PT99426A

PT99426A - Processo para a preparacao de agentes sinergicos para o tratamento de estados artriticos e inflamatorios e de composicoes farmaceuticas que os contem

Info

Publication number: PT99426A
Application number: PT99426A
Authority: PT
Inventors: Stephen John Foster
Original assignee: Ici Pharma
Priority date: 1990-11-06
Filing date: 1991-11-05
Publication date: 1992-09-30
Also published as: AU8604991A; CS329691A3; EP0485111A2; AU649729B2; EP0485111A3; KR920009396A; ZA918387B; IL99792A0; TW216772B; IE913655A1; JPH04264028A; NZ240297A; CA2054312A1

Description

Descrição referente à patente de invenção de ICI PHARMA, francesa, industrial e comercial, com sede em "Le Galien", 1 rue des Chauffours, BP127, 95022 Gergy Cedex, e de IMPERIAL CHEMICAL INDUSTRIES PLC, britânica, industrial e comercial, com s£ de em Imperial Chemical House, Mill-bank, London SW1P 3JF, Inglaterra (inventors Stephen John Póster, resji dente na Inglaterra), para "PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE AGENTES SINÉRGI COS PARA O TRATAMENTO DE ESTADOS ARTRÍTICOS E INFLAMATÕRIOS E DE COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS QUE OS CONTÊM".

DESCRIÇÃO A presente invenção refere-se a um agen te sinérgico para o tratamento de estados inflamatórios ou artríticos. Mais particularmente a presente invenção refere-se a um agente constituído por um inibidor da enzima 5-lipoxigenase (daqui em diante 5-LO) e por um inibidor da enzima ciclooxigena se (daqui em diante CO) para o tratamento sinérgico de estados inflamatórios ou artríticos. A presente invenção refere-se também a uma composição farmacêutica contendo o referido agente si^ nérgico e â utilização do agente no fabrico de um medicamento para o tratamento sinérgico de doenças inflamatórias ou artríti^ cas. A enzima 5-LO é conhecida como estando - 1 - envolvida na catalização da oxidação do ácido araquidônico para proporcionar, via um processo de cascata, leucotrienos fisiológicamente activos tais como leucotrieno (LTB^) e leucotrienos peptído-lípidos tais como leucotrieno (LTC^) e leucotrieno (LTD^) e vários metabolitos. São conhecidos vários inibido-res de 5-LO tais como os descritos nos pedidos de patente europeu NQs 0375404 A2 e 0385662 A2.

As relações L biossintéticas e propriedades fisiológicas dos leucotrienos estão resumidas por G. W. Taylor and S. R. Clarke em Trends in Pharmacological Sciences, 1986, 100-1003. Os leucotrienos e os seus metabolitos têm si^ do implicados na produção e desenvolvimento de várias doenças inflamatórias e alérgicas tais como doenças artríticas, asma, rinites alérgicas, dermetites atípicas, psoriese, perturbações cardiovasculares e cerebrovasculares e doenças inflamatórias do intestino. Além disso os leucotrienos são mediadores de doenças inflamatórias devido à sua capacidade para modular a função lin fócita e leucócita. A enzima CO é também conhecida por estar envolvida na catalização da oxidação do ácido araquidônico para originar prostaglandinas e tromboxanos fisiolÓgicamente ac tivos. Muitos dos inibidores de CO são conhecidos tais como os agentes anti-inflamatõrios não esteroidais, por exemplo, indome tacina, ácido acetilsalicílico, ibuprofeno, sulindac, tolmetine ou piroxicama.

Nos pedidos de patente europeus NQs. 0375404 A2 e 0385662 A2 ê descrito que compostos que são inibidores de 5-LO possuem, devido aos seus efeitos na produção de leucotrienos, determinados efeitos citoprotectores, por exemplo são úteis na redução ou eliminação de determinados efeitos gastrointestinais adversos dos agentes anti-inflamatórios não este roidais inibidores de ciclooxigenase.

Além disso é descrito que a co-adminis-tração de um inibidor de 5-LO com um agente anti-inflamatório não esteroidal pode originar uma redução da quantidade do último agente necessária para produzir um efeito terapêutico reduzindo assim do mesmo modo os efeitos secundários adversos. Uma composição farmacêutica constituída por um inibidor 5-LO, um 2 ί

agente anti-inflamatório não esteroidal inibidor de CO e um di-luente ou veículo ê também descrito.

Existe assim a descrição que se pode ob ter um mero efeito aditivo quando se utiliza um inibidor 5-LO e um inibidor CO em conjunto no tratamento de condições inflamató rias ou artríticas. Descobriu-se agora, surpreendentemente, que a combinação de inibidores particulares de 5-LO e vários agentes anti-inflamatõrios não esteroidais inibidores de ciclooxige nase não originam apenas um efeito aditivo mas sim um efeito si^ nérgico. Assim os efeitos secundários adversos são muito reduzi dos e igualmente é melhorada a eficácia do tratamento dos estados inflamatórios ou artríticos.

De acordo com esta invenção proporciona -se um agente sinérgico para o tratamento de estados inflamatórios ou artríticos constituído por um inibidor de 5-lipooxigena se seleccionado de 6-[(3-fluoro-5-[4-metoxi-3,4,5,6-tetra-hidro-2H-piran-4-il]feno xi)metil]-l-metil-2-quinolona, 4-[5-fluoro-3-(4-metil-3-oxo-2,3,-di-hidro-4H-l,4-bensoxazin-7--il-tio)fenil]-4-metoxitetra-hidropirano, 4-metoxi-4-[5-(l-metil-2-oxo-l,2,3,4-tetra-hidroquinolin-6-il--tio)tien-2-il]tetra-hidropirano,

4-[5-fluoro-3-(1-metil-oxo-l,2,3,4-tetra-hidroquinolin-6-il--tio)fenil]-4-metoxitetra-hidropirano e 4-[5-fluoro-3-(4-(4-fluoro-alfa, alfa-difluorobenzil)feniltio)--fenil]-4-metoxitetra-hidropirano, em associação ou mistura com um agente anti-inflamatório não e£ teroidal.

Convenientemente o inibidor de 5-lipoxi genase é 6-[(3-fluoro-5-[4-metoxi-3,4,5,6-tetra-hidro-2H-piran--4-il]fenoxijmetil]-l-metil-2-quinolona.

Alternativamente o inibidor de 5-lipoxi genase é convenientemente 4-[5-fluoro-3-(4-metil-3-oxo-2,3-di--hidro-4H-l,4-benzoxazin-7-il-tio)fenil]-4-metoxitetra-hidropirano.

Os agentes anti-inflamatórios não este-] roidais inibidores de ciclooxigenase adequados incluem, por * exemplo, derivados do ácido arilacético tais como diclofenac, 3

indometacina, sulindac e tolmetina, derivados do ácido arilpro-piónico tais como fenoprofero, flurbiprofeno, ibuprofeno e ceto profeno, derivados do ácido arilbutírico tais como fenbufeno, derivados do ácido salicílico tais como ácido acetilsalicílico, derivados do ácido aminoarilcarboxílico tais como ácido flufenâ mico e tiazinocarboxamidas tais como piroxicama. De preferência o agente anti-inflamatório não esteroidal é seleccionado de indometacina, flurbiprofeno e diclofenc. Ê de notar que o& inibidores 5-LO e CO desta invenção podem misturar-se antes de serem doseados no cor po humano ou animal ou alternativamente podem utilizar-se em conjunção um com o outro, isto é, não necessariamente em simultâneo mas em sequência ou separado. É de notar que se pode obter um tratamento sinérgicamente eficaz mesmo na administração separada dos inibidores 5-LO ou CO uma vez que o efeito sinérgi co depende da presença simultânea dos dois agentes no local da inflamação. Factores tais como a taxa de absorção, metabolismo e a taxa de excreção de cada agente afectam a sua presença no local da inflamação. Tais factores são bem conhecidos na especialidade e são considerados de rotina pelo médico quando contempla o tratamento de um estado médico que necessita da administração conjunta dos dois agentes para se obter um efeito benéfico. Assim o agente sinérgico desta invenção é um produto que contém o inibidor de 5-lipoxigenase e um agente anti-infla-matõrio não esteroidal como uma preparação combinada para utili. zação em simultâneo, sequencial ou em separado no tratamento si nérgico de estados inflamatórios ou artríticos.

De acordo com um aspecto particular de£ ta invenção proporciona-se um agente sinérgico para o tratamento de estados inflamatórios ou artríticos constituído pelo inibidor de 5-lipoxigenase; 6-[(3-fluoro-5-[4-metoxi-3,4,5,6-tetra-hidro-2H-piran-4-il]feno xi)metil]-l-metil-2-quinolona, em associação ou mistura com iam agente anti-inflamatório não esteroidal seleccionado de indometc. cina, flurbiprofeno e diclofenac. 0 inibidor de 5-LO, 6-[(3-fluoro-5-[4--metoxi-3,4,5,6-tetra-hidro-2H-piran-4-il]fenoxi)metil]-1-metil--2-quinolona está descrito no Pedido de Patente Europeu NQ. 4 τ *

0385662 Α2 (exemplo 6, composto nQ. 16 no quadro II); e como o 8Q dos 19 compostos apresentados nas páginas 15 e 16, embora o nome químico alternativo de 4-[5-fluoro-3-(1,2-di-hidro-l-metil -2-oxoquinolin-6-ilmetoxi)fenil]-4-metoxitetra-hidropirano tenha sido utilizado. A quantidade de cada um dos ingredientes activos (isto é, o inibidor de 5-LO ou um inibidor de CO) que se combina com outro ingrediente activo para produzir o agen te desta invenção é tal que see obtém um efeito anti-inflamató-rio ou anti-artrítico sinérgico depois da dosagem do agente.

Por exemplo, um agente sinérgico desta invenção contêm, em geral, por exemplo, entre 0,5 mg e 2 g de cada um dos ingredientes activos. Em particular a quantidade do ingrediente inibidor CO do agente sinérgico desta invenção possui como um limite superior a quantidade descrita na especialidade para a monotera-pia convencional com um tal composto.

No agente sinérgico desta invenção a proporção molar entre os dois ingredientes activos varia necessariamente com o inibidor de CO seleccionado e com a aplicação pretendida. A proporção molar é seleccionada de tal forma que se obtém vim efeito anti-inflamatôrio ou anti-artrítico sinérgico depois da dosagem do agente. Em particular a proporção molar pode estar compreendida, por exemplo, entre 100:1 e 1:100; mais particularmente entre, por exemplo, 10:1 e 1:10; e mais particu larmente entre 5:1 e 1:5. É de notar que os inibidores de 5-LO e de CO desta invenção podem colocar-se em mistura íntima quando se prepara um agente sinérgico como definido anteriormente. Alternativamente os inibidores de 5-LO e CO desta invenção podem dosear-se em separado ou sequencialmente. De acordo com um outro aspecto desta invenção proporciona-se um processo para a preparação de um agente sinérgico como definido anteriormente caracterizado por se colocar em associação ou mistura um inibidor de 5-LO como anteriormente definido e um agente anti-infla-matório não esteroidal como anteriormente definido. 0 efeito sinérgico que se obtém por uti lização do agente da presente invenção pode ser demonstrado uti lizando o ensaio anti-inflamatório padrão in-vivo descrito adi- 5

ante: 0 ensaio baseia-se na observação de que uma dose elevada única de ácido araquidónico quando aplicada to picamente a um ouvido de um rato induz um desenvolvimento rápido de um edema inflamatório que, acredita-se esteja associado com a infiltração de neutrófilos (D. Aked et alia, Brit. J. Pharmacol, 1986, 8_9, 431) . De acordo com o método de ensaio, do searam-se oralmente grupos de 10 ratos (25 - 30 g cada) com um veículo sozinho (uma mistura de 0,5% de hidroxipropilmetilcelu-lose, 0,1% de polisorbato 80 e água), com um inibidor de 5-LO sozinho, com um inibidor de CO sozinho ou com uma combinação de inibidores de 5-LO e CO. Depois de um período de 1 hora aplicou -se tópicamente ácido araquidónico (1 mg em 10 microlitros de acetona) a um ouvido de cada rato. Depois de mais um período de 1 hora mataram-se os ratos e perfurou-se uma porção em forma de disco (com um diâmetro de 6 mm) em cada um dos ouvidos. A compa ração dos pesos dos discos do ouvido entre os ouvidos tratados com ácido araquidónico e os ouvidos não tratados permite determinar o efeito de cada tratamento.

Os pormenores da inibição da resposta inflamatória induzida pelo ácido araquidónico estão descritos nos exemplos 1 a 10 que acompanham esta memória. Em geral é evi dente que o efeito anti-inflamatório do inibidor de 5-LO, 6—[3— -fluoro-5-[4-metoxi-3,4,5,6-tetra-hidro~2H-piran-4-il]fenoxi)me til]-l-metil-2-quinolona é variável (entre 0 e 47% de inibição para 1 a 10 mg/kg oralmente) e que o efeito anti-inflamatório dos inibidores de CO indometacina, flurbiprofero ou diclofenac é também variável (0 a 55% de inibição para 1 a 10 mg/kg oralmente) , ao passo que existe um efeito anti-inflamatório nitidamente sinérgico quando se administram o inibidor de 5-LO e um inibidor de CO em associação ou mistura (19 a 88% de inibição para doses de 1 a 10 mg/kg, oralmente). Verificou-se um efeito semelhante nos exemplos 11 a 15 relativamente â utilização de outros inibidores de 5-lipoxigenase desta invenção. Não se verifica toxicidade nítida ou ou tros efeitos não desejados quando se administra um agente sinér gico como anteriormente definido em doses várias vezes múltiplas de uma dose inibidora mínima. 6

De acordo com um aspecto conveniente desta invenção proporciona-se um agente sinérgico como anterior mente definido em que o agente anti-inflamatório não esteroidal é indometacina.

De acordo com um outro aspecto conveniente desta invenção proporciona-se um agente sinérgico como definido anteriormente em que o agente anti-inflamatõrio não este roidal i flurbiprofeno.

De acordo com um outro aspecto conveniente desta invenção proporçiona-se um agente sinérgico como definido anteriormente em que o agente não esteroidal é diclofe-nac.

De acordo com um outro aspecto da presente invenção proporciona-se uma composição farmacêutica para o tratamento sinérgico de estados inflamatórios ou artríticos que incluem um inibidor de 5-lipoxigenase seleccionado de 6-[(3-fluoro-5-[4-metoxi-3,4,5,6-tetra-hidro-2H-piran-4-il]feno xi)metil]-l-metil-2-quinolona, 4-[5-fluoro-3-(4-metil-3-oxo-2,3-di-hidro-4H-l,4-benzoxazin-7--il-tio)fenil]-4-metoxitetra-hidropirano, 4-metoxi-4-[5-(l-metil-2-oxo-l,2,3,4-tetra-hidroquinolin-6-il--tio)tien-2-il]tetra-hidropirano, 4-[5-fluoro-3-(l-metil-2-oxo-l,2,3,4-tetra-hidroquinolin-6-il--tio)fenil]-4-metoxitetra-hidropirano, e 4-[5-fluoro-3-(4-(4-fluoro-alfa, alfa-difluorobenzil)feniltio)--fenil]-4-metoxitetra-hidropirano, em associação ou mistura com um agente anti-inflamatõrio não esteroidal e um diluente ou veí^ culo farmaceuticamente aceitável.

Convenientemente o inibidor de 5-lipoxi genase é 6-[(3-fluoro-5-[4-metoxi-3,4,5,6-tetra-hidro-2H-piran--4-il]fenoxi)metil]-l-metil-2-quinolona. Alternativamente o ini bidor de 5-lipoxigenase é convenientemente 4-[5-fluoro-3-(4-me-til-3-oxo-2,3-di-hidro-4H-l,4-benzoxazin-7-il-tio)fenil]-4-meto xitetra-hidropirano.

Convenientemente o agente anti-inflamatõrio não esteroidal é seleccionado de indometacina, fluorbipro feno e diclofenac.

De acordo com um aspecto particular da 7

V

presente invenção proporciona-se uma composição farmacêutica pa ra o tratamento sinérgico de estados inflamatórios ou artríticos que inclui o inibidor de 5-lipoxigenase, 6-[(3-fluoro-5-[4--metoxi-3,4,5,6-tetra-hidro-2H-piran-4-il]fenoxi)metil]-1-metil -2-quinolona em associação ou mistura com um agente anti-infla-matório não esteroidal seleccionado de indometacina, flurbipro-feno e diclofenac e um diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável.

A composição pode estar numa forma adequada para utilização oral, por exemplo, pastilhas, cápsulas, soluções, suspensões ou emulsões aquosas ou oleosas; para utili zação tópica, por exemplo, cremes, unguentos, geles ou soluções ou suspensões aquosas ou oleosas; para utilização nasal, por exemplo, um aspersor nasal ou gotas nasais; para utilização vaginal ou rectal, por exemplo, um supositório; para administração por inalação, por exemplo, como um pó finamente dividido ou um aerossol líquido; para utilização sublingual ou bucal, por exemplo, pastilhas ou cápsulas; ou para utilização parentérica (incluindo intravenosa, subcutânea, intramuscular, intravascular ou infusão), por exemplo, uma solução ou suspensão estéril aquosa ou oleosa. Em geral, as composições anteriores podem pre parar-se de uma forma convencional utilizando excipientes convencionais.

Ê de notar que os inibidores de 5-LO e de CO desta invenção podem colocar-se em mistura íntima quando se prepara uma composição farmacêutica de uma forma convencional. Alternativamente podem preparar-se composições farmacêuticas separadas contendo uma o inibidor de 5-LO e a outra o inibi dor de CO. De acordo com um outro aspecto desta invenção propor ciona-se um processo para a preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento sinérgico de estados inflamatórios ou artríticos caracterizado por se colocar em associação ou mistura um inibidor de 5-LO como anteriormente definido, um agente anti-inflamatório não esteroidal como anteriormente definido e um diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável. A quantidade de cada um dos ingredientes activos (isto é o inibidor de 5-LO ou um inibidor de CO) que se combina com outro ingrediente e um ou vários excipientes 8 para proporcionar uma forma âe dosagem única varia necessariamente com o hospedeiro tratado e com a via particular de administração. Por exemplo, uma formulação concebida para administração oral no homem contém, em geral, por exemplo, entre 0,5 mg e 2 g de cada um dos agentes activos misturados com uma quan tidade apropriada e conveniente de excipientes que pode variar entre 5 e 98% em peso da composição total. As formas unitárias de dosagem contém, em geral, entre 1 mg e 500 mg de cada ingrediente activo. Alternativamente cada ingrediente activo pode combinar-se separadamente com um ou vários excipientes para pro duzir uma forma de dosagem de duas partes. No último caso a com posição farmacêutica desta invenção inclui um conjunto constituído por um primeiro recipiente com uma composição adequada contendo o inibidor de 5-LO e um segundo recipiente com uma com posição adequada contendo o inibidor de CO. Um tal conjunto pode, por exemplo, possuir a vantagem de o médico que desejar obter um efeito anti-inflamatório ou anti-artrítico poder selec-cionar as quantidades apropriadas de cada ingrediente activo e a sequência e o seu esquema de administração. Os especialistas no tratamento de animais de sangue quente podem fácilmente se-leccionar as quantidades apropriadas dos ingredientes activos e o esquema de dosagem de forma a obter um efeito sinérgico. Em particular as proporções molares apresentadas anteriormente e os resultados apresentados adiante proporcionam aos especialistas indicações com esta finalidade.

De acordo com um aspecto conveniente desta invenção proporciona-se uma composição farmacêutica como anteriormente definida em que o agente anti-inflamatório não e£3 teroidal é indometacina.

De acordo com um outro aspecto conveniente desta invenção proporciona-se uma composição farmacêutica como anteriormente definida em que o agente anti-inflamatório não esteroidal é flurbiprofeno.

De acordo com mais um aspecto convenien te desta invenção proporciona-se uma composição farmacêutica co mo definida anteriormente em que o agente anti-inflamatõrio não esteroidal é diclofenac.

Como referido anteriormente um agente 9

sinérgico da presente invenção é útil no tratamento de doenças inflamatórias ou artríticas o que ê devido apenas ou em parte aos efeitos de metabolitos de ácido araquidónico originados por meio de percursos lineares (5-LO catalizado) e ciclooxigenase.

De acordo com ma outro aspecto da presente invenção proporciona-se a utilização de um inibidor de 5--lipoxigenase seleccionado de 6-[(3-fluoro-5-[4-metoxi-3,4,5,6-tetra-hidro-2H-piran-4-il]feno xi)metil]-l-metil-2-quinolona, 4-[5-fluoro-3-(4-metil-3-oxo-2,3-di-hidro-4H-l,4-benzoxazin-7--il-tio)fenil)-4-metoxitetra-hidropirano, 4-metoxi-4-[5-(l-metil-2-oxo-l,2,3,4-tetra-hidroquinolin-6-il--tio)tien-2-il]tetra-hidropirano, 4-[5—fluoro-3-(l-metil-2-oxo-l,2,3,4-tetra-hidroquinolin-6-il--tio)fenil]-4-metoxitetra-hidropirano e 4-[5-fluoro-3-(4-(4-fluoro-alfa, alfa-difluorobenzil)feniltio)--fenil]-4-metoxitetra-hidropirano, em associação ou mistura com um agente anti-inflamatório não esteroidal no fabrico de um agente para o tratamento sinérgico de doenças inflamatórias ou artríticas.

Esta invenção refere-se também a um método de tratamento de doenças inflamatórias ou artríticas que consiste na administração a um animal de sangue quente que necessite de tal tratamento de uma quantidade sinérgicamente eficaz de um inibidor de 5-lipoxigenase seleccionado de 6-[(3-fluoro-5-[4-metoxi-3,4,5,6-tetra-hidro-2H-piran-4-il]feno xi)metil]-l-metil-2-quinolona, 4-[5-fluoro-3-(4-metil-3-oxo-2,3-di-hidro-4H-l,4-benzoxazin-7--il-tio)fenil)-4-metoxitetra-hidropirano, 4-metoxi-4-[5-(l-metil-2-oxo-l,2,3,4-tetra-hidroquinolin-6-il--tio)tien-2-il]tetra-hidropirano, 4-[5-fluoro-3-(l-metil-2-oxo-l,2,3,4-tetra-hidroquinolin-6-il--tio)fenil]-4-metoxitetra-hidropirano e 4-[5-fluoro-3-(4-(4-fluoro-alfa, alfa-difluorobenzil)feniltio)--fenil]-4-metoxi-tetra-hidropirano e um agente anti-inflamatório não esteroidal.

Convenientemente o inibidor de 5-lipoxi genase utilizado no fabrico do referido agente ou no referido 10

método de tratamento é 6-[(3-fluoro-5-[4-metoxi-3,4,5,6-tetra--hidro-2H-piran-4-il]fenoxi)metil]-l-metil-2-quinolona ou 4—[5— -fluoro-3-(4-metil-3-oxo-2,3-di-hidro-4H-l,4-benzaxazin-7-il--tio)fenil]-4-metoxitetra-hidropirano.

Convenientemente o agente anti-inflamatório não esteroidal utilizado no fabrico do agente ou no método de tratamento é seleccionado de indometacina, flurbiprofeno e diclofenac. De preferência utiliza-se indometacina.

De acordo com um aspecto particular da presente invenção proporciona-se uma utilização ou um método co mo anteriormente definido em que o inibidor de 5-lipoxigenase é 6-[(3-fluoro-5-[4-metoxi-3,4,5,6-tetra-hidro-2H-piran-4-il]feno xi)metil]-l-metil-2-quinolona e o agente anti-inflamatõrio não esteroidal é seleccionado de indometacina, flurbiprofeno e diclofenac. 0 tamanho da dose para objectivos terapêuticos ou profilácticos dum agente como anteriormente definido varia, naturalmente, de acordo com a natureza e gravidade dos estados, a idade e sexo do animal ou paciente e a via de ad ministração de acordo com os princípios bem conhecidos na medicina.

0 agente sinérgico como anteriormente definido quando utilizado para objectivos terapêuticos ou profjL lácticos administra-se, em geral, de tal modo que é recebida uma dose diária compreendida entre, por exemplo, 0,5 mg e 75 mg por kilo de peso de corpo de cada ingrediente activo dada se ne cessário em doses divididas. Em geral administram-se doses infe riores quando se utiliza uma via parentérica. Assim, por exemplo, para administração intravenosa utiliza-se, em geral, uma dose de ingrediente activo compreendida entre, por exemplo, 0,5 mg e 30 mg por kilo de peso do corpo. Do mesmo modo, para a administração por inalação, utiliza-se uma dose de cada ingredien te activo compreendida, por exemplo, entre 0,5 mg e 25 mg por kilo de peso do corpo. De preferência utiliza-se a via oral de tal forma que é recebida uma dose diária compreendida, por exem pio, entre 0,5 mg e 30 mg por kilo de peso do corpo de cada ingrediente activo.

Esta invenção é, em seguida, ilustrada 11

I

pelos seguintes exemplos não limitativos de 1 a 10 os quais se relacionam com o ensaio dos agentes sinêrgicos desta invenção no modelo inflamatório do ouvido do rato descrito anteriormente.

Abreviaturas:-

Nos exemplos 1 a 10 o inibidor de 5-LO, 6-[(3-fluoro-5-[4-metoxi-3,4,5,6-tetra-hidro-2H-piran-4-il]feno xi)metil]-l-metil-2-quinolona i identificado pelo número [1[; a indometacina é identificada pela letra I; o flurbiprofeno é identificada pela letra F e o diclofenac é identificado pela le tra D. 0 efeito de cada um dos compostos ou combinação de compostos de ensaio é calculado como se segue (di ferença de peso do ouvido significa a diferença média em peso das porções em forma de disco do ouvido retiradas do ouvido tra tado com ácido araquidónico comparadas com o ouvido não tratado para cada rato): de controlo de ensaio % de inibição = -------------------------- x 100 (dif. de peso do ouvido - Dif. de peso do ouvido

Dif. de peso do ouvido de controlo

Ex Agente (mg/kg) % de Inibição Comb. % de Inibição Efeito sinérgico (%) 1 [1] 0 0 [1] + I (10 mg/kg) 0 16.9 1 14.6 1 29.2 - 2.3 3 19.1 3 67.4 + 31.4 10 47.2 10 87.6 + 23.5 - 12 -

Εχ Agente (mg/kg) % de Inibição Comb. % de Inibição Efeito sinérgico (%) 2 [1] [1] + I (10 mg/kg) 0 0 0 27.4 1 - 5.3 1 38.9 + 16.8 3 9.5 3 44.3 + 7.4 10 0.5 10 70.5 + 12.6 3 [1] [1] + I (3 mg/kg) 0 0 0 12.8 1 - 9.2 1 25.7 + 22.1 3 0 3 33.0 + 20.2 10 15.6 10 53.2 + 24.8 4 I I + [1] (10 mg/kg) 0 0 0 44.4 1 - 8.3 1 20.8 - 15.3 3 15.3 3 77.8 + 18.1 10 55.3 10 79.2 - 20.7 5 I I + [1] (10 mg/kg) 1 0 0 0 15.2 1 - 5.1 1 52.5 + 41.4 3 18.2 3 75.8 + 42.4 10 55.6 10 83.8 + 13.0 6 [1] [1] + F (3 mg/kg) 0 0 0 14.6 1 16.7 1 35.4 + 4.1 3 20.8 3 50.0 + 14.6 10 15.6 10 55.2 + 20.0 13

Ex Agente (mg/kg) % de Inibição Comb. % de Inibição Efeito sinérgico (%) 7 [1] [1] + P (3 mg/kg) 0 0 0 7.6 1 16.2 1 19.0 - 4.8 3 13.3 3 25.7 + 4.8 10 11.4 10 4 4 · 8 +25.8 8 D D + [1](10 mg/kg) 0 0 0 12.5 3 11.1 3 51.1 +27.5 10 - 3.4 10 36.4 +27.3 30 11.4 30 64.8 +40.9 9 D D + [1](10 mg/kg) 0 0 0 25.7 3 5.9 3 57.4 +25.8 10 4.9 10 63.4 +32.8 30 17.8 30 71.3 +27.8 10 D D + [1](10 mg/kg) 0 0 0 3.2 3 - 2.1 3 48.4 +49.5 10 7.4 10 50.5 +39.9 30 10.5 30 68.4 +44.7

Esta invenção é, em seguida, ilustrada pelos seguintes exemplos não limitativos 11 a 15 que relacionam os agentes sinérgicos de ensaio desta invenção no modelo inflamatório do ouvido do rato. 14

Abreviaturas:-

Nos exemplos 11 a 15 a indometacina é identificada pela letra I; o inibidor de 5-LO, 4-[5-fluoro-3--(4-meti1-3-oxo-2,3-di-hidro-4H-l,4-benzoxazin-7-il-tio)fenil]--4-metoxitetra-hidropirano é identificado pelo número [2]; o inibidor de 5-LO, 4-metoxi-4-[5-(l-metil-2-oxo-l,2,3,4-tetra-h_i droquinolin-6-il-tio)tien-2-il]tetra-hidropirano é identificado pelo número [3]; o inibidor de 5-LO, 4-[5-fluoro-3-(l-metil-2--oxo-1,2,3,4-tetra-hidroquinolin-6-il-tio)-fenil]-4-metoxitetra -hidropirano é identificado pelo número [4]? e o inibidor de 5--LO, 4-[5-fluoro-3-(4-(4-fluoro-alfa, alfa-difluorobenzil)fenil tio)fenil]-4-metoxitetra-hidropirano é identificado com o número [ 5 ] .

Ex Agente (mg/kg) % de Inibição Comb % de . Inibição Efeito sinérgico (%) 11 [2] [2] + I (10 mg/kg) 0 0 0 30 3 15 3 50 + 5 10 22 10 17* - 35 30 34 30 84 + 20 12 I I + [2](30 mg/kg) 0 0 0 27 1 13 1 57 + 17 3 27 3 74 + 20 10 33 10 82 + 22 13 [3] [3] + I (10 mg/kg 0 0 0 10* 3 17* 3 45 + 18 10 15 10 75 + 50 30 20* 30 83 + 53 15

Ex Agente (mg/kg) % de Inibição Comb • % de Inibição Efeito sinérgico (%) 14 [4] [4] + I (10 mg/kg) 0 0 0 - 2.5* 3 5* 3 45 + 43 10 21 10 76 + 58 30 22 30 71 + 52 15 [5] [5] + I (10 mg/kg) 0 0 0 27 3 11* 3 30 - 8 10 16* 10 57 + 14 30 17* 30 57 + 13 Notas Todos os números de % de inibição são estatisticamente significativos excepto os indicados com um asterisco (*) .

0 inibidor de 5-LO, 4-.[5-fluoro-3-(4-me til-3-oxo-2,3-di-hidro-4H-l,4-benzoxazin-7-il-tio)fenil]-4-meto xi-tetra-hidropirano está descrito no Pedido de Patente Europeu co-pendente NQ. 91305532,3 (exemplo 5) por intermédio do método seguinte:

Adicionou-se, gota a gota, butil-lítio (1,6 M em hexano, 1 ml) a uma mistura de 7-mercapto-4-metil-3--oxo-2,3-di-hidro-4H-l,4-benzoxazina (0,292 g), 4-(3,5-di-fluo-rofenil)-4-metoxitetra-hidropirano (0,342 g) e N-metilpirroli-din-2-ona (3,75 ml) que se tinha arrefecido num banho de gelo. Agitou-se a mistura e permitiu-se que aquecesse à temperatura ambiente. Aqueceu-se a mistura a 145Q C durante 90 minutos, ten do sido o hexano destilado da mistura de reacção. Arrefeceu-se a mistura à temperatura ambiente e fraccionou-se entre acetato de etilo e água. Lavou-se a fase orgânica com água e com solução aquosa de hidróxido de sódio IN, secou-se (MgSO^)e evaporou 16

-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia de coluna utilizando uma mistura 15:1 v/v de cloreto de metileno e éter dietí-lico como eluente. Obteve-se assim 4-[5-fluoro-3-(4-metil-3-oxo -2,3-di-hidro-4H-l,4-benzoxazin-7-il-tio)fenil]-4-metoxi-tetra--hidropirano (0,202 g, 33%), p.f. 131 - 1332 C.

Espectro de RMN (CDCl^ valores $) 1.8-2.1 (m, 4H), 2.98 (s, 3H), 3.37 (s, 3H), 3.75-3.95 (m, 4H), 4.63 (s, 3H), 6.76-7.25(m, 6H). O 7-mercapto-4-metil-3-oxo-2,3-di-hidro -4H-l,4-benzoxazina utilizado como um material de partida obteve-se como se segue:-

Aqueceu-se ao refluxo uma mistura de 5--fluoro-2-nitrofenol (10,05 g), carbonato de potássio (10,6 g) e acetona (125 ml) durante 10 minutos. Arrefeceu-se a mistura à temperatura ambiente e adicionou-se, gota a gota, uma solução de bromoacetato de etilo (7,8 ml) em acetona (10 ml). Aqueceu--se a mistura ao refluxo durante 2,5 horas. Evaporou-se a mistu ra e fraccionou-se o resíduo entre éter dietílico e água. Lavou -se a fase orgânica com água, secou-se (MgSO^) e evaporou-se. Obteve-se assim 2-(5-fluoro-2-nitrofenoxi) acetato de etilo (14,28 g, 92%), p.f. 44 - 462 C.

Agitou-se e aqueceu-se a 80Q C durante 7 horas uma mistura de 2-(5-fluoro-2-nitrofenoxi) acetato de etilo (11 g), benzilmercaptano (5,2 g), trietilamina (5,08 g) e DMF (50 ml). Arrefeceu-se a mistura, verteu-se em agua e acidificou-se por adição de ácido clorídrico aquoso diluído. Extraiu -se a mistura com éter dietílico. Lavou-se a fase orgânica com ãgua e com uma solução salina, secou-se (MgSO) e evaporou-se pa ra proporcionar 2-(5-benziltio-2-nitrofenoxi) acetato de etilo (10,6 g, 68%) como um sólido.

Aqueceu-se, ao refluxo durante 30 minutos, uma mistura de uma parte (8,68 g) do produto obtido, clore to estanhoso di-hidratado (Tet. Let., 1984, 839; 28,1 g), aceta to de etilo (5 ml) e etanol (50 ml). Verteu-se a mistura em gelo e adicionou-se uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio. Removeu-se o precipitado resultante por filtração e ex-traíu-se o filtrado com acetato de etilo. Lavou-se a fase orgânica com água e com solução salina, secou-se (MgSO^) e evaporou -se para proporcionar 7-benziltio-3-oxo-2,3-di-hidro-4H-l,4-ben 17

zoxazina (3,32 g, 49%), p.f. 153 - 154Q C.

Adicionou-se uma porção de (2,7 g) do produto obtido a uma suspensão agitada de hidreto de sõdio (dij3 persão a 60% p/p em óleo mineral, 0,52 g; removeu-se o óleo lavando a dispersão sólida com éter de petróleo) em DMF (10 ml) e agitou-se a mistura â temperatura ambiente durante 30 minutos. Adicionou-se iodeto de metilo (2,13 g) e agitou-se a mistura â temperatura ambiente durante 30 minutos. Fraccionou-se a mistura entre éter dietílico e água. Lavou-se a fase orgânica com água e com solução salina, secou-se (MgSO^) e evaporou-se para proporcionar 7-benziltio-4-metil-3-oxo-2,3-di-hidro-4H-l,4-ben-zoxazina (2,6 g, 91%) como um sólido.

Adicionou-se, gota a gota, uma solução de ácido 3-cloroperbenzóico (1,72 g) em clorofórmio (10 ml) a uma solução de uma porção (2 g) da benzoxazina obtida em clorofórmio (15 ml) que se tinha arrefecido a 0Q C e agitou-se a mij3 tura a 08 C durante 4 horas. Adicionou-se hidróxido de cálcio (0,74 g) e agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 15 minutos. Filtrou-se a mistura e evaporou-se o filtrado para proporcionar 7-benzil-sulfinil-4-metil-3-oxo-2,3-di-hidro-4H--1,4-benzoxazina (2,1 g) como um sólido que se utilizou sem purificação posterior.

Adicionou-se, gota a gota, ácido tri-fluoroacético (4,2 g) a uma suspensão agitada de uma porção (1,5 g) da benzoxazina obtida em cloreto de metileno (45 ml) e agitou-se a solução assim obtida à temperatura ambiente durante 30 minutos e depois aqueceu-se ao refluxo durante 30 minutos. Evaporou-se a mistura e fraccionou-se o resíduo entre acetato de etilo e água. Lavou-se a fase orgânica com água e com uma so lução aquosa saturada de bicarbonato de sódio, secou-se (MgS04) e evaporou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia de colu na utilizando misturas crescentemente polares de cloreto de metileno e éter dietílico como eluente. Obteve-se assim dissulfu-reto de di-(4-metil-3-oxo-2,3-di-hidro-4H-l,4-benzoxazin-7-ilo) (0,68 g, 60%), p.f. 133 - 135° C.

Depois da repetição do passo anterior adicionou-se trifenilfosfina (0,576 g) a uma suspensão de dis-sulfureto (0,776 g) em 1,4-dioxano (9 ml). Adicionou-se água 18 * *

(2,5 ml) e ácido clorídrico concentrado (1 gota) e aqueceu-se a mistura a 50° C durante 1 hora. Arrefeceu-se a mistura à temperatura ambiente e fraccionou-se entre acetato de etilo e solução aquosa de hidróxido de sódio 0,5 N. Lavou-se a fase orgânica com água e com solução salina, secou-se (MgS04) e evaporou--se. Obteve-se assim o material de partida pretendido (0,425 g, 55%) p.f. 96 - 96Q C. O 4-(3,5-difluorofenil)-4-metoxi-tetra--hidropirano utilizado como um material dé partida obteve-se como se segue:

Preparou-se um reagente de Grignard a partir de 3,5-difluorobromobenzeno (38,6 g) e magnésio (4,88 g) numa mistura de tolueno (100 ml) e THF (50 ml) utilizando o pro cesso seguinte. Dissolveu-se 3,5-difluorobromobenzeno em tolueno (50 ml) e adicionou-se uma porção (aproximadamente 5%) da so lução a uma suspensão agitada do magnésio numa mistura de tolue no (50 ml) e THF (50 ml). Agitou-se a mistura ã temperatura ambiente durante aproximadamente 40 minutos até se observar o inj[ cio da formação exotérmica do reagente de Grignard. Arrefeceu--se a mistura num banho gelado a uma temperatura compreendida entre 15° e 20Q C enquanto se adicionou o remanescente da solução de 3,5-difluorobromobenzeno. Agitou-se a mistura â temperatura ambiente durante 2 horas.

Adicionou-se tetra-hidropiran-4-ona (10,69 g) durante 1 hora a uma porção (100 ml) do reagente de Grignard obtido que se arrefeceu a uma temperatura compreendida entre 15 e 20e C. Agitou-se a mistura â temperatura ambiente du rante 2 horas. Arrefeceu-se a mistura num banho de gelo e adicionou-se solução aquosa de ácido clorídrico (50% p/v, 25 ml) e solução salina (30% p/v, 52 ml). Separou-se a camada de tolueno e extraíu-se a camada aquosa com tolueno (32 ml). Combinaram-se as soluções orgânicas e lavaram-se com água (4 x 32 ml). Evaporou-se a solução sob pressão reduzida até um volume de 16,3 ml. Obteve-se uma solução concentrada (90% p/v) de 4-(3,5-difluoro-fenil)-4-hidroxi-tetra-hidropirano em tolueno. Aqueceu-se o con centrado a 60õ C e adicionou-se clorobenzeno (22,25 ml) mantendo-se a temperatura a 60Q C. Permitiu-se que a mistura arrefecesse à temperatura ambiente e depois arrefeceu-se num banho de 19

gelo até uma temperatura compreendida entre 0 e 5Q C. Isolou-se o precipitado e lavou-se com hexano (2 x 10 ml). Obteve-se assim 4-3,5-difluorofenil)-4-hidroxi-tetra-hidropirano (12,2 g).

Dissolveu-se uma porção (7,15 g) do material obtido em N-metilpirrolidin-2-ona (25 ml) e adicionou-se a uma massa fluída de hidreto de sódio (dispersão a 60% p/p em óleo mineral; 3,34 g) em N-metilpirrolidin-2-ona (32 ml) que se arrefeceu num banho de gelo a aproximadamente 20Q C. Agitou-se a mistura a esta temperatura durante 30 minutos. Dissolveu-se iodeto de metilo (5,22 g) em N-metilpirrolidin-2-ona (2 ml) e adicionou-se à mistura. Aqueceu-se a mistura resultante a 30Q C e agitou-se durante 2 horas. Evaporou-se a mistura. Obteve-se assim 4-(3,5-difluorofenil)-4-metoxi-tetra-hidropirano que se utilizou sem purificação posterior. 0 inibidor de 5-LO, 4-metoxi-4-[5-(1-me til-2-oxo-l,2,3,4-tetra-hidroquinolin-6-il-tio) tien-2-il]tetra -hidropirano está descrito no Pedido de Patente Europeu co-pen-dente NQ. 91305531,5 (seu exemplo 7) por meio do método seguinte :

Adicionou-se, gota a gota, uma solução de 4-(5-bromo-tien-2-il)-4-metoxi-tetra-hidropirano (0,415 g) em THF (8 ml) a n-butil-lítio (1,5 M em hexano, 1 ml) que se tjl nha arrefecido a -78Q C e agitou-se a mistura a -78° C durante 2 horas. Adicionou-se uma solução de dissulfureto de di-(l-me-til-2-oxo-l,2,3,4-tetra-hidroquinolin-6-ilo) (0,576 g) em THF (1,5 ml) e agitou-se a mistura a -78Q C durante 3 horas. Permitiu-se que a mistura aquecesse à temperatura ambiente e agitou--se durante 16 horas. Verteu-se a mistura numa solução aquosa fria de cloreto de amónio (15% p/v) e extraíu-se com acetato de etilo. Lavou-se a fase orgânica com água, secou-se (MgSO^) e evaporou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia de coluna utilizando inicialmente uma mistura 6:4 v/v de éter de petróleo (p.e. 40-60Q C) e acetato de etilo como eluente. Obteve-se 4-me toxi-4-[5-(l-metil-2-oxo-l,2,3,4-tetra-hidroquinolin-6-il-tio) tien-2-il]tetra-hidropirano com um rendimento de 55%, p.f. 84 -- 86° C.

Espectro de RMN (CDgCOCD^, valoresi ) 1.95-2.20 (m, 4H), 2.4--3.0 (m, 4H), 3.06 (s, 3H), 3.27 (s, 3H), 3.65-3.80 (m, 4H), 20

7.0-7.3 (m, 5Η) . Ο 4-(5-bromotien-2-il)-4-metoxi-tetra--hidropirano utilizado como material de partida obteve-se como se segue:

Adicionou-se, gota a gota, n-butil-lí-tio (1,6 M em hexano, 31 ml) a uma solução agitada de 2,5-bromo tiofeno (12,1 g) em THF (40 ml) que se tinha arrefecido a -40Q C. Permitiu-se que a mistura aquecesse a -209 C e agitou-se a esta temperatura durante 1 hora. Arrefeceu-se a mistura a -78Q C e adicionou-se, gota a gota, tetra-hidropiran-4-ona (5 g). Permitiu-se que a mistura aquecesse ã temperatura ambiente e agitou-se durante 12 horas. Verteu-se a mistura numa solução aquosa fria de cloreto de amónio (15% p/v) e extraíu-se com ace tato de etilo. Lavou-se a fase orgânica com água, secou-se (MgSO^) e evaporou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia de coluna utilizando uma mistura 17:3 v/v de cloreto de metile-no e éter dietílico como eluente. Obteve-se 4-(5-bromotien-2--il)-4-hidroxi-tetra-hidropirano (4,16 g, 32%) p.f. 100 - 102QC.

Adicionou-se, porção a porção, hidreto de sódio (dispersão a 60% p/v em óleo mineral, 0,72 g) a uma so lução de uma porção (2,48 g) do produto obtido em THF (30 ml) e agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 30 minutos. Adicionou-se iodeto de metilo (2,4 ml) e agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 18 horas. Verteu-se a mistura numa solução aquosa saturada fria de cloreto de amónio e extraíu-se com acetato de etilo. Secou-se a fase orgânica (MgSO^) e evaporou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia de coluna utilizando uma mistura 9:1 v/v de éter de petróleo (p.e. 60 - 80S C) e acetato de etilo como eluente. Obteve-se o material de par tida pretendido (2,1 g, 80%), p.f. 57 - 59° C.

Espectro de RMN (CDC13, valores S ) 1.9-2.2 (m, 4H), 3.06 (s, 3H , 3.6-3.85 (m, 4H), 6.87 (d, 1H), 7.03 (d, 1H). O dissulfureto de di-(l-metil-2-oxo-l, 2,3,4-tetra-hidroquinolin-6-ilo) utilizado como um material de partida obteve-se como se segue:

Agitou-se uma mistura de l-metil-1,2--di-hidroquinolin-2-ona (8 g), catalisadora 10% de paládio em carvão (2 g) e etanol (60 ml) sob uma pressão de 3,5 atmosferas 21

de hidrogénio durante 24 horas. Filtrou-se a mistura e evaporou -se. Purificou-se o resíduo por cromatografia de coluna utilizando uma mistura 9:1 v/v de cloreto de metileno e éter dietíli co como eluente. Obteve-se assim 1-metil-l,2,3,4-tetra-hidroqujL nolin-2-ona (7,88 g, 98%) como um óleo.

Adicionou-se, gota a gota, uma porção (1,6 g) do produto obtido a ácido cloro-sulfõnico (8 ml) e aque ceu-se a mistura a 802 c durante 2,5 horas. Arrefeceu-se a mistura à temperatura ambiente, verteu-se numa mistura de gelo e água e extraíu-se com acetato de etilo. Lavou-se a fase orgânica com água, secou-se (MgSO^) e evaporou-se para proporcionar cloreto de l-metil-2-oxo~l,2,3,4-tetra-hidroquinolin-6-il-sulfq nilo (1,97 g, 76%), p.f. 137 - 1392 C.

Espectro de RMN (CDC13, valores á ) 2.7-3.25 (m, 4H), 3.41 (s, 3H), 7.13 (d, 1H), 7.80-8.10 (m, 2H).

Adicionou-se, gota a gota, iodeto de trimetilsililo (5 g) a uma solução de uma porção (1,2 g) do pro duto obtido em cloreto de metileno (40 ml) e agitou-se a mistura â temperatura ambiente durante 16 horas. Lavou-se a mistura com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio e com uma solução aquosa saturada de sulfito de sódio, secou-se (MgS04) e evaporou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia de coluna utilizando uma mistura 9:1 v/v de cloreto de metileno e éter dietílico como eluente. Obteve-se assim o dissulfureto pretendido (0,418 g, 43%), p.f. 130° C.

Espectro de RMN (CD3COCD3) 2.40-3.0 (m, 4H), 3.26 (s, 3H), 6.84 (d, 1H), 7.15-7.40 (m, 2H). O inibidor de 5-LO, 4-[5-fluoro-3-(1-me til-2-oxo-l,2,3,4-tetra-hidroquinolin-6-il-tio)fenil]-4-metoxi--tetra-hidropirano obteve-se como se segue:

Adicionou-se, gota a gota, n-butil-lí-tio (1,4 M em hexano, 1,43 ml) a uma solução agitada de 6-mer-capto-l-metil-1,2,3,4-tetra-hidroquinolin-2-ona (0,386 g) e 4--(3,5-difluorofenil)-4-metoxi-tetra-hidropirano (0,547 g) em 1--metilpirrolidin-2-ona (6 ml) que se tinha arrefecido a 02 C. Aqueceu-se a mistura a 1452 C durante 2 horas, permitindo-se que o hexano destilasse da mistura de reacção. Arrefeceu-se a mistura â temperatura ambiente e fraccionou-se entre acetato de 22

etilo e água. Lavou-se a fase orgânica com água, com solução aquosa de hidróxido de sódio 0,5N, com água, com solução salina, secou-se (MgSO^) e evaporou-se. Purificou-se o resíduo por cro-matografia de coluna utilizando misturas crescentemente polares de cloreto de metileno e éter dietílico como eluente. Obteve-se assim 4-[5-fluoro-3-(l-metil-2-oxo-l,2,3,4-tetra-hidroquinolin--6-il-tio)fenil]-4-metoxi-tetra-hidropirano (0,404 g, 50%), p. f. 124 - 1259 C. O 6-mercapto-l-metil-l,2,3,4-tetra-hi-droquinolin-2-ona utilizado como material de partida obteve-se como se segue:

Adicionou-se água (1 ml) e ácido clorídrico concentrado (1 gota) a uma suspensão agitada de dissulfu-reto de di-(l-metil-2-oxo-l,2,3,4-tetra-hidroquinolin-6-ilo) (0,576 g, trifenilfosfina (0, 432 g) e 1,4-dioxano (5 ml) e ag_i tou-se a mistura à temperatura ambiente durante 1 hora. Fraccio nou-se a mistura entre acetato de etilo e solução aquosa de hidróxido de sódio 0,5N. Lavou-se a camada aquosa com éter dietílico, acidificou-se por adição de ácido clorídrico aquoso diluí^ do e extraiu-se com acetato de etilo. Lavou-se a camada orgânica com solução salina, secou-se (MgSO^) e evaporou-se. Cristali^ zou-se o óleo resultante por trituração numa mistura de éter de petróleo (p. e. 60 - 80Q C) e éter dietílico. Obteve-se assim o material de partida pretendido (0,465 g, 80%), p.f. 84° C. O inibidor de 5-LO, 4-[5-fluoro-3-(4--(4-fluoro-alfa, alfa-difluorobenzil)feniltio)fenil]-4-metoxi--tetra-hidropirano obteve-se como se segue:

Aqueceu-se a 1200 C durante 60 minutos uma mistura de difluoro-4-fluoro-41-iododifenilmetano (8 g), 4--(5-fluoro-3-mercaptofenil)-4-metoxi-tetra-hidropirano (6,2 g), cloreto cuproso (0,34 g), carbonato de potássio (6,4 g) e DMF (22 ml). Arrefeceu-se a mistura à temperatura ambiente e frac-cionou-se entre água e éter dietílico. Lavou-se a fase orgânica com água e solução salina, secou-se (MgSO^) e evaporou-se. Puri ficou-se o resíduo por cromatografia líquida de média capacidade utilizando misturas crescentemente polares de hexano e aceta to de etilo como eluente. Obteve-se assim 4-[5-fluoro-3-(4-(4--fluoro-alfa, alfa-difluorobenzil)feniltio)fenil]-4-metoxi-te- 23

tra-hidropirano (9 g, 85%), p.f. 54 - 57° C (recristalizado a partir de uma mistura de hexano e éter dietílico). 0 difluoro-4-fluoro-41-iododifenilmeta-no utilizado como material de partida obteve-se como se segue:

Arrefeceu-se uma solução de 1,4-di-iodo benzeno (12 g) em THF (120 ml) a -80Q C sob uma atmosfera de ar gon e adicionou-se, gota a gota, n-butil-lítio (1,6 M em hexano, 23 ml). Agitou-se a mistura a -80QC durante 30 minutos e de pois adicionou-se 4-fluorobenzaldeído (4,6 g) , gota a gota. Ag_i tou-se a mistura a -80° C durante 30 minutos. Adicionou-se solu ção salina (100 ml) e permitiu-se que a mistura aquecesse ã tem peratura ambiente. Extraíu-se a mistura com éter dietílico. Secou-se a fase orgânica (MgSO^) e evaporou-se para proporcionar 4-fluoro-4'-iododifenilmetanol como um óleo (13,4 g) que se uti_ lizou sem purificação posterior.

Adicionou-se clorocromato de piridínio (6 g) a uma mistura de 4-fluoro-41-iododifenilmetanol (6,7 g), sílica (10 g) e cloreto de metileno (60 ml) e agitou-se a mistu ra à temperatura ambiente durante 60 minutos. Adicionou-se éter dietílico (20 ml) e filtrou-se a mistura. Evaporou-se o filtrado e recristalizou-se o resíduo a partir de uma mistura de hexa no e acetato de etilo. Obteve-se 4-fluoro-41-iodobenzofenona (3,9 g).

Espectro de RMN 7.1-7.3 (m, 2H), 7.5(m, 2H), 7.7-7.9(m, 4H).

Adicionou-se etano-l,2-di-tiol (1,14 g) e trifluoreto diacetato de boro (1,14 g) a uma solução de 4-fluo ro-41-iodo-benzofenona (2 g) em cloreto de metileno (5 ml) e agitou-se a mistura â temperatura ambiente durante 1 hora. Adicionou-se hexano (20 ml) e éter dietílico (5 ml) e extraíu-se a solução com solução de hidróxido de sódio IN (3 x 20 ml). Lavou--se a fase orgânica com água, secou-se (MgSO^) e evaporou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia líquida de média capacidade utilizando misturas crescentemente polares de hexano e acetato de etilo como eluente. Obteve-se assim 2-(4-fluorofenil^ -2-(4-iodofenil)-1,3-ditiolano como um óleo (2,3 g).

Espectro de RMN 3.45(s, 4H), 7.0(m, 2H), 7.4(d, 2H), 7.5-7.7(m, 4H) .

Adicionou-se um complexo fluoreto de hi 24 , .. —Luj— eswesotóiss^^*3 drogénio-piridina (1 ml) e uma porção (0,8 g) de ditiolano obtjL do a uma solução de l,3-dibromo-4,4-dimetil-2,5-dioxoimidazoli-dina (0,58 g) em cloreto de metileno (5 ml) que se tinha arrefe eido a -80° C. Agitou-se a mistura a -80° C durante 20 minutos. Adicionou-se hexano (30 ml) e permitiu-se que a mistura aqueces^ se à temperatura ambiente. Filtrou-se a mistura através de uma coluna de alumina utilizando misturas crescentemente polares de hexano e éter dietllico como eluente. Purificou-se o produto ob tido por cromatografia líquida de média capacidade em sílica utilizando misturas crescentemente polares de hexano e acetato de etilo como eluente. Obteve-se assim o material de partida pretendido como um óleo (0,25 g).

Espectro de RMN 7.0-7.3(m, 4H), 7.45(m, 2H), 7.8(m, 2H). 0 4- (5-fluoro-3-mercaptofenil) -4-metoxd. -tetra-hidropirano como material de partida está descrito no Pe dido de Patente Europeu NQ. 0420511 (seu exemplo 4). EXEMPLO 16

Este exemplo ilustra formas de dosagem farmaceuticamente representativas contendo um dos dois ingredientes activos de agente sinêrgico desta invenção [daqui em dian te o composto X é utilizado para identificar um dos inibidores de 5-LO [1] a [5] ou um dos inibidores de CO I, F ou D (utilizando as abreviaturas apresentadas anteriormente)]: (a) Pastilha I mg/pastilha

Composto X................................... 100

Lactose Ph.Eur ............................... 182.75

Croscarmellose de sódio ...................... 12.0

Pasta de amido de milho (pasta a 5% p/v) ..... 2.25

Estearato de magnésio ........................ 3.0 25

(b) Pastilha II mg/pastilha

Composto X ................................. 50

Lactose Ph.Eur ............................. 223.75

Croscarmelose de sódio ................... 6.0

Amido de milho ............................. 15.0

Polivinilpirrolidona (pasta a 5% p/v) ...... 2.25

Estearato de magnésio ...................... 3.0 (c) Pastilha III mg/pastilha

Composto X ................................. 1.0

Lactose Ph.Eur ............................. 93,25

Croscarmelose de sódio ..................... 4.0

Pasta de amido de milho (pasta a 5% p/v) ... 0.75

Estearato de magnésio ...................... 1.0 (d) Cápsula mg/cápsula

Composto X ................................. 10 mg

Lactose Ph.Eur ............................. 488.5

Estearato de magnésio ...................... 1.5 (e) Injecgão I (50 mg/ml)

Composto X ................................. 5.0% p/v

Solução de hidróxido de sódio 1M ........... 15.0% v/v

Acido clorídrico 0,1M...................... (para ajustar o pH a 7,6)

Polietileno glicol 400 ..................... 4.5% p/v

Agua para injecgão até 100% (f) Injecgão II (10 mg/ml)

Composto X ................................. 1.0% p/v

Fosfato de sódio BP ........................ 3.6% p/v

Solução de hidróxido de sódio 0,1M ......... 15.0% v/v

Agua para injecgão atê 100% 26 (lmg/ml, tamponada a _pH6)_

(g) Injecgão III

Composto X ............................. 0.1% p/v

Fosfato de sódio BP .................... 2.26% p/v Ãcido cítrico .......................... 0.38% p/v

Polietileno glicol 400 ................. 3.5% p/v Ãgua para injecgão a 100% .............. (h) Aerossol I mg/ml

Composto X ................................. 10.0

Trioleato de sorbitano ..................... 13.5

Triclorofluorometano ....................... 910.0

Diclorodifluorometano ...................... 490.0 (i) Aerossol II mg/ml

Composto X ................................. 2.5

Lecitina de soja ........................... 2.7

Triclorofluorometano ....................... 67.5

Diclorodifluorometano ...................... 1086.0

Diclorotetrafluoroetano .................... 191.6

NOTA

As formulações anteriores podem obter--*se por procedimentos convencionais bem conhecidos na especiali^ dade farmacêutica. As pastilhas (a)-(c) podem ser revestidas com vim revestimento entérico por meios convencionais, por exemplo para proporcionar um revestimento de acetato-ftalato de celulose. As formulações de aerossol (h) - (i) podem utilizar-se em associação com distribuidores normalizados de aerossois de dose controlada e os agentes de suspensão trioleato de sorbitano e lecitina de soja podem ser substituídos por um agente de suspensão alternativo tal como mono-oleato de sorbitano, ses-quiolato de sorbitano, polisorbato 80, oleato de poliglicerol ou ácido oleíco. EXEMPLO 17

Este exemplo ilustra formas de dosagem 27 farmacêuticas representativas contendo os dois ingredientes ac-tivos do agente sinérgico desta invenção [daqui em diante composto [1] e I são utilizados de acordo com as abreviaturas apre sentadas anteriormente; alternativamente o composto [1] pode ser substituído por qualquer um dos compostos [2] a [5] e o com posto I pode ser substituído pelo composto F ou o composto D]: (a) Pastilha I mg/pastilha

Composto [1] .............................. 100

Composto I ................................ 100

Lactose Ph.Eur ............................ 182.75

Croscarmelose de sódio .................... 12.0

Pasta de amido de milho (pasta a 5% p/v) .. 2.25

Estearato de magnésio ..................... 3#0 (b) Pastilha II mg/pastilha

Composto [1] .............................. 50

Composto I ................................ 5Q

Lactose Ph.Eur............................ 223.75

Croscarmelose de sódio ................... g q

Amido de milho ............................ 25 o

Polivinilpirrolidona (pasta a 5% p/v) ,. 2 25

Estearato de magnésio ................. 2 q (o) Pastilha.!!! mg/pastilha

Composto [1] ......................... 10

Composto I ........................^ 2 o

Lactose Ph.Eur....................^ ^ 92 25

Croscarmelose de sódio............ # ^ ^ Q

Pasta de amido de milho (pasta a 5% p/v) o 75

Estearato de magnésio .............

(d) Cápsula mg/cápsula

Composto [1] ................................ 10 mg

Composto I .................................. 10 mg

Lactose Ph.Eur .............................. 478.5

Estearato de magnésio ....................... 1.5 (e) Injecgão I (50 mg/ml)

Composto [1] ................................ 2.5% p/v

Composto I .................................. 2.5% p/v

Solução de hidróxido de sódio 1M ............ 15.0% v/v

Acido clorídrico 0,1M (para ajustar o pH a 7,6)

Polietileno glicol 400 ...................... 4.5% p/v

Agua para injecção até 100% (f) Injecgão II (10 mg/ml)

Composto [1] ................................ 0.5% p/v

Composto I .................................. 0.5% p/v

Fosfato de sódio BP ......................... 3.6% p/v

Solução de hidróxido de sódio 0,1M .......... 15.0% v/v

Agua para injecção até 100% 29

Claims

- lã - Processo para a preparação de um agente sinérgico para o tratamento de estados inflamatórios ou artríti cos caracterizado pelo facto de se incorporar como ingrediente activo um inibidor da 5-lipoxigenase seleccionado no grupo cons ^ tituído por: ^ 6-[(3-fluoro-5-[4-metoxi-3,4,5,6-tetra-hidro-2H-piran-4-il]feno xi)metil]-l-metil-2-quinolona, 4-[5-fluoro-3-(4-metil-3-oxo-2,3-di-hidro-4H-l,4-benzoxazin-7--il-tio)fenil]-4-metoxi-tetra-hidropirano, 4-metoxi-4-[5-(l-metil-2-oxo-l,2,3,4-tetra-hidroquinolin-6-il--tio)tieno-2-il]tetra-hidropirano, 4-[5-fluoro-3-(l-metil-2-oxo-l,2,3,4-tetra-hidroquinolin-6-il--tio)fenil]-4-metoxi-tetra-hidropirano e 4-[5-fluoro-3-(4-(4-fluoro-alfa,alfa-difluoro-benzil)fenil-tio)-fenil]-4-metoxi-tetra-hidropirano, em conjunto com um agente anti-inflamatório não esteroidal, estando a proporção molar entre o inibidor 5-lipoxigenase e o agente anti-inflamatório não esteroidal compreendida no interva lo variável desde 10:1 até 1:10. - 2S - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de o inibidor de 5-lipoxigenase ser o composto 6-[(3-fluoro-5-[4-metoxi-3,4,5,6-tetra-hidro-2H-pi-ran-4-il]fenoxi)metil]-l-metil-2-quinolona. 30 Μ < - 3â - Processo de acordo com qualquer das rei vindicaçóes anteriores caracterizado pelo facto de o agente an-ti-inflamatõrio não esteroidal ser seleccionado entre o grupo constituído por indometacina, flurbiprofeno e diclofenac. - 4ã - Processo para a preparação de uma compo sição farmacêutica para o tratamento de estados inflamatórios ou artríticos caracterizado pelo facto de se incorporar um agen te sinérgico quando preparado de acordo com qualquer das reivin dicações anteriores em conjunto com um agente anti-inflamatório não esteroidal e um veículo ou diluente farmaceuticamente aceitáveis . As requerentes reivindicam a prioridade do pedido de patente europeia apresentado em 6 de Novembro de 1990, sob o nQ. 90403144.0. Lisboa ® hM3m t , 5 de Novembro de 1991.

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