CH359715A - Procédé de fabrication d'un dérivé d'amino-acide de l'acide para-amino-salicylique - Google Patents

Description

  
 



  Procédé de fabrication d'un dérivé d'amino-acide de l'acide para-amino-salicylique
 La présente invention a trait à un procédé de fabrication d'un dérivé non toxique du PAS (acide para-amino-salicylique), destiné à être utilisé pour retarder ou empêcher le développement d'une résistance du bacille de la tuberculose à des substances antibiotiques telles que la streptomycine.



   Le traitement normal de la tuberculose comprend l'utilisation de PAS simultanément avec la streptomycine ou l'isoniazide (hydrazide de l'acide isonicotinique). Le but de l'administration de PAS est d'empêcher le développement de souches de bacilles de la tuberculose qui résistent au médicament qui l'accompagne, la dose de PAS étant généralement de 10 à 15 g par jour.



   On a constaté qu'approximativement 30 O/o des patients manifestent des symptômes d'intoxication par le PAS et certains de ces symptômes sont tellement graves qu'il faut interrompre l'administration du médicament. D'autre part une dose de 15 g de PAS est souvent considérée comme insuffisamment élevée pour produire un effet thérapeutique adéquat, mais la toxicité du médicament limite la dose susceptible d'être administrée.



   Les symptômes d'intoxication au PAS sont des désordres gastro-intestinaux.



   Un autre problème réside dans l'instabilité de la molécule de PAS qui donne aussi bien lieu à des difficultés de fabrication que d'administration des préparations pharmaceutiques qui en contiennent.



   L'invention permet d'éviter les difficultés ci-dessus indiquées rencontrées avec le PAS.



   Le procédé selon l'invention est caractérisé en ce que   l'on    fait agir sur un amino-acide un agent d'introduction du reste carbobenzoxy, on transforme le dérivé obtenu en l'anhydride correspondant, on condense l'anhydride avec de l'acide para-amino-salicylique et on soumet le dérivé de l'acide para-aminosalicylique à une hydrogénation catalytique pour éliminer le résidu carbobenzoxy.



   Pour tirer tous les avantages possibles de l'invention, l'acide aminé sera choisi de façon à:
I) Conférer un goût agréable au composé.



     II)    Ne pas être séparable du composé par hydro
 lyse sous l'action d'enzymes stomacaux (par
 exemple, la pepsine) ou par le suc pancréatique
 (par exemple, la trypsine, la chymotrypsine, la
 carboxypeptidase), mais l'être par hydrolyse par
 les enzymes de la muqueuse intestinale.



  III) Conférer au dérivé la solubilité désirée.



  IV) Rendre le dérivé plus stable en solution que la
 molécule correspondante de PAS, qui est très
 peu stable.



   L'acide glutamique, par exemple, répond à toutes les exigences susmentionnées. Le dérivé obtenu avec cet acide présente un goût agréable, il n'est pas hydrolysé par les enzymes de l'estomac ou du pancréas mais il est hydrolysé par les enzymes de la muqueuse intestinale, il possède une solubilité excellente, il est stable et lorsqu'il est administré à des êtres humains il donne naissance à des niveaux sanguins de PAS importants. Le dérivé a été essayé cliniquement et est très satisfaisant. Aucun autre dérivé d'amino-acide du PAS ne présente les propriétés désirables que présente le glutamyl-PAS.



  Aucun des autres amino-acides connus ne pourrait conférer au dérivé final la solubilité élevée et le goût plaisant du dérivé glutamylique. D'autre part, l'acide glutamylique est l'amino-acide naturel le meilleur marché après la glycine. On a également préparé le dérivé glycinique du PAS.



   Un mode de mise en   oeuvre    de ce procédé est décrit ci-dessous à titre d'exemple:  
 Préparation du glutamyl-PAS 1) Préparation de l'acide carbobenzoxy-L
 glutamique.



     AcideL-glutamique      (P.M.    147). 14,7 g
   Carbobeuzoxychiorure      (P.M.    171) :    17, 1 g+ 20  /o = 20,5g   
 MgO   (P.M.    40) 6,5 g
 L'acide glutamique et le MgO sont dissous dans 100 cc   d'eau    et cette solution est couverte de 30 cc d'éther. Le carbobenzoxy-chlorure est ajouté par faibles quantités au cours de trente minutes en réfrigérant dans un bain d'eau à 00 C et en agitant continuellement. Le pH est contrôlé avec du papier   Hydrion   et la solution est maintenue alcaline par addition de MgO solide si besoin est. La solution est agitée à température ordinaire pendant 15 à 17 heures, du MgO étant ajouté si nécessaire de manière à maintenir la solution alcaline.

   Une goutte de pyridine est ajoutée et la solution est acidifiée au papier de rouge congo avec de l'acide chlorhydrique concentré en réfrigérant (bain de glace). La solution est extraite plusieurs fois au moyen d'acétate d'éthyle et est lavée ensuite plusieurs fois avec de l'acide chlorhydrique 1 N, filtrée à travers un filtre sec et évaporée sous pression réduite (température du bain inférieure à 400 C). On obtient ainsi de l'acide carbobenzoxy-L-glutamique. P.F. = 1200 C.



  2) Préparation de l'anhydride carbobenzoxy-L
 glutamylique.



  Acide   carbobenzoxy-L-   
 glutamique rendement total de l'opé
 ration 1 approximativement
 30g
Anhydride   acétique    80 cc
Chloroforme 37 cc
 80 cc d'anhydride acétique sont ajoutés à l'acide   carbobenzoxy¯L-glutamique    et la solution qui en résulte est chauffée pendant 5 à 10 minutes à 1000 C.



  Elle est ensuite évaporée sous pression réduite (température du bain inférieure à 500 C). Le résidu est dissous dans 40 cc de chloroforme sec, un léger trouble est produit par adjonction d'éther de pétrole   (650-110 )    et la solution trouble est placée dans un congélateur pour cristalliser (à environ   -      200    C). On obtient ainsi l'anhydride carbobenzoxy-L-glutamique.



     P.F.=940C.   



   Rendement: 18,3 g.



   Rendement   O/o =    (par rapport à l'acide glutamique)   70  /o-    3) Préparation du   carbobenzoxy-L-       glutamyl-PA S.   



  Acide p-amino-salicylique (PAS) 4 g
Anhydride   carbobenzoxy-Lglutamylique    6,8 g
Acétate d'éthyle, séché 2 à 3 h sur   P2OÏ,    1300 cc
 Le PAS est placé dans un grand flacon d'Erlenmeyer et on ajoute de l'acétate d'éthyle sec en agitant continuellement jusqu'à ce que le PAS soit complètement ou presque complètement dissous. La solution résultante est trouble et floculante.   I1    faut environ 800 cc d'acétate d'éthyle. L'anhydride carbobenzoxy-L-glutamylique est également dissous dans environ 150 cc d'acétate d'éthyle sec; ces solutions sont préparées à froid. La solution d'anhydride carbobenzoxy-L-glutamylique dans l'acétate d'éthyle est additionnée à la solution de PAS dans l'acétate d'éthyle peu à peu en 20 minutes et en agitant continuellement dans un bain de glace.

   La solution résultante est trouble et floculante. La solution est ensuite agitée pendant environ 20 heures au moyen d'un mélangeur magnétique, après quoi elle s'est presque clarifiée, tandis qu'un précipité brun apparaît. La solution est ensuite filtrée à travers un filtre sec et concentrée en une masse solide sous pression réduite.



   Recristallisation et purification
 du   carbobenzoxy-L-glutamyl-PAS   
 La masse solide est dissoute dans 95   o/o    d'éthanol en chauffant légèrement (à moins de 700 C). La solution est filtrée à travers un filtre sec et on ajoute de l'eau pour amorcer la formation d'un trouble. La solution est ensuite placée dans un appareil frigorifique pour la faire cristalliser. On recristallise le carbobenzoxy-L-glutamyl-PAS jusqu'à ce que son point de fusion soit de 197 à   205o C    (deux à trois fois).



   Rendement: 7,8 grammes.



   Rendement   O/o:      72  /o    (par rapport à l'anhydride carbobenzoxy-L-glutamylique.



   Azote    /o :    trouvé: 6,2   o/o    ; théorique : 6,97   O/o.   



  4) Préparation de L-glutamyl-PAS.



   Le carbobenzoxy-L-glutamyl-PAS (6,7 g) est dissous dans un mélange de solvants comprenant 80 cc de méthanol, 4 cc d'eau et 4 cc d'acide acétique glacial. La solution peut être légèrement chauffée (à moins de 400 C). On ajoute du noir de palladium   (B.D.H.)    (environ 100 mg) et on fait passer de l'hydrogène à travers la solution jusqu'à obtention d'un précipité blanc lourd (L-glutamyl-PAS) dans le récipient et jusqu'à ce que le dégagement de gaz carbonique ait cessé entièrement (48 h). Le dégagement de gaz carbonique peut être irrégulier mais il faut continuer l'hydrogénation jusqu'à ce que le récipient de réaction contienne un précipité blanc lourd. Pour dissoudre ce précipité on ajoute de l'eau et le mélange est chauffé jusqu'à ce que le précipité soit dissous.



  On ajoute une quantité minimum d'eau afin d'obtenir une solution sursaturée. On peut atteindre la température de 1000 C à ce moment-là sans risque de produire la décomposition du produit. Lorsque tout le glutamyl-PAS a passé en solution, la solution chaude est filtrée sur un filtre de   Celite   pour éliminer le palladium et le filtrat est placé dans un appareil réfrigérateur pour cristalliser. Les cristaux peuvent ensuite être filtrés et on peut continuer à concentrer le filtrat, l'ensemencer et le placer dans un appareil réfrigérateur pour cristalliser. Le glutamyl-PAS est recristallisé dans de l'eau chaude.  



   Rendement: 3,7 grammes.



   Rendement   O/o:    80   O/o.   



  Analyse: calculé pour   C12H1406N   
 C,   51,06;    H,   5,00 ;    N, 9,92
Trouvé : C,   50,91;    H,   4,98;    N, 9,90
 Le glycyle-PAS peut être préparé de façon similaire ainsi que d'autres dérivés d'amino-acides du
PAS.



   Pour certains usages cliniques des sels de métaux alcalins ou alcalino-terreux du glutamyl-PAS sont préférés; par exemple le sel monosodique du glutamyl-PAS a été préparé en combinant des proportions équivalentes de glutamyl-PAS et de soude caustique. Le sel monosodique ainsi formé peut être précipité sous forme cristalline à partir d'une solution aqueuse par addition d'un alcool tel que l'éthanol ou par addition d'acétone ou d'un solvant similaire.



  D'autres sels, tels que le sel monopotassique, le sel de magnésium ou le sel de calcium peuvent être préparés de façon similaire. Etant donné que le glutamyl-PAS contient deux groupes acides dans sa molécule on peut également préparer le sel disodique ou le sel dipotassique. Ces sels présentent l'avantage par rapport au glutamyl-PAS d'être plus solubles dans l'eau.
  

Claims (1)

1. REVENDICATION Procédé de fabrication d'un dérivé d'amino-acide de l'acide para-amino-salicylique, caractérisé en ce que l'on fait agir sur un amino-acide un agent d'introduction du reste carbobenzoxy, on transforme le dérivé obtenu en l'anhydride correspondant, on condense l'anhydride avec de l'acide para-amino-salicylique et on soumet le dérivé de l'acide para-aminosalicylique à une hydrogénation catalytique pour éliminer le résidu carbobenzoxy.

   SOUS-REVENDICATIONS 1. Procédé selon la revendication, caractérisé en ce que l'amino-acide choisi est de la glycine.

   2. Procédé selon la revendication, caractérisé en ce que l'amino-acide est de l'acide glutamique.

   3. Procédé selon la revendication, caractérisé en ce que l'on prépare les sels alcalins et alcalino-terreux du dérivé d'amino-acide obtenus.

   4. Procédé selon la revendication, caractérisé en ce que l'on fait réagir de l'acide Lglutamique avec du carbobenzoxychlorure en milieu alcalin, en ce que l'on fait réagir l'acide carbobenzoxy-L-glutamique obtenu avec de l'anhydride acétique, en ce que l'on condense l'anhydride ainsi formé avec de l'acide paraamino-salicylique pour obtenir le carbobenzoxy-Lglutamyl-PAS, en ce que l'on purifie le dérivé de PAS et en ce qu'on le soumet à une hydrogénation catalytique pour éliminer le résidu carbobenzoxy et obtenir le Lglutamyl-PAS.

   5. Procédé selon la revendication, caractérisé en ce que l'on fait réagir de la glycine avec du carbo benzoxychlorure en milieu alcalin, en ce qu'on fait réagir la carbobeazoxyglycine obtenue avec de l'anhydride acétique, en ce que l'on condense l'anhydride ainsi formé avec de l'acide para-amino-salicylique pour obtenir le carbobenzoxyglycyl-PAS, en ce que l'on purifie le dérivé du PAS et en ce qu'on le soumet à une hydrogénation catalytique pour éliminer le résidu carbobenzoxy et obtenir le glycyl-PAS.