BRPI0314042B1 - Polímeros à base de ciclodextrina para o fornecimento de agentes terapêuticos ligados a eles por covalência - Google Patents

Polímeros à base de ciclodextrina para o fornecimento de agentes terapêuticos ligados a eles por covalência Download PDF

Info

Publication number
BRPI0314042B1
BRPI0314042B1 BRPI0314042-3A BR0314042A BRPI0314042B1 BR PI0314042 B1 BRPI0314042 B1 BR PI0314042B1 BR 0314042 A BR0314042 A BR 0314042A BR PI0314042 B1 BRPI0314042 B1 BR PI0314042B1
Authority
BR
Brazil
Prior art keywords
cyclodextrin
polymer
solution
cpt
polymeric
Prior art date
Application number
BRPI0314042-3A
Other languages
English (en)
Other versions
BR0314042A (pt
BRPI0314042B8 (pt
Inventor
Jianjun Cheng
Mark E. Davis
Kay T. Khin
Original Assignee
Cerulean Pharma Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=31982363&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=BRPI0314042(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Cerulean Pharma Inc. filed Critical Cerulean Pharma Inc.
Publication of BR0314042A publication Critical patent/BR0314042A/pt
Publication of BRPI0314042B1 publication Critical patent/BRPI0314042B1/pt
Publication of BRPI0314042B8 publication Critical patent/BRPI0314042B8/pt

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/337—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having four-membered rings, e.g. taxol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A61K47/40—Cyclodextrins; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/58—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. poly[meth]acrylate, polyacrylamide, polystyrene, polyvinylpyrrolidone, polyvinylalcohol or polystyrene sulfonic acid resin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/61—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule the organic macromolecular compound being a polysaccharide or a derivative thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
    • A61K47/6949—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit inclusion complexes, e.g. clathrates, cavitates or fullerenes
    • A61K47/6951—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit inclusion complexes, e.g. clathrates, cavitates or fullerenes using cyclodextrin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/10—Antimycotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B82—NANOTECHNOLOGY
    • B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
    • B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B30/00—Preparation of starch, degraded or non-chemically modified starch, amylose, or amylopectin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B31/00—Preparation of derivatives of starch
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
    • C08B37/0009—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid alpha-D-Glucans, e.g. polydextrose, alternan, glycogen; (alpha-1,4)(alpha-1,6)-D-Glucans; (alpha-1,3)(alpha-1,4)-D-Glucans, e.g. isolichenan or nigeran; (alpha-1,4)-D-Glucans; (alpha-1,3)-D-Glucans, e.g. pseudonigeran; Derivatives thereof
    • C08B37/0012—Cyclodextrin [CD], e.g. cycle with 6 units (alpha), with 7 units (beta) and with 8 units (gamma), large-ring cyclodextrin or cycloamylose with 9 units or more; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G63/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming a carboxylic ester link in the main chain of the macromolecule
    • C08G63/91—Polymers modified by chemical after-treatment
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G69/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming a carboxylic amide link in the main chain of the macromolecule
    • C08G69/44—Polyester-amides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G81/00—Macromolecular compounds obtained by interreacting polymers in the absence of monomers, e.g. block polymers
    • C08G81/02—Macromolecular compounds obtained by interreacting polymers in the absence of monomers, e.g. block polymers at least one of the polymers being obtained by reactions involving only carbon-to-carbon unsaturated bonds
    • G—PHYSICS
    • G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
    • G16H—HEALTHCARE INFORMATICS, i.e. INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR THE HANDLING OR PROCESSING OF MEDICAL OR HEALTHCARE DATA
    • G16H20/00—ICT specially adapted for therapies or health-improving plans, e.g. for handling prescriptions, for steering therapy or for monitoring patient compliance
    • G16H20/10—ICT specially adapted for therapies or health-improving plans, e.g. for handling prescriptions, for steering therapy or for monitoring patient compliance relating to drugs or medications, e.g. for ensuring correct administration to patients
    • G—PHYSICS
    • G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
    • G16H—HEALTHCARE INFORMATICS, i.e. INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR THE HANDLING OR PROCESSING OF MEDICAL OR HEALTHCARE DATA
    • G16H70/00—ICT specially adapted for the handling or processing of medical references
    • G16H70/40—ICT specially adapted for the handling or processing of medical references relating to drugs, e.g. their side effects or intended usage
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
    • C08F220/00—Copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical or a salt, anhydride ester, amide, imide or nitrile thereof
    • C08F220/02—Monocarboxylic acids having less than ten carbon atoms; Derivatives thereof
    • C08F220/10—Esters
    • C08F220/26—Esters containing oxygen in addition to the carboxy oxygen
    • C08F220/28—Esters containing oxygen in addition to the carboxy oxygen containing no aromatic rings in the alcohol moiety
    • C08F220/282—Esters containing oxygen in addition to the carboxy oxygen containing no aromatic rings in the alcohol moiety and containing two or more oxygen atoms
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A90/00—Technologies having an indirect contribution to adaptation to climate change
    • Y02A90/10—Information and communication technologies [ICT] supporting adaptation to climate change, e.g. for weather forecasting or climate simulation

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Primary Health Care (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Business, Economics & Management (AREA)

Abstract

"polímeros à base de ciclodextrina para o fornecimento de agentes terapêuticos ligados a eles por covalência". a presente invenção se refere a composições inéditas de compostos poliméricos terapêuticos contendo ciclodextrina projetados como um veículo para o fornecimento de substâncias terapêuticas de pequenas moléculas e composições farmacêuticas suas. mais especificamente os agentes terapêuticos/bioativos são ligados por covalência a polímeros contendo ciclodextrina. estes polímeros contendo ciclodextrina melhoram a estabilidade e a solubilidade do medicamento e reduzem a toxicidade do agente terapêutico de molécula pequena quando usado in vivo. além disso, selecionando-se de uma variedade de grupos linkers e ligantes de alvejamento, os polímeros apresentam métodos para o fornecimento controlado dos agentes terapêuticos. a invenção também se refere a processos para o tratamento de pacientes com as composições terapêuticas descritas no presente. a invenção se refere ainda a processos para se conduzir o negócio farmacêutico compreendendo a fabricação, concessão de licença ou kits de distribuição contendo ou relacionados com os compostos poliméricos descritos no presente.

Description

POLÍMEROS À BASE DE CICLODEXTRINA PARA O FORNECIMENTO DE AGENTES TERAPÊUTICOS LIGADOS A ELES POR COVALÊNCIA
FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO
O fornecimento de alguns agentes terapêuticos de molécula pequena tais como camptotecina, tem sido problemático devido aos seus precários perfis farmacológicos. Estes agentes terapêuticos têm, frequentemente, baixa hidrossolubilidade, suas formas bioativas existem em equilíbrio com uma forma inativa, ou então as altas concentrações sistêmicas dos agentes levam a efeitos colaterais tóxicos. Para contornar o problema do seu fornecimento algumas abordagens consistiram em se conjugar o agente diretamente a um polímero hidrossolúvel, tal como o metacrilato de hidroxipropila (HPMA), polietileno glicol e ácido poli-L-glutâmico. Em alguns casos, tais conjugados foram bem sucedidos na solubilização ou na estabilização da forma bioativa do agente terapêutico, ou na obtenção de um preparado de liberação sustentada que contornava as complicações associadas com altas concentrações sistêmicas do agente.
Uma outra abordagem do problema de fornecimento de medicamentos tem sido a formação de complexos de inclusão hospedeiro/hóspede entre o agente terapêutico e ciclodextrinas ou derivados seus. As ciclodextrinas (α, β, γ) e suas formas oxidadas têm propriedades físico-quimicas específicas, tais como uma boa hidrossolubilidade, baixa toxicidade e baixa resposta imune. Até agora, a maior parte dos estudos de fornecimento de medicamentos com ciclodextrinas se centralizaram na sua capacidade de formar complexos supramoleculares, em que as ciclodextrinas formam complexos de inclusão hospedeiro/hóspede com moléculas terapêuticas e assim alteram as propriedades físicas, químicas e/ou biológicas destas moléculas hóspedes.
A patente U.S. N° 5.276.088 descreve um processo para se sintetizar polímeros contendo ciclodextrina ou fazendo-se reagir álcool polivinílico ou celulose ou derivados seus com derivados de ciclodextrina ou copolimerizando-se um derivado de ciclodextrina com acetato de vinila ou metacrilato de metila.
A patente U.S. N° 5.855.900 descreve um polímero biodegradável contendo ciclodextrina. A patente descreve um conjunto polimérico biodegradável estruturado supramolecular compreendendo uma mL de ciclodextrinas α, β, γ modificadas por medicamento e uma cadeia polimérica se infiltrando na cavidade estrutural das ciclodextrinas.
Continua a haver necessidade de novas abordagens para o fornecimento de agentes terapêuticos de molécula pequena que têm perfis farmacológicos precários tais como a camptotecina, paclitaxel, doxorobucina e ciclosporina A.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
A presente invenção se refere a composições inéditas de conjugados poliméricos definidos como materiais poliméricos ligados por covalência a agentes terapêuticos/ bioativos, tais como veículos para o fornecimento de agentes terapêuticos. Em um aspecto, a presente invenção propõe conjugados poliméricos hidrossolúveis, biocompatíveis, compreendendo um polímero biocompatível hidrossolúvel ligado a porções bioativas por meio de ligações que são clivadas em condições biológicas para a liberação de porções bioativas. Em determinadas tais modalidades, o polímero compreende porções cíclicas que se alternam com porções de linker que conectam as estruturas cíclicas, isto é, formando polímeros lineares ou ramificados, de preferência polímeros lineares. O polímero pode ser um policátion, poliânion, ou um polímero não iônico. O agente bioativo, que pode ser um agente terapêutico, um agente diagnóstico ou um adjuvante, constitui de preferência, até pelo menos 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30% ou até mesmo 35% em peso do conjugado. Em determinadas modalidades, a taxa de liberação do medicamento depende principalmente da taxa de hidrólise. Em determinadas outras modalidades, a taxa de liberação do medicamento depende principalmente da divagem enzimática.
A presente invenção propõe compostos poliméricos contendo ciclodextrina para emprego no fornecimento de medicamento destes agentes terapêuticos. A invenção também propõe compostos para emprego no fornecimento controlado de medicamento que sejam capazes de liberar um agente terapêutico a uma taxa direcionada, previsível e controlada.
Consequentemente, um aspecto da presente invenção consiste em um conjugado polimérico compreendendo porção de ciclodextrina, um agente e um agente opcional de ligante de alvejamento. O polímero pode ser de cadeia reta ou ramificada, e pode ser formado por meio de policondensação de monômeros contendo ciclodextrina, copolimerização entre um ou mais monômeros contendo ciclodextrina e um ou mais comonômeros que não contém porções ciclodextrina. Além disso, a presente invenção também propõe polímeros contendo ciclodextrina formados por enxerto de porções ciclodextrina em um polímero já formado. As porções ciclodextrina propostas pela presente invenção incluem, sem limitação, ciclodextrinas α, β e γ e suas formas oxidadas. Dependendo da relação medicamento/polímero desejada, o agente terapêutico pode ser ligado a um monômero por meio de um linker opcional antes da etapa de polimerização ou pode ser subsequentemente enxertado no polímero por meio de um linker opcional. De modo análogo, o ligante de alvejamento pode ser ligado a um monômero por meio de um linker opcional antes da etapa de polimerização, ou pode ser subseqüentemente enxertado ao polímero por meio de um linker opcional, ou pode ser ligado ao polímero como um complexo de inclusão ou por interações hospedeiro-hóspede.
Para ilustrar mais detalhadamente, uma modalidade da invenção consiste em um composto polimérico representado pela Fórmula I:
Figure BRPI0314042B1_D0001
em que
P representa uma cadeia polimérica reta ou ramificada;
CD representa uma porção cíclica tal como uma porção ciclodextrina;
Li, L? e L.3, a cada ocorrência independentemente podem estar ausentes ou representar um grupo linker;
D, independentemente para cada ocorrência, representa um agente terapêutico ou um promedicamento seu;
T, independentemente a cada ocorrência, representa um ligante de alvejamento ou seu precursor;
a, m e v, independentemente para cada ocorrência, representam números inteiros na faixa de 1 a 10 (de preferência de 1 a 8, 1 a 5 ou mesmo 1 a 3) ;
b representa um número inteiro na faixa de 1 a aproximadamente 30.000 (de preferência < 25.000, < 20.000, < 15.000, < 10.000, < 5.000, < 1.000, < 500, < 100, < 50, < 25, < 10, ou mesmo < 5); e new, independentemente para cada ocorrência, representam um número inteiro na faixa de 0 a aproximadamente 30.000 (de preferência < 25.000, < 20.000, < 15.000, < 10.000, < 5.000, < 1.000, < 500, < 100, < 50, < 25, < 10, 5 ou mesmo < 5), sendo que, ou a cadeia polimérica compreende porções de ciclodextrina ou então n é pelo menos 1.
Uma outra modalidade da presente invenção é um composto representado pela Fórmula II:
Figure BRPI0314042B1_D0002
io em que
P representa uma unidade monomérica de um polímero;
T, independentemente a cada ocorrência, representa um ligante de alvejamento ou um precursor seu;
L6, L7, Lr, Lg e Lio, independentemente a cada ocorrência, podem estar ausentes ou representar um grupo linker;
CD, independentemente a cada ocorrência, representa uma porção cíclica tal como uma porção ciclodex-trina ou um derivado seu;
D, independentemente a cada ocorrência, representa um agente terapêutico ou uma forma de promedicamento seu;
m, independentemente a cada ocorrência, representa um número inteiro na faixa de 1 a 10 (de preferência 1 a 8, 1 a 5, ou mesmo 1 a 3);
o representa um número inteiro na faixa de 1 a aproximadamente 30.000 (de preferência < 25.000, < 20.000, < 15.000, < 10.000, < 5.000, < 1.000, < 500, < 100, < 50, < 25, < 10, ou mesmo < 5); e p, n e q, independentemente a cada ocorrência, representam um número inteiro na faixa de 0 a 10 (de preferência 0 a 8, 0 a 5, 0 a 3, ou mesmo 0 a aproximadamente 2), sendo que cada um de CD e D está de preferência presente em pelo menos um local (de preferência pelo menos 5, 10, 25, 50 ou mesmo > 100 locais) no composto.
Uma outra modalidade da presente invenção é um composto representado pela Fórmula III:
Figure BRPI0314042B1_D0003
em que
CD representa uma porção cíclica tal como uma porção de ciclodextrina, ou um derivado seu;
L4, Lr„ L6 e L7, independentemente a cada ocorrência, podem estar ausentes ou representar um grupo linker;
D e D', independentemente a cada ocorrência,
representam o mesmo agente terapêutico ou diferente ou
promedicamentos seus;
T e Τ', independentemente a cada ocorrência,
representam o mesmo ligante de alvejamento ou diferente ou precursor seu;
f e Yz independentemente a cada ocorrência,
representam um número inteiro na faixa de 1 a 10 (de
preferência de 1 a 8, 1 a 5 ou mesmo 1 a 3) r
g e z, independentemente a cada ocorrência,
representam um número inteiro na faixa de 0 a 10 (de
preferência de 0 a 8, 0a5, 0a3, ou mesmo de 0 a 2) ; e
h representa um número inteiro na faixa de 1 a aproximadamente 30.000 (de preferência < 25.000, < 20.000, < 15.000, < 10.000, < 5.000, < 1.000, < 500, < 100, < 50, < 25, < 10, ou mesmo < 5); e sendo que, pelo menos uma ocorrência (e de preferência pelo menos 5, 10 ou mesmo de pelo menos 20, 50 ou > 100 ocorrências) de g representa um número inteiro acima de 0.
Um outro aspecto da presente invenção consiste em um método para a preparação dos conjugados poliméricos terapêuticos contendo ciclodextrina descritos no presente.
Um outro aspecto da presente invenção consiste em uma composição farmacêutica compreendendo um composto ou polímero conforme descrito acima.
Um outro aspecto da presente invenção consiste em uma forma de dosagem farmacêutica compreendendo um conjugado polimérico conforme escrito no presente.
Um outro aspecto da presente invenção consiste em um método para o tratamento de um paciente que compreende a administração de uma quantidade terapeuticamente efetiva de qualquer um dos conjugados poliméricos descritos no presente.
Um outro aspecto da presente invenção consiste em um método de se conduzir um negócio farmacêutico compreendendo a fabricação, concessão de licença ou distribuição de kits contendo qualquer um dos conjugados poliméricos descritos no presente ou relacionados com eles.
Em determinadas modalidades, estes conjugados poliméricos terapêuticos melhoram a estabilidade e/ou solubilidade de medicamento do agente terapêutico quando usados in vivo. Além disso, selecionando-se de uma variedade de grupos linker, os conjugados poliméricos apresentam processos para a liberação controlada dos agentes terapêuticos e/ou bioativos, ou melhoram a segurança in vivo e/ou a eficácia terapêutica do agente terapêutico/bioativo. Em determinadas modalidades, os conjugados poliméricos são bioerodíveis ou biodegradáveis.
DESCRIÇÃO SUCINTA DAS FIGURAS
A Figura 1 mostra as estratégias para se fazer variar os conjugados poliméricos para modular suas características.
A Figura 2 demonstra o efeito do comprimento da amarração do peptídeo sobre a taxa de liberação do medicamento para o polímero de CD carregado de medicamento.
A Figura 3 apresenta o efeito que a amarração da camptotecina tem sobre a intensificação da estabilidade da camptotecina, tal como na inibição da abertura do anel de lactona, por exemplo.
A Figura 4 mostra os estudos de abertura do anel de lactona no tampão ΚΗ2ΡΟ4 de pH 7,4.
A Figura 5a e 5b mostra o controle de polimerização por ajuste do tempo de polimerização.
A Figura 6 ilustra a liberação de CPT de HG6 e de HGGG6 a 37°C depois de 24 h em soluções tampão com pHs variando de 1,1 a 13,1.
A Figura 7 mostra a análise por HPLC da degradação do Polímero CD-BisCys-SS-Peg3400.
A Figura 8 mostra a curva do crescimento tumoral como uma função de tempo para D5W, CPT, irinotecan, LGGG10 à sua dose máxima não tóxica testada (18 mg de CPT/kg) e os outros três conjugados com polímero de alto peso molecular (HGGG6, HG6, HGGG10) nas suas MTDs em camundongos xenoenxertados.
A Figura 9 apresenta as curvas de crescimento tumoral médio para HGGG6, HG6 e HGGG10 em camundongos xenoenxertados.
A Figura 10 apresenta as curvas do crescimento tumoral médio para LGGG10 e HGGG10 cada um dosado a 9 mg de CPT/kg em camundongos xeno-enxertados.
A Figura 11 apresenta as perdas em peso corporal médio (MBW) como uma função do tempo lançado para D5W, CPT, irinotecan e os três conjugados contendo polímero de alto peso molecular nas suas MTDs em camundongos xeno-enxertados.
A Figura 12 mostra a correlação da concentração de CPT (ng/mg de tecido) para o tamanho de tumor (em mg) em camundongos xeno-enxertados.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO
I. Visão Geral
A presente invenção se refere a composições inéditas de compostos poliméricos terapêuticos contendo ciclodextrina projetados para o fornecimento de medicamento de agentes terapêuticos. Em determinadas modalidades, estes polímeros contendo ciclodextrina melhoram a estabilidade e/ou solubilidade do medicamento e/ou reduzem a toxicidade, e/ou melhoram a eficácia do agente terapêutico de pequena molécula quando usado in vivo. Em determinadas modalidades, os polímeros podem ser usados para o fornecimento de agentes terapêuticos tais como camptotecina, taxol, doxorubicina e anfotericina. Além disso, selecionando-se de uma variedade de grupos de linker, e/ou ligantes de alvejamento, a taxa de liberação do medicamento a partir dos polímeros pode ser atenuada para um fornecimento controlado. A invenção também se refere a processos de tratamento de pacientes com as composições terapêuticas descritas no presente, a invenção além disso se refere a processos para a condução de um negócio farmacêutico compreendendo a fabricação, concessão de licença ou distribuição de kits contendo os compostos poliméricos descritos no presente ou relacionados com eles.
Em linhas mais gerais, a presente invenção propõe conjugados poliméricos biocompativeis hidrossolúveis compreendendo um polímero biocompatível hidrossolúvel ligado por covalência a porções bioativadas através de ligações que são clivadas em condições biológicas para liberar as porções bioativas. Em determinadas tais modalidades, o polímero compreende porções cíclicas alternando com porções de linker que conectam as estruturas cíclicas, em polímeros lineares ou ramificados, por exemplo, de preferência, polímeros lineares. As porções cíclicas podem ser quaisquer estruturas cíclicas adequadas, tais como ciclodextrinas, éteres de coroa (18-coroa-6, 15-coroa-5, 12-coroa-4 etc., por exemplo), oligopeptídeos cíclicos (compreendendo de 5 a 10 resíduos de aminoácidos, por exemplo), criptandos ou criptatos (criptando [2,2,2], criptando-2,1,1, e seus complexos, por exemplo), calixarenes ou cavitandos, ou qualquer combinação deles. É preferível que a estrutura cíclica seja (ou seja modificada para ser) hidrossolúvel. Em determinadas modalidades, onde se deseja um polímero linear, por exemplo, a estrutura cíclica é selecionada d modo tal que em condições de polimerização, exatamente duas porções de cada estrutura cíclica sejam reativas com as porções de linker, de modo tal que o polímero resultante compreende (ou consista essencial em) uma série alternante de porções cíclicas e porções de linker, tal como pelo menos quatro de cada tipo de porção. As porções cíclicas difuncionalizadas adequadas incluem muitas das que são disponíveis no comércio e/ou fáceis de serem preparadas empregando-se protocolos publicados. Em determinadas modalidades, os conjugados são hidrossolúveis até uma concentração de pelo menos 0,1 g/mL, de preferência de pelo menos 0,25 g/mL.
O polímero pode ser um policátion,, poliânion, ou um polímero não iônico. Um polímero policatiônico ou polianiônico tem pelo menos um sítio que tem uma carga positiva ou negativa, respectivamente. Em determinadas tais modalidades, pelo menos uma da porção de linker e da porção cíclica compreende um tal sítio de modo que cada ocorrência dessa porção inclui um sítio com carga.
agente bioativo, que pode ser um agente terapêutico, um agente diagnóstico ou um adjuvante (tal como um rádio-sensibilizador, ou um composto que carece de uma atividade significativa quando administrados sozinho, mas que potencializa a atividade de um outro agente terapêutico), constitui, de preferência, pelo menos 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, ou mesmo 35% em peso do conjugado. Nas modalidades preferidas, a administração do polímero a um paciente resulta na liberação do agente bioativo durante um período de pelo menos 6 horas, de preferência pelo menos 12 ou 18 horas. 0 agente pode ser liberado, por exemplo, durante um período de tempo que varia de 6 horas a um mês, de 6 horas a duas semanas, de 6 horas a 3 dias etc. Em determinadas modalidades, a taxa de liberação do medicamento depende principalmente na taxa de hidrólise (ao contrário da divagem enzimática) , a taxa de liberação sofre alteração, por exemplo, de menos de um fator de 5, de preferência de menos de um fator de 2, na presença de enzimas hidrolíticas. Em outras modalidades, a taxa de liberação do medicamento pode depender principalmente da taxa de divagem enzimática.
Os conjugados poliméricos da presente invenção podem ser úteis para melhorar a solubilidade e/ou estabilidade de um agente bioativo/terapêutico, reduzir as interações de medicamento a medicamento, reduzir interações com elementos sanguíneos inclusive de proteínas plasmáticas, reduzir ou eliminar a imunogenicidade, proteger o agente do metabolismo, modular a cinética de liberação do medicamento, melhorar o tempo de circulação, melhorar a meia vida do medicamento (no soro, ou em tecidos selecionados, tais como tumores, por exemplo), atenuar toxicidade, melhorar a eficácia, normalizar o metabolismo do medicamento em pacientes de diferentes espécies, etnicidades, e/ou raças e/ou proporcionar um fornecimento direcionado a células ou a tecidos específicos. Os compostos de solubilidade precária e/ou tóxicos podem se benéficos especialmente da incorporação a compostos poliméricos da invenção
II. Definições (a) Termos Gerais
Um adjuvants, conforme o termo é usado no presente, é um composto que tem pouco ou nenhum valor terapêutico próprio, mas que aumenta a eficácia de um agente terapêutico. Os adjuvantes exemplares incluem rádiosensibilizadores, agentes que intensificam a transfecção (tais como cloroquina e seus análogos), agentes quimiotáticos e quimioatraentes, peptideos que modulam a adesão celular e/ou a mobilidade celular, agentes permeabilizadores de células, inibidores de resistência multi-medicamentosa e/ou bombas de efluxo etc.
O termo agonista, conforme empregado no presente, se refere a um agente que simula ou supra-regula (potencializa ou suplementa, por exemplo) a bioatividade de uma proteína de interesse ou um agente que facilita ou promove (potencializa ou suplementa, por exemplo) uma interação entre polipeptídeos ou entre um polipeptídeo e uma outra molécula (um esteróide, hormônio, ácidos nucléicos, moléculas pequenas etc., por exemplo). Um agonista pode ser uma proteína do tipo nativo ou derivado seu tendo pelo menos uma bioatividade da proteína do tipo nativo. Um agonista pode também ser uma molécula pequena que supra-regula a expressão de um gene ou que aumenta pelo menos uma bioatividade de uma proteína. Um agonista pode também ser uma proteína ou molécula pequena que aumenta a interação de um polipeptídeo de interesse com uma outra molécula, um peptídeo alvo ou ácido nucléico, por exemplo.
Antagonista, conforme empregado no presente, se refere a um agente que infra-regula (suprime ou inibe, por exemplo) a bioatividade de uma proteína de interesse ou um agente que inibe/suprime ou reduz (desestabiliza ou reduz, por exemplo) a interação entre polipeptídeos ou outras moléculas (esteróides, hormônios, ácidos nucléicos, por exemplo, etc.). Um antagonista pode também ser um composto que infra-regula a expressão de um gene de interesse ou que reduz a quantidade da proteína do tipo nativo presente. Um antagonista pode também ser uma proteína ou molécula pequena que reduz ou inibe a interação de um polipeptídeos de interesse com uma outra molécula, um peptídeo alvo ou ácido nucléico, por exemplo.
Os termos polímero biocompatível e biocompatibilidade quando usados em conexão com polímeros são reconhecidos na técnica. Os polímeros biocompatíveis incluem, por exemplo, polímeros que não são, nem eles mesmos tóxicos ao hospedeiro (m animal ou ser humano, por exemplo) nem se degradam (se o polímero se degradar) a uma taxa que produza subunidades monoméricas ou oligoméricas ou outros produtos secundários a concentrações tóxicas no hospedeiro. Em determinadas modalidades da presente invenção, a biodegradação geralmente abrange a degradação do polímero em um organismo, tal como em suas subunidades monoméricas, que pode ser conhecido como sendo efetivamente não tóxico. Os produtos oligoméricos intermediários que resultam de tal degradação podem ter propriedades toxicológicas diferentes, no entanto, ou a biodegradação pode abranger a oxidação ou outras reações bioquímicas que geram moléculas diferentes das subunidade monoméricas do polímero. Consequentemente, em determinadas modalidades, a toxicologia de um polímero biodegradável destinado a uso in vivo, tal como implantação ou injeção em um paciente, podem ser determinadas depois de uma ou mais análises de toxicidades. Não é necessário que qualquer composição objeto da invenção tenha uma pureza de 100% para ser considerada biocompatível. Portanto, uma composição objeto da presente invenção pode compreender 99%, 98%, 97%, 96%, 95%, 90%, 85%, 80%, 75%, ou mesmo menos, dos polímeros biocompatíveis, incluindo,por exemplo, polímeros e outros materiais e excipientes descritos no presente, continuando a ser biocompatível.
Para se determinar se um polímero ou outro material é biocompatível, pode ser necessário se conduzir uma análise da toxicidade. Tais ensaios são bem conhecidos na técnica. Um exemplo de tal ensaio pode ser conduzido com células vivas de carcinoma, tais como células tumorais GT3TKB do seguinte modo: a amostra é degradada em NaOH a 1M a 37°C até ser observada uma degradação completa. A solução é então neutralizada com HC1 a 1M. Colocam-se aproximadamente 200 pL de diversas concentrações dos produtos de amostra degradada em placas de cultura tecidual de 96 cavidades e semeadas com células humanas.....de carcinoma gástrico (GT3TKB) a uma densidade de 104/cavidade. Os produtos da amostra degradada são incubados com as células GT3TKB durante 48 horas. Os resultados do ensaio podem ser lançados em gráfico como% de crescimento relativo pela concentração da amostra degradada na cavidade de cultura tecidual. Além disso, polímeros e preparados da presente invenção podem também ser avaliados por estes in vivo bem conhecidos, tais como implantações subcutâneas em ratos para confirmar que eles não produzem níveis significativos de irritação ou inflamação nos sítios de implantação subcutânea.
O termo biodegradável é reconhecido na técnica, e inclui polímeros, composições e preparados, tais como os descritos no presente, que são destinados a se degradar durante do uso. Os polímeros biodegradáveis tipicamente diferente de polímeros não biodegradáveis pelo fato de que os primeiros podem ser degradados durante o uso. Em determinadas modalidades, tal uso abrange o uso in vivo, tal como terapia in vivo e em outras determinadas modalidades, tal uso abrange o uso in vitro. Em geral, a degradação que pode ser atribuída à biodegradabilidade abrange a degradação de um polímero biodegradável nas suas subunidades componentes, ou digestão, por um processo bioquímico, por exemplo, do polímero em subunidades menores não poliméricas. Em determinadas modalidades, dois tipos diferentes de biodegradação podem ser geralmente identificados. Um tipo de biodegradação, por exemplo, pode abranger a divagem de ligações (quer covalente ou outras) na estrutura polimérica. Em tal biodegradação, tipicamente resultam monômeros e oligômeros e ainda mais tipicamente tal biodegradação ocorre por divagem de uma ligação que conecta uma ou mais das subunidades de um polímero. Por outro lado, um outro tipo de biodegradação pode abranger a divagem de uma ligação (quer covalente ou outra) interna à cadeia lateral ou que conecta uma cadeia lateral à estrutura polimérica. Um agente terapêutico, por exemplo ou outra porção química ligada como uma cadeia lateral à estrutura polimérica pode ser liberada por biodegradação. Em determinadas modalidades, um ou outro ou os dois tipos gerais de biodegradação podem ocorrer durante do uso de um polímero.
Conforme empregado no presente, o termo biodegradação abrange os dois tipos gerais de biodegradação. A taxa de degradação de um polímero biodegradável frequentemente depende em parte de uma variedade de fatores inclusive da identidade química da ligação responsável por qualquer degradação, do peso molecular, cristalinidade, bioestabilidade e do grau de reticulação de tal polímero, das características físicas (formato e tamanho, por exemplo) de um implante e do modo e local da administração. Quanto maior for o peso molecular, por exemplo, maior o grau de cristalinidade e/ou quanto maior for a bioestabilidade, a biodegradação de qualquer polímero biodegradável é geralmente mais lenta. 0 termo biodegradável é destinado a abranger materiais e processos também denominados bioerodíveis.
Em determinadas modalidades em que o polímero biodegradável também tem um agente terapêutico ou um outro material associado com ele, a taxa de biodegradação de tal polímero pode ser caracterizada por uma taxa de liberação de tais materiais. Em tais circunstâncias, a taxa de biodegradação pode depender não somente da identidade química e das características físicas do polímero, mas também da identidade do(s) material (ais) incorporados a ele. A degradação das composições objeto da presente invenção inclui não somente a divagem das ligações intramoleculares, por oxidação e/ou por hidrólise, por exemplo, mas também a destruição de ligações intermoleculares, tais como a dissociação de complexos hospedeiro/hóspede por formação de complexo competitivo com hospedeiros estranhos de inclusão.
Em determinadas modalidades, os preparados poliméricos da presente invenção se biodegradam dentro de um periodo que é aceitável na aplicação desejada. Em determinadas modalidades, tal como em terapia in vivo, tal degradação corre em um período que é geralmente inferior a aproximadamente cinco anos, um ano, seis meses, três meses, um mês, quinze dias, cinco dias, três dias, ou mesmo um dia por exposição a uma solução fisiológica com m pH entre 6 e 8 tendo uma temperatura entre 25 e 37°C. Em outras modalidades, o polímero se degrada dentro de um período entre aproximadamente uma hora e diversas semanas dependendo da aplicação desejada.
Conforme empregado no presente, o termo bioerodível se refere a polímeros que fornecem quantidades efetivas sustentadas de agente terapêutico ao tecido alvo durante períodos de tempo extensos desejados. Assim, um polímero de acordo com a invenção no ambiente biológico do tecido do hospedeiro e semelhantes, em um aspecto é submetido a enzimas hidrolíticas e espécies oxidantes nos termos da resposta inflamatória do hospedeiro, e proporcionalmente a ela. Isto resulta na liberação do agente terapêutico por meio da quebra das ligações por covalência. Assim, em determinadas modalidades, os materiais da invenção utilizam o processo de reparação de cicatrização do próprio mamífero sendo degradados por ele, conforme já descrito no presente.
Os polímeros biodegradáveis de ácido polilático, de ácido poliglicólico e o copolímero de acido poliláticoglicólico (PLGA), já foram investigados exâústivatnente Jpara a preparação de nanopartículas. Estes polímeros são poliésteres que, depois de implantados no corpo, sofrem uma simples hidrólise. Os produtos de tal hidrólise são porções biologicamente compatíveis e metabolizáveis (em ácido lático e ácido glicólico, por exemplo), que são eventualmente removidas do corpo pelo ciclo do ácido cítrico. Os produtos da biodegradação dos polímeros são formados a uma taxa muito lenta, e portanto não afetam a função celular normal. Diversos estudos com implantes com estes polímeros provaram ser seguros nas aplicações de fornecimento de medicamento, usados na forma de matrizes, micro-esferas, materiais de implante ósseo, suturas cirúrgicas e também nas aplicações contraceptivas para efeitos a longo prazo, estes polímeros são também usados como materiais de enxerto para órgãos artificiais e recentemente como membranas de base nas investigações de engenharia de tecidos. Nature Med. 824-826 (1996). Assim estes polímeros foram testados pelo tempo em diversas aplicações e provaram ser seguros para uso humano. O que é muito importante é que estes polímeros são aprovados pelo FDA para uso humano.
Quando os polímeros são usados para o fornecimento de agentes farmacologicamente ativos in vivo, é essencial que os polímeros propriamente ditos sejam não tóxicos e que eles se degradem em produtos de degradação não tóxicos à medida que o polímero é erodido pelos fluidos corporais. Muitos polímeros biodegradáveis sintéticos, no entanto, produzem oligômeros e monômeros depois da erosão in vivo que interagem de modo adverso com o tecido circundante. D. F. Williams, J. Mater. Sei. 1233 (1982). Para se minimizar a toxicidade do veículo polimérico intacto e dos seus produtos de degradação, foram projetados polímeros baseados nos metabolites que ocorrem na natureza. É provável que os exemplos mais exaustivamente estudados de tais polímeros sejam os poliésteres derivados do ácido lático ou do ácido glicólico e poliamidas derivadas de aminoácidos.
Uma série de polímeros bioerodíveis ou biodegradáveis são conhecidos e usados para a liberação controlada de substâncias farmacêuticas. Tais polímeros são descritos.
por exemplo, nas patente U.S. N° 4.291.013; patente U.S. Ν'
4.347.234; patente U.S. N° 4.525.495; patente U.S. Ν'
4.570.629; patente U.S. N° 4.572.832; patente U.S. Ν'
4.587.268; patente U.S. N° 4.638.045; patente U.S. Ν'
4.675.381; patente U.S. N° 4.745.160; e patente U.S. Ν'
5.219.980.
Uma ligação bio-hidrolisável (éster, amida, carbonato, carbamatos ou imida, por exemplo) se refere a uma ligação que é clivada (um éster é clivado para formar uma hidroxila e um ácido carboxílico, por exemplo) em condições fisiológica. As condições fisiológicas incluem os ambientes ácidos e básicos do trato digestivo (estômago, intestinos etc., por exemplo), o ambiente ácido de um tumor, divagem enzimática, metabolismo, e outros processos biológicos, e se refere, de preferência, a condições fisiológicas em um vertebrado, tal como em um mamífero.
Conforme empregado no presente, comonômero precursor de A, linker, grupo linker e porção linker se refere a qualquer composto de cadeia reta ou ramificada, simétrico ou assimétrico que depois de reação com um precursor monomérico de ciclodextrina ou de outra porção cíclica adequada liga duas tais porções entre si. Em determinadas modalidades, um comonômero precursor de A é um composto contendo pelo menos dois grupos funcionais através dos quais pode se obter a reação e assim a ligação dos monômeros de ciclodextrina. Exemplos de grupos funcionais que podem ser iguais ou diferentes, terminais ou interno, de cada precursor de comonômero A incluem, sem limitação, grupos amino, ácido, imidazol, hidroxila, tio, acil haleto, -C=C-, ou -c^c- ou derivados seus. Em modalidades preferidas, os dois grupos funcionais são iguais e estão localizados nos terminais do comonômero. Em determinadas modalidades, um precursor do comonômero A contém um ou mais grupos pendentes tendo pelo menos um grupo funcional através do qual pode ser produzida a reação e assim a ligação do agente terapêutico ou ligante de alvejamento, ou possa ser produzida a polimerização ramificada. Exemplos de grupos funcionais, que podem ser iguais ou diferentes, terminais ou internos de cada grupo pendente de precursor do comonômero A incluem, sem limitação, grupos amino, ácido, imidazol, hidroxila, tiol, acil haleto etileno e etino e seus derivados. Em determinadas modalidades, o grupo pendente é um grupo alquila Ci-Cio (de preferência Ct-C6) (não) substituído de cadeia ramificada, cíclico ou de cadeia reta, ou arilalquila contendo opcionalmente um ou mais heteroátomos, tais como N, O, S, no interior da cadeia ou do anel.
Depois da copolimerização de um precursor de comonômero A com um precursor monomérico de ciclodextrina, podendo dois monômeros de ciclodextrina ser ligados entre si ligando-se o lado de hidroxila primário de um monômero de ciclodextrina com um lado de hidroxila primário de um outro monômero de ciclodextrina, ligando-se o lado de hidroxila secundário de um monômero de ciclodextrina com o lado de hidroxila secundário de um outro monômero de ciclodextrina, ou ligando-se o lado de hidroxila primário de um monômero de ciclodextrina com o lado de hidroxila secundário de um outro monômero de ciclodextrina. Conseqüentemente, podem existir combinações de tais ligações no copolímero final. Tanto o precursor do comonômero A como o comonômero A do copolímero final podem ser neutros, catiônicos (contendo, por exemplo, grupos protonados tais como, grupos de amônio quaternário, por exemplo) ou aniônicos (contendo, por exemplo, grupos desprotonados, tais como por exemplo, sulfato, fosfato, borato ou carboxilato). A carga do comonômero A do copolímero pode ser ajustada ajustando-se as condições de pH. Exemplos de precursores de comonômero A adequados incluem, sem limitação, succinimida (ditiobis (propionato de succinimidila) DSP, e suberato de dissucinimidila (DSS), glutamatos e aspartatos, por exemplo).
Os polímeros contendo ciclodextrina da presente invenção podem ser lineares, ramificados ou enxertados. Conforme empregado no presente, o termo polímero linear contendo ciclodextrina se refere a um polímero que compreende moléculas de ciclodextrinas (α, β, ou γ) o seus derivados que são inseridos no interior de uma cadeia polimérica. Conforme empregado no presente, o termo polímero enxertado contendo ciclodextrina se refere a um polímero que compreende moléculas de ciclodextrina (α, β ou γ) ou derivados seus que são pendentes da cadeia polimérica. 0 termo polímero de enxertia conforme empregado no presente, se refere a uma molécula de polímero que tem ligadas porções adicionais em forma de grupos pendentes ao longo de um a estrutura polimérica. O termo polimerização de enxertia indica uma polimerização em que uma cadeia lateral é enxertada em uma cadeia polimérica, consistindo tal cadeia lateral em um ou diversos outros monômeros. As propriedades do copolímero de enxerto obtido tais como, por exemplo, solubilidade, ponto de fusão, absorção de água, umectabilidade, propriedades mecânica, comportamento de adsorção etc, se afastam mais ou menos acentuadamente das do polímero inicial como função do tipo e quantidade dos monômeros enxertados. O termo relação de enxertia, conforme empregado no presente, significa a porcentagem em peso da quantidade dos monômeros enxertados com base no peso do polímero. Conforme empregado no presente, um polímero ramificado contendo ciclodextrina se refere a uma estrutura polimérica com uma multiplicidade de pontos de ramificação, cada ponto de ramificação sendo um ponto de partida de uma outra linha da estrutura polimérica, podendo cada seção da estrutura polimérica ter uma multiplicidade de moléculas de ciclodextrina (α, β ou γ) , ou derivados seus, inseridos na cadeia ou enxertados nela.
O termo porção ciclodextrina se refere a molécula de ciclodextrina (α, β ou γ) ou derivados seus, que podem se encontrar na sua forma oxidada ou reduzida. As porções de ciclodextrina podem compreender linkers opcionais. Os agentes terapêuticos opcionais e/ou ligantes de alvejamento podem ser ainda ligados a estas porções por meio de um linker opcional. A ligação pode ser covalente (opcionalmente por meio de ligações bio-hidrolisáveis, como ésteres, amidas, carbamatos e carbonates, por exemplo) ou podem ser um complexo hospedeiro-hóspede entre o derivado de ciclodextrina e o agente terapêutico e/ou ligante de alvejamento ou os linkers opcionais de cada um. As porções ciclodextrina podem incluir ainda um ou mais porções carboidrato, de preferência simples porções de carboidrato tais como galactose, ligadas ao núcleo cíclico, quer diretamente (isto é, por meio de uma ligação carboidrato) ou por meio de um grupo linker.
O termo ED50 significa a dose de um medicamento que produz 50% da sua resposta ou efeito máximo.
Uma quantidade efetiva de um composto objeto da presente invenção, n tocante ao processo da presente invenção de tratamento, se refere a uma quantidade do agente terapêutico em um preparado que, quando aplicado como parte de um regime de dosagem desejado proporciona um benefício de acordo com os padrões clinicamente aceitáveis para o tratamento ou a profilaxia de um distúrbio específico.
termo provedores de cuidados de saúde se refere a indivíduos ou organizações que proporcionam serviços de cuidados de saúda a uma pessoa comunidade etc. Exemplos de provedores de cuidados de saúde incluem médicos, hospitais, comunidades de idosos sob cuidados contínuos, instalações autorizadas de cuidados, instalações de cuidados subagudos, clínicas, clínicas de múltiplas especialidades, centros ambulatoriais autônomos, agência de saúde doméstica e HMOs.
Instrução(ões), conforme empregado no presente, significa documentos descrevendo materiais e metodologias relevantes referentes a um kit. Estes materiais podem incluir qualquer combinação das seguintes: informações sobre antecedentes, lista de componentes e informação sobre a sua disponibilidade (informações sobre a sua aquisição etc), protocolos sucintos ou detalhados para o emprego de kit, resolução de problemas, referências, suporte técnico e qualquer outro documento correlato. As instruções podem ser fornecidas juntamente com o kit ou como um componente membro separado, quer na forma dd papel ou em uma forma eletrônica que pode ser fornecida em dispositivo de memória que pode ser lido em computador ou ser baixado de um site da Internet, ou em forma de uma apresentação gravada. As instruções podem compreender um ou mais documentos e pressupõe a inclusão de atualizações futuras.
Kit, conforme empregado no presente, significa uma coleção de pelo menos dois componentes constituindo o kit. Em conjunto, os componentes constituem uma unidade funcional para uma finalidade dada. Os componentes membros individuais podem ser acondicionados fisicamente e conjunto ou separadamente. Um kit compreendendo uma instrução para o emprego do kit, por exemplo, pode ou não incluir fisicamente a instrução com outros componentes individuais. Em vez disso, a instrução pode ser fornecida como um componente separado,d quer na forma de papel ou em uma forma eletrônica que pode ser fornecida em um dispositivo de memória que pode ser lido em computador ou baixado de um site da Internet, ou em forma de uma apresentação gravada.
O termo LD5o significa a dose de um medicamento que é letal em 50% de pacientes de teste.
Um paciente ou objeto a ser tratado pelo processo da presente invenção pode significar tanto um paciente humano como um não humano.
As polimerizações da presente invenção incluem mecanismos radicais, aniônicos, e catiônicos, assim como reações de moléculas bifuncionais (análogas à formação de náilon, fazendo-se reagir moléculas, por exemplo, cada uma das quais porta duas ou mais porções reativas diferentes que reagem entre si (mas, de preferência, são desencorajadas de reagir intramolecularmente por restrições estéricas, conformacionais ou outras), ou fazendo-se reagir dois ou mais compostos diferentes, portando cada composto duas ou mais porções reativas que reagem somente com as porções reativas de compostos diferentes (isto é, intermolecularmente)) , assim como polimerizações catalisadas por metal tais como metátese de olefinas e outras reações de polimerização conhecidas dos versados na técnica.
O termo profilático ou terapêutico tratamento é reconhecido na técnica e inclui a administração ao hospedeiro de um ou mais das composições da presente invenção. Se ele for administrado antes da manifestação clínica da condição indesejável (doença ou outro estado indesejável do animal hospedeiro, por exemplo) então o tratamento é profilático, isto é, ele protege o hospedeiro contra o desenvolvimento da condição indesejável, ao passo que se ele for administrado depois da manifestação da condição indesejável, o tratamento é terapêutico, (isto é, ele pretende diminuir, melhorar ou estabilizar a condição indesejável existente ou seus efeitos colaterais).
O termo prevenção é reconhecido na técnica, e quando usado em relação com uma condição tal como recorrência local (dor, por exemplo), uma doença tal como o câncer, um complexo de síndromes tais como insuficiência cardíaca ou qualquer outra condição médica, é bem conhecido na técnica, e inclui a administração de uma composição que reduz a freqüência ou retardar o aparecimento de sintomas de uma condição médica em um paciente em comparação com um paciente que não recebe a composição. Assim, a prevenção do câncer inclui, por exemplo, a redução do número de tumores cancerosos detectáveis em uma população de pacientes que recebem um tratamento profilático em comparação com uma população de controle sem tratamento, e/ou retarda o aparecimento de tumores cancerosos detectáveis em uma população tratada em comparação com uma população de controle sem tratamento, de uma quantidade estatisticamente e/ou clinicamente significativa, por exemplo. A prevenção de uma infecção inclui, por exemplo, a redução do número de diagnósticos da infecção em uma população tratada em comparação com uma população de controle sem tratamento e/ou retardar o aparecimento de sintomas da infecção em uma população tratada em comparação com uma população de controle sem tratamento. A prevenção de dor inclui, por exemplo, a redução da frequência ou alternativamente retardar as sensações dolorosas experimentadas por pacientes em uma população tratada em comparação com uma população de controle sem tratamento.
Conforme empregado no presente, agente terapêutico inclui qualquer composto ou composição biologicamente ativo, sintético ou que ocorre na natureza ou composição de substância, que quando administrado a um organismo (humano ou animal não humano), induz um efeito desejado farmacológico, imunogênico e/ou fisiológico por meio de ação local e/ou sistêmica. 0 termo portanto abrange aqueles compostos ou substâncias químicas tradicionalmente considerados como medicamentos, vacinas e produtos biofarma31 cêuticos incluindo moléculas tais como proteínas, peptídeos, hormônios, ácidos nucléicos, construções genéticas e análogos. Mais especificamente, o ermo agente terapêutico inclui compostos ou composições para uso em todos as áreas terapêuticas principais incluindo, sem limitação, adjuvantes; antiinfecciosos tais como agentes antibióticos e antivirais; analgésicos e combinações analgésicas, agentes anoréxicos, antiinflamatórios, anti-epilépticos, anestésicos locais e gerais, hipnóticos, sedativos, agentes antipsicóticos, agentes neurolépticos, antidepressivos, ansiolíticos, antagonistas agentes bloqueadores de neurônios, anticolinérgicos, e agentes colinomiméticos, agentes antimuscarínicos e muscarínicos, antiadrenérgicos, antiarrítmicos, agentes anti-hipertensivos, hormônios e nutrientes, antiartríticos, agentes antiasmáticos, anticonvulsivos, anti-histaminas, antinauseantes, antineoplásticos, antipruríticos, antipiréticos; antiespasmódicos, preparados cardiovasculares (inclusive bloqueadores de canais de cálcio, bloqueadores beta, beta agonistas e antiarrítmicos), anti-hipertensivos, diuréticos, vasodilatadores; estimulantes do sistema nervoso central; preparados para tosse e resfriados; descongestionantes; diagnósticos; hormônios; estimulantes de crescimento ósseo e inibidores de ressorção óssea; imunossupressores; relaxantes musculares; psico-estimulantes; sedativos; tranquilizantes; proteínas, peptídeos e fragmentos seus (quer ocorrendo na natureza, quer sintetizados quimicamente ou produzidos de modo recombinante); e moléculas de ácidos nucléicos (formas poliméricas de dois ou mais nucleotídeos, quer ribonucleotídeos (RNA) quer desóxi-ribonucleotídeos (DNA) inclusive moléculas tanto de duas fitas como de uma única fita, construções genéticas, vetores de expressão, moléculas anti-sento e análogos), moléculas pequenas (de doxorubicina, por exemplo) e outras macromoléculas biologicamente ativas tais como, por exemplo, proteínas e enzimas. O agente pode ser um agente biologicamente ativo usado em aplicações médica, inclusive veterinárias e em agricultura, tal como com plantas assim como em outras áreas. O termo agente terapêutico também inclui, sem limitação, medicamentos; vitaminas; suplementos minerais; substâncias usadas para o tratamento, prevenção, diagnóstico, cura ou mitigação de doença ou mal; ou substância que afeta a estrutura ou função do corpo; ou promedicamentos, que se tornam biologicamente ativos ou mais ativos depois de terem sido colocados em um ambiente fisiológico predeterminado.
Conforme empregado no presente, o termo baixa hidrossolubilidade se refere a composto não hidrossolúveis tendo uma solubilidade precária em água, isto é <5 mg/mL com um pH fisiológico (6,5-7,4) . É preferível que sua hidrossolubilidade seja <1 mg/mL, sendo mais preferível <0,1 mg/mL. É desejável que o medicamento seja estável em água em forma de uma dispersão; caso contrário pode ser desejável uma forma liofilizada ou sólida secada por pulverização.
Exemplos de alguns medicamentos não hidrossolúveis preferidos incluem agentes imunossupressores tais como ciclosporinas inclusive ciclosporina (ciclosporina A) , agentes imunoativos, antivirais e agentes antifúngicos, agentes antineoplásicos, analgésicos e agentes antiinflamatórios, antibióticos, antiepilépticos, anestésicos, hipnóticos, sedativos, agentes antipsicóticos, agentes neurolépticos, antidepressivos, ansioliticos, agentes anticonvulsivos, antagonistas, agentes bloqueadores de neurônios, agentes anticolinérgicos e colinomiméticos, agentes antimuscarínicos e muscarínicos, antiadrenérgicos e antiarrítmicos, agentes anti-hipertensivos, hormônios e nutrientes. Uma descrição detalhada destes e de outros medicamentos adequados pode ser encontrada em Remington's Pharmaceutical Sciences, 18a. edição, 1990, . Mack Publishing Co. Filadélfia, Pa.
O termo índice terapêutico se refere ao índice terapêutico de um medicamento definido como LD50/ED50.
Uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto, no tocante a um método de tratamento, se refere a uma quantidade do(s) composto(s) em um preparado, que, quando administrado como parte de um regime de dosagem desejado (a um mamífero, de preferência a um humano), alivia um sintoma, melhora uma condição ou retarda o aparecimento de condições mórbidas de acordo com padrões clinicamente aceitáveis para o distúrbio ou condição a ser tratada ou para fins cosméticos, com uma relação benefício/risco razoável, por exemplo, aplicável a qualquer tratamento médico.
Uma dosagem diária terapeuticamente efetiva de um composto, no tocante a um método de tratamento, se refere a uma quantidade do(s) composto(s) em um preparado que, quando administrado como parte de um regime de dosagem diária desejado (a um mamífero, de preferência a um ser humano) alivia um sintoma, melhora uma condição ou retarda o início de condições mórbidas de acordo com padrões clinicamente aceitáveis para o distúrbio ou condição a ser tratado ou para fins cosméticos, com uma relação benefício/risco razoável, por exemplo, aplicável a qualquer tratamento médico.
(b) Termos Químicos
Uma cadeia alifática compreende as classes de alquila, alquenila e alquinila, definidos abaixo. Uma cadeia alifática reta é limitada a radicais de cadeia de carbono sem ramificação. Conforme empregado no presente, o termo grupo alifático se refere a um grupo hidrocarboneto alifático de cadeia reta, cadeia ramificada ou cíclico e inclui grupos alifáticos saturados e insaturados, tais como um grupo alquila, um grupo alquenila e um grupo alquinila.
Alquila se refere a um radical de cadeia de carbonos totalmente saturada ramificada ou sem ramificações tendo o número de átomos de carbono especificado ou até 30 átomos de carbono se não tiver sido feita nenhuma especificação. Alquila de 1 a 8 átomos de carbono, por exemplo, se refere a radicais tais como metila, etila, propila, butila, pentila, hexila, heptila e octila e aqueles radicais que são isômeros posicionais destes radicais. Alquila de 10 a 30 átomos de carbono inclui decila, undecila, dodecila, tridecila, tetradecila, pentadecila, hexadecila, heptadecila, octadecila, nonadecila, eicosila, heneicosila, docosila, tricosila e tetracosila. Em modalidades preferidas. Um alquila de cadeia reta ou de cadeia ramificada tem 30 ou menos átomos de carbono na sua estrutura (Ct-Cío para cadeias retas, C3-C30 para cadeias ramificadas, por exemplo), sendo mais preferível 20 ou menos, de modo análogo os cicloalquilas preferidos têm de 310 átomos de carbono na estrutura de anel, sendo mais preferível que tenham 5,6 ou 7 átomos de carbono na estrutura de anel.
Além disso, o termo alquila (ou alquila inferior) , conforme usado em todo o relatório, exemplos e reivindicações destina-se a incluir tanto alquilas não substituídos como alquilas substituídos, referindo-se os últimos a porções alquila que têm substituintes substituindo um hidrogênio em um ou mais carbonos da estrutura do hidrocarboneto.Tais substituintes podem incluir, por exemplo, um halogênio, um hidroxila, um carbonila (tal como um carboxila, um alcóxi-carbonila, um formila ou um acila), um tiocarbonila (tal como um tioéster, um tioacetato ou um tioformiato), um alcoxila, um fosforila, um fosfato, um fosfonato, um fosfinato, um amino, um amido um amidino, um ciano, um nitro, uma sulfidrila, um alquiltio, um sulfato, um sulfonato, um sulfamoíla, um sulfonamida, um sulfonila, um heterociclila, um aralquila, ou uma porção aromática ou heteroaromática. Deve ser evidente aos versados na técnica que as porções substituídas na cadeia de hidrocarboneto podem ser por sua vez substituídos, se for adequado. Os substituintes de um alquila substituído, por exemplo, podem
Figure BRPI0314042B1_D0004
incluir formas substituídas e não substituídas de amino, azido, imino, amido fosforila (inclusive fosfonato e fosfinato), sulfonila (inclusive sulfato, sulfonamido, sulfamoíla e sulfonato) e grupos silila, assim como éteres, alquiltios, carbonilas (inclusive cetonas, aldeídos, carboxilatos e ésteres), -CF3, -CN e análogos. Alquilas substituídos exemplares são descritos abaixo. Os cicloalquilas podem ainda ser substituídos com alquilas, alquenilas, alcoxilas, alquiltios, aminoalquilas, alquilas substituídos com carbonila, -CF3, -CN e análogos.
A não ser que o número de carbonos seja especificado em contrário, alquila inferior conforme empregado no presente, significa um grupo alquila, conforme definido acima, mas tendo de um a dez carbonos, sendo mais preferível de um a seis átomos de carbono na sua estrutura tal como metila, etila, n-propila, isopropil,a n-butil,a isobutila, sec-butila e terc-butila. De modo análogo alquenila inferior e alquinila inferior têm comprimentos de cadeia análogos. Em todo o pedido, os grupos alquila são alquilas inferiores. em modalidades preferidas, um substituinte designado no presente como alquila é um alquila inferior.
termo alquiltio se refere a um grupo alquila, conforme definido acima, tendo um radical de enxofre ligado a ele. Nas modalidades preferidas, a porção alquiltio é representada por um de -(S)-alquila, -(S)-alquenila, -(S)alquinila e - (S) - (CH3) m-Ri, sendo m e Ri definidos abaixo). Os grupos alquiltio representativo incluem metiltio, etiltio e análogos.
Alquenila se refere a qualquer radical de cadeia de carbono insaturado ramificado ou não ramificado tendo o número de átomos de carbono especificado ou até 26 átomos de carbono, se nenhum limite tiver sido especificado ao número de átomos de carbono; e tendo 1 ou mais ligações duplas no radical. Alquenila de 6 a 26 átomos de carbono é exemplificadas por hexenila, heptenila, octenila, nonenila, decenila, undecenila, dodenila, tridecenila, tetradecenila, pentadecenila, hexadecenila, heptadecenila, octadecenila, nonadecenila, icosenila, henicosenila, docosenila, tricosenila e tetracosenila, em suas diversas formas isoméricas, podendo a(s) ligação(ões) insaturada(s) estar localizada(s) em qualquer ponto no radical e pode ter tanto uma configuração (Z) como (E) ao redor da(s) ligação(ões) dupla(s).
Alquinila se refere a radicais hidrocarbila dentro do âmbito da alquenila, mas tendo 1 ou mais ligações triplas no radical.
Os termos alcoxila ou alcóxi, conforme empregado no presente, se refere a um grupo alquila, conforme definido abaixo, tendo um radical oxigenado ligado a ele. Os grupos alcoxila representativos incluem metóxi, etóxi, propóxi, terc-butóxi e análogos. Um éter consiste em dois hidrocarbonetos ligados por covalência por um oxigênio. Consequentemente, o substituinte de um alquila que transforma aquele alquila em éter é um alcoxila ou é semelhante a ele, de modo tal que pode ser representado por um de -O-alquila, -O-alquenila, -O-alquila, -O-(CH?)m-Ri, sendo m e R-, descritos abaixo.
Os termos amino e aminasão reconhecidos na técnica e se referem tanto a aminas não substituídas como a substituídas, uma porção que pode ser representada pelas fórmulas gerais:
Figure BRPI0314042B1_D0005
em que cada um de R3, R5 e Rs representa independentemente um hidrogênio, um alquila, um alquenila, (CH2)m-Ri ou então R3 e R5 tomados em conjunto com o átomo de N ao qual eles estão ligados completam um heterociclo que tem de 4 a 8 átomos na estrutura de anel; Ri representa um alquenila, arila, cicloalquila, um cicloalquenila, um heterociclila e/ou um policiclila; e m é zero ou um número inteiro na faixa de 1 a 8. Em modalidades preferidas, somente um de R3 ou R5 pode ser um carbonila, R3, R5 e o nitrogênio em conjunto não formam uma imida, por exemplo. Em modalidades ainda mais preferidas, cada um de R3 e R5 (opcionalmente R6) independentemente representam um hidrogênio, um alquila, um alquenila ou - (CH2)m~Ri-Assim, o termo alquilamino, conforme empregado no presente, significa um grupo amino, conforme definido acima, tendo um alquila substituído ou não substituído ligado a ele, isto é, pelo menos um de R3 e R5 é um grupo alquila. Em determinadas modalidades, um grupo amino ou um alquilamino é básico, significando que tem um pKa>7,00. As formas protonadas destes grupos funcionais tem pKas em relação a água acima de 7,00.
termo carbonila é reconhecido na técnica e inclui tais porções que podem ser representadas pela fórmula geral:
ou
Figure BRPI0314042B1_D0006
em que X e uma ligação ou representa um oxigênio ou um enxofre e R7 representa um hidrogênio, um alquila, um alquenila, -(CH2)m-Ri ou um sal farmaceuticamente aceitável, Rn representa um hidrogênio, um alquila, um alquenila ou -(CHxím-Ri/ sendo m e R-ι conforme definido acima. Nos casos em que X é um oxigênio e R7 ou R« não é hidrogênio, a fórmula representa um éster. Nos casos em que X é um oxigênio e R7 é conforme definido acima, refere-se à porção no presente, como um grupo carboxila, e especialmente nos casos em que R7 é um hidrogênio, a fórmula representa um ácido carboxilico. Nos casos em que X é um oxigênio, e Rn é hidrogênio, a fórmula representa um formiato. Em geral, nos casos em que o átomo de oxigênio da fórmula acima é substituído por enxofre, a fórmula representa um grupo tiocarbonila. Nos casos em que X é um enxofre e R7 ou Ro não é hidrogênio, a fórmula representa um grupo tioéster. Nos casos em que X é um enxofre e R7 é hidrogênio, a fórmula representa um grupo ácido tiocarboxílico. Nos casos em X é um enxofre e Rn é hidrogênio, a fórmula representa um grupo tioformiato. Por outro lado, nos casos em que X é uma ligação e R? não é hidrogênio, a fórmula acima representa um grupo cetona. Nos casos em que X é uma ligação e R? é hidrogênio, a fórmula acima representa um grupo aldeido.
O termo derivado se refere à modificação química de moléculas. As modificações químicas podem ser artificiais tal como a formação de medicamentos, natural tal como a formação de metabólitos. O artesão perito reconhecería facilmente a variedade de modos como as moléculas podem ser modificadas tal como por oxidação, redução, substituição eletrófila/nucleófila, alquilação, formação éster/amida e análogos. As ciclodextrinas, por exemplo, da presente invenção podem ser modificadas quimicamente por aminação tosilação ou por iodação antes de se ligar as mesmas por covalência à matriz polimérica. De modo análogo, os agentes terapêuticos podem ser quimicamente modificados por preparação de promedicamento (glicina-camptotecina, por exemplo).
O termo heterociclila ou grupo heterocíclico se refere a estruturas de anel tendo de 3-10 membros, sendo mais preferível anéis com 3 a 7 membros, incluindo as suas estruturas de anel um a quatro heteroátomos. Os heterociclos podem também ser policiclos. Os grupos heterociclila incluem, por exemplo, tiofeno, tiantreno, furano, pirano, isobenzofurano, cromeno, xanteno, fenoxantina, pirrol, imidazol, pirazol, isotiazol, isoxazol, piridina, pirazina, pirimidina, piridazina, indolizina, isoindol, indol, indazol, purina, quinolizina, isoquinolina, quinolina, ftalazina, naftiridina, quinoxalina, quinazolina, cinolina, pteridina, carbazol, carbolina, fenantridina, acridina, pirimidina, fenantrolina, fenazina, fenarsazina, fenotiazina, furazan, fenoxazina, pirrolidina, oxolano, tiolano, oxazol, piperidina, piperazina, morfolina, lactonas, lactamas, tais como azetidinonas e pirrolidinonas, sultamas, sultonas e análogos. O anel heterociclico pode ser substituído em uma ou mais posições com tais substituintes conforme descrito acima, tal como por exemplo, halogênio, alquila, aralquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, hidroxila, amino, nitro, sulfidrila, imino, amido, fosfato, fosfonato, fosfinato, carbonila, carboxila, silila, sulfamoíla, sulfinila, éter, alquiltio, sulfonila, cetona, aldeído, éster, um heterociclila, uma porção aromática ou heteroaromática, -CFs, -CN ou análogos.
Conforme empregado no presente, o termo substituído destina-se a incluir todos os substituintes permissíveis de compostos orgânicos. Em um aspecto amplo, os substituintes permissíveis incluem substituintes acíclicos e cíclicos, ramificados e não ramificados, carbocíclicos e heterocíclicos, aromáticos e não aromáticos de compostos orgânicos. Os substituintes ilustrativos incluem, por exemplo, os descritos no presente acima. Os substituintes permissíveis podem ser um ou mais e iguais ou diferentes para os compostos orgânicos. Para os fins da presente invenção, os heteroátomos, tais como nitrogênio, podem ter substituintes de hidrogênio e/ou qualquer substituinte permissível dos compostos orgânicos descritos no presente que satisfaçam as valências dos heteroátomos. A presente invenção não se destina a ser limitada de nenhum modo pelos substituintes permissiveis de compostos orgânicos.
termo hidrocarbila se refere a um radical hidrocarboneto monovalente composto por cadeias ou anéis de carbono tendo até 26 átomos de carbono aos quais são ligados átomos de hidrogênio. O termo inclui grupos alquila, cicloalquila, alquenila, alquinila e arila, grupos que têm uma mistura de ligações saturadas e insaturadas, anéis carbociclicos e inclui combinações de tais grupos, ele pode se referir a estruturas de cadeia reta, cadeia ramificada, cíclica ou combinações delas.
O termo hidrocarbileno se refere a um radical hidrocarbila divalente. Os exemplos representativos incluem alquileno, fenileno ou ciclo-hexileno. É preferível que a cadeia de hidrocarbileno seja totalmente saturada e/ou tenha uma cadeia de 1-10 átomos de carbono.
Conforme empregado no presente, o termo nitro significa -NO?; o termo halogênio designa -F, -Cl, -Br ou -I; o termo sulfidrila significa -SH; o termo hidroxila significa -OH; e o termo sulfonila significa -SO?-.
Deve ficar subentendido que substituição ou substituído com inclui a condição implícita de que tal substituição está de acordo com a valência permitida do átomo substituído e do substituinte, e que a substituição resulta em um composto estável, que não sofre, por exemplo, espontaneamente uma transformação tal como por rearranjo, ciclização, eliminação etc.
Podem ser feitas substituições análogas a grupos alquenila e alquinila para produzir, por exemplo, aminoalquenilas, aminoalquinilas, amidoalquenilas, amido-alquinilas, iminoalquenilas, iminoalquinilas, tioalquenilas, tioalquinilas, alquenilas ou alquinilas carbonil-substituidas.
Conforme empregado no presente, a definição de cada expressão, tal como alquila, m, n, por exemplo, etc., quando ocorre mais de uma vez em qualquer estrutura é considerada independente da sua definição em outro ponto na mesma estrutura.
Os termos triflila, tosila, mesila e nonaflila são reconhecidos na técnica e se referem aos grupos triflúormetano-sulfonila, p-tolueno-sulfonila, metano-sulfonila e nonaflúor-butano-sulfonila, respectivamente. Os termos triflato, tosilato, mesilato e nonaflato são reconhecidos na técnica e se referem aos grupos funcionais do éster triflúor-metano-sulfonato, éster p-tolueno-sulfonato, éster metano-sulfonato e éster nonaflúor-butano-sulfonato e a moléculas que contém tais grupos, respectivamente.
As abreviaturas Me, Et, Ph, Ms representam metila, etila, fenila e metano-sulfonila, respectivamente. Uma lista mais abrangente das abreviaturas utilizadas pelos químicos orgânicos versados na técnica aparece no primeiro exemplar de cada volume do Journal of Organic Chemistry; esta lista é tipicamente apresentada em uma tabela intitulada Standard
List of Abbreviations. As abreviaturas contidas na citada lista e todas as abreviaturas utilizadas por químicos orgânicos versados na técnica são pelo presente incorporadas ao presente documento a título de referência.
Determinados compostos da presente invenção podem existir em formas específicas geométricas ou estereoisoméricas. A presente invenção contempla todos tais compostos, incluindo cis e trans isômeros, (R) e (S) enantiômeros, diastereoisômeros (d)-isômeros, (1)-isômeros, misturas racêmicas deles e outras misturas suas, como incidindo no âmbito da invenção. Os átomos de carbono assimétricos adicionais podem estar presentes em um substituinte tal como um grupo alquila. Todos tais isômeros, assim como suas misturas, são destinados a serem incluídos nesta invenção.
Se, por exemplo, um enantiômero específico de um composto da presente invenção for desejado, ele pode ser preparado pro síntese assimétrica, ou por derivação com um auxiliar quiral, em que a mistura diastereoisomérica resultante é separada e o grupo auxiliar é clivado para proporcionar os enantiômeros puros desejados. Alternativamente, nos casos em que a molécula contém um grupo funcional básico, tal como um grupo amino, ou um grupo funcional ácido, tal como carboxila, podem ser formados sais diastereoisoméricos com um ácido ou base oticamente ativo adequado, seguido pela resolução dos diastereoisômeros deste modo formados por cristalização fracionada ou meio cromatográficos bem conhecidos na técnica, e pela recuperação subsequente dos enantiômeros puros.
Os equivalentes propostos dos compostos descritos acima incluem compostos que correspondem de outro modo a eles, e que têm as mesmas propriedades gerais deles, em que uma ou mais simples variações de substituintes feitas não afetam de modo adverso a eficácia do composto. Em geral, os compostos da presente invenção podem ser preparados pelos métodos ilustrados nos esquemas de reação geral tais como, por exemplo, os descritos abaixo, ou por modificações deles, empregando-se materiais de partida facilmente disponíveis, reagentes e procedimentos de síntese convencionais. Nestas reações, é também possível se utilizar variantes que são conhecidas por si, mas que não são mencionadas no presente.
Para os fins da presente invenção, os elementos químicos são identificados de acordo com a Tabela Periódica dos Elementos, versão CAS, Handbook of Chemistry and Physics, 67a. Ed., 1986-87, capa interna. Também para os fins da presente invenção, o termo hidrocarboneto se destina a incluir todos os compostos permissíveis que têm pelo menos um átomo de hidrogênio e um átomo de carbono. Em um aspecto amplo, os hidrocarbonetos permissíveis incluem compostos orgânicos acíclicos e cíclicos, ramificados e não ramificados, carbocíclicos e heterocíclicos, aromáticos e não aromáticos que podem ser substituídos ou não.
III. Aplicações Exemplares do Método e Composições (a) Composições Exemplares
A presente invenção inclui conjugados poliméricos tais como conjugados poliméricos contendo ciclodextrina, em que um ou mais agentes terapêuticos/bioativos são ligados por covalência. Em determinadas modalidades, o agente terapêutico é uma molécula pequena, uma macromolécula um anticorpo, um peptideo, uma proteína, uma enzima, um ácido nucléico, ou um polímero que tem função terapêutica. Os 5 polímeros incluem polímeros lineares ou ramificados contendo ciclodextrina e polímeros enxertados com ciclodextrina.
Exemplos de polímeros contendo ciclodextrina que podem ser modificados do modo descrito no presente são objeto de instruções na patente U.S. N° 6.509.323, na pedido U.S.
ίο publicado N° 20020151523 e pedidos de patente U.S. nós de série 60/417373 e 10/372723. Estes polímeros são úteis como veículos para o fornecimento de agentes terapêuticos de pequena molécula, e podem melhorar a estabilidade e solubilidade do medicamento quando usados in vivo.
Consequentemente, uma modalidade da presente invenção consiste em um composto polimérico representado pela Fórmula I:
Figure BRPI0314042B1_D0007
em que
P representa uma cadeia polimérica reta ou ramificada;
CD representa uma porção cíclica tal como uma porção ciclodextrina;
L-, L? e L3, a cada ocorrência independentemente podem estar ausentes ou representar um grupo linker;
D, independentemente para cada ocorrência, representa um agente terapêutico ou um promedicamento seu;
T, independentemente a cada ocorrência, representa um ligante de alvejamento ou seu precursor;
a, m e v, independentemente para cada ocorrência, representam números inteiros na faixa de 1 a 10 (de preferência de 1 a 8, 1 a 5 ou mesmo 1 a 3);
new, independentemente para cada ocorrência, representam um número inteiro na faixa de 0 a aproximadamente 30.000 (de preferência < 25.000, < 20.000, < 15.000, < 10.000, < 5.000, < 1.000, < 500, < 100, < 50, < 25, < 10, ou mesmo < 5); e b representa um número inteiro na faixa de 1 a aproximadamente 30.000 (de preferência < 25.000, < 20.000, < 15.000, < 10.000, < 5.000, < 1.000, < 500, < 100, < 50, < 25, < 10, ou mesmo < 5), sendo que, ou P compreende porções de ciclodextrina ou n é pelo menos 1.
Em determinadas modalidades
P contém uma multiplicidade de porções ciclodextrina no interior da cadeia polimérica não porções ciclodextrina enxertadas a grupos pendentes para fora da cadeia polimérica. Assim em determinadas modalidades, a cadeia polimérica da fórmula I compreende ainda n' unidades de U, em que n' representa um número inteiro na faixa de 1 a aproximadamente 30.000 (de preferência < 25.000, < 20.000, < 15.000, < 10.000, < 5.000, < 1.000, < 500, < 100, < 50, < 25, < 10, ou mesmo < 5); e U é representado pela fórmula geral:
Figure BRPI0314042B1_D0008
em que
CD representa uma porção cíclica, tal como uma porção de ciclodextrina, ou um derivado seu;
L4, L5, Ls e L7, independentemente a cada ocorrência, podem estar ausentes ou representar um grupo linker;
D e D', independentemente a cada ocorrência, representam o mesmo agente terapêutico ou agentes terapêuticos diferentes, ou formas de promedicamentos seus;
T e Τ', independentemente a cada ocorrência, representam o mesmo ligante de alvejamento ou ligantes de alvejamento diferentes, ou precursor seu;
f e y, independentemente a cada ocorrência,
representam um número inteiro na faixa de 1 a 10;
g e z, independentemente a cada ocorrência,
representam um número inteiro na faixa de 0 a 10.
5 Em modalidades preferidas l4 e L7 representam
grupos linker.
Em determinadas modalidades, o polímero pode ser selecionado dentre polissacarídeos, e outros polímeros biocompatíveis não protéicos e suas combinações, que contêm 10 pelo menos um grupo hidroxila terminal, tal como polivinilpirrolidona, poli(oxietileno)glicol (PEG), anidrido polissuccínico, ácido polissebácico, PEG-fosfato, poliglutamato, polietilenimina, éter divinílico do anidrido maléico (DIVMA) , celulose, pululans, inulina álcool polivinílico 15 (PVA), N-(2-hidroxipropil)metacrilamida (HPMA), dextrano e amido hidroxietílico (HES), e têm grupos pendente opcionais para a enxertia de agentes terapêuticos, ligantes de alvejamento e/ou porções de ciclodextrina. Em determinadas modalidades, o polímero pode ser biodegradável tal como 20 poli(ácido lático), poli(ácido glicólico), poli(2-cianoacrilatos de alquila), polianidridos e poliorto-ésteres ou bioerodíveis tais como copolímeros de polilactídeoglicolídeo, e seus derivados, poliaminoácidos não peptídicos, poliimino-carbonatos, poli alfa-aminoácidos, polialquil25 ciano acrilato, polifosfazenos ou copolímeros de poliaspartato e de poliglutamato de acilóxi-metila e suas misturas.
Uma outra modalidade da invenção é um composto polimérico representado pela fórmula II:
Figure BRPI0314042B1_D0009
em que
P representa uma unidade monomérica de um 5 polímero;
T, independentemente a cada ocorrência, representa um ligante de alvejamento ou um precursor seu;
Lfí, L7, Lo, L9 e Lm, independentemente a cada ocorrência, podem estar ausentes ou representar um grupo 10 linker;
CD, independentemente a cada ocorrência, representa uma porção cíclica tal como uma porção ciclodextrina ou um derivado seu;
D, independentemente a cada ocorrência, representa um agente terapêutico ou uma forma de promedicamento seu;
m, independentemente a cada ocorrência, representa um número inteiro na faixa de 1 a 10 (de preferência 1 a 8, a 5, ou mesmo 1 a 3);
o representa um número inteiro na faixa de 1 a aproximadamente 30.000 (de preferência < 25.000, < 20.000, < 15.000, < 10.000, < 5.000, < 1.000, < 500, < 100, < 50, < 25, < 10, ou mesmo < 5); e
P, e q, independentemente a cada ocorrência, representa um número inteiro na faixa de 0 a 10 (de preferência de a 8, 0 a 5 ou mesmo de 0 a aproximadamente sendo que cada um de
CD
D está de preferência presente em pelo menos um local (de preferência pelo menos
5, 10, 25, ou mesmo 50 ou 100 locais) no composto.
Uma outra modalidade da invenção é um composto representado pela Fórmula III
Figure BRPI0314042B1_D0010
em que
CD representa uma porção cíclica tal como uma porção de ciclodextrina, ou um derivado seu;
L4, Ln,, L6 e L7, independentemente a cada ocorrência, podem estar ausentes ou representar um grupo linker;
D e D', independentemente a cada ocorrência,
representam o mesmo agente terapêutico ou diferente ou
promedicamentos seus;
T e T', independentemente a cada ocorrência,
representam o mesmo ligante de alvejamento ou ligantes de alvejamento diferentes ou precursor seu;
f e y, independentemente a cada ocorrência, representam um número inteiro na faixa de 1 a 10 (de preferência de 1 a 8, 1 a 5 ou mesmo 1 a 3);
g e z, independentemente a cada ocorrência, representam um número inteiro na faixa de 0 a 10 (de preferência de 0 a 8, 0 a 5, 0 a 3, ou mesmo de 0 a 2); e h representa um número inteiro na faixa de 1 a aproximadamente 30.000 (de preferência < 25.000, < 20.000, < 15.000, < 10.000, < 5.000, < 1.000, < 500, < 100, < 50, < 25, < 10, ou mesmo < 5), sendo que, pelo menos uma ocorrência (e de preferência pelo menos 5, 10 ou mesmo de pelo menos 20, 50 ou 100 ocorrências) de g representa um número inteiro acima de 0.
Em modalidades preferidas L4 e L7 representam grupos linker.
Em determinadas modalidades, os polímeros subjacentes são polímeros lineares contendo ciclodextrina, a estrutura polimérica inclui, por exemplo, porções de ciclodextrina. 0 polímero pode ser, por exemplo, um polímero linear de ciclodextrina hidrossolúvel produzido proporcionando pelo menos um derivado de ciclodextrina modificado de modo a conter um sítio reativo em cada uma de exatamente duas posições e fazendo-se o derivado de ciclodextrina reagir com um linker que tem exatamente duas porções reativas capazes de formar uma ligação covalente com os sítios reativos em condições de polimerização que promovem a reação dos sítios reativos com as porções reativas, para formar ligações por covalência entre o linker e o derivado de ciclodextrina, sendo então produzido um polímero linear compreendendo unidades alternantes de derivados de ciclodextrina e linkers. Alternativamente, o polímero pode ser um polímero linear hidrossolúvel de ciclodextrina tendo uma estrutura polimérica linear, compreendo o polímero uma multiplicidade de porções ciclodextrina substituídas ou não e porções linker na estrutura polimérica linear, sendo cada uma das porções ciclodextrina, distinta de uma porção ciclodextrina no terminal de uma cadeia polimérica, é ligada a duas das citadas porções linker, ligando cada porção linker por covalência duas porções ciclodextrina. Em uma outra modalidade ainda, o polímero é um polímero hidrossolúvel linear de ciclodextrina compreendendo uma multiplicidade de porções ciclodextrina ligados por covalência entre si por uma multiplicidade de porções linker, sendo cada porção ciclodextrina, distinta de uma porção ciclodextrina no terminal de uma cadeia polimérica, ligada a duas porções linker para formar um polímero linear de ciclodextrina.
O(s) grupo(s) linker podem consistir em uma cadeia alquileno, uma cadeia polietileno glicol (PEG), um anidrido polissuccinico, ácido poli-L-glutâmico, poli(etilenoimina), um oligossacarídeo, uma cadeia de aminoácidos, ou qualquer outra ligação adequada. Em determinadas modalidades, o grupo linker propriamente dito pode ser estável em condições fisiológicas, tal como uma cadeia alquileno, ou pode ser clivável em condições fisiológicas, por uma enzima, por exemplo (a ligação contém, por exemplo, uma seqüência de peptídeo que é um substrato para uma peptidase) ou por hidrólise (a ligação contém, por exemplo, um grupo hidrolisável, tal como um éster ou tioéster). Os grupos linker podem ser biologicamente inativos, tal como um PEG, ácido poliglicólico ou cadeia de ácido polilático ou pode ser biologicamente ativos tal como um oligopeptideo ou polipeptídeo que, quando clivado das porções,se liga a um receptor, desativa uma enzima etc. Diversos grupos linker oligoméricos que são biologicamente compatíveis e/ou bioerodiveis são conhecidos na técnica e a seleção da ligação pode influenciar as propriedades finais do material, tal como a possibilidade dele ser durável quando implantado a possibilidade dele se deformar ou encolher gradualmente depois da implantação, ou da possibilidade dele se degradar gradualmente e ser absorvido pelo corpo. 0 grupo linker pode ser ligado às porções por qualquer ligação adequada ou grupo funcional, incluindo ligações carbono-carbono, ésteres, éteres, amidas, aminas, carbonatos, carbamatos, sulfonamidas etc.
Em determinadas modalidades, o(s) grupo(s) linker da presente invenção representa(m) um grupo hidrocarbileno, em que um ou mais grupos metileno é opcionalmente substituído por um grupo Y (desde que nenhum dos grupos Y esteja adjacente a um outro grupo Y), sendo cada Y, independentemente para cada ocorrência, selecionado dentre arila substituído ou não, heteroarila, cicloalquila, heterocicloalquila, ou -0-, C(=X) (em que X é NR·;, 0 ou S) , -0C(0)-, -C(=0)0, -NR;-, -NR;CO-, -C(O)NR;-, -S(0)n- (em que n é 0, 1 ou 2), -OC(O)-NRi, -NR,-C (0)-NR-,-, -NR,-C (NR,)-NR,-, e -B(ORi)-; e Ri, independentemente a cada ocorrência, representa H ou um alquila inferior.
Em determinadas modalidades, o grupo linker representa um aminoácido derivado ou não derivado. em determinadas modalidades, grupos linker com um ou mais grupos carboxila terminais podem ser conjugados ao polímero. Em determinadas modalidades uma ou mais destes grupos carboxila terminais pode ser capeado por uma ligação covalência deles a um agente terapêutico, uma porção alvejante, ou uma porção ciclodextrina por meio de uma ligação (tio)éster ou amida. Em outras modalidades ainda, os grupos linker tendo um ou mais grupos terminais hidroxila, tiol ou amino podem ser incorporados ao polímero. Em modalidades preferidas, um ou mais destes grupos hidroxila terminais pode ser capeado ligando-se os mesmos por covalência a um agente terapêutico, uma porção de alvejamento ou uma porção ciclodextrina por meio de uma ligação (tio)éster, amida, carbonato, carbamato, tiocarbonato ou tiocarbamato. Em determinadas modalidades, estas ligações (tio)éster, amida, (tio)carbonato ou (tio)carbamato podem ser bio-hidrolisáveis, isto é, capazes de ser hidrolisadas em condições biológicas.
Em determinadas modalidades, os polímeros conforme descritos acima têm polidispersabilidades inferiores a aproximadamente 3 ou até mesmo inferiores a aproximadamente 2.
Em determinadas modalidades, o agente terapêutico é uma molécula pequena, um peptídeo, uma proteína, ou um polímero que tem função terapêutica. Em determinadas modalidades, o agente é um agente terapêutico anticancerígeno (tal como camptotecina ou derivados correlates),
antifúngico, antibacteriano , antimicótico ou antiviral. Em
determinadas modalidades, o agente é um agonista de
receptor. Em determinadas modalidades, o agente é um
antagonista de receptor. em determinadas modalidades, o
agente terapêutico é um inibidor de protease. Além disso, um polímero da presente invenção pode conter um tipo de agente terapêutico ou pode conter mais de um tipo de agente terapêutico. Dois ou mais medicamentos anticancerígenos diferentes, por exemplo, ou um medicamento anticancerígeno e um imunossupressor, ou um agente antibiótico e um antiinflamatório, podem ser enxertados no polímero por meio de linkers opcionais. Selecionando-se linkers diferentes para medicamentos diferentes, pode ser atenuada a liberação de cada medicamento para se obter a dosagem e eficácia máximas.
Uma modalidade da presente invenção proporciona um fornecimento melhorado de determinados agentes terapêuticos de pequena covalência conjugação molécula hidrófobas conjugando-se os mesmos por aos polímeros contendo ciclodextrina. Tal melhora a hidrossolubilidade e consequentemente a em uma modalidade da invenção, o agente terapêutico é um composto hidrófobo com um log P> 0,4,
0, 6, >2, >3, >4, ou mesmo >5. Em outras modalidades, um agente terapêutico hidrófobo tal como camptotecina, pode ser conjugado a um outro composto, tal como um aminoácido, antes de se ligar por covalência o conjugado ao polímero. Exemplos de moléculas de camptotecina derivadas com aminoácidos são ilustrados no Esquema V.
Os conjugados poliméricos da presente invenção têm, de preferência, pesos moleculares na faixa de 10.000 a 500.000; 30.000 a 200.000; ou mesmo 70.000 a 150.000 amu.
Em determinadas modalidades, as porções ciclodextrina constituem pelo menos aproximadamente 2%, 5% ou 10% em peso, até 20%, 30%, 50% ou mesmo 80% do polímero modificado por ciclodextrina em peso. Em determinadas modalidades, os agentes terapêuticos, ou os ligantes de alvejamento constituem pelo menos aproximadamente 1%, 5%, 10% ou 15%, 20%, 25%, 30% ou mesmo 35% do polímero modificado por ciclodextrina em peso. O peso molecular médio numérico (Mn) pode também variar muito, mas geralmente incide entre os limites de aproximadamente 1.000 a aproximadamente 500.000 daltons, de preferência, de aproximadamente 5000 a aproximadamente 200.000 daltons e, ainda mais preferível, de aproximadamente 10.000 a aproximadamente 100.000. O mais preferível é que Mn varie entre aproximadamente 12.000 e 65.000 daltons. Em determinadas outras modalidades, Mn varia entre aproximadamente 3.000 e aproximadamente 150.000 daltons. Dentro de uma amostra dada de um polímero da presente invenção, pode e encontrar presente uma ampla faixa de pesos moleculares. As moléculas dentro da amostra, por exemplo, podem ter pesos moleculares que diferem de um fator de 2, 5, 10, 20, 50, 100 ou mais ou que diferem do peso molecular médio de um fator de 2, 5, 10, 20 50, 100 ou mais. As porções ciclodextrina exemplares incluem estruturas cíclicas que consistem essencialmente em 7 a 9 porções sacarídeo, tais como ciclodextrina e ciclodextrina oxidada. Uma porção ciclodextrina compreende opcionalmente uma porção linker que forma uma ligação por covalência entre a estrutura cíclica e a estrutura do polímero. de preferencialmente tendo de 1 a 20 átomos na cadeia, tal como cadeias alquila, incluindo derivados de ácido dicarboxílico (tal como derivados do ácido glutárico, derivados do ácido succínico e análogos) e cadeias heteroalquila, tais como cadeias de oligoetileno glicol.
As ciclodextrinas são polissacarídeos cíclicos contendo unidades de D-(+)-glicopiranose de ocorrência na natureza em uma ligação a-(1,4). As ciclodextrinas mais comuns são α ((α)-ciclodextrinas, e (β)-ciclodextrinas e gama (γ)-ciclodextrinas que contêm, respectivamente, seis, sete ou oito unidade glicopiranose. Estruturalmente, a natureza cíclica de uma ciclodextrina forma um trapézio ou um formato em rosca que tem uma cavidade interna apoiar ou 5 hidrófoba, os grupos hidroxila secundários situados em um lado do trapézio de ciclodextrina e os grupos hidroxila primários situados do outro. Assim, empregando-se (β)ciclodextrina como um exemplo, uma ciclodextrina é frequentemente representada esquematicamente do modo abaixo.
Figure BRPI0314042B1_D0011
10 0 lado em que os grupos hidroxila secundários estão localizados tem um diâmetro maior do que o lado em que se localizam os grupos hidroxila primários. A presente invenção propõe ligações covalentes às porções ciclodextrina nos grupos hidroxila primários e/ou secundários. A natureza hidrófoba da cavidade interna da ciclodextrina permite complexos de inclusão hospedeiro-hóspede de uma variedade de compostos, tais como adamantano, por exemplo (Comprehensive Supramolecular Chemistry, Volume 3, J.L. Atwood et al., eds., Pergamon Press (1996); T. Cserhati, Analytical Biochemistry, 225:328-32 (1995); Husain et al., Applied Spectroscopy, 46:652-658 (1992); FR 2 665 169). Métodos adicionais para a modificação de polímeros são descritos em Suh, J. e Noh, Y., Bioor. Med. Chem. Lett. 1998, 8, 13271330.
Em determinadas modalidades, as presente invenção contempla polímeros lineares, hidrossolúveis contendo ciclodextrina, em que uma multiplicidade de porções bioativas são ligadas por covalência ao polímero através de ligações que são clivadas em condições biológicas para liberar as porções bioativas, em que a administração do polímero a um paciente resulta na liberação do agente bioativo durante um período de pelo menos 2, 3, 5, 6, 8, 10, 15, 20, 24, 36, 48 ou mesmo 72 horas.
Em determinadas modalidades, a presente invenção contempla a atenuação da velocidade de liberação do agente terapêutico pela introdução de diversos grupos de ligação entre o agente terapêutico e/ou o ligante de alvejamento e o polímero. Assim, em determinadas modalidades a substância terapêutica polimérica da presente invenção consiste em composições para o fornecimento controlado de agentes terapêuticos. Os versados na técnica reconhecerão também que, rotulando-se o agente terapêutico e/ou o ligante de alvejamento com rádio-núcleos ou formando-se complexos de núcleos ativos para RMN, tais com tecnécio, gadolínio, ou disprósio, os polímeros da presente invenção podem atingir uma utilidade dupla diagnóstica/terapêutica.
Em outras modalidades, os compostos poliméricos estabilizam a forma bioativa de um agente terapêutico que existe em equilíbrio entre uma forma ativa e inativa. A conjugação do agente terapêutico aos polímeros da presente invenção, por exemplo, pode deslocar o equilíbrio entre duas formas tautoméricas do agente para o tautômero bioativo. Em uma outra modalidade, os compostos poliméricos podem atenuar o equilíbrio entre formas lactônicas e ácidas de um agente terapêutico.
Um método para se determinar o peso molecular é por cromatografia de permeação de gel (GPC), colunas de leito misto, solvente de CHpCl?, detetor de dispersão de luz e dn/dc off-line. Outros métodos são conhecidos na técnica.
Em outras modalidades, o conjugado polimérico da invenção pode ser um material flexível ou que pode escorrer. Quando o polímero usado é em si capaz de escorrer, a composição polimérica da invenção, mesmo quando viscosa, não precisa incluir um solvente biocompatível para poder escorrer, embora possam ainda estar presentes aços ou quantidades residuais de solventes biocompatíveis.
Embora seja possível que o polímero biodegradável ou o agente ativo biologicamente possa ser dissolvido em uma pequena quantidade de um solvente que não é tóxico para produzir de modo mais eficiente uma distribuição amorfa, monolítica ou uma dispersão fina do agente biologicamente ativo na composição flexível ou capaz de escorrer. É uma vantagem da invenção o fato de que, em uma modalidade preferida, nenhum solvente seja necessário para formar uma composição que pode escorrer. Além disso o uso de solventes é de preferência, evitado, pois, uma vez a composição polimérica contendo solvente é colocada total ou parcialmente no interior do corpo, o solvente se dissipa ou se difunde afastando-se do polímero e deve ser processado e eliminado pelo corpo, colocando um peso extra sobre a capacidade de eliminação do corpo num momento em que a doença (e/ou outros tratamentos para a doença) possa já ter afetado de modo deletério o mesmo.
No entanto, quando um solvente é usado para facilitar a mistura ou para manter a capacidade de escorrimento do conjugado polimérico da invenção, ele deve ser não-tóxico, ou de outro modo qualquer biocompatível e deve ser usado em quantidades relativamente pequenas. Os solventes que são tóxicos não devem ser usados em qualquer material a ser colocado ainda que parcialmente no interior do corpo vivo. Tal solvente também não deve causar uma irritação tecidual substancialmente nem necrose no sítio da administração.
Exemplos de solventes biocompatíveis adequados, quando usados, incluem N-metil-2-pirrolidona, 2-pirrolidona, etanol, propileno glicol, acetona, acetato de metila acetato de etila, metil etil cetona, dimetilformamida, dimetilsulfóxido, tetraidrofurano, caprolactama, ácido oléico, ou 1dodecilazaciclo-heptanona. Os solventes preferidos incluem
N-metil pirrolidona, 2-pirrolidona, dimetil sulfóxido e acetona, devido à sua capacidade de solvatação e a sua biocompatibilidade.
Em determinadas modalidades, os conjugados poliméricos da presente invenção são solúveis em um ou mais dos solventes orgânicos habituais para fins de facilidade de fabricação e processamento. Solventes orgânicos habituais incluem tais solventes com clorofórmio, diclorometanol, dicloroetano, 2-butanona, acetato de butila, butirato de etila, acetona, acetato de etila, dimetilacetamida, N-metil pirrolidona, dimetilformamida, e dimetilsulfóxido.
Um aspecto da presente invenção contempla a ligação de um agente terapêutico hidrófobo tal como (S)-20camptotecina a polímeros ramificados contendo ciclodextrina para um melhor fornecimento do medicamento. Foi constatado que (S)-20-camptotecina (CPT), um alcalóide isolado de Camptitheca accuminata em fins de 1950, apresenta atividade anticancerígena por inibição da ação de topoisomerase 1 durante a fase S do ciclo celular. Sua aplicação no tratamento para câncer humano, no entanto, é limitada, devido a diversos fatores, especialmente a suas interações indesejáveis com a albumina sérica humana, à instabilidade da forma de lactona bioativa, e a uma precária hidrossolubilidade. A fim de se contornar tal problema, foram desenvolvidos muitos análogos de CPT para melhorar a estabilidade da lactona e a sua hidrossolubilidade. Topotecan e irinotecan são análogos de CPT que já foram aprovados por FDA para o tratamento de câncer humano. A presente invenção descreve diversos tipos de polímeros lineares, ramificados ou enxertados contendo ciclodextrina em que a (S)-20-camptotecina é ligada por covalência ao polímero. Em determinadas modalidades, o medicamento é 5 ligado por covalência por meio de uma ligação biohidrolisável selecionada dentre um éster, amida, carbamatos ou carbonato.
Um esquema sintético exemplar para a ligação por covalência de um derivado CD a 20(S)-camptotecina é mostrado no Esquema I.
Esquema I
Figure BRPI0314042B1_D0012
Sem se desejar limitar o âmbito da invenção, uma estratégia geral para a síntese de polímeros lineares, ramificados ou enxertados contendo ciclodextrina (Polímero 15 de CD) para se carregar um agente terapêutico tal como camptotecina e um ligante de alvejamento opcional é mostrado no Esquema II.
Esquema II
Monômeros de ciclodextrina exemplares para polímeros lineares, ramificados ou enxertado® contendo ciclodextrina
Figure BRPI0314042B1_D0013
Figure BRPI0314042B1_D0014
Para ilustrar com mais detalhes, sem se destinar a ter caráter limitante, os precursores do comonômero A, as porções ciclodextrina, agentes terapêuticos e/ou ligantes de alvejamento podem ser montados do modo mostrado nos Esquemas Ila-IIb. Observe que nos esquemas Ila-b, em qualquer reação dada, pode haver mais de um precursor de comonômero A, porção ciclodextrina, agente terapêutico ou ligante de alvejamento que é do mesmo tipo ou de tipos diferentes. Além disso, antes da polimerização, um ou mais dentre precursor de comonômero A, porção ciclodextrina, agente terapêutico ou ligante de alvejamento pode estar ligado por covalência um com outro em uma ou mais etapas separadas.
Esquema lia: Esquema geral para polímeros de enxertia. O precursor de comonômero A, porção ciclodextrina, agente terapêutico e ligante de alvejamento são conforme definido acima. Além disso, os versados na técnica podem escolher dentre uma variedade de grupos reativos, tais como hidroxilas, carboxilas, haletos, aminas e etenos, etinos ativados ou grupos aromáticos a fim de se obter a polimerização
Para outros exemplos de grupos reativos são descritos em Advanced Organic Chemistry:
Reactions,
Mechanisms and Structure, 5a. Edição, 2000.
Figure BRPI0314042B1_D0015
Figure BRPI0314042B1_D0016
+ OPCIONALMENTE
Grupo . Reativo — Linker . Opcional — Agente Terapêutico
EfOU
Grupo Reativo — Linker Opcional -- Ligante de 1 Alvejamento
Polimerização V
Precursor do comonômero A
Ligante de Alvejamento Linker Opcional — Grupo(s) 1____ Pendentejsjj Linker Opcional — Ligante de alvejamento
Linker
Opcional
Porção Ciclodextrina
Esquema Ilb: Esquema geral de preparação de polímeros de cadeia reta contendo ciclodextrina. Os versados na técnica reconhecerão que escolhendo um precursor de comonômero A que tem uma multiplicidade de grupos reativos 5 pode se obter a ramificação do polímero.
Figure BRPI0314042B1_D0017
+ OPCIONALMENTE
Figure BRPI0314042B1_D0018
Polimerização
Figure BRPI0314042B1_D0019
Em que R é um agente terapêutico e/ou ligante de alvejamento que pode estar ausente ou presente
Exemplos para os diferentes modos de sintetização de polímeros de cadeia reta contendo CPT-ciclodextrina são mostrados nos esquemas III-VIII.
Esquema III
Figure BRPI0314042B1_D0020
Figure BRPI0314042B1_D0021
COOH
Ss.s^a\NH2
COOH*
Figure BRPI0314042B1_D0022
Figure BRPI0314042B1_D0023
Figure BRPI0314042B1_D0024
W representa um grupo de ligação opcional; e R representa W-CPT ou 0”)
Esquema IV
Figure BRPI0314042B1_D0025
Figure BRPI0314042B1_D0026
Figure BRPI0314042B1_D0027
Figure BRPI0314042B1_D0028
w—cft
Figure BRPI0314042B1_D0029
Figure BRPI0314042B1_D0030
em que W representa um grupo linker opcional
Esquema V
Figure BRPI0314042B1_D0031
Figure BRPI0314042B1_D0032
Figure BRPI0314042B1_D0033
Figure BRPI0314042B1_D0034
Figure BRPI0314042B1_D0035
W representa um grupo de ligação opcional, tal como um resíduo de glicila o
ΊΟ
Figure BRPI0314042B1_D0036
Esquema VII
Figure BRPI0314042B1_D0037
Figure BRPI0314042B1_D0038
Figure BRPI0314042B1_D0039
Figure BRPI0314042B1_D0040
Figure BRPI0314042B1_D0041
Exemplos para se enxertar ciclodextrinas nas cadeias laterais das subunidades de polímeros contendo CPT são mostrados nos Esquemas IX-XII. Cada subunidade pode se 5 repetir qualquer número de vezes, e uma subunidade pode ocorrer com uma freqüência substancialmente igual, mais frequentemente, ou menos freqüentemente do que uma outra subunidade, de modo que as duas subunidades podem estar presentes aproximadamente da mesma quantidade, ou a 10 quantidades diferentes, que podem diferir ligeiramente ou apresentar uma grande disparidade, uma subunidade, por exemplo, está presente praticamente a ponto de excluir a outra.
Em determinados casos, os polímeros são copolímeros 15 aleatórios, em que as unidades diferentes e/ou outras unidades monoméricas são distribuídas aleatoriamente em toda a cadeia polimérica. Deste modo, no caso em que aparece a fórmula Xm-Yn-Zo, em que X, Y e Z são subunidades poliméricas, estas subunidades podem se encontrar dispersas 5 aleatoriamente em toda a estrutura polimérica. Em parte o termo aleatório pretende se referir à situação em que a distribuição ou incorporação específica das unidades monoméricas em um polímero que tem mais de um tipo de unidades monoméricas não é dirigida ou controlada diretamente pelo protocolo sintético, resultando em vez disso de características inerentes ao sistema polimérico, tal como reatividade, quantidades de subunidades e outras características da reação sintética ou de outros métodos de fabricação, processamento ou tratamento.
Esquema IX
Figure BRPI0314042B1_D0042
Figure BRPI0314042B1_D0043
O
Figure BRPI0314042B1_D0044
Cl
Figure BRPI0314042B1_D0045
Esquema X
Figure BRPI0314042B1_D0046
Figure BRPI0314042B1_D0047
Figure BRPI0314042B1_D0048
Esquema XI
Figure BRPI0314042B1_D0049
Esquema XII
Figure BRPI0314042B1_D0050
A presente invenção propõe ainda polímeros de CD sintetizados empregando-se o monômero CD-biscisteína e um éster di-NHS tal como PEG-DiSPA ou PEG-BTC como mostrado nos
Esquemas XIII-XIV.
Esquema XIII
Figure BRPI0314042B1_D0051
Figure BRPI0314042B1_D0052
Esquema XIV
Figure BRPI0314042B1_D0053
Em determinadas modalidades, as presente invenção descreve diversas estratégias para aumentar a carga de medicamento conforme mostrado na Figura 1.
(b) Ligante de alvejamento
Conforme mencionado acima, um aspecto da presente invenção contempla a ligação de um agente terapêutico aos conjugados poliméricos descritos no presente.
Em determinadas modalidades, o conjugado polimérico compreende ainda um ligante de alvejamento. Assim, em determinadas modalidades, um ligante de alvejamento de receptor, célula e/ou tecido ou um precursor seu é acoplado a um conjugado polimérico. Conforme empregado no presente o termo ligante de alvejamento se refere a qualquer material ou substância que pode promover o alvejamento de receptores, células e/ou tecidos in vivo ou in vitro com as composições da presente invenção. O ligante de alvejamento pode ser sintético, semi-sintético ou ocorrendo na natureza. Os materiais ou substâncias que podem servir como ligantes de alvejamento incluem, por exemplo, proteínas, inclusive anticorpos, fragmentos de anticorpos, hormônios, análogos de hormônios, glicoproteínas e lectinas, peptídeos, polipeptídeos, aminoácidos, açúcares, sacarídeos, inclusive monossacarídeos e polissacarídeos, carboidratos, pequenas moléculas, vitaminas, esteróides, análogos de esteróides, hormônios, co-fatores, agentes bioativos e material genético, inclusive nucleosídeos, nucleotídeos, construções de ácido de nucleotídeos e polinucleotídeos. Conforme empregado no presente, o termo precursor a um ligante de alvejamento se refere a qualquer material ou substância que pode ser convertido em um ligante de alvejamento. Tal conversão pode abranger, por exemplo, ancoragem de um precursor a um ligante de alvejamento. As porções de precursor de alvejamento exemplares incluem grupos maleimida, grupos dissulfeto, tais como orto-piridil dissulfeto, grupos vinil sulfona, grupos azida e grupos aiodo acetila. A ligação do ligante de alvejamento ou de seu precursor ao polímero pode ser obtida de diversos modos incluindo, sem limitação, quelação, ligação por covalência ou formação de complexos hospedeiro-hóspede. Em determinadas modalidades, um grupo linker opcional pode se encontrar presente entre o ligante de alvejamento ou seu precursor e o polímero, sendo o grupo linker ligado ao polímero por quelação, ligação por covalência ou formar complexos hospedeiro/hóspede. Uma extremidade terminal de um grupo linker, por exemplo, pode ser ligada ao ligante de alvejamento ao passo que a, outra pode ser ligada a um grupo adamantano, ou outro tal porção hidrófoba, que forma um complexo hospedeiro/hóspede com a porção ciclodextrina. Deste modo, o ligante de alvejamento pode ser ligado a um a porção ciclodextrina enxertada a uma porção ciclodextrina no interior da cadeia polimérica, ou à cadeia polimérica propriamente dita. 0 número de ligantes de alvejamento por cadeia polimérica pode variar de acordo com vários fatores incluindo, sem limitação, a identidade do agente terapêutico, natureza da doença, tipo de cadeia polimérica. As estruturas de grupos linker, possíveis são as mesmas que as dos grupos linker definidas em outros pontos deste pedido.
(o) Composições Farmacêuticas, Preparados e Dosagens Em parte, uma composição polimérica biocompativel da presente invenção inclui um polímero biocompativel e opcionalmente biodegradável, tal como um que tenha unidades monoméricas repetidas mostradas em uma das fórmulas acima, opcionalmente incluindo qualquer outro polímero biocompativel e opcionalmente biodegradável mencionado acima ou conhecido na técnica. Em determinadas modalidades, as composições são não-pirogênicas, não desencadeias a elevação da temperatura corporal de um paciente de uma quantidade acima da clinicamente aceitável, por exemplo.
As composições da presente invenção podem conter um medicamento, agente terapêutico, ou substância bioativa que são substâncias biológica, fisiológica ou farmacologicamente ativas que atuam localmente ou sistemicamente no corpo humano ou animal. Uma composição da presente invenção pode incluir, por exemplo, qualquer um dos outros compostos discutidos acima.
Podem ser usadas diversas formas dos medicamentos ou de materiais biologicamente ativos que são capazes de serem liberados da matriz polimérica para o interior de tecidos adjacentes ou fluidos. Elas podem consistir em moléculas hidrófobas, moléculas neutras, moléculas polares ou complexos moleculares capazes de ligação hidrogênio. Elas podem se encontrar na forma de éteres, ésteres, amidas e análogos, inclusive de promedicamentos que são biologicamente ativados quando injetados no corpo humano ou animal por divagem de um éster ou amida, por exemplo. Um agente terapêutico em uma composição da presente invenção pode variar amplamente com a finalidade da composição.
Agentes plastificantes e estabilizantes conhecidos na técnica podem ser incorporados aos polímeros da presente invenção. Em determinadas modalidades, aditivos tais como agentes plastificantes e estabilizantes são selecionados para a usa biocompatibilidade. Em determinadas modalidades, os aditivos são tensoativos pulmonares, tais como 1,2dipalmitoil fosfatidil colina (DPPC) e L-a-fosfatidil colina (PC) .
Uma composição da presente invenção pode ainda conter um ou mais substancias adjuvantes tais como cargas, agentes espessantes ou análogos. Em outras modalidades, os materiais que servem como adjuvantes podem estar associados com a matriz polimérica. tais materiais adicionais podem afetar as características da matriz polimérica que resulta.
As cargas, por exemplo, tais como albumina sérica
boina (BSA) ou albumina sérica murina (MSA) podem estar
associadas com a matriz polimérica. Em determinadas
modalidades, a quantidade de carga pode variar de
aproximadamente 0,1 a aproximadamente 50% ou mais em peso da matriz polimérica ou aproximadamente 2,5, 5, 10, 25, ou 40 por cento. A incorporação de tais cargas pode afetar a biodegradação do material polimérico e/ou a velocidade de liberação sustentada de qualquer substância encapsulada. Outras cargas conhecidas dos versados na técnica, tais como carboidratos, açúcares, amidos, sacarideos, celulose e polissacarideos, inclusive manitose e sacarose, podem ser usados em determinadas modalidades da presente invenção.
Em outras modalidades, os intensificadores de esferonização facilitam a produção de matrizes poliméricas da presente invenção que tem geralmente um formato esférico. As substâncias tais como zeina, celulose microcristalina ou celulose microcristalina co-processada com carboximetil celulose sódica podem conferir plasticidade às composições da presente invenção assim como implantar resistência e integridade. Em modalidades específicas, durante a esferonização, os extrusados que são rígidos mas não plásticos, resultam na formação de implantes em formato de halteres e/ou uma grande proporção de partículas finas, e os extrusados que são plásticos, mas não rígidos tendem a aglomerar e formar implantes excessivamente grandes. Em tais modalidades, um equilíbrio entre rigidez e plasticidade é desejável. A porcentagem de intensificador de esferonização em um preparado tipicamente varia de 10 a 90% (peso/peso).
Em determinadas modalidades, uma composição da presente invenção inclui um excipiente. Um excipiente específico pode ser selecionado com base no seu ponto de fusão, solubilidade em um solvente selecionado (tal como um solvente que dissolve o polímero e/ou o agente terapêutico, por exemplo), e as características resultantes das micropartículas.
Os excipientes podem constituir alguns por cento, aproximadamente 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50% ou mais das composições da presente invenção.
Podem ser incorporados tampões, ácidos e bases às composições da presente invenção para se ajustar o seu pH. Podem também ser incluídos agentes para aumentar a distância de difusão dos agentes liberados da matriz polimérica.
Os desintegrantes são substâncias que, na presença de líquido, promovem a desintegração das composições da presente invenção. Os desintegrantes são empregados com grande frequência em implantes, em que a função do desintegrante consiste em se opor ou neutralizar o efeito de qualquer material de ligação usado no preparado da presente invenção. Em geral, o mecanismo da desintegração consiste no material insolúvel absorver a umidade e inchar.
Exemplos de desintegrantes incluem croscarmelose sódica e crospovidone, que, em determinadas modalidades, podem ser incorporadas ás matrizes poliméricas dentro de limites de aproximadamente 1-20% do peso total da matriz. Em outros casos, podem também ser acrescentadas cargas solúveis tais como açúcares (manitol e lactose) para facilitar a desintegração dos implantes.
Outros materiais podem ser usados para melhorar ou controlar a velocidade de liberação desejada de um agente terapêutico para um protocolo de tratamento específico. Se a liberação sustentada for demasiada para uma aplicação específica, por exemplo, pode ser acrescentado um agente formador de poros para gerar poros adicionais na matriz.
Qualquer material hidrossolúvel biocompatível pode ser usado como agente formador de poros. Eles podem ser capazes de se dissolver, se difundir ou se dispersar para fora do sistema polimérico formado sendo então gerados no sistema poros e canais microporosos. A quantidade de agente formador de poros (e o tamanho das partículas dispersas de tal agente formador de poros, se for adequado) no interior da composição deve afetar o tamanho e o número dos poros no sistema polimérico.
Os agentes formadores de poros incluem qualquer substância orgânica ou inorgânica farmaceuticamente aceitável que seja substancialmente miscível em água e nos fluidos corporais e que se dissipará a partir da matriz em formação e formada para dentro do meio aquoso ou os fluidos corporais ou para substância imiscíveis em água que rapidamente se degradam em substâncias hidrossolúveis.
Os agentes formadores de poros adequados incluem, por exemplo, açúcares tais como sacarose e dextrose, sais tais como cloreto de sódio e carbonato de sódio e polímeros tais como hidróxi-propil-celulose, carbóxi-metil-celulose, polietileno glicol e PVP. Pode-se fazer variar o tamanho e a extensão dos poros, alterando-se o peso molecular e a porcentagem do agente formador de poros incorporados ao sistema polimérico.
A carga, caráter lipófilo ou hidrófilo de qualquer matriz polimérica da presente invenção podem ser modificadas ligando-se de um modo qualquer um composto adequado à superfície da matriz. Podem ser usados, por exemplo, tensoativos para aumentar a umectabilidade de composições de fraca solubilidade ou hidrófobas. Exemplos de tensoativos adequados incluem dextrano, polissorbatos e lauril sulfato de sódio. Em geral os tensoativos são usados a baixas concentrações, geralmente abaixo de aproximadamente 5%.
Aglutinantes são materiais adesivos que podem ser incorporados aos preparados poliméricos para ligar e manter a integridade da matriz. Os aglutinantes podem ser acrescentados em forma de um pó seco ou em forma de solução. Açúcares e polímeros naturais e sintéticos podem atuar como aglutinantes.
Os materiais acrescentados especificamente como aglutinantes são geralmente incluídos na faixa de aproximadamente 0,5%-15% peso/peso do preparado da matriz. Determinados materiais tais como celulose microcristalina também usada como um intensificador de esferonização, também têm propriedades adicionais aglutinantes.
Diversos revestimentos podem ser aplicados para modificar as propriedades das matrizes.
Três tipos exemplares de revestimento são revestimento de vedação, brilho e entérico. Outros tipos de revestimento tendo diversas propriedades de dissolução ou erosão podem ser usados para modificar ainda mais o comportamento das matrizes da presente invenção, e tais revestimentos são conhecidos dos versados na técnica.
revestimento de vedação pode impedir a absorção de umidade excessiva pela matriz durante a aplicação de revestimentos entéricos aquosos. O revestimento de brilho geralmente melhora a manipulação das matrizes acabadas. Os materiais hidrossolúveis tais como hidroxipropil celulose podem ser usados para aplicar revestimento de vedação e revestimento de brilho nos implantes. O revestimento de vedação e o revestimento de brilho são geralmente pulverizados sobre as matrizes até se observar um aumento de peso entre aproximadamente 0,5% e aproximadamente 5%, frequentemente de aproximadamente 1% para o revestimento de vedação e de aproximadamente 3% para o revestimento de brilho.
Os revestimentos entéricos consistem em polímeros que são insolúveis no pH baixo (abaixo de 3,0) do estômago, mas são solúveis no pH elevado (acima de 4,0) do intestino delgado. Os polímeros tais como EUDRAGIT™, RohmTech, Inc., Malden, Mass., e AQUATERIC™, FMC Corp., Filadélfia, Penn., podem ser usados e são aplicados em camadas em forma de membranas delgadas sobre os implantes a partir de uma solução ou suspensão aquosa ou por um método de secagem por pulverização. O revestimento entérico é geralmente pulverizado até um aumento de peso de aproximadamente 1% até aproximadamente 30%, de preferência, de aproximadamente 10 a aproximadamente 15% e pode conter adjuvantes tais como plastificantes, tensoativos, agentes de separação que reduzem a pegajosidade dos implantes durante o revestimento e ajustadores de permeabilidade de revestimento.
As composições da presente invenção podem além disso conter um ou mais aditivos opcionais tais como reforço fibroso, colorantes, perfumes, modificadores de borracha, agentes modificadores etc. Na prática, cada um destes aditivos opcionais deve ser compatível com o polímero resultante e com o seu uso final. Exemplos de reforço fibroso adequado incluem microfibrilas de PGA, microfibrilas de colágeno, microfibrilas celulósicas e microfibrilas olefínicas. A quantidade de cada um destes aditivos opcionais empregados na composição é uma quantidade necessária para se obter o efeito desejado.
Os conjugados poliméricos terapêuticos conforme descritos no presente podem ser administrados em diversos preparados farmacêuticos, dependendo do distúrbio a ser tratado e a idade, condição e peso corporal do paciente, conforme é bem conhecido na técnica. Nos casos em que os compostos devem ser administrados oralmente, por exemplo, eles podem ser preparados em forma de comprimidos, cápsulas, grânulos, pós ou xaropes; ou para administração parenteral, eles podem ser preparados em forma de injeções (intravenosas, intramusculares ou subcutâneas), preparados de infusão de gotejamento ou supositórios. Para a aplicação pela via de membrana mucosa oftálmica, eles podem ser preparados em forma de gotas oculares ou ungüento ocular. Estes preparados podem ser preparados por meio convencionais e, se for desejado, o ingrediente ativo pode ser misturado com qualquer aditivo convencional, tal como um excipiente, um aglutinante, um agente desintegrante, um lubrificante, um corretor, um agente solubilizante, um auxiliar de suspensão, um agente emulsificante ou um agente de revestimento. Embora a dosagem variará dependendo dos sintomas, idade e peso corporal do paciente, a natureza e a severidade do distúrbio a ser tratado ou prevenido, a via de administração e a forma do medicamento, em geral uma dosagem diária de 0,01 a 2000 mg do agente terapêutico é recomendada para um paciente adulto humano e isto pode ser administrado em uma única dose ou em doses divididas.
O momento preciso da administração e/ou a quantidade do conjugado polimérico terapêutico que resultará nos resultados mais eficazes em termos de eficácia de tratamento em um dado paciente, dependerá da atividade, farmacocinética e biodisponibilidade de um composto específico, da condição fisiológica do paciente (incluindo idade, sexo, tipo e estágio da doença, condição física geral, resposta a uma dosagem dada e tipo de medicação) , da via de administração etc. No entanto, as diretrizes acima podem ser usadas como base para a modulação fina do tratamento, para a determinação do momento ótimo e/ou quantidade ótima de administração, por exemplo, o que não exigirá mais do que a experimentação rotineira que consiste no monitoramento do paciente e no ajuste da dosagem e/ou do momento da sua administração.A expressão farmaceuticamente aceitável é empregada no presente para se referir àqueles conjugados poliméricos terapêuticos, materiais, composições e/ou formas de dosagem que são, dentro do âmbito de bons critérios médicos, adequadas para usar em contato com os tecidos de seres humanos e animais sem uma excessiva toxicidade, irritação, resposta alérgica ou outro problema ou complicação, compatível com uma relação razoável de benefício/risco.
A expressão veículo farmaceuticamente aceitável conforme empregado no presente, significa um material, composição ou veículo, tal como uma carga líquida ou sólida, diluente, excipiente, solvente ou material encapsulante, implicados na condução ou transporte da substância química da presente invenção de um órgão, ou porção do corpo a outro órgão ou porção do corpo, material, composição ou veículo este que seja farmaceuticamente aceitável. Cada veículo deve ser aceitável no sentido de ser compatível com os demais ingredientes do preparado e não sejam nocivos ao paciente. Alguns exemplos de materiais que podem servir como veículos farmaceuticamente aceitáveis incluem: (1) açúcares, tais como lactose, glicose e sacarose; (2) amidos tais como amido de milho e amido de batata; (3) celulose e seus derivados,
tais como carboximetil celulose sódica, etil celulose e
acetato de celulose; (4) tragacanto em pó ; (5) malte; i (6)
gelatina; l [7) talco; (8) excipientes, tais como manteiga de
cacau e ceras para supositório; (9) óleos, tais como óleo de amendoim, óleo de caroço de algodão, óleo de cártamo, óleo de gergelim, óleo de oliva, óleo de milho e óleo de soja; (10) glicóis, tais como propileno glicol; (11) polióis, tais com glicerina sorbitol, manitol e polietileno glicol; (12) ésteres, tais como oleato de etila e laurato de etila; (13) agar; (14) agentes tampão, tais como hidróxido de magnésio e hidróxido e alumínio; (15) ácido algínico; (16) água livre de pirógenos; (17) solução salina isotônica;. (18) solução de Ringer; (19) álcool etílico; (20) solução de tampão de fosfato; e (21) outras substâncias não tóxicas compatíveis empregadas nos preparados farmacêuticos.
O termo sais farmaceuticamente aceitáveis se refere a sais de adição de ácido inorgânicos e orgânicos relativamente não tóxicos dos conjugados poliméricos terapêuticos. Estes sais podem ser preparados in situ durante o isolamento e purificação finais dos conjugados poliméricos terapêuticos, ou fazendo-se reagir separadamente um polímero purificado na sua forma de base livre com um ácido orgânico ou inorgânico adequado e isolando-se o sal assim formado. Os sais representativos incluem os sais bromidrato, cloridrato, sulfato, bissulfato, fosfato, nitrato, acetato, valeriato, oleato, palmitato, estearato, laurato, benzoato, lactato, fosfato, tosilato, citrato, maleato, fumarato, succinato, tartarato, naftilato, mesilato, glico-heptonato, lactobionato e laurilsulfonato e análogos (Veja, por exemplo, Berge et al. (1977) Pharmaceutical Salts, J. Pharm. Sci. 66:1-19).
Em outros casos, os conjugados poliméricos terapêuticos úteis nos métodos da presente invenção podem conter um ou mais grupos funcionais ácidos e, assim, são capazes de formar sais farmaceuticamente aceitáveis com bases farmaceuticamente aceitáveis. O termo sais farmaceuticamente aceitáveis nestes casos se refere a sais de adição de base relativamente não tóxicos inorgânicos e orgânicos do(s) polímero(s). Estes sais podem também ser preparados in situ durante o isolamento e purificação finais do(s) polímero(s) ou fazendo-se reagir separadamente o(s) polímero(s) purificado(s) na sua forma ácida livre com uma base adequada, tal como hidróxido, carbonato ou bicarbonate de um cátion farmaceuticamente aceitável com amônia, ou com uma amina primária, secundária ou terciária orgânica farmaceuticamente aceitável. Os sais alcalinos ou alcalinoterrosos representativos incluem os sais de lítio, sódio, potássio, cálcio, magnésio e alumínio e análogos. As aminas orgânicas representativas para a formação dos sais de adição 10 de base incluem etilamina, dietilamina, etileno diamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina e análogos (veja, por exemplo, Berge et al., supra).
Agentes umectantes, emulsificantes e lubrificantes, tais como lauril sulfato de sódio e estearato de magnésio, 15 assim como agentes colorantes, agentes de liberação, agentes de revestimento, adoçantes, aromatizantes e perfumantes, conservantes e antioxidantes podem também estar presentes nas composições.
Exemplos de antioxidantes farmaceuticamente aceitáveis incluem: (1) antioxidantes hidrossolúveis tais como ácido ascórbico, cloridrato de cisteína, bissulfato de sódio, metabissulfito de sódio, sulfito de sódio e análogos; (2) antioxidantes solúveis em óleo, tais como palmitato de ascorbila, hidróxi-anisol butilado (ΒΗΆ), hidroxitolueno 25 butilado (BHT), lecitina, galiato de propila, alfa-tocoferol e análogos; e (3) agentes quelantes metálicos tais como ácido cítrico, ácido etileno diamina tetra-acético (EDTA), sorbiton, ácido tartárico, ácido fosfórico e análogos.
Os preparados úteis nos métodos da presente invenção incluem aqueles para a administração oral, nasal, tópica (inclusive oftálmica, ótica, bucal e sublingual), retal, vaginal, em aerossol e/ou parenteral. Os preparados podem ser convenientemente apresentados na forma de dosagem unitária e podem ser preparados por qualquer método bem conhecido na técnica farmacêutica. A quantidade de ingrediente ativo que pode ser combinada com um material veículo para produzir uma forma de dosagem única variará dependendo do hospedeiro que estiver sendo tratado, do modo especifico de administração. A quantidade do ingrediente ativo que pode ser combinada com um material veículo para produzir uma forma de dosagem única geralmente será aquela quantidade do composto que produz um efeito terapêutico. Geralmente, de cem por cento, esta quantidade variará de aproximadamente 1 por cento a aproximadamente noventa e nove por cento do ingrediente ativo, de preferência de aproximadamente 5 por cento a aproximadamente 70 por cento, sendo o mais preferível de aproximadamente 10 por cento a aproximadamente 30 por cento.
Os métodos de preparação destes preparados ou composições incluem a etapa de se colocar em associação um conjugado (s) polimérico(s) terapêutico(s) com o veículo e opcionalmente, com um ou mais ingredientes acessórios, em geral, os preparados são preparados colocando uniforme e intimamente em associação um conjugado polimérico terapêutico com veículos líquidos, ou com veículos sólidos finamente divididos ou com ambos, e em seguida, se for necessário, dando formato ao produto.
Os preparados adequados para a administração oral podem se encontrar na forma de cápsulas, cachês, pílulas, comprimidos, gomas, pastilhas (usando uma base aromatizada, geralmente sacarose e acácia ou tragacanto), pós, grânulos ou em forma de uma solução ou de uma suspensão em um líquido aquoso ou não aquoso ou em forma de uma emulsão líquida de óleo em água ou de água em óleo, ou em forma de um elixir ou xarope ou em forma de pastilhas (usando uma base inerte, tal como elatina e glicerina, ou sacarose e acácia) e/ou como enxaguante bucal e semelhantes, cada um contendo uma quantidade predeterminada de um conjugado(s) polimérico(s) terapêutico(s) como um ingrediente ativo. Um composto pode também ser administrado em forma de um bolo, eletuário ou pasta.
Um comprimido pode também ser preparado por compressão ou moldagem, opcionalmente com um ou mais ingredientes acessórios. Os comprimidos preparados por compressão podem ser preparados empregando-se aglutinante (gelatina ou hidroxipropil metil celulose, por exemplo), lubrificante, diluente inerte, conservante, desintegrante (glicolato de amido sódico, ou carboximetil celulose sódica reticulada, por exemplo), agente tensoativo ou dispersante. Os comprimidos moldados podem ser preparados moldando-se em uma máquina adequada uma mistura do peptídeo peptidomimético em pó umedecido com um diluente líquido inerte.
Os comprimidos e outras formas de dosagem sólida, tais como drágeas, cápsulas, pílulas e grânulos podem ser opcionalmente riscados ou preparados com revestimentos ou cascos, tais como revestimento entérico e outros revestimentos conhecido na técnica de preparação de produtos farmacêuticos. Eles podem também ser preparados de modo tal que proporcionem uma liberação lenta ou controlada do ingrediente ativo em seu interior, empregando-se, por exemplo, hidroxipropil metil celulose em proporções variáveis para prover o perfil de liberação desejado, outras matrizes poliméricas, lipossomas e/ou microesferas. Eles podem ser esterilizados, por exemplo, por filtração através de um filtro retentor de bactérias, ou por incorporação de agentes de esterilização na forma de composições sólidas estéreis que podem ser dissolvidas em água estéril ou algum outro meio injetável estéril imediatamente antes do uso. Estas composições podem também conter opcionalmente agentes opacificantes e podem ser de uma composição tal que eles liberem o(s) ingrediente(s) ativo(s) somente, ou de preferência, em uma porção determinada do trato gastrintestinal, opcionalmente, de um modo retardado. Exemplos de composições de engaste que podem ser usadas incluem substâncias poliméricas e ceras. O ingrediente ativo pode também se encontrar na forma micro-encapsulada, se for adequado, com um ou mais dos excipientes descritos acima.
As formas de dosagem líquida para a administração oral incluem emulsões, microemulsões, soluções, suspensões, xaropes e elixires farmaceuticamente aceitáveis. Além do ingrediente ativo, as formas de dosagem líquida podem conter diluentes inertes habitualmente usados na técnica, tais como, por exemplo, água ou outros solventes, agentes solubilizantes e emulsificantes, tais como álcool etílico, álcool isopropílico,, carbonato de etila, acetato de etila, álcool benzílico, benzoato de benzila, propileno glicol, 1,3-butileno glicol, óleos (mais especificamente, óleos de caroço de algodão, de amendoim, de milho, germe de trigo, oliva, mamona e gergelim) , glicerol, álcool tetraidrofurílico, polietileno glicóis e ésteres de ácido graxo de sorbitan, e suas misturas.
Além dos diluentes inertes, as composições orais podem também incluir adjuvantes tais como agentes umectantes, agentes emulsificantes e de suspensão, adoçantes, aromatizantes, colorantes, perfumantes e conservantes.
As suspensões, além dos conjugados poliméricos terapêuticos ativos podem conter agentes de suspensão, tal como, por exemplo, álcoois isoestearílicos etoxilados, polioxietileno sorbitol e ésteres de sorbitan, celulose microcristalina, meta-hidróxido de alumínio, bentonita, agar-agar e tragacanto e suas misturas.
Os preparados para a administração retal ou vaginal podem ser apresentados em forma de um supositório, que pode ser preparado misturando-se um ou mais conjugados terapêuticos poliméricos com um ou mais excipientes adequados não irritantes ou veículos compreendo, por exemplo, manteiga de cacau, polietileno glicol, uma cera para supositórios ou um salicilato, e que é sólido à temperatura ambiente, mas líquido à temperatura corporal, e, portanto, fundirá no reto ou na cavidade vaginal e liberará o agente ativo.
Os preparados que são adequados para a administração vaginal também incluem pessários, tampões, cremes, géis, pastas, espumas e preparados para pulverização contendo tais veículos que são conhecidos na técnica como sendo adequado.
As formas de dosagem para a administração tópica ou transdérmica de um conjugado(s) polimérico(s) terapêutico (s) inclui pós, pulverizações, ungüentos, pastas, cremes, loções, géis, soluções, adesivos e inalantes. O componente ativo pode ser misturado em condições estéreis com um veículo farmaceuticamente aceitável e com quaisquer preservativos, tampões ou propelentes que possam ser necessários.
Os ungüentos, pastas, cremes e géis podem conter,
além doj (s) ligante(s) , excipientes, tais como gorduras
animais e vegetais, óleos, ceras, parafinas, amido,
tragacanto,derivados de celulose, polietileno glicóis, silicones, bentonitas, ácido silícico, talco e óxido de zinco ou suas misturas.
Os pós e pulverizações podem conter, além de um conjuga(s) polimérico(s) terapêutico (s), excipientes tais como lactose, ácido silícios, hidróxido de alumínio, silicatos de cálcio e pó de poliamida, ou misturas destas substâncias. As pulverizações podem além disso conter propelentes habituais tais como cloroflúor-hidrocarbonetos e hidrocarbonetos voláteis não substituídos tais com butano e propano.
O(s) conjugado(s) polimérico(s) terapêutico(s) pode(m) ser alternativamente administrado(s) por aerossol. Isto se obtém preparando-se um aerossol aquoso, preparado lipossômico ou partículas sólidas contendo o composto. Poderia ser usada uma suspensão não aquosa (de propelente fluorcarbono, por exemplo). Nebulizadores sônicos são preferidos pois eles minimizam a exposição do agente a cisalhamento que pode resultar na degradação do composto.
Habitualmente, um aerossol aquoso é produzido preparando-se uma solução aquosa ou suspensão do agente juntamente com veículos e estabilizantes farmaceuticamente aceitáveis convencionais. Os veículos e estabilizantes variam com as exigências do composto específico tipicamente incluindo tensoativos não iônicos (Tweens, Pluronics ou polietileno glicol), proteínas inócuas como albumina sérica, ésteres de sorbitan, ácido oléico, lecitina, aminoácidos tais como glicina, tampões, sais açúcares ou álcoois de açúcares. Os aerossóis são geralmente preparados a partir de soluções isotônicas.
Os adesivos transdermais têm a vantagem adicional de proporcionar um fornecimento controlado de um conjugado (s) polimérico(s) terapêuticos) ao corpo. Tais formas de dosagem podem ser preparadas dissolvendo-se ou dispersandose o agente no meio adequado. Os intensificadores de absorção podem também ser usados para aumentar o fluxo do ligante através da pele. A velocidade de tal fluxo pode ser controlada quer proporcionando uma membrana controladora da velocidade ou dispersando-se o peptidomimético em uma matriz polimérica ou gel.
Os preparados oftálmicos, ungüentos oculares, pós, soluções e análogos incidem também no âmbito da presente invenção.
As composições farmacêuticas da presente invenção adequadas para a administração parenteral compreendem um ou mais conjugado(s) polimérico(s) terapêutico(s) em combinação com um ou mais soluções, dispersões, suspensões ou emulsões aquosas ou não aquosas isotônicas estéreis farmaceuticamente aceitáveis ou pós estéreis que podem ser reconstituídos em soluções ou dispersões injetáveis estéreis imediatamente antes do uso, que podem conter antioxidantes, tampões, bacteriostáticos, solutos que tornam o preparado isotônico com o sangue do receptor destinado ou agentes de suspensão ou espessantes.
Exemplos de veículos aquosos ou não aquosos adequados que podem ser empregados nas composições farmacêuticas da presente invenção incluem água, etanol, polióis (tais como glicerol, propileno glicol, polietileno glicol e análogos) e misturas suas, óleos vegetais, tais como óleo de oliva e ésteres orgânicos injetáveis tais como oleato de etila. A fluidez adequada pode ser mantida, por exemplo, empregando-se materiais de revestimento, tais como lecitina, mantendo-se o tamanho de partícula necessário no caso de dispersões e com o uso de tensoativos.
Estas composições podem também conter adjuvantes tais como conservantes, agentes umectantes, agentes emulsi97
Figure BRPI0314042B1_D0054
ficantes e agentes dispersantes. A prevenção da ação de microorganismos pode ser assegurada com a inclusão de diversos agentes antibacterianos e antifúngicos, tais como parabeno, clorobutanol, ácido fenol sórbico, por exemplo e análogos. Pode ser também desejável se incluir agentes isotônicos tais como açúcares, cloreto de sódio e análogos nas composições. Além disso pode ser produzida uma absorção prolongada da forma farmacêutica injetável incluindo-se agentes que retardam a absorção tais como monoestearato de alumínio e gelatina.
Em algumas casas, a fim de se prolongar o efeito de um medicamento é desejável se retardar a absorção do medicamento a partir da injeção subcutânea ou intramuscular. Isto pode ser obtido empregando-se uma suspensão líquida de material cristalino ou amorfo que tenha uma hidrossolubilidade precária. A velocidade de absorção do medicamento então depende da sua velocidade de dissolução que, por sua vez, pode depender do tamanho dos cristais e da forma cristalina. Alternativa, a absorção retardada de uma forma de medicamento administrada por via parenteral é obtido dissolvendo-se ou suspendendo-se o medicamento em um veículo oleoso.
As formas de deposição injetáveis são preparadas formando-se matrizes microencapsuladas do(s) conjugado(s) polimérico(s) terapêutico(s) em polímeros biodegradáveis tais como de polilactídeo-poliglicolídeo. Dependendo da relação de medicamento para polímero, e da natureza do polímero específico empregado, a velocidade de liberação do medicamento pode ser controlada. Exemplos de outros polímeros biodegradáveis incluem poli(ortoésteres) e poli(anidridos). Os preparados injetáveis de deposição são também preparados aprisionando-se o medicamento em lipossomas ou microemulsões que são compatíveis com o tecido corporal.
Quando o(s) conjugado(s) polimérico(s) terapêutico (s) da presente invenção é (são) administrado(s) como produtos farmacêuticos, a seres humanos ou a animais eles pode ser dados isoladamente ou em forma de uma composição farmacêutica contendo, por exemplo, de 0,1 a 99,5% (sendo mais preferível de 0,5 a 90%) do ingrediente ativo em combinação com um veículo farmaceuticamente aceitável.
Os preparados de agentes podem ser administrados por via oral, parenteral, tópica ou retal. Eles são naturalmente administrados por formas adequadas a cada via de administração. Eles são administrados em forma de comprimidos ou cápsulas, por injeção, inalação, loção ocular, ungüento, supositório, infusão, por exemplo; topicamente por loção ou ungüento; e por via retal por supositórios. A administração oral é a preferida.
As expressões administração parenteral e administrado por via parenteral conforme empregado no presente significa modo de administração distintos da enteral e tópica administração, geralmente por injeção e inclui, sem limitação, injeção e infusão intravenosa, intramuscular, intraarterial, intratecal, intracapsular, infraorbital, intracardíaca, intradermal, intraperitoneal, transtraqueal, subcutânea, subcuticular, intraarticular, subcapsular, subaracnóide, intra-espinhal e intraesternal.
A expressão administração sistêmica, administrado sistemicamente, administração periférica e administrado perifericamente, conforme empregado no presente significa a administração de um conjugado polimérico terapêutico, medicamento ou outro material de modo diferente do diretamente no sistema nervoso central, de modo tal que entre no sistema do paciente e assim, seja sujeito a metabolismo e a outros processos, tal como por administração subcutânea, por exemplo.
Este(s) conjugado(s) polimérico(s) terapêutico(s) pode(m) ser administrado(s) a seres humanos e a outros animais por terapia pro qualquer via adequada de administração, inclusive por via oral, nasal, tal como, por exemplo, em forma de uma pulverização, por via retal, intravaginal, parenteral, intracisternal e topicamente, em forma de pós, ungüentos ou gota, incluindo por via bucal e sublingual.
Independentemente da via de administração selecionada, o(s) conjugado(s) polimérico(s) terapêutico(s) que pode(m) ser usados em uma forma hidratada e/ou as composições farmacêuticas da presente invenção, são preparados em formas de dosagem farmaceuticamente aceitáveis por processos convencionais conhecidos dos versados na técnica.
Pode se fazer variar os níveis de dosagem reais dos ingredientes ativos nas composições farmacêuticas da presente invenção de modo a se obter uma quantidade do ingrediente ativo que seja efetiva para se atingir a
100 resposta terapêutica desejada para um paciente, composição e modo de administração específicos sem ser tóxico ao paciente.
Estruturas Físicas das
Composições da
Presente Invenção
Os polímeros da presente invenção podem ser formados em uma variedade de formato. Em determinadas modalidades, por exemplo, as matrizes poliméricas da presente invenção podem se apresentar na forma de 10 micropartículas ou nanopartículas. As microesferas tipicamente compreendem uma matriz polimérica biodegradável que incorpora um medicamento. As microesferas podem ser formadas por uma ampla variedade de técnicas conhecidas dos versados na técnica. Exemplos de técnicas de formação de 15 microesferas incluem, sem limitação, (a) separação de fases por emulsificação e subseqüente evaporação do solvente orgânico (incluindo métodos de emulsão complexa tais como emulsões de óleo em água, emulsões de água em óleo e emulsões de água-óleo-água); (b) separação de fase de 20 coacervação; (c) dispersão no estado fundido; (d) deposição interfacial; (e) polimerização in situ; (f) secagem por pulverização e congelamento por pulverização; (g) revestimento por suspensão no ar; e (h) revestimento de panela e pulverização. Estes métodos, assim como as 25 propriedades e características de microesferas são descritas na patente U.S. N° 4.652.441; patente U.S. N° 5.100669; patente U.S. N° 4.526.938; WO 93;24150; EPA 0258780 A2; patente U.S. N° 4.438.253; e patente U.S. N° 5.330.768, cujo
101 conteúdo na íntegra é incorporado ao presente documento a título de referência.
Para se preparar as microesferas da presente invenção, podem ser empregados diversos métodos dependendo da aplicação desejada dos veículos de fornecimento. Os métodos adequados incluem, sem limitação, secagem por pulverização, secagem por congelamento, secagem ao ar, secagem a vácuo, secagem por leito fluidifiçado, trituração, co-precipitação e extração de fluido crítico. No caso de secagem por pulverização, secagem por congelamento, secagem ao ar, secagem a vácuo, secagem em leito fluidificado e extração de fluido crítico, os componentes (poliol estabilizador, material bioativo, tampões etc.) são primeiro dissolvidos ou suspensos em condições aquosas. No caso de trituração, os componentes são misturados na forma seca e triturados por qualquer método conhecido na técnica. No caso de co-precipitação, os componentes são misturados em condições orgânicas e processados do modo descrito abaixo. A secagem por pulverização pode ser usada para carregar o poliol de estabilização com o material bioativo. Os componentes são misturados em condições aquosas e secados empregando-se bicos de precisão para produzir gotículas extremamente uniformes em uma câmara de secagem. As máquinas de secagem por pulverização adequadas incluem, sem limitação, secadores de pulverização Buchi, NIR0,APV e Labplant usados de acordo com as instruções dos fabricantes.
O formato de micropartículas e nanopartículas pode ser determinado por microscopia eletrônica. As nano102 <J partículas de formato esférico são usadas em determinadas modalidades, para circulação pela corrente sangüínea. Se for desejado, as partículas podem ser fabricadas empregando-se técnicas conhecidas em outros formatos que sejam mais úteis para uma aplicação específica.
Além do fornecimento intracelular de um agente terapêutico, é também possível que partículas das composições da presente invenção, tais como micropartículas ou nanopartículas possam sofrer endocitose, obtendo assim acesso à célula. A freqüência de tal processo de endocitose dependerá provavelmente das dimensões de qualquer partícula.
Em determinadas modalidades, pode ser usados artigos sólidos úteis na definição do formato e para conferir rigidez e resistência estrutural às matrizes poliméricas. Um polímero, por exemplo, pode ser formado sobre uma tela ou outra trama para implantação. Um polímero pode também ser fabricado em forma de uma sonda ou de uma derivação, adaptado para manter abertas áreas no interior dos tecidos corporais ou para drenar fluido de uma cavidade ou luz corporal para outra. Além disso um polímero pode ser fabricado em forma de um dreno ou de um tubo adequado para a remoção de fluidos de um sítio pós operativo e em algumas modalidades adaptável para ser usado com sistemas de drenagem de seção fechada tais como drenos Jackson-Pratt e análogos como é habitual na técnica.
As propriedades mecânicas do polímero podem ser importantes para a processabilidade de se produzir artigos moldados ou prensados para a implantação. A temperatura de
103 transição vítrea, por exemplo, pode variar muito, mas deve ser suficientemente mais baixa do que a temperatura de decomposição para acomodar técnicas de fabricação convencionais, tais como moldagem por compressão, extrusão ou moEdagem por injeção.
(d) Biodegradabilidade e Características de Liberação
Em determinadas modalidades os polímeros e misturas da presente invenção, depois de contato com os fluidos corporais, sofrem uma degradação gradual. A vida de um polímero biodegradável in vivo depende, dentre outras coisas, do seu peso molecular, da sua cristalinidade, bioestabilidade e do grau de reticulação. Em geral quanto maior o peso molecular, quanto mais alto o grau de cristalinidade e quanto maior a bioestabilidade, tanto mais lenta será a biodegradação.
Se uma composição da presente invenção for preparada com um agente terapêutico ou com outro material, geralmente resulta a liberação de um tal agente ou outro material durante um período de tempo sustentado ou prolongado em comparação com a liberação de uma solução salina isotônica. Um tal perfil de liberação pode resultar em um fornecimento prolongado (durante, digamos de 1 a aproximadamente 2.000 horas, ou alternativamente aproximadamente 2 a aproximadamente 800 horas) de quantidades efetivas (aproximadamente 0,0001 mg/kg/hora, por exemplo até aproximadamente 10 mg/kg/hora) do agente ou de qualquer outro material associado com o polímero.
104
Uma variedade de fatores pode afeta a velocidade desejada de hidrólise de polímeros da presente invenção, a maciez e flexibilidade desejada da matriz sólida resultante, velocidade e extensão da liberação do material bioativo. Alguns tais fatores incluem a seleção/identidade de diversas subunidade a pureza enantiomérica ou diastereoisomérica das subunidades monoméricas, homogeneidade das subunidades encontradas no polímero e comprimento do polímero. A presente invenção inclui heteropolímeros com diversos ligações, por exemplo, e/ou a inclusão de outros elementos monoméricos no polímero a fim de controlar, por exemplo, a velocidade de biodegradação da matriz.
Para ilustrar ainda mais, pode se obter uma ampla faixa de velocidades de degradação ajustando-se os graus de hidrofobicidade das estruturas principais ou das cadeias laterais dos polímeros, mantendo ao mesmo tempo uma biodegradabilidade suficiente para o uso pretendido para qualquer tal polímero. Um tal resultado pode ser atingido fazendo-se variar os diversos grupos funcionais do polímero. A combinação de uma estrutura principal hidrófoba com uma ligação hidrófila por exemplo, produz uma degradação heterogênea, pois encoraja-se a divagem ao passo que se resiste à penetração da água.
Um protocolo geralmente aceito no campo e que pode ser usado para determinar a velocidade de liberação de qualquer agente terapêutico ou de outro material com que se carregam as matrizes poliméricas da presente invenção abrange da degradação de qualquer tal matriz em uma solução
105 de PBS a O,1M (pH 7,4) a 37°C, um ensaio conhecido na técnica. Para os fins da presente invenção, o termo protocolo PBS é usado no presente para se referir a tal protocolo.
Em determinados casos, as velocidades de liberação de sistemas poliméricos diferentes da presente invenção podem ser comparada, submetendo-se as mesmas a tal protocolo. Em determinados casos, pode ser necessário se processar sistemas poliméricos do mesmo modo para permitir que se façam comparações diretas e relativamente precisas de diferentes sistemas. A presente invenção instrui sobre meios diferentes diversos de preparação das matrizes poliméricas da presente invenção, por exemplo. Tais comparações podem indicar que qualquer um sistema polimérico libera o material incorporada a uma velocidade de aproximadamente 2 a menos de aproximadamente 1000 ou mais vezes mais rápido que um outro sistema polimérico.
Alternativamente, uma comparação pode revelar uma diferença de velocidades de aproximadamente 3, 5, 7, 10, 25, 50, 100, 250, 500 ou 750 vezes. Diferenças mais altas ainda entre velocidades incidem no âmbito da presente invenção e nos protocolos de velocidade de liberação.
Em determinadas modalidades, quando preparados de um modo determinado, a velocidade de liberação para sistemas poliméricos da presente invenção pode apresentar como monofásicos ou bifásicos.
A liberação de qualquer material incorporado à matriz polimérica, que é freqüentemente provida em forma de
106 uma microesfera, pode ser caracterizada em determinados casos por uma velocidade de liberação inicial aumentada, o que pode liberar de aproximadamente 5 a aproximadamente 50% ou mais de qualquer material incorporado, ou alternativamente aproximadamente 10, 15, 20, 25, 30, ou 40%, seguido por uma velocidade de liberação de grau inferior.
A velocidade de liberação de qualquer material incorporado pode também ser caracterizada pela quantidade de tal material liberado pro dia por mg da matriz polimérica. em determinadas modalidades, por exemplo, a velocidade de liberação pode variar de aproximadamente 1 ng ou menos de qualquer material incorporado por dia por mg do sistema polimérico a aproximadamente 500 ou mais ng/dia/mg. Alternativamente, a velocidade de liberação pode ser de aproximadamente 0,05, 0,5, 5, 10, 25, 50, 75, 100, 125, 150, 175, 200, 250, 300, 350, 400, 450, ou 500 ng/dia/mg. Em outras modalidades ainda, a velocidade de liberação de qualquer material incorporado pode ser de 10.000 ng/dia/mg ou ainda mais alta. Em determinados casos, os materiais incorporados e caracterizados por tais protocolos de velocidade de liberação podem incluir agentes terapêuticos, cargas e outras substâncias.
Em um outro aspecto, a velocidade de liberação de qualquer material de qualquer matriz polimérica da presente invenção pode ser apresentada como a meia vida de tal material na matriz.
Além da modalidade que abrange protocolos para a determinação de velocidades de liberação in vitro,
107 protocolos in vivo, em que em determinados casos podem ser determinadas as velocidades de liberação para sistemas poliméricos incidem também no âmbito da presente invenção. Outros ensaios úteis para a determinação da liberação de qualquer material dos polímeros do sistema da presente invenção são conhecidos na técnica.
(e) Implantes e Sistemas de Fornecimento
Na sua forma mais simples, um sistema de fornecimento biodegradável para um agente terapêutico consiste em uma dispersão de tal agente terapêutico em uma matriz polimérica. Em outras modalidades, um artigo é usado para o implante, injeção ou de outro modo colocado total ou parcialmente no interior do corpo, compreendendo o artigo as composições da presente invenção. É especialmente importante que um tal artigo resulte em um mínimo de irritação aos tecidos quando implantado ou injetado no tecido vascularizado.
Os sistemas de fornecimento biodegradáveis, e os artigos deles, podem ser preparados de uma variedade de modos conhecidos na técnica. O polímero da presente invenção pode ser processado no estado fundido empregando-se técnicas convencionais de extrusão ou de moldagem por injeção, ou então estes produtos podem ser preparados dissolvendo-se os mesmos em um solvente adequado, seguindo-se da formação do
dispositivo e a remoção subseqüente do solvente por
evaporação ou extração.
Quando um sistema ou artigo de implante se
encontra em seu lugar, ele deve permanecer pelo menos em
contato parcial com um fluido biológico, tal como sangue,
108 secreções de órgãos interno, membranas mucosas, fluido cérebro-espinhal e análogos, para permitir a liberação sustentada de qualquer agente terapêutico encapsulado.
(f) Métodos de Fabricação
Geralmente, os compostos da presente invenção podem ser preparados de um de dois modos: monômeros portando agentes terapêuticos, ligantes de alvejamento e/ou porções de ciclodextrina podem ser polimerizados, ou então as estruturas principais do polímero podem ser derivadas com agentes terapêuticos, ligantes de alvejamento e/ou porções de ciclodextrina.
Assim, em uma modalidade, a presente invenção contempla a síntese de compostos da invenção fazendo reagir os monômeros M-L-CD e M-L-D (e opcionalmente M-L-T), em que
CD representa uma porção cíclica, tal como um molécula de ciclodextrina, ou derivado seu;
L, independentemente a cada ocorrência, pode estar ausente ou representa um grupo linker;
D, independentemente para cada ocorrência, representa agentes terapêuticos iguais ou diferentes ou seus promedicamentos; e
T, independentemente a cada ocorrência, representa ligantes de alvejamento iguais ou diferentes ou seu precursor; e
M representa uma subunidade monomérica portando uma ou mais porções reativas capazes de sofrer uma reação de polimerização com um ou mais de outros M nos monômeros na
109 mistura de reação, em condições que produzem a polimerização dos monômeros.
Em determinadas modalidades, a mistura de reação pode ainda compreender monômeros que não portam porções CD, T ou D, tal como para separar as unidades monoméricas derivadas em todo o polímero.
Em uma modalidade alternativa, a invenção contempla a síntese de um composto da presente invenção fazendo um polímero P (o polímero que porta uma multiplicidade de grupos reativos, tais como ácidos carboxílicos, álcoois, tióis, aminas, epóxidos etc) reagir com os agentes de enxertia X-L-CD e Y-L-D (e opcionalmente, Z-L-T), em que
CD representa uma porção cíclica, tal como um molécula de ciclodextrina, ou derivado seu;
L, independentemente a cada ocorrência, pode estar ausente ou representa um grupo linker;
D, independentemente a cada ocorrência, representa agentes terapêuticos iguais ou diferentes ou promedicamentos seus;
T, independentemente a cada ocorrência, representa ligantes de alvejamento iguais ou diferentes ou seus precursores;
X, independentemente a cada ocorrência, representa um grupo reativo, tal como ácidos carboxílicos, álcoois, tióis, aminas, epóxidos etc., capazes de formar uma ligação covalente com um grupo reativo do polímero; e
110
Y e Ζ, independentemente a cada ocorrência, representam hospedeiros de inclusão ou grupos reativos, tais como ácidos carboxílicos, álcoois, tióis, aminas, epóxidos etc., capazes de formar uma ligação covalente com um grupo reativo do polímero ou complexos de inclusão com porções CD enxertadas no polímero, em condições que façam os agentes de enxertia formar ligações por covalência e/ou complexos de inclusão, conforme for adequado, com o polímero ou com porções enxertadas no polímero.
Se o polímero incluir, por exemplo, álcoois, tióis, ou aminas como grupos reativos, os agentes de enxertia podem incluir grupos reativos que reagem com eles, tais como isocianatos, isotiocianatos, cloretos ácidos, anidridos ácidos, epóxidos, cetenas, cloretos de sulfonila, ácidos carboxílicos ativados (ácidos carboxílicos tratados com um agente de ativação tal como PyBrOP, carbonildiimidazol ou um outro reagente que reage com um ácido carboxílico para formar uma porção suscetível a um ataque nucleófilo) ou outras porções nucleófilas conhecidas dos versados na técnica. Em determinadas modalidades, um catalisador pode ser necessário para produzir a reação (um ácido de Lewis, por exemplo, um catalisador de metal de transição, uma base amina etc., conforme será compreendido pelos versados na técnica.
Em determinadas modalidades, faz-se reagir os agentes de enxertia diferentes com o polímero simultaneamente ou substancialmente simultaneamente (em uma reação de um recipiente, por exemplo) , ou faz-se reagir em seqüência com
111 o polímero (opcionalmente com uma etapa de purificação e/ou de lavagem entre as reações).
Um outro aspecto da presente invenção consiste em um método para a fabricação de polímeros lineares ou ramificados contendo ciclodextrina representados pelas fórmulas I-III. Embora a discussão abaixo se concentre na preparação de moléculas lineares de ciclodextrina os versados na técnica reconhecerão com facilidade que os métodos descritos podem ser adaptados para a produção de polímeros ramificados escolhendo-se um precursor adequado para o comonômero a.
Consequentemente, uma modalidade da presente invenção consiste em um método de preparação de um copolímero linear de ciclodextrina. De acordo com a invenção, um copolímero linear de ciclodextrina da invenção pode ser preparado copolimerizando-se um precursor de monômero de ciclodextrina di-substituído com um grupo de saída adequado com um precursor de comonômero A capaz de deslocar os grupos de saída. 0 grupo de saída, que pode ser o mesmo ou diferente, pode ser qualquer grupo de saída conhecido na técnica que possa ser deslocado por copolimerização com um precursor de comonômero A. Em uma modalidade preferida, um copolímero linear de ciclodextrina pode ser preparado tratando-se com iodo um precursor de monômero de ciclodextrina para formar um precursor de monômero de ciclodextrina diiodado e copolimerizando-se o precursor de monômero diiodado de ciclodextrina com um precursor de comonômero A para formar um copolímero linear de ciclodextrina tendo uma
112 unidade repetida de fórmula II ou III ou uma combinação delas, cada uma de acordo com o descrito acima. Embora os exemplos apresentados abaixo discutam porções de ciclodextrina iodadas, os versados na técnica reconhecerão 5 prontamente que a presente invenção contempla e abrange porções de ciclodextrina em que outros grupos de saída tais com alquil e aril sulfonato possa estar presente em vez de grupos iodo. Em uma modalidade preferida, um método de preparação de um copolímero linear de ciclodextrina da 10 presente invenção por tratamento com iodo de um precursor de monômero de ciclodextrina conforme descrito acima para formar um precursor de monômero de ciclodextrina diiodado da fórmula IVa, IVb, IVc ou uma mistura deles:
Figure BRPI0314042B1_D0055
Figure BRPI0314042B1_D0056
Figure BRPI0314042B1_D0057
I
A ciclodextrina diiodada pode ser preparado por qualquer meio conhecido na técnica (Tabushi et al., J. Am
Chem. 106, 5267-5270 (1984); Tabushi et al., J. Am. Che. 106, 4580-4584 (1984)). Pode-se fazer reagir a βciclodextrina, por exemplo, com cloreto de bifenil-4,4'dissulfonila na presença de piridina anidra para formar uma 20 β-ciclodextrina capeada com cloreto de bifenil-4,4'
113 dissulfonila que se pode então fazer reagir com iodeto de potássio para produzir diiodo-p-ciclodextrina. 0 precursor de monômero de ciclodextrina é iodado em duas posições somente. Copolimerizando-se o precursor de monômero de 5 ciclodextrina diiodada com um precursor de comonômero A, conforme descrito acima, pode ser preparado um polímero linear de ciclodextrina tendo uma unidade repetida da Fr (a, (b ou uma combinação delas, também conforme descrito acima.
Se for adequado, o iodo ou os grupos iodo podem ser 10 substituídos com outros grupos de saída conhecidos.
Também de acordo com a invenção, os grupos iodo ou outro grupo de saída adequado podem ser deslocados com um grupo que permita a reação com um precursor com um comonômero A, conforme definido acima. Um precursor de 15 monômero de ciclodextrina diiodada da fórmula IVa, IVb, IVc, por exemplo, ou uma mistura deles pode ser aminada para formar um precursor de monômero de ciclodextrina diaminada da fórmula Va, Vb, Vc ou uma mistura deles:
Figure BRPI0314042B1_D0058
Figure BRPI0314042B1_D0059
114
O precursor de monômero de ciclodextrina diaminada pode ser preparado por qualquer meio conhecido nas técnica (Tabushi et al. Tetrahedron Lett. 18:11527-1530 (1977);
Mungall et al., J. Org. Chem. 1659-1662 (1975)). Pode-se fazer reagir uma diiodo-3-ciclodextrina, por exemplo, com azida sódica, reduzindo-se então para formar uma diamino-βciclodextrina). O precursor de monômero de ciclodextrina é aminado em duas posições somente. O precursor de monômero de ciclodextrina diaminado pode então ser copolimerizado com um precursor de comonômero A, conforme descrito acima,para produzir um copolimero linear de ciclodextrina tendo uma unidade repetida da fórmula II-III ou uma combinação delas, também conforme descrito acima. No entanto, a funcionalidade amino de um precursor de monômero de ciclodextrina diaminada não precisa estar diretamente ligado à porção ciclodextrina. Alternativamente a funcionalidade amino ou outra funcionalidade nucleófila pode ser introduzida pelo deslocamento do iodo ou de outros grupos de saída adequados de um precursor de monômero de ciclodextrina com porções contendo grupos amino tais como, por exemplo, HSCH2CH2NH2 (ou uma molécula di-nucleófila mais geralmente representada por HW-(CRiR?) n-WH em que W, independentemente a cada ocorrência, representa O, S ou NRi; Ri e R^, independentemente a cada ocorrência, representam H, alquila substituído ou não, arila substituído ou não, heteroalquila substituído ou não, heteroarila substituído ou não) com uma base adequada tal como hidreto de metal, álcali ou carbonato alcalino ou amina terciária para formar um precursor de monômero de
115 ciclodextrina diaminada da fórmula Vd, Ve,
Vf ou uma mistura deles:
Figure BRPI0314042B1_D0060
Um copolimero linear oxidado contendo ciclodextrina da presente invenção pode ser também preparado oxidando-se 5 um copolimero linear reduzido contendo ciclodextrina da invenção conforme descrito abaixo. Este método pode ser conduzido desde que o comonômero A não contenha uma porção ou grupo sensível a oxidação tal como, por exemplo, um tiol.
De acordo com a invenção, um copolimero linear de ciclodextrina da invenção pode ser oxidado de modo a introduzir pelo menos um monômero oxidado de ciclodextrina no copolimero, de modo tal que o monômero oxidado de ciclodextrina seja uma parte integrante da estrutura principal do polímero. Um copolimero linear de ciclodextrina que contém pelo menos um monômero oxidado de ciclodextrina é definido como um copolimero linear oxidado de ciclodextrina ou um polímero oxidado linear contendo ciclodextrina. O monômero de ciclodextrina pode ser oxidado ou do lado da hidroxila secundária ou da primária da porção ciclodextrina.
116
Se mais de um monômero oxidado de ciclodextrina estiver presente em um copolimero linear oxidado de ciclodextrina da presente invenção, podem estar presentes monômeros de ciclodextrina iguais ou diferentes oxidados ou no lado da 5 hidroxila primária, no lado da hidroxila secundária ou em ambos os lados. Para os fins de ilustração um copolimero linear oxidado de ciclodextrina com grupos hidroxila secundários oxidados tem, por exemplo, pelo menos uma unidade da fórmula Via ou VIb:
Figure BRPI0314042B1_D0061
Figure BRPI0314042B1_D0062
VIb 10 Nas fórmulas Via e VIb, C é um monômero oxidado substituído ou não de ciclodextrina e A é uma ligação comonômero, isto, é ligada por covalência, à ciclodextrina C oxidada. Além disso nas fórmulas Via e VIb, a oxidação dos grupos hidroxila secundários leva à abertura do anel da porção ciclodextrina e à formação de grupos aldeído.
117
Figure BRPI0314042B1_D0063
Um copolímero linear oxidado de ciclodextrina pode ser preparado por oxidação de um copolímero linear de ciclodextrina conforme discutido acima. A oxidação de um copolímero linear de ciclodextrina da presente invenção pode ser obtida por técnicas de oxidação conhecidas na técnica. (Hisamatsu et al., Starch 44: 188-191 (1992)). É preferível se empregar um oxidante tal como, por exemplo, periodato de sódio. Deve ser evidente aos versados na técnica que em condições de oxidação padrão o grau de oxidação pode variar, ou pode se fazê-lo variar, de copolímero a copolímero. Assim, em uma modalidade da invenção, um copolímero linear oxidado da invenção pode conter um monômero oxidado de ciclodextrina. Em uma outra modalidade, substancialmente todos os monômeros de ciclodextrina do copolímero estariam oxidados.
Um outro método de preparação de um copolímero oxidado linear de ciclodextrina da presente invenção abrange a oxidação de um precursor de monômero de ciclodextrina diiodado ou diaminado, conforme descrito acima, para formar um precursor de monômero oxidado diiodado ou diaminado de ciclodextrina e a copolimerização do precursor de monômero oxidado diiodado ou diaminado de ciclodextrina com um precursor de comonômero A. Em uma modalidade preferida, um precursor de monômero oxidado diiodado de ciclodextrina da fórmula Vila, Vllb, VIIc ou uma mistura deles:
118
Figure BRPI0314042B1_D0064
Figure BRPI0314042B1_D0065
Figure BRPI0314042B1_D0066
Vile pode ser preparado oxidando-se um precursor de monômero diiodado de ciclodextrina das fórmulas IVa, IVb, IVc ou uma mistura delas, conforme descrito acima. Em uma outra modalidade preferida, um precursor de monômero oxidado 5 diaminado de ciclodextrina da fórmula Villa, VlIIb, VIIIc ou uma mistura deles:
Figure BRPI0314042B1_D0067
VHIa
Figure BRPI0314042B1_D0068
VlIIb
Figure BRPI0314042B1_D0069
VIIIc
119 pode ser preparado pela aminação de um precursor de monômero oxidado diiodado de ciclodextrina das fórmulas Vila, Vllb, VIIc, ou uma mistura delas, conforme descrito acima. Em uma outra modalidade ainda preferida, um precursor 5 de monômero oxidado diaminado de ciclodextrina da fórmula
IXa, IXb, IXc, ou uma mistura delas:
o o
Figure BRPI0314042B1_D0070
Figure BRPI0314042B1_D0071
pode ser preparado pelo deslocamento do iodo ou de um outro grupo de saída adequado de um precursor de monômero oxidado de ciclodextrina di-substituído com um iodo ou outro 10 grupo de saída adequado com o grupo amino ou outro grupo nucleófilo contendo porção tal como, por exemplo, HSCH2CH2NH2 (ou uma molécula di-nucleófila mais geralmente representada por HW-(CRjR2) n-WH em que W, independentemente a cada ocorrência, representa O, S ou NR2; Ri e R2, independentemente 15 a cada ocorrência, representa H, alquila substituído ou não,
120 arila substituído ou não, heteroalquila substituído ou não, heteroarila substituído ou não) com uma base adequada tal como hidreto de metal, álcali ou carbonato alcalino ou amina terciária.
Alternativamente um precursor de monômero oxidado
diiodado ou diaminado de ciclodextrina, conforme descrito
acima, pode ser preparado oxidando-se um precursor de
monômero de ciclodextrina para formar um precursor de
monômero oxidado de ciclodextrina, diiodando-se e/ou diaminando-se em seguida o monômero oxidado de ciclodextrina, conforme descrito acima. Conforme foi discutido acima, a porção ciclodextrina pode ser modificada com outros grupos de saída diferentes dos grupos iodo e de outras funcionalidades contendo o grupo. 0 precursor de monômero oxidado diiodado ou diaminado de ciclodextrina pode então ser copolimerizado com um precursor de comonômero A, conforme descrito acima, para formar um copolimero linear oxidado de ciclodextrina da invenção.
Um copolimero linear oxidado de ciclodextrina pode também ser ainda mais modificado ligando-se pelo menos um ligante ao copolimero. O ligante é conforme descrito acima.
De acordo com a invenção, um copolimero linear de ciclodextrina ou um copolimero linear oxidado de ciclodextrina pode ser ligado ou enxertado a um substrato. O substrato pode ser qualquer substrato conforme é reconhecido pelos versados na técnica. Em uma outra modalidade preferida da invenção, um copolimero linear de ciclodextrina ou um copolimero linear oxidado de ciclodextrina pode ser
121 reticulado em um polímero para formar respectivamente, um copolimero reticulado de ciclodextrina ou um copolimero reticulado oxidado de ciclodextrina. O polímero pode ser qualquer polímero capaz de reticulação com um copolimero linear ou linear oxidado de ciclodextrina da invenção (tal como polímero de polietileno glicol (PEG), polímero de polietileno). O polímero pode também ser o mesmo copolimero linear de ciclodextrina ou copolimero linear oxidado de ciclodextrina ou um diferente. Assim, um copolimero linear de ciclodextrina, por exemplo, pode ser reticulado em um polímero incluindo, sem limitação, ele mesmo, um outro copolimero linear de ciclodextrina e um copolimero linear oxidado de ciclodextrina. Um copolimero reticulado linear de ciclodextrina da invenção pode ser preparado fazendo-se reagir um copolimero linear de ciclodextrina com um polímero na presença de um agente de reticulação. Um copolimero reticulado linear oxidado de ciclodextrina da invenção pode ser preparado fazendo-se reagir um copolimero linear oxidado de ciclodextrina com um polímero na presença de um agente de reticulação adequado. O agente de reticulação pode ser qualquer agente de reticulação conhecido na técnica. Exemplos dos agentes de reticulação incluem diidrazidas e dissulfetos. Em uma modalidade preferida, o agente de reticulação é um grupo instável de modo que um copolimero reticulado pode ser desreticulado se for desejado.
Um copolimero linear de ciclodextrina e um copolimero linear oxidado de ciclodextrina da invenção pode ser caracterizado por qualquer meio conhecido na técnica.
122
Tais métodos de caracterização ou técnica incluem, sem limitação, cromatografia de permeação de gel (GPC), espectrometria de massa de tempo de vôo de ionização de dessorção de laser assistido por matriz (MALDI-TOF Mass spec), RMN 1H e C13, dispersão de luz e titulação.
A invenção também propõe uma composição de ciclodextrina contendo pelo menos um copolimero linear de ciclodextrina e pelo menos um copolimero linear oxidado de ciclodextrina da invenção conforme descrito acima. Consequentemente, ou tanto o copolimero linear de ciclodextrina como o copolimero linear oxidado de ciclodextrina ou um deles pode estar reticulado em um outro polímero e/ou ligado a um ligante conforme descrito acima. As composições terapêuticas de acordo com a invenção contêm um agente terapêutico e um copolimero linear de ciclodextrina ou um copolimero linear oxidado de ciclodextrina, incluindo copolímeros reticulados, da invenção. Um copolimero linear de ciclodextrina, um copolimero linear oxidado de ciclodextrina e seus derivados reticulados são conforme descrito acima. 0 agente terapêutico pode ser qualquer agente terapêutico biologicamente ativo sintético ou natural incluindo aqueles conhecidos na técnica. Exemplos de agentes terapêuticos adequados incluem, sem limitação, antibióticos, esteróides, polinucleotídeos (DNA genômico, DNAc, RNAm, RNA de duas fitas e oligonucleotídeos anti-senso, por exemplo), plasmídeos, peptídeos, fragmentos de peptídeos, moléculas pequenas (doxorubicina, por exemplo) e outras macromoléculas
A
123 biologicamente ativas tais como, por exemplo, proteínas e enzimas.
(g) Métodos de Negócios
Outros aspectos da invenção propõem determinados métodos de se conduzir negócios. Mais especificamente, a colocação em prática dos métodos da invenção pode permitir composições terapêuticas inéditas e preparados melhorados delas. Esta etapa técnica quando combinada com uma ou mais etapas adicionais proporciona abordagens inéditas para se conduzir um negócio farmacêutico ou de preferência um negócio de bio-ciências. Produtos terapêuticos preparados pelo método da invenção, por exemplo, podem ser estados para eficácia como agentes terapêuticos em uma variedade de modelos de doenças, sendo então as composições terapêuticas potenciais para toxicidade e outros perfis de segurança antes de se formular, acondicionar e subsequentemente comercializar o preparado resultante para o tratamento da doença. Alternativamente, os direitos de se desenvolver e comercializar tais preparados ou para conduzir tais etapas podem ser objeto de licença a um terceiro para consideração.
Consequentemente, em determinadas modalidades, a presente invenção propõe um método de se conduzir um negócio farmacêutico que compreende:
a. fabricação de um preparado ou kit que inclui uma composição farmacêutica de qualquer um dos compostos de acordo com as reivindicações 1-4; e
124
b. comercialização a provedores de cuidados de saúda dos benefícios do emprego do preparado ou do kit no tratamento de uma doença ou distúrbio.
Em outras modalidades, a presente invenção descreve um método para a condução de um negócio farmacêutico que compreende:
a. a provisão de uma rede de distribuição para a venda de uma composição farmacêutica de qualquer um dos compostos de acordo com as reivindicações 1-4; e
b. provisão de material de instrução a pacientes ou a clínicos para o uso do preparado no tratamento de uma doença ou distúrbio.
Em determinadas- modalidades-,- -a--presente invenção propõe um processo para a condução de um negócio farmacêutico que compreende:
a. a determinação de um preparado e dosagem adequados de uma composição farmacêutica de qualquer um dos compostos de acordo com a reivindicações 1-4;
b. a condução de levantamento do perfil de preparados identificados na etapa (a), para eficácia e toxicidade em animais; e
c. a provisão de uma rede de distribuição para a venda de um preparado ou preparados identificados na etapa 9b) como tendo um perfil terapêutico aceitável.
Uma etapa adicional da modalidade compreende a provisão de um grupo de vendas para a comercialização do preparado a provedores de cuidados de saúda.
125
Em, outras modalidades ainda, a presente invenção propõe um método para a condução de um negócio farmacêutico que compreende:
a. a determinação de um preparado e dosagem de uma composição farmacêutica de qualquer um dos compostos de acordo com as reivindicações 1-4; e
b. concessão de licença, a uma terceira pare, dando direitos para desenvolvimento e venda subsequentes do preparado.
Exemplificação
Materiais. β-Ciclodextrina, β-CD (Cerestar USA, Inc. de Hammond, IN) foi secado a vácuo (<0,013 kPa (<0,l mTorr)) a 120°C durante 12 h antes de ser usada
Figure BRPI0314042B1_D0072
β-CD
Figure BRPI0314042B1_D0073
β-CD
Todos os solventes anidros, solventes de categoria
HPLC e outros solventes orgânicos habituais foram adquiridos de fornecedores comerciais e usados sem outra purificação. Recristalizou-se cloreto de bifenil-4,4'-dissulfonila (Aldrich Chemical Company, Inc. de Milwaukee, WI) a partir
126 de clorofórmio/hexanos. Pulverizou-se iodeto de potássio com um almofariz com pilão e secou-se em um forno a 200°C. A polietileno glicol dipropanóico-succinimida (PEG-DiSPA, PM 3400), polietileno glicol dibutanóico succinimida (PEG5 DiSBA, PM 3400) e dibenzotriazol carbonato de polietileno glicol (PEG-DiBTC, PM 3400) foram adquiridos de Nektar (Huntsville, AL). Polietileno glicol di-p-nitrofenol carbonato (PEG-DiNPC, PM 3400) foi adquirido de Sigma (St.
Louis, MO). CPT foi adquirido de Boehringer Ingelheim 10 (Ingelheim, Alemanha). 0 plasma humano foi adquirido de
Sigma e reconstituído com água Dl. O plasma murino foi preparado por remoção por centrifugação de células sangüíneas de amostras de sangue fresco coletadas de camundongos BALB/C fêmeas (Charles River). 6a, 6D-diiodo-6A, 6D-didesóxi-p-ciclo15 dextrina (CDDI, Esquema 2) foi sintetizado de acordo com um procedimento relatado anteriormente por Hwang et al. (Bioconjugate Chem. 12, 280-290). A água deionizada (18-ΜΩcm) foi obtida fazendo-se passar água deionizada no local através de um sistema de purificação Barnstead E-pure. Os 20 espectros de RMN foram registrados em um espectrômetro
Bruker AMX de 500 MHz ou Varian de 300 MHz. A análise espectral de massa (MS) foi conduzida empregando-se ou um espectrômetro de massa de eletropulverização dotado com um alçapão de ions LCQ (Thermo Finnigan) e equipado com uma 25 fonte de ionização de eletropulverização ou com um espectrômetro de massa MALDI-TOF (Voyager DE-PRO, Applied Biosystems). Os PMs das amostras de polímeros foram analisados em um sistema GPC equipado com uma bomba Hitachi
127
Figure BRPI0314042B1_D0074
L-6200 Intelligent Pump, um detetor Asnpec RI (ERC-7512, Erma, Inc.), um detetor DLS de Precision Detectors (PD 2020) e com colunas duplas de permeação de gel (PL-aquagel-OH-40 8 pm 300 mm x 7,5 mm, Polymer Laboratory) calibradas empregando-se padrão de polietileno glicol e eluidas empregando-se PBS (lx) a uma concentração de 20-50 mg/mL e a uma velocidade de fluxo de 0,7 mL/min à temperatura ambiente. Os derivados de CD foram analisados com uma coluna de fase inversa C-18 em um sistema HPLC equipado com um detetor de UV (detetor System Gold 168, Beckman Coulter) e um detetor de dispersão evaporativa de luz (ELS) (Sedex 75, Sedere, França). CPT, derivados de CPT e conjugados de polimero-CPT foram analisados nos sistemas HPLC com uma coluna de C-18 de fase inversa (HIRPB-4438, 4, 6 x 150 mm, Richard Scientific) equipada com um detetor de fluorescência (FD-500, GTI/Spectro Vision, Groton Technology, Inc.) empregando-se um gradiente de tampão de fosfato de potássio (pH 4,1) e acetonitrila. Os comprimentos de onda de excitação e emissão do detetor de fluorescência foram ajustados para 370 nm e 440 nm, respectivamente.
Exemplo 1:
β-Ciclodextrina capeado com bifenil-4,4'-dissulfonil-A,D, 1 (Tabushi et al. J. Am. Che. Soc. 106, 5267-5270 (1984)).
Esquema XV
128
Um frasco de fundo redondo de 500 mL equipado com uma barra de agitação magnética, um adaptador Schlenk e um septo foi carregada com 7,92 g (6,98 mmol) de βciclodextrina seca e 250 mL de piridina anidra (Aldrich Chemical Company, Inc.). A solução resultante foi agitada a 50°C sob nitrogênio enquanto se acrescentava 2,204 g (6,28 mmol) de cloreto de bifenil-4,4'-dissulfonila em quatro porções iguais a intervalos de 15 min. Depois de se agitar a 50°C durante outras 3 h, removeu-se o solvente a vácuo e o resíduo foi submetido a cromatografia de coluna de fase inversa usando-se uma eluição em gradiente de 0-40% de acetonitrila em água. As frações foram analisadas por cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC) e as frações adequadas foram combinadas. Depois da remoção da maior parte da acetonitrila em um evaporador rotativo, a suspensão aquosa resultante foi liofilizada até secar. Com isso obteve-se 3,39 g (38%) de 1 em forma de um sólido incolor.
Exemplo 2:
6a, 6D-Piiodo-6A, 6D-didesóxi-p-ciclodextrina, 2 (Tabushi et al. J. Am. Chem. 106, 4580-4584 (1984))
Esquema XVI
Figure BRPI0314042B1_D0075
129
Um tubo de centrifugação de 40 mL equipado com uma barra de agitação magnética, um adaptador Schlenk e um septo foi carregado com 1,02 g (7,2 mmol) de 1, 3,54 g (21,3 mmol) de iodeto de potássio em pó seco (Aldrich) e 15 mL de N,Ndimetilformamida (DMF) anidra (Aldrich). A suspensão resultante foi agitada a 80°C sob nitrogênio durante 2 h. Depois de ser resfriada até a temperatura ambiente, os sólidos foram separados pro filtração e o sobrenadante foi coletado. O precipitado sólido foi lavado com uma segunda porção de DMF anidro e os sobrenadantes foram combinados e concentrados a vácuo. O resíduo foi então dissolvido em 14 mL de água e resfriado em um banho de gelo antes de se acrescentar 0,75 mL (7,3 mmol) de tetracloroetileno (Aldrich) com uma agitação rápida. O produto precipitado foi filtrado em um frita de vidro média e lavado com uma pequena porção de acetona antes de ser secado a vácuo sobre P?Os durante 14 horas. Com isto obteve-se 0,90 g (92%) de 2 em forma de um sólido branco.
Exemplo 3:
6a, 6d-Bís- (2-aminoetiltio) -6a, 6D-didesóxi-3-ciclodextrina, 3 (Tabushi, I; Shimokawa, K; Fugita, K. Tetrahedron Lett.
1977, 1527-1530)
Esquema XVII
Figure BRPI0314042B1_D0076
130
Um frasco Schlenk de 25 mL equipado com uma barra de agitação magnética e um septo foi carregado com 0,91 mL (7,37 mmol) de uma solução a 0,81 M de 2-aminoetil-etiolato de sódio em etanol (Fieser, L.F.; Fieser, M. Reagents for Organic Synthesis; Wiley: Nova York, 1967; Vol.. 3, pp. 265266) . Fez-se evaporar a solução até secar e o sólido foi redissolvido em 5 mL de dm anidro (Aldrich) . Acrescentou-se 6a, 6D-diiodo-6A, 6D-didesóxi~3-ciclodextrina (2) (100 mg, 7,38 x 10-5 mol), sendo a suspensão resultante agitada a 60°C sob nitrogênio durante 2 h. Depois de se resfriar até a temperatura ambiente, concentrou-se a solução a vácuo e redissolveu-se o resíduo em água. Depois de se acidificar com HC1 a 0, IN, aplicou-se a solução a uma coluna de troca de ions Toyopearl SP-650M (forma de NH4 +) , eluindo-se o produto com um gradiente de bicarbonate de amônio de 0 a 0,4M. As frações adequadas foram combinadas e liofilizadas até secar. Obteve-se 80 mg (79%) de 3 em forma de um pó branco.
Síntese Alternativa de dicisteamina β-CD 3
A uma solução de 4,69 g (3,17 mmol) de 2 em 100 mL de água com o gás extraído, acrescentaram-se 0, 489 g (6,34 mmol) de cisteamina recém sublimada. A solução foi agitada com refluxo durante 2 horas. Depois de se resfriar até a temperatura ambiente e de se acidificar com HC1 a IN, a solução foi aplicada a uma coluna de troca de ions Toyopearl SP-650M (forma de NH4 +) e eluiu-se o produto com um gradiente de bicarbonato de amônio de 0 a 0,2 M. As frações adequadas foram combinadas e liofilizadas até secar. Com
131 este procedimento obteve-se 1,87 g (39% de rendimento) de um sólido branco. 0 sólido foi caracterizado por TLC (gel de silica, n-PrOH-AcOEt-HpO-NHsag 5/3/3/1, detecção por ninidrina) e apresentou um ponto principal correspondendo a 3. o espectro de massa de tempo de vôo (TOF) dessorção/ionização a laser assistido por matriz (MALDI) foi registrado no instrumento ELITE de 2 metros fornecido por PerSeptive Biosystems, Inc. MALDI-TOF m/z calcd para 3: 1252, encontrado 1253,5 [M+H]+, 1275,5 [M+Na]+, 1291,4 [M+K] + . RMN 13C (Bruker 500 MHz, D2O) δ ppm: 32,1 (S-CH2) e 38,8 (CH2-NH2) , 32,9 (C6 adjacente a S) , 60,2 (06 adjacente a OH), 70,8, 71,4, 72,5 (02, C3, C5), 81,8 (C4), 101,7 (Cl).
Exemplo 4;
6a, 6d-Bís- (2-amino-2-carboxiletiltio) -6a, 6D-didesóxi~3ciclodextrina, 4 (CD-BisCys)
Esquema XVIII
Figure BRPI0314042B1_D0077
167 mL de tampão de carbonato de sódio a 0,1M tiveram o gás extraído durante 45 minutos em um frasco de fundo redondo de 2 gargalos de 500 mL equipado com uma barra de agitação magnética, um condensador e um septo. A esta solução acrescentou-se 1,96 g (16,2 mmol) de L-cisteína e 10,0 g (73,8 mmol) de diiodo, desóxi-p-ciclodextrina 2. A
132 suspensão resultante foi aquecida a uma temperatura de refluxo durante 4,5 h até a solução ficar transparente (incolor). A solução foi então resfriada até a temperatura ambiente e acidificada a pH 3 empregando-se HC1 a IN. 0 produto foi precipitado acrescentando-se lentamente acetona (3 vezes a relação em peso da solução) . Com isso obteve-se 9,0 g de material bruto contendo CD-biscisteina (90,0%) de ciclodextrina que não reagiu, CD-mono-cisteina e cistina. O sólido resultante foi submetido a cromatografia de coluna de troca aniônica (SuperQ650M, Tosoh Bioscience) empregando-se uma eluição de gradiente de bicarbonato de amônio de 0-0,4M. Todas as frações foram analisadas por HPLC. As frações desejadas foram combinadas e o solvente foi reduzido a 100 mL a vácuo. 0 produto final ou foi precipitado acrescentandose acetona ou acrescentando-se metanol (3 vezes a relação em peso da solução) . 4 foi obtido com um rendimento de 60-90%. RMN (D20) δ (m, 7H, CD-2-CH) , 3, 79-3, 94 (m, 30H, CD-3,4CH, CD-CH2, Cys-CH), 3, 49-3, 62 (m, 14H, CD-5, 6-CH) , 2,923,30 (m, 4H, Cys-CH2) . RMN 13C (D2O) Ô 172,3, 101,9, 83, 9, 81, 6, 81,5, 73, 3, 72,2, 72, 0, 60,7, 54, 0, 34,0, 30, 6. ESI/MS (m/z) : 1342 [M]+, 1364 [M+Na] + . Pureza de 4 foi confirmada por HPLC.
Exemplo 5:
6a, 6d-Bís- (carboxilmetiltio) -6a, 6D-didesóxi-p-ciclodextrina, (CDDM)
Esquema XIX
Figure BRPI0314042B1_D0078
Figure BRPI0314042B1_D0079
Figure BRPI0314042B1_D0080
Uma solução de 50 mL de carbonato de sódio a 0,1M teve os gases extraídos durante 2 horas em um frasco de fundo redondo de 100 mL de 3 gargalos equipado com uma barra de agitação magnética, um condensador e um septo. Acrescen5 tou-se ao frasco com seringa ácido mercapto-acético (0,46 mL, 6,64 mmol) e ajustou-se pH para 9,3 com hidróxido de sódio a IN. A esta solução resultante acrescentou-se 3,00 g (2,21 mmol) de diiodo-p-ciclodextrina 2 e aqueceu-se a 80°C durante uma hora. A temperatura da solução foi aumentada de 10 10°C a cada hora até atingir 100°C. Depois de 3 h. à temperatura de refluxo, a solução incolor transparente foi resfriada à temperatura ambiente e acidificada até pH 3,5 empregando-se HC1 a IN. O produto bruto foi extraído com a lenta adição de acetona (3 vezes a relação em peso da 15 solução). O sólido resultante foi submetido a cromatografia de coluna de troca aniônica empregando-se uma solução de bicarbonate de amônio com um gradiente de 0-0,4M. Obteve-se assim 1,8 g (63,4%) de 5 em forma de um sólido incolor. ESI/MS (m/z): 1281[M]+. Pureza deste composto foi confirmada 20 com HPLC.
Exemplo 6:
CD-Bis(Ácido glutâmico-y-éster benzilico)6
Esquema XX
134
Figure BRPI0314042B1_D0081
Um frasco de fundo redondo de 50 mL equipado com uma barra de agitação magnética, um condensador e um septo foi carregado com 0,101 g (0,425 mmol) de H-Glu(Obzl)-OH e
0,15 g (0,106 mmol) de diiodo β ciclodextrina 2 em 5 mL de solução de carbonato de sódio a 0,1 M com os gases extraídos. A mistura em solução foi aquecida a 100°C durante
h. Resfriou-se então a solução até a temperatura ambiente e acidificou-se até pH 4 antes de se submeter a diálise em membranas MWCO 500 durante 24 h. O rendimento de 6 foi de
0, 142 g (83,6%) .
Exemplo 7;
CD-BisLys(Z) 7
Esquema XXI
Figure BRPI0314042B1_D0082
Figure BRPI0314042B1_D0083
Figure BRPI0314042B1_D0084
135
Um frasco de fundo redondo de 50 mL equipado com uma barra de agitação magnética, um condensador e um septo foi carregado com 0,124 g (0,443 mmol) de H-Lysina (Z)-OH e 0,15 g (0,111 mmol) de diiodo-p-ciclodextrina 2 em 5 mL de solução de carbonato de sódio com os gases extraídos a 0,lM. A mistura em solução foi aquecida a 100°C durante 4 h. A solução foi filtrada, sendo o pH do filtrado ajustado para 8,5 antes de se submeter o mesmo a diálise em membranas MWCO 500 durante 24 h. O rendimento de 7 foi de 0,124 g (68,9%).
Exemplo 8:
Síntese de tosilato de β-ciclodextrina, 8 (Melton, L.D., e
Slessor, K.N., Carbohydrate Research, 18, p. 29 (1971))
Esquema XXII
Cloreto de Tosila
Figure BRPI0314042B1_D0085
Figure BRPI0314042B1_D0086
Tosila
Um frasco de fundo redondo de 500 mL equipado com uma barra de agitação magnética, um adaptador de vácuo e um septo foi carregado com uma solução de β-ciclodextrina seco (8,530 g, 7,51 mmol) e 200 mL de piridina seca. A solução foi resfriada até 0°C antes de se acrescentar 1,29 g (6,76 mmol de cloreto de tosila. Deixou-se a solução resultante se aquecer até a temperatura ambiente de um dia para o outro. A piridina foi removido na medida do possível a vácuo. O resíduo resultante foi então recristalizado duas vezes a partir de 40 mL de água quente, obtendo-se 7,54 g (88%) de um sólido cristalino branco 8.
136
Exemplo 9;
Síntese de iodo-3-ciclodextrina, 9
Esquema XXIII
Figure BRPI0314042B1_D0087
Um frasco de fundo redondo com uma barra de agitação magnética e um adaptador Schlenk é carregado com 8, equivalentes de iodeto de potássio e DMF. A mistura resultante á aquecida a 80°C durante 3 h, quando se deixa a mistura de reação se resfriar até a temperatura ambiente. A mistura é então filtrada para remover o precipitado e faz-se 10 evaporar o filtrado até secar, redissolvendo-se o mesmo em água a 0°C. Acrescenta-se tetracloroetileno e agita-se a pasta resultante vigorosamente a 0°C durante 20 minutos. 0 sólido 9 é coletado em uma frita de vidro média, triturado com acetona e armazenado sobre P2O5.
Exemplo 10:
Síntese de Cisteamino-p-ciclodextrina, 10
Esquema XXIV
Figure BRPI0314042B1_D0088
Figure BRPI0314042B1_D0089
A uma solução de 9 em 100 mL de água com os gases extraídos, acrescentou-se 1 eq. de cisteamina recém
137 sublimada. A solução é agitada com refluxo durante 2 h. Depois de resfriada até a temperatura ambiente e acidificada com HCl a IN, aplica-se a solução a uma coluna de troca de ions Toyopearl SP-650M (forma de NH4 +) , eluindo-se o produto com um gradiente de bicarbonato de amônio. As frações adequadas são combinadas e liofilizadas até secar, obtendose 10.
Exemplo 11:
Sintese de Gly-CPT 11 (Greenwald et al., Bioorg. Med. Chem.
1998, 6, 551-562)
Esquema XXV
Figure BRPI0314042B1_D0090
Dissolveu-se t-Boc-glicina (0,9 g, 4,7 mmol) em 350 mL de cloreto de metileno anidro à temperatura ambiente e à esta solução acrescentou-se DIPC (0,75 mL, 4,7 mmol), DMAP (382 mg, 3,13 mmol) e camptotecina (0,55 g, 1,57 mmol) a 0°C. Deixou-se que a mistura de reação se aquecesse até a temperatura ambiente e deixou-se durante 16 h. A solução foi lavada com HCl a 0,lN secou-se e fez-se evaporar a pressão reduzida obtendo-se um sólido branco que foi recristalizado a partir de metanol obtendo-se camptotecin-20-éster de tBoc-glicina: RMN XH (DMSO-d6) δ 7,5-8,8 (m) , 7,3 (s), 5,5 (s), 4 (m), 2,1 (m) , 1,6 (s) , 1,3 (d), 0,9 (t) .
138
Camptotecin-20-éster de t-Boc-glicina (0,595 g,
1,06 mmol) foi dissolvido em uma mistura de cloreto de metileno (7,5 mL) e TFA (7,5 mL) e agitou-se à temperatura ambiente durante 1 h. Removeu-se o solvente e recristalizouse o resíduo a partir de cloreto de metileno e éter, obtendo-se 0,45 de 11. RMN 1H (DMSO-d6) δ 7,7-8,5 (m) , 7,2 (s), 5,6 (s), 5,4 (s) , 4,4 (m) , 2,2 (m) , 1,6 (d) , 1,0 (t) . RMN 13C (DMSO-d6) δ 168, 6, 166, 6, 156, 5, 152,2, 147,9, 146, 2, 144, 3, 131,9, 130, 6, 129, 7, 128,8, 128, 6, 128, 0, 127, 8, 119, 0, 95, 0, 77,6, 66, 6, 50, 5, 47, 9, 30,2, 15, 9, 7,9. ESI/MS (m/z) esperado 405; encontrado 406 (M+H).
Exemplo 12;
Síntese de GlyGlyGly-CPT 12
Esquema XXVI
Figure BRPI0314042B1_D0091
t-Boc-GlyGlyGly (1,359 g, 4,7 mmol) foi dissolvido em 350 mL de cloreto de metileno anidro à temperatura ambiente e a esta solução acrescentou-se DIPC (0,75 mL, 4,7 mmol), DMAP (382 mg, 3,13 mmol) e camptotecina 90,55 g, 1,57 mmol) a 0°C. Deixou-se que a mistura de reação se aquecesse até a temperatura ambiente e deixou-se durante 16 h. A solução foi lavada com HC1 a 0,1 N, secada e fez-se evaporar a pressão reduzida, obtendo-se um sólido branco, que foi
139 recristalizado a partir de metanol, obtendo-se o camptotecin
-20-éster de t-Boc-GlyGlyGly: RMN (DMSO-d6) δ 8,40 (s),
8,25 (d), 7,91 (d) , 7,78 (m), 7,65 (t: ), 7,26 (s), 7,05 (br,
s), 5,65 (d) , 5, 40 (d), 5,25 (S) , 5, 10 (br, s), 3,75-4,42
(m) , 2,15 -2,35 (m) , 1,45 (s) , o , 95 (t). Dissolveu-se o
camptotecin-20-éster de t-Boc-GlyGlyGly (1,5 g, 1,06 mmol) em uma mistura de cloreto de metileno (10 mL) e TFA (10 mL) e agitou-se à temperatura ambiente durante 1 h. Removeu-se o solvente a vácuo e redissolveu-se o resíduo em cloreto de metileno. A solução foi vertida em éter, obtendo-se o precipitado do composto título (amarelo). 0 precipitado foi filtrado e lavado com éter frio, obtendo-se 1,31 g de 12. RMN (DMSO-dg) δ 8,79 (s) , 7,75-8,61 (m) , 7,10 (s) , 5,55 (s) , 3, 90-4, 37 (m) , 3,86 (s) , 3,54 (s) , 2,11-2,23 (m) , 0,95 (t) . ESI/MS (m/z) esperado 519, encontrado 520 (M+H).
Estabilidade da ligação éster de DPT-peptídeo e 12 foram dissolvidos em tampão de PBS (pH 7,4) à temperatura ambiente para se preparar uma solução de aproximadamente 500 gg/mL. Esta solução foi ainda mais diluída em H3PO4 a 8,5% até 10 pg/mL. A taxa de hidrólise foi analisada empregando-se HPLC equipado com uma coluna RP (fase inversa) Cl8 e um detetor de fluorescência empregandose um tampão de acetonitrila/fosfato de potássio a 50/50 (v/v) (pH 4,1). 0 pico de 11 (ou de 12) e a CPT liberada (em forma de lactona) foram integrados. A estabilidade da ligação éster na solução aquosa é dependente do comprimento do peptídeo. Assim a taxa de liberação de medicamento (taxa
140 de hidrólise) pode ser modulada, ajustando-se o comprimento do peptídeo. Veja Figura 2.
Estabilidade de Lactona de CPT, 11 e 12 em Solução Salina
Tamponada com Fosfato (PBS)
CPT, 11 ou 12 foi dissolvido em DMSO a 1 mg/mL, sendo então diluído até 1 pg/mL com PBS (1 x, pH 7,4).
Injetaram-se 30 pL de solução em HPLC à temperatura ambiente a intervalos de tempo selecionados. A área pico da forma CPT lactona de CPT, 11 ou 12) foi integrada ίο A velocidade da abertura de anel de lactona para
11, 12 e CPT foi estudada em tampão PBS (pH 7,4). Tanto 11 como 12 foram muito estáveis contra a abertura do anel e nenhuma forma carboxilato de 11 e 12 foi detectada durante todo o estudo (7 horas) . Por outro lado, mais de 60% da de
CPT lactona foram transformados na sua forma carboxilado durante o mesmo período de tempo (Veja Figura 3).
Exemplo 13:
Síntese de Lys(Bis CBZ)-CPT 13
Esquema XXVII
Figure BRPI0314042B1_D0092
Figure BRPI0314042B1_D0093
Figure BRPI0314042B1_D0094
141
Figure BRPI0314042B1_D0095
Dissolveu-se N,N-BisCBZ-Lisina (311 mg, 0,75 mmol) em 56 mL de cloreto de metileno a temperatura ambiente. A esta solução acrescentou-se DIPC (0,12 mL, 0,75 mmol), DMAP (0,61 mg, 0,5 mmol) e camptotecina (0, 087 g, 0,25 mmol) a 0°C. Deixou-se que a mistura de reação se aquecesse até a temperatura ambiente e deixou-se repousar durante 16 h. A solução foi lavada com HC1 a 0,IN, secada e fez-se evaporar a pressão reduzida, obtendo-se um sólido amarelo claro que foi recristalizado a partir de metanol, obtendo-se camptotecin-20-éster de N,N-BisCBZ-Lys 13. A purificação de 13 foi satisfatória com base em análise de TLC e HPLC.
A hidrólise de 13 em solução aquosa é muito lenta e não pode ser detectada empregando-se HPLC equipada com um detetor de UV. A velocidade de hidrólise da ligação éster da CPT-linker de peptideo pode ser modulada não somente por ajuste do comprimento do peptideo, conforme mostrado no Exemplo 12, mas também empregando-se diferentes aminoácidos ligados diretamente ao 20-OH de CPT.
A transformação da forma lactona em foram carboxilato de CPT e 13 foi também testada em tampão PBS. Foi constatado que a transformação da forma lactona em forma carboxilado do composto 13 era muito mais lenta do que a da CPT livre, indicando que a forma de lactona (forma ativa do medicamento) pode ser estabilizada pela formação de um éster com o -OH de CPT na sua posição 20 (Veja Figura 4)
142
Figure BRPI0314042B1_D0096
Exemplo 14;
Síntese Lys-Gly-CPT 14 é dissolvido em clorofórmio. N,N-Dioc-Lys-NH (1,0 eq) é acrescentado, sendo seguido por trietilamina (1,0 eq.) A mistura é agitada à temperatura ambiente durante 16 horas e extraída duas vezes com água, sendo então secada com MgSCh. O solvente é removido sob alto vácuo, obtendo-se N,NDiBoc-Lys-Gly-CPT. A este composto acrescentou-se uma mistura de igual volume de CH^Cl? e TEA e agita-se à temperatura ambiente durante 1 h. O solvente é então removido a vácuo. 0 resíduo é redissolvido em CHCI3. Acrescenta-se éter à solução para extrair o produto 14. O precipitado é lavado diversas vezes com éter, sendo então secado a vácuo. Ele é purificado empregando-se cromatografia de coluna com gel de silica, obtendo-se 14 na forma de sal puro de TFA.
Exemplo 15:
Síntese de Suc-Gly-CPT 15
Uma solução de anidrido succínico é misturada com 11 (1 eq.) em CHC13 seco na presença de uma quantidade catalítica de DMAP e DIEA (1 eq.) . A mistura é agitada à temperatura ambiente durante 24 horas, obtendo-se 15. 15 é purificado por cristalização.
Exemplo 16:
Síntese de Glu-Suc-Gly-CPT 16 é convertido no seu éster de NHS empregando-se método DCC/NHS tradicional. Faz-se então o éster NHS de 15 reagir com ácido glutâmico (1,0 eq.) em DMSO na presença de
143 trietilamina. A solução é acrescentada a éter para precipitar 16. 16 é purificado por cristalização.
Exemplo 17:
Síntese de Glu-Bis(GlyCPT) 17 e Boc-Glu(NHS)-NHS (0,4 3eq.) são misturados em CHCI3 sob argônio antes de se acrescentar trietilamina (1 eq.) à mistura. A solução é agitada à temperatura ambiente durante 16 h e em seguida lavada com água ácida. A fase orgânica é secada e em seguida o solvente é removido a vácuo. O composto resultante é purificado empregando-se cromatografia de coluna de gel de silica. O composto purificado é então dissolvido em uma mistura de volume igual de TFA e CH^Cl?. A mistura é agitada à temperatura ambiente durante 1 h, sendo então vertida em éter. O precipitado 17 é lavado com éter e secado a vácuo.
Exemplo 18:
Síntese de Ciclodextrina-Camptotecina 18
Esquema XXVIII
Figure BRPI0314042B1_D0097
Submeteu-se CPT (197 mg, 0,566 mmol) a vácuo durante 30 minutos. Acrescentou-se clorofórmio seco (100 mL) sob argônio. Acrescentou-se fosgênio (1,34 mL, solução a 20%
144 em tolueno) a 0°C. 0 banho de gelo foi removido e a solução foi aquecida até a temperatura ambiente. Duas horas mais tarde removeu-se o solvente a alto vácuo. Acrescentou-se DMSO seco (50 mL) ao resíduo, e em seguida 200 mg de CD-NH? (Cyclodextrin Technology, Inc.) e trietilamina (4 mL, excesso). 16 horas mais tarde, a solução foi vertida em 200 mL de éter. 0 precipitado foi lavado com éter exaustivamente e em seguida secado. Obteve-se 167 mg de pó amarelo (18) (62% de rendimento). A análise TLC (gel de silica) de 18: Rf = 0 (revelado com CHCl3/MeOH v/v = 5/1) . A análise TLC de CPT: Rf = 0,65 (revelado com CHCl3/MeOH v/v = 5/1).
Solubilidade >10 mg/mL em água. Isto indica que a solubilidade de CPT em água pode ser substancialmente aumentada quando ele é ligado por covalência à molécula de ciclodextrina (hidrossolubilidade de CPT livre < 0,004 mg/mL).
Exemplo 19:
Síntese de Copolímero de CDDC-Dianidrido 19, 21 e do seu conjugado com CPT 20,22
Esquema XXIX
145
Figure BRPI0314042B1_D0098
N. do T. Veja formula na página 98
A: Dianidrido tetracético de etilenodiamina (35,6 mg, 0,1 mmol) e CDDC (3, 125,3 mg, 0,1 mmol) foram dissolvidos em 2 mL de DMSO seco. A solução foi aquecida a
50°C durante 72 h. Acrescentou-se água à mistura, e em seguida acrescentou-se NaOH a IN até um pH de aproximadamente 12. O polímero foi submetido a diálise em membrana de MWCO 10.000 durante 24 h. Foi observada precipitação na membrana de diálise. O sólido foi removido e a solução restante foi 10 novamente submetida a diálise em membrana de MWCO 10.000 durante 24 h. Obteve-se depois da liofilização um pó branco 19 (75 mg) .
é acrescentado à solução de polímero (19)/DMSO na presença de EDC (2 eq.), NHS (1 eq.) e de DIEA (1,0 eq.).
A solução foi agitada durante 16 h sendo então vertida em
146
Figure BRPI0314042B1_D0099
éter. O precipitado é lavado com CHpCl? exaustivamente até não ser observado nenhum medicamento livre na solução de lavagem. 0 composto 20 é obtido depois de secar a alto grande vácuo.
B: Dianidrido pentacético de dietileno-triamina (8,5 mg, 0, 024 mmol) e CDDC, 3 (30 mg, 0, 024 mmol) foram dissolvidos em l-metil-2-piridinona (2 mL).
A mistura foi agitada a 64°C durante 4 dias, sendo então submetida a diálise em membrana MWCO 10.000 durante 2 dias. Obteve-se depois da liofilização um pó branco 21 (3 mg).
é acrescentado à solução de polímero (21/DMSO na presença de EDC (2 eq.), NHS (1 eq.) e DIEA (1,0 eq.). A solução é agitada durante 16 horas, sendo então precipitada em éter. 0 precipitado é lavado exaustivamente com CH^Cl? até não ser observado nenhum medicamento livre na solução de lavagem. O composto 22 é obtido depois de secar a alto vácuo.
Exemplo 20;
Síntese de Copolímero de CCD-Cys 23 e seu conjugado com CPT 24
Esquema XXX
Figure BRPI0314042B1_D0100
COOH
Figure BRPI0314042B1_D0101
COOH
Figure BRPI0314042B1_D0102
TFA-GfrCPT
Figure BRPI0314042B1_D0103
AIV-CPT
147
Dissolveram-se CCD 1 (141,3 mg, 0,1 mmol) e cistina (24 mg, 0,1 mmol) em DMSO seco (0,3 Ml) e piridina (0,1 Ml). A mistura foi agitada sob argônio de um dia para o outro a 72°C. Acrescentou-se água (10 Ml). O precipitado foi filtrado e o filtrado foi submetido a diálise em membrana de 10.000 MWCO (Spectra/Por 7) durante 48 h. Foi obtido um pó branco 23 (8 mg).
é misturado com 23 em DMSO. Acrescentou-se EDC (2 eq.), NHS (1 eq.), e DIEA (1,0 eq.) à solução. A solução foi agitada durante 16 h, sendo então precipitada com éter. O precipitado foi lavado exaustivamente com CH2C12 até não ser observado nenhum medicamento livre na solução de lavagem. O composto 24 foi obtido depois de secar a grande vácuo.
Exemplo 21:
Síntese de Copolimero de CD-BisGlu-Diamina 25 e seu conjugado com CPT 26
Esquema XXXI
Figure BRPI0314042B1_D0104
Figure BRPI0314042B1_D0105
Figure BRPI0314042B1_D0106
CD-Bis(éster γ-benzílico do ácido glutâmico) 6 e etileno-glicolbis-etilamina são dissolvidos em DMSO seco
148
Acrescenta-se EDC (3 eq.) e Sulfo-NHS (2 eq.) à mistura. Agita-se a solução sob argônio durante 2 dias à temperatura ambiente. A solução é então transferida a uma membrana de diálise de 10.000 MWCO e submetida a diálise durante 48 horas. Depois da liofilização obtém-se um pó branco. O sólido é então dissolvido em mistura de solventes DMSO e metanol e tratado com H? na presença do catalisador Pd a 10%/C durante 24 horas. A solução é vertida em éter para extrair o produto. 25 é obtido depois de se secar a vácuo.
11 é misturado com 25 em solução de DMSO.
Acrescentam-se EDC (2 eq.), NHS (1 eq.) e DIEA (1,0 eq.) à solução. A solução é agitada durante 16 horas, precipitandose então com éter. 0 precipitado é lavado com CHíCI? exaustivamente até não ser observado nenhum medicamento livre na solução de lavagem. Obtém-se o composto 26 depois de se secar a grande vácuo.
Exemplo 22:
Síntese de Polímero CDDM-Lys(GlyCPT) 27
Esquema XXXII
Figure BRPI0314042B1_D0107
Figure BRPI0314042B1_D0108
Figure BRPI0314042B1_D0109
OCFT
149
CDDM, 5, e Lys-Gly-CPT, 14, são dissolvidos em
DMSO seco, EDC (3 eq.) e Sulfo-NHS (2 eq.) são acrescentados à mistura. Agitou-se a solução sob argônio durante 2 dias à temperatura ambiente. A solução é então vertido em éter. 0 precipitado 27 é secado a vácuo.
Exemplo 23:
Sintese de Copolímero CDDC-Cys(Boc) 28, Copolimero CDDC-Cys e seu Conjugado com CPT 30
Esquema XXXIII
Figure BRPI0314042B1_D0110
Figure BRPI0314042B1_D0111
Figure BRPI0314042B1_D0112
Figure BRPI0314042B1_D0113
Figure BRPI0314042B1_D0114
CDDC (3) e N, N-DiBoc-Cistina são dissolvidos em
DMSO seco. EDC (3 eq.) e Sulfo-NHS (2 eq.) foram acrescentados à mistura. A solução foi agitada sob argônio durante 2 dias à temperatura ambiente. A solução foi então transferida a uma membrana de diálise de 10.000 MWCO e 15 submetida a diálise durante 48 horas. Depois de liofilização obteve-se um pó branco, polímero CDDC-Cys(Boc), 28. A este pó branco 28 acrescentou-se uma mistura de HC1 e solução de
DMSO. A solução foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora, e submeteu-se então as diálise contra água durante 24 horas empregando-se membrana de MWCO 10.000. Obteve-se 29 em forma de um sólido branco.
Suc-Gly-CPT 15 é misturado com 29 em solução de
DMSO. EDC (2 eq.), NHS (1 Eq.), e DIEA (1,0 eq.) são
acrescentados à solução. Agita-se a solução durante 16 h sob
argônio precipitando-se então com éter. O precipitado é lavado co éter até não ser mais observado nenhum medicamento livre na solução de lavagem. Obtém-se o composto 30 depois de secar a grande vácuo.
Exemplo 24:
Síntese de Polímero de CD-Polifosfoéster 1 e seus conjugados a CPT 2
Esquema XXXIV
Figure BRPI0314042B1_D0115
AKiso-fiu)
Figure BRPI0314042B1_D0116
Figure BRPI0314042B1_D0117
O-4/Λ
Figure BRPI0314042B1_D0118
A síntese do polifosfoéster biodegradável pode ser encontrada em Wang J. et al., JACS, 2001, 123, 9480-9481.
O polifosfoéster é misturado com 10 (0,5 eq. de unidades repetidas) em DMSO, EDC (2eq.), NHS (12 eq.) e DIEA (1,0 eq.) são acrescentados à solução. A solução é agitada durante 16 horas, sendo então precipitada com éter. O CDpolifosfoéster 31 é dissolvido em DMSO. À solução acrescen
151 tou-se 11 (0,5 eq. de unidades repetidas), EDC (2 eq.), NHS (1 eq.) e DIEA (1,0 eq.). A solução é agitada durante 16 horas, sendo então precipitada com éter. O precipitado é lavado exaustivamente com éter até não ser observado nenhum medicamento na solução de lavagem. 0 composto 32 é obtido depois de secar a alto vácuo.
Exemplo 25:
Síntese de conjugado Copolimero CD-CPT 33 com estrutura de polietileno por meio de polimerização radical
Esquema XXXV
Figure BRPI0314042B1_D0119
Os monômeros acrilato de CPT, monometil éter trietileno glicólico e CD-monocistamina podem ser sintetizados a partir de N-acrilóxi-succinimida (Polysciences, Inc.). Estes monômeros são misturados numa relação de 1:1:1 em DMSO 15 seco. Acrescenta-se AIBN à mistura sob argônio. A solução é agitada à temperatura ambiente durante 24-48 horas até a solução se tornar viscosa. O conjugado polímero-CPT 33 é precipitado com éter e secado a vácuo.
152
Exemplo 26;
Síntese de CD-enxerto-poli(etileno-alt-anidrido maléico)GlyGlyGly CPT 34
Esquema XXXVI
Figure BRPI0314042B1_D0120
Figure BRPI0314042B1_D0121
O poli(etileno-alt-anidrido maléico) (Aldrich) é dissolvido em DMSO. 10 (0,4 eq. da unidade repetida) e 12 (0,4 eq. da unidade repetida) são acrescentados. A solução é aquecida a 70°C durante 16 horas, sendo então precipitada com éter. O CD-enxerto-poli(etileno-alt-anidrido maléico)10
GlyGlyGlyCPT 34 é secado a alto vácuo.
Exemplo 27:
Síntese do Conjugado Poliglutamato-CD-CPT 35
Esquema XXXVII
153
Figure BRPI0314042B1_D0122
Mistura-se poliglutamato (de SigmaAldrich) com 10 (0,5 eq. de unidade repetida) e 11 (0,5 eq. de unidade repetida) em DMSO. EDC (3 eq.), NHS (2 eq.) e DIEA (1,0 eq.) são acrescentado à solução A solução é agitada durante 16 horas, sendo então precipitado com éter. Depois de secar a alto vácuo, obtém-se o conjugado poliglutamato-CD-CPT 35.
Exemplo 28:
Sintese e Caracterização de Copolimeros CD-BisCys-Peg3400 36 e seus Conjugados com CPT 37.
A. Síntese e Caracterização dos Copolimeros CDBisCys-Peg3400 36
Esquema XXXVIIIa
Figure BRPI0314042B1_D0123
Figure BRPI0314042B1_D0124
Figure BRPI0314042B1_D0125
PEG-DiSPA (MW = 3400 Da)
DMSQ/DIEA, TEA ou DMAP
Figure BRPI0314042B1_D0126
36 a-f
Poli(CDDCys-PA-Peg
Abr.PA = ligação propanoicamida entre PEG e CD
154
Figure BRPI0314042B1_D0127
Esquema XXXVIlib
Figure BRPI0314042B1_D0128
Figure BRPI0314042B1_D0129
PEG-OSBA ÍMW = 3496 Da)
Figure BRPI0314042B1_D0130
Figure BRPI0314042B1_D0131
Figure BRPI0314042B1_D0132
PEG-DÍSTC (KW = 3406 Ds)
Figure BRPI0314042B1_D0133
PEG-D2SPC (W = 34ÕÍ Da)
Figure BRPI0314042B1_D0134
Psiy(£DDCys-CB-?EG) f
36i a= ?oI-y(CDDCyi-CB-?EC??
Abbr: BA= ligação butanoicamida; CD = ligação carbamato
Síntese de Poli(CDDCys-PA-PEG), 36a: Secou-se 4 (depois de precipitação com acetona, 63 mg, 0,047 mmol) e PEG-DiSPA (peso molecular 3400, 160 mg, 0,047 mmol) a vácuo 5 durante 8 horas. Acrescentou-se DMSO anidro (1,26 mL) à mistura sob argônio. Depois de 10 minutos de agitação, acrescentou-se diisopropiletilamina anidra (DIEA, 19 pL, 2,3 eq.) sob argônio. A mistura de reação foi agitada sob argônio durante 120 h. A solução contendo o polímero foi 10 submetida a diálise empregando-se uma membrana de MWCO 10.000 (Spectra/Por 7) contra água durante 48 h e liofilizada obtendo-se 196 mg de 36a (90%, Tabela 1) . Mw= 57,4 kDa, Mn = 41,7 kDa, Mw/Mn = 1,38. RMN 1H (D2O) δ 5,08 (m, CD-2-H) , 4,27 (m, Cys-CH) , 2,72-3, 76 (m, CD-3,4,5, 6-CH, CD15 CH2, PEG-CH2), 2,44 (m, Cys-CH2) .
155
A síntese de outros poli(CDDCys-PA-PEG) (36b-f), Poli(CDDCys-BA-PEG) (36 g) Poli(CDDCys-CB-PEG) (36h-i) foram obtidos em condições de polimerização análoga à de 36a. Os detalhes para as condições de polimerização, seleção de monômeros, peso molecular dos polímeros, polidispersabilidade e rendimentos são relacionados na tabela 1. 36g: RMN 1H
(D2O) δ 5,10 (M, CD-2-H), 4,25-4,37 (m, Cys-CH) , 2,72-3,86
(m, CD-3,4,5,6-CH , CD-CH2, PEG-CH2) , 2,21 (m, Cys-CH2) . 36h-
i: RMN XH (D20) δ 5,05 (m, CD-2-H), 4,56 (m, Cys-CH), 2,70-
3,93 (m, CD-3,4,5,6-CH, CD-CH2, PEG-CH2) , 2,38 (m, -OCH2CH2 CH2C (Ο)-NH-) , 2,34 (m, Cys-CH2) , 1,90 (m, -OCH2CH2CH2C (Ο)-NH-) .
A adição de uma base orgânica não-nucleófila (tal como DIEA) foi essencial para esta polimerização, uma vez que não foi observada nenhuma alteração na viscosidade das soluções de polimerização depois de 48 horas quando não tinha sido acrescentada nenhuma base. Quando foram acrescentados 2,3 eq. de DIEA, a viscosidade da solução de polimerização aumentou dramaticamente depois de 4-6 horas de reação. 0 DIEA desprotona os grupos amino de 4, tornando-os mais nucleófilos para acoplamento com PEG-DiSPA. Não havia essencialmente nenhuma diferença nas polimerizações se outras bases, tais como TEA ou DMAP fossem usadas (36b-c, Tabela 1) . A polimerização empregando 4 recuperado pelos dois métodos de precipitação diferentes (acetona e metanol) produziu polímeros com pesos moleculares diferentes. 4 que foi purificado pelo método de precipitação por metanol (não contém nenhuma cistina livre) resultou em um polímero com peso molecular mais alto (36d-e) em comparação com o 4 menos
156 puro que foi obtido pelo método de precipitação por acetona (36a). A polimerização de 4 com PEG-DiSPA tipicamente resulta em rendimentos de polímeros acima de 90%.
foi polimerizado com outros monômeros ativados tais como PEG-DiSBA, PEG-DiBTC e PEG-DiNPC. A reação de 4 com PEG-DiSBA deu como resultado o polímero 36b com ligações análogas às de 36a-f (ligação amido, mas um grupo -CH2 mais do que 36a-f no linker) com Mw acima de 100 kDa, ao passo que a reação de 4 com PEG-DiBTC e PEG-DiNPC gerou polímeros 10 36h e 36i, respectivamente, com porção de ligação carbamato e Mws acima de 50 kDa (Tabela 1).
Tabela 1
Polimerização de 4 com PEG difuncionalizado
CPD Comonômero PEG Base Tempo de Polimerização (h) Mw (kDa) Mn (kDa) Mw/Mn Rendimento (%)
36aa PEG-DiSPA DIEA 120 57,4 41,7 1,38 90
36ba PEG-DiSPA DMAP 120 54,2 38,1 1,42 91
36ca PEG-DiSPA TEA 120 57,4 42,6 1,35 91
36db PEG-DiSPA DIEA 120 93,6 58,0 1,48 96
36eb PEG-DiSPA DIEA 144 97,3 58,0 1,67 94
36fb PEG-DiSPA DIEA 2 35,3 25, 6 1,38 95
36g PEG-DiSPA DIEA 120 114,7 77,9 1,47 96
36h PEG-DiBTC DIEA 120 67,6 39, 4 1,47 95
36i PEG-DiNPC DIEA 120 86,5 57,2 1,51 96
a 4 foi lavado com acetona antes da polimerização b 4 foi lavado com metanol antes da polimerização
157
Os polímeros 36a-i são extremamente solúveis em solução aquosa. Eles podem ser facilmente dissolvidos em água ou solução salina tamponada com fosfato (PBS) a concentrações de pelo menos 200 mg/mL. A solubilidade destes polímeros em solução aquosa a concentrações acima de 200 mg/mL não foi tentada devido à grande viscosidade. Estes polímeros são também solúveis em DMF, DMSO e metanol, ligeiramente solúveis em CH3CN e CHC13 mas insolúveis em THF e éter etílico.
Controle do Peso Molecular dos Polímeros de CD. 4 (depois da precipitação com metanol) (5,2 mg, 0,0419 mmol) e PEG-DiSPA (147 mg, 0,0419 mmol) foram secados a vácuo durante 4-8 horas. À mistura acrescentou-se DMSO seco (1,1 mL) sob argônio. Depois de 10 minutos de agitação acrescentou-se DIEA (16 pL, 2,22 eq.) sob argônio. Uma porção da solução de polimerização (150 pL) foi removida e precipitada com éter a tempos selecionados (2 h, 18 h, 43 h, 70 h, 168 h, e 288 h) . Os pesos moleculares dos polímeros precipitados foram determinados do modo descrito acima.
Conforme mostrado nas Figuras 5a e 5b, os pesos moleculares de 36 podem ser controlados ajustando-se o tempo de polimerização.
Β. Síntese de Conjugados Poli(CDDCys-PA-PEG)CPT (HGGG6, LGGG10, HG6, HGGG10)
158
Esquema XXXIX
Figure BRPI0314042B1_D0135
Síntese de Poli(CDDCyS-PA-PEG)-GlyGlyGly-CPT (HGGG6) Dissolveu-se 36e (l,37g, 0,30 mmol de unidade repetida)em
DMSO seco (136 mL). A mistura foi agitada durante10 minutos. 12 (419 mg, 0,712 mmol, 2,36 eq.), DIEA (0,092 mL,
0,712 mmol, 2,36 eq.), EDC ( (172 mg, 0,903 mmol, 3 eq.)e
NHS (76 mg, 0, 662 mmol, 2,2 eq. ) foram acrescentados à solução polimérica e agitados durante aproximadamente 15
horas . 0 polímero foi precipitado com éter etílico (1 L) . , 0
éter foi vertido fora e o precipitado foi lavado com ch3 CN
10 (3 x 100 mL) . 0 precipitado foi dis solvido em 600 mL de
água. Parte do ; sólido insolúvel foi filtrado através de
filtros de 0,2 pm. A solução foi submetida a diálise
159 empregando-se membrana de 25.000 MWCO (Spectra/Por 7) durante 10 h a 10-15°C em água DI; A água da diálise foi mudada a cada 60 minutos. A solução do conjugado polimeromedicamento foi esterilizada fazendo-se passar a mesma através de filtros de 0,2 pm. A solução foi liofili-zada, obtendo-se um sólido amarelo HGGG6 (1,42 g, rendimento de 85%) .
Síntese de Poli(CDDCys-PA-PEG)-GlyGlyGly-CPT (LGGG10) A conjugação de 12 a 36f foi conduzida de um modo análogo ao usado para produzir HGGG6 exceto que este conjugado foi submetido a diálise com membrana de 10.000 MWCO (Spectra/Por 7) em vez de ser com membrana de 25.000 MWCO. O rendimento de LGGG10 foi de 83%.
Síntese de Poli(CDDCys-PA-PEG)-Gly-CPT (HG6) A conjugação de 1 a 3 6e foi conduzida de modo análogo ao empregado para produzir HGGG6. O rendimento de HG6 foi de 83%.
Síntese de Poli(CDDCys-PA-PEG)-GlyGlyGly-CPT (HGGG10) 36e (1,5 g, 0,33 mmol da unidade repetida) foi dissolvido em DMSO seco (150 Ml). A mistura foi agitada durante 10 minutos. 12 (941 mg, 1,49 mmol, 4,5 eq. ) , DIEA (0,258 mL, 1,49 mmol, 4,5 eq.), EDC (283 mg, 1,49 mmol, 4,5 eq.) e NHS (113 mg, 0,99 mmol, 3 eq. ) foram acrescentados à solução polimérica e agitados durante aproximadamente 24 horas. Uma outra porção de EDC (142 mg, 0,75 mmol, 2,3 eq.) e NHS (56 mg, 0,5 mmol, 1,5 eq.) foram acrescentados à solução de conjugação. O polímero foi agitado durante outras 22 horas.
160
Figure BRPI0314042B1_D0136
O procedimento de preparação foi o mesmo que o usado para a síntese de HGGG6. O rendimento de HGGG10 foi de 77%.
Determinação de % em peso de CPT nos conjugados Solução de estoque de HGGG6, LGGG10, HG6 e HGGG10 foram preparadas a uma concentração de 10 mg/mL em DMSO. Uma alíquota da solução de estoque correspondente foi diluída até 100 pg/mL empregando-se NaOH a IN. CPT foi completamente hidrolisado nesta solução básica e transformado na sua forma de carboxilato dentro de 2 h à temperatura ambiente, uma alíquota desta solução foi diluída até 10 pg/mL empregandose H3PO4 a 8,5%, e CPT na forma de carboxilato foi transformado na sua forma de lactona. 30 pL desta solução foram injetados na HPLC. A área de pico proveniente de CPT na forma de lactona foi integrado e comparado a uma curva padrão.
e 12 foram conjugados a 36e ou 36f (Tabela 2) empregando-se métodos de acoplamento convencionais. Devido à instabilidade do linker éster de 11 e 12 em solução aquosa, a conjugação foi conduzida em DMSO anidro sob argônio. Uma base orgânica era necessária para desprotonar os sais de TFA de 11 e 12 para facilitar o acoplamento. Para a conjugação do polímero com 12, a porcentagem em peso (% em peso) do carregamento do medicamento variou aproximadamente de 6-10%. A carga teórica máxima do medicamento é de aproximadamente 13% empregando-se PEG com peso molecular de 3400 Da; os valores máximos podem ser aumentados reduzindo-se o peso molecular dos segmentos de PEG. As solubilidades de todos os conjugados em água ou em PBS eram acima de 2 00 mg/mL
161 (equivalente a 12-20 mg de CPT/mL para uma carga de medicamento de 6-10% em peso, respectivamente). Detalhes para HGG6, LGGG10, HG6 e HGGG10 estão resumidos na Tabela 2.
Tabela 2
Propriedades dos conjugados polímero-CPT
Conjugado3 Mw do polímero progenitor (x 10’3) Mw/Mn b Linker CPT (% em peso)
HGGG6 97 1,7 Triglicina 6,1
LGGG10 35 1, 6 Triglicina 10,2
HG6 97 1,7 Glicina 6, 8
HGGG10 97 1,7 Triglicina 9, 6
Abreviaturas: H = Polímero de alto Mw (97 kDa), L = Polímero de baixo Mw (35 kDa), GGG = linker de triglicina, G = linker de glicina, 6 = carregamento de medicamento de aproximadamente 6% em peso, 10 = carregamento do medicamento de aproximadamente 10% em peso
Polidispersabilidade do polímero conforme medida por técnicas de dispersão de-luz· (-26) .
C. Liberação de CPT de HGGG6 e de HG6
Liberação de CPT em PBS. HGGG6 e HG6 foram preparados a 1 mg/mL em PBS (1 x, pH 7,4). Uma alíquota de 100 pL da solução foi transferida para um tubo Eppendorf de 10 1,5 mL e incubada a 37 °C. As amostras incubadas foram extintas a intervalos de tempo selecionados e armazenadas a -80°C até a análise. Cada solução foi diluída com H3PO4 até um volume total de 5 mL em um frasco volumétrico. 30 pL de tal solução foram injetados na HPLC. A área de pico da CPT 15 em forma de lactona foi integrada e comparada a uma curva padrão.
162
As análises para a liberação de CPT de HGGG6 e HG6 em PBS contendo acetil colinesterase (uma esterase, 100 unidades/mL) em tampão de KH2PO4 (pH 6,1, O,1M) e no tampão de KH2PO4 (pH 6,1, O,1M) contendo catepsina B (uma cisteina proteinase, 200 pm, pré-ativada sobre gelo durante 30 minutos neste tampão contendo DTT a 2 mM e EDTA a 1 mM) foram conduzidas de um modo análogo ao descrito acima para PBS sozinha.
Liberação de CPT em Plasma Humano. Uma alíquota de solução estoque de cada um de HGGG6 e HG6 foi diluída até uma concentração final de 0,5 mg/mL em PBS (1 x, pH 7,4). Esta solução foi acrescentada a um pó liofilizado de plasma humano para reconstituir plasma humano a 100% pela quantidade recomendada. A solução foi dividida em volume igual (250 pL) em tubos Eppendorf de 1,5 mL, incubada a 37°C e extinta a ponto selecionado no tempo. As amostras foram armazenadas a -80°C até a análise. As amostras foram separadas do plasma por colunas de extração de fase sólida. O cartucho de extração de fase sólida (cartucho Oasis HLB de 1 cc de Waters) foi pré-condicionada com 1 mL de acetonitrila e em seguida com 1 mL de H3PO4 a 8,5% antes de ser carregada. As amostras foram acidifiçadas com volume igual de H3PO4 a 8,5% antes de serem carregadas. Depois da solução acidificada ter sido carreada no cartucho o leito foi lavado com 3 x 1 mL de água. A CPT liberada e o conjugado polimérico foram eluídos com 3 x 1 mL de uma mistura de soluções de acetonitrila e tampão de fosfato de potássio (pH 4,1) (v/v 60/40). A solução eluida foi diluída
163 até um volume total de 5 mL em um frasco volumétrico de 5 mL. 30 pL de cada solução foram injetados na HPLC. A área de pico da CPT na forma de lactona foi integrada e comparada a uma curva padrão.
A liberação de CPT de HGGG6 e de HG6 em PBS contendo 4% de plasma humano (PBS/solução de plasma humano reconstituído - 96/4 (v/v)), em plasma murino e em albumina humana reconstituída (solução em PBS) foram conduzidas de um modo análogo ao descrito acima para o plasma humano puro.
Em PBS (1 x, pH 7,4), as meias-vidas (ti/3) para a liberação de CPT de HG6 e HGGG6 forma de 59 h e 32 h, respectivamente. As meias-vidas caíram para 25 h e 22 h, respectivamente, na presença de plasma humano a 4% e para 1,7 h e 1,6 h, respectivamente em plasma humano a 100% (HP) e para 2,6 h e 2,2 h respectivamente, em plasma murino a 100% (MP) . As taxas de liberação de CPT tanto de HG6 como de HGGG6 na presença de albumina (Alb) ou de acetil colinesterase (Ac Co) forma da mesma ordem de magnitude como em PBS. Em uma solução tampão a um pH inferior ao de PBS (pH 6,1) com ou sem a enzima catepsina B (ativa a pH 6,1) menos de 50% do total de CPT conjugado foram liberados tanto de HG6 como de HGGG6 para tempos de até 144 h (Tabela 3).
164
Tabela 3
Meia vida (ti/?, em hora) da liberação de CPT de HG6 e de HGG6a
Conjugado PBS13 4% HPC HP':1 MPe Albf Ac Cho9 pH 6,1 tampãoh Cath B (pH 6,1)1
HG6 59 25 1,7 2,6 62 33 >144 >144
HGGG6 32 22 1, 6 2,2 73 43 >144 >144
ti/2 é definido como tempo (horas) para a liberação da metade do total de CPT conjugado.
Abreviaturas: HP significa plasma humano, MP significa plasma murino
Tampão PBS lx, pH 7,4.
Plasma humano reconstituído misturado com PBS (v/v = 4/96).
Plasma humano reconstituído
Plasma murino fresco
Em tampão de PBS com albumina humana reconstituída
Na presença de acetil colinesterase em solução em PBS (100 unidades/mL) tampão de fosfato pH 6,1 (O,1M) tampão de fosfato pH 6,1 na presença de Catepsina B
Liberação de CPT em Solução a pHs Diferentes.
HGGG6 e HG6 foram preparados em solução tampão a 1 mg/mL com pHs variando de ácido (ph = 1,2) a básico (pH - 13,1) e incubados a 37°C durante 24 h. Uma alíquota de cada solução foi diluída com 8,5% de H3PO4 até aproximadamente 100 pg/mL.
pL de tal solução foram injetados em HPLC. A área de pico da forma de lactona de CPT foi integrada e comparada a uma 10 curva padrão.
O pH da solução aquosa tem um efeito significativo sobre as taxas de liberação de CPT tanto de HG6 como de HGGG6. As quantidades de CPT liberadas de HG6 e HGGG6 a 37°C depois de 24 h em soluções tampão com pHs variando de 1,1 a 15 13,1 são ilustradas na Figura 6. As ligações glicinila-éster
165 de CPT tanto em HG6 como em HGGG6 eram muito estáveis no pH ácido (1,1 a 6,4), uma vez que menos de 7% de CPT foram liberados em 24 h.
IC50 por meio de Ensaio MTT. A linhagem de células A2780 de carcinoma ovariano humano foi obtida da European Collection of Cell Cultures (Salisbury, Wiltshire, Reino unido). As linhagens de células HT29 de adenocarcinoma coloretal humano, PC-3 de carcinoma de próstata humano, e LS174T de adenocarcinoma colônico humano foram obtidas da American Type Cultures Collection (Rockville, MD) . As células foram semeadas em placas de 96 cavidades com 5000 células/cavidade e cultivadas em meio contendo soro fetal bovino a 10% a 37°C durante 24 h em uma atmosfera umidificada de CO? a 5%. O meio foi substituído com meio fresco contendo CPT, 36e, HGGG6 ou HG6 a concentrações variando de 1 nM a 10 pM de CPT e 36e (CPT equivalente para HGGG6 e HG6) . A cada concentração foram tratadas três cavidades por placa. O efeito dos compostos sobre o crescimento celular foi medido por ensaio MTT depois de 72 h. 0 meio foi removido, as células foram enxaguadas com PBS, a solução de MTT foi adicionada a uma concentração de 0,5 mg/mL e as placas foram incubadas durante 4 h a 37 °C. O meio foi removido e os cristais de formazan foram solubilizados em DMSO.A absorvência foi medida a 560 nm empregando-se um leitor de polacas SPECTRAFluor Plus (Tecan, Durham, NC) . A porcentagem de sobrevivência das células foi calculada em relação a células sem tratamento, e os valores de IC50 foram determinados a partir de gráficos de dose por sobrevivência de células. Os
166 dados de ICso de CPT, 36e, HGGG6 ou HG6 estão relacionados na Tabela 4.
Tabela 4
ICr,o de CPT, polímero 36e não conjugado e HG6 e HGGG6 conjugados a CPT em diversas linhagens de células
Linhagem de Células 36e (μΜ) CPT (μΜ) HG6 (μΜ) HGGG6 (μΜ)
LS174T >300 0, 005 0, 050 0,010
HT29 300 0, 020 0,050 0,030
A2780 100 0, 007 0, 025 0, 020
PC3 >300 0, 075 0,25 0,15
Exemplo 29;
Poli-CD-BisCys-Peg3400-Ala-CPT 37
3 6e (54 mg, , 0,012 mmol da unidade repetida) foi
dissolvido em DMSO seco (226 mL) e agitado durante 10
minutos. TFA-Ala-CPT que é preparado de modo análogo ao 11
(15 mg, 0, 028 mmol, 2,36 eq.), DIEA (4,88 mL, 0,028 mmol,
2,36 eq. ) , DCC (24,52 mg, 0,12 mmo1, 10 eq.) e NHS (13,6 mg,
0,12 mmol, 10 eq.) foram acrescentados à solução do polímero. A mistura foi agitada durante aproximadamente 16 horas. O polímero foi precipitado com éter (40 mL) e lavado com éter (2 x 30 mL) e com CH3CN (2 x 10 mL). Ele foi então redissolvido em solução aquosa a pH 4 (10 mL) e submetido a diálise a temperatura ambiente durante 48 h empregando-se membrana de 25.000 MWCO. Fez-se então passar a solução através de um filtro esterilizado de 0,1 pm e liofilizou-se, obtendo-se 37 (46 mg, 85%) . A porcentagem em peso do
167 carregamento do medicamento foi calculada como sendo de 5,5% empregando-se HPLC equipada com um detetor de fluorescência antes de se liberar de CPT de 37 usando-se uma base. CPT livre em 37 constituía < 1%.
Exemplo 30:
Poli-CD-BisCys-Peg3400-Leu-CPT 38
36e (54 mg, 0,012 mmol da unidade repetida) foi
dissolvido em DMSO seco (226 mL) e agitado durante 10
minutos. TFA-Leu-CPT que é preparado de modo análogo a 11
(16 mg, 0, 028 mmol, 2,36 eq.), DIEA (4,88 mL, 0, 028 mmol,
2,36 eq.), DCC (24,52 mg, 0,12 mmol, 10 eq.) e NHS (13,6 mg, 0,12 mmol, 10 eq.) foram acrescentados à solução do polímero. A mistura foi agitada durante aproximadamente 16 horas. O polímero foi precipitado com éter (40 mL) e lavado com éter (2 x 30 mL) e com CH^CN (2 x 10 mL) . ele foi então redissolvido em solução aquosa de pH 4 (10 mL) e submetido a diálise à temperatura ambiente durante 48 h, empregando-se membrana de 25.000 MWCO. Fez-se então passar a solução através de um filtro esterilizado de 0,1 pm e liofilizou-se obtendo-se 38 (42 mg, 78%). A porcentagem em peso do carregamento com medicamento foi calculada como sendo de 5,0% empregando-se HPLC equipada com um detetor de fluorescência depois da liberação de CPT de CPT empregandose base. CPT livre em 38 era < 1%.
Exemplo 31:
Síntese de CD-BisCys-BisPeg-FITC 39
Esquema XXXX
168 ιιο'^ο
Figure BRPI0314042B1_D0137
(25 mg, 0,0186 mmol) e FITC-Peg5000-NHS (Shearwater
186 mg, 0,0373 mmol) foram dissolvidos em DMSO seco (2 mL). DIEA (,0094 mL, 0,056 mmol, 3 eq.) foi acrescentado à mistura. A mistura foi mantida no escuro e agitada durante 24 horas.
Acrescentou-se então água (10 Ml) e a solução foi submetí da a diálise no escuro empregando-se 10.000 MWCO durante aproximadamente 48 horas. Depois da liofilização obteve-se um polímero amarelo 39. O polímero foi caracterizado por EM e RMN 1H.
Exemplo 32:
Síntese de Bis-succinimidil succinato Peg3400 (Bis-SS-PEG) (40a) e CD-Bis-Cys-SS-Peg3400 biodegradável (40b)e o seu conjugado a CPT 41
Esquema XXXXI
HO' .OH
40b
Deç i-itUMe ester botiií linknfc
169
Um frasco de fundo redondo de 100 mL equipado com uma barra de agitação magnética e um septo foi carregado com 10 g (2,99 mmol) de polietileno glicol peso molecular 3350, 2,0 g (20 mmol) de anidrido succinico e 50 mL de piridina anidra. Depois de se agitar a solução a 50°C durante 16 h, o solvente foi removido por evaporador rotativo. 0 resíduo foi redissolvido em 30 mL de água e extraído com 10 mL de clorofórmio três vezes. A fase orgânica foi secada sobre MgSOí e filtrada. O solvente foi então concentrado e precipitado fora em éter dietílico. Isto resultou em 9,6 g de bis-succinimidil Peg3400 com um rendimento de 90,6%. O produto foi analisado por Cromatografia Líquida de Alto Desempenho em coluna de fase inversa.
Um frasco de fundo redondo de 100 mL equipado com uma barra magnética de agitação e um septo foi carregado com 2 g (0,56 mmol) de bis-succinimidil Peg 3400 e 10 mL de diclorometano anidro. A esta solução acrescentou-se 0,324 g (2,82 mmol) de N-hidroxil succinimida. A mistura em solução foi então resfriada em um banho de gelo e acrescentou-se 0,58 g (2,82 mmol) de 1,3-diciclo-hexil-carbodimida. Depois de se deixar repousar à temperatura ambiente durante 24 horas, a solução foi filtrada e precipitada fora em 150 mL de éter dietílico. A dissolução em 10 mL de diclorometano e a precipitação em éter dietílico foi repetida duas vezes. Obteve-se assim 1,74 g (82,9%) de Bis-SS-PEG 40a. Ele foi analisado por Cromatografia Líquida de Alto Desempenho em coluna de fase inversa.
170
Polímero CD-BisCys-SS-Peg3400 40b
Um frasco em forma de pérola de 50 mL foi carregado com 100 mg (0, 0746 mmol) de 4 e 254 mg 90, 0746 mmol) de 4 0a. Os sólidos combinados foram secados a vácuo durante 24 horas antes da adição de 1 mL de DMSO anidro e 2,2 equivalente (0,164 mmol) de DIEA. A mistura em solução foi agitada à temperatura ambiente durante 3 dias, sendo então precipitada em éter dietílico. Obteve-se assim 100% de 40b. O peso molecular foi analisado em um sistema HPLC de Hitachi equipado com um detetor Anspec RI, um detetor DLS de Precision Detectors e uma coluna Progel-TSK G3000PWXT1 empregando-se como eluente PBS a 0,lM a uma taxa de fluxo d 0,7 mL.min-1. Mw = 93.000, Mn = 61.000 e Mw/Mn = 1,5.
Conjugado CD-Bis-Cys-SS-pEG3400-GlyGlyGly-CPT 41
40b (201,8 mg, 0,044 mmol de unidade repetida),
TFA-GlyGlyGly-CPT ' T2 ’(6'6' m, ~ 0, 105 mmol, 2, 36 eq.j', EDC (25, 5 mg, 0,133 mmol, 3 eq.) e NHS (11 mg, 0, 0977 mmol, 2,2 eq.) foram dissolvidos em DMSO seco (6 mL) e agitados durante 30 minutos. Acrescentou-se DIEA (19 pL, 0,105 mmol, 2,36 eq.) à solução do polímero. A mistura foi agitada durante aproximadamente 41 horas. O polímero foi extraído com éter dietílico (250 mL) e lavado com acetonitrila (3 x 25 mL) . Ele foi então redissolvido em água de pH 4 (10 mg/mL) e submetido a diálise à temperatura ambiente durante 24 horas empregando-se membrana de 10.000 MWCO. Fez-se então a solução passar através de um filtro esterilizado de 0,2 pm, liofilizando então para se obter 41 (128 mg, 52%). A porcentagem em peso do carregamento de medicamento foi
171 calculada como sendo 6,95% empregando-se HPLC equipado com um detetor de fluorescência depois da liberação de CPT de 41 empregando-se uma base.
A hidrólise de 41 foi ajustada em plasma humano (solução a 100%) a 1 mg/mL. As soluções de alíquotas (100 mL) foram colocadas em tubos eppendorf de 1,5 mL e incubadas em banho de água a 37 °C. Em seguida, as amostras foram acidificadas com 100 pL de H3PO4 a 8,5% e carregadas em cartucho de extração de fase sólida pré-condicionado. Ele foi eluído com tampão de acetonitrila:KH?P04 a 60:40 (v/v) . CPT livre (em forma de lactona) foi analisado em HPLC/detetor de fluorescência empregando-se tampão de acetonitrila/KH?P04. A meia vida foi determinada como sendo de 3 h.
Degradação do Polímero CD-Bis-Cys-SS-Peg3400 40b mg/mL de solução de 40b foram preparados em plasma humano reconstituído em solução de PBS (pH 7,4). Alíquotas de 100 mL foram incubadas a 37°C. Cada tubo de amostra foi tirado em um ponto específico no tempo e extraído em 900 pL de metanol frio. A solução foi centrifugada e o sobrenadante foi analisado em um HPLC/detetor de ELS. O espectro resultante é mostrado na Figura 7.
Métodos para se aumentar a porcentagem de carregamento em peso do medicamento
Método I. Síntese do Copolimero CD-BisCys-Peg com uma ligação Peg curta e seu conjugado com GlyCPT
172
Exemplo 33:
Síntese de CD-BisCys-Peg (PEG curto, Peg200-Peg2000, por exemplo) e o seu Conjugado com CPT 42
Esquema XXXXII
Figure BRPI0314042B1_D0138
A síntese do conjugado de polímero e do medicamento é igual a 36, 376 e 38 no Exemplo 28.
Método II. Síntese do Copolímero CD-BisCys-Peg com uma multiplicidade de moléculas de medicamento em cada sítio de carregamento
Exemplo 34:
Síntese de CD-BisCys-Peg e do seu Conjugado GluBis(GlyCPT) 43
Esquema XXXXIII
173
Figure BRPI0314042B1_D0139
Figure BRPI0314042B1_D0140
e Glu-Bis(Gly-CPT) são dissolvidos em DMSO.
EDC (3 eq.), NHS (2,2 eq.) e DIEA (2,2 eq.) são acrescentados à solução. CD-BisCys-Peg-GluBis(GlyCPT) 43 é precipitado com CH3CN e lavado como mesmo solvente até não ser detectado nenhum medicamento livre empregando-se UV ou TLC. 43 é secado sob alto vácuo.
Exemplo 35:
Síntese de conjugado PEI-CD-CPT 44 (Polímero de CD ramificado com conjugados com CPT)
A; Síntese do polímero ramificado PEI-ciclodextrina
Esquema XXXXIV
174
Figure BRPI0314042B1_D0141
NH
PEI (29 mg, Aldrich peso molecular 25.000) foi dissolvido em DMSO seco (2 mL) . Monotosilato de ciclodextrina (448 mg, Cyclodextrin Technologies Development, Inc.) foi acrescentado à solução sob N?. A solução turva ficou transparente depois da mistura ter sido agitada a 70°C durante aproximadamente hora. A solução ficou ligeiramente amarela depois de 48 horas a tal temperatura sob N?.
A solução foi transferida a uma membrana Spectra/Por MWCO 10.000 e submetida a diálise contra água durante 4 dias. A água foi então removida por liofilização. Obteve-se um pó branco (120-140 mg) depois da solução ter sido liofilizada. A relação ciclodextrina/PEI foi calculada com base na integração de prótons de RMN XH.
B: Síntese de conjugado ramificado PEI-CD-CPT
Esquema XXXXV
175
Figure BRPI0314042B1_D0142
PEI-CVD e Suc-Gly-CPT 15 (1,0 eq.) são dissolvidos em DMSO. EDC (3 Eq.O, NHS (2,2 eq.)e DIEA (1 eq.) são acrescentados à solução. PEI-CD-Gly-CPT 4 é precipitado com éter, lavado exaustivamente com este solvente e secado a 5 alto vácuo.
Exemplo 36;
Síntese de Ad-PEG34oo~Ad 4 5
Esquema XXXXVI
Figure BRPI0314042B1_D0143
Figure BRPI0314042B1_D0144
240 mg de 1-aminoadamantano (1,60 mmol, Aldrich) e
272 mg de PEG34oo (SPA) 2 (0, 080 mmol, Shearwater Polymers) foram acrescentados a um frasco de vidro equipado com uma barra de agitação. A isto acrescentaram-se 5 mL de
176 diclorometano, agitando-se a solução de um dia para o outro. No dia seguinte, filtrou-se a solução para remover o produto secundário n-hidróxi-succinimida e removeu-se o diclorometano a vácuo. O resíduo foi dissolvido em água e centrifugado para remover o excesso de 1-aminoadamantano. 0 sobrenadante foi então submetido a diálise de um dia para o outro em Slide-A-Lyzer de Pierce com MWCO = 3500. A solução foi então liofilizada, obtendo-se 248 mg de um sólido pulverulent© branco de Ad-PEG3400-Ad 45.
Exemplo 37;
Síntese de DiCiclodextrina PEG 46
362 mg de CD-NHj (0,32 mmol, Cyclodextrin Technology, Inc.) e 436 mg de PEG3400 (SPA) 2 (0,128 mmol,
Shearwater Polymers) foram acrescentados a um frasco de vidro equipado com uma barra de agitação. A este frasco foram acrescentados 4,36 mL de DMSO, e agitou-se a solução durante 72 horas. A solução foi submetida a diálise empregando-se membrana de 2000 MWCO durante 4 dias em água. 46 (603 mg, 86%) foi obtido em forma de um pó branco depois de liofilização.
Exemplo 38:
Síntese de Inclusão de polímero 47 empregando-se DIAD-Peg 45 e DiCD-PEG 46 (54, 6 mg, 0,01 mmol) e 45 (34 mg, 0,01 mmol) foram misturados em água (0,27 mL) e agitados de um dia para o outro. A solução é muito viscosa. 0 polímero 47 foi extraído com éter e secado a vácuo.
177
Exemplo 39:
Síntese de Inclusão do Conjugado de Polímero CPT 48 entre
DiCD-PEG 46 e um composto CPT-Di-AD
Síntese do reticulador de diadamantano: Bis-(2(1-
Figure BRPI0314042B1_D0145
Piridina anidra (10 mL, Aldrich, Milwaukee, WI) foi resfriada em um banho de gelo e acrescentou-se diclorofosfato de metila (1,488 g, 10 mmmol, Aldrich, Milwaukee, WI) gota a gota. A mistura foi mantida fria durante outros 15 minutos. Durante este período formou-se um precipitado diclorofosfato de N-metilpiridínio. Acrescentou-se 1adamantano etanol (4,758 g, 26,4 mmol, Aldrich, Milwaukee, WI), e a mistura lacrada foi agitada de um dia para o outro à temperatura ambiente. Ela foi então vertia em uma solução de NaHCO3 a 10% (50 mL) e fez-se evaporar a piridina a vácuo. 0 sólido ligeiramente amarelo foi dissolvido em 1 L de água e extraído com éter (três porções de 150 mL). A fase aquosa foi acidificada com HC1 a 2N até um pH de 1, sendo então extraída com três porções de 150 mL de CHCl3:n-BuOH (7:3). A fase orgânica combinada (éter e CHC13:n-BuOH) foi lavada com água e formou-se um precipitado ligeiramente amarelo nos solventes misturados, fazendo-se neste ponto
178 evaporar os solventes a vácuo. Formou-se um sólido ligeiramente amarelo que foi recristalizado a partir de acetona/hexano. 0 sólido foi secado a vácuo, rendimento de 60%.
Esquema XXXXVIII
Figure BRPI0314042B1_D0146
Fosfato de bis-(2(1-adamantil)etila) e 11 foram misturados em DMSO. Acrescentou-se EDO (3 eq.), NHS (2,2 eq.), e DIEA (1 eq.) à solução. A solução foi agitada sob argônio durante 16 horas. Precipitou-se fosfato de bis-(2(1adamantil)etila)-Gly-CPT com éter, lavou-se exaustivamente com este solvente e secou-se a grande vácuo. Este composto e Oi-CD-PEG 46 são misturados em DMSO para formar o conjugado de inclusão polimero-CPT 48
Exemplo 40:
Síntese de Foliato de AD-Peg 49
O procedimento abaixo é a síntese de Foliato de AD-Pegsooo. Este método pode ser adaptado para a síntese de qualquer moléculas de três componentes Molécula hóspedeLinker-Ligante.
1. Síntese de AD-Peg-NH?
266 mg de FMOC-PEGsooo-NHS (78,2 pmol, Shearwater
Polymers, Huntsville AL) foram acrescentados a um frasco de
179 vidro equipado com uma barra de agitação magnética. Acrescentaram-se 10 eq. de 1-adamantano-metilamina (1,5 mmol, Aldrich) dissolvido em 3 mL de diclorometano e a solução foi agitada de um dia para o outro à temperatura ambiente. O solvente foi removido a vácuo e acrescentou-se água à solução restante para dissolver o produto de PEG. A solução foi centrifugada a 20K rcf durante 10 minutos, quando a fase de adamantano-metilamina se separou em forma de um líquido mais denso. A porção aquosa foi coletada e a água removida a vácuo. O líquido viscoso restante foi redissolvido em piperidina a 20% em DMF para a desproteção de FMOC e agitada durante 30 minutos à temperatura ambiente. O solvente foi removido a vácuo, lavado diversas vezes co DMF, redissolvido em água e passado por uma coluna de troca de ânions apara remover o PEG que não reagiu. As primeiras frações foram coletadas e liofilizadas, obtendo-se 222 mg de um pó pulverulento branco (rendimento de 76%) do produto desejado que foi confirmado por análise MALDI-TOF.
2. Síntese de Foliato de N-hidróxi-succinimida (NHS-foliato)
Esquema XXXXIX
Figure BRPI0314042B1_D0147
DCC/NHS
Figure BRPI0314042B1_D0148
NHS-foliato é sintetizado de acordo com o método de Lee e Low (Lee, R.J.
Low, P.S. J. Biol. Chem. 1994, 269,
180
3198-3204). Dissolve-se ácido fólico (5 g, 11,3 mmol; Sigma) em DMSO (100 mL) e trietilamina (2,5 mL) e faz-se reagir com, N-hidróxi-succinimida (2,6 g, 22,6 mmol) e diciclohexil-carbodiimida (4,7 g, 22,7 mmol) de um dia para o outro à temperatura ambiente. A solução é filtrada e concentrada a pressão reduzida. Precipita-se o NHS-foliato empregando-se éter dietílico (precipitado amarelo-laranja) e lava-se 2-3 vezes em éter anidro, seca-se a vácuo e armazena-se a -20°C.
3 · AD-Pegsooo-Foliato
Esquema L
Figure BRPI0314042B1_D0149
AD-Peg5000-NH2 e NHS-foliato são misturados a 1:1 eq. em solução de DMSO. Acrescenta-se DIEA (2 eq.). Deixa-se a mistura se agitando à temperatura ambiente de um dia para o outro. A solução de DMSO é então submetida a diálise contra membrana de 35000 MWCO (Spectra/Por 7) durante 48 horas. Obtém-se AD-peg-5000-Foliato 49 depois de liofilização.
Exemplo 41:
Preparação do AD-Peg-Foliato e de um conjugado CDPolimero-CPT. Um procedimento típico: Um conjugado CDpolimero CPT é dissolvido em um tampão D5W. Uma solução de D5W contendo 0,1-1 eq. (mols de unidade repetida)da solução de AD-Peg-Foliato é acrescentada à solução do polímero. Os tamanhos de partícula do polímero são medidos antes e depois
181 da adição de AD-Peg-Foliato empregando-se dispersão de luz.
Esta solução é usada ou em teste in vitro ou in vivo para a análise dos efeitos de alvejamento do foliato.
Exemplo 42:
Ligação por covalência de um ligante de alvejamento (foliato, por exemplo) a um conjugado de polímero de CD-CPT (tal como PEI-CD-GlyCPT)
Esquema LI
Figure BRPI0314042B1_D0150
PEI-CD-GlyCPT 44 e Foliato-NHS (0,1-0,5 eq.) são io misturados em DMSO e agitados durante 24 horas. O polímero é extraído com éter e lavado exaustivamente com este solvente até não poder ser detectada nenhuma molécula livre de foliato. O conjugado resultante de foliato de polímero de CD-CPT 50 é secada a vácuo.
182
Exemplo 43:
Reticulação do polímero de CD-CPT empregando-se Ad-Peg-Ad. 51
Um procedimento típico: Misturam-se AD-Peg-AD 45 (0,01-1 eq. de unidade repetidas de polímero de CD) e conjugado de polímero de CD com CPT em uma quantidade mínima de DMSO. A solução viscosa resultante é precipitada com éter e secada a vácuo, obtendo-se um polímero ligeiramente reticulado 51. 51 deve ainda manter um tamanho de partícula pequeno em solução, ter boa hidrossolubilidade e ter peso molecular mais alto do que o conjugado de polímero de CD com CPT progenitor.
Exemplo 44:
Testes in vivo de conjugados de polímero e camptotecina HGGG6, LGGG10, HG6 e HGGG10 (Sintetizados de acordo com o Exemplo 28)
A. Toxicidade In vivo e Análise da Química do Sangue a partir de Dosagem com Polímero 3 6e Progenitor
A toxicidade de 36e e os seus efeitos sobre a química do sangue foram avaliados em camundongos nus Charles River fêmeas 913-14 semanas de idade). Quatro grupos de tratamento de seis camundongos cada foram tratados com uma solução em D5W de 36e numa dose de 240 mg/kg, 160 mg/kg, 80 mg/kg ou D5W sozinho por injeção i.v. na veia da cauda nos Dias 1, 5 e 9, respectivamente. O volume da dosagem foi determinado com base em uma relação de 200 pL para um camundongo de 20 g e foi ajustado correspondendo ao peso corporal real dos camundongos. Os pesos corporais dos camundongos foram observados diariamente durante os
183 primeiros 5 dias e em seguida duas vezes por semana. As amostras sangüíneas (150-200 pL) foram coletadas de cada camundongo por sangria retro-orbital sob isofluorano no Dia 12. As amostras provenientes de três camundongos em cada grupo foram usadas para análises de contagem de sangue completa (CBC), ao passo que as amostras sangüíneas provenientes dos três camundongos restantes em cada grupo eram processadas para análises de química do sangue. O estudo foi interrompido no Dia 23. Todos os camundongos sofreram eutanásia por punção cardíaca sob CO?, e o sangue de cada camundongo foi coletado para análise de CBC e de química do sangue do mesmo modo como no Dia 12.
Não houve nenhuma diferença significativa em perda do peso corpora, CBC ou dados de química do sangue entre qualquer um dos grupos tratados por 36e e o grupo de controle que recebeu D5W em todo o estudo, e nenhum efeito dependente de tempo foi observado durante os 23 dias para todos os grupos tratados. 36e foi bem tolerado por camundongos com o tratamento à dose máxima (240 mg/kg).
B. Determinação da Dose Máxima Tolerável (MTD) para os conjugados de CDP-CPT
A MTD foi determinada empregando-se camundongos Charles River nus fêmeas (15-15 semanas de idade) para HG6, LGGG10, HGGG10. Uma solução a 5% (peso/volume) de dextrose (D5W) dos conjugados de polímero-CPT foi preparada de fresco antes de cada injeção. Doses para os grupos de tratamento variavam de 2,25 mg de CPT/kg a 54 mg de CPT/kg. A dosagem foi administrada por via intravenosa (i.v.) por injeção na
184 veia da cauda nos Dias 1, 5 e 9. O volume de dosagem foi determinado com base em uma relação de 2 00 pL para um camundongo de 20 g e foi ajustada de acordo com o peso corporal real (BW) dos camundongos. Três a cinco camundongos 5 foram usados em cada grupo de tratamento. Os pesos corporais dos camundongos foram acompanhados diariamente durante os primeiros 5 dias e em seguida duas vezes por semana. A MTD foi definida como a dose mais alta administrada que resultasse em uma redução do peso corporal médio do grupo de 10 menos de 2 0% ou a dose mais alta administrada que não resultasse na morte de qualquer animal naquele grupo. A perda máxima de peso corporal médio e as mortes relacionadas com o tratamento para todos os grupos tratados estão relacionadas na Tabela 5.
Tabela 5.
Resposta a tratamento para o estudo de MTD. Camundongos nus (n = 3-6) foram tratados por via i.v. por meio de injeção na veia da cauda
Agente mg/Kga Perda máxima em % do peso corporal; Diab ntr/nc
D5W - -2,5%; Dia 3 0/6
36e 240 -2,0%; Dia 3 0/6
36e 160 -3,5%; Dia 13 0/6
36e 80 -2,35%; Dia 3 0/6
LGGG10 54 -20,6%; Dia 3 3/3
LGGG10 36 -9,3%; Dia 13 0/3
LGGG10 18 0 0/3
LGGG10 9 0 0/5
LGGG10 4,5 -0,8%; Dia 13 0/5
185
HG6 54 -28,5%; Dia 3 3/3
HG6 36 -23,9%; Dia 3 3/3
HG6 18 -22,1%; Dia 3 3/3
HG6 9 -6,1%; Dia 9 0/5
HG6 4,5 -4,4%/ Dia 5 0/5
HG6 2,25 -2,9%; Dia 9 0/5
HGGG10 54 — 3/3
HGGG10 36 -34%; Dia 5 3/3
HGGG10 18 -16%; Dia 3 1/3
HGGG10 9 -3,3%; Dia 9 0/5
HGGG10 4,5 -2,5%; Dia 9 0/5
Mg de CDP/kg para o polímero de CDP e mg de CPT/kg para os três conjugados testados.
Perda máxima de peso corporal (BW) observada após injeção
Número de mortes relacionadas com tratamento (NTR) para o número de camundongos tratados (N)
A MTD de LGGG10, HG6 e HGGG10 foram determinadas como sendo 36 mg de CPT/kg, 9 mg de CPT/kg e 9 mg de CPT/kg, respectivamente. Com base nas similaridades estruturais entre HGGG6 e HGGG10 espera-se que a MTD para estes dois grupos seja similar. Portanto, a MTD de HGGG6 (não testado) foi presumida como sendo de 9 mg de CPT/kg.
C. Estudo de Eficácia Antitumoral estudo de eficácia antitumoral foi conduzida empregando-se camundongos Charles River nus fêmeas (15-16 semanas de idade). Um fragmento (1 mm3) de tecido de carcinoma de cólon humano LS174T foi implantado subcutaneamente (s.c.) no flanco direito de cada camundongo de teste aproximadamente 14-18 dias antes da dosagem. O volume tumoral foi determinado medindo-se o tumor em duas dimensões
186 com calipes e calculado empregando-se a fórmula: volume do tumor = (comprimento x largura2)/2. 0 volume do tumor foi convertido em peso do tumor presumindo-se que 1 mm3 seja igual a 1 mg de tumor em peso. 0 tratamento foi iniciado 5 quando o tamanho do tumor médio atingia aproximadamente 60100 mg (Dia 1) . Os animais foram distribuídos em doze grupos. Cada grupo consistia em sete camundongos com tamanhos de tumor que variavam de 62,5-144,0 mg com tamanhos médios de tumor no grupo de 88,6-90,7 mg. Os camundongos em io cada grupo foram tratados de acordo com o protocolo relacionado na Tabela 6. Todos os tratamentos com conjugados foram administrados por via intravenosa por injeção na veia da cauda. Os tamanhos de tumores foram medidos duas vezes por semana durante todo o decorrer do experimento. NO fim do 15 estudo, os tumores provenientes de cada camundongo eutanasiado foi coletado e resfriado a -80°C.
Tabela 6
Protocolo de dosagem para o estudo de eficácia a.
Grupo Agente Dose (mg CPT/kg)b Viac Programa6
1 D5W - i .V. Q4D x 3
2 CPT 9 i.p. Q4D x 2e
3 Irinotecan 100f i.p. Qwk x 3
4 HGGG6 9 i. V. Q4D x 3
5 HGGG6 4,5 i. V. Q4D x 3
6 LGGG10 36 i .V. Q4D x 3
7 LGGG10 18 i. V. Q4D x 3
8 LGGG10 9 i. V. Q4D x 3
9 HG6 9 i. V. Q4D x 3
187
10 HG6 4,5 i.v. Q4D x 3
11 HGGG10 9 i.v. Q4D x 3
12 HGGG10 4,5 i.v. Q4D x 3
Sete camundongos foram usados em cada grupo
Doses são equivalentes de CPT exceto o grupo 3
i.p. = intraperitoneal, i.v. = intravenosa
Programas de administração foram abreviados como Q4D x 3 três injeções com intervalos de quatro dias, Qwk x 3 = três injeções com intervalo de uma semana, a primeira dose oi iniciada no dia 1 para todos os grupos
A terceira dose programada não foi dada devido à toxicidade emergente
100 mg de irinotecan/kg
Cada animal foi eutanasiado quando o peso tumoral atingiu o tamanho final predeterminado (1.500 mg). 0 ponto final no tempo (TTE) para cada camundongo foi calculado a partir da equação: TTE = (log(ponto final-b))m, sendo que b 5 em são a interseção e a inclinação, respectivamente, da linha obtida pela regressão linear de um conjunto de dados de crescimento tumoral transformado por log constituído da primeira observação que excedeu o volume final do estudo e das três observações consecutivas que imediatamente 10 precederam o volume final. Os animais que não atingiram o ponto final receberam um valor TTE igual ao último dia do estudo (114 dias). Os animais classificados como tendo mortes relacionadas com tratamento (TR)tiveram atribuído um valor de TTE igual ao do dia da morte. Os animais 15 classificados como tendo morte não relacionada com tratamento (NTR) são excluídos dos cálculos de TTE. O retardamento do crescimento tumoral (TGD) definido como o aumento no tempo médio até o ponto final (TTE) em um grupo de tratamento comparado com o grupo de controle, foi um parâmetro investigado para se avaliar a eficácia do tratamento. TGD é calculado como a diferença entre o TTE médio para um grupo de tratamento e o TTE médio do grupo de controle (TGD = T C) e é expresso em dias, e em forma de uma porcentagem do TTE médio do grupo de controle;% de TGD = (T - C)/C em que T é igual ao TTE médio para um grupo de tratamento e C é igual ao TTE para o controle, Grupo 1.
Toxicidade. Os animais foram pesados diariamente nos Dias 1-5, em seguida duas vezes por semana. Os camundongos foram examinados freqüentemente para sinais claros de qualquer efeito colateral adverso relacionado com o medicamento. A toxicidade aceitável para medicamentos contra câncer em camundongos é definida pela NCI como uma perda média de peso corporal no grupo inferior a 20% durante o estudo e não mais de uma morte tóxica dentre sete animais tratados.
Os resultados para este estudo de eficácia que inclui valores TTE médios, carga tumoral média no dia 114, resposta a tratamento e morte estão resumidos na Tabela 7.
Tabela 7
Grupo TTE Médio3 T-Cb % TGDC Carga Tumoral Médio em mg (Ns d) NTR“/NNTR f /Neu9 P vs D5Wh P vs CPT1
1 34,9 - - (0) 0/1/6 - -
2 51,4 16,5 47% -(0) 2/0/5 0,2128 -
3 68,7 33,8 97% 1152(3) 0/0/4 0,0002 0,0253
4 114,0 79,1 227% 256(5) 1/0/1 0,0040 0,0115
5 65,6 30,7 88% 566(2) 0/1/4 0,0046 0,1369
189
6 100, 0 65,1 187% 666(3) 4/0/0 0,0272 0,0289
7 75,6 40,7 117% 221(3) 0/0/4 0,0018 0,0601
8 63,2 28,3 81% 700(1) 1/0/5 0,0006 0,1064
9 114, 0 79,1 227% 394(4) 0/0/3 0,0002 0,0028
10 74,2 39,3 113% 668(2) 1/1/3 0,0016 0,0673
11 114,0 79,1 227% 500(5) 1/0/1 0,0040 0,0050
12 78,0 43,1 123% 1010 (2) 0/0/6 0,0006 0,0392
TTE = Tempo (Dias) até o ponto final (1500 mg)
T-C = Diferença entre TTE (Dias) de grupo ratado contra o grupo de controle % de TGD = [(T-C)/C]
Camundongos sobreviventes
NTI; = Número de mortes relacionadas com tratamento
Nntr = Número de mortes não relacionadas com tratamento
Neu = Número de camundongos eutanasiados depois de atingido o ponto final
Valor de P em relação ao grupo de tratamento com D5W (Grupo 1)
Valor de P em relação ao grupo de tratamento com CPT (Grupo 2)
Uma morte NTR foi observada no dia 72 nos animais de controle tratados com D5W. Os tumores nos demais seis camundongos de controle cresceu até o tamanho de ponto final 5 de 1500 mg, resultando em um TTE médio de 34,9 dias (Tabela 7)
Duas mortes relacionadas com tratamento foram relatadas no Dia 9 para CPT a 9 mg/] kg. Deste modo CPT deve ser considerado como sendo tóxico a esta dose neste 10 experimento. 0 TTE médio para este grupo foi de 51,4 dias, correspondendo a uma T-C de 16,5 dias e um TGD de 47%, em relação aos camundongos de controle sem tratamento (não significativo). Nenhum animal no Grupo 2 sobreviveu ao dia 114.
190
O Grupo 3 recebeu irinotecan i.p. a 100 mg/kg (Qwk x 3) . O TTE médio para o Grupo 3 foi de 68,7 dias, correspondendo a uma T-C significativa de 33,8 dias e um TGD de 97%, em relação aos camundongos de controle (P < 0,01). Três animais sobreviveram ao Dia 114 com uma carga tumoral média de 1.152 mg. Nenhuma regressão foi registrada.
Os Grupos 4 e 5 receberam HGGG6 i.v. Q4D x 3 a 9 e 4,5 mg de CPT/kg, respectivamente. Uma morte relacionada com tratamento foi observada no Dia 16 no Grupo 4, e uma morte NTR foi registrada no dia 37 no Grupo 5. O TTE médio para o Grupo 4 foi de 114 dias, valor máximo possível neste estudo. Este valor TTE corresponde a uma T-C significativa de 79,1 dias e um TGD de 227%, em relação ao controle (P<0,01) . Os tumores em cinco camundongos do Grupo 4 não atingiram o ponto final de 1.500 mg. Estes cinco camundongos tinham uma carga tumoral média de 256 mg no Dia 114. 0 TTE médio para o Grupo 5 foi de 65,6 dias, e corresponde a uma T-C significativa de 30,7 dias e um TGD de 88% em relação ao controle (P<0,01).
Os Grupos 6-8 foram tratados com LGGG10 i.v. Q4D x 3 a 36, 18 e 9 mg de CPT/kg, respectivamente. Embora não tivesse sido observada nenhuma morte no estudo de MTD empregando-se este conjugado em camundongos não portadores de tumores as 36 mg de CPT/kg (Tabela 5) , quatro mortes relacionadas com tratamento foram registradas no Grupo 6 quando os camundongos portadores de tumores receberam esta dose, dois no Dia 16 e um cada nos Dias 75 e 100. Estes resultados indicam que 36 mg de CPT/kg é provavelmente acima
191 de MTD de LGGG10. Conforme se vê na Tabela 5, nenhuma perda significativa de peso corporal foi registrada no estudo de MTD quando os camundongos receberam doses de 18 mg de CPT/kg, indicando que esta dose está abaixo de MTD. Portanto, a MTD de LGGG10 se encontra em algum ponto entre 18 e 36 mg de CPT/kg. O TTE médio para o Grupo 7 (18 mg de CPT/kg) foi de 75,6 dias. Este valor de TTE corresponde uma T-C significativa de 40,7 dias e um TGD de 117%, em relação aos camundongos de controle (P<0,01). Três camundongos neste grupo tinham uma carga tumoral média de 221 mg no Dia 114. Uma morte TR tardia foi registrada no Dia 103 no Grupo 8 (9 mg de CPT/kg) . 0 TTE médio para o grupo 8 foi de 63,2 dias. Este valor de TTE corresponde a uma T-C significativa de 28,3 dias e um TGD de 81%, em relação aos camundongos de controle sem tratamento (P<0,01). O camundongo restante neste grupo tinha uma carga tumoral de 700 mg no Dia 114.
Os Grupos 9 e 10 receberam HG6 i.v. Q4D x 3 a 9 e 4,5 mg de CPT/kg, respectivamente. Uma morte TR e uma morte NTR foram registradas no Grupo 10 nos Dias 47 e 84 respectivamente. O TTE médio para o Grupo 9 foi o máximo, 114 dias. Este valor TTE corresponde a uma T-C significativa de 79,1 dias e um TGD de 227%, em relação aos camundongos de controle sem tratamento (P<0,01). Quatro camundongos no Grupo 9 tinham uma carga tumoral média de 394 mg no Dia 114. O TTE médio para o Grupo 10 foi de 74,2 dias. Este valor de TTE corresponde uma T-C significativa de 39,3 dias e um TGD de 113%, em relação aos camundongos de controle (P<0,01). Os
192 dois camundongos restantes no Grupo 10 tinham uma carga tumoral média de 668 mg no Dia 114.
Os grupos 11 e 12 receberam HGGG10 i.v. Q4D x 3 a e 4,5 mg de CPT/kg, respectivamente. Uma morte relacionada com tratamento foi registrada no Dia 16 no Grupo 11. O TTE médio para os Grupos 11 e 12 foi de 114 dias e 78 dias, respectivamente. 0 valor de TTE para o Grupo 11 corresponde a uma T-C significativa de 79,1 dias e a um TGD de 227%, em relação aos camundongos de controle (P<0,01). Os tumores em cinco camundongos no Grupo 11 não atingiram o ponto final; estes cinco camundongos tinham uma carga tumoral média de 500 mg no Dia 114. O valor TTE do Grupo 12 corresponde a uma T-C significativa de 43,1 dias e um TGD de 123%, em relação aos camundongos de controle (P <0,01). Os dois camundongos restantes neste grupo tinham uma carga tumoral média de 1,010 mg no Dia 114.
A curva de crescimento tumoral como uma função de tempo para D5W, CPT, irinotecan, LGGG10 na sua dose não tóxica mais alta estada (18 mg de CPT/kg) e os outros três conjugados com polímero de alto peso molecular (HGG6, HG6, HGGG10) nas suas MTDs são apresentados na Figura 8. Os três conjugados de alto peso molecular administrados às suas MTDs apresentaram uma inibição do crescimento tumoral mais prolongada comparados a D5W, CPT e irinotecan. As curvas do crescimento tumoral médio para HGG6, HG6 e HGGG10 que são ilustradas na Figura 9 mostram que há uma resposta a dose distinta para todos estes três polímeros quando recebem doses às suas MTDs e á metade de suas MTDs. As curvas de
193 crescimento tumoral médio para LGG10 e HGG1, cada um recebendo 9 mg de CPT/kg conforme ilustrado na Figura 10, demonstram que o conjugado polímero de alto peso molecular medicamento tem um efeito antitumoral maior quando comparadas aos conjugados de baixo peso molecular, presumese que devido ao seu acúmulo intensificado (efeito EPR) e a uma eliminação renal reduzida.
Perda de Peso Corporal Médio de Camundongos. As perdas de peso corporal médio (MBW) como uma função do tempo são lançadas para D5W,, CPT, irinotecan e para os três conjugados contendo polímero de alto peso molecular às suas MTDs (Figura 11) . As perdas máximas de MBW observadas no Grupo 2 (CPT) e os dois conjugados com o linker triglicina administrados às suas MTDs (Grupos 4 e 11) eram de 13,1%, 18,3% e 12,6%, respectivamente. A perda máxima de MBW de HG6 (3,4%), o único conjugado com um linker de glicina, foi análoga à perda máxima de MBW registrada para irinotecan (5,0%). Perdas máximas desprezíveis de peso corporal médio em grupo foram registradas em todos os outros grupos de tratamento e no grupo D5W. 0 peso corporal médio voltou aos níveis de linha de base para todos os grupos de tratamento depois da interrupção da terapia.
D. Correlação entre o tamanho do tumor do camundongo eutanasiado e a concentração de CPT no tumor correspondente
Cada tumor coletado de camundongos no término do estudo de camundongos com xeno-enxerto de LS174t foi descongelado e colocado em um tubo de lise de 2 mL (Lysing
194
Matrix D, Qbiogen) . 300 pL de reagente de lise (Cellytic-MT Lise de Tecido de Mamifero/Reagente de extração) foi acrescentado a cada tubo. O tecido foi homogeneizado em um homogeneizador FastPrep FP12 (Qbiogen) a 5 m/s durante 40 seg. A homogeneização foi repetida seis vezes com um intervalo de 10 min. entre as homogeneizações sucessivas. A solução homogeneizada foi centrifugada a 14000 g durante 15 min. a 10°C. 90 pL da solução foi retirada com seringa sendo a ela acrescentados 10 pL de NaOH a IN. Uma alíquota de 500 pL de MeOH à esta solução depois de se permitir que a solução homogeneizada repousasse durante 2 h à temperatura ambiente;. A solução foi centrifugada durante 15 minutos a 14.000 g. O sobrenadante (270 pL) foi misturada com 30 pL de HC1 a IN e injetada em uma HPLC para análise. A correlação da concentração de CPT (ng/mg de tecido) como tamanho do tumor (em mg) é ilustrada na figura 12. A concentração de CPT foi correlacionada inversamente com o tamanho do tumor.
Exemplo 45:
Síntese de Poli(CDDC-PEG)-Amfotericina B 52 por meio de linker amida
Esquema LIT
Figure BRPI0314042B1_D0151
195
Poli(CDDC-PEG) (788 mg) e 1,1'-carbonil diimidazol (CDI, 1,45 g, 50 eq.) foram agitados em DMSO anidro (10 mL) na presença de DMAP (429 mg, 20 eq.) durante 16 horas. Acrescentou-se éter 9200 mL) à mistura para precipitar poli(CDDC-PEG)-carbonil-imidazol. O sólido amarelo resultante foi lavado com éter 2 x 200ml e secada a vácuo. O sólido foi dissolvido em DMSO anidro (15 mL), acrescentando-se em seguida AmB (332 mg, 2 eq.)e DMAP (43,0 mg, 2 eq.). A solução foi agitada no escuro durante 48 horas e submetida a diálise em água empregando-se uma membrana MWCO 25000 durante 3 dias. A solução foi então filtrada empregando-se um filtro de 0,2 pm e liofilizada. Um sólido amarelo (920 mg) 52 foi obtido. A% em peso de AmB é de aproximadamente 13%.
Exemplo 46:
Síntese de Poli(CDDC-PEG)-Amfotericina B 53 por meio de linker imina
Figure BRPI0314042B1_D0152
M«raO«>HD
Figure BRPI0314042B1_D0153
e PEG-DiSPA (relação 1:1) foram secados a vácuo a temperatura ambiente. Acrescentou-se DMSO (10 mg de 3/mL DMSO) ao sólido e em seguida acrescentou-se DIEA (2 eq.) à mistura. 0 polímero foi extraído com éter em excesso 5 dias
196 mais tarde e submetido a diálise empregando-se uma membrana MWCO 25000 durante 48 horas. O rendimento de poli(CDDC-PEG) é de 80-95%. O peso molecular do polímero foi determinado empregando-se GPC para ser de 70-100 kDa.
Poli(CDDC-PEG) (1,124 g, 0,25 mmol) foi dissolvido em água (55 mL), NaI04 (0,264 , 5 eq.) foi acrescentado. A solução foi agitada no escuro à temperatura ambiente durante 20 minutos e armazenada a 4°C durante 24 horas no escuro. Acrescentou-se uma solução de BaCl? (5,05 eq.) à solução resultando na imediata precipitação de Ba(IO4)í.O precipitado foi filtrado. Acrescentou-se uma solução saturada de Na^COs para se ajustar o pH para 11. Acrescentou-se então anfotericina B (343 mg, 1,5 eq.) à solução e agitou-se à temperatura ambiente no escuro durante 48 horas. O pH da solução foi mantido em 11 acrescentando-se NaOH (0,lN) durante toda a reação. A solução foi submetida a diálise a 4°C durante 48 horas empregando-se MWCO 25000 e liofilizada, obtendo-se 1,03 g de conjugado de polímero-AmB 53 em forma de um pó amarelo. A% em peso de AmB é determinada como sendo 18 empregando-se um espectrômetro de UV a 405 nm.
D. Referências.
Outros polímeros contendo ciclodextrina que podem ser modificados de acordo com as instruções da presente invenção, assim como métodos de preparação de tais polímeros, são descritos nos pedidos de patentes U.S. 09/203.556, 09/339.818, 09/43.707, 10/021.294 e 10/021.312 todos pelo presente incorporados integralmente ao presente documento a título de referência.
197
Todas as referências, patentes e publicações citadas no presente são pelo presente incorporados ao presente documento a título de referência.
Equivalentes
Os versados na técnica reconhecerão ou serão capazes de determinar, empregando experimentação rotineira, numerosos equivalentes aos compostos e métodos do seu uso descritos no presente, tais equivalentes são considerados como incidindo no âmbito da presente invenção e são 10 abrangidos pelas reivindicações que seguem.

Claims (3)

  1. REIVINDICAÇÕES
    1. Composto CARACTERIZADO pelo fato de que compreende uma subunidade da fórmula:
    em que:
    Figure BRPI0314042B1_C0001
    Figure BRPI0314042B1_C0002
    representa β-ciclodextrina;
    Figure BRPI0314042B1_C0003
    representa um polietileno glicol (PEG) .
    2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que m é um número tal que o peso molecular do PEG é 3400. 3. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que a dita subunidade é da
    fórmula:
    Figure BRPI0314042B1_C0004
    Petição 870190094389, de 20/09/2019, pág. 14/15
  2. 2/2
  3. 4. Preparação farmacêutica CARACTERIZADA pelo fato que compreende um composto como definido na reivindicação ou um éster, sal ou hidrato farmaceuticamente aceitável mesmo, e um excipiente farmacêutico.
BRPI0314042A 2002-09-06 2003-09-04 polímeros à base de ciclodextrina para o fornecimento de agentes terapêuticos ligados a eles por covalência BRPI0314042B8 (pt)

Applications Claiming Priority (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US40885502P 2002-09-06 2002-09-06
US60/408.855 2002-09-06
US42283002P 2002-10-31 2002-10-31
US60/422.830 2002-10-31
US45199803P 2003-03-04 2003-03-04
US60/451.998 2003-03-04
PCT/US2003/027588 WO2004022099A2 (en) 2002-09-06 2003-09-04 Cyclodextrin-based polymers for delivering the therapeutic agents covalently bound thereto

Publications (3)

Publication Number Publication Date
BR0314042A BR0314042A (pt) 2005-07-05
BRPI0314042B1 true BRPI0314042B1 (pt) 2020-02-11
BRPI0314042B8 BRPI0314042B8 (pt) 2021-05-25

Family

ID=31982363

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BR122012021252A BR122012021252B8 (pt) 2002-09-06 2003-09-04 polímeros à base de ciclodextrina para o fornecimento de agentes terapêuticos ligados a eles por covalência
BRPI0314042A BRPI0314042B8 (pt) 2002-09-06 2003-09-04 polímeros à base de ciclodextrina para o fornecimento de agentes terapêuticos ligados a eles por covalência

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BR122012021252A BR122012021252B8 (pt) 2002-09-06 2003-09-04 polímeros à base de ciclodextrina para o fornecimento de agentes terapêuticos ligados a eles por covalência

Country Status (17)

Country Link
US (20) US7270808B2 (pt)
EP (4) EP1534340B1 (pt)
JP (4) JP2006502301A (pt)
KR (6) KR102008768B1 (pt)
CN (2) CN104383554B (pt)
AT (1) ATE533513T1 (pt)
AU (2) AU2003278764C1 (pt)
BR (2) BR122012021252B8 (pt)
CA (1) CA2497792C (pt)
CY (2) CY1112362T1 (pt)
ES (3) ES2377318T3 (pt)
HK (1) HK1254600A1 (pt)
IL (2) IL234715A0 (pt)
MX (2) MXPA05002444A (pt)
PT (2) PT2277551E (pt)
TW (2) TWI422379B (pt)
WO (1) WO2004022099A2 (pt)

Families Citing this family (230)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8106098B2 (en) * 1999-08-09 2012-01-31 The General Hospital Corporation Protein conjugates with a water-soluble biocompatible, biodegradable polymer
US7141540B2 (en) * 2001-11-30 2006-11-28 Genta Salus Llc Cyclodextrin grafted biocompatible amphilphilic polymer and methods of preparation and use thereof
DE60323936D1 (de) * 2002-01-14 2008-11-20 Gen Hospital Corp Bioabbaubare polyketale, verfahren zu ihrer herstellung sowie ihre verwendung
EP1534269B1 (en) * 2002-07-19 2013-10-30 The General Hospital Corporation Oxime conjugates and methods for their formation and use
ES2377318T3 (es) * 2002-09-06 2012-03-26 Cerulean Pharma Inc. Polímeros a base de ciclodextrina para el suministro de los agentes terapéuticos enlazados covalentemente a ellos
KR20050051686A (ko) * 2002-10-09 2005-06-01 인설트 테라페틱스, 인코퍼레이티드 사이클로덱스트린-기초한 재료, 조성물 및 이의 용도
SG129240A1 (en) * 2003-01-23 2007-02-26 Agency Science Tech & Res Biodegradable copolymer and nucleic acid delivery system
JP4009721B2 (ja) * 2003-05-23 2007-11-21 独立行政法人産業技術総合研究所 イオン結合性ポリマー含有基板、該基板を含有する検出用センサー及び病原菌又は病原菌が生産する毒素の検出方法
ATE507845T1 (de) 2003-09-05 2011-05-15 Gen Hospital Corp Polyacetal-arzneimittelkonjugate als freisetzungssystem
US6960300B2 (en) * 2003-09-08 2005-11-01 Sami Labs Limited Process for preparing water soluble diterpenes and their applications
US8394365B2 (en) 2003-09-17 2013-03-12 Nektar Therapeutics Multi-arm polymer prodrugs
CA2537336C (en) * 2003-09-17 2013-02-26 Nektar Therapeutics Al, Corporation Multi-arm polymer prodrugs
CN1925855B (zh) 2003-12-19 2010-06-16 普莱希科公司 开发Ret调节剂的化合物和方法
JP2008501314A (ja) * 2004-04-23 2008-01-24 ノベシン リミテッド 線状又は分枝状糖ポリマーの存在下でタンパク質を折り畳むための方法及びキット
EP1761283A2 (en) * 2004-06-07 2007-03-14 California Institute Of Technology Biodegradable drug-polymer delivery system
US7498342B2 (en) * 2004-06-17 2009-03-03 Plexxikon, Inc. Compounds modulating c-kit activity
CN101098854B (zh) 2004-07-23 2012-12-05 恩多塞特公司 二价连接体及其轭合物
JP5107716B2 (ja) * 2004-11-05 2012-12-26 ザ・チルドレンズ・ホスピタル・オブ・フィラデルフィア 分子治療用生分解性リンカー
TW200640493A (en) * 2005-02-16 2006-12-01 Insert Therapeutics Inc Cyclodextrin-based polymers for therapeutics delivery
JP2008537551A (ja) 2005-03-31 2008-09-18 カランド ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド リボヌクレオチドレダクターゼサブユニット２の阻害剤およびその使用
US7846941B2 (en) * 2005-05-17 2010-12-07 Plexxikon, Inc. Compounds modulating c-kit and c-fms activity and uses therefor
UA95244C2 (ru) 2005-06-22 2011-07-25 Плексикон, Инк. Соединения и способ модулирования активности киназ, и показания для их применения
WO2007009265A1 (en) * 2005-07-22 2007-01-25 The Governors Of The University Of Alberta Tec Edmonton NOVEL β-CYCLODEXTRIN-BASED MOLECULES AND DRUG DELIVERY COMPOSITIONS
GT200600381A (es) 2005-08-25 2007-03-28 Compuestos organicos
WO2007030559A2 (en) * 2005-09-07 2007-03-15 Plexxikon, Inc. 1, 3-disubstituted indole derivatives for use as ppar modulators
BRPI0615948A2 (pt) * 2005-09-07 2011-05-31 Plexxikon Inc composto ativo de ppar, sua composição, seu kit e seu uso
JP2009509932A (ja) * 2005-09-07 2009-03-12 プレキシコン，インコーポレーテッド Ｐｐａｒ活性化合物
AU2006327551A1 (en) * 2005-12-19 2007-06-28 Capsutech Ltd. Cyclodextrin-containing polymers and uses thereof
US7671067B2 (en) * 2006-02-09 2010-03-02 Enzon Pharmaceuticals, Inc. Treatment of non-hodgkin's lymphomas with multi-arm polymeric conjugates of 7-ethyl-10-hydroxycamtothecin
US7462627B2 (en) * 2006-02-09 2008-12-09 Enzon Pharmaceuticals, Inc. Multi-arm polymeric conjugates of 7-ethyl-10-hydroxycamptothecin for treatment of breast, colorectal, pancreatic, ovarian and lung cancers
KR20080104347A (ko) 2006-03-29 2008-12-02 노파르티스 아게 선택적 히드록사메이트-기재 ｍｍｐ 억제제
US20080027212A1 (en) 2006-06-28 2008-01-31 Skinner Keith K Methods and compositions for improved uptake of biological molecules
EP2049517B1 (en) 2006-07-20 2013-11-27 Novartis AG Amino-piperidine derivatives as cetp inhibitors
WO2008063888A2 (en) 2006-11-22 2008-05-29 Plexxikon, Inc. Compounds modulating c-fms and/or c-kit activity and uses therefor
CN101583380B (zh) * 2006-11-30 2013-07-10 尼克塔治疗公司 用于制备聚合物轭合物的方法
TWI528976B (zh) * 2006-12-13 2016-04-11 斯茹林製藥公司 用於醫物傳遞之以環糊精為基之聚合物
JP2010514695A (ja) 2006-12-21 2010-05-06 プレキシコン，インコーポレーテッド キナーゼ調節のための化合物および方法およびそのための適応症
PE20121126A1 (es) * 2006-12-21 2012-08-24 Plexxikon Inc Compuestos pirrolo [2,3-b] piridinas como moduladores de quinasa
WO2008079909A1 (en) * 2006-12-21 2008-07-03 Plexxikon, Inc. Pyrrolo [2,3-b] pyridines as kinase modulators
US20080176958A1 (en) 2007-01-24 2008-07-24 Insert Therapeutics, Inc. Cyclodextrin-based polymers for therapeutics delivery
KR20090108082A (ko) * 2007-02-09 2009-10-14 엔존 파마슈티컬즈, 인코포레이티드 7-에틸-10-하이드록시캄토테신 다분지형 고분자 접합체를 이용한 내성 또는 불응성 암의 치료방법
PE20090159A1 (es) * 2007-03-08 2009-02-21 Plexxikon Inc COMPUESTOS DERIVADOS DE ACIDO INDOL-PROPIONICO COMO MODULADORES PPARs
AU2008224988A1 (en) 2007-03-14 2008-09-18 Endocyte, Inc. Binding ligand linked drug delivery conjugates of tubulysins
CN101784565B (zh) 2007-06-25 2014-12-10 恩多塞特公司 含有亲水性间隔区接头的共轭物
US9877965B2 (en) 2007-06-25 2018-01-30 Endocyte, Inc. Vitamin receptor drug delivery conjugates for treating inflammation
WO2009012283A1 (en) 2007-07-17 2009-01-22 Plexxikon Inc. Compounds and methods for kinase modulation, and indications therefor
CN101970012A (zh) * 2007-09-14 2011-02-09 日东电工株式会社 药物载体
CN101809039B (zh) * 2007-09-28 2012-08-29 那诺蒂克株式会社 叶酸修饰的环糊精化合物、其制备方法、靶向性药物传递系统用的药物传递剂、药物组合物及造影剂
EP2200649A4 (en) 2007-10-19 2012-09-26 Univ California COMPOSITIONS AND METHODS FOR TREATING CNS INFUSION, PSYCHOSIS, DELIRE, PTSD OR PTSS
CN101910150B (zh) 2007-11-05 2013-09-18 诺瓦提斯公司 作为cetp抑制剂、可用于治疗疾病如高脂血症或动脉硬化的4-苄基氨基-1-羧基酰基哌啶衍生物
MX2010006063A (es) 2007-12-03 2010-07-01 Novartis Ag Derivados de 4-bencil-amino-pirrolidina 1,2-disustituida como inhibidores de la proteina de transferencia de colesteril-ester (cetp) utiles para el tratamiento de las enfermedades tales como hiperlipidemia o arterioesclerosis.
AU2009228765B2 (en) 2008-03-24 2012-05-31 Novartis Ag Arylsulfonamide-based matrix metalloprotease inhibitors
CA2720184C (en) 2008-03-31 2017-07-18 Boston Medical Center Corporation Predictive marker for topoisomerase i inhibitors
AU2009232355A1 (en) 2008-04-04 2009-10-08 Calando Pharmaceuticals, Inc. Compositions and use of EPAS1 inhibitors
WO2009143018A2 (en) 2008-05-19 2009-11-26 Plexxikon, Inc. Compounds and methods for kinase modulation, and indications therefor
PE20091846A1 (es) * 2008-05-19 2009-12-16 Plexxikon Inc DERIVADOS DE PIRROLO[2,3-d]-PIRIMIDINA COMO MODULADORES DE CINASAS
JP5767965B2 (ja) * 2008-06-10 2015-08-26 プレキシコン インコーポレーテッドＰｌｅｘｘｉｋｏｎ Ｉｎｃ． キナーゼを調節する５ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン誘導体、およびその適応症
US8110576B2 (en) * 2008-06-10 2012-02-07 Plexxikon Inc. Substituted pyrrolo[2,3b]pyrazines and methods for treatment of raf protein kinase-mediated indications
AU2009282413B2 (en) 2008-08-11 2014-07-17 Nektar Therapeutics Multi-arm polymeric alkanoate conjugates
US8557292B2 (en) 2008-08-13 2013-10-15 California Institute Of Technology Carrier nanoparticles and related compositions, methods and systems
TW201010732A (en) * 2008-08-29 2010-03-16 Enzon Pharmaceuticals Inc Method of treating RAS associated cancer
US20100068266A1 (en) * 2008-09-16 2010-03-18 Searete Llc, A Limited Liability Corporation Of The State Of Delaware Ex vivo-modifiable multiple-release state final dosage form
US20100068275A1 (en) * 2008-09-16 2010-03-18 Searete Llc, A Limited Liability Corporation Of The State Of Delaware Personalizable dosage form
US20100068153A1 (en) * 2008-09-16 2010-03-18 Searete Llc, A Limited Liability Corporation Of The State Of Delaware Ex vivo activatable final dosage form
LT2349346T (lt) 2008-09-23 2019-09-25 Nektar Therapeutics Kamptotecino provaistų (pvz., peg-irinotekano) metronominio dozavimo būdas
KR20110075029A (ko) * 2008-10-21 2011-07-05 엔즌 파마슈티칼스, 인코포레이티드 7-에틸-10-하이드록시캄토테신의 다중-암 고분자 컨쥬게이트로 신경모세포종의 치료
US20110287036A1 (en) * 2008-11-17 2011-11-24 Riken Novel cancer targeting therapy using complex of subtance capable of binding specifically to constituent factor of cancer stroma and anti-tumor compound
AR074584A1 (es) * 2008-12-10 2011-01-26 Mersana Therapeutics Inc Formulaciones farmaceuticas de conjugados camtotecina-polimero biocompatibles biodegradables
US8309530B2 (en) * 2009-02-04 2012-11-13 Washington State University Compositions and methods for modulating ghrelin-mediated conditions
WO2010099466A2 (en) 2009-02-26 2010-09-02 The Regents Of The University Of California A supramolecular approach for preparation of size controllable nanoparticles
AU2010224184A1 (en) * 2009-03-11 2011-09-29 Plexxikon, Inc. Pyrrolo [2, 3-b] pyridine derivatives for the inhibition of Raf kinases
WO2010104945A1 (en) * 2009-03-11 2010-09-16 Plexxikon, Inc. Pyrrolo [2, 3-b] pyridine derivatives for the inhibition of raf kinases
MY172424A (en) 2009-04-03 2019-11-25 Hoffmann La Roche Propane- i-sulfonic acid {3- (4-chloro-phenyl)-1h-pyrrolo [2, 3-b] pyridine-3-carconyl] -2, 4-difluoro-phenyl} -amide compositions and uses thereof
TW201041888A (en) * 2009-05-06 2010-12-01 Plexxikon Inc Compounds and methods for kinase modulation, and indications therefor
JP5747432B2 (ja) * 2009-05-28 2015-07-15 国立大学法人秋田大学 ２置換修飾シクロデキストリンおよびこれを用いた核酸検出方法
WO2010138802A2 (en) * 2009-05-28 2010-12-02 Cornell University Compositions and their use for removing cholesterol
US8329724B2 (en) 2009-08-03 2012-12-11 Hoffmann-La Roche Inc. Process for the manufacture of pharmaceutically active compounds
WO2011031865A1 (en) * 2009-09-09 2011-03-17 Cerulean Pharma Inc. Cyclodextrin-based polymers for therapeutic delivery
US20120114658A1 (en) * 2009-09-15 2012-05-10 John Ryan Treatment of cancer
AU2010295646B2 (en) * 2009-09-15 2016-02-11 Ellipses Pharma Limited Treatment of cancer
US8381774B2 (en) * 2009-09-20 2013-02-26 Medtronic Vascular, Inc. Methods for loading a drug eluting medical device
CN106220623A (zh) 2009-11-06 2016-12-14 普莱希科公司 用于激酶调节的化合物和方法及其适应症
ES2627911T3 (es) 2009-11-18 2017-08-01 Plexxikon, Inc. Derivados de N-[2-fluoro-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-carbonil)-fenil]-4-bencenosulfonamida como moduladores de la proteína quinasa Raf para el tratamiento del cáncer
CN102781237A (zh) * 2009-11-23 2012-11-14 天蓝制药公司 用于传递治疗剂的基于环糊精的聚合物
BR112012015745A2 (pt) * 2009-12-23 2016-05-17 Plexxikon Inc compostos e métodos para a modulação de quinase, e indicações dos mesmos
US20110178287A1 (en) * 2010-01-19 2011-07-21 Cerulean Pharma Inc. Cyclodextrin-based polymers for therapeutic delivery
US20120004195A1 (en) * 2010-01-19 2012-01-05 Alexandra Glucksmann Cyclodextrin-based polymers for therapeutic delivery
JP2011190341A (ja) * 2010-03-15 2011-09-29 Nano Dex Kk シクロデキストリン化合物
EP2553019A1 (en) 2010-03-26 2013-02-06 Mersana Therapeutics, Inc. Modified polymers for delivery of polynucleotides, method of manufacture, and methods of use thereof
WO2011119995A2 (en) 2010-03-26 2011-09-29 Cerulean Pharma Inc. Formulations and methods of use
WO2011119262A1 (en) 2010-03-26 2011-09-29 Cerulean Pharma Inc. Methods and systems for generating nanoparticles
US20110300150A1 (en) * 2010-05-18 2011-12-08 Scott Eliasof Compositions and methods for treatment of autoimmune and other disease
US20120064107A1 (en) * 2010-05-18 2012-03-15 Cerulean Pharma Inc. Compositions and methods for treatment of autoimmune and other disease
WO2012019168A2 (en) 2010-08-06 2012-02-09 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
US20120213854A1 (en) * 2010-09-30 2012-08-23 Fetzer Oliver S Methods of treating a subject and related particles, polymers and compositions
EP2625189B1 (en) 2010-10-01 2018-06-27 ModernaTX, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
WO2012088422A1 (en) 2010-12-22 2012-06-28 Nektar Therapeutics Multi-arm polymeric prodrug conjugates of taxane-based compounds
WO2012088445A1 (en) 2010-12-22 2012-06-28 Nektar Therapeutics Multi-arm polymeric prodrug conjugates of cabazitaxel-based compounds
US9233163B2 (en) 2010-12-28 2016-01-12 The Children's Hospital Of Philadelphia Hydrolytically releasable prodrugs for sustained release nanoparticle formulations
US8546521B2 (en) 2011-01-28 2013-10-01 Cerulean Pharma Inc. Method for fabricating nanoparticles
US9624213B2 (en) 2011-02-07 2017-04-18 Plexxikon Inc. Compounds and methods for kinase modulation, and indications therefor
AR085279A1 (es) 2011-02-21 2013-09-18 Plexxikon Inc Formas solidas de {3-[5-(4-cloro-fenil)-1h-pirrolo[2,3-b]piridina-3-carbonil]-2,4-difluor-fenil}-amida del acido propano-1-sulfonico
AU2012236099A1 (en) 2011-03-31 2013-10-03 Moderna Therapeutics, Inc. Delivery and formulation of engineered nucleic acids
WO2012145632A1 (en) * 2011-04-21 2012-10-26 Cerulean Pharma Inc. Cyclodextrin-based polymers for therapeutic delivery
US9464124B2 (en) 2011-09-12 2016-10-11 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
DE19216461T1 (de) 2011-10-03 2021-10-07 Modernatx, Inc. Modifizierte nukleoside, nukleotide und nukleinsäuren und verwendungen davon
CA3018046A1 (en) 2011-12-16 2013-06-20 Moderna Therapeutics, Inc. Modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions
CN111012914A (zh) 2012-01-18 2020-04-17 苏州泰飞尔医药有限公司 治疗肺部疾病的高穿透力前药组合物和医药组合物
US20130196906A1 (en) * 2012-01-31 2013-08-01 Cerulean Pharma Inc. Cyclodextrin-based polymers for therapeutic delivery
US10080805B2 (en) 2012-02-24 2018-09-25 Purdue Research Foundation Cholecystokinin B receptor targeting for imaging and therapy
EP2826492A4 (en) * 2012-03-13 2015-10-21 Postech Acad Ind Found DRUG CONJUGATE WITH CONTROLLED RELEASE AND USE THEREOF
US9358235B2 (en) 2012-03-19 2016-06-07 Plexxikon Inc. Kinase modulation, and indications therefor
US20140080175A1 (en) 2012-03-29 2014-03-20 Endocyte, Inc. Processes for preparing tubulysin derivatives and conjugates thereof
WO2013151665A2 (en) 2012-04-02 2013-10-10 modeRNA Therapeutics Modified polynucleotides for the production of proteins associated with human disease
US9283287B2 (en) 2012-04-02 2016-03-15 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins
US9254311B2 (en) 2012-04-02 2016-02-09 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of proteins
US9572897B2 (en) 2012-04-02 2017-02-21 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins
US9598503B2 (en) * 2012-04-18 2017-03-21 Cerulean Pharma Inc. Methods and systems for polymer precipitation and generation of particles
US9150570B2 (en) 2012-05-31 2015-10-06 Plexxikon Inc. Synthesis of heterocyclic compounds
US9827321B2 (en) 2012-08-14 2017-11-28 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Stabilizing shear-thinning hydrogels
EP2892534B8 (en) 2012-09-06 2021-09-15 Plexxikon Inc. Compounds and methods for kinase modulation, and indications therefor
US20140094432A1 (en) 2012-10-02 2014-04-03 Cerulean Pharma Inc. Methods and systems for polymer precipitation and generation of particles
BR112015008365A2 (pt) 2012-10-16 2017-07-04 Endocyte Inc composto da fórmula b-l(d)x, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, composição farmacêutica, uso de um composto, composição de forma de dosagem unitária ou dose unitária, composição para tratar um câncer em um paciente, e método para tratar um câncer em um paciente
WO2014070233A1 (en) 2012-10-29 2014-05-08 Boston Medical Center Corporation Brca1 mutations as predictive markers for topoisomerase i inhibitors
PL2922554T3 (pl) 2012-11-26 2022-06-20 Modernatx, Inc. Na zmodyfikowany na końcach
US9919059B2 (en) 2012-12-10 2018-03-20 Massachusetts Institute Of Technology Multistage nanoparticle drug delivery system for the treatment of solid tumors
CN103044349B (zh) * 2012-12-13 2014-05-21 浙江大学 一种微波辅助纳米铁酸盐制备乙二胺四乙酸酐的方法
MX365640B (es) 2012-12-21 2019-06-10 Plexxikon Inc Compuestos y metodos para la modulacion de quinasas y sus indicaciones.
WO2014130994A1 (en) * 2013-02-25 2014-08-28 University Of Rochester Nanoparticles for controlled release of anti-biofilm agents
US9132097B2 (en) 2013-03-01 2015-09-15 California Institute Of Technology Nanoparticles stabilized with nitrophenylboronic acid compositions
US9468681B2 (en) 2013-03-01 2016-10-18 California Institute Of Technology Targeted nanoparticles
US20140302516A1 (en) 2013-03-14 2014-10-09 University Of Washington Through Its Center For Commercialization Polymer dot compositions and related methods
WO2014152211A1 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Moderna Therapeutics, Inc. Formulation and delivery of modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions
US8980864B2 (en) 2013-03-15 2015-03-17 Moderna Therapeutics, Inc. Compositions and methods of altering cholesterol levels
DK2970265T3 (en) 2013-03-15 2018-10-01 Plexxikon Inc HETEROCYCLIC COMPOUNDS AND APPLICATIONS THEREOF
CN105228983A (zh) 2013-05-30 2016-01-06 普莱希科公司 用于激酶调节的化合物及其适应症
ES2761587T3 (es) 2013-08-07 2020-05-20 Friedrich Miescher Institute For Biomedical Res Nuevo método de cribado para el tratamiento de la ataxia de Friedreich
EP3041934A1 (en) 2013-09-03 2016-07-13 Moderna Therapeutics, Inc. Chimeric polynucleotides
WO2015034925A1 (en) 2013-09-03 2015-03-12 Moderna Therapeutics, Inc. Circular polynucleotides
WO2015048744A2 (en) 2013-09-30 2015-04-02 Moderna Therapeutics, Inc. Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides
EP3052521A1 (en) 2013-10-03 2016-08-10 Moderna Therapeutics, Inc. Polynucleotides encoding low density lipoprotein receptor
CN109806027A (zh) 2013-11-01 2019-05-28 雷恩斯根公司 双部件调节性人工晶状体设备
US9771369B2 (en) 2014-03-04 2017-09-26 Plexxikon Inc. Compounds and methods for kinase modulation, and indications therefor
US10653709B2 (en) * 2014-05-19 2020-05-19 North Carolina State University Methods of folding a graft copolymer with dual anticancer drugs and related applications
MX379365B (es) 2014-06-30 2025-03-11 Tarveda Therapeutics Inc Conjugados y partículas direccionados y formulaciones de estos.
US20170204152A1 (en) 2014-07-16 2017-07-20 Moderna Therapeutics, Inc. Chimeric polynucleotides
EP3171895A1 (en) 2014-07-23 2017-05-31 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of intrabodies
US10004596B2 (en) 2014-07-31 2018-06-26 Lensgen, Inc. Accommodating intraocular lens device
ES2774177T3 (es) 2014-09-15 2020-07-17 Plexxikon Inc Compuestos heterocíclicos y usos de estos
CN104274837B (zh) * 2014-09-18 2017-01-11 福格森（武汉）生物科技股份有限公司 一种尼洛替尼口服制剂
CN104311820B (zh) * 2014-09-24 2017-06-20 北京化工大学 一种基于多糖接枝聚天冬氨酸苄酯构建可降解药物载体的方法
WO2016164641A1 (en) 2015-04-08 2016-10-13 Plexxikon Inc. Compounds and methods for kinase modulation, and indications therefor
TWI547308B (zh) * 2015-06-10 2016-09-01 聚和國際股份有限公司 聚電解質膠囊的製備方法及所製得的聚電解質膠囊
ES2882255T3 (es) 2015-07-01 2021-12-01 California Inst Of Techn Sistemas de administración basados en polímeros de ácido múcico catiónicos
WO2017006279A1 (en) * 2015-07-08 2017-01-12 Aten Porus Lifesciences Cyclodextrin-polymer complexes and compostions and methods of making and using the same
HUE053990T2 (hu) * 2015-07-22 2021-08-30 Nitto Denko Corp Nanorészecske liofilizált formák készítményei és eljárások
US10829484B2 (en) 2015-07-28 2020-11-10 Plexxikon Inc. Compounds and methods for kinase modulation, and indications therefor
EA037478B1 (ru) 2015-08-04 2021-04-01 Дьюк Юниверсити Генетически кодируемые внутренне неупорядоченные полимеры-"невидимки" для доставки и способы их применения
ES2913048T3 (es) 2015-09-21 2022-05-31 Opna Immuno Oncology Sa Compuestos heterocíclicos y usos de estos
US11160871B2 (en) 2015-10-28 2021-11-02 Tarveda Therapeutics, Inc. SSTR-targeted conjugates and particles and formulations thereof
WO2017079537A1 (en) 2015-11-04 2017-05-11 Duke University Polycationic polymers for use in treating and detecting cancer
CN113180886A (zh) 2015-12-01 2021-07-30 雷恩斯根公司 调节性人工晶状体装置
US20180271998A1 (en) 2015-12-04 2018-09-27 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. Disulfide-stabilized fabs
WO2017106630A1 (en) 2015-12-18 2017-06-22 The General Hospital Corporation Polyacetal polymers, conjugates, particles and uses thereof
US11752213B2 (en) 2015-12-21 2023-09-12 Duke University Surfaces having reduced non-specific binding and antigenicity
EP3405501B1 (en) * 2016-01-21 2023-11-15 Aten Porus Lifesciences Cyclodextrin based polymers, methods, compositions and applications thereof
WO2017176807A2 (en) 2016-04-04 2017-10-12 University Of Virginia Patent Foundation Compositions for inhibiting formation of and/or disrupting bacterial biofilms and methods of use therefor
WO2017210476A1 (en) 2016-06-01 2017-12-07 Duke University Nonfouling biosensors
CN109715196A (zh) 2016-06-13 2019-05-03 转矩医疗股份有限公司 用于促进免疫细胞功能的组合物和方法
WO2018053201A1 (en) 2016-09-14 2018-03-22 Duke University Triblock polypeptide-based nanoparticles for the delivery of hydrophilic drugs
TW201815766A (zh) 2016-09-22 2018-05-01 美商普雷辛肯公司 用於ｉｄｏ及ｔｄｏ調節之化合物及方法以及其適應症
JP2020500150A (ja) 2016-09-23 2020-01-09 デューク ユニバーシティ 下限臨界溶液温度挙動を有する非反復かつ非構造的ポリペプチド
ES3046537T3 (en) 2016-11-08 2025-12-02 Regeneron Pharma Steroids and protein-conjugates thereof
WO2018106738A1 (en) 2016-12-05 2018-06-14 Massachusetts Institute Of Technology Brush-arm star polymers, conjugates and particles, and uses thereof
US12447464B2 (en) 2016-12-22 2025-10-21 Duke University Polycationic microfibers and methods of using the same
EP3558991A2 (en) 2016-12-23 2019-10-30 Plexxikon Inc. Compounds and methods for cdk8 modulation and indications therefor
US11072668B2 (en) 2017-01-03 2021-07-27 The University Of North Carolina At Chapel Hill Nitric oxide-releasing alginates as biodegradable antibacterial scaffolds and methods pertaining thereto
WO2018132732A1 (en) 2017-01-12 2018-07-19 Duke University Genetically encoded lipid-polypeptide hybrid biomaterials that exhibit temperature triggered hierarchical self-assembly
JP7403152B2 (ja) 2017-03-28 2023-12-22 ザ ユニバーシティ オブ ノース カロライナ アット チャペル ヒル 生分解可能な抗菌性スキャフォールドとしての一酸化窒素放出性ポリアミノグリコシドおよびそれに関する方法背景
WO2018213320A1 (en) 2017-05-15 2018-11-22 Duke University Recombinant production of hybrid lipid-biopolymer materials that self-assemble and encapsulate agents
KR20200007905A (ko) 2017-05-18 2020-01-22 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 사이클로덱스트린 단백질 약물 접합체
WO2018226846A1 (en) 2017-06-07 2018-12-13 Plexxikon Inc. Compounds and methods for kinase modulation
WO2019006374A1 (en) 2017-06-30 2019-01-03 Duke University ORDER AND DISORDER AS A DESIGN PRINCIPLE FOR STIMULI-SENSITIVE BIOPOLYMER NETWORKS
JP7187048B2 (ja) 2017-06-30 2022-12-12 マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー 分枝多官能性マクロモノマーおよび関連ポリマーならびにそれらの使用
EP3706735A1 (en) 2017-11-06 2020-09-16 Snap Bio, Inc. Pim kinase inhibitor compositions, methods, and uses thereof
MX2020004691A (es) 2017-11-07 2020-08-20 Regeneron Pharma Enlazadores hidrofilicos para conjugados anticuerpo-farmaco.
AU2018369760B2 (en) 2017-11-15 2025-01-02 The University Of North Carolina At Chapel Hill Nitric oxide-releasing hyperbranched compounds as antibacterial scaffolds and methods pertaining thereto
SG11202006510XA (en) 2018-01-08 2020-08-28 Regeneron Pharma Steroids and antibody-conjugates thereof
WO2019147954A1 (en) 2018-01-26 2019-08-01 Duke University Albumin binding peptide-drug (aibiped) conjugates and methods of making and using same
WO2019173539A1 (en) 2018-03-06 2019-09-12 The University Of North Carolina At Chapel Hill Nitric oxide-releasing cyclodextrins as biodegradable antibacterial scaffolds and methods pertaining thereto
EP3768666A1 (en) 2018-03-20 2021-01-27 Plexxikon Inc. Compounds and methods for ido and tdo modulation, and indications therefor
EP3788343B1 (en) 2018-04-30 2024-03-27 Duke University Stimuli-responsive peg-like polymer-based drug delivery platform
CN118955710A (zh) 2018-05-09 2024-11-15 里珍纳龙药品有限公司 抗msr1抗体及其使用方法
WO2019241327A1 (en) 2018-06-13 2019-12-19 California Institute Of Technology Nanoparticles for crossing the blood brain barrier and methods of treatment using the same
US11649275B2 (en) 2018-08-02 2023-05-16 Duke University Dual agonist fusion proteins
US10988491B2 (en) 2018-08-17 2021-04-27 Massachusetts Institute Of Technology Degradable polymers of a cyclic silyl ether and uses thereof
US12594347B2 (en) 2018-09-07 2026-04-07 Duke University Nanoparticulate drug delivery systems
JP7645546B2 (ja) 2018-12-28 2025-03-14 ザ ユニバーシティ オブ ノース カロライナ アット チャペル ヒル 一酸化窒素放出抗菌性ポリマーおよびそれから製造された足場、ならびにそれに関する方法
WO2020139403A1 (en) * 2018-12-29 2020-07-02 Wacker Chemie Ag Hydrophilic cyclodextrin-containing silicone gels
US12433870B2 (en) 2019-01-31 2025-10-07 Northwestern University Supramolecular photoprotection of a photosensitizer
SG11202110714VA (en) 2019-04-09 2021-10-28 Plexxikon Inc Condensed azines for ep300 or cbp modulation and indications therefor
WO2020236253A1 (en) 2019-05-20 2020-11-26 Massachusetts Institute Of Technology Boronic ester prodrugs and uses thereof
US11512314B2 (en) 2019-07-12 2022-11-29 Duke University Amphiphilic polynucleotides
KR102904096B1 (ko) * 2019-12-06 2025-12-24 (주) 에이치엔에이파마켐 공유결합성 유기 골격체 및 폴리머를 이용한 경피전달용 복합체
US12509444B2 (en) 2019-12-06 2025-12-30 Plexxikon Inc. Compounds and methods for CD73 modulation and indications therefor
WO2021141662A1 (en) 2020-01-10 2021-07-15 Massachusetts Institute Of Technology Proteolysis targeting chimeric molecules (protacs) with functional handles and uses thereof
CN111443068B (zh) * 2020-03-06 2023-06-27 天津大学 具有多重刺激响应特性的纯有机室温磷光材料及筛选方法和应用
US20210315869A1 (en) 2020-04-02 2021-10-14 Plexxikon Inc. Compounds and methods for csk modulation and indications therefor
US11807626B2 (en) 2020-04-23 2023-11-07 Opna Bio SA Compounds and methods for CD73 modulation and indications therefor
WO2021222442A1 (en) 2020-04-29 2021-11-04 Plexxikon Inc. Synthesis of heterocyclic compounds
NL2025818B1 (en) * 2020-06-11 2022-02-16 Umc Utrecht Holding Bv Improved adhesive drug carrier
EP4164658A4 (en) * 2020-06-15 2024-06-12 Nanosynthons LLC Excipients providing stabilization and enhanced water solubilization and their uses
EP4192509A1 (en) 2020-08-05 2023-06-14 Ellipses Pharma Ltd Treatment of cancer using a cyclodextrin-containing polymer-topoisomerase inhibitor conjugate and a parp inhibitor
WO2022061251A1 (en) 2020-09-18 2022-03-24 Plexxikon Inc. Compounds and methods for kras modulation and indications therefor
CN112755197B (zh) * 2020-10-09 2023-01-13 黑龙江大学 一种环糊精药物包合物及其制备方法和应用
WO2022159319A2 (en) * 2021-01-19 2022-07-28 Mountain Valley Md Inc A porous aluminum nanoparticulate structure
WO2022165260A1 (en) 2021-01-29 2022-08-04 Iovance Biotherapeutics, Inc. Methods of making modified tumor infiltrating lymphocytes and their use in adoptive cell therapy
CN115160454A (zh) * 2021-04-01 2022-10-11 四川大学 一种基于聚-β-环糊精与金刚烷主客体作用的超分子多醛化合物及其制备方法
CN113274541A (zh) * 2021-05-10 2021-08-20 四川大学 一种抗菌型胶原基医用材料及其制备方法
WO2022240966A1 (en) 2021-05-11 2022-11-17 Opna Immuno-Oncology Sa Compounds and methods for yap/tead modulation and indications therefor
KR20230050084A (ko) * 2021-10-07 2023-04-14 주식회사 셀진 Plga 및 약물을 함유하는 베타-사이클로덱스트린을 포함하는 약물 전달체
MX2024007452A (es) * 2021-12-15 2024-07-09 Sillajen Inc Composiciones farmaceuticas que comprenden beta-ciclodextrinas modificadas.
EP4469065A1 (en) 2022-01-28 2024-12-04 Iovance Biotherapeutics, Inc. Cytokine associated tumor infiltrating lymphocytes compositions and methods
CN114470237B (zh) * 2022-03-21 2023-12-19 中国科学院长春应用化学研究所 一种类病毒结构基因载体、药物递送系统、其制备方法及其应用
CN115006549B (zh) * 2022-06-16 2024-07-05 湖南科技大学 一种粒径可控及可控降解的酸敏型交联环糊精纳米水凝胶药物递送系统的制备方法
CN115340615B (zh) * 2022-08-12 2023-05-02 同济大学 一种基于环糊精-氨基酸的荧光分子及其合成方法与应用
US20240132521A1 (en) 2022-08-22 2024-04-25 Iambic Therapeutics, Inc. Compounds and methods for modulating her2
WO2025015318A2 (en) 2023-07-13 2025-01-16 Iovance Biotherapeutics, Inc. Cytokine encoding lentiviral vectors and uses thereof for making tumor infiltrating lymphocytes
WO2026006784A1 (en) 2024-06-28 2026-01-02 Iovance Biotherapeutics, Inc. Methods of making tumor reactive peripheral blood lymphocytes (trpbl)
CN119345381B (zh) * 2024-12-23 2025-04-18 上海华之沃生物医药科技有限公司 替曲朵辛偶联物及其制备方法和应用

Family Cites Families (246)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2131201A (en) 1928-08-04 1938-09-27 Gen Motors Corp Composite clutch
US2129408A (en) 1936-07-02 1938-09-06 Arthur C Davidson Truck stabilizer
US2129401A (en) 1937-09-09 1938-09-06 Botinger Fred Flexible utility ladder
US2131208A (en) 1938-02-26 1938-09-27 Union Switch & Signal Co Remote indication apparatus
US3472835A (en) * 1964-02-12 1969-10-14 American Mach & Foundry Schardinger dextrins
US3454530A (en) * 1966-03-07 1969-07-08 Leslie C Case Novel polyols which are reaction products of a monoepoxide and a cyclic monoanhydride
US3453257A (en) * 1967-02-13 1969-07-01 Corn Products Co Cyclodextrin with cationic properties
US3426011A (en) * 1967-02-13 1969-02-04 Corn Products Co Cyclodextrins with anionic properties
US3654261A (en) * 1968-06-27 1972-04-04 Cpc International Inc Quaternary ammonium alkoxide alkoxy polyol compounds
USRE32268E (en) * 1973-03-01 1986-10-21 Strategic Medical Research Corp. Therapeutic composition and method of therapeutically treating warm blooded animals therewith
GB1390479A (en) 1973-09-05 1975-04-16 I Orch Sinteza Akademii Nauk L Pharmaceutical composition for treatment of parkinsonism
DE2843963A1 (de) 1978-10-09 1980-04-24 Merck Patent Gmbh Im koerper resorbierbare geformte masse auf basis von kollagen und ihre verwendung in der medizin
DE2842862A1 (de) * 1978-10-02 1980-04-10 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur bestimmung von ionen, polaren und/oder lipophilen substanzen in fluessigkeiten
CA1190855A (en) 1980-09-03 1985-07-23 Rolf W. Pfirrmann Treatment of osteitis
JPS58113198A (ja) * 1981-12-26 1983-07-05 Hidetoshi Tsuchida シクロデキストリンが結合したポルフイリン化合物
US4570629A (en) 1982-03-17 1986-02-18 University Of Illinois Foundation Hydrophilic biopolymeric copolyelectrolytes, and biodegradable wound dressing comprising same
JPS58167613A (ja) 1982-03-26 1983-10-03 Mitsubishi Petrochem Co Ltd 水溶性シクロデキストリン含有重合体の製造法
EP0092918B1 (en) 1982-04-22 1988-10-19 Imperial Chemical Industries Plc Continuous release formulations
CA1208558A (en) 1982-10-07 1986-07-29 Kazuo Kigasawa Soft buccal
US4438253A (en) 1982-11-12 1984-03-20 American Cyanamid Company Poly(glycolic acid)/poly(alkylene glycol) block copolymers and method of manufacturing the same
HU191101B (en) * 1983-02-14 1987-01-28 Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszeti Termekek Gyara Rt,Hu Process for preparing water-soluble cyclodextrin polymers substituted with ionic groups
ATE26584T1 (de) 1983-07-01 1987-05-15 Battelle Memorial Institute In-vivo abbaubares polypeptid und dessen anwendung zur verzoegerten freigabe von medikamenten.
US4525495A (en) 1983-07-22 1985-06-25 The Dow Chemical Company Mineral filled composites
JPS60100516A (ja) 1983-11-04 1985-06-04 Takeda Chem Ind Ltd 徐放型マイクロカプセルの製造法
US4818542A (en) * 1983-11-14 1989-04-04 The University Of Kentucky Research Foundation Porous microspheres for drug delivery and methods for making same
US4727064A (en) * 1984-04-25 1988-02-23 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Pharmaceutical preparations containing cyclodextrin derivatives
GB8416234D0 (en) 1984-06-26 1984-08-01 Ici Plc Biodegradable amphipathic copolymers
US4625014A (en) * 1984-07-10 1986-11-25 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Cell-delivery agent
CH663951A5 (fr) 1984-10-10 1988-01-29 Nestle Sa Procede d'enrichissement selectif en acides gras polyinsatures d'un melange contenant des acides gras fractions enrichies obtenues et compositions les contenant.
US4582865A (en) * 1984-12-06 1986-04-15 Biomatrix, Inc. Cross-linked gels of hyaluronic acid and products containing such gels
US4638045A (en) 1985-02-19 1987-01-20 Massachusetts Institute Of Technology Non-peptide polyamino acid bioerodible polymers
JPH0651725B2 (ja) * 1985-02-28 1994-07-06 メルシャン株式会社 部分メチル化シクロデキストリン及びその製造方法
GB8506792D0 (en) * 1985-03-15 1985-04-17 Janssen Pharmaceutica Nv Derivatives of y-cyclodextrin
US4841081A (en) * 1985-10-16 1989-06-20 Osaka Soda Co., Ltd. Method of optically resolving a racemate or a diastereomeric mixture of glycidyl compound
FR2601675B1 (fr) 1986-07-17 1988-09-23 Rhone Poulenc Sante Derives du taxol, leur preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
ES2058081T3 (es) 1986-09-05 1994-11-01 American Cyanamid Co Poliesteres que contienen bloques de oxido de alquileno como sistemas de administracion de medicamentos.
GB2197720A (en) 1986-11-20 1988-05-25 Nat Res Dev Immobilisation of polynucleotides
US5166320A (en) * 1987-04-22 1992-11-24 University Of Connecticut Carrier system and method for the introduction of genes into mammalian cells
JP2993967B2 (ja) * 1987-06-17 1999-12-27 インスティテュート・フォー・チャイルド・ヘルス・リサーチ ダニアレルゲンのクローニング
US4877778A (en) * 1987-07-01 1989-10-31 The Children's Medical Center Corporation Method of enhancing lipophile transport using cyclodextrin derivatives
US4774329A (en) * 1987-08-04 1988-09-27 American Maize-Products Company Controlled release agent for cetylpyridinium chloride
US4941996A (en) 1987-10-19 1990-07-17 Minnesota Mining And Manufacturing Company Inclusion complexes providing second harmonic generation
US5760015A (en) 1988-01-19 1998-06-02 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Cyclodextrin compounds and methods of making and use thereof
JP2670680B2 (ja) 1988-02-24 1997-10-29 株式会社ビーエムジー 生理活性物質含有ポリ乳酸系微小球およびその製造法
JP2614081B2 (ja) 1988-05-27 1997-05-28 大塚化学株式会社 光学活性β−ラクタム誘導体の製造法
US4887778A (en) 1988-06-01 1989-12-19 Universal Instruments Corporation Feeder drive assembly and replaceable section for tape supplying and cover peeling
JPH01319502A (ja) * 1988-06-21 1989-12-25 Showa Denko Kk シクロデキストリン誘導体及びその製造方法
HU200913B (en) 1988-07-28 1990-09-28 Ciklodextrin Kutato Fejlesztoe Process for producing infusion stock-solution containing pharmaceutically active components of bad water solubility
MY106598A (en) 1988-08-31 1995-06-30 Australian Commercial Res & Development Ltd Compositions and methods for drug delivery and chromatography.
US5098793A (en) * 1988-09-29 1992-03-24 Uop Cyclodextrin films on solid substrates
US4902788A (en) 1988-09-29 1990-02-20 Uop Crosslinked cyclodextrins supported on porous refractory inorganic oxides
IT1230566B (it) 1988-10-17 1991-10-28 Vectorpharma Int Farmaci poco solubili supportati su sostanze polimeriche in forma atta all'aumento della velocita' di dissoluzione
US5108921A (en) * 1989-04-03 1992-04-28 Purdue Research Foundation Method for enhanced transmembrane transport of exogenous molecules
US5688488A (en) * 1989-04-03 1997-11-18 Purdue Research Foundation Composition and method for tumor imaging
US5424186A (en) * 1989-06-07 1995-06-13 Affymax Technologies N.V. Very large scale immobilized polymer synthesis
US5143854A (en) * 1989-06-07 1992-09-01 Affymax Technologies N.V. Large scale photolithographic solid phase synthesis of polypeptides and receptor binding screening thereof
US5376645A (en) 1990-01-23 1994-12-27 University Of Kansas Derivatives of cyclodextrins exhibiting enhanced aqueous solubility and the use thereof
JPH03221505A (ja) 1990-01-29 1991-09-30 Toppan Printing Co Ltd シクロデキストリンポリマーの合成方法及びシクロデキストリン膜の製造方法
WO1991013100A1 (en) * 1990-03-02 1991-09-05 Australian Commercial Research & Development Limited Cyclodextrin compositions and methods for pharmaceutical and industrial applications
IT1241417B (it) * 1990-03-06 1994-01-14 Vectorpharma Int Composizioni terapeutiche a rilascio controllato di farmaci supportatisu polimeri reticolati e rivestiti con film polimerici,e loro processodi preparazione
DE4009825A1 (de) * 1990-03-27 1991-10-02 Consortium Elektrochem Ind Wasserunloesliche cyclodextrin-polymerisate und verfahren zu deren herstellung
US5139687A (en) 1990-05-09 1992-08-18 The Proctor & Gamble Company Non-destructive carriers for cyclodextrin complexes
JPH0425505A (ja) 1990-05-21 1992-01-29 Toppan Printing Co Ltd シクロデキストリンポリマー及びシクロデキストリン膜の製造方法
US5650489A (en) * 1990-07-02 1997-07-22 The Arizona Board Of Regents Random bio-oligomer library, a method of synthesis thereof, and a method of use thereof
FR2665169A1 (fr) 1990-07-30 1992-01-31 Rhone Poulenc Chimie Composes d'inclusion de cyclodextrines enfermant des antioxydants phenoliques et leur utilisation dans les polymeres.
JPH04106101A (ja) 1990-08-27 1992-04-08 Showa Denko Kk シクロデキストリンポリマーおよびその製造方法
JPH059205A (ja) * 1990-09-28 1993-01-19 Mercian Corp 新規なアドリアマイシン誘導体
EP0477931B1 (en) * 1990-09-28 1994-08-17 Mercian Corporation Novel adriamycin derivatives
US5208316A (en) * 1990-10-01 1993-05-04 Toppan Printing Co., Ltd. Cyclodextrin polymer and cyclodextrin membrane prepared using said polymer
KR927003647A (ko) * 1990-11-30 1992-12-18 돕빵 인사쯔 가부시끼가이샤 시클로덱스트린유도체 및 시클로덱스트린 고정화 폴리머의 제조방법
DE69132531T2 (de) 1990-12-06 2001-09-13 Affymetrix, Inc. (N.D.Ges.D.Staates Delaware) Verbindungen und ihre Verwendung in einer binären Synthesestrategie
US5148854A (en) * 1990-12-11 1992-09-22 Toshiba Kikai Kabushiki Kaisha Counting die cast manufactured goods
NO180605C (no) * 1990-12-19 2003-08-28 Geco As Anordning til vektbelastning av streamerkabel
US5330768A (en) 1991-07-05 1994-07-19 Massachusetts Institute Of Technology Controlled drug delivery using polymer/pluronic blends
US5750561A (en) 1991-07-08 1998-05-12 Rhone-Poulenc Rorer, S.A. Compositions containing taxane derivatives
US5698582A (en) 1991-07-08 1997-12-16 Rhone-Poulenc Rorer S.A. Compositions containing taxane derivatives
US5714512A (en) 1991-07-08 1998-02-03 Rhone-Poulenc Rorer, S.A. Compositions containing taxane derivatives
CA2116431A1 (en) 1991-09-06 1993-03-18 Gurcharn S. Sidhu Composition and method for reducing cholesterol concentration
NZ244306A (en) 1991-09-30 1995-07-26 Boehringer Ingelheim Int Composition for introducing nucleic acid complexes into eucaryotic cells, complex containing nucleic acid and endosomolytic agent, peptide with endosomolytic domain and nucleic acid binding domain and preparation
EP0610441A4 (en) 1991-10-29 1996-01-10 Clover Cons Ltd CROSSLINKABLE POLYSACCHARIDES, POLYCATIONS AND LIPIDS CAN BE USED TO ENCODE AND DISPENSE MEDICINAL PRODUCTS.
US6849462B1 (en) * 1991-11-22 2005-02-01 Affymetrix, Inc. Combinatorial strategies for polymer synthesis
JP2976154B2 (ja) 1991-11-27 1999-11-10 コニカ株式会社 ハロゲン化銀写真感光材料用固形処理剤
JP3221505B2 (ja) 1992-02-06 2001-10-22 日本信号株式会社 移動体の運行管理装置
US5219980A (en) 1992-04-16 1993-06-15 Sri International Polymers biodegradable or bioerodiable into amino acids
JPH05331074A (ja) 1992-05-27 1993-12-14 Nippon Oil & Fats Co Ltd 薬物運搬体
GB9211268D0 (en) 1992-05-28 1992-07-15 Ici Plc Salts of basic peptides with carboxyterminated polyesters
IT1256134B (it) 1992-09-09 1995-11-29 Luigi Boltri Sali lipofili contenenti isotopi neutron attivabili e composizioni che li contengono
US5482719A (en) 1992-10-30 1996-01-09 Guillet; James E. Drug delivery systems
AU683631B2 (en) * 1992-11-30 1997-11-20 Biocure, Inc. Polymerizable carbohydrate esters, polymers made from such esters and the use of such polymers
FR2698543B1 (fr) 1992-12-02 1994-12-30 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouvelles compositions à base de taxoides.
US6749868B1 (en) 1993-02-22 2004-06-15 American Bioscience, Inc. Protein stabilized pharmacologically active agents, methods for the preparation thereof and methods for the use thereof
US5439686A (en) 1993-02-22 1995-08-08 Vivorx Pharmaceuticals, Inc. Methods for in vivo delivery of substantially water insoluble pharmacologically active agents and compositions useful therefor
NZ262679A (en) 1993-02-22 1997-08-22 Vivorx Pharmaceuticals Inc Compositions for in vivo delivery of pharmaceutical agents where the agents are contained in a polymeric shell
US6753006B1 (en) 1993-02-22 2004-06-22 American Bioscience, Inc. Paclitaxel-containing formulations
US6096331A (en) 1993-02-22 2000-08-01 Vivorx Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions useful for administration of chemotherapeutic agents
US6537579B1 (en) 1993-02-22 2003-03-25 American Bioscience, Inc. Compositions and methods for administration of pharmacologically active compounds
US5298410A (en) * 1993-02-25 1994-03-29 Sterling Winthrop Inc. Lyophilized formulation of polyethylene oxide modified proteins with increased shelf-life
HU210922B (en) 1993-05-24 1995-09-28 Europharmaceuticals Sa Nimesulide alkali salt cyclodextrin inclusion complexes their preparation and pharmaceutical compositions containing them
US5840485A (en) * 1993-05-27 1998-11-24 Selectide Corporation Topologically segregated, encoded solid phase libraries
TW328535B (en) * 1993-07-02 1998-03-21 Novartis Ag Functional photoinitiators and their manufacture
JP3288149B2 (ja) 1993-08-05 2002-06-04 日本食品化工株式会社 シクロデキストリンポリマー及びその製造方法
RU2094059C1 (ru) 1993-08-30 1997-10-27 Московский государственный университет, химический факультет Способ транспорта нейротропных препаратов в мозг
US5616568A (en) * 1993-11-30 1997-04-01 The Research Foundation Of State University Of New York Functionalized derivatives of hyaluronic acid
US5880154A (en) * 1994-02-01 1999-03-09 The Board Of Regents Of The University Of Nebraska Polymeric adamantane analogues
TW307775B (en) 1994-02-15 1997-06-11 Novartis Erfind Verwalt Gmbh Unsaturated carbohydrate derivatives, polymers thereof and their use
IL112920A (en) 1994-03-07 2003-04-10 Dow Chemical Co Composition comprising a dendritic polymer complexed with at least one unit of biological response modifier and a process for the preparation thereof
JPH07316205A (ja) 1994-03-30 1995-12-05 D D S Kenkyusho:Kk シクロデキストリン誘導体
HU218280B (en) 1994-04-26 2000-07-28 Cyclodextrin inclusion complexes containing sin-1a which are stable intheir solid state, process for their preparation and pharmaceutical compositions containing the comlexes
US6589736B1 (en) * 1994-11-22 2003-07-08 The Trustees Of Boston University Photocleavable agents and conjugates for the detection and isolation of biomolecules
US5691316A (en) * 1994-06-01 1997-11-25 Hybridon, Inc. Cyclodextrin cellular delivery system for oligonucleotides
US5716594A (en) * 1994-06-06 1998-02-10 The Jmde Trust Biotin compounds for targetting tumors and sites of infection
US5776842A (en) 1994-06-23 1998-07-07 Cellresin Technologies, Llc Cellulosic web with a contaminant barrier or trap
EP0776330B1 (en) * 1994-06-23 2003-08-20 Affymax Technologies N.V. Photolabile compounds and methods for their use
US5549974A (en) * 1994-06-23 1996-08-27 Affymax Technologies Nv Methods for the solid phase synthesis of thiazolidinones, metathiazanones, and derivatives thereof
US5679773A (en) * 1995-01-17 1997-10-21 Affymax Technologies N.V Reagants and methods for immobilized polymer synthesis and display
US5494854A (en) 1994-08-17 1996-02-27 Texas Instruments Incorporated Enhancement in throughput and planarity during CMP using a dielectric stack containing HDP-SiO2 films
JP3699141B2 (ja) 1994-09-24 2005-09-28 伸彦 由井 超分子構造の生体内分解性医薬高分子集合体及びその調製方法
US5548932A (en) * 1994-11-08 1996-08-27 Maxcess Technologies, Inc. Adjustable cable tray support system
US5656611A (en) * 1994-11-18 1997-08-12 Supratek Pharma Inc. Polynucleotide compositions
US6353055B1 (en) * 1994-11-18 2002-03-05 Supratek Pharma Inc. Polynucleotide compositions
MA23823A1 (fr) 1995-03-27 1996-10-01 Aventis Pharma Sa Nouveaux taxoides, leur preparation et les compositions qui les contiennent
US6372780B2 (en) 1995-03-27 2002-04-16 Aventis Pharma S.A. Methods of treating cell lines expressing multidrug resistance P-glycoprotein
US5847170A (en) 1995-03-27 1998-12-08 Rhone-Poulenc Rorer, S.A. Taxoids, their preparation and pharmaceutical compositions containing them
US5728804A (en) * 1995-06-02 1998-03-17 Research Corporation Technologies, Inc. Use of cyclodextrins for protein renaturation
US6667293B1 (en) 1995-09-12 2003-12-23 Hybridon, Inc. Use of cyclodextrins to modulate gene expression with reduced immunostimulatory response
US6630351B1 (en) 1999-06-07 2003-10-07 Mirus Corporation Compositions and methods for drug delivery using pH sensitive molecules
CN1304058C (zh) 1996-03-12 2007-03-14 Pg－Txl有限公司 水溶性紫杉醇产品
US6441025B2 (en) 1996-03-12 2002-08-27 Pg-Txl Company, L.P. Water soluble paclitaxel derivatives
JP3830198B2 (ja) 1996-03-29 2006-10-04 東光薬品工業株式会社 超分子構造高分子集合体を用いた皮膚透過性インドメタシン外用剤
DE19612768A1 (de) 1996-03-29 1997-10-02 Basf Ag Cyclodextringruppen enthaltende Polymere, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung
JPH11514388A (ja) * 1996-04-03 1999-12-07 ザ・トラステイーズ・オブ・ザ・ユニバーシテイ・オブ・ペンシルベニア シクロデキストリン化合物ならびにその製造法および使用
US5844030A (en) * 1996-07-09 1998-12-01 Andros; Nicholas Charged ion cleaning devices and cleaning system
DE19629494A1 (de) 1996-07-09 1998-01-15 Schering Ag Pseudopolyrotaxane
US6232434B1 (en) * 1996-08-02 2001-05-15 Duke University Medical Center Polymers for delivering nitric oxide in vivo
US5770645A (en) 1996-08-02 1998-06-23 Duke University Medical Center Polymers for delivering nitric oxide in vivo
US6083697A (en) 1996-11-14 2000-07-04 Affymetrix, Inc. Chemical amplification for the synthesis of patterned arrays
JPH10158195A (ja) 1996-11-28 1998-06-16 Res Inst For Prod Dev 配位結合を利用した薬物−高分子複合体製剤の調製方法
US6495579B1 (en) 1996-12-02 2002-12-17 Angiotech Pharmaceuticals, Inc. Method for treating multiple sclerosis
HUP9700632A3 (en) 1997-03-24 1999-10-28 Cyclolab Ciklodextrin Kutato F Pharmaceutical compositions containing propylamine derivative and cyclodextrine and process for producing the same
WO1998047496A2 (en) * 1997-04-18 1998-10-29 Access Pharmaceuticals, Inc. Polymer-platinum compounds
JP2001524097A (ja) 1997-04-23 2001-11-27 ユニバーシティ オブ オタゴ 眼用組成物の制御放出
EP0979311A1 (en) 1997-04-30 2000-02-16 Of The University Of Minnesota Regents $i(IN VIVO) USE OF RECOMBINAGENIC OLIGONUCLEOBASES TO CORRECT GENETIC LESIONS IN HEPATOCYTES
US5990237A (en) 1997-05-21 1999-11-23 Shearwater Polymers, Inc. Poly(ethylene glycol) aldehyde hydrates and related polymers and applications in modifying amines
CA2303268A1 (en) * 1997-06-13 1998-12-17 Scott Walsh Therapeutic nanospheres
DE19726186A1 (de) 1997-06-20 1998-12-24 Boehringer Ingelheim Int Komplexe für den Transport von Nukleinsäure in höhere eukaryotische Zellen
JPH11100401A (ja) * 1997-07-30 1999-04-13 Kikkoman Corp 環状オリゴ糖及びそれを含むレトロウイルス性疾患の予防または治療剤
US6410342B1 (en) * 1997-08-19 2002-06-25 Pharmacopeia, Inc. Method and apparatus for controlled photoelution
CA2302316A1 (en) * 1997-09-15 1999-03-25 Genetic Immunity, Llc. Method of delivering genes to antigen presenting cells of the skin
WO1999030727A1 (en) 1997-12-17 1999-06-24 Enzon, Inc. Polymeric prodrugs of amino- and hydroxyl-containing bioactive agents
US6383811B2 (en) 1997-12-30 2002-05-07 Mirus Corporation Polyampholytes for delivering polyions to a cell
GB9801109D0 (en) 1998-01-20 1998-03-18 Pfizer Cyclodextrin compositions
WO1999041007A2 (en) * 1998-02-11 1999-08-19 University Of Houston Method and apparatus for chemical and biochemical reactions using photo-generated reagents
IT1298732B1 (it) 1998-03-13 2000-02-02 Recordati Chem Pharm Composizioni farmaceutiche orali assumibili senza liquidi,contenenti complessi di inclusione
US6048736A (en) 1998-04-29 2000-04-11 Kosak; Kenneth M. Cyclodextrin polymers for carrying and releasing drugs
WO1999061062A1 (en) 1998-05-29 1999-12-02 Massachusetts Institute Of Technology Cyclodextrin complexes
US7091192B1 (en) * 1998-07-01 2006-08-15 California Institute Of Technology Linear cyclodextrin copolymers
US6509323B1 (en) * 1998-07-01 2003-01-21 California Institute Of Technology Linear cyclodextrin copolymers
US6261583B1 (en) 1998-07-28 2001-07-17 Atrix Laboratories, Inc. Moldable solid delivery system
US6703381B1 (en) 1998-08-14 2004-03-09 Nobex Corporation Methods for delivery therapeutic compounds across the blood-brain barrier
AU756796B2 (en) 1998-10-16 2003-01-23 Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services, The Combination therapy with VIP antagonist
US7375096B1 (en) 1998-12-04 2008-05-20 California Institute Of Technology Method of preparing a supramolecular complex containing a therapeutic agent and a multi-dimensional polymer network
EP1133318B1 (en) 1998-12-04 2007-03-14 California Institute of Technology Supramolecular complexes containing therapeutic agents
AU2592600A (en) 1998-12-23 2000-07-31 G.D. Searle & Co. Method of using an integrin antagonist and one or more antineoplastic agents as a combination therapy in the treatment of neoplasia
US6740643B2 (en) * 1999-01-21 2004-05-25 Mirus Corporation Compositions and methods for drug delivery using amphiphile binding molecules
FR2789685B1 (fr) * 1999-02-15 2001-05-04 Univ Lille Sciences Tech Procede de fabrication de polymeres solubles et insolubles a base de cyclodextrine(s) et/ou de derives de cyclodextrine(s) et polymeres solubles a base de cyclodextrine(s) et/ou de derives de cyclodextrine(s)
AUPP913999A0 (en) * 1999-03-12 1999-04-01 Biota Scientific Management Pty Ltd Novel chemical compounds and their use
FR2792942B1 (fr) * 1999-04-29 2001-06-08 Commissariat Energie Atomique Cyclodextrines amphiphiles, leur preparation et leur utilisation pour solubiliser des systemes organises et incorporer des molecules hydrophobes
WO2000075162A1 (en) 1999-06-07 2000-12-14 Mirus Corporation A compound containing a labile disulfide bond
US6309633B1 (en) 1999-06-19 2001-10-30 Nobex Corporation Amphiphilic drug-oligomer conjugates with hydroyzable lipophile components and methods for making and using the same
US6420378B1 (en) 1999-10-15 2002-07-16 Supergen, Inc. Inhibition of abnormal cell proliferation with camptothecin and combinations including the same
EP1233671A4 (en) 1999-11-29 2005-11-02 Mirus Corp COMPOSITIONS AND METHODS OF DISPOSING MEDICAMENTS USING AMPHIPHILIC BINDING MOLECULARS
SK282717B6 (sk) 2000-03-10 2002-11-06 �Stav Experiment�Lnej Farmakol�Gie Sav Spôsob prípravy ultravysokomolekulových hyalurónanov
US20010041706A1 (en) 2000-03-24 2001-11-15 Synold Timothy W. Blockade of taxane metabolism
EP1267936A2 (en) * 2000-03-31 2003-01-02 SuperGen, Inc. Camptothecin complexes
JP2001288097A (ja) 2000-04-07 2001-10-16 Pg-Txl Co Lp 水溶性パクリタキセル誘導体
CA2410632A1 (en) 2000-06-22 2001-12-27 David S. Garvey Nitrosated and nitrosylated taxanes, compositions and methods of use
US6664228B1 (en) 2000-08-10 2003-12-16 Ceramoptec Industries, Inc. Photoselective marking of biological targets
WO2002010392A2 (en) 2000-08-01 2002-02-07 Oregon Health & Science University Mammalian dna binding membrane-associated protein-encoding gene and uses
TWI321054B (en) * 2000-12-19 2010-03-01 California Inst Of Techn Compositions containing inclusion complexes
EP1352072A4 (en) 2001-01-17 2004-09-01 Zycos Inc NUCLEIC ACID RELEASE PREPARATIONS
EP1243276A1 (en) 2001-03-23 2002-09-25 Franciscus Marinus Hendrikus De Groot Elongated and multiple spacers containing activatible prodrugs
US6828392B2 (en) 2001-08-28 2004-12-07 Carlsberg A/S Hydroxy and amine functionalized resins
US20030129262A1 (en) 2001-08-30 2003-07-10 Epner Daniel E. Methionine restriction for cancer therapy
US20030049203A1 (en) 2001-08-31 2003-03-13 Elmaleh David R. Targeted nucleic acid constructs and uses related thereto
US20040063654A1 (en) 2001-11-02 2004-04-01 Davis Mark E. Methods and compositions for therapeutic use of RNA interference
US20030157030A1 (en) 2001-11-02 2003-08-21 Insert Therapeutics, Inc. Methods and compositions for therapeutic use of rna interference
US20030134824A1 (en) 2001-11-12 2003-07-17 Ronald Breslow Beta-cyclodextrin dimers and phthalocyanines and uses thereof
US7141540B2 (en) * 2001-11-30 2006-11-28 Genta Salus Llc Cyclodextrin grafted biocompatible amphilphilic polymer and methods of preparation and use thereof
US6527887B1 (en) * 2002-01-18 2003-03-04 Mach I, Inc. Polymeric cyclodextrin nitrate esters
EP2316468A1 (en) * 2002-02-22 2011-05-04 Shire LLC Delivery system and methods for protecting and administering dextroamphetamine
JP2005518470A (ja) * 2002-02-22 2005-06-23 インサート セラピューティクス インコーポレイテッド 炭水化物−修飾ポリマー組成物及びその使用法
WO2003105828A1 (en) 2002-06-14 2003-12-24 Bristol-Myers Squibb Company Combination of epothilone analogs and chemotherapeutic agents for the treatment of proliferative diseases
US7776814B2 (en) 2002-07-09 2010-08-17 R&D-Biopharmaceuticals Gmbh Tubulysin conjugates
ES2601143T3 (es) 2002-07-19 2017-02-14 Omeros Corporation Copolímeros tribloque biodegradables, métodos de síntesis de los mismos, e hidrogeles y biomateriales preparados a partir de los mismos
EP1562627A4 (en) 2002-08-23 2006-11-02 Mclean Hospital Corp CORTICOSTEROID CONJUGATES AND ITS USES
AU2003256038A1 (en) 2002-08-30 2004-03-19 Ramot At Tel Aviv University Ltd. Self-immolative dendrimers releasing many active moieties upon a single activating event
US20040047835A1 (en) 2002-09-06 2004-03-11 Cell Therapeutics, Inc. Combinatorial drug therapy using polymer drug conjugates
CN1694728B (zh) 2002-09-06 2011-12-28 天蓝制药公司 用于传递治疗剂的以环糊精为基础的聚合物
ES2377318T3 (es) 2002-09-06 2012-03-26 Cerulean Pharma Inc. Polímeros a base de ciclodextrina para el suministro de los agentes terapéuticos enlazados covalentemente a ellos
US7091193B2 (en) 2002-10-09 2006-08-15 Kosan Biosciences Incorporated Therapeutic formulations
KR20050051686A (ko) * 2002-10-09 2005-06-01 인설트 테라페틱스, 인코퍼레이티드 사이클로덱스트린-기초한 재료, 조성물 및 이의 용도
AU2003280592B2 (en) 2002-10-31 2008-12-18 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha High-molecular weight derivatives of camptothecins
AU2003295600A1 (en) 2002-11-14 2004-06-15 Dharmacon, Inc. Functional and hyperfunctional sirna
US7550470B2 (en) 2002-12-11 2009-06-23 Merck & Co. Inc. Substituted pyrazolo[1,5-A]pyrimidines as tyrosine kinase inhibitors
WO2004069159A2 (en) 2003-01-27 2004-08-19 Endocyte, Inc. Vitamin receptor binding drug delivery conjugates
US7358262B2 (en) 2003-01-29 2008-04-15 Whitehead Institute For Biomedical Research Identification of genotype-selective anti-tumor agents
CN1216057C (zh) 2003-03-28 2005-08-24 贵州省生物研究所 喜树碱类似物的衍生物及其制备方法
UA101945C2 (uk) 2003-05-30 2013-05-27 Дженентек, Инк. Лікування злоякісного новоутворення за допомогою бевацизумабу
EP1525890A1 (en) 2003-10-02 2005-04-27 Complex Biosystems GmbH Protein-Proteophore complexes
WO2006004574A2 (en) 2004-02-19 2006-01-12 Abbott Laboratories Method for using gamma cyclodextrin to control blood glucose and insulin secretion
EP3042964A1 (en) 2004-06-04 2016-07-13 Genentech, Inc. Egfr mutations
CN101098854B (zh) 2004-07-23 2012-12-05 恩多塞特公司 二价连接体及其轭合物
CN101080227B (zh) 2004-12-15 2011-08-31 诺瓦提斯公司 用于治疗癌症的治疗剂的组合
TW200640493A (en) 2005-02-16 2006-12-01 Insert Therapeutics Inc Cyclodextrin-based polymers for therapeutics delivery
KR20070114753A (ko) 2005-02-18 2007-12-04 아브락시스 바이오사이언스 인크. 치료제의 조합 및 투여 방식, 및 조합 요법
JP2008531591A (ja) 2005-02-24 2008-08-14 エラン・ファルマ・インターナショナル・リミテッド ドセタキセルおよびそれらの類似体のナノ粒子製剤
JP2008537551A (ja) 2005-03-31 2008-09-18 カランド ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド リボヌクレオチドレダクターゼサブユニット２の阻害剤およびその使用
CA2612183C (en) 2005-06-28 2015-08-11 Genentech, Inc. Egfr and kras mutations
JP4994618B2 (ja) 2005-08-11 2012-08-08 学校法人北里研究所 Ｔｓ−１／カンプトテシン類による化学放射線療法
US8143236B2 (en) 2005-12-13 2012-03-27 Bionumerik Pharmaceuticals, Inc. Chemoprotective methods
US7897568B2 (en) 2006-03-03 2011-03-01 Vinay K. Singh Compositions for treatment of cancer
KR100917809B1 (ko) 2006-05-22 2009-09-18 에스케이케미칼주식회사 우수한 저장안정성을 갖는 도세탁셀 함유 주사제 조성물
US20100112077A1 (en) 2006-11-06 2010-05-06 Abraxis Bioscience, Llc Nanoparticles of paclitaxel and albumin in combination with bevacizumab against cancer
TWI528976B (zh) 2006-12-13 2016-04-11 斯茹林製藥公司 用於醫物傳遞之以環糊精為基之聚合物
US20080176958A1 (en) * 2007-01-24 2008-07-24 Insert Therapeutics, Inc. Cyclodextrin-based polymers for therapeutics delivery
US20110177161A1 (en) 2007-05-24 2011-07-21 Dr. Reddy's Laboratories Limited Pharmaceutical compositions of [5(s)-(2'-hydroxyethoxy)-20(s)-camptothecin
FR2918279B1 (fr) 2007-07-05 2010-10-22 Aventis Pharma Sa Combinaisons antitumorales contenant un agent inhibiteur de vegf et de l'irinotecan
US20100273859A1 (en) 2007-12-14 2010-10-28 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Treatment and prevention of hiv infection
AU2009232355A1 (en) 2008-04-04 2009-10-08 Calando Pharmaceuticals, Inc. Compositions and use of EPAS1 inhibitors
TW201010732A (en) 2008-08-29 2010-03-16 Enzon Pharmaceuticals Inc Method of treating RAS associated cancer
ES2704986T3 (es) 2008-10-16 2019-03-21 Celator Pharmaceuticals Inc Combinaciones de una camptotecina liposomal soluble en agua con cetuximab o bevacizumab
CA2756072A1 (en) 2009-03-30 2010-10-14 Cerulean Pharma Inc. Polymer-agent conjugates, particles, compositions, and related methods of use
US20110245201A1 (en) 2009-09-15 2011-10-06 John Ryan Treatment of cancer
US20130029909A1 (en) 2009-09-15 2013-01-31 John Ryan Treatment of cancer
US20120114658A1 (en) 2009-09-15 2012-05-10 John Ryan Treatment of cancer
AU2010295646B2 (en) 2009-09-15 2016-02-11 Ellipses Pharma Limited Treatment of cancer
CN102781237A (zh) 2009-11-23 2012-11-14 天蓝制药公司 用于传递治疗剂的基于环糊精的聚合物
US20110178287A1 (en) 2010-01-19 2011-07-21 Cerulean Pharma Inc. Cyclodextrin-based polymers for therapeutic delivery
US9062094B2 (en) 2010-01-22 2015-06-23 Ascendis Pharma As Dipeptide-based prodrug linkers for aliphatic amine-containing drugs
WO2011119262A1 (en) 2010-03-26 2011-09-29 Cerulean Pharma Inc. Methods and systems for generating nanoparticles
US20110300150A1 (en) 2010-05-18 2011-12-08 Scott Eliasof Compositions and methods for treatment of autoimmune and other disease
US20120213854A1 (en) 2010-09-30 2012-08-23 Fetzer Oliver S Methods of treating a subject and related particles, polymers and compositions
EP2463289A1 (en) 2010-11-26 2012-06-13 Almirall, S.A. Imidazo[1,2-b]pyridazine derivatives as JAK inhibitors
WO2013037789A1 (en) 2011-09-12 2013-03-21 Universiteit Gent Neuregulin-1-based prognosis and therapeutic stratification of colorectal cancer
WO2013059651A1 (en) 2011-10-21 2013-04-25 University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education Bifunctional compounds
EP2903644A4 (en) 2012-10-05 2016-03-09 Cerulean Pharma Inc TREATMENT OF CANCER

Also Published As

Publication number Publication date
US20120065368A1 (en) 2012-03-15
US8580244B2 (en) 2013-11-12
US8580242B2 (en) 2013-11-12
AU2009251190A1 (en) 2010-01-21
US8603454B2 (en) 2013-12-10
KR20160106223A (ko) 2016-09-09
JP5586487B2 (ja) 2014-09-10
US20130196945A1 (en) 2013-08-01
CN102516417A (zh) 2012-06-27
CY1112362T1 (el) 2015-12-09
TW201221132A (en) 2012-06-01
BR122012021252B1 (pt) 2018-07-10
US20150165055A1 (en) 2015-06-18
EP3332811A1 (en) 2018-06-13
AU2009251190C1 (en) 2013-03-14
BR0314042A (pt) 2005-07-05
AU2003278764A1 (en) 2004-03-29
US20130131013A1 (en) 2013-05-23
IL234715A0 (en) 2014-11-30
EP1534340B1 (en) 2011-11-16
JP2014167022A (ja) 2014-09-11
CA2497792C (en) 2014-08-05
US20040077595A1 (en) 2004-04-22
JP5934743B2 (ja) 2016-06-15
US8404662B2 (en) 2013-03-26
CY1114941T1 (el) 2016-12-14
US20120178711A1 (en) 2012-07-12
EP2277551A2 (en) 2011-01-26
AU2003278764C1 (en) 2010-09-16
KR101268258B1 (ko) 2013-05-31
US8580243B2 (en) 2013-11-12
BR122012021252B8 (pt) 2021-05-25
US8252276B2 (en) 2012-08-28
HK1151467A1 (en) 2012-02-03
JP5681646B2 (ja) 2015-03-11
BRPI0314042B8 (pt) 2021-05-25
US8475781B2 (en) 2013-07-02
US20080058427A1 (en) 2008-03-06
TW200423947A (en) 2004-11-16
US8314230B2 (en) 2012-11-20
EP2402036B1 (en) 2018-02-14
WO2004022099A2 (en) 2004-03-18
MX367615B (es) 2019-08-28
US8680202B2 (en) 2014-03-25
KR20050038039A (ko) 2005-04-25
KR101857900B1 (ko) 2018-05-14
AU2009251190B2 (en) 2012-08-09
US20140044669A1 (en) 2014-02-13
PT1534340E (pt) 2012-03-13
EP2277551B1 (en) 2013-05-08
KR20120104412A (ko) 2012-09-20
PT2277551E (pt) 2013-08-22
ES2666694T3 (es) 2018-05-07
CA2497792A1 (en) 2004-03-18
EP2277551A3 (en) 2011-11-23
JP2012082220A (ja) 2012-04-26
WO2004022099A3 (en) 2004-10-28
US20130039880A1 (en) 2013-02-14
ES2417324T3 (es) 2013-08-07
JP2006502301A (ja) 2006-01-19
US7270808B2 (en) 2007-09-18
US20130165405A1 (en) 2013-06-27
AU2003278764B2 (en) 2010-02-04
ES2377318T3 (es) 2012-03-26
US20210128516A1 (en) 2021-05-06
US8609081B2 (en) 2013-12-17
US9550860B2 (en) 2017-01-24
US20140288023A1 (en) 2014-09-25
ATE533513T1 (de) 2011-12-15
HK1254600A1 (en) 2019-07-26
CN104383554A (zh) 2015-03-04
JP2011080089A (ja) 2011-04-21
US20120283214A1 (en) 2012-11-08
IL234716A0 (en) 2014-11-30
US8110179B2 (en) 2012-02-07
KR20130033467A (ko) 2013-04-03
MXPA05002444A (es) 2005-09-30
KR102008768B1 (ko) 2019-08-08
KR20140070676A (ko) 2014-06-10
US20130156721A1 (en) 2013-06-20
US20170369651A1 (en) 2017-12-28
US8389499B2 (en) 2013-03-05
US20120289480A1 (en) 2012-11-15
HK1072202A1 (en) 2005-08-19
KR20180004322A (ko) 2018-01-10
US20130203700A1 (en) 2013-08-08
CN102516417B (zh) 2014-12-10
US20120301424A1 (en) 2012-11-29
US20130129665A1 (en) 2013-05-23
TWI422379B (zh) 2014-01-11
TWI366464B (en) 2012-06-21
EP2402036A1 (en) 2012-01-04
KR101476067B1 (ko) 2014-12-23
US20130190450A1 (en) 2013-07-25
CN104383554B (zh) 2018-06-08
US8399431B2 (en) 2013-03-19
US8518388B2 (en) 2013-08-27
EP1534340A2 (en) 2005-06-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
BRPI0314042B1 (pt) Polímeros à base de ciclodextrina para o fornecimento de agentes terapêuticos ligados a eles por covalência
CA2818071C (en) Modified cyclodextrin ring compounds having exactly two hydroxyl moieties substituted with an amino acid for therapeutics delivery
AU2012247051B2 (en) Cyclodextrin-based polymers for therapeutics delivery
AU2013204984A1 (en) Cyclodextrin-based polymers for therapeutics delivery
HK1072202B (en) Cyclodextrin-based polymers for delivering the therapeutic agents covalently bound thereto
HK1151467B (en) Cyclodextrin-based polymers for delivering the therapeutic agents covalently bound thereto
HK1165305B (en) Cyclodextrin-based polymers for delivering the therapeutic agents covalently attached thereto
HK1165305A (en) Cyclodextrin-based polymers for delivering the therapeutic agents covalently attached thereto

Legal Events

Date Code Title Description
B06F Objections, documents and/or translations needed after an examination request according [chapter 6.6 patent gazette]
B15V Prolongation of time limit allowed

Free format text: RECONHECIDO O OBSTACULO ADMINISTRATIVO E DEVOLVIDO O PRAZO DE 27 DIAS PARA CUMPRIMENTO DE EXIGENCIA, NOS TERMOS DO ARTIGO 221 PARAGRAFO 2O DA LPI E DA RESOLUCAO 116/04.

B25C Requirement related to requested transfer of rights

Owner name: INSERT THERAPEUTICS, INC. (US)

Free format text: A FIM DE ATENDER AS DUAS MODIFICACOES REQUERIDAS ATRAVES DA PETICAO NO 020110040034/RJ DE 20/04/2011, APRESENTE COMPLEMENTACAO DA TAXA RELATIVA A TRANSFERENCIA POR INCORPORACAO DO 1O ATO, BEM COMO A GUIA DE CUMPRIMENTO DE EXIGENCIA.

B25D Requested change of name of applicant approved

Owner name: CALANDO PHARMACEUTICALS, INC. (US)

Free format text: NOME ALTERADO DE: INSERT THERAPEUTICS, INC.

B25A Requested transfer of rights approved

Owner name: CERULEAN PHARMA INC. (US)

Free format text: TRANSFERIDO DE: CALANDO PHARMACEUTICALS, INC.

B07D Technical examination (opinion) related to article 229 of industrial property law [chapter 7.4 patent gazette]
B07E Notification of approval relating to section 229 industrial property law [chapter 7.5 patent gazette]
B15K Others concerning applications: alteration of classification

Ipc: A61K 47/40 (2006.01), A61P 35/00 (2006.01), A61K 3

B07A Application suspended after technical examination (opinion) [chapter 7.1 patent gazette]
B09B Patent application refused [chapter 9.2 patent gazette]
B12B Appeal against refusal [chapter 12.2 patent gazette]
B16A Patent or certificate of addition of invention granted [chapter 16.1 patent gazette]

Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 10 (DEZ) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 11/02/2020, OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS.

B16C Correction of notification of the grant [chapter 16.3 patent gazette]

Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 20 (VINTE) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 04/09/2003 OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS. PATENTE CONCEDIDA CONFORME ADI 5.529/DF

B21F Lapse acc. art. 78, item iv - on non-payment of the annual fees in time

Free format text: REFERENTE A 21A ANUIDADE.

B21H Decision of lapse of a patent or of a certificate of addition of invention cancelled [chapter 21.8 patent gazette]

Free format text: ANULADA A PUBLICACAO CODIGO 21.6 NA RPI NO 2790 DE 25/06/2024 POR TER SIDO INDEVIDA.