UA72293C2 - Ep4 receptor selective agonists (variants) for treating conditions presenting with low bone mass and pharmaceutical composition - Google Patents

Ep4 receptor selective agonists (variants) for treating conditions presenting with low bone mass and pharmaceutical composition Download PDF

Info

Publication number
UA72293C2
UA72293C2 UA2002065186A UA2002065186A UA72293C2 UA 72293 C2 UA72293 C2 UA 72293C2 UA 2002065186 A UA2002065186 A UA 2002065186A UA 2002065186 A UA2002065186 A UA 2002065186A UA 72293 C2 UA72293 C2 UA 72293C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
butyl
pyrrolidin
hydroxy
phenyl
bone
Prior art date
Application number
UA2002065186A
Other languages
English (en)
Original Assignee
Pfizer Prod Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pfizer Prod Inc filed Critical Pfizer Prod Inc
Publication of UA72293C2 publication Critical patent/UA72293C2/uk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/4015—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. piracetam, ethosuximide
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D207/22—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/24—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D207/26—2-Pyrrolidones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D207/20—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/10—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)

Description

Цей винахід стосується способів і фармацевтичних композицій, що містять простагландинові агоністи, які є корисними для запобігання розрідження кістки, для відновлення або збільшення кісткової маси, а також для підсилення регенерації кістки, включаючи лікування станів, що полягають в зменшенні кісткової маси та/чи дефектів кісток у хребетних тварин, і зокрема, у ссавців, включаючи людину. Цей винахід особливо стосується способів і фармацевтичних композицій, що містять селективні простагландинові агоністи ЕРА рецептора.
Остеопороз - це системне скелетне захворювання, що характеризується зменшенням кісткової маси і пошкодженням кісткової тканини з подальшим збільшенням ламкості кісток і схильності до переломів. В США такий стан спостерігається більше ніж у 25 млн. чол. і є причиною більше 1,3 млн. переломів щороку, включаючи 500 000 переломів хребта, 250 000 переломів тазостегнового суглоба і 240 000 переломів зап'ястя щорічно. Перелом тазостегнового суглоба є найсерйознішим наслідком остеопорозу, 5-2095 хворих помирає протягом року і понад 5095 залишаються непрацездатними.
Найбільший ризик захворювання на остеопороз загрожує людям похилого віку, і, таким чином, передбачається, що проблема значно зросте із старінням населення. Передбачається, що в світі кількість бипадків переломів збільшиться втричі протягом наступних 60 років, і підрахували, що у 2050 році у світі буде 4,5 млн. випадків переломів. Жінки піддаються ризику захворювання на остеопороз частіше ніж чоловіки. У жінок відбувається значна втрата кісткової маси протягом п'яти років після менопаузи. Іншими факторами, що збільшують ризик захворювання, є паління, зловживання алкоголем, сидячий спосіб життя і недостатнє вживання кальцію.
Існує два головних тили фармацевтичної терапії для лікування остеопорозу. Перший полягає у застосуванні анти-резорбтивних сполук для зменшення резорбції кісткової тканини.
Естроген є прикладом анти-резорбтивного агента. Відомо, що естроген зменшує вірогідність переломів.
Крім того, Віаск, ех а. в ЕР 0605193А1 повідомляє, що естроген, особливо при оральному застосуванні, зменшує рівні ЛНГ в плазмі і збільшує рівні корисних ліпопротеїнів високої густоти (ЛВГ). Однак, естроген не відновлює кістки у остеопорозному скелеті до стану кісток молодої людини. Крім того, довготривала терапія естрогеном спричиняє ряд розладів, включаючи зростання ризику раку матки, внутрішньоматкового раку та можливого раку молочної залози. | це є причиною відмови багатьох жінок у такому лікуванні. Через виникнення значних небажаних ефектів, пов'язаних з терапією естрогеном, виникає необхідність розробки альтернативних способів лікування остеопорозу, які б мали бажані ефекти на рівень ЛНГ в сироватці, але не спричиняли небажаних ефектів.
Другим типом фармацевтичної терапії для лікування остеопорозу є використання анаболічних агентів для прискорення остеогенезу та збільшення кісткової маси. Такі агенти повинні відновлювати стан кісток в остеопорозному хребті.
Деякі простагландинові агоністи розкриті в патентах Великобританії МоМо 1478281 і 1479156, а також в патентах США МоМоео 4175203, 4055596, 4175203, 3987091 і 3991106, які є користними як, наприклад, ниркові вазодипататори.
У патенті США Мо 4033996 розкриті 8-аза-9-оксо(і діоксо)-тіа-11,12-секопростагландини, які є корисними як ниркові вазодилататори для запобігання утворення тромбів, для зменшення виділення гормонів росту, а також як регулятори імунної реакції.
У патенті Франції Ме 897566 розкриті похідні амінокислот для лікування неврологічних, психічних та серцево-судинних захворювань. у. Огу. Слеш. 26; 1961; 1437 розкриває Ме-ацетил-Мебензил-р-амінофенілмеркаптоацетилову кислоту.
У патенті США Мо 4761430 розкриті сполуки арилбензенсульфонаміду як агенти, що зменшують рівень ліпідів.
У патенті США Мо 4443477 розкриті сульфонамідофенілкарбонові кислоти як агенти, що зменшують рівень ліпідів.
У патенті США Мо 3528961 розкриті похідні є-капролактаму як фарбники.
У патенті США Мо 3780095 розкриті ацильовані анілінкарбонові кислоти як жовчогінні речовини.
У патенті США Мо 4243678 розкриті ацилгідрокарбіламіналканові кислоти, які застосовуються при лікуванні виразки шлунку, як інгібітори жировиділення, а також для боротьби із запаленнями шкіри.
У патенті США Мо 4386031 розкриті М-бензоїл-ш-аніліналканкарбонові кислоти як протиалергійні речовини, інгібітори агрегації тромбоцитів, протизапальні агенти та агенти, що зменшують рівень ліпідів.
Повідомлялося, що внаслідок зменшення кісткової маси крім остеопорозу лише в Америці щорічно виявляють майже 20-25 млн. випадків у жінок і у зростаючої кількості чоловіків вертебральних переломів, а також 250000 випадків переломів тазостегнових суглобів. В останньому випадку спостерігається коефіцієнт смертності 1295 протягом перших двох років, 3095 пацієнтів потребують догляду няньки після перелому.
Оскільки це дуже важливо, "очікується, що зростуть економічні та медичні наслідки одужання завдяки повільному або неповному зростанню кісток на місцях переломів, завдяки старінню населення в цілому.
Естрогени були показані (Воіападег еї а!., З8Ій Аппиа! Меєїпд Оппоредіс ВНезеагсп Босієїу, 1992) для удосконалення якості лікування апендикулярних переломів. Таким чином, естрогензаміщувальна терапія повинна бути ефективною як спосіб лікування переломів. Однак, дотримання хворим режиму і схеми лікування естрогеном є відносно недостатніми через його побічні ефекти, включаючи відновлення менструації, мастодинії підвищений ризик раку матки, підвищений ризик раку молочної залози, а також супутнє використання прогестинів. Крім того чоловіки не погоджуються на лікування естрогеном. Існує необхідність в терапії, яка була б корисною для пацієнтів, які страждають переломами ослаблених кісток і яка б підвищила дотримання хворим режиму і схеми лікування.
Продемонстрували, що простагландин Е2 (РОЕ2) може відновлювати ослаблені кістки у оваріектомізованого (ОУХ) пацюка, моделі для постклімактеричного остеопорозу. Ке, Н.2., вї аі., Вопе, 23:249- 255, 1998. Однак, спостерігалися серйозні побічні наслідки, пов'язані з РОЕ2. деє, МУ.5.5. апа Ма, У.Р., Вопе, 21:297-304,1997.
Хоча існує ряд терапій остеопорозу, виникає необхідність і продовжується пошук в даній галузі стосовно альтернативних терапій остеопорозу. Крім того, існує необхідність в терапії зростання кісток на місці перелому. Також, існує необхідність в терапії, яка може покращити відновлення росту в скелетних зонах, де існують дефекти, викликані або спричинені, наприклад, пухлинами в кістках. Крім того, існує необхідність в терапії, яка може покращити відновлення росту кісток в скелетних зонах, де потрібна трансплантація кістки.
Цей винахід стосується способів лікування станів, викликаних зменшенням кісткової маси у ссавців, що полягають у призначенні ссавцям селективного антагоніста ЕРА рецептора, його проліків або фармацевтично прийнятної солі згаданого селективного агоніста ЕРА рецептора або згаданих проліків.
Цей винахід особливо стосується таких способів, коли згаданим станом є остеопороз, крихкість, остеопорозний перелом, дефект кісток, дитяче ідиопатичне розрідження кістки, альвеолярне розрідження кістки, мандибулярне розрідження кістки, перелом кістки, остеотомія, розрідження кістки, пов'язане з періодонтитом, або протезне вростання. У способах цього винаходу, яким віддається перевага, селективний агоніет ЕРА рецептора призначається систематично,, наприклад, орально, підшкірно, внутрішньом'язово або як аерозоль. В інших способах цього винаходу, яким віддається перевага, агоніст ЕР4 рецептора призначається для місцевого застосування.
Способи цього винаходу є особливо корисними, коли згаданим станом є крихкість..
Способи цього винаходу є особливо корисними, коли згаданим станом є остеопороз.
Способи цього винаходу є також особливо корисними, коли згаданим станом є перелом кістки або остеопорозний перелом.
Селективні агоністи ЕР4, яким віддається перевага, для використання в способах цього винаходу включають сполуки формули І: о ше ах у ! І їх проліки і фармацевтично прийнятні солі згаданих композицій або згаданих проліків, де:
О - це СООВУ, СОМНВ: або тетразол-5-іл;
А - це простий або цис-подвійний зв'язок;
В - це простий або транс-подвійний зв'язок;
О0- це и, С Й
НТоН, НОоб'нооого нон,
В2- це о-тівеніл, феніл, фенокси, однозаміщений феніл і однозаміщений фенокси, згаданими замісниками є хлор, фтор, феніл, метокси, трифторметил або (Сі-Сз)алкіл;
ВЗ - це водень, (Сі-С5)алкіл, феніл або р-біфеніл;
В'-4е СОВ? або 50285; і
Во-це феніл або (С1-Сз)алкіл.
Групою селективних агоністів ЕРА рецептора формули І, яким віддається перевага, для використання в способах цього винаходу є сполуки сполуки формули І, в яких О - це 5-тетразоліл і О - це нон 1 які утворюють сполуки, що мають формулу ІЙ од що т
Ге
Сполуками в межах цієї групи, яким віддається особлива перевага, є 55-(4-(З-хлор-феніл)-ЗВ-гідрокси- бутил)-1-(6-«-2Н-тетразол-5-іл)-гексил-піролідин-2-он; / 55-(ЗВ-гідрокси-4-(З3-трифторметил-феніл)-бутил)-1-(6- (2Н-тетразол-5-іл)-гексил)-піролідин-2-он; 58-(35-гідрокси-4-феніл-бут-1-еніл)-1-(6-(2Н-тетразол-5-іл)-гексил)- піролідин-2-он; і 55-(ЗВ-гідрокси-4-феніл-бутил)-1 -І6-(1 Н-тетразол-5-іл)-гексил|-піролідин-2-он.
Іншою групою селективних агоністів ЕР4 рецептора формули !/, яким віддається перевага, для використання в способах цього винаходу є сполуки сполуки формули І, в яких ОО - це СООН. Сполуками в межах цієї групи, яким віддається особлива перевага, є 7-(25-ІЗВ-гідрокси-4-(3-фенокси-феніл)-бутил|-5-оксо- піролідин-1-іл)-гептанова кислота; 7-(25-(З3В-гідрокси-4-(З-трифторметил-феніл)-бутил)-5-оксо-піролідин-1 -іл)- гептанова кислота; 7-125-І4-(З-хлор-феніл)-ЗН-гідрокси-бутил|-5-оксо-піролідин-1-іліу-гептанова кислота; 7-(25- (ЗА-гідрокси-4-феніл-бутил)-5-оксо-піролідин-1-ілу-гептанова кислота; і 7- |28-(35-гідрокси-4-феніл-бут-1ї - еніл)-5-оксо-піролідин-1-іл|-гептанова кислота.
Переважно лікуються жінки після менопаузи і чоловіки віком від 60 років. Також віддається перевага особам, незалежно від віку, у яких спостерігається значне зменшення кісткової маси, тобто в 1,5 рази або більше від рівня кісткової маси молодої людини.
У способах цього винаходу, станами, викликаними зменшенням кісткової маси, є такі стани як, наприклад, остеопороз, дитяче ідиопатичне розрідження кістки, альвеолярне розрідження кістки, мандибулярне розрідження кістки, перелом кістки, остеотомія, розрідження кістки, пов'язане з періодонтитом, або протезне вростання.
Способи лікування "вторинного остеопорозу" також включаються в межі способів цього винаходу. "Вторинний остеопороз" включає остеопороз, викликаний глюкокортикоїдами, остеопороз, викликаний гіпертиреозом, остеопороз, викликаний іммобілізацією, остеопороз, викликаний гепарином, і остеопороз, викликаний імунодепресією, у хребетних тварин, наприклад, ссавців (включаючи людину). Ці способи полягають у призначенні згаданим хребетним тваринам, наприклад, ссавцям, для лікування "вторинного остеопорозу" кількості селективного простагландинового агоніста ЕР4 рецептора, його проліків або фармацевтично прийнятної солі згаданого селективного простагландинового агоніста ЕРА рецептора або згаданих проліків.
Ще один аспект даного винаходу стосується способів для підсилення приживлюваності кісткового трансплантанта, включаючи вертебральний синостоз, підсилення випрямлення трубчастих кісток, підсилення зростання кісток внаслідок лицьової реконструкції, верхньощелепної реконструкції таули нижньощелепної реконструкції у хребетних, наприклад, у ссавців (включаючи людину), що полягає у призначенні згаданим хребетним, наприклад, ссавцям, які перенесли лицьову реконструкцію, верхньощелепну реконструкцію чи нижньощелепну реконструкцію, кількості селективного простагландинового агоніста ЕРА рецептора, його проліків або фармацевтично прийнятної солі згаданого селективного простагландинового агоніста ЕРА рецептора або згаданих проліків для прискорення зростання кістки. Активні селективні простагландинові агоністи ЕРА рецептора цього винаходу можна призначати для місцевого застосування на місце реконструкції кістки або для системного застосування.
Доза, якій віддається перевага, становить 0,001-100 мг/кг/ідень селективних агоністів ЕР4 рецептора, їх проліків або фармацевтично прийнятної солі згаданої сполуки або проліків. Особливо віддається перевага дозі, що становить 0,01-10 мг/кг/ день селективного агоніста ЕРА рецептора, його проліків або фармацевтично прийнятної солі згаданої сполуки або проліків.
Фраза "стан(и), що полягає(ють) у зниженні кісткової маси" стосується стану, коли рівень кісткової маси нижчий норми для такого віку, як визначається в стандартах Всесвітньої Організації Здоров'я "Аззеветепі ої
Егасіште Вівк алеї їїз Арріїсайоп юю 5сгеепіпд г Розітепораиза! Овіеороговів (1994). Верогі ої а Ууопа Неаїщт
Огдапігайоп 5щау Стор. УУопа Неай Огдапігайоп ТесппісаІ Зепйез 843". До "стану(ів), що полягає(ють) у зменшенні кісткової маси" належать первинний та вторинний остеопороз, як згадано вище. Також до таких станів належать периодонтальні захворювання, альвеолярне розрідження кісток, розрідження кісток внаслідок остеостомії та дитяче ідіопатичне розрідження кісток. Фраза "стан(и), що полягає(ють) у зменшенні кісткової маси" також включає ускладнення остеопорозу, такі як викривлення хребта, зменшення зросту та протезна хірургія.
Фраза "стан(и), що полягають у зменшенні кісткової маси" також стосується хребетних, наприклад, савців, які мають значно вищу за середню вірогідність розвитку вищезгаданих захворювань, включаючи остеопороз (наприклад, жінки після менопаузи та чоловіки, віком за 50 років). Здатність збільшення кісткової маси включає прискорення зростання кістки на місці перелому, відновлювапьну хірургію за допомогою кісткового трансплантанта, прискорення приживання кісткових трансплантатів, зростання кісток після лицьової реконструкції верхньощелепної реконструкції чи нижньощелепної реконструкції, вростання протеза,
вертебрапьний синостоз або випрямлення трубчатої кістки.
Способи цього винаходу також можуть застосовуватися в зв'язку з ортопедичними пристроями, такими як каркаси для з'єднання хребців, апаратні засоби для з'єднання хребців, пристрої для внутрішньої і зовнішньої фіксації кісток, гвинти і штифти.
Фахівець в даній галузі зрозуміє, що термін "кісткова маса" насправді стосується кісткової маси на одиницю площі, яка іноді (хоча не завжди вірно) означає густину мінералів у кістках.
Термін "лікування", що вживається тут означає запобіжну (наприклад, профілактичну), паліативну і лікувальну дію.
Під "фармацевтично прийнятним" мається на увазі, що носій, зв'язувальна речовина, розріджувач, наповнювач та/чи сіль повинні бути сумісними з іншими інгредієнтами композиції, а також повинні бути нешкідливими для реципієнта.
Термін "проліки" стосується сполуки, що є попередником лікарського засобу, який після застосування виділяє цей лікарський засіб іп мімо в результаті деяких хімічних або фізіологічних процесів (наприклад, проліки при доведенні до фізіологічного рівня рН або завдяки дії фермента перетворюються на бажану форму лікарського засобу). Типові проліки при розщепленні виділяють бажану сполуку лікарського засобу.
Вираз "фармацевтично прийнятна сіль" стосується нетоксичних аніонних солей, що містять аніони, такі як (але не обмежуються до) хлорид, бромід, йодид, сульфат, бісульфат, фосфат, ацетат, малеат, фумарат, оксалат, лактат, тартрат, цитрат, глюконат, метансульфонат і 4-толуол-сульфонат. Вираз також стосується нетоксичних катіонних солей, таких як (але не обмежуючись до) натрій, калій, кальцій, магній, амоній або протонований бензатин (М,М'-дибензилетилендіамін), холін, етаноламін, діетаноламін, етилендіамін, мегламін (М-метил-глюкамін), бенетамін (М-бензилфенетиламін), піперазин або трометамін (2-аміно-2-гідроксиметил- 1,3-пропандіол).
Способи цього винаходу мають результатом остеогенез завдяки зменшеному числу переломів. Даний винахід є значним внеском в дану галузь завдяки забезпеченню способів, що підвищують остеогенез, і мають результатом запобігання, затримку та/чи регресію остеопорозу та пов'язаних захворювань кісток.
Цей винахід також стосується сполук, вибраних з 7-(25-ІЗВ-гідрокси-4-(3-фенокси-феніл)-бутил|-5-оксо- піролідин-1-ілугептанової кислоти; 55-(4-(3З-хлор-феніл)-ЗВ-гідрокси-бутил)-1-(6-(2Н-тетразол-5-іл)-гексил- піролідин-2-он; 7-(25-(З3В-гідрокси-4-(З--трифторметил-феніл)-бутил)-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептанової кислоти; 7-25-І4-(3-хлор-феніл)-ЗВ-гідрокси-бутил|-5-оксо-піролідин-1-ілу-гептанової кислоти; та 55-(3В- гідрокси-4-(3- трифторметил-феніл)-бутил)-1-(6-(2Н-тетразол-5-іл)-гексил)-піролідин-2-ону.
Цей винахід також особливо стосується 7-(25-ІЗВ-гідрокси-4-(3-фенокси-феніл)-бутил|-5-оксо-піролідин-1- іл)-гептанової кислоти.
Цей винахід також особливо стосується 55-(4-(3-хлор-феніл)-ЗВ-гідрокси-бутил)-1-(6-(2Н-тетразол-5-іл)- гексил-піролідин-2-ону.
Цей винахід також особливо стосується 7-(25-(3В-гідрокси-4-(З-трифторметил-феніл)-бутил)-5-оксо- піролідин-1-іл)-гептанової кислоти.
Цей винахід також особливо стосується 7-(25-|4-(З-хлор-феніл)-ЗВ-гідрокси-бутил|-5-оксо-піролідин-1-ілу- гептанової кислоти.
Цей винахід також особливо стосується 55-(З3В-гідрокси-4-(З-трифторметил-феніл)-бутил)-1-(6-(2Н- тетразол-5-іл)-гексил)-піролідин-2-ону.
Інші риси і переваги стануть зрозумілими з опису та формули, які описують винахід,
Будь-який селективний агоніст ЕР4 рецептора може використовуватися як селективний агоніст ЕРА рецептора даного винаходу. Селективні агоністи ЕР4 - це сполуки, які мають ІС50 по відношенню до рецепторів ЕР, ЕР2 і ЕРЗ, що, принаймні, в 10 разів більше за ІС50 для підвиду ЕРА рецептора. Наприклад, 7-2-(3-гідрокси-4-феніл-бутил)-5-оксо-піролідин-1-іл)у-гептанова кислота - це селективний РОЕ2 агоніст ЕРА рецептора з ІС5О зв'язування ЕР4 рецептора, що дорівнює 16 нМ. У всіх інших підвидах рецептора ЕР, включаючи підвиди рецепторів ЕРІ, ЕР2 та ЕРЗ, ІС50 для 7-(2-(3-гідрокси-4-феніл-бутил)-5-оксо-піролідин-1- іл)у-гептанової кислоти є більше ніж 3200нНМ.
Сполуки Формули І можна одержати як показано в патенті США Ме4177346, який включений сюди шляхом посилання.
Селективні агоністи ЕРА рецептора, що використовуються в способах даного винаходу, адаптовані для терапевтичного використання як агенти, що стимулюють остеогенез та збільшення кісткової маси у хребетних, наприклад, у ссавців, включаючи людину. Оскільки остеогенез тісно пов'язаний з розвитком остеопорозу та захворюваннями кісток, агоністи, що використовуються в способах даного винаходу завдяки своїй дії на кістки, запобігають, зупиняють та/чи регресують остеопороз.
Корисність селективних агоністів ЕР4, що використовуються у способах даного винаходу як лікарські засоби при лікуванні станів, що полягають у зменшенні кісткової маси (наприклад, остеопороз) у хребетних, наприклад, ссавців (зокрема у людей, особливо у жінок), демонструється активністю таких агоністів в загальноприйнятих аналізах включаючи аналіз зв'язування рецептора, дослідження циклічного АМФ, дослідження іп мімо та дослідження по зростанню кісток, які описуються нижче. Такі аналізи дозволяють порівняти активність селективних агоністів ЕРА між собою та з активністю інших відомих сполук і композицій.
Результати таких порівнянь є корисними для визначення рівнів дозування для хребетних, наприклад, для ссавців, включаючи людину, для лікування таких захворювань.
Дослідження іп мімо
Активність анаболічних кісткових агентів на підсилення остеогенезу та збільшення кісткової маси можна дослідити на здорових пацюках чоловічої і жіночої статі та на пацюках, позбавлених статевих гормонів (орхіектомізовані пацюки чоловічої статі та оваріектомізовані пацюки жіночої статі).
Під час дослідження можна використовувати пацюків чоловічої та жіночої статі різного віку (як, наприклад, віком З місяці). Пацюкам, здоровим або кастрованим (оваріектомізованим чи орхідектомізованим), вводили підшкірно або вводили через шлунковий зонд різні дози простагландинових агоністів (1, З, або 10 мг/кг/день)
протягом ЗО днів. У кастрованих пацюків лікування починалося наступного дня після операції (для запобігання розрідження кісток) або в момент появи розрідження кісток (для відновлення кісткової маси). Протягом дослідження всі пацюки мали вільний доступ до води та сухого корму (ТеКкіай Родепі Оієї 58064, Напап Текіай,
Маадізоп, У), що містить 1,4695 кальцію, 0,9995 фосфору та 4,96 ІШ/г вітаміну Юз. Усім пацюкам підшкірно вводили по 10мг/кг капьцеїну за дванадцять та два дні перед усипанням. Пацюків усипали. Одержали наступні результати:
Вимірювання мінералів у стегні:
Під час аутопсії у кожного пацюка вилучали праве стегно і сканували його, застосовуючи подвійний абсорбційний рентгеноспектральний аналіз (ХА, ОВ 1000ЛМ, Ноіодіс Іпс., УМакат, МА) оснащену програмним забезпеченням "Недіопа! Нідп Аевоішіоп Зсап" (Ноодіс Іпс., ММайнат, МА). Розмір поля сканування - 5,08 х 1,902см, дозвіл -0,0254 х 0,0127см і швидкість сканування - 7,25мм/с. Аналізували відскановані зображення стегон і визначали ділянку кістки, вміст мінералів у кістці (ВМС), і густину мінералів у кістці (ВМО) усього стегна (МУР), метафізи дистального стегна (ОЕМ), тіло стегнової кістки (Е5) та проксимальне стегно (РЕ).
Гістоморфометричний аналіз великогомілкової кістки:
Під час аутопсії вилучали праву гомілку, звільняли її від мускул і розрізали на три частини. Проксимальну великогомілкову кістку та тіло великогомілкової кістки поміщали в 7095 етанол, зневоднювали у висококонцентрованому етанолі, обезжирювали в ацетоні, а потім занурювали в метилметакрилат (Еазітап
Огдапіс Спетіса!5, Носпезіег, МУ).
Фронтальні секції метафізів проксимальних великогомілкових кісток товщиною 4 і 10мкМ розрізали, використовуючи мікротом ВНеїспегп-Уипд Роїусиї 5. Секції товщиною 4мкМ фарбували модифікованою фарбою
Маззоп'з Тгіспготе, в той час як секції товщиною 10мкМ залишали нефарбованими. По одній секції товщиною 4 мкМ та 10мкМ з кожного пацюка використовували для гістоморфометріт губчатої кістки.
Поперечні зрізи тіл великогомілкових кісток товщиною ЮмкМ розрізали, використовуючи мікротом
Веіїспеп-дипд Роїусиії 5. Ці зрізи використовували для гістоморфометричного аналізу кортикальних кісток.
Гістоморфометрія губчатої кістки: Гістоморфометричну систему Віодпапі О5/2 (ВМ Віотеїгісв, Іпс.,
Мавзпимійє, ТМ) використовували для статичних і динамічних гістоморфометричних вимірювань вторинного спонгіозу проксимальних великогомілкових метафізів між 1,2 та З,бмм дистально у відношенні до росту пластинно-епіфізіального злиття. Перші 1,2мм тибіальної метафізарної ділянки потрібно пропускали з метою обмеження вимірювання вторинних спонгіозів. Секцію товщиною 4мкМ використовували для визначення індексів стосовно об'єму кістки, структури кістки та резорбції кістки, в той час як секції товщиною 10мкМ використовували для визначення індексів стосовно остеогенезу та обігу мінералів у кістці.
І) Вимірювання і обчислення стосовно об'єму і структури губчатот кістки: (1) Загальна метафізарна ділянка (ТУ, мм): метафізарно ділянка між 1,2 та 3,6 мм дистально у відношенні до росту пластинно-епіфізіального злиття. (2) Ділянка губчатої кістки (ВМ, мм): загальна ділянка трабекул в межах ТУ. (3) Периметр губчатої кістки (В5, мм): довжина загального периметру трабекул. (4) Об'єм губчатої кістки (ВМ/ТУМ, 95): ВМ / ТМ х 100. (5) Розмір губчатої кістки (ТВМ, Ж/мм): 1,199 /2 х В5 / ТМ. (6) Товщина губчатої кістки (ТВТ, мкМ): (2000 /1,199) х (ВМ/ В5). (7) Розділення губчатої кістки (ТВ5, мкМ): (2000 х 1.199) х (ТМ - ВМ).
І) Вимірювання і обчислення стосовно резорбції кістки: (1) Розмір остеокласта (ОСМ, Ж): загальний розмір остеокласта в межах загальної метафізарної ділянки. (2) Периметр остеокласта (ОСР, мм): довжина периметра губчатої кістки покритої остеокластами. (3) Розмір/мм остеокласта (ОСМ/мм, Ж/мм): ОСМ / В5. (4)
Периметр остеокласта в процентному співвідношенні (95ОСР, 95): ОСР / В5 х 100.
І) Вимірювання і обчислення стосовно остеогенезу і обігу мінералів у кістці (1) Мічений периметр, що містить один кальцеїн (51 5, мм): загальна довжина трабекулярного периметра міченого однією капьцеїновою міткою. (2) Мічений периметр, що містить два кальцеїни (0/5, мм): загальна довжина трабекулярного периметра, міченого двома кальцеїновими мітками. (3) Зсередини мічена ширина (П/МУ, мкМ): середня відстань між двома кальцеїновими мітками. (4) Периметр мінералізації в процентному співвідношенні (РМ5,
Фе): (51 5/2 - 01 5) / В5 У 100. (5) Значення мінеральної репозиції (МАН, мкМ/Здау): І МУ Лнтервап мітки. (6)
Швидкість остеогенезу/поверхня (ВЕВ/В5, мкМ"/д./мкМ): (515/2 - 015) х МАВ / В5. (7) Швидкість обігу мінералів у кістці (ВТА, Оо/у): (5І 5/2 - 0І 5)хХМАНВ/ВМУх 100.
Гістоморфометрія кортикального шару кістки: Пстоморфометричну систему Віодцапі О5/2 (Н.М
Віотеїйгісв, Іпс., МазпміПе, ТМ) використовували для статичних і динамічних гістоморфометричних вимірювань кортикального шару тіла великогомілкової кістки. Вимірювали загальну ділянку тканини, ділянку мозкової порожнини, періостальний периметр, ендокортикальний периметр, одно-мічений периметр, двойний мічений периметр, і зсередини мічену товщину на обох періостальній і ендокортиальній поверхнях, і обчислювали ділянку губчатої кістки (ділянка загальної тканини - ділянка мозкової порожнини), ділянку губчатої кістки в процентному співвідношенні (кортикальна ділянка / ділянку загальної тканини х 100), ділянку мозку в процентному співвідношенні (ділянка мозкової порожнини / ділянку загальної тканини х 100), періостеальний і ендокортікальний процент міченого периметра Кодно-мічений периметр/2-двойний мічений периметр)/загальний периметр х 100), значення мінеральної репозиції (зсередини мічена ширина/інтервали), та показник остеогенезу (значення мінеральної репозиції х Модно-мічений периметр/2-двойний мічений периметр/загальний периметрі.
Статистичні дані
Статистичні дані обчислювали, використовуючи пакети 5іаїМієм 4.0 (Арасив Сопсерів, Іпс., Вегкеїєу, СА).
Аналіз на варіантність (АМОМА), що проводиться за допомогою РІ 50 Фішера (5іаї Мієм, Арасив Сопсерів Іпс., 1918 Вопіїа Аме, ВеїкеІєу, СА 94704-1014) використовували і для порівняння розбіжностей між групами.
Визначення підвищення рівня цАМФ у клітинних лініях 293-5, що стабільно понадекспресують рекомбінантні людські ЕРа рецептори.
КДНК, що представляють повні відкриті рамки зчитування для людських ЕР4 рецепторів, одержали за допомогою зворотної ПЛР при використанні олігонуклеотидних праймерів, що базуються на опублікованих послідовностях (1) і РНК від первинних клітин людських легеней (ЕР), у якості шаблонів. КДНК клонуються в численні області клонування рсоМАЗ (Іпмігодеп Согрогайоп, 39858 Боїітепіо МаїІєу Віма., Зап Оієдо, СА 92121) і використовуються для трансфекції людських клітин 293-5 ембріональної нирки шляхом попередньої пресіпітації фосфату кальцію. (3418-стійю колонії розмножувалися та тестувалися на специфічне РНІРОЕ» зв'язування. Трансфектанти, що демонструють високі рівні специфічного (ЗНІРОЕг зв'язування далі характеризувалися шляхом аналізу Скетчарда для визначення В тах і Ках для РОЕЗ5. Лінії, вибрані для пошуку сполуки, мають приблизно 256400 рецепторів на клітину і Ка - 2,9н8М для РОЕ» (ЕР»2). Постійне експресування рецептора в парентальних клітинах 293-5 є незначним. Клітини залишають в АРМІ з додаванням сироватки плода корови (1095 кінцевої юлькості) та 418 (700 мкМ/мл кінцевої кількості).
Відповіді ЦАМФ в лініях 293-5/ЕР4 визначали шляхом відділення клітин з колби з культурою в 1 мл Сач і
Мда дефіцитний по РВ5 буфер за допомогою ретельного подрібнення, додаючи АРМІ без вмісту сироватки до кінцевої концентрації 1 х 106 кпітин/мл, і додаючи З-ізобутил-1-метилксантин (ІВМХ) до кінцевої концентрації 1мМ. Один міліметр клітинної суспензії негайно аліквотувапи у 2мл мікроцентрифузі з підвішеним ротором та інкубувати протягом 10 хвилин, регенерували при 37"С, 595 СО», відносній вологості 9595. Сполука, яку потрібно протестувати, додавали до клітин у співвідношенні 1:100, щоб кінцева концентрація ДМСО або етанолу становила 195. Після додавання сполуки негайно закрили трубки, перемішували, перевертаючи двічі, та інкубували при 37"С хвилин і негайно охолоджували на льоду протягом 5 хвилин. Клітковий осад осідав після центрифугування при 1000 х д протягом 5 хвилин, і очищені лізати переміщували у чисті трубки.
Концентрацію цАМФ визначали за допомогою комерційно доступного комплекту для радіоїмуноанапізу цАМФ (МЕК-033, ОиРопі/МЕМ Везеагсп Ргодисів, 549 АІрапу 5ї., Во5іоп, МА 02118), після чого розводили очищені лізати у співвідношенні 1:10 в буфері для радіоїмуноанапізу ЦАМФ (що входить до комплекту). Як правило, клітини обробляли 6-8 концентраціями сполуки, яку потрібно тестувати, в логарифмічних розведеннях.
Обчислення ЕСво здійснювали на калькуляторі з використанням аналізу лінійної регресії на лінійній ділянці кривих реакції на дозу.
Посилання: 1. Ведап, ОМ. Ваїєу, Т.9У. Реррет"і, 0.9. Рієгсе, К.І. Водагацвз, А.М. Оопеїо, У.Е. Раїграїт, С.Е. Кеаліє, К.М.
Муосджага, О.Р. апа сії, О.М. 1994. Сіопіпд ої а Моме! Нитап Ргозіадіапаіїп Весеріог м/йй Спагасієгівіїс5 ої Ше
Рпагтасіодіса!Пу Оєїїпей ЕР: З!ибіуре. Мої. Рнаппасоіоду 46:213-220.
Дслідження щодо зв'язування простагландинових Ег рецепторів
Приготування мембрани: Всі операції проводили при 4"С. Трансфектовані клітини, що експресують простагландинові Ег рецептори типу 1 (ЕР'ї, рецептори типу 2 (ЕР»), типу З (ЕРз) або типу 4 (ЕРа), збирали і суспендували у співвідношенні 2 млн. клітин на мл в буфері А (50 мМ Тріс-НСЇІ (рН 7.4), 10 мМ Маосі», мМ
ЕОТА, 1мМ пефаблокового пептида, (Воепгіпдег Мапппєїт Согр., Іпаіапароїїв, ІМ), Т0мкМ фосфорамідонового пептида, (Зідта, 51. І оці5, МО), їмкМ пепстатину А пептида, (бідта, 51. Гоців, МО), 10мкМ еластатінального пептида, (бідта, 51. Гоціз, МО), 100мкМ протибольового пептида, (бідта, 5. І оціз, МО)). Клітини руйнували шляхом ультразвукової обробки сонатором Брансона (Моде! 5250, Вгапзоп Шгавзопіся Согрогайоп, Юапригу,
СТ) двома вибухами по 15 секунд. Нелізовані клітини і залишоквиділяли центрифугуванням при 100х9 протягом 10хв. Потім мембрани збирали шляхом центрифугування при 45,000 х д протягом хвилин.
Мембрани, що осіли, ресуспендували до рівня 3-10 мг протеїну на мл буфера А, концентрацію протеїну визначали методом Бредфорда (Вгадтюга, М., Апау. Віоспет., 72,248 (1976)). Ресуспендовані мембрани зберігали у замороженому вигляді при -80"С до використання.
Дослідження зв'язування: Заморожені мембрани, приготовлені як вказано вище, розморожували і розбавляли до 0,5мг/мл (для пацюкового ЕР) або 0,Змг/мл (для пацюкового ЕР4) у вищезгаданому буфері А.
Заморожені мембрани, приготовлені як вказано вище, розморожували і розбавляли до 0,5мг/мл (для пацюкового ЕР2) або 0,Змг/мл (для пацюкового ЕР4) у вищезгаданому буфері А. Один об'єм мембран з'єднували з 0,05 об'єму тестованої сполуки або буферу і одним об'ємом ЗнМз Н-простагландину Ег (ТАК 431,
Атегзпат, Апіпдіоп Неїднів, І) в буфері А. Суміш (205 мкЛ загального об'єму) інкубували протягом 1 години при 25"С. Потім мембрани, регенерували шляхом фільтрування через скловолоконні фільтри типу СЕ/С (21205-401, УМаїїас, Сайнегериго, МО) з використанням збирального пристрою Томтека (Моде! Мас 11/96,
Тотіес, Огапде, СТ). Мембрани із зв'язаним ЗН-простагландином Ег відловлюються фільтром, в той час як буфер і незв'язаний ЗН-простагландин Ег проходять через фільтр у відходи. Потім кожен зразок тричі промивали Змл 50 мМ Тріс-НСЇІ (рН 7.4), 10 мМ Мосі», 1 мМ ЕОТА. Фільтри просушували у мікрохвильовий печі. Для визначення кількості зв'язування ЗН-простагландину Ег з мембранами, просушені фільтри поміщали в пластмасові мішки з рідиною для сцинтиляції і обчислювали на Веїаріаїє зчитувачі КВ 1205 (МайПас,
Саїйшегериго, МО). ІСво визначали з концентрації тестованої сполуки, необхідної для витіснення 5090 специфічно зв'язаного ЗН-простагландину Е». 2935 клітини, що експресують пацюкові рецептори ЕР2 і ЕРА простатандина Е2, генерували способами, відомими фахівцям у даній галузі Як правило, праймери ПЛР (полімеразна ланцюгова реакція), що стосуються кінців 5' та 3' опублікованого рецептора повної довжини готували вищерозкритими способами і використовували в реакціях АВТ-ПЛР з викристанням загальної РНК з нирки пацюка для обох ЕР2 та ЕРА рецепторів.
Повну кодуючу послідовність ЕР2 рецептора пацюка готували як розкрито в Метоїй еї аї!., Рговіадіапаїпв, 1997, 54,713-725. Повну кодуючу послідовність ЕРА рецептора пацюка готували як розкрито в Запоо еї аї|.,
Віоспет. Віорпуб. Не5. Сотт., 1994,200,1329-1333. Такі рецептори повної довжини використовували для приготування 2935 клітин, що експресують ЕР2 та ЕРА рецептори.
Повну кодуючу послідовність для ЕРі рецептора готували як розкрито в Рипк еї аї., уоштаї ої Віоіодісаї
Спетівігу, 1993, 268,26767-26772. Повну кодуючу послідовність для ЕРго рецептора готували як розкрито в
Ведап еї аї., МоїІесшаг РНпапптасоіоду, 1994,46,213-220. Повну кодуючу послідовність для ЕРз рецептора готували як розкрито в Недап еї аї., Вийївй доцгпа! ої РНаптасоіоду, 1994, 112,377-385. Повну кодуючу послідовність для ЕР4 рецептора готували як розкрито в Вавіїєп, доцгпа! ої Віоіодісаї Спетівігу, 1994, 269,11873-11877. Такі рецептори повної довжини використовували для приготування клітин 2935, що експресують ЕР: ЕР», ЕРз та ЕР. рецептори.
Клітини 2935, що експресують людські ЕР:, ЕРг, ЕРз або ЕРаи простагландинові Ег рецептори, генерували способами, добре відомими фахівцям у даній галузі. Як правило, праймери ПЛР (полімеразна ланцюгова реакція), що стосуються кінців 5' та 3' опублікованого рецептора повної довжини готували вищерозкритими способами і використовували в реакціях АТ-ПЛР з викристанням загальної РНК з нирки людини (для ЕР), легень людини (для ЕРг), легень людини (для ЕРз) або лімфоцитів людини (для ЕР4). Продукти ПЛР клонували за допомогою методу ТА виступаючих кінців у плазміді рСН2.1 (Іпмйгодеп, Сагізрай, СА) і ідентичність клонованого рецептора підтверджували розшифровкою послідовності ДНК. 2935 клітини (Мауо, Оері. ої Віоспетівзігу, Моппмезієгп Опім.) трансфектуються клонованим рецептором у плазміді рсСОМАЗ шляхом електропорації. Стабільні клітинні лінії, що експресують рецептори, встановлюються наступною селекцією трансфектованих клітин з (3418.
Лінії клонованих клітин, що експресують максимальну кількість рецепторів, вибирали, дотримуючись аналізу зв'язування ЗН-РОЕ» з використанням немічених РОБ» в якості конкурента.
ДОСЛІДЖЕННЯ ЗРОСТАННЯ КІСТКИ
ДОСЛІДЖЕННЯ ВПЛИВІВ НА ЗРОСТАННЯ КІСТКИ ПІСЛЯ СИСТЕМНОГО ПРИЗНАЧЕННЯ
Техніка перелому: Пацюків Зргаде-Оамеу віком З місяці анастезували кетаміном. На проксимальній частині правої гомілки або стегна робили розріз довжиною 1см. Нижче наводиться хірургічна техніка стосовно гомілки. Розріз продовжували до кістки і просвердлювали отвір діаметром їмм на 4мм проксимально до дистальної сторони горбкуватості великогомілкової кістки і на 2мм медіально до переднього виступу.
Інтрамедулярний внутрішньокістковий остеосинтез здійснювали стальним нефарбованим штифтом діаметром
О,8мм (максимальне навантаження 36,3 М, максимальна жорсткість 61,8 М/мм, тестували за тих же умов, що й кістки). Кістково-мозковий канал не розсвердлювали. Стандартизований закритий перелом робили на 2 мм вище місця сполучення великогомілкової та малогомілкової кісток шляхом триточкового згинання з використанням спеціальних регульованих щипців з тупими затискачами. Для мінімізації пошкодження м'якої тканини, старалися не змістити перелом. Шкіру зшивали елементарною ниткою найлону. Операцію проводили при стерильних умовах. Рентгенівські знімки всіх преломів робили негайно після внутрішньокісткового остеосинтезу, | вилучали пацюків з переломами поза межами спеціальної діафізарної ділянки або із зміщеними штифтами. Тварин, що залишилися, довільно розділяли на наступні фупи з 10-12 тваринами у кожній підгрупі на період для тестування зростання кістки на місці перелому. Перша група одержувала щоденно гіпераліментацію наповнювача (вода: 10095 етанол - 95:5) при 1 мл/пацюк, в той час як інші одержували гіпераліментацію 0,01-10Омг/кг/день тестованої сполуки (1 мл/пацюк) на 10, 20, 40 і 80 день.
На 10, 20, 40 ї 80 день, 10-12 пацюків з кожної групи анезтезувапи. кетаміном і умертвляли шляхом знекровлювання. Великогомілкову і малогомілкову кістки вилучали при розтині і видаляли всю м'яку тканину.
Кістки 5-6 пацюків з кожної групи зберігали в 7095 етанолі для гістологічного аналізу, а кістки інших 5-6 пацюків з кожної групи зберігали в буферному розчині Рінгера (ї4"С, рН 7.4) для рентгенівських знімків та біомеханічних тестувань, що проводилися.
Гістологічний аналіз: Способи гістологічного аналізу пошкодженої кістки (перелом) були раніше опубліковані Моускшдом і Беком (Тпе ЕНесів ої Стоулп Ногптопе оп Егасішге Неаїїпд іп ВРаїв: А Нівіогодісаї
Оезспрійоп. Вопе, 14:19-27, 1993). Коротко, місце перелому розпилювали на мм до кожного боку лінії перелому, поміщеного некальцінованим в метиметакрилат, і розрізали фронтальні ділянки на мікротомі
Веіспеп-удипд Роїусиї товщиною ЗмкМ. Мавгзоп- Гіспготе забарвлені середньо-фронтальні ділянки (включаючи великогомілкову кістку та малогомілкову кістку) використовували для відображення реакції клітин і тканини на зростання кістки з та без лікування. Ділянки, забарвлені червоною фарбою бів, використовували для відображення характеристики структури кісткової мозолі а також для диференціації перетинчастої ретикулофіброзної кістки і пластинчатої кістки на місці перелому. Проводили наступні вимірювання: (1) щілина перелому - вимірюється як найкоротша відстань між кінцями кортикального шару кістки та в переломі, (2) довжина і діаметр кісткової мозолі, (3) загальна площа кісткової мозолі в об'ємі кістки, (4) кісткова тканина на ділянку тканини в межах ділянки кісткової мозолі, (5) волокниста з'єднувальна тканина в кістковій мозолі і (6) хрящова ділянка в кістковій мозолі.
Біомеханічний аналіз: Способи біомеханічного аналізу були раніше опубліковані Беком і Андреассеном (Тне ЕнНесів ої Адіпд оп Егасшге Неаїїпа іп Раїв. Саїсії Тіввце Іпі 45:292-297,1989). Коротко, рентгенівські знімки всіх переломів робили перед біомеханічним аналізом. Механічні властивості зростання кістки на місці перелому аналізували деструктивною процедурою згинання в трьох або чотирьох точках. Визначали максимальне навантаження, жорсткість, енергію при максимальному навантаженні, зміщення при максимальному навантаженні і максимальне зусилля.
ДОСЛІДЖЕННЯ ВПЛИВІВ НА ЗРОСТАННЯ КІСТКИ ПІСЛЯ МІСЦЕВОГО ПРИЗНАЧЕННЯ
Техніка перелому: У дослідженні використовували гончих собак чоловічої та жіночої статі віком біля двох років після анестезії. Поперечні радіальні переломи виконували повільним тривалим згинанням у трьох точках як описав ГІ епейпап еї аї. (Іепенап, Т. М.; Ваїїдапа, М.; МипатакКег, ОМ; Ууоса, Р.Е.: Епесів ої ЕНОР оп Егасшге
Неаїїпд іп Юод5. У Оппор Нев 3:499-507; 1985). Провід втягували через місце перелому з метою гарантії повного анатомічного порушення кістки. Після чого наносили простагландинові агоністи на місце перелому шляхом застосування таблеток повільного вивільнення або використання сполук у прийнятному вигляді, як, наприклад, пасто-гелевий розчин або суспензія на 10, 15 або 20 тижнів.
Гістологічний аналіз: Способи гістологічного аналізу пошкодженої кістки (перелом) були раніше опубліковані Петером еї а. (Реїег, СР.; Соок, МУ.О.; Мипатакег, О.М.; Ргомові, М. Т.; Зеедог, 9У.а.; Водап, С.А.
ЕнМесів ої аЇІепагопаїє оп Ігасішге Неаїїпд апа ропе гетодеїйпуд іп доде. 9. Оппор. Нев. 14:74-70,1996) і
Моускілдом і Беком (Те ЕНесів ої Стоп Ногтопе оп Егасішге Неаїїпа іп ВНаїв: А Нізіоіодісаї Оезсгіріоп. Вопе, 14:19-27,1993). Коротко, після умертвлення, місце перелому розпилювали на Зсм до кожного боку лінії перелому, поміщеного некальцінованим в метиметакрилат, і розрізали фронтальні секції на мікротомі Неїспегй-
Уипду Роїусиї товщиною 8мкМ фронтальних секцій. Мав55оп-Тгіспготе забарвлені середньо-фронтальні ділянки (включаючи великогомілкову кістку та малогомілкову кістку) використовували для відображення реакції клітин і тканини на зростання кістки з та без лікування. Ділянки, забарвлені червоною фарбою 5іпши5, використовували для відображення характеристики структури кісткової мозолі, а також для диференціації перетинчастої ретикулофіброзної кістки і пластинчатої кістки на місці перелому. Проводили наступні вимірювання: (1) щілина перелому - вимірюється як найкоротша відстань між кінцями кортикального шару кістки та ав переломі, (2) довжина і діаметр кісткової мозолі, (3) загальна площа кісткової мозолі в об'мі кістки, (4) кісткова тканина на ділянку тканини в межах ділянки кісткової мозолі, (5) волокниста з'єднувальна тканина в кістковій мозолі і (6) хрящова ділянка в кістковій мозолі.
Біомеханічний аналіз: Способи біомеханічного аналізу були раніше опубліковані Беком і Андреассеном (Тне Ебесів ої Адіпд оп Егасійге Неаїїпд іп Наїв. Саїсії Тіввце Іпі 45:292-297,1989) і Петером еї аї. (Реїег,
С.Р.;Соок, М.О.; Мипатакег, О.М.; Ргомові, М. Т.; беєдог, 9.с2.; Нодап, С.А. Емесів ої Аіепагопаїе Оп Егасшгте
Неаїїпд Апа Вопе Нетоавеїїпд Іп Ооде. У. Оппор. Нев. 14:74-70,1996). Коротко, рентгенівські знімки всіх переломів робили перед біомеханічним аналізом. Механічні властивості зростання кістки на місці перелому аналізували деструктивною процедурою згинання в трьох або чотирьох точках. Визначали максимальне навантаження, жорсткість, енергію при максимальному навантаженні, зміщення при максимальному навантаженні і максимальне зусилля.
Призначали селективні агоністи ЕР4 рецептора згідно способів даного винаходу можна будь-яким способом систематично та/чи місцево (наприклад, на місце перелому кістки, остеотомії або хірургічної ортопедії). Ці способи включають оральний, парентеральний, інтрадуодеальний способи застосування тощо. Як правило, сполуки даного винаходу застосовують орально, але можливе і парентеральне застосування (наприклад, внутрішньовенне, внутрішньом'язове, трансдермальне, підшкірне, ректальне або інтрамедулярне), наприклад, коли орапьне застосування неприйнятне для пацієнта або коли пацієнт не може ковтнути лікарський засіб.
Способи цього винаходу використовуються для лікування і покращення зростання кістки на місці перелому та остеотомій при місцевому застосуванні (наприклад, на місцях переломів кістки остеотомій) селективних агоністів ЕРА рецептора. Селективні агоністи ЕРА рецептора цього винаходу застосовуються на місцях перелому кістки або остеотомії, наприклад, або шляхом ін'єкції сполуки в прийнятному розчиннику (наприклад, маслянистий розчинник такий як арахісова олія) на хрящову пухлину, або у випадках відкритого перелому, шляхом місцевого застосування сполуки у прийнятному наповнювачі, носії або розріджувачі, таких як кістковий віск, демінералізований кістковий порошок, полімерний кістковий цемент, кісткові ущільнювачі, тощо. З іншого боку, локально можна застосовувати шляхом нанесення розчину абу дисперсії сполуки в прийнятному носії або розчиннику на поверхню або їх введенні в твердий або напівтвердий імплантат, що як правило, використовується в хірургічній ортопедії, як, наприклад, дакронова сітка, гель-піна і кістка Кієї, або протези.
У будь-якому випадку кількість і тривалість застосування сполук, звичайно, буде залежати від об'єкта, що лікується, тяжкості хвороби, способу застосування та оцінки лікаря щодо стану хворого. Таким чином, через індивідуальність організму кожного пацієнта, зазначені тут дози є загальними, і лікар повинен титрувати дози лікарського засобу для досягнення бажаного ефекту при лікуванні (наприклад, збільшення кісткової маси), яку, на думку лікаря, є найбільш прийнятним для пацієнта. При виборі способу лікування лікар повинен брати до уваги ряд факторів, таких як початковий рівень кісткової маси, вік хворого, попередні захворювання, а також наявність інших захворювань (наприклад, серцевосудинні захворювання).
Як правило, використовують таку кількість селективного агоніста ЕРА рецептора, що є достатньою для збільшення кісткової маси до рівня, вищого за поріг перелому кістки (це описується в Ше Уопа Неаїкйп
Огдапігайоп 5іщшау, що вже цитувалося тут).
Сполуки селективного агоніста ЕРА рецептора, що використовуються в способах цього винаходу, як правило, призначаються у вигляді фармацевтичних композицій, що містять, принаймні, одну сполуку цього винаходу та фармацевтично прийнятний наповнювач або розчинник. Таким чином, селективний агоніст ЕРА рецептора можна призначати індивідуально прийнятними дозами для орального, інтраназального, парентерального, ректального або трансдермального застосування.
Для орального застосування фармацевтичній композиції можна надати вигляду розчину, суспензії, таблеток; пілюль, капсул, порошку тощо. Таблетки, що містять різні наповнювачі, такі як цитрат натрію, карбонат кальцію і фосфат кальцію, виготовляють з додаванням різних дизінтегрантів, таких як крохмаль, переважно картопляний та з тапіоки, і визначені комплексні силікати, разом із зв'язувальними агентами, такими як полівінілпіролідон, сахароза, желатин і акація. Крім того, для приготування таблеток є корисними змащувальні агенти, такі як стеарат магнію, лауриловий сульфат натрію, і тальк. Подібні тверді композиції також застосовуються як наповнювачі у м'яких і твердих желатинових капсулах; матеріали, яким віддається перевага в цьому випадку, є також лактоза або молочний цукор, а також поліетиленгліколі з високою молекулярною масою. Коли для орального застосування необхідні водні суспензії та/чи елексири, композиції цього винаходу можна комбінувати з різними ппідсолоджувачами, ароматизаторами, фарбниками, емульгуючими агентами та/чи суспендуючими агентами, а також з такими розріджувачами, як вода, етанол, пропіленгліколь, гліцерин та різними їх комбінаціями.
З метою парентерального застосування, розчини можна застосовувати в кунжутовоїй чи арахісоїйї олії або у водному пропіленгліколі, а також у стерильних водних розчинах прийнятних розчинних у воді солей. Такі водні розчини можна буферувати, за необхідності, і рідкі розчинники потрібно спершу ізотонувати прийнятною сіллю або глюкозою. Такі водні розчини є особливо прийнятними для внутрішньовенних, внутрішньом'язових, підшкірних та інтраперитонеапьних ін'єкцій. В такому випадку, стерильне водне середовище можна легко одержати стандартними способами, відомими фахівцеві в даній галузі.
Для трансдермапьного застосування (наприклад, місцевого), готуються розчинні стерильні водні або частково водні розчини (як правило, з концентрацією 0,1-5905), подібні до вищезазначених розчинів для парентерального застосування.
Способи приготування різних фармацевтичних композицій з прийнятною кількістю активного інгредієнта є відомими або зрозумілими з опису для. фахівця в даній галузі Приклади способів приготування фармацевтичних композицій дивіться в ВНетіпдіоп'є РІПаптасеціїсаІ бсіеєпсе5. Маск Рибіїзпіпд Сотрапу,
Еазюп, Ра., 19 Еайоп (1995).
Протокол дослідження
Метою даного дослідження є визначення здатності відновлення кісткової маси оваріектомізованих пацюків за допомогою селективних агоністів ЕРА рецептора, зокрема 7-(2-(3-гідрокси-4-феніл-бутил)-5-оксо-піролідин- 1-іл)-гептанової кислоти.
Пацюків чоловічої статі Зргадие-Оам/єу оваріектомізували (ОУХ) у віці 3,5 місяці. Через десять місяців після оваріектомізації, пацюкам підшкірно вводили наповнювач або 7-(2-(3-гідрокси-4-феніл-бутил)-5-оксо- піролідин-1-іл)у--ептанову кислоту (ЗОмг/кг/день) протягом 28 днів. Пацюків розтинали. Під час аутопсії вилучали у кожного пацюка праве стегно і сканували його, застосовуючи подвійний абсорбційний рентгеноспектральний аналіз ОЕХА, ОНА 1000, Ноіодіс Іпс., УМаййпат, МА), оснащений програмним забезпеченням "Недіопа! Нідчн Незоїшіоп бсап" (Ноіодіс Іпс., Маїат, МА). Розмір поля сканування - 5,08 х 1,902см, дозвіл - 0,0254 х 0,0127см і швидкість сканування - 7,25мм/с. Аналізували відскановані зображення стегон. Вміст мінералів у кістці (ВМС), густину мінералів у кістці (ВМО) усього стегна (М/Р), метафізи дистального стегна (ОЕМ) і тіло стегнової кістки (5) визначали способами, описаними в Н. 7. Ке еї аї.,
Огоїохіїепе, а Мем Евігодеп Апіадопіз/Адопізі, Ргемепів Вопе І 055 іп Омапйесіюотігей Наїз. ЕМООСВІМОЇ! ОС 136:2435-2441,1995.
Результати дослідження і обговорення
Порівняно з ОМХ пацюками, яких обробляли наповнювачем, у ОМХ пацюків, яких обробляли 7-(2-(3- гідрокси-4-феніл-бутил)-5-оксо-піролідин-1-ілу--ептановою кислотою, загальний ВМС стегна збільшився на 1795, загальний ВМО стегна збільшився на 1395, ВМС дистального стегна збільшився на 895, ВМО дистального стегна збільшився на 895, ВМС тіла стегнової кістки збільшився на 2095, і ВМО тіла стегнової кістки збільшився на 1895. У пацюків, яких обробляли 7-(2-(3-гідрокси-4-феніл-бутил)-5-оксо-піролідин-1-ілу-гептановою кислотою, не спостерігалося побічних ефектів типу РОЕ2.
Ці дані показують, що 7-(2-(3З-гідрокси-4-феніл-бутил)-5-оксо-піролідин-1-іл)у-ептанова кислота, селективний РОЕ2 агоніст ЕРА рецептора, стимулює остеогенез і відновлення кісток у остеопорозних ОМХ пацюків.
Загальні експериметри
Спектри ЯМР були записані на спектрометрі Майап Опіу 400 (Мапап Со., Раїо АЮ, Саїїйогпіа) при майже 2370 при 400МГц на протонових ядрах. Хімічні зрушення виражали в частинах на міліон. Максимальні точки позначили наступним чином: с., синглет; д., дублет, т., триплет; к., квартет; м:, мультиплет; ш.с.-широкий синглет. Масспектр хімічної іонізації при атмосферному тиску (АРСІ) одержали на спектрометрі Різопз Ріацогт
ІП. При описуванні інтенсивності іонів, що містять хлорин або бромін, відслідковували очікуване співвідношення інтенсивності (приблизно 3:1 для іонів, що містять 35С1/37СІ) та 1:11 для "Вг/4'Вг) і надавали дані стосовно інтенсивності лише нижчої маси.
Хроматографію середнього тиску проводили з використанням очисної системи Віоїаде (Віоїаде, Буах
Согрогайоп, Спапойцевзмійе, Мігдіпіа) над азотним тиском. Флеш-хроматографію проводили або на сілікагелі
Вакег (40 т) (У.Т. ВакКег, Рпийрзриго, М.9.) або на сілікагелі 60 (ЕМ Зсієпсев, С1рОвіомлп, МУ.) в скляній колонці під низьким азотним тиском. Радіальну хроматографію проводили з використанням хроматотрона (модель 7924Т, Наїтізоп Незеєагсі). Препаративну хроматографію проводили з використанням сілікагелю СЕ Апайеси
Опіріаїєз (20х20 ст) (Апайесп, Іпс. Межа, ОЕ). Диметилформамід (ДМФ), тетрагідрофуран (ТГФ) і дихлорметан (СН2СІ2), що використовувалися як розчинники реакції були безводними, і надавалися компанією АїЇдісн Спетіса! Сотрапу (Міїмаикеє, М/ізсопвіп). Термін "концентрований" стосується виділення розчинника при тиску для аспірації води на роторному випарнику. Абревіатура "год." означає "години". Термін "ТБАФ" стосується тетрабутиламонієвого фториду. Термін "ДМАП" стосується диметиламінопіридину. Терміни "дихлорметан" і "метиленовий хлорид" є синонімами і використовуються почергово в описі, а також в
Прикладах і Приготуваннях.
Приклад 1 7--25-І4-(3-Хлор-феніл)-ЗВ-гідрокси-бутил|-5-оксо-піролідин-1-ілу-гептанова кислота о --е и ! я СЯ он ф
Стадія А: Етиловий естер 7-28-І4-(З-хлор-феніл-3-оксо-бут-1-еніл|-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептанової кислоти. До розчину диметилового естеру І3-(3З-хлор-феніл)-2-оксо-пропіл|-фосфонової кислоти (2,66г, 9,6Зммоль) в ТГФ (Зб5мл) при 0"С додавали порціями Ман (6095 ваги в маслі, 426бмг, 10,7ммоль). Суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 40 хвилин. Суміш охолоджували до 0"С і додавали розчин етилового естеру 7-2А-форміл-5-оксо-піролідин-1-іл)у--ептанової кислоти (з розрахунку 10,бммоль,
одержаного способом, описаним в Приготуванні 7, але з використанням відмінних кількостей реагентів) в ТГФ, і реакцію перемішували протягом 18 год. Додавали АСОН і суміш розбавляли ЕАс. Органічний розчин промивали послідовно насиченим розчином Мансоз (г2х), водою (1х), і соляним розчином (1х). Органічний розчин просушували (Ма5Оа4), фільтрували і концентрували. Залишок очищали за допомогою хроматографії середнього тиску, використовуючи в якості елюанта 1595 ацетон в толуолі для одержання етилового естеру 7- (28-І4-(3-хлор-феніл)-3-оксо-бут-1-еніл|-5-оксо-піролідин-1-ілу-гептанової кислоти (2,26г). "Н-ЯМР (СОСІз») б 7,27-1,15 (м., ЗН), 7,08 (м., 1Н), 6,66 (дд., 1Н), 6,20 (д., 1Н), 4.17 (м., 1Н), 4,11 (к., 2Н), 3,82 (с., 2Н), 3,55 (м., 1Н), 2,72 (М., 1Н), 2,46-2,23 (м., 5Н), 1,79 (м., 1Н), 1,58 (м., 2Н), 1,47-1,20 (м., 9Н); МС 420,2 (Мт), 418,2 (М-1).
Стадія В: Етиловий естер 7-28-|4-(3З-хлор-феніл)-35-гідрокси-бут-1-еніл|-5-оксо-піролідин-1-іл|-гептанової кислоти. До розчину етилового естеру 7-(28-І4-(З-хлор-феніл)-3-оксо-бут-1-еніл|-5-оксо-піролідин-1 -іл)- гептанової кислоти (2,1г, 5,0ммоль) в безводному СНесі» (200мл) додавали (Н)-2-метил-СВ5-оксазаборолідин (ІМ в толуолі, 5мл, 5ммоль) і розчин охолоджували до -45"С. Реакцію перемішували протягом 20 хвилин і додавали катехолборан (1М в ТГФ, 15мл, 15ммоль). Суміш перемішували протягом 18 год. при -4576.
Додавали водний НС (1М, 10Омл) і суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 18 год. Кислотний водний шар відокремлювали і органічний розчин промивали льодяним 1 М Маон (2х), а потім соляним розчином (1х). Органічний розчин просушували (Мд5О), фільтрували і концентрували. В результаті очищення хроматографією середнього тиску (1:11 ЕТОАс:гексани до 8095 ЕОАс в гексанах) одержали етиловий естер 7- (281-І4-(3-хлор-феніл)-35-гідрокси-бут-1-еніл|-5-оксо-піролідин-1-ілу-гептанової кислоти (800 мг), як суміш у приблизному співвідношенні 6:1 35:3А спиртових діастереомерів при "Н-ЯМР. "Н-ЯМР (СОСІз) б 7,23-7,17 (м.,
ЗН), 7,06 (м., 1Н), 5,67 (д.д., 1 Н), 5,46 (дд., 1Н), 4,37 (м., 1Н), 4,08 (к., 2Н), 4,00 (м., 1Н), 3,44 (м., 1Н), 2,80 (м., 2Н), 2,67 (м., 1Н), 2,41-2,12 (м., 5Н), 1,70-1,20 (м., 13Н); МС 422,3 (Мт).
Стадія С: Етиловий естер 7-(25-|І4-(З-хлор-феніл)-ЗВ-гідрокси-бутил|-5-оксо-піролідин-1 іл)-гептанової кислоти. До розчину етилового естеру 7-28-І4-(З-хлор-феніл)-35-гідрокси-бут-1-еніл|-5-оксо-піролідин-1 -іл)- гептанової кислоти (800мг, 1,9б0ммоль) в ЕЮН (50мл) додавали 1095 паладію на вуглеці (80мг). Суміш гідрували на шейкері Раїт при 45 рзі протягом 4,5 год. Каталізатор виділлли шляхом фільтрування через
СеїїефФ з додаванням ЕЮН. В результаті очищення хроматографією середнього тиску (1:1 гексани:ЕТАс до 41 ЕЮАс:гексани) одержали етиловий естер 7-(25-І4-(3-хлор-феніл)-3ЗВА-гідрокси-бутил|-5-оксо-піролідин-1-іл)- гептанової кислоти (625 мг). "Н-ЯМР (СОСІз) б 7,27-7,21 (м., ЗН), 7,09 (м., 1Н), 4,10 (м., 2Н), 3,84 (м., 1Н), 3,61 (м., 2Н), 2,90 (м., 1Н), 2,78 (дд., 1Н). 2,68 (м., 1Н), 2,47-2,25 (м., 4Н), 2,12 (м., 1Н), 1,92-1,22 (м., 17Н); МО 424 3 (МАТ).
Стадія 0: 7-(25-І4-(З-хлор-феніл)-3ЗВА-гідрокси-бутил|-5-оксо-піролідин-1-ілі-гептанова кислота. До розчину етилового естеру 7-(25-І4-(З-хлор-феніл)-3В-гідрокси-бутил|-5-оксо-піролідин-1-іліу-гептанової кислоти (595мг, 1,40ммоль) в ЕЮН (25мл) додавали 2М Маон (бмл). Суміш перемішували протягом 24 год. при кімнатній температурі і концентрували у вакуумі до приблизно 3/4 вихідного об'єму. Водний 1 М НСІ додавали для одержання рівня рН 2. Водний розчин промивали метиленхлоридом (Зх). Комбіновані органічні шари промивали водою, а потім соляним розчином. Органічний розчин просушували (Ма5О»4), фільтрували і концентрували для одержання сполуки, зазначеної в заголовку Прикладу 1 (500мг). "Н-ЯМР (СОСІз) б 7,28- 7,18 (м., ЗН), 7,08 (м., 1Н), 3,84 (м., 1Н), 3,58 (м., 2Н), 2,90 (м., 1Н), 2,77 (дд., 1Н), 2,68 (м., 1Н), 2,43-2,28 (м.,
АН), 2,10 (м., 1Н), 1,78 (м., 1Н), 1,66-1,22 (м., 13Н); МС 396,2 (М-н1), 394 2 (М-1).
Приклад 2 7-25-ІЗВ-Гідрокси-4-(З-трифторметил-феніл)-бутил|-5-оксо-піролідин-1-іліу-гептанова кислота
С.
СОоон суль
СЕ. он
Стадія А: Етиловий естер 7-(2-оксо-58-|З-оксо-4-(З3--рифторметил-феніл)-бут-1-еніл|-піролідин-1-іл)- гептанової кислоти. Дотримуючись процедури, описаної в Прикладі 1, Стадія А, аніон, одержаний з диметилового естеру (2-оксо-3-(З-трифторметил-феніл)-пропіл|-фосфонової кислоти (4,16г, 13,40ммоль) та ман (6095 в маслі, 590мг, 14,7ммоль) піддавали реакції з етиловим естером 7-(2А-форміл-5-оксо-піролідин-1- ілу-гептанової кислоти (з розрахунку 14,74ммоль) протягом 24 год. В результаті очищення хроматографією середнього тиску (градієнт розчинника 2095 ЕЮАс в гексанах до ЕЮАс) одержали етиловий естер 7-(2-оксо- 5А8-ІЗ-оксо-4-(З-трифторметил-феніл)-бут-1-еніл|-піролідин-1-іл)-гептанової кислоти (4,29Гг). 1ІЄН-ЯМР (СОСІз) б 7,52 (д., 1 Н), 7,44 (м., 2Н), 7,37 (д., 1 Н), 6,67 (д.д., 1 Н), 6,22 (д., 1Н)у, 4,80 (м., 1Н), 4,08 (к., 2Н), 3,90 (с., 2Н), 3,54 (м., 1 Н), 2,70 (м., 1 Н), 2,37 (м., 2Н), 2,24 (м., ЗН), 1,78 (м., 1Н), 1,56 (м., 2Н), 1,44- 1,20 (м., 9Н); МС 454.2 (Мат), 452,2 (М-1).
Стадія В: Етиловий естер 7-(28-І35-гідрокси-4-(З-трифторметил-феніл)-бут-1-еніл|-5-оксо-піролідин-1-іл)- гептанової кислоти. До розчину етилового естеру 7-(2-оксо-58-Ї3-оксо-4-(З-трифторметил-феніл)-бут-1-еніл|- піролідин-1-ілу-гептанової кислоти (1,5г, 3,31ммоль) та (Н)-2-метил-СВ5-оксазаборолідину (1М в толуолі,
О,бБмл, О0,5ммоль) в СНоСіІ» (100мл) при -45"С додавали краплями катехолборан (1М в ТГФ, 9,9мл, 9,9ммоль).Розчин перемішували протягом 24 год. при -45"С і додавали 1 М НС. Суміш перемішували протягом 1 год. при кімнатній температурі і відділялли шари. Водний розчин промивали СНесі» (2х) і комбіновані органічні шари промивали послідовно льодяним 0,5М МаоОН та соляним розчином (двічі).
Органічний розчин просушували (Мо95С.), фільтрували і концентрували. В результаті очищення хроматографією середнього тиску (5095 ЕТОАс в гексанах до 6095 ЕЮАс в гексанах до 8095 ЕЮАсС в гексанах до ЕЮАс до 595 МеОН в СНесіг2) одержали етиловий естер 7-28-ІЗ5-гідрокси-4-(З-трифторметил-феніл)-бут- 1-еніл|-5-оксо-піролідин-1-іліу-гептанової кислоти (1,23г) як суміш у приблизному співвідношенні 5,5:1 35:38 спиртових діастереомерів при аналізі НРІ С. "Н-ЯМР (СОСІз) б 7,51-7,35 (м., 4Н), 5,72 (д.д., 1 Н), 5,50 (д.д., 1
Н), 4,44 (м., 1Н), 4,09 (к., 2Н), 4,01 (м., 1Н), 3,44 (м., 1Н), 2,90 (д., 2Н), 2,71 (м., 1Н), 2,37-2,12 (м., 5Н), 1,70-1,21 (м., 13Н); МС 456,3 (М--1), 454,3 (М-1).
Стадія С: Етиловий естер 7-(25-ІЗВ-гідрокси-4-(З-трифторметил-феніл)-бутил|-5-оксо-піролідин-1-іл)- гептанової кислоти. Дотримуючись процедури, описаної в Прикладі 1, Стадія С, розчин етилового естеру 7- (2в8-ІЗ5-гідрокси-4-(З-трифторметил-феніл)-бут-1-еніл|-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептанової кислоти (1,18г, 2,59ммоль) в ЕЮН (50мл) гідрували в присутності 1095 паладію на вуглеці (120мг) при 40-45 рві на шейкері
Раїт протягом 24 год. В результаті очищення хроматографії середнього тиску (5095 ЕЮАс в гексанах до ЕЮАсС до 19565, МеОН в СНеоСіІг до 390 МеонН в СНеСіІ» до 5906 Меон в СНесСіІ2 до 10906 Меон в СНесСіг) одержали етиловий естер 7-25-ІЗВ-гідрокси-4-(З-трифторметил-феніл)-бутил|-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептанової кислоти (1,08г). "Н-ЯМР (СОСІз) б 7,51-7,39 (м., 4Н), 4,09 (к., 2Н), 3,86 (м., 1Н), 3,60 (м., 2Н), 2,89 (м., 2Н), 2,76 (м., 1Н), 2,33 (м., 4Н), 2,11 (м., 1Н), 1,80 (м., 1Н), 1,68-1,21 (м., 16Н).
Стадія 0: Етиловий естер 7-(25-ІЗВ-гідрокси-4-(З-трифторметил-феніл)-бутил|-5-оксо-піролідин-1-іл)- гептанової кислоти. Дотримуючись процедури, описаної в Прикладі 1, Стадія ЮО, етиловий естер 7-(25-ІЗВ- гідрокси-4-(З-триФторметил-феніл)-бутил|-5-оксо-піролідин-1-ілігептанової кислоти (1,93г, 4,22ммоль) гідролізували 6М Маон (26 мл) в ЕЮН (52 мл) протягом 24 год. В результаті хроматографії середнього тиску (ЕЮАс до 195 МеОнН в СНесі» до 395 МеОН в СНесі» до 595 МеОН в СНесі» до 1095 МеОнН в СНеосіІ2) одержали 7-25-ІЗВ-гідрокси-4-(З-трифторметил-феніл)-бутил|-5-оксо-піролідин-1-ілу-гептанову кислоту (1,66 г). "Н-ЯМР (СОСІз) 6 7,51-7,39 (м., 4Н), 3,88 (м., 1Н), 3,58 (м., 2Н), 2,84 (м., ЗН), 2,34 (м., АН), 2,10 (м., 1Н), 1,80 (м., 1Н), 1,67-1,26 (м., 13Н); МС 430,4 (М-н1).
Стадія Е: Натрієва сіль 7-(25-ІЗВ-гідрокси-4-(З-трифторметил-феніл)-бутил|-5-оксо-піролідин-1-іл)- гептанової кислоти. До розчину 7-25-ІЗВ-гідрокси-4-(З-трифторметил-феніл)-бутил|-5-оксо-піролідин-1 -іл)- гептанової кислоти (1,66г, 3,87ммоль) в ЕЮН (1бмл) додавали Мансоз (325мг, 3,87ммоль) у воді ( мл). Суміш перемішували протягом 5 год. і концентрували у вакуумі. Залишок азеотропували СНесі» (Зх) для одержання натрієвої солі сполуки, зазначеної у заголовку Прикладу 2 (1,698г.). "Н-ЯМР (СОСІзв) б 7,48 (м., 4Н), 3,80 (м., 1Н), 3,69 (м., 1Н), 3,52 (м., 1Н), 2,94 (м., 1Н), 2,81 (м., 2Н), 2,32 (м., 2Н), 2,13 (м., ЗН), 1,81 (м., 1Н), 1,69-1,26 (м., 13Н); МО 430,3 (М-Ма--1), 428,2 (М-Ма-1).
Приклад З 55-І4-(3-Хлор-феніл)-3-гідрокси-бутил|-1-І|І6-(2Н-тетразол-5-іл)-гексиліІ-піролідин-2-он о; мем руч
М | ; М ра а у Че он Щі
Стадія А: 7-28-І14-(3-Хлор-феніл)-3-оксо-бут-1-еніл|-5-оксо-піролідин-1-ілІі-гептаннітріл. Дотримуючись процедури, описаної в Прикладі 2, Стадія А, аніон, одержаний з диметилового естеру ІЗ-(З-хлор-феніл)-2-оксо- пропіл|- фосфонової кислоти (3,35г, 12,12ммоль) та Ман,(6о095 в маслі, 53Змг, 13,3ммоль) піддавали реакції з 7- (2А8-форміл-5-оксо-піролідин-1-іл)у-гептаннітрілом (з розрахунку 13,3ммоль) протягом 18год. В результаті хроматографії середнього тиску (2095 ЕЮАс в гексанах до 8095 ЕЮАсС в гексанах) одержали 7-(28-(4-(З-хлор- феніл)-3-оксо-бут-1-еніл|-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептаннітріл (1,52г). "Н-ЯМР (СОСІз) б 7,24 (м., 2Н), 7,17 (с., 1Н), 7,06 (м., 1Н), 6,64 (д.д., 1Н), 6,20 (д., 1 Н), 4,15 (м., 1Н), 3,80 (с., 2Н), 3,50 (м., 1Н), 2,72 (м., 1Н), 2,46-2,20 (м., 5Н), 1,78 (м., 1Н), 1,59 (м., 2Н), 1,40 (м., 4Н), 1,24(м.,2Н).
Стадія В: О0/07-(25-І4-(3-(хлор-феніл)-3-оксо-бутил|-5-оксо-піролідин-1-іл) гептаннітріл. Дотримуючись процедури Прикладу 1, Стадія С, 7-(28-І4-(З-хлор-феніл)-3-оксо-бут-1-еніл|-5-оксо-піролідин-1-ілу-гептаннітріл (86Омг, 2,3!ммоль) в Меон (40мл) гідрогенували в присутності 1090 паладію на вуглеці (Збмг) протягом 1 год.
В результаті очищення радіальною хроматографією (гексани до 2095 ЕЮАс в гексанах до 7095 ЕЮАс в гексанах) одержали 7-(25-І4-(3З-хлор-феніл)-3-оксо-бутил|-5-оксо-піролідин-1 -ілу-гептаннітріл (730мГг).
Стадія С: 7-(25-І4-(3-Хлор-феніл)-3-гідрокси-бутил)-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептаннітріл. До розчину 7-25-
І4-(З-хлор-феніл)-3-оксо-бутил|-5-оксо-піролідин-1-ілу-гептаннітрілу (730мг, 1,897ммоль) в Меон (ЗОмл) при 0"С додавали Мавна (З5мг, 0,921ммоль). Суміш перемішували при 0"С протягом 45 хвилин і додавали воду.
Леткі компоненти виділили у вакуумі і водний розчин, що залишився, розбавляли метиленхлоридом.
Органічний розчин промивали водою, а потім соляним розчином, просушували (Мда5О»), фільтрували і концентрували. В результаті очищення хроматографією середнього тиску (1:11 гексани: ЕЮАс до ЕЮАс до 390
Меон в СНеосі) одержали 7-25-І4-(3-хлор-феніл)-3-гідрокси-бутил|-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептаннітріл (73ОмгГг). 1ІТН-ЯМР (СОСІз) б 7,22 (м., ЗН), 7,07 (д., 1Н), 3,80 (м., 1Н), 3,57 (м., 2Н), 2,88 (м., 1Н), 2,78 (м., 1 Н), 2,64 (м., 1
Н), 2,91 (м., 4Н), 2,10 (м., 1 Н), 1,65-1,22 (м., 14Н); М5 377,3 (М-н1).
Стадія 0: 55-І4-(3-Хлор-феніл)-3-гідрокси-бутил|-1-(6-(2Н-тетразол-5-іл)-гексил|-піролідин-2-он. Розчин 7- (25-І4-(З-хлор-феніл)-3-гідрокси-бутил|-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептаннітрілу (730мг,1,94ммоль), триметилсілілазиду (0,6Змл, 0,475ммоль) і оксид дибутилтину (96бмг, З,87ммоль) в толуолі (ЗОмл) нагрівали із зворотнім холодильником протягом 18 год. Леткі компоненти виділяли у вакуумі і залишок розводили СНесі».
Органічний розчин промивали 1 М НС, а потім соляним розчином. Органічний розчин просушували (Ма5Оа), фільтрували і концентрували. Залишок очищали хроматографією середнього тиску, використовуючи в якості елюанта ЕАс до 2956 МеоН в СНоСі» до 795 МеонН в СНоСіІ» для одержання комплексу ТМС. Залишок розбавляли МеОнН і додавали 2М НОСІ, розчин перемішували протягом 40 хвилин. Розчин розбавляли СНесСі» і органічний шар промивали водою, а потім соляним розчином. Органічний розчин просушували (Мда5о), фільтрували і концентрували. Залишок очищали хроматографією середнього тиску, використовуючи в якості елюанта ЕОАс до 795 МеонН в СНоСіІ?г для одержання 55-|4-(З-хлор-феніл)-3-гідрокси-бутил|-1-(6-(2Н- тетразол-5-іл)-гексил|-піролідин-2-он (521мг). "Н-ЯМР (СОСІЗз) б 7,23 (м., ЗН), 7,09 (д., 1Н), 3,85 (м., 1Н), 3,66 (м., 1Н), 3,53 (м., 1Н), 2,96 (м., ЗН), 2,81 (м., 1Н), 2,70 (м., 1Н), 2,44 (м., 2Н), 2,18 (м., 1Н), 1,88-1,27 (м., 14Н);
МС 420,2 (Ма1), 418,3 (М-1).
Приклад 4 55-ІЗВ-Гідрокси-4-(З-трифторметил-феніл)-бутил/|-1-(І6-(2Н-тетразол-5-іл)-гексил|-піролідин-2-он
ММ уч /
М М
С он
Стадія А: 7--2-Оксо-58-(3-оксо-4-(З-трифторметил-феніл)-бут-1-еніл|-піролідин-1-іл)-гептаннітрил.
Дотримуючись процедури, описаної в Прикладі 1, Стадія А, аніон, одержаний з диметилового естеру (2-оксо-3- (З-трифторметил-феніл)-пропіл|-фосфонової кислоти (2,68г, 8,б4ммоль) та Ман (60595 в маслі, 400мг, 10ммоль) піддавали реакції з 7-(28-форміп-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептаннітрилом (з розрахунку ТОммоль) протягом 18 год. В результаті очищення хроматографією середнього тиску (3095 ЕТОАс в гексанах до 8095 ЕЮАс в гексанах) одержали /7-(2-оксо-58-(З-оксо-4-(З-т-рифторметил-феніл)-бут-1-еніл|-піролідин-1-ілу-гептаннітріл (1,2г). "Н-ЯМР (СОСІЗз) б 7,52 (м., 1Н), 7,45 (м., 2Н), 7,37 (м., 1Н), 6,67 (д.д., 1Н), 6,23 (д., 1Н), 4,18 (м., 1Н), 3,90 (с., 2Н), 3,53 (м., 1Н), 2,73 (м., 1Н), 2,45-2,23 (м., 5Н), 1,79 (м., 1Н), 1,60 (м., 2Н), 1,41 (м., 4Н), 1,24 (м., 2Н); М5 407,2 (Мат), 405,3 (М-1).
Стадія В: 7-28-ІЗ35-Гідрокси-4-(З-трифторметил-феніл)-бут-1-еніл|-5-оксо-піролідин-1-іл)у-гептаннітрил. До розчину 7-2-оксо-58-|З-оксо-4-(З-трифторметил-феніл)-бут-1-еніл|-піролідин-1-іліу-гептаннітрилу (1,14г, 2,81ммоль) та (А)-2-метил-СВ5-оксазаборолідину (1М в толуолі, 0,42 мл, 0,42 ммоль) в СНесСі» (112 мл) при - 45"С краплями додавали катехолборан (1М в ТГФ, 8,4мл, 8,4ммоль). Суміш перемішували при -457С протягом
ТІ8год. і додавали 1М НСІ. Суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 40 хвилин і відокремлювали шари. Органічний розчин промивали холодним 1 М Маон (тричі).
Органічний розчин промивали послідовно 1 М НСІЇ, водою і соляним розчином. Органічний розчин просушували (Ма5О4), фільтрували і концентрували. В результаті хроматографії середнього тиску (1:1 гексани: ЕЮАс до 8095 ЕОАс в гексанах) одержали 7-(28-|ІЗ35-гідрокси-4-(З--рифторметил-феніл)-бут-1-еніл|-
Б-оксо-піролідин-ії -ілі-гептаннітріл (820 мг) як приблизне співвідношення 2,5:1 35:38 спиртових діастереомерів при "Н-ЯМР, "Н-ЯМР (СОСІз) б 7,51.7,38 (м., АН), 5,72 (д.д., 1Н), 5,49 (Д.Д., 1Н), 4,45 (м., 1Н), 4,02 (м., 1Н), 3,47 (м., 1Н), 2,90 (м., 2Н), 2,71 (м., 1Н), 2,34 (м., 4Н), 2,18 (м., 1Н), 1,66 (м., 4Н), 1,44 (м., 4Н), 1,27 (м.,2Н); М5 409,2 (М--1).
Стадія с. 7-28-І35-гідрокси-4-(З-трифторметил-феніл)-бутил|-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептаннітрил.
Дотримуючись процедури, описаної в Прикладі 1, Стадія С, 7-28-І35-гідрокси-4-(З-трифторметил-феніл)-бут- 1-еніл|-5-оксо-піролідин-1-ілу-гептаннітрил (810мг) в Меон (40мл) гідрували в присутності 1095 паладію на вуглеці (100мг) при 50 рзі протягом 18 год. на шейкері Раїт. В результаті очищеня хроматографією середнього тиску (1:11 гексани:ЕТОАс до ЕАс до 3956 МеоН в СНосіг) одержали 7-(25-|ІЗВ-гідрокси-4-(З-трифторметил- феніл)-бутил|-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептаннітріл (720 мг). "Н-ЯМР (СОСІз) б 7,44 (м., АН), 3,84 (м., 1Н), 3,58 (м., 2Н), 2,88 (м., 2Н), 2,73 (м., 1Н), 2,32 (м., 4Н), 2,11 (м.,1Н), 1,78 (м., 1 Н), 1,65-1,37 (м., 11 Н), 1,30 (м., 2Н); МС 411,2 (Мат).
Стадія 0: 55-ІЗВ-Гідрокси-4-(З-трифторметил-феніл)-бутил/|-1-(6-(2Н-тетразол-5-іл)-гексил|-піролідин-2-он.
Дотримуючись процедури, описаної в Прикладі 3, Стадія 0, 7-(25-ІЗВ-гідрокси-4-(З-трифторметил-феніл)- бутил|-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептаннітріл (710мг, 1,73ммоль) піддавали реакції з азидотриметилсиланом (399мг, 3,4б6ммоль) та дибутилтиновим оксидом (4Змг, 1,7ммоль) в толуолі (25мл), нагрівали із зворотнім холодильником протягом 18 год. Леткі компоненти вилучали у вакуумі і залишок розводили СНесСі». Органічний розчин промивали послідовно 1 М НСЇІ (двічі), водою (1 раз) і соляним розчином (1 раз). Органічний розчин просушували (М9502), фільтрували і концентрували. В результаті очищення залишку хроматографією середнього тиску, використовуючи в якості елюанта ЕТАс до 295 Меон в СНосСі» до 896 МеонН в СНесІіг, одержали 55-ІЗВ-гідрокси-4-(З-трифторметил-феніл)-бутил|/-1-І6-(2Н-тетразол-5-іл)у-гексил|-піролідин-2-он (45Омг). "Н-ЯМР (СОСІз) б 7,44 (м., АН), 3,87 (м., 1 Н), 3,65 (м., 1 Н), 3.50 (м., 1Н), 3,01-2,73 (м., 5Н),2,42 (м., 2Н), 2,16 (м., 1Н), 1,86-1,23 (м., 14Н); МС 454,4 (Мн), 452,4 (М-1).
Стадія Е: Натрієва сіль 55-ІЗВ-гідрокси-4-(З--т-рифторметил-феніл)-бутил|-1-(6-(2Н-тетразол-5-іл|-гексил|- піролідин-2-он. Дотримуючись процедури, описаної в Прикладі 2, Стадія Е, в результаті обробки 55-ІЗВ- гідрокси-4-(З-трифторметил-феніл)-бутилі/-1-(6-(2Н-тетразол-5-іл|-гексил|-піролідин-2-он (428мг, 0,944ммоль)
Мансо» (7амг 0 діммапь) волепжапи натпієвм сіпь гАЗОМг). ІННЯяЯМеР (СОСІз) б 7,48 (м., АН), 3,79 (м., 1Нн), 3,67 (м., г , ще МЕ (м., 1Н), 1,84-1,27 (м., 14Н); МС 454,4 (М-Ма--1), 452,4 (М-
Ма-: . г. М и зазол-Б5-іл)-гексил|-піролідин-2-он . ТЕО і
Стадія А: 7-2-(3-(трет-Бутил-диметил-сіланилокси)-4-(4-фтор-феніл)-бутил|-5-оксо-піролідинін- 1 -іл)- гептаннітріл. Розчин 5-|3-(трет-бутил-диметил-сіланилокси)-4-(4-фтор-феніл)-бутил|-піролідин-2-ону (150мг, 0,41ммоль) в ДМФ (5мл) додавали до Ман (6095 ваги в маслі, 1бмг, 0,41ммоль) в ДМФ (1Омл). Через 1,5 год. додавали 7-бромгептаннітріл (7Змг, 0,41ммоль) в ДМФ (5мл) і суміш перемішували протягом 2,5 год. при 9076.
Додавали воду (20 мл) і водний розчин промивали ЕЮАс (4х15мл). Комбіновані органічні розчини промивали водою (2х15мл), просушували (Ма5О»4), фільтрували і концентрували. В результаті очищення залишку хроматографією середнього тиску (1:1 гексани:ЕОАс) одержали 7-(2-І3-(трет-бутил-диметил-сіланилокси)-4- (4-фтор-феніл)-бутил/|-5-оксо-піролідин-1-іп)-гептаннітріл (161мг). "Н-ЯМР (СОСІз) б 7,09 (м., 2Н), 6,95 (м., 2Н), 3,81 (М., 1Н), 3,54 (м., 2Н), 2,86 (м., 1Н), 2,68 (м., 2Н), 2,29 (м., 4Н), 2,06 (м., 1Н), 1,74-1,23 (м., 13Н), 0,85 (а,
ОН), 0,04 (м., ЗК), 0,19 (м., ЗК); М 475.1 (М-н1).
Стадія В: 7-(2-І4-(4-Фтор-феніл)-3-гідрокси-бутил|-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептаннітріл. До розчину 7-(2-(3- (трет-бутил-диметил-сіланилокси)-4-(4-фтор-феніл)-бутил|-5-оксо-піролідин-1-ілу-гептаннітрілу (158мг, 0,33Зммоль) в ТГФ (20мл) при 0"С додавали ТВАЕ (1М в ТГФ, 0,50мл, 0,50ммоль). Суміш перемішували при кімнатній температурі протягом З год. і додавали насичений водний МансСоз. Леткі компоненти виділяли у вакуумі. Водний розчин, що залишився, промивали СНСіІз (4х5мл) і комбіновані органічні розчини просушували (М9502), фільтрували і концентрували. В результаті очищення залишка хроматографією середнього тиску (1:11 гексани: ЕЮАс до ЕТАс) одержали 7-(2-14-(4-фтор-феніл)-3-гідрокси-бутил|-5-оксо- піролідин-1-ілу-гептаннітріл (82мг). "Н-ЯМР (СОСІз) б 7,15 (м., 2Н), 7,00 (м., 2Н), 3,77 (м., ЛН), 3,58 (м., 2Н), 2,89 (м., 1Н), 2,79 (м., 1Н), 2,64 (м., 1Н), 2,34 (м., 4Н), 2,12 (м., 1Н), 1,68-1,24 (м., 14Н); МС 361,2 (М-1).
Стадія с. 5-І4-(4-Фтор-феніл)-3-гідрокси-бутил|-1-І6-(2Н-тетразол-5-іл)-гексил|-піролідин-2-он.
Дотримуючись процедури, описаної в Прикладі 3, Стадія 0, 7-2-І4-(4-фторо-феніл)-3-гідрокси-бутил|-5-оксо- піролідин-1-ілу-гептаннітріл (71мг, 0,197ммоль) піддавали реакції з азидотриметилсіланом (45мг, 0,394ммоль) та дибутилтиновим оксидом (5мг, 0,02ммоль) в толуолі (1Омл), нагрівали із зворотнім холодильником протягом 16 год. Додавали азидотриметилсілан (200мг) та дибутилтиновий оксид (5Омг) і суміш нагрівали із зворотнім холодильником протягом 5 год. Суміш підкислювали 1М НСІ до рН-2 (бБмл) і водний розчин промивали ЕЮАс (4х10мл). Комбіновані органічні розчини просушували (Мо5О4), фільтрували і концентрували. В результаті очищення хроматографією середнього тиску (ЕІЮАс до 39:1 ЕЮАс:Меон до 19:1
ЕЮАСс:Меон) одержали сполуку, зазначену у заголовку Прикладу 5А (39мг). "Н-ЯМР (СОСІз) б 7,16 (м., 2Н), 7,00 (м., 2Н), 3,81 (м., 1Н), 3,68 (м., 1Н), 3,53 (м., 1Н), 2,99 (м., ЗЕ), 2,80 (м., 1Н), 2,68 (м., 1Н), 2,47 (м., 2Н), 2,20 (м., 1Н), 1,88-1,22 (м., 14Н); МС 404,3 (Ма1); 402,3 (М-1).
Приклад 6 5-(4-Біфеніл-З-іл-З-гідрокси-бутил)-1-(6-(2Н-тетразол-5-іл)-гексил|-піролідин-2-он о мМ нн /МН
М М
ТЯ
Стадія А: 742-І4-Біфеніл-3-іл-3-«трет-бутил-диметил-сіланилокси)-бутил|-5-оксо-піролідин-1-іл)- гептаннітріл. Дотримуючись процедури, описаної в Прикладі 5, Стадія А, аніон, одержаний з 5-І4-біфеніл-З-іл-
З-(трет-бутил-диметил-сіланилокси)-бутил|-піролідин-2-он (239,1мг, 0,564ммоль) та Манмо5 (1М в ТФ, 0,67мл, 0,67ммоль) алкіпували 7-бромгептаннітрілом (118 мг, 0,620 ммоль) при 707С протягом 24 год. В результаті очищення хроматографією середнього тиску (СНесСіг до 1 95 Меон в СНесСі» до 296 МеОН в СНесСіг до 496 МеоН в СНесСіг) одержали 7-(2-|І4-біфеніл-З-іл-3-«(трет-бутил-диметил-сіланилокси)-бутил|-5-оксо- піролідин-1-ілу-гептаннітріл (187мг). МО 533,3 (М--1).
Стадія В: 7-І2-(4-Біфеніл-3-іл-З-гідрокси-бутил)-5-оксо-піролідин-1-іл|-гептаннітріл. Дотримуючись процедури, описаної в Прикладі 5, Стадія В, 7-(2-І4-біфеніл-3-іл-3-(трет-бутил-диметил-сіланилокси)-бутил|-5- оксо-піролідин-1-ілу-гептаннітріл (187мг, 0,351ммоль) депротектували ТВАЕ (1М в ТГФ, 0,53мл, 0,53ммоль).
Додавали при 0"С і суміш перемішували при кімнатний температурі протягом 24 год. В результаті очищення хроматографією середнього тиску (СН2СІ2 до 1 95 МеонН в СНесі» до 296 МеОН в СНесі» до 695 МеонН в СНесСі» до 1095 МеоН в СНесСіІ») одержали 7-(2-(4-біфеніл-З-іл-З-гідрокси-бутил)-5-оксо-піролідин-1-іл|-гептаннітріл (85мг). "Н-ЯМР (СОСІз) б 7,58 (м., 1Н), 7,51-7,33 (м., 4Н), 7,21-7,12 (м., 4Н), 3,85 (м., 1Н), 3,60 (м., 2Н), 2,90 (м., 1Н), 2,83-2,60 (м., 2Н), 2,45-2,30 (м., 4Н), 2,14 (м., 1Н), 1,73-1,25 (м., 14Н).
Стадія С: 5-(4-Біфеніл-З3-іл-З-гідрокси-бутил)-1-(6-(2Н-тетразол-5-іл)-гексил|-піролідин-2-он. Дотримуючись процедури, описаної в Прикладі 3, Стадія О, 7-(2-(4-біфеніл-З-іл-З3-гідрокси-бутил)-5-оксо-піролідин-1-іл|- гептаннітріл (109мг, 0,260ммоль) піддавали реакції з азидотриметилсіланом (0,б9мл, 0,52ммоль) та дибутилтиновим оксидом (11мг, 0,044ммоль) в толуолі (5,3мл) і нагрівали із зворотнім холодильником протягом 72 год. Суміш охолоджували і додавали воду. Суміш підкислювали 1 М НСІ до рн-а2 і водний розчин промивали 595 МеонН в СНесі» (тричі). Комбіновані органічні розчини просушували (М950О4), фільтрували і концентрували. В результаті очищення хроматографією середнього тиску (1:11 гексани:ЕІЮАс до ЕТОАс до 290
Меон в СНесСіІ ю 495 Меон іп СНеоСі» ю 895 МеоН іп СНеСіг) одержали сполуку, зазначену у заголовку
Прикладу 6 (107мг). "Н-ЯМР (СОСІз) б 7,57 (м., 1 Н), 7,51-7,32 (м., 4Н), 7,25-7,13 (м., 4Н), 3,91 (м., 1Н), 3,74- 3,50 (м., 2Н), 2,96 (м., ЗК), 2,77 (м., 1Н), 2,50 (м., 2Н), 2,22 (м., 1Н), 2,07 (м., 1Н), 1,90-1,22 (м., 14Н); МС 462,2 (М--1), 460,1 (М-1).
Приклад 7 5-І4-(3-Фтор-феніл)-3-гідрокси-бутил/-1-І(І6-(2Н-тетразол-5-іл)-гексил|-піролідин-2-он . -М і" х. /МН
М М
Е он
Стадія А: О0/007-(2-ІЗ-(трет-Бутил-диметил-сіланилокси)-4-(3-Фтор-феніл)-бутил|-5-оксо-піролідин-і -іл)- гептаннітріл. Дотримуючись процедури, описаної в Прикладі 5, Стадія А, аніон, одержаний з 5-|3-(трет-бутил- диметил-сіланилокси)-4-(3-фтор-феніл)-бутил|-піролідин-2-ону (250мг, 0,684ммоль) та Манмо5 (1М в ТІФ,
О,8Омл, 0,80ммоль) алкілували 7-бромгептаннітрілом (142мг, 0,748ммоль) при 70"С протягом 72 год. В результаті очищення хроматографією середнього тиску (1:11 гексани:ЕОАс до ЕІЮАс до 595 Меон в СНесіг) одержали 7-(2-І3З-(трет-бутил-диметил-сіланилокси)-4-(3-фтор-феніл)-бутил|-5-оксо-піролідин-1-ілу-гептаннпріл (261,7мг). "Н-ЯМР (СОСІз) б 7,26 (м., 1Н), 6,92 (м., ЗЕ), 3,89 (м., 1Н), 3,59 (м., 2Н), 2,89 (м., 1Н), 2,75 (м., 2Н), 2,36 (м., 4Н), 2,11 (м., 1Н), 1,72-1,26 (м., 13Н), 0,89 (с., 9Н), 0,09 (в, 6Н); МС 475,3 (М-н1).
Стадія В: О0/07-2-І4-(3-Фтор-феніл)-3-гідрокси-бутил|-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептаннітріл. Дотримуючись процедури, описаної в Прикладі 5, Стадія В, 7-(2-І3-«трет-бутил-диметил-сіланилокси)-4-(3З-фтор-феніл)- бутил|-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептаннітріл (261,7 мг, 0,551ммоль) депротектували ТВАБ М в тетрагідрофурани, 0,8Змл, 0,8Зммоль). Додавали при 0"С і суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 24 год. В результаті очищення хроматографією середнього тиску (СНесСіг до 1 96 МеОН в СНесі» до 295 МеОнН в СНесі» до 495 МеОнН в СНеосі2) одержали 7-(2-І4-(3-фтор-феніл)-3-гідрокси-бутил|-5-оксо-піролідин- 1-іл)-гептаннпріл (141мг). "Н-ЯМР (СОСІз) б 7,32 (м., 1Н), 6,98 (м., ЗЕ), 3,86 (м., 1Н), 3,64 (м., 2Н), 2,99-2,80 (м., 2Н), 2,71 (м., 1Н), 2,38 (м., 4Н), 2,16(м., 1Н), 1,74-1,29 (м., 14Н); МС 361,3 (Ма1).
Стадія с. 5-І4-(3-Фтор-феніл)-3-гідрокси-бутил/-1-(6-(2Н-тетразол-5-1л)-гексил)| піролідин-2-он.
Дотримуючись процедури, описаної в Прикладі 6, Стадія С, 7-(2-І(4-(3-фтор-феніл)-3-гідрокси-бутил|-5-оксо- піролідин-1-ілі-гептаннітріл (141,3мг, 0,392ммоль) піддавали реакції з азидотриметилсіланом (0,210мл, 1,57ммоль) та дибутилтиновим оксидом (29мг, 0,11бммоль) в толуолі (дЗмл) і нагрівали із зворотнім холодильником протягом 72 год. В результаті очищення хроматографією середнього тиску (СНоСі» до 295
Меон в СНесСі» до 495 Меон в СН»Ст12 до 695 Меон в СНесСіг) одержали сполуку, зазначену у заголовку
Прикладу 5С (101,5мг). "Н-ЯМР (СОсіз) б 7,26 (м., 1 Н), 6,94 (м,, ЗЕ), 3,87 (м., 1Н), 3,70 (м., 1Н), 3,52 (м., 1Н), 2,98 (м., ЗК), 2,78 (м., 2Н), 2,48 (м., 2Н), 2,20 (м., 1Н), 1,89-1,24 (м., 14Н); МО 404,2 (Ма1), 401,9 (М-1).
Приклад 8 55-І4-(3-Хпор-феніл)-ЗВА-гідрокси-бутил/|-1-(6-(2Н-тетразол-5-іл)-гексил|-піролідин-2-он мем
Цит рн Жн
М
; Сі он
Стадія А: 7-28-|ІЗ5-гідрокси-4-(З-хлор-феніл-бут-1-еніл|-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептаннітрілу. До розчину 7- (2-оксо-58-|З-оксо-4-(З-хлор-феніл)-бут-1-еніл|-піролідин-1-ілу-гептаннітріл (1,62г, 4,34ммоль) в СНеосі» (200мл) при -45"С додавали (Н)-2-метил-«СВ5-оксазаборолідин (1М в толуолі, 1,3мл, 1,3ммоль). Після перемішування протягом 20 хвилин краплями додавали катехолборан (1М в ТГФ, 1Змл, 1Зммоль). Реакцію перемішували при -457"С протягом 16 год. і додавали 1 М НС. Суміш нагрівали до кімнатної температури і відділяли шари.
Органічний розчин промивали охолодженим 1 М Маон (тричі). Органічний розчин промивали послідовно 1 М
НОЇ, водою і соляним розчином. Органічний розчин просушували (Ма5О»4), фільтрували і концентрували. В результаті очищення хроматографією середнього тиску (1:1 гексани:ЕАс до 2095 МеонН в СНосіг) одержали 7-28-ІЗ35-гідрокси-4-(З-хлор-феніл)-бут-1-еніл|-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептаннітріл (53бмг) як суміш 8,2:1 35228 спирту при НРІ С. "Н-ЯМР (СОСІз) б 7,24-7,17 (м., ЗЕ), 7,07 (м., 1Н), 5,69 (д.д., 1Н), 5,46 (д.д., 1Н), 4,40 (м., 1Н), 4,01 (м., 1Н), 3,46 (м., 1Н), 2,81 (м., 2Н), 2,68 (м., 1Н), 2,42-2,28 (м., 4Н), 2,20 (м., 1Н), 1,73-1,59 (м., 4Н). 1,42 (м., 4Н), 1,25 (м., 2Н); МО 375 (Мт).
Стадія В: 7-(25-І4-(З-хлор-феніл)-ЗВ-гідрокси-бутил|-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептаннітріл. Дотримуючись процедури, описаної в Прикладі 4, Стадія С, 7-28-ІЗ35-гідрокси-4-(З-хлор-феніл)-бут-1-еніл|-5-оксо-піролідин-1- ілу-гептаннітріл (53бмг) в ЕЮН (ЗОмл) гідрували в присутності 1095 паладію на вуглеці (бОмг) протягом 3З,5год.
В результаті очищення хроматографією середнього тиску (1:11 гексани":ЕТОАс до 2095 МеоН в СНесіг ) одержали /7-25-І4-(З-хлор-феніл)-ЗВ-гідрокси-бутил|-5-оксо-піролідин-1-ілугептаннітріл о (440мг). "Н-ЯМР (СОСІз) б 7,22 (м., ЗК), 7,08 (м., 1Н), 3,83 (м., 1Н), 3,59 (м., 2Н), 2,90 (м., 1Н), 2,77 (д.д., 1Н), 2,66 (д.д., 1Н), 2,39-2,29 (м., 4Н), 2,11 (м., 1Н), 1,78 (м., 1Н), 1,68-1,39 (м., 11Н), 1,29 (м., 2Н); МО 377,2 (М-1).
Стадія с. 5-І4-(3-Хлор-феніл-ЗВ-гідрокси-бутилі-11|-6-(2Н-тетразол-5-іл)-гексил|-піролідин-2-он.
Дотримуючись процедури, описаної в Прикладі 3, Стадія О, суміш 7-25-І4-(3-хлор-феніл)-ЗВ-гідрокси-бутил|-
Б-оксо-піролідин-1-ілі-гептаннітрілу (420мг, 1,114ммоль), триметилсилілазиду (257мг, 2,23ммоль) і дибутилтинового оксиду (56бмг) в толуолі (ЗОмл) нагрівали із зворотнім холодильником протягом 16бгод. Леткі речовини виділяли у вакуумі і залишок розчиняли в Мен і перемішували з ЗМ НСІ протягом Згод. Реакцію розбавляли водою та СНесСі» і вшділяли шари. Органічні шари промивали водою, а потім соляним розчином.
Органічний розчин просушували (Ма950О:), фільтрували і концентрували. В результаті очищення хроматографією середнього тиску (ЕЮАс до 295 МеоН в СНеосСі до 795 Меон в СНесі2) одержали 55-|4-(3- хлор-феніл)-ЗВ-гідрокси-бутил|/-1-І6-(2Н-тетразол-5-іл)-гексилІ-піролідин-2-он (311мг). "Н-ЯМР (СОСІз») б 7,22 (м., ЗЕ), 7,08 (м., 1Н), 3,86 (м., 1Н), 3,66 (м., 1Н), 3,52 (м., 1Н), 2,96 (м., ЗК), 2,82-2,68 (м., 2Н), 2,45 (м., 2Н), 2,17(м., 1Н), 1,88-1,22 (м., 14Н); МС 420 2 (Мн1), 418,3 (М-1).
Приклад 9 7-28-І3-Гідрокси-4-(3-фенокси-феніл)-бут-1-еніл|-5-оксо-піролідин-1-іліу-гептанова кислота о м а в Соон
Стадія А: Етиловий естер 7-(2-оксо-58-(3-оксо-4-(3-фенокси-феніл)-бут-1-еніл|-піролідин-1-іл)-гептанової кислоти. Дотримуючись процедури, описаної в Прикладі 1, Стадія А, аніон, одержаний з диметилового естеру (2-оксо-3-(3З-фенокси-феніл)-пропіл|-фосфонової кислоти (63З3мг, 1,98ммоль) та Ман (6095 в маслі, 7Омг, 1,74ммоль) піддавали реакції з етиловим естером 7-2А-форміл-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептанової кислоти (з розрахунку 1,58ммоль) більше 24 год. В результаті хроматографії середнього тиску (ЕАс) одержали етиловий естер //7-(2-оксо-58-(3-оксо-4-(3-фенокси-феніл)-бут-1-еніл|-піролідин-1-ілігептанової кислоти (215мг). "Н-ЯМР (СОСІз) б 7,28 (м., ЗЕ), 7,08 (м., 1Н), 6,97 (м., 2Н), 6,89 (м., 2Н), 6,83 (м., 1Н), 6,62 (д.д., 1Н), 6,19 (д., 1Н), 4,13 (м., 1Н), 4,08 (к., 2Н), 3,79 (с., 2Н), 3,51 (м., 1Н), 2,68 (м., 1Н), 2,35 (м., 2Н), 2,24 (м., ЗК), 2,24 (м., ЗК), 1,75 (м., 1Н), 1,54 (м., 2Н), 1,43-1,20 (м.,9Н).
Стадія В: Етиловий естер 7-28-ІЗ-гідрокси-4-(3-фенокси-феніп)-бут-1-еніл|-5-оксо-піролідин-1-іл)- гептанової кислоти. Дотримуючись процедури, описаної в Прикладі 3, Стадія С, етиловий естер 7-(2-оксо-58-
ІЗ-оксо-4-(3-фенокси-феніл)-бут-1-еніл|-піролідин-1-ілу-гептанової кислоти (215мг, 0,451ммоль) піддавали реакції з МаВнНа (17мг, 0,45ммоль) в ЕЮН (Змл) при 0"С більше 4 год. В результаті очищення хроматографією середнього тиску (ЕЮАс) одержали етиловий естер 7-(28-ІЗ-гідрокси-4-(3-фенокси-феніл)-бут-1-еніл|-5-оксо-
піролідин-1-іл)у-гептанової кислоти (167мг). "Н-ЯМР (СОСІз) б 7,33 (м., 2Н), 7,25 (м., 1Н), 7,10 (м., 1Н), 6,99 (м., 2Н), 6,93 (м., 1Н), 6,86 (м., 2Н), 5,72 (м., 1Н), 5,45 (м., 1Н», 4,37 (м., 1Н), 4,10 (ад, 2Н), 3,47 (м., 1Н), 2,82 (м., ЗЕ), 2,35 (м., 2Н), 2,26 (І, 2Н), 2,15(м..1Н), 1,70-1,21 (м., 13Н).
Стадія С: 0/7-(28-ІЗ-гідрокси-4-(3-фенокси-феніл)-бут-1-еніл|-5-оксо-піролідин-1-ілу-гептанова кислота.
Дотримуючись процедури, описаної в Прикладі 1, Стадія О, етиловий естер 7-28-ІЗ-гідрокси-4-(3-фенокси- феніл)-5ут-1-еніл|-5-оксо-піролідин-1-іл)-гєптанової кислоти (29мг, 0,0бО0ммоль) гідролізували 2М Маон в ЕЮН (4, Омл) при кімнатній температурі більше 24 год. з метою одержання сполуки, зазначеної у заголовку (20мг).
ІН-ЯМР (СОСІз) б 7,33-7,21 (м., ЗЕ), 7,08 (м., 1Н), 6,98-6,84 (м., 5Н), 5,70 (м., 1Н), 5,44 (м., 1Н), 4,36 (м., 1Н), 4,00 (м. 1), 3,44 (мин), 2,85-2,51 (м., ЗА), 2,32 (м., 4Н), 2,14 (м., 1), 1,68-1,18 (м., ТОН).
Приклад 10 7-25-І3-Гідрокси-4-(3-фенокси-феніл)-бутил|-5-оксо-піролідин-1-ілу-гептанова кислота вів о . он а
Стадія А: Етиловий естер 7-(25-ІЗ-гідрокси-4-(3-Фенокси-феніл)-бутил|-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептанової кислоти. Дотримуючись процедури, описаної в Прикладі 1. Стадія С, суміш етилового естеру 7-28-ІЗ-гідрокси- 4-(3-фенокси-феніл)-бут-1-еніл|-5-оксо-піролідин-1-ілу-гептанової кислоти (139мг, 0,290ммоль), Меон (Зомл) та 1095 паладію на вуглеці (14мг) гідрували на шейкері Рагг при 50 рві протягом 18 год. В результаті очищення хроматографією середнього тиску (1:11 гексани:ЕОАс) одержали етиловий естер 7-25-І3-гідрокси-4-(3- фенокси-феніл)-бутил|-5-оксо-піролідин-1-ілу-гептанової кислоти (8бмг). "Н-ЯМР (СОСІзв) б 7,935-7,24 (м., ЗБЕ), 7,10 (м., 1Н), 6,99 (м., 2Н), 6,93 (м., 1Н), 6,87 (м., 2Н), 4,09 (ад, 2Н), 3,80 (м., 1Н), 3,58 (м., 2Н), 2,82 (м., 2Н), 2,64 (м., 1Н), 2,42-2,24 (м., АН), 2,10 (м., 1Н), 1,77 (м., 1Н), 1,66-1,21 (м., 16Н).
Стадія В: 7-25-І3-Гідрокси-4-(3-Фенокси-феніл)-бутил|-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептанова кислота.
Дотримуючись процедури, описаної в Прикладі 1, Стадія О, етиловий естер 7-(25-ІЗ-гідрокси-4-(З-фенокси- феніл)-бутил|-5-оксо-піролідин-1-ілу-гептанової кислоти (8бмг, 1,79ммоль) гідролізували 2М МаонН в меон (4мл) більше 18 год, з метою одержання сполуки, зазначеної у заголовку (62мг). "Н-ЯМР (СОСІз) б 7,33-7,23 (м., ЗК), 7,09 (м., 1Н), 6,98 (м., 2Н), 6,91 (м., 1Н), 6,86 (м., 2Н), 3,80 (м., 1Н), 3,56 (м., 2Н), 2,88 (м., 1Н), 2,77 (м., 1Н), 2,64 (м., 1Н), 2,38-2,28 (м., 4Н), 2,09 (м., 1Н), 1,77 (м., 1Н), 1,64-1,21 (м., 1З3Н).
Приготування 1 7-28-Гідроксиметил-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептаннітріл
Стадія А: 7-(2А8-(трет-Бутил-диметил-сіланилоксиметил)-5-оксо-піролідин-1-іл|-гептаннітріл. До суміші Ман (6095 в маслі, 3,836г, 0,0959ммоль, промитого 25мл ДМФ) в ДМФ (250мл) додавали розчин 5Е-(трет-бутил- диметил-сіланилоксиметил)-піролідин-2-ону (Темапаєдгоп: Азуттеїйу, 1996, 7, 2113) (20,00г, 87,19ммоль) в
ДМФ (50мл). Реакцію перемішували при кімнатній температурі протягом 1,5 год. і додавали розчин 7- бромгептаннітрілу (16,574г, 87,19ммоль) в ДМФ (50мл). Реакцію перемішували при 90"С протягом З год.
Реакцію охолоджували до кімнатної температури і додавали воду (750мл). Водний розчин промивали ЕЮАс (4х250мл). Комбіновані органічні розчини промивали водою (2х250мл), просушували (Ма5О»), фільтрували і концентрували. В результаті очищення хроматографією середнього тиску, використовуючи в якості елюанта розчинний градієнт. (9:11 гексани:ЕОАс до 7:3 гексани:ЕОАс до 1:1 гексани:ЕТОАс) одержали 7-(2В8-(трет- бутил-диметил-сіланилоксиметил)-5-оксо-піролідин-1-іл|-гептаннітріл (22,46 г). "ІН-ЯМР (СОСІз) 5 3,69-3,55 (м.,
АН), 2,99 (м., 1Н), 2,42 (м., 1Н), 2,34-2,24 (м., ЗЕ), 2,05 (м., 1Н), 1,81 (м., 1Н), 1,67-1,42 (м., 6Н), 1,31 (м., 2Н), 0,86 (з, 9Н), 0,03 (5, 6Н); МО 339,3 (М--1).
Стадія В: 7--28-Гідроксимєтил-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептаннітріл. Розчин фториду тетрабутиламонію (1М в ТГФ, 100,Омл, 100, О0ммоль) обережно додавали до розчину 7-І(2А-(трет-бутил-диметил-сіланилоксиметил)-5- оксо-піролідин-1-іл|-гептаннітрілу (22,39г, 66,13ммоль) в ТГФ (400мл) при 0"С. Реакцію нагрівали до кімнатної температури і перемішували протягом 4 год. Додавали насичений водний Манссь (250мл) і у вакуумі виділяли леткі речовини. Водний розчин, що залишився, промивали СНСІз (4х200мл). Комбіновані органічні розчини просушувапи (Мо5О24), фільтрували і концентрували. В результаті очищення хроматографією середнього тиску, використовуючи в якості елюанта розчинний градієнт (9:11 гексани"!ЕАс до 41 гексани:ЕОАс до 7:3 гексани:ЕЮАс до 6:4 гексани:ЕАс до 1:1 гексани:ЕТОАс до ЕАс до 9:11 ЕЮАс:Ммеон) одержали 7-(2В-гідроксиметил-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептаннітріл (14,922г). "Н-ЯМР (СОСІз) б 3,78 (д.д., 1Н), 3,71-3,58 (м., ЗК), 3,00 (м., 1Н), 2,46 (м., 1Н), 2,36-2,27 (м., ЗЕ), 2,08 (м., 1Н), 1,93 (м., 1 Н), 1,77 (м., 1 Н), 1,68- 1,43 (м., 6Н), 1,32 (м., 2Н); МО 2251 (Мн).
Приготування 2
Етиловий естер 7-(2В-гідроксиметил-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептанової кислоти
Стадія А: Етиловий естер 7-(2В-(трет-бутил-диметил-сіланилоксиметил)-5-оксо-піролідин-1-іл|-гептанової кислоти. Дотримуючись процедури, описаної в Приготуванні 1, Стадія А, аніон, одержаний з 5Е-(трет-бутил- диметил-сіланилоксиметил)-піролідин-2-ону (30,000г, 130, 8ммоль) і Ман (6095 в маслі, 5,756г, 143, 9ммоль) в
ДМФ (60Омл) піддавали реакції з етил 7-бромгептаноатом (32,559г, 137,3ммоль) протягом З год. при 9070. В результаті очищення хроматографією середнього тиску, використовуючи в якості елюанта розчинний градієнт
(9:11 гексани:ЕАс до 4:1 гексани:ЕЮАс до 7:3 гексани:Е(ОАс до 6:4 гексани:ЕТОАс) одержали етиловий естер 7-(28-(трет-бутил-диметил-сіланилоксиметил)-5-оксо-піролідин-1-іл|--ептанової кислоти (39,46г). "Н-ЯМР (СОСІз) 6 4,10 (к., 2Н), 3,62 (м., 4Н), 2,95 (м., 1Н), 2,42 (м., 1Н), 2,27 (м., ЗК), 2,04 (м., 1Н), 1,81 (м.1Н), 1,65- 1,26 (м., 8Н), 1,23 (І, ЗА), 0,86 (5, 9Н), 0,03 (5, 6Н); МО 386,2 (М-1).
Стадія В: Етиловий естер 7-(2В-гідроксиіиетил-5-оксо-піролідин-1-іл)у-гептанової кислоти. Дотримуючись процедури, описаної в Приготуванні 1, Стадія В, етиловий естер 7-(2В-(трет-бутил-диметил- сіланилоксиіїйетил)-5-оксо-піролідин-1-іл|-гептанової кислоти (39,46г, 102,3ммоль) депротектували ТВАЕ (1М в
ТГФ,. 154 Омл, 154 Оммоль) з тривалістю реакції 2,5 год. В результаті очищення хроматографією середнього тиску, використовуючи в якості елюанта розчинний градієнт (9:11 гексани:Е(ОАс до 6:4 гексани:Е(ОАс до 1:1 гексаниї!ЕОАс до ЕОАс до 19:11 ЕЮАсМеон) одержали етиловий естер 7-(2В-гідроксиметил-5-оксо- піролідин-1-іл)-гептанової кислоти (25,41г). "Н-ЯМР (СОСІз) б 4,10 (к., 2Н), 3,77 (д.д., 1Н), 3,64 (м., ЗР), 2,96 (м., 1Н), 2,46 (м, 1Н), 2,35-2,25 (м., ЗЕ), 2,08 (м., 1Н), 1,93 (м., 1Н), 1,71 (м., 1Н), 1,63-1,27 (м., 8Н), 1,23 (т., ЗН); МС 212,2 (Мат).
Приготування З
Диметиловий естер (2-оксо-3-(З-трифторметил-феніл)-пропіл|- фосфонової кислоти
Стадія А: М-Метокси-М-метил-2-(З-трифторметил-феніл)-ацетамід. До розчину М,О- диметилгідроксиламінового гідрохлориду (1,577г, 16,2ммоль) в ДМФ (25мл) та СНоС12 (25мл) при 0 додавали триетиламін (2,25мл). Після перемішування протягом 5 хвилин додавали "З3- трифторметилфенілоцтову кислоту (3,0г, 14,7ммоль), НОВТ (3,177г, 23,5ммоль) і ОЕБЕС (2- диетиламіноетилхлоридпдрохлорид, 3,10г, 16,2ммоль). Суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 18 год. і концентрували у вакуумі. Залишок разбавляли ЕЮАс і органічний розчин промивали послідовно 1М МаоОнН (двічі), водою і соляним розчином. Органічний розчин просушували (М95О4), фільтрували і концентрували у вакуумі. В результаті хроматографії середнього тиску (2090 Е(АсС в гексанах до 50956 ЕТОАс в гексанах) одержали М-метокси-М-метил-2-(З-трифторметил-феніл)-ацетамін.
Стадія В: Диметиловий естер (2-оксо-3-(З--т-рифторметил-феніл)-пропіл|-фосфонової кислоти. До розчину диметил метилрфосфонату (9,4г, 75,8ммоль) в толуолі (8О0мл) при -78"С обережно додавали п-ВиГі (2,5М в гексанах, 28мл, 70ммоль). Суміш перемішували протягом 1 год. і обережно додавали розчин М-метокси-М- метил-2-(З-трифторметил-феніл)-ацетаміду (14,39г) в толуолі (ЗОмл). Суміш перемішували протягом 2,5 год. і додавали АсСОН (40мл). Суміш нагрівали до кімнатної температури і додавали воду. Органічний шар промивали водою, а потім соляним розчином. Органічний розчин просушували (Мо5О54), фільтрували і концентрували у вакуумі. В результаті хроматографії середнього тиску (СН2Сі» до 295 Меон в СНесі») одержали сполуку, зазначену у заголовку Приготування З (9,37г). "Н-ЯМР (СОСІз) б 7,52 (м., 1 Н), 7,44 (м., 2Н), 7,37 (м., 1 Н), 3,96 (с., 2Н), 3,87 (с., ЗК), 3,76 (с., ЗК), 3,12 (д.2Н).
Приготування 4
Диметиловий естер ІЗ-(З-хлор-феніл)-2-оксо-пропіл|І-фосфонової кислоти
Замістивши відповідні вихідні речовини, дотримуючись процедури, аналогічної процедурі, описаній в
Приготуванні 3, приготували сполуку, зазначену у заголовку Приготування 4.
Приготування 5
Диметиловий естер ІЗ-(3-Хлор-феніл)-2-оксо-пропіл|- фосфонової кислоти
До розчину диметилметилфосфонату (17,93г, 144ммоль) в ТГФ (270мл) при -78"С обережно додавали п-
Ви (2,5М, 64,2мл, 160 ,бммоль). Суміш перемішували протягом 1 год. і обережно додавали метиловий естер (З-хлор-феніл)-оцтової кислоти (26,93г, 146ммоль). Суміш нагрівали до кімнатної температури і перемішували протягом 24 год. Додавали АСОН (15мл) і у вакуумі вилучали леткі речовини. Залишок розводили СНесі: і органічний розчин обережно промивали насиченим водним Мансоз (тричі). Органічний шар промивали (Ма50О»), фільтрували і концентрували у вакуумі. В результаті очищення хроматографією середнього тиску (2095 Ес в гексанах до ЕІОАс) одержали сполуку, зазначену в заголовку (9,28Гг).
Приготування 6
Тетрагідро-піролізин-3,5-діон
Сполуку, зазначену у заголовку Пригтування 6, одержали, дотримуючись процедури, описаної в Патенті
США Ме 4 663 464.
Приготування 7
Етиловий естер 7--28-форміл-5-оксо-піролідин-1-іл)-гептанової кислоти
До розчину етилового естеру 7-(2В-гідроксиметил-5-оксо-піролідин-1-іл)у-гептанової кислоти (1,63Гг, 6,0Тммоль) в бензолі (5Хо0мл) додавали 1-(З-диметиламінопропіл)-3-етилкарбодіїмідовий гідрохлорид (3,46г, 18,03ммоль) і ОМ5О (1,5мл, 24,04ммоль). Розчин охолоджували до 0"С і додавали трифторацетат піридинію (1,28 г, 6,61 ммоль). Суміш перемішували при 0"С протягом 15 хвилин, а потім при кімнатній температурі протягом 2 год. Розчин зливали з маслянистого осаду. Осад промивали бензолом (тричі) і комбіновану бензолову промивку концентрували у вакуумі з метою одержання етилового естеру 7-2В-форміл-5-оксо- піролідин-1-іл)-гептанової кислоти, який використовували без подальшого очищення.
Приготування 8
Метиловий естер 4-(312-І4-біфеніл-3-іл-3-(трет-бутил-диметил-сіланилокси)-бутил|-5-оксо-піролідин-1-ілу- пропіл)-бензойної кислоти
Стадія А: 5-(3-Бром-3-оксо-бутил)-піролідин-2-он. До розчину тетрагідро-піролізин-3,5-діону (5г, Збммоль) в СНесі» (320мл) при 0"С додавали краплями бромід З-бромбензилмагнію (0.25М в Еб, 155 мл, 38,8 ммоль).
Розчин перемішували при 0"С протягом 2 год. і гасили насиченим водним хлоридом амонію. Додавали 1 М НСІ для одержання рн-З. Після нагрівання до кімнатної температури водний розчин екстрагували додаванням
СНеСІ» (Зх). Комбіновані органічні екстракти просушували (Мд5О»х), фільтрували і концентрували. В результаті очищення хроматографією середнього тиску, використовуючи в якості елюанта розчинний градієнт (1:1 гексани:ЕОАс до ЕЮАс до 595 МеонН в СНесіг) одержали 5-(3-бром-3-оксо-бутил)-піролідин-2-он (7,84г). /Н-
ЯМР (СОСІ») б 7,41-7,11 (м., 4Н), 6,24 (ш.с., 1 Н), 3,67 (с., 2Н), 3,60 (м., 1Н), 2,52 (т., 2Н), 2,32 (м., 2Н), 2,20
(М..1Н), 1,88-1,60 (м.,ЗН).
Стадія В: 5-(3-Бром-3-гідрокси-бутил)-піролідин-2-он. До розчину 5-(3-бром-3-оксо-бутил)-піролідин-2-ону (7,84г, 25,3ммоль) в ЕЮН (13Омл) при 0"С додавали Мавна (480мг, 12,бммоль) і суміш перемішували при 07 протягом 2,5 год. Реакцію гасили насиченим водним хлоридом амонію. Додавали воду і СНоСі». Водний шар промивали СНесіг» (Зх) і комбіновані органічні екстракти просушували (Мд5Ой), фільтрували і концентрували.
В результаті очищення хроматографією середнього тиску, використовуючи в якості елюанта розчинний градієнт (1:11 гексани:ЕТЮАс до Е(ОАс до 1 95 МеоН в СНеосі» до 395 МеоН в СНеосі» до 595 МеОН в СНесі» до 895 МеонН в СНесіг) одержали 5-(3-бром-3-гідрокси-бутил)-піролідин-2-он (6,76 г). "Н-ЯМР (СОСіз) б 7,36-7,09 (м., 4Н), 6,27 (д., 1Н), 3,78 (м., 1Н), 3,63 (м., 1Н), 2,75 (м., 1Н), 2,62 (м., 1Н), 2,32-2,18 (м., ЗН), 1,88 (м., 1Н), 1,73-1,42 (м., 5Н); МС 312,2,-314 1 (М.У).
Стадія С: 5-ІЗ-Бром-3-(трет-бутил-диметил-сіланилокси)-бутил|-піролідин-2-он. До розчину 5-(3-бром-3- гідрокси-бутил)-піролідин-2-ону (6,76г, 21,6ммоль) в ДМФ (8бмл) додавали трет-бутилдиметилсиліловий хлорид (3,59г, 23,8ммоль), а потім імідазол (2,95г, 43,3ммоль) і ОМАР (264мг, 2,16бммоль). Реакцію перемішували протягом 24 годин і гасили насиченим водним хлоридом амонію. Водний розчин промивали
ЕОАс (ЗХ) і комбіновані органічні екстракти просушували (Мо50»4), фільтрували і концентрували. В результаті очищення хроматографією середнього тиску, використовуючи в якості елюанта розчинний градієнт (СНеоСі» до 195 МеОН в СНесі» до 395 МеОН в СНесі» до 595 МеОН в СНесі» до 895 МеОнН в СНосіг) одержали 5-(3-бром-3- (трет-бутил-диметил-сіланилокси)-бутил|-піролідин-2-он (7,45г). "Н-'ЯМР (СОСІз) б 7,30 (м., 2Н), 7,12 (м., 1Н), 7,04 (м., 1Н), 5,71 (м., 1Н), 3,81 (м., 1Н), 3,56 (м., 1Н), 2,66 (м., 2Н), 2,32-2,17 (м., ЗН), 1,70-1,35 (м., 5Н), 0,82 (с.,
ОН), -0,06 (д., ЗН), -0,24 (д., ЗН); МС 426,2, 428,2 (М).
Стадія 0: 5-І4-Біфеніл-З3-іл-3-(трет-бутил-диметил-сіланилокси)-бутил|-піролідин-2-он. До розчину 5-|3- бром-3-(трет-бутил-диметил-сіланилокси)-бутил|-піролідин-2-ону (750мг, 1,7бммоль) в ОМЕ (15мл) додавали фенілборонову кислоту (236мг, 1,93ммоль). Додавали ацетат паладію (26,3мг, 0, 088ммоль) і три-о- толілфосфін (39,5мг, 0,17бммоль), а потім розчин Ма»2бОз (37,3мг, 3,52ммоль) у воді (1,8мл). Реакцію нагрівали із зворотнім холодильником протягом 24 год. Реакцію охолоджували і леткі речовини вилучали у вакуумі. Залишок розбавляли соляним розчином і ЕТОАс. Водний розчин промивали ЕАсС (ЗХ) і комбіновані органічні екстракти просушували (Мд5О4), фільтрували і концентрували. В результаті очищення хроматографією середнього тиску, використовуючи в якості елюанта розчинний градієнт (1:1 гексани:Е(Ас до
ЕЮОАс до 195 МеОнН в СНесі» до 395 МеОН в СНесі» до 595 МеОнН в СНесіг) одержали 5-(4-біфеніл-З-іл-3-(трет- бутил-диметил-сіланилокси)-бутил|-піролідин-2-он (717,Змг). "І"Н-ЯМР (СОСІз) 6,7,57 (м., 2Н), 7,43 (м., 2Н), 7,33 (м., ЗН), 7,11 (м., 2Н), 5,78 (м., 1Н), 3,91 (м., 1Н), 3,59 (м., 1Н), 2,76 (м., 2Н), 2,27 (М., зн), 1,73-1,38 (м., 5Н), 0,83 (с., 9Н), -0,03 (д., ЗН), -0,16 (д., ЗН); МО 424,3 (М-н1).
Приготування 9 5-ІЗ-(трет-Бутил-диметил-сіланилокси)-4-(3-фтор-феніл)-бутил|-піролідин-2-он
Стадія А: 5-І4-(3-Фтор-феєніл-3-оксо-бутил|-піролідин-2-он. Дотримуючись процедури, описаної в
Приготуванні 8, Стадія А, тетрагідро-піролізин-3,5-діон (2 г, 14 ммоль) піддавали реакції з хлоридом 3- фторбензилмагнію (0,25М в ЕСО, б2мл, 15,5ммоль) більше 2,5 год. В результаті очищення хроматографією середнього тиску, використовуючи в якості елюанта розчинний градієнт (1:11 гексани:ЕТОАс до 21 ЕЮАс гексани до ЕІОАс до 295 МеОнН в СНесі» до 1095 МеОнН в СНесі2) одержали 5-І4-(3-фтор-феніл)-3-оксо-бутил|- піролідин-2-он (2,1730г). "ІН-'ЯМР (СОСІз) б 7,32-7,27 (м., 1Н), 7,00-6,90 (м., ЗН), 6,12 (ш.с, 1Н), 3,69 (с., 2Н), 3,59 (м., 1Н), 2,52 (т., 2Н), 2,30 (м., 2Н), 2,19 (м., 1Н), 1,75 (м., 2Н), 1,65 (ти Н
Стадія В: 5-І4-(3-Фтор-феніл-3-гідрокси-бутил|-піролідин-2-он. Дотримуючись процедури, описаної в
Приготуванні 8, Стадія В, 5-І4-(3-фтор-феніл)-3-оксо-бутил|-піролідин-2-он (2,17г, 8,71ммоль) відновлювали
Мавна (165мг, 4,35ммоль). В результаті очищення хроматографією середнього тиску, використовуючи в якості елюанта розчинний градієнт (1:11 гексани:ЕгОАс до ЕТОАсС до 195 МеоН в СНеосіг» до 395 МеОН в СНесіг до 695
МеОнН в СНесіг) одержали 5-І4-(3-фтор-феніл)-3-гідрокси-бутил|-піролідин-2-он (2,23г). "Н-ЯМР (СОСІз) 6 7,27 (м., 1Н), 6,94 (м., ЗН), 6,38 (м., 1Н), 3,82 (м., 1Н), 3,66 (м., 1Н), 2,79 (м., 1Н), 2,67 (м., 1Н), 2,33-2,21 (м., ЗН), 1,92 (д., 94,15 Нл, 1Н), 1,75-1,40 (м., 5Н); МО 252,2 (МА1).
Стадіяс: /5-ІЗ-«трет-Бутил-диметил-сіланилокси)-4-(3-фтор-феніл)-бутил|-піролідин-2-он. Дотримуючись процедури, описаної в Приготуванні 8, Стадія С, 5-І4-(3-фтор-феніл)-3-гідрокси-бутил|-піролідин-2-он (2,23г, 8,87ммоль) піддавали реакції з трет-бутилдиметилсілиловим хлоридом (1,47г, 9,76бммоль). В результаті очищення хроматографією середнього тиску, використовуючи в якості елюанта розчинний градієнт (1:1 гексани:ЕОАс до ЕІЮАс до 196 МеоОнН в СНесСіг до 295 МеОН в СНесі» до 495 МеонН в СНесіг) одержали 5-|3- (трет-бутил-диметил-сіланилокси)-4-(3-фтор-феніл)-бутил|-піролідин-2-он (2,84г). "Н-ЯМР (СОСІз) б 7,23 (м., 1Н), 6,88 (м., ЗН), 5,75 (м., 1Н), 3,85 (м., 1Н), 3,57 (м., 1Н), 2,71 (м., 2Н), 2,30 (м., 2Н), 2,25 (м., 1Н), 1,70-1,38 (м., 5Н), 0,84 (с., 9Н), 0 (с., ЗН),-0,2(с., ЗН).
Приготування 10 5-ІЗ-(трет-Бутил-диметил-сіланилокси)-4-(4-фтор-феніл)-бутил|-піролідин-2-он
Стадія А: 5-І4-(4-Фтор-феніл)-3-оксо-бутил|-піролідин-2-он. Дотримуючись процедури, описаної в
Приготуванні 8, Стадія А, тетрагідро-піролізин-3,5-діон (1,41г, 10,1ммоль) піддавали реакції з хлоридом 4- фторбензилмагнію (0.25М в ЕСО, 5Омл, 12,5ммоль) більше 5 год. В результаті очищення хроматографією середнього тиску (296 МеОН в СНесСіг2) одержали 5-(4-(4-фтор-феніл)-3-оксо-бутил|-піролідин-2-он (2,64г). "Н-
ЯМР (СОСІз») 6 7,18 (м., 2Н), 7,03 (м., 2Н), 6,34 (м., 1Н), 3,70 (с., 2Н), 3,62 (м., 1Н), 2,54 (т., 2Н), 2,34-2,15 (м,
ЗН), 1,82-1,61 (м., ЗН).
Стадія В: 5-І4-(4-Фтор-феніл)-3-гідрокси-бутил|-піролідин-2-он. Дотримуючись процедури, описаної в
Приготуванні 8, Стадія В, 5-І(4-(4-фтор-феніл)-3-оксо-бутил|-піролідин-2-он (2,64г, ммоль) відновлювали МавнНа (400мг, ммоль) при кімнатній температурі протягом 1 год. Додатково додавали МаВНа (150мг) і реакцію перемішували протягом 20 год. В результаті очищення хроматографією середнього тиску, використовуючи в якості елюанта розчинний градієнт (СНоСі» до 295 МеОнН в СН2СІ2 до 495 МеонН в СНеосі») одержали 5-І(4-(4- фтор-феніл)-3-гідрокси-бутил|-піролідин-2-он (2,01г). "І!Н-ЯМР (СОСІз) б 7,14 (м., 2Н), 6,98 (м., 2Н), 6,78 (м., 1Н),
3,76 (м., 1Н), 3,65 (м., 1Н), 2,76 (м., 1Н), 2,64 (м., 1Н), 2,32-2,18 (м., 4Н), 1,72-1,47 (м., 5Н).
Стадія С: 5-І3-(трет-Бутил-диметил-сіланилокси)-4-(4-фтор-феніл)-бутил|-піролідин-2-он. Дотримуючись процедури, описаної в Приготуванні 8, Стадія С, 5-І4-(4-фтор-феніл)-3-гідрокси-бутил|-піролідин-2-он (1,95г, 7,19ммоль) піддавали реакції з трет-бутилдиметилсілиловим хлоридом (1,47г, 9,76бммоль). В результаті очищення хроматографією середнього тиску (195 МеоОН в СНесСіг) одержали 5-І3-(трет-бутил-диметил- сіланилокси)-4-(4-фтор-феніл)-бутил|-піролідин-2-он. "Н-ЯМР (СОСІз) б 7,12 (м., 2Н), 6,97 (м., 2Н), 5,75 (м., 1Н), 3,83 (м., 1Н), 3,60 (м., 1Н), 2,71 (м., 2Н), 2,36-2,24 (м., ЗН), 1,70-1,38 (м., 5Н), 0,84 (с., 9Н), -0,05 (д., ЗН), -0,2 (д., зн).
Приготування 11
Диметиловий естер (|2-оксо-3-(3-фенокси-феніп)-пропіл|-фосфонової кислоти Шляхом заміщення відповідного вихідного матеріалу за способом, описаним для сполуки Приготування 5, одержали сполуку, зазначену у заголовку Приготування 11.

Claims (10)

1. Застосування агоніста селективного рецептора ЕРА формули І: ів) в пря ПИ 9 або фармацевтично прийнятної солі згаданої сполуки, де: О являє собою СООК", СОМНЕ" або тетразол-5-іл; А являє собою цис-подвійний зв'язок; В являє собою простий або транс-подвійний зв'язок; -О0 являє собою ни тон Дон або нон, ВЕ являє собою "-тієніл, феніл, фенокси, монозаміщений феніл і монозаміщений фенокси, при цьому згаданими замісниками є хлор, фтор, феніл, метокси, трифторметил або (Сі1- Сз)алкіл; ЕВ" являє собою водень, (С1-Сз)алкіл, феніл або п-біфеніл; В являє собою СОЕ? або 5021? і В? являє собою феніл або (С1-Сз)алкіл, або 7-4128-|3-гідрокси-4-(3-феноксифеніл)-бут- 1-еніл |-5-оксопіролідин- 1-іл )гептанової кислоти, або 7-125-|3-гідрокси-4-(3-феноксифеніл)-бутил |-5-оксопіролідин- 1-1л ) гептанової кислоти, для виробництва лікарського засобу для лікування стану, що пов'язаний з низькою кістковою масою.
2. Застосування за пунктом 1, в якому О являє собою 5-тетразоліл, а -О являє собою ни тон
3. Застосування за пунктом 2, в якому сполука формули І являє собою 5К-(35-гідрокси-4- фенілбут- 1-еніл)-1-(6-(1Н-тетразол-5-1л)гексил)піролідин-2-он, 55-(ЗК-гідрокси-4- фенілбутил)-1-(6-(1Н-тетразол-5-1л)гексил)піролідин-2-он, 55-(4-(3-хлорфеніл)-3К- гідроксибутил)- 1-(6-(2Н-тетразол-5-іл)гексил)піролідин-2-он або // 55-(ЗК-гідрокси-4-(3- фторметилфеніл)бутил)- 1-(6-(2Н-тетразол-5-1л)гексил)піролідин-2-он.
4. Застосування за пунктом 1, в якому вказаний агоніст рецептора ЕРА являє собою сполуку формули І, де О являє собою СООН, а |) являє собою ни тон
5. Застосування за пунктом 4, в якому вказана сполука являє собою 7-(25-(3К-гідрокси-4- фенілбутил)-5-оксопіролідин-1-іл)гептанову кислоту; 7-І2К-(35-гідрокси-4-фенілбутил-1- еніл)-5-оксопіролідин- 1-іл |гептанову кислоту; 7-4125-ІЗК-гідрокси-4-(3- трифторметилфеніл)бутил |-5-оксопіролідин-1-ілігептанову кислоту; 7-125-ІЗК-гідрокси-4- (3-феноксифеніл)бутил |-5-оксопіролідин-1-ілігептанову кислоту; 7-(25-(3ЗК-гідрокси-4-(3- трифторметилфеніл)бутил)-5-оксопіролідин-1-іл)угептанову кислоту або /7-125-І4-(3- хлорфеніл)-З3К-гідроксибутил |-5-оксопіролідин- 1-іл )гептанову кислоту.
б. Застосування за будь-яким з пп. 1-5, в якому вказаний стан являє собою остеопороз, ламкість кісток, остеопорозний перелом, дефект кісток, дитячу ідіопатичну втрату кісткової маси, альвеолярну втрату кісткової маси, мандибулярну втрату кісткової маси, перелом кісток, остеотомію, втрату кісткової маси, асоційовану з періодонтитом або простетичне вростання всередину.
7. Застосування за будь-яким з пп. 1-6, в якому лікарський засіб призначений для системного або місцевого введення.
8. Сполука, вибрана з 7-125-|ЗК-гідрокси-4-(Зфеноксифеніл)бутил |-5-оксопіролідин- 1- іл)гептанової кислоти; 7-(25-(3К-гідрокси-4-(3-трифторметилфеніл)бутил)-5-оксопіролідин- 1-1л)гептанової кислоти; //7-425-І4-(3З-хлорфеніл)-3ЗК-гідроксибутил |-5-оксопіролідин- 1- ілугептанової кислоти; 55-І4-(3-хлорфеніл)-ЗК-гідроксибутил |- 1-(6-(2Н-тетразол-5- іл)гексил|піролідин-2-ону та /55-(ЗК-гідрокси-4-(3-трифторметилфеніл)бутил)- 1-(6-(2Н- татразол-5-1л)гексил)піролідин-2-ону.
9. Сполука за пунктом 8, для використання як лікарського засобу.
10. Фармацевтична композиція, що включає сполуку, заявлену в пункті 8, та фармацевтично прийнятний розріджувач або носій.
UA2002065186A 1999-12-22 2000-11-20 Ep4 receptor selective agonists (variants) for treating conditions presenting with low bone mass and pharmaceutical composition UA72293C2 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US17135399P 1999-12-22 1999-12-22
PCT/IB2000/001711 WO2001046140A1 (en) 1999-12-22 2000-11-20 Ep4 receptor selective agonists in the treatment of osteoporosis

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA72293C2 true UA72293C2 (en) 2005-02-15

Family

ID=22623430

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UA2002065186A UA72293C2 (en) 1999-12-22 2000-11-20 Ep4 receptor selective agonists (variants) for treating conditions presenting with low bone mass and pharmaceutical composition

Country Status (36)

Country Link
US (2) US6737437B2 (uk)
EP (1) EP1110949B1 (uk)
JP (1) JP2001181210A (uk)
KR (1) KR100419681B1 (uk)
CN (1) CN1413190A (uk)
AP (2) AP2002002555A0 (uk)
AT (1) ATE250575T1 (uk)
AU (2) AU1293101A (uk)
BG (1) BG106882A (uk)
BR (1) BR0016560A (uk)
CA (1) CA2329678A1 (uk)
CO (1) CO5251453A1 (uk)
CR (1) CR6678A (uk)
CZ (1) CZ20022048A3 (uk)
DE (1) DE60005471T2 (uk)
DK (1) DK1110949T3 (uk)
EA (1) EA005293B1 (uk)
EE (1) EE200200355A (uk)
ES (1) ES2204458T3 (uk)
GE (1) GEP20043203B (uk)
HR (1) HRP20020537A2 (uk)
HU (1) HUP0005001A3 (uk)
IL (1) IL140325A0 (uk)
IS (1) IS6388A (uk)
MA (1) MA26852A1 (uk)
MX (1) MXPA02006322A (uk)
NO (1) NO20022925D0 (uk)
OA (1) OA12117A (uk)
PE (1) PE20010953A1 (uk)
PL (1) PL356662A1 (uk)
PT (1) PT1110949E (uk)
SK (1) SK8552002A3 (uk)
TR (2) TR200201643T2 (uk)
UA (1) UA72293C2 (uk)
WO (1) WO2001046140A1 (uk)
ZA (1) ZA200007694B (uk)

Families Citing this family (52)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20010056060A1 (en) * 2000-02-07 2001-12-27 Cameron Kimberly O. Treatment of osteoporsis with EP2/EP4 receptor selective agonists
OA12533A (en) * 2000-11-27 2006-06-05 Pfizer Prod Inc Ep4 receptor selective agonists in the treatment of osteoporosis.
CA2451392A1 (en) * 2001-07-16 2003-01-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Prostaglandin analogues as ep4 receptor agonists
CN100371322C (zh) * 2001-07-16 2008-02-27 霍夫曼-拉罗奇有限公司 作为前列腺素类化合物激动剂的2-吡咯烷酮衍生物
ES2360604T3 (es) * 2001-07-23 2011-06-07 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Remedios para enfermedades con pérdida de masa osea que tienen como ingrediente activo agonistas de ep4.
EP2255829A3 (en) 2001-07-23 2012-03-28 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Pharmaceutical composition for treatment of diseases associated with decrease in bone mass comprising EP4 agonist as active ingredient
JPWO2003041717A1 (ja) * 2001-11-12 2005-03-03 小野薬品工業株式会社 プロスタグランジン誘導体を有効成分とする局所投与用持続性フィルム状製剤
US20040254230A1 (en) * 2001-12-03 2004-12-16 Ogidigben Miller J. Method for treating ocular hypertension
WO2003047417A2 (en) * 2001-12-03 2003-06-12 Merck & Co., Inc. Ep4 receptor agonist, compositions and methods thereof
DE60235198D1 (de) 2001-12-20 2010-03-11 Merck Serono Sa Coinsins Pyrrolidin-derivatie als prostaglandin-modulatoren
AU2003211574A1 (en) 2002-03-05 2003-09-16 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. 8-azaprostaglandin derivative compounds and drugs containing the compounds as the active ingredient
EP1490055A1 (en) * 2002-03-18 2004-12-29 Pfizer Products Inc. Use of selective ep4 receptor agonists for the treatment of liver failure, loss of patency of the ductus arteriosus, glaucoma or ocular hypertension
US6573294B1 (en) 2002-05-14 2003-06-03 Allergan, Inc. 8-azaprostaglandin analogs as agents for lowering intraocular pressure
AU2011202937B2 (en) * 2002-05-14 2012-06-07 Allergan, Inc. 8-azaprostaglandin analogs as agents for lowering intraocular pressure
AU2003233729B2 (en) 2002-06-06 2007-10-04 Merck Frosst Canada Ltd 1,5-distributed pyrrolid-2-one derivatives for use as EP4 receptor agonists in the treatment of eye diseases such as glaucoma
JP4754820B2 (ja) 2002-06-10 2011-08-24 メルク セローノ ソシエテ アノニム プロスタグランジン作動薬としてのγラクタムおよびその使用
ES2584606T3 (es) 2002-10-10 2016-09-28 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Microesferas que comprenden ONO-1301
US7196082B2 (en) 2002-11-08 2007-03-27 Merck & Co. Inc. Ophthalmic compositions for treating ocular hypertension
AU2003287481B2 (en) 2002-11-08 2009-04-23 Merck & Co., Inc. Ophthalmic compositions for treating ocular hypertension
US7053085B2 (en) 2003-03-26 2006-05-30 Merck & Co. Inc. EP4 receptor agonist, compositions and methods thereof
CA2511255C (en) 2003-01-10 2009-04-07 F. Hoffmann-La Roche Ag 2-piperidone derivatives as prostaglandin agonists
US7256211B1 (en) 2003-01-21 2007-08-14 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. 8-azaprostaglandin derivatives and medical use thereof
ES2305779T3 (es) 2003-03-03 2008-11-01 Laboratoires Serono Sa Derivados de g-lactama como agonistas de prostaglandinas.
US6734206B1 (en) 2003-06-02 2004-05-11 Allergan, Inc. 3-oxa-8-azaprostaglandin analogs as agents for lowering intraocular pressure
US6734201B1 (en) 2003-06-02 2004-05-11 Allergan, Inc. 8-Azaprostaglandin carbonate and thiocarbonate analogs as therapeutic agents
US7179820B2 (en) 2003-06-06 2007-02-20 Allergan, Inc. Piperidinyl prostaglandin E analogs
CA2529123A1 (en) 2003-07-18 2005-02-10 Applied Research Systems Ars Holding N.V. Hydrazide derivatives as prostaglandin receptors modulators
AU2004268012B2 (en) 2003-09-02 2008-11-20 Merck & Co., Inc. Ophthalmic compositions for treating ocular hypertension
AU2004271978B2 (en) 2003-09-04 2009-02-05 Merck & Co., Inc. Ophthalmic compositions for treating ocular hypertension
DE602004020079D1 (de) 2003-09-04 2009-04-30 Merck & Co Inc Ophthalmische zusammensetzungen zur behandlung der okularen hypertonie
WO2005027931A1 (en) * 2003-09-19 2005-03-31 Pfizer Products Inc. Pharmaceutical compositions and methods comprising combinations of 2-alkylidene-19-nor-vitamin d derivatives and an ep2 or ep4 selective agonist
WO2005080367A1 (en) 2004-02-12 2005-09-01 Pharmagene Laboratories Limited Ep2 receptor agonists
CN1988903A (zh) 2004-07-20 2007-06-27 默克公司 用于治疗高眼压症的眼用组合物
WO2006061366A1 (en) 2004-12-06 2006-06-15 Laboratoires Serono S.A. Pyrrolidin-2-one derivatives for use as dp1 receptor agonists
US7531533B2 (en) 2005-01-27 2009-05-12 Asahi Kasei Pharma Corporation 6-Membered heterocyclic compound and use thereof
KR20080000647A (ko) 2005-04-28 2008-01-02 오노 야꾸힝 고교 가부시키가이샤 경피 흡수 제제
KR100686186B1 (ko) * 2005-06-13 2007-02-26 영진종합건설 주식회사 교량용 배수 구조물
CA2618486A1 (en) 2005-08-09 2007-02-15 Asterand Uk Limited Ep2 receptor agonists
US8410171B2 (en) 2006-10-26 2013-04-02 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Adhesive preparation
US9394520B2 (en) 2006-12-08 2016-07-19 University Of Rochester Expansion of hematopoietic stem cells
EP2220057A4 (en) 2007-11-14 2011-10-12 Cayman Chem Co PROSTAGLANDIN E1 AND E2 ANALOGUES FOR THE TREATMENT OF VARIOUS MEDICAL CONDITIONS
CA2738045C (en) 2010-05-28 2019-02-19 Simon Fraser University Conjugate compounds, methods of making same, and uses thereof
WO2013018837A1 (ja) 2011-08-02 2013-02-07 小野薬品工業株式会社 左室拡張機能改善剤
WO2014015247A1 (en) 2012-07-19 2014-01-23 Cayman Chemical Company, Inc. Difluorolactam compounds as ep4 receptor-selective agonists for use in the treatment of ep4-mediated disease and conditions
ES2733998T3 (es) 2012-10-29 2019-12-03 Cardio Incorporated Agente terapéutico específico de enfermedad pulmonar
US9676712B2 (en) 2013-03-15 2017-06-13 Cayman Chemical Company, Inc. Lactam compounds as EP4 receptor-selective agonists for use in the treatment of EP4-mediated diseases and conditions
PT2989098T (pt) * 2013-03-15 2017-08-16 Cayman Chemical Co Inc Compostos de lactama como agonistas selectivos do receptor ep4 para uso no tratamento de doenças e condições mediadas por ep4
KR20160048054A (ko) 2013-07-19 2016-05-03 카이맨 케미칼 컴파니 인코포레이티드 골 성장의 촉진을 위한 방법, 시스템 및 조성물
KR102456567B1 (ko) 2013-08-09 2022-10-19 알데릭스, 인코포레이티드 인산염 수송을 억제하기 위한 화합물 및 방법
US9968716B2 (en) 2013-10-15 2018-05-15 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Drug-eluting stent graft
CN107849072B (zh) 2015-06-12 2020-12-15 西蒙弗雷泽大学 酰胺连接的ep4激动剂-二膦酸盐化合物及其用途
WO2020237096A1 (en) 2019-05-21 2020-11-26 Ardelyx, Inc. Combination for lowering serum phosphate in a patient

Family Cites Families (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR897566A (fr) 1942-08-28 1945-03-26 Bopp & Reuther Gmbh Machine à rotors
US3528961A (en) 1966-08-16 1970-09-15 Allied Chem Monoazo dyes from e-caprolactam
US3780095A (en) 1970-04-08 1973-12-18 Byk Gulden Lomberg Chem Fab Acylated anilino-carboxylic acids and their salts
US3987091A (en) 1973-04-12 1976-10-19 Merck & Co., Inc. 11,12-secoprostaglandins
US4033996A (en) 1973-04-25 1977-07-05 Merck & Co., Inc. 8-Aza-9-oxo(and dioxo)-thia-11,12-secoprostaglandins
SE7414770L (uk) 1973-12-13 1975-06-16 Merck & Co Inc
DK366475A (da) 1974-08-30 1976-03-01 Merck & Co Inc Fremgangsmade til fremstilling af aryloxy- eller arylthioholdige secoprostaglandiner
US3991106A (en) 1974-09-13 1976-11-09 Merck & Co., Inc. 16-Ethers of 8-aza-9-dioxothia-11,12-seco-prostaglandins
US4055596A (en) 1974-09-13 1977-10-25 Merck & Co., Inc. 11,12-Seco-prostaglandins
US4113873A (en) 1975-04-26 1978-09-12 Tanabe Seiyaku Co. Ltd. 8-azaprostanoic acid derivatives
DE2528664A1 (de) 1975-06-27 1977-01-13 Hoechst Ag Pyrrolidone und verfahren zu ihrer herstellung
IL49325A (en) 1976-03-31 1979-11-30 Labaz 8-aza-11-deoxy-pge1 derivatives,their preparation and pharmaceutical compositions containing them
DE2619638A1 (de) * 1976-05-04 1977-11-17 Hoechst Ag Pyrrolidone und verfahren zu ihrer herstellung
US4177346A (en) 1976-08-06 1979-12-04 Pfizer Inc. 1,5-Disubstituted-2-pyrrolidones
US4175203A (en) 1976-12-17 1979-11-20 Merck & Co., Inc. Interphenylene 11,12-secoprostaglandins
US4243678A (en) 1977-12-30 1981-01-06 Byk Gulden Lomberg Chemische Fabrik Gmbh Acylhydrocarbylaminoalkanoic acids, compositions and uses
DE3000377A1 (de) 1980-01-07 1981-07-09 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Neue sulfonamide, verfahren zu deren herstellung sowie diese verbindungen enthaltende arzneimittel
DE3042482A1 (de) 1980-11-11 1982-06-24 A. Nattermann & Cie GmbH, 5000 Köln N-benzoyl- (omega) -anilinoalkancarbonsaeuren, -salze und -ester, verfahren zu ihrer herstellung und diese enthaltende pharmazeutische praeparate
EP0068968B1 (fr) 1981-06-16 1985-09-18 Choay S.A. Nouveaux médicaments contenant à titre de substance active des composés du type arylbenzènesulfonamide et leurs procédés de préparation
AU6427596A (en) * 1992-04-14 1996-10-31 Alfred Maximillian Stessl A boat hull
TW383306B (en) 1992-12-22 2000-03-01 Lilly Co Eli New use of 2-phenyl-3-aroylbenzothiophenes in lowering serum cholesterol
WO1998027976A1 (en) * 1996-12-20 1998-07-02 Pfizer Inc. Prevention and treatment of skeletal disorder with ep2 receptor subtype selective prostaglandin e2 agonists
GB2330307A (en) * 1998-02-07 1999-04-21 Glaxo Group Ltd EP4 Receptor antagonists as bone resorption inhibitors
EP1121133A1 (en) * 1998-10-15 2001-08-08 Merck & Co., Inc. Methods for stimulating bone formation
AU1444200A (en) * 1998-10-15 2000-05-01 Merck & Co., Inc. Methods for inhibiting bone resorption

Also Published As

Publication number Publication date
CN1413190A (zh) 2003-04-23
AU7239300A (en) 2001-06-28
ES2204458T3 (es) 2004-05-01
AU1293101A (en) 2001-07-03
MA26852A1 (fr) 2004-12-20
US20010047105A1 (en) 2001-11-29
HUP0005001A3 (en) 2002-01-28
CZ20022048A3 (cs) 2004-03-17
TR200301841T4 (tr) 2004-01-21
EP1110949B1 (en) 2003-09-24
BR0016560A (pt) 2002-09-10
MXPA02006322A (es) 2002-12-13
AP2002002555A0 (en) 2002-06-30
GEP20043203B (en) 2004-03-25
PT1110949E (pt) 2003-12-31
TR200201643T2 (tr) 2002-11-21
PL356662A1 (en) 2004-06-28
CO5251453A1 (es) 2003-02-28
CA2329678A1 (en) 2001-06-22
WO2001046140A1 (en) 2001-06-28
DK1110949T3 (da) 2003-11-24
AU763983B2 (en) 2003-08-07
US6737437B2 (en) 2004-05-18
NO20022925L (no) 2002-06-18
US6642266B2 (en) 2003-11-04
OA12117A (en) 2006-05-04
PE20010953A1 (es) 2001-09-25
DE60005471T2 (de) 2004-04-22
KR100419681B1 (ko) 2004-02-21
AP2001002357A0 (en) 2001-12-31
BG106882A (en) 2003-02-28
EA200200505A1 (ru) 2002-12-26
CR6678A (es) 2004-01-14
SK8552002A3 (en) 2003-09-11
HRP20020537A2 (en) 2004-12-31
NO20022925D0 (no) 2002-06-18
IL140325A0 (en) 2002-02-10
EE200200355A (et) 2003-10-15
US20020040149A1 (en) 2002-04-04
IS6388A (is) 2002-05-17
HU0005001D0 (uk) 2001-02-28
EP1110949A1 (en) 2001-06-27
ZA200007694B (en) 2002-06-20
ATE250575T1 (de) 2003-10-15
JP2001181210A (ja) 2001-07-03
KR20010067415A (ko) 2001-07-12
HUP0005001A2 (hu) 2001-12-28
DE60005471D1 (de) 2003-10-30
EA005293B1 (ru) 2004-12-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA72293C2 (en) Ep4 receptor selective agonists (variants) for treating conditions presenting with low bone mass and pharmaceutical composition
DE60130675T2 (de) Selektive agonisten des ep4 rezeptors für die behandlung von osteoporose
JPH11180926A (ja) 骨粗しょう症用化合物
CA2334257C (en) Treatment of osteoporosis with ep2/ep4 receptor selective agonists
HRP980356A2 (en) Prostaglandin agonists
JP2000514827A (ja) ある種のプロスタグランジンアゴニストによる骨質量の減少の防止および回復
US20030166631A1 (en) Pharmaceutical compositions and methods for administering EP2 receptor selective agonists
EP1210951B1 (en) Composition containing estrogen agonists/antagonists and testosterone for treating a decline in the level of the hormone testosterone
MX2013010622A (es) Composiciones y métodos para el tratamiento de enfermedades y transtornos relacionados con el tejido musculoesquelético utilizando complejos de análogo de citrato de ion metálico.
HRP20000859A2 (en) Therapeutic combinations of (selective) estrogen receptor modulators (serm) and growth hormone secretagogues (ghs) for treating musculoskeletal frailty
JP4340042B2 (ja) 軟骨生成促進剤及び軟骨損傷由来疾病予防治療剤
AU2008291814A1 (en) Polymorphs of 3- ( ( (4-tert-butyl-benzyl) - (pyridine-3-sulfonyl) -amino) -methyl) -phenoxy) -acetic acid sodium salt or a hydrate thereof and methods for making the same
JPH02221230A (ja) 骨粗鬆症予防剤
WO2002056873A2 (en) 2-substituted dibenzo[a,e]1,2,3-triazolo[4,5-c][7]annulen-8-ones as growth hormone secretagogues
Mostafa et al. Complications in Ilizarov Ring Fixation in Schatzker Type VI Tibial Plateau Fracture.
HK1051366A (en) Ep4 receptor selective agonists in the treatment of osteoporosis
HK1145171A (en) Polymorphs of (3-(((4-tert-butyl-benzyl)-(pyridine-3-sulfonyl)-amino)-methyl)-phenoxy)-acetic acid sodium salt or a hydrate thereof and methods for making the same