BRPI0710737A2 - uso de compostos pb-10 33 éteis para o tratamento de degeneraÇço macular relacionada À idade (amd), assim como referidos compostos - Google Patents

Abstract

USO DE COMPOSTOS PB-10 33 éTEIS PARA O TRATAMENTO DE DEGENERAÇçO MACULAR RELACIONADA À IDADE (AMD), ASSIM COMO REFERIDOS COMPOSTOS. A presente invenção refere-se genericamente ao campo de tratamento e profilaxia de doenças degenerativas retinianas. Mais particularmente, a presente invenção contempla um método para prevenir, reduzir o risco de desenvolvimento ou diferentemente tratar ou melhorar os sintomas de degeneração macular relacionada à idade (AMD) ou condições retinianas relacionadas, em mamíferos, e particularmente, em seres humanos. A presente invenção fornece ainda composições terapêuticas que permitem a administração dependente da dose ou específica da dose de agentes úteis no tratamento e profilaxia de degeneração macular relacionada à idade ou condições degenerativas retinianas relacionadas.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "USO DECOMPOSTOS PB-10 33 ÚTEIS PARA O TRATAMENTO DE DEGENERA-ÇÃO MACULAR RELACIONADA À IDADE (AMD), ASSIM COMO REFE-RIDOS COMPOSTOS".

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

Campo da Invenção

A presente invenção refere-se genericamente ao campo de tra-tamento e profilaxia de doenças retinianas degenerativas. Mais particular-mente, a presente invenção contempla um método para prevenir, reduzir orisco de desenvolvimento ou tratar de outra forma ou melhorar os sintomasde degeneração macular relacionada à idade (AMD) ou condições retinianasafins em mamíferos, e particularmente, seres humanos. A presente invençãofornece ainda composições farmacêuticas que permitem a administraçãodependente da dose ou específica da dose de agentes úteis no tratamento eprofilaxia de degeneração macular relacionada à idade ou condições retinia-nas degenerativas afins.

Descrição das Técnicas Anteriores

Uma referência a qualquer técnica anterior neste relatório descri-tivo não é, e não deve ser tomada, como um reconhecimento ou qualquersugestão de que as técnicas anteriores fazem parte do conhecimento geralcomum em qualquer país.

Os detalhes bibliográficos de referências no relatório descritivoem questão também estão listados no final do relatório descritivo.

A degeneração macular é um termo clínico utilizado para descre-ver uma família de doenças que são todas caracterizadas por uma perda pro-gressiva da visão central associada com anormalidades da membrana de Bru-ch, da coróide, da retina neural e/ou do epitélio pigmentário retiniano. Estesdistúrbios incluem condições muito comuns que afetam indivíduos idosos, taiscomo AMD, bem como distrofias mais raras, de início mais precoce, que emalguns casos podem ser detectadas na primeira década de vida. Outras macu-lopatias incluem a distrofia macular da Carolina do Norte, distrofia do fundo deSorsby, doença de Stargardt1 doença de Best e Malattia leventinese.A AMD é a principal causa de perda de visão permanente emindivíduos com mais de 65 anos de idade, afetando atualmente cerca de 15milhões de norte-americanos. A AMD afeta as células fotorreceptoras sensí-veis à luz e as células epiteliais pigmentadas na mácula, o centro da retinado olho. Embora ela possa não causar cegueira total, a doença destrói a vi-são central, tornando impossível ler, assistir a telas de monitores eletrônicose dirigir. Ela não tem cura documentada, nunca demonstrou remissão espon-tânea, e os tratamentos eficazes são muito limitados.

A retina é uma rede complicada de células nervosas, que trans-forma a luz em impulsos nervosos que percorrem até o cérebro, onde elessão interpretados como imagens visuais. A parte central da retina, denomi-nada mácula, é responsável pela visão necessária para ler e outras tarefasdetalhadas. A lesão da mácula resulta em visão deficiente. O processo do-entio mais comum que afeta a mácula é a AMD. Em pacientes com AMD, ascélulas fotorreceptoras retinianas e epiteliais pigmentadas na mácula mor-rem durante o curso de vários anos. A morte celular e a perda gradual devisão usualmente não começam até os 60 anos de idade ou mais, e daí onome degeneração macular relacionada à idade.

Existem dois tipos de AMD: degeneração macular seca, e dege-neração macular úmida. A degeneração macular seca, embora mais comum,resulta tipicamente em uma perda de visão menos grave e mais gradual. Ospacientes que são afetados por AMD seca têm perda gradual da visão cen-tral devido à morte de células fotorreceptoras e seus associados próximos,células retinianas pigmentadas (RPE), com deposição de uma mistura ami-lóide cérea complexa, denominada "drusen". As fotorreceptoras, as célulasna retina que realmente "vêm" a luz são essenciais para a visão. As célulasepiteliais retinianas pigmentadas (RPE) macrofágicas são necessárias paraa sobrevivência, função e renovação fotorreceptora.

Os pacientes com degeneração macular úmida desenvolvemnovos vasos sangüíneos sob a retina. À medida que as células fotorrecepto-ras e RPE degeneram lentamente, há uma tendência de os vasos sangüí-neos crescerem a partir da sua localização normal na coróide para dentro deuma localização anormal embaixo da retina. Este crescimento anormal denovos vasos sangüíneos é denominado neovascularização coroideana(CNV). Os vasos sangüíneos anormais vazam e sangram, causando hemor-ragia, inchaço, tecido cicatrizante, e perda grave de visão central. Apenas10% dos pacientes com AMD têm o tipo úmido, mas ele é responsável por90% de toda a cegueira resultante da AMD.

As células epiteliais retinianas pigmentadas (RPE) no olho atu-am como macrófagos, que fagotizam e reciclam componentes dos segmen-tos externos membranáceos de fotorreceptores. Caso as mitocôndrias den-tro das células epiteliais retinianas pigmentadas sejam danificadas, a reci-clagem de fotorreceptores é inibida, com acúmulo resultante de drusen. Osdrusen causam um estiramento lateral da monocamada das RPE e o deslo-camento físico das RPE do suprimento vascular imediato, os coriocapilares.Este deslocamento cria uma barreira física que pode impedir a difusão nor-mal de metabólitos e rejeitos entre os coriocapilares e a retina.

Dependendo da localização, o tratamento com laser pode algu-mas vezes ser dado para destruir os vasos sangüíneos anormais formadosna AMD úmida. Apenas 15% dos casos de AMD úmida são elegíveis parater o tratamento com laser porque os vasos sangüíneos podem não estarlocalizados perto demais da parte central da mácula. O laser é um feixe deluz que é absorvido pelo pigmento do sangue, fármacos e células RPE1 quese converte em energia térmica que cauteriza os vasos sangüíneos anor-mais. Freqüentemente, a neovascularização volta, pois o estímulo não foiremovido, resultando em perda grave de visão. De fato, a maioria dos paci-entes com AMD, que têm visão muito deficiente, perderam-na devido às se-qüelas da neovascularização. A opinião médica atual afirma que não há tra-tamento disponível que previna permanentemente a morte celular ou o cres-cimento anormal de vasos sangüíneos que ocorre na AMD.

Até hoje, não existem medidas específicas conhecidas para pre-venir a ocorrência de AMD. No caso de pacientes já diagnosticados comAMD em um ou ambos olhos, os principais tratamentos atuais incluem as-sesto de luz (fototerapia) e/ou suplemento vitamínico e mineral, cada um dosquais sendo de valor questionável. A fototerapia envolve assestar a luz con-tra a párea macular que contém a lesão de vasos sangüíneos defeituososnascentes para inibir ou obstruir sua função. Um tipo de fototerapia é a tera-pia fotodinâmica (PDT). Na PDT, um agente fotossensível é administradodentro dos vasos de um paciente e então o agente é ativado no sítio-alvo dalesão de novos vasos (a mácula) direcionando luz de baixa energia a partirde um laser especificamente para esta área. O agente ativado gera radicaislivres e outras espécies químicas ativadas que desestabilizam e destroem osnovos vasos.

A terapia fotodinâmica (PDT) foi relatada como sendo de algumabenefício para pacientes com AMD. Por exemplo, um estudo (Arch Ophthal-mol. 117:1329-1345 (1990)) avaliou a PDT em quatrocentos e dois olhos depacientes diagnosticados com AMD em pelo menos um olho. O resultado dotratamento foi avaliado comparando a capacidade de os pacientes leremprecisamente um quadro de visão convencional (um com cerca de cinco le-tras por linha) antes do tratamento e depois do tratamento. Em doses mesesdepois da terapia fotodinâmica (PDT), 61% dos olhos (246/402) erraram me-nos de 15 letras (isto é, o paciente perdeu menos do que cerca de três linhasem um quadro visual convencional), enquanto que 46% dos olhos (96/207)dos pacientes que se submeteram a tratamento com um placebo errarammenos do que 15 letras (p<0,001). Em vinte e quatro meses depois da PDT,a acuidade visual e a sensibilidade a contrastes foram prolongadas em paci-entes que receberam a PDT. Uma porcentagem significantemente mais altadesses pacientes (58%) erraram menos do que 15 letras, em comparaçãocom os pacientes que se submeteram ao tratamento com placebo (38%).Entretanto, apenas 16% dos pacientes que receberam PDT tiveram visãomelhorada, em comparação com 7% dos pacientes que receberam placebo.

Outro tipo de fototerapia é a terapia de fotocoagulação. Na tera-pia por fotocoagulação, a luz de alta energia de um laser é direcionada es-pecificamente para o sítio-alvo dos novos vasos. O calor gerado a partir dolaser de alta energia coagula o fluido dentro e ao redor dos novos vasos. Afotocoagulação a laser não é uma forma de PDT; ela é uma abordagem detratamento separada. Ela usa a transmissão de calor lateral, aplicada comum método similar a um cautério, para coagular o líquido dentro e ao redordo vaso, enquanto que a PDT usa um agente fotossensível ativado para ge-rar produtos químicos ativos que danificam ou destroem os novos vasos quecontêm o agente.

Embora a PDT ou a terapia por fotocoagulação a laser seja usa-da separadamente para tratar pacientes com AMD, nenhuma das duas ficasem desvantagens. Um problema com a PDT é que seus efeitos são transi-entes; os pacientes que recebem PDT devem ser tratados novamente a ca-da cerca de três meses. Além disso, os pacientes requerem pelo menos cin-co tratamentos repetidos dentro dos dois primeiros anos meramente paraestabilizar sua condição, e antes que qualquer efeito terapêutico ocorra. Es-tes tratamentos cumulativos danificam a retina, reduzindo ainda mais a acui-dade visual do paciente.

Uma desvantagem da fotocoagulação a laser é que ela é não-seletiva, e não assesta apenas os novos vasos. Ela deve ser administrada,portanto, de tal modo que apenas as lesões sejam assestadas, e os tecidoscircundantes não-afetados não sejam danificados. Entretanto, em cerca dametade dos pacientes com AMD, os novos vasos ficam localizados na áreaembaixo da fóvea, que é difícil ou impossível de assestar com a coagulaçãoa laser sem danificar a retina sensorial. Outra desvantagem é que o trata-mento por fotocoagulação não é permanente e as taxas de recorrência paraa produção de novos vasos é alta, atingindo 39-76%, usualmente dentro dosdois primeiros anos. Entretanto, os tratamentos repetidos podem realmenteinduzir o crescimento de novos vasos e membranas (membranas neovascu-Iares subretinianas e neovascularizações coroideanas recorrentes) no localdo tratamento. Os tratamentos repetidos podem também danificar irreversi-velmente áreas não-afetadas da retina, incluindo a retina neurossensória eas células epiteliais retinianas pigmentadas (RPE). Assim sendo, o tratamen-to em si pode resultar em o paciente ter visão ainda mais reduzida duranteum período de tempo. Especificamente, alguns pacientes que passam porterapia de fotocoagulação desenvolvem escotoma, que é uma área de visãodeprimida dentro do campo visual, circundada por áreas de visão menosdeprimida ou normal.

Há, portanto, uma necessidade de desenvolver métodos alterna-tivos para tratar AMD ou condições afins.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

A presente invenção é atribuída, em parte, à determinação re-cente que os depósitos proteináceos sobre a membrana limitadora da retina,referidos como "drusen", compreendem também zinco e cobre, e assim sen-do, são propostos como sendo similares a uma placa do tipo amilóide. Assimsendo, a presente invenção contempla o uso de um composto atenuador deproteínas metálicas (MPAC) para reduzir os níveis ou remover de outra for-ma o excesso de metais de drusen, restaurando desta forma a homeostasianormal de metais na retina. A presente invenção é particularmente útil paratratar ou prevenir ou reduzir de outra forma o risco de desenvolvimento dedegeneração macular relacionada à idade (AMD); entretanto, a invenção emquestão se estende ao tratamento de qualquer distúrbio retiniano degenera-tivo associado com agregados, complexos, depósitos ou placas do tipo ami-lóide, ou qualquer condição associada a drusen que compreendem metal emexcesso.

O método da presente invenção é útil independentemente dequalquer inibição de uma metaloproteinase de matriz e/ou quantidade espe-cífica da dose do MPAC pode ser empregada. Um único agente pode seradministrado ou uma combinação de dois ou mais agentes.

Os presentes agentes compreendem pelo menos dois anéis com6 membros fundidos, com pelo menos um átomo de nitrogênio na posição 1e um grupo hidroxila ou mercapto na posição 8. Os compostos úteis são de-finidos pelas Fórmulas I até XXVII que estão descritos mais detalhadamenteabaixo.

Os exemplos de compostos apropriados incluem aqueles na Ta-bela 8, tais como PB-1033, PB-1076, PB-1085, PB-1120, PB-1127, PB-1135,PB-1149, PB-1151, PB-1160 e PB-1168, ou um seu sal ou derivado ou equi-valente funcional farmaceuticamente aceitável.Assim sendo, um aspecto da presente invenção contempla ummétodo para o tratamento ou profilaxia de uma condição ou distúrbio dege-nerativo retiniano em um indivíduo, sendo que o dito método compreendeadministrar ao dito indivíduo uma quantidade eficaz de um MPAC ou de umaformulação que compreende um MPAC por um tempo e sob condições efi-cazes para alterar os níveis de metais em drusen retinianos ou tecido cir-cundante.

A presente invenção fornece também um método para o trata-mento ou profilaxia de uma condição ou distúrbio degenerativo retiniano emum indivíduo, sendo que o dito método compreende administrar ao dito indi-víduo uma quantidade eficaz de um MPAC ou de uma formulação que com-preende um MPAC por um tempo e sob condições eficazes para alterar osníveis de metais em drusen retinianos ou tecido circundante.

Particularmente, a presente invenção fornece um método paratratar um indivíduo com degeneração macular relacionada à idade (AMS),sendo que o dito método compreende administrar ao dito indivíduo umaquantidade de PB-1033 ou um seu sal, derivado, ou equivalente funcional,eficaz para reduzir metal em drusen retinianos até um nível que melhora ossintomas da AMD.

As expressões "alterar os níveis de metal" e "reduzir metal" sãoutilizadas em seu sentido mais amplo e referem-se a uma mudança na dis-tribuição de um metal em drusen retinianos ou tecido circundante. As ex-pressões referem-se também a uma redução na quantidade ou atividade demetal em drusen retinianos ou tecido circundante, bem como uma reduçãona quantidade ou atividade de metal em áreas específicas, isto é, a distribui-ção de metal em drusen retinianos ou tecido circundante.

A seleção de um MPAC é genericamente, porém não exclusiva-mente, independente de sua capacidade de inibir uma metaloproteinase.Uma quantidade de dosagem definida ou específica também pode ser admi-nistrada.

Conseqüentemente, outro aspecto da presente invenção forneceum método para o tratamento ou profilaxia de uma condição ou distúrbio re-tiniano degenerativo em um indivíduo, sendo que o dito método compreendeadministrar ao dito indivíduo uma quantidade eficaz de um MPAC ou de umaformulação que compreende um MPAC por um tempo e sob condições efi-cazes para reduzir os níveis de metais em drusen retinianos ou tecido cir-cundante, independentemente de qualquer efeito sobre uma metaloproteina-se de matriz.

Uma referência a "independentemente" significa que uma oumais metaloproteinases podem ser inibidas ou nenhuma metaloproteinase éinibida.

Ainda outro aspecto da presente invenção define uma faixa dedosagem específica para restaurar otimamente a homeostasia de metais naretina.

Assim sendo, este aspecto da presente invenção refere-se a ummétodo para o tratamento ou profilaxia de uma condição ou distúrbio retinia-no degenerativo em um indivíduo, sendo que o dito método compreendeadministrar ao dito indivíduo uma quantidade eficaz de um MPAC ou de umaformulação que compreende um MPAC por um tempo e sob condições efi-cazes para reduzir os níveis de metais em drusen retinianos ou tecido cir-cundante, onde a quantidade eficaz é uma faixa de dose específica para res-taurar otimamente a homeostasia de metais na retina.

Outro aspecto da presente invenção contempla um método parareduzir os níveis de um metal de drusen em um indivíduo, para desta formamelhorar os sintomas de degeneração macular relacionada à idade (AMD),sendo que o dito método compreende administrar ao dito indivíduo umaquantidade eficaz de PB-1033 ou um seu sal, derivado ou equivalente fun-cional farmaceuticamente aceitável.

A presente invenção fornece também o uso de um MPAC nafabricação de um medicamento para o tratamento de um distúrbio retinianodegenerativo em um indivíduo.

Particularmente, a presente invenção contempla o uso de PB-1033 ou um seu sal, derivado ou equivalente funcional farmaceuticamenteaceitável na fabricação de um medicamento para o tratamento de degenera-ção macular relacionada à idade (AMD) em um indivíduo.

Uma terapia combinada também faz parte da presente invenção,onde dois ou mais MPACs são administrados ou um MPAC e outro agenteativo tal como um quelante de metal, citocina, molécula genética, agenteantimicrobiano ou agente antiviral, um antibiótico e/ou um anestésico.

O indivíduo preferido é um ser humano, embora a presente in-venção tenha aplicação nas indústrias veterinária, de corrida de cavalos ecriação de animais.

A presente invenção fornece ainda formulações para tratar, pre-venir ou reduzir o risco de desenvolver uma condição ou distúrbio retinianodegenerativo ou distúrbio, que compreende um MPAC como aqui descrito.

Embora PB-1033 seja um MPAC particularmente útil, a presenteinvenção se estende a qualquer MPAC englobado pelos compostos dasFórmulas I a XXVII, tal como, porém sem limitações, aqueles listados na Ta-bela 8, incluindo PB-1076, PB-1085, PB-1120, PB-1127, PB-1135, PB-1149,PB-1151, PB-1160 e PB-1168, ou um seu sal ou derivado ou equivalentefuncional farmaceuticamente aceitável.

As abreviaturas aqui utilizadas são definidas na Tabela 1.

TABELA 1 - ABREVIATURAS

<table>table see original document page 10</column></row><table>

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

Neste relatório descritivo inteiro, a menos que o contexto requei-ra diferentemente, a palavra "compreendem", ou variações tais como "com-preende" ou "compreender" deve ser entendido como inferindo a inclusão deum elemento ou número inteiro ou grupo de elementos ou números inteiroscitados, mas não a exclusão de qualquer outro elemento ou número inteiroou grupo de elementos ou números inteiros.

Todas citações científicas, patentes, pedidos de patente e espe-cificações técnicas de fabricante aqui referidas doravante são aqui incorpo-radas como referência em sua totalidade.

Uma referência a qualquer técnica anterior não é, e não deve serconsiderada, um reconhecimento de qualquer forma de sugestão de que atécnica anterior faz parte do conhecimento genérico comum em qualquerpaís.

Deve-se entender que, a menos que diferentemente indicado, ainvenção em questão não está limitada aos componentes de formulações,métodos de fabricação, materiais biológicos ou reagentes, esquemas de do-sagem, específicos, e similares, pois eles podem variar. Deve-se entendertambém que a terminologia aqui utilizada è com o propósito de descrevermeramente modalidades específicas e não pretende ser limitativa.

Como utilizadas no relatório descritivo em questão, as formas nosingular "um", "uma" e "o" e "a" incluem os aspectos no plural, a menos queo contexto claramente dite o contrário. Assim sendo, por exemplo, uma refe-rência a "uma formulação" inclui uma única formulação, bem como duas oumais formulações; uma referência a "um agente" ou "um reagente" inclui umúnico agente ou reagente, bem como dois ou mais agentes ou reagentes; eassim por diante.

Os termos "agente", "reagente", "composto", "agente farmaceuti-camente ativo", "medicamento", "agente terapêutico", "agente ativo" e "fár-maco" são aqui utilizados de forma intercambiável para se referirem a uniaentidade química ou biológica que induz ou apresenta um efeito desejado,tal como a melhora de sintomas de uma doença retiniana degenerativa. Ostermos englobam também ingredientes ativos farmaceuticamente aceitáveise farmacologicamente ativos desses agentes ativos aqui especificamentemencionados. Quando os termos "agente", "reagente", "composto", "agentefarmaceuticamente ativo", "medicamento", "agente terapêutico", "agente ati-vo" e "fármaco" são utilizados, então deve-se entender que isto inclui a enti-dade ativa de per si, bem como os sais, ésteres, amidas, pró-fármacos, me-tabólitos, análogos, etc., farmaceuticamente aceitáveis e farmacologicamen-te ativos.

Uma referência a um "agente", "reagente", "composto", "agentefarmaceuticamente ativo", "medicamento", "agente terapêutico", "agente ati-vo" e "fármaco" inclui combinações de dois ou mais agentes ativos. Uma"combinação" inclui também múltiplas partes, tais como uma composição emduas partes, na qual os agentes são fornecidos separadamente e dados oudistribuídos separadamente ou misturados entre si antes da distribuição. Porexemplo, uma embalagem farmacêutica em múltiplas partes pode ter dois oumais agentes mantidos separadamente. Assim sendo, este aspecto da pre-sente invenção inclui terapia combinada. A terapia combinada inclui a co-administração de um quelante de metais e outro ingrediente ativo, tal comoum composto químico, citocina, molécula genética, agente antimicrobiano ouagente antiviral, um antibiótico e/ou um anestésico.

Os termos "quantidade eficaz" e "quantidade terapeuticamenteeficaz" de um agente, como aqui utilizados, significam uma quantidade sufi-ciente do agente para proporcionar o efeito ou resultado terapêutico ou fisio-lógico desejado. Tal efeito ou resultado inclui alterar ou reduzir a disponibili-dade de íons metálicos e/ou reduzir sua quantidade em drusen, reduzir osníveis de amilóides, reduzir ou prevenir degéneração macular ou uma condi-ção relacionada e/ou tratar ou prevenir enfraquecimento da visão. Os efeitosindesejáveis, por exemplo, efeitos colaterais, são algumas vezes manifesta-dos junto com o efeito terapêutico desejado; assim sendo, um médico equili-bra os benefícios contra os riscos potenciais em determinar qual e uma"quantidade eficaz" apropriada. A quantidade exata necessária variará deindivíduo para indivíduo, dependendo da espécie, idade e condição geral doindivíduo, modo de administração, e similares. Assim sendo, pode não serpossível especificar uma "quantidade eficaz" exata. Entretanto, uma "quanti-dade eficaz" apropriada em qualquer caso individual pode ser determinadapelos versados nessas técnicas usando apenas experimentação rotineira.

A quantidade eficaz é julgada a quantidade necessária para pre-venir ou melhorar os sintomas da condição de degeneração retiniana, talcomo AMD. Em uma modalidade, a quantidade de MPAC usada é a quanti-dade necessária ou que é eficaz em reduzir os níveis de drusen metálicos.Os exemplos de metais incluem zinco e cobre. As quantidades eficazes in-cluem entre 1 ng/mL e 1.000 mg/mL, tal como entre cerca de 5 ng/mL e cer-ca de 500 mg/mL, ou cerca de 10 ng/mL a cerca de 100 mg/mL, ou quanti-dades ou faixas entre estes valores.

Os termos "metal" e "íon metálico" podem ser utilizados de formaintercambiável neste contexto.

O termo carreador, excipiente ou diluente "farmaceuticamenteaceitável" significa um veículo farmacêutico que compreende um materialque não é biologicamente ou de outra forma indesejável, isto é, o materialpode ser administrado a um indivíduo junto com o agente ativo selecionadosem causar qualquer reação adversa ou reação adversa substancial. Os car-readores podem incluir excipientes e outros aditivos tais como diluentes, de-tergentes, agentes colorantes, agentes umectantes ou emulsificantes, agen-tes para tamponamento de pH, conservantes, e similares.

Similarmente, um sal, éster, amida, pró-fármaco ou derivado"farmacologicamente aceitável" de um composto aqui fornecido é um sal,éster, amida, pró-fármaco, ou derivado que não é biologicamente ou de for-ma indesejável.

O termo "tratar" um indivíduo pode envolver a prevenção de umacondição retiniana degenerativa ou outro episódio fisiológico adverso em umindivíduo suscetível, bem como o tratamento de um indivíduo clinicamentesintomático, melhorando os sintomas da condição. Particularmente, a pre-sente invenção contempla uma redução da formação de placas do tipo ami-lóide e/ou uma redução no teor de metais em drusen, para restaurar a ho-meostasia normal de metais na retina. --- -

O termo "indivíduo", como aqui utilizado, refere-se, de preferên-cia, a um mamífero, e mais preferivelmente, um primata, incluindo um prima-ta inferior e ainda mais preferivelmente um ser humano que pode se benefi-ciar das formulações e métodos da presente invenção. Um indivíduo inde-pendentemente de se é um animal humano ou não-humano pode ser referi-do como um paciente, animal, hospedeiro ou recebedor individual. Os com-postos e métodos da presente invenção têm aplicações em medicina huma-na, medicina veterinária, bem como em geral criação de animais domésticosou selvagens. Por conveniência, um "animal" inclui uma espécie aviária, talcomo uma ave doméstica (incluindo patos, galinhas, perus e gansos), umaave avícola ou ave de recreação. A condição em um animal não-humanopode não ser de ocorrência natural, mas induzida, tal como em um modeloanimal.

Como indicado acima, os animais preferidos são primatas hu-manos e não-humanos, tais como sagüis, babuínos, orangotangos, primatasinferiores, tais como Tupia, animais de criação, cobaias, animais de compa-nhia ou animais selvagens cativos. Um ser humano é o alvo mais preferido.Entretanto, modelos animais não-humanos pode ser usados.

Os exemplos de cobaias incluem camundongos, ratos, coelhos,porquinhos-da-índia, e hamsters. Os coelhos e animais roedores, tais comoratos e camundongos, proporcionam um sistema de testes ou modelo animalcomo o fazem primatas e primatas inferiores. Os animais de criação incluemcarneiros, vacas, porcos, cabras, cavalos e asnos. Os animais não-mamíferos tais como espécies aviárias, peixe-zebra, anfíbios (incluindo sa-po-cururu) e espécies drosófila, tais Drosophila melanogaster, também sãocontempladas. Em vez de um animal vivo, um sistema de teste também po-de compreender um sistema de cultura de tecidos.

Uma "condição retiniana degenerativa" é uma condição que secaracteriza por uma perda progressiva da visão. As condições dentro doâmbito deste termo inluem degeneração macular relacionada à idade (AMD),distrofia macular da Carolina do Norte, distrofia do fundo de Sorsby, doençade Stargardt, doença de Best e Malattia leventinese.

Uma condição específica para a qual os agentes e métodos dapresente invenção podem ser eficazes e a AMD. Entretanto, a presente in-venção se estende a qualquer doença retiniana degenerativa associada a oucaracterizada por agregados, depósitos ou placas similares a amilóides.Assim sendo, um aspecto da presente invenção contempla ummétodo para o tratamento ou profilaxia de uma condição ou distúrbio retinia-no degenerativo em um indivíduo, sedo que o dito método compreende ad-ministrar ao dito indivíduo uma quantidade eficaz de um MPAC ou de umaformulação que compreende um MPAC por um tempo e sob condições efi-cazes para alterar os níveis de metais em drusen retinianos ou tecido cir-cundante. Em uma modalidade, os níveis de metais alterados são níveis demetais reduzidos.

Em outra modalidade, a presente invenção fornece um métodopara o tratamento ou profilaxia de uma condição ou distúrbio retiniano dege-nerativo em um indivíduo, sendo que o dito método compreende administrarao dito indivíduo uma quantidade eficaz de um MPAC ou de uma formulaçãoque compreende um MPAC por um tempo e sob condições eficazes paraalterar os níveis de metais em drusen retinianos ou tecido círcundante, inde-pendentemente de qualquer efeito sobre uma metaloproteinase de matriz.Em outra modalidade, os níveis de metais alterados são níveis de metaisreduzidos.

Ainda outro aspecto da presente invenção refere-se a um méto-do para o tratamento ou profilaxia de uma condição ou distúrbio retinianodegenerativo em um indivíduo, sendo que o dito método compreende admi-nistrar ao dito indivíduo uma quantidade eficaz de um MPAC ou de uma for-mulação que compreende um MPAC por um tempo e sob condições efica-zes para alterar os níveis de metais em drusen retinianos ou tecido círcun-dante, onde a quantidade eficaz é uma faixa de dose específica para restau-25 rar otimamente a homeostasia de metais na retina.

A presente invenção fornece também o uso de um MPAC nafabricação de um medicamento para o tratamento de um distúrbio retinianodegenerativo em um indivíduo.,

Os agentes preferidos da presente invenção pelo menos doisanéis com 6 membros fundidos, com pelo menos um átomo de nitrogênio naposição 1 e um grupo hidroxila ou mercapto na posição 8. Os agentes dapresente invenção são referidos coletivamente como compostos atenuado-res de proteínas de metais ou MPACs e tendo uma ou mais das seguintespropriedades: atuam como ionóforos (isto é, capturam e transferem metaisdentro de células), são Iigantes de metais, cruzam a barreira sangüínea docérebro, apresentam toxicidade celular reduzida, são capazes de dissolverou desagregar depósitos, agregados ou placas do tipo amilóide, e são está-veis em ambientes aquosos. De preferência, os agentes têm duas ou mais,três ou mais, ou quatro ou mais, ou cinco ou mais das propriedades listadasacima.

Os compostos particularmente úteis, definidos adicionalmenteabaixo, incluem aqueles listados na Tabela 8, tais como PB-1033, PB-1076,PB-1085, PB-1120, PB-1127, PB-1135, PB-1149, PB-1151, PB-1160 e PB-1168, ou um seu sal ou derivado ou equivalente funcional farmaceuticamen-te aceitável. PB-1033 é particularmente útil, embora a presente invenção nãoesteja limitada a ele.

A este respeito, a presente invenção contempla ainda um méto-do para tratar um indivíduo com degeneração macular relacionada à idade(AMD), sendo que o dito método compreende administrar ao dito indivíduouma quantidade de PB-1033 ou um seu sal, derivado, ou equivalente funcio-nal farmaceuticamente aceitável, eficaz para reduzir metal em drusen retini-anos até um nível que melhora os sintomas de AMD.

A presente invenção fornece também um método pára reduzir osníveis de um metal de drusen retinianos em um indivíduo, para desta formamelhorar os sintomas de degeneração macular relacionada à idade (AMD),compreendendo administrar ao dito indivíduo uma quantidade de PB-1033ou um seu sal, derivado, ou equivalente funcional farmaceuticamente aceitá-vel.

Os exemplos de derivados ou equivalentes funcionais farmaceu-ticamente.aceitáveis incluem aqueles listados na Tabela 8, tais como PB-1033, PB-1076, PB-1085, PB-1120, PB-1127, PB-1135, PB-1149, PB-1151,PB-1160 e PB-1168, ou um seu sal ou derivado ou equivalente funcionalfarmaceuticamente aceitável. Os exemplos de metais incluem zinco e cobre.

Assim sendo, certos agentes úteis da presente invenção estãoenglobados por compostos da Fórmula I:

<formula>formula see original document page 17</formula>

onde:

R é O ou S;

R1 é selecionado independentemente entre H, alquila opcional-mente substituída; aquenila opcionalmente substituída; alquinila opcional-mente substituída; arila opcionalmente substituída; heterociclila opcional-mente; um antioxidante; um grupamento de assesto; CN; halogênio; CF3;SO3H; e OR21 SR21 SOR2, SO2R21 NR2R31 (CH2)nNR2R31 HCNOR21HCNNR2R31 CONR2R31 CSNR2R31 NCOR21 NCSR31 CO2R2 ou SO2NR2R31onde R2 e R3 são selecionados independentemente entre H1 alquila opcio-nalmente substituída; aquenila opcionalmente substituída; alquinila opcio-nalmente substituída; arila opcionalmente substituída; heterociclila opcional-mente substituída; um antioxidante; um grupamento de assesto; e η é umnúmero inteiro entre 1 e 10;

X é selecionado independentemente entre CH1 CO1 N e NH;

Z é selecionado independentemente entre CH, CO, N, NH e O;

Y está independentemente ausente ou em conjunto com o anelao qual ele está anexado forma uma arila com 5 ou 6 membros opcional-mente substituída ou uma heterociclila com 5 ou 6 membros opcionalmentesubstituída;

m é um número inteiro entre 1 e 3; e

ρ é um número inteiro entre 1 e 4,

seus sais hidratos, solvatos, derivados, pró-fármacos, tautôme-ros e/ou isômeros, a um indivíduo que necessita dele,desde que:

(i) pelo menos um entre X e Z seja diferente de CH; e(ii) fanquinona ou seus tautômeros estejam excluídos, isto é,quando R é O, R1 na posição 7 é OH1 X é CH e Y está ausente, então Z não

De preferência, R é O.

Além disso, R1 é de preferência halogênio, arila opcionalmentesubstituída, heterociclila opcionalmmente substituída, alquila opcionalmentesubstituída, OR2, SR2, (CH2)nNR2R3, CONR2R3, e NCOR2, onde n, R2 e R3são como definidos acima. Mais preferivelmente, R1 é flúor; iodo; cloro; fenilaopcionalmente substituída tal como 4-halo-fenila, por exemplo, 4-flúor-fenilaou 4-cloro-fenila; um grupo heteromonocíclico insaturado com 3 a 6 mem-bros, opcionalmente substituído, contendo 1 a 4 átomos de nitrogênio, taiscomo imidazolila ou piridinila; um grupo heteromonocíclico saturado com 3 a6 membros, opcionalmente substituído, contendo 1 a 4 átomos de oxigênio,tais como morfolinila; alquila de CrC4 opcionalmente substituída tal comometila ou etila; cicloalquila de C2-C6 opcionalmente substituída tal como cico-propila; alcóxi de C1-C6 opcionalmente substituído; tio opcionalmente substi-tuído; CH2NR4R5, onde R4 e R5 são selecionados independentemente entreH, alquila de Ci-C4; ou CONH(CH2)2R6, onde R6 é heterociclila opcionalmen-te substituída.

Y é, de preferência, fenila opcionalmente substituída; um grupoheteromonocíclico insaturado com 5 ou 6 membros, opcionalmente substitu-ído, contendo 1 a 4 átomos de nitrogênio, tais como imidazolila ou piridinila;ou um grupo heteromonocíclico saturado com 5 ou 6 membros, opcional-mente substituído, contendo 1 a 2 átomos de oxigênio e 1 a 3 átomos denitrogênio, tais como morfolinila.

O grupo halo preferido é coro, mas outros átomos de halogênioestão englobados pela presente invenção.

As classes ilustrativas de compostos da Fórmula I são as se-guintes:<formula>formula see original document page 19</formula><table>table see original document page 20</column></row><table><formula>formula see original document page 21</formula> 8-hidróxi-6H-[1,6]naftirin-5-ona

<formula>formula see original document page 21</formula> dibenzo[1 ,g]quinazolin-8-ona

onde R1, m, η e ρ são como definidos acima e q é um número inteiro entre 1ou 2.

Os compostos acima fazem parte também de grupos mais gené-ricos de compostos tais como aqueles englobados pela Fórmula II:

<formula>formula see original document page 21</formula>

R1 é H ou halogênio, alquila opcionalmente substituída; aquenilaopcionalmente substituída; acila opcionalmente substituída; arila opcional-mente substituída; heterociclila opcionalmente substituída; um antioxidante;ou um grupamento de assesto;

R2 é H; alquila opcionalmente substituída; aquenila opcionalmen-te substituída; arila opcionalmente substituída; heterociclila opcionalmente;alcóxi opcionalmente substituído; um antioxidante; um grupamento de asses-to; COR6 ou CSR6, onde R6 é H, alquila opcionalmente substituída, aquenilaopcionalmente substituída, hidroxila, arila opcionalmente substituída, hetero-ciclila opcionalmente, um antioxidante; um grupamento de assesto, OR7,SR7 ou NR7R81 onde R7 e R8 são iguais ou diferentes e são selecionadosentre H, alquila opcionalmente substituída, aquenila opcionalmente substitu-ída, arila opcionalmente substituída ou heterociclila opcionalmente substituí-da; CN; (CH2)nNR9R10, HCNOR9 ou HCNNR9R10, onde R9 e R10 são iguaisou diferentes e são selecionados entre H, alquila opcionalmente substituída,aquenila opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída ou hete-rociclila opcionalmente substituída, e η é 1 a 4; OR11, SR11 ou NR11R12, ondeR11 e R12 são iguais ou diferentes e são selecionados entre H, alquila opcio-nalmente substituída, aquenila opcionalmente substituída, arila opcionalmen-te substituída ou heterociclila opcionalmente substituída, ou em conjunto for-mam heterociclila opcionalmente substituída; ou SOaNR13R14, onde R13 e R14são iguais ou diferentes e são selecionados entre H, alquila opcionalmentesubstituída, aquenila opcionalmente substituída, arila opcionalmente substi-tuída ou heterociclila opcionalmente substituída; e

R3, R4, R5, R e RD são iguais ou diferentes e são selecionadosentre H, alquila opcionalmente substituída, aquenila opcionalmente substitu-ída, alcóxi opcionalmente substituído, acila opcionalmente substituída, hidro-xila, amino opcionalmente substituído, tio opcionalmente substituído, sulfoni-la opcionalmente substituída, sulfinila opcionalmente substituída, sulfonil-amino opcionalmente substituído, halogênio, SO3H, amina, CN, CF3, arilaopcionalmente substituída, heterociclila opcionalmente substituída, um antio-xidante ou um grupamento de assesto,

seus sais hidratos, solvatos, derivados, pró-fármacos, tautôme-ros e/ou isômeros, desde que:

(a) quando R1 a R3, R e RG são H, então R4 não é Cl ou I, e R5não é I;

(b) quando R1 a R3, R, RD e R5 são H, então R4 não é CHO,chohccl3,

<formula>formula see original document page 22</formula><formula>formula see original document page 23</formula>

(c) quando R1, R5, RD e R são Η, R2 é CO2H e R3 é OH1 entãoR4 não é bromo, metila, fenila, hidróxi-metil ou triflúor-metila;

(d) quando R11 R4, R5 e R, são H1 R2 é CO2H e R3 é OH, entãoRD não é bromo, iodo, metila, fenila, propila, fenetila, heptila, benzil-amino-metila, 3-amino-propila, 3-hidróxi-propila, 4-metóxi-fenila, 3-metil-fenilai 4-cloro-fenila, 3,4-dicloro-fenila, piridin-3-ila, fur-2-ila, 4-cloro-fenila, 3,4-dicloro-fenila, 2-cloro-fenila, 3-cloro-fenila, 2-cloro-fenila, 3-cloro-fenila, 2-metóxi-fenila, ou piperidin-2-ila;

(e) quando R1, R4, R e RD são H, R2 é CO2H e R3 é OH, entãoR5 não é fenila, 3-hidróxi-propila, fenetila, 3-amino-prop-1 -ila ou hex-1 -ila;

(f) quando R1, R4, RD e R5 são Hf R2 é CO2H e R3 é OH, então Rnão é N-morfolino-metila, bromo ou fenila;

(g) quando R1, R e RD são H, R2 é CO2H e R3 é OH, então R4 eR5 não são cloro;

(h) quando R1, R4 e RD são H, R2 é CO2H e R3 é OH, então R eR5 não são bromo;

(i) quando R1, R, RD e R5 são H, R2 é CO2Me e R3 é OH1 entãoR4 não é hidróxi-metila, fenila ou bromo;(j) quando R1, R1 R4 e R5 são H, R2 é CO2Me e R3 é OH1 entãoRD não é 4-metóxi-fenila, 3-metil-fenila, pirin-3-ila, benzila, bromo, 4-cloro-fenila, 3,4-dicloro-fenila, 3-hidróxi-propila, ou 3-t-butóxi-carbonil-amino-propila;

(k) quando R1, R, R4 e RD são H1 R2 é CO2Me e R3 é OH1 entãoR5 não é fenila ou 3-t-butóxi-carbonil-amino-prop-1-ila;

(I) quando R11 R, R4, RD e R5 são H e R2 é CO2Me1 então R3 nãoé tolueno-4-sulfonil-amino, piperazin-ila, morfolin-1-ila, piperidin-1-ila, 4-metil-piperazin-1-ila, 3-benzoil-amino-prop-1-ila, fenetila, 3-t-butóxi-carbonil-amino-propila, 3-hidróxi-propila, amino ou hex-1-ila;

(m) quando R11 R41 RD e R5 são H1 R2 é CO2Na e R3 é OH, en-tão R não é fenila;

(n) quando R1, R1 R4, RD e R5 são H e R2 é CO2H1 então R3 nãoé fenila, 4-cloro-fenila, fenetila, 3-hidróxi-propila, amino, morfolin-1-ila, piperi-din-1-ila, 4-metil-piperazin-1-ila, tolueno-4-sulfonil-amino, 3-benzoil-amino-prop-1-ila, amino-prop-1-inila, hex-1-ila, 5-hidróxi-pent-1-ila, piperazin-1-ila,ou 2-(1-piperazinil)-pirimidinila;

(0) quando R11 RD e R são H, R2 é CO2Me e R3 é OH, então R4e R5 não são cloro;

(p) quando R1, R4, RD e R5 são H, R2 é CO2Me e R3 é OH, entãoR não é bromo;

(q) quando R1, RD e R4 são H, R2 é CO2Me e R3 é OH, então Re R5 não são bromo;

(r) quando R1, R, R3, RD e R5 são H e R2 é CO2H, então R4 nãoé fenila, 4-cloro-fenila ou fenil-etila;

(s) quando R1, R5, RD, R4, R3 e R são H, então R2 não é 2H-tetrazol-1-ila;

(t) quando R1, R5, R4 e R são H, R2 é CO2H e R3 é OH, então RDnão é 3,5-dicloro-fenila ou 4-flúor-fenila; e

(u) pelo menos um entre R1 a R5, R e RD são diferentes de H.Os compostos da Fórmula Il úteis são os seguintes:

(1) Fórmula Ill<formula>formula see original document page 25</formula>

onde

R, R11 e R3 são como definidos na Fórmula Il acima; e

R2a é H; alquila de C1-C6 opcionalmente substituída; aquenila deC1-C6 opcionalmente substituída; arila opcionalmente substituída; heterocicli-la opcionalmente substituída; um antioxidante; ou um grupamento de asses-to; COR6a ou CSR6a, onde R6a é H, alquila de C1-C6 opcionalmente substituí-da, aquenila de C2-C6 opcionalmente substituída, hidroxila, arila opcional-mente substituída, heterociclila opcionalmente, ou OR7a, SR7a ou NR7aR8a,onde R7a e R8a são iguais ou diferentes e são selecionados entre H, alquilade C1-C6 opcionalmente substituída, aquenila de C2-C6 opcionalmente subs-tituída, arila opcionalmente substituída ou heterociclila opcionalmente substi-tuída; CN; CH2NR9aR10a, ou HCNNR9aR10a, onde R9a e R10a são iguais oudiferentes e são selecionados entre H, alquila de C1-C6 opcionalmente subs-tituída, aquenila de C2-C6 opcionalmente substituída, arila opcionalmentesubstituída ou heterociclila opcionalmente substituída; OR11a, SR11a ouNR aR a, onde R a e R a são iguais ou diferentes e são selecionados en-tre H, alquila de C1-C6 opcionalmente substituída, aquenila de C2-C6 opcio-nalmente substituída, arila opcionalmente substituída ou heterociclila opcio-nalmente substituída, ou em conjunto formam heterociclila opcionalmentesubstituída; ou SO2NR13aR14a, onde R13a e R14a são iguais ou diferentes esão selecionados entre H, alquila de C1-C6 opcionalmente substituída, aque-nila de C2-C6 opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída ouheterociclila opcionalmente substituída;

- Fórmula IV<formula>formula see original document page 26</formula>

onde

R1 é como definido na Fórmula Il acima; e

R20a é alquila de CrC6 opcionalmente substituída; aquenila deCrC6 opcionalmente substituída; arila opcionalmente substituída; heterocicli-Ia opcionalmente substituída.

A Fórmula IV pode representar compostos nos quais um grupa-mento antioxidante está anexado à posição C2 da 8-hidróxi-quinolina, de talmodo que a exposição a um ambiente pró-oxidante, isto é, radicais hidroxila,resultem em uma molécula com melhores propriedades de ligação de me-tais.

Os exemplos representativos estão ilustrados abaixo:

<formula>formula see original document page 26</formula>

onde

R1 e R3 são como definidos na Fórmula Il acima; eR60a é alquila de C1-C6 opcionalmente substituída, alquenila deC2-C6 opcionalmente substituída, hidroxila, OR70a, SR70a, N2R70R8aa, ouNR70aR80a, onde R70 e R80a são iguais ou diferentes e são selecionados en-tre H, alquila de C1-C6 opcionalmente substituída, arila opcionalmente substi-tuída ou heterociclila opcionalmente substituída.

A Fórmula V representa compostos nos quais um grupo amidahidrofílico está anexado à posição C2 da 8-hidróxi-quinolina, de modo a au-mentar genericamente a solubilidade, e ao mesmo tempo, mantendo a per-meabilidade da membrana.

Os exemplos representativos estão ilustrados abaixo:<formula>formula see original document page 28</formula>

onde:

R1 é como definido na Fórmula II acima; e

R2□□a é CN; CH2NR9□aR10□a, HCNOR9□a, ou HCNNR9□aR10□a,onde R9□a e R10□a são iguais ou diferentes e são selecionados entre H, alqui-Ia de C1-C6 opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída,arila opcionalmente substituída, ou heterociclila opcionalmente substituída.

Os exemplos representativos estão ilustrados abaixo:

<formula>formula see original document page 28</formula>

- Fórmula VII

<formula>formula see original document page 28</formula>

onde:

R1 é como definido na Fórmula II acima; e

R11□□a e R12□a são iguais ou diferentes e são selecionados entreH, alquila de CrC6 opcionalmente substituída, alquenila de C2-C6 opcional-mente substituída, arila opcionalmente substituída, e heterociclila opcional-mente substituída, ou em conjunto formam heterociclila opcionalmente subs-tituída.

- Fórmula VIII<formula>formula see original document page 29</formula>

onde:

R1 é como definido na Fórmula Il acima; e

R13dd3 e R140a são iguais ou diferentes e são selecionados entreH1 alquila de CrC6 opcionalmente substituída, alquenila de C2-C6 opcional-mente substituída, arila opcionalmente substituída, ou heterociclila opcio-nalmente substituída.

- Fórmula IX

<formula>formula see original document page 29</formula>

onde:

R1, RD, R, R2 e R3 são como definidos na Fórmula Il acima; eR4b e R5b são iguais ou diferentes e são selecionados entre H;

alquila de CrC6 opcionalmente substituída; alquenila de C2-C6 opcionalmen-te substituída; arila opcionalmente substituída; heterociclila opcionalmentesubstituída; um antioxidante; um grupamento de assesto; SO3H;SO2NR13aR14a, onde R13a e R14a são definidos na Fórmula Ill acima; ouOR15b, SR15b, SO2R15b, CONR15bR16b ou NR15bR16b, onde R15b e R16b são i-guais ou diferentes e são selecionados entre H; alquila de CrC6 opcional-mente substituída, alquenila de C2-C6 opcionalmente substituída, acila de CrC6 opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída, ou heterocicli-la opcionalmente substituída,

incluindo as condições (a) a (c), (e), (g), (h), (o), (q), (r) e (u) co-mo definido acima.

Os compostos da Fórmula IX úteis são os seguintes: (IX)<formula>formula see original document page 30</formula>

onde:

R11 RD1 R, R2 e R3 são como definidos na Fórmula Il acima; eR4Db e R50b são como definidos na Fórmula IX acima, desde quepelo menos um seja halogênio,

incluindo as condições (a), (c), (g), (h), (i), (o), (q) e (u) definidasacima.

onde:

R1 é como definido na Fórmula Il acima;R4DDb é H ou halogênio; e

R500b é arila opcionalmente substituída ou heterocicíila opcio-nalmente substituída.

Um exemplo representativo está ilustrado abaixo.

- Fórmula XI

<formula>formula see original document page 30</formula>onde:

R1 é como definido na Fórmula II acima;RDD é alcóxi de C1-6, alquila de C1-6, alquenila de C2-6 ou halo-alquila de C1-6; e

R500b é H ou halogênio.

Um exemplo representativo está ilustrado abaixo.

<formula>formula see original document page 31</formula>

onde:

R1 é como definido na Fórmula Il acima; e

RDD é como definido na Fórmula Xlll acima.

- Fórmula XIV<formula>formula see original document page 32</formula>

onde:

R2 a R5, R e R□ são como definido na Fórmula II acima; e

R100b é alquila de Ci-6 opcionalmente substituída, arila opcio-nalmente substituída, aril-acila opcionalmente substituída, alquil(Ci-6)-acilaou heterociclila opcionalmente substituída.

- (iii) Fórmula XV

<formula>formula see original document page 32</formula>

onde.

R1, R2, R3, R e R□ são como definidos na Fórmula II; e

pelo menos um entre R4c e R5c é halogênio, e o outro é selecio-nado entre H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmentesubstituída, alcóxi opcionalmente substituído, acila opcionalmente substituí-da, hidroxila, amino opcionalmente substituído, tio opcionalmente substituí-do, sulfonila opcionalmente substituída, sulfinila opcionalmente substituída,sulfonil-amino opcionalmente substituído, SO3H, amina, CN, CF3, arila op-cionalmente substituída, heterociclila opcionalmente substituída, um antioxi-dante, um grupamento de assesto,

seus sais, hidratos, solvatos, derivados, pró-fármacos, tautôme-ros e/ou isômeros,

desde que:

(a) quando R1 a R3, R e RD são H, então R4c não é cloro ou iodo, eR5c não é iodo;

(b) quando R1 a R5c, RD e R são H, R2 é CO2H1 e R3 é OH, entãoR4c não bromo;

(c) quando R11 R e RD são H1 R2 é CO2H e R3 é OH, então R4c e R5cnão são cloro;

(d) quando R11 R4c, e RD são H, R2 é CO2H ou CO2ME e R3 é OH,.então R e R5c não são bromo;

(e) quando R11 R, RD e R5c são H, R2 é CO2Me e R3 é OH, entãoR4c não são bromo;

(f) quando R1, R e RD são H, R2 é CO2Me e R3 é OH, então R4c eR5c não são cloro.

Um composto da Fórmula XV preferido é o seguinte:

<formula>formula see original document page 33</formula>

onde:

R2, R, RD, R4c e R5c são como definidos na Fórmula XVI; eR30 é alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmentesubstituída, alcóxi opcionalmente substituído, acila opcionalmente substituí-da, amino opcionalmente substituído, tio opcionalmente substituído, sulfonilaopcionalmente substituída, sulfinila opcionalmente substituída, sulfonil-aminoopcionalmente substituído, halogênio, SO3H, amina, CN, CF3, arila opcio-nalmente substituída, heterociclila opcionalmente substituída, um antioxidan-te, ou um grupamento de assesto,

desde que pelo menos um entre R, R2 e R3d seja diferente de H.

Os exemplos representativos estão ilustrados abaixo:

<formula>formula see original document page 33</formula>

onde:R1 é como definido na Fórmula Il e R4c é como definido na Fór-mula XV; e

R5cDD é arila opcionalmente substituída ou heterociclila opcio-nalmente substituída.

- Fórmula XVIII

<formula>formula see original document page 34</formula>

onde:

R1 é como definido na Fórmula II, R5c é como definido na Fórmu-la XV e RDG é como definido na Fórmula XII; e

-Fórmula XIX

<formula>formula see original document page 34</formula>

onde:

R21 R31 R e RD são como definidos na Fórmula Il1 R4c e R5c sãocomo definidos na Fórmula XV e R1b é como definido na Fórmula XII.

Outros exemplos de compostos aqui contemplados incluem:<formula>formula see original document page 35</formula>

A presente invenção fornece também um composto da FórmulaXX que é um composto da Fórmula Il com as seguintes ressalvas:

(a) quando R1 e R3 a R5, R e RD são H1 então R2 não é H, metila, CO2H1 CN, CONCH2CO2H, COCH3, CH2NH2, CNOH, pirid-2-ila, 2-hidróxi-fenila, CHNNH2, NH-(pirid-2-ila),ou SO3H;

(b) quando R1 e R4 a R7 são H1 então R3 não é OH e R2 não éCO2H;

(c) quando R1 a R31 R6 e R7 são H1 então (i) quando R5 é I, R4 não éCl, SO3H ou I; (ii) quando R5 é H, R4 não é SO3H, NH2 ou Cl; (iii) R4 e R5 nãosão ambos Cl, Br ou CH3; e (iv) quando R2 a R7 são H, então R1 não é

<formula>formula see original document page 36</formula>

quando R1 a R3, R e RD são Η, então R4 não é Cl ou I e R5 não

quando R1 a R3, R, RD e R5 são H, então R4 não é CHO,

<formula>formula see original document page 36</formula>(f) quando R1, R5, RD e R são Η, R2 é CO2H, e R3 é OH, então R4não é bromo, metila, fenila, hidróxi-metila ou triflúor-metila;

(g) quando R1, R41 R5 e R são H, R2 é CO2H e R3 é OH, então RDnão é bromo, iodo, metila, fenila, propila, fenetila, heptila, benzil-amino-metila, 3-amino-propila, 3-hidróxi-propila, 4-metóxi-fenila, 3-metil-fenila, 4-cloro-fenila, 3,4-dicloro-fenila, piridin-3-ila, fur-2-ila, 4-cloro-fenila, 3,4-dicloro-fenila, 2-cloro-fenila, 3-cloro-fenila, 2-cloro-fenila, 2-metóxi-fenila, ou piperi-din-2-ila;

(h) quando R1, R41 R e RD são H1 R2 é CO2H e R3 é OH, então R5não é fenila, 3-hidróxi-propila, fenetila, 3-amino-prop-1 -ila ou hex-1 -ila;

(i) quando R1, R4, RD e R5 são H, R2 e CO2H e R3 é OH, então Rnão é N-morfolino-metila, bromo ou fenila;

(j ) quando R1, R e RD são H, R2 é CO2H e R3 é OH1 então R4 e R5não são cloro;

(k) quando R1, R4 e RD são H, R2 é CO2H e R3 é OH, então R e R5não são bromo;

(1) quando R1, R, RD e R5 são H, R2 é CO2Me e R3 é OH, então R4não é hidróxi-metila, fenila ou bromo;

(m) quando R1, R, R4, e R5 são H, R2 é CO2Me e R3 é OH, então RDnão é 4-metóxi-fenila, 3-metil-fenila, piridin-3-ila, benzila, bromo, 4-cloro-fenila, 3,4-dicloro-fenila, 3-hidróxi-propila ou 3-t-butóxi-carbonil-amino-propila;

(n) quando R1, R, R4 e RD são H, R2 é CO2Me e R3 é OH, então R5não é fenila ou 3-t-butóxi-carbonil-amino-prop-1-ila;

(o) quando R11-R, R4, RD e R5 são H, e R2 é CO2Me, então R3 não étolueno-4-sulfonil-amino, piperazin-1-ila, morfolin-1-ila, piperidin-1-ila, 4-metil-piperazin-1-ila, 3-benzoil-amino-prop-1-ila, fenetila, 3-t-butóxi-carbonil-amino-propila, 3-hidróxi-propila, amino ou hex-1-ila;

(P) quando R1, R4, RD e R5 são H, R2 é CO2Na e R3 é OH, então Rnão é fenila;

(q) quando R1, R, R4, RD e R5 são H e R2 é CO2H, então R3 não éfenila, 4-cloro-fenila, fenetila, 3-hidróxi-propila, amino, morfolin-1-ila, piperi-din-1-ila, 4-metil-piperazin-1-ila, tolueno-4-sulfonil-amino, 3-benzoil-amino-prop-1-ila, amino-prop-1-inila, hex-1-ila, 5-hidróxi-pent-l-ila, piperazin-1-ila,ou 2-(1 -piperazinil)-pirimidinila;

(r) quando R1, RO e R são H1 R2 é CO2Mee R3 é OH1 então R4 e R5não são cloro;

(s) quando R11 R41 RD e R5 são H, R2 é CO2Me e R3 é OH1 então Rnão é bromo;

(t) quando R1lRDe R4 são H, R2 é CO2Me e R3 é OH1 então R e R5não são bromo;

(u) quando R11 R, R31 RDe R5 são H, e R2 é CO2H1 então R4 não éfenila, 4-cloro-fenila ou fenil-etila;

(v)quando R1, R5, RD1 R41 R3 e R são H, então R2 não é 2H-tetrazol-1-ila;

(w) quando R11 R51 R41 e R são H, R2 é CO2H e R3 é OH1 então RDnão é 3,5-dicloro-fenila ou 4-flúor-fenila;

(χ) pelo menos um entre R1 a R5, R e RD é diferente de H;

(y) quando R1 a R3, R5, RD e R são H, então R4 não é cloro, NH2 ouSO3H; e

(z) quando R1, R3 a R51 E e RD são H, então R2 não é CH3.

De preferência, a invenção fornece um composto da Fórmula Ic1com as seguintes ressalvas adicionais:

(g) quando R1 a R3, R e RD são H, então R4c e R5c não são amboscloro ou bromo; e

(h) quando R1 a R3, R5c, R e RD são H, então R4c não é cloro.

Os compostos particularmente preferidos incluem uma série deassim denominados compostos "PB" (ou PBT), alguns dos quais sendo refe-ridos acima, tais como:

<formula>formula see original document page 38</formula><formula>formula see original document page 39</formula><formula>formula see original document page 40</formula><formula>formula see original document page 41</formula><formula>formula see original document page 42</formula><formula>formula see original document page 43</formula>

O grupo 8-hidroxila ou 8-mercapto nos compostos acima podemser bloqueados para formar um pró-fármaco, particularmente um pró-fármaco éster. 8-hidróxi ou 8-mercapto representa um sítio principal de me-tabolismo para os compostos acima: conjugação com ácido glicurônico ousulfato dá uma espécie hidrofílica pronta para ser excretada.

Outros compostos úteis incluem um composto da Fórmula XXI:

<formula>formula see original document page 43</formula>

onde:

R, R1 e m são como definidos na Fórmula I;

W é Ch1 N ou NH;

U é CH1 CO ou N; e

YD, em conjunto com o anel ao qual ele está anexado, formauma héterociclila com 6 membros, contendo N, opcionalmente substituída.

Os compostos da Fórmula XXI preferidos são os seguintes:

(i) Fórmula XXII

<formula>formula see original document page 43</formula>

onde:

R, R1, m e q são como definidos na Fórmula I.De preferência, R1 fica localizado nas posições 2, 3, 5 e/ou 7, eé selecionado entre halogênio, arila opcionalmente substituída, heterociclilaopcionalmente substituída, alquila opcionalmente substituída e (CH2)nNR2R3,onde n, R2 e R3 são como definidos acima. Mais preferivelmente, R1 é cloro,fenila opcionalmente substituída, cicloalquila de C2-6, CH2NR4R5, onde R4 eR5 são selecionados independentemente entre H e alquila de C1-4 ou piridini-la opcionalmente substituída.

Particularmente, os exemplos estão ilustrados abaixo:

<formula>formula see original document page 44</formula>

onde:

R, R1', m e q são como definidos na Fórmula I.

R1 pode ficar localizado nas posições 2, 4, 5 e/ou 7, e é selecio-nado entre halogênio e heterociclila opcionalmente substituída. De preferên-cia, R1 é cloro e/ou morfolinila.

Os exemplos preferidos estão ilustrados abaixo:<formula>formula see original document page 45</formula>

(iii) Fórmula XXIV

<formula>formula see original document page 45</formula>

onde:

R, R1, m e q são como definidos na Fórmula I.

De preferência, R1 fica localizado nas posições 2, 5 e/ou 7, e éselecionado entre halogênio e CH2NR4R51 onde R4 e R5 são selecionadosindependentemente entre H e alquila de C1-4.

Os exemplos úteis estão ilustrados abaixo:

<formula>formula see original document page 45</formula>

(iv) Fórmula XXV<formula>formula see original document page 46</formula>

onde:

R, R1, m e q são como definidos na Fórmula I.De preferência, R1 fica localizado nas posições 2 e/ou 7, e é se-lecionado entre heterociclila opcionalmente substituída, CO2R21 (CH2)nNR2R3e CONR2R31 onde n, R2 e R3 são como definidos na Fórmula I.Os exemplos preferidos estão ilustrados abaixo.

<formula>formula see original document page 46</formula>onde:

R, R1, m e q são como definidos na Fórmula I.De preferência, R1 fica localizado nas posições 2, 3, 6 e/ou 7, eé selecionado entre halogênio, arila opcionalmente substituída, e(CH2)nNR2R3, onde n, R2 e R3 são como definidos na Fórmula I.Os exemplos preferidos estão ilustrados abaixo.<formula>formula see original document page 47</formula>

onde:

R1 R1 e m são como definidos na Fórmula I.De preferência, R1 fica localizado nas posições 2 e/ou 7, e é se-lecionado entre (CH2)nNR2R31 onde n, R2 e R3 são como definidos acima.

Qualquer referência aos compostos listados acima inclui seussais e isômeros farmaceuticamente aceitáveis.

O termo "alquila", utilizado isoladamente ou em palavras com-postas tais como "alquila opcionalmente substituída" ou "alquil-amino", refe-re-se a grupos hidrocarbônicos com cadeia linear, ramificada ou cíclica, ten-do entre 1 e 10 átomos de carbono, de preferência 1 a 6 átomos de carbono,e mais preferivelmente, 1 a 4 átomos de carbono. Os exemplos ilustrativosdesses grupos alquila são metila, etila, propila, isopropila, butila, isobutila,sec-butila, t-butila, pentila, neopentila, hexila, ciclo-propila, ciclo-butila, ciclo-pentila ou ciclo-hexila. Os grupos alquila preferidos são alquilas de C1-4 taiscomo metila ou etila e cicloalquila de C2-6 tal como ciclo-propila.

O termo "alquenila", utilizado isoladamente ou em palavras com-postas tais como "alquenila opcionalmente substituída", denota radicais line-ares, ramificados ou moocíclicos ou policíclicos, tendo pelo menos uma liga-ção dupla carbono-carbono, tendo entre 2 e 20 átomos de carbono, de prefe-rência 2 a 14 átomos de carbono, e mais preferivelmente, 2 a 6 átomos decarbono. Os exemplos de radicais alquenila incluem alila, etenila, propenila,butenila, isobutenila, 3-metil-2-butenila, 1-pentenila, ciclopentenila, 1-metil-ciclopentenila, 1-hexenila, 3-hexenila, ciclo-hexenila, 1-heptenila, 3-heptenila, 1-octenila, ciclo-octenila, 1-nonenila, 2-nonenila, 1-decenila, 3-decenila, 1,3-butadienila, 1,4-pentadienila, 1,3-ciclopentadienila, 1,3-hexadienila, 1,4-hexadienila, 1,3-ciclo-hexadienila, 1,4-ciclo-hexadienila, 1,3-cicloheptadienila, 1,3,5-cicloheptatrienila, 1,3,5,7-ciclo-octatetraenila, e simi-lares.

O termo "alquinila", utilizado isoladamente ou em palavras com-postas tais como "alquinila opcionalmente substituída", refere-se a radicaiscom linear ou ramificada, tendo pelo menos uma ligação tripla carbono-carbono, tendo entre 2 e 20 átomos de carbono, de preferência 2 a 14 áto-mos de carbono, e mais preferivelmente, 2 a 6 átomos de carbono. Os e-xemplos etinila, 1-propinila, 1- e 2-butinila, 2-metil-2-propinila, 2-pentinila, 3-pentinila, 4-pentinila, 2-hexinila, 3-hexinila, 4-hexinila, 5-hexinila, 5-hexinila,10-undecinila, 4-etil-1-octin-3-ila, 7-dodecinila, 9-dodecinila, 10-dodecinila, 3-metil-1-dodecin-3-ila, 2-tridecinila, 11-tridenila, 3-tetradecinila, 7-hexadecinila, 3-octadecinila, e similares. —.....

O termo "grupo heterociclila", utilizado isoladamente ou em pala-vras compostas tais como "heterociclila opcionalmente substituída" refere-sea grupos heterocíclicos monocíclicos ou policíclicos, contendo pelo menosum heteroátomo selecionado entre nitrogênio, enxofre e oxigênio.Os grupos heterocíclicos apropriados incluem grupos heterocí-clicos que contêm N, tais como grupos heteromonocíclicos insaturados, ten-do 3 a 6 membros, contendo 1 a 4 átomos de nitrogênio, por exemplo, pirroli-Ia1 pirrolinila, imidazolila, pirazolila, piridila, piridinila, pirimidinila, pirazinila,piridazinila, triazolila ou tetrazolila;

grupos heteromonocíclicos saturados, tendo 3 a 6 membros,contendo 1 a 4 átomos de nitrogênio tais como pirrolidinila, imidazolidinila,piperidino ou piperazinila;

grupos heterocíclicos insaturados condensados, contendo 1 a 5átomos de nitrogênio, tais como indolila, isoindolila, indolizinila, benzimidazo-lila, quinolila, isoquinolila, indazolila, benzotriazolila ou tetrazolopiridazinila;

grupos heteromonocíclicos insaturados, tendo 3 a 6 membros,contendo um átomo de oxigênio, tais como piranila ou furila;

grupos heteromonocíclicos insaturados, tendo 3 a 6 membros,contendo 1 a 2 átomos de enxofre, tal como tienila;

grupos heteromonocíclicos saturados, tendo 3 a 6 membros,contendo 1 a 2 átomos de oxigênio e 1 a 3 átomos de nitrogênio, tais comooxazolila, isoxazolila ou oxadiazolila;

grupos heteromonocíclicos saturados, tendo 3 a 6 membros,contendo 1 a 2 átomos de oxigênio e 1 a 3 átmos de nitrogênio, tal comomorfolinila;

grupos heterocíclicos insaturados, contendo 1 a 2 átomos deoxigênio e 1 a 3 átomos de nitrogênio, tais como benzoxazolila ou benzoxa-diazolila;

grupos heteromonocíclicos insaturados, tendo 3 a 6 membros,contendo 1 a 2 átomos de enxofre e 1 a 3 átomos de nitrogênio, tais comotiazolila ou tiadiazolila;

grupos heteromonocíclicos saturados, tendo 6 membros, con-tendo 1 a 2 átmos de enxofre e 1 a 3 átomos de nitrogênio, tal como tiazoli-dinila; e

grupos heterocíclicos insaturados condensados, contendo 1 a 2átomos de enxofre e 1 a 3 átomos de nitrogênio, tais como benzotiazolila oubenzotiadiazolila.

De preferência, a heterociclila é um grupo heteromonocíclicoinsaturados, tendo 5 ou 6-membros, contendo 1 a 3 átomos de nitrogênio,tais como imidazolila ou piridinila; um grupo heteromoncíclico saturados,tendo 5 ou 6 membros, contendo 1 a 4 átomos de nitrogênio, tais como imi-dazolidinila ou piperazinila; ou um grupo heteromonocíclico saturado, tendoou 6 membros, contendo 1 a 2 átomos de oxigênio e 1 a 3 átomos de ni-trogênio, tal como morfolinila.

O termo "arila", utilizado isoladamente ou em palavras combina-das, tais como "arila opcionalmente substituída", denota um sistema carbo-cíclico aromático, contendo um, dois ou três anéis, onde tais anéis podemser anexados entre si, de uma maneira pendente ou podem estar fundidos.O termo "arila" engloba radicais aromáticos tais como fenila, naftila, tetrai-dronaftila, indano e bifenila. De preferência, a arila é fenila opcionalmentesubstituída, tal como 4-halo-fenila, mais preferivelmente 4-flúor-fenila ou 4-cloro-fenila.

O termo "halo" refere-se a flúor, cloro, bromo ou iodo, de prefe-rência flúor, iodo ou cloro, mais preferivelmente cloro.

O termo "alcóxi" refere-se a radicais de cadeia linear ou ramifi-cada, contend óxi, cada tendo de preferência partes alquila com 1 a cerca deátomos de carbono. Os exemplos de alcóxi incluem metóxi, etóxi, propóxi,butóxi e t-butóxi.

O termo "tio opcionalmente substituído" refere-se substituintesopcionais tais como radicais que contêm uma alquila linear ou ramificada,tendo 1 a 10 átomos de carbono, de preferência 1 a 6 átomos de carbono,mais preferivelmente 1 a 4 átomos de carbono, anexada a um átomos deenxofre bivalente. Os exemplos de radicais alquil-tio incluem metal-tio, etil-tio, propel-tio, butil-tio e hexiBio.

O termo "opcionalmente substituído" refere-se a um grupo quepode ou não ser adicionalmente substituído com um ou mais grupos selecio-nados entre alquila, aquenila, alquinila, arila, aldeído, halogênio, halo-alquila,halo-alquenila, halo-alquinila, halo-arila, hidroxila, alcóxi, alquenilóxi, arilóxi,benzilóxi, halo-alcóxi, halo-alquenilóxi, halo-arilóxi, nitro, nitro-alquila, nitro-alquenila, nitro-alquinila, nitro-arila, nitro-heterociclila, amino, alquil-amino,dialquil-amino, alquenil-amino, alquinil-amino, aril-amino, diaril-amino, benz-yl-amino, dibenzil-amino, acila, alquenil-acila, alquinil-acila, aril-acila, acil-amino, diacil-amino, acilóxi, alquil-sulfonilóxi, aril-sulfonilóxi, aril-sulfenilóxi,heterociclila, heterociclóxi, heterociclil-amino, halo-heterociclila, alquil-sulfenila, aril-sulfenila, carboalcóxi, carboarilóxi, mercapto, alquil-tio, benzyl-tio, acil-tio, grupos que contêm fósforo, e similares. De preferência, o substi-tuinte opcional é alquila de C1-6, mais preferivelmente alquila de C1-4; CF3;flúor; cloro; iodo; ciano; alcóxi de C1-6, mais preferivelmente alcóxi de C1-4;arila; heterociclila; amino; ou alquil-amino.

O termo "antioxidante" é aqui utilizado em seu sentido mais am-plo e refere-se a um grupo que tem a capacidade de reagir com uma espéciede oxigênio reativa tal como um radical hidroxila, de modo a gerar um produ-to atóxico. Os exemplos incluem fenóis tais como 3,4,5-trimetóxi-fenila e 3,5-di-t-butil-4-hidróxi-fenila, indol-aminas tais como melatonina e flavonóides.Outros exemplos podem ser encontrados na literatura (Wright et al, J AmChem Soc 123:1173-1183, 2001).

O termo "grupo de assesto" é aqui utilizado em seu sentido maisamplo e refere-se a um grupo que facilitará a distribuição do fármaco para océrebro por meio de um mecanismo de transporte ativo. O grupamento deassesto é reconhecido por enzimas transportadoras específicas que são par-te integrante da barreira hematoencefálica e estas enzimas transportadorasentão proporcionam um mecanismo para que o fármaco seja importado paradentro do cérebro. Tipicamente, tais transportadores são dependentes desódio e seus substratos contêm ácidos carboxílicos tais como ácido ascórbi-co e L-glutamato. A conjugação do grupamento de assesto ao fármaco é édesempenhada de modo a reter o grupamento ácido.

O termo "quelante de metais" aqui utilizado é distinguido do con-ceito conhecido anteriormente de "terapia de quelação". A "terapia de quela-ção" é um termo associado clinicamente com a remoção de metais pesados,tais como doença de Wilson, β-tallassemia e hemocromatose.Os sais dos compostos acima são, de preferência, farmacutica-mente aceitáveis, mas deve-se avaliar que os sais não farmaceuticamenteaceitáveis também caem dentro do âmbito da presente invenção, pois elessão úteis como intermediários na preparação de sais farmaceuticamenteaceitáveis. Os exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis incluem saisde cátions farmaceuticamente aceitáveis, tais como sódio, potásssio lítio,cálcio, magnésio, amônio e alquil-amônio; sais de adição de ácidos de áci-dos inorgânicos farmaceuticamente aceitáveis, tais como ácidos clorídrico,orto-fosfórico, sulfúrico, nítrico, carbônico, bórico, sulfâmico, e bromídrico; ousais de ácidos orgânicos farmaceuticamente aceitáveis, tais como os ácidosacético, propiônico, butírico, tartárico, maléico, hidróxi-maléico, fumárico,cítrico, lático, múcico, glicônico, benzóico, succínico, oxálico, fenil-acético,metanossulfônico, tri-halo-metanossulfônico, toluenossulfônico, benzenos-sulfônico, salicílico, sulfanílico, aspártico, glutâmico, edético, esteárico, pal-mítico, oléico, láurico, pantotênico, tânico, ascórbico e valérico.

Além disso, alguns dos compostos da presente invenção podemformar solvatos com água ou solventes orgânicos comuns. Tais solvatos es-tão englobados dentro do âmbito da presente invenção.

O termo "pró-fármaco" é aqui utilizado no seu sentido mais am-pio para incluir os compostos que são convertidos in vivo nos compostosacima. O uso da estratégia com pró-fármacos otimiza a distribuição do fár-maco para seu local de ação, por exemplo, a retina. Em um aspecto, o termorefere-se à presença de um grupamento alquila de Ci-6 ou aril-éster que édesenhado para resistir à hidrólise até que o pró-fármaco tenha cruzado abarreira hematoencefálica. Em um segundo aspecto, o termo refere-se àanexação na posição 2 de um grupo antioxidante, particularmente o grupa-mento 3,4,-5trimetóxi-fenila ou seus derivados. A exposição ao ambientepró-oxidante da retina pode levar então à hidroxilação do grupo -3,4,5-trimetóxi-fenila para dar o substituinte 2-hidróxi-3,4,5-trimetóxi-fenila, cujogrupo hidroxila atua para intensificar as propriedades Iigantes dos compos-tos acima.

O termo "tautómero" é aqui utilizado em seu sentido mais amplopara incluir os compostos acima que são capazes de existir em um estadode equilíbrio entre duas formas isoméricas. Tais compostos podem diferir naligação que conecta dois átomos ou grupos e na posição destes átomos ougrupos no composto.

O termo "isômero" é aqui utilizado no seu sentido mais amplo einclui isômeros estruturais, geométricos e estereoisômeros. Como os com-postos acima podem ter um ou mais centros quirais, eles são capazes deexistir em formas enantioméricas.

As composições da presente invenção compreendem pelo me-nos um dos compostos acima junto com um ou mais carreadores farmaceu-ticamente aceitáveis e opcionalmente, outros agentes terapêuticos. Cadacarreador, diluente, adjuvante e/ou excipiente deve ser farmaceuticamente"aceitável" no sentido de ser compatível com os outros ingredientes da com-posição, e não deve ser nocivo para o indivíduo. As composições incluemaquelas apropriadas para adminsitração oral, retal, nasal, tópica (incluindobucal e sublingual), vaginal ou parenteral (incluindo subcutânea, intramuscu-lar, intravenosa e intradérmica). As composições podem ser conveniente-mente apresentadas em formas de dosagem unitárias e podem ser prepara-das por métodos bem-conhecidos nas técnicas de farmácia. Tais métodosincluem a etapa de associar o ingrediente ativo com o que constitui um oumais ingredientes acessários. Genericamente, as composições são prepara-das associando uniformemente e intimamente o ingrediente ativo com carre-adores, diluentes, adjuvantes, e/ou excipientes líquidos ou carreadores sóli-dos finamente divididos ou ambos, e então, caso necessário, modelar o pro-duto.

Os compostos acima podem ser administrados por via oral, tópi-ca, ou parenteral em formulações de dosagem unitária, contend carreadores,adjuvantes e veículos atóxicos convencionais farmaceuticamente aceitáveis.O termo parenteral, como aqui utilizado, inclui a administração por injeçãosubcutânea, aerossol aos pulmões ou cavidade nasal, injeção intravenosa,intramuscular, intratecal, intracraniana, ou técnicas de infusão. A administra-ção intra-ocular é particularmente útil.A presente invenção fornece também formulações farmacêuticastópicas, orais e parenterais apropriadas para uso nos métodos de tratamentoinovadores da presente invenção. Os compostos da presente invenção po-dem ser administrados por via oral como comprimidos, suspensões aquosasou oleosas pastilhas, trociscos, grânulos, emulsões, cápsulas, xaropes ouelixires. A composição para uso oral pode conter um ou mais agentes sele-cionados no grupo de agentes edulcorantes, sabores, agentes colorantes, econservantes, para produzir preparações farmaceuticamente atraentes epalatáveis. Os edulcorantes apropriados incluem sacarose, lactose, glicose,aspartame ou sacarina. Os agentes desintegradores apropriados incluemamido de milho, metal-celulose, poli(vinil-pirrolidona), goma xantana, bento-nita, ácido algínico ou ágar. Os sabores apropriados incluem óleo de hortelã-pimenta, óleo de gaultheria, sabor de cereja, laranja, ou framboesa. Os con-servantes apropriados incluem benzoato de sódio, vitamina E, alfatocoferol,ácido ascórbico, metilparaben, propilparaben ou bissulfito de sódio. Os Iubrr-rificantes apropriados incluem estearato de magnésio, ácido esteárico, olea-to de sódio, cloreto de sódio ou talco. Os agentes retardadores de tempoincluem monoestearato de glicerila ou diestearato de glicerila. Os comprimi-dos contêm o ingrediente ativo em mistura com excipientes atóxicos farma-ceuticamente aceitáveis que são apropriados para a fabricação de comprimidos.

Estes excipientes podem ser, por exemplo, (1) diluentes inertes,tais como carbonato de cálcio, lactose, fosfato de cálcio ou fosfato de sódio;(2) agentes granuladores e desintegradores, tais como amido de milho ouácido algínico; (3) agentes aglutinantes, tais como amido, gelatina ou acácia;e (4) agentes lubrificantes, tais como estearato de magnésio, ácido esteáricoou talco. Estes comprimidos podem ser não-revestidos ou revestidos portécnicas conhecidas para retardara~disintegração e absorção no trato gas-trointestinal, e desta forma proporcionar uma ação prolongada durante umperíodo mais longo. Por exemplo, um material retardante de tempo tal comomonoestearato de glicerila ou diestearato de glicerila pode ser empregado. Orevestimento pode ser realizado usando técnicas descritas nas patentes n^US. 4.256.108; 4.160.452; e 4.265.874, para formar comprimidos terapêuti-cos osmáticos para liberação controlada.

Os compostos acima, bem como o agente farmaceuticamenteativo útil no método da invenção, podem ser administrados para aplicação invivo, por via parenteral por injeção ou perfusão gradual durante o tempo in-dependentemente ou juntos. A administração pode ser intra-ocular, intrave-nosa, intra-arterial, intraperitoneal, intramuscular, subcutânea, intracavidade,transdérmica ou infusão, por exemplo, por bomba osmótica. Para estudos invitro, os agentes podem ser adicionados ou dissolvidos em um tampão a-propriado biologicamente aceitável e adicionados a uma célula ou tecido.

As preparações para administração parenteral incluem soluções,suspensões e emulsões aquosas e não-aquosas. Os exemplos de solventesnão-aquosos são propilenoglicol, polietilenoglicol, óleos vegetais, tais comoóleo de oliva, e ésteres orgânicos injetáveis, tais como oleato de etila. Oscarreadores aquosos incluem água, soluções, emulsões ou suspensões al-coólicas/aquosas, incluindo solução salina e meios tamponados. Os veículosparenterais incluem solução de cloreto de sódio, dextrose de Ringer, dextro-se e cloreto de sódio, veículos de Ringer intravenosos Iactados que incluemrepositores de líquidos e nutrientes, repositores de eletrólitos (tais como a-queles baseados em dextrose de Ringer), e similares. Conservantes e outrosaditivos também podem estar presentes, tais como, por exemplo, agentesantimicrobianos, antioxidantes, quelantes, fatores de crescimento e gasesinertes, e similares.

A presente invenção inclui várias composições farmacêuticasúteis para melhorar doenças. As commposições farmacêuticas de acordocom uma modalidade da invenção são preparadas combinando um compos-to acima, seus análogos, derivados ou sais, ou combinações dos compostosacima, com um ou mais agentes farmaceuticamente ativos, em uma formaapropriada para administração a um indivíduo, usando carreadores, excipi-entes, e aditivos ou auxiliares. Freqüentemente, os carreadores ou auxiliaresusados incluem carbonato de magnésio, dióxido de titânio, lactose, manitol eoutros açúcares, talco, proteína do leite, gelatina, amido, vitaminas, celulosee seus derivados, óleos animais e vegetais, polietilenoglicóis e solventes,tais como água estéril, álcoois, glicerina e álcoois poliidroxilados. Os veícu-los intravenosos incluem repositores de líquidos e nutrientes. Os conservan-tes incluem agentes antimicrobianos, antioxidantes, quelantes e gases iner-tes. Outros carreadores farmaceuticamente aceitáveis incluem soluções a-quosas, excipientes atóxicos, incluindo sais, conservantes, tampões e simila-res, como descrito, por exemplo, em "Remington1S Pharmaceutical Scien-ces", 20a edição, Williams and Wilkins (2000), e "The British National Formu-lary" 43â edição (British Medicai Association and Royal Pharmaceutical Soci-ety of Great Britain, 2002; http://bnf.rhn.net), cujos teores são aqui incorpo-rados como referência. OpH e a concentração exata dos vários componen-tes da composição farmacêutica são ajustados de acordo com técnicas roti-neiras. Vide "Goodman and GiIman1S The Pharmacological Basis for Thera-peutics" (7â edição, 1985).

As composições farmacêuticas são preparadas e administradas,de preferência, em doses unitárias. As doses unitárias sólidas podem sercomprimidos, cápsulas e supositórios. Para o tratamento de um indivíduo,dependendo da atividade do composto, da maneira de administração, natu-reza de gravidade do distúrbio, idade e peso do indivíduo, diferentes dosesdiárias podem ser usadas. Sob certas circunstâncias, entretanto, doses diá-rias mais altas ou mais baixas podem ser apropriadas. A administração dadosediária pode ser conduzida por uma única administração nà forma deuma dose unitária individual ou então várias doses unitárias menores e tam-bém múltiplas administrações de doses subdivididas em intervalos específi-cos.As composições farmacêuticas de acordo com a invenção po-dem ser administradas localmente ou por via sistêmica em uma dose tera-peuticamente eficaz. As quantidades eficazes para este uso dependerão,evidentemente, da gravidade da doença e do peso e estado geral do indiví-duo. Tipicamente, as dosagens usadas in Wfra podem fornecer uma orienta-ção útil nas quantidades úteis para administração in situ da composição far-macêutica, e os modelos animais podem ser usados para determinar as do-sagens eficazes para tratamento dos efeitos colaterais citotóxicos. Váriasconsiderações estão descritas, por exemplo, em Langer, Science, 249:1527,(1990). As formulações para uso oral podem estar na forma de cápsulas degelatina dura, onde o ingrediente ativo é misturado com um diluente sólido,por exemplo, carbonato de cálcio, fosfato de cálcio ou caulim. Elas podemestar também na forma de cápsulas de gelatina mole, onde o ingredienteativo e misturado com água ou um meio oleoso, tal como óleo de amendoim,parafina líquida ou óleo de oliva.

As suspensões aquosas contêm normalmente o materiais ativosem mistura com excipientes apropriados para a fabricação de suspensõesaquosas. Tais excipientes podem ser (1) um agente de suspensão, tal comocarbóxi-metil-celulose sódica, metil-celulose, hidróxi-propil-metil-celulose,alginato de sódio, poli(vinil-pirrolidona), goma de tragacanto e goma de acá-cia; (2) agentes dispersantes ou umectantes que podem ser (a) um fosfatí-deo de ocorrência natural tal como lecitina; (b) um produto da condensaçãode um óxido de alquileno com um ácido graxos, por exemplo, estearato depolioxietileno; (c) um produto da condensação de óxido de etileno com umálcool alifático de cadeia longa, por exemplo, heptadecaetilenoxicetanol; (d)um produto da condensação de óxido de etileno com um éster parcial deri-vado de um ácido graxo e hexitol, tal como monooleato de sorbitol polioxieti-lenado, ou (e) um produto da condensção de óxido de etileno com um ésterparcial derivado de ácidos graxos e anidridos de hexitol, por exemplo, mo-nooleato de sorbitano polioxietilenado.

As composições farmacêuticas podem estar na forma de umasuspensão aquosa ou oleosa injetável estéril. Esta suspensão pode ser for-mulada de acordo com métodos conhecidos, usando agentes dispersantesou umectantes e auxiliares de suspensão que foram mencionados acima. Apreparação-injetável estéril pode ser também uma solução ou suspensãoinjetável estéril em um diluente ou solvente atóxico para uso parenteral, porexemplo, como uma solução em 1,3-butanodiol. Dentre os veículos aceitá-veis que podem ser empregados estão a água, solução de Ringer, e soluçãode cloreto de sódio isotônica. Além disso, óleos fixos estéreis são emprega-dos convencionalmente como um solvente ou meio de suspensão. Para estepropósito, qualquer óleo fixo brando pode ser empregado incluindo monogli-cerídeos ou diglicerídeos sintéticos. Além disso, os ácidos graxos, tais comoo ácido oléico, entram uso na preparação de injetáveis.

Os compostos acima podem ser administrados também na for-ma de sistemas de distribuição por lipossomas, tais como vesículas unilame-Iares pequenas, e vesículas multilamelares. Os lipossomas podem ser for-mados a partir de uma série de fosfolipídeos, tais como colesterol, esteari-lamina, ou fosfatidilcolinas.

Os compostos acima podem ser apresentados também para usona forma de composições veterinárias, que podem ser preparadas, por e-xemplo, por métodos convencionais nessas técnicas. Os exemplos de taiscomposições veterinárias incluem aquelas adaptadas para:

(a) administração oral, aplicação externa, por exemplo, porçõespara derramamento ou deglutição (por exemplo, soluções ou suspensõesaquoas ou não-aquosas); comprimidos ou bolos; pós, grânulos ou péletespara mistura com rações; pastas para aplicação à língua;

(b) administração parenteral, por exemplo, por injeção subcutâ-nea, intramuscular ou intravenosa, por exemplo, solução ou suspensão esté-ril; ou (quando apropriado) por injeção intramamária, onde uma suspensãoou solução é introduzida no úbere por intermédio da teta;

(c) aplicações tópicas, por exemplo, como um creme, pomadaou spray aplicado à pepe; ou

(d) por via intravaginal, por exemplo, como um pessário, cremeou espuma.

A presente invenção será descrita adicionalmente abaixo pelosexemplos não-limitativos que se seguem.

EXEMPLO 1

Dissolução de Abeta 1-42 Agregada Mediada por Composto PB

Abeta 1-42 está disponível no Keck Laboratory, Yale UniversitySchool of Medicine. PBS (pH 6,6): Sigma Ns do Catálogo D-8662. Zn(ZnCI2):BDH N- do Catálogo 100884E (dissolvido em água em uma concentração 1mM). DMSO: Ajax Ne do Catálogo 2225. Tioflavina Τ: Sigma N2 do CatálogoT-3516 (dissolvida em água em uma concentração 1 mM)

A título de exemplo de uma composição amilóide, Abeta é dis-solvida em água destilada, e a concentração do peptídeo é avaliada pelaabsorção medida a 214 nm em espectrômetro UV. Uma mistura reativa deagregação (por uma concentração de um composto em teste) é preparadada seguinte maneira: Abeta: 25 μΜ, ZnCI2 50 μΜ, ThT 50 μΜ, PBS até com-pletar 500 μL. O tubo é envolvido com folha e incubado a 37 °C sob reotaçãopor 24 horas. Uma diluição serial de cada composto em teste é feita emDMSO, por exemplo: 100 μΜ, 500 μΜ, 1.000 μΜ, 2.500 μΜ e 5.000 μΜ. Asconcentrações finais são 1,5, 10, 25 e 50 μΜ. 5 μL de cada um destes com-postos são colocados em um tubo de contrífuga e 5 μL de DMSO são adi-cionados aos tubos com os controles negativos positivos. 495 μL de agrega-dos (depois de incubação de 24 horas) são adicionados ao tubo da centrífu-ga. O controle negativo é PBS mais ZnCI2 e ThT e DMSO. O controle positi-vo é agregados mais DMSO. Os tubos são incubados a 37 °C por mais 2horas sob rotação. As amostras são medidas quanto à fluorescência de ThT,usando um fluorímetro LS55 (Perkin Elmer) em uma cubeta (volume de 500μL). O comprimento de onda de excitação é 450 nm e o comprimento de on-da de emissão é 480 nm. Os dados são analisados usando o programa"graphpad prism". Os compostos testados incluíram os assim denominadoscompostos "PB".

EXEMPLO 2

Triagem Post-Mortem

O ensaio BAS é adotado para a retina post-morterri. Usandouma trefina, regiões de 6 mm de diâmetro da retina periférica olhos congela-dos de doadores são dissecadas. Depois de descongelar, a retina neuronale as células RPE são removidas por agitação suave em-tampão de PBS.

Depois da remoção das células RPE,tiras da membrana de Bruch são corta-das do olho.

4 amostras são preparadas:

1) Controle2) TPEN 100 μΜ

3) PB-1033 100 μΜ

4) ΡΒ-1033 250 μΜ

Depois de 30 min. de incubação, as amostras são lavadas 3 ve-zes com PBS e depois, aplicação de ZP1 10 μΜ (sensor de fluorescênciapara zinco) por 10 min.

As amostras são então lavadas 3 vezes e a marcação é visuali-zada usando um microscópio de fluorescência e confocal.

Uma repetição deste procedimento é realizada com a exceçãode que as amostras são incubadas por um período de 15 horas antes delavar para determinar a ligação diferencial do metal durante este períodomais longo.

Os resultados do teste são na forma de reprodução de imagensde fuorescência a partir de um microscópio confocal das 4 amostras testa-das neste exemplo depois de 15 horas de incubação das amostras. Os re-sultados indicaram que TPEN inibiu a marcação com ZP1, indicando a eficá-cia deste ensaio. PB-1033 também inibiu a marcação de ZP1. Os resultadosindicam claramente que PB-1033 inibe e reduz íons metálicos em drusenretinianos. As fotografias microscópicas de fluorescência (que estão em co-res) está disponíveis mediante solicitação ao titular da patente.

EXEMPLO 3

Ensaio Clínico

Pacientes com AMD são selecionados e recebem um compostoem teste (incluindo um composto PB) em uma concentração de 500 mg/diapor um mês. As leituras são feitas no início e depois em 1 mês e incluem:

1. microperimetria; e

2. retinografia multifocal.

Caso as retinas estejam aliviadas de tensão oxidante depois dotratamento com MPAC, ela deve ser refletida por estabilização destes mar-cadores de saúde retiniana.

EXEMPLO 4

Avaliação dos CompostosOs ensaios que se seguem foram usados na avaliação doscompostos quanto à adequabilidade para uso nos métodos da invenção.Ensaio 1. Ensaio Fluorométrico com HgOg

Um ensaio fluorométrico foi usado para testar a capacidade deum composto em teste para inibir a geração de peróxido de hidrogênio porAB na presença de cobre, baseado em diacetato de diclorofIuorosceína(DCF; Molecular Probes, Eugene, OR, EUA). A solução de DCF (5 mM) em100% de sulfóxido de dimetila (previamente purgado com argônio por 2 h a°C) foi desacetilada na presença de NaOH a 0,25 M por 30 min. e neutra-10 Iizada em pH 7,4 até uma concentração final 1 mM. A solução de insumo deperoxidise de rábano (HRP) foi preparada até 1 DM em pH 7,4. As reaçõesforam conduzidas em PBS, pH 7,4, em uma placa com 96 poços (volumetotal = 250 □ l/poço). As soluções reativas continham Αβ 1-42 em concentra-ções na faixa entre 50 nM e 1 DM, quelato de cobre-glicina (Cu-Gly), forampreparadas adicionando CuCI2 à glicina na razão de 1:6 e adicionadas à ABna proporção 2 Cu-Gly:1 AB), agentes redutores que incluem dopamina(5DM) ou ácido ascórbico, DCF desacetilada 100DM, e HRP 0,1 DM. EDTA1-10 DM ou outro quelante também podem estar presentes como um contro-le para cobre livre,mas não foi necessário para que o ensaio funcionasse. Amistura reativa foi incubada a 37 0C por 60 min. Padrões de catalase (4.000unidades/mL) e H2O2 (1-2,5 DM) em PBS, pH 7,4, podem ser incluídos comocontroles positivos. A fluorescência foi registrada usando uma leitora de pla-cas com filtros de excitação e emissão a 485 nM e 530 nM, respectivamente.A concentração de H2O2 pode ser estabelecida comparando a fluorescênciacom os padrões de H2O2. A inibição da produção de AB H2O2 foi testada in-cluindo uma dada contração de composto(s) em teste nos poços do teste.

Ensaio 2. Ensaios de Neurotoxicidade

Culturas Neuronais Corticais Primárias

As culturas corticais foram preparadas como descrito anterior-mente (White et ai, J Neuroscience 18:6207-6217, (1998)). No Dia embrio-nário 14, os córtices de camundongos BL6Jx129sv foram removidos, disse-cados para remover as meninges e dissociados em tripsina a 0,025% (pe-Io/volume). As células dissociadas foram plaqueadas em placas de culturacom 48 poços em uma densidade de 2 χ 106 células/mL em MEM com 25%(volume/volume) de FCS e 5% (volume/volume) de HS, e incubadas a 37 0C,por 2 h. O meio foi então substituído por meio Neurobasal (Invitrogen LifeTechnologies) e suplementos de B27 (Invitrogen Life Technologies). As cul-turas foram mantidas a 37 0C em 5% de CO2. Antes do exeperimento, omeio de cultura foi substituído por meio Neurobasal e B27 menos antioxidan-tes (Invitrogen Life Technologies).Ensaio 3. Ensaio MTS para Viabilidade de Células

A viabilidade de células é determinada usando o ensaio comMTS. O meio de cultura é substituído por meio Neurobasal fresco mais su-plementos B27 menos antioxidantes. 1/10 do volume da solução de MTS(Cell Titre 96 Aqueous One, Promega Corporation) foi incubado a 37 0C1 por2 h. Alíquotas de 200 microlitros são medidas com um espectrofotômetro a560 nm.

Ensaio 4. Ensaio para Citotoxicidade dos Compostos em Teste

Células corticais neuronais foram cultivadas por cinco dias comodescrito no Ensaio 2 em meio NB e suplemento B27.

No sexto dia, os compostos em teste foram adicionados às cultu-ras de células neuronais em meio NB e suplemento B27 menos antioxidan-tes.

Os compostos em teste foram dissolvidos em 100% de DMSOaté uma concentração 2,5 mM (10 mM, caso excesso do composto tivessesido pesado por frasco, e depois diluído até 2,5 mM). A solução 2,5 mM deinsumo foi diluída serialmente 1 para 10, para dar soluções de trabalho 250μΜ, 25 μΜ, 2,5 μΜ. Os compostos em teste não foram adicionados direta-mente às células, e ao invest disso, eles foram adicionados a uma "Placa deFáfmaco" com 48 poços, compreendendo o seguinte:Preparação da "Placa de Fármaco":

A uma placa de 48 poços adicionar:

Poço 1: 576 μί de NB+B27(nenhum antioxidante)* + 24 μί decomposto em teste 2,5 μΜPoço 2 : 576 μΙ_ de NB+B27 (nenhum antioxidante) + 24 μΙ_ decomposto em teste 25 μΜ

Poço 3 : 576 μί de NB+B27 (nenhum antioxidante) + 24 μΙ_ decomposto em teste 250 μΜ

Poço 4 : 576 [iL de NB+B27 (nenhum antioxidante) + 24 μ[_ decomposto em teste 2,5 μΜ

Poço 5 : 576 μΙ_ de NB+B27 (nenhum antioxidante) + 24 μΙ_ decomposto em teste 25 μΜ

Poço 6 : 576 μΙ_ de NB+B27 (nenhum antioxidante) + 24 μΙ_ decomposto em teste 250 μΜ

Poço 7 : 576 μΙ_ de NB+B27 (nenhum antioxidante) + 24 μΙ_ dediluente do composto em teste**

Poço 8 : 600 μΙ_ de NB+B27 (nenhum antioxidante)A Placa de Fármaco foi incubada a 37 0C por 15 min. 200 μm. decada poço foram adicionados em triplicata à placa de células corresponden-te. A placa de células foi incubada a 37 0C1 por 4 dias.* meio NB e B27 (nenhum antioxidante),

** diluente PBT 10% de DMSO em NB+B27 (nenhum antioxidante)

Depois de completado o ensaio, 1/10 do volume de MTS foi adi-cionado por poço da placa (isto é, 25μΙ_/250 μί). As placas foram incubadasa 37 0C por 2 h, e depois a absorvância foi lida a 560 nm.Ensaio 5. Ensaio de Solubilizacão de Amilóide em Cérebro Humano

Este ensaio foi realizado para avaliar a capacidade de um com-posto em teste mobilizar AD, como uma forma exemplificativa de amilóide,da fase insolúvel para a fase solúvel de um extrato de tecido do cérebro hu-mano com AD post-mortem.

Até 0,5 g de córtex portador de placas sem meninges foi homo-geneizado usando um homogeneizador DIAX 900 (Heudolph and-Go-r Ke-Iheim, Alemanha) ou outro dispositivo apropriado por períodos de 30 segun-dos em plena velocidade em 2 ml_ de solução salina tamponanda com fosfa-to gelada, pH 7,4. Para obter a fração extraível com solução salina tampo-nada com fosfato, o homogeneizador foi centrifugado a 100.000 χ g por 30min. e o sobrenadante foi removido. Alternativamente, o tecido foi secadopor ceongelamento, e depois pulverizado para formar um pó que foi entãopesado em alíquotas para extração como acima. O sobrenadante, seja se-cado por congelamento e recolocado em suspensão ou na forma não-concentrada, foi dissolvido em 200 DL de tampão de amostra de dodecil-sulfato de sódio (SDS) Tris-Tricina, pH 8,3, contendo 8% de SDS, 10% de 2-mercaptoetanol. Alíquotas (10 DL) foram então fervidas por 10 minutos an-tes de eletroforese em gel de SDS-poliacrilamida. A fração insolúvel de a-mostras corticais foi obtida recolocando em suspensão a amostra peletizadainicial em 1 ml_ de solução salina tamponada com fosfato. Uma alíquota de50 DL desta suspensão foi então fervida em 200 mL de tampão de amostracomo acima.

A eletroforese em gel de Tris-Tricina/poliacrilamida foi realizadacarregando adequadamente amostras diluídas sobre géis com gradientes de10% a 20% (Novex, San Diego, CA), e em seguida, transferindo para cimade membrana de nitrocelulose de 0,2 Dm (Bio-Rad,Hercules, CA). AD foidetectado usando o anticorpo monoclonal W02, que detecta os resíduos 5até 8, 17 (ou outro anticorpo apropriado) em conjunto com anti-lgG do ca-mundongo de coelho conjugada com peroxidise de rábano (Dako, Dinamar-ca), e visualizado usando quimioluminescência intensificada (por exemplo,ECL; Amersham Life Science, Buckinghamshire, Reino Unido). Cada gelincluía três fileiras contendo 0,5, 1, e 2 ng de AD4O sintético (Keck Labora-tory, Yale University, New Haven, CT) como padrões de referência.

Os filmes de manchas foram escaneados usando um sistema dereprodução de imagens apropriado, tal como o sistema de documentaçãoem gel de UVP, e densitometria realizada usando um software apropriado,por exemplo, UVP Labworks. A faixa dinâmica do filme/scanner foi determi-nada usando um comprimido em etapas (N2 91JJSI600, Kodak, Rochester,NY), um filme calibrado exposto pelo fabricante às etapas fornecidas comintensidade crescente conhecida. A faixa quantificável de intensidade de si-nais para a análise densitométrica das bandas de AD monomérico e diméri-co para a comparação com uma curva obtida escaneando e densitometriado comprimido em etapas. As amostras nas quais a intensidade é baixa de-pois do ensaio preliminar podem ser testadas novamente usando padrõessintéticos com concentração mais baixa ou mais alta.

Todas as amostras foram analisadas pelo menos duas vezes, eas cargas de gel e as diluições foram ajustadas para encaixar na regiãoquantificável da curva-padrão. A porporção de AD "solúvel" para "insolúvel"pode ser usada para determinar a eficiência da extração de um compostoem teste em comparação com a eficiência de um composto conhecido. OAD insolúvel sendo compreendido pela fração pelotizável derivada da placaamilóide insolúveldas amostras corticais acima e a fração solúvel compreen-dendo Ad solúvel monomérico e/ou oligomérico

Ensaio 6. Efeito da Administração de Compostos em Teste sobre Depósitosde Aa em Animais Transqênicos

Modelos de animais transgênicos estão disponíveis para inúme-ros distúrbios neurológicos, incluindo doença de Alzheimer; mal de Parkin-son; esclerose lateral amiotrófica (ELA) hereditária; doença de Huntington; edoença de Creutzfeld-Jakob (CJD). Descobriu-se que um dos modelostransgênicos para doença de Alzheimer, o camundongo transgênicoAPP2576, também tem uma alta incidência de catarata. Estes modelos ani-mais foram apropriados para testar aos métodos da invenção.

Os camundongos transgênicos da cepa APP2576 foram usados.Camundongos fêmeos com oito a nove meses de idade foram selecionadose divididos em grupos para tratamento.

Os camundongos foram sacrificados em intervalos, e seus cére-bros foram examinados para determinar se o tratamento com os compostosem teste diminuiu a formação de amilóides no cérebro, e a identificação doprotocolo de administração mais eficaz.

Outros camundongos_em cada grupo foram testados durante umperíodo de até oito meses quanto ao desempenho cognitivo, usando um Iabi-rinto de água de Morris de acordo com métodos padronizados. A saúde ge-ral e o bem-estar dos animais também foram medidos todos os dias por umoperador vendado, usando uma escala de numerous interiso com cinco pon-tos, que pontua subjetivamente uma combinação de características, incluin-do atividade motora, vigilância e sinais de saúde geral.

Ensaio 7. Ensaio de Solubilidade

Soluções de insumo de compostos da fórmula I ou Il (1 mM) fo-ram preparadas em sulfóxido de dimetila. Os compostos que não se dissol-veram foram classificados como não-solúveis (N). As soluções de insumoem DMSO foram diluídas 1 para 100 em PBS, pH 7,4. Os compostos quederam uma solução Iimpid foram classificados como solúveis (Y), enquantoque os compostos que deram uma suspensão translúcida depois da dissolu-ção em DMSO foram classificados como "desagregadados" (C).

Ensaio 8. Propriedades Físico-químicas

Cálculos da Área Superificial Polar (PSA)

Os valores da área superficial polar foram calculados usando oprograma baseado na web disponível através de "Molinspiration", um pacotepara o cálculo de propriedades moleculares.

Medições da Solubilidade Turbidimétrica

A estimativa da solubilidade foi medida em pH 2,0 e também empH 6,5. Ela fica dentro da faixa de pH que pode ser prevista ao longo do tra-to gastrointestinal proximal em seres humanos.

Os compostos foram dissolvidos em DMSO até concentraçõesapropriadas e depois inoculados em tampão de HCI 0,01 M (pH aproxima-damente = 2,0) ou tampão de fosfato isotônico pH 6,5, sendo a concentra-ção final de DMSO 1%. As amostras foram então analisadas por intermédiode Nefelometria, para daterminar uma faixa de solubilidade (Bevan e Lloyd,Anal. Chem. 72:1781-1787 (2000)).

Valores de cLoq P

Os valores teóricos de Log P foram determinados usando osoftware ACD Log P, Os valores quotados foram calculados a partir de umabase de dados não-instruída e referem-se a espécies não-reunidas.

E Loq D

Os valores de Log D eficazes foram medidos usando um métodocromatográfico que emprega uma coluna SUPELCOSIL LC-ABZ, usandouma fase móvel saturada de octanol em pH 7,4. Vide F. Lombardo et al, J.Med. Chem. 43:2922-2928 (2000).

EXEMPLO 5

Propriedades de Compostos PBT

A Tabela 8 fornece as propriedades e estruturas de compostosPBT particularmente preferidos que caem dentro do âmbito da presente in-venção.<table>table see original document page 68</column></row><table><table>table see original document page 69</column></row><table><table>table see original document page 70</column></row><table><table>table see original document page 71</column></row><table><table>table see original document page 72</column></row><table><table>table see original document page 73</column></row><table><table>table see original document page 74</column></row><table><table>table see original document page 75</column></row><table><table>table see original document page 76</column></row><table><table>table see original document page 77</column></row><table><table>table see original document page 78</column></row><table><table>table see original document page 79</column></row><table><table>table see original document page 80</column></row><table><table>table see original document page 81</column></row><table><table>table see original document page 82</column></row><table><table>table see original document page 83</column></row><table><table>table see original document page 84</column></row><table><table>table see original document page 85</column></row><table><table>table see original document page 86</column></row><table><table>table see original document page 87</column></row><table><table>table see original document page 88</column></row><table><table>table see original document page 89</column></row><table><table>table see original document page 90</column></row><table><table>table see original document page 91</column></row><table><table>table see original document page 92</column></row><table><table>table see original document page 93</column></row><table><table>table see original document page 94</column></row><table><table>table see original document page 95</column></row><table><table>table see original document page 96</column></row><table><table>table see original document page 97</column></row><table><table>table see original document page 98</column></row><table><table>table see original document page 99</column></row><table><table>table see original document page 100</column></row><table><table>table see original document page 101</column></row><table><table>table see original document page 102</column></row><table><table>table see original document page 103</column></row><table><table>table see original document page 104</column></row><table><table>table see original document page 105</column></row><table><table>table see original document page 106</column></row><table><table>table see original document page 107</column></row><table><table>table see original document page 108</column></row><table><table>table see original document page 109</column></row><table><table>table see original document page 110</column></row><table><table>table see original document page 111</column></row><table><table>table see original document page 112</column></row><table><table>table see original document page 113</column></row><table><table>table see original document page 114</column></row><table><table>table see original document page 115</column></row><table><table>table see original document page 116</column></row><table><table>table see original document page 117</column></row><table>a- concentração em μΜ do composto em teste necessária parainibir 50% da produção de Abeta H2O2

b- viabilidade de células neuronais corticais cultivadas primárias(células neuronais) ou células de neuroblastoma humano M17 (células M17)na presença de compostos em teste em concentrações de 1 e 10μΜ.

c- % de inibição de da oligomerização de ditirosina como refe-renciada a padrão interno (estabelecido como 100% de inibição)

d- extensão pela qual o composto mobiliza Abeta da fase insolúvelpara a fase solúvel de um extrato de tecido de um cérebro humano com ADpost-mortem. Os resultados são referenciados a PBS basal e quotados co-mo o efeito máximo atingido em toda faixa de concentração, e em seguida,pelas concentrações ou faixa de concentrações nas quais o efeito é obser-vado

e- Desagregação de Abeta:Zn (25:50 μΜ) Agregações Sintéticas;12 valor = CE 50 (μΜ), 2- valor = % de redução de agregado a 5μΜ

f- Observações visuais durante toxicidade aguda em camundon-gos ou em camundongos Tg ou estudos de PK em ratos

g- Confirmação da presença de composto no plasma em um oudois pontos no tempo (entre 30 min. e 4 h) depois de dose oral única ou re-petida de 30 mg/kg (a menos que diferentemente especificado)

h- % de diferença do controle em carga amilóide isolúvel/solúvelno cérebro e % de diferença do controle na abundância de placasamilóidesapós gavagem oral diária de 30mg/kg (a menos que diferentemente especifi-cado) durante 9 semanas em camundongos transgênicos com 13-14 mesesde idade. Apenas os resultados estatisticamente significantes (p<0,05)sãoquotados como valores percentuais, tendências estão indicadas sem números.

Os versados nessa técnica devem avaliar que a invenção aquidescrita é suscetível a variações e modificações diferentes daquelas especi-ficamente descritas. Deve-se entender que a invenção inclui todas as varia-ções e modificações. A invenção inclui também todas as etapas, caracterís-ticas, composições e compostos referidos ou indicados neste relatório des-critivo, individualmente ou coletivamente, e quaisquer e todas as combina-ções de quaisquer duas ou mais das ditas etapas ou características.

BIBLIOGRAFIA

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The British National Formulary 43rd ed, British Medicai Associa-tion and Royal Pharmaceutical Society of Great Britain, 2002

WO 02/055081

White et al., J Neuroscience 78:6207-6217, 1998

Wright et al, J Am Chem Soc 123:1173-1183, 2001

Claims (17)

1. Uso de PB-1033: <formula>formula see original document page 120</formula> ou um sal, derivado ou equivalente funcional farmaceuticamente aceitável domesmo, caracterizado pelo fato de que é para a fabricação de um medica-mento para o tratamento de degeneração macular relacionada à idade(AMD) em um indivíduo.

2. Uso, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fatode que o indivíduo é um mamífero.

3. Uso, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fatode que o mamífero é um humano.

4. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3,caracterizado pelo fato de que a quantidade de PB-1003 ou derivado domesmo ou equivalente funcional é uma quantidade que reduz os níveis deum metal em drusens retinianos.

5. Uso, de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fatode que o metal é selecionado na lista que consiste em zinco e cobre.

6. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5,caracterizado pelo fato de que o derivado ou equivalente funcional de PB--1033 é selecionado na lista da Tabela 8 ou seus sais, derivados ou equiva-lentes funcionais farmaceuticamente aceitáveis.

7. Uso, de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fatode que o derivado ou equivalente de P-1033 é selecionado da lista que con-siste em PB-1076, PB-1085, PB-1120, PB-1127, PB-1135, PB-1149, PB--1151, PB-1160 e PB-1168, ou sais derivados ou equivalentes funcionaisfarmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

8. Uso de PB-1003 <formula>formula see original document page 120</formula>ou um sal, derivado ou equivalente funcional farmaceuticamente aceitável domesmo, caracterizado pelo fato de que é para reduzir os níveis de um metalem drusen retinianos em um indivíduo, para desta forma melhorar os sinto-mas de degeneração macular relacionada à idade (AMD).

9. Uso, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fatode que o indivíduo é um mamífero.

10. Uso, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelofato de que o mamífero é um humano.

11. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 8 a 10,caracterizado pelo fato de que o metal é selecionado na lista que consisteem zinco e cobre.

12. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 8 a 11,caracterizado pelo fato de que o derivado ou equivalente funcional de PB-- 1033 é selecionado da lista da Tabela 8 ou sais, derivados ou equivalentesfuncionais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo.

13. Uso, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelofato de que o derivado ou equivalente funcional de P-1033 é selecionado dalista que consiste em PB-1076, PB-1085, PB-1120, PB-1127, PB-1135, PB-- 1149, PB-1151, PB-1160 e PB-1168, ou sais derivados ou equivalentes fun-cionais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo.

14. Composto, caracterizado pelo fato de que é selecionado apartir do grupo que consiste em:<formula>formula see original document page 121</formula><formula>formula see original document page 122</formula><formula>formula see original document page 123</formula>

15. Composto, de acordo com a reivindicação 14, caracterizadopelo fato de que é selecionado a partir de PB 1267, PB 1268, PB 1269 e PB-1271.

16. Composto, de acordo com a reivindicação 15, caracterizadopelo fato de que é PB 1268.

17. Composto, de acordo com a reivindicação 16, caracterizadopelo fato de que é PB 1135 ou PB 1149.