PT95090A

PT95090A - Processo de preparacao de 3,5-dieno-esteroides,7-ceto ou hidroxi-substituidos,e de composicoes farmaceuticas que os contem

Info

Publication number: PT95090A
Application number: PT95090A
Authority: PT
Inventors: Dennis Alan Holt; Brian Walter Metcalf; Mark Alan Levy
Original assignee: Smithkline Beecham Corp
Priority date: 1989-08-24
Filing date: 1990-08-23
Publication date: 1991-04-18
Also published as: EP0414529B1; EP0414529A3; IE903070A1; CA2023609A1; ZA906710B; AU640396B2; GR3015461T3; US5032586A; AU6115290A; ATE116657T1; KR910004653A; EP0414529A2; JPH03118326A; DE69015736T2; DE69015736D1; DK0414529T3; ES2066140T3; NZ235000A

Description

MEHÓRIA DESCRITIVA

Campo da Invencão 0 presente invento refere-s® aa processo de preparação de certas análogas 7-esta e hidroxi, substituídas com carbaxilo ou éster de carboxila, de compostas esteráides sintéticas e de composições f a r mac '§u t i c a que usam estes compostas s contenda estes compostos, e a métodos na inibição da esteróide-5-cr-redutase de mamíferas.

Descrido da arte relacionada A classe de hormonas esteróides conhecidas coma androgénias ê responsável pelas caracter.isticas físicas que diferenciam as machas das fêmeas. Das várias argãas que produzem andragénias, as testículos produzem estas drogas nas maiores quantidades. Centras na cérebro exercem o contraio principal no nível de produção de androgénio. Quando um controlo de produção ineficaz resultei na produção excessiva da hormona androgénia resultam numerosas manifestações físicas e estados de doenças. Por exempla a acne vulgaris, a seborreia, o hirsutismo feminino e a hipertrofia prostática benigna estão correlacionados com níveis de androgénio elevados. Adicionalmente, a incidência da calvície padrão masculina tem sido associada a níveis de androgénio elevadas» A testosterona é o principal androgénio segregado pelos testículos e é o principal esteróide androgénico no plasma dos machos» é agora conhecido que os androgánios 5-a-reduzidos são as hormonas activas em alguns tecidos, tais como a próstata e a glândula sebâcea» A testosterona em circulação serve assim como pró-hormona para a di-hidrotestosterona (DHT), o seu análogo 5-a--reduzido, nestes tecidas mas não noutras tais como os músculos e os testículos. A esteróide--5-íx~redutase é uma enzima, dependente de NADPH, que converte a testosterona em DHT. A importância desta enzima no desenvolvimento masculino foi dramaticamente sublinhada por se ter verificado uma deficiência genética de esteróide-5-α--redutase na pseudo-hermafrodite masculina. Imperato-McSinley et a1., J. Sterois Biochem. 11¾ 637-648 (1979).

0 recanneeimenta cia importância de níveis de DHT elevaaos em muitos estados de doença tem estimulado muitos esforços para sintetizar in i bi ci ores desta enzima,, Na Tabela i mostram estruturas de várias inibidores ei a s s t e r ó i d e ™ 5 -- α - r í sdutase conheciaos. Tabela 1

Inibidores de 5-"«~redutase

Refersncia Hs i a e Vo i g h t,, 1973

1χ10“°Η (Irreversível}

Robaire et al „ ,,

BIohm et a]..... 1980

Liang et al 1983

ο prxmeiro inibidor descrita foi a acido iT-fá-carboxn

1CQ 11) por Hsia e Voighfc em 1973» Jj,___In vest.» Dermat. 62 s 224-227„ q secoesteróide (2) foi o in.ib.idor seguinte; a ser descrito « verificou-se também que tinha utilidade como marcador Cj& afinidade para a 5-a-redut.ase,, Robaire et al. J_»_________Stern-i h

Bi achem. Sn 307-310 (.1977),, A d ia cace tona (3) tem sido descrita como sendo um potente in.ib.idor da estsróicie-5-d-redutase, dependente do tempo» Blohm et al». Brochem» Biophys. Res» Comm. 95ii 273-280 (1980) % Patente dos Estados Unidos nQ 4.317,,8175 publicada em 2 de Março de 1982« 0 composto (4) é um exemplo de um grupo de inibidores 4-asa-esteráides da esteróide-5-ffl” redutase,, descritos na Patente dos Estados Unidos nS 4..377,584,. publicada em 22 de Março de 1983. e em Liang st al., J» SterGlll Biochem. 19 s 385-390 (1983)» Mostrou-se. também, que o -metileno—esteróide (5) é um desactivaddr da esteróide—5—· -redutase dependente do tempo. Petrow et al. Steroids 38s 121“* -140 (1981). 1'ê'm-se. também, descrito outros inibidores da esteráide-5-«““ -redutase. A Patente dos Estados Unidos nS 4.361.578. publicada em 2 de Junho de 1986. descreve uma classe de inibidores da enzima homoesteróide. A Patente dos Estados Unidos n9 4.191»759. publicada em 4 de Março de 1980, descreve amidas de Í7(3-carboM2·"" -4-androsten-3-ona que são activas como inibidores í:,‘â

-7- esteróide-5~a~redutase. As Patentes Jaoonesas J60146855-A e J6Ô116657-A descrevem vários derivados da anilina possuindo numerosas actividades, incluindo a activida.de inibidora da esteróide-5-a-redutase. A Patente Japonesa J60142941-A descreve cetonas fenii-substituídas possuindo actividade inibidora da ο-α-redutase, e a Patente Europeia EPÍ73516-A descreve várias amidas fenil-substituídas possuindo actividade similar» Shiseido referenciou derivados do terpeno que são inibidores activos da esteróide-5-a--redutase« Patente Japonesa NQ J59053417-A»

Tem-se descrito a carbonilação, catalisada por paládio, de derivados do androsteno substituídos» Cacchi et al», Tet» Letters 26s 1109—1112 (1985). Contudo não se referiu para os compostos sintetizados qualquer actividade biológica»

Em Deghenghi et al», Canadian J» Chem» 40s 818-820 (1962)» descreve-se a -preparação cie 3-cloro-3,5-dienos esteróides» de fósforo para 3-halo~3,5-dienos 2784-2785 (1964)

Tem-se descrito o uso de tri-halogenetos converter Δ ^'-3-cetonas esteróides nos correspondentes Ross et al» , J„«„ Qrq» Chem» 291;

Sumário da Invenção 0 presente invento resulta do facto de se ter verificado que a esteróide-5-a-redutase ê inibida por certos análogos 7-ceto ou hidroxi-3,5-dieno, substituídos com carboxilo e com éster de alquilo de carboxilo, de compostos esteróides sintéticos» Os compostos s«ío potentes inibidores da enzima»

Os compostos, presentemente preferidos, da invenção e que são usados na preparação de composições farmacêuticas e nos processos da invenção., incluems 17β-(N,N-di-isopropiIcarboxamido5-7-oxo~androsta-3,5-dieno--3-carboxilato de etilo? ácido 17(3—N, N-di-isopropiIcarboxamido ) -7-oxo-androsta-3,5- -cl ieno-3-carbox í 1 ico § 17(3 (N,N-di-isopropilc srboxamido)-7-oxo-androsta ,5-dieno—

71 43ώ 56C Case 14458 -9- 3—carboxilato de meti los aciaa 17S” (M,, N ~ d i - i b d p r ο ρ .11 c a r b a x a m i d o} “7íHhidroxi~and.rosta~ -3„ 5~tíieno"“3~carboMiliCD5 Í7Í3- (N-t-butilcarboxamido)“7-oxa-andrasta—35 5“-dieno-3-carbO“ -xiiato de metilos ãcxdo 178“ (N--t-buti lcarboxamido} -~7-axo--aridrosta~3 ? S-dieno-S--carboxllicop e 178“ (N ,, !M“di“isoprop.i lcarboxamido)“78“hidraxi“antíro5ta”3,, 5--dieno-3-carboxilato de etilo»

Num seu aspecto o presente inventa descreve novas processos úteis na preparação dos compostos inibidores da 5-cc-redutase do presente invento., A invenção descreve também um processo para inibir a actividade da S-cc-redutase em mamífeross incluindo os humanoss que compreende administrar internamente, a um sujeito que o necessite,, uma quantidade eficas de um composto inibidor de 5~«“ --•redutase do presente invento»

No presente invento inclui“se o processo de preparação de composiçSes farmacêuticas, compreendendo um transportador farmacêutico e os compostos do presente invento,,

Descrição detalhada da invenção

Os compostos do presente invento que inibem a 5-«-“redutase têm a fórmula (I) seguintes

II

Q na qual 5 o -anel D tem uma ligação dupla facultativa onde se indica pela linha a tracejado,, desde que o anel D não tenha uma ligação

duola quando representa dois substituintes ou um substi tuin te diva1en te § X é (1) cetOj, ou (25 um átomo de hidrogénio ou um grupo hidroxilo? RÍ é H ou alquilo Cj^-g? e R-" é (1) α-hidrogénio? c<~hidroxi 1 o ? ou «-acetoxilo e/ou. 0 B-W-C-R3 onde W é uma ligação ou alquil e R·3 á (x) alquilo C^-g, ( i x ) a 1 cox i lo C j[_g, (iii) M(r4)2? onde cada R^ é seleccionado, independente-mente, de entre hidrogénio, alquilo Ci_g, cicloalquilo Cg-g? fenilo^ ou ambos os grupos R^? conjuntamente com o átomo de azoto ao qual se ligam? representam um anel saturado com 5-6 membros, compreendendo até um outro heteroátomo seleccionado de entre oxigénio e azoto? (2) =CH-W-C0-R3 ou =CH-W~0R5, onde M e R3 tem o mesmo significado que anteriormente, e R5 é (x) fenilaiquilC^-gcarbonilo, (ii) ciclaalqilC5„^0carbonila? (iii) benzoilo, (i v) a 1 c o x i C (Ntigc a ^ pon i 1 o ? (v) aminocarbonilo ou aminocarbonilo substituído por alquiloC^-g (vi) alquilo C^-g, ou

(vi i) a 1 qui 1Ci_20cark°n i 1 ο I 7 3l 4·:>4 SBC Case 14458

»10.- (3) α-hidrogénio e (3-NHCQR^* onde R& é alquilo ou (3 HM(R4)·;> onde R4 tem o mesmo significado que anterior- (4) c:eto§ ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis»

Tal como são aqui usadas, a não ser onde se indique ser ds outro modo,, as expressões alquilo Cj[».n e alq Ci,_.n representam uma cadeia de hidrocarboneto* linear ou ramificada * possuindo la n átomos de carbono e Alq representa uma cadeia de hidrocarboneto., linear ou ramificada* possuindo .1 a 12 átomos de carbono»

Entre os compostos preferidos do presente invento incluem-se aqueles que possuem,, como substituinte R2* a-hidrogénio e fs--COIM(R4}2« Destes compostos* aqueles onde cada R4 é seleccionado, independentemente,, de entre hidrogénio e alquilo C^-g, são particu1armente preferidos.

Os compostos de fórmula (I)* ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis* são incluídos nas composições farmacêuticas cia invenção e usados nos p.r.aGessos da invenção „

Tal como se usou anteriormente e como se usará na restante descrição e nas reivindicações* os carbonos do núcleo esteróide são inumerados e os anéis são indicadas por letras como segues

0 Esquema I mostra a preparação dos compostos de fórmula (c) que podem ser usados como compostos de partida na preparação de compostos do presente invento tal como a seguir se ilustra no Esquema Π. R^ é R2, ou grupos que podem ser convertidos quimicamente em grupos R2 por reacçffes químicas conhecidas* tais como as que se descrevem em J„ Fried e J„ Edwards* Qraanic 71 434 SBC Case 14438 -11,.

Reactions in Steroid Chemistry,, Pubs Van Nostrand Eexnhold Company (1972)., desde que nâo inclua nenhuns grupos que tornem inoperativos os processos dos Esquemas 1 ou II» Por exemplo, os compostos onde R7 é ácido carboxilico podem ser convertidas nas arnidas correspondentes por reacção com atninas ou com aminas substituídas, através dos cloretos de ácido correspondentes» As reacçÊfes para converter R(/ em podem ser realizadas em produtos cios percursos sintéticas cios Esquemas I ou II, ou, quando for apropriado ou prefeível, em certos intermediários desses percursos sintéticos» 0 esquema I pode ser realizado de acordo com a descrição da Patente Europeia n£2 0»289»327 publicada em 2 ds Novembro de 1988 ( Pedido de Patente Europeia nQ88303878»85, que é aqui incorporada como refertncia.

ESQUEMA I

fórmula (a)

fórmula (b) /1 434 SBC Case 14458 12

°l-8 alk0\c

u x> il 7 o fórmula (c)

fórmula (a) são compostos que são conhecidos e que estão

precursores conhecidos, usando procedimentos conhecidos»

De acordo com o Esquema 1, a um composto de fórmula (a) dissolvido num solvente orgânico apropriado,, preferivelmente* d i c1orome tano, adiciona-se ó-di-t-buti1-4— meti1piridina.

Adiciona-se, depois, um anidrido tri-halo-alquilsulfónico, preferivelmente anidrido trifluorometanossulfónico, obtendo-se um composto de fórmula (b}«

Ao composto de fórmula (fe), dissolvido num solvente orgânica adequado, tal como dimeti1formamida (DHF), adicionam-se uma base orgânica, tal como trimetilamina, ou, preferivelmente, trietilamina, um composto de paládio '(11), tal como acetato de bis(difenilfosfino)propanopaládio (II), ou, preferivelmente, acetato de bis(trifenilfosfina)paládio (II), e um alcanolC^-g, seguindo-se a adição de CO, obtendo-se um composto de fórmula (c).

71 434 SBC Case 14458

Esauema ϊ Ϊ Οη oalk0 l-o

0 Esquema II ilustra um processa para preparar os compostos oa invenção,, Um composto de fórmula í c:) que pode ser preparada como no Esquema I anterior* ê oxidado obtendo-se um composto de formula (d). A oxidação pode ser realizada usando um solvente orgânico apropriado* tal como benzeno, e um agente oxidante,, tal como. clorocromato de piridínio,, 0 composto de fórmula (d) pode ser depois hidrolisado, por examploj por contacto com um agente

alcaimo, tal tomo carbonato de potássio» obtendo-se um comoosto os formula ibj. Suosequentemente â hidrólise, o composto de formula (e; pode ser rediuido,, por contacto com um agente redutor , tal como boro-hidreto de sódio, para se obter um composto de formula {g » AI ternativamente, o composto de fórmula (d) pode ser reduzido, obtendo-se um composto de fórmula (f), por contacto com um agente redutor, tal como boro-hidreto de sódio» Depois, pode--se hi.drol.isar o composto de fórmula (f), por exemplo» por contacto com um agente alcalino., tal como carbonato de potássio, obtendo-se um composto de fórmula (gj. □s sais de adição de base,, farmaceuticamente aceitáveis, dos compostos de fórmula (I) cia invenção, contendo um grupo ácido, podem ser preparados, por processas conhecidos, a partir de bases orgânicas s inorgânicas, que podem incluir bases de metais alcalinos e de metais alcalino-terrosos, não tóxicas, tais como nidróxido de cálcio, de sódio e de potássio, hidróxido de amónio, e bases orgânicas não tóxicas, tais corno trieti lamina., butilamina, piperazina e (tri-hidroximet.il) meti lamina» £m virtude dos compostos de fórmula (I), ou dos seus sais íarmaceuticamente aceitáveis, inibem a actividade da esteróide-5--α-redutase, têm uti1 idade.terapêutica no tratamento de doenças s de condições onde diminuições na actividade da DHT produzem o efeito terapêutico desejado» Estas doenças e condições incluem a acne vulgaris„ a seborreia, o hirsutismo feminino, doenças da próstata, tais como a hipertrofia próstâtica benigna e o cSncro da próstata, e a calvície masculina padrão» Como inibidores da esteróide-5-«-redutase, os compostos de fórmula (1), ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis, melhoram também a urodinâmica. isto é, estes compostos ou os seus sais aliviam problemas relacionados com a micção, mesmo antes da diminuição do tamanho da próstata»

Testaram-se vários compostos da invenção, para determinar a potência de inibição da esterô.ide-5-α- redutase humana, usando tecido de próstatas humanas hiperplásticas» Para determinar a

potência na inibição da enzima humana, usou-se o procedimento seguinte.

Descongelaram-se próstatas humanas congeladas e trituraram-sa em pequenos bocados (5 mm-') « Homogeneizou-se o tecido em 3 a S volumes de tampão de fosfato de potássio 20 mM, pH 6,5, contendo 0,33 M de sacarose,, 1 mii de ditiotreitol e 50 μΜ de NADPH, com um aparelho Brinkmanh Polytron (Sybron Corporation, Westbury, New York),, Subrneteu-se a solução a sonicação durante 3 a 5 minutos com um Sonifier (Branson Sonic Power 00.) a que se seguiu uma homogeneização manual num homogeneizador Dounce de vidro (Kontes Slass Company, Vineland, New Jersey).

Obtiveram-se partículas de próstata por centrifugação diferencial a 600 ou. 1000 x g, durante 20 minutos e a 140«000 x g durante 60 minutos a 4oC» Lavou-se o sedimento obtido da centrifugação a 140.000 x g com 5 a 10 volumes de tecida do tampão descrito anteriormente e recentrifugou-se a 140,,000 x g, Suspendeu-se o sedimento resultante em tampão de fosfato de potássio 20 mH, pH 6,5, contendo 20% de glicerol, 1 mM de ditiotreitol e 50 μΙΊ de NADPH,, A solução de partículas em suspensão foi armazenada a -80°C» MA) em num

Depositaram-se uma quantidade constante de testosterona (52 a 55 mCi/mmol, New England Nuclear, Boston, em etanol e quantidades variáveis do inibidor potencial stanol, em tubos de ensaio, e concentraram-se até á secura 3AVANT Speed Vac. A cada tubo de ensaio adicionou-se tampão, 20 μΐ de NADPH 10 mM e uma alíquota de solução de partículas de próstata, até um volume final de 0,5 ml de citrato de sódio 50 mH, pH 5,0. Após incubação da solução a 37°C durante 20 a 30 minutos, extinguiu-se a reacção pela adição de 4 ml de acetato de etiio e adicionaram-se 0,25 pmol de testosterona, di--hidrotestosterona, androstanodiol e androstanodiona, como transportadores,, Removeu-se a fase orgânica para um segundo tubo de ensaio e evaporou-se, até à secura, num Speed Oac „ Dissolveu— se o resíduo em 20 a 30 μ.1 de clorofórmio e manchou-se numa faixa individual cie uma placa de TLC de sílica gel de faixas pré- “16" SõC Case .14458 -definidas de 20 x 20 cm (Si 2S0F-PA, Baker Chemical) e desenvolveram-se duas vezes com acetona a clorofórmio (1*9)« Determinou-se o teor radioquímico nas bandas do substrato e cios produtos com um leitor de visualização BIQSCAN (Bioscan, Ine„, Washington, D,C,), Calculou-se a percentagem de radio—marcador recuperado convertido no produto,, a partir da qual se determinou a actividade da enzima» Todas as incubaçSes foram realizadas de modo a que não se consumisse mais do que 20% do substrato (testosterona)»

Os resultados obtidas experimentalmente foram ajustados em computador a uma função linear, representando o recíproco da actividade da enzima (1/velocidade) em função da concentração variável de inibidor (Dixon, M» (1953), Biochem» J., 55, 170)., Assumindo que o inibidor esteróide é um inibidor competitivo cia testosterona, pode-se calcular um valor para a constante ds .inibição (Κχ) a partir da Equação is Κχ = (B/A)/(S/Km + 1) Equação i onde B é a ordenada na origem no eixo de 1/velocidade, A é o declive da recta, S é a concentração do substrato (Testosterona) usada na experiência e Km é a constante de Michaelis-Menton do substrato (testosterona) que numa experiência separada se determinou ser 4,5 μΜ»

Na Tabela 2 apresentara-se os resultados dos testes anteriores e mostra-se que os compostos testados da invenção são potentes inibidores da esteróide—5-«-redutase humana. labela 5

Constantes de inibição da esteráide-5-α--redutase humana

Composto i<·; (nM) (1) Ácido 17|3-(N,N~di~.isopropil- 13 - 20 ca r ho x amido)-7-ox o-an d ros t a--3,5-d ieno-3-carboxí1ico (Preparado como no Exemplo 25

(2) Ácido 17(3-( N-t-butilcarboxamida) — 45 -J-oxo-androsta-S, S-dieno-3--carboxílico (Preparado como no Exemplo 7) l3) Acido 17(3-( Ν,Ν—di-isopropil- 4-15 c a r bo x am i d 0-7(3 - h i d r ox i. ·--androsta—3, 5~d ±eno—3-carboxí 1 i c o (Preparado como no Exemplo 5)

Adicionalmente, observou-se a supressão da concentração de DHT, in vivo, pelo uso de um composto de fórmula (15, num painel de primatas,,

Os compostos de fórmula (I), ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis, podem ser incorporados em formas de dosagem convenientes, tais como cápsulas, comprimidos, ou preparações injectáveis. Podem-se utilizar transportadores ou diluentes farmacêuticos, sólidos ou líquidos. Exemplos de transportadores sólidos incluem, amido, lactose, sulfato de cálcio di-hidratado, caulino, sacarose, talco, gelatina, ágar, pectxna, goma arábica, estearáto de magnésio e ácido esteárico. Exemplos de transportadores líquidos incluem, xarope, óleo de amendoim, azeite, solução salina e água» 0 transportador ou ailuente pode incluir qualquer material de libertação prolongada, tal como monoestearato de glicsrilo ou diestearato de glicerilo, soEinho ou conjuntamente com uma cííra,

A quantidade transportador sólido pode variar grandemente mas, preferivelmente, será de cerca de 25 me; a cerca de i g, por unidade de dosagem» Quando se u.sa um transportador líquido, a preparação pode estar na forma de um xarope, elixir, emulsão, cápsula de gelatina mole, líquido estéril injectável, tal como numa ampola, ou na forma de uma suspensão num líquido;, aquoso ou não aquoso» com de acordo -envolvendo

As composições farmacêut as técnicas cor»vencionais icas podem ser preparadas d o q u i mico f a rmacêutico, mxstura, granulação- e prensagem, conforme apropriado paira as formas de comprimido, ou mistura, enchimento e dissolução dos 7i 434 SBC Casô 14458

--18™ ingredientes, conforme apropriado para se obterem os produtos orais ou parentéricos desejadas»

As doses dos compostos de fórmula (I) do presente invento, ou dos seus sais farmaceuticamente aceitáveis, numa unidade de dosagem farmacêutica, tal como anteriormente se descreveu, serio uma quantidade eficaz, não tóxica, seleccionada na gama de 0,1 -IODO mg/Kg de composto activo, preferivelmente de 1-100 mg/Kg. A dose seleccionada pode ser administrada a um paciente humana que necessite de inibição da esieróide-S-a-redutase, de 1-6 vezes ao dia, topicamente, oralmente, rectalmente, por injecçlo. ou continuamente por perfusão. As unidades de dosagem oral para administração a humanos contêm, preferivelmente, de 1 a 500 mg de composta activo» 0 presente invento inclui, também, métodos de inibição da actividade da esteróide-5-a-redutase em mamíferos, incluindo os humanos, que compreende a administração internamente a um sujeito que necessite desta inibição, de um composto de fórmula (I) ou dum seu sal farmaceuticamenie aceitável, numa quantidade eficaz, inibidora da esteróide-5-a-redutase. 0s processos, do presente invento, de redução do tamanho da próstata, que incluem métodos de redução da velocidade á qual o tamanho da próstata aumenta ou de manutenção do tamanha da próstata, compreendem administrar, internamente, a um sujeito, uma quantidade eficaz tíe um composto de fórmula (1), ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável„

Equivalentes de compostos de fórmula Cl) contemplados, são compostos correspondentes aos compostos de; fórmula < I) aos quais se adicionaram subnstituintes a qualquer das posições não substituídas dos compostos de fórmula (I), ou nos quais os grupos meti lo em CNq ou Cj.3 estão ausentes ou substituídos por alquiloC2-4, desde que estes compostos tenham a utilidade farmacêutica dos compostos de fórmula (I3«

Os e fórmula compostos xemplos seguintes ilustram a preparação da compostos de (1) e de composições farmacêuticas contendo estes » Não se pretende que os exemplos limitem'o Smhito da

/X 4·~ι4

SBC L/35S X445S -19- invenção, tal como aqui anteriormente se definiu e a seguzr se reivindica» 176—(N„N-di-lsopropiIcarboxamirio)-7-oxo— androsfca-3„ 5-dieno-5-carbaxilato de etilo ( i } Ácido androst-4~eno-5—ona-17B-cartaoí 1 ico

Dissol veu-se o andrpst-4“ena-3-ana-17f3-carbaxi lato de meti lo (20 gs 60 mmole) em 700 ml de uma solução 20si de metanóiságua s adicionou-se hidróxido de potássio (7 g), e aqueceu-se a solução ao refluxo* sob árgan, durante 24 horas., Depois* acidif icou-se a 3 adicionaram-se 250 ha ra f i1trou-ss a (94%) de ácido mistura reaccianal com ácido clorídrico a 3% ml de água» Após envelhecimento durante .1 mistura e secou-se, obtendo-se 10 g androst—4—eno—3-ona—17(3—carboxí Iico na forma de um sólido branco cristal ino (i i) Androst-4-enQ-5-ona-176-(N»N-di-iso- prooilcarboxamida)

Secou-se* azeoiropicamente, uma solução de ácido androst-4-eno”3“ona”i7|B-carbQxilico (18 g, 006 mole) em 350 ml de tolueno até se recolherem aproximadamente 100 ml de destilado» Depois, arrefeceu-se a solução até 10°C. Adicionou-se piridina i.á,7 ml, 0,08 mole) seguida pela adição lenta de uma solução de cloreto de oxalilo (7,2 ml, 0,08 mole) em 10 ml de tolueno» Agitou-se a mistura reaccianal â temperatura ambiente (sob ârgon) durante 2 horas, e, depois, arrefeceu-se até 0°C» Adicionou-se, gota a gota, uma solução de di-isopropilamina (89 ml, 0,6 mole) em 40 ml de tolueno, de modo a que a temperatura não excedesse os 40°C. Agitou-se a mistura reaccional durante 1 hora e depois extinguiu-se com 300 ml de água-gelo* Separaram-se as fases e extractou~se a fase aquosa 4 vezes com acetato de etilo (800 ml).

Com b i n a ram-se as fases orgânicas e lavaram-se com ácido clorídrico a 5% 0 1 com sal moura» Secou -se, depois, a fase orgânica sobre sulfato de sódio e concent rou-se até á s e o u r a» P o r rec rista1i zação por dissolução em 10 ml de tolueno e

/ ,1,. £{..·, aj. 6BC Case 14458 adição de 200 ml de hexana, obtiveram-se 16,5 g (69%) cie androsi-4-ena-3-ona-i70™ (M,N-di-isopropiIcarboxamida) ( ρf „ 236™ i ri.,.·.».* f >»*/ J Π ( íii ) 1,78-('MaN-di-isopropiIcarboxamido)-5- (t r 1. f 3. uo rotne 111 su 1 f ona to) --30 d roa t a-55--d ieno D isso 1 veu-se a an d ros t-4-en ο-3-οηa-178™ £ N, N-d i-1 sopropi 1 car-ooxamida) (5 g, 12,5 mmole) em 50 ml de cloreto de metileno» à solução de esteróide adicionou-se, depois, 2,6-di-t-bufcil—4-"metilpiridina (3,08 g, 17,0 mmole) e agitou-se à temperatura ambiente durante 15 minutos» Adicionou-se anidrido trifluorometa-nossulfónico £3,5 ml, 19 mmol) à solução e continuou-se a agitação durante 30 minutos» Diluiu—se, depois, a mistura reaccional com 50 ml de cloreto de metileno e filtrou-se. Lavou- fase orgânica, duas ve; om ácido clorídrico a 5%, solução saturada ds bicarbonato de sódio e com salmoura. Depois, secou-se sobre sulfato de sòd'io e evaporou-se» Purificou-se o triflato por cromatografia em sílica gel, por eluição com 20% de acetato de etilo em hexana, obtendo-se 4 g (61%) de 170-(N,N-di--isopropiIcarboxamido)-3-(trifluorometilsulfonato)-androsta-3,5— -tíieno» s.iv) 176—(M«N-di—isopropiIcarboxamido)-androsta- 3,3-dieno-3-carboxilato de etilo A uma solução de 170-(N,N-di-isopropiIcarboxamido)-3-(tri-fluorometilsulfonato)-androsta-3,5-dieno (4 g, 7,5 mmole) em 60 ml ds uma solução ís1 de etanol em DMF, adicionou-se acetato de bis(trifenilfosfina)paládio (II) (570 mg) e um grande excesso (20 ml) de trietilamina» Fes-se borbulhar monóxido de carbono através da solução, durante 5 minutos, e agitou-se a mistura reaccional a 65°C, de um dia para o outro, sob i atmosfera da C0„ Diluiu-se depois a mistura, com acetato de etilo e lavou-se com água até pH neutro» Secou—se a fase orgânica sobre sulfato de sódio e evaporou-se» Por purificação, por cromatografia em sílica gel, por eluição com 20% de acetato de etilo em hexana, fí^-á

e hexano, obteve—se 3,, 5-dien0“3~car box i 1 a- ο 7 43.4 ·=££ Case 14458 seguida de recristalisaçáo em éter etílico .1.7 β - {N, |\|-d i - i so p r o p i 1 c a r bo x am i d o) -an d ros ta· to de etilo» (V) 17ff(N„N~di-isopropi1carboxamido)-7-bxh-androsta-3» 5~diena~5~carbox,i lato dg etilo

Aqueceram-se 17p-(N,N-di-isopropi1earboxamido)-androsta-3,5--dleno-3-carboxilato de etilo (40 mg;, 0,09 mmole) e clorocromato de piridinio (129 mg , 0, 6 mmole) em 4 ml de benzeno, ao refluxo. durante 18 horas»

Eluíu-ss a mistura reaccional arrefecida através de uma coluna de Florisil, com acetato de etilo e concentrou-se. Cromatografou-se depois o resíduo (sílica gel., hexanosacetato de etilo 4si) obtendo-se 30 mg (70%) do composto do título»

Exemplo 2

Acido 170-( N, IM-d i - i so p r o pi. 1 c a r bo x am i d o) --7-oxo—and rosta—5»5—d ieno--3-carboxl 1 ico A 88 ml de uma solução 10sl de metanol-água adicionaram-se 17β-(N,N-di-isopropilcarboxamido)-7-oxo-androsta-3,5-dieno-3-car-boxilato de etilo (3,17 mmole) e 1 g de K2CO3 e aqueceu-se ao refluxo, sob argon, durante 20 horas» Depois, concentrou-se a mistura até à secura e diluíu-se com água» Lavou-se a fase aquosa com acetato de etilo e acidificau-ss» Lavou-se a emulsão várias vezes com diclorometano» Secou-se a fase orgânica sobre sulfato de sódio e evaporou-se» 0 produto foi recristalisado a partir de acetonitrilo obtendo-se o ácido 170-(N,N-di-isoprapilcarboxamida)--7-oxo-androsta-3,5-dieno-3-carboxílico (p„f» 160-161°C)»

Exemplo 3 176-N., N-d i-isopropi lcarboxamido )-/-oxo-and ros ta--3»5-dienο-3-carboxi1ato de metilo (i) 17S-(N»N-di isopropilcarboxamido)-androsta~3» 5- dieno-3-carboxilato de meti lo 0 composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 1,

71 434 SBC Case 14458 passos (i)-(iv) substituindo o etanol por metanol no passo (xvj ao Exempla 1« (1i) 176-(N»N-di-isoprapiIcarboxamido)-7-oxo-andrpsta-5»5- -riisno-S-carboxilato de metilo

Tratou-se uma solução de i78-(N,N-di~isoprapilcarboxamido)~ -androsta-3,5-diena~3-carbaxilata de metilo (3,0 g, 6,8 mmole) em 225 ml de benzeno com clorocromato de piridínio (12,75 g, 27,2 mmole) e com peneiro molecular de 5$, em pó* (15 g) e aqueceu-se, ao refluxo, tíe um dia para o outro» Diluiu-se depois a mistura com benzeno (150 ml) e, filtrou-se» Concentrdu-se o filtrado e cromatografou-se (20% de acetato de etilo em hexanos) obtendo-se 1,, 1 g (35%) do composto do titulo»

Exemplo 4

Acido 17(3-( iNÍ,,lNí—di—isoprop±lcarboKamido)—7— -oxp-androsta-3.5-dieno-3-carboxlIicQ 0 composto do título foi preparado de acorda com o exemplo 2, substituindo a 178-(N?N-di-isopropilcarboxamido)-7-oxo--androsta-3,5-dieno-3-carboxilato de etilo por 17(3-(N,i\i-di--isopropi1earbaxamido)-7-oxo-androsta-3,,5-dieno-3-carboxilato tíe metilo»

Acido 176-( N.. M-d i - i so p r o p i 1 c a r bo x am i d o) -7B --hidroxi-androsta-3»5—dieno—3-carboxi1ico

Tratou-se uma solução de ácido 17(3-(N,N-di-isopropilcarboxa-mido)-7-axo™androsta-3, S-dieno-3-carboxi 1 ico (.120 mg, Q27 mmole) em etanol absoluto (10 ml), a 0oC, com NaBH4 (25 mg). Após 1 hora deixou-se a mistura aquecer até ’à temperatura ambiente» Após 3 horas,, removeu-se o etanol in vácuo e redissolveu-se o resíduo em CH-pCl? e filtrou-se» Concentrou-se o filtrado e recristalizou—se .U. o resíduo a partir de metanóis Hexano Is9,, obtendo-se 67 mg do composto do título (56%)« 71 434 SBC Case 14458

Εκemela é 176- (N-t-buti Icarboxamido) --7--qxq™· -androsta-55- d i e nq-·carbo;·:i 1 ato de meti lo ( i ) 176-· (N-t-buti Icarboxamido) ~androsta··-3 , 5- -d i en ο-3-c a r ba κ i 1 a to cl e rne t i 1 o 0 composto do título foi preparado de acordo com. o Exemplo i ϋ passos (1) a (iv)!( substituindo a di-isopropilamina por terc— -butilamina no passo (i.i) do Exemplo 1, e substituindo o etanol por metanol no passo (iv) do Exemplo 1« (i i) 176 - (M-1“· bu t i 1 c a r bo x am ido) --7--0 x o-an d ros ta·· ~3„S~dieno-3-carboxilato de meti 1o □ composta do título foi preparado de acordo com o passo (ii) do exemplo 3 substituindo o 176- (NjiM-di- -isopropi1carboxamido)-androsta-3s 5-dieno-3-carboxilato de meti lo por 176- (N—t—buti 1 carboxamido) -and ros ta—3 ,, 5—d ieno—3-car boxi 1 ates de meti lo.

Exemplo 7 Ácido 17 6 - (M-1 - bu 111 c a r bo :·; a m i d o) 7 - o x o - and ros ta-3,5--d ieno~-3~carboxí 1 ico 0 composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 2 .i substituindo o i76"Ç|\í,l|\|"di-isopropiicarboxamido)“7-oxo™ -androsta-35~dieno~3-earboxilato de etilo por 176-(N—t~ -butil(:::arboxamido)-7--oxo-androsta-3? 5-dieno-3-carboxilato de me tilo»

Exemolo 8 176- (N, M-di-isopropi lcarboxamido) -76--hidroxi-androsta-5,5~diena-3-carboxi-lato de etilo

Disso 1 veu-se o 176-·- (N ,t N-di-isopropi 1 carboxamido} -7-oxo--androsta-3,.S-dieno-3-carboxilato de etilo (47 mg,, 0,,1 mmole) em 1 ml de etanol e deixou-se arrefecer até 0oC, Adicionou-se boro-

71 434

SBC Case 1445S mg ) . -hidreto de sódio ¢4,,75 mg). Agitou-se depois a mistura reaccional a 0°C,, durante 30 minutos 3 e aqueceu-se,, graduai mente s até a temperatura ambiente» Após um total de 3 horas de tempo de reacção,, removeu- se 0 so UHpLI2u Lavou-se a fases solvente,, Red isso Iveu-se o resíduo em 3 CH2CI2 com HG1 0?5N frio e com salmoura,, secou-se sobre iigSQ/s. anidro e evaporou-se até â secura»

Cromatografou-se o resíduo (40% de acetato de etxlo,, 60% de nexano? obtendo-se o composto do título,,

Exemplo 9

Uma forma de dosagem oral para administração dos _ compostos de fórmula (I) é preparada por penei ração,, mistura e enchimento P em cápsulas de gelatina dura,, dos ingredientes nas proporções que se mostram na Tabela 3, seguinte,,

Tabela 3

Quantidades

Inaredientes Ácido 17(3-(di—isopropilcarbo- 50 mg xamido)-7-oxo-and rosta-3,5-d leno-3-carboxí X ico estearato de magnésio 5 mg lactose 75 mg

Exemplo 10

Misturam—se a sacarose,, o sulfato de cálcio di-hidratado e o composto de fórmula (I),, indicado na Tabela 4 seguinte,, e granulam-se nas proporções indicadas com uma solução de gelatina a 10%» Peneiram-se os grânulos húmidos, secam—se, misturam-se com o amidoj com o talco e com o ácido esteárico,, peneiram-se e prensam-se na forma de um comprimido. (a toela 4

Ingredientes Quantidades

Acido 170-(M“t“butilcarboxamida)“7- 100 mg -oxo-androsta-3 ? 5-dieno-3-carboxi~

Ixco

Sulfato de cálcio di-hidratado 150 mg sacarose 20 mg amido 10 mg talco 5 mg ácido esteárico 3 mq Εκemolo 11

Dissolve-se o ácido 17(3— (W,Ν-di-iso-propiicarboxamido)-7Í3--hidroKi-androsta-3s 5-di.eno-3-carboxi.lico ¢1,,0 g) em Ξ0 g de óleo de soja e emulsiona-se por mistura com 1,,2 g de fosfolípido de ovo e com água suficiente para se ter um volume final até 100 ml. A formulação interlípido formada é adequadas para administração intravenosa.

Na Tabela 5, na página seguinte? mostram-se os resultados dos vários testes realizados nalguns dos compostos·; da invenção. 71 434 SBC Case 14458 -26-

Tabela 5

y~V y-v y-T /X ω y*>. Tf /X CQ Tf VO s O VO O O o o «. o a ρ *> ** ·» CQ « S -p ω ra CQ %-✓ Φ w P v>y s^y VO Vy* O H co ω H CA V-/ *k ** ^ ψ» *k LA fA f- LA

σ« rH fc5 O Tf LA hS · CO rH CO rH (¾ ω * * * ·> rH O O H O rH Í4 £8 c (D a φrHH Φ m •H rH 'PG <

Φ O Ό « rH r- O O rH 4= i« 1 G CQ co o d VO Pl f*< rH β 0 Ο £Λ H Ο Ό IA t>- O O cd •k «k r α n ο ω rA Η ·*» O τί la σ Tf Cg LA CA O rH » * ·» G O CO rA O c- rH Cg O H 0 O CM W • Tf o o d) fci S rH H σ P rA a tcj w P co C— Ό CM CM (¾ • O O

| £> £> H W /^S O O o | O ,Q 1 li? 0 O Ό •H P Cg Pá * * aá w-fs »-« ,Q p Π Φ a cg 0 P O •H ΊΡ X fA rH O \ *»H IA Λ O oJ°y\ A •k X G 0 ΡΛ cd Φ P O cm / A rH »tí o -P P *H pá \ J ra CQ P P G. O LA •k °7 V o •Η 1 O P O -P P K\ / \ y •H +» P P, o \ \ c CO p o P rH \ / \ 1 cg O +3 co 43 •H Pi O n •H CQ -P p\ J/ •k 0 0 BH 1 O Φ Pi X •H o\ *H P 0 o rH Ο © P / \ I *r( a 1 c Φ / \ c- X o Í2=í P P \ iy r— O ¢5 p* \ II rH y—\ & fei o o O P v^y X +» \ 0 P 1 <n 0 Cg H U=D / 'P •H H 0 O C- *H O P ΓΑ rH X O Φ S X 1 01 G

O O rHΌ P cg a ρ ®OS X Pf w O P o ÍP c

CVI 71 434SBC Case 14458 -27- Tabela 5

lálise Elementar Γ- /—s <—\ ο y—N tJ-VD « n O O C0 o * » •k Ώ ® Ό g -p vx S-/ A 3 LP» *Λ O iH Γ- Ο ·» t- LTV σ> I-1 i ►z O 9 * K*\ ω « C0 CO σ\ r4 * » o O ο o o *tí o cr\ V0 o o r-í •P fctf 1 C CD LTV o d VO Pi N H 1 fl o ω CVJ Γ Ο Ό H σ> ΟΟ 0 ctJ ·* ·> •k c h H ω cu W -P Γ- o *0 O Η σ\ a vo ο H «k ·» 0 rl ΟΝ κ\ O Γ- 1—1 (tf ·· ·♦ *« O O κ 5¾ O v£> -O *0 0} * GO *;Q 00

irv—* tr\ Ln OOON m ιΛ νλ

m t- o *, ·» O rA c d d r) ϋa M »0 m

CM H O ·

•d" O £5a VO CM O

1 ο ,Ω ΙΓ\ ρ •k Ctf κν ο Η 01 •Η 4» Ρ. 09 Ο Ο U Μ Α ι3 ο C ctf GQ (tf U •Η ο 0 1 «Η ο Ο -Ρ •Η Η •Η *ρ d 0 Η η u I Ρ SH 0 4* *0 X Α η Η Ο 0 Η S Λ ,Ο ο\ U Ο Φ 1 Φ ca Β «V Γ- ο ο Γ- 1 ϊ£ Η /-ν ΝΛ Ο 1 0 13 Ο Ό •Η C *Η a φ Ο ctf •Η X Ό o< C w' vP « I t « a jl jl a u_a a_ jj

V

1 Γ— | • 1 Ο Ν"\ »d 1 •Η ο a 0 ctf ω Ο X •Η Η Ο 13 •Η ,Ο 1 -Ρ Ρ ΙΓΝ Φ 0 *k a 0 Ν"\ Η 1 φ *Η (0 13 *Ρ -Ρ 0 Q Ο & Ο «Ρ | Ρ ctf -Ρ 13 Η 1 α Η a ΰ X I Ο I ο ,Ω % X Ρ Γ ο (S Η ! 0

0 X I •M \

/o

o O rH Ό P a a ρ o d H P.H lí\ M3 o P o P· fi 71 431+ SBC Case 14458 -28- Tabela 5

VO CQ 0 O £5 O » *· »· g q m 03 D3 B *P N—✓ •'W*' « q LA LA LA 0 H CO f—! t- LA LA

n cd p q Φ s CD 1—I W

ON H fe O ia σ\ « * r- o tf 0D ·» ·> íH O H O —> Φ O Ό oi O D- O O 1—1 p Kd 1 q co co 0 d vo (¾ fc 1“1 * q 0 OV PA CA 0 n3 O H 0 cd q q CM CO fA H P. C— 0 τ3 cd H H VO PA CO d * LA PA 0 CM ** ·* H C**- GO ÍA cdO ...... O W íaq

Análise

cd tf r-H IA d PA S W U LA *0 CM P>4 O I O Fh ftí cd *H 0 6 cd PA X 0 O rQ q q φ cd ♦H 0 d H p ♦rí IA d P ·» 0 4= d PA 4* d to M cd 0 4= P p Ph to 1 GO SH tf 0 o\ S-/ q 0 ® 1 S <0, α 0 c— cd 0 É3 H 0 0 •H 0 X H 'd 0 •H X O c- O & 0( q H •H U d I u

o O H Ti PJ cd 6 U €> Λ X ® q o

invenção sido entender que a aí descritas e abrangidas no

Tendo as concretizações preferidas da ilustradas pela descrição anterior;, deve-se invenção não está limitada às instruções precisas que se reserva o direito a todas as modificações âmbito das reivindicações seguintes»

Claims

REIVINDICAÇÕES 1» Processo de preparação de um composto de fórmula (I)

o anel D tem uma ligação dupla opcional, ande se indica pela linha a tracejado, desde que o anel D não tenha uma ligação dupla Ci^-0^7 quando R— representa dois substituintes ou um substituinte divalente? X é í1) ceto, ou (2)-um átomo de hidrogénio e um grupo hidroxilo? R-1- é H ou alquilo e ti'*" 6? (1) «“hidrogénio, «“hidroxilo, ou a-ãc.B toi 1 o e/ ou 0 β-W-J-R3 onde W é uma ligação ou alquilo e R0 é (i) alquiloC^_g, (ii) alcoxiloC^-g, (iii) N(R^'>2? onde cada R^' é seleccionado, inde-pendentemente, de entre hidrogénio, alquilo C^_g., cicloalquilo C3_&, fenilo, ou ambos os grupos R^, conjuntamente com o átomo de azoto ao qual se ligam, representam um anel saturado de 5-6 membros compreendendo até um outro <» 71 434 SBC Case .14458

heteroátomo seleccionado de entre oxigénio e asoto 5 (2) jlll Hap =CH-k!"~C0“'Ro ou =CM.....W*-QR°, onde W e R'~' f®m o mesmo significado que anteriormente e ( i ) f en i 1 a 3. q u i 3. C c a r bon i 1 o s ( ii ) c ic 1 oa 1 qui 1 Cs-ujcarbon i 1 o, (iii) benzoilo. (iv) alcoxiCj__gcarbanilo,, (v) aminocarbonilo ou aminocarbonilo substituído por a 3. q u i 3. o C j .... g , (vi) a 1 qui I oC χ._gou (vii ) a 1 qui 3.Cj_.._20carbon i 1 o jj (3) a-hidrogénio e í3~NHC0Rà ande R6 ê alquiloC^-^ ou Í3-N(R^)2 onde R-<* tem o mesma significado que ante riormenteii ou (4) ceta§ ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável. caracterizadD por compreender: a reacção de um composto de fórmula (II)

na qual α anel D tem uma ligação dupla opcional, onde se indica pela linha a tracejado, desde que o anel D não tenha uma ligação dupla C16-17 quando R·^ representa dois substituintes ou um substituinte divalente e R3· e Rj~ são definidos como anteriormente. (i) corn um agente oxidante num solvente orgânico não eactivo para dar um composto de fórmula (I) onde X é estar, (2) quando X é hidrogénio e hidroxilo, a reacção do

composto ceto com um agente redutor? num solvente orgânico nao reactivo, para dar um composto de 7-hidroxilo de fórmula (I) j e? depois opcionalmente? a formação de um sal farmaceuticamente aceitável» 2o Processo de acordo com a reivindicação 1? caractarizado por o agente oxidante ser o clorocromato de piridínio. 3„ Processo de acordo com a reivindicação 1? caraeterizado par o agente redutor ser o boro-hidreto cie sódio.
4. Processo de acordo com a reivindicação 1? 2 ou 3? caraeterizado por o composto preparado ser um composto com a fórmula

II o na quais R1 e X são definidos como na reivindicação 1? e R"' é . |3-CON(r4)2» onde cada é seleccionado? independentemente? de entre hidrogénio e alquiloC^-gj ou. um seu sal farmaceuticamente aceitável.
5. Processo de acordo com a reivindicação 1? 2? 3 ou 4? caraeterizado por o composto preparado ser o ácido 170~(N~t~ -butiIcarboxamida) -7~oxo-androsta-3,5-dieno-3-caf-boxí 1 ico. 5 ou. um seu sal farmaceuticamente aceitável. é» Processo de acordo com a reivindicação i? 2? 3 ou 4? caraeterizado por o composto preparado ser o ácido 17iB“(NsN“di-—isopropíicarboxamida)-7-oxo-androsta-3? 5"dieno-3"carboxilico ou um seu sa1.
7. Processo de acordo com a reivindicação 1? 2? 3 ou 4? caracterizado por o composto preparado ser o ácido 170-(N?N~di~ /1 4·~*4 SBC Case 14458 ~isopropilcarbdMamida)-78~hidroMi-androsta~3,5-dieno“3“carbQKi--lico ou um seu sal. 8„ Processo de preparação de uma composição farmacêutica caracterisado por compreender a associação de um composto de fórmula {I) ,, ou de um seu sal farmaceuticamsnte aceitável 5 definido coma na reivindicação .1, com um transportador farmacêuticamente aceitável. Lisboaj, 23. m 1vv0 . Por SMITHKLINE BEECHAM CORPORATION - 0 AGENTE OFICIAL -