CH312432A - Procédé de préparation d'un chlorhydrate purifié de chlortétracycline. - Google Patents

Description

  



  Procédé de préparation d'un chlorhydrate purifié de   chlortétracycline.   



   La présente invention se rapporte à un procédé de préparation d'un chlorhydrate purifié de   chlortétracydine    à partir d'une    e    matière impure contenant de la   chlortétra-    eycline sous une forme autre que le chlorhydrate.



   Le micro-organisme appelé   Streptomyces      aureofaciena produit pendant sa croissance    de la   chlortétraeycline,    une substance vendue dans le commerce sous la marque de fabrique    aauréomycine  , qui présrente lme remarquable    activité antibiotique   dans un    domaine   théra-    peutique beaucoup plus'étendu que les autres antibiotiques antérieurement connus et qui répond à la formule suivante :
EMI1.1     

Des détails sur te micro-organisme et les propriétés de la   chlortétraeyeline    sont donnés dans les   Annals of the   New York Academy    of Sciences  , volume 51, article 2, novembre 1948 ;

   l'on trouve dans la littérature médicale de nombreuses références   aux résultats remar-      quables    obtenus avee ce puissant antibiotique.



   Le procédé selon l'invention est caractérisé par le fait qu'on   prépare, à    partir de ladite matière impure contenant de la chlortétracycline sous une forme autre que le chlorhydrate, une solution aqueuse présentant un   pg    inférieur à 4 et contenant au moins 0, 3 mg de chlortétracycline sous forme de sel d'acide par   cm3,    on mélange cette solution, débarrassée de toute matière insoluble, avec un solvant organique et un chlorure soluble dans   l'eau    pour provoquer la séparation de chlorhydrate de   chlortétracyeline    et on isole le produit solide obtenu.



   La matière impure de départ renfermant de la chlortétraeycline peut être un mélange de fermentation provenant de la culture d'un micro-organisme producteur de   chlortétra-    cycline dans un milieu nutritif aqueux, ou un produit solide renfermant de la chlortétracyeline et des impuretés provenant de la fermentation, obtenu comme produit intermé  diaire    dans l'élaboration d'un mélange de fermentation. Pour préparer la solution aqueuse présentant un   pg inférieur à    4 et contenant au moins 0, 3 mg de   chlortétracycline    par cm3, on peut procéder selon les méthodes décrites ci-après.



   Selon une première méthode, on ajoute à un mélange de fermentation aqueux renfermant de la chlortétraeycline un acide minéral tel que l'acide chlorhydrique ou l'acide sulfurique, par exemple sous forme   d'une    solution aqueuse diluée, pour réduire le   pg    dudit mélange à une valeur inférieure à 4 et transformer la   ehlortétraeyeline    en un sel d'acide. On filtre la solution obtenue contenant de la 
   chlortétracycline sous    forme de sel d'acide pour éliminer les impuretés insolubles. Il sera généralement nécessaire de concentrer la solution aqueuse acide, de préférence par distillation sous vide à basse température, pour obtenir une concentration en   chlortétracycline    d'au moins 0, 3   Mg/CM3.   



   Selon une deuxième méthode, on ajoute au mélange de fermentation un alcali, par exemple une solution aqueuse de soude caustique, pour porter   1 p du melane a une    valeur comprise entre 6 et   11.    On filtre le mélange pour obtenir un résidu solide renfermant de la   chlortétracycline.    On épuise le résidu solide par un acide minéral aqueux pour obtenir une solution aqueuse acide contenant la   chlortétracycline sous    forme de sel d'acide.



  Si cette solution est trop diluée, on peut la concentrer par distillation sous vide a basse tem  pérature.    Selon une variante de cette seconde méthode, on ajoute au mélange   de fermen-    tation un composé basique d'un métal   alea-    lino-terreux tel que   Ca,    Ba, Mg et Sr, par exemple de l'hydroxyde de calcium, pour porter le   PEX    du mélange à une valeur de 6 à 11, de préférence 7 à 9, et transformer la chlortétracycline en un sel alealino-terreux insoluble. Par filtration du mélange, on obtient un résidu solide renfermant la chlortétra  cycline sow forme d'mn    sel   alealino-terreux.   



  Ce résidu est alors épuisé par un acide   miné-    ral aqueux de la manière décrite    ci-dessus.   



   Selon une troisième méthode, on ajoute un alcali, par exemple de la soude caustique, au mélange de fermentation, comme dans la deuxième méthode. On recueille par filtration un résidu solide que   l'on    épuise   par lm mé-    lange d'eau et d'un solvant organique en présence soit d'un alcali, soit d'un acide minéral.



  Comme solvant organique, on peut utiliser une cétone, de préférence l'acétone, ou un alcool   tel que 1'éthanol. Ensuite, le solvant    organique est éliminé de l'extrait obtenu, de   préfé-    rence en soumettant ce dernier   à une distilla-    tion sous vide à basse température.

   On obtient ainsi une solution aqueuse soit alcaline, soit acide, renfermant la   ehlortétraeyeline.    Si la solution obtenue est   alealine,    il faut encore l'acidifier par un acide minéral pour obtenir la solution aqueuse acide voulue.
   l, a solution aqlleuse aoide contenant    la
   chlortétracyeline    doit avoir un   pg    inférieur
 à 4.   Si le pH était supérieur à    4, les caractéristiques de solubilité de la   chlortétracycline    ne seraient pas assez favorables. D'autre part, il est   préférable que le PH    ne soit pas sensi  blement    inférieur à 1.

   Un   p}    inférieur serait théoriquement satisfaisant, mais dans la mise en oeuvre'du procédé à l'échelle industrielle, la corrosion produite par une solution aussi acide nécessiterait l'utilisation de récipients particulièrement résistants aux acides, ce qui entraînerait   it des frais considérables. Un com-    promis raisonnable au point de vue économique consiste à préparer une solution acide présentant un   pji de 1 à    2, de préférence de 1, 5.



   Au cas où la solution aqueuse contenant la   chlortétracycline    sous forme d'un sel d'aeide n'est pas suffisamment concentrée, on peut la concentrer par distillation sous vide. A des températures   supérieures à environ 50  C,    une décomposition de la   chlortétracycline    se pro  duit.    Il convient donc d'opérer à des   tempé-    ratures comprises entre 20 et   40     C. On peut aussi éliminer 1'eau par, sublimation, après avoir congelé le tout.

   On poursuit la distillation du solvant, s'il y en a un,   et/om    de l'eau, jusqu'à obtention d'une concentration en chlortétracycline d'au moins 0, 3   mg/cm3.    La   chlortétracycline    est soluble dans la phase aqueuse jusqu'à concurrence d'environ 15 mg par em3   3 à un pg de 1,    5 et à la température ambiante. Il1 est préférable de poursuivre la concentration jusqu'à obtention d'une concentration en   ehlortétraeyeline    dans la phase aqueuse de 3 à 30   mg par cm3, selon    les impuretés présentes.

   Avec   certains mé-    langes de fermentation, on peut obtenir la concentration préférée en concentrant la phase   aqueuse à approximativement 25 /o    ou moins du volume initial du mélange.



   Le chlorure que l'on mélange à la solution aqueuse acide contenant la   ehlortétraeyeline    ou au mélange de celle-ci avec le solvant organique est utilisé, de préférence, en une   quan-    tité suffisant a obtenir une solution pratiquement saturée. On peut toutefois aussi obtenir des résultats satisfaisants en utilisant des quantités de chlorure inférieures à la quantité qui sature la solution.



   Comme chlorure, on utilise de préférence le chlorure de sodium. On peut toutefois aussi utiliser d'autres chlorures, par exemple le chlorure de potassium et le chlorure d'ammonium qui permettent d'obtenir le chlorhydrate de chlortétTacyeline sous forme de beaux cristaux. En outre, on peut utiliser les chlorures de calcium et de lithium.



   Le solvant organique que l'on mélange à la   solution acide contenant la chlortétra-      cycline, déjà additionnée de chlorure ou    non, peut être un alcool. On peut utiliser, par exemple, les alcools méthylique, éthylique et isopropylique qui provoquent la séparation du chlorhydrate de   chlortétracyeline    sous forme cristalline et forment, avec la solution acide, une seule phase aux températures et concen  trations    utilisées. Il est toutefois préférable d'utiliser des solvants qui forment, avec la solution acide, un mélange se séparant en deux phases.

   Comme solvants de ce type, on    peut utiliser des alcooLs à chaîne de longueur    moyenne, par exemple l'alcool butylique normal, l'alcool butylique secondaire, l'alcool amylique, l'alcool hexylique, l'alcool   oetylique,    l'alcool   eaprylique, le décanol, etc. La sépara-    tion du chlorhydrate de   chlortétraeycline    se produit à l'interface de la phase aqueuse et de la phase organique.



   On peut aussi utiliser des alcools polyvalents et leurs éthers, par exemple les éthers   d'éthylèneglycol.    Il est. avantageux d'utiliser le   butanol      normail    qui n'est pas soluble dans   l'eau    au point de provoquer des difficultés dans la séparation des phases et ne dissout. pas une quantité exagérée de   ehlortétzeyeline.    Il convient d'utiliser une quantité de   butanol    normal juste suffisante pour former une phase séparée.

   En quantité d'environ   5  /o, le butanol    normal dissout en grande partie les impuretés sans dissoudre une proportion démesurée de   chlortétraeyeline.    Si on ajoute plus de   10  /o    de   butanol,    la perte de produit dans le solvant devient généralement trop élevée.



   Une manière commode d'isoler le chlorhydrate de   chlortétracyeline    qui s'est formé et séparé est la filtration à la température ambiante. On peut laver le produit isolé avec un ou plusieurs solvants et le sécher. On peut utiliser à cet effet   l'éthanol    ou d'autres alcools, l'eau, certaines cétones, etc. La pureté du produit obtenu dépend, dans une certaine mesure, de la matière de départ. Dans certains cas, il est avantageux de soumettre à une puri  fication supplémentaire    le produit obtenu.



  Une reeristallisation supplémentaire améliore généralement la pureté, mais n'est pas absolu  ment'nécessaire.   



   Dans le mode préféré de mise en oeuvre du procédé suivant l'invention, le solvant organique est choisi de manière à former une phase distincte de la phase aqueuse. Le chlorhydrate de   ehlortétraeyeline    se sépare de pré  férence    à l'interface de ces deux phases. Le chlorure présent dans le mélange favorise une séparation nette des deux phases. Le solvant organique sert à dissoudre certaines impuretés   aeeompagnant la èhlortétraeyeline    et à faciliter la formation de cristaux purs de chlorhydrate de chlortétracycline.

   L'effet combine du solvant organique et du chlorure présents dans le mélange facilite la séparation d'un chlorhydrate de   eMo'rtétracycline    cristallisé exempt de Ra majeure partie des impuretés accompagnant la chlortétracycline dans la matière de départ impure.



   Les exemples suivants montrent comment on peut réaliser la présente invention.



   Exemple 1 :
 A 4, 9 litres d'un mélange de fermentation provenant de la culture d'un micro-organisme producteur de   chlortétracycline,    on ajoute 135   cm3    d'acide   ch4orhydrique 6 N    pour réduire le   P1    du mélange à 1, 45. On agite le tout pour assurer un mélange intime et la dissolution de toute la   chlortétracycline.    A 3000   em3    de la solution résultante, on ajoute 300 g   d'un    adjuvant de filtration, en   l'oeeur-    rence le produit marque     Hy-F1lo Superçel  ,    on filtre le mélange sur papier filtre et on lave le résidu solide avec suffisamment   d'eau    acidulée pour obtenir 3000 cm3 de filtrat.

   On place le filtrat dans une colonne à distillation sous vide et on distille à une température de   25    à   30     sous vide, jusqu'à obtention de 550 cm3 de concentrat présentant une teneur en   ehlortétraeyeline    d'environ 2   mglem3.    On en prélève 50   em3    comme échantillon d'essai et on ajoute au reste du concentrat 25   em3    d'alcool butylique normal et 125 g de chlorure de sodium. On agite le mélange à la temperature ambiante pendant   1/2    heure, puis on le laisse reposer jusqu'au lendemain à 2  C. On sépare les cristaux sur un entonnoir   Büchner,    on les lave d'abord avec une petite quantité d'alcool, puis avec de l'eau distillée, et on les sèche sous vide.

   On obtient un rendement en chlorhydrate de   chlortétracycline    de 4, 61 g.



  Selon l'analyse colorimétrique, le produit obtenu présente une activité de 300 y par   mg,    ce qui correspond à une récupération de   37  /o    de la   chlortétraeycline    sous forme de chlorhydrate cristallisé, par rapport à la quantité de   chlortétracycline    présente dans le mélange de fermentation.



   On porte le pg de 1 litre d'un mélange de fermentation   eontenant de la ehlortétraeyeline    à environ 9 par addition de soude caustique
ION, on ajoute 25 g de terre d'infusoires comme adjuvant de filtration et on sépare les solides par filtration. Après lavage, le gâteau de filtration est extrait avec 250   cm3    d'eau acidifiée   à un pg    de 1, 35 par de   l'aeide      sulfu-      rique. Après agitation, on ajoute    de 1'acide sulfurique supplémentaire pour maintenir le   pe    à 1, 35.

   On filtre le mélange et on ajoute au filtrat acide qui présente une teneur en chlortétracycline d'environ 3, 5   mg/cm3,      5"/o    en volume de   butanol    et 25  /o en poids de chlorure de sodium. On agite et refroidit le mélange, on sépare les cristaux de chlorhydrate de chlortétracyeline dans un entonnoir Biichner et on les lave à   l'eau.   



   Exemple 3 :
 A 5 litres d'un mélange de fermentation contenant de la   ehlortétraeyeline,    on ajoute suffisamment d'acide chlorhydrique   6 N    pour porter le pu du mélange à 1, 4. On agite vigoureusement le mélange et on le filtre. On ajoute au filtrat qui présente une teneur en chlortétracycline d'environ 1   mg/cm3,      5 /o en    volume d'alcool butylique normal et   30  /o en    poids de chlorure de sodium. On agite le mélange à la température ambiante pendant une heure, et on le laisse reposer jusqu'au lendemain à   2       C.    On recueille les'cristaux dans un entonnoir   Biichner    et on les lave avec une petite quantité d'alcool et ensuite à   l'eau    distillée.

   On obtient ainsi du chlorhydrate de   chlortétracyc'line cristallisé.   

Claims (1)

1. REVENDICATION : Procédé de préparation d'un chlorhydrate purifié de ehlortétraeyeline à partir d'une matière impure contenant de la ehlortétraeyeline sous une forme autre que'le chlorhydrate, caractérisé en ce qu'on prépare, à partir de ladite matière, une solution aqueuse présen- tant un PH inférieur à 4 et contenant au moins 0, 3 mg de chlortétracycline sous forme de sel d'acide par em3, on mélange cette solution, débarrassée de toute matière insoluble, avec un solvant organique et un chlorure soluble dans l'eau pour provoquer la séparation de chlorhydrate de ehlortétraeycline et on isole le produit solide obtenu.

   SOUS-REVENDICATIONS : 1. Procédé selon la revendication, caractérisé en ce que le chlore est utilisé en quantité suffisante pour saturer pratiquement la solution aqueuse.

   2. Procédé selon la revendication et la sous-revendication 1, caractérisé en ce qu'on utilise du chlorure de sodium comme chlorure soluble dans l'eau.

   3. Procédé selon la revendication, caractérisé en ce qu'on prépare ladite solution à partir d'un mélange de fermentation provenant de la culture d'un micro-organisme producteur de chlortétraeycline dans un milieu nutritif aqueux, en acidifiant ce mélange afin d'abaisser son pg au-dessous de 4, en éliminant toutes les matières non dissoutes et en concentrant la solution aqueuse résultante jusqu'à ce e qu'elle contienne au moins 0, 3 mglem3 de chlortétracyeline sous forme de sel d'acide.

   4. Procédé selon la revendication, caractérise en ce qu'on prépare ladite solution à partir d'un mélange de fermentation provenant de la culture d'un micro-organisme producteur de ehtlortétraeycline dans lm milieu nutritif aqueux, en ajoutant à ce mélange une substance alcaline pour allgmenter son pE à une valeur supérieure à 6, en séparant le précipité ainsi obtenu qui renferme la ehlortétraeyeline et en l'épuisant par un acide minéral aqueux.

   5. Procédé selon la revendication et la sous-revendication 4, caractérisé en ce que la substance alcaline est un hydroxyde de métal alcalin.

   6. Procédé selon la revendication et les sous-revendications 4 et 5, caractérisé en ce qu'on augmente le pg du mélange de fermentation à une valeur comprise entre 6 et 11.

   7. Procédé selon la revendication et la sous-revendication 4, caractérisé en ce que la substance alcaline est un hydroxyde alealinoterreux.

   8. Procédé selon la revendication et les sous-revendications 4 et 7, caractérisé en ce qu'on augmente le pH du mélange de fermentation à une valeur comprise entre 7 et 9.

   9. Procédé selon la revendication, caracté- risé en ce qu'on prépare ladite solution à partir d'un mélange de fermentation provenant de la culture d'un micro-organisme pro ducteur de ehlortétraeycline dans un milieu nutritif aqueux, en ajoutant à ce mélange un alcali pour augmenter son pu à une valeur supérieure à 6, en séparant le précipité ainsi obtenu qui renferme la chlortétracyeline, en l'épuisant, en présence d'eau et d'un alcali, par un solvant organique capable de dissoudre 'la chlortétracycline, en éliminant ledit solvant et en ajoutant ensuite au résidu aqueux un acide.

   10. Procédé selon la revendication et la sous-revendication 9, caractérisé en ce qu'on augmente le Pll du mélange de fermentation à une valeur comprise entre 6 et 11.

   11. Procédé selon la revendication, carac térisé en ce qu'on prépare ladite solution à partir d'un mélange de fermentation provenant. de la. culture d'un micro-organisme producteur de ehGortétraeyeline dans un. milieu nutritif aqueux, en ajoutant à ce mélange un composé alcalin pour augmenter son PE à lme valeur supérieure à 6, en séparant le préeipité ainsi obtenu qui renferme la chlortétra- eyeline, en l'épuisant, en présence d'eau et d'un acide, par un solvant organique capable de dissoudre la chlortétraeycline et en élimi- nant ledit solvant.

   12. Procédé selon la revendication et la sous-revendication 11, caractérisé en ce qu'on augmente le pg du mélange de fermentation à une valeur comprise entre 6 et 11.

   13. Procédé selon la revendication et la sous-revendication 9, caractérisé en ce que le solvant organique est chassé par distillation à une température inférieure à 50 C.

   14. Procédé selon la revendication et. 1a sous-revendication 11, caractérisé en ce que le solvant organique est chassé par distillation à une température inférieure à 50 C.

   15. Procédé selon la revendication et la sous-revendication 3, caractérisé en ce que la solution aqueuse est concentrée jusqu'à ce qu'elle contienne de 0, 3 à 30, 0 mg de chlortétracycline par cl. 3.

   16. Procédé selon la revendication et les sous-revendications 3 et 15, caractérisé en ce que la concentration est effectuée par distilla- tion dans le vide.

   17. Procédé selon la revendication, caractérisé en ce qu'on prépare une solution acide dont le pH est compris entre 1 et 4.

   18. Procédé selon la revendication, carac térisé en ce qu'on utilise du butanol comme solvant organique, en quantité ne dépassant pas 10 /o du volume de la solution acide.