4,05-3,32 (m, 5H), 3,87 (s, 3H), 1,57-1,55 (m, 2H), 1,33-1,24 (m, 1H), 0,92-0,88 (m, 3H), 0,67-0,60 (m, 2H), 0,37-0,31 (m, 2H).
P r z y k ł a d 259
1-((R)-2,2-Dimetylo-1,3-dioksolan-4-ylo)-1-[(3S,4S)-3((R)-1-hydroksyetylo)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]metanon
Do poddawanego mieszaniu roztworu Półproduktu 70 (73,5 mg, 0,293 mmoli, 1,0 równ.) w CH2Cl2 (3 ml) w temperaturze pokojowej w atmosferze azotu dodano Et3N (65,2 mg, 0,645 mmoli), a następnie chlorek 2,2-dimetylo-1,3-dioksolano-(4R)-karbonylu (53,2 mg, 0,322 mmoli). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc w temperaturze pokojowej, a następnie wlano do 50 ml EtOAc, przemyto solanką, osuszono nad Na2SO4 i zatężono in vacuo uzyskując produkt w postaci pianki (94 mg, wydajność 85%). Surowy produkt poddano hydrolizie przez LiOH poprzez Półprodukt 5 uzyskując związek tytułowy Przykładu 259.
1H NMR (CDCI3, 300 MHz) δ: 6,97-6,58 (m, 3H, aromatyczny), 4,68 (t, 1H, J=6,4 Hz), 4,44-4,34 (m, 1H), 4,24-3,95 (m, 1H), 3,94-3,50 (m, 5H), 3,87 (d, 3H, OMe), 3,42 (d, 1H, J=12,4 Hz), 3,35 (d, 1H, J=12,4 Hz), 1,4 (m, 6H), 1,15 (m, 3H), 0,75 (m, 3H).
P r z y k ł a d 260
1-((R)-2,2-Dimetylo-1,3-dioksolan-4-ylo)-1-{(3S,4S)-3((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}metanon
182
PL 202 227 B1
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 259 (126 mg, 0,332 mmoli, 1,0 równ.) i Półproduktu 90 (69,8 mg, 0,332 mmoli, 1,0 równ.) sposobem Przykładu 176 uzyskując produkt w postaci białej pianki (160 mg).
1H NMR (CDCI3, 300 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 7,42-7,25 (m, 5H, aromatyczny), 7,08 (d, 1H, aromatyczny), 6,36 (d, 2H, aromatyczny), 5,0 (d, 2H, CH2), 4,72-4,60 (m, 1H), 4,45-4,32 (m, 1H), 4,22-4,10 (m, 1H), 3,95-3,70 (m, 3H), 3,89 (s, 3H, OMe), 3,70-3,45 (m, 2H), 3,44-3,29 (m, 1H), 1,5-1,38 (2d, 6H, Me), 1,02-0,75-0,65 (m, 3H), 0,63 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 494,55 (m+1).
P r z y k ł a d 261 (R)-2,3-Dihydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}propan-1-on
Do fiolki reakcyjnej zawierającej związek tytułowy Przykładu 260 (160 mg, 0,323 mmoli) dodano kwas octowy (3,0 ml) i wodę (1,0 ml). Fiolkę zatopiono, ogrzewano do 50°C i mieszano przez 2 h. Mieszaninę reakcyjną zatężono in vacuo i oczyszczono przez HPLC z odwróconymi fazami na kolumnie C18 (Luna 10 μ, C18, 250 x 10 mm). Gradient wymywania 50-100% acetonitryl-woda (0,05% TFA) dał związek tytułowy Przykładu 261 jako białą stałą piankę (52,2 mg, wydajność 35,6%).
1H NMR (CDCl3, 300 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 7,5-7,21 (m, 5H, aromatyczny), 7,05 (m, 1H, aromatyczny), 6,9-6,75 (m, 2H, aromatyczny), 5,0 (d, 2H), 4,31 (s, 1H), 4,01-3,2 (m, 9H), 3,88 (s, 3H, OMe), 1,01-0,9 (m, 3H), 0,7 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 454,20 (m+1).
P r z y k ł a d 262
1-((S)-2,2-Dimetylo-1,3-dioksolan-4-ylo)-1-[(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]metanon
Do poddawanego mieszaniu roztworu Półproduktu 70 (73,5 mg, 0,293 mmoli, 1,0 równ.) w CH2Cl2 (3 ml) dodano w temperaturze pokojowej w atmosferze azotu Et3N (65,2 mg, 0,645 mmoli), a następnie dodano chlorek 2,2-dimetylo-1,3-dioksolano-(4S)-karbonylu (53,2 mg, 0,322 mmoli). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez noc, a następnie wlano do 50 ml EtoAc, przemyto solanką, osuszono Na2SO4 i zatężono in vacuo uzyskując produkt w postaci pianki (94 mg, wydajność 85%). Surowy produkt zhydrolizowano stosując LiOH poprzez Półprodukt 5 uzyskując związek tytułowy Przykładu 262.
PL 202 227 B1
183 1H NMR (CDCl3, 300 MHz) δ: 6,93-6,65 (m, 3H, aromatyczny), 5,68 (s, 1H), 4,67 (m, 1H), 4,34 (m, 1H), 4,21 (m, 1H), 3,94-3,40 (m, 5H), 3,89 (s, 3H, OMe), 1,4 (m, 6H), 1,16 (m, 3H), 0,76 (m, 3H).
P r z y k ł a d 263
1-((S)-2,2-Dimetylo-1,3-dioksolan-4-ylo)-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}metanon
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 262 (126 mg, 0,332 mmoli, 1,0 równ.) i Półproduktu 90 (69,8 mg, 0,332 mmoli, 1,0 równ.) sposobem Przykładu 176 uzyskując biały produkt w postaci pianki (160 mg).
1H NMR (CDCl3, 300 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 7,52-7,15 (m, 5H, aromatyczny), 7,08 (d, 1H, aromatyczny), 6,86 (d, 2H, aromatyczny), 5,98 (m, 2H, CH2), 4,64 (m, 1H), 4,35-4,32 (m, 1H), 4,22-4,10 (m, 1H), 3,97-3,36 (m, 5H), 3,89 (s, 3H, OMe), 1,5-1,38 (2d, 6H, Me), 1,02-0,75 (m, 3H), 0,74 (s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 494,55 (m+1).
P r z y k ł a d 264 (S)-2,3-Dihydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}propan-1-on
Do fiolki reakcyjnej zawierającej związek tytułowy Przykładu 263 (160 mg, 0,323 mmoli) dodano kwas octowy (3,0 ml) i wodę (1,0 ml). Fiolkę zatopiono, ogrzewano do 50°C i mieszano przez 2 h. Mieszaninę reakcyjną zatężono in vacuo i oczyszczono przez HPLC z odwróconymi fazami na kolumnie C18 (Luna 10 μ, C18, 250 x 10 mm). Gradient wymywania 50-100% acetonitryl-woda (0,05% TFA) dał produkt jako białą stałą piankę (52,2 mg, wydajność 35,6%).
1H NMR (CDCl3, 300 MHz, mieszanina rotamerów) δ: 7,44-7,18 (m, 5H, aromatyczny), 7,08 (s, 1H, aromatyczny), 6,86 (s, 2H, aromatyczny), 4,6 (s, 2H, CH2), 4,4-4,3 (m, 1H), 4,01-4,62 (m, 7H), 3,89 (s, 3H, OMe), 3,59-3,46 (m, 1H), 3,32-3,29 (m, 1H), 2,4 (m, 1H), 0,95 (m, 3H), 0,72 (d, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): Da/e 454,20 (m+1).
[α]ο=14,6° (c = 1,00, EtOH).
184
PL 202 227 B1
R1=t-Bu; R3=(S)-COCH(OAc)CH2Ph
Wytworzono z Półproduktu 73 przez acylowanie estrem (S)-1-chlorokarbonylo-2-fenyloetylowym kwasu octowego według Procedury F. Babudriego i in, Tetrahedron, 8, 2431-2440 (1999).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): m/z 498 (m+1).
P r z y k ł a d 266
R1=H; R3=(S)-COCH(OAc)CH2Ph
Wytworzono ze związku tytułowego Przykładu 265 według metody TFA z Przykładu 143 uzyskując związek tytułowy Przykładu 266.
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): m/z 442 (m+1).
PL 202 227 B1
185
Przykład 267
Ester (S)-1-benzylo-2-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksy-etylo)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}-2-okso-etylowy kwasu octowego
R1=PhCECCH2; R3=(S)-COCH(OAc)CH2Ph
Związek z Przykładu 266 (88 mg, 0,2 mmoli) i Półprodukt 90 (50 mg, 0,24 mmoli) poddano Procedurze z użyciem Cs2CO3 z Przykładu 176 i nieczyszczoną pozostałość (110 mg) użyto bez dalszego oczyszczania.
P r z y k ł a d 268 (S)-2-Hydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}-3-fenylopropan-1-on
R1=PhCECCH2; R3=(S)-COCH(OH)CH2Ph
Przykład 267 (110 mg nieoczyszczonej substancji, 0,2 mmoli ilości teoretycznej) poddano Procedurze odbezpieczania O-Octanu i oczyszczono przez HPLC (kolumna C18, 20 x 50 mm YMC
186
PL 202 227 B1
CombiPrep, 20 ml/min, 10-95% acetonitryl/woda w 7 min) uzyskując związek tytułowy Przykładu 268 (38 mg, 75%).
1H NMR (300 MHz, CDCl3, mieszanina rotamerów) δ: 7,50-7,16 (m, 10H), 7,10-6,52 (m, 3H), 5,05-4,92 (m, 2H), 4,52-4,36 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,87-2,72 (m, 9H), 1,48/1,29 (2d, J=4,3/4,6 Hz, 1H), 0,93/0,88 (2d, J=6,4 Hz, 3H), 0,66/0,51 (2s, 3H).
LRMS (Elektrorozpylanie, dodatnie): m/e 514 (m+H).
Związki o wzorze strukturalnym (II) testowano na właściwości hamowania PDE4. Zdolność związku do hamowania aktywności PDE4 odzwierciedla wartość IC50 charakterystyczna dla danego związku, czyli stężenie inhibitora wymagane do 50%-owego hamowania aktywności enzymu. Wartości IC50 dla związków o wzorze strukturalnym (II) oznaczano z użyciem rekombinacyjnej ludzkiej PDE4.
Wartości IC50 hamowania aktywności fosfodiesterazy in vitro i wyliczone z nich wartości Ki dla związków opisanych w przykładach oznaczano przez pomiar hamowania hydrolizy cAMP jako funkcji stężenia badanego związku w zakresie stężeń od 0 do 1 mM. Wartości Ki badanych związków w powyższej próbie zawierały się w zakresie od około 0,0003 μΜ do około 100 μΜ. Związki według wynalazku w zasadzie charakteryzują się wartościami IC50 w próbie na rekombinacyjnej ludzkiej PDE4 niższymi od około 50 μΜ, korzystnie niższymi od około 25 μΜ a jeszcze korzystniej niższymi od około 15 μΜ. Związki według wynalazku na ogół wykazują wartości IC50 w próbie na rekombinacyjnej ludzkiej PDE4 niższe od około 1 μΜ a często niższe od około 0,05 μΜ. Pełne zalety wynalazku wykazują inhibitory charakteryzujące się wartością IC50 od około 700 pM (pikomolarną) do około 15 μΜ.
Wartości IC50 związków określano na podstawie krzywych: stężenie-odpowiedź, na ogół prowadząc oznaczenia dla zakresu stężeń od 0,1 ρΜ do 500 μΜ. Badania aktywności wobec innych enzymów PDE z wykorzystaniem standardowej metodologii opisanej przez Loughney' a i in. w J. Biol. Chem., 271, str. 796-806 (1996) również wykazały, że związki według wynalazku są wysoce selektywne dla cAMP-swoistego enzymu PDE4.
Szczególnie związek według wynalazku opisany jako próbka 66 wykazuje wartość IC50 względem rekombinacyjnej ludzkiej PDE4 równą 0,015 μΜ natomiast jego IC50 w próbie hamowania PDE1A wynosi 80 μΜ, w próbie hamowania PDE1B wynosi 100 μΜ, w próbie hamowania PDE1C wynosi 12 μΜ, w próbie hamowania PDE2 - 450 μΜ, w próbie hamowania PDE3A - 40 μΜ, w próbie hamowania PDE5 - 270 μΜ i w próbie hamowania PDE7 - 36 μΜ. Powyższe dane ilustrują selektywność niniejszego związku w odniesieniu do hamowania PDE4.
Związki o wzorze strukturalnym (II) testowano również na zdolność zmniejszania sekrecji TNFa w ludzkich limfocytach obwodowych. Zdolność zmniejszania wydzielania TNFa jest związana z wartościami EC50 (efektywne stężenie związku, przy którym występuje 50%-owe obniżenie poziomu całkowitego TNFa). Hamowanie uwalniania TNFa in situ w traktowanych endotoksyną izolowanych ludzkich obwodowych limfocytach krwi wyrażone w wartościach EC50 związków podanych w przykładach oznaczano jako funkcję stężenia badanego związku w zakresie stężeń od 0 do 100 μΜ. W wyżej wymienionej próbie, wartości EC50 badanych związków wynosiły od około 0,0002 μΜ do około 20 μΜ. Związki według wynalazku w zasadzie dają wartości EC50 niższe od około 50 μΜ, korzystnie niższe od około 25 μΜ a jeszcze korzystniej, niższe od około 15 μΜ. Związki według wynalazku na ogół wykazują wartości EC50 w próbie PLB/TNFa niższe od około 1 μΜ a często niższe od około 0,05 μΜ. Dla uzyskania pełnej korzyści z wynalazku, inhibitor PDE4 posiada wartość EC50 wynoszącą od około 1000 ρΜ (pikomolarną) do około 20 μΜ.
Wytwarzanie rekombinacyjnych ludzkich PDE oraz oznaczenia wartości IC50 i EC50 można prowadzić z wykorzystaniem metod znanych w stanie techniki. Przykładowe metody są opisane poniżej.
Ekspresja ludzkich PDE
Ekspresja w zakażonych baculowirusem komórkach Spodoptera fugiperda (Sf9)
Baculowirusowe plazmidy transferowe skonstruowano z użyciem albo plazmidu pBlueBacIII (Invitrogen) albo plazmidu pFastBac (BRL-Gibco). Strukturę wszystkich plazmidów potwierdzano przez sekwencjonowanie w miejscach łączenia wektora oraz przez pełne sekwencjonowanie wszystkich regionów generowanych w reakcji PCR. Plazmid pBB-PDE1A3/6 zawierał pełną otwartą ramkę odczytu PDE1A3 (Loughney i wsp., J. Biol. Chem. 271, str. 796-806, 1996) w pBlue-BacIII. Plazmid Hcam3aBB zawierał pełną otwartą ramkę odczytu PDE1C3 (Loughney i wsp., 1996) w pBlueBacIII. Plazmid pBB-PDE3A zawierał pełną otwartą ramkę odczytu PDE3A ^eacci i wsp., Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 89, str. 3721-3725, 1992) w pBlueBacIII.
Podstawowe zasoby rekombinacyjnego wirusa wytworzono albo w układzie MaxBac (Invitrogen) albo w układzie FastBac (Gibco-BPL), postępując zgodnie z instrukcjami producenta. W obydwu
PL 202 227 B1
187 przypadkach ekspresja rekombinacyjnych ludzkich PDE w uzyskanych wirusach była inicjowana przez wirusowy promotor polihedronu. W układzie MaxBac®, wirusy oczyszczano dwukrotnie metodą łysinek dla upewnienia się, że preparat nie jest zanieczyszczony wirusem typu dzikiego (occ+). Ekspresję białka prowadzono następująco. Wzrost komórek Sf9 prowadzono w temperaturze 27°C w pożywce hodowlanej Grace's Insect (Gibco-BRL) wzbogaconej ilościami: 10% płodowej surowicy cielęcej, 0,33% hydrolizatu drożdżowego TC (TC yeastolate), 0,33% hydrolizatu z albuminy mleka, 4,2 mM NaHCO3, 10 μg/ml gentamycyny, 100 jednostek/ml penicyliny i 100 μg/ml streptomycyny. Komórki w logarytmicznej fazie wzrostu zakażano wielokrotnością około 2 do 3 cząstek wirusa na komórkę i prowadzono inkubacje w czasie 48 godzin. Komórki odwirowywano, przemywano nie wzbogaconą pożywką Grace i szybko zamrażano do przechowywania.
Ekspresja w Saccharomyces cerevisiae (drożdże)
Rekombinacyjną produkcję ludzkich PDE1B, PDE2, PDE4A, PDE4B, PDE4C, PDE4D, PDE5 i PDE7 prowadzono w sposób podobny do opisanego w przykładzie 7 opisu patentowego Stanów Zjednoczonych Ameryki, US 5.702.936, wprowadzonego do niniejszego opisu jako odnośnik, z takim wyjątkiem, że użyto drożdżowy wektor transformacyjny pochodzący z podstawowego plazmidu ADH2 opisanego w publikacji Price i wsp., Methods in Enzymology, 185, str. 308-318, 1990, wprowadzono drożdżowy promotor ADH2 i drożdżowe sekwencje terminatorowe a komórki gospodarza Saccharomyces cerevisiae były szczepem BJ2-54 z niedoborem proteazy, zdeponowanym w dniu 31 sierpnia 1998 r w American Type Culture Collection, Manassas, Virginia, pod numerem akcesyjnym ATCC 74465. Transformowane komórki gospodarza hodowano w pożywce 2X SC-leu (pH =6,2) z dodatkiem metali śladowych i witamin. Po 24 godzinach dodano pożywkę YEP z dodatkiem glicerolu w ilości potrzebnej do ustalenia końcowego stężenia na 2X YET/3% glicerolu. Po około 24 godzinach komórki zebrano, przemyto i przechowywano w temperaturze -70°C.
Oczyszczanie kalmoduliny
Kalmodulinę stosowaną do aktywacji enzymów PDE1 oczyszczano z jąder bydlęcych w sposób w zasadzie taki sam, jaki jest opisany przez Dedman'a i in. w Methods in Enzymology, 102, str. 1-8 (1983), postępując według procedury podanej dla Phenyl-Sepharose® firmy Pharmacia.
Immobilizacja kalmoduliny na agarozie
Kalmodulinę immobilizowano na żywicy BioRad Affi-Gel® 15, postępując według instrukcji producenta.
Preparaty fosfodiesterazy ludzkiej
Oznaczenia aktywności fosfodiesterazy
Aktywność fosfodiesterazy w preparatach oznaczano w sposób następujący. W próbach na
PDE zastosowano technikę rozdziału na węglu aktywnym, zasadniczo taką samą, jaka jest opisana
32P 32P przez Luoghney'a i in. (1996). W tej próbie, fosfodiesteraza przekształca 32P-cAMP albo 32P-cGMP w odpowiednie 32P5'-AMP bądź 32P5'-GMP proporcjonalnie do ilości PDE obecnej w próbce. Następnie, 32P5'-AMP bądź 32P5'-GMP przeprowadza się ilościowo w wolny 32P-fosforan i nie znakowaną adenozynę bądź guanozynę przez działanie 5'-nukleotydazą z jadu żmii. W ten sposób ilość uwolnionego 32P-fosforanu jest proporcjonalna do aktywności enzymu. Próbę tę prowadzono w temperaturze 30°C w 100 μl mieszaniny reakcyjnej o składzie (stężenia końcowe): 40 mM Tris HCl (pH =8,0), 1 μM ZnSO4, 5 mM MgCl3 i 0,1 mg/ml albuminy surowicy cielęcej (BSA). Alternatywnie, w próbach, w których oznacza się specyficzną aktywność PDE1, mieszaniny inkubacyjne zawierały ponadto 0,1 mM CaCl2 i 10 μg/ml kalmoduliny. Enzym PDE występował w ilościach dających <30% całkowitej hydrolizy substratu (liniowe warunki oznaczenia). Próbę rozpoczynano przez dodanie substratu (1 mM 32P-cAMP albo GMP) i mieszaninę inkubowano przez 12 minut. Następnie dodano 75 μg jadu żmii Crotalus atrox i kontynuowano inkubację przez 3 minuty (ogółem 15 minut). Reakcję zatrzymano przez dodanie 200 μl węgla aktywnego (zawiesina 25 mg/ml w 0,1 M NaH2PO4, pH 4). Po odwirowaniu (750 g przez 3 minuty) w celu osadzenia węgla aktywnego, pobrano próbkę supernatantu do oznaczenia radioaktywności w liczniku scyntylacyjnym i wyliczono aktywność PDE.
Analizy na aktywność inhibitora przeprowadzono podobnie jak w metodzie opisanej przez Loughney'a i wsp., J. Biol. Chem. 271, str. 796-806 (1996), z tym wyjątkiem, że użyto zarówno cGMP jak i cAMP a stężenie substratu utrzymywano na poziomie poniżej 32 nM, znacznie niższym od Km testowanych PDE.
Oczyszczanie PDE1A3 z komórek SF9
Peletki komórek (po 5 g) mieszano w temperaturze pokojowej z ilością 10 ml buforu do lizy [skład: 50 mM MOPS (pH 7,5), 2 mM ditiotreitolu (DTT), 2 mM chlorowodorku benzamidyny, 5 μM
188
PL 202 227 B1
ZnSO4, 0,1 mM CaCl2, 20 μg/ml inhibitorów kalpainy I i II i po 5 μg/ml leupeptyny, pepstatyny i aprotyniny]. Lizę komórek prowadzono metodą przepuszczania przez celkę ciśnieniową French® (SLM-Aminco®, Spectronic Instruments, Inc., Rochester NY). Powstały lizat wirowano przez godzinę w ultrawirówce Beckmana z rotorem typu T180, z szybkością 45000 obrotów/minutę. Zebrano supernatant i przefiltrowano go przez filtr 0,2 μm. Filtrat wprowadzono na kolumnę SEPHACRYL® o wymiarach 2,6 cm x 90 cm, zrównoważoną buforem do kolumn A (bufor do lizy z dodatkiem 100 mM NaCl i 2 mM MgCl2). Ustawiono szybkość przepływu przez kolumnę na 1 ml/minutę i zbierano frakcje po 7 ml. Połączono frakcje aktywne i dodano 0,16 mg kalmoduliny. Enzym podawano przez dobę, z szybkością 0,2 ml/minutę na kolumnę powinowactwa wypełnioną agarozą ACC-1, w sposób opisany w publikacji Hansena i wsp., Methods in Enzymology, 159, str. 453-557 (1988). Kolumnę przemyto 5 objętościami buforu do kolumny B (bufor do kolumny A bez NaCl) i następnie 5 objętościami buforu do kolumny C (bufor do kolumny A z dodatkiem 250 mM NaCl). Kolumnę eluowano buforem do kolumny D [skład: 50 mM MOPS (pH 7,5), 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, 1 mM DTT, 1 mM chlorowodorku benzamidyny, 100 mM NaCl, 20 μg/ml inhibitorów calpainy I i II i po 5 μg/ml leupeptyny, pepstatyny i aprotyniny], wprowadzając jedną objętość kolumny z szybkością 0,1 ml/minutę, zatrzymując przepływ na godzinę i kontynuując eluowanie z tą samą szybkością. Zbierano frakcje po 0,5 ml. Frakcje wykazujące aktywność połączono i początkowo dializowano wobec buforu do dializy o składzie: 25 mM MOPS (pH 7,5), 100 mM NaCl, 10 μM ZnSO4, 1 mM CaCl2, 1 mM DTT i 1 mM chlorowodorku benzamidyny. Następnie przeprowadzono dializę wobec buforu do dializy zawierającego 50% glicerolu, próbkę szybko zamrożono w suchym lodzie i przechowywano w temperaturze -70°C. Otrzymane preparaty oznaczane metodą elektroforezy SDS-PAGE miały czystość 10 do 15%. Preparaty te miały aktywności właściwe od około 5 do około 20 μmoli cAMP hydrolizowanego na minutę na miligram białka.
Oczyszczanie PDE1B z S. cerevisiae
Komórki drożdży (50 g) rozmrażano przez zmieszanie z ilością 100 ml perełek szklanych (0,5 mM, przemytych kwasem) i z 200 ml buforu A w temperaturze pokojowej. Bufor A składał się z 50 mM MOPS (pH 7,5), 1 mM DTT, 2 mM benzamidyny HCl, 0,01 mM ZnSO4, 5 mM MgCl2, 20 μg/ml inhibitorów kalpainy I i II i po 5 μg/ml leupeptyny, pepstatyny i aprotyniny. Mieszaninę schłodzono do temperatury 4°C, przeniesiono do aparatu Bead-Beater® i prowadzono lizę komórek przez szybkie mieszanie przez 6 cykli po 30 sekund. Homogenat wirowano przez 15 minut w wirówce Beckman J221M z rotorem JA-10, z prędkością 9000 obrotów/minutę, w temperaturze 4°C. Supernatant zebrano i wirowano go w ultrawirówce Beckman XL-80 z rotorem TI45 wirującym z prędkością 36000 obrotów/minutę w czasie 45 minut w temperaturze 4°C. Supernatant zebrano i strącono PDE1B przez dodanie stałego siarczanu amonowego (0,33 g/ml supernatantu) podczas mieszania w łaźni z lodem, przy utrzymywaniu wartości pH w zakresie 7,0 - 7,5. Następnie mieszaninę wirowano przez 22 minuty w wirówce Beckman J2 z rotorem JA-10 pracującym z prędkością 9000 obrotów/minutę (12000 g). Supernatant odrzucono a peletkę rozpuszczono w 100 ml buforu B [skład: 50 mM MOPS (pH 7,5), 1 mM DTT, 1 mM benzamidyny HCl, 0,01 mM ZnSO4, 2 mM MgCl2, 2 mM CaCl2 i po 5 μg/ml leupeptyny, pepstatyny i aprotyniny]. Skorygowano wartość pH i przewodność, odpowiednio do 7,5 i 15-20 milisimensów (mS). Ten roztwór wprowadzono na kolumnę kalmodulina-Agaroza o pojemności 20 ml, uprzednio zrównoważoną 10 objętościami kolumny buforu B przepuszczanego z szybkością 1 ml/minutę. Przepływ przez kolumnę powtarzano co najmniej 5 razy. Kolumnę przemyto 5 objętościami buforu B, 5 objętościami buforu B z dodatkiem 250 mM NaCl i znowu 2 objętościami buforu B bez NaCl. Eluowanie prowadzono 1 objętością buforu C [50 mM MOPS (pH 7,5), 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, 1 mM DTT, 1 mM benzamidyny HCl] z szybkością 0,33 ml/minutę, zatrzymywano przepływ na godzinę i dalej kontynuowano eluowanie. Zbierano frakcje około 4 ml i oznaczano w nich aktywność PDE. Frakcje aktywne połączono i zatężono do objętości 5 ml w systemie ultrafiltracji Amicon. Następnie koncentrat wprowadzono na kolumnę Sephacryl® S-300 o pojemności 320 ml (1,6 cm x 150 cm), uprzednio zrównoważoną co najmniej 2 objętościami buforu D [25 mM MOPS (pH 7,5), 1 mM DTT, 1 mM benzamidyny HCl, 0,01 mM ZnSO4, 2 mM CaCl2 i 100 mM NaCl]. Kolumnę eluowano z szybkością 1 ml/minutę (11 cm/godzinę) zbierając frakcje po 5 ml. Frakcje objęte pikiem aktywności łączono i dializowano przez noc wobec buforu D z dodatkiem 50% glicerolu. Oczyszczony enzym zamrażano na suchym lodzie i przechowywano w temperaturze -70°C. Otrzymane preparaty miały czystość około >90% oznaczoną metodą SDS-PAGE. Preparaty te miały aktywności właściwe od około 10 do 30 μmoli cGMP hydrolizowanego na minutę na miligram białka.
PL 202 227 B1
189
Oczyszczanie PDE1C3 z komórek Sf9
Peletkę komórek (5 g) rozmrażano na lodzie przez dodanie 20 ml buforu do lizy [50 mM MOPS (pH 7,4), 10 μM ZnSO4, 0,1 mM CaCl2, 1 mM DTT, 2 mM benzamidyny HCl i po 5 μg/ml pepstatyny, leupeptyny i aprotyniny]. Lizę komórek prowadzono przez przepuszczenie przez celkę ciśnieniową French® (SLM-Aminco®, Spectronic Instruments), utrzymując temperaturę poniżej 10°C. Otrzymany homogenat komórek wirowano z szybkością 36000 obrotów/minutę, w temperaturze 4°C przez 45 minut w ultrawirówce Beckmana, stosując rotor typu TI45. Supernatant odrzucano i otrzymaną peletkę zawieszano w 40 ml buforu solubilizacyjnego [bufor do lizy zawierający 1 M NaCl, 0,1 M MgCl2, 1 mM CaCl2, 20 μg/ml kalmoduliny i 1% sulfobetainy SB12 (Z3-12)] przez sonifikację w rezonatorze VibraCell z mikrokońcówką, 3 razy po 30 sekund. Proces przeprowadzono podczas chłodzenia w mieszaninie kruszonego lodu z solą. Po sonifikacji mieszaninę powoli mieszano w czasie 30 minut w temperaturze 4°C w celu dokończenia solubilizacji białek błonowych. Mieszaninę wirowano przez 45 minut w ultrawirówce Beckman z rotorem typu TI45 pracującym z prędkością 36000 obrotów/minutę. Supernatant rozcieńczono buforem do lizy zawierającym 10 μg/ml inhibitorów calpainy I i II. Strącone białko wirowano przez 20 minut z szybkością 9000 obrotów/minutę w wirówce Beckman z rotorem JA-10. Zebrany supernatant poddano chromatografii na agarozie Mimetic Blue® AP Agarose.
W celu przeprowadzenia chromatografii na kolumnie z agarozą Mimetic Blue® AP Agarose, żywicę na początku osłaniano przez zastosowanie 10 objętości złoża 1% roztworu poliwinylopirolidonu (o masie cząsteczkowej 40.000) w celu zablokowania niespecyficznych miejsc wiązania. Luźno związany PVP-40 usuwano przez przemycie 10 objętościami złoża 2M roztworu NaCl i 10 mM cytrynianu sodu o pH 3,4. Tuż przed dodaniem próbki solubilizowanej PCE1C3, kolumnę równoważono 5 objętościami złoża buforu A do kolumny [50 mM MOPS (pH 7,4), 10 μM ZnSO4, 5 mM MgCl2, 0,1 mM CaCl2, 1 mM DTT, 2 mM benzamidyny HCl].
Solubilizowaną próbkę wprowadzono na kolumnę z szybkością przepływu 2 ml/minutę z recyklingiem, tak, że cała próbka była wprowadzana na kolumnę 4 do 5 razy w ciągu 12 godzin. Po zakończeniu ładowania kolumnę przemywano 10 objętościami kolumny buforu A do kolumny, następnie 5 objętościami buforu B do kolumny (bufor do kolumny A z dodatkiem 20 mM 5'-AMP) i kolejno 5 objętościami kolumny buforu do kolumny C [50 mM MOPS (pH 7,4), 10 μM ZnSO4, 0,1 mM CaCl2, 1 mM DTT, 2 mM benzamidyny HCl]. Enzym eluowano dzieląc eluat na trzy następujące po sobie połączone frakcje. Pierwsza połączona frakcja zawierała enzym z przemycia 5 objętościami złoża buforu C do kolumny zawierającego 1 mM cAMP. Druga połączona frakcja zawierała enzym z przemycia 10 objętościami złoża buforu C do kolumny z dodatkiem 1 M NaCl. Końcowa połączona frakcja enzymu zawierała eluat z przemycia 5 objętościami złoża buforu C do kolumny zawierającego 1 M NaCl i 20 mM cAMP.
Zebrano i połączono frakcje zawierające aktywny enzym i usunięto cykliczny nukleotyd znaną metodą chromatografii z filtracją żelową albo chromatografii na żywicach hydroksyapatytowych. Po usunięciu cyklicznych nukleotydów dializowano połączone frakcje wobec buforu do dializy o składzie: 25 mM MOPS (pH 7,4), 10 μM ZnSO4, 500 mM NaCl, 0,1 mM CaCl2, 1 mM DTT, 1 mM benzamidyny HCl. Następnie prowadzono dializę wobec buforu do dializy z dodatkiem 50% glicerolu. Enzym szybko zamrożono w suchym lodzie i przechowywano w temperaturze -70°C. Według analizy metodą SDSPAGE, otrzymane preparaty miały czystość około >90%. Aktywność właściwa tych preparatów wynosiła od około 0,1 do 1,0 μmola hydrolizowanego cAMP na minutę na miligram białka.
Oczyszczanie PDE2 z S. cerevisiae
Zamrożone peletki komórek drożdży, szczepu YI34 (10 g, przechowywane w temperaturze -70°C) rozmrażano na lodzie w 25 ml buforu do lizy [skład: 50 mM MOPS (pH 7,2), 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, 1 mM DTT, 0,1 mM fluorku 4-(2-aminoetylo)benzenosulfonylu (AEBSF), po 1 μg/ml pepstatyny, leupeptyny, aprotyniny i inhibitorów kalpainy I i II i 2 mM chlorowodorku benzamidyny]. Lizę komórek prowadzono przez przepuszczenie trzy razy przez celkę ciśnieniową French® (SLM-Aminco®, Spectronic Instruments). Lizat wirowano z prędkością 36000 obrotów/minutę, w temperaturze 4°C w ultrawirówce Beckmana z rotorem typu 45Ti w czasie 60 minut. Zebrano supernatant znad osadu i przepuszczono go dwa razy przez 15 ml żywicy Epoxy-cGMP Sepharos® w temperaturze 4°C, z szybkością około 0,5 ml/minutę. Następnie kolumnę przemyto ilością 45 ml buforu do przemywania 1 [50 mM MOPS (pH 7,2), 0,1 mM EDTA, 0,1 mM DTT]. Po tym przemyciu, kolumnę przemyto ilością 45 ml buforu do przemywania 2 (bufor do przemywania 1 z dodatkiem 0,5 M NaCl). Po tym przemyciu solą, kolumnę przemyto ilością 15 ml buforu do przemywania 3 (bufor do przemywania 1 z dodatkiem 0,25 M NaCl). Kolumnę przeniesiono do temperatury pokojowej i pozostawiono do ogrzania. Następnie, na kolumnę podano około 25 ml buforu do eluowania (bufor do przemywania 3 z dodatkiem 10 mM cGMP (utrzy190
PL 202 227 B1 mywany w temperaturze pokojowej) i zbierano frakcje wycieku po 2 ml. Małe próbki każdej z tych frakcji rozcieńczano 20-krotnie w PBS z dodatkiem 5 mM MgCl2 dla umożliwienia hydrolizy konkurującego ligandu i detekcji aktywności PDE2. Aktywne frakcje przepuszczono przez kolumnę Pharmacia PD10® pracującą na zasadzie filtracji żelowej w celu wymiany na bufor do przemywania 3. Poddane wymianie połączone frakcje rozcieńczono w proporcji 50% (objętościowo) sterylnym 80% glicerolem przechowywano w temperaturze -20°C. Otrzymane preparaty miały czystość powyżej 85%, jak wykazała analiza metodą elektroforezy SDS-PAGE z następnym barwieniem białka barwnikiem Coomassie R-250. Preparaty te miały aktywności właściwe od około 150 do 250 μmola hydrolizowanego cGMP na minutę na miligram białka.
Preparowanie PDE3A z komórek Sf9
Komórki (2 x 1010) zawieszono w buforze do lizy o składzie: 50 mM MOPS (pH 7,5), 2 mM DTT, mM benzamidyny HCl, 5 μΜ ZnSO4, 0,1 mM CaCl2, 20 μg/ml inhibitorów kalpainy I i II i po 5 μg/ml leupeptyny, pepstatyny i aprotyniny. Mieszaninę sonifikowano dwa razy po 30 sekund i komórki poddano lizie w celce ciśnieniowej French® (SLM-Aminco®, Spectronic Instruments), utrzymując temperaturę 4°C. Lizat wirowano z prędkością 100.000 g przez 45 minut. Peletkę przemyto raz w buforze do lizy i zawieszono w 46 ml buforu do lizy w homogenizatorze Dounce. Próbki przechowywano w temperaturze -70°C. Te preparaty miały aktywność właściwą od około 1 do 2 nmoli hydrolizowanego cAMP na minutę na miligram białka.
Preparaty ludzkich PDE4A, 4B, 4C i 4D
Preparowanie PDE4A z S. cerevisiae
Komórki drożdży (50 g szczepu drożdżowego YI26 niosącego HDUN1.46) rozmrażano w temperaturze pokojowej przez zmieszanie z ilością 50 ml buforu do lizy [50 mM MOPS (pH 7,5), 10 μΜ ZnSO4, 2 mM MgCl2, 14,2 mM 2-merkaptoetanolu, po 5 μg/ml pepstatyny, leupeptyny i aprotyniny, po 20 μg/ml inhibitorów kalpainy I i II i 2 mM benzamidyny HCl]. Lizę komórek prowadzono w celce ciśnieniowej French® (SLM-Aminco®, Spectronic Instruments), w temperaturze 10°C. Ekstrakt wirowano w wirówce Beckmana z rotorem JA-10, z prędkością 9000 obrotów/minutę w czasie 22 minut, w temperaturze 4°C. Supernatant usunięto i wirowano go przez 45 minut w wirówce Beckmana z rotorem typu TI45 z prędkością 36.000 obrotów/minutę, w temperaturze 4°C. PDE4A strącano z supernatantu wirowanego z dużą szybkością przez dodanie do mieszanego i utrzymywanego w łaźni z lodem supernatantu stałego siarczanu amonowego (0,26 g/ml supernatantu), utrzymując wartość pH pomiędzy 7,0 a 7,5. Strącone białka zawierające PDE4A zebrano przez wirowanie w czasie 22 minut w wirówce Beckmana z rotorem JA-10, pracującym z prędkością 9000 obrotów/minutę. Osad zawieszono w 50 ml buforu G [50 mM MOPS (pH 7,5), 10 μM ZnSO4, 5 mM MgCl2, 100 mM NaCl, 14,2 mM 2-merkaptoetanolu, 2 mM benzamidyny HCl, po 5 μg/ml leupeptyny, pepstatyny i aprotyniny i po 20 μg/ml inhibitorów kalpainy I i II] i przefiltrowano przez filtr 0,45 μm.
Zawieszoną próbkę (50 do 100 ml) wprowadzono na kolumnę SEPHACRYL® S-300 firmy Pharmacia o wymiarach 5 cm x 100 cm, zrównoważoną buforem G. Enzym eluowano przy szybkości przepływu 2 ml/minutę, frakcje wykazujące aktywność połączono do dalszego frakcjonowania.
PDE4A wyizolowaną metodą chromatografii z filtracją żelową (10 ml) wprowadzono na kolumnę Sigma Cibacron Blue Agarose type-300 o wymiarach 1,6 cm x 20 cm, zrównoważoną buforem A [50 mM MOPS (pH 7,5), 10 μM ZnSO4, 5 mM MgCl2, 14,2 mM 2-merkaptoetanolu i 100 mM benzamidyny HCl]. Kolumnę przemywano kolejno ilością 50 do 100 ml buforu A, 20 do 30 ml buforu A z dodatkiem 20 mM 5'-AMP, 50 do 100 ml buforu A z dodatkiem 1,5 M NaCl i 10 do 20 ml buforu C [50 mM Tris HCl (pH 8), 10 μM ZnSO4, 14,2 mM 2-merkaptoetanolu i 2 mM benzamidyny HCl]. Enzym eluowano ilością 20 do 30 ml buforu C z dodatkiem 20 mM cAMP.
Połączono frakcje objęte pikiem aktywności PDE i strącono je siarczanem amonowym (0,33 g/ml enzymu w połączonych frakcjach) w celu usunięcia nadmiaru cyklicznego nukleotydu. Strącone białka zawieszono w buforze X [25 mM MOPS (pH 7,5), 5 μM ZnSO4, 50 mM NaCl, 1 mM DTT i 1 mM benzamidyny HCl] i odsolono je w procesie filtracji żelowej na kolumnie Pharmacia PD-10®, postępując według instrukcji producenta. Enzym szybko zamrożono w łaźni: suchy lód/etanol i przechowywano w temperaturze -70°C.
Otrzymane preparaty miały czystość około >80% według oznaczenia metodą SDS-PAGE. Aktywność właściwa tych preparatów wynosiła od około 10 do około 40 μmoli hydrolizowanego cAMP na minutę na miligram białka.
PL 202 227 B1
191
Preparowanie PDE4B z S. cerevisiae
Komórki drożdży (150 g szczepu drożdżowego Y123, niosącego HDUN2.32) rozmrażano w temperaturze pokojowej przez zmieszanie z ilością 100 ml perełek szklanych (0,5 mM, przemytych kwasem) i 150 ml buforu do lizy [50 mM MOPS (pH 7,2), 2 mM EDTA, 2 mM EGTA, 1 mM DTT, 2 mM benzamidyny HCl, po 5 μg/ml pepstatyny, leupeptyny, aprotyniny i inhibitorów kalpainy I i II]. Mieszaninę oziębiono do 4°C, przeniesiono do aparatu Bead-Beater® i prowadzono lizę komórek przez szybkie mieszanie w 6 cyklach po 30 sekund. Homogenat wirowano przez 22 minuty w temperaturze 4°C w wirówce Beckman J2-21M z rotorem JA-10, z szybkością 9000 obrotów/minutę. Supernatant zebrano i wirowano go przez 45 minut w temperaturze 4°C w ultrawirówce Beckman XL-80 z rotorem TI45 pracującym z prędkością 36.000 obrotów/minutę. Zebrano supernatant i strącono PDE4B przez dodanie stałego siarczanu amonowego (0,26 g/ml supernatantu), mieszając mieszaninę umieszczoną w łaźni z lodem i utrzymując pH w zakresie 7,0 do 7,5. Następnie mieszaninę tę wirowano przez 22 minuty w wirówce Beckman J2 z rotorem JA-10 pracującym z szybkością 9000 obrotów/minutę (12000 x g). Supernatant odrzucono a peletkę rozpuszczono w 200 ml buforu A [50 mM MOPS (pH 7,5), 5 mM MgCl2, 1 mM DTT, 1 mM benzamidyny HCl i po 5 μg/ml leupeptyny, pepstatyny i aprotyniny]. Skorygowano wartość pH i przewodność odpowiednio na 7,5 i 15-20 mS.
Zawieszoną próbkę (25 ml) wprowadzono na kolumnę Sigma Cibacron Blue Agarose-type 300 o wymiarach 1,6 cm x 200 cm, zrównoważoną buforem A. Próbkę recyklizowano 4 do 6 razy w czasie 12 godzin. Następnie kolumnę przemyto kolejno ilościami 125 ml do 250 ml buforu A, 125 ml do 250 ml buforu A z dodatkiem 1,5 M NaCl i 25 ml do 50 ml buforu A. Enzym eluowano ilością 50 ml do 75 ml buforu E [50 mM Tris HCl (pH 8), 2 mM EDTA, 2 mM EGTA, 1 mM DTT, 2 mM benzamidyny HCl i 20 mM cAMP] i 50 ml do 75 ml buforu E z dodatkiem 1 M NaCl. Frakcje objęte pikiem aktywności PDE połączono i strącono siarczanem amonowym (0,4 g/ml puli enzymu) dla usunięcia nadmiaru cyklicznego nukleotydu. Strącone białka zawieszono w buforze X [25 mM MOPS (pH 7,5), 5 μM ZnSO4, 50 mM NaCl, 1 mM DTT i 1 mM benzamidyny HCl] i odsolono je w procesie filtracji żelowej na kolumnie Pharmacia PD-10®, postępując według instrukcji producenta. Pulę enzymu dializowano przez dobę wobec buforu X z dodatkiem 50% glicerolu. Następnie enzym szybko zamrożono w łaźni: suchy lód/etanol i przechowywano w temperaturze -70°C.
Otrzymane preparaty miały czystość około >90% według oznaczenia metodą SDS-PAGE. Aktywność właściwa tych preparatów wynosiła od około 10 do około 50 μmoli hydrolizowanego cAMP na minutę na miligram białka.
Preparowanie PDE4C z S. cerevisiae
Komórki drożdży (150 g szczepu drożdżowego YI30, niosącego HDUN3.48) rozmrażano w temperaturze pokojowej przez zmieszanie z ilością 100 ml perełek szklanych (0,5 mM, przemytych kwasem) i 150 ml buforu do lizy [50 mM MOPS (pH 7,2), 2 mM EDTA, 2 mM EGTA, 1 mM DTT, 2 mM benzamidyny HCl, po 5 μg/ml pepstatyny, leupeptyny, aprotyniny i inhibitorów kalpainy I i II]. Mieszaninę oziębiono do 4°C, przeniesiono do aparatu Bead-Beater® i prowadzono lizę komórek przez szybkie mieszanie w 6 cyklach po 30 sekund. Homogenat wirowano przez 22 minuty w temperaturze 4°C w wirówce Beckman J2-21M z rotorem JA-10, z prędkością 9000 obrotów/minutę. Supernatant zebrano i wirowano go przez 45 minut w temperaturze 4°C w ultrawirówce Beckman XL-80 z rotorem TI45 pracującym z prędkością 36.000 obrotów/minutę.
Zebrano supernatant i strącono PDE4C przez dodanie stałego siarczanu amonowego (0,26 g/ml supernatantu), podczas mieszania mieszaniny umieszczonej w łaźni z lodem, utrzymując pH w zakresie 7,0 do 7,5. Po 30 minutach mieszaninę tę wirowano przez 22 minuty w wirówce Beckman J2 z rotorem JA-10 pracującym z szybkością 9000 obrotów/minutę (12000 x g). Supernatant odrzucono a peletkę rozpuszczono w 200 ml buforu A [50 mM MOPS (pH 7,5), 5 mM MgCl2, 1 mM DTT, 2 mM benzamidyny HCl i po 5 μg/ml leupeptyny, pepstatyny i aprotyniny]. Skorygowano wartość pH i przewodność odpowiednio na 7,5 i 15-20 mS.
Zawieszoną próbkę (25 ml) wprowadzono na kolumnę Sigma Cibacron Blue Agarose-type 300 o wymiarach 1,6 cm x 20 cm, zrównoważoną buforem A. Próbkę recyklizowano przez kolumnę 4 do 6 razy w czasie 12 godzin. Następnie kolumnę przemyto kolejno ilościami 125 ml do 250 ml buforu A, 125 ml do 250 ml buforu A z dodatkiem 1,5 M NaCl i następnie 25 ml do 50 ml buforu A. Enzym eluowano ilością 50 ml do 75 ml buforu E [50 mM Tris HCl (pH 8), 2 mM EDTA, 2 mM EGTA, 1 mM DTT, 2 mM benzamidyny HCl i 20 mM cAMP] i 50 ml do 75 ml buforu E z dodatkiem 1 M NaCl. Frakcje objęte pikiem aktywności PDE4C połączono i strącono siarczanem amonowym (0,4 g/ml puli enzymu) dla usunięcia nadmiaru cyklicznego nukleotydu. Strącone białka zawieszono w buforze X [25 mM
192
PL 202 227 B1
MOPS (pH 7,2), 5 μM ZnSO4, 50 mM NaCl, 1 mM DTT i 1 mM benzamidyny HCl] i odsolono je w procesie filtracji żelowej na kolumnie Pharmacia PD-10®, postępując według instrukcji producenta. Pulę enzymu dializowano przez dobę wobec buforu X z dodatkiem 50% glicerolu. Następnie enzym szybko zamrożono w łaźni: suchy lód/etanol i przechowywano w temperaturze -70°C.
Otrzymane preparaty miały czystość około >80% według oznaczenia metodą SDS-PAGE. Aktywność właściwa tych preparatów wynosiła od około 10 do około 20 μmoli hydrolizowanego cAMP na minutę na miligram białka.
Preparowanie PDE4D z S. cerevisiae.
Komórki drożdży (100 g szczepu drożdżowego YI29, niosącego HDUN4.11) rozmrażano w temperaturze pokojowej przez zmieszanie z ilością 150 ml perełek szklanych (0,5 mM, przemytych kwasem) i 150 ml buforu do lizy [50 mM MOPS (pH 7,2), 10 μM ZnSO4, 2 mM MgCl2, 14,2 mM 2-merkaptoetanolu, 2 mM benzamidyny HCl, po 5 μg/ml pepstatyny, leupeptyny, aprotyniny, inhibitorów kalpainy I i II]. Mieszaninę oziębiono do 4°C, przeniesiono do aparatu Bead-Beater® i prowadzono lizę komórek przez szybkie mieszanie w 6 cyklach po 30 sekund. Homogenat wirowano przez 22 minuty w temperaturze 4°C w wirówce Beckman J2-21M z rotorem JA-10, z szybkością 9000 obrotów/minutę. Supernatant zebrano i wirowano go przez 45 minut w temperaturze 4°C w ultrawirówce Beckman XL-80 z rotorem TI45 pracującym z szybkością 36.000 obrotów/minutę. Zebrano supernatant i strącono PDE4D przez dodanie stałego siarczanu amonowego (0,33 g/ml supernatantu), mieszając mieszaninę umieszczoną w łaźni z lodem i utrzymując pH w zakresie 7,0 do 7,5. Po 30 minutach mieszaninę tę wirowano przez 22 minuty w wirówce Beckman J2 z rotorem JA-10 pracującym z szybkością 9000 obrotów/minutę (12000 x g). Supernatant odrzucono a peletkę rozpuszczono w 100 ml buforu A [50 mM MOPS (pH 7,5), 10 μM ZnSO4, 5 mM MgCl2, 14,2 mM 2-merkaptoetanolu, 100 mM benzamidyny HCl i po 5 μg/ml leupeptyny, pepstatyny i aprotyniny, inhibitorów kalpainy I i II]. Skorygowano wartość pH i przewodność odpowiednio na 7,5 i 15-20 mS.
Zawieszoną próbkę (10 ml) wprowadzono z szybkością przepływu 0,67 ml/minutę na kolumnę Sigma Cibacron Blue Agarose-type 300 o wymiarach 1,6 cm x 20 cm, zrównoważoną buforem A. Kolumnę przemyto kolejno ilościami 50 ml do 100 ml buforu A, 20 ml do 30 ml buforu A z dodatkiem 20 mM 5'-AMP, 50 ml do 100 ml buforu A z dodatkiem 1,5 M NaCl i następnie 10 ml do 20 ml buforu C [50 mM Tris HCl (pH 8), 10 μM ZnSO4, 14,2 mM 2-merkaptoetanolu, 2 mM benzamidyny HCl]. Enzym eluowano ilością 20 ml do 30 ml buforu C z dodatkiem 20 mM cAMP.
Frakcje objęte pikiem aktywności PDE4D połączono i strącono siarczanem amonowym (0,4 g/ml puli enzymu) dla usunięcia nadmiaru cyklicznego nukleotydu. Strącone białka zawieszono w buforze X [25 mM MOPS (pH 7,2), 5 μM ZnSO4, 50 mM NaCl, 1 mM DTT i 1 mM benzamidyny HCl] i odsolono je w procesie filtracji żelowej na kolumnie Pharmacia PD-10®, postępując według instrukcji producenta. Pulę enzymu dializowano przez dobę wobec buforu X z dodatkiem 50% glicerolu. Następnie enzym szybko zamrożono w łaźni: suchy lód/etanol i przechowywano w temperaturze -70°C.
Otrzymane preparaty miały czystość około >80% według oznaczenia metodą SDS-PAGE. Aktywność właściwa tych preparatów wynosiła od około 20 do około 50 μmoli hydrolizowanego cAMP na minutę na miligram białka.
Oczyszczanie PDE5 z S. cerevisiae
Peletki komórek (29 g) rozmrażano na lodzie z równą objętością buforu do lizy [25 mM Tris HCl (pH 8), 5 mM MgCl2, 0,25 mM DTT, 1 mM benzamidyny i 10 μM ZnSO4]. Lizę komórek prowadzono w aparacie Microfluidizer® (Microfluidics Corp.) z użyciem azotu pod ciśnieniem 20.000 funtów/cal2. Lizat odwirowano i przefiltrowano przez filtr do jednorazowego użytku 0,45 μ^ι. Filtrat wprowadzono na kolumnę Q SEPHAROSE® Fast Flow (Pharmacia) o pojemności 150 ml. Kolumnę przemyto 1,5 objętości buforu A [20 mM Bis-Tris Propan (pH 6,8), 1 mM MgCl2, 0,25 mM DTT, 10 μM ZnSO4] i eluowano stopniowym gradientem 125 mM NaCl w buforze A i następnie liniowym gradientem 125-1000 mM NaCl w buforze A. Wykazujące aktywność enzymu frakcje z liniowego gradientu podano na kolumnę hydroksyapatytową o pojemności 180 ml w buforze B [20 mM Bis-Tris Propan (pH 6,8), 1 mM MgCl2, 0,25 mM DTT, 10 μM ZnSO4 i 250 mM KCl]. Po załadowaniu, kolumnę przemyto dwiema objętościami buforu B i eluowano liniowym gradientem 0-125 mM fosforanu potasowego w buforze B. Aktywne frakcje połączono, strącono 60% siarczanem amonowym i zawieszono w buforze C [20 mM Bis-Tris Propan (pH 6,8), 125 mM NaCl, 0,5 mM DTT i 10 μM ZnSO4]. Tę pulę wprowadzono na kolumnę SEPHACRYL® S-300 HR o pojemności 140 ml i prowadzono eluowanie buforem C. Aktywne frakcje rozcieńczono do zawartości 50% glicerolu i przechowywano w temperaturze -20°C.
PL 202 227 B1
193
Otrzymane preparaty miały czystość około 85% według oznaczenia metodą SDS-PAGE. Aktywność właściwa tych preparatów wynosiła od około 3 μmoli hydrolizowanego cGMP na minutę na miligram białka.
Preparowanie PDE7 z S. cerevisiae
Peletki komórek (126 g) rozmrożono i suspendowano w temperaturze pokojowej w czasie około 30 minut z równą objętością buforu do lizy [50 mlW Tris HCl (pH 8), 1 mlW EDTA, 1 mlW DTT, 50 mlW NaCl, 2 mlW benzamidyny HCl i po 5 μg/ml pepstatyny, leupeptyny i aprotyniny]. Lizę komórek prowadzono w temperaturze 0-4°C z dodatkiem perełek szklanych (125 ml) w aparacie Bead-Beater® w 6 cyklach po 30 sekund. Lizat odwirowano i przefiltrowano przez filtry do jednorazowego użytku 0,45 μm. Przefiltrowany ekstrakt (178 ml) rozdzielono na porcje po 4 ml, szybko zamrożono w suchym lodzie i przechowywano w zamrażarce w temperaturze -70°C. Preparaty te były stabilne przez kilka cykli zamrażania i rozmrażania. Ich aktywność właściwa wynosiła około 50 do 100 pmoli hydrolizowanego cAMP na minutę na miligram białka.
Stymulowane lipopolisacharydem uwalnianie TNF-a z ludzkich obwodowych limfocytów krwi.
Dla oceny zdolności związku do obniżania sekrecji TNF-a w ludzkich obwodowych limfocytach krwi (PBL) przeprowadzono następujące testy. Poprzednie badania wykazały, że inkubowanie ludzkich PBL ze środkami podwyższającymi poziom cAMP, takimi jak prostaglandyna E21, forskolina, 8-bromo-cAMP lub dibutyrylo-cAMP, hamuje sekrecję TNF-α przez te komórki podczas stymulacji lipopolisacharydem (LPS, endotoksyna). Przeprowadzono zatem wstępne doświadczenia dla zademonstrowania, że selektywne inhibitory PDE4, takie jak rolipram, hamują indukowaną przez LPS sekrecję TNF-a z limfocytów ludzkich w sposób zależny od dawki. Tak więc, wydzielanie TNF-a z ludzkich PBL wykorzystano jako standard zdolności związku do podnoszenia wewnątrzkomórkowych stężeń cAMP i/lub do hamowania aktywności PDE4 w komórce.
Pobraną od ochotników heparynizowaną krew (około 30 ml) mieszano w proporcji 1:1 z buforowaną fosforanem solą fizjologiczną modyfikowaną płynem Dulbecco. Tę mieszaninę mieszano w proporcji 1:1 z odczynnikiem HISTOPAQUE® i wirowano z szybkością 1500 obrotów/minutę w temperaturze pokojowej, bez hamowania (braking) in the swinging bucket wirówki Beckman, model TJ6. Po odwirowaniu erytrocyty znajdowały się na dnie probówek a surowica pozostawała na powierzchni probówek. Warstwa zawierająca limfocyty opadała pomiędzy warstwę surowicy a warstwę HISTOPAQUE. Pobrano ją przez zassanie do świeżej próbówki. Komórki zliczano, doprowadzano do stężenia 3 x 106 komórek/ml i ilości po 100 μΙ umieszczano w studzienkach w płytce 96-dołkowej. Do każdej studzienki dodawano badane związki i płyn RPMI (Gibco, BRL Life Sciences) i po 15 minutach dodawano bakteryjny LPS (25 mg/ml). Mieszaninę inkubowano przez 20 godzin w temperaturze 37°C w nawilgotnionej komorze. Następnie komórki oddzielano przez wirowanie z szybkością 800 obrotów/minutę przez 5 minut w temperaturze pokojowej. Ilość 180 μΙ supernatantu przenoszono do nowej płytki w celu oznaczenia stężenia TNF-a. Białko TNF-a w supernatancie komórkowym oznaczano dostępnym w handlu testem immunoenzymatycznym ELISA (CYTOSCREEN® Immunoassay Kit udostępniany przez Biosource International).
W tej próbie na komórkach uzyskano wyniki dla różnych związków pirolidynowych według wynalazku. Wartości EC50 (efektywne stężenie związku obniżające o 50% poziom całkowitego TNF-a) ilustrują zdolność związków według wynalazku do hamowania stymulowanego przez LPS uwalniania TNF-a z ludzkich PBL. W poniższej tabeli przedstawiona jest zdolność związków o wzorze (II) do hamowania aktywności PDE4 i uwalniania TNF-a in vitro. W tabeli tej, wartości IC50 oznaczono w próbie wobec ludzkiej rekombinacyjnej PDE4.
Numer Próbki1 Stereochemia IC50 w próbie na PDE4 (Μ x 10-9) EC50 w próbie na PBL/TNF-α (Μ x 10-9)
1 2 3 4
1 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 87,0 1.205,8
2 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 260,0 1.900,0
3 Konfiguracja względna, jak podano, związek racemiczny 180,0 3.261,7
4 Konfiguracja względna, struktura stereochemiczna jak podano, związek racemiczny 190,0 3.611,5
194
PL 202 227 B1 cd. tabeli
1 2 3 4
5 Konfiguracja względna, struktura stereochemiczna jak podano, związek racemiczny 75,0 1.551,3
6 Konfiguracja względna, struktura stereochemiczna jak podano, związek racemiczny 75,0 3.657,5
7 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 5.800,0
8 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 784,0 909,6
9 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 13.000,0
10 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 7.900,0
11 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 3.700,0
12 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 2.600,0
13 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 1.000,0 2.339,5
14 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 900,0 2.981,5
15 Konfiguracja względna, struktura stereochemiczna jak podano, związek racemiczny, mieszanina izomerów eterowych 4,3 108,8
16 Konfiguracja względna, struktura stereochemiczna jak podano, związek racemiczny, mieszanina izomerów eterowych 7,3 46,4
17 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 2.211,6 3.447,3
18 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 1.027,3 5.101,6
19 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 1.974,0 1.951,1
20 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 536,0 170,0
21 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 16,2 278,0
22 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 520,4 164,0
23 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 1.592,2
24 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku, mieszanina izomerów eterowych 1,6 40,0
25 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku, mieszanina izomerów eterowych 2,8 12,2
26 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku, mieszanina izomerów eterowych 35,0 106,0
27 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku, mieszanina izomerów eterowych 1,8 36,0
28 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 23,0 241,0
29 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 4,9 78,0
30 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 100,0 440,0
31 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 3,6 35,0
32 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 1.000,0 801,0
33 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 2.100,0
34 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 402,6 250,0
35 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 35,6 20,3
PL 202 227 B1
195 cd. tabeli
1 2 3 4
36 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 187,2 1.600,0
37 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 0,768 72,0
38 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 5,9 36,0
39 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 2,7 48,1
40 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 98,4 139,1
41 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 27,0 266,9
42 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 7,5 171,7
43 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 12,5 145,8
44 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 41,2 238,0
45 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 247,6 694,0
46 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 1.805,9 13.317,0
47 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 2.727,4 20.000,0
48 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 89,7 446,0
49 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 14,3 26,2
50 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 44,8 151,2
51 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 44,7 72,6
52 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 26,7
53 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku mieszanina izomerów tetrahydrofurylowych 116,3 112,6
54 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku; mieszanina kwasu 2,2-dimetylo-4-okso-4-pirolidyn-1-ylo-masłowego i amidów kwasu 3,3-dimetylo-4-okso-4-pirolidyn-1-ylomasłowego 464,7
55 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 1.842,1
56 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 4,0
57 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 95,6
58 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku
59 Związek racemiczny, konfiguracja względna jak pokazano 58,0 170,0
60 Związek racemiczny, konfiguracja względna jak pokazano 74,0 44,0
61 Związek racemiczny, konfiguracja względna jak pokazano 18,3 57,8
62 Związek racemiczny, konfiguracja względna jak pokazano 6,8 10,2
63 Związek racemiczny, konfiguracja względna jak pokazano, racemiczna reszta norbornylowa 51,4 267,4
64 Związek racemiczny, konfiguracja względna jak pokazano, racemiczna reszta norbornylowa 8,5 36,2
65 Związek racemiczny, konfiguracja względna jak pokazano 220,0 181,0
66 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 14,0 71,6
67 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 514,7 603,3
68 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 61,1 169,9
69 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 13,3 57,0
196
PL 202 227 B1 cd. tabeli
1 2 3 4
70 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku; pojedynczy, nie zidentyfikowany izomer 1 alkoholu 498,5 547,2
71 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku; pojedynczy, nie zidentyfikowany izomer 2 alkoholu 1.707,2
72 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 2.452,6
73 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 9.131,0
74 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 352,3 557,3
75 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 45,1 121,0
76 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 36,6 173,0
77 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 188,7 580,0
78 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 760,1 1.288,6
79 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 1.639,0 2.366,6
80 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 300,0 272,4
81 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 700,0 624,8
82 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 389,8 490,0
83 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 172,0 51,0
84 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 21,7 40,0
85 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 3.576,8
86 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 6.077,6
87 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 896,6 934,4
88 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 953,4 629,5
89 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 699,0 860,0
90 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 69,4 61,0
91 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 150,0 44,0
92 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 439,4
93 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 33,1 7,8
94 Konfiguracja absolutna, jak podano na rysunku 238,2 1.800,0
1) - Patrz załącznik A podający strukturę każdego związku (próbki)
Z danych przedstawionych powyżej wynika, że związki według wynalazku są silnymi inhibitorami PDE4, np. związki te wykazują wartość IC50 względem ludzkiej rekombinacyjnej PDE4 wynoszącą od około 700 pM do około 15 μM. Korzystne związki wykazują wartość IC50 około 100 nM lub niższą a szczególnie korzystne związki charakteryzują się wartością IC50 około 50 nM lub niższą.
Podobnie, stężenie efektywne EC50 w próbie na PBL/TNFa korzystnych związków wynosi około 500 nM lub jest niższe a korzystnie, wynosi około 200 nM lub jest niższe. Bardziej korzystne związki wykazują EC50 w tej próbie wynoszące około 100 nM lub niższe.
Aby uzyskać pełne korzyści z wynalazku, związki powinny posiadać wartość IC50 w stosunku do ludzkiej rekombinacyjnej PDE4 około 100 nM lub niższą i wartość EC50 w próbie na PBL/TNFa około 500 nM lub niższą. Bardziej korzystnie, związki te powinny wykazywać wartość IC50 wynoszącą około 50 nM lub niższą i wartość EC50 w próbie na PBL/TNFa około 100 nM lub niższą.
Modele zwierzęce.
Próba na hamowanie poziomu TNFa w surowicy ssaków (myszy/TNFa ED50 (mg/kg))
Dla oceny właściwości związku obniżania poziomu TNFa w surowicy ssaków zastosowano niżej opisany sposób postępowania. Specjalistom z tej dziedziny wiedzy znany jest fakt, że poprzednie
PL 202 227 B1
197 badania udowodniły, iż inkubowanie aktywowanych przez LPS ludzkich monocytów czynnikami, które mogą podwyższać poziom cAMP, takimi jak PGE2, forskolina i dbcAMP, hamuje wydzielanie TNFa. Inhibitory PDE4, takie jak rolipram, które również podwyższają poziom cAMP, także obniżają poziom TNFa w surowicy. Rolipram hamuje ponadto sekrecję TNFa z aktywowanych LPS makrofagów myszy. Zgodnie z tym, oznaczano skuteczność związku w obniżaniu poziomu PDE4 in vivo przez podawanie tego związku i oznaczanie obniżenia poziomu TNFa w surowicy u myszy, którym wstrzyknięto LPS. Samice myszy C3H o masie 20-25 g, głodzono przez noc i następnie podawano dootrzewnowo testowany związek w odpowiednim nośniku, na 60 minut przed iniekcją LPS. Następnie myszom wstrzykiwano dootrzewnowo 5 μg LPS. Po 90 minutach od iniekcji LPS, myszy wykrwawiano przez serce i krew pozostawiano na noc w temperaturze 4°C do skrzepnięcia. Następnie próbki wirowano przez 10 minut w mikrowirówce, surowicę zbierano i przechowywano w temperaturze -20°C do czasu analizy. Poziomy TNFa w surowicy oznaczano w dostępnym na rynku zestawie ELISA (Genzyme), postępując według instrukcji załączonej do zestawu. Procent obniżenia poziomu TNFa w surowicy przez dany związek wyliczano w porównaniu do poziomu TNFa w surowicy myszy kontrolnych, którym podano sam nośnik.
Połączona próba uwalniania TNFa u myszy stymulowanych endotoksyną i aktywności ruchowej (ED50, mg/kg).
Celem tego badania było oznaczenie skuteczności inhibitorów PDE4 in vivo na modelu mysim ze stymulacją LPS łącznie z oznaczeniem działań niepożądanych na ośrodkowy układ nerwowy (CNS) objawiających się spadkiem ruchliwości spontanicznej. Do badań użyto samice myszy Balb/c o średniej masie ciała około 20 g. Inhibitory PDE4 przygotowane w nośniku, 30% Cremophor® EL, podawano drogą iniekcji dootrzewnowych (i.p.) w dawkach 0,1, 1,0, 10,0 i 100 mg/kg. Objętości poszczególnych dawek (około 150 μθ dobierano stosownie do zmierzonej masy ciała. Po godzinie, każda mysz otrzymywała iniekcję do żyły ogonowej 5 mg/kg LPS w końcowej objętości 200 pl. Po 90 minutach od podania LPS, zwierzęta wykrwawiano, zbierano próbki surowicy i przechowywano je w temperaturze -70°C do czasu analizy.
Do oznaczeń skuteczności, próbki surowicy rozcieńczano dwukrotnie i oznaczano poziomy TNFa w zestawie CYTOSCREEN® Immnoassay Kit (Biosource International). Uśredniano dane z jednakowych prób na trzech myszach dla każdego badanego związku.
Poruszanie się na płaszczyźnie X-Y lub wspinanie się na tylnych łapach oznaczano ilościowo przez zliczanie, ile razy zwierzę przekroczyło „wiązkę światła” w jednostce czasu. Spadek ilości wydarzeń aktywności ruchowej był wprost proporcjonalny do ruchliwości lub nieruchomienia zwierzęcia. Zliczanie punktowe dobrze korelowało z oceną subiektywną opisaną powyżej.
W poniższej tabeli są przedstawione sumarycznie wyniki oznaczeń ED50 w próbie poziomu TNFa u myszy (mg/kg) prowadzonych opisaną powyżej metodą.
Numer związku (próbki)1) Próba na TNFa u myszy ED50 (mg/kg) ED50 (mg/kg)3)
29 -- 9,8
31 3 83
61 0,2 >50
62 0,08 >50
66 5 >50
67 -- >50
68 12 20
69 7 <0,5
3) - dawka efektywna w mg/kg, obniżająca ruchliwość spontaniczną o 50% w stosunku do kontroli.
Zbadano również, że związki o wzorze (II) wywierają mniejsze działania niepożądane na ośrodkowy układ nerwowy niż rolipram i związki ujawnione przez Feldman'a i wsp., w opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki, US 5.665.754. Okazało się również, że aktywność w stosunku od ośrodkowego układu nerwowego jest związana z konfiguracją absolutną związków według wynalazku.
198
PL 202 227 B1
Wiadomo, że stereoizomery leków mogą się znacząco różnić aktywnością biologiczną, np. siłą działania, selektywnością, absorpcją, dystrybucją, metabolizmem, efektem działania i profilem działań niepożądanych. W niniejszym wynalazku, enancjomery i diastereomery reprezentowane przez związki (A) - (D) w poniższej tabeli badano na aktywność wobec PDE in vitro, na uwalnianie TNFa z ludzkich limfocytów krwi obwodowej (PBL) w próbie na komórkach stymulowanych LPS, na ruchliwość myszy i na wymioty u fretki.
Jak wynika z poniższej tabeli, związki (C) i (A), to znaczy, odpowiednio próbki 66 i 69, wykazują podobne hamowanie PDE4 i stymulowanego przez LPS uwalniania TNFa ale zupełnie różne profile behawioralne. Związki (C) i (A), które są mniej aktywne w stosunku do ośrodkowego układu nerwowego, pochodzą z cyklizacji [3+2] dominującego produktu, azometynoilidu do chiralnego α,β-nienasyconego amidu. Tak więc, konfiguracja absolutna inhibitora PDE4 według wynalazku znacząco wpływa na profil behawioralny danego związku.
PL 202 227 B1
199 cd. tabeli
Próbka nr 62 d 3 HO-/ 6,8 0,08 Niewielki lub brak (przy dawce 50 mg/kg)
Próbka nr 61 HO-/ ΆΖ θ- 18,3 0,2 Niewielki lub brak (przy dawce 50 mg/kg)
d A LY
1) Działania niepożądane na ośrodkowy układ nerwowy oznaczano przez subiektywną ocenę unieruchamiania myszy po wstrzyknięciu związków dootrzewnowo w dawkach 1, 10 i 100 mg/kg masy ciała. Prowadzono punktową ocenę ruchliwości (lub jej braku) przez obserwację następujących objawów: osłabione zachowanie poznawcze, postawa zwierzęcia utuczonego, postawa leżąca pyszczkiem w dół, zmierzwione futerko i podobnych. Nie odnotowano żadnych widocznych objawów w czasie trwającej 60 minut oceny zwierząt, którym podano związki z przykładów 8(C), 8(D) i 8(B). Jednakże u myszy wystąpiły działania niepożądane po wszystkich dawkach związku z przykładu 8(A). Ponadto, po podaniu najwyższej dawki związku z przykładu 8(A), myszy konały i umierały w ciągu 10 minut od podania.
Przedstawione powyżej dane dowodzą, że związki o wzorze (II) są silnymi i selektywnymi inhibitorami PDE4. Ważną dodatkową zaletą związków o wzorze (II) jest to, że wywierają słabsze niepożądane działanie na ośrodkowy układ nerwowy lub działania tego nie wykazują wcale a cechą tą były obarczone wcześniejsze inhibitory PDE4. W celu pełniejszej ilustracji skuteczności związków o wzorze (II) testowano je ponadto na właściwości pobudzania wymiotów na modelach zwierzęcych. Metoda i wyniki testu emetogennego są przedstawione poniż ej.
Model wymiotów u fretki po doustnym i dożylnym podaniu selektywnych inhibitorów PDE4
Niniejsze badanie przeprowadzono w celu zbadania właściwości pobudzania wymiotów przez inhibitory PDE4 in vivo. Fretka już poprzednio została uznana za cenne narzędzie do oceny emezy po ekspozycji na testowane związki. Poprzednie badania wykazały, że na podstawie reakcji wymiotnej fretki w odpowiedzi na wiele inhibitorów PDE4 można przewidzieć skłonności wymiotne u ludzi po podaniu tych samych testowanych związków. Tak więc, brak działania i/lub osłabione działanie wymiotne badanych związków u fretki zapowiada korzystny brak działania emetogennego u ludzi. Wymioty są złożoną odpowiedzią fizjologiczną na szkodliwe czynniki, inicjowaną obwodowo lub ośrodkowo. Testowano zatem związki działające selektywnie na PDE4 zarówno podawane dożylnie jak i doustnie.
Do badań użyto fretki dorosłe, samce kastrowane i z opuszczonymi jądrami (gatunek Mustela putorius furo, szczep Sable) o wadze od 1 do 1,5 kg. Testy przeprowadzono na grupach po 4 zwierząt, którym nie podawano przedtem inhibitorów PDE4. Inhibitory PDE4 przygotowywano w nośniku stanowiącym 10% modyfikowany olej rącznikowy (Polyoxyl-35 castor oli; Cremophor® EL dostarczany przez BASF Corporation, Parsippany, NY) w buforowanej fosforanem soli fizjologicznej (PBS) i podawano je drogą iniekcji dożylnych do cewnika chirurgicznego założonego na stałe do prawej, zewnętrznej żyły szyjnej w ilości 0,66 ml/kg masy ciała. Inhibitory pDE4 do podania doustnego przygotowano w nośniku stanowiącym 30% Cremophor® EL w PBS i podawano je zwierzętom przez intubację do żołądka strzykawką nr 16. Zwierzęta otrzymywały inhibitory PDE4 w objętości 1,33 ml/kg masy ciała.
Wszystkie zwierzęta głodzono na 8 do 12 godzin przed podaniem inhibitorów PDE4. Po podaniu inhibitora pDE4 oceniano ilościowo wymioty i zachowanie zwierzęcia przez 3 godziny po podaniu. Zliczano ogólną ilość odpowiedzi wymiotnych i epizodów wymiotnych podczas okresu obserwacji. Ponadto, rejestrowano również czas do pojawienia się pierwszego epizodu wymiotów, czas trwania epizodów wymiotów i ogólne zmiany behawioralne, w tym ataksję, obfitość i lepkość śliny, drapanie pyszczka, hiperwentylację, chód do tyłu, spłaszczoną pozycję ciała, zwiększoną aktywność, oblizywanie się i wygląd ogólny. Dla celów porównawczych, działanie wymiotne próbek 66 i 69 testowano po
200
PL 202 227 B1 podaniu dożylnym w dawkach 1,0, 2,5, 5,0 i 10 mg/kg i doustnym, w dawkach 2,5, 10, 17 i 25 mg/kg. Wyniki są podsumowane w poniższej tabeli.
WYNIKI PORÓWNAWCZE
Związek (A) (Próbka 69) Ilość wydarzeń wymiotnych
Doustnie (mg/kg) Wymioty Odruchy wymiotne Ogółem Ilość zwierząt, u których wystąpiły objawy
2,5 0 0 0 0/4
10,0 5 27 32 3/4
17,0 7 51 58 3/4
25,0 26 88 114 4/4
Dożylnie (mg/kg) Wymioty Odruchy wymiotne Ogółem Ilość zwierząt, u których wystąpiły objawy
1,0 0 0 0 0/4
2,5 0 3 3 1/4
5,01) 0 300 300 2/2
10,0 -- -- -- --
WYNIKI PORÓWNAWCZE
Związek (C) (Próbka 66) Ilość wydarzeń wymiotnych
Doustnie (mg/kg) Wymioty Odruchy wymiotne Ogółem Ilość zwierząt, u których wystąpiły objawy
2,5 0 0 0 0/4
10,0 8 14 22 2/4
17,0 1 17 18 2/3
25,0 12 61 73 4/4
Dożylnie (mg/kg) Odruchy wymiotne Ogółem Ilość zwierząt, u których wystąpiły objawy
1,0 0 0 0 0/4
2,5 0 0 0 0/4
5,01) 0 10 10 2/4
10,0 4 27 31 4/4
Tylko dwu fretkom podano dożylnie dawkę 5 mg/kg związku (A) z powodu ciężkości działań niepożądanych.
Dlatego zwierzętom nie podawano dożylnie dawki 10 mg/kg związku z przykładu 8(A)
W zasadzie, obydwa związki (C) i (A) podane albo doustnie albo drogą iniekcji dożylnej dawały wyraźną zależność: dawka -odpowiedź w odniesieniu do działania wymiotnego. Związek (A) dawał znacznie silniejszą odpowiedź wymiotną niż związek (C). Było to wyraźnie widoczne przy porównywaniu odpowiedzi na dawki doustne. Przykładowo, w dawce 25 mg/kg masy ciała, związek (A) wywoływał więcej odruchów wymiotnych (bez wymiotów) i epizodów wymiotnych niż ta sama dawka doustna związku (C). Poza tym, ilość odruchów wymiotnych i wymiotów w jednym epizodzie wymiotnym była
PL 202 227 B1
201 znacznie większa dla związku (A) niż dla związku (C) w grupie zwierząt, którym podano tę samą dawkę. Podobna tendencja utrzymywała się przy dawkach doustnych 17 i 11 mg/kg masy ciała, przy których związek (A) wywierał silniejszą odpowiedź niż związek (C). Nie było wyraźnych obserwowalnych różnic pomiędzy grupami, które otrzymały najniższe dawki obydwu związków. W tych przypadkach, występowały pewne niewielkie objawy oblizywania się/pocierania pyszczka łapą po obydwu związkach ale nie obserwowano odpowiedzi wymiotnych.
Wyniki podawania doustnego wyraźnie kontrastują z podawaniem dożylnym. Przy dawce dożylnej 5 mg/kg masy ciała związku (A) jedno z testowanych zwierząt zmarło prawie natychmiast po podaniu (w ciągu 5 minut), podczas gdy drugie zwierzę było wyraźnie w ciężkim stanie ale powróciło do normy po 3 godzinach. To wyczerpanie można przypisać albo ostrej toksyczności albo nadmiernej odpowiedzi farmakologicznej na wymioty pochodzenia ośrodkowego. Zaobserwowano również, że wyczerpanie i ciężkie oddychanie u zwierząt z tej dawki były trudne do odróżnienia od ekstremalnych odruchów wymiotnych. Działanie to nie było tak poważne po dożylnym podaniu związku (C), co jest przedstawione w powyższej tabeli. Jakkolwiek u wszystkich zwierząt wystąpiły wymioty po dawce 10 mg/kg masy ciała związku (C), to u żadnego nie wystąpiło wyczerpanie związane z podaniem dawki 5 mg/kg związku (A). Za wyjątkiem dawki 5 mg/kg masy ciała związku (A), wszystkie zwierzęta powróciły do zdrowia po badaniu i wyglądały normalnie.
Przykład 101 Przykład 264 Przykład 109 Przykład 268 Przykład 195
Test
PDE4B IC50 (pM) 0,011 0,003 0,02 0,015 0,007
Oznaczanie EC50 (pM) w próbie na komórkach 0,03 0,010 0,03 0,006 0,03
ED50 (mg/kg) w próbie na myszach drażnionych LPS 3 1 5 5 9
ED50 (mg/kg) w próbie ruchliwości spontanicznej myszy 100 <100 100 100 100
Wyniki badań podane w powyższych tabelach dowodzą, że związki według wynalazku wykazują użyteczność do selektywnego hamowania aktywności PDE4 u ssaków, nie wywierając przy tym niepożądanego działania na ośrodkowy układ nerwowy ani działania wymiotnego charakterystycznego dla inhibitorów PDE4 znanych wcześniej.
Jest oczywiste, że bez odchodzenia od istoty i zakresu wynalazku można dokonać wielu modyfikacji i zmian w wynalazku przedstawionym w niniejszym opisie, a więc, powinny być nałożone tylko takie ograniczenia, które wynikają z załączonych zastrzeżeń.

Claims (39)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Związek będący pochodną pirolidyny o wzorze (II):
    1 w którym R1 jest wybrany spośród atomu wodoru, C1-6alkilu i z grupy obejmującej:
    PL 202 227 B1
    235
    236
    PL 202 227 B1
    PL 202 227 B1
    237
    238
    PL 202 227 B1
    PL 202 227 B1
    239
    240
    PL 202 227 B1
    PL 202 227 B1
    241
    242
    PL 202 227 B1
    R2 jest wybrany z grupy obejmującej atom wodoru, metyl i fluorowcopodstawiony metyl;
    PL 202 227 B1
    243
    R3 jest wybrany z grupy obejmującej:
    244
    PL 202 227 B1
    PL 202 227 B1
    245
    246
    PL 202 227 B1
    PL 202 227 B1
    247
    248
    PL 202 227 B1
    PL 202 227 B1
    249
    250
    PL 202 227 B1
    HOCH2-ch-C
    NH tBuOC
    CH2 ch3so2nhch2-c— hoch2chc
    HN-C-OtBu
    CH3x
    CH-CH-C
    NH2 ^x^ch2o—c—nh-ch2-c—
    AA cf3so2nhch2-c—
    AcS
    CH2
    PL 202 227 B1
    251
    252
    PL 202 227 B1
    R4 jest wybrany z grupy obejmującej: atom wodoru, C1-6alkil, fluorowcoC1-6alkil, C3-10cykloalkil, fenyl i benzyl;
    R5 jest wybrany z grupy obejmującej: atom wodoru, C1-6alkil, C2-6alkinyl, fluorowcoC1-6alkil, hydroksyC1-6alkil, C3-10cykloalkil, fenyl i benzyl;
    R6 jest wybrany z grupy obejmującej: atom wodoru, C1-6alkil i C(=O)R7,
    R7 jest wybrany z grupy obejmującej: C1-6alkil;
    R10 jest wybrany z grupy obejmującej: atom wodoru, C1-6alkil, fluorowcoC1-6alkil, C3-10cykloalkil, i jego sole i solwaty.
    PL 202 227 B1
    253
  2. 2. Związek według zastrz. 1 o wzorze (III):
  3. 3. Związek według zastrz. 1, w którym R4 jest wybrany z grupy obejmującej: atom wodoru, metyl, trifluorometyl i cyklopropyl.
    5
  4. 4. Związek według zastrz. 1, w którym R5 oznacza C1-6alkil.
  5. 5. Związek według zastrz. 1, w którym R6 jest wybrany z grupy obejmującej: atom wodoru, acetyl.
  6. 6. Związek według zastrz. 1 wybrany z grupy obejmującej:
    Ester metylowy kwasu 4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-(1-hydroksy-1-metyloetylo)-3-metylopirolidyno-1-karboksylowego
    1-[4-(S)-(3-Cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(1-hydroksy-1-metyloetylo)-3-(S)-metylopirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon
    Ester metylowy kwasu trans-(±)-3-(1-hydroksyetylo)-4-[3-(indan-2-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidyno-1-karboksylowego
    Ester metylowy kwasu trans 4-[3-exo-(bicyklo[2.2.1]hept-2-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-(1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyno-1-karboksylowego
    Ester metylowy kwasu trans-3-(1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(1-metylo-3-fenylopropoksy)fenylo]-3-metylopirolidyno-1-karboksylowego
    1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-(fenylometoksy)etan-1-on
    1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksyetan-1-on
    N-{3-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-3-oksopropylo}(fenylometoksy)karboksyamid
    1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-3-aminopropan-1-on
    4-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-4-oksobutanoan fenylometylu
    Kwas 4-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksy-fenylo)-3-metylopirolidynylo]-4-okso-butanowy
    N-{2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-oksoetylo}(fenylometoksy)karboksyamid
    1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-aminoetan-1-on
    Keton 3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylowo-4-metylo-piperazynylowy
    Keton 3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylowo-morfolin-4-ylowy
    1-[3-((1S)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-[(2S,1R,5R)-5-metylo-2-(metyloetylo)cykloheksyloksy]-etan-1-on
    Keton 3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylowo-2-metylo-(1,3-tiazol-4-ilo)-owy
    3-{[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]sulfonylo}-pirydyna
    254
    PL 202 227 B1
    1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-(fenylometoksy)etan-1-on
    1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksyetan-1-on
    2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-oksooctan metylu
    1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-amino-2-metylopropan-1-on
    3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    Kwas 4-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2,2-dimetylo-4-oksobutanowy
    Keton 3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylowo-2-metylo(1,3-tiazol-4-ilo)-owy
    Keton 3-((1R)-1-hydroksyetylo)(4S,3R)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylocyklopentylowo-oksolan-3-yIowy
    N-{2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-oksoetylo}(fenylometoksy)karboksyamid
    1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-aminoetan-1-on (1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-Indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-(2-pirydylo)pirolidyn-3-ylo]etan-1-ol (1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-Indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-(3-pirydylo)pirolidyn-3-ylo]etan-1-ol (1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-Indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-pirymidyn-2-ylopirolidyn-3-ylo]etan-1-ol (1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-Cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-(2-pirydylo)pirolidyn-3-ylo]etan-1-ol (1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-Cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-(3-pirydylo)pirolidyn-3-ylo]etan-1-ol
    3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(4-fenoksyfenoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    3-((1S)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(4-fenoksyfenoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(4-fenylofenoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    3-((1S)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(4-fenylofenoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(4-metoksy-3-fenoksyfenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    3-((1S)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(4-metoksy-3-fenoksyfenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(4-fluorofenoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    3-((1S)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(4-metoksy-3-(1,3-tiazol-2-iloksy)fenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    3-((1S)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(4-metoksy-3-(1,3-tiazol-2-iloksy)fenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-benzimidazol-2-iloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    3-((1S)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-benzimidazol-2-iloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenylopropoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    PL 202 227 B1
    255
    3-((1S)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenylopropoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(4-fenylobutoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    3-((1S)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(4-fenylobutoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(2-fenyloetoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    3-((1S)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(2-fenyloetoksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu (1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-Cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-(2-pirydylometylo)pirolidyn-3-ylo]etan-1-ol (1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-Cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-(3-pirydylometylo)pirolidyn-3-ylo]etan-1ol (1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-Cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-(4-pirydylometylo)pirolidyn-3-ylo]etan-1-ol
    3-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]propanoan fenylometylu
    Kwas 3-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]propanowy
    2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]octan fenylometylu
    Kwas 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]octowy
    Octan 2-[(3R)-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-okso-1-fenyloetylu
    1-[(3R)-3-((IR)-1-Hydroksyetylo)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksy-2-fenyloetan-1-on
    1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-(fenylometoksy)etan-1-on
    1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksyetan-1-on
    Octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo](1S)-1-metylo-2-oksoetylu
    1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo](2S)-2-hydroksypropan-1-on
    Octan {[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]karbonylo}-cyklopropylu
    Keton 3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylowo-hydroksycyklopropylowy
    Octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-1,1-dimetylo-2-oksoetylu
    1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksy-2-metylopropan-1-on
    2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-oksooctan metylu
    Kwas 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-okso-octowy
    2-[3-{(1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-okso-acetamid
    2-{(3S,4S)-3-((R)-1-Hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)-fenylo]-3-metylo-pirolidyn-1-ylo}-2-okso-acetamid
    2-((3S,4S)-3-((R)-1-Hydroksyetylo)-4-{4-metoksy-3-[3-(4-trifluorometylo-fenylo)prop-2-ynyloksy]-fenylo}-3-metylopirolidyn-1-ylo)-2-okso-acetamid
    2-[(3S,4S)-4-{3-[3-(4-Fluorofenoksy)propoksy]-4-metoksyfenylo}-3-((R)-1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-okso-acetamid
    256
    PL 202 227 B1
    2-[(3S,4S)-4-(3-Cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-okso-acetamid
    2-{(3S,4S)-3-((R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-(indan-2-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}-2-okso-acetamid
    2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-N-metylo-2-oksoacetamid
    1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-piperydyloetano-1,2-dion
    2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-N-cyklopentylo-2-oksoacetamid
    2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-okso-N-benzyloacetamid
    N-{(1R)-2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-1-butylo-2-oksoetylo}(fenylometoksy)karboksyamid (2R)-1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-aminoheksan-1-on
    N-{(1R)-2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-1-(metyloetylo)-2-oksoetylo}(fenylometoksy)-karboksyamid (2R)-1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-amino-3-metylobutan-1-on
    Octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo](1S)-1cykloheksylo-2-oksoetylu
    1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo](2S)-2-cykloheksylo-2-hydroksyetan-1-on
    1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo](2R)-2-cykloheksylo-2-acetoksyetan-1-on (2R)-1-[3-{(1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-cykloheksylo-2-hydroksyetan-1-on
    N-{2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-(1S)-1-butylo-2-oksoetylo}(fenylometoksy)karboksyamid
    1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo](2S)-2-aminoheksan-1-on
    Octan (1R)-2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-1-butylo-2-oksoetylu (2R)-1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksyheksan-1-on
    N-{2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-(1S)-2-okso-1-benzyloetylo}(fenylometoksy)karboksyamid
    1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo](2S)-2-amino-3-fenylopropan-1-on
    N-{(1R)-2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-okso-1-benzyloetylo}(fenylometoksy)karboksyamid (2R)-1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-amino-3-fenylopropan-1-on
    Octan 2-{(3S,4S)-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-okso-1-propylo-etylu
    1-{(3S,4S)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksypentan-1-on
    1-{(3S,4S)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-(fenylometoksy)propan-1-on
    1-{(3S,4S)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-(hydroksy)propan-1-on
    N-((1R)-2-{(3S,4S)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-1-(tert-butylo)-2-oksoetylo)(tert-butoksy)karboksyamid (2R)-1-{(3S,4S)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-amino-3,3-dimetylobutan-1-on
    PL 202 227 B1
    257
    N-{2-[(3S,4S)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo](1R)-2-okso-1-[(fenylometoksy)metylo]etylo}(tert-butoksy)karboksyamid
    N-(2-{(3S,4S)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-2-okso-1-[(fenylometoksy)metylo]etylo)-(tert-butoksy)karboksyamid
    N-(2-{(3S,4S)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1R)-1-(hydroksymetylo)-2-oksoetylo)(tert-butoksy)karboksyamid
    Chlorowodorek 1-{(3S,4S)-((1R)-1-hydroksyetylo)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2R)-2-amino-3-hydroksypropan-1-onu
    Octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-cykloheksylo-2-oksoetylu
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-cykloheksylo-2-hydroksyetan-1-on
    Octan (1R)-2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-1-cykloheksylo-2-oksoetylu (2R)-1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-cykloheksylo-2-hydroksyetan-1-on
    N-((1R)-2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-1-butylo-2-oksoetylo)(fenylometoksy)karboksyamid (2R)-1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-aminoheksan-1-on
    N-((1R)-2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-1-(metyloetylo)-2-oksoetylo)(fenylometoksy)karboksyamid (2R)-1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-amino-3-metylobutan-1-on
    1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-acetylotioetan-1-on
    1{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-acetylotioetan-1-on
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-sulfanyloetan-1-on
    N-(2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-oksoetylo)(fenylometoksy)karboksyamid
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-aminoetan-1-on
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-[(metylosulfonylo)amino]etan-1-on
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-{[(trifluorometylo)sulfonylo]amino}etan-1-on
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-(dimetylamino)etan-1-on
    N-(2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-metylo-2-oksoetylo)(fenylometoksy)-karboksyamid
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-aminopropan-1-on
    N-((1R)-2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-1-metylo-2-oksoetylo)(fenylometoksy)-karboksyamid (2R)-1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-aminopropan-1-on
    N-(2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-(metyloetylo)-2-oksoetylo)(fenylometoksy)karboksyamid
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-amino-3-metylobutan-1-on
    N-(2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-(2-metylopropylo)-2-oksoetylo)(fenylometoksy)karboksyamid
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-amino-4-metylopentan-1-on
    258
    PL 202 227 B1
    N-((1R)-2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-1-(2-metylopropylo)-2-oksoetylo)(fenylometoksy)karboksyamid (2R)-1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-amino-4-metylopentan-1-on
    N-(2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-butylo-2-oksoetylo)(fenylometoksy)karboksyamid
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-aminoheksan-1-on
    N-((1R)-2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-(1R)-cykloheksylo-2-oksoetylo)(fenylometoksy)karboksyamid (2R)-1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-amino-2-cykloheksyloetan-1-on
    N-((1R)-2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-(1S)-cykloheksylo-2-oksoetylo)(fenylometoksy)karboksyamid
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-amino-3,3-dimetylobutan-1-on
    1-{(3R)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-(tert-butoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-(fenylometoksy)etan-1-on
    1-[(3R)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-(fenylometoksy)-etan-1-on
    2-Benzyloksy-1-(3-((1R)-1-hydroksyetylo)-(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(1-metylocyklopropylometoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo)etanon
    1-((3R)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-{4-metoksy-3-[(metylocyklopropylo)metoksy]fenylo}-3-metylopirolidynylo)-2-hydroksyetan-1-on
    2-Benzyloksy-1-[(3S,4S)-4-[3-(2-cyklopropyloetoksy)-4-metoksyfenylo]-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-etanon
    1-{(3R)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-(2-cyklopropyloetoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksyetan-1-on
    1-{(3R)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-(2-cyklopentyloetoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksyetan-1-on
    1-[(3S,4S)-4-[3-(2-cyklopentyloetoksy)-4-metoksyfenylo]-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon
    2-Benzyloksy-1-[4-(S)-[3-(bicyklo[4.1.0]hept-7-ylometoksy)-4metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]etanon
    1-[4-(S)-[3-(Bicyklo[4.1.0]hept-7-ylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon
    2-Benzyloksy-1-[4-(S)-[3-(bicyklo[3.1.0]heks-6-ylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]etanon
    1-[4-(S)-[3-(Bicyklo[3.1.0]heks-6-ylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon
    2-Benzyloksy-1-[4-(S)-[3-(4-tert-butylocykloheksyloksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]etanon
    1-[4-(S)-[3-(4-tert-Butylocykloheksyloksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon
    2-Benzyloksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(4-metylocykloheksyloksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}-etanon
    2-Hydroksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(4-metylocykloheksyloksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}-etanon
    2-Benzyloksy-1-[4-(S)-[3-(dekahydronaftalen-2-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]etanon
    1-[4-(S)-[3-(Dekahydronaftalen-2-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon
    2-Benzyloksy-1-[4-(S)-[3-(bicykloheksylo-4-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]etanon
    1-[4-(S)-[3-(Bicykloheksylo-4-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon
    PL 202 227 B1
    259
    2-Benzyloksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(4-trifluorometylocykloheksyloksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon
    2-Hydroksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3(4-trifluorometylocykloheksyloksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon
    2-Benzyloksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(3-metoksy-3-metylobutoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon
    2-Hydroksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(3-metoksy-3-metylobutoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon
    2-Benzyloksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(1-fenylocyklopentylometoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon
    2-Hydroksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3'-(1-fenylocyklopentylometoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon
    2-Benzyloksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(1-fenylocyklopropylometoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon
    2-Hydroksy-1-{3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-4-(S)-[4-metoksy-3-(1-fenylocyklopropylometoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon
    2-Benzyloksy-1-[(3S,4S)-4-3-(3-etylo-oksetan-3-ylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-((1R)-1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]etanon
    1-((3R)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-{3-[(3-etylo-oksetan-3-ylo)metoksy]-4-metoksyfenylo}-3-metylopirolidynylo)-2-hydroksyetan-1-on
    Octan (2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(tert-butoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-oksoetylu
    Octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-oksoetylu
    2-Benzyloksy-1-[(3S,4S)-4-[3-(2-bifenylo-4-yloetoksy)-4-metoksyfenylo]-3-((R)-1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]etanon
    1-[(3S,4S)-4-[3-(2-Bifenylo-4-yloetoksy)-4-metoksyfenylo]-3-((R)-1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon
    Octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-oksoetylu
    Octan 2-(3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-{3-[3-(4-fluorofenylo)prop-2-ynyloksy]-4-metoksyfenylo}-3-metylopirolidynylo)-2-oksoetylu
    Octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(dicyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-oksoetylu
    Octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-{[3-(4-chlorofenylo)(1,2,4-oksadiazol-5-ilo)]metoksy}-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-oksoetylu
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksyetan-1-on
    1-(3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-{3-[3-(4-fluoro-fenylo)prop-2-ynyloksy]-4-metoksyfenylo}-3-metylopirolidynylo)-2-hydroksyetan-1-on
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(dicyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksyetan-1-on
    1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-{[3-(4-chlorofenylo)-(1,2,4-oksadiazol-5-ilo)]metoksy}-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksyetan-1-on
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(3,3-dimetylobutoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-(fenylometoksy)etan-1-on
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(3,3-dimetylobutoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksyetan-1-on
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-(fenylometoksy)etan-1-on
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksyetan-1-on
    N-(2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-oksoetylo)(fenylometoksy)karboksyamid
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-aminoetan-1-on
    260
    PL 202 227 B1
    Octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-1,1-dimetylo-2-oksoetylu
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksy-2-metylopropan-1-on
    Octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-metylo-2-oksoetylu
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-hydroksypropan-1-on
    Octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-okso-1-fenyloetylu
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksy-2-fenyloetan-1-on
    Octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-1-(4-fluorofenylo)-2-oksoetylu
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo}(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-(4-fluorofenylo)-2-hydroksyetan-1-on
    Octan ({3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-karbonylo)-cyklopropylu
    Keton 3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylowo-hydroksy-cyklopropylowy
    Octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-(metylopropylo)-2-oksoetylu
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-hydroksy-3-metylopentan-1-on
    Octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-(2-metylopropylo)-2-oksoetylu
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-hydroksy-4-metylopentan-1-on
    Octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-2-okso-1-benzyloetylu
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(2S)-2-hydroksy-3-fenylopropan-1-on
    Octan (1R)-2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-okso-1-benzyloetylu ((2R)-1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-hydroksy-3-fenylopropan-1-on
    Octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(tert-butoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-metylo-2-oksoetylu
    Octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo](1S)-1-metylo-2-oksoetylu
    Octan 2-{3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidynylo}(1S)-1-metylo-2-oksoetylu
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidynylo}-(2S)-2-hydro-ksypropan-1-on
    Octan 2-(3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-{3-[3-(4-fluorofenylo)prop-2-ynyloksy]-4-metoksyfenylo}-3-metylopirolidynylo)-2-oksoetylu
    1-(3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-{3-[3-(4-fluoro-fenylo)prop-2-ynyloksy]-4-metoksyfenylo}-3-metylopirolidynylo)(2S)-2-hydroksypropan-1-on
    Octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(4-metoksy-3-{3-[4-(trifluorometylo)fenylo]prop-2-ynyloksy}fenylo)-3-metylopirolidynylo](1S)-1-metylo-2-oksoetylu
    1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(4-metoksy-3-{3-[4-(trifluorometylo)fenylo]prop-2-ynyloksy}fenylo)-3-metylopirolidynylo](2S)-2-hydroksypropan-1-on
    Octan 2-[3-{(1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-{[3-(4-chlorofenylo)(1,2,4-oksadiazol-5-ilo)]metoksy}-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo](1S)-1-metylo-2-oksoetylu
    1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-{[3-(4-chlorofenylo)(1,2,4-oksadiazol-5-ilo)]metoksy}-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo](2S)-2-hydroksypropan-1-on
    PL 202 227 B1
    261
    Octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-1-(4-fluorofenylo)-2-oksoetylu
    1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-(4-fluorofenylo)-2-hydroksyetan-1-on
    Octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-1-metylo-2-oksoetylu
    1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksypropan-1-on
    Octan 2-[3-((1R)-1-hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-1,1-dimetylo-2-oksoetylu
    1-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-hydroksy-2-metylopropan-1-on (3R)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-(tert-butoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    2-Hydroksy-1-((3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-{4-metoksy-3-[2-(tetrahydrofuran-2-ylo)etoksy]fenylo}-3-metylopirolidyn-1-ylo)etanon
    2-Hydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(tetrahydrofuran-3-ylometoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon (3R)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-((3S)-oksolan-3-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu (3R)-3-((1R)-1-Hydroksyetylo)-4-[3-((3R)-oksolan-3-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-{3-[2-(4-fluorofenoksy)etoksy]-4-metoksyfenylo}-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-{3-[3-(4-fluorofenoksy)propoksy]-4-metoksyfenylo}-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(4-metoksy-3-prop-2-ynyloksyfenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-but-2-ynyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-{3-[3-(4-fluorofenylo)prop-2-ynyloksy]-4-metoksyfenylo}-3-metylopirolidynokarboksylan metylu
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-acetylotioetan-1-on
    1-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-sulfanyloetan-1-on
    Ester tert-butylowy kwasu (2-[(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-okso-etylo)karbaminowego
    2-Amino-1-((3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-{4-metoksy-3-[3-(4-trifluorometylofenylo)-prop-2-ynyloksy]fenylo}-3-metylopirolidyn-1-ylo)etanon
    2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[3-(tert-butoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-oksooctan metylu
    2-[3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynylo]-2-oksooctan metylu
    2-{3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidynylo}-2-oksooctan metylu
    Ester metylowy kwasu 4-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(1,2-dihydroksyetylo)-3-metylopirolidyno-1-karboksylowego [4-(S)-(3-Cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-(2,2-dimetylo-[1,3]-dioksolan-4-(S)-ylo)metanon
    1-[4-(S)-(3-Cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)-(1-(R)-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2(S)-3-dihydroksypropan-1-on (R)-2,3-Dihydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[3-(indan-2-ylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}propan-1-on
    262
    PL 202 227 B1 (R)-1-[(3S,4S)-4-{3-[3-(4-Fluorofenoksy)propoksy]-4-metoksyfenylo}-3-((R)-1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2,3-dihydroksypropan-1-on
    1-((R)-2,2-Dimetylo-1,3-dioksolan-4-ylo)-1-((3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-{4-metoksy-3-[3-(4-trifluoro-metylofenylo)prop-2-ynyloksy]fenylo}-3-metylopirolidyn-1-ylo)metanon (R)-2,3-Dihydroksy-1-((3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-{4-metoksy-3-[3-(4-trifluorometylofenylo)prop-2-ynyloksy]fenylo}-3-metylopirolidyn-1-ylo)-propan-1-on
    2-Benzyloksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(2-tiofen-3-ylo-etoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}-etanon
    2-Hydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3((R)-2-fenylocyklopropylometoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon
    1-[(3S,4S)-4-[3-(3-Cyklopentylopropoksy)-4-metoksyfenylo]-3-((R)-1-hydroksyetylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]-2-hydroksyetanon
    2-Hydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(3-fenylopropoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon
    2-Hydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[3-(1-hydroksyindan-2-yloksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon
    2-Hydroksy-1-((3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-{4-metoksy-3-[2-(4-metoksyfenylo)etoksy]fenylo}-3-metylopirolidyn-1-ylo)etanon
    2-Hydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3((R)-2-metylocyklopropylometoksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}etanon
    1-(R)-[1-(2-Benzyloksyetylo)-4-(S)-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)-metylopirolidyn-3-ylo]-etanol
    2-Benzyloksy-1-[4-(S)-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)-hydroksymetylo-3-metylopirolidyn-1-ylo]etanon
    1-((R)-2,2-Dimetylo-1,3-dioksolan-4-ylo)-1-[(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidyn-1-ylo]metanon
    1-((R)-2,2-Dimetylo-1,3-dioksolan-4-ylo}-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}metanon (R)-2,3-Dihydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}propan-1-on
    1-((S)-2,2-Dimetylo-1,3-dioksolan-4-ylo)-1-[(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidon-1-ylo]metanon
    1-((S)-2,2-Dimetylo-1,3-dioksolan-4-ylo)-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}metanon (S)-2,3-Dihydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}propan-1-on
    Ester (S)-1-benzylo-2-{(3S,4S)-3-{(R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}-2-oksoetylowy kwasu octowego (S)-2-Hydroksy-1-{(3S,4S)-3-((R)-1-hydroksyetylo)-4-[4-metoksy-3-(3-fenyloprop-2-ynyloksy)fenylo]-3-metylopirolidyn-1-ylo}-3-fenylopropan-1-on
    3-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-(3-hydroksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidynokarboksylan metylu.
  7. 7. Związek według zastrz. 1 o IC50 względem ludzkiego rekombinacyjnego PDE4 około
    700 pM do około 15 μΜ.
  8. 8. Związek według zastrz. 1 o EC50 względem PBL/TNFa około 1 nM do około 20 μΜ.
  9. 9. Związek według zastrz. 1 o IC50 względem ludzkiego rekombinacyjnego PDE4 około 700 pM do około 15 μM i EC50 względem PBL/TNFa około 1 nM do około 20 μM.
  10. 10. Związek według zastrz. 7 o IC50 względem ludzkiego rekombinacyjnego PDE4 około 100 x 10-9 M lub mniej.
  11. 11. Związek według zastrz. 10 o IC50 względem ludzkiego rekombinacyjnego PDE4 około 50 x 10-9 M lub mniej.
  12. 12. Związek według zastrz. 8 o EC50 względem PBL/TNFa około 500 x 10-9 M lub mniej.
  13. 13. Związek według zastrz. 12 o EC50 względem PBL/TNFa około 100 x 10-9 M lub mniej.
  14. 14. Związek według zastrz. 9 o IC50 względem ludzkiego rekombinacyjnego PDE4 około 100 x 10-9 lub mniej i EC50 względem PBL/TNFa około 500 x 10-9 M lub mniej.
    PL 202 227 B1
    263
  15. 15. Związek według zastrz. 14 o IC50 względem ludzkiego rekombinacyjnego PDE4 około 50 x 10-9 lub mniej i EC50 względem PBL/TNFa około 100 x 10-9 M lub mniej.
  16. 16. Związek według zastrz. 1, wybrany z grupy obejmującej:
    (±)-[1-Benzylo-4-(3-cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidyn-3-ylo]metanol
    2-[1-Benzylo-4-(S)-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)-metylopirolidyn-3-ylo]propan-2-ol
    2-[4-(S)-(3-Cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)-metylopirolidyn-3-ylo]propan-2-ol
    2- Benzyloksy-1-[4-(S)-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(1-hydroksy-1-metyloetylo)-3-(S)-metylopirolidyn-1-ylo]etanon (1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-Indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-benzylopirolidyn-3-ylo]etan-1-ol (1R)-1-[(3S,4S)-4-(3-Indan-2-yloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidyn-3-ylo]etan-1-ol (IR) -1-[(3S,4S)-4-(3-Cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-benzylopirolidyn-3-ylo]etan-1-ol (IS) -1-[(3S,4S)-4-(3-Cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylo-1-benzylopirolidyn-3-ylo]etan-1-ol (1S)-1-{(3S,4S)-4-[4-Metoksy-3-(fenylometoksy)-fenylo]-3-metylo-1-benzylopirolidyn-3-ylo}etan-1-ol (1R)-1-{(3S,4S)-4-[4-Metoksy-3-(fenylometoksy)-fenylo]-3-metylo-1-benzylopirolidyn-3-ylo}etan-1-ol
    1-R-[1-Benzylo-4-S-(3-tert-butoksy-4-metoksyfenylo)-3-S-metylopirolidyn-3-ylo]etanol
    3- [1-Benzylo-4-(S)-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)-metylopirolidyno-3-karbonylo]-4-(R)-fenylooksazolidyn-2-on
    1-[1-Benzylo-4-(S)-(3-cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)-metylopirolidyn-3-ylo]etanol (1R)-1-{(3S,4S)-4-[3-(Cyklopropylometoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylopirolidyn-3-ylo}etan-1-ol (IR) -1-[(3S,4S)-4-(3-Cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidyn-3-ylo]etan-1-ol (IS) -1-[(3S,4S)-4-(3-Cyklopentyloksy-4-metoksyfenylo)-3-metylopirolidyn-3-ylo]etan-1-ol
    5-[4-((1R)-1-Hydroksyetylo)(3S,4S)-4-metylopirolidyn-3-ylo]-2-metoksyfenol (1R)-1-{(3R)-4-[3-(tert-Butoksy)-4-metoksyfenylo]-3-metylo-1-benzylopirolidyn-3-ylo}etan-1-ol
    5-[(4R)-4-((1S)-1-Hydroksyetylo)-4-metylo-1-benzylopirolidyn-3-ylo]-2-metoksyfenol [4-(S)-(3-Cyklopropylometoksy-4-metoksyfenylo)-3-(S)-metylopirolidyn-3-ylo]metanol.
  17. 17. Kompozycja farmaceutyczna, znamienna tym, że zawiera związek jak określono w dowolnym z zastrz. 1-16, farmaceutycznie dopuszczalny nośnik i ewentualnie drugi przeciwzapalny środek leczniczy.
  18. 18. Kompozycja według zastrz. 17, znamienna tym, że zawiera drugi przeciwzapalny środek leczniczy zdolny do ukierunkowywania się na TNFa.
  19. 19. Zastosowanie związku jak określono w zastrz. 1 - 16, do wytwarzania leku do leczenia ssaka w stanie, w którym inhibitowanie PDE specyficznego dla cAMP daje korzyść terapeutyczną.
  20. 20. Zastosowanie związku jak określono w zastrz. 1 - 16, do wytwarzania leku do modulowania poziomów cAMP u ssaka.
  21. 21. Zastosowanie według zastrz. 19, w którym stan jest chorobą alergiczną, chorobą autoagresyjną, chorobą zapalną, chorobą zapalenia stawów lub zapaleniem skóry.
  22. 22. Zastosowanie według zastrz. 19, w którym stan jest reumatoidalnym zapaleniem stawów, zapaleniem kości i stawów, ostrym dnawym zapaleniem stawów lub zapaleniem kręgosłupa.
  23. 23. Zastosowanie według zastrz. 19, w którym stan jest oftalmopatią związaną z tarczycą, chorobą Behceta, posocznicą, wstrząsem septycznym, wstrząsem endotoksynowym, posocznicą gram-ujemną, posocznicą gram-dodatnią, syndromem wstrząsu toksycznego, alergicznym zapaleniem spojówek, wiosennym zapaleniem spojówek lub ziarniakiem kwasochłonnym.
  24. 24. Zastosowanie według zastrz. 19, w którym stan jest astmą, przewlekłym zapaleniem oskrzeli, alergicznym nieżytem nosa, zespołem ostrego wyczerpania oddechowego dorosłych, przewlekłą chorobą zapalną płuc, przewlekłą czopującą chorobą płuc, krzemicą lub sarkoidozą płucną.
  25. 25. Zastosowanie według zastrz. 19, w którym stan jest uszkodzeniem związanym z reperfuzją mięśnia sercowego, mózgu lub kończyn, takim jak uszkodzenie mózgu lub rdzenia kręgowego wskutek urazu.
  26. 26. Zastosowanie według zastrz. 19, w którym stan jest zwłóknieniem, tworzeniem bliznowca lub tworzeniem tkanki bliznowatej.
  27. 27. Zastosowanie według zastrz. 19, w którym stan jest układowym toczeniem rumieniowatym, zaburzeniem związanym z odrzuceniem przeszczepu, reakcją przeszczepu przeciw komórkom biorcy lub odrzuceniem aloprzeszczepu.
  28. 28. Zastosowanie według zastrz. 19, w którym stan jest przewlekłym zapaleniem kłębuszków nerwowych, nefropatią przypisaną cukrzycy Typu 2, zapalną chorobą jelit, chorobą Crohna lub wrzodziejącym zapaleniem okrężnicy.
    264
    PL 202 227 B1
  29. 29. Zastosowanie według zastrz. 19, w którym stan jest proliferacyjną chorobą limfocytową lub białaczką.
  30. 30. Zastosowanie według zastrz. 19, w którym stan jest zapalną chorobą skóry, atopową chorobą skóry, łuszczycą lub pokrzywką.
  31. 31. Zastosowanie według zastrz. 19, w którym stan jest kardiomiopatią, zastoinową niewydolnością serca, miażdżycą tętnic, gorączką, charłactwem, charłactwem wtórnym po infekcji lub nowotworze, charłactwem wtórnym po zespole nabytego niedoboru odpornościowego, ARC, powikłaniami mózgowymi w malarii, osteoporozą, chorobą resorpcji kości, gorączką i mięśniobólami wskutek infekcji, zaburzeniem erekcji, bezpłodnością męską lub żeńską, moczówką prostą, zaburzeniem ośrodkowego układu nerwowego, reakcją niepokoju lub napięcia, niedokrwieniem mózgowym, późną dyskinezą, chorobą Parkinsona lub zespołem napięcia przedmiesiączkowego.
  32. 32. Zastosowanie według zastrz. 19, w którym stan jest depresją lub demencją poudarową.
  33. 33. Zastosowanie według zastrz. 32, w którym etap leczenia ssaka dodatkowo obejmuje leczenie przy użyciu drugiej terapii przeciwdepresyjnej.
  34. 34. Zastosowanie według zastrz. 33, w którym druga terapia przeciwdepresyjna jest wybrana z grupy obejmującej: procedurę elektrowstrząsów, inhibitor oksydazy monoaminowej, selektywny inhibitor powtórnego wychwytu serotoniny i selektywny inhibitor powtórnego wychwytu norepinefryny.
  35. 35. Zastosowanie według zastrz. 19, w którym stan jest otyłością.
  36. 36. Zastosowanie według zastrz. 19, w którym leczenie ponadto obejmuje podawanie inhibitora PDE3.
  37. 37. Zastosowanie związku jak określono w zastrz. 1 - 16, do wytwarzania leku do obniżania poziomów TNF u ssaka.
  38. 38. Zastosowanie związku jak określono w zastrz. 1 - 16, do wytwarzania leku do hamowania aktywacji komórek zapalnych u ssaka.
  39. 39. Zastosowanie związku jak określono w zastrz. 1 - 16, do wytwarzania leku do inhibitowania
PL355988A 1999-12-23 2000-11-28 Związek będący pochodną pirolidyny, kompozycja zawierająca ten związek i jego zastosowanie PL202227B1 (pl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US09/471,846 US6258833B1 (en) 1999-12-23 1999-12-23 Cyclic AMP-specific phosphodiesterase inhibitors
PCT/US2000/032401 WO2001047905A1 (en) 1999-12-23 2000-11-28 Pyrrolidine derivatives as cyclic amp-specific phosphodiesterase inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL355988A1 PL355988A1 (pl) 2004-05-31
PL202227B1 true PL202227B1 (pl) 2009-06-30

Family

ID=23873210

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL355988A PL202227B1 (pl) 1999-12-23 2000-11-28 Związek będący pochodną pirolidyny, kompozycja zawierająca ten związek i jego zastosowanie

Country Status (29)

Country Link
US (6) US6258833B1 (pl)
EP (1) EP1242400B1 (pl)
JP (1) JP4294903B2 (pl)
KR (1) KR20020063600A (pl)
CN (1) CN1434813A (pl)
AT (1) ATE325108T1 (pl)
AU (1) AU778543B2 (pl)
BG (1) BG65892B1 (pl)
BR (1) BRPI0016693B1 (pl)
CA (1) CA2395193C (pl)
CZ (1) CZ20022188A3 (pl)
DE (1) DE60027769D1 (pl)
EA (1) EA005686B1 (pl)
EE (1) EE05087B1 (pl)
GE (1) GEP20043384B (pl)
HK (1) HK1051359A1 (pl)
HR (1) HRP20020541B1 (pl)
HU (1) HUP0301113A3 (pl)
IL (1) IL150313A0 (pl)
IS (1) IS6436A (pl)
MX (1) MXPA02006212A (pl)
NO (1) NO20023008L (pl)
PL (1) PL202227B1 (pl)
RS (1) RS50841B (pl)
SK (1) SK287964B6 (pl)
TR (1) TR200400702T4 (pl)
UA (1) UA73964C2 (pl)
WO (1) WO2001047905A1 (pl)
ZA (1) ZA200205551B (pl)

Families Citing this family (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6455571B1 (en) * 1998-04-23 2002-09-24 Abbott Laboratories Inhibitors of neuraminidases
US6258833B1 (en) * 1999-12-23 2001-07-10 Icos Corporation Cyclic AMP-specific phosphodiesterase inhibitors
US20010049368A1 (en) * 2000-02-29 2001-12-06 Reines Scott A. Method for treating or preventing depression
CA2414839C (en) * 2000-07-03 2010-02-16 Speedel Pharma Ag Preparation of (r)-2-alkyl-3-phenylpropionic acids
US6953774B2 (en) * 2000-08-11 2005-10-11 Applied Research Systems Ars Holding N.V. Methods of inducing ovulation
WO2002047540A2 (en) * 2000-12-15 2002-06-20 The General Hospital Corporation Methods for inhibiting fibrosis
US20040014099A1 (en) * 2001-03-19 2004-01-22 Decode Genetics Ehf. Susceptibility gene for human stroke; methods of treatment
US20030073711A1 (en) * 2001-08-23 2003-04-17 Whitehead Clark M. Methods for treatment of scleroderma
US6479493B1 (en) 2001-08-23 2002-11-12 Cell Pathways, Inc. Methods for treatment of type I diabetes
IL161317A0 (en) * 2001-10-16 2004-09-27 Memory Pharm Corp 4-(4-alkoxy-3-hydroxyphenyl)-2-pyrrolidone derivatives as pde-4 inhibitors for the treatment of neurological syndromes
US7507707B2 (en) * 2001-12-14 2009-03-24 Laboratoires Serono Sa Methods of inducing ovulation using a non-polypeptide camp level modulator
MY140561A (en) 2002-02-20 2009-12-31 Nycomed Gmbh Dosage form containing pde 4 inhibitor as active ingredient
DE10228132A1 (de) * 2002-06-24 2004-01-22 Arzneimittelwerk Dresden Gmbh Amide cyclischer Aminosäuren als PDE 4 Inhibitoren
ES2335498T3 (es) 2003-03-10 2010-03-29 Nycomed Gmbh Nuevo proceso para la preparacion de reflumilast.
SG169900A1 (en) * 2003-04-16 2011-04-29 Memory Pharm Corp 4 - (3,4 - disubstituted phenyl) - pyrrolidin-2-one compounds as phosphodiesterase 4 inhibitors
EP1631568A1 (en) * 2003-04-18 2006-03-08 Memory Pharmaceuticals Corporation Pyrazole derivatives as phosphodiesterase 4 inhibitors
JP2007521276A (ja) * 2003-06-25 2007-08-02 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション Ｎｋ−２およびｎｋ−３として用いるための４−カルボキサミドキノリン誘導体
AU2004277932B2 (en) * 2003-09-30 2009-07-16 Merck & Co., Inc. Phenyl pyrrolidine ether tachykinin receptor antagonists
US20050201989A1 (en) * 2004-02-19 2005-09-15 St. Camillus Medical, Inc. Compositions and methods for ex vivo preservation of blood vessels for vascular grafts using inhibitors of tumor necrosis factor-alpha
ATE413398T1 (de) * 2004-04-08 2008-11-15 Wyeth Corp Thioamidderivate als progesteronrezeptormodulatoren
EP1799673A1 (en) * 2004-10-15 2007-06-27 Memory Pharmaceuticals Corporation Pyrazole derivatives as phosphodiesterase 4 inhibitors
EP1802615A1 (en) * 2004-10-20 2007-07-04 Memory Pharmaceuticals Corporation Phosphodiesterase 4 inhibitors
US8663694B2 (en) * 2005-03-16 2014-03-04 Takeda Gmbh Taste masked dosage form containing roflumilast
EP2275095A3 (en) 2005-08-26 2011-08-17 Braincells, Inc. Neurogenesis by muscarinic receptor modulation
EP2258358A3 (en) 2005-08-26 2011-09-07 Braincells, Inc. Neurogenesis with acetylcholinesterase inhibitor
EP1940389A2 (en) 2005-10-21 2008-07-09 Braincells, Inc. Modulation of neurogenesis by pde inhibition
AU2006308889A1 (en) 2005-10-31 2007-05-10 Braincells, Inc. GABA receptor mediated modulation of neurogenesis
JP2009514969A (ja) 2005-11-09 2009-04-09 コンビナトアールエックス インコーポレーティッド 医学的状態を治療するための方法、組成物、およびキット
US20070244143A1 (en) * 2006-03-08 2007-10-18 Braincells, Inc Modulation of neurogenesis by nootropic agents
US20100216734A1 (en) * 2006-03-08 2010-08-26 Braincells, Inc. Modulation of neurogenesis by nootropic agents
US20100009983A1 (en) * 2006-05-09 2010-01-14 Braincells, Inc. 5 ht receptor mediated neurogenesis
JP2009536667A (ja) * 2006-05-09 2009-10-15 ブレインセルス，インコーポレイティド ５ｈｔ受容体介在性の神経新生
EP2382975A3 (en) 2006-05-09 2012-02-29 Braincells, Inc. Neurogenesis by modulating angiotensin
AU2007292848A1 (en) 2006-09-08 2008-03-13 Braincells, Inc. Combinations containing a 4-acylaminopyridine derivative
US20100184806A1 (en) 2006-09-19 2010-07-22 Braincells, Inc. Modulation of neurogenesis by ppar agents
AU2007299920A1 (en) * 2006-09-19 2008-03-27 Braincells, Inc. PPAR Mediated Modulation of Neurogenesis
AR063275A1 (es) * 2006-10-12 2009-01-14 Epix Delaware Inc Compuestos de carboxamida, una composicion farmaceutica que los comprende y su uso en la preparacion de un medicamento para el tratamiento de enfermedades mediadas por la activacion de ccr2.
ME01579B (me) 2007-08-07 2014-09-20 Takeda Pharmaceuticals Co Derivati pirolidin-2-ona kao modulatori androgenskih receptora
BRPI0820701A2 (pt) 2007-12-11 2015-06-16 Cytopathfinder Inc Composto de carboxamida e seu uso como agonistas do receptor de quimiocina
WO2010099217A1 (en) 2009-02-25 2010-09-02 Braincells, Inc. Modulation of neurogenesis using d-cycloserine combinations
CN102603623A (zh) * 2011-12-26 2012-07-25 北京赛林泰医药技术有限公司 制备高纯度罗氟司特的方法
WO2013106547A1 (en) 2012-01-10 2013-07-18 President And Fellows Of Harvard College Beta-cell replication promoting compounds and methods of their use
JO3264B1 (ar) * 2013-03-13 2018-09-16 Lilly Co Eli مركبات ازيتيدينيل أوكسي فينيل بيروليدين
WO2015112568A1 (en) * 2014-01-24 2015-07-30 Celgene Corporation Methods for the treatment of obesity using apremilast
PL3150578T3 (pl) * 2014-05-29 2021-07-19 Mitsubishi Tanabe Pharma Corporation Nowy związek pirolidynowy i zastosowanie jako agonisty receptora melanokortyny
WO2016033776A1 (en) * 2014-09-04 2016-03-10 Eli Lilly And Company Crystalline (2s) -3- [ (3s, 4s) -3- [ (1r) -1-hydroxyethyl] -4- (4-methoxy-3- { [1- (5-methylpyridin-2-yl) azetidin-3-yl] oxy} phenyl) -3-methylpyrrolidin-1-yl] -3-oxopropane-1, 2-diol
TW201625591A (zh) * 2014-09-12 2016-07-16 美國禮來大藥廠 吖丁啶基氧苯基吡咯啶化合物
WO2017072796A1 (en) 2015-10-30 2017-05-04 Council Of Scientific & Industrial Research 2-pyridone based compounds useful as potential phosphodiesterase3a (pde3a)inhibitors and a process for the preparation thereof
JP6392297B2 (ja) * 2015-11-27 2018-09-19 田辺三菱製薬株式会社 医薬組成物
WO2019065954A1 (ja) 2017-09-29 2019-04-04 田辺三菱製薬株式会社 光学活性ピロリジン化合物及びその製造方法
US20220056014A1 (en) * 2018-12-18 2022-02-24 Wuhan Humanwell Innovative Drug Research and Development Center Limited Company Phenylpyrrolidine compound and use thereof
CN112409333B (zh) * 2019-08-23 2024-06-14 武汉人福创新药物研发中心有限公司 苯基吡咯烷类化合物
TWI877358B (zh) * 2020-04-29 2025-03-21 大陸商廣東東陽光藥業股份有限公司 取代的吡咯烷類化合物及其在藥物中的應用

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5821622B2 (ja) * 1973-02-28 1983-05-02 ウェルファイド株式会社 ピロリジンメタノ−ル ノ セイゾウホウ
JPS50108258A (pl) * 1974-02-08 1975-08-26
US5665754A (en) 1993-09-20 1997-09-09 Glaxo Wellcome Inc. Substituted pyrrolidines
CA2143143A1 (en) * 1994-03-08 1995-09-09 Toshihiko Tanaka 3-phenylpyrrolidine derivatives
JPH07300455A (ja) * 1994-03-08 1995-11-14 Mitsubishi Chem Corp ３−フェニルピロリジン誘導体
US5998428A (en) 1995-05-31 1999-12-07 Smithkline Beecham Corporation Compounds and methods for treating PDE IV-related diseases
US5856103A (en) * 1994-10-07 1999-01-05 Board Of Regents The University Of Texas Method for selectively ranking sequences for antisense targeting
DE19601938A1 (de) * 1996-01-12 1997-07-17 Schering Ag Neue Phosphodiesteraseinhibitoren
AU738037B2 (en) * 1997-04-04 2001-09-06 Pfizer Products Inc. Nicotinamide derivatives
US6258833B1 (en) * 1999-12-23 2001-07-10 Icos Corporation Cyclic AMP-specific phosphodiesterase inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
EE200200351A (et) 2003-10-15
NO20023008D0 (no) 2002-06-21
NO20023008L (no) 2002-08-20
JP4294903B2 (ja) 2009-07-15
HUP0301113A2 (hu) 2003-08-28
SK9172002A3 (en) 2002-11-06
US7176229B2 (en) 2007-02-13
PL355988A1 (pl) 2004-05-31
CN1434813A (zh) 2003-08-06
BRPI0016693B1 (pt) 2015-09-01
EA005686B1 (ru) 2005-04-28
KR20020063600A (ko) 2002-08-03
EP1242400A1 (en) 2002-09-25
MXPA02006212A (es) 2004-02-26
ZA200205551B (en) 2003-07-11
US20060074123A1 (en) 2006-04-06
EE05087B1 (et) 2008-10-15
US6258833B1 (en) 2001-07-10
IL150313A0 (en) 2002-12-01
UA73964C2 (uk) 2005-10-17
CA2395193A1 (en) 2001-07-05
HRP20020541B1 (en) 2008-06-30
SK287964B6 (sk) 2012-07-03
DE60027769D1 (de) 2006-06-08
US6423710B1 (en) 2002-07-23
AU2426201A (en) 2001-07-09
TR200400702T4 (tr) 2004-06-21
CA2395193C (en) 2008-06-17
US6458787B1 (en) 2002-10-01
BR0016693A (pt) 2003-03-11
BG106860A (bg) 2003-03-31
WO2001047905A1 (en) 2001-07-05
HRP20020541A2 (en) 2004-08-31
IS6436A (is) 2002-06-19
US20040152754A1 (en) 2004-08-05
HUP0301113A3 (en) 2011-07-28
JP2003519135A (ja) 2003-06-17
BG65892B1 (bg) 2010-04-30
CZ20022188A3 (cs) 2003-03-12
YU48002A (sh) 2005-11-28
US6716871B2 (en) 2004-04-06
RS50841B (sr) 2010-08-31
ATE325108T1 (de) 2006-06-15
US6998416B2 (en) 2006-02-14
EP1242400B1 (en) 2006-05-03
US20040023945A1 (en) 2004-02-05
GEP20043384B (en) 2004-05-10
AU778543B2 (en) 2004-12-09
EA200200590A1 (ru) 2002-12-26
HK1051359A1 (zh) 2003-08-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6716871B2 (en) Cyclic AMP-specific phosphodie sterase inhibitors
US6376489B1 (en) Cyclic AMP-specific phosphodiesterase inhibitors
US6348602B1 (en) Cyclic AMP-specific phosphodiesterase inhibitors
US6455562B1 (en) Cyclic AMP-specific phosphodiesterase inhibitors
US6680336B2 (en) Cyclic AMP-specific phosphodiesterase inhibitors
US20020044963A1 (en) Cyclic AMP-specific phosphodiesterase inhibitors

Legal Events

Date Code Title Description
RECP Rectifications of patent specification
RECP Rectifications of patent specification