UA128258C2 - Препарат, що містить антитіло - Google Patents

Препарат, що містить антитіло Download PDF

Info

Publication number
UA128258C2
UA128258C2 UAA202102683A UAA202102683A UA128258C2 UA 128258 C2 UA128258 C2 UA 128258C2 UA A202102683 A UAA202102683 A UA A202102683A UA A202102683 A UAA202102683 A UA A202102683A UA 128258 C2 UA128258 C2 UA 128258C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
pharmaceutical preparation
rgo
yuyu
mai
tug
Prior art date
Application number
UAA202102683A
Other languages
English (en)
Inventor
Кристиан ФРАЙХЕЛЬ
Клаудіа Мюллер
Клаудиа Мюллер
Роберт МЮЛЛЕР
Пьотр Ян Щесни
Мартін Уоргалл
Мартин Уоргалл
Крістін Вурт
Кристин ВУРТ
Original Assignee
Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг filed Critical Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг
Publication of UA128258C2 publication Critical patent/UA128258C2/uk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39591—Stabilisation, fragmentation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/20—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing sulfur, e.g. dimethyl sulfoxide [DMSO], docusate, sodium lauryl sulfate or aminosulfonic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0048—Eye, e.g. artificial tears
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M5/00—Devices for bringing media into the body in a subcutaneous, intra-vascular or intramuscular way; Accessories therefor, e.g. filling or cleaning devices, arm-rests
    • A61M5/178—Syringes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/06—Antiglaucoma agents or miotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/22—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against growth factors ; against growth regulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C07K2317/526—CH3 domain
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/71—Decreased effector function due to an Fc-modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Anesthesiology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

Винахід стосується рідкого фармацевтичного препарату, що містить біспецифічне антитіло до VEGF/ANG2, і способу отримання та застосування препарату. 102

Description

(57) Реферат:
Винахід стосується рідкого фармацевтичного препарату, що містить біспецифічне антитіло до
МЕСР/АМСа, і способу отримання та застосування препарату.
Галузь винаходу
Цей винахід стосується рідкого фармацевтичного препарату біспецифічних антитіл до ангіопоетину-2 (АМО-2)-2 і фактора росту ендотелію судин людини (МЕСЕ, МЕСБЕ-А) (біспецифічних антитіл до МЕСЕР/АМС2) і способу отримання та застосування препарату.
Рівень техніки
Біспецифічні антитіла до ангіопоетину-2 (АМО-2)-2 і фактора росту ендотелію судин людини (МЕСЕ, МЕС -А) (біспецифічні антитіла до МЕСР/АМО2) представляють терапевтичний інтерес, зокрема як лікарські засоби для лікування та профілактики лікування судинних захворювань, включаючи судинне захворювання очей. Біспецифічні антитіла до МЕСР/АМО2 описані, наприклад, у М/О2010040508, УМО2011/117329 або У/О2014/009465. Ці антитіла інгібують зв'язування Меді з рецептором МЕСЕ і в той же час зв'язування АМО-2 з Тів2.
Молекули антитіл, як частина групи білкових фармацевтичних препаратів, є дуже схильними до фізичного та хімічного розкладання. Хімічне розкладання включає будь-який процес, який включає модифікацію білка за допомогою утворення або розриву зв'язку, що дає нову хімічну речовину. Відомо багато хімічних реакцій, які діють на білки. Ці реакції можуть включати гідроліз, включаючи розрив пептидних зв'язків, а також дезамідування, ізомеризацію, окиснення та розкладання. Фізичне розкладання відноситься до змін у структурі вищого порядку та включає денатурацію, адсорбцію на поверхнях, агрегацію й осадження. На стабільність білка впливають характеристики самого білка, наприклад, амінокислотна послідовність, профіль глікозилювання, і зовнішні фактори, такі як температура, рН розчинника, допоміжні речовини, поверхні контакту або швидкості зсуву. Таким чином, важливо визначити оптимальні умови препарату для захисту білка від реакцій розкладання під час виготовлення, зберігання та введення. (Маппіпод, М. С., еї аІ. (1989), "арійу ої ргоївіп рпагтасеціїсаІв", Рнагт Нез 6(11), 903-918; 7пепа, ». У., УЧапів, Г. У. (2005), ""пЯнепсе ої рН, риїег зресієв, апа 5іогаде їетрегаїшйге оп рпувзісоспетісаї в5іарійу ої а питапігей топосіопаї! апіїбсду І А2987", Іпі. У. Рпаппасешісз 308, 46-51). Стабільні рідкі препарати терапевтичних антитіл є особливо складними для отримання, коли препарат повинен містити антитіла в високій концентрації.
Таким чином, метою цього винаходу є забезпечення рідкого, зокрема висококонцентрованого, препарату біспецифічного антитіла до МЕСР/АМО2 із якомога можна меншою кількістю необхідних допоміжних речовин, який полегшує бажане дозування та забезпечує зручне інтравітреальне введення біспецифічного антитіла за допомогою тонких голок пацієнту.
Суть винаходу
Цей винахід стосується рідкого фармацевтичного препарату біспецифічного антитіла до
МЕСР/АМО2, способу отримання та застосуванням препарату. Зокрема фармацевтичні препарати цього винаходу призначені для застосування у разі інтравітреального введення для лікування офтальмологічних захворювань, таких як ВМД і ДМН.
В одному аспекті цей винахід стосується рідкого фармацевтичного препарату, який містить: - від 20 до 150 мг/мл біспецифічного антитіла до МЕСЕ/АМО2, яке містить константну ділянку важкого ланцюга підкласу ЇДО1 людини, - від 15 до 35 ММ хлориду натрію, - від 15 до 25 мМ гістидин-ацетатного буфера, за рН 5,5:0,5; причому біспецифічне антитіло до МЕСЕ/АМО2 є двовалентним і містить перший антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з МЕСЕ людини, і другий антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з АМО-2 людини, де ї) вказаний перший антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з МЕС, містить у варіабельному домені важкого ланцюга СОВЗН-ділянку з ФЕО ІО МО: 1, СОВ2Н-ділянку з БЕО
ІО МО: 2 ї СОВІТН-ділянку з 5ЕО ІО МО: 3, і у варіабельному домені легкого ланцюга СОВЗІ - ділянку з ФЕО ІЮ МО: 4, СОНР2І -ділянку з БЕО ІЮ МО: 5 і СОНТІ -ділянку з ФЕО ІО МО: 6; і ії) вказаний другий антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з АМО-2, містить у варіабельному домені важкого ланцюга СОВЗН-ділянку з ФЕО ІО МО: 9, СОВ2Н-ділянку з БЕО
ІО МО: 10 ї СОВТН-ділянку з 5ЕО ІЮ МО: 11, ї у варіабельному домені легкого ланцюга СОВЗІ - ділянку з ФЕО ІЮ МО: 12, СОР2І -ділянку з ФЕО ІЮ МО: 13 ї СОНТІ -ділянку з ФЕО ІО МО: 14, і де ії) біспецифічне антитіло містить константну ділянку важкого ланцюга підкласу Їд21 людини, яка містить мутації І253А, НЗІ1бА і Н4ІЗ5БА і мутації І 234А, І 235А і РЗ29О (нумерація згідно з ЄО- індексом Кабата).
В одному варіанті реалізації біспецифічне антитіло до МЕСЕ/АМО2 є двовалентним і містить амінокислотні послідовності 5ЕО ІЮ МО: 17, 5ЕО ІЮ МО: 18, 5ЕО ІЮО МО: 19 і 5ЕО ІЮО МО: 20.
В одному варіанті реалізації біспецифічне антитіло до МЕСР/АМС2 являє собою фарицимаб. 60 В одному варіанті реалізації препарат додатково містить
- від 1 до 20 мМ щонайменше одного стабілізатора.
В одному варіанті реалізації препарат додатково містить - 7,0 мМ 52,0 мм метіоніну.
В одному варіанті реалізації препарат додатково містить - 0,01-0,07 95 (мас./об.) поверхнево-активної речовини.
В одному варіанті реалізації препарат додатково містить - 0,04 95 (мас./об.) - 0,02 95 (мас./об.) полісорбату 20.
В одному варіанті реалізації препарат додатково містить - 50-250 мМ регулятора тонічності.
В одному варіанті реалізації препарат додатково містить - 160 мм «5 24 мМ сахарози.
В одному варіанті реалізації препарат по суті не містить видимі частинки.
В одному варіанті реалізації препарат являє собою стабільний препарат.
В одному варіанті реалізації осмоляльність препарату становить 300-100 мОсм/кг.
В одному варіанті реалізації препарат призначений для інтравітреального введення.
В одному аспекті препарат призначений для застосування в лікуванні судинного захворювання очей.
В одному варіанті реалізації судинне захворювання очей вибрані з групи, яка складається з діабетичної ретинопатії (ДР), діабетичного макулярного набряку (ДМН), оклюзії вени сітківки (ОВС), оклюзії центральної вени сітківки (ОЦВС), макулярної дегенерації, вологої форми вікової макулярної дегенерації (вологої ВМД), ретинопатії недоношених (РН), неоваскулярної глаукоми, пігментного ретиніту (ПР), ретинальної ангіоматозної проліферації, макулярної телеангіектазії, ішемічної ретинопатії, неоваскуляризації райдужної оболонки, внутрішньоочної неоваскуляризації, неоваскуляризації рогівки, неоваскуляризації сітківки, хоріоїдальної неоваскуляризації і дегенерації сітківки, зокрема з групи, яка складається з діабетичної ретинопатії (ДР), діабетичного макулярного набряку (ДМН), оклюзії вени сітківки (ОВС), оклюзії центральної вени сітківки (ОЦВС), вологої форми вікової макулярної дегенерації (вологої ВМД).
Один аспект цього винаходу являє собою спосіб отримання фармацевтичного препарату згідно з цим винаходом.
Один аспект цього винаходу являє собою флакон, який містить фармацевтичний препарат згідно з цим винаходом.
Один аспект цього винаходу являє собою попередньо заповнений шприц, який містить фармацевтичний препарат згідно з цим винаходом.
Один аспект цього винаходу являє собою ліофілізовану форму рідкого фармацевтичного препарату згідно з цим винаходом.
Цей винахід забезпечує рідкий фармацевтичний препарат біспецифічного антитіла до
МЕСР/АМО2 (з константною ділянкою 951), який має корисні властивості, придатні для офтальмологічного застосування й інтравітреального введення: препарат має низьку в'язкість і низьку мутність (навіть за високих концентрацій, наприклад, приблизно 120 мг/л), препарат є стабільним і ізотонічним. Це зокрема досягається комбінацією 20-150 мг/мл (зокрема 100-140 мг/мл) біспецифічного антитіла до МЕСЕР/АМС2, яке містить константну ділянку важкого ланцюга підкласу ЇД051 людини, як описано в цьому документі, 15-35 мМ хлориду натрію і 15-25 мМ гістидинового буфера за рН 5,5:0,5.
Стислий опис графічних матеріалів
Фігура 1 Результати щодо мутності (фіг. ТА) ї в'язкості (фіг. 1Б) препаратів з частини І відбору рН/буфера. Фіг. 1 порівнює результати щодо мутності та в'язкості препаратів із частини
Ї відбору рН/буфера (під стовпчиками: перший рядок: Мо зразка препарату; другий рядок: значення рн; третій рядок: буферна система; четвертий рядок: іонна сила).
Фігура 2 Результати щодо мутності (фіг. 2А) і в'язкості (фіг. 2Б) препаратів із частини ЇЇ відбору рН/буфера (під стовпчиками: перший рядок: Мо зразка препарату; другий рядок: значення рн; третій рядок: знижувач в'язкості відсутній (-), МасСі або Сасіг; четвертий рядок: іонна сила).
Фігура З Високомолекулярні сполуки (ВМС) препаратів із частини ІЇ відбору рН/буфера спочатку та через 8 тижнів зберігання за 5 "С і 25 "С (під стовпчиками: перший рядок: Мо зразка препарату; другий рядок: значення рн; третій рядок: знижувач в'язкості відсутній (-), Масі або
Сасі»; четвертий рядок: іонна сила).
Фігура 4 Рівні високомолекулярних сполук (ВМС) спочатку та після механічного стресу (під стовпчиками: перший рядок: тип фізичного стресу; другий рядок: 95 поверхнево-активної речовини; третій рядок: Мо зразка препарату). 60 Фігура 5 Мутність (фіг. 5А) і в'язкість (фіг. 5Б) препаратів із відбору І допоміжних речовин (під стовпчиками: перший рядок: значення рН із Масі як знижувача в'язкості, відсутність (-) або наявність (5) метіоніну як стабілізатора; другий рядок: Мо зразка препарату).
Фігура 6 Рівні високомолекулярних сполук (ВМС) спочатку та у разі зберігання за 5 "С (під стовпчиками: перший рядок: значення рН із Масі як знижувача в'язкості, відсутність (-) або наявність (5) метіоніну як стабілізатора; другий рядок: Мо зразка препарату).
Фігура 7 Рівні високомолекулярних сполук (ВМС) спочатку та у разі зберігання за 25 "С (під стовпчиками: перший рядок: значення рН із Масі як знижувача в'язкості, відсутність (-) або наявність (5) метіоніну як стабілізатора; другий рядок: Мо зразка препарату).
Фігура 8 Рівні заряджених частинок (головній пік (фіг. А), кислотний пік (фіг. 8Б) і основний пік (фіг. 88)) спочатку та у разі зберігання за 5 "С (під стовпчиками: перший рядок: значення рн із Масі як знижувача в'язкості, відсутність (-) або наявність (5) метіоніну як стабілізатора; другий рядок: Мо зразка препарату).
Фігура 9 Рівні заряджених частинок (головній пік (фіг. 9А), кислотний пік (фіг. 9Б) і основний пік (фіг. 9В)) спочатку та у разі зберігання за 25 "С (під стовпчиками: перший рядок: значення рн із МасСі як знижувача в'язкості, відсутність (-) або наявність (т) метіоніну як стабілізатора; другий рядок: Мо зразка препарату).
Фігура 10 Мутність (фіг. 10А) і в'язкість (фіг. 10Б) оптимізованого й еталонного препарату з концентрацією білка 120 мг/мл із відбору ІІ допоміжних речовин.
Фігура 11 Мутність (фіг. 114А) і в'язкість (фіг. 11Б) оптимізованого й еталонного препарату з концентрацією білка 30 мг/мл із відбору ІЇ допоміжних речовин.
Фігура 12 Рівні високомолекулярних сполук (ВМС) спочатку (лівий стовпчик) і через 13 тижнів зберігання за 5 (середній стовпчик) і 25"С (правий стовпчик) оптимізованого й еталонного препарату з концентрацією білка 120 мг/мл.
Фігура 13 Рівні високомолекулярних сполук (ВМС) на початку (лівий стовпчик) і через 13 тижнів зберігання за 5 (середній стовпчик) і 25"С (правий стовпчик) оптимізованого й еталонного препарату з концентрацією білка 30 мг/мл.
Фігура 14 Рівні заряджений частинок (головний пік (фіг. 14А), кислотний пік (фіг. 14Б) і основний пік (фіг. 14В)) на початку (лівий стовпчик) і через 13 тижнів зберігання за 5 (середній стовпчик) і 25 "С (правий стовпчик) оптимізованого й еталонного препарату.
Детальний опис суті винаходу
Цей винахід стосується рідкого фармацевтичного препарату, який містить біспецифічне антитіло до МЕСР/АМОС2, яке містить константну ділянку важкого ланцюга підкласу ЇДО1 людини.
Термін "фармацевтичний препарат" відноситься до препаратів, які знаходяться в такій формі, щоб забезпечувати однозначну ефективність біологічної активності активних інгредієнтів, і які не містять додаткові компоненти, які є токсичними для суб'єктів, яким вводять препарат.
Термін "рідкий" у разі використання в цьому документі стосовно препарату згідно з цим винаходом означає препарат, який є рідким щонайменше за температури від приблизно 2 "С до приблизно 35 С (в одному варіанті реалізації від приблизно 2 С до приблизно 25 С) за атмосферного тиску.
Концентрація біспецифічного антитіла до МЕСЕ/АМО2, яке міститься в фармацевтичному препараті, знаходиться в діапазоні від приблизно 20 мг/мл до приблизно 150 мг/мл, зокрема концентрація становить 120 мг/мл х 18 мг/мл, більш конкретно концентрація становить 120 мг/мл х 12 мг/мл. В іншому варіанті реалізації концентрація може становити 30 мг/мл «5 4,5 мг/мл.
У разі використання в цьому документі "антитіло" стосується зв'язувального білка, який містить антигензв'язувальні сайти. Терміни "зв'язувальний сайт" або "антигензв'язувальний сайт" у разі використання в цьому документі означають ділянку(и) молекули антитіла, з якою(ими) фактично зв'язується ліганд. Термін "антигензв'язувальний сайт" включає варіабельні домени важкого ланцюга (УН) антитіла і варіабельні домени легкого ланцюга (МІ) антитіла (пара МНЛЛІ).
Специфічність антитіла стосується селективного розпізнавання антитіла для конкретного епітопу антигена. Природні антитіла, наприклад, є моноспецифічними. "Біспецифічні антитіла" згідно з цим винаходом являють собою антитіла, які мають дві різні антигензв'язувальні специфічності. Антитіла цього винаходу є специфічними до двох різних антигенів, МЕСЕ як першого антигена й АМО-2 як другого антигена.
Термін "моноспецифічне" антитіло у разі використання в цьому документі означає антитіло, яке має один або більше зв'язувальних сайтів, кожен з яких зв'язується з одним і тим самим епітопом одного і того самого антигена. 60 Термін "валентний" у разі використання в цій заявці означає присутність певної кількості зв'язувальних сайтів у молекулі антитіла. Таким чином, терміни "двовалентний", "чотиривалентний" і "шестивалентний" означають присутність двох зв'язувальних сайтів, чотирьох зв'язувальних сайтів і шести зв'язувальних сайтів, відповідно, в молекулі антитіла.
Біспецифічні антитіла згідно з цим винаходом переважно є "двовалентними".
Терміни "біспецифічне антитіло, яке зв'язується з фактором росту ендотелію судин людини (МЕСРЕ) і з ангіопоетином-2 (АМО-2) людини", "біспецифічне антитіло до МЕСР/АМО2" і "біспецифічне антитіло «МЕСБ/АМО2»" у разі використання в цьому документі є взаємозамінними та відносяться до антитіла, яке має щонайменше два різні антигензв'язувальні сайти, один, який зв'язується з МЕСЕ, і другий, який зв'язується з АМО2.
Біспецифічні антитіла до МЕСБ/АМО2 описані, наприклад, у М/02010/040508,
МО2011/117329, УМО2012/131078, УМО2015/083978, УМО2017/197199 і У/О2014/009465.
ММО2014/009465 описує біспецифічні антитіла до МЕСБ/АМО2, спеціально розроблені для лікування судинних захворювань очей. Біспецифічні антитіла до МЕСЕ/АМО2 з МО2014/009465 (який включений у цей документ у всій своїй повноті) є особливо придатними в лікуванні та в схемах лікування судинних захворювань очей, як описано в цьому документі. Зокрема антитіло до МЕСР/АМО2 Сто55МАБ МЕсСРапод2-0016, як описано в УМО2014/009465, яке також описано як фарицимаб (в УмМогпа Неанкт Огдапігайоп (2017). "Іпіегпайопа! Мопргоргієїагу Матев ог
Ріпаптасешіса! Зирвеіапсез (ІММ). Ргорозеа ІММ: Гівї 118" М/НО Огид Іптогтайоп. 31 (4)), є переважним біспецифічним антитілом до МЕСЕ/АМО2 цього винаходу.
В одному варіанті реалізації біспецифічне антитіло, яке зв'язується з фактором росту ендотелію судин людини (МЕСЕ) і з ангіопоетином-2 (АМО-2) людини, є біспецифічним антитілом до МЕСР/АМО2, яке містить перший антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з МЕСЕ людини, і другий антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з
АМО-2 людини, де ї) вказаний перший антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з МЕС, містить у варіабельному домені важкого ланцюга СОВЗН-ділянку з ФЕО ІО МО: 1, СОВ2Н-ділянку з БЕО
ІО МО: 2 ї СОВІТН-ділянку з 5ЕО ІО МО: 3, і у варіабельному домені легкого ланцюга СОВЗІ - ділянку з ФЕО ІЮ МО: 4, СОНР2І -ділянку з БЕО ІЮ МО: 5 і СОНТІ -ділянку з ФЕО ІО МО: 6; і ії) вказаний другий антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з АМО-2, містить у варіабельному домені важкого ланцюга СОНЗН-ділянку з 5ЕО ІЮ МО: 9, СОВ2Н-ділянку з БЕО
ІО МО: 10 ї СОВТН-ділянку з 5ЕО ІЮ МО: 11, ї у варіабельному домені легкого ланцюга СОВЗІ - ділянку з ФЕО ІЮ МО: 12, СОР2І -ділянку з ФЕО ІЮ МО: 13 ї СОНТІ -ділянку з ФЕО ІО МО: 14, і де ії) біспецифічне антитіло містить константну ділянку важкого ланцюга підкласу Їд21 людини, яка містить мутації І253А, НЗІ1бА і Н4ІЗ5БА і мутації І 234А, І 235А і РЗ29О (нумерація згідно з ЄО- індексом Кабата).
В одному варіанті реалізації таке біспецифічне антитіло до МЕСЕ/АМО2 є двовалентним.
В одному варіанті реалізації таке біспецифічне двовалентне антитіло до МЕСР/АМИа2 характеризується тим, що і) вказаний перший антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з МЕСБЕ, містить як варіабельний домен важкого ланцюга УН амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮО МО: 7, а як варіабельний домен легкого ланцюга У. - амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 8, і і) вказаний другий антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з АМО-2, містить як варіабельний домен важкого ланцюга УН амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 15, а як варіабельний домен легкого ланцюга У. - амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 16.
В одному аспекті цього винаходу таке біспецифічне, двовалентне антитіло згідно з цим винаходом характеризується тим, що містить а) важкий ланцюг і легсий ланцюг першого повнорозмірного антитіла, яке специфічно зв'язується з МЕСЕ; б) модифікований важкий ланцюг і модифікований легкий ланцюг другого повнорозмірного антитіла, яке специфічно зв'язується з АМО-2, де константні домени Сі їі СНІ заміняються один одним.
Цей формат біспецифічного, двовалентного антитіла для біспецифічного антитіла, яке специфічно зв'язується з фактором росту ендотелію судин (МЕСЕ) людини й ангіопоетином-2 (АМО-2) людини, описаний у УМО 2009/080253 (включаючи модифіковані за типом "виступи у западини" доменами СНЗ). Антитіла на основі цього формату біспецифічного, двовалентного антитіла називаються Сто55МАБ.
В одному варіанті реалізації таке біспецифічне, двохвалентне антитіло до МЕСЕ/АМО2 характеризується тим, що містить: а) як важкий ланцюг першого повнорозмірного антитіла амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ 60 МО: 17, а як легкий ланцюг першого повнорозмірного антитіла амінокислотну послідовність ФЕО
ІО МО: 18, ї б) як модифікований важкий ланцюг другого повнорозмірного антитіла амінокислотну послідовність 5ЕО 10 МО: 19, як модифікований легкий ланцюг другого повнорозмірного антитіла амінокислотну послідовність ХЕО ІЮ МО: 20.
В одному варіанті реалізації таке біспецифічне, двовалентне антитіло до МЕСР/АМОС2 характеризується тим, що містить амінокислотні послідовності ФЕО ІЮ МО: 17, 5ЕО ІЮО МО: 18,
ЗЕО ІО МО: 19 і 5ЕО ІЮ МО: 20.
Отже, один варіант реалізації цього винаходу являє собою біспецифічне, двовалентне антитіло, яке містить перший антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з МЕСЕ людини, і другий антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з АМО-2 людини, яке характеризується тим, що містить амінокислотні послідовності ЕС ІЮО МО: 17, 5ЕО ІО МО: 18,
ЗЕОЮ МО: 191 5ЕО ІО МО: 20.
В одному варіанті реалізації домени СНЗ біспецифічного, двовалентного антитіла згідно з цим винаходом замінені за технологією "виступи у западини" яка описана докладно з декількома прикладами, наприклад, у МУМО 96/027011, Кіддулау .В., еї аї., Ргоївіп Епд 9 (1996) 617-621; і Мегснапі, А.М., еї аї., Маї Віоїеснпо! 16 (1998) 677-681. У цьому способі поверхні контакту двох доменів СНЗ змінюють для підвищення гетеродимеризації обох важких ланцюгів, які містять ці два домени СНЗ. Кожен з двох доменів СНЗ (двох важких ланцюгів) може бути "виступом", тоді як інший є "западиною". Введення дисульфідного містка стабілізує гетеродимери (Мегспапі, А.М, еї аї., Маїиге Віоїесі 16 (1998) 677-681; Амуєї, 5., єї аї. У. Мої. Віої. 270 (1997) 26-35) і підвищує вихід.
У переважному аспекті цього винаходу біспецифічні антитіла до МЕСР/АМО2 згідно з цим винаходом характеризуються тим, що кожен з домену СНЗ одного важкого ланцюга та домену СНЗ іншого важкого ланцюга стикуються на поверхні контакту, яка містить початкову поверхню контакту між доменами СНЗ антитіла; де вказану поверхню контакту змінено для забезпечення утворення біспецифічного антитіла, де зміна характеризується тим, що: а) домен СНЗ одного важкого ланцюга змінено так, щоб в межах початкової поверхні контакту домену СНЗ одного важкого ланцюга, який стикується з початковою поверхнею контакту домену СНЗ3 іншого важкого ланцюга в межах біспецифічного антитіла, амінокислотний залишок було замінено на амінокислотний залишок, який має більший об'єм бокових ланцюгів, з утворенням при цьому виступу в межах поверхні контакту домену СНЗ одного важкого ланцюга, який може розташовуватися в порожнині в межах поверхні контакту домену СНЗ іншого важкого ланцюга, і б) домен СНЗ іншого важкого ланцюга змінено так, щоб в межах початкової поверхні контакту другого домену СНЗ, який стикується з початковою поверхнею контакту першого домену СНЗ в межах біспецифічного антитіла, амінокислотний залишок було замінено на амінокислотний залишок, який має менший об'єм бокових ланцюгів, з утворенням при цьому порожнини в межах поверхні контакту другого домену СНЗ, в якій може розташовуватися виступу межах поверхні контакту першого домену
СНЗ.
Таким чином, біспецифічні антитіла до МЕСЕ/АМО2 для застосування, описаного в цьому документі, переважно характеризуються тим, що кожен домен СНЗ важкого ланцюга повнорозмірного антитіла з а) і домен СНЗ важкого ланцюга повнорозмірного антитіла з б) стикуються на поверхні контакту, яка містить зміну в початковій поверхні контакту між доменами СНЗ антитіла; де ї) в домені СНЗ одного важкого ланцюга амінокислотний залишок було замінено на амінокислотний залишок, який має більший об'єм бокових ланцюгів, з утворенням при цьому виступу в межах поверхні контакту домену СНЗ одного важкого ланцюга, який може розташовуватися в порожнині в межах поверхні контакту домену СНЗ іншого важкого ланцюга, і де і) в домені СНЗ іншого важкого ланцюга амінокислотний залишок було замінено на амінокислотний залишок, який має менший об'єм бокових ланцюгів, з утворенням при цьому порожнини в межах поверхні контакту другого домену СНЗ, в якій може розташовуватися виступу межах поверхні контакту першого домену бо СНЗ.
Переважно вказаний амінокислотний залишок, який має більший об'єм бокових ланцюгів, вибирають із групи, яка складається з аргініну (К), фенілаланіну (ЕР), тирозину (У), триптофану (М).
Переважно вказаний амінокислотний залишок, який має менший об'єм бокових ланцюгів, вибирають із групи, яка складається з аланіну (А), серину (5), треоніну (Т), валіну (М).
В одному аспекті цього винаходу обидва домени СНЗ додатково змінені шляхом введення цистеїну (С) як амінокислоти в відповідних положеннях кожного домену СНЗ, так що між обома доменами СНЗ може утворюватися дисульфідний місток.
В одному варіанті реалізації біспецифічне антитіло містить мутацію Т366УМ у домені СНЗ "ланцюга виступів" і мутації 73665, І З368А, у407М у домені СНЗ "ланцюга западин". Додатковий дисульфідний місток між ланцюгами між доменами СНЗ можна також використовувати (Мегспапі, А.М, еї аї., Маїшге Віоїесп 16 (1998) 677-681), наприклад, шляхом введення мутації 5354С у домен СНЗ і мутації У349С в інший домен СНЗ.
В іншому переважному варіанті реалізації біспецифіне антитіло містить мутації 5354С і
ТЗ36бУУ в одному з двох доменів СНЗ і мутації У349С, 73665, І З368А, У407М в іншому з двох доменів СНЗ. В іншому переважному варіанті реалізації біспецифічне антитіло містить мутації
У349С, Т366УМ в одному з двох доменів СНЗ і мутації 5354, 73665, І З368А, 7407М в іншому з двох доменів СНЗ (додаткова мутація У349С або 5354С в одному домені СНЗ і додаткова мутація 5354С або У349С в іншому домені СНЗ, які утворюють дисульфідний місток між ланцюгами) (нумерація завжди згідно з ЕО-індексом Кабата (Кабаї, Е.А., еї аЇ., Зедоепсев5 ої
Ргоївіпв ої Іттипоіодіса! Іпіеге5і, Бій єй., Рибіїс Неанйй Зегмісе, Маїййопа! Іпвійшев ої Неапн,
Веїпезаа, МО (1991)).
Інші технології для модифікацій СНЗ для посилення гетеродимеризації розглядаються як альтернативи цього винаходу і описані, наприклад, у М/О 96/27011, УМО 98/050431, ЕР 1870459, мо 2007/110205, МО 2007/147901, МО 2009/089004, МО 2010/129304, МО 2011/90754, МО 2011/143545, МО 2012/058768, УМО 2013/157954 ії УМО 2013/096291.
В одному варіанті реалізації підхід до гетеродимеризації, описаний в ЕР 1870459 АТ, використовують альтернативно. Цей підхід оснований на введенні заміщень/мутацій заряджених амінокислот з протилежним зарядом у конкретних положеннях амінокислот на поверхні контакту доменів СНЗ/СНЗ між обома важкими ланцюгами. Один переважний варіант реалізації для вказаних мультиспецифічних антитіл представляє мутації К409О0 і КЗ7ОЕ амінокислот у домені СНЗ одного важкого ланцюга і мутації 0О399К і ЕЗ57К амінокислот у домені
СНЗ іншого важкого ланцюга мультиспецифічного антитіла (нумерація згідно з ЕО-індексом
Кабата).
В іншому варіанті реалізації вказане мультиспецифічне антитіло містить мутацію ТЗ36бУМ амінокислоти в домені СНЗ "ланцюга виступів" і мутації 73665, І З68А і У407М амінокислот у домені СНЗ "ланцюга западин"; і додатково містить мутації К4090 і КЗ70ОЕ амінокислот у домені
СНнЗ "ланцюга виступів" і мутації 0О399К і ЕЗ57К амінокислот у домені СНЗ "ланцюга западин".
В одному варіанті реалізації підхід до гетеродимеризації, описаний у УМО2013/157953, використовують альтернативно. В одному варіанті реалізації домен СНЗ одного важкого ланцюга містить мутацію Т366К амінокислоти, а домен СНЗ іншого важкого ланцюга містить мутацію 3510 амінокислоти. У додатковому варіанті реалізації домен СНЗ одного важкого ланцюга також містить мутацію ІГЗ351К амінокислоти. У додатковому варіанті реалізації домен
СНЗ іншого важкого ланцюга також містить мутацію амінокислоти, яка вибрана з У349Е, 3490 і
І З68Е (в одному варіанті реалізації І З68Е).
В одному варіанті реалізації підхід до гетеродимеризації, описаний у М/02012/058768, використовують альтернативно. В одному варіанті реалізації домен СНЗ одного важкого ланцюга містить мутації 351 і У407А амінокислот, а домен СНЗ іншого важкого ланцюга містить мутації ТЗ36бА і К409Е амінокислот. У додатковому варіанті реалізації домен СНЗ іншого важкого ланцюга також містить мутацію амінокислоти в положенні Т411, 0399, 5400, 405, М390 або К392. В одному варіанті реалізації вказану мутацію амінокислоти обирають із групи, яка складається з а) ТАЛ1М, Т411к, 4110, ТАТ1К, Т4110, ТА11Е ї ТАМ, б) оз99к, Ю399МУ, 0399 і Ю399К, в) 5400Е, 54000, 5400К і 5400К, г) Е405І, Е405М, Е405тТ, 4055, Е405М і Е4О5МУ, г) МЗООм, МЗ9ОК і М3900, д) К392У, К392М, КЗ392К, КЗ3921І, КЗ392Е і К392Е.
У додатковому варіанті реалізації домен СНЗ одного важкого ланцюга містить мутації І 351 60 і У407А амінокислот, а домен СНЗ іншого важкого ланцюга містить мутації Т366М і К409г амінокислот. У додатковому варіанті реалізації домен СНЗ одного важкого ланцюга містить мутацію У407А амінокислоти, а домен СНЗ іншого важкого ланцюга містить мутації ТЗ366бА і
К409Е амінокислот. У додатковому варіанті реалізації домен СНЗ іншого важкого ланцюга також містить мутації КЗ92Е, Т411Є, 0399К і 5400К амінокислот.
В одному варіанті реалізації підхід до гетеродимеризації, описаний у М/02011/143545, використовують альтернативно. В одному варіанті реалізації модифікацію амінокислот згідно з
МО2011/143545 вводять у домен СНЗ важкого ланцюга в положенні, яке обране з групи, яка складається з 368 і 409.
В одному варіанті реалізації підхід до гетеродимеризації, описаний у М/О2011/090762, який також використовує технологію "виступи у западини" описану вище, використовують альтернативно. В одному варіанті реалізації домен СНЗ одного важкого ланцюга містить мутацію Т366УМ амінокислоти, а домен СНЗ іншого важкого ланцюга містить мутацію У407А амінокислоти. В одному варіанті реалізації домен СНЗ одного важкого ланцюга містить мутацію
Т366У амінокислоти, а домен СНЗ іншого важкого ланцюга містить мутацію У407тТ амінокислоти.
В одному варіанті реалізації поліспецифічне антитіло представляє ізотип Ідса2, Її підхід до гетеродимеризації, описаний у ММО2010/129304, використовують альтернативно.
В одному варіанті реалізації підхід до гетеродимеризації, описаний у УМО2009/089004, використовують альтернативно. В одному варіанті реалізації домен СНЗ одного важкого ланцюга містить амінокислотну заміну К392 або М392 на негативно заряджену амінокислоту (в одному варіанті реалізації глутамінову кислоту (Е) або аспарагінову кислоту (0); у додатковому варіанті реалізації мутацію К3920 або М3920), а домен СНЗ іншого важкого ланцюга містить амінокислотну заміну 0399, ЕЗ356, 0356 або Е357 на позитивно заряджену амінокислоту (в одному варіанті реалізації лізин (К) або аргінін (К), у додатковому варіанті реалізації заміну 0399К, ЕЗ56К, ОЗ356К або ЕЗ357К; а в ще одному додатковому варіанті реалізації мутацію ОЗ99К або ЕЗ3З56К). У додатковому варіанті реалізації домен СНЗ одного важкого ланцюга також містить амінокислотну заміну К-409 або К409 на негативно заряджену амінокислоту (в одному варіанті реалізації глутамінову кислоту (Е) або аспарагінову кислоту (0); у додатковому варіанті реалізації мутацію К409О0 абокК4090). У додатковому варіанті реалізації домен СНЗ одного важкого ланцюга додатково або альтернативно містить амінокислотну заміну К439 та/або К370 на негативно заряджену амінокислоту (в одному варіанті реалізації глутамінову кислоту (Е) або аспарагінову кислоту (03).
В одному варіанті реалізації підхід до гетеродимеризації, описаний у М/02007/147901, використовують альтернативно. В одному варіанті реалізації домен СНЗ одного важкого ланцюга містить мутації К25ЗЕ, 0282К і К3220 амінокислот, а домен СНЗ іншого важкого ланцюга містить мутації 0239К, Е240ОК і К2920 амінокислот.
В одному варіанті реалізації підхід до гетеродимеризації, описаний у М/02007/110205, використовують альтернативно.
В одному переважному варіанті реалізації таке біспецифічне антитіло до МЕСР/АМО2 є двовалентним.
В одному варіанті реалізації біспецифічне, двовалентне антитіло, яке зв'язується з фактором росту ендотелію судин людини (МЕСЕ) і з ангіопоетином-2 (АМО-2) людини, є біспецифічним антитілом до МЕСР/АМО2, яке містить перший антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з МЕСЕ людини, і другий антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з АМО-2 людини, де ї) вказаний перший антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з МЕС, містить у варіабельному домені важкого ланцюга СОВЗН-ділянку з ФЕО ІО МО: 1, СОВ2Н-ділянку з БЕО
ІО МО: 2 ї СОВІТН-ділянку з 5ЕО ІО МО: 3, і у варіабельному домені легкого ланцюга СОВЗІ - ділянку з ФЕО ІЮ МО: 4, СОНР2І -ділянку з БЕО ІЮ МО: 5 і СОНТІ -ділянку з ФЕО ІО МО: 6; і ії) вказаний другий антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з АМО-2, містить у варіабельному домені важкого ланцюга СОВЗН-ділянку з ФЕО ІО МО: 9, СОВ2Н-ділянку з БЕО
ІО МО: 10 ї СОВТН-ділянку з 5ЕО ІЮ МО: 11, ї у варіабельному домені легкого ланцюга СОВЗІ - ділянку з ФЕО ІЮ МО: 12, СОР2І -ділянку з ФЕО ІЮ МО: 13 ї СОНТІ -ділянку з ФЕО ІО МО: 14, і де ії) біспецифічне антитіло містить константну ділянку важкого ланцюга підкласу Їд21 людини, яка містить мутації І253А, НЗІ1бА і Н4ІЗ5БА і мутації І 234А, І 235А і РЗ29О (нумерація згідно з ЄО- індексом Кабата); і де ім) у константній ділянці важкого ланцюга мутація ТЗ66М/ міститься в одному домені СНЗ, а мутації 73665, І 368А, У407М містяться в іншому домені СНЗ (нумерація згідно з ЕО-індексом
Кабата). 60 В одному варіанті реалізації біспецифічне, двовалентне антитіло, яке зв'язується з фактором росту ендотелію судин людини (МЕСЕ) і з ангіопоетином-2 (АМО-2) людини, є біспецифічним антитілом до МЕСР/АМОС2, яке містить перший антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з МЕСЕ людини, і другий антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з АМО-2 людини, де ї) вказаний перший антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з МЕС, містить у варіабельному домені важкого ланцюга СОВЗН-ділянку з ФЕО ІО МО: 1, СОВ2Н-ділянку з БЕО
ІО МО: 2 ї СОВІТН-ділянку з 5ЕО ІО МО: 3, і у варіабельному домені легкого ланцюга СОВЗІ - ділянку з ФЕО ІЮ МО: 4, СОНР2І -ділянку з БЕО ІЮ МО: 5 і СОНТІ -ділянку з ФЕО ІО МО: 6; і ії) вказаний другий антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з АМО-2, містить у варіабельному домені важкого ланцюга СОВЗН-ділянку з БЕО ІЮ МО: 9, СОВ2Н-ділянку з БЕО
ІО МО: 10 ї СОВТН-ділянку з 5ЕО ІЮ МО: 11, ї у варіабельному домені легкого ланцюга СОВЗІ - ділянку з ФЕО ІЮ МО: 12, СОР2І -ділянку з ФЕО ІЮ МО: 13 ї СОНТІ -ділянку з ФЕО ІО МО: 14, і де ії) біспецифічне антитіло містить константну ділянку важкого ланцюга підкласу Їд21 людини, яка містить мутації І253А, НЗІ1бА і Н4ІЗ5БА і мутації І 234А, І 235А і РЗ29О (нумерація згідно з ЄО- індексом Кабата); і де їм) у константній ділянці важкого ланцюга мутації 53540 і ТЗ366М/ містяться в одному домені
СНЗ, а мутації У349С, 73665, І З68А і М407У містяться в іншому домені СНЗ (нумерація згідно з
Еи-індексом Кабата).
В одному варіанті реалізації таке біспецифічне, двовалентне антитіло до МЕСР/АМОС2 характеризується тим, що містить амінокислотні послідовності ФЕО ІЮ МО: 17, 5ЕО ІЮО МО: 18,
ЗЕО ІО МО: 19 і 5ЕО ІЮ МО: 20.
Отже, один варіант реалізації цього винаходу являє собою біспецифічне, двовалентне антитіло, яке містить перший антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з МЕСЕ людини, і другий антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з АМО-2 людини, яке характеризується тим, що містить амінокислотні послідовності ЕС ІЮО МО: 17, 5ЕО ІО МО: 18,
ЗЕО ІО МО: 191 5ЕО ІО МО: 20.
В одному переважному варіанті реалізації таке біспецифічне антитіло до МЕСЕР/АМО2 являє собою фарицимаб.
Термін "МЕСЕ" у разі використання в цьому документі стосується фактору росту ендотелію судин людини (МЕСЕЛ/ЕСЕ-А), фактору росту ендотеліальних клітин судин людини з 165 амінокислот (амінокислоти 27-191 послідовності попередника МЕСЕ165 людини: 5ЕО ІО МО: 25; амінокислоти 1-26 представляють сигнальний білок) і спорідненим ізоформам 121, 189 і 206 фактора росту ендотеліальних клітин судин, як описано в І ейпо, О.МУ., еї аї., 5сіепсе 246 (1989) 1306-9; Ноиск еї а!., Мої. Епадостіп. 5 (1991) 1806-1814; Кеск, Р.)., вї а!., 5сіеєпсе 246 (1989) 1309- 12, ії Соппоїу, О.Т., еї аї.,, 9. ВіоЇ. Спет. 264 (1989) 20017-24; разом з алельними та процесованими формами цих факторів росту, які зустрічаються в природі. МЕСЕ залучений у регуляцію нормального й атипового ангіогенезу та неоваскуляризації, пов'язаних із пухлинами та внутрішньоочними захворюваннями (Ре!тага, М., еї аЇ., Епдосг. Кеу. 18 (1997) 4-25; Вежтап,
В.А. еї аї., У. Сііп. Іпмеві. 91 (1993) 153-159; Вгомп, Г.Р., еї аі., Нитап Раїної. 26 (1995) 86-91;
Вгомл, І..Р., еї а)., Сапсег Нез. 53 (1993) 4727-4735; Мацепт, »., еї а!., Вії. у). Сапсег. 73 (1996) 931-934; і Омогак, Н.Р., еї аІ., Ат. 9). Раїфйої. 146 (1995) 1029-1039). МЕСЕ являє собою гомодимерний глікопротеїн, який був виділений із декількох джерел і містить декілька ізоформ.
МЕСЕ показує високоспецифічну мітогенну активність щодо ендотеліальних клітин.
Антагоніст/інгібітор, МЕС інгібує зв'язування МЕСЕ з його рецептором МЕСЕК. Відомі антагоністи/інгібітори МЕСЕ включають біспецифічні антитіла до МЕСР/АМО2, як описано в
МмО2014/009465.
Термін "АМО-2" у разі використання в цьому документі відноситься до ангіопоетину-2 (АМа- 2) людини (альтернативно має скорочення АМОРТ2 або АМО2) (5ЕО ІЮО МО: 24), який описаний, наприклад, у Маїізопріє!те, Р.С., еї аІ., Зсіепсе 277 (1997) 55-60, і Спешпа, А.Н., еї аІ., сепотісв 48 (1998) 389-91. Ангіопоетини 1 і 2 були виявлені як ліганди до Тіє, сімейства тирозинкіназ, які селективно експресуються в ендотелії судин (Уапсороціо5, .0., еї аІ., Маїшге 407 (2000) 242- 48). Зараз існують чотири точно визначених члени сімейства ангіопоетинів. Ангіопоетини З і 4 (Апод-3 і Апд-4) можуть представляти дуже відмінні аналоги одного й того самого локусу гена у мишей і людини (Кіт, І., еї аіІ., РЕВ5З І еї, 443 (1999) 353-56; Кіт, І., єї а!., У Віої Снет 274 (1999) 26523-28). АМО-1 і АМО-2 були спочатку ідентифіковані під час експериментів на культурах тканин як агоніст і антагоніст, відповідно (див. для АМО-1: Оамів, 5., вії а!., Сеї! 87 (1996) 1161-69; а для АМО-2: Маїізопрієїте, Р.С., єї а)Ї., Зсіепсе 277 (1997) 55-60). Усі з відомих ангіопоетинів зв'язуються в першу чергу зі своїм рецептором ТІЕ2, і як Апо-1, так і Апд-2 зв'язуються з ТІЕ2 з афінністю З НМ (Ка) (Маїізопрієїте, Р.С., еї аї., бсіепсе 277 (1997) 55-60). Антагоніст/інгібітор 60 АМО2 інгібує зв'язування АМО2 з його рецептором ТІЕ2. Відомі антагоністи/нгібітори АМО2 включають біспецифічні антитіла до МЕСЕ/АМС2, як описано в УМО2014/009465.
Антигензв'язувальні сайти біспецифічного антитіла цього винаходу містять шість ділянок, що визначають комплементарність (СОМ), які вносять у різному ступені вклад в афінність зв'язувального сайту для антигену. Існують три варіабельні домени СОК важкого ланцюга (СОКНІ, СОКН?2 ї СОКНЗ) і три варіабельні домени СОК легкого ланцюга (СОКІ 1, СОКІ2 і
СОН). Розмір СОК і каркасних ділянок (ЕК) визначають порівнянням із зібраною базою даних амінокислотних послідовностей, в якій ці ділянки були визначені згідно з варіабельністю серед послідовностей.
Антитіла цього винаходу містять константні ділянки імуноглобуліну, отримані з імуноглобуліну класу ЇДС1 людини.
Терміни "моноклональне антитіло" або "препарат моноклонального антитіла" у разі використання в цьому документі відносяться до препарату молекул антитіл з одним амінокислотним препаратом.
Термін "химерне антитіло" відноситься до антитіла, яке містить варіабельну ділянку, тобто зв'язувальну ділянку, з одного джерела або виду та щонайменше частину константної ділянки, отриману з іншого джерела або виду, зазвичай отриману шляхом технологій рекомбінантної
ДНК. Химерні антитіла, які містять мишачу варіабельну ділянку та людську константну ділянку, представляють особливий інтерес. Інші форми "химерних антитіл", охоплені цим винаходом, представляють такі, в яких константна ділянка була модифікована або змінена відносно такої в початковому антитілі для отримання бажаних властивостей згідно з цим винаходом, особливо щодо зв'язування з С14 та/або зв'язування з рецептором Ес (ЕсК). Такі химерні антитіла також називають "антитілами з перемиканням класу". Химерні антитіла є продуктом експресованих генів імуноглобулінів, які містять сегменти ДНК, які кодують варіабельні ділянки імуноглобулінів, і сегменти ДНК, які кодують константні ділянки імуноглобулінів. Способи отримання химерних антитіл включають звичайні технології рекомбінантної ДНК і генної трансфекції та є добре відомими в цій галузі. Див., наприклад, Могттізоп, 5.І.., еї аїЇ., Ргос. Маї0!. Асад. Зсі. ОБА 81 (1984) 6851-6855; патенти США Мо 5202238 і Мо 5204244.
Термін "гуманізоване антитіло" відноситься до антитіл, в яких каркасні ділянки або "ділянки, які визначають комплементарність" (СОК), були модифіковані так, щоб містити СО імуноглобуліну з відмінною специфічністю у порівнянні з початковим імуноглобуліном. У переважному варіанті реалізації мишачу СОК прищеплюють у каркасну ділянку антитіла людини для отримання "гуманізованого антитіла". Див., наприклад, Кіесптапп, Г.., еї аїЇ., Маїиге 332 (1988) 323-327; і Меибегодет", М.5., єї аї., Майте 314 (1985) 268-270. Особливо переважні СОК відповідають таким, які представляють послідовності, які розпізнають антигени, вказані вище для хімерних антитіл. Інші форми "гуманізованих антитіл", охоплені цим винаходом, представляють такі, в яких константна ділянка була додатково модифікована або змінена відносно такої в початковому антитілі для отримання властивостей згідно з цим винаходом, особливо щодо зв'язування з С14 та/або зв'язування з рецептором Ес (ГСК).
Термін "антитіло людини" у разі використання в цьому документі призначений включати антитіла, які мають варіабельні та константні ділянки, отримані з послідовностей імуноглобулінів зародкових ліній людини. Антитіла людини добре відомі в цій галузі техніки (мап
РІК, М.А., апа мап де УміпКеї, У.3., Сит. Оріп. Спет. Віої. 5 (2001) 368-374). Антитіла людини можна також отримувати у трансгенних тварин (наприклад, мишей), які можуть у разі імунізації продукувати повний набір або вибірку антитіл людини за відсутності продукування ендогенних імуноглобулінів. Перенесення генної матриці імуноглобулінів зародкових ліній людини у таких мишей із мутантною зародковою лінією буде спричиняти продукування антитіл людини у разі антигенної стимуляції (див., наприклад, ЧаКобоміїв, А., еї аїЇ., Ргос. Маї). Асай. 5сі. ОБА 90 (1993) 2551-2555; даКороміїв5, А., еї а)., Майте 362 (1993) 255-258; Вгиддетапп, М., еї аї., Уеаг Іттипо). 7 (1993) 33-40). Антитіла людини можна також отримувати в фаг-дисплейних бібліотеках (Ноодепроот, Н.В., апа М/іпіег, С., у). Мої. Віої. 227 (1992) 381-388; МагїКзв, 9.О., еї аї., У. Мої. Віо!. 222 (1991) 581-597). Технології Соїе і співавт. і Воегпег і співавт. також доступні для отримання моноклональних антитіл людини (Соїе єї аїЇ., Мопосіопа! Апііїбодієх апа Сапсег Тпегару, АЇап К.
Іів5, р. 77 (1985); і Воегпег, Р., еї аї., У. Іттипої. 147 (1991) 86-95). Як уже вказувалося для химерних і гуманізованих антитіл згідно з цим винаходом, термін "антитіло людини" у разі використання в цьому документі також включає такі антитіла, які модифіковані в константній ділянці для отримання властивостей згідно з цим винаходом, особливо щодо зв'язування С14а та/або зв'язування з ЕСЕ, наприклад, шляхом "перемикання класу", тобто зміни або мутації частин Ес (наприклад, з ІДС1 на ІдС4 та/або мутація Ід 1/ас4).
Термін "рекомбінантне антитіло людини" у разі використання в цьому документі 60 призначений включати всі антитіла людини, які отримані, експресовані, створені або виділені рекомбінантними засобами, такі як антитіла, виділені з клітини-хазяїна, такої як клітина М5О або
СНО, або з тварини (наприклад, миші), яка є трансгенною щодо генів імуноглобулінів людини, або антитіла, які експресовані за допомогою рекомбінантного вектора експресії, трансфікованого в клітину-хазяїна. Такі рекомбінантні антитіла людини мають варіабельні та константні ділянки в перегрупованій формі. Рекомбінантні антитіла людини згідно з цим винаходом були піддані іп мімо соматичній гіпермутації. Таким чином, амінокислотні послідовності ділянок МН і МІ. рекомбінантних антитіл являють собою послідовності, які, хоча отримані з і є спорідненими з послідовностями МН і МІ зародкових ліній людини, не можуть природним чином існувати в наборі зародкових ліній антитіла людини іп мімо. "Варіабельна ділянка" (варіабельна ділянка легкого ланцюга (Мі), варіабельна ділянка важкого ланцюга (Ун)) або "варіабельний домен" у разі використання в цьому документі означає кожну з пар доменів легких і важких ланцюгів, які залучені безпосередньо в зв'язування антитіла з антигеном. Варіабельні домени легких і важких ланцюгів мають однакову загальну структуру, і кожний домен містить чотири каркасні ділянки (ЕК), послідовності яких є значною мірою консервативними, з'єднані трьома "гіперваріабельними ділянками" (або ділянками, які визначають комплементарність, СОК). Каркасні ділянки приймають В-складчасту конформацію, а СОК можуть утворювати петлі, які з'єднують Д-складчасту структуру. СОК у кожному ланцюгу утримуються в своїй тримірній структурі за допомогою каркасних ділянок і утворюють разом із
СОК з іншого ланцюга антигензв'язувальний сайт. СОКЗ-ділянки важких і легких ланцюгів антитіла грають особливо важливу роль у специфічності/афінності зв'язування антитіл згідно з цим винаходом. Термін "антигензв'язувальна частина антитіла" у разі використання в цьому документі відноситься до амінокислотних залишків антитіла, які відповідають за зв'язування антигена. Антигензв'язувальна частина антитіла містить амінокислотні залишки з "ділянок, які визначають комплементарність", або "СОК". "Каркасні" ділянки або "ЕК" являють собою ділянки варіабельних доменів, які не відносяться до залишків гіперваріабельної ділянки, як визначено в цьому документі. Таким чином, варіабельні домени важких і легких ланцюгів антитіла містять від
М- до С-кінця домени ЕКТ, СОКІ1, ЕК2, СОК2, ЕКЗ, СОКЗ ії ЕК4. Зокрема СОКЗ важкого ланцюга являє собою ділянку, яка забезпечує головним чином зв'язування антигена та визначає властивості антитіла. Області СОК і ЕК визначають згідно зі стандартним визначенням із Кабаї еї аі., Зедиепсез ої Ргоївіп5 ої Іттипоіодіса! Іпіегеві, Бій ей. Рибіїс Неайй Зегуісе, Маїйопаї!
Іпзійшез ої Неацйй, Веїпезаа, МО (1991), та/або їх залишкам з "гіперваріабельної петлі".
Термін "епітоп" включає будь-яку поліпептидну детермінанту, здатну специфічно зв'язуватися з антитілом. У деяких варіантах реалізації детермінанта-епітоп включає хімічно активні поверхневі угрупування молекул, такі як амінокислоти, бокові ланцюги цукрів, фосфорил або сульфоніл, а в деяких варіантах реалізації може мати специфічні тримірні структурні характеристики та/або специфічні зарядні характеристики. Епітоп являє собою ділянку антигена, яка зв'язується антитілом.
Термін "повнорозмірне антитіло" означає антитіло, яке складається з двох "важких ланцюгів повнорозмірного антитіла" і двох "легких ланцюгів повнорозмірного антитіла". "Зажкий ланцюг повнорозмірного антитіла" являє собою поліпептид, який складається в напрямку від М-кінця до
С-кінця з варіабельного домену (УН) важкого ланцюга антитіла, константного домену 1 (СНІ) важкого ланцюга антитіла, шарнірної ділянки (НК) антитіла, константного домену 2 (СН2) важкого ланцюга антитіла та константного домену З (СНЗ) важкого ланцюга антитіла, який скорочено називається МН-СНІ-НА-СН2-СНЗ; і необов'язково константного домену 4 (СНА) важкого ланцюга антитіла в випадку антитіла підкласу ДЕ. Переважно "важкий ланцюг повнорозмірного антитіла" являє собою поліпептид, який складається в напрямку від М-кінця до
С-кінця з МН, СНІ, НЕ, СН2 ї СНЗ. "Легкий ланцюг повнорозмірного антитіла" являє собою поліпептид, який складається в напрямку від М-кінця до С-кінця з варіабельного домену легкого ланцюга (МІ) антитіла та константного домену легкого ланцюга (СІ) антитіла, що скорочено називається МІ -СІ. Константний домен (СІ) легкого ланцюга антитіла може бути каппа або лямбда. Два ланцюга повнорозмірного антитіла зв'язані разом за допомогою дисульфідних зв'язків між поліпептидами між доменом СІ. і доменом СНІ і між шарнірними ділянками важких ланцюгів повнорозмірного антитіла. Приклади типових повнорозмірних антитіл представляють природні антитіла, такі як Їдо (наприклад, Їдс1 і Ідсе2), ІЗ9М, ІдЧА, дО ії ЗЕ. Повнорозмірні антитіла згідно з цим винаходом можуть бути від одного виду, наприклад, людини, або вони можуть бути химерними або гуманізованими антитілами. Повнорозмірні антитіла згідно з цим винаходом містять два антигензв'язувальні сайти, кожен утворений парою МН і Мі, обидва з яких специфічно зв'язуються з одним і тим самим антигеном. С-кінець важкого або легкого ланцюга вказаного повнорозмірного антитіла означає останню амінокислоту на С-кінці бо вказаного важкого або легкого ланцюга. М-кінець важкого або легкого ланцюга вказаного повнорозмірного антитіла означає останню амінокислоту на М-кінці вказаного важкого або легкого ланцюга.
Термін "константна ділянка" або "константні домени" у разі використання в межах цих застосувань означає суму доменів антитіла, які відрізняються від варіабельної ділянки.
Константна ділянка не залучена безпосередньо в зв'язування антигену, а проявляє різні ефекторні функції. Залежно від амінокислотної послідовності константної ділянки їхніх важких ланцюгів антитіла розділяються на класи: ІдА, дО, ІДЕ, дос і І9М, і декілька з них можна додатково розділили на підкласи, такі як Їдс1, Ідс2, Ід, і Ід, ІдДАЇ і ІДА2. Константні ділянки важкого ланцюга, які відповідають різним класам антитіл, називаються альфа, дельта, епсілон, гамма та мю, відповідно. Константні ділянки легкого ланцюга, які можна виявити у всіх п'яти класах антитіл, називаються каппа тп лямбда.
Термін "константна ділянка людського походження" у разі використання в цій заявці означає константну ділянку важкого ланцюга антитіла людини підкласу Ідс1, Ід02, ДОЗ або Ідс4 та/або константну ділянку каппа або лямбда легкого ланцюга. Такі константні ділянки є добре відомими в цій галузі техніки та, наприклад, описані у Кабаї, Е. А. (див., наприклад, ЧУоппзоп, 0., апа и, Т. Т., Мисівїс Асіаз Рез. 28 (2000) 214-218; Кабаї, Е. А., єї а!., Ргос. Маї). Асай. 5сі. ОБА 72 (1975) 2785-2788).
Термін константний домен (або ділянка) важкого ланцюга у разі використання в цьому документі визначає С-кінцеву ділянку важкого ланцюга імуноглобуліну, яка містить щонайменше частину константної ділянки важкого ланцюга.
Термін включає нативні послідовності константних доменів важкого ланцюга та варіантні константні домени важкого ланцюга. Варіантні константні домени важкого ланцюга включають, наприклад, мутації в константних доменах, які використовуються для сприяння гетеродимеризації, як описано вище для технології виступи у западини. Також можуть бути включені інші мутації, такі як, наприклад, І 234А (І еи235Аїа), І235А (І еи234АїЇа;) і РЗ29О (Рго32901у), оскільки константні домени, з такими мутаціями, мають знижене зв'язування з Еск (зокрема вони більше не демонструють зв'язування з ЕсЕ-гамма-ї, ЕсВ-гамма-ї! і ЕсК-гамма-П).
Це є особливо придатним для зниження потенційних побічних ефектів, таких як, наприклад, тромбоз (Меуєег, Т., еї аї., У. Тиготбр. Наетові. 7 (2009) 171-81). Крім того, наприклад, мутації
І253А, НЗ1ТОА ї Н4ІЗ5А (нумерація згідно з ЕО-індексом Кабата) також можуть бути включені в константний домен, оскільки константні домени з такими мутаціями мають знижене зв'язування з ЕсКп (одна або дві мутації) або усунене зв'язування з ЕсКп (всі З мутації).
В одному аспекті константна ділянка важкого ланцюга ДС людини йде від аланіну 118 (А118) (нумерація згідно з ЕО-індексом Кабата) до карбоксильного кінця важкого ланцюга.
Однак антитіла, які продукуються клітинами-хазяїнами, можуть піддаватися посттрансляційному відщіпленню однієї або більше, зокрема однієї або двох, амінокислот від С-кінця важкого ланцюга. Таким чином, антитіло, яке продукується клітиною-хазяїном шляхом експресії специфічної молекули нуклеїнової кислоти, яка кодує повнорозмірний важкий ланцюг, може містити повнорозмірний важкий ланцюг, або воно може містити розщеплений варіант повнорозмірного важкого ланцюга. Це може бути випадок, в якому кінцеві дві амінокислоти С- кінця важкого ланцюга являють собою гліцин (5446) і лізин (К447, нумерація згідно з ЕО- індексом). Таким чином, лізин (Гуз447) на С-кінці або гліцин (сіІу446) і лізин (І уз447) на С-кінці константного домену важкого ланцюга можуть бути присутні або можуть не бути присутні.
Амінокислотні послідовності важких ланцюгів, які включають константний домен важкого ланцюга, позначають в цьому документі як С-кінцевий дипептид гліцин-лізин, якщо не вказано інше. "Стабільний" препарат являє собою такий, в якому білок, наприклад, антитіло, по суті зберігає свою фізичну та хімічну стабільність і, таким чином, свою біологічну активність під час зберігання; наприклад, де вміст високомолекулярних сполук (ВС) біспецифічного антитіла в фармацевтичному препараті становить менше 10 95 через 8 тижнів за 25 "С (в одному варіанті реалізації менше 5 95, в одному варіанті реалізації менше 2,5 95). В одному варіанті реалізації вміст високомолекулярних сполук (ВС) біспецифічного антитіла в фармацевтичному препараті становить менше 10 95 через 52 тижні за 25 "С (в одному варіанті реалізації менше 5 9б).
В одному варіанті реалізації "стабільний рідкий фармацевтичний препарат" являє собою рідкий препарат без значних змін, які спостерігаються за температури охолодження (2-8 27С) протягом щонайменше 12 місяців, зокрема 2 років і більш конкретно З років. Критерії для стабільності є такими: не більше 10 95, зокрема 5 95, мономера антитіла розкладається, що вимірюється за допомогою ексклюзійної хроматографії (ЕХ-ВЕРХ). Крім того, розчин є безбарвним або від прозорого до злегка опалового у разі візуального аналізу. Концентрація 60 білка в препараті змінюється не більше ніж на ж/- 10 95. Утворюється не більше ніж 10 95,
зокрема 5 95, агрегатів. Стабільність вимірюють методами, які відомі в цій галузі, такими як Уф- спектроскопія, ексклюзійна хроматографія (ЕХ-ВЕРХ), іонообмінна хроматографія (О-ВЕРХ), турбидиметрія та візуальний огляд.
Мутність (в ОМФ (:ходиниця мутності за формазином))
Мутність фармацевтичного препарату може бути визначена на турбидиметрі (наприклад, на турбидиметрі Насп 2100 АМ згідно з Європейською фармакопеєю 2.2.1 (Прозорість і ступінь опалесценції рідин)). Об'єм зразка приблизно 2 мл розчину зразка переносять у скляну кювету з внутрішнім діаметром 11 мм. Скляну кювету розміщують у турбидиметрі та вимірюють мутність відносно калібрувальної кривої еталонних суспензій 1 ОМФ, 3 ОМФ, 10 ОМФ, 20 ОМФ і 100
ОМФ.
В'язкість «у мПа)
В'язкість зразків фармацевтичного препарату можна визначати на реометрі (наприклад, ротаційному реометрі Апіоп Рааг Рпузіса МОСК 301 з 25 мм - конусом 0,57 за швидкості зсуву 1000 с" і температури 20 С).
Видимі частинки
Зразки у флаконах візуально оглядали на відповідній контрольно-вимірювальній машині (наприклад, контрольно-вимірювальній машині Зеіїдепадег М90-ї) за допомогою 2 х збільшувальної лінзи. Джерела освітлення 11, 12 і І З доводили до установки 5. Зразки флаконів вивчали під час обертального руху на наявність частинок. Утворення видимих частинок є неприйнятним для інтравітреального введення згідно з вимогами О5Р-МЕ «790», які по суті не містять видимі частинки. О5Р-МЕ «790» забезпечує, що досягається стандарт "по суті не містить" під час перевіряння парентеральних лікарських засобів, і спостерігається, що не більше певної кількості елементів містять видимі тверді частинки. Більш конкретно, для парентеральних лікарських засобів, які були піддані 100 95 перевірці, стандарт "по суті не містить" задовольняється, коли партія задовольняє прийнятному рівню якості (ПРЯ) 0,65 95 або менше. І якщо буде необхідно оцінити продукт, який був відвантажений замовникам (наприклад, через претензії або нормативний запит), фірма може відібрати й оглянути 20 елементів. Якщо у зразку не спостерігаються частинки, партію вважають такою, яка "по суті не містить" видимі тверді частинки.
Концентрація білка (в мг/мл)
Концентрацію білка в зразках препарату вимірювали шляхом поглинання ультрафіолетового (УФ) випромінювання на фотометрі для ультрафіолетової та видимої частини спектра І атраа від Регкіп ЕІтег. Зразки препарату розводили за допомогою 20 мМ розчину І -гістидин- ацетатного буфера рнН 5,5 до концентрації білка приблизно 0,5 мг/мл і набирали в кювету для 35 вимірювання з товщиною 1 см. УФ-поглинання кювети для вимірювання вимірювали на довжині хвилі 280 і 320 нм.
Концентрацію білка розраховували з виміряних поглинань УФ-випромінювання на 280 (А280) і 320 нм (АЗ20), за коефіцієнта екстинкції (Е) 1,70 мл//мг х см), товщини (4) 1 см і коефіцієнта розведення (КР), який відповідає фактичному розведенню, згідно з наведеним нижче рівнянням:
К зація Єї / (СА2ВО- АЗ201 х КР : лкавмг/мл ж - -- я -- -- оннентрація білка в мг/мл (ЕХ рн рН зразків препаратів визначали потенціометрією зі скляним електродом.
Іонна сила
Безрозмірну іонну силу І препаратів розраховували згідно з Рівняння 1: хв)
Рівняння 1 і
У цьому виразі 7 являє собою зарядове число іона І (позитивне для катіонів і негативне для аніонів), Б; являє його молярність. БУ відповідає 1 моль/кг і є необхідним для того, щоб зробити І безрозмірним (РПузіса! Спетізігу, Р. АїКіпв, 9. де Рашіа, Охтога Ргезз Міпеїйп еайіоп, р. 194).
Молярність заряджених частинок буфера розраховували за допомогою рівняння
Гендерсона-Хассельбаха (Меїйодз іп Епгуптоіоду-сиїде ю Ргоївіп Ригітісайоп, Моїште 182, М.Р.
Решів5спег, Асадетіс Ргевв, Іпс., 1990, р. 24П).
Осмоляльність
Осмоляльність зразків препарату вимірювали на осмометрі Озтотаї 030 ЗР від Сопоїес згідно з принципом пониження температури замерзання.
Поверхнево-активні речовини
Фармацевтичний препарат цього винаходу містить поверхнево-активну речовину для зниження агрегації антитіл і утворення частинок. Термін "поверхнево-активна речовина" у разі використання в цьому документі означає фармацевтично прийнятну допоміжну речовину, яку використовують для захисту препаратів білків від механічних стресів, таких як перемішування та зусилля зсуву. Приклади фармацевтично прийнятних поверхнево-активних речовин включають складні ефіри поліоксіетиленсорбітану та жирних кислот (Тмееєп), алкілові ефіри поліоксіетилену (наприклад, ті, що продаються під торговою назвою Вгі)"М) і сополімер поліоксіетилену-поліоксипропилену (РоЇохатег, Ріигопіс).
Переважно поверхнево-активна речовина являє собою складний ефір поліоксіетиленсорбітану та жирних кислот або полоксамер. Приклади складних ефірів поліоксіетиленсорбітану та жирних кислот представляють полісорбат 20 (який продається під торговою назвою Тм'еєп 20"М) і полісорбат 80 (який продається під торговою назвою Тмеєп 807м). Переважним складним ефіром поліоксіетиленсорбітану та жирної кислоти є полісорбат 20.
Вищевказані поверхнево-активні речовини зазвичай використовують у концентрації 0,01 Фо (мас./об.) або вище, наприклад, від 0,01 до приблизно 0,09 95 (мас./0об.). Поверхнево-активна речовина в фармацевтичній композиції цього винаходу, зокрема використовується в діапазоні від приблизно 0,02 95 до приблизно 0,06 95 (мас./об.), більш конкретно в діапазоні від приблизно 0,03 95 до приблизно 0,05 95 (мас./06б.), ще більш конкретно в концентрації приблизно 0,04 95 (мас./об.).
Термін "полоксамер" у разі використання в цьому документі включає триблок-сополімер поліоксіетилену-поліоксипропілену, який складається з центрального гідрофобного ланцюга поліоксипропілену з двома гідрофільними ланцюгами поліоксіеєтилену по боках, відомий як полоксамер 188, який продається під торговою назвою РІ ШКОМІСФ Еб68 від ВА5Е (Парсипенні,
Нью-Джерсі). Інші полоксамери, які можна використовувати в препаратах цього винаходу, включають полоксамер 403 (який продається як РІШКОМІСФ Р123), полоксамер 407 (який продається як РІШКОМІСФ Р127), полоксамер 402 (який продається як РІШКОМІСФ Р122), полоксамер 181 (який продається як РІ ШКОМІСФ 161), полоксамер 401 (який продається як
РІГ ОКОМІСО 1121), полоксамер 185 (який продається як РІШКОМІСФ Рб5) і полоксамер 338 (який продається як РІОКОМІСФ Е108).
Буфери
Термін "буфер" у разі використання в цьому документі позначає фармацевтично прийнятну допоміжну речовину, яка стабілізує РН фармацевтичного препарату. Придатні буфери є добре відомими в цій галузі та можуть бути знайдені в літературних джерелах. Типові фармацевтично прийнятні буфери для інтравітреального введення включають, окрім іншого, гістидинові буфери, цитратні буфери, сукцинатні буфери, ацетатні буфери, фосфатні буфери або їх суміші. В цьому контексті буфери, які представляють особливий інтерес, включають І -гістидин ("тістидиновий буфер") або суміші І-гістидину гідрохлориду І-гістидину з регулюванням рН за допомогою кислоти або основи, які є відомими в цій галузі. Буфери, які представляють особливий інтерес, включають І-гістидин ("гістидиновий буфер"), зокрема І-гістидин з регулюванням рН за допомогою оцтової кислоти (наприклад, 30 95) або гідрохлориду. Вищевказані буфери зазвичай використовуються в концентрації від приблизно 2 мМ до приблизно 200 мМ або від приблизно 5
ММ до приблизно 100 мМ, зокрема в концентрації від приблизно 10 мМ до приблизно 30 мМ або від приблизно 15 мМ до приблизно 20 мМ і більш конкретно приблизно 20 мМ. Незалежно від буфера, що використовується, РН можна доводити до значення в діапазоні від 4,5 до 7,0 |і зокрема до значення в діапазоні від 5,0 до 6,0 і найбільш конкретно рН 5,5:20,2 за допомогою кислоти або основи, які відомі в цій галузі, наприклад, оцтової кислоти, соляної кислоти, фосфорної кислоти, сірчаної кислоти та лимонної кислоти, гідроксиду натрію та гідроксиду калію, зокрема оцтової кислоти. Буфером, який представляє особливий інтерес, є гістидин (І - гістидин)-ацетатний буфер в концентрації 15-25 мМ (в одному варіанті реалізації 20 мМ х З мМ, зокрема 20 мМ х 2 мМ) за рН 5,5:0,5 (в одному варіанті реалізації за рН 5,5:0,3; зокрема за рн 5,550,2)
Стабілізатори
Термін "стабілізатор" означає фармацевтично прийнятну допоміжну речовину, яка захищає активний фармацевтичний інгредієнт і/або препарат від хімічного та/або фізичного розкладання під час виробництва, зберігання та застосування. Шляхи хімічного та фізичного розкладання білкових фармацевтичних препаратів розглянуто в Сіеїапа єї аІ. (1993), Стій Кем Тег Огид
Сатег Зуві 10(4):307-77, Мапд (1999) Іпі У Рнапт 185(2):129-88, Мапд (2000) Іпі у Рнапт 203(1- 2):1-60, ії Спі еї аЇ. (2003) Рнагт Кез 20(9):1325-36. Стабілізатори включають, окрім іншого, бо цукри, амінокислоти, поліоли, циклодекстрини, наприклад, гідроксипропіл-В-циклодекстрин,
сульфобутилетил-В-циклодекстрин, В-циклодекстрин, поліетиленгліколі, наприклад, РЕС 3000,
РЕС 3350, РЕС 4000, РЕС 6000, альбумін, альбумін людської сироватки (АЛС), альбумін бичачої сироватки (АБС), солі, наприклад, хлорид натрію, хлорид магнію, хлорид кальцію, хелатори, наприклад, ЕДТК, як визначено далі. Стабілізатори, які в тому числі використовують в цьому винаході, обрані з групи, яка складається з цукрів, поліолів і амінокислот. Більш конкретно, стабілізатори обирають із групи, яка складається з сахарози, трегалози, сорбіту та метіоніну.
Більш переважно стабілізатор являє собою метіонін. Метіонін використовували в препаратах, описаних в цьому документі, вперше для використання у застосуваннях для очей.
Доклінічні дослідження безпеки показали, що метіонін показує гарний профіль безпеки для використання у разі захворювань очей у разі введення, наприклад, інтравітреально.
Стабілізатори можуть бути присутні в препараті в концентрації від приблизно 2 мМ до приблизно 600 мМ, зокрема, якщо стабілізатором є метіонін, у концентрації від приблизно 2 мМ до приблизно 15 мМ або від 5 до 12 мМ; більш конкретно в концентрації від приблизно 5 до 9
ММ або приблизно 7 мМ.
В одному переважному варіанті реалізації стабілізатором є метіонін у концентрації 7,0 мМ 5 2,0 мМ метіоніну (в одному варіанті реалізації 7,0 ММ ж 1,0 мМ метіоніну; в одному варіанті реалізації 7,0 мМ 5 0,7 мМ метіоніну). Метіонін як стабілізатор є особливо корисним, оскільки він може працювати, окрім іншого, як поглинач для пероксиду водню, який використовують для стерилізації ін'єкційних розчинів або упакованих попередньо заповнених шприців.
У деяких варіантах реалізації рідкий фармацевтичний препарат цього винаходу містить антиоксидант як другий стабілізатор. "Антиоксидант" являє собою фармацевтично прийнятну допоміжну речовину, яка попереджає окиснення активного фармацевтичного інгредієнта.
Антиоксиданти включають, окрім іншого, хелатуючі засоби, такі як ЕДТК, лимонна кислота, аскорбінова кислота, бутильований гідрокситолуол (БГТ), бутильований гідроксианізол (БГА), сульфіт натрію, п-амінобензойна кислота, глутатіон, пропілгалат, цистеїн, метіонін, етанол, бензиловий спирт і н-ацетилцистеїн. Антиоксиданти можна використовувати в концентрації від приблизно 0,01 до приблизно 100 мМ, зокрема в концентрації від приблизно 5 до приблизно 50
ММ і більш конкретно в концентрації від приблизно 5 до приблизно 25 мМ. Зокрема метіонін обирають як другий стабілізатор, зокрема в концентрації від приблизно 5 до приблизно 25 мМ, більш конкретно в концентрації приблизно 10 мм.
Термін "цукор" у разі використання в цьому документі означає моносахарид або олігосахарид. Моносахарид являє собою мономерний вуглевод, який не гідролізується кислотами, включаючи прості цукри та їхні похідні, наприклад, аміноцукри. Приклади моносахаридів включають глюкозу, фруктозу, галактозу, манозу, сорбозу, рибозу, дезоксирибозу, нейрамінову кислоту. Олігосахарид являє собою вуглевод, який складається з більше ніж однієї мономерної сахаридної ланки, з'єднаної глікозидним(и) зв'язком(ами), розгалуженої, або в вигляді ланцюга. Мономерні сахаридні ланки в олігосахариді можуть бути однаковими або різними. В залежності від кількості мономерних сахаридних ланок олігосахарид є ди-, три-, тетра- пента- тощо сахаридом. На відміну від полісахаридів моносахариди й олігосахариди є розчинними у воді. Приклади олігосахаридів включають сахарозу, трегалозу, лактозу, мальтозу та рафінозу. Зокрема цукри обирають з сахарози та трегалози, зокрема сахарози.
Термін "амінокислота" у разі використання в цьому документі означає загалом фармацевтично прийнятну органічну молекулу, яка має амінофрагмент, розташований в а- положенні відносно карбоксильної групи. Приклади амінокислот включають аргінін, гліцин, орнітин, лізин, гістидин, глутамінову кислоту, аспарагінову кислоту, ізолейцин, лейцин, аланін, фенілаланін, тирозин, триптофан, метіонін, серин, пролін, зокрема метіонін.
Термін "поліоли" у разі використання в цьому документі означає фармацевтично прийнятні спирти з більше ніж однією гідроксигрупою. Придатні поліоли включають, окрім іншого, маніт, сорбіт, гліцерин, декстран, гліцерин, арабіт, пропіленгліколь, поліетиленгліколь і їх комбінації.
Поліоли можна використовувати в концентрації від приблизно 10 до приблизно 500 мМ, зокрема в концентрації від приблизно 10 до приблизно 250 мМ і більш конкретно в концентрації від приблизно 200 до приблизно 250 мМ.
Термін "стабілізатори" також включає ліопротектори. Термін "ліопротектор" означає фармацевтичну прийнятну допоміжну речовину, яка захищає нестабільний активний інгредієнт (наприклад, білок) від дестабілізуючих умов у процесі ліофілізації під час подальшого зберігання та розведення. Ліопротектори включають, окрім іншого, групу, яка складається з цукрів, поліолів (таких як, наприклад, цукрові спирти) і амінокислот. Зокрема, ліопротектори бо можна обирати з групи, яка складається з цукрів, таких як сахароза, трегалоза, лактоза,
глюкоза, маноза, мальтоза, галактоза, фруктоза, сорбоза, рафіноза, нейрамінова кислота, аміноцукрів, таких як глюкозамін, галактозамін, М-метилглюкозамін ("меглюмін"), поліолів, таких як маніт і сорбіт, і амінокислот, таких як метіонін або гліцин. Ліопротектори зазвичай використовують у концентрації від приблизно 10 до приблизно 600 мМ, зокрема в концентрації від приблизно 10 до приблизно 250 мМ і більш конкретно в концентрації від приблизно 100 до приблизно 250 мМ.
Регулятори тонічності
Фармацевтичний препарат може також містити регулятори тонічності. Термін "регулятори тонічності" у разі використання в цьому документі означає фармацевтично прийнятні регулятори тонічності, які використовують для модулювання тонічності препарату. Препарат може бути гіпотонічним, ізотонічним або гіпертонічним. Ізотонічність загалом відноситься до осмотичного тиску відносно розчину, зазвичай відносно сироватки крові людини. Препарат згідно з цим винаходом може бути гіпотонічним, ізотонічним або гіпертонічним, переважно фармацевтичний препарат є ізотонічним. Ізотонічний препарат являє собою рідину або рідину, розведену з твердої форми, наприклад, з ліофілізованої форми, і означає розчин, який має тонічність, подібну до тонічності деякого іншого розчину, з яким його порівнюють, такого як фізіологічний сольовий розчин і сироватка крові. Придатні регулятори тонічності включають, окрім іншого, хлорид натрію, хлорид калію, гліцерин і будь-який компонент з групи амінокислот, цукрів, зокрема сахарозу. В одному варіанті реалізації цього винаходу переважним регулятором тонічності є сахароза. Регулятори тонічності зазвичай використовують у концентрації від приблизно 5 ММ до приблизно 1000 мМ, зокрема від приблизно 30 мМ до приблизно 500 мМ, більш конкретно від приблизно 120 мМ до приблизно 200 мМ. Регулятори тонічності для ізотонічних препаратів цього винаходу зазвичай використовують у концентрації від приблизно 50 мМ до приблизно 250 мМ, зокрема від приблизно 120 мМ до приблизно 200 мМ. Більш конкретно, регулятори тонічності для ізотонічних препаратів використовують у концентрації від 130 мм до 190 мМ їі ще більш конкретно в концентрації приблизно 160 мМ х 24 мМ у випадку, коли сахарозу використовують як регулятор тонічності. Регулятор тонічності і його концентрацію обирають для забезпечення ізотонічного препарату з цільовою осмоляльністю 3005100 мОсм/кг (зокрема з цільовою осмоляльністю 300-450 мОсм/кг.)
У рамках стабілізаторів і регуляторів тонічності є група сполук, яка може працювати обома шляхами, тобто вони можуть одночасно бути стабілізатором і регулятором тонічності. Їх приклади можна знайти в групі цукрів, амінокислот, поліолів, циклодекстринів, поліетиленгліколів і солей. Прикладом цукру, який може одночасно бути стабілізатором і регулятором тонічності, є сахароза і трегалоза, зокрема сахароза.
Знижувач в'язкості
Фармацевтичний препарат може також містити знижувачі в'язкості. Термін "знижувачі в'язкостії у разі використання в цьому документі означає фармацевтично прийнятний модифікатор іонної сили, який використовують для зниження в'язкості препарату, що є важливим для препаратів із високими концентраціями та препаратів, які передбачені для інтравітреального введення в око тонкими голками (забезпечуючи відносно швидке введення без необхідності в високому тиску для ін'єкції) у разі лікування захворювань очей. Прикладами типових знижувачів в'язкості є, наприклад, хлорид кальцію або хлорид натрію.
Ад'юванти
Фармацевтичний препарат може також містити ад'юванти, такі як консерванти, змочуючі засоби, емульгатори та диспергуючі засоби. Запобігання присутності мікроорганізмів можна забезпечувати як процедурами стерилізації, так і включенням різних антибактеріальних і протигрибкових засобів, наприклад, парабену, хлорбутанолу, фенолу, сорбінової кислоти тощо.
Консерванти зазвичай використовують у концентрації від приблизно 0,001 до приблизно 2 95 (мас./об.). Консерванти включають, окрім іншого, етанол, бензиловий спирт, фенол, м-крезол, п- хлор-м-крезол, метил- або пропілпарабени, хлорид бензалконію.
Фармацевтичний препарат може також містити різні вищевказані засоби, такі як буфери, поверхнево-активні речовини, стабілізатор, модифікатор іонної сили, в менших кількостях, які по суті не змінюють технічні ознаки фармацевтичного препарату цього винаходу, наприклад, такі як в'язкість 20 мПа:с або менше (переважно 15 мПа-:с або менше), мутність 30 ОМФ або менше (переважно 25 ОМФ або менше), осмоляльність 300-500 мОсм/кг, по суті відсутність видимих частинок.
Застосування
Фармацевтичний препарат біспецифічного антитіла до МЕСР/АМО2 згідно з цим винаходом можна використовувати у разі профілактики або лікування судинних захворювань очей. З цією 60 метою забезпечують фармацевтичний препарат біспецифічного антитіла до МЕСЕ/АМО2 для інтравітреального введення у вигляді рідкого ізотонічного препарату з в'язкістю 20 мПа:с або менше (переважно 15 мПа-:с або менше), мутністю 30 ОМФ або менше (переважно 25 ОМФ або менше), осмоляльністю 3300-50 мОсм/кг, по суті відсутністю видимих частинок. Рідкий ізотонічний фармацевтичний препарат біспецифічного антитіла до МЕСР/АМО2 для цієї мети можна забезпечувати в скляних флаконах або у вигляді попередньо заповненого шприца, зокрема у вигляді попередньо заповненого скляного шприца.
Для таких препаратів, які вводять інтравітреально в око, допоміжних речовин, таких як, наприклад, аргінін, слід уникати, оскільки була описана токсичність аргініну як носія для тканинного активатора плазміногену (І1-РА) для сітківки і пігментного епітелію сітківки (див., наприклад, Веппег 0 О, Могзе 15, Той СА еї аі Аг ОрпїШаїтої! 19911091731-1736.1736;
Уопйпзоп ММУ, ОЇзеп КА. Негапае? Е. еї аї, Атей! ОрпіНаї!тоо! 1990108259-263.263, Ігиіпе М 0,
Уоппзоп ММУ, Неіпапаве? Е. еї аї, . Атей Орпійаї!тої 1991109718-722.722, доппзоп ММУ, ОїЇзеп КВ.
Неіпапае? Е., Неїйїіпа 199111250-258.258). Таким чином, рідкий фармацевтичний препарат цього винаходу по суті не містить аргініну (що означає, що препарат не містить аргініну або містить кількості аргініну нижче концентрації/рівня, за яких вони можуть бути токсичними (через їхню функцію носія для тканинного активатора плазміногену (І-РА)), або не містить аргініну. Низька в'язкість також є важливою для забезпечення промислового способу виробництва (підвищення концентрації ультрафільтрацією) і для забезпечення простого та зручного інтравітреального введення (сили впорскування (ковзання) менше 20 Н, зокрема менше 15 Н, за швидкості впорскування 50 мм/хв). Було показано, що рідкий фармацевтичний препарат цього винаходу з в'язкістю менше 15 мПа:сс можна було вводити за допомогою ін'єкційної голки 300 з часом впорскування 5 с із силою впорскування менше 5 Н. З цією метою фармацевтичний препарат біспецифічного антитіла до МЕСР/АМС2 являє собою рідкий ізотонічний препарат із в'язкістю 15 мПа:с або менше, мутністю 25 ОМФ або менше, осмоляльністю 300-450 мОсм/кг, який по суті не містить видимі частинки. Щоб уникнути будь-яких видимих частинок, рідкий фармацевтичний препарат цього винаходу по суті не містить хлориду кальцію (що означає, що препарат не містить хлориду кальцію або містить кількості хлориду кальцію нижче концентрації/рівня, за яких можуть сприяти утворенню видимих частинок, так що препарат залишається таким, який не містить видимі частинки/по суті не містить видимі частинки) або не містить хлориду кальцію.
Терміни "офтальмологічне судинне захворювання" і "судинне захворювання очей" використовуються взаємозамінно в цьому документі та включають, окрім іншого, внутрішньоочні неоваскулярні синдроми, такі як діабетична ретинопатія, діабетичний макулярний набряк, ретинопатія недоношених, неоваскулярна глаукома, оклюзії вени сітківки, оклюзії центральної вени сітківки, макулярна дегенерація, вікова макулярна дегенерація, пігментний ретиніт, ретинальна ангіоматозна проліферація, макулярна телеангіектазія, ішемічна ретинопатія, неоваскуляризація райдужної оболонки, внутрішньоочна неоваскуляризація, неоваскуляризація рогівки, неоваскуляризація сітківки, хоріоїдальна неоваскуляризація та дегенерація сітківки. (Сагпег, А., Мазсшіаг аізеазев, Іп: Раїпобіоіоду ої осцаг аізеазе, А дупатіс арргоаси, Сагпег", А., апа Кіїпрмопи, а.К., (еадв.), 2па еайіоп, Магсе! ОекКег, Мем Моїк (1994), рр. 1625-1710). У разі використання в цьому документі офтальмологічне судинне захворювання відноситься до будь- якого патологічного стану, який характеризується зміненою або нерегульованою проліферацією й інвазією нових кровоносних судин у структури тканин очей, таких як сітківки або рогівка. В одному варіанті реалізації офтальмологічне судинне захворювання обирають із групи, яка складається з: вологої форми вікової макулярної дегенерації (вологої ВМД) (яка також називається неоваскулярною віковою макулярною дегенерацією (НВМД)), діабетичного макулярного набряку (ДМН), діабетичної ретинопатії (ДР), непроліферативної діабетичної ретинопатії (НПДР), проліферативної діабетичної ретинопатії (ПДР), кістозного макулярного набряку (КМН), васкуліту (наприклад, оклюзії центральної вени сітківки), оклюзії вени сітківки (ОВС), оклюзії центральної вени сітківки (9ЦВС), набряку диска зорового нерва, ретиніту, кон'юктивіту, увеїту, хоріоїдиту, мультифокального хоріоїдиту, окулярного "гістоплазмозу, блефариту, синдрому сухого ока (синдрому Шегрена) й інших офтальмологічних захворювань, причому захворювання або розлад очей пов'язаний з неоваскуляризацією в очах, транссудацією та/або набряком сітківки, зокрема вологою формою вікової макулярної дегенерації (вологою ВМД) (яка також називається неоваскулярною віковою макулярною дегенерацією (НВМД)), діабетичним макулярним набряком (ДМН), діабетичною ретинопатією (ДР), непроліферативною діабетичною ретинопатією (НПДР), проліферативною діабетичною ретинопатією (ПДР), кістозним макулярним набряком (КМН), васкулітом (наприклад, оклюзією центральної вени сітківки), оклюзією вени сітківки (ОВС), оклюзією центральної вени сітківки (ОЦВС). Таким чином, біспецифічні антитіла до МЕСБ/АМО2 для застосування та способи, 60 описані в цьому документі, є придатними для профілактики та лікування вологої ВМД (яка також називається неоваскулярною віковою макулярною дегенерацією (НВМД)), ДМН, ДР, НПДР, ПДР, також переважно вологої ВМД, ДМН їі ОВС, також переважно вологої ВМД. У деяких варіантах реалізації судинне захворювання очей обирають із групи, яка містить вологу форму вікової макулярної дегенерації (вологої ВМД)), діабетичний макулярний набряк (ДМН), оклюзію вени сітківки (ОВС), діабетичну ретинопатію (ДР) і ретинопатію недоношених (РН).
Інші захворювання, пов'язані з неоваскуляризацією рогівки, включають, окрім іншого, епідемічний кератокон'юнктивіт, дефіцит вітаміну А, надмірне носіння контактних лінз, атопічний кератит, верхній лімбальний кератит, сухий кератит криловидної плеви, синдром Шегрена, розацею, фліктенульозний кон'юнктивіт, сифіліс, мікобактеріальні інфекції, ліпідну дегенерацію, хімічні опіки, бактеріальні виразки, грибкові виразки, інфекції простого герпесу, інфекції оперізуючого герпесу, інфекції найпростішими, саркому Капоші, виразку Мурена, маргінальну дегенерацію Террієна, крайову дистрофію рогівки, ревматоїдний артрит, системну вовчанку, поліартеріїт, травму, саркоїдоз Вегенера, склерит, синдром Стівенса-Джонсона, перифігоїдну радіальну кератотомію та відторгнення трансплантата рогівки.
Захворювання, пов'язані з неоваскуляризацією сітківки/хоріоїдальною неоваскуляризацією, включають, окрім іншого, діабетичну ретинопатію, макулярну дегенерацію, серповидноклітинну анемію, саркоїд, сифіліс, еластичну псевдоксантому, хворобу Педжета, оклюзію вен, оклюзію артерій, обструктивне захворювання сонної артерії, хронічний увеїт/вітрит, мікобактеріальні інфекції, хворобу Лайма, системну червону вовчанку, ретинопатію новонароджених, пігментний ретиніт, набряк сітківки (включаючи макулярний набряк), хворобу Ілза, хворобу Бехчета, інфекції, які викликають ретиніт або хоріоїдит, ймовірний гістоплазмоз очей, хворобу Беста, міопію, вроджені ямки в диску зорового нерва, хворобу Штаргардта, парспланіт, хронічне відшарування сітківки, синдром підвищеної в'язкості крові, токсоплазмоз, травму й ускладнення після лазерної операції. Інші захворювання включають, окрім іншого, захворювання, пов'язані з почервонінням райдужної оболонки (неоваскуляризацією кута передньої камери), і захворювання, викликані атипічною проліферацією судинно-волокнистої або волокнистої тканини, включаючи всі форми проліферативної вітреоретинопатії.
Ретинопатія недоношених (РН) являє собою захворювання ока, яке вражає недоношених немовлят. Вважається, що вона викликана порушенням росту кровоносних судин сітківки, що може призводити до рубцювання та відшаруванню сітківки. РН може бути помірною та може самовільно усуватися, але може призводити до сліпоти в серйозних випадках. Таким чином, всі немовлята, які народилися передчасно, знаходяться в групі ризику РН, і дуже мала вага під час народження є додатковим фактором ризику. Як отруєння киснем, так і відносна гіпоксія може сприяти розвитку РН.
Макулярна дегенерація є патологічним станом, який головним чином виявляється у людей старшого віку, за якого центр внутрішньої оболонки ока, яка відома як жовта пляма сітківки, піддається стоншуванню, атрофії та в деяких випадках кровотечі. Це може призводити до втрати центрального зору, що викликає нездатність бачити дрібні деталі, читати або впізнавати лиця. Згідно з Американською академією офтальмології сьогодні це основна причина втрати центрального зору (сліпоти) в Сполучених Штатах для людей віком більше п'ятдесяти років.
Хоча деякі види макулярної дегенерації, які вражають молодших індивідуумів, іноді називають макулярною дистрофією, термін загалом стосується вікової макулярної дегенерації (ВМД або ввМД). "Вікова макулярна дегенерація (ВМД)" у разі використання в цьому документі відноситься до серйозного патологічного стану очей, коли руйнується невелика центральна частина сітківки, відома як макула. Волога форма ВМД (волога ВМД (вВМД), яка також називається неоваскулярною ВМД (нВМД)), форма розвиненої ВМД, характеризується ростом атипових кровоносних судин з хоріоїду під макулою. Це називається хоріоїдальною неоваскуляризацією.
Ці кровоносні судини пропускають кров і рідину в сітківку, викликаючи викривлення зору, через яке прямі лінії здаються хвилястими, а також призводить до сліпих плям і втрати центрального зору. Ці атипові кровоносні судини в результаті рубцюються, що призводить до безповоротної втрати центрального зору. Симптоми ВМД включають темні, змазані ділянки в центрі зору; і погіршують або змінюють сприйняття кольорів. ВМД можна виявити під час звичайної перевірки очей. Однією з найбільш ранніх ознак макулярної дегенерації є присутність дрібних жовтих відкладень у друзах під сітківкою або агрегація пігменту.
Пігментний ретиніт (ПР) представляє групу генетичних патологічних станів очей. У разі прогресування симптомів для ПР нічна сліпота зазвичай передує тунельному зору за роки або навіть десятиліття. Багато людей з ПР офіційно не визнаються сліпими до 40 або 50 років і зберігають деяку частину зору все своє життя. Інші стають повністю сліпими через ПР, у деяких 60 випадках навіть у дитинстві. Розвиток ПР відрізняється в кожному випадку. ПР представляє тип спадкової дистрофії сітківки, групу спадкових розладів, за якої відхилення від норми фоторецепторів (паличок і колбочок) або пігментного епітелію сітківки (ПЕС) призводять до поступової втрати зору. Індивідууми з порушенням спочатку відчувають порушення темнової адаптації або нікталопію (нічну сліпоту), а потім зниження периферичного поля зору (відомого як тунельний зір) і іноді втрату центрального зору, пізніше в ході захворювання.
Макулярний набряк виникає, коли рідина та відкладення білків збираються на або під макулою ока, жовтою центральною ділянкою сітківки, що викликає її потовщення та набухання.
Набухання може викривляти центральний зір людини, оскільки макула знаходиться біля центра сітківки позаду очного яблука. Ця ділянка містить щільно упаковані колбочки, які забезпечують гострий, ясний центральний зір, щоб забезпечити те, що людина бачить форму, колір і деталі, які знаходяться безпосередньо на лінії погляду. Кістозний макулярний набряк представляє тип макулярного набряку, який включає утворення кіст. "Діабетичний макулярний набряк" (ДМН) у разі використання в цьому документі відноситься до серйозного патологічного стану очей, який уражує людей з діабетом (1 або 2 типу).
Макулярний набряк виникає, коли кровоносні судини в сітківці протікають у макулу, і рідина та відкладення білків збираються на або під макулою ока (жовтою центральною ділянкою сітківки) і викликають її потовщення та набухання (набряк). Набухання може викривляти центральний зір людини, оскільки макула знаходиться біля центра сітківки позаду очного яблука. Первинні симптоми ДМН включають, окрім іншого, туманний погляд, точки, що плавають, втрату контрасту, двоїння в очах і можливу втрату зору. Патологія ДМН характеризується руйнуванням гемато-ретинального бар'єра, зазвичай заважаючи руху води в сітківці, таким чином забезпечуючи накопичення рідини в тканині сітківки та присутність потовщення сітківки. ДМН на цей час діагностують під час огляду очей, який складається з перевірки гостроти зору, за якої визначають найменші букви, які людина може читати на стандартній карті, розширеній перевірці зору для перевірки на ознаки захворювання, процедурі отримання зображень, такої як оптична когерентна томографія (ОКТ) або флуоресцентна ангіографія (ФА) і тонометрія, інструмент, який вимірює тиск всередині ока. Наведені далі дослідження також проводили для визначення лікування: оптична когерентна томографія (ОКТ), флуоресцентна ангіографія "та стереофотографія очного дна. ДМН можна в широкому сенсі розділити на дві основні категорії - фокальний і дифузний. Фокальний ДМН характеризується конкретними зонами окремого та помітного протікання в макулу з достатнім макулярним кровотоком. Дифузний ДМН відбувається внаслідок протікання зі всього капілярного ложа, яке оточує макулу, що відбувається через руйнування внутрішнього гемато-ретинального бар'єра ока. Окрім фокального та дифузного, ДМН також поділяють на основі результатів клінічних обстежень щодо клінічно значимого макулярного набряку (КЗМН), не-КЗМН, і КЗМН із центральним ураженням (КЗМН-ЦУ), який включає ямку. Цей винахід включає способи для лікування вищевказаних категорій ДМН.
В одному варіанті реалізації цього винаходу судинне захворювання очей обране з групи, яка складається з: вологої форми вікової макулярної дегенерації (вологої ВМД), діабетичного макулярного набряку (ДМН), діабетичної ретинопатії (ДР), непроліферативної діабетичної ретинопатії (НПДР), проліферативної діабетичної ретинопатії (ПДР), васкуліту (наприклад, оклюзії вени сітківки (ОВС) і оклюзії центральної вени сітківки (ОЦВО).
В одному варіанті реалізації судинне захворювання очей вибрані з групи, яка складається з діабетичної ретинопатії (ДР), діабетичного макулярного набряку (ДМН), оклюзії вени сітківки (ОВС), оклюзії центральної вени сітківки (ОЦВС), макулярної дегенерації, вологої форми вікової макулярної дегенерації (вологої ВМД), ретинопатії недоношених (РН), неоваскулярної глаукоми, пігментного ретиніту (ПР), ретинальної ангіоматозної проліферації, макулярної телеангіектазії, ішемічної ретинопатії, неоваскуляризації райдужної оболонки, внутрішньоочної неоваскуляризації, неоваскуляризації рогівки, неоваскуляризації сітківки, хоріоїдальної неоваскуляризації і дегенерації сітківки, зокрема з групи, яка складається з діабетичної ретинопатії (ДР), діабетичного макулярного набряку (ДМН), оклюзії вени сітківки (ОВС), оклюзії центральної вени сітківки (ОЦВС), вологої форми вікової макулярної дегенерації (вологої ВМД).
В одному варіанті реалізації цього винаходу судинне захворювання очей представляє діабетичну ретинопатію (ДР).
В одному варіанті реалізації цього винаходу судинне захворювання очей представляє діабетичний макулярний набряк (ДМН).
В одному варіанті реалізації цього винаходу судинне захворювання очей представляє оклюзію вени сітківки (ОВС).
В одному варіанті реалізації цього винаходу судинне захворювання очей представляє 60 оклюзію центральної вени сітківки (ОЦВС).
В одному варіанті реалізації цього винаходу судинне захворювання очей представляє ретинопатію недоношених (РН).
В одному варіанті реалізації цього винаходу судинне захворювання очей представляє макулярну дегенерацію.
В одному варіанті реалізації цього винаходу судинне захворювання очей представляє вікову макулярну дегенерацію (ВМД).
В одному варіанті реалізації цього винаходу судинне захворювання очей представляє вологу форму вікової макулярної дегенерації (ВВМД).
В одному варіанті реалізації цього винаходу судинне захворювання очей представляє хоріоїдальну неоваскуляризацію.
Введення
Рідкий фармацевтичний препарат згідно з цим винаходом можна вводити інтравітреальними (ІВТ) засобами, наприклад, такими, які відомі у фармацевтичній галузі (наприклад, відповідним шприцом). Для інтравітреальної ін'єкції зазвичай об'єми ін'єкції становлять 50-100 мкл.
Інтравітреальну ін'єкцію здійснюють шляхом використання одноразового шприца та голки для ін'єкції 30 (2505-3060) або попередньо заповненого шприца з відповідною голкою для ін'єкції.
Рідкий препарат можна відбирати з флакона, який містить препарат, за допомогою голки з фільтром із розміром пор 5 мкм. Техніка інтравітреальних ін'єкцій описана, наприклад, у
О.Могвіоп, Соттипйну Еуе Неай. 2014; 27(87): 47.
З цією метою фармацевтичний препарат біспецифічного антитіла до МЕСР/АМО2 знаходиться у вигляді рідкого ізотонічного препарату з в'язкістю 15мПа:с або менше, мутністю
ОМФ або менше, осмоляльністю 3002-50 мОсм/кг, який по суті не містить видимі частинки.
Композиції, призначені для застосування іп мімо, повинні бути стерильними. Це легко досягається шляхом фільтрації через стерильні фільтруючі мембрани та асептичної виробничої 25 практики.
Спосіб отримання препарату
Фармацевтичний препарат згідно з цим винаходом можна отримувати способами або процесами, які відомі в цій галузі, наприклад, ультрафільтрацією-діафильтрацією, діалізом, додаванням і перемішуванням, ліофілізацією, розведенням і їх комбінаціями. Приклади отримання препаратів згідно з цим винаходом можна знайти далі в цьому документі.
В одному варіанті реалізації цього винаходу фармацевтичний препарат може бути отриманий шляхом нижченаведеного способу або процесу виготовлення, який включає такі кроки: 1. Заміна буфера на буфер діафільтрації, який містить гістидин-ацетатний буфер, або гістидин-ацетатний буфер і хлорид натрію, або гістидин-ацетатний буфер, хлорид натрію та метіонін, або гістидин-ацетатний буфер, хлорид натрію, метіонін і сахарозу, шляхом ультрафільтрації та діафільтрації з використанням напівпроникної мембрани з ВММ (відсіканням за молекулярною масою) від 5 до 80 кДа (30-50 кДа) (30 кДа). Зазвичай співвідношення між буфером для діафільтрації й основним об'ємом розчину становить 5-20 (5- 10). 2. Альтернативно 1, заміну буфера можна забезпечувати за допомогою діалізу з використанням буфера для діалізу, який містить гістидин-ацетатний буфер, або гістидин- ацетатний буфер і хлорид натрію, або гістидин-ацетатний буфер, хлорид натрію та метіонін, або гістидин-ацетатний буфер, хлорид натрію, метіонін і сахарозу, і діалізну мембрану з ВММ від 5 до 80 кДа (30-50 кДа) (30 кДа). Зазвичай співвідношення між буфером для діалізу й основним об'ємом розчину становить 5-20 (5-10). 3. Основний об'єм розчину з заміненим буфером концентрують ультрафільтрацією з використанням мембрани для діафільтрації з ВММ (відсіканням за молекулярною масою) від 5 до 80 кДа (30-50 кДа) (30 кДа) з концентрацією білка більше 120 мг/мл (120-160 мг/мл) (120-200 мг/мл). 4. Готову композицію фармацевтичного препарату регулюють додаванням початкових розчинів відповідних допоміжних речовин або за допомогою відповідного стабілізуючого буфера. Розчин гомогенізують перемішуванням.
Крім того, спосіб або процес виготовлення може включати такі кроки: 5. Кінцевий приготований розчин можна зберігати замороженим за температури нижче - 20 7С (нижче -40 "С). 6. Перед заповненням у кінцевий первинний контейнер розчин розморожують. 7. Декілька контейнерів або партій фармацевтичного препарату змішують і гомогенізують перемішуванням. 60 8. Гомогенізований фармацевтичний препарат фільтрують через декілька (щонайменше два) фільтрів для стерилізації з розміром пор щонайменше 0,2 або 0,22 мкм. 9. Стерильно відфільтрований розчин набирають за асептичних умов у стерильні флакони або шприци, що попередньо заповнюються, і закривають еластомерною пробкою, відповідно обмежувачем ходу поршня та ковпачками наконечників. 10. Заповнені первинні контейнери оглядають на дефекти та видимі частинки. 11. Попередньо заповнені шприци збирають з відповідними компонентами пристрою, упаковують у стерильну захисну систему та стерилізують по зовнішній поверхні. 12. Флакони та стерилізовані шприци упаковують у кінцеву вторинну упаковку.
Фармацевтичні препарати згідно з цим винаходом також можуть бути в ліофілізованій формі або в рідкому вигляді, який відновлений з ліофілізованої форми. "Ліофілізовану форму" виготовляють шляхом способів ліофільної сушки, які відомі в цій галузі. Ліофілізат зазвичай має достатній вміст вологи приблизно 0,1-5 95 (мас./мас.) і знаходиться у вигляді порошку або фізично стабільного осаду. "Відновлену форму" можна отримати з ліофілізату шляхом швидкого розчинення після додавання середовища для відновлення. Придатні середовища для відновлення включають, окрім іншого, воду для ін'єкції (ВДІ), бактеріостатичну воду для ін'єкції (БВДІ), розчини хлориду натрію (наприклад, 0,995 (мас./об.) МасСі) і розчини глюкози (наприклад, 5 95 (мас./об.) глюкози).
Отримання антитіл
Антитіла до МЕСБ/АМО2, які є особливо придатними для цього винаходу, отримують рекомбінантними засобами. Способи рекомбінантного отримання є добре відомими в рівні техніки та включають експресію білків у клітинах прокаріот і еукаріот з наступним виділенням антитіла і зазвичай очищенням до фармацевтично прийнятної чистоти. Для експресії антитіл, як вказано вище в клітині-хазяїні, нуклеїнові кислоти, які кодують відповідні модифіковані легкі та важкі ланцюги, вставляють у вектори експресії стандартними методами. Експресію проводять у відповідних клітинах-хазяїнах прокаріот або еукаріот, таких як клітини СНО, клітини М5О, клітини 5Р2/0, клітини НЕК293, клітини СО5, клітини РЕК.Сб, дріжджі або клітини Е. сої, і виділяють антитіло з клітин (супернатанту або клітин після лізису). Загальні методи рекомбінантного отримання антитіл є добре відомими в цій галузі й описані, наприклад, в оглядових статтях МакКгідев, 5.С., Ргоїєїп Ехрг. Ригії. 17 (1999) 183-202; Свїівве, 5., вї а, Ргоївїіп
Ехрг. Ритії. 8 (1996) 271-282; Каштап, В.., Мої. Віоїтеснпо! 16 (2000) 151-160; М/егпег, В.С., Огид
Вез. 48 (1998) 870-880. Спосіб отримання антитіла, придатний в цьому винаході, включає кроки а) трансформації клітини-хазяїна векторами, які містять молекули нуклеїнових кислот, які кодують вказане антитіло; б) культивації клітини-хазяїна в умовах, які забезпечують синтез вказаної молекули антитіла; і в) виділення вказаної молекули антитіла з вказаної культури.
Антитіла зручно відокремлювати від культурального середовища за допомогою традиційних процедур очищення імуноглобуліну, таких як, наприклад, хроматографія з білком А-сефарозою, з гідроксиапатитом, гель-єлектрофорез, діаліз або афінна хроматографія. ДНК і РНК, які кодують моноклональні антитіла, легко виділяти та секвенувати за допомогою звичайних процедур. Клітини гібридоми можуть слугувати як джерело такої ДНК і РНК. Як тільки виділена,
ДНК може бути вставлена в вектори експресії, які потім трансфікують у клітини-хазяїв, такі як клітини НЕК 293, клітини СНО або клітини мієломи, які в іншому випадку не продукують білок- імуноглобулін, з отриманням синтезу рекомбінантних моноклональних антитіл у клітинах- хазяях.
Варіанти амінокислотних послідовностей (або мутанти) біспецифічного антитіла отримують шляхом введення відповідних змін нуклеотидів у ДНК антитіла або шляхом нуклеотидного синтезу. Такі модифікації можна проводити, однак, тільки в дуже обмеженому діапазоні.
Наприклад, модифікації не змінюють вищевказані характеристики антитіла, такі як ізотип дос і зв'язування антигена, але можуть покращувати вихід рекомбінантного отримання, стабільність білка або полегшувати очищення.
Термін "клітина-хазяїн" у разі використання в цій заявці означає будь-який вид клітинної системи, який можна сконструювати для створення антитіл, які містяться у препараті цього винаходу. В одному варіанті реалізації клітини НЕК29З3 і клітини СНО використовують як клітини-хазяї.
У разі використання в цьому документі вирази "клітина", "клітинна лінія" і "клітинна культура" використовують взаємозамінно, і всі такі позначення включають потомство. Таким чином, слова "трансформанти" та "трансформовані клітини" включають первинно змінені клітини та культури, отримані з них, незалежно від кількості перенесень. Також зрозуміло, що все потомство може не бути точно ідентичним щодо вмісту ДНК через навмисні або випадкові мутації. Включене потомство варіантів, яке має таку саму функцію або біологічну активність, щодо яких проводять 60 скринінг початково трансформованих клітин.
Експресія в клітинах М5О описана, наприклад, у Вагпезв, І.М., еї аІ., Суїотесппоіоду 32 (2000) 109-123; Ватез, І.М., еї аї., Віотеси. Віоепу. 73 (2001) 261-270. Тимчасова експресія описана, наприклад, у Юигоспег, МУ., еї аї., Мисі. Асідв5. Ке5з. 30 (2002) Е9У. Клонування варіабельних доменів описане в Огіапаї, К., еї а!., Ргос. Маї). Асай. 5сі. ОБА 86 (1989) 3833-3837; Сапег, Р., єї а!., Ргос. Маї). Асай. сі. ОБА 89 (1992) 4285-4289; і Могаептацоа, Г., еї аї., У. Іттипої. Меїйоав5 204 (1997) 77-87. Переважна система тимчасової експресії (НЕК 293) описана 5сПіІаєдег, Е.-У., і
СпПгізіепзеп, К., у СуюїесппоЇїоду 30 (1999) 71-83 і 5спІаедег, Е.-9У., у У. Іттипої. МеїШйоаз 194 (1996) 191-199.
Контрольні послідовності, які підходять для прокаріотів, наприклад, містять промотор, необов'язково операторну послідовність та сайт зв'язування рибосоми. Відомо, що еукаріотичні клітини використовують промотори, енхансери та сигнали поліаденілування.
Нуклеїнова кислота є "функціонально зв'язаною", коли вона знаходиться у функціональному взаємозв'язку з іншою послідовністю нуклеїнової кислоти. Наприклад, ДНК передпослідовності або секреторної лідерної послідовності функціонально зв'язана з ДНК поліпептиду, якщо він експресується у вигляді білка- попередника, який бере участь у секреції поліпептиду; промотор або енхансер функціонально зв'язаний з кодуючою послідовністю, якщо це впливає на транскрипцію послідовності; або сайт зв'язування рибосоми функціонально зв'язаний із кодуючою послідовністю, якщо він розташований так, щоб полегшити трансляцію. Зазвичай, "функціонально зв'язаний" означає, що послідовності ДНК, які зв'язані, є прилеглими, а у випадку секреторної лідерної послідовності, є прилеглими та знаходяться у рамці зчитування. У той самий час енхансери не повинні бути прилеглими. Зв'язування здійснюється за допомогою лігування в зручних сайтах рестрикції. Якщо таких сайтів не існує, синтетичні олігонуклеотидні адаптери або лінкери використовують відповідно до звичайної практики.
Очищення антитіл проводять для виключення компонентів клітин або інших забруднюючих речовин, наприклад, інших нуклеїнових кислот або білків клітин, стандартними техніками, включаючи лужну/ДСН обробку, СеСіІ-бендинг, колонкову хроматографію, електрофорез в агарозному гелі й інші, добре відомі в цій галузі. Див. А!изибеї, Е., еї аіІ., вед. Ситепі Ргоїосої!в5 іп
МоїІесшаг Віоіоду, Сгеепе Рибіїзпіпуд апа ММіеу Іпіегзсіепсе, Мем/ МХоїкК (1987). Для очищення білків розроблені та знайшли широке розповсюдження різні методи, такі як афінна хроматографія з використанням білків мікроорганізмів (наприклад, афінна хроматографія на білку А або білку С), іонообмінна хроматографія (наприклад, катіонообмінна (карбоксиметилові смоли), аніонообмінна (аміноетилові смоли) хроматографія та хроматографія зі змішаною формою розділення), тіофільна адсорбція (наприклад, з бета-меркаптоетанолом й іншими ЗІН- лігандами), хроматографія на основі гідрофобної взаємодії або адсорбційна хроматографія ароматичних сполук (наприклад, із феніл-сефарозою, аза-аренофільними смолами або м- амінофенілбороновою кислотою), металхелатуюча афінна хроматографія (наприклад, із матеріалом, який має афінність до МІі(ІІ) Її Сщ(І)), гель-фільтрація й електрофоретичні методи (такі як гель-електрофорез, капілярний електрофорез) (Міауаіакепті, М.А., Аррі. Віоспет.
Віотесн. 75 (1998) 93-102).
Амінокислотні послідовності, розкриті в даній заявці: 711.6 |СОВБіваріабельногодоменулегоголанцюга «МЕСЕ»:Д/-:/ /:/: 711.8 |СОКоваріабельногодоменуважкоголанцюгахАМО-2»./-/:/ /://::/СС:(/СУ("У 71.79 СОР варіабельногодоменуважкоголанцюгахАМО-2»./-/:/ З
11111111 фланцюєєМЕов»ЇЗ/////7777111111111111111111111111111111 ланцюг «АМО-2» ланцюг «МЕСЕ» ланцюг «АМО-2»
Далі перераховані варіанти реалізації цього винаходу: 1. Рідкий фармацевтичний препарат, який містить: - від 20 до 150 мг/мл біспецифічного антитіла до МЕСР/АМС2, яке містить константну ділянку важкого ланцюга підкласу Ї(ДС1 людини (в одному варіанті реалізації 30 мг/мл х 4,5 мг/мл або 120 мг/мл х 18 мг/мл), - від 15 до 35 ММ хлориду натрію (в одному варіанті реалізації 25 ММ т 5 мМ; в одному варіанті реалізації 25 мМ х 3,75 мМ хлориду натрію; зокрема 25 мМ 5 2,5 мМ хлориду натрію), - від 15 до 25 мМ гістидин-ацетатного буфера (в одному варіанті реалізації 20 мМ -3 мМ гістидин-ацетатного буфера; в одному варіанті реалізації 20 мМ х 2 мМ гістидин-ацетатного буфера), за рН 5,5:0,5 (в одному варіанті реалізації за рН 5,5:-0,3; зокрема за рН 5,5:0 2); де біспецифічне антитіло до МЕСБ/АМОС2 є двовалентним і містить перший антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з МЕОСЕ людини, і другий антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з АМО-2 людини, де ї) вказаний перший антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з МЕС, містить у варіабельному домені важкого ланцюга СОВЗН-ділянку з ФЕО ІО МО: 1, СОВ2Н-ділянку з БЕО
ІО МО: 2 ї СОВІТН-ділянку з 5ЕО ІО МО: 3, і у варіабельному домені легкого ланцюга СОВЗІ - ділянку з ФЕО ІЮ МО: 4, СОНР2І -ділянку з БЕО ІЮ МО: 5 і СОНТІ -ділянку з ФЕО ІО МО: 6; і ії) вказаний другий антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з АМО-2, містить у варіабельному домені важкого ланцюга СОВЗН-ділянку з ФЕО ІО МО: 9, СОВ2Н-ділянку з БЕО
ІО МО: 10 ї СОВТН-ділянку з 5ЕО ІЮ МО: 11, ї у варіабельному домені легкого ланцюга СОВЗІ - ділянку з ФЕО ІЮ МО: 12, СОР2І -ділянку з ФЕО ІЮ МО: 13 ї СОНТІ -ділянку з ФЕО ІО МО: 14, і де ії) біспецифічне антитіло містить константну ділянку важкого ланцюга підкласу Їд21 людини, яка містить мутації І253А, НЗІ1бА і Н4ІЗ5БА і мутації І 234А, І 235А і РЗ29О (нумерація згідно з ЄО- індексом Кабата). 2. Фармацевтичний препарат згідно з варіантом реалізації 1, в якому біспецифічне антитіло до МЕСР/АМСО2 є двовалентним і містить перший антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з МЕСЕ людини, і другий антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з
Зо АМО-2 людини, де і) вказаний перший антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з МЕСБЕ, містить як варіабельний домен важкого ланцюга УН амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮО МО: 7, а як варіабельний домен легкого ланцюга У. - амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО: 8, і і) вказаний другий антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з АМО-2, містить як варіабельний домен важкого ланцюга УН амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО: 15, а як варіабельний домен легкого ланцюга У. - амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 16. 3. Фармацевтичний препарат згідно з варіантом реалізації 2, в якому біспецифічне антитіло до МЕСР/АМСО2 є двовалентним і містить перший антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з МЕСЕ людини, і другий антигензв'язувальний сайт, який специфічно зв'язується з
АМО-2 людини, де де їм) у константній ділянці важкого ланцюга мутації 53540 і ТЗ366М/ містяться в одному домені
СНЗ, а мутації У349С, 73665, І З68А і М407У містяться в іншому домені СНЗ (нумерація згідно з
Еи-індексом Кабата). 4. Фармацевтичний препарат згідно з будь-яким одним із варіантів реалізації 1-3, в якому біспецифічне антитіло до МЕСР/АМО2 є двовалентним і містить амінокислотні послідовності
ЗЕО ІО МО: 17, БЕО ІЮ МО: 18, БЕОІЮ МО: 1911 5ЕО ІЮ МО: 20. 5. Фармацевтичний препарат згідно з будь-яким одним із варіантів реалізації 1-3, в якому біспецифічне антитіло до МЕСЕР/АМО2 являє собою фарицимаб.
6. Фармацевтичний препарат згідно з варіантом реалізації 1, причому препарат містить
- 120 мг/мл х 18 мг/мл біспецифічного антитіла до МЕСР/АМО2 (зокрема 120 мг/мл «х 12 мг/мл біспецифічного антитіла до МЕСЕР/АМО2).
7. Фармацевтичний препарат згідно з будь-яким одним із пп. 1-7 для інтравітреального введення.
8. Фармацевтичний препарат згідно з будь-яким одним із варіантів реалізації 1-6, причому препарат по суті не містить видимі частинки.
9. Фармацевтичний препарат згідно з будь-яким одним із варіантів реалізації 1-8, причому препарат додатково містить
- від 1 до 20 мМ щонайменше одного стабілізатора (в одному варіанті реалізації який обраний з цукрів, поліолів і амінокислот).
10. Фармацевтичний препарат згідно з будь-яким одним із варіантів реалізації 1-8, причому препарат додатково містить
- 7,0 мМ 52,0 мм метіоніну (в одному варіанті реалізації 7,0 мМ х 1,0 мМ метіоніну; в одному варіанті реалізації 7,0 мМ х 0,7 мМ метіоніну).
11. Фармацевтичний препарат згідно з будь-яким одним із варіантів реалізації 1-10, причому препарат додатково містить
- 0,01-0,07 95 поверхнево-активної речовини (в одному варіанті реалізації яка обрана з полісорбату 20, полісорбату 80 або полоксамеру).
12. Фармацевтичний препарат згідно з будь-яким одним із варіантів реалізації 1-10, причому препарат додатково містить
- 0,04 95 (мас./об.) - 0,02 (мас./об.) полісорбату 20 (в одному варіанті реалізації від 0,03 95 (мас./об.) до 0,07 95 (мас./об.)); в одному варіанті реалізації 0,04 95 (мас./об.) х 0,01 (мас./об.); в одному варіанті реалізації приблизно 0,04 95 (мас./об.)).
13. Фармацевтичний препарат згідно з будь-яким одним із варіантів реалізації 1-12, причому препарат додатково містить
- 550-250 мМ регулятора тонічності (в одному варіанті реалізації регулятор тонічності обирають з сахарози, трегалози та сорбіту).
14. Фармацевтичний препарат згідно з будь-яким одним із варіантів реалізації 1-12, причому препарат додатково містить
- 160 мм х 24 мм сахарози (в одному варіанті реалізації 160 мМ х 16 мМ; в одному варіанті реалізації приблизно 160 мМ).
15. Фармацевтичний препарат згідно з будь-яким одним із варіантів реалізації 1-14, причому препарат має в'язкість 20 мПа:с або менше (в одному варіанті реалізації 17 мПа:с або менше; в одному варіанті реалізації 16 мПа-:с або менше, в одному варіанті реалізації приблизно 15 мПа:с або менше; в одному варіанті реалізації 15 мПа:с або менше).
16. Фармацевтичний препарат згідно з будь-яким одним із варіантів реалізації 1-15, причому препарат має мутність 30 ОМФ або менше (в одному варіанті реалізації 27 ОМФ або менше; в одному варіанті реалізації 26 ОМФ або менше; в одному варіанті реалізації приблизно 25 ОМФ або менше; в одному варіанті реалізації 25 ОМФ або менше).
17. Фармацевтичний препарат згідно з будь-яким одним із варіантів реалізації 1-16, причому препарат має іонну силу від 20 до 50 (в одному варіанті реалізації іонну силу від 30 до 50 (в одному варіанті реалізації іонну силу від 30 до 45; в одному варіанті реалізації іонну силу
3010).
18. Фармацевтичний препарат згідно з будь-яким одним із варіантів реалізації 1-17 для інтравітреального введення, причому препарат по суті не містить хлориду кальцію (або не містить хлориду кальцію).
19. Фармацевтичний препарат згідно з будь-яким одним із варіантів реалізації 1-17 для інтравітреального введення, причому препарат по суті не містить аргініну (або не містить аргініну).
20. Фармацевтичний препарат згідно з будь-яким одним із варіантів реалізації 1-17 для інтравітреального введення, причому препарат по суті не містить аргініну та хлориду кальцію (або не містить аргініну та хлориду кальцію).
21. Фармацевтичний препарат згідно з будь-яким одним із варіантів реалізації 1-5 і 7-20, причому препарат містить або складається (щонайменше) з таких компонентів:
- від 20 до 150 мг/мл біспецифічного антитіла до МЕСЕР/АМС2 (в одному варіанті реалізації 30 мг/мл х 4,5 мг/мл або 120 мг/мл х 18 мг/мл, зокрема 120 мг/мл 5 12 мг/мл);
- від 15 до 35 ММ хлориду натрію (в одному варіанті реалізації 25 ММ т 5 мМ; в одному
60 варіанті реалізації 25 мМ х 3,75 мМ хлориду натрію; зокрема 25 мМ 5 2,5 мМ хлориду натрію);
- від 15 до 25 мМ гістидин-ацетатного буфера (в одному варіанті реалізації 20 мМ 53 мМ гістидин-ацетатного буфера; в одному варіанті реалізації 20 мМ «5 2 мМ гістидин-ацетатного буфера); - 7,0 мМ «2,0 мм метіоніну (в одному варіанті реалізації 7,0 мМ 5 1,0 мм метіоніну; в одному варіанті реалізації 7,0 мМ х 0,7 мм метіоніну); - від 0,03 95 (мас./об.) до 0,07 95 (мас./0б.) полісорбату 20 (в одному варіанті реалізації 0,04 95 (мас./об.) х 0,02 (мас./об.); в одному варіанті реалізації 0,04 95 (мас./об.) - 0,01 (мас./об.); в одному варіанті реалізації приблизно 0,04 95 (мас./об.)); - 160 мм х 24 мМ сахарози (в одному варіанті реалізації 160 мМ х 16 мМ; в одному варіанті реалізації приблизно 160 мМ); - вода (для (офтальмологічних) ін'єкцій); за рН 5,5:0,5 (в одному варіанті реалізації за рН 5,5:-0,3; зокрема за рН 5,5:0 2); 22. Фармацевтичний препарат згідно з будь-яким одним із варіантів реалізації 1-21, причому препарат являє собою стабільний препарат. 23. Фармацевтичний препарат згідно з будь-яким одним із варіантів реалізації 1-21, в якому вміст високомолекулярних сполук (ВМС) біспецифічного антитіла в фармацевтичному препараті становить менше 10 95 через 8 тижнів за 25 "С або через 52 тижні за 25 "С (в одному варіанті реалізації менше 5 95). 24. Фармацевтичний препарат згідно з будь-яким одним із варіантів реалізації 1-21, причому головний пік біспецифічного антитіла в фармацевтичному препараті становить більше 50 95, і вміст високомолекулярних сполук (ВМС) біспецифічного антитіла в фармацевтичному препараті становить менше 10 95 через 2 роки за 2-8 "С (або через З роки за 2-87) (головний пік біспецифічного антитіла в фармацевтичному препараті становить більше 5595, і вміст високомолекулярних сполук (ВМС) біспецифічного антитіла в фармацевтичному препараті становить менше 7 95 через 2 роки за 2-8 "С (або через З роки за 2-8 7С)). 25. Фармацевтичний препарат згідно з будь-яким одним із варіантів реалізації 1-24, в якому осмоляльність препарату становить 300-100 мОсм/кг (в одному варіанті реалізації 30050
МО см/кг). 26. Фармацевтичний препарат згідно з будь-яким одним із варіантів реалізації 1-25 для застосування в лікуванні судинного захворювання очей. 27. Фармацевтичний препарат для застосування згідно з варіантом реалізації 26, де судинні захворювання очей обрані з групи, яка складається з діабетичної ретинопатії (ДР), діабетичного макулярного набряку (ДМН), оклюзії вени сітківки (ОВС), оклюзії центральної вени сітківки (ОЦВС), макулярної дегенерації, вологої форми вікової макулярної дегенерації (вологої ВМД), ретинопатії недоношених (РН), неоваскулярної глаукоми, пігментного ретиніту (ПР), ретинальної ангіоматозної проліферації, макулярної телеангіектазії, ішемічної ретинопатії, неоваскуляризації райдужної оболонки, внутрішньоочної неоваскуляризації, неоваскуляризації рогівки, неоваскуляризації сітківки, хоріоїдальної неоваскуляризації і дегенерації сітківки, зокрема з групи, яка складається з діабетичної ретинопатії (ДР), діабетичного макулярного набряку (ДМН), оклюзії вени сітківки (ОВС), оклюзії центральної вени сітківки (ОЦВС), вологої форми вікової макулярної дегенерації (вологої ВМД). 28. Фармацевтичний препарат для застосування згідно з варіантом реалізації 26, причому судинне захворювання очей представляє діабетичну ретинопатію. 29. Фармацевтичний препарат для застосування згідно з варіантом реалізації 26, причому судинне захворювання очей представляє діабетичний макулярний набряк (ДМН). 30. Фармацевтичний препарат для застосування згідно з варіантом реалізації 26, причому судинне захворювання очей представляє оклюзію вени сітківки (ОВС). 31. Фармацевтичний препарат для застосування згідно з варіантом реалізації 26, причому судинне захворювання очей представляє оклюзію центральної вени сітківки (ОЦВО). 32. Фармацевтичний препарат для застосування згідно з варіантом реалізації 26, причому судинне захворювання очей представляє макулярну дегенерацію. 33. Фармацевтичний препарат для застосування згідно з варіантом реалізації 26, причому макулярна дегенерація представляє вікову макулярну дегенерацію (ВМД). 34. Фармацевтичний препарат для застосування згідно з варіантом реалізації 26, причому макулярна дегенерація представляє вологу форму вікової макулярної дегенерації (ВВМД) (яка також називається неоваскулярною віковою макулярною дегенерацією (НВМД). 35. Фармацевтичний препарат для застосування згідно з варіантом реалізації 26, причому судинне захворювання очей представляє хоріоїдальну неоваскуляризацію. 36. Спосіб отримання фармацевтичного препарату за будь-яким одним із варіантів 60 реалізації 1-25,
спосіб включає такі кроки: - заміна буфера основного об'єму розчину біспецифічного антитіла а) на буфер для діафільтрації шляхом ультрафільтрації та діафільтрації або б) шляхом діалізу за допомогою буфера для діалізу, причому буфери містять гістидин-ацетатний буфер, або гістидин-ацетатний буфер і хлорид натрію, або гістидин-ацетатний буфер, хлорид натрію та метіонін, або гістидин- ацетатний буфер, хлорид натрію, метіонін і сахарозу; - концентрування основного об'єму розчину з заміненим буфером шляхом ультрафільтрації; - регулювання готової композиції фармацевтичного препарату шляхом додавання початкових розчинів відповідних допоміжних речовин або за допомогою відповідного стабілізуючого буфера та сгомогенизація рідкого фармацевтичного препарату шляхом перемішування. 37. Флакон, який містить фармацевтичний препарат за будь-яким одним із варіантів реалізації 1-25. 38. Попередньо заповнений шприц, який містить фармацевтичний препарат за будь-яким одним із варіантів реалізації 1-25. 39. Ліофілізована форма рідкого фармацевтичного препарату за будь-яким одним із варіантів реалізації 1-25.
Приклади
Рідкі фармацевтичні препарати лікарських засобів для інтравітреального (ІВТ) введення згідно з цим винаходом були розроблені наступним чином.
Приклад 1: Матеріали та способи
Біспецифічне антитіло до МЕСЕР/АМО2 Сто55МАБ МЕсСЕапд2-0016 (фарицимаб), отримане й очищене, як описано в УМО2014/009465, надавали для подальших експериментів початково в концентрації приблизно 130-140 мг/мл у 20 мМ гістидин-НСІ буфері за рН 5,5.
Короткий опис матеріалів (включаючи постачальника), які використовували під час отримання препаратів, і їх первинне упакування надані в таблиці 1 і таблиці 2.
Таблиця 1
Хімічні речовини, які використовують для препаратів
Таблиця 2
Первинне упакування
Закупорювальна система контейнера
Безбарвний 2 мл або б мл скляний флакон (скло 1 типу), закритий за допомогою гумової пробки (0 777-1, 13 мм) й алюмінієвої додаткової укупорки з запобіжним ковпачком.
Безбарвний 1,0 мл попередньо заповнений шприц (скло 1 типу), з насадкою Люера, закритий за допомогою ковпачка наконечнику СеггезПпеійтег Виепде ТЕ! С і обмежувача ходу поршня М/евзі 4023/50.
Безбарвний 0,5 мл попередньо заповнений шприц (скло 1 типу), з насадкою Люера, закритий за допомогою ковпачка наконечнику Мейег ОМ5 і обмежувача ходу поршня УУеві 4023/50. Ковпачок наконечнику Мецег ОУ5 складається з еластомеру У/езі 4023/50.
Ексклюзійна хроматографія (ЕХ-ВЕРХ)
Ексклюзійну хроматографію (ЕХ) використовували для виявлення розчинних високомолекулярних сполук (агрегатів) і низькомолекулярних продуктів гідролізу (НМ) у препаратах. Метод проводили за допомогою Т5К-Сеї! (з30005МУУХІ., 7,8 х 300 мм, 5 мкм (То5оп
Віозсіепсе, Мо за каталогом 08541) або Віобзийе 250, 7,8 х 300 мм або 5 мкм (М/аїег5, Мо за каталогом 186002165). Інтактний мономер, агрегати та фрагменти розділяли за профілем ізократичного елюювання, використовуючи 0,2 М фосфат калію, 0,25 М КСІ, рН 7,0 як рухому фазу, та виявляли на довжині хвилі 280 нм.
Іонообмінна хроматографія (О-ВЕРХ)
Іонообмінну хроматографію (ОХ) проводили для виявлення продуктів хімічного розкладання, які змінюють повний заряд антитіла, яке тестують, у препаратах. Метод проводили за допомогою колонки УМС ВіоРго 5Р-Е, 100 х 4,6 мм, 5 мкм (УМС, номер за каталогом 5ЕО00505-1046УУР). 20 мМ ВЕБ (М, М-біс(і2-гідроксіетил|-2-аміноетансульфонова кислота), рН 6,8, використовували як елюент А, а 20 мМ ВЕ5, 488 мМ Масі, рН 6,8 як елюент В, відповідно, за швидкості потоку 0,8 мл/хв. Зразки розводили елюентом А до З мг/мл перед впорскуванням у колонку.
Програма градієнта: 01191112 51198112 яви 11111101 24017110 яв 17Г19811111111Ї11111111112с 50119811 2
Мутність (в ОМФ («одиниця мутності за формазином))
Мутність зразків препарату вимірювали на турбидиметрі Наспй 2100 АМ згідно з
Європейською фармакопеєю 2.2.1 (Прозорість і ступінь опалесценції рідин). Об'єм зразка приблизно 2 мл розчину зразка переносять у скляну кювету з внутрішнім діаметром 11 мм.
Скляну кювету розміщують у турбидиметрі та вимірюють мутність відносно калібрувальної кривої еталонних суспензій 1 ОМФ, З ОМФ, 10 ОМФ, 20 ОМФ і 100 ОМФ.
В'язкість «у мПа)
В'язкість зразків фармацевтичного препарату вимірювали на ротаційному реометрі Апіоп
Рааг Рпузіса МСЕ 301 з 25 мм - конусом 0,57 за швидкості зсуву 1000 с" і температури 20 2С.
Видимі частинки
Зразки у флаконах візуально оглядали на контрольно-вимірювальній машині Зеїдепадег
М90-Т за допомогою 2 х збільшувальної лінзи. Джерела освітлення 1,12 і ІЗ доводили до установки 5. Зразки флаконів вивчали під час обертального руху на наявність частинок.
Концентрація білка (в мг/мл)
Концентрацію білка в зразках препарату вимірювали шляхом поглинання ультрафіолетового (УФ) випромінювання на фотометрі для ультрафіолетової та видимої частини спектра Гатраа 35 від Регкіп ЕІтег. Зразки препарату розводили за допомогою 20 мМ розчину І -гістидин- ацетатного буфера рН 5,5 до концентрації білка приблизно 0,5 мг/мл і набирали в кювету для вимірювання з товщиною 1 см. УФ-поглинання кювети для вимірювання вимірювали на довжині хвилі 280 і 320 нм.
Концентрацію білка розраховували з виміряних поглинань УФ-випромінювання на 280 (А280) і 320 нм (АЗ20), за коефіцієнта екстинкції (Е) 1,70 мл//мг х см), товщини (4) 1 см і коефіцієнта розведення (КР), який відповідає фактичному розведенню, згідно з наведеним нижче рівнянням:
К г бі , (А2ВО - АЗ20 КР снцентрація білкавмг/млоюв ----- хх
Осмоляльність
Осмоляльність зразків препарату вимірювали на осмометрі Озтотаї 030 ЗР від Сопоїес згідно з принципом пониження температури замерзання. рн рН зразків препаратів визначали потенціометрією зі скляним електродом.
Приклад 2: Відбір І рн/буфера
Установка
Метою відбору рН/буфера був вибір оптимального рН і буфера для комерційного препарату антитіла до МЕСР/АМО2 і вибір препарату з низькою в'язкістю, зниженою мутністю та гарною стабільністю, що дає низьке утворення розчинних агрегатів і заряджених ізоформ.
Перша частина відбору рНн/буфера включала три буферні системи І -гістидин/І -гістидин-НСЇ (Ніз/Нівз-НОЇ), І -гістидинацетат (Ніз/ацетат) і ацетат натрію (Ма/ацетат), діапазон рН від 5,3 до 6,5, діапазони буферної сили від 7 до 300 мМ і діапазон іонної сили від 5 до 86. Установка активних препаратів показана в таблиці 3.
Таблиця З
Коди препаратів: Частина І відбору рн/буфера . . Об'єм
Код Буферна Концентрація Іонна Білок Форма рн заповнення препарату система буфера (мм) сила | (мг/мл) (мл) випуску флакон ли; б мл гг Ніз/Ніз-НОЇ 5,9 75 45,5 120 27 флакон зів о |воіві м ід флакон б мл вата | 860 | 27 флак флакон флакон флакон флакон еф 1 ши флакон зро вв у флакон ли; б мл 11 Ніз/Ніз-НОЇ 5,9 10 5 120 27 флакон флакон флакон флакон б мл
Таблиця З
Коди препаратів: Частина І відбору рн/буфера . . Об'єм
Код Буферна Концентрація Іонна Білок Форма рн заповнення
ЯЗ ЗЕ ЕЕ флакон т ве |в) лю 027 даю
Е17 Ма/ацетат 5,9 43 45,5 120 27 флакон зов фер» шо флакон
Ніз/Ніз-НОЇ б мл 918 Ге5| 1 г ол флакон
Матеріал та методи
Короткий опис матеріалів, які використовували під час отримання препаратів, і їх первинне упакування надані в таблиці 1 і таблиці 2.
В лікарській речовині заміняли буфер шляхом діалізу, використовуючи 5іїде-А-Іулег це (Тнегто 5сіепійс) з відсіканням за молекулярною масою 10 кДа, на буферні системи, перелічені в таблиці 3. Таким чином, 42 мл лікарської речовини вводили в пристрій для діалізу та заміняли буфер тричі на 5 л буфера для діалізу.
Необов'язково, якщо концентрація білка була менше 120 мг/мл після діалізу, лікарську речовину концентрували центрифугуванням за допомогою пристрою Атісоп Ойга 15, ОКгасеї 1ОК (МіПроге) (20 "С, 4000 об./хв.).
Потім діалізовану та необов'язково концентровану лікарську речовину розводили відповідним буфером для діалізу до цільової концентрації білка 120 мг/мл, що давало кінцевий розчин лікарської речовини.
Кожний розчин лікарської речовини фільтрували через 0,22 мкм фільтр 5іепймех М (Мій роге) і набирали в чисті та стерильні б мл флакони з об'ємом заповнення 2,7 мл. Флакони закривали пробками й обтискали.
Аналітичні методи
Аналітичні методи тестування мутності та в'язкості описані в прикладі 1.
Результати
Фіг. 1 порівнює результати мутності та в'язкості препаратів із відбору І рн/буфера.
Загалом, препарати з високою іонною силою (наприклад, 4, 14, 10, 3, 8 і 18) показують високу мутність (вище 30 ОМФ) і низьку в'язкість (приблизно 10 мПа:с). Навпаки, препарати з низькою іонною силою мають високу в'язкість (приблизно 25-40 мПа:с) і низьку мутність (нижче 10 ОМФ). Несподіваним є те, що препарати з буферною системою гістидин-ацетату (13, 6, 4, 14) можна ідентифікувати з низькими в'язкостями приблизно 10 мпПагсс і мутністю менше 25 ОМФ.
Висновок
Вимірювали в'язкість і мутність препаратів із відбору І рН/бсуфера. Несподіваним є те, що препарати гістидин-ацетатної буферної системи та з іонною силою 45,5 або вище показали низьку в'язкість і знижені значення мутності.
Приклад 3: Відбір ІІ рРНнН/буфера
Установка
Метою відбору рН/буфера був вибір оптимального рН і буфера для препарату антитіла до
МЕСР/АМО2 Сто55МАБ МЕгЕсСРапда-0016 (фарицимаб) і вибір препарату з низькою в'язкістю, зниженою мутністю та гарною стабільністю, що дає низьке утворення розчинних агрегатів і заряджених ізоформ.
Друга частина відбору рН/буфера була розроблена на основі результату відбору рн/буфера та включала буферну систему І -гістидин-ацетат (Ніз/ацетат), діапазон рН від 5,5 до 6,0 з діапазоном буферної сили від 14 до 59 мМ. Іонну силу препаратів змінювали або шляхом підвищення буферної сили, або шляхом додавання хлориду натрію (Масі) або хлориду кальцію (Са Сіг), що давало діапазон іонної сили від 10 до 50. Установка активних препаратів показана в таблиці 4.
Таблиця 4
Коди препаратів: Частина ІІ відбору рН/буфера
Код Буфер- Концентра- . Об'єм препарату на : . Концентра- | Іонна | Білок Форма ція буфера | рН | Сіль | . . заповне- (- -Мо систе- (мМ) ція солі (ММ) сила | (мг/мл) ння (мл) випуску зразка) ма
САМООб69- | Нів- 14 55 10 120 27 б мл 01-01 ацетат флакон
САМООб69- | Нів- б мл осо (ацеше 3956) 20080020 027 олаюн
САМООб69- | Нів- б мл
САМООб69- | Нів- б мл
САМОб9- | Нів- б мл
САМООб69- | Нів- б мл
САМООб69- | Нів- б мл 07-07 (ацешт 20601 21000027 вла
САМООб69- | Нів- б мл о6со6 (ацеше 39601 20800200 27 влаюн
САМООб69- | Нів- б мл 09-09 (ацетше 20060 Має го08о0п2о 027 даю
САМООб69- | Нів- б мл ло ацетат 200босясь 67 030 120) 2 ОО флаюн
СиМооб9- Нів- 20 масі! 40 5000120 | 27 |бмл 11-11 ацетат флакон
САМООб69- | Нів- б мл ета |ащетн 200 6о|сась| а | 50) іо | 2 флаюн
Матеріал та методи
Короткий опис матеріалів, які використовували під час отримання препаратів, і їх первинне упакування надані в таблиці 1 і таблиці 2.
В лікарській речовині заміняли буфер за допомогою ультрафільтрації-діафільтрації, використовуючи напівпроникну мембрану Їарзсаіює ТТ (Мійїроге) з відсіканням за молекулярною масою 30 кДа, на буферні системи, перелічені в таблиці 4. Таким чином, 120 мл лікарської речовини вводили в систему І арзсаіе і заміняли буфер на 1050 мл буфера для діафільтрації.
Після заміни буфера лікарську речовину концентрували в системі І арзсаіе до концентрації білка приблизно 150 мг/мл.
Потім концентровану лікарську речовину розводили початковими розчинами відповідного буфера та сольовими розчинами до цільової концентрації білка 120 мг/мл, що давало кінцевий розчин лікарської речовини згідно з таблицею 4.
Кожний розчин лікарської речовини фільтрували через 0,22 мкм фільтр 5біепймех СУ (Мій роге) і набирали в чисті та стерильні б мл флакони з об'ємом заповнення 2,7 мл. Флакони закривали пробками й обтискали.
Аналітичні методи
Аналітичні методи тестування мутності, в'язкості і ЕХ-ВЕРХ описані в прикладі І.
Програма для стабільності
Препарати зберігали стабільність за 2-8 С і 25 протягом 8 тижнів. Зразки відбирали й аналізували на початку випробування на стабільність і через 8 тижнів зберігання.
Результати
Фіг. 2 порівнює результати з мутності і в'язкості другої частини відбору рН/буфера. Загалом, мутність підвищується у разі підвищення іонної сили та за рН 6,0 у порівнянні з рН 5,5. Крім того, присутність хлориду натрію також призводить до більшої мутності. рН 5,5 також знижує в'язкість у порівнянні з рН 6. Крім того, іонна сила щонайменше 30 сприяє зниженню в'язкості до рівня приблизно 15 мПа:с. У разі порівняння дії різних солей на в'язкість хлорид кальцію або більша буферна сила є ефективнішими для зниження в'язкості, ніж хлорид натрію.
Враховуючи обидві цілі, зниження мутності та в'язкості, препарат з іонною силою щонайменше 30 і рН 5,5 показує знижений рівень мутності приблизно 20 ОМФф і в'язкість приблизно 15 мПа:с.
Фіг. 3 порівнює рівні агрегатів (ВМС) препаратів відбору І рН/буфера спочатку (- 0) з рівнями через 8 тижнів за 5 "С і 25 "С. Загалом, рівні ВМС підвищуються з підвищенням іонної сили. Якщо порівнювати вплив різних солей, висока буферна сила або присутність хлориду натрію спричиняє менше збільшення кількості збільшення агрегатів, ніж присутність хлориду натрію. Нижчий рН 5,5 має невеликий вплив на зниження утворення агрегатів.
Висновок
Препарат із рН 5,5 й іонною силою 30 забезпечує оптимум зі зниженою мутністю, низькою в'язкістю та зниженим утворенням агрегатів. їонну силу можна регулювати за допомогою більшої буферної сили або додавання солей хлориду натрію та хлориду кальцію. Загалом, вища буферна сила або присутність хлориду кальцію демонструє переважні властивості мутності та в'язкості.
Приклад 4: Відбір поверхнево-активної речовини
Установка
Метою відбору поверхнево-активної речовини є вибір оптимального типу поверхнево- активної речовини та концентрації поверхнево-активної речовини для препарату антитіла до
МЕСР/АМО2 Сто55МАБ МЕСапаг2-0016 (фарицимабу).
Матриця препарату з 120 мг/мл антитіла до МЕСРБ/Апд-2, 20 мМ І-гістидин-ацетатного буфера за рН 5,5, 25 мМ хлориду натрію та 180 мМ сахарози основана на результаті відборів | і
ЇЇ рНнібуфера та для забезпечення ізотонічного препарату з цільовою осмоляльністью 300250 мОсм/кг.
Відбір поверхнево-активної речовини досліджував стабілізуючий ефект поверхнево- активних речовин полісорбату 20 і полоксамеру 188 за різних концентрацій поверхнево-активної речовини від 0,01 до 0,07 95 на антитіло до Меді-Апд2. Крім того, досліджували препарат без поверхнево-активної речовини.
У таблиці 5 підсумовані тестові препарати відбору поверхнево-активної речовини.
Зо
Таблиця 5
Коди препаратів для відбору поверхнево-активної речовини
Код Цільова Поверхне- Концентрація Об'єм Форма препарату | Матриця | : во- поверхнево- онна сила | осмоляльність - | заповне- | випус- (- -Мо препарату активна активної (мОсм/кг) су! ННЯ (МЛ) ку зразка) речовина Іречовини (95) б мл авмМоО071- 27 фла- 01
Кон . б мл авмМоО071- Полісор-
Кон . б мл
СеМО071- | 120 мг/мл Полісор- 0,03 27 фла- оз антитіла до бат 20 КОН
Меді-Апд2 б мл
САМОО71- | 20 мм Нів- Полісор- 0 05 27 фла- 04 ацетат рН 40 311 бат 20 " " КОН 5,5, 25 ММ б Мп
ОАМОО071- | Масі Полісор- сахарози б мл авмМоО071- Полокса- 0,01 27 фла- 06 мер
Кон б мл
САМО071- Полокса- 0,03 27 фла- 07 мер
Кон
САМОО71-
Зо
Таблиця 5
Коди препаратів для відбору поверхнево-активної речовини
Код . Поверхне-ІКонцентрація б Ф препарату | Матриця Цільова во- поверхнево- Об'єм орма
Іонна сила | осмоляльність - | заповне- | випус- (- -Мо препарату активна активної (мОсм/кг) ння (мл) ку зразка) речовина Іречовини (95) о т ВО кон б мл 09 мер он
Матеріал та методи
Короткий опис матеріалів, які використовували під час отримання препаратів, і їх первинне упакування надані в таблиці 1 і таблиці 2.
У лікарській речовині заміняли буфер за допомогою ультрафільтрації-діафільтрації, використовуючи напівпроникну мембрану Іабрзсаіює ТТ (Мійроге) з відсіканням за молекулярною масою 30 кДа, на 20 мМ гістидин-ацетатного буфера для діафільтрації з рН 5,3.
Таким чином, 250 мл лікарської речовини вводили в систему І арзсаїйе і заміняли буфер на 1700 мл буфера для діафільтрації.
Після заміни буфера лікарську речовину концентрували в системі І арзсаіе до концентрації білка приблизно 170 мг/мл і рН приблизно 5,5.
Потім концентровану лікарську речовину розводили початковими розчинами відповідного буфера та сольовими розчинами до цільової концентрації білка 120 мг/мл, що давало кінцевий розчин лікарської речовини згідно з таблицею 5.
Кожний розчин лікарської речовини фільтрували через 0,22 мкм фільтр 5біепймех СУ (Мій роге) і набирали в чисті та стерильні б мл флакони з об'ємом заповнення 2,7 мл. Флакони закривали пробками й обтискали.
Аналітичні методи
Аналітичні методи тестування концентрації білка, рН, осмоляльності, мутності, в'язкості, видимих частинок і ЕХ-ВЕРХ описані в прикладі І.
Програма для стабільності
В умовах випробування на механічний стрес під час відбору поверхнево-активної речовини застосовували горизонтальне струшування протягом 1 тижня за 2-80 (200 об./хв.), горизонтальне струшування протягом 1 тижня за 25 "С (200 об./хв.) і 5 циклів заморожування- розморожування (-40 "С/5 "С).
Результати
У таблиці 6 підсумовані початкові результати зразків відбору поверхнево-активної речовини.
Усі препарати мали концентрацію білка приблизно 120 мг/мл і рН 5,5:0,1. Виміряна осмоляльність становила від 335 до 350 мОсм/кг і, таким чином, була дещо вище, ніж цільова 311 мОсм/кг. Обрана матриця препарату з 120 мг/мл Меді-Апд2 з 20 мМ гістидин-ацетатного буфера за рН 5,5 плюс 25 мМ хлориду натрію та 180 мМ сахарози давала низькі в'язкості приблизно 15 мПа:сс і знижену мутність 20 ОМФ.
Препарати відбору поверхнево-активної речовини піддавали стресу внаслідок струшування за 57 і 25 С і стресу внаслідок заморожування-розморожування (п'ять циклів заморожування- розморожування) і аналізували на видимі частинки та розчинні агрегати (ВМО).
У таблиці 7 підсумовані результати для видимих частинок спочатку та після фізичного стресу. Усі зразки препаратів спочатку не містили частинки. Після дії різних фізичних стресів препарат СКМО071-01 без поверхнево-активної речовини завжди показував багато частинок.
Додавання щонайменше 0,01 95 полісорбату 20 попереджає утворення видимих частинок у разі дії трьох методів забезпечення фізичного стресу.
Несподіваним є те, що додавання полоксамеру не може попередити утворення видимих частинок після дії струшування протягом 1 тижня за 5 "С, тоді як він міг захистити білок від струшування за 25 "С і стресу внаслідок заморожування-розморожування.
Фіг. 4 показує рівні розчинних агрегатів (ВМС) початкових зразків і підданих стресу зразків.
Препарат СКМО071-01 (1) без поверхнево-активної речовини був чутливим до стресу від струшування та показав підвищені рівні агрегатів до 10 95 через 1 тиждень струшування за 5 "Сі 25"С. Присутність 0,01 95 полісорбату 20 не була достатньою для повного попередження збільшення розчинних агрегатів через 1 тиждень струшування за 25 С, оскільки рівень агрегатів підвищувався з З до 3,8 95. Несподіваним є те, що рівень полісорбату 20, який дорівнює або перевищує 0,03 95, потребувався для попередження збільшення кількості розчинних агрегатів через 1 тиждень струшування за 25 "С.
Таблиця 6
Короткий опис результатів для концентрації білка, рН, осмоляльності, мутності та в'язкості зразків відбору поверхнево-активної речовини після виготовлення
Код препарату Концентрація білка Н Осмоляльність Мутність В'язкість - -Мо зразка) (мг/мл) р (мОсм/кг) (ОМФ) (мПа:с) еАМО071-01 сАмМоО071-02 еАМОО71-03
АМО071-04 еАМО071-05 еАМО071-06
АМО071-07 еАМОО71-08 аАМО071-09
Таблиця 7
Короткий опис результатів для видимих частинок початкових і підданих фізичному стресу зразків відбору поверхнево-активної речовини через 1 через 1 . . після 5 циклів
Код препарату| Поверхнево- п . тиждень тиждень очатковий заморожування- (- -Мо зразка) (активна речовина струшування | струшування за 5С за 25 С розморожування свМО071-01 | немає немає з багатьма з багатьма з багатьма частинок частинками |частинками |частинками авмМоО071-02 0,01 т немає немає немає немає частинок полісорбату 20 | частинок частинок частинок аеМмО071-03 0,03 т немає немає немає немає частинок полісорбату 20 | частинок частинок частинок аеМмО071-04 0,05 т немає немає немає немає частинок полісорбату 20 | частинок частинок частинок аеМмО071-05 0,07 т немає немає немає немає частинок полісорбату 20 | частинок частинок частинок полоксамеру частинок частинками |частинок полоксамеру частинок частинками |частинок полоксамеру частинок частинками |частинок полоксамеру частинок частинками |частинок
Висновок
Додавання щонайменше 0,03 95 полісорбату 20 потребується для повної стабілізації антитіла до МЕСР/АМО2 за концентрації 120 мг/мл від стресу внаслідок струшування та заморожування-розморожування.
Поверхнево-активна речовина полоксамер не може захистити біспецифічне антитіло до
МЕСРЕ/АМОа2 за концентрації 120 мг/мл від стресу внаслідок струшування за 5 "С.
Матриця препарату з 20 мМ гістидин-ацетатного буфера за рН 5,5, 25 мМ хлориду натрію та 180 мМ сахарози забезпечує прийнятні результати мутності (приблизно 20 ОМФ) і в'язкості (приблизно 15 мПа:с) для 120 мг/мл препарату антитіла до МЕСР/АМО2.
Приклад 5: Відбір І допоміжних речовин
Установка
Метою відбору допоміжних речовин є вибір кінцевої композиції для комерційного препарату антитіла до МЕСЕР/АМО2 Сто55МАБ МЕсСЕРапд2-0016 (фарицимабу).
На основі результатів попередніх відборів І і Її рН/буфера та відбору поверхнево-активної речовини обирали матрицю препарату, яка складалася з 120 мг/мл антитіла до Меді-Апд2, 20
ММ гістидин-ацетатної буферної системи, 160 мм сахарози та 0,04 95 полісорбату 20. В матриці препарату досліджували вплив рН (5,5 порівняно з 5,8), солі (25 мМ хлориду натрію порівняно з 8 мМ хлориду кальцію) та метіоніну (0 порівняно з 7 мМ). Іонну силу доводили до 40 на основі вкладу від концентрації буфера та солі.
У таблиці 8 підсумовані препарати відбору І допоміжних речовин.
Таблиця 8
Коди препаратів для частини І відбору допоміжних речовин
Код Об'єм препарату ІКонцентра- рн/ сі Метіонін Полісорбат Форма сх іль Сахароза заповне- (- ція білка | буфер (мМ) 20 ННЯ випуску -Мо зразка) 3 01 25 ММ ї 7 02 гістидин-
Ме 1
ОЗ рн 55 8 ММ сАМОО073- Сасіг о / 1ї66мм | 00496 | 2,7 б мл 05 25 ММ
ОобТар гістидин-
М 1 07 рн 5,8 8 ММ о8
Матеріал та методи
Короткий опис матеріалів, які використовували під час отримання препаратів, і їх первинне упакування надані в таблиці 1 і таблиці 2.
В лікарській речовині заміняли буфер за допомогою ультрафільтрації-діафільтрації, використовуючи напівпроникну мембрану Іабзсаіє ТТ (Мійроге) з відсіканням за молекулярною масою 30 кДа, на 20 мМ гістидин-ацетатного буфера для діафільтрації з рН 5,3 або 20 мМ гістидин-ацетату з рН 5,6. Таким чином, 410 мл лікарської речовини вводили в систему І арзсаїйе і заміняли буфер на 3000 мл буфера для діафільтрації.
Після заміни буфера лікарську речовину концентрували в системі І арзсаіе до концентрації білка приблизно 165 мг/мл і рН приблизно 5,5 або рН 5,8.
Потім концентровану лікарську речовину розводили початковими розчинами відповідного буфера та сольовими розчинами до цільової концентрації білка 120 мг/мл, що давало кінцевий розчин лікарської речовини згідно з таблицею 8.
Кожний розчин лікарської речовини фільтрували через 0,22 мкм фільтр біепймех МУ (Мій роге) і набирали в чисті та стерильні б мл флакони з об'ємом заповнення 2,7 мл. Флакони закривали пробками й обтискали.
Аналітичні методи
Аналітичні методи тестування концентрації білка, рН, осмоляльності, мутності, в'язкості, видимих частинок, ЕХ-ВЕРХ і 10-ВЕРХ описані в прикладі І.
Програма для стабільності
Препарати зберігали стабільність за 2-8 "С до 20 тижнів і за 25 "С до 13 тижнів. Крім того, зразки піддавали горизонтальному струшуванню протягом 1 тижня за 2-80 (200 об./хв.), горизонтальному струшуванню протягом 1 тижня за 250 (200 об./хв.) і 5 циклам заморожування-розморожування (-40 "С/ 5 "С).
Результати
У таблиці 9 підсумовані початкові результати відбору | допоміжних речовин. Усі препарати мали концентрацію білка від 125 до 130 мг/мл. Препарати ЗКМО073-01 - 04 із цільовим рН 5,5 мали виміряні значення рН приблизно 5,6, тоді як препарати ЗКМО073-05 - 08 з цільовим рН 5,8 мали виміряні значення рН приблизно 5,9. Осмоляльність препаратів, які містять 25 мМ хлориду натрію (5КМО0073-01, - 02, -05 і -06), мала вищі результати осмоляльності (від 313 до 322 мОсм/кг) у порівнянні зі препаратами з 8 мМ хлориду кальцію (5ЗАМО0073-03, - 04, -07 і -08), де вона була від 273 до 288 мОсм/кг).
У таблиці 10 підсумовані результати для видимих частинок спочатку, після фізичного стресу та через 13 тижнів зберігання за 5 "С і 25 "С. Після виготовлення та після дії фізичного стресу (1 тиждень струшування за 5 "С або 25 "С або п'ять циклів заморожування-розморожування) всі препарати не містили частинки. Несподіваним є те, що всі препарати, які містили 8 мМ хлориду кальцію, показали видимі частинки через 13 тижнів зберігання за 5 С і 25 "С, тоді як всі препарати, які містили 25 ММ хлориду натрію, не містили частинки.
Фіг. 5 порівнює результати мутності та в'язкості препаратів, які містять 25 мМ хлориду натрію. Таким чином, препарати з рН 5,5 показали нижчу мутність (21 ОМФ відносно 25 ОМФ) і нижчу в'язкість (17 мПа:с порівняно з 21 мПа:с).
Фіг. 6 і 7 показують збільшення кількості розчинних агрегатів (ВМС) у разі зберігання 20 тижнів за 5 "С, відповідно, зберігання 13 тижнів за 25 "С. Препарати з рН 5,8 показали дещо нижче збільшення кількості розчинних агрегатів у порівнянні з препаратами за рн 5,5.
Несподіваним є те, що додавання метіоніну може знижувати утворення розчинних агрегатів і може компенсувати вплив нижчого рН на агрегацію.
Фіг. 8 і 9 порівнюють зміну заряджених ізоформ, виміряну за допомогою ІОХ, через 20 тижнів зберігання за 5 "С і 13 тижнів зберігання за 25 "С, відповідно. Усі препарати показали невелике зменшення приблизно на 1 95 площі головного піка через 13 тижнів зберігання за 50. Це супроводжується приблизно 0,295 збільшенням кислотних ізоформ і приблизно 1 95 збільшенням площі основного піка. Немає явних відмінностей, викликаних різним рН або присутністю метіоніну. Хоча зменшення головного піка набагато більше (приблизно 18 95) через 13 тижнів зберігання за 25 "С, немає явних відмінностей на основі рН і метіоніну. Зменшення головного піка у разі зберігання за 25 "С головним чином викликано збільшенням кількості кислотних ізоформ.
Таблиця 9
Короткий опис результатів для концентрації білка, рН і осмоляльності зразків відбору допоміжних речовин після виготовлення
Таблиця 10
Короткий опис результатів для видимих частинок початкових і підданих фізичному стресу зразків відбору І допоміжних речовин після 5 циклів
Код через 1 через 1 препарату . - | тиждень тиждень заморожува" | через 13 через 13 (--Мо Сіль | Початковий струшуван- | струшуван- ння- тижнів за тижнів за зразка) ня за 5"С |ня за257С0 розмови з'с 2576 01 25 ММ частинок частинок |частинок |частинок частинок |частинок 02 частинок частинок |частинок |частинок частинок |частинок
З авмо073- немає немає немає немає багатьма з багатьма оз частинок частинок |частинок |частинок частинка- стинка:- 8 ММ Ми ми
Сасіг З б авмо073- немає немає немає немає багатьма | багатьма 04 частинок частинок |частинок |частинок частинка- стинка:-
Ми ми 05 25 ММ) частинок частинок частинок частинок частинок |частинок об частинок частинок |частинок |частинок частинок |частинок
З авмо073- немає немає немає немає багатьма з багатьма 07 частинок частинок |частинок |частинок частинка- стинка:- 8 ММ Ми ми
Сасіг З б авмо073- немає немає немає немає багатьма | багатьма ов частинок частинок |частинок |частинок частинка- стинка:-
Ми ми
Висновок
Хоча присутність хлориду кальцію спричиняє зниження рівнів в'язкості та мутності у порівняні з препаратами з хлоридом натрію (посилання на приклади 2 і 3), вона також несподівано викликає утворення видимих частинок. Утворення видимих частинок є неприйнятним для інтравітреального введення згідно з вимогами О5Р-МЕ «790», які по суті не містять видимі частинки. Таким чином, додавання хлориду натрію як модифікатора іонної сили для зниження в'язкості є переважним порівняно з використання хлориду кальцію.
Крім того, препарати за рН 5,5 показують нижчу мутність і нижчу в'язкість у порівнянні з препаратами за рН 5,8. Однак препарати за рН 5,8 показали дещо менше утворення розчинних агрегатів, ніж препарати за рН 5,5, але цей ефект може бути компенсований додаванням 7 мМ метіоніну. Таким чином, додавання метіоніну забезпечує зниження кількості розчинних агрегатів за рН 5,5, із забезпеченням при цьому нижчих рівнів в'язкості та мутності.
Різниця рН (рН 5,5 порівняно з 5,8) або присутність або відсутність метіоніну не має впливу на утворення заряджених ізоформ.
Загалом, препарат із 25 мМ хлориду натрію, а не 8 мМ хлориду кальцію, і 20 мМ гістидин- ацетатного буфера за рН 5,5 з 7 мМ метіоніну та 160 мМ сахарози та 0,04 95 полісорбату 20 забезпечує препарат без частинок із низькою омутністю та в'язкістю та покращеними властивостями стабільності.
Приклад 6: Відбір ІЇ допоміжних речовин
Установка
У другій частині відбору допоміжних речовин властивість стабільності додатково визначають у попередньо заповненому шприці та за концентрації білка 30 мг/мл.
Відбір І допоміжних речовин давав оптимізований препарат, який складається з 120 мг/мл антитіла до МЕСЕР/"АМО2 Сто55МАЬ МЕсСЕРапд2-0016 (фарицимаб), 20 мМ гістидин-ацетату за рн
5,5, 25 ММ хлориду натрію, 160 мМ сахарози, 7 мМ метіоніну та 0,04 95 полісорбату 20, яким заповнювали скляний флакон (відповідає препарату СОКМО073-02).
Цей препарат також набирали в попередньо заповнений шприц (5КМО0076-02). Крім того, властивість стабільності цієї матриці препарату тестували за концентрації білка 30 мг/мл, набраного в попередньо заповнений шприц (5КМО0077-02), або в скляний флакон (6КМО077- 06).
Для порівняння стабільність еталонного препарату, набраного в скляний флакон, тестували за 30 мг/мл (5КМО077-09) і 120 мг/мл (5КМО0076-05).
У таблиці 11 підсумовані препарати відбору ІЇ допоміжних речовин.
Таблиця 11
Коди препаратів для частини ІЇ відбору допоміжних речовин
Код . препара- |Концентра- . о. Полі- Об'єм Форма щі А, рнН/ буфер Сіль |Метіонін| Сахароза | сорбат ту (- Мо | ція білка 20 раповнення|) випуску зразка) бе 20 ММ імл |! мл ї 25 ММ ПпЗшШ гістидинацетат 7 ММ 160 мМ 02 Зомг/мл рН 55 масі авмо077- ' о, сВАМО076- гістидин-НСІ ММ 0 мМ 60 ММ
Матеріал та методи
Короткий опис матеріалів, які використовували під час отримання препаратів, і їх первинне упакування надані в таблиці 1 і таблиці 2.
У лікарській речовині заміняли буфер за допомогою ультрафільтрації-діафільтрації, використовуючи напівпроникну мембрану Іабзсаіє ТТ (Мійроге) з відсіканням за молекулярною масою 30 кДа.
Для отримання антитіла до МЕСР/"АМО2 Сгто55МАБ МЕОГапд2-0016 (фарицимабу) в 20 мМ гістидин-ацетатного буфера рН 5,5, приблизно 340 мл лікарської речовини вводили в систему
І арзсайе і заміняли буфер на 2400 мл 20 мМ гістидин-ацетатного буфера для діафільтрації рН 5.2.
Антитіло до МЕСЕР/АМО2 Сто55МАБ МЕсСРапд2-0016 (фарицимаб) у 20 мМ гістидин-НСЇ буфері рН 6,0 отримували з використанням приблизно 200 мл лікарської речовини. Її вводили в систему І арзсаїйє і заміняли буфер на 1400 мл 20 мМ гістидин-НСІ буфера для діафільтрації рН 5,85.
Після заміни буфера відповідну лікарську речовину концентрували в системі І арзса|є до концентрації білка приблизно 165 мг/мл і рН або приблизно 5,5, або рН 6,0.
Потім концентровану лікарську речовину розводили початковими розчинами відповідного буфера та сольовими розчинами до цільової концентрації білка 30 або 120 мг/мл, що давало кінцевий розчин лікарської речовини згідно з таблицею 8.
Кожний розчин лікарської речовини фільтрували через 0,22 мкм фільтр 5іеймех СМ (Мій роге) і набирали в чисті та стерильні 6 мл флакони з об'ємом заповнення 2,7 мл або в чисті стерилізовані 1 мл шприци, які попередньо заповнюються, з об'ємом заповнення 1 мл. Флакони закривали пробками й обтискали, толі як шприци закривали обмежувачем ходу поршня.
Аналітичні методи
Аналітичні методи тестування концентрації білка, рН, осмоляльності, мутності, в'язкості, видимих частинок і ЕХ-ВЕРХ описані в прикладі І.
Програма для стабільності
Препарати зберігали стабільність за 2-8 "С і 24 "С до 13 тижнів. Крім того, зразки піддавали горизонтальному струшуванню протягом 1 тижня за 2-87 (200 об./хв.), горизонтальному струшуванню протягом 1 тижня за 25"С (200 об./хв.) і 5 циклам заморожування- розморожування (-40 "С/ 5 С).
Результати
Помилка! Джерело посилання не знайдено. підсумовує початкові результати відбору ЇЇ допоміжних речовин. зАКМО0076-02 (оптимізований препарат у ПЗШ) ї 5КМО076-05 (еталонний препарат) обидва відповідають цільовій концентрації білка 120 мг/мл із виміряними значеннями 119 або 123 мг/мл, відповідно. ЗЕМО077-02 (оптимізований препарат у ПЗШ), АКМО077-06 (оптимізований препарат у флаконі) і ЗКМО076-05 (еталонний препарат) отримували з цільовою концентрацією білка 30 мг/мл. Фактична концентрація білка знаходилася в діапазоні від 30 до 31 мг/мл. рН всіх препаратів був близький до цільового рН і з максимальним відхиленням тільки 0,1 одиниці рн.
Осмоляльність препаратів за 120 мг/мл була дещо вищою та складала від 310 до 320 мОсм/кг, тоді як препарати з 30 мг/мл мали від 278 до 394 моОсм/кг.
У Помилка! Джерело посилання не знайдено. підсумовані результати для видимих частинок спочатку, після фізичного стресу та через 13 тижнів зберігання за 5 "С і 25 "6. Після виготовлення та після дії фізичного стресу (1 тиждень струшування за 5 "С або 25 "С або п'ять циклів заморожування-розморожування) всі препарати не містили частинки. Несподіваним є те, що еталонні препарати показали багато частинок через 13 тижнів зберігання за 5 і 25 "С. Усі інші препарати не містили частинки.
Фігура 10 порівнює результати мутності і в'язкості оптимізованих і еталонних препаратів за концентрації білка 120 мг/мл. Оптимізований препарат показав явно нижчу мутність приблизно 23 ОМФ, тоді як препарат для клінічного дослідження мав мутність більше 45 ОМФ. Цікаво, що в'язкість обох препаратів була нижче 14 мПа-:с.
Фігура 11 показує мутність і в'язкість препаратів з 30 мг/мл. Тут різниця в мутності менше між препаратами 5КМО0072-02 і СЄКМО077-09, але все ще оптимізовані препарати показували нижчу мутність, значення в'язкості для обох препаратів з 30 мг/мл були дуже низькими у порівнянні з препаратами з 120 мг/мл і становили нижче 2 мПа:с.
Фігура 12 і Фігура 13 показують збільшення кількості ВМ-сполук через 13 тижнів зберігання за 5 і 25"С. Оптимізований препарат показував як за 120 мг/мл, так і за 30 мг/мл менше збільшення кількості ВМ-сполук, ніж еталонний препарат. Стабілізуючий ефект найбільш явно виражений через 13 тижнів зберігання за 25 "С, де кількість ВМС підвищувалась тільки до 2,4 95 в оптимізованому препараті СКМО076-02, тоді як препарат ЗКМО076-05 показував збільшення до 2,9 96. Таку саму тенденцію також спостерігали для препаратів із ЗО мг/мл, причому нижче збільшення до 1,0 95 спостерігали для оптимізованого препарату та збільшення до 1,3 95 для еталонної форми.
Фігура 14 порівнює зміну кількості заряджених ізоформ, виміряну за допомогою ІОХ через 13 тижнів зберігання за 5 "С і 25 "С. Усі препарати показали невелике зменшення приблизно на 195 площі головного піка через 13 тижнів зберігання за 5 "С. Це супроводжується відповідним збільшенням площі основного піка, тоді як площа кислотного піка залишається незмінною. Хоча зменшення головного піка набагато більше (приблизно 10 95) через 13 тижнів зберігання за 25 "С, немає явних відмінностей між препаратами. Зменшення головного піка у разі зберігання за 25 "С головним чином викликане збільшенням кількості кислотних ізоформ (приблизно 8 905) і невеликим збільшенням кількості основних ізоформ (1-2 95). Збільшення кількості основних ізоформ через 13 тижнів за 25"С дещо нижче (прибл. 195) у еталонних препаратів (приготованих за рН 6,0) у порівнянні з оптимізованими препаратами (прибл. 2 95 збільшення).
Нижча концентрація білка та первинний контейнер не впливають на заряджені ізоформи.
Таблиця 12
Короткий опис результатів для концентрації білка, рН і осмоляльності зразків відбору ЇЇ допоміжних речовин після виготовлення 30 мг/мл у флаконі, аАМО077-09 |еталонний З1 294 препарат
Таблиця 12
Короткий опис результатів для концентрації білка, рН і осмоляльності зразків відбору ЇЇ допоміжних речовин після виготовлення і форма випуску (мг/мл) флаконі, еталонний препарат
Таблиця 13
Короткий опис результатів для видимих частинок початкових і підданих фізичному стресу зразків відбору ІЇ допоміжних речовин після 5 циклів через 1 через 1
Код Препарат | тиждень | тиждень заморожува- | через 13 через 13 препарату іформа |Початковий струшуван- струшуван- ння- тижнів за тижнів за випуску ня за 5 2. ня за 25 "С | Розморожува- "с 2576 ння 02 ПпЗшШ частинок |частинок |частинок |частинок частинок |частинок 02 ПпЗшШ частинок |частинок )|частинок |частинок частинок |частинок об флаконі частинок |частинок |частинок |частинок частинок |частинок 30 мг/мл у З З аАМОО077- | флаконі, немає немає немає немає багатьма |багатьма 09 еталонний | частинок |частинок )|частинок |частинок частинка- | частинка- препарат Ми Ми 120 мг/мл у
САМОО76- | флаконі, немає немає немає немає Немає Немає 05 еталонний | частинок |частинок )|частинок |частинок частинок |частинок препарат
Висновок
Результат відбору Ії допоміжних речовин підтвердив, що оптимізовані препарати кращі за еталонний препарат. Мутність оптимізованих препаратів за 120 мг/мл знижувалася від більше ніж 45 ОМФ до менше ніж 25 ОМФ із збереженням в'язкості менше 15 мПа:с. Низька в'язкість є важливою для забезпечення промислового способу виробництва (підвищення концентрації ультрафільтрацією) та для забезпечення простого та зручного інтравітреального введення (сили впорскування менше 20 Н, зокрема менше 15 Н). Було показано, що оптимізований препарат із в'язкістю менше 15 мПа:с можна було ін'єкувати за допомогою голки для ін'єкції 300 із часом впорскування 5 с із силою впорскування менше 5 Н.
Крім того, оптимізовані препарати з 30 мг/мл все ще не містили частинки, тоді як еталонні препарати показали видимі частинки через 13 тижнів зберігання за 5 і 250. Крім того, збільшення кількості ВМ-сполук було нижче в оптимізованих препаратах.
Покращену властивість стабільності оптимізованих препаратів спостерігали за концентрацій білка 30 і 120 мг/мл і у флаконі, а також у попередньо заповненому шприці.
Загалом, оптимізований препарат із концентрацією білка 30 і 120 мг/мл, який містить гістидин-ацетатний буфер рН 5,5, 25 мМ хлориду натрію, 7 мМ метіоніну, 160 мМ сахарози та 0,04 95 полісорбату 20, забезпечує препарат без частинок із низькою мутністю та в'язкістю та покращеною властивістю стабільності у флаконі та попередньо заповненому шприці.
Приклад 7: Безпека метіоніну для застосування у разі показань для очей (у препараті для інтравітреального введення)
Огляд неклінічних досліджень токсичності з І -метіоніном
Проводили дослідження токсичності на яванських макаках, в якому метіонін (10 мМ) був компонентом носія та приготованого тестового матеріалу Сго55МАБ МЕОРапд2-0016 (фарицимаб). У цьому дослідженні всього 12 тваринам (б самців/б самиць) вводили інтравітреально 50 Нл/око двічі через 14 днів. Ліві очі обробляли носієм (який містив 10 мМ метіоніну), а праві очі обробляли приготованим тестовим матеріалом Сто55МАБ МЕсСРапа2-0016 (фарицимабом), який також містив 10 мМ метіоніну. У цьому дослідженні не спостерігали жодних впливів метіоніну на очі у яванських макаків.
Проводили три дослідження (на яванських макаках і на новозеландських білих кроликах), в яких метіонін (5-25 ММ) був компонентом носія, який вводили інтравітреально (також 50 нл/око) до шести разів через 14 днів. У цих дослідженнях не спостерігали жодних впливів метіоніну на очі у будь-яких тварин, яких обробляли носієм, який містив метіонін.
Огляд неклінічних досліджень токсичності представлений у Таблиця 14
Таблиця 14 Помилка! Джерело посилання не знайдено.
Короткий опис неклінічних досліджень токсичності, які містять метіонін (який дозують інтравітреально) о 122 ДОМ рееенк ою евном макак макак аміни 00070000 бамице осами самиць (семие - . самці (самці/самиці) самиць самиць самиць
Носій у ліве Носій в Носій в Носій в око, - обидва ока |обидваока |обидва ока
Введення приготований (контрольна | (контрольна ) (контрольна фарицимабу / група) група) група) праве око ше 220201 111 днів через) препарат для
Сто55МАБ
МЕСапаг2-0016 (фарицимаб)
ШИ ее не : МЕСапаг2-0016 фарицимаб матеріал (фарицимаб)
ММ метіоніну є. є. о. о. метіоніну метіоніну метіоніну метіоніну 1-11 - (5 мМММАТ | 17МММАТ (ТММ МА!
Носій/композиція | буфера рН 5,5 петидин- петидин- петидин- НС контрольного 240 мМ 240 мМ 240 ММ 0,04 96 полісорбату 0,04 95 0,02 Чо 0,02 Чо 0,02 Чо 20 (мас./об.) полісорбату | полісорбату | полісорбату полісорбату 20 | 20 20 20 шен ше 111 21 натрію хлориду натрію
Скорочення: МАТ - М-ацетилтриптофан; НЗБ - новозеландський білий.
Приклад 8: Стабільність
Партію лікарського продукту (120 мг/мл антитіла до Меді/Апд2 (фарицимаб) в 20 мМ 1 - гістидин-ацетату рН 5,5, 160 мМ сахарози, 25 мМ хлориду натрію, 7 мМ І -метіоніну, 0,04 95 полісорбату 20) фільтрували через 0,22 мкм стерильний фільтр і набирали в чисті та стерильні 2 мл скляні флакони з об'ємом заповнення 0,24 мл.
Після виготовлення рН становив 5,6, осмоляльність 320 мОсм/кг і концентрація білка 120 мг/мл.
Таблиця 15 представляє дані щодо стабільності партії лікарського продукту СІ 10219-01 у разі зберігання за 5 "С. Таблиця 16 показує стабільність у разі зберігання за 25 "С.
Таблиця 15
Дані щодо стабільності партії лікарського продукту антитіла до Меді-Апд2 (фарицимаб) у разі зберігання за 5 С
Час Видимі частинки Мутність | ВМС згідно з Головний Кислотний пік| Основний пік (тижні) д (НОМ) (ЕХ (95 площі) о; пло щі (95 площі) (95 площі)
Практично не 0 мептьчатни! 2 | 06 | 78 | ве | во ши в яв флаконів
МЕС ШОЕ НКИ НОСИ НОЯ НС флаконів флаконів
Своя | отв флаконів флаконів флаконів флаконів
Таблиця 16
Дані щодо стабільності партії лікарського продукту антитіла до Меді-Апд2 (фарицимаб) у разі зберігання за 25 "С вис
Час Видимі Мутність згідно з | Головний пік | Кислотний пік | Основний пік (тижні) частинки (НОМ) ЕХ (90 (95 площі) (95 площі) (95 площі) площі)
Практично не містить 24 1,0 72,8 18,9 8,3 частинки до | частинок на 23 2,0 вв 214 10,5 10 флаконів 13. /9 частинок на 23 2,6 59,7 28,6 117 10 флаконів 26 |З частинок на 23 30 50, 372 12,8 10 флаконів
Бо /|9 частинок на 24 3,5 377 49,9 12А 10 флаконів
Скорочення
Гістидин-ацетатний буфер
Ніз-НСЇІ Гістидин-гідрохлоридний буфер
ЕХ-ВЕРХ Ексклюзійна високоефективна рідинна хроматографія
ІО-ВЕРХ Іонообмінна високоефективна рідинна хроматографія одиниця мутності за формазіном
Високомолекулярні сполуки
Низькомолекулярні сполуки
ПЕРЕЛІК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ
«1105 Е.Нойтапп-Іа Косбе АС -120» Препарат, що містить антитіло «1305 РЗ5108-ЖМО «1505 ЕРІ8203104.7 «1515 2018-10-29 «1605 25 «1705 РаїепЦп версия 3.5 2105 1 «2115 14 212 Білок 213» Штучний «220» «2232 СОКЗН важкого ланцюга, «МСЕ» «4005» 1
Зо Туг Рго Туг Тут Туг О1у Тіг 5ег Нів Тгр Туг Ре Авр Ма! 1 5 10 2105» 2 «2115 17 212 Білок 213» Штучний «220» «2232 СОК2Н важкого ланцюга, «МСЕ» «А005» 2
А
Ттр Пе Авзп Тіт Туг Тіт С1у ОТи Рго Тіг Туг АІа Аа Авр Ре Гуз 1 5 10 15
Ат 2105» 3 «2115 5 212 Білок 213» Штучний «220» «2232 СОКІН важкого ланцюга, «МСЕ» «4005» 3
Нів Туг С1у Меї Авп 1 5 2105» 4 «2115 9 212 Білок 213» Штучний «220»
Зо «2232 СОЮЗІ, легкого ланцюга, «МЕС» «400» 4
СІп СІп Туг 5ег Тіг Маї Рго Ттр ТЕг 1 5 2105 5 «2115 7 212 Білок
213» Штучний «2232 СОКОІ, легкого ланцюга, «МСЕ» «4005» 5
Ре Тіт 5ег 5ег Гец Нів бет 1 5 «2105 6 «2115 11 212 Білок «213» Штучний «2205» «2232 СІК, легкого ланцюга, «МСЕ» «400» 6
Зег АІа 5ег СІп Авзр Пе 5ег Авп Туг Гей Авп 1 5 10 «2105 7 «2115 123 212 Білок 213» Штучний «2205» 223» варіабельний домен важкого ланцюга МН, «МЕСЕ» «4005 7
СОЇи МУаї Сів Гей Маї ОЇи 5ег Оу Су О1у Гей Маї СІп Рго СІу СО1У 1 5 10 15
Зег Пец Агро Гей 5Зег Суб Аа Аа 5ег СО1у Туг Авр Ре Тіг Нів Туг
20 25 30
О1Іу Меї Авп Ттр Маї Аг» Сіп Аа Рго СІу Гуз С1У Гец Си Тгр Ма! 35 40 45
СОІУ Тгр Пе Авзп Тіт Туг Тіт С1Ту Си Рго Тіт Туг Аа Аа Авр Ре 50 55 60
Гуз Аг» Агео Ре Тіт Ре 5ег Гей Авр Тіт 5ег Муз 5ег Тіг Аа Туг 65 70 75 80
ІГеп СІп Меї Авп 5ег Гей Агро Аа Сп Авр Тіг Аа Ма! Тут Туг Сув 85 90 95
Аа Гуз Туг Рго Туг Туг Туг СТу Тіт 5ег Нів Ттр Туг Ре Авр Маї 100 105 110
Ттр СОІУ СіІп СІу Тіт Гей Маї Тіг Маї 5ег 5ег 115 120 2105 8 «2115 107
Зо 212» Білок 213» Штучний «220» 223» варіабельний домен легкого ланцюга МІ, «МЕСЕ» «4005» 8
Авр Пе СіІп Гей Тіт СіІп 5ег Рго 5ег Зег Гец 5ег Аа 5ег Ма! СІ1Уу 1 5 10 15
Авр Аге Маї Тіт Пе Тіг Сув 5ег Аа 5ег СІп Авр Пе 5ег Авп Тут 20 25 30
Гей Авп Ттр Туг СІп СІп Мув Рго С1У Гуз Аа Рго Гуз Ма! Гей Пе 35 40 45
Туг Рре Тіг 5ег 5ег Гей Нів Зег СІТу Маї Рго 5ег Аг» Ре 5ег СО1у 50 55 60
Зег СІ1у 5ег С1У Тіг Авр Ре Тіг Пец Тіт Пе 5ег 5ег Гей СіІп Рго 65 70 75 80
Си Авзр Ре Аа Тіт Туг Туг Суб СІп СіІп Туг 5ег Тіг Маї Рго Ттр 85 90 95
Тіг Рре С1у СІп Су Тіт Гув Ма! СТи Пе Гув 100 105 «2105 9 «2115 20 212» Білок 213» Штучний «220» «2232 СОКЗН важкого ланцюга, «АМО-2» «А00» 9
Зег Рго Авп Рго Туг Туг Туг Авр 5ег бег О1у Туг Туг Туг Рго С1у 1 5 10 15
Аа Ре Авр Пе
«2105 10 «2115 17 212 Білок 213» Штучний «220» «2232 СОК2Н важкого ланцюга, «АМО-2» «4005 10
Ттр Пе Авп Рго Авп 5ег С1у СІу Тіг Авп Туг АІа СІп Гув Ре СіІп 1 5 10 15
С1у «2105 11 «2115 5 212 Білок «213» Штучний «220» «2232 СОКІН важкого ланцюга, «АМО-2» «4005 11
СОІУ Туг Тут Ме: Нів 1 5 «2105 12 «2115 11 212 Білок 213» Штучний
«2232 СОЕЗІ, легкого ланцюга, хАМО-25 «А00» 12
СіІп МУаї Тгр Авр 5ег 5ег Зег Авр Нів Тгр Ма! 1 5 10 «2105 13 «2115 7 212 Білок 213» Штучний «220» «2232 СОЮКІІ, легкого ланцюга, «АМО-25 «4005 13
Авр Авр 5ег Авр Аге Рго 5ег 1 5 «2105 14 «2115 11 212 Білок 213» Штучний «220»
Зо «223» СІК, легкого ланцюга, «АМО-25 «А00» 14
СІу С1у Авп Авп Пе СІу 5етг Муз Зег Ма! Нів 1 5 10 «2105 15 «2115 129 «212» Білок
213» Штучний 223» варіабельний домен важкого ланцюга УН, хАМО-25 «4005 15
СІп МУаї Сів Гей Маї СІп 5ег О1у АІа СЇи Ма! Гуз Гуз Рго О1у Аа 1 5 10 15
Зег Ма! Гуз Ма! бег Суз Муз Аа б5ег СІ1уУ Тут Тіт Рре Тіт СТу Туг 20 25 30
Туг Меї Ніз Ттр Маї Аг» Сп Аа Рго С1у СІп СПУ Гей Сп Ттр Ме: 35 40 45
СОІУ Тгр Пе Авп Рго Авп 5ег С1у СІ1у Тіт Авп Туг Аа СіІп Гуз Ріе 50 55 60
СІп С1у Агео Ма! Тіт Меї Тіт Агео Авр Тіг 5ег Пе бЗег Тіг Аа Туг 65 70 75 80
Меї ОЇ Гей 5ег Аг» Гей Аге 5ег Авр Авр Тіг Аа Маї Туг Туг Сув 85 90 95
Аа Аге 5ег Рго Авп Рго Тут Туг Туг Авр ет 5ег С1у Туг Туг Туг 100 105 110
Рго ОСІу АІа Ре Авр Пе Тгр С1у СІп С1у Тіг Ме: Ма! Тіг Маї 5ег 115 120 125 зег
«2105 16 «2115 110 212» Білок 213» Штучний «220» 223» варіабельний домен легкого ланцюга МІ,, «АМО-25 «4005» 16
Зег Туг Ма!Ї Гей Тіг СіІп Рго Рго 5ег Маї 5ег Маї Аа Рго Су Сіп 1 5 10 15
Тіг Аа Аг» Пе Тіг Сув СТ1у СІ1у Авп Авзп Пе СпТу бег Гуз бег Маї 20
Нів Ттр Туг СІп СІп Мув Рго С1у СіІп Аа Рго Маї Гец Маї Ма! Тут 25
Авр Авр 5ег Авр Аге Рго 5ег С1у Пе Рго ОЇи Аг» Ре 5ег О1Іу 5ег 60
Зо Авп ет С1у Авп Тіт Аа Тіт Гей Тіг Пе 5ег Аге Ма! СТи Аа СІ1у 65 70 75 80
Авр Сн Аа Авр Туг Туг Сув СІп Маї Ттр Авр 5ег 5ег 5ег Авр Нів 35 85 90 95
Ттр Маї Ріе СіІу СІу Су Тіт Гуз Гей Тіг МУаї Гей бег 5ег 100 105 110 40
«2105 17 «211» 453 212» Білок «213» Штучний «220» 223» Важкий ланцюг | «МЕСК-АМО-2» Сто55МАБ Ір 13 мутаціями ААА і мутаціями РУ29С0 МАМА (МЕС ТКапе2-0016) «4005 17
СОЇи МУаї Сів Гей Маї ОЇи 5ег Оу Су О1у Гей Маї СІп Рго СІу СО1У 1 5 10 15
Зег Пец Агро Гец 5Зег Сув Аа Аа 5ег СО1у Туг Авр Ре Тіг Нів Туг 20
О1Іу Меї Авп Ттр Маї Аг» Сіп Аа Рго СІу Гуз С1У Гец Си Тгр Ма! 25 СОІУ Тгр Пе Авп Тіт Туг Тіт С1Ту Си Рго Тіт Туг Аа Аа Авзр Ріє 60
Гуз Аг» Агео Ре Тіт Ре 5ег Гей Авр Тіт 5ег Муз 5ег Тіг Аа Туг 30 65 70 75 80
ІГеп СІп Меї Авп 5ег Гей Агео Аа СіІп Авр Тіг Аа Маї Туг Туг Сув 85 90 95 35
Аа Гуз Туг Рго Туг Туг Туг СТу Тіт 5ег Нів Ттр Туг Ре Авр Маї 100 105 110 40
Ттр ОСІу СіІп СІу Тіт Гей Маї Тіг Маї 5ег Зег АІа бег Тіг Гув С1у 115 120 125
Рго 5Зег Маї Ріе Рго Гей АїЇа Рго 5ег 5ег Муз Зег Тіт бЗег СОТу С1Уу 130 135 140
Тіг Аа Аа Гей СІу Сув Гей Ма! Гуз Авр Туг Ре Рго СІи Рго Маї 145 150 155 160
Тіг МУаї 5ег Тгр Авп 5ег СІу АІа Гей Тіт 5ег СТУ Ма! Ні Тіг Ріе 165 170 175
Рго АЇа Маї Гецп Сіп бег 5ег СО1у Гей Туг Зет Гец 5ег Зег Ма! Маї 180 185 190
Тіг Маї Рго 5ег бег Зет Геп Су Тіт Сіп Тіт Туг Пе Сув Азп Маї 195 200 205
Авп Нів Гуз Рго Зет Авп Тіг ув Ма! Авзр Муз Гуз Ма! СЇи Рго Гуз 210 215 220
Зег Суб Авр Гуз Тіг Ні Тіг Сув Рго Рго Сузв Рго Аа Рго ОЇи АїЇа 225 230 235 240
Аа СіІу С1у Рго 5Зег Ма! Ре Гей Ре Рго Рго Гув Рго Гув Авр ТЕГ 2А5 250 255
ІГ.еп Меї Аа 5ег Аг» Тіт Рго СІЇи Маї Тіг Сув Маї Ма! Ма! Авр Ма! 260 265 270
Зег Нів СЇши Авр Рго Сп Ма! МГув Ре Авп Тгр Туг Ма! Авр СОІУ Маї 275 280 285
СІЇи Маї Нів Авзп Аа Гуз Тіт Гуз Рго Агео Сп СТи СіІп Туг Авп бег 290 295 300
Тіг Туг Аге Маї Маї 5ег Ма! Геп Тіг Маї Ге Аа Сіп Авр Тгр Гей 305 310 315 320
Авп ОСІу Муз ОЇи Туг Суб Суб Дуб Маї бег Авп Муз Аа Гецп СІу Аа 325 330 335
Рго Пе ОЇпй Гуз Тіт Пе 5егт Гуз АІа МПув СТу Сп Рго Аге Си Рго 340 345 350
СІп МУаї Туг Тіг Гей Рго Рго Сув Аг» Авр Си Гей Тіт Гуз Авп Сп 355 360 365
Уа! 5ег Гецп Ттр Сув Ге Ма! був СТу Ре Тут Рго 5ег Авр Пе АїЇа 370 375 380
Уа! СІч Тгр ОЇи 5ег Авзп С1Ту СіІп Рго СЇпй Авзп Авп Туг Губв Тіт ТВг
Зо 385 390 395 400
Рго Рго Маї Гей Авр 5ег Авр СІу 5ег Ре Ре Гей Туг 5ег Гуз Гей 405 410 415
Тіг Уаї Авр Муз 5ег Аге Ттр СіІп СІп СО1у Авзп Маї Ре 5ег Сув бег 420 425 430
Уа! Меї Ніз Си Аа Гей Нів Авп Аа Туг Тіт Сп Гув Зег Гей 5ег 435 440 445
ІГ.ец 5ег Рго СІ1у Гуз 450 «2105 18 «211» 463 212» Білок 213» Штучний «220» 223» Важкий ланцюг 2 «МЕСК-АМО-2» Сто55МАЬ Ів 13 мутаціями ААА і мутаціями РУ29С0 МАМА (МЕС ТКапе2-0016) «4005 18
СІп МУаї Сів Гей Маї СІп 5ег О1у АІа СЇи Ма! Гуз Гуз Рго О1у Аа 1 5 10 15
Зег Ма! Гуз Ма! Зег Суз Муз Аа ет СІ1у Туг Тіт Ріе Тіг СІу Туг 20 25 30
Туг Меї Ніз Ттр Маї Аг» Сп Аа Рго С1у СІп СПУ Гей Сп Ттр Ме: 35 40 45
СОІУ Тгр Пе Авп Рго Авп 5етг СІу С1у Тіт Авп Туг АІа СІп Гув Ре 50 55 60
СІп С1у Агео Ма! Тіт Меї Тіт Агео Авр Тіг 5ег Пе бЗег Тіг Аа Туг 65 70 75 80
Меї ОЇ Гей 5ег Аге Гец Аге Зег Авзр Авзр Тіг Аа Ма! Туг Туг Сув
85 90 95
Аа Аге 5ег Рго Авп Рго Тут Туг Туг Авр ет 5ег С1у Туг Туг Туг 100 105 110
Рго СІу АІа Ріе Авр Пе Ттр СОІУ СІп Су Тіг Ме: Маї Тіг Маї 5ег 115 120 125
Зег АІа 5ег Маї Аа Аа Рго 5ег Ма! Ре Пе Ре Рго Рго 5ег Авр 130 135 140
ОЇи СІп Гей Муз 5ег С1у Тіг Аа 5ег Маї Ма! Сув Гей Гей Авп Авп 145 150 155 160
Ре Тут Рго Агео Сп Аа Гуз Маї СіІп Ттр Гуз Маї Авр Авп Аа Гей 165 170 175
Сп 5ег С1у Авп 5ег СіІп СОЇи Зег Ма! Тіг СІТи СІп Авр 5ег Гуз Авр 180 185 190
Зег Тіт Туг ет Гей Зег 5егт Тіт Гей Тіт Гей Зег Суб Аа Авр Туг 195 200 205
ОЇи Гуз Нів Гуз Маї Туг АІа Сув СЇи Ма! Тіг Нів СіІп С1у Гец 5ег 210 215 220
Зег Рго МаЇ Тіт Гуз ет Рре Авп Аге С1у ОЇш Сувз Авр Гуз Тіг Нів 225 230 235 240
Тіг Сув Рго Рго Сув Рго Аа Рго СЇи АїЇа Аа СІу С1Ту Рго 5ег Ма!
2А5 250 255
Ре Гей Ре Рго Рго Муз Рго Суб Авр Тіг Гей Ме: Аа 5ег Агро Тег 260 265 270
Рго СЇшп Маї Тіг Сув МУаї Уаї Ма! Авр Маї 5ег Нів ОЇи Авр Рго ОЇи 275 280 285
Уа! Гув Ре Авп Ттр Туг Маї Авзр О1у Маї СЇи Маї Нів Авп Аа Гуз 290 295 300
Тіг Гуз Рго Агео Сп Си СіІп Туг Авзп 5ег Тіт Туг Аге Маї Маї 5ег 305 310 315 320
Уа! Геп Тіг Маї Гей Аа СіІп Авр Ттр Гей Авп С1у Гуз СЇйи Туг Гуз 325 330 335
Сувз був Маї Зег Авп Гуз Аа Гей Оу Аа Рго Пе СІи був Тіг Пе 340 345 350
Зег Муз АІа Гуз О1у Сп Рго Аге Си Рго Сіп Маї Сув Тіт Ген Рго 355 360 365
Рго 5Зег Аге Авр Сп Гей Тіт Мув Авзп Сіп Маї 5Зег Гей 5ег Сув АїЇа 370 375 380
Ма! Гуз С1Уу Ре Тут Рго 5ег Авр Пе Аа Маї Сіи Ттр ОЇи 5ег Авп 385 390 395 400
СОІУ СІп Рго СЇп Авп Авп Тут Гуз Тіг Тіт Рго Рго Маї Гей Авр 5ег
405 410 415
Авр Су бег Ре Ре Гей Маї 5ег Гуз Пец Тіт Ма! Авр Гуз 5ег Аг» 420 425 430
Ттр СІп СіІп СІу Авзп Маї Рре 5ег Сув 5ег Ма! Ме: Нів ОЇи Аа Гей 435 440 445
Нів Авп Аа Туг Тіт СІп Суб бег Пец 5ет Гей 5ег Рго СІу Мув 450 455 460 «2105 19 «2115 214 212» Білок 213» Штучний «220» 223» Важкий ланцюг | «МЕСК-АМО-2» Сто55МА Ів 13 мутаціями ААА і мутаціями РУ29С0 МАМА (МЕС ТКапе2-0016) «4005 19
Авр Пе СіІп Гей Тіт СіІп 5ег Рго 5ег Зег Гец 5ег Аа 5ег Ма! СІ1Уу 1 5 10 15
Авр Аге Маї Тіт Пе Тіг Сув 5ег Аа 5ег СІп Авр Пе 5ег Авп Тут 20 25 30
Гей Авп Ттр Туг СІп СІп Мув Рго С1У Гуз Аа Рго Гуз Ма! Гей Пе 35 40 45
Туг Рре Тіг 5ег 5ег Гей Нів бег С1у Маї Рго 5ег Аг» Ре 5ег С1у 60
Зег СІ1у 5ег С1У Тіг Авр Ре Тіг Пец Тіт Пе 5ег 5ег Гей СіІп Рго 65 70 75 80
Си Авзр Ре Аа Тіт Туг Туг Суб СІп СіІп Туг 5ег Тіг Маї Рго Ттр 85 90 95
Тіг Рре С1у СІп Су Тіт ув Ма! СТи Пе Гуз Агео Тіг Маї Аа Аа 100 105 110
Рго 5Зег Маї Ре Пе Ре Рго Рго 5ег Авр Сп СіІп Геп Гуз 5Зег СО1У 115 120 125
Тіг Аа 5ег Ма! Маї Сув Гей Гей Авп Авп Ре Туг Рго Аге Сни Аа 130 135 140
Гуз Маї СіІп Тгр Гуз Маї Авр Авп Аа Гей Сп 5ег ОЇу Авп 5ег СІп 145 150 155 160
Си 5ег Ма! Тіт ОЇи СІп Авр 5ег Муз Авзр 5ег Тіт Тутг 5ег Гей 5ег 165 170 175
Зег Тіт Гей Тіг Гей 5ег Гуз Аа Авр Туг СОТи Гув Нів Муз Маї Туг 180 185 190
Аа Суз ОЇи Маї Тіт Нів СІп О1у Гей 5ет 5ег Рго Ма! Тіт Мув бег 195 200 205
Ріе Авп Аге С1у ОСЇнп Сув 210
«2105 20 «2115» 213 212» Білок 213» Штучний «220» 223» Легкий ланцюг 2 «МЕСЕ-АМО-2» Сто55МАЬ Ів і1з мутаціями ЛААА і мутаціями РУ29С0 МАМА (МЕС ТКапе2-0016) «4005 20
Зег Туг Ма!Ї Гей Тіг СіІп Рго Рго 5ег Маї 5ег Маї Аа Рго ОСІу СіІп 1 5 10 15
Тіг Аа Аг» Пе Тіг Сув СТ1у СІ1у Авп Авзп Пе СпТу бег Гуз бег Маї 20
Нів Ттр Туг СІп СІп Мув Рго С1у СіІп Аа Рго Маї Ге Маї Ма! Туг 25
Авр Авр 5ег Авр Аге Рго 5ег С1у Пе Рго ОЇи Аг» Ре 5ег О1Іу 5ег 60
Зо Авп Зег С1у Авп Тіт Аа Тіг Гей Тіт Це 5ег Аг» Маї ОЇи Аа С1Уу 65 70 75 80
Авр Сн Аа Авр Туг Туг Сув СІп Маї Ттр Авр 5ег 5ег 5ег Авр Нів 35 85 90 95
Ттр Маї Ре СІу СІ1у СІу Тіт Гуз Меп Тіг Маї Гей 5етг 5ег Аа 5ег 100 105 110 40
Тіг Гув С1у Рго 5Зег Маї! Ре Рго Гей Аа Рго 5ег 5ег Гув бег ТВг 115 120 125
Зег С1у СТу Тіт Аа Аа Гей ОСІу Сувз Гей Ма! Гуз Авр Туг Ре Рго 130 135 140
Си Рго Маї Тіг Маї ет Ттр Авп Зег СО1у АІа Гей ТІг Зег СОІУ Маї 145 150 155 160
Нів Тіг Рре Рго Аа Маї Гей Сп 5ег 5ег СО1у Пец Тут бег Гей бег 165 170 175
Зег Ма! Маї Тіг Маї Рго 5ег 5ег 5ег Геп С1у Тіт СІп Тіг Туг Пе 180 185 190
Сув Авп Маї Авп Нів Гуз Рго 5ег Авзп Тіт Гуз Ма! Авр Гуз Мув Маї 195 200 205
СІЇи Рго Муз 5Зег Сув 210 «2105 21 «2115 107 212» Білок «213» Ното варіепве «4005 21
Ат» Тіг Маї Аїа Аїа Рго 5ег Маї Ре Пе Ре Рго Рго 5ег Авр Сіп 1 5 10 15
СіІп Гей Гуз бег СТУ Тіг Аа 5ег Ма! Ма! Сув Гей Гей Авп Авп Ріе 20 25 30
Туг Рго Аг» ОЇи Аа Муз Ма! СІп Ттр Гуз Ма! Авр Авп Аа Гей Сіп 35 40 45
Зег С1уУ Авзп 5Зег СІп Си Зег Ма! Тіг СЇй СіІп Авр 5ег Гуз Авр 5ег 50 55 60
Тіг Туг бег Гей 5ег 5ег Тіт Гей Тіг Гей 5ег Гуз Аа Авр Туг Сп 65 70 75 80
Гуз Нів Гуз Маї Туг АІа Сув Си Маї Тіг Нів СІп СТу Гец 5ег 5ег 85 90 95
Рго Маї Тіг Гуз 5ег Ре Авп Агео Сі1у ОЇи Сув 100 105 «2105 22 «2115 105 212» Білок «213» Ното варіепве «4005 22
Сп Рго Муз АїЇа Аа Рго 5ег Маї Тіт Гей Ре Рго Рго 5ег 5ег ОЇй 1 5 10 15
ОЇ Гей СіІп Аа Авоп Гуз Аа ТВг Гей Ма! Сув Гей Пе 5ег Авр Ріє 20 25 30
Туг Рго СІу АІа Маї Тіг Маї Аа Тгр Гуз Аа Авр 5ег Зет Рго Ма! бо
35 40 45
Гуз АІа СІу Ма! ОЇ Тіт Тіт Тіт Рго Зег Гуз СіІп 5ег Авп Авп Гуз 50 55 60
Туг Аа Аа 5ег 5ег Тут Гей бег Гей Тіт Рго СОЇи Сіп Ттр Гуз бег 65 70 75 80
Нів Аге 5ег Туг 5ег Сув СІп Маї Тіт Нів ОЇи ОС1у 5ег Тіт Ма! СТи 85 90 95
Гув Тіг Маї Аа Рго Тіт СЇи Сув 5ег 100 105 «2105 23 «2115 330 212» Білок «213» Ното варіепве «4005 23
Аа 5ег Тіг Муз О1Ту Рго 5ег Маї Ре Рго Гей Аа Рго 5ег 5ег Гуз 1 5 10 15
Зег Тіт 5ег С1у СТу Тіг Аа Аа Ге СІу Сув Гецп Маї Гуз Авр Туг 20 25 30
Ре Рго СіІи Рго Ма! Тіг Маї 5ег Тгр Авп 5Зег СОІУ Аа Гей Тіт 5ег 35 40 45
Оу Маї Нів Тіт Ре Рго Аа МУаї Гей СІп 5ег Зег СОІУ Гец Туг 5ег 60
І.ец 5ег 5Зег Ма! Маї Тіг Маї Рго 5ег 5ег 5ег Пецп СТу Тіг СІп ТЕГ 65 70 75 80
Туг Пе Сув Авп Маї Авзп Нів Гуз Рго Зег Азп Тіг ув Ма! Авр Гуз 85 90 95
Гуз Маї СІш Рго Гуз 5ег Сув Авр МЦув Тіт Нів Тіг Сув Рго Рго Сув 100 105 110
Рго Аа Рго Сп Гей Пец СІу ОІТу Рго 5ег Ма! Ре Гей Ре Рго Рго 115 120 125
Гуз Рго був Авр Тіт Гей Меї Пе 5ег Агро Тіг Рго СІи Ма! Тіг Сув 130 135 140
Уа! Уаї Маї Авр Маї 5ег Нів Си Авр Рго Сип Ма! Дуб Ре Авп Тгр 145 150 155 160
Туг Уа! Авр СОІУ Маї ОЇи Маї Нів Авзп Аа Гуз Тіг Мув Рго Аге ОЇц 165 170 175
ОЇ СІп Туг Авп 5ег Тіг Туг Аг» Маї Ма! 5ег Ма! Геп Тіг Маї Гей 180 185 190
Нів СіІп Авр Ттр Гей Авп СТу Дуб СОЇТи Туг Суб Суб ув Маї ет Авп 195 200 205
Гуз Аа Гей Рго Аа Рго Пе СЇш МЦув Тіт Пе 5ет Гуз АІа Гув С1у 210 215 220 б2
Сп Рго Аге Сни Рго Сіп Маї Туг Тіг Гей Рго Рго Зег Агео Авр ОЇцй 225 230 235 240
Геп Тіт Гув Авп СІп Маї бег Гей Тіт Сувз Гей Ма! був СТу Ре Туг 2А5 250 255
Рго 5Зег Авр Пе Аа Маї Си Тгр Си 5ег Авзп С1у СіІп Рго СЇи Авп 260 265 270
Авп Туг був Тіт Тік Рго Рго Маї Гей Авр 5ег Авр О1Іу Зег Ріе Ре 275 280 285
ІГ.ецп Туг 5ег Муз Пец Тіт Ма! Авзр Гуз 5ег Агро Ттр СіІп Сіп СІу Авп 290 295 300
Уаї Рне 5ег Сув Зег Ма! Ме: Нів ОЇи Аа Гей Нів Авп Нів Туг Тіг 305 310 315 320
СІп Гуз бег Гей 5ег Мей 5ег Рго С1Уу Гув 325 330 «2105 2А «2115 191 212» Білок «213» Ното варіепве «4005 2А
Меї Авп Ре Гей Гей 5ег Тгр Маї Нів Ттр Зег Пец Аа Гей Гей Гей 1 5 10 15
Туг Гей Нів Нів Аа Гуз Ттр 5ег СіІп Аа Аа Рго Ме: Аа СЇи С1у 20 25 30
СІу С1уУ Сп Азвп Ніз Нів ОЇши Маї Ма! Гуз Ре Меї Авр Маї Туг СіІп 35 40 45
Ате 5ег Туг Сув Нів Рго Пе СЇи Тіт Гецп Маї Авр Пе Ре СіІп СТи 50 55 60
Туг Рго Авр СЇшп Пе Си Тут Пе Ре Муз Рго 5ег Сув Маї Рго Гей 65 70 75 80
Меї Аге Сув СІу СОІУ Сувз Сув Авзп Авр СЇй С1У Пец СТи Сув Маї Рго 85 90 95
Тіг СЇй ОЇй 5ег Авп Пе Тіт Меї СіІп Пе Меї Агео Пе Гуз Рго Нів 100 105 110
СІп С1У Сп Нів Пе СІу Си Ме: 5ег Ріе Гей Сп Нів Авп Гуз Сув 115 120 125
Зо ОЇ Сув Аге Рго Гуз Гув Авр Аге Аа Аге Сіп ОЇи Авп Рго Сув С1у 130 135 140
Рго Сув 5ег СОЇй Агро Аге Муз Нів Гецп Ре Ма! СіІп Авр Рго СІп Тіг 145 150 155 160
Сув був Сув бег Сув Суб Авп Тіт Авр 5ег Аг» Сув Мув Аа Агро СіІп 165 170 175
Гей Сп Гей Авп СЇй Аг» Тіг Суб Аг» Сув Авр Муз Рго Агро Аг 180 185 190 «2105 25 «2115 496 212» Білок «213» Ното варіепве «4005 25
Меї Тгр СІп Пе Маї Ре Ріе Тіг Гец 5ег Сув Авр Гец Маї Гей АїЇа 1 5 10 15
Аа Аа Туг Авзп Авп Ре Агео Муз 5ег Меї Авр 5ег Пе С1у МПув МГув 20
СІп Туг СІп Маї СІп Нів СІу 5ег Сув бег Туг Тіт Ре Гей Гей Ртго 25 ОЇи Меї Авр Авп Сув Аге 5ет 5ег 5ег 5ег Рго Туг Маї! 5ег Авзп АїЇа 60
Уа! СіІп Агео Авр Аа Рго Гей ОЇи Туг Авр Авр 5ег Ма! СіІп Аге Гей 30 65 70 75 80
СІп Маї Гей ОЇ Авп Пе Меї ОСЇп Авзп Авзп Тіг СІп Тгр Гей Ме Гуз 85 90 95 35
Гей Сп Авп Туг Пе СіІп Авзр Азп Меї Муз Гуз ОЇ Меї Маї ОЇи Пе 100 105 110 40
СІп СІп Авп Аа Ма! СІп Авзп Сіп Тіг Аа Маї Ме: Пе ОЇи Пе С1у 115 120 125
Тіг Авп Гей Гей Авп СіІп Тіг Аа СТи СІп Тбт Агео Гуз Гей Тіт Авр 130 135 140
Уа! СІи Аа Сіп Маї Геп Авп СІп Тіт Тбг Агео Гей ОЇ Гей СІп Гей 145 150 155 160
Ге Сни Нів 5ег Гей 5ег Тіг Азп Гуз Гей ОТи Му ОІп Пе Гей Авр 165 170 175
СІп Тіт 5ег СЇи Пе Авзп Гуз Гей СіІп Авр Гуз Авп 5ег Ре Гей Си 180 185 190
Гуз МЦув Ма! Гец Аа Меї Сп Авр Гуз Нів Пе Пе Сіп Гей Сіп 5ег 195 200 205
Пе Гув Спи ОЇи Мув Авр СіІп Гей СіІп Маї Гей Маї 5ег МГув СІп Авп 210 215 220
Зег Пе Пе СЇйи Сп Геп Си Гуз Пув Це Ма! Тіг Аа Тіг МУаї Авп 225 230 235 240
Авп Зег Ма! Гей СІп Гуз СЇп Сп Нів Авр Гей Меї ОЇи Тіг Маї Авп 2А5 250 255
Авп Пец Гей Тіг Ме: Ме: 5ег Тіг 5ег Авп 5ег АІа Гуз Авр Рго ТЕГ 260 265 270
Уа! АІа Гуз ОЇи СІи Сп Пе 5ег Ре Аг» Авр Сувз Аа Си Маї Ре 275 280 285
Гуз Зег СОІУ Нів Тіт Тіт Авп СОІУ Пе Туг Тіт Гей Тіт Рре Рго Авп 290 295 300
Зег Тіт Сип ОЇ Пе Гуз АІа Туг Сувз Авр Ме: ОЇ Аа СіІу СІТу С1у 305 310 315 320
СОІУ Тгр Ті Пе Пе Сіп Агео Аг» ОЇи Авр СІу 5ег Ма! Авр Ре Сіп 325 330 335
Ат» Тіг Ттр Гуз СЇи Туг був Ма! СТу Ре СТУ Авп Рго 5ег СІу ОЇи 340 345 350
Туг Тгр Гей О1у Авп ОЇи Ре Маї 5ег СІп Гей Тіг Авп СІп СіІп Аге 355 360 365
Туг Ма! Ге Гуз Пе Нів Гей Гуз Авр Ттр СЇий СТу Авп ОЇи Аа Туг 370 375 380
Зег Гей Туг ОЇшп Нів Ріе Туг Гец 5ег 5ег ОЇ Си Гей Авп Туг Аге
Зо 385 390 395 400
Пе Нів Гей Муз С1У Пеп Тіт СІу Тіт АІа СІу Мув Пе 5етг Зег Пе 405 410 415
Зег СІп Рго СІ1у Авп Авзр Ре 5ег Тіг МЦув Авр СІу Авр Авп Авр Гуз 420 425 430
Сув Пе Сувз був Сув ет СІп Меї Гей Тіт ОІу О1у Тгр Ттр Ре Авр 435 440 445
Аа Сув Оу Рго 5ег Авп Гец Авп Су Меї Туг Туг Рго СіІп Аг» СіІп 450 455 460
Авп Тіт Авзп Гуз Рве Авзп СІу Пе Гуз Ттр Туг Туг Тгр Гуз О1у 5ег 465 470 475 450
СОІУ Тут 5ег Геп Мув АІа Тіт Тіг Ме: Ме: Пе Аге Рго Аа Авр Ре

Claims (21)

485 490 495 ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
1. Рідкий фармацевтичний препарат, який містить: 120518 мг/мл біспецифічного антитіла до фактора росту ендотелію судин людини (МЕСБР)/ангіопоетину-2 (АМО2), яке містить константну ділянку важкого ланцюга підкласу Ідс1 людини, від 15 до 35 ММ хлориду натрію, від 15 до 25 мМ гістидин-ацетатного буфера, при значенні рН 5,5:0,5; де біспецифічне антитіло до МЕСР/АМО2 являє собою фарицимаб.
2. Фармацевтичний препарат за п. 1 для інтравітреального введення.
3. Фармацевтичний препарат за п. 1 або 2, причому препарат, по суті, не містить видимих частинок.
4. Фармацевтичний препарат за будь-яким із пп. 1-3, причому препарат додатково містить 7,052,0 мм метіоніну.
5. Фармацевтичний препарат за будь-яким із пп. 1-4, причому препарат додатково містить від 0,03 до 0,07 95 (мас./об.) полісорбату-20.
6. Фармацевтичний препарат за будь-яким із пп. 1-5, причому препарат додатково містить 160-424 мМ сахарози.
7. Фармацевтичний препарат за будь-яким із пп. 1-6, причому препарат має в'язкість 20 мПа:с або менше.
8. Фармацевтичний препарат за будь-яким із пп. 1-7, причому препарат має мутність 30 ОМФ або менше.
9. Фармацевтичний препарат за будь-яким із пп. 1-8, причому препарат має іонну силу від 20 до
50.
10. Фармацевтичний препарат за будь-яким із пп. 1-9, в якому вміст високомолекулярних сполук (ВМС) біспецифічного антитіла в фармацевтичному препараті становить менше 10 95 через 8 тижнів при 25 "С або через 52 тижні при 25 С.
11. Фармацевтичний препарат за будь-яким із пп. 1-10, в якому осмоляльність препарату становить 3005100 моОсм/кг.
12. Фармацевтичний препарат за будь-яким із пп. 1-11 для застосування в лікуванні судинного захворювання очей.
13. Фармацевтичний препарат для застосування за п. 12, причому судинне захворювання очей вибране з групи, яка складається з діабетичної ретинопатії (ДР), діабетичного макулярного набряку (ДМН), оклюзії вени сітківки (ОВС), оклюзії центральної вени сітківки (ОЦВС), макулярної дегенерації, вологої форми вікової макулярної дегенерації (вологої ВМД), ретинопатії недоношених (РН), неоваскулярної глаукоми, пігментного ретиніту (ПР), ретинальної ангіоматозної проліферації, макулярної телеангіектазії, ішемічної ретинопатії,
неоваскуляризації райдужної оболонки, внутрішньоочної неоваскуляризації, неоваскуляризації рогівки, неоваскуляризації сітківки, хоріоїдальної неоваскуляризації і дегенерації сітківки.
14. Застосування фармацевтичного препарату за будь-яким із пп. 1-11 для виготовлення лікарського засобу для лікування судинного захворювання очей.
15. Застосування за п. 14, причому судинне захворювання очей вибране з групи, яка складається з діабетичної ретинопатії (ДР), діабетичного макулярного набряку (ДМН), оклюзії вени сітківки (ОВС), оклюзії центральної вени сітківки (ОЦВС), макулярної дегенерації, вологої форми вікової макулярної дегенерації (вологої ВМД), ретинопатії недоношених (РН), неоваскулярної глаукоми, пігментного ретиніту (ПР), ретинальної ангіоматозної проліферації, макулярної телеангіектазії, ішемічної ретинопатії, неоваскуляризації райдужної оболонки, внутрішньоочної неоваскуляризації, неоваскуляризації рогівки, неоваскуляризації сітківки, хоріоїдальної неоваскуляризації і дегенерації сітківки.
16. Фармацевтичний препарат для застосування за п. 13 або застосування за п. 15, де судинне захворювання очей вибране з групи, яка складається з діабетичної ретинопатії (ДР), діабетичного макулярного набряку (ДМН), оклюзії вени сітківки (ОВС), оклюзії центральної вени сітківки (ОЦВС) та вологої форми вікової макулярної дегенерації (вологої ВМД).
17. Застосування за п. 14 або 15, де фармацевтичний препарат призначений для інтравітреального введення.
18. Спосіб отримання фармацевтичного препарату за будь-яким одним із пп. 1-11, де спосіб включає стадії, на яких: замінюють буфер основного об'єму розчину біспецифічного антитіла а) на буфер для діафільтрації шляхом ультрафільтрації та діафільтрації або б) шляхом діалізу за допомогою буфера для діалізу, причому буфери містять гістидин-ацетатний буфер, або гістидин-ацетатний буфер і хлорид натрію, або гістидин-ацетатний буфер, хлорид натрію та метіонін, або гістидин- ацетатний буфер, хлорид натрію, метіонін і сахарозу; концентрують основний об'єм розчину з заміненим буфером шляхом ультрафільтрації; регулюють готову композицію фармацевтичного препарату шляхом додавання початкових розчинів відповідних допоміжних речовин або за допомогою відповідного стабілізуючого буфера та гомогенізують рідкий фармацевтичний препарат шляхом перемішування.
19. Флакон, який містить фармацевтичний препарат за будь-яким одним із пп. 1-11.
20. Попередньо заповнений шприц, який містить фармацевтичний препарат за будь-яким із пп. 1-11.
21. Ліофілізована форма рідкого фармацевтичного препарату за будь-яким одним із пп. 1-11. ' ЗфутнітТь пн М Кк, в пиши ний и в : їз 01 в» і жі ав щої во ж Її ох с 45л 1 бадої за с ка о вк Зх 1 51 ож газі до ВО Її ща 1: ! : вхо з кг ще по-же : хек Я пк Я щі г нен ї НК т Мо хх хо ха: меш : Зх які ях ля зК-н : хх які хх мхі Малих ; леми : Шк ів пе : :
Фіг. 18,
рр ї 1... НИ е : ою ес Ен
Фіг. 1Е о . "Кт
Фіг. 2А рн шини шшшш її | . "й 16 нНнипвии,иин,иии,инии шнн,исшииишишшшши нн
Фіг. 2Е Дідро слннннтнннтнтнтянтння о па шк плн ШЕ иНИи
Фіг. З
ЖКекнякуєвссь ятки; «лнаЕктя : ї ! х І;
х 1. щ Ж 1 ї У : х 1 х 1 х т х 1 зах КУ : Ко В ї ОТ Кк : Щш Ж ці с хх ї п т : ВХ : що : : У а :
що . а о я Мессі ве - ще ее ее деобю вБас . Її | о о | й : КК у М ще ще СВ о. ее ВО ВЕ З ди Ж Мк І що А Же : ВІВ ПЕК ЩЕ КАЖЕ ОВ ВЕК ЕХ С я СІВ К Ще я; А я : оз що 1о000овекх пк ром : п те : ТУ : їх ЩЕ дІМХ У КНИМ о мдкдюмо КМУ хі мохом РК лі ЩУКИ
Фіг. 4 : ! Міутність (ОМИВ) ШЕ щЩИ ОО повоанв: РО : ОХ КОХ : я І 0 0 ' : Ве ї М ММК УХЯ СКК х х С : От і ХО ОО КО ОО ! : ї п В МОХ СО п ; : ; ЕОМ ОКО ЗМК С СЯ і : | в масі . Ка ма : ВН ані | ВИ Маю ем : !
Фіг. 5А
: П'язкість : ШК ї о. о : ож ! ; о п : в : оеое а о . . : РО ЩО фе ВВ т ВВ т В т Кс : АОС ту ПЕ пи ВИ: : «Віг. 56 І Результати для ВМС (зкздне з БЖ за в 1. п ко «В ві ЗІ . ща | . ОВ а . що КО . що о . С | о. Я Б . о о . щ і . . З : . С . 5 о . с ОО ії. 5 її. оо свая чим 000 вНЯяМЕІНМО 00 риЖаНЯМ о 000 зна Ммю : з Ї ї В дж хлурвемицій Я ки БЕ пахне 8ОЧе ЗВКНЕ
Фіг. е
: Ї рк. - ж а ока о ж шою Кр Результати ла ВМС чзане з Кр З : хх : 5 М БУ я : : с жНааМми М 00 вОаУКНЛеМ 0 нях мемМ 000 ВКМ. : щЕіхуч ІК. Ж ання Б кажи : зріс. й ! : Резулвевти зай олово віка свя ПО ! ! ТО ї ХУ : НИ ї ОХ сек : ТТ ож бе пн си, ссссссссосоооооооососсх ВК сис плели З пн : Он ВН ва сх . щ щ 000 що що 00 Щіктчна о т ї ВО о ОО м ОК КО ! Ж х ВО я ОКХ ПЕК о В Мода зюжнОС: ж : о. 5. с 5 о. Що ! : тег (2. КК ОН. Я ДК ВК 0 Я.О : нг о . о с : ОВО я КВ ОК АККВЯ ОО : : І ЗО НЕ ПИ І КО Во Я ПИ З КОНоХ : : ї МК ЗВ ОО З ЗАКО ПК ЗК ж ДЕС : о 6 . г с 6 ше 00000000 000
Фіг. ВА ї а, піди АКА ААААААААААААААААААА АКА АКА АХА АКА А АКА АКА АЛ АЛ, : ! ЕЙ 7 - к гу дра ! : 7 : - хи мини сек ази Ме з і : : і Везультати яая каснуєного зіеа згілно 3 ОО Я ї ї : : ї І : : ї ї І : : : : Її ! СОДА пе Ж кичатковий ОБО : : ше і ще шк : ож ; : со КАК ВВВВВ ЗЕ рвовь за жржві і ща - З ЕЕ. на ще Я вия : ї ї пок ще зрневея ще я . З... : : ШООЖА КО фон я декана ВВ я Я Ви ах актів З ї жом Ех ШЕ ЗОН ХО ЕНН ОК З ВЕ дя ЗХ ЕК ЗЖювЕНИХ ож ; МО В 5 . о рот ШЕ ОО КВВВЯ ОК ВВ ОККО НЯ зи снів З : о . ще ЗВ с ще Са КК . З я ЩЕ знЖНІО: : ї ВО З ОККО ОХ Я де ЗК В ! : ї Ж КО М ник СЕ Кос КК С 5 ПЕК : : ОО ЖИИ КОЖ ОА ЗК Кок Я М... : : до СО ПМК ВН СО Я СК З ОО ЗУ : ї Мем ТУ Зоо ХХ ПН нн Зх оо ох : ! ї ОО В ОО ОО ВО :
! о. о ВУ о ! о о о я ЗО о оо ще ЕН я Зо : : 1 МБ С МК ЕН КЕ ЕКО ПК ОХ : : що о 5 о. ща : : ду ре ше сне плн ОООННЯ поту З пу ВВЕ КЕКВ но, : як : : й Ї : - | : : мар МОЇ о шррееваєтивмо 0 важ Маємо щем : : ши в НЕ м нн в в В ПО : ОТ ї Я ї і : : ї ї 1 п: ї - і : ! : І ! З і 5 : 5 ! ,
Фіг. ВЕ : ЩО преететенттетнтятнннненнененне песен ї ї Без жувж Кк ою весно ная рек я Ав. : : юю юю юю юю юю юю юю юю юю юю юю юю юю юю юю юю юю юю юю юю юю : ї пох н : ! ; щеке
: . : ! : : ся сиковнх : : ШОК СЕТ З Дж спіааяк донох В ІНИЧА КЕ: ї Хе : : ких зВКкох В я хх : ше о. о Фк с жав о ії вав БО жах Ех : ОО ЗУ ще т ! ок ї ВО ВХ З КЕН У ЗОВ КЕ : ! ї ї Ве: С КЕ зо У М У... : ! оо ол ОХ ВОВК сю . зх ОХ У плодам еще я . се о шізтваої ї ВОК КЕ ПН : 5 М З КК Ух о ЗУ МЛ тва: : КЗ ї АЖ ХняК ЗАМККХ зро ПЕ до ХО оо : ! щ Ї Б Зх ВК зннех ОХ КНУ КЕ Кон Я : :
ж . с . о а . ОО ще вин: : ОВ я ХК З З Зо ОКХ ОКХ 7 : Її де х Вени о ооо ХХ КЕ Зони :
ши . о п. : Н що В Ми ЯК. нн В КК ЯКО Не А ОН ОЗ ще !
я . ОО ях ! 5 ПЕН ЗО КЕ З о ЕЕ що : ! : З І Во о о я о. СОЕЕЕХ С КЕ З : ї КЕ ПН ОКА Я г ВХ Кс У : ! шо З АК З о Зо МО о : ! Ї Зх ж : КЕ ПИ ККУ ДН ОН ЕЕ : ШО ОО п ях М : : о Її ї : ц садом : : : І : хо дв І хх де вхо ит : ніх мтр я : : ії вах ЗАМ Її вима ої ЕОМ. ! ОЕМ | : ' ' і : ; : ! ! ї ї ї ї - : З ! і ї ї і х : ой : г З :
Фіг. Б
! Результати для головного піка сідно 3 ОКР І : Її - : ВЕН подиху Ох пе ЗХ о. совок З нн і ГЕ : у 55 Ох Я і : 5 ї Ох КН, АКА ж ХНУ ОККО сх : їв її ОБ ВО ЕК КК : ОК НН рок 0 . . і 0: о. . вітвеше ж ї ВХ ї КЕ и МО і : -е ї : о ШК ЕКО КК КЕ МКС : ' о ВА БАМЯЛ-М Її вв М | вия 0 зак !
Фіг. зд : Я ПМ А А М ЕМ М ВАМ ОВ А М А ТА ЛЕМ А А В А ЛА и А ОА А ЕМ В М АТМ А А А А Ин ! ! с Везультати до кнслокного міка задане з КЕ ! ре Ок: : о . Ж і . . ДЕТИКНІ ковий: : ! ВО ПО : МО | КЕ : : ше . о. МО . о : : с ВН 0 виялянаям 0 Зак М віз !
Фіг. ЗЕ
І Жезультути для основного піка Спїдно з НК ІС ! щі о. с. Що незаткекнй В і с ско Со жах : ше і ОККО Зх я я шлю їж ! по КВ зо КЕ дані ? : ї мор КК З тт ЕК т вв НКИ НИ тт З : ОКО в ВВ шо Ме ше ЗО Ж БжлнЖнио: Я З Б Ух КВ о КЕ ЕН В ОХ З шу: о і 3 с о. а й : : І ОО З ОВО Ох КЕ я о ща : : Ї З ЕК ЗХ х КК КНОНиХ СХ ОО ПК ОКХ КК ЗХ: : Я ії ВО ООН ОО СОМ ВН СК ВВ :
о с. о її : ; 1 ВЕБ Є ОВ СЕ ще ОК : Її внаевиіа-м 0 БизаМмияМ 0 зпзямием о 0 ная жМО :
Фіг. ЗЕ шини кни ж : щі Мухветь НІ еко е В ев ! : У ПИ с пн : хм СХ о. : ше с : ї ММ : Ж і - сок о : ОК 45 долоня о о, нн с чн ша о. с ! : с с : ї Х ММ ХХ З о. : . с с : : пиЕКИНОЇ ! ІЧ МКЕННТХ ЕІ : ! Сзка ванн пренниах | Тековеннвам херецеркх : :
Фіг. 10д пе п вакість айв 0000 о пн папа ТТ КТК Т КТ ТТ ТТ ТТН ТТ ТТ ТТЛ Т КТ ТТ КТК ТТ ТТ КК КТ ТТ ТТН ТТ ТТ
: о. нн ан : Коли внеВН пом Вт о
Фнг. ОБ ши МЕ еювість БОКИ зокеононнне Ті семовУм : вувжниннй пенєе ії Фіг ЛА
В'язкість см
! . о І о. ! : че ї ЗХ о. с Сех : : ї Ох х п х с : : пла «дкннжх кжнжжккюккюжююютсююю с пн ЖК КК ЖК Ох ОККО Х ОХ скхжекккюкеюкюккюкккнккюю ва о. с : : с с :
: . ивовтя-ая Е виМОСтч г сВуерЕнвай принаие ! Кування зерегнерай ріг. МБ : | ВМС згідно з ЕХ ОВО ВЕ В здтумвє ше. ї б сивовну с вн ї к Дохревх Ах ОО нанні З КОХ ви до - прям : ШЕ с . с ка ве, і шої о. М о. ЕЕ ! Е ве о я о ШИ : : п п п о ' | Кв хною в ТУ | ТЛИ масках у фковвкянй ! ' | КІН НК ЛІКОТТХ подЕННВЕЖКХ ' Кувацнннй пеемитх ! !
Фіг. 12
: : ВМС згідно з КК її їв шо сен Б в. НУ : о. о . г КЕНЕ ЩЕопечазкий. Ро оня КО КН ОК ЕНН КК КЕН І і ЯКО СО о ВВ С п ТБ ПЕН полю : рожі КК КЕН ВО я . З М ЗВ ВК ше . о о о с г і шо о. о. ОО. шо Бепеюиа ВИС мн нн : ; . я п я Б ОО і ! . о о о що Е і ЩЕ. Ох Б о М 5 ШИ : : сяк хка Е Вам : ІМК : : : В хвою БА ; ЗК мех У фовюгиві : ЗО мем ух УпЕВИК : : : Хветуам кун ЕДЕМ. Е кер КН ен : фалохке кремарах :
Фіг. 13 Е Голови вік зими з ТК ВЕБ за ще зах ще : : ХХ СК - З Хо СХ . М з : : Зк: ХХ еннжкижккнкннк В хажкхххктккккно деискнжжккск : я В о . Ж : В В З МОБ С : в ВВ ОО ОЗ 5 5 ! хх А ЗОВ ОО З о : с Е шо В ОО Я В вах ВНІ ше ж в ож о с п ше її 7 7 о с Обов М. ВО Я 00 -б КК нннннннно - дея дев : а с с с о с лан У: о о | с с с с о о. с . / . о с о. ' : п : Ж хх МК... ОХ я... сс ЗИ КО З ......... Я : шо і ! : : ! і БВМЕНУМНИХ 1 ОБЕМОЄТКОЮ 0 ОВКЮБУМОЄ 0 ОВМЮЄТЬОХ с ОЕМЮВЯЮ : і : ад сте ХВ мубма о ЗА жалюов НАННЯ : : опо жонавіНУ МмемевіНН сао уже : : ї ро ЛЛЕї Х Ук МмиВЬ : У КИ і : : : Блурмр вний І СБК ННИ | ХНуИМЕЄВИННЙ І рек: Еіоавнна : : : МИЛЕ Х ; зЕреВАИЕ То щенровех : ін зухніЗиах : :
Фіг. 148
: вх в сх жо й жов ва в : Кнелотний шік о Стідне з ОКХ 1 : ВК ЗВНЕ: ВИЯВ: КИ ех : ок : КО ЗНУ. Вр Ки ох : поет т и МИ ХО» о. жи : ож : в 5. 5 Зх ДИКО : ЩЕ ї З й в ях З її ож : БО ня: КИТИ ПИ он ВІ МІ Кен І ж ше щ : З о В : ще З З Ох Ох МІХ зпхно : : 5 ще ща о ОО УЗ: : р ори нення ннннннсннннннннннн в ве Жідсихи : : МОБ КК ВОК с КК що : : с о с ! о с маш : : с с ! с с : : : ЩЕ о ХХ с з о с ї : ! с с ! ТЕ с с ! : зи сіння ХХ ОХ зн ВХ М.М Но нене МВ Зх я сени Кі ші у : : жУююв о: ОЄВВЮЮЮЧМ Її сбиМморукою 1 овьЕюткеї Її вве! : а НН ТО Вбжелях Роб межах : : зу жева НИ Може ТЗ о тжвамня 10 раки 0005 фа : ремовінунавннй : Сбтнаюєюваняйй З свиунхерлинянотн: Блек ої 0 БуачоннеЯ : Бреняряк ро ПРЯЖУ. 1000 щрожарег о рові о 10 Брик о! :
Фіг. 14Е : Ссневнив вік ізрідне НК . Ес :
ко . : Б ї кое ох око ї ОК о о с шко ВОНА ж: ЦЗ ес І за зав древня їж ї с о ях НОСОВ МО иа ДЕ : З ОКУ СХ У х Зоо: ХХ ВОККоХ У зх ї у я 0010 ше 0щ -щ т : ї : о о о. а о о : : : с с с с с : : : с с о с с ; Е : КЕ Коко ХХ Зв о Я ЗХ я СО Кс ї І ОМ 0 бЕМОЮтТи: о бМЕНЮУУЯВ Її ОЧЕМЕМКТИЧНЬ 0 ем. : . | ум хихкукц ЦИХ . кзитхнюв ЦЗ : Зб менх ї ема : Зршкя : Ї : зн ЕХ : ма БЕЗ І У Ваихне Е хек: : УВазкУжа ! ї : їО БМ Нкна вл: З смтУеевювимМі с сніденнанем Ї БалюнняйО З Баня ї ї : прентрах ї ПрИБжрАх : пІХоРаНК ї ВюЛаВЯЕ : нІхЗнниНу : ;
Фіг. 146
UAA202102683A 2018-10-29 2019-10-25 Препарат, що містить антитіло UA128258C2 (uk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP18203104 2018-10-29
PCT/EP2019/079137 WO2020089051A1 (en) 2018-10-29 2019-10-25 Antibody formulation

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA128258C2 true UA128258C2 (uk) 2024-05-22

Family

ID=64082948

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA202102683A UA128258C2 (uk) 2018-10-29 2019-10-25 Препарат, що містить антитіло

Country Status (19)

Country Link
US (2) US12503503B2 (uk)
EP (1) EP3873519A1 (uk)
JP (1) JP6920393B2 (uk)
KR (2) KR102590359B1 (uk)
CN (4) CN112930194B (uk)
AU (2) AU2019370601B2 (uk)
BR (1) BR112021007946A2 (uk)
CA (1) CA3114728C (uk)
CL (1) CL2021001037A1 (uk)
CR (1) CR20210200A (uk)
IL (1) IL281717B2 (uk)
MA (1) MA54052A (uk)
MX (1) MX2021004774A (uk)
MY (1) MY195550A (uk)
PE (1) PE20211865A1 (uk)
SG (1) SG11202103064YA (uk)
TW (1) TWI734233B (uk)
UA (1) UA128258C2 (uk)
WO (1) WO2020089051A1 (uk)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SG11202108627SA (en) 2019-02-18 2021-09-29 Lilly Co Eli Therapeutic antibody formulation
MA54325A (fr) 2019-06-05 2022-05-11 Regeneron Pharma Dispositifs et procédés pour l'administration précise de doses
PE20230986A1 (es) 2020-09-04 2023-06-21 Hoffmann La Roche Anticuerpo que se une a vegf-a y ang2, y metodos de uso
TW202221027A (zh) * 2020-09-17 2022-06-01 大陸商江蘇恆瑞醫藥股份有限公司 特異性結合ｖｅｇｆ和ａｎｇ－２的雙特異性抗原結合分子
CN115569191A (zh) * 2021-07-05 2023-01-06 山东新时代药业有限公司 一种重组人源化抗bcma/cd3双特异性抗体冻干制剂
CN115581765A (zh) * 2021-07-05 2023-01-10 山东新时代药业有限公司 一种重组人源化抗bcma/cd3双特异性抗体注射液
CA3250813A1 (en) * 2022-04-29 2023-11-02 Merck Sharp & Dohme Llc PHARMACEUTICAL FORMULATIONS OF AN ANTI-ILT4 ANTIBODY OR AN ANTIGEN-BINDING FRAGMENT OF IT AND METHODS OF USE
WO2024085606A1 (ko) * 2022-10-20 2024-04-25 (주)니오테스바이오 인간 안지오포이에틴-2에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 부위를 포함하는 이중특이적 항체 및 그 응용
USD1120314S1 (en) 2022-11-30 2026-03-24 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Dose delivery device
WO2025219504A1 (en) 2024-04-19 2025-10-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Treatment of ophthalmologic diseases

Family Cites Families (305)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4275149A (en) 1978-11-24 1981-06-23 Syva Company Macromolecular environment control in specific receptor assays
US4318980A (en) 1978-04-10 1982-03-09 Miles Laboratories, Inc. Heterogenous specific binding assay employing a cycling reactant as label
US4490473A (en) 1983-03-28 1984-12-25 Panab Labeled antibodies and methods
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4752601A (en) 1983-08-12 1988-06-21 Immunetech Pharmaceuticals Method of blocking immune complex binding to immunoglobulin FC receptors
US4737456A (en) 1985-05-09 1988-04-12 Syntex (U.S.A.) Inc. Reducing interference in ligand-receptor binding assays
US4676980A (en) 1985-09-23 1987-06-30 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Target specific cross-linked heteroantibodies
US5091178A (en) 1986-02-21 1992-02-25 Oncogen Tumor therapy with biologically active anti-tumor antibodies
US6548640B1 (en) 1986-03-27 2003-04-15 Btg International Limited Altered antibodies
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
US5985599A (en) 1986-05-29 1999-11-16 The Austin Research Institute FC receptor for immunoglobulin
EP0307434B2 (en) 1987-03-18 1998-07-29 Scotgen Biopharmaceuticals, Inc. Altered antibodies
US5204244A (en) 1987-10-27 1993-04-20 Oncogen Production of chimeric antibodies by homologous recombination
US5202238A (en) 1987-10-27 1993-04-13 Oncogen Production of chimeric antibodies by homologous recombination
US5770701A (en) 1987-10-30 1998-06-23 American Cyanamid Company Process for preparing targeted forms of methyltrithio antitumor agents
US5606040A (en) 1987-10-30 1997-02-25 American Cyanamid Company Antitumor and antibacterial substituted disulfide derivatives prepared from compounds possessing a methyl-trithio group
WO1989006692A1 (en) 1988-01-12 1989-07-27 Genentech, Inc. Method of treating tumor cells by inhibiting growth factor receptor function
US5576184A (en) 1988-09-06 1996-11-19 Xoma Corporation Production of chimeric mouse-human antibodies with specificity to human tumor antigens
ATE159982T1 (de) 1988-09-15 1997-11-15 Univ Columbia Antikörper mit modifiziertem kohlenhydratgehalt und verfahren zur herstellung und verwendung
ES2052027T5 (es) 1988-11-11 2005-04-16 Medical Research Council Clonacion de secuencias de dominio variable de inmunoglobulina.
US5047335A (en) 1988-12-21 1991-09-10 The Regents Of The University Of Calif. Process for controlling intracellular glycosylation of proteins
DE3920358A1 (de) 1989-06-22 1991-01-17 Behringwerke Ag Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung
GB8916400D0 (en) 1989-07-18 1989-09-06 Dynal As Modified igg3
CA2026147C (en) 1989-10-25 2006-02-07 Ravi J. Chari Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
US5208020A (en) 1989-10-25 1993-05-04 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
US5959177A (en) 1989-10-27 1999-09-28 The Scripps Research Institute Transgenic plants expressing assembled secretory antibodies
US5859205A (en) 1989-12-21 1999-01-12 Celltech Limited Humanised antibodies
US6150584A (en) 1990-01-12 2000-11-21 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US6075181A (en) 1990-01-12 2000-06-13 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5770429A (en) 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5364930A (en) 1990-10-16 1994-11-15 Northwestern University Synthetic C1q peptide fragments
US5419904A (en) 1990-11-05 1995-05-30 The Regents Of The University Of California Human B-lymphoblastoid cell line secreting anti-ganglioside antibody
ES2113940T3 (es) 1990-12-03 1998-05-16 Genentech Inc Metodo de enriquecimiento para variantes de proteinas con propiedades de union alteradas.
US5571894A (en) 1991-02-05 1996-11-05 Ciba-Geigy Corporation Recombinant antibodies specific for a growth factor receptor
US5278299A (en) 1991-03-18 1994-01-11 Scripps Clinic And Research Foundation Method and composition for synthesizing sialylated glycosyl compounds
US20030206899A1 (en) 1991-03-29 2003-11-06 Genentech, Inc. Vascular endothelial cell growth factor antagonists
US6582959B2 (en) 1991-03-29 2003-06-24 Genentech, Inc. Antibodies to vascular endothelial cell growth factor
ATE255131T1 (de) 1991-06-14 2003-12-15 Genentech Inc Humanisierter heregulin antikörper
WO1994004679A1 (en) 1991-06-14 1994-03-03 Genentech, Inc. Method for making humanized antibodies
US6136310A (en) 1991-07-25 2000-10-24 Idec Pharmaceuticals Corporation Recombinant anti-CD4 antibodies for human therapy
CA2116774C (en) 1991-09-19 2003-11-11 Paul J. Carter Expression in e. coli antibody fragments having at least a cysteine present as a free thiol. use for the production of bifunctional f(ab') 2 antibodies
FI941572L (fi) 1991-10-07 1994-05-27 Oncologix Inc Anti-erbB-2-monoklonaalisten vasta-aineiden yhdistelmä ja käyttömenetelmä
WO1993010260A1 (en) 1991-11-21 1993-05-27 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Controlling degradation of glycoprotein oligosaccharides by extracellular glycosisases
GB9206422D0 (en) 1992-03-24 1992-05-06 Bolt Sarah L Antibody preparation
CA2118508A1 (en) 1992-04-24 1993-11-11 Elizabeth S. Ward Recombinant production of immunoglobulin-like domains in prokaryotic cells
DK1975181T3 (da) 1992-10-28 2011-06-06 Genentech Inc Anvendelse af vaskulære endothelcelle-vækstfaktor-antagonister
US5736137A (en) 1992-11-13 1998-04-07 Idec Pharmaceuticals Corporation Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma
US5635483A (en) 1992-12-03 1997-06-03 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Tumor inhibiting tetrapeptide bearing modified phenethyl amides
US5780588A (en) 1993-01-26 1998-07-14 Arizona Board Of Regents Elucidation and synthesis of selected pentapeptides
US5412468A (en) 1993-03-09 1995-05-02 The Perkin-Elmer Corporation Grouping of spectral bands for data acquisition in a spectrophotometer
US6491916B1 (en) 1994-06-01 2002-12-10 Tolerance Therapeutics, Inc. Methods and materials for modulation of the immunosuppresive activity and toxicity of monoclonal antibodies
US5885573A (en) 1993-06-01 1999-03-23 Arch Development Corporation Methods and materials for modulation of the immunosuppressive activity and toxicity of monoclonal antibodies
US6180377B1 (en) 1993-06-16 2001-01-30 Celltech Therapeutics Limited Humanized antibodies
US5595721A (en) 1993-09-16 1997-01-21 Coulter Pharmaceutical, Inc. Radioimmunotherapy of lymphoma using anti-CD20
US5773001A (en) 1994-06-03 1998-06-30 American Cyanamid Company Conjugates of methyltrithio antitumor agents and intermediates for their synthesis
US5814464A (en) 1994-10-07 1998-09-29 Regeneron Pharma Nucleic acids encoding TIE-2 ligand-2
US5789199A (en) 1994-11-03 1998-08-04 Genentech, Inc. Process for bacterial production of polypeptides
US6485726B1 (en) 1995-01-17 2002-11-26 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Receptor specific transepithelial transport of therapeutics
US6030613A (en) 1995-01-17 2000-02-29 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Receptor specific transepithelial transport of therapeutics
US6086875A (en) 1995-01-17 2000-07-11 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Receptor specific transepithelial transport of immunogens
US5731168A (en) 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
US5840523A (en) 1995-03-01 1998-11-24 Genetech, Inc. Methods and compositions for secretion of heterologous polypeptides
US5747035A (en) 1995-04-14 1998-05-05 Genentech, Inc. Polypeptides with increased half-life for use in treating disorders involving the LFA-1 receptor
US5869046A (en) 1995-04-14 1999-02-09 Genentech, Inc. Altered polypeptides with increased half-life
US5714586A (en) 1995-06-07 1998-02-03 American Cyanamid Company Methods for the preparation of monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates
US5712374A (en) 1995-06-07 1998-01-27 American Cyanamid Company Method for the preparation of substantiallly monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates
US6267958B1 (en) 1995-07-27 2001-07-31 Genentech, Inc. Protein formulation
US5730977A (en) 1995-08-21 1998-03-24 Mitsui Toatsu Chemicals, Inc. Anti-VEGF human monoclonal antibody
AU690474B2 (en) 1995-09-11 1998-04-23 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Antibody againts alpha-chain of human interleukin 5 receptor
ATE279947T1 (de) 1996-03-18 2004-11-15 Univ Texas Immunglobulinähnliche domäne mit erhöhten halbwertszeiten
US5834597A (en) 1996-05-20 1998-11-10 Protein Design Labs, Inc. Mutated nonactivating IgG2 domains and anti CD3 antibodies incorporating the same
EP0938506B1 (en) 1996-07-16 2003-11-05 Plückthun, Andreas, Prof. Dr. Immunoglobulin superfamily domains and fragments with increased solubility
US6277375B1 (en) 1997-03-03 2001-08-21 Board Of Regents, The University Of Texas System Immunoglobulin-like domains with increased half-lives
US6323321B1 (en) 1997-03-05 2001-11-27 Eberhard-Karls-Universitat Tubingen Universitatsklinikum Antibody 97A6
IL132240A0 (en) 1997-04-07 2001-03-19 Genentech Inc Anti-vegf antibodies
US20020032315A1 (en) 1997-08-06 2002-03-14 Manuel Baca Anti-vegf antibodies
DK0979281T3 (da) 1997-05-02 2005-11-21 Genentech Inc Fremgangsmåde til fremstilling af multispecifikke antistoffer med heteromultimere og fælles bestanddele
US6171586B1 (en) 1997-06-13 2001-01-09 Genentech, Inc. Antibody formulation
US20040191256A1 (en) 1997-06-24 2004-09-30 Genentech, Inc. Methods and compositions for galactosylated glycoproteins
US6172213B1 (en) 1997-07-02 2001-01-09 Genentech, Inc. Anti-IgE antibodies and method of improving polypeptides
US6040498A (en) 1998-08-11 2000-03-21 North Caroline State University Genetically engineered duckweed
US6610833B1 (en) 1997-11-24 2003-08-26 The Institute For Human Genetics And Biochemistry Monoclonal human natural antibodies
ES2375931T3 (es) 1997-12-05 2012-03-07 The Scripps Research Institute Humanización de anticuerpo murino.
PT1049787E (pt) 1998-01-23 2005-04-29 Vlaams Interuniv Inst Biotech Derivados de anticorpos multipropositos
IL138608A0 (en) 1998-04-02 2001-10-31 Genentech Inc Antibody variants and fragments thereof
US6528624B1 (en) 1998-04-02 2003-03-04 Genentech, Inc. Polypeptide variants
US6242195B1 (en) 1998-04-02 2001-06-05 Genentech, Inc. Methods for determining binding of an analyte to a receptor
US6194551B1 (en) 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
AU3657899A (en) 1998-04-20 1999-11-08 James E. Bailey Glycosylation engineering of antibodies for improving antibody-dependent cellular cytotoxicity
DE19819846B4 (de) 1998-05-05 2016-11-24 Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts Multivalente Antikörper-Konstrukte
EP1105427A2 (en) 1998-08-17 2001-06-13 Abgenix, Inc. Generation of modified molecules with increased serum half-lives
WO2000035956A1 (fr) 1998-12-16 2000-06-22 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Anticorps monoclonal anti-vegf humain
US7183387B1 (en) 1999-01-15 2007-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
US6737056B1 (en) 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
KR100940380B1 (ko) 1999-01-15 2010-02-02 제넨테크, 인크. 효과기 기능이 변화된 폴리펩티드 변이체
US6676927B1 (en) 1999-01-20 2004-01-13 The Rockefeller University Animal model and methods for its use in the selection of cytotoxic antibodies
US6897044B1 (en) 1999-01-28 2005-05-24 Biogen Idec, Inc. Production of tetravalent antibodies
WO2000053634A1 (en) 1999-03-10 2000-09-14 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Single-stranded fv inducing apoptosis
PT1176195E (pt) 1999-04-09 2013-07-18 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd Processo para controlar a actividade de uma molécula funcional sob o ponto de vista imunológico
US6703020B1 (en) 1999-04-28 2004-03-09 Board Of Regents, The University Of Texas System Antibody conjugate methods for selectively inhibiting VEGF
ECSP992970A (es) 1999-06-01 2000-01-27 Secuencia del gen relacionado con angiopoyetino scarface 3
US6946129B1 (en) 1999-06-08 2005-09-20 Seattle Genetics, Inc. Recombinant anti-CD40 antibody and uses thereof
PT1222292E (pt) 1999-10-04 2005-11-30 Medicago Inc Metodo para regulacao da transcricao de genes exogenos na presenca de azoto
US7125978B1 (en) 1999-10-04 2006-10-24 Medicago Inc. Promoter for regulating expression of foreign genes
BR0015224A (pt) 1999-10-29 2002-07-09 Genentech Inc Anticorpo anti-antìgeno de célula estaminal prostática (psca) isolado, anticorpo monoclonal anti-psca, ácido nucleico isolado, vetor de expressão, célula, célula hospedeira, método de produção de anticorpo, composição método in vitro para matar uma célula cancerosa que expresse psca, uso de uma anticorpo monoclonal anti-psca e artigo industrializado
EP1240319A1 (en) 1999-12-15 2002-09-18 Genentech, Inc. Shotgun scanning, a combinatorial method for mapping functional protein epitopes
ES2274823T3 (es) 1999-12-29 2007-06-01 Immunogen, Inc. Agentes cototoxicos que comprenden doxorrubicinas y daunorrubicinas y su utilizacion terapeutica.
JP5179689B2 (ja) 2000-02-11 2013-04-10 メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 抗体ベース融合タンパク質の循環系内半減期の増強
WO2001064754A1 (en) 2000-03-03 2001-09-07 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Gene recombinant antibody and its fragment
US7449443B2 (en) 2000-03-23 2008-11-11 California Institute Of Technology Method for stabilization of proteins using non-natural amino acids
AU2001247616B2 (en) 2000-04-11 2007-06-14 Genentech, Inc. Multivalent antibodies and uses therefor
FR2807767B1 (fr) 2000-04-12 2005-01-14 Lab Francais Du Fractionnement Anticorps monoclonaux anti-d
CA2399940A1 (en) 2000-04-13 2001-10-25 The Rockefeller University Enhancement of antibody-mediated immune responses
US6586207B2 (en) 2000-05-26 2003-07-01 California Institute Of Technology Overexpression of aminoacyl-tRNA synthetases for efficient production of engineered proteins containing amino acid analogues
US20060029604A1 (en) 2000-06-28 2006-02-09 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a GlcNAc2Man3GlcNAc2 glycoform
US20060034828A1 (en) 2000-06-28 2006-02-16 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a GlcNAcMAN5GLCNAC2 glycoform
US20060024304A1 (en) 2000-06-28 2006-02-02 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a Man5GlcNAc2 glycoform
US7598055B2 (en) 2000-06-28 2009-10-06 Glycofi, Inc. N-acetylglucosaminyltransferase III expression in lower eukaryotes
US20060034830A1 (en) 2000-06-28 2006-02-16 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a GalGlcNAcMan5GLcNAc2 glycoform
US6946292B2 (en) 2000-10-06 2005-09-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity
DK2314686T4 (da) 2000-10-06 2023-08-21 Kyowa Kirin Co Ltd Celler, der danner antistofsammensætninger
US6596541B2 (en) 2000-10-31 2003-07-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modifying eukaryotic cells
IL155977A0 (en) 2000-11-30 2003-12-23 Medarex Inc Transgenic transchromosomal rodents for making human antibodies
JP4336498B2 (ja) 2000-12-12 2009-09-30 メディミューン，エルエルシー 延長した半減期を有する分子ならびにその組成物および用途
US7754208B2 (en) 2001-01-17 2010-07-13 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
AU2002250293B2 (en) 2001-03-09 2007-10-11 Arnason, Barry G. Mr Polymeric immunoglobulin fusion proteins that target low-affinity FCGammaReceptors
ES2364816T3 (es) 2001-04-02 2011-09-14 Genentech, Inc. Terapia de combinación.
UA83791C2 (uk) 2001-04-13 2008-08-26 Байоджен Айдек Ма Инк. Антитіло проти vla-1, фармацевтична композиція, що його містить, та їх застосування для лікування індивідуума з імунологічним розладом, опосередкованим vla-1
US7667004B2 (en) 2001-04-17 2010-02-23 Abmaxis, Inc. Humanized antibodies against vascular endothelial growth factor
GB0118662D0 (en) 2001-07-31 2001-09-19 Univ Southampton Binding agents
NZ581474A (en) 2001-08-03 2011-04-29 Glycart Biotechnology Ag Antibody glycosylation variants having increased antibody-dependent cellular cytotoxicity
WO2003020906A2 (en) 2001-08-31 2003-03-13 Abmaxis, Inc. Multivalent protein conjugate with multiple ligand-binding domains of receptors
ES2276735T3 (es) 2001-09-14 2007-07-01 Affimed Therapeutics Ag Anticuerpos fv multimericos de cadena sencilla en tandem.
US7521053B2 (en) 2001-10-11 2009-04-21 Amgen Inc. Angiopoietin-2 specific binding agents
US7138370B2 (en) 2001-10-11 2006-11-21 Amgen Inc. Specific binding agents of human angiopoietin-2
US7658924B2 (en) 2001-10-11 2010-02-09 Amgen Inc. Angiopoietin-2 specific binding agents
KR100988949B1 (ko) 2001-10-25 2010-10-20 제넨테크, 인크. 당단백질 조성물
US20040093621A1 (en) 2001-12-25 2004-05-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd Antibody composition which specifically binds to CD20
US20060024292A1 (en) 2001-12-27 2006-02-02 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a Gal2GlcNAc2Man3GlcNAc2 glycoform
US20060034829A1 (en) 2001-12-27 2006-02-16 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a MAN3GLCNAC2 glycoform
US20040002587A1 (en) 2002-02-20 2004-01-01 Watkins Jeffry D. Fc region variants
WO2003073238A2 (en) 2002-02-27 2003-09-04 California Institute Of Technology Computational method for designing enzymes for incorporation of amino acid analogs into proteins
US8188231B2 (en) 2002-09-27 2012-05-29 Xencor, Inc. Optimized FC variants
US20080152649A1 (en) 2002-03-01 2008-06-26 Xencor, Inc. Optimized igf-1r antibodies and methods of using the same
AU2003217912A1 (en) 2002-03-01 2003-09-16 Xencor Antibody optimization
US7662925B2 (en) 2002-03-01 2010-02-16 Xencor, Inc. Optimized Fc variants and methods for their generation
US7317091B2 (en) 2002-03-01 2008-01-08 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
US20080206242A1 (en) 2002-03-01 2008-08-28 Xencor, Inc. Method of treatment of th2-mediated conditions using optimized anti-cd30 antibodies
US20040132101A1 (en) 2002-09-27 2004-07-08 Xencor Optimized Fc variants and methods for their generation
US20070148171A1 (en) 2002-09-27 2007-06-28 Xencor, Inc. Optimized anti-CD30 antibodies
US20040259150A1 (en) 2002-04-09 2004-12-23 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Method of enhancing of binding activity of antibody composition to Fcgamma receptor IIIa
EP1502603A4 (en) 2002-04-09 2006-12-13 Kyowa Hakko Kogyo Kk AN ANTIBODY COMPOSITION CONTAINING MEDICAMENT FOR PATIENTS WITH Fc gamma RIIIa POLYMORPHISM
US7081443B2 (en) 2002-05-21 2006-07-25 Korea Advanced Institutes Of Science And Technology (Kaist) Chimeric comp-ang1 molecule
CA2488441C (en) 2002-06-03 2015-01-27 Genentech, Inc. Synthetic antibody phage libraries
JP2006513139A (ja) 2002-07-03 2006-04-20 ザ・ブリガーム・アンド・ウーメンズ・ホスピタル・インコーポレーテッド 治療薬の全身性送達のための中央部気道投与
EP1572091A4 (en) 2002-07-09 2008-03-05 Genentech Inc COMPOSITIONS AND METHODS FOR TUMOR DIAGNOSIS AND TREATMENT
US20050043516A1 (en) 2002-07-25 2005-02-24 Genentech, Inc. TACI antibodies and uses thereof
WO2004029207A2 (en) 2002-09-27 2004-04-08 Xencor Inc. Optimized fc variants and methods for their generation
US20060235208A1 (en) 2002-09-27 2006-10-19 Xencor, Inc. Fc variants with optimized properties
WO2004035752A2 (en) 2002-10-15 2004-04-29 Protein Design Labs, Inc. ALTERATION OF FcRn BINDING AFFINITIES OR SERUM HALF-LIVES OF ANTIBODIES BY MUTAGENESIS
US7361740B2 (en) 2002-10-15 2008-04-22 Pdl Biopharma, Inc. Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis
US7365168B2 (en) 2002-10-15 2008-04-29 Pdl Biopharma, Inc. Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis
US7217797B2 (en) 2002-10-15 2007-05-15 Pdl Biopharma, Inc. Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis
EP1944320A1 (en) 2002-12-16 2008-07-16 Genentech, Inc. Immunoglobulin variants and uses thereof
US7608260B2 (en) 2003-01-06 2009-10-27 Medimmune, Llc Stabilized immunoglobulins
US7960512B2 (en) 2003-01-09 2011-06-14 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
EP2368578A1 (en) 2003-01-09 2011-09-28 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
US20050079574A1 (en) 2003-01-16 2005-04-14 Genentech, Inc. Synthetic antibody phage libraries
US8084582B2 (en) 2003-03-03 2011-12-27 Xencor, Inc. Optimized anti-CD20 monoclonal antibodies having Fc variants
US20090010920A1 (en) 2003-03-03 2009-01-08 Xencor, Inc. Fc Variants Having Decreased Affinity for FcyRIIb
US8388955B2 (en) 2003-03-03 2013-03-05 Xencor, Inc. Fc variants
US20060104968A1 (en) 2003-03-05 2006-05-18 Halozyme, Inc. Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminogly ycanases
US7871607B2 (en) 2003-03-05 2011-01-18 Halozyme, Inc. Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminoglycanases
NZ621449A (en) 2003-05-30 2015-07-31 Genentech Inc Treatment with anti-vegf antibodies
WO2004106375A1 (en) 2003-05-30 2004-12-09 Merus Biopharmaceuticals B.V. I.O. Fab library for the preparation of anti vegf and anti rabies virus fabs
JP4629047B2 (ja) 2003-06-12 2011-02-09 イーライ リリー アンド カンパニー Ｇｌｐ−１アナログ複合タンパク質
CN100518817C (zh) 2003-07-04 2009-07-29 南加州大学 恢复造血功能的治疗剂和组合物及其用途
WO2005044853A2 (en) 2003-11-01 2005-05-19 Genentech, Inc. Anti-vegf antibodies
US20050106667A1 (en) 2003-08-01 2005-05-19 Genentech, Inc Binding polypeptides with restricted diversity sequences
US7758859B2 (en) 2003-08-01 2010-07-20 Genentech, Inc. Anti-VEGF antibodies
CN1871259A (zh) 2003-08-22 2006-11-29 比奥根艾迪克Ma公司 具有改变的效应物功能的经改进的抗体和制备它的方法
AU2004273791A1 (en) 2003-09-05 2005-03-31 Genentech, Inc. Antibodies with altered effector functions
SG176455A1 (en) 2003-10-09 2011-12-29 Ambrx Inc Polymer derivatives
EP1673395A1 (en) 2003-10-15 2006-06-28 PDL BioPharma, Inc. Alteration of fc-fusion protein serum half-lives by mutagenesis of positions 250, 314 and/or 428 of the heavy chain constant region of ig
GB0324368D0 (en) 2003-10-17 2003-11-19 Univ Cambridge Tech Polypeptides including modified constant regions
PT1692182E (pt) 2003-11-05 2010-05-13 Roche Glycart Ag Anticorpos de cd20 com uma afinidade de ligação acrescida ao receptor fc e uma função efectora acrescida
EP3434275A1 (en) 2003-11-06 2019-01-30 Seattle Genetics, Inc. Assay for cancer cells based on the use of auristatin conjugates with antibodies
WO2005063815A2 (en) 2003-11-12 2005-07-14 Biogen Idec Ma Inc. Fcϝ receptor-binding polypeptide variants and methods related thereto
EP2385069A3 (en) 2003-11-12 2012-05-30 Biogen Idec MA Inc. Neonatal Fc rReceptor (FcRn)- binding polypeptide variants, dimeric Fc binding proteins and methods related thereto
EP1701979A2 (en) 2003-12-03 2006-09-20 Xencor, Inc. Optimized antibodies that target the epidermal growth factor receptor
AU2004309347B2 (en) 2003-12-19 2010-03-04 Genentech, Inc. Monovalent antibody fragments useful as therapeutics
US20050136051A1 (en) 2003-12-22 2005-06-23 Bernard Scallon Methods for generating multimeric molecules
WO2005077981A2 (en) 2003-12-22 2005-08-25 Xencor, Inc. Fc POLYPEPTIDES WITH NOVEL Fc LIGAND BINDING SITES
AU2005205533B2 (en) 2004-01-07 2012-03-22 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. M-CSF-specific monoclonal antibody and uses thereof
US20060018911A1 (en) 2004-01-12 2006-01-26 Dana Ault-Riche Design of therapeutics and therapeutics
AU2005206277B2 (en) 2004-01-22 2011-06-23 Merck Patent Gmbh Anti-cancer antibodies with reduced complement fixation
CN103755800B (zh) 2004-02-02 2016-02-24 Ambrx公司 经修饰的人类生长激素多肽与其用途
WO2005092925A2 (en) 2004-03-24 2005-10-06 Xencor, Inc. Immunoglobulin variants outside the fc region
CA2561686C (en) 2004-03-31 2014-12-02 Genentech, Inc. Humanized anti-tgf-beta antibodies
US7785903B2 (en) 2004-04-09 2010-08-31 Genentech, Inc. Variable domain library and uses
WO2005123780A2 (en) 2004-04-09 2005-12-29 Protein Design Labs, Inc. Alteration of fcrn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis
PT1737891E (pt) 2004-04-13 2013-04-16 Hoffmann La Roche Anticorpos anti p-selectina
US20050276806A1 (en) 2004-06-15 2005-12-15 Advanced Biotherapy, Inc. Treatment of autism
US20060009360A1 (en) 2004-06-25 2006-01-12 Robert Pifer New adjuvant composition
EP3342782B1 (en) 2004-07-15 2022-08-17 Xencor, Inc. Optimized fc variants
WO2006020258A2 (en) 2004-07-17 2006-02-23 Imclone Systems Incorporated Novel tetravalent bispecific antibody
EA012464B1 (ru) 2004-08-04 2009-10-30 Эпплайд Молекьюлар Эволюшн, Инк. Антитело против cd20 и его применение
WO2006031370A2 (en) 2004-08-19 2006-03-23 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
US20060074225A1 (en) 2004-09-14 2006-04-06 Xencor, Inc. Monomeric immunoglobulin Fc domains
TWI309240B (en) 2004-09-17 2009-05-01 Hoffmann La Roche Anti-ox40l antibodies
ES2579805T3 (es) 2004-09-23 2016-08-16 Genentech, Inc. Anticuerpos y conjugados modificados por ingeniería genética con cisteína
US7442778B2 (en) 2004-09-24 2008-10-28 Amgen Inc. Modified Fc molecules
JO3000B1 (ar) 2004-10-20 2016-09-05 Genentech Inc مركبات أجسام مضادة .
WO2006047350A2 (en) 2004-10-21 2006-05-04 Xencor, Inc. IgG IMMUNOGLOBULIN VARIANTS WITH OPTIMIZED EFFECTOR FUNCTION
WO2007024249A2 (en) 2004-11-10 2007-03-01 Macrogenics, Inc. Engineering fc antibody regions to confer effector function
BRPI0517837A (pt) 2004-11-12 2008-10-21 Xencor Inc variantes fc com ligação alterada a fcrn
US20070135620A1 (en) 2004-11-12 2007-06-14 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US8367805B2 (en) 2004-11-12 2013-02-05 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US8802820B2 (en) 2004-11-12 2014-08-12 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
CN101098890B (zh) 2004-11-12 2012-07-18 赞科股份有限公司 对FcRn的结合被改变的Fc变体
ES2371083T3 (es) 2004-12-21 2011-12-27 Medimmune Limited Anticuerpos dirigidos contra la angiopoyetina-2 y usos de los mismos.
CA2595169A1 (en) 2005-01-12 2006-07-20 Xencor, Inc. Antibodies and fc fusion proteins with altered immunogenicity
DOP2006000029A (es) 2005-02-07 2006-08-15 Genentech Inc Antibody variants and uses thereof. (variantes de un anticuerpo y usos de las mismas)
US20060206947A1 (en) 2005-02-28 2006-09-14 Scallon Bernard J Heterodimeric protein binding compositions
CN101198698B (zh) 2005-03-31 2014-03-19 中外制药株式会社 通过调节多肽缔合制备多肽的方法
US8008443B2 (en) 2005-04-26 2011-08-30 Medimmune, Llc Modulation of antibody effector function by hinge domain engineering
EP2004695A2 (en) 2005-07-08 2008-12-24 Xencor, Inc. Optimized anti-ep-cam antibodies
EP2377554A1 (en) 2005-07-22 2011-10-19 Amgen, Inc Concentrated protein lyophilates, methods and uses
US7923538B2 (en) 2005-07-22 2011-04-12 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd Recombinant antibody composition
JP5364870B2 (ja) 2005-08-19 2013-12-11 アッヴィ・インコーポレイテッド 二重可変ドメイン免疫グロブリン及びその使用
WO2007033216A2 (en) 2005-09-12 2007-03-22 Beth Israel Deaconess Medical Center Methods and compositions for the treatment and diagnosis of diseases characterized by vascular leak, hypotension, or a procoagulant state
WO2007044887A2 (en) 2005-10-11 2007-04-19 Transtarget, Inc. Method for producing a population of homogenous tetravalent bispecific antibodies
EP1957531B1 (en) 2005-11-07 2016-04-13 Genentech, Inc. Binding polypeptides with diversified and consensus vh/vl hypervariable sequences
WO2007064919A2 (en) 2005-12-02 2007-06-07 Genentech, Inc. Binding polypeptides with restricted diversity sequences
EP2518083A3 (en) 2005-12-15 2012-12-05 Medimmune Limited Combination of angiopoietin-2 antagonist and of VEGF-A, KDR and/or FLTL antagonist for treating cancer
AR059066A1 (es) 2006-01-27 2008-03-12 Amgen Inc Combinaciones del inhibidor de la angiopoyetina -2 (ang2) y el inhibidor del factor de crecimiento endotelial vascular (vegf)
US7678373B2 (en) 2006-02-10 2010-03-16 Genentech, Inc. Anti-FGF19 antibodies and methods using same
CN103073639A (zh) 2006-03-17 2013-05-01 比奥根艾迪克Ma公司 稳定的多肽组合物
TW200812615A (en) 2006-03-22 2008-03-16 Hoffmann La Roche Tumor therapy with an antibody for vascular endothelial growth factor and an antibody for human epithelial growth factor receptor type 2
WO2007110205A2 (en) 2006-03-24 2007-10-04 Merck Patent Gmbh Engineered heterodimeric protein domains
CA2651567A1 (en) 2006-05-09 2007-11-22 Genentech, Inc. Binding polypeptides with optimized scaffolds
WO2007147901A1 (en) 2006-06-22 2007-12-27 Novo Nordisk A/S Production of bispecific antibodies
DK2059533T3 (da) 2006-08-30 2013-02-25 Genentech Inc Multispecifikke antistoffer
WO2008073300A2 (en) 2006-12-08 2008-06-19 Lexicon Pharmaceuticals, Inc. Monoclonal antibodies against angptl3
MY183404A (en) 2006-12-19 2021-02-18 Genentech Inc Vegf-specific antagonists for adjuvant and neoadjuvant therapy and the treatment of early stage tumors
CN101679966B (zh) 2007-01-24 2014-03-12 协和发酵麒麟株式会社 具有增强的效应子活性的遗传重组抗体组合物
US10259860B2 (en) 2007-02-27 2019-04-16 Aprogen Inc. Fusion proteins binding to VEGF and angiopoietin
NZ580530A (en) 2007-06-06 2012-04-27 Domantis Ltd Anti vegf polypeptides, antibody variable domains and antagonists
AU2008259590A1 (en) 2007-06-06 2008-12-11 Domantis Limited Methods for selecting protease resistant polypeptides
WO2009006520A1 (en) 2007-07-03 2009-01-08 Medimmune, Llc Hinge domain engineering
MX2010001637A (es) 2007-08-17 2010-03-15 Hoffmann La Roche Mediacion de citotoxicidad de celulas que evidencian la expresion superficial de cd9.
JP2010538012A (ja) 2007-08-28 2010-12-09 バイオジェン アイデック マサチューセッツ インコーポレイテッド Ｉｇｆ−１ｒの複数のエピトープに結合する組成物
EP2196541B1 (en) 2007-09-28 2012-11-07 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anti-glypican-3 antibody having improved kinetics in plasma
CN105315323A (zh) 2007-10-30 2016-02-10 健泰科生物技术公司 通过阳离子交换层析进行的抗体纯化
AU2008345242B2 (en) 2007-10-31 2014-02-27 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
KR20210049186A (ko) 2007-11-30 2021-05-04 애브비 바이오테크놀로지 리미티드 단백질 제형 및 이의 제조방법
TWI580694B (zh) 2007-11-30 2017-05-01 建南德克公司 抗-ｖｅｇｆ抗體
EP2222709B1 (en) 2007-11-30 2016-11-23 Glaxo Group Limited Antigen-binding constructs
US8227577B2 (en) 2007-12-21 2012-07-24 Hoffman-La Roche Inc. Bivalent, bispecific antibodies
US8242247B2 (en) 2007-12-21 2012-08-14 Hoffmann-La Roche Inc. Bivalent, bispecific antibodies
US9266967B2 (en) 2007-12-21 2016-02-23 Hoffmann-La Roche, Inc. Bivalent, bispecific antibodies
US20090162359A1 (en) 2007-12-21 2009-06-25 Christian Klein Bivalent, bispecific antibodies
EP3663318A1 (en) 2008-01-07 2020-06-10 Amgen Inc. Method for making antibody fc-heterodimeric molecules using electrostatic steering effects
US8507656B2 (en) 2008-01-28 2013-08-13 Medimmune Limited Stabilized angiopoietin-2 antibodies and uses thereof
JO2913B1 (en) 2008-02-20 2015-09-15 امجين إنك, Antibodies directed towards angiopoietin-1 and angiopoietin-2 proteins and their uses
US8268314B2 (en) 2008-10-08 2012-09-18 Hoffmann-La Roche Inc. Bispecific anti-VEGF/anti-ANG-2 antibodies
KR101834999B1 (ko) 2008-10-14 2018-03-06 제넨테크, 인크. 이뮤노글로불린 변이체 및 그의 용도
US8133979B2 (en) 2008-12-16 2012-03-13 Hoffmann-La Roche Inc. Antibodies against human angiopoietin 2
AU2010245011B2 (en) 2009-04-27 2015-09-03 Oncomed Pharmaceuticals, Inc. Method for making heteromultimeric molecules
SI2519543T1 (sl) 2009-12-29 2016-08-31 Emergent Product Development Seattle, Llc Beljakovine, ki se vežejo s heterodimeri in njihova uporaba
AR080794A1 (es) 2010-03-26 2012-05-09 Hoffmann La Roche Anticuerpos bivalentes biespecificos anti- vegf/ anti-ang-2
TW201138821A (en) 2010-03-26 2011-11-16 Roche Glycart Ag Bispecific antibodies
PH12012501991A1 (en) 2010-04-07 2017-07-26 Abbvie Inc Tnf-alpha binding proteins
EP2569337A1 (en) 2010-05-14 2013-03-20 Rinat Neuroscience Corp. Heterodimeric proteins and methods for producing and purifying them
CN102191209A (zh) 2010-08-26 2011-09-21 苏州大学 VEGF165和Ang-1双基因共表达载体及其应用
PL2635607T3 (pl) 2010-11-05 2020-05-18 Zymeworks Inc. Projekt stabilnego przeciwciała heterodimerowego z mutacjami w domenie FC
CN103533950A (zh) 2011-01-13 2014-01-22 瑞泽恩制药公司 Vegf拮抗剂在治疗血管生成眼病中的用途
ES2692268T5 (en) 2011-03-29 2025-02-26 Roche Glycart Ag Antibody fc variants
US9527925B2 (en) 2011-04-01 2016-12-27 Boehringer Ingelheim International Gmbh Bispecific binding molecules binding to VEGF and ANG2
CN102250247B (zh) 2011-06-15 2013-06-19 常州亚当生物技术有限公司 一种抗vegf/ang2双特异性抗体及其应用
CN102250248A (zh) 2011-06-15 2011-11-23 常州亚当生物技术有限公司 抗vegf/ang2双特异性抗体及其应用
AU2012323849B2 (en) 2011-10-13 2017-04-20 EyePoint, Inc. Treatment of ocular disease
PT2794905T (pt) 2011-12-20 2020-06-30 Medimmune Llc Polipéptidos modificados para estrutura de anticorpos bispecíficos
DK2838918T3 (da) 2012-04-20 2019-08-12 Merus Nv Fremgangsmåder og midler til fremstilling af heterodimere ig-lignende molekyler
LT3495387T (lt) 2012-07-13 2021-11-25 Roche Glycart Ag Bispecifiniai anti-vegf / anti-ang-2 antikūnai ir jų panaudojimas akių kraujagyslių ligoms gydyti
ES2881671T3 (es) 2012-08-21 2021-11-30 Opko Pharmaceuticals Llc Formulaciones de liposomas
EP2992010B1 (en) 2013-04-29 2021-03-24 F.Hoffmann-La Roche Ag Fc-receptor binding modified asymmetric antibodies and methods of use
SG10201800492PA (en) 2013-04-29 2018-03-28 Hoffmann La Roche Human fcrn-binding modified antibodies and methods of use
KR20150063728A (ko) 2013-12-02 2015-06-10 삼성전자주식회사 항 VEGF-C/항 Ang2 이중 특이 항체
BR112016014969A2 (pt) * 2014-01-15 2018-01-23 Hoffmann La Roche polipeptídeo, formulação farmacêutica e uso de um polipeptídeo
TWI738632B (zh) * 2014-11-07 2021-09-11 瑞士商諾華公司 穩定的含有高濃度抗vegf抗體之蛋白質溶液調配物
US20160144025A1 (en) 2014-11-25 2016-05-26 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods and formulations for treating vascular eye diseases
HUE057653T2 (hu) 2014-12-11 2022-05-28 Bayer Healthcare Llc Kis aktív choroidális neurovaszkularizáció lézióval jellemzett idõskori makuladegeneráció kezelése
US20180000932A1 (en) * 2014-12-31 2018-01-04 Novelmed Therapeutics, Inc. Formulation of aglycosylated therapeutic antibodies
AR103477A1 (es) 2015-01-28 2017-05-10 Lilly Co Eli Compuestos de vegfa / ang2
KR101808234B1 (ko) 2015-06-23 2017-12-12 (주)알테오젠 IgG Fc 도메인을 가지는 융합 단백질의 안정한 액상 제제
WO2017085253A1 (en) * 2015-11-18 2017-05-26 Formycon Ag Pre-filled plastic syringe containing a vegf antagonist
JP2019504402A (ja) 2015-12-18 2019-02-14 コグノア， インコーポレイテッド デジタル個別化医療のためのプラットフォームおよびシステム
WO2017129685A1 (en) * 2016-01-26 2017-08-03 Formycon Ag Liquid formulation of a vegf antagonist
WO2017197199A1 (en) 2016-05-13 2017-11-16 Askgene Pharma Inc. Novel angiopoietin 2, vegf dual antagonists
TWI798179B (zh) 2016-06-17 2023-04-11 美商建南德克公司 多特異性抗體之純化
WO2018122053A1 (en) * 2016-12-29 2018-07-05 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-angiopoietin-2 antibody formulation
EP3600442A1 (en) 2017-03-22 2020-02-05 Genentech, Inc. Optimized antibody compositions for treatment of ocular disorders
WO2019154776A1 (en) 2018-02-06 2019-08-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Treatment of ophthalmologic diseases
JP7235770B2 (ja) * 2018-05-10 2023-03-08 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 高濃度ｖｅｇｆ受容体融合タンパク質を含む製剤

Also Published As

Publication number Publication date
US20260125458A1 (en) 2026-05-07
IL281717B2 (en) 2025-07-01
KR20210069677A (ko) 2021-06-11
TW202033180A (zh) 2020-09-16
JP2020097567A (ja) 2020-06-25
IL281717B1 (en) 2025-03-01
TWI734233B (zh) 2021-07-21
CA3114728A1 (en) 2020-05-07
WO2020089051A1 (en) 2020-05-07
US12503503B2 (en) 2025-12-23
BR112021007946A2 (pt) 2021-08-03
CN119033684A (zh) 2024-11-29
CL2021001037A1 (es) 2021-09-24
US20210324062A1 (en) 2021-10-21
CN112930194A (zh) 2021-06-08
CN119033685A (zh) 2024-11-29
CA3114728C (en) 2024-05-14
MA54052A (fr) 2022-02-09
AU2024203126A1 (en) 2024-05-30
CR20210200A (es) 2021-05-25
AU2019370601A1 (en) 2021-05-27
KR102467349B1 (ko) 2022-11-16
JP6920393B2 (ja) 2021-08-18
CN119033686A (zh) 2024-11-29
KR102590359B1 (ko) 2023-10-16
IL281717A (en) 2021-05-31
SG11202103064YA (en) 2021-05-28
KR20220136446A (ko) 2022-10-07
AU2019370601B2 (en) 2024-05-23
CN112930194B (zh) 2024-08-09
EP3873519A1 (en) 2021-09-08
MY195550A (en) 2023-01-31
MX2021004774A (es) 2021-08-24
PE20211865A1 (es) 2021-09-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102467349B1 (ko) 항체 제형
AU2020244614B2 (en) Stable protein solution formulation containing high concentration of an anti-VEGF antibody
CN110559435B (zh) 包含离子性液体的液体蛋白质制剂
US20110256135A1 (en) Anti-nerve growth factor (ngf) antibody compositions
US20240287198A1 (en) Anti-cd40 antibodies for use in prevention of graft rejection
TW202308689A (zh) 高濃度的雙特異性抗體調配物
TW201944983A (zh) 高度濃縮的低黏度masp-2抑制性抗體製劑、試劑盒和方法
EP4233901A2 (en) Pharmaceutical compositions containing anti-beta amyloid antibodies
EP3632931A1 (en) Improved il-6 antibodies
US20230173069A1 (en) Formulation comprising anti-il-23p19 antibody, method for preparing same and use thereof
CN113453719A (zh) 包含抗cd47抗体的制剂及其制备方法和用途
US20230080706A1 (en) Recombinant fully human anti-tigit monoclonal antibody formulation, method for preparing same and use thereof
TW202426502A (zh) 治療不活躍甲狀腺眼病之方法
RU2806628C2 (ru) Состав, содержащий антитело
TW202528347A (zh) 抗運甲狀腺素蛋白抗體、包含所述抗體之組成物及用於治療或預防運甲狀腺素蛋白介導之澱粉樣變性的方法
CA2966758C (en) Stable protein solution formulation containing high concentration of an anti-vegf antibody
WO2021220216A1 (en) Methods for clearing vitreous hemorrhage
CN119013044A (zh) 含有pd-1抗体的稳定高浓度氯化钠配制品及其使用方法
EA042435B1 (ru) Стабильный препарат раствора белка, содержащего анти-vegf антитело в высокой концентрации