PL215209B1 - Nowe pochodne diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych, sposób wytwarzania pochodnych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych oraz zastosowanie pochodnych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych - Google Patents

Nowe pochodne diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych, sposób wytwarzania pochodnych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych oraz zastosowanie pochodnych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych

Info

Publication number
PL215209B1
PL215209B1 PL385906A PL38590608A PL215209B1 PL 215209 B1 PL215209 B1 PL 215209B1 PL 385906 A PL385906 A PL 385906A PL 38590608 A PL38590608 A PL 38590608A PL 215209 B1 PL215209 B1 PL 215209B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
acid
valine
group
mmol
phosphite
Prior art date
Application number
PL385906A
Other languages
English (en)
Other versions
PL385906A1 (pl
Inventor
Marcin Sienczyk
Józef Oleksyszyn
Łukasz Winiarski
Original Assignee
Politechnika Wroclawska
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Politechnika Wroclawska filed Critical Politechnika Wroclawska
Priority to PL385906A priority Critical patent/PL215209B1/pl
Publication of PL385906A1 publication Critical patent/PL385906A1/pl
Publication of PL215209B1 publication Critical patent/PL215209B1/pl

Links

Landscapes

  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

Przedmiotem wynalazku są nowe pochodne diestrowe arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych, sposób wytwarzania pochodnych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych oraz ich zastosowanie jako inhibitorów ludzkiej neutrofilowej elastazy.
Z publikacji Oleksyszyn J, Powers JC, Methods in Enzymology, znany jest kwas 1-amino-2-metylopropanofosfonowy, z grupy kwasów 1-aminoalkanofosfonowych, który jest analogiem waliny. W literaturze naukowej Boduszek B, Brown AD, Powers JC., J. Ezym. Inhib. 1994, 8, 147-158, opisano pochodne fosfonowego analogu waliny, posiadające podstawniki w pierścieniu chlorofenoli, związki te nie są inhibitorami ludzkiej neutrofilowej elastazy.
Nie zostały opisane w literaturze pochodne diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych, z podstawnikami według wynalazku, które posiadają właściwości nieodwracalnych i specyficznych inhibitorów ludzkiej neutrofilowej elastazy. Ludzka neutrofilowa elastaza (LNE) jest enzymem proteolitycznym, który w przypadku niekontrolowanej aktywności jest powodem wielu stanów patologicznych. Stany te związane z chorobami płuc, opisano w publikacjach Cardin C. i inn., Curr.Med.Chem., 2008,15,83-808; Abboud RT, Vimaloathan S., Int. J. Tuberc. Lung Dis., 2008,12, 362-367; Kelly E, i inn., Expert Opi.Ther. Targets, 2008,12,145-157, natomiast prowadzące do powikłań reumatologicznych opisano w publikacji Momohara S. i inn., Clin. Rheumatol., 1997, 16, 133-140 zaś skutkujące zapaleniami i arteriosklerozą opisano w Bieth JG. J. Soc. Biol., 2001, 195, 173-179. W ludzkim ciele aktywność enzymatyczna LNE jest inhibitowana nieodwracalnie z szybkością limitowaną dyfuzją przez endogenny białkowy inhibitor, alfa-1-PI, tzn. inhibitor proteinazy, dawniej zwany alfa-1-antytrypsyną. Wiele schorzeń opisanych w cytowanych publikacjach, jest związanych z miejscową niezdolnością organizmu lub niekiedy z genetycznym niedomiarem do utrzymania koncentracji alfa-1-PI na poziomie umożliwiającym kontrolę enzymatycznej aktywności elastazy. Elastaza odgrywa też ważną rolę w przerzutowaniu komórek nowotworowych raka płuc i piersi. W modelach zwierzęcych tych schorzeń inhibitory elastazy mają efekt terapeutyczny, opisany w publikacji Sato T., i inn., Surg. Oncol., 2006, 15, 217-222. W literaturze patentowej i naukowej między innymi Edwards PD., Bernstein PR., Med. Res. Rev., 1994, 14, 127-194; Macdonald SJ., i inn., J. Med. Chem., 2002, 45, 3878-90; Sykes NO., i inn., J. Med. Chem., 2002, 45, 2850-56, opisano cały szereg niskocząsteczkowych inhibitorów LNE. Wszystkie one charakteryzują się “odwracalnością” to znaczy kompleks inhibitor-enzym jest stosunkowo nietrwały i po pewnym czasie wolny, aktywny enzym jest uwalniany przyczyniając się do dalszych zniszczeń matryksy międzykomórkowej. Z kinetyki inhibicji elastazy in vivo, przez odwracalne inhibitory wynika, że takie inhibitory nie są w stanie skorygować istniejącej nierównowagi stechiometrycznej między LNE i alfa-1-PI.
Nowe pochodne diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych o wzorze ogólnym 1, w którym W oznacza grupę benzyloksykarbonylową (Cbz) lub dipeptyd składający się z proliny i waliny, w którym grupa aminowa waliny jest zablokowana przez grupę t-butyloksykarbonylową (Boc) lub 4-metoksybenozoilową, R oznacza podstawnik analogiczny do łańcucha bocznego waliny, norwaliny, norleucyny lub kwasu 2-aminobutanowego (Abu). X1,X2,X4 i X5 oznaczają wodór, natomiast X3 oznacza wodór lub związek wybrany z grupy obejmującej; merkaptometyl (S-metyl) 1,1,3,3-tetrametylobutyl, karboksymetyl lub tertbutyl. Nowe związki są mieszaninami racemicznymi w przypadku prostych analogów fosfonowych waliny, norwaliny i kwasu 2-aminobutanowego lub mieszaninami diastereoizomerów w przypadku pochodnych tri-peptydowych.
Sposób wytwarzania dotyczy pochodnych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych o wzorze ogólnym 1, w którym W oznacza grupę benzyloksykarbonylową (Cbz) lub dipeptyd składający się z proliny i waliny, w którym grupa aminowa waliny jest zablokowana przez grupę t-butyloksykarbonylową (Boc) lub 4-metoksybenozoilową, R oznacza podstawnik analogiczny do łańcucha bocznego waliny, norwaliny, norleucyny lub kwasu 2-aminobutanowego (Abu). X1;X2,X4 i X5 oznaczają wodór, natomiast X3 oznacza wodór lub związek wybrany z grupy obejmującej; merkaptometyl (S-metyl) 1,1,3,3-tetrametylobutyl, karboksymetyl lub tertbutyl. Nowe związki są mieszaninami racemicznymi w przypadku prostych analogów fosfonowych waliny i mieszaninami diastereoizomerów w przypadku pochodnych tri-peptydowych.
Sposób wytwarzania pochodnych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych o wzorze ogólnym 1, w którym W oznacza Cbz, R oznacza łańcuch boczny waliny, norwaliny i kwasu 2-aminobutylowego, X1,X2,X4 i X5 oznaczają wodór, natomiast X3 oznacza karboksymetyl, polega na tym, że fosforyn triarlowy, otrzymany z fenolu tri-p-karboksymetylowego oraz chlorku fosforu (III)
PL 215 209 B1 w acetonitrylu, poddaje się amidoalkilowaniu przy użyciu karbaminianu, fosforynu tri-p-karboksymetylu, oraz aldehydu, takiego jak aldehyd n-butylowy, aldehyd izobutylowy i aldehyd propylowy w lodowatym kwasie octowym jako rozpuszczalniku.
W odmianie sposobu w celu wytworzenia nowych peptydowych pochodnych estrów o wzorze ogólnym 1, w którym W oznacza dipeptyd składający się z proliny i waliny, w którym grupa aminowa waliny jest zablokowana przez grupę t-butyloksykarbonylową (Boc), R oznacza podstawnik analogiczny do łańcucha bocznego waliny, norwaliny, norleucyny, X1,X2,X4 i X5 oznaczają wodór, natomiast X3 oznacza wodór lub związek wybrany z grupy obejmującej; merkaptometyl (S-metyl) 1,1,3,3-tetrametylobutyl lub tertbutyl polega na tym, że fosforyn triarlowy, poddaje się amidoalkilowaniu przy użyciu karbaminianu, fosforynu tri-p-merkaptometylu, fosforynu tri-p-1,1,3,3-tetrametylobutylu, fosforynu tri-p-tertbutylu lub fosforynu tri-fenylowego oraz aldehydu, takiego jak aldehyd n-butylowy, aldehyd izobutylowy i aldehyd n-pentylowy w lodowatym kwasie octowym jako rozpuszczalniku. A następnie prowadzi się syntezę bromowodorków estrów difenylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych, w której odblokowuje się ochronną grupę benzyloksykarbonylową (Cbz) przy użyciu roztworu kwasu bromowodorowego w kwasie octowym. W kolejnym etapie substrat w postaci bromowodorku estru difenylowego kwasu 1-aminoalkanofosfonowego poddaje się reakcji z proliną z zablokowaną grupą α-aminową w obecności trójetyloaminy, heksafluorofosforanu 0-benzotriazol-1-yIo-W,W,W,W-tetrametylouroniowego (HBTU) jako odczynnika sprzęgającego i acetonitrylu jako rozpuszczalnika. W efekcie otrzymuje się fosfonodipeptydy, zawierające w swej strukturze resztę estru difenylowego fosfonowego analogu waliny, norwaliny, norleucyny lub z zablokowaną grupą α-aminową, z których następnie usuwa się grupę blokującą terc-butylową (t-Boc), przy użyciu roztworu kwasu trójfluorooctowego (TFA) i dichlorometanu (CH2CI2), użytych w stosunku objętościowym 1:1. W kolejnym etapie substrat w postaci odblokowanego dipeptydu estru difenylowego kwasu 1-aminoalkanofosfonowego poddaje się reakcji z waliną z zablokowaną grupą α-aminową w obecności trójetyloaminy, heksafluorofosforanu 0-benzotriazol-1-yIo-N,N,N',N'-tetrametylouroniowego (HBTU) jako odczynnika sprzęgającego i acetonitrylu jako rozpuszczalnika.
W odmianie sposobu w celu wytworzenia nowych peptydowych pochodnych estrów o wzorze ogólnym 1, w którym W oznacza dipeptyd składający się z proliny i waliny, w którym grupa aminowa waliny jest zablokowana przez grupę 4-metoksybenozoilową, R oznacza podstawnik analogiczny do łańcucha bocznego waliny, X1,X2,X4 i X5 oznaczają wodór, natomiast X3 oznacza związek wybrany z grupy obejmującej; merkaptometyl (S-metyl), 1,1,3,3-tetrametylobutyl lub tertbutyl polega na tym, że fosforyn triarlowy, poddaje się amidoalkilowaniu przy użyciu karbaminianu, fosforynu tri-p-merkaptometylu, fosforynu tri-p-1,1,3,3-tetrametylobutylu, fosforynu tri-p-tertbutylu lub fosforynu tri-fenylowego oraz aldehydu izobutylowego w lodowatym kwasie octowym jako rozpuszczalniku. A następnie prowadzi się syntezę bromowodorków estrów difenylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych, w której odblokowuje się ochronną grupę benzyloksykarbonylową (Cbz) przy użyciu roztworu kwasu bromowodorowego w kwasie octowym. W kolejnym etapie substrat w postaci bromowodorku estru difenylowego kwasu 1-aminoalkanofosfonowego poddaje się reakcji z proliną z zablokowaną grupą α-aminową w obecności trójetyloaminy, heksafluorofosforanu 0-benzotriazol-1-yIo-N,N,N',N'-tetrametylouroniowego (HBTU) jako odczynnika sprzęgającego i acetonitrylu jako rozpuszczalnika. W efekcie otrzymuje się fosfonodipeptydy, zawierające w swej strukturze resztę estru difenylowego fosfonowego analogu waliny z zablokowaną grupą α-aminową, z których następnie usuwa się grupę blokującą tercbutylową (t-Boc), przy użyciu roztworu kwasu trójfluorooctowego (TFA) i dichlorometanu (CH2Cl2), użytych w stosunku objętościowym 1:1. W kolejnym etapie substrat w postaci odblokowanego dipeptydu estru difenylowego kwasu 1-aminoalkanofosfonowego poddaje się reakcji z waliną z zablokowaną grupą α-aminową w obecności trójetyloaminy, heksafluorofosforanu 0-benzotriazol-1-yIo-W,W,W,W-tetrametylouroniowego (HBTU) jako odczynnika sprzęgającego i acetonitrylu jako rozpuszczalnika.
W efekcie otrzymuje się fosfonotripeptydy, zawierające w swej strukturze resztę estru difenylowego fosfonowego analogu waliny z zablokowaną grupą α-aminową, z których następnie usuwa się grupę blokującą terc-butylową (t-Boc), przy użyciu roztworu kwasu trójfluorooctowego (TFA) i dichlorometanu (CH2Cl2), użytych w stosunku objętościowym 1:1. W kolejnym etapie substrat w postaci odblokowanego tripeptydu estru difenylowego kwasu 1-aminoalkanofosfonowego poddaje się reakcji z kwasem p-metoksybenzoesowym w obecności trójetyloaminy, heksafluorofosforanu 0-benzotriazol-1-yIo-N,N,N',N'-tetrametylouroniowego (HBTU) jako odczynnika sprzęgającego i acetonitrylu jako rozpuszczalnika.
PL 215 209 B1
Zastosowanie terapeutyczne związków o wzorze ogólnym 1, w którym podstawniki mają wyżej zdefiniowane znaczenie, do wytwarzania nieodwracalnych inhibitorów LNE w preparatach przeciwzapalnych, w leczeniu arteriosklerozy, powikłań reumatycznych oraz nowych leków antyrakowych, przydatnych w leczeniu raków piersi i płuc. Korzystnie stosuje się tylko jeden, reaktywny izomer optyczny, który reaguje z enzymami, odpowiednio tylko jedną formę optyczną - która opowiada izomerowi L-waliny, norwaliny, norleucyny lub kwasu 2-aminobutanowego (Abu).
Związki według wynalazku charakteryzują się okresem półrozpadu kompleksu inhibitor-elastaza większym niż trzy dni. Zaletą zastosowania nowych związków jest fakt, że po trzech dniach, kompleks in vivo zostaje wyeliminowany, a aktywność enzymatyczna elastazy zostaje unieszkodliwiona.
Przedmiotem wynalazku jest przedstawiony w przykładach wytwarzania estrów difenylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych z nowymi podstawnikami przy aromatycznych pierścieniach fenylowych.
Przedmiot wynalazku został objaśniony w przykładach realizacji, bez jednoczesnego ograniczania jego zakresu.
P r z y k ł a d 1
Sposób wytwarzania estru di-4-karboksymetylofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-n-butylofosfonowego, przedstawionego wzorem II.
Etap 1. Otrzymywanie fosforynu trój-4-karboksymetylofenylowego.
W tym celu do kolby okrągłodennej wyposażonej w mieszadło magnetyczne dodaje się 4,5 g (29 mmola) 4-karboksymetylofenoIu i 20 ml acetonitrylu. Po rozpuszczeniu całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 90°C przez 2 minuty. Następnie do mieszaniny reakcyjnej dodaje się 0,87 ml (9,8 mmola) chlorku fosforu (III). Całość ogrzewa się przez trzy godziny w temperaturze wrzenia. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce obrotowej. Powstały surowy produkt w postaci oleju wykorzystuje się bezpośrednio, bez oczyszczania do reakcji syntezy estru di-4-karboksymetylofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-n-propylofosfonowego.
Etap 2. Otrzymywanie estru di-4-karboksymetylofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-n-butylofosfonowego.
W tym celu do kolby okrągłodennej - zawierającej fosforyn trój-4-karboksymetylofenylowy powstały bezpośrednio w etapie 1 - wyposażonej w mieszadło magnetyczne odważa się 1,51 g (10 mmola) karbaminianu benzylu i 1,1 ml (10,5 mmola) aldehydu n-butylowego. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w 10 ml lodowatego kwasu octowego całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 90°C przez 3 godziny. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce rotacyjnej a pozostałość rozpuszcza w 100-150 ml metanolu i umieszcza się w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu. Uzyskany produkt odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu. Otrzymuje się 1,62 g surowego produktu (29% wagowo) Wzór sumaryczny: C28H30NO9P. Masa cząsteczkowa: 555,517 g/mol. Widmo 31P NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 18,63 (s). Widmo 1H NMR (roztwór w CDCl3, δ [ppm]): 0,96(t, 3H, CH3), 1,44-1,99 (m, 4H, CH2, CH2), 3,90 (s, 6H, 2xOCH3), 4,47-4,59 (m, 1H, CHP), 5,09 (q, 2H, ArCH2O), 5,27 (d, 1H, NH), 7,13-7,32 (m, 9H, aromat.), 7,86-8,01 (m, 4H, aromat.).
P r z y k ł a d 2
Sposób wytwarzania estru di-4-karboksymetylofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-izobutylofosfonowego, przedstawionego wzorem III
Sposób wykonania syntezy fosforynu trój-4-karboksymetylofenylowego jest analogiczny jak w przykładzie 1 (Etap 1). Drugim etapem jest synteza estru di-4-karboksymetylofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-izobutylofosfonowego.
Etap 2. Otrzymywanie estru di-4-karboksymetylofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-izobutylofosfonowego.
W tym celu do kolby okrągłodennej - zawierającej fosforyn trój-4-karboksymetylofenylowy powstały w etapie 1 - wyposażonej w mieszadło magnetyczne odważa się 1,51 g (10 mmola) karbaminianu benzylu i 1,1 ml (10,5 mmola) aldehydu tertbutylowego. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w 10 ml lodowatego kwasu octowego całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 90°C przez 3 godziny. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce rotacyjnej a pozostałość rozpuszcza się w 100-150 ml metanolu i umieszcza w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu. Uzyskany produkt odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu. Uzyskuje się 1,73 g surowego produktu (31% wagowo) Wzór sumaryczny: C28H30NO9P. Masa cząsteczkowa: 555,517 g/mol. Widmo 31P NMR (roztwór w CDCI3,
PL 215 209 B1 δ [ppm]): 17,99(s). Widmo 1H NMR (roztwór w CDCfe, δ [ppm]): 1,0-1,1 (m, 6H, 2xCH3), 2,29-2,43 (m, H, CH), 3,87 (s, 6H, 2xOCH3), 4,38-4,49 (m, 1H, CHP), 5,07 (q, 2H, ArCH2O), 5,21 (d, 1H, NH), 7,117,31 (m, 9H, aromat.), 7,90-8,0 (m, 4H, aromat.).
P r z y k ł a d 3
Sposób wytwarzania estru di-4-karboksymetylofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-propylofosfonowego, przedstawionego wzorem IV. Syntezę fosforynu trój-4-karboksymetylofenylowego prowadzi się jak w przykładzie 1 (Etap 1). Kolejnym etapem jest synteza estru di-4-karboksymetylofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-propylofosfonowego
Etap 2. Otrzymywanie estru di-4-karboksymetylofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-propylofosfonowego.
W tym celu do kolby okrągłodennej - zawierającej fosforyn trój-4-karboksymetylofenylowy powstały bezpośrednio w etapie 1 - wyposażonej w mieszadło magnetyczne odważa się 1,51 g (10 mmola) karbaminianu benzylu i 1,1 ml (10,5 mmola) aldehydu propylowego. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w 10 ml lodowatego kwasu octowego całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 90°C przez 3 godziny. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce rotacyjnej a pozostałość rozpuszcza się w 100-150ml metanolu i umieszcza się w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu. Uzyskany produkt odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu. Uzyskuje się 1,73 g surowego produktu (31% wagowo) Wzór sumaryczny: C28H28NO9P. Masa cząsteczkowa: 541,490 g/mol. Widmo 31P NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]):18,41 (s). Widmo 1H NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]):~ 0,97 (t, 3H, CH3), 1,67-1,98 (m, 2H, CH2), 3,77 (s, 6H, 2 xOCH3), 4,30-4,42 (m, 1H, CHP), 4,99 (q, 2H, ArCH2O), 5.41 (d, 1H, NH), 7,04-7,20 (m, 9H, aromat.), 7,80-7,89 (m, 4H, aromat.).
P r z y k ł a d 4
Sposób wytwarzania pochodnej trójpeptydowej estru di-4-tertbutylofenylowego kwasu izobutylofosfonowego, przedstawionego wzorem V.
Etap 1. Otrzymywanie fosforynu trój-4-terbutylofenylowego.
W tym celu do kolby okrągłodennej wyposażonej w mieszadło magnetyczne dodaję się 16,54 g (0,11 mola) 4-tertbutylofenolu i acetonitrylu. Po rozpuszczeniu całość ogrzewa sie pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 90°C przez 2 minuty. Następnie do mieszaniny reakcyjnej dodaje się 3,3 ml (38 mmola) chlorku fosforu (III). Całość ogrzewa się przez trzy godziny w temperaturze wrzenia. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce obrotowej. Powstały surowy produkt w postaci oleju wykorzystano bezpośrednio, bez oczyszczania do reakcji syntezy estru di-4-tertbutylofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-izopropylo-metano-fosfonowego.
Etap 2. Otrzymywanie estru di-4-tertbutylofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-izobutylofosfonowego.
W tym celu do kolby okrągłodennej - zawierającej fosforyn trój-4-tertbutylofenylowy powstały bezpośrednio w etapie 1 - wyposażonej w mieszadło magnetyczne odważa się 5,55 g (37 mmola) karbaminianu benzylu i 3,33 ml (37 mmola) aldehydu tertbutylowego. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w lodowatym kwasie octowym całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 90°C przez 3 godziny. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce rotacyjnej a pozostałość rozpuszcza sie w metanolu i umieszcza w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu. Uzyskany produkt odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu. Uzyskano 8,01 g surowego produktu (39% wagowo). Wzór sumaryczny: C32H42O5NP. Masa cząsteczkowa: 551,659 g/mol
Etap 3. Otrzymywanie bromowodorku estru di-4-tertbutylofenylowego kwasu izobutylofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się 2,00 g estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-izopropylometanofosfonowego (3,6 mmola) i dodaje się 5,00 ml roztworu kwasu bromowodorowego (33%) w kwasie octowym. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Następnie lotne składniki mieszaniny poreakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej a uzyskany olej rozpuszcza się w minimalnej ilości metanolu i dodaje się eteru dietylowego do pierwszego zmętnienia. Kolbę umieszcza sie w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu, który odsącza sie pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na wolnym powietrzu do stałej wagi. Otrzymuje się 1,62 g (90%wagowo) bromowodorku estru di-tertbutylofenylowego kwasu izobutylofosfonowego fosfonowego. Wzór sumaryczny: C24H3703NPBr. Masa cząsteczkowa: 498,438 g/mol.
Etap 4. Reakcja syntezy pochodnej dipeptydowej estru di-4-tertbutylofenylowego kwasu izobutylofosfonowego fosfonowego.
PL 215 209 B1
Do kolby okrągłodennej odważa się 0,93 g (1,9 mmol) bromowodorku estru di-4-tertbutylofenylowego kwasu izobutylofosfonowego i dodaje sie 0,41 g Boc-Pro-OH (1,9 mmola). Całość zalewa się acetonitrylem (15 ml). Odczekuje się 2 minuty i dodaje się 0,55 ml trójetyloaminy (4 mmola). Po 10 minutach dodaje się 0,74 g (1,9 mmola) heksafluorofosforanu O-benzotriazol-1-yIo-N,N,N',N'-tetrametylouroniowego. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 24 godziny. Następnie mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką, przenosi do rozdzielacza i ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu. Warstwę octanową przemywa się kolejno: dwukrotnie siarczanem potasu (5%), solanką, dwukrotnie wodorowęglanem sodu (5%), solanką.
Frakcje octanowe suszy się bezwodnym siarczanem magnezu. Odparowuje się lotne rozpuszczalniki, a następnie produkt oczyszcza się metodą chromatografii kolumnowej stosując jako eluent chloroform/octan etylu w stosunku objętościowym 4:1. Po zebraniu frakcji zawierających oczekiwany produkt lotne rozpuszczalniki odparowuje się na wyparce rotacyjnej. Otrzymuje się oczekiwany produkt o masie 1,06 g (94% wagowo). Wzór sumaryczny: C34H51O6N2P. Masa cząsteczkowa: 591,851 g/mol.
Etap 5. Usunięcie grupy t-Boc z pochodnej dipeptydowej estru di-4-tertbutylofenylowego kwasu izobutylofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się pochodną dipeptydową estru di-4-tertbutylofenylowego kwasu izobutylofosfonowego i rozpuszcza się ją w dichlorometanie (10 ml), a następnie dodaje powoli 50% roztwór kwasu trójfluoroctowego w dichlorometanie (5 ml). Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 2 godziny, a jej przebieg monitoruje się metodą chromatografii cienkowarstwowej. Następnie lotne składniki mieszaniny poreakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej, uzyskany olej rozpuszcza się w toluenie i ponownie odparowuje. Czynność tą powtarza się trzykrotnie. Powstały olej o masie 1,36 g - posłużył jako substrat wyjściowy do otrzymania pochodnej tripeptydowej estru di-4-tertbutylofenylowego kwasu izobutylofosfonowego.
Etap 6. Reakcja syntezy pochodnej trójpeptydowej estru di-4-tertbutylofenylowego kwasu izobutylofosfonowego.
*P
Do powstałego w etapie V produktu TFA*Pro-ValP(OC6H5-C4H9)2 (m=1,36 g; n=2,2 mmola) dodaje się 0,49 g (2,25 mmola) Boc-Val-OH. Całość zalewa się acetonitrylem (~10ml). Odczekuje się 2 minuty i dodaje 0,9 ml (6,5 mmola) trójetyloaminy. Po 10 minutach dodaje się 0,86 g (2,3 mmola) heksafluorofosforanu O-benzotriazol-1-yIo-N,N,N',N'-tetrametylouroniowego. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 4 godziny. Następnie mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką przenosi do rozdzielacza i ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu. Warstwę octanową przemywa się kolejno: dwukrotnie siarczanem potasu (5%), solanką dwukrotnie wodorowęglanem sodu (5%), solanką.
Warstwę octanową zlewa się do kolby stożkowej i dodaje się siarczanu magnezu. Następnie robi się płytkę TLC i oczyszcza się produkt metodą chromatografii kolumnowej stosując jako eluent chloroform, chloroform/octan etylu w stosunku objętościowym 1:4, następnie chloroform/octan etylu w stosunku objętościowym 1:8 i na sam koniec octan etylu. Po zebraniu frakcji zawierających oczekiwany produkt lotne rozpuszczalniki odparowuje się na wyparce rotacyjnej. Powstały olej rozpuszcza się w dichlorometanie i odparowuje na wyparce rotacyjnej, aż do spienienia produktu, otrzymuje się oczekiwany produkt o masie 0,89 g (57% wagowo). Wzór sumaryczny: C41H64O5N3P. Masa cząsteczkowa: 713,89 g/mol. Widmo 31P NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 17,62 (s); 18,00 (s). Widmo 1H NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 0,76-1,02 (m, 12H, 4xCH3), 1,18 (s, 18H, 6xCH3), 1,33 (s, 9H, 3xCH3), 1,95 (m, 5H, 3 xCH, 1xCH2), 2,33 (m, 2H, CH2,), 3,62 (m, 2H, CH2), 4,17 (m, 1H, CH), 4,62 (m, 1H, CHP), 5,12 (d, 1H, NH), 5,32 (d, 1H, NH), 6,96-7,26 (m, 8H, aromat.).
P r z y k ł a d 5
Sposób wytwarzania pochodnej trójpeptydowej estru di-4-(1,1,3,3-tetrametylobutylo)fenylowego kwasu izobutylofosfonowego, przedstawionego wzorem VI
Etap 1. Otrzymywanie fosforynu trój-4-(1,1,3,3-tetrametylobutylo)fenylowego.
W tym celu do kolby okrągłodennej wyposażonej w mieszadło magnetyczne dodaje się 16,71 g (81 mmola) 4-(1,1,3,3-tetrametylobutylo)fenolu i acetonitrylu. Po rozpuszczeniu całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 90°C przez 2 minuty. Następnie do mieszaniny reakcyjnej dodaje się 2,4 ml (27 mmola) chlorku fosforu (III). Całość ogrzewa się przez trzy godziny w temperaturze wrzenia. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce obrotowej. Powstały surowy produkt w postaci oleju wykorzystuje się bezpośrednio, bez oczyszczania do reakcji syntezy estru di-4-(1,1,3,3-tetrametylobutylo)fenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-izopropylo-metano-fosfonowego.
PL 215 209 B1
Etap 2. Otrzymywanie estru di-4-(1,1,3,3-tetrametylobutylo)fenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-izobutylofosfonowego.
W tym celu do kolby okrągłodennej - zawierającej fosforyn trój-4-metylomerkaptofenylowy powstały bezpośrednio w etapie 1 - wyposażonej w mieszadło magnetyczne odważa się 4,1 g (27 mmola) karbaminianu benzylu i 2,5 ml (27,5 mmola) aldehydu tertbutylowego. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w lodowatym kwasie octowym całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 90°C przez 3 godziny. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce rotacyjnej a pozostałość rozpuszcza się w metanolu i umieszcza się w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu. Uzyskany produkt odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu. Uzyskuje się 6,13 g surowego produktu (35% wagowo). Masa cząsteczkowa: 663,874 g/mol. Wzór sumaryczny C40H58NO5P
Etap 3. Otrzymywanie bromowodorku estru di-4-(1,1,3,3-tetrametylobutylo)fenylowego kwasu izobutylofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się 2,00 g estru di-4-(1,1,3,3-tetrametylobutylo)fenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino) izobutylofosfonowego (3,1 mmola) i dodaje się 5,00 ml roztworu kwasu bromowodorowego (33%) w kwasie octowym. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Następnie lotne składniki mieszaniny poreakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej. Produkt nie krystalizuje w układzie metanol/eter dietylowy. Do dalszej syntezy użyto surowego produktu. Wzór sumaryczny: C32H53O3NPBr. Masa cząsteczkowa: 610,652 g/mol.
Etap 4. Reakcja syntezy pochodnej dipeptydowej estru di-4-(1,1,3,3-tetrametylobutylo)fenylowego kwasu izobutylofosfonowego.
W kolbie okrągłodennej umieszcza się 3,14 mmol bromowodorku estru di-4-(1,1,3,3-tetrametylobutylo)fenylowego kwasu izobutylofosfonowego i dodaje się 0,68 g Boc-Pro-OH (3,16 mmola). Całość zalewa się acetonitrylem (15 ml). Odczekuje się 2 minuty i dodaje się 1,3 ml trójetyloaminy (9,4 mmola). Po 10 minutach dodaje się 1,26 g (3,3 mmola) heksafluorofosforanu O-benzotriazol-1-yIo-N,N,N',N'-tetrametylouroniowego. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 24 godziny. Następnie mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką przenosi do rozdzielacza i ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu. Warstwę octanową przemywa się kolejno: dwukrotnie siarczanem potasu (5%), solanką, dwukrotnie wodorowęglanem sodu (5%), solanką.
Frakcje octanowe suszy się bezwodnym siarczanem magnezu. Odparowuje się lotne rozpuszczalniki, a następnie produkt oczyszcza się metodą chromatografii kolumnowej stosując jako eluent chloroform/octan etylu w stosunku objętościowym 4:1. Po zebraniu frakcji zawierających oczekiwany produkt lotne rozpuszczalniki odparowuje się na wyparce rotacyjnej. Otrzymuje się oczekiwany produkt o masie 1,57 g (69% wagowo). Wzór sumaryczny: C42H67O6N2P. Masa cząsteczkowa: 726,973 g/mol.
Etap 5. Usunięcie grupy t-Boc z pochodnej dipeptydowej estru di-4-(1,1,3,3-tetrametylobutylo)fenylowego kwasu izobutylofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się 1,57 g (2,16 mmol) pochodnej dipeptydowej estru di-4-(1,1,3,3-tetrametylobutylo)fenylowego kwasu izobutylofosfonowego i rozpuszcza się ją w dichlorometanie (10 ml), a następnie dodaje się powoli 50% roztwór kwasu trójfluoroctowego w dichlorometanie (10 ml). Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 2 godziny, a jej przebieg monitoruje się metodą chromatografii cienkowarstwowej. Następnie lotne składniki mieszaniny poreakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej, uzyskany olej rozpuszcza się w toluenie i ponownie odparowuje. Czynność tą powtarza się trzykrotnie. Powstały olej o masie 1,74 g - posłużył jako substrat wyjściowy do otrzymania pochodnej tripeptydowej estru di-4-(1,1,3,3-tetrametylobutylo)fenylowego kwasu izobutylofosfonowego.
Etap 6. Reakcja syntezy pochodnej trójpeptydowej estru di-4-(1,1,3,3-tetrametylobutylo)fenylowego kwasu izobutylofosfonowego.
P
Do powstałego w etapie V produktu TFA*Pro-ValP(OC6H5-4-C8H17)2 (m=1,74 g; n=2,1 mmola) dodaje się 0,47 g (2,16 mmola) Boc-Val-OH. Całość zalewa się acetonitrylem (~15 ml). Odczekuje się 2 minuty i dodaje się 0,66 ml (4,8 mmola) trójetyloaminy. Po 10 minutach dodaje się 0,86 g (2,3 mmola) heksafluorofosforanu O-benzotriazol-1-yIo-N,N,N',N'-tetrametylouroniowego. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 4 godziny. Następnie mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką, przenosi do rozdzielacza i ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu. Warstwę octanową przemywa się kolejno: dwukrotnie siarczanem potasu (5%), solanką dwukrotnie wodorowęglanem sodu (5%), solanką.
Warstwę octanową zlewa się do kolby stożkowej i dodaje się siarczanu magnezu. Następnie robi się płytkę TLC i oczyszcza się produkt metodą chromatografii kolumnowej stosując jako eluent
PL 215 209 B1 chloroform. Po zebraniu frakcji zawierających oczekiwany produkt lotne rozpuszczalniki odparowuje się na wyparce rotacyjnej. Powstały olej rozpuszcza się w dichlorometanie i odparowuje się na wyparce rotacyjnej, aż do spienienia produktu, otrzymuje się oczekiwany produkt o masie 0,51 g (29% wa31 gowo). Wzór sumaryczny: C47H76O7N3P. Masa cząsteczkowa: 826,104 g/mol. Widmo 31P NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 17,50 (s); 17,93 (s). Widmo 1H NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 0,61 (s, 18H, 6xCH3), 0,72-0,98 (m, 12H, 4xCH3), 1,22 (s, 12H, 4xCH3), 1,33 (s, 9H, 3xCH3), 1,60 (s, 4H,2xCH2), 1,60-2,33 (m, 6H, 2xCH2, 2xCH), 3,62 (m, 2H, CH2), 4,18 (m, 1H, CH), 4,65 (m, 1H, CHP), 5,2 (dd, 1H, NH), 6,92-7,29 (m, 9H, NH, aromat.).
P r z y k ł a d 6
Sposób wytwarzania pochodnej trójpeptydowej estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu n-pentylofosfonowego, przedstawionej wzorem VII.
Etap 1. Otrzymywanie fosforynu trój-4-metylomerkaptofenylowego.
W tym celu do kolby okrągłodennej wyposażonej w mieszadło magnetyczne dodaje się 4,4 g (32 mmola) 4-metylomerkaptofenolu i 20 ml acetonitrylu. Po rozpuszczeniu całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 90°C przez 2 minuty. Następnie do mieszaniny reakcyjnej dodaje się 1 ml (11 mmola) chlorku fosforu (III). Całość ogrzewa się przez trzy godziny w temperaturze wrzenia. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce obrotowej. Powstały surowy produkt w postaci oleju wykorzystuje się bezpośrednio, bez oczyszczania do reakcji syntezy estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu N-(benzyIoksykarbonyIamino)-izopropylo-metano-fosfonowego.
Etap 2. Otrzymywanie estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-n-pentylofosfonowego.
W tym celu do kolby okrągłodennej - zawierającej fosforyn trój-4-metylomerkaptofenylowy powstały bezpośrednio w etapie 1 - wyposażonej w mieszadło magnetyczne odważa się 1,71 g (11 mmola) karbaminianu benzylu i 1,32 ml (12 mmola) aldehydu n-pentylowego. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w 10 ml lodowatego kwasu octowego całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 90°C przez 3 godziny. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce rotacyjnej a pozostałość rozpuszcza się w 100-150 ml metanolu umieszcza się w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu. Uzyskany produkt odsącza sie pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu. Uzyskuje się 2,09 g surowego produktu (35% wagowo) Masa cząsteczkowa: 545,645 g/mol. Wzór sumaryczny C27H32NO5PS2
Etap 3. Otrzymywanie bromowodorku estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu n-pentylofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się 2,09 g estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-n-pentylofosfonowego (3,8 mmol) i dodaje się 8,00 ml roztworu kwasu bromowodorowego (33%) w kwasie octowym. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez godziny. Następnie lotne składniki mieszaniny poreakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej a uzyskany olej rozpuszcza się w minimalnej ilości metanolu i dodaje sie eteru dietylowego do pierwszego zmętnienia. Kolbę umieszcza się w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu, który odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na wolnym powietrzu do stałej wagi. Otrzymuje się 1,77 g (95% wagowo) bromowodorku estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu n-pentylofosfonowego. Wzór sumaryczny: C19H27O3NPS2Br. Masa cząsteczkowa: 492,424 g/mol.
Etap 4. Reakcja syntezy pochodnej dipeptydowej estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu n-pentylofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się 1,00 g (2 mmol) bromowodorku estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu n-pentylofosfonowego i dodaje się 0,48 g Boc-Pro-OH (2,2 mmola). Całość zalewa się acetonitrylem (10 ml). Odczekuje się 2 minuty i dodaje sie 0,71 ml trójetyloaminy (5,1 mmola). Po 10 minutach dodaje się 0,81 g (2,1 mmola) heksafluorofosforanu O-benzotriazol-1-ylo-N,N,N',N'-tetrametylouroniowego. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 24 godziny. Następnie mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką, przenosi się do rozdzielacza i ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu. Warstwę octanową przemywa się kolejno: dwukrotnie siarczanem potasu (5%), solanką, dwukrotnie wodorowęglanem sodu (5%), solanką.
Frakcje octanowe suszy się bezwodnym siarczanem magnezu. Odparowuje się lotne rozpuszczalniki, a następnie produkt oczyszcza się metodą chromatografii kolumnowej stosując jako eluent heksan/octan etylu w stosunku objętościowym 1:1. Po zebraniu frakcji zawierających oczekiwany produkt,
PL 215 209 B1 lotne rozpuszczalniki odparowuje się na wyparce rotacyjnej. Otrzymuje się oczekiwany produkt o masie 0,70 g (57% wagowo). Wzór sumaryczny: C29H41O6N2PS2. Masa cząsteczkowa: 608,744 g/mol.
Etap 5. Usunięcie grupy t-Boc z pochodnej dipeptydowej estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu n-pentylofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się pochodną dipeptydową estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu n-pentylofosfonowego i rozpuszcza się ją w dichlorometanie (10 ml), a następnie dodaje się powoli 50% roztwór kwasu trójfluoroctowego w dichlorometanie (10 ml). Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 2 godziny, a jej przebieg monitoruje się metodą chromatografii cienkowarstwowej. Następnie lotne składniki mieszaniny poreakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej, uzyskany olej rozpuszcza się w toluenie i ponownie odparowuje. Czynność tą powtarza się trzykrotnie. Powstały olej służy jako substrat wyjściowy do otrzymania pochodnej tripeptydowej estru di-4-metoksyfenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-n-pentylofosfonowego.
Etap 6. Reakcja syntezy pochodnej trójpeptydowej estru di-4-metoksyfenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-n-pentylofosfonowego.
Do powstałego w etapie V produktu TFA*Pro-nLeup(OC6H5-4-SCH3)2 dodaje się 0,20 g (0,9 mmola) Boc-Val-OH. Całość zalewa się acetonitrylem (~5 ml). Odczekuje się 2 minuty i dodaje się 0,28 ml (2 mmola) trójetyloaminy. Po 10 minutach dodaje się 0,32 g (0,84 mmola) heksafluorofosforanu O-benzotriazol-1-ylo-N,N,N',N'-tetrametylouroniowego. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 4 godziny. Następnie mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką, przenosi do rozdzielacza i ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu. Warstwę octanową przemywa się kolejno: dwukrotnie siarczanem potasu (5%), solanką, dwukrotnie wodorowęglanem sodu (5%), solanką.
Warstwę octanową zlewa się do kolby stożkowej i dodaje się siarczanu magnezu. Następnie robi się płytkę TLC i oczyszcza się produkt metodą chromatografii kolumnowej stosując jako eluent chloroform. Po zebraniu frakcji zawierających oczekiwany produkt, lotne rozpuszczalniki odparowuje się na wyparce rotacyjnej. Powstały olej rozpuszcza się w dichlorometanie i odparowuje się na wyparce rotacyjnej, aż do spienienia produktu, otrzymuje się oczekiwany produkt o masie 0,49 g (78% wagowo). Wzór sumaryczny: C34H50O7N3PS2· Masa cząsteczkowa: 707,876 g/mol. Widmo 31P NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 18,87 (s); 19,12 (s). Widmo 1H NMR (roztwór w CDCl3, δ [ppm]): 0,76-0,92 (m, 9H, 3xCH3), 1,35 (s, 9H, 3xCH3),
1,45-2,25 (m, 10H, 4xCH2, 2xCH), 2,37 (s, 6H, 2xCH3), 3,4-3,75 (m, 2H, CH2), 4,15-4,25 (m, 1H, CH), 4,55-4,75 (m, 1H, CHP), 5,16 (dd, 1H, NH), 6,98-7,29 (m, 9H, NH, aromat.).
P r z y k ł a d 7
Sposób wytwarzania pochodnej trójpeptydowej estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu n-butylofosfonowego, przedstawionego wzorem VIII.
Sposób wykonania syntezy fosforynu trój-4-metylomerkaptofenylowego jest analogiczny do przykładu VI (Etap 1). Kolejnym etapem jest synteza estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-n-butylofosfonowego
Etap 2. Otrzymywanie estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-n-butylofosfonowego.
W tym celu do kolby okrągłodennej - zawierającej fosforyn trój-4-metylomerkaptofenylowy powstały bezpośrednio w etapie 1 - wyposażonej w mieszadło magnetyczne odważa się 1,71 g (11 mmola) karbaminianu benzylu i 1,1 ml (12 mmola) aldehydu n-butylowego. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w 10 ml lodowatego kwasu octowego całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 90°C przez 3 godziny. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce rotacyjnej a pozostałość rozpuszcza się w 100-150 ml metanolu umieszcza w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu. Uzyskany produkt odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu. Uzyskuje się 2,86 g surowego produktu (49% wagowo) Masa cząsteczkowa: 531,619 g/mol. Wzór sumaryczny: C26H30NO5PS2
Etap 3. Otrzymywanie bromowodorku estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu n-butylofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się 0,53 g estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-n-butylofosfonowego (1 mmol) i dodaje się 4,00 ml roztworu kwasu bromowodorowego (33%) w kwasie octowym. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez godziny. Następnie lotne składniki mieszaniny poreakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej a uzyskany olej rozpuszcza się w minimalnej ilości metanolu i dodaje się eteru dietylowego do pierwszego zmętnienia. Kolbę umieszcza się w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu, który odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na wolnym powietrzu do stałej wagi. Otrzymuje
PL 215 209 B1 się 0,41 g (86% wagowo) bromowodorku estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu n-butylofosfonowego. Wzór sumaryczny: C18H25O3NPS2Br. Masa cząsteczkowa: 478,40 g/mol.
Etap 4. Reakcja syntezy pochodnej dipeptydowej estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu n-butylofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się 0,37 g (0,77 mmol) bromowodorku estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu n-butylofosfonowego i dodaje się 0,19 g Boc-Pro-OH (0,88 mmola). Całość zalewa się acetonitrylem (10 ml). Odczekuje się 2 minuty i dodaje się 0,27 ml trójetyloaminy (1,9 mmola). Po 10 minutach dodaje się 0,31 g (0,82 mmola) heksafluorofosforanu O-benzotriazol-1-ylo-N,N,N',N'-tetrametylouroniowego. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 24 godziny. Następnie mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką, przenosi do rozdzielacza i ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu. Warstwę octanową przemywa się kolejno: dwukrotnie siarczanem potasu (5%), solanką dwukrotnie wodorowęglanem sodu (5%), solanką.
Frakcje octanowe suszy się bezwodnym siarczanem magnezu. Odparowuje się lotne rozpuszczalniki, a następnie produkt oczyszcza się metodą chromatografii kolumnowej stosując jako eluent heksan/octan etylu w stosunku objętościowym 1:1. Po zebraniu frakcji zawierających oczekiwany produkt, lotne rozpuszczalniki odparowuje się na wyparce rotacyjnej. Otrzymuje się oczekiwany produkt o masie 0,27 g (59% wagowo). Wzór sumaryczny: C28H39O6N2PS2. Masa cząsteczkowa: 594,717 g/mol.
Etap 5. Usunięcie grupy t-Boc z pochodnej dipeptydowej estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu n-butylofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się pochodną dipeptydową estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu n-butylofosfonowego i rozpuszcza się ją w dichlorometanie (6 ml), a następnie dodaje się powoli 50% roztwór kwasu trójfluoroctowego w dichlorometanie (6 ml). Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 2 godziny, a jej przebieg monitoruje się metodą chromatografii cienkowarstwowej. Następnie lotne składniki mieszaniny poreakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej, uzyskany olej rozpuszcza się w toluenie i ponownie odparowuje. Czynność tą powtarza się trzykrotnie. Powstały olej służy jako substrat wyjściowy do otrzymania pochodnej trójpeptydowej estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu n-butylofosfonowego
Etap 6. Reakcja syntezy pochodnej trójpeptydowej estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu n-butylofosfonowego.
Do powstałego w etapie V produktu TFA*Pro-nValP(OC6H5-4-SCH3)2 dodaje się 0,11 g (0,51 mmola) Boc-Val-OH. Całość zalewa się acetonitrylem (~5 ml). Odczekuje się 2 minuty i dodaje się 0,107 ml (0,77 mmola) trójetyloaminy. Po 10 minutach dodaje się 0,17 g (0,45 mmola) heksafluorofosforanu 0-benzotriazol-1-yIo-N,N,N',N'-tetrametylouroniowego. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 4 godziny. Następnie mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką, przenosi do rozdzielacza i ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu. Warstwę octanową przemywa się kolejno:
> dwukrotnie siarczanem potasu (5%) > solanką > dwukrotnie wodorowęglanem sodu (5%) > solanką.
Warstwę octanową zlewa się do kolby stożkowej i dodaje się siarczanu magnezu. Następnie robi się płytkę TLC i oczyszcza produkt metodą chromatografii kolumnowej stosując jako eluent chloroform. Po zebraniu frakcji zawierających oczekiwany produkt, lotne rozpuszczalniki odparowuje się na wyparce rotacyjnej. Powstały olej rozpuszcza się w dichlorometanie i odparowuje na wyparce rotacyjnej, aż do spienienia produktu, otrzymuje się oczekiwany produkt o masie 0,28 g (80% wagowo). Wzór sumaryczny: C33H48O7N3PS2. Masa cząsteczkowa: 693,849 g/mol. Widmo 31P NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 18,87 (s); 19,12 (s). Widmo 1H NMR (roztwór w CDCl3, δ [ppm]): 0,76-0,92 (m, 9H, 3xCH3), 1,35 (s, 9H, 3xCH3), 1,45-2,25 (m, 10H, 4xCH2, 2xCH), 2,37 (s, 6H, 2xCH3), 3,4-3,75 (m, 2H, CH2), 4,15-4,25 (m, 1H, CH), 4,55-4,75 (m, 1H, CHP), 5,16 (dd, 1H, NH), 6,98-7,29 (m, 9H, NH, aromat.).
P r z y k ł a d 8
Sposób wytwarzania pochodnej trójpeptydowej estru difenylowego kwasu n-pentylofosfonowego, przedstawionego wzorem IX.
Etap 1. 0trzymywanie estru difenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-n-pentylofosfonowego.
W tym celu do kolby okrągłodennej wyposażonej w mieszadło magnetyczne odważa się 1,6 g (10 mmola) karbaminianu benzylu i dodaje się 10 mmol fosforynu trifenylowego i 1 ml (11 mmola) aldehydu n-pentanowego. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w 10 ml lodowatego kwasu octowego
PL 215 209 B1 całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 90°C przez 3 godziny. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce rotacyjnej a pozostałość rozpuszcza się w 100-150 ml metanolu i umieszcza się w temperaturze -20°C w celu krystalizacji produktu. Uzyskany produkt odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu. Uzyskuje się 2,65 g surowego produktu (58% wagowo) w postaci białego osadu. Masa cząsteczkowa: 453,472 g/mol. Wzór sumaryczny: C25H28NO5P
Etap 2. Otrzymywanie bromowodorku estru difenylowego kwasu n-pentylofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się 2,00 g estru difenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-n-pentylofosfonowego (4,4 mmola) i dodaje się 8,00 ml roztworu kwasu bromowodorowego (33%) w kwasie octowym. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Następnie lotne składniki mieszaniny poreakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej a uzyskany olej rozpuszcza się w minimalnej ilości metanolu i dodaje eteru dietylowego do pierwszego zmętnienia. Kolbę umieszcza się w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu, który odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na wolnym powietrzu do stałej wagi. Otrzymuje się 1,64 g (93% wagowo) bromowodorku estru difenylowego kwasu n-pentylofosfonowego. Wzór sumaryczny: C17 H23O3NPBr. Masa cząsteczkowa: 400,25 g/mol.
Etap 3. Reakcja syntezy pochodnej dipeptydowej estru difenylowego kwasu n-pentylofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się 1,02 g (2,5 mmol) bromowodorku estru difenylowego kwasu n-pentylofosfonowego i dodaje się 0,6 g Boc-Pro-OH (2,8 mmola). Całość zalewa się acetonitrylem (~10 ml). Odczekuje się 2 minuty i dodaje się 0,885 ml trójetyloaminy (6,4 mmola). Po 10 minutach dodaje się 1,02 g (2,7 mmola) heksafluorofosforanu O-benzotriazol-1-yIo-N,N,N',N'-tetrametylouroniowego. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 24 godziny. Następnie mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką, przenosi do rozdzielacza i ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu. Warstwę octanową przemywa się kolejno: dwukrotnie siarczanem potasu (5%), solanką, dwukrotnie wodorowęglanem sodu (5%), solanką.
Frakcje octanowe suszy się bezwodnym siarczanem magnezu. Odparowuje się lotne rozpuszczalniki, a następnie produkt oczyszcza się metodą chromatografii kolumnowej stosując jako eluent heksan/octan etylu w stosunku objętościowym 1:1. Po zebraniu frakcji zawierających oczekiwany produkt, lotne rozpuszczalniki odparowuje się na wyparce rotacyjnej. Otrzymuje się oczekiwany produkt o masie 1,02 g (78% wagowo). Wzór sumaryczny: C27H37O6N2P. Masa cząsteczkowa: 516,57 g/mol.
Etap 4. Usunięcie grupy t-Boc z pochodnej dipeptydowej estru difenylowego kwasu n-pentylofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się pochodną dipeptydową estru difenylowego kwasu n-pentylofosfonowego i rozpuszcza ją w dichlorometanie (5 ml), a następnie dodaje się powoli 50% roztwór kwasu trójfluoroctowego w dichlorometanie (10 ml). Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 2 godziny, a jej przebieg monitoruje się metodą chromatografii cienkowarstwowej. Następnie lotne składniki mieszaniny poreakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej, uzyskany olej rozpuszcza się w toluenie i ponownie odparowuje. Czynność tą powtarza się trzykrotnie. Powstały olej o masie 1,44 g - służy jako substrat wyjściowy do otrzymania pochodnej tripeptydowej estru difenylowego kwasu n-pentylofosfonowego.
Etap 5. Reakcja syntezy pochodnej trójpeptydowej estru difenylowego kwasu n-pentylofosfonowego.
Do powstałego w etapie 4 produktu TFA*Pro-nLeup(OC6H6)2 (m=1,44 g; n=2,7 mmola) dodaje się 0,65 g (3 mmola) Boc-Val-OH. Całość zalewa się acetonitrylem (~10 ml). Odczekuje się 2 minuty i dodaje się 0,94 ml (6,8 mmola) trójetyloaminy. Po 10 minutach dodaje się 1,08 g (2,8 mmola) heksafluorofosforanu O-benzotriazol-1-yIo-N,N,N',N'-tetrametylouroniowego. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 4 godziny. Następnie mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką, przenosi do rozdzielacza i ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu. Warstwę octanową przemywa się kolejno: dwukrotnie siarczanem potasu (5%), solanką dwukrotnie wodorowęglanem sodu (5%), solanką.
Warstwę octanową zlewa się do kolby stożkowej i dodaje się siarczanu magnezu. Następnie oczyszcza się produkt metodą chromatografii kolumnowej stosując eluent octan etylu/chloroform w stosunku objętościowym 1:4. Po zebraniu frakcji zawierających oczekiwany produkt, lotne rozpuszczalniki odparowuje się na wyparce rotacyjnej. Powstały olej rozpuszcza się w dichlorometanie i odparowuje na wyparce rotacyjnej, aż do spienienia produktu, otrzymuje się oczekiwany produkt o masie
PL 215 209 B1
1,48 g (89% wagowo). Wzór sumaryczny: C32H46O7N3P. Masa cząsteczkowa: 615,702 g/mol. Widmo 31P NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 18,30 (s); 18,52 (s). Widmo 1H NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 0,75-0,91 (m, 9H, 3xCH3), 1,1-1,3 (m, 2H, CH2), 1,35 (s, 9H, 3xCH3), 1,5-2,2 (m, 9H, 4xCH2, CH),
3,45-3,7 (m, 2H, 2xCH), 4,1-4,25 (m, 1H, CH), 4,6-4,75 (m, 2H, CH2), 5,19 (dd, 1H, NH), 6,98-7,32 (m, 11H, NH, aromat.).
P r z y k ł a d 9
Sposób wytwarzania pochodnej trójpeptydowej estru difenylowego kwasu n-butylofosfonowego, przedstawionego wzorem X.
Etap 1. Otrzymywanie estru difenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-n-butylofosfonowego.
W tym celu do kolby okrągłodennej wyposażonej w mieszadło magnetyczne odważa się 1,6 g (10 mmola) karbaminianu benzylu i dodaje się 10 mmol fosforynu trifenylowego i 1 ml (11 mmola) aldehydu n-butanowego. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w 10 ml lodowatego kwasu octowego całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 90°C przez 3 godziny. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce rotacyjnej a pozostałość rozpuszcza w 100-150 ml metanolu i umieszcza się w temperaturze -20°C w celu krystalizacji produktu. Uzyskany produkt odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu. Uzyskuje się 2,45 g surowego produktu (56% wagowo) w postaci białego osadu. Masa cząsteczkowa: 439,445 g/mol. Wzór sumaryczny: C24H26NO5P
Etap 2. Otrzymywanie bromowodorku estru difenylowego kwasu n-butylofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się 1,7 g estru difenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-n-butylofosfonowego (3,8 mmola) i dodaje się 10 ml roztworu kwasu bromowodorowego (33%) w kwasie octowym. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Następnie lotne składniki mieszaniny poreakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej a uzyskany olej rozpuszcza w minimalnej ilości metanolu i dodaje się eteru dietylowego do pierwszego zmętnienia. Kolbę umieszcza się w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu, który odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na wolnym powietrzu do stałej wagi. Otrzymuje się 1,39 g (93% wagowo) bromowodorku estru difenylowego kwasu n-butylofosfonowego. Wzór sumaryczny: C16H21O3NPBr. Masa cząsteczkowa: 386,223 g/mol.
Etap 3. Reakcja syntezy pochodnej dipeptydowej estru difenylowego kwasu n-butylofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się 1,00 g (2,6 mmol) bromowodorku estru difenylowego kwasu n-butylofosfonowego i dodaje się 0,61 g Boc-Pro-OH (2,8 mmola). Całość zalewa się acetonitrylem (~10 ml). Odczekuje się 2 minuty i dodaje się 0,9 ml trójetyloaminy (6,5 mmola). Po 10 minutach dodaje się 1,03 g (2,7 mmola) heksafluorofosforanu O-benzotriazol-1-yIo-N,N,N',N'-tetrametylouroniowego. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 24 godziny. Następnie mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką, przenosi do rozdzielacza i ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu. Warstwę octanową przemywa się kolejno: dwukrotnie siarczanem potasu (5%), solanką dwukrotnie wodorowęglanem sodu (5%), solanką.
Frakcje octanowe suszy się bezwodnym siarczanem magnezu. Odparowuje się lotne rozpuszczalniki, a następnie produkt oczyszcza się metodą chromatografii kolumnowej stosując jako eluent heksan/octan etylu w stosunku objętościowym 1:1. Po zebraniu frakcji zawierających oczekiwany produkt, lotne rozpuszczalniki odparowuje się na wyparce rotacyjnej. Otrzymuje się oczekiwany produkt o masie 0,82 g (63% wagowo). Wzór sumaryczny: C26H35O6N2P. Masa cząsteczkowa: 502,544 g/mol.
Etap 4. Usunięcie grupy t-Boc z pochodnej dipeptydowej estru difenylowego kwasu n-butylofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się pochodną dipeptydową estru difenylowego kwasu n-butylofosfonowego i rozpuszcza się ją w dichlorometanie (5 ml), a następnie dodaje się powoli 50% roztwór kwasu trójfluoroctowego w dichlorometanie (10 ml). Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 2 godziny, a jej przebieg monitoruje się metodą chromatografii cienkowarstwowej. Następnie lotne składniki mieszaniny poreakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej, uzyskany olej rozpuszcza się w toluenie i ponownie odparowuje. Czynność tą powtarza się trzykrotnie. Powstały olej o masie 0,92 g - służy jako substrat wyjściowy do otrzymania pochodnej tripeptydowej estru difenylowego kwasu n-butylofosfonowego.
PL 215 209 B1
Etap 5. Reakcja syntezy pochodnej trójpeptydowej estru difenylowego kwasu n-butylofosfonowego.
P
Do powstałego w etapie 4 produktu TFA*Pro-nValP(OC6H6)2 (m=0,92 g; n=1,8 mmola) dodaje się 0,43 g (2 mmola) Boc-Val-OH. Całość zalewa się acetonitrylem (~10 ml). Odczekuje się 2 minuty i dodaje się 0,62 ml (4,5 mmola) trójetyloaminy. Po 10 minutach dodaje się 0,71 g (1,9 mmola) heksafluorofosforanu 0-benzotriazol-1-yIo-N,N,N',N'-tetrametylouroniowego. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 4 godziny. Następnie mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką, przenosi do rozdzielacza i ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu. Warstwę octanową przemywa się kolejno: dwukrotnie siarczanem potasu (5%), solanką, dwukrotnie wodorowęglanem sodu (5%), solanką.
Warstwę octanową zlewa się do kolby stożkowej i dodano siarczanu magnezu. Następnie oczyszcza się produkt metodą chromatografii kolumnowej stosując eluent octan etylu/chloroform w stosunku objętościowym 1:4. Po zebraniu frakcji zawierających oczekiwany produkt, lotne rozpuszczalniki odparowuje się na wyparce rotacyjnej. Powstały olej rozpuszcza się w dichlorometanie i odparowuje na wyparce rotacyjnej, aż do spienienia produktu, otrzymuje się oczekiwany produkt o masie 0,85 g (78% wagowo). Wzór sumaryczny: C31H44O7N3P. Masa cząsteczkowa: 601,676 g/mol. Widmo 31P NMR (roztwór w CDCl3, δ [ppm]): 18,35 (s); 18,56 (s). Widmo 1H NMR (roztwór w CDCl3, δ [ppm]): 0,75-0,91 (m, 9H, 3xCH3), 1,24-1,32 (m, 2H, CH2), 1,35 (s, 9H, 3xCH3), 1,5-2,2 (m, 7H, 3xCH2, CH),
3,45-3,7 (m, 2H, 2xCH), 4,15-4,25 (m, 1H, CHP), 4,6-4,75 (m, 2H, CH2), 5,19 (dd, 1H, NH), 7,05-7,32 (m, 11H, NH, aromat.).
P r z y k ł a d 10
Sposób wytwarzania estru di-4-tertbutylofenylowego kwasu N-(p-metoksy-walino-proliloamino) izobutylofosfonowego, przedstawionego wzorem XI
Sposób wykonania początkowych 6 etapów syntezy jest analogiczny z przykładem 4. Kolejnym etapem jest odblokowanie pochodnej trójpeptydowej estru di-4-tertbutylofenylowego kwasu izobutylofosfonowego.
Etap 7. Usunięcie grupy t-Boc z pochodnej trójpeptydowej estru di-4-tertbutylofenylowego kwasu izobutylofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się 0,65 g (0,9 mmol) pochodnej tripeptydowej estru di-4-tertbutylofenylowego kwasu izobutylofosfonowego i rozpuszcza się ją w dichlorometanie (10 ml), a następnie dodaje się powoli 50% roztwór kwasu trójfluoroctowego w dichlorometanie (10 ml). Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 2 godziny, a jej przebieg monitoruje się metodą chromatografii cienkowarstwowej. Następnie lotne składniki mieszaniny poreakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej, uzyskany olej rozpuszcza się w toluenie i ponownie odparowuje. Czynność tą powtarza się trzykrotnie. Powstały olej służy jako substrat wyjściowy do przyłączenia kwasu p-metoksybenzoesowego do pochodnej tripeptydowej estru di-4-tertbutylofenylowego kwasu izobutylofosfonowego.
Etap 8. Przyłączenie kwasu p-metoksybenzoesowego do pochodnej tripeptydowej estru di-4-tertbutylofenylowego kwasu izobutylofosfonowego.
Do powstałego w etapie 7 produktu TFA+Val-Pro-ValP(OC6H5-P-C4H9)2 (m=0,66 g; n=0,93 mmola) dodaje się 0,15 g (0,98 mmola) kwasu p-metoksybenzoesowego. Całość zalewa się acetonitrylem (~10 ml). Odczekuje się 2 minuty i dodaje się 0,28 ml (2 mmola) trójetyloaminy. Po 10 minutach dodaje się 0,36 g (0,95 mmola) heksafluorofosforanu 0-benzotriazol-1-yIo-N,N,N',N'-tetrametylouroniowego. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 4 godziny. Następnie mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką, przenosi do rozdzielacza i ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu. Warstwę octanową przemywa się kolejno: dwukrotnie siarczanem potasu (5%), solanką, dwukrotnie wodorowęglanem sodu (5%), solanką.
Frakcje octanowe suszy się bezwodnym siarczanem magnezu. Następnie oczyszcza się produkt metodą chromatografii kolumnowej stosując jako eluent heksan/octan etylu w stosunku objętościowym 3:1, następnie w stosunku 2:1 i na koniec w stosunku 1:1. Po zebraniu frakcji zawierających oczekiwany produkt, lotne rozpuszczalniki odparowuje się na wyparce rotacyjnej. Powstały olej rozpuszcza się w dichlorometanie i odparowuje na wyparce rotacyjnej, aż do spienienia produktu, otrzymuje się oczekiwany produkt o masie 0,50 g (72% wagowo). Wzór sumaryczny: C42H58O7N3P. Masa cząsteczkowa: 747,907 g/mol. Widmo 31P NMR (roztwór w CDCl3, δ [ppmj): 17,61 (s); 18,01 (s). Widmo 1H NMR (roztwór w CDCl3, δ [ppm]): 0,82-1,06 (m, 12H, 4xCH3), 1,19 (s, 18H, 6xCH3), 1,86-2,34 (m, 5H, CH2, 3xCH), 3,45-3,8 (m, 2H, CH2), 3,75 (s, 3H, CH3), 4,4-4,75 (m, 2H, CHP, CH), 6,8-7,69 (m, 14H, 2xNH, aromat).
PL 215 209 B1
P r z y k ł a d 11
Sposób wytwarzania estru di-4-(1,1,3,3-tetrametylobutylo)fenylowego kwasu N-(p-metoksywalino-proliloamino) izobutylofosfonowego przedstawionego wzorem XII.
Sposób wykonania początkowych 6 etapów syntezy jest analogiczny z przykładem 5. Kolejnym etapem jest odblokowanie pochodnej trójpeptydowej estru di-4-(1,1,3,3-tetrametylobutylo)fenylowego kwasu izobutylofosfonowego
Etap 7. Usunięcie grupy t-Boc z pochodnej trójpeptydowej estru di-4-(1,1,3,3-tetrametylobutylo)fenylowego kwasu izobutylofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się 0,8 g (0,97 mmol) pochodnej trójpeptydowej estru di-4-(1,1,3,3-tetrametylobutylo)fenylowego kwasu izobutylofosfonowego i rozpuszcza się ją w dichlorometanie (10 ml), a następnie dodaje się powoli 50% roztwór kwasu trójfluoroctowego w dichlorometanie (10 ml). Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 2 godziny, a jej przebieg monitoruje się metodą chromatografii cienkowarstwowej. Następnie lotne składniki mieszaniny poreakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej, uzyskany olej rozpuszcza się w toluenie i ponownie odparowuje. Czynność tą powtarza się trzykrotnie. Powstały olej służy jako substrat wyjściowy do przyłączenia kwasu pmetoksybenzoesowego do pochodnej tripeptydowej estru di-4-(1,1,3,3-tetrametylobutylo)fenylowego kwasu izobutylofosfonowego.
Etap 8. Przyłączenia kwasu p-metoksybenzoesowego do pochodnej tripeptydowej estru di-4-(1,1,3,3-tetrametylobutylo)fenylowego kwasu izobutylofosfonowego.
P
Do powstałego w etapie 7 produktu TFA*Val-Pro-ValP(OC6H5-4-C8H17)2 (m=0,73 g; n=0,8 mmola) dodaje się 0,14 g (0,92 mmola) kwasu p-metoksybenzoesowego. Całość zalewa się acetonitrylem (~10 ml). Odczekuje się 2 minuty i dodaje się 0,3 ml (2,1 mmola) trójetyloaminy. Po 10 minutach dodaje się 0,35 g (0,92 mmola) heksafluorofosforanu O-benzotriazol-1-yIo-N,N,N',N'-tetrametylouroniowego. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 4 godziny. Następnie mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką, przenosi do rozdzielacza i ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu. Warstwę octanową przemywa sie kolejno: dwukrotnie siarczanem potasu (5%), solanką, dwukrotnie wodorowęglanem sodu (5%), solanką.
Frakcje octanowe suszy się bezwodnym siarczanem magnezu. Następnie oczyszcza się produkt metodą chromatografii kolumnowej stosując jako eluent chloroform. Po zebraniu frakcji zawierających oczekiwany produkt, lotne rozpuszczalniki odparowuje się na wyparce rotacyjnej. Powstały olej rozpuszcza się w dichlorometanie i odparowuje na wyparce rotacyjnej, aż do spienienia produktu, otrzymując oczekiwany produkt o masie 0,50 g (66% wagowo). Wzór sumaryczny: C50H74O7N3P. Masa cząsteczkowa: 860,121 g/mol. Widmo 31P NMR (roztwór w CDCl3, δ [ppm]): 17,45 (s); 17,91 (s). Widmo 1H NMR (roztwór w CDCl3, δ [ppm]): 0,61 (s, 18H, 3xCH3), 0,80-1,22 (m, 12H, 4xCH3), 1,24 (s, 12H, 4xCH3), 1,60 (s, 4H, 2xCH2), 1,7-2,4 (m, H, 2xCH2, 2xCH), 3,45-3,8 (m, 2H, CH2), 3,75 (s, 3H, CH3), 4,45-4,74 (m, 2H, CHP, CH), 6,64-7,71 (m, 14H, 2xNH, aromat.).
P r z y k ł a d 12
Sposób wytwarzania estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu N-(p-metoksy-walinoproliloamino) izobutylofosfonowego, przedstawionego wzorem XIII.
Etap 1. Otrzymywanie fosforynu trój-4-metylomerkaptofenylowego.
W tym celu do kolby okrągłodennej wyposażonej w mieszadło magnetyczne dodaje się 4,4 g (32 mmola) 4-metylomerkaptofenolu i 20 ml acetonitrylu. Po rozpuszczeniu całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 90°C przez 2 minuty. Następnie do mieszaniny reakcyjnej dodaje się 1 ml (11 mmola) chlorku fosforu (III). Całość ogrzewa się przez trzy godziny w temperaturze wrzenia. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce obrotowej. Powstały surowy produkt w postaci oleju wykorzystuje się bezpośrednio, bez oczyszczania do reakcji syntezy estru di 4-metylomerkaptofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-izopropylometano-fosfonowego.
Etap 2. Otrzymywanie estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-izobutylofosfonowego.
W tym celu do kolby okrągłodennej - zawierającej fosforyn trój-4-metylomerkaptofenylowy powstały bezpośrednio w etapie 1 - wyposażonej w mieszadło magnetyczne odważa się 1,6 g (10 mmola) karbaminianu benzylu i 1 ml (11 mmola) aldehydu tertbutylowego. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w 10 ml lodowatego kwasu octowego całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 90°C przez 3 godziny. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce rotacyjnej a pozostałość rozpuszcza w 100-150 ml metanolu i umieszcza się
PL 215 209 B1 w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu. Uzyskany produkt odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu. Uzyskuje się 2,65 g surowego produktu (50% wagowo) w postaci białego osadu. Masa cząsteczkowa: 531,619 g/mol. Wzór sumaryczny: C26H30NO5PS2
Etap 3. Otrzymywanie bromowodorku estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu izobutylofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się 2,00 g estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-izobutylofosfonowego (3,7 mmola) i dodaje się 5,00 ml roztworu kwasu bromowodorowego (33%) w kwasie octowym. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Następnie lotne składniki mieszaniny poreakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej a uzyskany olej rozpuszcza w minimalnej ilości metanolu i dodaje się eteru dietylowego do pierwszego zmętnienia. Kolbę umieszcza się w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu, który odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na wolnym powietrzu do stałej wagi. Otrzymuje się 1,52 g (86%wagowo) bromowodorku estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu izobutylofosfonowego. Wzór sumaryczny: C18H25O3NPS2Br. Masa cząsteczkowa: 478,40 g/mol.
Etap 4. Reakcja syntezy pochodnej dipeptydowej estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu izobutylofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się 0,48 g (1 mmol) bromowodorku estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu izobutylofosfonowego i dodaje się 0,23 g Boc-Pro-OH (1,06 mmola). Całość zalewa się acetonitrylem (5-10 ml). Odczekuje się 2 minuty i dodaje się 0,28 ml trójetyloaminy (2,04 mmola). Po 10 minutach dodaje się 0,40 g (1,05 mmola) heksafluorofosforanu O-benzotriazol-1-yIo-N,N,N',N'-tetrametylouroniowego. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 24 godziny. Następnie mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką przenosi do rozdzielacza i ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu. Warstwę octanową przemywa się kolejno: dwukrotnie siarczanem potasu (5%), solanką dwukrotnie wodorowęglanem sodu (5%), solanką.
Frakcje octanowe suszy się bezwodnym siarczanem magnezu. Odparowuje się lotne rozpuszczalniki, a następnie produkt oczyszcza metodą chromatografii kolumnowej stosując jako eluent chloroform/octan etylu w stosunku objętościowym 4:1. Po zebraniu frakcji zawierających oczekiwany produkt, lotne rozpuszczalniki odparowuje się na wyparce rotacyjnej. Otrzymuje sie oczekiwany produkt o masie 0,56 g (99% wagowo). Wzór sumaryczny: C28H39O6N2PS2. Masa cząsteczkowa: 594,717 g/mol.
Etap 5. Usunięcie grupy t-Boc z pochodnej dipeptydowej estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu izobutylofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się pochodną dipeptydową estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu izobutylofosfonowego i rozpuszcza się ją w dichlorometanie (10 ml), a następnie dodaje się powoli 50% roztwór kwasu trójfluoroctowego w dichlorometanie (5 ml). Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 2 godziny, a jej przebieg monitoruje się metodą chromatografii cienkowarstwowej. Następnie lotne składniki mieszaniny poreakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej, uzyskany olej rozpuszcza się w toluenie i ponownie odparowuje. Czynność tą powtarza się trzykrotnie. Powstały olej o masie 0,58 g - służy jako substrat wyjściowy do otrzymania pochodnej tripeptydowej estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu izobutylofosfonowego.
Etap 6. Reakcja syntezy pochodnej trójpeptydowej estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu izobutylofosfonowego.
Do powstałego w etapie V produktu TFA*Pro-ValP(OC6H5-4-SCH3)2 (m=0,58 g; n=0,95 mmola) dodaje się 0,21 g (0,96 mmola) Boc-Val-OH. Całość zalewa się acetonitrylem (~5 ml). Odczekuje się 2 minuty i dodaje się 0,28 ml (2,02 mmola) trójetyloaminy. Po 10 minutach dodaje się 0,40 g (1,05 mmola) heksafluorofosforanu O-benzotriazol-1-yIo-N,N,N',N'-tetrametylouroniowego. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 4 godziny. Następnie mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką, przenosi do rozdzielacza i ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu. Warstwę octanową przemywa się kolejno: dwukrotnie siarczanem potasu (5%), solanką, dwukrotnie wodorowęglanem sodu (5%), solanką.
Warstwę octanową zlewa się do kolby stożkowej i dodaje się siarczanu magnezu. Następnie oczyszcza się produkt metodą chromatografii kolumnowej stosując eluent octan etylu/chloroform w stosunku objętościowym 1:4. Po zebraniu frakcji zawierających oczekiwany produkt, lotne rozpuszczalniki odparowuje się na wyparce rotacyjnej. Powstały olej rozpuszcza się w dichlorometanie i odparowuje na wyparce rotacyjnej, aż do spienienia produktu, otrzymuje się oczekiwany produkt o masie 0,42 g (63% wagowo). Wzór sumaryczny: C33H48O7N3PS2. Masa cząsteczkowa: 693,849 g/mol.
PL 215 209 B1
Etap 7. Usunięcie grupy t-Boc z pochodnej trójpeptydowej estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu izobutylofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się 0,8 g (1,1 mmol) pochodnej trójpeptydowej estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu izobutylofosfonowego i rozpuszcza się ją w dichlorometanie (10 ml), a następnie dodaje się powoli 50% roztwór kwasu trójfluoroctowego w dichlorometanie (10 ml). Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 2 godziny, a jej przebieg monitoruje się metodą chromatografii cienkowarstwowej. Następnie lotne składniki mieszaniny poreakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej, uzyskany olej rozpuszcza się w toluenie i ponownie odparowuje. Czynność tą powtarza się trzykrotnie. Powstały olej służy jako substrat wyjściowy do przyłączenia kwasu p-metoksybenzoesowego do pochodnej tripeptydowej estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu izobutylofosfonowego.
Etap 8. Przyłączenia kwasu p-metoksybenzoesowego do pochodnej tripeptydowej estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu izobutylofosfonowego.
Do powstałego w etapie 7 produktu TFA*Val-Pro-ValP(OC6H5-4-SCH3)2 (m=0,47 g; n=0,68 mmola) dodaje się 0,11 g (0,72 mmola) kwasu p-metoksybenzoesowego. Całość zalewa się acetonitrylem (~10 ml). Odczekuje się 2 minuty i dodaje się 0,31 ml (2 mmola) trójetyloaminy. Po 10 minutach dodaje się 0,27 g (0,71 mmola) heksafluorofosforanu O-benzotriazol-1-yIo-N,N,N',N'-tetrametylouroniowego. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 4 godziny. Następnie mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką, przenosi do rozdzielacza i ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu. Warstwę octanową przemywa sie kolejno: dwukrotnie siarczanem potasu (5%), solanką dwukrotnie wodorowęglanem sodu (5%), solanką.
Frakcje octanowe suszy się bezwodnym siarczanem magnezu. Następnie oczyszcza się produkt metodą chromatografii kolumnowej stosując jako eluent heksan/octan etylu w stosunku objętościowym 1:1, następnie 1:2, potem 1:3 i na koniec sam octan etylu. Po zebraniu frakcji zawierających oczekiwany produkt, lotne rozpuszczalniki odparowuje się na wyparce rotacyjnej. Powstały olej rozpuszcza się w dichlorometanie i odparowuje się na wyparce rotacyjnej, aż do spienienia produktu, otrzymuje się oczekiwany produkt o masie 0,3 g (61% wagowo). Wzór sumaryczny: C36H46O7N3PS2.
Masa cząsteczkowa: 725,894 g/mol. Widmo 31P NMR (roztwór w CDCl3, δ [ppm]): 18,11 (s); 18,50 (s). Widmo 1H NMR (roztwór w CDCh, δ [ppm]): 0,91-1,14 (m, 12H, 4xCH3), 1,75-2,25 (m, 5H, 3xCH, CH2), 2,45 (s, 6H, 2xCH3), 3,5-3,75 (m, 2H, CH2), 3,84 (s, 3H, CH3), 4,0-4,2 (m, H, CH), 4,53 (d, H, NH), 4,68-4,83 (m, 2H, CH2), 6,75-7,80 (m, 13H, NH, aromat.).
Aktywność inhibitorowa otrzymanych w przykładach I-XII pochodnych wobec ludzkiej elastazy netrofilowej.
Aktywność biologiczną estrów difenylowych fosfonowych analogów waliny, norwaliny, norleucyny i kwasu 1-aminopropionowego(Abu), a także ich peptydowych pochodnych przebadano pod kątem zdolności do hamowania proteolitycznej aktywności ludzkiej elastazy neutrofilowej. Wszystkie badania sporządzono na czytniku mikropłytek Molecular Devices Spectramax Gemini XP. Badania rozpoczęto od wyznaczania Km dla substratu w warunkach prowadzonych testów (temperatura 37°C, długość fali ekstynkcji 350 nm i emisji 460 nm, czas pomiaru 10 minut). Pomiaru dokonano przy różnych stężeniach substratu w zakresie od 10 μΜ do 500 μΜ przy stałym stężeniu enzymu 125 ng/ml (~5 nM). Wartość Km wynosiła 125 μΜ w podanych warunkach. Pomiary aktywności inhibitorowej wykonano przy różnych stężeniach inhibitorów w zakresie od 12,5 nM do 2000 nM. W badaniach wykorzystano handlowo dostępny substrat N-Suc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC. Końcowe stężenie substratu wynosiło 60 μΜ. Do każdej studzienki odmierzono 100 μΙ enzymu, 50 μl substratu i 50 μl inhibitora. Uzyskane wyniki przedstawiono w tabeli 1. Wartość IC50 jest to stężenie inhibitora potrzebne do zahamowania aktywności enzymu o 50% po 10 minutach.
PL 215 209 B1
T a b e l a 1
Wyniki badania aktywności inhibitorowej estrów difenylowych analogów waliny, norwaliny, norleucyny i kwasu 1-aminopropionowego (Abu) wobec ludzkiej elastazy neutrofilowej
Wzór związku Wartość IC5o
C·*' 0-. 18 nM
o— VM ,ο^ζΐ^* Λ<χ· □·— 100 nM
-,Χ/θΛ ''f'OA 40 nM
Uoc tW - Pra - Vn'._ 0 1,43 μΜ
Par . V«l - Pm - ^tχ ^Ό^λ· 6,88 μΜ
Bot - V«|. Γ'ίυ - i,i.ni^ t/K/*! k/*·'' 0,58 μΜ
fiu - Val - Prt, - nVnl oA^A''' 19 nM
Itot - Vai - Pro nteu^ 0“*^^^ 4,2 μΜ
Boc - Vtd - Pm - n Val^ '· Α^| ΧΌ 1,76 μΜ
pA„,„..,,,.-Ο-Y 6,2 μΜ
ryt,,„ ^0¾% '” ”X“-Op< 27,5 μΜ
^Υ^'' ν.,ι.ί-Γ. νΛΐ.Λ /AA X -,x~> 1>6- 8,8 nM

Claims (5)

1. Nowe pochodne diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych o wzorze ogólnym 1, w którym W oznacza grupę benzyloksykarbonylową (Cbz) lub dipeptyd składający się z proliny i waliny, w którym grupa aminowa waliny jest zablokowana przez grupę t-butyloksykarbonylową (Boc) lub 4-metoksybenozoilową, R oznacza podstawnik analogiczny do łańcucha bocznego waliny, norwaliny, norleucyny lub kwasu 2-aminobutanowego (Abu). X1,X2,X4 i X5 oznaczają wodór, natomiast X3 oznacza wodór lub związek wybrany z grupy obejmującej; merkaptometyl (S-metyl) 1,1,3,3-tetrametylobutyl, karboksymetyl lub tertbutyl.
2. Sposób wytwarzania pochodnych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych o wzorze ogólnym 1, w którym W oznacza Cbz, R oznacza łańcuch boczny waliny, norwaliny i kwasu 2-aminobutylowego, X1,X2,X4 i X5 oznaczają wodór, natomiast X3 oznacza karboksymetyl, znamienny tym, że fosforyn triarlowy, otrzymany z fenolu tri-p-karboksymetylowego oraz chlorku fosforu (III) w acetonitrylu, poddaje się amidoalkilowaniu przy użyciu karbaminianu, fosforynu tri-p-karboksymetylu, oraz aldehydu, takiego jak aldehyd n-butylowy, aldehyd izobutylowy i aldehyd propylowy w lodowatym kwasie octowym jako rozpuszczalniku.
3. Sposób wytwarzania pochodnych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych o wzorze ogólnym 1, w którym W oznacza dipeptyd składający się z proliny i waliny, w którym grupa aminowa waliny jest zablokowana przez grupę t-butyloksykarbonylową (Boc), R oznacza podstawnik analogiczny do łańcucha bocznego waliny, norwaliny, norleucyny, X1,X2,X4 i X5 oznaczają wodór, natomiast X3 oznacza wodór lub związek wybrany z grupy obejmującej; merkaptometyl (S-metyl) 1,1,3,3-tetrametylobutyl lub tertbutyl, znamienny tym, że fosforyn triarlowy, poddaje się amidoalkilowaniu przy użyciu karbaminianu, fosforynu tri-p-merkaptometylu, fosforynu tri-p-1,1,3,3-tetrametylobutylu, fosforynu tri-p-tertbutylu lub fosforynu tri-fenylowego oraz aldehydu, takiego jak aldehyd n-butylowy, aldehyd izobutylowy i aldehyd n-pentylowy w lodowatym kwasie octowym jako rozpuszczalniku, po czym prowadzi się syntezę bromowodorków estrów difenylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych, w której odblokowuje się ochronną grupę benzyloksykarbonylową (Cbz) przy użyciu roztworu kwasu bromowodorowego w kwasie octowym, w kolejnym etapie substrat w postaci bromowodorku estru difenylowego kwasu 1-aminoalkanofosfonowego poddaje się reakcji z proliną z zablokowaną grupą α-aminową w obecności trójetyloaminy, heksafluorofosforanu O-benzotriazol-1-yIo-W,W,W,W-tetrametylouroniowego (HBTU) jako odczynnika sprzęgającego i acetonitrylu jako rozpuszczalnika, z uzyskanych fosfonodipeptydów, zawierających w swej strukturze resztę estru difenylowego fosfonowego analogu waliny, norwaliny, norleucyny lub z zablokowaną grupą α-aminową, usuwa się grupę blokującą terc-butylową (t-Boc), przy użyciu roztworu kwasu trójfluorooctowego (TFA) i dichlorometanu (CH2Cl2), użytych w stosunku objętościowym 1:1, w kolejnym etapie substrat w postaci odblokowanego dipeptydu estru difenylowego kwasu 1-aminoalkanofosfonowego, poddaje się reakcji z waliną z zablokowaną grupą α-aminową w obecności trójetyloaminy, heksafluorofosforanu O-benzotriazol-l-yIo-N,N,N',N'-tetrametylouroniowego (HBTU) jako odczynnika sprzęgającego i acetonitrylu jako rozpuszczalnika.
4. Sposób wytwarzania pochodnych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych o wzorze ogólnym 1, w którym W oznacza dipeptyd składający się z proliny i waliny, w którym grupa aminowa waliny jest zablokowana przez grupę 4-metoksybenozoilową, R oznacza podstawnik analogiczny do łańcucha bocznego waliny, X1,X2,X4 i X5 oznaczają wodór, natomiast X3 oznacza związek wybrany z grupy obejmującej; merkaptometyl (S-metyl), 1,1,3,3-tetrametylobutyl lub tertbutyl, znamienny tym, że fosforyn triarlowy, poddaje się amidoalkilowaniu przy użyciu karbaminianu, fosforynu tri-p-merkaptometylu, fosforynu tri-p-1,1,3,3-tetrametylobutylu, fosforynu tri-p-tertbutylu lub fosforynu tri-fenylowego oraz aldehydu tert-butylowego w lodowatym kwasie octowym jako rozpuszczalniku, po czym prowadzi się syntezę bromowodorków estrów difenylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych, w której odblokowuje się ochronną grupę benzyloksykarbonylową (Cbz) przy użyciu roztworu kwasu bromowodorowego w kwasie octowym, a w kolejnym bromowodorek estru difenylowego kwasu 1-aminoalkanofosfonowego poddaje się reakcji z proliną z zablokowaną grupą α-aminową w obecności trójetyloaminy, heksafluorofosforanu 0-benzotriazol-1-yIo-N,N,N',N'-tetrametylouroniowego (HBTU) jako odczynnika sprzęgającego i acetonitrylu jako rozpuszczalnika, w następnym etapie z otrzymanego fosfonodipeptydu, usuwa się grupę blokującą terc-butylową (t-Boc), przy użyciu roztworu kwasu trójfluorooctowego (TFA) i dichlorometanu (CH2Cl2), użytych w stosunku objętościowym 1:1 po czym odblokowany dipeptyd estru difenylowego kwasu 1-aminoalkanofosfonowego poddaje się reakcji
PL 215 209 B1 z waliną z zablokowaną grupą α-aminową w obecności trójetyloaminy, heksafluorofosforanu O-benzotriazol-1-yIo-N,N,N',N'-tetrametylouroniowego (HBTU) jako odczynnika sprzęgającego i acetonitrylu jako rozpuszczalnika.
5. Zastosowanie pochodnych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych o wzorze ogólnym 1, w którym W oznacza grupę benzyloksykarbonylową (Cbz) lub dipeptyd składający się z proliny i waliny, w którym grupa aminowa waliny jest zablokowana przez grupę t-butyloksykarbonylową (Boc) lub 4-metoksybenozoilową, R oznacza podstawnik analogiczny do łańcucha bocznego waliny, norwaliny, norleucyny lub kwasu 2-aminobutanowego (Abu). X1 ,X2, X4 i X5 oznaczają wodór, natomiast X3 oznacza wodór lub związek wybrany z grupy obejmującej; merkaptometyl (S-metyl) 1,1,3,3-tetrametylobutyl, karboksymetyl lub tertbutyl, do wytwarzania nieodwracalnych inhibitorów LNE w preparatach przeciwzapalnych, w leczeniu arteriosklerozy, powikłań reumatycznych oraz nowych leków antyrakowych, przydatnych w leczeniu nowotworów piersi i płuc.
Rysunki w
N
Wzór I
W=Cbz,Y-Val-Pro
Cbz= benzyloksykarbonylowa grupa
Val= walina
Pro= prolina
Y= grupa t-butyloksykarbonylowa (Boc) lub grupa p-metoksybenzoilowa
PL385906A 2008-08-18 2008-08-18 Nowe pochodne diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych, sposób wytwarzania pochodnych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych oraz zastosowanie pochodnych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych PL215209B1 (pl)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL385906A PL215209B1 (pl) 2008-08-18 2008-08-18 Nowe pochodne diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych, sposób wytwarzania pochodnych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych oraz zastosowanie pochodnych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL385906A PL215209B1 (pl) 2008-08-18 2008-08-18 Nowe pochodne diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych, sposób wytwarzania pochodnych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych oraz zastosowanie pochodnych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL385906A1 PL385906A1 (pl) 2010-03-01
PL215209B1 true PL215209B1 (pl) 2013-11-29

Family

ID=43012814

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL385906A PL215209B1 (pl) 2008-08-18 2008-08-18 Nowe pochodne diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych, sposób wytwarzania pochodnych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych oraz zastosowanie pochodnych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL215209B1 (pl)

Also Published As

Publication number Publication date
PL385906A1 (pl) 2010-03-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5585486A (en) Peptidic ketones as interleukin-1β-converting enzyme inhibitors
US6492402B1 (en) Thrombin inhibitors
US5858979A (en) Inhibitors and substrates of thrombin
RU2075481C1 (ru) Производные борсодержащих пептидов и фармацевтическая композиция, обладающая ингибирующей активностью к трипсинподобным сериновым протеазам
US5288707A (en) Borolysine peptidomimetics
Holladay et al. Synthetic and enzyme inhibition studies of pepstatin analogs containing hydroxyethylene and ketomethylene dipeptide isosteres
EP0511940A2 (en) Phosphono/biaryl substituted dipeptide derivatives
ES2298837T3 (es) Derivados del acido fosfinico, inhibidores de beta-secretasa para el tratamiento de la enfermedad de alzheimer.
JPS61189298A (ja) 新規オリゴペプチジルアルギニノール誘導体
AU708929B2 (en) O-malonyltyrosyl compounds, O-malonyltyrosyl compound- containing peptides, and uses thereof
WO2012140500A1 (en) Selective cysteine protease inhibitors and uses thereof
US12084476B2 (en) Tailored cyclodepsipeptides as potent non-covalent serine protease inhibitors
Gunatilleke et al. Tuning the Au (I)-mediated inhibition of cathepsin B through ligand substitutions
US5686419A (en) Basic α-aminoalkylphosphonate derivatives
US20040142851A1 (en) Hydrazinopeptoids and their uses for treating cancers
PL215209B1 (pl) Nowe pochodne diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych, sposób wytwarzania pochodnych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych oraz zastosowanie pochodnych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych
Melo et al. Synthesis and hydrolysis by cathepsin B of fluorogenic substrates with the general structure benzoyl-X-ARG-MCA containing non-natural basic amino acids at position X
CA2070983A1 (en) Cyclic renin inhibitors
PL227742B1 (pl) Pochodne estrów diarylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych, sposób wytwarzania pochodnych estrów diarylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych oraz ich zastosowanie
PL218840B1 (pl) Pochodne diestrów 4-metylotiofenylowych kwasów 1-amino-2-metylo-propanofosfonowych, sposób wytwarzania pochodnych diestrów 4-metylotiofenylowych kwasów 1-amino-2-metylo-propanofosfonowych oraz zastosowanie pochodnych diestrów 4-metylotiofenylowych kwasów 1-amino-2-metylo-propanofosfonowych
US5648338A (en) Inhibitors and substrates of thrombin
US6482797B1 (en) N-terminal site selective inhibitors of human angiotensin conversion enzyme (ACE)
PL215832B1 (pl) Diestry arylowe kwasów 1-aminoalkanofosfonowych i ich peptydowe pochodne oraz sposób ich wytwarzania i zastosowanie
RS50072B (sr) S-nitrozotioli kao agensi za tretman cirkulatornih poremećaja
Haremza et al. Es Sbai