RS64221B1 - Modulatori piruvat kinaze i njihova upotreba - Google Patents

Modulatori piruvat kinaze i njihova upotreba

Info

Publication number
RS64221B1
RS64221B1 RS20230354A RSP20230354A RS64221B1 RS 64221 B1 RS64221 B1 RS 64221B1 RS 20230354 A RS20230354 A RS 20230354A RS P20230354 A RSP20230354 A RS P20230354A RS 64221 B1 RS64221 B1 RS 64221B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
optionally substituted
c6alkyl
methyl
compound
protecting group
Prior art date
Application number
RS20230354A
Other languages
English (en)
Inventor
Giovanni Cianchetta
Charles Kung
Tao Liu
Anil Kumar Padyana
Zhihua Sui
Zhenwei Cai
Dawei Cui
Jingjing Ji
Original Assignee
Agios Pharmaceuticals Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Agios Pharmaceuticals Inc filed Critical Agios Pharmaceuticals Inc
Publication of RS64221B1 publication Critical patent/RS64221B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/5025—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D513/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D513/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D513/14—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/08—Plasma substitutes; Perfusion solutions; Dialytics or haemodialytics; Drugs for electrolytic or acid-base disorders, e.g. hypovolemic shock
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/36—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings condensed with carbocyclic rings or ring systems

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Description

Opis
OSNOVA
[0001] Piruvat kinaza (PK) je metabolički enzim koji pretvara fosfoenolpiruvat u piruvat tokom glikolize. Četiri PK izoforme postoje kod sisara: L i R izoforme (iz PKLR gena) su eksprimirane u jetri i crvenim krvnim zrncima respektivno, a PKM gen kodira dve splajs varijante, M1 izoformu koja se eksprimira u većini tkiva odraslih, i M2 izoforma koja se eksprimira tokom embrionalnog razvoja i u nekim tkivima odraslih uključujući bubrege i hematopoetske matične ćelije. Mnoge tumorske ćelije takođe eksprimiraju PKM2. Ova tetramerna alosterično regulisana izoforma je intrinzično dizajnirana da nishodno reguliše svoju aktivnost, kroz post-translacionu modifikaciju, alosteričku modulaciju malim molekulima ligandima uključujući neke aminokiseline, i disocijacijom podjedinica (u dimerni oblik), što rezultira delimičnom inhibicijom glikolize u poslednjem koraku. Ovo akumulira ushodne glikolitičke intermedijere kao anabolički izvor ugljenika za sintezu lipida i nukleinskih kiselina, dok reasocijacija PKM2 u aktivni tetramer dopunjava normalno kataboličko stanje kao povratna informacija nakon deobe ćelije (Protein Sci. 2010 Nov; 19(11): 2031-2044). Modulacija (npr. inhibicija ili aktivacija) PKM2 može biti efikasna u lečenju brojnih poremećaja, na primer, kancera, gojaznosti, dijabetičkih bolesti (npr. dijabetička nefropatija (DN)), koronarne arterijske bolesti (CAD), Bloom sindroma (BS), autoimunih stanja i bolesti zavisnih od proliferacije (npr. benigna hiperplazija prostate (BPH)). Jiang, J-K. et al., Bioorg. & Med. Chem. Lett., 2010, 20, 3387-3393 odnosi se na aktivatore PKM2 na bazi supstituisane osnove tieno[3,2-b]pirol[3,2-d]piridazinona.
REZIME
[0002] Ovde su opisani postupci modulacije aktivnosti piruvat kinaze M2 (PKM2) kod subjekta kome je to potrebno, koji sadrže primenu efikasne količine jedinjenja formula (I), (II), (III), (IV), (V-a), (V-b), (VI) ili (IX) (koje se ovde zajednički nazivaju "Formule (I)-(IX)") ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, ili jedinjenja Formula (I'), (II'), (III'), (IV'), (V'), (koje se ovde zajednički nazivaju Formule (I')-(V')" ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, koje regulišu PKM2, divljeg tipa i/ili mutantne enzime (kao što su oni opisani ovde).
[0003] Obim pronalaska je definisan patentnim zahtevima. Sve reference u opisu na postupke lečenja odnose se na jedinjenja, farmaceutske kompozicije i lekove ovog pronalaska za upotrebu u postupku za lečenje ljudskog (ili životinjskog) tela terapijom (ili za dijagnozu).
[0004] U jednom primeru izvođenja, pronalazak obezbeđuje postupak modulacije aktivnosti piruvat kinaze M2 (PKM2) kod subjekta, koji sadrži primenu efikasne količine jedinjenja Formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli
pri čemu Q, R<1>, R<2>, L<1>, L<2>i Q su kao što su definisani ovde.
[0005] U jednom primeru izvođenja, jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so je izabrano od jedinjenja iz tabele 1 i slika 1A-1C, 2A-2C i 3.
[0006] Takođe je obezbeđen postupak modulacije aktivnosti piruvat kinaze M2 (PKM2) kod subjekta kome je to potrebno, koji sadrži primenu farmaceutske kompozicije koja sadrži efikasnu količinu jedinjenja Formule (I)-(IX) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili jedinjenja Formule (I')-(V') ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, i farmaceutski prihvatljivog nosača.
[0007] U sledećem aspektu, obezbeđen je postupak modulacije (npr. povećanje ili smanjenje) nivoa PKM2 aktivnosti kod subjekta kome je to potrebno, koji sadrži primenu na subjekta efikasne količine ovde opisanog jedinjenja. U nekim primerima izvođenja, jedinjenje ili kompozicija opisana ovde se koristi za održavanje PKM2 u njegovoj aktivnoj konformaciji ili aktiviranje aktivnosti piruvat kinaze u ćelijama koje se razmnožavaju kao sredstvo za preusmeravanje metabolita glukoze u kataboličke, a ne anaboličke procese kod pacijenta. U određenim primerima izvođenja, obezbeđeni postupak povećava nivo (tj. aktiviranje) aktivnosti PKM2 kod subjekta. U određenim primerima izvođenja, obezbeđeni postupak smanjuje nivo aktivnosti PKM2 kod subjekta.
[0008] U sledećem primeru izvođenja, obezbeđen je postupak modulacije (npr. povećanje ili smanjenje) nivoa glukoze u plazmi kod subjekta kome je to potrebno, koji sadrži primenu efikasne količine ovde opisanog jedinjenja na subjekta. U određenim primerima izvođenja, obezbeđeni postupak povećava nivo glukoze u plazmi kod subjekta. U određenim primerima izvođenja, obezbeđeni postupak smanjuje nivo glukoze u plazmi kod subjekta.
[0009] U sledećem primeru izvođenja, obezbeđen je postupak inhibicije proliferacije ćelija kod subjekta kome je to potrebno, koji sadrži primenu na subjekta efikasne količine jedinjenja opisanog ovde. Na primer, ovaj postupak može inhibirati rast transformisane ćelije, npr. ćelije kancera, ili generalno inhibirati rast u PKM2 zavisnoj ćeliji koja prolazi kroz aerobnu glikolizu.
[0010] U sledećem primeru izvođenja, obezbeđen je postupak lečenja subjekta koji pati ili je podložan bolesti ili poremećaju povezanim sa funkcijom PKM2, koji sadrži primenu na subjekta efikasne količine jedinjenja opisanog ovde. U određenom primeru izvođenja, postupak dalje sadrži identifikaciju ili izbor subjekta koji bi imao koristi od modulacije (npr. aktivacije) PKM2 i/ili glukoze u plazmi. Na primer, pacijent se može identifikovati na osnovu nivoa PKM2 aktivnosti u ćeliji pacijenta za lečenje kancera povezanog sa funkcijom PKM2. U sledećem primeru izvođenja, izabrani pacijent je subjekat koji pati ili je podložan poremećaju ili bolesti identifikovanoj ovde, na primer, poremećaju karakterisanom neželjenim rastom ili proliferacijom ćelija. U određenim primerima izvođenja, bolest je neoplastični poremećaj. U određenim primerima izvođenja, bolest je kancer, gojaznost, dijabetička bolest (npr. dijabetička nefropatija (DN)), ateroskleroza, restenoza, koronarna arterijska bolest (CAD), Bloom sindrom (BS), benigna hiperplazija prostate (BPH) ili autoimuna bolest. U određenim primerima izvođenja, bolest je kancer. U određenim primerima izvođenja, bolest je dijabetička bolest. U određenim primerima izvođenja, dijabetička bolest je dijabetička nefropatija (DN). U određenim primerima izvođenja, bolest je koronarna arterijska bolest (CAD).
[0011] U jednom primeru izvođenja, obezbeđena je upotreba jedinjenja opisanog ovde ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili farmaceutske kompozicije koja ih sadrži u bilo kojoj od gore opisanih postupaka pronalaska. U jednom primeru izvođenja, obezbeđeno je jedinjenje koje je ovde opisano ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili farmaceutska kompozicija koja ih sadrži za upotrebu u bilo kom od gore opisanih postupaka pronalaska. U sledećem primeru izvođenja, obezbeđena je upotreba jedinjenja opisanog ovde ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili farmaceutske kompozicije koja ih sadrži za proizvodnju leka za bilo koji od opisanih postupaka pronalaska.
KRATAK OPIS SLIKA
[0012]
Slike 1A-1C su liste struktura drugih primera jedinjenja korišćenih u postupcima pronalaska. Slike 2A-2C su liste struktura drugih primera jedinjenja korišćenih u postupcima pronalaska. Slika 3 je lista struktura drugih primera jedinjenja korišćenih u postupcima pronalaska.
Slika 4 prikazuje sintezu primera intermedijera korišćenih u Primerima 1-10.
DETALJAN OPIS PRONALASKA
Definicije
[0013] Ovde opisana jedinjenja, koja se koriste u postupcima pronalaska, mogu da sadrže jedan ili više asimetričnih centara, i stoga mogu postojati u različitim stereoizomernim oblicima, npr., enantiomeri i/ili dijastereomeri. Na primer, ovde opisana jedinjenja mogu biti u obliku pojedinačnog enantiomera, dijastereomera ili geometrijskog izomera, ili mogu biti u obliku smeše stereoizomera, uključujući racemske smeše i smeše obogaćene jednim ili više stereoizomera. Izomeri se mogu izolovati iz smeša postupcima poznatim stručnjacima u ovoj oblasti, uključujući hiralnu tečnu hromatografiju visokog pritiska (HPLC) i formiranje i kristalizaciju hiralnih soli; ili poželjni izomeri se mogu dobiti asimetričnim sintezama. Vidi, na primer, Jacques et al., Enantiomers, Racemates and Resolutions (Wiley Interscience, New York, 1981); Wilen et al., Tetrahedron 33:2725 (1977); Eliel, E.L. Stereochemistry of Carbon Compounds (McGraw-Hill, NY, 1962); i Wilen, S.H. Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions p. 268 (E.L. Eliel, Ed., Univ. of Notre Dame Press, Notre Dame, IN 1972).
[0014] U jednom primeru izvođenja, ovde opisana jedinjenja mogu takođe da sadrže jednu ili više izotopskih supstitucija. Na primer, jedinjenja koja imaju sadašnju strukturu osim zamene vodonika deuterijumom ili tricijumom, zamene<19>F sa<18>F, ili zamene<12>C sa<13>C ili<14>C su unutar obima otkrića. Takva jedinjenja su korisna, na primer, kao analitička sredstva ili probe u biološkim testovima.
[0015] Ovde opisana jedinjenja takođe mogu biti predstavljena u višestrukim tautomernim oblicima, u takvim slučajevima, izričito obuhvataju sve tautomerne oblike ovde opisanih jedinjenja, iako samo jedan tautomerni oblik može biti predstavljen (npr. alkilacija sistema prstenova može dovesti do alkilacije na više mesta; svi takvi proizvodi reakcije su izričito uključeni). Svi takvi izomerni oblici takvih jedinjenja su izričito uključeni. Ako je tautomer nekog jedinjenja aromatičan, ovo jedinjenje je aromatično. Slično, ako je tautomer supstituenta heteroaril, ovaj supstituent je heteroaril.
[0016] Termin "alkil" odnosi se na radikal ravnolančane ili razgranate zasićene ugljovodonične grupe koja ima od 1 do 10 atoma ugljenika ("C1-10alkil"). Primeri C1-6alkil grupe uključuju metil (C1), etil (C2), propil (C3) (npr., n-propil, izopropil), butil (C4) (npr., n-butil, terc-butil, sekbutil, izo-butil), pentil (C5) (npr., n-pentil, 3-pentanil, amil, neopentil, 3-metil-2-butanil, tercijarni amil) i heksil (C6) (npr., n-heksil). Osim ako nije drugačije naznačeno, svaka instanca alkil grupe je nezavisno nesupstituisana („nesupstituisani alkil“) ili supstituisana („supstituisani alkil“) sa jednim ili više supstituenata (npr., halogen, kao što je F). U određenim primerima izvođenja, alkil grupa je nesupstituisani -C1-10alkil. U određenim primerima izvođenja, alkil grupa je supstituisani -C1-10alkil.
[0017] Termin "haloalkil" odnosi se na supstituisanu alkil grupu, gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni halogenom, npr., fluoro, bromo, hloro ili jodo i uključuje alkil ostatke u kojima su svi vodonici zamenjeni sa halo (npr., perfluoroalkil). U nekim primerima izvođenja, haloalkil grupa ima 1 do 8 atoma ugljenika ("C1-8haloalkil").
[0018] Termin "alkoksi" ili "alkoksil" "O-alkil" se odnosi na -O-alkil radikal. Na primer, sa između 1 i 6 atoma ugljenika.
[0019] Termin "ariloksi" se odnosi na -O-aril radikal. U nekim primerima izvođenja ariloksi grupa je fenoksi.
[0020] "Hidroksialkil" ili "hidroksialkil" mogu uključiti alkil strukture koje su supstituisane sa jednom ili više hidroksilnih grupa.
[0021] Termin "heteroalkil" se odnosi na alkil grupu, koja dalje uključuje najmanje jedan heteroatom (npr., 1, 2, 3 ili 4 heteroatoma) odabranih od kiseonika, azota ili sumpora unutar (tj. umetnutih između susednih atoma ugljenika) i/ili postavljenih na jednu ili više terminalnih pozicija roditeljskog lanca. U određenim primerima izvođenja, heteroalkil grupa se odnosi na zasićenu grupu koja ima od 1 do 10 atoma ugljenika i 1 ili više heteroatoma unutar matičnog lanca ("heteroC1-10alkil"). Osim ako nije drugačije naznačeno, svaki primer heteroalkil grupe je nezavisno nesupstituisani („nesupstituisani heteroalkil") ili supstituisani („supstituisani heteroalkil") sa jednim ili više supstituenata. U određenim primerima izvođenja, heteroalkil grupa je nesupstituisani heteroC1-10alkil. U određenim primerima izvođenja, heteroalkil grupa je supstituisani heteroC1-10alkil.
[0022] Termin "alkenil" odnosi se na radikal ravnolančane ili razgranate ugljovodonične grupe koja ima od 2 do 10 atoma ugljenika i jednu ili više ugljenik-ugljenik dvostrukih veza (npr., 1, 2, 3 ili 4 dvostruke veze). Jedna ili više dvostrukih veza ugljenik-ugljenik mogu biti unutrašnje (kao što je 2-butenil) ili terminalne (kao što je 1-butenil). Primeri -C2-4alkenil grupe uključuju etenil (C2), 1-propenil (C3), 2-propenil (C3), 1-butenil (C4), 2-butenil (C4), butadienil (C4), i slično. Osim ako nije drugačije naznačeno, svaka instanca alkenil grupe je nezavisno nesupstituisana („nesupstituisani alkenil“) ili supstituisana („supstituisani alkenil“) sa jednim ili više supstituenata. U određenim primerima izvođenja, alkenil grupa je nesupstituisani -C2-10alkenil. U određenim primerima izvođenja, alkenil grupa je supstituisani -C2-10alkenil. U alkenil grupi, C=C dvostruka veza može biti (E)- ili (Z)-dvostruka veza.
[0023] Termin "alkinil" odnosi se na radikal ravnolančane ili razgranate ugljovodonične grupe koja ima od 2 do 10 atoma ugljenika i jednu ili više trostrukih veza ugljenik-ugljenik (npr.1, 2, 3 ili 4 trostruke veze) („C2-10alkinil"). Primeri alkinil grupa uključuju etinil (C2), 1-propinil (C3), 2-propinil (C3), 1-butinil (C4), 2-butinil (C4), pentinil (C5), heksinil (C6) heptinil (C7), oktinil (C8), i slično. Osim ako nije drugačije naznačeno, svaka instanca alkinil grupe je nezavisno nesupstituisana („nesupstituisani alkinil“) ili supstituisana („supstituisani alkinil“) sa jednim ili više supstituenata. U određenim primerima izvođenja, alkinil grupa je nesupstituisani -C2-10alkinil. U određenim primerima izvođenja, alkinil grupa je supstituisani -C2-10alkinil.
[0024] Termin "karbociklil" ili "karbociklični" odnosi se na radikal nearomatičnog monocikličnog, bicikličnog ili tricikličnog ili policikličnog ugljovodoničnog sistema prstena koji ima od 3 do 14 atoma ugljenika u prstenu ("C3-14karbociklil") i nula heteroatoma u nearomatičnom sistemu prstena. Karbociklil grupe uključuju potpuno zasićene sisteme prstenova (npr. cikloalkil) i delimično zasićene sisteme prstena. U nekim primerima izvođenja, karbociklil grupa ima 3 do 10 atoma ugljenika u prstenu ("C3-10karbociklil").
[0025] Termin "cikloalkil" kako se ovde koristi uključuje zasićene ciklične, biciklične, triciklične ili policiklične ugljovodonične grupe koje imaju 3 do 14 ugljenika koji sadrže naznačeni broj prstenova i atoma ugljenika (na primer C3-C14monociklični, C4-C14biciklični, C5-C14triciklični, ili C6-C14policiklični cikloalkil). U nekim primerima izvođenja "cikloalkil" je monociklični cikloalkil. Primeri monocikličnih cikloalkil grupa uključuju ciklopentil (C5), cikloheksil (C5), ciklopropil (C3), ciklobutil (C4), cikloheptil (C7) i ciklooktil (C8). U nekim primerima izvođenja "cikloalkil" je biciklični cikloalkil. Primeri bicikličnih cikloalkila uključuju biciklo[1.1.0]butan (C4), biciklo[1.1.1] pentan (C5), spiro[2.2] pentan (C5), biciklo[2.1.0]pentan (C5), biciklo[2.1.1]heksan (C6), biciklo[3.3.3]undekan (C11), dekahidronaftalen (C10), biciklo[4.3.2]undekan (C11), spiro[5.5]undekan (C11) i biciklo[4.3.3]dodekan (C12). U nekim primerima izvođenja "cikloalkil" je triciklični cikloalkil. Primeri tricikličnih cikloalkila uključuju adamantin (C12). Osim ako nije drugačije naznačeno, svaka instanca cikloalkil grupe je nezavisno nesupstituisana („nesupstituisani cikloalkil“) ili supstituisana („supstituisani cikloalkil“) sa jednim ili više supstituenata. U određenim primerima izvođenja, cikloalkil grupa je nesupstituisani C3-14cikloalkil. U određenim primerima izvođenja, cikloalkil grupa je supstituisani C3-14cikloalkil.
[0026] Termin "heterociklil" ili "heterociklični" odnosi se na radikal 3- do 14-članog nearomatičnog sistema prstena koji ima atome ugljenika u prstenu i 1 do 4 heteroatoma u prstenu, pri čemu je svaki heteroatom nezavisno izabran od azota, kiseonika i sumpora („3-14-člani heterociklil“). U heterociklil grupama koje sadrže jedan ili više atoma azota, tačka vezivanja može biti atom ugljenika ili azota, kako valenca dozvoljava. Heterociklil grupa može biti ili monociklična („monociklični heterociklil“) ili policiklična (npr. kondenzovani, premošćeni ili spiro sistem prstena kao što je biciklični sistem („biciklični heterociklil“) ili triciklični sistem („triciklični heterociklil“)), i može biti zasićeni ili mogu da sadrže jednu ili više ugljenik-ugljenik dvostruke ili trostruke veze. Heterociklil policiklični sistemi prstena mogu uključivati jedan ili više heteroatoma u jednom ili oba prstena. "Heterociklil" takođe uključuje sisteme prstena u kojima je heterociklil prsten, kao što je definisan gore, fuzionisan sa jednom ili više karbociklil grupa pri čemu je tačka vezivanja ili na karbociklil ili heterociklil prstenu, ili sisteme prstena u kojima je heterociklil prsten, kako je gore definisan, fuzionisan sa jednom ili više aril ili heteroaril grupa, pri čemu je tačka vezivanja na heterociklil prstenu, i u takvim slučajevima, broj članova prstena nastavlja da označava broj članova prstena u sistemu heterociklilnog prstena. Osim ako nije drugačije naznačeno, svaki primer heterociklila je nezavisno nesupstituisani („nesupstituisani heterociklil“) ili supstituisan („supstituisani heterociklil“) sa jednim ili više supstituenata. U određenim primerima izvođenja, heterociklil grupa je nesupstituisani 3-14-člani heterociklil. U određenim primerima izvođenja, heterociklil grupa je supstituisani 3-14-člani heterociklil. U nekim primerima izvođenja, heterociklil grupa je 5-10-člani nearomatični sistem prstena koji ima atome ugljenika u prstenu i 1-4 heteroatoma u prstenu, pri čemu je svaki heteroatom nezavisno izabran od azota, kiseonika i sumpora ("5-10-člani heterociklil").
[0027] Primeri heterociklil grupa obuhvataju aziridinil, oksiranil, tiiranil, azetidinil, oksetanil, tietanil, tetrahidrofuranil, dihidrofuranil, tetrahidrotiofenil, dihidrotiofenil, pirolidinil, dihidropirolil, pirolil-2,5-din, dioksolanil, oksatiolanil, ditiolanil, triazolinil, oksadiazolinil, tiadiazolinil, piperidinil, tetrahidropiranil, dihidropiridinil, tianil, piperazinil, morfolinil, ditianil, dioksanil, triazinanil, azepanil, oksepanil, tiepanil, azokanil, oksekanil, tiokanil, indolinil, izoindolinil, dihidrobenzofuranil, dihidrobenzotienil, tetrahidrobenzotienil, tetrahidrobenzofuranil, tetrahidroindolil, tetrahidrohinolinil, tetrahidroizohinolinil, dekahidrohinolinil, dekahidroizohinolinil, oktahidrohromenil, oktahidroizohromenil, dekahidronaftiridinil, dekahidro-1,8-naftiridinil, oktahidropirolo[3,2-b]pirol, indolinil, ftalimidil, naftalimidil, hromanil, hromenil, 1H-benzo[e][1,4]diazepinil, 1,4,5,7-tetrahidropirano[3,4-b]pirolil, 5,6-dihidro-4H-furo[3,2-b]pirolil, 6,7-dihidro-5H-furo[3,2-b]piranil, 5,7-dihidro-4H-tieno[2,3-c]piranil, 2,3-dihidro-1H-pirolo[2,3-b]piridinil, 2,3-dihidrofuro[2,3-b]piridinil, 4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirolo[2,3-b]piridinil, 4,5,6,7-tetrahidrofuro[3,2-c]piridinil, 4,5,6,7-tetrahidrotieno[3,2-b]piridinil, 1,2,3,4-tetrahidro-1,6-naftiridinil i slično.
[0028] Termin "aril" odnosi se na radikal monocikličnog ili policikličnog (npr., bicikličnog ili tricikličnog) 4n+2 aromatičnog sistema prstena (npr., koji ima 6, 10 ili 14 π elektrona podeljenih u cikličnom nizu) koji ima 6-14 atoma ugljenika u prstenu i nula heteroatoma obezbeđenih u sistemu aromatičnog prstena („C6-14aril"). U nekim primerima izvođenja, aril grupa ima 6 atoma ugljenika u prstenu ("C6aril"; npr., fenil). U nekim primerima izvođenja, aril grupa ima 10 atoma ugljenika u prstenu ("C10aril"; npr., naftil kao što su 1-naftil i 2-naftil). U nekim primerima izvođenja, aril grupa ima 14 atoma ugljenika u prstenu ("C14aril"; npr., antracil). "Aril" takođe uključuje sisteme prstenova u kojima je aril prsten, kao što je definisan gore, fuzionisan sa jednom ili više karbociklil ili heterociklil grupa pri čemu je radikal ili tačka vezivanja na aril prstenu, i u takvim slučajevima, broj atoma ugljenika se nastavlja da označava broj atoma ugljenika u sistemu aril prstena. Osim ako nije drugačije naznačeno, svaka instanca aril grupe je nezavisno nesupstituisana („nesupstituisani aril“) ili supstituisana („supstituisani aril“) sa jednim ili više supstituenata. U određenim primerima izvođenja, aril grupa je nesupstituisani C6-14aril. U određenim primerima izvođenja, aril grupa je supstituisani C6-14aril.
[0029] "Arilalkil" ili "aralkil" je podskup "alkila" i odnosi se na alkil grupu supstituisanu aril grupom, pri čemu je tačka vezivanja na alkil grupi. Primeri "arilalkila" ili "aralkila" uključuju benzil, 2-feniletil, 3-fenilpropil, 9-fluorenil, benzhidril i tritil grupe
[0030] Termin "heteroaril" se odnosi na radikal 5-14-člane monocikličnog ili policikličnog (npr., bicikličnog, tricikličnog) 4n+2 aromatičnog sistema prstena (npr., koji imaju 6, 10 ili 14 π elektrona podeljenih u cikličnom nizu) koji imaju atome ugljenika u prstenu i 1-4 heteroatoma u prstenu koji su obezbeđeni u sistemu aromatičnog prstena, pri čemu je svaki heteroatom nezavisno izabran od azota, kiseonika i sumpora („5-14 heteroaril"). U nekim primerima izvođenja heteroaril može biti 5-8 člani monociklični heteroaril koji sadrži 1-4 heteroatoma. U nekim primerima izvođenja heteroaril može biti 8-12-člani biciklični heteroaril koji ima 1-6 heteroatoma. U nekim primerima izvođenja heteroaril može biti 11-14-člani triciklični heteroaril sistem prstena koji ima 1-9 heteroatoma. U heteroaril grupama koje sadrže jedan ili više atoma azota, tačka vezivanja može biti atom ugljenika ili azota, kako valenca dozvoljava. Heteroaril policiklični sistemi prstena mogu uključivati jedan ili više heteroatoma u jednom ili oba prstena. "Heteroaril" uključuje sisteme prstenova u kojima je heteroaril prsten, kako je gore definisan, fuzionisan sa jednom ili više karbociklil ili heterociklil grupa pri čemu je tačka vezivanja na heteroaril prstenu, i u takvim slučajevima, broj članova prstena nastavlja da označava broj članova prstena u sistemu heteroaril prstena. "Heteroaril" takođe uključuje sisteme prstenova u kojima je heteroaril prsten, kako je gore definisan, fuzionisan sa jednom ili više aril grupa pri čemu je tačka vezivanja ili na aril ili heteroaril prstenu, i u takvim slučajevima, broj članova prstena označava broj članova prstena u kondenzovanom policikličnom (aril/heteroaril) sistemu prstena. Policiklične heteroaril grupe u kojima jedan prsten ne sadrži heteroatom (npr., indolil, hinolinil, karbazolil i slično) tačka vezivanja može biti na bilo kom prstenu, tj. na prstenu koji nosi heteroatom (npr., 2-indolil) ili prsten koji ne sadrži heteroatom (npr., 5-indolil). U nekim primerima izvođenja, heteroaril grupa je monociklični 5-10-člani aromatični sistem prstena koji ima atome ugljenika u prstenu i 1-4 heteroatoma u prstenu koji su obezbeđeni u sistemu aromatičnog prstena, pri čemu je svaki heteroatom nezavisno izabran od azota, kiseonika i sumpora („5-10-člani monociklični heteroaril"). U nekim primerima izvođenja, heteroaril grupa je biciklični 8-12-člani aromatični sistem prstena koji ima atome ugljenika u prstenu i 1-6 heteroatoma u prstenu koji su obezbeđeni u sistemu aromatičnog prstena, pri čemu je svaki heteroatom nezavisno izabran od azota, kiseonika i sumpora („8-12-člani biciklični heteroaril"). Osim ako nije drugačije naznačeno, svaki primer heteroaril grupe je nezavisno nesupstituisani („nesupstituisani heteroaril“) ili supstituisani („supstituisani heteroaril“) sa jednim ili više supstituenata. U određenim primerima izvođenja, heteroaril grupa je nesupstituisani 5-14-člani heteroaril. U određenim primerima izvođenja, heteroaril grupa je supstituisani 5-14-člani heteroaril. U određenim primerima izvođenja, heteroaril grupa je izborno supstituisani 5-člani monociklični heteroaril. U određenim primerima izvođenja, heteroaril grupa je izborno supstituisani 6-člani monociklični heteroaril.
[0031] Primeri monocikličnih heteroaril grupa obuhvataju pirolil, furanil, tiofenil, imidazolil, pirazolil, oksazolil, izoksazolil, tiazolil, izotiazolil, triazolil, oksadiazolil, tiadiazolil, tetrazolil, piridinil, piridizinil, pirimidinil, pirazinil, triazinil, tetrazinil, azepinil, oksepinil, tiepinil, indolil, izoindolil, indazolil, benzotriazolil, benzotiofenil, izobenzotiofenil, benzofuranil, benzoizofuranil, benzimidazolil, benzoksazolil, benzizoksazolil, benzoksadiazolil, benztiazolil, benzizotiazolil, benztiadiazolil, indolizinil, purinil, naftiridinil, pteridinil, hinolinil, izohinolinil, cinolinil, hinoksalinil, ftalazinil, hinazolinilfenantridinil, dibenzofuranil, karbazolil, akridinil, fenotiazinil, fenoksazinil i fenazinil.
[0032] "Heteroaralkil" ili "heteroarilalkil" se odnosi na alkil grupu supstituisanu heteroaril grupom, pri čemu je tačka vezivanja na alkil ostatku.
[0033] Termin "zasićen" odnosi se na ostatak koji ne sadrži dvostruku ili trostruku vezu, tj. ostatak sadrži samo jednostruke veze.
[0034] Dodavanje sufiksa "-en" na grupu ukazuje na to da je grupa dvovalentna grupa, npr., alkilen je dvovalentni ostatak alkila, alkenilen je dvovalentni ostatak alkenila, alkinilen je dvovalentni ostatak alkinila, heteroalkilen je dvovalentni ostatak heteroalkila, heteroalkenilen je dvovalentni ostatak heteroalkila, heteroalkinilen heteroalkenilen je dvovalentni ostatak heteroalkinila, karbociklilen je dvovalentni ostatak karbociklila, heterociklilen je dvovalentni ostatak heterociklila, arilen je dvovalentni ostatak arila i heteroarilen je dvovalentni ostatak
1
heteroarila.
[0035] Termin "izborno supstituisan" odnosi se na supstituisani ili nesupstituisan. Generalno, termin "supstituisan" znači da je najmanje jedan vodonik prisutan u grupi zamenjen dozvoljenim supstituentom, npr., supstituentom koji nakon supstitucije rezultira stabilnim jedinjenjem, npr., jedinjenjem koje ne prolazi spontano kroz transformaciju kao što je preuređivanje, ciklizacija, eliminacija ili druga reakcija. Osim ako nije drugačije naznačeno, "supstituisana" grupa ima supstituent (npr. C1-6alkil, halogen, nitro, cijano, hidroksil, C1-6haloalkil, C1-6haloalkoksi, C1-6acil, C3-6cikloalkil, C6-10aril, monociklični ili biciklični heteroaril, i monociklični ili biciklični heterociklil), na jednoj ili više pozicija grupe koje se mogu supstituisati, i kada je više od jedne pozicije u bilo kojoj datoj strukturi supstituisano, supstituent je ili isti ili različit na svakoj poziciji. Termin "supstituisan" podrazumeva supstituciju sa svim dozvoljenim supstituentima organskih jedinjenja i uključuje bilo koji od ovde opisanih supstituenata koji rezultiraju formiranjem stabilnog jedinjenja. Ovo otkriće razmatra bilo koju i sve takve kombinacije da bi se došlo do stabilnog jedinjenja. Za potrebe ovog otkrića, heteroatomi kao što je azot mogu imati vodonične supstituente i/ili bilo koji pogodan supstituent kao što je ovde opisan koji zadovoljavaju valence heteroatoma i rezultiraju formiranjem stabilnog ostatka. Otkriće nije namenjeno da bude ograničeno na bilo koji način ovde opisanim primerima supstituenata.
[0036] Termin "Halo" ili "halogen" odnosi se na fluor, hlor, brom ili jod.
[0037] Termin "acil" se odnosi na grupu koja ima opštu formulu -C(=O)R<X1>, -C(=O)OR<X1>, -C(=O)-O-C(=O)R<X1>, -C(=O)SR<X1>, -C(=O)N(R<X1>)2, -C(=S)R<X1>, -C(=S)N(R<X1>)2, i -C(=S)S(R<X1>), -C(=NR<X1>)R<X1>, -C(=NR<X1>)OR<X1>, -C(=NR<X1>)SR<X1>, i -C(=NR<X1>)N(R<X1>)2, pri čemu R<X1>je vodonik; halogen; supstituisani ili nesupstituisani hidroksil; supstituisani ili nesupstituisani tiol; supstituisani ili nesupstituisani amino; supstituisani ili nesupstituisani acil, ciklični ili aciklični, supstituisani ili nesupstituisani, razgranati ili nerazgranati C1-10alkil; ciklični ili aciklični, supstituisani ili nesupstituisani, razgranati ili nerazgranati C2-10alkenil; supstituisani ili nesupstituisani C2-10alkinil; supstituisani ili nesupstituisani C6-12aril, supstituisani ili nesupstituisani heteroaril, kada valenca dozvoljava. Primeri acil grupa uključuju aldehide (-CHO), karboksilne kiseline (-CO2H), ketone, acil halogenide, estre, amide, imine, karbonate, karbamate i uree.
[0038] U određenim primerima izvođenja, supstituent prisutan na atomu azota, na atomu kiseonika ili na atomu sumpora je zaštitna grupa za azot, zaštitna grupa za kiseonik ili zaštitna grupa za sumpor, respektivno. Zaštitne grupe za azot, kiseonik i sumpor su dobro poznate u tehnici i uključuju one koje su detaljno opisane u Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 3rd edition, John Wiley & Sons, 1999.
[0039] Na primer, grupe za zaštitu azota uključuju, ali nisu ograničene na, formamid, acetamid, hloroacetamid, trihloracetamid, trifluoroacetamid, fenilacetamid, metil karbamat, etil karbamat, 9-fluorenilmetil karbamat (Fmoc), t-butil karbamat (BOC ili Boc), 1-adamantil karbamat (Adoc), vinil karbamat (Voc), alil karbamat (Alloc), 2-(trimetilsilil)etoksi]metil (SEM), ptoluensulfonamid (Ts), benzensulfonamid, 2,3,6-trimetil-4 -metoksibenzensulfonamid (Mtr), 2,4,6-trimetoksibenzensulfonamid (Mtb), fenotiazinil-(10)-acil derivat, N'-ptoluensulfonilaminoacil derivat,
[0040] Primeri zaštitnih grupa za kiseonik i sumpor uključuju, ali nisu ograničeni na, metil, metoksimetil (MOM), metiltiometil (MTM), t-butiltiometil, (fenildimetilsilil)metoksimetil (SMOM), benziloksimetil (BOM), p-metoksibenziloksimetil (PMBM), (4-metoksifenoksi)metil (p-AOM), tetrahidropiranil (THP), metansulfonat (mezilat), benzilsulfonat i tozilat (Ts).
[0041] Termin "odlazeća grupa" ima svoje uobičajeno značenje u stanju tehnike sintetičke organske hemije i odnosi se na atom ili grupu koja je sposobna da bude zamenjena nukleofilom. Primeri pogodnih odlazećih grupa uključuju, ali nisu ograničeni na, halogen (kao što su F, Cl, Br ili I (jod)), alkoksikarboniloksi, ariloksikarboniloksi, alkansulfoniloksi, arensulfoniloksi, alkilkarboniloksi (npr. acetoksi), estar sulfonske kiseline, kao što je toluensulfonat (tozilat, -OTs), metansulfonat (mezilat, -OMs), p-bromobenzensulfoniloksi (brosilat, -OBs), -OS(=O)2(CF2)3CF3(nonaflat, -ONf), ortrifluorometansulfonat (triflat, -OTf).
[0042] Kako se ovde koristi, termin "so" se odnosi na bilo koju i sve soli, i obuhvata farmaceutski prihvatljive soli.
[0043] Termin "farmaceutski prihvatljiva so" odnosi se na one soli koje su, u okviru racionalne medicinske procene, pogodne za upotrebu u kontaktu sa tkivima ljudi i nižih životinja bez nepotrebne toksičnosti, iritacije, alergijskog odgovora i slično, i srazmerne su razumnom odnosu koristi/rizika. Farmaceutski prihvatljive soli su dobro poznate u tehnici. Na primer, Berge et al. detaljno opisuju farmaceutski prihvatljive soli u J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19. Farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja prema ovom pronalasku uključuju one izvedene iz pogodnih neorganskih i organskih kiselina i baza. Primeri farmaceutski prihvatljivih, netoksičnih kiselih adicionih soli su soli amino grupe formirane sa neorganskim kiselinama, kao što su hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, fosforna kiselina, sumporna kiselina i perhlorna kiselina ili sa organskim kiselinama, kao što su sirćetna kiselina, oksalna kiselina, maleinska kiselina, vinska kiselina, limunska kiselina, ćilibarna kiselina ili malonska kiselina ili korišćenjem drugih postupaka poznatih u tehnici, kao što je jonska razmena. Ostale farmaceutski prihvatljive soli obuhvataju adipat, alginat, askorbat, aspartat, benzensulfonat, benzoat, bisulfat, borat, butirat, kamforat, kamforsulfonat, citrat, ciklopentanpropionat, diglukonat, dodecilsulfat, etanfanosulfonat, format, fumarat, glukoheptanoat, glicerofosfat, glukonat, hemisulfat, heptanoat, heksanoat, hidrojodid, 2-hidroksi-etansulfonat, laktobionat, laktat, laurat, lauril sulfat, malat, maleat, malonat, metansulfonat, 2-naftalensulfonat, nikotinat, nitrat, oleat, oksalat, palmitat, pamoat, pektinat, persulfat, 3-fenilpropionat, fosfat, pikrat, pivalat, propionat, stearat, sukcinat, sulfat, tartarat, tiocijanat, p-toluensulfonat, undekanoat, valeratne soli i slično. Soli dobijene od odgovarajućih baza uključuju soli alkalnih metala, zemnoalkalnih metala, amonijuma i N<+>(C1-4alkil)4<->soli. Reprezentativne soli alkalnih ili zemnoalkalnih metala uključuju natrijum, litijum, kalijum, kalcijum, magnezijum i slično. Dodatne farmaceutski prihvatljive soli uključuju, kada je prikladno, netoksični amonijum, kvaternarni amonijum i amin katjone formirane korišćenjem kontrajona kao što su halogenid, hidroksid, karboksilat, sulfat, fosfat, nitrat, niži alkil sulfonat i aril sulfonat.
[0044] Termini "kompozicija" i "formulacija" koriste se naizmenično.
[0045] "Subjekat" za koga se razmatra primena odnosi se na čoveka (tj. muškog ili ženskog pola bilo koje starosne grupe, npr., pedijatrijski subjekat (npr., beba, dete ili adolescent) ili odraslu osobu (npr., mlada odrasla osoba, odrasla osoba srednjih godina ili odrasla osoba starije životne dobi)) ili životinja koja nije čovek. U određenim primerima izvođenja, životinja koja nije čovek je sisar (npr., primat (npr., makaki majmun ili rezus majmun), komercijalno relevantan sisar (npr., goveda, svinja, konj, ovca, koza, mačka ili pas) ili ptica (npr., komercijalno relevantna ptica, kao što su pile, patka, guska ili ćurka)). U određenim primerima izvođenja, životinja koja nije čovek je riba, gmizavac ili vodozemac. Životinja koja nije čovek može biti mužjak ili ženka u bilo kojoj fazi razvoja. Životinja koja nije čovek može biti transgena životinja ili genetski modifikovana životinja. U određenim primerima izvođenja, subjekat je pacijent. Termin "pacijent" se odnosi na čoveka kome je potrebno lečenje bolesti. U određenim primerima izvođenja, termin "pacijent" je odrasla osoba starija od 18 godina kojoj je potrebno lečenje bolesti. U određenim primerima izvođenja, termin "pacijent" je ljudsko dete ne starije od 18 godina kome je potrebno lečenje bolesti. U određenim primerima izvođenja, pacijent nije pod redovnom transfuzijom (npr. koji ima najmanje 4 epizode transfuzije u periodu od 12 meseci). U određenim primerima izvođenja, pacijent je pod redovnom transfuzijom (npr. imao je najmanje 4 epizode transfuzije u periodu od 12 meseci).
[0046] Termin "primeniti", "primena", ili "primenjivanje" se odnosi na implantaciju, apsorpciju, ingestiju, injektiranje, udisanje ili na drugi način uvođenje jedinjenja opisanog ovde, ili njegove kompozicije, u ili na subjekta.
[0047] Termini "tretman", "lečiti", i "tretirati" odnose se na reverziju, ublažavanje, odlaganje početka ili inhibiranje napredovanja bolesti opisane ovde. U nekim primerima izvođenja, lečenje
1
se može primeniti nakon što se jedan ili više znakova ili simptoma bolesti razvije ili su primećeni (tj. terapeutski tretman). U sledećim primerima izvođenja, tretman se može primeniti u odsustvu znakova ili simptoma bolesti. Na primer, tretman se može primeniti na osetljivog subjekta pre pojave simptoma (tj. profilaktički tretman) (npr., u svetlu istorije simptoma i/ili u svetlu izloženosti patogenu). Lečenje se takođe može nastaviti nakon što simptomi nestanu, na primer, da bi se odložilo ili sprečilo ponavljanje. U određenim primerima izvođenja, lečenje uključuje odlaganje pojave najmanje jednog simptoma poremećaja tokom određenog vremenskog perioda.
[0048] Termini "stanje", "bolest", i "poremećaj" se koriste naizmenično.
[0049] "Efikasna količina" ovde opisanog jedinjenja se odnosi na količinu dovoljnu da izazove željeni biološki odgovor. Efikasna količina jedinjenja opisanog ovde može da varira u zavisnosti od faktora kao što su željena biološka krajnja tačka, farmakokinetika jedinjenja, stanje koje se leči, način primene i starost i zdravlje subjekta. U određenim primerima izvođenja, efikasna količina je terapeutski efikasna količina. U određenim primerima izvođenja, efikasna količina je da generiše odgovor hemoglobina subjekta od ≥1.5 g/dL povećanja koncentracije Hb od početne vrednosti. Osnovna koncentracija Hb subjekta je prosek svih dostupnih koncentracija Hb pre tretmana ovim jedinjenjem. U određenim primerima izvođenja, efikasna količina je da generiše odgovor hemoglobina subjekta od ≥1.0 g/dL povećanja koncentracije Hb u odnosu na početnu vrednost. U određenim primerima izvođenja, efikasna količina je da generiše odgovor hemoglobina subjekta od ≥2.0 g/dL povećanja koncentracije Hb od početne vrednosti. U određenim primerima izvođenja, efikasna količina je količina jedinjenja opisanog ovde u jednoj dozi. U određenim primerima izvođenja, efikasna količina su kombinovane količine jedinjenja opisanog ovde u više doza.
[0050] "Terapeutski efikasna količina" ovde opisanog jedinjenja je količina dovoljna da obezbedi terapeutsku korist u lečenju stanja ili da odloži ili minimizira jedan ili više simptoma povezanih sa stanjem. Terapeutski efikasna količina jedinjenja označava količinu terapeutskog sredstva, samog ili u kombinaciji sa drugim terapijama, koja pruža terapeutsku korist u lečenju stanja. Termin "terapeutski efikasna količina" može da obuhvati količinu koja poboljšava ukupnu terapiju, smanjuje ili izbegava simptome, znake ili uzroke stanja, i/ili poboljšava terapeutsku efikasnost drugog terapeutskog sredstva. U određenim primerima izvođenja, terapeutski efikasna količina je količina dovoljna za izazivanje merljive aktivacije divljeg tipa ili mutantnog PKM2. U određenim primerima izvođenja, terapeutski efikasna količina je količina dovoljna za regulaciju (npr. snižavanje) glukoze u plazmi kod subjekta kome je to potrebno. U određenim primerima izvođenja, terapeutski efikasna količina je količina dovoljna za izazivanje merljive efikasnosti za lečenje proliferativne bolesti (npr. kancer, autoimuna bolest). U određenim primerima izvođenja, terapeutski efikasna količina je količina dovoljna za izazivanje merljive efikasnosti za lečenje i/ili prevenciju dijabetičke bolesti (npr. DN). U određenim primerima izvođenja, terapeutski efikasna količina je količina dovoljna za izazivanje merljive efikasnosti za lečenje i/prevenciju CAD.
[0051] Termin "aktivator" kako se ovde koristi označava sredstvo koje (merljivo) povećava aktivnost piruvat kinaze (npr. PKM2) ili izaziva povećanje aktivnosti piruvat kinaze (npr. PKM2) do nivoa koji je veći od bazalnih nivoa aktivnosti PKM2. Na primer, aktivator može imitirati efekat izazvan prirodnim ligandom (npr. FBP). Efekat aktivatora izazvan jedinjenjem koje je ovde dato može biti u istoj, ili većoj ili manjoj meri od aktivacionog efekta izazvanog prirodnim ligandom, ali je izazvan isti tip efekta. Jedinjenje koje je ovde dato može se proceniti da bi se utvrdilo da li je aktivator merenjem bilo direktno ili indirektno aktivnosti piruvat kinaze kada je podvrgnuto pomenutom jedinjenju. Aktivnost jedinjenja datog ovde može da se meri, na primer, u odnosu na kontrolnu supstancu. U nekim slučajevima, izmerena aktivnost test jedinjenja je za aktivaciju PKM2. Aktivnost PKM2 se može meriti, na primer, praćenjem koncentracije proizvoda kao što je ATP ili nivoa kofaktora kao što je NADH koji se koristi u sistemu za ispitivanje spregnutih enzima (videti PCT/US2010/040486).
[0052] Termin "inhibitor" kako se ovde koristi označava sredstvo koje (merljivo) usporava, zaustavlja, smanjuje ili inaktivira enzimsku aktivnost piruvat kinaze (npr. PKM2) da se smanji na nivo koji je manji od bazalnih nivoa ili aktivnosti piruvat kinaze (npr. PKM2).
[0053] Termin "ex vivo" koji se odnosi na postupak kako se ovde koristi znači da se postupak odvija van organizma. Na primer, ćelija ili tkivo se mogu ekstrahovati iz organizma koji će biti u kontaktu sa jednim ili više jedinjenja koja su ovde data ili njihovom farmaceutski prihvatljivom soli ili farmaceutskom kompozicijom, izborno pod veštački kontrolisanim uslovima (npr., temperatura).
[0054] Termin "in vitro" pozivanje na postupak kako se ovde koristi znači da se postupak odvija van organizma i da je sadržan u veštačkoj sredini. Na primer, ćelija ili tkivo mogu biti ekstrahovani iz organizma koji će biti u kontaktu sa jednim ili više jedinjenja koja su ovde data ili njihovom farmaceutski prihvatljivom soli ili farmaceutskom kompozicijom, u zatvorenom, veštačkom okruženju (npr., sistem kulture), kao što je u epruveti, u kulturi, u bočici, u mikrotitarskoj ploči, na Petrijevoj posudi i slično.
Jedinjenja
[0055] Ovde su opisani postupci koji se odnose na jedinjenja i farmaceutske kompozicije koje
1
moduliraju PKM2, i upotreba ovih jedinjenja i farmaceutskih kompozicija za ove postupke. Konkretno, ovi postupci uključuju postupak modulacije aktivnosti piruvat kinaze M2 (PKM2) kod subjekta, postupak modulacije (npr. povećanje ili smanjenje) nivoa aktivnosti PKM2 kod subjekta kome je to potrebno, postupak modulacije (npr. povećanje ili smanjenje) nivoa glukoze u plazmi kod subjekta kome je to potrebno, postupak inhibicije proliferacije ćelija kod subjekta kome je to potrebno (transformisana ćelija, npr. ćelija kancera, ili generalno inhibiranje rasta u PKM2 zavisnoj ćeliji koja podvrgava se aerobnoj glikolizi), postupak lečenja subjekta koji pati ili je podložan bolesti ili poremećaju povezanim sa funkcijom PKM2. U jednom primeru izvođenja, jedinjenja i kompozicije opisane ovde modulišu PKM2 vezivanjem u alosteričnom džepu za vezivanje. U jednom primeru izvođenja, jedinjenja i kompozicije opisane ovde inhibiraju PKM2. U jednom primeru izvođenja, jedinjenja i kompozicije opisane ovde aktiviraju PKM2. U jednom primeru izvođenja, ovde opisano jedinjenje je jedinjenje Formule (I)-(IX), ili jedinjenje Formule (I')-(V'), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje Formule (I)-(IX), ili jedinjenje Formule (I')-(V'), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. U jednom primeru izvođenja, jedinjenje koje se koristi u postupcima pronalaska je jedinjenje opisano u Međunarodnoj patentnoj prijavi br. PCT/CN2017/09496 i U.S. privremenim patentnim prijavama br.62/673,533 i 62/673,526.
[0056] U prvom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak modulacije aktivnosti piruvat kinaze M2 (PKM2) kod subjekta kome je to potrebno, koji sadrži primenu efikasne količine jedinjenja Formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, gde:
Q je vodonik, izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani alkenil, izborno supstituisani alkinil, izborno supstituisani cikloalkil, izborno supstituisani heterociklil, izborno supstituisani aril, ili izborno supstituisani heteroaril;
R<1>je vodonik, izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani haloalkil, izborno supstituisani alkenil, izborno supstituisani alkinil, izborno supstituisani cikloalkil, izborno supstituisani heterociklil, izborno supstituisani aril, -OR<o1>, - C(=O)R<c1>ili grupa za zaštitu azota;
L<1>je veza, izborno supstituisani alkilen, -O-, -S-, -S-CH2-, -S(=O)CH2-, -S(=O)2CH2-, -NR<3>-, -NR<3>C(=O)-, -C(=O)NR<3>-, -C(=O)-, -OC(=O)-, -C(=O)O-, -NR<3>C(=O)O-, -OC(=O)NR<3>-, -NR<3>C(=O)NR<3>-, -OC(R<4>)2-, -C(R<4>)2O--NR<3>C(R<4>)2-, -C(R<4>)2NR<3>-, -S(=O)2-, -S(=O)-, -S(=O)2O-, -OS(=O)2-, -S(=O)O-, -OS(=O)-, -S(=O)2NR<3>-, -NR<3>S(=O)2-, -S(=O)NR<3>-, -NR<3>S(=O)-, -
1
NR<3>S(=O)2O-, - OS(=O)2NR<3>-, - NR<3>S(=O)O-, -OS(=O)NR<3>-, ili -S(=O)(=NR<3>)-, pri čemu se tačka vezivanja za R<2>nalazi se na levoj strani;
L<2>je veza, izborno supstituisani alkilen, -C(=O)-, -S(=O)2-, ili -S(=O)-, pri čemu je tačka vezivanja za Q na desnoj strani;
R<2>je vodonik, halogen, izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani alkoksi, izborno supstituisani alkenil, izborno supstituisani alkinil, izborno supstituisani cikloalkil, izborno supstituisani heterociklil, izborno supstituisani aril, ili izborno supstituisani heteroaril, ili zaštitna grupa za azot kada je L<1>jednako -NR<3>-, - NR<3>C(=O)-, -NR<3>C(=O)O-, -NR<3>C(R<4>)2-, -NR<3>S(=O)2-, -NR<3>S(=O)-, -NR<3>C(=O)NR<3>-, -NR<3>S(=O)2O-, ili -NR<3>S(=O)O-, grupa za zaštitu kiseonika kada je L<1>jednako -O-, -OC(=O)-, -OC(=O)NR<3>-, -OC(R<4>)2-, -OS(=O)2- -OS(=O)2NR<3>-, -OS(=O)NR<3>-, ili -OS(=O)-, ili grupa za zaštitu sumpora kada je L<1>jednako -S-;
svaka instanca R<3>je nezavisno vodonik, -OR<o2>, izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani alkenil, izborno supstituisani alkinil, izborno supstituisani cikloalkil, izborno supstituisani heterociklil, izborno supstituisani aril, izborno supstituisani heteroaril ili zaštitna grupa za azot; svaka instanca R<o1>, i R<o2>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani alkil ili zaštitna grupa za kiseonik;
svaka instanca R<c1>je nezavisno izborno supstituisani alkil ili -N(R<cn>)2, pri čemu svaka instanca R<cn>je nezavisno vodonik, -C1-6alkil, ili zaštitna grupa za azot; i
svaka instanca R<4>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani alkenil, izborno supstituisani alkinil, izborno supstituisani cikloalkil, izborno supstituisani heterociklil, izborno supstituisani aril, ili izborno supstituisani heteroaril.
[0057] U drugom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak modulacije nivoa glukoze u plazmi kod subjekta kome je to potrebno, koji sadrži primenu efikasne količine jedinjenja Formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu Formula (I) je kao što je definisana u prvom primeru izvođenja.
[0058] U trećem primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak inhibicije proliferacije ćelija kod subjekta koji pati od ili je podložan bolesti ili poremećaju povezanim sa funkcijom PKM2, koji sadrži primenu efikasne količine jedinjenja formule (I) ili farmaceutski prihvatljive soli od toga, pri čemu je formula (I) kao što je definisana u prvom primeru izvođenja.
[0059] U četvrtom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak lečenja bolesti povezane sa aberantnom aktivnošću PKM2 kod subjekta kome je to potrebno, koji sadrži primenu efikasne količine jedinjenja formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu Formula (I) je kao što je definisana u prvom primeru izvođenja.
1
[0060] U petom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa četvrtim primerom izvođenja kao što je gore opisan, pri čemu je bolest proliferativna bolest.
[0061] U šestom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa četvrtim primerom izvođenja kao što je gore opisan, pri čemu bolest je kancer, gojaznost, dijabetička bolest (npr. dijabetička nefropatija (DN)), ateroskleroza, restenoza, bolest koronarne arterije (CAD), Bloom sindrom (BS), benigna hiperplazija prostate (BPH) ili autoimuna bolest.
[0062] U sedmom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak lečenja hiperglikemije kod subjekta kome je to potrebno, koji sadrži primenu efikasne količine jedinjenja formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu je formula (I) kao što je definisana u prvom primeru izvođenja.
[0063] U osmom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak lečenja dijabetičke bolesti kod subjekta kome je to potrebno, koji sadrži primenu efikasne količine jedinjenja formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu je formula (I) kao što je definisana u prvom primeru izvođenja.
[0064] U devetom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa osmim primerom izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu je dijabetička bolest dijabetička nefropatija.
[0065] U desetom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do devetog primera izvođenja kao što je gore opisan, pri čemu postupak dalje sadrži identifikaciju subjekta koji bi imao koristi od modulacije PKM2.
[0066] U jedanaestom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa prvim primerom izvođenja kao što je gore opisan, pri čemu je modulacija aktiviranje.
[0067] U dvanaestom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do jedanaestog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu:
Q je vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, izborno supstituisani C3-C12cikloalkil, izborno supstituisani 3- do 14-člani heterociklil, izborno supstituisani 6- do 14-člani aril, ili izborno supstituisani 5- do 14-člani heteroaril;
R<1>je vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, izborno supstituisani -C1-C6haloalkil, izborno supstituisani -C2-C6alkenil, izborno supstituisani -C2-C6alkinil, izborno supstituisani C3-C12cikloalkil, izborno supstituisani 3- do 14-člani heterociklil, izborno supstituisani 6- do 12-člani aril, -OR<o1>, - C(=O)R<c1>ili grupa za zaštitu azota;
L<1>je veza, izborno supstituisani C1-6alkilen, -O-, -S-, -S-CH2-, -S(=O)CH2-, -S(=O)2CH2-, -NR<3>-, -NR<3>C(=O)-, -C(=O)NR<3>-, -C(=O)-, -OC(=O)-, -C(=O)O-, -NR<3>C(=O)O-, -OC(=O)NR<3>-, -NR<3>C(=O)NR<3>-, -OC(R<4>)2-, -C(R<4>)2O-, -NR<3>C(R<4>)2- -C(R<4>)2NR<3>-, -S(=O)2-, -S(=O)-, -S(=O)2O-
1
, -OS(=O)2- -S(=O)O-, -OS(=O)-, -S(=O)2NR<3>-, -NR<3>S(=O)2-, -S(=O)NR<3>-, -NR<3>S(=O)-, -NR<3>S(=O)2O- -OS(=O)2NR<3>-, -NR<3>S(=O)O- -OS(=O)NR<3>-, ili -S(=O)(=NR<3>)-, pri čemu je tačka vezivanja za R<2>na levoj strani;
L<2>je veza, izborno supstituisani C1-C6alkilen, -C(=O)-, -S(=O)2-, ili -S(=O)-, pri čemu je tačka vezivanja za Q na desnoj strani;
R<2>je vodonik, halogen, izborno supstituisani -C1-C6alkil, izborno supstituisani -C1-C6alkoksi, izborno supstituisani -C3-C12cikloalkil, izborno supstituisani 3- do 14-člani heterociklil, izborno supstituisani -C6-C12aril, ili izborno supstituisani 3- do 14-člani heteroaril, ili grupa za zaštitu azota kada je L<1>jednako -NR<3>-, -NR<3>C(=O)-, -NR<3>C(=O)O-, -NR<3>C(R<4>)2-, -NR<3>S(=O)2-, -NR<3>S(=O)-, -NR<3>C(=O)NR<3>-, -NR<3>S(=O)2O-, ili -NR<3>S(=O)O-, grupa za zaštitu kiseonika kada je L<1>jednako -O-, -OC(=O)-, -OC(=O)NR<3>-, -OC(R<4>)2-, -OS(=O)-, -OS(=O)2-, -OS(=O)2NR<3>-, -OS(=O)NR<3>-, ili -OS(=O)-, ili grupa za zaštitu sumpora kada L<1>je -S-;
svaka instanca R<3>je nezavisno vodonik, -OR<o2>, izborno supstituisani -C1-C6alkil, izborno supstituisani -C2-C6alkenil, izborno supstituisani -C2-C6alkinil, izborno supstituisani C2-C12cikloalkil, izborno supstituisani C3-C12heterociklil, izborno supstituisani C6-C12aril, izborno supstituisani C5-C12heteroaril, ili grupa za zaštitu azota;
svaka instanca R<o1>i R<o2>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitnu grupu za kiseonik;
svaka instanca R<c1>je nezavisno izborno supstituisani -C1-C6alkil ili -N(R<cn>)2, pri čemu svaka instanca R<cn>je nezavisno vodonik, -C1-C6alkil, ili zaštitnu grupu za azot;
svaka instanca R<4>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, izborno supstituisani -C2-C6alkenil, izborno supstituisani -C2-C6alkinil, izborno supstituisani C3-C12cikloalkil, izborno supstituisani 3- do 14-člani heterociklil, izborno supstituisani C6-C12aril, ili izborno supstituisani 5- do 14-člani heteroaril.
[0068] U trinaestom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojom od prvog do dvanaestog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu:
Q je C6-C12aril, 5- do 6-člani monociklični heteroaril ili 8- do 12-člani biciklični heteroaril, od kojih je svaki supstituisani sa 0-3 instance R<c>;
R<1>je izabran od sledećih: vodonik, -C1-C6alkil, -C1-C6haloalkil, C3-C7monociklični cikloalkil i 3- do 14-člani heterociklil, -OR<o1>, -C(=O)R<c1>ili grupa za zaštitu azota; pri čemu je svaki alkil, cikloalkil ili heterociklil supstituisan sa 0-3 instance R<d>;
R<2>je izabran od sledećih: vodonik, halogen, -C1-C6alkil, -C1-C6alkoksi, C3-C7monociklični cikloalkil, C6-C12biciklični cikloalkil, 3- do 14-člani heterociklil, C6-C12aril, 5- do 6-člani
1
monociklični heteroaril, 8- do 12-člani biciklični heteroaril, pri čemu je svaki alkil, cikloalkil, heterociklil, aril i heteroaril supstituisani sa 0-3 instance R<e>, ili grupa za zaštitu azota kada je L<1>jednako -NR<3>-, -NR<3>C(=O)-, -NR<3>C(=O)O-, -NR<3>C(R<4>)2-, -NR<3>S(=O)2-, -NR<3>S(=O)-, -NR<3>C(=O)NR<3>-, -NR<3>S(=O)2O-, ili -NR<3>S(=O)O-, grupa za zaštitu kiseonika kada je L<1>jednako -O-, -OC(=O)-, -OC(=O)NR<3>-, -OC(R<4>)2-, -OS(=O)-, -OS(=O)2- -OS(=O)2NR<3>-, -OS(=O)NR<3>-, ili -OS(=O)-, ili grupa za zaštitu sumpora kada je L<1>jednako -S-;
R<3>je izabran od sledećih: vodonik, -OR<o2>, -C1-C6alkil, C3-C7monociklični cikloalkil, C6-C12biciklični cikloalkil, 3- do 14-člani heterociklil, C6-C12aril, 5- do 6-člani monociklični heteroaril i 8- do 12-člani biciklični heteroaril, pri čemu je svaki alkil, cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril supstituisani sa 0-3 instance R<f>;
R<4>je izabran od sledećih: vodonik, -C1-C6alkil, C3-C7monociklični cikloalkil i 3- do 14-člani heterociklil, pri čemu je svaki alkil, cikloalkil ili heterociklil supstituisan sa 0-1 instance R<g>; L<1>je veza, alkilen supstituisan sa 0-3 instance R<h>, -O-, -S-, -S-CH2-, -S(=O)CH2-, -S(=O)2CH2-, -NR<3>-, -NR<3>C(=O)-, -C(=O)NR<3>-, -C(=O)-, -OC(-O)-, -C(-O)O-, -NR<3>C(=O)O-, -OC(=O)NR<3>-, -NR<3>C(=O)NR<3>-, -OC(R<4>)2-, -C(R<4>)2O-, -NR<3>C(R<4>)2-, -C(R<4>)2NR<3>-, -S(=O)2-, -S(=O)-, -S(=O)2O-, -OS(=O)2-, -S(=O)O-, -OS(=O)-, -S(=O)2NR<3>-, -NR<3>S(=O)2-, -S(=O)NR<3>-, -NR<3>S(=O)-, -NR<3>S(=O)2O-, -OS(=O)2NR<3>-, -NR<3>S(=O)O-, -OS(=O)NR<3>-, ili -S(=O)(=NR<3>)-, pri čemu je tačka vezivanja za R<2>na levoj strani;
L<2>je veza, alkilen supstituisani sa 0-3 instance R<h>, -C(=O)-, - S(=O)2- ili -S(=O)-, pri čemu je tačka vezivanja za Q na desnoj strani;
svaki R<c>je nezavisno izabran od sledećih: halo, -C1-C6alkil, -C1-C6haloalkil, -C1-C6hidroksialkil, -OH, -OC1-C6alkil, -C1-C6aminoalkil, -NH(C1-C6alkil), -N(C1-C6alkil)2, -C(=O)OC1-C6alkil, -C(=O)OH, -C(=O)C1-C6alkil, -C(=O)NH2, -C(=O)NH(C1-C6alkil), -C(=O)N(C1-C6alkil)2, -NHC(=O)NH2, -NHC(=O)NH(C1-C6alkil), -NH(C=O)N(C1-C6alkil)2, -NHC(=O)(C1-C6alkil), -N(C1-C6alkil)C(=O)(C1-C6alkil), -S(=O)2NH2, -S(=O)2NH(C1-C6alkil), -S(=O)2N(C1-C6alkil)2, -NHS(=O)2(C1-C6alkil), -NH2, -CN i -NO2; ili dve instance R<c>vezane za iste ili susedne atome ugljenika, uzeti zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju cikloalkil ili heterociklil C(=O)OH;
svaki R<d>je nezavisno izabran od halo, -C1-C6alkil, -OH, -OC1-C6alkil, -NH2i -CN;
svaki R<c>je nezavisno izabran od sledećih: halo, -C1-C6alkil, -C1-C6haloalkil, -C1-C6hidroksialkil, -OH, -OC1-C6alkil, -C1-C6aminoalkil, -NH(C1-C6alkil), -N(C1-C6alkil)2, -C(=O)OC1-C6alkil, -C(=O)OH, -C(=O)C1-C6alkil, -C(=O)NH2, -C(=O)NH(C1-C6alkil), -C(=O)N(C1-C6alkil)2, -NHC(=O)NH2, -NHC(=O)NH(C1-C6alkil), -NH(C=O)N(C1-C6alkil)2, -NHC(=O)(C1-C6alkil), -N(C1-C6alkil)C(=O)(C1-C6alkil), -S(=O)2NH2, -S(=O)2NH(C1-C6
2
alkil), -S(=O)2N(C1-C6alkil)2, -NHS(=O)2(C1-C6alkil), -NH2, -CN i -NO2; ili dve instance R<e>vezane za iste ili susedne atome ugljenika, uzete zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju cikloalkil ili heterociklil;
svaki R<f>je nezavisno izabran od halo, -C1-C6alkil, -C1-C6haloalkil, -C1-C6alkoksi, -OH, -NH2, -CN i -NO2;
svaki R<g>je nezavisno izabran od halo, -C1-C6alkil, -C1-C6haloalkil, -C1-C6alkoksi, -OH, NH2, -CN i NO2i;
svaki R<h>je nezavisno izabran od halo, -C1-C6alkil, -C1-C6haloalkil, -C1-Cehidroksialkil, -OH, -OC1-C6alkil, -C1-C6aminoalkil, -NH(C1-C6alkil), -N(C1-C6alkil)2, -C(=O)OC1-C6alkil, -C(=O)OH, -C(=O)C1-C6alkil, -C(=O)NH2, -C(=O)NH(C1-C6alkil), -C(=O)N(C1-C6alkil)2, -NHC(=O)NH2, -NHC(=O)NH(C1-C6alkil), -NH(C=O)N(C1-C6alkil)2, -NHC(=O)(C1-C6alkil), -N(C1-C6alkil)C(=O)(C1-C6alkil), -S(=O)2NH2, -S(=O)2NH(C1-C6alkil), -S(=O)2N(C1-C6alkil)2, -NHS(=O)2(C1-C6alkil), -NH2, -CN i -NO2, S(=O)2aril, S(=O)2heteroaril i =NOH ili dve instance R<cn>vezane za iste ili susedne atome ugljenika, uzete zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju cikloalkil ili heterociklil.
[0069] U četrnaestom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do trinaestog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu jedinjenje je jedinjenje predstavljeno Formulom (II):
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; gde:
R<a>i R<b>su svaki nezavisno vodonik, halogen, -CN, -NO2, -N3, izborno supstituisani alkil, -OR<o3>, -N(R<n1>)2, -C(=O)N(R<n1>)2, ili -C(=O)R<c2>, ili R<a>i R<b>može se uzeti zajedno sa atomom ugljenika da bi se formirao izborno supstituisani cikloalkil ili izborno supstituisani heterociklil;
svaka instanca R<n1>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za azot;
svaka instanca R<o3>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za kiseonik; i
svaka instanca R<c2>je nezavisno izborno supstituisani -C1-C6alkil;
pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kom od prvog do dvanaestog primera izvođenja.
[0070] U petnaestom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do trinaestog primera izvođenja kao što je gore opisan, pri čemu je L<1>jednako veza, izborno supstituisan -C1-6alkilen, -C(=O)-, -S(=O)-, -S(=O)2-, -NR<3>C(=O)-, ili -C(=O)NR<3>-; i pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kom od prvog do četrnaestog primera izvođenja.
[0071] U šesnaestom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do četrnaestog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu L<1>je C1-6alkilen supstituisan sa R<j>i R<k>;
pri čemu svaka instanca R<j>i R<k>je nezavisno izabrana od sledećih: H, halogen, -CN, -OR<o7>, -N(R<n5>)2, -N(R<n5>)C(=O) R<c5>, -C(=O)N(R<n5>)2, -C(=O)R<c5>, -C(=O)OR<o7>-SR<js>, -S(=O)2R<js>, ili -S(=O)R<js>, izborno supstituisan -C1-C6alkil; ili R<j>i R<k>može se uzeti zajedno sa atomom ugljenika da formira C=O, C=NR<jn>, izborno supstituisani C3-C6monociklični cikloalkil prsten ili izborno supstituisani C3-C6monociklični heterociklil prsten;
svaki od R<n5>i R<jn>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, -OR<o8>ili grupa za zaštitu azota;
svaka instanca R<o7>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitnu grupu za kiseonik;
svaka instanca R<c5>je nezavisno izborno supstituisani -C1-C6alkil; i
svaka instanca R<js>je nezavisno izborno supstituisani -C1-C6alkil, izborno supstituisani C6-12aril, izborno supstituisani heteroaril, ili zaštitnu grupu za sumpor; i
pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kom od prvog do petnaestog primera izvođenja.
[0072] U sedamnaestom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do šesnaestog primera izvođenja kao što je gore opisan, gde je jedinjenje predstavljeno Formulom (I'):
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde:
R<1>je vodonik, izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani haloalkil, izborno supstituisani alkenil, izborno supstituisani alkinil, izborno supstituisani cikloalkil, izborno supstituisani heterociklil, izborno supstituisani aril, -OR<o1>, -C(=O)R<c1>ili grupa za zaštitu azota; gde:
R<o1>je vodonik, izborno supstituisani alkil ili zaštitna grupa za kiseonik;
R<c1>je izborno supstituisani alkil ili -N(R<cn>)2, pri čemu svaka instanca
R<cn>je nezavisno vodonik, -C1-6alkil, ili zaštitna grupa za azot;
R<2>i Q su svaki nezavisno izborno supstituisani 5- ili 6-člani monociklični heteroaril;
R<a>i R<b>su svaki nezavisno vodonik, halogen, -CN, -NO2, -N3, izborno supstituisani alkil, -OR<o3>, -N(R<n1>)2, -C(=O)N(R<n1>)2ili -C(=O)R<c2>; ili alternativno R<a>i R<b>mogu biti uzeti zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani da formiraju izborno supstituisani cikloalkil ili izborno supstituisani heterociklil; gde:
svaka instanca R<n1>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za azot;
R<o3>je vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za kiseonik; i
R<c2>je izborno supstituisani -C1-C6alkil; i
R<j>i R<k>su svaki nezavisno vodonik, halogen, -CN, -OR<o7>, -N(R<n5>)2, -N(R<n5>)C(=O)R<c5>, -C(=O)N(R<n5>)2, -C(=O)R<c5>, -C(=O)OR<o7>, -SR<js>, -S(=O)2R<js>, -S(=O)R<js>ili izborno supstituisani -C1-C6alkil; ili alternativno R<j>i R<k>mogu se uzeti zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani da formiraju C=O, izborno supstituisani C1-C6monociklični cikloalkil prsten, ili izborno supstituisani C3-C6monociklični heterociklil prsten; gde:
svaka instanca R<n5>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, -OR<o8>ili grupa za zaštitu azota, gde R<o8>je vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za kiseonik; svaka instanca R<o7>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za kiseonik;
svaka instanca R<c5>je nezavisno izborno supstituisani -C1-C6alkil; i
svaka instanca R<js>je nezavisno izborno supstituisani -C1-C6alkil, izborno supstituisani C6-12aril, izborno supstituisani heteroaril ili zaštitna grupa za sumpor.
[0073] U osamnaestom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa sedamnaestim primerom izvođenja kao što je gore opisan, pri čemu, jedinjenje je jedinjenje predstavljeno Formulom (I') ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu 5- ili 6-člani monociklični heteroaril predstavljen sa R<2>je izborno supstituisan na svakom atomu ugljenika koji se može supstituisati u prstenu sa R<p>i izborno supstituisan na svakom atomu azota koji se može supstituisati u prstenu sa R<n6>; gde:
svaka instanca R<p>je nezavisno vodonik, halogen, -CN, -NO2, -N3, izborno supstituisani alkil,
2
izborno supstituisani alkenil, izborno supstituisani alkinil, izborno supstituisani cikloalkil, izborno supstituisani aril, izborno supstituisani heterociklil, izborno supstituisani heteroaril, -OR<o6>, -SR<s2>, -N(R<n3>)2, -C(=O)N(R<n3>)2, -N(R<n3>)C(=O)R<c4>, -C(=O)R<c4>, -C(=O)OR<o6>, -OC(=O)R<c4>, -S(=O)R<s2>, -S(=O)2R<s2>, -S(=O)OR<o6>, -OS(=O)R<c4>, -S(=O)2OR<o6>, -OS(=O)2R<c4>, -S(=O)N(R<n3>)2, -S(=O)2N(R<n3>)2, -N(R<n3>)S(=O)R<s2>, -N(R<n3>)S(=O)2R<s2>, -N(R<n3>)C(=O)OR<o6>, - OC(=O)N(R<n3>)2, -N(R<n3>)C(=O)N(R<n3>)2, -N(R<n3>)S(=O)N(R<n3>)2, -N(R<n3>)S(=O)2N(R<n3>)2, - N(R<n3>)S(=O)OR<o6>, -N(R<n3>)S(=O)2OR<o6>, -OS(=O)N(R<n3>)2, ili -OS(=O)2N(R<n3>)2;ili alternativno dve instance R<p>vezane za iste ili susedne atome ugljenika, mogu se uzeti zajedno sa atomom(ima) ugljenika za koje su vezane da formiraju izborno supstituisani cikloalkil ili heterocikloalkil; gde:
svaka instanca R<n3>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za azot;
svaka instanca R<o6>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za kiseonik; i
svaka instanca R<c4>je izborno supstituisani -C1-C6alkil;
svaka instanca R<s2>je nezavisno izborno supstituisani -C1-C6alkil ili zaštitna grupa za sumpor; i R<n6>je vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za azot; i
pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u sedamnaestom primeru izvođenja.
[0074] U devetnaestom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do osamnaestog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu je Q izborno supstituisani 5- do 6-člani monociklični heteroaril; i pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kom od prvog do osamnaestog primera izvođenja.
[0075] U dvadesetom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do devetnaestog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu Q ima jednu od sledećih formula:
gde:
svaka instanca R<n>je nezavisno vodonik, halogen, -CN, -NO2, -N3, izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani alkenil, izborno supstituisani alkinil, izborno supstituisani cikloalkil, izborno supstituisani aril, izborno supstituisani heterociklil, izborno supstituisani heteroaril, -OR<o4>, -SR<s1>, -N(R<n2>)2, -C(=O)N(R<n2>)2, -N(R<n2>)C(=O)R<c3>, -C(=O)R<c3>, -C(=O)OR<o4>, -OC(=O)R<c3>, -S(=O)R<s1>, -S(=O)2R<s1>, -S(=O)OR<o4>, -OS(=O)R<c3>, -S(=O)2OR<o4>, -OS(=O)2R<c3>, -S(=O)N(R<n2>)2, -S(=O)2N(R<n2>)2, -N(R<n2>)S(=O)R<s1>, -N(R<n2>)S(=O)2R<s1>, -N(R<n2>)C(=O)OR<o4>, -OC(=O)N(R<n2>)2, -N(R<n2>)C(=O)N(R<n2>)2, -N(R<n2>)S(=O)N(R<n2>)2, -N(R<n2>)S(=O)2N(R<n2>)2, -N(R<n2>)S(=O)OR<o4>, -N(R<n2>)S(=O)2OR<o4>, -OS(=O)N(R<n2>)2, ili -OS(=O)2N(R<n2>)2; ili dve instance R<cn>vezane za iste ili susedne atome ugljenika, uzete zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezane da formiraju izborno supstituisani cikloalkil ili heterocikloalkil; gde:
svaka instanca R<n2>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za azot;
svaka instanca R<o4>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za kiseonik;
svaka instanca R<c3>je nezavisno izborno supstituisani -C1-C6alkil;
svaka instanca R<cn>je nezavisno izborno supstituisani -C1-C6alkil ili zaštitna grupa za sumpor; n je 0, 1, 2 ili 3, kako valenca dozvoljava; i
svaki od R<na>, R<nb>, i R<nd>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za azot; i
pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kom od prvog do devetnaestog primera izvođenja.
[0076] U dvadeset i prvom primeru izvođenja pronalaska, dat je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do dvadesetog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu je 5- ili 6-člani monociklični heteroaril predstavljen sa Q izabran od sledećih:
2
i
pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kom od prvog do dvadesetog primera izvođenja.
[0077] U dvadeset drugom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do dvadeset prvog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu je 5-ili 6-člani monociklični heteroaril predstavljen sa Q izabran od sledećih:
i
pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kom od prvog do dvadeset prvog primera izvođenja.
[0078] U dvadeset trećem primeru izvođenja pronalaska, dat je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do dvadeset drugog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu je 5- ili 6-člani monociklični heteroaril predstavljen sa Q izabran od sledećih:
i
pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kom od prvog do dvadeset drugog primera izvođenja.
2
[0079] U dvadeset četvrtom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do dvadeset trećeg primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu je 5-ili 6-člani monociklični heteroaril predstavljen sa Q
i pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kom od prvog do dvadeset trećeg primera izvođenja.
[0080] U dvadeset petom primeru izvođenja pronalaska, dat je postupak u skladu sa bilo kojom od prvog do šesnaestog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu je Q izborno supstituisani 8- do 12-člani biciklični heteroaril ili izborno supstituisani 8- do 12- člani biciklični heterociklil; i pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kom od prvog do šesnaestog primera izvođenja.
[0081] U dvadeset šestom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do šesnaestog i dvadeset petog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu je Q jedna od sledećih formula:
2
pri čemu svaka instanca R<cn>je nezavisno izabrana od sledećih: vodonik, halogen, -CN, -NO2, -N3, izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani alkenil, izborno supstituisani alkinil, izborno supstituisani cikloalkil, izborno supstituisani aril, izborno supstituisani heterociklil, izborno supstituisani heteroaril, -OR<o4>, -SR<s1>, -N(R<n2>)2, -C(=O)N(R<n2>)2, -N(R<n2>)C(=O)R<c3>, -C(=O)R<c3>, -C(=O)OR<o4>, -OC(=O)R<c3>, -S(=O)R<s1>, -S(=O)2R<s1>, -S(=O)OR<o4>, -OS(=O)R<c3>, -S(=O)2OR<o4>, -OS(=O)2R<c3>, -S(=O)N(R<n2>)2, -S(=O)2N(R<n2>)2, -N(R<n2>)S(=O)R<s1>, -N(R<n2>)S(=O)2R<s1>, -N(R<n2>)C(=O)OR<o4>, -OC(=O)N(R<n2>)2, -N(R<n2>)C(=O)N(R<n2>)2, -N(R<n2>)S(=O)N(R<n2>)2, -N(R<n2>)S(=O)2N(R<n2>)2, -N(R<n2>)S(=O)OR<o4>, -N(R<n2>)S(=O)2OR<o4>, -OS(=O)N(R<n2>)2, -OS(=O)2N(R<n2>)2, ili dve instance R<n>vezane za iste ili susedne atome ugljenika, uzete zajedno sa atomima za koje su vezane formiraju izborno supstituisani cikloalkil ili heterocikloalkil; svaka instanca R<na>i R<nb>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za azot;
svaka instanca R<n2>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za azot;
svaka instanca R<o4>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za kiseonik;
svaka instanca R<c3>je nezavisno izborno supstituisani -C1-C6alkil;
svaka instanca R<s1>je nezavisno izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili grupa za zaštitu sumpora; n je 0, 1, 2 ili 3, kako valenca dozvoljava; i
pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kom od prvog do šesnaestog i dvadeset petog primera izvođenja.
2
[0082] U dvadeset sedmom primeru izvođenja pronalaska, dat je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do dvadeset šestog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu R<2>je izabran od sledećih: vodonik, hidroksil, halogen, -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkoksil, fenil, naftalenil, C3-6cikloalkil, 5-člani heteroaril, 6-člani heteroaril, 8-člani biciklični heteroaril, 9-člani biciklični heteroaril, pri čemu je svaki alkil, alkenil, fenil i heteroaril supstituisani sa 0-3 instance R<e>; i pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kom od prvog do dvadeset šestog primera izvođenja.
[0083] U dvadeset osmom primeru izvođenja pronalaska, dat je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do dvadeset sedmog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu R<2>ima jednu od sledećih formula:
2
pri čemu svaka instanca R<p>je nezavisno izabrana od sledećih: vodonik, halogen, -CN, -NO2, -N3, izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani alkenil, izborno supstituisani alkinil, izborno supstituisani cikloalkil, izborno supstituisani aril, izborno supstituisani heterociklil, izborno supstituisani heteroaril, -OR<o6>, -SR<s2>, -N(R<n3>)2, -C(=O)N(R<n3>)2, -N(R<n3>)C(=O)R<c4>, -C(=O)R<c4>, C(=O)OR<o6>, -OC(=O)R<c4>, -S(=O)R<s2>, -S(=O)2R<s2>, -S(=O)OR<o6>, -OS(=O)R<c4>, -S(=O)2OR<o6>, -OS(=O)2R<c4>, -S(=O)N(R<n3>)2, -S(=O)2N(R<n3>)2, -N(R<n3>)S(=O)R<s2>, -N(R<n3>)S(=O)2R<s2>, -N(R<n3>)C(=O)OR<o6>, -OC(=O)N(R<n3>)2, -N(R<n3>)C(=O)N(R<n3>)2, -N(R<n3>)S(=O)N(R<n3>)2, -N(R<n3>)S(=O)2N(R<n3>)2, -N(R<n3>)S(=O)OR<o6>, -N(R<n3>)S(=O)2OR<o6>, -OS(=O)N(R<n3>)2, -OS(=O)2N(R<n3>)2, ili dve instance R<p>vezane za iste ili susedne atome ugljenika, uzete zajedno sa atomima za koje su vezane formiraju izborno supstituisani cikloalkil ili heterocikloalkil; svaka instanca R<n3>, R<nc>, i R<nd>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za azot;
svaka instanca R<o6>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za kiseonik;
svaka instanca R<c4>je nezavisno izborno supstituisani -C1-C6alkil;
svaka instanca R<s2>je nezavisno izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili grupa za zaštitu sumpora; p je 0, 1, 2 ili 3, kako valenca dozvoljava; i
pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kom od prvog do dvadeset sedmog primera izvođenja.
[0084] U dvadeset devetom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do dvadeset osmog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu je 5-ili 6-člani monociklični heteroaril predstavljen sa R<2>izabran od jednog od sledećih:
1
gde:
svaka instanca R<nc>i R<nd>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za azot;
p je 0, 1, 2, 3 ili 4, kako valenca dozvoljava;
pri čemu su preostale promenljive kao što su definisane u bilo kom od prvog do dvadeset osmog primera izvođenja.
[0085] U tridesetom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do dvadeset devetog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu je 5- ili 6-člani monociklični heteroaril predstavljen sa R<2>izabran od jednog od sledećih:
2
pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kom od prvog do dvadeset devetog primera izvođenja.
[0086] U trideset prvom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do tridesetog primera izvođenja kao što su gore opisani, gde je R<2>izabran od jednog od sledećih:
i pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kom od prvog do dvadesetogtridesetog primera izvođenja.
[0087] U trideset drugom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od dvadeset sedmog do trideset prvog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu svaka instanca R<p>je nezavisno vodonik, halogen, izborno supstituisani C1-4alkil, -CN, -NO2, -N3, -OR<o4>, -N(R<n2>)2, -C(=O)N(R<n2>)2, -C(=O)R<c3>, ili -C(=O)OR<o4>; i pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kom od dvadeset osmog do trideset prvog primera izvođenja.
[0088] U trideset trećem primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do šesnaestog i dvadeset sedmog do trideset drugog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu jedinjenje je jedinjenje formule (III):
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu su promenljive kao što su definisane u bilo kom od prvog do šesnaestog i dvadeset sedmog do trideset drugog primera izvođenja.
[0089] U trideset četvrtom primeru izvođenja pronalaska, dat je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do dvadeset četvrtog i dvadeset sedmog do trideset drugog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu jedinjenje je jedinjenje formule (IV):
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu su promenljive kao što su definisane u bilo kom od prvog do dvadeset četvrtog i dvadeset sedmog do trideset drugog primera izvođenja.
[0090] U trideset petom primeru izvođenja pronalaska, dat je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do dvadeset četvrtog i dvadeset sedmog do trideset drugog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu jedinjenje je jedinjenje formule (V-a):
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu m je 0, 1 ili 2; i ostale promenljive su kao što su definisane u bilo kom od prvog do dvadeset četvrtog i od dvadeset sedmog do trideset drugog primera izvođenja.
[0091] U trideset šestom primeru izvođenja pronalaska, dat je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do dvadeset četvrtog i dvadeset sedmog do trideset drugog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu jedinjenje je jedinjenje formule (V-h):
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu m je 0, 1 ili 2; R<nc>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za azot; i pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kom od prvog do dvadeset četvrtog i od dvadeset sedmog do trideset drugog primera izvođenja.
[0092] U trideset sedmom primeru izvođenja pronalaska, dat je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do šesnaestog i dvadeset petog do trideset drugog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu jedinjenje je jedinjenje formule (VT):
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde R<n7>je vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za azot; i pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kom od prvog do šesnaestog i dvadeset petog do trideset drugog primera izvođenja.
4
[0093] U trideset osmom primeru izvođenja pronalaska, dat je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do dvadeset četvrtog i dvadeset sedmog do trideset drugog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu jedinjenje je jedinjenje formule (IX):
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde R<nc>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za azot; i pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kom od od prvog do dvadeset četvrtog i od dvadeset sedmog do trideset drugog primera izvođenja.
[0094] U trideset devetom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do trideset osmog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu jedinjenje je jedinjenje formule (II'):
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu R<n6>je vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za azot; q je 0, 1, 2 ili 3; i pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kom od prvog do trideset osmog primera izvođenja. Alternativno, promenljive su kao što su opisane u bilo kojem od sedamnaestog, osamnaestog, dvadeset devetog, tridesetog i trideset prvog primera izvođenja.
[0095] U četrdesetom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do trideset osmog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu jedinjenje je jedinjenje formule (III'):
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je q 0, 1, 2 ili 3; i pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kom od primera izvođenja od prvog do trideset osmog primera izvođenja.
[0096] U četrdeset prvom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do trideset osmog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu jedinjenje je jedinjenje formule (IV'):
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu R<n6>je vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za azot; q je 0, 1, 2 ili 3; i pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kojem od prvog do trideset osmog primera izvođenja.
[0097] U četrdeset drugom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do trideset osmog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu jedinjenje je jedinjenje formule (V'):
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu q je 0, 1, 2 ili 3; i pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kojem od prvog do trideset osmog primera izvođenja.
[0098] U četrdeset trećem primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od trideset devetog do četrdeset drugog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu R<n6>je vodonik ili -C1-4alkil; i pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kojem od trideset devetog do četrdeset drugog primera izvođenja.
[0099] U četrdeset četvrtom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od trideset devetog do četrdeset drugog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu svaka instanca R<p>je nezavisno vodonik, halogen, izborno supstituisani C1-4alkil, -CN, -NO2, -N3, -OR<o4>, -N(R<n2>)2, -C(=O)N(R<n2>)2, -C(=O)R<c3>, ili -C(=O)OR<o4>; i pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kojem od trideset devetog do četrdeset drugog primera izvođenja.
[0100] U četrdeset petom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od dvadeset šestog do četrdeset drugog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu R<na>je vodonik ili -C1-4alkil; i pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kojem od dvadeset šestog do četrdeset drugog primera izvođenja.
[0101] U četrdeset šestom primeru izvođenja pronalaska, dat je postupak u skladu sa bilo kojim od dvadesetog do četrdeset petog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu svaka instanca R<n>je nezavisno vodonik, halogen, izborno supstituisani C1-4alkil, -CN, -NO2, -N3, -OR<o4>, -N(R<n2>)2, -C(=O)N(R<n2>)2, -C(=O)R<c3>, ili - C(=O)OR<o4>; i pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kojem od dvadesetog do četrdeset petog primera izvođenja.
[0102] U četrdeset sedmom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od prve do četrdeset šestog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu R<1>je vodonik ili -C1-C4alkil; i pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kojem od prvog do četrdeset šestog primera izvođenja.
[0103] U četrdeset osmom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od šesnaestog do četrdeset sedmog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu R<j>i R<k>su svaki nezavisno vodonik, halogen, -OR<o7>, ili -C1-C4alkil; ili R<j>i R<k>su spojeni zajedno da formiraju =O; i pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kojem od šesnaestog do četrdeset sedmog primera izvođenja.
[0104] U četrdeset devetom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od šesnaestog do četrdeset osmog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu R<j>i R<k>su svaki vodonik; i pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kojem od šesnaestog do četrdeset osmog primera izvođenja.
[0105] U pedesetom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od četrnaestog do četrdeset devetog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu R<a>i R<b>su svaki vodonik; i pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kojem od četrnaestog do četrdeset devetog primera izvođenja.
[0106] U pedeset i prvom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od trideset petog do pedesetog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu q je 0 ili 1; i pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kojem od trideset petog do pedesetog primera izvođenja.
[0107] U pedeset drugom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od dvadesetog do pedeset prvog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu n je 0 ili 1; i pri čemu su ostale promenljive kao što su definisane u bilo kom od dvadesetog do pedeset prvog primera izvođenja.
[0108] U pedeset trećem primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od prvog do pedeset drugog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu jedinjenje je jedinjenje izabrano iz Tabele 1 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0109] U pedeset četvrtom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak modulacije aktivnosti piruvat kinaze M2 (PKM2), koji sadrži dovođenje u kontakt PKM2 sa efikasnom količinom jedinjenja kao što je opisano u bilo kom od prethodno navedenih od prvog do pedeset trećeg primera izvođenja, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.
[0110] U pedeset petom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak inhibicije proliferacije ćelije koja eksprimira piruvat kinazu M2 (PKM2), koji sadrži dovođenje ćelije u kontakt sa efikasnom količinom jedinjenja kao što je opisano u bilo kom od gore navedenih od prvog do pedeset trećeg primera izvođenja, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.
[0111] U pedeset šestom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od pedeset četvrtog i pedeset petog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu je postupak ex vivo postupak.
[0112] U pedeset sedmom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od pedeset četvrtog i pedeset petog primera izvođenja kao što su gore opisani, pri čemu je postupak in vitro postupak.
[0113] U pedeset osmom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od pedeset četvrtog do pedeset sedmog primra izvođenja, pri čemu postupak inhibira aktivnost PKM2.
[0114] U pedeset devetom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od pedeset četvrtog do pedeset sedmog primera izvođenja, pri čemu postupak aktivira aktivnost PKM2.
[0115] U šezdesetom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od pedeset četvrtog do pedeset devetog primera izvođenja, pri čemu je PKM2 eksprimiran u ćeliji koja nije crveno krvno zrnce.
[0116] U šezdeset prvom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od pedeset četvrtog do šezdesetog primera izvođenja, pri čemu je ćelija izvedena ili dobijena od subjekta koji pati ili je podložan bolesti ili poremećaju povezanim sa funkcijom PKM2.
[0117] U šezdeset drugom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa šezdeset prvim primerom izvođenja, pri čemu je bolest ili poremećaj povezan sa aberantnom aktivnošću PKM2.
[0118] U šezdeset trećem primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa šezdeset prvim primerom izvođenja, pri čemu je bolest ili poremećaj kancer, gojaznost, dijabetička bolest (npr. dijabetes, dijabetička nefropatija (DN)), ateroskleroza, restenoza, koronarna arterijska bolest (CAD), Bloom sindrom (BS), benigna hiperplazija prostate (BPH) ili autoimuna bolest.
[0119] U šezdeset četvrtom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa šezdeset trećim primerom izvođenja, gde je dijabetička bolest dijabetička nefropatija.
[0120] U šezdeset petom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od pedeset petog do šezdeset četvrtog primera izvođenja, pri čemu ćelija je ćelija koja prekomerno eksprimira PKM2.
[0121] U šezdeset šestom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od pedeset petog do šezdeset petog primera izvođenja, pri čemu ćelija je ćelija koja eksprimira PKM2 koja ima aberantnu aktivnost.
[0122] U šezdeset sedmom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđen je postupak u skladu sa bilo kojim od pedeset petog do šezdeset šestog primera izvođenja, pri čemu ćelija je ćelija kancera, ćelija pankreasa, ćelija jetre, nervna ćelija ili ćelija bubrega.
[0123] U određenim primerima izvođenja jedinjenja Formule (I)-(IX), (I')-(V') ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, R<2>i Q su svaki nezavisno izborno supstituisani 5- ili 6-člani monociklični heteroaril. U određenim primerima izvođenja jedinjenja Formule (I)-(IX), (I')-(V') ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, R<2>i Q su oba izborno supstituisani 5- ili 6-člani monociklični heteroaril; i L<1>i L<2>su svaki nezavisno izborno supstituisani C1-4 alkilen. U određenim primerima izvođenja, R<2>i Q su isti. U određenim primerima izvođenja, R<2>i Q su različiti.
[0124] U određenim primerima izvođenja, ovde opisana jedinjenja su korisna kao aktivatori PKM2 koji se koriste u postupcima i kompozicijama opisanim ovde i deluju pomoću ili imaju jedan ili više od sledećih mehanizama ili osobina:
a. to je alosterični aktivator PKM2;
b. modulira (npr. stabilizuje) vezivanje FBP u džepu za vezivanje PKM2;
c. modulira (npr. stimuliše) oslobađanje FBP iz džepa za vezivanje PKM2;
d. to je modulator (npr. agonist), npr. analog, FBP, npr. agonist koji vezuje PKM2 sa nižim, približno istim ili većim afinitetom od FBP;
e. modulira (npr. stimuliše) rastvaranje tetramernog PKM2;
f. modulira (npr. stimuliše) sklapanje tetramernog PKM2;
g. modulira (npr. stabilizuje) tetramernu konformaciju PKM2;
h. modulira (npr. stimuliše) vezivanje polipeptida koji sadrži fosfotirozin za PKM2; i. modulira (npr. stimuliše) sposobnost polipeptida koji sadrži fosfotirozin da indukuje oslobađanje FBP iz PKM2, npr., izazivanjem promene u konformaciji PKM2, npr., u položaju Lys 433, čime ometa oslobađanje FBP;
j. modulira sklonost PKM2 da se podvrgne post-translacionim modifikacijama (npr. oksidacija na Cys358 ili acetilacija na Lys305) koje utiču na aktivnost enzima.
k. vezuje se za ili menja položaj Lys 433 u odnosu na FBP džep za vezivanje;
l. selektivno modulira (npr. aktivira) PKM2 preko najmanje jedne druge izoforme PK, na primer, selektivan je za PKM2 u odnosu na jedan ili više PKR, PKM1 ili PKL;
m. ima afinitet za PKM2 koji je veći od njegovog afiniteta za najmanje jednu drugu izoformu PK, npr. PKR, PKM1 ili PKL.
[0125] Jedinjenje opisano ovde može biti testirano na njegovu sposobnost da aktivira PKM2. Radi jednostavnosti, aktivnost aktivacije ovih jedinjenja je predstavljena kao AC50u tabeli 2. U tabelama 2, ovde opisano jedinjenje može imati AC50 divljeg tipa PKM2. "A" se odnosi na AC50 manji od 0.300 µM; "B" se odnosi na AC50 od 0.301 µM do 0.800 µM i "C" se odnosi na AC50 veći od 0.800 µM.
Tabela 1. Primeri jedinjenja kao modulatora PKM2
4
4
4
4
Tabela 2: AC50primernih jedinjenja za divlji tip PKM2
4
4
4
[0126] U određenim primerima izvođenja, jedinjenje Formule (I)-(IX), (I')-(V') je izabrano od bilo kog od jedinjenja navedenih u Tabeli 1 i Primerima. U određenim primerima izvođenja, jedinjenje Formule (I)-(IX), (I')-(V') ima formulu bilo koju datu dole:
pri čemu su R<na>, R<nc>, R<o2>, i R<o6>kao što su ovde definisani, i R<ox>je vodonik ili zaštitna grupa za kiseonik. U određenim primerima izvođenja, R<na>je grupa za zaštitu azota (npr. SEM ili BOC). U određenim primerima izvođenja, R<nc>je grupa za zaštitu azota (npr. SEM ili BOC). U određenim primerima izvođenja, R<o2>je grupa za zaštitu kiseonika (npr. THP). U određenim primerima izvođenja, R<o6>je grupa za zaštitu kiseonika (npr. TBS). U određenim primerima izvođenja, R<ox>je grupa za zaštitu kiseonika (npr. THP).
[0127] Jedinjenja koja su ovde opisana mogu biti napravljena korišćenjem različitih sintetičkih tehnika kao što su navedene u Primerima. Transformacije sintetičke hemije i metodologije zaštitnih grupa (zaštita i deprotekcija) korisne u sintetisanju ovde opisanih jedinjenja su poznate u tehnici i uključuju, na primer, one kao što su opisane u R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2d. Ed., John Wiley and Sons (1991); L. Fieser and M. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994); i L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995), i njihova naredna izdanja.
[0128] Određena jedinjenja aktivatora korisna kao PKM2 divlji tip i/ili mutantni aktivatori su ona koja pokazuju specifičnost i aktivaciju enzima PKM2 (divljeg tipa i/ili mutantnog enzima) u odsustvu FBP do nivoa većeg od onog od 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 99 ili 100% u prisustvu FBP.
[0129] U nekim primerima izvođenja, jedinjenja Formule (I) se mogu pripremiti korišćenjem postupaka ilustrovanih u Šemi 1. Tiazolil aldehid formule S1 reaguje sa etil azidoacetatom pod uslovima nukleofilne adicije (npr. baza) u odgovarajućem rastvaraču (npr. etanolu) dajući intermedijere formula S2. Hidroksilna grupa formule S2 može se konvertovati u odlazeću grupu i podvrgnuti eliminaciji da bi se dobila formula S3. Ciklizacija i naknadna funkcionalizacija amino grupe daje biciklično jedinjenje formule S5, koje je podvrgnuto nukleofilnom izmeštanju sa natrijum metanetiolatom, nakon čega sledi oksidacija da bi se dobila formula S7. Dalja ciklizacija formule S7 u prisustvu hidrazina, praćena nukleofilnim izmeštanjem sa LG<1>-CH2-Q<1>u prisustvu baze daje intermedijere formule S9. Grupa sumpora u formuli S9 može biti oksidovana u sulfinil ili sulfonil da bi se dobila formula S10 ili S11, koja je supstrat za dalje nukleofilno izmeštanje da bi se dobila opšta formula S12. Kako se ovde koristi, X<1>je odlazeća grupa kako je ovde definisana. U određenim primerima izvođenja, X<1>je halogen,
2
alkansulfoniloksi, arensulfoniloksi, diazonijum, alkil diazeni, aril diazeni, alkil triazeni, aril triazeni, nitro, alkil nitrat, aril nitrat, alkil fosfat, aril fosfat, alkil karbonil oksi, aril karbonil oksi, alkokskarbonil oksi, ariokskarbonil oksi amonijak, alkil amini, aril amini, hidroksil grupa, alkoksi grupa, ariloksi grupa; LG<1>je odlazeća grupa kao što je ovde definisana; Q<1>je izborno supstituisani cikloalkil, izborno supstituisani heterociklil, izborno supstituisani aril, ili izborno supstituisani heteroaril; i Nu<1>je nukleofil kako je ovde definisan. Nu<1>jedinjenja formule S12 mogu dalje da se konvertuju u druge funkcionalne grupe sa standardnim hemijskim transformacijama. R<1>je kao što je definisano u prvom primeru izvođenja.
[0130] U nekim primerima izvođenja, jedinjenja Formule (I) se mogu pripremiti korišćenjem postupaka prikazanih na Šemi 2. Slično Šemi 1, formula S21 se može dobiti od tiazol aldehida formule S13. Halogeniranje formule S21 daje formulu S22, koja može da prođe reakciju organskog kuplovanja sa alkil metalom, alkenil metalom, alkinil metalom, aril metalom, heteroaril metalom, heterociklil metalom ili cikloalkil metalom da bi se dobilo jedinjenje formule S23. Kako se ovde koristi, X<3>je halogen; R<1>je kao što je definisan u prvom primeru izvođenja pronalaska; LG<2>je odlazeća grupa kao što je ovde definisana; Q<2>je izborno supstituisani cikloalkil, izborno supstituisani heterociklil, izborno supstituisani aril, ili izborno supstituisani heteroaril; M<1>je metal (npr. Li, Na, K, Mg, Zn, Sn, B, Pd, Si, Cu itd.), X<4>je halogen ili estar alkil sulfonske kiseline ili estar aril sulfonske kiseline; R<r1>je izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani alkenil, izborno supstituisani alkinil, izborno supstituisani cikloalkil, izborno supstituisani heterociklil, izborno supstituisani aril, ili izborno supstituisani heteroaril. U određenim primerima izvođenja, reakcija organskog kuplovanja je Negišijeva reakcija; X<3>je I; i M<1>je Zn.
[0131] Jedinjenja formule S22 i S23 su korisni intermedijeri za uvođenje više funkcionalnih grupa na X<3>i/ili R<r1>položaj (šema 3). U određenim primerima izvođenja, jedinjenje formule 23-i može se dalje oksidovati da bi se formirala formula S24. Nukleofilno dodavanje S24 sa odgovarajućim nukleofilom stvara jedinjenje S25. U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja formule S22 mogu biti spojena sa vinil metalom da bi se uvela vinil grupa u tiazolni prsten. Oksidacija vinil grupe praćena nukleofilnim dodavanjem daje jedinjenje formule S28. Kako se ovde koristi, Nu<2>je nukleofil.
[0132] Kako se ovde koristi, R<r2>je izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani alkenil, izborno supstituisani alkinil, izborno supstituisani cikloalkil, izborno supstituisani heterociklil, izborno supstituisani aril, ili izborno supstituisani heteroaril. Nu<1>i Q2 je kao što je definisan u šemi 2.
[0133] Kako se ovde koristi, nukleofil je hemijska vrsta koja daje elektronski par elektrofilu da bi formirala hemijsku vezu u odnosu na reakciju. Svi molekuli ili joni sa slobodnim parom elektrona ili bar jednom pi vezom mogu delovati kao nukleofili. Primeri nukleofila sadrže najmanje jednu grupu koja poseduje nukleofilnu funkcionalnu grupu, na primer, alfa ugljenik (npr. ugljenik pored karbonil, sulfonil, sulfinil, aril grupu ili heteroaril), tiol grupu, hidroksil grupu, primarnu amin grupu, sekundarna amin grupu, halogenid, cijanid, azid, alkoksid, organski metal ili neorgansku bazu.
[0134] U nekim primerima izvođenja, jedinjenja Formule (I) se mogu pripremiti korišćenjem
4
postupaka prikazanih na Šemi 4. Nukleofilna zamena formula S30 sa sekundarnim cikličnim aminom daje formule S31. Reakcije organskog kuplovanja (npr. Suzuki kuplovanje, Pd kuplovanje itd.) jedinjenja S32 daju jedinjenje formule S33(i)-(iii). Dalje, sulfinil grupa formule S34 može biti funkcionalizovana sa amonijum karbamatom da bi se dobio imino-sulfanon formule S35.
[0135] Kako se ovde koristi,
predstavlja prsten A sa azotom kao atomom u prstenu.
[0136] Kako se ovde koristi,
predstavlja Prsten B sa tačkom vezivanja na atomu ugljenika u prstenu.
[0137] R<1>je kao što je definisan u prvom primeru izvođenja. Svaka instanca R<35>, R<36>, i R<37>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani alkenil, izborno supstituisani alkinil, izborno supstituisani aril, izborno supstituisani heteroaril, izborno supstituisani heterociklil, ili izborno supstituisani cikloalkil.
[0138] X<4>je halogen ili -OTf. M<4>je organski metal sa odgovarajućim ligandima ako je potrebno (organski ili neorganski) kako valenca dozvoljava. Primer M<4>uključuje, ali nije ograničen na organski Li, Sn, B (npr. borne kiseline i boron estri), Zn, Mg, Si, Pd i Cu.
Postupci lečenja
[0139] U jednom primeru izvođenja, obezbeđen je postupak za lečenje bolesti, stanja ili poremećaja kao što su ovde opisani (npr. lečenje) koji sadrže primenu jedinjenja, farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja ili farmaceutske kompozicije koja sadrži jedinjenje opisano ovde (npr., jedinjenje Formule (I)-(IX), (I')-(V'), u Primerima, i u Tabeli 1 i slikama 1A-1C, 2A-2C, 3).
[0140] Ovde opisana jedinjenja i kompozicije mogu se primenjivati na ćelije u kulturi, npr. in vitro ili ex vivo, ili na subjekta, npr., in vivo, za lečenje i/ili dijagnostikovanje raznih poremećaja, uključujući one koji su ovde opisani u nastavku.
Proliferativna bolest
[0141] U nekim primerima izvođenja, obezbeđen je postupak lečenja proliferativne bolesti koji sadrži primenu na subjekta jedinjenja, njegove farmaceutski prihvatljive soli ili njegove farmaceutske kompozicije, kao što je ovde opisano. Kako se ovde koristi, "proliferativna bolest" se odnosi na bolest koja se javlja usled abnormalnog rasta ili proširenja umnožavanjem ćelija (Walker, Cambridge Dictionary of Biology; Cambridge University Press: Cambridge, UK, 1990). Proliferativna bolest može biti povezana sa: 1) patološkom proliferacijom normalno mirnih ćelija; 2) patološkom migracijom ćelija sa njihove normalne lokacije (npr., metastaze neoplastičnih ćelija); 3) patološkom ekspresijom proteolitičkih enzima kao što su matriksne metaloproteinaze (npr., kolagenaze, želatinaze i elastaze); ili 4) patološkom angiogenezom kao kod proliferativne retinopatije i tumorskih metastaza. Primeri proliferativnih bolesti uključuju kancere (tj. "maligne neoplazme"), benigne neoplazme, angiogenezu, inflamatorne bolesti i autoimune bolesti. U određenim primerima izvođenja, proliferativna bolest je kancer. U određenim primerima izvođenja, proliferativna bolest je autoimuna bolest.
[0142] Termini "neoplazma" i "tumor" se ovde koriste naizmenično i odnose se na abnormalnu masu tkiva u kojoj rast mase prevazilazi i nije usklađen sa rastom normalnog tkiva. Neoplazma ili tumor mogu biti "benigni" ili "maligni", u zavisnosti od sledećih karakteristika: stepena ćelijske diferencijacije (uključujući morfologiju i funkcionalnost), brzine rasta, lokalne invazije i metastaza. „Benigna neoplazma“ je generalno dobro diferencirana, ima karakterističan sporiji rast od maligne neoplazme i ostaje lokalizovana na mestu nastanka. Pored toga, benigna neoplazma nema sposobnost infiltriranja, invazije ili metastaze na udaljena mesta. Primeri benignih neoplazmi uključuju, ali nisu ograničeni na, lipom, hondrom, adenom, akrohordon, senilne angiome, seboreične keratoze, lentigos i lojne hiperplazije. U nekim slučajevima, određeni „benigni“ tumori mogu kasnije dovesti do malignih neoplazmi, koje mogu biti rezultat dodatnih genetskih promena u subpopulaciji tumorskih neoplastičnih ćelija, a ovi tumori se nazivaju „premaligne neoplazme“. Primer pre-maligne neoplazme je teratom. Nasuprot tome, "maligna neoplazma" je generalno slabo diferencirana (anaplazija) i ima karakterističan brz rast praćen progresivnom infiltracijom, invazijom i destrukcijom okolnog tkiva. Štaviše, maligna neoplazma generalno ima sposobnost da metastazira na udaljena mesta. Termin "metastaza", "metastatski" ili "metastazirati" odnosi se na širenje ili migraciju ćelija kancera iz primarnog ili originalnog tumora u drugi organ ili tkivo i obično se može identifikovati po prisustvu "sekundarnog tumora" ili "sekundarne ćelijske mase" tipa tkiva primarnog ili originalnog tumora i ne tipa tkiva organa ili tkiva u kome se nalazi sekundarni (metastatski) tumor. Na primer, za kancer prostate koji je prešao u kosti se kaže da je metastazirani kancer prostate i uključuje kancerozne ćelije kancera prostate koje rastu u koštanom tkivu.
[0143] Termin "kancer" se odnosi na klasu bolesti koje karakteriše razvoj abnormalnih ćelija koje se nekontrolisano razmnožavaju i imaju sposobnost da se infiltriraju i unište normalna telesna tkiva. Videti, npr. Stedman's Medical Dictionary, 25th ed.; Hensyl ed.; Williams & Wilkins: Philadelphia, 1990. Primeri kancera uključuju solidne tumore, tumore mekih tkiva i njihove metastaze. Otkriveni postupci su takođe korisni u lečenju nesolidnih kancera. Primeri solidnih tumora uključuju maligne tumore (npr. sarkomi, adenokarcinomi i karcinomi) različitih sistema organa, kao što su pluća, dojke, limfoidni, gastrointestinalni (npr. debelo crevo) i genitourinarnog (npr. tumori bubrega, uritelijalni ili testisa) trakta, ždrela, prostate i jajnika. Primeri adenokarcinoma uključuju kolorektalne kancere, karcinom bubrežnih ćelija, kancer jetre, nesitnoćelijski karcinom pluća i kancer tankog creva. Drugi primeri kancera su: akutna limfoblastična leukemija, adultna; Akutna limfoblastična leukemija, dečija; Akutna mijeloidna leukemija, adultna; Adrenokortikalni karcinom; Adrenokortikalni karcinom, dečiji; Limfom povezan sa SIDA-om; Maligne bolesti povezane sa SIDA-om; Analni kancer; Astrocitom, cerebelarni dečiji; Astrocitom, cerebralni dečiji; Kancer žučnih kanala, ekstrahepatični; Kancer bešike; Kancer bešike, dečiji; Kancer kostiju, osteosarkom/maligni fibrozni histiocitom; Gliom moždanog stabla, dečiji; Tumor mozga, adultni; Tumor mozga, gliom moždanog stabla, dečiji; Tumor mozga, cerebelarni astrocitom, dečiji; Tumor mozga, cerebralni astrocitom/maligni gliom, dečiji; Tumor mozga, Ependimom, dečiji; Tumor mozga, meduloblastom, dečiji; Tumor mozga, supratentorijalni primitivni neuroektodermalni tumori, dečiji; Tumor mozga, vizuelni put i hipotalamični gliom, dečiji; Tumor mozga, dečiji (drugo); Kancer dojke; Kancer dojke i trudnoća; Kancer dojke, dečiji; Kancer dojke, kod muškarca; Bronhijalni adenomi/karcinoidi, dečiji; Karcinoidni tumor, dečiji; Karcinoidni tumor, Gastrointestinalni; Karcinom, adrenokortikalni; Karcinom, ćelija ostrvaca; Karcinom nepoznatog primarnog mesta; Limfom centralnog nervnog sistema, primarni; Cerebelarni astrocitom, dečiji; Cerebralni astrocitom/maligni gliom, dečiji; Kancer grlića materice; Dečiji kanceri; Hronična limfocitna leukemija; Hronična mijelogena leukemija; Hronični mijeloproliferativni poremećaji; Sarkom prozirnih ćelija ovojnica tetiva; Kancer debelog creva; Kolorektalni kancer, dečiji; Kožni T-ćelijski limfom; Kancer endometrijuma; Ependimom, dečiji; Epitelni kancer, jajnika; Kancer jednjaka; Kancer jednjaka, dečiji; Ewing-ova porodica tumora; Ekstrakranijalni tumor germinativnih ćelija, dečiji; Ekstragonadalni tumor germinativnih ćelija; Kancer ekstrahepatičnog žučnog kanala; Kancer oka, intraokularni melanom; Kancer oka, retinoblastom; kancer žučne kese; gastrični kancer (želuca); gastrični kancer (želuca), dečiji; Gastrointestinalni karcinoidni tumor; Tumor germinativnih ćelija, ekstrakranijalni, dečiji; Tumor germinativnih ćelija, ekstragonadalni; Tumor germinativnih ćelija, jajnika; gestacioni trofoblastični tumor; Gliom, dečjeg moždanog stabla; Gliom, dečiji vizuelni put i hipotalamus; leukemija dlakavih ćelija; Kancer glave i vrata; Hepatocelularni kancer (jetre), adultni (primarni); Hepatocelularni kancer (jetre), dečiji (primarni); Hodgkinov limfom, adultni; Hodgkinov limfom, dečiji; Hodgkinov limfom tokom trudnoće; Hipofaringealni kancer; Gliom hipotalamusa i vizuelnog puta, dečiji; Intraokularni melanom; Karcinom ćelija ostrvaca (endokrinog pankreasa); Kaposijev sarkom; kancer bubrega; kancer larinksa; kancer larinksa, dečiji; Leukemija, akutna limfoblastična, adultna; Leukemija, akutna limfoblastična, dečija; Leukemija, akutna mijeloidna, adultna; Leukemija, akutna mijeloidna, dečija; Leukemija, hronična limfocitna; Leukemija, hronična mijelogena; Leukemija, dlakavih ćelija; Kancer usne i usne duplje; kancer jetre, adultni (primarni); Kancder jetre, dečiji (primarni); Nesitnoćelijski kancder pluća; sitno ćelijski kancer pluća; Limfoblastična leukemija, akutna adultna; Limfoblastična leukemija, akutna u detinjstvu; Limfocitna leukemija, hronična; Limfom, povezan sa SIDA-om; Limfom, centralni nervni sistem (primarni); Limfom, kožni T-ćelijski; Limfom, Hodgkin-ov, adultni; Limfom, Hodgkin-ov, dečiji; Limfom, Hodgkin-ov tokom trudnoće; Limfom, ne-Hodgkin-ov, adultni; Limfom, ne-Hodgkin-ov, dečiji; Limfom, ne-Hodgkin-ov tokom trudnoće; Limfom, primarni centralni nervni sistem; Makroglobulinemija, Waldenstrom-ova; kancer dojke kod muškaraca; Maligni mezoteliom, adultni; Maligni mezoteliom, dečiji; Maligni timom; Meduloblastom, dečiji; Melanom; Melanom, intraokularni; karcinom Merkelove ćelije; Mezoteliom, maligni; Metastatski skvamozni kancer vrata sa okultnim primarnim mestom; Sindrom višestruke endokrine neoplazije, dečiji; Multipli mijelom/neoplazma plazma ćelija; Mycosis Fungoides; mijelodisplastični sindromi; mijelogena leukemija, hronična; Mijeloidna leukemija, akutna dečija; Multipli mijelom; mijeloproliferativni poremećaji, hronični; Kancer nosne šupljine i paranazalnih sinusa; kancer nazofarinksa; Kancer nazofarinksa, dečiji; Neuroblastom; Ne-Hodgkin-ov limfom, adultni; Ne-Hodgkin-ov limfom, dečiji; Ne-Hodgkinov limfom tokom trudnoće; nesitnoćelijski kancer pluća; Oralni kancer, dečiji; kancer usne duplje i usana; Orofaringealni kancer; Osteosarkom/maligni fibrozni histiocitom kostiju; Kancer jajnika, dečiji; Epitelijalni kancer jajnika; Tumor germinativnih ćelija jajnika; Maligni tumor jajnika sa niskim potencijalom; Kancer pankreasa; Kancer pankreasa, dečiji; Kancer pankreasa, ćelija ostrvaca; Kancer Paranazalnog sinusa i nosne šupljine; kancer paratiroidne žlezde; kancer penisa; feohromocitom; Pinealni i supratentorijalni primitivni neuroektodermalni tumori, dečiji; Tumor hipofize; Neoplazma plazma ćelija/multipli mijelom; Pleuropulmonalni blastom; Trudnoća i kancer dojke; Trudnoća i Hodgkin-ov limfom; trudnoća i ne-Hodgkinov limfom; Primarni limfom centralnog nervnog sistema; Primarni kancer jetre, adultni; Primarni kancer jetre, dečiji; kancer prostate; kancer rektuma; kancer bubrežnih ćelija (bubrega); kancer bubrežnih ćelija, dečiji; kancer prelaznih ćelija bubrežne karlice i uretera; Retinoblastom; Rabdomiosarkom, dečiji; Kancer pljuvačne žlezde; Kancer pljuvačne žlezde, dečiji; Sarkom, Ewing-ova porodica tumora; Sarkom, Kaposi-ev; Sarkom (osteosarkom)/maligni fibrozni histiocitom kosti; Sarkom, rabdomiosarkom, dečiji; Sarkom, mekog tkiva, adultni; Sarkom, mekog tkiva, dečiji; Sezary sindrom; kancer kože; kancer kože, dečiji; Kancer kože (melanom); karcinom kože, Merkelove ćelije; sitnoćelijski kancer pluća; kancer tankog creva; sarkom mekog tkiva, adultni; Sarkom mekog tkiva, dečiji; skvamozni kancer vrata sa primarnim okultnim, metastatskim; gastrični kancer (želuca); gastrični kancer (želuca), dečiji; Supratentorijalni primitivni neuroektodermalni tumori, dečiji; T-ćelijski limfom, kožni; Kancer testisa; Timom, dečiji; Timom, maligni; Tiroidni kancer; kancer štitne žlezde, dečiji; Karcinom prelaznih ćelija bubrežne karlice i uretera; Trofoblastični tumor, gestacijski; Nepoznato primarno mesto, kancer, dečiji; Neobični dečiji kanceri; Ureter i bubrežna karlica, kancer prelaznih ćelija; kancer uretre; sarkom materice; vaginalni kancer; gliom vizuelnog puta i hipotalamusa, dečiji; kancer vulve; Waldenstrom-ova makroglobulinemija; i Wilms-ov tumor. Metastaze gore pomenutih kancera se takođe mogu lečiti ili sprečiti u skladu sa postupcima opisanim ovde.
Kombinovane terapije kancera
[0144] U nekim primerima izvođenja, obezbeđeni postupak dalje obuhvata primenu jednog ili više dodatnih tretmana kancera. Primeri lečenja kancera uključuju, na primer: hemoterapiju, ciljane terapije kao što su terapije antitelima, imunoterapija i hormonska terapija. Primeri svakog od ovih tretmana su dati u nastavku.
[0145] U nekim primerima izvođenja, ovde opisano jedinjenje se primenjuje sa jednom ili više hemoterapija. Hemoterapija je lečenje kancera lekovima koji mogu da unište ćelije kancera. "Hemoterapija" se obično odnosi na citotoksične lekove koji uopšte utiču na ćelije koje se brzo dele, za razliku od ciljane terapije. Lekovi za hemoterapiju ometaju deobu ćelija na različite moguće načine, na primer, umnožavanje DNK ili odvajanje novoformiranih hromozoma. Većina oblika hemoterapije ciljno deluje na sve ćelije koje se brzo dele i nisu specifične za ćelije kancera, iako određeni stepen specifičnosti može proizaći iz nesposobnosti mnogih ćelija kancera da poprave oštećenje DNK, dok normalne ćelije generalno mogu.
[0146] Primeri hemoterapeutskih sredstava koji se koriste u terapiji kancera uključuju, na primer, antimetabolite (npr. derivate folne kiseline, purina i pirimidina) i sredstva za alkilovanje (npr. azot iperit, nitrozouree, platinu, alkil sulfonate, hidrazine, triazene, aziridine, otrov deobnog vretena, citotoksična sredstva, inhibitore topoizomeraze i druge). Primeri sredstava uključuju aklarubicin, aktinomicin, alitretinon, altretamin, aminopterin, aminolevulinsku kiselinu, amrubicin, amsakrin, anagrelid, arsenov trioksid, asparaginazu, atrasentan, belotekan, beksaroten, endamustin, bleomicin, bortezomib, busulfan, kamptotecin, kapecitabin, karboplatin, karbokvon, karmofur, karmustin, celekoksib, hlorambucil, hlormetin, cisplatin, kladribin, klofarabin, krisantaspaza, ciklofosfamid, citarabin, dakarbazin, daktinomicin, daunorubicin, decitabin, demekolcin, docetaksel, doksorubicin, efaproksiral, elesklomol, elsamitrucin, enocitabin, epirubicin, estramustin, etoglucid, etoposid, floksuridin, fludarabin, fluorouracil (5FU), fotemustin, gemcitabin, gliadel implantati, hidroksikarbamid, hidroksiurea, idarubicin, ifosfamid, irinotekan, irofulven, iksabepilon, larotaksel, leukovorin, lipozomalni doksorubicin, lipozomalni daudorubicin, lonidamin, lomustin, lukanton, manosulfan, mazoprokol, melfalan, merkaptopurin, mesna, metotreksat, metil amino levulinat, mitobronitol, mitoguazon, mitotan, mitomicin, mitoksantron, nedaplatin, nimustin, oblimersen, omacetaksin, ortataksel, oksaliplatin, paklitaksel, pegaspargaza, pemetreksed, pentostatin, pirarubicin, piksantron, plikamicin, porfimer natrijum, prednimustin, prokarbazin, raltitreksed, ranimustin, rubitekan, sapacitabin, semustin, sitimagen ceradenovek, satraplatin, streptozocin, talaporfin, tegafur-uracil, temoporfin, temozolomid, tenipozid, tesetaksel, testolakton, tetranitrat, tiotepa, tiazofurin, tioguanin, tipifarnib, topotekan, trabektedin, triazikvon, trietilenmelamin, triplatin, tretinoin, treosulfan, trofosfamid, uramustin, valrubicin, verteporfin, vinblastin, vinkristin, vindesine, vinflunin, vinorelbin, vorinostat, zorubicin i drugi citostatici ili citotoksična sredstva opisana ovde.
[0147] U nekim primerima izvođenja, ovde opisano jedinjenje se primenjuje sa jednom ili više ciljanih terapija. Ciljana terapija predstavlja upotrebu sredstava specifičnih za deregulisane proteine ćelija kancera. Lekovi za terapiju usmerenu na male molekule su generalno inhibitori enzimskih domena na mutiranim, prekomerno eksprimiranim ili na drugi način kritičnim proteinima unutar ćelije kancera. Istaknuti primeri su inhibitori tirozin kinaze kao što su aksitinib, Bosutinib, Cediranib, dasatinib, erlotinib, imatinib, gefitinib, lapatinib, Lestaurtinib, Nilotinib, Semaksanib, Sorafenib, Sunitinib i Vandetanib, i takođe ciklin-zavisni inhibitori kinaze kao što su Alvocidib i Seliciklib. Terapija monoklonskim antitelima je još jedna strategija u kojoj je terapeutsko sredstvo antitelo koje se specifično vezuje za protein na površini ćelija kancera. Primeri uključuju anti-HER2/neu antitelo trastuzumab (HERCEPTIN<®>) koje se obično koristi kod kancera dojke i anti-CD20 antitela rituksimab i tositumomab koja se tipično koriste u različitim malignitetima B-ćelija. Drugi primeri anbitela uključuju cetuksimab, panitumumab, trastuzumab, alemtuzumab, bevacizumab, edrecolomab i gemtuzumab. Primeri fuzionih proteina uključuju Aflibercept i Denileukin diftitoks. U nekim primerima izvođenja, ciljana terapija se može koristiti u kombinaciji sa ovde opisanim jedinjenjem.
[0148] Ciljana terapija takođe može uključiti male peptide kao „uređaje za navođenje“ koji se mogu vezati za receptore na površini ćelije ili zahvaćeni ekstracelularni matriks koji okružuje tumor. Radionuklidi koji su vezani za ove peptide (npr. RGD) na kraju ubijaju ćeliju kancera ako se nuklid raspadne u blizini ćelije. Primer takve terapije je BEXXAR<®>.
[0149] U nekim primerima izvođenja, ovde opisano jedinjenje se primenjuje sa jednom ili više imunoterapija. Imunoterapija kancera se odnosi na raznovrstan skup terapijskih strategija dizajniranih da podstaknu imuni sistem pacijenta da se bori protiv tumora. Savremeni postupci za generisanje imunološkog odgovora protiv tumora uključuju intravezikularnu BCG imunoterapiju za površinski karcinom bešike i upotrebu interferona i drugih citokina za izazivanje imunološkog odgovora kod pacijenata sa karcinomom bubrežnih ćelija i melanomom.
[0150] Alogena transplantacija hematopoetskih matičnih ćelija može se smatrati oblikom imunoterapije, pošto će imunološke ćelije donatora često napasti tumor u efektu transplantata protiv tumora. U nekim primerima izvođenja, imunoterapijska sredstva se mogu koristiti u kombinaciji sa ovde opisanim jedinjenjem.
[0151] U nekim primerima izvođenja, ovde opisano jedinjenje se primenjuje sa jednom ili više
1
hormonalnih terapija. Rast nekih karcinoma može se inhibirati davanjem ili blokiranjem određenih hormona. Uobičajeni primeri tumora osetljivih na hormone uključuju određene vrste kancera dojke i prostate. Uklanjanje ili blokiranje estrogena ili testosterona je često važan dodatni tretman. Kod određenih kancera, primena hormonskih agonista, kao što su gestageni, može biti terapeutski korisna. U nekim primerima izvođenja, sredstva za hormonsku terapiju mogu se koristiti u kombinaciji sa jedinjenjem opisanim ovde.
Gojaznost i poremećaji masti
[0152] U nekim primerima izvođenja, obezbeđen je postupak lečenja ili prevencije gojaznosti kod čoveka (npr. dete ili odrasla osoba) primenom na ljudskog subjekta efikasne količine jedinjenja, farmaceutski prihvatljive soli ili njegove farmaceutske kompozicije kao što je ovde opisano. "Gojaznost" se odnosi na stanje u kome subjekt ima indeks telesne mase veći ili jednak 30. Mnoga jedinjenja koja su ovde opisana mogu se koristiti za lečenje ili prevenciju stanja prekomerne težine. „Prekomerna težina“ se odnosi na stanje u kojem subjekt ima indeks telesne mase veći ili jednak 25.0. Indeks telesne mase (BMI) i druge definicije su prema "NIH Clinical Guidelines on the Identification and Evaluation, and Treatment of Overweight and Obesity in Adults" (1998). Tretman ovim jedinjenjem može biti u količini efikasnoj da promeni težinu subjekta, npr. za najmanje 2, 5, 7, 10, 12, 15, 20, 25, 30, 25, 40, 45, 50 ili 55%. Tretman jedinjenjem može biti u količini efikasnoj da smanji indeks telesne mase subjekta, npr. na manje od 30, 28, 27, 25, 22, 20 ili 18. Jedinjenja se mogu koristiti za lečenje ili prevenciju aberantnog ili neodgovarajućeg povećanja telesne težine, brzine metabolizma ili taloženja masti, na primer, anoreksije, bulimije, gojaznosti, dijabetesa ili hiperlipidemije (npr. povišeni trigliceridi i/ili povišeni holesterol), kao i poremećaja metabolizma masti ili lipida.
[0153] Jedinjenje ili kompozicija opisana ovde se može primeniti za lečenje gojaznosti povezane sa Prader-Willi sindromom (PWS). PWS je genetski poremećaj povezan sa gojaznošću (npr. morbidna gojaznost).
[0154] Jedinjenje ili kompozicija opisana ovde može se koristiti za smanjenje telesne masti, sprečavanje povećanja telesne masti, smanjenje holesterola (npr. ukupnog holesterola i/ili odnosa ukupnog holesterola prema HDL holesterolu) i/ili smanjenje apetita kod osoba koje imaju gojaznost povezanu sa PWS, i/ili smanjenje komorbiditeta kao što su dijabetes, kardiovaskularne bolesti i moždani udar.
Hiperglikemija
2
[0155] Visoki nivoi glukoze izazivaju metaboličke abnormalnosti u metaboličkim putevima glukoze i indukuju mitohondrijalnu disfunkciju. Ovo takođe prekomerno proizvodi reaktivne vrste kiseonika (ROS). Povišena intracelularna glukoza dovodi do akumulacije toksičnih metabolita glukoze sorbitola, metilglioksala (MG) i diacilglicerola (DAG), za koje se pretpostavlja da doprinose mikrovaskularnim komplikacijama, npr., DN. Utvrđeno je da aktivatori PKM2 malih molekula poništavaju povišenje toksičnih metabolita glukoze i mitohondrijalnu disfunkciju izazvano hiperglikemijom (Nat Med. 2017, 23(6): 753-762; U.S. Patent br.9921221).
[0156] U određenim primerima izvođenja, ovde je obezbeđen postupak lečenja hiperglikemije kod subjekta koji sadrži primenu terapeutski efikasne količine jedinjenja, farmaceutski prihvatljive soli ili njegove farmaceutske kompozicije.
[0157] U određenim primerima izvođenja, ovde je obezbeđen postupak lečenja dijabetičke bolesti kod subjekta koji sadrži primenu terapeutski efikasne količine jedinjenja, farmaceutski prihvatljive soli ili njegove farmaceutske kompozicije. "Dijabetička bolest" kako se ovde koristi odnosi se na dijabetes i pred-dijabetes, kao i na dijabetičke implikacije. Dijabetes se odnosi na grupu metaboličkih bolesti kod kojih osoba ima visok šećer u krvi, bilo zato što telo ne proizvodi dovoljno insulina, ili zato što ćelije ne reaguju na insulin koji se proizvodi. Ovaj visoki šećer u krvi proizvodi klasične simptome poliurije (često mokrenje), polidipsiju (pojačana žeđ) i polifagiju (pojačana glad). Postoji nekoliko vrsta dijabetesa. Dijabetes tipa I je rezultat neuspeha tela da proizvodi insulin i trenutno zahteva da osoba ubrizgava insulin ili nosi insulinsku pumpu. Dijabetes tipa II je rezultat insulinske rezistencije, stanja u kojem ćelije ne mogu pravilno da koriste insulin, ponekad u kombinaciji sa apsolutnim nedostatkom insulina. Gestacijski dijabetes nastaje kada trudnice bez prethodne dijagnoze dijabetesa razviju visok nivo glukoze u krvi. Drugi oblici dijabetesa uključuju kongenitalni dijabetes, koji je posledica genetskih defekata lučenja insulina, dijabetes povezan sa cističnom fibrozom, steroidni dijabetes izazvan visokim dozama glukokortikoida i nekoliko oblika monogenog dijabetesa, npr., dijabetesa mladih sa početkom u zrelom dobu (npr., MODY 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ili 10). Pred-dijabetes ukazuje na stanje koje se javlja kada je nivo glukoze u krvi veći od normalnog, ali nije dovoljno visok za dijagnozu dijabetesa. Svi oblici dijabetesa povećavaju rizik od dugotrajnih komplikacija. Oni se obično razvijaju nakon mnogo godina, ali mogu biti prvi simptom kod onih koji inače nisu dobili dijagnozu pre tog vremena. Glavne dugoročne komplikacije odnose se na oštećenje krvnih sudova. Primeri dijabetičkih implikacija uključuju kardiovaskularne bolesti, makrovaskularne bolesti kao što su ishemijska bolest srca (angina, infarkt miokarda), moždani udar i periferna vaskularna bolest, mikrovaskularne komplikacije (npr., oštećenje malih krvnih sudova), dijabetička retinopatija (tj. uticaj dijabetesa na formiranje krvnih sudova u mrežnjači oka), dijabetička nefropatija (tj. uticaj dijabetesa na bubrege), dijabetička neuropatija (npr. dijabetes na nervnom sistemu, koji najčešće uzrokuje utrnulost, peckanje i bol u stopalima i takođe povećava rizik od oštećenja kože zbog izmenjenog osećaja), dijabetičke čireve na stopalu i sindrom X. U određenim primerima izvođenja, „dijabetička bolest“ uključuje ili više odabranih od hiperglikemije, hiperinsulinemije, dijabetesa, insulinske rezistencije, poremećenog metabolizma glukoze, stanja poremećene tolerancije glukoze (IGT), stanja poremećene glukoze u plazmi kod gladovanja, dijabetičke retinopatije, dijabetičke nefropatije, glomeruloskleroze, dijabetičke neuropatije i sindroma X.
[0158] U određenim primerima izvođenja, jedinjenje ili kompozicija opisana ovde može da se koristi za snižavanje reaktivnih vrsta kiseonika (ROS) i/ili najmanje jednog od metabolita glukoze (npr. sorbitol, metilglioksal (MG) i diacilglicerol (DAG)) kod subjekta.
[0159] U određenim primerima izvođenja, jedinjenje ili kompozicija opisana ovde može da se koristi za lečenje mikrovaskularnih komplikacija.
[0160] U određenim primerima izvođenja, jedinjenje ili kompozicija opisana ovde može da se koristi za lečenje DN. U određenim primerima izvođenja, lečenje DN može uključiti smanjenje bilo kog simptoma povezanog sa DN, uključujući, ali ne ograničavajući se na, promene u apetitu, promenu u snu, proteina u serumu, slabost i/ili mučninu.
[0161] U određenim primerima izvođenja, postupak dalje sadrži primenu na subjekta terapeutski efikasne količine jednog ili više sekundarnih sredstava koja povećavaju nivo ili aktivnost jednog ili više zaštitnih faktora DN. Primeri zaštitnih faktora DN uključuju, ali nisu ograničeni na SOD1-superoksid dismutazu; TPI1-triozfosfat izomerazu izoformu 2; SORD-Sorbitol dehidrogenazu; ALDOA-Aldolazu A, fruktoza-bisfosfat; GAPDH-Gliceraldehid-3-fosfat dehidrogenazu; PKM-piruvat kinaza izozime M1/M2; ENO1-Alfa-enolazu; FGB-fibrinogen beta lanac; SELENBP1-Selen vezujući protein 1; PEBP1-fosfatidiletanolamin-vezujući protein 1; CRYL1-Lambda-kristalinski homolog (U.S. Patent br. 9921221). Sekundarno sredstvo može povećati nivo ili aktivnost zaštitnog faktora ili smanjiti nivo ili aktivnost faktora rizika za najmanje 50%, 100% (1 puta), 11⁄2 puta, 2 puta, 3 puta, 4 puta, 5 puta, 10 puta, 15 puta, 20 puta ili više. U određenim primerima izvođenja, obezbeđeni postupak obuhvata dovođenje nivoa ili aktivnosti zaštitnog faktora u suštini do njegovog nivoa ili aktivnosti kod subjekta koji je zaštićen od razvoja mikrovaskularnih komplikacija. „U suštini u okviru svog nivoa“ se odnosi na manje od 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% ili 100% kontrolne vrednosti. Sekundarno sredstvo može biti mali molekul, protein koji sadrži zaštitni faktor ili njegovu
4
biološki aktivnu varijantu (npr. fragment), ili nukleinska kiselina koja kodira protein koji sadrži zaštitni faktor ili njegovu biološki aktivnu varijantu (npr. fragment).
Biološki aktivne varijante proteina zaštitnih faktora takođe uključuju nezrele i zrele forme pune dužine ili njihove fragmente koji sadrže aminokiselinsku sekvencu koja se razlikuje od prirodne sekvence ili njenog fragmenta za najviše 1, 2, 3, 4, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50 ili 100 delecija, adicija ili supstitucija aminokiselina, kao što su konzervativne supstitucije aminokiselina. Biološki aktivne varijante proteina zaštitnih faktora DN mogu takođe uključivati varijante koje su najmanje 70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97%, 98% ili 99% identične punoj dužini zrelog ili prekursora humanog PEBP1 proteina (ili drugom biomarkeru identifikovanom u ovoj specifikaciji) ili njegovom fragmentu.
[0162] U nekim primerima izvođenja, dati postupak dalje sadrži izbor subjekta za lečenje. Na primer, subjekat se može izabrati ako subjekt ima ili je u riziku za razvoj DN, npr., subjekt koji ima dijabetes, na primer, dijabetes tipa 1 ili tipa 2, ili subjekt koji je predijabetičar, na primer, ima metabolički sindrom, insulinsku rezistenciju, hiperglikemiju, hiperlipidemiju ili subjekat koji je sa prekomernom težinom ili gojazan, na primer, koji ima BMI≥25. U nekim slučajevima, subjekat se može izabrati ako subjekat ima ili je u riziku za razvoj dijabetesa tipa 1 i/ili tipa 2. U nekim slučajevima, subjekat se može izabrati ako subjekt uzima ili će uzimati insulin, na primer, za lečenje dijabetesa.
[0163] Kardiovaskularna bolest je hronično inflamatorno stanje. Povećani unos glukoze i glikolitički fluks stimuliše reaktivne vrste kiseonika u mitohondrijama. ROS stimuliše dimerizaciju PKM2 i omogućava njegovu nuklearnu translokaciju. Nuklearni PKM2 funkcioniše kao protein kinaza i podstiče proizvodnju IL-6 i IL-1β. To dovodi do sistemske i tkivne inflamacije. Utvrđeno je da smanjenje glikolize i sprovođenje tetramerizacije PKM2 ispravlja proinflamatorni fenotip makrofaga koronarne arterijske bolesti (CAD) (J. Exp. Med. 2016, 213(3): 337-354).
[0164] U određenim primerima izvođenja, ovde je obezbeđen postupak lečenja kardiovaskularne bolesti kod subjekta koji sadrži primenu terapeutski efikasne količine jedinjenja, farmaceutski prihvatljive soli ili njegove farmaceutske kompozicije. Ovde opisana jedinjenja ili kompozicija mogu sniziti nivo glukoze u plazmi kod subjekta. „Kardiovaskularna bolest“ kako je definisana u ovoj prijavi sadrži, ali nije ograničena na hipertenziju, kongestivnu srčanu insuficijenciju, dijabetes, glomerulosklerozu, hroničnu bubrežnu insuficijenciju, koronarnu bolest srca, anginu pektoris, infarkt miokarda, moždani udar, vaskularnu restenozu endotelnu disfunkciju, oštećenje vaskularne disfunkcije usklađenost i kongestivna srčana insuficijencija. U određenim primerima izvođenja, kardiovaskularna bolest je koronarna arterijska bolest (CAD). U određenim primerima izvođenja, jedinjenje ili kompozicija opisana ovde može da se koristi za snižavanje reaktivnih vrsta kiseonika (ROS) u mitohondrijama kod subjekta.
[0165] U određenim primerima izvođenja, ovde je obezbeđen postupak lečenja autoimune bolesti kod subjekta koji sadrži primenu terapeutski efikasne količine jedinjenja, farmaceutski prihvatljive soli ili njegove farmaceutske kompozicije. Utvrđeno je da je aktivacija PKM2 oslabila proinflamatorni fenotip M1 makrofaga izazvanog sa LPS, istovremeno stimulišući osobine tipične za M2 makrofag. Pored toga, utvrđeno je da je aktivacija PKM2 pomoću TEPP-46 in vivo inhibirala proizvodnju LPS i IL-1β, istovremeno povećavajući proizvodnju IL-10. (Cell Metab. 2015, 21(1): 65-80) Shodno tome, aktivatori PKM2 mogu biti korisni za lečenje autoimune bolesti stimulisanjem proizvodnje IL-1β i/ili IL-10.
[0166] "Autoimuna bolest" se odnosi na bolest koja nastaje usled neodgovarajućeg imunološkog odgovora tela subjekta na supstance i tkiva koja su normalno prisutna u telu. Primeri autoimunih bolesti uključuju, ali nisu ograničeni na, glomerulonefritis, Goodpasture-ov sindrom, nekrotizirajući vaskulitis, limfadenitis, periarteritis nodozu, sistemski eritematozni lupus, reumatoidni artritis, psorijatični artritis, sistemski eritematozni lupus, eritematozni lupus, sistemski eritematozni lupus polimiozitis, sindrom anti-fosfolipidnih antitela, sklerodermu, pemfigus vulgaris, vaskulitis povezan sa ANCA (npr. Wegener-ova granulomatoza, mikroskopski poliangiitis), uveitis, Sjogren-ov sindrom, Kronova bolest, Reiter-ov sindrom, ankilozni spondilitis, Lajmska bolest, Guillain-Barre sindrom, Hašimotov tiroiditis i kardiomiopatiju.
Kompozicije i putevi primene
[0167] Kompozicije koje su ovde opisane uključuju ovde opisana jedinjenja (npr. ovde opisano jedinjenje), kao i dodatna terapeutska sredstva ako su prisutna, u količinama efikasnim za postizanje modulacije simptoma bolesti ili bolesti, uključujući one opisane ovde.
[0168] Termin "farmaceutski prihvatljiv nosač ili pomoćno sredstvo" odnosi se na nosač ili pomoćno sredstvo koje se može primeniti na pacijenta, zajedno sa jedinjenjem koje je ovde dato, i koje ne uništava njegovu farmakološku aktivnost i nije toksično kada se primenjuje u dozama dovoljnim da se isporuči terapeutska količina jedinjenja.
[0169] Farmaceutski prihvatljivi nosači, ađuvansi i vehikulumi koji se mogu koristiti u farmaceutskim kompozicijama datim ovde uključuju, ali nisu ograničeni na, jonoizmenjivače, glinicu, aluminijum stearat, lecitin, sisteme za isporuku lekova koji se samoemulguju (SEDDS) kao što je d-α-tokoferol polietilenglikol 1000 sukcinat, surfaktanti koji se koriste u farmaceutskim oblicima za doziranje kao što su Tweens ili drugi slični polimerni matriksi za isporuku, serumski proteini, kao što je humani serum albumin, puferske supstance kao što su fosfati, glicin, sorbinska kiselina, kalijum sorbat, delimične smeše glicerida i zasićenih biljnih masnih kiselina, voda, soli ili elektroliti, kao što su protamin sulfat, dinatrijum hidrogen fosfat, kalijum hidrogen fosfat, natrijum hlorid, soli cinka, koloidni silicijum dioksid, magnezijum trisilikat, polivinil pirolidon, supstance na bazi celuloze, polietilen glikol, natrijum karboksimetilceluloza, poliakrilati, voskovi, polietilen-polioksipropil-blok polimeri, polietilen glikol i vunena mast. Ciklodekstrini kao što su α-, β- i γ-ciklodekstrin, ili hemijski modifikovani derivati kao što su hidroksialkilciklodekstrini, uključujući 2- i 3-hidroksipropil-β-ciklodekstrine, ili drugi solubilizovani derivati takođe mogu biti korisni za poboljšanje isporuke jedinjenja formula opisanih ovde.
[0170] Farmaceutske kompozicije date ovde mogu se primenjivati oralno, parenteralno, sprejom za inhalaciju, lokalno, rektalno, nazalno, bukalno, vaginalno ili preko implantiranog rezervoara, poželjno oralnom primenom ili primenom injekcijom. Farmaceutske kompozicije koje su ovde date mogu sadržati bilo koje konvencionalne netoksične farmaceutski prihvatljive nosače, ađuvanse ili vehikulume. U nekim slučajevima, pH formulacije se može podesiti farmaceutski prihvatljivim kiselinama, bazama ili puferima da bi se poboljšala stabilnost formulisanog jedinjenja ili njegovog oblika za isporuku. Termin parenteralno, kako se ovde koristi, uključuje subkutane, intrakutane, intravenske, intramuskularne, intraartikularne, intraarterijske, intrasinovijalne, intrasternalne, intratekalne, intralezijske i intrakranijalne tehnike injekcije ili infuzije.
[0171] Farmaceutske kompozicije koje su ovde date mogu se oralno primenjivati u bilo kom oralno prihvatljivom obliku doze uključujući, ali bez ograničenja na, kapsule, tablete, emulzije i vodene suspenzije, disperzije i rastvore. U slučaju tableta za oralnu upotrebu, nosači koji se obično koriste uključuju laktozu i kukuruzni skrob. Lubrikaciona sredstva, kao što je magnezijum stearat, takođe se tipično dodaju. Za oralnu primenu u obliku kapsula, korisni razblaživači uključuju laktozu i sušeni kukuruzni skrob. Kada se vodene suspenzije i/ili emulzije primenjuju oralno, aktivni sastojak se može suspendovati ili rastvoriti u uljanoj fazi, kombinuje se sa sredstvima za emulgovanje i/ili suspendovanje. Ako se želi, mogu se dodati određeni zaslađivači i/ili arome i/ili boje.
[0172] Kada kompozicije koje su ovde date sadrže kombinaciju jedinjenja sa formulama opisanim ovde i jednog ili više dodatnih terapeutskih ili profilaktičkih sredstava, i jedinjenje i dodatno sredstvo treba da budu prisutni u nivoima doze između oko 1 do 100%, a poželjnije između oko 5 do 95% doze koja se normalno primenjuje u režimu monoterapije. Dodatna sredstva se mogu primenjivati odvojeno, kao deo režima višestrukih doza, od jedinjenja koja su ovde data. Alternativno, ta sredstva mogu biti deo jednog oblika doze, pomešana zajedno sa jedinjenjima koja su ovde data u jednoj kompoziciji.
[0173] Ovde opisana jedinjenja mogu se, na primer, primenjivati injekcijom, intravenski, intraarterijski, subdermalno, intraperitonealno, intramuskularno ili subkutano; ili oralno, bukalno, nazalno, transmukozno, topikalno, u oftalmološkom preparatu, ili inhalacijom, sa dozom u rasponu od oko 0.5 do oko 100 mg/kg telesne težine, alternativno doze između 1 mg i 1000 mg/dozi, svaka 4 do 120 sati, ili prema zahtevima određenog leka. Postupci ovde razmatraju primenu efikasne količine jedinjenja ili kompozicije jedinjenja da bi se postigao željeni ili navedeni efekat. Tipično, ovde date farmaceutske kompozicije će se primenjivati od oko 1 do oko 6 puta dnevno ili alternativno, kao kontinuirana infuzija. Takva primena se može koristiti kao hronična ili akutna terapija. Količina aktivnog sastojka koja se može kombinovati sa materijalima nosača da bi se proizveo jedan oblik doze će varirati u zavisnosti od tretiranog domaćina i određenog načina primene. Tipičan preparat će sadržati od oko 5% do oko 95% aktivnog jedinjenja (tež./tež.). Alternativno, takvi preparati sadrže od oko 20% do oko 80% aktivnog jedinjenja.
EKSPERIMENTALNO
Lista skraćenica:
[0174]
Opšti eksperimentalni
[0175] U sledećim primerima, hemijski reagensi su kupljeni iz komercijalnih izvora (kao što su Alfa, Acros, Sigma Aldrich, TCI i Shanghai Chemical Reagent Company), i korišćeni su bez daljeg prečišćavanja. Fleš hromatografija je izvedena na Ez Purifier III preko kolone sa česticama silika gela od 200-300 esh. Analitičke i preparativne ploče za tankoslojnu hromatografiju (TLC) bile su HSGF 254 (debljina 0.15-0.2 mm, Shanghai Anbang Company, Kina). Spektri nuklearne magnetne rezonance (NMR) su snimljeni korišćenjem Brucker AMX-300 ili AMX-400 NMR (Brucker, Švajcarska). Hemijska pomeranja su prijavljena u delovima na milion (ppm, δ) etero(ESI) sa Waters LCT TOF masenog spektrometra (Waters, SAD). HPLC hromatografi su snimljeni na Agilent 1200 tečnoj hromatografiji (Agilent, SAD, kolona: Ultimate 4,6 m × 50 mm, 5 M, pokretna faza A: 0.1% mravlja kiselina u vodi; pokretna faza B: acetonitril). Mikrotalasne reakcije su izvedene na mikrotalasnom sintisajzeru Initiator 2.5 (Biotage, Švedska).
[0176] HPLC uslovi koji se koriste u eksperimentima opisanim ovde su sledeći:
Postupak 1:
Instrument: Shimadzu LC-2010AHT
Kolona: IMC-Triart C18, 50 × 4.6 mm, 5 µm
Pokretna faza: Rastvarač A:H2O/CH3OH/TFA = 90/10/0.1,
Rastvarač B: H2O/CH3OH/TFA = 90/10/0.1
Brzina protoka: 2.5 mL/min
Temperatura kolone: 35°C
Talasna dužina: 220 nm/254 nm
Postupak 2:
Instrument: Shimadzu LC-2010AHT
Kolona: IMC-Triart C18, 50 × 4.6 mm, 5 µm
Pokretna faza: Rastvarač A:H2O/CH3OH/TFA = 90/10/0.1,
Rastvarač B: H2O/CH3OH/TFA = 90/10/0.1
Brzina protoka: 2.5 mL/min
Temperatura kolone: 35°C
Talasna dužina: 220nm/254nm
[0177] Prep-HPLC uslovi koji se koriste u eksperimentima opisanim ovde su sledeći:
Instrument: Waters 2545B/2767
Kolona: IMC-Triart C18, 50 × 4.6 mm, 5 µm
Mobilna faza: Rastvarač A:H2O (01.% FA),
Rastvarač B: CH3OH ili CH3CN
Brzina protoka: 20 mL/min
Temperatura kolone: 35°C
Talasna dužina: 220 nm/254 nm
Primer 1. Priprema jedinjenja E1-vii sa šemom E1
[0178]
pri čemu R<e1>je izborno supstituisani alkil (npr. C1-3alkil); Q je kao što je definisan u bilo kom od prvog do dvadeset šestog primera izvođenja pronalaska; Q' je dalje funkcionalizovani Q, a X je odlazeća grupa (npr. halogen kao što je Br ili I; OMs; ili OTs). Tiazol 5-karbaldehid E1-i se podvrgava kondenzaciji sa 2-azidoacetatom da bi se dobilo jedinjenje formule E1-ii. Jedinjenje E1-ii se podvrgava ciklizaciji u zagrejanom o-ksilenu da bi se dobio biciklični sistem E1-iii, nakon čega sledi metilacija amino grupe i naknadna oksidacija da bi se dobilo jedinjenje E1-iv. Jedinjenje E1-iv reaguje sa hidrazinom nakon čega sledi ciklizacija dajući jedinjenje E1-v. Jedinjenje E1-v može da reaguje sa nukleofilom kao što je X-CH2-Q da bi se dobio E1-vi, koji se može dalje funkcionalizovati u E1-vii koji ima Q'.
Primer 1A. Sinteza 6-(3-metoksibenzil)-2,4-dimetil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona
[0179]
1
[0180] Korak A. Etil (Z)-2-azido-3-(2-metiltiazol-5-il)akrilat. U rastvor NaOEt (803 mg, 11.79 mmol) u EtOH (10 mL) između oko -10 °C i oko -5 °C dodat je u kapima rastvor 2-metiltiazol-5-karbaldehida (500 mg, 3.93 mmol ) i etil 2-azidoacetata (1.53 g, 11.79 mmol) u anhidrovanom EtOH (3 mL). Reakciona smeša je mešana oko 1 h dok je temperatura održavana ispod 0 °C, a zatim zagrejana do sobne temperature i mešana još 2 h. Dobijena smeša je sipana u zasićeni vodeni rastvor NH4Cl (50 mL) na 0 °C i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio željeni proizvod (500 mg) koji je direktno upotrebljen u sledećem koraku bez ikakvog prečišćavanja. LCMS: m/z 239 (M+H)<+>.
[0181] Korak B. Etil 2-metil-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilat. Smeša etil (Z)-2-azido-3-(2-metiltiazol-5-il)akrilata (500 mg, 2.1 mmol) u o-ksilenu (5 mL) je mešana na 140 °C tokom 2 sata, zatim ohlađena do sobne temperature i zatim direktno prečišćena hromatografijom na koloni silika gela (eluent: pentan/EtOAc = 6/1 da bi se dobio željeni proizvod (220 mg, 49.8 % prinos). LCMS: m/z 211 (M+H)<+>.
[0182] Korak C. Etil 2,4-dimetil-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilat. U rastvor etil 2-metil-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata (160 mg, 0.76 mmol) u DMF (3 mL) na 0 °C dodat je NaH (36.5 mg, 1.52 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 0.5 h, nakon čega sledi dodavanje CH3I (47 µL, 0.76 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 0.5 h, zatim sipana u zasićeni vodeni rastvor NH4Cl na 0 °C i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluent: pentan/etil acetat = 6/1) da bi se dobio željeni proizvod (124 mg, 72.6 % prinos). LCMS: m/z 225 (M+H)<+>.
[0183] Korak D. Etil 6-formil-2,4-dimetil-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilat. U smešu etil 2,4-dimetil-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata (100 mg, 0.446 mmol) u DMF (1 mL) na 0°C je dodat POCl3(122.5 µL, 1.338 mmol). Reakciona smeša je mešana na 100 °C tokom 2 h. zatim sipana u zasićeni vodeni rastvor NaHCO3na 0 °C i ekstrahovan sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika
2
gela (eluent: pentan/etil acetat = 5/1) da bi se dobio željeni proizvod (57 mg, 50.7 % prinos). LCMS: m/z 253 (M+H)<+>.
[0184] Korak E. 2,4-dimetil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-on. U smešu etil 6-formil-2,4-dimetil-4H-pirolo[2,3-d] tiazol-5-karboksilata (57 mg, 0.226 mmol) u 2-etoksietanolu (2 mL) dodat je N2H4.H2O (53.7 µL, 1.130 mmol). Reakciona smeša je mešana na 100 °C tokom 1 h zatim sipana u H2O i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluent: pentan/etil acetat = 5/1) da bi se dobio željeni proizvod (49 mg, 98.4 % prinos). LCMS: m/z 221 (M+H)<+>.
[0185] Korak F. 6-(3-metoksibenzil)-2,4-dimetil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-on . U smešu 2,4-dimetil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona (49 mg, 0.223 mmol) u DMF (1 mL) na 0 °C je dodat t-BuOK (50.8 mg, 0.454 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 0.5 h, nakon čega sledi dodavanje 1-(hlorometil)-3-metoksibenzena (34.9 mg, 0.223 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h, zatim sipana u zasićeni vodeni rastvor NH4Cl na 0 °C i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu (eluent: pentan/etil acetat = 3/1) da bi se dobio željeni proizvod. LCMS: m/z 341 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.56 (s, 1H), 7.23 (t, 1H), 6.92 - 6.72 (m, 3H), 5.32 (s, 2H), 4.26 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 2.85 (s, 3H).
[0186] Gore navedeni postupak je korišćen za proizvodnju sledećih jedinjenja korišćenjem odgovarajućih početnih materijala. Standardna zaštita i deprotekcija se mogu koristiti kada je potrebno.
4
Primer 1B. Sinteza 1-(3-((2,4-dimetil-5-okso-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il) metil)fenil)uree
[0187]
[0188] Korak A. 2,4-dimetil-6-(3-nitrobenzil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U smešu 2,4-dimetil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (100 mg, 0.45 mmol) u DMF (5 mL) su dodati 1-(bromometil)-3-nitrobenzen (194 mg, 0.9 mmol) i t-BuOK (76 mg, 0.68 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 1 h, zatim sipana u vodu i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC da bi se dobio željeni proizvod (100 mg, 62.5% prinos). LCMS: m/z 356 (M+H)<+>.
[0189] Korak B. 6-(3-Aminobenzil)-2,4-dimetil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U smešu 2,4-dimetil-6-(3-nitrobenzil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (100 mg, 0.28 mmol) u MeOH/THF (10 mL/10 mL) pod N2je dodat Pd/C (10%, 50 mg). Reakciona smeša je mešana na 40 °C pod H2tokom 12 h, zatim filtrirana kroz celit. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC da bi se dobilo željeno jedinjenje (80 mg, 88% prinos). LCMS: m/z 326 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.54 (s, 1H), 6.94 (t,, 1H), 6.57 - 6.32 (m, 3H), 5.19 (s, 2H), 5.04 (s, 2H), 4.26 (s, 3H), 2.85 (s, 3H).
1
[0190] Korak C. 1-(3-((2,4-dimetil-5-okso-4H-tiazolo[5'.4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il))metil)fenil)urea. U smešu 6-(3-aminobenzil)-2,4-dimetil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (65 mg, 0.2 mmol) u HOAc (2 mL) je dodat KOCN (160 mg, u HOAc:H2O=2 mL:4 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h, zatim sipana u zasićeni vodeni rastvor NaHCO3i ekstrahovana sa EtOAc. Organski slojevi su koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobilo željeno jedinjenje (4 mg, 5 % prinos). LCMS: m/z 369 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.60-8.50 (m, 2H), 7.39 (d, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.16 (t, 1H), 6.85 (d, 1H), 5.78 (s, 2H), 5.28 (s, 2H), 4.27 (s, 3H), 2.86 (s, 3H).
Primer 1C. Sinteza 2,4-dimetil-6-(3-(metilamino)benzil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona
[0191]
[0192] Korak A. Terc-butil (3-((2,4-dimetil-5-okso-4,5-dihidro-6H-tiazolo[5',4':4,5] pirolo[2,3-d]piridazin -6-il)metil)fenil)karbamat U smešu 6-(3-aminobenzil)-2,4-dimetil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona (90 mg, 0.28 mmol) u 1,4-dioksanu (10 mL) je dodat Boc2O (73 mg, 0.33 mmol). Reakciona smeša je mešana na refluksu preko noći, a zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluent: PE/EtOAc - 3/1) da bi se dobio željeni proizvod (90 mg, 76.3% prinos). LCMS: m/z 426 (M+H)<+>.
[0193] Korak B. Terc-butil (3-((2,4-dimetil-5-okso-4,5-dihidro-6H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin -6-il)metil)fenil)(metil)karbamat. U smešu terc-butil (3-((2,4-dimetil-5-okso-4,5-dihidro-6H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d])piridazin-6-il)metil)fenil)karbamata (90 mg, 0.21 mmol) u anhidrovanom DMF (5 mL) na 0 °C je dodat NaH (13 mg, 0.32 mmol, 60% tež). Smeša je mešana na 0 °C tokom 1 sata, nakon čega je u kapima dodavan MeI. Dobijena smeša je mešana na 0-5 °C tokom 3 sata, zatim sipana u hladni zasićeni vodeni rastvor NH4Cl i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC da bi se dobio željeni proizvod (70 mg, 75.2 % prinos). LCMS: m/z 440 (M+H)<+>.
2
[0194] Korak C. 2,4-dimetil-6-(3-(metilamino)benzil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo [5',4':4,5] pirolo[2,3-d]piridazin-5-on. U smešu terc-butil (3-((2,4-dimetil-5-okso-4,5-dihidro-6H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]) piridazin-6-il)metil)fenil) (metil)karbamata (90 mg, 0.21 mmol) u DCM (3 mL) je dodat TFA (1 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h, zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (25 mg, 46.4 % prinos). LCMS: m/z 340 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.54 (s, 1H), 7.12 (t, 1H), 6.66-6.61 (m, 3H), 5.26 (s, 2H), 4.26 (s, 3H), 2.85 (s, 3H), 2.68 (d, 3H).
[0195] Gore navedeni postupak je korišćen za proizvodnju sledećeg jedinjenja korišćenjem odgovarajućih početnih materijala. Standardna zaštita i deprotekcija se mogu koristiti kada je potrebno.
Primer 1D. Sinteza 6-(3-hidroksibenzil)-2,4-dimetil-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona
[0197] U smešu 6-(3-metoksibenzil)-2,4-dimetil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (53 mg, 0.16 mmol) u DCM (4 mL) na 0 °C dodat je BBr3(195 mg, 0.778 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h, zatim ugašena sa MeOH. Dobijena smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (15.6 mg, 30.70% prinos). LCMS: m/z 327 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.34 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 7.12 (t, 1H), 6.78 - 6.56 (m, 3H), 5.26 (s, 2H), 4.278(s, 3H), 2.86 (s, 3H).
[0198] Gore navedeni postupak je korišćen za proizvodnju sledećih jedinjenja korišćenjem odgovarajućih početnih materijala. Standardna zaštita i deprotekcija se mogu koristiti kada je potrebno.
4
Primer 1E. Sinteza 6-[3-(1-Amino-etil)-benzil]-2,8-dimetil-6,8-dihidro-3-tia-1,5,6,8-tetraaza-ciklopenta[a]inden-7-ona
[0199]
[0200] U mešanu smešu 6-(3-acetilbenzil)-2,4-dimetil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (50 mg, 0.142 mmol) u MeOH (4 mL) je dodat NH4OAc (109 mg, 1.42 mmol) i NaBH3CN (18 mg, 0.284 mmol). Reakciona smeša je mešana na 35 °C tokom 13 h, zatim koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (20 mg, 40.0% prinos). LC-MS: m/z 354 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.48 (s, 1H), 7.25 (dd, 3H), 7.12 (d, 1H), 5.26 (s, 2H), 4.17 (s, 3H), 4.15 - 4.06 (m, 1H), 2.76 (s, 3H), 1.27 (d, 3H).
Primer 1F. Sinteza 6-(3-(aminometil)benzil)-2,4-dimetil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona
[0201]
[0202] Korak A. 2-(3-(bromometil)benzil)izoindolin-1,3-dion. U mešanu smešu 1,3-bis(bromometil)benzena (1.3 g, 4.96 mmol) u DMF (20 mL) dodat je kalijum 1,3-dioksoizoindolin-2-id (0.918 g, 4.96 mmol) i K2CO3(1.03 g, 7.44 mol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h, zatim sipana u zasićeni vodeni rastvor NH4Cl (30 mL) i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluent: PE/EtOAc = 30/1) da bi se dobio željeni proizvod (1.1 g, 67.4% prinos). LC-MS: m/z 330 (M+H)<+>.
[0203] Korak B. 2-(3-((2,4-Dimetil-5-okso-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il))metil)benzil)izoindolin-1,3-dion. U mešanu smešu 2-(3-(bromometil)benzil)izoindolin-1,3-diona (100 mg, 0.303 mmol) u DMF (4 mL) dodat je 2,4-dimetil-4H-tiazolo[5’,4’:4,5]pirolo[2,3-d] piridazin-5(6H)-on (66.7 mg, 0.303 mmol) i K2CO3(83.6 mg, 0.606 mol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h, zatim sipana u zasićeni vodeni rastvor NH4Cl (15 mL) i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluent: PE/EtOAc = 5/1) da bi se dobio željeni proizvod (80 mg, 56.3% prinos). LC-MS: m/z 470 (M+H)<+>.
[0204] Korak C. 6-(3-(Aminometil)benzil)-2,4-dimetil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U mešanu smešu 2-(3-((2,4-dimetil-5-okso-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H))-il)metil)benzil)izoindolin-1,3-diona (80 mg, 0.17 mmol) u EtOH (5 mL) je dodat N2H4.H2O (44 mg, 98% tež, 0.85 mmol). Reakciona smeša je mešana na 100 °C tokom 2 h, zatim sipana u zasićeni vodeni rastvor NH4Cl (15 mL) i ekstrahovan sa DCM dva puta. Organski slojevi su dva puta isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (30 mg, 52.1% prinos). LC-MS: m/z 324 (M+H-NH3)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.57 (s, 1H), 7.32 (m, 3H), 7.23 (d, 1H), 5.35 (s, 2H), 4.27 (s, 3H), 3.84 (s, 2H), 2.86 (s, 3H).
Primer 1G. Sinteza 6-(4-(hidroksimetil)benzil)-2,4-dimetil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona
[0205]
[0206] Korak A. Metil 4-((2,4-dimetil-5-okso-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il)metil)benzoat. U smešu 2,4-dimetil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (100 mg, 0.4 mmol) u DMF (20 mL) je dodat K2CO3(181 mg, 1.3 mmol). Smeša je mešana na 60°C tokom 30 min, nakon čega je usledilo dodavanje metil 4-(bromometil)benzoata (100 mg, 0.4 mmol) na 0 °C. Dobijena smeša je mešana na 60°C tokom 18 h, zatim sipana u ledenu vodu i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu (eluent: PE/EtOAc = 50/1 do 10/1) da bi se dobio željeni proizvod (120 mg, 74.61%). LCMS: m/z 369 (M+H)<+>.
[0207] Korak B. 6-(4-(hidroksimetil)benzil)-2,4-dimetil-4H-tiazolo[5',4':4,5] pirolo[2,3d]piridazin-5(6H)-on. U smešu 4-((2,4-dimetil-5-okso-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il)metil)benzoata (100 mg, 0.3 mmol) u THF (20 mL) na 0 °C je dodat LAH (30 mg, 0.8 mmol). Reakcija je mešana na 0 °C pod N2tokom 30 min, a zatim ugašena sa NaSO4-10H2O i filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC da bi se dobio željeni proizvod (3 mg, 3.25%). LCMS: m/z 341 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.12 (s, 1H), 7.36 (d, 2H), 7.25 (d, 2H), 5.37 (s, 2H), 4.59 (s, 2H), 4.31 (s, 3H), 2.80 (s, 3H).
[0208] Gore navedeni postupak je korišćen za proizvodnju sledećih jedinjenja korišćenjem odgovarajućih početnih materijala. Standardna zaštita i deprotekcija se mogu koristiti kada je potrebno.
Primer 1H. Sinteza 6-((6-aminopiridin-2-il)metil)-2,4-dimetil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona
[0209]
[0210] Korak A: 6-((6-((2,4-dimetoksibenzil)amino)piridin-2-il)metil)-2,4-dimetil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. Smeša 6-((6-fluoropiridin-2-il)metil)-2,4-dimetil-4H-tiazolo[5',4':4,5]-pirolo[2,3-d]piridazin-5 (6H)-ona (40 mg, 0.12 mmol) i (2,4-dimetoksifenil)metanamina (102 mg, 0.6 mmol) u NMP (1 mL) je mešana na 140°C do završetka. Dobijena smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC da bi se dobio željeni proizvod (20 mg, 34.5% prinos). LC-MS: 477 (M+H)<+>.
[0211] Korak B: 6-((6-aminopiridin-2-il)metil)-2,4-dimetil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. Smeša 6-((6-((2,4-dimetoksibenzil)amino)piridin-2-il)metil)-2,4-dimetil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (20 mg, 0.042 mmol) i TFA (45 mg, 0.42 mmol) u DCM (1 mL) je mešana na sobnoj temperaturi do završetka. Dobijena smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (20 mg, 34.5% prinos). LC-MS: 327(M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.55 (s, 1H), 7.26 (t, 1H), 6.30 (d, 1H), 6.09 (d, 1H), 5.90 (s, 2H), 5.19 (s, 2H), 4.25 (s, 3H), 2.85 (s, 3H).
Primer 1I. Sinteza 6-(hidroksimetil)-2,4-dimetil-4H-tiazolo[5',4':4,5] pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona
[0212]
[0213] Smeša 2,4-dimetil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (30 mg, 0.14 mmol), formaldehida (1.5 mL, 40% tež.) i NH3(0.75 mL, 33% tež.) u dioksanu (2 mL) je mešana na 50 °C tokom 1 sata, zatim sipana u vodu i ekstrahovana sa DCM. Organski sloj je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC da bi se dobio željeni proizvod (4.40 mg, 17 % prinos). LCMS: 251 (M+H).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.55 (s, 1H), 6.63 (t, 1H), 5.44 (d, 2H), 4.27 (s, 3H), 2.85 (s, 3H).
Primer 2. Priprema jedinjenja formule E2-vii sa šemom E2
[0214]
pri čemu Xa je odlazeća grupa (npr. halogen kao što je Br ili I; OMs; ili OTs); Xbje halogen (npr. Cl, Br ili 1); n1 je 0 ili 1; M je vodonik (na primer za Hekovu reakciju) ili organski metalni kompleks (npr. organoborni kompleks kao što je borna kiselina ili kompleks pinako bora; organokalajni kompleks kao što je -Sn(Bu<t>)3; kompleks organocinka kao što je - Zn(halogen)); Q i R<2>su kao što su definisani u bilo kom od prvog do dvadeset šestog primera izvođenja pronalaska. U određenim primerima izvođenja, Q i R<2>su svaki nezavisno izborno supstituisani aril, izborno supstituisani heteroaril, izborno supstituisani karbociklus ili izborno supstituisani heterociklil, izborno supstituisani alkil. Slično sintezi jedinjenja Formule E1-v u Primeru 1, jedinjenje E2-iv se može sintetisati iz tiazol aldehida E2-i uz nekoliko modifikacija (npr. reakcija jedinjenja E2-ii sa MsCl nakon čega sledi eliminacija da bi se dobilo jedinjenje E2- iii; triciklični sistem se može formirati sa kat. AcOH u 2-metoksietanolu). Supstitucija i halogenacija (npr. CBr4ili Cl3CCCl3u prisustvu LiHMDS; ili 1,2,3,4,5-pentafluoro-6-jodobenzen u prisustvu t-BuOK i toluena) jedinjenja E2-iv daje jedinjenje E2-vi. Kuplujuće reakcije jedinjenja E2-vi sa organometalom u prisustvu katalizatora daju jedinjenje E2-vii ili E2-viii. Direktna nukleofilna reakcija E2-vi sa neukleofilom (Nu) može da generiše jedinjenje E2-ix.
Primer 2A. Sinteza 2-(4-fluorobenzil)-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4H-tiazolo [5',4':4,5] pirolo[2,3-d] piridazin-5(6H) -ona
[0215]
[0216] Korak A. Etil 2-azido-3-hidroksi-3-(tiazol-5-il)propanoat. Lagano je dodat natrijum (12.2 g, 0.531 mol) na sobnoj temperaturi u mešani rastvor suvog EtOH (300 mL). Reakciona smeša je zatim ohlađena do -20°C, a zatim je u kapima dodavan rastvor etil 2-azidoacetata (68.5 g, 0.531 mol) i tiazol-5-karbaldehida (20.0 g, 0.177 mol) u anhidrovanom EtOH (100 mL) uz održavanje temperature između -20 °C do -15 °C. Posle dodavanja, reakciona smeša je mešana na -20°C još 1 sat, a zatim sipana u zasićeni vodeni rastvor NH4Cl (1L). Dobijena smeša je zasićena sa NaCl i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovana organska faza je isprana fiziološkim rastvorom, osušena preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem (eluent: PE/EtOAc= 6/1 do 5/1 do 1/1) da bi se dobio željeni proizvod (34 g) kao bled. LCMS: m/z = 243 (M+H)<+>.
[0217] Korak B. Etil (Z)-2-azido-3-(tiazol-5-il)akrilat. U mešanu smešu etil 2-azido-3-hidroksi-3-(tiazol-5-il)propanoata (103 g, 0.426 mol) u suvom DCM (1.5 L) na -35 °C dodat je MsCl (146 g, 1.28 mol), nakon čega sledi dodavanje TEA u kapima (301 g, 2.98 mol) uz održavanje temperature između -35 °C do -30 °C. Nakon dodavanja, reakciona smeša je mešana na -30 °C još 15 min, a zatim sipana u zasićeni vodeni rastvor NH4Cl (1.5 L). Dobijena smeša je zasićena sa NaCl i ekstrahovana sa DCM dva puta. Kombinovani organski slojevi su isprani u nizu sa vodenim rastvorom HCl (1 M) i fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu korišćenjem (eluent: PE/EtOAc= 5/1) da bi se dobio željeni proizvod (82.0 g, 86.3% prinos). LCMS: m/z = 225 (M+H)<+>.
[0218] Koraci C-E za sintezu etil 4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata, etil 4-metil-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata i etil 6-formil-4-metil-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata su bili slični postupcima u Primeru 1A.
[0219] Korak F. Etil (E)-6-(hidrazonometil)-4-metil-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilat. U mešanu smešu N2H4.H2O (2.0 g, 98%, 40 mmol) u 2-metoksietanolu (50 mL) na sobnoj temperaturi je dodat etil 6-formil-4-metil-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilat (4.8 g, 20 mmol), a zatim je dodato 20 kapi AcOH. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi oko 30 minuta dok smeša ne postane bistra. Dobijena smeša je sipana u vodu (100 mL) uz mešanje i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio željeni proizvod koji je upotrebljen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. LCMS: m/z = 253 (M+H)<+>.
[0220] Korak G. 4-Metil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-on. U mešanu suspenziju etil (E)-6-(hidrazonometil)-4-metil-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata (4.8 g, 0.19 mol) u 2-metoksietanolu (50 mL) na sobnoj temperaturi je dodat AcOH (20 kapi). Reakciona suspenzija je mešana na 105°C tokom 3 sata, a zatim filtrirana. Filterski kolač je ispran vodom i osušen pod visokim vakuumom da bi se dobila prva serija željenog proizvoda. Filtrat je razblažen vodom i ekstrahovan sa DCM dva puta. Organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobila druga serija željenog proizvoda. Kombinovane dve serije željenog proizvoda (2.5 g) su direktno korišćene u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. LCMS: m/z= 207 (M+H)<+>.1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.68(s, 1H), 9.35 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 4.30 (s, 3H).
[0221] Korak H. 6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-on. U mešanu smešu 4-metil-4,6-dihidro-SH-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona (2 g, 10.0 mmol) i K2CO3(2.7 g, 20 mmol) u DMF (15 mL) je dodat 1-(hlorometil)-3-metoksibenzen (2.3 g, 15 mmol). Reakciona smeša je mešana na 50 °C tokom 3 sata, zatim sipana u vodu i ekstrahovana sa EtOAc dva puta. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluent: PE/EtOAc = 5/1) da bi se dobio željeni proizvod (2 g, 67% prinos). LCMS: m/z= 327 (M+H)<+>.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.36 (s, 1H),8.64 (s, 1H), 7.24 (t, 1H), 6.88-6.80 (m, 3H), 5.33 (s, 2H),.4.31 (s, 3H) 3.72 (s, 3H).
[0222] Korak I. 2-jodo-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5 -on. U mešanu smešu 6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona (1 g, 3 mmol) i t-BuOK (688 mg, 6 mmol) u toluenu (30 mL) na sobnoj temperaturi je dodat 1,2,3,4,5-pentafluoro-6-jodobenzen (3.6 g, 12
1
mmol). Reakciona smeša je mešana na 135 °C tokom 4 h. (uljano kupatilo je prethodno zagrejano) i zatim koncentrovano pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu (eluent: PE/EtOAc = 6/1) da bi se dobio željeni proizvod (1 g, 72% prinos). LCMS: m/z= 453 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.61 (s, 1H), 7.23 (t, 1H), 6.88-6.80 (m, 3H), 5.31 (s, 2H),.4.26 (s, 3H) 3.71 (s, 3H).
[0223] Korak J. (4-Fluorobenzil)cink(II) bromid. U balon sa okruglim dnom od 25 mL sa tri grla dodat je Zn u prahu (1300 mg, 20 mmol). Smeša je degazirana pod visokim vakuumom i ponovo pročišćena sa N2tri puta. Dodati su suvi THF (15 mL), TMSCl (108 mg, 1 mmol) i 1,2-dibromoetan (186 mg, 1 mmol) preko šprica na sobnoj temperaturi. Suspenzija je zagrevana na 65 °C tokom 30 min, a zatim ohlađena na 0 °C, nakon čega je u kapima dodavan 1-(bromometil)-4-fluorobenzen (1.89 g, 10 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h. Supernatantni rastvor je direktno korišćen za sledeći korak.
[0224] Korak K. 2-(4-Fluorobenzil)-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U balon sa okruglim dnom od 25 mL sa tri grla dodat je 2-jodo-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d] piridazin-5(6H)-on (100 mg, 0.22 mmol) i Pd(PPh)3)4(25.4 mg, 10 mol%). Boca je degazirana pod visokim vakuumom i ponovo pročišćena sa N2tri puta. Supernatantni rastvor (4-fluorobenzil)cink(II) bromida (6 mL) je dodat preko šprica u balon. Dobijena smeša je mešana pod N2na 65 °C tokom 0.5 h. zatim koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC da bi se dobio željeni proizvod (6 mg). LCMS: m/z = 435 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,53 (s, 1H), 7.75-7.50 (m, 1H), 7.47 (s, 2H), 7.23 (s, 3H), 6.84 (s, 2H), 5.31 (s, 2H), 4.52 (s, 2H), 4.26 (s, 3H), 3.71 (s, 3H).
[0225] Gore navedeni postupak je korišćen za proizvodnju sledećih jedinjenja korišćenjem odgovarajućih početnih materijala. Standardna zaštita i deprotekcija amino grupa se mogu koristiti kada je to prikladno. Primeri amino zaštitne grupe uključuju, ali nisu ograničeni na SEM. Uklanjanje zaštite SEM se može izvesti u TFA i DCM.
Jed. Struktura Karakterizacija
br.
2
4
Primer 2B. Sinteza 2-benzil-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona
[0226]
[0227] Korak A. Etil 2-bromo-4-metil-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilat U rastvor etil 2-bromo-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata (1.1 g, 4 mmol) u anhidrovanom DMF (10 mL) dodat je NaH (320 mg, 60% u ulju, 8 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 min, nakon čega je usledilo dodavanje Mel (852 mg, 6 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi još 2 h, zatim ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani vodom i fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu (eluent: PE/EtOAc = 5/1) da bi se dobio željeni proizvod (950 mg, 82.2% prinos). LCMS: m/z 289 (M+H)<+>.
[0228] Korak B. Etil 2-benzil-4-metil-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilat U smešu etil 2-bromo-4-metil-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata (720 mg, 2.5 mmol) i Pd(PPh)3)4(145 mg, 0.125 mmol) u suvom THF pod N2je dodat benzilcink bromid (20 mL, 0.5 M). Reakciona smeša je mešana na 65°C tokom 1 h. zatim ugašen zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl i ekstrahovan sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu (eluent: PE/EtOAc = 4/1) da bi se dobio željeni proizvod (600 mg, 80.0% prinos). LCMS: m/z 301 (M+H)<+>.
[0229] Korak C. Etil 2-benzil-6-formil-4-metil-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilat U rastvor etil 2-benzil-4-metil-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata (600 mg, 2 mmol) u 1,2-dihloroetanu (6 mL) dodata je smeša fosfor oksihlorida (612 mg, 4 mmol) i N-metil-N-fenilformamida (540 mg, 4 mmol). Reakciona smeša je refluksovana preko noći, zatim ohlađena i sipana u ledenu vodu, a zatim ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu (eluent: PE/EtOAc = 3/1) da bi se dobio željeni proizvod (140 mg) kao žuto ulje. LCMS: m/z 329 (M+H)<+>.
[0230] Korak D. 2-benzil-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on U rastvor etil 2-benzil-6-formil-4-metil-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata (140 mg, sirov) u 2-etoksietanolu (3 mL) dodat je hidrazin hidrat (0.5 mL, 98% tež.). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 1 h. zatim ohlađen do sobne teperature. Talog je sakupljen filtracijom i ispran sa MeOH da bi se dobio željeni proizvod (60 mg, 10.1% prinos u 2 koraka). LCMS: m/z 297 (M+H)<+>.
[0231] Korak E. 2-benzil-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on U smešu 2-benzil-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (50 mg, 0.169 mmol) i NaHCO3(28 mg, 0.338 mmol) u DMA (1 mL) pod N2je dodat 1-(hlorometil)-3-metoksibenzen (40 mg, 0.254 mmol). Reakciona smeša je mešana na 120 °C tokom 3 sata. zatim ugašen zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su koncentrovani pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (8 mg, 11.4% prinos). LCMS: m/z 417
1
(M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.53 (s, 1H), 7.36-7.43 (m, 4H), 7.30-7.32 (m, 1H), 7.20-7.25 (m, 1H), 6.82-6.85 (m, 3H), 5.31 (s, 2H), 4.51 (s, 2H), 4.27 (s, 3H), 3.71 (s, 3H).
Primer 2C. Sinteza 6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-2-(1-feniletil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona
[0232]
[0233] Korak A. 4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-on je sintetisan postupkom sličnom Primeru 2A. LCMS: m/z 467 (M+H)<+>.
[0234] Korak B. 2-jodo-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-on je sintetisan postupkom sličnom Primeru 2A. LCMS: 593 (M+H)<+>.
[0235] Korak C. 2-benzil-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. Cink u prahu (1.3 g, 20 mmol) je suspendovan u anhidrovanom THF (5 mL) pod N2, nakon čega sledi dodavanje 1,2-dibromoetana (0.01 mL). Smeša je zagrevana na 65 °C tokom 5 min, nakon čega je usledilo dodavanje hlorotrimetilsilana (0.01 mL). Dobijena smeša je zagrevana na 65 °C još 15 min, a zatim ohlađena na 0 °C, nakon čega je u kapima dodavan rastvor (bromometil)benzena (1.7 g, 10 mmol) u anhidrovanom THF (5 mL). Dobijena smeša je mešana 1 h na 65°C, zatim ohlađena da bi se dobio benzilcink (II) bromid (oko 1 M u THF) koji je direktno korišćen u sledećem koraku. U smešu 2-jodo-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4' :4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (300 mg, 0.5 mmol) u suvom THF (2 mL) pod N2je dodat redom Pd (PPh3)4(58 mg, 0.05 mmol) i gornji benzilcink(II) bromid (5 ml, 1 M). Dobijena smeša je zagrevana na 65°C tokom 1 h, zatim sipana u vodu i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu (eluent: PE/EtOAc = 5/2) da bi se dobio željeni proizvod (230
1 1
mg, prinos 82.7 %). LCMS: 557 (M+H)<+>.
[0236] Korak D. 2-benzoil-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U smešu 2-benzil-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (100 mg, 0.18 mmol) u DMF (5 mL) je dodat K2CO3(74 mg, 0.53 mmol). Smeša je mešana na 50 °C pod vazduhom 4 h, zatim sipana u vodu. Talog je sakupljen filtracijom, ispran sa PE i osušen pod visokim vakuumom da bi se dobio željeni proizvod (100 mg, 98 % prinos). LCMS: 571 (M+H)<+>.
[0237] Korak E. 2-(1-hidroksi-1-feniletil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil) etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U smešu metil magnezijum bromida (0.6 mL, 1.5 M) u suvom THF (2 mL) pod ledenim kupatilom dodat je rastvor 2-benzoil-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)) etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (100 mg, 0.175 mmol) u suvom THF. Smeša je mešana 1 h, i sipana u zasićeni vodeni rastvor NH4Cl i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen prep-TLC da bi se dobio željeni proizvod (30 mg, 29,4 % prinos) kao ulje. LCMS: 587 (M+H)<+>.
[0238] Korak F. 6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-2-(1-feniletil)-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. Rastvor 2-(1-hidroksi-1-feniletil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (30 mg, 0.05 mmol) u mešanom rastvoru ufTFA/TES (2 mL/0.5 mL) je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 h, zatim koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (5 mg, 22.7 % prinos). LCMS: m/z 441 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.11 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.46 - 7.41 (m, 3H), 7.37 (t, 2H), 7.28 (m, 2H), 6.95 (d, 1H), 5.65 (s, 2H), 4.71 (q, 1H), 4.28 (s, 3H), 1.78 (d, 3H).
[0239] Nusproizvod, 4-metil-6-((1-metil-1H-indazol-4-il)metil)-2-(1-feniletil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-on je takođe dobijen pomoću prep-HPLC:
LCMS: m/z 455 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.52 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.41 (d, 1H), 7.42 - 7.30 (m, 6H), 6.97 (d, 1H), 5.64 (s, 2H), 4.70 (q, 1H), 4.27 (s, 3H), 4.09 (s, 3H), 1.77 (d, 3H).
1 2
Primer 2D. Sinteza 6-((1H-indazol-4-il)metil)-2-(1-hidroksi-1-feniletil)-4-metil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona
[0240]
[0241] Korak A. 6-((1H-indazol-4-il)metil)-2-benzoil-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U smešu 2-benzoil-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4' :4,5] pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (75 mg, 0.13 mmol) u DCM (2 mL) je dodat TFA (2 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h, zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC da bi se dobio željeni proizvod (30 mg, 52.6 % prinos). LCMS: 441 (M+H)<+>.
[0242] Korak B. 6-((IH-indazol-4-il)metil)-2-(1-hidroksi-1-feniletil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U smešu metil magnezijum bromida (0.22 mL, 1.5 M) u suvom THF (1 mL) u ledenom kupatilu dodat je rastvor 6-((1H-indazol-4-il)metil)-2-benzoil-4-metil-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (30 mg, 0.068 mmol) u suvom THF. Smeša je mešana 30 min, a zatim sipana u zasićeni vodeni rastvor NH4Cl i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (8 mg, 25.8 % prinos). LCMS: 457 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.11 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.62 (d, 2H), 7.45 (d, 1H), 7.34 (t, 2H), 7.29-7.23 (m, 2H), 6.99 - 6.93 (m, 2H), 5.65
1
(s, 2H), 4.26 (s, 3H), 2.01 (s, 3H).
[0243] Gore navedeni postupak je korišćen za proizvodnju sledećih jedinjenja korišćenjem odgovarajućih početnih materijala.
Primer 2E. Sinteza 2-(hidroksi(fenil)metil)-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona
1 4
[0244]
[0245] Korak A. 2-benzoil-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U rastvor 2-benzil-4-metil-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (40 mg, 0.135 mmol) i K2CO3(37 mg, 0.27 mmol) u DMF (1 mL) je dodat 1-(hlorometil)-3-metoksibenzen (31 mg, 0.2 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi na vazduhu preko noći, a zatim sipana u vodu. Talog je sakupljen filtracijom i ispran sa EtOAc da bi se dobio željeni proizvod (30 mg, 51.7% prinos). LCMS: m/z 431 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.76 (s, 1H), 8.46-8.49 (m, 2H), 7.78 (t, 1H), 7.66 (t, 2H), 7.25 (t, 1H), 6.84-6.89 (m, 3H), 5.36 (s, 2H), 4.37 (s, 3H), 3.73 (s, 3H).
[0246] Korak B. 2-(Hidroksi(fenil)metil)-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5 (6H)-on. U smešu 2-benzoil-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (20 mg, 0.047 mmol) u THF (1 mL) i MeOH (1 mL) je dodat NaBH4(3.5 mg, 0.093 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 min, ugašena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je odvojen i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC da bi se dobio željeni proizvod (13 mg, 64.0% prinos). LCMS: m/z 433 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.58 (s, 1H), 7.49-7.53 (m, 2H), 7.36-7.40 (m, 2H), 7.28-7.33 (m, 1H), 7.20-7.25 (m, 1H), 7.07 (d, 1H), 6.82-6.85 (m, 3H), 6.08 (d, 1H), 5.31 (d, 2H), 4.21 (s, 3H), 3.71 (s, 3H).
[0247] Gore navedeni postupak je korišćen za proizvodnju sledećih jedinjenja korišćenjem odgovarajućih početnih materijala.
1
Primer 2F. Sinteza 6-((1H-indazol-4-il)metil)-2-(hidroksi(fenil)metil)-4-metil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona
[0248]
[0249] Korak A. 2-(Hidroksi(fenil)metil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on je sintetisan postupkom sličnim Primeru 2E. LCMS: m/z 573 (M+H)<+>.
[0250] Korak B. 6-((1H-indazol-4-il)metil)-2-(hidroksi(fenil)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on je sintetisan korišćenjem postupka sličnog Primeru 2D. LCMS: m/z 443 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.12 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.56-7.42 (m, 3H), 7.37 (s, 2H), 7.28 (m, 2H), 7.07 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 6.08 (s, 1H), 5.65 (s, 2H), 4.21 (s, 3H).
Primer 2G. Sinteza metil 6-(3-metoksibenzil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2 -karboksilata
[0251]
[0252] U mešanu smešu 2-jodo-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)- ona (40 mg, 0.088 mmol) u MeOH (5 mL) je dodat Et3N (27 mg, 0.264 mmol) i Pd(dppf)Cl2(6.5 mg, 0.009 mmol). Reakciona smeša je mešana na 85°C pod CO tokom 12 h, zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (2 mg, 5.88% prinos). LC-MS: m/z 385 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.72 (s, 1H), 7.24 (t, 1H), 6.95 - 6.81 (m, 3H), 5.34 (s, 2H), 4.29 (s, 3H), 3.99 (s, 3H), 3.72 (s, 3H).
[0253] Slična reakcija je izvedena sa 2-hloro-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-onom, koji je stvorio 2-metoksi-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d] piridazin-5-on kao glavni
1
nusprodukt. LC-MS: m/z 357 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.50 (s, 1H), 7.26-7.21 (m, 1H), 6.88 - 6.80 (m, 3H), 5.30 (s, 2H), 4.19 (brs, 6H), 3.72 (s, 3H).
Primer 2H. Sinteza 2-(fluoro(fenil)metil)-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona
[0254]
[0255] U rastvor 2-(hidroksi(fenil)metil)-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin- 5(6H)-ona (20 mg, 0.046 mmol) u DCM (2 mL) na -78°C je dodat DAST (0.3 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min, zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC da bi se dobio željeni proizvod (2.5 mg, 12.5 % prinos). LCMS: 435. (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.64 (s, 1H), 7.55-7.48 (m, 5H), 7.26-7.07 (m, 2H), 6.92-6.74 (m, 3H), 5.32 (s, 2H), 4.25 (s, 3H), 3.71 (s, 3H).
Primer 2I. Sinteza 6-((1H-indazol-4-il)metil)-2-(amino(fenil)metil)-4-metil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona
[0256]
[0257] Korak A. (Z)-2-((Hidroksiimino)(fenil)metil)-4-metil6-((1-((2-(trimetilsilil) etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-S(6H)-on.
Smeša 2-benzoil-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (100 mg, 0.175 mmol) i NH2OH.HCl (123 mg, 1.75 mmol) u anhidrovanom MeOH (5 mL) je mešana na 100°C u zatvorenoj epruveti tokom 12 sati. Zatim je sipana u zasićeni vodeni rastvor NH4Cl (20 mL) i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog
1
Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluent: PE/EA = 2/1) da bi se dobio željeni proizvod (40 mg, 39.1% prinos). LC-MS: m/z 586 (M+H)<+>.
[0258] Korak B. 6-((1H-indazol-4-il)metil)-2-(amino(fenil)metil)-4-metil-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on U mešanu smešu (Z)-2-((hidroksiimino)(fenil)metil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (40 mg, 0.068 mmol) u TFA (3 mL) je dodat Zn (44 mg, 0.68 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h, zatim sipana u zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(20 mL) i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (4.6 mg, 14.8% prinos). LC-MS: m/z 442 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.11 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.52-7.40 (m, 3H), 7.39-7.32 (m, 2H), 7.30 - 7.22 (m, 2H), 6.95 (d, 1H), 5.65 (s, 2H), 5.49 (s, 1H), 4.20 (s, 3H).
[0259] Gore navedeni postupak je korišćen za proizvodnju sledećih jedinjenja korišćenjem odgovarajućih početnih materijala.
Primer 2J. Sinteza N-((6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo) [2,3-d]piridazin-2-il)(1H-pirazol-3-il)metil)acetamida
[0260]
1
[0261] Korak A. N-((6-((1-acetil-1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)(1-acetil-1H-pirazol-3-il)metil) acetamid. U mešanu smešu 6-((1H-indazol-4-il)metil)-2-(amino(1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (20 mg, 0.046 mmol) u DCM/MeCN (1 mL/1 mL) je dodat Et3N (14 mg, 0.139 mmol) i anhidrid sirćetne kiseline (24 mg, 0.23 mmol). Dobijena smeša je mešana na 23°C tokom 1 sata, zatim ugašena vodom i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod (30 mg) koji je direktno upotrebljen u sledećem koraku bez ikakvog daljeg prečišćavanja. LCMS: m/z 558 (M+H)<+>.
[0262] Korak B. N-((6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)(1H-pirazol-3-il)metil)acetamid. U mešanu smešu N-((6-((1-acetil-1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo [2,3-d]piridazin-2-il)(1-acetil-1H-pirazo1-3-il)metil)acetamida (30 mg, 0.053 mmol) u MeOH (3 mL) pod N2dodat je K2CO3(22 mL, 0.16 mmol). Smeša je mešana na 23 °C tokom 30 minuta, a zatim ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (2.0 mg, 9% prinos). LC-MS: m/z: 474 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.57 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.48-7.60 (d, 1H), 7.31-7.27 (t, 1H), 7.00-6.98 (d, 1H), 6.51 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 5.66 (s, 2H), 4.33 (s, 3H), 1.97 (s, 3H).
Primer 2K. Sinteza 2-(difluoro(fenil)metil)-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3- d]piridazin-5-ona
[0263]
[0264] Korak A. 6-(3-metoksibenzil)-4-metil-2-(2-fenil-1,3-ditiolan-2-il)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-on. U smešu 2-benzoil-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-
1
4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona (86 mg, 0.2 mmol) u toluenu (3 mL) je dodat p-TsOH (36 mg, 0.2 mmol) i etan-1,2-ditiol (39 mg, 0.4 mmol). Smeša je mešana na 110 °C tokom 4 sata, zatim sipana u vodu i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu (eluent: PE/EtOAc = 3/1) da bi se dobio željeni proizvod (80 mg, 80 % prinos). LCMS: m/z 507 (M+H)<+>.
[0265] Korak B. 2-(Difluoro(fenil)metil)-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-on. U smešu 6-(3-metoksibenzil)-4-metil-2-(2-fenil-1,3-ditiolan-2-il)-4,6-dihidro-5H-tiazolo [5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona (65 mg, 0.13 mmol) i NIS (malo) u DCM (5 mL) je dodat Py.HF (1 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod N2tokom 2 h, zatim sipana u vodu i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluent: PE/EtOAc = 3/1) da bi se dobila čvrsta supstanca (50 mg, 76 % prinos). LCMS: m/z 595 (M+H)<+>.
[0266] U smešu gornje čvrste supstance (25 mg, 0.04 mmol) u THF/MeOH (3 mL/2 mL) dodat je Pd/C (5 mg). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod H240 min, a zatim filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC da bi se dobio željeni proizvod (7 mg, 36.8 % prinos). LCMS: 453 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.70 (s, 1H), 7.74-7.70 (m, 2H), 7.64-7.56(m, 3H), 7.26-7.20 (m, 1H), 6.88-6.84 (m, 3H), 5.33 (s, 2H), 4.25 (s, 3H), 3.71 (s, 3H).
Primer 2L. Sinteza 6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-2-(1-fenilciklo-propil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona
[0267]
[0268] Korak A. 4-Metil-2-(1-fenilciklopropil)-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5’,4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. U smešu 2-benzil-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo [2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (60 mg, 0.1 mmol) u suvom DMF (2 mL) je dodat 1,2-dibromoetan (10
11
µL, 0.1 mmol) i TBAB (3 mg, 0.01 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min, nakon čega je usledilo dodavanje NaH (8 mg, 0.2 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h, zatim sipana u zasićeni vodeni rastvor NH4Cl i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC da bi se dobio željeni proizvod (26 mg, 44.7 % prinos). LCMS: 583 (M+H)<+>.
[0269] Korak B. 6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-2-(1-fenilciklopropil)-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. Smeša 4-metil-2-(1-fenilciklopropil)-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (26 mg, 0.044 mmol) u rastvoru HCl u dioksanu (4M, 2 mL) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h, zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (3 mg, 15 % prinos). LCMS: 453 (M+H)<+>.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.11 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.59 - 7.52 (m, 2H), 7.50 - 7.38 (m, 4H), 7.32 - 7.23 (m, 1H), 6.95 (d, 1H), 5.63 (s, 2H), 4.24 (s, 3H), 1.84-1.81 (m, 2H), 1.59-1.57 (m, 2H).
Primer 2M. Sinteza 3-((2,4-dimetil-5-okso-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il)metil)benzamida
[0270]
[0271] Korak A. Sinteza 3-((2-bromo-4-metil-5-okso-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il)metil)benzonitrila Na -40°C pod atmosferom N2, u smešu 3-((4-metil-5-okso-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il)metil)benzonitrila (200 mg, 0.62 mmol) i CBr4(1.03 g, 3.11 mmol) u THF (15 mL) je ukapavanjem dodat LiHMDS (1.24 mL, 1 M u THF). Reakciona smeša je mešana na -40°C tokom 2 sata, ugašena zasićenim NH4Cl i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 0-25% EtOAc u PE) da bi se dobio 3-((2-bromo-4-metil-5-okso-4H-tiazolo[5',4':4,5)]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il)metil)benzonitril (200 mg, 80.6% prinos). LC-MS (ESI): m/z 400 (M+H)<+>.
[0272] Korak B. Sinteza 3-((2,4-dimetil-5-okso-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin6(5H)-il)metil)benzonitrila U smešu 3-((2-bromo-4-metil-5-okso-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il)metil)benzonitrila (100 mg, 0,25 mmol) i metilborne kiseline (45 mg, 0.75 mmol) u toluenu (2 mL) je dodat Na2CO2(53 mg, 0.5 mmol), a zatim Pd2(dba)3(23 mg, 0,025 mmol) i xantphos (14 mg, 0.025 mmol). Reakciona smeša je mešana na 100°C tokom 15 h. Reakciona smeša je filtrirana i filtrat je isparavan. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 0-50% EtOAc u petrol etru) da bi se dobio 3-((2,4-dimetil-5-okso-4H-tiazolo[5',4':4,5])pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il)metil)benzonitril (60 mg, 71.4% prinos). LC-MS (ESI): m/z 336 (M+H)<+>.
[0273] Korak C. Sinteza 3-((2,4-dimetil-5-okso-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il)metil)benzamida Rastvor 3-((2,4-dimetil-5-okso-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il)metil) benzonitrila (60 mg, 0.18 mmol) u H2SO4(1 mL) je mešan na 30 °C preko noći. Reakcija je ugašena zas. NaHCO3i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i isparavana. Ostatak je prečišćen pomoću pre-TLC (10% MeOH u DCM) da bi se dobio 3-((2,4-dimetil-5-okso-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirol[2,3-d]piridazin-6(5H)-il)metil)benzamid (10 mg, 15,7% prinos). LC-MS (ESI): m/z 354 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.59 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.46 (d, 1H), 7.41 (t, 1H), 7.35 (s, 1H), 5.40 (s, 2H), 4.26 (s, 3H), 2.86 (s, 3H).
Primer 2N. Sinteza 2-(2-(1H-pirazol-3-il)etil)-4-metil-6-((1-metil-1H-pirazol-3-il)metil)-4,6-dihidro-5H- tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona
[0274]
[0275] Korak A. Sinteza 3-jodo-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazola U smešu 3-jodo-1H-pirazola (1 g, 5.16 mmol) i p-TsOH (88 mg, 0.52 mmol) u DCM (15 mL) je dodat DHP (0.56 mL, 6.19 mmol) i mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je isprana sa zas. NaHCO3i fiziološkim rastvorom, osušena preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovana. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0 ~ 10% EtOAc u PE) da bi se dobio 3-jodo-1-(oksan-2-il)-1H-pirazol (1.4 g). LC-MS (m/z 279 (M+H)<+>.
[0276] Korak B. Sinteza (E)-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-3-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il) vinil)-1H-pirazola Pod azotom, u smešu 3-jodo-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazola (150 mg, 0.54 mmol) u toluenu (3 mL) dodat je 2-etenil-4,4 ,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (0.18 mL, 1.08 mmol), Et3N (0.37 mL, 2.7 mmol) i Pd(PBu3)2(14 mg, 0.03 mmol). Reakcija je mešana na 100 °C tokom 3 sata. Smeša je koncentrovana i prečišćena pomoću prep-TLC (35% EtOAc u PE) da bi se dobio 1-(oksan-2-il)-3-[(E)-2-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2 -il)etenil]-1H-pirazol (60 mg, 37% prinos). LC-MS (ESI): m/z 305 (M+H)<+>.
[0277] Korak C. Sinteza 4-metil-6-((1-metil-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona U smešu 4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (500 mg, 2.42 mmol) u DMF (15 mL) dodat je K2CO3(335 mg, 2.42 mmol). Posle mešanja na 50 °C tokom 30 minuta, dodat je rastvor 3-(bromometil)-1-metil-1H-pirazola (636 mg, 3.64 mmol) u DMF (2 mL). Reakcija je mešana na 50 °C preko noći. Suspenzija je sipana u zas. NH4Cl, ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je osušen preko anhidrovanog Na2SO4, filtriran i koncentrovan. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0 ~ 100 EtOAc u PE) da bi se dobio 4-metil-6-((1-metil-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (280 mg). LC-MS (ESI): m/z 301 (M+H)<+>.
[0278] Korak D. Sinteza 2-jodo-4-metil-6-((1-metil-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2, 3-d]piridazin-5(6H)-ona U smešu 4-metil-6-((1-metil-1H-pirazo1-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazina-5(6H)-ona (280 mg, 0.93 mmol) u toluenu (10 mL) je dodat pentafluorjodobenzen (0.50 mL, 3.73 mmol) i t-BuOK (209 mg, 1.86 mmol). Reakcija je mešana na 135°C tokom 2 sata pod azotom. Smeša je ohlađena na sobnoj temperaturi i koncentrovana. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0 ~ 100% EtOAc u PE) da bi se dobio 2-jodo-4-metil-6-((1-metil-1H-pirazo1-3-il)metil)-4H- tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (300 mg). LC-MS (ESI): m/z 427 (M+H)<+>.
[0279] Korak E. Sinteza (E)-4-metil-6-((1-metil-1H-pirazol-3-il)metil)-2-(2-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il))-1H-pirazol-3-il)vinil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona Pod azotom, u smešu 2-jodo-4-metil-6-((1-metil-1H-pirazo1-3-il)metil)-4H-
11
tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (300 mg, 0.71 mmol) i (E)-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-3-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)vinil)-1H-pirazola (300 mg, 0.99 mmol) u DME (5 mL) i vodi (1 mL) dodati su Na2CO3(149 mg, 1.41 mmol) i Pd(PPh3)2Cl2(49 mg, 0.071 mmol). Smeša je mešana na 80 °C tokom 3 sata. Zatim je smeša ohlađena, razblažena sa EtOAc, isprana vodom i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je osušen preko anhidrovanog Na2SO4, filtriran i koncentrovan. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0 ~ 100% EtOAc u PE) da bi se dobio (E)-4-metil-6-((1-metil-1H-pirazol-3-il)metil)-2- (2-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazo1-3-il)vinil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (170 mg). LC-MS (ESI): m/z 477 (M+H)<+>.
[0280] Korak F. Sinteza 4-metil-6-((1-metil-1H-pirazol-3-il)metil)-2-(2-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-3-il)etil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona U smešu (E)-4-metil-6-((1-metil-1H-pirazol-3-il)metil)-2-(2-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-3-il)vinil)-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (80 mg, 0.17 mmol) u THF (3 mL) i MeOH (3 mL) dodat je Pd/C (10 mg). Reakcija je mešana pod H2na sobnoj temperaturi tokom 6 h. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC (EtOAc) da bi se dobio 4-metil-6-((1-metil-1H-pirazol-3-il)metil)-2-(2-(1-(tetrahidro-2H-piran)-2-il)-1H-pirazol-3-il)etil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (20 mg). LC-MS (ESI): m/z 479 (M+H)<+>.
[0281] Korak G. Sinteza 2-(2-(1H-pirazol-3-il)etil)-4-metil-6-((1-metil-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona U smešu 4-metil-6-((1-metil-1H-pirazol-3-il)metil)-2-(2-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-3-il)etil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (20 mg, 0.042 mmol) u etanolu (2 mL) dodata je HCl (0.5 mL, 4 M u dioksanu). Reakciona smeša je mešana na 50 °C 30 min. Reakciona smeša je ohlađena i sipana u zas. NaHCO3, ekstrahovan sa EtOAc. Organski sloj je osušen preko anhi. Na2SO4, filtriran i koncentrovan. Ostatak je prečišćen prep-TLC (10% MeOH u DCM) da bi se dobio 2-(2-(1H-pirazol-3-il)etil)-4-metil-6-((1-metil-1H-pirazol- 3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (10 mg, 61% prinos). LC-MS (ESI): m/z 395 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.56 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 7.56 (d, 1H), 7.52 (s, 1H), 6.12 (d, 1H), 6.08 (d, 1H), 5.27 (s, 2H), 4.27 (s, 3H), 3.77 (s, 3H), 3.48 (t, 2H), 3.13 (t, 2H).
[0283] Korak A. Sinteza etil 5-hidroksi-1-(4-metoksibenzil)-1H-pirazol-4-karboksilata U smešu (4-metoksibenzil)hidrazin dihidrohlorida (2.25 g, 10 mmol) i K2CO3(4.14 g, 30 mmol) u metanolu (50 mL) i vodi (10 mL) dodat je dietil 2-(etoksimetilen)malonat (2.16 g, 10 mmol). Smeša je mešana na 80 °C tokom 5 h. Zatim je smeša ugašena vodenim rastvorom NH4Cl i ekstrahovana sa EtOAc. Organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko Na2SO4i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 0-50% EtOAc u PE) da bi se dobilo 1.1 g etil 5-hidroksi-1-(4-metoksibenzil)-1H-pirazol-4-karboksilata.
[0284] Korak B. Sinteza 5-hidroksi-1-(4-metoksibenzil)-1H-pirazol-4-karboksilne kiseline U rastvor etil 5-hidroksi-1-(4-metoksibenzil)-1H-pirazol-4-karboksilata (800 mg, 2.9 mmol) u metanolu (10 mL) dodat je rastvor KOH (800 mg, 15 mmol) u vodi (10 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Zatim je smeša koncentrovana i ostatak je direktno upotrebljen u sledećem koraku. LC-MS (ESI): m/z 249 (M+H)<+>.
[0285] Korak C. Sinteza 1-(4-metoksibenzil)-1H-pirazol-5-ola Smeša 5-hidroksi-1-(4-metoksibenzil)-1H-pirazol-4-karboksilne kiseline rastvorena je u 2 M HCl (50 mL) i mešana na 60 °C tokom 16 sati. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen pomoću pre-TLC da bi se dobilo 120 mg 1-(4-metoksibenzil)-1H-pirazol-5-ola. LC-MS (ESI): m/z 205 (M+H)<+>.
11
[0286] Korak D. Sinteza terc-butil N-(terc-butoksi)karbonil (6-((2-((1-(4-metoksibenzil)-1H-pirazol-5-il)oksi)-4-metil-5-okso-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il)metil)piridin-2-il)karbamata U rastvor 1-[(4-metoksifenil)metil]-1H-pirazol-5-ola (60 mg, 0.29 mmol) u DMF (8 mL) je dodat KOH (18 mg, 0.32 mmol) na 5 °C. Reakciona smeša je mešana na 5°C 30 min, dodat je rastvor terc-butil N-(terc-butoksi)karbonil (6-((2-bromo-4-metil-5-okso-4H-tiazolo[5,4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il)metil)piridin-2-il)karbamata (174 mg, 0.29 mmol) u DMF (2 mL). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h, a zatim sipana u 1 M vodeni rastvor limunske kiseline, ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i isparavani. Ostatak je prečišćen pomoću pre-TLC (EA:PE=1:1) da bi se dobilo 80 mg terc-butil N-(tercbutoksi)karbonil(6-((2-((1-(4-metoksibenzil)-1H-pirazol-5-il)oksi)-4-metil-5-okso-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il) metil)piridin-2-il)karbamata. LC-MS: m/z 715 (M+H)<+>.
[0287] Korak E. Sinteza 2-((1H-pirazol-5-il)oksi)-6-((6-aminopiridin-2-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona Rastvor terc-butil N-(tercbutoksi)karbonil(6-((2-((1-(4-metoksibenzil)-1H-pirazol-5-il)oksi)-4-metil-5-okso-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il)metil)piridin-2-il)karbamata (60 mg, 0.08 mmol) u TFA (2 mL) je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je koncentrovana i prečišćena pomoću prep-HPLC da bi se dobilo 15 mg 2-((1H-pirazol-5-il)oksi)-6-((6-aminopiridin-2-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. LC-MS (ESI): m/z 395 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 8.41 (s, 1H), 7.76 - 7.63 (m, 2H), 6.79 (d, 1H), 6.64 (d, 1H), 6.31 (d, 1H), 5.42 (s, 2H), 4.26 (s, 3H).
Primer 3. Priprema jedinjenja formule E3-ii i derivata sa šemom E3
[0288]
11
[0289] Jedinjenje E3-ii se može sintetisati Stille-ovom reakcijom između jedinjenja E3-i i tributil(vinil)stanana. Heck-ova reakcija E3-ii u prisustvu katalizatora (npr. paladijumov katalizator kao što je Pd(Pt-Bu3)2, DMF) praćena redukcijom alkenil grupe može da stvori jedinjenje E3-ix. Alternativno, standardna hidrogenacija jedinjenja E3-ii stvara jedinjenje E3-iii. Hidroboracija jedinjenja E3-ii praćena oksidacijom natrijum perboratom daje proizvod E3-vii. Direktna oksidacija jedinjenja E3-ii sa osmijum(VIII) oksidom i natrijum perjodatom daje aldehid E3-iv. Nukleofilna adicija aldehida E3-iv daje proizvod E3-v. Standardna redukcija jedinjenja E3-iv sa natrijum borohidridom daje jedinjenje E3-vi. Reduktivna aminacija jedinjenja E3-iv daje jedinjenje E3-viii. Pri čemu Q i R<2>su kao što su definisani u bilo kom od prvog do dvadeset šestog primera izvođenja pronalaska. U određenim primerima izvođenja, Q i R<2>su svaki nezavisno izborno supstituisani aril, izborno supstituisani heteroaril, izborno supstituisani karbocikl ili izborno supstituisani heterociklil.
Primer 3A. Sinteza 2-etil-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona
[0290]
[0291] Korak A.6-(3-M etoksibenzil)-4-metil-2-vinil-4-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d] piridazin-
11
5(6H)-on. U smešu 2-hloro-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (600 mg, 1.67 mmol) i tributil(vinil)stanana (1 mL, 3.4 mmol) u DMF (6 mL) je dodat Pd(PPh3)4. Smeša je mešana na 100 °C preko noći pod N2zatim je sipana u vodu i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu (eluent: PE/EtOAc = 5/2) da bi se dobio željeni proizvod (410 mg, 68 % prinos). LCMS: m/z 353 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.61 (s, 1H), 7.23 (t, 1H), 7.10 (dd, 1H), 6.89 - 6.80 (m, 3H), 6.28 (d, 1H), 5.75 (d, 1H), 5.32 (s, 2H), 4.27 (s, 3H), 3.72 (s, 3H).
[0292] Korak B. 2-etil-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-S(6H)-on. U smešu 6-(3-metoksibenzil)-4-metil-2-vinil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (30 mg, 0.88 mmol) u MeOH (1 mL) i THF (1 mL) pod N2dodat je Pd/C (10 mg). Smeša je mešana pod H2na sobnoj temperaturi tokom 1 h, zatim filtrirana kroz celit. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC da bi se dobio željeni proizvod (5 mg, 16.7 % prinos).
[0293] LCMS: m/z 355 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.56 (s, 1H), 7.23 (t, 1H), 6.89 - 6.78 (m, 3H), 5.32 (s, 2H), 4.26 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.17 (q, 2H), 1.38 (t, 3H).
[0294] Gore navedeni postupak je korišćen za proizvodnju sledećih jedinjenja korišćenjem odgovarajućih početnih materijala.
Jed. Struktura Karakterizacija
Primer 3B. Sinteza 2-(hidroksimetil)-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona
11
[0295]
[0296] Korak A. 6-(3-metoksibenzil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2 -karbaldehid. U smešu 6-(3-metoksibenzil)-4-metil-2-vinil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (410 mg, 1.16 mmol) u dioksanu (6 mL) i vodi (2 mL) su dodati NaIO4(1 g, 4.6 mmol), 2,6-dimetilpiridin (0.27 mL, 2.32 mmol) i OsO4(kat.). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h, zatim ugašena zasićenim vodenim rastvorom Na2S2O3i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluent: PE/EtOAc = 1/1) da bi se dobio željeni proizvod (130 mg, 31.7 % prinos). LCMS: m/z 387 (M+MeOH+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.08 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 7.24 (t, 1H), 6.88-6.83 (m, 3H), 5.34 (s, 2H), 4.34 (s, 3H), 3.72 (s, 3H).
[0297] Korak B. 2-(Hidroksimetil)-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4H-tiazolo[5'.4'.4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U smešu 6-(3-metoksibenzil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karbaldehida (30 mg, 0.08 mmol) u metanolu (2 mL) je dodat NaBH4(6 mg, 0.16 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 10 min, zatim sipana u vodu i ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je koncentrovan pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (10 mg, 35.7 % prinos). LCMS: m/z 357 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.59 (s, 1H), 7.23 (t, 1H), 6.86-6.82 (m, 3H), 6.34 (t, 1H), 5.32 (s, 2H), 4.89 (d, 2H), 4.26 (s, 3H), 3.72 (s, 3H).
[0298] Gore navedeni postupak je korišćen za proizvodnju sledećih jedinjenja korišćenjem odgovarajućih početnih materijala. Standardna zaštita i deprotekcija se mogu koristiti kada je potrebno.
11
Primer 3C: Sinteza 2-(2-hidroksipropan-2-il)-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona
[0299]
[0300] Korak A.2-(1-Hidroksietil)-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U smešu 6-(3-metoksibenzil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karbaldehida (100 mg, 0.28 mmol) u THF (3 mL) na 0 °C je u kapima dodat metilmagnezijum hlorid (0.19 mL, 0.56 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 10 min, zatim sipana u zasićeni vodeni rastvor NH4Cl i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluent: PE/EtOAc = 5/2) da bi se dobio željeni proizvod
12
(40 mg). LCMS: m/z 371 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.58 (s, 1H), 7.24 (t, 1H), 6.97 - 6.77 (m, 3H), 6.41 (d, 1H), 5.40 - 5.23 (m, 2H), 5.18 - 5.02 (m, 1H), 4.26 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 1.55 (d, 3H).
[0301] Korak B. 2-Acetil-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U smešu 2-(1-hidroksietil)-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (30 mg, 0.08 mmol) u DCM (3 mL) je dodat mangan (IV) oksid (35 mg, 0.4 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. zatim filtriran kroz celit. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio željeni proizvod (25 mg). LCMS: m/z 369 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.83 (s, 1H), 7.35 (t, 1H), 6.99-6.94 (m, 3H), 5.45 (s, 2H), 4.45 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 2.85 (s, 3H).
[0302] Korak C. 2-(2-Hidroksipropan-2-il)-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U smešu 2-acetil-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (20 mg, 0.05 mmol) u THF (1 mL) na 0°C dodat je ukapavanjem metilmagnezijum hlorid (0.08 mL, 0.15 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 10 min, zatim sipana u zasićeni vodeni rastvor NH4Cl i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC da bi se dobio željeni proizvod (10 mg). LCMS: m/z 385(M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.58 (s, 1H), 7.24 (t, 1H), 6.89 - 6.81 (m, 3H), 6.28 (s, 1H), 5.33 (s, 2H), 4.26 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 1.60 (s, 6H).
Primer 3D. Sinteza 6-((1H-indazol-4-il)metil)-2-(2-hidroksietil)-4-metil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-on
[0303]
[0304] Korak A. 2-(2-hidroksietil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4,6-dihidro- 5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-on. U smešu 4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-2-vinil-4,6-dihidro-5H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona (100 mg, 0.20 mmol) u THF (2 mL) na 0 °C pod N2dodata je BH3-THF (0.2 mL, 1 mol/L, 0.20 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h, zatim ohlađen na 0 °C, nakon čega sledi dodavanje vode (1 mL) i NaBO3.4H2O (154 mg, 1.00 mmol). Smeša je polako zagrejana do sobne temperature i mešana na toj temperaturi 3 h. Dobijena smeša je sipana u zasićeni vodeni rastvor NH4Cl i ekstrahovan sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu (eluent: PE/EtOAc = 5/1) da bi se dobio željeni proizvod (30 mg). LC-MS: m/z 511 (M+H)<+>.
[0305] Korak B. 6-((1H-indazol-4-il)metil)-2-(2-hidroksietil)-4-metil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5] pirolo[2,3-d]piridazin-5-on. U rastvor 2 (30 mg, 0.18 mmol) u DCM (3 mL) na 0 °C je dodavan u kapima TFA (1 mL). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h, zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (2.0 mg). LC-MS: m/z 381 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.11 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.30-7.26 (m, 1H), 6.96 (d, 1H), 5.66 (s, 2H), 5.02-5.00 (m, 1H), 4.27 (s, 3H), 3.85-3.81 (m, 2H), 3.32-3.25 (m, 2H).
Primer 3E. Sinteza 6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-2-((metilamino)metil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5] pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona
[0306]
[0307] Korak A.4-metil-2-((metilamino)metil)-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi) metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5 ',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U smešu 4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karbaldehida (50 mg, 0.1 mmol) u THF (10 mL) na 0 °C dodat je u kapima MeNH2(30% u MeOH, 21 mg, 0.2 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h, nakon čega sledi dodavanje natrijum cijanoborhidrida (19 mg, 0.3 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, a zatim ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC da bi se dobio željeni proizvod (35 mg). LCMS: m/z 511 (M+H)<+>.
[0308] Korak B. 6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-2-((metilamino)metil)-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U smešu 4-metil-((metilamino)metil)-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (35 mg, 0.07 mmol) u DCM (10 mL) na 0°C je dodavan u kapima TFA (3 mL).
Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h, zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (5 mg). LCMS: m/z 380(M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.13 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.16 (d, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.31 - 7.25 (m, 1H), 6.96 (d, 1H), 5.66 (s, 2H), 4.26 (s, 3H), 4.09 (s, 2H), 2.40 (s, 3H).
Primer 3F. Sinteza 6-((1H-indazol-4-il)metil)-2-(aminometil)-4-metil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2 ,3-d]piridazin-5-on
[0309]
[0310] Korak A. (E)-4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karbaldehid oksim. U smešu 4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi) metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karbaldehida (120 mg, 0.24 mmol) u MeOH (10 mL) na 0°C je dodat hidroksilamin hidrohlorid (50 mg, 0.73 mmol), nakon čega sledi dodavanje KOAc (71 mg, 0.73 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 8 h, zatim ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC da bi se dobio željeni proizvod (90 mg). LCMS: m/z 510 (M+H)<+>.
[0311] Korak B. 2-(Aminometil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U smešu (E)-4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karbaldehid oksim (90 mg, 0.18 mmol) u sirćetnoj kiselini (10 mL) je dodat Zn u prahu (58 mg, 0.88 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, a zatim filtrirana kroz celit. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (70 mg). LCMS: m/z 496 (M+H)<+>.
[0312] Korak C. 6-((1H-indazol-4-il)metil)-2-(aminometil)-4-metil-4H-tiazolo [5',4':4,5] pirolo[2,3-d]piridazin-5 (6H)-on je sintetisan korišćenjem postupka u Primeru 3D. LCMS: m/z 366 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.13 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.45 (d,
12
1H), 7.33 - 7.20 (m, 1H), 6.97 (d, 1H), 5.66 (s, 2H), 4.24 (d, 3H), 4.17 (s, 2H).
Primer 3G. Sinteza N-((6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)metil)acetamida
[0313]
[0314] Korak A. N-((4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)metil)acetamid. U smešu 2-(aminometil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (35 mg, 0.07 mmol) u DCM (10 mL) na 0°C je dodat anhidrid sirćetne kiseline (22 mg, 0.21 mmol), nakon čega sledi dodavanje trietilamina (22 mg, 0.21 mmol) i DMAP (0.8 mg, 0.007 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h, zatim ugašena vodom i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC da bi se dobio željeni proizvod (25 mg) kao žuto ulje. LCMS: m/z 538 (M+H)<+>.
[0315] Korak B. N-((4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo)[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)metil)acetamid je sintetisan korišćenjem postupka u Primeru 3D. LCMS: m/z 408 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.12 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.46 (d, 1H), 7.31-7.21 (m, 1H), 6.97 (d, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.31 (s, 3H), 1.93 (s, 3H).
Primer 3H. Sinteza N-((6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)metil)metansulfonamida
[0316]
[0317] Korak A. N-((4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)metil)metansulfonamid. U smešu 2-(aminometil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4Htiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (50 mg, 0.1 mmol) u DCM (5 mL) na 0°C je dodat Et3N (30.62 mg, 0.3 mmol), nakon čega sledi dodavanje MsCl (9.24 mg, 0.081 mmol). Smeša je mešana na 20 °C tokom 2 sata, zatim koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC da bi se dobio željeni proizvod (20 mg).
[0318] Korak B. N-((6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)metil)metansulfonamid je sintetisan korišćenjem postupka iz Primera 3D. LCMS: m/z 444 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.11 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 8.17 (d, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.34 - 7.20 (m, 1H), 6.97 (d, 1H), 5.66 (s, 2H), 4.64 (d, 2H), 4.27 (s, 3H), 3.04 (s, 3H).
Primer 31. Sinteza 2-(2-(1H-pirazol-3-il)etil)-6-((6-aminopiridin-2-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4' :4,5]pirolo[2,3-dlpiridazin-5(6H)-on
[0319]
[0320] Korak A. Sinteza terc-butil N-[(terc-butoksi)karbonil]-N-[6-({4-bromo-7-metil-9-okso-3-tia-5,7,10,11-tetraazatriciklo [6.4.0.0 {2,6}] dodeka-1 (8),2(6),4,11-tetraen-10-il}metil)piridin-2-il]karbamata Na -40°C pod atmosferom N2, u smešu terc-butil N-[(tercbutoksi)karbonil]-N-[6-({7-metil-9-okso-3-tia-5,7,10,11-tetraazatriciklo[6.4.0,0{2,6}]dodeka-1(8),2(6),4,11-tetraen-10-il}metil)piridin-2-il]karbamat (1.4 g, 2.73 mmol) i CBr4(4.52 g, 13.65 mmol) u THF (20 mL) je ukapavanjem dodat LiHMDS (5.46 mL, 5.46 mmol). Reakciona smeša je mešana na -40°C tokom 30 min, zatim ugašena vodom (4 mL) i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, PE/EA=10:1~3:1) da bi se dobilo 500 mg terc-butil N-[(terc-butoksi)karbonil]-N-[6-({4-bromo-7-metil-9-okso-3-tia-5,7,10,11-tetraazatriciklo[6.4.0.0 {2,6}]dodeka-1(8),2(6),4,11-tetraen-10-il}metil)piridin-2-il]karbamata. LC-MS: m/z 591 (M+H)<+>.
Korak B. Sinteza terc-butil N-[(terc-butoksi)karbonil]-N-[6-({4-vinil-7-metil-9-okso-3-tia-5,7,10,11-tetraazatriciklo[6.4.0.0{2,6}]dodeka-1(8),2(6),4,11-tetraen-10-il}metil)piridin-2-il]karbamata U rastvor terc-butil N-[(terc-butoksi)karbonil]-N-[6-({4-bromo-7-metil-9-okso-3-
12
tia-5,7,10,11-tetraazatriciklo [6.4.0.0{2,6}]dodeka-1(8),2(6),4,11-tetraen-10-il}metil)piridin-2-il]karbamata (500 mg, 0.85 mmol) u DMF (10 mL) je dodat tributil(etenil)stanan (536 mg, 1.69 mmol) i DIPEA (327 mg, 2.53 mmol), a zatim Pd(PPh3)4(105 mg, 0.08 mmol). Reakciona smeša je mešana pod atmosferom N2na 80°C tokom 3 sata, a zatim ugašena H2O i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, PE/EA=10:1-5:1) da bi se dobilo 300 mg terc-butil N-[(tercbutoksi)karbonil]-N-[6-({4-vinil-7-metil-9-okso-3-tia-5,7,10,11-tetraazatriciklo[6.4.0.0{2,6}]dodeka-1(8),2(6),4,11-tetraen-10-il}metil)piridin-2-il]karbamat. LC-MS: m/z 539 (M+H)<+>.
[0321] Korak C. Sinteza terc-butil (E)-3-(2-(6-((6-((terc-butoksikarbonil)[(tercbutoksi)karbonil]amino)piridin-2-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)vinil)-1H-pirazol-1-karboksilata U rastvor tercbutil N-[(terc-butoksi)karbonil]-N-[6-({4-vinil-7-metil-9-okso-3-tia-5,7,10,11-tetraazatriciklo[6.4.0.0{2,6}]dodeka-1(8),2(6),4,11-tetraen-10-il}metil)piridin-2-il]karbamata (300 mg, 0.56 mmol) u DMF (4 mL) je dodat terc-butil 3-jodo-1H-pirazol-1-karboksilat (180 mg, 0.61 mmol). Reakciona smeša je mešana na 100 °C preko noći. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, reakciona smeša je ugašena sa H2O i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pre-TLC (PE/EA=1:1) da bi se dobilo 200 mg terc-butil (E)-3-(2-(6-((6-((terc-butoksikarbonil)[(tercbutoksi)karbonil]amino)piridin-2-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)vinil)-1H-pirazol-1-karboksilata. LC-MS: m/z 705 (M+H)<+>.
[0322] Korak D. Sinteza terc-butil 3-(2-(6-((6-((terc-butoksikarbonil)[(tercbutoksi)karbonil]amino)piridin-2-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)etil)-1H-pirazol-1-karboksilata U rastvor tercbutil (E)-3-(2-(6-((6-((terc-butoksikarbonil)[(terc-butoksi)karbonil]amino)piridin-2-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)vinil)-1H-pirazol-1-karboksilata (200 mg, 0.28 mmol) u THF/MeOH (4 mL, 10:1) je dodat Pd/C (6 mg, 10 % tež.). Reakciona smeša je mešana pod vodonikom na sobnoj temperaturi tokom 12 h. Smeša je filtrirana kroz sloj celita, a filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen pomoću pre-TLC (PE/EA=1:1) da bi se dobilo 100 mg terc-butil 3-(2-(6-((6-((terc-butoksikarbonil)[(tercbutoksi))karbonil]amino)piridin-2-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-
12
tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)etil)-1H-pirazol-1-karboksilata. LC-MS: m/z 707 (M+H)<+>.
[0323] Korak E. Sinteza 2-(2-(1H-pirazol-3-il)etil)-6-((6-aminopiridin-2-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4' :4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. Na 0°C pod atmosferom N2, u smešu terc-butil 3-(2-(6-((6-((terc-butoksikarbonil)[(terc-butoksi)karbonil]amino)piridin-2-il)metil)-4-metil- 5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)etil)-1H-pirazol-1-karboksilata (100 mg, 0.14 mmol) u EtOH (2 mL) dodata je HCl (2 mL, 4 M u dioksanu). Posle mešanja na 80 °C tokom 1 h, smeša je sipana u zasićeni NaHCO3, ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću pre-TLC (DCM/MeOH=10:1) da bi se dobilo 10 mg 2-(2-(1H-pirazol-3-il)etil)-6-((6-aminopiridin-2-il) metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. LC-MS: m/z 407 (M+H)<+>.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.52 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 7.60 - 7.10 (m, 2H), 6.30 (d, 1H), 6.18 - 6.02 (m, 2H), 5.90 (s, 2H), 5.19 (s, 2H), 4.26 (s, 3H), 3.61 - 3.41 (m, 2H), 3.19 - 3.12 (m, 2H).
Primer 4. Sinteza jedinjenja E4-vii i E4-viii
[0324]
pri čemu je Hal halogen (npr. Br ili I); LG je odlazeća grupa (npr. halogen kao što je Br ili I; OMs; ili OTs); Q je kao što je definisan u bilo kojoj od prvog do dvadeset šestog primera izvođenja; i Q' je dalje funkcionalizovan Q (npr. izborno supstituisani aril, izborno supstituisani
12
heteroaril, izborno supstituisani karbociklus ili izborno supstituisani heterociklil). Reakcija aromatične supstitucije jedinjenja E4-i sa natrijum metanetiolatom daje jedinjenje E4-ii, koje se može konvertovati u jedinjenje E4-v korišćenjem sinteze jedinjenja E1-iii u E1-vi. Oksidacija jedinjenja E4-v sa mCPBA daje jedinjenje E4-vi i E4-vii respektivno. Jedinjenje E4-viii se može konvertovati iz E4-v daljim funkcionalizovanjem Q u Q'.
Primer 4A. Sinteza 6-(3-metoksibenzil)-4-metil-2-(metiltio)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona
[0325]
[0326] Korak A: Etil 4-metil-2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilat. U smešu etil 2-bromo-4-metil-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata (500.0 mg, 1.73 mmol) u EtOH (10.0 mL) dodat je NaSMe (240.0 mg, 3.5 mmol). Reakciona smeša je mešana na 25 °C tokom 3 sata, zatim ugašena ledenom vodom i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio željeni proizvod (460 mg) koji je direktno upotrebljen u sledećem koraku bez ikakvog prečišćavanja. LC-MS: m/z 257 (M+H)<+>.
[0327] Korak B: Etil 6-formil-4-metil-2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilat. U rastvor etil 4-metil-2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata (460.0 mg, 1.8 mmol) i N-metil-N-fenilformamida (490 mg, 3.6 mmol) u DCE (10 mL) je dodat POCl3(550.0 mg, 3.6 mmol). Dobijena smeša je mešana na 130 °C tokom 3 sata, zatim ugašena ledenom vodom i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu (eluent: PE/EtOAc = 8/1) da bi se dobio željeni proizvod (320.0 mg). LC-MS: m/z 285 (M+H)<+>.
[0328] Korak C: 4-metil-2-(metiltio)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[54':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-on. U rastvor etil 6-formil-4-metil-2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata (300.0 mg, 1.06 mmol) u EtOH (5.0 mL) je dodat N2H4.H2O (2 mL, 98% tež.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h, zatim zagrevana na 60 °C preko noći, a zatim ohlađena. Čvrsta
12
supstanca je sakupljena filtracijom i osušena pod visokim vakuumom da bi se dobio željeni proizvod (180.0 mg). LC-MS: m/z 253 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.61 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 4.22 (s, 3H), 2.81 (s, 3H).
[0329] Korak D: 6-(3-metoksibenzil)-4-metil-2-(metiltio)-4,6-dihidro-5H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-on. U rastvor 4-metil-2-(metiltio)-4,6-dihidro-SH-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona (180.0 mg, 0.7 mmol) u DMF (5.0 mL) je dodat kalijum karbonat (200 mg, 1.4 mmol). Smeša je mešana na 60°C tokom 1 h, a zatim je usledilo dodavanje 1-(hlorometil)-3-metoksibenzena (170 mg, 1.07 mmol). Dobijena smeša je mešana na 60 °C tokom 3 sata, zatim ugašena ledenom vodom (100.0 mL) i ekstrahovana sa DCM (10.0 mL x 3). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluent: DCM/MeOH = 10/1) da bi se dobio željeni proizvod (200.0 mg). LC-MS: m/z 373 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.57 (s, 1H), 7.24 (t, 1H), 6.88 - 6.82 (m, 3H), 5.32 (s, 2H), 4.24 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 2.82 (s, 3H).
[0330] Gore navedeni postupak je korišćen za proizvodnju sledećih jedinjenja korišćenjem odgovarajućih početnih materijala. Standardna zaštita i deprotekcija se mogu koristiti kada je potrebno.
12
1
Primer 4B. Sinteza 4-metil-2-(metiltio)-6-((2-okso-2,3-dihidropirimidin-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2 ,3-d]piridazin-5(6H)-ona
[0331]
[0332] Smeša 6-((2-hloropirimidin-4-il)metil)-4-metil-2-(metiltio)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (50 mg, 0.132 mmol) u HCl (10 mL) je mešana na 100°C tokom 1 sata, zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (5.0 mg, 10.51 % prinos). LCMS: m/z 361 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.82 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 6.14 (s, 1H), 5.22 (s, 2H), 4.24 (s, 3H), 2.82 (s, 4H).
[0333] Gore navedeni postupak je korišćen za proizvodnju sledećih jedinjenja korišćenjem odgovarajućih početnih materijala.
1 1
Primer 4C. Sinteza 6-(3-metoksibenzil)-4-metil-2-(metilsulfinil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona
[0334]
[0335] U rastvor 6-(3-metoksibenzil)-4-metil-2-(metiltio)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d] piridazin-5-ona (30.0 mg, 0.08 mmol) u DCM (3.0 mL) na 0°C je dodat m-CPBA (14.0 mg, 0.08 mmol). Dobijena smeša je mešana na 0 °C tokom 1 h, zatim ugašena ledenom vodom i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluent: DCM/MeOH = 10/1) da bi se dobio željeni proizvod (15.0 mg). LC-MS: m/z 389(M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.74 (s, 1H), 7.25 (t, 1H), 6.86 (dd, 3H), 5.35 (s, 2H), 4.30 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.11 (s, 3H).
[0336] Gore navedeni postupak je korišćen za proizvodnju sledećih jedinjenja korišćenjem odgovarajućih početnih materijala. Standardna zaštita i deprotekcija se mogu koristiti kada je potrebno.
1 2
1
14
Primer 4D. Sinteza 4-((4-metil-2-(metilsulfinil)-5-okso-4,5-dihidro-6H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin- 6-il)metil)benzamida
[0337]
1
[0338] Korak A: 4-((4-metil-2-(metiltio)-5-okso-4,5-dihidro-6H-tiazolo(5';4':4,5)pirolo[2,3-d]piridazin-6-il)metil)benzamid. Smeša 4-((4-metil-2-(metiltio)-5-okso-4,5-dihidro-6H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazina-6-il)metil)benzonitrila (50.0 mg, 0.13 mmol) u H2SO4(1.0 mL) je mešana na 0°C tokom 1 sata, zatim neutralisana zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluent: DCM/MeOH = 10/1) da bi se dobio željeni proizvod (20.0 mg). LC-MS: m/z 386 (M+H)<+>.
[0339] Korak B: 4-((4-metil-2-(metilsulfinil)-5-okso-4,5-dihidro-6H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6-il)metil)benzamid. U rastvor 4-((4-metil-2-(metiltio)-5-okso-4,5-dihidro-6H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazina-6-il)metil)benzamida (20.0 mg, 0.052 mmol) u DCM (2.0 mL) na 0 °C je dodat m-CPBA (10.0 mg, 0.052 mmol). Dobijena smeša je mešana na 0 °C tokom 1 sata, a zatim ugašena ledenom vodom (10.0 mL) i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu (eluent: DCM/MeOH = 10/1) da bi se dobio željeni proizvod (5.0 mg). LC-MS: m/z 402(M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.75 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.82 (d, 2H), 7.38-7.33 (m, 3H), 5.42 (s, 2H), 4.29 (s, 3H), 3.11 (s, 3H).
Primer 4E. Sinteza 6-(3-(2-hidroksipropan-2-il)benzil)-4-metil-2-(metilsulfinil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona
[0340]
[0341] Korak A. 6-(3-(2-Hidroksipropan-2-il)benzil)-4-metil-2-(metiltio)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U smešu 6-(3-acetilbenzil)-4-metil-2-(metiltio)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H) -ona (120 mg, 0.31 mmol) u suvom THF (5 mL) na 0 °C je dodat u kapima metilmagnezijum hlorid (0.3 mL, 0.9 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min, a zatim sipana u zasićeni vodeni rastvor NH4Cl i
1
ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je odvojen i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC da bi se dobio željeni proizvod (70 mg). LCMS: m/z 401 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.56 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.23 (t, 1H), 7.09 (d, 1H), 5.33 (s, 2H), 4.98 (s, 1H), 4.24 (s, 3H), 2.81 (s, 3H), 1.39 (s, 6H).
[0342] Korak B. 6-(3-(2-Hidroksipropan-2-il)benzil)-4-metil-2-(metilsulfinil)-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U smešu 6-(3-(2-hidroksipropan-2-il)benzil)-4-metil-2-(metiltio)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3 -d]piridazin-5(6H)-ona (46 mg, 0.115 mmol) u DCM (3 mL) na 0°C je dodat m-CPBA (20 mg, 0.1 mmol, 85 % tež./tež.). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min, a zatim ugašena zasićenim vodenim rastvorom Na2S2O3i ekstrahovana sa DCM. Organski sloj je odvojen i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (10 mg). LCMS: m/z 417 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.73 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.34 (d, 1H), 7.24 (t, 1H), 7.09 (d, 1H), 5.37 (s, 2H), 4.98 (s, 1H), 4.30 (s, 3H), 3.11 (s, 3II), 1.39 (s, 6II).
Primer 4F. Sinteza 6-((2-aminopiridin-4-il)metil)-4-metil-2-(metilsulfinil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazina -5(6H)-ona
[0343]
[0344] Korak A. 2-Bromo-4-(bromometil)piridin. Smeša 2-bromo-4-metilpiridina (1 g, 5.81 mmol), NBS (1.1 g, 6.39 mmol) i katalitičke količine AIBN (100 mg) u CCl4(10 mL) je mešana na 80°C preko noći. Dobijena smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluent: PE/EtOAc = 200/1) da bi se dobio željeni proizvod (500 mg).
[0345] Korak B. 6-((2-bromopiridin-4-il)metil)-4-metil-2-(metiltio)-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. Smeša 4-metil-2-(metiltio)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (100 mg, 0.40 mmol), i K2CO3(164 mg, 1.19
1
mmol) u DMF (8 mL) je mešano na 60°C tokom 2 sata, a zatim je dodat rastvor 2-bromo-4-(bromometil)piridina (199 mg, 0.80 mmol) u DMF (2 mL) i katalitičku količinu TBAB (13 mg). Smeša je mešana na 60°C preko noći, zatim ugašena vodom (20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu (eluent: PE/EtOAc = 10/1) da bi se dobio željeni proizvod (150 mg). LCMS: m/z 423 (M+H)<+>.
[0346] Korak C. Terc-butil (4-((4-metil-2-(metiltio)-5-okso-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6)(5H)-il)metil)piridin-2-il)karbamat. Smeša 6-((2-bromopiridin-4-il)metil)-4-metil-2-(metiltio)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d] piridazin-5(6H)-on (100 mg, 0.24 mmol), terc-butil karbamata (83 mg, 0.71 mmol), K3PO4(201 mg, 0.95 mmol), Pd2(dba)3(18 mg, 0.02 mmol) i Xanphos (11 mg, 0.02 mmol) u dioksanu (10 mL) su mešani na 100 °C pod azotom preko noći. Dobijena smeša je ugašena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluent: PE/EtOAc = 3/1) da bi se dobio željeni proizvod (100 mg). LCMS: m/z 459 (M+H)<+>.
[0347] Korak D-E: terc-butil (4-((4-metil-2-(metilsulfinil)-5-okso-4H-tiazolo[5',4':4,5] pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H))-il)metil)piridin-2-il)karbamat je sintetisan postupkom sličnom Primeru 4C i 6-((2-Aminopiridin-4-il)metil)-4-metil-2-(metilsulfinil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on je sintetisan postupkom sličnom Primeru 3G. LCMS: m/z 375 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.67 (s, 1H), 7.73 (d, 1H), 6.30 (d, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.89 (s, 2H), 5.24 - 5.03 (m, 2H), 4.29 (s, 3H), 3.03 (s, 3H).
[0348] Gore navedeni postupak je korišćen za proizvodnju sledećih jedinjenja korišćenjem odgovarajućih početnih materijala. Standardna zaštita i deprotekcija se mogu koristiti kada je potrebno.
1
Primer 4G. Sinteza 6-((2-aminotiazol-5-il)metil)-4-metil-2-(metilsulfinil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d] piridazin-5(6H)-on
[0349]
[0350] Korak A-B. 2-bromo-5-(bromometil)tiazol i 6-((2-bromotiazol-5-il)metil)-4-metil-2-
1
(metiltio)-4H-tiazolo [5',4':4,5] pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on su sintetisani slično Primeru 4F.
[0351] Korak C. 6-((2-((2,4-dimetoksibenzil)amino)tiazol-5-il)metil)-4-metil-2-(metiltio)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. Smeša 6-((2-bromotiazol-5-il)metil)-4-metil-2-(metiltio)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d] piridazin-5(6H)-ona (130 mg, 0.30 mmol) i DIPEA (0.1 mL) u NMP (0.1 mL) i (2,4-dimetoksifenil)metanamin (0.1 mL) su mešani na 150 °C tokom 4 sata. Zatim je vučna smeša ugašena vodom (10 mL), ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu (eluiran sa PE/EtOAc = 5/1) da bi se dobio željeni proizvod (60 mg, 38.4% prinos). LC-MS: m/z 515 (M+H)<+>.
[0352] Korak D. 6-((2-((2,4-dimetoksibenzil)amino)tiazol-5-il)metil)-4-metil-2-(metilsulfinil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U smešu 6-((2-((2,4-dimetoksibenzil)amino)tiazol-5-il)metil)-4-metil-2-(metiltio)-4H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (50 mg, 0.10 mmol) u THF (3 mL) na 0 °C dodat je okson (61 mg, 0.10 mmol). Smeša je mešana na 0 °C 1 sat, zatim ugašena zasićenim vodenim rastvorom Na2S2O3(5 mL) i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio željeni proizvod (30 mg, 50.1% prinos) koji je korišćen direktno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. LC-MS: m/z 531 (M+H)<+>.
[0353] Korak E. 6-((2-Aminotiazol-5-il)metil)-4-metil-2-(metilsulfinil)-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5 (6H)-on je sintetisan slično Primeru 3G. LC-MS: m/z 381 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.70 (s, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.87 (s, 2H), 5.28 (s, 2H), 4.29 (s, 3H), 3.11 (s, 3H).
[0354] Gore navedeni postupak je korišćen za proizvodnju sledećih jedinjenja korišćenjem odgovarajućih početnih materijala. Standardna zaštita i deprotekcija se mogu koristiti kada je potrebno.
14
Primer 4H. Sinteza 6-(3-metoksibenzil)-4-metil-2-(metilsulfonil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona
[0355]
[0356] U rastvor 6-(3-metoksibenzil)-4-metil-2-(metilsulfinil)-4,6-dihidro-SH-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d] piridazin-5-ona (30.0 mg, 0.08 mmol) u DCM (3.0 mL) na 0 °C je bio m-CPBA (35.0 mg, 0.2 mmol). Dobijena smeša je mešana na 0 °C tokom 1 h, zatim ugašena ledenom vodom i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluent: DCM/MeOH = 10/1) da bi se dobio željeni proizvod (10.0 mg, 32% prinos). LC-MS: m/z 405 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.78 (s, 1H), 7.24 (t, 1H), 6.92 - 6.82 (m, 3H), 5.35 (s, 2H), 4.33 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.57 (s, 3H).
Primer 5. Sinteza jedinjenja formule E5-ii i derivata sa šemom E5. Šema E5
[0357]
[0358] pri čemu je Q kao što je definisano u bilo kom od prvog do dvadeset šestog primera izvođenja pronalaska; Nu je nukleofil (tj. hemijska vrsta koja daju elektronski par elektrofilu da formira hemijsku vezu u odnosu na reakciju). Nu' je izborno supstituisani alkoksil, izborno supstituisani tiol, izborno supstituisani amino, ili izborno funkcionalizovani ugljenik nukleofili.
Primer 5A. Sinteza 6-((1H-indazol-4-il)metil)-2-(benziltio)-4-metil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2, 3-d]piridazin-5-ona
[0359]
[0360] Korak A. 2-(benziltio)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U rastvor fenilmetanetiola (91.21 mg, 734.32 µmol) u DCM (5 mL) na 0°C dodaju se DIPEA (142.3 mg, 1.10 mmol) i 4-metil-2-(metilsulfonil)-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (200 mg, 0.37 mmol). Smeša je mešana na 20°C 1 h, zatim ugašen vodom i ekstrahovan sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu (eluent: PE/EtOAc = 5/1 do 3/1) da bi se dobio željeni proizvod (200 mg). LCMS: m/z 589 (M+H)<+>
[0361] Korak B. 6-((1H-indazol-4-il)metil)-2-(benziltio)-4-metil-4,6-dihidro-5H-tiazolo [5';4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-on. Smeša 2-(benziltio)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo [5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (30 mg, 50.95 µmol) u DCM/TFA (V:V = 3:1) je mešana na 20°C tokom 2 h, zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (5 mg). LCMS: m/z 459 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.11 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.49 (d, 2H), 7.45 (d, 1H), 7.34 (t, 2H), 7.28 (dd, 2H), 6.95 (d, 1H), 5.65 (s, 2H), 4.62 (s, 2H), 4.26 (s, 3H).
Primer 5B. Sinteza 6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-
14
tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3 -d]piridazin-2-sulfonamida
[0362]
[0363] Korak A. 4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-sulfonamid. U rastvor 2-(benziltio)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (100 mg, 0.169 mmol) u HOAc/H2O (V:V= 1:1, 10 mL) je dodat NCS (45 mg, 0.34 mmol). Smeša je mešana na 40 °C tokom 3 sata, zatim ohlađena na 0 °C, nakon čega sledi sporo dodavanje NH3/THF (5 mL) do pH 9 na toj temperaturi. Dobijena smeša je mešana na 20°C tokom 0.5 h, zatim ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC (eluent: PE/EtOAc = 1/1) da bi se dobio željeni proizvod (20 mg). LCMS: m/z 546 (M+H)<+>.
[0364] Korak B. 6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-sulfonamid. Smeša 4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-sulfonamida (20 mg, 36.65 µmol) u DCM/TFA (V/V=3/1) je mešana na 20 °C tokom 2 h, zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (1.7 mg). LCMS: m/z 416 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.13 (s, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.31 (brs, 2H), 8.17 (s, 1H), 7.47 (d, 1H), 7.36 - 7.20 (m, 1H), 6.99 (d, 1H), 5.68 (s, 2H), 4.30 (s, 3H).
14
Primer 5C. Sinteza dimetil 2-(6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)malonata
[0365]
[0366] Korak A. Dimetil 2-(4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il) malonat. U smešu BuOK (103 mg, 0.92 mmol) i dimetil malonata (91 mg, 0.69 mmol) u THF (5 mL) pod N2dodat je 4-metil-2-(metilsulfonil)-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-on (250 mg, 0.46 mmol). Reakciona smeša je mešana na 60 °C tokom 16 h, zatim sipana u ledenu vodu i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog
14
Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela da bi se dobio željeni proizvod (100 mg, prinos 36.48%). LC-MS: m/z 597 (M+H)<+>.
[0367] Korak B. 2-(6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo [5',4':4,5] pirolo[2, 3-d]piridazin-2-il)malonat je sintetisan slično Primeru 5A. LC-MS: m/z 467 (M+H)<+>.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.12 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.30-7.26 (m, 1H), 6.96 (d, 1H), 5.84 (s, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.27 (s, 3H), 3.77 (s, 6H).
[0368] Primer 5D. Sinteza metil 2-(6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)acetata
[0369] Korak A. Metil 2-(4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)acetat. U rastvor dimetil 2-(4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil) etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)malonata (130 mg, 0.22 mmol) u DMSO (2 mL) pod N2je dodat zasićeni vodeni rastvor LiCl (0.1 mL). Dobijena smeša je mešana na 130 °C tokom 10 min, zatim sipana u ledenu vodu i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Zatim je ostatak prečišćen hromatografijom na koloni silika gela da bi se dobio željeni proizvod (100 mg). LC-MS: m/z 539 (M+H)<+>.
[0370] Korak B. Metil 2-(6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2 ,3-d]piridazin-2-il)acetat je sintetisan kao u Primeru 5A. LC-MS: m/z 409 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.12 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.30-7.26 (m, 1H), 6.96 (d, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.39 (s, 2H), 4.27 (s, 3H), 3.70 (s, 3H).
Primer 5E. Sinteza 2-(6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)acetamida
[0371]
[0372] Korak A. 2-(4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il) metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)sirćetna kiselina. U smešu metil 2-(4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-
14
tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)acetata (100 mg, 0.186 mmol) u MeOH/H2O (3 mL/1 mL) na 0 °C pod N2je dodat LiOH (23 mg, 0.558 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h, zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je zakišeljen sa vodenim rastvorom HCl (1 M) i ekstrahovan sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je direktno korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. LC-MS: m/z 525 (M+H)<+>.
[0373] Korak B. 2-(4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5’,4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)acetamid. U smešu 2-(4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)sirćetne kiseline (50 mg, 0.095 mmol), EDCI (37 mg, 0.190 mmol), HOBT (26 mg, 0.190 mmol) i DIPEA (0.05 mL, 0.286 mmol) u DCM (5 mL) na 0 °C je dodat NH4Cl (26 mg, 0.477 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h, zatim sipana u ledenu vodu i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu da bi se dobio željeni proizvod (20 mg). LC-MS: m/z 524 (M+H)<+>.
[0374] Korak C. 2-(6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2, 3-d]piridazin-2-il)acetamid je sintetisan postupkom kao u Primeru 5A. LCMS: m/z 394 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.12 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.33-7.22 (m, 2H), 6.96 (d, 1H), 5.66 (s, 2H), 4.27 (s, 3H), 4.07 (s, 2H).
Primer 5F. Sinteza 6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3 -d]piridazin-2-karboksamida
[0375]
[0376] Korak A.4-metil-2-(metiltio)-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U smešu 4-metil-2-(metiltio)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5 (6H)-ona (1 g, 3.96 mmol) u DMF (25 mL) na 0°C dodat je NaH (318 mg, 7.93 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min,
14
nakon čega sledi dodavanje rastvora 4-(bromometil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazola (2 g, 5.94 mmol) u DMF (10 mL) na 0°C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h, zatim sipana u ledenu vodu i ekstrahuje sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu (eluent: PE/EtOAc = 50/1 do 10/1) da bi se dobio željeni proizvod (1,85 g). LCMS: m/z 513 (M+H)<+>. Korak B. 4-metil-2-(metilsulfonil)-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on.
[0377] U smešu 4-metil-2-(metiltio)-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi) metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5', 4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (700 mg, 1.37 mmol) u DCM (20 mL) na 0°C je dodat m-CPBA (831 mg, 4.01 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, zatim ugašena zasićenim vodenim rastvorom Na2SO3i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu da bi se dobio željeni proizvod (360 mg). LCMS: m/z 545 (M+H)<+>.
[0378] Korak C. 4-metil-5-okso-6 ((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H indazol-4-il) metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5’,4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karbonitril. U smešu 4-metil-2-(metilsulfonil)-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5', 4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (300 mg, 0.552 mmol) u DMF (10 mL) na 0°C je dodat KCN (72 mg, 1.10 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h, zatim ugašena vodom i ekstrahovan sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluent: PE/EtOAc = 5/1) da bi se dobio željeni proizvod (210 mg). LCMS: m/z 492 (M+H)<+>.
[0379] Korak D. 6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karboksamid. Smeša 4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karbonitrila (50 mg, 0.1 mmol) u konc. H2SO4(3 mL) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 h, zatim ugašena zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (6 mg). LCMS: m/z 380 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 13.12 (s, 1H), 8.71 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.46 (d, 1H), 7.33 - 7.23 (m, 1H), 6.98 (d, 1H), 5.68 (s, 2H), 4.33 (s, 3H).
14
[0380] Gore navedeni postupak je korišćen za proizvodnju sledećih jedinjenja korišćenjem odgovarajućih početnih materijala. Standardna zaštita i deprotekcija se mogu koristiti kada je potrebno.
Primer 5G. Sinteza 6-((1H-indazol-4-il)metil)-N-hidroksi-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karboksamida
[0381]
[0382] Korak A. Metil 4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karboksilat. U smešu 4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo
1
[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karbonitrila (100 mg, 0.20 mmol) u MeOH (10 mL) na 0 °C je dodat MeONa (110 mg, 0.61 mmol, 30% tež.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h, zatim ugašena zasićenom HCl (1 M) i ekstrahovana sa DCM (30 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio željeni proizvod (85 mg) kao žuto ulje koje je direktno korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. LCMS: m/z 525 (M+H)<+>.
[0383] Korak B. 4-metil-5-okso-6((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5 ',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karboksilna kiselina. U smešu metil 4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi) metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karboksilata (90 mg, 0.18 mmol) u THF (10 mL) na 0 °C je dodat rastvor LiOH (12 mg, 0.48 mmol) u H2O (10 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, zatim polako podešena na pH 5 sa vodenim rastvorom HCl (1 M) i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio željeni proizvod (70 mg, 84 % sirovog prinosa) kao belo ulje koje je direktno korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. LCMS: m/z 511 (M+H)<+>.
[0384] Korak C. 4-metil-5-okso-N((tetrahidro-2H-piran-2-il)oksi)-6-((1-((2-(trimetil silil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karboksamid. U smešu 4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karboksilne kiseline (70 mg, 0.14 mmol) u DCM (10 mL) na 0 °C je dodat O-(tetrahidro-2H -piran-2-il)hidroksilamin (24 mg, 0.21 mmol), EDCI (39 mg, 0.21 mmol) i HOBT (28 mg, 0.21 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, zatim ugašena vodom i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC da bi se dobio željeni proizvod (35 mg) kao žuto ulje. LCMS: m/z 610 (M+H)<+>.
[0385] Korak D. 6-((1H-indazol-4-il)metil)-N-hidroksi-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2 ,3-d]piridazin-2-karboksamid je sintetisan korišćenjem postupka iz Primera 5A. LCMS: m/z 396 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.12 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.46 (d, 1H), 7.31 - 7.25 (m, 1H), 6.97 (d, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.31 (s, 3H).
Primer 5H. Sinteza 2-(6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2 ,3-d]piridazin-2-il)-2-fenilacetamida
1 1
[0386]
[0387] Korak A. 2-(4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il) metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4'-4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)-2-fenilacetonitril. U smešu 2-fenilacetonitrila (43 mg, 0.36 mmol) u THF (3 mL) dodat je NaH (14 mg, 0.36 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min, nakon čega sledi dodavanje 4-metil-2-(metilsulfonil)-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-on (100 mg, 0.18 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi još 3 h, zatim ugašena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu (eluent: PE/EtOAc = 3/1) da bi se dobio proizvod (63 mg, 59 % prinos). LCMS: 582 (M+H)<+>.
[0388] Korak B. 2-(6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)-2-fenilacetamid je sintetisan slično Primeru 5F. LCMS: m/z 470 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.11 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.13 (s, 1H) 8.01 (s, 1H),7.54-7.24 (m, 8H), 6.94 (d, 1H), 5.65 (s, 2H), 5.51 (s, 1H), 4.24 (s, 3H).
1 2
Primer 51. Sinteza 2-(6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)-2-hidroksi-2-fenilacetamida
[0389]
[0390] Smeša 2-(4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)-2-fenilacetonitrila (100 mg, 0.18 mmol) u konc. H2SO4(1 mL) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h, zatim sipana u vodu i ekstrahuje sa DCM. Kombinovani organski slojevi su koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u MeOH (3 mL), a zatim je dodat NH3.H2O (3 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h, zatim pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (2 mg). LCMS: 486 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.12 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.14 (s, 1H),7.71 (d, 2H), 7.64 (d, 2H),7.52 (s, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.40-7.24 (m, 4H), 6.95 (d, 1H), 5.66 (s, 2H) 4.27 (s, 3H).
Primer SJ. Sinteza metil 2-(6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)-2-fenilacetata
[0391]
[0392] Korak A. Metil 2-(4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H) - indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5'.4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)-2-fenilacetat. U smešu metil 2-fenilacetata (43 mg, 0.29 mmol) u THF (3 mL) dodat je NaH (11 mg, 0.29 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi. tokom 30 minuta, nakon čega sledi dodavanje 4-metil-2-(metilsulfonil)-6-((1-((2-(trimetilsilil) etoksi) metil)-1H-indazo1-4-il)metil)-4,6 -dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona (82 mg, 0.15 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h, zatim ugašena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom
1
na koloni na silika gelu (eluent: PE/EtOAc = 3/1) da bi se dobio željeni proizvod (20 mg). LCMS: 615 (M+H)<+>.
[0393] Korak B. Metil 2-(6-((1 Hindazol-4-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5'4':4,5]pirolo[2 ,3-d]piridazin-2-il)-2-fenilacetat. Smeša metil 2-(4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)-2-fenilacetata (40 mg, 0.07 mmol) u DCM/TFA (V:V = 1: 1.2 mL) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h, zatim sipana u vodu i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (5 mg). LCMS: 485 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.11 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.13 (s, 1H) 7.54-7.50 (m, 2H), 7.46-7.36 (m, 4H), 7.30-7.24 (m, 1H), 6.94 (d, 1H), 5.87 (s, 1H),5.65 (s, 2H), 4.26 (s, 3H), 3.73 (s, 3H).
[0394] Gore navedeni postupak je korišćen za proizvodnju sledećih jedinjenja korišćenjem odgovarajućih početnih materijala.
Primer 6. Sinteza 6-(3-metoksibenzil)-4-metil-2-(trifluorometil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin- 5-ona
[0395]
1 4
[0396] U mešanu smešu 2-jodo-6-(3-metoksibenzil)-4-metil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazina -5-ona (90 mg, 0.2 mmol) i CuI (kat.) u DMF (5 mL) je dodat metil 2,2-difluoro-2-(fluorosulfonil)acetat (58 mg, 0.3 mmol). Reakciona smeša je mešana na 70 °C tokom 4 h, zatim sipana u vodu i ekstrahuje sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu (eluent: PE/EtOAc = 5/1) da bi se dobio željeni proizvod (10 mg). LCMS: m/z= 395 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.78 (s, 1H), 7.24 (t, 1H), 6.90-6.82 (m, 3H), 5.34 (s, 2H), 4.32 (s, 3H) 3.72 (s, 3H).
Primer 7. Sinteza jedinjenja E7-v i E7-viii
[0397]
[0398] Nukleofilna aromatična supstitucija između jedinjenja E7-iii i jedinjenja E7-i i/ili jedinjenja E7-ii daje intermedijer E7-iv. Redukcija fenilsulfonil grupe jedinjenja E7-iv daje intermedijer E7-v. Korišćenjem standardne reakcije alkilacije E7-vi i baze (npr. K2CO3, K3PO4, t-BuOK ili Cs2CO3) dobija se jedinjenje E7-viii, gde X<a>je odlazeća grupa kao što su Cl, Br, I, OMs, OTs; Ar1i Ar2su svaki nezavisno izborno supstituisane aril, izborno supstituisane heteroaril, izborno supstituisane karbocikl ili izborno supstituisane heterociklil; izborno supstituisane alkil, izborno supstituisane alkilaril, izborno supstituisane alkilheteroaril, izborno supstituisane alkienil i izborno supstituisane alkinil grupe. Jedinjenje E7-viii se takođe može sintetisati iz intermedijera E7-v kroz Mitsunobu reakciju korišćenjem cijanometilentributilfosforana (CMBP) u toluenu. U određenim primerima izvođenja, Ar1 i Ar2 su svaki nezavisno izborno supstituisani heteroaril.
Primer 7A. Sinteza 4-metil-2-(metilsulfinil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona (intermedijeri E7-i )
1
[0399]
[0400] U mešanu suspenziju 4-metil-2-(metiltio)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona (1.01 g, 4.0 mmol) u DCM (20 mL) dodata je 3-hloro-benzperoksoična kiselina (0.77 g, 3.8 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2h. Zatim je smeša filtrirana, isprana sa EtOAc i triturisana sa MeOH da bi se dobio 4-metil-2-(metilsulfinil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3 -d]piridazin-5-on (600 mg). LCMS: m/z 269 (M+H)<+>. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.78(s, 1H), 8.64 (s, 1H), 4.28 (s, 3H), 3.11 (s, 3H).
Primer 7B. Sinteza 4-metil-2-(metilsulfonil)-4,6-dihidro-SH-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona (E7-ii)
[0401]
[0402] U balon sa tri grlića napunjen 4-metil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-onom (30 g, 0.119 mol, 1.0 ekv.) u DCM (600 mL) dodat je m-CPBA (61.5 g, 3 ekv.) na 20 °C u tri porcije. Smeša je mešana na 30 °C preko noći, LC-MS je pokazala 100 % potrošnju početnog materijala. Smeša je ohlađena do sobne temperature, dodata je još jedna porcija m-CPBA (1.0 ekv.). Reakciona smeša je mešana na 30 °C tokom 2 sata, LC-MS je pokazao E7-ii (LCMS: m/z 269 (M+H)<+>). Smeša je ohlađena do sobne temperature i filtrirana. Filter kolač je suspendovan u MeOH (500 mL) i mešan na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom, isprana etilacetatom, osušena u vakuumu da bi se dobilo 28 g smeše od 5% E7-i i 95% E7-ii. Smeša (28 g) je suspendovana u DMSO (600 mL), zagrejana na 120°C - 130°C da bi se formirao bistar rastvor. Zatim je ohlađen do sobne temperature, istaložena je čvrsta supstanca. Smeša je filtrirana i osušena da bi se dobilo 23 g čistog E5-1, LCMS: m/z 285 (M+H)<+>.1H NMR (400 MHz, DMSO) δ12.87 (s, 1H), 8.69 (s, 1H), 4.32 (s, 3H), 3.56 (s, 3H).
1
Primer 7C. Sinteza 3-((fenilsulfonil)metil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazola
[0403]
[0404] Metil 1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-karboksilat Na 0°C pod atmosferom N2, u mešani rastvor metil 1H-pirazol-3-karboksilata (90 g, 0.72 mol) u THF (1 L) je dodat NaH (20.7 g, 0.864 mol, 60 %). Dobijena smeša je polako zagrejana do sobne temperature i mešana 1 h. Reakciona smeša je zatim ohlađena nazad do 0°C i u kapima je dodat SEMCl (151.5 mL, 0.842 mol). Mešanje je nastavljeno još 2 sata pre nego što je ugašeno sa zas. NH4Cl i ekstrahovan etil acetatom (3 x). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko Na2SO4. Rastvarači su uklonjeni pod vakuumom da bi se dobio sirovi proizvod od 210 g koji je korišćen u sledećem koraku bez prečišćavanja.
[0405] (1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metanol Na 0 °C pod atmosferom N2, u suspenziju LAH (16.9 g, 0.44 mol) u THF (760 mL) dodat je sirovi metil 1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-karboksilat (76 g). Dobijena smeša je polako zagrejana do sobne temperature i mešana 1 sat. Reakciona smeša je ponovo ohlađena do 0°C i uzastopno su dodavani H2O (15.6 mL), 10 % NaOH (15.6 mL), H2O (15.6 mL). Dobijena smeša je filtrirana kroz jastučić celita i isprana sa MTBE (4 x). Kombinovane organske frakcije su osušene preko Na2SO4. Rastvarači su uklonjeni pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod 69.4 g koji je korišćen u sledećem koraku bez prečišćavanja. LC-MS: m/z 229 (M+H)<+>.
[0406] 3-(jodometil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol Na 0 °C pod atmosferom N2, u mešani rastvor (1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metanola (61.5 g, teoretski 0.262 mol) u THF (310 mL) je dodat TEA (55.42 mL, 0.393 mol), a zatim MsCl (24 mL, 0.314 mol). Reakcija je zagrejana do sobne temperature i mešana 1 sat pre uvođenja NaI (196.5 g, 1.31 mol, u 310 mL DMF). Dobijena smeša je mešana još 1 sat i ugašena sa ledenom vodom, ekstrahovana sa MTBE (3 x). Kombinovani organski slojevi su isprani sa zas. Na2S2O3i fiziološkim rastvorom, osušeni preko Na2SO4i koncentrovani da bi se dobilo 77.5 g sirovog proizvoda koji se koristi u sledećem koraku bez prečišćavanja. LC-MS: m/z 339 (M+H)<+>.
[0407] 3-((fenilsulfonil)metil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol Na 0 °C pod atmosferom N2, u mešani rastvor (1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metanola (77.5 g, teoretski 0.229 mol) u DMF (600 mL) dodat je natrijum benzensulfinat (53.5 g, 0.32 mol) i mešan 1 sat na 0°C. Nakon zagrevanja do sobne temperature, reakciona smeša je ugašena
1
sa ledenom vodom i zas. Na2S2O3, ekstrahovana etil acetatom (3 x). Kombinovani organski slojevi su isprani sa zas. NaHCO3i fiziološkim rastvorom uzastopno, osušeni preko Na2SO4. Rastvarači su uklonjeni pod vakuumom, a ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 20 % ~ 70 % etil acetata u petrol etru) da bi se dobilo 56.7 g. LCMS: [M H]<+>353. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 7.85-7.77 (m, 4H), 7.62 (dd, 2H), 6.19 (d, 1H), 5.35 (d, 2H), 4.70 (d, 2H), 3.44-3.38 (m, 2H), 0.88-0.77 (m, 2H), -0.01 (s, 9H).
Primer 7D. Sinteza 4-metil-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4' :4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona
[0408]
[0409] 4-metil-2-((fenilsulfonil)(1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-5-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5] pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U rastvor 3-((fenilsulfonil)metil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazola (1.8 g, 5.1 mmol) u suvom THF (30 mL) na -40 °C dodat je LiHMDS (7.5 mL, 7.5 mmol) u kapima. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 min, a zatim je dodata suspenzija 4-metil-2-(metilsulfinil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d] piridazin-5(6H)-ona (580 mg, 2.7 mmol) u suvom THF (30 mL) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi još 1 sat i sipana u ledom ohlađen zasićeni vodeni rastvor NH4Cl (20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (60 mL), osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0 - 2.5 % metanol u dihlorometanu) da bi se dobio željeni proizvod (800 mg). LC-MS (ESI) pronađeno: 557 (M+H)<+>.1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.78 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.84-7.78 (m, 3H), 7.67-7.59 (m, 2H), 6.94 (s, 1H), 6.72 (d, 1H), 5.48 (d, 2H), 4.29 (s, 3H), 3.56 (dd, 2H), 0.88 (dd, 2H), 0.00 (s, 9H).
[0410] 4-metil-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-5-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2 ,3-d]piridazin-5(6H)-on. U smešu 4-metil-2-((fenilsulfonil)(1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-5-il)metil)-4H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (0.8 g, 1.41 mmol) u THF (5 mL) i MeOH (10 mL) pod N2je dodat u kapima SmI2(0.1 M/THF, 45 mL) u ledenom kupatilu. Posle mešanja tokom 10 minuta, reakcija je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (50 mL) i ekstrahovana sa EAOAc (50 mL x 3).
1
Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (60 mL), osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0 -3 % metanol u dihlorometanu) da bi se dobio željeni proizvod (310 mg). LC-MS) nađeno: 417 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.31 (s, 1H), 7.60 (d, 1H), 6.39 (d, 1H), 5.49 (s, 2H), 4.58 (s, 2H), 4.43 (s, 3H), 3.62 (t, 2H), 0.95 (t, 2H), 0.0 (s, 9H).
Primer 7E. Sinteza 2-((1H-pirazol-3-il)metil)-6-((1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5’,4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona
[0411]
[0412] Korak A. metil 1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-karboksilat. U rastvor metil 1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-karboksilata (900 mg, 5.1 mmol) u suvom DMF (10 mL) dodat je NaH (305 mg, 7.6 mmol, 60 %) na 0° C u porcijama. Suspenzija je mešana 15 min u ledenom kupatilu pre uvođenja u kapima (2-(hlorometoksi)etil)trimetilsilana (1.07 mL, 6.0 mmol) i mešana još 1 h na sobnoj temperaturi. Zatim je smeša sipana u zas. NH4Cl (vodeni), ekstrahovana etil acetatom. Kombinovani organski slojevi su osušeni sa anhidrovanim Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0 - 30 % etil acetat u petrol etru) da bi se dobio metil 1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-karboksilat (1.32 g). LCMS: m/z 308 (M+H)<+>.
[0413] Korak B. (1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)metanol. U rastvor metil 1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-karboksilata (1 g, 3.2 mmol) u suvom THF (10 mL) je dodat LiHAl4(146 mg, 3.8 mmol) u porcijama pod ledenim kupatilom. Smeša je mešana 30 min na 0 °C. Zatim je suspenzija sipana u zas. NH4Cl (vodeni), ekstrahovana etil acetatom (2x). Kombinovani organski slojevi su osušeni sa anhidrovanim Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0 - 60 % etil acetat u petrol etru) da bi se dobio (1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazolo[4,3-c]piridin- 4-il)metanol (500 mg). LCMS: m/z 280 (M+H)<+>.
[0414] Korak C. 4-(hlorometil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazolo[4,3-c]piridin U rastvor (1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)metanola (120 mg, 0.43 mmol) u dihlorometanu (2 mL) je dodat PPh3(225 mg, 0.86 mmol). Smeša je ohlađena do 0 °C i dodat je NCS (114 mg, 0.86 mmol). Suspenzija je zagrejana do sobne temperature i mešana još 1
1
h. Zatim je reakcija sipana u zas. NaHCO3(vodeni). Vodeni sloj je ekstrahovan dihlorometanom. Kombinovani organski slojevi su osušeni sa anhidrovanim Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0 - 30 % etil acetat u petrol etru) da bi se dobio 4-(hlorometil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazolo[4,3-c]piridin (70 mg) kao ulje. LCMS: m/z 298 (M+H)<+>.
[0415] Korak D. 4-metil-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi))metil)-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U smešu K2CO3(41 mg, 0.3 mmol) u anhidrovanom DMF (2 mL) dodat je 4-metil-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (41 mg, 0.1 mmol) i mešana je na 50 °C 30 min pod argonom. Dodat je rastvor 4-(hlorometil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazolo[4,3-c]piridina (30 mg, 0.1 mmol) u DMF (1 mL) i mešan još 4 sata. Suspenzija je ohlađena do sobne temperature i sipana u 0.5 N HCl (vodeni). Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom. Kombinovani organski slojevi su osušeni sa anhidrovanim Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen pomoću pre-TLC da bi se dobio 4-metil-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3- d]piridazin-5(6H)-on (40 mg, 60 %). LCMS: m/z 678 (M+H)<+>.
[0416] Korak E. 2-((1H-pirazol-3-il)metil)-6-((1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. Rastvor 4-metil-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)metil)-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (30 mg, 0.044 mmol) u 35% TFA (1 mL, u dihlorometanu) je mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je koncentrovana i ostatak je prečišćen pre-HPLC da bi se dobio 2-((1H-pirazol-3-il)metil)-6-((1H-pirazolo[4,3-c]piridin-4-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (3 mg). LCMS: m/z 418 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.51 (s, 1H), 12.78 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.18 (d, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.43 (d, 1H), 6.27 (d, 1H), 5.78 (s, 2H), 4.51 (s, 2H), 4.25 (s, 3H).
Primer 7F. Sinteza 6-((1H-imidazol-2-il)metil)-2-((1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5] pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona
[0417]
1
[0418] Korak A. 1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-imidazol-2-karbaldehid: Uzorak NaH je ispran heksanom (2 x 10 mL) pod N2. Balon je napunjen suvim DMF (20 mL) i dodat je 1H-imidazol-2-karbaldehid (500 mg, 5.2 mmol) u malim porcijama. Posle mešanja na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h, u kapima je dodat SEMCl (864 mg, 5.2 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 min. Reakciona smeša je sipana u vodu, ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen preko Na2SO4, koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi 1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-imidazol-2-karbaldehid (800 mg). LCMS: 227 (M+H)<+>.
[0419] Korak B. (1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-imidazol-2-il)metanol: U mešanu smešu 1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-imidazol-2-karbaldehida (1.6 g, 7 mmol) u THF (20 mL) dodat je NaBH4(1.34 g, 35 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 min. Reakciona smeša je sipana u vodeni rastvor NH4Cl i ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen preko Na2SO4, koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi (1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-imidazol-2-il)metanol (1.3g).
[0420] Korak C. 2-(hlorometil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-imidazol: U mešanu smešu (1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-imidazol-2-il)metanola (400 mg, 1.75 mmol) u DCM (20 mL) dodat je NCS (466 mg, 3.5 mmol) i PPh3(920 mg, 3.5 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Reakciona smeša je sipana u vodu i ekstrahovana sa DCM. Smeša je isprana vodom i organski sloj je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću Pre-TLC (PE: EtOAc=1:1) da bi se dobio 2-(hlorometil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-imidazol. LCMS: 247 (M+H)<+>. U mešanu smešu 4-metil-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (50 mg, 0.12 mmol) u suvom DMF (5 mL) je dodat K2CO3(66 mg, 0.48 mmol) na 60°C pod N2. Posle 20 min, jedinjenje E7-3 (60 mg, 0.24 mmol), u suvom DMF (2 mL) je dodato na 60 °C pod N2. Smeša je mešana na 60 °C tokom 1.5 h pod N2. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i podešena na pH= 5-6 sa 0.5N vodenim rastvorom HCl. Zatim je smeša ekstrahovana sa EtOAc, isprana vodom i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je osušen preko Na2SO4, koncentrovana pod sniženim pritiskom i prečišćena pomoću Prep-TLC (PE: EtOAc=1:1,5) da bi se dobio 4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-imidazol-2-il)metil)-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]
1 1
pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (25 mg). LCMS: 627 (M+H)<+>. Smeša 4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-imidazol-2-il)metil)-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi))metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (25 mg, 0,04 mmol) u DCM/TFA (2 mL/2 mL) je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je prečišćen prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (1.3 mg). LCMS: 367 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.51 (s, 1H), 7.66 (d, 1H), 6.9 (s, 2H), 6.27 (d, 1H), 5.34 (s, 2H), 4.51 (s, 2H), 4.27 (s, 3H).
[0421] Sledeća jedinjenja su sintetisana prema Šemi E7 i postupku iz Primera 7C-7E korišćenjem odgovarajućeg početnog materijala.
1 2
1
14
1
1
1
1
1
1
11
12
1
14
1
1
1
1
1
1
11
12
1
14
1
1
1
1
1
1
11
12
1
14
1
1
1
1
1
2
21
22
2
24
Primer 7F. Sinteza 2-((1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-6-(2-(tiazol-4-il)etil)-4H-tiazolo[5',4':4,5] pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona
[0422]
[0423] Korak A. Sinteza etil 2-(tiazol-4-il)acetata U rastvor etil 2-(2-aminotiazol-4-il)acetata (2 g, 10.7 mmol) u THF (30 mL) dodat je t-BuONO (1.6 g, 16.1 mmol). Reakciona smeša je mešana na 50 °C tokom 16 sati. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je
2
razblažena sa EtOAc, isprana vodom i fiziološkim rastvorom, osušena preko anhidrovanog Na2SO4, koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 80-100% EtOAc u PE) da bi se dobio etil 2-(tiazol-4-il)acetat (400 mg). LC-MS (ESI): m/z 172 (M+1)<+>.
[0424] Korak B. Sinteza 2-(tiazol-4-il) etanola U mešani rastvor etil 2-(tiazol-4-il)acetata (400 mg, 2.3 mmol) u DCM (20 mL) dodat je DIBAL-H (4.7 mL, 7.0 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod N2tokom 3 sata. Reakcija je ugašena zas. NaHCO3, ekstrahovana sa DCM i organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen preko anhidrovanog Na2SO4, koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 50-100% EtOAc u PE) da bi se dobio 2-(tiazol-4-il) etanol (200 mg). LC-MS (ESI): m/z 130 (M+1)<+>.
[0425] Korak C. Sinteza 4-metil-6-(2-(tiazol-4-il)etil)-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il) metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on U smešu 4-metil-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (60 mg, 0.14 mmol) i 2-(tiazol-4-il) etanola (55 mg, 0.4 mmol) u toluenu (5 mL) dodat je CMBP (104 mg, 0.4 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C pod N2tokom 3 sata. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc, isprana vodom i fiziološkim rastvorom, osušena preko anhidrovanog Na2SO4, koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 80-100% EtOAc u PE) da bi se dobilo 60 mg 4-metil-6-(2-(tiazol-4-il)etil)-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. LC-MS: m/z 528 (M+1)<+>.
[0426] Korak D. Sinteza 2-((1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-6-(2-(tiazol-4-il)etil)-4H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona U rastvor 4-metil-6-(2-(tiazol-4-il)etil)-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (60 mg, 0.1 mmol) u DCM (1 mL) je dodat TFA (0.5 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata. Reakcionoj smeši je podešen pH = 7.5 sa zasićenim NaHCO3, ekstrahovana je sa DCM, isprana fiziološkim rastvorom, osušena preko anhidrovanog Na2SO4, koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC (10% MeOH u DCM) da bi se dobilo 10 mg 2-((1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-6-(2-(tiazol-4-il) )etil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. LC-MS: m/z 398 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.03 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.58 - 4.40 (m, 4H), 4.26 (s, 3H), 3.23 (t, 2H).
2
Primer 8. Sinteza jedinjenja E8-v, E8-vi i E8-viii [0427]
2
[0428] Jedinjenje E8-i se može konvertovati u intermedijer E8-ii ili akilacijom ili Mitsunobu reakcijom kao u primeru E7-v do E7-viii. Oksidacija E8-ii sa mCPBA ili oksonom stvara jedinjenja E8-v i E8-vi. Oba jedinjenja E8-v i E8-vi takođe mogu da se formiraju od E8-i oksidacijom nakon koje prvo sledi alkilacija ili Mitsumobu reakcija. Pri čemu X<a>je odlazeća grupa (npr. Cl, Br, I, OMs, OTs); Jedinjenja E8-v i E8-vi mogu se konvertovati u intermedijer E8-viii kroz reakciju nukleofilne aromatične supstitucije sa jedinjenjem E8-vii, koristeći LiHMDS ili t-BuOK kao bazu. Jedinjenje E8-xi se može sintetisati iz jedinjenja E8-viii koristeći SmI2 ili Zn u AcOH ili TES sa AlCl3. Kako se ovde koristi, R1 je izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani aril, izborno supstituisani heteroaril, izborno supstituisani karbocikl ili izborno supstituisani heterociklil; Ar1 i Ar2 su svaki nezavisno izborno supstituisani aril, izborno supstituisani heteroaril, izborno supstituisani karbocikl ili izborno supstituisani heterociklil; izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani alkilaril, izborno supstituisani alkilheteroaril, izborno supstituisani alkienil i izborno supstituisani alkinil. U određenim primerima izvođenja, R1 je izborno supstituisani C1-6 alkil (npr. metil ili etil). U određenim primerima izvođenja, R1 je C1-6 alkil; i Ar1 i Ar2 su svaki nezavisno izborno supstituisani heteroaril.
Primer 8A. Sinteza 6-((1H-indazol-4-il)metil)-2-((5-hloro-1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-4H-
2
tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona
[0429]
[0430] Etil 5-hloro-1-tritil-1H-pirazol-3-karboksilat: U mešanu smešu etil 5-hloro-1H-pirazol-3-karboksilata (100 mg, 0.575 mmol) i TEA (0.24 mL, 1.44 mmol) u suvom DCM (10 mL) dodat je TrtCl (192 mg, 0.689 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h, i zatim sipana u H2O. Dobijena smeša je ekstrahovana sa DCM. Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom (30 mL), osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0-4 % etil acetat u petrol etru) da bi se dobio željeni proizvod (sirov, 240 mg, 100 %).
[0431] (5-hloro-1-tritil-1H-pirazol-3-il)metanol: U mešanu smešu etil 5-hloro-1-tritil-1H-pirazol-3-karboksilata (1.20 g, 2.88 mmol) u suvom THF (10 mL) dodat je LAH (400 mg, 10.5 mmol) na -30°C. Reakciona smeša je mešana na -30 °C tokom 0.5 h. Na2SO410H2O (2 g) je dodat polako da se reakcija ugasi. Dobijena smeša je razblažena sa EtOAc i filtrirana kroz sloj celita. Filtrat je koncentrovan i ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 10 % - 15 % etil acetat u petroletru) da bi se dobio željeni proizvod (540 mg).
[0432] (5-hloro-1-tritil-1H-pirazol-3-il)metil metansulfonat: U mešanu smešu (5-hloro-1-tritil-1H-pirazol-3-il)metanola (100 mg, 0.267 mmol) i DIPEA (0.14 mL, 0.801 mmol) u suvom DCM (10 mL) dodat je MsCl (46 mg, 0.401 mmol) na 10 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Reakciona smeša je ugašena vodom. Dobijena smeša je ekstrahovana sa DCM (2X). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (30 mL), osušeni preko anhidrovanog Na2SO4 i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio željeni proizvod (sirov, 150 mg) kao lepljivo ulje. 5-hloro-3-((fenilsulfonil)metil)-1-tritil-1H-pirazol:
U mešanu smešu (5-hloro-1-tritil-1H-pirazol-3-il)metil metansulfonata (150 mg sirovog, 0.267 mmol) u suvom DMF (10 mL) dodat je PhSO2Na (100 mg, 0.610 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 20 h. Reakciona smeša je razblažena vodom. Dobijena smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2X). Organski slojevi su isprani fiziološkim
2
rastvorom (30 mL), osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC (eluent: PE/EtOAc =3/1) da bi se dobio željeni proizvod (80 mg). LCMS: m/z 521 (M+Na)<+>.
[0433] 2-((5-hloro-1-tritil-1H-pirazol-3-il)(fenilsulfonil)metil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-on: U smešu 5-hloro-3-((fenilsulfonil)metil)-1-tritil-1H-pirazola (100 mg, 0,2 mmol) i 4-metil-2-(metilsulfonil)-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (100 mg, 0,2 mmol) u suvom THF (10 mL) je ukapavanjem dodat LiHMDS (1 mL, 10 mmol, 1M u THF) na 10 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 10 min i sipana u vodeni rastvor NH4Cl. Sledeća smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2X). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (30 mL), osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0 - 30 % etil acetat u petrol etru) da bi se dobio željeni proizvod od E8-3 (75 mg) kao žuto ulje. LCMS: m/z 985 (M+Na)<+>.
[0434] 2-((5-hloro-1-tritil-1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil) etoksi)metil)-1H-indazol-4 -il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U smešu jedinjenja E8-3 (75 mg, 0.0779 mmol) u THF (5 mL) i MeOH (5 mL) na sobnoj temperaturi pod N2je dodat SmI2(5 mL, 0.1 M u THF). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 10 min i zatim ugašena vodom. Sledeća smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2X). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (30 mL), osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC (PE/EtOAc =2/1) da bi se dobio 2-((5-hloro-1-tritil-1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5 (6H)-on (50 mg). LCMS: m/z 845 (M+23)+.
[0435] 6-((1H-indazol-4-il)metil)-2-((5-hloro-1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U smešu 2-((5-hloro-1-tritil-1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (50 mg, 0.0608 mmol) u DCM ( 6 mL) na sobnoj temperaturi pod N2dodata je TFA (2 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Sledeća smeša je podešena na pH=8 sa vodenim rastvorom NaHCO3, ekstrahovana sa 80 % DCM/iPrOH (2X). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (30 mL), osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC (C18, 0 - 50 % acetonitrila u H2O sa 0.1% mravlje kiseline) da bi se dobio željeni proizvod (10 mg). LCMS: m/z 451 (M+H)+.<1>H NMR
21
(400 MHz, DMSO-d6) δ 13.10-13.2 (brs, 2H), 8.58 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.43-7.46 (m, 1H), 7.25-7.30 (m, 1H), 6.94-6.97 (m, 1H), 6.32 (s, 1H), 5.65 (s, 2H), 4.55 (s, 2H), 4.27 (s, 3H).
Primer 8B. Sinteza 2-((1H-1,2,3-triazol-4-il)metil)-4-metil-6-(3-(trifluorometoksi)benzil)-4H-tiazolo[5',4':4,5] pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona
[0436]
[0437] Korak A. Sinteza 4-metil-2-(metiltio)-6-(3-(trifluorometoksi)benzil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin- 5(6H)-ona. U rastvor NaH (130 mg, 3.2 mmol) u DMF (4 mL) dodat je 4-metil-2-(metiltio)-411-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (270 mg, 1.1 mmol) na 0 °C pod N2. Posle 5 min, smeša 1-(bromometil)-3-(trifluorometoksi)benzena (420 mg, 1.65 mmol) u DMF (2 mL) je dodata u reakcionu smešu. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakcija je ugašena zasićenim NH4Cl i ekstrahovana sa EA. Organski sloj je ispran zasićenim NaCl (3x), osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0 - 30 % etil acetat u petrol etru) da bi se dobio 4-metil-2-(metiltio)-6-(3-(trifluorometoksi)benzil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (420 mg). LCMS: 427 (M+H)<+>
[0438] Korak B. Sinteza 4-metil-2-(metilsulfonil)-6-(3-(trifluorometoksi)benzil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. U rastvor 4-metil-2-(metiltio)-6-(3-(trifluorometoksi)benzil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5 (6H)-ona (420 mg, 0.99 mmol) u DCM (10 ml) je dodat mCPBA (520 mg, 3.0 mmol) na 0 °C pod N2. Reakciona smeša je nastavila da se meša preko noći. Rastvor je ugašen zasićenim Na2S2O3i ekstrahovan sa DCM (3x). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0 ~ 50 % etil acetata u petrol etru) da bi se dobio 4-metil-2-(metilsulfonil)-6-(3-(trifluorometoksi)benzil)-4H-tiazolo[5’,4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (330 mg). LCMS: m/z 459 (M+H)<+>.
[0439] Korak C. Sinteza 4-metil-2-((fenilsulfonil)(1-((2-(trimetilsilil)etoksi) metil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)metil)-6-(3-(trifluorometoksi)benzil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3d]piridazin-5-ona. U smešu 4-metil-2-(metilsulfonil)-6-(3-(trifluorometoksi)benzil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5 (6H)-ona (165 mg, 0.36 mmol) i 4-((fenilsulfonil)metil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-1,2,3-triazola (50 mg, 0.54 mmol) u suvom DMF (10 mL) dodat je Cs2CO3(351 mg, 1.08 mmol) na 65 °C. Reakciona smeša je mešana na 65 °C tokom 2 sata i sipana u vodeni rastvor NH4Cl. Dobijena smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (30 mL), osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0 35 % etil acetata u petrol etru) da bi se dobio željeni proizvod 4-metil-2-((fenilsulfonil)(1-((2-(trimetilsilil)etoksi) metil) -1H-1,2,3-triazol-4-il)metil)-6-(3-(trifluorometoksi)benzil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-on (E8-6) (200 mg). LCMS: m/z 732 (M+H)<+>.
[0440] Korak D. Sinteza 2-((1H-1,2,3-triazol-4-il)metil)-4-metil-6-(3-(trifluorometoksi)benzil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. Slično Primeru 8A, jedinjenje E8-6 je reagovalo sa SmI2, nakon čega sledi uklanjanje zaštite sa TFA, da bi se dobio željeni proizvod. LCMS: 462 (M+H)<+>.<1>HNMR (400 MHz, DMSO) δ 8.52 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.46 (dd, 1H), 7.39-7.2 (m, 3H), 5.40 (s, 2H), 4.63 (s, 2H), 4.26 (s, 3H).
Primer 8C. Sinteza 2,6-bis((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5] pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona
[0441]
[0442] Korak A: 4-((feniltio)metil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol. U rastvor 4-(bromometil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazola (340 mg, 1.0 mmol) u DMF (10 mL) dodat je natrijum benzentiolat (265 mg, 2 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h, zatim ugašena ledenom vodom (10.0 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 50.0 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod (370 mg) koji je direktno korišćen u sledećem koraku. LCMS: m/z 371 (M+H)<+>.
[0443] Korak B: 4-((fenilsulfonil)metil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol. U rastvor 4-((feniltio)metil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazola (370 mg) u THF (20 mL) na 0 °C dodat je rastvor oksona (2.15 g, 3.5 mmol) u H2O (20 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h, zatim ugašena ledenom vodom (50 mL) i ekstrahovana sa AcOEt (3 x 50.0 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluent: EA/PE=1/5) da bi se dobio željeni proizvod (300 mg). LCMS: m/z 403 (M+H)<+>.
[0444] Korak C. 4-metil-2-((fenilsulfonil)(1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-6-((1-((2-(2))trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U rastvor 4-((fenilsulfonil)metil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazola (163 mg, 0.40 mmol, 2.2 ekv.) u suvom THF (5 mL) na -40 °C je u kapima dodat LiHMDS (0.46 mL, 0.46 mmol, 2.5 ekv.). Smeša je mešana na ovoj
21
temperaturi 10 minuta, a zatim je u kapima dodavan rastvor 4-metil-2-(metilsulfonil)-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (100 mg, 0.18 mmol, 1.0 ekv.) u suvom THF (3 mL) na -40 °C. Smeša je mešana na ovoj temperaturi još 30 min do završetka. Dobijena smeša je sipana u ledeni zasićeni vodeni rastvor NH4Cl (20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 10 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (20 mL), osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC da bi se dobio željeni proizvod (100 mg). LCMS: m/z 867 (M+H)<+>.
[0445] Korak D: 2,6-bis((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5,4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U rastvor 4-metil-2-((fenilsulfonil)(1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (50 mg, 0.06 mmol, 1.0 ekv.) u suvom DCE (2 mL) pod N2dodat je AlCl3(38 mg, 0.30 mmol, 5.0 ekv.) i TES (34 mg, 0.30 mmol, 5.0 ekv.). Smeša je zagrevana na 60 °C tokom 30 min, zatim ohlađena do sobne temperature, sipana u vodu (10 mL) i ekstrahovana sa DCM/MeOH (V:V=20:1, 3 x 10 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (5 mg). LCMS: m/z 467 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.15 (s, 1H), 13.10 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.49 (d, 1H), 7.44 (d, 1H), 7.38 -7.30 (m, 1H), 7.29 - 7.21 (m, 1H), 7.14 (d, 1H), 6.93 (d, 1H), 5.64 (s, 2H), 4.84 (s, 2H), 4.28 (s, 3H).
Primer 8D. Sinteza 2-((1H-pirazol-3-il)metil)-6-((6-aminopiridin-2-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5] pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona i 6-((6-aminopiridin-2-il)metil)-4-metil-2-(1H-pirazol-3-karbonil)-4H- tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona
[0446]
[0447] Korak A. terc-butil N-[(terc-butoksi)karbonil]-N-[6-({4-metansulfonil-7-metil-9-okso-3-tia-5,7,10,11-tetraazatriciklo[6.4.0.0{2,6}]dodeka-1(8),2(6),4,11-tetraen-10-il}metil)piridin-2-il]karbamat Smeša 4-metil-2-(metilsulfonil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (7.5 g, 26.4 mmol) i K3PO4(8.3 g, 39.3 mmol) u anhidrovanom MeCN (300 mL) je mešana na 70 °C tokom 1 sata pod N2. Zatim je dodat rastvor terc-butil N-[(tercbutoksi)karbonil]-N-[6-(bromometil)piridin-2-il]karbamata (11.2 g, 29.0 mmol) u MeCN (30 mL). Posle mešanja na 70 °C tokom 2.5 sata pod N2, reakciona smeša je ugašena sa zas. NH4Cl i ekstrahovana sa EA (300 mL X 3). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom i fiziološkim rastvorom, osušeni preko Na2SO4, filtrirani i organska faza je koncentrovana. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0 ~ 50 % etil acetat u petrol etru) da bi se dobio tercbutil N-[(terc-butoksi)karbonil]-N-[6-({4-metansulfonil-7-metil-9-okso-3-tia-5,7,10,11-tetraazatriciklo[6.4.0.0{2,6}]dodeka-1(8),2(6),4,11-tetraen-10- il}metil)piridin-2-il]karbamat (5.5 g). LC-MS (ESI) pronađeno: 591.1 (M+H)<+>.
[0448] Korak B. terc-butil (6-((4-metil-5-okso-2-((fenilsulfonil)(1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil))-4H-tiazolo[5',4':4,5)pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il)metil)piridin-2-il)karbamat. U mešanu smešu 3-((fenilsulfonil)metil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazola (11.9 g, 33.8 mmol) u anhidrovanom THF (200 mL) dodat je LiHMDS (50 mL, 1 M u THF) na -40 °C pod argonom. Posle 10 minuta, smeša je zagrejana do 10°C i mešana 1 sat, zatim je dodat terc-butil N-[(terc-butoksi)karbonil]-N-[6-({4-metansulfonil-7-metil-9-okso-3-tia-5,7,10,11-tetraazatriciklo[6.4.0.0{2,6}]dodeka-1(8),2(6),4,11-tetraen-10-il}metil)piridin-2-il]karbamat (9.1 g, 15.4 mmol u 35 mL THF). Reakcija je mešana na 10°C još 30 min. Reakciona smeša je sipana u vodeni rastvor NH4Cl, ekstrahovana sa EtOAc (200 mL × 3). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom i fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani. Sirovi proizvod je
21
prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0 - 50 % etil acetat u petrol etru) da bi se dobio tercbutil (6-((4-metil-5-okso-2-((fenilsulfonil)(1-( (2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il)metil)piridin-2-il)karbamat (6.6 g). LC-MS (ESI) pronađeno: 763.2 (M+H)<+>.
[0449] Korak C. terc-butil (6-((4-metil-5-okso-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il)metil)piridin-2-il)karbamat Rastvor terc-butil (6-((4-metil-5-okso-2-((fenilsulfonil)(1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil))-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il)metil)piridin-2-il)karbamata (6.0 g, 7.86 mmol) u EtOH /AcOH (35 mL 1 50 mL) je zagrevan do 50°C uz snažno mešanje u prisustvu Zn (2.55 g, 117.9 mmol) tokom 40 min. Dodatna količina cinka je dodavana svakih 40 minuta (2.55 g, dva puta, pratiti reakciju pomoću TLC/LC-MS da bi se izbegao sporedni proizvod i prekomerno redukovani proizvod). Rastvor je filtriran i filter kolač je ispran sa DCM. Filtrat je delimično isparavan, neutralizovan zasićenim rastvorom NaHCO3, osušen preko MgSO4i rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, DCM : MeOH= 40:1) da bi se dobio tercbutil (6-((4-metil-5-okso-2-((1-((2-(trimetilsilil))etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il)metil)piridin-2-il)karbamat (3.1 g). LC-MS (ESI) pronađeno: 623.3 (M+H)<+>.
[0450] Korak D. 2-((1H-pirazol-3-il)metil)-6-((6-aminopiridin-2-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on U smešu terc-butil (6-((4-metil-5-okso-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H)-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il)metil)piridin-2-il)karbamata (3.0 g, 4.8 mmol) u etanolu (30 mL) je dodat HCl (30 mL, 4 M u dioksanu). Reakciona smeša je mešana na 80°C 40 min. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana i čvrsta supstanca je sakupljena, suspendovana u vodi i neutralizovana vodenim rastvorom NaHCO3na 10°C. Filtrirana da bi se dobilo željeno jedinjenje 2-((1H-pirazol-3-il)metil)-6-((6-aminopiridin-2-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (1.5 g). LC-MS (ESI) pronađeno: 393,2 (M+H)<+>.<1>HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.78 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 7.72(s, 1H), 7.25 (dd, 1H), 6.33 - 6.24 (m, 2H), 6.08 (d, 1H), 5.90 (s, 2H), 5.19 (s, 2H), 4.49 (s, 2H), 4.26 (s, 3H).
Korak E. Sinteza terc-butil (6-((4-metil-5-okso-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-karbonil)-4H-tiazolo)[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il)metil)piridin-2-il)karbamata
21
[0451] U rastvor terc-butil (6-((4-metil-5-okso-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H)-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il)metil)piridin-2-il)karbamata (100 mg, 0.16 mmol) u DMF (2 mL) je dodat K2CO3(88 mg, 0.64 mmol). Smeša je mešana na 70°C tokom 8 h. Smeša je sipana u vodu, talog je sakupljen filtracijom i prečišćen pomoću pre-TLC (2% MeOH u DCM) da bi se dobio terc-butil (6-((4-metil-5-okso-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-karbonil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il )metil)piridin-2-il)karbamat (20 mg). LC-MS (ESI): m/z 637 (M+H)<+>.
[0452] Korak F. Sinteza 6-((6-aminopiridin-2-il)metil)-4-metil-2-(1H-pirazol-3-karbonil)-4H-tiazolo[5',4':4,5] pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona U rastvor terc-butil (6-((4-metil-5-okso-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-karbonil)-4H-tiazolo[5',4`:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6(5H)-il)metil)piridin-2-il)karbamata (20 mg, 0.03 mmol) u EtOH (1 mL) je dodata HCl (1 mL, 4 mol/L u dioksanu). Smeša je mešana na 80 °C tokom 1 sata i ohlađena. Talog je sakupljen filtracijom i neutralizovan sa zas. NaHCO3, ispran vodom i osušen da bi se dobilo 5 mg 6-((6-aminopiridin-2-il)metil)-4-metil-2-(1H-pirazol-3-karbonil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. LC-MS (ESI): m/z 407 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.75 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.31-7.22 (m, 1H), 6.31 (d, 1H), 6.14 (d, 1H), 5.91 (s, 2H), 5.23 (s, 2H), 4.38 (s, 3H).
Primer 8E. Sinteza 6-((1H-pirazol-3-il)metil)-2-((6-(dimetilamino)piridin-2-il)metil)-4-metil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona
[0453]
[0454] Korak A. (6-(dimetilamino)piridin-2-il)metanol. U rastvor (6-hloropiridin-2-il)metanola (500 mg, 2.67 mmol) u dimetilaminu u THF (35 mL) dodat je Pd(OAc)2(78 mg, 0.35 mmol), Xantphos (170 mg, 0.29 mmol) i t-BuONa (385 mg, 4.01 mmol). Reakciona smeša je mešana na 100 °C tokom 18 h. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0 ~ 35 % etil acetat u petrol
21
etru) da bi se dobio (6-(dimetilamino)piridin-2-il)metanol (180 mg). LCMS: 153 (M+H)<+>.
[0455] Korak B. 6-(hlorometil)-N,N-dimetilpiridin-2-amin. U mešanu smešu (6-(dimetilamino)piridin-2-il)metanola (170 mg, 1.1 mmol) u DCM (10 mL) dodat je SOCl2(665 mg, 5.6 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Reakciona smeša je podešena na pH= 7-8 sa vodenim rastvorom NaHCO3. Zatim je smeša ekstrahovana sa DCM, isprana vodom i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je osušen preko Na2SO4, koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio 6-(hlorometil)-N,N-dimetilpiridin-2-amin (70 mg). LCMS: 171 (M+H)<+>.
[0456] Korak C. N,N-dimetil-6-((fenilsulfonil)metil)piridin-2-amin. U mešanu smešu 6-(hlorometil)-N,N-dimetilpiridin-2-amina (500 mg, 2.94 mmol) u DMSO (10 mL) dodat je PhSO2Na (1.44 g, 8.82 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 sati. Reakciona smeša je sipana u vodu i ekstrahovana sa DCM. Smeša je isprana vodom i organski sloj je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0 ~ 20 % etil acetata u petrol etru) da bi se dobio N,N-dimetil-6-((fenilsulfonil)metil)piridin-2-amin (380 mg). LCMS: 277 (M+H)<+>.
[0457] Korak D. 2-((6-(dimetilamino)piridin-2-il)(fenilsulfonil)metil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U mešanu smešu 4-metil-2-(metilsulfonil)-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (180 mg, 0.36 mmol), koji je sintetisan slično jedinjenju E8-1 u Primeru 8A, u suvom THF (10 mL ) je dodat N,N-dimetil-6-((fenilsulfonil)metil)piridin-2-amin (120 mg, 0.44 mmol) i t-BuOK (122 mg, 1.1 mmol) na 60°C pod N2. Smeša je mešana na 60 °C tokom 2 h pod N2. Zatim je smeša sipana u vodu i ekstrahovana sa EtOAc, isprana vodom i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je osušen preko Na2SO4, koncentrovan pod sniženim pritiskom i prečišćen pomoću Prep-TLC (PE: EtOAc=1:1.5) da bi se dobio 2-((6-(dimetilamino)piridin-2-il)(fenilsulfonil)metil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (50 mg). LCMS: 691 (M+H)<+>.
[0458] Korak E. 2-((6-(dimetilamino)piridin-2-il)metil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. U smešu 2-((6-(dimetilamino)piridin-2-il)(fenilsulfonil)metil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (50 mg, 0.07 mmol) u THF (5 mL) i MeOH (5 mL) na sobnoj temperaturi pod N2je dodat SmI2(5 mL, 0.1 M u THF) na -40 °C. Reakciona smeša je mešana na -40 °C tokom 10 min i zatim ugašena vodom. Sledeća smeša je dva puta ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani
21
organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (30 mL), osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC (PE/EtOAc = 1/1.5) da bi se dobio željeni proizvod (10 mg). LCMS: m/z 551 (M+H)+.
[0459] Korak F. 6((1H-pirazol-3-il)metil)-2-((6-(dimetilamino)piridin-2-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on. Smeša 2-((6-(dimetilamino)piridin-2-il)metil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-dJpiridazin-5(6H)-ona (10 mg, 0.018 mmol) u DCM/TFA (2 mL/2 mL) je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (1.4 mg). LCMS: 421 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.51 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.48 (dd, 1H), 6.64 (d, 1H), 6.54 (d, 1H), 6.11 (d, 1H), 5.32 (s, 2H), 4.44 (s, 2H), 4.26 (s, 3H), 3.05 (s, 6H).
[0460] Sledeća jedinjenja su sintetizovana prema Šemi E8 i Primeru 8C korišćenjem odgovarajućeg početnog materijala. Standardna zaštita i deprotekcija se mogu koristiti kada je potrebno.
21
22
22
22
22
22
22
22
2
21
22
2
24
2
2
2
2
2
24
24
24
24
24
Primer 8F. Sinteza 4-metil-6-(2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)etil)-2-(piridin-3-ilmetil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on
[0461]
[0462] Korak A. Sinteza 4-metil-6-(2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)etil)-2-(metiltio)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona U smešu 4-metil-2-(metiltio)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (360 mg, 1.4 mmol ) i 2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)etanola (300 mg, 2.4 mmol) u toluenu (10 mL) je dodat CMBP (600 mg, 2.1 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C pod N2tokom 3 sata. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc, isprana vodom i fiziološkim rastvorom, osušena preko anhidrovanog Na2SO4, koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 80-100% EtOAc u petrol etru) da bi se dobio 4-metil-6-(2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)etil)-2-(metiltio)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (500 mg). LC-MS (ESI): m/z 361 (M+1)<+>.
[0463] Korak B. Sinteza 4-metil-6-(2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)etil)-2-(metilsulfonil)-4H-
24
tiazolo[5',4':4,5] pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on U smešu 4-metil-6-(2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)etil)-2-(metiltio)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (600 mg, 1.7 mmol) u DCM (20 mL) je dodat m-CPBA (1.01 g, 5.0 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc, isprana zasićenim NaHCO3i fiziološkim rastvorom, osušena preko anhidrovanog Na2SO4, koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 80-100% EtOAc u PE) da bi se dobio 4-metil-6-(2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)etil)-2-(metilsulfonil)-4H-tiazolo[5',4':4,5] pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (600 mg). LC-MS (ESI): m/z 393 (M+1)<+>.
[0464] Korak C. Sinteza 4-metil-6-(2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)etil)-2-((fenilsulfonil)(piridin-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona U smešu 3-((fenilsulfonil)metil)piridina (300 mg, 1.3 mmol) u THF (20 mL) dodat je LiHMDS (2 mL, 2.0 mmol) na sobnoj temperaturi. Posle mešanja na sobnoj temperaturi pod N2tokom 15 min, 4-metil-6-(2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)etil)-2-(metilsulfonil)-4H-tiazolo[5',4':4,5] pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (300 mg, 0.8 mmol) je dodat u reakcionu smešu i dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 3 sata. Reakciona smeša je ugašena zasićenim NH4Cl, ekstrahovana sa EtOAc. Organska faza je isprana fiziološkim rastvorom, osušena preko anhidrovanog Na2SO4, koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 80-100% EtOAc u petrol etru) da bi se dobilo 110 mg 4-metil-6-(2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)etil)-2-((fenilsulfonil)(piridin-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. LC-MS: m/z 546 (M+1)<+>.
[0465] Korak D. Sinteza 4-metil-6-(2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)etil)-2-(piridin-3-ilmetil)-4H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona U rastvor 4-metil-6-(2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)etil)-2-((fenilsulfonil)(piridin-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (110 mg, 0,2 mmol) u THF (5 mL) i MeOH (5 mL) je dodat SmI2(5 mL, 0.1 M u THF) na sobnoj temperaturi. Zatim je reakciona smeša mešana pod N2na sobnoj temperaturi tokom 10 min. Reakcioni rastvor je ugašen vodom, razblažen sa EtOAc, ispran vodom i fiziološkim rastvorom, osušen preko anhidrovanog Na2SO4, koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 80-100% EtOAc u petrol etru) da bi se dobilo 6 mg 4-metil-6-(2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)etil)-2-(piridin-3-ilmetil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. LC-MS (ESI): m/z 406 (M+1)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.66 (s, 1H), 8.52 (d, 2H), 7.84 (d, 1H), 7.54 (d, 1H), 7.41 (dd, 1H), 6.04 (d, 1H), 4.58 (s, 2H), 4.48 - 4.30 (m, 2H), 4.26 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.12 - 2.75 (m, 2H).
Primer 8G. Sinteza 4-metil-6-(prop-2-in-1-il)-2-(piridin-2-ilmetil)-4H-
24
tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3- d]piridazin-5(6H)-ona
[0466]
[0467] Korak A. Sinteza_4-metil-2-(metilsulfonil)-6-(prop-2-in-1-il)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. U smešu 4-metil-2-(metilsulfonil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (200 mg, 0.70 mmol ) u DMF (5 mL) je dodat t-BuOK (157 mg, 1.4 mmol), a zatim 3-bromoprop-1-in (0.12 mL, 1.4 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 15 min. Zatim je suspenzija sipana u zasićeni NH4Cl, ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0~50 % EtOAc u PE) da bi se dobilo 60 mg 4-metil-2-(metilsulfonil)-6-(prop-2-in-1-il)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. LC-MS (ESI): m/z 323 (M+H)<+>.
[0468] Korak B. Sinteza 4-metil-2-((fenilsulfonil)(piridin-2-il)metil)-6-(prop-2-in-1-il)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona._U smešu 4-metil-2-(metilsulfonil)-6-(prop-2-in-1-il)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d] piridazin-5(6H)-ona (60 mg, 0.18 mmol) i 2-((fenilsulfonil)metil)piridina (87 mg, 0.37 mmol) u THF (5 mL) je dodat t-BuOK (63 mg, 0.57 mmol). Posle mešanja na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 h pod azotom, reakcija je sipana u zasićeni NH4Cl, ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC (eluent: 70% EtOAc u petrol etru) da bi se dobilo 50 mg 4-metil-2-((fenilsulfonil)(piridin-2-il)metil)-6-(prop-2-in-1-il)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. LC-MS (ESI): m/z 476 (M+H)<+>.
[0469] Korak C. Sinteza 4-metil-6-(prop-2-in-1-il)-2-(piridin-2-ilmetil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona U rastvor_4-metil-2-((fenilsulfonil)(piridin-2-il)metil)-6-(prop-2-in-1-il)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (50 mg, 0.11 mmol) u THF/MeOH (4 mL, 1:1) je dodat SmI2(4.2 mL, 0.1 M u THF) na -70 °C u atmosferi azota. Posle mešanja 5 min, reakcija je ugašena vodom. Smeša je razblažena sa EtOAc i isprana
2
sa zas. NH4Cl. Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobilo 5 mg 4-metil-6-(prop-2-in-1-il)-2-(piridin-2-ilmetil)-4H-tiazolo[5',4' :4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. LC-MS: m/z 336 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.60 - 8.52 (m, 2H), 7.81 (td, 1H), 7.51 (d, 1H), 7.33 (dd, 1H), 4.93 (d, 2H), 4.67 (s, 2H), 4.26 (s, 3H), 3.27 (t, 1H).
Primer 8H. Sinteza 2-((1H-pirazol-3-il)metil)-6-benzil-4-etil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3 -d]piridazin-5-ona
[0470]
[0471] Korak A. Sinteza etil 4-etil-2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata U smešu etil 2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata (500 mg, 2,06 mmol) u DMF (5 mL) dodat je K2CO3(856 mg, 6.19 mmol). Posle mešanja na 70 °C tokom 1.5 h, dodat je EtI (483 mg, 3.10 mmol). Smeša je mešana na 70°C još 1 sat. Reakciona smeša je razblažena sa H2O i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovana organska faza je uparena pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0-30% EtOAc u petrol etru) da bi se dobio etil 4-etil-2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilat (400 mg). LC-MS (ESI): m/z 271 (M+1)<+>.
[0472] Korak B. Sinteza etil 4-etil-6-formil-2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata Smeša POCl3(3.6 ml) i PhNMeCHO (5 mL) je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1 sata, zatim dodat u rastvor etil 4-etil-2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata (400 mg, 1.48 mmol) u DCE (10 mL). Posle mešanja na 100 °C tokom 2 sata, reakciona smeša je razblažena sa H2O i ekstrahovana sa EtOAc dva puta. Kombinovane organske faze su osušene preko anhidrovanog Na2SO4i isparavane pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0-30% EtOAc u PE) da bi se dobio etil 4-etil-6-formil-2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilat (400 mg). LC-MS (ESI): m/z 299 (M+1)<+>.
2 1
[0473] Korak C. Sinteza 6-benzil-4-etil-2-(metiltio)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona U smešu 4-etil-6-formil-2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata (400 mg, 1.34 mmol) u AcOH (4 mL) dodat je benzilhidrazin dihidrohlorid (260 mg, 1.34 mmol) pod N2. Smeša je mešana na 100 °C tokom 3 sata. Reakciona smeša je isparavana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0-50% EtOAc u petrol etru) da bi se dobilo 250 mg 6-benzil-4-etil-2-(metiltio)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5 ',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona. LC-MS: m/z 357 (M+1)<+>. Korak D. Sinteza 6-benzil-4-etil-2-(metilsulfonil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5 -ona U smešu 6-benzil-4-etil-2-(metiltio)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona (250 mg, 0.70 mmol) u DCM (5 mL) dodat je mCPBA (657.5 mg, 3.8 mmol) na 0°C. Posle mešanja tokom 1.5 h, reakciona smeša je isparavana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC (10% MeOH u DCM) da bi se dobio 6-benzil-4-etil-2-(metilsulfonil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-on (90 mg). LC-MS: m/z 389 (M+1)<1>.
[0474] Korak E. Sinteza 6-benzil-4-etil-2-((fenilsulfonil)(1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona U smešu 6-benzil-4-etil-2-(metilsulfonil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona (90 mg, 0.23 mmol) i 3-((fenilsulfonil)metil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazola (123 mg, 0.35 mmol) u THF (3 mL) dodat je KO<t>Bu (85 mg, 0.76 mmol) pod N2na sobnoj temperaturi. Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 30 min, reakciona smeša je ugašena zasićenim NH4Cl i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovana organska faza je isparavana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0-50% EtOAc u petrol etru) da bi se dobio 6-benzil-4-etil-2-((fenilsulfonil)(1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil) -1H-pirazol-3-il)metil)-4,6-dihidro-SH-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-on (140 mg, 92.2 % prinosa). LC-MS: m/z 661 (M+1)<+>.
[0475] Korak F. Sinteza 6-benzil-4-etil-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4,6-dihidro-5H- tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona U smešu 6-benzil-4-etil-2-((fenilsulfonil)(1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona (140 mg, 0.21 mmol) u EtOH (2 mL) i DCE (1 mL) je dodata sirćetna kiselina (0.2 mL, 2.8 mmol) i cink (360 mg, 5.5 mmol). Smeša je mešana na 80 °C tokom 3 sata. Reakciona smeša je filtrirana i filtrat je isparavan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0-50% EtOAc u petrol etru) da bi se dobilo 30 mg 6-benzil-4-etil-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona. LC-MS (ESI): m/z 521 (M+1)<+>.
2 2
[0476] Korak G. Sinteza 2-((1H-pirazol-3-il)metil)-6-benzil-4-etil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona U smešu 6-benzil-4-etil-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona (30 mg, 0.06 mmol) u DCM (4 mL) je dodat TFA (4 mL). Posle mešanja na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h, reakciona smeša je isparavana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC (20% MeOH u DCM) da bi se dobio 2-((1H-pirazol-3-il)metil)-6-benzil-4-etil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-on (5 mg). LC-MS (ESI): m/z 391 (M+1)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.79 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.42 - 7.11 (m, 5H), 6.27 (d, 1H), 5.36 (s, 2H), 4.78 (q, 2H), 4.48 (s, 2H), 1.44 (t, 3H).
Primer 8I. Sinteza 6-benzil-4-fenil-2-(piridin-2-ilmetil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona
[0477]
[0478] Korak A. Sinteza etil 2-(metiltio)-4-fenil-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata U rastvor etil 2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata (400 mg, 1.7 mmol) i PhI (265 mg, 2.55 mmol) u dioksanu (5 mL) je dodat Cs2CO3(1.1 g, 3.4 mmol), zatim CuI (65 mg, 0.34 mmol) i (1R,2R)-N1,N2-dimetilcikloheksan-1,2-diamin (48 mg, 0.34 mmol). Smeša je mešana u atmosferi azota na 100°C tokom 7 sati. Smeša je sipana u vodu i ekstrahovana sa EtOAc dva puta. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Crveni ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0 ~10 % EtOAc u petrol etru) da bi se dobio etil 2-(metiltio)-4-fenil-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilat (400 mg). LC-MS (ESI): m/z 319 (M+1)<+>.
[0479] Korak B. Sinteza etil 6-formil-2-(metiltio)-4-fenil-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata U rastvor PhNMeCHO (1.5 mL) u DCE (5 mL) dodat je POCl3(1.2 mL, 12.5 mmol) pod 0°C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min. Zatim je u smešu dodat
2
etil 2-(metiltio)-4-fenil-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilat (400 mg, 1.25 mmol), smeša je mešana na 50 °C preko noći. Smeša je ugašena zasićenim NaHCO3i dva puta ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Crveni ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0 ~50% EtOAc u petrol etru) da bi se dobio etil 6-formil-2-(metiltio)-4-fenil-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilat (280 mg). LC-MS (ESI): m/z 347 (M+1)<+>.
[0480] Korak C. Sinteza 6-benzil-2-(metiltio)-4-fenil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona U smešu etil 6-formil-2-(metiltio)-4-fenil-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata (280 mg, 0.81 mmol) u AcOH (6.0 mL) dodat je benzilhidrazin dihidrohlorid (468 mg, 2.4 mmol). Reakciona smeša je mešana na 100 °C tokom 2 h. Filtrat je isparavan i prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0-70% EtOAc u petrol etru) da bi se dobilo 100 mg 6-benzil-2-(metiltio)-4-fenil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. LC-MS: m/z 405 (M+1)<+>.
[0481] Korak D. Sinteza 6-benzil-2-(metilsulfonil)-4-fenil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona U rastvor 6-benzil-2-(metiltio)-4-fenil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (100 mg, 0.25 mmol) u DCM (5 mL) je dodat mCPBA (151 mg, 0.75 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Smeša je ugašena vodenim rastvorom Na2S2O3i dva puta ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Crveni ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0 ~100% EtOAc u petrol etru) da bi se dobio 6-benzil-2-(metilsulfonil)-4-fenil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (60 mg). LC-MS (ESI): m/z 437 (M+1)<+>.
[0482] Korak E. Sinteza 6-benzil-4-fenil-2-((fenilsulfonil)(piridin-2-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona U smešu 6-benzil-4-fenil-2-((fenilsulfonil)(piridin-2-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (60 mg, 0.14 mmol) i 2-((fenilsulfonil)metil)piridina (50 mg, 0.21 mmol) u suvom DMF (5 mL) je dodat t-BuOK (31 mg, 0.28 mmol) pod N2. Reakciona smeša je mešana na 60 °C tokom 1.5 h. Nakon što je ohlađena do sobne temperature, smeša je sipana u zasićeni NH4Cl. Sledeća smeša je dva puta ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC (petroleum etar/EtOAc = 1/4) da bi se dobilo 40 mg 6-benzil-4-fenil-2-((fenilsulfonil)(piridin-2-il)metil)-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. LC-MS (ESI): m/z 590 (M+1)<+>.
[0483] Korak F. Sinteza 6-benzil-4-fenil-2-(piridin-2-ilmetil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-
2 4
d]piridazin-5(6H)-ona U smešu 6-benzil-4-fenil-2-((fenilsulfonil)(piridin-2-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (30 mg, 0.05 mmol) u THF (1.5 mL) i MeOH (1.5 mL) je dodat SmI2(2.5 mL, 0.1 M u THF) na -78 °C pod N2. Reakciona smeša je mešana na -78 °C tokom 10 min i zatim ugašena vodom. Smeša je dva puta ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Crveni ostatak je prečišćen pomoću HPLC da bi se dobio 6-benzil-4-fenil-2-(piridin-2-ilmetil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (5 mg). LC-MS (ESI): m/z 450 (M+1)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.67 (s, 1H), 8.56 (d, 1H), 7.82-7.76 (m, 1H), 7.59-7.45 (m, 6H), 7.34-7.23 (m, 6H), 5.32 (s, 2H), 4.63 (s, 2H).
Primer 8J. Sinteza 2-((1H-pirazol-3-il)metil)-4,6-dibenzil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona
[0484]
[0485] Korak A. Sinteza etil 4-benzil-6-formil-2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata. U smešu etil 6-formil-2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata (300 mg, 1.1 mmol) u DMF (3 mL) dodat je K2CO3(460 mg, 3.3 mmol). Posle mešanja na 70 °C tokom 1.5 h, dodat je BnBr (0.2 mL, 1.6 mmol). Smeša je mešana na 70 °C tokom 1 h. Reakciona smeša je razblažena sa H2O i ekstrahovana sa EtOAc dva puta. Kombinovane organske faze su osušene preko anhidrovanog Na2SO4i isparavane pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0-30% EtOAc u petrol etru) da bi se dobio etil 4-benzil-6-formil-2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilat (370 mg). LC-MS (ESI): m/z 361 (M+1)<+>.
[0486] Korak B. Sinteza 4,6-dibenzil-2-(metiltio)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona U smešu etil 4-benzil-6-formil-2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata (370 mg, 1.0 mmol) u AcOH (4 mL) dodat je benzilhidrazin dihidrohlorid (390 mg, 2.0 mmol) pod N2. Smeša je mešana na 100°C tokom 3 sata. Reakciona smeša je razblažena sa H2O i ekstrahovana sa EtOAc dva puta. Kombinovane organske faze su osušene preko anhidrovanog
2
Na2SO4i isparavane pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0~50% EtOAc u petrol etru) da bi se dobio 4,6-dibenzil-2-(metiltio)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (320 mg). LC-MS (ESI): m/z 419 (M+1)<+>.
[0487] Korak C. Sinteza 4,6-dibenzil-2-(metilsulfonil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona U smešu 4,6-dibenzil-2-(metiltio)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (320 mg, 0,76 mmol) u DCM (5 mL) dodat je mCPBA (657.5 mg, 3.2 mmol). Posle mešanja na 0 °C tokom 1.5 h, reakciona smeša je ugašena zasićenim Na2S2O3, ekstrahovana sa EtOAc. Organska faza je isprana fiziološkim rastvorom, osušena preko anhidrovanog Na2SO4i isparavana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću pre-TLC (10% MeOH u DCM) da bi se dobio 4,6-dibenzil-2-(metilsulfonil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (170 mg). LC-MS (ESI): m/z 451 (M+1)<+>.
[0488] Korak D. Sinteza 4,6-dibenzil-2-((fenilsulfonil)(1-((2-(trimetilsilil)etoaci)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5', 4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona U smešu 4,6-dibenzil-2-(metilsulfonil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (170 mg, 0.38 mmol) i 3-((fenilsulfonil)metil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazola (160 mg, 0.46 mmol) u THF (3 mL) je dodat KO'Bu (85 mg, 0.76 mmol) pod N2na sobnoj temperaturi. Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 3 h, reakciona smeša je ugašena zasićenim NH4Cl i dva puta ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovane organske faze su osušene preko anhidrovanog Na2SO4i isparavane pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0~50% EtOAc u petrol etru) da bi se dobio 4,6-dibenzil-2-((fenilsulfonil)(1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (200 mg). LC-MS (ESI): m/z 723 (M+1)<+>.
[0489] Korak E. Sinteza 4,6-dibenzil-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoari)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona U smešu 6-((4-aminopirimidin-2-il)metil)-4-metil-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (200 mg, 0.28 mmol) u EtOH (2 mL) i DCE (1 mL) dodaju se sirćetna kiselina (0.2 mL, 2.8 mmol) i cink (360 mg, 5.5 mmol). Posle mešanja na 100 °C tokom 3 sata, reakciona smeša je filtrirana i filtrat je isparavan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0-50% EtOAc u petrol etru) da bi se dobio 4,6-dibenzil-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (120 mg). LC-MS: m/z 583 (M+1)<+>.
[0490] Korak F. Sinteza 2-((1H-pirazol-3-il)metil)-4,6-dibenzil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. U smešu 4,6-dibenzil-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-
2
5(6H)-ona (120 mg, 0.21 mmol) u DCM (4 mL) je dodat TFA (4 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h. Reakciona smeša je isparavana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC (20% MeOH u DCM) da bi se dobilo 9 mg 2-((1H-pirazol-3-il)metil)-4,6-dibenzil-4H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. LC-MS: m/z 453 (M+1)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.78 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.42 - 7.04 (m, 10H), 6.25 (d, 1H), 5.98 (s, 2H), 5.37 (s, 2H), 4.48 (s, 2H).
Primer 8K. Sinteza 2-((1H-pirazol-3-il)metil)-6-benzil-4-ciklopropil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3 -d]piridazin-5-ona
[0491]
[0492] Korak A. Sinteza etil 4-ciklopropil-2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata U suspenziju ciklopropilborne kiseline (687 mg, 8 mmol) i etil 2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata (970 mg, 4 mmol) u DCE (10 mL) dodat je Na2CO3(848 mg, 8 mmol), a zatim Cu(OAc)2(727 mg, 4 mmol) i bipiridin (625 mg, 4 mmol). Smeša je mešana na 70 °C tokom 2 h pod vazduhom. Dobijena smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, i ugašena zasićenim NH4Cl, ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0-30% EtOAc u petrol etru) da bi se dobio etil 4-ciklopropil-2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilat (1.0 g, 88.5% prinos). LC-MS (ESI): m/z 283 (M+1)<1>.
[0493] Korak B. Sinteza etil 4-ciklopropil-6-formil-2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata Smeša POCl3(8.6 mL) i PhNMeCHO (12 mL) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata, zatim je dodata u rastvor etil 4-ciklopropil--2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata (1.0 g, 3.54 mmol) u DCE (10 mL). Posle mešanja na 100 °C tokom 2 sata, reakciona smeša je razblažena sa H2O i ekstrahovana sa EtOAc dva puta. Kombinovane
2
organske faze su osušene preko anhidrovanog Na2SO4i isparavane pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0-30% EtOAc u petrol etru) da bi se dobio etil 4-ciklopropil-6-formil-2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilat (620 mg). LC-MS (ESI): m/z 311 (M+1)<+>.
[0494] Korak C. Sinteza 6-benzil-4-ciklopropil-2-(metiltio)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona U smešu 4-etil-6-formil-2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata (620 mg, 2 mmol) u AcOH (4 mL) dodat je benzilhidrazin dihidrohlorid (390 mg, 2 mmol) pod N2. Smeša je mešana na 100 °C tokom 3 sata. Reakciona smeša je isparavana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0-50% EtOAc u petrol etru) da bi se dobio 6-benzil-4-etil-2-(metiltio)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-on (320 mg). LC-MS (ESI): m/z 369 (M+1)<+>.
[0495] Korak D. Sinteza 6-benzil-4-ciklopropil-2-(metilsulfonil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona U smešu 6-benzil-4-ciklopropil-2-(metiltio)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5- ona (320 mg, 0.87 mmol) u DCM (5 mL) je dodat mCPBA (704 mg, 3.5 mmol). Posle mešanja na 0 °C tokom 1.5 h, reakciona smeša je ugašena zasićenim Na2S2O3, ekstrahovana sa EtOAc. Organska faza je isprana fiziološkim rastvorom, osušena preko anhidrovanog Na2SO4i isparavana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC (10% MeOH u DCM) da bi se dobilo 110 mg 6-benzil-4-ciklopropil-2-(metilsulfonil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona. LC-MS: m/z 401 (M+1)<+>.
[0496] Korak E. Sinteza 6-benzil-4-ciklopropil-2-((fenilsulfonil)(1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona U smešu 6-benzil-4-etil-2-(metilsulfonil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona (110 mg, 0.27 mmol) i 3-((fenilsulfonil)metil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazola (123 mg, 0.35 mmol) u THF (3 mL) dodat je KO'Bu (85 mg, 0.76 mmol) pod N2na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Reakciona smeša je ugašena zasićenim NH4Cl i dva puta ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovana organska faza je isparavana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0-50% EtOAc u petrol etru) da bi se dobilo 100 mg 6-benzil-4-ciklopropil-2-((fenilsulfonil)(1-((2-(trimetilsilil)etoksi))metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona. LC-MS: m/z 673 (M+1)<+>.
[0497] Korak F. Sinteza 6-benzil-4-ciklopropil-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4,6-dihidro-5H- tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona U smešu 6-benzil-4-ciklopropil-2-((fenilsulfonil)(1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4,6-
2
dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona (100 mg, 0.15 mmol) u MeOH (3 mL) i THF (3 mL) je dodat SmI2(4.5 ml, 0.45 mmol) na -60 °C pod N2. Smeša je mešana na -60 °C tokom 10 min, ugašena sa H2O i ekstrahovana sa EtOAc dva puta. Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4i isparavane pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0-50% EtOAc u petrol etru) da bi se dobilo 40 mg 6-benzil-4-ciklopropil-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona. LC-MS: m/z 533 (M+1)<+>.
[0498] Korak G. Sinteza 2-((1H-pirazol-3-il)metil)-6-benzil-4-ciklopropil-4,6-dihidro-SH-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona U smešu 6-benzil-4-ciklopropil-2-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona (40 mg, 0.07 mmol) u DCM (4 mL) je dodat TFA (4 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h. Reakciona smeša je isparavana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC (20% MeOH u DCM) da bi se dobilo 5 mg 2-((1H-pirazol-3-il)metil)-6-benzil-4-ciklopropil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona. LC-MS (ESI): m/z 403 (M+1)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.77 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.35 - 7.23 (m, 5H), 6.26 (d, 1H), 5.35 (s, 2H), 4.48 (s, 2H), 4.19 (tt, 1H), 1.40 (td, 2H), 1.15 (td, 2H).
Primer 8L. Sinteza 4-metil-6-((1-metil-1H-pirazol-3-il)metil)-2-(2-(piridin-3-il)etil)-4H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona
[0499]
2
[0500] Korak A. Sinteza etil 6-(hidroksimetil)-2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata U rastvor etil 6-formil-2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata (1.3 g, 4.8 mmol) u MeOH (20 mL) dodat je NaBH4(274 mg, 7.2 mmol) na 0°C. Posle mešanja na 0°C tokom 20 minuta, reakcioni rastvor je razblažen sa EtOAc, ispran vodom i fiziološkim rastvorom, osušen preko Na2SO4, koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0~10% MeOH u DCM) da bi se dobio etil 6-(hidroksimetil)-2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilat (1 g). LC-MS (ESI): m/z 273 (M+1)<+>.
[0501] Korak B. Sinteza etil 6-(hidroksimetil)-2-(metiltio)-4-(tiazol-2-il)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata U rastvor etil 6-(hidroksimetil)-2-(metiltio)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata (1 g, 3.7 mmol) i 2-bromotiazola (3 g, 18.4 mmol) u dioksanu (30 mL) je dodat Cs2CO3(3 g, 9.2 mmol), zatim CuI (700 mg, 3.7 mmol) i N<1>,N<2>-dimetilcikloheksan-1,2-diamin (520 mg, 3.7 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110°C pod atmosferom N2u trajanju od 16 sati. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana. Filtrat je razblažen sa EtOAc, ispran vodom i fiziološkim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog Na2SO4, koncentrovan. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 30-50% EtOAc u petrol etru) da bi se dobio etil 6-(hidroksimetil)-2-(metiltio)-4-(tiazol-2-il)-4H-pirolo[2 ,3-d]tiazol-5-karboksilat (1 g). LC-MS (ESI): m/z 356 (M+1)<+>.
[0502] Korak C. Sinteza etil 6-formil-2-(metiltio)-4-(tiazol-2-il)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata U rastvor etil 6-(hidroksimetil)-2-(metiltio)-4-(tiazol-2-il)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata (1 g, 2.8 mmol) u DCM (20 mL) je dodat Dess-Martin (1.3 g, 3.4 mmol). Posle mešanja na sobnoj temperaturi tokom 2 sata, reakcioni rastvor je razblažen sa DCM, ispran zasićenim NaHCO3i fiziološkim rastvorom, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 20-30% EtOAc u petrol etru) da bi se dobio etil 6-formil-2-(metiltio)-4-(tiazol-2-il)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilat (800 mg). LC-MS (ESI): m/z 354 (M+1)<+>. Korak D. Sinteza 6-benzil-2-(metiltio)-4-(tiazol-2-il)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona U rastvor etil 6-formil-2-(metiltio)-4-(tiazol-2-il)-4H-pirolo[2,3-d]tiazol-5-karboksilata (800 mg, 2.3 mmol) u AcOH (10 mL) je dodat benzilhidrazin dihidrohlorid (449 mg, 2.3 mmol). Posle mešanja na sobnoj temperaturi tokom 1 sata, reakciona smeša je zagrevana na 100 °C tokom 2 sata. Reakciona smeša je ohlađena na 0 °C, neutralizovana sa 1 M vodenim rastvorom NaOH, ekstrahovana sa DCM. Organska faza je isprana fiziološkim rastvorom, osušena preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 05% MeOH u DCM) da bi se dobio 6-benzil-2-(metiltio)-4-(tiazol-2-il)-4H-tiazolo[5',4' :4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (300 mg). LC-MS (ESI): m/z 412 (M+1)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.72 (s, 1H), 7.98 (d, 1H),
2
7.87 (d, 1H), 7.40 - 7.15 (m, 5H), 5.31 (s, 2H), 2.76 (s, 3H).
[0503] Korak E. Sinteza 6-benzil-2-(metilsulfonil)-4-(tiazol-2-il)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona U smešu 6-benzil-2-(metiltio)-4-(tiazol-2-il)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (300 mg, 0.73 mmol) u MeOH (5 mL) i THF (5 mL) je dodat rastvor oksona (2.2 g, 3.6 mmol) u H2O (5 mL) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Reakciona smeša je razblažena sa DCM, isprana sa zasićenim NaHCO3i fiziološkim rastvorom, osušena preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0-5% MeOH u DCM) da bi se dobio 6-benzil-2-(metilsulfonil)-4-(tiazol-2-il)-4H-tiazolo[5',4' :4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (260 mg). LC-MS (ESI): m/z 444 (M+1)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.93 (s, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.91 (d, 1H), 7.40 - 7.18 (m, 5H), 5.35 (s, 2H), 3.53 (s, 3H).
[0504] Korak F. Sinteza 6-benzil-2-((fenilsulfonil)(piridin-2-il)metil)-4-(tiazol-2-il)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona U mešani rastvor 2-((fenilsulfonil)metil)piridina (120 mg, 0.51 mmol) u THF (3 mL) dodat je LiHMDS (0.7 mL, 0.7 mmol) na 0 °C pod atmosferom N2. Posle mešanja na 0°C tokom 30 minuta, dodat je rastvor 6-benzil-2-(metilsulfonil)-4-(tiazol-2-il)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (150 mg, 0.34 mmol) u THF (3 mL). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakcija je ugašena zasićenim NH4Cl, ekstrahovana sa DCM. Organska faza je isprana fiziološkim rastvorom, osušena preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0-5% MeOH u DCM) da bi se dobio 6-benzil-2-((fenilsulfonil)(piridin-2-il)metil)-4-(tiazol-2-il)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (100 mg). LC-MS (ESI): m/z 597 (M+1)<+>.
[0505] Korak G. Sinteza 6-benzil-2-(piridin-2-ilmetil)-4-(tiazol-2-il)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona U rastvor 6-benzil-2-((fenilsulfonil)(piridin-2-il)metil)-4-(tiazol-2-il)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (100 mg, 0.17 mmol) u AcOH (5 mL) je dodat Zn (110 mg, 1.7 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 min. Reakciona smeša je razblažena sa DCM, isprana zasićenim NaHCO3i fiziološkim rastvorom, osušena preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen pomoću pre-TLC (65% EtOAc u petrol etru) da bi se dobilo 5 mg 6-benzil-2-(piridin-2-ilmetil)-4-(tiazol-2-il)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo [2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. LC-MS (ESI): m/z 457 (M+1)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.72 (s, 1H), 8.61 (d,1H), 7.98 (d, 1H), 7.92 - 7.84 (m, 2H), 7.55 (d, 1H), 7.41 (dd, 1H), 7.35-7.23 (m, 5H), 5.32 (s, 2H), 4.70 (s, 2H).
2 1
Primer 9. Sinteza jedinjenja E9-vi i E9-vii
[0506]
[0507] Jedinjenje E9-iv se može sintetisati pomoću dva pristupa, (i) i (ii) u Šemi 9. Za pristup (i), jedinjenje E9-ii se može sintetisati iz jedinjenja E9-i reakcijom alkilacije kao što je prikazano u Primeru 7 ili Primeru 8. Kako se ovde koristi, X<a>je odlazeća grupa (npr. Br, I, OMs ili OTs). Reakcija formilacije jedinjenja E9-ii sa LiHMDS i DMF daje intermedijer E9-iii. E9-iii reaguje sa redukcionim sredstvom (npr. NaBH4) da obezbedi jedinjenje E9-iv. Alternativno, u pristupu (ii), haloagenacija jedinjenja E9-i stvara jedinjenje E9-ix. Jedinjenje E9-ix prolazi kroz Still-eovu reakciju, ozonolizu i redukciju da bi se dobilo jedinjenje E9-x. Jedinjenje E9-x može biti alkilovano sa E9-viii da bi se dobilo jedinjenje E9-iv. U Šemi 9, (iii), jedinjenje E9-iv se podvrgava halogenaciji da bi se dobio intermedijer E9-v (X<b>je halogen kao što je Cl ili Br). Metalom (npr. Pd ili Cu) katalizovano spajanje E9-v sa organskim kalajem, borom, cinkom ili magnezijumom daje jedinjenje E9-vi. Kako se ovde koristi; Jedinjenje E9-v takođe može da reaguje sa nekim nukleofilima kao što je azot u heterociklusu da bi se dobio proizvod E9-vii. Kako se ovde koristi, M je organski metalni kompleks (npr. organobor kompleks kao što je borna kiselina ili kompleks pinako bora, organokalajni kompleks kao što je -Sn(Bu<t>)3; kompleks organocinka kao što je -Zn(halogen)); Ar1i Ar2su svaki nezavisno izborno supstituisani aril, izborno supstituisani heteroaril, izborno supstituisani karbocikl ili izborno supstituisani heterociklil. U određenim primerima izvođenja, Ar1i Ar2su svaki nezavisno izborno
2 2
supstituisani heteroaril.
Primer 9A. Sinteza 6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-2-(tiazol-4-ilmetil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona
[0508]
[0509] Korak A. Sinteza 4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karbaldehida. U smešu 4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (2.6 g, 5.57 mmol, 1 ekv.) u suvom THF (30 mL) je dodat LiHMDS (1 M, 11.14 mL, 2.0 ekv.) na -78 °C. Smeša je mešana na -78 °C tokom 2 h. Zatim je DMF (2.04 g, 27.86 mmol, 2.14 mL, 5.0 ekv.) ukapavanjem dodat u gornju smešu. Smeša je mešana na -78 °C tokom 2 h. TLC (PE: EA=2:1, UV=254 nm) je pokazala da je formirana jedna glavna nova tačka. Smeša je sipana u hladan zasićeni NH4Cl (20 mL). Zatim je smeša zagrejana do sobne temperature. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (40 mL x 3). Organski sloj je ispran vodom (20 mL x 3) i koncentrovan in vacuo da bi se dobio željeni proizvod (2.6 g, sirov). LCMS: m/z 495,2 [M+H]<+>
[0510] Korak B. Sinteza 2-(hidroksimetil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi) metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo [5',4':4,5] pirolo[2,3-d] piridazin-5(6H)-ona. U smešu sirovog 4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-5,6-dihidro-4H- dodat je tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karbaldehida (1.0 g, 2.02 mmol, 1 ekv.) u THF (10 mL) i MeOH (10 mL) NaBH4(152.97 mg, 4.04 mmol, 2 ekv.). Smeša je mešana na 30°C tokom 14 h. TLC (DCM:MeOH=10:1, UV=254 nm) je pokazala da je početni materijal u potpunosti potrošen i da je formirana jedna glavna nova tačka. Reakcija je ugašena dodavanjem vode (20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (30 mL x 3). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL). Organska faza je koncentrovana in vacuo. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu (ISCO<®>; 40 g SepaFlash<®>Silikatna fleš kolona, eluent od 0-5% MeOH/DCM @ 30mL/min). Eluent je koncentrovan u vakuumu da se dobije željeni proizvod
2
(382 mg). LCMS: m/z 497.1 [M<+>H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.61 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.66 (d, 1H), 7.38 (t, 1H), 7.05 (d,), 6.36 (t, 1H), 5.74 (s, 2H), 5.68 (s, 2H), 4.89 (d, 2H), 4.26 (s, 3H), 3.50 (t, 2H), 0.78 (t, 2H), -0.12 (s, 9H).
[0511] Korak C. Sinteza 2-(hlorometil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi) metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. U smešu 2-(hidroksimetil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5', 4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (150.0 mg, 302.02 umol, 1 ekv.) i Et3N (61.12 mg, 604.04 umol, 84.08 uL, 2.0 ekv.) u DCM (5 mL) je dodat 4-metilbenzensulfonil hlorid (75.0 mg, 393.40 umol, 1.30 ekv.). Smeša je mešana na 30 °C tokom 5 h. TLC (PE: EA=4:1, UV=254 nm) je pokazala da je početni materijal u potpunosti potrošen. U smešu su dodati voda (10 mL) i DCM (20 mL). Organski slojevi su koncentrovani in vacuo da bi se dobila žuta guma (0.1 g). Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu (ISCO<®>; 4 g SepaFlash<®>Silikatna fleš kolona, eluent od 0-20% etil acetat/petroleum etar gradijent @ 30 mL/min). Željena frakcija je koncentrovana in vacuo da bi se dobio željeni proizvod (40.0 mg, 76.88 umol). LCMS: m/z 515.1 [M<+>H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 8.27 (d, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.52 (d, 1 H), 7.39 (dd, 1 H), 7.25 (s, 1H), 5.76 (s, 2H), 5.72 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.40 (s, 3H), 3.50-3.57 (m, 2H), 0.84-0.90 (m, 2H), -0.09 to -0.06 (m, 9H).
[0512] Korak D. Sinteza 4-metil-2-(tiazol-4-ilmetil)-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona. U rastvor 2-(hlorometil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5', 4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (50 mg, 0.97 mmol) i 4-(tributilstanil)tiazola (114 mg, 2.91 mmol) u toluenu (4 mL) dodat je Pd(PPh3)4(402 mg, 2.91 mmol). Zatim je smeša zagrevana u MW reaktoru na 120°C tokom 30 minuta pod N2. Rastvor se sipa u vodu i ekstrahuje sa EtOAc, osuši preko anhidrovanog Na2SO4. Organski sloj je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0 ~ 50 % etil acetata u petrol etru) da bi se dobio 4-metil-2-(tiazol-4-ilmetil)-6-((1-((2-(trimetilsilil)) etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (jedinjenje E9- 4) (30 mg). LCMS: 564 (M+H)<+>.
[0513] Korak E. Sinteza 6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-2-(tiazol-4-ilmetil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona. U smešu jedinjenja E9-4 (30 mg, 0.05 mmol) u DCM (3 mL) na sobnoj temperaturi pod N2dodata je TFA (3 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen prep. HPLC (C18, 0 ~ 90 % acetonitrila u H2O sa 0.1% mravlje kiseline) da bi se dobio željeni proizvod (3.9 mg). LCMS: 434 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 13.12
2 4
(s, 1H), 9.12 (d, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.71 (d, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.35 - 7.24 (m, 1H), 6.96 (d, 1H), 5.65 (s, 2H), 4.70 (s, 2H), 4.27 (s, 3H).
Primer 9B. Sinteza 2-((1H-imidazol-1-il)metil)-6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona
[0514]
[0515] Korak A. Sinteza 2-((1H-imidazol-1-il)metil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. U smešu 2-(hlorometil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5', 4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (25.0 mg, 48.53 umol, 1 ekv.) i KI (8.06 mg, 48.53 umol, 1 ekv.) u THF (0,3 mL) je dodat imidazol (33.04 mg, 485.34 umol, 10.0 ekv.). Smeša je zagrejana do 60 °C i mešana na 60 °C tokom 12 sati. LCMS je pokazao da je željeni proizvod stvoren i da je početni materijal u potpunosti potrošen. Reakciona smeša je kombinovana sa drugom šaržom (25 mg). Smeša je koncentrovana in vacuo da bi se dobila žuta sirova guma (50.0 mg). Proizvod bi se koristio za sledeći korak reakcije bez ikakvog prečišćavanja. LCMS: m/z 547.2 [M<+>H]<+>.
[0516] Korak B. Sinteza 2-((1H-imidazol-1-il)metil)-6-((1H-indazol-4-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. U rastvor 2-((1H-imidazol-1-il)metil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (50.0 mg, 64.02 umol, 1 ekv.) u dioksanu (1 mL) je dodat HCl /dioksan (4 M, 2 mL, 124.96 ekv.) i 2 kapi vode. Smeša je mešana na 30 °C tokom 12 h. TLC (PE: EA=1:1, UV=254 nm) je pokazala da je početni materijal u potpunosti potrošen. Smeša je koncentrovana in vacuo da bi se dobila žuta guma (0.2 g) koja je prečišćena preparativnom HPLC (bazni) da bi se dobio naslovni proizvod (4.0 mg). LCMS: m/z 417.0 [M<+>H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8.43 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.43-7.49(m, 1H), 7.29-7.36(m, 2H), 7.12(d, 1H), 7.04(s, H), 5.74(s, 2H), 5.73 (s, 2H), 4.34 (s, 3H).
Primer 9C. Sinteza 4-metil-2-(piridin-2-ilmetil)-6-(piridin-3-ilmetil)-4H-
2
tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin- 5(6H)-ona
[0517]
[0518] Korak A. Sinteza 2-(hidroksimetil)-4-metil-6-(piridin-3-ilmetil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5 (6H)-ona_Na -78 °C, u smešu 4-metil-6-(piridin-3-ilmetil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (640 mg, 2.15 mmol) u THF (10 mL) je dodat LiHMDS (4.3 mL, 1 M u THF). Posle 30 min, smeši je dodat suvi DMF (0.84 mL, 10.8 mmol). Nakon potpunog utroška polaznog materijala, smeša NaBH4(164 mg, 4.3 mmol) u EtOH (4 mL) je dodata i mešana 5 min. Zatim je smeša sipana u zasićeni NH4Cl, ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen preko anhidrovanog Na2SO4, filtriran i koncentrovan. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0-5% MeOH u DCM) da bi se dobio 2-(hidroksimetil)-4-metil-6-(piridin-3-ilmetil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (220 mg). LC-MS (ESI): m/z 328 (M+H)<+>.
[0519] Korak B. Sinteza 2-(hlorometil)-4-metil-6-(piridin-3-ilmetil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5 (6H)-ona U smešu 2-(hidroksimetil)-4-metil-6-(piridin-3-ilmetil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (100 mg, 0.31 mmol) u DCM (5 mL) je dodat Et3N (0.43 mL, 3.1 mmol) i MsCl (0.12 mL, 1.5 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 6 h. Zatim je smeša isprana zasićenim NH4Cl (vodeni rastvor), osušena preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirana i koncentrovana. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0~50 % EtOAc u PE) da bi se dobilo 65 mg 2-(hlorometil)-4-metil-6-(piridin-3-ilmetil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. LC-MS (ESI): m/z 346 (M+H)<+>.
[0520] Korak C. Sinteza 4-metil-2-(piridin-2-ilmetil)-6-(piridin-3-ilmetil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona Pod azotom, u smešu 2-(hlorometil)-4-metil-6-(piridin-3-ilmetil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (50 mg, 0.14 mmol) i 2-(tributilstanil)piridina (0.14 mL, 0.43 mmol) u toluenu (3 mL) je dodat Pd(PPh3)4(17 mg, 0.014 mmol). Reakciona smeša je mešana na 100 °C preko noći. Zatim je smeša ohlađena, koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC (eluent: 10% MeOH u DCM) da bi se dobilo 2 mg 4-metil-2-(piridin-2-ilmetil)-6-( piridin-3-ilmetil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. LC-MS (ESI): m/z 389 (M+H)<+>.<1>H NMR
2
(400 MHz, DMSO-d6) δ 8.56 (m, 3H), 8.48 (dd, 1H), 7.81 (td, 1H), 7.71 (d, 1H), 7.50 (d, 1H), 7.37 - 7.30 (m, 2H), 5.38 (s, 2H), 4.67 (s, 2H), 4.25 (s, 3H).
Primer 9D. Sinteza 2-((1H-1,2,4-triazol-1-il)metil)-6-((1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona i 6-((1H-pirazol-3-il)metil)-2-((4H-1,2,4-triazol-4-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona
[0522] Korak A. Sinteza 1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-karbaldehida. U suspenziju 1H-pirazol-3-karbaldehida (10.0 g, 104.07 mmol, 1 ekv.) i DIPEA (33.63 g, 260.18 mmol, 45.32 mL, 2.5 ekv.) u DCM (500 mL) dodat je u kapima 2-(hlorometoksi)etil-trimetilsilan (26.03 g, 156.11 mmol, 27.63 mL, 1.5 ekv.) na -40°C. Zatim je reakciona smeša zagrejana do sobne temperature i mešana 16 h. TLC (petroleum etar:EtOAc = 5:1) je pokazala da je početni materijal u potpunosti potrošen i da su formirane dve nove tačke. Reakciona smeša je koncentrovana in vacuo. Ostatak je kombinovan sa još 2 šarže (po 10.0 g) i prečišćen pomoću Combiflash (od 100% petrol etra do 40% EtOAc u petrol etru) da bi se dobio željeni proizvod od 60.0 g (napomena: smeša 2 regioizomera sa odnosom ~5/4).<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 10.06 (s, 1H), 10.00 (s, 1H), 7.68 (d, 1H), 7.67 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.92 (d, 1H), 5.87 (s, 2H), 5.56 (s, 2H), 3.61-3.67 (m, 4H), 0.91-1.01 (m, 4H), -0.09-0.05 (m, 18H).
[0523] Korak B. Sinteza (1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metanola. U rastvor 1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-karbaldehida (30 g, 132.54 mmol, 1 ekv, smeše 2 regioizomera sa odnosom ~5/4) u THF (200 mL)/MeOH (100 mL) je dodat NaBH4(7.52 g, 198.81 mmol, 1.50 ekv.) u porcijama na 0°C, reakciona smeša je mešana na 0°C do sobne temperature 18 h. TLC (petroleum etar:EtOAc = 2:1) je pokazao da su početni materijali u
2
potpunosti potrošeni i da su formirane dve nove tačke. Rastvarač je koncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen pomoću Combiflash (100% petrol etra do 100% EtOAc) da bi se dobilo 25 g željenog proizvoda. (Napomena: odnos smeše 2 regioizomera ~3/2).<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 7.55 (d, 1H), 7.47 (brs, 1H), 6.36 (d, 1H), 6.34 (d, 1H), 5.57 (s, 2H), 5.42 (s, 2H), 4.74-4.76 (m, 4H), 3.55-3.60 (m, 4H), 0.85-0.96 (m, 4H), 0.00-0.06 (m, 18H).
[0524] Korak C. Sinteza 3-(bromometil)-1-((2-(trimetilsilil)etoar)metil)-1H-pirazola. U rastvor (1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metanola (23 g, 100.72 mmol, 1 ekv., odnos 2 regioizomera ~3/2) i PPh3(36.98 g, 141.00 mmol, 1.4 ekv.) u DCM (200 mL) je dodat CBr4(46.76 g, 141.00 mmol, 1.4 ekv.) na 0°C i reakciona smeša je mešana na 0°C tokom 3 sata. TLC (petroleum etar:EtOAc = 5:1) je pokazala da su početni materijali u potpunosti potrošeni i formirano je nova tačka. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je kombinovan sa drugom šaržom (2.0 g) i prečišćen pomoću Combiflash (od 100% petrol etra do 50% EtOAc u petrol etru) da bi se dobio željeni proizvod 22.0 g (75.53 mmol).<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 7.51 (d, 1H), 6.39 (d, 1H), 5.38 (s, 2H), 4.50 (s, 2H), 3.52-3.57 (m, 2H), 0.86-0.96 (m, 2H), - 0.03-0.02 (m, 9H).
[0525] Korak D. Sinteza 4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoari)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. Suspenzija 4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (1.0 g, 4.85 mmol, 1 ekv.), 3-( bromometil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazola (2.12 g, 7.27 mmol, 1.5 ekv.), K3PO4(2.57 g, 12.12 mmol, 2.5 ekv.) i NaI (218.05 mg, 1.45 mmol, 0.3 ekv.) u DMF (15 mL) je mešan na 60°C tokom 18 sati pod N2. TLC (petrol etar:EtOAc = 1:1) je pokazao da je početni materijal u potpunosti potrošen i formirana je nova tačka. Reakciona smeša je kombinovana sa još 3 šarže (svaka po 1.0 g) i sipana u ledenu vodu (250 mL). Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (150 mL x 3). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (120 mL x 2), fiziološkim rastvorom (120 mL) i osušeni preko Na2SO4. Rastvarač je koncentrovan u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Combiflash (od 100% petrol etra do 80% EtOA u petrol etru) da bi se dobio željeni proizvod (3.6 g).<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 8.91 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.49 (d, 1H), 6.36 (d, 1H), 5.51 (s, 2H), 5.40 (m, 2H), 4.45 (s, 3 H), 3.52-3.58 (m, 2H), 0.85-0.90 (m, 2H), -0.05 (s, 9H). Korak E. Sinteza 4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karbaldehida.
Pod argonom, u rastvor 4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (1.7 g, 4.09 mmol, 1 ekv.) u THF (30 mL) je polako dodat LiHMDS (1.0 M, 8.18 mL, 2 ekv.) na -78°C, reakciona smeša je mešana na -70°C tokom 1 h. Zatim je u smešu kap po kap dodat rastvor DMF (1.49 g, 20.45 mmol, 1.57 mL, 5
2
ekv.) u THF (3 mL). Dobijena smeša je mešana na -70°C 1 h. TLC (petrol etar: EtOAc = 1:1) je pokazao da se formira nova tačka. Reakciona smeša je u kapima dodata u vodeni rastvor NH4Cl (50 mL) na 0°C, zatim je smeša ekstrahovana sa EtOAc (30 mL x 3). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (40 mL) i osušeni preko Na2SO4. Rastvarač je uklonjen u vakuumu da bi se dobio sirovi željeni proizvod (1.8 g) koji je korišćen za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.
[0526] Korak F. Sinteza 2-(hidroksimetil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi) metil)-1H-pirazo1-3-il)metil)-4H-tiazolo[5’,4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. U rastvor 4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karbaldehida (1.8 g, 3.24 mmol, 1 ekv.) u THF (20 mL) MeOH (10 mL) je dodat NaBH4(245.08 mg, 6.48 mmol, 2 ekv.) na 0°C i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 h. TLC (petrol etar:EtOAc = 1:2) je pokazao da je početni materijal u potpunosti potrošen i formirana je nova tačka. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, ostatak je prečišćen pomoću Combiflash (od 100% DCM do 5% MeOH u DCM). Dobijen je željeni proizvod (1.1 g).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.63 (s, 1H), 7.86 (d, 1H), 6.44 (t, 1H), 6.27 (d, 1H), 5.40-5.42 (m, 4H), 4.98 (d, 2H), 4.34 (s, 3H), 3.55-3.61 (m, 2H), 0.86-0.91 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
[0527] Korak G. Sinteza (4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)metil metansulfonata. U rastvor 2-(hidroksimetil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5', 4':4,5] pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (700 mg, 1.57 mmol, 1 ekv.) i Et3N (317.21 mg, 3.13 mmol, 436.33 uL, 2.0 ekv.) u DCM (15 mL) je u kapima dodat MsCl (269.32 mg, 2.35 mmol, 181.97 uL, 1.5 ekv.) na 0°C i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. TLC (petrol etar:EtOAc = 1:1) je pokazao da je početni materijal u potpunosti potrošen i formirana je nova tačka. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (80 mL) i isprana vodom (30 mL x 4), fiziološkim rastvorom (40 mL) i osušena preko Na2SO4. Rastvarač je uklonjen u vakuumu da se dobije sirov proizvod (700 mg). LCMS: (m/z 525.5 (M+H).
[0528] Korak H. Sinteza 2-((1H-1,2,4-triazol-1-il)metil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona i 2-((4H-1,2,4-triazol-4-il)metil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. Smeša (4-metil-5-okso-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-il)metilmetansulfonata (150 mg, 285.88 umol, 1 ekv.), 1H-1,2,4-triazola (197.45 mg, 2.86 mmol, 10 ekv.) i CsF (86.85 mg, 571.77 umol, 21.08 uL, 2
2
ekv.) u MeCN (8 mL) je mešana na 60°C pod N2tokom 18h. LCMS je pokazao da je početni materijal u potpunosti potrošen i formirana su dva nova pika. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, a ostatak je prečišćen pomoću Combiflash (od 100% DCM do 8% MeOH u DCM). Dobijeni su proizvod 2-((1H-1,2,4-triazol-1-il)metil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (55 mg) i 2-((4H-1,2,4-triazol-4-il)metil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (30 mg).
[0529] Korak I. Sinteza 2-((1H-1,2,4-triazol-1-il)metil)-6-((1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5 ,4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. U suspenziju 2-((1H-1,2,4-triazol-1-il)metil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazola-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (55 mg, 110.52 umol, 1 ekv.) i HCl /dioksana (4 M, 1 mL, 36.19 ekv.) u DCM (3 mL) je dodata H2O (1.99 mg, 110.52 umol, 0.05 mL, 1 ekv.) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 h. LCMS je pokazao da je početni materijal u potpunosti potrošen i pronađeno je 84% željenog proizvoda. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, i ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (24.1 mg, 65.60 umol, 59.35% prinos). Kolona: Xtimate C18 150*25mm*5um, pokretna faza: [voda(0.225%FA)-ACN]; B%: 13%-43%, 11.2 min. LCMS: m/z 367.9 (M+H)<+ 1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8.72 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.52 (brs, 1H), 6.26 (d, 1H), 5.92 (s, 2H), 5.43 (s, 2H), 4.30 (s, 3H).
[0530] Korak J. Sinteza 6-((1H-pirazol-3-il)metil)-2-((4H-1,2,4-triazol-4-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. U suspenziju 2-((4H-1,2,4-triazol-4-il)metil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazola-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (30 mg, 60.28 umol, 1 ekv.) i HCl /dioksana (4 M, 1 mL, 66.35 ekv.) u DCM (3 mL) je dodata H2O (50.00 mg, 2.78 mmol, 0.05 mL, 46.04 ekv.) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 sati. LCMS je pokazao da je početni materijal u potpunosti potrošen, pronađen je željeni proizvod. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, a ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (2.1 mg, 5.72 umol). Kolona: Xtimate C18150*25mm*5um; pokretna faza: [voda (0.225% FA)-ACN]; B%: 13%-43%, 11.2 min. LCMS: m/z 368.0(M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8.74 (s, 2H), 8.38 (s, 1H), 7.52 (d, 1H), 6.26 (d, 1H), 5.84 (s, 2H), 5.44 (s, 2H), 4.31 (s, 3H).
[0531] Sledeća jedinjenja su sintetisana u skladu sa Šemom E9 i postupkom iz Primera 9A-9B korišćenjem odgovarajućeg početnog materijala.
2
21
22
2
24
2
2
2
2
2
Primer 9E. Sinteza 2-((1H-1,2,4-triazol-1-il)metil)-6-((2-aminopirimidin-4-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona
[0532]
[0533] Korak A. Sinteza_2-hloro-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona U smešu 4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (3 g, 14.5 mmol) u suvom THF (80 mL) je dodat LiHMDS (30.5 mL) na -65 °C kap po kap. Posle mešanja tokom 1 sata, dodat je rastvor heksahloretana (1.8 mL, 16 mmol) u suvom THF (20 mL). Reakciona smeša je podignuta na -20 °C tokom 3 sata. Zatim je smeša ugašena zasićenim NH4Cl i mešana na sobnoj temperaturi tokom 20 min. Talog je sakupljen filtracijom i ispran sa EtOAc da bi se dobilo 3.5 g 2-hloro-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. LC-MS (ESI): m/z 241 (M+H)<+>.
[0534] Korak B. Sinteza 4-metil-2-vinil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona Pod azotom, u smešu 2-hloro-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona
2
(1.5 g, 6.2 mmol) i tributil(etenil)stanana (5.5 mL, 18.7 mmol) u DMF (30 mL) je dodat Pd(PPh3)4(0.36 g, 0.31 mmol). Reakciona smeša je mešana na 100°C tokom 2 h. Zatim je smeša ohlađena i razblažena sa EtOAc, isprana sa vodom i fiziološkim rastvorom, osušena preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovana. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0 ~ 10% MeOH u DCM) da bi se dobilo 1.4 g 4-metil-2-vinil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2, 3-d]piridazin-5(6H)-ona. LC-MS (ESI): m/z 233 (M+H)<+>. Korak C. Sinteza_4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karbaldehida_Na -60 °C, smeša 4-metil-2-vinil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (500 mg, 2.15 mmol) u DCM/MeCN (500 mL, zapremina 1:1) je prečišćena sa O3tokom 20 min. Zatim je reakcija ugašena dimetilsolfanom i koncentrovana da bi se dobilo 500 mg 4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d] piridazin-2-karbaldehida. LC-MS (ESI): m/z 235 (M+H)<+>.
[0535] Korak D. Sinteza_2-(hidroksimetil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona_U smešu 4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karbaldehida (500 mg, 2.13 mmol) u EtOH (3 mL) je dodat NaBH4(81 mg, 2.13 mmol) na 0 °C. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 5 min. Zatim je smeša sipana u zasićeni NH4Cl, ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0 ~ 8% MeOH u DCM) da bi se dobilo 120 mg 2-(hidroksimetil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. LC-MS (ESI): m/z 237 (M+H)<+>.
[0536] Korak E. Sinteza_6-((2-hloropirimidin-4-il)metil)-2-(hidroksimetil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona_U smešu 2-(hidroksimetil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (200 mg, 0.85 mmol ) u DMF (8 mL) je dodat K2CO3(351 mg, 2.54 mmol). Posle mešanja na 60°C tokom 30 minuta, dodat je rastvor 2-hloro-4-(hlorometil)pirimidina (276 mg, 1.7 mmol) u DMF (2 mL). Reakciona smeša je mešana još 4 h, sipana u zasićeni NH4Cl, ekstrahovan sa EtOAc. Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen preko anhidrovanog. Na2SO4i koncentrovan. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0 ~ 8% MeOH u DCM) da bi se dobilo 160 mg 6-((2-hloropirimidin-4-il)metil)-2-(hidroksimetil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. LC-MS (ESI): m/z 363 (M+H)<+>. Korak F. Sinteza_6-((2-(bis(2,4-dimetoksibenzil)amino)pirimidin-4-il)metil)-2-(hidroksimetil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona_U smešu 6-((2-hloropirimidin-4-il)metil)-2-(hidroksimetil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (160 mg, 0.44 mmol) u MeCN (5 mL) je dodat bis(2,4-dimetoksibenzil)amin (280 mg, 0.88 mmol) i AcOH (1 kap). Reakciona smeša je mešana na 80 °C preko noći. Reakciona smeša je isparavana i ostatak
2 1
je prečišćen pomoću prep-TLC (eluent: 5% MeOH u DCM) da bi se dobilo 75 mg 6-((2-(bis(2,4-dimetoksibenzil)amino)pirimidin-4-il)metil)-2-(hidroksimetil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. LC-MS (ESI): m/z 644 (M+H)<+>.
[0537] Korak G. Sinteza 6-((2-(bis(2,4-dimetoksibenzil)amino)pirimidin-4-il)metil)-2-(hlorometil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4' :4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona Na temperaturi od 0°C, u rastvor 6-((2-(bis(2,4-dimetoksibenzil)amino)pirimidin-4-il)metil)-2-(hidroksimetil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (75 mg, 0.12 mmol) u DCM (5 mL) je dodat Et3N (0.16 mL, 1.16 mmol) i MsCl (0.05 mL, 0.58 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa DCM, isprana zasićenim NH4Cl i fiziološkim rastvorom, osušena preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovana da bi se dobilo 70 mg sirovog proizvoda 6-((2-(bis(2,4-dimetoksibenzil)amino)pirimidin-4-il)metil)-2-(hlorometil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. LC-MS (ESI): m/z 662 (M+H)<+>.
[0538] Korak H. Sinteza 2-((1H-1,2,4-triazol-1-il)metil)-6-((2-(bis(2,4-dimetoksibenzil)amino)pirimidin-4-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona Smeša 4H-1,2,4-triazola (39 mg, 0.57 mmol) i K2CO3(78 mg, 0.57 mmol) u DMF (3 mL) je mešana na 60°C tokom 30 min. Dodat je 6-((2-(bis(2,4-dimetoksibenzil)amino)pirimidin-4-il)metil)-2-(hlorometil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on (75 mg, 0.11 mmol) i mešan je još 30 min. Suspenzija je sipana u zasićeni NH4Cl, ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, 0 ~ 10% DCM u MeOH) da bi se dobilo 60 mg 2-((1H-1,2,4-triazol-1-il)metil)-6-((2)-(bis(2,4-dimetoksibenzil)amino)pirimidin-4-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5 (6H)-ona. LC-MS (ESI): m/z 695 (M+H)<+>.
[0539] Korak I. Sinteza 2-((1H-1,2,4-triazol-1-il)metil)-6-((2-aminopirimidin-4-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona U smešu 2-((1H-1,2,4-triazol-1-il)metil)-6-((2-(bis(2,4-dimetoksibenzil)amino)pirimidin-4-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (30 mg, 0.043 mmol) u EtOH (2 mL) dodat je HCl (0.5 mL, 4 M u dioksanu). Reakciona smeša je mešana na 80 °C preko noći. Zatim je smeša ohlađena i sipana u zasićeni NaHCO3, ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobilo 8 mg 2-((1H-1,2,4-triazol-1-il)metil)-6-((2-aminopirimidin-4-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. LC-MS (ESI): m/z 395 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.80 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.12-8.10 (m, 2H), 6.60 (s, 2H), 6.19 (d, 1H), 6.01 (s, 2H), 5.19 (s, 2H), 4.26 (s, 3H).
2 2
Primer 10. Sinteza jedinjenja E10-ii
[0540]
Šema E10
[0541] Kao što je prikazano na šemi E10, reakcija E10-i sa aldehidom u prisustvu baze (npr.
2
LiHMDS) stvara jedinjenje E10-ii, koje se može razdvojiti hiralnom HPLC ili SFC da bi se dobila dva enantiomera. Kako se ovde koristi, Ar1 i Ar2 su svaki nezavisno izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani haloalkil, izborno supstituisani alkenil, izborno supstituisani alkinil, izborno supstituisani cikloalkil, izborno supstituisani heterociklil, izborno supstituisani aril.
Primer 10A. Sinteza (S)-6-((1H-indazol-4-il)metil)-2-(hidroksi(1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-4,6-dihidro-5H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona i (R)-6-((1H-indazol-4-il)met6il)-2-(hidroksi(1H)-pirazol-3-il)metil)-4-metil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona
[0542]
[0543] Korak A. Sinteza 2-(hidroksi(1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-6-((1-((2-(2))trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. Pod argonom, u rastvor 4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (0.5 g, 1.07 mmol, 1 ekv.) u THF (15 mL) je polako dodat LiHMDS (1.0 M, 2.14 mL, 2.0 ekv.) na -78° C, i reakciona smeša je mešana na -78°C tokom 1 h. Zatim je u reakcionu smešu dodat rastvor 1-(2-trimetilsililetoksimetil) pirazol-3-karbaldehida (1.21 g, 5.36 mmol, 5 ekv.) u THF (2 mL). Dobijena smeša je mešana na -78°C tokom 1 h. TLC (petrol etar:EtOAc = 2:1) pokazao je formiranje dve nove tačke. Reakciona smeša je ugašena vodenim rastvorom NH4Cl (15 mL) na -70°C, i razblažena vodom (20 mL). Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (20 mL x 3). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL) i osušeni preko Na2SO4. Rastvarač je koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen pomoću Combiflash (od 100% petrol etra do 100% EtOAc) da bi se dobio željeni proizvod (70 mg, 101.01 umol). LCMS: m/z 693,2 (M+H)<+>
[0544] Korak B. Sinteza 6-((1H-indazol-4-il)metil)-2-(hidroksi(1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4’:4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. U rastvor 2-(hidroksi(1-((2-
2 4
(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil) )etoksi)metil)-1H-indazol-4-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (0,04 g, 57.72 umol, 1 ekv.) u DCM (3 mL) je dodat TFA (65.82 mg, 577.22 umol, 42.74 uL, 10 ekv.) na 0°C, i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 36 h. LCMS je pokazao da je početni materijal u potpunosti potrošen i formirano je 57% željenog proizvoda. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, a ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (11 mg). LCMS: m/z 432,9 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13,10 (brs, 2H), 8,58 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,43 (d, 1H), 7,26 (dd, 1H), 6,93 (d, 2H ), 6,19 (d, IH), 6,07 (s, IH), 5,63 (s, 2H), 4,20 (s, 3H).
[0545] Korak C. Sinteza (S)-6-((1H-indazol-4-il)metil)-2-(hidroksi(1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona i (R)-6-((1H-indazol-4-il)metil)-2-(hidroksi(1H)-pirazol-3-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. Jedinjenje 6-((1H-indazol-4-il)metil)-2-(hidroksi(1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on je odvojeno pomoću SFC. SFC uslov: Kolona je DAICEL CHIRALCEL OJ-H (250mm*30mm, 5um); pokretna faza: A: 55% CO2; B: 45% [0.1% NH3H2O u EtOH]/min. Odvajanje SFC dalo je dva enantiomera. Jedan enantiomer (2.6 mg): LCMS: m/z 433,0 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.63 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.64 (brs, 1H), 7.47 (brd, 1H), 7.27-7.32 (m, 1H), 6.97 (brd, 1H), 6.22 (d, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.64 (s, 2H), 5.34 (brs, 1H), 4.24 (s, 3H). I 3.5 mg drugog enantiomera: LCMS: m/z 433.0 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.63 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.64 (brs, 1H), 7.48 (brd, 1H), 7.28-7.32 (m, 1H), 6.98 (brd, 1H), 6.23 (d, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.64 (s, 2H), 5.34 (brs, 1H), 4.25 (s, 3H).
Primer 10B. Sinteza (R)-6-((1H-pirazol-3-il)metil)-2-(hidroksi(1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona i (S)-6-((1H-pirazol-3-il)metil)-2-(hidroacit(1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona
[0546]
[0547] Korak A. Sinteza 2-(hidroksi(1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-
2
4-metil-6-((1-((2-(2))trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. Pod argonom, u rastvor 4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (0.5 g, 1.20 mmol, 1 ekv.) u THF (10 mL) je polako dodat LiHMDS (1.0 M, 2.41 mL, 2 ekv.) na -78°C, i reakciona smeša je mešana na -70°C tokom 1 h. Zatim je u reakcionu smešu dodat rastvor 1-(2-trimetilsililetoksimetil) pirazol-3-karbaldehida (816.97 mg, 3.61 mmol, 3 ekv.) u THF (1 mL). Dobijena smeša je mešana na -70°C tokom 1 h. TLC (petrol etar:EtOAc = 1:1) je pokazala da su formirane dve nove tačke. Reakciona smeša je ugašena vodenim rastvorom NH4Cl (5 mL) na -70°C, a zatim zagrejana do sobne temperature. Smeša je razblažena vodom (10 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (8 mL x 3). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (10 mL) i osušeni preko Na2SO4. Rastvarač je koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen pomoću Combiflash (od 100% petrol etra do 100% EtOAc) da bi se dobio sirovi proizvod (130 mg) kao bledo braon guma, koja je korišćena za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. LCMS: m/z 643.2 [M+H]<+>
[0548] Korak B. Sinteza 6-((1H-pirazol-3-il)metil)-2-(hidroksi(1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. U rastvor 2-(hidroksi(1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-6-((1-((2-(trimetilsilil) )etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona (0.13 g, 202.20 umol, 1 ekv.) u DCM (8 mL) je dodat TFA (4.62 g, 40.52 mmol, 3 mL, 200.38 ekv.), a zatim H2O (500.00 mg, 27.75 mmol, 0.5 mL, 137.26 ekv.), zatim je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 18 h, zatim zagrevana na 40°C tokom 18 h. LCMS je pokazao da je početni materijal u potpunosti potrošen. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, a ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC da bi se dobio željeni proizvod (20.5 mg). LCMS: m/z 382.9 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.72 (brs, 1H), 12.61 (brs, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.56-7.62 (m, 2H), 6.82 (brs, 1H), 6.18 (d, 1H), 5.99-6.09 (m, 2H), 5.24-5.32 (m, 2H), 4.19 (s, 3H).
[0549] Korak C. Sinteza (R)-6-((1H-pirazol-3-il)metil)-2-(hidroksi(1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona i (S)-6-((1H-pirazol-3-il)metil)-2-(hidroksi(1H)-pirazol-3-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-ona. Jedinjenje 6-((1H-pirazol-3-il)metil)-2-(hidroksi(1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-4H-tiazolo[5',4':4,5] pirolo[2,3-d]piridazin-5(6H)-on je odvojeno pomoću SFC. SFC uslov: Kolona je DAICEL CHIRALCEL OJ-H (250mm*30mm, 5um); pokretna faza: A: 55% CO2; B: 45% [0.1% NH3H2O u EtOH]/min. Odvajanjem SFC dobija se 2-[(R)-hidroksi(1H-pirazol-3-il)metil]-4-metil-6-(1H-pirazol-3-ilmetil)tiazolo[3,4]pirolo[1,3-d]piridazin-5-on i 2-[(S)-hidroksi(1H-pirazol-3-il)metil]-4-metil-6-(1H-pirazol-3-ilmetil)tiazolo[3,4]pirolo[1,3-d]piridazin-5-on. Jedan
2
izomer (4.4 mg): LCMS: m/z 383 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ ppm 8.39 (s, 1H), 7.61 (brs, 1H), 7.55 (brs, 1H), 6.34 (brs, 1H), 6.25 (brs, 1H), 6.18 (brs, 1H), 5.44 (s, 2H), 4.29 (s, 3H). Drugi izomer (4.1 mg): LCMS: m/z 383 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8.40 (s, 1H), 7.59 (brs, 1H), 7.54 (brs, 1H), 6.34 (brs, 1H), 6.26 (brs, 1 H), 6.19 (brs, 1 H), 5.44 (s, 2H), 4.29 (s, 3H).
Primer 10C: Sinteza 6-((1H-pirazol-3-il)metil)-2-(difluoro(1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5’,4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona
[0550]
[0551] Korak A. 3-(6-((1-(N,N-dimetilsulfamoil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karbonil)-N,N-dimetil-1H-pirazol-1-sulfonamid. U smešu 3-((2-((1-(N,N-dimetilsulfamoil)-1H-pirazol-3-il)(hidroksi)metil)-4-metil-5-okso-4,5-dihidro-6H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6-il)metil)-N,N-dimetil-1H-pirazol-1-sulfonamida (50 mg, 83.80 umol, napravljen slično kao E10-1) u DCM (1.5 mL) je dodat MnO2(72.85 mg, 838.00 umol) i smeša je mešana na 15 °C tokom 1.5 sata. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod (60 mg, sirov). LCMS: m/z 595.1 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.34 (s, 1H), 8.12 (d, 1H), 7.90 (d, 1H), 7.41 (d, 1H), 6.38 (d, 1H), 5.54 (s, 2H), 4.49 (s, 3H), 3.10 (s, 6H) 2.93 (s, 6H).
[0552] Korak B. 3-((2-((1-(N,N-dimetilsulfamoil)-1H-pirazol-3-il)difluorometil)-4-metil-5-okso-4,5-dihidro-6H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6-il)metil)-N,N-dimetil-1H-pirazol-1-sulfonamid. U rastvor 3-(6-((1-(N,N-dimetilsulfamoil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karbonil)-N,N-dimetil-1H-pirazol-1-sulfonamida (240 mg, 403.60 umol) u DCE (4 mL ) je dodat BAST (1.34 g, 6.05 mmol, 1.33 mL), i smeša je mešana na 50 °C tokom 12 h. Reakciona smeša je razblažena dihlorometanom (20 mL) i isprana zasićenim NaHCO3(10 mL *2), osušena preko anhidrovanog
2
Na2SO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirov proizvod (300 mg, sirov) koji je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. LCMS: m/z 617.1 (M+H)<+>.
[0553] Korak C. 6-((1H-pirazol-3-il)metil)-2-(difluoro(1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-on. U smešu 3-((2-((1-(N,N-dimetilsulfamoil)-1H-pirazol-3-il)difluorometil)-4-metil-5-okso-4,5-dihidro-6H-tiazolo [5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6-il)metil)-N,N-dimetil-1H-pirazol-1-sulfonamida (240 mg, 163.47 umol) u DCM (2 mL) je dodata TFA (2.07 g, 18.15 mmol, 1.34 mL) i smeša je zagrevana do 50 °C tokom 5 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC (kolona: Agela ASB 150*25mm*5um; pokretna faza: [voda (0.05%HCl)-ACN]; B%: 30%-60%, 8 min) da bi se dobio željeni proizvod (3.9 mg, 5.45% prinosa, 92% čistoće) kao bela čvrsta supstanca. LCMS: m/z 403.1 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.67 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 6.72 (s, 1H), 6.16 (s, 1H), 5.36 (s, 2H), 4.28 (s, 3H).
Primer 10D: Sinteza 2-(1-(1H-pirazol-3-il)etil)-6-((1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-4,6-dihidro-5H-tiazol[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona
[0554]
[0555] Korak A: 3-((2-(1-(1-(N,N-dimetilsulfamoil)-1H-pirazol-3-il)-1-hidroksietil)-4-metil-5-okso-4,5-dihidro-6H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6-il)metil)-N,N-dimetil-1H-pirazol-1-sulfonamid. U rastvor 3-(6-((1-(N,N-dimetilsulfamoil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karbonil)-N,N-dimetil-1H-pirazol-1-sulfonamida (160 mg, 269.07 umol) u THF (3 mL) je dodat CH3MgBr (3 M, 179.38 uL) i reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 3 h. Reakciona smeša je sipana u zasićeni NH4Cl (10 mL) na 0 °C, ekstrahovana etil acetatom (20 mL x 3). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (10 mL), osušeni preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu (ISCO<®>; 12 g SepaFlash<®>Silikatna fleš kolona, eluent od 0~90% etil acetat/petrol etar gradijent @ 40 mL/min) da bi se dobio željeni proizvod (50 mg, 81.87 umol). LCMS: m/z 611.1 (M+H)<+>.
[0556] Korak B: 2-(1-(1H-pirazol-3-il)etil)-6-((1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-4,6-dihidro-
2
SH-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-on. U smešu 3-((2-(1-(1-(N,N-dimetilsulfamoil)-1H-pirazol-3-il)-1-hidroksietil)-4-metil-5-okso-4,5-dihidro-6H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-6-il)metil)-N,N-dimetil-1H-pirazol-1-sulfonamida (50 mg, 81.87 umol) u DCE (0.5 mL) je dodat Et3SiH (19.04 mg, 163.75 umol, 26.15 uL) na 0 °C, a zatim TFA (1.54 g, 13.51 mmol, 1 mL, 164.96 umol na 1 °C) i mešana je na 1°C h. Smeša je zagrevana do 50 °C još 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC (kolona: Agela ASB 150*25mm*5um; mobilna faza: [voda (0.05% HCl)-ACN]; B%: 25%-55%, 7 min) da bi se dobilo 7.0 mg željeni proizvod. LCMS: m/z 381.2 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.46 (s, 1H), 8.15 (d, 2H), 6.78 (d, 1H), 6.74 (d, 1H), 5.60 (s, 2H), 5.00 (q, 1H), 4.33 (s, 3H), 1.94 (d, 3H).
Primer 10E: Sinteza 6-((1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-2-(1H-pirazol-3-karbonil)-4,6-dihidro-5H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-5-ona
[0557]
[0558] Korak A. 4-metil-2-(1H-pirazol-3-karbonil)-6-(1H-pirazol-3-ilmetil)tiazolo[3,4]pirolo[1,3-d]piridazin-5-on. U rastvor 3-(6-((1-(N,N-dimetilsulfamoil)-1H-pirazol-3-il)metil)-4-metil-5-okso-5,6-dihidro-4H-tiazolo[5',4':4,5]pirolo[2,3-d]piridazin-2-karbonil)-N,N-dimetil-1H-pirazol-1-sulfonamida (50 mg, 84.08 umol) u DCE (1.5 mL) dodata je TFA (2.31 g, 20.26 mmol, 1.5 mL) i reakciona smeša je zagrevana do 50 °C tokom 12 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC da bi se dobilo 6.0 mg željenog proizvoda. LCMS: m/z 381.1 (M+H).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.72 (s, 1H), 7.96 (d, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.49 (d, 1H), 6.19 (d, 1H), 5.37 (s, 2H), 4.38 (s, 3H).
Primer 11. Test PKM2
Postupak:
[0559] Osnovni rastvor enzima PKM2 je razblažen da se dobije 1.11x Reakciona mešavina (bez
2
ADP). 1 µL test jedinjenja je prvo dodat u bunarčiće, a zatim 40 µL 1.11x Reakciona mešavina (bez ADP) i inkubirano je na sobnoj temperaturi (25°C) 60 min. Reakcija je započeta sa 10 µL ADP (0.4 mM konačna koncentracija), dovodeći konačnu Reakcionu mešavinu do 1x, a napredak reakcije je meren kao promene u apsorpciji na talasnoj dužini od 340 nm na sobnoj temperaturi.
[0560] Pripremanje test jedinjenja: Test jedinjenja su pripremljena pri 50x konačnoj koncentraciji u DMSO. Napravljena su 1 do 3 razblaženja za 11 tačaka (na primer, 50 µ L jedinjenja od 5000 µM je dodato u 100 µL 100% DMSO da bi se dobilo 1667 µM, 50 µL ovoga dodato u 100 µL DMSO tako da se dobije 556 µM i tako dalje). Jedinjenja su dodata u test kao razblaženje od 1 do 50 (1 µL u 50 µL) da bi se dobila maksimalna koncentracija od 100 µM, smanjujući 3 puta za 11 poena.
[0561] Reakciona mešavina: PKM2 (5 ng/bunarčiću, 0.1 µ g/ml), ADP (0.4 mM), PEP (0.11 mM), NADH (180 µM), LDH (0.005 U/µL, Sigma# L3888), 1 mM DTT, 0.03% BSA u 1x Reakcionom puferu
[0562] Reakcioni pufer: 100 mM KCI, 50 mM Tris pH 7.5, 5 mM MgCl2.
2

Claims (16)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u postupku lečenja proliferativne bolesti, gojaznosti, dijabetičke bolesti, ateroskleroze, restenoze, koronarne arterijske bolesti, Bloom-ovog sindroma ili autoimune bolesti; pri čemu postupak sadrži primenu efikasne količine jedinjenja formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli na pacijenta, pri čemu:
    Q je vodonik, izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani alkenil, izborno supstituisani alkinil, izborno supstituisani cikloalkil, izborno supstituisani heterociklil, izborno supstituisani aril, ili izborno supstituisani heteroaril; R<1>je vodonik, izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani haloalkil, izborno supstituisani alkenil, izborno supstituisani alkinil, izborno supstituisani cikloalkil, izborno supstituisani heterociklil, izborno supstituisani aril, -OR<o1>, - C(=O)R<c1>ili grupa za zaštitu azota; L<1>je veza, izborno supstituisani alkilen, -O-, -S-, -S-CH2-, -S(=O)CH2-, -S(=O)2CH2-, -NR<3>-, -NR<3>C(=O)-, -C(=O)NR<3>-, -C(=O)-, -OC(=O)-, - C(=O)O-, -NR<3>C(=O)O-, -OC(=O)NR<3>-, -NR<3>C(=O)NR<3>-, -OC(R<4>)2-, -C(R<4>)2O--NR<3>C(R<4>)2-, -C(R<4>)2NR<3>-, -S(=O)2-, -S(=O)-, -S(=O)2O-, -OS(=O)2-, -S(=O)O-, - OS(=O)-, -S(=O)2NR<3>-, -NR<3>S(=O)2-, -S(=O)NR<3>-, -NR<3>S(=O)-, -NR<3>S(=O)2O-, - OS(=O)2NR<3>-, -NR<3>S(=O)O-, -OS(=O)NR<3>-, ili -S(=O)(=NR<3>)-, pri čemu je tačka vezivanja za R<2>na levoj strani; L<2>je veza, izborno supstituisani alkilen, -C(=O)-, -S(=O)2-, ili -S(=O)-, pri čemu je tačka vezivanja za Q na desnoj strani; R<2>je vodonik, halogen, izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani alkoksi, izborno supstituisani alkenil, izborno supstituisani alkinil, izborno supstituisani cikloalkil, izborno supstituisani heterociklil, izborno supstituisani aril, ili izborno supstituisani heteroaril, ili zaštitna grupa za azot kada je L<1>jednako -NR<3>-, - NR<3>C(=O)-, -NR<3>C(=O)O-, -NR<3>C(R<4>)2-, -NR<3>S(=O)2-, -NR<3>S(=O)-, - NR<3>C(=O)NR<3>-, - NR<3>S(=O)2O-, ili -NR<3>S(=O)O-, grupa za zaštitu kiseonika kada je L<1>jednako -O-, -OC(=O)-, -OC(=O)NR<3>-, -OC(R<4>)2-, -OS(=O)2-, -OS(=O)2NR<3>-, -OS(=O)NR<3>-, ili -OS(=O)-, ili grupa za zaštitu sumpora kada je L<1>jednako -S-; svaka instanca R<3>je nezavisno vodonik, -OR<o2>izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani alkenil, izborno supstituisani alkinil, izborno supstituisani cikloalkil, izborno supstituisani heterociklil, izborno supstituisani aril, izborno supstituisani heteroaril, ili zaštitna grupa za azot; svaka instanca R<o1>, i R<o2>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani alkil ili zaštitna grupa za kiseonik; svaka instanca R<c1>je nezavisno izborno supstituisani alkil ili -N(R<cn>)2, pri čemu svaka instanca R<cn>je nezavisno vodonik, -C1-6alkil, ili zaštitna grupa za azot; i svaka instanca R<4>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani alkenil, izborno supstituisani alkinil, izborno supstituisani cikloalkil, izborno supstituisani heterociklil, izborno supstituisani aril, ili izborno supstituisani heteroaril.
  2. 2. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu prema zahtevu 1, naznačeno time što bolest je kancer ili benigna hiperplazija prostate.
  3. 3. Jedinjenje formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu je formula (I) kao što je definisana u zahtevu 1, za upotrebu u postupku lečenja hiperglikemije; pri čemu postupak sadrži primenu efikasne količine jedinjenja formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli na pacijenta.
  4. 4. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu prema zahtevu 1, naznačeno time što bolest je dijabetička bolest, kao što je dijabetička nefropatija.
  5. 5. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, naznačeno time što: (a) Q je vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, izborno supstituisani C3-C12cikloalkil, izborno supstituisani 3- do 14-člani heterociklil, izborno supstituisani 6- do 14-člani aril, ili izborno supstituisani 5- do 14-člani heteroaril; R<1>je vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, izborno supstituisani -C1-C6haloalkil, izborno supstituisani -C2-C6alkenil, izborno supstituisani -C2-C6alkinil, izborno supstituisani C3-C12cikloalkil, izborno supstituisani 3- do 14-člani heterociklil, izborno supstituisani 6- do 12-člani aril, -OR<o1>, - C(=O)R<c1>ili grupa za zaštitu azota; L<1>je veza, izborno supstituisani C1-6alkilen, -O-, -S-, -S-CH2-, - S(=O)CH2-, -S(=O)2CH2-, -NR<3>-, -NR<3>C(=O)-, -C(=O)NR<3>-, -C(=O)-, -OC(=O)-, -C(=O)O-, -NR<3>C(=O)O-, -OC(=O)NR<3>-, -NR<3>C(=O)NR<3>-, -OC(R<4>)2-, -C(R<4>)2O-, -NR<3>C(R<4>)2-, -C(R<4>)2NR<3>-, -S(=O)2-, -S(=O)-, -S(=O)2O-, -OS(=O)2-, - S(=O)O-, -OS(=O)-, -S(=O)2NR<3>-, -NR<3>S(=O)2-, -S(=O)NR<3>-, -NR<3>S(=O)-, -NR<3>S(=O)2O-, -OS(=O)2NR<3>-, -NR<3>S(=O)O-, -OS(=O)NR<3>-, ili -S(=O)(=NR<3>)-, pri čemu je tačka vezivanja za R<2>na levoj strani; L<2>je veza, izborno supstituisani C1-C6alkilen, -C(=O)-, -S(=O)2-, ili - S(=O)-, pri čemu je tačka vezivanja za Q na desnoj strani; R<2>je vodonik, halogen, izborno supstituisani -C1-C6alkil, izborno supstituisani -C1-C6alkoksi, izborno supstituisani -C3-C12cikloalkil, izborno supstituisani 3- do 14-člani heterociklil, izborno supstituisani -C6-C12aril, ili izborno supstituisani 3- do 14-člani heteroaril, ili grupa za zaštitu azota kada je L<1>jednako -NR<3>-, -NR<3>C(=O)-, -NR<3>C(=O)O-, -NR<3>C(R<4>)2-, -NR<3>S(=O)2-, -NR<3>S(=O)-, -NR<3>C(=O)NR<3>-, -NR<3>S(=O)2O-, ili -NR<3>S(=O)O-, ili grupa za zaštitu sumpora kada je L<1>jednako -S-; svaka instanca R<3>je nezavisno vodonik, -OR<o2>izborno supstituisani -C1-C6alkil, izborno supstituisani -C2-C6alkenil, izborno supstituisani -C2-C6alkinil, izborno supstituisani C3-C12cikloalkil, izborno supstituisani C3-C12heterociklil, izborno supstituisani C6-C12aril, izborno supstituisani C5-C12heteroaril, ili grupa za zaštitu azota; svaka instanca R<o1>i R<o2>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za kiseonik; svaka instanca R<c1>je nezavisno izborno supstituisani -C1-C6alkil ili -N(R<cn>)2, pri čemu svaka instanca R<cn>je nezavisno vodonik, -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za azot; svaka instanca R<4>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, izborno supstituisani -C2-C6alkenil, izborno supstituisani -C2-C6alkinil, izborno supstituisani C3-C12cikloalkil, izborno supstituisani 3- do 14-člani heterociklil, izborno supstituisani C6-C12aril, ili izborno supstituisani 5- do 14-člani heteroaril; ili (b) Q je C6-C12aril, 5- do 6-člani monociklični heteroaril ili 8- do 12-člani biciklični heteroaril, od kojih je svaki supstituisan sa 0-3 instanci R<c>; R<1>je izabran od sledećih: vodonik, -C1-C6alkil, -C1-C6haloalkil, C3-C7monociklični cikloalkil i 3- do 14-člani heterociklil, -OR<o1>, -C(=O)R<c1>ili grupa za zaštitu azota; pri čemu je svaki alkil, cikloalkil ili heterociklil supstituisan sa 0-3 instance R<d>; R<2>je izabran od sledećih: vodonik, halogen, -C1-C6alkil, -C1-C6alkoksi, C3-C7monociklični cikloalkil, C6-C12biciklični cikloalkil, 3- do 14-člani heterociklil, C6-C12aril, 5- do 6-člani monociklični heteroaril, 8- do 12-člani biciklični heteroaril, pri čemu je svaki alkil, cikloalkil, heterociklil, aril i heteroaril supstituisani sa 0-3 instanci R<e>, ili grupa za zaštitu azota kada je L<1>jednako -NR<3>-, -NR<3>C(=O)-, -NR<3>C(=O)O-, -NR<3>C(R<4>)2-, -NR<3>S(=O)2-, -NR<3>S(=O)-, -NR<3>C(=O)NR<3>-, -NR<3>S(=O)2O-, ili -NR<3>S(=O)O-, grupa za zaštitu kiseonika kada je L<1>jednako -O-, -OC(=O)-, -OC(=O)NR<3>-, -OC(R<4>)2-, -OS(=O)-, -OS(=O)2-, -OS(=O)2NR<3>-, -OS(=O)NR<3>-, 2 ili -OS(=O)-, ili grupa za zaštitu sumpora kada je L<1>jednako -S-; R<3>je izabran od sledećih: vodonik, -OR<o2>, -C1-C6alkil, C3-C7monociklični cikloalkil, C6-C12biciklični cikloalkil, 3- do 14-člani heterociklil, C6-C12aril, 5- do 6-člani monociklični heteroaril i 8- do 12-člani biciklični heteroaril, pri čemu je svaki alkil, cikloalkil, heterocikloalkil, aril i heteroaril supstituisan sa 0-3 instanci R<f>; R<4>je izabran od sledećih: vodonik, -C1-C6alkil, C3-C7monociklični cikloalkil i 3- do 14-člani heterociklil, pri čemu je svaki alkil, cikloalkil ili heterociklil supstituisan sa 0-1 instancom R<g>; L<1>je veza, alkilen supstituisan sa 0-3 instanci R<h>, -O-, -S-, -S-CH2-, -S(=O)CH2-, -S(=O)2CH2-, -NR<3>-, -NR<3>C(=O)-, -C(=O)NR<3>-, -C(=O)-, -OC(=O)-, -C(=O)O-, -NR<3>C(=O)O-, -OC(=O)NR<3>-, -NR<3>C(=O)NR<3>-, -OC(R<4>)2-, -C(R<4>)2O-, -NR<3>C(R<4>)2-, -C(R<4>)2NR<3>-, -S(=O)2-, -S(=O)-, -S(=O)2O-, -OS(=O)2-, - S(=O)O-, -OS(=O)-, -S(=O)2NR<3>-, -NR<3>S(=O)2-, -S(=O)NR<3>-, -NR<3>S(=O)-, -NR<3>S(=O)2O-, -OS(=O)2NR<3>-, -NR<3>S(=O)O-, -OS(=O)NR<3>-, ili -S(=O)(=NR<3>)-, pri čemu je tačka vezivanja za R<2>na levoj strani; L<2>je veza, alkilen supstituisani sa 0-3 instance R<h>, -C(=O)-, - S(=O)2-, ili -S(=O)-, pri čemu je tačka vezivanja za Q na desnoj strani; svaki R<c>je nezavisno izabran od sledećih: halo, -C1-C6alkil, -C1-C6haloalkil, -C1-C6hidroksialkil, -OH, -OC1-C6alkil, -C1-C6aminoalkil, -NH(C1-C6alkil), -N(C1-C6alkil)2, -C(=O)OC1-C6alkil, -C(=O)OH, -C(=O)C1-C6alkil, -C(=O)NH2, -C(=O)NH(C1-C6alkil), -C(=O)N(C1-C6alkil)2, -NHC(=O)NH2, -NHC(=O)NH(C1-C6alkil), -NH(C=O)N(C1-C6alkil)2, -NHC(=O)(C1-C6alkil), -N(C1-C6alkil)C(=O)(C1-C6alkil), -S(=O)2NH2, -S(=O)2NH(C1-C6alkil), -S(=O)2N(C1-C6alkil)2, -NHS(=O)2(C1-C6alkil), -NH2, -CN i -NO2; ili dve instance R<c>vezane za iste ili susedne atome ugljenika, uzete zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani formiraju cikloalkil ili heterociklil C(=O)OH; svaki R<d>je nezavisno izabran od sledećih: halo, -C1-C6alkil, -OH, -OC1-C6alkil, -NH2i -CN; svaki R<e>je nezavisno izabran od sledećih: halo, -C1-C6alkil, -C1-C6haloalkil, -C1-C6hidroksialkil, -OH, -OC1-C6alkil, -C1-C6aminoalkil, -NH(C1-C6alkil), -N(C1-C6alkil)2, -C(=O)OC1-C6alkil, -C(=O)OH, -C(=O)C1-C6alkil, -C(=O)NH2, -C(=O)NH(C1-C6alkil), -C(=O)N(C1-C6alkil)2, -NHC(=O)NH2, -NHC(=O)NH(C1-C6alkil), -NH(C=O)N(C1-C6alkil)2, -NHC(=O)(C1-C6alkil), -N(C1-C6alkil)C(=O)(C1-C6alkil), -S(=O)2NH2, -S(=O)2NH(C1-C6alkil), -S(=O)2N(C1-C6alkil)2, -NHS(=O)2(C1-C6alkil), -NH2, -CN i -NO2; ili dve instance R<e>vezane za iste ili susedne atome ugljenika, uzete zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezane formiraju cikloalkil ili heterociklil; svaki R<f>je nezavisno izabran od sledećih: halo, -C1-C6alkil, -C1-C6haloalkil, -C1-C6alkoksi, -OH, -NH2, -CN i -NO2; svaki R<g>je nezavisno izabran od sledećih: halo, -C1-C6alkil, -C1-C6haloalkil, -C1-C6alkoksi, -OH, NH2, -CN i NO2i; svaki R<h>je nezavisno izabran od sledećih: halo, -C1-C6alkil, -C1-C6haloalkil, -C1-C6hidroksialkil, -OH, -OC1-C6alkil, -C1-C6aminoalkil, -NH(C1-C6alkil), -N(C1-C6alkil)2, -C(=O)OC1-C6alkil, -C(=O)OH, -C(=O)C1-C6alkil, -C(=O)NH2, -C(=O)NH(C1-C6alkil), -C(=O)N(C1-C6alkil)2, -NHC(=O)NH2, -NHC(=O)NH(C1-C6alkil), - NH(C=O)N(C1-C6alkil)2, -NHC(=O)(C1-C6alkil), -N(C1-C6alkil)C(=O)(C1-C6alkil), -S(=O)2NH2, -S(=O)2NH(C1-C6alkil), -S(=O)2N(C1-C6alkil)2, -NHS(=O)2(C1-C6alkil), -NH2, -CN i -NO2, S(=O)2aril, S(=O)2heteroaril i =NOH ili dve instance R<h>vezane za iste ili susedne atome ugljenika, uzete zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezane formiraju cikloalkil ili heterociklil.
  6. 6. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, naznačeno time što je jedinjenje formule (II):
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde: R<a>i R<b>su svaki nezavisno vodonik, halogen, -CN, -NO2, -N3, izborno supstituisani alkil, -OR<o3>, -N(R<n1>)2, -C(=O)N(R<n1>)2ili -C(=O)R<c2>, ili R<a>i R<b>mogu se uzeti zajedno sa atomom ugljenika da bi se formirao izborno supstituisani cikloalkil ili izborno supstituisani heterociklil; svaka instanca R<n1>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupu za azot; svaka instanca R<o3>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za kiseonik; i svaka instanca R<c2>je nezavisno izborno supstituisani -C1-C6alkil.
  7. 7. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, pri čemu L<1>je C1-6alkilen supstituisan sa R<j>i R<k>; pri čemu svaka instanca R<j>i R<k>je nezavisno izabrana od sledećih: H, halogen, -CN, -OR<o7>, -N(R<n5>)2, -N(R<n5>)C(=O) R<c5>, -C(=O)N(R<n1>)2, -C(=O)R<c5>, -C(=O)OR<o7>, - SR<js>, -S(=O)2R<js>, ili -S(=O)R<js>, izborno supstituisani -C1-C6alkil; ili R<j>i R<k>mogu se uzeti zajedno sa atomom ugljenika da formiraju C=O, C=NR<jn>, izborno supstituisani C3-C6monociklični cikloalkil prsten ili izborno supstituisani C3-C6monociklični heterociklil prsten; 2 svaki od R<n5>i R<jn>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, -OR<o8>ili grupa za zaštitu azota; svaka instanca R<o7>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za kiseonik; svaka instanca R<c5>je nezavisno izborno supstituisani -C1-C6alkil; i svaka instanca R<js>je nezavisno izborno supstituisani -C1-C6alkil, izborno supstituisani C6-12aril, izborno supstituisani heteroaril, ili zaštitna grupa za sumpor.
  8. 8. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, pri čemu je Q jedne od sledećih formula:
    gde: svaka instanca R<n>je nezavisno vodonik, halogen, -CN, -NO2, -N3, izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani alkenil, izborno supstituisani alkinil, izborno supstituisani cikloalkil, izborno supstituisani aril, izborno supstituisani heterociklil, izborno supstituisani heteroaril, -OR<o4>, -SR<s1>, -N(R<n2>)2, -C(=O)N(R<n2>)2, -N(R<n2>)C(=O)R<c3>, -C(=O)R<c3>, -C(=O)OR<o4>, -OC(=O)R<c3>, -S(=O)R<s1>, -S(=O)2R<s1>, -S(=O)OR<o4>, -OS(=O)R<c3>, -S(=O)2OR<o4>, -OS(=O)2R<c3>, -S(=O)N(R<n2>)2, -S(=O)2N(R<n2>)2, -N(R<n2>)S(=O)R<sl>, -N(R<n2>)S(=O)2R<s1>, -N(R<n2>)C(=O)OR<o4>, -OC(=O)N(R<n2>)2, -N(R<n2>)C(=O)N(R<n2>)2, -N(R<n2>)S(=O)N(R<n2>)2, -N(R<n2>)S(=O)2N(R<n2>)2, -N(R<n2>)S(=O)OR<o4>, -N(R<n2>)S(=O)2OR<04>, -OS(=O)N(R<n2>)2, ili -OS(=O)2N(R<n2>)2; ili dve instance R<n>vezane za iste ili susedne atome ugljenika, uzete zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezane tako da formiraju izborno supstituisani cikloalkil ili heterocikloalkil; gde: svaka instanca R<n2>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za 2 azot; svaka instanca R<o4>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za kiseonik; svaka instanca R<o3>je nezavisno izborno supstituisani -C1-C6alkil; svaka instanca R<s1>je nezavisno izborno supstituisani -C1-C6alkil ili zaštitnu grupu za sumpor; n je 0, 1, 2 ili 3, kako valenca dozvoljava; i svaki od R<na>, R<nb>, i R<nd>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili grupa za zaštitu azota.
  9. 9. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-7, gde je Q jedne od sledećih formula:
    2
    pri čemu svaka instanca R<n>je nezavisno izabrana od sledećih: vodonik, halogen, -CN, -NO2, -N3, izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani alkenil, izborno supstituisani alkinil, izborno supstituisani cikloalkil, izborno supstituisani aril, izborno supstituisani heterociklil, izborno supstituisani heteroaril, -OR<o4>, -SR<s1>, - N(R<n2>)2, -C(=O)N(R<n2>)2, - N(R<n2>)C(=O)R<c3>, -C(=O)R<c3>, -C(=O)OR<o4>, -OC(=O)R<c3>, - S(=O)R<s1>, -S(=O)2R<s1>, -S(=O)OR<o4>, -OS(=O)R<c3>, -S(=O)2OR<o4>, -OS(=O)2R<c3>, -S(=O)N(R<n2>)2, -S(=O)2N(R<n2>)2, -N(R<n2>)S(=O)R<s1>, -N(R<n2>)S(=O)2R<s1>, -N(R<n2>)C(=O)OR<o4>, - OC(=O)N(R<n2>)2, -N(R<n2>)C(=O)N(R<n2>)2, -N(R<n2>)S(=O)N(R<n2>)2, -N(R<n2>)S(=O)2N(R<n2>)2, -N(R<n2>)S(=O)OR<o4>, -N(R<n2>)S(=O)2OR<o4>, -OS(=O)N(R<n2>)2, -OS(=O)2N(R<n2>)2, ili dve instance R<n>vezane za iste ili susedne atome ugljenika, uzete zajedno sa atomima za koje su vezane formiraju izborno supstituisani cikloalkil ili heterocikloalkil; svaka instanca R<na>i R<nb>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za azot; svaka instanca R<n2>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za azot; svaka instanca R<o4>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za kiseonik; svaka instanca R<o3>je nezavisno izborno supstituisani -C1-C6alkil; svaka instanca R<s1>je nezavisno izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili grupa za zaštitu sumpora; i n je 0, 1, 2 ili 3, kako valenca dozvoljava.
  10. 10. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, naznačeno time što je R<2>izabran od sledećih: vodonik, hidroksil, halogen, -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkoksil, fenil, naftalenil, C3-6cikloalkil, 5-člani heteroaril, 6-člani heteroaril, 8-člani biciklični heteroaril, 9-člani biciklični heteroaril, pri čemu je svaki alkil, alkenil, fenil i heteroaril supstituisan sa 0-3 instance R<e>. 2
  11. 11. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, gde R<2>ima jednu od sledećih formula:
    2
    pri čemu svaka instanca R<p>je nezavisno izabrana od sledećih: vodonik, halogen, -CN, -NO2, -N3, izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani alkenil, izborno supstituisani alkinil, izborno supstituisani cikloalkil, izborno supstituisani aril, izborno supstituisani heterociklil, izborno supstituisani heteroaril, -OR<o6>, -SR<s2>, - N(R<n3>)<2>, -C(=O)N(R<n3>)2, - N(R<n3>)C(=O)R<c4>, -C(=O)R<c4>, -C(=O)OR<o6>, -OC(=O)R<c4>, - S(=O)R<s2>, -S(=O)2R<s2>, -S(=O)OR<o6>, -OS(=O)R<c4>, -S(=O)2OR<o6>, -OS(=O)2R<c4>, -S(=O)N(R<n3>)2, -S(=O)2N(R<n3>)2, -N(R<n3>)S(=O)R<s2>, -N(R<n3>)S(=O)2R<s2>, -N(R<n3>)C(=O)OR<o6>, -OC(=O)N(R<n3>)2, -N(R<n3>)C(=O)N(R<n3>)2, -N(R<n3>)S(=O)N(R<n3>)2, -N(R<n3>)S(=O)2N(R<n3>)2,-N(R<n3>)S(=O)OR<o6>, -N(R<n3>)S(=O)2OR<o6>, -OS(=O)N(R<n3>)2, -OS(=O)2N(R<n3>)2, ili dve instance R<p>vezane za iste ili susedne atome ugljenika, uzete zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju izborno supstituisani cikloalkil ili heterocikloalkil; svaka instanca R<n3>, R<nc>, i R<nd>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za azot; svaka instanca R<o6>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za kiseonik; svaka instanca R<o4>je nezavisno izborno supstituisani -C1-C6alkil; svaka instanca R<s2>je nezavisno izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili grupa za zaštitu sumpora; i p je 0, 1, 2 ili 3, kako valenca dozvoljava; izborno pri čemu svaka instanca R<p>je nezavisno vodonik, halogen, izborno supstituisani C1-4alkil, -CN-NO2-N3, -OR<o4>, -N(R<n2>)2, -C(=O)N(R<n2>)2, -C(=O)R<c3>, ili -C(=O)OR<o4>.
  12. 12. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-7 i 10 ili 11, naznačeno time što je jedinjenje formule (III):
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu R<a>i R<b>su kao što su definisani u zahtevu 6; i R<n>i n su kao što su definisani u zahtevu 8 ili zahtevu 9.
  13. 13. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-8 i 10 ili 11, pri čemu (a) jedinjenje je formule (IV):
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu R<a>i R<b>su kao što su definisani u zahtevu 6; i R<n>i n su kao što su definisani u zahtevu 8 ili zahtevu 9; ili (b) jedinjenje je formule
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde R<a>i R<b>su kao što su definisani u zahtevu 6; R<n>je kao što je definisan u zahtevu 8 ili zahtevu 9; i m je 0, 1 ili 2; ili 1 (c) jedinjenje je formule
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde R<a>i R<b>su kao što su definisani u zahtevu 6; R<n>je kao što je definisan u zahtevu 8 ili zahtevu 9; m je 0, 1 ili 2; i R<nc>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za azot; ili (d) jedinjenje je formule (IX):
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde R<a>i R<b>su kao što su definisani u zahtevu 6; R<n>i n su kao što su definisani u zahtevu 8 ili zahtevu 9; i R<nc>je nezavisno vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili grupa za zaštitu azota.
  14. 14. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-7 i 9-11, naznačeno time što je jedinjenje formule (VI):
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu R<a>i R<b>su kao što su definisani u zahtevu 6; R<n>i n su kao što su definisani u zahtevu 8 ili zahtevu 9; i R<n7>je vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili grupa za zaštitu azota.
  15. 15. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, naznačeno time što (a) jedinjenje je predstavljeno sledećom strukturnom formulom: 2
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu R<a>i R<b>su kao što su definisani u zahtevu 6; R<j>i R<k>su kao što su definisani u zahtevu 7; R<p>je kao što je definisan u zahtevu 11; i q je 0, 1, 2 ili 3; ili (b) jedinjenje je predstavljeno sledećom strukturnom formulom:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu R<a>i R<b>su kao što su definisani u zahtevu 6; R<j>i R<k>su kao što su definisani u zahtevu 7; R<p>je kao što je definisan u zahtevu 11; i q je 0, 1, 2 ili 3; ili (c) jedinjenje je predstavljeno sledećom strukturnom formulom:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde R<a>i R<b>su kao što su definisani u zahtevu 6; R<j>i R<k>su kao što su definisani u zahtevu 7; R<p>je kao što je definisan u zahtevu 11; q je 0, 1, 2 ili 3; i R<n6>je vodonik, izborno supstituisani -C1-C6alkil, ili zaštitna grupa za azot; ili (d) jedinjenje je predstavljeno sledećom strukturnom formulom:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde R<a>i R<b>su kao što su definisani u zahtevu 6; R<j>i R<k>su kao što su definisani u zahtevu 7; R<p>je kao što je definisan u zahtevu 11; i q je 0, 1, 2 ili 3.
  16. 16. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, naznačeno time što je jedinjenje izabrano od sledećih jedinjenja:
    4
    1
    11
RS20230354A 2017-08-15 2018-08-15 Modulatori piruvat kinaze i njihova upotreba RS64221B1 (sr)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2017097496 2017-08-15
US201862673533P 2018-05-18 2018-05-18
US201862673526P 2018-05-18 2018-05-18
EP18766400.8A EP3668512B1 (en) 2017-08-15 2018-08-15 Pyruvate kinase modulators and use thereof
PCT/US2018/000129 WO2019035865A1 (en) 2017-08-15 2018-08-15 MODULATORS OF PYRUVATE KINASE AND THEIR USE

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS64221B1 true RS64221B1 (sr) 2023-06-30

Family

ID=63524352

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20220003A RS62871B1 (sr) 2017-08-15 2018-08-15 Aktivatori piruvat kinaze za upotrebu u lečenju krvnih poremećaja
RS20230354A RS64221B1 (sr) 2017-08-15 2018-08-15 Modulatori piruvat kinaze i njihova upotreba

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20220003A RS62871B1 (sr) 2017-08-15 2018-08-15 Aktivatori piruvat kinaze za upotrebu u lečenju krvnih poremećaja

Country Status (34)

Country Link
US (8) US11590132B2 (sr)
EP (4) EP4026838A1 (sr)
JP (5) JP7275107B2 (sr)
KR (3) KR102717594B1 (sr)
CN (3) CN117186119A (sr)
AU (4) AU2018316588B2 (sr)
BR (1) BR112020003254A2 (sr)
CA (1) CA3072455A1 (sr)
CL (1) CL2020000375A1 (sr)
CO (2) CO2020002961A2 (sr)
CR (1) CR20200123A (sr)
CY (1) CY1124953T1 (sr)
DK (2) DK3668513T3 (sr)
EC (1) ECSP20018487A (sr)
ES (3) ES2966825T3 (sr)
FI (1) FI3668512T3 (sr)
HR (2) HRP20220039T1 (sr)
HU (2) HUE057178T2 (sr)
IL (3) IL272599B (sr)
LT (2) LT3668512T (sr)
MD (1) MD3668513T2 (sr)
MX (2) MX2020001832A (sr)
MY (1) MY204421A (sr)
PE (1) PE20200724A1 (sr)
PH (1) PH12020500343B1 (sr)
PL (2) PL3668512T3 (sr)
PT (2) PT3668513T (sr)
RS (2) RS62871B1 (sr)
SG (2) SG11202001262QA (sr)
SI (2) SI3668512T1 (sr)
SM (2) SMT202300146T1 (sr)
TW (3) TWI796353B (sr)
UA (1) UA126292C2 (sr)
WO (3) WO2019035865A1 (sr)

Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PT3448859T (pt) 2017-03-20 2019-10-25 Forma Therapeutics Inc Composições de pirrolopirrole como ativadores de piruvato quinase (pkr).
SG11202001262QA (en) 2017-08-15 2020-03-30 Agios Pharmaceuticals Inc Pyruvate kinase activators for use in treating blood disorders
US12233063B2 (en) 2017-10-20 2025-02-25 The Regents Of The University Of Michigan Compositions and methods for treating eye disorders
ES2989438T3 (es) 2018-09-19 2024-11-26 Novo Nordisk Healthcare Ag Activación de la piruvato cinasa R
US12053458B2 (en) 2018-09-19 2024-08-06 Novo Nordisk Health Care Ag Treating sickle cell disease with a pyruvate kinase R activating compound
SG11202108744WA (en) * 2019-02-13 2021-09-29 Agios Pharmaceuticals Inc Thieno[3,2-b] pyrrole[3,2-d]pyridazinone derivatives and their use as pkm2 derivatives for the treatment of cancer, obesity and diabetes related disorders
WO2020262419A1 (ja) * 2019-06-26 2020-12-30 日産化学株式会社 電荷輸送性ワニス
CN114615977B (zh) 2019-09-19 2025-01-14 诺沃挪第克健康护理股份公司 丙酮酸激酶r(pkr)活化组合物
EP4185293A4 (en) * 2020-07-21 2025-01-15 The Regents of The University of Michigan COMPOSITIONS AND METHODS FOR ACTIVATING PYRUVATE KINASE
CN112490502B (zh) * 2020-12-04 2022-01-21 广州天赐高新材料股份有限公司 一种电解液及锂二次电池
WO2022170200A1 (en) 2021-02-08 2022-08-11 Global Blood Therapeutics, Inc. 1-(2-sulfonyl-2,6-dihydropyrrolo[3,4-c]pyrazol-5(4h)-yl]-ethanone derivatives as pyruvate kinase (pkr) and pkm2 activators for the treatment of sickle cell disease
US12128035B2 (en) 2021-03-19 2024-10-29 Novo Nordisk Health Care Ag Activating pyruvate kinase R
CA3231728A1 (en) * 2021-09-30 2023-04-06 Sitryx Therapeutics Limited Novel compounds
IL312679A (en) * 2021-11-16 2024-07-01 Agios Pharmaceuticals Inc Compounds for the treatment of anemia associated with MDS and other conditions
CN116159061A (zh) * 2023-03-09 2023-05-26 上海市第十人民医院 丙酮酸激酶m2激活剂在制备预防或治疗心力衰竭的药物中的应用
EP4671102A1 (en) 2023-03-28 2025-12-31 Honda Motor Co., Ltd. METHOD FOR PROVIDING INFORMATION, PROGRAM FOR PROVIDING INFORMATION, STORAGE MEDIA AND INFORMATION PROCESSING APPARATUS
TW202509043A (zh) 2023-05-15 2025-03-01 美商阿吉歐斯製藥公司 ２－（（１ｈ－吡唑－３－基）甲基）－６－（（６－胺基吡啶－２－基）甲基）－４－甲基－４，６－二氫－５ｈ－噻唑基［５＇，４＇：４，５］吡咯并［２，３－ｄ］嗒𠯤－５－酮之結晶形式
CN121443584A (zh) * 2023-07-05 2026-01-30 安吉奥斯医药品有限公司 丙酮酸激酶活化剂的合成
WO2025207563A1 (en) 2024-03-27 2025-10-02 Agios Pharmaceuticals, Inc. Use of a pk activator in the treatment of sickle cell disease

Family Cites Families (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4405635A (en) 1979-06-18 1983-09-20 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. 4-Aroylimidazol-2-ones and their use as pharmaceuticals
US4883914A (en) 1987-08-17 1989-11-28 American Cyanamid Company Benzenesulfonyl carboxamide compounds useful as herbicidal agents
AU6388900A (en) 1999-07-30 2001-02-19 Abbott Gmbh & Co. Kg 2-pyrazolin-5-ones
BR0013694A (pt) 1999-09-04 2002-05-21 Astrazeneca Ab Composto, processo para a preparação de um composto, composição farmacêutica, e, uso de um composto
EP1972629A1 (en) * 2007-03-23 2008-09-24 Mutabilis SA New imidazolo-heteroaryl derivatives with antibacterial properties
FR2933983B1 (fr) * 2008-07-15 2010-08-27 Servier Lab Nouveaux derives tricycliques,leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
KR20110033299A (ko) * 2008-07-23 2011-03-30 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 트리-사이클릭 피라졸로피리딘 키나제 억제제
WO2010025202A1 (en) * 2008-08-29 2010-03-04 Amgen Inc. PYRIDO[3,2-d]PYRIDAZINE-2(1H)-ONE COMPOUNDS AS P38 MODULATORS AND METHODS OF USE THEREOF
JP5632379B2 (ja) * 2008-10-09 2014-11-26 アメリカ合衆国 ヒトピルビン酸キナーゼ活性化剤
EP2417123A2 (en) * 2009-04-06 2012-02-15 Agios Pharmaceuticals, Inc. Therapeutic compositions and related methods of use
CR20170071A (es) 2009-06-29 2017-03-28 Agios Pharmaceuticals Inc Compuestos terapeuticos y composiciones
CA2797694A1 (en) 2010-04-29 2011-11-03 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Departmen T Of Health And Human Services Activators of human pyruvate kinase
JP5886310B2 (ja) 2010-12-06 2016-03-16 グラクソ グループ リミテッドＧｌａｘｏ Ｇｒｏｕｐ Ｌｉｍｉｔｅｄ Ｌｐ−ＰＬＡ２により媒介される疾患または状態の処置における使用のためのピリミジノン化合物
TWI549947B (zh) 2010-12-29 2016-09-21 阿吉歐斯製藥公司 治療化合物及組成物
ME03074B (me) * 2011-05-03 2019-01-20 Agios Pharmaceuticals Inc Akтivatori piruvat kinaze za upotrebu u terapiji
CA2834692A1 (en) * 2011-05-03 2012-11-08 Agios Pharmaceuticals, Inc. Pyruvate kinase activators for use in therapy
EP3372230B1 (en) 2011-05-03 2020-08-12 Agios Pharmaceuticals, Inc. Pyruvate kinase activators for use for increasing lifetime of the red blood cells and treating anemia
US9388164B2 (en) 2011-05-03 2016-07-12 Agios Pharmaceuticals, Inc Methods of using pyruvate kinase activators
CN103930422A (zh) * 2011-07-19 2014-07-16 无限药品股份有限公司 杂环化合物及其用途
WO2013056153A1 (en) * 2011-10-13 2013-04-18 Kung Charles Activators of pyruvate kinase m2 and methods of treating disease
US9921221B2 (en) 2012-07-26 2018-03-20 Joslin Diabetes Center, Inc. Predicting and treating diabetic complications
WO2014074848A1 (en) 2012-11-08 2014-05-15 Agios Pharmaceuticals, Inc. Therapeutic compounds and compositions and their use as pkm2 modulators
EP2951181A1 (en) * 2013-01-30 2015-12-09 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Amidoimidazopyridazines as mknk-1 kinase inhibitors
US9783529B2 (en) 2013-03-13 2017-10-10 Flatley Discovery Lab, Llc Pyridazinone compounds and methods for the treatment of cystic fibrosis
WO2014139144A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Agios Pharmaceuticals, Inc. Therapeutic compounds and compositions
AR097543A1 (es) * 2013-09-06 2016-03-23 Lexicon Pharmaceuticals Inc COMPUESTOS BASADOS EN IMIDAZO[1,2-b]PIRIDAZINA, COMPOSICIONES QUE LOS COMPRENDEN Y SUS MÉTODOS DE USO
HRP20220195T1 (hr) 2017-07-07 2022-04-15 Inflazome Limited Novi spojevi sulfonamid karboksamida
SG11202001262QA (en) 2017-08-15 2020-03-30 Agios Pharmaceuticals Inc Pyruvate kinase activators for use in treating blood disorders
AR112475A1 (es) 2017-08-15 2019-10-30 Agios Pharmaceuticals Inc Moduladores de piruvato quinasas y uso de los mismos
KR20200041942A (ko) 2017-08-15 2020-04-22 애브비 인코포레이티드 거대환식 mcl-1 저해제 및 이의 용도
PE20200758A1 (es) 2017-08-15 2020-07-27 Inflazome Ltd Sulfonilureas y sulfoniltioureas como inhibidores de nlrp3
SG11202108744WA (en) * 2019-02-13 2021-09-29 Agios Pharmaceuticals Inc Thieno[3,2-b] pyrrole[3,2-d]pyridazinone derivatives and their use as pkm2 derivatives for the treatment of cancer, obesity and diabetes related disorders

Also Published As

Publication number Publication date
US20220233541A1 (en) 2022-07-28
US11590132B2 (en) 2023-02-28
CR20200123A (es) 2020-06-29
EP3668513A1 (en) 2020-06-24
HUE057178T2 (hu) 2022-04-28
RS62871B1 (sr) 2022-02-28
ES2966825T3 (es) 2024-04-24
JP7301040B2 (ja) 2023-06-30
IL272597B (en) 2022-06-01
WO2019035863A8 (en) 2019-03-28
TWI796353B (zh) 2023-03-21
KR102717594B1 (ko) 2024-10-14
PT3668513T (pt) 2022-01-21
TWI823580B (zh) 2023-11-21
CA3071993A1 (en) 2019-02-21
PT3668512T (pt) 2023-05-22
US20230226055A1 (en) 2023-07-20
SMT202200023T1 (it) 2022-03-21
TWI790271B (zh) 2023-01-21
WO2019035863A1 (en) 2019-02-21
JP7275107B2 (ja) 2023-05-17
US20220395503A1 (en) 2022-12-15
JP2023027276A (ja) 2023-03-01
WO2019035864A1 (en) 2019-02-21
RU2020110573A3 (sr) 2021-12-24
UA126292C2 (uk) 2022-09-14
EP4026838A1 (en) 2022-07-13
HRP20230452T1 (hr) 2023-07-21
KR20200054200A (ko) 2020-05-19
CO2020002959A2 (es) 2020-04-13
JP7530453B2 (ja) 2024-08-07
TW201919631A (zh) 2019-06-01
TW202323258A (zh) 2023-06-16
SG11202001262QA (en) 2020-03-30
AU2018316587B2 (en) 2023-05-11
CN111032045B (zh) 2023-08-15
PH12020500343B1 (en) 2024-02-21
US11957680B2 (en) 2024-04-16
EP3668512A1 (en) 2020-06-24
CN111032046B (zh) 2023-09-26
US20250144093A1 (en) 2025-05-08
US11364240B2 (en) 2022-06-21
SI3668513T1 (sl) 2022-04-29
HRP20220039T1 (hr) 2022-04-15
CL2020000375A1 (es) 2020-12-11
AU2024205818A1 (en) 2024-09-05
PL3668512T3 (pl) 2023-06-19
DK3668513T3 (da) 2022-01-10
CN117186119A (zh) 2023-12-08
JP2020531432A (ja) 2020-11-05
EP3668881B1 (en) 2023-10-04
US11872225B2 (en) 2024-01-16
JP2023052478A (ja) 2023-04-11
ES2944545T3 (es) 2023-06-22
HUE061910T2 (hu) 2023-08-28
DK3668512T3 (da) 2023-05-22
CO2020002961A2 (es) 2020-04-13
KR20200054199A (ko) 2020-05-19
KR102642408B1 (ko) 2024-02-28
KR20230127364A (ko) 2023-08-31
MX2020001833A (es) 2020-07-22
US20200206225A1 (en) 2020-07-02
MY204421A (en) 2024-08-28
CA3072455A1 (en) 2019-02-21
US11464775B2 (en) 2022-10-11
WO2019035864A8 (en) 2019-03-28
AU2018316588B2 (en) 2023-02-02
IL292530A (en) 2022-06-01
SG11202001353PA (en) 2020-03-30
SMT202300146T1 (it) 2023-07-20
US12133853B2 (en) 2024-11-05
JP2024147805A (ja) 2024-10-16
CY1124953T1 (el) 2023-01-05
IL272599A (en) 2020-03-31
AU2023202772B2 (en) 2024-05-16
SI3668512T1 (sl) 2023-06-30
BR112020003254A2 (pt) 2020-10-27
FI3668512T3 (fi) 2023-05-12
PH12020500343A1 (en) 2021-02-08
US20200207785A1 (en) 2020-07-02
AU2018316588A1 (en) 2020-02-20
US20210130371A1 (en) 2021-05-06
PE20200724A1 (es) 2020-07-21
EP3668513B1 (en) 2021-11-10
US11040036B2 (en) 2021-06-22
WO2019035865A8 (en) 2019-03-28
BR112020003262A2 (pt) 2020-09-01
LT3668512T (lt) 2023-06-12
IL292530B2 (en) 2023-06-01
JP2020531443A (ja) 2020-11-05
ES2905100T3 (es) 2022-04-07
WO2019035865A1 (en) 2019-02-21
CN111032046A (zh) 2020-04-17
EP3668512B1 (en) 2023-02-15
IL272599B (en) 2022-08-01
ECSP20018487A (es) 2020-05-29
RU2020110573A (ru) 2021-09-16
TW201920203A (zh) 2019-06-01
IL272597A (en) 2020-03-31
MD3668513T2 (ro) 2022-04-30
AU2018316587A1 (en) 2020-02-20
MX2020001832A (es) 2020-07-22
AU2023202772A1 (en) 2023-05-18
US20210077490A1 (en) 2021-03-18
EP3668881A1 (en) 2020-06-24
PL3668513T3 (pl) 2022-03-21
LT3668513T (lt) 2022-03-25
KR102764124B1 (ko) 2025-02-05
CN111032045A (zh) 2020-04-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11872225B2 (en) Pyruvate kinase modulators and use thereof
CN112236429B (zh) 用作ii型irak抑制剂的杂芳基化合物及其用途
CA2971640C (en) Cot modulators and methods of use thereof
CN108602776B (zh) 用作irak抑制剂的杂芳基化合物及其用途
TWI469983B (zh) 用於治療神經病症之咪唑並［５，１－ｆ］［１，２，４］三類
KR20210128435A (ko) 티에노[3,2-b] 피롤[3,2-d]피리다지논 유도체, 및 암, 비만증, 및 당뇨병 관련 장애의 치료를 위한 pkm2 유도체로서 이의 용도
CA3068854A1 (en) Selective inhibitors of clinically important mutants of the egfr tyrosine kinase
RS58455B1 (sr) Jedinjenja i postupci za modulaciju kinaze, i indikacije za njih
EP3676261B1 (en) Substituted 2-azabicyclo[3.1.1]heptane and 2-azabicyclo[3.2.1]octane derivatives as orexin receptor antagonists
CN104903331A (zh) Jnk抑制剂
RU2797518C2 (ru) Модуляторы пируваткиназы и их применение
HK40030322B (en) Pyruvate kinase modulators and use thereof
HK40030322A (en) Pyruvate kinase modulators and use thereof
HK40043591A (en) Heteroaryl compounds as type ii irak inhibitors and uses thereof
JP2024528729A (ja) Ｓｒｐｋインヒビター
HK1138587A (en) Thiazoles and pyrazoles useful as kinase inhibitors
HK1242303A1 (en) Heteroaryl compounds as irak inhibitors and uses thereof