TR201809351T4 - Nörolojik bozuklukların baklofen ve akamprosat tabanlı terapisi. - Google Patents

Nörolojik bozuklukların baklofen ve akamprosat tabanlı terapisi. Download PDF

Info

Publication number
TR201809351T4
TR201809351T4 TR2018/09351T TR201809351T TR201809351T4 TR 201809351 T4 TR201809351 T4 TR 201809351T4 TR 2018/09351 T TR2018/09351 T TR 2018/09351T TR 201809351 T TR201809351 T TR 201809351T TR 201809351 T4 TR201809351 T4 TR 201809351T4
Authority
TR
Turkey
Prior art keywords
baclofen
acamprosate
combination
drug
composition according
Prior art date
Application number
TR2018/09351T
Other languages
English (en)
Inventor
Cohen Daniel
Chumakov Ilya
Nabirochkin Serguei
Vial Emmanuel
Guedj Mickaël
Original Assignee
Pharnext
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pharnext filed Critical Pharnext
Publication of TR201809351T4 publication Critical patent/TR201809351T4/tr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
    • A61K31/137—Arylalkylamines, e.g. amphetamine, epinephrine, salbutamol, ephedrine or methadone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
    • A61K31/138—Aryloxyalkylamines, e.g. propranolol, tamoxifen, phenoxybenzamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/145—Amines having sulfur, e.g. thiurams (>N—C(S)—S—C(S)—N< and >N—C(S)—S—S—C(S)—N<), Sulfinylamines (—N=SO), Sulfonylamines (—N=SO2)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/164—Amides, e.g. hydroxamic acids of a carboxylic acid with an aminoalcohol, e.g. ceramides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A61K31/196—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino group being directly attached to a ring, e.g. anthranilic acid, mefenamic acid, diclofenac, chlorambucil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/27—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carbamic or thiocarbamic acids, meprobamate, carbachol, neostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/325—Carbamic acids; Thiocarbamic acids; Anhydrides or salts thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A61K31/4045—Indole-alkylamines; Amides thereof, e.g. serotonin, melatonin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/42—Oxazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/428—Thiazoles condensed with carbocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/64—Sulfonylureas, e.g. glibenclamide, tolbutamide, chlorpropamide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/02—Muscle relaxants, e.g. for tetanus or cramps
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A61K9/2004—Excipients; Inactive ingredients

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Mevcut buluş, nöronal hücrelerin iskemik veya hipoksik olaylardan korunması için yeni bileşimler ve yöntemlerle ilgilidir. Daha kesin olarak, bu buluş, nöronal hücreleri iskemi veya hipoksiden etkili bir şekilde koruyan yeni kombinatoryel terapileri sağlamaktadır.

Description

TEKNIK ALAN Mevcut bulus, nörolojik hastalllîlar ve bozukluklarEtedavisi için uygun kombinasyonlar ile ilgilidir. Daha spesifik olarak, mevcut bulus, Baklofen ve Akamprosat kombinasyonuna dayalEl olarak nörolojik bozukluklar yeni kombinasyonel terapisi ile ilgilidir. ÖNCEKI TEKNIK Alzheimer hastallgllîaAD), kortikal iliskilendirme alanlarII dahil olmas. atfedilebilen, disfazi (konusma bozuklugu ve konusma anlasllfna bozuklugunun oldugu dil bozuklugu), dispraksi (motor veya sensör engellerin olmadigEldurumIarda belli amaçIElhareketler ve mimikleri koordine ve ifa edememe), ve agnozi (nesneleri, kisileri, sesleri, sekilleri veya kokularlZl tanIia kabiliyeti) ile birlikte haflîla eksikligi ile karakterize olan prorotipik kortikal demanstlEI Spastik paraparez (bacaklarßtkileyen zaylîliilZD gibi özel semptomlar da dahil olabilir (1-4). Alzheimer hastal[g]l:linsidansl:Iyas ile birlikte dramatik olarak artmaktadlü AD halihazRla demansI en yaygI nedenidir. Bu, son asamadaki hastalarElyavas yavas yataga baglü idrarIEltutamaz ve ev içi bakIia bagIilEIhale getiren kognitif fonksiyonun global bir bozulmasüile klinik olarak karakterize olmaktadB Ölüm teshisten ortalama 9 yiüsonra gerçeklesir (5). AD'nin insidans oranEyas ile birlikte dramatik olarak artmaktadlEl Birlesmis Milletler nüfus tahminleri, 80 yas üzeri insanlar. say-I 2050 yi kadar 370 milyona yaklasacaglîl tahmininde bulunmaktadlü Halihazlûla 85 yas üzerine hastalarI 0/0 50'sinde AD bulundugu tahmin edilmektedir. Bu nedenle, dünya çapIia önümüzdeki 50 ylDiçinde 100 milyondan fazla insan demanstan sikayetçi hale gelecektir. Sürekli bakir ve diger hizmetlere ihtiyaç duyan insanlar. fazla sayiîÇl medikal, parasal ve insan kaynaklarIElciddi bir sekilde etkileyecektir (6). Haflîla kaybühastalilîl ilk özelligidir ve episodik bellegi içermektedir (günlük olaylarI bellegi) Semantik bellek (sözsel ve görsel anlam bellegi ) hastaligi. daha sonraki asamalarlda söz konusudur. Bunun aksine, çallgma bellegi (bilgilerin geçici depolanmasül'e manipüle edilmesi için kullanllân yapilârül'e prosesleri içeren klgla süreli bellek) ve prosedürel bellek (becerilerin ve prosedürlerin uzun süreli bellegi olan bilinçsiz bellek) geç döneme kadar korunmaktadlü HastalilZl ilerlediginde, dil bozuklugu, görsel alglglal ve uzamsal eksiklikler, agnoz ve apraksi gibi ilave özellikler ortaya çlKlnaktadlB Alzheimer hastallgiII klasik özelligi, vakalarliîl yaklaslß % 80'inde kimlik tanIiIamas. izin verecek düzeyde karakteristiktir (7). Her halükarda, klinik heterogenite gerçeklesmektedir ve bu sadece klinik yönetim için önemli olmakla kalmamakta, aynlîamanda islevsel olarak farkIEl formlar (8) için spesifik medikasyon tedavilerinin önemini ortaya koymaktadlü AD'nin patolojik aylîli edici özelligi, beta-amiloit (Abeta), Tau içeren nörofibriler dügümler (NFT) ve nöronal ve sinaptik disfonksiyon ve kaybülçermektedir (9-11). Son on yIa, AD'nin nedenine iliskin iki ana hipotez önerilmistir: Nöro-dejeneratif prosesin, Amiloit PRekürsör Proteininin (APP) (12) anormal islemesi ile tetiklenen olayla serisi oldugunu belirten "amiloit basamak hipotezi" ve sitoskeletal degisikliklerin tetikleyici olaylar oldugunu öneren "nöronal sitoskeletal dejenerasyon hipotezi" (13). AD'nin ilerlemesini açllZlayan en yayg kabul edilmis teori amiloit basamak hipotezidir (14-16) ve AD arastlîilnacilârßsas olarak Abeta proteinleri ile iliskili toksikligin arka planIaki mekanizmalarüiespit etmeye odaklanmlstlEI Mikrovasküler geçirgenlik ve yeniden modelleme, aberans anjiyogenez ve kan beyin bariyeri klEllIhale amiloit basamag Ia (17) APP toksikligine katkElsaglayan kilit olaylar olarak tanIiIanmlStB Bunun aksine, Tau proteini, temel ve pratik endiselere baglEIoIarak amiloide klýlasla farmasötik endüstrisinden çok daha az dikkat çekmistir. AyrlEla, sinaptik yogunluk degisikligi, diger ikisine klýlasla kognitif bozulma ile en iyi korelasyona sahip olan patolojik lezyondur. Çallglnalar, amiloit patolojisinin, kolinerjik terminallerin en hassas gözüktügü bir nörotransmitör spesifik sekilde ilerledigini ve bunun arkasIan glutamaterjik terminaller ve nihai olarak GABAerjik terminallerin (11) geldigini göstermistir. Glutamat, memeli sinir sisteminde en bol bulunan eksitatör nörotransmitördür. Patolojik kosullar aItIa, sinaptik yarlEta anormal birikmesi, glutamat reseptörlerinin fazla aktivasyonuna neden olmaktadlE (18). Sinaptik yariEta glutamat. anormal birikmesi, glutamat reseptörlerinin fazla aktivasyonuna neden olmaktadlüve bu da patolojik prosesleri ve nihai olarak nöronal hücre ölümünü netice vermektedir. Eksitotoksisite ad Ellerilen bu proses, akut ve kronik nörolojik bozukluklar süs-a nöronal dokularda yaygIoIarak gözlenmektedir. SurasElgiderek açllZl hale gelmektedir ki eksitotoksisite, sunlar gibi bir çok farklElçokIu bozuklugun patogenezine dahildir: Omurilik yaralanmasÇlfelç, travmatik beyin yaralanmasÇl isitme kaybÇlalkolizm ve alkol çekilmesi, alkolik nöropati veya nöropatik agrlZlve diger nörodejeneratif bozukluklar, örnegin multiplDskIeroz, Alzheimer hastallglüAmiyotrofik Lateral Skleroz, Parkinson hastalIglElve Huntington hastallglEl(19-21). Bu hastalllîlar için etkili tedavinin gelistirilmesi, bunlarI insidanleb ve aynlanda küratif tedavilerin bulunmamaslüb bagllîcblarak önemli bir kamu sagllglßorunu olarak kalmaktadE NMDA glutamat reseptörlerinin blokerleri ve bazEasetiI-kolinesteraz modülatörleri üzerinde yer alan AD'nin semptomlarIElgelistirmek veya yavaslatmak için iki tür medikasyon kullanllfnaktadlü(26 - 27). Bu reseptörün farklElsahalarIElhedef alan NMDAR antagonistleri, eksitotoksisiteye karsEl durabilme bakIiIan test edilmistir. Rekabetçi olmayan NMDAR antagonistleri, iyon kanallZl gözenegini hedef almakta, böylelikle postsinaptik nöronlara kalsiyum girisini azaltmaktadlEl Bunlardan bazllârüanay durumuna ulasm EtEI Bir örnek olarak, Memantin halihazlEIa orta ile ciddi arsElAlzheimer hastall'gll karsüonaylanmß durumdadlEl Bu klinik olarak, alkol bagIiIHJEIJfaz II), amiyotrofik lateral skleroz (faz III), Parkinson ile iliskili demans (Faz II), epilepsi, Huntington hastalIglEafaz IV), multiplEBkleroz (faz IV), Parkinson hastallglmfaz IV) ve travmatik beyin yaralanmasEl(faz IV) gibi bir eksitotoksiklik bileseninî içeren diger endikasyonlarda test edilmistir. Bu molekül ancak çogu Alzheimer hastalIgIÜhastaslIilçin lellElllZl faydaya sahiptir, çünkü semptomatik etkileri orta düzeydedir. Eksistotoksikligin sIlEliandlEllBias- yönelik diger yaklasIi, gluatamI presinaptik saIIiII inhibite edilmesinden olusmaktadlü Halihazüla amiyotrofik lateral sklerozda onaylanmlglolan Riluzol, iskemi ve travmatik beyin yaralanmaslîtnodellerinde cesaretlendirici sonuçlar göstermistir (22-25). Su anda erken multipllZl skleroz, Parkinson hastallglEl(plaseboya göre daha iyi herhangi bir sonuç göstermemektedir) ve aynElzamanda omurilik yaralanmasIa faz II denemelerinde test edilmektedir. 1995 y-a, ilaç, amiyotrofik lateral sklerozun tedavisi için, 1996 y-a ise Huntington hastalIgIII tedavisi için orfan ilaç durumuna ulasm lgtlü Depresyonun tedavi edilmesi için memantin, felbatam, akamprosat ve MRZ 2/579 gibi NMDA Hama ve ark. (150), nöropatik omuirilik yaralanmaslîagrllârllîgidermek için ketaminle (bir NMDA reseptör antagonisti) birlestirilmis olan baklofenin (bir GABA reseptör agonisti) kullanIiElile ilgilidir. Lyden ve ark (51), serebral iskemiyi müteakip ögrenme ve beyin bölümleri hacmine iliskin MK ile muskimolün (bir GABA-A agonisti) birlesmesinin nöro-koruyucu etkilerini incelemektedirler. Costa ve ark. (52) in vitro baklofen ve muskimolün birlesiminin iskeminin neden oldugu alan potansiyelinin kismi restorasyonuna izin vermekte oldugunu ortaya koymuslardE Zhou ve ark. (53) beyin iskemisini müteakip baklofen ve muskimolün birlesmesinin nörokoruyucu etkisini incelemektedirler. kullanIi için ilaç kombinasyonlarlüçUZIamaktadB Bu alandaki aktif arastûnalara ragmen halen nörolojik bozukluklar için, ve özel olarak glutamat ve/veya amiloit beta toksisitesi ile ilgili nörolojik bozukluklar için alternatif veya iyilestirilmis etkili tedavilere ihtiyaç bulunmaktadlE Mevcut bulus, merkezi sinir sisteminin (CNS) ve periferal sinir sisteminin (PNS) nörolojik hastal[lZlarl:için yeni tedavilere imkan saglamaktadE BU LUSUN ÖZETI Mevcut bulusun amaclîl nörolojik bozukluklar. tedavisi için uygun olan yeni terapötik bilesimler saglamaktß Daha özel olarak, bulus, Baklofenve Akamprosat'I bir kombinasyonuna dayalEloIarak, glutamat ve/veya amiloit beta toksiklik ile ilgili nörolojik bozukluklar tedavi edilmesine uygun bilesimler ile ilgilidir. Bulus, digerlerinin arasIia, bulus sahipleri taraflEdan, Baklofen ve Akamprosat'I kombinasyonunun, Alzheimer hastalarlEb önemli ve beklenmedik faydalar sagladlgJIEl beklenmedik bir sekilde kesfetmesinden kaynaklanmaktadlE AyrlEia, bulus sahipleri sasIlEE bir sekilde sunu kesfetmistir ki bu kombinasyon, glutamat toksisitesini içeren nörolojik bozukluklarda karsilâsüân farkllîl yaralanmalara karsü nöronal hücrelerin önemli ve beklenmedik sekilde korunmasIElsaglamaktlB Böylelikle, Baklofen ve AkamprosatI bu kombinasyonu, nörolojik bozukluklardan sikayet eden, bunlara maruz kalmE olan veya bunlardan sikayetçi oldugundan süphelenilen hastalar için etkili bir tedavi teskil etmektedir. Bu bulusun amacülstemlerde tannlandiglîsekilde bir bilesimle ilgilidir. Özellikle de bu bulus baklofen, veya bunun farmasötik olarak kabul edilebilir tuzunu ve acamprosate veya bunun farmasötik olarak kabul edilebilir tuzunu içeren bilesimlerle ilgilidir. Burada, özellikle AD ile iliskili bozukluklar olmak üzere, multipl skleroz (MS), Amiyotrofik Lateral Skleroz (ALS), Parkinson hastallglZQPD), nöropatiler (nöropatik agrülieya alkolik nöropati gibi), alkolizm veya alkolden uzaklasma, Huntington hastalig]lZl(HD) ve omurilik yaralanmasElgibi nörolojik rahatslZllklarI tedavisinde kullanllBwak üzere, Baklofen ve Acamprosate'in kombinasyonunu içeren bilesimler açllZlanmaktadlE Bulusun bilesimi, tek aktif muhteviyat olarak Baklofen ve Akamprosat içerebilir. Alternatif olarak, bilesimler ilave aktif muhteviyattan olusabilir. Bu baglamda, bu bulusun diger bir amacÇl Baklofen, Akamprosat ve Sulfisoksazol, Methimazol, Prilokain, Difillin, Kinakrine, Karbenoksolon, Aminokaproik asit, Kabergoline, Dietilkarbamazin, Sinakalset, Sinnarizin, Eplerenon, Fenoldopam, Leflunomit, Levosimendan, Sulodeksit, Ter-binafine, Zonisamit, Etomidat, Fenformin, Trimetadizin, Meksiletine, Ifenprodil, Moksifloksasin, Bromokriptine veya To-rasemitten seçilen en az bir üçüncü bilesikten olusan, ihtiyaç duyan bir denekteki nörolojik bozuklugun tedavisinde kullanIi için bir bilesim ile ilgilidir. Mevcut bulusta daha ayrEtlIJII olarak ele alicagügibi, bulusun bir kombinasyonel terapisindeki bilesikler, denege es zamanIEblarak, ayrEblarak, sElEblarak ve/veya tekrarlEl olarak uygulanabilir. Mevcut bulus, yukari tanIilandEglEgibi, örnegin en az iki bilesigin bir kombinasyonunu içeren herhangi bir farmasötik bilesimle ilgilidir. Bulusun bilesimleri tipik olarak ayrlîla bir veya daha fazla farmasötik olarak kabul edilebilir eksipiyian veya taslsîlîlâbn olusmaktadE AyrlEla, mevcut bulusta kullanllân bilesikler bir tuz, hidrat, asit, rakemat veya izomer formunda olabilir. Bunlar ayrlEla sürekli salIi formülasyonlarEliormunda da olabilir. Bilesiklerin ön-ilaçlarülreya türevleri de kullanlEibilir. Tercih edilen bir yapllândlüinada, bilesik bu sekilde veya bir tuz, hidrat veya bunun sürekli salIi formunda kullanIJJE Mevcut bulusta kullanIi için özellikle tercih edilen bir tuz Akamprosat kalsiyumdur. Burada ayrlEia, bir farmasötik bilesimin halebnmasII bir yöntemi açllZlanmaktadlEIve yöntem, Baklofen ve Akamprosatübir farmasötik olarak kabul edilebilir eksipiyian veya taslýlElElh karlStEllßîasIan olusmaktadlü Burada ayrlEla ihtiyaç duyan bir memeli denekte, tercihen ihtiyaç duyan bir insan denekte bir nörolojik bozuklugun tedavi edilmesi için bir yöntemde kullanIi için bir bilesim açllZlanmaktadlElve yöntem söz konusu denege, bulusun bir kombinasyonunun bir etkili miktarII verilmesinden olusmaktadE Burada ayrlîla ihtiyaç duyan bir memeli denekte, tercihen ihtiyaç duyan bir insan denekte Alzheimer veya ilgili bozuklugun tedavi edilmesi için bir yöntemde kullan! için bir bilesimi açlKIanmaktadlEl ve yöntem söz konusu denege, bulusun bir kombinasyonunun bir etkili miktarII verilmesinden olusmaktadlEI Burada ayrlîia ihtiyaç duyan bir memeli denekte, tercihen ihtiyaç duyan bir insan denekte bir nörolojik bozuklugun tedavi edilmesi için bir yöntemde kullann için bir bilesimi açlElanmaktadlElve yöntem söz konusu denege, Baklofen ve Akamprosat& bir etkili miktarlElE es zamanllZl ayrEIveya sßlüolarak verilmesinden olusmaktadE Burada ayrlîa ihtiyaç duyan bir memeli denekte, tercihen ihtiyaç duyan bir insan denekte Alzheimer veya bir ilgili bozuklugun tedavi edilmesi için bir yöntemde kullanIi için bir bilesimi açlKlanmaktad lElve yöntem söz konusu denege, Baklofen ve Akamprosat. bir etkili miktarII es zamanlüayrüveya sülüolarak verilmesinden olusmaktadlü Burada herhangi bir memeli denekte, tercihen herhangi bir insan deneginde, hastal[g]I herhangi bir asamasIa, bir nörolojik bozuklugun tedavi edilmesi için kullanliâbilen bir tedavi açiklanmaktadlîl Örneklerde açManacagEgibi, bulusun bilesimleri, söz konusu deneklerin patolojik durumunu hafifletebilmektedir. SEKILLERIN KISA AÇIKLAMASI Sekil 1: Ilaç taramasEliçin kullanllân endoteliyal hücreler üzerinde insan ßamiloitinin toksikliginin deneysel modelinin dogrulanmasü 10 nM'de bir saatlik VEGF ön tedavisi, bu amiloit yaralanmasIan kapiler agEönemli ölçüde korumustur (amiloit intoksikasyonu ile karsllâst-[gllütla kapiler agI +%70'i). Sekil 2: Meta amiloit ile intoksike edilmis HBMEC kültürlerinde kapiler agI toplam uzunlugu üzerinde Baklofen (BCL) ve Akamprosat (ACP) kombinasyon terapisinin etkisi. Insan amiloit peptiti (Aß1-42 2.5uM) önemli ölçüde intoksikasyon üretir ve bu araç ile tedavi edilen hücrelere klýbsla % 40'. üzerindedir. Bu intoksikasyon, Akamprosat ve Baklofen (A)'in kombinasyonu ile önemli ölçüde önlenmektedir ve burada, bu konsantrasyonlarda, Akamprosat (B) ve Baklofen (C) tek basEl intoksikasyon üzerinde önemli bir etkiye sahip araçtan önemli ölçüde farklIlEl "ns" herhangi bir önemli etki yoktur (ANOVA + Dunnett Post- Hoc testi). Sekil 3: Meta amiloit ile intoksike edilmis HBMEC kültürlerinde kapiler agI toplam uzunlugu üzerinde Baklofen (BCL) ve Terbinafin (TBN) kombinasyon terapisinin etkisi. Insan amiloit peptiti (Aß1-42 2.5uM) önemli ölçüde intoksikasyon üretir ve bu araç ile tedavi edilen hücrelere klýbsla % 40'I üzerindedir. Bu intoksikasyon, Terbinafin ve Baklofenin kombinasyonu ile önlenmektedir. *: p<0.05: Kontrolden önemli ölçüde farklIlEl (intoksikasyon yok). Sekil 4: Ilaç taramasEiçin kullanllân nöronal hücreler üzerinde insan pamiloit toksikliginin deneysel modelinin dogrulanmaslZlBir saatlik Estradiol ( ön tedavisi, nöronlarlîlbu amioit yaralanmasIdan (-94%) önemli ölçüde korumustur ve bu nöro koruma için bir pozitif kontrol olarak degerlendirilmektedir. *: p<0.05: Kontrolden önemli ölçüde farklIlEl(intoksikasyon yok). 9: p<0.05, bu Aß1-42 intoksikasyonunun önemli ölçüde farkIIIB Sekil 5: Fare primer kortikal hücreleri üzerinde insan Aß1.42 toksikliginde LDH salIiIIlizerinde Akamprosat (ACP) ve Baklofen (BCL) kombinasyon terapisinin etkisi. Insan amiloit peptiti (Aßi-42 10pM) bu araç ile tedavi edilen nöronlara kis-:asla önemli ölçüde intoksikasyon üretir. Bu intoksikasyon, Akamprosat ve Baklofen (A)' In kombinasyonu ile önemli ölçüde önlenmektedir ve burada, bu konsantrasyonlarda, Akamprosat (B) ve Baklofen (C) tek baslâl intoksikasyon üzerinde önemli bir etkiye sahip degildir: 9: p<0.05, bu %112 intoksikasyonunun önemli ölçüde farklIE*: p<0.05, araçtan önemli ölçüde farklIEj "ns" belirgin etki bulunmamaktadE (ANOVA + Dunnett Post-Hoc testi). Sekil 6: Fare primer kortikal hücreleri üzerinde insan Aß1.42 toksikliginde LDH salIiIIilizerinde sinakalset (CNC) and Sulfisoksazol (SFX) kombinasyon terapisinin etkisi. Insan amiloit peptiti (Aßi-42 IOpM) bu araç ile tedavi edilen nöronlara klýlasla önemli ölçüde intoksikasyon üretir. Bu intoksikasyon, sinakalset and Sulfisoksazol kombinasyonu ile önlenmektedir. *: p<0.05, araçtan önemli ölçüde farkIIlîj Sekil 7: Meta amiloit ile intoksike edilmis kortikal nöronlarda nöritler agI toplam uzunlugu üzerinde Akamprosat (ACP) ve Baklofen (BCL) kombinasyon terapisinin etkisi. Insan amiloit peptiti (Aßi-42 2.5uM) önemli ölçüde intoksikasyon üretir ve bu araç ile tedavi edilen hücrelere klîbsla % 15'I üzerindedir. Bu intoksikasyon, Akamprosat ve Baklofen'in kombinasyonu ile önemli ölçüde önlenmektedir ve burada, bu konsantrasyonlarda, Akamprosat ve Baklofen tek baslâl intoksikasyon üzerinde önemli bir etkiye sahip degildir: 9: p<0.05, bu Aß1-42 intoksikasyonunun önemli ölçüde farklIE*: p<0.05, bu araçtan önemli ölçüde farklIlEl (ANOVA + Dunnett Post-Hoc testi). Sekil 8: Y labirent testi ile tanIilanan, Akamprosat ve Baklofen kombinasyon terapisinin davranlgl üzerindeki etkisi. Amiloit peptit, alternasyon yüzdesi ile ölçüldügü sekilde bilinç üzerinde önemli bir azalma üretmektedir (%53.8 krs % 73.5) Bu zarar verici etki, Akam- prosat (0.2mg/kg/gün) ve Baklofen (3mg/kg/gün)I kombinasyonu ile önemli ölçüde farklIIEl*: p<. Sekil 9: Pasif kaçlEina (kaçma latensisi) ile tanIilanan, Akamprosat ve Baklofen kombinasyon terapisinin bellek üzerindeki etkisi. Amiloit peptiti, kontrol ile karsüâst-lglia, kaçlgl Iatensisi ile ölçüldügünde bellek performanslarIa önemli bir azalmaya neden olmaktadlü Bu zarar verici etki, Akam-prosat (0.2mg/kg) ve Baklofen (3mg/kg). kombinasyonu ile önemli ölçüde engellenir (komple koruma) <: p<0.05, bu Aß25-35 intoksikasyonunun önemli ölçüde farklIlEl*: p<0.05, bu araçtan önemli ölçüde farklIlB (ANOVA + Dunn'stest). Sekil 10: Pasif kaçlöma (step-through latensisi) ile tanIilanan, Akamprosat ve Baklofen kombinasyon terapisinin bellek üzerindeki etkisi. Amiloit peptiti, kontrol ile karsllâst- [gIEtla step-through Iatens ile ölçüldügünde bellek performanslaria %44'ün üzerinde azalmaya neden olmaktadIE Bu zararlEl etki, Akamprosat (0.2mg/kg) ve Baklofen (3mg/kg)in kombinasyonu ile önemli ölçüde önlenmektedir (koruma etkisinin % 78.8'i) öyle ki bu konsantrasyonlarda, Akamprosat ve Baklofen tek bas. intoksikasyon üzerinde düsük bir bu araçtan önemli ölçüde farklIB (ANOVA + Dunnett Post-Hoc testi). Sekil 11: Hippokamüste nöron yogunlugu üzerinde Akamprosat ve Baklofen kombinasyon terapisinin etkisi. Amiloit peptiti,hipp0kamüste milimetre bas. nöronlarII saylgljile ölçüldügü sekilde, kontrole klýasla % 21'in üzerinde önemli bir nöronal yogunluk azalmaslîl üretmektedir. Bu nöronal yaralanma, Akamprosat (0.2mg/kg) ve Baklofen (3mg/kg). kombinasyonu ile önemli ölçüde engellenir (yaralanan nöronlarI %63.2'i korunmaktadlE) <: ölçüde farklIlEl (ANOVA + Dunnett Post-Hoc testi). Sekil 12: Kan beyin bariyeri bütünlügü üzerinde Akamprosat ve Baklofen kombinasyon terapisinin etkisi. Amiloit peptit, kan beyin bariyerini (BBB) etkilemekte ve kontrol ile klýbslandlglia % 51 düzeyinde geçirgenliginde önemli bir artlga neden olmaktadE Kan beyin bariyeri üzerindeki zararlar, Akamprosat (0.2mg/kg) ve Baklofen (3mg/kg)in kombinasyonuna bagllj olarak önemli ölçüde önlenmektedir (bütünlügün o/o 66.6'si bu araçtan önemli ölçüde farklIlîj (ANOVA + Dunnett Post-Hoc testi). Sekil 13: Sinaptofizin konsantrasyonunda yansIIîElsekilde, sinaptik yogunluk üzerinde Akamprosat ve Baklofen kombinasyon terapisinin etkisi. Amiloit peptit, sinaps fonksiyonunu etkilemekte ve beynin sinaptofisin konsantrasyonunda, kontrol ile karsllâst-[gllütla %34'ün üzerinde olmak üzere önemli bir azalmaya neden olmaktadlE Sinaptik yogunluk üzerindeki zararlar, Akamprosat (0.2mg/kg/gün) ve Baklofen (3mg/kg/gün)in kombinasyonuna bagllîl olarak önemli ölçüde önlenmektedir (% 76). o: p<0.05, bu Aß25-35 intoksikasyonunun önemli ölçüde farklIlE*: p<0.05, bu araçtan önemli ölçüde farklIB (ANOVA + Dunnett Post-Hoc testi). Sekil 14: Hippokampüste oksidatif stes üzerinde Akamprosat ve Baklofen kombinasyon terapisinin koruyucu etkisi. Amiloit petit, lipit peroksidasyonu ile ölçüldügü sekilde, hippokampüste oksidatif stersin önemli bir artElEla neden olmaktadlE (kontrol ile karsllâst-[glliîda % 59'un üzerinde). Bu oksidatif stres, Akam-prosat (0.2mg/kg/gün) ve Baklofen (3mg/kg/gün)I kombinasyonu ile önemli ölçüde engellenir (%659) 0: p<0.05, bu Aßzs-35 intoksikasyonunun önemli ölçüde farklIE *: p<0.05, bu araçtan önemli ölçüde farklIlEi (ANOVA + Dunnett Post-Hoc testi). Sekil 15: Nöronal kortikal hücreler üzerinde glutamat toksikligine karsEIBaklofen ve Akamprosat kombinasyon terapisinin etkisi, Baklofen ( kombinasyonu ile önemli ölçüde önlenmektedir ve bu konsantrasyonlarda, Baklofen ve Akamprosat tek baslEb inoksikasyon üzerinde önemli bir etkiye sahip degildir. O: p<0.05, glutamat intoksikasyonundan önemli ölçüde farklIlB (ANOVA + Dunnett Post-Hoc testi). Sekil 16: Y labirent testi ile tanilanan, Donepezil, Akamprosat ve Baklofen kombinasyon terapisinin davranlgl ve kognitif performanslar üzerindeki etkisi. Amiloit peptit, alternasyon yüzdesi ile ölçüldügü sekilde bilinç üzerinde önemli bir azalma üretmektedir (%51,5 krs % 71,8) Bu zararlüatki, Donepezil (0,25mg/kg/day), Akamprosat (32mg/kg/day) ve Baklofen (480mg/kg/day)'un kombinasyonu ile önemli ölçüde önlenmektedir (korumanI % 98'I) ve bu konsantrasyonlarda ilaçlarI önemli bir etkisi bulunmamaktadü <: p<0.01, bu Aß25-35 intoksikasyonunun önemli ölçüde farklIlEl*: p<0.01, bu araçtan önemli ölçüde farklIlB (ANOVA + Dunnett Post-Hoc testi). Sekil 17: Fare primer kortikal hücreleri üzerindeki insan Aß1-42 toksiklik eseylerinde Akamprosat ve türevi Homotaurin ön tedavisinin koruyucu etkisinin karsHâstlEllIl1asElAß1-42, araçla tedavi edilen nöronlar ile karslßst-mgla önemli bir intoksikasyon üretmektedir. Intoksikasyon esit sekilde Homotorin ve Akamprosat (99%, 8nM) taraflEUan belirgin düzeyde önlenmektedir. <: p<0.0001: Aß1-42 intoksikasyonunun önemli ölçüde farklIE Sekil 18: Klinik skor ile ölçüldügü sekilde, kronik progresif deneysel oto-imün ensefalomiyelitisin (EAE) gelismesi Üzerinde Akamprosat ve Baklofen kombinasyon terapisinin etkisi. Imünizasyon, klinik skor ile ölçüldügü sekilde fiziksel özelliklerde önemli bir azalmaya neden olmaktadlB Bu zararIEietki, Akam-prosat (ng/kg/gün) ve Baklofen (30mg/kg/gün)I kombinasyonu ile önemli ölçüde engellenir (p-degeri <0,01) BULUSUN AYRINTILI AÇIKLAMASI Mevcut bulus, nörolojik bozukluklar. tedavisi için uygun olan yeni bilesimler saglamaktadE Bulus, bu hastaliElarI etkili bir sekilde düzeltilmesine izin veren ve herhangi bir memeli denekte kullanüâbilecek yeni ilaç kombinasyonlarlüçilglamaktadlü Bulus merkezi veya çevresel olabilen, özellikle bozukluklar olmak üzere nörolojik bozukluklari tedavi edilmesi için uygun olup, burada sinirler veya nöron rahatslîliElarlZI ßamiloid, BBB bozunmasiîiveya glutamat eksitotoksisitesinin tedavisi ile ilgilidir. Bu tür bozukluklara örneklere nörodejeneratif rahatslîlüîlar, nöropatiler, omurilik yaralanmalarEi/e alkolizm gibi madde istismarüiahildir. Nörodejeneratif bozukluklar, Alzheimer ve ilgili bozukluklar, Amiyotrofik Lateral Skleroz (ALS), MultipEÜSkIeroz (MS), Parkinson Hastal[g]|:I(PD), Huntington HastaliglEi(HD) gibi hastal[lZ]arl:ifade etmektedir ve bunlar fonksiyonlar. progresif bir kaybIlZIve nöronlarI ölümünü içermektedir. Nöropatiler, periferal sinir sisteminin sinirlerinin zarar gördügü durumlarEifade etmektedir ve bu genetik faktörler, inflamatuar hastallklar veya ilaçlarEivincristine, oxaliplatin, etil alkol) içeren kimyasal maddelerin neden oldugu perieral sinir sistemi zararlarlüiçermektedir. Nöropatilerin tedavisi, nöropatik agrII tedavisini de içermektedir. Bulus özellikle AD ve iliskili bozukluklari tedavisi için uygundur. Bu bulusun baglamIa, demansÇl hafif kognitif bozuklugu (MCI), ve yas ile iliskili bellek bozuklugunu (AAMI) içermektedir. Burada kullannlîitibariyle "tedavi" ifadesi, yukar-ki hastaIEKIar veya bozukluklar nedeniyle veya bunlara bagIIZIoIarak ortaya ç[Klan semptomlar. terapisi, önlenmesi, profilaksisi, geciktirilmesi veya azaltHIhasIEIçermektedir. Tedavi terimi özel olarak hastallglül ve iliskili semptomlar. ilerlemesinin kontrolünü içermektedir. Tedavi terimi özel olarak, tedavi edilen deneklerde, Amiloit Beta'nI neden oldugu toksiklige karsEbir korumayÇlveya söz konusu toksikligin azaltllüiaslîlveya geciktirilmesini, ve/veya ii) glutamat eksitotoksiklige karsEbir korumayÇlveya söz konusu toksikligin azaltHBiaslZi/eya geciktirilmesini içermektedir. Tedavi terimi aynEIzamanda nöronal hücrelerin bir korumasIEIveya kognitif semptomlari bir iyilestirmesini ifade etmektedir. Bu bulusun baglamEUahilinde, bir spesifik ilaç veya bilesigin ifadesinden sadece spesifik olarak ismi belirtilen molekül anlasllüiamalüaynüamanda bunun farmasötik olarak kabul edilebilir tuzlarljinlasllüiaIIlEl Akamprosat'I bir biyolojik etkiye neden olmak üzere bir denege birlikte uygulandlgiEbir tedaviyi belirtmektedir. Bu bulusa göre bir birlestirilmis terapide, en az ki ilaç, aynüamanda veya slülüblarak, birlikte veya ayrübir sekilde verilebilmektedir. AyrlEla, en azlEtlan Baklofen ve Akamprosat, farklElrotalar ve protokoller araclügilîila uygulanabilmektedir. Bunun bir sonucu olarak, her ne kadar birlikte formüle edilebilseler de, bir kombinasyonun ilaçlarüyrü olarak formüle edilebilir. Burada kullanIiIZitibariyle "pro ilaç" terimi, mevcut bulusun bir bileseninin herhangi bir islevsel türevini (veya prekürsörünü) ifade etmektedir ve bu, bir biyolojik sisteme uygulandlgilîl zaman, örnegin spontane kimyasal reaksiyon(lar), enzim katalize kimyasal reaksiyon(lar) ve/veya metabolik kimyasal reaksiyon(lar). bir sonucu olarak söz konusu bilesigi üretir. Ön- ilaçlar, genellikle sonuçta ortaya çlElan ilaçtan daha az aktiftir veya aktif degildir ve örnegin, ilacI fizikokimyasal özelliklerini iyilestirmek, ilacElspesifik bir dokuya hedeflemek, ilacI farmakokinetik ve farmakodinamik özelliklerini iyilestirmek ve/veya istenmeyen yan etkileri azaltmak için kullanllâbilir. Pro ilaca yatklEl olan yaygI islevsel gruplardan bazüârüsllîlbma olmakslZEl, karboksilik, hidroksil, amin, fosfat /fosfonat ve karbonil gruplarIElçermektedir. Bu gruplar. modifikasyonu aracllJgIMa tipik olarak üretilen ön-Ilaçlar sIlEllama olmaks- esterleri, karbonatlarÇlkarbamatlarlÇlamitIeri ve fosfatlarElçermektedir. Uygun ön-ilaçlarI seçimi için spesifik teknik rehberlik genel olarak bilinmektedir (29- 33). AyrlEh, ön-ilaçlarI hazlEllanmasüteknikte uzmanlilZl sahibi olan kisiler tarafüdan bilinen geleneksel yöntemlerle gerçeklestirilebilir. Diger ön-ilaçlarElsenezIemek için kullanllâilecek yöntemler konuya iliskin birçok degerlendirmede tarif edilmektedir (30; 34- 40). Örnegin, ArBakIofen Placarbil, ChemID plus Advance veri tabanIda Iistelenmektedir (web sitesi chem.sis.nlm.nih.gov/che midplus/) ve ArBakIofen Placarbil Balofenin iyi bilinen bir pro iIasitlEl(41-42). Bir bilesigin "türevi" terimi, bu bilesigin bir bir asit, amit, ester, eter, asetilatIEl/aryant, hidroksilatIEl/aryant veya bir alkilatlüiaryantüCl-Cö) gibi söz konusu bilesik ile islevsel ve/veya yapgl olarak iliskili herhangi bir molekülü içermektedir. Türev terimi aynüamanda yukari listelenen bir veya daha fazla ikame edene sahip, yaplîlal olarak iliskili bilesigi içermektedir. Örnegin, Homotorin, Akamprosat'I deasetile edilmis türevidir. Bir bilesigin tercih edilen türevleri, bilinen yöntemlerle tespit edildigi sekilde, söz konusu bilesige önemli derecede benzerlige sahip olan moleküllerdir. PubChem (http://Dubchem.ncbi.nlm.nih.ciov/ m1) veya DrugBank (http://www.druqbank.ca/) gibi birçok veri tabanIa bir ana moleküle benzerlik endeksleri ile birlikte benzer bilesikler bulunabilir. Daha tercih edilen bir yapllândlîilnada, türevler, 0.4'ten daha fazla, tercihen 0.5'ten daha fazla, daha tercihen 0.6'dan daha fazla, daha tercihen 0.7'den daha fazla bir ana ilaç ile bir Tanimoto benzerlik endeksine sahip olmalIlEl Tanimoto benzerlik endeksi, iki molekül araleUaki yaplglal benzerlik derecesini ölçmek için yaygI olarak kullanilRiaktadlEl Tanimoto benzerlik endeksi online olarak bulunan Küçük Molekül Alt Grafik Detektörü gibi yaziüüi taraflian edilen türevler, bir ana bilesik ile hem yaplglal hem de islevsel olarak iliskili olmalIlÜ yani bunlar ana ilacI aktivitesinin en az azIan bir klglnIIEtutmaIlÜ daha tercihen AB veya glutamat toksisitesine karslîbir koruyucu aktiviteye sahip olmaIIlE Türev ifadesi aynüamanda genellikle özel enzimatik sistemler araciIJglîla bir organizmaya verildikten sonra söz konusu iIacI islemesi veya (biyokimyasal) m0difikasyon(lar).an kaynaklanan ve Haci bir biyolojik aktivitesini gösteren veya koruyan bir molekül gibi bir ilaci metabolitlerini içermektedir. Metabolitlerin, ana ilacI terapötik eyleminin çogunlugundan sorumlu oldugu açilZJanmIStlEI Bir spesifik yapilândlEInada, burada kullan-[gllîl sekilde bir "metabolit", ana ilacI aktivitesinin en azIan bir klgtnIEtutan, tercihen AB toksikligi veya glutamat toksikligine karsEbir protektif aktiviteye sahip olan bir modifiye edilmis veya islenmis ilaclîgiöstermektedir. olarak toksik olmayan, inorganik veya organik asit ilave tuzunu ifade etmektedir. Farmasötik tuz formasyonu, ilacI bir tuz versiyonunu olusturmak için bir konteryon ile birlikte bir asidik, bazik veya zwitteriyonik ilaç molekülünün çiftlestirilmesinden olusmaktadlE Nötralizasyon reaksiyonunda bir çok çesitli kimyasal tür kullanllâbilir. Bu nedenle bulusun farmasötik olarak kabul edilebilir tuzlarübir baz olarak islev gören ana bilesigin, bir tuz, örnegin asetik asit, nitrik asit, tartrik asit, hidroklorik asit, sülfürik asit, fosforik asit, metan sülfonik asit, kamfor sülfonik asit, oksalik asit, maleik asit, sukkinik asit veya sitrik asit tuzlarElgibi bir tuz olusturmak için bir inorganik veya organik asit ile reaksiyona sokulmasEille elde edilebilenleri içermektedir. Bulusun farmasötik olarak kabul edilebilir tuzlarüiynlâamanda ana bilesigin bir asit olarak Islev gördügü ve örnegin sodyum, potasyum, kalsiyum, magnezyum, amonyum veya kolin tuzlarlîcblusturmak için uygun bir baz ile reaksiyona sokuldugu tuzlarüçermektedir. Her ne kadar belli bir aktif ilkeye sahip tuzlarI çogunlugu biyolojik olarak denk olsa da, bunlardan bazllârüdigerlerinin yeninde, artan çözünürlüge veya biyo elverislilik özelliklerine sahiptir. Tuz seçimi su anda H. Stahl ve C.G Wetmuth tarafIan kitaplarlEUa ögretildigi sekilde ilaç gelistirme sürecinde yaygI bir standart islemdir (45). Tercih edilen bir yapllândlîünada, bir bilesigin belirlenmesi bilesigin özellikle belirlendigi, ve bununla beraber bunun farmasötik olarak kabul edilebilir tuzunun da belirlendigi anlam- gelmektedir. Özel bir yapllândlîilnada, bilesigin bir geciktirilmis saIIi formülasyonu kullanllüiaktadlü Yukarlîlla ele allEtllglEgibi, bulus, nörolojik bozukluklarda söz konusu olan bir çok biyolojik proses üzerinde güçlü bir beklenmedik etkiye sahip olan özel ilaç kombinasyonlarEüe ilgilidir. Bu nedenle bu ilaç kombinasyonlarlZlAlzheimer hastal[glÇlmultipl skleroz, amiyotrofik lateral skleroz, Parkinson hastal[glüHuntington hastal[g]l,`_lnöropatiler (örnegin nöropatik agrIZl/eya alkolik nöropati) alkolizm, veya alkolden uzaklama, ve omurilik yaralanmasEgibi nörolojik bozukluklar. tedavi edilmesi için yeni yaklasIiIarEtemsil etmektedir. Daha spesifik olarak, bulus, nörolojik bozukluklarda önemli bir in vivo etki saglayan, Akamprosat ile birlikte Baklofen'den olusan bilesimleri açllZlamaktadlE AsIIa, bulus, deneysel k-ida, Baklofen ve Akamprosattan olusan kombinasyon terapilerinin, nörolojik bozukluklardan sikayet eden hastalar. durumunu önemli ölçüde iyilestirebilecegini göstermektedir. Özel olarak bulus sahipleri sasIlEElbir sekilde sunu kesfetmistir ki Baklofen ve Akamprosat kombinasyonlarlZl beta-amiloit intoksike sini rhücrelerinde kapiler ag veya LDH saIIiII uzunlugu üzerinde güçlü, beklenmedik bir etkiye sahiptir ve AD'nin yeni terapötik yaklasllarIEltemsil etmektedir. AyrlEb, örnekler sunu göstermektedir ki, bulusun bir kombinasyon terapisinde, Baklofen 80 nM veya daha az dozda etkili olabilir ve Akamprosat, 1 nM veya daha az bir dozda etkili olabilir. Bu sonuçlar önemlidir ve özelikle avantajlIB çünkü bu kadar düsük dozlarda, her türlü muhtemel yan etkiden kaçIllâbilir. AyrlEla, bu kombinasyonlar etkili bir sekilde nöronal hücreleri glutamat toksikligi, oksidatif stres fibi farklßtkilerden korumaktadlîlve farklljliörolojik bozukluklarda söz konusu olan BBB geçirgenlesmesini veya nöronal hücrelerin neden oldugu apoptozu önlemektedir. Bu nedenle mevcut bulus, baklofen ve Akamprosat bilesimlerine baglElolarak, nörolojik bozukluklari yeni bir terapisini önermektedir. Daha özel olarak, mevcut bulus, Baklofen ve Akamprosat kombinasyonlar. dayalülarak, Alzheimer hastallglüle iliskili bozukluklar multipl skleroz, amiyotrofik lateral skleroz, Parkinson hastallglg Huntington hastallglü nöropatiler (örnegin nöropatik agrEveya alkolik nöropati) alkolizm, veya alkolden uzaklasma, ve omurilik yaralanmasügiibi yeni bir tedaviyi öne sürmektedir. Bu baglamda, bir özel yapllândlîilnada, bulus, Baklofen ve Akamprosat'tan olusan bir bilesim ile ilgilidir. Burada ayrlEla AD, AD ile iliskili rahatsiZllZlar, MS, PD, ALS, HD, nöropatiler (örnegin nöropatik agrElveya alkolik nöropati) alkolizm, veya alkolden uzaklasma, veya omurilik yaralanmasi. tedavisinde kullanma yönelik Baklofen ve AkamprosatElçeren bir bilesim açlElanmaktadlE Burada ayrEla AD, AD ile iliskili rahatslZllZJar, MS, PD, ALS, HD, nöropatiler (örnegin nöropatik agrül'eya alkolik nöropati) alkolizm, veya alkolden uzaklasma, veya omurilik yaralanmasII tedavisinde kullanla yönelik Baklofen ve Akamprosat. bir ilaç üretiminde kullanliüçllîlanmaktadlü Baklofen ve Akamprosat için örnek CAS sayllârüsaglîlhki Tablo 1'de verilmektedir. Tablo 1 aynüamanda, sIlEIlandlîlEEblmayan bir sekilde, bu bilesikler için ortak tuzlarürakematlarü ön-ilaçlarümetabolitleri veya türevleri belirtmektedir. Ilaç CAS Sayllîirü SIR] veya Tanimoto benzerlik endeksi Akamprosat ve iliskili bilesikler Etil Dimetil Ammonio Propan/ 0.77 Sulfonat Baklofen ve iliskili bilesikler 3-(p-klor0feniI)-4- / Metabolit hidroksibutirik asit ArBakIofen plakarbil 847353-30-4 Ön-ilaç Baklofenin ön ilaçlarII spesifik Örnekleri Hanafi ve ark'ta 2011 (41) verilmektedir ve özellikle CNS hedeflemesi için ilgili olan Baklofen esterleri ve Baklofen ester karbomatlarlîl bulunmaktadlEl Yukar- bahsedildigi üzere baklofen plakarbil iyi bilinen bir ön ilaçtEve bu nedenle bulusun bilesimlerinde Baklofenin yerine kullanilâbilir. Baklofenin diger ön ilaçlarÇl Akamprosat için kullanlSIEön ilaçlar, örnegin pantoik asit ester neopentil sulfonil esterleri, neopentil sulfonil esterleri ön-ilaçlarEi/eya Akamprosat. maskelenmis karboksilat neopentil Baklofen ve Akamprosat, tek bas. veya ilave bilesikler ile birlikte kullanllâbilir. Bu baglamda, özel bir yapllândlîilnada, bulusun bilesimleri, Sulfisoksazol, Methimazol, Prilokain, Dinlin, Kuinakrin, Carbenoksolone, Aminokaproik asit, Ca-bergoline, Dietilkarbamazin, Sinakalset, Sinarizin, Eplerenone, Fenoldopam, Leflunomit, Levosimendan, Sulo-deksit, Terbinafin, Zonisamit, Etomidat, Fenformin, Trimetadizin, Meksiletine, Ifenprodil, Moksifloksacin, Bromoc-riptine veya Torasemit'den seçilen en az bir bilesikten olusabilir. Bu bilesiklerin her biri için örnek CAS sayllârlâsagldlaki Tablo 2'de verilmektedir: ILAÇ ADI CAS SAYISI Aminokaproik Asit 60-32-2 Bromokriptin 25614-03-3 Kabergolin 81409-90-7 Karbenoksolon 5697-56-3 Sinakalset 226256-56-0 Sinarizin 298-57-7 Dietilkarbamazin 90-89-1 Eplerenon 107724-20-9 Etomidat 33125-97-2 Fenoldopam 67227-57-0 Leflunomit 75706-12-6 Levosimendan 141505-33-1 Methimazol 60-56-0 Moksifloksasin 354812-41-2 Fenformin 114-86-3 14289-32-8 Kuinakrin 83-89-6 Sulfisoksazol 127-69-5 Sulodeksit 57821-29-1 Terbinafîn 91161-71-6 Zonisamit 68291-97-4 Burada ayn üamanda ihtiyacünan bir sujede AD ile iliskili bir rahatslîllgil tedavi edilmesine yönelik bu kombinasyonun kullanillçlElanmaktadlEl AyrIEla burada ihtiyadJJIan bir sujede MS, PS, ALS, HD, nöropatiler (örnegin nöropatik agrÜ/eya alkolik nöropati) alkolizm, veya alkolden uzaklasma, veya omurilik yaralanmasII tedavisinde bu kombinasyonun kullanIiIZI açllZlanmaktadlEI Örneklerde açlIZJandEgiEüzere, en az Baklofen ve Akamprosat kullanan bilesim terapileri, nöronal yaralanmalara neden olan biyolojik prosesler üzerinde güçlü beklenmedik bir etkiye sahiptir. AyrlEla, bu kombinasyonar in vivo olarak çok etkili bir sekilde nörolojik hastallKlarI semptomlarIEUüzeltme kabiliyeti göstermistir. Bu nedenle bu kombinasyonlar, Alzheimer hastallgiü Multipl!] Skleroz, Amiyotrofik Lateral Skleroz, Parkinson Hastallgiü Huntington Hastallglünöropatiler (örnegin nöropatik agrÜ/eya alkolik nöropati), alkolizm veya alkol geri çekilmesi ve omurga yaralanmaslZlgibi nörolojik bozukluklar. tedavi edilmesi için yeni yaklasmlarülemsil etmektedir. Bu bilesimler, nöronal hücreler üzerindeki amiloit B(AB) peptit toksikligini veya glutamat eksikotoksikligini etkili bir sekilde önlemektedir. AyrlEla, in vivo olarak bu bilesimler, ciddi kognitif semptomlarIEl iyilestirilmesine ve nöronal hücrelerin korunmaslüta neden olmaktadlü Bu nedenle, bu bozukluklarElledavi etmek için yeni ve güçlü yöntemleri temsil etmektedirler. Deneysel bölüm ayrlîa sunu göstermektedir ki yukari belirtilmis olan bilesimler i)in vito nöronal hücrelerin, glutamat eksitotoksikliginden sinerjistik olarak korunmaleda, ve ii) glutamat eksikotoksikligi ile ilgili hastalllZIar için in vivo modellerde klinik faydalar. saglanmasIa da etkilidir. Mevcut bulusta açÜZlanan bilesimler, ihtiyacüalan bir sujede Alzheimer hastallglEQAD) AD ile iliskili bozukluklar, MS, PS, ALS, HD, nöropatiler (örnegin nöropatik agrElveya alkolik nöropati) alkolizm, veya alkolden uzaklasma, veya omurilik yaralanmasII kombinasyonel tedavisi için 2, 3, 4 veya 5 bölge ilacIan, daha tercihen 2, 3 veya 4 bölge iIacIEilçerebilir. Bir tercih edilen yapllândlünada, bulusun ilaçlarlJen etkili etkiyi saglamak üzere birlestirilmis, ayrüreya sßlüliygulama için kombinasyon halinde kullanlE1aktadlE Burada ayrlEia Alzheimer hastal[g]l:aAD) AD ile iliskili bozukluklar, MS, PS, ALS, HD, nöropatiler (örnegin nöropatik agrlZl veya alkolik nöropati) alkolizm, veya alkolden uzaklasma, veya omurilik yaralanmasEgibi nörolojik rahatslîllElarI tedavisinde kullanllîhak üzere bilesimler açllîlanmakta olup, bunlar birlikte, ayrElayrElveya ardlglîl uygulama için asagßhki ilaç kominasyonlarian birini içermektedir: - Baklofen ve Akamprosat, - Baklofen ve Akamprosat ve Dietilkarbamazin, - Baklofen ve Akamprosat ve Cinacelcet, - Baklofen ve Akamprosat ve Sulfisoksazol, - Baklofen ve Akamprosat ve Torasemit, - Baklofen ve Akamprosat ve Ifenprodil, - Baklofen ve Akamprosat ve Meksiletin, - Baklofen ve Akamprosat ve Eplerenon, - Baklofen ve Akamprosat ve Levosimendan, - Baklofen ve Akamprosat ve Terbinafin, veya - Baklofen ve Akamprosat ve Leflunomit. Deneysel bölümde tarif edildigi gibi, bulusun kombinasyonel teragileri, Alzheimer hastallgllîl veya insan deneklerindeki ilgili hastallElarElyilestirmek üzere önemli terapötik ve biyolojik etkiler saglamaktadlE Bunlar, AB toksikligine karslZlgüçIü bir nöroprotektif etkiye neden olmakta ve davranlglsal performanslar ve biyokimyasal tahliller için in vivo olarak pozitif sonuçlar vermektedir. Sonuçlar sunu göstermektedir ki bulusun bilesimleri, AB agregatlarEl tarafIan in vivo olarak tetiklenen moleküler yollarüetkili bir sekilde düzeltmekte ve ii)nöronun hayatta kalmasElveya sinaps bütünlügü gibi hastalanan hayvanda gözlemlenen nörofizyolojik bozukluklarlE] iyilestirilmesine neden olmaktadlü Ayrlîla, sunulan sonuçlar sunu göstermektedir ki yukarlki kombinasyon terapileri, glutamat eksitotoksikligine karslZönemli bir sinerjistik nöro koruyucu etkiye sahiptir (sekil 15) ve bu, AD, MS, PD, ALS, HD, nöropatiler (önegin nöropatik agrEl/eya alkolik nöropati), alkolizm veya alkol çekilmesi, veya omurga yaralanmaslîgibi farklüiörolojik hastallKlarda implike olan bir yoldur. Bu terapiler, bu hastalllZJar için in vivo veya in vitro modellerde pozitif sonuçlar vermektedir. Buna ek olarak, in vivo sonuçlar sunu göstermektedir ki bulusun bilesimleri Beyin Kan Bariyerinin bütünlügünü etkili bir sekilde eski haline getirmekte ve bir çok nörolojik hastalliîta zarar gördügü bilinen apoptoz tetiklemesini önlemekte, geciktirmekte veya azaltmaktadlE Ayrlîia, bu iki ilaç için gözlemlenen özellikle yüksek sinerjistik etkilesim, tek ilaçlEtedavide kullanllgllda herhangi bir etki göstermeyen ilaç konsantrasyonlarIlEl kullanIilEla izin vermektedir. Ayrlîla, deneysel bölümde gösterildigi gibi, Baklofen ve Akamprosat kombinasyonu, diger terapötik kombinasyonlar ile karsllâst-[gilda Alzheimer hastallglîl üzerinde gelistirilmis bir terapötik faydaya neden olmaktadlEl Bu bilesimler, amiloit ß proteininin veya peptitin insan hücreleri ve in vivo model üzerindeki toksik etkilerini önlemekte ve bu bozuklugun tedavi edilmesi için yeni ve güçlü yöntemleri temsil etmektedir. Burada ayrlîla Alzheimer hastallgiEaAD) AD ile iliskili bozukluklar, MS, PS, ALS, HD, nöropatiler (örnegin nöropatik agrElveya alkolik nöropati) alkolizm, veya alkolden uzaklasma, veya omurilik yaralanmasEgibi bir nörolojik hastalIgJI tedavi edilmesi için yukar- tanIilandlglEl sekilde bir bilesim açlElanmaktadlB Daha önceden belirtildigi gibi, bu bulusun bir kombinasyon terapisinde, bilesikler veya ilaçlar birlikte veya ayrlIcblarak formüle edilebilir ve birlikte, ayrüieya sülüilarak verilebilir. Burada ayrlEla Alzheimer hastalig]lZl(AD) AD ile iliskili bozukluklar, MS, PS, ALS, HD, nöropatiler (örnegin nöropatik agrElveya alkolik nöropati) alkolizm, veya alkolden uzaklasma, veya omurilik yaralanmaslîgibi bir nörolojik hastallglI tedavi edilmesi için kullanüâcak olan bir ilaci üretiminde kullanllüiak üzere yukarlElh tannlandlglElgii bir bilesim açlElanmaktadlEl Burada ayrlEla yukar- açlKland[g]l:lsekilde bilesimin etkili bir miktar.. ihtiyacliblan sujeye uygulanmasIElçeren Alzheimer hastaliglüAD) AD ile iliskili bozukluklar, MS, PS, ALS, HD, nöropatiler (örnegin nöropatik agrl3'eya alkolik nöropati) alkolizm, veya alkolden uzaklasma, veya omurilik yaralanmaslîgjibi bir nörolojik hastalllZJarI tedavi edilmesine yönelik bir yöntem açllZIanmaktadlEl Burada ayrlîla Alzheimer hastallgiüAD) AD ile iliskili bozukluklar, MS, PS, ALS, HD, nöropatiler (örnegin nöropatik agrIZl/eya alkolik nöropati) alkolizm, veya alkolden uzaklasma, veya omurilik yaralanmasElgibi bir nörolojik hastallElarI tedavi yöntemi açlEJanmaktadB yöntem yukar- açllîland[g]l3ekilde bir bilesimin etkili miktarIÜhtiyacßlan sujeye aynßnda, ayrlîiyrüalarak veya ardlgllîlolarak verilmesini içermektedir. Bulus ayrüa etkili miktarda Baklofen ve AkamprosatI bir sujeye aynlînda, ayrüamanlarda veya ardlglîlolarak verilmesini içerecek sekilde ihtiyacüilan hastada Alzheimer hastal[g]l:QAD) AD ile iliskili bozukluklar, MS, PS, ALS, HD, nöropatiler (örnegin nöropatik agrlZl/eya alkolik nöropati) alkolizm, veya alkolden uzaklasma, veya omurilik yaralanmasügibi nörolojik hastallKlarI tedavi edilmesine yönelik bir yöntemi açllZJamaktadE Bulusun bilesimleri tipik olarak ayrlEla bir veya daha fazla farmasötik olarak kabul edilebilir eksipiyian veya taslýlaîlhn olusmakadEl AyrlEti, mevcut bulusta kullan! için, ilaçlar veya bilesikler genellikle farmasötik olarak kabul edilebilir eksipiyianler veya tasls-LIEEr ile karlgtlîllüiaktadlEl Bu baglamda, burada aynEkamanda bir farmasötik bilesimin hazlElbnmasEiçin bir yöntem açllZJanmaktadlEI ve yöntem, bir uygun eksipiyian veya taslSLIEIEIh yukarElhki bilesiklerin karlgtlEllüiasIan olusmaktadlB Örnegin burada uygun bir eksipiyian veya tasEIEIElh Baklofen ve Akamprosat'I karigtlîllîhasian olusan bir yöntem açlKJanmaktadB Yukar- belirtildigi sekilde bulusun tercih edilen yapllând Ünalar- göre, bilesikler bu sekilde veya farmasötik olarak kabul edilebilir tuz, ön ilaç, türev veya bunun sürekli saIIi formülasyonu formunda kullaniIlEl Her ne kadar in vitro ve in vivo olarak çok etkili olsa da, denege veya spesifik duruma bagIEl olarak, bulusun kombinasyon terapisi aynElzamanda, deneklerde tedavi edilen nörolojik durum Için faydalülave Ilaçlar veya tedaviler ile birlikte veya konjüksiyon veya iliski halinde kullanllâbilir. Burada açlKIanan ilaç(lar) veya ilaç(lar). kombinasyon(lar)l:lile birlikte kullanllân diger terapiler, Alzheimer hastal[g]Çl AD ile iliskili bir bozukluk, MS, PD, ALS, HD, nöropatiler (örnegin nöropatik agrEl/eya alkolik nöropati), alkoliklik veya alkol çekilmesi, veya ourga yaralanmasi. semptomlarIElhafîfleten bir veya daha fazla ilaç(tan), veya bu bozukluklari palyatif tedavisi için kullanllâbilir olan ilaçlardan olusabilir. Örnegin, sonuçlar aynüamanda yukarlEllaki kombinasyon terapilerinin, donepezil (sekil 16) ile birlestirildigi zaman önemli bir sinerjistik nörokoruyucu etkiye sahip oldugunu göstermektedir. Bu nedenle, bulusun kombinasyonlarEile kullanllâbilecek örnek terapiler sunlardlîl Donepezil (CAS: 120014-06-4), Bu baglamda, özel bir yapüândünada, mevcut bulusa göre ilaç(lar) veya bilesimler, Ginkgo Biloba özütleri ile birlestirilebilir. Uygun özütler arasia, leilEllama olmaksIZlEI, Ginkgo biloba özütleri, iyilestirilmis Ginkgo biloba özütleri (örnegin aktif muhteviyat olarak zenginlestirilmis veya kontaminant olarak azaltilîhlg) veya Ginkgo biloba özütleri içeren herhangi bir iIacEl içerebilir. Bulusa göre terapi evde, doktorun ofisinde, bir klinikte, bir hastanenin ayakta tedavi departmanIia veya bir hastanede saglanabilir ve böylelikle doktor, terapinin etkilerini yakIan gözlemleyebilir ve gerekli olan ayarlamalarüapabilir. Terapinin süresi tedavi edilen hastal[g]lEl asamalea, hastanlEl yaslEa ve durumuna ve hastanlE tedaviye nasil] cevap verecegine baglIE Kombinasyonun her bir bileseninin uygulama dozajüfrekansÜ/e modu bagIisE bir sekilde kontrol edilebilir. Örnegin, bir ilaç oral olarak verilirken, ikinci ilaç intramusküler olarak verilebilir. Kombinasyon terapisi dinlenme sürelerini içeren döngü içi veya döngü dlgEbIarak verilebilir, böylelikle hastanI vücudu, henüz öngörülemeyen yan etkilerden kurtulma sansüa sahip olacaktlEl Ilaçlar, bir uygulama tüm ilaçlarlâktaracak sekilde birlikte formüle edilebilir. Kombinasyonun her bir ilaci. uygulanElÇldiger bilesenler ile birlikte hastaIlElveya bozuklugu etkili bir sekilde tedavi edebilecek veya hastanI durumunu hafifletebilecek bir sekilde ilaç konsantrasyonu ile sonuçlanacak herhangi bir uygun araçla olabilir. Her ne kadar kombinasyonunun ilaçlarElsaf kimyasal olarak uygulanmasünümkün olsa da, bunlar. bir farmasötik bilesim olarak sunulmaslîtercih edilmektedir ki buna bu baglamda farmasötikal formülasyon adül'erilmektedir. Muhtemel bilesimler arasIda oral, rektal, topikal (transdermal, bukkal ve sublingual dahil) veya parenteral (subkütanöz, intramusküler, intravenöz ve intradermal dahil) uygulama için uygun olanlar yer aImaktadlB Daha yaygI olarak, bu farmasötikal formülasyonlar, bir dizi dozlama birimi içeren "hasta paketlerinde" veya genellikle bir blister paketi gibi bir tek pakette bir ayrIZtedavi süresi boyunca kullanIi için ölçümlü birim dozlarII uygulanmasEliçin diger araçlarla hastaya verilir. Hasta paketleri, geleneksel reçetelemelere göre daha avantajlßlü zira geleneksel uygulamada bir eczacühastanl farmasötik tedarikini bir hacimli tedarikten bölmektedir, bunda ise hastanI her zaman hasta paketinde yer alan paket insertine erisimi vardlElve bu geleneksel reçetelemelerinde normalde bulunmamaktadlB Bir paket insertifinin dahil edilmesinin, hastanI doktorun talimatlarlîlle uyumunu iyilestirdigi gösterilmistir. Böylelikle, bulus ayrlîh, söz konusu formülasyonlar için uygun paketleme malzemeleri ile birlikte, burada daha önce tarif edildigi sekilde bir farmasötikal formülsyonunu içermektedir. Bu tür bir hasta paketinde, kombinasyon tedavisi için bir formülasyonun amaçlanan kullanIiIÇI tedavi için formülasyonu en iyi sekilde kullanmaya yardIiclZlolmak için talimat, tesisler, provizyonlar, uyarlamalar ve/veya diger araçlarla saglanabilir. Bu tür tedbirler, mevcut bulus ile birlikte tedavi için spesfik olarak uygun olan ve tedavi için uyarlanmlSlözeI bir hasta paketi hazlîllamaktad lEI Ilaç, herhangi bir uygun miktarda, herhangi bir uygun taslýlîünaddede bulunabilir. Ilaç, bilesimin toplam aglîlliglüolarak % 99'a kadar miktarda mevcut olabilir. Bilesim, oral, parenteral (ör. intravenöz, intramusküler) rektal, kütanöz, nazal, vajinal, inhalant, deri (patch), veya oküler uygulama roasEiçin uygun bir dozaj formunda saglanabilir. Böylelikle, bilesim, örnegin tabletler, kapsüller, haplar, tozlar, granülatlar, süspansiyonlar, emülsiyonlar, solüsyonlar, jeller, örnegin hidrojeller, macunlar, merhemler, kremler, plasterler, dirençler, ozmotik aktarIi cihazlarü supozitörler, enemalar, ejekte edilebilirler, implantlar, Spreyler veya aerosollar formunda olabilir. Farmasötik bilesimler, geleneksel farmasötik uygulamaya göre formüle edilebilir (bkz. ör. ör., Remington The Science and Practice of Pharmacy (20th ed.), ed. A. R. Gennaro, Lippincott Williams & Wilkins, 2000 and Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, eds. J. Swarbrick and J. C. Boylan, 1988-1999, Marcel Dekker, New York Bulusa göre farmasötik bilesimler, uygulamadan hemen sonra veya uygulamadan belli bir süre sonra aktif ilacßalacak sekilde formül edilebilir. Kontrollü salIi formülasyonlarüsunlarEliçermektedir; (i)uzatI]Bilgl bir süre boyunca vücut içinde iIacI hemen hemen sabit bir konsantrasyonunu olusturan formülasyonlar; (i) uzatüöig bir süre boyunca vücut içinde önceden belirlenen bir gecikme süresinden sonra ilacI hemen hemen sabit bir konsantrasyonunu olusturan formülasyonlar; (iii) aktif ilaç maddesinin plazma düzeyindeki dalgalanmalarla iliskili istenmeyen yan etkilerin konkomitant minimzasyonu ile vücutta göreceli, sabit, etkili ilaç düzeyini korumak suretiyle, önceden belirlenen süre boyunca ilaç eylemini sürdüren formülasyonlar; (iv) örnegin bir kontrollü saIIi bilesimini, hastallKlEdoku veya organa bitisik veya içine uzamsal olarak yerlestirerek, ilaç eylemini lokalize eden formülasyonlar; ve (v) bir özel hedef hücre tipine ilacüiktarmak için taslýlîllâr veya kimyasal türevler kullanarak ilaç eylemini hedefleyen formülasyonlar, ilacI asag-kilere sahip oldugu durumlarda, bir kontrollü alIi formülasyonu formunda iIaçIarI verilmesi özellikle tercih edilmektedir. IlaçlarI (i) dar bir terapötik endeks (zararlüran etkilere veya toksik reaksiyonlara neden olan plazma konsantrasyonu ve terapötik bir etkiye neden olan plazma konsantrasyonu arasIaki fark küçüktür; genel olarak terapötik endeks, TI, medyan ölümcül dozun (LD50) medyan efektif doza (EDSO) oranlZblarak tanllanmaktadß; (ii) gastra entestenal yolda dar bir emilim penceresi; veya (iii) plazma düzeyini bir terapötik düzeyde tutmak için bir gün boyuca sllZl dozlama gerekecek sekilde çok kisa bir biyolojik yarlîlömüre sahip olmalarIZI durumu gibi tercih edilen durumlarda kontrollü sail formülasyonu olarak uygulanmalarlîl tercih edilmektedir. SaIIi oranßöz konusu ilacI metabolizma oranIlîgeçecek sekilde kontrollü saIIi elde etmek amaclýla belli say. stratejiden herhangi birisi takip edilebilir. Kontrollü salIi, örnegin farkIEl tipte kontrollü sali bilesimleri ve kaplamalarEldahil olmak üzere farklElformülasyon parametrelerinin uygun bir seçimi ile elde edilebilir. Böylelikle, ilaç, bir farmasötik bilesime uygun eksipiyianler ile formüle edilir ve bu, uygulandlthan sonra, ilacEkontrollü bir sekilde salar (tek veya birden fazla birim tablet veya kapsül bilesimi, yag solüsyonlarü süspansiyonlar, emülsiyonlar, mikro kapsüller, mikro küreler, nano partiküller, yamalar ve Oral KullanIi için KatlJDozai FormlarEl Oral kullanIi için fomülasyonlar arasIa, bulusun bilesimini içeren tabletlerin, toksik olmayan farmasötik olarak kabul edilebilir eksipiyianlerle bir karlSlEl içinde sunulmasEl/er almaktadlEl Bu eksipiyianler örnegin asal dilüentler veya dolgular (ör. sukroz, mikrokristalin selüloz, nisastalar, patates nisastasü kalsiyum karbonat, sodyum klorit, kalsiyum fosfat, kalsiyum sülfat veya sodyum fosfat); granüllestirme ve parçalanma ajanlarEKör . selüloz türeleri örnegin mikro kristalin selüloz, patates nisastasüdahil nisastalar, kroskarmeloz sodyum alginatlarüveya alginik asit); baglaylEl ajanlar (ör. akasya, alginik asit, sodyum alginat, jelatik, nisasta, prejelatinize nisasta, mikro kristalin selüloz, karboksimetilelüloz sodyum, metil selüloz, hidroksipropil, metilselüloz, etilselüloz, polivinil pirolidon, veya polietilen glikol), veya yaglaylûljanlar, glidantlar ve anti adhesifler (ör. stearik asit, silikalar veya talk) i içermektedir. Diger farmasötik olarak kabul edilebilir eksipiyanlar renklendiriciler, çesnilendirme ajanlarlZI plastiklestiriciler, humektanlar, tamponlama ajanlarElve benzerleri olabilir. Tabletler kaplanmamlS olabilir ve emilimi geciktirecek ve gastroentestenal yolda emilimi saglayacak tekniklerle saglanabilir ve böylelikle uzun bir süre boyunca devam eden etki saglanabilecektir. Kaplama, önceden belirlenen bir yapi aktif ilaç maddesini salacak sekilde uyarlanabilir (ör. bir kontrollü saIIi formülasyonu elde edecek sekilde) veya mideden geçene kadar aktif ilaç maddesini salmayacak sekilde uyarlanabilir (enterik kaplama). Kaplama bir sekeler kaplamasÇl bir film kaplamasEl(ör., hidroksipropil metilselüloz, metilselüloz, metil hidroksietilselüloz, hidroksipropilselüloz, karboksimetilselüloz, akrilat kopolimerleri, polietilene glikoller ve/veya polivinilpirrolidon bazlm veya bir enteric kaplama (ör., metakrilil asit kopolimeri, selüloz asetat ftalat, hidroksipropil metilselüloz ftalat, hidroksipropil metilselüloz asetat sukkinat, polivinil asetat ftalat, shellac, ve/veya etilselüloz bazlm olabilir. Gliseril monostearat veya gliseril distkarat gibi bir zaman geciktirme materyali kullanilâbilir. KatEltablet bilesimleri, bilesimi istenmeyen kimyasal degisikliklerden koruyacak sekilde uyarlanmE bir kaplamayEiçerebilir (ör. aktif ilaç maddesinin sallilîidan kimyasal bozulma). Kaplama, Encyclopedia of Pharmaceutical Technology yayIIa tarif edilene benzer sekilde katlîcllozaj üzerinde uygulanabilir. Ilaçlar tablet içinde karlgtlîllâbilir veya k-ilandlEIâbilir. Örnegin, bir birinci Ilaç tabletin iç klýnia yer allElve bir Ikinci ilaç dlSlk-ida yer allEl böylelikle ikinci IlacI önemli bir klýnÇl birinci iIacI salIIIan önce salIlE Oral kullanIi için formülasyonlar, çignenebilir tabletler olarak veya sert jelatîn kapsüller olarak sunulabilir ki burada aktif muhteviyat bir asal katEdilüent ile karlStlEIüEl(ör. patates nisastasÇl mikro kristalin selüloz, kalsiyum karbonat, kalsiyum fosfat veya kaolin), veya yumusak jelatin kapsüller halinde sunulabilir ki burada aktif muhteviyat, örnegin süarafîn veya zeytin yag [gibi su veya yag ortamEile karlStlEllIEl Geleneksel bir sekilde tabletler ve kapsüller altIa yukarida belirtilen muhteviyat kullanliârak tozlar ve granülatlar hazlEllanabilir. Oral kullanIi için kontrollü saln bilesimleri, örnegin aktif ilaç maddesinin difüzyonu ve /veya çözülmesini kontrol etmek suretiyle aktif ilacßalak sekilde yapllândlüllâbilir. Çözülme veya difüzyon kontrollü salIiIÇlilaçlar bir tablet, kapsül ,topak veya granülat formasyonunun uygun kaplamaslîile, veya iIacElbir uygun matrise dahil etmek suretiyle elde edilebilir. Bir kontrollü salIi kaplamasElyukarlElh belirtilmis olan kaplamalardan bir veya birden fazlasIlZI ve/veya örnegin sellak, balmumu, glikowax, kastor parafini, karnauba parafini, stearil alkol, gliseril monostearat, gliseril distearat, gliserol palmitostearat, etilselüloz, akrilik reçineler, dI-polilactic asit, selüloz asetat butirat, polivinil klorit, polivinil asetat, vinil pirrolidone, polietilen, polimetacrilate, metilmetakrilat, 2-hidroksimetakrilat, metakrilat hidrojeller, 1,3 butilen glikol, etilen glikol metakrilat, ve/veya polietilen glikolleri içerebilir. Bir kontrollü salnlünatris formülasyonunda, matris malzemesi örnegin hidratllîl metilselüloz, karnauba parafini ve stearil alkol, karbopol 934, silikon, gliseril tristearat, metil akrilat-metil metakrilat, polivinil klorit, polietilen, ve/veya halojene florokarbon yer alabilir. Istemde bulunulan kombinasyonun ilaçlarIan bir veya birden fazlasIEiçeren bir kontrollü saIIi bilesimi, bir yüzey tablet veya kapsül formunda olabilir (yani orla uygulama üzerine,belli bir süre boyunca gastrik içerigin tepesinde yüzey bir tablet veya kapsül). Ila(lar)I bir yüzer tablet formülasyonu, ilaçlarI bir karglElII eksipiyianlerle ve hidroksietilselüloz, hidroksiön-pilselüloz, veya hidroksipropilmetilselüloz gibi hidrokoloitlerin tabletler haline gelecek sekilde lelStlEllâbilir. Gastrik slîljle temas ettikten sonra, tablet, yüzeyi etraflElda hemen hemen su geçirmez bir jel bariyeri olusturmaktadlE Bu jel bariyeri, birden daha düsük bir yogunluk korumada yer allElve böylelikle tabletin gastrik s_ yüzer halde kalmalela izin verir. Oral Uygulama için Slîllâr Su ilavesi ile bir 5qu süspansiyonun hazlEIlanmasEiçin uygun tozlar, dagülâbilir tozlar veya granüller, oral uygulama için kullanlglülozaj formlarIB Bir süspansiyon olarak formülasyon, bir dagltîina veya nemlendirme ajanüsüspansiyon ajanEl/e bir veya daha fazla koruyucu ile bir karlgmda aktif muhteviyat saglar. Uygun süspansiyon ajanlarü örnegin sodyum karboksimetilselüloz, metilselüloz, sodyum alginat ve benzerleridir Pa renteral Bilesimler Farmasötik bilesim aynElgeIenekseI, toksik olmayan farmasötik olarak kabul edilebilir taslýlîllâr ve adjüvanlar içeren uygun aktarIi cihazlarlZl/eya implantlarEbraclüglîla, veya dozaj formlarda, formülasyolarda enjeksiyon, infüzyon veya implantasyon ile parenteral olarak uygulanabilir (intravenöz, intramusküler, subkütanöz veya benzeri). Bu bilesimlerin formülasyonu ve hazlEllanmasÇlfarmasötik formülasyonu tekniginde uzman olanlar tarafIan iyi bilinmektedir. Parenteral kullanIi için bilesimler birim dozaj formlarlîiUa (ör. tek dozlu ampuller) veya birden fazla doz içeren ve uygun bir koruyucunun ilave edilecegi viyallerde (asagEbakIlZj saglanabilir. Bilesim, bir solüsyon, bir süspansiyon, bir emülsiyon ve bir infüzyon cihazD dormuda, veya implantasyon için bir aktarIi cihazEIbiçiminde olabilir, veya kullanndan önce su veya diger uygun araç ile yeniden teskil edilecek bir kuru toz olarak sunulabilir. Aktif cihaz (lar)dan ayrljblarak, bilesim uygun parenteral kabul edilebilir taslsîlîllâr ve/veya eksipiyianler içerebilir. Aktif ilaç(lar) mikro kürelere, mikrokapsüllere, nano partiküllere, Iipozomlara veya benzerlerine kontrollü salIi için dahil edilebilir. Bilesim, süspansiyon saglaylEÇlçözdürücü, stabilize edici, pH ayarlaylElâjanlarEle/veya daglüna ajanlarlllerebilir. Bulusa göre farmasötik bilesimler, steril enjeksiyon için uygun formda olabilir. Bu tür bir bilesim hazlîliamak için, uygun aktif ilaç(lar), parenteral olarak kabul edilebilir slIElbir araçta çözdürülebilir veya süspanse edilir. KullanHâbilir kabul edilebilir araçlar ve solventler aras-a su ve hidroklorik asit, sodyum hidroksit veya uygun bir tampon, 1,3-butanediol, Ringer solüsyonu,ve izotonik sodyum klorit solüsyonundan uygun bir miktarda ilave ile uygun pH'a ayarlanmlglsu yer almaktadlE Sulu formülasyon bir veya birden fazla koruyucu içerebilir (ör., metil, etil veya n-propil p-hidroksibenzoat) Ilaçlardan birinin suda sadece hafif veya tedbirli olarak çözülebilir oldugu durumlarda, bir çözülme gelistirici veya çözdürücü ajanlar ilave edilebilir, veya solvent propilen glikol veya benzerinden w/w % 10- 60 içerebilir. Kontrollü sal! parenteral bilesimleri, sulu süspansiyonlar, mikro küresel, mikro kapsüller, manyetik mikro küreler, yag solüsyonlarlZlyag süspansiyonlarü/eya emülsiyonlar formunda olabilir. Alternatif olarak, aktif ilaç(lar), biyolojik olarak uyumlu taslîlîllâra, Iipozomlara, nano partiküllere, implantlara veya infüzyon cihazlarlEh dahil edilebilir. Mikro küreler ve/veya mikro kapsülerin hazlHbnmasIa kullanHâcak malzemeler, örnegin poligalactin, poli-(isobutil cyanoacrilate), poli(2-hidroksietiI-L-glutamnine) gibi biyolojik olarak ayrgbilir /biyolojik olarak tüketilebilir polimerledir. Bir kontrollü saIIillIparenteral formülasyon formüle ederken kullanllâbilecek biyolojik olarak uyumlu tasMEllâr karbon hidratlar (ör. dekstranlar), proteinler (ör. abümin), lipo proteinler veya antikorlardlB Implantlarda kullanIi için malzemeler biyolojik olarak ayrlgtülâbilir olmayabilir ör., polidimetil siloksan) veya biyolojik olarak ayrlgIlElllâbilir olabilir (ör., poli(kaprolakton), poli(glikolik asit) veya poli(orth0 esterleri)). Alternatif yollar Her ne kadar daha az tercih edilse ve daha az kullanlgllîiblsa da, diger uygulama yollarü/e buna baglEloIarak diger formülasyonlar da degerlendirilmektedir. Bu baglamda, rektal uygulama için, bir bilesim için uygun dozaj formlarElsupozitörleri (emülsiyon veya süspansiyon tipi) ve rektal jelatin kapsülerini (solüsyonlar veya süspansiyonlar) içermektedir. Bir tipik supozitör formülasyonda, aktif ilaç(lar), kakao yagüesterlestirilmis yaglEbsitler, gliserinlestirilmis jelatin ve polietilen glikoller gibi farkllEuda çözülebilir ve dagüßbilir bazlar gibi uygun bir farmasötik olarak kabul edilebilir supozitör tabanla birlestirilebilir. FarklEI katküâr, gelistiriciler veya sürfaktanlar dahil edilebilir. Farmsötikal bilesimler aynlîkamanda geleneksel olarak toksik olmayan farmasötikal olarak kabul edilebilir taslsîlîllâr ve eksipiyianler içeren dozaj formlarlîlveya formülasyonlarda perkütanöz emilim için deri üzerinde topikal olarak uygulanabilir. Formülasyonlar kremleri, merhemleri, losyonlarÇl Iinimentleri, jelleri, hidrojelleri, solüsyonlarÇl süspansiyonlarÇl çubuklarü spreyleri, macunlarlZl plasterleri ve diger transdermal ilaç aktarn sistemlerini içermektedir. Farmasötik olarak kabul edilebilir tasmaiâr veya eksipiyianler emülsifiye ajanlarlü antioksidanlarÇl tamponlama ajanlarIÇl koruyucularÇl humektanlarÇl nüfuz gelistiricilerini, selatlastlEElîjanlarÇljel olusturma ajanlarIÇlmerhem bazlarIÇlparfümleri ve deri koruyucu ajanlarlüçerebilir. Koruyucular, humektanlar ve nüfuz gelistiricileri metil veya propil p-hidroksi-benzoat, and benzalkonium klorit, geliserin, propilene glikol, üre, vs gibi parabenler olabilir. YukarlElla deri üzerinde topikal uygulama için tarif edilmis olan farmasötik bilesimler ayni] zamanda tedavi edilecek olan vücut klêlTiII üzerine veya buna yakI olarak topikal uygulama ile baglantlmlilarak kullanUâbilir. Bilesimler, pansumanlar veya alternatif olarak plasterler, pedler, süngerler, stripler veya diger uygun esnek malzeme formlarEgibi özel ilaç aktarl cihazlarljracHJgilýla uygulama veya dogrudan uygulama için uyarlanabilir. Tedavi dozailarüie süresi Su nokta takdir edilecekti ki kombinasyonun ilaçlarÇlaynü/eya farklEllarmaöstik formülasyon içinde konkomitant olarak veya sßalElbir sekilde verilebilir. Eger sülüerilme söz konusu ise, ikinci (veya ilave) aktif muhteviyatI verilmesindeki gecikme, aktif muhteviyatI kombinasyonunun etkin etkisinin faydasIElkaybedecek sekilde olmamalIE Bu tarife göre bir kombinasyon için bir asgari gereklilik o sekildedir ki kombinasyon, aktif muhteviyatI kombinasyonunun etkin etkisinin faydaslîila olacak sekilde kombine kullani için amaçlanmalIlEl Bir kombinasyonun amaçlanan kullanIiÇl bulusa göre kombinasyonu kullanmaya yardIichlmak için tesisler, provizyonlar, uyarlamalar ve/veya diger araçlar ile gerçeklestirilebilir. Bu bulusun bir kombinasyonundaki iIaçIarI terapötik olarak etkili miktarlarlîlarasia, Alzheimer hastal[g]II semptomlar. azaltmak, klinik olarak açlEl hale geldigi zaman hastaliglI ilerlemesini durdurmak veya yavaslatmak, veya hastal[giI gelisme riskini önlemek veya azaltmak Için etkili olan miktarlar yer almaktadlEl Her ne kadar mevcut bulusuna aktif ilaçlarEiböIünmüs dozlar halinde verilebilse de - örnegin günde iki veya üç kez - kombinasyondaki her bir "aci bir ek günlük dozu tercih edilmektedir ve tek bir farmasötik bilesimde (birim dozaj formu) tüm iIaçlarI tek bir günlük dozu en fazla tercih edilendir. Uygulama, birkaç günden birkaç yllâ kadar günde bir defadan birkaç defaya kadar olabilir ve hastanlE] ömrü boyunca bile olabilir. Bir çok durumda kronik veya en azIdan periyodik olarak tekrarlayan uzun süreli uygulama endikedir. birimleri ifade etmektedir (örnegin kapsüller, tabletler veya yüklü slEEga silindirleri) ve her bir birim, gerekli farmasötikal taslîlEEIile birlikte istenilen terapötik etkiyi üretmek için hesaplanan önceden tespit edilmis miktarda aktif malzeme veya malzemeler içerir. Bir tercih edilen birim dozaj bilesimindeki her bir ilaci miktarüuygulama yöntemi, hastanI vücut aglîll[gll]/e yasÇlhastaHgI asamasü/e tedavi edilecek kisinin genel saglilZJ durumu göz önüne aIIrak potansiyel yan etki riski gibi bir çok faktöre bagIIIEl Buna ek olarak, bir özel hasta konusunda farmakogenomik bilgiler (bir terapötigin farmakokinetik,farmakodinamik veya etkililik profili üzerinde genotipin etkisi) kullanHân dozaj Etkileyebilir. Daha yüksek dozajlar. gerekli olabilecegi özel olarak zarar veren durumlara cevap verme durumu hariç olmak üzere, kombinasyonda her bir ilaci tercih edilen dozajüuzun süreli bakn tedavisi için genellikle öngörülen dozajI üzerinde olmayan veya faz 3 klinik çalismalarda güvenli oldugu kan [Elbnmlglolan dozlarI erimi dahilinde olacaktlEI Bulusun bir öne çlEan avantajElsudur ki her bir bilesik bir kombinasyon terapisinde düsük dozlarda kullanllâbilir ve kombinasyon halinde hasta için önemli bir klinik fayda saglar. Kombinasyon terapisi aslIa bilesiklerin bireysel olarak etkisinin olmadlglüleya düsük oldugu dozlarda etkili olabilir. Buna göre, bulusun özel bir avantajlIJ her bir bilesigin optimal altlîl dozlarIlÇlyani genellikle reçete edilen terapötik dozlardan daha düsük olan dozlarÇltercihen kadar düsük dozlar kullanimi Bu terapötik atüiozajlarda, bilesikler herhangi bir yan etki sergilemeyecektir ve bulusa göre kombinasyon, Alzheimer hastaligiII tedavi edilmesinde tam etkilidir. Tercih edilen bir dozaj, uzun süreli bakl tedavisi için genellikle reçete edilenin % 1 ila % 50'si arasIaki miktarlara karsl]]Kl gelmektedir. En tercih edilen dozaj, uzun süreli bakIi tedavisi için genellikle reçete edilenin % 1 ila % 'si aras-aki miktarlara kars[[[lZl gelmektedir. Bulusta kullan için ilaçlarI dozajlarII spesifik örnekleri asagi verilmektedir: az, daha da tercihen 50 mg/gün'den daha az akamprosat ve bu dozajlar özel olarak oral uygulama için uygundur. mg/gün'den az, daha da tercihen 25 mg/gün'den daha az baklofen ve bu dozajlar özel olarak oral uygulama için uygundur. - Aminokaproik Asit oral olarak günde yaklasllZlO.1 9 ila 2.4 9, - Bromokriptin oral olarak günde yaklasIKl 0.01 ila 10 mg, - Dietilkarbamazin oral olarak günde yaklasllîl0,6 ila 600 mg, - Kabergolin oral olarak günde yaklasüîll ila 10 mg, - Sinakalset oral olarak günde yaklasllîl0,3 ila 36 mg, - Sinarizin oral olarak günde yaklasilZl0,6 ila 23 mg, - Difilin oral olarak günde yaklasllîlg ila 320 mg, - Eplerenone oral olarak günde yaklasllZl 0,25 ila 10 mg, - Ifenprodil oral olarak günde yaklaslKlO,4 ila 6 mg, - Leflunomit oral olarak günde yaklasllîl0,1 ila 10 mg, - Levosimendan oral olarak günde yaklasllZl0,04 ila 0,8 mg, - Meksiletin oral olarak günde yaklaslElö ila 120 mg, - Moksifloksasin oral olarak günde yaklasllZl4 ila 40 mg, - Fenformin oral olarak günde yaklasllZl 0,25 ila 15 mg, - Kuinakrin oral olarak günde yaklaslE] 1 ila 30 mg, - Sulûsoksazol oral olarak günde yaklasllg20 ila 800 mg, - Sulodeksit oral olarak günde yaklasilîl0,05 ila 40 mg, - Terbinafin oral olarak günde yaklasllZl2,5 ila 25 mg, - Torasemit oral olarak günde yaklasllZl0,05 ila 4 mg, - Trimetadizin oral olarak günde yaklasllîl0,4 ila 6 mg, - Zonisamit oral olarak günde yaklasllîl0,5 ila 50 mg, Bilesimler aktif muhteviyat olarak sadece Baklofen ve Akamprosatt'tan olustugu zaman, bu iki bilesik farklEbranIarda kullanllâbilir, örnegin aglEllllZl cinsinden 0.05 ila 1000, tercihen Akamprosat/Baklofen aglEllHZloranIa olabilir. Ancak su nokta anlasllâcaktß ki fiili olarak verilen bilesenlerin miktarÇltedavi edilecek olan durum, verilecek olan bilesenlerin seçimi, bireysel hastanI yasÇlaglHllglü/e tepkisi, hastanI semptomlar.. ciddiyeti ve seçilen bilesikler da dahil olmak üzere ilgili kosullar Eglültia bir doktor tarafIdan tespit edilecektir. Bu nedenle, yukari belirtilmis olan dozaj erimleri, burada belirtilmis olan ögretiler için genel kllâvuzluk ve destek saglamayümaçlamaktadüve bulusun kapsamlElßIlHlandIEnaya yönelik degildir. Asaglki örnekler, sadece örnek amaclîla verilmistir ve sIlEIland [Bina içermemektedir. ÖRNEKLER Hayvanlar. bakiEl/e besiciligi ve deneyler, IASP'I ArastlElna ve Etik Konular Komitesinin (1983) kllâvuz ilkelerine göre gerçeklestirilmistir. A) Aß TOKSIKLIGI ILE ILGILI HASTALIKLARIN TEDAVISI Bu deneyler dizisinde, aday kombinasyonlar insan AßHz'sinin toksik etkilerini önleme veya azaltma kabiliyerleri bakIilEtlan test edilmistir. Aß M2 AD'ye maruz kalan Insan hastalardan allEbn biyopsilerde bulunan agregalarEteskil eden bir tam uzunluklu peptittir. Etki, AD'nin farklElfizyolojik özellikleri gösteren in vitro modellerdeki kombinasyonlarI aktivitesini belgelemek üzere farkIIZIhücre tipleri üzerinde tespit edilmektedir. i)hayvanlarI bilissel performansElve ii) AD'nin moleküler isaretler (apoptoz ndüksiyonu, oksidatif stres endüksiyonu, inflamasyon yolu endüksiyonu) Üzerinde kombinasyonlari etkisini degerlendirerek bu koruyucu etkiyi teyit eden, AD için bir fare modelinde in vivo çallîmalar gerçeklestirilmisir. 42'SININ TOKSIKLIGINI ÖNLEMEKTEDIR. Insan beyni mikro vasküler endoteliyal hücre kültürleri, Aß1-42 toksikligi üzerinde aday bilesik(ler) tarafian saglanan korumayßallgtnak üzere kullanllîhlgtlü Insan beyni mikrovasküler endotelyal serebral hücreleri (HBMEC, ScienCelI Ref 1000, geçis 'da donmus) hlîlEliJir sekilde 37 OC' de bir su banyosunda çözdürülmüstür. Süpernatant, % Eagle's ortamIEia (DMEM; Pan Biotech ref P04-03600) derhal yerlestirilmistir. Hücre süspansiyonu + 4 0C' de 10 dakika boyunca 180 g'de santrifüje edilmistir ve topaklar CSC süspansiyona tabi tutulmus ve 96 çukurçuk plakada çukurcuk bas. 20.000 hücrelik yogunlukta nihai 100 i.il'lik bir hacimde tohumlanmlgtmmatrigel katmanlîbiyo-kaplama serebral hücreler spontan olarak kapiler ag morfogenezi prosesine baslamlgtlEi(33). Kosul bas. 6 çukurcuk olacak sekilde kosul baslEb üç ayrEkültür gerçeklestirilmistir. Test bilesikleri ve Insan amiloit -ßHz tedavisi (ana solüsyon) rekonstitüe edilmistir ve karanliIZta 3 gün boyunca 37 0C'de yavasça çalkalanmlStE Kontrol ortamüyn Ügosullarda hazlEIianmIStlEI 3 günden sonra, insan amiloit peptit, kontrol ortam-a seyreltilmis 2.5 uM'de HBMEC üzerinde kullanilBiIStlE (optimal inkübasyon zamanm AßHz peptit, 18 saatlik inkübasyon boyunca matrigel üzerinde HBMEC tohumlamaleUa 2 saat sonra ilave edilmistir. Matrigel üzerinde HMBEC tohumlamasIan bir saat sonra, test bilesikleri ve VEGF-165 kültür ortamIia çözdürülmüstür ((+ ve daha sonra AßHz uygulamasIan önce 1 saat boyunca HBMEC ile pre inkübe edilmistir (10 m'lik kültür çukurcugu bas. bir nihai hacimde). Testten veya VEGF inkübasyonundan bir saat sonra (matrigel üzerinde hücre tohumlamasIan iki saat sonra), 100 pl Aß1.42, ilave ilaç dilüsyonlarIEönlemek amaclýla, test bilesikleri veya VEGF'in mevcudiyetinde (200 pl'lik toplam hacim /çukurcukta) kontrol ortamlEUa seyreltilmis 2.5 iJM'Iik bir nihai konsantrasyona ilave edilmistir. Kültür plakalarII organizasyonu VEGF-A'nI bir ön anjiyogenik izoformu oldugu bilinen VEGF-165, referans bilesigi olarak bu çalSlnadaki tüm deneyler için kullanHIJHlStlEl VEGF-165, anjiyogenezde dahil olan en bol VEGF izoformlar-an biridir. VEF, 10 nM'de referans test bilesigi olarak kullanllhîlgtlüßekil 1). Asag-ki kosullar degerlendirilmistir: - Negatif Kontrol: Sadece ortam + 0.10/0 DMSO - Intoksikasyon: 18 saat için amiloit-[31-42 (2.5pM) - Pozitif kontrol: 18 saatlik bir inkübasyon süresi boyunca Aß1-42 ( ilavesinden 1 saat önce VEGF-165 (10nM) (1 referans bilesigi/kültür) - Test bilesikleri: 18 saatlik bir inkübasyon süresi boyunca Aß1-42( ilavesinden Kapiler ag kantifikasyonu ile 2 resi çekilmistir. Tüm görüntüler aynükosulda allElnlgtE Developer yazlHEhlZI(GE Healthcare) kullanilârak anjiyogenez aglarII analizi yapilîhlgtlîl Kapiler agI toplam uzunlugu degerlendirilmistir. Veri Islemesi Amiloit yaralanmasIIZlifade edecek sekilde kontrol kosullarII yüzdesi bakIiIEUan (intoksikasyon yok, amiloit yok = % 100) veriler ifade edilmistir. Tüm degerler, 3 kültürün ortalamasEblarak ifade edilmistir +/-SEM (s.e.mean) (kosul bas. n = 6 çukurcuk ). Farkllj kosullar üzerinde istatistiksel analizler gerçeklestirilmistir (ONE-WAY ANOVA, arkaleUan izin verildiginde Dunnett testi, Statview yazl1]]ii versiyonu 5.0). Sonuçlar Baklofen - Akamprosat kombinasyonu, Sekil 2'de gösterildigi gibi, HBMEC modelnde Insan AßHz peptitinin toksikligine karslîlönemli bir koruyucu etki vermektedir (AßHz peptit yaralanmaleUa % 24 azalma gözlenmistir). Sonuçlar açllö bir sekilde sunu göstermektedir ki insan amiloit peptiti (Aß1-42 2.5uM) tarafIan intoksikasyon Ilaç kombinasyonu tarafIan önemli ölçüde önlenmis olup, bu konsantrasyonlarda, ilaçlar tek basIEb yukar- tarif edimis olan deneysel kosullard intoksikasyon üzerinde önemli bir etki göstermemistir. Bunun tersine olarak, Baklofen ve Terbinafin kombinasyonu (burada sadece karsllâstlElna amaclýla verilmistir) Aß1-42 'ye karsEldaha zaylEl bir koruma vermektedir (Aßi-42 peptit yaralanmaleUa % 15 kadar bir azalma gözlenmistir) (Sekil 3). Böylelikle, her ne kadar bu iki kombinasyon ABi-42 'ye karsEbir korumaya izin verse de, Baklofen - Akamprosat kombinasyonu açik] bir sekilde öndedir. AsIIa, bu ilaçlar herhangi bir etkisi bulunmayan konsantrasyonlarda, kombinasyon halinde kullanIiglIa Aßi-42 'ye karsElinsan HMBE hücrelerinin önemli düzeyde korunmalela izin vermektedir. Ayrlîla, Baklofen - Akamprosat kombinasyonu, Baklofen- Terbinafin kombinasyonundan daha etkilidir. Baklofen ve AkamprosatlEl bu tür bir etkisi, örnegin Baklofen - Terbinafin kombinasyonun etkisi ile karsllâst-[gllEUa % 60 düzeyinde önemli bir iyilesmeyi temsil etmektedir. Ayrlîla, Baklofen - Akamprosat kombinasyonunda kullanllân Baklofen konsantrasyonu, Baklofen - Terbinafin kombinasyonunda kullanllân Baklofen konsantasyonundan çok daha düsüktür (25 kat azalma) 1.2 Primer kortikal nöron hücreleri üzerinde insan A 1-42 gegtitin toksikligi üzerindeki etkisi Primer kortikal nöronlarI kültürü Fare kortial nöronlarESinger et al tarafian tarif edildigi sekilde kültürlenmistir. (47). Klghca günlük gestasyonda olan hamile disi fareler, servikal dislokasyon ile öldürülmüs (Rats Wistar) ve fetuslar uterustan çlElartHBilgtlEl Korteksçkbrtüîlîlg ve % 2 Penicillin 10.000 U/ml ve Streptomisin 10 mg/ml ve % 1 bovin serum albümini (BSA) içeren Leibovits (L15) buz soguklugunda ortama yerlestirilmistir. Korteksler, 37 0C 'de 20 dakika için tripsin ile çözülmüstür (% içeren Dulbecco'nun modifiye edilmis EagleotamEl(DMEM) ilavesi ile durdurulmustur. Hücreler daha sonra 10 ml pipet içinden 3 seri geçis ile çözdürülmüs ve + 4°C'de 10 dakika boyunca 515 g'da santrifüj edilmistir. Süpernatant atilBilStlîlve hücrelerin topagüBZ7 (2%), L-glutamin (0.2mM), 2% PS solüsyonu ve 10ng/ml BDNF `den olusan bir tanlanmlg kültür ortamIa yeniden süspanse edilmistir. Yasatllâbilir hücreler, tripan maci eksklüzyon testi kullanilarak bir Neubauer sitometresinde sayilBiEtB Hücreler 96 çukurcuklu plakada (çukurcuklar önceden poli-L-Iysine (10ug/ml) ile kaplanmlgtlî) 30.000 hücre /çukurcuk yogunlugunda tohumlanmlSIlEve nemlendirilmis hava (95%)/C02 (5%) atmosferinde + 37 0C 'de kültürlenmistir. Kosul basi 6 çukurcuk olacak sekilde kosul bas. üç bag lslîlkültür gerçeklestirilmistir. Test bilesikleri ve Insan amiloit 431-42 tedavisi Klgca, Aß1-42 peptit 40 pM'de tanIilEikültür ortamIa (ana solüsyon) rekonstitüe edilmistir ve karanlltha 3 gün boyunca 37 0C 'de yavasça çalkalanmlStE Kontrol ortamüiynükosullarda hazlEIlanmIStlB 3 gün sonra, primer kortikal nöronlar üzerinde solüsyon su sekilde kullanüüügtlîi Nöron kültüründen 10 gün sonra, test bilesikleri kültür ortamIa (+% çözdürülmüs ve daha sonra Aß1.42 uygulamaslian önce 1 saat boyunca nöronlarla pre inkübe edilmistir (100 pl'lik kültür çukurcugu bas. nihai hacimde) Test bilesiklerinin inkübasyonundan bir saat sonra, ilave test bilesigi seyreltigini önlemek amaclýla, iIaçIarI mevcudiyetinde 10 pM' lik bir nihai konsantrasyona 100 pl 'lik Aßi- 42 ilave edilmistir. Kortikal nöronlar 24 saat boyunca intoksike edilmistir. Kosul basi 6 çukurcuk olacak sekilde kosul bas. üç ayrEkültür gerçeklestirilmistir. Slâsls-Lla pozitif kontrol ve referans bilesikleri olarak BDNF (50ng/ml) ve EstradioI-ß (150nM) kullanilEwIStlE Kosul basli-ala 12 çukurcuk olacak sekilde kosul baslEla üç ayrElkültür gerçeklestirilmistir. Kültür plakalarII organizasyonu 150nM'de EstradioI-ß bir pozitif kontrol olarak kullanllüilglîlßekil 4). Estradiol-B kültür ortamIa çözdürülmüs ve amiloit-[31-42 uygulamasIan önce 1 saat Asag-ki kosullar degerlendirilmistir: KONTROL PLAKASI: 12 çukurcuk /kosul - Negatif Kontrol: Sadece ortam + 0.10/0 DMSO Intoksikasyon: 24 saat boyunca amiloit-B1-" (10 pm) - Referans bilesigi: Estradiol (150nM) lsaat. - ILAÇ PLAKASI: 6 çukurcuk /kosul Negatif Kontrol: Sadece ortam + 0.1% DMSO Intoksikasyon: 24 saat boyunca amiloit-[31-42 (10 iJrn) - Test bilesikleri: Test bilesikleri - 1 saat, bunu müteakip 24 saat boyunca amiloit-[31-42 (10 IJM) Laktat dehidrogenaz (LDH) aktivite tahlili Intoksikasyondan 24 saat sonra, süpernatant allEhiEl ve Sitotoksisite Tespit Kiti ile analiz toksikliinin kantifikasyonu için bu kolorimetrik tahlil, süpernatanta ölçen hücrelerin sitozolundan salIn laktat dehidrogenaz (LDH) aktivitesinin ölçümüne dayanmaktadB Veri Islemesi Amiloit yaralanmaslü ifade edecek sekilde kontrol kosullarII yüzdesi bak"an (intoksikasyon yok, amiloit yok = % 100) veriler ifade edilmistir. Tüm degerler, 3 kültürün ortalamasüalarak ifade edilmistir +/-SEM (s.e.mean) (kosul bas. n = 6 çukurcuk ). FarklEl kosullar üzerinde istatistiksel analizler gerçeklestirilmistir (ONE-WAY ANOVA, arkasEUan izin verildiginde Dunnett testi, Statview yazlüiîîi versiyonu 5.0). Sonuçlar Baklofen ve Akamprosat. kombinasyonu, Sekil 5'te gösterildigi gibi primer kortikal nöron hücrelerinde insan Aß1-42 peptitinin toksikligine karsEönemli bir koruyucu etkiye neden olmaktadIEI (hücre hayata kalIiIEI°/o 34 artiElnlStlE). Sonuçlar açilZl bir sekilde sunu göstermektedir ki insan amiloit peptiti (Aß1- tarafIan intoksikasyon kombinasyonla önemli ölçüde önlenmistir ve bu konsantasyonlarda Baklofen veya Akamprosat tek bas. intoksikasyon üzerinde önemli bir etkiye sahip degildir. Bunun tersi olarak, her ne kadar bu modelde aktif olsa da, Sulfisoksazol ve Sinakalset kombinasyonu, Aß1.42'ye karslîlaha zayilîlbir koruma saglamaktadlE(°/o 19, Sekil 6). Böylelikle, her ne kadar bu iki kombinasyon AB 1-42'ye karslîbir korumaya izin verse de, Baklofen - Akamprosat kombinasyonu açIKl bir sekilde öndedir. AsIIa, bu ilaçlar herhangi bir etkisi bulunmayan konsantrasyonlarda, kombinasyon halinde kullanIlgiIa Aß1.42'ye karsßrimerkortikal nöron hücrelerinin önemli düzeyde korunmasi izin vermektedir. Ayrlâ, Baklofen - Akamprosat kombinasyonu, Sulfisoksazol- Sinakalset kombinasyonundan daha etkilidir. Baklofen ve Akamprosat. bu tür bir etkisi, örnegin Sulfisoksazol ve Sinakalset kombinasyonun etkisi ile karsilâst-Iigla % 60 düzeyinde önemli bir iyilesmeyi temsil etmektedir. Birlikte ele allEUigiHa bu sonuçlar, Azlheimer hastallglII bir çok in vitro modelnde, Baklofe - Akamprosat kombinasyonlarlElI beklenmedik ve önemli bir pozitif etkisini göstermektedir. Etki, diger Baklofen tabanlEkombinasyon terapileri (ör. Baklofen - Terbinafin) veya diger aktif kombinasyon terapileri (Sulfisoksazol - Sinakalset) tarafIan tetiklenenlere klýlasla daha üstündür. Kortikal hücreler üzerinde Akamprosat ve Homotorin koruma aktivitesinin bir karsllâstlânaslîl yapilBilgtlEl (Sekil 17). Bu sonuçlar sunu göstermektedir ki Akamprosat'I Homotorin adEl verilen türevi, Aß1-42 'ye karsßtkili bir korumaya izin vermektedir. Bu bulusun baglamIa, Baklofen ve Akamprosat türevleri ile degistirilebilir, ancak bu türevlerin burada tarif edilen tahlilde etkili olmasügerekmektedir. 1.3 Bir nörit bü üme ve sina s i Ievsellik modelinde A &'nin toksikligine kagÜ koruma Fare kortikal nöronlarEBinger et al taraf-an tarif edildigi sekilde kültürlenmistir. (35). Klîlaca 15 günlük gestasyonda olan hamile disi fareler, servikal dislokasyon ile öldürülmüs (Rats Wistar) ve fetuslar uterustan çilZlartilBilStlEl Korteks çlKleiitilBilglve % 2 Penicillin 10.000 U/ml ve Streptomisin 10 mg/ml ve % 1 bovin serum albümini (BSA) Içeren Leibovits (L15) buz soguklugunda ortama yerlestirilmistir. Korteksler, 37 C'de 20 dakika için tripsin ile çözülmüstür (% içeren Dulbecco'nun modifiye edilmis EagleotamEI(DMEM) ilavesi ile durdurulmustur. Hücreler daha sonra 10 ml pipet içinden 3 seri geçis ile çözdürülmüs ve + 4C'de 10 dakika boyunca 515 g'da santrifüj edilmistir. Süpernatant atlEhlStlElve hücrelerin topaglÇlBZ7 (2%), L-glutamin (0.2mM), 2% PS solüsyonu ve long/ml BDNF `den olusan bir tanlanmlgl kültür ortamIa yeniden suspense edilmistir. Yasatllâbilir hücreler, tripan maci eksklüzyon testi kullanüârak bir Neubauer sitometresinde sayllîhlgtB Hücreler 96 çukurcuklu plakada (çukurcuklar önceden poIi-L-Iysine (10mg/ml) ile kaplanmlgtlE) 30.000 hücre /çukurcuk yogunlugunda tohumlanmlstlîlve nemlendirilmis hava (95%)/C02 (5%) atmosferinde + 37 C'de kültürlenmistir. günlük kültürden sonra, hücreler ilaçlar ile inkübe edilmistir. 1 saat sonra, hücreler BDNF olmadan ancak ilaçlar ile birlikte tanIilanan ortamda ile intoksike edilmistir. Kortikal nöronlar 24 saat boyunca intoksike edilmistir. Pozitif (nöroprotektif) kontrol olarak BDNF (long/ml) kullanHIhlStlE Kosul basi 6 çukurcuk olacak sekilde kosul bas. üç baglislîlkültür gerçeklestirilmistir. Nöritlerin uzunlugu ve Sinaps kantifikasyonu 24 saatlik intoksikasyondan sonra Süpernatant allEtnlIstlEl ve kortikal nöronlar, 5 dakika boyunca etanol (% 95) ve asetik asit (% 5) soguk solüsyonu ile tespit edilmistir. % 0.1 saponin ile geçirgenligin saglanmaslia sonra, hücreler % 1 foetal inek serumu içeren PBS ile 2 saat boyunca bloke edilmistir. Daha sonra hücreler, monoklonal antikor anti mikro tübül iliskili protein 2 (MAP-2; Sigma) ile veya anti PSD95 (P246, Sigma)antikorlarl]le birlikte anti sinaptofisin (SYN, 55798, Sigma) ile inkübe edilmis ve sinaps kantifiye edilmistir. Bu antikorlar spesifik hücre gövdelerini ve nöronlarI nöritlerini (MAP2) ve pre ve post sinaptik elemanlarEQsÜslýla SYN ve PSD95) boyamlSIE Bu antikorlar, Aleksa Fluor 488 keçi anti fare IgG (Moleküler probu) ile ortaya çllZmlStE NöronlarI çekirdekleri, bir florasan isaretleyicisi ile etiketlenmistir (Hoechst solution, Çukurcuk bas., 20x büyütme ile InCell AnalyzerTM kullanilarak 10 resim allEhilStlü Tüm resimler aynEkosulda allEtnlStlE Nörit agII analizi, nörit agII toplam uzunlugunu degerlendirmek üzere Developer software (GE Healthcare) kullantlârak gerçeklestirilmistir. Sonuçlar Baklofen ve Akamprosat. kombinasyonu, Sekil 7'de gösterildigi gibi primer kortikal nöron hücrelerinde insan Aß1-42 peptitinin toksikligine karsElönemli bir koruyucu etkiye neden olmaktadlîl(nörit agIEP/o 80 artlîiinlStlE). Sonuçlar açila bir sekilde sunu göstermektedir ki insan amiloit peptiti (%142 tarafIan intoksikasyon kombinasyonla önemli ölçüde önlenmistir ve bu konsantasyonlarda Baklofen veya Akamprosat tek baslEb intoksikasyon üzerinde önemli bir etkiye sahip degildir. Ayrlîa, bu kombinasyon ile tedavi edilen nörit agII toplam uzunlugu, kontrol hücrelerinden önemli ölçüde farkllîdegildir. Bu nedenle, bu kombinasyon, kortikal nörn hücrelerin sadece insan Aß1.42 petitinin toksikligine karsEdegil, aynüamanda makul kortikal nörün hücrelerine göre bir nörit büyümesine karsßtkili korumaya izin vermektedir. INSAN Aß 25-35'in TOKSIKLIGINI ÖNLEMEKTEDIR. Hayvanlar Çallglnada Erkek Isviçre fareleri kullanllüilgtß Hayvanlar plastik kafeslerde yer almakta, laboratuar yiyecegine ve davranlglsal deneyler haricinde suyuna serbest erisimleri bulunmaktadlîl ve12 saatlik aydIllZl /karanlllZi döngüsünde düzenlenmis bir ortamda tutulmaktadlEl( . Deneyler ses geçirmez ve havaslZ düzenlenmis deney odalarIda gerçeklestirilmis ve bu odalarda fareler her deneyden önce en az 30 dakika tutulmustur. Kombinasyon tedavisi Ilaç(lar) gavaj ile günlük olarak verilmektdir (os basi). [325-35 peptit ve karlStlEllIhlSIBZS-BS peptit (kontrol) steril bidistil suda çözdürülmüs ve kullanIia kadar - 20 oC'de depolanmlgtlE ß-amiloit peptitleri daha sonar intraserebroventriküler (icv) olarak verilmistir. Kisaca her bir fare eter ile uyusturulmustur ve gözler ve kulaklarI arasIda esit mesafede, kafa taslZI düzlemine dik olarak, her gözden esit mesafede orta noktanI sag. dogru lmm tek yönlü bir paslanmaz çelik igne sokulmustur. Peptitler veya araç kademeli olarak yaklasllîl3 s içinde aktarllîhlgtlü Fareler, enjeksiyondan 1 dakika sonra normal davranlgl sergilemektedir. Uygulama alani: ön deneylerde Hindistan mürekkebi enjekte etmek suretiyle kontrol edilmistir. Ne ignenin sokulmasljhe de aracI enjeksiyonu sagkalIi, davranlglsal degisiklikler veya bilissel islevler üzerinde önemli bir etkiye neden olmamlgtlîl Ilaç tedavisi -1'inci günde, Aß25-35 peptitinin enjeksiyonundan 24 saat önce, ilaç kombinasyonlarEl/eya araç solüsyonlarÇl günde iki defa gavaj ile os bas. uygulanmlgtlü (8:00 am'de ve 6:00pm'de). karlStlElanlglAß25.35 peptit (kontrol) icv enjeksiyonu yapilIhlStlE 0 gün ve 7 gün arasIa, günde bir kere veya iki kere gavaj ile 05 bas. ilaç kombinasyonu veya araç solüsyonu verilmistir (8:00 am ve 6:00 pm'de). Bir hayvan grubu bir tek enjeksiyonda (8:00'de) gavaj Ile os bas. donepezil (referans bilesik - 1 mg/kg/gün) almaktadlEI Ilaçlar suda çözdürülmekte ve her bir gavaj uygulamasIan önce taze olarak hazlîllanmaktadlü 7'inci günde, tüm hayvanlar, Y-labirent testinde (uzamsal çallglna belleginin bir endeksi) spotane alternasyon performanslîlbaknlEtlan test edilmistir. 7 ve 8'inci günlerde, hayvanlar. baglamsal uzun süreli bellekleri, step-down tipi pasif kaçlElna prosedürü kullanllârak degerlendirilmistir. 8'inci günde, hayvanlar kesilmistir. Beyinleri çllZlarllIhE ve ilave analiz için - 80°C'de saklanmigtlû Kombinasyonlar intoksike hayvanlar. davranlslsal ve kognitif performanslarlü gelistirmektedir Spontane alternasyon performanslarE-l Y Labirent Testi 7'inci günde, tüm hayvanlar, Y-labirent testinde (uzamsal çallgna belleginin bir endeksi) spotane alternasyon performansEbakIiEtlan test edilmistir. Y labirenti gri polivinilkloritten yapHBiStlEl Her bir kol 40 cm uzunlugunda, 13 cm yüksekliginde, tabanda 3 cm genisliginde, tepede 10 cm genisligindedir ve esit bir açi yaklübamaktadlü Her bir fare bir kolun ucuna yerlestirilmekte ve 8 dakikalllîl bir oturum boyunca labirent içinde serbest bir sekilde hareket etmelerine izin verilmektedir. AynERola muhtemel geri dönüsler dahil olmak üzere kol girisleri serisi görsel olarak kontrol edilmektedir. Bir alternasyon, ardilZIdurumlarda tüm üç kola girisler olarak tanilanmaktadlü Bu nedenle maksimum alternasyonlarI sayEQtoplam kol girislerinin saymksi ikidir ve alternasyon yüzdesi (fiili alternasyon / maksimum alternasyon) x 100 olarak hesaplanmaktadlB Paramtereler, alternasyon yüzdesini (bellek endeksi) ve toplam kol girisi say-Eieksplorasyon endeksi) içermektedir. Ekstrem davranlâ sergileyen hayvanlar (Alternasyon yüzdesi < 25% veya 85% veya kol girislerinin saylîl:l<10) atlEhaktadlE Genellikle bu hayvanlar. % 0-5'ini teskil etmektedir. Bu test davranlssal düzeyde Aß5.35 enjeksiyonu tarafIan farelerde neden olunan etki veamnestik etkiyi analiz etmeye yard IicüilmaktadE Pasif kaçlEtna testi Aparat beyaz polivinilklorit duvarlarla aydlElatliüilg ve digeri siyah polivinilklorit duvarlarla koyulastlîiîhlgl iki kompartmanlEI(15 x 20 x 15 cm yükseklik) ve bir lîgara zeminli bir aparattlE Giyotik kaplZl her bir kompartmanlîlaylElnaktadE AparatI 40 cm üzerine konumlandlEllßilglolan 60 W'IUZJ lamba, deney slBisIa beyaz kompartmanüiydlatmaktadlü Karlgtlîllfhlgl footshock (3 saniye boyunca bir sok jeneratörü karlgtlElElîEl kullanilârak lîgara zemine aktarilâbilmektedir (Lafayette Instruments, Lafayette, USA) Giyotik kapüagitim oturumu sßsia ilk asamada kapatilüiaktadlü Her bir fare beyaz kompartmanI içine yerlestirilmektedir. 5 saniye sonra, kapEi/ükselmektedir. Fare karaltllüilglkompartmana girdiginde ve pençelerini lîgara zemin üzerine yerlestirdiginde, kapEl saniye boyunca aktariHE Step-through gecikmesi, yani koyulastlîllîhgkompartmana girmek için geçen gecikme ve vokalizasyonlarI sayiîllaydedilmektedir. Tutma testi egitimden 24 saat sonra gerçeklestirilmistir. Her bir fare tekrar beyaz kompartmanI içine yerlestirilmektedir. 5 saniye sonra kapllâr kaldmlgl step-through gecikme ve kaçis] gecikmesi, yani beyaz kompartmana dönmek için geçen zaman 300 s'ye kadar kaydedilmektedir. Davranlgisal performanslar ve [325-35 peptit icv enjeksiyonundan 7 gün sonra gerçeklestirilen biyo kimyasal tahlillerde pozitif sonuçlar gözlenmistir. Baklofen ve Akamprosat'l kombinasyonu, Sekil 8, 9 & 10'da gösterildigi gibi Intoksike hayvanlar. davranlgal ve bilissel performanslarEilizerinde önemli bir koruyucu etkiye neden olmaktadlB Sekil 8'de, sadece % 53.8 alternasyon ile, intoksike edilen fare, kontrol ile karsilâst-Ilgla güçlü bir sekilde bozulmus uzamsal çallSi'na bellegi sergilemistir. Kontrol ile karsllâst-[gllEUa alternasyon yüzdelerinin % 48'inden daha fazla bir iyilesme ile, zarar görme, Baklofen ve Akamprosat ile tedavi edilen fareler üzerinde önemli bir sekilde önlenmektedir. Benzer sekilde 9 ve 10 sekilleri sunu göstermektedir ki intoksite hayvanlar slüslsîla kaçlg gecikmeleri ve step-through gecikmelerindeki puanlar. göre bozulmus davranlgtal ve bilissel performanslar sergilemektedir. Her iki testte, Baklofen ve Akamprosat'I kombinasyonu, bozulmada önemli bir düzeltmeye izin vermektedir. Bu kombinasyon ile tedavi edilen farelerin kaçlg gecikmesi kontrol farelerinden önemli düzeyde farklEUegildir (Sekil 9) ve step-through gecikme (Sekil 10) bulusun kombinasyonlarEile tek baslEla ilaçlar ile karsllâst-[gllEUa kombinasyonun gelistirilmis bir etkisi ile artmaktadlB Bellek bozulmasElAlzheimer hastallgiII erken asama özelligidir ve bu sonuçlar aç[lZl bir sekilde amiloit peptitin davranlglsal ve bilissel performanslar (bellek dahil) üzerindeki toksik etkisinin, bulusun kombinasyonlarliile önemli sekilde önlenebilecegini göstermektedir. AyrEla, Sekil 16 sunu göstermektedir ki Baklofen (480ug/kg/day), Akamprosat (32ug/kg/day) ve Donepezil (O,25mg/kg/day)'in son derece düsük dozu, Y-labirent testi ile ölçüldügü sekilde farelerin davranlglsal ve bilissel performanslar. komple bir korumasi izin vermektedir. Her ne kadar donepezil bu konsantrasyonda uzamsal çallsma bellegi üzerinde önemli bir etkiy sahip olmasa da (0/0 32 koruma), Baklofen ve Akamprosat kombinasyonu ile birlikte kullanliüintoksite farelerin bilissel performanslar.. komple (% 98) korumaleh izin vermektedir. Bulusun kombinasyonlarüeylemlerini güçlendirmek amaclýla diger terapiler ile birlestirilebilmektedir. Kombinasyonlar nörolojik hastall]illarI nörofizyolojik iliskisini iyilestirmektedir Kombinasyon terapileri AB intoksikasyonun in vivo modelinde test edilmektedir. BunlarI nörolojik hastallElarda etkilenen bi çok parametre üzerindeki etkileri degerlendirilmektedir: - Apoptozun bir göstergesi olarak degerlendirilen, kaspaz ( 3 ve 9) ekspresyon düzeyi, - Oksidatif stres düzeyi için bir markör olarak degerlendirilen Iipit peroksidasyon - Beyin inflamasyon düzeyinin bir markörü olarak degerlendirilen GFAP ekspresyon tahlili - Genel sinaps bütünlügü (sinaptofizin ELISA). - CAI'de yasatllâbilir nöronlarI kantifikasyonu Bey/'n Kan Bar/yeri bütün/ügü Aß tarafIdan hayvan intoksikasyonu konusundaki deneysel tasarIi bölüm III'teki ile aynIlEl Kan beyin bariyeri (BBB) bütünlügü üzerinde kombinasyon terapilerinin potansiyel koruyucu (Sc.Aß) ile intraserebroventriküler (icv) enjeksiyonu yapüân farelerde enjeksiyondan 7 gün sonra analiz edilmistir. Aßzs-35 enjeksiyonundan 7 gün sonra, hayvanlar, EB (Evans Blue) öntemi kullanilârak BBB bütünlügünü tespit etmek için test edilmistir. EB boyasIlEl periferal enjeksiyondan sonra serum albüminine baglandfgilîlbilinmektedir ve bu serum albümin için bir izleyici olarak kullanllüilglü EB boyasü%2 tuz'da, 4 ml/kg) transkardiyak perfüzyondan 3 saat önce intraperitoneal (ip) olarak enjekte edilmistir. Fareler daha sonra i.p. 200 ul ön karEEli ketamin 80 mg/kg, ksilazin 10 mg/kg ile anastesi edilmis ve gögüs açlliilglîl Sag atriyumdan gelen swenksiz hale gelene kadar yaklasllZl 15 dakika boyunca 250 ml'Iik tuzla fareler transkardiyal olarak perfüze edilmistir. Dekapitasyondan sonra, beyin çlKartllÜilgl ve üç bölgeye ayrilB'ilgtB serebral korteks (sol+ sag), hippokampus (left + right), diensefalon. Daha sonra her bir beyin bölgesi, EB albümin ekstravasasyonunun kantitatif ölçümü Için tartllîhlStlEl Numuneler, fosfat tamponlu tuz solüsyonunda homojenize edilmis ve proteini çökeltmek için %60 trikloroasetik asit'in ilavesinden sonra vorteksleme ile karlgtlîllü'ilgtß Örneklemler 4°C'de sogutulmus ve daha sonra 10,000 g'da 4°C'de 30 dakika boyu santrifüjlenmistir. Süpernatant spektrofotometre kullanarak EB abzorbanslîlçin 610 nm'de ölçülmüstür. EB her ikisi için de kantfiye edilebilmektedir o albüminin bilinen konsantrasyonu ile elde edilen bir standart egri kullanüârak ug/mg beyin dokusu o ug/mg protein. Genel sinaps bütünlügü (sinaptofizin ELISA). Sinaptoûsin, sinaps bütünlügü için bir markör olarak seçilmistir ve bir ticari ELISA kit kullanilârak tahlil edilmistir (USCN , Ref. E90425Mu) Numuneler hippokampus dokularldan hazEllanmlg ve imalatçEl/e referans literatür tarafIan tarif edildigi sekilde bir ekstraksiyon tamponunda homojenize edilmistir. Dokular buz soguklugunda PBS (0.02 mol/l, pH 7.0-7.2) `de durulanmlg ve fazla kan iyice temizlenmis ve nitrojen dondurmasliîtlan önce ve -80 CC depolamada tartilIhlStlE Dokular küçük parçalara kesilmistir ve bir cam homojenizör ile 1 ml buz soguklugunda fosfat tampon tuz (PBS) solüsyonunda homojenize edilmistir. Sonuçta elde edilen süspansiyon bir ultrasonik hücre disrüptörü ile sonike edilmis veya hücre membranlarlüjaha fazla künak için iki buz çözdürme döngüsüne tabi tutulmustur. Daha sonra, homogenatlar 5,000 g'da 5 dakika boyunca santrifüje edilmistir ve süpernatant derhal tahlil edilmistir. Tüm numuneler triplikatlarda analiz edilmistir. Ektraksiyon performansllîdegerlendirmek ve normalizasyona izin vermek için Pierce BCA (bisinkoninik asit) protein tahlil kiti (Pierce, Ref. #23227) ile proteinlerin kantifikasyonu gerçeklestirilmistir. Toplam protein konsantrasyonlarlîdaha sonra standart egri dilüsyonlarIan hesaplanmlgve normalize ELISA sonuçlar. hizmet etmistir. CA! 'de yasatßbi//f nöron/WE kantifikas yonu 8'inci günde, her bir fare, 80 mg/kg ve ksilazin 10 mg/kg ön karlglînlIan ip 200 pl miktarEl ile anestetize edilmis ve 100 ml salin solüsyonu ile ve arkasEtlan 100 ml 4% paraformaldehit ile transkardial olarak perfüze edilmis. Beyinler ç[lZlartl]Bilgl ve 4°C'de %4 paraformaldehit solüsyonunda post-fiksasyondan sonra 24 saat boyunca bekletilmistir. Post fiksasyondan sonra beyinler fosfat tampon tuz (PBS) solüsyonunda ylEbnmlgl daha sonra cerebellum çlKbrtllüîlgl ve ön beyinler dilimlenmek üzere bir vibratom plakaslîüzerine yerlestirilmistir (Leica VTIOOOS, Leica, Wetzlar, Germany). Beyinler, bir vibratom kullanllârak koronal kesitlerde (20 um kalI[g]Ia) kesilmistir (Leica VTIOOOS, Leica, Wetzlar, Germany). Seri kesitler PBS ile 24 çukurcuklu plaka üzerine yerlestirilmistir. Bunlar daha sonra hippokampal formasyonu içerecek sekilde seçilmistir ve 9 kesit jelatin kapltham seride yerlestirilmistir (kresil moru) Tüm slaytlar, ayrlih1aylîönlemek için 48 saat boyunca oda lelakllglIa kurutulmaktadlEl Kresil moru boyamasl kadar slaytlar oda slîlakllgllda depolanmlStlEl Kesitler daha sonra % 0.2 kresil moru aylücEile boyanmlgtlEl(Sigma-Aldrich), daha sonra derecelenmis etanol ile dehidre edilmis, tolüen ile isleme tabi tutulmus ve Mounteks ortamlîl ile monte edilmistir (BDH Laboratory Supplies, Poole, Dorset, UK) Montaj isleminden sonra slaytlar 24 saat kurutma için Oda SlElakllgllEUa tutulmustur. CA 1 alanII incelemesi bir Ella mikroskobu kullanilârak gerçeklestirilmis (Dialux 22, Leitz), dilimler bir CCD kamerasüçinden (Sony XC-77CE, Sony, Paris, Fransa) ve NIHImage® v1.63 yazDJEiEQNIH) ile dijitallestirilmistir. CAI ölçümü ve piramidal hücre sayIilarElmageJ® (NIH) kullanllârak islenmistir. Veriler, her bir grup için milimetre baslEla CA 1 piramidal hücrelerinden dokuz dilim aracHJgllîLla eksprese edilmistir (sol ve sag hippokampus CAI sayIiDI49). Oks/dat/'f stres :ah/171' Fareler dekapitasyon ile öldürülmüs ve her iki hippokampus hlîllîlbir sekilde çllîlartllßilgl tanimi& ve tahlil edilene kadar slîünitrojende tutulmustur. Çözdürme isleminden sonra hippokampus soguk metanolde ( 1/10 aglBllEl/hacim) homojenize edilmis, 5 dakika boyunca 1,0009 'da santrifüje edilmis ve süpernatant eppendorf tüpüne yerlestirilmistir. Her bir homogenatI reaksiyon hacmi FeSO4 1 mM, HZSO4 0.25 M, ksilenol turuncu 1 mM'ye ilave edilmis ve oda lelakllglIa 30 dakika boyu inkübe edilmistir. 580 nm (A580 1)'de abzorbansI okunmasIdan sonra, 10 pl kumen hidroperoksit 1 mM (CHP) numuneye ilave edilmis, oda slîlakllgilda 30 dakika boyu inkübe edilmis ve maksimal oksidasyon düzeyi tespit edilmistir. Abzorbans 580 nm (A580 2)'de ölçülmüstür. Lipit peroksidasyon düzeyi CHPE = A olarak tespit edilmis ve doku aglElllgiEl bas. CHP dengi olarak ve kontrol grubu verilerinin yüzdesi olarak eksprese edilmistir. Kaspas yo/u endÜkSIyon tahlil/ ve GFAF ekspresyon tab/171' Fareler dekapitasyon ile öldürülmüs ve her iki hippokampus hIZDJir sekilde çlKlartlEhlgl buz soguklugunda PBS (0.02 mol/I, pH 7.0-7.2)'de durulanmüg] ve fazla kan temizlenmis, iyice tartliîzhg ve tahlil edilene kadar slîlîlnitrojende tutulmustur. Dokular küçük parçalara kesilmistir ve bir cam homojenizör ile 1 ml buz soguklugunda PBS ile homojenize edilmistir. Sonuçta elde edilen süspansiyon bir ultrasonik hücre disrüptörü ile sonike edilmis veya hücre membranlarIEdaha fazla klîilnak için iki buz çözdürme döngüsüne tabi tutulmustur. Daha sonra, homogenatlar 5 9'de 5 dakika boyunca santrifüje edilmistir ve süpernatant derhal tahlil edilmistir. Deneyler su ticari tahlil ile gerçeklestirilmistir: Kaspas-3 (USCN - E90626Mu), Kaspas-9 Ektraksiyon performansllîtlegerlendirmek ve normalizasyona izin vermek için Pierce BCA (bisinkoninik asit) protein tahlil kiti (Pierce, Ref. #23227) ile proteinlerin kantifikasyonu gerçeklestirilmistir. Baklofen ve Akamprosat'I kombinasyonu, Sekil 11, 12 ve 13 & 14'de gösterildigi gibi intoksike hayvanlar. nörofizyolojik fonksiyonlar üzerinde önemli bir koruyucu etkiye neden olmaktadlE Islenmemis intoksike hayvanlar ile karsllâst-[giia % 60'dan fazla bir koruma ile, kombinasyon nöronlarI (Sekil 11) ve sinaptik yogunlugun (Sekil 13) korunmasEiçin etkilidir. Benzer sekilde, Sekil 12, baklofen ve Akamprosat kombinasyonunun, isleme allEmamlgl intoksike hayvanlar ile karsüâst-@Ia BBB bütünlügünü (%76) korudugunu göstermektedir. Son olarak, bu kombinasyon terapisi, tedavi edilmemis intoksike hayvanlar (Sekil 14) ile karsllâst-[gllîlzaman, tedavi edilmis hayvanlari beyinlerinde Aß'nin neden oldugu genel oksidatif stresin azaltlEhaletla etkilidir. Örneklerin A Bölümünde gösterildigi gibi, Alzheimer hastallgllîlve iliskili bozukluklar gibi nörodejeneratif bozukluklar dahil olmak üzere, bir çok nörolojik bozuklukta zarar görmüs olan bir çok nörolojik fonksiyon, Baklofen - Akamprosat kombinasyonu ile korunmakta veya semptomlarlîglieciktirilmekte veya azaltllBiaktad B B) NÖRONAL HÜCRELER ÜZERINDE GLUTAMAT TOKSIKLIGININ ÖNLENMESI Bu diger deney setinde, aday bilesikler, nöronal hücreler üzerinde glutamat toksikliginin toksik etkilerini önleme veya azaltma kabiliyetleri bak"an test edilmistir. Glutamat toksikligi, MultipUZl Skleroz, Alzheimer HastallglÇl Amiyotrofik Lateral Skleroz, Parkinson Hastallglü Huntington Hastal[glü nöropatiler, alkolizm ve alkol çekilmesi veya omurilik yaralanmasElgibi nörolojik hastaliklar veya bozukluklar. patogenezinde gözlenmektedir. Ilaçlar ilk olarak bireysel olarak test edilmekte, arkasldan kombinatoryel eylemlerininin tahlili incelenmektedir. Yöntemler Bulusun ilaç kombinasyonlari. etkililigi, primer kortikal nöron hücreleri üzerinde degerlendirilmistir. Bu tahlillerde kullanllân protokol, yukarlflhki A.I.2 bölümünde tarif edilenle aynIlE G/umat toksi'k//g/ tah/i//er/ Bilesiklerin nöroprotektif etkisi, spesifik olarak glutamaterjik nöronlarüaçlgb vuran nörit aglîl (Nörofilaman imüno boyama (NF)) kantifikasyonu ile degerlendirilmistir. Nöron kültürünü 12 gününden sonra, aday kombinasyonlar. ilaçlarElkültür ortamlülda (% + çözdürülmüstür. Aday kombinasyonlar daha sonra Glutamat yaralanmasIan önce 1 saat boyunca nöronlar ile pre inkübe edilmistir. Inkübasyondan bir saat sona, aday kombinasyonlar. mevcudiyetinde, 20 dakika boyunca Glutamat ilave edilmis, 40 pM `lik nihai konsantrasyona getirilmis ve ilave ilaç dilüsyonu önlenmistir. Inkübasyonun sonunda, ortam, glutamatslZ aday kombinasyonlu ortamda degistirilmistir. Kültür glutamat yaralanmasIan 24 saat sonra sabitlenmistir. MK bir pozitif kontrol olarak kullanilÜilStlEl Saponin (Sigma) ile permeabilizasyondan sonra, hücreler % 10 keçi serumu içeren PBS ile 2 saat boyunca bloke edilmis, daha sonra hücreler Nörofilaman antikoruna (NF, Sigma) karsEl hare monoklonal primer antikor ile inkübe edilmistir. Bu antikor Aleksa Flor 488 keçi anti-fare Hücrelerin çekirdekleri bir florasan markörü (Hoechst solution, SIGMA) ile etiketlenmis ve nörit agü için durum baslEb altßukurcuk kullanllß'ilSIE Sonuçlar Baklofen - Akamprosat kombinasyonu, kortikal nöronal hücreler için glutamat toksikligine karsEl bir koruyucu etki saglamaktadß Sekil 15'de örnegi verildigi sekilde, bulusun kombinasyonlarÇlyukarlâla tarif edilmis olan deneysel kosullar altia nöronlarElglutamat toksikliginden güçlü bir sekilde korumaktadlE Su noktanI kaydedilmesi önemlidir ki, ilaçlarI tek bas. bir düsük koruyucu etkiye sahip oldugu ilaç konsantrasyonlarEkullan[lârak etkili bir koruma elde edilmektedir. Baklofen ve Akamprosat'I kombinasyonu, tek bas. Akamprosata göre % 200'den fazla ve tek bas. kullanllân Baklofen'e göre % 47'den fazla C) BULUSUN KOMBINASYONLARINI KULLANARAK GLUTAMAT EKSITOTOKSIKLIGI ILE ILGILI DIGER BOZUKLUKLARIN IYILESTIRILMESI Birçok AD modelinde burada örneklendirilmis olan koruyucu etkilerle birlikte bulusun iIaçlarEl ve ilaç kombinasyonlarII glutamat toksikligine karsElyukarlEIla belirtilmis olan in vitro koruyucu etki, bulus sahiplerini bu ilaçlarüle kombinasyonlarüMS, ALS ve nöropatik agrlîgjibi glutamat toksikliginin dahil oldugu patogenezde diger hastallElarI bazünodellerinde test etmeye yönlendirmistir. KORUYUCU ETKISI Miyelin oligodentrosit glikoprotein ile bag lgllîlandlîllßîlgJWOG ile bag @EandIElIBiSj farelerde kronik progresif EAE'nin gelistigi bir model, multiplElskleroz tedavisinde bulusun bilesimlerinin faydalßtkisini göstermek için kullanlUEl C57L/6J disi fareler (8 haftal[lZD Janvier (Fransa)'dan allEInaktadlEi iki hafta habitüasyondan sonra, disi farelerde (10 haftal[lZD MOG (Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein) peptit ile imünizasyondan sonra kronik paraliz gelismistir. EAE Endüksiyonu için (EK-0110, EK-0115; Hooke Iaboratories)Hooke Kit MOG ile deneysel ensefalomiyelit baslatllîhlgtlü Kontrol kiti CK-'dir. Deneysel prosedür Deneysel ensefalomiyelit asaglki prosedürle saglanm lgtlEI O'lEtÜgünde, her biri 0.1 mI'Iik iki subkütanöz enjeksiyon gerçeklestirilmistir; bunlardan birisi farenin üst SIIa diger alt slBIIadE Her bir enjeksiyon 100ug MOG35.55 peptit (MEVGWYRSPFSRWHLYRNGK), 200ug inaktiflestirilmis Mycobacterium tuberculosis H37Ra içermektedir ve bu Komple Freund adjüvanIa emülsifiye edilmistir (CFA) (Hooke laboratories). Emülsiyon, MOG-spesifik otoimün T hücrelerini genisletmek ve farklllâstEinak için gerekli antijeni saglamaktadB PBS'de (Hooke kit) Pertussis toksinden 500 ng'dan iki intraperitoneal enjeksiyon, MOG enjeksiyonundan 2 gün (Gün 0) ve 24 saat (Gün 1) sonra gerçeklestirilir. Pertussis toksin, ilave adjüvan saglayarak EAE gelismesini gelistirmektedir. Farelerde imünizasyondan 8 gün sonra EAE gelismektedir ve bunlar deney süresi boyunca kronik olarak paralize kalmaktadlE Imünüzasyondan sonra, fareler bir kör prosedürde klinik semptomlar bakIilEUan günlük olarak gözlenmistir. Hayvanlar geleneksel bir patojensiz tesiste tutulmustur ve tüm deneyler, geçerli lokal bioetik komitesi tarafIan öngörülen ve onaylanan kllâvuz ilkeler ile uyumlu olarak gerçeklestirilmistir. Deneysen gruplar ve ilaç tedavisi: Açllîlanmlglolan disi fare gruplarüimünizasyondan önce aglîllllîlolarak homojenize edilmistir: - Kontrol grubu: EAE faresinin aynleosulIarIa araç enjeksiyonu (Gün 1'den Gün 28'e, - EAE grubu: MOG enjeksiyonu (gün 0) + Pertussis toksin enjeksiyonlarüGün 0 ve 1) - Gün 1 ila Gün 28 arasüplasebo günlük olarak oral olarak verilmektedir. - EAE + pozitif kontrol: MOG enjeksiyonu (gün 0) + Pertussis toksin enjeksiyonlarlJGün 0 ve 1) - Gün 1 ila Gün 28 arasÇldeksametazon günlük olarak oral olarak verilmektedir. - EAE + tedavi grubu: MOG enjeksiyonu (Gün 0) + Pertussis toksin enjeksiyonlarElGün 0 ve 1). Tedaviler, imünizasyondan bir gün önce baslamakta ve Gün 28'de bitmektedir. Istatistiksel analiz için statistica yazlIlülilI(Statsoft Inc.) kullanüßîlgtlîl Klinik hastal[lZJskorunu analiz etmek için ANOVA analizi ve Ögrenci t testi kullanilmlgtm P < 0.05 önemli olarak degerlendirilmektedir. HastallglI meydana gelisindeki gecikmeler, klinik skor ve ölümün gecikmesi, Kaplam-Meier egrileri ve bir Coks modeli (R paketi "sagkali'j ile referans "immu" grubu ile her bir grup arasIa karsllâstlîllüilgtlü Sonuçta elde edilen p-degerleri tek taraflIIElve hipotezin referans Toplam klinik skot kuyruk skoru, arka bacak skoru, ön bacak skoru ve idrar kesesi skorundan olusmaktad lElve asaglîlh tarif edildigi sekildedir: Kuyruk skoru: Bir normal fare, hareket ederken kuyrugunu dik tutmaktadE Eger kuyrugun ekstremitesi, düsme egilimi ile sarkilZJise Eger kuyruk tamamen sarklEIise ve masa üzerinde sürünüyorsa Arka bacak skoru: Bir normal fare enerjik bir yürüyüse sahiptir ve pençelerini sürüklemez. Asaglki testlerden herhangi birisi pozitiftir: A- Hafif vurma test: Bas parmak ve isaret parmagElarasIda kuyrugu tutarken, hayvanI slîll- vurun ve kendisini dogrulmasEiçin geçen zamanügözlemleyin. Bir sagllElElfare kendisini derhal döndürecektir. Bir gecikme arka bacak zay[fll[glI[ göstermektedir. B-Fareyi tel kafesin tepesine yerlestirin ve bir kenardan digerine geçisini gözlemleyin. Eger bir veya iki bacak sllZllEla çubuklar arasIa kayarsa, kismi bir paraliz oldugunu degerlendiririz Önceki her iki test pozitiftir. Bir veya iki arka bacak paraliz isareti göstermektedir, ancak bazElhareketler korunmaktadlü örnegin; Hayvanlar, bßklmiadan önce klîla bir süre için tel kafes tepesinin alt kenarIEliutup oraya tutunabilmektedir. Her iki bacak paralize oldugunda ve fare hareket ederken onlarßürüklediginde Ön bacak skoru: Bir normal fare, kavramak ve yürümek ve basIEljik tutmak için ön pençelerini aktif olarak kullanmaktadlEl Yürümek mümkündür, ancak pençelerden birisinde veya her Ikisindeki zaylüllga baglE olarak zordur, örnegin ön pençeler, fare tel tepe kafesinin alt klglnIIZItutarken zorland[g]Ia zaylEl olarak degerlendirilir. ZayEfli[glI diger bir isareti da bas. düsmesidir. Bir ön bacak paralize oldugunda (kavrama imkanslZlglElve farenin paralize bacak etrafIda dönmesi) Bu zamanda bas kas tonunun çogunlugunu da kaybetmistir. Fare hareket edemez ve su ve yiyecek ulasllâmaz. Idrar torbasßkoru: Skor :0 Bir normal fare idrar torbasIEllamamen kontrol edebilmektedir. Skor=1 Bir fare, vücudunun alt klgmlîlidrar içinde oldugu zaman inkontinant olarak degerlendirilmektedir. Her bir hayvan için global skor, yukari belirtilen kategorilerin tamam ilavesi ile tespit edilmektedir. Canlüiiayvanlar için maksimum skor 10'dur. Bir MS modelinde Sonuç - Kombinasyon terapisi etkilidir Baklofen ve Akamprosat kombinasyonu için "EAE + tedavi grubunda" global klinik skorda önemli bir iyilesme gözlenmektedir. Baklofen (30 mg/kg/gün) ve Akamprosat (2 mg/kg/gün) kombinasyonu, kronik progresif EAE'nin gelismesine karsEönemli bir koruyucu etkiye neden olmustur ve böylelikle multipll] skleroz tedavisinde bilesimin faydalEétkisini teyit etmistir (Sekil 18). Semptomlarda % 30 azalma ile, sonuçlar asllîl bir sekilde sunu göstermektedir i kombinasyon, 13'üncü günden itibaren hastallglI gelismesinde önemli bir azalmaya neden olmaktadlEI Bu sonuç, Baklofen - Akamprosat kombinasyonunun, demiyelinasyon ve bunun implikasyonlarlîüahil olmak üzere nöronal koruma üzerindeki öne çlKEin pozitif etkiyi teyit etmektedir. Birlikte ele al"[gla bu sonuçlar göstermektedir ki bu kombinasyon, Bamiloit, BBB parçalanmasü glutamat eksitoksikligi veya demiyelinasyon gibi nörolojik hastalllZlarI gelismesinde söz konusu olan bir çok strese karslîrhöronlarI etkili bir sekilde korunmaslülßaglamaktadü 11. ALS'NIN MODELLERINDE KOMBINASYONLARIN KORUYUCU ETKISI Mevcut bulusa göre ALS üzerinde Kombinasyon terapilerinin etkisi, in vitro olarak bir es kültür modelinde, ve in vivo olarak ALS'nin bir fare modelinde gösterilmistir Protokoller ve sonuçlar bu bölümde gösterilmektedir. 11.1 Sinir -kas es kültürünün primer kültürlerinde glutmat toksikligine karsEl koruyucu etki Sinir ve kas hücrelerinin primer es kültürleri SagllKlEliiastanI biyopsisinin kularan daha önce tarif edilmis olan yöntemine göre insan kasÜiazlElanlgtEHB). Kas hücreleri, ayrllfnlg hücrelerden allEmlSIIEl(çukurcuk bas_ 10000 hücre), 48 çukurcuk plakaletla % 0.1 jelatin kaplanmlgl MEM ortamEl/e M 199 ortamIZI karlgüiian olusan bir proliferat ortamIa yetistirilmistir. Uydu hücre füzyonundan hemen sonra, dorsal kök gangliasEQDRG) takUJEIan 13 günlük fare Wistar embriyolarII omurgalarII bütün transvers dilimleri çukurcuk bas. kas mono katman 1 eksplant üzerine yerlestirilmistir (merkez alanda). Iyi bir inervasyon oranlîlelde etmekiçin DRG gereklidir. Inervate edilen kültürler karlglîl ortamda tutulmustur. Normal es kültürde 24 saat bekletildikten sonra, nöritler, omurilik eksplantlarlûdan nöritlerin büyüdügü gözlenmistir. Bunlar,miyotüpler ile temas kurmakta ve 8 gün sonra ilk kontraksiyonlara neden olmaktadlEl Bundan hemen sonra, omurga eksplantlarIlEl yakIa yer alan inervate kas lifleri görsel olarak sürekli olarak büzülmektedir. Inervate lifler, inervate olmayanlardan morfolojik ve uzamsal olarak farklIEve bunlardan kolayllEla aylEll edilebilmektedir. Bir es kültür yap[lîJ`1aktadlEl(kosul bas. 6 çukurcuk). Glutamat yaralanmasEl 27'inci günde, es kültürler, 20 dakika boyunca glutamat intoksikasyonundan (60 |JM) önce bir saat aday bilesikler veya Riluzol ile inkübe edilmistir. Daha sonra, es kültürler yEbnmStB ve aday bilesikler ve Riluzol ilave 48 saat boyunca ilave edilmistir. Bu inkübasyon zamanIan sonra, sabitlenmemis es kültürler, oda süklkjiia 15 dakika boyunca 500 nmol/L konsantrasyonunda Aleksa 488 ile kuple edilmis a-bungarotoksin ile inkübe edilmistir. Daha sonra, es kültürler oda lelakl[g]Ia 20 dakika boyunca PFA ile sabitlenmistir. % 0.1 saponin ile permeabilizasyondan sonra, es kültürler anti nörofilaman antikoru ile inkübe edilmistir (NF). Bu antikorlar, Aleksa Fluor 568 keçi anti fare IgG (Moleküler probu) ile ortaya çlIZlnIgtlB NöronlarI çekirdekleri, bir florasan isaretleyicisi ile etiketlenmistir (Hoechst solution). Uç noktalar (1) Toplam nörit uzunlugu, (2) Motor birimlerinin saylîEl(3) Toplam motor birim alan Eve bunlar motor nöron sag kalIiEle islevselligini göstermektedir. Her bir durum için, çukurcuk bas. 20x büyütme ile InCeIl AnalyzerTM 1000 (GE Healthcare) kullan liârak 2 x 10 resim aIlEhilSIlEl Tüm görüntüler aynElkosulda allEtnlStlE Sonuçlar Baklofen ve Akamprosat kombinasyonu etkili bir sekilde motor nöronlarlJI/e motor birimlerini es kültür modelinde korumaktadlEl 11.2 Kombinasyon terapileri ALS Fare modelinde etkilidir Deneyler erkek fare üzerinde gerçeklestirilmektedir. Transfenik erkek fare BöSJL- Laboratories, Ben Harbor, USA'dan aliîima ve Charles River Fransa daglfiEJilLIlmimik ALS'ye deneyler setinde seçilmistir. HastaliKllZfare, SOD1-G93A transgenini eksprese etmektedir ve bu, endogenöz insan SOD1 promotörü tarafIdan tahrik edilen bir mutant insan SOD1 geni ile tasarlanmilîiEi(k0d0n 93'te glisinin alanine bir tek amino asit ikamesi). Kontrol fareleri, kontrol insan SOD1 genini eksprese etmektedir. Hayvanlar. randomizasyonu : Hayvanlar. randomizasyonu ve grup tayini vücut aglHi[gi- dayanmaktadB her bir grup için randomizasyon, ilk tedaviden bir gün önce yapiEhaktadlEl IlacI verilmesi Fareler, dogumdan sonraki 60'IElcIIgünden itibaren ölüme kadar araçta seyreltilmis aday ilaç tedavisi ile dozlanmlgtlEi Ilaç adaylarII seyreltilmis solüsyonlarlZJ verilme isieminin baslamasIan hemen önce oda slîiakligiia su ile haziîlianmlgtE Içme suyunda: Riluzol, % 5 siklodekstrin'de 6 mg/ml'lik bir nihai konsantrasyonda (her bir grup ortalama vücut aglEIiigilEb göre ayarlanmlgi içme suyuna ilave edilmistir. Bir fare 5 mI/gün kadar içtigi zaman, tahmin edilen verilen doz 30 mg/kg/gün'dür ve bu, farenin sagkallllîirtlîiinak için gösterilen bir dozdur. - Siklodekstrin stok solüsyonundan oda slîiakligiiüda suda seyreltilmis (% 20 Siklodekstrin), % 5'Iik bir nihai konsantrasyonda araç olarak kullaniliilgIlEl Oral uygulama (os baslEla): - Ilaç kombinasyonlarlîgliünlük olarak 05 bas. verilmektedir. - Siklodekstrin stok solüsyonundan oda slîlakligilEUa suda seyreltilmis (% 20 Siklodekstrin), % 5'lik bir nihai konsantrasyonda araç olarak kullanlllgmlgtß Klinik gözlem Her bir farenin klinik gözlemi, tedavinin birinci gününden (60 günlük) ölüme kadar (veya öldürülmeye kadar) günlük olarak gerçeklestirilmistir. Klinik gözlem davranEisal testlerin çallglhiasldan olusmaktadE Paralizn baslanglE],Il"meyil kayblZJ "dikilme refleksi kaybElve genel yürüyüs biçimi gözlemi: - Paralizin baslanglElü Gözlem, her bir ayagi paraliz gözleminden olusmaktadlB Paralizin baslang IELIlparalizin ilk isaretlerinden birine karsilik] gelmektedir. - Yürüme biçimi kaybEliesti, tremor veya titreme bildiriminden ve fare kuyrugu tarafIan asIlgEaman arka bacagI pozisyonundan olusmaktad lEl(asl]B1a veya meyil verme). - Dikilme refleksinin kaybüfarenin, herhangi bir tarafa döndürüldükten sonra 30 saniye içinde dikilme kabiliyetini degerlendirmektedir. Dikilme refleksi, fare kendisini dikemedigi zaman kaybolmaktadE Dikilme refleksinin kaybü hastaliglEl son asamaslütespit etmektedir: Kendisini dikemeyen farelere ötönazi uygulanmaktadlB In Vivo modelde ALS'de Sonuç - Kombinasyon terapileri etkilidir Baklofen ve Akamprosat kombinasyonu ile tedavi edilen hastallEthayvanlar için hastallKla bir iyilesme gözlenmistir. OLDUGU NÖROPATILERDE KOMBINASYONLARIN KORUYUCU ETKISI Mevcut bulusun kombinasyonel terapileri, periferal nöropatinin uygun modellerinde in vivo olarak test edilmektedir (yani oksaliplatinin neden oldugu nöropatinin akut modeli ve oksaliplatinin neden oldugu nöropatinin kronik modeli). Hayvanlar, protokoller ve sonuçlar bu bölümde gösterilmektedir. Hayvan Besiciligi Oksaliplatin tedavisinin (Do) deneyinin baslang-ia 150- 175 g aglElligl-a Sprague-Dawley fareleri (CERJ, France) kullanilBilgtlB Hayvanlar, çalElna boyunca standart topaklastlüßig laboratuar yiyecegine ve suya acl Iibitum erisimle, 12 saat- 51121 /karanllla döngüsü ile bir hayvan tesisinde barlEUlElülgtlB Hayvanlar kafes bas. 4 veya 5 tane olacak sekilde barlEdlElBwlStlElve herhangi bir testten önce bir haftalllZl bir aklimasyon süresi gözlenmistir. Deneysel tasarüi Tüm deneylerde asagidaki döit fare grubu kullanllfhlîstlü Kontrol gruplarü Grup 1: Oksaliplatin (damlfllhîlglsu ) aracl:li.p. Aday kombinasyonlari aracEllDamLEllBwlSl su ), p.o. günlük. Grup 2: Oksaliplatin (damlûlîhlglsu ), i.p. Aday kombinasyonlari aracEllDamlEllBileu ), p.o. günlük. Grup 3: Oksaliplatin 3 mg/kg i.p. / Damlîllmlglsuda tek ilaç, p.o. günlük x 9. Grup 4: Oksaliplatin 3 mg/kg i.p. / Damlfllfhlgsuda aday kombinasyon(lar), p.o. günlük x 9. Grup 5: DamlEllEnlg suda Oksaliplatin 3 mg/kg i.p. / Gabapentin (100 mg/kg), p.o. test gününde (i.e. D1 & D8); Araç ve test ögeleri D1 ila D7 arasIda günlük olarak verilmistir (son test gününden önceki gün) ve test gününde Gabapentin verilmistir (Testten 120 dakika önce). Tüm tedaviler, mümkün oldugunda kodlanmgve rastgele bir sßda verilmistir. Dozlar, serbest aktif madde olarak eksprese edilmistir. Nöropati endüksiyonu Akut nöropati, oksaliplatinin bir tek intraperitoneal enjeksiyonu ( 3 mg/kg) ile endüke edilmistir. Kronik periferal nöropati, 0, 2, 4 ve 7 (CD: 12 mg/kg, i.p.) günlerinde oksaliplatin (3 mg/kg, i.p.)'in tekrarlüntraperitoneal enjeksiyonlarlîlle endüke edilmistir. Insanlardaki kronik nöropati de kümülatiftir ve farelerdeki kümülatif doza klýbsla yaklasllîl 15 mg/kg'ye karsl]]]Zl gelen toplam oksaliplatin veya :540 mg/m2 dozlarßlmlglhastalarda yayg olarak gözlenmektedir (Cersosimo R.J. 2005) Farelerde oksaliplatinin neden oldugu agr[l]]]1öropati, oksaliplatinle tedavi edilen hastalarda agrßemptomlarlßogaltmaktadlEl -Termal hiperalerjesi en erken semptomdur. Bu, aseton testi ile veya kuyruk daldlElna testi ile ölçülebilmektedir. - Mekanik hiperalgesi daha sonra ortaya çlEmaktadIE Bu Von Frey testi veya pençe baslik; testi Ile kantifiye edilebilmektedir. Hayvan dozlamasüie testi Tüm ilaç kombinasyonlarÇloksaliplatin 3 mg/kg (D-1) ilk intraperitoneal enjeksiyonundan önceki gün verilmistir ve D7'ye kadar günlük olarak oral bir sekilde takip edilmistir. Test günleri boyunca (yani D1 ve D?) ilaç kombinasyonlarlîtestten sonra verilmistir. Referans tedavili gruptan gelen hayvanlar (gabapentin) sadece test günleri süslda dozlanmlgtlü Aseton testi D1'de (oksaliplatin 3 mg/kg (oksaliplatinin akut etkisi) birinci enjeksiyonundan yaklaslKl 24 saat sonra) ve D 8 (oksaliplatinin kronik etkisi) `de termal nosiseptif olmayan simülasyona cevaplarEölçmek suretiyle aseton testi kullan llârak soguk allodini degerlendirilmistir. Aseton testinde, her iki arka pençenin düzlemsel yüzeyine bir damla asetonun uygulanmaletlan sonra arka pençe çekilme gecikmesi (reaksiyon zamanDîlölçülmüstür ve cevabi yogunlugu puanlanmlgtIEl (soguk skoru). Asetonun sogutma etkisine reaksiyon cevabüasetonun uygulanmaslan sonra 20 saniye içinde (kesme) ölçülmüstür. Asetona verilen cevaplar, asag-ki 4 puanllîljlçege göre derecelendirilmistir: 0(cevap yok); 1 (hlZIEl geri çekilme, pençenin hafifçe sallanmasllj 2 (uzamlSlgecikme veya pençenin belirgin sekilde sallanmasm 3 (yalama veya @Bina ile pençenin tekrar tekrar sallanmasm Her bir deneysel grup için, sonuçlar su sekilde ifade edilmistir: - Pençe reaksiyonunu saglamak için gerekli olan saniye cinsinden ifade edilen zaman olarak tanilanan reaksiyon zamanüher bir fare için 6 ölçümün ortalamaslZltoplam ± - Her bir fare için 6 puan. toplamEblarak tanIilanan kümülatif soguk skor, toplam ± SEM. Minimum skor 0'dE(6 denemenin herhangi birine cevap yok) ve maksimum muhtemel skor 18'dir (altüdenemenin her birinde pençelerin tekrarlElvurulmaslIlve yalanmasüleya -1as[)] Istatistiksel Analiz Tip 3 tek taraflElögrenci testi gerçeklestirilmistir. Belirginlik düzeyi p<0.05 olarak ayarlanmlStB tüm gruplar hastalllZlEl+ araç grubu ile karsllâstlîllhilgtlîl(oksaliplatin tedavili grubu). Ortalamalar ve standart hata ortalamasßekillerde gösterilmektedir. Sonuçlar Oksaliplatin, zaman süreci boyunca aseton uygulamasian sonra pençe çekilmesinin reaksiyon zamanIa önemli bir azalmaya neden olmustur (hastallElElgrup + araç). Bu azalma progresiftir ve araç grubu ile karsllâst-Ilgla 1'inci günden (oksaliplatin'in neden oldugu nöropatinin akut modeli) 8'inci güne (kronik model) kadar belirgindir. o Oksaliplatinin neden oldugu nöropatinin akut model ve kronik modelled anti-allodinik etkisi Oksaliplatinin neden oldugu nöropatinin akut modeli ve kronik modelinde anti alodinik etki Baklofen ve Akamprosat kombinasyonu, Oksaliplatinin neden oldugu nöropatinin her iki modelinde test edilmistir. Bu, kümülatif soguk skorda önemli bir azalmaya ve oksaliplatin araç tedavili grup ile karsllâstnlgla reaksiyon zamanIa önemli bir artlgla neden olmaktadlE Sonuç olarak, bu ilaç kombinasyonu, kronik ve akut nöropatiden korumaktadlB TR TR TR TR TR TR TR TR TR TR

Claims (13)

ISTEMLER
1. Baklofen veya bunun farmasötik olarak kabul edilebilir tuzunu ve akamprosate veya bunun farmasötik olarak kabul edilebilir tuzunu içeren bilesim.
2. Sulfisoksazol, metimazol, prilokain, difilin, kuinakrin, karbenoksolon, aminokaproik acid, kabergolin, dietilkarbamazin, sinakalset, sinarizin, eplereron, fenoldopam, Ieflunomit, levosimendan, sulodeksit, terbinafin, zonisamit, etomidat, fenformin, trimetadizin, meksiletin, ifenprodil, moksifloksasin, bromokriptin or torasemitten seçilen en az bir bilesik veya bunun farmasötik olarak kabul edilebilir tuzunu içeren Istem 1'e göre bilesim.
3. Istem 1 veya 2'ye göre bilesim olup, burada söz konusu bilesim asagldhki bilesik kombinasyonlarIan en az birini içermektedir: baklofen ve akamprosat, baklofen ve akamprosat ve dietilkarbamazin, baklofen ve akamprosat ve sinakalset, baklofen ve akamprosat ve sulfisoksazol, baklofen ve akamprosat ve torasemit, baklofen ve akamprosat ve ifenprodil, baklofen ve akamprosat ve meksiletin, baklofen ve akamprosat ve eplerenon, baklofen ve akamprosat ve levosimendan, baklofen ve akamprosat ve terbinafin, veya baklofen ve akamprosat ve leflunomit, veya bunun farmasötik olarak kabul edilebilir tuzlar!]
4. Asaglki bilesiklerin kombinasyonlarian en az birini içeren Istem 1'e göre bilesim: baklofen, akamprosat ve rivastigmin, baklofen, akamprosat ve memantin, veya baklofen, akamprosat ve gabapentin, veya bunlari farmasötik olarak kabul edilebilir tuzlarlIl
5. Sadece etken madde olarak baklofen ve akamprosat veya bunun farmasötik olarak kabul edilebilir tuzlarIEigeren Istem 1'e göre bilesim.
6. Ilaveten farmasötik olarak kabul edilebilir tasMEÃleya eksipiyanEilçeren önceki istemlerden herhangi birine göre bilesim.
7. Bilesiklerin birlikte veya ayrlîiliygulanacak sekilde formüle edildikleri önceki istemlerden herhangi birine göre bilesim.
8. Söz konusu bilesimin oral uygulama için adapte edildigi önceki istemlerden herhangi birine göre bilesim.
9. Aglîllilîlcinsinden kamprosat/baklaofen orani. 0.05 ve 1000 arasIa oldugu önceki istemlerden herhangi birine göre bilesim.
10. Söz konusu bilesimin, günlük uygulamaya uygun tekli veya çoklu birim doz biçiminde formüle edildigi önceki istemlerden herhangi birine göre bilesim.
11. Günlük uygulamaya uygun olan toplam baklofen dozunun 100mg'den az oldugu istem 10'a göre bilesim.
12. Günlük uygulamaya uygun olan toplam akamprosat dozunun 1000mg'den az oldugu istem 10 veya 11'e göre bilesim.
13. AkamprosatI kalsiyum tuzunu içeren önceki istemlerden herhangi birine göre bilesim.
TR2018/09351T 2011-03-01 2012-03-01 Nörolojik bozuklukların baklofen ve akamprosat tabanlı terapisi. TR201809351T4 (tr)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP11305217 2011-03-01
US201161468658P 2011-03-29 2011-03-29
US201161493606P 2011-06-06 2011-06-06
EP11305687 2011-06-06

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TR201809351T4 true TR201809351T4 (tr) 2018-07-23

Family

ID=46758335

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TR2018/09351T TR201809351T4 (tr) 2011-03-01 2012-03-01 Nörolojik bozuklukların baklofen ve akamprosat tabanlı terapisi.

Country Status (26)

Country Link
US (7) US9820978B2 (tr)
EP (5) EP3332781A1 (tr)
JP (2) JP5987008B2 (tr)
KR (2) KR101937782B1 (tr)
CN (2) CN103596562B (tr)
AU (2) AU2012222351B2 (tr)
BR (1) BR112013022112B1 (tr)
CA (1) CA2828765C (tr)
CY (3) CY1115074T1 (tr)
DK (3) DK2727588T3 (tr)
EA (2) EA023277B1 (tr)
ES (5) ES2698927T3 (tr)
HR (1) HRP20140131T1 (tr)
HU (1) HUE038653T2 (tr)
IL (2) IL228177B (tr)
LT (2) LT2796132T (tr)
MX (2) MX373746B (tr)
PL (3) PL2560631T3 (tr)
PT (1) PT2560631E (tr)
RS (3) RS53227B (tr)
SG (2) SG192968A1 (tr)
SI (3) SI2560631T1 (tr)
SM (3) SMT201800327T1 (tr)
TR (1) TR201809351T4 (tr)
WO (2) WO2012117075A2 (tr)
ZA (1) ZA201306039B (tr)

Families Citing this family (41)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2065038A1 (en) 2007-11-30 2009-06-03 Pharnext New therapeutic approaches for treating Charcot-Marie-Tooth disease
EP2135607A1 (en) 2008-06-18 2009-12-23 Pharnext Combination of pilocarpin and methimazol for treating Charcot-MarieTooth disease and related disorders
US9393241B2 (en) 2009-06-02 2016-07-19 Pharnext Compositions for treating CMT and related disorders
EP2263665A1 (en) 2009-06-02 2010-12-22 Pharnext New compositions for treating CMT and related disorders
US9387206B2 (en) 2009-11-03 2016-07-12 Pharnext Therapeutic approaches for treating Alzheimer's disease
EP2322163A1 (en) 2009-11-03 2011-05-18 Pharnext New therapeutics approaches for treating alzheimer disease
KR101937782B1 (ko) 2011-03-01 2019-01-11 파넥스트 바클로펜 및 아캄프로세이트에 기초한 신경 장애의 치료
US10010515B2 (en) 2011-03-01 2018-07-03 Pharnext Therapeutic approaches for treating Parkinson's disease
EP2705842A1 (en) * 2012-09-05 2014-03-12 Pharnext Therapeutic approaches for treating parkinson's disease
UA113165C2 (xx) * 2011-03-01 2016-12-26 Застосування комбінації баклофену і акампросату для лікування неврологічних захворювань та композиція, яка містить баклофен і акампросат
US9241933B2 (en) 2011-03-01 2016-01-26 Pharnext Compositions for treating amyotrophic lateral sclerosis
US9867837B2 (en) * 2011-03-01 2018-01-16 Pharnext Compositions for treating neurological disorders
US9248111B2 (en) 2011-03-01 2016-02-02 Pharnext Therapeutic approaches for treating parkinson's disease
US9931326B2 (en) 2011-03-29 2018-04-03 Pharnext Composition comprising torasemide and baclofen for treating neurological disorders
GB2501457A (en) 2012-02-10 2013-10-30 Rational Intellectual Holdings Ltd Assigning player positions in an online table game
AU2013224959B2 (en) * 2012-03-01 2017-12-07 Pharnext New compositions for treating amyotrophic lateral sclerosis
SMT201700373T1 (it) * 2012-03-01 2017-09-07 Pharnext Nuove composizioni per il trattamento della sclerosi laterale amiotrofica
NZ704280A (en) * 2012-07-18 2017-06-30 Pharnext Baclofen and acamprosate based therapy of macular degeneration disorders
EP2705841A1 (en) 2012-09-05 2014-03-12 Pharnext Combinations of nootropic agents for treating cognitive dysfunctions
GB201300684D0 (en) 2013-01-15 2013-02-27 Apitope Int Nv Peptide
DK3003268T3 (en) 2013-06-05 2018-11-05 Pharnext STABLE ORAL SOLUTIONS FOR COMBINED API
PL3010543T3 (pl) * 2013-06-19 2026-01-19 Som Innovation Biotech, S.A. Środki terapeutyczne stosowane w profilaktyce i/lub leczeniu hiperkinetycznych zaburzeń ruchowych
KR102206745B1 (ko) * 2013-07-12 2021-02-03 경상대학교산학협력단 안토시아닌 및 gabab 수용체 작용제를 유효성분으로 포함하는 신경질환 치료제
WO2015023830A1 (en) 2013-08-14 2015-02-19 Stc.Unm Treatment and prevention of stroke and other neurological disorders
WO2015063140A1 (en) * 2013-10-30 2015-05-07 Pharnext Compositions, methods and uses for the treatment of diabetes and related conditions by controlling blood glucose level
MX2016010409A (es) 2014-02-11 2016-11-30 Pharnext Combinacion de baclofeno, acamprosato y trigliceridos de cadena media para el tratamiento de trastornos neurologicos.
WO2016081472A1 (en) * 2014-11-21 2016-05-26 Biohaven Pharmaceutical Holding Company Ltd. Sublingual formulation of riluzole
KR102790656B1 (ko) 2015-05-04 2025-04-02 컨플루언스 파마슈티컬스, 엘엘씨 아캄프로세이트의 스프링클 제형
EP3156050A1 (en) * 2015-10-16 2017-04-19 Universitat Autònoma De Barcelona New combination therapies for treating neurological damage
US11026942B2 (en) 2015-12-29 2021-06-08 Kyoto University Agent for preventing and/or treating Alzheimer's disease
CN109069450A (zh) * 2016-02-05 2018-12-21 法奈克斯公司 神经障碍的新的组合疗法
US10383870B2 (en) 2016-06-10 2019-08-20 Pharnext Early treatment of CMT disease
CN111050761A (zh) * 2017-04-24 2020-04-21 法奈克斯公司 阿尔茨海默病的基于idalopirdine的组合治疗
IL270654B2 (en) * 2017-05-17 2024-07-01 Confluence Pharmaceuticals Llc Formulations of homotaurines and salts thereof
CA3067688A1 (en) 2017-07-31 2019-02-07 Novartis Ag Use of mavoglurant in the reduction of alcohol use or in preventing relapse into alcohol use
EP3661500B1 (en) 2017-07-31 2026-01-07 Novartis AG Use of mavoglurant in the reduction of cocaine use or in preventing relapse into cocaine use
EP3746062A1 (en) * 2018-01-29 2020-12-09 Pharnext Baclofen and acamprosate based therapy of alzheimer's disease in patients having lost responsiveness to acetylcholinesterase inhibitor therapy
CN116059192B (zh) 2019-11-13 2024-10-29 润佳（苏州）医药科技有限公司 同位素富集的3-氨基-1-丙磺酸及其衍生物的用途
WO2023154794A1 (en) * 2022-02-09 2023-08-17 University Of North Texas Health Science Center Drug repurposing for delayed treatment of ischemic stroke
CN115350172A (zh) * 2022-08-12 2022-11-18 昆明医科大学 Gabapentin对AD情景记忆改善的应用
WO2025095099A1 (ja) * 2023-11-02 2025-05-08 株式会社ケイファーマ 前頭側頭葉変性症治療剤及び治療用組成物

Family Cites Families (42)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5721263A (en) 1993-06-07 1998-02-24 Takeda Chemical Industries, Ltd. Pharmaceutical composition for angiotensin II-mediated diseases
US6573251B2 (en) 1994-03-30 2003-06-03 Denis Barritault Drug and pharmaceutical composition for the treatment of lesions of the nervous system and fractions enriched in heparan sulfate
US6391922B1 (en) * 1998-01-13 2002-05-21 Synchroneuron, Llc Treatment of posttraumatic stress disorder, obsessive-compulsive disorder and related neuropsychiatric disorders
AU3173301A (en) 2000-02-11 2001-08-20 European Molecular Biology Laboratory Methods and compositions for treatment of alzheimer's disease by enhancing plasmin or plasmin-like activity
US20030149010A1 (en) 2001-07-19 2003-08-07 Keller Bradley T. Combination of an aldosterone receptor antagonist and an HMG CoA reductase inhibitor
AU2002316231A1 (en) 2002-02-19 2003-09-29 Xenoport, Inc. Methods for synthesis of prodrugs from 1-acyl-alkyl derivatives and compositions thereof
US20040067918A1 (en) 2002-03-18 2004-04-08 Keller Bradley T. Combination of an aldosterone receptor antagonist and nicotinic acid or a nicotinic acid derivative
US20040102525A1 (en) 2002-05-22 2004-05-27 Kozachuk Walter E. Compositions and methods of treating neurological disease and providing neuroprotection
ES2584606T3 (es) 2002-10-10 2016-09-28 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Microesferas que comprenden ONO-1301
BRPI0413756A (pt) 2003-08-20 2006-10-31 Xenoport Inc composto, métodos para tratar ou evitar espasticidade ou um sintoma de espasticidade, doença de refluxo gastro-esofágico, vìcio em droga, vìcio em ou abuso de álcool, ou vìcio em ou abuso de nicotina, e tosse ou êmese em um paciente, e, composição farmacêutica
CN102702065A (zh) 2003-12-30 2012-10-03 什诺波特有限公司 酰氧基烃基氨基甲酸酯前药及其中间体的合成
US20080025962A1 (en) 2004-11-30 2008-01-31 Angesmg,Inc. Remedy for Alzheimer's Disease
US20080188510A1 (en) 2005-05-23 2008-08-07 Eisai R & D Management Co., Ltd. Novel methods using zonisamide
AU2006308889A1 (en) 2005-10-31 2007-05-10 Braincells, Inc. GABA receptor mediated modulation of neurogenesis
KR20090026275A (ko) 2006-07-06 2009-03-12 로스캄프 리서치 엘엘씨 베타-아밀로이드 생성을 억제하기 위한 화합물 및 그의 조합물, 및 그의 사용 방법
TWI369982B (en) 2007-01-11 2012-08-11 Xenoport Inc Sustained release oral dosage forms of a prodrug of r-baclofen and methods of treatment
KR101441725B1 (ko) 2007-05-22 2014-09-18 오츠카 세이야쿠 가부시키가이샤 알츠하이머병 치료를 위한 카르보스티릴 유도체 및 도네페질을 포함하는 치료제
WO2009033069A1 (en) 2007-09-07 2009-03-12 Xenoport, Inc. Simple pantoic acid ester neopentyl sulfonyl ester cyclization release prodrugs of acamprosate, compositions thereof, and methods of use
US20090082464A1 (en) 2007-09-07 2009-03-26 Bernd Jandeleit Externally masked neopentyl sulfonyl ester cyclization release prodrugs of acamprosate, compositions thereof, and methods of use
TW200932734A (en) 2007-10-15 2009-08-01 Xenoport Inc Internally masked neopentyl sulfonyl ester cyclization release prodrugs of acamprosate, compositions thereof, and methods of use
US20090118365A1 (en) * 2007-11-06 2009-05-07 Xenoport, Inc Use of Prodrugs of GABA B Agonists for Treating Neuropathic and Musculoskeletal Pain
US20100137442A2 (en) 2008-02-01 2010-06-03 Xenoport, Inc. Sustained Release Particulate Oral Dosage Forms of (R)-Baclofen and Methods of Treatment
WO2009096985A1 (en) 2008-02-01 2009-08-06 Xenoport, Inc. Sustained release particulate oral dosage forms of (r)-baclofen prodrugs and methods of treatment
DK2282779T3 (da) 2008-04-29 2013-05-27 Pharnext Nye terapeutiske fremgangsmåder til behandling af alzheimer sygdom og beslægtede lidelser gennem en modulation af cellestress-respons
WO2009133128A1 (en) * 2008-04-29 2009-11-05 Pharnext Combination compositions for treating alzheimer disease and related disorders with zonisamide and acamprosate
PL2282778T3 (pl) * 2008-04-29 2017-08-31 Pharnext Nowe podejścia terapeutyczne do leczenia choroby alzheimera i powiązanych zaburzeń poprzez modulację angiogenezy
EP2135607A1 (en) 2008-06-18 2009-12-23 Pharnext Combination of pilocarpin and methimazol for treating Charcot-MarieTooth disease and related disorders
EP2377865B1 (en) 2008-11-27 2014-12-17 National University Corporation Kagawa University Cyclobutyl purine derivative, angiogenesis promoting agent, lumenization promoting agent, neurocyte growth promoting agent, and drug
CA2745741A1 (en) * 2008-12-04 2010-06-10 Intec Pharma Ltd. Zaleplon gastroretentive drug delivery system
KR20110117216A (ko) 2009-03-03 2011-10-26 제노포트 인코포레이티드 Ｒ-바클로펜 전구약물의 서방형 경구 투약 형태
EP2419401A2 (en) 2009-04-17 2012-02-22 XenoPort, Inc. GAMMA-AMINO-BUTYRIC ACID DERIVATIVES AS GABAb RECEPTOR LIGANDS
EP2263665A1 (en) 2009-06-02 2010-12-22 Pharnext New compositions for treating CMT and related disorders
US9393241B2 (en) 2009-06-02 2016-07-19 Pharnext Compositions for treating CMT and related disorders
US9387206B2 (en) 2009-11-03 2016-07-12 Pharnext Therapeutic approaches for treating Alzheimer's disease
EP2322163A1 (en) 2009-11-03 2011-05-18 Pharnext New therapeutics approaches for treating alzheimer disease
US9241933B2 (en) 2011-03-01 2016-01-26 Pharnext Compositions for treating amyotrophic lateral sclerosis
UA113165C2 (xx) 2011-03-01 2016-12-26 Застосування комбінації баклофену і акампросату для лікування неврологічних захворювань та композиція, яка містить баклофен і акампросат
KR101937782B1 (ko) 2011-03-01 2019-01-11 파넥스트 바클로펜 및 아캄프로세이트에 기초한 신경 장애의 치료
US10010515B2 (en) 2011-03-01 2018-07-03 Pharnext Therapeutic approaches for treating Parkinson's disease
US9248111B2 (en) 2011-03-01 2016-02-02 Pharnext Therapeutic approaches for treating parkinson's disease
US9867837B2 (en) 2011-03-01 2018-01-16 Pharnext Compositions for treating neurological disorders
US9931326B2 (en) 2011-03-29 2018-04-03 Pharnext Composition comprising torasemide and baclofen for treating neurological disorders

Also Published As

Publication number Publication date
CY1120369T1 (el) 2019-07-10
KR20140038378A (ko) 2014-03-28
WO2012117075A3 (en) 2012-12-13
WO2012117075A2 (en) 2012-09-07
EA201891833A1 (ru) 2019-01-31
BR112013022112B1 (pt) 2021-09-28
LT2727588T (lt) 2019-01-25
US20170231958A1 (en) 2017-08-17
EP3332781A1 (en) 2018-06-13
ES2698927T3 (es) 2019-02-06
US20200085790A1 (en) 2020-03-19
DK2796132T3 (en) 2018-07-23
SI2796132T1 (sl) 2018-09-28
CN105997969A (zh) 2016-10-12
SG192968A1 (en) 2013-09-30
AU2012222351A1 (en) 2013-08-29
DK2560631T3 (da) 2014-02-10
HK1182615A1 (en) 2013-12-06
IL228177B (en) 2018-01-31
RS57426B1 (sr) 2018-09-28
ES2845204T3 (es) 2021-07-26
HK1203158A1 (en) 2015-10-23
NZ614184A (en) 2015-08-28
CY1120925T1 (el) 2019-12-11
US8741886B2 (en) 2014-06-03
WO2012117076A3 (en) 2012-10-26
US20140080873A1 (en) 2014-03-20
SI2560631T1 (sl) 2014-06-30
CN103596562A (zh) 2014-02-19
ES2678794T3 (es) 2018-08-17
EP2560631A2 (en) 2013-02-27
US8865769B2 (en) 2014-10-21
SMT201400029B (it) 2014-07-07
US9636316B2 (en) 2017-05-02
JP5987008B2 (ja) 2016-09-06
PL2560631T3 (pl) 2014-06-30
ES2665569T3 (es) 2018-04-26
AU2017210501A1 (en) 2017-08-17
EA023277B1 (ru) 2016-05-31
US20140378440A1 (en) 2014-12-25
AU2017210501B2 (en) 2018-11-01
WO2012117076A2 (en) 2012-09-07
EP2727588A1 (en) 2014-05-07
EP2796132A1 (en) 2014-10-29
JP6416328B2 (ja) 2018-10-31
AU2012222351B2 (en) 2017-05-18
EP2727588B1 (en) 2018-08-29
EA201300974A1 (ru) 2014-01-30
PL2727588T3 (pl) 2019-04-30
MX340568B (es) 2016-07-14
ES2450074T3 (es) 2014-03-21
SI2727588T1 (sl) 2019-03-29
KR101937782B1 (ko) 2019-01-11
EP2680835B1 (en) 2018-02-07
US9144558B2 (en) 2015-09-29
ZA201306039B (en) 2014-10-29
PT2560631E (pt) 2014-02-24
KR101918745B1 (ko) 2018-11-15
RS58114B1 (sr) 2019-02-28
EP2560631B1 (en) 2014-01-15
SMT201800327T1 (it) 2018-09-13
KR20180043844A (ko) 2018-04-30
MX2013010043A (es) 2014-02-11
EP2796132B1 (en) 2018-05-02
JP2014510069A (ja) 2014-04-24
US20160000736A1 (en) 2016-01-07
LT2796132T (lt) 2018-10-10
HRP20140131T1 (hr) 2014-05-09
SG10201610587SA (en) 2017-02-27
IL261725A (en) 2018-10-31
CA2828765C (en) 2019-07-30
MX373746B (es) 2020-05-20
CN105997969B (zh) 2022-03-25
CY1115074T1 (el) 2016-12-14
BR112013022112A2 (pt) 2018-06-26
SMT201800618T1 (it) 2019-02-28
EP2680835A2 (en) 2014-01-08
PL2796132T3 (pl) 2018-10-31
RS53227B (sr) 2014-08-29
US20130090307A1 (en) 2013-04-11
DK2727588T3 (en) 2018-12-10
US9820978B2 (en) 2017-11-21
HUE038653T2 (hu) 2018-11-28
US20130085122A1 (en) 2013-04-04
CA2828765A1 (en) 2012-09-07
CN103596562B (zh) 2016-06-01
JP2017193562A (ja) 2017-10-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TR201809351T4 (tr) Nörolojik bozuklukların baklofen ve akamprosat tabanlı terapisi.
US20180338988A1 (en) Compositions for treating neurological disorders
CN108420819A (zh) 用于治疗神经障碍的新组合物
US9931326B2 (en) Composition comprising torasemide and baclofen for treating neurological disorders
IL256992A (en) Treatment of neurological disorders based on baclofen and acamprosate
HK1203158B (en) Baclofen and acamprosate based therapy of neurological disorders
HK1197729B (en) Baclofen and acamprosate based therapy of neurological disorders
NZ614184B2 (en) Baclofen and acamprosate based therapy of neurogical disorders
HK1182615B (en) Baclofen and acamprosate based therapy of neurogical disorders
HK1197729A (en) Baclofen and acamprosate based therapy of neurological disorders
JP2017008078A (ja) バクロフェンおよびアカンプロセートに基づく神経疾患の治療