Tarifnamenin belirli bilesikleri kuvvetli immüno- modülatörlerdir, bunlarla çalisilirken dikkatli olunmalidir. Bulusun Ozeti Bir birinci yaklasimda, formül (1)"in bilesikleri ve bunlarin tuzlari temin edilmektedir: R1)\N/ ES: Rl (lS)-1-inetilbutiloksidir; m 3 ila 6 arasinda bir degere sahip olan bir tamsayidir; n 0 ila 4 arasinda bir degere sahip olan bir tamsayidir. Diger bir uygulamada, m 3'ti`1r. Diger bir uygulamada, m 4"t'ûr. Diger bir uygulamada, m 5 "tir. Diger bir uygulamada, m 4 ila 6 arasinda bir degere sahip olan bir tamsayidir. Diger bir uygulamada, n 1 "dir. Diger bir uygulamada, n 3 "tür, Diger bir uygulamada, n 4"t'l`1r. Diger bir uygulamada, n 2 ila 4 arasinda bir degere sahip olan bir tamsayidir. Tarifnamenin diger bir yaklasiminda, formül (IA)"nin bilesikleri ve bunlarin tuzlari temin edilmektedir: R1A Ci_6alkilamin0 veya C1_6alk0ksidir; mA 3 ila 6 arasinda bir degere sahip olan bir tamsayidir; uA ise 0 ila 4 arasinda bir degere sahip olan bir tamsayidir. Diger bir uygulamada, R'A n-butiloksidir. Diger bir uygulamada, RIA n-butilaminodur. Diger bir uygulamada, R'A (15)- 1 -metilbutiloksidir. Diger bir uygulamada, RI A (1 S)-1-metilpr0piloksidir. Diger bir uygulamada, R1A (l S)-l-metilpentiloksidir. Diger bir uygulamada, RIA l-metiletiloksidir. Diger bir uygulamada, R1A (l R)-l -metilbutilaminodur. Diger bir uygulamada, R'A (l S)-1-metilbutilaminodur Diger bir uygulamada, mA 4'tür. Diger bir uygulamada, mA 5 "tir Diger bir uygulamada, mA 6"d1r. Diger bir uygulamada, nA O"dir. Diger bir uygulamada, n A 1 "dir, Diger bir uygulamada, nA 2°dir. Diger bir uygulamada, nA 3 "tür Diger bir uygulamada, nA 4'tür. Tarifnameniii diger bir yaklasiminda, burada tarif edildigi gibi formül (lA)"nin bilesikleri ve bunlarin tuzlari temin edilmekte olup, buradaki m 4 ila 6 arasindaki bir degere sahip olan bir tamsayidir. Tarifnamenin diger bir yaklasiminda, 6-amin0-2-(butiloksi)-9- sarti ile burada tarif edildigi gibi formül (IA)"nin bilesikleri ve bunlarin tuzlari temin edilmektedir. Diger bir yaklasimda, 6-amin0-2-{[(lS)-l-metilbutil]0ksi}-9- tuzlarinin hariç tutulmasi sarti ile formül (I),in bilesikleri ve bunlarin tuzlari temin edilmektedir. Tarifnamenin diger bir yaklasiminda, 6-amin0-2-{[(lS)-l- 0n"un ve bunun tuzlarinin hariç tutuldugu ve m'nin 4 ila 6 arasinda bir degere sahip olan bir tamsayi oldugu, burada daha 'önce tarif edildigi gibi formül (IA)°nin bilesikleri ve bunlarin tuzlari temin edilmektedir. Tarifnamenin diger bir yaklasiininda, 6-amin0-2-(buti10ksi)-9- {[(lS)-l-metilbutil]0ksi}-9-[5-(1-piperidinil)pentil]-7,9-dihidr0-8H- purin-8-0n ve bunun tuzlarinin hariç tutulmasi sarti ile burada daha önce tarif edildigi gibi formül (1A)°nin bilesikleri ve bunlarin tuzlari temin edilmektedir. Formül (I)°in bilesiklerinin örnekleri asagidaki listede temin edilmektedir ve bulusun diger bir yaklasimini meydana getirmektedir: 6-amin0-2- { [(1 8)- l -metilbutil]0ksi}-9-[4-(1-piperidinil)butil]- 7,9-dihidro-8H-purin-8-0n; 6-amino-9-[4-(hekzahidr0-lH-azepin-l-il)buti1]-2-{[(lS)-1 - metilbutil]0ksi}-7,9-dihidr0-8H-purin-8-on; 6-amino-9-[5-(hekzahidr0- 1 H-azepin-l -il)penti1]-2- { [(1 S)-l - metilbutil] 0ksi} -7 ,9-dihidr0-8H-purin-8 -0n; 6-amin0-2- { [(1 8)- 1 -metilbutil]0ksi } -9-[3 -(l - piperidinil)pr0pil]-7,9-dihidr0-8H-purin-8-0n; ve bunlarin tuzlari. Tarifnamenin bir yaklasiminda, 6-amin0-2- {[( 1 5)- l - ve bunun bir tuzu temin edilmektedir. Tarifnamenin diger bir yaklasiminda, 6-amino-2-{[(lS)-'l- ve bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzu temin edilmektedir. Tarifnamenin diger bir yaklasiminda, 6-amin0-2-{[(lS)-l- serbest baz seklinde temin edilmektedir. Bundan Ötürü, bulusun diger bir yaklasimi olarak formül (l)°in bir bilesigi veya bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzu tedavide kullanim için temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, bu nedenle 6-amino-2-{[(lS)-l- metilbutil]0ksi } -9-[5 -(l -piperidinil)pentil] -7,9-dihidro-8H-purin-8-on veya bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzu tedavide kullanim için temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, ayiii zamanda 6-amino-2-{[(IS)-l- metilbutil]0ksi } -9-[5 -(l -piperidinil)pentil] -7,9-dihidro-8H-purin-8-on, serbest baz seklinde tedavide kullanim için temin edilmektedir. Formül (I)°in bir bilesiginin veya bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunun tedavide kullanildigi zaman, aktif bir terap'otik ajan seklinde kullanilmasi takdir edilecektir. Bu nedenle ayni zamanda formül (1)'in bir bilesigi veya bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzu., alerjik hastaliklarin ve diger enflamatuvar kosullarin, enfeksiyöz hastaliklarin ve kanserin tedavisinde kullanim için temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, bu nedenle ayni zamanda 6-amino- 2-{[(lS)-1-metilbutil]oksi}-9-[5-(1-piperidinil)pentil]-7,9-dihidro-8H- purin-8-0n veya bunun farmas'otik açidan kabul edilebilir bir tuzu, alerjik hastaliklarin ve diger enflamatuvar kosullarin, enfeksiyöz hastaliklarin ve kanserin tedavisinde kullanim için temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, ayni zamanda bu nedenle 6-amino- purin-8-on, alerjik hastaliklarin ve diger enflamatuvar kosullarin, enfeksiyöz hastaliklarin ve kanserin tedavisinde kullaniin için serbest baz seklinde temin edilmektedir. Bu nedenle ayni zamanda alerjik rinitin tedavisinde kullanim için formül (1)"in bir bilesigi veya bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzu da temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, bu nedenle ayni zamanda alerjik rinitin tedavisinde kullanim için 6-amin0-2-{ [(1S)-l-meti1buti1]0ksi}- 9-[5-(1-piperidinil)pentil]-7,9-dihidr0-8H-purin-8-0n ve bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzu da temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, ayni zamanda bu nedenle alerjik rinitin tedavisinde kullanim için serbest baz seklinde 6-amino-2- {[( l S)-1 -metilbutil]0ksi}-9-[5-(1 -piperidinil)pentil]-7,9-dihidr0-8H- purin-8-0n da temin edilmektedir. Bu nedenle ayni zamanda astiinin tedavisinde kullanim için formül (I),in bir bilesigi veya bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzu da temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, bu nedenle ayni zamanda astim tedavisinde kullanim için 6-amin0-2-{[(lS)-l-metilbutil]oksi}-9-[5- (l-piperidinil)pentil]-7,9-dihidr0-8H-purin-8-0n ve bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzu da temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, bu nedenle ayni zamanda astiin tedavisinde kullanim için serbest baz seklinde 6-amin0-2-{[(lS)-l- da temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, bu nedenle ayni zamanda formül (I)°in bir bilesigini veya bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunu kapsayan bir asi adjuvani da temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, ayrica bir antijeni veya antijen bilesiinini ve formül (1)"in bir bilesigini veya bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunu kapsayan immünojenik bir bilesim temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, ayrica bir anti jeni veya anti jen bilesimiiii ve formül (1)"in bir bilesigini veya bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunu kapsayan bir asi bilesimi temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, ayrica hastaligin tedavisi veya önlenmesi için, hastaliktan mustarip veya buna karsi hassas olan bir insan bireye, bir anti jeni veya antijen bilesimini ve formül (I)°in bir bilesigini veya bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunu kapsayan imm'i'ijenik bir bilesimin tatbik edilmesini kapsayan bir yöntem temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, ayrica hastaligin tedavisi veya önlenmesi için, hastaliktan mustarip veya buna karsi hassas olan bir insan bireye, bir anti jeni veya antijen bilesimini ve formül (I),in bir bilesigini veya bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunu kapsayan bir asi bilesiminin tatbik edilmesini kapsayan bir yöntem temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, ayrica formül (I)°in bilesiginin veya bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunun, hastaligin tedavisi veya önlenmesi için bir antijeni veya antijen bilesimini kapsayan immüjenik bir bilesimin üretimi için kullanilmasi temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, ayrica formül (1)"in bilesiginin veya bunun farinasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunun, hastaligin tedavisi veya önlenmesi için bir antijeiii veya antijen bilesimini kapsayan bir asi bilesimiiiin üretimi için kullanilmasi temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, ayrica formül (1)"in bilesiginin veya bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunun, alerjik hastaliklarin ve diger enflamatuvar durumlarin, enfeksiyöz hastaliklarin ve kanserin tedavisi için bir ilacin 'üretimi için kullaniini temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, ayrica 6-amino-2-{[(IS)-l- ve bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunun, alerjik hastaliklarin ve diger enflamatuvar durumlarin, enfeksiyöz hastaliklarin ve kanserin tedavisi için bir ilacin üretimi için kullaniini temin edilmektedir. Tarifiiameye uygun olarak, ayrica, serbest baz halinde 6- amino-Z- {[(1 S)-l -metilbutil]0ksi}-9-[5-(1-piperidinil)pentil]-7,9- dihidr0-8H-purin-8-0n"un alerjik hastaliklarin ve diger enflamatuvar durumlarin, enfeksiyöz hastaliklarin ve kanserin tedavisi için bir ilacin üretimi için kullanimi teinin edilmektedir. Tarifnaineye uygun olarak, ayrica formül (I)°in bir bilesiginin ve bunuii farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunuii, alerjik rinitiii tedavisi için bir ilacin üretimi için kullanimi temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, ayrica 6-amin0-2-{[(l S)-l- ve bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunun, alerjik rinitin tedavisi için bir ilacin 'üretimi için kullanimi temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, ayrica, serbest baz halinde 6- dihidr0-8H-purin-8-0n°un alerjik rinitin tedavisi için bir ilacin üretimi için kullaniini temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, ayrica formül (I)7in bir bilesiginin ve bunun farniasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunun, astim tedavisi için bir ilacin üretimi için kullanimi temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, ayrica 6-amin0-2-{[(IS)-l- Ve bunun farinasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunun, astim tedavisi için bir ilacin üretimi için kullaniini temin edilinektedir. Tarifnameye uygun olarak, ayrica, serbest baz halinde 6- amino-2-{[(lS)-l -metilbutil]0ksi}-9-[5-(1-piperidinil)penti1]-7,9- dihidro-SH-purin-8-0n"un astim tedavisi için bir ilacin üretimi için kullanimi temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, ayrica alerjik hastaliklarin ve diger enflamatuvar durumlarin, enfeksiyöz hastaliklarin ve kanserin tedavisi için bir yöntem temin edilmekte olup, yöntem gereksinimi olan bir insan bireye, formül (I)°in bilesiginin veya bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunun terapötik açidan etkin bir miktarinin tatbik edilmesini kapsamaktadir. Tarifnameye uygun olarak, ayrica alerjik hastaliklarin diger enflamatuvar durumlarin, enfeksiyöz hastaliklarin ve kanserin tedavisi için bir yöntem temin edilmekte olup, yöntem gereksinimi olan bir insan bireye, 6-amin0-2-{[(1S)-l-metilbutil]0ksi}-9-[5-(1- piperidinil)pentil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-on veya bunun famiasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunun terapötik açidan etkin bir miktarinin tatbik edilmesini kapsamaktadir. Tarifnameye uygun olarak, ayrica alerjik hastaliklarin diger enflainatuvar durumlarin, enfeksiyöz hastaliklarin ve kanserin tedavisi için bir yöntem temin edilmekte olup, yöntem gereksinimi olan bir insan bireye, serbest baz halinde 6-amin0-2-{[(lS,)-l-rnetilbutil]0ksi}- 9-[5-(1 -piperidinil)pentil]-7,9-dihidr0-8H-purin-S-on "un terapötik açidan etkin bir miktarinin tatbik edilmesini kapsamaktadir. Tarifnameye uygun olarak, ayrica alerjik rinitin tedavisi için bir yöntem temin edilmekte olup, yöntem gereksinimi olan bir insan bireye, formül (I),in bilesiginin veya bunuii farinasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunun terapötik açidan etkin bir miktarinin tatbik edilmesini kapsamaktadir. Tarifnameye uygun olarak, ayrica alerjik riiiitin tedavisi için bir yöntem temin edilmekte olup, yöntem gereksinimi olan bir insan bireye, 6-amino-2- { [(1 S)-l -metilbutil]oksi} -9-[5-(1 -piperidinil)pentil] -7,9-dihidr0-8H-purin-8-0n veya bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunun terapötik açidan etkin bir miktarinin tatbik edilmesini kapsamaktadir. Tarifnameye uygun olarak, ayrica alerjik rinitin tedavisi için bir yöntem temin edilmekte olup, yöntem gereksinimi olan bir insan bireye, serbest baz halinde 6-amino-2-{[(1S)-1-metilbutil]0ksi}-9-[5- (l-piperidinil)pentil]-7,9-dihidr0-8H-purin-S-on"un terapötik açidan etkin bir miktarinin tatbik edilmesini kapsamaktadir. Tarifnameye uygun olarak, ayrica astim tedavisi için bir yöntem temin edilmekte olup, yöntem gereksinimi olan bir insan bireye, formül (1)"in bilesiginin veya bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunun terapötik açidan etkin bir miktarinin tatbik edilmesini kapsamaktadir. Tarifnameye uygun olarak, ayrica astim tedavisi için bir yöntem temin edilmekte olup, yöntem gereksinimi olan bir insan bireye, 6-amin0-2- {[(1 S)-l -metilbutil]0ksi} -9-[5-( 1 -piperidinil)- pentil]-7,9-dihidro-SH-purin-8-0n veya bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunun terapötik açidan etkin bir miktarinin tatbik edilmesini kapsamaktadir. Tarifnameye uygun olarak, ayrica astim tedavisi için bir yöntem temin edilmekte olup, yöntem gereksiniini olan bir insan bireye, serbest baz halinde 6-amin0-2-{ [(1S)-l-metilbutil]0ksi}-9-[5- (1-piperidinil)pentil]-7,9-dihidr0-8H-purin-S-on"un terapötik açidan etkin bir miktarinin tatbik edilmesini kapsamaktadir. Tarifname bir baska yaklasimda, formül (I),in bir bilesigini veya bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunu, en az bir diger terapötik açidan aktif ajan ile birlikte kapsayan bir bilesimi temin etmektedir. Tarifname bir baska yaklasimda, 6-amin0-2-{[(lS)-1- veya bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunu, en az bir diger terapötik açidan aktif ajan ile birlikte kapsayan bir bilesimi temin etmektedir. Tarifname bir baska yaklasimda, serbest baz halinde 6-amin0- purin-8-0n,u, en az bir diger terapötik açidan aktif ajan ile birlikte kapsayan bir bilesimi temin etmektedir. Ayrica formül (1)"in bir bilesigini veya bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunu ve bir veya daha fazla farmasötik açidan kabul edilebilir seyrelticiyi veya tasiyiciyi kapsayan farmasötik bir bilesim temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, ayrica 6-amino-2-{[(lS)-l- metilbutil]0ksi } -9-[5-( 1 -piperidinil)pentil]-7,9-dihidro-8 H-purin-8-0n veya bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunu ve bir veya daha fazla farmasötik açidan kabul edilebilir seyrelticiyi veya tasiyiciyi kapsayan farmasötik bir bilesim temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, ayrica, serbest baz halinde 6- dihidr0-8H-purin-8-0n"u ve bir veya daha fazla farmasötik açidan kabul edilebilir seyrelticiyi veya tasiyiciyi kapsayan farmasötik bir bilesim temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, ayni zamanda farmasötik bir bilesimin hazirlaninasi için formül (I)7i11 bir bilesiginin veya bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunun bir veya daha fazla farmasötik açidan kabul edilebilir seyreltici veya tasiyici ile karistirilmasini kapsayan bir proses de teinin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, ayni zamanda farmasötik bir bilesimin hazirlanmasi için 6-amin0-2-{[(lS)-l-metilbutil]oksi}-9-[5- ( l -piperidinil)pentil]-7,9-dihidr0-8H-purin-8-011"un veya bunun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzunun bir veya daha fazla farmasötik açidan kabul edilebilir seyreltici veya tasiyici ile karistirilinasini kapsayan bir proses de temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, ayni zamanda farmasötik bir bilesimin hazirlanmasi için serbest baz halinde 6-amino-2-{[(lS)-l- metilbutil]0ksi } -9-[5 -(l -piperidinil)pentil] -7,9-dihidro-8H-purin-8- on'un bir veya daha fazla farmasötik açidan kabul edilebilir seyreltici veya tasiyici ile karistirilmasini kapsayan bir proses de temin edilmektedir. Formül (I)°in bilesikleri ve bunlarin tuzlari, bu tarifnamenin diger bir yönünü meydana getiren, burada tarif edilen metodoloji yoluyla hazirlanabilir. Tarifnameye uygun olarak, formül (1)"in bir bilesiginin hazirlanmasi için bir proses temin edilmekte olup, proses formül (II),nin bilesiginin korumasinin kaldirilmasini kapsar; R1ÂZNß~OR2 burada; R1, m ve n burada formül (I)°in bilesigi için daha önce tarif edildigi gibidir ve R2 C 1-6 alkildir ve bundan sonra eger gerekirse, asagidaki istege bagli asamalarin bir veya daha fazlasi gerçeklestirilir: (i) herhangi bir koruyucu grubun uzaklastirilmasi; (ii) bu sekilde olusturulan bilesigin tuzunun hazirlanmasi. Mevcut tarifnaine, burada tarif edilen uygulamalarin ve yaklasimlarin bütün koinbinasyonlarini kapsar. Bulusun Ayrintili Tarifi Mevcut bulus, bu alanda uzman kimseler tarafindan bilinen ve takdir edilen sekilde tarif edilmektedir. Basvuru kolayligi açisindan, burada bundan sonra belirli terimler tarif edilmektedir. Ancak belirli terimlerin tarif edilmesi gerçegi, tarif edilen terimlerin alisilageldik anlamlari ile bagdasmaz sekilde kullanildiginin bir göstergesi olarak kabul edilmemelidir veya alternatif olarak, tarif edilmeyen herhangi bir terimin belirsiz veya alisilageldik ve kabul edilmis anlami içinde kullanilmadigi seklinde düsünülmemelidir. Daha ziyade, burada kullanilan bütün terimlerin, bu alanda uzman bir kimsenin mevcut bulusun kapsamini takdir edebilecegi sekilde bulusu tarif ettigine inanilmaktadir. Asagidaki tarifler, tarif edilen terimleri açiklamaya yönelik olup, kisitlamaya yönelik degildir. örnegin; dörde kadar karbon atoinu veya ikiye kadar karbon atoinu içeren, tekabül eden alkilin hem düz zincirli hem de dallanmis zincirli alifatik izomerlerine basvurulari içine almaktadir. "Alkil" terimine yapilan bu tip referanslar, alkil grubu baska bir grubun, örnegin; bir alkilainino veya alkoksi grubunun parçasi oldugu zaman da tatbik edilebilir. Alkil gruplarini içeren bu tip alkil gruplarinin 'Örnekleri C1_ öalkil, C 1 _Galkilamino, ve C 1-6alk0ksidir. tipik bir sekilde brom, klor veya fluor ifade eder. "Halo" terimine referanslar iyodo, bromo, kloro veya fluoro, tipik bir sekilde bromo, kloro veya fluoro ifade eder. Bulusun bilesiklerine burada yapilan referanslarin, formül (I)°in serbest baz halindeki veya bir tuzu seklindeki, 'Örnek olarak farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzu seklindeki bir bilesigi anlamina geldigi anlasilinalidir. Formül (1)"in bilesiklerinin tuzlari, farmasötik açidan kabul edilebilir tuzlari ve farmasötik açidan kabul edilebilir olmayan fakat formülün bilesikleriiiin hazirlanmasinda kullanisli olan tuzlari ve bunlarin farmas'otik açidan kabul edilebilir tuzlarini içine alir. Tuzlar belirli inorganik veya organik asitlerden veya belirli inorganik veya organik bazlardan türevlenebilir. Bulus kapsami içinde, formül (1)"in bilesiklerinin tuzlarinin bütün olasi stoikometrik ve stoikometrik olmayan sekillerini içine alir. Tuzlarin 'ornekleri farmasötik açidan kabul edilebilir tuzlardir. Farmasötik açidan kabul edilebilir tuzlar asit ilave tuzlari ve baz ilave tuzlari içine alir. Uygun tuzlar hakkinda derleine için bakiniz Berge ve ark., J. Pharm. Sci., 66:1-19 (1977). Formül (1)"in bilesiginin farmasötik açidan kabul edilebilir asit ilave tuzlarinin örnekleri hidrobromür, hidroklori'ir, sülfat, p- toluensülfonat, metansülfonat, naftalensülfonat ve fenilsülfonat tuzlarini içine alir. Tuzlar, bu alanda iyi bilinen teknikler, örnegin; çözeltiden çöktürme, ardindan filtrasyon veya çözücünün uçurulmasi kullanilarak olusturulabilir. Tipik bir sekilde, farmasötik açidan kabul edilebilir asit ilave tuz, formül (I),in bilesiginin, genellikle kristallendirme veya filtrasyon yoluyla izole edilen tuzu vermek üzere, uygun bir kuvvetli asit (hidrobromik, hidroklorik, sülfürik, p-toluensülfonik, metansülfonik veya naftalensülfonik asitler gibi) ile istege bagli olarak organik bir çözücü gibi uygun bir çözücü içinde reaksiyonu yoluyla olusturulabilir. Pek çok organik bilesigin, içinde reaksiyona sokulduklari veya üzerinden çöktürüldükleri veya kristallendirildikleri çözücülerle koinpleksler olusturabildigi takdir edilecektir. Bu kompleksler olarak bilinir. Yüksek kaynama noktali çözücüler ve/veya su, etanol, izo-propil alkol ve N-metil pirolidinon gibi hidrojen baglari olusturmaya yüksek egilimli çözücüler solvatlari olusturmak üzere kullanilabilir. Solvatlanmislarin teshisi için yöntemler NMR ve mikro- analizi içine alir ancak bunlar ile sinirli degildir. Formül (I)°in bilesiklerinin solvatlari bulusun kapsami içindedir. Burada kullanildigi gibi, solvat terimi, bunlarin herhangi bir tuzunun yani sira serbest baz haldeki bilesigin solvatlarini da kapsar. Bulusun belirli bilesikleri siral atoinlar ve/veya çok sayida bag içerebilir ve bu nedenle, bir veya daha fazla stereoizomerik sekilde mevcut olabilir. Mevcut bulus, ayri ayri stereoizomerler seklinde veya rasemik modifikasyonlar da dahil olmak üzere bunlarin karisimlari seklinde olsun olmasin optik izomerler de dahil olmak üzere, bulusun bilesiklerinin bütün stereoizomerlerini içine almaktadir. Herhangi bir stereoizoiner agirlik olarak %lO°dan daha az, örnegin; agirlik olarak stereoizomeri içerebilir. Örnek olarak; herhangi bir optik izomer agirlik olarak %10"dan daha az, örnegin; agirlik olarak %5 "ten daha az veya agirlik olarak %0.59ten daha az antipodunu içerebilir. Bulusun belirli bilesikleri, totomerik sekillerde mevcut olabilir. Mevcut bulusun, ayri ayri totomerler halinde veya bunlarin karisimlari seklinde olsun, bulusun bilesiklerinin bütün totomerlerini kapsadigi anlasilacaktir. Bulusun bilesikleri, kristal veya amorf sekilde olabilir. Ayrica, bulusun bilesiklerinin kristal sekillerinin bazilari polimorflar seklinde mevcut olabilir, bunlarin hepsi mevcut bulusun kapsaini içine dahildir. Bulusun bilesiklerinin termodinamik açidan en stabil polimorf sekli veya sekilleri 'Özel ilgi çekmektedir. Bulusun bilesiklerinin polimorf sekilleri, X-isini toz kirinimi (XRPD), enfraruj/kizil Ötesi spektroskopisi (IR), Raman spektroskopisi, ayrim taramali kalorimetri (DSC), terinogravimetrik analiz (TGA) ve kati hal nükleer manyetik rezonans (ssNMR) da dahil olmak üzere ancak bunlarla sinirli olmaksizin, bir dizi geleneksel analitik teknik kullanilarak karakterize edilebilir ve ayirt edilebilir. Onceki açiklamalardan, bulusun kapsami içine dahil edilenlerin formül (I)°in bilesiklerinin solvatlari, hidratlari, izomerleri ve polimorf sekilleri ve bunlarin tuzlari ve solvatlari oldugu takdir edilecektir. Formül (1)"in bilesiklerinin ve bunlarin farmasötik açidan kabul edilebilir tuzlarinin potansiyel olarak faydali etkilere sahip oldugu hastalik durumlarinin örnekleri, alerjik hastaliklar ve diger enflamatuvar durumlari, örnegin; alerjik rinit ve astim, enfeksiyöz hastaliklar ve kanseri içine alir. Formül (1)"in bilesikleri ve bunlarin farmasötik açidan kabul edilebilir tuzlari ayni zamanda asi adjuvanlari olarak potansiyel kullanima sahiptir. Immün cevap modülatörleri olarak formül (1)"in bilesikleri ve bunlarin farmasötik açidan kabul edilebilir tuzlari, tek basina veya bir ad juvan seklinde kombinasyon halinde, enflamatuvar veya astim, alerjik rinit ve rino-konjonktivit, besin alerjisi gibi alerjik hastaliklar, akciger hastaliklarina asiri hassasiyet, eozinofilik pnömonitis, gecikmis tipte asiri hassasiyet bozukluklari, ateroskleroz, pankreatit, gastrit, kolit, osteoartrit, psoriasis, sarkodiyoz, pulmoner fibroz, solunum güçlügü sendromu, bronkiyolit, kronik obstrüktif akciger hastaligi, sinüzit, sistik fibroz, aktinik keratoz, deri displazisi, kronik ürtiker, ekzema ve dermatitin bütün tipleri de dahil olmak üzere ancak bunlarla sinirli olmaksizin, immün aracili bozukluklarin tedavisinde ve/veya önlenmesinde de faydali olabilir. Formül (I)"in bilesikleri ve bunlarin farmasötik açidan kabul edilebilir tuzlari ayni zamanda hava yollarinin Viral alevlenmeleri ve tonsilit de dahil olmak üzere ancak bunlar ile sinirli olmaksizin, solunum enfeksiyonlarina karsi reaksiyonlarin tedavisinde ve/Veya önlenmesinde de kullanisli olabilir. Bilesikler romatoid artrit, psoriatik artrit, sistemik lupus eritematöz, Sjöegrens hastaligi, ankilozan spondilit, skleroderina, dermatomiyozit, diyabet, gref kökenli konak hastaligi da dahil olmak üzere gref rejeksiyonu, Crohn hastaligi ve ülseratif kolit de dahil olmak üzere ancak bunlarla sinirli olinaksizin enflamatuvar barsak hastaliklari da dahil olmak üzere ancak bunlarla sinirli olmaksizin, otoimmün hastaliklarin tedavisinde ve/veya önlenmesinde de kullanisli olabilir. Formül (I)"in bilesikleri ve bunlarin farmasötik açidan kabul edilebilir tuzlari ayni zainanda hepatit virüslerinin neden olduklari (örnegin; hepatit B virüsü, hepatit C Virüsü), insan immün yetmezlik virüs, papilloma virüsler, herpes virüsleri, solunum sistemi virüsleri (örnegim influenza virüsü, solunum sinsisyal virüsü, rinovirüs, meta- pnömo virüs, para-influenza virüsü, SARS) ve Bati Nil virüsü de dahil olinak üzere ancak bunlarla sinirli olmaksizin, enfeksiyöz hastaliklarin tedavisinde veya önlenmesinde de kullanisli olabilir. Formül (I)°in bilesikleri ve bunlarin farinasötik açidan kabul edilebilir tuzlari ayni zamanda örnegin; bakterilerin, mantarlarin veya protozoalarin neden oldugu inikrobiyal enfeksiyonlarin tedavisinde de kullanisli olabilir. Bunlar, tüberküloz, bakteriyel pnömoni, aspergilloz, histoplazmoz, kandidoz, pnömosistoz, lepra, klamidya, kriptokok hastaligi, kriptosporidyoz, toksoplazmoz, laysmanya, malarya/sitma ve tripanozomiyazi içine alir ancak bunlar ile sinirli degildir. Formül (I)"in bilesikleri ve bunlarin farmasötik açidan kabul edilebilir tuzlari ayni zamanda çesitli kanserlerin tedavisinde, özellikle de renal hücreli karsinom, akciger kanseri, meme kanseri, kolorektal kanser, mesane kanseri, melanom, lösemi, lenfomalar ve over kanseri de dahil olinak üzere ancak bunlarla sinirli olmaksizin, immünoterapiye cevap verdigi bilinen kanserlerin tedavisinde de kullanisli olabilir. Tedavi veya terapiye referanslarm, duruma bagli olarak, var olan kosullarin tedavisinin yani sira profilaksiye genisleyebilecegi bu alanda uzman kimseler tarafindan takdir edilecektir. Burada söz edildigi üzere, formül (I),in bilesikleri ve bunlarin farmasötik açidan kabul edilebilir tuzlari terapötik ajanlar olarak kullanisli olabilir. Formül (I)"in bilesikleri ve bunlarin farmasötik açidan kabul edilebilir tuzlari herhangi bir uygun yolla tatbik etmek için formüle edilebilir. Formül (I)°in bilesikleri ve bunlarin farmasötik açidan kabul edilebilir tuzlari, örnegin, oral, topikal, inhale etme, intranazal, bukkal, parenteral (örnek olarak; intravenöz, subki'itan, intradermal veya intramusküler) veya rektal uygulama yolu için formüle edilebilir. Bir yaklasimda, formül (1)"in bilesikleri ve bunlarin farmasötik açidan kabul edilebilir tuzlari oral uygulama için formüle edilir. Diger bir yaklasimda, formül (I)"in bilesikleri ve bunlarin farmasötik açidan kabul edilebilir tuzlari topikal uygulama için, örnegin; intranazal veya inhale edilen uygulama için formüle edilir. Oral uygulama için tabletler ve kapsüller baglayici ajanlar, örnegin; surup, akasya, jelatin, sorbitol, tragakanta, nisasta müsilaji, selüloz veya polivinil pirolidon; dolgu maddeleri, örnek olarak; laktoz, mikrokristalize selüloz, seker, misir nisastasi, kalsiyum fosfat veya sorbitol; kaydiricilar/lubrikanlar, örnegin; magnezyum stearat, stearik asit, talk, polietilen glikol veya silika; disentegranlar/dagiticilar, örnegin; patates nisastasi, çapraz-karmeloz sodyum veya sodyum nisasta glikollat veya sodyuin lauril sülfat gibi islatici ajanlar gibi geleneksel yardiinci maddeleri içerebilir. Tabletler bu alanda iyi bilinen yöntemlere uygun sekilde kaplanabilir. Oral sivi preparatlar örnegin; sulu veya yagli süspansiyonlar, çözeltiler, emülsiyonlar, suruplar veya eliksirler seklinde olabilir veya su veya diger uygun bir tasiyici ile kullanimdan Önce hazirlanmak için kuru ürün seklinde takdim edilebilir. Bu tip sivi preparatlar süspansiyon ajanlari, örnegin; sorbitol surubu, metil selüloz, glukoz/seker surubu, jelatin, hidroksimetil selüloz, karboksimetil selüloz, alüminyum stearat jeli veya hidrojene yenilebilir yaglar; emülsifiye edici ajanlar, örnek olarak; lesitin, sorbitan monooleat veya akasya; susuz tasiyicilar (yenilebilir yaglar içerebilirler), 'Örnek olarak; badem yagi, fraksiyone Hindistan cevizi yagi, yagli esterler, propilen glikol veya etil alkol; veya koruyucular/prezervatifler, örnek olarak; metil veya propil p-hidroksibenzuatlar veya sorbik asit gibi geleneksel katki maddelerini içerebilir. Preparatlar ayni zamanda uygun oldugu sekilde tampon tuzlarini, lezzet vericileri, renklendirme ve/veya tatlandirma ajanlarini (örnegin; mannitol) da içerebilir. Intranazal uygulama için bilesimler, buruna damla seklinde veya basinçli poinpa yoluyla tatbik edilen sulu bilesiinleri içine alir. Uygun bilesimler bu amaçla seyreltici veya tasiyici olarak su içerir. Akciger veya buruna uygulama için bilesimler, bir veya daha fazla yardiinci maddeyi, örnek olarak; bir veya daha fazla süspansiyon ajanini, bir veya daha fazla koruyucuyu, bir veya daha fazla sürfaktani, bir veya daha fazla toniklik ayarlayici ajani, bir veya daha fazla ko-çözücüyü içerebilir ve bilesimin pH°s1n1 kontrol etmek üzere bilesenleri, ömegin; bir tampon sistemini içine alabilir. Ayrica, bilesimler antioksidanlar gibi diger yardimci maddeleri, örnegin; sodyum metabisülfit ve tadi maskeleyici ajanlari içerebilir. Bilesiinler ayni zamanda buruna veya solunum yolunun diger bölgelerine nebülizasyon yoluyla da tatbik edilebilir. Intranazal bilesimler formül (I)°in bilesiginin (bilesiklerinin) ve bunlarin farmasötik açidan kabul edilebilir (bir) tuzunun (tuzlarinin) nazal bosluklarin (hedef doku) bütün alanlarina tasinabilmesine izin verebilir ve ayrica, formül (I)°in (bir) bilesiginin (bilesiklerinin) ve bunlarin farmasötik açidan kabul edilebilir tuzunun (tuzlarinin), hedef doku ile daha uzun süre temas halinde kalmasina izin verebilir. Intranazal bilesimler için uygun bir dozlama rejimi, hasta için nazal boslugun temizlenmesini takiben burun içinden yavasça inhale edecegi sekil olacaktir. Inhalasyon sirasinda, burun deliklerinin biri elle basilarak kapali tutulurken, bilesim diger burun deligine tatbik edilecektir. Bu prosedür daha sonra diger burun deligi için tekrar edilecektir. Tipik bir sekilde, her bir burun deligi için bir veya iki sprey yukaridaki prosedür yoluyla her gün bir, iki veya üç kere, ideal olarak günde bir kere tatbik edilecektir. Ozel ilgi çekenler günde bir kez uygulama için uygun olan intranazal bilesimlerdir. Eger dahil edilmisse süspansiyon ajani (ajanlari), bilesimin toplam agirligi temel alinarak, tipik bir sekilde %01 ila 5 (ag/ag) miktarda, %15 ila %24 (ag/ag) miktarda mevcut olacaktir. Farmasötik açidan kabul edilebilir süspansiyon ajanlarinin örnekleri Avicel® (mikrokristalize selüloz ve karboksimetilselüloz sodyum), karboksimetilselüloz sodyum, veegum, tragakanta, bentonit, metilselüloz, ksantan zamki, karbopol ve polietilen glikolleri içine alir ancak bunlar ile sinirli degildir. Akciger veya buruna uygulama için bilesimler bir veya daha fazla yardimci maddeyi içerebilir, inikrobiyal veya fungal kontaminasyondan ve üremeden bir veya daha fazla koruyucunun dahil edilmesiyle korunabilir. Farmasötik açidan kabul edilebilir anti- mikrobiyal ajanlarin veya koruyucularin `Örnekleri, katerner amonyum bilesikleri (örnek olarak; benzalkonyum klorür, benzetonyum klor'i'ir, setrimid, setilpiridinyum klori'ir, lauralkonyum klori'ir ve miristil pikolinyum klorür), civali ajanlar (örnek olarak; fenilmerkürik nitrat, fenilmerkürik asetat ve tiyomersal), alkollü ajanlar (örnek olarak; klorobutanol, feniletil alkol ve benzil alkol), antibakteriyel esterler (örnek olarak; para-hidroksibenzoik asidin esterleri), disodyum edetat (EDTA) gibi kelat yapici ajanlar ve klorhekzidin, sorbik asit ve tuzlari (potasyum sorbat gibi) ve polimiksin gibi diger anti-mikrobiyal ajanlar içine alir ancak bunlar ile sinirli degildir. Farmasötik açidan kabul edilebilir anti-fungal ajanlarin 'Örnekleri sodyum benzuat, sorbik asit, sodyum propiyonat, metilparaben, etilparaben, propilparaben ve butilparabeni içine alir ancak bunlar ile sinirli degildir. Eger dahil edilmisse, koruyucu (koruyucular) bilesimin toplam agirligi temel miktarda mevcut olabilir. Bilesimler (örnegim en az bir bilesigin süspansiyonda oldugu), bilesiinin sulu fazi içinde ilaç partiküllerinin dissolüsyonunu kolaylastirmak üzere islev gösteren bir veya daha fazla sürfaktani içerebilir. Ornek olarak, kullanilan sürfaktanin miktari, karistirina sirasinda köpüklenmeye neden olmayacak olan miktardir. Farmasötik açidan kabul edilebilir sürfaktanlarin örnekleri, yag alkolleri, esterler ve polioksietilen (20) sorbitan monooleat (Polysorbat 80), makrogol eterler ve poloksamerler gibi eterleri içine alir. Sürfaktan, bilesimin toplam agirligi temel alinarak, %001 ila 0.75 (ag/ag), örnegin; yaklasik olarak %0.5 (ag/ag) miktar gibi yaklasik olarak %001 ila Bir veya daha fazla toniklik ayarlayici ajan (ajanlar) vücut sivilari, örnegin; nazal boslugun sivilari ile toniklige ulasmak üzere dahil edilebilir, bu da azalan tahris düzeyleri ile sonuçlanir. Farmasötik açidan kabul edilebilir toniklik ayarlayici ajanlarin örnekleri sodyum klor'ur, dekstroz, ksilitol, kalsiyum klor'ur, glukoz, gliserin ve sorbitolü içine alir ancak bunlar ile sinirli degildir. Eger mevcutsa toniklik ayarlayici ajan, bilesimin toplam agirligi temel alinarak, %45 ila 5.5 (ag/ag), örnegin; yaklasik olarak %5.0 (ag/ag) gibi yaklasik olarak %01 ila %10 (ag/ag) miktarda mevcut olabilir. Bulusun bilesimleri, sodyum sitrat, sitrik asit, trometamol, disodyum fosfat (örnek olarak; dodekahidrat, heptahidrat, dihidrat ve susuz sekilleri) veya sodyum fosfat gibi fosfatlar ve bunlarin karisimlari gibi uygun tamponlama ajanlarinin ilavesi ile tamponlanabilir. Eger mevcutsa tamponlama ajani, bilesimin toplam agirligi temel alinarak, %01 ila 5 (ag/ag) miktarda, örnegin; %1 ila 3 (ag/ag) dahil edilebilir. Tat maskeleyici ajanlarin örnekleri, suklaroz, sukroz, sakkarin veya bunun bir tuzu, fr'uktoz, dekstroz, gliserol, misir surubu, aspartam, asetasülfam-K, ksilitol, sorbitol, eritritol, anionyum glisirizinat, taumatin, neotam, mannitol, ökaliptus yagi, kafur veya dogal lezzet verici bir ajan, yapay bir lezzet verici ajan ve bunlarin kombinasyonlarini içine alir. Bir veya daha fazla ko-çöz'ûcü (ko-çözücüler) ilaç bilesiginin (bilesiklerinin) ve/veya diger yardimci maddelerin çözünürlügüne yardimci olmak üzere dahil edilebilir. Farmasötik açidan kabul edilebilir ko-ç'oz'ûcülerin örnekleri propilen glikol, dipropilen glikol, etilen glikol, gliserol, etanol, polietilen glikoller (örnek olarak PEG ve metanolü içine alir ancak bunlar ile sinirli degildir. Bir uygulamada, ko-çözücü propilen glikoldür. Eger mevcutsa ko-çözücü (ko-çözücüler) bilesimin toplam agirligi temel alinarak, %1 ila 25 gibi, örnegin; %1 ila 10 (ag/ag) miktarda, %0.05 ila %30 (ag/ag) miktarda dahil edilebilir. Inhale edilen uygulama için bilesimler basinçli pompa veya inhalatör yoluyla, örnegin; rezervuar kuru toz inhalatörler, ünite-doz kuru toz inhalat'orleri, 'Önceden ölçeklendirilmis çok dozlu kuru toz inhalatörleri, nazal inhalat'orler veya basinçli aerosol inhalatörler, nebülizatörler veya insüflatörler yoluyla solunum yoluna tatbik edilen sulu, organik veya sulu/organik karisimlari, kuru toz veya kristalize bilesimleri içine alir. Uygun bilesimler bu amaçla seyreltici veya tasiyici olarak su içerir ve tamponlama ajanlari, toniklik modifiye edici ajanlar ve benzeri gibi geleneksel yardimci maddeler ile temin edilebilir. Sulu bilesimler ayni zamanda nebülizasyon yoluyla buruna ve solunum yolunun diger bölgelerine de tatbik edilebilir. Bu tip bilesimler, uygun bir sivilastirilmis itici gaz kullanilinasiyla 'Ölçekli doz inhalatörü gibi basinçli paketlerden tasinan aerosoller veya süspansiyonlar ya da sulu çözeltiler olabilir. Buruna (örnegin, rinit/nezle tedavisi için) veya akcigere topik sekilde uygulama için bilesimler, basinçli pompa yoluyla nazal bosluklara tatbik edilen basinçli aerosol bilesimlerini ve sulu bilesiinleri içine alir. Basinçli olmayan ve nazal bosluga topikal uygulama için uygun olan bilesimler özel ilgi çekmektedir. Uygun bilesiinler bu amaçla seyreltici veya tasiyici olarak su içerir. Akciger veya buruna uygulama için sulu bilesimler, tainponlaina ajanlari, toniklik modifiye edici ajanlar ve benzeri gibi geleneksel yardimci maddeler ile temin edilebilir. Sulu bilesimler buruna ayni zamanda nebülizasyon yoluyla da tatbik edilebilir. Sivi dagiticisi tipik bir sekilde sivi bilesiini nazal bosluklara tasimak üzere kullanilabilir. Sivi bilesim sulu veya susuz olabilir fakat tipik bir sekilde suludur. Bu tip bir sivi dagiticisi, kullanici tarafindan sivi dagiticinin pompa mekanizmasina tatbik edilen kuvvetin uygulanmasi üzerine içinden sivi bilesimin ölçülü dozunun dagitildigi bir dagitma agizligina veya dagitma basligina sahip olabilir. Bu tip sivi dagiticilar genellikle sivi bilesiinin çoklu ölçülü dozlarinin bulundugu bir rezervuar ile temin edilir, dozlar birbiri ardina pompanin çalistirilmasi `uzerine dagitilabilmektedir. Dagitim basligi veya agizligi, sivi bilesimin nazal bosluk içine sprey seklinde dagitilmasi için, kullanicinin burun delikleri içine yerlestirilmek üzere konfigüre edilebilir. Daha önce sözü edilen tipte bir sivi dagiticisi, (Glaxo Group Limited) tarif edilmekte ve çizimle açiklanmaktadir. Dagitici, sivi bilesimi içermek için kap 'üzerine monte edilmis bir koinpresyon pompasina sahip olan sivi dagitma cihazini barindiran bir yuvaya sahiptir. Yuva, pompanin komprese olmasi ve bilesimiii ölçülü dozunu, yuvanin nazal basligi içinden pompa gövdesinden disariya pompalamaya neden olmak üzere bir kam araciligiyla kabi yuva içinde yukariya dogru hareket ettirinek üzere yuvaya göre içeriye dogru hareket edebilen en az bir parmakla çalistirilabilir yan manivelaya sahiptir. Bir uygulamada, sivi dagitici WO Formül (1)"in bilesigini ve bunun farmas'otik açidan kabul edilebilir tuzunu içeren sulu bilesimler, ayni zamanda Uluslararasi Limited) açiklandigi gibi, örnegin bunun Sekilleri 22-46°ya basvurularak açiklandigi gibi veya Birlesik Krallik patent basvuru numarasi GB0723418.0,da (Glaxo Group Limited) açiklandigi gibi, örnegin bunun Sekilleri 7-32"ye basvurularak açiklandigi gibi bir pompa yoluyla da tasinabilir. Pompa GBO723418.O"1n Sekilleri l-6"da açiklandigi gibi bir harekete geçirici tarafindan harekete geçirilebilir. Inhalasyon yoluyla akcigere topikal tasinma içiii kuru toz bilesimler, bir inhalatör veya insüflatör içinde kullanim için ömegin, jelatinden yapilmis mesela kapsüller veya kartuslar içinde veya örnegin lamine alüminyum folyodan blisterlerde takdim edilebilir. Toz karisim bilesimleri genellikle formül (Diin bilesigiiiin veya bunun farmas'otik açidan kabul edilebilir tuzunun ve mono-, di- veya polisakkaritler (örnegin; laktoz veya nisasta) gibi uygun bir toz bazin (tasiyici / seyreltici / yardiinci madde) inhalasyonu için bir toz karisim içerir. Kuru toz bilesimler ayni zainaiida, ilaç ve tasiyiciya ek olarak, diger bir yardiinci inaddeyi (Örnek olarak; seker esteri gibi bir üçlü ajan, mesela sellobioz oktaasetat, kalsiyum stearat veya magnezyum stearat) de içerebilir. Bir uygulamada, inhale edilen uygulama için uygun bir bilesim, uygun bir inhalasyon cihazinin içine monte edilen ilaç paketinin (paketlerinin) üzerinde temin edilen çok sayida kapali doz kaplari içine dahil edilebilir. Kaplar birer birer yirtilabilir, soyulabilir ve diger bir sekilde açilabilir sekilde olabilir ve Inhalasyon yoluyla tatbik edilen kuru toz bilesiminin dozlari, bu alanda bilindigi gibi inhalasyon cihazinin agiz kismina yerlestirilebilir. Ilaç paketi bir dizi farkli sekil alabilir, örnegin; disk seklinde veya uzun serit seklinde olabilir. Ornek niteligindeki inhalasyon cihazlari GlaxoSmithKline tarafindan pazarlanan DISKHALERTM ve DISKUSTM cihazlaridir. Kuru toz inhale edilebilir bir bilesim, ayni zamanda bir inhalasyon cihazi içinde bulk rezervuar seklinde de temin edilebilir, cihaz sonra rezervuardan Ölçüleme mekanizmasi ile bilesimin ölçülü dozu, ölçülü dozun cihazin agiz kisminda inhale eden hasta tarafindan inhale edilebildigi inhalasyon kanalina temin edilir. Ornek niteligindeki pazarlaiian bu tip cihazlar TURBUHALERTM (AstraZeneca), TWISTHALERTM (Schering) ve CLICKHALERTM"dir Kuru toz bilesimin diger bir tasinma yöntemi, daha sonra, tipik bir sekilde hasta tarafindan talep üzerine inhalasyon cihazina yüklenen kapsüllerde (kapsül basina bir doz) temin edilen bilesiinin ölçülü dozlari içindir. Cihaz, kapsülün yirtilmasi, delinmesi veya baska sekilde açilmasi için araçlara sahiptir, böylece dozun cihazin agiz kisminda inhale ettigi zaman hastanin akcigerlerine sürüklenmesi müinkün olur. Bu tip cihazlarin pazarlanan örnekleri olarak ROTAHALERTM (GlaxoSmithKline) ve HANDIHALERTWden (Boehringer Ingelheim) söz edilebilir. Inhalasyon için uygun olan basinçli aerosol bilesimleri, süspansiyon veya çözelti olabilir ve formül (1)"in bilesigini ve bunun farinasötik açidan kabul edilebilir tuzunu ve fluorokarbon veya hidrojen içeren klorofluorokarbon veya bunlarin karisimlari, özellikle de hidrofluoroalkanlar, bilhassa l,1,l,2-tetrafluor0etan, 1,1,l,2,3,3,3- heptafluoro-n-propan veya bunlarin bir karisimi gibi uygun bir itici gazi içerebilir. Aerosol bilesimi, istege bagli olarak bu alanda iyi bilinen, sürfaktanlar gibi örnegin; oleik asit, lesitin veya oligolaktik tarif edildigi gibi (Minnesota Mining and Manufacturing Company) ve ko-çözücüler örnegin; etanol gibi ilave bilesim yardimci maddeleri içerebilir. Basinçli bilesimler, genellikle bir valf (örnegin; dozaj valfi) ile kapatilmis bir kutu (örnegin; alüminyum kutu) içinde tutulacaktir ve bir agiz kismi ile temin edilen bir harekete geçiriciye geçirilecektir. Merhemler, kremler ve jeller, örnegin, uygun kivain verici ve/Veya jellesme ajani ve/veya çözücü ilavesi ile sulu veya yagli baz ile formüle edilebilir. Bu tip bazlar, bundan ötürü, su ve/veya sivi parafin veya yer fistigi yagi veya hintyagi gibi bir bitkisel yag gibi bir yagi veya polietilen glikol gibi bir çözücüyü içine alir. Bazin tabiatina uygun olarak kullanilabilen kivam verici ajanlar ve jellesme ajanlari vazelin, alüminyum stearat, setostearil alkol, polietilen glikoller, yün yagi/lanolin, balmumu, karboksipolimetilen ve selüloz türevleri ve/veya gliseril monostearat ve/veya iyonik olinayan emülsifiyan ajanlari içine alir. Losyonlar sulu veya yagli baz ile formüle edilebilir ve genel olarak ayni zamanda bir veya daha fazla emülsifiyan ajan, stabilizan ajan, dispersiyon ajani, süspansiyon ajani veya kivam verici ajani da Harici uygulama için tozlar uygun olan herhangi bir toz bazin, örnegin; talk, laktoz veya nisasta yardimiyla olusturulabilir. Damlalar sulu veya susuz baz ile formüle edilebilir, ayni zamanda bir veya daha fazla dispersiyon ajani, çözündürme ajani, süspansiyon ajani veya koruyuculari kapsar. Formül (I)'in bilesikleri ve bunun farmas'otik açidan kabul edilebilir tuzlari, bilesimin transdermal tasinmasi için Örnegin; aktif bileseni deri içine tasiyan plasterler veya diger cihazlar (örnegim basinçli gaz cihazlari) içine formüle edilebilir. Bukkal uygulama için bilesimler, geleneksel sekilde formüle edilen tabletler veya lozanjlar seklini alabilir. Formül (I)°in bilesikleri ve bunun farmasötik açidan kabul edilebilir tuzlari, ayni zamanda süpozituvarlar seklinde, Ömegin; kakao yagi veya diger gliseritler gibi geleneksel süpozituvar bazlarini içerenler seklinde de formüle edilebilir. Formül (I)°in bilesikleri ve bunun farmasötik açidan kabul edilebilir tuzlari, birim doz seklinde, 'Örnek olarak; bolus enjeksiyonu veya sürekli enfüzyon yoluyla parenteral uygulama seklinde takdim edilebilir ve birim doz seklinde, örnegin; ampuller, flakonlar, küçük hacimli enfüzyonlar veya önceden doldurulmus siringalar seklinde veya ilave edilen koruyucu ile çok dozlu kaplarda da takdim edilebilir. Bilesimler sulu veya susuz tasiyicilar içinde çözeltiler, süspansiyonlar veya emülsiyonlar gibi sekiller alabilir ve anti-oksidanlar, tamponlar, antimikrobiyal ajanlar ve/Veya toniklik ayarlayici ajanlar gibi formülasyon ajanlarini içerebilir. Alternatif olarak, kullanimdan önce aktif bilesen uygun bir tasiyici örnegin; steril, pirojensiz su ile hazirlamak için toz halde olabilir. Kuru takdim sekli steril toz aseptik sekilde ayri ayri steril kaplar içine doldurularak veya steril çözelti aseptik sekilde her bir kaba doldurularak ve dondurulup kurutularak hazirlanabilir. Formül (I),in bilesikleri ve bunun farmasötik açidan kabul edilebilir tuzlari, ayni zamanda aktivitelerini modüle etmek üzere adjuvanlari seklinde asilar ile de formüle edilebilir. Bu tip bilesimler antikor (antikorlar) veya antikor parçasi (parçalari) veya protein, DNA, canli veya ölü bakteriler ve/Veya Virüsler veya Virüs benzeri partiküller de dahil olmak üzere ancak bunlar ile sinirli olmaksizin anti jenik bileseni alüminyum tuzlari, yagli ve sulu emülsiyonlar, isi soklu proteinler, lipid A preparatlari ve türevleri, glikolipidler, CpG DNA veya benzer ajanlar gibi diger TLR agonistleri, GM-CSF veya bunlarla sinirli olmaksizin adjuvan aktiviteli bir veya daha fazla bilesen ile birlikte içerebilir. Formül (I)"in bilesikleri ve bunun farmasötik açidan kabul edilebilir tuzlari, tek basina veya diger terapötik ajanlar ile bilesim halinde kullanilabilir. Formül (I)°in bilesikleri ve bunun farmas'otik açidan kabul edilebilir tuzlari, ve diger farmasötik açidan kabul edilebilir aktif ajan (ajanlar) birlikte veya ayri ayri tatbik edilebilir ve ayri ayri tatbik edildikleri zaman, uygulama herhangi bir sirayla ayni anda veya ardisik sekilde olabilir. Forinül (1) 'in bilesiginin(bilesiklerinin) ve bunun farmasötik açidan kabul edilebilir tuzunun(tuzlarinin), ve diger farmasötik açidan kabul edilebilir aktif ajanin(ajanlarin) miktarlari ve bagil uygulama zamanlari, arzu edilen kombine terapötik etkiye ulasmak 'uzere seçilecektir. Formül (Dain bilesiginin ve bunun farmasötik açidan kabul edilebilir tuzunun diger tedavi ajanlari ile kombinasyonunun uygulanmasi, her iki bilesigi içine alan tek bir farmas'otik bilesim içinde es zamanli uygulama yoluyla veya her biri bilesiklerin birini içeren ayri farinas'otik bilesiinler halinde olabilir. Alternatif olarak, kombinasyon bir tedavi ajaninin ilk olarak tatbik edildigi ve digerinin ikinci tatbik edildigi veya tam tersi sekilde ardisik sekilde, ayri ayri tatbik edilebilir. Bu tip ardisik uygulama zaman açisindan yakin veya uzak olabilir. Formül (I)°in bilesikleri ve bunun farmas'otik açidan kabul edilebilir tuzlari, viral enfeksiyonlarin önlenmesinde veya tedavisinde kullanisli bir veya daha fazla ajanla kombinasyon halinde kullanilabilir. Bu tip ajanlarin örnekleri, sinirlama olmaksizin WO açiklananlar gibi polimeraz inhibitörlerini ve benzer ajanlari; asiklovir, famsiklovir, gansiklovir, sidofovir, lamivudin ve benzer ajanlar gibi replikasyon inhibitörlerini; HIV proteaz inhibitörleri sakuinavir, ritonavir, indinavir, nelfinavir, amprenavir, fosamprenavir, brekanavir, atazanavir, tipranavir, palinavir, lasinaVir ve HCV proteaz proteaz inhibitörlerini; zidovudin, didanosin, lamivudin, zalkitabin, abasavir, stavidin, adefovir, adefovir dipivoksil, fozivudin, todoksil, emtrisitabin, alovudin, amdoksovir, elvusitabin ve benzer ajanlar gibi nüklezit ve nükleotit tersine transkriptaz inhibitörlerini; nevirapin, delavirdin, efavirenz, lovirid, immunokal, oltipraz, kapravirin, TMC- 278, TMC-125, etravirin ve benzer ajanlar gibi nükleozit olmayan tersine transkriptaz inhibitörlerini (immunokal, oltipraz Vb. gibi anti- oksidan aktiviteye sahip olan bir ajan da dahil olmak üzere); enfuvirtid benzer ajanlar giris inhibitörlerini; L-870,180 ve benzer ajanlar gibi entegraz inhibitörlerini; PA-344 ve PA-457 ve benzer ajanlar gibi Vicriviroc (Sch-C), Sch-D, TAK779, maraviroc (UK-427,857), TAK449 ve benzer ajanlar gibi kemokin reseptörü inhibitörlerini; CS- 8958, zanamivir, oseltamivir, peramivir ve benzer ajanlar gibi nöraminidaz inhibitörlerini; ainantadin veya rimantadin ve benzer ajanlar gibi iyon kanali blokerlerini; ve !SIS-14803 ve benzer ajanlar gibi müdahil RNA ve antisens oligonükleotitleri; tayin edilmemis etki ajanlari içine alir. Formül (1)"in bilesikleri ve bunun farmasötik açidan kabul edilebilir tuzlari, Viral enfeksiyonlarin, örnegin; immün terapiler (mesela; interferon veya diger sitokinler / kemokinler, sitokin / kemokin reseptör modülatörleri, sitokin agonistleri veya antagonistleri ve benzer ajanlar) önlenmesinde veya tedavisinde kullanisli olabilen bir veya daha fazla ajanla; ve terapötik asilar, antifibrotik ajanlar, kortikosteroidler veya NSAIIler/nonsteroidal anti enflamatuvar ajanlar gibi anti-enflamatuvar ajanlar ve benzer ajanlar ile kombinasyon halinde de kullanilabilir. Formül (1)'in bilesikleri ve bunun farmasötik açidan kabul edilebilir tuzlari, alerjik hastalik, enflamatuvar hastalik, otoimmün hastaliklarin tedavisinde veya önlenmesinde yararli olabilen bir veya daha fazla diger ajan ile örnegin; antijen iinmünoterapisi, anti- histaminler, steroidler, NSAIIler, bronkodilatörler (örnegin; beta 2 agonistleri, adrenerjik agonistleri, antikolinerjik ajanlar, teofilin), metotreksat, lökotrien modülatörleri ve benzer ajanlar; anti-IgE, anti- TNF, anti-IL-S, anti-IL-6, anti-IL-12, anti-IL-l ve benzer ajanlar gibi monoklonal antikor terapisi; reseptör terapileri örnek olarak; entanecept ve benzer ajanlar; anti jen spesifik olmayan immünoterapiler (örnegin; interferon veya diger sitokinler / kemokinler, sitokin / kemokin reseptör modülatörleri, sitokin agonistleri veya antagonistleri, TLR agonistleri ve benzer ajanlar) ile kombinasyon halinde kullanilabilir. Formül (I)"in bilesikleri ve bunun farmasötik açidan kabul edilebilir tuzlari, kanserin tedavisinde veya önleninesinde yararli olabilen bir veya daha fazla diger ajan ile örnegin; alkilleme ajanlari, topoizomeraz inhibitörleri, antimetabolitler, antimitotik ajanlar, kinaz inhibitörleri ve benzer ajanlar gibi kemo-terapötikler; trastuzumab, gemtuzumab ve benzer ajanlar gibi monoklonal antikor; ve tainoksifen, goserelin ve benzer ajanlar gibi hormon tedavisi ile kombinasyon halinde kullanilabilir. Bulusa uygun sekildeki farmasötik bilesimler, diger terapötik alanlarda, örnegin; gastrointestinal hastaliklarda tek basina veya en az bir diger terap'otik ajan ile kombinasyon halinde de kullanilabilir. Bulusa uygun sekildeki bilesimler ayni zamanda gen replasman tedavisi ile kombinasyon halinde de kullanilabilir. Tarifname, diger bir yaklasimda formül (1)"in bir bilesigini veya bunun farmas'otik açidan kabul edilebilir bir tuzunu, en az bir diger terapötik açidan aktif ajan ile birlikte kapsayan bir kombinasyonu içine alir. Yukarida isaret edilen kombinasyonlar, uygun bir sekilde farmas'otik bir bilesim seklinde kullanim için takdim edilebilir ve bundan dolayi, yukarida tarif edildigi gibi bir koinbinasyonu en az bir farmasötik açidan kabul edilebilir seyreltici veya tasiyici ile kapsayan farmas'otik bilesimler, tarifnamenin diger bir yaklasimini takdim etmektedir. Formül (I),in bilesiginin ve bunun farmas'otik açidan kabul edilebilir tuzunun terap'otik açidan etkin miktari, bir dizi etinene bagli olacaktir. Örnegin, türler, alicinin yasi ve agirligi, tedavi gerektiren kesin durum ve bunun siddeti, bilesiinin tabiati ve uygulama yolu dikkate alinmasi gereken bütün etmenlerdir. Terapötik açidan etkin miktar nihayetinde basvurulan uzman hekimin karari olmalidir. Ne olursa olsun, zayif insanlarin tedavisi için mevcut bulusun bilesiginin etkin miktari, gün basina 0.0001 ila 100 mg/kg vücut agirligi araligi içinde olmalidir. Daha çik etkin miktar gün basina 0.001 ila 10 mg/kg araliginda olmalidir. Bundan ötürü, 70 kg agirligindaki bir yetiskin için gün basina fiili miktarin örnegi genellikle 7 ila 700 mg olacaktir. Intranazal ve inhalasyon uygulamasi yollari için, 70 kg agirligindaki bir yetiskin için tipik dozlar gün basina 1 mikrogram ila 1 mg araligi içinde olmalidir. Bu miktar günde tek doz halinde veya toplam günlük dozun ayni olacagi sekilde gün basina birkaç bölünmüs dozda (iki, 'üç, dört, bes veya daha fazla gibi) verilebilir. Formül (I),in bilesiginin farmasötik açidan kabul edilebilir tuzunun etkin miktari, haddizatinda formül (I)°in bilesiginin etkin miktarinin veya bunun farmas'otik açidan kabul edilebilir tuzunun bir orani seklinde tayin edilebilir. Benzer dozajlar, burada isaret edilen diger durumlarin tedavisi için uygun olmalidir. Formül (I)7in bilesikleri ve bunun farmasötik açidan kabul edilebilir tuzlari ayni zamanda herhangi bir uygun siklikta, örnegin; hafta basina 1-7 kere de tatbik edilebilir. Kesin dozlama rejimi elbette ki terap'otik endikasyon, hastanin yasi ve durumu ve seçilen 'Özel uygulama yolu gibi etineiilere bagli olacaktir. Farmasötik bilesimler, birim doz basina önceden saptanmis miktarda aktif bilesen içeren birim doz sekillerinde takdim edilebilir. Böyle bir ünite, tedavi edilmekte olan durum, uygulama yolu ve hastanin yasi, agirligi ve durumuna bagli olarak, sinirlayici olmayan bir 'Örnek olarak; 0.5 mg ila 1 g formül (I)°in bilesigini ve bunun farmasötik açidan kabul edilebilir tuzunu içerebilir. Tercih edilen birim dozaj bilesimleri, burada yukarida anlatildigi gibi bir günlük dozu veya alt dozlari veya aktif bilesenin uygun bir fraksiyonunu içerenlerdir. Bu tip farmasötik bilesimler, eczacilik alaninda iyi bilinen herhangi bir yöntem yoluyla hazirlanabilir. Bundan ötürü ayrica formül (I)°in bilesigini ve bunun farmas'otik açidan kabul edilebilir tuzunu ve bir veya daha fazla farmas'otik açidan kabul edilebilir seyreltici veya tasiyiciyi kapsayan farmasötik bir bilesim temin edilmektedir. Tarifnameye uygun olarak, ayni zamanda bu tip bir farmas'otik bilesiinin hazirlanmasi için, formül (l)'in bilesiginin ve bunun farmas'otik açidan kabul edilebilir tuzunun, bir veya daha fazla seyreltici veya tasiyici ile karistirilmasini kapsayan bir proses de temin edilmektedir. Tarifname ve takip eden istemler boyunca, kapsam aksini gerektirmedigi takdirde, "kapsamak" ve "kapsamaktadir" ve "kapsar "gibi varyasyonlarin, belirtilen tamsayiyi veya asamayi veya tainsayi grubunu içine aldiginin ancak herhangi bir diger tamsayiyi veya asamayi ya da tainsayi grubunu veya asamalari hariç birakinadiginin ima edildigi anlasilacaktir. Formül (I)"in bilesikleri ve bunun tuzlari, burada daha sonra tarif edilen metodoloji yoluyla hazirlanabilir, bu da bu tarifnamenin diger yaklasimlarini meydana getirmektedir. Tarifnameye uygun olarak, formül (1)'in bilesiginin hazirlanmasi için bir proses temin edilmekte olup, proses, formül (ll)"nin bilesiginin korumasinin kaldirilmasini kapsar: R1 ÄJNIZ'SIOR buradaki R1, m ve n burada formül (1)"in bilesigi için daha önce tarif edildigi gibidir ve R2 CH, alkildir ve bundan sonra eger gerekirse, asagidaki istege bagli asamalarin bir veya daha fazlasi gerçeklestirilir: (i) herhangi bir koruyucu grubun uzaklastirilinasi; (ii) bu sekilde olusturulan bilesigin tuzunun hazirlanmasi. Örnek olarak, formül (ll)"nin bilesigi, uygun bir asidin, çözeltisinin varliginda uygun bir çözücü içinde, örnegin; l,4-dioksan içinde hidrojen klorürün bir çözeltisi içinde çözündürülür ve uygun bir sicaklikta, mesela oda sicakliginda, uygun bir süre, örnegin; 12-24 saat süreyle karistirilir. Çözücü düsürülmüs basinç altinda uzaklastirilir ve bakiye uygun bir çözücü içinde örnegin; metanol içinde çözündürülür ve iyon degistirme kartusuna, örnegin; aminopropil SPE kartusuna yüklenir. Kartus uygun bir çözücü, örnegin; metano] ile elüe edilir ve çözücü, formül (1)"in bilesigini vermek üzere uzaklastirilir. Formül (Il)°nin bilesigi, formül (IIIYün bilesiginin: R1)|\ÄN›:ENIOR2 buradaki R1 ve m burada formül (1)"in bilesigi için daha önce tarif edildigi gibidir ve R2 formül (II)'nin bilesigi için tarif edildigi gibidir ve X bir çikan gruptur, örnegin; bromo veya klor gibi bir halo grubudur, formül (IV)"ün bilesigi: buradaki n, formül (I)7in bilesigi için daha önce tarif edildigi gibidir, ile reaksiyonu yoluyla hazirlanabilir Ornek olarak, formül (III)'ün bilesigi, formül (IV),ün bilesigi ve uygun bir baz, mesela N,N-diizopropiletilaniin, uygun bir çözücü içinde, örnegin; DMF içinde çözündürülür ve uygun bir sicaklikta, örnegin; 50-600C"de, uygun bir süre, örnegin; 46-50 saat süreyle isitilir. Eger gerekli ise, ilave formül (IV) bilesigi ve baz ilave edilir ve reaksiyon karisimi, uygun bir sicaklikta, örnegin; 50-600C'de, uygun bir süre, örnegin; 46-50 saat süreyle isitilir. Urün daha sonra geleneksel araçlar kullanilarak, örnegin; uygun organik çözücü ve su arasinda partisyone etme yoluyla reaksiyondan ekstre edilir, ardindan organik faz izole edilir ve çözücü uzaklastirilir ve eger gerekirse, saflastirilir. Formül (IIIYün bilesigi, formül (V)'in bilesiginin, örnegin; trifluoroasetat tuzu gibi formül (V)"in bilesiginin bir tuzunun: buradaki Rl daha önce formül (1)'in bilesigi için burada tarif edildigi gibidir ve R2 formül (II)'nin bilesigi için tarif edildigi gibidir, formül (VI)"nin bilesigi: burada m daha önce formül (1)"in bilesigi için burada tarif edildigi gibidir ve X ise forinül (HI)"ün bilesigi için daha önce burada tarif edildigi gibidir, ile reaksiyonu yoluyla hazirlanabilir. Örnek olarak, formül (V)°in bilesiginin trifluoroasetat tuzu ve uygun bir baz, örnegin; potasyum karbonat, uygun bir çözücü, örnegin; DM F içinde süspanse edilir ve uygun bir sicakliga, örnegin; ; 50-60°C"ye, uygun atmosfer altinda, örnegin; azot atmosferi altinda, uygun bir süre, ömegin; 20-120 dakika süreyle isitilir. Karisiin uygun bir sicakliga, örnegin; oda sicakligina sogutulur ve formül (VI)°nin bilesigi ilave edilir ve karistirmaya uygun bir süre, örnegin; 18-24 saat oda sicakliginda devam edilir. Çözücü düsürülmüs basinç altinda uçurulur ve bakiye uygun bir çözücü, örnegin; DCM ve su arasinda partisyone edilir. Ham ürün daha sonra organik fazdan izole edilir ve kolon kromatografisi gibi geleneksel teknikler yoluyla saflastirilir. Alternatif olarak, formül (II)"nin bilesigi, formül (V),in bilesiginin, örnegin; trifluoroasetat gibi formül (V)°in bilesiginin bir tuzunun, "tek kap" prosesi seklinde, X°in bromo oldugu formül (VI')°nin bilesigi ve forinül (IV)°in bilesigi ile reaksiyonu yoluyla hazirlanabilir. Ornek olarak, formül (V)"in bilesiginin trifluoroasetat tuzu, uygun bir çözücü, örnegin; DMF içinde çözündürülür ve uygun bir baz örnegin; potasyum karbonat ilave edilir. Reaksiyon karisimi uygun bir sicaklikta, örnegin; 45-60°C"de, uygun bir atmosfer altinda, örnegin; azot atmosferi altinda, uygun bir süre, ömegin, 1-2 saat süreyle karistirilir ve daha sonra, uygun bir sicakliga, örnegin; oda sicakligina sogutulur. X"in bromo oldugu formül (VI)°nin bilesigi daha sonra ilave edilir ve uygun bir süreyle, örnegin 40-60 dakika karistirildiktan sonra, formül (IV)"ün bilesigi ve uygun bir baz, örnegin; trietilamin, uygun bir çözücü içinde, örnegin; DMF içinde ilave edilir. Reaksiyon karisiini daha sonra uygun bir süre, örnegin; 12-24 saat süreyle karistirilir. Çözücü uzaklastirilir ve bakiye uygun organik çözücü, örnegin; diklorometan ve su arasinda partisyone edilir. Formül (11)"nin ham ürünü geleneksel yollarla izole edilir ve örnegin kromatografi yoluyla saflastirilir. Formül (V)"in bilesiginin bir tuzu, uygun bir asidin, örnegin; trifluoroasetik asidin varliginda, formül (VII),nin bilesiginin korumasinin kaldirilmasi yoluyla hazirlanabilir: R1 N/ N buradaki RI daha önce formül (I)°in bilesigi için burada tarif edildigi gibidir ve R2 formül (II),nin bilesigi için tarif edildigi gibidir ve P bir koruyucu gruptur, örnegin; tetrahidro-ZH-piran-Z-il grubudur. Örnek olarak, uygun bir asit, mesela trifluoroasetik asit, formül (VII),nin bilesiginiii uygun bir çözücü mesela metanol içindeki çözeltisine ilave edilir. Karisim uygun sicaklikta, örnegin oda sicakliginda, uygun bir süre, örnegin; 48-72 saat süreyle karistirilir. Reaksiyon karisimi, daha sonra, uygun bir çözücü., mesela etil asetat ile seyreltilmeden önce, düsürülmüs basinç altinda konsantre edilir. Sonuçta meydana gelen karisimi filtre edilir ve küçük hacim uygun çözücüyle, örnegin; etil asetat ile süzüntü renksiz hale geçene kadar yikanir. Bakiye açik havada ve sonra, formül (V)"ün bilesiginin tuzunu vermek üzere düsürülmüs basinç altinda kurutulur. Süzüntü konsantre edilebilir ve konsantre uygun bir çözücünün, örnegin; etil asetatin küçük bir hacmi ile seyreltilir ve sonra filtre edilir ve formül (V)°in bilesiginin tuzunun ikinci ürünüiiü vermek üzere kurutulur. Formül (V)°in bilesiginin bir tuzu, ömegin; trifluoroasetat tuzu, ayni zamanda formül (IX)°un bilesiginin: buradaki RI daha önce formül (I),in bilesigi içiii burada tarif edildigi gibidir ve P formül (VII)°nin bilesigi için burada daha öiice tarif edildigi gibidir, uygun bir halojenleme ajaniyla, örnegin; N- bromosüksinimid ile reaksiyonu yoluyla, ardindan alkoksit anyonuyla, örnegin; monoksit anyonu ile reaksiyon yoluyla ve daha sonra uygun bir asidin, örnegin; trilluoroasetik asidin varliginda izole edilmesi yoluyla da hazirlanabilir. Örnek olarak, formül (IX)"un ham bilesiginin uygun bir kuru çözücü içindeki, örnegin; kuru kloroform içindeki bir çözeltisine, uygun bire sicaklikta, örnegin; oda sicakliginda, porsiyonlar halinde uygun bir halojenleme ajani, mesela N-bromosüksinimid uygun bir süreyle, örnegin; 5 dakika süreyle ilave edilir. Çözelti uygun bir sicaklikta, örnegin; oda sicakliginda, uygun bir süre, örnegin; 25-35 dakika süreyle karistirilir. Reaksiyon karisimi daha sonra su ile yikanir ve organik faz, örnegin; hidrofobik cam tozu içinden geçirilerek kurutulur ve düsürülmüs basinç altinda konsantre edilir. Sonuçta meydana gelen kati madde, uygun bir çözücü, örnegin; kuru metanol ve uygun alkoksit, örnegin; sodyum metoksidin metanol içindeki bir çözeltisi içinde çözündürülür, uygun bir sicaklikta, örnegin; oda sicakliginda, inert bir atmosfer altinda, örnegin azot atmosferi altinda ilave edilir. Reaksiyon karisimi, kondansatör takilarak uygun bir sicaklikta, örnegin; 60-7OOC"de, uygun bir süre, örnegin; 12-18 saat süreyle isitilir. Reaksiyon karisimi sonra sogutulur ve düsürülmüs basinç altinda konsantre edilir. Bakiye daha sonra uygun bir çözücü içine, örnegin; etil asetat içine alinir ve uygun bir sulu vasat içine, örnegin; doymus sulu amonyuin klorür çözeltisine dökülür. Organik tabaka ayrilir ve su ile daha da yikanir, örnegin; magnezyuin sülfat üzerinden kurutulur, filtre edilir ve düsürülmüs basinç altinda konsantre edilir. Bu maddenin uygun kuru çözücü, örnegin; kuru metanol içindeki çözeltisine, uygun bir sicaklikta, örnegin oda sicakliginda, uygun bir asit, örnegin; trifluoroasetik asit ilave edilir. Reaksiyon uygun bir süre, örnegin; 25-35 saat süreyle karistirilir ve formül (V)"in bilesigini vermek üzere düsürülmüs basinç altinda konsantre edilir. Formül (VII)°nin bilesigi, formül (VIII)°in bilesiginin: R1J\N/ N\ buradaki Ri daha önce formül (I)°in bilesigi için burada tarif edildigi gibidir, P formül (Vll)°nin bilesigi için burada daha önce tarif edildigi gibidir ve Q bir halojen atomudur, örnegin; broni atomudur, alkoksit anyonuyla, örnegin; metoksit anyonu ile reaksiyonu yoluyla hazirlanabilir. Örnegin, formül (VIII)°in bilesiginin uygun bir çözücü mesela metanol içindeki bir çözeltisi, uygun bir alkoksit, örnegin; sodyum metoksit çözeltisi ile uygun bir çözücü içinde, örnegin; metanol içinde uygun bir süre, örnegin; 4-5 saat süreyle kaynamaya isitilir. Reaksiyon karisimi düsürülmüs basinç altinda konsantre edilir ve uygun organik çözücü, örnegin; etil asetat ve uygun sulu vasat, örnegin; doymus sulu amonyum klorür çözeltisi arasinda partisyone edilir. Organik faz ayrilir, örnegin; tuzlu su ile yikanir ve örnegin; hidrofobik cam tozu içinden geçirilerek kurutulur. Çözücü sonra formül (Vll)"nin bilesigini vermek üzere düsürülmüs basinç altinda uzaklastirilir. Formül (Vlll)7in bilesigi, formül (IX),un bilesiginin, N- bromosüksinimid gibi uygun bir halojenleme ajani ile reaksiyonu yoluyla hazirlanabilir. Örnek olarak, formül (IX)"un bilesigi uygun bir çözücü içinde, örnegin; kloroform içinde çözündürülür ve uygun bir sicakliga, öniegin; 0-0.5°C°ye sogutulur. Bu çözeltiye, sicaklik yaklasik olarak 3°C°nin altinda tutulurken, N-bromosüksinimid gibi uygun bir halo jenleine ajani ilave edilir. Çözelti uygun bir sicaklikta, örnegin; 2- 3°C"de, uygun bir süre, örnegin; 30-45 dakika süreyle karistirilir, sonra uygun bir sicakliga, örnegin; oda sicakligina isininasina izin verilir ve uygun bir süreyle, mesela 5-7 saat süreyle karistirilir. Reaksiyon karisimi, su ile yikanir ve organik faz kurutulur ve örnegin; hidrofobik cam tozu kullanilarak sulu fazdan ayrilir. Organik çözücü daha sonra uzaklastirilir ve formül (Vlll)°in bilesigini vermek üzere, ham ürün, Örnegin; kromatograf i yoluyla saflastirilir. Rlin C1_6alkoksi oldugu formül (IX)°un bilesigi, formül (X)°un bilesiginin: buradaki P, formül (VII)°nin bilesigi için daha önce burada tarif edildigi gibidir ve T uygun bir çikan gruptur, örnegin; bir halojen atomudur, mesela bir klor atomu veya flüor atomudur, formül (IIIS)"in çözücüsü içinde hazirlanan Rl-H (XIIIS) buradaki formül (Xlll)"ün bilesigindeki Rl grubu, formül (XlllS)°niri çözücüsündeki Rl grubu ile aynidir, formül (XIII)"ün bilesiginin bir çözeltisi ile: buradaki R1 Ci_6a1koksidir ve m ise sodyum gibi uygun bir alkali metal liganttir, reaksiyonu yoluyla hazirlanabilir. Ornek olarak, sodyum t-butoksit gibi formül (XIII)°ün bilesigi, formül (XIIIS)°in çözücüsüne ilave edilir. Karisim homojen olana kadar karistirilir, sonra formül (VII)"nin bilesigi ilave edilir. Reaksiyon karisimi uygun bir sicakliga, örnegin; 100°C 'ye, uygun bir süre, örnegin; 12-18 saat süreyle isitilir. Çözücü önemli ölçüde düsürülniüs basinç altinda uzaklastirilir ve uygun bir çözücü, mesela dietil eter ve su arasinda partisyone edilir. Organik faz ayrilir ve sulu faz, daha çözücü ile tekrar ekstre edilir. Organik tabakalar sonra izole edilir, birlestirilir, uygun bir kurutma ajani, örnegin; susuz magnezyum sülfat kullanilarak kurutulur. Kurutma ajani filtre edilerek uzaklastirilir ve Riin C 1-6alkoksi oldugu formül (IX)°un bilesigini vermek üzere çözücü düsürülmüs basinç altiiida üründen uzaklastirilir. Rlin C1_6alkilamin0 oldugu formül (IX)°un bilesigi, formül (X)"un bilesiginin, forinül (XIVYün bilesigi ile reaksiyonu yoluyla hazirlanabilir: buradaki R1 C 1 -Öalkilaminodur Ornek olarak, formül (XIV)"ün bilesigi, uygun bir kuru çözücü içinde, örnegin; kuru etilen glikol içinde, uygun bir sicaklikta, örnegin; oda sicakliginda, uygun bir inert atmosfer altinda, mesela azot atmosferi altinda formül (X)°un bilesiginin çözeltisine ilave edilir. Reaksiyon karisimi uygun bir sicaklikta, örnegin; 110- 130°C"de, uygun bir süreyle, mesela 12-18 saat süreyle isitilir. Reaksiyon daha sonra uygun bir sicakliga, mesela oda sicakligina sogutulur, uygun bir çözücüyle, örnegin; etil asetat ile seyreltilir ve su ile yikanir. Organik tabaka uygun bir kurutma ajaniyla, örnegin; susuz magnezyum sülfat ile kurutulur, filtre edilir ve R'in CH, alkilamino oldugu formül (IX)"un bilesigini ürün olarak vermek üzere düsürülmüs basinç altinda konsantre edilir. Formül (X)'un bilesigi, formül (XI)"in bilesiginin: buradaki P, forinül (VII)"nin bilesigi için daha önce burada tarif edildigi gibidir ve T formül (X),un bilesigi için burada daha önce tarif edildigi gibidir ve V uygun bir çikan gruptur, mesela bir halojen atomudur, inesela bir klor atomudur, amoiiyagin alkollü çözeltisiyle, örnegin; amonyagin izo-propil alkol içindeki bir çözeltisi ile reaksiyonu yoluyla hazirlanabilir. Ornek olarak, formül (XI)"in bilesigi, amonyagin alkollü çözeltisiyle, örnegin; izo-propil alkol içindeki ZM amonyak çözeltisi ile, uygun bir sicaklikta, örnegin; 50-60°C°de, uygun bir süreyle, mesela 5-6 saat süreyle isitilir. Reaksiyon karisimi daha sonra uygun bir sicaklikta, örnegin; oda sicakliginda, uygun bir süre, mesela 12-18 saat süreyle beklemeye birakilir. Amonyagin alkollü çözeltisinin diger bir miktari, örnegin; ; izo-propil alkol içindeki 2M amonyak çözeltisi, sonuçta ineydana gelen keki parçalamak üzere ilave edilir ve reaksiyon karisimi, reaksiyon tamamlanana kadar bir süre daha mesela 8-10 saat daha isitilir. Reaksiyon karisimina su ilave edilir ve kati madde filtrasyon yoluyla uzaklastirilir, uygun yikama vasati ile örnegin; izo-propil alkol ve su karisimi ile yikanir ve sonra, formül (X)°un bilesiginin birinci ürününü vermek üzere örnegin; emme altinda havada kurutma yoluyla kurutulur. Süzüntünün bir süre daha, örnegin 12-18 saat daha beklemesine izin verilir ve sonuçta meydana gelen formül (X)"un bilesiginin sonuçta meydana gelen ikinci ürünü filtrasyon yoluyla izole edilir ve kurutulur. Forinül (X)°un bilesigi, ayni zamanda formül (Xll)°nin bilesiginin: buradaki T formül (X)"un bilesigi için burada daha önce tarif edildigi gibidir ve V ise formül (XI)7in bilesigi için burada daha önce tarif edildigi gibidir, formül (XV)"in bilesigi ile: buradaki PU koruyucu grup Piye uygun bir öncül maddedir örnegin; 3,4-dihidr0-2H-pirabil grubudur, reaksiyonu yoluyla, ardindan amonyagin alkollü bir çözeltisi, örnegin; izo-propil alkol içindeki amonyak çözeltisi ile reaksiyon yoluyla da hazirlanabilir. Örnek olarak, p-toluensülfonik asit monohidrat, uygun bir kuru çözücü. içinde, örnegin; kuru etil asetat içinde, formül (XII)°nin bilesiginin çözeltisine ilave edilir. Reaksiyon karisimi, uygun bir sicakliga, ömegin; 50-60°C"ye isitilir ve formül (XV)°in bilesigi ilave edilir. Reaksiyon uygun bir sicaklikta, örnegin; 50-60°C°de, uygun bir süre, mesela 1-2 saat süreyle karistirilir ve çözücü düsürülmüs basinç altinda uzaklastirilir. Sonuçta meydana gelen kati maddenin amonyagin alkollü çözeltisi içindeki, örnegin; izo-propil alkol içindeki 2M amonyak çözeltisi içindeki süspansiyonu, uygun inert bir atmosfer altinda, örnegin; azot atmosferi altinda, uygun bir sicaklikta, mesela 60-70°C°de, uygun bir süre boyunca, mesela 4-5 saat süreyle ekli bir kondansatör ile isitilir. Reaksiyon karisimi su içine dökülür ve uygun bir süreyle, mesela 12-18 saat süreyle sogumaya birakilir. Sonuçta meydana gelen çökelti filtrasyon yoluyla izole edilir ve formül (X)"un bilesigini vermek üzere kurutulur. Formül (X)"un bilesigi ayni zamanda, formül (XIA)°nin bilesiginin: buradaki T flüor atomudur, uygun bir koruyucu ajanla, örnegin; N,O- bis(trimetilsilil)asetamid gibi bir sililleine ajani ile reaksiyonu yoluyla, ardindan formül (XIA)°nin korumali bilesiginin, formül (XVE)°nin bilesigi ile: buradaki PU koruyucu grup P için uygun bir öncü] maddedir, örnegin; 3,4-dihidro-2H-piranil grubudur ve E ise bir açiloksi grubudur, mesela bir asetat grubudur, reaksiyonu yoluyla da hazirlanabilir. Örnek olarak, uygun bir koruyucu ajan, inesela N,O- bis(trimetilsilil)asetamid, formül (XIA)°nin bilesiginin, örnegin; 2- fluoro-lH-purin-6-amin°in, uygun bir susuz çözücü içindeki, mesela susuz asetonitril içindeki karistirilan süspansiyonuna ilave edilir ve sonuçta meydana gelen karisim uygun bir süreyle, mesela 2-3 saat süreyle kaynamaya isitilir. Reaksiyon karisimi daha sonra uygun bir sicakliga, örnegin; O-5°C"ye isitilir. Formül (XVE)"nin bilesiginin, örnegin; tetrahidropiranil asetatin, uygun susuz bir çözücü içindeki mesela susuz asetonitril içindeki çözeltisi, daha sonra yavasça ilave edilir, ardindan damla damla olacak sekilde bir Lewis asidi, örnegin; trimetilsilil trifluorometansülfonat ilave edilir. Reaksiyon sicakligi uygun bir sicakliga, örnegin; 8-15°C"ye ayarlanir ve karistirmaya bir süre daha, örnegin 1-2 saat daha devam edilir. Karisim daha sonra lM sodyum karbonat ilavesi ile doyurulur. Organik tabaka, karistirma ile 0°C°ye sogutulur. Çöken kati madde daha sonra örnegin filtrasyon Formül (XI)"in bilesigi, formül (XH)"nin bilesiginin, formül (XVYin bilesigi ile reaksiyonu yoluyla hazirlanabilir. Örnek olarak, formül (XII)°nin bilesigine uygun bir organik çözücü, mesela etil asetat ilave edilir, ardindan p-toluens'ûlfonik asit eklenir. Karisim, uygun bir sicakliga, örnegin; 50-60°C,ye isitilir ve sonra, 3,4-dihidro-2H-piran ilave edilir. Reaksiyon karisimi daha sonra uygun bir sicaklikta, örnegin; 50-60°C"de uygun bir süre, mesela 4-5 saat isitilir. Çözücü daha sonra ürün olarak formül (XI)"in bilesigini vermek üzere reaksiyon karisimindan düsürülmüs basinç altinda uzaklastirilir. Kisaltmalar Asagidaki liste, burada kullanildigi gibi belirli kisaltmalarin tanimlarini temin etmektedir. Listenin kapsamli olmadigi fakat asagida bulunmayan kisaltmalarin bu alanda uzman kimselerce açikça bilindigi takdir edilecektir. DCM Diklorometan DMF N,N-Dimetilf0rmamid DMSO Dimetilsülfoksit EtOAc Eti] asetat MDAP HPLC dak.(min) Temizlendi (Stripped) uzaklastirilmasi Dietil eter Hidroklorik asit Yüksek performansli sivi kromatografisi Presearch Limited, Basingstoke, Hants., RG24 8PZ,Ingiltere"den temin edilebilen UV absorpsiyon yoluyla fraksiyon analizli otomatik alev kroinatografisi cihazi Elektrosprey kütle spektroskopisi yoluyla fraksiyonlarin analizi ve iki çözücülü gradyan kullanilarak Cig kolonunda tersine faz HPLC Kati faz ekstraksiyonu Metanol Düsür'ûlmüs altinda basinç çözücünün Trifluoroasetik asit izo-Propil ters-Butil Asetil n-Butil oda sicakligi Burada daha 'önce tarif edilen sentetik prosesler Sema 1"de özetlenmektedir. 4; x. - .J \ -- .. u _ . 4 '-'5 4."- - Sema 1"in sentetik asamalarinin her bir için tipik reaksiyon kosullari asagida temin edilmektedir: A Dihidropiran / paratoluen sülfonik asit, örnegin 50°C, 3-6 saat süreyle A1 Dihidropiran / paratoluen sülfonik asit, örnegin 50°C, 1 saat süreyle, daha sonra amonyak / iPrOH, Örnegin 60°C, 4 saat süreyle, sonra su ilavesi ve oda sicakligina 12-18 saat süreyle sogutma A2 MeCN içinde BSA, geri çeviren sogutucuda kaynatina, 0°C°ye sogutma, sonra MeCN içinde THP asetat, sonra NaHC03 (sulu) B Amonyak/iPrOH, örnegin, 50°C 5 saat süreyle, sonra oda sicakliginda 12-18 saat süreyle, soiira 50°C 9 saat süreyle C x = NH için, RA = Ci_6alki]: RANHz/etilene gliko] RAONa/BuOH/dimetoksietan örnegin, 93-110°C 12-18 saat süreyle Cl CHC13 içinde NBS örnegin, 0-5°C 30 dakika süreyle, sonra oda sicakliginda 0.5-1 saat süreyle, sonra örnegin, NaOMe/metanol, Nz altinda/60-7OOC/ 12-18 saat, sonra TFA/MeOH örnegin, oda sicakligi 18-65 saat süreyle. D CHCl3 içinde NBS örnegin, 0-5°C 30 dakika süreyle, sonra oda sicakligi 36-48 saat süreyle. E NaOMe/MeOH örnegin, 4-6 saat süreyle geri çeviren sogutucuda kaynaina F TFA/MeOH örnegin, oda sicakligi 18-65 saat süreyle. ilavesi, 40 dakika karistirma, sonra (IV)/Et3N ilavesi, sonra Gl K2CO3/DMF, sonra 50°C, Nz altinda 30 dakika süreyle, sonra oda sicakligi, (V1) ilavesi, 20 saat süreyle karistirma. G2 N,N-diiZOprOpiletilaminli DMF içinde çözelti, sonra 50°C 48 saat süreyle, sonra daha (IV) ilavesi, daha sonra 50°C 48 saat süreyle. H HCI/metanol, sonra oda sicakligi 18 saat süreyle. Formüller (IV), (V1), (XIA), (XII), (X"in bilesikleri ya literatürden bilinmektedir ya da ticari olarak mevcuttur, örnegin; Sigma-Aldrich, Ingiltere°den temin edilebilir veya bilinen prosedürlerle, örnegin; 1. March, Advanced Organic Chemistry, 6.Bask1 (2007) WileyBlackwell veya Coinprehensive Organic Synthesis (Trost BM. ve F leming I., (editörler), Pergamon Press, 1991) gibi sentetik metodolojinin standart referans metinlerinde açiklananlar ile ayni sekilde üretilebilir. Burada tarif edilen sentetik yollarda kullanilabilen diger koruyucu gruplarin örnekleri ve bunlarin uzaklastirilmalari için yollar, T. W. Greene 'Protective Groups in Organic Synthesis', 4. Edisyon, J. Wiley and Sons, 2006,da bulunabilir. Burada daha önce tarif edilen reaksiyonlarin veya proseslerin herhangi biri için geleneksel isitma ve sogutma yöntemleri, örnegin; sirasiyla sicakligi düzenlenen yag banyolari veya sicakligi düzenlenen sicak bloklar ve buz/tuz banyolari veya kuru buz/aseton banyolari kullanilabilir. Geleneksel izolasyon yöntemleri, örnegin sulu veya susuz çözücülerden veya bunlarin içine ekstraksiyon kullanilabilir. Organik çözücüler, çözeltiler veya ekstrelerin, susuz magnezyum sülfat veya susuz sodyum sülfat ile çalkalanmasi veya hidrofobik cam tozu içinden geçirilmesi gibi geleneksel kurutma yöntemleri kullanilabilir. Geleneksel saflastirma yöntemleri, örnegin kristalizasyon ve kromatografi, örnegin; silika kromatografisi veya tersine faz kromatografisi gerektigi gibi kullanilabilir. Kristalizasyon etil asetat, metanol, etanol veya butanol veya bunlarin sulu karisimlari gibi geleneksel çözüc'uler kullanilarak gerçeklestirilebilir. Spesifik reaksiyon sürelerinin, sicakliklarin tipik bir sekilde reaksiyon izleme teknikleri yoluyla, örnegin; ince tabaka kromatografisi veya LC-MS yoluyla saptanabilecegi takdir edilecektir. Uygun olan yerlerde, bulusun bilesiklerinin ayri ayri izomerik sekilleri, siral yüksek performansli sivi kromatografisi (siral HPLC) ve diyastereomerik türevlerin fraksiyonel kristalizasyonu gibi geleneksel prosedürler kullanilarak ayri ayri izomerler seklinde hazirlanabilir. Bilesiklerin mutlak stereokimyasi, X isini kritallografisi gibi geleneksel yöntemler kullaiiilarak tayin edilebilir. Bulusun yaklasimlari, referans yoluyla açiklanmaktadir fakat asagidaki Orneklerle hiçbir sekilde kisitlanmamaktadir. Genel Deneysel Ayrintilar Bilesikler, Advanced Cheinistry Deve10pments Inc., Toronto, Ontario, M5H2L3, Kanada"dan ACDfName PRO 6.02 kimyasal isimlendirme yazilimi kullanilarak isiinlendirilinistir. Burada refere edildigi gibi LCMS sistemleri A-D°nin deneysel ayrintilari su sekildedir: Sistem A Kolon: 50mm x 2.1 mm ID, 1.7m Acquity UPLC BEH Cig Akis hizi: 1 mL/dak. Sicaklik: 40°C UV teshis araligi: 210 ila 350nm Kütle spektrumu: Alternatif taraina pozitif ve negatif modlu elektrosprey iyonizasyoiiu kullanilarak kütle spektrometresinde kaydedildi. Çözücüler: A: su içinde %0.l h/h formik asit çözeltisi B: asetonitril içinde %0.l h/h formik asit çözeltisiGradyan: Süre (dakika) %A %B 0.1 97 3 l .4 0 l 00 1.9 0 100 2.0 97 3 Sistem B Kolon: 30mm X 4.6mm ID, 3.5um Sunfire C .8 kolon Akis hizi: 3mL/dak. Sicaklik: 30°C UV teshis araligi: 210 ila 350nm Kütle spektrumu: Alternatif tarama pozitif ve negatif modlu elektrosprey iyonizasyonu kullanilarak kütle spektronietresinde kaydedildi. Çözücüler: A: su içinde %01 h/h formik asit çözeltisi B: asetonitril içinde %01 h/h formik asit çözeltisi Gradyan: Süre (dakika) %A %B 0.1 97 3 4.2 0 100 4.8 0 100 4.9 97 3 .0 97 3 Sistem C Kolon: 50mm x 2.1 mm ID, 1.7pm Acquity UPLC BEH Cig Akis hizi: 1 mL/dak. Sicaklik: 40°C UV teshis araligi: 210 ila 350nm Kütle spektruinu: Alternatif tarama pozitif ve negatif modlu elektrosprey iyonizasyonu. kullanilarak kütle spektrometresinde kaydedildi. Çözücüler: A: 10mM amonyum bikarbonat, su içinde, amonyak çözeltisi ile pH 10'a ayarlanir. B: asetonitril Gradyan: Süre (dakika) %A %B 1.5 3 97 1.9 3 97 2.0 0 100 Sistem D Kolon: 50mm x 4.6mm ID, 3.5üm XBridge Cig kolon Akis hizi: 3mL/dak. Sicaklik: 30°C UV teshis araligi: 210 ila 350nm Kütle spektrumu: Alternatif tarama pozitif ve negatif modlu elektrosprey iyonizasyonu kullanilarak kütle spektroinetresinde kaydedildi. Çözücüler: A: 'lOmM ainonyum bikarbonat, su içinde, amonyak çözeltisi ile pH 10°a ayarlanir. B: asetonitril Gradyan: Süre (dakika) %A %B 4.0 3 97 .0 3 97 Kromatografik saflastirma tipik bir sekilde `Önceden paketlenmis silika jel kartuslar kullanilarak gerçeklestirildi. Flashmaster II, atilabilir, normal faz, Kati Faz Ekstraksiyon (SPE) kartuslarini (2g ila 100 g) kullanan, otomatik çok kullanicili bir alev kromatografi sistemi olup, Argonaut Technologies Ltd"den temin edilebilir. Gradyan yöntemlerinin çalistirilabilmesini mümkün kilan, katerner hat 'üzerinde çözücü. karistirmasi temin eder. Numuneler, çözücüleri, akis hizlarini, gradyan profilini ve toplama kosullarini idare eden çok fonksiyonlu açik erisimli yazilim kullanilarak siralanir. Sistem, otomatik pik kesme, toplama ve izlemeyi mümkün kilan, Knauer degisken dalga boyu UV detektörû ve iki Gilson FC204 fraksiyon toplayici ile donatilmistir. Azot akisi kullanilarak çözücünün uzaklastirilmasi, Radleys Discovery Technologies Saffron Walden, Essekz, CB 11 3AZ, Ingiltere"den temin edilen 30-40°C°de GreenHouse Blowdown sistemde gerçeklestirilir. 1H NMR spektrumlari, ya hepsi 400 HHz°de çalisan Bruker DPX 400 ya da Bruker Avance DRX veya Varian Unity 400 spektrometrede ya CDC13 ya da DMSO-d6 kaydedilir. Kullanilan dahili standart ya DMSO-d(J için 2.50 ppm"de veya CDC13 için 7.25 ppm"de bakiye protonlanmis çözücü ya da tetrametilsilandir. Kütle yönlendirmeli oto-hazirlayici HPLC asagida verilen kosullarda denenmistir. UV teshisi 210 nm ila 350 nm dalga boyundan ortalama sinyaldir ve ki'itle spektrumlari, alternatif tarama pozitif ve negatif modlu elektrosprey iyonizasyonu kullanilarak kütle spektrometresinde kaydedilmistir. Yöntem A Yöntem A, XBridge C is kolonunda (tipik bir sekilde 150 mm x 19 mm i.d. 5 um paketleme çapi) oda sicakliginda gerçeklestirilmistir. Kullanilan çözücüler sunlardir: A = amonyak çözeltisi ile pH 10"a ayarlanan 10 mM sulu amonyum bikarbonat B = asetonitril Yöntem B Yöntem B, Sunfire Cig kolonunda (tipik bir sekilde 150 mm x mm i.d. Sum paketleme çapi) oda sicakliginda gerçeklestirilmistir. Kullanilan çözücüler sunlardir: A = su içindeki %0.1 h/h formik asit çözeltisi B = asetonitril içindeki %O.1 h/h forinik asit çözeltisi Yöntem C Yöntem C, Sunfire C 18 kolonunda (tipik bir sekilde 150 mm x mm i.d. 5um paketleme çapi) oda sicakliginda gerçeklestirilmistir. Kullanilan çözücüler sunlardir: A = su içindeki %0.] h/h trifluoroasetik asit çözeltisi B = asetonitril içindeki %O.l h/h trifluoroasetik asit çözeltisi Yöntem D Yöntem D, Atlantis Cig kolonunda (tipik bir sekilde 100 mm X mm i.d. 5um paketleme çapi) oda sicakliginda gerçeklestirilmistir. Kullanilan çözücüler sunlardir: A = su içindeki %0.] h/h formik asit çözeltisi B = asetonitril içindeki %0.l h/h formik asit çözeltisi Yöntem E, Supercosil ABZ+Plus kolonunda (tipik bir sekilde 100 mm x 21.2 mm i.d. Suni paketleme çapi) oda sicakliginda gerçeklestirilmistir. Kullanilan çözücüler sunlardir: A = su içindeki %0.l h/h formik asit çözeltisi B = asetonitril : su 9525 + %0.05 formik asit Ara madde ]: 2,6-Dikl0r0-9-(tetrahidr0-2H-piran-Z-il)-9H- 2,6-Diklor0purine (250 g) (örnegin Aldrich, Ingiltere'den temin edilebilir) etil asetat (260 ml), ardindan p-toluensülfonik asit (0.253 g) ilave edildi. Karisim 50°C°ye isitildi ve sonra, 3,4-dihidr0- 2H-piran (16.8 g) ilave edildi. Reaksiyon karisimi daha sonra 4 saat süreyle 50°C"de isitildi. Reaksiyon karisimi, baslikta adi geçen bilesigi sari renkli bir kati seklinde (36.9 g) vermek üzere vakumda uçuruldu. Ara madde 2: 2-Kloro-9-(tetrahidr0-2H-piran-Z-il)-9H-purin- 6-amin saat süreyle 50°C"de izopropanol (250 ml) içinde ZM amonyak ile isitildi. Gece boyunca oda sicakliginda bekletildikten sonra, sonuçta meydana gelen keki parçalamak üzere biraz daha izopropanol (100 ml) içinde 2M amonyak ilave edildi ve reaksiyon karisimi, reaksiyon tamamlanana kadar 9 saat daha isitildi. Reaksiyon karisiniina su (70 ml) ilave edildi ve sari renkli kati madde filtre edilerek ayrildi. Kati madde izopropil alkol : su (5 :l (h/h), 60 ml) ile yikandi ve sonra, birinci `ürünü vermek üzere enime altinda havada kurutuldu. Süzüntü, çökeltiyi izole etmek üzere gece boyunca bekletildikten sonra yeniden filtre edildi ve her iki kati madde vakumda kurutuldu. Birinci ürün safti, ikinci ürün ise çok minör kirlilik/impürite gösteriyordu (izole edilen genis sinyal 3.5 ppm, birinci üründe görülinedi) fakat diger sekilde ayniydi. Kati birinci ürün (28.4 g), kati ikinci ürün (3.42 g). Ara madde 2 (alternatif yöntem): 2-Kloro-9-(tetrahidro-2H- viran-2-il)-9H-purin-6-amin 2,6-Dik10r0purinin (25 g) (örnegin, Aldrich, Ingiltere"den temin edilebilir) kuru etil asetat (200 ml) içindeki çözeltisine, p- toluensülfonik asit monohidrat (235 mg) ilave edildi. Reaksiyon 50°C"ye isitildi ve 3,4-dihidr0-2H-piran (18.] ml) bir seferde ilave edildi. Reaksiyon 50°C"de 1 saat karistirilmaya birakildi ve çözücü düsürülmüs basinç altinda uzaklastirildi. Bu, sari renkli bir kati verdi. Bu katinin (~36g) izopropanol (460 ml) içindeki 2.0M amonyak içindeki bir süspansiyonu azot altinda, 60°C°de 4 saat süreyle ekli kondansatör ile isitildi. Reaksiyon su (50 ml) içine döküldü ve gece boyunca sogumaya birakildi. Çökelti filtre edildi ve baslikta adi geçen bilesigi kirli beyaz renkli bir kati 31 g (%93, 2 asama) seklinde vermek üzere döner evaporatörde (60°C) 30 dakika süreyle kurutuldu. Bulunan MS (elektrosprey): (M)_ = 254, 256 (3: l) Ara madde 3: 2-(Butiloksi)-9-(tetrahidro-ZH-piran-Z-i1)-9H- purin-6-amin Butan-l-ol"e (76 mL) kisim kisim olacak sekilde dikkatle sodyum ters-butoksit (15.2 g) ilave edildi (Not: reaksiyon karisimi sonuçta ineydana gelen soluk sari çözeltiye ilave edilmeden önce yukaridaki homojen olana kadar karistirildi (yaklasik olarak 15 dakika). Reaksiyon karisimi, daha sonra gece boyunca lOOOC'ye isitildi. Reaksiyon karisimi, dietil eter ve su arasinda partisyone edilmeden önce mümkün oldugu kadar fazla butan-l-ol uzaklastirmak üzere temizlendi. Dietil eter fazi ayrildi ve sulu kisim dietil eter ile yeniden ekstre edildi. Birlestirilen organik tabakalar (susuz) magnezyum sülfat üzerinden kurutuldu. Magnezyum sülfat filtre edilerek ayrildi ve süzüntü kahverengi viskoz bir yag vermek üzere temizlendi, bu daha sonra tolüenle (3 kere) azeotrope edildi ve gece boyunca yüksek vakum altina yerlestirildi, diklorometan ile yeni kaba aktarildi ve temizlendi, baslikta adi geçen bilesigi kahverengi cam seklinde (9.45 g) vermek üzere yüksek vakuin altina yerlestirildi. Ara madde 4: 8-Bromo-2-(butiloksi)-9-(tetrahidro-2H-piran-2- il 1-9H-purin-6-amin 2-(Butiloksi)-9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amin (buz banyosu). Sicaklik 3°C7nin altinda tutulurken, bu çözeltiye kisiin kisim olacak sekilde N-bromosüksinimid (6.07g) ilave edildi. Bu koyu yesil bir çözelti verdi, 2.5°C,de 30 dakika karistirildi, sonra oda sicakliginda isinmaya birakildi ve sonra 6 saat karistirildi. Reaksiyon karisimi daha sonra su (100 m1, iki kere) ile yikandi. Organik faz, hidrofobik cam tozu kullanilarak kurutuldu / ayrildi ve baslikta adi geçen bilesigi soluk sari renkli bir kati seklinde (8.37 g) vermek üzere kroinatografisi yoluyla saflastirilan ( koyu kahverengi bir zamk vermek üzere uçuruldu. lH NMR (CDCl3): 5.61 (1 H, dd), 1.50 (2H, m), 0.97 (3H, t). Ara madde 5: 2-(Butiloksi)-8-(metiloksi)-9-(tetrahidr0-2H- biran-2-il)-9H-purin-6-amin 8-Brom0-2-(butiloksi)-9-(tetrahidr0-2H-piran-2-il)-9H-purin- 6-amin (8.37g) inetanol (14.4ml) içinde %25 sodyum inetoksit ve metanol (65ml) ile 4.5 saat kaynamaya isitildi. Reaksiyon karisimi düsürülmüs basinç altinda koiisantre edildi ve etil asetat ve doymus amonyum klori'ir çözeltisi arasinda partisyone edildi. Organik faz ayrildi ve ekstraksiyon etil asetata tekrar edildi. Organik fazlar birlestirildi ve tuzlu su ile (iki kere) yikandi. Organik faz, sulu kisim ayrildiktan sonra hidrofobik cam tozu içinden geçirildi ve bir köpük (7.52g) vermek üzere oda sicakliginda yüksek vakum altina yerlestirilen açik kahverengi zaink vermek üzere uçuruldu, bu köpük, çevre basincinda bir zaink (7.34 g) halinde çökeldi, ve baslikta adi geçen bilesigi sari renkli amorf bir kati seklinde vermek 'üzere gece boyunca katilastirildi. (C15H23,N5O3)+ için hesaplanan MS = 321 Bulunan MS (elektrosprey): (M+H)_ = 322 Ara inadde 6: 2-(Butiloksi)-8-(metiloksi)-9H-nurin-6-amine trifluoroasetat tuzu 2-(Butiloksi)-8-(metiloksi)-9-(tetrahidro-2H-piran-Z-il)-9H- purin-6-aminin (7.34 g) inetanol (100 ml) içindeki bir çözeltisine, trifluoroasetik asit (lOml) ilave edildi. Karisim, bir süspansiyon vermek üzere oda sicakliginda, hafta sonu boyunca karistirildi. Reaksiyon karisimi, etil asetat (50 ml) ile seyreltilmeden önce, küçük hacme (kivamli bulamaç) konsantre edildi. Sonuçta meydana gelen bulamaç filtre edildi ve küçük hacim etil asetat ile süzüntü renksiz olana kadar yikandi. Kalan kati madde hava ile kurutuldu ve sonra, baslikta adi geçen bilesigi beyaz renkli bir kati seklinde (6.20g) vermek üzere vakumda kurutuldu. Daha Önce elde edilen süzüntü, bir bulamaç vermek üzere konsantre edildi, bu küçük hacim etil asetat (10 ml) ile seyreltildi ve sonra filtre edildi ve yukaridaki gibi kurutuldu. Bu ikinci ürün beyaz renkli bir kati (0.276g) seklinde izole edildi. Her iki ürün de NMR yoluyla ayniydi. Bulunan MS (elektrOSprey): (M+H)7 : 238 m), 0.99 (3H, t) (degistirilebilir NHZ, NH ve COOH protonlari gözlenmedi). Ara madde 7: Nz-Buti1-9-(tetrahidr0-2H-piran-Z-il)-9H-purin- 2 6-diamin 2-kloro-9-(tetrahidro-2H-piran-2-i1)-9H-purin-6-aminin (log) in kuru etilen glikol (50ml) içindeki bir çözeltisine oda sicakliginda ve azot altinda, bir seferde n-butilamin (16ml) ilave edildi. Reaksiyon 120°C,de gece boyunca isitildi. Reaksiyon oda sicakligina sogutuldu, etil asetat (150ml) ile seyreltildi ve su ile (2 x 501nl) yikandi. Organik tabaka MgSO4 üzerinden kurutuldu, filtre edildi ve vakumda konsantre edildi. Bu baslikta adi geçen bilesigi Viskoz yesil bir yag (10.2g) seklinde verdi, bu yag bir sonraki asamada daha fazla sallastirina olmaksizin kullanildi. (C 14H22N60)+ için hesaplanan MS = 290 Bulunan MS (elektrosprey): (M+H)^ : 291 0.9 (3H, t). Ara madde 8: Nz-Butil-8-(metiloksi)-9H-Durin-2,6-diamin trifluoroasetik asit tuzu CFgcozH Hani NZ-butil-9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-2,6- çözeltisine oda sicakliginda, kisimlar halinde 5 dakikada N- bromosüksininiid (6.3g) ilave edildi. Koyu renkli çözelti oda sicakliginda 30 dakika karistirilniaya birakildi. Reaksiyon karisimi su (20 ml) ile yikandi. Organik faz hidrofobik cain tozu içinden geçirildi ve vakumda konsantre edildi. Bu, kuru metanol (100ml) içinde çözündürülen bej renkli kati verdi ve oda sicakliginda, azot altinda sodyum metoksit çözeltisi (metanol içinde agirlik olarak %25, 24 ml) bir seferde ilave edildi. Reaksiyon gece boyuiica kondansatör ile 65°C"de isitildi. Reaksiyon sogutuldu ve vakumda konsantre edildi. Sonuçta meydana gelen turuncu bakiye etil asetat (150 m1) içine alindi ve doymus sulu amonyuin klorür (50 ml) içine döküldü. Organik tabaka ayrildi ve su ile (50 ml) biraz daha yikandi. Organik tabaka MgSO4 üzerinden kurutuldu, filtre edildi ve vakuinda konsantre edildi. Oda sicakliginda, kuru metanol (70 ml) içindeki bu maddeye, oda sicakliginda bir seferde trifluoroasetik asit (7ml) ilave edildi. Reaksiyon 30 saat süreyle karistirildi ve ürün olarak koyu kahverengi bir kati vermek üzere konsantre edildi. Bu dietil eter (20 m1) içine alindi ve ögütüldü. Kati madde, baslikta adi geçen bilesigi bej renkli kati (3.3 g, %35, 4 asama) seklinde vermek üzere filtre edildi. (CIOHIÖNÖO)+ için hesaplanan MS = 236 Bulunan MS (elektrosprey): (M+H)' = 237 protonlar açik degildir). Ara madde 9: 241( lS)-l-Metilbutilloksü-9-(tetrahidr0-2H-piran-2- il g-9H-purin-6- ainin Yöntem A Sodyum t-butoksit (48.5g, 505mmol) kisim kisim olacak sekilde (S)-2-pentanole (185ml) (örnegin, Julich Chiral Solutions, Almanya,dan temin edilebilir) oda sicakliginda ilave edildi, homojen olana kadar karistirildi (Not: reaksiyon ekzotermiktir). 2-Klor0-9- (tetrahidr0-2H-piran-2-il)-9l-I-purin-ö-amin (32g, 126mmol) ilave edildi ve reaksiyon karisimi 70°C°de 72 saat süreyle isitildi. Reaksiyon oda sicakligina sogutuldu ve etil asetat (500ml) ve su (500ml) arasinda partisyone edildi. Organik faz doymus sodyum klorür çözeltisi (100 ml) ile yikandi, kurutuldu (MgSO4), filtre edildi ve uçuruldu. Bakiye eter ile ögütüldü ve kati madde filtre edildi. Çökelti eter ile yeniden yikandi ve süzüntüler birlestirildi ve uçuruldu. Ham inadde (yaklasik 30g) DMSO: metanol (lzl) içinde çözündür'ûld'u ve tersine faz (Cm) kolonda (330 g), 8 kolon hacmi üzerinden % gradyani kullanilarak kromatografi yoluyla saflastirildi, fraksiyonlar doymus sulu sodyum karbonat çözeltisi ile derhal nötralize edildi. Uygun fraksiyonlar birlestirildi ve dikloroinetan ve doymus sulu sodyum hidrojen karbonat arasinda partisyone edildi. Organik faz, hidrofobik cam tozu içinden geçis yoluyla kurutuldu, filtre edildi ve baslikta adi geçen bilesigi soluk krem rengi bir köpük (14.97g) seklinde vermek üzere uçuruldu. LCMS (Sistem B): tRET = 2.21 dak; MH+ 306 Yöntem B Sodyum t-butoksit (206g, 2.144mol), 2L7lik balonjoje içinde (S)-2-pentanole (720ml, 6.58mol) (örnegin, Julich Chiral Solutions, Almanya"dan temin edilebilir) ilave edildi. Karisim 50°C°de bütün sodyum t-butoksit çözünene kadar karistirildi. 2-Flu0ro-9-(tetrahidr0- halinde ilave edildi. 3 saat sonra, LCMS analizi baslangiç maddesinin tamamen tüketildigini gösterdi ve karisim buz/su (3L) içine döküldü ve sonra metil t-butil eter ile ekstre edildi. Bu emülsiyon olusumu ile sonuçlandi ve karisim Celite içinden filtre edildi ve organik faz ayrildi. Sulu tabaka daha sonra kati NaCl ile muamele edildi ve sonra, metil t-butil eter ile yeniden ekstre edildi. Organik ekstreler birlestirildi ve tuzlu su ile yikandi, magnezyum sülfat üzerinden kurutuldu, filtre edildi ve sonra, baslikta adi geçen bilesigi soluk kahverengi bir zamk seklinde (158.59g) vermek üzere uçuruldu. LCMs (Sistem D): tm = 2.65 dak; MH+ 306 Ara madde 10: 8-Br01n0-2-{[(lS)-l-inetilbutilloksi}-9- (tetrahidro-ZH-piran-Z-il)- 9H-purin-6-amin N-Bromosüksinimid (12.16g, 68.3mmol), azot atmosferi altinda, <5°C3de, 5 dakikada kisim kisim olacak sekilde 2-{[(lS)-l- metilbutil]oksi}-9-(tetrahidr0-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-aminin (14.9g, 48.8mmol) kloroform (80ml) içindeki karistirilmis çözeltisine ilave edildi. Reaksiyon karisimi, <5°C°de 5 dakika süreyle karistirildi, sonra doymus sodyum hidrojen karbonat çözeltisi (80ml) ve sonra su (80 ml) ile yikandi. Köpük DCM (50ml) içinde çözündür'ûldü ve su (501111) ve sonra tuzlu su (50 ml) ile yikandi. Birlestirilen sulu fazlar DCM (501n1) ile yikandi. Birlestirilen organik tabakalar hidrofobik cam tozu içinden kurutuldu ve baslikta adi geçen bilesigi turuncu renkli bir köpük seklinde (18.5g) vermek üzere çözücü vakumda uzaklastirildi. LCMS (Sistem D): tRET = 3.06 dak., MH+ 384/386 Ara inadde ll: 2-"(1S)-l-Metilbutilloksü-8-(metiloksi)-9- (tetrahidro-ZH-piran-2-11)-9H-purin-6-amin 8-Bromo-2- {[(1 8)- l -metilbutil]oksi} -9-(tetrahidro-2H-piran- çözündürüldü ve metanol (81111) içindeki sodyum metoksit (%25) çözeltisi azot atmosferi altinda damla damla olacak sekilde ilave edildi. Çözelti 90°Csde 4 saat süreyle, azot atmosferi altinda kaynamaya isitildi. Ilave metanol içinde sodyum metoksit (%25 çözelti, 3ml) ilave edildi ve reaksiyon 60°C°de 16 saat daha karistirildi. Metanol içinde sodyum metoksidin ilave bir kismi (%25 çözelti, 5m1) eklendi ve reaksiyon 7 saat daha 90°C"de karistirildi. Çözücü, döner evaporatörde uzaklastirildi ve ham ürün, EtOAc (75ml) ve doymus amonyum klorür çözeltisi (751111) arasinda partisyone edildi. Organik tabaka tuzlu su (75ml) ile yikandi. Çözücü, soluk turuncu bir köpük seklindeki baslikta adi geçen bilesigi (6 g) ürün olarak vermek üzere döner evaporatörde uzaklastirildi. LCMS (Sistem C): tm : 1.14 dak; MH_ 336,337 Ara madde 12: 2-{[(lS)-l-Metilbuti1]0ksi}-8-(metiloksi)-9H- purin-6-amin trifluoroasetat tuzu 2- { [(1 S)-l -Metilbutil]oksi } -8-(metiloksi)-9-(tetra-hidro-2H- çözündürüldü. Trifluoroasetik asit (20.67ml, 268mm01) damla damla olacak sekilde ilave edildi ve karisim, azot atmosferi altinda 72 saat süreyle 20°C"de karistirildi. Çözücü vakumda uzaklastirildi ve sonuçta meydana gelen kati madde etil asetat ile yikandi ve filtre edildi. Süzünt'ü temizlendi ve bakiye etil asetat ile yikandi. Birlestirilen kati bakiyeler, baslikta adi geçen bilesigi kirli beyaz bir kati halinde (5 .3 g) vermek üzere vakumlu etüvde 2 saat süreyle kurutuldu. LCMS (Sistem C): tm = 0.76 dak.; MH+ 252, 253 Ara madde 13: 2-(Butiloksi)-9-(3-kloropropiD-S-(metiloksi)-9H- purin-ö-amin 2-(Buti10ksi)-8-(metiloksi)-9H-purin-6-amin tritluoroasetat DMF (50ml) içinde karistirildi ve 50°C°de, azot altinda 75 dakika isitildi. Karisim oda sicakligina sogumaya birakildi ve sonra O°C"ye edildi. Karisim 0 ila 10°C°de yaklasik olarak 5 saat süreyle karistirildi, sonra, LCMS arzu edilen ürünün yaklasik olarak %70,ini gösterdigi zaman, 40 saat daha oda sicakligina sogumaya birakildi. Karisiniiii çökmesi beklendi ve yüzer tabaka pipetle alindi ve çözücü döner evaporatörde, yaklasik olarak 23°C"de yüksek vakumlu pompa kullanilarak uçuruldu. Kloroform ve su, karistirilan birlestirilen bakiyelere ilave edildi ve fazlar hidrofobik cam tozu kullanilarak ayrildi. Sulu tabaka kloroformun diger porsiyonlari ile yeniden ekstre edildi ve birlestirilen kloroform ekstreleri, sari renkli bir kati (2.798g) vermek üzere 23°C"de yüksek vakum altinda uçuruldu. Bu ham madde, iki benzer hazirlamadan elde edilen benzer maddelerle (0.56g ve 0.995g) birlestirildi ve baslikta adi geçen bilesigi (3.011g) kirli beyaz renkli bir kati seklinde vermek üzere, elüent olarak 221 etil asetat / kloroform kullaiiilarak silika üzerinde alev kolon kromatografisi yoluyla saflastirildi. LCMS (Sistem D): tRET = 2.79 dak.; MH+ 314, 316 Ara madde 14: 2-(Butiloksi)-9-(4-klor0butil)-8-(metiloksi)-9H-purin- 6-amin 1' :-0\ 2-(Buti10ksi)-8-(metiloksi)-9H-purin-6-amine trifluoro-asetat (20ml) içinde süspanse edildi ve 30 dakika süreyle azot altinda 50°C"ye isitildi. Karisim oda sicakligina sogutuldu, 1-bromo-4- oda sicakliginda devam edildi. Çözücü düsürülmüs basinç altinda uçuruldu ve bakiye, DCM (40m1) ve su (40ml) arasiiida partisyone edildi. Tabakalar hidrofobik cam tozu kullanilarak ayrildi ve sulu tabaka DCM (10ml) ile yikandi. Birlestirilen organik ekstreler, siklohekzan:eti1 asetat %0-100 gradyan ile 30 dakika süreyle elde edilen FlashMaster (70g kartus) kullanilan silika kromatografisi kullanilarak saflastirilan ham maddeyi vermek üzere vakumda konsantre edildi. Uri'in içeren fraksiyonlar birlestirildi ve baslikta adi geçen bilesigi (1.4g) beyaz renkli bir kati madde seklinde vermek üzere uçuruldu. LCMS (Sistem D): tRET = 2.92 dak.; MH+ = 328, 330 Ara madde 15: 2-(Butiloksi)-9-(5-kloropentil)-8-(metiloksi)- 9H-purin-6-amin 2-(Butiloksi)-8-(metiloksi)-9H-purin-6-amin trifluoro-asetat (20ml) içinde süspanse edildi ve azot altinda 1 saat süreyle 50°Csye isitildi. Karisim, oda sicakligina sogutuldu, l-bromo-5-kloropentan (0.75ml, 5.69mmol) ilave edildi ve karistirmaya oda sicakliginda 18 saat devam edildi. Reaksiyon karisimi, DCM (40ml) ve su (401111) arasinda partisyone edildi ve tabakalar hidrofobik cam tozu kullanilarak ayrildi. Sulu tabaka tekrar DCM (lOml) ile ekstre edildi ve birlestirileii organikler, doymus lityum klorür çözeltisi ile yikandi, ayrildi (hidrofobik cam tozu) ve baslikta adi geçen bilesigi sari renkli bir yag seklinde (1.946g) vermek 'üzere vakumda konsaiitre edildi. LCMS (Sistem B): tRET = 2.58 dak.; MH+ = 342, 344 Ara madde 16: 2-(Butiloksi)-9-(5-klorohekziD-S-(meti10ksi)- 9H-gurin-6-amin 2-(Butiloksi)-8-(meti10ksi)-9l-I-purin-6-amin trifuoro-asetat tuzunun (3g, içindeki bir çözeltisine potasyum karbonat (2.95g, 21.35mm01) ilave edildi ve karisim 60°C"de 1 saat süreyle azot atmosferi altinda karistirildi. Karisim daha sonra oda sicakligina sogutuldu ve l-br0m0-6-klorohekzan (1.27ml, 8.54mmol) ilave edildi ve reaksiyon 50°C"ye isitildi ve gece boyunca azot atmosferi altinda karistirildi. Reaksiyon karisimi su (yaklasik olarak 50ml) ile seyreltildi ve etil asetat (2 X 70 ml) ile ekstre edildi. Birlestirilen organik ekstreler kurutuldu (MgSO4), filtre edildi ve süzüntû, turuncu renkli bir yag (yaklasik olarak 3.5 g) vermek üzere konsantre edildi. Bu madde diklorometan içinde çözünd'ur'uldü ve 60 dakikada siklohekzan gradyani içinde %0-100 etil asetat kullanilarak Flashmaster IPda (70g aminopropil kartus) saflastirildi. Uygun fraksiyonlar birlestirildi ve soluk sari bir kayi haline katilasan, baslikta adi geçen bilesigi (1.2g) sari bir yag halinde vermek üzere vakumda konsantre edildi. LCMS (Sistem D): tRET = 3.59 dak.; MH+ = 356, 358 Ara madde 17: Nz-Buti1-9-(3-kloropropiD-S-(meti10ksi)-9H- purin-2,6-diamin NZ-Butil-S-(metiloksi)-9H-purin-2,6-diamin trifluoro-asetat DMF (lOml) içinde süspanse edildi ve karisim, 2 saat süreyle azot altinda 50°Csde isitildi. Karisim sogumaya birakildi ve sonra, 1- karisimi oda sicakliginda gece boyunca karistirildi. 16 saat sonra, reaksiyon karisimi su ve DCM (25ml her biri) arasinda partisyone edildi. Sulu faz daha DCM (2 x 20ml) ile ekstre edildi. Birlestirilen DCM ekstreleri magnezyum sülfat üzerinden kurutuldu ve daha fazla saflastirma olmaksizin kullanilan, soluk sari renkli yag seklindeki saf olmayan baslikta adi geçen bilesigi biraz kati mevcudu (0.76g) ile vermek üzere vakumda konsantre edildi. LCMS (Sistem D): tRET = 2.75 dak.; MH+ = 313, 315 purine-2,6-diamine NZ-Butil-8-(n1etiloksi)-9H-purin-2,6-diamin trifluoro-asetat (401111) içinde süspanse edildi ve 30 dakika süreyle azot altinda 50°C"ye isitildi. Karisim oda sicakligina sogutuldu, 1-br01110-4- klorobutan (1.645m1, 14.27mmol) ilave edildi ve karistirmaya oda sicakliginda 20 saat devam edildi. Çözücü vakum altinda konsantre edildi. Tabakalar hidrofobik cam tozu kullanilarak ayrildi ve sulu faz DCM (100ml) ile yeniden ekstre edildi. Birlestirilen organik ekstreler vakumda konsantre edildi ve bakiye 40 dakikada DCM: metanol %0- gradyan kullanilarak ve a FlashMaster cihazi (100 g silika kartus) kullanilarak kromatografi yoluyla saflastirildi. Aruz edilen fraksiyonlar birlestirildi ve saf olmayan baslikta adi geçen bilesigi sari renkli bir yag seklinde (5.1 g) vermek üzere vakum altinda konsantre LCMS (Sistem D): tm = 2.88 dak; MH+ = 327, 329 Ara madde 19: 9-(5-Klor0pentil)-2-H(lS)-1-metilbutilloksi}- 2-{[(lS)-1-Metilbutil]oksi}-8-(metiloksi)-9H-purin-6-amin içinde 60°C"de karistirildi. l-Bromo-S-kloropentan (0.216ml, 1.642mmol) ve trietilamin (0.343ml, 2.464mmol) ilave edildigi zaman reaksiyon oda sicakligina sogutuldu ve karisim 16 saat süreyle azot altinda 20°C"de karistirildi. Karisim su (101111) ve tuzlu su (10ml) ile seyreltildi ve DCM (2 x 10ml) ile ekstre edildi. Birlestirilen organik ekstreler uçuruldu ve bakiye DCM içinde çözündürîildü ve 40 dakikada siklohekzan gradyan içinde %0-100 etil asetat ile Flashmaster II (70 g aminopropil kartus) kullanilarak kolon kromatografisi yoluyla saflastirildi. Uygun fraksiyonlar birlestirildi ve baslikta adi geçen bilesigi sari renkli bir zamk (430mg) seklinde vermek üzere vakumda LCMS (Sistem D): tRET = 4.15 dak; MH+ = 356, 358 Ara madde 20: 9-[3-(1-Azetidinilmropill-2-(butiloksi)-8- 2-(Butiloksi)-8-(metiloksi)-l H-purin-6-amin trifluoro-asetat (lOOmg, içinde çözündürüldü ve potasyum karbonat (98mg, 0.712mmol) ilave edildi. Reaksiyon karisimi, 1 saat süreyle azot altinda 50°C°de karistirildi ve sonra oda sicakligina 40 dakika daha karistirildiktan sonra, DMF (1 ml) içinde azetidin edildi. Reaksiyon karisimi, daha sonra 18 saat daha karistirildi. Çözücü uzaklastirildi ve bakiye dikloroinetan (2ml) ve su (2ml) arasinda partisyone edildi. Bakiyeler hidrofobik cam tozu kullanilarak ayrildi ve sulu faz, DCM (2ml) ile yeniden ekstre edildi. Birlestirilen organik ekstreler konsantre edildi ve bakiye 1:] MeOH: DMSO (1 ml) içinde çözündüri'ildü ve MDAP yoluyla saflastirildi (Yöntem A). Fraksiyonlari içeren ürün, baslikta adi geçen bilesigi beyaz renkli bir kati (l 3mg) seklinde vermek üzere azot akisi altinda uçuruldu. LCMS (Sistem B): tRET = 1.07 dak.; MH+ = 335 Ara madde 21: 2-( Butiloksi)-8-(metiloksi)-9-[3-( l-pirolidinil)- propill-9H-purin-6- amin 2-(Butil0ksi)-8-(metiloksi)- l H-purin-6-amin trifluoro-asetat, 1,3-dibr0mopropan ve pirolidinden, ara madde 20'ye benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem C): tRET = 0.60 dak.; MH+ = 349 Ara madde 22: 2-(Butiloksi)-9-[3-(hekzahidr0-lH-azepin-l- i1)propill-8-(metiloksi)- 9H-purin-6-amin 2-(Buti10ksi)-8-(meti10ksi)- l H-purin-6-amin trifluoroasetat, 1,3-dibr0m0pr0pan ve hekzahidro-lH-azepinden ara madde 20°ye benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem B): tRET = 1.24 dak.; MH+ = 377 Ara madde 23: 9-[4-(1-AzetidiniDbutill-2-(bu.tiloksi)-8- (metiloksi)-9H-purin-6- amin diizopropiletilamin ( içinde çözünd'ûr'ûldü ve 48 saat süreyle 50°C°de isitildi. LCMS reaksiyonun tamamlanmamis oldugunu gösterdi ve ilave azetidin (0.021 ml, edildi. Reaksiyon karisimi 48 saat daha 50°C°de isitildi. Karisim daha sonra DCM (4ml) ve su (4111]) arasinda partisyone edildi ve tabakalar hidrofobik cain tozu kullanilarak ayrildi. Sulu faz DCM (4ml) ile yeniden ekstre edildi ve birlestirilen organik ekstreler konsantre edildi ve bakiye, MDAP yoluyla saflastirildi (Yöntem A). Urün içeren fraksiyonlar, baslikta adi geçen bilesigi saydam bir zamk seklinde (7.6mg) vermek 'üzere azot akisi altinda uçuruldu. LCMS (Sistem B): tRET = 1.15 dak.; MH+ = 349 Ara madde 24: 2-( Butiloksi)-8-( metiloksi)-9-[4-( l - pirolidinillbutill-9H-nurin-6- amin formik asit tuzu 2-(Butiloksi)-8-(metiloksi)-l H-purin-6-amin trifluoro-asetat, 1,4-dibromobutan ve pirolidinden, ara madde 20"ye benzer sekilde, ancak Yöntem D kullanilarak kütle yönlendirmeli oto-hazirlama ile hazirlandi. LCMS (Sistem B): tRET = 1.19 dak.; MH+ = 363 Ara madde 25: 2-(Butiloksi)-8-(rnetiloksi)-9-l4-(1-piperidiniD butill-9H-purin-6-amin formik asit tuzu 2-(Buti10ksi)-8-(meti10ksi)-l H-purin-6-amin trifluoro-asetat, 1,4-dibr0m0butan ve piperidinden, ara madde ZO'ye benzer sekilde fakat Yöntem A, ardindan Yöntem D kullanilarak kütle yönlendirmeli oto-hazirlama ile hazirlandi. LCMS (Sistem B): tRET = 1.22 dak.; MH+ = 377 Ara madde 26: 2-(Butiloksi)-9-[4-(hekzahidr0-lH-azepin-1- i1)buti1]-8-(meti10ksi)- 9H-purin-6-amin 2-(Buti10ksi)-8-(metiloksi)- l H-purin-6-amin trifluoro-asetat, 1,4-dibr0mobutan ve hekzahidro-lH-azepinden, ara madde 20°ye benzer sekilde hazirlandi. LCMs (Sistem B): tm = 1.30 dak; MH+ = 391 Ara madde 27: 9-[5-(1-AzetidiniDpentill-2-(`buti10ksi)-8- (metiloksi)-9H-purin-6- amin diizopropiletilamin ( içinde çözündür'ûldü ve 72 saat süreyle 50°Csde isitildi. Çözücü vakumda uzaklastirildi ve bakiye DCM (5ml) ve su (5 ml) arasinda partisyone edildi ve tabakalar, hidrofobik cam tozu kullanilarak ayrildi. Sulu faz DCM (5ml) ile yeniden ekstre edildi ve birlestirilen organik ekstreler konsantre edildi ve bakiye l:1 MeOH: DMSO (lml) içinde çözündür'ûldü ve MDAP yoluyla saflastirildi (Yöntem A). Urûn içeren fraksiyonlar, baslikta adi geçen bilesigi saydam bir zamk (6.8 g) seklinde vermek üzere azot akisi altinda uçuruldu. LCMS (Sistem B): tm = 1.26 dak; MH+ = 363 Ara madde 28: 2-(Butiloksi)-8-(meti10ksi)-9-[5-(1- pirolidinil)pentil]-9H-purin-6- amin 2-(Buti10ksi)-9-(5-kloropentiD-S- (metiloksi)-9H-purin-6-amin ve pirolidinden, ara madde 277ye benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem B): tm = 1.27 dak.; MH+ = 377 Ara madde 29: 2-(Butiloksi)-8-(meti10ksi)-9-[5-( l - piperidinil)pentil]-9H-purin-6- amin 2-(Buti10ksi)-9-(5-kloropentiD-S-(metiloksi)-9H-purin-6-amin ve piperidinden, ara madde 27°ye benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem B): tRET = 1.33 dak.; MH+= 391 il)pentill-8-(meti10ksi)- 9H-purin-6-amin 2-(Buti10ksi)-9-(5-kloropenti1)-8-(metiloksi)-9H-purin-6-amin ve hekzahidro-lH-azepinden, ara madde 27"ye benzer sekilde fakat Yöntem A, ardindan Yöntem E kullanilarak MDAPler yoluyla ardisik LCMS (Sistem B): tRET = 1.38 dak.; MH_ = 405 azosinil)pentill-8-(metiloksi)- 9H-purin-6-amin 2-(Buti10ksi)-9-(5-kloropentiD-S- (metiloksi)-9H-purin-6-amin ve oktahidroazosinden, ara madde 38"e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem B): tRET = 1.45dak.; MH+ = 419 Ara madde 32: 2-( Butiloksi)-8-( metiloksi)-9-[6-( 1 - pirolidinil)hekzil]-9H-purin-6-amin 2-(Butiloksi)-9-(6-klor0hekzil)-8-(metiloksi)-9H-purin-6-amin ve pirolidinden ara madde 38"e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D). tRET : 2.97dak; MH+ : 391 Ara madde 33: 2-( Butiloksi)-8-( metiloksi)-9-[6-( 1 - piperidinil)hekzil]-9H-purin-6-amin 2-(Butil0ksi)-9-(6-klor0hekzil)-8-(metiloksi)-9H-purin-6-amin ve piperidinden ara madde 38"e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): tRET = 3.12dak.; MH+ = 405 Ara madde 34: 2-(Butiloksi)-9-[6-(hekzahidr0-lH-azenin-l- il)hekzi1]-8-(metiloksi)- 9H-purin-6-amin 2-(Butiloksi)-9-(6-klorohekzil)-8-(metiloksi)-9H-purin-6-amin ve hekzahidro-lH-azepinden Ara madde 38"e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): tm = 3.20dak.; MH+ = 419 Ara madde 35; N2-Butil-8-(metiloksi)-9-[4-(l- piperidinil)butill-9H-DurIn-2,6- diamin Nz-Butil-8-(metiloksi)-3H-purin-2,6-diamine trifluoro-asetat DMF (3ml) içinde süspanse edildi ve 1 saat süreyle 60°C"ye isitildi. Reaksiyon karisimi, oda sicakligina sogutuldu, l-bromo-4-klor0butan 0.547mmol) ilave edildi ve reaksiyon karisimi 72 saat süreyle 60°C°ye isitildi. Çözücü vakumda uzaklastirildi ve bakiye DCM (2ml) ve su (2ml) arasinda partisyone edildi. Sulu faz DCM (2ml) ile yeniden ekstre edildi ve birlestirilen organik ekstreler konsantre edildi. Bakiye (yaklasik olarak içinde çözündürüldü ve MDAP yoluyla saflastirildi (Yöntem A). Fraksiyonlari içeren ürün, daha fazla saflastirma olmaksizin kullanilan, saf olinayan baslikta adi geçen bilesigi sari renkli bir zamk seklinde (106mg) vermek üzere vakumda uçuruldu. LCMS (Sistem B): tRET = 1.11 dak.; MH+ = 376 Ara madde 36: Nz-Butil-9-l4-(hekzahidro-lH-azepin-1- il)butil]-8-(metiloksi)-9H-purin-2,6-diamin Nz-Butil-8-(metiloksi)-3H-purin-2,6-diamin trifluoroasetat DMF (3ml) içinde süspanse edildi ve 1 saat süreyle 60°Csye isitildi. Reaksiyon karisimi oda sicakligina sogutuldu, l-bromo-4-k10r0butan karistirildi. Hekzahidro-lH-azepin (54.2mg, 0.547mmol) ve saat süreyle 60°C"ye isitildi. Çözücü vakumda uzaklastirildi ve bakiye DCM (5m1) ve su (5m1) arasinda partisyone edildi. Sulu faz DCM (5ml) ile yeniden ekstre edildi ve birlestirilen organik ekstreler vakuinda konsantre edildi. Bakiye içinde çözündürüldü ve MDAP yoluyla 2 en jeksiyonda saflastirildi (Yöntem B). Temin edilen bu madde (74 mg) halen saf degildi ve MDAP yoluyla saflastirildi (Yöntem A). Fraksiyonlari içeren ürün, baslikta adi geçen bilesigi saydam bir zamk seklinde (l3mg) vermek üzere azot akisi altinda uçuruldu. LCMS (Sistem B): tRET = 1.12dak.; MH+ = 390 Ara madde 37: 9-[4-(Hekzahidr0-lH-azepin-l-il)butill-2- { l( 1 8)- l -metilbutilloksü- 8-( metiloksi)-9H-purin-6-amin U 1 %550 2- { [( 1 S)- 1 -metilbutil]0ksi } -8-(meti10ksi)- l H-purin-6-amin trifluoroasetat, 1-brom0-4-klor0butan ve hekzahidro-lH-azepinden, ara madde 365ya benzer sekilde fakat Yöntem B ardindan Yöntem A (x2) kullanilarak, üç ardisik MDAP ile hazirlandi. ( l -piperidinihpentill- 9H-purin-6-amin 9-(5-Kloropenti1)-2- { [(1 S)-1-metilbuti1]oksi}-8-(metiloksi)- süspanse edildi ve karisim 18 saat süreyle 70°C°ye isitildi. Çözücü uzaklastirildi ve bakiye DCM (41111) ve doymus sodyum bikarbonat (4n11) arasinda partisyone edildi. Sulu faz daha DCM ile yeniden ekstre edildi ve birlestirilen organik ekstreler konsantre edildi ve bakiye içinde çözündürüldü ve MDAP ile saflastirildi (Yöntem A). Urün içeren fraksiyonlar birlestirildi ve baslikta adi geçen bilesigi (47.2 mg) vermek üzere azot akisi altinda LCMS (Sistem D): tRET = 3.11 dak.; MH+ = 405 Ara madde 39: 2-Fluor0-9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H- purin-ö-amin H-purin-ö-aminin (200g, 1.306mmol) (örnegin, AlliedSignal, ABD"den temin edilebilir) susuz asetonitril (4L) içindeki karistirilan süspansiyonuna lOL"1ik kontrollü laboratuvar reaktörü içinde ilave edildi ve sonuçta meydana gelen karisim, kaynamaya isitildi ve bu sicaklikta 2 saat süreyle tutuldu. Sirkülat'or daha sonra yeniden programlandi ve reaksiyon karisimi 0°C"ye sogutuldu. Tetrahidropirariil asetatiii (hazirlama Tetrahedroii Letters 2006, (500 ml) içindeki çözeltisi daha sonra, bir damlatma hunisi araciligiyla ilave edildi, ardindan trimetilsilil trifluorometansülfonat (283mL, 1.567m01) damlatma hunisi araciligiyla damla damla olacak sekilde ilave edildi. Hiçbir anlamli ekzotermi gözlenmedi. Sirkülatör sicakligi °C"ye ayarlandi ve karistirmaya 1 saat daha devam edildi. Karisim daha sonra 1 M sodyum karbonat (4L) ilavesiyle doyuruldu. Kati bir çökelti gözlendi ve pH°nin bazik olmasi kontrol edildi. Ilave su süspansiyona (1 L) ilave edildi ve bekleme üzerine, sulu tabaka anlamli kati inorganikleri içererek, tabakalar ayrildi. Sulu ve inorgaiiik katilarin çogunlugu ayrildi. Organik tabaka halen anlamli sekilde katilar içeriyordu ve daha fazla çöknieyi tesvik etmek üzere karistirma ile 0°C°ye sogutuldu. Kati madde filtrasyon yoluyla toplandi ve pet su ile iyice yikandi, sonra baslikta adi geçen bilesigi krem renkli bir kati halinde (152.8g) vermek üzere vakumda 4OOC"de gece boyunca kurutuldu. LCMS (Sistem D): tm = 1.71 dak.; MH+ = 238 Ara madde 40: 2-{[(l S)-l-Metilpropilloksi$-9-(tetrahidr0-2H- piran-Z-ill-9H-purin- 6-an1in Sodyum ters-butoksit (3.24g, 33.7mn101) kisim kisim olacak sekilde, karistirma ile (28)-2-butanole (lOg, l35mmol) ilave edildi. 2- Fluoro-9-(tetrahidro-2H-piran-Z-il)-9H-purin-6-amin (2g, 8.43mmol), sonuçta meydana gelen süspansiyona ilave edildi ve LCMS tamamlanmis reaksiyoiiu gösterdigi zaman karisim 6 saat süreyle 50°C"ye isitildi. Sogutulduktan sonra, karisim etil asetat (100ml) ile seyreltildi ve su (50 ml) ile yikandi ve sulu tabaka tekrar etil asetat (50 ml) ile ekstre edildi. Birlestirilen organik ekstreler brayn ile yikandi, hidrofobik cam tozu kullanilarak kurutuldu ve vakumda uçuruldu (62°C'de alkolün asirisini uçurmak için). Bakiye (2.52 g) diklorometan içinde çözündürüldü ve a Flashmaster II cihazi kullanilarak aminopropil kartusta (110 g) saflastirildi ve 60 dakikada siklohekzan içinde %0-100 etil asetat ile elüe edildi. Uygun fraksiyonlar birlestirildi ve baslikta adi geçen bilesigi beyaz renkli bir kati seklinde ( l .93 Sg) vermek üzere vakumda uçuruldu. LCMS (Sistem D): tRET = 2.41 dak.; MH+ = 292 Ara madde 41 : 8-Bromo-2-"(1S)-l-metilnropilloksi)-9- (tetrahidro-2H-piran-Z-il)- 9H-purin-6-amin metilpropil]oksi } -9-(tetrahidro-2H -piran-2 -il)-9 H -purin-6-aminin °C3de kisiin kisim olacak sekilde ilave edildi. Sonuçta meydana gelen yesil çözelti, 1 saat süreyle O-SOCSde karistirildi, bu sirada kirmiziya döndü ve karisim daha sonra oda sicakligina isinmaya birakildi, gece boyunca karistirildi. Sonuçta meydana gelen yesil çözelti su (2x20ml) ile yikandi, hidrofobik cam tozu kullanilarak ayrildi ve konsantre edildi. Bakiye diklorometan içinde çözündürüldü ve Flashmaster II cihazi ve 60 dakika %0-100 etil asetat-siklohekzan gradyani kullaiiilarak silika jel kromatografisi (100g kartus) yoluyla saflastirildi. Uygun fraksiyonlar birlestirildi ve baslikta adi geçen bilesigi sari renkli bir köpük seklinde (1.79 g) vermek üzere vakumda LCMs (Sistem B): tm = 2.58dak.; MH+ = 370/372 Ara madde 42: 8-(Metiloksi)-2-{[(1S)-1-metilnronilloksi}-9- (tetrahidrO-ZH-piran- 2-il)-9H-purin-6-amin çözündürüld'û ve metanol içinde %25 sodyum metoksit (3.2ml, 4.83mmol) ilave edildi ve karisim 2.5 saat kaynamaya isitildi. Reaksiyon karisimi, gece boyunca oda sicakliginda beklemeye birakildi ve sonra vakumda konsantre edildi ve bakiye diklorometan (40ml) ve doymus amonyum klor'ur çözeltisi (40ml) arasinda partisyone edildi. Tabakalar hidrofobik cam tozu kullanilarak ayrildi ve sulu faz dikloronietan (40n11) ile yeniden ekstre edildi. Birlestirilen organik ekstreler, baslikta adi geçen bilesigi sari renkli bir köpük seklinde (1 .65 g) vermek üzere vakumda konsantre edildi. LCMS (Sistem B): tRET = 2.211 dak; MH+ = 322 Ara madde 43: 8-(Metiloksi)-2-"(1S)-l-metilpropilloksD-IH- purin-6-amin trifluoroasetat piran-2-il)-9H-purin-6-aminden ara madde 127ye benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem B): tRET = l.19dak.; MH+ = 238 metilpropil]0ksi}-9H- purin-6-amin trifluoroasetat ve l-bromo-4-klor0butandan, %0-100 etil asetat - siklohekzan gradyani kullanilarak, aminopropil (NHZ) kartus ile ara madde 189e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): tm : 2.83dak.; MH+ : 328/330 Ara madde 45: 2-{[(lS)-1-Metilpentilloksü-9-(tetrahidro-2H- piran-Z-ill-9H-purin- 6-amin Sodyum t-butoksit (4.86g, 50.6mmol), (S)-2-hekzanol (12g, l l7mmol) ve 1 ,2-dimet0ksietanin (12ml) karistirilmis karisimina kisim kisim olacak sekilde ilave edildi. Sonuçta meydana gelen karisim azot atmosferi altinda, 50°C°ye isitildi ve sonra 2-fluor0-9-(tetrahidr0-2H- piran-Z-i1)-9H-purin-6-amin (3g, 12.65mmol) ilave edildi. Sonuçta meydana gelen karisim, LCMS tamamlanmis reaksiyonu gösterdigi zaman 20 saat süreyle 50°C"de tutuldu. Karisim oda sicakligina sogutuldu ve etil asetat (lOOml) ve su (lOOml) arasinda partisyone edildi. Organik faz, su (100 ml) ile sonra tuzlu su ile (50 ml) yikandi, usuz magnezyum sülfat üzerinden kurutuldu, filtre edildi ve uçuruldu. Bakiye diklorometan içinde çözündürüld'û ve aminopropil (NHZ) kartusta (lOOg) 40 dakikada siklohezan gradyani içinde %0-100 etil asetat ile eli'ie edilerek saflastirildi. Uygun fraksiyonlar birlestirildi ve baslikta adi geçen bilesigi beyaz renkli bir köpük seklinde (1.665g) LCMS (Sistem D): tRET = 2.88dak.; MH+ = 320 Ara madde 46: 8-Bromo-2-{[(lS)-1-metilpentilloksi}-9- (tetrahidro-ZH-piran-Z-il)- 9H-purin-6-amin N-Bromosüksinimid (1.504g, 8.45mmol) 2- { [( l S)-l - metilpentil]0ksi} -9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-aminin bir buz banyosu içinde sogutulan azot atmosferi altinda ilave edildi. 3 saat sonra, LCMS reaksiyonun %80 tainainlandigini gösterdi ve daha fazla N-bromosüksiniinid (0.68g) ilave edildi ve karistirmaya 2 saat daha devam edildi. Su (40ml) ilave edildi ve fazlar hidrobromik cam tozu kullanilarak ayrildi. Organik faz uçuruldu ve bakiye diklorometan içinde çözündürüldü ve siklohekzan içinde %0-100 etil asetat gradyani kullanilarak, ardindan 60 dakika %0-20 metanol (+%l trietilamin) gradyani kullanilarak aminopropil (NHZ) kartusta (IOOg) saflastirildi. Uygun fraksiyonlar birlestirildi ve beyaz renkli köpük seklinde (2.38g) baslikta adi geçen bilesige uçuruldu. LCMS (Sistem D): tRET = 3.24dak.; MH+= 398/400 Ara madde 47: 8-(Metiloksi)-2-{[(lS)-l-metilpentilloksi)-9- (tetrahidro-ZH-piran-2-il)-9H-purin-6-amin Sodyum metoksidin metanol (0.5M, 20ml, lOmmol) içindeki bir çözeltisi, of 8-bromo-2-{[(lS)-1-metilpentil]oksi}-9-(tetrahidro- içindeki çözeltisine ilave edildi ve karisim, geri çeviren sogutucu altinda 5 saat süreyle isitildi. Daha fazla metanol içinde metoksit (41111, 2mmol) ilave edildi ve karisim 2 saat daha geri çeviren sogutucuda isitildi ve sonra sogutuldu ve uçuruldu. Bakiye etil asetat (1001111) ve su (IOOml) arasinda partisyone edildi. Organik faz ayrildi, doymus tuzlu su ile yikandi, susuz magnezyum sülfat üzerinden kurutuldu, filtre edildi ve uçuruldu. Bakiye diklorometan içinde çözündürüldü ve 40 dakika siklohekzan içinde %0-100 etil asetat gradyani kullanilarak aminopropil (NHZ) kartusta (lOOg) saflastirildi. Uygun fraksiyonlar birlestirildi ve baslikta adi geçen bilesigi beyaz renkli bir köpük seklinde (1 .725g) vermek üzere vakumda uçuruldu. LCMS (Sistein D): tRET = 3.06dak.; MH+ = 350 Ara madde 48: 8-(Metiloksi)-2- `"(1 S)-l -1netilpentilloksi} - 1 H- purin-6-amin trifluoroasetat {[(l S)-1-metilpentil]oksi}-9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6- çözeltisine ilave edildi. Sonuçta meydana gelen karisim, azot atmosferi altinda 66 saat süreyle karistirildi ve sonra, baslikta adi geçen bilesigi beyaz renkli bir kati seklinde (1.65g) vermek üzere vakuinda kurutuldu. LCMS (Sistem D): tm = 2.14dak.; MH+ = 266 Ara madde 49: 9-(4-Klor0butil)-8-(metiloksi)-2-H(lS)-l- metilnentil]0ksi)-9H-purin-6-amin 8-(Metiloksi)-2- { [( l 8)- l -metilpentil]oksi } -l H-purin-ö-amin trifluoroasetat ve l-br0m0-4-klorobutandan ara madde 449e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): tm = 3.22dak.; MH+ = 356/358 Ara madde 50: 2-[(l-MetiletiDoksil-9-(tetrahidro-2H-piran-2- il g-9H-purin-6-amin ml, 220 mmol) 5 dakikada karistirma ile kisim kisim olacak sekilde ilave edildi. 2-Fluoro-9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amin (2 g, 8.43 mmol) ilave edildi ve reaksiyon karisimi 50°C°de 4 saat isitildi ve karistirildi ve sonra oda sicakligina sogumaya birakildi. Reaksiyon karisimi daha sonra etil asetat (75 ml) ile seyreltildi, su (3x25 ml) ile yikandi ve birlestirilen sulu tabakalar tekrar etil asetat (2X25 ml) ile ekstre edildi. Birlestirilen organik tabakalar hidrobromik cam tozu içinden geçirilerek kurutuldu, filtre edildi ve kirli beyaz renkli bir kati madde (2.30g) vermek üzere uçuruldu. Bu madde diklorometan içinde çözündürûldü ve siklohekzan içinde %O-lOO etil asetat gradyan ile elüe edilen amin0pr0pil SPE kartus (70g) kullanilarak saflastirildi. Uygun fraksiyonlar birlestirildi ve 40 dakika su (+ içinde MeOH/DMSO içinde tersine faz (Cig) Flashmaster 11 Sistem yüklemesi kullanilarak, kolon kromatografisi yoluyla ayrica saflastirilan, beyaz renkli bir kati (1.6g) vermek üzere uçuruldu, yaklasik olarak 2 ml doymus sodyum bikarbonat çözeltisi içeren flakonlara toplandi. Uygun fraksiyonlar birlestirildi ve diklorometan (3x100 ml) ile ekstre edildi. Birlestirilen organik ekstreler, hidrobromik cam tozu içinden geçis yoluyla kurutuldu ve baslikta adi geçen bilesigi beyaz renkli kati seklinde (888 mg) vermek üzere LCMS (Sistem B): tRET = 1.76d.ak.; MH+ = 278 Ara madde 51 : 8-Bromo-2-[(l-metiletil)oksi]-9-(tetrahidro- N-Bromosüksinimid (604 mg, 3.39 mmol) 2-[(l- mg, 3.20 mmol) kloroform (30 ml) içindeki çözeltisine 0-5°C"de azot altinda ilave edildi. Karisim O-5°C"de 1 saat karistirildi, bu sirada rengi kirmizimsi kahverengiye döndü ve daha sonra oda sicakligina isitildi ve 4 saat daha karistirildi. LCMS reaksiyonun tamamlanmainis oldugunu gösterdi ve daha fazla N-bromosüksinimid (114 mg, 0.641 mmol) ilave edildi ve reaksiyon karisimi oda sicakliginda gece boyunca karistirildi. Reaksiyon karisimi daha sonra kloroform (30 ml) ile seyreltildi, su (2 x 20ml) ile yikandi ve tabakalar hidrobromik cam tozu kullanilarak ayrildi ve organik tabaka, kirmizi renkli bir kati (1.16 g) vermek üzere uçuruldu. Bu madde diklorometan içinde çözündür'ûld'û ve siklohekzan içinde %0-100 etil asetat gradyani elüent olarak kullanilarak, SPE kartusta (50g) silika jel kromatografisi yoluyla saflastirildi. Uygun fraksiyonlar birlestirildi ve baslikta adi geçen bilesigi soluk sari kati 712mg seklinde vermek üzere uçuruldu. LCMS (Sistem B): tRET = 2.36dak.; MH+ = 356/358 Ara madde 52: 2-[( l -Metiletihoksil-8-(metiloksi)-9- (tetrahidr0-2H-piran-Z-il)-9H-purin-6-amin karistirilan bir süspansiyonuna sodyum metoksit (metanol içindeki saat süreyle isitildi. Reaksiyon karisimi, daha sonra 70°C"ye isitildi ve 2.5 saat karistirildi. Çözücü uçuruldu ve bakiye doymus sulu amonyum klorür çözeltisi (15 m1) ve etil asetat (20 ml) arasinda partisyone edildi. Tabakalar ayrildi, sulu faz ilave etil asetat (2x10 ml.) ile ekstre edildi ve organik ekstreler birlestirildi, hidrobromik cam tozu içinden geçis yoluyla kurutuldu ve baslikta adi geçen bilesigi sari renkli bir kati seklinde (573 mg) vermek üzere uçuruldu. LCMs (Sistem B): tm = l.92dak.; MH+ = 308 Ara madde 53: 2-[( l-Metiletilloksil-S-(metiloksi)-lH-nurin-ö- amin trifluoroasetat N 3;::. ,JNQSgO o /LLNç/l., H' Trifluoroasetik asit (1 ml, 12.98mmol), 2-[(l -metiletil)oksi]-8- (metiloksi)-9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-pu.rin-6-aminin (568mg, 1.848mm01) metanol (lOml) içindeki karistirilan bir çözeltisine ilave edildi ve karisiin oda sicakliginda gece boyunca karistirildi. Daha fazla trifluoroasetik asit (0.2ml) ilave edildi ve reaksiyon karisimi, oda sicakliginda 1.5 saat daha karistirildi ve sonra, vakumda uçuruldu. Kati bakiye etil asetat ile ögütüldü, filtre edilerek toplandi, etil asetat ile yikandi ve baslikta adi geçen bilesigi beyaz renkli bir kati seklinde (405mg) vermek üzere, gece boyunca vakumda kurutuldu. LCMS (Sistem B): tRET = l.02dak.; MH+ = 224 (metiloksi)-9H-purin-6-amin 2-[( l -Metiletil)0ksi]-8-(meti10ksi)- l H-purin-6-amin trifluoroasetat ve l-br0m0-5-kloropentandan ara madde 44°e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem A): tRET = 0.93dak.; MH+ = 328/330 Ara madde 55: 2-(Siklobuti10ksi)-9-(tetrahidro-ZH-piran-Z-il)- 9H-purin-6-amin Sodyum t-butoksit (3.31 g, 34.2mm01) siklobutanole (lOml) oda sicakliginda kisim kisim olacak sekilde ilave edildi. Karisim çok koyu bir kivam aldi ve 50°C°ye isitildi. 2-Flu0r0-9-(tetrahidr0-2H- dimetoksietane (3m1) ilave edildi ve karisim 50°C,de 90 dakika karistirildi ve sonra sogutuldu ve etil asetat (50ml) ve su (50ml) arasinda partisyone edildi. Hiçbir fazda çözünmeyen bir çökelti filtre edilerek uzaklastirildi. Organik faz ayrildi, doymus tuzlu su ile yikandi, susuz magnezyum sülfat üzerinden kurutuldu, filtre edildi ve krem renkli bir köpük vermek üzere uçuruldu. Bu madde diklorometan içinde çözündür'üldü ve siklohekzan içinde %0-100 etil asetat gradyani, ardindan 40 dakika %0-20 metanol (+l% trietilamin) gradyani kullanilarak aminopropil (NH2) kartusta (110g) saflastirildi. Uygun fraksiyonlar birlestirildi ve baslikta adi geçen bilesigi kirli beyaz renkli bir kati seklinde (0.655g) vermek üzere uçuruldu. LCMS (Sistem B): tm = l.98dak.; MH+ = 290 viran-2-il)-9H-purin-6-amin i/ '\ N /I ;i`m/A Nü* B kloroform (15ml) içindeki karistirilan bir çözeltisine OOC"de ilave edildi. Karisim oda sicakligina isitildi ve gece boyunca birakildi, bu sirada su (15ml) ilave edildi ve fazlar ayrildi. Sulu tabaka diklorometan ile ekstre edildi ve organik ekstreler birlestirildi, tuzlu su ile yikandi, susuz magnezyum sülfat üzerinden kurutuldu ve baslikta adi geçen bilesigi turuncu renkli bir köpük seklinde (1.79g) vermek üzere uçuruldu. LCMS (Sistem D): tRET = 2.72dak.; MH+ = 368/370 Ara madde 57: 2-(Siklobutiloksi)-8-(metiloksi)-9-(tetrahidr0- 2H-niran-2-il)-9H- puriri-ö-amin çözündürüldü ve metanol içinde %25 sodyum metoksit (2.274ml, 9.72mm01) ilave edildi. Karisiin 67°C°de 24 saat süreyle isitildi ve sonra oda sicakligina sogutuldu. Etil asetat ve su ilave edildi ve tabakalar ayrildi. Sulu. tabaka iki kere daha etil asetat ile ekstre edildi ve organik ekstreler birlestirildi, tuzlu su ile yikandi, susuz magnezyum sülfat 'üzerinden kurutuldu ve baslikta adi geçen bilesigi krem rengi bir köpük seklinde (1 .27 g) verinek üzere uçuruldu. LCMS (Sistem D): tm = 2.53dak.; MH+ = 320 Ara madde 58: 2-(Sik10butiloksi)-8-(metiloksi)-lH-purin-6- amin trifluoroasetat (metiloksi)-9-(tetrahidr0-2H-piran-2-i1)-9H-purin-6-aminin (l .27 g, 3.98mm01) metanol (50m1) içindeki çözeltisine ilave edildi ve karisim °C"de azot atmosferi altinda 21 saat karistirildi. Çözücü vakumda uzaklastirildi ve bakiye kati madde 1,1-dimetiletil metil eter ile ögütüldü ve sonra filtre edilerek toplandi ve baslikta adi geçen bilesigi krem rengi bir kati seklinde (1.0922g) vermek 'üzere vakumda kurutuldu. LCMs (Sistem D): tRET = 1.17dak.; MH+ = 236 Ara madde 59: 9(4-lorobuti1)-2-(sik10butiloksi)-8-(metiloksi)- 9H-purin-6-amin 2-(Siklobutiloksi)-8-(metiloksi)-l H-purin-6-amin trifluoroasetat ve l-br0m0-4-klor0butandan ara madde 44"e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): tRET = 2.76dak.; MH+ = 326/328 Ara madde 60: 2-(Siklopentiloksi)-9-(tetrahidr0-2H-piran-2- i] g-9H-purin-6-amin Siklopentanol (25ml, 275mmol), 1,2-dimetoksietan (35ml) ile seyreltilen kivainli bir süspansiyon verinek üzere sodyum ters- daha sonra azot altinda, 20 saat süreyle 50°C°de isitilan, sonuçta meydana gelen çözeltiye ilave edildi. Karisim sogutuldu ve su ve etil asetat ilave edildi. Tabakalar ayrildi ve sulu tabaka tekrar etil asetat ile yikandi. Organik ekstreler birlestirildi, tuzlu su ile yikandi, susuz magnezyum sülfat üzerinden kurutuldu ve 40°C°de düsürülmüs basinç altinda konsantre edildi. Bakiye siklohekzan (50ml) içinde 330 g silika kartusa yüklendi ve ilk olarak 10 kolon hacim üzerinden siklohekzan içinde %O-IOO etil asetat gradyaniyla ve sonra, etil asetat içinde %0- metanol gradyani ile elüe edildi. Urün içeren fraksiyonlar birlestirildi ve baslikta adi geçen bilesigi beyaz renkli bir köpük seklinde (2.51 g) vermek üzere uçuruldu. LCMS (Sistem D): 'Imar = 2.51 dak.; MH+ = 304 Ara madde 61: 8-Bromo-Z-(siklopentiloksi)-9-(tetrahidro-2H- piran-2-il)-9H-purin- 6-amin 2-(Siklopentiloksi)-9-(tetrahidro-2H-piran-2-i1)-9H-purin-6- aminden ara madde 56'ya benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): tm = 2.88dak.; MH+ = 382/384 Ara madde 62: 2-(Siklopentiloksi)-8-(metiloksi)-9-(tetrahidro- purin-6-amin"den ara madde 57"ye benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem C): tRET = 1.11 dak.; MH+ = 334 Ara madde 63: 2-(Siklopentiloksi)-8-(metiloksi)-lH-purin-6- amin trifluoroasetat 9H-purin-6-amin"den ara madde 5 8"e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem B): tm = 1.27d.ak.; MH+ = 250 Ara madde 64: 9-(4-Klor0butil)-2-(siklopentiloksi)-8- (metiloksi)-9H-purin-6-amin 1/ \i` 51' .x/ \i`._o X/lkor "N/'NIN` \ 2-(Siklopentiloksi)-8-(metiloksi)-l H-purin-Ö-ainin trifluoroasetat ve 1-bromo-4-klorobutandan, ara madde 44"e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): tRET = 2.90dak.; MH+ = 340/342 Ara madde 65: 2-(Siklohekziloksi)-9-(tetrahidro-2H-niran-2- il g-9H-purin-6-amin Sodyum ters-butoksit (3.29g, 34.2mmol) oda sicakliginda siklohekzanole (lSml) kisim kisim olacak sekilde ilave edildi. Karisim çok koyu kivam aldi ve daha fazla siklohekzanol (lOml) ilave edildi ve karisim 50°C7ye isitildi. 2-Fluoro-9-(tetrahidro-2H-piran- 2- saat süreyle isitildi ve sonra, 60°C"ye isitildi ve 2 saat daha isitildi, bu noktada LCMS reaksiyonun tamamlandigini gösterdi. Karisim oda sicakligina sogutuldu ve etil asetat (150ml) ve su (150ml) arasinda partisyone edildi. Organik faz ayrildi, doymus tuzlu su ile yikandi, susuz magnezyum sülfat üzerinden kurutuldu, filtre edildi ve su banyosunda 60°C°de uçuruldu. Bakiye diklorometan içinde çözündür'ûld'û ve siklohekzan içinde %0-100 etil asetat gradyan, ardindan 30 dakika %0-20 inetanol (+%l trietilamin) gradyan kullanilarak, 70g aminopropil (NHZ) kartusta saflastirildi. Bazi ürün içeren fraksiyonlar siklohekzanol ile kontamine oldu ve bunlar 40 dakika siklohekzan içinde %0-100 etil asetat gradyan kullanilarak 70 g silika kartusta yeniden saflastirildi. Iki saflastirmadan gelen `ürün içeren fraksiyonlar birlestirildi ve baslikta adi geçen bilesigi soluk sari renkli bir köpük seklinde (1 .59g) vermek üzere vakumda uçuruldu. LCMS (Sistem D): tRET = 2.65dak.; MH+ = 318 Ara madde 66: 8-Bromo-2-(siklohekziloksi)-9-(tetrahidr0-2H- viran-2-il)-9H-purin-6-amin kloroform (51111) içindeki karistirilan çözeltisine OOC"de ilave edildi. Sonuçta meydana gelen karisim O°C"de 1.5 saat karistirildi ve sonra oda sicakligina isitildi ve 2 saat daha karistirildi. Su (5ml) ilave edildi ve fazlar hidrobroinik cam tozu kullanilarak ayrildi. Organik faz uçuruldu ve bakiye diklorometan içinde çözündür'uldu ve 40 dakika siklohekzan içinde %0-100 etil asetat gradyani ile elüe edilerek 70g aminopropil (NHZ) kartusta saflastirildi. Uygun fraksiyonlar birlestirildi ve baslikta adi geçen bilesigi beyaz renkli bir kati seklinde (0.252 g) vermek üzere vakumda uçuruldu. LCMS (Sistem B): tRET = 2.83dak.; MH+ = 396/398 Ara madde 67: 2-(Siklohekzi10ksi)-8-(metiloksi)-9-(tetrahidr0- 8-Bromo-Z-(siklohekzi10ksi)-9-(tetrahidr0-2H-piran-Z-i1)-9H- purin-6-aminden ara madde 57"ye benzer sekilde hazirlandi. LCMS (SISICITI D). tRET : 2.86dak., IVIH+ : 348 Ara madde 68: 2-(Siklohekziloksil-8-(meti10ksi)-lH-purin-Ö- amin trifluoroasetat 2-(siklohekziloksi)-8-(meti10ksi)-9- (tetrahidr0-2H-piran-2-il)- 9H-purin-6-aminden ara madde 58"e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem B): tRET : 1.43dak.; MH+ = 264 Ara madde 69: 9-(4-Klor0buti1)-2-(Siklohekziloksi)-8- (ineti10ksi)-9H-purin-6-amin 2-(Sik10hekziloksi)-8-(metiloksi)-l H-purin-ö-amin sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): tm = 3.05dak.; MH+ = 354/356 Ara madde 70: N2-I(IR)-l-Metilbutill-9-(tetrahidr0-2H-piran- 2-i1)-9H-purin-2.6- diamin LJ) (2R)-2-pentanamin içeren diklorometanin (11.12g yaklasik olarak 3.1g, 35.6mmol amin içerir) ham numunesi, 2-flu0r0-9- etilen glikol (501111) içindeki süspansiyonuna ilave edildi. Karisim etil asetat (2001111) arasinda partisyone edildi. Organik faz ayrildi, doymus tuzlu su ile yikandi, susuz magnezyum sülfat üzerinden kurutuldu, filtre edildi ve uçuruldu. Bakiye diklorometan içinde çözündür'ûld'û ve 40 dakika %0-100 etil asetat - siklohekzan gradyani kullanilarak llOg aminopropil (NHQ) kartusta saflastirildi. Uygun fraksiyonlar birlestirildi ve bakiye dietil eter ile ögütüld'û ve bazi çözünmeyen baslangiç maddeleri filtrasyon yoluyla uzaklastirildi. Eter süzüntüsünün uçurulmasi, baslikta adi geçen bilesigi kirli beyaz renkli bir köpük seklinde (2.34g) verdi. LCMS (Sistem D): tRET = 2.63dak.; MH+ = 305 Ara madde 71 : 8-Br0mo-N2-[(1R)-l-metilbutill-9-(tetrahidro- A 1 H ., \-Br N-Bromosüksinimid (2.08g, 11.69mmol), NZ-[(lR)-l- metilbutil]-9-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-2,6-diaminin (2.27g, 7.46mmol) kloroforin (30ml) içindeki karistirilan bir çözeltisine kisim kisim olacak sekilde 0°C°de azot atmosferi altinda ilave edildi. Reaksiyon karisimi 1.5 saat karistirilmaya birakildi, bu sirada kloroform (20ml) ve su (50ml) ilave edildi. Karistirildiktan sonra, tabakalar hidrobromik cam tozu kullanilarak ayrildi, sulu tabaka ilave kloroform porsiyonu ile yikandi ve birlestirilen organik ekstreler uçuruldu. Bakiye diklorometan içinde çözündürüldü ve 40 dakika siklohekzan içinde %0-100 etil asetat gradyani kullanilarak, llOg aminopropil (NHZ) kartusta saflastirildi. Uygun fraksiyonlar birlestirildi ve baslikta adi geçen bilesigi kirli beyaz renkli bir köpük seklinde (0.846g) vermek üzere vakuinda uçuruldu. LCMS (Sistem D): tm = 3.05dak.; MH+ = 383/385 Ara madde 72: N2-[(1R)-1-Metilbutill-S-(meti10ksi)-9- (tetrahidro-ZH-piran-2-11)-9H-purin-2,6-diamin 1 Ti "Ms o Sodyum metoksidin metanol (0.5M, 91111, 4.5mmol) içindeki bir çözeltisi 8-bromo-N2-[(l R)-l -metilbutil]-9-(tetrahidro-2H-piran-2- içindeki çözeltisine ilave edildi ve sonuçta meydana gelen çözelti, 23.5 saat geri çeviren sogutucu altinda isitildi. Daha fazla metanol içinde sodyum metoksit (0.5M, 4.5ml) daha sonra ilave edildi ve geri çeviren sogutucuda isitmaya 4 saat daha devam edildi. Daha fazla metanol içinde sodyum metoksit (0.5M, 4.5m1) tekrar ilave edildi ve geri çeviren sogutucuda isitmaya 16.5 saat daha devam edildi, bu sirada LCMS reaksiyonun tamamlanmis oldugunu gösterdi. Reaksiyon karisimi oda sicakligina sogutuldu, uçuruldu ve etil asetat (751111) ile yeniden ekstre edildi ve birlestirilen organik fazlar doymus tuzlu su ile yikandi, susuz magnezyum sülfat üzerinden kurutuldu, filtre edildi ve uçuruldu. Bakiye diklorometan içinde çözünd'urüldü ve siklohekzan içinde %O-lOO etil asetat gradyan, ardindan 15 dakika aminopropil (NI-[2) kartusta saflastirildi. Urün içeren fraksiyonlar birlestirildi ve baslikta adi geçen bilesigi beyaz renkli bir köpük seklinde (0.6l4g) vermek üzere vakumda uçuruldu. LCMS (Sistem D): tm = 2.83dak.; MH+ = 335 Ara madde 73: N2-[(lR)-l-Metilbutill-8-(metiloksi)-3H-purin- 216-diamin trifluoroasetat Trifluoroasetik asit (1 ml, 1.48g, 7.08mmol) N2-[(lR)-l- metilbutil]-8-(metiloksi)-9-(tetrahidr0-2H-piran-Z-il)-9H-purin-2,6- çözeltisine ilave edildi. Sonuçta nieydana gelen karisim 66 saat süreyle azot atmosferi altinda karistirildi ve sonra, baslikta adi geçen bilesigi kirli beyaz renkli bir kati seklinde (0.690g) vermek üzere LCMS (Sistem D): tm = l.89dak.; MH+ = 251 Ara madde 74: 9-(4-K10r0butil)-N2-[(lRl-l-metilbutill-8- (metiloksi)-9H-purin-2,6-diamin Nz-[(1 R)-l -metilbutil]-8-(meti10ksi)-3H-purin-2,6-diamin trifluoroasetat ve l-br0m0-4-klor0butandan, ara madde 44"e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): tRET = 3.02dak.; MH+ = 341/343 Ara madde 75; NZ-mS)-l-Metilbutil1-9-(tetrahidro-2H-piran)- 9H-purin-2,6- diamin 2-Flu0r0-9-(tetrahidro-2H-piran-Z-il)-9H-purin-6-amin ve (28)-2-pentanamin°den ara madde 707e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): tRET = 2.63dak.; MH+ = 305 2H-piran-2-il)-9H-purin-2,6-diamin NZ-[(1 S)-1 -metilbuti1]-9-(tetrahidr0-2H-piran-2-i1)-9H-purin- 2,6-diaminden, ara madde 71"e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): tm = 3.05dak.; MH+ = 383/385 Ara madde 77: NZ-l( 18)-1-Metilbutill-8-(metiloksi)-9- (tetrahidro-ZH-piran-Z-il)-9H-Durin-2,6-diamine Sodyum metoksidin metanol içindeki bir çözeltisi (0.5M, içindeki çözeltisine ilave edildi ve sonuçta meydana gelen çözelti, 4 saat süreyle geri çeviren sogutucu altinda isitildi. Daha fazla metanol içinde sodyum metoksit (0.5M, 12ml, 6mmol) ilave edildi ve geri çeviren sogutucuda isitmaya 18 saat daha devam edildi. Karisim sogutuldu ve uçuruldu ve bakiye etil asetat (75ml) ve su (75ml) arasinda partisyone edildi. Sulu faz etil asetat (75ml) ile yeniden ekstre edildi ve birlestirilen organik fazlar doymus tuzlu su ile yikandi, susuz magnezyum sülfat üzerinden kurutuldu ve uçuruldu. Bakiye diklorometan içinde çözündürüldü ve siklohekzan içinde %0- 100 etil asetat gradyani, ardindan 15 dakika %0-20 metanol (+%1 trietilainin) gradyani kullanilarak lOOg aminopropil (NH2) kartusta saflastirildi. Urun içeren fraksiyonlar birlestirildi ve baslikta adi geçen bilesigi beyaz renkli bir köpük seklinde (0.848g) vermek üzere vakumda uçuruldu. LCMs (Sistem D): tRET : 2.83dak.; MH+ : 335 Ara madde 78: NZ-l( l8)-1-Metilbutill-8-(meti10ksi)-3H-purin- 2,6-diamin trifluoroasetat NZ-[(l S)-l -metilbuti1]-8-(meti10ksi)-9-(tetrahidr0-2H-piran-2- i1)-9H-purin-2,6-diaminden, ara madde 73"e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): tm = l.89dak.; MH+ = 251 (metiloksi)-9H-purin- 2,6-diamin i 1' l ir› 0\ trifluoroasetat ve 1-br0mo-4-klorobutandan, ara madde 44"e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): Imar = 3.02dak.; MH+ = 341/343 8-(metiloksi)-9H-purin-6-amin 2- { [( 1 S)- 1 -Metilbutil]0ksi} -8-(metiloksi)-9H-purin-6-amin trifluoroasetat ve 1-br0m0-3-kloropropandan, ara madde 44°e benzer sekilde hazirlandi. Ara madde 81: 9-(5-KloropentiD-S-(meti10ksi)-2-H(1S)-l- metilpropiß 0ksi} -9H-purin-6-amin 8-(Metiloksi)-2-{[(1 S)-1 -metilpropi1]0ksi} -1H-purin-6-amin trifluoroasetat ve 1-br0mo-5-kloropentandan Ara madde 14,e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem A): tRET = 1.00 dak.; MH+ = 342/344 9-(5-Kloropentil)-8-(metiloksi)-2-{[(1S)-l-metilpr0pil]0ksi}- 9H-purin-6-amin ve piperidinden, ara madde 38"e benzer sekilde ancak diklorometan içinde %0-25 metanol gradyan kullanilarak silika üzerinde saflastirma ile hazirlandi. LCMS (Sistem A): tRET = 0.61 dak; MH+ = 391 Ara madde 83: 2-( Butiloksi)-8-(meti10ksi)-9-[3-(l - piperidinil)pr0pi1]-9H-purin-6-amin. formik asit tuzu f/"N HCOZH 2-(Butil0ksi)-8-(metiloksi)- l H-purin-6-amin trifluoro-asetat, 1,3-dibr0m0pr0pan ve piperidinden, ara madde 20"ye benzer sekilde ancak Yöntem A, ardindan Yöntem D kullanilarak MDAP yoluyla ardisik saflastirmalar ile hazirlandi. LCMS (Sistem B): tRET = l.16dak.; MH+ = 363 Referans Omegi 1: 6-Amino-9-[3-(1-azetidiniDpropill-Z- (butiloksi)-7,9-dihidr0-8H-purin-8-on edildi ve karisim, 18 saat süreyle oda sicakliginda karistirildi. Çözücü vakuinda uzaklastirildi ve bakiye metanol içinde çözündürüldü ve aminopropil SPE kartusa (2g) yüklendi. Kartus metanol ile elüe edildi ve çözücü, baslikta adi geçen bilesigi beyaz renkli bir kati seklinde (1 3mg) vermek üzere uzaklastirildi. LCMS (Sistem B): tRET = 1.12dak.; MH+ = 321 Referans Örnegi 2: 6-Amin0-2-(buti10ksi)-9-[3-(1- pirolidinil)pr0pill-7,9-dihidr0-8H-purin-8-0n edildi ve karisimi oda sicakliginda 5 saat süreyle karistirildi. Çözücü, metanol içinde çözündürülen krem rengi kati maddeyi vermek üzere vakumda uzaklastirildi ve aminopropil SPE kartusa (2g) yüklendi ve metanol ile elüe edildi. Çözücü, baslikta adi geçen bilesigi beyaz renkli bir kati seklinde (43mg) vermek üzere uçuruldu. LCMS (Sistem C): tRET = 0.70dak.; MH_ = 335 Referans Örnegi 3: 6-Amin0-2-(butiloksi)-9-[3-(hekzahidr0- lH-azepin- l -il)pr0pill -7,9- dihidr0-8H-purin-8-0n (metiloksi)-9H-purin-6-aminden Referans Ornegi 1"e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem B): tRET = 1.33dak.; MH+ = 363 Referans Örnegi 4: 6-Amino-9-[4-(l-azetidini1`)buti1]-2- (butiloksi)-7,9-dihidr0-8H-purin-8-on 9-[4-(1-Azetidinil)butil]-2-(buti10ksi)-8-(metiloksi)-9H-purin- 6-an1inden, Referans Örnegi l"e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem B): tRET = 1.16dak.; MH+ = 335 Referans Örnegi 5: 6-Amino-2-(butiloksi)-9-[4-( 1 - pirolidini])butil]-7,9-dihidr0-8H-purin-8-0n 2-(Butiloksi)-8-(metiloksi)-9-[4-(1-pirolidinil)butil]-9H-purin- 6-amin forinik asit tuzundan, Referans Örnegi l°e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem B): tRET = l.23dak.; MH+ = 349 Referans Örnegi 6: 6-Amin0-2-(buti10ksi)-9-[4-( 1 - piperidinillbutill-7,9-dihidr0-8H-purin-8-0n 2-(Butiloksi)-8-(metiloksi)-9-[4-(1 -piperidinil)butil]-9H-purin- 6-aniin formik asit tuzundan, Referans Örnegi l"e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem B): tm = 1.29dak.; MH+ = 363 Referans Örnegi 7: 6-Amino-2-(butiloksi)-9-[4-(hekzahidr0- lH-azepin-l -il)butil l -7.9-dihidr0- 8H-purin-8-0n 2-(Buti10ksi)-9-[4-(hekzahidr0- l H-azepin-l -il)butil]-8- (inetiloksi)-9H-purin-6-aminden, Referans Örnegi l"e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem B): tm = 1.37dak.; MH+ = 377 Referans Örnegi 8: 6-Amin0-9-[5-(l-azetidinil)pentil]-2- (butiloksi)-7,9-dihidr0-8H-purin-S-on 9-[5-(1-azetidinil)pentil]-2-(butiloksi)-8-(metiloksi)-9H-purin- 6-an1inden, Referans Örnegi l"e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem B): tRET = l.25dak.;MH+ = 349 Referans Örnegi 9: 6-Amino-2-(butiloksi)-9-[5-( 1- pirolidinihpentil]-7,9-dihidro-8H-pun'n-S-on 2-(Butiloksi)-8-(metiloksi)-9-[5-(l -pirolidinil)pentil]-9 H- purin-Ö-aininden, Referans Örnegi l,e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem B): tm = 1.28dak.; MH+ : 363 Referans Örnegi 10: 6-Aniino-Z-(butiloksi)-9-[5-( 1- piperidini1)pentil]-7,9-dihidr0-8l-l-purin-8-0ri 2-(Butiloksi)-8-(metiloksi)-9-[5-(l -piperidinil)pentil]-9H- purin-6-a1ninden, Referans Örnegi l"e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem B): tm = l.35dak.; MH+ = 377 Referans Örnegi 11: 6-Amino-2-(butiloksi)-9-[5-(hekzahidr0- l H-azepin- l -il)penti1]-7,9-dihidr0-8 H-purin-S-on .2.1. Yöntem A 2-(Buti10ksi)-9-[5-(hekzahidr0- l H-azepin-l -il)pentil]-8- (metiloksi)-9H-purin-6-aminden, Referans Örnegi 2"ye benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem B): tRET = l.55dak.; MH+ = 391 Yöntem B 2-(Buti10ksi)-8-(metiloksi)- l H-purin-6-amin trifluoro-asetat, l-bromo-S-kloropentan ve hekzahidro-l H-azepinden, Referans Örnegi l9"a benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem B): tRET : 1.54dak.; MH+ : 391 Referans Örnegi 12: 6-Amin0-2-(butiloksi)-9-hekzahidr0- (inetiloksi)-9H-purin-6-aminden, Referans Örnegi 1"e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): tRET = 3.17dak.; MH+= 405 Referans Örnegi 13: 6-Amino-2-(butiloksi)-9-[6-( 1- pirolidinil)hekzil]-7,9-dihidr0-8H-purin-8-0n 2-(Butiloksi)-8-(metiloksi)-9-[6-(1-pirolidinil)hekzil]-9H- purin-6-a1ninden, Referans Örnegi l°e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): tm = 2.47dak.; MH+ = 377 Referans Örnegi 14: 6-Amjno-2-(butiloksi)-9-[6-( l - piperidinil)hekzil]-7,9-dihidr0-8H-purin-8-0n 2-(Buti10ksi)-8-(metiloksi)-9- [6-( l -piperidinil)hekzil] -9H- purin-6-aininden, Referans Örnegi 1"e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): tm = 2.68dak.; MH+ = 391 2-(Buti10ksi)-9-[6-(hekzahidr0-'1 H-azepin- 1 -il)hekzil]-8- (metiloksi)-9H-purin-6-aminden, Referans Örnegi l'e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): tm = 2.76dak.; MH+ = 405 Referans Örnegi 1 6: 6-Amin0-2-(butilamin0)-9-[3-( 1 - piperidinil)pr0pi1l-7,9-dihidr0-8H-purin-8-0n Nz-butil-9-(3-kloropropil)-8-(metiloksi)-9H-purin-2,6-diamin (250mg, 0.8 mmol), piperidin (340mg, 4mmol) ve sodyum iyodürün ( içindeki bir karisimi, 48 saat süreyle geri çeviren sogutucu altinda isitildi. Çözücü uçuruldu ve bakiye hazirlayici ITK yoluyla saflastirildi, sonra metanol (5ml) içinde çözündürüldü. Metanol içinde hidrojen klorür (0.51111) 16 saat süreyle ilave edildi. Çözücü daha sonra uçuruldu ve bakiyenin pH°si sodyum bikarbonat çözeltisi ilave edilerek 7-8°e ayarlandi. Urün etil asetat içine ekstre edildi ve ekstre uçuruldu ve baslikta adi geçen bilesigi (161ng) vermek üzere bakiye hazirlayici HPLC yoluyla saflastirildi. LCMS (Sistem A): tRET = 0.55dak.; MH+ = 348 Referans Örnegi 17: 6-Amino-2-(butilamin0)-9-[4-( 1 - piperidinil)butill-7,9-dihidro-8H-purin-8-on N2-Butil-8-(metiloksi)-9-[4-(1-piperidinil)butil]-9H-purin-2,6- diaminden, Referans Örnegi l'e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem B): tRET = O.96dak.; MH+ = 362 Referans Örnegi 18: 6-Arnino-2-(butilamin0)-9-[4- (hekzahidro- l H-azepin- l -il)butil]-7,9-dihidro-8 H-purin-S-on NZ-butil-9-[4-(hekzahidro-l H-azepin- l -il)butil]-8-(metiloksi)- 9H-purin-2,6-dianiinden, Referans Örnegi 1"e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem B): tRET = 1.12dak.; MH+ = 376 Referans Örnegi 19: 6-Amino-2-(butilamino)-9-[5- (hekzahidro-l H-azepin-l -illpentill-7,9-dihidr0-8H-purin-8-on NZ-Butil-S-(metiloksi)-3H-purine-2,6-diamin trifluoroasetat DMF (3ml) içinde süspanse edildi ve 1 saat süreyle 60°C°ye isitildi. Reaksiyon karisimi oda sicakligina sogutuldu ve l-broino-S- daha karistirildi. Hekzahidro-l H-azepin (54.2mg, 0.547mmol) ve saat süreyle 70°C7ye isitildi. LCMS, NZ-buti1-9-[5-(hekzahidr0-lH- azepin-1-il)pentil]-8-(metiloksi)-9H-purin-2,6-diamin olusumu ile tutarli olan MH+ 404 ile inajör bir pik gösterdi. Çözücü vakumda uzaklastirildi ve bakiye DCM (2ml) ve su (2ml) arasinda partisyone edildi. Sulu kisim tekrar DCM (2ml) ile ekstre edildi ve birlestirilen organik ekstreler konsantre edildi ve bakiye l:1 MeOH:DMSO (2ml) içinde çözündürüldü ve MDAP (Yöntem C) yoluyla saflastirildi. Urün içeren fraksiyonlarin uçurulmasi, LC MS"nin muhtemelen TFA varliginda konsantrasyona bagli olarak, 8-metoksi grubunun hidrolize ugradigini gösterdigi bakiye TFA verdi. Bu ham madde bir kez daha yoluyla tekrar saflastirildi. Urün içeren fraksiyonlar, baslikta adi geçen bilesigi beyaz renkli bir kati madde seklinde (39mg)vermek üzere azot akisi altinda uçuruldu. LCMS (Sistem B): tRET = 1.18dak.; MH+ = 390 Ornek l: 6-Amin0-2-{[(lS)-1-metilbutilloksü-9-[4-( l- piperidinil)butill-7,9-dihidro-8H-purin-S-on 2- {[(l S)-l -metilbutil]0ksi}-8-(meti10ksi)-l H-purin-6-amin trifluoroasetat, 1-br01n0-4-k10r0butan ve piperidinden, Referans Örnegi l9"a benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem B): tm = 1.38dak.; MH+ = 377 Örnek 2: 6-Amin0-9-[4-(hekzahidr0-l H-azenin- l -i1)butill-2- { f( 1 8)- l -metilbutilloksi)-7,9-dihidr0-8H-purin-8-0n 9-[4-(Hekzahidr0-l H-azepin-l -il)butil]-2- { [(1 S)-l - metilbuti1]0ksi}-8-(meti10ksi)-9H-purin-6-aminden, Referans Örnegi l"e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem B): tRET = l.48dak.; MH+ = 391 piperidinil)pentil]-7,9- dihidro-SH-purin-S-on 2-{[(l S)-l -Metilbutil]oksi}-8-(meti10ksi)-9-[5-(1- piperidinil)pentil]-9H-purin-6-aminden Referans Örnegi l"e benzer sekilde asagidaki gibi hazirlandi: Hidrojen klorürün dioksan içindeki çözeltisi (4M, 0.71 ml), 2- { [(1 S)-1 -metilbuti1]0ksi} -8-(metiloksi)-9-[5 -(l -piperidinil)penti1]-9H- çözeltisine ilave edildi. Sonuçta meydana gelen karisim oda sicakliginda, gece boyunca karistirilmaya birakildi ve daha sonra azot altina yerlestirildi. Bakiye metanol içinde çözündürüld'û ve 2g aminopropil SPE kartusa (metanol ile önceden kondisyone edilmis) yüklendi, metanol ile elüe edildi ve sonuçta meydana gelen çözelti, baslikta adi geçen bilesigi sari renkli bir kati seklinde (40.97mg) vermek üzere azot altina yerlestirildi. LCMS (Sistem D): tm = 2.70dak.; MH+ = 391 Benzer sekilde hazirlanan bir numune (1.7g) etil asetat (yaklasik olarak 50m1) `üzerinden yenideii kristallendirildi. Kristaller t0p1andi, buzda sogutulmus etil asetat (15ml) ile yikandi ve baslikta adi geçen bilesigi krem rengi kristalize bir kati seklinde (1.33g) vermek üzere 3 saat, 50°C°de vakumda kurutuldu Erime noktasi baslangici (DSC): 207.40C (bakiniz Sekil. 2) XRPD: (bakiniz Sekil 1 ve Tablo 1) Örnek 4: 6-Amin0-9-[5-(hekzahidro- lH-azepin- l -i1)pentill-2- { I( 1 8)- l - metilbutilloksi)-7,9-dihidr0-8H-purin-8-0n 2-{[(l S)-1-metilbutil]0ksi}-8 -(meti10ksi)- 1 H-purin-ö-amin trifluoroasetat, l-broino-S-kloropentan ve hekzahidro-lH-azepinden, Referans Örnegi 19°a benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem B): tRET = l.54dak.; MH+ = 405 Referans Örnegi 20: 6-Amin0-2-{[(1S)-l-inetilnropilloksi}-9- 9H-purin-6-a1nin ve piperidinden, Referans Örnegi 257e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): tRET = 2.27dak.; MH+ = 363 Ara inadde 8-n1et0ksi türevi 8-(nietiloksi)-2-{[(lS)-l- metilpropil]oksi} -9-[4-( l -piperidinil)butil]-9H-purin-6-amin numunesi de izole edilmistir. LCMS (Sistem D): tRET = 2.56dak.; MH+ = 377 Referans Örnegi 21: 6-A1nin0-2-H(lS)-l-metilpentil]0ksi} -9- 9-(4-Kiorobutii)-8-(metiioksi)-2-{[(18)-1-metiipentill-°k5i}' 9H-purin-6-amin ve piperidinden, Referans Örnegi 25°e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): tm = 2.72dak.; MH+ = 391 Ara madde 8-1net0ksi türevi 8-(metiloksi)-2-{[(1S)-1- metilpentil]oksi } -9-[4-(1 -piperidinil)butil]-9H-purin-6-amin numunesi de izole edilmistir. LCMS (Sistem D): tRET = 3.01 dak.; MH+ = 405 piperidinil)-pentill-7,9-dihidr0-8H-purin-8-on 9-(5-Klor0pentil)-2-[( l -metiletil)0ksi]-8-(metiloksi)-9H-purin- 6-an1in ve piperidinden, Referans Örnegi 25"e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): tm = 2.18dak.;MH+ = 363 Ara madde 8-met0ksi türevi 2-[(l-meti1etil)0ksi]-8- (inetiloksi)-9-[5-(l-piperidinil)pentil]-9H-purin-6-amin nuinunesi de izole edildi. LCMS (Sistem D): tm = 2.43dak.; MH+ = 377 Referans Örnegi 23: 6-Amin0-2-(Siklobutiloksi)-9-[4-(l- piperidinil)butill-7,9-dihidr0-8H-purin-8-on 9-(4-Klorobutil)-2-(siklobutiloksi)-8-(metiloksi)-9H-purin-6- amin ve piperidinden, Referans Örnegi 25,e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): tRET = 2.24 dak.; MH+ = 361 Ara madde 8-met0ksi türevi 2-(siklobutiloksi)-8-(metiloksi)-9- LCMS (Sistem D): tm = 2.49 dak.; MH+ = 375 Referans Örnegi 24: 6-A1nin0-2-(Siklopentiloksi)-9-[4-(1- piperidinil)butill-7,9-dihidr0-8 H- purin-S-on 9-(4-Klorobutil)-2-(siklopenti10ksi)-8-(metiloksi)-9H-purin-6- amin ve piperidinden, Referans Örnegi 25,e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): tRET = 2.38dak.; MH+ = 375 Ara madde 8-met0ksi türevi 2-(siklopentiloksi)-8-(metiloksi)- 9-[4-(l-piperidinil)butil]-9H-purin-6-amin numunesi de izole edildi. LCMS (Sistem D): tm = 2.64dak.; MH+ = 389 Referans Örnegi 25: 6-Amin0-2-(Siklohekziloksi)-9-[4-(l- piperidini1)butill-7,9-dihidro-8H-purin-S-on (siklohekziloksi)-8-(metiloksi)-9H-purin-6-amin (0. l 03 g, ve piperidinin ( içindeki karistirilan çözeltisine ilave edildi. Sonuçta meydana gelen karisim, 20 saat süreyle 80°C°de isitildi, bu sirada LCMS iki ürünün olusuinunu gösterdi, bunlardan biri klorürün piperidin ile degistigine tekabül ediyordu ve ikincisi ise 8-metoksi parçasinin es zamanli hidrolizine karsilik geliyordu. Reaksiyon karisimi diklorometan (6ml) ve su (6ml) arasinda partisyone edildi ve fazlar hidrobromik cain tozu kullanilarak ayrildi. Çözücü organik fazdan azot akisi altinda yerlestirme ünitesinde uzaklastirildi ve bakiye 1:l MeOH:DMSO (2ml) içinde çözündürüldü ve baslikta adi geçen bilesigi beyaz renkli bir kati halinde (16.6mg) vermek üzere kütle yönlendirmeli oto-hazirlama yoluyla (Yöntem A) ayrildi. LCMS (Sistem D): tRET = 2.53dak.; MH+ = 389 Ara madde 2-(siklohekziloksi)-8-(metiloksi)-9-[4-(1- piperidinil)buti1]-9H-purin-6-amin de renksiz bir kati seklinde izole edildi (55.2mg). LCMS (Sistem D): tm = 2.80dak.; MH+ = 403 Referans Örnegi 26: 6-An1ino-2-{ [( lR)-1-metilbutillaminol-9- 9-(4-Klorobutil)-N2-[(IR)-1-metilbuti1]-8-(metiloksi)-9H- purin-2,6-diamin ve piperidinden, Referans Örnegi 25'e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): tRET = 2.47dak.; MH+ = 376 Ara madde 8-1net0ksi türevi NZ-[(lR)-1-metilbutil]-8- (metiloksi)-9-[4-(l -piperidinil)butil]-9H-purine-2,6-diamine numunesi de izole edildi. LCMS (Sistem D): tm = 2.76dak.; MH+ = 390 Referans Örnegi 27: 6-Amino-2-H( lS)-l-metilbutillaminol-9- 9-(4-klor0butil)-N2-[(l S)-l -metilbutil]-8-(metiloksi)-9H- purine-2,6-diamin ve piperidinden, Referans Ornegi 25"e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): iRET = 2.47 dak.; MH+ = 376 Ara madde 8-met0ksi türevi NZ-[(lS)-l-metilbutil]-8- (inetiloksi)-9-[4-(l-piperidinil)butil]-9H-purin-2,6-dia1nin nuinunesi de izole edilmistir. LCMS (Sistem D): tRET = 2.76 dak.; MH+ = 390 Örnek 5: 6-Amin0-2- { I( 1 S)-l -metilbutilloksi } -9-[3-( l - piperidinihpropill-7,9-dihidr0-8H-purin-8-0n 9H-purin-6-amin ve piperidinden, Referans Örnegi 25°e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): tRET = 2.52 dak.; MH+ = 363 Ara madde 8-met0ksi türevi 2-{[(l S)-l-metilbutil]0ksi}-8- (metiloksi)-9-[3-(l-piperidinil)pr0pil]-9H-purin-6-a1nin numunesi de izole edilmistir. LCMs (Sistem D): tRET = 2.87 dak.; MH+ = 377 Referans Örnegi 28: 6-Amin0-2-{[( lS)-l-inetilpropilloksi}-9- 8-(meti10ksi)-2-{[(lS)-l-metilpropil]0ksi}-9-[5-(1- piperidinil)pentil]-9H-purin-6-aminden, Referans Örnegi l°e benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem D): tRET = 2.39 dak; MH+ = 377 Referans Örnegi 29: 6-Amjno-Z-(butiloksi)-9-[3-( l - piperidinil)propil]-7,9-dihidr0-8H-purin-S-on 2-(Buti10ksi)-8-(metiloksi)-9- [3 -( l -piperidinil)pr0pil]-9H- purin-6-aminden, Referans Örnegi 1,6 benzer sekilde hazirlandi. LCMS (Sistem B): tm = 1.23 dak; MH+ = 349 Polimorfizm X-isini toz kirinimi (XRPD) ve ayrimsal taramali kalorimetri (DSC) 6-amjno-2- {[(l S)-l-metilbutil]oksi} -9-[5-(1-piperidinil)pentil]- 7,9-dihidro-8H-purin-8-on üzerinde asagidaki yöntemlere uygun sekilde gerçeklestirildi. XRPD verileri, X'Celerator detektör ile donatilmis olan PANalytical X'Pert Pro toz kirinim ölçerde / difraktometrede edinildi. Edinim kosullari su sekildeydi: isin: Cu Ka, jeneratör gerilimi: 40 kV, Numune birkaç miligram numune Si plaka (sifir geçmis) üzerine monte edilerek hazirlandi, bu da ince bir toz tabakasi ile sonuçlandi. Karakteristik pik pozisyonlari ve hesaplanan d-araliklari Tablo l"de özetlenmistir. Bunlar, Highscore yazilim kullanilarak ham verilerden hesaplanmistir. Pik pozisyonlarindaki deneysel hata yaklasik olarak ±0.1° 29 seklindedir. Bagil pik yogunluklari, tercih edilen oryantasyona bagli olarak degisiklik gösterecektir. purin-8-on°un kati haldeki sekli için karakteristik XRPD Pik Pozisyonlari 26 " d-araligi / Ã .0 17.6 .0 8.8 12.7 7.0 13.5 6.5 13.8 6.4 16.6 5.3 18.9 4.7 .0 4.4 22.2 4.0 23.3 3.8 24.2 3.7 26.1 3.4 6-Amino-2-{[(l S)-1-metilbutil]oksi}-9-[5-(1- piperidinil)pentil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-on,un 'Örnek niteligindeki bir XRPD difraktogrami, Sekil `1 "de gösterilmektedir. DSC termogrami, TA Instruments kaloriinetre kullanilarak elde edildi. Numune alüminyum kap içine tartildi, üstüne bir kapak yerlestirildi ve kap kapatilmaksizin hafifçe engellendi. Deney 10°C dakika'1 isitma hizi kullanilarak gerçeklestirildi. 6-Amin0-2-{[(1S)-1-metilbutil]0ksi}-9-[5-(1- piperidinil)penti1]-7,9-dihidro-8H-purin-8-Oniun 'Örnek niteligindeki bir DSC termogrami Sekil 2"de gösterilmektedir. Biyolojik Veriler Tarifnamenin bilesikleri, asagidaki tayinlere veya benzer tayinlere uygun sekilde in vitro biyolojik aktivite açisindan test edilmistir: Kriyo-korumali Insan Periferal Kan Tek çekirdekli Hücreleri (PBMCler) kullanilarak Interferon-oc"nin Indüksiyonu için Tayin Bilesiklerin Hazirlanmasi Bilesikler DMSO içinde çözündürüldü. DMSO ile seri halde 2 misli seyreltmeler hazirlandi ve 384 kuyucuklu saydam Greiner polipropilen plaklar içine 0.25 ul dagitildi. PBMClerin Hazirlanmasi 200 m1"ye kadar kan numuneleri, saglikli insan donörlerden elde edildi. 25 ml hacimli tam kan, Leucosep tüplerde 15 m1 Ficoll gradyanlari üzerine yayildi ve 1000 g°de 20 dakika süreyle santrifü je edildi. Plazina / histopak ara yüzündeki banttaki hücreler dikkatle çikartildi ve iki kere PBS ile yikandi (5 dakika süreyle 400 g"de toplanmak üzere santriiüje edildi). Nihai pellet dondurma vasati (%90 hücre/ml konsantrasyona süspanse edildi. Süspanse edilen hücreler, daha sonra hiz kontrollü bir dondurucu kullanilarak kriyo-koruma altina alindi (donduruldu) ve 4 aya kadar -140°C°de saklandi. Interferon-a için Inkübasvon ve Tayin Tayinden hemen önce, kriyo-korumali (dondurulmus) PBMClerin flakonlari, 37°C,de bir su banyosu içinde hizla çözündürüldü. Hücrelerin tripan mavisi içindeki 1:10 seyreltmesi hazirlandi ve sayildi. PBMCler daha sonra üreme vasati [%10 inek fetüsü serumu (invitrogen), Penisilin + Streptovadin (Gibco kat. # insan IFN-gama (Preprotech katalog #300-02) içeren RPMI 1640] içinde 1x106 hücre/ml yogunluga seyreltildi ve 50 ul/kuyucuk, 0.25/ ul DMSO veya 0.25/u1 DMSO içinde test bilesigini içeren 384 kuyucuklu saydam Greiner polipropilen plaklar içine dagitildi. Bilesigin en üst nihai konsantrasyonu tipik bir sekilde 50 uM veya 5 uM idi (oldukça yüksek oranda aktif bilesiklere uyan egrinin elde edilmesi için). Plaklar 24 saat süreyle, 37°C°de, %5 C02 içinde inkübe PBMC yüzer tabakalari içindeki lFN-a"yi kantifiye etmek üzere çok izoformlu immün tayin kullanildi. Insan IFN-a"ya (katalog numarasi 31101, Stratech Scientific) karsi tavsan poliklonal antikoru, tayin tamponu (%10 inek fetüsü serumu içeren RPMI 1640, Discovery) tek bir küçük spot 384 kuyucuklu GAR (keçi anti-tavsan antikoru kapli) plagm her bir kuyucuguna 20 pl ilave edildi. Plak 1 saat süreyle oda sicakliginda, siddetli çalkalama ile inkübe edildi. PBS ile üç yikamanin ardindan, hücre yüzer tabakasinin 20 u1°si, plagin her bir kuyucuguna ilave edildi. Plak daha sonra 1 saat süreyle oda sicakliginda siddetli çalkalama ile inkübe edildi. IFN-oüya bir çift Scientific) sülfo-TAG (MSD) ile isaretlendi, tayin tamponu içinde 121000 seyreltildi ve plagin her bir kuyucuguna 20 ul ilave edildi. Plak ayrica 1 saat süreyle oda sicakliginda siddetli çalkalaina ile inkübe edildi. PBS ile üç yikamanin ardindan, 30 ul X2 T tamponu (MSD) her bir kuyucuga ilave edildi ve plak, MSD Sector 6000 plak okuyucusunda okundu. Veriler 1 uM resikimod (n = 16) ve DMSO (n = 16) dahili plak kontrollerine norinalize edildi. pEC50 degerleri, test bilesiklerinin iki misli seri seyreltinesinden, 11 noktadan, ActivityBase°de IRLS ile 4 parametreli egri uydurmasiyla türevlendirildi. Referans Ornekleri 1 ila 30 ve Örnekler 1 ila 4, ortalama pEC50 5.5 sahipti. Taze Insan Periferal Kan Tek cekirdekli Hücreleri (PBMCler) kullanilarak Interferon-OL ve TNF-(x Indüksiyonu için Tayin Bilesik Hazirlanmasi Bilesikler DMSO içinde çözündürüldü ve 100X gereken konsantrasyon araligini vermek üzere Bioinek 2000 kullanilarak seri sekilde seyreltildi. 1 ul test bilesigi, Biomek FX kullanilarak 96 kuyucuklu kültür plaklarina aktarildi. Her bir bilesik, her bir donör için ikili sekilde tayin edildi. Her bir plak standart olarak TLRagonisti resikimodun seyreltme serilerini içeriyordu ve Kolon 11, 200 uM resikimodun 1 aksini içeriyordu (2 uM nihai konsantrasyon verir, resikimoda yaklasik maksiiiial cevabi taniiiilaiiiak üzere kullanildi). PBMClerin Hazirlanmasi Iki insan donörden kan numuneleri, sodyum heparin (10 U/ml) içinde toplandi. Tam kanin 25 ml hacimleri, 20 dakika süreyle 800 g°de santrifüje edilen leucosep tüplerde 15 m1 Histopak üzerine yayildi ve plazma / histopak ara yüzündeki banttaki hücreler dikkatle çikartildi. Toplanan hücreler 2500 rpm'de 10 dakika süreyle santrifü je edildi ve pellet 10 ml vasat (RPMI , %10 h/h inek fetüsü serumu (FCS, düsük endotoksin) 100 U/ml penisilin G, 100 tig/ml streptomisin, 10 mM L-glutamin ve 1)( esansiyel olinayan amino asitler ile takviye edilmistir) içinde yeniden SÜSpanse edildi. Hücrelerin 1:20 seyreltmesi, tripan mavisi kullanilarak hazirlandi ve hücreler hematositometre kullanilarak sayildi. PBMCler 2x106/ml nihai konsantrasyon vermek üzere seyreltildi ve bu hücre süspansiyonunun 100 ul"si, l nl seyreltilmis test bilesigi içeren kuyucuklara ilave edildi. Interferon-a ve TNF-a için Inkübasvon ve Tayin Hücre preparatlari, Biomek FX kullaiiilarak yüzer tabakanin bir numunesi uzaklastirildiktan sonra 24 saat süreyle (37°C, %95 hava, kimyasal lüminesans tayin platformu kullanilarak hem IFN-oi hem de TNF-OL için tayin edildi. IFN-oi tayini yukarida tarif edilene benzer sekilde yapildi. TNF-a tayini kit talimatlarina (Kat. No. K] 11 BHB) uygun sekilde gerçeklestirildi. Serbestlenen sitokin 2 uM resikimod kontrolünün (kolon ll) yüzdesi seklinde ifade edildi. Bu yüzde, bilesik konsantrasyonuna karsi grafige isaretlendi ve cevap açisindan pECSO, lineer olmayan en az kareler egri uydurma yoluyla tayin edildi. lFN-oi cevaplari için genellikle 4 parainetreli lojistik model seçildi. Açik maksimum cevabin elde edildigi TNF cevaplari için (diger bir deyisle, cevapta iyi tanimlanmis bir plato gözlendi), genel olarak 4 parametreli model kullanildi. Eger egrinin üstteki asimptotu iyi tanimlanmamissa, bu durumda egri uydurma genellikle %100°lik inaksimal cevap (diger bir deyisle, 2 uM resikimoda cevaben) veya eger bu resikimod cevabindan daha yüksekse, test edilen en yüksek konsantrasyona cevap ile kisitlandi. Bazi egriler sitokinlerin biri veya her ikisi için can seklindeydi ve can seklindeki cevabin asagi egimi üzerindeki sitokin verileri (diger bir deyisle, maksimal cevabi veren yukaridaki konsantrasyonlar) ekseriyetle pik cevabin hemen üzerindeki konsantrasyonun istisna tutulmasiyla genellikle egri uydurmadan hariç birakildi. Egri uydurma bu nedenle doz cevap egrisinin çikan egimi üzerinde konsantre oldu. TR TR TR TR TR TR TR TR TR TR