PL238289B1 - Sposób wytwarzania 3-O-(β-D-4’-O-metyloglukopiranozylo)- 17-etynyloestr-17β-olu - Google Patents

Sposób wytwarzania 3-O-(β-D-4’-O-metyloglukopiranozylo)- 17-etynyloestr-17β-olu Download PDF

Info

Publication number
PL238289B1
PL238289B1 PL426021A PL42602118A PL238289B1 PL 238289 B1 PL238289 B1 PL 238289B1 PL 426021 A PL426021 A PL 426021A PL 42602118 A PL42602118 A PL 42602118A PL 238289 B1 PL238289 B1 PL 238289B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
methylglucopyranosyl
hours
carried out
ethinylestr
organic solvent
Prior art date
Application number
PL426021A
Other languages
English (en)
Other versions
PL426021A1 (pl
Inventor
Ewa Kozłowska
Iga Franczak
Edyta Kostrzewa-Susłow
Tomasz Janeczko
Original Assignee
Wrocław University Of Environmental And Life Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Wrocław University Of Environmental And Life Sciences filed Critical Wrocław University Of Environmental And Life Sciences
Priority to PL426021A priority Critical patent/PL238289B1/pl
Publication of PL426021A1 publication Critical patent/PL426021A1/pl
Publication of PL238289B1 publication Critical patent/PL238289B1/pl

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/44Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
    • C12P19/56Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen atom of the saccharide radical directly bound to a condensed ring system having three or more carbocyclic rings, e.g. daunomycin, adriamycin
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07JSTEROIDS
    • C07J17/00Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen, having an oxygen-containing hetero ring not condensed with the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton
    • C07J17/005Glycosides
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P33/00Preparation of steroids
    • C12P33/20Preparation of steroids containing heterocyclic rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Zgłoszenie dotyczy 3-O-(ß-D-4'-O-metyloglukopiranozylo)-17-etynyloestr-17ß-olu i sposobu wytwarzania 3-O-(ß-D-4'-O-metyloglukopiranozylo)-17-etynyloestr-17ß-olu. Zgodnie z rozwiązaniem w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w komórkach szczepu Isaria fumosorosea KCh J2, następuje przyłączenie ß-D-4'-O-metyloglukopiranozy do grupy hydroksylowej substratu. Uzyskany w ten sposób produkt wydziela się z wodnej kultury mikroorganizmu, znanym sposobem, przez ekstrakcję rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą (chloroform).

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania 3-O-(β-D-4'-O-metyloglukopiranozylo)-17-etynyloestr-17e-olu.
Metoda według wynalazku może znaleźć zastosowanie w przemyśle farmaceutycznym do wytwarzania leków antykoncepcyjnych.
17-etynyloestr-17β-ol jest składnikiem większości leków antykoncepcyjnych stosowanych doustnie (Schramm G, Henske R. Hormonal contraceptive containing a combination of ethinyloestradiol and Chlormadinone acetate. Patent No.: US 9,107,840 B2; Date of Patent: Aug. 18, 2015). Wiele naturalnych związków występuje w formie związanej z jednostką cukrową, co ma istotny wpływ na ich stabilność i rozpuszczalność, a często także wpływa na ich biodostępność i aktywność biologiczną (Wang X. Structure, mechanism and engineering of plant natural product glycosyltransferases. FEBS Lett. 2009; 583(20):3303-9;p Wang L, Han W, Xie C, Hou J, Fang Q, Gu J, et al. Comparing the acceptor promiscuity of a Rosa hybrida glucosyltransferase RhGT1 and an engineered microbial glucosyltransferase OleDPSA toward a small flavonoid library. Carbohydr Res. 2013; 368:73-7; Pandey RP, Gurung RB, Parajuli P, Koirala N, Tuoi LT, Sohng JK. Assessing acceptor substrate promiscuity of YjiC-mediated glycosylation toward flavonoids. Carbohydr Res. 2014;393:26-31).
3-O-(β-D-4'-O-metyloglukopiranozylo)-17-etynyloestr-17β-ol znany jest ze zgłoszenia patentowego DE2326084.
Z opisu zgłoszenia wynalazku P.416996 znany jest szczep Isaria fumosorosea KCh J2.
Istota wynalazku polega na tym, że do podłoża odpowiedniego dla grzybów strzępkowych wprowadza się szczep Isaria fumosorosea KCh J2. Po upływie co najmniej 48 godzin do hodowli wprowadza się substrat, którym jest 17-etynyloestr-17e-ol o wzorze 1, rozpuszczony w rozpuszczalniku organicznym mieszającym się z wodą. Transformację prowadzi się w temperaturze od 20 do 30 stopni Celsjusza, przy ciągłym wstrząsaniu, co najmniej 9 godzin. Kolejno produkt ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą i oczyszcza chromatograficznie.
W wyniku regioselektywnego przyłączenia e-D-4'-O-metyloglukopiranozy (wytworzonej przez układ enzymatyczny biokatalizatora) do grupy hydroksylowej obecnej przy węglu C-3 w cząstce substratu, otrzymuje się 3-O-(e-D-4'-O-metyloglukopiranozylo)-17-etynyloestr-17e-ol, a reakcję prowadzi się w wodnej kulturze szczepu Isaria fumosorosea KCh J2.
Korzystnie jest, gdy stosunek masy dodawanego substratu do objętości hodowli wynosi 0,2 g : 1 L.
Korzystnie także jest, gdy proces prowadzi się w temperaturze 25 stopni Celsjusza.
Korzystnie jest również, gdy transformację prowadzi się przez 72 godziny.
Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w komórkach szczepu Isaria fumosorosea KCh J2, następuje przyłączenie β-D-4'-O-metyloglukopiranozy do grupy hydroksylowej substratu. Uzyskany w ten sposób produkt wydziela się z wodnej k ultury mikroorganizmu, znanym sposobem, przez ekstrakcję rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą (octan etylu). Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie 3-O-(β-D-4'-O-metyloglukopiranozylo)-17-etynyloestr-17e-olu, z wydajnością izolowaną na poziomie 30% (konwersja według NMR = 80%), w temperaturze pokojowej i przy pH naturalnym dla szczepu.
Wynalazek jest bliżej objaśniony na przykładzie wykonania.
Przykład
Do kolby Erlenmajera o pojemności 2000 cm3, w której znajduje się 500 cm3 sterylnej pożywki zawierającej 5 g aminobaku i 15 g glukozy, wprowadza się szczep Isaria fumosorosea KCh J2. Po 72 godzinach jego wzrostu dodaje się 100 mg 17-etynyloestr-17e-olu o wzorze 1, rozpuszczonego w 1 cm3 DMSO. Transformację prowadzi się w 25 stopniach Celsjusza przy ciągłym wstrząsaniu przez 24 godziny. Następnie mieszaninę poreakcyjną ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu, osusza bezwodnym siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymany ekstrakt oczyszcza się chromatograficznie, używając jako eluentu mieszaniny chloroform i metanol 9 : 1.
Na tej drodze otrzymuje się 40 mg 3-O-(e-D-4'-O-metyloglukopiranozylo)-17-etynyloestr-17e-olu, (konwersja według NMR = 80%).
Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi:
1H NMR (600 MHz) (ppm) (DMSO) δ: 0.75 (s, 3H, 18-H); 1.22-1.35 (m, 4H, 7-Ha, 8-H, 11-Ηβ, 15-Ηβ); 1.59 (dd, 1H, J = 10.9, 7.7 Hz, 14-H); 1.62-1.68 (m, 2H, 12-Ha, 15-Ha); 1.75-1.82 (m, 2H, 7-Ηβ, 12-Ηβ); 1.86 (td, 1H, J = 13.1, 3.5 Hz, 16-Ha); 2.06-2.13 (m, 2H, 9-H, 16-Ηβ); 2.32 (dq, 1H, J = 13.5, 3.0 Hz, 11-Ha); 2.72-2.78 (m, 2H, 6-Ha, 6-Ηβ); 3.01 (t, 1H, J = 9.3 Hz, 4-H'); 3.20 (ddd, 1H,
PL 238 289 B1
J = 8.8, 8.0, 5.2 Hz, 2-H'); 3.30 (ddd, 1H J = 9.6, 4.9, 2.0 Hz, 5-H'); 3.36-3.39 (m, 1H, 3-H'); 3.44 (s, 3H, -OCH3); 3.45-3.51 (m, 1H, one of 6-H'); 3.61 (ddd, 1H, J = 11.9, 4.7, 1.6 Hz, one of 6-H'); 4.68 (t, 1H, J = 5.7 Hz, C'6-OH); 4.78 (d, 1H, J = 6.7 Hz, 1-H'); 5.21 (d, 1H, J = 5.4 Hz, C'3-OH); 5.32 (d, 1H, J = 5.3 Hz, C'2-OH); 5.34 (s, 1H, C17-OH); 6.69 (d, 1H, J = 2.6 Hz, 4-H); 6.77 (dd, 1H, J = 8.6, 2.6 Hz, 2-H); 7.16 (d, 1H, J = 8.7 Hz, 1-H).
13C NMR (151 MHz) (ppm) (DMSO) δ: 126.18 (C-1); 113.83 (C-2); 155.24 (C-3); 116.30 (C-4); 137.44 (C-5); 29.35 (C-6); 26.95 (C-7); 39.12 (C-8); 43.45 (C-9); 133.52 (C-10); 26.12 (C-11 ); 32.65 (C-12); 46.74 (C-13); 49.09 (C-14); 22.53 (C-15); 38.85 (C-16); 78.23 (C-17); 12.79 (C-18); 89.01 (C-20); 75.11 (C-21); 100.40 (C-1'); 73.54 (C-2'); 76.39 (C-3'); 79.14 (C-4'); 75.63 (C-5'); 60.36 (C-6'); 59.71 (-OCH3).

Claims (4)

1. Sposób wytwarzania 3-O-(e-D-4'-O-metyloglukopiranozylo)-17-etynyloestr-17e-olu, znamienny tym, że do podłoża odpowiedniego dla grzybów strzępkowych wprowadza się szczep Isaria fumosorosea KCh J2, następnie po upływie co najmniej 48 godzin do hodowli wprowadza się substrat, którym jest 17-etynyloestr-17e-ol o wzorze 1, rozpuszczony w rozpuszczalniku organicznym mieszającym się z wodą, transformację prowadzi się w temperaturze od 20 do 30 stopni Celsjusza, przy ciągłym wstrząsaniu, co najwyżej 12 godzin, po czym produkt ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą i oczyszcza chromatograficznie.
2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że stosunek masy dodawanego substratu do objętości hodowli wynosi 0,1 g : 1 L.
3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że proces prowadzi się w temperaturze 25 stopni Celsjusza.
4. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że transformację prowadzi się przez 24 godziny.
PL426021A 2018-06-22 2018-06-22 Sposób wytwarzania 3-O-(β-D-4’-O-metyloglukopiranozylo)- 17-etynyloestr-17β-olu PL238289B1 (pl)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL426021A PL238289B1 (pl) 2018-06-22 2018-06-22 Sposób wytwarzania 3-O-(β-D-4’-O-metyloglukopiranozylo)- 17-etynyloestr-17β-olu

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL426021A PL238289B1 (pl) 2018-06-22 2018-06-22 Sposób wytwarzania 3-O-(β-D-4’-O-metyloglukopiranozylo)- 17-etynyloestr-17β-olu

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL426021A1 PL426021A1 (pl) 2020-01-02
PL238289B1 true PL238289B1 (pl) 2021-08-02

Family

ID=69160753

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL426021A PL238289B1 (pl) 2018-06-22 2018-06-22 Sposób wytwarzania 3-O-(β-D-4’-O-metyloglukopiranozylo)- 17-etynyloestr-17β-olu

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL238289B1 (pl)

Also Published As

Publication number Publication date
PL426021A1 (pl) 2020-01-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL238289B1 (pl) Sposób wytwarzania 3-O-(β-D-4’-O-metyloglukopiranozylo)- 17-etynyloestr-17β-olu
PL234610B1 (pl) Sposób wytwarzania 7-O-β-D-4"-metoksyglukopiranozyloflawanonu
PL248131B1 (pl) Sposób wytwarzania 2’-metylo-3’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu
PL240095B1 (pl) 4’-O-β-D-(4”-O-Metyloglukopiranozylo)-2’,5’-dimetoksyflawon i sposób wytwarzania 4’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-2’,5’- dimetoksyflawonu
PL238785B1 (pl) Sposób wytwarzania 4’-hydroksy-6-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- flawanonu
PL248806B1 (pl) Sposób wytwarzania 3-chloro-2’-hydroksy-5’-O-β-D-(4’’-Ometyloglukopiranozylo)- dihydrochalkonu
PL240957B1 (pl) Sposób wytwarzania 2’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu
PL239566B1 (pl) Sposób wytwarzania 3’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu
PL240096B1 (pl) Sposób wytwarzania 4’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- 2’,5’-dimetoksyflawonu
PL241672B1 (pl) Sposób wytwarzania 3’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu
PL238789B1 (pl) Sposób wytwarzania 4’-hydroksy-5,7-dimetoksyflawonu
PL240097B1 (pl) 8-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-2’-metoksyflawon i sposób wytwarzania 8-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-2’- metoksyflawonu
PL240947B1 (pl) Sposób wytwarzania 5’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- 2’-metoksyflawonu
PL239565B1 (pl) 3’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawon i sposób wytwarzania 3’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawonu
PL238788B1 (pl) Sposób wytwarzania 4’-hydroksy-5,7-dimetoksyflawonu
PL240948B1 (pl) Sposób wytwarzania 4’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu
PL249024B1 (pl) 4-Chloro-2’-hydroksy-3-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-dihydrochalkon i sposób wytwarzania 4-chloro-2’-hydroksy-3-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-dihydrochalkonu
PL241002B1 (pl) Sposób wytwarzania 2’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu
PL241001B1 (pl) 5’-O-β-D-(4”-O-Metyloglukopiranozylo)-2’-metoksyflawon i sposób wytwarzania 5’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-2’- metoksyflawonu
PL240930B1 (pl) Sposób wytwarzania 4’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu
PL247869B1 (pl) Sposób wytwarzania 2’-Metylo-3’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawanonu
PL247870B1 (pl) Sposób wytwarzania 5-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawanonu
PL241535B1 (pl) 6-Metylo-4’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawanon i sposób wytwarzania 6-metylo-4’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- flawanonu
PL243174B1 (pl) 2’-O-β-D-(4”-O-Metyloglukopiranozylo)-5’-metoksyflawon i sposób wytwarzania 2’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-5’- metoksyflawonu
PL241671B1 (pl) Sposób wytwarzania 2’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- 5’-metoksyflawonu