Procédé de préparation de 16a,21-di-alkanoyle(inférieur)-oxy- 11p,17a-dihydroxy-9a-halogéno-2a-inéthyl-4-pregnène-3,20-âione La présente invention a pour objet un procédé de préparation de 16a,21-di-alkanoyle(inférieur)-oxy- 11(3,17a - dihydroxy - 9a -halogéno- 2a-méthyl- 4-pre- gnène-3,20-dione. Ces nouveaux.
composés peuvent être représentés par la formule
EMI0001.0012
dans laquelle R représente un radical alkanoyle infé rieur et Hal un halogène, et ces composés sont pré parés par réaction d'une 16a,21-di-alkanoyle(infé- rieur)-oxy-17a-hydroxy-9 (3,11(3-oxy-2a-méthyl-4-pre- gnène-3,20-dione avec un hydrohalogénure, dans un solvant. Si on le désire, on peut traiter le produit ainsi obtenu par un alcali pour obtenir une l 1(3,16a,17a, 21-tétrahydroxy-9a-halogéno-2a-méthyl-4-pregnène- 3,
20-dione.
Les composés obtenus par le procédé selon la présente invention possèdent une activité glucocorti- coïde semblable à celle de l'hydrocortisone et sont utiles comme agents anti-inflammatoires, dans l'ar thrite et les désordres dermatologiques et ophtalmi ques et, de plus, dans le traitement d'affections telles que l'asthme, les brûlures, la bursite et analogues. Ils peuvent être administrés aux patients souffrant de ces affections par voie buccale, sous forme de tablettes, de capsules, etc., parentérales, en suspen sion ou solution, ou topique,
dans des onctions, des crèmes ou analogues.
Par oxydation des. 16a,21-diacétoxy-11(3,17a-di hydroxy-9a-halogéno-2a-méthyl-4-pregnène-3,21- dione obtenues, on peut préparer les composés 11- carbonylés correspondants.
Les produits intermédiaires utilisés comme matiè res de départ dans le procédé de la présente inven tion peuvent être préparés par une série de réactions partant du 3,20-bis-éthylènedioxy-5,9(11)-pregna- diène-ll(3,16a,17a,21-t6tro1, comme indiqué dans les exemples. On donne ci-après une illustration graphi que des réactions, depuis la matière de départ initiale jusqu'aux composés obtenus par le présent procédé.
EMI0001.0045
EMI0002.0001
EMI0003.0001
Bans les formules précédentes, R et Hal ont les significations données ci-dessus.
<I>. Exemple 1</I> A une solution de 3,5 g de 3,20-bis-éthylène- dioxy-5-pregnène-11(1,16a,17a,21-t6trol dans 30 cc de pyridine, on ajoute 4,0 cc d'anhydride acétique. On laisse le mélange reposer pendant 17 heures à la température ambiante, puis on le verse dans l'eau.
On recueille le solide résultant et on le lave à l'eau, ce qui donne 4,0g de 3,20-bis-éthylènedioxy-16a,21-di- acétoxy-5-pregnène-11(3,17a-diol (11), point de fusion 130-1350. Une cristallisation dans le mélange acé- tone-éther de pétrole donne 3,8g, point de fusion 129-135o.
A une solution de 1,0g de 3,20-bis-éthylène- dioxy-16a,21-diac6toxy-5-pregnène-11(3,17a-diol dans <B>10,0</B> cc de pyridine refroidie à -50, on ajoute 1,0 cc d'oxychlorure de phosphore et on laisse reposer le mélange à température ambiante pendant 24 heures.
On verse la solution dans l'eau glacée et le solide résultant filtré et soigneusement lavé à l'eau donne 0,84g de 3,20-bis-éthyiènedioxy-16a,21-diacétoxy- 5,9(11)-pregaadiène-17a-o1 (III), point de fusion 205-211 . Quatre cristallisations dans le mélange acétone-méthanol donnent<B>0,31g,</B> point de fusion 221-224O C ; y max. ; [a]D =-480 (C l,050).
Une solution de 0,53 g de 3,20-bis-éthylènedioxy-16a,21- diacétoxy-5,9(11)-pregnadiène-17a-o1 dans 45 cc d'acide acétique à 66 % (v/v) est chauffée au bain marie pendant 30 minutes ; on ajoute de l'eau et on refroidit et filtre le mélange, ce qui donne 0,23 g de 20-éthylènedioxy-16a,21-diacétoxy-3-oxo-4,9- (11)-pregnadiène-17a-ol (IV), point de fusion 182 1850.
Trois cristallisations dans le mélange acétone- éther de pétrole donnent 0,16g, point de fusion 184,5-186C ; I, max. 239-240#t (s l6,700) ; [ ]D) = 0- (C 1,075).
A une suspension de 4,89 g (10 moles) de 20 éthylène-dioxy-16a,21-diacétoxy-3-oxo-4,9(11)-pre- gnadiène-17 -o1 dans 65 cc de butanol tertiaire on ajoute 1,74 g de méthoxyde de sodium (30 moles + 5 % d'excès) et on laisse le mélange sous agita tion sous azote pendant 10 minutes. On ajoute goutte à goutte une solution de 3,4 cc (25 moles) d'oxalate d'éthyle dans 20 cc de butanol tertiaire et on agite sous azote pendant encore 5 heures.
On ajoute de l'éther (environ<B>100</B> cc) et on filtre le mélange réactionnel et on le lave soigneusement à l'éther, ce qui donne 8,5 g de solide jaune. Cet oeno- late de sodium de la 20-éthylènedioxy-16a,17a,21- trihydroxy-2-éthoxyoxalyl-4,9 (11)-pregnadiène-3-one (V) est soluble dans l'eau, précipite par un acide dilué et donne un test de coloration positif avec une solution de chlorure ferrique.
Bans un autre essai, on dissout le méthoxyde de sodium dans 15 cc de méthanol et on l'ajoute à la suspension de (IV) dans le butanol tertiaire. Ce pro cessus donne une réaction plus propre car le méthoxyde tend à se séparer en morceaux s'il n'est pas dissous avant addition.
A une suspension de 8,5 g de 20-éthylènedioxy- 16a,17ci,21-trihydroxy-2-éthoxyalyl-4,9(11) -pregna- diène-3-one dans 250 cc d'acétone (séchée sur du carbonate de potassium), on ajoute 8,0 g de carbo nate de potassium anhydre et 60 cc d'iodure de méthyle, et on soumet le mélange réactionnel au reflux pendant 20 heures. Après filtration des sels minéraux on évapore la solution jaune à sec, sous pression réduite.
On dissout le résidu dans l'acétate d'éthyle, on le lave plusieurs fois à l'eau et on l'éva pore à sec sous pression réduite, ce qui donne 4,1 g de 20-éthylènedioxy-16a,17a,21-trihydroxy-2-éthoxy- axalyl-2-méthyl-4,9(11)-pregnadiène-3-one (VI), huile jauni, qui ne donne pas de coloration avec des solutions de chlorure ferrique.
A une solution de 4,1 g de 20-éthylènedioxy 16a,17a,21-trihydroxy-2-éthoxyaxalyl-2-méthyl-4,9- (11)-pregaadiène-3-one (huile), dans 200 ec de méthanol, on ajoute 0,56 g de méthoxyde de sodium et on laisse la solution reposer à la température ambiante sous azote pendant 4 heures. On ajoute de l'eau (l00 cc) puis, goutte à goutte, de l'acide acé tique pour rendre la solution neutre, puis on élimine la plus grande partie du méthanol sous pression réduite dans un bain à température de 40-45".
On refroidit le mélange, on le filtre et on le lave avec de l'eau, ce qui donne 2,5 g, point de fusion 185 205,1, 1 max. 239-240 (7700). On dissout ce solide dans le chloroforme, on le lave plusieurs fois avec de la soude à 2 % (pour éliminer la plus grande partie de la coloration), puis à l'eau jusqu'à ce que les eaux de lavage soient neutres. On sèche l'extrait sur du sulfate de sodium et on l'évapore à sec sous pres sion réduite, ce qui donne 2,3 g de 20-éthylènedioxy- 16cc,17u, 21-trihydroxy-2a. - méthyl-4,9(11)
-pregna- diène-3-one (VII), semi-solide.
A une solution de 2,3 g de 20-éthylènedioxy- 16u,17a, 21-trihydroxy-2cc - méthyl-4,9(11) -pregna- diène-3-one dans 200 cc de méthanol, on ajoute 25 cc d'acide sulfurique à 8 % (v/v) et on soumet le mélange au reflux pendant 45 minutes. On ajoute de l'eau, on élimine la plus grande partie du métha nol sous pression réduite et on extrait le résidu à l'acétate d'éthyle.
On lave l'extrait avec une solution de bicarbonate de sodium, puis avec de l'eau jus qu'à ce que les eaux de lavage soient neutres, on sèche sur du sulfate de sodium et on évapore à sec, ce qui donne 1,6 g d'huile jaune.
On soumet ensuite cette huile à une séparation chromatographique sur une colonne de terre à diatomées (400)g) de la manière suivante Le solvant consiste en deux parties d'acétate d'éthyle, trois parties d'éther de pétrole (point d'ébul lition 90-100o), trois parties de méthanol et deux parties d'eau, la phase supérieure de ce mélange étant la phase mobile et la phase inférieure étant la phase stationnaire.
On dissout l'huile dans 15 ce de phase stationnaire, on délaye avec 30 g de terre à diatomées et on tasse sur le sommet de la colonne de terre à diatiomées qui est préalablement prépa rée avec 200 cc de phase stationnaire. On fait alors débuter la chromatographie avec la phase mobile et on recueille 128 fractions de 20 cc de volume cha cune. Les fractions 71-119 inclus présentent une forte coloration avec le bleu de tétrazolium ; on les réunit et on les évapore à sec, ce qui donne 0,75 g de solide brut.
Cinq cristallisations dans le mélange acétone-éther de pétrole donnent<B>0,13</B> g de 16u,170., 21-trihydroxy-2a-méthyl-4,9(11) -pregnadiène- 3,20- dione (VIII), point de fusion 203-207 C ; ?. max. 237-238u (F 17.400) ; [a]26 = + 103,1 (C 1,088).
A une solution de 0,62 g de 16u,17a,21-tri- hydroxy-2u-méthyl-4,9(11) -pregnadiène - 3,20-dione brut dans 8,0 cc de pyridine, on ajoute 2,0 cc d'anhydride acétique et on laisse le mélange reposer à la température ambiante jusqu'au lendemain. On verse la solution dans l'eau, on la refroidit, on la filtre et on la lave soigneusement à l'eau. On dissout le solide dans l'acétate d'éthyle, on le sèche sur du sulfate de magnésium et on l'évapore, ce qui donne 0,35 g.
Trois cristallisations dans le mélange acétone- éther de pétrole donnent 0,17 g de 16u,21-diacétoxy- 17u - hydroxy - 20. - méthyl - 4,9(l 1) -pregnadiène-3,20- dione (IX), point de fusion 221,5-224 C ; # max. 238-239 [ (s 16.900) ; [0.]D = + 104c, (C 1,040).
A une solution de 0,10 g de 16u,21-diacétoxy- 17a-hydroxy-2u - méthyl - 4, 9 (11) - pregnadiène - 3,20- dione dans 5,0 cc de dioxane (exempt de peroxyde) et 1,0 cc d'eau refroidie à 15 , on ajoute 0,042 g de N-bromoacétamide et 0,21 cc d'acide perchlorique à 10 %. On laisse reposer le mélange réactionnel à 200 pendant 20 minutes, puis on ajoute 0,5 cc d'une solution saturée de sulfite de sodium, puis de l'eau jusqu'à ce qu'il se forme un solide.
On refroidit le mélange, on ajoute encore de l'eau et on recueille encore le solide et on le lave à l'eau, ce qui donne 0,095g de 16o0.,21-diacétoxy-11(3,17a-dihydroxy-9a- bromo-2a-méthyl-4-pregnène-3,20-dione (X), point de fusion 131-134 avec décomposition. Ce solide donne un test de Beilstein positif pour l'halogène. Des tentatives pour le purifier conduisent à sa décomposition.
A une solution de 0,19 g de 16u,21-diacétoxy 11(3,17a-dihydroxy-9a-bromo-2a-méthyl-4-pregnène- 3,20-dione dans 60 cc d'éthanol absolu, on ajoute 0,055 g d'acétate de potassium (séché à 110 ) et on soumet le mélange au reflux pendant 17 heures, puis on l'évapore à sec. On dissout le résidu dans l'acé tate d'éthyle et l'eau, on lave l'acétate d'éthyle plu sieurs fois à l'eau, on sèche sur du sulfate de sodium et on évapore à sec, ce qui donne 0,14 g d'huile. On dissout cette huile dans 4,0 cc de pyridine et on traite par 1,0 ce d'anhydride acétique jusqu'au len demain à température ambiante.
On verse la solution dans l'eau, on refroidit et on recueille le solide résul tant et on le lave à l'eau, ce qui donne 0,042 g, point de fusion 202-208 . On extrait l.0. liqueur mère aqueuse (qui présente une forte couleur bleu tétra- zolium) par l'acétate d'éthyle, on la lave à l'eau, on la sèche sur du sulfate de sodium et on l'évapore, ce qui donne une huile qui, quand on la traite par le méthanol, donne 0,056 g, point de fusion 218 221 .
Trois cristallisations dans le méthanol donnent 0,035g 16a,21-diacétoxy-17a-hydroxy-9(3,11(3-oxy- 2c@-méthyl-4-pregnène-3,20-dione (XI), point de fusion 222-223,5,1C; max. 242-24311 (s l4,100) ; [ ]D = 34,, (C 1,098).
Analyse: calculée pour C:,eH3408 (474,83) C = 65,80 ; H = 7,22 Trouvée.<B>C=65,57;</B> H=7,49 Dans un autre essai, la fraction recueillie dans la filtration de l'eau est cristallisée plusieurs fois dans le méthanol et donne un point de fusion cons tant de 203-211o. On la soumet à l'essai par taches sur une feuille de papier et on la compare avec les produits (IX) et (X) purs comme standard (toluène, 6 parties ; éther de pétrole 90-100 , 4 parties ;
méthanol 6,5 parties ; eau 3,5 partis ; 2 heures). Les composés (IX) et (XI) s'étalent tous les deux sur les mêmes distances (17 cm) et le produit inconnu ne présente qu'une seule tache, également à 17 cm.
On suppose par conséquent que le premier jet de cristal lisation dans l'eau est un mélange de l'oxyde et des 9-déhydrodiacétates. A une solution de 0,10 g de 16a,21- diacétoxy - 17a - hydroxy - 9a,11(3 - oxy - 2a- méthyl-4-pregnène-3,20-dione dans 25 cc de chloro forme (exempt d'alcool) préalablement refroidi à -5-, on ajoute 1 cc d'acide fluorhydrique anhydre.
On place le mélange réactionnel sur une secoueuse méca nique, on laisse secouer pendant 2 heures à moins 5e, on verse dans l'eau glacée et on neutralise avec un bicarbonate de sodium. On extrait le mélange plusieurs fois avec du chloroforme et on lave les extraits réunis jusqu'à neutralité avec de l'eau, on les sèche sur du sulfate de sodium et on évapore à sec. On dissout le résidu dans 5 cc de pyridine, on ajoute de l'anhydride acétique (1,0 cc) et on laisse la solution reposer à la température ambiante pen dant 16 heures. On la verse ensuite dans l'eau et on l'extrait plusieurs fois à l'acétate d'éthyle.
On lave les extraits combinés jusqu'à neutralité avec de l'eau, on les sèche sur du sulfate de sodium et on évapore à sec, ce qui donne une huile. On soumet l'huile à une séparation chromatographique sur terre à diatomées en utilisant un système solvant consistant en trois parties d'acétate d'éthyle, 2 par- ties d'éther de pétrole (point d'ébullition 90-100"), 3 parties de méthanol et 2 parties d'eau.
On utilise la phase supérieure de ce mélange solvant comme phase mobile et la phase inférieure comme phase stationnaire. On fait passer l'éluat de la colonne dans un spectrophotomètre Beckmann muni d'un enregistreur automatique pour une lecture à 240 mi crons. L'enregistreur indique 4 pics distincts dont chacun est conservé séparément. Le dernier pic à venir (approximativement 2 volumes de colonne) est évaporé à sec, ce qui donne 13,0 mg d'huile.
On cristallise cette huile dans le mélange acétone-éther de pétrole, ce .qui donne 5,5 mg de 16a,21-diacétoxy- 11 a,17a-dihydroxy-9a-fluoro-2a-méthyl-4-pregnène- 3,20-dione (XII), point de fusion 140-2000. Une cristallisation dans le mélange acétone-éther de pétrole donne 3,0 mg, point de fusion 140-200 ;
essai de cétole positif avec le bleu tétrazolium ;une tache sur le chromatogramme au papier.
Analyse: calculée pour CzcH3sO8F (491,52) F = 3,87 Trouvée: F=4,47 <I>Exemple 2</I> On conduit deux autres expériences comme à l'exemple 2, qui donnent respectivement 10,5 mg de XII, point de fusion 130-215o C et 27,5 mg de XII, point de fusion 135-2140 C.
On combine ces deux produits et on les recristal lise dans le mélange acétone-éther de pétrole, ce qui donne 30 mg fondant à 130-215 C, une tache sur la bande de papier. Analyse: F = 4,29 % s 237 - 8 =<B>16,00</B> (ETOH Abs.).
Infrarouge identique aux essais précédents. <I>Exemple 3</I> Par saponification avec la soude ou la potasse de la 16a.,21-diacétoxy-lla-dihydroxy-9a-fluoro-2- méthyl-4-pregnène-3,20-dione, on obtient la 11,a, 16a.,17 , 21- tétrahydroxy - 9a - fluoro- 2a - méthyl - 4- pregnène-3,20-dione.