RS58945B1

RS58945B1 - Derivati benzodioksola kao inhibitori fosfodiesteraze

Info

Publication number: RS58945B1
Application number: RS20190851A
Authority: RS
Inventors: Simon Feldbæk Nielsen
Original assignee: Leo Pharma As
Priority date: 2010-06-24
Filing date: 2011-06-24
Publication date: 2019-08-30
Also published as: JP2016164168A; US20130123291A1; EP2585469B1; US9637499B2; TW201206940A; HUE044301T2; EP2585469A1; EP3070091A1; KR101864578B1; CY1117862T1; SI2585469T1; TWI507410B; JP2013529602A; SI3070091T1; KR20130038341A; ES2733092T3; PT3070091T; CN102958937B; HK1182699A1; WO2011160632A1

Description

Opis

OBLAST PRONALASKA

[0001] Ovaj pronalazak se odnosi na nova jedinjenja sa inhibitornom aktivnošću u odnosu na fosfodiesterazu, kao i na njihovu upotrebu kao terapeutskih agenasa u lečenju inflamatornih bolesti i stanja.

OSNOVA PRONALASKA

[0002] Fosfodiesteraze su enzimi koji katalizuju hidolizu cikličnog AMP i/ili cikličnog GMP u ćelijama, u 5-AMP i 5-GMP, respektivno, i kao takvi su kritični za ćelijsku regulaciju nivoa cAMP ili cGMP. Od 11 do sada identifikovanih fosfosdiesteraza, fosfodiesteraze (PDE) 4, PDE7 i PDE8 su selektivne za cAMP. PDE4 je najvažniji modulator cAMP eksprimiran u imunim i inflamatornim ćelijama kao što su neutrofili, makrofagi i T-limfociti (Z. Huang and J.A. Mancini, Current Med. Chem. 13, 2006, pp. 3253-3262). Kako je cAMP ključni sekundarni mesindžer u modulaciji inflamatornih odgovora, pronađeno je da PDE4 reguliše inflamatorne odgovore inflamatornih ćelija moduliranjem proinflamatornih citokina kao što je TNFα, IL-2, IFN-γ, GM-CSF i LTB4. Inhibicija PDE4 je stoga postala privlačno ciljno mesto za terapiju inflamatornih bolesti kao što su astma, hronična opstruktivna bolest pluća (COPD), reumatoidni artritis, atopijski dermatitis, Kronova bolest. (M.D.Houslay et al., Drug Discovery Today 10 (22), 2005, pp. 1503-1519). Kako pacijenti sa atopijskim dermatitisom (AD) imaju povećanu PDE-aktivnost, inhibicija PDE4 bi takođe mogla biti vijabilni tretman za AD (Journal of Investigative Dermatology(1986), 87(3), 372-6).

[0003] Familija PDE4 gena sastoji se od najmanje četiri gena, A, B, C i D, koji imaju visok stepen homologije (V. Boswell Smith and D. Spina, Curr. Opinion Investig. Drugs 6(11), 2006, pp. 1136-1141). Četiri PDE4 izoforme su diferencijalno eksprimirane u različitim tkivima i tipovima ćelija. Tako, PDE4B je najviše eksprimiran u monocitima i neutrofilima, ali ne u ćelijama korteksa i epitala, dok je PDE4D eksprimiran u plućima, korteksu, cerebelumu i T-ćelijama (C. Kroegel and M. Foerster, Exp. Opinion Investig. Drugs 16(1), 2007, pp. 109-124). Pretpostavljeno je da je inhibicija PDE4D u mozgu povezana sa štetnim efektima nađenim pri kliničkoj primeni inhibitora PDE4, primarno mučnina i povraćanje, dok je inhibicija PDE4B povezana sa anti-inflamatornim efektima (B. Lipworth, Lancet 365,2005, pp. 167-175). Međutim, veruje se da do sada razvijeni inhibitori PDE nisu specifični za bilo koju od četiri PDE4 izoforme.

[0004] Brojni inhibitori PDE4 su proučavani u odnosu na njihov terapeutski efekat na inflamatorne bolesti, primarno astmu, inflamatornu bolest creva i COPD. Prvi od njih, teofilin, je slabi, neselektivni inhibitor fosfodiesteraze korišćen u tretmanu respiratornih bolesti kao što su astma i COPD. Tretman sa teofilinom može, međutim, dovesti do blagih i teških štetnih efekata, npr. aritmije i konvulzija, ograničavajući kliničku upotrebu teofilina (Kroegel and Foerster, supra). Kako je fosfodiesteraza ostala privlačno ciljno mesto za antiinflamatornu terapiju, razvijeno je i ispitivano nekoliko drugih, selektivnijih inhibitora PDE4 u kliničkom okruženju. Klinički razvoj mnogih inhibitora PDE4 prve generacije kao što je rolipram prekinut je usled dozno ograničavajućih sporednih efekata, primarno mučnine i povraćanja. Druga generacija inhibitora PDE4 sa očigledno manje izraženim štetnim efektima je trenutno u kliničkim ispitivanjima (Houslay, supra).

[0005] Nedavno razvijeni inhibitori PDE-4 su na primer opisani u EP 0771794 i EP 0943613. WO 96/31476 opisuje strukturno različite 4-supstituisane-3,5-dihloro-piridine koji su inhibitori ciklične AMP fosfodiesteraze.

[0006] WO 2008/104175 opisuje 4-supstituisana 3,5-dihloropiridin jedinjenja gde supstituent sadrži spiro benzodioksol ili benzodioksepin heterociklični sistem prstena. Ova jedinjenja su opisana kao inhibitori PDE4, i namenjena su topikalnoj primeni jer su podvrgnuta razgradnji kada se primenjuju oralno.

[0007] Pregled prekliničkih i kliničkih ispitivanja sa selektivnim inhibitorima PDE4, uključujući takve inhibitore namenjene za tretman atopijskog dermatitisa i psorijaze, nedavno je dat u Inflammation & Allergy: Drug Targets, 2007, 6(1),17-26.

[0008] Postoji stalna potreba za razvojem novih inhibitora PDE4 koji imaju povoljniji terapijski okvir, tj. manje štetnih efekata nakon oralne primene, uz zadržavanje njihovog terapeutskog antiinflamatornog efekta.

KRATAK OPIS PRONALASKA

[0009] Pronalazak je definisan priloženim patentnim zahtevima. Opis koji sledi podleže ovom ograničenju. Svi aspekti i primeri izvođenja koji su označeni kao „aspekt pronalaska“, ali nisu obuhvaćeni patentnim zahtevima, samo su aspekti ovog opisa i ne čine deo pronalaska.

[0010] Pronalazači su iznenađujuće pronašli da jedinjenja ovog pronalaska pokazuju PDE4 inhibitornu aktivnost nakon oralne primene i mogu biti korisni kao terapeutski agensi za sistemski tretman inflamatornih alergijskih bolesti kao što su bornhijalna astma, COPD, alergijski rinitis, i nefritis; autoimunih bolesti kao što su reumatoidni artritis, multipla skleroza, Kronova bolest i sistemski lupus eritematozus; bolesti centralnog nervnog sistema kao što su depresija, amnezija i demencija; organopatija povezanih sa ishemijskim refluksom izazvanim srčanom insuficijencijom, šok i cerebrovaskularne bolesti, i slično; insulinrezistentnog dijabetesa; rana; i drugih bolesti gde inflamacija igra ulogu u etiologiji ili progresiji bolesti.

[0011] Jedinjenja ovog pronalaska mogu takođe biti korisna u sprečavanju, lečenju ili ublažavanju različitih bolesti, kao što su kožne bolesti ili stanja kao što su proliferativni i inflamatorni kožni poremećaji, naročito psorijaza, epidermalna inflamacija, alopecija, atrofija kože, atrofija kože izazvana steroidima, starenje kože, foto-starenje kože, akne, dermatitis, atopijski dermatitis, seboreični dermatitis, kontaktni dermatitis, urtikarija, pruritus i ekcem.

[0012] U skladu s tim, predmetni pronalazak se odnosi na jedinjenje koje je 2-(3,5-dihloro-1-oksido-piridin-4-il)-1-{9-difluorometoksi-spiro[2H-1,5-benzodioksepin-3(4H),3’-oksetan]-6-il}etanon (jedinjenje 102) 2-(3,5-dihloro-1-oksido-piridin-4-il)-1-{9-difluorometoksispiro[2H-1,5-benzodioksepin-3(4H),4’-tetrahidropiran]-6-il}etanon (jedinjenje 104) 2-(3,5-dihloro-1-oksido-piridin-4-il)-1-(7-difluorometoksi-2’,3’,5’,6’-tetrahidro-spiro[1,3-benzodioksol-2,4’-(4H)-piran]-4 il)etanon (jedinjenje 106) 2-(3,5-dihloro-1-oksido-piridin-4-il)-1-(7-difluorometoksi-2’,3’,5’,6’-tetrahidro-spiro[1,3-benzodioksol-2,4’-(4H)-tiopiran-1’,1’-dioksid]-4-il)etanon (jedinjenje 108) ili farmaceutski prihvatljiv hidrat ili solvat ovog jedinjenja.

[0013] Jedinjenja slične hemijske strukture poznata su iz WO 2008/104175. Generalno je poznato da se ova jedinjenja brzo metabolišu i inaktiviraju nakon sistemske/oralne primene jer se metoksi grupa (R3=OCH3) razlaže do hidroksilne grupe (R3=OH) kao što je prikazano u primeru 15. Međutim, u jedinjenjima ovog pronalaska, metabolizam R3i stoga inaktivacija je značajno smanjena. Stoga, na primer kada A je 3,5-dihloropiridin, jedinjenja formule IIa su metabolisana do metaboilički stabilnijeg i aktivnog N-oksida (IIb) i kada A je 3,5-dihloropiridin-N-oksid, jedinjenja su generalno metabolički stabilna stvarajući jedinjenja pogodna za sistemsku, naročito oralnu, primenu – videti primer 10.

[0014] U sledećem aspektu, pronalazak se odnosi na jedinjenja predmetnog pronalaska za upotrebu u terapiji.

DETALJAN OPIS PRONALASKA

Definicije

[0015] Namera je da termin "farmaceutski prihvatljiva so" označava soli pripremljene reakcijom jedinjenja pronalaska sa pogodnom neorganskom ili organskom kiselinom, kao što je hlorovodonična, bromovodonična, jodovodonična, sumporna, azotna, fosforna, mravlja, sirćetna, 2,2-dihlorsirćetna, adipinska, askorbinska, L-asparaginska, L-glutaminska, galaktarna, mlečna, maleinska, L-jabučna, ftalna, limunska, propionska, benzoeva, glutarna, glukonska, D-glukuronska, metansulfonska, salicilna, ćilibarna, malonska, tartarna, benzensulfonska, etan-1,2-disulfonska, 2-hidroksietansulfonska kiselina, toluensulfonska, sulfaminska ili fumarna kiselina. Farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja pronalaska mogu takođe biti pripremljene pomoću reakcije sa pogodnom bazom kao što je natrijum hidroksid, kalijum hidroksid, magnezijum hidroksid, kalcijum hidroksid, srebro hidroksid, amonijak ili slično, ili pogodni netoksični amini, kao što su niži alkilamini, na primer trietilamin, hidroksiniži alkilamini, na primer 2-hidroksietilamin, bis-(2-hidroksietil)-amin, cikloalkilamini, na primer dicikloheksilamin, ili benzilamini, na primer N,N’-dibenziletilendiamin i dibenzilamin, ili L-arginin ili L-lizin. Soli dobijene pomoću reakcije sa pogodnom bazom obuhvataju, ali bez ograničenja na soli natrijuma, soli holina, 2-(dimetil-amino)-etanol soli, 4-(2-hidroksietil)-morfolin soli, L-lizin soli, N-(2-hidroksietil)-pirolidin soli, etanolamin soli, soli kalijuma, tetrabutilamonijum soli, benziltrimetilamonijum soli, cetiltrimetilamonijum soli, tetrametilamonijum soli, tetrapropilamonijum soli, tris(hidroksimetil)-aminometan soli, N-metil-D-glukamin soli, soli srebra, benzetonijum soli i trietanolamin soli.

[0016] Termin "solvat" je određen tako da označava vrstu formiranu pomoću interakcije između jedinjenja, npr. jedinjenja pronalaska i rastvarača, npr. alkohola, glicerola ili vode, pri čemu su navedene vrste u čvrstom obliku. Kada je voda rastvarač, navedena vrsta je označena kao hidrat.

Primeri izvođenja pronalaska

[0017] Specifični primeri jedinjenja pronalaska su 2-(3,5-dihloro-1-oksido-piridin-4-il)-1-{9-difluorometoksi-spiro[2H-1,5-benzodioksepin-3(4H),3’-oksetan]-6-il}etanon (jedinjenje 102) 2-(3,5-dihloro-1-oksido-piridin-4-il)-1-{9-difluorometoksi-spiro[2H-1,5-benzodioksepin-3(4H),4’-tetrahidropiran]-6-il}etanon (jedinjenje 104) 2-(3,5-dihloro-1-oksido-piridin-4-il)-1-(7-difluorometoksi-2’,3’,5’,6’-tetrahidro-spiro[1,3-benzodioksol-2,4’-(4H)-piran]-4-il)etanon (jedinjenje 106) 2-(3,5-dihloro-1-oksido-piridin-4-il)-1-(7-difluorometoksi-2’,3’,5’,6’-tetrahidrospiro[1,3-benzodioksol-2,4’-(4H)-tiopiran-1’,1’-dioksid]-4-il)etanon (jedinjenje 108).

[0018] Jedinjenja ovog pronalaska mogu tipično da imaju molekulsku težinu manju od 800 daltona, kao što je manje od 750 daltona, npr. manje od 700 daltona, ili manje od 650, 600, 550 ili 500 daltona.

[0019] Jedinjenja pronalaska mogu se dobiti u kristalnom obliku bilo direktno koncentrovanjem iz organskog rastvarača ili kristalizacijom ili rekristalizacijom iz organskog rastvarača ili smeše pomenutog rastvarača i korastvarača koji može biri organski ili neorganski, kao što je voda. Kristali se mogu izolovati u obliku esencijalno bez rastvarača ili kao solvat, kao što je hidrat. Pronalazak pokriva sve kristalne modifikacije i oblike i takođe njihove smeše.

[0020] Jedinjenja pronalaska mogu ili ne moraju sadržati asimetrično supstituisane (hiralne) atome ugljenika koji daju izomerne oblike, npr. enantiomere i moguće diastereomere. Ovaj pronalazak se odnosi na sve takve izomere, bilo u čistom obliku ili kao njihove smeše (npr. racemate). Čisti stereoizomerni oblici jedinjenja i intermedijera ovog pronalaska mogu se dobiti primenom procedura poznatih u tehnici. Različiti izomerni oblici mogu se razdvojiti postupcima fizičke separacije kao što je selektivna kristalizacija i hromatografske tehnike, npr. tečna hromatografija korišćenjem hiralnih stacionarnih faza. Enantiomeri se mogu međusobno razdvojiti selektivnom kristalizacijom svojih diastereomernih soli sa optički aktivnim aminima, kao što je l-efedrin. Alternativno, enantiomeri se mogu razdvojiti hromatografskim tehnikama korišćenjem hiralnih stacionarnih faza. Pomenuti čisti stereoizomerni oblici mogu se takođe izvesti iz odgovarajućih čistih stereoizomernih oblika odgovarajućih početnih materijala, uz uslov da se reakcija odigrava stereoselektivno ili stereospecifično. Poželjno, ukoliko je poželjan specifičan steroizomer, pomenuto jedinjenje će biti sintetisano stereoselektivnim ili stereospecifičnim postupcima pripreme. Ovi postupci će pogodno koristiti hiralne čiste početne materijale.

[0021] Jedinjenja pronalaska, izborno u kombinaciji sa drugim aktivnim jedinjenjima, mogu biti korisna za lečenje kožnih bolesti ili stanja, ili akutnih ili hroničnih kožnih poremećaja sa ranama, naročito u lečenju proliferativnih i inflamatornih kožnih poremećaja, psorijaze, kancera, epidermalne inflamacije, alopecije, atrofije kože, atrofije kože izazvane steroidima, starenja kože, foto-starenja kože, akni, dermatitisa, atopijskog dermatitisa, seboreičnog dermatitisa, kontaktnog dermatitisa, urtikarija, pruritusa i ekcema.

[0022] Osim što su korisna za lečenje ljudi, jedinjenja ovog pronalaska mogu takođe biti korisna za veterinarsko lečenje životinja uključujući sisare kao što su konji, stoka, ovce, svinje, psi i mačke.

[0023] Za upotrebu u terapiji, jedinjenja ovog pronalaska su tipično u obliku farmaceutske kompozicije. Pronalazak se stoga odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje pronalaska, izborno zajedno sa jednim ili više terapeutski aktivnih jedinjenja, zajedno sa farmaceutski prihvatljivim ekscipijentom ili nosačem. Ekscipijent mora biti "prihvatljiv" u smislu da je kompatibilan sa drugim sastojcima kompozicije i da nije štetan za svog primaoca.

[0024] Pogodno, aktivni sastojak čini od 0,05-99,9% težine formulacije.

[0025] U obliku jedinice doze, jedinjenje se može primeniti jednom ili više puta na dan u odgovarajućim intervalima, međutim, uvek u zavisnosti od stanja pacijenta, i u skladu sa receptom lekara. Pogodno, jedinica doze formulacije sadrži između 0,1 mg i 1000 mg, poželjno između 1 mg i 100 mg, kao što je 5-50 mg jedinjenja pronalaska.

[0026] Pogodna doza jedinjenja pronalaska zavisiće, između ostalog, od starosti i stanja pacijenta, težine bolesti koja se leči i drugih faktora dobro poznatih lekarima. Jedinjenje se može primeniti bilo oralno, parenteralno ili topikalno prema različitim doznim režimima, npr. dnevno ili sa nedeljnim intervalima. Generalno pojedinačna doza će biti u opsegu od 0,01 do 400 mg/kg telesne težine. Jedinjenje se može primeniti kao bolus (tj. cela dnevna doza je primenjena odjednom) ili u podeljenim dozama dva ili više puta na dan.

[0027] U kontekstu topikalnog tretmana pogodnije je koristiti "jedinica upotrebe", koja označava pojedinačnu dozu koja se može primeniti na pacijenta, i sa kojom se može lako rukovati i pakovati, i koja ostaje kao fizički i hemijski stabilna jedinica doze koja sadrži ili aktivni materijal kao takav ili njegovu smešu sa čvrstim ili tečnim farmaceutskim razređivačima ili nosačima.

[0028] Termin "jedinica upotrebe" u vezi sa topikalnom upotrebom označava unitarnu, tj. pojedinačnu dozu koja se može primeniti topikalno na pacijenta u primeni po kvadratnom centimetru inficirane površine od 0,1 mg do 10 mg, i poželjno od 0,2 mg do 1 mg, aktivnog sastojka koji je u pitanju.

[0029] Takođe je predviđeno da u određenim režimima lečenja, primena sa dužim intervalima, npr. svaki drugi dan, svake nedelje, ili čak sa dužim intervalima može biti korisna.

[0030] Ukoliko tretman uključuje primenu drugog terapeutski aktivnog jedinjenja preporučuje se konsultacija Goodman & Gilman’s Farmacological Basis of Terapeutics, 9th Ed., J.G. Hardman and L.E. Limbird (Eds.), McGraw-Hill 1995, za korisne doze pomenutih jedinjenja.

[0031] Primena jedinjenja ovog pronalaska sa jednim ili više drugih aktivnih jedinjenja može biti ili istovremena ili sekvencijalna.

[0032] Formulacije uključuju npr. one u obliku pogodnom za oralnu (uključujući produženo ili vremenski regulisano oslobađanje), rektalnu, parenteralnu (uključujući potkožnu, intraperitonealnu, intramuskularnu, intraartikularnu i intravensku), transdermalnu, oftalmičku, topikalnu, dermalnu, nazalnu ili bukalnu primenu. Topikalna primena formulacije za koju se traži zaštita je naročito pogodna.

[0033] Formulacije mogu biti pogodno predstavljene u obliku jedinica doze i mogu se pripremiti bilo kojim postupkom dobro poznatim u farmaceutskoj tehnici, npr. kao što je opisano u Remington, Science and Practice of Pharmacy, 20th ed., 2000. Svi postupci uključuju korak dovođenja aktivnog sastojka u vezu sa nosačem, koji čini jedan ili više pomoćnih sastojaka. Generalno, formulacije se pripremaju uniformnim i intimnim dovođenjem aktivnog sastojka u vezu sa tečnim nosačem ili fino podeljenim čvrstim nosačem ili sa oba, i zatim, ukoliko je potrebno, oblikovanjem proizvoda u željenu formulaciju.

[0034] Formulacije ovog pronalaska pogodne za oralnu primenu mogu biti u obliku diskretnih jedinica kao kapsule, kesice, tablete ili lozenge, gde svaka sadrži prethodno određenu količinu aktivnog sastojka; u obliku praška ili granula; u obliku rastvora ili suspenzije u vodenoj tečnosti ili ne-vodenoj tečnosti, kao što je etanol ili glicerol; ili u obliku ulje-u-vodi emulzije ili voda-u-ulju emulzije. Takva ulja mogu biti jestiva ulja, kao što je npr. ulje semena pamuka, ulje susama, kokosovo ulje ili ulje kikirikija. Pogodni agensi za disperziju i suspenziju za vodene suspenzije uključuju sintetičke ili prirodne gume ako što su tragant, alginat, akacija, dekstran, natrijum karboksimetilceluloza, želatin, metilceluloza, hidroksipropilmetilceluloza, hidroksipropilceluloza, karbomeri i polivinilpirolidon. Aktivni sastojci se takođe mogu primeniti u obliku bolusa, elektuarijuma ili paste.

[0035] Tableta se može napraviti presovanjem ili kalupljenjem aktivnog sastojka izborno sa jednim ili više pomoćnih sastojaka. Presovane tablete mogu se pripremiti presovanjem, u pogodnoj mašini, aktivnog sastojka (sastojaka) u slobodno tekućem obliku kao što je prašak ili granule, izborno izmešane sa vezujućim sredstvom, kao što je npr. laktoza, glukoza, skrob, želatin, guma akacija, tragantova guma, natrijum alginat, karboksimetilceluloza, metilceluloza, hidroksipropilmetilceluloza, polietilen glikol, voskovi i i slično; luibrikantom kao što je npr. natrijum oleat, natrijum stearat, magnezijum stearat, natrijum benzoat, natrijum acetat, natrijum hlorid ili slično; agensom za raspadanje kao što je npr. skrob, metilceluloza, agar, bentonit, kroskarmeloza natrijum, natrijum skrob glikolat, krospovidon ili slično ili agensom za disperziju, kao što je polisorbat 80. Kalupljene tablete mogu se napraviti kalupljenjem u pogodnoj mašini, smeše aktivnog sastojka u prašku i nosača ovlaženog sa inertnim tečnim razređivačem.

[0036] Formulacije za rektalnu primenu mogu biti u obliku supozitorija u kojima je jedinjenje ovog pronalaska pomešano sa čvrstim supstancama sa niskom tačkom topljenja, rastvorljivim ili nerastvorljivim u vodi kao što su kakao puter, hidrogenisana biljna ulja, polietilen glikol ili estri masnih kiselina polietilen glikola, dok se eliksiri mogu pripremiti korišćenjem miristil palmitata.

[0037] Formulacije pogodne za parenteralnu primenu pogodno sadrže sterilne uljane ili vodene preparate aktivnih sastojaka, koji su izotonični u odnosu na krv primaoca, npr. izotonični slani rastvor, izotonični rastvor glukoze ili rastvor pufera. Formulacija može pogodno biti sterilisana na primer filtriranjem preko filtera koji zadržava bakterije, dodavanjem agensa za sterilizaciju formulaciji, zračenjem formulacije ili zagrevanjem formulacije. Lipozomalne formulacije kao što su opisane u npr. Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, vol.9, 1994, takođe su pogodne za parenteralnu primenu.

[0038] Alternativno, jedinjenja pronalaska mogu biti predstavljena kao sterilni, čvrsti preparati, npr. prašak osušen zamrzavanjem, koji se lako rastvaraju u sterilnom rastvaraču neposredno pre upotrebe.

[0039] Transdermalne formulacije mogu biti u obliku flastera ili zavoja.

[0040] Formulacije za oftalmičku primenu mogu biti u obliku sterilnog vodenog preparata aktivnih sastojaka, koji mogu biti u mikrokristalnom obliku, na primer, u obliku vodene mikrokristalne suspenzije. Lipozomalne formulacije ili biorazgradivi polimerski sistemi npr. kao što su opisani u Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, vol. 2, 1989, mogu se takođe koristiti za predstavljanje aktivnog sastojka za oftalmičku primenu.

[0041] Formulacije pogodne za topikalnu ili oftalmičku primenu uključuju tečne ili polu-tečne preparate kao što su masti, losioni, gelovi, sprejevi, pene, ulje-u-vodi ili voda-u-ulju emulzije kao što su kreme, masti ili paste; ili rastvori ili suspenzije kao što su kapi. Kompozicije za oftalmički tretman mogu poželjno dodatno sadržati ciklodekstrin.

[0042] Za topikalnu primenu, jedinjenje pronalaska može biti tipično prisutno u količini od 0.01 do 20% po težini kompozicije, kao što je 0.1% do oko 10 %, ali mogu takođe biti prisutni u količini od do oko 50% kompozicije.

[0043] Formulacije pogodne za nazalnu ili bukalnu primenu uključuju prašak, samostalno propelente i formulacije spreja, kao što su aerosoli i atomizeri. Takve formulacije su detaljno opisane u npr. Modern Pharmaceutics, 2nd ed., G.S. Banker and C.T. Rhodes (Eds.), page 427-432, Marcel Dekker, New York; Modern Pharmaceutics, 3th ed.,G.S. Banker and C.T. Rhodes (Eds.), page 618-619 i 718-721, Marcel Dekker, New York i Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, vol. 10, J. Swarbrick and J.C. Boilan (Eds), page 191-221, Marcel Dekker, New York.

[0044] Kao dodatak prethodno pomenutim sastojcima, formulacije jedinjenja pronalaska mogu uključivati jedan ili više dodatnih sastojaka kao što su razređivači, puferi, aromatizeri, boje, površinski aktivna sredstva, sredstva za zgušnjavanje, konzervansi, npr. metil hidroksibenzoat (uključujući anti-oksidante), agense za stvaranje emulzije i slično.

[0045] Kada se aktivni sastojak primenjuje u obliku soli sa farmaceutski prihvatljivim netoksičnim kiselinama ili bazama, poželjne soli su na primer lako rastvorljive u vodi ili slabo rastvorljive u vodi, da bi se dobila naročita i odgovarajuća stopa apsorpcije.

[0046] Farmaceutske kompozicije mogu dodatno sadržati jednu ili više aktivnih komponenti konvencionalno korišćenih u tretmanu kožne bolesti ili stanja, npr. izabranu iz grupe koja se sastoji od glukokortikoida, vitamina D i analoga vitamina D, antihistaminika, antagonista faktora aktivacije trombocita (PAF), antiholinergičkih agenasa, metilksantina, β-adrenergičkih agenasa, inhibitora COX-2, salicilata, indometacina, flufenamata, naproksena, timegadina, soli zlata, penicilamina, agenasa za snižavanje serumskog holesterola, retinoida, soli cinka, salicilazosulfapiridina i inhibitora kalcineurina.

[0047] Pronalazak je opisan detaljno u sledećim primerima koji ni na koji način ne ograničavaju obim pronalaska za koji se traži zaštita.

POSTUPCI ZA PRIPREMU

[0048] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu biti pripremljena na određeni broj načina koji su dobro poznati stručnjacima u tehnici sinteze. Jedinjenja pronalaska mogu na primer biti pripremljena upotrebom reakcija i tehnika navedenih u daljem tekstu zajedno sa postupcima poznatim u tehnici sintetičke organske hemije, ili njihovih varijacija kao što je jasno stručnjacima iz date oblasti tehnike. Poželjni postupci obuhvataju, ali bez ograničenja na, one koji su opisani u daljem tekstu. Reakcije su izvedene u rastvaračima odgovarajućim za reagense i materijale korišćene i pogodne za postignute transformacije. Takođe, u sintetičkim postupcima opisanim u daljem tekstu, razume se da su svi predloženi reakcioni uslovi, uključujući izbor rastvarača, reakcionu atmosferu, reakcionu temperaturu, trajanje eksperimenta i postupaka obrade, izabrani da budu uslovi standardni za tu reakciju, što bi trebalo da prepozna stručnjak iz date oblasti tehnike. Ne mogu sva jedinjenja koja spadaju u datu klasu biti kompatibilna sa nekim od reakcionih uslova potrebnih u nekim od opisanih postupaka. Takve restrikcije supstituenata koji su kompatibilni sa reakcionim uslovima biće jasne stručnjacima iz date oblasti tehnike i alternativni postupci mogu biti korišćeni.

[0049] Početni materijali su ili poznata jedinjenja koja su komercijalno dostupna, ili mogu biti pripremljena pomoću rutinskih sintetičkih postupaka dobro poznatih stručnjacima iz date oblasti tehnike.

[0050] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku ili bilo koji intermedijer mogu biti prečišćeni ako je potrebno upotrebom standardnih postupaka dobro poznatih hemičaru koji se bavi sintetičkom organskom hemijom, npr. postupci opisani u "Purification of Laboratory Chemicals", 5th ed. 2003. Početni materijali su ili poznata jedinjenja, komercijalno dostupna, ili mogu biti pripremljeni pomoću rutinskih sintetičkih postupaka koji su dobro poznati stručnjacima iz date oblasti tehnike.

OPŠTI POSTUPCI, PRIPREME I PRIMERI

[0051]<1>H spektri nuklearne magnetne rezonance (NMR) su beleženi na 300 MHz i<13>C NMR spektri na 75.6 MHz. Vrednosti hemijskih pomeranja (δ, u ppm) su navedene u naznačenom rastvaraču u odnosu na interne standarde tetrametilsilan (δ = 0.00) ili hloroform (δ = 7.25) ili deuteriohloroform (δ = 76.81 za<13>C NMR). Data je vrednost multipleta, bilo definisane (dublet (d), triplet (t), kvartet (q)) ili ne (m) na približnoj srednjoj tački, osim ukoliko nije naveden opseg. (bs) označava široki singlet. Korišćeni organski rastvarači su obično bili anhidrovani. Hromatografija je izvedena ma Merck silika gelu 60 (0.040 - 0-063 mm). Naznačeni odnosi rastvarača označavaju zapr.:zapr. osim ukoliko nije navedeno drugačije.

[0052] Sledeće skraćenice su korišćene u specifikaciji:

DCM dihlorometan

DMF N,N’-Dimetilformamid

DMSO dimetil sulfoksid

Et etil

EtOAc etil acetat

h čas

L litar

LDA litijum diizopropilamid

LiHMDS litijum heksametildisilazid

m mili

Me metil

MeOH metanol

NMR nuklearna magnetna rezonanca

ppt talog

rt sobna temperatura

TsCl p-toluensulfonil hlorid

THF tetrahidrofuran

v zapremina

Preparativna HPLC/MS

[0053] Preparativna HPLC/MS je izvedena na Dionex APS-sistemu sa dve Shimadzu PP150 prep. pumpe i Thermo MSQ Plus masenim spektrometrom. Kolona: Waters XTerra C-18, 150 mm x 19 mm, 5 µm; sistem rastvarača: A = voda (0.1 % mravlja kiselina) i B = acetonitril (0.1 % mravlja kiselina); stopa protoka = 18 mL/min; postupak (10 min): linearni gradijentni postupak koji ide od 10 % B do 100 % B za 6 minuta i stoji na 100 % B još 2 minuta. Frakcije su sakupljene na bazi tragova relevantnih jona i PDA signala (240-400 nm).

Analitička HPLC/MS

[0054] Postupak A: Analitička HPLC/MS je izvedena na Dionex APS-sistemu sa P680A analitičkom pumpom i Thermo MSQ Plus masenim spektrometrom. Kolona: Waters XTerra C-18, 150 mm x 4.6 mm, 5 µm; sistem rastvarača: A = voda (0.1 % mravlja kiselina) i B = acetonitril (0.1 % mravlja kiselina); stopa protoka = 1.0 mL/min; postupak (10 min): Linearni gradijenti postupak koji ide od 10 % B do 100 % B za 6.6 minuta i stoji na 100 % B još 1.5 minuta.

[0055] Postupak B: Analitička HPLC/MS je izvedena na sistemu koji se sastoji od Waters 2795 HPLC, Micromass ZQ masenog spektrometra, Waters 996 PDA. Kolona: Waters XTerra C-18, 50 mm x 3.0 mm, 5 µm; sistem rastvarača: A = voda:acetonitril 95:5 (0.05 % mravlja kiselina) i B = acetonitril (0.05 % mravlja kiselina); stopa protoka = 1.0 mL/min; postupak (8 min): Linearni gradijentni postupak koji ide od 10 % B do 100 % B za 6.0 minuta i stoji na 100 % B u trajanju od 1 minut.

Opšti postupak pripreme:

[0056] Jedinjenja prema pronalasku mogu na primer biti pripremljena ko što sledi. Jedinjenja opšte formule IIa i IIb, gde su n, m, R1, R2kao što su definisani u prethodnom tekstu i R3= OCF2H mogu biti pripremljena kao što sledi:

[0057] Početni materijali formule 3a su pripremljeni prema standardnim postupcima poznatim stručnjaku iz date oblasti tehnike (WO 2008/104175). Selektivna dealkilacija 3a upotrebom sumpornog nukleofila npr. t-dodecil merkaptana daje 4a.

[0058] Reakcija jedinjenja formule 4a sa natrijum hlorodifluoroacetatom u prisustvu baze npr. K2CO3u pogodnom rastvaraču kao što je DMF na temperaturama od sobne temperature do 140°C daje jedinjenja formule IIa.

[0059] Oksidacija IIa sa 3-hloroperbenzoevom kiselinom ili H2O2/metiltrioksorenijumom (VII) u pogodnom rastvaraču kao što je DCM dala je jedinjenja opšte formule IIb Priprema 1:

2-(3,5-dihloropiridin-4-il)-1-{9-hidroksi-spiro[2H-1,5-benzodioksepin-3(4H),3’-oksetan]-6-il}etanon (jedinjenje 401)

[0060]

[0061] U rastvor 2-(3,5-dihloropiridin-4-il)-1-{9-metoksi-spiro[2H-1,5-benzodioksepin-3(4H),3’-oksetan]-6-il}etanona (272mg, 0.7mmol) u anhidrovanom DMF (4mL) dodat je K2CO3 (916mg, 7mmol) i t-dodecil merkaptan (3.12 ml, 13 mmol). Smeša je zagrevana, uz mešanje, na 140°C u hermetički zatvorenoj epruveti u trajanju od 16 časova. Smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature i dodata je voda (20ml). Posle neutralizacije sa 4N HCl smeša je ekstrahovana sa DCM. Kombinovana organska faza je isprana fiziološkim rastvorom, sušena preko MgSO4 i isparavana do sušenja pod sniženim pritiskom. Hromatografija je proizvela proizvod 401.

<1>H NMR (300 MHz, DMSO) δ 8.65 (s, 2H), 7.36 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.68 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.64 (s, 2H), 4.54 (s, 2H), 4.53-4.42 (m, 4H), 4.33 (s, 2H).

Primer 1 (Nije deo obima patentnih zahteva)

2-(3,5-dihloropiridin-4-il)-1-{9-difluorometoksi-spiro[2H-1,5-benzodioksepin-3(4H),3’-oksetan]-6-il}etanon (jedinjenje 101)

[0062]

[0063] U rastvor 2-(3,5-dihloropiridin-4-il)-1-{9-hidroksi-spiro[2H-1,5-benzodioksepin-3(4H),3’-oksetan]-6-il}etanona [401](1.66g, 4.2mmol) u DMF (12mL) i vodi (1.3ml) dodat je K2CO3 (1.45g, 10.5mmol) i natrijum hlorodifluoroacetat (1.28g, 8.4 mmol). Smeša je zagrevana pod argonom, uz mešanje, na 100°C u hermetički zatvorenoj epruveti u trajanju od 1.5 časa. Dodato je još 950mg natrijum hlorodifluoroacetata i zagrevanje je nastavljeno 1 čas. Dodato je još 950 mg natrijum hlorodifluoroacetata i 1.45g K2CO3, zagrevanje je nastavljeno 5 časova. Dodat je sledeći deo od 950mg natrijum hlorodifluoroacetata i 1.45g K2CO3, zagrevanje je nastavljeno 2 časa. Smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, dodata je voda (200ml) i pH je podešen do 3 upotrebom 4N HCl. Smeša je ekstrahovana sa DCM i kombinovana organska faza je isprana fiziološkim rastvorom, sušena preko MgSO4 i isparavana do sušenja pod sniženim pritiskom. Hromatografija je proizvela 793mg proizvoda 101.

<1>H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8.51 (s, 2H), 7.46 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.64 (t, J = 74 Hz, 1H), 4.68 - 4.56 (m, 8H), 4.56 - 4.46 (bs, 2H).

Primer 2:

2-(3,5-dihloro-1-oksido-piridin-4-il)-1-{9-difluorometoksi-spiro[2H-1,5-benzodioksepin-3(4H),3’-oksetan]-6-il}etanon (jedinjenje 102)

[0064]

[0065] U rastvor 2-(3,5-dihloropiridin-4-il)-1-{9-difluorometoksi-spiro[2H-1,5-benzodioksepin-3(4H),3’-oksetan]-6-il}etanona [101] (792mg, 1.8mmol) u DCM (15ml) dodata je 3-hloroperbenzoeva kiseline (1.2g, 7mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 časa. Dodata je nova količina 3-hloroperbenzoeve kiseline (0.6g, 3.5mmol) i mešanje je nastavljeno 16 časova. Reakciona smeša je isprana sa Na2CO3 i zatim fiziološkim rastvorom, sušena preko MgSO4 i isparavana do sušenja pod sniženim pritiskom. Hromatografija je proizvela skoro čist proizvod koji je kasnije suspendovan u EtOAc i otfiltriran proizvodeći 464mg 102

<1>H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8.22 (s, 2H), 7.47 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.63 (t, J=74Hz, 1H), 4.70 - 4.59 (m, 6H), 4.56 (bs, 2H), 4.52 (bs, 2H).

Priprema 2:

2-(3,5-dihloropiridin-4-il)-1-{9-hidroksi-spiro[2H-1,5-benzodioksepin-3(4H),4’

tetrahidropiran]-6-il}etanon (jedinjenje 402)

[0066]

[0067] U rastvor 2-(3,5-dihloropiridin-4-il)-1-{9-metoksi-spiro[2H-1,5-benzodioksepin-3(4H),4’-tetrahidropiran]-6-il}etanona (351mg, 0.8mmol) u anhidrovanom DMF (6mL) dodat je K2CO3 (1.1g, 8mmol) i t-dodecil merkaptan (3.8 ml, 16 mmol). Smeša je zagrevana, uz mešanje, na 140°C u hermetički zatvorenoj epruveti u trajanju od 22 časa. Smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature i dodata je voda. Posle neutralizacije sa 4N HCl smeša je ekstrahovana sa DCM (2x50ml). Kombinovana organska faza je ekstrahovana dva puta sa 2N NaOH. Vodena faza je isprana dva puta sa DCM, neutralizovana sa 4N HCL i konačno ekstrahovana sa DCM. Organska faza je isprana fiziološkim rastvorom, sušena preko MgSO4 i isparavana do sušenja pod sniženim pritiskom. Hromatografija je proizvela proizvod 402 kao žuti prašak (118mg)

<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.49 (s, 2H), 7.51 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.30 (s, 1H), 4.60 (s, 2H), 4.27 (s, 2H), 4.21 (s, 2H), 3.91 - 3.55 (m, 4H), 1.76 (t, J = 5.5 Hz, 4H).

Primer 3: (nije deo obima patentnih zahteva)

2-(3,5-dihloropiridin-4-il)-1-{9-diflourometoksi-spiro[2H-1,5-benzodioksepin-3(4H),4’-tetrahidropiran]-6-il}etanon (jedinjenje 103)

[0068]

[0069] U rastvor 2-(3,5-dihloropiridin-4-il)-1-{9-hidroksi-spiro[2H-1,5-benzodioksepin-3(4H),4’-tetrahidropiran]-6-il}etanona [402] (118mg, 0.28mmol) u anhidrovanom DMF (6mL) dodat je K2CO3 (76mg, 0.55mmol) i natrijum hlorodifluoroacetat (84mg, 0.55mmol). Smeša je zagrevana pod argonom, uz mešanje, na 100°C u hermetički zatvorenoj epruveti u trajanju od 1.5 časa. Dodata je nova količina K2CO3 (76mg, 0.55mmol) i natrijum hlorodifluoroacetat (84mg, 0.55mmol) i mešanje je nastavljeno na 80°C u trajanju od 6 časova. Smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, dodata je voda i smeša je neutralizovana upotrebom 4N HCl. Smeša je ekstrahovana sa DCM i kombinovana organska faza je isprana fiziološkim rastvorom, sušena preko MgSO4 i isparavana do sušenja pod sniženim pritiskom. Hromatografija je proizvela 40mg proizvoda 103.

<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.50 (s, 2H), 7.44 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.63 (t, J= 74Hz, 1H), 4.62 (s, 2H), 4.27 (s, 2H), 4.22 (s, 2H), 3.87 - 3.58 (m, 4H), 1.85 - 1.62 (m, 4H).

Primer 4:

2-(3,5-dihloro-1-oksido-piridin-4-il)-1-{9-difluorometoksi-spiro[2H-1 ,5-benzodioksepin-3(4H),4’-tetrahidropiran]-6-il}etanon (jedinjenja 104)

[0070]

[0071] U rastvor 2-(3,5-dihloropiridin-4-il)-1-{9-diflourometoksi-spiro[2H-1,5-benzodioksepin-3(4H),4’-tetrahidropiran]-6-il}etanona [103] (37mg, 0.08mmol) u DCM (3ml) dodata je 3-hloroperbenzoeva kiselina (54mg, 0.3mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova. Dodata je nova količina 3-hloroperbenzoeve kiseline (27mg, 0.18mmol) i mešanje je nastavljeno 5 časova. Reakciona smeša je isprana sa Na2CO3 i zatim fiziološkim rastvorom, sušena preko MgSO4 i isparavana do sušenja pod sniženim pritiskom. Hromatografija je proizvela 33mg proizvoda 104.

<1>H NMR (600 MHz, CDC13) δ 8.21 (s, 2H), 7.45 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.64 (t, J=74Hz, 1H), 4.55 (s, 2H), 4.28 (s, 2H), 4.24 (s, 2H), 3.86 - 3.61 (m, 4H), 1.89 -1.64 (m, 4H).

Priprema 3:

2-(3,5-dihloropiridin-4-il)-1-(7-hidroksi-2’,3’,5’,6’-tetrahidro-spiro[1,3-benzodioksol-2,4’-(4H)-piran]-4-il)etanon (jedinjenje 403).

[0072]

[0073] U rastvor 2-(3,5-dihloropiridin-4-il)-1-(7-metoksi-2’,3’,5’,6’-tetrahidro-spiro[1,3-benzodioksol-2,4’-(4H)-piran]-4-il)etanona (325mg, 0.8mmol) u anhidrovanom DMF (5mL) dodat je K2CO3 (1.1g, 8mmol) i t-dodecil merkaptan (3.7 ml, 16 mmol). Smeša je zagrevana, uz mešanje, na 140°C u hermetički zatvorenoj epruveti u trajanju od 16 časova. Smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature i dodata je voda. Posle neutralizacije sa 4N HCl smeša je ekstrahovana sa DCM (2x50ml). Kombinovana organska faza je ekstrahovana dva puta sa 2N NaOH. Vodena faza je isprana dva puta sa DCM, neutralizovana sa 4N HCL i konačno ekstrahovana sa DCM (3x75ml). Organska faza je sušena preko MgSO4 i isparavana do sušenja pod sniženim pritiskom. Hromatografija je proizvela proizvod 403 kao beli prašak (192mg)

<1>H NMR (300 MHz, DMSO) δ 8.65 (s, 2H), 7.95 (s, 1H), 7.25 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.56 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 4.59 (s, 2H), 3.92 - 3.67 (m, 4H), 2.21 - 1.94 (m, 4H).

Primer 5: (nije deo obima patentnih zahteva)

2-(3,5-dihloropiridin-4-il)-1-(7-difluorometoksi-2’,3’,5’,6’-tetrahidro-spiro[1,3-benzodioksol-2,4’-(4H)-piran]-4-il)etanon (jedinjenje 105)

[0074]

[0075] U rastvor 2-(3,5-dihloropiridin-4-il)-1-(7-hidroksi-2’,3’,5’,6’-tetrahidro-spiro[1,3-benzodioksol-2,4’-(4H)-piran]-4-il)etanona [403] (188mg, 0.47mmol) u anhidrovanom DMF (10mL) dodat je K2CO3 (98mg, 0.7mmol) i natrijum hlorodifluoroacetat (108.5mg, 0.7mmol). Smeša je zagrevana pod argonom, uz mešanje, na 100°C u hermetički zatvorenoj epruveti u trajanju od 45 min. Dodata je nova količina K2CO3 (65mg, 0.47mmol) i natrijum hlorodifluoroacetata (72mg, 0.47mmol) i mešanje je nastavljeno na 100°C u trajanju od 30 min. Smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, filtrirana i isparavana do sušenja pod sniženim pritiskom. HPLC prečišćavanje je proizvelo 89mg proizvoda 105.

<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.52 (s, 2H), 7.46 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 6.81 (d, J=9.0, 1H), 6.74 (t, J=73Hz, 1H), 4.60 (s, 2H), 4.05 - 3.83 (m, 4H), 2.21 (t, J = 5.5 Hz, 4H).

Primer 6:

2-(3,5-dihloro-1-oksido-piridin-4-il)-1-(7-difluorometoksi-2’,3’,5’,6’-tetrahidro-spiro[1,3-benzodioksol-2,4’-(4H)-piran]-4-il)etanon (jedinjenje 106)

[0076]

[0077] U rastvor 2-(3,5-dihloropiridin-4-il)-1-(7-difluorometoksi-2’,3’,5’,6’-tetrahidrospiro[1,3-benzodioksol-2,4’-(4H)-piran]-4-il)etanona [105] (89 mg, 0.2 mmol) u dihlorometanu (4 mL) dodat je 30% H2O2 (68 µL, 0.6mmol) i metiltrioksorenijum(VII) (25 mg). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, dodat je MnO2 (5 mg) i mešana 10min. Posle filtracije i isparavanja do sušenja pod sniženim pritiskom, standardno HPLC prečišćavanje je dalo 33 mg proizvoda 106.

<1>H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8.22 (s, 2H), 7.46 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 6.81 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 6.74 (t, J= 73Hz, 1H), 4.53 (s, 2H), 4.08 - 3.88 (m, 4H) 2.21 (t, J = 5.5 Hz, 4H).

Priprema 4:

2-(3,5-dihloropiridin-4-il)-1-(7-hidroksi-2’,3’,5’,6’-tetrahidro-spiro[1,3-benzodioksol-2, 4’-(4H)-tiopiran]-4-il)etanon (jedinjenje 404)

[0078]

[0079] U rastvor 2-(3,5-dihloropiridin-4-il)-1-(7-metoksi-2’,3’,5’,6’-tetrahidro-spiro[1,3-benzodioksol-2,4’-(4H)-tiopiran]-4-il)etanona (8.3g, 19.5mmol) u anhidrovanom DMF (80mL) dodat je K2CO3 (27g, 195mmol) i t-dodecil merkaptan (92 ml, 390 mmol). Smeša je zagrevana, uz mešanje, na 140°C u hermetički zatvorenoj epruveti u trajanju od 21 čas. Dodata je nova količina K2CO3 (13g) i t-dodecil merkaptana (45ml). Mešanje je nastavljeno dodatnih 5 časova. Smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature i dodata je voda. Posle neutralizacije sa 4N HCl smeša je ekstrahovana sa DCM (3x200ml). Kombinovana organska faza je isprana fiziološkim rastvorom, sušena preko MgSO4 i isparavana do sušenja pod sniženim pritiskom. “Flash” hromatografija je dala sirovi proizvod koji je ponovo rastvoren u DCM i zatim ekstrahovan dva puta sa 2N NaOH. Vodena faza je isprana dva puta sa DCM, neutralizovana sa 4N HCL i konačno ekstrahovana sa DCM (3x150ml). Organska faza je isprana fiziološkim rastvorom, sušena preko MgSO4 i isparavana do sušenja pod sniženim pritiskom. Hromatografija je proizvela 2.56g proizvoda 404.

<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.52 (s, 2H), 7.38 (d, J = 9.0Hz, 1H), 6.54 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.60 (s, 2H), 2.94 - 2.77 (m, 4H), 2.46 - 2.15 (m, 4H).

Primer 7: (Nije deo obima patentnih zahteva)

2-(3,5-dihloropiridin-4-il)-1-(7-difluorometoksi-2’,3’,5’,6’-tetrahidro-spiro[1,3-benzodioksol-2, 4’-(4H)-tiopiran]-4-il)etanon (jedinjenje 107)

[0080]

[0081] U rastvor 2-(3,5-dihloropiridin-4-il)-1-(7-hidroksi-2’,3’,5’,6’-tetrahidro-spiro[1,3-benzodioksol-2,4’-(4H)-tiopiran]-4-il)etanona [404] (4.27g, 10.4mmol) u anhidrovanom DMF (120mL) dodat je K2CO3 (2.16g, 15.6mmol) i natrijum hlorodifluoroacetat (2.47g, 15.6mmol). Smeša je zagrevana pod argonom, uz mešanje, na 100°C u trajanju od 40min. Smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, dodata je voda (500ml) i ekstrahovana sa EtOAc (2x400ml). Kombinovana organska faza je isprana vodom (500ml) i zasićenim rastvorom NaCl (150ml), nakon čega je sledilo sušenje preko Na2SO4 i isparavana do sušenja pod sniženim pritiskom. Hromatografija je proizvela 2.64g proizvoda 107 kao žuto-beli prašak.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.67 (s, 2H), 7.61 - 7.09 (m, 2H), 6.93 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.67 (s, 2H), 3.05 - 2.74 (m, 4H), 2.42 - 2.16 (m, 4H).

Primer 8:

2-(3,5-dihloro-1-oksido-piridin-4-il)-1-(7-difluorometoksi-2’,3’,5’,6’-tetrahidro-spiro[1,3-benzodioksol-2,4’-(4H)-tiopiran-1’,1’-dioksid]-4-il)etanon (jedinjenje 108).

[0083] U rastvor 2-(3,5-dihloropiridin-4-il)-1-(7-difluorometoksi-2’,3’,5’,6’-tetrahidrospiro[1,3-benzodioksol-2,4’-(4H)-tiopiran]-4-il)etanona [107] (2.64g, 5.7mmol) u hloroformu (40ml) lagano je dodavan rastvor 3-hloroperbenzoeve kiseline (5.76g, 25.7mmol) u hloroformu (50ml) – uz održavanje temperature između 21°C i 24°C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 19 časova i dodata je u NaHCO3 (vodeni) rastvor. Organska faza je isprana vodenim rastvorom NaCl. Vodene faze su ekstrahovane sa DCM. Kombinovane organske faze su sušene preko Na2S04 i isparavane do sušenja pod sniženim pritiskom. Hromatografija je proizvela 1.95 g proizvoda 108 kao beli prašak.

<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.23 (s, 2H), 7.52 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 6.89 (d, J= 9.1Hz, 1H), 6.70 (t, J=72Hz ,1H), 4.48 (s, 2H), 3.50 - 3.18 (m, 4H), 2.83 - 2.55 (m, 4H).

Primer 9: (Nije deo obima patentnih zahteva)

PDE4 ANALIZA

[0084] Humani rekombinantni PDE4 (Genbank pristupni br. NM_006203) je inkubiran 1 čas, sa test jedinjenjem u koncentracijama do 10 µM, sa cAMP (1x10-5M) i sa niskom količinom (0.021 MBq) radioaktivno obeleženog cAMP. Na kraju inkubacije, cepanje supstrata je procenjivano vezivanjem AMP proizvoda za SPA kuglice, koje generišu hemoluminescenciju kada se vežu za radioaktivni trejser. AMP proizvod je inhibirao vezivanje radioaktivnog trejsera za kuglice i luminescentni signal je nestao.

[0085] Rezultati su izračunati kao molarne koncentracije koje rezultiraju u 50% inhibiciji cepanja supstrata u poređenju sa kontrolnim uzorcima, i izraženi su kao IC50(M).

[0086] Rezultati su prikazani u Tabeli 1 u daljem tekstu.

Tabela 1

Primer 10:

[0087] In vivo farmakokinetičke analize:

Jedan pacov je doziran oralno (5 mg/kg – rastvoreno u DMSO/H2O/propilenglikolu [1:5:4]) i uzorci krvi su uzeti iz sublingvalnog venskog pleksusa na 30 min, 1 čas, 2 časa, 4 časa i 6 časova. Uzoci krvi su uzeti u BD Vacutainer SST epruvete za odvajanje seruma, serum je izolovan centrifugiranjem, prebačen u Micronics epruvete i zatim analiziran.

Parametri masenog spektrometra (API5000 serija) su optimizovani za analizu za specifična jedinjenja i test injekcije su izvedene da bi se potvrdila validnost ustanovljenog generičkog hromatografskog postupka. Generički postupak je zasnovan na analizi sa brzim gradijentom (2.5 min) na C18 koloni sa pokretnim fazama koje se sastoje od metanola, amonijum acetata, mravlje kiseline i vode.

Standardi su pripremljeni u serumu pacova da bi se pokrio analitički opseg 0.1 do 300 ng/ml. Standardi, kontrolni serum i uzorci za ispitivanje su naneti na 96 –komornu ploču sa dubokim komoricama i proteini su istaloženi dodavanjem acetonitrila koji sadrži interni standard. Uzorci su analizirani na LC-MS/MS obično preko noći. Integracija i kvantitativno određivanje je izvedeno na osnovu veze između analita i internog standarda upotrebom Analyst softvera verzije 1.5. Farmakokinetički parametri su izračunati upotrebom standardizovanog Excel dokumenta.

[0088] In vivo farmakokinetički profil u pacovu jedinjenja 101 navedenog u WO 2008/104175 i jedinjenja 105 i 106 navedenih u primerima 5 i 6, respektivno:

PO doziranje jedinjenja 101 iz WO 2008/104175 - 5 mg/kg: Cmax za serum < 3ng/ml matičnog jedinjenja, međutim Cmax za serum ~2000ng/ml metabolita (R3=OH). PDE4 aktivnost metabolita (jedinjenja 403) je 5000nM tj. neaktivno je u poređenju sa matičnim jedinjenjem (PDE4=20nM).

PO doziranje jedinjenja 105 - 5mg/kg: Cmax za serum < 3ng/ml matičnog jedinjenja, međutim Cmax za serum aktivnog metabolita, jedinjenja 106 je 93 ng/ml.

PO doziranje jedinjenja 106 - 5mg/kg: Cmax za serum je 133ng/ml i biodostupnost od 22%.

Ċ

Claims

Patentni zahtevi

1. Jedinjenje koje je 2-(3,5-dihloro-1-oksido-piridin-4-il)-1-{9-difluorometoksi-spiro[2H-1,5-benzodioksepin-3(4H),3’-oksetan]-6-il}etanon ili njegov farmaceutski prihvatljiv hidrat ili solvat za upotrebu u lečenju proliferativnih i inflamatornih kožnih poremećaja kao što su psorijaza, epidermalna inflamacija, akne, dermatitis, atopijski dermatitis, seboreični dermatitis, kontaktni dermatitis, urtikarija, pruritus i ekcem.

2. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što je poremećaj kože psorijaza.

3. Jedinjenje 2-(3,5-dihloro-1-oksido-piridin-4-il)-1-{9-difluorometoksi-spiro[2H-1,5-benzodioksepin-3(4H),3’-oksetan]-6-il}etanon, za upotrebu u oralnom lečenju psorijaze.

4. Jedinjenje koje je 2-(3,5-dihloro-1-oksido-piridin-4-il)-1-{9-difluorometoksi-spiro[2H-1,5-benzodioksepin-3(4H),4’-tetrahidropiran]-6-il}etanon, ili njegov farmaceutski prihvatljiv hidrat ili solvat, za upotrebu u lečenju proliferativnih i inflamatornih kožnih poremećaja kao što su psorijaza, epidermalna inflamacija, akne, dermatitis, atopijski dermatitis, seboreični dermatitis, kontaktni dermatitis, urtikarija, pruritus i ekcem.

5. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 4, naznačeno time što je poremećaj kože psorijaza.

6. Jedinjenje 2-(3,5-dihloro-1-oksido-piridin-4-il)-1-{9-difluorometoksi-spiro[2H-1,5-benzodioksepin-3(4H),4’-tetrahidropiran]-6-il}etanon, za upotrebu u oralnom lečenju psorijaze.

7. Jedinjenje koje je 2-(3,5-dihloro-1-oksido-piridin-4-il)-1-(7-difluorometoksi-2’,3’,5’,6’-tetrahidro-spiro[1,3-benzodioksol-2,4’-(4H)-piran]-4-il)etanon, ili njegov farmaceutski prihvatljiv hidrat ili solvat, za upotrebu u lečenju proliferativnih i inflamatornih kožnih poremećaja kao što su psorijaza, epidermalna inflamacija, akne, dermatitis, atopijski dermatitis, seboreični dermatitis, kontaktni dermatitis, urtikarija, pruritus i ekcem.

8. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 7, naznačeno time što je poremećaj kože psorijaza.

9. Jedinjenje 2-(3,5-dihloro-1-oksido-piridin-4-il)-1-(7-difluorometoksi-2’,3’,5’,6’-tetrahidrospiro[1,3-benzodioksol-2,4’-(4H)-piran]-4-il)etanon, za upotrebu u oralnom lečenju psorijaze.

10. Jedinjenje koje je 2-(3,5-dihloro-1-oksido-piridin-4-il)-1-(7-difluorometoksi-2’,3’,5’,6’-tetrahidro-spiro[1,3-benzodioksol-2,4’-(4H)-tiopran-1’,1’-dioksid]-4-il)etanon, ili njegov farmaceutski prihvatljiv hidrat ili solvat, za upotrebu u lečenju proliferativnih i inflamatornih kožnih poremećaja kao što su psorijaza, epidermalna inflamacija, akne, dermatitis, atopijski dermatitis, seboreični dermatitis, kontaktni dermatitis, urtikarija, pruritus i ekcem.

11. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 10, naznačeno time što je poremećaj kože psorijaza.

12. Jedinjenje 2-(3,5-dihloro-1-oksido-piridin-4-il)-1-(7-difluorometoksi-2’,3’,5’,6’-tetrahidro-spiro[1,3-benzodioksol-2,4’-(4H)-tiopiran-1’,1’-dioksid]-4-il)etanon, za upotrebu u oralnom lečenju psorijaze.

Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5