UA75322C2 - Use of mhc class ii ligands as adjuvant for vaccination and lag-3 for cancer immunotherapy - Google Patents
Use of mhc class ii ligands as adjuvant for vaccination and lag-3 for cancer immunotherapy Download PDFInfo
- Publication number
- UA75322C2 UA75322C2 UA2000020976A UA2000020976A UA75322C2 UA 75322 C2 UA75322 C2 UA 75322C2 UA 2000020976 A UA2000020976 A UA 2000020976A UA 2000020976 A UA2000020976 A UA 2000020976A UA 75322 C2 UA75322 C2 UA 75322C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- cells
- antigen
- immune response
- tumor
- application according
- Prior art date
Links
- 239000003446 ligand Substances 0.000 title claims abstract description 25
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 title abstract 2
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 title description 4
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 title description 3
- 101100510617 Caenorhabditis elegans sel-8 gene Proteins 0.000 title 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 47
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 47
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 47
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims abstract description 37
- 102000043131 MHC class II family Human genes 0.000 claims abstract description 21
- 108091054438 MHC class II family Proteins 0.000 claims abstract description 21
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 98
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 71
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 41
- 101710199257 Peripheral myelin protein 22 Proteins 0.000 claims description 28
- 102100035917 Peripheral myelin protein 22 Human genes 0.000 claims description 27
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims description 20
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims description 16
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 11
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 11
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims description 7
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 5
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 claims description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 4
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 claims description 4
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 3
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 claims description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000011398 antitumor immunotherapy Methods 0.000 claims description 2
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 claims description 2
- 102000018713 Histocompatibility Antigens Class II Human genes 0.000 claims 2
- 108010027412 Histocompatibility Antigens Class II Proteins 0.000 claims 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 claims 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 3
- 230000000145 adjuvantlike effect Effects 0.000 abstract description 2
- 102000017578 LAG3 Human genes 0.000 abstract 2
- 101150030213 Lag3 gene Proteins 0.000 abstract 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 58
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 54
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 24
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 21
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 21
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 17
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 15
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 15
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 14
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 14
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 description 13
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 11
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 9
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 8
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 8
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 8
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 7
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 7
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 7
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 7
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 6
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 6
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- 101100298048 Mus musculus Pmp22 gene Proteins 0.000 description 6
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 6
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 6
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 6
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 6
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 5
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 5
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 5
- 102100034613 Annexin A2 Human genes 0.000 description 4
- 108090000668 Annexin A2 Proteins 0.000 description 4
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000008949 Histocompatibility Antigens Class I Human genes 0.000 description 4
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 4
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 4
- 230000006023 anti-tumor response Effects 0.000 description 4
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 4
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 4
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 4
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 4
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 4
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 4
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 210000003171 tumor-infiltrating lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 101001000631 Homo sapiens Peripheral myelin protein 22 Proteins 0.000 description 3
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 3
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 3
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 3
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 3
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- VYZAMTAEIAYCRO-BJUDXGSMSA-N Chromium-51 Chemical compound [51Cr] VYZAMTAEIAYCRO-BJUDXGSMSA-N 0.000 description 2
- 102000016844 Immunoglobulin-like domains Human genes 0.000 description 2
- 108050006430 Immunoglobulin-like domains Proteins 0.000 description 2
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 2
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 2
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 230000003750 conditioning effect Effects 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 2
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 2
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 230000005014 ectopic expression Effects 0.000 description 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 229940117681 interleukin-12 Drugs 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 2
- 231100000588 tumorigenic Toxicity 0.000 description 2
- 230000000381 tumorigenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000012646 vaccine adjuvant Substances 0.000 description 2
- 229940124931 vaccine adjuvant Drugs 0.000 description 2
- 101150042008 ACO4 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- 206010002961 Aplasia Diseases 0.000 description 1
- 208000003950 B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 101100310927 Caenorhabditis elegans sra-4 gene Proteins 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 241000689227 Cora <basidiomycete fungus> Species 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010088652 Histocompatibility Antigens Class I Proteins 0.000 description 1
- 101001002657 Homo sapiens Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 101001137987 Homo sapiens Lymphocyte activation gene 3 protein Proteins 0.000 description 1
- 101000651298 Homo sapiens TRAF-interacting protein with FHA domain-containing protein A Proteins 0.000 description 1
- GRRNUXAQVGOGFE-UHFFFAOYSA-N Hygromycin-B Natural products OC1C(NC)CC(N)C(O)C1OC1C2OC3(C(C(O)C(O)C(C(N)CO)O3)O)OC2C(O)C(CO)O1 GRRNUXAQVGOGFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N IDUR Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(I)=C1 XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 206010024229 Leprosy Diseases 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 102100020862 Lymphocyte activation gene 3 protein Human genes 0.000 description 1
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- PPQNQXQZIWHJRB-UHFFFAOYSA-N Methylcholanthrene Chemical compound C1=CC=C2C3=CC4=CC=C(C)C(CC5)=C4C5=C3C=CC2=C1 PPQNQXQZIWHJRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000686985 Mouse mammary tumor virus (strain C3H) Protein PR73 Proteins 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 101001000630 Mus musculus Peripheral myelin protein 22 Proteins 0.000 description 1
- 208000030852 Parasitic disease Diseases 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 1
- 102100027651 TRAF-interacting protein with FHA domain-containing protein A Human genes 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000005809 anti-tumor immunity Effects 0.000 description 1
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005975 antitumor immune response Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 201000008274 breast adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 229940030156 cell vaccine Drugs 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000001461 cytolytic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 230000000779 depleting effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 238000001215 fluorescent labelling Methods 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002743 glutamine Drugs 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000055277 human IL2 Human genes 0.000 description 1
- GRRNUXAQVGOGFE-NZSRVPFOSA-N hygromycin B Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](NC)C[C@@H](N)[C@H](O)[C@H]1O[C@H]1[C@H]2O[C@@]3([C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](C(N)CO)O3)O)O[C@H]2[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 GRRNUXAQVGOGFE-NZSRVPFOSA-N 0.000 description 1
- 229940097277 hygromycin b Drugs 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000012151 immunohistochemical method Methods 0.000 description 1
- 238000012744 immunostaining Methods 0.000 description 1
- 230000001024 immunotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 230000002601 intratumoral effect Effects 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 210000004153 islets of langerhan Anatomy 0.000 description 1
- 210000001821 langerhans cell Anatomy 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 230000000527 lymphocytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002803 maceration Methods 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 235000019988 mead Nutrition 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 239000007922 nasal spray Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 229940021993 prophylactic vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000012342 propidium iodide staining Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 229960000856 protein c Drugs 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000008844 regulatory mechanism Effects 0.000 description 1
- 201000010174 renal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000009738 saturating Methods 0.000 description 1
- 210000005212 secondary lymphoid organ Anatomy 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 231100000617 superantigen Toxicity 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002992 thymic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 230000005748 tumor development Effects 0.000 description 1
- 230000005740 tumor formation Effects 0.000 description 1
- 230000005851 tumor immunogenicity Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- A61K38/1774—Immunoglobulin superfamily (e.g. CD2, CD4, CD8, ICAM molecules, B7 molecules, Fc-receptors, MHC-molecules)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P33/00—Antiparasitic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P33/00—Antiparasitic agents
- A61P33/10—Anthelmintics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55516—Proteins; Peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Zoology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
Опис винаходу
Цей винахід стосується застосування ГАс-3 і СО4, а в загальнішому сенсі -лігандів молекул МНС класу І 2 або МНеС-іІ-подібних лігандів в якості ад'ювантів для вакцин, з метою бустингу антиген-специфічної імунної відповіді, так само як і застосування І АС-3 в якості терапевтичного засобу в імунотерапії злоякісних пухлин.
В даний час установлено, що білки, які кодуються ділянкою МНС (головний комплекс гістосумісності) класу
І, втягнуті в багато напрямків імунних реакцій, включно взаємодію між різними типами лімфоїдних клітин, таких, як лімфоцити і антиген-презентуючі клітини. Різні дослідження також продемонстрували, що й інші 70 механізми, не пов'язані з участю молекул СО4, беруть участь у прояві ефекторної функції Т-хелперів.
Ген активації лімфоцитів-3 (ГАс-3), експресований СО-4 і СОб-позитивними активованими Т-клітинами людини, так само як і інактивованими клітинами МК, кодує поліпептид, що складається з 503 амінокислот і відноситься до мембранних білків | типу, і має чотири позаклітинних імуноглобуліно-подібних домени (Іде) 1, що є лігандом молекул МНС класу ІІ (2). Аналіз цієї амінокислотної послідовності дозволив виявити виразні сегменти ідентичності в порівнянні з амінокислотними послідовностями, які виявляються у відповідних ділянок СО4, хоча загальний рівень гомології амінокислотних послідовностей СО4 і | АОС-3 людини практично не перевищує контрольний рівень (приблизно 2095-на ідентичність послідовностей поліпептидів). Також є кілька внутрішніх ділянок гомології послідовностей в молекулі | АС-3 між доменами 1 (01) і З (03), так само як і між доменами 2 (02) і 4 (04): це підтверджує, що ГАС-3 еволюціонував так само, як і СО4, шляхом дуплікації відповідних генів, при тому, що предковою була структура з двома доменами І95Е (1). Крім того, гени ГАс-3 і сСр4 локалізовані дуже близько один до одного в дистальній частині короткого плеча хромосоми 12 |З). Таким чином, гени (і білки) ГАС-3 і СО4 можуть бути визначені як "двоюрідні брати" в складі суперсімейства імуноглобуліно-подібних білків (21.
Як і 204, ГАС-3 людини має Ід-подібні позаклітинні домени, при тому, що в доменах 2 і 4 є мотиви МУХС; с 29 однак відмінністю від СО4 є присутність додаткової випетленої послідовності в складі 1-го домену (що Ге) розпізнається моноклональним антитілом 1784) і цитоплазматичного багатого проліном мотиву (Ер-повтори) в складі ГАС-3 людини (ПІ АС-3). Недавно ген активації лімфоцитів-3 миші (ті АС-3) був клонований і було виявлено приблизно 7095-ний рівень гомології з ПІГАС-3: зокрема, є той самий багатий проліном цитоплазматичний "хвіст". сч
Антиген-специфічна стимуляція СО4-позитивних Т-клітинних клонів в присутності моноклонального антитіла с проти ГАС-3 приводить до посилення клітинної проліферації і виробляння цитокінів (5). Була підтверджена регуляторна роль ПІ АС-3 в активації СО4-несучих Т-лімфоцитів за рахунок перехресного зв'язування молекул о
МН класу ІІ, експресованих Т-клітинами, з химерними білками І Ас-З3/Ла (|б6). Взаємодія між ГАс-3 і молекулами ою
МНС класу ІЇ придушує сигнали, передані молекулами МНС класу ІІ, що експресуються СО4-позитивними 3о Т-лімфоцитами (ослаблення проліферації клітин і виробляння цитокінів): це підтверджує, що і ГАС-3, і МНС в класу І є ефекторними молекулами механізму негативної регуляції імунних відповідей, опосередковуваних
Т-хелперними лімфоцитами. Для химерного білка ПІ Ас-3/Ід було показано зв'язування чужорідних молекул МНС класу ІІ (миші і мавпи). Крім того, передбачається, що ті АбС-3 опосередковує позитивний сигнал в ефекторних « клітинах: на це вказує те, що трансгенні миші, які несуть нульову мутацію в гені ГАС-3, характеризуються З 50 порушенням в пулі клітин МК (7|. с Лінії пухлинних клітин мишей, методами генной інженерії змінених таким чином, щоб експресувати мембранні
Із» (87.1, 87.2, СОБІ їі ін) або секретирувати молекули (інтерлейкин-2, інтерлейкин-12 та ін.), часто використовують в дослідженнях імунних відповідей або протипухлиинних проявів. Такий підхід показує, що багато пухлинних клітин є потенційно антигенними |9)| і стають імуногенними тоді, коли вони експресують які-небудь молекули. Отримані в експерименті у мишей пухлини класифікують як імуногенні тоді, коли після і однієї ін'єкції сингенним мишам клітинних вакцин, що не реплікуються, ці миші виробляють ефективну імунну 4! відповідь проти наступних летальних впливів. Пухлини, що не забезпечують збереження такої залишкової імуногенності, визначаються як слабоімуногенні або неімуногенні. о Протипухлинні імунні відповіді в першу чергу опосередковуються Т-лімфоцитами (12). Недавні дослідження ка 20 підтвердили дефіцит в презентуванні антигенів і прилігруванні Т-клітин, що створює проблеми для практичного втілення ідеї універсальної протипухлинної вакцини. Дійсно, було встановлено, що трансфекція пухлинних клітин їз генами, що кодують різні цитокіни, такі як 1-2, 1/-4, 11-12 або СМ-С5ЕБ, або генами, що кодують ко-стимуляторні молекули, такі, як В7, не тільки приводить до первинного відторгнення модифікованих клітин, але і часто забезпечує захисний імунітет проти наступних впливів немодифікованими пухлинними клітинами (131. 29 Функціональні антиген-презентуючі клітини (АРС) здатні приймати, процесувати і презентувати антиген
ГФ) Т-лімфоцитам у контексті ко-стимуляторних сигналів, необхідних для активації Т-лімфоцитів, що приводить до оптимального презентування антигену. Зокрема, вірогідно встановлено, що позитивні за молекулами МНС класу о ІЇ дендритні клітини відіграють принципову роль у процесуванні і презентуванні антигенів в імунній системі.
Заявники висловили гіпотезу, згідно з якою пухлинна імуногенність повинна зростати, якщо пухлину вдасться 60 модифікувати так, щоб вона безпосередньо направляла АРС організму-хазяїна, такі, як макрофаги і дендритні клітини. Дійсно, було повідомлено про те, що перехресне зв'язування молекул МНС класу ІЇ, специфічно експресованих такими клітинами, з використанням моноклонального антитіла або суперантигену, опосередковує сигнали, що приводять до вироблення ТМЕа і 1-12 (14, 15). Раніше було повідомлено, що ген активації лімфоцитів-3 (ГАС-3), що входить в склад локуса СО4 |1,6), кодує білок, що зв'язується з молекулами класу ІІ бо головного комплексу гістосумісності людини і миші з великим рівнем афінності в порівнянні з СО4 (17,61.
Заявники цього винаходу досліджували, чи може експресія ПГАС-3, СО4 людини (пСО4) і ті АС-3 на трьох
МНС класу ІІ-позитивних пухлинах миші (слабоїмуногенна саркома МСА-205 і неімуногенна аденокарцинома
Т5/АКЕМСА) опосередкувати імунну відповідь таким чином, щоб відторгати пухлину в миші з індукуванням системного імунітету.
В результаті заявники встановили, що ГАС-3 людини або миші у випадку його експресії у вигляді мембранного білка в лінії клітин солідної пухлини або у випадку його інокуляції мишам у вигляді розчинного білка індукує формування імунітету до найбільш злоякісних пухлин миші. Імунітет виявився залежним від
Т-лімфоцитів і антиген-специфічним. 70 Автори також дослідили роль СО4 і виявили, що СО4 людини (пСО4) також індукує системну протипухлинну відповідь.
Індукований імунітет, як було встановлено, опосередковується Т-лімфоцитами, оскільки таку саму протипухлинну відповідь було виявлено у мутантних мишей лінії "пиде", у яких через аплазію гіпофізу відсутні
Т-лімфоцити.
Протипухлинний ефект був також виявлений, коли були використані різні лінії пухлинних клітин, що виявляють різні варіанти власної імуногенності, так само як і різні лінії мишей, що експресують різні гени комплексу МНС.
Крім того, індуковані білками п АС-3 і йСО4 ефекти були виявлені тоді, коли лінії пухлинних клітин, що експресують ПІ АС-3 і пСО4, були ін'єкційоновані в ділянці, що відрізняється від місця вихідної інокуляції у ліній пухлинних клітин дикого типу.
Далі, системне введення розчинного ПІ АС-3 прямо індукує пригнічення росту пухлини іп мімо.
Всі вказані вище результати показують, що ГАС-3 і СО4 здатні обумовлювати антиген-специфічну, опосередковувану Т-лімфоцитами імунну відповідь і можуть бути використані в імунотерапії з метою запобігання розвитку злоякісних пухлин в популяціях, що характеризуються відповідним ризиком або, в загальнішому змісті, сч ов Для будь-яких імунотерапевтичних цілей, що грунтуються на антиген-специфічній, опосередкованій Т-клітинами імунній відповіді, а також показують, що І АС-3 також може застосовуватись в якості засобу для пригнічення і) росту пухлини іп мімо.
Далі заявники продемонстрували, що розчинний І АС-3 у випадку введення одночасно з антигеном, стосовно якого виробляється імунна відповідь, здатний функціонувати в якості вакцинного ад'юванта. с зо Такий вияв може бути пояснений поліпшенням презентування даного антигену спеціальними АРС (дендритними клітинами і макрофагами), розташованими під шкірою, що опосередковується молекулами МНС с класу І. с
Отже, оскільки, індукція СО8" -Т-клітинного імунітету втягнута у вірусні (наприклад, ВІЛ-СНІД, гепатит або герпес) і внутрішньоклітинні паразитарні і бактеріальні (наприклад, проказа, туберкульоз) інфекції і о Ззпоякісні пухлини, ГАС-3 може бути, зокрема, використаний для терапевтичної вакцинації проти патогенних - агентів, зв'язаних з цими захворюваннями, так само як і для лікування злоякісних пухлин.
У відповідності до одного з аспектів цей винахід стосується використання ліганду молекул МНА класу І! і лігандів подібних молекул для виробництва лікарського засобу, призначеного для профілактики або лікування « патологічних станів, що втягують антиген-специфічну імунну відповідь, переважно антиген-специфічну, опосередковувану Т-лімфоцитами імунну відповідь. - с В першому варіанті молекулою, що зв'язується з МНС класу ІЇ, є білок І АС-3, так само як і його похідні, ц здатні зв'язуватися з лігандом І АС-3, що входить в МНС. "» В контексті цього винаходу під похідними (ГАС-3 маються на увазі мутанти, варіанти і фрагменти І АС-3, а саме розчинні фрагменти І Ас-3, які зберігають здатність самого І АС-3 зв'язуватися з молекулами МНС класу ІІ.
Таким чином, можуть бути використані такі форми ГАс-3: -І - повний білок І АО-3; сл - розчинний фрагмент поліпептиду ГАС-3, до якого входить принаймні один з чотирьох позаклітинних імуноглобуліно-подібних доменів, а саме розчинна частина І АС-3, до якого входить позаклітинний сегмент, що оз тягнеться від 23-ї амінокислоти до 448-ї амінокислоти послідовності АС-3, наведеної |в заявці на видачу патенту Франції Мо90-00-121; де - фрагмент І АС-3, до якого входять по суті повні перший і другий домени;
Кз - фрагмент ГАС-3, до якого входять по суті повні перший і другий домени або всі чотири домени, такі, як визначені |в міжнародній патентній заявці УМО 95/30751, такий фрагмент як: - мутантний варіант розчинного І АС-3 або його фрагмент, до якого входять позаклітинні домени 01 і 02, до
ЯКИХ ВХОДИТЬ: - заміна амінокислоти за одним з наступних положень:
Ф, 73-є положення, в якому аргінін замінений на глутамінову кислоту; ко 75-е положення, в якому аргінін замінений на аланін або глутамінову кислоту; 76-е положення, в якому аргінін замінений на глутамінову кислоту; або поєднання однієї або кількох таких бо замін;
З0-е положення, в якому аспарагінова кислота замінена на аланін; 56-е положення, в якому гістидін замінений на аланін; 77-е положення, в якому тіразин замінений на фенілаланін; 88-е положення, в якому аргінін замінений на аланін; 65 103-е положення, в якому аргінін замінений на аланін; 109-е положення, в якому аспарагінова кислота замінена на глутамінову кислоту;
115-е положення, в якому аргінін замінений на аланін; або делеція ділянки, що знаходиться між 54-м і 66-м положеннями, або поєднання двох або більшої кількості таких замін.
Такі мутантні варіанти (описані в РМА5, Ргос. Маї!. Асад. Зсі. ОА - червень 1997| |41; - або фізіологічний варіант ГАС-3, до якого входять розчинний білок з молекулярною масою 52кДа за наявності в ньому доменів О1, 02 і 03.
У відповідності до другого варіанту цього винаходу білком, що зв'язується з МНС класу ІІ, є СЮ4 або його похідна, здатна зв'язуватися з лігандом СО4 з складу молекул МНС класу ІІ.
Похідні СО такі ж самі, як ті, що були визначені для похідних І АС-3. Тобто вони є мутантними, варіантами 7/0 | Фрагментами СО4, а саме розчинними (не зв'язаними з мембраною) фрагментами СО4, що зберігають здатність СА зв'язуватися з молекулами МНС класу ІІ.
ГАСс-3 і СО4, а саме, НГ АО-3 і пСО4 або їх похідні, такі, як були визначені вище, можуть бути введені в якості рекомбінантних складових, що експресують такі молекули, наприклад, в складі трансфікованих клітин або рекомбінантних вірусів.
Цей винахід стосується також пухлинних клітин, трансфікованих молекулою ДНК, що кодує принаймні один ліганд молекул МНС класу ІЇ, такий, як СО4 або І АС-3, або їх похідні.
Ще одним об'єктом цього винаходу є використання клітин, таких, як пухлинні клітини, трансфікованих молекулою ДНК, що кодує принаймні один ліганд молекул МНА класу ЇЇ, такий, як СО4 або І Ас-3, або їх похідні, для виробництва лікарського засобу, переважно лікарського засобу, призначеного для профілактики або лікування патологічних станів, пов'язаних з антиген-специфічною імунною відповіддю, такою, як антиген-специфічна, опосередкована Т-лімфоцитами імунна відповідь, або для лікування таких патологій, як злоякісні пухлини.
Трансфіковані клітини переважно є клітинами ссавців, а, зокрема, - пухлинними клітинами ссавців.
У відповідності до одного із своїх аспектів, цей винахід стосується способу одержання клітин, сч ов трансфікованих молекулою ДНК, що кодує принаймні один ліганд молекул МНС класу ІІ, такий, як СО4 або
ІГАС-3, або їх похідні, до яких відноситься виділення клітин у пацієнта (донора), трансфекція згаданих клітин (8) молекулою ДНК, що кодує принаймні один ліганд молекул МНС класу ІІ, такий, як СО4 або І Ас-3, або їх похідні, і виділення трансфікованих клітин.
Для одержання пухлинних клітин у відповідності до цього винаходу, даний спосіб може бути здійснений на с зо матеріалі виділених у пацієнта (донора) пухлинних клітин.
Однак, у відповідності до варіанту, якому слід надати перевагу, білок, що зв'язується з молекулами МНС с класу ІІ, а саме СО4 або І Ас-3, або їх похідні, вводять у вільному вигляді, а саме в розчинній формі, шляхом с системного введення, наприклад, за допомогою підшкірної, внутрішньом'язової або внутрішньовенної ін'єкцій.
Лікарський засіб у відповідності до цього винаходу може бути використаний в якості вакцини для о профілактики захворювань, пов'язаних з антиген-специфічною імунною відповіддю, перевагу слід надавати ї- опосередкованій Т-лімфоцитами імунній відповіді.
У цьому випадку його вводять разом з відповідним наповнювачем з одним або кількома антигенами, проти якого (яких) формується дана імунна відповідь. Антиген може бути інактивованим або ослабленим інфекційним початком або очищеним антигеном, наприклад, отриманим методами конструювання рекомбінантних білків, « 0 таким, як антиген інфекційного агента або пухлинний антиген, які переважно здатні обумовлювати в с опосередковану Т-лімфоцитами імунну відповідь.
Вакцина може бути використана для запобігання виникнення у суб'єкта інфекційного захворювання, такого, як ;» вірусне, бактеріальне або паразитарне захворювання, якщо відповідний інфекційний агент обумовлює формування специфічної імунної відповіді, перевагу слід надати імунній відповіді, опосередкованій Т-лімфоцитами. -І Вакцина може бути використана для лікування пацієнта від інфекційного захворювання, такого, як згадувалося вище, пов'язаного з опосередкованим Т-лімфоцитами імунною відповіддю, а саме імунною 1 відповіддю, опосередкованою СО8-позитивними Т-клітинами. 2) Приклади захворювань, пов'язаних з формуванням опосередкованої Т-лімфоцитами імунної відповіді, наведені нижче в таблиці. іме) це о стьЯятН 5в 1нвМнеМ 0оГелямиї////111111111111111 о нем, ому нем Сарюма калоші, відтортення при трансплантація, во
С онююни лошсьюриюю 11 111тя 1 Меланом, лейююв/// 65 В цих випадках антиген розподіляється по клітинах і відповідні пептиди завантажуються на молекули МНС класу І і презентуються на поверхні таких клітин, де вони розпізнаються СО5-носними Т-клітинами. Дані,
отримані заявниками, які показують, що молекули І АС-З/Ід індукують ефективну Т-клітинну імунну відповідь у тварин і стимулюють незрілі дендритні клітини і макрофаги іп міо, чітко підтверджують, що білок | АОш-3 є ад'ювантом Т-клітин в ситуаціях, коли він взаємодіє з молекулами МНС класу ІЇ на спеціальних клітинах АРС.
Вакцина може бути також використана для захисту суб'єкта від злоякісної пухлини, причому як солідної пухлини, так і лейкозу.
Вакцина також може бути використана для лікування пацієнта від злоякісної пухлини.
У цьому випадку білок, що зв'язується з молекулами МНС класу ІІ, а саме ГАС-3 або СО4, вводять суб'єкту «реципієнтові) підшкірно або внутрішньошкірно або у формі назального аерозолю разом з одним або кількома /о антигенами, здатними обумовлювати імунну відповідь; перевагу слід надавати імунній відповіді, опосередкованій
Т-лімфоцитами. Антиген може бути пептидом, ліпопротеїном, рекомбінантним білком або молекулою ДНК, що кодує такі антигени.
Протипухлинна вакцина може прищіплюватись в популяціях, що характеризуються ризиками, які визначають генотипово (профілактична вакцина), або пацієнтам (лікувальна вакцина), у яких є пухлина або є високий /5 бтупінь ризику її рецидиву після хірургічного втручання.
Якщо вакцина використовується в якості стандартної (профілактичної) вакцини або лікувального препарату, вона може бути введена у вигляді "голої" плазміди |191, до якої входить послідовність ДНК, що кодує ГАС-3 або
Сра4, перевагу слід надати вміщенню під контроль сильного промотора.
Також слід надати перевагу наявності у складі плазміди ДНК, що кодує антиген, стосовно якого формується імунна відповідь.
Наступним об'єктом цього винаходу, таким чином, є фармацевтична композиція, що містить ефективну кількість ліганду молекул МНС класу ІЇ в поєднанні з ефективною кількістю антигену, здатного стимулювати імунну систему, перевагу слід надавати здійсненню цього по шляху формування Т-клітинної імунної відповіді.
Ще в одному своєму аспекті цей винахід стосується використання ГАС-3 з якості лікарського засобу, сч ов призначеного для проведення протипухлинної імунотерапії в пацієнтів, у яких розвинулась злоякісна пухлина.
У цьому випадку надають перевагу введенню І АС-3 у вигляді вільного білка І Ас-3 або його похідної разом із і) фармацевтично прийнятним наповнювачем, перевагу слід надавати у вигляді розчинної похідної у відповідності до того, як воно було охарактеризовано вище.
ГАС-3 може бути введений шляхом внутрішньопухлинної ін'єкції або за допомогою системної ін'єкції, с зо Наприклад, підшкірно, внутрішньовенно або внутрішньом'язово.
Іншим об'єктом цього винаходу є спосіб генотерапії пухлин, в якому є такі етапи, як виділення частини с пухлинних клітин пацієнта, трансфікування вказаних клітин молекулою ДНК, що кодує принаймні один ліганд с молекул МНС класу ІІ, такий, як СО4 або І Ас-3, або їх похідні, ії повторне введення трансфікованих клітин цьому ж пацієнту. о
Нижченаведені приклади характеризують активність ГАС-3 і СО4 у зв'язку з профілактикою або лікуванням ї- патологічних станів, що втягують опосередковану Т-лімфоцитами імунну відповідь.
Для кращого розуміння цього винаходу можна звернутися до Фіг., що додаються, на яких:
Фіг.1 показує середній розмір пухлин у мишей С57ВІ/6, заражених пухлинними клітинами МСА-205 дикого типу (МСА МУТ), пухлинними клітинами МСА-205, трансфікованими пСО4 (МСА пСО4), пухлинними клітинами «
МСА-205, трансфікованими ПІ АС-3 (МСА ПІ АС-3); з с Фіг.2 показує результати (середній розмір пухлин), отримані після повторної стимуляції тих самих мишей пухлинними клітинами МСА дикого типу в мінімальній пухлинорідній дозі; ;» Фіг.3 показує результати (середній розмір пухлин), отримані після повторної стимуляції тих самих мишей сторонньою лінією пухлинних клітин МСЗ8;
Фіг.А4 показує результати (середній розмір пухлин), отримані при використанні іншої лінії мишей (ВАЇ В/с) і -І іншої лінії пухлинних клітин (Т5/А) як дикого типу (Т5/А дикий тип), так і трансфікованих АСО4 (Т5/А ПСО) або ПІ АО-3 (Т5/А ПІ АО-3); о Фіг.5 показує результати (середній розмір пухлин), отримані на існуючих пухлинах, на які впливали різними 2) дозами клітин МСА, що експресують ПІ АС-3;
Фіг.6 показує результати (середній розмір пухлин), отримані з використанням розчинного ГАС-3, що де вводиться разом з клітинами МСА (МСА мії. - дикий тип; МСА ул--25мкг ГАО-3; і МСА ул--250мкг І Ас-3);
Ге Фіг. збоку від рамки фігури 6 показує частку мишей, у яких розвинулася пухлина;
Фіг.7 і 8 показують дані про експресію ГАС-3 на мембрані лімфоцитів, що інфільтруються в пухлину (ТІЇ 5 у п'ятьох пацієнтів (Р1-Р5), у яких є карцинома ниркових клітин (КОС);
Фіг.9 демонструє відторгнення пі асб-3-позитивних пухлинних клітин, опосередковуване СЮО5-позитивними лімфоцитами.
Ф) А: РАСо5-аналіз (за допомогою клітинного флуоресцентного сортера) експресії СО8 лімфоцитами, що ка інфільтруються в пухлину (ЛІП) у контрольних мишей (МСА-205 дикого типу) у порівнянні з ЛІП мишей варіанту
МСА-205--ПІ АС-3. В: СО5-позитивні Т-лімфоцити беруть участь у контролі росту пухлини Т5/А ПІ АС-3. Мишам бо Внутрішньочеревно шляхом ін'єкції вводили 200мкг очищеного СО4- або СОв8-специфічного моноклонального антитіла в дні -3, -2, -1, 4 і 8. Пухлинні клітини Т5/А дикого типу або Т5/А ПІ АС-3 (МТО) були введені ін'єкцією підшкірно в 0-й день. Дані показані як середні 4 середнє квадратичне відхилення (5.е.) для 5 мишей у кожній групі окремого експерименту. Ці експерименти були проведені в двох повтореннях і були отримані подібні результати. С: Збільшена активність протипухлинних СТІ у мишей, що виявляють відторгнення клітин 65 ПІ АС-3/1З/А. Мишам вводили підшкірні трансплантати 5Отис. клітин ПІ АС-3/Т5/А, а потім проводили їх повторну стимуляцію на 30-й день з використанням 250 тисяч вихідних клітин ТЗ/А. Селезінки були взяті на 60-й день життя безпухлинних мишей, і спленоцити культивували протягом 6 днів з поміченими клітинами-мішенями, які були опромінені. Цитолітична активність стосовно помічених клітин-мішеней була протестована в стандартному 4-годинному тесті з виходом радіоактивного хрому-51 при різних співвідношеннях "ефектор:мішень" (Е:Т).
Показано результати експерименту на двох особинах мишей. Ці експерименти були здійснені в двох повтореннях на 4 особинах і були отримані подібні результати;
Фіг.10 показує дані (середній розмір пухлини) для мишей (20 особин лінії С57ВІ/6), яким трансплантували клітини МТО, сингенні пухлинним клітинам МСА-20.5, яким проводили одноразове введення вакцини, що містить
ГАС-З/д. На 6-й день були сформовані 4 групи по 5 мишей, яким проводили одноразове підшкірне введення /о вакцини (200мкл). Антиген привносили жорстко опроміненими (100Гр) клітинами МСА-205.
Експерименти, що ілюструють дані приклади, були проведені з використанням наступних матеріалів і методів.
Матеріали і методи 1. Лінії пухлинних клітин
Використані лінії пухлинних клітин, позитивні за класом І і негативні за класом Ії МНС, були такими: слабко імуногенна, індукована метилхолантреном лінія саркомних клітин МСА-205 (сингенна мишам лінії
С57ВІ/6 Н-2); імуногенна лінія клітин ниркової карциноми КЕМСА; і неіїмуногенна лінія клітин недиференційованої спонтанної аденокарциноми молочної залози Т5/А (обидві сингенні мишам лінії ВАЇ В/с
Н-29), Лінія клітин карциноми товстої кишки МСЗ38 (сингенна мишам лінії С57ВІ/6) були використані в експериментах з повторної стимуляції в якості контрольної пухлини. Клітини підтримували при 37 С у вологій атмосфері повітря при 1095 СО» у повному середовищі (культуральне середовище КРМІ-1640 з додаванням глутаміна, пірувата натрію, пеніциліну і стрептоміцину, 1095 звільненої від ендотоксинів навколоплідної сироватки теляти і 005мММ 2-В-меркаптоетанолу). Для експериментів по імунному фарбуванню й в експериментах іп мімо клітини відбирали з відповідних культуральних ємностей з фосфатним буфером, що с містить їмМ ЕДТА. Перед проведенням підшкірної ін'єкції клітини промивали тричі холодним фосфатним о буфером (1х) і ресуспендували в тому ж буфері. Клітини не культивували протягом більш двох тижнів. 2. Миші
Самки мишей лінії С57ВІ /6 у віці 6 або 8 тижнів були придбані у фірмі ІЕГРКА-СКЕБО аб. (І уоп, Франція).
Самки мишей лінії ВАЇ В/с у віці 4 або 8 тижнів були придбані у фірми ЗАММІЕК Іаб. (Франція). Всі миші с утримувались в умовах, вільних від конкретних патогенів. Самки мишей лінії "пиде" були придбані в віварії
Іпвійцї Сивіаме Коизвзу і утримувались в захищеному мкросередовищі. сч
З. Генетичні конструкції со
КДНК п АС-3, ті АС-3 ії НСО4 були клоновані у вектор, що несе ген гігроміцинової резистентності (сайтами, що клонують, були Храї!-сайт для ПІ АС-3 і СО і Хпо!І-сайт для ті АсС-3), уміщаючи під контроль промотора ЗКа о |181. В якості негативного контролю використовували клонування кКДНК ПІ АС-3 в протилежній орієнтації. Всі їч- лінії пухлинних клітин (2,5млн. клітин) використовували для трансфекції шляхом електропорації з використанням пристрою Епигодепіес (Бельгія): клітини МСА-205 при 200 В, клітини Т5/А і КЕМСА при З00 В, при опорі 1500мкФ і необмеженому опорі шунта. Трансфектантів селектували в присутності гігроміцину-В (Зідта): трансфектанти «
МСА-205 при концентрації 10Омкг/мл, а трансфектанти клітин КЕМСА і Т5/А при 200Омкг/мл. Резистентні клітини, що експресували трансфіковані молекули, були ідентифіковані з використанням цитофлуориметра ЕШе (Соцег, - с Ніагіеанй, РІ, США) і клоновані шляхом обмежуючого розведення. В даному аналізі використовували кращий клон ц для кожної з конструкцій у випадку кожної лінії пухлинних клітин. ,» 4. Цитофлуориметричний аналіз
Резистентні клітини, що експресують трансфіковані молекули, були забарвлені шляхом непрямої імунофлуоресценції з використанням насичуючих кількостей очищених або взятих з асцитиої рідини - І моноклональних антитіл. Спочатку клітини інкубували з моноклональними антитілами: 1784 (антитіло, специфічне стосовно ПІ АС-3) |2), ОКТА (антитіло, специфічне стосовно ПСО), в якості негативного контролю і-й використовувалась преімунна сироватка кролика (позначалася як РІЗ) і імунна сироватка кролика до ті АС-3 (95) (позначена як ІЗ). Експресія молекул класів І і ЇЇ МНС миші на пухлинах виявляли з використанням наступних
Мо 20 моноклональних антитіл: 34-1-25 - у відношенні Н-2 КУ ї 02; 28-8-65 - у відношенні Н-2 КР? і ОР; 14-4-48 (у відношенні ЕЗУ; М50114 (у відношень ІА і Є). г» Потім клітини промивали і інкубували з поєднаною з РІТС (флуоресцинізотіоціанат) козячою антимишиною сироваткою (ЗАМ Соцег) або поєднаною з РІТС козячою антикролячою сироваткою (САК Боційегп Віобесппоіодіез пс.) Для аналізу присутності клітин, що 22 інфільтруються, або заповнення клітин на периферії пухлини деякі миші були забиті, а їх пухлини
ГФ! розмацеровані. Клітини забарвлювали шляхом прямої імунофлуоресценції з використанням 1784-РІТС або наступних моноклональних антитіл (Рпапгтіпдеп): анти-7?7СО4-РЕ (І3Т4), анти-тСО8 (Гу-2 і ГузЗ.2), анти-тМКк о (284) і анти-тСО22 (ГурБ-8.2). Клітини відсортовували з використанням цитофлуориметра ЕїЇйе (СоцЦег).
Позитивні клітинні лінії потім клонували шляхом обмежуючого розведення Іас-З3-позитивних або 60 сСОод4-позитивних клонів, а отримані клони були заморожені для проведення подальшого аналізу.
Для створення розчинних молекул І АС-3 позаклітинні домени в складі ПІ АС-3 і ті АС-3 були приєднані до
Ес-сегментів імуноглобулінів піді! і тідс2а, відповідно, згідно з описаним раніше |б). Кінцеві рекомбінантні білки - НГАО-ЗЛа і ті АС-З/д - були отримані в клітинах СНО й очищені на колонках з протеїном А. 5. Експерименти з пухлинами іп мімо бо 5.1. Досягнення росту пухлин і вакцинація
Впровадження ліній пухлинних клітин було здійснено підшкірно з використанням мінімальної пухлинорідної дози (МОД) - 20 тисяч клітин на 1 мишу для лінії МСА-205, 50 тисяч клітин для лінії Т5/А і 100 тисяч клітин для лінії КЕМСА, - або з використанням 5-кратної МОД. Мишам, у яких не розвивалась пухлина протягом 30 днів після проведення ін'єкції, проводили повторну стимуляцію вихідною лінією пухлинних клітин (5-кратна МОД).
Клітини МСОСЗ8 (карцинома товстої кишки) були використані в кількості 100 тисяч для індукції контрольної пухлини в мишей лінії С57ВІ /6, які відторгали пухлину Т5/А. Пухлинні клітини вводили ін'єкцією узгодженим за віком мишам лінії С57ВІ /6 і ВАЇ В/с, які раніше не піддавались яким-небудь подібним діям.
Ріст пухлин контролювали 2-3 рази в тиждень шляхом вимірювання двох лінійних параметрів пухлини (перпендикулярних один до одного) з використанням штангенциркуля. В день проведення аналізу пухлини іп мімо 7/0 Клітини аналізували цитофлуориметрично і ставили тест на проліферацію іп мйго. 5.2. Моделі лікування пухлин
В 0-й день лінії пухлинних клітин дикого типу були інокульовані підшкірно в лівий бік (МОД) . В 0-й, на 3-й або 6-й день І аб-3-позитивні пухлинні клітини вводили ін'єкцією в правий бік (МОД або 5-кратна МОД) з метою визначення протипухлинного дії на нетрансфіковані клітини, розташовані у віддаленій частині тіла. Ріст /5 пухлин контролювали так само, як це було описано вище. 5.3. Для цитометрического аналізу мишей інокулювали підшкірно 5-кратною МОД пухлинних клітин у відповідності до описаного вище. На 8-й день пухлини розмецеровували і тестували з використанням моноклональних антитіл СЮОЗ-РЕ, СО4-РЕ, СО8-РЕ, СО80-РІТС, СО86-РІТС, 284-РЕ (клітини МК), СО22-РЕ (В-клетки) або пі АС-3-РІТС з використанням цитофлуориметра Еїїе (СоїНег). 5.4. Для виснаження лімфоцитів мишам внутрішньочеревинно вводили 200мкг очищеного |18)| анти-СБ4 (уТ5 191.1.2) або анти-СО8 (УТ5 169.4.2.1) моноклонального антитіла в дні -3, -2, -1, 4 і 8. Пухлинні клітини дикого типу або ПІ АС-3-Т5/А були інокульовані підшкірно на 0-й день (МОД). Цитофлуориметричний аналіз контрольних мишей, що одержували такі дози моноклональних антитіл, показав більш ніж 9590о-ную редукцію маркерної мішені в селезінці (дані в заявку не внесено). сч 6. Дослідження іп міго
Для тестування цитотоксичності були сформовані пухлино-специфічні короткочасні культури СТІ. на основі і) змішаної лімфоцитарної культури пухлинних клітин. Коротше, ЗОмлн. спленоцитів були відібрані на 30-й день у мишей, які відторгнули пухлини, які у них утворилися. Ці клітини були простимульовані Змлн. опромінених вихідних пухлинних клітин у повному середовищі протягом 4 днів, а потім додавали 50од./мл рекомбінантного с зо інтерлейкину-2 людини (Сейшз) на 2 дні. Ефекторні функції спленоцитів були протестовані на 6-й день в рамках стандартного 4-годинного тесту на вихід радіоактивного хрому-51 (при співвідношенні "ефектор:мішень" від 25:1 с до 200:1) проти відмічених клітин-мішеней, аутологічних пухлинних клітин, сторонньої саркомної лінії Н-29 со
МУЕНІ-164 і МК-чутливої клітинної лінії МАС. Ефективність лізису в трьох повторах була підрахована як
Трізниця шкідливих експериментального і спонтанного випромінювань в імп/хв. різниця середніх максимального о і спонтанного випромінювань в імп/хв.1їх100. Автори визначали лізис як специфічний тоді, коли був лізис ї- мишачих спленоцитів, що відторгали пухлинні клітини, за відрахуванням лізису позаекспериментальних спленоцитів миші.
Результати
Приклад 1 «
Поверхнева експресія НСО4, ПІ АС-3,. ті АС-3 і молекул МН в лініях пухлинних клітин шщ с Трансфіковані пухлинні клони були забарвлені у відповідності до описаного в розділі 2.2 і проаналізовані й з метою порівняння рівнів експресії АНСО4, ПІ АС-3 і ті АС-3. В даному аналізі використовували для кожної з «» конструкцій по одному клону, який показав найкращі результати. Серед ліній пухлинних клітин найвищий рівень молекул МНС класу І експресували клітини Т5/А, а найменший рівень експресії молекул МНС класу І - клітини МСА-205. Які-небудь істотні відмінності в рівні експресії молекул МНС класу | при порівнянні вихідних і -і трансфікованих клонів пухлинних клітин виявлено не було.
Приклад 2 іні Формування пухлинних моделей і вакцинація: порівняння дії НСО4 і пі АО-3
Ге) Дані експерименти були проведені з метою визначення пухлинорідності клітин після їх трансфікування: клітинами МСА-205, ТЗ/А, як показано на Фіг1 і 4 і КЕМСА. Індукція протипухлинного імунітету де Їаб-3-позитивної пухлини порівнювали з вихідними лініями пухлинних клітин. з Клітини МСА-205, Т5/А і КЕМСА дикого типу ефективно проліферували у випадку, коли їх підшкірно імплантували або сингенним мишам ліній С57ВІ /6 і ВА! В/с, або мутантним мишам пиде/пиде. Пухлинні клітини, що виявляли стабільну трансфікованість клонами пПГАС-3 в зворотній орієнтації, визначену в процесі
Пігроміцинового добору, характеризувалися подібними параметрами росту.
Тварини, яким вводили МСА-Ї АС-3, відторгали пухлину. Тварини, яким вводили МСА-СО4, виявляли низьку іФ) інтенсивність росту пухлини в порівнянні з тваринами, яким вводили клітини МСА дикого типу. Дві особини (з 5) ко повністю відторгали пухлину (Фіг.1).
Подібні результати були отримані в аналізі ті АС-3 (дані в заявку не внесено). во Ці результати вказують на те, що ектопічна експресія ПІ АС-3, ті АО-3 і пСО4 підвищує імуногенність лінії саркомних клітин МСА і запобігає утворенню пухлини в МСА-трансфектанта, тобто вона обумовлює формування імунітету проти злоякісної пухлини в миші.
Подібні результати були отримані в аналізі пухлинних клітин Т5/А у мишей лінії ВАЇ В/с (Фіг.2).
Подібні результати також були отримані при аналізі пухлинних клітин КЕМСА у сингенних мишей лінії ВАЇ В/с. 65 Таким чином, протипухлинна дія виявляється: - в різних лініях мишей, що експресують різні гени головного комплексу гістосумісності (МНС);
- при використанні різних ліній пухлинних клітин (що виявляють різний рівень власної імуногенності -
ТЗ/А«МСА).
Миші лінії "пиде" (пи/пи) були інокульовані пухлинними клітинами МСА дикого типу, МСА НІ Ас-3 ії МСА пора: ріст трансфектантів характеризувався подібними параметрами.
Це підтверджує той факт, що системний, довгостроковий, пухлино-специфічний, обумовлений молекулами
НГАС-3 або ПСО імунітет є опосередковуваним Т-лімфоцитами (які відсутні в мишей "пиде").
Мишам, які раніше були інокульовані клітинами МСА дикого типу, МСА рі АО-3 і МСА Ср і через 30 днів не характеризувалися розвитком пухлини, проводили повторну стимуляцію (1-разову) 5-кратною дозою МОД 7/0 пухлинних клітин або сторонньої лінії клітин МСЗ8 карциноми товстої кишки.
Отримані результати показані на Фіг.2 і З.
Після повторної стимуляції ріст МСА дикого типу виявився уповільненим у тварин, які виживали і яким вводились клітини МСА ГГ АС-3 і клітини МСА С04 (Фіг.2).
Жодного з цих ефектів не було виявлено у мишей, повторно простимульованих сторонніми пухлинними /5 Клітинами МОЗ8 (Фіг.3).
Це вказує на те, що ектопічна експресія і НПГАС-3, і пСО4 має ад'юванто-подібну дію і індукує довготривалий антиген-специфічний імунітет стосовно вихідного немодифікованого типу пухлини.
Приклад З
Лікування пухлин МСА-205 дикого типу в мишей С57ВІ /6 з використанням МСА ПІ АО-3
В цьому експерименті були використані три групи по п'ять особин у кожної з них.
Кожну групу інокулювали в один бік клітинами МСА дикого типу, а через З дні - або клітинами МСА дикого типу (група 1), клітинами МСА ПІГАС-3 в кількості 200 тисяч клітин (група 2), або клітинами МСА НГ АС-3 в кількості 1 млн. клітин (група 3).
Розмір вихідної пухлини вимірювали в кожній групі осіб протягом 30 днів. Дані наведені на Фіг.5. сч
Ін'єкція клітинами МСА ПІ АС-3 затримувала ріст пухлини в дозозалежному режимі.
Цей експеримент підтверджує наявність системного ефекту І АС-3 стосовно росту пухлини і вказує на те, що і)
ГАС-3 є лікарським засобом, що справляє дію на пухлини щільних тканин.
Приклад 4
Лікування пухлин МСА-205. дикого типу в мишей С57ВІ /6 з використанням розчинного І АС-3 с зо Три групи по п'ятеро мишей в кожній були одночасно інокульовані клітинами МСА дикого типу, суспендованими або у фосфатному буфері (група 1), або у фосфатному буфері, що містить розчинний білок с
ГАС-3 людини (зп АС-3 0104) в кількості або 25мкг (група 2), або 25Омкг (група 3). с
Розмір пухлин вимірювали в кожній групі протягом З0 днів.
Отримані дані наведено на Фіг.б. Щео,
Введення ПІ АС-3 0104 індукувало уповільнення росту пухлини в залежному від дози режимі. ї-
Отримані дані показують, що системне введення розчинного ПІ АС-3 прямо обумовлює пригнічення росту пухлини іп мімо.
Приклад 5
Експресія | АС-3 іп мімо на поверхні пухлинних лімфоцитів (ТІЇ) людини, що інфільтруються в карциному « ниркових клітин (КОС) з с В організмі людини І АС-3 експресується в тканинах (наприклад, в запалених вторинних лімфоїдних органах), але не на поверхні моноядерних клітин циркулюючої крові (РВМС) |З), причому навіть таких, як активовані іп ;» мімо РВМС, позитивні за антисенами СО25 і СОб69. На вищому рівні (АС-3 експресований на поверхні активованих, обмежених по класу | МНС, СО8-позитивних клітинах в порівнянні з обмеженими по класу ІІ МНС, СОра-позитивними клітинами |З), а індукція експресії ГАФ-3 інтерлейкином-12 або ще потужнішим поєднанням -І інтерлейкинів (ІІ 2-4ІЇ 12) виявляється істотнішою на клітинах СО4-- у порівнянні з клітинами СО4к. Білок І АС-3 є активаційним антигеном, що слабо експресується як іп мйго, так і іп мімо, і іноді буває важко оцінити о кількісно і якісно параметри флуоресцентного мічення свіжоприготовлених пухлинних тканин. Оскільки ГАС-3 оо може взаємодіяти з антиген-презентируючими клітинами пухлин людини, позитивними за молекулами МНС 5р класу Ії, заявники оцінювали його експресію в групі пухлин, для яких відома асоційованість з Т-лімфоцитами, з ю застосуванням імуногістохімічних методик (процедура АРААР). Експресія | АС-3 була виявлена у всіх тестованих
Ге пухлинних лімфоцитів, що інфільтруються, (ТІ), включно 5 меланом, 10 ниркових аденокарцином і 7 В-клітинних лімфом.
Вісім пацієнтів були обстежені щодо експресії | АС-3 в пухлинних лімфоцитах, що інфільтруються, у випадках наявності карциноми ниркових клітин.
В експериментах з цитофлуориметричним тестуванням були використані розмацеровані пухлинні тканини.
Ф) Експресія | АС-3 була досліджена в популяції лімфоцитів, визначеній за її розмірами і ступенем гранулярності. ка Загиблі клітини були виключені з аналізу після їх виявлення за допомогою фарбування йодистим пропідієм.
Клітини ТІЇ позитивно забарвлювались моноклональним антитілом 1784, специфічним стосовно епітопу в складі во позаклітинної петлі поліпептиду ГАс-3.
Отримані результати подані на Фіг.7 для пацієнтів Р1-РЗ, і на Фіг.8 для пацієнтів РА і Р5.
Для всіх пацієнтів цієї групи було виявлено зсув піку флуоресценції, що вказує на зв'язування антитіла 1784 на поверхні цих лімфоцитів.
Таким чином, у всіх пацієнтів клітини ТІЇ дійсно експресували ГАС-3 за наявності істотної частки (3090) 65 КСС-ТІЇ. у незалежних пацієнтів.
В усіх вибірках для СОЗ-позитивних Т-лімфоцитів було виявлено експресування І АО-3 (в межах 1195-4890) за більшого рівня експресії і Т-лімфоцитів СОвк.
З іншого боку, моноядерні клітини периферійної крові були негативними щодо І АС-3 в цих самих пацієнтів: це показує, що експресія ГАС-3 на поверхні лімфоцитів є процесом, спорідненим Т-клітинній активації в пухлинах.
Більше того, при використанні тесту ТІФА (твердофазний імуноферментний аналіз) було показано, що високі концентрації (біля Тнг/мл) розчинного | АС-3 виявляються в крові ракових хворих.
Ці дані показують, що білок (АС-3 є молекулою, втягнутою в протипухлинну відповідь, що природно зустрічається у людини, і, відповідно, підтверджує застосування І АС-3 в бустингу імунологічного контролю за 7/0 пухлинними клітинами у людини.
Приклад 6
Опосередкування первинного відторгнення СЮО8-позитивними Т-лімфоцитами
Відторгнення трансфектантів МСА-205 ПІ АО-3 і Т8Б/А ПГАС-3 було залежним від Т-лімфоцитів, оскільки відторгнення зовсім не спостерігалося у дефіцитних за Т-клітинами ("безтимусних") мишей пи/пи. Після ін'єкції 7/5 З-кратної МОД таких клітин пухлини по 1Омм у діаметрі утворювалися на 8-й день: розмацерування пухлинні клітини і лімфоцити, що інфільтруються в пухлину, аналізували методом ЕАС5. Пухлини дикого типу, так само як і трансфектанти по ГАС-3, що виявляються початково негативними за антигенами СО8О і СО86, зберігали негативність за цими поверхнево-клітинними маркерами після інокуляції, у той час як | АсС-3 стабільно виявлявся в пухлинах ПІ АС-3 при використанні моноклонального антитіла 1784, специфічного стосовно І АС-3 (дані в 2о Заявку не внесено). В 8-денних пухлинах-експлантантах частка СОв-позитивних клітин склала приблизно 3195 в пухлинах МСА-205 ПІ АС-3 в порівнянні з 4956 в пухлинах МСА-205 (Фіг.9а), в той час як ніяких відмінностей не було виявлено при аналізі наборів клітин СО4-, В або МК. Подібні результати були отримані при аналізі пухлин
Т5/А (дані в заявку не внесено). Нарешті, відносний внесок СО4- і СОв-позитивних Т-лімфоцитів в формування протипухлинної відповіді був проаналізований шляхом виснаження мишей за цими клітинними комплексами. Як сч об показано на Фіг.9ю, введення СОВ8-специфічного моноклонального антитіла в момент інокуляції дозою МОД
ПГАС-3/15/А запобігає відторгненню пухлинних клітин ПІ Ас-3/15/А. Участь СО4-позитивних хелперних і)
Т-лімфоцитів підтверджується конкретним ефектом, що спостерігається при використанні моноклонального антитіла, специфічного стосовно СО4 (Фіг.9б).
Приклад 7 с зо Посилення пухлино-специфічної СТІ -відповіді дією ПІ АС-3
Для подальшого з'ясування механізму протипухлинної активності | АС-3 автори оцінювали вплив цього білка с на утворення цитотоксичних Т-лімфоцитів (клітин СТ), здатних знищувати неїмуногені клітини ТЗ/А. Спленоцити су були зібрані у мишей, яким імплантували пухлину ПІ Ас-3/15/А і які були здатні відторгати пухлинні клітини дикого типу при 5-кратній дозі МОД в експериментах з повторної стимуляції, і були повторно простимульовані іп о міо на Є днів опроміненими клітинами Т5/А. Активність клітин СТІ. була визначена в спленоцитах мишей, яким ї- були імплантовані пухлинні клітини пі АС-3 (Фіг.Ус), у той час як спленоцити тварин, які ще взагалі не втягувались в експеримент, не виявляли цитотоксичної активності зовсім (дані в заявку не внесені). Активність
СТІ, мабуть, виявляється селективною стосовно неімуногенних клітин Т5/А, оскільки сингенні саркомні клітини
МЕНІ, так само як і МК-чутливі клітини УАС, не лізувалися (Фіг.Ос). «
Приклад 8 з с Лікування сформованих пухлин
Й Автори винаходу показали, що контроль росту пухлини може бути забезпечений шляхом використання и?» розчинної молекули ГАС-3, що береться в якості вакцинного ад'юванта. Однократна ін'єкція суміші антигену (опромінені пухлинні клітини) разом з бустерним чинником (ті АС-З/д - їмкг або О,1мкг) виявляється ефективною (Фіг.10). -І Передбачається, що іп мімо молекули розчинного І АС-3 можуть передавати сигнал клітинам острівців
Лангерганса (або будь-яким антиген-презентуючим клітинам, що знаходяться у вакцинному сайті) Через о молекули класу ІЇ головного комплексу гістосумісності (МНС) про ефективне "включення" СО5-позитивних 2) Т-лімфоцитів.
Бібліографія о ГІ. Ттівбеї! еї аї., 1990, 9. Ехр. Меа., 171, 1393-1405.
Ге ІІ. Ваїхегаз еї а!., 1992, 9. Ехр. Меад., 176, 327-337.
ІЗ). Ниага еї аї., 1994, |Іттиподепеїйїісв, 39, 213.
І). Нєиага еї а!., 1997, Ргос. Май). Асад. Зсі. ОБА, 91, 5744-5749.
ІБ). Нинага еї а/ї., 1994, Єиг. У. ІттипоЇ., 24, 3216-3221.
ІЄ). Ннага еї а/ї., 1996, Єиг. У. Іттипої., 26, 1180-1186. (Ф) Г/. Міуагакі еї аї., 1996, Зсіепсе, 272, 408. ка ІВ). Аподеміп еї аї., 1997, Іпіет., У. Сапсег,...
ІЗ). І огдціп еї аї., 1992, Сеїї, 71, 1093. 60 101. Такебе еї а!., 1988, 9. Мої. Сеїі. Віо!., 8, 466. (11). Создгоме еї аї., 1991, СеїІ., 66, 1051. (121. Кевійо М.Р. 5 МУипаегісп 9.к., 1995, "Віоїоду ої Сейшаг Іттипе Кезропзев: Віоіодісаї Тегару ої
Сапсег", еаз. М.Юеміа, 5.НеПтап 5 5.Козепрбего, І ірріпсоїї, РпіЇадеїрпіа, рр.3-37. (131. Рагасі! О.М., 1995, Аппи. Кеу. Іттипо)., 13, 399-415. 65 (141. М/аде МУ.Г., Оамоиві ., Заіатего .)., Апаге Р., УМакв Т.Н., Сатрбіег У).С., 1993, Іттипої. Тодау, 14, 539-542. (151. Косп Р., еіаплі О., Удеппемеіїп Р., дапКе К., Нешег С, Катрдеп Е., Котапі М, Зспціег О., 1996, 3.
Ехр.
Меа., 184, 741-746. (161. Вгопідне! О., Вогіем., Тебе! Р., 1997, Іттиподепеїйісв, 47, 96-98. (171. Ниага В., Ргідепі Р., Тоигпіег М., Вгипідчеї! О., Тгіреї! Р., 1995, Еиг. 9. Іттипої., 25, 2718-2721. (18). МсКіппеу М.М. 5. Рагкіпзоп А., 1987, У.
Іттипої.
Ме(под3вз, 96, 271-273. (191. Попе Н, Согтг М., Котап М., Ка? Е., 1998, ІттипоЇї.
Тодау, 19, 89-96.
Claims (17)
1. Застосування ліганду МНС класу ІІ, здатного посилювати антиген-специфічну імунну відповідь, вибраного з групи, що складається з СО4, ГАС-3, і похідного СЮО4 або І АС-3, яке зберігає здатність зв'язуватись з молекулою МН класу ІЇ, з якою зв'язується СО4 або І АС-3 для виробництва лікарського засобу, призначеного для профілактики або лікування патологічних станів, пов'язаних з антигенспецифічною імунною відповіддю.
2. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим , що вказана антигенспецифічна імунна відповідь є опосередкованою Т-клітинами імунною відповіддю.
З. Застосування за п. 1 або 2, яке відрізняється тим, що вказане похідне | АС-3, яке зберігає здатність зв'язуватись з молекулою МНС класу ІІ, з якою зв'язується | АС-3, являє собою мутант або розчинний фрагмент ГАС-3.
4. Застосування за п. З, яке відрізняється тим, що розчинний фрагмент ГАС-3 вибраний з групи, яка складається з фрагментів 01-02 і 01-04 | АО-3.
5. Застосування за п. З або 4, яке відрізняється тим, що антигенспецифічна імунна відповідь являє собою опосередковану СОВ8- Т-клітинами імунну відповідь.
6. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що лікарський засіб містить ліганд МНС класу ІІ у формі сч трансфікованих клітин, що експресують ліганд, або у формі розчинної молекули зазначеного ліганду.
7. Застосування за п. 1 або 2, яке відрізняється тим, що лікарський засіб являє собою вакцину для (о) профілактики патологічного стану або лікування патологічного стану у разі його виникнення.
8. Застосування за будь-яким з пп. 1-7, яке відрізняється тим, що ліганд МНС класу ІЇ вводиться в комбінації з антигеном, проти якого формується імунна відповідь. с зо
9. Застосування за п. 8, яке відрізняється тим, що антиген вибраний з групи, яка складається з вірусних, бактеріальних і паразитарних антигенів. с
10. Застосування за п. 8, яке відрізняється тим, що антиген являє собою пухлинний антиген. со
11. Застосування за п. 7, яке відрізняється тим, що вакцина містить ліганд МНС класу ІЇ у вигляді голої плазміди, яка включає послідовність ДНК, що кодує І АО-3 або СО4 ів)
12. Застосування за п. 11, яке відрізняється тим, що гола плазміда додатково містить послідовність ДНК, чн яка кодує антиген, проти якого формується імунна відповідь.
13. Застосування за будь-яким з пп. 1-8, яке відрізняється тим, що патологічний стан являє собою злоякісну пухлину.
14. Застосування за будь-яким з пп. 1-8, яке відрізняється тим, що патологічний стан являє собою інфекційне « 70 захворювання. ш-в с
15. Застосування розчинного фрагменту ГАС-3 за п. 4 або 5 для виробництва лікарського засобу, призначеного для протипухлинної імунотерапії або імунотерапії при інфекційних захворюваннях. :з»
16. Фармацевтична композиція, що містить ефективну кількість антигену, здатного індукувати антигенспецифічну імунну відповідь, разом з ефективною кількістю ліганду МНС класу ІЇ, здатного посилювати антигенспецифічну імунну відповідь, вибраного з групи, що складається з СО4, І АС-3 і похідного СО4 або І АС-3, -І яке зберігає здатність зв'язуватись з молекулою МНС класу ІІ, з якою зв'язується СА або І Ас-3.
17. Фармацевтична композиція за п. 16, яка відрізняється тим, що ліганд МНС класу ІІ являє собою | АС-3 о або похідне І АС-3, яке зберігає здатність зв'язуватись з молекулою МНС класу ІЇ, з якою зв'язується І АС-3. (95) з 50 Ко) Ф) іме) 60 б5
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP97401800A EP0893507A1 (en) | 1997-07-25 | 1997-07-25 | Use of MHC class II ligands (CD4 and LAG-3) as adjuvant for vaccination and of LAG-3 in cancer treatment |
| PCT/EP1998/004621 WO1999004810A2 (en) | 1997-07-25 | 1998-07-23 | Use of mhc class ii ligands as adjuvant for vaccination and of lag-3 in cancer treatment |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA75322C2 true UA75322C2 (en) | 2006-04-17 |
Family
ID=8229825
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UA2000020976A UA75322C2 (en) | 1997-07-25 | 1998-07-23 | Use of mhc class ii ligands as adjuvant for vaccination and lag-3 for cancer immunotherapy |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US6410509B1 (uk) |
| EP (3) | EP0893507A1 (uk) |
| JP (1) | JP4723722B2 (uk) |
| KR (1) | KR100603075B1 (uk) |
| CN (1) | CN1184320C (uk) |
| AT (2) | ATE324455T1 (uk) |
| AU (1) | AU753738B2 (uk) |
| BR (1) | BR9811037A (uk) |
| CA (2) | CA2293805C (uk) |
| DE (2) | DE69841866D1 (uk) |
| DK (1) | DK1002108T3 (uk) |
| EA (3) | EA200300092A1 (uk) |
| EE (1) | EE200000039A (uk) |
| ES (1) | ES2262242T3 (uk) |
| IL (2) | IL134212A0 (uk) |
| NO (1) | NO20000378D0 (uk) |
| PT (1) | PT1002108E (uk) |
| UA (1) | UA75322C2 (uk) |
| WO (1) | WO1999004810A2 (uk) |
Families Citing this family (29)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ATE519779T1 (de) * | 2001-09-19 | 2011-08-15 | Roussy Inst Gustave | An das glu-pro motiv-bindende proteine und peptide, diese enthaltende therapeutische zusammensetzungen und deren anwendungen |
| US20060240024A1 (en) | 2003-02-28 | 2006-10-26 | The Johns Hopkins University | T cell regulation |
| KR20050082389A (ko) * | 2004-02-18 | 2005-08-23 | 메덱스젠 주식회사 | 직렬 연쇄체를 갖는 면역접합체를 포함하는 장기이식합병증 치료용 약제학적 조성물 |
| FR2868781B1 (fr) * | 2004-04-13 | 2008-02-22 | Immutep | Composition de vaccin comprenant un ligand cmh de classe ii couple a un antigene, procede de preparation et utilisations |
| EP1777523A1 (en) * | 2005-10-19 | 2007-04-25 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | An in vitro method for the prognosis of progression of a cancer and of the outcome in a patient and means for performing said method |
| EP2044949A1 (en) * | 2007-10-05 | 2009-04-08 | Immutep | Use of recombinant lag-3 or the derivatives thereof for eliciting monocyte immune response |
| WO2011031139A1 (en) | 2009-09-09 | 2011-03-17 | Universiteit Utrecht Holding B.V. | An ataq protein or a part thereof as a vaccine |
| SA110310855B1 (ar) | 2009-11-13 | 2014-09-16 | Laboratories Leti S L Unipersonal | استخدام مصدر l3 و/ أو l5 كلقاح أو كوسيلة تشخيصية لمرض طفيلي |
| US9187751B2 (en) | 2010-11-10 | 2015-11-17 | Laboratorios Leti, S.L. | Adjuvant |
| GB201322626D0 (en) | 2013-12-19 | 2014-02-05 | Immutep S A | Combined preparations for the treatment of cancer |
| UA122479C2 (uk) | 2014-01-24 | 2020-11-25 | Дана-Фарбер Кенсер Інстітьют, Інк. | Виділена молекула антитіла, яка зв’язується з людським білком програмованої смерті-1 (pd-1) |
| CN103751778B (zh) * | 2014-01-28 | 2016-09-28 | 复旦大学 | 3′-脱氧腺苷在制备广谱疫苗增效的免疫佐剂中的应用 |
| EA201691765A1 (ru) | 2014-03-14 | 2016-12-30 | Новартис Аг | Молекулы антител против lag-3 и их применения |
| WO2016056596A1 (ja) | 2014-10-07 | 2016-04-14 | 日本電気株式会社 | Ｈｓｐ７０由来のペプチド、これを用いた癌の治療又は予防のための医薬組成物、免疫誘導剤、及び抗原提示細胞の製造方法 |
| WO2016094639A1 (en) * | 2014-12-10 | 2016-06-16 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Mini-intronic plasmid dna vaccines in combination with lag3 blockade |
| GB201500374D0 (en) | 2015-01-09 | 2015-02-25 | Immutep S A | Combined preparations for the treatment of cancer |
| US10526388B2 (en) | 2015-03-09 | 2020-01-07 | Cytlimic Inc. | Peptide derived from GPC3, pharmaceutical composition for treatment or prevention of cancer using the same, immunity inducer, and method for producing antigen-presenting cells |
| AU2016244570B2 (en) * | 2015-04-07 | 2020-08-27 | Nec Corporation | Medicine |
| EP3294324A1 (en) | 2015-05-13 | 2018-03-21 | Agenus Inc. | Vaccines for treatment and prevention of cancer |
| MX2017016844A (es) | 2015-07-16 | 2018-08-15 | Biokine Therapeutics Ltd | Composiciones y procedimientos para tratar cancer. |
| US20180340025A1 (en) | 2015-07-29 | 2018-11-29 | Novartis Ag | Combination therapies comprising antibody molecules to lag-3 |
| US10265379B2 (en) | 2015-09-16 | 2019-04-23 | Annabelle Rodriguez Oquendo | Use of recombinant lymphocyte activation gene-3 as a companion therapeutic for patients at risk for cardiovascular disease and other chronic inflammatory diseases |
| WO2017046409A1 (en) | 2015-09-18 | 2017-03-23 | Rijksuniversiteit Groningen | Long chain inulin for stimulating an immune response |
| CN108495651A (zh) | 2015-12-17 | 2018-09-04 | 诺华股份有限公司 | 抗pd-1的抗体分子及其用途 |
| US11291718B2 (en) | 2016-10-11 | 2022-04-05 | Cytlimic Inc. | Method for treating cancer by administering a toll-like receptor agonist and LAG-3 IgG fusion protein |
| CN108204958A (zh) * | 2016-12-19 | 2018-06-26 | 伊缪泰普有限公司 | 结合测定 |
| EP3784688A2 (en) | 2018-04-26 | 2021-03-03 | Agenus Inc. | Heat shock protein-binding peptide compositions and methods of use thereof |
| CN113271970A (zh) * | 2018-09-27 | 2021-08-17 | 健诺西生物科学公司 | 治疗方法 |
| JP2020138940A (ja) | 2019-02-28 | 2020-09-03 | テルモ株式会社 | 治療方法 |
Family Cites Families (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NZ226414A (en) * | 1987-10-02 | 1992-07-28 | Genentech Inc | Cd4 peptide adhesion variants and their preparation and use |
| WO1990001870A1 (en) * | 1988-08-22 | 1990-03-08 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, U.S. Department Of Commerce | Retroviral vectors expressing soluble cd4; a gene therapy for aids |
| JPH02231083A (ja) * | 1988-08-31 | 1990-09-13 | Eisai Co Ltd | 組換ナチュラルキラー細胞活性化因子 |
| EP0385909B1 (en) * | 1989-03-03 | 1994-07-13 | MicroGeneSys, Inc. | A kit or composition for the prevention or treatment of HIV-1 infections |
| EP0394827A1 (en) * | 1989-04-26 | 1990-10-31 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Chimaeric CD4-immunoglobulin polypeptides |
| FR2656800B1 (fr) * | 1990-01-08 | 1992-05-15 | Roussy Inst Gustave | Nouvelles proteines produits par les lymphocytes humains, sequence d'adn codant pour ces proteines et applications pharmaceutiques et biologiques. |
| US5851828A (en) * | 1991-03-07 | 1998-12-22 | The General Hospital Corporation | Targeted cytolysis of HIV-infected cells by chimeric CD4 receptor-bearing cells |
| ES2249760T3 (es) * | 1993-01-26 | 2006-04-01 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania (A Corporation Of Pennsylvania) | Composiciones y procedimientos de administracion de materias geneticas. |
| SE510135C2 (sv) * | 1994-05-05 | 1999-04-19 | Berol Nobel Ab | Vattenhaltig suspension av en cellulosaeter, sätt för dess framställning samt komposition |
| JP3700859B2 (ja) * | 1994-05-06 | 2005-09-28 | アンスティテュ ギュスタブ ルシ | Ｌａｇ−３タンパク質の可溶性ポリペプチドフラクション；製造方法、治療用製剤、抗イディオタイプ抗体 |
| MX9700560A (es) * | 1994-08-05 | 1997-05-31 | Warner Lambert Co | Metodo de uso de integrasa retroviral negativa transdominante en el tratamiento de infecciones retrovirales. |
| CZ172497A3 (en) * | 1994-12-07 | 1997-10-15 | Hoffmann La Roche | Fragments of monoclonal substance exhibiting immunosuppressor activity |
| CN1171117A (zh) * | 1994-12-23 | 1998-01-21 | 实验室奥姆公司 | Mhc－ⅱ结合和/或mhc－ⅱ模拟分子用于预防和/或治疗炎性疾病的用途 |
| ES2191784T3 (es) * | 1995-12-28 | 2003-09-16 | Univ Johns Hopkins Med | Vacunas de tumores de citocinas paracrinas alogenicas. |
-
1997
- 1997-07-25 EP EP97401800A patent/EP0893507A1/en not_active Withdrawn
-
1998
- 1998-07-23 CA CA2293805A patent/CA2293805C/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-07-23 KR KR1020007000265A patent/KR100603075B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1998-07-23 EE EEP200000039A patent/EE200000039A/xx unknown
- 1998-07-23 EA EA200300092A patent/EA200300092A1/ru unknown
- 1998-07-23 ES ES98945090T patent/ES2262242T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1998-07-23 CN CNB988075474A patent/CN1184320C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1998-07-23 BR BR9811037-3A patent/BR9811037A/pt not_active IP Right Cessation
- 1998-07-23 DE DE69841866T patent/DE69841866D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1998-07-23 JP JP2000503862A patent/JP4723722B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1998-07-23 PT PT98945090T patent/PT1002108E/pt unknown
- 1998-07-23 WO PCT/EP1998/004621 patent/WO1999004810A2/en not_active Ceased
- 1998-07-23 EA EA200000161A patent/EA003740B1/ru not_active IP Right Cessation
- 1998-07-23 AT AT98945090T patent/ATE324455T1/de active
- 1998-07-23 CA CA2732570A patent/CA2732570C/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-07-23 EP EP98945090A patent/EP1002108B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-07-23 IL IL13421298A patent/IL134212A0/xx unknown
- 1998-07-23 AU AU92547/98A patent/AU753738B2/en not_active Expired
- 1998-07-23 UA UA2000020976A patent/UA75322C2/uk unknown
- 1998-07-23 EP EP06008545A patent/EP1698701B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-07-23 DE DE69834330T patent/DE69834330T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1998-07-23 EA EA200200565A patent/EA005405B1/ru not_active IP Right Cessation
- 1998-07-23 AT AT06008545T patent/ATE478956T1/de not_active IP Right Cessation
- 1998-07-23 DK DK98945090T patent/DK1002108T3/da active
-
2000
- 2000-01-24 IL IL134212A patent/IL134212A/en not_active IP Right Cessation
- 2000-01-25 NO NO20000378A patent/NO20000378D0/no not_active Application Discontinuation
- 2000-01-27 US US09/492,113 patent/US6410509B1/en not_active Expired - Lifetime
-
2002
- 2002-01-10 US US10/041,600 patent/US7109026B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EA005405B1 (ru) | Применение опухолевых клеток, трансфицированных днк, кодирующей lag-3 или cd4, для производства лекарственного препарата для профилактики или лечения злокачественных опухолей | |
| AP1261A (en) | Composition containing an OX-40 receptor binding agent or a nucleic acid encoding the same and methods for enhancing antigen-specific immune response. | |
| CA2169635C (en) | Method, compositions and devices for administration of naked polynucleotides which encode biologically active peptides | |
| JP4059920B2 (ja) | 癌自己関連抗原特異的ヒト細胞障害性ｔ細胞の産生とその使用 | |
| JP4900884B2 (ja) | 腫瘍抗原 | |
| JP2002515734A (ja) | 遺伝子改変された樹状細胞により媒介される免疫刺激 | |
| AU2006277295B2 (en) | Glypican-3 (GPC3)-derived tumor rejection antigenic peptides useful for HLA-A2-positive patients and pharmaceutical comprising the same | |
| JP2022553192A (ja) | 癌ワクチン | |
| WO1999061068A9 (en) | Anti-prostate cancer vaccines, and methods of making, using and evaluating the same | |
| KR20020001865A (ko) | 면역반응을 증강시키기 위한 가용성 공동자극 분자의 용도 | |
| Bronte et al. | Effective genetic vaccination with a widely shared endogenous retroviral tumor antigen requires CD40 stimulation during tumor rejection phase | |
| US20040191761A1 (en) | Modified adenoviral E1A constructs and methods of use thereof | |
| CA2321974A1 (en) | Tumor associated antigen 791tgp72 | |
| JP4223813B2 (ja) | 免疫増強特性を有するムチンペプチド | |
| Ludvíková et al. | Use of polyclonal rabbit antibodies for detection of the bcr-abl fusion zone in cells transfected with experimental bcr-abl DNA vaccines | |
| KR20260071971A (ko) | Il-7 단백질 및 cd80 단백질을 포함하는 막단백질형태의 융합펩타이드 및 이의 항종양 용도 | |
| WO2024052542A2 (en) | A peptide cocktail | |
| WO1995012681A1 (en) | Methods relating to ir-95 | |
| HK40088792A (en) | Recombinant poxviruses for cancer immunotherapy | |
| WO2001032843A9 (en) | Enhanced immune recognition of pathogenic cells by icsbp expression | |
| MXPA99012024A (en) | Use of mhc class ii ligands as adjuvant for vaccination and of lag-3 in cancer treatment | |
| Sukumar | Mechanisms of Rejection of High Grade B Cell Lymphoma in Mice |