PT94779B

PT94779B - Processo para a preparacao da diamida do acido n,n-bis-(alcoxi-alquil)-piridino-2,4-dicarboxilico e de composicoes farmaceuticas que as contem

Info

Publication number: PT94779B
Application number: PT94779A
Authority: PT
Inventors: Ekkehard Baader; Martin Bickel; Volkmar Gunzler-Pukall
Original assignee: Hoechst Ag
Priority date: 1989-07-20
Filing date: 1990-07-20
Publication date: 1997-04-30
Also published as: NO903235L; LV10430A; LV10430B; DE3924093A1; HUT54653A; IE64438B1; CY1997A; CZ357690A3; PT94779A; JPH0358973A; JPH0776213B2; ES2052112T3; FI903624A0; NO177187B; CA2021529C; RU1836350C; IL95121A0; AU624978B2; SK279199B6; LT3798B

Description

Descrição da patente de invenção de HOECHST AKTIENGESELLSCHAFT, alemã, industrial e comercial, com sede em D-6230 Frankfurt am Main 80, República Federal Alemã, (inventores: Dr. Ekkehard Baader, Dr. Martin Bickel e Dr. Volkmar Gunzler-Pukall, residentes na Alemanha Ocidental) para PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DA PI AMI DA DO ACIDO Ν,Ν’-BIS-(ALCOXI-ALQUIL)-PIRIDINO-2,4-DICARBOXILICO E DE COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS QUE AS CONTEM

Os compostos que inibem a prolinahidroxilase e a lisinahidroxilase causam uma inibição muito selectiva da biossíntese do colagéneo por influência sobre reacções de hidroxilação específica do colagéneo. No decurso destas reacções a prolina ou a lisina ligadas através de proteínas sao hidroxiladas pelos enzimas prolinahidroxilase ou lisinahidroxilase. respectivamente. Se estas reacções forem impedidas por meio de inibidores forma-se então uma molécula de colagéneo subhidroxilada não funcionalizada,

GSP ’

que só pode desprender-se da célula para a cavidade extracelular em quantidades muito reduzida. 0 colagéneo subhidroxilado, além disso, não pode ser incorporado na matriz de colagéneo e é degradado proteoliticamente muito facilmente. Como consequência deste efeito reduz-se globalmente a quantidade de colagéneo depositada extracelularmente.

3abe-se que a inibição da prolinahidroxilase por inibidores conhecidos, tais como ο <a,'-dipiridilo, Conduz a uma inibição da biossintese de Cl de macrofagos (W. Muller et al, PEBS Lett. 90 (1978) 218: Immunbiology 155 (1978) 47). Deste modo não se realiza a via clássica de activação complementar. Os inibidores da prolinahidroxilase actuam pois também como agentes imunossupressivos, por exemplo no caso de doenças imunocomplexas.

Sabe-se também que a prolinahidroxilase é inibida eficazmente por ácidos piridino-2,4- e -2,5-dicarboxílicos (K. Majamaa et al, Eur. J. Biochem. 138 (1984) 239-245), Estes compostos de resto, só são eficazes como inibidores em culturas de células apenas em concentrações muito elevadas (Tschank, G. et al·., Biochem, J. 23S, 625-633 (1987).

Na Especificação DE-A 3 432 094 são descritos piridino-2,4- e 2,5-dicarboxilatos com 1 a 6 átomos de carbono na parte alquilo do éster, como medicamentos para inibição da prolinahidroxilase e da lisinahidroxilase.

Estes diésteres de alquilo inferior tem no entanto o inconveniente de serem dissociados aos ácidos muito rapidamente no organismo, e de não chegarem às células em concentrações suficientemente altas para a sua acção e, consequentemente, serem pouco adequadas para uma eventual administração como medicamentos.

As Especificações DE-A-3 703 959, DE-A 3 703 962 e DE-A 3 703 963 descrevem de forma genérica ester/

/amidas mistos, diésteres alquilados superiores e diamidas do ácido piridino-2,4- e -2,5-dicarboxílicos que inibem eficazmente a biossintese do colagéneo no modelo animal.

Assim, na Especificação DE-A 3 703 959 ^escreve-se entre outros a síntese da diamida do ácido N,N'-bis(2-metoxietil)-piridino-2,4-dicarboxílico de fórmula (III)

e da diamida do ácido N,N'-bis(3-isopropoxipropil)-piridino-2,4-dicarboxílico de fórmula (IV)

(IV)

CH.

CH_%

Nos Peuidos de patente alemãs P 3 826 471.4 e P 3 828 140.6 propõe-se um processo aperfeiçoado para a preparação da diamida do ácido N,N'-bis(2-metoxietii) -piridino-2,4-dicarboxílico de fórmula (III).

A capacidade de ressorpção entérica de muitos dos compostos descritos na especificação DE-A 3 703 959 no entanto, ainda é insatisfatória, de modo que subsist uma necessidade de se dispôr de compostos que depois da administração oral inibem a prolinahidroxilase e a lisinahidroxilase mesmo com doses reduzidas.

- 3 fórmula I

Descobriu-se agora que os compostos de

CONH-(R¹)-(OR^)

COKÍH-CR¹' )-(or²' )_n, (I) na qual r! representa alcanodiilo com 1 a 4 átomos de carbono, de cadeia linear ou ramificada;

R representa alquilo com 1 a 4 átomos de carbono, de cadeia linear, ou hidrogénio, n é 1 ou 2 e

1¹ 2 ’ 12 R , R e n' tem os mesmos significados que R , R e n,

1' 2 2 ’ mas em que R eR , R eR enen’ são iguais ou diferentes, assim como os seus sais fisiologicamente aceitáveis, com excepção da diamida do ácido E,N'-bis-(2-metoxietil)-piridino-2 , 4-dicarboxf lico e da amida do ácido N,N'-bis(2-hidroxietil)-piridino-2,4-dicarboxílico, satisfazem às condições descritas acima.

Em comparação com os compostos descritos na Especificação DE-A 3 703 959, N,N'-bis(2-metoxietil)-piridino-2,4-dicarboxildiamida e N,E’-bis(3-isopropoxipropil)-piridino-2,4-dicarboxildiamida, os compostos de fórmula I possuem tanto uma melhor eficácia farmacológica como também uma melhor capacidade de ressorpção entérica.

A invenção refere-se para a preparação das diamidas de ácido -piridino-2,4-dicarboxílicos de fórmula também a um processo N, N'-bis-(alcoxialqui

I

(I) na qual

R¹ representa alcanodiilo com 1 a 4 átomos de carbono, de cadeia linear ou ramificada,

1¹ 2' 12 R , R e n' tem os mesmos significados oue R , R e n,

1 ’ 2 2 ’ mas em que R eR , R eR enen' são iguais ou diferentes, com excepção da diamida do ácido N,N'-bis(2-metoxietil)-piridino-2,4-dicarboxílico e da diamida do ác ido N,N’-bis(2-hidroxietil)-piridino-2,4-dicarboxílico, o qual é caracterizado por se fazer reagir um halogeneto do ácido piridino-2,4-dicarboxílico com uma alcoxiaiquilamina ou hidroxialquilamina.

A invenção refere-se igualmente a um processo para a preparação de diamidas do ácido N,N'-(bis (alcoxialquilj-piridino-2,4-dicarboxílico de fórmula I

C0NH-(R¹)-(0R²) n

(I)

CONH-CR¹')-(0R²') , na qual representa ca com 1 a

alcanoidilo de cadeia linear ou ramifica4 átomos de carbono,

R repres-nta alquilo de cadeia linear com 1 a 4 átomos de carbono, ou hidrogénio, n é 1 ou 2 e

1’ 2’ 12

R , R e n’ tem os mesmos significados quer R , R e n,

1 ’ 2 2' mas em que R eR , R eR enen' são iguais ou diferentes, o qual é caracterizado por primeiro

A)

- se misturar o ácido piridino-2,4-dicarboxílico com pelo menos dois equivalentes de um agente de halogenação, e por

- se dissolverem num dissolvente pelo menos dois equivalentes de hidroxialquilamina ou de alcoxialquilamina de fórmula II ou II'

H₂N-(R¹)-(0R²)_n (II)

H₂N-(R¹')-(0R²')_n, (II') nas quais

1’

R e R representam alcanodiilo de cadeia linear ou ramifi cada com 1 a 4 átomos de carbono,

2 ’

R e R representam alquilo de cadeia linear com 1 a 4 átomos de carbono, ou hidrogénio, e representam os números I ou 2 e 2 2'

R e R , bem como n e n', são iguais ou diferentes, mas os compostos II e II' são diferentes, e fazendo-se reagir de seguida^ a solução preparada em 12. com a solução preparada em 22._f ou por

B) se transformar a diamida do ácido ΙΓ,Ν'-bis-( alcoxialquil)-piridino-2,4-dicarboxílico assim obtida no composto de bis_Ώ1 τ,Ι’ R e R

-(hidroxialquilo), ou por

G) se fazer reagir o haiógeneto do ácido piridino-2,4-dicarboxílico preparado de acordo dom A) 12., com um álcool benzílico substituído ou insubstituído, com obtenção de piridino-2,4-dicarboxilato de benzilo, se saponificar selectivamente o áster benzílico na posição 2 da piridina, se transformar de novo, de acordo com a variante do processo A) 12., o ácido carboxílico livre na posição 2 do halogeneto de acilo, e se misturar o composto assim obtido con uma solução preparada de acordo com A) 22., utilizando-se um composto de fórmula II¹. formando-se uma piridino-4-carboxiiato de benzilo-2-carboxilamida, e por se dissociar em seguida hidrogenoiiticamente o grupo de bloqueio benzilo na posição 4, por se transformar de novo o ácido carboxílico livre, segundo a variante do processo A) 1^Δ., no cloreto de acilo, o qual em seguida é misturado com uma solução preparada de acordo com A) 22., utilizando-se um composto de fórmula II, formando-se um composto de fórmula I substituído assimetricamente, e por eventualmente se transformar em seguida o composto de fórmula I assim obtido num seu sal fisiologicamente aceitável.

No processo para a preparação dos compostos de fórmula I o ácido piridino-2,4-dicarboxílico, que é utilizado como substância de partida e é obtido no comércio, é posto em suspensão num dissolvente como por exemplo tolueno, e é misturado à temperatura ambiente com um agente de halogenação, de preferência com um agente de cloração, como por exemplo SOClg· No que se refere à quantidade molar do ácido piridino-2,4-dicarboxílico utilizado, empregam-se 2-3 equivalentes de um agente de halogenação, de preferência 2,5 equivalentes. A mistura reactiva obtida é aquecida a 90-110°C e de preferência a 100°C até que se deixe de obse var qualquer libertação gasosa e se forme uma solução límpida. Em seguida evaporam-se 10% da solução, de preferência em

•ζ alto vácuo (até cerca de lCr Torr) e o halogeneto do ácido carboxílico assim obtido é submetido à reacção seguinte.

No que se refere à quantidade molar de ácido piridino-2,4-dicarboxílico utilizado, disso'lve-se neste caso uma quantidade duas a 4 vezes molar da alcoxialquilamina ou hidroxialquilamina, obtida comercialmente, num dissolvente como por exemplo tolueno, e adiciona-ee-lhe de preferência uma q .antidade 2 a 4 vezes molar de uma base, como por exemplo trietilamina, 0 halogeneto do ácido carboxílico é levado a reagir com a alooxialquilamina ou a hidroxialquilamina, Promove-se esta reacção de preferência adicionando-se gota a gota a solução da alquilamina referida ao halogeneto do ácido piridino-2,4-dicarboxilico também dissolvido. No entanto tabém é possível adicionar-se gota a gotaa solução do halogento do ácido carboxílico à solução da alooxialquilamina ou hidroxialquilamina, A adição é realizada a uma temperatura compreendida entre -5 até +5°C, de preferência a 0°C. Deixa-se processar a reacção da mistura reactiva aquecendo-se, por exemplo à temperatura ambiente, e agitando-se ainda durante 2 a 5 horas, de preferência 3 horas. 0 produto obtido é em seguida acidificado para se eeparar do produto pretendido o excesso da hidroxialquilamina ou da alooxialquilamina. A acidificação pode ser realizada por exemplo com ácido cítrico 0,2 molar. A fase orgânica é então separada e é lavada com água. Em seguida a fase orgânica é seca - de pre ferência com sulfato de magnésio - e finalmente elimina-se o dissolvente. Por eliminação do dissolvente o produto precipita na forma de um sólido branco ou na forma de um óleo.

Para a preparação da diamida do ácido N,N’-bis(hidroxialquil)-piridino-2,4-dicarboxílico procede-se de preferência transformando-se de harmonia com processos conhecidos da literatura, por exemplo com tribrometo de boro, uma correspondente bis(alcoxialquil)-diamida, de pre-

ferência a bis(metoxialquil)-diamida, na correspondente bis(hidroxialquil)-diamida.

Os compostos de fórmula I substituídos assimetricamente podem ser sintetizados, por exemplo, do seguinte modo: a reacção de um halogeneto do ácido piridino-2,4-dicarboxílico, de preferência o respectivo cloreto, com álcool benzilico substituido ou insubstituido, com obtenção do piridino-2,4-dicarboxilato de benzilo, em seguida a saponificação selectiva do éster na posição 2 (por exemplo na presença de um catalisador de cobre, Acta Helv. 44,

1963, pág, 637) transformação do ácido livre na posição 2 no halogeneto de acilo, reacção com um composto de fórmula (II*) ao piridino-4-carhoxilato de henzilo-2-carhoxilamida dissociação hidrogenolítica do grupo benzilo remanescente (por exemplo com H₂/Pd. ver Houben-Weyl, vol. IV/lc (1980) pág. 381 - 382) e em seguida transformação do ácido livre na posição 4 do anel piridina no halogeneto de acilo.

halogeneto de acilo pode então ser rransformado na diamida mista (I) por reacção com uma amina de fórmula II (ver esquema da reacção).

tratamento pós-reactivo dos produtos pode eventualmente realizar-se por exemplo por extracção ou por cromatografia, por exemplo através de silica-gel. 0 produto isolado pode ser recristalizado e ser eventualmente submemido a reacção com um ácido apropriado para obtenção de um sal fisiologicamente aceitável. Como ácidos apropriados interessam por exemplo:

ácidos minerais, tais como ácido clorídrico e ácido bromídrico, assim como os ácidos sulfúrico, fosfórico, azótico ou perclórico, ou ácidos orgânicos tais como por exemplo ácidos fórmico. acético, propiónico, succínioo, glicólico, láctico, málico, tartárico, cítrico, maleico, fumárico, fenilacético, benzóico, metanossulfónico, toluenossulfónico, oxálico, 4-aminobenzoico. naftalino-1,5-dissulfónico ou ascórbico.

Os compostos de fórmula I podem ter aplicação como medicamentos na forma de composições farmacêuticas, as quais contém os compostos eventualmente em combinação com substâncias veiculares farmaceuticamente aceitáveis. Os compostos podem ser utilizados como medicamentos por exemplo na forma das composições farmacêuticas que conrém estes compostos em misturas com uma substância veicular orgânica ou inorgânica farmaceuticamente, apropriada pa a aplicação entérica, per-cutãnea ou parentérica, como por exemplo água, goma arábica, gelatina, lactose, amidos, estearato de magnésio, talco, óleos vegetais, polialquilenoglicois, vaselina, etc.

As composições farmacêuticas podem aprestntar-se na forma sólida, por exemplo na forma de comprimidos, drageias, supositórios ou cápsulas; numa forma pastosa, por exemplo como pomadas, ou numa forma líquida, por exemplo como soluções, suspensões ou emulsões. Eventualmente são esterilizadas e/ou contém substâncias auxiliares, tais como conservantes, estabilizadores, humectantes ou emulsionantes, sais para modificação da pressão osmótica ou tampões. Podem também conter ainda outras substâncias activas.

Verificou-se que os compostos de fórmula I possuem uma capacidade de resorção entérica extraordinariamente boa. A capacidade de resorção foi ensaiada em ratos Wistar aos quais foram administrados por via intra-gástrica os compostos de acordo com a invenção. 0 nível no soro baixou nas primeiras horas após a administração da substância e após cerca de 5 h alcançou-se um patamar ainda levemente decrescente. A partir do nível no soro, inicialmente muito alto, imediatamente depois da administração das substâncias concluiu-se da boa capacidade de resorção das substâncias.

A seguir a invenção será elucidada mais prrmenorizadamente com base nos exemplos.

Exemplo 1

Bis-Ν,Ν'-(metoxipropil)-amida do ácido piridino-2,4-dicarboxílico g de ácido piridino-2,4-dicarboxílico são incorporados em 50 ml de tolueno e 1 ml de dimetilformamida e adiciona-se à solução-,/gota a gota, 2,7 ml de cloreto de.tionilo. Aquece-se a ué deixar de se observar qualquer libertação gasosa (cerca de 2,5 h). Arrefece-se, por destilação eliminam-se 5 ml de tolueno e abicionam-se gota a gota à solução 4,6 ml de 3-metoxipropilamina e 5 ml de trietilamina. Depois da agitação da solução à temperatura ambiente durante 4 h evapora-se, toma-se o resíduo com água e extrai-se 4 vezes com cloreto de metileno. Os extractos orgânicos depois de reunidos são secos com sulfato de magnésio e evaporados, 0 produto bruto é cromatografado através de silica-gel (eluente acetato de etilo).

rendimento: 4,3 g; óleo ¹H-NMR (CDC1₅); 5 = 1,6-2,3 (4H, m); 3,2-3,8 (14H, m);

7.8-8,0 (ÍH, m); 8,3-8,5 (ÍH, m);

8,6-8,8 (ÍH, m).

Exemplo 2

Bis-N,N'-(etoxipropil)-amida do ácièo piridino-2,4-dicarboxilico____

Processo, ver exemplo 1; componente ami na etoxipropilamina, rendimento: 4,5 g, p.f.: 46-48°C (CD01₃) : 1,3 (6H, tr); 1,7-2,1 (4H, m);

3.3- 3,8 (12H, m); 7.8-8.0 (ÍH, m);

8.4- 8,5 (ÍH, m); 8,5-8,8 (ÍH, m);

Exemplo 3

Bis-N,N’-(2-dimetoxietil)-amida do ácido piridino-2,4-dicarboxílico

Processo ver exemplo 1, componente amina 2-dimetoxietilamina, rendimento: 1,6 g (a partir de 3 g do ácido pirrdino-2,4-dicarboxílico), óleo ¹H-m (CLC1₅): 5 = 3,4 (12H, s); 3,7 (4H, m); 4,5 )2H,

m); 7,9-8,0 (ÍH, m); 8,4-8,5 (ÍH, tn);

8,7-8,8 (ÍH, m):

Exemplo 4

Bis-N,N'-(2-metoxiisopropil)-amida do ácido piridino-2,4-dicarboxílico

Processo ver exemplo 1; componente amina

-2-metoxiisopropilamina; rendimento: 3,3 g (a partir de 3 g de ácido piridino-2,4-dicarboxílico), óleo ¹H-m (CDC1₃): 5 = 1,3 (6H, d); 3,2 (6H, s); 3,5 (4H, d); 4,4 (2H, m); 7,9-8,0 (ÍH, m);

8,4-8,5 (ÍH, m); 8,7-8,8 (ÍH, m);

Exemplo 5

Bis-N,N'-(2-etoxietil)-amida do ácido piridino-2,4-dicarboxílico

Processo ver exemplo 1; componente amina etoxietilamina, rendimento: 7,8 g (a partir de 10 g de ácido piridino-2,4-dicarboxílico).

p.f. 42-44°C.

(CDCl^): 5 1,2 (3H, tr); 3,3-3,8 (12H, qu. e m): 7,9 (ÍH, m); 8,4-8,5 (1H, m);

8,7-8,8 (ÍH, m):

Exemplo 6

Bis-N,N'-(3-hidroxi-etil)-amida do ácido piridino-2,4-dicarboxílico

0,5 g de bis-Ν,Ν'-(3-metoxietil)-amida do ácido piridino-2,4-dicarboxíiico são dissolvidos em 10 ml de diclorometano e a -78°C adicionam-se-lhes gota a gota tribrometo de boro (11 ml, solução molar 1 em diclorometano) Depois de terminada a adição deixa-se vir à temperatura ambie te e agita-se ainda 3 horas continuamente. Verte-se sobre 10C ml de solução saturada de bicarbonato de sódio e extrai-se por 3 vezes com acetato de etilo.Os extractos orgânicos depois de reunidos sâo secos com sulfato de magnésio e evaporados. 0 produto bruto é cromatografado através de silica-gel.

¹H-NI© (GDClj): 5 = 1,5-2,2 (4H, m); 3,4 (4H, m); 3,6 (4H,m)

7,9-8,0 (ÍH, m); 8,4-8,5 (ÍH, m);

8,7-8,8 (IH, m);

Exemplo 7a

Piridino-2,4-dicarboxilato de benzilo g de ácido piridino-2,4-dicarboxílico são transformados analogamente ao exemplo 1, com 30 ml de cloreto de tionilo, no cloreto de acilo e fazem-se reagir com 43,8 g de álcool benzílico. 0 produto é recristalizado em éter diisopropílico.

Rendimento: 42,1 g pf: 63-65°0.

Exemplo 7b

Hemi-éster de 4-benzilo do ácido piridino-2-carboxilico g de piridino-2,4-dicarboxilato de benzilo do exemplo 7a são adicionados a uma suspensão de 27,8

g de nitrato de cobre-II em 700 ml de metanol. Ferve-se ao refluxo lhe depois do arrefecimento filtra-se para remover o complexo de cobre. 0 complexo é posto em suspensão em dioxano e faz-se borbulhar na solução sulfureto de carbono. 0 sulfureto de cobre que precipita é isolado por filtração e a fase orgânica é concentrada. 0 produto é triturado com éter de petróleo.

Rendimento: 25,5 g pf 115-H5°C.

Exemplo 7c

Piridino-2-(5-metoxipropil)-carboxilamida-4-carboxilato de benzilo

5,9 g dr hemiéster de 4-benzilo do áci do piridino-2-carboxílico do exemplo 7b são transformados no cloreto de acilo, analogamente ao exemplo 1, com 1,2 ml de cloreto de tionilo, e fasem-se reagir com 5-metoxipropilamina obtendo-se a amida. 0 produto é cromatografado para purificação através de silica-gel com uma mistura de ciclohexano/acetato de etilo (1:1).

Rendimento: 4,5 g óleo.

Exemplo 7d

Mono-2-(5-metoxipropil)-carboxilamida do ácido piridino-4-carboxílico

4,5 g do composto do exemplo 7c são dissolvidos em 100 ml de dioxano e são hidrogenados durante 4 h à pressão normal, na presença de 500 mg do cata lisador paládio/carvão (10%). Depois do termo da absorção de hidrogénio filtra-se para recuperar o catalisador e extrai-se o dissolvente.

Rendimento: 5,5 g pf 124-126°C

Exemplo 7e

4-( 2-metoxietil)-2-(3-n3etoxipropil)-diamida do ácido piridlno-2,4-dicarboxilioo

Analogamente ao exemplo 1 1,8 g do composto do exemplo 7d são transformados no cloreto de acilo com 0,6 ml de cloreto de tionilo e em seguida fazem-se reagir com 2-metoxietilamina. 0 produto, para purificação, é cromatografado através de sílica-gel com uma mistura de diclorometano/metanol (20:1).

rendimento: 1,0 g óleo ¹H-NMR (CHC1₃): β = 1,9-2,0 (2H, qui); 3,4 (6H, s); 3,5-3,7 (8H, m); 6,9 (ÍH, s, br); 8,0 (ÍH, dd);

8,4 (ÍH, s, br); 8,5 (ÍH, s); 8,7 (ÍH, d);

Exemplo 8

2-(2-metoxietil-4-(3-tnetoxipropil)-diamida do ácido piridino-2,4-dicarboxilico

Analogamente aos exemplos 7a-e prepara-se o composto do exemplo 8 utilizando-se no passo de reacção do exemplo 7c 2-metoxietilamina e no passo de reacção do exemplo 7e 3-metoxipropilamina.

ponto de fusão: 69-72°C

7,9 (ÍH, dd); 8,3 (ÍH, br); 8,4 (ÍH, d);

8,7 (ÍH, d);

Exemplo 9

Capacidade de resorção entérica

Ratazanas Wistar fémeas, de cerca de 150 g de peso corporal, recebem 50 mg/kg da substância a ensaiar, administrada por via intra-gástrica por meio de uma sonda de esófago. Após 5, 10, 15, 30, 60, 120, 180 e 240 minutos narcotisam-se, de cada vez, 4 ratazanas e sangram-se através da veia cava. 0 sangue é imediatamente centrifugado e 0 composto administrado é extraído do soro com éter. Depois da evaporação do éter 0 resíduo é tomado em 100 ml de um líquido. Este líquido consiste em ãcido fosfórico 0,05 M e acetonitrilo (4:1).

Destas amostras injectam-se 50 _zul numa coluna de HPLC. A detecção é realizada a UV 200 nm e com um tempo de retenção de 2,2 minutos. 0s resultados estão indicados no Quadro 1.

Quadro 1: nível no soro dos compostos da invenção dos exemplos 1 a 3, depois da administração de 50 mg/kg p.o.

Exemplo 10

Eficácia farmacológica

Para a comprovação da inibição efectiva da prolinahidroxilase e da lisinahidroxilase pelos compostos de acordo com a invenção mediram-se as concentrações de hidroxiprolina no fígado e as concentrações de 7s-(IV)-colagénio no soro de

a) ratazanas não tratadas (controle)

b) ratazanas às quais foi administrado tetracloreto de carbono (carbono CCl^)

c) ratazanas às quais foi administrado primeiro tetracloreto de carbono e seguidamente um composto de acordo com a invenção.

(Este método de ensaio é descrito por Rouiller,

C., experimental toxic injury of the liver; in The Liver, C. Rouiller, Vol. 2, S. 335-476, New York, Academic Press, 1964).

A intensidade da acção dos compostos de acordo com a invenção foi determinado como inibição em percentagem da síntese de hidroxiprolina no fígado e da síntese de 7s-(IV)-colagénio no soro depois da administração oral, em comparação com os animais de controlo aos quais foi administrado apenas tetracloreto de carbono (controles CCl^). Os resultados estão indicados no quadro

2. Como substâncias de comparação estão igualmente referidas os compostos dos exemplos 2 e 3 da especificação DE-A 3 703 959 /™N,N’- e N,N'-bis(3-isopropoxipropil)18

-diamida do áciào piridino-2,4-dicarboxílico). Surpreendentemente os compostos de acordo com a invenção, mesmo logo após a administração oral, apresentam uma melhor eficácia do que o composto, administrado i.p., do exemplo 2 da especificação DE-A 3 703 959.

- 19 CM

Tabela ι

o

o ira o ra P +» ra -~l C •H a ra	• · · · β 0 o O O O Pd o a ο. -η ca
7s-(lV)- colagénio no soro (f<> inibição)	co r- cj m oo r-t OJ ι—1
Hidroxiprolina no fígado (% de inibição)	CM O UA O UA Cn CD Cn CM CD UA <-
dosagem	eo tso m eo ho e a e a a tio a O o ua un CM r-l CCJ r-d C\J CM X X X ix! Μ X CM ·ΛΙ CM C\J CM CM
Substância do Exemplo	cn cn un un cn cn να na O O r- n- na na ro <tj co *a? T3 l -d l cq pq H CM CM Ρ NA A

Claims

REIVINDICAÇÕES

- 1& Processo para a preparação de amidas do ácido N,N’-bis(aicoxialquil)-piridino-2,4-dicarboxílico de fórmula I

C0NH-(R¹)-(0R²) n

(I)

C0NH-(R'^L* )-(or )_n t na qual

R^ representa alcanodiilo com 1 a 4 átomos de carbono, de cadeia linear ou ramificada, / representa alquilo com 1 a 4 átomos de carbono, de cadeia linear, ou hidrogénio, n representa os ríúmerosl ou 2 e

1 ’ 2 · 12 R , R e n’ tem os mesmos significados que R , R e n,

1 1 ’ 2 2 ’ mas em que R eR , R eR enen’ são iguais ou diferentes, com excepção da diamida do ácido N,N'-bis-(2-metoxietil)-piridino-2,4-dicarboxílico e da amida do ácido N,R'-bis-(2-hidroxietil)-piridino-2,4-dicarboxilico, caracterizado por se fazer reagir um halogeneto do ácido piridino-2 ,4-dicarbcxílico com uma alcoxialquilamina ou bidroxialquilamina.

- 2§ Processo para a preparação de diamidas do ácido N,R’-bis-(alcoxialquil)-piridino-2,4-dicarboxílico de fórmula I

- 21 CONH-drH-í OR²) na qual

R¹ representa alcanodiilo com 1 a 4 átomos de carbono, de cadeia linear ou ramificada,

R representa alquilo de cadeia linear com 1 a 4 átomos de carbono, ou hidrogénio, n é 1 ou 2 e

1*2' 12 R , R e n’ tem os mesmos significados que R , R e n

1 1 ’ 2 2' mas R eR , R eR enen’ são iguais ou diferentes, caracterizado por

A) 1^ se misturar o ácido piridino-2,4-dicarboxílico com pelo menos 2 equivalentes de agente de halogenação, e por

22 se dissolverem num dissolvente pelo menos 2 equivalentes de hidroxialquilamina ou de alcoxialquilamina de fórmulas II ou II’

H₂N-(R¹)-(0R²)_n II h₂n-(r¹')-(or²’)_n> II' nas quais 1 1'

R e R representam alcanodiilo de cadeia linear ou ramificada com 1 a 4 átomos de carbono,
2 2'

R e R representam alquilo de cadeia linear com 1 a 4 átomos de carbono,ou hidrogénio, e n e n' representam os números 1 ou 2 e 1 1 ’ 2 2'

R e R , R e R bem como n e n’ são iguais ou diferentes mas os compostos II e II' são diferences, e fazendo-se reagir em seguida a solução preparada em 12. com a solução preparada em 22, ou por

B) se transformar a diamida do ácido R,N’-bis-(alcoxialquil)-piridino-2,4-dicarboxilico assim obtido, no composto de bis-(hidroxialquilo), ou por

C) se fazer reagir o halogeneto do ácido piridino-2,4-dicarboxilico preparado de acordo com A) 12., com um álcool benzílico substituido ou insubstitui do, com obtenção de piridina-2,4-dicarboxilato de benzilo, se saponificar selectivamente o éster benzílico na posição 2 da piridina, se transformar de novo, de acordo com a variante do processo A)

12, o ácido carboxílico livre na posição 2 no halogeneto de acilo, e se misturar o composto assim obtido com uma solução preparada de acordo com A)

22., utilizando-se um composto de fórmula II’, formando-se uma piridino-4-carboxilato de benzilo-carboxilamida, e por se dissociar em seguida hidrogenoliticamente o grupo de bloqueio benzilo na posição 4, por se transformar de novo o ácido carboxílico livre, segundo a variante do processo A)

12., no cloreto de acilo, o qual em seguida é mistu rado com uma solução preparada de acordo com A) 22. utilizando-se um composto de fórmula II, formando-se um composto de fórmula I substituido assimetricamente, e por eventual mente se transformar em seguida o composto de fórmula I assim obtido num seu sal fisiologicamente aceitável, ções 1 ou 2, caracterizado por na fórmula I os ,1 A’ ^2 ^2’ tes R e R

Processo de acordo com as e n e n’ terem em cada reivindicasubstituincaso o mesmo significado.

- 4- ções tes

1 ou 2, -(R¹)-(OR

Processo de caracterizado por K e -(R¹ /-(OR² acordo com as reivindicana fórmula I os substituin) ’ serem diferentes.

Processo de acordo com as reivindicaçõe 1 ou 2, caracterizado por se obterem compostos nos quais

R representa alquilo de cadeia linear ou ramificada com 1 a 3 átomos de carbono e

R representa alquilo de cadeia linear com 1 ou 2 átomos de carbono, ou hiidrogénio.

ções mula

Processo de acordo com as reivindica1 ou 2, caracterizado por se obter um composto de fórconh-ch₂-ch₂-ch₂-o-ch₅

CONH-CH₂-CH₂-CH₂-O-CH₅

24 assim como os seus sais fisiologicamente aceitáveis.

- 7ê Processo de acordo com as reivindicações 1 ou 2, caracterizado por se obter um composto de fórmula assim como os seus sais fisiologicamente aceitáveis.

- 8§ ções 1 ou 2, mula

Processo de acordo com as reivindicacaracterizado por se obter um composto de fórconh-ch₂ch

O-CH₃

O-CH₅ conh-ch₂-ch

O-CH, / ³

0-CH₅ assim como os seus sais fisiologicamente aceitáveis.

- 9& Processo de acordo com as reivindicações 1 ou 2, caracterizado por se obter um composto de fórmula

- 25 CH,

CONH-CH-CH₂-OCH₅

N>

CONH-CH-CH₂-OCH₅

CH, assim como os seus sais fisiologicamente aceitáveis,

- 106 Processo de acordo com as reivindicações 1 ou 2, caracterizado por se obter um composto de fór mula cohh-ch₂-ch₂-o-c₂h₅

C0NH-CH₂-CH₂-0-C₂H₅ assim como os seus sais fisiologicamente aceitáveis.

- 116 _

Processo de acordo com as reivindicações 1 ou 2, caracterizado por se obter um composto de fór mula conh-ch₂-ch₂-ch₂-oh fr ^xconh-ch₂-ch₂-ch₂-oh assim como os seus sais fisiologicamente aceitáveis,

- 12S Processo de acordo com as reivindicações 1 ou 2, caracterizado por se obtèr um composto de fórmu la assim como os seus sais fisiologicamente aceitáveis.

- 136 Processo de acordo com as reivindicações 1 ou 2, caracterizado por se obter um composto de fórmula

CONH(CH₂)gOCH₅

CONH(CH₂)₂OCH₅ assim como os seus sais fisiologicamente aceitáveis.

- 27 Processo para a preparação de composiçSes farmacêuticas para a influenciação da biossíntese do colagéneo e de substâncias semelhantes ao colagéneo, ou da biossíntese de Cl_q, caracterizado por se incorporar como ingrediente activo um composto de fórmula I, quando obtido por um processo de acordo com qualquer das reivindicações 1-13 e/ou um sal fisiologicamente aceitável deste composto.