RS62507B1 - Humana antitela za pd-1 - Google Patents

Humana antitela za pd-1

Info

Publication number
RS62507B1
RS62507B1 RS20211336A RSP20211336A RS62507B1 RS 62507 B1 RS62507 B1 RS 62507B1 RS 20211336 A RS20211336 A RS 20211336A RS P20211336 A RSP20211336 A RS P20211336A RS 62507 B1 RS62507 B1 RS 62507B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
antibody
antibodies
antigen
binding
amino acid
Prior art date
Application number
RS20211336A
Other languages
English (en)
Inventor
Nicholas J Papadopoulos
Andrew J Murphy
Gavin Thurston
Ella Ioffe
Elena Burova
Original Assignee
Regeneron Pharma
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=52462456&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS62507(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Regeneron Pharma filed Critical Regeneron Pharma
Publication of RS62507B1 publication Critical patent/RS62507B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2818—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against CD28 or CD152
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61N—ELECTROTHERAPY; MAGNETOTHERAPY; RADIATION THERAPY; ULTRASOUND THERAPY
    • A61N5/00—Radiation therapy
    • A61N5/10—X-ray therapy; Gamma-ray therapy; Particle-irradiation therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/14—Prodigestives, e.g. acids, enzymes, appetite stimulants, antidyspeptics, tonics, antiflatulents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/04—Antipruritics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/14—Drugs for dermatological disorders for baldness or alopecia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2827—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against B7 molecules, e.g. CD80, CD86
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Radiology & Medical Imaging (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)

Description

Opis
OBLAST PRONALASKA
[0001] Predmetni pronalazak se odnosi na humana antitela i fragmente koji vezuju antigene humanih antitela koji se specifično vezuju za imunomodulatorni receptor programirane ćelijske smrti-1 (PD-1), i terapeutske i dijagnostičke postupke za upotrebu takvih antitela.
IZJAVA O POVEZANOJ OBLASTI TEHNIKE
[0002] Programirana ćelijska smrt-1 (PD-1) (takođe poznat kao CD279) je proteinski receptor od 288 aminokiselina koji je eksprimiran na aktiviranim T-ćelijama i B-ćelijama, prirodnim ćelijama ubicama i monocitima. PD-1 je član CD28/CTLA-4 (antigena citotoksičnog T limfocita)/ ICOS (inducibilnog kostimulatora) familije T-ćelijskih ko-inhibitornih receptora (Chen et al 2013, Nat. Rev. Immunol. 13: 227-242). Primarna funkcija PD-1 je da oslabi imunološki odgovor (Riley 2009, Immunol. Rev.229: 114-125). PD-1 ima dva liganda, PD-ligand1 (PD-L1) i PD-L2. PD-L1 (CD274, B7H1) je široko eksprimiran i na limfoidnim i ne-limfoidnim tkivima kao što su CD4 i CD8 T-ćelije, ćelije linija makrofaga, perifernih tkiva kao i na ćelijama tumora, ćelijama koje su inficirane virusima i ćelijama autoimunih tkiva. PD-L2 (CD273, B7-DC) ima više ograničenu ekspresiju u odnosu na PD-L1, eksprimiran je na aktiviranim dendritičnim ćelijama i makrofagima (Dong et al 1999, Nature Med.). PD-L1 je eksprimiran na većini humanih kancera, uključujući melanom, gliom, ne-mikrocelularni kancer pluća, karcinom skvamoznih ćelija glave i vrata, leukemiji, kanceru pankreasa, karcinomu ćelija bubrega, i hepatocelularnom karcinomu, i može se indukovati u skoro svim tipovima kancera (Zou and Chen 2008, Nat. Rev. Immunol.8: 467-77). Vezivanje PD-1 za njegove ligande za rezultat ima smanjenu proliferaciju T-ćelija i lučenje citokina, koji obuhvataju humoralne i ćelijske imune odgovore u bolestima kao što je kancer, virusna infekcija i autoimuna bolest. Blokada vezivanja PD-1 za reverznu imunosupresiju je proučavana u autoimunoj, virusnoj i tumorskoj imunoterapiji (Ribas 2012, NEJM 366: 2517-2519; Watanabe et al 2012, Clin. Dev. Immunol. Volume 2012, Article ID: 269756; Wang et al 2013, J. Viral Hep.20: 27-39).
[0003] T-ćelijski ko-stimulatorni i ko-inhibitorni molekuli (kolektivno poznati kao ko-signalni molekuli) igraju krucijalnu ulogu u regulaciji aktivacije T-ćelija, diferencijaciji podtipova, efektorskima funkcijama i preživljavanju (Chen et al 2013, Nature Rev. Immunol. 13: 227-242). Prateći prepoznavanje srodnih kompleksa peptid-MHC na antigen-prezentujućim ćelijama od strane T-ćelijskog receptora, ko-signalnih receptora ko-lokalizuje sa T-ćelijskim receptorima na imunološkoj sinapsi, u kojoj oni sinergiraju sa signalizacijom TCR-a da se promoviše ili inhibira T-cell aktivacija ili funkcija (Flies et al 2011, Yale J. Biol. Med. 84: 409-421). Krajnji imunski odgovor je regulisan ravnotežom između ko-stimulatornih i koinhibitornih signala ("imune tačke provere") (Pardoll 2012, Nature 12: 252-264). PD-1 funkcioniše kao jedna takva 'tačka imune provere' u posredovanju u toleranciji perifernih T-ćelija i u izbegavanju autoimunosti. PD-1 se vezuje za PD-L1 ili PD-L2 i inhibira aktivaciju T-ćelija. Sposobnost PD1 da inhibira aktivaciju T-ćelija je iskorišćena od strane hroničnih virusnih infekcija i tumora da bi se izbegao imuni odgovor. U hroničnim virusnim infekcijama, PD-1 je visoko eksprimiran na T-ćelijama koje su specifične za virus i ove T-ćelije postaju "iscrpljene" sa gubitkom efektorskih funkcija i proliferativnog kapaciteta Freeman 2008, PNAS 105: 10275-10276. PD-L1 e e sprmran na ro om opsegu tumora sptvana na životinjskim modelima su pokazala da PD-L1 na tumorima inhibira aktivaciju T-ćelija i lizu tumorskih ćelija i može dovesti do povećane smrti tumor-specifičnih T-ćelija. Sistem PD-1: PD-L1 takođe igra važnu ulogu u razvoju indukovanih T-regulatornih (Treg) ćelija i u održavanju funkcije Treg (Francisco et al 2010, Immunol. Rev.236: 219-242).
[0004] S obzirom na to da PD-1 igra važnu ulogu u autoimunosti, imunosti prema tumoru i infektivnoj imunosti, idealna je meta za imunoterapiju. Blokiranje PD-1 sa antagonistima, uključujući monoklonska antitela, ispitivano je u tretmanima kancera i hroničnim virusnim infekcijama (Sheridan 2012, Nature Biotechnology 30: 729-730).
[0005] Monoklonska antitela protiv PD-1 su poznata iz oblasti tehnike i opisana su, na primer, u US objavi patenta br. 8008449, 8168757, 20110008369, 20130017199, 20130022595, i u WO2006121168,WO20091154335, WO2012145493, WO2013014668, WO2009101611, EP2262837, i EP2504028.
KRATAK OPIS SUŠTINE PRONALASKA
[0006] Predmetni pronalazak obezbeđuje antitela i njihove fragmente za vezivanje antitela kao što je definisano u zahtevima, koji se vezuju za PD-1. Antitela iz predmetnog pronalaska su korisna, između ostalog, za ciljanje T ćelija koje eksprimiraju PD-1, i za modulisanje PD-1 aktivnosti. U određenim izvođenjima, antitela iz pronalaska su korisna za inhibiranje ili neutralizaciju PD-1 aktivnosti i/ili za stimulisanje T ćelijske aktivacije, npr, pod uslovima gde je ubijanje posredovano T ćelijama korisno ili poželjno. U alternativnim aspektima iz pronalaska, antitela pojačavaju vezivanje PD-1 i/ili aktivnost i mogu se koristiti za inhibiranje aktivacije T-ćelija. Anti-PD-1 antitela iz pronalaska, ili njihovi antigen vezujući delovi, mogu biti uključeni kao deo multi-specifičnog antigen-vezujućeg molekula, na primer, da bi se modulisao imunološki odgovor i/ili za ciljanje antitela prema specifičnom ćelijskom tipu, kao što je tumorska ćelija, ćelija autoimunog tkiva ili virusom inficirana ćelija. Antitela su korisna u lečenju bolesti ili poremećaja kao što je kancer, virusna infekcija i autoimuna bolest.
[0007] Antitela iz pronalaska mogu biti pune dužine (na primer, IgG1 ili IgG4 antitelo) ili mogu sadržati samo deo za vezivanje antigena (na primer, Fab, F(ab')2ili scFv fragment), i mogu biti modifikovani da utiču na funkcionalnost, npr., da bi se eliminisale rezidualne efektorske funkcije(Reddy et al., 2000, J. Immunol.
164:1925-1933). U određenim izvođenjima, antitela mogu biti bispecifična.
[0008] U prvom aspektu, predmetni pronalazak obezbeđuje izolovana rekombinantna monoklonska antitela ili njihove fragmente koji vezuju antigen kao što je definisano u zahtevima koja se specifično vezuju za PD-1. U određenim izvođenjima, antitela su potpuno humana. Primeri anti-PD-1 antitela iz predmetnog pronalaska ovde su navedeni u Tablelama 1 - 3. Tabela 1 prikazuje indentifikatore aminokiselinskih sekvenci za varijabilne regione teškog lanca (HCVRs), varijabilne regione lakog lanca (LCVRs), regione koji određuju komplementarnost teškog lanca (HCDR1, HCDR2 and HCDR3), i regione koji određuju komplementarnost lakog lanca (LCDR1, LCDR2 and LCDR3) anti-PD-1 antitela iz primera. Tabela 2 prikazuje identifikatore sekvence nukleinske kiseline HCVRs, LCVRs, HCDR1, HCDR2 HCDR3, LCDR1, LCDR2 i LCDR3 primera anti-PD-1 antitela. Tabela 3 predstavlja identifikatore aminokiselinske sekvence sekvenci teškog i lakog lanca primera anti-PD-1 antitela.
[0009] Predmetni pronalazak obezbeđuje antitela, ili njihove fragmente koji vezuju antigen, koji se sastoje iz HCVR koji sadrži aminokiselinsku sekvencu izabranu od bilo koje od HCVR sekvenci aminokiselina navedenih u Tabeli 1, ili suštinski njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci.
[0010] Predmetni prikaz takođe obezbeđuje antitela, ili njihove fragmente koji vezuju antigen, koji se sastoje iz LCVR koji sadrži aminokiselinsku sekvencu izabranu od bilo koje od LCVR sekvenci aminokiselina nave en u Ta e 1, su tns n ovu s nu se vencu oa e ar 90%, ar 95%, ar 98% ar 99% identična u sekvenci.
[0011] Predmetni prikaz takođe obezbeđuje antitela, ili njihove fragmente koji vezuju antigen, koji se sastoje iz para HCVR i LCVR aminokiselinske sekvence (HCVR/LCVR) koja sadrži bilo koju od HCVR aminokiselinskih sekvenci navedenih u Tabeli 1 uparenih sa bilo kojim od LCVR aminokiselinskih sekvenci navedenih u Tabeli 1. U skladu sa određenim aspektima, predmetni pronalazak obezbeđuje antitela, ili njihove fragmente koji vezuju antigen, koji se sastoje iz para HCVR/LCVR aminokiselinske sekvence sadržane u bilo kom od primera anti-PD-1 antitela navedenih u Tabeli 1. U određenim aspektima, par HCVR/LCVR aminokiselinske sekvence je izabran iz grupe koja se sastoji iz SEQ ID NOs: 2/10, 18/26, 34/42, 50/58, 66/74, 82/90, 98/106, 114/122, 130/138, 146/154, 162/170, 178/186, 194/202, 210/202, 218/202, 226/202, 234/202, 242/202, 250/202, 258/202, 266/202, 274/202, 282/202, 290/202, 298/186, 306/186 i 314/186. U određenim aspektima, par HCVR/LCVR aminokiselinske sekvence je izabran iz jednog od SEQ ID NOs: 130/138 (npr., H2M7795N), 162/170 (npr., H2M7798N), 234/202 (npr., H4xH9048P), ili 314/186 (npr., H4xH9008P). U pronalasku, antitelo ili njegov fragment koji vezuje antigen sadrži HCVR/LCVR par aminokiselinske sekvence prema SEQ ID Nos: 162/170.
[0012] Predmetni prikaz takođe obezbeđuje antitela, ili njihove fragmente koji vezuju antigen, koji se sastoje iz CDR1 teškog lanca (HCDR1) koji sadrži aminokiselinsku sekvencu izabranu od bilo koje od HCDR1 aminokiselinskih sekvenci koje su navedene u Tabeli 1 ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci.
[0013] Predmetni prikaz takođe obezbeđuje antitela, ili njihove fragmente koji vezuju antigen, koji se sastoje iz CDR2 teškog lanca (HCDR2) koji sadrži aminokiselinsku sekvencu izabranu od bilo koje od HCDR2 aminokiselinskih sekvenci koje su navedene u Tabeli 1 ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bаr 98% ili bar 99% identična u sekvenci.
[0014] Predmetni prikaz takođe obezbeđuje antitela, ili njihove fragmente koji vezuju antigen, koji se sastoje iz CDR3 teškog lanca (HCDR3) koji sadrži aminokiselinsku sekvencu izabranu od bilo koje od HCDR3 aminokiselinskih sekvenci koje su navedene u Tabeli 1 ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci.
[0015] Predmetni prikaz takođe obezbeđuje antitela, ili njihove fragmente koji vezuju antigen, koji se sastoje iz CDR1 lakog lanca (LCDR1) koji sadrži aminokiselinsku sekvencu izabranu od bilo koje od LCDR1 aminokiselinskih sekvenci koje su navedene u Tabeli 1 ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci.
[0016] Predmetni prikaz takođe obezbeđuje antitela, ili njihove fragmente koji vezuju antigen, koji se sastoje iz CDR2 lakog lanca (LCDR2) koji sadrži aminokiselinsku sekvencu izabranu od bilo koje od LCDR2 aminokiselinskih sekvenci koje su navedene u Tabeli 1 ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci.
[0017] Predmetni prikaz takođe obezbeđuje antitela, ili njihove fragmente koji vezuju antigen, koji se sastoje iz CDR3 lakog lanca (LCDR3) koji sadrži aminokiselinsku sekvencu izabranu od bilo koje od LCDR3 aminokiselinskih sekvenci koje su navedene u Tabeli 1 ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci.
[0018] Predmetni prikaz takođe obezbeđuje antitela, ili njihove fragmente koji vezuju antigen, koji se sastoje iz HCDR3 i LCDR3 para aminokiselinske sekvence (HCDR3/LCDR3) koji sadrži bilo koju od HCDR3 aminokiselinskih sekvenci koje su navedene u Tabeli 1 koje su uparene sa bilo kojom od LCDR3 aminokiselinskih sekvenci koje su navedene u Tabeli 1. U skladu sa određenim aspektima, predmetni pronalazak obezbeđuje antitela, ili njihove fragmente koji vezuju antigen, koji se sastoje iz para HCDR3/LCDR3 aminokiselinske sekvence koji je sadržan u bilo kom od primera anti-PD-1 antitela koja su nave ena u Ta e 1. U o re enm aspe tma, HCDR3 LCDR3 par amno se ns e se vence e za ran z grupe koja se sastoji iz SEQ ID NOs: 136/144 (npr., H2M7795N), 168/176 (npr., H2M7798N), 240/208 (npr., H4xH9048P), i 320/192 (npr., H4xH9008P).
[0019] Predmetni pronalazak obezbeđuje antitela, ili njihove fragmente koji vezuju antigen, koji se sastoje iz teškog lanca koji sadrži aminokiselinsku sekvencu izabranu od bilo koje od HC aminokiselinskih sekvenci koje su navedene u Tabeli 3, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci.
[0020] Predmetni prikaz takođe obezbeđuje antitela, ili njihove fragmente koji vezuju antigen, koji se sastoje iz lakog lanca koji sadrži aminokiselinsku sekvencu izabranu od bilo koje od LC aminokiselinskih sekvenci koje su navedene u Tabeli 3, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci.
[0021] Predmetni prikaz takođe obezbeđuje antitela, ili njihove fragmente koji vezuju antigen, koji se sastoje iz HC i LC aminokiselinskog para (HC/LC) koji sadrži bilo koju od HC aminokiselinskih sekvenci koje su navedene u Tabeli 3 uparene sa bilo kojom od LC aminokiselinskih sekvenci koje su navedene u Tabeli 3. U skladu sa određenim aspektima, predmetni pronalazak obezbeđuje antitela, ili njihove fragmente koji vezuju antigen, koja se sastoje iz HC/LC para aminokiselinske sekvence koji je sadržan u bilo kom od primera anti-PD-1 antitela koja su navedena u Tabeli 3. U određenim aspektima, HC/LC par aminokiselinske sekvence je izabran iz grupe koja se sastoji iz SEQ ID NOs: 330/331, 332/333, 334/335, i 336/337. U nekim izvođenjima, antitelo ili njegov antigen vezujući fragment sastoji se iz HC/LC para aminokiselinskih sekvenci prema SEQ ID NOs: 330/331.
[0022] Predmetni prikaz takođe obezbeđuje antitela, ili njihove fragmente za vezivanje antigena, koji se sastoje iz niza od šest CDRs (tj., HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3) koji su sadržani u bilo kom od primera anti-PD-1 antitela koja su navedena u Tabeli 1. U određenim aspektima, HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3 aminokiselinska sekvenca koja je predstavljena, izabrana je iz grupe koja se sastoji iz SEQ ID NOs: 132-134-136-140-142-144 (e.g., H2M7795N); 164-166-168-172-174-176 (npr.,H2M7798N); 236-238-240-204-206-208 (npr., H4xH9048P); i 316-318-320-188-190-192 (npr., H4xH9008P).
[0023] U povezanom aspektu, predmetni pronalazak obezbeđuje antitela, ili njihove fragmente koji vezuju antigen, koji se sastoje iz niza od šest CDRs (tj., HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3) koji su sadržani u HCVR/LCVR paru aminokiselinske sekvence kao što je definisano u bilo kom od primera anti-PD-1 antitela koja su navedena u Tabeli 1. Na primer, predmetni prikaz uključuje antitela, ili njihove fragmente koji vezuju antigen, koji se sastoje iz HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1- LCDR2-LCDR3 niza aminokiselinskih sekvenci koje su sadržane u HCVR/LCVR paru aminokiselinske sekvence koja je izabrana iz grupe koja se sastoji iz SEQ ID NOs: 130/138 (npr., H2M7795N); 162/170 (npr., H2M7798N); 234/202 (npr., H4xH9048P); i 314/186 (npr ., H4xH9008P). U oblasti tehnike su dobro poznati postupci i tehnike za identifikovanje CDRs unutar HCVR i LCVR aminokiselinskih sekvenci i korišćeni su za identifikovanje CDRs unutar specifičnih ovde naznačenih, HCVR i/ili LCVR aminokiselinskih sekvenci. Primeri konvencija koje se mogu koristiti za identifikovanje granica CDRs uključuju, npr., definiciju po Kabatu, Chothia definiciju, i AbM definiciju. U opštim terminima, definicija po Kabatu je zasnovana na varijabilnosti sekvence, Chothia definicija je zasnovana na položaju strukturalnih regiona petlje, i AbM definicija je kompromis između Kabat i Chothia pristupa. Videti, npr., Kabat, "Sequences of Proteins of Immunological Interest," National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991); Al-Lazikani et al., J. Mol. Biol.273:927-948 (1997); i Martin et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86:9268-9272 (1989). Baze podataka koje su dostupne javno su takođe dostupne za identifikovanje sekvenci CDR unutar antitela.
[0024] Predmetni pronalazak uključuje anti-PD-1 antitela koja imaju modifikovani obrazac glikozilacije. U nekim izvođenjima, modifikacija kako bi se uklonila neželjena mesta glikozilacije mogu biti korisna, ili antitelo kome nedostaje ostatak funkoze koji se nalazi na oligosaharidnom lancu, na primer, da bi se povećala funkcija ćelijske citotoksičnosti koja zavisi od antitela (ADCC) (videti Shield et al. (2002) JBC 277:26733. U rugm prmenama, mo ac a gaa toz ac om mo e se napravt a se mo ovaa citotoksičnost koja zavisi od komplementa (CDC).
[0025] Predmetni prikaz takođe obezbeđuje antitela i njihove fragmente koji vezuju antigen koji su u kompeticiji za specifično vezivanje za PD-1 sa antitelom ili njegovim antigen vezujućim fragmentom koji se sastoji iz CDRs HCVR i CDRs LCVR, pri čemu HCVR i LCVR svaki imaju aminokiselinsku sekvencu koja je izabrana iz HCVR i LCVR sekvenci koje su navedene u Tabeli 1.
[0026] Predmetni prikaz takođe obezbeđuje izolovana antitela i njihove fragmente koji vezuju antigen koji blokiraju vezivanje PD-1 za PD-L1 ili PD-L2. U nekim aspektima, antitelo ili njegov fragment za vezivanje antigena koji blokira vezivanje PD-1 za PD-L1 mogu se vezati za isti epitop na PD-1 kao PD-L1 ili se mogu vezati za različiti epitop na PD-1 kao PD-L1.
[0027] U različitim aspektima, predmetni pronalazak obezbeđuje antitela i njihove fragmente koji vezuju antigen koji stimulišu vezivanje PD-1 za PD-L1. U određenim aspektima, predmetni prikaz obezbeđuje izolovana antitela ili njihove fragmente za vezivanje antigena koji vezuju PD-1, gde antitela ili njihovi fragmenti za vezivanje antigena pojačavaju vezivanje PD-1 za PD-L1. U nekim aspektima, izolovana antitela ili njihovi fragmenti za vezivanje antigena sadrže CDRs HCVR, pri čemu HCVR ima aminokiselinsku sekvencu koja je izabrana iz grupe koja se sastoji iz SEQ ID NOs: 2, 98, i 250; i CDRs LCVR, pri čemu LCVR ima aminokiselinsku sekvencu koja je izabrana iz grupe koja se sastoji iz SEQ ID NOs: 10, 106, i 202. U nekim aspektima, izolovana antitela ili njihovi fragmenti za vezivanje antigena sadrže HCVR/LCVR par aminokiselinske sekvence koji je izabran iz grupe koja se sastoji iz SEQ ID NOs: 2/10 (npr., H1M7789N), 98/106 (npr., H2M7791N), i 250/202 (npr., H4H9068P2).
[0028] Predmetni prikaz takođe obezbeđuje antitela i njihove fragmente koji vezuju antigen koji se vezuju specifično za PD-1 iz humanih ili drugih vrsta. U određenim aspektima, antitela se mogu vezati za huamni PD-1 i/ili za PD-1 cinomolgusa.
[0029] Predmetni prikaz takođe obezbeđuje antitela i njihove fragmente koji vezuju antigen koji su u unakrsnoj kompeticiji za vezivanje sa PD-1 sa referentnim antitelom ili njegovim fragmentom za vezivanje antigena koji se sastoji iz CDRs HCVR i CDRs LCVR, pri čemu HCVR i LCVR svaki ima aminokiselinsku sekvencu koja je izabrana iz HCVR i LCVR sekvenci koje su navedene u Tabeli 1.
[0030] U jednom izvođenju, prikaz obezbeđuje izolovano antitelo ili njegov fragment za vezivanje antigena koji ima jednu ili više od sledećih karakteristika: (a) blokira vezivanje PD-1 sa PD-L1 ili PD-L2; (b) specifično se vezuje za humani PD-1 i/ili PD-1 cinomolgusa; (c) blokiran PD-1-indukovanu nishodnu regulaciju T-ćelija i spašava T-ćelijsku signalizaciju; (d) suprimira tumorski rast i povećava preživljavanje kod subjekata sa kancerom debelog creva; (e) inhibira T-ćelijsku proliferaciju u testu reakcije pomešanih limfocita (MLR); i (f) povećava lučenje IL-2 i/ili interferona-gama u MLR testu.
[0031] U nekim aspektima, antitelo ili njegov fragment za vezivanje antigena mogu se vezati specifično za PD-1 na način agonista, tj., može pojačati ili stimulisati vezivanje PD-1 i/ili aktivnost; u drugim aspektima, antitelo se specifično može vezati za PD-1 na antagonistički način, tj., može blokirati PD-1 od vezivanja za njegov ligand.
[0032] U određenim izvođenjima, antitela ili fragmenti za vezivanje antigena iz predmetnog pronalaska su bispecifični sastoje se iz prve specifičnosti vezivanja za PD-1 i druge specifičnosti vezivanja za drugi ciljani epitop. Drugi ciljni epitop može biti drugi epitop na PD-1 ili na različitom proteinu. U određenom izvođenju, ciljni epitop može biti na različitoj ćeliji uključujući različitu T-ćeliju, B-ćeliju, tumorsku ćeliju, ćeliju autoimunog tkiva ili ćeliju koja je inficirana virusom.
[0033] U drugom aspektu, predmetni pronalazak obezbeđuje molekule nukleinske kiseline koji kodiraju anti-PD-1 antitela ili njegove delove prema pronalasku. Predmetni pronalazak obezbeđuje molekule nukleinske kiseline koji kodiraju bilo koju od HCVR aminokiselinskih sekvenci koje su navedene u Tabeli 1; u o re enm aspe tma moe u nu ens e se ne sa r po nu eot nu se vencu oa e za rana z bilo kog od HCVR sekvenci nukleinskih kiselina koje su navedene u Tabeli 2, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci.
[0034] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje molekule nukleinske kiseline koji kodiraju bilo koju od LCVR aminokiselinskih sekvenci koje su navedene u Tabeli 1; u određenim aspektima molekul nukleinske kiseline sadrži polinukleotidnu sekvencu koja je izabrana iz bilo koje od LCVR sekvenci nukleinskih kiselina koje su navedene u Tabeli 2, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci.
[0035] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje molekule nukleinske kiseline koji kodiraju bilo koju od HCDR1 aminokiselinskih sekvenci koje su navedene u Tabeli 1; u određenim aspektima molekul nukleinske kiseline sadrži polinukleotidnu sekvencu koja je izabrana iz bilo koje od HCDR1 sekvenci nukleinskih kiselina koje su navedene u Tabeli 2, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci.
[0036] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje molekule nukleinske kiseline koji kodiraju bilo koju od HCDR2 aminokiselinskih sekvenci koje su navedene u Tabeli 1; u određenim aspektima molekul nukleinske kiseline sadrži polinukleotidnu sekvencu koja je izabrana iz bilo koje od HCDR2 sekvenci nukleinskih kiselina koje su navedene u Tabeli 2, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci .
[0037] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje molekule nukleinske kiseline koji kodiraju bilo koju od HCDR3 aminokiselinskih sekvenci koje su navedene u Tabeli 1; u određenim aspektima molekul nukleinske kiseline sadrži polinukleotidnu sekvencu koja je izabrana iz bilo koje od HCDR3 sekvenci nukleinskih kiselina koje su navedene u Tabeli 2, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci.
[0038] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje molekule nukleinske kiseline koji kodiraju bilo koju od LCDR1 aminokiselinskih sekvenci koje su navedene u Tabeli 1; u određenim aspektima molekul nukleinske kiseline sadrži polinukleotidnu sekvencu koja je izabrana iz bilo koje od LCDR1 sekvenci nukleinskih kiselina koje su navedene u Tabeli 2, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci.
[0039] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje molekule nukleinske kiseline koji kodiraju bilo koju od LCDR2 aminokiselinskih sekvenci koje su navedene u Tabeli 1; u određenim aspektima molekul nukleinske kiseline sadrži polinukleotidnu sekvencu koja je izabrana iz bilo koje od LCDR2 sekvenci nukleinskih kiselina koje su navedene u Tabeli 2, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci.
[0040] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje molekule nukleinske kiseline koji kodiraju bilo koju od LCDR3 aminokiselinskih sekvenci koje su navedene u Tabeli 1; u određenim aspektima molekul nukleinske kiseline sadrži polinukleotidnu sekvencu koja je izabrana iz bilo koje od LCDR3 sekvenci nukleinskih kiselina koje su navedene u Tabeli 2, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci.
[0041] Predmetni prikaz takođe obezbeđuje molekule nukleinske kiseline koji kodiraju HCVR, gde HCVR sadrži niz od tri CDRs (tj., HCDR1-HCDR2-HCDR3), gde niz HCDR1-HCDR2 HCDR3 aminokiselinske sekvence je kao što je definisano sa bilo kojim od primera anti-PD-1 antitela koja su navedena u Tabeli 1.
[0042] Predmetni prikaz takođe obezbeđuje molekule nukleinske kiseline koji kodiraju LCVR, gde LCVR sadrži niz od tri CDRs (tj., LCDR1-LCDR2-LCDR3), gde niz LCDR1-LCDR2-LCDR3 aminokiselinske sekvence je kao što je definisano sa bilo kojim od primera anti-PD-1 antitela koja su navedena u Tabeli 1.
[0043] Pre metn pr az ta o e o ez e ue moe ue nu ens e se ne o o rau HCVR LCVR, pr čemu HCVR sadrži aminokiselinsku sekvencu prema bilo kojoj od HCVR aminokiselinskih sekvenci koje su navedene u Tabeli 1, i gde LCVR sadrži aminokiselinsku sekvencu prema bilo kojoj od LCVR aminokiselinskih sekvenci koje su navedene u Tabeli 1. U određenim aspektima, molekul nukleinske kiseline sadrži polinukleotidnu sekvencu koja je izabrana iz bilo koje od HCVR sekvenci nukleinskih kiselina koje su navedene u Tabeli 2, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci, i polinukleotidnu sekvencu koja je izabrana od bilo koje od LCVR sekvenci nukleinskih kiselina koje su navedene u Tabeli 2, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci. U određenim aspektima prema ovom aspektu iz prikaza, molekul nukleinske kiseline koji kodira za HCVR i LCVR, gde HCVR i LCVR su zajedno izvedeni iz istog anti-PD-1 antitela koje je navedeno u Tabeli 1.
[0044] Predmetni prikaz obezbeđuje molekule nukleinske kiseline koji kodiraju bilo koju od aminokiselinskih sekvenci teškog lanca koje su navedene u Tabeli 3. Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje molekule nukleinske kiseline koji kodiraju bilo koju od aminokiselinskih sekvenci lakog lanca koje su navedene u Tabeli 3.
[0045] Predmetni prikaz takođe obezbeđuje molekule nukleinske kiseline koji kodiraju i težak lanac (HC) i laki lanac (LC), pri čemu HC sadrži aminokiselinsku sekvencu prema bilo kojoj od HC aminokiselinskih sekvenci koje su navedene u Tabeli 3, i gde LC sadrži aminokiselinsku sekvencu prema bilo kojoj od LC aminokiselinskih sekvenci koje su navedene u Tabeli 3.
[0046] U povezanom aspektu, predmetni pronalazak obezbeđuje rekombinantne ekspresione vektore koji se sastoje iz polinukleotidnih molekula iz pronalaska. Predmetni prikaz uključuje rekombinantne ekspresione vektore koji se sastoje bilo kojih molekula nukleinske kiseline koji su gore pomenuti, tj., molekule nukleinske kiseline koji kodiraju bilo koje od HCVR, LCVR, i/ili CDR sekvenci kao što je predstavljeno u Tabeli 1. Predmetni prikaz takođe obezbeđuje rekombinantne ekspresione vektore koji su sposobni da eksprimuju polipeptid koji se sastoji iz teškog ili lakog lanca anti-PD-1 antitela. Na primer, predmetni prikaz uključuje rekombinantne ekspresione vektore koji se sastoje iz bilo koje gore pomenute molekule nukleinske kiseline, tj., molekule nukleinske kiseline koji kodiraju bilo koju od sekvenci teškog lanca ili lakog lanca kao što je predstavljeno u Tabeli 3. Takođe uključeni u obim predmetnog pronalaska su ćelije domaćina u koje su takvi vektori iz pronalaska uvedeni, kao i postupci za prozivodnju antitela ili njihovih delova iz pronalaska kultivisanjem ćelija domaćina iz pronalaska u uslovima koji dozvoljavaju proizvodnju antitela ili fragmenata antitela, i dobijanja antitela i fragmenata antitela koji su na taj način proizvedeni.
[0047] U daljem aspektu, predmetni prikaz obezbeđuje multi-specifične antigen-vezujuće molekule i njihove fragmente za vezivanje antigena koji se sastoje iz prve specifičnosti za vezivanje antigena koja se specifično vezuje za PD-1 i drugu specifičnost za vezivanje antigena koja se specifično vezuje za antigen koji je izabran iz grupe koja obuhvata antigen koji je specifičan za ćeliju tumora, antigen koji je specifičan za autoimuno tkivo, antigen koji je specifičan za inficiranu ćeliju, T-ćelijski ko-inhibitor, T-ćelijski receptor, Fc receptor, PD-L1, i PD-1. U određenim aspektima, prva specifičnost za vezivanje antigena može sadržati tri CDRs dobijena iz HCVR sa aminokiselinskom sekvencom koja je izabrana iz HCVR sekvenci u Tabeli 1 i tri CDRs dobijena iz LCVR sa aminokiselinskom sekvencom koja je izabrana iz LCVR sekvenci u Tabeli 1. U jednom aspektu, prva specifičnost za vezivanje antigena može sadržati vanćelijski domen PD-L1. Druga specifičnost za vezivanje antigena može ciljati antigen na istoj ćeliji kao PD-1 ili na različitoj ćeliji istog tipa tkiva ili različitog tipa tkiva. Na primer, multi-specifičan antigen-vezujući molekul može se vezati za T-ćeliju pri čemu prva specifičnost za vezivanje antigena može se specifično vezati za PD-1 i druga specifičnost za vezivanje antigena može se vezati za T-ćelijski receptor na T-ćeliji. Alternativno, u drugom aspektu, prva specifičnost za vezivanje antigena može se vezati specifično za PD-1 na T-ćeliji i druga specifičnost za vezivanje antigena može se ciljano usmeriti na antigen/receptor na B-ćeliji iil makrofagu ili antigenprezentujućim ćelijama. U određenim aspektima, druga specifičnost za vezivanje antigena može se usmert na antgen o e u vez sa automunm t vnom. U e nom aspe tu, prva spec nost za vezvane antigena može sadržati vanćelijski domen PD-L1 i druga specifičnost za vezivanje antigena može se vezati za drugi epitop na PD-1. U određenim aspektima , prva specifičnost za vezivanje antigena vezuje se za PD-1 sa nižim afinitetom, na primer, sa KDvećim od 10<-7>M, većim od 10<-6>M, većim od 10<-5>M, ili većim od 10<-4>M.
[0048] U trećem aspektu, pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja se sastoji iz rekombinantnog humanog antitela ili njegovog fragmenta iz pronalaska koji se specifično vezuje za PD-1 i farmaceutski prihvatljivog nosača. U povezanom aspektu, pronalazak sadrži kompoziciju koja je kombinacija anti-PD-1 antitela iz pronalaska i drugog terapeutskog sredstva. U jednom izvođenju, drugo terapeutsko sredstvo je bilo koje sredstvo koje je povoljno kombinovano sa anti-PD-1 antitelom. Primeri sredstava koja se mogu povoljno kombinovati sa anti-PD-1 antitelom uključuju, bez ograničenja, druga sredstva koja vezuju i/ili modulišu PD-1 signalizaciju (uključujući druga antitela ili njihove fragmente za vezivanje antigena, npr.) i/ili sredstva koja je vezuju direktno PD-1 ali ipak moduliraju aktivaciju imune ćelije. Dodatne kombinovane terapije i ko-formulacije uključujući anti-PD-1 antitela iz predmetnog pronalaska su prikazana ovde na drugom mestu.
[0049] U daljem aspektu, prikaz obezbeđuje postupke za modulaciju imunog odgovora kod subjekta, postupak obuhvata davanje terapeutski efikasne količine anti-PD-1 antitela ili njegovog fragmenta za vezivanje antigena iz pronalaska subjektu kome je to potrebno. U određenim aspektima, prikaz obezbeđuje postupke za pojačanje imunog odgovora kod subjekta, postupci obuhvataju davanje subjektu efikasne količine antitela ili njegovog fragmenta iz pronalaska koje vezuje PD-1 i blokira vezivanje PD-1 za PD-L1. U jednom aspektu , prikaz obezbeđuje postupak za stimulaciju ili pojačanje stimulacije T-ćelije. U jednom aspektu, prikaz obezbeđuje postupke za inhibiranje T-regulatorne (Treg) ćelije kod subjekta, postupci obuhvataju davanje terapeutski efikasne količine blokirajućeg antitela ili njegovog fragmenta za vezivanje antigena iz pronalasku subjektu kome je to potrebno. U određenim aspektima , subjekat kome je to potrebno može patiti od bolesti ili poremećaja kao što je kancer ili virusna infekcija. U alternativnim aspektima, prikaz obezbeđuje postupke za inhibiranje ili suprimiranje T-ćelijske aktivacije kod subjekta, postupci sadrže davanje terapeutski efikasne količine aktivirajućeg antitela ili njegovog fragmenta iz prikaza subjektu kome je to potrebno. U jednom aspektu, subjekat može patiti od autoimune bolesti ili poremećaja.
[0050] U drugom aspektu, prikaz obezbeđuje terapeutske postupke za lečenje bolesti ili poremećaja kao što je kancer, autoimuna bolest ili virusna infekcija kod subjekta korišćenjem anti-PD-1 antitela ili porcije antitela za vezivanje antigena iz prikaza, gde terapeutski postupci sadrže davanje terapeutski efikasne količine farmaceutske kompozicije koja se sastoji iz antitela ili fragmenta antitela iz prikaza subjektu kome je to potrebno. Poremećaj koji se leči je bilo koja bolest ili stanje koje je poboljšano, unapređeno, inhibirano ili sprečeno stimulacijom ili inhibicijom PD-1 aktivnosti ili signalizacije. U određenim aspektima, antitelo ili njegov fragment za vezivanje antigena iz pronalaska daje se u kombinaciji sa drugim terapeutskim sredstvom subjektu kome je potrebno. Drugo terapeutsko sredstvo može biti izabrano iz grupe koja se sastoji iz antitela koje je specifično za drugi T-ćelijski ko-inhibitor, antitelo koje je specifično za antigen tumorske ćelije, antitelo koje je specifično za T-ćelijski receptor, antitelo koje je specifično za Fc receptor, antitelo koje je specifično za epitop na virusom inficiranoj ćeliji, antitelo koje je specifično za antigen na autoimunom tkivu, antitelo koje je specifično za PD-L1, citotoksično sredstvo, anti-kancerozni lek, antivirusni lek, anti-inflamatorni lek (npr., koritikosteroidi), hemoterapeutsko sredstvo, terapija zračenjem, imunosupresant i bilo koji drugi lek ili terapija koji su poznati u oblasti tehnike. U određenim aspektima, drugo terapeutsko sredstvo može biti sredstvo koje pomaže suzbijanju ili smanjenju bilo kojih mogućih neželjenih efekat(a) koji su povezani sa antitelom ili njegovim fragmentom za vezivanje antigena iz pronalaska, ukoliko se takvi neželjeni efekt(i) pojave.
[0051] U određenim izvođenjima, predmetni prikaz obezbeđuje postupke za suprimiranje tumorskog rasta. U određenim aspektima, predmetni prikaz obezbeđuje postupke za povećenje preživljanja kod pac enata o mau ancer. Prmer ancera u u uu, a nsu ogran en na, prmarn re urentn kancer, uključujući kancer mozga (npr., glioblastom multiforme), kancer pluća (npr., ne-mikrocelularni kancer pluća), karcinom skvamoznih ćelija glave i vrata, karcinom bubrežnih ćelija, melanom, multipli mijelom, kancer prostate, i kancer debelog creva. Postupci obuhvataju davanje farmaceutske kompozicije koja se sastoji iz terapeutski efikasne količine anti-PD-1 antitela iz predmetnog pronalaska u kombinaciji sa drugim terapeutskim sredstvom koje je izabrano iz grupe koja obuhvata antagonist vaskularnog endotelnog faktora rasta (VEGF) (npr., aflibercept, bevacizumab), inhibitor angiopojetina-2 (Ang2) (npr., anti-Ang2 antitelo kao što je nesvacumab), inhibitor gena 3 aktivacije limfocita (LAG-3), inhibitor citotoksični T-limfocit antigen 4 (CTLA-4) (npr., ipilimumab), hemoterapeutsko sredstvo, i terapija zračenjem. Ovde su na drugom mestu opisani dodatni primeri dodatnih terapija/terapeutskih sredstava koji se mogu koristiti u kombinaciji sa anti-PD-1 antitelom iz pronalaska za upotrebu u lečenju kancera.
[0052] Antitelo ili njegov fragment mogu se primeniti subkutanozno, intravenozno, intradermalno, intraperitonealno, oralno, intramuskularno, ili intrakranijalno. Antitelo ili njegov fragment se mogu primeniti u dozi od oko 0.1 mg/kg telesne težine do oko 100 mg/kg telesne težine subjekta (ispitanika).
[0053] Predmetni prikaz takođe uključuje upotrebu anti-PD-1 antitela ili njegovog fragmenta za vezivanje antigena iz pronalaska u dobijanju leka za lečenje bolesti ili poremećaja koji bi imali koristi od blokade ili poboljšanja vezivanja PD-1 i/ili signalizacije.
[0054] Druga izvođenja će postati očigledna iz pregleda sledećeg detaljnog opisa.
KRATAK OPIS SLIKA
[0055]
Slika 1 je šematski prikaz biotesta PD-1 koji se zasniva na luciferazi koji je ovde opisan u Primeru 8. Panel A: Inaktivne Jurkat ćelije; Panel B: Jurkat ćelije su aktivirane sa grupisanjem T-ćelijskog receptora (TCR) kroz CD3xCD20 bispecifično antitelo; Panel C: aktivacija PD-1 atenuira odgovor u aktiviranim Jurkat ćelijama; Panel D: Blokiranje PD-1 spašava odgovor u aktiviranim Jurkat ćelijama.
Slika 2 ilustruje tumorski rast i rezultate preživljavanja za miševe koji su primili implant sa Kolon-26 ćelijama tumora u Danu 0 i tretirani su sa označenim kombinacijama molekula injekcijom u Danima 3, 6, 10, 13 i 19 ("ranog tretmana tumorskog modela"). Grafik prikazuje zapreminu tumora (u mm<3>) za različite eksperimentalne grupe u različitim vremenskim tačkama nakon implantacije. Strelice nagore duž X-ose ukazuju na vreme injekcija za tretman. "mlgG2a" je IgG2 izotipska kontrola; "Fc" je humani Fc kontrola; "VEGF Trap" je aflibercept; "anti-PD-1" je anti-mišji PD-1 klon RPMI-14; "anti- PD-L1" je anti-PD-L1 monoklonsko antitelo kao što je ovde na drugom mestu opisano.
Slika 3 ilustruje tumorski rast i rezultate preživljavanja za miševe koji su primili implant sa Kolon-26 tumor ćelijama tumora u Danu 0 i tretirani su sa označenim kombinacijama molekula injekcijom u Danima 3, 6, 10, 13 i 19 ("ranog tretmana tumorskog modela"). Grafik prikazuje zapreminu tumora (u mm<3>) individualnih miševa u svakoj eksperimentalnoj grupi u Danu 28 nakon implantacije. "mlgG2a" je IgG2 izotipska kontrola; "Fc" je humani Fc kontrola; "VEGF Trap" je aflibercept; "anti-PD-1" je anti-mišji PD-1 klon RPMI-14; "anti-PD-LI" je anti-PD-LI monoklonsko antitelo kao što je ovde na drugom mestu opisano.
DETALJAN OPIS
[0056] Pre nego što su opisani predmetni postupci, može se razumeti da ovaj pronalazak nije ograničen na određene postupke, i opisane eksperimentalne uslove, kao takvi postupci i uslovi se mogu razlikovati. Takođe treba razumetu da ovde korišćena terminologija je samo za svrhu opisivanja određenih izvođenja, i nije namenjena da bude ograničavajuća, s obzirom na to da će predmetni pronalazak biti ograničen samo prikazanim patentnim zahtevima.
1
[0057] Osm u o o n e ruga e e nsano, sv te n nau n termn o su ov e or en mau sto značenje kako to obično razume stručnjak koji je verziran u oblast tehnike kojoj ovaj pronalazak pripada. Iako bilo koji postupci i materijali koji su slični ili jednaki sa onima koji su ovde opisani mogu se koristiti u praksi ili testiranju predmetnog pronalaska, poželjni postupci i materijali su sada opisani.
[0058] Termin "PD-1" odnosi se na protein programirane smrti-1, T-ćelijski ko-inhibitor, takođe poznat kao CD279. Aminokiselinska sekvenca pune dužine PD-1 je obezbeđena u GenBank kao pristupni broj NP_005009.2 i takođe je ovde naznačena sa SEQ ID NO: 327. Termin "PD-1" takođe uključuje varijante proteina PD-1 koji ima aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NOs: 321, 322, 323, ili 324. Termin "PD-1" uključuje rekombinantni PD-1 ili njegov fragment. Termin takođe obuhvata PD-1 ili njegov fragment koji je spojen sa, na primer, histidinskim tagom, mišjom ili humanim Fc, ili signalna sekvenca kao što je ROR1. Na primer, termin uključuje sekvence koje su predstavljene SEQ ID NOs: 323 ili 324, koji sadrži mišji Fc (mlgG2a) ili humani Fc (hlgG1) na C-kraju, spojenim sa aminokiselinskim ostacima 25 - 170 pune dužine PD-1 sa C93S izmenom. Varijante proteina kao što je prikazano u SEQ ID NO: 321 sadrži histidinski tag na C-kraju, spojenim sa aminokiselinskim ostacima 25 - 170 pune dužine PD-1. Osim ukoliko nije naznačeno da potiče od ne-humanih vrsta, termin "PD-1" označava humani PD-1.
[0059] PD-1 je član CD28/ CTLA-4/ICOS familije ko-inhibitora T-ćelija. PD-1 je protein koji se sastoji iz 288-aminokiselina sa vanćelijskim N-terminalnim domenom koji je IgV-sličan, transmembranskog domena i intraćelijskog domena koji sadrži imunoreceptorski tirozin-zasnovani inhibitorni (ITIM) motiv i imunoreceptorski tirozin-zasnovani „switch“ (ITSM) motiv (Chattopadhyay et al 2009, Immunol. Rev.). Receptor PD-1 ima dva liganda, PD-ligand-1 (PD-L1) i PD-L2.
[0060] Termin "PD-L1" odnosi se na ligand koji se vezuje za PD-1 receptor takođe poznat kao CD274 i B7H1. Aminokiselinska sekvenca PD-L1 pune dužine je obezbeđena u GenBank pod pristupnim brojem NP_054862.1 i ovde je takođe naznačena sa SEQ ID NO: 328. Termin takođe obuhvata PD-L1 ili njegov fragment koji je spojen sa, na primer, histidinskim tag-om, mišjim ili humanim Fc, ili signalnom sekvencom kao što je ROR1. Na primer, termin uključuje sekvence koje su predstavljene sa SEQ ID NOs: 325 ili 326, koje sadrže mišji Fc (mlgG2a) ili humani Fc (hlgG1) na C-kraju, spojenim sa aminokiselinskim ostacima 19 -239 PD-L1 pune dužine. PD-L1 je protein 290 aminokiselina sa vanćelijskim IgV-sličnim domenom, trasmembranskim domenom i visoko konzervisanim unutarćelijskim domenom od približno 30 aminokiselina. PD-L1 je konstitutivno eksprimiran na mnogim ćelijama kao što su antigen prezentujuće ćelije (npr., dendritične ćelije, makrofagi, i B-ćelije) i na hematopoetskim i ćelijama koje nisu hematopoetske (npr., vaskularne endotelijalne ćelije, pankreasnim ostrvcima, i na imunoprivilegovanim mestima). PD-L1 je takođe široko eksprimiran na različitim tumorima, virusno inficiranim ćelijama i autoimunom tkivu, i komponenta je imunosupresivnog miljea (Ribas 2012, NEJM 366: 2517-2519).
[0061] Kao što je ovde korišćeno, termin "T-ćelijski ko-inhibitor" odnosi se na ligand i/ili receptor koji modulira imuni odgovor preko aktivacije ili supresije T-ćelije. Termin "T-ćelijski ko-inhibitor", takođe je poznat kao T-ćelijski ko-signalni molekul, uključuje, ali nije ograničen na, limfocitni aktivacioni gen 3 protein (LAG-3, takođe poznat kao CD223), citotoksični T-limfocitni antigen-4 (CTLA-4), B i T limfocitni atenuator (BTLA), CD-28, 2B4, LY108, T-ćelijski imunoglobulin i mucin 3(TIM3), T-ćelijski imunoreceptor sa imunoglobulinom i ITIM (TIGIT; takođe poznat kao VSIG9), leukocit povezani imunoglobulinu-sličan receptor 1 (LAIR1; takođe poznat kao CD305), inducibilni T-ćelijski kostimulator (ICOS; takođe poznat kao CD278), V-domen Ig supresor T-ćelijske aktivacije (VISTA) i CD160.
[0062] Kao što je ovde korišćeno, termin "Fc receptor" odnosi se na površinski proteinski receptor koji se nalazi na imunim ćelijama uključujući B limfocite, ćelije prirodne ubice, makrofage, bazofile, neutrofile, i mast ćelije, koji ima specifičnost vezivanja za Fc region antitela. Termin "Fc receptor" uključuje, ali nije ograničen na, Fcy receptor [npr., FcyRI (CD64), FcyRIIA (CD32), FcyRIIB (CD32), FcyRIIIA (CD16a), i FcyRI 11B (CD16b)], Fca receptor (npr., FcaRI ili CD89) i Fcs receptor [npr., FcsRI, i FcsRII (CD23)].
[0063] Termn "antteo", ao to e ov e or en, e namenen a se o nos na munogo u ns e molekule koji se sastoje iz četiri polipeptidna lanca, dva teška (H) lanca i dva laka (L) lanaca koja su međusobno povezana disulfidnim vezama (tj., "puni molekuli antitela"), kao i njihovi multimeri (npr. IgM) ili njihovi fragmenti za vezivanje antigena. Svaki težak lanac se sastoji iz varijabilnog regiona teškog lanca ("HCVR" ili "VH") i konstantnog regiona teškog lanca (koji se sastoji iz domena CH1, CH2 i CH3). Svaki laki lanac se sastoji iz varijabilnog regiona lakog lanca ("LCVR ili "VL") i konstantnog regiona lakog lanca (CL). Regioni VHi VLdalje se mogu podeliti u hipervarijabilne regione, koji su poznati pod imenom regioni za određivanje komplementarnosti (CDR), rasuti među regionima koji su više konzervisani, koji su poznati pod imenom regioni okvira (FR). Svaki VHi VLse sastoji iz tri CDRs i četiri FRs, koji su aranžirani od aminokraja prema karboksi kraju u sledećem redu: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. U određenim aspektima iz prikaza, FRs antitela (ili njihovih fragmenata za vezivanje antigena) mogu biti identični sa humanim germinativnim sekvencama, ili mogu biti prirodno ili veštački modifikovani. Aminokiselinska konsenzusna sekvenca može biti definisana na osnovu „side-by-side“ uporedne analize dva ili više CDRs.
[0064] Takođe je moguća supstitucija jednog ili više CDR ostataka ili izostavljanje jednog ili više CDRs. Antitela su opisana u naučnoj literaturi u kojima jedan ili dva CDRs mogu biti slobodni za vezivanje. Padlan et al. (1995 FASEB J. 9:133-139) su analizirali regione kontakta između antitela i njihovih antigena, na osnovu objavljenih kristalnih struktura, i zaključeno je da samo oko jedne petine do jedne trećine CDR ostataka stvarno dolazi u kontakt sa antigenom. Padlan je takođe pronašao mnoga antitela u kojima jedan ili dva CDRs nisu imali aminokiseline prilikom dolaska u kontakt sa antigenom (videti takođe, Vajdos et al.
2002 J Mol Biol 320:415-428).
[0065] CDR ostaci koji ne dolaze u kontakt sa antigenom mogu se identifikovati na osnovu prethodnih ispitivanja (na primer ostaci H60- H65 u CDRH2 ovde često nisu potrebi), iz regiona Kabat CDRs koji se nalaze izvan Chothia CDRs, molekularnim modelovanjem i/ili empirijski. Ukoliko je CDR ili njegov ostatak(ci) izostavljen, obično je zamenjen sa aminokiselinom koja zauzima odgovarajuću poziciju u drugoj sekvenci humanog antitela ili konsenzusu takvih sekvenci. Pozicije za supstituciju unutar CDRs i aminokiseline za supstituciju takođe se empirijski mogu odabrati. Empirijske supstitucije mogu biti konzervativne ili ne-konzervativne supstitucije.
[0066] Puna humana anti-PD-1 monoklonska antitela koja su ovde prikazana mogu sadržati jednu ili više aminokiselinskih supstitucija, insercija i/ili delecija u regionima okvira i/ili CDR regionima varijabilnih domena teškog lanca i lakog lanca u poređenju sa odgovarajućim germinativnim sekvecama. Takve mutacije se mogu jednostavno utvrditi upoređivanjem aminokiselinskih sekvenci koje su ovde prikazane sa germinativnim sekvencama dostupnim od, na primer, javnih baza podataka sekvenci antitela. Predmetni prikaz uključuje antitela, i njihove fragmente za vezivanje antigena, koji su izvedeni od bilo koje od ovde prikazanih aminokiselinskih sekvenci, gde jedna ili više aminokiselina unutar jednog ili više okvira regiona i/ili CDR regioni su mutirani prema odgovarajućem ostatku(cima) germinativne sekvence iz kojih je antitelo izvedeno, ili prema odgovarajućem ostatku(cima) druge humane germinativne sekvence, ili prema konzervativnoj supstituciji aminokiseline odgovarajućeg germinativnog ostat(a)ka (takve promene u sekvenci su ovde kolektivno naznačene sa "germinative mutacije"). Osoba koja je uobičajeno verzirana u stanje tehnike, počev sa ovde prikazanim skevencama varijabilnog regiona teškog i lakog lanca, mogu lako proizvesti brojna antitela i fragmente za vezivanje antigena koji sadrže jedan ili više individualnih germinativnih mutacija ili njihove kombinacije. U određenim aspektima, svaki od regiona okvira i/ili CDR ostataka unutar VHi/ili VLdomena su mutirani nazad do ostataka koji se nalaze u originalnoj germinativoj sekvenci iz koje je antitelo izvedeno. U drugim aspektima, samo određeni ostaci su mutirani nazad do originalne germinativne sekvence, npr., samo mutirani ostaci koji se nalaze unutar prvih 8 aminokiselina FR1 ili unutar poslednjih 8 aminokiselina FR4, ili samo mutirani ostaci koji se nalaze unutar CDR1, CDR2 ili CDR3. U drugim aspektima, jedan ili više od regiona okvira i/ili CDR ostatak(a) su mutirani do odgovarajućih ostatak(a) različite germinativne sekvence (tj., germinativna sekvenca koja je različita od germinativne sekvence iz koje je antitelo originalno dobijeno). Osim toga, antitela iz predmetnog prikaza mogu sadržati o ou om nac u ve v e germnatvn mutac a unutar regona o vra CDR regona, npr., g e su određeni individualni ostaci mutirani do odgovrajućeg ostatka određene germinativne sekvence dok određeni drugi ostaci koji se razlikuju od originalne germinativne sekvence održavani su ili su mutirani do odgovarajućeg ostatka različite germinativne sekvence. Jednom kada se dobiju, antitela i fragmenti za vezivanje antigena koji sadrže jednu ili više germinativnih mutacija mogu se jednostavno ispitati za jedno ili više željeno svojstvo kao što je, unapređena specifičnost vezivanja, pojačan afinitet vezivanja, poboljšana ili pojačana antagonistička ili agonistička biološka svojstva (u slučaju da postoje), smanjena imunogenost, itd. Antitela i fragmenti za vezivanje antigena koj su dobijeni na ovaj opšti način su obuhvćeni predmetnim pronalaskom.
[0067] Predmetni prikaz takođe uključuje puna humana anti-PD-1 monoklonska antitela koja sadrže varijante bilo kojih od HCVR, LCVR, i/ili CDR aminokiselinskih sekvenci koje su ovde prikazane koje imaju jednu ili više konzervativnu supstituciju. Na primer, predmetni prikaz uključuje anti-PD-1 antitela koja imaju HCVR, LCVR, i/ili CDR aminokiselinske sekvence sa, npr., 10 ili manje, 8 ili manje, 6 ili manje, 4 ili manje, itd. konzervativnih aminokiselinskih supstitucija u odnosu na bilo koju od HCVR, LCVR, i/ili CDR ovde prikazanih aminokiselinskih sekvenci.
[0068] Termin "humano antitelo", kao što je ovde korišćen, namenjen je da uključi antitela koja imaju varijabilne i konstantne regione koji su izvedeni iz humanih germinativnih imunoglobulinskih sekvenci. Humana mAt-a iz prikaza mogu uključiti aminokiselinske ostatke koji nisu kodirani sa humanim germinativnim imunoglobulinskim sekvencama (npr., mutacije koje su slučajno uvedene ili mutageneza koja je specifična za mesto in vitro ili korišćenjem somatske mutacije in vivo), na primer u CDRs i posebno CDR3. Međutim , Termin "humano antitelo", kao što je ovde korišćeno, nije namenjeno da uključi mAt-a u kojima CDR sekvence koje su dobijene iz germinativnih drugi sisarskih vrsta (npr., miša), su prenete graftom na humane sekvence FR. Termin uključuje antitela koja su rekombinantno proizvedena u nehumanom sisaru, ili u ćelijama ne-humanog sisara. Termin nije namenjen da uključi antitela koja su izolovana iz ili generisana u humanom subjektu.
[0069] Termin ''rekombinant", kao što je ovde korišćen, odnosi se na antitela ili njihove fragmente za vezivanje antigena iz pronalaska kreirane, eksprimirane, izolovane ili dobijene tehnologijama ili postupcima koji su poznati u oblasti tehnike kao što je tehnologija rekombinantne DNK koja uključuje, npr., splajsovanje DNK i transgenu ekspresiju. Termin se odnosi na antitela koja su eksprimirana u ne-humanom sisaru (uključujći transgene ne-humane sisare, npr., transgene miševe), ili ćelijski (npr., CHO ćelije) ekspresioni sistem ili izolovane iz rekombinantne kombinovane biblioteke humanog antitela.
[0070] Termin "multi-specifični antigen-vezujući molekuli", kao što je ovde korišćeno odnosi se na bispecifične, tri-specifične ili multispecifične antigen-vezujuće molekule, i njihove fragmente za vezivanje antigena. Multi-specifični antigen-vezujući molekuli mogu biti specifični za različite epitope jednog ciljanog polipeptida ili mogu sadržati antigen-vezujuće domene specifične za epitope više od jednog ciljnog polipeptida. Multi-specifični antigen-vezujući molekul može biti pojedinačni multifunkcionalni polipeptid, ili može biti multimerni kompleks dva ili više polipeptida koja su kovalentno ili ne-kovalentno povezana jedan sa drugim. Termin "multi-specifični antigen-vezujući molekuli" uključuje antitela iz predmetnog pronalaska koja mogu biti povezana sa ili istovremeno eksprimirana sa drugim funkcionalnim molekulom, npr., drugim peptidom ili proteinom. Na primer, antitelo ili njegov fragment može biti funkcionalno povezan (npr., hemijskim spajanjem, genetičkim spajanjem, ne-kovalentnim vezivanjem ili drugačije) za jedan ili više drugih molekulskih entiteta, kao što je protein ili njegov fragment da bi se proizvelo bispecifičan ili multi-specifičan antigen-vezujući molekul sa drugom specifičnosti u pogledu vezivanja. Prema predmetnom pronalasku, termin "multi-specifični antigen-vezujući molekuli" takođe uključuju bispecifična, tri-specifična ili multi-specifična antitela ili njihove fragmente za vezivanje antigena. U određenim izvođenjima, antitelo iz predmetnog pronalaska je funkcionalno povezano sa drugim antitelom ili njegovim fragmentom za vezivanje antigena da se proizvede bispecifično antitelo sa drugom
1
spec nost vezvana. Bspec na mut-spec na anttea z pre metnog pronaas a su ov e opsana na drugom mestu u specifikaciji.
[0071] Termin "specifično vezuje,"ili "vezuje se specifično za", ili slično, označava da antitelo ili njegov fragment za vezivanje antigena obrazuje kompleksa sa antigenom koji je relativno stabilan pod fiziološkim uslovima. Specifično vezivanje se može karakterisati sa ravnotežnom konstantom disocijacije od bar oko 1x10<-8>M ili manje (npr., manja KDoznačava jače vezivanje). Posupci kojima se određuje da li dva molekula specifično vezuju su dobro poznati u oblasti tehnike i uključuju, na primer, ravnotežnu dializu, površinsku plazmonsku rezonanciju, i slično. Kao što je ovde opisano, antitela su identifikovana sa površinskom plazmonskom rezonancijom, npr., BIACORE™, koja se specifično vezuju za PD-1. Osim toga, multispecifična antitela koja se vezuju za jedan domen u PD-1 i jedan ili više dodatnih antigena ili bi-specifična koja se vezuju za dva različita regiona u PD-1 ipak se smatraju antitelima koja "specifično vezuju", kao što je ovde korišćeno .
[0072] Termin "visokoafinitetno" antitelo se odnosi na ona mAt-a koja imaju afinitet vezivanja sa PD-1, eksprimiran sa KD, od bar 10<-7>M; poželjno 10<-8>M; poželjnije 10<-9>M, još više poželjno 10<-10>M, još poželjnije 10<-11>M, kao što je mereno sa površinskom plazmonskom rezonancijom, npr., BIACORE™ ili rastvorafinitetnoj ELISA.
[0073] Pod terminom "spora brzina dis.", "Kdis' ili "kd" označava antitelo koje disocira sa PD-1, sa konstantom brzine 1 x 10<-3>s<-1>ili manje, poželjno 1 x 10<-4>s<-1>ili manje, kao što je određeno sa površinskom plazmonskom rezonancijom, npr., BIACORE™.
[0074] Termini "porcije za vezivanje antigena" antitela, "antigen-vezujući fragment" antitela, i slično, kao što je ovde korišćeno, uključuju bilo koji polipeptid ili glikoprotein koji se nalazi u prirodi, dobija enzimski, sintetički, ili genetički modifikovani koji specifično vezuju antigen da bi se obrazovao kompleks. Termini "antigen-vezujući fragment" antitela, ili "fragment antitela", kao što je ovde korišćeno, odnosi se na jedan ili više fragmenata antitela koji zadržavaju sposobnost da se vežu za PD-1.
[0075] U specifičnim izvođenjima, antitelo ili fragmenti antitela iz pronalaska mogu biti konjugovani sa ostatkom kao što je ligand ili terapetuska grupa ("imunokonjugat"), kao što je antibiotik, drugo anti-PD-1 antitelo, ili antitelo koje je specifično za drugi antigen kao što je tumor-specifičan antigen, antigen autoimunog tkiva, antigen virusom inficirane ćelije, Fc receptor, T-ćelijski receptor, ili T-ćelijski koinhibitor, ili imunotoksin, ili bilo koji drugi terapeutski ostatak koji je korisan za lečenje bolesti ili stanja uključujući kancer, autoimunu bolest ili hroničnu virusnu infekciju.
[0076] "Izolovano antitelo", kao što je ovde korišćeno, je namenjeno da se odnosi na antitelo koje je u suštini slobodno od drugih antitela (At-a) koji imaju različite antigenske specifičnosti (npr., izolovano antitelo koje specifično vezuje PD-1, ili njegov fragment, je u suštini slobodno od At-a koja specifično vezuju antigene koji nisu PD-1.
[0077] "Blokirajuće antitelo" ili "neutralizujuće antitelo", kao što je ovde korišćeno (ili "antitelo koje neutralizuju PD-1 aktivnost" ili "antagonističko antitelo"), je namenjeno da se odnosi na antitelo čije vezivanje za PD-1 rezultuje u inhibiciji bar jednu biološku aktivnost PD-1. Antitela iz pronalaska sprečavaju ili blokiraju vezivanje PD-1 sa PD-L1.
[0078] "Aktivirajuće antitelo" ili "pojačavajuće antitelo", kao što je ovde korišćeno (ili "agonist antitela"), je namenjen da se odnosi na antitelo čije vezivanje za PD-1 rezultuje u povećavanju ili stimulaciji bar jedne biološke aktivnosti PD-1. Na primer, antitelo iz prikaza može povećati vezivanje PD-1 za PD-L1.
[0079] Termin "površinska plazmonska rezonancija", kao što je ovde korišćeno, odnosi se na optički fenomen koji dozvoljava analizu biomolekulskih interakcija u realnom vremenu detekcijom izmena u proteinskim koncentracijama unutar biosenzorskog matriksa, na primer korišćenjem BIACORE™ sistema (Pharmacia Biosensor AB, Uppsala, Sweden and Piscataway, N.J.).
[0080] Termn "KD", ao to se ov e orst, e namenen a se o nos na ravnote nu onstantu soc ac e određene interakcije antitelo-antigen.
[0081] Termin "epitop" se odnosi na antigenu determinantu koja interaguje sa specifičim mestom za vezivanje antigena u varijabilnom regionu molekula antitela koji se naziva paratop. Pojedinačni antigen može imati više od jednog epitopa. Prema tome, različita antitela mogu se vezati za različite površine na antigenu i mogu imati različite biološke efekte. Termin "epitop" takođe se odnosi na mesto na antigenu na kom odgovaraju B i/ili T ćelije. Takođe se odnosi na region antigena koji je vezan od strane antitela. Epitopi se mogu definisati kao strukturalni ili funkcionalni. Funkcionalni epitopi su generalno podset strukturalnih epitopa i imaju one ostatke koji direktno doprinose afinitetu interakcije. Epitopi mogu takođe biti konformacioni, odnosno, sastavljeni iz nelinearnih aminokiselina. U određenim slučajevima, epitopi mogu uključiti determinante koje su hemijski aktivne grupacije molekula na površini kao što sui aminokiseline, bočni lanci šećera, fosforil grupe, ili sulfonil grupe, i, u određenim slučajevima, mogu imati specifične tri-dimenzione strukturalne karakteristike, i/ili specifične karakteristike naelektrisanja.
[0082] Termin "suštinki identičan" ili "u suštini identičan," kada se odnosi na nukleinsku kiselinu ili njen fragment, označava da, kada se optimalno poravna sa odgovarajućim nukleotidnim insercijama ili delecijama sa drugim nukleinskim kiselinama (ili sa njenim komplementarnim lancem), postoji ideničnost u nukleotidnoj sekvenci u bar oko 90%, i poželjnije bar oko 95%, 96%, 97%, 98% ili 99% baza nukleotida, kao što je mereno sa bilo kojim dobro poznatim algoritomom za identičnost sekvence, kao što je FASTA, BLAST ili GAP, kao što je razmatrano u tekstu ispod. Molekul nukleinske kiseline having koji je u suštini identičan sa referentnim molekulom nukleinske kiseline može, u određenim slučajevima, kodirati polipeptid koji ima istu ili u suštini sličnu aminokiselinsku sekvencu kao polipeptid koji je kodiran sa referentnim molekulom nukleinske kiseline.
[0083] Kao što je primenjeno sa polipeptidima, termin "suštinska sličnost" ili " u suštini sličan" označava da dve peptidne sekvence, kada su optimalno poravnate, kao što je korišćenjem programa GAP ili BESTFIT upotrebom podrazumevanih „gap“ težina, dele bar 90% identičnost u sekvenci, još poželjnije bar 95%, 98% ili 99% identičnost u sekvenci. Poželjno, položaji ostataka, koji nisu identični, razlikuju se sa konzervativnim aminokiselinskim supstitucijama. "Konzervativna aminokiselinska supstitucija" je ona u kojoj je aminokiselinski ostatak je supstituisan sa drugim aminokiselinskim ostatakom koji ima bočni lanac (R grupu) sa sličnim hemijskim svojstvima (npr., naelektrisanje ili hidrofobnost). Generalno, konzervartivna supstitucija aminokiselina neće suštinski izmeniti funkcionalna svojstva proteina. U slučajevima u kojima su dve ili više aminokiselinskih sekvenci različite jedna od druge zahvaljujući konzervativnim supstitucijama, procenat stepena sličnosti može se podestiti naviše da bi se ispravila konzervativna priroda supstitucija. Sredstva za ovo prilagođavanje su dobro poznata u oblasti tehnike osobama koje su verzirane u oblast tehnike. Videti, npr., Pearson (1994) Methods Mol. Biol.24: 307-331. Primeri grupa aminokiselina koje imaju bočne lance sa sličnim hemijskim svojstvima obuhvataju 1) alifatični bočni lanci: glicine, alanin, valin, leucin i izoleucin; 2) alifatični-hidroksilni bočni lanci: serin i treonin; 3) bočni lanci koji sadrže amid: asparagin i glutamin; 4) aromatični bočni lanci: fenilalanin, tirozin, i triptofan; 5) bazni bočni lanci: lizin, arginin, i histidin; 6) kiseli boči lanci: aspartat i glutamat, i 7) bočni lanci koji sadrže sumpor: cistein i metionon. Poželjne grupe konzervativnih aminokiselinskih supstitucija su: valin-leucin-izoleucin, fenilalanin-tirozin, lizin-arginin, alanin-valin, glutamat-aspartat, i asparagin-glutamin. Alternativno, konzervativna zamena je bilo koja izmena koja ima pozitivnu vrednost u PAM250 log-verovatnoći matrice prikazano u Gonnet et al. (1992) Science 256: 144345. "Umereno konzervativna" zamena je bilo koja promena koja ima ne-negativnu vrednost u PAM250 log-verovatnoći matrice.
[0084] Sličnost sekvence za polipeptide je obično izmerena korišćenjem softvera za analizu sekvence. Softver za analizu proteina slaže slične sekvence korišćenjem merenja sličnosti dodeljenim različitim supstitucijama, delecije i druge modifikacije, uključujući konzervativne aminokiselinske supstitucije. Na primer, GCG softver sadrži programe kao što su GAP i BESTFIT koji se mogu koristiti sa podrazumevanim parametrima da bi se odredila to homologija sekvenci ili identičnost u sekvenci između blisko povezanih
1
po pept a, ao to su omoogn po pept a z raz t vrsta organzama zme u protena v eg tpa i njegovog muteina. Videti, npr., GCG Verziju 6.1. Polipeptidne sekvence takođe se mogu uporediti korišćenjem FASTA sa podešenim ili preporučenim parametrima; program u GCG Verzija 6.1. FASTA (npr., FASTA2 i FASTA3) obezbeđuje poravnanja i procenat u identičnosti sekvence regiona koji se najbolje poklapaju između upita i sekvenci koje se pretražuju (Pearson (2000) supra). Drugi poželjni algoritam kada se poredi sekvenca iz pronalaska sa bazom podataka koja sadrži veliki broj sekvenci iz različitih organizama je kompjuterski program BLAST, posebno BLASTP ili TBLASTN, korišćenjem podrazumevanih parametara. Videti, npr., Altschul et al. (1990) J. Mol. Biol.215: 403-410 i (1997) Nucleic Acids Res.25:3389-3402.
[0085] Pod frazom "terapeutski efikasna količina" je namenjena da označi količinu koja proizvodi željeni efekat za koji je namenjen. Tačna količina će zavisiti od svrhe tretmana, i biće moguće da se utvrdi od strane stručnjaka iz oblasti tehnike korišćenjem poznatih tehnika (videti, na primer, Lloyd (1999) The Art, Science and Technology of Pharmaceutical Compounding).
[0086] Kao što je ovde korišćeno , termin "subjekt" se odnosi na životinju, poželjno sisar, kome je potrebno ublažavanje, prevencija i/ili tretman bolesti ili poremećaja kao što je hronična virusna infekcija, kancer ili autoimuna bolest.
[0087] Kao što je ovde korišćeno, "anti-kancerozni lek" označava bilo koje sredstvo koje je korisno za lečenje kancera uključujući, ali bez ograničenja na, citotoksine i sredstva kao što su antimetaboliti, alkilujuća sredstva, antracikline, antibiotike, antimitotička sredstva, prokarbazin, hidroksiurea, asparaginaza, kortikosteroidi, mitotan (O,P'-(DDD)), biološka sredstva (npr., antitela i interferoni) i radioaktivna sredstva. Kao što je ovde korišćeno, "citotoksin ili citotoksično sredstvo", takođe se odnosi na hemoterapeutsko sredstvo i označava bilo koje sredstvo koje je štetno za ćelje. Primeri uključuju Taxol® (paklitaxel), temozolamid, citohalasin B, gramicidin D, etidijum bromid, emetin, cisplatin, mitomicin, etopozid, tenopozid, vinkristin, vinbiastin, koihicin, doksorubicin, daunorubicin, dihidroksi antracin dion, mitoksantron, mitramicin, aktinomicin D, 1-dehidrotestosteron, glukokortikoide, prokain, tetrakain, lidokain, propranolol, i puromicin i njihovi analozi i homolozi.
[0088] Kao što je ovde korišćeno, termin "anti-virisni lek" se odnosi na bilo koji drugi lek ili terapiju koji je korišćen za lečenje, prevenciju, ili ublažavanje virusne infekcije u subjektu domaćinu. Termin "anti-virusni lek" uključuje, ali nije ograničen na zidovudin, lamivudin, abakavir, ribavirin, lopinavir, efavirenz, kobicistat, tenofovir, rilpivirin, analgetike i kortiskosteroide. U kontekstu predmetnog pronalaska, virusne infekcije uključuju dugotrajne virusne infekcije uzrokovane sa virusima uključujuči, ali bez ograničenja na, humani virus imunodeficijencije (HIV), hepatitis B virus (HBV), hepatitis C virus (HCV), humani papiloma virus (HPV), virus limfocitnog horiomeningitisa (LCMV), i virus imunodeficijencije majmuna (SIV).
[0089] Antitela ili fragmenti za vezivanje antigena iz predmetnog pronalaska specifično se vezuju za PD-1 i moduliraju interakciju PD-1 sa PD-L1. Anti-PD-1 antitela iz prikaza se mogu vezati za PD-1 sa visokim afinitetom ili sa niskim afinitetom. Antitela iz predmetnog pronalaska su blokirajuća antitela, gde se antitela vezuju za PD-1 i blokiraju interakciju PD-1 sa PD-L1. Blokirajuća antitela iz pronalaska blokiraju vezivanje PD-1 sa PD-L1 i stimuliraju ili pojačavaju T-ćelijsku aktivaciju. U nekim izvođenjima, blokirajuća antitela mogu biti korisna za stimulaciju ili pojačanje imunog odgovora i/ili za lečenje subjekta koji pati od kancera, ili hronične virusne infekcije. Antitela koja kada se daju subjektu kome je potrebno mogu smanjiti hroničnu infekciju izazvanu virusom kao što je HIV, LCMV ili HBV u subjektu. Mogu biti korišćeni za inhibiranje rasta tumorskih ćelija kod subjekta. Mogu se koristiti zasebno ili kao dodatna terapija sa drugim terapeutskim grupama ili modalitetima koji su poznati u oblasti tehnike za lečenje kancera, ili virusne infekcije.
[0090] U drugim aspektima, antitela iz predmetnog prikaza mogu biti aktivirajuća antitela, pri čemu se antitela mogu vezati za PD-1 i pojačati interakciju PD-1 i PD-L1. U nekim aspektima, aktivirajuća antitela mogu pojačati vezivanje PD-1 sa PD-L1 i/ili inhibirati ili suprimirati T-ćelijsku aktivaciju. Aktivirajuća antitela
1
z pre metnog pr aza mogu t orsna za n rane muns og o govora o su e ta za e ene autoimune bolesti.
[0091] U određenim izvođenjima, anti-PD-1 antitela mogu biti multi-specifični antigen-vezujući molekuli, gde oni sadrže prvu specifičnost vezivanja za PD-1 iz pronalaska i drugu specifičnost vezivanja prema antigenu koji je izabran iz grupe koja obuhvata drugi T-ćelijski ko-inhibitor, antigen autoimunog tkiva, T-ćelijski receptor, Fc receptor, T-ćelijski receptor, PD-L1, i različit epitop PD-1.
[0092] U određenim aspektima , antitela iz prikaza su dobijena iz miševa koji su imunizovani sa primarnim imunogenom, kao što je PD-1 pune dužine [videti GenBank pristupni broj NP_005009.2 (SEQ ID NO: 327)] ili sa rekombinantnim oblikom PD-1 ili modifikovanim fragmentima humanog PD-1 (SEQ ID NOs: 321, 323, ili 324) ili sa modifikovanim fragmentima PD-1 cinomolgusa (SEQ ID NO: 322), praćeno imunizovanjem sa sekundarnim imunogenom, ili sa imunogenetski aktivnim fragmentom PD-1.
[0093] Imunogen može biti biološki aktivan i/ili imunogenski fragment PD-1 ili DNK koja kodira njegov aktivni fragment. Fragment se može dobiti od N-terminalnog ili C-terminalnog domena PD-1. U određenim aspektima prikaza, imunogen je fragment PD-1 koji ima opseg aminokiselinskih ostataka 25 - 170 SEQ ID NO: 327 sa C93S izmenom.
[0094] Peptidi mogu biti modifikovani da se uključi dodavanje ili supstitucija određenih ostataka za obeležavanje ili za svrhe spajanja sa molekulima nosačima, kao što je, KLH. Na primer, cistein se može dodati ili na N kraju ili C kraju peptida, ili linker sekvenca se može dodati da se sekvenca pripremi za spajanje sa, na primer, KLH za imunizaciju.
[0095] Aminokiselinska sekvenca pune dužine humanog PD-1 pune dužine je prikazana kao SEQ ID NO: 327.
[0096] U određenim aspektima, antitela koja se specifično vezuju za PD-1 mogu se dobiti korišćenjem fragmenata gore označenih regiona, ili peptide koji se prostiru izvan označenih regiona za oko 5 do oko 20 aminokiselinskih ostataka sa jednog, ili oba, N ili C terminalnih krajeva ovde opisanih regiona. U određenim aspektima, bilo koja kombinacija gore označenih regiona ili njihovih fragmenata može se koristiti u dobijanju PD-1 specifičnih antitela. U određenim aspektima, bilo koji jedan ili više od gore označenih regiona PD-1, ili njihovi fragmenti mogu se koristiti za dobijanje monospecifičnih, bispecifičnih, ili multispecifičnih antitela.
[0097] Anti-PD-1 antitela iz predmetnog pronalaska su sposobna da se vežu za i neutralizuju aktivnost PD-1, kao što je određeno sa in vitro ili in vivo testovima. Sposobnost antitela iz pronalaska da se vežu za i neutralizuju aktivnost PD-1 mogu se izmeriti korišćenjem standardnog postupka koji je poznat stručnjacima iz oblasti tehnike, uključujući testove vezivanja, ili testove za ispitivanje aktivnost, kao što je ovde opisano.
[0098] Ne-ograničavajući, primer in vitro testova za merenje aktivnosti vezivanja su ilustrovane u ovde opisanim Primerima. U Primeru 3, afiniteti vezivanja i kinetičke konstantne humanih anti-PD-1 antitela za humani PD-1 i PD-1 cinomolgusa su određeni sa površinskom plazmonskom rezonancijom i merenja su sprovedena na Biacore 4000 ili T200 instrumentu. U Primerima 4 i 5, testovi blokrianja su korišćeni da bi se odredila sposobnost anti-PD-1 antitela da blokira sposobnost vezivanja PD-L1 za PD-1 in vitro. U Primeru 6, testovi blokiranja su korišćeni da se odredi unakrsna kompeticija između anti-PD-1 antitela. Primer 7 opisuje vezivanje antitela za ćelije koje u višku eksprimiraju PD-1. U Primeru 8, test luciferaze je korišćen da bi se odredila sposobnost anti-PD-1 antitela da antagonizuju PD-1/PD-L1 signalizaciju u T-ćelijama.
[0099] Antitela iz predmetnog pronalaska su sposobna da pojačaju ili stimulišu T-ćelijsku aktivaciju in vitro i kod subjekta sa kancerom ili kod subjekta koji je inficiran sa virusom kao što je LCMV. U određenim izvođenjima, antitela iz predmetnog pronalaska su korišćeni u kombinaciji sa drugim terapeutskim
1
sre stvom, ao to e antteo prema se un arnom T- e s om o-n toru, a se poa ao muns odgovor i inhibirao tumorski rast kod subjekta.
[0100] Antitela koja su specifična za PD-1 ne moraju sadržati dodatne obeleživače ili ostatke, ili oni mogu sadržati N-terminalni ili C-terminalni obeleživač ili grupu. U jednom izvođenju , obeleživač ili grupa je biotin. U testu vezivanja, položaj obeleživača (ukoliko postoji) može odrediti orijentaciju peptida u odnosu na površinu na koju je peptid vezan. Na primer, ukoliko je površina obložena avidinom, peptid koji sadrži N-terminalni biotin će biti orijentisan tako da će C-terminalna porcija peptida biti distalna u odnosu na površinu. U jednom izvođenju , obeleživač može biti radionuklid, fluorescentna boja ili MRI-detektabilni obleživač. U određenim aspektima, takva obeležena antitela mogu se koristiti u dijagnostičkim testovima uključujući testove snimanja.
Fragmenti za vezivanje antigena antitela
[0101] Osim ukoliko nije specifično drugačije naznačeno, termin "antitelo," kao što je ovde korišćeno, treba razumeti da obuhvata molekule antitela koji sadrže dva imunoglobulinska teška lanca i dva imunoglobulinska laka lanca (tj., "puni molekuli antitela") kao i njihovi antigen-vezujućem fragmentu. Termini "antigen-vezujuća porcija" antitela, "antigen-vezujući fragment" antitela, i slično, kao što je ovde korišćeno, uključuju bilo koji polipeptid ili glikoprotein koji se pojavljuje u prirodi, koji se enzimski mogu dobiti, sintetički, ili generički modifikovan koji se specifično vezuje za antigen da bi se obrazovao kompleks. Termini "antigen-vezujući fragment" antitela, ili "fragment antitela", kao što je ovde korišćeno, odnosi se na jedan ili više fragmenata antitela koji zadržavaju sposobnost da se specifično vežu za PD-1. Fragment antitela može uključiti Fa fragment, F(ab')2fragment, Fv fragment, dAb fragment, fragment koji sadrži CDR, ili izolovani CDR. U određenim izvođenjima, termin "antigen-vezujući fragment" odnosi se na polipeptidni fragment multi-specifičnog antigen-vezujućeg molekula. U takvim aspektima iz prikaza, termin" antigenvezujući fragment" uključuje, npr., vanćelijski domen PD-L1 koji se specifično vezuje za PD-1. Antigenvezujući fragmenti antitela mogu se dobiti, npr., iz punih molekula antitela upotrebom bilo kojih pogodnih standardnih postupaka kao što je proteolitička digestija ili postupci rekombinantnog genetskog inženjeringa uključujuči manipulaciju i eksprimiranje DNK koja kodira varijabilne i (opciono) konstantne domene antitela. Takva DNK je poznata i/ili je već dostupna od, npr., komercijalnih izvora, DNK biblioteka (uključujući, npr., fagne biblioteke antitela), ili se mogu sintetisati. DNK može biti sekvencirana i hemijski manipulisana ili korišćenjem postupaka molekularne biologije, na primer, da bi se jedan ili više varijabilnih i/ili konstantnih domena aranžirali u pogodnu konformaciju, ili da bi se uveli kodoni, kreirali cisteinski ostaci, modifikovale, dodale ili uklonile aminokiseline, itd.
[0102] Ne-ograničavajući primeri fragmenata za vezivanje antigena uključuju: (i) Fab fragmente; (ii) F(ab')2 fragmente; (iii) Fd fragmente; (iv) Fv fragmente; (v) jednolančane Fv (scFv) molekule; (vi) dAb fragmente; i (vii) minimalne jedinice za prepoznavanje koje se sastoje iz aminokiselinskih ostataka koji imitiraju hipervarijabilni region antitela (npr., izolovani regioni koji određuju komplementarnost (CDR) kao što je CDR3 peptid), ili ograničeni FR3-CDR3-FR4 peptid. Drugi dizajnirani molekuli, kao što su domen specifična antitela, antitela sa jednim domenom, antitela sa deletiranim domenom, himerna antitela, antitela sa graftovanim CDR, diatela, triatela, tetratela, minitela, nanotela (npr. monovalentna nanotela, bivalentna nanotela, itd.), mali modularni imunofarmaceutici (SMIPs), i varijabilni IgNAR domeni ajkula, su takođe obuhvaćeni izrazom "antigen-vezujući fragment," kao što je ovde korišćeno .
[0103] Fragment za vezivanje antigena antitela će obično sadržati bar jedan varijabilni domen. Varijabilni domen može biti bilo koje veličine ili aminokiselinske kompozicije i generalno će sadržati bar jedan CDR, koji je susedan ili je u okviru sa jednom ili više sekvenci regiona okvira. U fragmentima za vezivanje antigena koji imaju VHdomen povezan sa VLdomenom, VHi VLdomeni mogu se nalaziti relativno jedan u odnosu na drugog u bilo kom poželjnom aranžmanu. Na primer, varijabilni region može biti dimer i sadržati VH- VH, VH- VLili VL- VLdimere. Alternativno, fragment za vezivanje antigena iz antitela može sadržati monomerni VHili VLdomen.
1
[0104] U o re enm aspe tma, ragment za vezvane antgena z anttea mo e sa r at ar e an varijabilni domen koji je kovalentno povezan sa bar jednim konstantnim domenom. Ne-ograničavajući, primeri konfiguracija varijabilnih i konstantnih domena koji se mogu naći unutar fragmenta za vezivanje antigena antitela iz predmetnog prikaza uključuju: (i) VH-CH1; (ii) Vh -Ch2; (iii) VH-CH3; (iv) VH-CH1-CH2; (v) VH-CH1-CH2-CH3; (vi) VH-CH2-CH3; (vii) VH-CL; (viii) VL-CH1; (ix) VL-CH2; (x) VL–CH3; (xi) VL–CH1-CH2; (xii) VL-CH1-CH2-CH3; (xiii) VL-CH2-CH3; i (xiv) VL-CL. U bilo kojoj konfiguraciji varijabilnih i konstantnih domena, uključujući bilo koje od gore navedenih primera konfiguracija, varijabilni i konstantni domeni mogu biti ili direktno povezani jedan sa drugim ili mogu biti povezani sa punim ili parcijalnim regionom zgloba ili linkera. Region zgloba se može sastojati iz bar 2 (npr., 5, 10, 15, 20, 40, 60 ili više) aminokiselina, koje rezultuju u fleksibilnoj ili polu-fleksibilnoj vezi između susednih varijabilnih i/ili konstantnih domena u jednom polipeptidnom molekulu. Osim toga, fragment za vezivanje antigena antitela iz predmetnog prikaza može sadržati homo-dimer ili hetero-dimer (ili drugi multimer) prema bilo kojoj od konfiguracija varijabilnog i konstantnog domena koje su navedene gore u tekstu u ne-kovalentnoj vezi jedan sa drugim i/ili sa jednim ili više monomernim VHili VLdomenom (npr., sa disulfidnom vez(ama)om.
[0105] Kao sa punim molekulima antitela, fragmenti za vezivanje antigena mogu biti mono-specifični ili multi-specifični (npr., bispecifični). Multi-specifičan fragment za vezivanje antigena antitela će obično sadržati bar dva različita varijabilna domena, pri čemu je svaki varijabilni domen sposoban da se specifično veže za odvojeni antigen ili za različit epitop na istom antigenu. Bilo koji format multi-specifičnog antitela, uključujući primer formata bi-specifičnih antitela koji su ovde prikazani, mogu biti prilagođeni za upotrebu u kontekstu fragmenta za vezivanje antigena antitela iz predmetnog pronalaska korišćenjem rutinskih postupaka koji su dostupni u oblasti tehnike.
Dobijanje humanih antitela
[0106] Postupci za dobijanje humanih antitela u transgenim miševima su poznati u oblasti tehnike. Bilo koji na taj način poznati postupci mogu se iskoristiti u kontekstu predmetnog prikaza da bi se dobila humana antitela koja se specifično vezuju za PD-1.
[0107] Imunogen koji se sastoji iz bilo kog od sledećeg može se koristiti za dobijanje antitela koja su specifična za PD-1. U određenim aspektima, antitela iz prikaza su dobijena iz miševa koji su imunizovani sa, nativnim PD-1 pune dužine (Videti GenBank pristupni broj NP_005009.2) (SEQ ID NO: 327), ili sa rekombinantnim PD-1 peptidom. Alternativno, PD-1 ili njegov fragment mogu biti proizvedeni korišćenjem standardnih biohemijskih postupaka i modifikovani (SEQ ID NOS: 321 - 324) i korišćeni kao imunogen.
[0108] U određenim aspektima, imunogen može biti peptid iz N terminalnog ili C terminalnog kraja PD-1. U jednom aspektu, imunogen je vanćelijski domen ili IgV-sličan domen PD-1. U određenim aspektima iz prikaza, imunogen je fragment PD-1 koji ima opseg od oko ostataka aminokiselina 25-170 SEQ ID NO: 327 sa C93S izmenom.
[0109] U nekim aspektima, imunogen može biti rekombinantni PD-1 peptid eksprimiran u E. coli ili u bilo kojim drugim eukariotskim ili sisarskim ćelijama kao što su ćelije jajnika kineskog hrčka (CHO).
[0110] U određenim aspektima, antitela koja se specifično vezuju za PD-1 mogu se dobiti korišćenjem fragmenata iz gore pomenutih regiona, ili peptida koji se protežu izvan naznačenih regiona za oko 5 do oko 20 aminokiselinskih ostataka sa jednog, ili oba, N ili C terminalna kraja ovde opisanih regona. U određenim aspektima, bilo koja kombinacija gore pomenutih regiona ili njihovih fragmenata može se koristiti u dobijanju antitela koja su specifična za PD-1.
[0111] Korišćenjem VELOCIMMUNE® tehnologije (videti, na primer, US 6,596,541, Regeneron Pharmaceuticals, VELOCIMMUNE®) ili bilo koji drugi poznati postupak za generisanje monoklonskih antitela, visokoafinitetna himerna antitela prema PD-1 su inicijalno izolovana tako da imaju humani varijabilni region i mišji konstantni region. VELOCIMMUNE® tehnologija uključuje generisanje transgenog
1
m a o ma genom o ma genom o se sasto z var a n regona umanog te og a og anca operativno povezanih sa endogenim mišjim lokusima konstantnog regiona tako da miš proizvodi antitelo koje sadrži humani varijabilni region i mišji konstantni region u odgovoru na antigensku stimulaciju. DNK koja kodira za varijabilne regione teških i lakih lanaca antitela su izolovane i operativno povezane sa DNK koja kodira konstantne regione humanog teškog i lakog lanca. Nakon toga DNK je eksprimirana u ćeliji koja je sposobna za eksprimiranje punog humanog antitela.
Bioekvivalenti
[0112] Anti-PD-1 antitela i fragmetni antitela iz predmetnog prikaza obuhvataju proteine koji imaju aminokiselinske sekvence koje se razlikuju od onih za opisana antitela, ali koji zadržavaju sposobnost da se vežu za PD-1. Takve varijante antitela i fragmenata antitela sadrže jednu ili više adicija, delecija, ili supstitucija aminokiselina kada su upoređene sa matičnom sekvencom, ali ispoljavaju biološku aktivnost koja je u suštini ekvivalentna sa onom od opisanih antitela. Slično tome, antitelo koje kodira DNK sekvence iz predmetnog prikaza obuhvata sekvence koje sadrže jednu ili više od adicija, delecija, ili supstitucija nukleotida kada se uporede sa prikazanom sekvencom, ali koje kodiraju antitelo ili fragment antitela koji je u suštini bioekvivalentan sa antitelom ili fragmentom antitela iz pronalaska.
[0113] Dva proteina za vezivanje antigena, ili antitela, se smatraju bioekvivalentima ukoliko su, na primer, oni farmaceutski ekvivalenti ili farmaceutske alternative čija brzina i stepen apsorpcije ne pokazuju značajnu razliku kada su primenjeni u istoj dozi pod sličnim eksperimentalnim uslovima, ili pojedinačna doza ili višestruke doze. Određena antitela će se smatrati ekvivalentima ili farmakološkim alternativama ukoliko su ekvivalenti u kontekstu njihove apsorpcije ali ne u njihovoj brzni apsorpcije i još se mogu smatrati bioekvivalentima zbog toga što su takve razlike u brzini apsorpcije namerne i reflektovane su u obeležavanju, nisu od suštinske važnosti za postizanje efikasnih telesnih koncentracija leka na, npr. hroničnoj upotrebi, i nisu smatrane medicinski značajnim za proučavanje određenog proizvoda leka.
[0114] U jednom aspektu, dva proteina za vezivanje antigena su bioekvivalentna ukoliko ne postoje klinički značajne razlike u njihovoj bezbednosti, čistoći, ili potenciji.
[0115] U jednom aspektu, dva proteina za vezivanje antigena su bioekvivalentna ukoliko pacijent može biti prebačen jednom ili više puta između referentnog proizvoda i biološkog proizvoda bez očekivanog povećanja rizika od neželjenih efekata, uključujući kliničku značajnu promenu u imunogenosti, ili smanjenoj efikasnosti, u poređenju sa kontinuiranom terapijom bez daljeg prebacivanja.
[0116] U jednom aspektu, dva proteina za vezivanje antigena su bioekvivalenti ukoliko oba deluju preko uobičajenog mehanizma ili mehanizama delovanja za uslove ili uslove upotrebe, u meri u kojoj su ti mehanizmi poznati.
[0117] Bioekvivalencija se može pokazati korišćenjem in vivo i/ili in vitro postupaka. Mere bioekvivalencije uključuju, npr., (a) in vivo ispitivanje kod ljudi ili drugih sisara, u kojima je koncentracija antitela ili njegovog metabolita merena u krvi, plazmi, serumu, ili drugoj biološkoj tečnosti kao funkcija vremena; (b) in vitro ispitivanje koje je u korelaciji sa i razumno predviđa podatke o biodostupnosti kod čoveka in vivo; (c) in vivo ispitivanje kod ljudi ili drugih sisara u kojima je odgovarajući akutni farmakološki efekat antitela (ili njegove mete) meren kao funkcija vremena; i (d) u dobro kontrolisanom kliničkom ispitivanju koje uspostavlja bezbednost, efikasnost, ili biodostupnost ili bioekvivalenciju antitela.
[0118] Bioekvivalentne varijante antitela iz pronalaska se mogu konstruisati, na primer, pravljenjem različitih supstitucija ostataka ili sekvenci ili uklanjanjem terminalnih ili unutrašnjih ostataka ili sekvenci koje nisu potrebne za biološku aktivnost. Na primer, cisteinski ostaci koji nisu od suštinske važnosti za biološku aktivnost mogu biti uklonjeni ili zamenjeni sa drugim aminokiselinama da bi se sprečilo obrazovanje nepotrebnih ili neispravnih intramolekulskih disulfidnih mostova nakon renaturacije. U drugim kontekstima, bioekvivalentna antitela mogu uključiti varijante antitela koje se sastoje iz
2
amno se ns naee trsana, oa mo uu ara terst e g oz ac e anttea, npr., mutac e oe eliminišu ili uklanjaju glikozilaciju.
Anti-PD-1 Antitela koja sadrže Fc Varijante
[0119] Prema određenim izvođenjima iz predmetnog pronalaska, anti-PD-1 antitela su obezbeđena koja se sastoje iz Fc domena koji sadrži jednu ili više mutacija koje pojačavaju ili umanjuju vezivanje antitela za FcRn receptor, npr., na kiseloj pH u poređenju sa neutralnom pH. Na primer, predmetni pronalazak uključuje anti-PD-1 antitela koja sadrže mutaciju u CH2 ili CH3 regionu Fc domena, pri čemu mutaci(e)a povećava afinitet Fc domena prema FcRn u kiselom okruženju (npr., u endozomu gde je pH opsega od oko 5.5 do oko 6.0). Takve mutacije mogu rezultovati u povećanju polu-života antitela u serumu kada se daju životinji. Ne-ograničavajući primeri takvih Fc modifikacija uključuju, npr., modifikaciju na položaju 250 (npr., E ili Q); 250 i 428 (npr., L ili F); 252 (npr., L/Y/F/W ili T), 254 (npr., S ili T), i 256 (npr., S/R/Q/E/D ili T); ili modifikaciju na položaju 428 i/ili 433 (npr., H/L/R/S/P/Q ili K) i/ili 434 (npr., A, W, H, F ili Y [N434A, N434W, N434H, N434F ili N434Y]); ili modifikaciju na položaju 250 i/ili 428; ili modifikaciju na položaju 307 ili 308 (npr., 308F, V308F), i 434. U jednom izvođenju, modifikacija obuhvata 428L (npr., M428L) i 434S (npr., N434S) modifikaciju; 428L, 2591 (npr., V259I), i 308F (npr., V308F) modifikaciju; 433K (npr., H433K) i 434 (npr., 434Y) modifikaciju; 252, 254, i 256 (npr., 252Y, 254T, i 256E) modifikaciju; 250Q i 428L modifikaciju (npr., T250Q i M428L); i 307 i/ili 308 modifikaciju (npr., 308F ili 308P). U još drugom izvođenju, modifikacija obuhvata 265A (npr., D265A) i/ili 297A (npr., N297A) modifikaciju.
[0120] Na primer, predmetni pronalazak uključuje anti-PD-1 antitela koja se sastoje iz Fc domena koji sadrži jedan ili više parova ili grupa mutacija koje su izabrane iz grupe koja obuhvata: 250Q i 248L (npr., T250Q i M248L); 252Y, 254T i 256E (npr., M252Y, S254T i T256E); 428L i 434S (npr., M428L i N434S); 257I i 3111 (npr., P257I i Q311I); 257I i 434H (npr., P257I i N434H); 376V i 434H (npr., D376V i N434H); 307A, 380A i 434A (npr., T307A, E380A i N434A); i 433K i 434F (npr., H433K i N434F). U jednom izvođenju, predmetni pronalazak uključuje anti-PD-1 antitela koja se sastoje iz Fc domena koji sadrži S108P mutaciju u regionu zgloba IgG4 da bi se promovisala stabilizacija dimera. Razmatraju se sve moguće kombinacije navedenih mutacija Fc domena, i drugih mutacija unutar varijabilnih domena koje su ovde prikazane.
[0121] Predmetni pronalazak takođe uključuje anti-PD-1 antitela koja se sastoje iz himernog konstantnog regiona (CH) teškog lanca, pri čemu himerni CHregion sadrži segmente koji su izvedeni iz CHregiona više od jednog izotopa imunoglobulina. Na primer, antitela iz pronalaska mogu sadržati himerni CHregion koji se sastoji iz dela ili celog CH2 domena koji je izveden iz humanog IgG1, humanog IgG2 ili humanog IgG4 molekula, kombinovano sa delom ili celim CH3 domenom koji je izveden iz humanog IgG1, humanog IgG2 ili humanog IgG4 molekula. Prema određenim izvođenjima, antitela iz pronalaska sadrže himerni CHregion koji ima himerni region zgloba. Na primer, himerni zglob može sadržati aminokiselinsku sekvencu "gornjeg zgloba" (aminokiselinski ostaci iz pozicija 216 do 227 prema EU obeležavanju) koji su izvedeni iz humanog IgG1, humanog IgG2 ili humanog IgG4 regiona zgloba, kombinovano sa sekvencom "donjeg zgloba" (aminokiselinski ostaci iz pozicija 228 do 236 prema EU obeležavanju) koji su izvedeni iz regiona zgloba humanog IgG1, humanog IgG2 ili humanog IgG4. Prema određenim izvođenjima, himerni region zgoba sadrži aminokiselinske ostatke koji su izvedeni iz gornjeg zgloba humanog IgG1 ili humanog IgG4 i aminokiselinskih ostataka koji su izvedeni iz donjeg zgloba humanog IgG2. Antitelo koje se sastoji iz himernog CHregiona kao što je ovde opisano može, u određenim izvođenjima, ispoljiti modifikovane Fc efektorske funkcije bez oštećujućih efekata na terapeutska ili farmakokinetička svojstva antitela. (Videti, npr., USSN.14/170,166, podneta 31 januara, 2014).
Biolo ke karakteristike antitela
[0122] Generalno, antitela iz predmetnog pronalaska funkcionišu preko vezivanja za PD-1. Predmetni prikaz uključuje anti-PD-1 antitela i njihove fragmente za vezivanje antigena koji vezuju rastvorljive monomerne ili dimerne molekule PD-1 sa visokim afinitetom. Na primer, predmetni prikaz uključuje antitela i fragmente za vezivanje antigena iz antitela koja se vezuju za monomerni PD-1 (npr., na 25°C ili na 37°C) sa KDmanjom od oko 50nM i mereno površinskom plazmonskom rezonancijom, npr., korišćenjem formata testa kao što je ovde definisano u Primeru 3. U određenim aspektima, antitela ili njihovi fragmenti za vezivanje antigena vezuju monomerni PD-1 sa KDmanjom od oko 40nM, manjom od oko 30nM, manjom od oko 20nM, manjom od oko 10nM manjom od oko 5nM, manjom od oko 2nM ili manjom od oko 1nM, kao što je mereno sa površinskom plazmonskom rezonancijom, npr., korišćenjem formata testa kao što je ovde definisano u Primeru 3, ili u suštini sličnom testu.
[0123] Predmetni prikaz takođe uključuje antitela i njihove fragmente za vezivanje antigena koji vezuju dimerni PD-1 (npr., na 25°C ili na 37°C) sa KDkoja je manja od oko 400 pM kao što je mereno površinskom plazmonskom rezonancijom, npr., korišćenjem formata testa kao što je ovde definisano u Primeru 3. U određenim aspektima, antitela ili njihovi fragmenti za vezivanje antigena vezuju dimerni PD-1 sa KDkoja je manja od oko 300 pM, manja od oko 250 pM, manja od oko 200 pM, manja od oko 100 pM, ili je manja od oko 50 pM, kao što je mereno sa površinskom plazmonskom rezonancijom, npr., korišćenjem formata testa kao što je ovde definisano u Primeru 3, ili u suštini sličnom testu.
[0124] Predmetni prikaz takođe uključuje antitela ili njihove fragmente za vezivanje antigena koji vezuju PD-1 cinomolgusa (Macaca fascicularis) (npr., na 25°C ili na 37°C) sa KDmanjom od oko 35 nM kao što je mereno sa površinskom plazmonskom rezonancijom, npr., korišćenjem formata testa kao što je ovde definisano u primeru 3. U određenim aspektima, antitela ili njihovi fragmenti za vezivanje antigena vezuju PD-1 cinomolgulsa sa KDmanjom od oko 30 nM, manjom od oko 20 nM, manjom od oko 15 nM, manjom od oko 10 nM, ili manjom od oko 5 nM, kao što je mereno sa površinskom plazmonskom rezonancijom, npr., korišćenjem formata testa kao što je ovde definisano u Primeri 3, ili u suštini sličnim testom.
[0125] Predmetni prikaz takođe uključuje antitela i njihove fragmente za vezivanje antigena koji vezuju PD-1 sa polu-životom disocijacije (t<1>/2) većim od oko 1.1 minuta kao što je mereno sa površinskom plazmonskom rezonancijom na 25°C ili 37°C, npr., korišćenjem formata testa kao što je ovde definisano u Primeru 3, ili u suštini sličnom testu. U određenim aspektima, antitela ili fragmenti za vezivanje antigena iz predmetnog prikaza vezuju PD-1 sa t<1>/2većim od oko 5 minuta, većim od oko 10 minuta, većim od oko 30 minuta, većim od oko 50 minuta, većim od oko 60 minuta, većim od oko 70 minuta, većim od oko 80 minuta, većim od oko 90 minuta, većim od oko 100 minuta, većim od oko 200 minuta, većim od oko 300 minuta, većim od oko 400 minuta, većim od oko 500 minuta, većim od oko 600 minuta, većim od oko 700 minuta, većim od oko 800 minuta, većim od oko 900 minuta, većim od oko 1000 minuta, ili većim od oko 1200 minuta, kao što je mereno sa površinskom plazmonskom rezonancijom na 25°C ili 37°C, npr., korišćenjem formata testa kao što je ovde definisano u Primeru 3 (npr., hvatanje-mAt ili ili format hvatanja antitela), ili u suštini sličan test.
[0126] Predmetni prikaz takođe uključuje antitela ili njihove fragmente za vezivanje antigena koji blokiraju vezivanje PD-1 za PD-L1 sa IC50 koja je manja od oko 3 nM kao što je određeno korišćenjem ELISA-zasnovanog imunoeseja testa, npr., kao što je prikazano u Primeru 4, ili u suštini sličnom testu. Predmetni prikaz takođe uključuje antitela i njihove fragmente za vezivanje antigena koji se vezuju za PD-1 i pojačavaju vezivanje PD-1 sa PD-L1.
[0127] U nekim aspektima, antitela iz predmetnog prikaza se mogu vezati za vanćelijski domen PD-1 ili za fragment domena. U nekim aspektima, antitela iz predmetnog prikaza mogu se vezati za više od jednog domena (unakrsno reaktivna antitela). U određenim aspektima, antitela iz predmetnog prikaza se mogu vezati za epitop koji je lociran u vanćelijskom domenu koji se sastoji iz aminokiselinskih ostataka 21 - 171 PD-1 (SEQ ID NO: 327). U jednom aspektu, antitela se mogu vezati za epitop koji se sastoji iz jedne ili više amno se na oe su za rane z grupe oa se sasto z amno se ns ostata a 1 - 146 o SEQ ID NOs: 321 - 324.
[0128] U određenim aspektima, antitela iz predmetnog prikaza mogu funkcionisati pomoću blokiranja ili inhibiranja aktivnosti vezivanja PD-L1 koja je povezana sa PD-1 vezivanjem za bilo koji drugi region ili fragment pune dužine proteina, aminokiselinska sekvenca koja je prikazana u SEQ ID NO: 327. U određenim aspektima, antitela mogu atenuirati ili modulirati interakciju između PD-1 i PD-L1.
[0129] U određenim izvođenjima, antitela iz predmetnog pronalaska mogu biti bi-specifična antitela. Bispecifična antitela iz pronalaska mogu vezati jedan epitop u jednom domenu i mogu takođe vezati drugi epitop u različitom domenu PD-1. U određenim izvođenjima, bi-specifična antitela iz pronalaska mogu vezati dva različita epitopa u istom domenu. U jednom izvođenju, multi-specifični antigen-vezujući molekul sadrži prvu specifičnost za vezivanje pri čemu prva specifičnost za vezivanje sadrži vanćelijski domen ili njegov fragment PD-L1; i druga specifičnost vezivanja za drugi epitop PD-1.
[0130] U jednom aspektu, prikaz obezbeđuje izolovano puno humano monoklonsko antitelo ili njegov fragment za vezivanje antigena koje se vezuje za PD-1, pri čemu antitelo ili njegov fragment za vezivanje antigena ispoljava jednu ili više od sledećih karakteristika: (i) sadrži HCVR koja ima aminokiselinsku sekvencu koja je izabrana iz grupe koja se sastoji iz SEQ ID NO: 2, 18, 34, 50, 66, 82, 98, 114, 130, 146, 162, 178, 194, 210, 218, 226, 234, 242, 250, 258, 266, 274, 282, 290, 298, 306, i 314, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci; (ii) sadrži LCVR koji ima aminokiselinsku sekvencu koja je izabrana iz grupe koja se sastoji iz SEQ ID NO: 10, 26, 42, 58, 74, 90, 106, 122, 138, 154, 170, 186, i 202, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci; (iii) sadrži HCDR3 domen koji ima aminokiselinsku sekvencu koja je izabrana iz grupe koja se sastoji iz SEQ ID NO: 8, 24, 40, 56, 72, 88, 104, 120, 136, 152, 168, 184, 200, 216, 224, 232, 240, 248, 256, 264, 272, 280, 288, 296, 304, 312, i 320, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci; i LCDR3 domen koji ima aminokiselinsku sekvencu koja je izabrana iz grupe koja se sastoji iz SEQ ID NO: 16, 32, 48, 64, 80, 96, 112, 128, 144, 160, 176, 192, i 208, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci; (iv) sadrži HCDR1 domen koji ima aminokiselinsku sekvencu koja je izabrana iz grupe koja se sastoji iz SEQ ID NO: 4, 20, 36, 52, 68, 84, 100, 116, 132, 148, 164, 180, 196, 212, 220, 228, 236, 244, 252, 260, 268, 276, 284, 292, 300, 308, i 316, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci; HCDR2 domen koji ima aminokiselinsku sekvencu koja je izabrana iz grupe koja se sastoji iz SEQ ID NO: 6, 22, 38, 54, 70, 86, 102, 118, 134, 150, 166, 182, 198, 214, 222, 230, 238, 246, 254, 262, 270, 278, 286, 294, 302, 310, i 318, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci; LCDR1 domen koji ima aminokiselinsku sekvencu koja je izabrana iz grupe koja se sastoji iz SEQ ID NO: 12, 28, 44, 60, 76, 92, 108, 124, 140, 156, 172, 188, i 204, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci; i LCDR2 domen koji ima aminokiselinsku sekvencu koja je izabrana iz grupe koja se sastoji iz SEQ ID NO: 14, 30, 46, 62, 78, 94, 110, 126, 142, 158, 174, 190, i 206, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci; (v) je multi-specifičan antigen-vezujući molekul koji se sastoji iz prve specifičnosti vezivanja za PD-1 i druge specifičnosti vezivanja za antigen koji je izabran iz grupe koja se sastoji iz PD-1, tumor specifičnog antigena, antigena koji je specifičan za autoimuno tkivo, antigen virusno inficirane ćelije, različiti T-ćelijski ko-inhibitor, T-ćelijski receptor, i Fc receptor; (vi) vezuje se za humani PD-1 sa KDod oko 28pM do oko 1.5µM; (vii) vezuje PD-1 cinomolgusa sa Kdod oko 3nM do oko 7.5µM; (viii) blokira ili pojačava vezivanje PD-1 sa PD-L1 sa IC50 ≤ oko 3.3nM; (ix) bloira PD-1-indukovanu smanjenu regulaciju T-ćelije i/ili spašava T-ćelijsku signalizaciju u T-ćelijskom/APC luciferaza reporterskom testu; (x) stimuliše proliferaciju T-ćelija i aktivaciju u testu reakcije mešanih limfocita (MLR); (xi) indukuje proizvodnju IL-2 i/ili IFNy u testu MLR; i (xii) suprimira rast tumora i pojačava preživljavanje kod subjekata koji imaju kancer.
2
[0131] U e nom aspe tu, pr az o ez e ue zoovano puno umano mono ons o antteo negov antigen-vezujući fragment koji blokira vezivanje PD-1 za PD-L1, pri čemu antitelo ili njegov fragment ispoljava jednu ili više od sledećih karakteristika: (i) sadrži HCVR koji ima aminokiselinsku sekvencu koja je izabrana iz grupe koja se sastoji iz SEQ ID NO: 130, 162, 234 i 314, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci; (ii) sadrži LCVR koji ima aminokiselinsku sekvencu koja je izabrana iz grupe koja se sastoji iz SEQ ID NO: 138, 170, 186, i 202, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvencu; (iii) sadrži HCDR3 domen koji ima aminokiselinsku sekvencu koja je izabrana iz grupe koja se sastoji iz SEQ ID NO: 136, 168, 240, i 320, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identičan u sekvenci; i LCDR3 domen koji ima aminokiselinsku sekvencu koja je izabrana iz grupe koja se sastoji iz SEQ ID NO: 144, 176, 192, i 208, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identičan u sekvenci; (iv) sadrži HCDR1 domen koji ima aminokiselinsku sekvencu koja je izabrana iz grupe koja se sastoji iz SEQ ID NO: 132, 164, 236, i 316, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identičan u sekvenci; HCDR2 domen koji ima aminokiselinsku sekvencu koja je izabrana iz grupe koja se sastoji iz SEQ ID NO: 134, 166, 238, i 318, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci; LCDR1 domen koji ima aminokiselinsku sekvencu koja je izabrana iz grupe koja se sastoji iz SEQ ID NO: 140, 172, 188, i 204, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci; i LCDR2 domen koji ima aminokiselinsku sekvencu koja je izabrana iz grupe koja se sastoji iz SEQ ID NO: 142, 174, 190, i 206, ili u suštini njihovu sličnu sekvencu koja je bar 90%, bar 95%, bar 98% ili bar 99% identična u sekvenci; (v) je multi-specifični antigen-vezujući molekul koji sadrži prvu specifičnost vezivanja PD-1 i drugu specifičnost vezivanja za antigen koja je izabrana iz grupe koja se sastoji iz različitog epitopa PD-1, tumor specifičnog antigena, antigena koji je specifičan za autoimunotkivo, antigen virusno inficirane ćelije, različit T-ćelijski ko-inhibitor, T-ćelijski receptor, i Fc receptor; (vi) vezuje za humani PD-1 sa KD≤ 10<-9>M; (vii) vezuje za PD-1 cinomolgusa sa KD≤ 10<-8>M; (viii) blokira vezivanje PD-1 sa PD-L1 sa IC50 ≤ 10<-10>M; (ix) blokira PD-1-indukovanu smanjenu regulaciju T-ćelija i/ili spašava T-ćelijsku signalizaciju u T-ćelijskom/APC luciferaznom reporterskom testu; (x) stimuliše T-ćelijsku proliferaciju i aktivnost u testu reakcije pomešanih limfocita (MLR); (xi) indukuje proizvodnju IL-2 i/ili IFNy u MLR testu; i (xii) suprimira tumorski rast i povećava preživljavanje kod subjekata koji imaju kancer.
[0132] Antitela iz predmetni prikaza mogu imati jednu ili više od prethodno pomenutih bioloških karakteristika, ili bilo koju njihovu kombinaciju. Druge biološke karakteristike antitela iz predmetnog pronalaska biće očigledne osobi koja je uobičajeno verzirana u stanje tehnike iz pregleda predmetnog prikaza uključujući ovde navedene radne primere.
Selektivnost vrste i unakrsna reaktivnost vrste
[0133] Prema određenim aspektima iz prikaza, anti-PD-1 antitela vezuju se za humani PD-1 ali ne za PD-1 iz drugih vrsta. Alternativno, anti-PD-1 antitela iz prikaza, u određenim aspektima, vezuju se za humani PD-1 i za PD-1 iz jedne ili više od ne-humanih vrsta. Na primer, anti-PD-1 antitela iz prikaza mogu se vezati za humani PD-1 i mogu vezati ili ne moraju vezati, kao što to može biti slučaj, za jedаn ili više od PD-1 miša, pacova, zamorca, hrčka, gerbila, svinje, mačke, psa, zeca, koze, ovde, krave, konja, kamile, cinomolgusa, marmoseta, rezusa ili šimpanze. U određenim aspektima, anti-PD-1 antitela iz prikaza mogu se vezati za humani i PD-1 cinomolgusa sa istim afinitetima ili sa različitim afinitetima, ali se ne vezuju za PD-1 poreklom od pacova i miša.
Mapiranje epitopa i srodne tehnologije
[0134] Predmetni prikaz uključuje anti-PD-1 antitela koja interaguju sa jednom ili više aminokiselina koje se mogu naći u jednom ili više domena PD-1 molekula uključujući, npr., vanćelijski (IgV-sličan) domen, transmembranski domen, i unutarćelijski domen koji sadrži imunoreceptor tirozin-zasnovani inhibitorni motiv (ITIM) i imunoreceptor tirozin-zasnovani „switch“ motiv (ITSM). Epitop za koji se antitela mogu vezat mo e se sastoat z e ne ontnurane se vence o 3 v e npr., 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 ili više) aminokiselina koje su locirane unutar bilo kog od prethodno pomenutih domena PD-1 molekula (npr. linearni epitop u domenu). Alternativno, epitop se može sastojati iz mnoštva nekontinuiranih aminokiselina (ili aminokiselinskih sekvenci) koje su locirane unutar ili jednog ili oba od gore pomenutih domena molekula PD-1 (npr. konformacioni epitop).
[0135] Različite tehnike koje su poznate osobama iz oblasti tehnike mogu se koristiti da bi se odredilo da li će antitelo "interagovati sa jednom ili više aminokiselina" unutar polipeptida ili proteina. Primeri postupaka uključuju, na primer, rutinske testove unakrsnog blokiranja, kao što su oni koji su opisani u Antibodies, Harlow and Lane (Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harbor, NY). Drugi postupci uključuju analize skeniranja mutacija alanina, analizu peptidnog blota (Reineke (2004) Methods Mol. Biol.248: 443-63), analize kristalografskih studija cepanja peptida i NMR analizu. Dodatno, postupci kao što je ekscizija epitopa, ekstrakcija epitopa i hemijska modifikacija antigena se mogu koristiti (Tomer (2000) Prot. Sci.9: 487-496). Drugi postupak koji se može koristiti za identifikovanje aminokiselina unutar polipeptida sa kojim antitelo interaguje je razmena vodonik/deuterijum koja je detektovana sa masenom spektrometrijom. U opštim terminima, postupak razmene vodonik/deuterijum uključuje obeležavanje proteina od interesa deuterijumom, praćeno vezivanjem antitela za protein koji je obeležen deuterijumom. Sledeće, kompleks protein/antitelo se prenosi u vodu i zamenjivi protoni unutar aminokiselina koji su zaštićeni sa kompleksom antitela podležu povratnoj razmeni deutrijum-vodonik sporije u odnosu na razmenjive protone unutar aminokiselina koje nisu deo interfejsa. Kao rezultat, aminokiseline koje obrazuju deo interfejsa protein/antitelo mogu zadržati deuterijum i prema tome ispoljiti relativno višu masu u poređenju sa aminokiselinama koje nisu uključene u interfejs. Nakon disocijacije antitela, ciljani protein je je izložen cepanju proteazom i maseno spektrometrijskoj analizi, time otkrivajući ostatke koji su obeleženi deuterijumom koji odgovaraju specifičnim aminokiselinama sa kojima antitelo interaguje. Videti, npr., Ehring (1999) Analytical Biochemistry 267: 252-259; Engen and Smith (2001) Anal. Chem.73: 256A-265A.
[0136] Termin "epitop" odnosi se na mesto na antigenu u odnosu na koje B i/ili T ćelije reaguju. B-ćelijski epitopi mogu se dobiti i sa uzastopnih aminokiselina ili neuzastopnih aminokiselina koje su postavljene jedna uz drugu tercijarnim savijanjem proteina. Epitopi koji su obrazovani iz uzastopnih aminokiselina se obično zadržavanju pri izlaganju denaturišućim rastvaračima, pri čemu epitopi koji su dobijeni tercijernim savijanjem su obično izgubljeni nakon tretmana sa denaturišućim rastvaračima. Epitop obično uključuje bar 3, i uobičajenije, bar 5 ili 8-10 aminokiselina u jedinstvenoj prostornoj konformaciji.
[0137] Profilisanje asistirano modifikovanjem (MAP), takođe poznato kao Profilisanje antitela zasnovano na strukturi antigena (ASAP) je postupak koji kategorizuje velike brojeve monoklonskih antitela (mAbs) koja su usmerena protiv istog antigena u skladu sa sličnostima profila vezivanja svakog antitela za hemijski ili enzimski modifikovane površine antigena (videti US 2004/0101920). Svaka kategorija može odražavati jedinstveni epitop koji se ili izrazito razlikuje od ili parcijalno preklapa sa epitopom koji je predstavljen sa drugom kategorijom. Ova tehnologija omogućava brzo filtriranje genetički identičnih antitela, kao što se karakterizacija može fokusirati na genetički različita antitela. Kada je primenjen na skrining hibridoma, MAP može olakšati identifikaciju retkih klonova hibridoma koji proizvode mAbs koja imaju željene karakteristike. MAP može biti korišćeno za sortiranje antitela iz pronalaska u grupe antitela koja vezuju različite epitope.
[0138] U određenim aspektima, anti-PD-1 antitela ili njihovi fragmenti za vezivanje antigena vezuju epitop unutar bilo kog jednog ili više regiona koji su navedeni u PD-1, ili u prirodnom obliku, kao što je navedeno u SEQ ID NO: 327, ili rekombinantno proizvedeni, kao što je navedeno u SEQ ID NOS: 321 - 324, ili u njegovom fragmentu. U nekim aspektima , antitela iz prikaza vezuju se za vanćelijski domen koji se sastoji iz jedne ili više aminokiselina koja je izabrana iz grupe koja se sastoji iz aminokiselinskih ostataka 21 - 171 PD-1. U nekim aspektima, antitela iz prikaza vezuju se za vanćelijski region koji se sastoji iz jedne ili više aminokiselina koja je izabrana iz grupe koja se sastoji iz aminokiselinskih ostataka 1 - 146 iz PD-1 cinomolgusa, kao što je navedeno u SEQ ID NO: 322.
2
[0139] U o re enm aspe tma, anttea z pr aza, ao to e pr azano u Ta e 1, nteraguu ar e nom aminokiselinskom sekvencom koja je izabrana iz grupe koja se sastoji iz aminokiselinskih ostataka u rasponu od približno položaja 21 do približno položaja 136 SEQ ID NO: 327; ili aminokiselinskih ostataka u rasponu od približno položaja 136 do približno položaja 171 SEQ ID NO: 327. Ovi regioni su delom navedeni u SEQ ID NOs: 321 - 324.
[0140] Predmetni prikaz uključuje anti-PD-1 antitela koja se vezuju za isti epitop, ili porciju epitopa, kao bilo koji od specifičnih primera antitela koji su ovde opisani u Tabeli 1, ili antitelo koje ima CDR sekvence iz bilo koje od primera antitela koji su opisani u Tabeli 1. Slično tome, predmetni prikaz takođe uključuje anti-PD-1 antitela koja su u kompeticiji za vezivanje za PD-1 ili PD-1 fragment sa bilo kojim od specifičnih primera antitela koji su ovde opisani u Tabeli 1, ili antitelo koje ima CDR sekvence prema bilo kom od primera antitela koji su opisani u Tabeli 1. Na primer, predmetni prikaz uključuje anti-PD-1 antitela koja su u unakrsnoj kompeticiji za vezivanje sa PD-1 sa jednim ili više antitelima kao što je ovde definisano u primeru 6 (npr, H2aM7788N, H4xH8992P, H4xH8999P, H1M7799N, H2aM7780N, H1M7800N, H2aM7794N, H2aM7798N, H4xH9145P2, H4H9057P2, H4xH9120P2, H4xH9128P2, H4H9019P, H4xH9119P2, H4xH9135P2, H4xH9034P, H2aM7790N, H4xH9035P, H4xH9037P, H4xH9045P i H2aM7795N).
[0141] Može se jednostavno utvrditi da li se antitelo vezuje za isti epitop, ili je u kompeticiji za vezivanje sa, referentnim anti-PD-1 antitelom korišćenjem rutinskih postupaka koji su poznati u oblasti tehnike. Na primer, da bi se odredilo da li se antitelo koje se ispituje vezuje za isti epitop kao referentno anti-PD-1 antitelo iz pronalaska, omogućeno je da se referentno antitelo veže za PD-1 protein ili peptid pod uslovima zasićenja. Sledeće, ispitivana je sposobnost antitela koje se ispituje da se veže za molekul PD-1. Ukoliko je antitelo koje se ispituje sposobno da se veže za PD-1 nakon vezivanja zasićenjem sa referentnim anti-PD-1 antitelom, može se zaključiti da se ispitivano antitelo vezuje za različiti epitop u odnosu na referentno anti-PD-1 antitelo. Sa druge strane, ukoliko ispitivano antitelo nije sposobno da se veže za PD-1 protein nakon vezivanja zasićenjem sa referentnim anti-PD-1 antitelom, onda se ispitivano antitelo može vezati za isti epitop kao epitop koji je vezan od strane referentnog anti-PD-1 antitela iz pronalaska.
[0142] Da bi se odredilo da li je antitelo u kompeticiji za vezivanje sa referentnim anti-PD-1 antitelom, gore opisana tehnologija vezivanja je sprovedena u dve orijentacije: U prvoj orijentaciji, referentnom antitelu je dozvoljeno da se veže za PD-1 protein pod uslovima zasićenja zatim sledi procena vezivanja antitela koje se ispituje sa PD-1 molekulom. U drugoj orijentaciji, antitelu koje se ispituje je omogućeno da se veže za PD-1 molekul pod uslovima zasićenja zatim sledi procena vezivanja referentnog antitela sa PD-1 molekulom. Ukoliko, u obe orijentacije, samo prvo (zasićujuće) antitelo je sposobno da se veže sa PD-1 molekulom, onda se zaključuje da su antitelo koje se ispituje i referentno antitelo u kompeticiji za vezivanje sa PD-1. Kao što će biti jasno osobi koja je uobičajeno verzirana u stanje tehnike, antitelo koje je u kompeticiji za vezivanje sa referentnim antitelom ne mora nužno da se veže za identičan epitop kao referentno antitelo, ali može sterno blokirati vezivanje referentnog antitela preko vezivanja za preklapajući epitop ili susedni epitop.
[0143] Dva antitela se vezuju za isti ili preklapajući epitop ukoliko svaki kompetitivno inhibira (blokira) vezivanje drugog sa antigenom. To jeste, 1-, 5-, 10-, 20- ili 100-struki višak jednog antitela inhibira vezivanje drugog za bar 50% ali poželjno 75%, 90% ili čak 99% kao što je mereno u kompetitivnom testu vezivanja (videti, npr., Junghans et al., Cancer Res.199050:1495-1502). Alternativno, dva antitela imaju isti epitop ukoliko u suštini sve aminokiselinske mutacije u antigenu koje smanjuju ili eliminišu vezivanje jednog antitela smanjuju ili eliminišu vezivanje drugog. Dva antitela imaju epitope koji se preklapaju ukoliko neke aminokiselinske mutacije koje smanjuju ili eliminišu vezivanje jednog antitela smanjuju ili eliminišu vezivanje drugog.
2
[0144] Do atn rutns e sperment npr., mutac e pept a ana ze vezvana mogu se zvest a se potvrdilo da li je uočeni nedostatak vezivanja ispitivanog antitela je zbog činjenice da vezivanje za isti epitop kao referentno antitelo ili ukoliko je sterno blokiranje (ili drugi fenomen) je odgovoran za nedostatak uočenog vezivanja. Eksperimenti ove vrste se mogu izvesti korišćenjem ELISA, RIA, površinske plazmonske rezonancije, protočne citometrije ili bilo kojim drugim kvantitativnim ili kvalitativnim testom vezivanja antitela koji je dostupan u oblasti tehnike.
Imunokonjugati
[0145] Pronalazak obuhvata humano anti-PD-1 monoklonsko antitelo iz pronalaska konjugovano sa terapeutskim ostatkom ("imunokonjugat"), kao što je citotoksin ili hemoterapeutsko sredstvo za lečenje kancera. Kao što je ovde korišćeno, termin "imunokonjugat" odnosi se na antitelo koje je hemijski ili biološki povezano sa citotoksinom, radioaktivnim sredstvom, citokinom, interferonom, ciljnim ili reporterskim ostatkom, enzimom, toksinom, peptidom ili proteinom ili teerapeutskim sredstvom. Antitelo može biti povezano sa citotoksinom, radioaktivnim sredstvom, citokinom, interferonom, ciljnim ili reporterskim ostatkom, enzimom, toksinom, peptidom ili terapeutskim sredstvom na bilo kom položaju duž molekula dok je u stanju da se veže za njegovu metu. Primeri imunokonjugata uključuju konjugate antitela i leka i spojene proteine antitelo-toksin. U jednom izvođenju, sredstvo može biti drugo različito antitelo koje je specifično za PD-1. U određenim izvođenjima , antitelo može biti konjugovano sa sredstvom koje je specifično za tumorsku ćeliju ili virusom inficiranu ćeliju. Tip terapeutskog ostatka koji može biti konjugovan sa anti-PD-1 antitelom i koji će uzeti u obzir to stanje koje se leči i željeni terapeutski efekat koji se želi postići. Primeri pogodnih sredstava za obrazovanje imunokonjugata su poznati u oblasti tehnike; videti na primer, WO 05/103081.
Multi-specifična antitela
[0146] Antitela iz predmetnog pronalaska mogu biti mono-specifična, bi-specifična, ili multi-specifična. Multi-specifična antitela mogu biti specifična za različite epitope na ciljnom polipeptidu ili mogu sadržati antigen-vezujuće domene koji su specifični za više od jednog ciljanog polipeptida. Videti, npr., Tutt et al., 1991, J. Immunol.147:60-69; Kufer et al., 2004, Trends Biotechnol.22:238-244.
[0147] U jednom aspektu, predmetni prikaz uključuje multi-specifične molekule za vezivanje antigena ili njihove fragmente za vezivanje antigena gde je jedna specifičnost imunoglobulina specifična za vanćelijski domen PD-1, ili njegov fragment, i druga specifičnost imunoglobulina je specifična za vezivanje izvan vanćelijskog domena PD-1, ili druge terapeutske mete, ili je konjugovana sa terapeutskim ostatkom. U određenim aspektima, prva specifičnost za vezivanje antigena može se sastojati iz PD-L1 ili PD-L2, ili njegovog fragmenta. U određenim aspektima iz prikaza, jedna specifičnost imunoglobulina je specifična za epitop koji se sastoji iz aminokiselinskih ostataka 21-171 PD-1 (SEQ ID NO: 327) ili njegovog fragmenta, i druga specifičnost imunoglobulina je specifična za drugi ciljni antigen. Drugi ciljni antigen može biti na istoj ćeliji kao PD-1 ili na različitoj ćeliji. U jednom aspektu, druga ciljna ćelija je na imunoj ćeliji koja nije T-ćelija kao što je B-ćelija, antigen-prezentujuća ćelija, monocit, makrofag, ili dendritična ćelija. U nekom aspektu, drugi ciljni antigen može se nalaziti na tumorskoj ćeliji ili na ćeliji autoimunskog tkiva ili na virusom inficiranoj ćeliji.
[0148] U drugom aspektu, prikaz obezbeđuje multi-specifične molekule za vezivanje antigena ili njihove fragmente za vezivanje antigena koje se sastoji iz prve specifičnosti za vezivanje antigena koja se vezuje za PD-1 i druge specifičnosti za vezivanje antigena koja se vezuje za T-ćelijski receptor, B-ćelijski receptor ili Fc receptor. U povezanom aspektu, prikaz obezbeđuje multi-specifične molekule za vezivanje antigena ili njihove fragmente za vezivanje antigena koji se sastoje iz prve specifičnosti za vezivanje antigena koja se vezuje za PD-1 i druge specifičnosti za vezivanje antigena koja se vezuje za različiti T-ćelijski ko-inhibitor kao što je LAG-3, CTLA-4, BTLA, CD-28, 2B4, LY108, TIGIT, TIM3, LAIR1, ICOS i CD160.
2
[0149] U rugom aspe tu, pr az o ez e ue mut-spec ne moe ue za vezvane antgena n ove fragmente za vezivanje antigena koji se sastoji iz prve specifičnosti za vezivanje antigena koja se vezuje za PD-1 i druge specifičnosti za vezivanje antigena koja se vezuje za antigen koji je specifičan za autoimuna tkiva. U određenim aspektima, antitela mogu biti aktivirajuća ili agonistička antitela.
[0150] Bilo koji od multi-specifičnih molekula za vezivanje antigena iz pronalaska, ili njihovih varijanti, mogu se konstruisati korišćenjem standardnih molekularno bioloških postupaka (npr., rekombinantna DNK i tehnologija proteinske ekspresije), kao što će biti poznato osobi iz oblasti tehnike.
[0151] U nekim izvođenjima, PD-1-specifična antitela su generisana u bi-specifičnom formatu ("bispecifičnom") u kojoj se varijabilni regioni vezuju za različite domene PD-1 su povezane zajedno da se potvrdi specifičnost dualnog-domena u pojedinačnom vezujućem molekulu. Odgovarajuće dizajnirani bispecifici mogu pojačati sveukupnu PD-1 inhibitornu efikasnost kroz povećavanje i specifičnosti i aviditeta vezivanja. Varijabilni regioni sa specifičnošću za individualne domene, (npr., segmente N-terminalnog domena), ili koji se mogu vezati za različite regione unutar jednog domena, su upareni na strukturalnog skeli koja dozvoljava svakom regionu da se istovremeno veže za razdvojene epitope, ili za različite regione unutar jednog domena. U jednom primeru za bi-specifične, varijabilne regione teškog lanca (VH) iz grupe za povezivanje sa specifičnosti za jedan domen su rekombinovani sa varijabilnim regionima lakog lanca (VL) iz serija grupa za povezivanje sa specifičnosti za drugi domen da bi se identifikovali nesrodni VLpartneri koji se mogu upariti sa originalnim VHbez narušavanja originalne specifičnosti za VH. Na ovaj način, pojedinačni VLsegment (npr., VL1) se može kombinovati sa dva različitia VHdomena (npr., VH1 i VH2) da se generiše bi-specifični koji se sastoji iz dva vezujuća "kraka" (VH1- VL1 i VH2- VL1). Upotreba pojedinačnog VLsegmenta smanjuje kompleksnost sistema i time pojednostavljuje i povećava efikasnost u kloniranju, ekspresiji, i postupke prečišćavanja koji su korišćeni za generisanje bi-specifičnog (Videti, za primer, USSN13/022759 i US2010/0331527).
[0152] Alternativno, antitela koja se vežu za više od jednog domena i druge mete, kao što je, ali bez ograničenja na, za primer, drugo različito anti-PD-1 antitelo, može se pripremiti u bi-specifičnom formatu korišćenjem ovde opisanih postupaka, ili drugih postupaka koji su poznati stučnjacima iz oblasti tehnike. Varijabilni regioni antitela koji se vezuju za različite regione mogu biti spojeni sa varijabilnim regionima koij se vezuju za relevantna mesta na, na primer, vanćelijskom domenu PD-1, da se potvrdi dualna-specifičnost prema antigenu sa pojedinačnim vezujućim molekulom. Na odgovarajući način dizajnirani bi-specifici ove prirode imaju dualnu funkciju. Varijabilni regioni sa specifičnosti za vanćelijski domen su kombinovani sa varijabilnim regionom sa specifičnosti za spoljni deo vanćelijskog domena i upareni su na strukturalnoj skeli koja dozvoljava svakom varijabilnom regionu da se veže za zasebne antigene.
[0153] Primer formata bi-specifičnog antitela koje se može koristiti u kontektstu predmetnog pronalaska uključuje upotrebu prvog imunoglobulinskog (Ig) CH3 domena i drugog Ig CH3 domena, pri čemu se prvi i drugi Ig CH3 domeni razlikuju jedan od drugog u bar jednoj aminokiselini, i gde razlikovanje u bar jednoj aminokiselini smanjuje vezivanje bi-specifičnog antitela za Protein A u poređenju sa bi-specifičnim antitelom kome nedeostaje razlika u aminokiselini. U jednom izvođenju, prvi Ig CH3 domen se veže za Protein A i drugi Ig CH3 domen sadrži mutaciju koja smanjuje ili ukida vezivanje za Protein A kao što je H95R modifikacija (sa IMGT numerisanjem egzona; H435R sa EU numerisanjem). Drugi CH3 može dalje sadržati Y96F modifikaciju (sa IMGT; Y436F sa EU). Ostale modifikacije koje se mogu dalje naći unutar CH3 uključuju: D16E, L18M, N44S, K52N, V57M, i V82I (sa IMGT; D356E, L358M, N384S, K392N, V397M, i V422I sa EU) u slučaju IgG1 antitela; N44S, K52N, i V82I (IMGT; N384S, K392N, i V422I sa EU) u slučaju IgG2 antitela; i Q15R, N44S, K52N, V57M, R69K, E79Q, i V82I (sa IMGT; Q355R, N384S, K392N, V397M, R409K, E419Q, i V422I sa EU) u slučaju IgG4 antitela. Varijacije na formatu bi-specifičnog antitela gore opisanog su razmatrani unutar obima ovog pronalaska.
[0154] Drugi primeri bispecifičnih formata koji se mogu koristiti u kontekstu predmetnog pronalaska, uključuju, bez ograničenja, npr., scFv-zasnovane ili diatelo bispecifične formate, IgG-scFv fuzije, dualni
2
vara n omen DVD -g, Qua roma, „ no s-nto- oes , zae n a anac npr., zae n a anac sa „knobs-into-holes“, itd.), CrossMab, CrossFab, (SEED)body, leucinski zatvarač, Duobody, lgG1/lgG2, Fab (DAF)-lgG dualnog dejstva, i Mab<2>bispecifični formati (videti, npr., Klein et al. 2012, mAbs 4:6, 1-11, i reference koje su tamo naznačene, za pregled gore navedenih formata). Bispecifična antitela se takođe mogu konstruisati upotrenom konjugacije peptida/nukleinske kiseline, npr., gde su neprirodne aminokiseline sa ortogonalnoj hemijskoj reaktivnosti su korišćeni za generisanje konjugata antitelaoligonukleotida koji su specifični za mesto koji se zatim sami sastavljaju u multimerne komplekse sa definisanom kompozicijom, valencijom i geometrijom. (Videti, npr., Kazane et al., J. Am. Chem. Soc. [Epub: Dec.4, 2012]).
Terapeutska davanja i formulacije
[0155] Pronalazak obezbeđuje terapeutske kompozicije koje se sastoje iz anti-PD-1 antitela ili njihovih fragmenata koji vezuju antigen iz predmetnog pronalaska. Terapeutske kompozicije u skladu sa pronalaskom primenjivaće se sa odgovarajućim nosačima, ekscipijensima, i drugim sredstvima koja su uključena u formulacije da bi se obezbedio unapređeni transfer, isporuka, toleranca, i slično. Mnoštvo odgovarajućih formulacija može se pronaći u formularu poznatom svim farmaceutskim hemičarima: Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA. Ove formulacije uključuju, na primer, praškove, paste, masti, žele, voskove, ulja, lipida, lipida (katjonski ili anjonski) koji se sastoje iz nosača (kao što je LIPOFECTIN™), DNK konjugati, anhidrovane apsorpcione paste, emulzije ulja u vodi i vode u ulju, emulzije „carbowax“ (polietilen glikoli različitih molekulskih težina), polu-čvrsti gelovi, i polučvrste mešavine koje sadrže carbowax. Videti takođe Powell et al. "Compendium of excipients for parenteral formulations" PDA (1998) J Pharm Sci Technol 52:238-311.
[0156] Doza antitela može se razlikovati od starosti i veličine subjekta kome se daje, ciljane bolesti, stanja, načina davanja, i slično. Kada se antitelo iz predmetnog pronalaska koristi za lečenje bolesti ili poremećaja kod odraslog pacijenta, ili za prevenciju takve bolesti, povoljno je primeniti antitelo iz predmetnog pronalaska normalno u jednoj dozi od oko 0.1 do oko 60 mg/kg telesne težine, poželjnije oko 5 do oko 60, oko 10 do oko 50, ili oko 20 do oko 50 mg/kg telesne težine. U zavisnosti od težine stanja, učestalosti i trajanje tretmana se može prilagoditi. U određenim aspektima, antitelo ili njegov fragment za vezivanje antigena iz pronalaska može se primeniti kao početna doza bar od oko 0.1 mg do oko 800 mg, oko 1 do oko 500 mg, oko 5 do oko 300 mg, ili oko 10 do oko 200 mg, do oko 100 mg, ili do oko 50 mg. U određenim aspektima, početna doza može biti praćena davanjem druge ili mnoštva naknadnih doza antitela ili njegovog fragmenta koji veže antigen u količini koja može biti približno ista ili manja u odnosu na početnu dozu, pri čemu su naredne doze odvojene bar 1 dan do 3 dana; bar jednu nedelju, bar 2 nedelje; bar 3 nedelje; bar 4 nedelje; bar 5 nedelja; bar 6 nedelja; bar 7 nedelja; bar 8 nedelja; bar 9 nedelja; bar 10 nedelja; bar 12 nedelja; ili bar 14 nedelja.
[0157] Poznati su različiti sistemi za isporuku i mogu se koristiti za davanje farmaceutske kompozicije iz pronalaska, npr., enkapsuliranje u lipozomima, mikropartikule, mikrokapsule, rekombinantne ćelije koje su sposobne za eksprimiranje mutiranih virusa, endocitoze koja je posredovana receptorom (videti, npr., Wu et al. (1987) J. Biol. Chem. 262:4429-4432). Postupci za uvođenje uključuju, ali nisu ograničeni na, intradermalne, transdermalne, intramuskularne, intraperitonealne, intravenozne, subkutanozne, intranazale, epiduralne i oralne načine davanja. Kompozicija se može primeniti korišćenjem bilo kod pogodnog načina, na primer infuzijom ili injekcijom bolusa, apsorpcijom kroz epitelne ili mukokutanozne obloge (npr., oralna mukoza, rektalna i intestinalna mukoza, itd.) i mogu se davati zajedno sa drugim biološki aktivnim sredstvima. Davanje može biti sistemsko ili lokalno. Farmaceutska kompozicija se takođe može isporučiti u nosaču, posebno lipozomu (videti, na primer, Langer (1990) Science 249:1527-1533).
[0158] Ovde je takođe razmatrano korišćenje nanočestica da bi se isporučila antitela iz predmetnog pronalaska. Antitelo-konjugovane nanočestice se mogu koristiti zajedno u terapeutskim i dijagnostičkim primenama. Antitelom-konjugovane nanočestice i postupci za dobijanje i upotrebu detaljno su opisani od
2
strane Arrue o, M., et a. 2009 "Ant o y-conugate nanopartces or ome ca app catons" u J. Nanomat. Volume 2009, Article ID 439389, 24 stane, doi: 10.1155/2009/439389). Nanočestice se mogu razviti i konjugovati sa antitelima koja se nalaze u farmaceutskim kompozicijama za ciljane tumorskih ćelija ili ćelija autoimunog tkiva ili ćelija koje su inficirane virusom. Nanočestice za isporuku leka su takođe opisane u, na primer, US 8257740, ili US 8246995.
[0159] U određenim situacijama, farmaceutska kompozicija se može isporučiti sistemom kontrolisanog oslobađanja. U jednom izvođenju, može se koristiti pumpa. U drugom izvođenju, mogu se koristiti polimerni materijali. U još drugom izvođenju, sistem kontrolisanog oslobađanja može biti postavljen u blizini mete kompozicije, zahtevajući tako samo deo sistemske doze.
[0160] Injektabilni preparati mogu uključiti dozne oblike za intravenozne, subkutanozne, intrakutanozne, intrakranijalne, intraperitonealne i intramuskularne injekcije, infuzije kap po kap, itd. Ovi injektabilni preparati mogu se pripremati postupcima koji su javno poznati. Na primer, injektabilni preparati se mogu pripremiti, npr., rastvaranjem, suspenzijom ili emulgovanjem antitela ili njegove soli koja je gore opisana u sterilnom vodenom medijumu ili uljanom medijumu koji se konvencionalno koristi za injekcije. Kao vodeni medijum za injekcije, postoje, na primer, fiziološki rastvor soli, izotonični rastvor koji sadrži glukozu i druga dodatna sredstva, itd., koja se mogu koristiti u kombinaciji sa odgovarajućim sredstvom za rastvaranje kao što je alkohol (npr., etanol), polialkohol (npr., propilen glikol, polietilen glikol), nejonski surfaktant [npr., polisorbat 80, HCO-50 (polioksietilen (50 mol) adukt hidrogenizovanog ricinusnog ulja)], itd. Kao uljani medijum, korišćeni su, npr., susamovo ulje, sojino ulje, itd., koji se mogu koristiti u kombinaciji sa sredstvom za rastvaranje kao što je benzil benzoat, benzil alkohol, itd. Ovako pripremljena injekcija se poželjno puni u odgovarajuću ampulu.
[0161] Farmaceutska kompozicija iz predmetnog pronalaska može se isporučiti subkutanozno ili intravenozno sa standardnom iglom i špricem. Dodatno, u odnosu na subkutanoznu isporuku, uređaj olovke za isporuku već ima primene u isporuci farmaceutskih kompozicija iz predmetnog pronalaska. Takav uređaj olovke za isporuku mogu biti za višekratnu upotrebu i jednokratnu upotrebu. Uređaj olovke za isporuku za višekratnu upotrebu generalno koristi zamenjivi kertridž koji sadrži farmaceutsku kompoziciju. Onda kada je farmaceutska kompozicija u kertridžu primenjena i kertridž je prazan, prazan kertridž se može odbaciti i zameniti sa novim kertridžem koji sadrži farmaceutsku kompoziciju. Uređaj olovke za isporuku se nakon toga može ponovo koristiti. U jednokratnom uređaju olovke za isporuku, ne postoji zamenjivi kertridž. Osim toga, jednokratni uređaj olovke za isporuku dolazi prethodno napunjen sa farmaceutskom kompozicijom koja je držana u rezervoaru sprave. Jednom kada je rezervoar ispražnjen od farmaceutske kompozicije, ceo uređaj se odbacuje.
[0162] Brojne višekratne olovke i autoinjektorske sprave za isporuku imaju primenu u subkutanoznoj isporuci farmaceutske kompozicije iz predmetnog pronalaska. Primeri uključuju, ali svakako nisu ograničeni na AUTOPEN™ (Owen Mumford, Inc., Woodstock, UK), DISETRONIC™ olovka (Disetronic Medical Systems, Burghdorf, Switzerland), HUMALOG MIX 75/25™ olovka HUMALOG™ olovka, HUMALIN 70/30™ olovka (Eli Lilly i Co., Indianapolis, IN), NOVOPEN™ I, II i III (Novo Nordisk, Copenhagen, Denmark), NOVOPEN JUNIOR™ (Novo Nordisk, Copenhagen, Denmark), BD™ olovka (Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ), OPTIPEN™, OPTIPEN PRO™, OPTIPEN STARLET™, i OPTI-CLIK™ (Sanofi-Aventis, Frankfurt, Germany), da navedemo samo neke. Primeri uređaja za isporuku olovke za jednokratnu upotrebu koji imaju upotrebe u subkutanoznoj isporuci farmaceutske kompozicije iz predmetnog pronalaska uključuje, ali svakako nisu ograničeni na SOLOSTAR™ olovku (Sanofi-Aventis), FLEXPEN™ (Novo Nordisk), i KWIKPEN™ (Eli Lilly), SURECLICK ™ Autoinjector (Amgen, Thousand Oaks, CA), PENLET ™ (Haselmeier, Stuttgart, Germany), EPIPEN (Dey, L.P.) i HUMIRA ™ Pen (Abbott Labs, Abbott Park, IL), da navedemo samo neke.
[0163] Kao prednost, farmaceutske kompozicije za oralnu ili parenteralnu upotrebu koje su ovde opisane su pripremljene u doznim oblicima u jediničnoj dozi koja je prilagođena dozi aktivnih sastojaka. Takvi dozni oblici u jediničnoj dozi uključuju, na primer, tablete, pilule, kapsule, injekcije (ampule), supozitorije, itd.
Ko na anttea oe se naaz e generano o o 5 o o o 500 mg po oznom o u u e n no oz; posebno u obliku injekcije, poželjno je da se antitelo nalazi od oko 5 do oko 100 mg i u oko 10 do oko 250 mg za druge dozne oblike.
Terapeutske upotrebe antitela
[0164] Antitela iz pronalaska su korisna, inter alia, za lečenje, prevenciju i/ili ublažavanje bilo koje bolesti ili poremećaja koji je povezan sa ili je posredovan sa ekspresijom PD-1, signalizacijom, ili aktivnosti, ili se može lečiti blokiranjem interakcije između PD-1 i PD-1 liganda (npr., PD-L1, ili PD-L2) ili na drugi način inibiranjem aktivnosti PD-1 i/ili signalizacije. Na primer, predmetni prikaz obezbeđuje postupke za lečenje kancera (inhibicija tumorskog rasta), hronične virusne infekcije i/ili autoimune bolesti davanjem anti-PD-1 antitela (ili farmaceutske kompozicije koja se sastoji iz anti-PD-1 antitela) kao što je ovde opisano pacijentu kome je potreban takav tretmana. Antitela iz predmetnog prikaza su korisna za lečenje, prevenciju, i/ili ublažavanje bolesti ili poremećaja ili stanja kao što je kancer, autoimuna bolest ili virusna infekcija i/ili za ublažavanje bar jednog simptoma koji je povezan sa takvom bolesti, poremećajem ili stanjem. U kontekstu postupaka ovde opisanih tretmana, anti-PD-1 antitelo se može primeniti kao monoterapija (tj., kao jedino terapetusko sredstvo) ili u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih terapeutskih sredstava (Primeri koji su ovde na drugom mestu opisani).
[0165] U nekim aspektima iz prikaza, ovde opisana antitela su korisna za lečenje subjekta koji pati od primarnog ili rekurentnog kancera, uključujući, ali bez ograničenja na, karcinom bubrežnih ćelija, kolorektalni kancer, ne-sitnoćelijski kancer pluća, kancer mozga (npr., glioblastom multiforme), karcinom skvamoznih ćelija glave i vrata, kancer želuca, kancer prostate, kancer jajnika, kancer bubrega, kancer dojke, multipli mijelom, i melanom.
[0166] Antitela se mogu koristiti za lečenje ranog stadijuma ili simptoma kasnog stadijuma kancera. U jednom aspektu antitelo ili njegov fragment iz pronalaska mogu se koristiti za lečenje metastatskog kancera. Antitela su korisna u smanjenju ili inhibiciji ili sužavanju tumorskog rasta i solidnih tumora i kancera krvi. U određenim aspektima, tretman sa antitelom ili njegovim fragmentom koji veže antigen iz pronalaska dovodi do više od 50% regresije, više od 60% regresije, više od 70% regresije, više od 80% regresije ili više od 90% regresije tumora kod subjekta. U određenim aspektima, antitela se mogu koristiti za sprečavanje relapsa tumora. U određenim aspektima, antitela su korisna u produžavanju sveukupnog preživljavanja kod subjekta sa kancerom. U nekim aspektima, antitela su korisna u smanjenju toksičnosti zbog hemoterapije ili terapije zračenjem dok se održava dugoročno preživljavanje kod pacijenta koji pati od kancera.
[0167] U određenim aspektima, antitela iz pronalaska su korisna za lečenje subjekata koji pate od hroničnih virusnih infekcija. U nekim aspektima, antitela iz predmetnog pronalaska su korisna u smanjenju virusnih titara u domaćinu i/ili spašavanje iscrpljenih T-ćelija. U određenim aspektima, antitelo ili njegov fragment iz pronalaska mogu se koristiti za lečenje hronične virusne infekcije sa virusom limfocitnog meningitisa (LCMV). U nekim aspektima, antitelo ili njegov fragment koji veže antigen iz pronalaska se mogu davati u terapeutskoj dozi pacijentu koji je inficiran sa humanim virusom imunodeficijencije (HIV) ili humanim papiloma virusom (HPV) ili hepatitis B/C virusom (HBV/HCV). U povezanom aspektu, antitelo ili njegov fragment koji veže antigen iz pronalaska mogu se koristiti za lečenje infekcije sa virusom imunodeficijencije majmuna (SIV) kod subjekta majmuna kao što je cinomolgus.
[0168] U određenim aspektima, blokirajuće antitelo iz predmetnog pronalaska može se dati u terapeutski efikasnoj količini subjektu koji pati od kancera ili virusne infekcije.
[0169] U određenim aspektima, antitela iz prikaza su korisni za lečenje autoimune bolesti, uključujući ali bez ograničenja na, alopecia areata (opadanje kose u pečatima), autoimuni hepatitis, bolest celijakija, Gravesova bolest, Žilijen-Bar sindrom, Hašimoto bolest, hemolitička anemija, inflamatorna bolest creva, inflamatorne miopatije, multiple skleroza, primarna bilijarna ciroza, psorijaza, reumatoidni artritis,
1
s ero erma, Sogrenov sn rom, sstems ertematozn upus, vt go, automun pan reatts, automuna urtrikarija, autoimuna thrombocitopenijska purpura, Kronova bolest, dijabetes tipa I, eozinofilni fascitis, eozinofilni enterogastritis, Goodpasture-ov sindrom, mijastenija gravis, psorijazni artritis, reumatska groznica, ulcerativni kolitis, vaskulitis i Vegenerova granulomatoza. U određenim aspektima, aktivirajuće antitelo iz prikaza može se koristiti za lečenje subjekta koji pati od autoimune bolesti.
[0170] Jedno ili više antitela iz predmetnog pronalaska mogu se davati da bi se olakšala ili sprečila ili smanjila ozbiljnost jednog ili više od simptoma ili stanja bolesti ili poremećaja.
[0171] Ovde je takođe razmotrena upotreba jednog ili više antitela iz predmetnog prikaza profilaktički pacijentima koji se nalaze u riziku da razviju bolest ili poremećaj kao što je kancer, autoimuna bolest i hronična virusna infekcija.
[0172] U daljem aspektu iz prikaza predmetna antitela su korišćena za dobijanje farmaceutske kompozicije za lečenje pacijenata koji pate od kancera, autoimune bolesti ili virusne infekcije. U drugom aspektu iz predmetnog prikaza, predmetna antitela su korišćena kao dodatna terapija sa bilo kojim drugim sredstvom ili bilo kojom drugom terapijom koja je poznata stručnjaku u oblasti tehnike koje je korisno za lečenje kancera, autoimune bolesti ili virusne infekcije.
Kombinovane terapije i kombinacije
[0173] Kombinovane terapije anti-PD-1 antitela iz pronalaska i bilo koji dodatak koji se može kao prednost kombinovati sa antitelom iz pronalaska, ili sa biološki aktivnim fragmentom antitela iz pronalaska.
[0174] Antitela iz predmetnog pronalaska se mogu kombinovati sinergistički sa jednim ili više antikancerogenim lekovima ili terapijom koja se koristi za lečenje kancera, uključujući, na primer, karcinom ćelija bubrega, kolorektalni kancer, glioblastom multiforme, karcinom skvamoznih ćelija glave i vrata, nemikrocelularni kancer pluća, kancer debelog creva, kancer jajnika, adenokarcinom, kancer prostate, gliom, i melanom. Ovde je razmotrena upotreba anti-PD-1 antitela iz pronalaska u kombinaciji sa imunostimulatornim i/ili terapijama koje podržavaju imuni sistem da bi se inhibirao tumorski rast, i/ili poboljšalo preživljavanje pacijenata koji imaju kancer. Imunostimulatorne terapije uključuju direktne imunostimulatorne terapije da bi se povećala aktivnost imunoloških ćelija ili pomoću "oslobađanja kočnice" na suprimiranim imunim ćelijama ili "stajanjem na gas" kako bi se aktivirao imuni odgovor. Primeri uključuju ciljanje drugih receptora tačaka provere, vakcinaciju i adjuvanse. Modaliteti koji podržavaju imuni sistem mogu povećati antigeničnost tumora promovisanjem imunogene ćelijske smrti, inflamacije ili imaju druge direktne efekte koji promovišu anti-tumorski imuni odgovor. Primeri uključuju zračenje, hemoterapiju, anti-angiogena sredstva, i operaciju.
[0175] U različitim izvođenjima, jedno ili više antitela iz predmetnog pronalaska mogu se koristiti u kombinaciji sa antitelom protiv PD-L1, drugim antitelom protiv PD-1 (npr, nivolumab), LAG-3 inhibitorom, CTLA-4 inhibitorom (npr., ipilimumab), TIM3 inhibitorom, BTLA inhibitorom, TIGIT inhibitorom, CD47 inhibitorom, antagonistom drugog T-ćelijskog ko-inhibitora ili liganda (npr., antitelo protiv CD-28, 2B4, LY108, LAIR1, ICOS, CD160 ili VISTA), inhibitorom indolamin-2,3-dioksigenaze (IDO), antagonistom vaskularnog endotelijalnog faktora rasta (VEGF) [npr., "VEGF-Trap" kao što je aflibercept ili drugi VEGF-inhibirajući fuzioni protein kao što je predstavljeno u US 7,087,411, ili anti-VEGF antitelom ili njegovim fragmentom koji se vezuje antigen (npr., bevacizumab, ili ranibizumab) ili mali molekulom kinaznim inhibitorom VEGF receptora (npr., sunitinib, sorafenib, ili pazopanib)], Ang2 inhibitorom (npr., nesvacumab), inhibitorom transformišućeg faktora rasta beta (TGFp), inhibitorom receptora epidermalnog faktora rasta (EGFR) (npr., erlotinib, cetuksimab), agonistom prema ko-stimulatornim receptorom (npr., agonist prema glukokortikoid-indukovanom TNFR-srodnom proteinu), antitelom koje je specifično za tumor-specifičan antigen (npr, CA9, CA125, melanoma-povezani antigen 3 (MAGE3), karcinoembrionski antigen (CEA), vimentin, tumor-M2-PK, antigen specifičan za prostatu (PSA), mucin-1, MART-1, i CA19-9), vakcinom (npr., Bacillus Calmette-Guerin, vakcina kancera), adjuvansom da bi se
2
pove ao prezentovane antgena npr., a tor stmuac e oon a granuoct-ma ro aga , spec nm antitelom (npr., CD3xCD20 bispecifično antitelo, PSMAxCD3 bispecifično antitelo), citotoksinom, hemoterapeutskim sredstvom (npr., dakarbazin, temozolomid, ciklofosfamid, docetaksel, doksorubicin, daunorubicin, cisplatin, karboplatin, gemcitabin, metotreksat, mitoksantron, oksaliplatin, paklitaksel, i vinkristin), ciklofosfamidom, terapijom zračenjem, IL-6R inhibitorom (npr., sarilumab), IL-4R inhibitorom (npr., dupilumab), IL-10 inhibitorom, citokinima kao što su IL-2, IL-7, IL-21, i IL-15, konjugatom antitela sa lekom (ADC) (npr., anti-CD19-DM4 ADC, i anti-DS6-DM4 ADC), anti-inflamatorni lek (npr., kortikosteroidi, i ne-steroidni anti-inflamatorni lekovi), dijetetski suplementima kao što su anti-oksidansi ili bilo koja palijativna nega da bi se lečio kancer. U određenim izvođenjima, anti-PD-1 antitela iz predmetnog pronalaska mogu se koristiti u kombinaciji sa vakcinama za kancer uključujući ćelije dendritičnih ćelija, onkolitičke viruse, vakcine tumorskim ćelijama, tj. da pojača antitumorski odgovor. Primeri vakcina kancera koji se može koristiti u kombinaciji sa anti-PD-1 antitelima iz predmetnog pronalaska uključuju MAGE3 vakcinu za melanom i kancer bešike, MUC1 vakcina za kancer dojke, EGFRv3 (npr., Rindopepimut) za kancer mozga (uključujući glioblastom multiforme), ili ALVAC-CEA (za CEA+ kancera).
[0176] U određenim aspektima, anti-PD-1 antitela iz pronalaska mogu se davati u kombinaciji sa terapijom zračenjem u postupcima da bi se generisali trajni dugoročni anti-tumorski odgovori i/ili da bi se poboljšalo preživljavanje pacijenata koji imaju kancer. U nekim aspektima, anti-PD-1 antitela iz pronalaska mogu se davati pre, istovremeno ili nakon davanja terapije zračenjem pacijentu. Na primer, terapija zračenjem se može primeniti u jednoj ili više doza na tumorske lezije nakon čega sledi davanje jedne ili više doza anti-PD-1 antitela iz pronalaska. U nekim aspektima, terapija zračenjem se može primeniti lokalno na tumorsku leziju da se pojača lokalna imunogenost kod tumora pacijenta (adjuvansno zračenje) i/ili da bi se ubile tumorske ćelije (ablativno zračenje) praćeno sistemskim davanjem anti-PD-1 antitela iz pronalaska. Na primer, intrakranijelno zračenje može se primeniti pacijentu sa kancerom mozga (npr., glioblastom multiforme) u kombinaciji sa sistemskim davanjem anti-PD-1 antitela iz pronalaska. U određenim aspektima, anti-PD-1 antitela iz pronalaska mogu se davati u kombinaciji sa terapijom zračenjem sa hemoterapeutskim sredstvom (npr., temozolomid) ili VEGF antagonistom (npr., aflibercept).
[0177] U određenim aspektima, anti-PD-1 antitela iz pronalaska mogu se davati u kombinaciji sa jednim ili više anti-virusnih lekova za lečenje hronične virusne infekcije uzrokovane sa LCMV, HIV, HPV, HBV ili HCV. Primeri antivirusnih lekova uključuju, ali nisu ograničeni na, zidovudin, lamivudin, abakavir, ribavirin, lopinavir, efavirenz, kobicistat, tenofovir, rilpivirin i kortikosteroide. U nekim aspektima, anti-PD-1 antitela iz pronalaska mogu se davati u kombinaciji sa LAG3 inhibitorom, CTLA-4 inhibitorom ili bilo kojim antagonistom drugog T-ćelijkog ko-inhibitora za lečenje hronične virusne infekcije.
[0178] U određenim aspektima, za lečenje autoimune bolesti mogu se kombinovati anti-PD-1 antitela iz prikaza sa antitelom protiv Fc receptora na imunim ćelijama. U jednom aspektu, antitelo ili njegov fragment iz prikaza je davano u kombinaciji sa antitelom ili proteinom koji veže antigen koji je usmeren na antigen koji je specifičan za autoimuno tkivo. U određenim aspektima, antitelo ili njegov fragment za vezivanje antigena iz prikaza je davan u kombinaciji sa antitelom ili proteinom koji veže antigen koji su usmereni protiv T-ćelijskog receptora ili B-ćelijskog receptora, uključujući ali bez ograničenja na, Fca (npr., CD89), Fcy (npr., CD64, CD32, CD16a, i CD16b), CD19, itd. Antitela ili njihovi fragmenti iz prikaza se mogu koristiti u kombinaciji sa bilo kojim lekom ili terapijom koja je poznata u oblasti tehnike (npr., kortikosteroidi i drugi imunosupresanti) da bi se lečila autoimuna bolest ili poremećaj uključujući, ali bez ograničenja na alopecia areata (opadanje kose u pečatima), autoimuni hepatitis, bolest celijakija, Gravesova bolest, Žilijen-Bar sindrom, Hašimoto bolest, hemolitička anemija, inflamatorna bolest creva, inflamatorne miopatije, multiple skleroza, primarna bilijarna ciroza, psorijaza, reumatoidni artritis, skleroderma, Sjogrenov sindrom, sistemski eritematozni lupus, vitiligo, autoimuni pankreatitis, autoimuna urtrikarija, autoimuna trombocitopenijska purpura, Kronova bolest, dijabetes tipa I, eozinofilni fascitis, eozinofilni enterogastritis, Goodpasture-ov sindrom, mijastenija gravis, psorijazni artritis, reumatska groznica, ulcerativni kolitis, vaskulitis i Vegenerova granulomatoza.
[0179] Do atna terapeuts a tvna a tvna sre stva omponente mogu se avat pre, stovremeno sa, nakon davanja anti-PD-1 antitela iz predmetnog pronalaska. Za svrhe predmetnog pronalaska, takvi režimi davanja su smatrani davanjem anti-PD-1 antitela "u kombinaciji" sa drugim terapeutski aktivnom komponentom.
[0180] Dodatna terapeutski aktivna komponent(e)a može se primeniti subjektu pre davanja anti-PD-1 antitela iz predmetnog pronalaska. Na primer, može se smatrati da je primenjena prva komponenta "pre" druge komponente ukoliko je prva komponenta davana 1 nedelju pre, 72 h pre, 60 h pre, 48 h pre, 36 h pre, 24 h pre, 12 h pre, 6 h pre, 5 h pre, 4 h pre, 3 h pre, 2 h pre, 1 h pre, 30 minuta pre, 15 minuta pre, 10 minuta pre, 5 minuta pre, ili manje od 1 minuta pre davanja druge komponente. U drugim aspektima, dodatna terapeutski aktivna komponent(e)a mogu se primeniti subjektu nakon davanja anti-PD-1 antiela iz predmetnog pronalaska. Na primer, može se smatrati da je primenjena prva komponenta "nakon" druge komponente ukoliko je prva komponenta davana 1 minut nakon, 5 minuta nakon, 10 minuta nakon, 15 minuta nakon, 30 minuta nakon, 1 h nakon, 2 h nakon, 3 h nakon, 4 h nakon, 5 h nakon, 6 h nakon, 12 h nakon, 24 h nakon, 36 h nakon, 48 h nakon, 60 h nakon, 72 h nakon davanja druge komponente. U još drugim aspektima, dodatna terapeutski aktivna komponent(e)a mogu se primeniti subjektu istovremeno sa davanjem anti-PD-1 antitela iz predmetnog pronalaska. "Istovremeno" davanje, za svrhe predmetnog pronalaska, uključuje, npr., davanje anti-PD-1 antitela i dodatne terapeutski aktivne komponente subjektu u pojedinačnom doznom obliku (npr., zajedno, istovremeno formulisanom), ili u odvojenim doznim oblicima koji su davani subjektu tokom 30 minuta ili manje jedan u odnosu na drugog. Ukoliko su davani u razdvojenim doznim oblicima, svaki dozni oblik može se primeniti preko istog načina davanja (npr., i anti-PD-1 antitelo i dodatna terapeutski aktivna komponenta mogu se primeniti intravenozno, subkutanozno, itd.); alternativno, svaki dozni oblik može se primeniti različitim načinom davanja (npr., anti-PD-1 antitelo može se davati intravenozno, i dodatne terapeutski aktivne komponente se mogu primeniti subkutanozno). U bilo kom slučaju, primena komponenti u pojedinačnom doznom obliku, u odvojenim doznim oblicima pomoću istog načina davanja, ili u odvojenim doznim oblicima različitim načinima davanja su svi smatrani "istovremenim davanjem," za svrhe predmetnog prikaza. Za svrhe predmetnog prikaza, davanje anti-PD-1 antitela "pre", "istovremeno sa," ili "nakon" (kao što su oni termini koji su gore u tekstu definisani) davanje dodatne terapeutski aktivne komponente je smatrano davanje anti-PD-1 antitela "u kombinaciji sa" dodatnom terapeutski aktivnom komponentom).
[0181] Predmetni pronalazak uključuje farmaceutske kompozicije u kojima anti-PD-1 antitelo predmetnog pronalaska je istovremeno formulisan sa jednom ili više dodatnih terapeutskih aktivnih komponena(ta) kao što je ovde opisano negde drugo korišćenjem različitih kombinacija doza.
[0182] U primerima aspekata u kojima anti-PD-1 antitelo iz pronalaska je davano u kombinaciji sa VEGF antagonistima (npr., VEGF „trap“ kao što je aflibercept), uključujući davanje ko-formulacija koji se sastoje iz anti-PD-1 antitelo i VEGF antagonist, individualne komponente mogu se dati subjektu i/ili ko-formulisani korišćenjem različitih doznih kombinacija. Na primer, anti-PD-1 antitelo mogu se dati subjektu i/ili sadržani u ko-formulaciji u količini koja je izabrana iz grupe koja se sastoji iz 0.01 mg, 0.02 mg, 0.03 mg, 0.04 mg, 0.05 mg, 0.1 mg, 0.2 mg, 0.3 mg, 0.4 mg, 0.5 mg, 0.6 mg, 0.7 mg, 0.8 mg, 0.9 mg, 1.0 mg, 1.5 mg, 2.0 mg, 2.5 mg, 3.0 mg, 3.5 mg, 4.0 mg, 4.5 mg, 5.0 mg, 6.0 mg, 7.0 mg, 8.0 mg, 9.0 mg, i 10.0 mg; i VEGF antagonist (npr., VEGF „trap“ kao što je aflibercept) mogu se dati subjektu i/ili sadržati u ko-formulaciji u količini koja je izabrana iz grupe koja se sastoji iz 0.1 mg, 0.2 mg, 0.3 mg, 0.4 mg, 0.5 mg, 0.6 mg, 0.7 mg, 0.8 mg, 0.9 mg, 1.0 mg, 1.1 mg, 1.2 mg, 1.3 mg, 1.4 mg, 1.5 mg, 1.6 mg, 1.7 mg, 1.8 mg, 1.9 mg, 2.0 mg, 2.1 mg, 2.2 mg, 2.3 mg, 2.4 mg, 2.5 mg, 2.6 mg, 2.7 mg, 2.8 mg, 2.9 mg i 3.0 mg. Kombinacije/ko-formulacije mogu se dati subjektu prema bilo kom od režima davanja koji su ovde na drugom mestu prikazani, uključujući, npr., dva puta nedeljno, jednom svake nedelje, jednom svake 2 nedelje, jednom svake 3 nedelje, jednom svakog meseca, jednom svaka 2 meseca, jednom svaka 3 meseca, jednom svaka 4 meseca, jednom svakih 5 meseci, jednom svaka 6 meseca, itd.
4
Režimi davanja
[0183] Prema određenim aspektima iz predmetnog prikaza, višestruke doze anti-PD-1 antitela (ili farmaceutske kompozicije koja se sastoji iz kombinacije anti-PD-1 antitela i bilo kog od dodatnih ovde pomenutih terapeutskih aktivnih sredstava) mogu se davati subjektu tokom tokom određenog vremenskog toga. Postupci prema ovom aspektu iz prikaza sadrže uzastopno davanje subjektu višestrukih doza anti-PD-1 antitela iz pronalaska. Kao što je ovde korišćeno, "uzastopno davanje" označava da svaka doza anti-PD-1 antitela je davana subjektu tokom određenog vremenskog perioda, npr., u različitim danima koji su razdvojeni sa unapred određenim intervalom (npr., h, dani, nedelje ili meseci). Predmetni prikaz uključuje postupke koji obuhvataju uzastopno davanje pacijentu u pojedinačnoj početnoj dozi anti-PD-1 antitela, praćeno sa jednom ili više sekundarnih doza anti-PD-1 antitela, i opciono praćeno sa jednom ili više tercijernih doza anti-PD-1 antitela. Anti-PD-1 antitelo može se davati u dozi između 0.1 mg/kg do 100 mg/kg.
[0184] Termini "početna doza," ''sekundarne doze," i "tercijarne doze," odnose se na vremensku sekvencu davanja anti-PD-1 antitela iz pronalaska. Prema tome, "početna doza" je doza koja je davana na početku režima tretmana (takođe poznata kao "osnovna doza"); "sekundarna doza" su doze koje su davane nakon početne doze; i "tercijerne doze" su doze koje su davane nakon sekundarnih doza. Početne, sekundarne, i tercijerne doze mogu sve sadržati istu količinu anti-PD-1 antitela, ali se generalno mogu razlikovati jedan od drugog u terminima učestalosti davanja. U određenim izvođenjima, međutim, količina anti-PD-1 antitela koja se nalazi u početnim, sekundarnim i/ili tercijernim dozama razlikuje se jedan od drugog (npr., prilagođeno gore ili dole prema potrebi) tokom trajanja tretmana. U određenim aspektima, dve ili više doza (npr., 2, 3, 4, ili 5) su davane na početku režima tretmana kao "opterećujuće doze" praćeno sa naknadnim dozama koje su davane na manje učestaloj osnovi (npr., "doze za održavanje").
[0185] U određenim navedenim aspektima iz predmetnog prikaza, svaka sekundarna i/ili tercijerna doza je davana 1 do 26 (npr., 1, 1<1>/2, 2, 2<1>/2, 3, 3<1>/2, 4, 4<1>/2, 5, 5<1>/2, 6, 6<1>/2, 7, 7<1>/2, 8, 8<1>/2, 9, 9<1>/2, 10, 10<1>/2, 11, 11<1>/2, 12, 12<1>/2, 13, 13<1>/2, 14, 14<1>/2, 15, 15<1>/2, 16, 16<1>/2, 17, 17<1>/2, 18, 18<1>/2, 19, 19<1>/2, 20, 20<1>/2, 21, 21<1>/2, 22, 22<1>/2, 23, 23<1>/2, 24, 24<1>/2, 25, 25<1>/2, 26, 26<1>/2, ili više) nedelja neposredno nakon prethodne doze. Fraza "neposredno nakon prethodne doze," Kao što je ovde korišćena, označava, u nizu višestrukih davanja, doza anti-PD-1 antitela koje se daje pacijentu pre primene sledeće doze u nizu bez međudoza.
[0186] Postupci u skladu sa ovim aspektom iz prikaza mogu sadržati davanje pacijentu bilo kog broja sekundarnih i/ili tercijernih doza anti-PD-1 antitela. Na primer, u određenim aspektima, samo jedna sekundarna doza je davana pacijentu. U drugim aspektima, dve ili više (npr., 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, ili više) sekundarnih doza su davane pacijentu. Slično tome, u određenim aspektima, samo pojedinačna tercijerna doza je davana pacijentu. U drugim aspektima, dve ili više (npr., 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, ili više) tercijernih doza su davane pacijentu.
[0187] U aspektima koji uključuju višestruke sekundarne doze, svaka sekundarna doza se može davati u istoj učestalosti kao druge sekundarne doze. Na primer, svaka sekundarna doza može se davati pacijentu 1 do 2 nedelje ili 1 do 2 meseca neposredno nakon prethodne doze. Slično tome, u aspektima koji uključuju višestruke tercijarne doze, svaka tercijarna doza se može dati u istoj učestalosti kao druge tercijarne doze. Na primer, svaka tercijerna doza može se dati pacijentu 2 do 12 nedelja neposredno nakon prethodne doze. U određenim aspektima iz prikaza, učestalost u kojoj su sekundarne i/ili tercijarne doze davane pacijentu mogu se razlikovati tokom trajanja režima tretmana. Učestalost davanja može takođe biti podešena tokom trajanja tretmana od strane lekara u zavisnosti od potreba individualnog pacijenta nakon kliničkog ispitivanja.
[0188] Predmetni prikaz uključuje režime davanja u kojima 2 do 6 doza za opterećenje su date pacijentu u prvoj učestalosti (npr., jednom nedeljno, jednom svake dve nedelje, jednom svake tri nedelje, jednom mese no, e nom sva a va meseca, t . , pra eno avanem ve v e oze za o r avane pac entu na manje učestaloj osnovi. Na primer, prema aspektu iz prikaza, ukoliko su doze za opterećenje davane u učestalosti od, npr., jednom mesečno (npr., dva, tri, četiri, ili više doza za opterećenje je davano jednom mesečno), onda doze za održavanje mogu da se daju pacijentu jednom svakih pet nedelja, jednom svakih šest nedelja, jednom svakih sedam nedelja, jednom svakih osam nedelja, jednom svakih deset nedelja, jednom svakih dvanaest nedelja, itd.).
Diagnostičke upotrebe antitela
[0189] Anti-PD-1 antitela iz predmetnog pronalaska se mogu koristiti za detekciju i/ili merenje PD-1 u uzorku, npr., za dijagnostičke svrhe. Neki aspekti razmatraju upotrebu jednog ili više antitela iz predmetnog pronalaska u testovima da bi se detekovala bolest ili poremećaj kao što je kancer, autoimuna bolest ili hronična virusna infekcija. Primeri dijagnostičkih testova za PD-1 mogu sadržati, npr., dovođenje u kontakt uzorka, koji je dobijen od pacijenta, sa anti-PD-1 antitelom iz pronalaska, pri čemu anti-PD-1 antitelo je obeleženo sa detektabilnim obeleživačem ili reporterskim molekulom ili je korišćeno kao ligand za hvatanje da bi se selektivno izolovao PD-1 iz uzoraka pacijenata. Alternativno, neobeleženo anti-PD-1 antitelo može se koristiti u dijagostičkim primenama u kombinaciji sa sekundarnim antitelom koje je samo obeleženo za detekciju. Detektabilni obeleživač ili reporterski molekul može biti radioizotop, kao što je<3>H,<14>C,<32>P,<35>S, ili<125>I; fluorescentni ili luminiscentni ostatak kao što je fluorescein izotiocijanat, ili rodamin; ili enzim kao što je alkalna fosfataza, p-galaktorzidaza, peroksidaza rena, ili luciferaza. Specifični primeri testova koji se mogu koristiti za detekciju ili merenje PD-1 u uzorku uključuju enzimski povezani imunosorbent test (ELISA), radioimunotest (RIA), ili sortiranje ćelija aktiviranih fluorescencijom (FACS).
[0190] Uzorci koji se mogu koristiti u dijagnostičkim testovima za PD-1 prema predmetnom prikazu uključuju bilo koji uzorak tkiva ili tečnosti koji se može dobiti od pacijenta, koji sadrži ili detektabilne količine PD-1 proteina, ili njegovog fragmenta, pod normalnim ili patološkim uslovima. Generalno, nivoi PD-1 u određenom uzorku koji su dobijeni iz zdravog pacijenta (npr., pacijent koji nije pogođen kancerom ili autoimunom bolesti) biće izmereni da bi se inicijalno uspostavio osnovni nivo, ili standard, nivoa PD-1. Ovaj osnovni nivo PD-1 može se nakon toga uporediti protiv nivoa PD-1 izmerenih u uzorcima koji su dobijeni iz individua koje su suspektne da imaju stanje koje je povezano sa kancerom, ili simptome koji su povezani sa takvim stanjem.
[0191] Antitela koja su specifična za PD-1 ne moraju imati dodatne obeleživače ili ostatke, ili mogu imati N-terminalni ili C-terminalni obeleživač ili ostatak. U jednom izvođenju, obeleživač ili ostatak je biotin. U testu vezivanja, lokacija obeleživača (ukoliko postoji) može odrediti orijentaciju peptida u odnosu na površinu na kojoj je peptid vezan. Na primer, ukoliko je površina obložena sa avidinom, peptid koji sadrži N-terminalni biotin biće orijentisan tako da C-terminalni deo peptida bude udaljen u odnosu na površinu.
[0192] Aspekti iz prikaza se odnose na upotrebu prikazanih antitela kao markera za prognozu predviđanja kancera ili autoimunog poremećaja kod pacijenata. Antitela iz predmetnog pronalaska mogu se koristiti u dijagnostičkim testovima za ispitivanje prognoze kancera kod pacijenta i za predviđanje preživljavanja.
PRIMERI
[0193] Sledeći primeri su predstavljeni da bi se osobi koja je uobičajeno verzirana u stanje tehnike obezbedio potpuni prikaz i opis kako da se naprave i koriste postupci i kompozicije iz pronalaska, i nisu namenjeni da ograniče obim onoga što pronalazači smatraju svojim pronalaskom. Napori su napravljeni da osiguraju tačnost u odnosu na korišćene brojeve (npr., količine, temperaturu, itd.) ali neke eksperimentalne greške i odstupanja treba uzeti u obzir. Osim ukoliko nije drugačije naznačeno, delovi su delovi u odnosu na masu, molekulska težina je srednja molekulska težina, temperatura je u stepenima Celizijusa, sobna temperatura je oko 25°C, i pritisak je na ili je blizu atmosferskog.
Primer 1: Generisanje humanih antitela koja su specifična za PD-1
[0194] Humana antitela koja su specifična za PD-1 su generisana korišćenjem fragmenta PD-1 koji je opsega od približno aminokiselina 25 -170 GenBank pristupni NP_005009.2 (SEQ ID NO: 327) sa C93S izmenom. Imunogen je davan direktno, sa adjuvansom da bi se stimulisao imuni odgovor, VELOCIMMUNE® mišu koji sadrži DNK koja kodira varijabilne regione humanog imunoglobulinskog teškog i kapa lakog lanca. Imuni odgovor antitela je praćen sa PD-1-specifičnim imunotestom. Kada je postignut željeni imuni odgovor splenociti su sakupljeni i spojeni sa ćelijama mijeloma miša da bi se sačuvala njihova vijabilnost i obrazovale ćelijske linije hibridoma. Izvršen je skrining hibridoma ćelijskih linija i selektovane su za identifikovanje ćelijskih linija koje proizvode PD-1-specifična antitela. Korišćenjem ovog postupka, i gore opisanog imunogena, nekoliko anti-PD-1 himernih antitela (tj., antitela koja poseduju humane varijabilne domene i mišje konstantne domene) su dobijeni; primeri antitela koji su generisani na ovaj način su naznačeni kao H1M7789N, H1M7799N, H1M7800N, H2M7780N, H2M7788N, H2M7790N, H2M7791N, H2M7794N, H2M7795N, H2M7796N, i H2M7798N.
[0195] Anti-PD-1 antitela su takođe izolovana direktno iz antigen-pozitivnih B ćelija bez spajanja sa ćelijama mijeloma, kao što je opisano u U.S. 2007/0280945A1, ovde specifično uključeno sa potpunim referencama. Korišćenjem ovog postupka, nekoliko potpuno humanih anti-PD-1 antitela (tj, antitela koja sadrže humane varijabilne domene i humane konstantne domene) su dobijena; primeri antitela koja su generisana na ovaj način su označena kao što sledi: H4H9019P, H4xH9034P2, H4xH9035P2, H4xH9037P2, H4xH9045P2, H4xH9048P2, H4H9057P2, H4H9068P2, H4xH9119P2, H4xH9120P2, H4xH9128P2, H4xH9135P2, H4xH9145P2, H4xH8992P, H4xH8999P, i H4xH9008P.
[0196] Biološka svojstva primera antitela koja su generisana u skladu sa postupcima iz ovog primera, detaljno su opisana u primerima koji su predstavljeni u tekstu ispod.
Primer 2: Aminokiselinske i nukleotidne sekvence varijabilnog regiona teškog i lakog lanca
[0197] Tabela 1 prikazuje identifikatore aminokiselinskih sekvenci varijabilnog regiona teškog i lakog lanca i CDRs izabranih anti-PD-1 antitela iz pronalaska. Odgovarajući identifikatori sekvence nukleinske kiseline su predstavljeni u Tabeli 2.
Tabela 1: Identifikatori aminokiselinske sekvence
(nastavak)
Tabela 2: Identifikatori sekvence nukleinske kiseline
(nastavak)
[0198] Antitela su ovde obično naznačena u skladu sa sledećom nomenklaturom: prefiks Fc (npr. "H4xH," "HIM," "H2M," itd.), koga prati numerički identifikator (npr. "7789," "7799," itd., kao što je prikazano u Tabeli 1), praćeno sa "P," "P2," "N," ili "B" sufiksom. Prema tome, u skladu sa ovom nomenklaturom, antitelo ovde može biti naznačeno sa, npr., "H1H7789N," "H1M7799N," "H2M7780N," itd. H4xH, H1M, H2M i H2aM prefiksi na ovde korišćenim oznakama antitela označavaju određeni izotip Fc regiona antitela. Na primer, "H4xH" antitelo ima humani IgG4 Fc sa 2 ili više aminokiselinskih promena kao što su prikazane u US20100331527, "H1M" antitelo ima mišji IgG1 Fc, i "H2M" antitelo ima mišji IgG2 Fc (a ili b izotip) (svi varijabilni regioni su potpuno humani kao što je naznačeno sa prvim 'H' u oznaci antitela). Kao što će biti jasno osobi koja je uobičajeno verzirana u stanje tehnike, antitelo koje ima određeni Fc izotip može se konvertovati u antitelo sa različitim izotipom Fc (npr., antitelo sa mišjim IgG1 Fc može se konvertovati u antitelo sa humanim IgG4, itd.), ali u bilo kom slučaju, varijabilni domeni (uključujući CDRs) – koji su označeni sa numeričkim identifikatorima koji su prikazani u Tabeli 1 – će ostati isti, i očekivano je da svojstva vezivanja za antigen budu identična ili u suštini identična bez obzira na prirodu domena Fc.
[0199] U određenim izvođenjima, izabrana antitela sa mišijim IgG1 Fc su konvertovana u antitela sa humanim IgG4 Fc. U jednom izvođenju, IgG4 Fc domen sadrži mutaciju serin u prolin u regionu zgloba (S108P) da bi se promovisala stabilizacija dimera. Tabela 3 prikazuje identifikatore sekvence aminokiselina sekvenci teškog lanca i lakog lanca odabranih anti-PD-1 antitela sa humanim IgG4 Fc.
Tabela 3
[0200] Svaka sekvenca teškog lanca u Tabeli 3 sаstoji se iz varijabilnog regiona (VHili HCVR; koji sadrži HCDR1, HCDR2 i HCDR3) i konstantnog regiona (koji sadrži CH1, CH2 i CH3 domene). Svaka sekvenca lakog lanca u Tabeli 3 sastoji se iz varijabilnog regiona (VLili LCVR; koji sadrži LCDR1, LCDR2 i LCDR3) i konstantnog regiona (CL). SEQ ID NO: 330 sadrži HCVR koji se sastoji iz aminokiselina 1 - 117 i konstantni region koji se sastoji iz aminokiselina 118 - 444. SEQ ID NO: 331 sadrži LCVR koji se sastoji iz aminokiselina 1 - 107 i onstantan regon o se sasto z amno se na 108 - 214. SEQ ID NO: 332 oa sa r HCVR o se sasto iz aminokiselina 1 - 122 i konstantan region koji se sastoji iz aminokiselina 123 - 449. SEQ ID NO: 333 koja sadrži LCVR koji se sastoji iz aminokiselina 1 - 107 i konstantan region koji se sastoji iz aminokiselina 108 -214. SEQ ID NO: 334 koja sadrži HCVR koji se sastoji iz aminokiselina 1 - 119 i konstantan region koji se sastoji iz aminokiselina 120 - 446. SEQ ID NO: 335 koja sadrži LCVR koji se sastoji iz aminokiselina 1 - 108 i konstantan region koji se sastoji iz aminokiselina 109 - 215. SEQ ID NO: 336 koja sadrži HCVR koji se sastoji iz aminokiselina 1 - 121 i konstantan region koji se sastoji iz aminokiselina 122 - 448. SEQ ID NO: 337 koji sadrži LCVR koji se sastoji iz aminokiselina 1 - 108 i konstantan region koji se sastoji iz aminokiselina 109 -215.
Primer 3: Vezivanje antitela za PD-1 kao što je određeno sa Površinskom plazmonskom rezonancijom
[0201] Brzine konstante asocijacije i disocijacije (kai kd, redom), ravnotežne konstante disocijacije i polu životi disocijacije (KDi t<1>/2, redom) za vezivanje antigena za prečišćena anti-PD1 antitela određena su korišćenjem biosenzor testa površinske plazmonske rezonancije u realnom vremenu na Biacore 4000 ili Biacore T200 instrumentu u realnom vremenu. Biacore senzor površina je derivatizovana ili sa poliklonskim zečjim anti-mišjim antitelom (GE, # BR-1008-38) ili sa monoklonskim mišjim anti-humanim Fc antitelom (GE, # BR-1008-39) da bi se uhvatilo približno 100-900 RUs anti-PD-1 monoklonskih antitela, koja su eksprimirana ili sa mišjim Fc ili sa humanim Fc, redom. PD-1 reagensi koji su ispitani za vezivanje sa anti-PD-1 antitelima uključuju rekombinantni humani PD-1 koji je eksprimiran sa C-terminalnim myc-mycheksahistidinskim tag-om (hPD-1-MMH; SEQ ID NO: 321), rekombinantnim PD-1 cinomolgus majmuna koji je eksprimiran sa C-terminalnim myc- myc-heksahistidinskim tag-om (MfPD-1-MMH; SEQ ID NO: 322), rekombinantni humani PD-1 dimer koji je eksprimiran ili sa C-terminalnim mišjim IgG2a Fc tagom (hPD-1-mFc; SEQ ID NO: 323) ili sa C-terminalnim humanim IgG1 Fc (hPD1-hFc; SEQ ID NO: 324), i PD-1 majmuna sa mFc (SEQ ID NO: 329). Različite koncentracije PD-1 reagenasa opsega od 200nM do 3.7nM je ubrizgano preko površine sa uhvaćenim anti-PD-1 monoklonskim antitelom na brzini protoka od 30µL/min na Biacore 4000 ili na 50µL/min na Biacore T200. Vezivanje PD-1 reagenasa za uhvaćena monoklonska antitela praćeno je tokom 3 do 5 minuta dok je njihova disocijacija sa antitela praćena tokom 7 do 10 minuta u HBST puferu za nalivanje (0.01 M HEPES pH 7.4, 0.15 M NaCl, 3 mM EDTA, 0.05% v/v Surfaktant P20). Eksperimenti su sprovedeni na 25°C i 37°C. Kintetičke konstante brzine asocijacije (ka) i disocijacije (kd) su određene obrađivanjem i uklapanjem podataka u 1:1 model vezivanja korišćenjem Scrubber 2.0c softvera za uklapanje kriva. Ravnotežne konstante disocijacije vezivanja (KD) i disocijativni polu-životi (t1/2) su zatim izračunati iz kinetičkih konstanti brzine: KD(M) = kd/ kai t<1>/2(min) = [In2/(60*kd)]. Parametri kinetika vezivanja za vezivanja različitih anti-PD-1 monoklonskih antitela za različite PD-1 reagense na 25°C i 37°C su tabelarno predstavljeni u Tabelama 4-11.
Tabela 4: Parametri kinetika vezivanja anti-PD-1 monoklonskih antitela koja se vezuju za humani PD-1-MMH na 25°C.
4
(nastavak)
Tabela 5: Parametri kinetika vezivanja anti-PD-1 monoklonskih antitela koja se vezuju za humani PD-1-MMH na 37°C.
Tabela 6: Parametri kinetika vezivanja anti-PD-1 monoklonskih antitela koja se vezuju za humani PD-1 dimer (humani PD-1-mFc ili humani PD-1-hFc) na 25°C.
Tabela 7: Parametri kinetika vezivanja anti-PD-1 monoklonskih antitela koja se vezuju za humani PD-1 dimer (humani PD-1-mFc ili humani PD-1-hFc) na 37°C.
(nastavak)
4
Tabela 8: Parametri kinetika vezivanja anti-PD-1 monoklonskih antitela koja se vezuju za MfPD-1-MMH na 25°C.
(nastavak)
Tabela 9: Parametri kinetika vezivanja anti-PD-1 monoklonskih antitela koja se vezuju za MfPD-1- MMH na 37°C
(nastavak)
4
Tabela 10: Parametri kinetika vezivanja anti-PD-1 monoklonskih antitela koja se vezuju za PD-1 dimer majmuna (PD-1-mFc majmuna) na 25°C
(nastavak)
4
Tabela 11: Parametri kinetika vezivanja anti-PD-1 monoklonskih antitela koja se vezuju za PD-1 dimer majmuna (majmun PD-1-mFc) na 37°C
[0202] Kao što je prikazano u Tabeli 4, na 25°C, 28 od 29 anti-PD-1 antitela iz pronalaska vezuju se za hPD-1-MMH sa KDvrednostima u opsegu od 2.1nM do 291nM. Jedno antitelo, H4H9068P2, nije ispoljilo bilo koje merljivo vezivanje za hPD-1-MMH na 25°C. Kao što je prikazano u Tabeli 5, na 37°C, 26 od 29 anti-PD-1 antitela iz pronalaska vezuje se za hPD-1-MMH sa KDvrednostima u opsegu od 3.79nM do 1.51µM. Tri antitela iz pronalaska nisu pokazala bilo koje ubedljivo vezivanje za hPD-1-MMH na 37°C. Kao što je prikazano u Tabeli 6, na 25°C, svih 29 anti-PD-1 antitela iz pronalaska vezuju se za hPD-1 dimere proteina sa KDvrednostima u opsegu od 65.5pM do 59.4nM. Kao što je prikazano u Tabeli 7, na 37°C, svih 27 anti-PD-1 antitela iz pronalaska vezuje hPD-1 dimere proteina sa KDvrednostima u opsegu od 3.09pM do 551nM. Kao što je prikazano u Tabeli 8, na 25°C, 27 od 29 anti-PD-1 antitela iz pronalaska vezuju se za
4
M PD-1-MMH sa KDvre nostma u opsegu o 3.09nM o 551nM. Dva anttea z pronaas a nsu spo a bilo koje ubedljivo vezivanje za MfPD-1-MMH na 25°C. Kao što je prikazano u Tabeli 9, na 37°C, 25 od 29 anti-PD-1 antitela iz pronalaska vezuje se za MfPD-1-MMH sa KDvrednostima u opsegu od 7.00nM do 7.54µM. Četiri antitela iz pronalaska nisu pokazala bilo koje ubedljivo vezivanje za MfPD- 1-MMH na 37°C. Kao što je prikazano u Tabeli 10, na 25°C, svih 18 od ispitanih anti-PD-1 antitela iz pronalaska vezuje se za MfPD-1 dimer sa KDvrednostima u opsegu od 137pM do 54.2nM. Kao što je prikazano u Tabeli 11, na 37°C, svih 18 od ispitanih anti-PD-1 antitela iz pronalaska vezuje se za MfPD-1 dimer sa KDvrednostima u opsegu manjem od 49pM do 86.3nM.
Primer 4: Blokiranje vezivanja PD-1 sa PD-L1 kao što je određeno korišćenjem ELISA
[0203] Sposobnost anti-PD-1 antitela da blokiraju vezivanje humanog human PD-1 sa njegovim ligandom, PD-L1 receptorom, je mereno korišćenjem tri formata kompetitivne sendvič ELISA. Dimerni humani PD-L1 proteini, koji se sastoje iz porcije humanog PD-L1 vanćelijskog domena koji je eksprimiran ili sa C-terminalnim humanim Fc tag-om (hPD-L1-hFc; SEQ ID: 325) ili C-terminalnim mišjim Fc tag-om (hPD-L1-mFc; SEQ ID: 326), ili dimernim humanim PD-L2, koji se sastoji iz humanog PD-L2 vanćelijskim regionom koji je proizveden sa C-terminalnim humanim Fc tag-om (hPD-L2-hFc; R&D Systems, #1224-PL) su odvojeno obloženi u koncentraciji od 2 µg/mL u PBS na mikrotitarskoj ploči sa 96-bunarića preko noći na 4°C. Nespecifična mesta vezivanja su naknadno blokirana korišćenjem 0.5% (mas/v) rastvora BSA u PBS. U prvom kompetitivnom formatu, konstantna koncentracija 1.5nM dimernog humanog PD-1 proteina, koji se sastoji iz humanog PD-1 vanćelijskog domena eksprimiranog sa C-terminalnim mišjim Fc tag-om (hPD-1-mFc; SEQ ID: 323) je dodat u serijska razblaženja anti-PD-1 antitela ili izotipska kontrolna antitela tako da finalne koncentracije antitela su u opsegu od 0 do 200nM. U drugom formatu kompeticije, konstantna koncentracija 200 pM dimernog biotinilovanog humanog PD-1 proteina, sastoji se iz humanog PD-1 vanćelijskog domena koji je eksprimiran sa C-terminalnim humanim Fc tag-om (biot-hPD-1-hFc; SEQ ID: 323), je slično dodat u serijska razblaženja anti-PD-1 antitela ili izotipsku kontrolu na finalnim koncentracijama antitela u opsegu od 0 do 50nM. U trećem formatu kompeticije, konstantna koncentracija 100 pM dimernog hPD-1-mFc proteina je slično dodata u serijska razblaženja anti-PD-1 antitela ili izotipskoj kontroli na finalnim koncentracijama antitela opsega od 0 do 100nM. Ovi kompleksi antitela-proteina su nakon toga inkubirani 1 h na sobnoj temperaturi (RT). Kompleksi antitela-proteina sa 1.5 nM konstantnim hPD-1-mFc su preneti u mikrotitarske ploče obložene sa hPD-L1-hFc, kompleksi antitela-proteina sa 200 pM konstantnim biot-hPD-1-hFc su preneti u hPD-L1-mFc obložene ploče, i kompleksi antitela-proteina sa 100 pM konstantnim hPD-1-mFc su preneti u mikrotitarske ploče koje su obložene sa hPD-L2-hFc. Nakon inkubiranja od 1 h na RT, bunarići su isprani, i hPD-1-mFc koji je vezan za ploču je detektovan sa anti-mFc poliklonskim antitelom konjugovanim sa peroksidazom rena (HRP) (Jackson ImmunoResearch Inc., #115-035-164), i biot-hPD-1-hFc koji je vezan za ploče je detektovan sa streptavidin konjugovanim HRP (Thermo Scientific, #N200). Uzorci su razvijeni sa rastvorom TMB (BD Biosciences, #51-2606KC i #51-2607KC) da bi se proizvela kolorimetrijska reakcija i nakon čega je razvijanje boje stabilizovano sa dodavanjem 1M sumporne kiseline pre merenja apsorbancije na 450nm na Victor X5 čitaču ploča. Analiza podataka je izvedena korišćenjem sigmoidalnog modela doze-odgovora sa Prism™ softverom (GraphPad). Izračunata vrednost IC50, definisana je kao koncentracija antitela koja je potrebna da bi se smanjilo za 50% humanog PD-1 vezivanja za humani PD-L1 ili PD-L2, korišćena je kao indikator jačine blokiranja. Procenat maksimalne blokade je izračunat kao mera spobnosti antitela da u potpunosti blokiraju vezivanje za humani PD-1 ili za humani PD-L1 ili PD-L2 na ploči kao što je određeno sa krive. Ovaj procenat maksimalne blokade je izračunat oduzimanjem od 100% odnosa smanjenja u uočenom signalu u prisustvu najveće ispitivane koncentracije za svako antitelo u odnosu na razliku između uočenog signala za uzorak humanog PD-1 koji ne sadrži anti-PD-1 antitelo (0% blokiranja) i pozadinskog signala sa HRP-konjugovanog sekundarnog antitela zasebno (100% blokiranja).
[0204] Procenat maksimalne blokade i izračunatih vrednosti IC50signala vezivanja za antitela koja blokiraju više od 35% hPD-1 prikazane su u Tabelama 2 - 14. Antitela koja su prikazala smanjenje u signalu vezivanja
4
PD-1 o 35% mane su e nsana ao ne- o ator. Anttea oa su po azaa pove ane o 35% v e u signalu vezivanja humanog PD-1 su karakterisana kao ne-blokatori/pojačivači. Teorijsko dno testa, definisano kao minimalna koncentracija antitela koja je teorijski neophodna da se zauzme 50% mesta vezivanja humanog PD-1 u testu, je 0.75nM za format korišćenjem 1.5nM konstantnog hPD-1-mFc, 100pM za format korišćenjem 200pM konstantnog biot-hPD-1-hFc, i 50pM za format korišćenjem 100pM konstantnog hPD-1-mFc, ukazuje na to da niže izračunate vrednosti IC50mogu da ne predstavljaju kvantitativno mesto vezivanja protein-antitelo. Iz tog razloga, antitela sa izračunatim vrednostima IC50koje su manje od 0.75nM u testu sa hPD-1-mFc konstantnim i hPD-L1 obloženim, manje od 100pM u testu sa biot-hPD-1-hFc konstantnim i hPD-L1 obloženim, i manjim od 50pM u testu sa hPD-1-mFc konstantnim i hPD-L2 obloženim su prijavljeni u Tabelama 12 - 14 kao <7.5E- 10M, <1.0E-10M i <5.0E-11M, redom.
Tabela 12: ELISA blokiranje vezivanja humanog PD-1 sa humanim PD-L1 sa anti-PD-1 antitelima
(nastavak)
4
Tabela 13: ELISA blokiranje biotinilovanog humanog PD-1 vezivanja za humani PD-L1 sa anti-PD-1 antitelima
Tabela 14: ELISA blokiranje humanog PD-1 vezivanja sa humanim PD-L2 sa anti-PD-1 antitelima
[0205] Kao što je naznačeno u Tabeli 12, u prvom formatu testa, 23 od 27 anti-PD-1 antitela blokirala su 1.5nM hPD-1-mFc od vezivanja za hPD-L1-hFc sa IC50vrednostima u opsegu od 190pM do 3.3nM sa maksimalnim procentom blokade u opsegu od 67% do 100%. Jedno antitelo, H2aM7796N, identifikovano je kao ne-blokirajuće. Tri anti-PD-1 antitela (H4H9068P2, H1M7789N, i H2aM7791N) su identifikovana kao ne-blokatori/ pojačivači.
[0206] Kao što je prikazano u Tabeli 13, u drugom formatu testa, 23 od 27 anti-PD-1 antitela blokiralo je 200pM biot-hPD-1-hFc od vezivanja za hPD-L1-mFc sa vrednostima IC50u opsegu od 59pM do 1.3nM sa maksimalnim procentom blokade u opsegu od 60% do 101%. Jedno antitelo, H1M7789N, identifikovano je kao ne-blokatorsko. Tri anti-PD-1 antitela (H4H9057P2, H4H9068P2, i H2aM7791N) su identifikovana kao ne-blokatori/ pojačivači.
[0207] U trećem testu formata kao što je prikazano u Tabeli 14, ispitana su četiri anti-PD-1 antitela iz pronalaska, i izotipska kontrola. Sva 4 anti-PD-1 antitela iz pronalaska su blokirala 100pM (fiksna koncentracija) hPD-1-mFc od vezivanja za hPD-L2-hFc koji je obložen na ploči sa vrednostima IC50u opsegu od 0.13nM do 1.3nM i sa maksimalnim procentom blokade u opsegu od 94% do 100%.
Primer 5: Blokiranje PD-1 vezivanja za PD-L1 kao što je određenio biosenzorskim testom i korišćenjem površinske plazmon rezonancije
[0208] Inhibicija humanog PD-1 od vezivanja za humani PD-L1 sa različitim anti-PD-1 monoklonskim antitelom je proučavana korišćenjem ili inferometrijskog ispitivanja bio sloja u realnom vremenu na Octet Red96 biosenzorskom instrumentu (Fortebio Inc.) ili korišćenjem biosenzorskog testa površinske plazmonske rezonancije u realnom vremenu na Biacore 3000 instrumentu.
[0209] Ispitivanja inhibicije za anti-PD-1 monoklonska antitela koja su eksprimirana sa mišjim Fc su izvedena na Octet Red 96 instrumentu. Prvo, 100nM rekombinantnog humanog PD-1 koji je eksprimiran
1
sa C-termnanm m m IgG2a Fc tag-om PD- 1-mFc; SEQ ID NO: 323 e n u rano sa 500nM sva og o anti-PD-1 monoklonskog antitela tokom bar 1 h pre pokretanja inhibicionog testa. Oko 0.8nm do 1.2nm rekombinantnog humanog PD-L1 koji je eksprimiran sa C-terminalnim humanim IgG1 Fc tag-om (hPD-L1-hFc; SEQ ID NO: 325) je uhvaćen korišćenjem anti-humanog IgG Fc za hvatanje Octet biosenzora. Octet biosenzori koji su obloženi sa hPD-L1-hFc su zatim uronjeni u bunariće koji sadrže mešavinu hPD-1-mFc i različitih anti-PD-1 monoklonskih antitela. Ceo eksperiment je izveden na 25°C u Octet HBST puferu (0.01 M HEPES pH7.4, 0.15M NaCl, 3 mM EDTA, 0.05% v/v Surfaktant P20, 0.1mg/mL BSA) sa mešanjem ploče na brzini od 1000oum. Biosenzori su isprani u Octet HBST puferu između svakog koraka eksperimenta. Odgovori vezivanja u realnom vremenu su praćeni tokom čitavog toka trajanja eksperimenta i odgovor vezivanja na kraju svakog koraka je zabeležen. Vezivanje hPD-1-mFc za uhvaćeni hPD-L1-hFc je upoređeno u prisustvu i odsustvu različitih anti-PD-1 monoklonskih antitela i korišćeno je da bi se odredilo ponašanje blokiranja ispitivanih antitela kao što je prikazano u Tabeli 15.
Tabela 15: Inhibicija humanog PD-L1 vezivanja za PD-1 sa anti-PD-1 monoklonskim antitelima koja su eksprimiranja sa mišjim Fc kao što je mereno na Octet Red 96 instrumentu
(nastavak)
[0210] Kao što je prikazano u tabeli 15, 9 od 11 anti-PD-1 antitela koja su ispitana na Octet Red 96 instrumentu pokazala su snažno blokiranje hPD-1-mFc od vezivanja za hPD-L1-hFc u opsegu od 86% do potpune blokade vezivanja. Jedno anti-PD-1 antitelo (H1M7789N) koje je ispitano pokazalo je slabije blokiranje hPD-1-mFc vezivanja za hPD-L1-hFc sa 29% blokadom. Jedno antitelo (H2aM7791N) koje je ispitano pokazalo je sposobnost pojačanja vezivanja hPD-1-mFc sa hPD-L1-hFc.
[0211] Sledeće, studije inhibicije za anti-PD-1 monoklonska antitela koja su eksprimirana sa humanim Fc su sprovedene na Biacore 3000 instrumentu. Prvo, 100nM rekombinantnog humanog PD-1 koji je eksprimiran sa C-terminalnim humanim IgG1 Fc tag-om (hPD-1-hFc; SEQ ID: 324) inkubiran je sa 500nM svakog anti-PD-1 monoklonskog antitela za bar 2 h pre pokretanja inhibicionog testa. Površina CM5
2
Bacore senzora e prvo ervatzovana sa po ons m ze m ant-m m antteom GE Cataog# BR-1008-38) upotrebom standardne EDC-NHS hemije. Oko 730 RUs rekombinantnog humanog PD- L1 koji je eksprimiran sa C-terminalnim mišjim IgG2a Fc tag-om (hPD-L1.mFc; SEQ ID: 326) je nakon toga uhvaćen praćeno ubrizgavanjem 100nM od hPD-1.hFc u prisustvu ili odsustvu različitih anti-PD-1 monoklonskih antitela na brzini protoka od 25^L/min tokom 3 minuta. Čitavi eksperiment je sproveden na 25°C u puferu za nalivanje koji se sastoji iz 0.01 M HEPES pH7.4, 0.15M NaCl, 3mM EDTA, 0.05% v/v Surfaktant Tween-20 (HBS-ET pufer za nalivanje).Odgovori vezivanja u realnom vremenu su praćeni tokom čitavog trajanja eksperimenta i odgovor vezivanja na kraju svakog koraka je zabeležen. Vezivanje hPD-1-hFc sa uvaćenim hPD-L1-mFc je upoređen u prisustvu i odsutvu različitih anti-PD-1 monoklonskih antitela i korišen je da bi se odredilo ponašanje blokiranja ispitivanih antitela kao što je prikazano u Tabeli 16.
Tabela 16: Inhibicija humanog PD-L1 vezivanja sa PD-1 sa anti-PD-1 monoklonskim antitelima eksprimiranim sa humanim Fc kao što je mereno sa Biacore 3000 instrumentom
(nastavak)
[0212] Kao to e pr azano u Ta e 16, 18 o 20 ant-PD-1 anttea z pronaas a oa su sptana na Bacore 3000 instrumentu pokazala su snažno blokiranja hPD-1-hFc od vezivanja hPD-L1-mFc sa blokiranjem u opsegu od 96% do 100%. Jedno antitelo je ispoljilo sposobnost da pojača vezivanje hPD-1-hFc sa hPD-L1-mFc. U ovoj studiji, jedno od ispitivanih antitela iz pronalaska (H4H9057P2) ispoljilo je ne-specifično pozadinsko vezivanje sa anti-mišjem Fc površinom za hvatanje.
Primer 6: Octet unakrsna kompeticija između anti-PD-1 antitela
[0213] Kompeticija vezivanja između anti-PD-1 monoklonskih antitela je određena korišćenjem inferometrijskog testa bio sloja, bez obeleživača u realnom vremenu na Octet RED384 biosenzoru (Pall ForteBio Corp.). Ceo eksperiment je sproveden na 25°C u 0.01 M HEPES pH7.4, 0.15M NaCl, 3 mM EDTA, 0.05% v/v Surfaktant Tween-20, 0.1 mg/mL BSA (Octet HBS-ET pufer) sa mešanjem ploče na brzini od 1000oum. Da bi se ispitalo da li su 2 antitela sposobna za kompeticiju jedan sa drugim za vezivanje sa njihovim odgovarajućim epitopima na rekombinantno eksprimiranom humanom PD-1 sa C-terminalnim myc-myc-heksahistidinskim tag-om (hPD-1-MMH; SEQ ID: 321), oko 0.1nM hPD-1-MMH je prvo uhvaćeno na anti-Penta-His antitelo koje je obloženo sa Octet biosenzorskim „tips“ (Pall ForteBio Corp., # 18-5079) uranjanjem „tips“ 5 minuta u bunariće koji sadrže 50µg/mL rastvora hPD-1-MMH. Biosenzorski „tips“ uhvaćeno od strane antitela su zatim zasićeni sa prvim anti-PD-1 monoklonskim antitelom (naknadno naznačenim kao mAb-1) uranjanjem u bunariće koji sadrže 50µg/mL rastvora mAb-1 tokom 5 minuta. Biosenzorski „tips“ su zatim naknadno uronjeni u bunariće koji sadrže 50µg/mL rastvora drugog anti-PD-1 monoklonskog antitela (koje je naknadno naznačeno sa mAb-2). Biosenzorski „tips“ su isprani u Octet HBS-ET puferu između svakog koraka u eksperimentu. Odgovor vezivanja u realnom vremenu je praćen tokom tajanja eksperimentna i odgovor vezivanja na kraju svakog koraka je zabeležen. Odgovor vezivanja mAb-2 sa hPD-1-MMH prethodno u kompleksu sa mAb-1 je upoređen i određivano je kompetitivno/nekompetitivno ponašanje različitih anti-PD-1 monoklonskih antitela. Rezultati su sažeto predstavljeni u Tabeli 17 (*mAb2s u samo-kompeticiji nisu navedena).
Tabela 17: Unakrsna kompeticija između parova odabranih anti-PD-1 antitela
(nastavak)
4
nastava
[0214] Druga ompetc a vezvana zme u panea o a ran ant-PD-1 mono ons anttea o re ena je korišćenjem interferometrijskog testa bio sloja bez obeleživača na Octet HTX biosenzoru (Pall ForteBio Corp.). Čitavi eksperiment je izveden na 25°C u 0.01 M HEPES pH7.4, 0.15M NaCl, 3 mM EDTA, 0.05% v/v Surfaktant Tween-20, 0.1 mg/mL BSA (Octet HBS-ET pufer) sa mešanjem ploče na brzini od 1000oum. Da bi se ispitalo da li su 2 antitela sposobna da budu u kompeticiji jedna sa drugim za vezivanje sa njihovim odgovarajućim epitopima na hPD-1-MMH, oko 0.25nm hPD-1-MMH je prvo uhvaćeno na anti-Penta-His antitelom obloženim Octet biosenzorskim „tips“ (Fortebio Inc, # 18-5079) uranjanjem „tips“ tokom 150 sekundi u bunariće koji sadrže 10µg/mL rastvora hPD-1-MMH. Biosenzorski „tips“ za hvatanje antigena su nakon toga zasićeno sa prvim anti-PD-1 monoklonskim antitelom (koji je naknadno naznačen sa mAb-1) uranjanjem u bunariće koji sadrže 100µg/mL rastvora mAb-1 tokom 5 minuta. Biosenzorski „tips“ su naknadno uronjeni u bunariće koji se sastoje iz 100µg/mL rastvora drugog anti-PD-1 monoklonskog antitela (koji je naknadno naznačen sa mAb-2) tokom 4 minuta. Svi biosenzori su isprani u Octet HBS-ET puferu između svakog koraka eksperimenta. Odgovor vezivanja u realnom vremenu je praćen tokom trajanja eksperimenta i odgovor vezivanja na kraju svakog koraka je zabeležen kao što je prikazano na Slici 2. Odgovor vezivanja mAb-2 sa hPD-1-MMH u prethodnom kompleksu sa mAb-1 je upoređen i određivano je kompetitivno/ne-kompetitivno ponašanje različitih anti-PD-1 monoklonskih antitela. Rezultati su prikazani u Tabeli 18 (*mAb2s u samo-kompeticiji nisu navedena).
Tabela 18: Unakrsna kompeticija između parova odabranih anti-PD-1 antitela
[0215] Pod eksperimentalnim uslovima koji su prikazani u ovom Primeru, H4H7795N2 je u unakrsnoj kompeticiji sa H4H7798N; H4H7798N je u unakrsnoj kompeticiji sa H4H7795N2 i H4H9008P; H4H9008P je u unakrsnoj kompeticiji sa H4H7798N i H4H9068P2; H4H9068P2 je u unakrsnoj kompeticiji sa H4H9008P i H4H9048P2.
Primer 7: Vezivanje antitela za ćelije koje prekomerno eksprimiraju PD-1
[0216] Vezivanje anti-PD-1 antitela za ćelijsku liniju bubrega humanog embriona (HEK293; ATCC, #CRL-1573) koja je stabilno transfektovana sa humanim PD-1 pune dužine (aminokiseline 1 do 289 pristupnog broja NP_005009.2) (HEK293/hPD-1) je određeno korišćenjem FACS.
[0217] Za test, adherentne ćelije su odlepljene korišćenjem tripsina ili pufera za disocijaciju oslobođenog od enzima i blokiranog sa kompletnim medijumom. Ćelije su centrifugirane i resuspendovane u koncentraciji od 2.5-6x10<^>6 ćelija/mL u hladnom PBS koji sadrži 2% FBS. HEK293 parentalne i HEK293/hPD-1 ćelije su nakon toga inkubirane u trajanju od 15-30min na ledu sa 100nM od svakog anti-PD-1 antitela. Nevezana antitela su uklonjena ispiranjem sa D-PBS koji sadrži 2% FBS, i ćelije su nakon toga inkubirane sa alofikocijanin-konjugovanim F(ab')2 koji prepoznaje ili humani Fc (Jackson ImmunoResearch, # 109-136-170) ili mišji Fc (Jackson ImmunoResearch, #115-136-146) tokom 15-30 minuta na ledu. Ćelije su isprane sa D-PBS koji sadrži 2% FBS da bi se uklonio nevezani sekundarni F(ab')2 i merenja fluorescencije su dobijena korišćenjem ili HyperCyte (IntelliCyt, Inc.) protočnog citometra ili Accuri protočnog citometra (BD Biosciences). Podaci su analizirani korišćenjem FlowJo softvera (Tree Star).
Tabela 19: FACS vezvane ant-PD-1 anttea sa HEK293 PD-1 e ama parentanm HEK293 e ama
(nastavak)
[0218] Kao što je prikazano u Tabeli 19, 25 od 27 anti-PD-1 antitela iz pronalaska pokazalo je snažno vezivanje sa HEK293/ hPD-1 ćelijama u poređenju sa vezivanjem na parentalnoj HEK293 liniji. Dva antitela iz pronalaska (H2aM7795N i H4H9068P2) slabije vezuju ćelije koje eksprimiraju humani PD-1 u poređenju sa svim drugim ispitanim antitelima.
[0219] Da bi se dalje karakterisala anti-PD1 antitela iz pronalaska, vezivanje koje zavisi od doze za ćelijsku liniju bubrega humanog embriona (HEK293; ATCC, #CRL-1573) stabilno je transfektovana sa humanim PD1 pune u ne amno se ne 1 o 289 prstupnog roa NP_005009.2 HEK293 PD-1 e o re eno korišćenjem FACS.
[0220] Za test, adherentne ćelije su odvojene korišćenjem tripsina i blokirane su kompletnim medijumom. Ćelije su centrifugirane i resuspendovane na koncentraciji od 6x10<^>6 ćelija/mL u puferu za bojenje (1% FBS u PBS). Da bi se odredio EC50i Emaxanti-PD1 antitela, 90uL ćelijske suspenzije je inkubirano tokom 30 minuta na ledu sa serijski razblaženim anti-PD-1 antitelima i kontrole su razblažene do finalne koncentracije u opsegu od 5 pM do 100 nM (kao negativna kontrola je uključen uzorak bez mAb) u puferu za bojenje. Ćelije su nakon toga centrifugirane i peleti su isprani jednom sa puferom za bojenje da bi se uklonila nevezana antitela. Ćelije su zatim nakon toga inkubirane 30 minuta na ledu ili sa alofikocijanin-konjugovanim sekundarnim F(ab')2 koji prepoznaje humani Fc (Jackson ImmunoResearch, # 109-136-170) ili mišjim Fc (Jackson I mmunoResearch, #115-136-071). Ćelije su centrifugirane i peleti su isprane jednom sa puferom za bojenje da bi se uklonilo nevezani sekundarni F(ab')2 i zatim su fiksirane preko noći sa 1:1 razblaženjem Cytofix (BD Biosciences, # 554655) i puferom za bojenje. Sledećeg dana, ćelije su centrifugirane i peleti su isprane jednom sa puferom za bojenje, resuspendovane i proceđene. Merenja fluorescencije su izvedena na Hypercyt® citometru i analizirana u Fore-Cyt™ (IntelliCyt; Albuquerque, NM) da bi se odredile srednje vrednosti intenziteta fluorescencije (MFI). EC50vrednosti su izračunate sa logističke jednačine sa četiri parametra prekom 11-tačaka krive odgovora korišćenjem GraphPad Prism. Emaxza svako antitelo je definisano kao vezivanje na najvećoj ispitivanoj dozi antitela (100nM).
Tabela 20: Dozno zavisno vezivanje FACS anti-PD-1 antitela sa HEK293/hPD-1 ćelijama
(nastavak)
Tabela 21: Dozno zavisno FACS vezivanje anti-PD-1 antitela sa HEK293/hPD-1 ćelijama
(nastavak)
[0221] Kao što je prikazano u Tabeli 20, 25 od 28 anti-PD1 antitela iz pronalaska pokazalo je dozno zavisno vezivanje za HEK293/hPD-1 ćelije sa vrednostima EC50u opsegu od 33.18pM do 2.59nM i vrednostima Emaxu opsegu od 37,789 do 11,368 MFI. Tri anti-PD1 antitela iz pronalaska nisu pokazali snažno vezivanje sa HEK293/hPD-1 ćelijama i prema tome EC50vrednost nije mogla biti određena. Nijedna od izotipskih kontrola nije pokazala bilo koje merljivo vezivanje u ovom testu.
[0222] Kao što je prikazano u 21, 3 od 6 anti-PD1 titela iz pronalaska pokazalo je dozno zavisno vezivanje za HEK293/hPD-1 ćelije sa sa vrednostima EC50u opegu od 509pM do 4.81nM i vrednsotima Emaxu opsegu od 39,774 do 14,111 MFI. Tri ispitana antitela iz pronalaska vezuju HEK293/hPD-1 ćelije, ali ne dostižu plato. Prema tome njihove precizne EC50vrednosti nisu mogle biti određene i njihove vrednosti EC50su ta o e nazna ene tme a se ne mogu ustanovt. N e na o zotps ontroa n e po azaa o oe merljivo vezivanje u ovom testu
Primer 8: Blokiranje PD-1-indukovane smanjene regulacije T-ćelija kod T-ćelija/APC luciferaznog reporterskog testa
[0223] Aktivacija T-ćelija je postignuta stimulisanjem T-ćelijskih receptora (TcR) koji prepoznaju specifične peptide koji su prezentovani klasom I ili II proteina glavnog kompleksa tkivne podudarnosti na antigen prezentujućim ćelijama (APC). Aktivirani TcRs zauzvrat iniciraju kaskadu signalnih događaja koja se može pratiti pomoću reporterskih gena vođena sa transkripcionim faktorima kao što su aktivator-protein 1 (AP-1), Nuklearni faktor aktivisanih T-ćelija (NFAT) ili Nuklearni faktor kapa-laki-lanac-pojačivač aktivisanih B ćelija (NFKb). T-ćelijski odgovor je modulisan preko angažovanja ko-receptora koji su eksprimirani ili konstituitivno ili inducibilno na T-ćelijama. Jedan takav receptor je PD-1, koji je negativni regulator aktivnosti T-ćelija. PD-1 interaguje sa svojim ligandom, PD-L1, koji je eksprimiran na ciljanim ćelijama uključujući APC-e ili ćelije kancera, i deluje na način da isporuči inhibitorne signale preko regrutovanja fosfataza na TcR signalozomu, dovodeći do supresije pozitivne signalizacije.
[0224] Sposobnost anti-PD-1 antitela da antagonizuju PD-1/PD-L1-posredovanu signalizaciju preko PD-1 receptora u humanim T ćelijskim linijama je procenjena korišćenjem vitro ćelijski zasnovanog testa kao što je prikazano na Slici 1. Biotest je razvijen da se izmeri T ćelijska signalizacija indukovana sa interakcijom između APC i T ćelija korišćenjem pomešane kulture izvedene iz dve sisarske ćelijske linije: Jurkatove ćelije (imortalizovana T ćelijska linija) i Raji ćelije (B ćelijska linija). Za prvu komponentu biotesta, Jurkatove ćelije klona E6-1 (ATCC, #TIB-152) su transdukovane sa Cignal Lenti AP-1 Luc Reporterom (Qiagen -Sabiosciences, #CLS-011L) u skladu sa uputstvima proizvođača. Lentivirus kodira gen koji kodira luciferazu kod svica pod kontrolom minimalnog CMV promotera, tandemski ponovci TPA-inducibilnog elementa transkiripcionog odgovora (TRE) i gena za rezistenciju na puromicin. Dizajnirana Jurkat ćelijska linija nakon toga transdukovana sa PD-1 himerom koja sadrži vanćelijski domen humanog PD-1 (aminokiseline od 1 do 170 humanog PD1; pristupni broj NP_005009.2) i trans-membranski i citoplazmatski domeni humanog CD300a (aminokiseline od 181 do 299 humanog CD300a; pristupni broj NP_009192.2). Dobijena stabilna ćelijska linija (Jurkat/AP1-Luc/ hPD1-hCD300a) je izabrana i održavana u RPMI/10% FBS/ penicilin/streptomicin/glutamin dopunjenom sa 500ug/mL G418+1ug/mL puromicina.
[0225] Za drugu komponentu biotesta, Raji ćelije (ATCC, #CCL-86) su transdukovane sa genom koji kodira humani PD-L1 (aminokiseline 1-290 pristupnog broja NP_054862.1) koje su bile klonirane u lentivirusni (pLEX) vektorski sistem (Thermo Scientific Biosystems, #OHS4735). Raji ćelije, koje su pozitivne za PD-L1 (Raji/ hPD-L1) izolovane su sa FACS korišćenjem PD-L1 antitela i održavane su u Iscove/10% FBS/penicilin/streptomicin/glutaminu koji je dopunjen sa 1ug/mL puromicinom.
[0226] Da bi se stimulisala interakcija APC/T ćelija, korišćeno je bispecifično antitelo koje se sastoji iz jednog Fab kraka koji se vezuje za CD3 na T ćelijama i drugi Fab krak za vezivanje koji veže CD20 na Raji ćelijama (CD3xCD20 bispecifično antitelo; npr., kao što je prikazano u US20140088295). Prisustvo bispecifičnog molekula u testu rezultuje u aktivaciji na T ćelijama i APC premošćavanjem CD3 podjedinica na T-ćelijama sa CD20 endogeno eksprimiranih na Raji ćelijama. Pokazano je da spajanje CD3 sa anti-CD3 antitelima dovodi do aktivacije T ćelija. U ovom biotestu, antitela koja blokiraju PD1/PD-L1 interkciju obnavljaju T-ćelijsku aktivnost onesposobljavanjem inhibitorne signalizacije i nakon toga dovodeci do aktivacije AP1-Luc.
[0227] U biotestu koji je zasnovan na luciferazi, RPMI1640 dopunjen sa 10% FBS i penicilin/streptomicin/glutamin je korišćen kao medijum testa da bi se pripremile suspenzije ćelija i razblaženja antitela kako bi se izveo skrining anti-PD1 monoklonskih antitela (mAbs). U danu kada se skrining sprovodi, EC50vrednosti anti-PD1 mAbs, u prisustvu fiksne koncentracije CD3xCD20 bispecifičnog antitela (30 pM), kao i EC50zasebnog bispecifičnog antitea, su određene. Sledećim redom, ćelije i reagensi su dodavani na bele ploče sa ravnim dnom sa 96 bunarića. Za određivanja EC50anti-PD1 mAb, prva fiksna
1
oncentrac a CD3xCD20 spec nog anttea nana 30 pM e prprem ena o ata e u unar e na mikrotitarskoj ploči. Nakon toga su dodate 12-tačaka serijska razblaženja anti-PD1 mAbs i kontrole (finalne koncentracije u opsegu od 1.7 pM do 100 nM; plus bunarići koji sadrže samo medijum testa). Za bispecifično antitelo (zasebno) određivanje EC50, bispecifično antitelo, u finalnim koncentracijama u opsegu od 0.17 pM do 10 nM (plus bunarići koji sadrže samo medijum testa), dodati su u bunariće na mikrotitarskim pločama. Nakon toga, 2.5x10<^>6/mL suspenzije Raji/hPD-L1 ćelija je pripremljena i 20 uL po bunariću je dodato (finalni broj ćelija/bunariću 5x10^4 ćelija). Ploče su ostavljene na sobnoj temperaturi (15-20 minuta), dok je pripremljena suspenzija 2.5x10^6/mL Jurkat/AP1-Luc/hPD1(ecto)-hCD300a(TM-Cyto).20 uL Jurkat suspenzije (finalni ćelijski broj/bunariću 5x10^4 ćelija) dodat je po bunariću. Ploče sa zajedničkom kulturom su inkubirane tokom 5 do 6 h na 37°C/5% CO2. Uzorci su ispitani u duplikatima i aktivnost luciferaze je zatim detektovana nakon dodavanja ONE-Glo™ (Promega, # E6051) reagensa i relativne svetlosne jedinice (RLUs) su merene na Victor luminometru.
[0228] RLU vrednosti za svaki skrining antitela su normalizovane podešavanjem uslova testa sa fiksnom (30 pM) koncentracijom CD3/CD20 bispecifičnog antitela, ali bez anti-PD-1 antitela do 100%. Ovo tanje odgovara maksimalnom AP1-Luc odgovoru koji je pokrenut sa bispecifičnim molekulom u prisustvu PD-1/PD-L1 inhibitornog signala. Nakon dodavanja anti-PD-1 antitela, inhibitorni signal je suprimiran, i povećana stimulacija je ovde prikazana kao Emax, procenat povećanja u signalu u prisustvu najveće ispitane doze antitela (100 nM). Da bi se uporedila jačina ispitanih anti-PD1 antitela, koncentracija antitela na kojoj je normalizovana vrednost RLU dostigla 150% aktivacije je određena sa logističke jednačine sa četiri parametra preko 12-tačaka krive odgovora korišćenjem GraphPad Prism. Rezultati su predstavljeni u Tabeli 22 i Tabeli 23, redom.
Tabela 22: Anti-PD1 antitelo koje blokira PD-1/PD-L1 zavisnu inhibiciju AP1-Luc signalizacije u Eksperimentu 1
2
(nastavak)
Tabela 23: Anti-PD1 antitelo koje blokira PD-1/PD-L1 zavisnu inhibiciju AP1-Luc signalizacije u Eksperimentu 2
[0229] Kao to e pr azano u Ta e 22, 25 o 31 ant-PD-1 anttea z pronaas a oa su sptana o raa su PD-1/PD-L1 inhibiciju sa Emaxvrednostima u opsegu od 239 do 163. Šest od 31 anti-PD-1 antitela iz pronalaska nisu ispoljili suštinsko blokiranje interakcije PD1/PD-L1 kada je ispitano u ovom testu.
[0230] Kao što je prikazano u Tabeli 23, 2 od 4 anti-PD-1 antitela iz pronalaska koja su ispitana blokirala PD-1/PD-L1 inhibiciju sa Emaxvrednostima od 150 i 343%, redom.2 od 4 anti-PD-1 antitela iz pronalaska nisu ispoljila suštinsku blokadu PD1/PD-L1 interakcije kada su ispitivana u ovom testu.
Primer 9: In vivo efikasnost anti-PD-1 antitela
[0231] Da bi se odredio efekat odabranog broja anti-PD-1 antitela iz pronalaska u relevantnom in vivo modelu, sprovedene su tri studije MC38.ova tumorskog rasta, uključujući subkutanozno ubrizgavanje tumorskih ćelija počevši od različitih dana, kod miševa koji su homozigoti za eksprimiranje vanćelijskog domena humanog PD-1 umesto vanćelijskog domena mišjeg PD-1 (PD-1 Humln miševi) na 75% C57/BI6 / 25% 129 pozadinskim sojevima.
[0232] Za ispitivanja, miševi su jednako podeljeni u skladu sa telesnom težinom u 5 grupa tretmana ili kontrolnih grupa za Ispitivanje 1 (5 miševa po grupi), 8 grupa tretmana ili kontrolnih grupa za Ispitivanje 2 (5 miševa po grupi), i 5 grupa tretmana ili kontrolnih grupa za Ispitivanje 3 (7 miševa po grupi). U danu 0, miševi su anestezirani preko inhalacije izoflurana i zatim su subkutanozno ubrizgani u desni bok sa 5x10<5>MC38.ova ćelija u suspenziji 100uL DMEM za Ispitivanje 1 ili 1x10<6>MC38.ova ćelija u suspenziji 100 uL DMEM za Ispitivanje 2 i Ispitivanje 3. Za Ispitivanje 1, grupe tretmana su intraperitonealno primile injekciju sa 200ug bilo kojeg od tri anti-PD-1 antitela iz pronalaska, ili antitela izotipske kontrole sa irelevantnom specifičnosti u danima 3, 7, 10, 14, i 17 iz eksperimenta, dok je jedna grupa miševa ostavljena netretiranom. Za Ispitivanje 2, grupe koje su primile tretman su primile intraperitonealnu injekciju sa bilo kojim od tri anti-PD-1 antitela iz pronalaska na 10mg/kg ili 5mg/kg po/dozi, jedno antitelo iz pronalaska (H4H7795N2) na 10mg/kg po dozi, ili antitelo izotipske kontrole sa irelevantnom specifičnosti na 10mg/kg u danima 3, 7, 10, 14, i 17 eksperimenta. Za Ispitivanje 3, grupe koje su primile tretman su primile intraperitonealnu injekciju sa bilo kojim od dva anti-PD-1 antitela iz pronalaska na 5mg/kg ili 2.5mg/kg po/dozi, ili antitelo izotipske kontrole sa irelevantnom specifičnosti na 5mg/kg u danima 3, 7, 10, 14, i 17 eksperimenta. Eksperimentalno doziranje i protokol tretmana za grupe miševa prikazane su u Tabeli 24.
4
Tabela 24: Eksperimentalno doziranje i protokol tretmana za grupe miševa
[0233] Za ispitivanja, određivane su srednje vrednosti zapremine tumora su određene merenjima korišćenjem kalipera i procenta preživljavanja u Danu 14 ili 17 i Danu 23 ili 24 iz svakog eksperimenta za svaku grupu koja prima tretman. Dodatno, broj miševa koji su bez tumora su takođe ispitani na kraju ispitivanja (Dan 42 za Ispitivanje 1 i Dan 31 za Ispitivanje 2 i Ispitivanje 3). Rezultati, koji su eksprimirani kao srednja vrednost zapremine tumora (mm<3>)(±SD), procenat preživljavanja, i broj miševa koji su bez tumora su prikazani u Tabeli 23 za Ispitivanje 1, Tabeli 3 za Ispitivanje 2, i Tabeli 4 za Ispitivanje 3.
Tabela 25: Srednja vrednost zapremine tumora, procenat preživljavanja i brojevi miševa bez tumora u svakoj grupi koja je primila tretman iz in vivo Ispitivanja 1 tumora
[0234] Kao to e pr azano u Ta e 25 za Isptvane 1, m ev o su tretran sa e nm antteom z pronalaska, H4H7798N nisu razvili bilo koje detektabilne tumore tokom trajanja ispitivanja. Miševi koji su tretirani sa H4H9008P ispoljili su trajno smanjenu zapreminu tumora u poređenju sa kontrolama u danima 17 i 24 ispitivanja sa 3 od 5 miševa ili 4 od 5 miševa koji su oslobođeni od tumora na kraju eksperimenta, redom. Suprotno time, tretman sa jednim od anti-PD1 antitela, H4H7795N2, nije pokazao značajnu efikasnost u smanjenju tumorske zapremine u ovom ispitivanju u poređenju sa kontrolama. U danu 23 ispitivanja, 1 od 5 miševa je uginuo u H4H7795N2 grupi, i 2 od 5 miševa je uginulo u grupi koja je primila tretman izotipske kontrole. U grupi koja nije primila tretman i grupi sa izotipskoj kontroli neki miševi su ispoljili spontane regresije tumora (1 od 5 miševa i 2 od 5 miševa, redom).
)
vivo
%
in
iz
an
tm
tre
il<a>A m N pri
je
oja
k % pi
gru
kojsva A
N
u
ora
m % z tu
be
aišev
A
mora
N
jevi
m
ro tu
2
ib
janja
aniva
javpit
Is
živl preat A
N
cen
,pro
ora
tum
ne
i
em
apr
A
st z N no
vred
ja
edn
:Sr
26 Nela
Tab H
H
[0235] Kao što je prikazano u Tabeli 26 za Ispitivanje 2, miševi koji su tretirani sa jednim antitelom iz pronalaska, H4H7798N na 10mg/kg nisu razvili detektabilne tumore tokom trajanja ovog ispitivanja. Grupe miševa koji su tretirani sa 10 mg/kg ili H4H9008P ili H4H9048P2 ispoljili su suštinski smanjenu zapreminu tumora u poređenju sa kontrolama u danima 17 i 24 ispitivanja. Četiri od 5 miševa u svakoj grupi koja je tretirana sa 10mg/kg ili H4H9008P ili H4H9048P2 bili su bez tumora u Danu 31, gde u grupi koja je primila tretman izotipske kontrole samo 1 od 5 životinja bila je bez tumora kao rezultat spontane regresije tumora. Jedno antitelo koje je ispitano na 10mg/kg, H4H7795N2, pokazalo je suštinski smanjenu zapreminu tumora u poređenju sa kontrolama u danima 17 i 24 ispitivanja, ali ovo antitelo je bilo najmanje efikasno anti-PD1 antitelo sa samo 2 od 5 mišava koji su preživeli na kraju eksprerimenta.
[0236] Odgovor koji zavisi od doze u supresiji tumora na ispitivanim dozama (5 mg/kg i 10 mg/kg) je uočen u grupama koje su tretirane sa H4H7798N, H4H9008P, i H4H9048P2. H4H7798N ili H4H9008P terapija na 5 mg/kg bila je najmanje efikasna, sa 4 od 5 miševa bez tumora na kraju eksperimenta u danu 21, pri čemu 5 od 5 miševa su ostali bez tumora u oba 10 mg/kg doznih grupa H4H7798N, i H4H9008P.
[0237] Dunetov test u višestrukim poređenjima 2 smerne ANOVA pokazao je da razlike u tumorskom rastu između grupa koje su tretirane sa izotipskim kontrolnim antitelom na 10 mg/kg kao referentnim i grupe koje su tretirane sa 10 mg/kg sa ili H4H7798N, H4H9008P, ili H4H9048P2 bile su statistički značajne sa p vrednosti <0.005. Razlike u tumorskom rastu između grupe koja je tretirana sa izotipskim kontrolnim antitelom u 10 mg/kg kao referentnim i grupe koje su tretirane sa 5 mg/kg sa ili H4H7798N , H4H9008P, ili H4H9048P2 bile su statistički značajne sa p vrednosti <0.05.
Tabela 27: Srednja vrednost zapremine tumora, procenat preživljavanja i brojevi miševa bez tumora u svakoj grupi koja je primila tretman iz in vivo Ispitivanja 3 tumora
[0238] Kao što je prikazano u Tabeli 27 za Ispitivanje 3, 6 od 7 miševa koji su tretirani sa jednim antitelom iz pronalaska, H4H7798N, ili drugim antitelom iz pronalaska, H4H9008P, na 5mg/kg bili su bez tumora na kraju eksperimenta, pri čemu nije bilo životinja bez tumora u izotipskoj kontrolnoj grupi. Jedan miš koji je nosio tumor u IgG4 kontrolnoj grupi uginuo je nakon implantacije u danu 17. Samo 4 od 7 miševa koji su tretirani sa H4H9008P sa 2.5mg/kg dozi ostali su bez tumora na kraju eksperimenta. Razlika u zapreminama tumora u danu 21 između ispitanih anti-PD-1 antitela i grupe koja je primila izotipsku kontrolu bila je statistički značajna kao što je određeno sa jednosmernom ANOVA sa Dunnetovim posttestom višestrukog poređenja sa p<0.01. Sva četiri anti-PD-1 antitela jednako su bila efikasnija na 5 mg/kg doze u odnosu na 2.5 mg/kg doze.
Primer 10: Anti-tumorski efekti kombinacije anti-PD-1 antitela i VEGF antagonista modelu ranog lečenja tumora kod miša
[0239] Model tumora sa ranim tretmanom je razvijen da bi se ispitala efikasnost kombinacije anti-PD-1 antitela i VEGF antagonista. U ovom modelu, kombinovana terapija je davana ubrzo nakon implantacije tumora. Eksperiment je takođe koristio zasebno anti-PD-L1 antitelo i u kombinaciji sa VEGF antagonistom. Anti-PD-1 antitelo koje je korišćeno u ovom eksperimentu bilo je anti-mišji PD-1 klon "RPMI-14" sa pacovskim IgG2b (Bio X Cell, West Lebanon, NH). VEGF antagonist koji je korišćen u ovom eksperimentu bio je aflibercept (himerni molekul koji je zasnovan na VEGF receptoru, takođe poznat pod imenom "VEGF-trap" ili "VEGFR1R2-FcAC1(a)," pri čemu je puni opis ovde na drugom mestu obezbeđen). Anti-PD-L1 antitelo koje je korišćeno u ovom eksperimentu bilo je anti-PD-L1 monoklonsko antitelo sa VH/VLsekvencama antitela "YW243.55S70" prema US20100203056A1 (Genentech, Inc.), sa mišjim IgG2a i koje je unakrsno reaktivno sa mišjim PD-L1.
[0240] Za ovaj eksperimentalni model, 1.0x10<6>Kolon-26 tumorskih ćelija je subkutanozno implantirano u BALB/c miševe u Danu 0. Počev od Dana 3, pre uspostavljavanja tumora koji se mogu izmeriti, miševi su tretirani sa jednom od mono- ili kombinovanim terapijama, ili kontrolnom kombinacijom, kao što je predstavljeno u Tabeli 28.
Tabela 28: Eksperimentalno doziranje i grupe koje primaju tretman
[0241] Različite terapije su davane u pet različitih vremenskih tačaka tokom dvonedeljnog perioda (tj., injekcije u Danu 3, Danu 6, Danu 10, Danu 13 i Danu 19).
[0242] Životinja u svakoj grupi koja je primila terapiju su procenjene u smislu učestalosti tumora, zapremine tumora, srednjeg vremena preživljavanja, i broja životinja bez tumora u Danu 50. Obim tumorskog rasta je predstavljen na Slici 2 (krive tumorskog rasta) i Slici 3 (zapremina tumora u Danu 28). Rezultati su takođe prikazani u Tabeli 29.
Tabela 29: Miševi u grupama tretmana bez tumora
[0243] Tumorski rast je u suštini smanjen kod životinja koje su tretirane sa kombinacijom VEGF Trap anti-PD-1 antitelom u poređenju sa režimima tretmana koji uključuju ili zasebno terapeutsko sredstvo (videti Slike 2 i 3). Osim toga, preživljavanje je u suštini povećano kod VEGF Trap anti-PD-1 antelo grupe, sa 70% životinja koje su preživele bar dan 50 nakon implantacije tumora. U suprotnosti sa tim, za anti-PD-1 i VEGF Trap monoterapijske grupe, preživljavanje do Dana 50 bilo je samo 40% i 30% redom (videti Sliku 3 i Tabelu 29).
Primer 11: Studija kliničkog ispitivanja ponovljenog doziranja sa anti-PD-1 antitelom kao pojedinačnom terapijom i u kombinaciji sa drugim terapijama protiv kancera kod pacijenata sa uznapredovalim malignitetima
[0244] Ovo je studija povećanja doze anti-PD-1 antitela, zasebno ili u kombinaciji sa terapijom zračenjem, ciklofosfamidom, ili oba kod pacijenata sa uznapredovalim malignitetima. Primer anti-PD-1 antitela ("mAb") koji je korišćen u ovom Primeru sadrži HCVR prema SEQ ID NO: 162 i LCVR prema SEQ ID NO: 170.
Ciljevi ispitivanja
[0245] Primarni cilj ispitivanja je karakterisati stabilnost, podnošljivost, DLTs mAb koja su davana IV kao monoterapija, ili u kombinaciji sa ciljanim zračenjem (sa namerom da ovo služi kao imuno-stimulatorno, pre u odnosu na tumor-ablativnu terapiju), niskodoznim ciklofosfamidom (terapija koja je poznata da inhibira odgovore regulatornih T-ćelija), ili oba kod pacijenata sa uznapredovalim malignitetima.
[0246] Sekundarni ciljevi ispitivanja su: (1) da se odredi preporučena doza faze 2 (RP2D) mAb kao monoterapija i u kombinaciji sa drugim terapijama protiv kancera (ciljano zračenje, niskodozni ciklofosfamid, ili oba); (2) da se opiše preliminarna antitumorska aktivnost mAb, zasebno i sa svakim partnerom (ima) kombinacije; (3) da se odredi PK mAb kao monoterapije i u kombinaciji sa drugim terapijama protiv kancera (ciljano zračenje, niskodozni ciklofosfamid, ili oba); i (4) da se proceni imunogenost mAb.
Dizajn studije
[0247] Bezbednost će biti ispitana u odvojenim, standardnim 3 3 kohortama povećanja doze (u monoterapiji, kombinaciji sa terapijom zračenjem, kombinaciji sa ciklofosfamidom, i kombinaciji sa terapijom zračenjem plus ciklofosfamidom). Izbor kombinovane terapije sa zračenjem, ciklofosfamidom, ili oba će biti zasnovan na osnovu procene ispitivača za najbolji izbor terapije za individualnog pacijenta u konsultaciji sa sponzorom. Da bi se uključio u kohortu terapije zračenjem, pacijent mora imati leziju koja se može bezbedno ozračiti i za koju je razmatrano da bi se smatralo medicinski odgovarajućim zračenje na ograničenim, palijativnim dozama, i bar jednu drugu leziju koja je pogodna za procenu odgovora. Pacijentu će biti omogućeno da se uključi samo ukoliko je slot dostupan u kohorti za izabrani tretman.
[0248] Pacijenti će proći kroz procedure skrininga da bi se odredila podobnost tokom 28 dana pre inicijalnog davanja mAb. Nakon uključivanja pacijenata u kohortu sa mAb monoterapijom, uključivanje sledećih kohorti će biti određeno po pojavljivanju DLTs u prethodnim kohortama (tj, bez DLT u kohorti od 3 pacijenta, ili ne više od 1 DLT u proširenoj kohorti od 6 pacijenata), i dostupnosti slotova pacijenata. Planirani dozni nivoi monoterapija su 1, 3, ili 10 mg/kg koji su davani IV svakih 14 dana (2 nedelje).
[0249] Jednom kada su jedan ili oba od 1 mg/kg ili 3 mg/kg mAb monoterapije kohorta DLT perioda posmatranja završeni bez DLT u kohorti od 3 pacijenta ili sa ne više od 1 DLT u proširenoj kohorti od 6 pacijenata, pacijenti mogu biti uključeni u kohorti koja kombinuje ciklofosfamid ili terapiju zračenjem sa mAb na doznom nivou monoterapije. Pacijenti mogu biti uključeni u kombinaciju mAb ciklofosfamid/terapiji zračenjem kohorti jednom kada su periodi posmatranja DLT za obe kohorte za onu kod mAb nivoa doze ciklofosfamid i za kohortu za onu kod mAb nivoa doze režima iste terapije zračenjen završeni su bez DLT u kohorti od 3 pacijenta, ili ne više od 1 DLT u proširenoj kohorti od 6 pacijenata.
[0250] Jednom kada je period posmatranja DLT kohorte 3 mg/kg mAb monoterapije završen sa bez DLT u kohorti od 3 pacijenata, ili ne više od 1 DLT u proširenoj kohorti od 6 pacijenata, takođe se može uključii kohorta monoterapije 10 mg/kg mAb.
[0251] Kohorte mAb 3 mg/kg i 10 mg/kg monoterapije uključiće se samo nakon potrebnog broja pacijenata u prethodnoj kohorti doze monoterapije (tj, 1 mg/kg i 3 mg/kg, redom) su završili period 28 dnevnog posmatranja DLT bez pokazivanja maksimalne podnošljive doze (MTD) za taj nivo doze. Kohorta sa mAb 1 mg/kg kombinovanim tretmanom uključiće se samo nakon završetka perioda posmatranja DLT za kohortu 1 mg/kg monoterapije. Kombinovane kohorte koje su primile 3 mg/kg mAb uključiće se samo nakon potrebnog broja pacijenata u respektivnim 1 mg/kg mAb kombinovanim kohortama su završili period posmatranja DLT bez pokazivanja MTD. Trostruke kombinovane kohorte koje kombinuju mAb sa ciklofosfamidom i režimom zračenja uključiće se samo onda kada potreban broj pacijenata u obe odgovarajuće duple kombinovane kohorte na tom doznom nivou su završile period posmatranja DLT bez pokazivanja MTD.
[0252] Tabela 30 prikazuje kohorte povećanja doze u kojima će pacijenti biti uključeni.
Tabela 30: Moguće kohorte povećanja doze
[0253] DLT je definisan kao bilo koji prema sledećem: ne-hematološka toksičnost (npr., uveitis, ili bilo koja druga irAE), ili hematološka toksičnost (npr., neutropenija, trombocitopenija, febrilna neutropenija).
[0254] Maksimalna podnošljiva doza (MTD) je definisana kao najveća doza u kojoj manje od trećine proširene kohorte od 6 pacijenata imaju DLT tokom prvog ciklusa tretmana. Prema tome, MTD je definisan na nivou doze odmah ispod nivoa na kome je doziranje zaustavljeno zbog pojavljivanja 2 ili više DLTs u proširenoj kohorti od 6 pacijenata. Ukoliko povećanje doze nije zaustavljeno zbog pojave DLTs, smatraće se da MTD nije bio određen. Moguće je da MTD ne može biti definisan u ovom ispitivanju, ili za grupu koja je primila monoterapiju ili za individualne kombinovane grupe. Dodatno, moguće je da mAb MTDs može da se razlikuje između monoterapije i svakog režima kombinovanog tretmana.
Trajanje ispitivanja
[0255] Pacijenti će primiti do 48 nedelja tretmana, nakon čega će slediti period od 24 nedelje. Pacijenti će primiti tretman do završetka 48 nedeljnog perioda tretmana, ili do progresije bolesti, neprihvatljive toksičnosti, povlačenja pristanka, ili ispunjavanja nekog drugog kriterijuma za povlačenje studije. Nakon minimuma od 24 nedelje tretmana, pacijenti sa potvrđenim kompletnim odgovorima (CR) mogu odlučiti da prekinu lečenje i nastave sa svim relevantnim procenama studije (npr, procenama efikasnosti). Nakon minimuma od 24 nedelje tretmana, pacijenti sa procenama tumorskog opterećenja stabilne bolesti (SD) ili parcijalog odgovora (PR) koji su bili nepromenjeni za 3 sukcesivne procene tumora mogu takođe izabrati da prekinu lečenje i nastave sa svim relevantnim procenama studije (npr, procenama efikasnosti).
Populacija studije
[0256] Ciljna populacija ove studije obuvata pacijente sa uznapredovalim malignitetima koji nisu kandidati za standardnu terapiju, nisu voljni da prolaze kroz standardnu terapiju, ili za koje nijedna dostupna terapija nije očekivana da bude od kliničke koristi; i pacijenti sa malignitetima koji se ne mogu izlečiti i nisu uspeli da odgovore na ili su pokazali napredovanje tumora bez obzira na standarndu terapiju.
[0257] Kriterijum uključivanja: Pacijent mora ispuniti sledeće kriterijume da bi bio podoban za uključivanje u ovu studiju: (1) pokazuje napredovanje solidnog tumora bez alternativne „standardna-briga“ dostupne terapeutske opcije; (2) bar 1 leziju za procenu odgovora. Pacijenti koji su dodeljeni terapiji zračenjem zahtevaju bar jednu dodatnu leziju koja može biti bezbedno ozračena dok se štede lezije indeksa i za koje je zračenje na ograničenim, palijativnim dozama koje se razmatra će se smatrati medicinski prihvatljivim; (3) Istočna kooperativna onkološka grupa (ECOG) status performansi ≤ 1; (4) više od 18 godina starosti; (5) hepatična funkcija: a. ukupni bilirubin ≤ 1.5x gornja granica normalnog (ULN; ukoliko su metastaze na jetri ≤ 3x ULN), b. transaminaze ≤ 3x ULN (ili ≤ 5.0x ULN, ukolko su metastaze na jetri), c. alkalna fosfataza (ALP) ≤ 2.5x ULN (ili 5.0x ULN, ukoliko su metastaze na jetri); (6) funkcija bubrega: kreatinin iz seruma ≤ 1.5x ULN; (7) broj neutrofila (ANC) ≥ 1.5 x 10<9>/L, c. broj pločica ≥ 75 x 10<9>/L; (8) mogućnost davanja potpisanog informisanog pristanka; i (9) sposobnost i volja da se pridržavaju zakazanim posetama, planovima za lečenje, laboratorijskim testovima, i drugim postupcima koji su povezani sa lečenjem.
[0258] Kriterijumi za isključivanje: Pacijent koji ispunjava bilo koji od sledećih kriterijuma biće isključen iz ispitivanja: (1) Dokaz u toku ili nedavne (u poslednjih 5 godina) značajne autoimune bolesti koja zahteva lečenje sa sistemskim imunosupresivnim tretmanima, koji mogu ukazati na rizik za irAEs; (2) Prethodni tretman sa sredstvom koje blokira put PD-1/PD-L1; (3) Prethodni tretman sa drugim imunim modulišućim sredstvima tokom manje od 4 nedelje ili 4 polu-života, kojigod je veći, pre prve doze mAb; (4) Primeri imuih modulišućih sredstava uključuju blokatore CTLA-4, 4-1BB (CD137), OX-40, terapeutske vakcine, ili tretmane citokinima; (5) Netretirana metastaza (ze) na mozgu koje se mogu smatrati aktivnim. Pacijenti sa prethodno tretiranim metastazama na mozgu mogu učestvovati pod uslovom da su stabilni (tj, bez dokaza progresije snimanjem bar 4 nedelje pre prve doze tretmana ispitivanja, i bilo koji neurološki simptomi su se vratili na početni nivo), i ne postoji dokaz novih ili povećanja metastaza mozga; (6) Imunosupresivne doze kortikosteroida (> 10 mg prednizona dnevno ili ekvivalent) tokom 4 nedelje pre prve doze mAb; (7) Tromboza dubokih vena, embolija pluća (uključujući asimptomatsku emboliju pluča koja se identifikuje na snimanju), ili drugi tromboembolijski događaj tokom 6 meseci pre prve doze mAb; (8) Aktivna infekcija koja zahteva terapiju, uključujući poznatu infekciju sa humanim virusom imuodeficijencije, ili aktivnu infekciju sa hepatitis B ili hepatitis C virusom; (9) Istorija pneumonitisa tokom poslednjih 5 godina; (10) Bilo koji istraživački ili antitumorski tretman tokom 30 dana pre početnog davanja mAb; (11) Istorija dokumentovanih alergijskih reakcija ili akutne reakcije preosetljivosti koja je doprineta tretmanom sa terapijama antitela generalno, ili sredstvima koja su specifično korišćena u ispitivanju; (12) Poznata alergija na doksiciklin ili tetraciklin (oprez zbog pristustva tragova komponenti u mAb); (13) Dojenje; (14) Pozitivan serum testa za trudnoću; (15) Istorija tokom poslednjih 5 godina invazivnog maligniteta osim onog koji se leči u ovoj studiji, sa izuzetkom resektovanim/ablatiranim karcinomom bazalnih ili skvamoznih ćelija kože ili karcinoma in situ cerviksa, ili drugi lokalni tumori koji se smatraju izlečenim sa lokalnim tretmanom; (16) Akutni ili hronični psihijatrijski problemi koji, pod procenom ispitivača, čine pacijenta nepodobnim za učešće; i (17) Kontinuirana seksualna aktivnost kod muškaraca ili žena sa potencijalnom da zatrudne koji nisu voljni da praktikuju odgovarajuću kontracepciju tokom ispitivanja.
Tretmani studije
[0259] mAb će biti dostavljeno kao tečnost u sterilnim, bočicama za jednokratnu upotrebu. Svaka bočica će sadržati zapreminu dovoljnu da se pokupi 10 mL mAb u koncentraciji od 25 mg/mL. Instrukcije za pripremu doze su dostupne u referentnim priručnicima za studije. mAb će se davati u ambulantnim uslovima kao 30 minutna IV infuzija. Doza svakog pacijenta će zavisiti od individualne telesne težine. Doza mAb mora biti prilagođena za svaki ciklus za promene telesne težine od ≥10%. mAb će se davati zasebno i u kombinaciji sa zračenjem i ili ciklofosfamidom.
Monoterapija
[0260] mAb će se davati u ambulantnim uslovima kao IV infuzija tokom 30 minuta svakih 14 dana tokom 48 nedelja (tj. Dani 1, 1563, 29±3, i 43±3 od 56 dnevnog ciklusa). Planirani režimi monoterapije koji će biti dodeljeni mogu uključiti: (i) 1 mg/kg IV infuzije tokom 30 minuta svakih 14 dana u trajanju od 48 nedelja; (ii) 3 mg/kg infuzije tokom 30 minuta svakih 14 dana u trajanju od 48 nedelja; (iii) 10 mg/kg infuzije tokom tokom 30 minuta svakih 14 dana tokom 48 nedelja; i (iv) 0.3 mg/kg infuzije tokom 30 minuta svakih 14 dana tokom 48 nedelja (ukoliko MTD je određen da bude ispod 1 mg/kg).
Kombinovana terapija
[0261] Prateća terapija zračenjem i ciklofosfamidom će biti isporučena preko recepta i njihova upotreba, doza, modifikacije doze, smanjenja, ili odlaganja, kao i bilo koji potencijalni AEs koji nastaju iz njihove upotrebe, pratiće se zajedno sa onim kod mAb.
[0262] Zajednička primena mAb i zračenja: mAb će se davati IV infuzijom tokom 30 minuta svakih 14 dana tokom 48 nedelja u kombinaciji sa tretmanom zračenjem od dana 8 do dana 12. Planirani kombinovani režimi mAb i terapije zračenjem mogu uključiti:
<•>1 mg/kg mAb infuzije tokom 30 minuta svakih 14 dana tokom 48 nedelja plus 30 Gy koji se daje 1 nedelju nakon prve doze mAb, poželjno uzastopnim danima)
<•>1 mg/kg mAb infuzije tokom 30 minuta svakih 14 dani tokom 48 nedelja plus 27 Gy koji se daje 1 nedelju nakon prve doze mAb, poželjno u ne-uzastopnim danima)
<•>3 mg/kg mAb infuzije tokom 30 minuta svakih 14 dana tokom 48 nedelja plus 30 Gy koji se daje 1 nedelju nakon prve doze mAb, poželjno uzastopnim danima)
<•>3 mg/kg mAb infuzije tokom 30 minuta svakih 14 dana tokom 48 nedelja plus 27 Gy koji se daje 1 nedelju nakon prve doze mAb, poželjno u ne-uzastopnim danima)
[0263] Pacijenti će primiti ili 30 Gy koji je dat kao 5 frakcija 6 Gy dnevnog davanja počev od 1 nedelje nakon prve doze mAb, ili 27 Gy koji je dat kao 3 frakcije 9 Gy davano svakog drugog dana počev od 1 nedelje nakon prve doze mAb. Lezija koja je odabrana za zračenje treba da bude lezija koja se može bezbedno ozračiti sa fokalnim zračenjem dok se štede lezije indeksa i za koje je zračenje na ograničenim, palijativnim dozama koje se razmatra će se smatrati medicinski prihvatljivim. Ciljna doza za pacijenta će biti zasnovana na dodeljenoj kohorti i treba da bude u skladu sa zahtevima normalnog tkiva, u skladu sa standardnom onkološkom praksom zračenja. Tretman na režimu doziranja koji je specifikovan protokolom je dozvoljen samo ukoliko su ispunjeni kriterijumi normalnog tkiva. Ukoliko kriterijumi normalnog tkiva ne mogu biti ispunjeni na ili režimima terapije zračenja koji su naznačeni u protokolu, pacijent ne ispunjava uslove za uključenje u kohortu u kombinovanu terapiju zračenjem u ovoj studiji.
[0264] Zajedničko davanje mAb i ciklofosfamida: mAb će biti davano sa IV infuzijom tokom 30 minuta svakih 14 dana (2 nedelje) tokom 48 nedelja u kombinaciji sa ciklofosfamidom 200 mg/m<2>svakih 14 dana tokom 4 doze. Svaka od 4 doza ciklofosfamida će se davati 1 dan pre svake od prvih 4 mAb doza (dani -1, 14, 28, i 42 prvih 56 dnevnog ciklusa).
[0265] Iako je ciklofosfamid uspešno korišćen zajedno sa drugim lekovima, stopa metabolizma i leukopenijska aktivnost ciklofosfamida navodno se povećavaju sa hroničnim davanjem visokih doza fenobarbitala. Tretman ciklofosfamidom uzrokuje značajnu i trajnu inibiciju aktivnosti holinesteraze, time potencirajući efekat sukcinilholin hlorida. Planirana kombinacija mAb i režima ciklofosfamida koja je dodeljena je:
<•>Ciklofosfamid 200 mg/m<2>svakih 14 dana (dani -1, 14, 28, i 42 prvog 56 dnevnog ciklusa) za ukupno 4 doze plus
<•>3 mg/kg mAb infuzije tokom 30 minuta svakih 14 dana tokom 48 nedelja (obezbeđena doza monoterapije 3 mg/kg < MTD; ukoliko 3 mg/kg > MTD, doza će biti 1 mg/kg).
[0266] Zajedničko davanje mAb, zračenja i ciklofosfamida: Planirani režim kombinacije mAb, zračenja, i ciklofosfamida uključuje:
<•>Ciklofosfamid 200 mg/m<2>svakih 14 dana (dani -1, 14, 28, i 42 iz prvog 56 dnevnog ciklusa) za ukupno 4 doze plus
<•>27 Gy terapija zračenjem (9 Gy x 3 puta/nedeljno; davano 1 nedelju nakon prve doze mAb, poželjno ne u uzastopnim danima) ILI
30 Gy terapija zračenjem (6 Gy x 5 puta/nedeljno; davano 1 nedelju nakon prve doze mAb, poželjno u uzastopnim danima) plus
<•>3 mg/kg mAb infuzija tokom 30 minuta svakih 14 dana tokom 48 nedelja (obezbeđena monodoza terapije od 3 mg/kg < MTD; ukoliko 3 mg/kg > MTD, doza će biti 1 mg/kg)
Promenjive ispitivanja
[0267] Primarne promenjive: Primarne promenjive bezbednosti uključuju učestalost DLTs, učestalost i težinu neželjenih događaja izazvanih lečenjem (TEAEs), i abnormalnih laboratorijskih nalaza tokom 48 nedelja tretmana.
[0268] Sekundarne Promenjive: Ključne sekundarne promenjive uključuju sledeće:
<•>Koncentraciju u serumu i farmakokinetike (PK) mAb
<•>Ispitane antitumorske aktivnosti korišćenjem odgovarajućih kriterijuma za indikacije:
o Kriterijum procene odgovora u kriterijumima solidnih tumora (RECIST) mereno sa kompjuterizovanom tomografijom (CT) ili snimanjem magnetnom rezonancijom (MRI) o Takođe se trebaju koristiti drugi kriterijumi procene za specifične tumore u kojima RECIST merenja ne predstavljaju standard.
o Imunski-povezani kriterijum odgovora (irRC) primenjen na RECIST merenja. U svim slučajevima, irRC će biti vodeći alat da bi se odredilo napredovanje bolesti (PD), SD, CR, ili PR. Standardni podaci RECIST takođe će biti sakupljeni za informatičke podatke.
<•>Anti-mAb antitela
Postupci ispitivanja
[0269] Postupci koji sledeće će biti sprovedeni na skriningu za svrhe utvrđivanja podobnosti za studije ili karakterisanja osnovne populacije: (i) serum β-HCG (rezulati moraju biti ≤ 72 h pre prve doze); (ii) Sakupljanje arhiviranog tumorskog materijala: Nakon što je pacijent dao informisani pristanak, pacijent će biti zamoljen da organizuje da se obezbedi bilo koji dostupni prethodno sakupljeni uzorci tumora; (iii) MRI Mozga: MRI Mozga je potrebna na skriningu ukoliko nije izvedeno u prethodnih 60 dana; i (iv) x-zračenje grdi: Grudi su ozračeni x-zračenjem koje je potrebno na skriningu ukoliko nisu izvedeni u prethodnih 60 dana.
[0270] Efikasnost postupaka: CT ili MRI za ispitivanje biće izvedeno u skrining poseti (tokom 28 dana pre infuzije) i tokom svakog ciklusa (približno svakih 8 nedelja) u danu 56±3, i kada se sumnja na progresiju bolesti. Dodatno, za pacijente koji nisu napredovali u studiju, procena tumora će biti izvedena za sledeće posete 3, 5, i 7. Jednom kada je izbor napravljen da se koristi CT sken ili MRI, naredna ispitivanja su napravljena korišćenjem istog modaliteta.
[0271] Procena odgovora na tumor će se sprovesti u skladu sa kriterijumima imunološki povezanih odo (irRC; Nishino 2013). Procene u skladu sa Kriterijumom evaluacije odgovora kod solidnih tumora (RECIST) verzija 1.1 (Eisenhauer 2009) takođ će biti izvedene kao podržavajuće istraživanje; međutim, primarnog određivanje napredovanja bolesti za individualnog pacijenta biće napravljeno za irRC. Merljive lezije koje su izabrane kao ciljne lezije za RECIST procene takođe će biti uključene kao indeks lezija za irRC procene.
[0272] Postupci bezbednosti: Vitalni znaci, uključujući temperaturu, krvi pritisak u mirovanju, puls, i disanje, će biti sakupljeni. Kada se zakaže u istoj poseti kao druge procedure, vitalne znake treba meriti pre kliničkih laboratorijskih ispitivanja, PK, ili prikupljanja istraživačkih uzoraka. Tokom ciklusa 1, vitalni znaci će biti zabeleženi u danima tretmana pre tretmana, na kraju infuzije, svakih 30 minuta za prvih 4 h nakon infuzije, i na 6 i 8 h nakon ispitivanja davanja leka. U ciklusima koji slede, vitalni znaci u danima tretmana biće ispitani i dokumentovani pre infuzije, svakih 30 minuta za prvih 2 h, i zatim po satu tokom 4 h nakon ispitivanja davanja leka.
[0273] Tokom poseta će se izvršiti potpuni ili ograničeni fizički pregled. Potpuni fizički pregled će uključiti pregled kože, glave, očiju, nosa, grla, vrata, zglobova, pluća, srca, pulsa, abdomena (uključujući jetru i slezinu), limfnih čvorova, i ekstremiteta, kao i kratak neurološki pregled. Ograničeni fizički pregled će uključiti pluća, srce, abdomen, i kožu.
[0274] Biće urađen standardni ECG sa 12 odvoda. Bilo koji ECG nalaz koji se procenjuje od strane istraživača kao klinički značajan (pogoršanje) u poređenju sa osnovnom vrednosti smatraće se AE, snimljenim, i praćenim.
[0275] Testovi imunološke bezbednosti sastoje se iz reumatoidnog faktora (RF), tireostimulišućeg hormona (TSH), C-reaktivnog proteina (CRP), i titra antinuklearnog antitela (ANA) i obrasca. Ukoliko, tokom trajanja ispitivanja, 4-struko ili veće povećanje sa osnovnog nivoa u RF ili ANA ili se uoče abnormalni nivoi TSH ili CRP, takođe se mogu sprovesti sledeći testovi: anti-DNK antitelo, anti-Sjogrenov sindrom A antigen (SSA) antitelo (Ro), anti-Sjogrenov sindrom B antigen (SSB) antitelo (La), antitiroglobulinsko antitelo, anti-LKM antitelo, antifosfolipidno antitelo, antitelo protiv ćelija ostrvca, antineutrofilno citoplazmatsko antitelo, C3, C4, CH50. Aktivirano parcijalno vreme tromboplastima (aPTT) i Internacionalni normalizovani odnos (INR) biće analizirani od strane loklane laboratorije u mestu.
Bezbednost
[0276] Neželjeni događaj (AE) je bilo koja neželjena medicinska pojava kod pacijenta koji je primio lek u ispitivanju koji može i ne mora da ima uzročnu vezu sa lekom koji se ispituje. Prema tome, AE je bilo koji neželjeni i nenamenski znak (uključujući abnormalne laboratorijske nalaze), simptom, ili bolest koja je vremenski povezana sa korišćenjem leka koji se ispituje, bez obzira da li se smatra povezanim sa ispitivanim lekom ili ne. AE takođe uključuje bilo koje pogoršanje (tj, bilo koju klinički značajnu promenu u učestalosti i/ili intenzitetu) prethodno postojećeg stanja koje je vremenski povezano sa korišćenjem ispitivanog leka. Progresija osnovnog maligniteta neće se smatrati AE ako je jasno u skladu sa tipičnim obrascem progresije osnovnog kancera (uključujući vremensko trajanje, pogođene organe, itd.). Klinički simptomi progresije mogu biti prijavljeni kao AEs ukoliko simptom ne može da se odredi ekskluzivno zbog progresije osnovnog maligniteta, ili se ne uklapa u očekivani obrazac progresije za bolest koja se ispituje.
[0277] Ozbiljan neželjeni događaj (SAE) je bilo koja neželjena medicinska pojava koja u bilo kojoj dozi rezultuje smrtnosti, je životno ugrožavajuća, zahteva stacionarnu hospitalizaciju pacijenta ili produžavanje postojeće hospitalizacije, rezultuje u perzistentnoj ili značajnoj destabilnosti/nemogućnosti (suštinsko narušavanje kod osobe da sprovodi svoje normalne životne funkcije), je kongenitalna anomalija/defekt po rođenju.
[0278] Informacije pacijenta za sve AEs i SAEs će biti zabeležene.
Statistički plan
[0279] Ispitivanje povećanja doze je zasnovano na tradicionalnom 3 3 dizajnu sa 3 do 6 pacijenata koji su dodeljeni po nivou doze. Tačan broj pacijenata koji su uključeni u ispitivanju će zavisiti od broja protokolom definisanih DLTs koji su uočeni, i potrebe za proširenjem trenutno definisanih doznih nivoa, ili otvaranjem dodatnih kohorti na nižim doznim nivoima. Nakon potrebnog početnog upisa u sledeću kohortu došlo je povećanja doze, uključivanje u svaku od prethodnih kohorti ispod MTD za taj tretman će biti proširen (ukoliko nije prethodno proširen tokom povećanja) do ukupno 6 pacijenata.
[0280] Podaci će biti predstavljeni korišćenjem samo opisane statistike. Generalno, podaci će biti predstavljeni pomoću doznih nivoa i kombinacija. Pregledi bezbednosti i analize će se sprovesti na postavci analize bezbednosti (SAF). Primarna analiza bezbednosti biće zasnovana na nastanku lečenja AEs (TEAEs).

Claims (12)

Patentni zahtevi
1. Izolovano antitelo ili njegov fragment koji veže antigen koje se specifično vezuje za humani protein programirane smrti-1 (PD-1), pri čemu izolovano antitelo ili njegov fragment koji veže antigen sadrži varijabilni region teškog lanca (HCVR) koji ima SEQ ID NO: 162 i varijabilni region lakog lanca (LCVR) koji ima SEQ ID NO: 170.
2. Izolovano antitelo ili njegov fragment koji veže antigen prema patentnom zahtevu 1, pri čemu antitelo ili njegov fragment koji veže antigen je multi-specifični molekul koji veže antigen.
3. Izolovano antitelo ili njegov fragment koji veže antigen prema patentnom zahtevu 1 ili 2, pri čemu je antitelo IgG1 ili IgG4 antitelo.
4. Izolovano antitelo ili njegov fragment koji veže antigen prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-3, pri čemu antitelo sadrži teški lanac i laki lanac, gde teški lanac sadrži aminokiselinsku sekvencu koja je predstavljena u SEQ ID NO: 330 i/ili laki lanac sadrži aminokiselinsku sekvencu koja je predstavljena u SEQ ID NO: 331.
5. Izolovano antitelo ili njegov fragment koji veže antigen prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-4, pri čemu antitelo sadrži aminokiselinski par sekvenci teškog/lakog lanca koji je predstavljen u SEQ ID NO: 330/331.
6. Farmaceutska kompozicija koja sadrži izolovano antitelo ili njegov fragment koji veže antigen koje se vezuje za PD-1 prema bilo kojem od patentnih zahteva 1- 5 i farmaceutski prihvatljivi nosač ili rastvarač.
7. Izolovani polinukleotidni molekul koji sadrži polinukleotidnu sekvencu koja kodira za HCVR i polinukleotidnu sekvencu koja kodira za LCVR antitela ili njegovog fragmenta koji veže antigen kao što je prikazano u bilo kojem od patentnih zahteva 1 - 5.
8. Vektor koji sadrži polinukleotidni molekul prema patentnom zahtevu 7.
9. Ćelija koja sadrži vektor prema patentnom zahtevu 8.
10. Postupak za proizvodnju anti-PD-1 antitela ili njegovog fragmenta koji veže antigen, koji obuhvata kultivisanje ćelije domaćina prema patentnom zahtevu 9 pod uslovima koji omogućavaju proizvodnju antitela ili fragmenta, i regeneraciju tako proizvedenog antitela ili fragmenta.
11. Postupak prema patentnom zahtevu 10, koji dalje obuhvata formulisanje antitela ili njegovog fragmenta koji veže antigen kao farmaceutske kompozicije koja sadrži prihvatljivi nosač.
12. Postupak prema patentnom zahtevu 10, pri čemu je ćelija domaćina CHO ćelija.
RS20211336A 2014-01-23 2015-01-23 Humana antitela za pd-1 RS62507B1 (sr)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201461930576P 2014-01-23 2014-01-23
US201462014181P 2014-06-19 2014-06-19
EP15703187.3A EP3097119B1 (en) 2014-01-23 2015-01-23 Human antibodies to pd-1
PCT/US2015/012589 WO2015112800A1 (en) 2014-01-23 2015-01-23 Human antibodies to pd-1

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS62507B1 true RS62507B1 (sr) 2021-11-30

Family

ID=52462456

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20211336A RS62507B1 (sr) 2014-01-23 2015-01-23 Humana antitela za pd-1

Country Status (31)

Country Link
US (4) US9987500B2 (sr)
EP (2) EP3097119B1 (sr)
JP (5) JP6425730B2 (sr)
KR (2) KR102337042B1 (sr)
CN (2) CN113248614A (sr)
AU (1) AU2015209233B2 (sr)
BR (1) BR122022010183B1 (sr)
CA (2) CA2936075C (sr)
CL (1) CL2016001871A1 (sr)
CY (1) CY1124747T1 (sr)
DK (1) DK3097119T3 (sr)
EA (1) EA034770B8 (sr)
ES (1) ES2888224T3 (sr)
HR (1) HRP20211794T1 (sr)
HU (1) HUE056332T2 (sr)
IL (2) IL246818B (sr)
LT (1) LT3097119T (sr)
MX (3) MX385545B (sr)
MY (1) MY176475A (sr)
NZ (1) NZ722342A (sr)
PH (1) PH12016501330B1 (sr)
PL (1) PL3097119T3 (sr)
PT (1) PT3097119T (sr)
RS (1) RS62507B1 (sr)
SG (1) SG11201605482SA (sr)
SI (1) SI3097119T1 (sr)
SM (1) SMT202100669T1 (sr)
TW (1) TWI681969B (sr)
UA (1) UA122666C2 (sr)
UY (1) UY35964A (sr)
WO (1) WO2015112800A1 (sr)

Families Citing this family (613)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3255060A1 (en) 2008-12-09 2017-12-13 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-pd-l1 antibodies and their use to enhance t-cell function
EP2445932B1 (en) 2009-06-26 2018-02-28 Soricimed Biopharma Inc. Soricidin derived peptides and methods for the detection of trpv-6 cancers and drug delivery
EP3812387A1 (en) 2011-07-21 2021-04-28 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Heterocyclic protein kinase inhibitors
HK1203971A1 (en) 2012-05-15 2015-11-06 Bristol-Myers Squibb Company Cancer immunotherapy by disrupting pd-1/pd-l1 signaling
JOP20200236A1 (ar) 2012-09-21 2017-06-16 Regeneron Pharma الأجسام المضادة لمضاد cd3 وجزيئات ربط الأنتيجين ثنائية التحديد التي تربط cd3 وcd20 واستخداماتها
TWI635098B (zh) 2013-02-01 2018-09-11 再生元醫藥公司 含嵌合恆定區之抗體
AR095196A1 (es) 2013-03-15 2015-09-30 Regeneron Pharma Medio de cultivo celular libre de suero
SMT202100065T1 (it) 2013-05-02 2021-03-15 Anaptysbio Inc Anticorpi diretti contro la proteina della morte programmata (pd-1)
AR097306A1 (es) 2013-08-20 2016-03-02 Merck Sharp & Dohme Modulación de la inmunidad tumoral
WO2015048312A1 (en) 2013-09-26 2015-04-02 Costim Pharmaceuticals Inc. Methods for treating hematologic cancers
SG10201804945WA (en) 2013-12-12 2018-07-30 Shanghai hengrui pharmaceutical co ltd Pd-1 antibody, antigen-binding fragment thereof, and medical application thereof
TWI680138B (zh) 2014-01-23 2019-12-21 美商再生元醫藥公司 抗ｐｄ-ｌ１之人類抗體
TWI681969B (zh) 2014-01-23 2020-01-11 美商再生元醫藥公司 針對ｐｄ-１的人類抗體
PE20170255A1 (es) 2014-01-24 2017-03-22 Dana Farber Cancer Inst Inc Moleculas de anticuerpo que se unen a pd-1 y usos de las mismas
HUE045065T2 (hu) 2014-01-31 2019-12-30 Novartis Ag TIM-3 antitest molekulák és felhasználásaik
GB201403775D0 (en) 2014-03-04 2014-04-16 Kymab Ltd Antibodies, uses & methods
CA2942245C (en) 2014-03-12 2021-11-02 Yeda Research And Development Co. Ltd. Reducing systemic regulatory t cell levels or activity for treatment of disease and injury of the cns
US10519237B2 (en) 2014-03-12 2019-12-31 Yeda Research And Development Co. Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of disease and injury of the CNS
US10618963B2 (en) 2014-03-12 2020-04-14 Yeda Research And Development Co. Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of disease and injury of the CNS
WO2017042633A2 (en) * 2015-09-10 2017-03-16 Yeda Research And Development Co. Ltd Reducing systemic regulatory t cell levels or activity for treatment of disease and injury of the cns
US9394365B1 (en) 2014-03-12 2016-07-19 Yeda Research And Development Co., Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of alzheimer's disease
KR102442436B1 (ko) 2014-03-14 2022-09-15 노파르티스 아게 Lag-3에 대한 항체 분자 및 그의 용도
TWI701042B (zh) 2014-03-19 2020-08-11 美商再生元醫藥公司 用於腫瘤治療之方法及抗體組成物
TWI693232B (zh) 2014-06-26 2020-05-11 美商宏觀基因股份有限公司 與pd-1和lag-3具有免疫反應性的共價結合的雙抗體和其使用方法
US9982052B2 (en) 2014-08-05 2018-05-29 MabQuest, SA Immunological reagents
KR102357893B1 (ko) 2014-08-05 2022-02-04 맵퀘스트 에스아 Pd-1 에 결합하는 면역학적 시약
KR20170060042A (ko) 2014-09-13 2017-05-31 노파르티스 아게 Alk 억제제의 조합 요법
KR102614189B1 (ko) 2014-11-17 2023-12-18 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. Cd3xcd20 이특이적 항체를 이용한 종양의 치료 방법
ES2905615T3 (es) * 2014-11-20 2022-04-11 Promega Corp Sistemas y métodos para evaluar moduladores de puntos de control inmunitario
TWI595006B (zh) 2014-12-09 2017-08-11 禮納特神經系統科學公司 抗ｐｄ－１抗體類和使用彼等之方法
WO2016160792A1 (en) 2015-03-30 2016-10-06 Stcube & Co., Inc. Antibodies specific to glycosylated pd-l1 and methods of use thereof
WO2016161010A2 (en) 2015-03-30 2016-10-06 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Heavy chain constant regions with reduced binding to fc gamma receptors
US11933786B2 (en) 2015-03-30 2024-03-19 Stcube, Inc. Antibodies specific to glycosylated PD-L1 and methods of use thereof
EP3770171A1 (en) 2015-04-03 2021-01-27 XOMA Technology Ltd. Treatment of cancer using inhibitors of tgf-beta and pd-1
PL3298033T5 (pl) 2015-05-18 2023-10-30 TCR2 Therapeutics Inc. Kompozycje i zastosowania medyczne do reprogramowania TCR z zastosowaniem białek fuzyjnych
KR102608921B1 (ko) 2015-05-18 2023-12-01 스미토모 파마 온콜로지, 인크. 생체 이용률이 증가된 알보시딥 프로드러그
TWI773646B (zh) 2015-06-08 2022-08-11 美商宏觀基因股份有限公司 結合lag-3的分子和其使用方法
TWI870335B (zh) 2015-06-12 2025-01-21 美商宏觀基因股份有限公司 變異的嵌合4d5抗體及其與抗pd-1抗體聯合用於治療癌症的應用
MX383464B (es) 2015-07-13 2025-03-14 Cytomx Therapeutics Inc Anticuerpos anti-pd-1, anticuerpos anti-pd-1 activables, y métodos de uso de los mismos.
CA2991628C (en) 2015-07-16 2020-04-07 Bioxcel Therapeutics, Inc. A novel approach for treatment of cancer using immunomodulation
HRP20211058T8 (hr) 2015-07-29 2021-11-26 Novartis Ag Kombinirane terapije koje sadrže molekule antitijela protiv lag-3
HUE068868T2 (hu) 2015-07-30 2025-02-28 Macrogenics Inc PD-1-hez kötõdõ molekulák és alkalmazásukra szolgáló eljárások
TWI870789B (zh) 2015-08-04 2025-01-21 美商再生元醫藥公司 補充牛磺酸之細胞培養基及用法
CA2994631A1 (en) 2015-08-07 2017-02-16 Pieris Pharmaceuticals Gmbh Novel fusion polypeptide specific for lag-3 and pd-1
EP4458417A3 (en) * 2015-08-11 2025-02-19 Wuxi Biologics Ireland Limited Novel anti-pd-1 antibodies
AR105654A1 (es) * 2015-08-24 2017-10-25 Lilly Co Eli Anticuerpos pd-l1 (ligando 1 de muerte celular programada)
AU2016317915B2 (en) * 2015-09-01 2021-02-18 Agenus Inc. Anti-PD-1 antibodies and methods of use thereof
AU2016325630B2 (en) 2015-09-23 2022-11-17 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Optimized anti-CD3 bispecific antibodies and uses thereof
KR20180063885A (ko) * 2015-09-24 2018-06-12 더 유니버시티 오브 노쓰 캐롤라이나 엣 채플 힐 전이 감소를 위한 방법 및 조성물
US10981991B2 (en) 2015-09-29 2021-04-20 Shanghai Zhangjiang Biotechnology Co., Ltd. PD-1 antibodies and uses thereof
BR112018006237A2 (pt) * 2015-09-29 2018-10-09 Celgene Corp proteínas de ligação a pd-1 e métodos de uso das mesmas
US12030942B2 (en) 2015-10-02 2024-07-09 Les Laboratoires Servier Anti-PD-1 antibodies and compositions
WO2017055404A1 (en) 2015-10-02 2017-04-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific antibodies specific for pd1 and tim3
ES2924402T3 (es) * 2015-10-02 2022-10-06 Symphogen As Anticuerpos anti-PD-1 y composiciones
BR112018006817A2 (pt) 2015-10-08 2018-10-23 Macrogenics Inc método de tratamento do câncer
TWI756187B (zh) 2015-10-09 2022-03-01 美商再生元醫藥公司 抗ｌａｇ３抗體及其用途
PE20181326A1 (es) * 2015-11-03 2018-08-20 Janssen Biotech Inc Anticuerpos que se unen especificamente a pd-1 y sus usos
CN106699889A (zh) * 2015-11-18 2017-05-24 礼进生物医药科技（上海）有限公司 抗pd-1抗体及其治疗用途
IL300122A (en) 2015-11-18 2023-03-01 Merck Sharp ַ& Dohme Llc Substances that bind to PD1 and/or LAG3
JP7003036B2 (ja) 2015-12-02 2022-02-04 エスティーキューブ，インコーポレイテッド グリコシル化ｐｄ－１に対して特異的な抗体およびその使用方法
IL260021B (en) 2015-12-14 2022-09-01 Macrogenics Inc Bispecific molecules that are immunoreactive for pd1 and ctla4 and methods for using them
US10392442B2 (en) 2015-12-17 2019-08-27 Bristol-Myers Squibb Company Use of anti-PD-1 antibody in combination with anti-CD27 antibody in cancer treatment
LT3394103T (lt) * 2015-12-22 2023-09-11 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Antikūnų prieš pd-1 ir bispecifinių antikūnų prieš cd20/cd3 derinys, skirtas vėžiui gydyti
CN105669864B (zh) * 2015-12-23 2018-10-16 杭州尚健生物技术有限公司 抗人程序性死亡受体1抗体及其制备方法和用途
US20170210803A1 (en) * 2016-01-21 2017-07-27 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Treatment of cancer with combinations of immunoregulatory agents
ES3034233T3 (en) 2016-01-22 2025-08-14 MabQuest SA Non-blocking pd1 specific antibodies
US11214617B2 (en) 2016-01-22 2022-01-04 MabQuest SA Immunological reagents
CN109073635A (zh) 2016-01-25 2018-12-21 豪夫迈·罗氏有限公司 用于测定t细胞依赖性双特异性抗体的方法
AU2017219254B2 (en) 2016-02-17 2019-12-12 Novartis Ag TGFbeta 2 antibodies
US10537633B2 (en) 2016-03-04 2020-01-21 Jn Biosciences Llc Antibodies to TIGIT
EP3432924A1 (en) 2016-03-23 2019-01-30 Novartis AG Cell secreted minibodies and uses thereof
US10894823B2 (en) * 2016-03-24 2021-01-19 Gensun Biopharma Inc. Trispecific inhibitors for cancer treatment
US11542332B2 (en) 2016-03-26 2023-01-03 Bioatla, Inc. Anti-CTLA4 antibodies, antibody fragments, their immunoconjugates and uses thereof
WO2017172733A1 (en) * 2016-03-28 2017-10-05 The Regents Of The University Of California Anti-ryk antibodies and methods of using the same
CN109071636A (zh) 2016-03-29 2018-12-21 斯特库比股份有限公司 用于选择特异性结合糖基化免疫检查点蛋白的抗体的方法
ES2883297T3 (es) 2016-03-29 2021-12-07 Stcube Inc Anticuerpos de función doble específicos para PD-L1 glucosilado y métodos de uso de los mismos
CA3022961A1 (en) * 2016-05-02 2017-11-09 Tetragenetics, Inc. Anti-kv1.3 antibodies, and methods of production and use thereof
TWI910495B (zh) * 2016-05-13 2026-01-01 美商再生元醫藥公司 藉由投予pd-1抑制劑治療皮膚癌之方法
ES2954139T3 (es) 2016-06-02 2023-11-20 Bristol Myers Squibb Co Bloqueo de PD-1 con nivolumab en el linfoma de Hodgkin refractario
SG10202101062YA (en) 2016-06-02 2021-03-30 Bristol Myers Squibb Co Use of an anti-pd-1 antibody in combination with an anti-cd30 antibody in lymphoma treatment
CN109476753A (zh) 2016-06-03 2019-03-15 百时美施贵宝公司 用于治疗肿瘤的方法的抗-pd-1抗体
CN109475634A (zh) 2016-06-03 2019-03-15 百时美施贵宝公司 用于治疗复发性小细胞肺癌的方法的抗-pd-1抗体
JP2019517512A (ja) 2016-06-03 2019-06-24 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 結腸直腸癌を有する患者の処置における抗ｐｄ−１抗体の使用
WO2017214182A1 (en) * 2016-06-07 2017-12-14 The United States Of America. As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services Fully human antibody targeting pdi for cancer immunotherapy
MX2018014950A (es) * 2016-06-07 2019-04-25 Macrogenics Inc Terapia de combinacion.
CN109563170B (zh) 2016-06-10 2023-10-13 瑞泽恩制药公司 抗gitr抗体及其用途
CA3026876A1 (en) * 2016-06-10 2017-12-14 Novartis Ag Therapeutic uses of a c-raf inhibitor
CN109715196A (zh) 2016-06-13 2019-05-03 转矩医疗股份有限公司 用于促进免疫细胞功能的组合物和方法
RU2769282C2 (ru) 2016-06-20 2022-03-30 Кимаб Лимитед Анти-PD-L1 и IL-2 цитокины
US9567399B1 (en) 2016-06-20 2017-02-14 Kymab Limited Antibodies and immunocytokines
AU2017298298B2 (en) 2016-07-18 2024-03-07 President And Fellows Of Harvard College Human lymphoid tissue-on-chip
CN109715666B (zh) 2016-07-20 2023-02-21 斯特库比股份有限公司 癌症治疗方法和使用结合糖基化pd-l1的抗体的组合的疗法
NL2017267B1 (en) 2016-07-29 2018-02-01 Aduro Biotech Holdings Europe B V Anti-pd-1 antibodies
CA3032498A1 (en) 2016-08-02 2018-02-08 TCR2 Therapeutics Inc. Compositions and methods for tcr reprogramming using fusion proteins
AU2017306506B2 (en) * 2016-08-05 2020-05-21 Y-Biologics Inc. Antibody to programmed cell death 1 (PD-1) and use thereof
WO2018026248A1 (ko) * 2016-08-05 2018-02-08 주식회사 와이바이오로직스 프로그램화된 세포 사멸 단백질(pd-1)에 대한 신규 항체 및 이의 용도
US11858996B2 (en) 2016-08-09 2024-01-02 Kymab Limited Anti-ICOS antibodies
EP3500294A4 (en) * 2016-08-22 2020-07-29 Arbutus Biopharma Corporation ANTI-PD-1 ANTIBODIES, OR THEIR FRAGMENTS, FOR THE TREATMENT OF HEPATITIS B
WO2018035710A1 (en) 2016-08-23 2018-03-01 Akeso Biopharma, Inc. Anti-ctla4 antibodies
CN106967172B (zh) 2016-08-23 2019-01-08 康方药业有限公司 抗ctla4-抗pd-1 双功能抗体、其药物组合物及其用途
CN106977602B (zh) * 2016-08-23 2018-09-25 中山康方生物医药有限公司 一种抗pd1单克隆抗体、其药物组合物及其用途
EP3504328A1 (en) 2016-08-24 2019-07-03 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Host cell protein modification
JP2019534859A (ja) 2016-09-19 2019-12-05 セルジーン コーポレイション Ｐｄ−１結合タンパク質を使用して白斑を治療する方法
MX2019002867A (es) 2016-09-19 2019-11-12 Celgene Corp Metodos de tratamiento de trastornos inmunologicos usando proteinas de union a pd-1.
EP3504234A4 (en) 2016-09-29 2020-12-02 Beijing Hanmi Pharmaceutical Co., Ltd. CONSTRUCTIONS OF HETERODIMERIC IMMUNOGLOBULINS AND THEIR PREPARATION PROCESSES
WO2018067993A1 (en) 2016-10-07 2018-04-12 TCR2 Therapeutics Inc. Compositions and methods for t-cell receptors reprogramming using fusion proteins
JP7258747B2 (ja) 2016-10-28 2023-04-17 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 抗ｐｄ－１抗体を用いた尿路上皮癌の処置方法
JP2019533458A (ja) 2016-11-01 2019-11-21 アナプティスバイオ インコーポレイティッド プログラム死１（ｐｄ−１）に対する抗体
HRP20211703T1 (hr) 2016-11-02 2022-02-04 Jounce Therapeutics, Inc. Protutijela protiv pd-1 i njihova upotreba
MY200695A (en) 2016-11-03 2024-01-11 Bristol Myers Squibb Co Activatable anti-ctla-4 antibodies and uses thereof
EP3534947A1 (en) 2016-11-03 2019-09-11 Kymab Limited Antibodies, combinations comprising antibodies, biomarkers, uses & methods
JP2019534044A (ja) 2016-11-08 2019-11-28 クイル ピュージェット サウンド バイオセラピューティクス コーポレーション 抗ｐｄ１および抗ｃｔｌａ４抗体
KR102247704B1 (ko) 2016-11-18 2021-05-03 북경한미약품 유한공사 항 pd-1/항 her2 천연항체 구조 형태의 헤테로다이머 계의 이중특이성 항체 및 그 제조방법
DK3541841T3 (da) 2016-11-18 2024-10-21 Servier Lab Anti-PD-1-antistoffer og sammensætninger
WO2018094275A1 (en) 2016-11-18 2018-05-24 Tolero Pharmaceuticals, Inc. Alvocidib prodrugs and their use as protein kinase inhibitors
JP7291396B2 (ja) 2016-11-22 2023-06-15 ティーシーアール２ セラピューティクス インク． 融合タンパク質を用いたｔｃｒの再プログラミングのための組成物及び方法
WO2018098352A2 (en) 2016-11-22 2018-05-31 Jun Oishi Targeting kras induced immune checkpoint expression
EP4649966A3 (en) * 2016-12-01 2026-02-18 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Radiolabeled anti-pd-l1 antibodies for immuno-pet imaging
CN110300599B (zh) 2016-12-07 2024-07-02 艾吉纳斯公司 抗体和其使用方法
CN110168105B (zh) 2016-12-09 2024-05-24 瑞泽恩制药公司 用于对t细胞受体进行测序的系统和方法及其用途
RU2768404C2 (ru) * 2016-12-23 2022-03-24 Ремд Биотерапьютикс, Инк. Иммунотерапия с применением антител, связывающих белок 1 программируемой смерти клеток (pd-1)
CN106674209B (zh) * 2016-12-23 2020-03-06 深圳先进技术研究院 程序性死亡受体1基因抑制剂及其制备方法与应用
CN108203464B (zh) * 2016-12-25 2021-07-20 南京金斯瑞生物科技有限公司 高亲和力、高特异性、多抗原识别表位的具有更高功能性的抗人pd-1抗体
CN108239083B (zh) 2016-12-26 2021-08-17 阿里根公司 芳香烃受体调节剂
WO2018128939A1 (en) 2017-01-05 2018-07-12 Gensun Biopharma Inc. Checkpoint regulator antagonists
AU2018206481B2 (en) 2017-01-09 2025-02-27 Tesaro, Inc. Methods of treating cancer with anti-PD-1 antibodies
WO2018134279A1 (en) 2017-01-18 2018-07-26 Pieris Pharmaceuticals Gmbh Novel fusion polypeptides specific for lag-3 and pd-1
JP7275030B2 (ja) 2017-01-20 2023-05-17 タユー ファシャ バイオテック メディカル グループ カンパニー， リミテッド 抗ｐｄ－１抗体およびその使用
WO2018134784A1 (en) 2017-01-20 2018-07-26 Novartis Ag Combination therapy for the treatment of cancer
AR110904A1 (es) * 2017-01-20 2019-05-15 Sanofi Sa ANTICUERPOS ANTI-TGF-b Y SU USO
TWI787230B (zh) * 2017-01-20 2022-12-21 法商賽諾菲公司 抗ＴＧＦ-β抗體及其用途
TWI832600B (zh) 2017-01-20 2024-02-11 美商健臻公司 骨靶向抗體
EP3571227A1 (en) * 2017-01-20 2019-11-27 Sanofi Anti-tgf-beta antibodies and their use
EA201991673A1 (ru) 2017-02-10 2020-01-17 Регенерон Фармасьютикалз, Инк. Меченные радиоактивным изотопом антитела к lag3 для иммуно-пэт-визуализации
HUE057337T2 (hu) 2017-02-10 2022-05-28 Novartis Ag 1-(4-amino-5-bróm-6-(1H-pirazol-1-il)pirimidin-2-il)-1H-pirazol-4-ol és alkalmazása rák kezelésében
TWI674261B (zh) 2017-02-17 2019-10-11 美商英能腫瘤免疫股份有限公司 Nlrp3 調節劑
MA47604A (fr) * 2017-02-21 2020-01-01 Regeneron Pharma Anticorps anti-pd-1 pour le traitement du cancer du poumon
AU2018224094B2 (en) 2017-02-24 2025-04-17 Macrogenics, Inc. Bispecific binding molecules that are capable of binding CD137 and tumor antigens, and uses thereof
TW202428301A (zh) 2017-02-28 2024-07-16 法商賽諾菲公司 治療性rna
US11161905B2 (en) 2017-03-04 2021-11-02 Xiangtan Tenghua Bioscience Recombinant antibodies to programmed death 1 (PD-1) and uses thereof
EP3596108A4 (en) 2017-03-15 2020-12-23 Pandion Operations, Inc. TARGETED IMMUNOTOLERANCE
WO2018183459A1 (en) * 2017-03-29 2018-10-04 Celgene Corporation Formulations comprising pd-1 binding proteins and methods of making thereof
EP3601355A1 (en) 2017-03-31 2020-02-05 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
EP3608341A4 (en) * 2017-04-01 2021-01-06 Beijing Hanmi Pharmaceutical Co., Ltd. HETERODIMER BIS SPECIFIC ANTI-PD-1 / ANTI-HER2 ANTIBODIES WITH NATURAL ANTIBODY STRUCTURE AND PRODUCTION OF IT
US11571459B2 (en) 2017-04-03 2023-02-07 Oncxerna Therapeutics, Inc. Methods for treating cancer using PS-targeting antibodies with immuno-oncology agents
MY201482A (en) 2017-04-03 2024-02-26 Hoffmann La Roche Immunoconjugates of an anti-pd-1 antibody with a mutant il-2 or with il-15
UA129904C2 (uk) 2017-04-05 2025-09-10 Ле Лаборатуар Сервьє Комбінація антитіла до tim-3 й антитіла до pd-1 для лікування раку
EP4516809A3 (en) 2017-04-05 2025-09-03 F. Hoffmann-La Roche AG Bispecific antibodies specifically binding to pd1 and lag3
US11603407B2 (en) * 2017-04-06 2023-03-14 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Stable antibody formulation
TWI788340B (zh) 2017-04-07 2023-01-01 美商必治妥美雅史谷比公司 抗icos促效劑抗體及其用途
AR111651A1 (es) 2017-04-28 2019-08-07 Novartis Ag Conjugados de anticuerpos que comprenden agonistas del receptor de tipo toll y terapias de combinación
AR111760A1 (es) 2017-05-19 2019-08-14 Novartis Ag Compuestos y composiciones para el tratamiento de tumores sólidos mediante administración intratumoral
CN110799206A (zh) * 2017-05-22 2020-02-14 肿瘤免疫股份有限公司 使用可溶性cd24治疗癌症疗法中免疫相关不良事件的方法
US10676516B2 (en) 2017-05-24 2020-06-09 Pandion Therapeutics, Inc. Targeted immunotolerance
CN110678200B (zh) 2017-05-30 2024-05-17 百时美施贵宝公司 包含抗lag-3抗体或抗lag-3抗体和抗pd-1或抗pd-l1抗体的组合物
ES2965352T3 (es) 2017-05-30 2024-04-12 Bristol Myers Squibb Co Tratamiento de tumores positivos a gen 3 de activación de linfocitos (LAG-3)
JP2020522495A (ja) 2017-05-30 2020-07-30 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 抗ｌａｇ−３抗体、ｐｄ−１経路阻害剤および免疫療法剤の組み合わせを含む組成物
JP7273732B2 (ja) 2017-05-31 2023-05-15 ノバルティス アーゲー ５－ブロモ－２，６－ジ（１ｈ－ピラゾール－１－イル）ピリミジン－４－アミン及び新たな塩の結晶形
KR20240149982A (ko) 2017-06-01 2024-10-15 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항-pd-1 항체를 사용하여 종양을 치료하는 방법
CR20190550A (es) 2017-06-05 2020-04-05 Janssen Biotech Inc Anticuerpos que se unen específicamente a pd-1 y métodos de uso
WO2018229715A1 (en) 2017-06-16 2018-12-20 Novartis Ag Compositions comprising anti-cd32b antibodies and methods of use thereof
GB201709808D0 (en) 2017-06-20 2017-08-02 Kymab Ltd Antibodies
MY204117A (en) 2017-06-22 2024-08-08 Novartis Ag Antibody molecules to cd73 and uses thereof
EP3642240A1 (en) 2017-06-22 2020-04-29 Novartis AG Antibody molecules to cd73 and uses thereof
CA3061874A1 (en) 2017-06-22 2018-12-27 Novartis Ag Il-1beta binding antibodies for use in treating cancer
WO2019005635A2 (en) * 2017-06-25 2019-01-03 Systimmune, Inc. ANTI-PD-1 ANTIBODIES AND METHODS OF PREPARATION AND USE
CA3066747A1 (en) 2017-06-27 2019-01-03 Novartis Ag Dosage regimens for anti-tim-3 antibodies and uses thereof
EP3421494A1 (en) 2017-06-29 2019-01-02 Sanofi Use of isatuximab in combination with an anti-pd-1 antibody
BR112020000127A2 (pt) 2017-07-06 2020-07-07 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. método para selecionar um hidrolisado de soja, e, glicoproteína
US11344543B2 (en) 2017-07-14 2022-05-31 Innate Tumor Immunity, Inc. NLRP3 modulators
JP2020527572A (ja) 2017-07-20 2020-09-10 ノバルティス アーゲー 抗ｌａｇ−３抗体の投薬量レジメンおよびその使用
SG11202000073XA (en) * 2017-07-24 2020-02-27 Regeneron Pharma Anti-cd8 antibodies and uses thereof
TWI799432B (zh) 2017-07-27 2023-04-21 美商再生元醫藥公司 抗ctla-4抗體及其用途
JP7186764B2 (ja) 2017-07-28 2022-12-09 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 抗癌剤としての環状ジヌクレオチド
WO2019027847A1 (en) * 2017-07-29 2019-02-07 University Of Southern California SYNTHETIC EXTRACELLULAR VESICLES FOR NEW THERAPIES
EP4029877B1 (en) 2017-08-03 2024-01-17 Amgen Inc. Interleukin-21 muteins and methods of treatment
SG11202000198QA (en) 2017-08-04 2020-02-27 Genmab As Binding agents binding to pd-l1 and cd137 and use thereof
US10947263B2 (en) 2017-08-31 2021-03-16 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
JP7208225B2 (ja) 2017-08-31 2023-01-18 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 抗癌剤としての環状ジヌクレオチド
KR102812783B1 (ko) 2017-08-31 2025-05-26 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항암제로서의 시클릭 디뉴클레오티드
MX2020002612A (es) * 2017-09-07 2020-07-13 Univ Res Inst Inc Augusta Anticuerpos de la proteina de muerte celular programada 1.
JP7196160B2 (ja) 2017-09-12 2022-12-26 スミトモ ファーマ オンコロジー， インコーポレイテッド Ｍｃｌ－１阻害剤アルボシジブを用いた、ｂｃｌ－２阻害剤に対して非感受性である癌の治療レジメン
AU2018336785B2 (en) 2017-09-20 2022-07-14 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Immunotherapy methods for patients whose tumors carry a high passenger gene mutation burden
US11351163B2 (en) 2017-09-29 2022-06-07 Bristol-Myers Squibb Company Compositions and methods of treating cancer
US11660311B2 (en) 2017-10-10 2023-05-30 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
CN111247169A (zh) 2017-10-15 2020-06-05 百时美施贵宝公司 治疗肿瘤的方法
EP3697801B1 (en) 2017-10-16 2024-11-20 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
WO2019081983A1 (en) 2017-10-25 2019-05-02 Novartis Ag CD32B TARGETING ANTIBODIES AND METHODS OF USE
KR20200074993A (ko) * 2017-11-03 2020-06-25 노파르티스 아게 쇼그렌 증후군 치료에 사용하기 위한 항-cd40 항체
TW201923089A (zh) 2017-11-06 2019-06-16 美商建南德克公司 癌症之診斷及治療方法
WO2019090330A1 (en) 2017-11-06 2019-05-09 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating a tumor
WO2019090390A1 (en) * 2017-11-08 2019-05-16 University Of Canberra Immunogenic compositions and uses therefor
CN111655288A (zh) 2017-11-16 2020-09-11 诺华股份有限公司 组合疗法
EP3713937A2 (en) 2017-11-20 2020-09-30 Ariagen, Inc. Indole compounds as aryl hydrocarbon receptor (ahr) modulators
US20200371091A1 (en) 2017-11-30 2020-11-26 Novartis Ag Bcma-targeting chimeric antigen receptor, and uses thereof
US10174092B1 (en) 2017-12-06 2019-01-08 Pandion Therapeutics, Inc. IL-2 muteins
US10946068B2 (en) 2017-12-06 2021-03-16 Pandion Operations, Inc. IL-2 muteins and uses thereof
CN109912577B (zh) * 2017-12-12 2021-10-22 深圳先进技术研究院 用于抑制eb病毒相关肿瘤的化合物及其制备方法和用途
GB201721338D0 (en) 2017-12-19 2018-01-31 Kymab Ltd Anti-icos Antibodies
EP3728314A1 (en) 2017-12-19 2020-10-28 Kymab Limited Bispecific antibody for icos and pd-l1
MX2020006639A (es) 2017-12-22 2020-09-14 Regeneron Pharma Sistema y metodo para caracterizar las impurezas de un producto farmaceutico.
US12539308B2 (en) 2018-01-08 2026-02-03 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Immune-enhancing RNAs for combination with chimeric antigen receptor therapy
TW201930344A (zh) 2018-01-12 2019-08-01 美商安進公司 抗ｐｄ-１抗體及治療方法
EP3740506A1 (en) 2018-01-16 2020-11-25 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating cancer with antibodies against tim3
CA3096287A1 (en) 2018-01-22 2019-07-25 Pascal Biosciences Inc. Cannabinoids and derivatives for promoting immunogenicity of tumor and infected cells
EP3743076A1 (en) 2018-01-22 2020-12-02 Bristol-Myers Squibb Company Compositions and methods of treating cancer
US12398209B2 (en) 2018-01-22 2025-08-26 Janssen Biotech, Inc. Methods of treating cancers with antagonistic anti-PD-1 antibodies
AU2019215031C1 (en) 2018-01-31 2026-02-26 Novartis Ag Combination therapy using a chimeric antigen receptor
BR112020013336A2 (pt) 2018-01-31 2020-12-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. produto farmacêutico proteico, métodos para caracterizar as impurezas do produto farmacêutico proteico de alto peso molecular intermediário, para produção de um anticorpo, e para caracterizar as impurezas de fármaco com variação de carga, anticorpo, e, sistema para caracterizar impurezas de fármaco de alto peso molecular intermediário.
TW202311746A (zh) 2018-02-02 2023-03-16 美商再生元醫藥公司 用於表徵蛋白質二聚合之系統及方法
KR102171766B1 (ko) * 2018-02-02 2020-10-29 주식회사 뉴라클제네틱스 Pd-l1 결합력이 증대된 pd-1 변이체
WO2019153200A1 (zh) 2018-02-08 2019-08-15 北京韩美药品有限公司 抗pd-1/抗her2天然抗体结构样异源二聚体形式双特异抗体及其制备
US20200399383A1 (en) 2018-02-13 2020-12-24 Novartis Ag Chimeric antigen receptor therapy in combination with il-15r and il15
US10519187B2 (en) 2018-02-13 2019-12-31 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
GB201802573D0 (en) * 2018-02-16 2018-04-04 Crescendo Biologics Ltd Therapeutic molecules that bind to LAG3
EP3758735B1 (en) 2018-02-28 2023-12-13 AP Biosciences, Inc. Bifunctional proteins combining checkpoint blockade for targeted therapy
WO2019168774A1 (en) 2018-02-28 2019-09-06 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Systems and methods for identifying viral contaminants
ES2980374T3 (es) 2018-03-08 2024-10-01 Bristol Myers Squibb Co Dinucleótidos cíclicos como agentes anticancerosos
HUE065344T2 (hu) 2018-03-19 2024-05-28 Regeneron Pharma Mikrochip kapilláris elektroforézis assay-k és reagensek
US12259355B2 (en) 2018-03-19 2025-03-25 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Microchip capillary electrophoresis assays and reagents
US12253490B2 (en) 2018-03-19 2025-03-18 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Microchip capillary electrophoresis assays and reagents
MX2020009550A (es) * 2018-03-22 2020-11-11 Keires Ag Proteinas de union a antigeno antagonistas.
CA3094747A1 (en) * 2018-03-23 2019-09-26 ISR Immune System Regulation Holding AB (publ) Combinations of macrolide compounds and immune checkpoint inhibitors
EP3768715A1 (en) 2018-03-23 2021-01-27 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against mica and/or micb and uses thereof
CN108546297B (zh) * 2018-03-29 2019-08-02 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 针对pd-1的单克隆抗体及其应用
KR20200139724A (ko) 2018-03-30 2020-12-14 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 종양을 치료하는 방법
EP3774903A1 (en) 2018-04-04 2021-02-17 Bristol-Myers Squibb Company Anti-cd27 antibodies and uses thereof
AU2019247511B2 (en) 2018-04-06 2025-10-16 Atyr Pharma, Inc. Compositions and methods comprising anti-NRP2 antibodies
US20210147547A1 (en) 2018-04-13 2021-05-20 Novartis Ag Dosage Regimens For Anti-Pd-L1 Antibodies And Uses Thereof
CN109336975B (zh) * 2018-04-18 2022-05-13 中国科学院微生物研究所 一种靶向pd-1的肿瘤抑制性抗体及其应用
PE20210160A1 (es) 2018-04-25 2021-01-26 Innate Tumor Immunity Inc Moduladores de nlrp3
CN108840932B (zh) * 2018-04-28 2022-03-29 中国科学院微生物研究所 一种pd-1特异性抗体及其抗肿瘤应用
CN110404066B (zh) * 2018-04-28 2022-06-17 齐鲁制药有限公司 一种抗人pd-1的单克隆抗体制剂、联合用药物及其用途
MX2020011684A (es) 2018-05-04 2020-12-10 Merck Patent Gmbh Inhibicion combinada de pd-1/pd-l1, tgfbeta y dna-pk para el tratamiento del cancer.
TW202016125A (zh) 2018-05-10 2020-05-01 美商再生元醫藥公司 用於定量及調節蛋白質黏度之系統與方法
KR20210010896A (ko) 2018-05-14 2021-01-28 이뮤노코어 리미티드 이기능성 결합 폴리펩타이드
CN112236455B (zh) 2018-05-17 2023-05-16 南京维立志博生物科技有限公司 结合pd-1的抗体及其用途
TWI869346B (zh) 2018-05-30 2025-01-11 瑞士商諾華公司 Ｅｎｔｐｄ２抗體、組合療法、及使用該等抗體和組合療法之方法
WO2019232319A1 (en) 2018-05-31 2019-12-05 Peloton Therapeutics, Inc. Compositions and methods for inhibiting cd73
WO2019232244A2 (en) 2018-05-31 2019-12-05 Novartis Ag Antibody molecules to cd73 and uses thereof
KR102870868B1 (ko) 2018-06-01 2025-10-15 노파르티스 아게 Bcma에 대한 결합 분자 및 이의 용도
US12448448B2 (en) 2018-06-20 2025-10-21 Incyte Corporation Anti-PD-1 antibodies and uses thereof
TW202504917A (zh) 2018-06-21 2025-02-01 美商再生元醫藥公司 用雙特異性抗CD3xMUC16抗體及抗PD-1抗體治療癌症之方法
IL279354B1 (en) 2018-06-21 2026-02-01 Regeneron Pharma Bispecific antibodies against psma and against cd28 and their uses
MY205645A (en) 2018-06-23 2024-11-02 Genentech Inc Methods of treating lung cancer with a pd-1 axis binding antagonist, a platinum agent, and a topoisomerase ii inhibitor
US11795206B2 (en) 2018-06-24 2023-10-24 Yunbiao Lu Specific bifunctional BY-001 (active composition of homomultimer of chimeric protein pd-L1 / fc-gamma1) down regulates the activation of human immune cells and the use thereof
US10597453B2 (en) 2018-06-29 2020-03-24 Gensun Biopharma, Inc. Antitumor immune checkpoint regulator antagonists
AU2019301070B2 (en) * 2018-07-09 2025-09-11 Precigen, Inc. Fusion constructs and methods of using thereof
AR116109A1 (es) 2018-07-10 2021-03-31 Novartis Ag Derivados de 3-(5-amino-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona y usos de los mismos
BR122022012697B1 (pt) 2018-07-10 2023-04-04 Novartis Ag Usos de derivados de 3-(5-hidróxi-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6- diona, e kit
WO2020018789A1 (en) 2018-07-18 2020-01-23 Genentech, Inc. Methods of treating lung cancer with a pd-1 axis binding antagonist, an antimetabolite, and a platinum agent
US12258407B2 (en) 2018-07-19 2025-03-25 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co., Ltd. Anti-PD-1 antibodies, dosages and uses thereof
JP2021531306A (ja) 2018-07-25 2021-11-18 アドバンスド アクセラレーター アプリケーションズ エスエー 神経内分泌腫瘍の処置の方法
JP7490925B2 (ja) 2018-07-26 2024-05-28 エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド Ｎｒｐ２関連疾患を治療するための組成物および方法
CN112739371A (zh) 2018-07-26 2021-04-30 百时美施贵宝公司 用于治疗癌症的lag-3组合疗法
WO2020021061A1 (en) 2018-07-26 2020-01-30 Pieris Pharmaceuticals Gmbh Humanized anti-pd-1 antibodies and uses thereof
WO2020037091A1 (en) 2018-08-16 2020-02-20 Innate Tumor Immunity, Inc. Imidazo[4,5-c]quinoline derived nlrp3-modulators
WO2020037094A1 (en) 2018-08-16 2020-02-20 Innate Tumor Immunity, Inc. Substitued 4-amino-1h-imidazo[4,5-c]quinoline compounds and improved methods for their preparation
ES2974964T3 (es) 2018-08-16 2024-07-02 Innate Tumor Immunity Inc Moduladores de NLRP3 derivados de imidazo[4,5-c]quinolina
WO2020041655A1 (en) 2018-08-24 2020-02-27 Sanofi Therapeutic rna for solid tumor cancers
US20210246219A1 (en) 2018-08-27 2021-08-12 Pieris Pharmaceuticals Gmbh Combination therapies comprising cd137/her2 bispecific agents and pd-1 axis inhibitors and uses thereof
CN119264211A (zh) 2018-08-27 2025-01-07 瑞泽恩制药公司 拉曼光谱在下游纯化中的应用
JP7511542B2 (ja) 2018-08-30 2024-07-05 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド タンパク質複合体を特徴づけるための方法
CA3110513A1 (en) 2018-08-31 2020-03-05 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Dosing strategy that mitigates cytokine release syndrome for cd3/c20 bispecific antibodies
WO2020044252A1 (en) 2018-08-31 2020-03-05 Novartis Ag Dosage regimes for anti-m-csf antibodies and uses thereof
EP3847154A1 (en) 2018-09-03 2021-07-14 F. Hoffmann-La Roche AG Carboxamide and sulfonamide derivatives useful as tead modulators
WO2020049534A1 (en) 2018-09-07 2020-03-12 Novartis Ag Sting agonist and combination therapy thereof for the treatment of cancer
JP2022512642A (ja) 2018-10-09 2022-02-07 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー がんを治療するための抗ＭｅｒＴＫ抗体
US12331320B2 (en) 2018-10-10 2025-06-17 The Research Foundation For The State University Of New York Genome edited cancer cell vaccines
JP2022504905A (ja) 2018-10-16 2022-01-13 ノバルティス アーゲー 標的化療法に対する応答を予測するためのバイオマーカーとしての単独の又は免疫マーカーと組み合わせた腫瘍突然変異負荷
LT4445958T (lt) 2018-10-19 2025-12-10 Bristol-Myers Squibb Company Kompleksinė terapija, skirta melanomai gydyti
WO2020086724A1 (en) 2018-10-23 2020-04-30 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
US20230053449A1 (en) 2018-10-31 2023-02-23 Novartis Ag Dc-sign antibody drug conjugates
CA3118964A1 (en) * 2018-11-05 2020-05-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Dosing regimen of anti-tigit antibody for treatment of cancer
US11046769B2 (en) * 2018-11-13 2021-06-29 Compass Therapeutics Llc Multispecific binding constructs against checkpoint molecules and uses thereof
SI3880186T1 (sl) 2018-11-14 2024-07-31 Regeneron Pharmaceuticals, Inc., Intralezijska uporaba zaviralcev PD-1 za zdravljenje kožnega raka
CN113316590B (zh) 2018-11-16 2025-02-28 百时美施贵宝公司 抗nkg2a抗体及其用途
US20230054194A1 (en) 2018-11-19 2023-02-23 Ariagen, Inc. Methods of Treating Cancer
JP7699542B2 (ja) 2018-11-20 2025-06-27 コーネル ユニバーシティー 放射線核種の大環状錯体およびがんの放射線療法におけるそれらの使用
AU2019392090A1 (en) 2018-12-03 2021-06-17 Agensys, Inc. Pharmaceutical compositions comprising anti-191P4D12 antibody drug conjugates and methods of use thereof
US11034710B2 (en) 2018-12-04 2021-06-15 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. CDK9 inhibitors and polymorphs thereof for use as agents for treatment of cancer
KR102835299B1 (ko) 2018-12-04 2025-07-18 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 다중 동위원소체 반응 모니터링에 의한 샘플내 보정 곡선을 사용한 분석 방법
BR112021011224A2 (pt) 2018-12-11 2021-08-24 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Inibidores de alk5
EP3666905A1 (en) * 2018-12-11 2020-06-17 Sanofi E. coli positive for pks island as marker of positive response to anti-pd1 therapy in colorectal cancer
US11453721B2 (en) 2018-12-19 2022-09-27 Regeneran Pharmaceuticals, Inc. Bispecific anti-MUC16 x anti-CD28 antibodies and uses thereof
FI3898668T3 (fi) 2018-12-19 2023-11-28 Humabs Biomed Sa B-hepatiittivirusta neutraloivia vasta-aineita ja niiden käyttöjä
MA54540A (fr) 2018-12-19 2021-10-27 Regeneron Pharma Anticorps anti-cd28 x anti-cd22 bispécifiques et leurs utilisations
KR20210106437A (ko) 2018-12-20 2021-08-30 노파르티스 아게 3-(1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온 유도체를 포함하는 투약 요법 및 약학적 조합물
RS67553B1 (sr) 2018-12-20 2026-01-30 Humabs Biomed Sa Kombinovana hbv terapija
US20220025036A1 (en) 2018-12-21 2022-01-27 Novartis Ag Use of il-1beta binding antibodies
ES2963700T3 (es) * 2018-12-21 2024-04-01 Ose Immunotherapeutics Anticuerpo humanizado anti-PD-1 humana
BR112021012066A2 (pt) 2018-12-21 2021-11-03 Onxeo Novas moléculas de ácido nucleico conjugadas e seus usos
WO2020128637A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Novartis Ag Use of il-1 binding antibodies in the treatment of a msi-h cancer
JP2022514087A (ja) 2018-12-21 2022-02-09 ノバルティス アーゲー ＩＬ－１β結合抗体の使用
KR20210107730A (ko) 2018-12-21 2021-09-01 노파르티스 아게 골수 형성이상 증후군의 치료 또는 예방에서의 il-1 베타 항체의 용도
WO2020136133A1 (en) 2018-12-23 2020-07-02 F. Hoffmann-La Roche Ag Tumor classification based on predicted tumor mutational burden
SG11202106765XA (en) * 2018-12-27 2021-07-29 Gigagen Inc Anti-pd-1 binding proteins and methods of use thereof
AU2020208193A1 (en) 2019-01-14 2021-07-29 BioNTech SE Methods of treating cancer with a PD-1 axis binding antagonist and an RNA vaccine
US12391675B2 (en) 2019-01-14 2025-08-19 Innate Tumor Immunity, Inc. NLRP3 modulators
US12338228B2 (en) 2019-01-14 2025-06-24 Innate Tumor Immunity, Inc. NLRP3 modulators
WO2020150114A1 (en) 2019-01-14 2020-07-23 Innate Tumor Immunity, Inc. Heterocyclic nlrp3 modulators, for use in the treatment of cancer
CN113301963A (zh) 2019-01-14 2021-08-24 先天肿瘤免疫公司 用于治疗癌症的作为nlrp3调节剂的取代的喹唑啉类
WO2020150491A1 (en) 2019-01-16 2020-07-23 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for characterizing disulfide bonds
AU2020210614A1 (en) 2019-01-21 2021-08-26 Sanofi Therapeutic RNA and anti-PD1 antibodies for advanced stage solid tumor cancers
BR112021014662A2 (pt) 2019-02-01 2021-09-21 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Tratamentos de combinação para o câncer que compreendem belantamab mafodotin e um anticorpo anti ox40 e usos e métodos dos mesmos
MX2021009562A (es) 2019-02-12 2021-09-08 Novartis Ag Combinacion farmaceutica que comprende tno155 y un inhibidor de pd-1.
KR20260008165A (ko) 2019-02-12 2026-01-15 스미토모 파마 아메리카, 인크. 헤테로시클릭 단백질 키나제 억제제를 포함하는 제제
CN113490528B (zh) 2019-02-15 2024-12-03 诺华股份有限公司 3-(1-氧代-5-(哌啶-4-基)异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮衍生物及其用途
CA3123519A1 (en) 2019-02-15 2020-08-20 Novartis Ag Substituted 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
MA55084A (fr) * 2019-02-28 2022-01-05 Regeneron Pharma Administration d'inhibiteurs de pd-1 pour le traitement du cancer de la peau
MX2021010560A (es) 2019-03-06 2021-11-12 Regeneron Pharma Inhibidores de la via il-4/il-13 para una eficacia aumentada en el tratamiento de cancer.
WO2020185722A2 (en) 2019-03-13 2020-09-17 Merck Sharp & Dohme Corp. Anti-cancer combination therapies comprising ctla-4 and pd-1 blocking agents
WO2020191326A1 (en) 2019-03-20 2020-09-24 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Treatment of acute myeloid leukemia (aml) with venetoclax failure
CA3134335A1 (en) 2019-03-22 2020-10-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Egfr x cd28 multispecific antibodies
KR20210141621A (ko) 2019-03-22 2021-11-23 스미토모 다이니폰 파마 온콜로지, 인크. Pkm2 조정제를 포함하는 조성물 및 그를 사용한 치료 방법
KR20210146348A (ko) 2019-03-28 2021-12-03 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 종양을 치료하는 방법
WO2020198676A1 (en) 2019-03-28 2020-10-01 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
MX2021012398A (es) 2019-04-12 2021-11-12 Vascular Biogenics Ltd Metodos de terapia antitumoral.
IL287177B2 (en) 2019-04-15 2026-04-01 Ariagen Inc Indole-based chiral thiazole derivatives and their use
EP3725370A1 (en) 2019-04-19 2020-10-21 ImmunoBrain Checkpoint, Inc. Modified anti-pd-l1 antibodies and methods and uses for treating a neurodegenerative disease
BR112021020867A2 (pt) 2019-04-19 2022-01-04 Genentech Inc Anticorpos, ácido nucleico, vetor, célula hospedeira, método de produção de um anticorpo, imunoconjugado, formulação farmacêutica, usos do anticorpo, método de tratamento de um indivíduo com câncer e método para reduzir a depuração
WO2020231992A1 (en) 2019-05-13 2020-11-19 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Improved competitive ligand binding assays
US12012374B2 (en) 2019-05-13 2024-06-18 Bristol-Myers Squibb Company Agonists of ROR GAMMAt
EP3969040A1 (en) 2019-05-13 2022-03-23 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Combination of pd-1 inhibitors and lag-3 inhibitors for enhanced efficacy in treating cancer
US20230295087A1 (en) 2019-05-13 2023-09-21 Bristol-Myers Squibb Company AGONISTS OF ROR GAMMAt
BR112021023345A2 (pt) 2019-05-20 2022-02-01 Pandion Operations Inc Imunotolerância com alvo em madcam
WO2020239558A1 (en) 2019-05-24 2020-12-03 Pfizer Inc. Combination therapies using cdk inhibitors
US20220363760A1 (en) 2019-05-30 2022-11-17 Bristol-Myers Squibb Company Multi-tumor gene signature for suitability to immuno-oncology therapy
KR20220016155A (ko) 2019-05-30 2022-02-08 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 면역-종양학 (i-o) 요법에 적합한 대상체를 확인하는 방법
WO2020243570A1 (en) 2019-05-30 2020-12-03 Bristol-Myers Squibb Company Cell localization signature and combination therapy
WO2020252471A1 (en) * 2019-06-14 2020-12-17 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Antibodies against pd-1 and methods of use thereof
EP3986460A2 (en) 2019-06-18 2022-04-27 Janssen Sciences Ireland Unlimited Company Combination of hepatitis b virus (hbv) vaccines and anti-pd-1 antibody
KR20220041080A (ko) 2019-06-18 2022-03-31 얀센 사이언시즈 아일랜드 언리미티드 컴퍼니 B형 간염 바이러스(hbv) 백신 및 항-pd-1 또는 항-pc-l1 항체의 조합
CN114340735B (zh) 2019-06-28 2024-11-12 璟尚生物制药公司 突变的TGFβ1-RII胞外域和免疫球蛋白支架组成的抗肿瘤拮抗剂
EP3994132A1 (en) 2019-07-03 2022-05-11 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Tyrosine kinase non-receptor 1 (tnk1) inhibitors and uses thereof
JP7674278B2 (ja) * 2019-07-03 2025-05-09 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 抗ニューヨーク食道扁平上皮がん１（ｎｙ－ｅｓｏ－１）抗原結合タンパク質およびその使用方法
JP6881658B2 (ja) 2019-07-05 2021-06-02 小野薬品工業株式会社 Ｐｄ−１／ｃｄ３二重特異性タンパク質による血液がん治療
WO2021005607A1 (en) * 2019-07-09 2021-01-14 National Institute For Biotechnology In The Negev Ltd. Antibodies with reduced immunogenicity
AU2020322474A1 (en) * 2019-08-01 2022-03-10 Vaccinex,Inc. Combined inhibition of semaphorin-4D and TGFβ and compositions therefor
US20220273718A1 (en) * 2019-08-02 2022-09-01 University Of Virginia Patent Foundation Bispecific antibody targeting of t regulatory cells for treatment of inflammatory conditions
US20220306630A1 (en) 2019-08-06 2022-09-29 Bristol-Myers Squibb Company AGONISTS OF ROR GAMMAt
WO2021024020A1 (en) 2019-08-06 2021-02-11 Astellas Pharma Inc. Combination therapy involving antibodies against claudin 18.2 and immune checkpoint inhibitors for treatment of cancer
US20220332825A1 (en) 2019-08-08 2022-10-20 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Bispecific protein
US11629190B2 (en) 2019-08-15 2023-04-18 Oregon State University Canine antibody therapeutic for treating cancer
TW202124446A (zh) 2019-09-18 2021-07-01 瑞士商諾華公司 與ｅｎｔｐｄ２抗體之組合療法
CN114502590A (zh) 2019-09-18 2022-05-13 诺华股份有限公司 Entpd2抗体、组合疗法、以及使用这些抗体和组合疗法的方法
WO2021055994A1 (en) 2019-09-22 2021-03-25 Bristol-Myers Squibb Company Quantitative spatial profiling for lag-3 antagonist therapy
WO2021061790A1 (en) 2019-09-24 2021-04-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Systems and methods for chromatography use and regeneration
KR20220066950A (ko) 2019-09-25 2022-05-24 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 암 요법을 위한 복합 바이오마커
AU2020351751A1 (en) 2019-09-25 2022-04-21 Seagen Inc. Combination anti-CD30 ADC, anti-PD-1 and chemotherapeutic for treatment of hematopoietic cancers
BR112022007179A2 (pt) 2019-10-21 2022-08-23 Novartis Ag Inibidores de tim-3 e usos dos mesmos
CN114786679A (zh) 2019-10-21 2022-07-22 诺华股份有限公司 具有维奈托克和tim-3抑制剂的组合疗法
US12297451B1 (en) 2019-10-25 2025-05-13 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Cell culture medium
EP4051321A4 (en) 2019-10-30 2023-11-22 Duke University IMMUNOTHERAPY WITH COMBINATION THERAPY INCLUDING AN IMMUNOTOXIN
AU2020380288B2 (en) * 2019-11-04 2024-02-01 Inovio Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy to treat brain cancer
US20220387529A1 (en) 2019-11-04 2022-12-08 Duke University Treatment for primary and metastatic cancer
US20220390455A1 (en) 2019-11-05 2022-12-08 Bristol-Myers Squibb Company M-protein assays and uses thereof
WO2021092220A1 (en) 2019-11-06 2021-05-14 Bristol-Myers Squibb Company Methods of identifying a subject with a tumor suitable for a checkpoint inhibitor therapy
WO2021092221A1 (en) 2019-11-06 2021-05-14 Bristol-Myers Squibb Company Methods of identifying a subject with a tumor suitable for a checkpoint inhibitor therapy
WO2021092071A1 (en) 2019-11-07 2021-05-14 Oncxerna Therapeutics, Inc. Classification of tumor microenvironments
US20220411499A1 (en) 2019-11-08 2022-12-29 Bristol-Myers Squibb Company LAG-3 Antagonist Therapy for Melanoma
TW202130618A (zh) 2019-11-13 2021-08-16 美商建南德克公司 治療性化合物及使用方法
WO2021097256A1 (en) 2019-11-14 2021-05-20 Cohbar, Inc. Cxcr4 antagonist peptides
KR20220104208A (ko) 2019-11-22 2022-07-26 세라밴스 바이오파마 알앤디 아이피, 엘엘씨 Alk5 억제제로서 치환된 1,5-나프티리딘 또는 퀴놀린
US20230000864A1 (en) 2019-11-22 2023-01-05 Sumitomo Pharma Oncology, Inc. Solid dose pharmaceutical composition
CA3158119A1 (en) 2019-11-25 2021-06-03 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Sustained release formulations using non-aqueous emulsions
KR20220114002A (ko) 2019-12-09 2022-08-17 씨젠 인크. Liv1-adc 및 pd-1 길항제를 사용하는 병용 요법
IL294085A (en) 2019-12-19 2022-08-01 Bristol Myers Squibb Co Combinations of dgk inhibitors and checkpoint antagonists
BR112022011902A2 (pt) 2019-12-20 2022-09-06 Novartis Ag Terapias de combinação
EP4079763A4 (en) * 2019-12-20 2023-10-11 Guangdong Feipeng Pharmaceutical Co., Ltd MONOCLONAL ANTIBODY AGAINST HUMAN PROGRAMMED DEATH-1 (PD-1)
EP4087842A1 (en) 2020-01-10 2022-11-16 Innate Tumor Immunity, Inc. Nlrp3 modulators
BR112022012310A2 (pt) 2020-01-17 2022-09-06 Novartis Ag Combinação compreendendo um inibidor de tim-3 e um agente hipometilante para uso no tratamento de síndrome mielodisplásica ou leucemia mielomonocítica crônica
CN115398236B (zh) 2020-01-21 2024-06-11 瑞泽恩制药公司 用于糖基化的蛋白质的电泳的去糖基化方法
KR20210095781A (ko) 2020-01-24 2021-08-03 주식회사 에이프릴바이오 항원결합 단편 및 생리활성 이펙터 모이어티로 구성된 융합 컨스트럭트를 포함하는 다중결합항체 및 이를 포함하는 약학조성물
CA3168923A1 (en) 2020-01-30 2021-08-05 ONA Therapeutics S.L. Combination therapy for treatment of cancer and cancer metastasis
MX2022009391A (es) 2020-01-31 2022-09-26 Genentech Inc Metodos para inducir linfocitos t especificos para neoepitopo con un antagonista de union al eje de pd-1 y una vacuna de arn.
JP2023514152A (ja) 2020-02-06 2023-04-05 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｉｌ－１０およびその使用
CN113244385A (zh) * 2020-02-07 2021-08-13 上海君实生物医药科技股份有限公司 抗pd-1抗体在治疗恶性肿瘤中的用途
EP4107187A4 (en) 2020-02-21 2024-07-03 Pandion Operations, Inc. TISSUE-TARGETED IMMUNOTOLERANCE WITH A CD39 EFFECTOR
EP4110341A2 (en) 2020-02-28 2023-01-04 Novartis AG A triple pharmaceutical combination comprising dabrafenib, an erk inhibitor and a raf inhibitor
US11787867B2 (en) 2020-03-06 2023-10-17 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-GITR antibodies and uses thereof
AU2021232158A1 (en) 2020-03-06 2022-09-29 Ona Therapeutics, S.L. Anti-CD36 antibodies and their use to treat cancer
EP4114398A1 (en) 2020-03-06 2023-01-11 Celgene Quanticel Research, Inc. Combination of an lsd-1 inhibitor and nivolumab for use in treating sclc or sqnsclc
AU2021244200A1 (en) 2020-03-23 2022-11-24 Bristol-Myers Squibb Company Anti-CCR8 antibodies for treating cancer
WO2021195415A1 (en) * 2020-03-26 2021-09-30 Cureimmune Therapeutics Inc. Anti-pd-1 antibodies and methods of use
CN115916963A (zh) 2020-03-27 2023-04-04 门德斯有限公司 白血病来源的经修饰细胞用于增强过继性细胞治疗的效力的离体用途
TW202204339A (zh) 2020-03-31 2022-02-01 美商施萬生物製藥研發 Ip有限責任公司 經取代的嘧啶及使用方法
US20230287081A1 (en) * 2020-04-16 2023-09-14 Nantong Yichen Biopharma. Co. Ltd. PD-1 mutant polypeptide and preparation and application thereof
IL296226A (en) 2020-04-21 2022-11-01 Novartis Ag Dosing regimen for treating a disease modulated by csf-1r
PE20231648A1 (es) 2020-04-22 2023-10-17 Merck Sharp And Dohme Llc CONJUGADOS DE INTERLEUCINA 2 HUMANA SESGADOS AL DIMERO DEL RECEPTOR DE INTERLEUCINA 2 byc Y CONJUGADOS CON UN POLIMERO HIDROSOLUBLE NO PEPTIDICO
CR20220596A (es) 2020-05-26 2023-01-23 Boehringer Ingelheim Int Anticuerpos anti-pd-1
MX2022014734A (es) * 2020-05-26 2023-03-15 Regeneron Pharma Metodos de tratamiento del cancer de cuello uterino mediante la administracion del anticuerpo inhibidor de pd-1 cemiplimab.
KR20230029611A (ko) * 2020-05-27 2023-03-03 다나-파버 캔서 인스티튜트 인크. T 세포를 선택적으로 조절하기 위한 이중특이적 분자
MX2022015157A (es) 2020-06-02 2023-01-16 Arcus Biosciences Inc Anticuerpos para tigit.
EP4165041A1 (en) 2020-06-10 2023-04-19 Theravance Biopharma R&D IP, LLC Naphthyridine derivatives useful as alk5 inhibitors
TW202214857A (zh) 2020-06-19 2022-04-16 法商昂席歐公司 新型結合核酸分子及其用途
KR20230027056A (ko) 2020-06-23 2023-02-27 노파르티스 아게 3-(1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온 유도체를 포함하는 투약 요법
EP4171617A1 (en) 2020-06-30 2023-05-03 Mendus B.V. Use of leukemia-derived cells in ovarian cancer vaccines
KR20230035576A (ko) 2020-07-07 2023-03-14 비온테크 에스이 Hpv 양성 암 치료용 rna
WO2022009157A1 (en) 2020-07-10 2022-01-13 Novartis Ag Lhc165 and spartalizumab combinations for treating solid tumors
WO2022011256A1 (en) 2020-07-10 2022-01-13 Precigen, Inc. Fusion constructs and methods of using thereof
US11787775B2 (en) 2020-07-24 2023-10-17 Genentech, Inc. Therapeutic compounds and methods of use
JP7819176B2 (ja) 2020-08-03 2026-02-24 ノバルティス アーゲー ヘテロアリール置換３－（１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン誘導体及びその使用
US12516307B2 (en) 2020-08-18 2026-01-06 Onchilles Pharma, Inc. Modified porcine pancreatic elastase proteins
KR20230056761A (ko) 2020-08-26 2023-04-27 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 Pd-1 저해제의 투여에 의한 암 치료 방법
IL300813A (en) 2020-08-28 2023-04-01 Bristol Myers Squibb Co LAG-3 antagonist therapy for hepatocellular carcinoma
WO2022047108A1 (en) 2020-08-31 2022-03-03 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Asparagine feed strategies to improve cell culture performance and mitigate asparagine sequence variants
EP4204020A1 (en) 2020-08-31 2023-07-05 Advanced Accelerator Applications International S.A. Method of treating psma-expressing cancers
KR102942647B1 (ko) * 2020-08-31 2026-03-20 바이오션, 인코포레이티드 Pd-1에 결합하는 항체 및 이의 용도
EP4204021A1 (en) 2020-08-31 2023-07-05 Advanced Accelerator Applications International S.A. Method of treating psma-expressing cancers
AU2021334361A1 (en) 2020-08-31 2023-05-11 Bristol-Myers Squibb Company Cell localization signature and immunotherapy
WO2022049526A1 (en) 2020-09-02 2022-03-10 Pharmabcine Inc. Combination therapy of a pd-1 antagonist and an antagonist for vegfr-2 for treating patients with cancer
CN116194142A (zh) 2020-09-03 2023-05-30 瑞泽恩制药公司 通过施用pd-1抑制剂治疗癌症疼痛的方法
MX2023002884A (es) 2020-09-14 2023-03-31 Boehringer Ingelheim Int Vacuna heterologa de estimulo primario.
MX2023003214A (es) 2020-09-18 2023-05-24 Regeneron Pharma Moleculas de union al antigeno que se unen a cd38 y/o cd28 y usos de las mismas.
JP2023545926A (ja) 2020-09-24 2023-11-01 メルク・シャープ・アンド・ドーム・エルエルシー プログラム死受容体１（ｐｄ－１）抗体とヒアルロニダーゼ変異体とそれらのフラグメントとの安定製剤およびその使用方法
JP2023544164A (ja) 2020-10-02 2023-10-20 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド サイトカイン放出症候群の低減を伴うがんを治療するための抗体の組合せ
CN116406369A (zh) 2020-10-05 2023-07-07 百时美施贵宝公司 用于浓缩蛋白质的方法
US20230364127A1 (en) 2020-10-06 2023-11-16 Codiak Biosciences, Inc. Extracellular vesicle-aso constructs targeting stat6
AR123855A1 (es) 2020-10-20 2023-01-18 Genentech Inc Anticuerpos anti-mertk conjugados con peg y métodos de uso
KR20230093282A (ko) 2020-10-23 2023-06-27 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 폐암에 대한 lag-3 길항제 요법
WO2022093981A1 (en) 2020-10-28 2022-05-05 Genentech, Inc. Combination therapy comprising ptpn22 inhibitors and pd-l1 binding antagonists
MX2023004847A (es) 2020-10-28 2023-07-11 Ikena Oncology Inc Combinación de un inhibidor del receptor de hidrocarburos de arilo (ahr) con un inhibidor de pdx o doxorrubicina.
AU2021374594B2 (en) 2020-11-04 2026-03-05 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies and anti-cd79b antibody drug conjugates
JP7716473B2 (ja) 2020-11-04 2025-07-31 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｃｄ２０／抗ｃｄ３二重特異性抗体の皮下投薬
TWI874719B (zh) 2020-11-04 2025-03-01 美商建南德克公司 用抗cd20/抗cd3雙特異性抗體進行治療之給藥
CA3199095A1 (en) 2020-11-06 2022-05-12 Novartis Ag Cd19 binding molecules and uses thereof
US20230414660A1 (en) * 2020-11-13 2023-12-28 Ludwig Institute For Cancer Research Ltd Pd-1 decoy variants for immunotherapy
WO2022115588A1 (en) 2020-11-25 2022-06-02 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Sustained release formulations using non-aqueous membrane emulsification
US20220168293A1 (en) 2020-12-02 2022-06-02 Pfizer Inc. Time to resolution of axitinib-related adverse events
EP4255481A1 (en) 2020-12-02 2023-10-11 Genentech, Inc. Methods and compositions for neoadjuvant and adjuvant urothelial carcinoma therapy
WO2022120179A1 (en) 2020-12-03 2022-06-09 Bristol-Myers Squibb Company Multi-tumor gene signatures and uses thereof
TW202237119A (zh) 2020-12-10 2022-10-01 美商住友製藥腫瘤公司 Ａｌｋ﹘５抑制劑和彼之用途
AU2021400979A1 (en) * 2020-12-15 2023-06-29 Bicara Therapeutics Inc. Combination therapy for the treatment of cancer
KR20230121854A (ko) 2020-12-17 2023-08-21 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. 단백질-캡슐화 마이크로겔의 제작
TW202245808A (zh) 2020-12-21 2022-12-01 德商拜恩迪克公司 用於治療癌症之治療性ｒｎａ
WO2022135666A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 BioNTech SE Treatment schedule for cytokine proteins
WO2022135667A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 BioNTech SE Therapeutic rna for treating cancer
JP2024501029A (ja) 2020-12-28 2024-01-10 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｐｄ１／ｐｄ－ｌ１抗体の皮下投与
US20220233693A1 (en) 2020-12-28 2022-07-28 Bristol-Myers Squibb Company Antibody Compositions and Methods of Use Thereof
MX2023008527A (es) 2021-01-20 2023-07-28 Regeneron Pharma Metodos para mejorar el valor proteico en cultivo celular.
JP2024506249A (ja) 2021-01-22 2024-02-13 メンドゥス・ベスローテン・フェンノートシャップ 腫瘍ワクチン接種の方法
US20240141060A1 (en) 2021-01-29 2024-05-02 Novartis Ag Dosage regimes for anti-cd73 and anti-entpd2 antibodies and uses thereof
WO2022169921A1 (en) 2021-02-04 2022-08-11 Bristol-Myers Squibb Company Benzofuran compounds as sting agonists
WO2022173931A1 (en) 2021-02-11 2022-08-18 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating cancer by administering a neoadjuvant pd-1 inhibitor
EP4297782A1 (en) * 2021-02-23 2024-01-03 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating lung cancer by administering a pd-1 inhibitor
JP2024512299A (ja) 2021-03-03 2024-03-19 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド タンパク質の粘度を定量及び変更するためのシステム及び方法
CA3212351A1 (en) 2021-03-12 2022-09-15 Mendus B.V. Methods of vaccination and use of cd47 blockade
US20240310266A1 (en) 2021-03-18 2024-09-19 Novartis Ag Biomarkers for cancer and methods of use thereof
EP4313123A1 (en) 2021-03-23 2024-02-07 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating cancer in immunosuppressed or immunocompromised patients by administering a pd-1 inhibitor
IL306090A (en) 2021-03-25 2023-11-01 Oncxerna Therapeutics Inc Targeted cancer treatments
TW202304506A (zh) 2021-03-25 2023-02-01 日商安斯泰來製藥公司 涉及抗claudin 18.2抗體的組合治療以治療癌症
AU2022243005A1 (en) 2021-03-26 2023-10-05 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods and systems for developing mixing protocols
CN117858719A (zh) 2021-03-29 2024-04-09 朱诺治疗学股份有限公司 使用检查点抑制剂疗法和car t细胞疗法的组合进行给药和治疗的方法
EP4314068A1 (en) 2021-04-02 2024-02-07 The Regents Of The University Of California Antibodies against cleaved cdcp1 and uses thereof
TW202304979A (zh) 2021-04-07 2023-02-01 瑞士商諾華公司 抗ＴＧＦβ抗體及其他治療劑用於治療增殖性疾病之用途
TW202309022A (zh) 2021-04-13 2023-03-01 美商努法倫特公司 用於治療具egfr突變之癌症之胺基取代雜環
CA3213632A1 (en) 2021-04-30 2022-11-03 F. Hoffmann-La Roche Ag Dosing for combination treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibody and anti-cd79b antibody drug conjugate
WO2022232503A1 (en) 2021-04-30 2022-11-03 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods and compositions for cancer
AR125874A1 (es) 2021-05-18 2023-08-23 Novartis Ag Terapias de combinación
EP4346887A1 (en) 2021-05-25 2024-04-10 Edelweiss Immune Inc C-x-c motif chemokine receptor 6 (cxcr6) binding molecules, and methods of using the same
WO2022251359A1 (en) 2021-05-26 2022-12-01 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Bicyclic inhibitors of alk5 and methods of use
BR112023024984A2 (pt) 2021-06-01 2024-02-20 Regeneron Pharma Tampão de amostra de eletroforese aquosa, método para identificar contaminantes ou impurezas em uma amostra de droga proteica, e, kit
EP4346904A1 (en) 2021-06-03 2024-04-10 Synthorx, Inc. Head and neck cancer combination therapy comprising an il-2 conjugate and cetuximab
GB202107994D0 (en) 2021-06-04 2021-07-21 Kymab Ltd Treatment of cancer
TW202317623A (zh) * 2021-06-14 2023-05-01 美商再生元醫藥公司 基於il2之治療劑及其使用方法
KR20240022608A (ko) 2021-06-18 2024-02-20 젠자임 코포레이션 항-tgf-베타 항체 제형 및 이의 용도
WO2023279092A2 (en) 2021-07-02 2023-01-05 Genentech, Inc. Methods and compositions for treating cancer
CA3225254A1 (en) 2021-07-13 2023-01-19 BioNTech SE Multispecific binding agents against cd40 and cd137 in combination therapy for cancer
IL310201A (en) * 2021-07-19 2024-03-01 Regeneron Pharma Combination of inhibitor-control inhibitor and oncolytic virus for cancer treatment
AU2022314734A1 (en) 2021-07-19 2024-02-08 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Il12 receptor agonists and methods of use thereof
AU2022317820A1 (en) 2021-07-28 2023-12-14 F. Hoffmann-La Roche Ag Methods and compositions for treating cancer
WO2023010094A2 (en) 2021-07-28 2023-02-02 Genentech, Inc. Methods and compositions for treating cancer
KR20240042476A (ko) 2021-07-30 2024-04-02 오엔에이 테라퓨틱스 에스.엘. 항-cd36 항체 및 암을 치료하기 위한 이의 용도
IL310808A (en) 2021-08-13 2024-04-01 Inovio Pharmaceuticals Inc Combination therapy to treat brain cancer
KR20240046251A (ko) 2021-08-16 2024-04-08 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. 신규 il27 수용체 효능제 및 그의 사용 방법
US20230077710A1 (en) 2021-09-08 2023-03-16 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. HIGH-THROUGHPUT AND MASS-SPECTROMETRY-BASED METHOD FOR QUANTITATING ANTIBODIES AND OTHER Fc-CONTAINING PROTEINS
CA3232463A1 (en) 2021-09-20 2023-03-23 Philip Mellors Methods of controlling antibody heterogeneity
WO2023051926A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 BioNTech SE Treatment involving non-immunogenic rna for antigen vaccination and pd-1 axis binding antagonists
WO2023056403A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 Genentech, Inc. Methods for treatment of hematologic cancers using anti-tigit antibodies, anti-cd38 antibodies, and pd-1 axis binding antagonists
TW202327595A (zh) 2021-10-05 2023-07-16 美商輝瑞大藥廠 用於治療癌症之氮雜內醯胺化合物的組合
EP4413040A1 (en) 2021-10-06 2024-08-14 Genmab A/S Multispecific binding agents against pd-l1 and cd137 in combination
WO2023059803A1 (en) 2021-10-07 2023-04-13 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Ph meter calibration and correction
CA3230984A1 (en) 2021-10-07 2023-04-13 Ross BROWNE Systems and methods of ph modeling and control
TW202333802A (zh) 2021-10-11 2023-09-01 德商拜恩迪克公司 用於肺癌之治療性rna(二)
TW202330104A (zh) 2021-10-26 2023-08-01 美商再生元醫藥公司 用於產生實驗室用水及分配不同溫度之實驗室用水的系統及方法
CA3224890A1 (en) 2021-10-29 2023-05-04 Bristol-Myers Squibb Company Lag-3 antagonist therapy for hematological cancer
WO2023079428A1 (en) 2021-11-03 2023-05-11 Pfizer Inc. Combination therapies using tlr7/8 agonist
WO2023080900A1 (en) 2021-11-05 2023-05-11 Genentech, Inc. Methods and compositions for classifying and treating kidney cancer
WO2023083439A1 (en) 2021-11-09 2023-05-19 BioNTech SE Tlr7 agonist and combinations for cancer treatment
KR20240099460A (ko) 2021-11-11 2024-06-28 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. Cd20-pd1 결합 분자 및 이의 사용 방법
AU2022384793A1 (en) 2021-11-12 2024-04-11 Advanced Accelerator Applications Combination therapy for treating lung cancer
US12275745B2 (en) 2021-11-24 2025-04-15 Genentech, Inc. Therapeutic compounds and methods of use
US12110276B2 (en) 2021-11-24 2024-10-08 Genentech, Inc. Pyrazolo compounds and methods of use thereof
CN116333118B (zh) * 2021-12-16 2024-04-19 徕特康(苏州)生物制药有限公司 抗表皮生长因子受体抗体及其制备方法和用途
EP4452327A1 (en) 2021-12-20 2024-10-30 Synthorx, Inc. Head and neck cancer combination therapy comprising an il-2 conjugate and pembrolizumab
US20230312718A1 (en) 2022-01-07 2023-10-05 Regeneron Pharmaceuticals, Inc Methods of Treating Recurrent Ovarian Cancer with Bispecific Anti-MUC16 x Anti-CD3 Antibodies Alone or in Combination with Anti-PD-1 Antibodies
KR20240135661A (ko) 2022-01-26 2024-09-11 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 간세포성 암종에 대한 조합 요법
KR20240137086A (ko) 2022-01-28 2024-09-19 조지아뮨 인코포레이티드 Pd-1 작용제인 세포예정사 단백질 1에 대한 항체
WO2023154799A1 (en) 2022-02-14 2023-08-17 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Combination immunotherapy for treating cancer
CN119677533A (zh) 2022-02-17 2025-03-21 瑞泽恩制药公司 用于治疗癌症的检查点抑制剂与溶瘤病毒的组合
WO2023164638A1 (en) 2022-02-25 2023-08-31 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for colorectal carcinoma
WO2023168404A1 (en) 2022-03-04 2023-09-07 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating a tumor
JP2025508076A (ja) 2022-03-08 2025-03-21 アレンティス・セラピューティクス・アクチェンゲゼルシャフト Ｔ細胞の利用能を向上させるための抗クローディン－１抗体の使用
IL315405A (en) 2022-03-17 2024-11-01 Regeneron Pharma Methods for treating recurrent epithelioid sarcoma using bispecific anti-MUC16 and anti-CD3 antibodies alone or in combination with anti-PD-1 antibodies
WO2023178329A1 (en) 2022-03-18 2023-09-21 Bristol-Myers Squibb Company Methods of isolating polypeptides
KR20240164561A (ko) 2022-03-18 2024-11-19 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. 폴리펩타이드 변종을 분석하기 위한 방법 및 시스템
IL315770A (en) 2022-04-01 2024-11-01 Genentech Inc Dosage for treatment with bispecific anti-FCRH5/anti-CD3 antibodies
CN116925223A (zh) * 2022-04-02 2023-10-24 普米斯生物技术(珠海)有限公司 抗pd-1单克隆抗体及其衍生物和用途
WO2023196987A1 (en) 2022-04-07 2023-10-12 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
JP7851417B2 (ja) 2022-04-08 2026-04-24 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 三次リンパ組織様構造の機械学習識別、分類、及び定量化
WO2023214325A1 (en) 2022-05-05 2023-11-09 Novartis Ag Pyrazolopyrimidine derivatives and uses thereof as tet2 inhibitors
JP2025517650A (ja) 2022-05-11 2025-06-10 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ＦｃＲＨ５／抗ＣＤ３二重特異性抗体による処置のための投与
KR20250024872A (ko) 2022-05-11 2025-02-19 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 다중특이적 결합 분자 전구단백질 및 이의 용도
EP4522657A1 (en) 2022-05-12 2025-03-19 Genmab A/S Binding agents capable of binding to cd27 in combination therapy
WO2023224912A1 (en) 2022-05-16 2023-11-23 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating metastatic castration-resistant prostate cancer with bispecific anti-psma x anti-cd3 antibodies alone or in combination with anti-pd-1 antibodies
US20230416396A1 (en) 2022-05-18 2023-12-28 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Multispecific antigen binding molecules that bind cd38 and 4-1bb, and uses thereof
WO2023230554A1 (en) 2022-05-25 2023-11-30 Pfizer Inc. Combination of a braf inhibitor, an egfr inhibitor, and a pd-1 antagonist for the treatment of braf v600e-mutant, msi-h/dmmr colorectal cancer
CA3257348A1 (en) 2022-05-27 2023-11-30 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. INTERLEUKIN-2 PROPROTEINS AND THEIR USES
KR20250022071A (ko) 2022-06-02 2025-02-14 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항체 조성물 및 이의 이용 방법
CA3258187A1 (en) 2022-06-04 2023-12-07 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. INTERLEUKIN-2 PROPROTEINS AND THEIR USES
KR20250022049A (ko) 2022-06-07 2025-02-14 제넨테크, 인크. 항-pd-l1 길항제 및 항-tigit 길항제 항체를 포함하는, 폐암 치료의 효율을 결정하는 방법
AU2023305619A1 (en) 2022-07-13 2025-01-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
KR20250040020A (ko) 2022-07-19 2025-03-21 제넨테크, 인크. 항-fcrh5/항-cd3 이중특이성 항체로 치료하기 위한 투약법
EP4310197A1 (en) 2022-07-21 2024-01-24 Fundación para la Investigación Biomédica del Hospital Universitario Puerta de Hierro Majadahonda Method for identifying lung cancer patients for a combination treatment of immuno- and chemotherapy
US20250368738A1 (en) 2022-07-22 2025-12-04 Philogen S.P.A Anti-cd28 antibodies
CN119923267A (zh) 2022-07-27 2025-05-02 阿斯利康(瑞典)有限公司 表达白介素-12的重组病毒与pd-1/pd-l1抑制剂的组合
IL318426A (en) 2022-08-02 2025-03-01 Regeneron Pharma Methods for treating metastatic castration-resistant prostate cancer using bispecific antibodies against PSMA and CD28 in combination with anti-PD-1 antibodies
US20240067691A1 (en) 2022-08-18 2024-02-29 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Interferon receptor agonists and uses thereof
CN120051483A (zh) 2022-08-18 2025-05-27 再生元制药公司 干扰素前蛋白及其用途
TW202417012A (zh) * 2022-08-19 2024-05-01 美商旗艦先鋒創新公司 包含myc調節劑及檢查點抑制劑之組合療法
EP4581366A1 (en) 2022-09-01 2025-07-09 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for bladder cancer
US20260015416A1 (en) 2022-09-30 2026-01-15 Alentis Therapeutics Ag Treatment of drug-resistant hepatocellular carcinoma
AU2023356866A1 (en) 2022-10-03 2025-04-17 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating cancer with bispecific egfr x cd28 antibodies alone or in combination with anti-pd-1 antibodies
WO2024077095A1 (en) 2022-10-05 2024-04-11 Genentech, Inc. Methods and compositions for classifying and treating bladder cancer
EP4599088A1 (en) 2022-10-05 2025-08-13 Genentech, Inc. Methods and compositions for classifying and treating lung cancer
KR20250093336A (ko) 2022-10-25 2025-06-24 제넨테크, 인크. 다발성 골수종에 대한 치료 및 진단 방법
KR20250099224A (ko) 2022-11-01 2025-07-01 하이델베르크 파마 리서치 게엠베하 항-gucy2c 항체 및 이의 용도
CN120302979A (zh) 2022-12-01 2025-07-11 生物技术公司 针对CD40和CD137的多特异性抗体与抗PD1 Ab和化学治疗的组合治疗
EP4626552A1 (en) 2022-12-01 2025-10-08 MedImmune Limited Combination therapy for treatment of cancer comprising anti-pd-l1 and anti-cd73 antibodies
JP2026501506A (ja) 2022-12-14 2026-01-16 アステラス・ファーマ・ヨーロッパ・ベスローデン・フェンノートシャップ Ｃｌｄｎ１８．２及びｃｄ３に結合する二重特異性結合剤並びに免疫チェックポイント阻害剤を含む併用療法
TW202435942A (zh) 2022-12-16 2024-09-16 美商里珍納龍藥品有限公司 評估層析管柱完整性的方法及系統
JP2026501282A (ja) 2022-12-20 2026-01-14 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｐｄ－１軸結合アンタゴニストおよびｒｎａワクチンを用いて膵臓がんを処置する方法
EP4638503A1 (en) 2022-12-21 2025-10-29 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for lung cancer
KR20250133728A (ko) 2023-01-06 2025-09-08 라센 테라퓨틱스, 인코포레이티드 항-il-18bp 항체
TW202430560A (zh) 2023-01-06 2024-08-01 美商拉森醫療公司 抗ｉｌ－１８ｂｐ抗體
WO2024150177A1 (en) 2023-01-11 2024-07-18 Advesya Treatment methods for solid tumors
IL322055A (en) 2023-01-13 2025-09-01 Regeneron Pharma IL12 receptor agonists and methods of using them
US20240245779A1 (en) 2023-01-25 2024-07-25 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modeling liquid protein composition stability
EP4655595A1 (en) 2023-01-25 2025-12-03 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Mass spectrometry-based characterization of antibodies co-expressed in vivo
CN120813375A (zh) 2023-01-30 2025-10-17 凯玛布有限公司 抗体
WO2024163708A1 (en) 2023-02-01 2024-08-08 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Asymmetrical flow field-flow fractionation with mass spectrometry for biomacromolecule analysis
WO2024165403A1 (en) 2023-02-06 2024-08-15 Philogen S.P.A. Anti-cea antibodies
EP4669963A2 (en) 2023-02-22 2025-12-31 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. SYSTEM FITNESS PARAMETERS AND COLUMN AGING
IL322506A (en) 2023-02-23 2025-10-01 Imcheck Therapeutics Combinations of BTN3A activating antibody and immune checkpoint inhibitors
JP2026507123A (ja) 2023-02-28 2026-02-27 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド Ｔ細胞活性化剤およびその使用方法
EP4680342A1 (en) 2023-03-13 2026-01-21 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Combination of pd-1 inhibitors and lag-3 inhibitors for enhanced efficacy in treating melanoma
WO2024196952A1 (en) 2023-03-20 2024-09-26 Bristol-Myers Squibb Company Tumor subtype assessment for cancer therapy
CN121620391A (zh) 2023-04-06 2026-03-06 金麦安博股份有限公司 用于治疗癌症的针对pd-l1和cd137的多特异性结合剂
WO2024223299A2 (en) 2023-04-26 2024-10-31 Isa Pharmaceuticals B.V. Methods of treating cancer by administering immunogenic compositions and a pd-1 inhibitor
US20240366471A1 (en) 2023-05-01 2024-11-07 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Multidose antibody drug products using phenol or benzyl alcohol
AU2024270495A1 (en) 2023-05-05 2025-10-09 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
EP4709484A1 (en) 2023-05-10 2026-03-18 Genentech, Inc. Methods and compositions for treating cancer
TW202509071A (zh) 2023-05-12 2025-03-01 丹麥商珍美寶股份有限公司 能夠與ｏｘ４０結合之抗體、其變異體及其用途
WO2024236048A1 (en) 2023-05-16 2024-11-21 Nh Theraguix Combination therapy for treating tumors with radiotherapy
WO2024263195A1 (en) 2023-06-23 2024-12-26 Genentech, Inc. Methods for treatment of liver cancer
EP4731681A1 (en) 2023-06-23 2026-04-29 Imcheck Therapeutics Bispecific antibodies targeting btn3a and the pd-1/pd-l1 inhibitory axis
WO2024263904A1 (en) 2023-06-23 2024-12-26 Genentech, Inc. Methods for treatment of liver cancer
WO2025021073A1 (zh) 2023-07-21 2025-01-30 江苏迈威康新药研发有限公司 抗Nectin4抗体药物偶联物和抗PD-1抗体的药物组合以及其用途
WO2025024257A1 (en) 2023-07-21 2025-01-30 Genentech, Inc. Diagnostic and therapeutic methods for cancer
KR20260049559A (ko) 2023-08-02 2026-04-14 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. 이중특이적 항-PSMA x 항-CD28 항체를 이용한 투명 세포 신세포 암종의 치료 방법
IL325956A (en) 2023-08-02 2026-03-01 Regeneron Pharma Methods for treating metastatic castration-resistant prostate cancer using bispecific antibodies against PSMA and CD28
WO2025038763A1 (en) 2023-08-15 2025-02-20 Bristol-Myers Squibb Company Ceramic hydroxyapatite chromatography flow through method
TW202515614A (zh) 2023-08-25 2025-04-16 美商建南德克公司 治療非小細胞肺癌之方法及組成物
WO2025054406A1 (en) 2023-09-08 2025-03-13 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods and systems for assessing chromatographic column integrity
WO2025056180A1 (en) 2023-09-15 2025-03-20 BioNTech SE Methods of treatment using agents binding to epcam and cd137 in combination with pd-1 axis binding antagonists
US20250095773A1 (en) 2023-09-18 2025-03-20 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods and systems for developing chromatography protocols
US20250109905A1 (en) 2023-09-29 2025-04-03 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Lyophilization using controlled nucleation
WO2025075970A1 (en) 2023-10-02 2025-04-10 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Drug delivery device safety system
WO2025080538A1 (en) 2023-10-09 2025-04-17 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating cancer with a combination of a pd1 inhibitor and a targeted immunocytokine
WO2025085404A1 (en) 2023-10-16 2025-04-24 Genentech, Inc. Diagnostic and therapeutic methods for treating lung cancer
US20250129117A1 (en) 2023-10-18 2025-04-24 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Rapid purification of monoclonal antibody from in-process upstream cell culture material
US20250145662A1 (en) 2023-11-02 2025-05-08 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for reducing lipase activity using stress
WO2025106469A1 (en) 2023-11-14 2025-05-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Engineered heavy chain variable domains and uses thereof
AU2024379466A1 (en) 2023-11-15 2026-04-23 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Combination of pd-1 inhibitors and lag-3 inhibitors for enhanced efficacy in treating lung cancer
TW202539732A (zh) 2023-11-29 2025-10-16 美商再生元醫藥公司 以雙特異性抗muc16×抗cd28抗體與抗pd-1抗體之組合或與雙特異性抗muc16×抗cd3抗體之組合治療復發性卵巢癌及子宮內膜癌之方法
TW202540189A (zh) 2023-11-30 2025-10-16 德商生物新技術公司 在組合療法中能夠結合ｏｘ４０之抗體
WO2025117889A2 (en) 2023-11-30 2025-06-05 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating cancer by administering a combination therapy including a neoadjuvant pd-1 inhibitor
WO2025122614A1 (en) 2023-12-05 2025-06-12 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Il18 receptor agonists and methods of use thereof
WO2025120866A1 (en) 2023-12-08 2025-06-12 Astellas Pharma Inc. Combination therapy involving bispecific binding agents binding to cldn18.2 and cd3 and agents stabilizing or increasing expression of cldn18.2
WO2026033885A1 (en) 2024-08-08 2026-02-12 Astellas Pharma Inc. Combination therapy involving bispecific binding agents binding to cldn18.2 and cd3 and agents stabilizing or increasing expression of cldn18.2
TW202541837A (zh) 2023-12-08 2025-11-01 日商安斯泰來製藥公司 含有結合至cldn18.2和cd3之雙特異性結合劑和穩定或增加cldn18.2表現之藥劑之組合療法
WO2025120867A1 (en) 2023-12-08 2025-06-12 Astellas Pharma Inc. Combination therapy involving bispecific binding agents binding to cldn18.2 and cd3 and anti-vegfr2 antibodies
TW202542187A (zh) 2023-12-12 2025-11-01 美商再生元醫藥公司 以雙特異性抗muc16x抗cd3抗體單獨或與抗pd-1抗體組合治療子宮內膜癌之方法
WO2025145207A1 (en) 2023-12-29 2025-07-03 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy of kras inhibitor and treg-depleting agent
WO2025155607A1 (en) 2024-01-16 2025-07-24 Genentech, Inc. Methods of treating urothelial carcinoma with a pd-1 axis binding antagonist and an rna vaccine
WO2025166281A1 (en) 2024-02-01 2025-08-07 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Platform for charge-detection mass spectrometry analysis of aavs
WO2025174933A1 (en) 2024-02-14 2025-08-21 Genentech, Inc. Methods for treatment of pancreatic cancer with anti-pd-l1 ab, anti-tigit ab, gemcitabine and nab-placlitaxel
WO2025175164A1 (en) 2024-02-16 2025-08-21 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of producing concentrated formulated drug substances comprising proteins, and concentrated formulated drug substance made by the methods
US12521446B2 (en) 2024-02-27 2026-01-13 Bristol-Myers Squibb Company Anti-CEACAM5 antibody drug conjugates
WO2025184208A1 (en) 2024-02-27 2025-09-04 Bristol-Myers Squibb Company Anti-ceacam5 antibodies and uses thereof
TW202602489A (zh) 2024-03-15 2026-01-16 美商再生元醫藥公司 作為經穩定的蛋白質調配物之賦形劑的聚山梨醇酯及聚氧乙烯山梨糖醇酐
WO2025199243A1 (en) 2024-03-20 2025-09-25 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Trivalent multispecific binding molecules and methods of use thereof
WO2025226695A1 (en) 2024-04-23 2025-10-30 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Stable antibody formulation
WO2025232879A1 (en) 2024-05-10 2025-11-13 Cytocares (Shanghai) Inc. Anti-lilrb2 monospecific and bispecific antibody constructs and uses thereof
WO2025245489A1 (en) 2024-05-24 2025-11-27 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of tumors in subjects having fgl-1 positive samples
WO2025255480A1 (en) 2024-06-07 2025-12-11 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Tetravalent multispecific binding molecules and methods of use thereof
WO2025257588A1 (en) 2024-06-10 2025-12-18 Affimed Gmbh Cd16a/tumor antigen polyspecific binder for use in the treatment of immune checkpoint inhibitor resistance
WO2025259840A1 (en) 2024-06-13 2025-12-18 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods and systems for scaled chromatography
WO2026025028A1 (en) 2024-07-26 2026-01-29 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of making ultra-high concentrated protein formulations using lyophilization
WO2026060350A1 (en) 2024-09-13 2026-03-19 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of improving photo stability and controlling formation of hmw species in biologic formulations, and biologic formulations produced by the methods
WO2026076201A2 (en) 2024-10-03 2026-04-09 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Systems and methods for producing therapeutic proteins using single pass tangential flow filtration for in-line concentration and volume reduction of production pools
WO2026080597A1 (en) 2024-10-08 2026-04-16 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Sustained delivery of biologics and non-aqueous manufacture of same

Family Cites Families (94)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH07291996A (ja) 1994-03-01 1995-11-07 Yuu Honshiyo ヒトにおけるプログラムされた細胞死に関連したポリペプチド、それをコードするｄｎａ、そのｄｎａからなるベクター、そのベクターで形質転換された宿主細胞、そのポリペプチドの抗体、およびそのポリペプチドまたはその抗体を含有する薬学的組成物
GB9809951D0 (en) 1998-05-08 1998-07-08 Univ Cambridge Tech Binding molecules
US7087411B2 (en) 1999-06-08 2006-08-08 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Fusion protein capable of binding VEGF
JP5004390B2 (ja) 1999-08-23 2012-08-22 デイナ ファーバー キャンサー インスティチュート，インコーポレイテッド 新規ｂ７−４分子およびその用途
PL354286A1 (en) 1999-08-23 2003-12-29 Dana-Farber Cancer Institutedana-Farber Cancer Institute Pd-1, a receptor for b7-4, and uses therefor
DK1234031T3 (en) 1999-11-30 2017-07-03 Mayo Foundation B7-H1, AN UNKNOWN IMMUNE REGULATORY MOLECULE
EP1320599A2 (en) 2000-06-28 2003-06-25 Genetics Institute, LLC Pd-l2 molecules: pd-1 ligands and uses therefor
US6596541B2 (en) 2000-10-31 2003-07-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modifying eukaryotic cells
US6586251B2 (en) * 2000-10-31 2003-07-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modifying eukaryotic cells
AR036993A1 (es) 2001-04-02 2004-10-20 Wyeth Corp Uso de agentes que modulan la interaccion entre pd-1 y sus ligandos en la submodulacion de respuestas inmunologicas
US7794710B2 (en) 2001-04-20 2010-09-14 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods of enhancing T cell responsiveness
CA2466279A1 (en) 2001-11-13 2003-05-22 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Agents that modulate immune cell activation and methods of use thereof
AU2003281200A1 (en) 2002-07-03 2004-01-23 Tasuku Honjo Immunopotentiating compositions
JP2004104681A (ja) 2002-09-12 2004-04-02 Renesas Technology Corp 入力バッファ回路
US20040101920A1 (en) 2002-11-01 2004-05-27 Czeslaw Radziejewski Modification assisted profiling (MAP) methodology
CN101899114A (zh) 2002-12-23 2010-12-01 惠氏公司 抗pd-1抗体及其用途
US7563869B2 (en) 2003-01-23 2009-07-21 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Substance specific to human PD-1
EP1737890A2 (en) 2004-03-24 2007-01-03 Xencor, Inc. Immunoglobulin variants outside the fc region
PT1737891E (pt) 2004-04-13 2013-04-16 Hoffmann La Roche Anticorpos anti p-selectina
US7850962B2 (en) 2004-04-20 2010-12-14 Genmab A/S Human monoclonal antibodies against CD20
US8257740B1 (en) 2011-08-15 2012-09-04 Gp Medical, Inc. Pharmaceutical composition of nanoparticles
DK2439273T3 (da) 2005-05-09 2019-06-03 Ono Pharmaceutical Co Humane monoklonale antistoffer til programmeret død-1(pd-1) og fremgangsmåder til behandling af cancer ved anvendelse af anti-pd-1- antistoffer alene eller i kombination med andre immunterapeutika
US8246995B2 (en) 2005-05-10 2012-08-21 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Hydrophobic nanotubes and nanoparticles as transporters for the delivery of drugs into cells
CA2611814A1 (en) 2005-06-20 2007-01-04 Medarex, Inc. Cd19 antibodies and their uses
PT1907424E (pt) 2005-07-01 2015-10-09 Squibb & Sons Llc Anticorpos monoclonais humanos para o ligando 1 de morte programada (pd-l1)
CN104072614B (zh) 2005-07-08 2017-04-26 生物基因Ma公司 抗-αvβ6 抗体及其用途
EP1820513A1 (en) 2006-02-15 2007-08-22 Trion Pharma Gmbh Destruction of tumor cells expressing low to medium levels of tumor associated target antigens by trifunctional bispecific antibodies
US8216996B2 (en) 2006-03-03 2012-07-10 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Multimer of extracellular domain of cell surface functional molecule
JP5307708B2 (ja) 2006-06-02 2013-10-02 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド ヒトｉｌ−６受容体に対する高親和性抗体
BR122017025062B8 (pt) 2007-06-18 2021-07-27 Merck Sharp & Dohme anticorpo monoclonal ou fragmento de anticorpo para o receptor de morte programada humano pd-1, polinucleotídeo e composição compreendendo o referido anticorpo ou fragmento
WO2009014708A2 (en) 2007-07-23 2009-01-29 Cell Genesys, Inc. Pd-1 antibodies in combination with a cytokine-secreting cell and methods of use thereof
WO2009024531A1 (en) 2007-08-17 2009-02-26 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Method for treating and diagnosing hematologic malignancies
EP2195342A1 (en) 2007-09-07 2010-06-16 Ablynx N.V. Binding molecules with multiple binding sites, compositions comprising the same and uses thereof
CN101970499B (zh) 2008-02-11 2014-12-31 治疗科技公司 用于肿瘤治疗的单克隆抗体
EP2262837A4 (en) 2008-03-12 2011-04-06 Merck Sharp & Dohme PD-1 BINDING PROTEINS
KR101001360B1 (ko) 2008-06-16 2010-12-14 (주)기가레인 전자 기기의 접지에 전기적으로 연결되는 인쇄회로기판
AU2009288730B2 (en) 2008-08-25 2013-06-20 Amplimmune, Inc. Compositions of PD-1 antagonists and methods of use
US9181342B2 (en) 2008-09-12 2015-11-10 Isis Innovation Limited PD-1 specific antibodies and uses thereof
AU2009290544B2 (en) 2008-09-12 2015-07-16 Oxford University Innovation Limited PD-1 specific antibodies and uses thereof
US8552154B2 (en) 2008-09-26 2013-10-08 Emory University Anti-PD-L1 antibodies and uses therefor
KR101050829B1 (ko) 2008-10-02 2011-07-20 서울대학교산학협력단 항 ｐｄ-1 항체 또는 항 ｐｄ-ｌ1 항체를 포함하는 항암제
EP3255060A1 (en) 2008-12-09 2017-12-13 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-pd-l1 antibodies and their use to enhance t-cell function
JP5844159B2 (ja) * 2009-02-09 2016-01-13 ユニヴェルシテ デクス−マルセイユＵｎｉｖｅｒｓｉｔｅ Ｄ’Ａｉｘ−Ｍａｒｓｅｉｌｌｅ Ｐｄ−１抗体およびｐｄ−ｌ１抗体ならびにその使用
MY192182A (en) 2009-06-26 2022-08-04 Regeneron Pharma Readily isolated bispecific antibodies with native immunoglobulin format
EP2482849B1 (en) 2009-09-30 2018-06-06 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Combination immunotherapy for the treatment of cancer
WO2011066342A2 (en) 2009-11-24 2011-06-03 Amplimmune, Inc. Simultaneous inhibition of pd-l1/pd-l2
PL2504364T3 (pl) 2009-11-24 2017-12-29 Medimmune Limited Ukierunkowane środki wiążące przeciwko B7-H1
SMT202600080T1 (it) 2010-02-08 2026-03-09 Regeneron Pharma Topo con catena leggera comune
EP2545078A1 (en) 2010-03-11 2013-01-16 UCB Pharma, S.A. Pd-1 antibody
TW201134488A (en) * 2010-03-11 2011-10-16 Ucb Pharma Sa PD-1 antibodies
WO2011159877A2 (en) 2010-06-18 2011-12-22 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Bi-specific antibodies against tim-3 and pd-1 for immunotherapy in chronic immune conditions
CN107090029B (zh) 2010-11-11 2021-07-13 港大科桥有限公司 可溶性 pd-1变体、融合构建体及其用途
JP6072771B2 (ja) 2011-04-20 2017-02-01 メディミューン，エルエルシー Ｂ７−ｈ１およびｐｄ−１に結合する抗体およびその他の分子
CA2840018C (en) 2011-07-24 2019-07-16 Curetech Ltd. Variants of humanized immunomodulatory monoclonal antibodies
MX368257B (es) 2011-08-01 2019-09-26 Genentech Inc Antagonistas de unión al eje pd-1e inhibidores de mek y sus usos en el tratamiento de cáncer.
CN107858333B (zh) * 2011-10-28 2022-05-27 瑞泽恩制药公司 T细胞受体基因修饰小鼠
KR101764096B1 (ko) 2011-11-28 2017-08-02 메르크 파텐트 게엠베하 항-ｐｄ-ｌ1 항체 및 그의 용도
GB201120527D0 (en) 2011-11-29 2012-01-11 Ucl Business Plc Method
WO2013112986A1 (en) 2012-01-27 2013-08-01 Gliknik Inc. Fusion proteins comprising igg2 hinge domains
EP2825036B1 (en) * 2012-03-16 2018-05-02 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Histidine engineered light chain antibodies and genetically modified rodents for generating the same
EP3511343A1 (en) 2012-05-04 2019-07-17 Dana Farber Cancer Institute, Inc. Affinity matured anti-ccr4 humanized monoclonal antibodies and methods of use
WO2013169693A1 (en) 2012-05-09 2013-11-14 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating cancer using an il-21 polypeptide and an anti-pd-1 antibody
US20130303250A1 (en) 2012-05-11 2013-11-14 Ryan Moore Method of Playing a Card Game
HK1203971A1 (en) 2012-05-15 2015-11-06 Bristol-Myers Squibb Company Cancer immunotherapy by disrupting pd-1/pd-l1 signaling
RU2689760C2 (ru) 2012-05-31 2019-05-30 Дженентек, Инк. Способы лечения рака с применением антагонистов аксиального связывания pd-1 и vegf антагонистов
JOP20200236A1 (ar) 2012-09-21 2017-06-16 Regeneron Pharma الأجسام المضادة لمضاد cd3 وجزيئات ربط الأنتيجين ثنائية التحديد التي تربط cd3 وcd20 واستخداماتها
PL2904011T3 (pl) 2012-10-02 2018-01-31 Bristol Myers Squibb Co Połączenie przeciwciał anty-kir i przeciwciał anty-pd-1 w leczeniu raka
CA2889182A1 (en) 2012-10-26 2014-05-01 The University Of Chicago Synergistic combination of immunologic inhibitors for the treatment of cancer
TWI635098B (zh) 2013-02-01 2018-09-11 再生元醫藥公司 含嵌合恆定區之抗體
US9974845B2 (en) 2013-02-22 2018-05-22 Curevac Ag Combination of vaccination and inhibition of the PD-1 pathway
WO2014159562A1 (en) 2013-03-14 2014-10-02 Bristol-Myers Squibb Company Combination of dr5 agonist and anti-pd-1 antagonist and methods of use
BR112015023120A2 (pt) 2013-03-15 2017-11-21 Genentech Inc método para identificar um indivíduo com uma doença ou disfunção, método para prever a responsividade de um indivíduo com uma doença ou disfunção, método para determinar a probabilidade de que um indivíduo com uma doença ou disfunção exibirá benefício do tratamento, método para selecionar uma terapia, usos de um antagonista de ligação do eixo pd-l1, ensaio para identificar um indivíduo com uma doença, kit de diagnóstico, método para avaliar uma resposta ao tratamento e método para monitorar a resposta de um indivíduo tratado
SMT202100065T1 (it) 2013-05-02 2021-03-15 Anaptysbio Inc Anticorpi diretti contro la proteina della morte programmata (pd-1)
WO2014194293A1 (en) 2013-05-30 2014-12-04 Amplimmune, Inc. Improved methods for the selection of patients for pd-1 or b7-h4 targeted therapies, and combination therapies thereof
US20160145355A1 (en) 2013-06-24 2016-05-26 Biomed Valley Discoveries, Inc. Bispecific antibodies
BR112016000853A2 (pt) 2013-07-16 2017-12-12 Genentech Inc métodos para tratar ou retardar, reduzir ou inibir a recidiva ou a progressão do câncer e a progressão de uma doença imune-relacionada em um indivíduo, para aumentar, melhorar ou estimular uma resposta ou função imune em um indivíduo e kit
AU2014296887A1 (en) 2013-08-02 2016-01-28 Aduro Biotech Holdings, Europe B.V. Combining CD27 agonists and immune checkpoint inhibition for immune stimulation
AU2014309199B2 (en) 2013-08-20 2018-04-19 Merck Sharp & Dohme Llc Treating cancer with a combination of a PD-1 antagonist and dinaciclib
AR097306A1 (es) 2013-08-20 2016-03-02 Merck Sharp & Dohme Modulación de la inmunidad tumoral
JP6595458B2 (ja) 2013-09-20 2019-10-23 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー 腫瘍を処置するための抗ｌａｇ−３抗体と抗ｐｄ−１抗体との組合せ
WO2015048312A1 (en) 2013-09-26 2015-04-02 Costim Pharmaceuticals Inc. Methods for treating hematologic cancers
MY175472A (en) 2013-09-27 2020-06-29 Genentech Inc Anti-pdl1 antibody formulations
IL263466B2 (en) 2013-12-17 2023-10-01 Genentech Inc Anti-CD3 antibodies and methods of using them
TWI681969B (zh) * 2014-01-23 2020-01-11 美商再生元醫藥公司 針對ｐｄ-１的人類抗體
TWI680138B (zh) 2014-01-23 2019-12-21 美商再生元醫藥公司 抗ｐｄ-ｌ１之人類抗體
PE20170255A1 (es) 2014-01-24 2017-03-22 Dana Farber Cancer Inst Inc Moleculas de anticuerpo que se unen a pd-1 y usos de las mismas
TWI701042B (zh) 2014-03-19 2020-08-11 美商再生元醫藥公司 用於腫瘤治療之方法及抗體組成物
US10092645B2 (en) 2014-06-17 2018-10-09 Medimmune Limited Methods of treatment with antagonists against PD-1 and PD-L1 in combination with radiation therapy
TWI693232B (zh) 2014-06-26 2020-05-11 美商宏觀基因股份有限公司 與pd-1和lag-3具有免疫反應性的共價結合的雙抗體和其使用方法
EP4245376A3 (en) 2014-10-14 2023-12-13 Novartis AG Antibody molecules to pd-l1 and uses thereof
CN108112254B (zh) 2015-03-13 2022-01-28 西托姆克斯治疗公司 抗-pdl1抗体、可活化的抗-pdl1抗体、及其使用方法
MX383464B (es) * 2015-07-13 2025-03-14 Cytomx Therapeutics Inc Anticuerpos anti-pd-1, anticuerpos anti-pd-1 activables, y métodos de uso de los mismos.
LT3394103T (lt) 2015-12-22 2023-09-11 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Antikūnų prieš pd-1 ir bispecifinių antikūnų prieš cd20/cd3 derinys, skirtas vėžiui gydyti
US11603407B2 (en) * 2017-04-06 2023-03-14 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Stable antibody formulation

Also Published As

Publication number Publication date
TW201540726A (zh) 2015-11-01
MX2021009852A (es) 2021-09-10
CA2936075A1 (en) 2015-07-30
JP7562606B2 (ja) 2024-10-07
MX2016009554A (es) 2016-11-17
EA034770B1 (ru) 2020-03-18
EA201691482A1 (ru) 2016-11-30
JP7174009B2 (ja) 2022-11-17
JP6711883B2 (ja) 2020-06-17
HRP20211794T1 (hr) 2022-03-18
TWI681969B (zh) 2020-01-11
AU2015209233A1 (en) 2016-08-04
PL3097119T3 (pl) 2022-01-03
AU2015209233B2 (en) 2020-03-05
JP2022160558A (ja) 2022-10-19
IL246818B (en) 2019-07-31
US20150203579A1 (en) 2015-07-23
US10737113B2 (en) 2020-08-11
LT3097119T (lt) 2021-10-11
EA034770B8 (ru) 2020-07-10
CL2016001871A1 (es) 2017-05-19
JP2017505125A (ja) 2017-02-16
CA3207270A1 (en) 2015-07-30
CY1124747T1 (el) 2022-07-22
CA2936075C (en) 2023-09-19
HUE056332T2 (hu) 2022-02-28
JP6425730B2 (ja) 2018-11-21
IL246818A0 (en) 2016-08-31
ES2888224T3 (es) 2022-01-03
PH12016501330B1 (en) 2021-12-10
SI3097119T1 (sl) 2021-11-30
IL267798B (en) 2020-09-30
KR20160132010A (ko) 2016-11-16
US9987500B2 (en) 2018-06-05
BR122022010183B1 (pt) 2024-01-30
BR112016016699A2 (pt) 2017-10-03
CN106068275A (zh) 2016-11-02
CN106068275B (zh) 2021-06-01
PH12016501330A1 (en) 2016-08-15
MX385545B (es) 2025-03-18
JP2024178339A (ja) 2024-12-24
EP3097119A1 (en) 2016-11-30
EP3097119B1 (en) 2021-08-25
US20240316361A1 (en) 2024-09-26
JP2020146050A (ja) 2020-09-17
UA122666C2 (uk) 2020-12-28
JP2019038823A (ja) 2019-03-14
IL267798A (en) 2019-09-26
KR20210152583A (ko) 2021-12-15
UY35964A (es) 2015-08-31
SMT202100669T1 (it) 2022-01-10
NZ722342A (en) 2022-05-27
CN113248614A (zh) 2021-08-13
SG11201605482SA (en) 2016-08-30
PT3097119T (pt) 2021-09-29
EP3967710A1 (en) 2022-03-16
DK3097119T3 (en) 2021-09-27
MY176475A (en) 2020-08-11
US20200330794A1 (en) 2020-10-22
MX2021003436A (es) 2021-06-15
KR102337042B1 (ko) 2021-12-08
WO2015112800A1 (en) 2015-07-30
US20180185668A1 (en) 2018-07-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7562606B2 (ja) Ｐｄ－１に対するヒト抗体
US20240166740A1 (en) Anti-lag3 antibodies and uses thereof
CN106103482B (zh) 针对pd-l1的人抗体
HK40070794A (en) Human antibodies to pd-1
CA3000209C (en) Anti-lag3 antibodies and uses thereof
HK1228406B (en) Human antibodies to pd-1
BR112016016699B1 (pt) Anticorpo isolado ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo que se liga especificamente a pd-1, método de produção e usos do mesmo, composição farmacêutica, molécula de polinucleotídeo isolada, e vetor
EA039718B1 (ru) Антитела к lag3 и их применения