CH686482A5 - Preparation huileuse et procede pour son obtention - Google Patents

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Description

La présente invention concerne une préparation huileuse ainsi qu'un procédé pour son obtention. L'invention porte particulièrement sur une préparation huileuse contenant, en tant qu'ingrédients actifs, des substances qui inhibent la production d'oxygène réactif et de peroxyde lipide dans le corps humain. Ci-dessous, ces substances seront désignées par le terme «substances antioxydantes».

Récemment, l'attention s'est portée sur des substances antioxydantes qui présentent des effets excellents lorsqu'on les utilise pour la prévention et le traitement de diverses maladies inflammatoires et invétérées, telles que l'arthrorhumatisme chronique, la thrombophlébite, le sclériasis systémique progressif, la maladie de Buerger, la maladie de Raynaud, le dermato-ulcère opiniâtre, etc, qui sont provoquées par la destruction de l'organisation cellulaire par l'oxygène réactif et les peroxydes de lipide produits dans le corps humain.

Une étude effectuée par les auteurs de la présente invention a permis de mettre en évidence le fait que les substances antioxydantes mentionnées ci-dessus comprennent des substances à faible masse moléculaire, telles que les flavonoïdes, les polyphénols, les tannins, les tocophérols, la vitamine Bi, etc. contenues dans une plante, ainsi que le fait que leur administration par voie orale, en tant que médicament ou aliment diététique, inhibe la production de l'oxygène réactif et des peroxydes de lipide susmentionnés, dans le corps [voir Journal of Japan Pharmacist Association, No 39, vol. 12, supplément, «Bioavailability of SOD (Superoxide Dismutase) and crude drug», pages 1097-1119, publié le 1er décembre 1987],

Conformément à l'état de la technique, on connaît, en tant que préparation contenant de telles substances antioxydantes, une substance nutritive botanique qui fait l'objet du brevet japonais No 1 366 268, et une composition antioxydante décrite dans la demande de brevet japonais publiée avant examen, No 63-79 834, au nom de Niwa.

La substance nutrititive botanique du brevet No 1 366 268 est obtenue par mélange de poudre de thé vert avec de la poudre de riz non poli cuite et de la poudre de soja, adjonction d'une faible quantité d'Aspergillus oryzae (champignon microscopique désigné par le terme japonais «koji»), suivie de l'immersion de ce mélange de poudre dans un mélange d'huile de sésame et d'huile de soja, pendant environ 4 jours, pour extraire les ingrédients actifs, élimination des précipités par centrifugation et incorporation de la substance huileuse résiduelle dans une capsule de gélatine ou de matière similaire.

La composition antioxydante qui fait l'objet de la demande de brevet No 63-79 384 est obtenue par chauffage modéré de graines ou de germes végétaux, de façon à éviter de les brûler; suivi de l'incubation de ces substances végétales par adjonction d'un micro-organisme et adjonction d'une huile végétale obtenue à partir d'une plante ayant également subi un chauffage modéré. A titre facultatif, on ajoute à la composition de la vitamine C, des dérivés de vitamine C ou une matière végétale contenant ces substances.

En tant que graines végétales, on utilise une graine contenant des substances antioxydantes telles que celles mentionnées ci-dessus, notamment des flavonoïdes, des polyphénols, des tannins, des tocophérols, la vitamine Bi, etc, y compris le riz, le blé, l'orge, le soja, les pois dits «adzuki», le maïs, l'orge perlée (connue sous le nom japonais de «hatomugi»), les pois. En tant qu'huile végétale, on utilise l'huile de sésame, l'huile de soja, l'huile de cotton, l'huile de maïs, l'huile de carthame, l'huile d'œno-thère, l'huile de son de riz, l'huile de colza, l'huile d'olive, etc.

Toutefois, la substance nutritive botanique décrite dans le brevet No 1 366 268 a une activité antioxydante faible en raison du procédé de traitement de la matière végétale brute.

La composition antioxydante qui fait l'objet de la demande de brevet No 63-79 834, de Niwa, remédie à ce problème en augmentant, de façon remarquable, l'activité des substances antioxydantes grâce au chauffage modéré de la matière végétale brute, afin d'éviter de la brûler, par exposition à un rayonnement infrarouge lointain, en évitant ainsi la désactivation des substances antioxydantes provoquée par une température élevée et en libérant la matière première et en la transformant en ingrédients actifs à faible masse moléculaire, ainsi qu'en effectuant l'incubation de la matière ayant subi ce traitement thermique afin de favoriser la nouvelle libération et transformation des substances actives à faible masse moléculaire.

Toutefois, les études effectuées depuis lors par les auteurs de la présente invention ont permis de mettre en évidence le fait que, bien que la substance antioxydante mentionnée ci-dessus inhibe, de façon remarquable, la production de l'oxygène réactif et des peroxydes de lipide in vitro, les activités antioxydantes mises en évidence dans l'organisme humain ne sont pas suffisantes.

On considère que, pour permettre aux substances antioxydantes de parvenir à l'intérieur des cellules atteintes d'une maladie telle qu'une réaction inflammatoire, etc, provoquée par l'oxygène réactif et les peroxydes de lipide, il est nécessaire qu'elles traversent les membranes cellulaires qui recouvrent les surfaces des cellules. Toutefois, la membrane cellulaire humaine renferme une grande quantité de constituants huileux et graisseux et, par conséquent, elle présente la propriété de ne permettre le passage que de substances huileuses, de sorte que la composition antioxydante susmentionnée, qui a une faible teneur en substance huileuse, a une faible aptitude à traverser la membrane cellulaire pour pénétrer à l'intérieur de la cellule.

C'est pourquoi les auteurs de la présente invention ont répété les études dans le but d'améliorer l'ap2

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titude de la composition antioxydante à traverser la membrane cellulaire, en accomplissant de nouveaux progrès dans le choix des espèces végétales utilisées comme matières premières, ainsi que dans leur procédé de traitement. Ceci a permis d'obtenir une préparation huileuse dans laquelle l'activité des substances antioxydantes constituant les ingrédients actifs est élevée, de même que leur aptitude à pénétrer à l'intérieur de la cellule atteinte d'une maladie.

La présente invention a pour but de fournir une préparation huileuse dans laquelle l'activité des substances antioxydantes constituant les ingrédients actifs ainsi que leur aptitude à pénétrer à l'intérieur des cellules au lieu atteint par la maladie sont élevées.

L'invention a également pour but de fournir un procédé d'obtention de cette préparation.

A cet effet, le procédé d'obtention d'une préparation huileuse, selon l'invention, présente les caractéristiques spécifiées dans la revendication 1.

Des caractéristiques supplémentaires éventuelles, particulièrement avantageuses de ce procédé sont spécifiées dans les revendications 2 à 6.

En tant que matières premières contenant en grande quantité les substances antioxydantes, on peut mentionner, outre les germes de riz, les germes de blé et le soja, les espèces végétales décrites dans ladite demande de brevet japonais publiée avant examen No 63-79 834, c'est-à-dire l'orge, le pois dit «adzuki», le maïs, l'orge perlée («hatomugi»), les pois, etc. Toutefois, il résulte des études effectuées par les auteurs de la présente invention que les germes de riz, les germes de blé et le soja constituent les matières premières les plus avantageuses.

Outre les germes de riz et de blé et le soja, on peut mentionner le son de riz, l'orge perlée («hatomugi») et le blé. Par conséquent, en tant que matières premières, on peut ajouter, avec les germes de riz e/ou de blé, au moins une matière choisie parmi le son de riz, l'orge perlée («hatomugi») et le blé. De toute façon, la proportion de germes (germe de riz et/ou germe de blé) dans la matière première à base de céréales, est de préférence supérieure ou égale à 1% en poids.

Les substances antioxydantes contenues dans la matière première à base de céréales décrites ci-dessus, forment un polymère macromoléculaire complexe en association avec les autres substances et, par conséquent, elles n'ont pas d'activité sous une telle forme, de sorte qu'il est nécessaire de rompre les liaisons macromoléculaires par chauffage modéré ou traitement similaire, de façon à libérer les substances antioxydantes à faible masse moléculaire. Toutefois, si la température de chauffage est trop élevée, les substances antioxydantes à faible masse moléculaire sont désactivées, de sorte qu'il est nécessaire de tenir compte de ce fait lors du choix des conditions de chauffage.

En vue de satisfaire à une telle condition, il est nécessaire de chauffer la matière première à base de céréales à une température n'excédant pas 100°C, ce chauffage étant effectué lentement et pendant une durée suffisante. Plus précisément, on peut, par exemple, effectuer ce chauffage en plaçant la matière première à base de céréales dans un récipient en céramique, tel qu'un récipient en poterie, et la soumettre à une exposition à un rayonnement infrarouge lointain, ayant de préférence une longueur d'onde de 4 à 14 micromètres, le chauffage étant effectué tout en agitant doucement et en maintenant la température à une valeur d'environ 90 à 96°C.

Le temps de chauffage varie selon la nature de l'espèce végétale, de sorte qu'il n'est pas possible d'en indiquer la valeur sans faire de distinction. Toutefois, cette durée est, de préférence, d'environ 30 minutes à 3 heures. Il est à noter que la manière dont on effectue le chauffage ne se limite pas à celle qui est indiquée ci-dessus, à condition que les substances antioxydantes dans la matière première à base de céréales soient suffisamment libérées en tant que substances à faible masse moléculaire, tout en évitant leur désactivation.

Après le traitement thermique décrit ci-dessus, on ajoute de l'Aspergillus oryzae («koji») à la matière première pour effectuer son incubation. De préférence, on effectue l'incubation à une température de 20 à 36°C, pendant deux à six jours environ. Lorsque l'incubation est effectuée en utilisant un appareil de fermentation, une durée d'environ 2 à 3 heures est suffisante. Cette incubation est effectuée afin de favoriser encore la libération des substances antioxydantes dans la matière première à base de céréales, et leur transformation en substances à faible masse moléculaire. Cette opération d'incubation développe, de manière remarquable, l'activité des substances antioxydantes en comparaison avec le cas d'une matière première n'ayant subi que le traitement thermique.

On broie ensuite la matière incubée afin de la réduire en une poudre fine. Le broyage peut être effectué en utilisant un appareil de broyage du commerce. Cependant, certains types de broyeurs engendrent une température élevée au cours de leur utilisation, ce qui désactive les substance antioxydantes. C'est pourquoi il est préférable d'utiliser des broyeurs qui n'engendrent pas une température élevée lors de leur utilisation, par exemple, on peut utiliser un concasseur.

On prépare ensuite l'huile en mélangeant une huile obtenue à partir de sésame chauffé (qui sera désignée ci-dessous par le terme de «huile de pâte de sésame») avec une huile obtenue à partir de sésame brut, en proportions convenables, et l'on ajoute au mélange d'huile la poudre fine mentionnée ci-dessus. L'huile de pâte de sésame est une huile obtenue par découpage et pressage de pâtes brutes de sésame après chauffage de celles-ci à une température n'excédant pas 100°C, ce chauffage étant effectué lentement et pendant une durée suffisante. Toutefois, la teneur en matière solide fine formée par broyage du sésame reste inchangée, de sorte que la matière conserve l'apparence d'une pâte. Cette huile de pâte de sésame est riche en substances antioxydantes à faible masse moléculaire et son

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utilisation permet d'obtenir la préparation huileuse ayant une activité élevée en substances antioxydantes.

Toutefois, cette huile de pâte de sésame a une viscosité élevée et les dimensions des gouttes d'huile sont également élevées, de sorte qu'une préparation, dans laquelle on ajoute uniquement l'huile de pâte de sésame à la poudre fine susmentionnée, a une faible aptitude à la pénétration à l'intérieur des cellules dans une partie atteinte d'une maladie. Toutefois, lorsque l'on ajoute l'huile de sésame obtenue à partir du sésame brut à l'huile de pâte de sésame, on peut abaisser la taille des gouttelettes et améliorer l'aptitude à la pénétration à l'intérieur des cellules dans une région malade.

L'huile recueillie à partir de sésame brut est une huile obtenue par élimination des matières solides après broyage et pressage du sésame brut, et elle constitue une huile de sésame ordinaire disponible dans le commerce. En raison du fait que la proportion de mélange de l'huile de pâte de sésame à l'huile de sésame ordinaire varie également selon la quantité de poudre fine que l'on ajoute, on ne peut pas l'indiquer sans discrimination. Cette proportion est, de préférence, de 1 à 3 parties en poids d'huile de sésame ordinaire pour 1 partie en poids de sésame.

La proportion de mélange d'huile par rapport à la poudre fine que l'on y ajoute est telle que la quantité de mélange d'huile s'établit à 60 à 95% en poids par rapport à la quantité totale des deux. Si la quantité de mélange d'huile est inférieure à 60% en poids, l'aptitude à traverser la membrane cellulaire est médiocre. D'autre part, si la quantité de mélange d'huile dépasse 95% en poids, la concentration en substances antioxydantes en tant qu'ingrédients actifs est faible, de sorte que l'effet d'inhibition de la production d'oxygène réactif et de peroxydes de lipide diminue également.

La préparation huileuse selon l'invention, qui est administrée par voie orale, peut être préparée en ajoutant la poudre fine au mélange d'huile en l'enfermant dans une capsule de gélatine, ou de matière similaire, dès que le mélange d'huile est préparé. Toutefois, il est particulièrement avantageux de soumettre le mélange de matières à une maturation, effectué à une température de 20 à 35°C, pendant 3 à 30 jours environ, de préférence à 28 à 30°C pendant environ une semaine, avant encapsulation.

Lorsque l'on effectement le traitement de maturation, la libération des substances antioxydantes et leur transformation en substances à faible masse moléculaire progresse encore sous l'effet du «koji» subsistant dans la poudre fine et les substances antioxydantes sont bien liées au mélange d'huile de sorte que l'activité et l'aptitude à pénétrer par osmose à l'intérieur des cellules des ingrédients actifs sont encore améliorées.

La préparation huileuse selon l'invention peut également comprendre une matière première à base de céréales comprenant des germes de riz ou des germes de blé et du soja et, éventuellement, au moins une substance choisie parmi le son de riz, l'orge perlée («hatomugi») ou le blé, cette substance étant réduite à l'état de poudre fine telle quelle, sans chauffage ni incubation, et ajoutée au mélange d'huile conjointement avec la poudre fine chauffée et incubée décrite ci-dessus.

Dans la poudre fine de matière première à base de céréales non chauffée ni incubée, la substance antioxydante constituant l'ingrédient actif n'est pas libérée ni transformée en substances à faible masse moléculaire. Toutefois, lors de son adjonction au mélange d'huile conjointement avec la poudre fine chauffée et incubée, la libération des substances antioxydantes et leur transformation en substances à faible masse moléculaire s'effectue graduellement, même après encapsulation, grâce au «koji» qui reste dans la poudre fine incubée. Ceci présente l'avantage de permettre de maintenir pendant une longue période l'effet d'inhibition de la production de l'oxygène réactif et des peroxydes de lipide.

Au contraire, dans la préparation huileuse dans laquelle on utilise seulement la poudre fine chauffée et incubée, les substances antioxydantes qui constituent les ingrédients actifs sont progressivement décomposées à cause des réactions enzymatiques, et autres, qui s'effectuent de manière continue, même après encapsulation, de sorte que la période d'efficacité est courte en comparaison de ce qui se passe dans le cas où l'on ajoute la poudre fine non traitée.

Toutefois, dans le cas où la quantité de poudre fine non traitée ajoutée est trop élevée, l'activité des ingrédients actifs diminue. Il est, par conséquent, préférable que la quantité de poudre fine non traitée soit d'environ 0,5 à 1 partie en poids pour 1 partie en poids de poudre fine traitée et incubée. Il est à noter que, même dans le cas où l'on ajoute les deux types de poudre fine, la quantité de mélange d'huile est de 60 à 95% en poids de la quantité totale.

Dans la préparation huileuse, ainsi obtenue, conformément à la présente invention, aussi bien l'activité des substances antioxydantes que l'aptitude à pénétrer par osmose à l'intérieur des cellules sont élevées et, comme cela est également mis en évidence par les résultats d'essais cliniques qui seront décrits ci-dessous, cette préparation présente des effets remarquables contre diverses maladies inflammatoires et invétérées contre lesquelles les effets thérapeutiques des agents anti-inflammatoires classiques ont été insuffisants.

La préparation huileuse selon l'invention peut être encapsulée dans de la gélatine ou des substances similaires, et administrée par voie orale en tant que médicament. En outre, dans le cas d'une pigmentation anormale, telle qu'une dermatose, un chloasme, des tâches de rousseur, des rides, etc, on peut directement appliquer la préparation huileuse sur la partie atteinte. En plus de l'utilisation pour lutter contre la dermatose et les affections similaires, la préparation huileuse selon l'invention peut être également utilisée pour combattre les maladies de l'âge adulte et les maladies invétérées, telles que l'arthrorhumatisme chronique, la thrombophlébite, le sclérome systémique progressif, la maladie de

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Buerger, la maladie de Raynaud, le dermato-ulcère opiniâtre, etc. La préparation selon l'invention est également efficace pour le traitement et la prévention de diverses autres maladies provoquées par la pollution, les brûlures, les blessures externes, la fatigue, la «gueule de bois», la constipation, etc.

En outre, la préparation huileuse selon l'invention n'a pas d'effet secondaire en raison du fait que l'on utilise uniquement des céréales, du «koji» et du sésame en tant que matières premières, de sorte qu'il est possible de l'administrer par voie orale en tant qu'aliment diététique pour l'entretien et l'amélioration de l'état de santé. Il va sans dire que, lors de l'élaboration de cette préparation, on peut éventuellement ajouter des ingrédients auxiliaires médicaux et autres, utiles pour la santé, tels que diverses vitamines, substances minérales, etc, ainsi que des agents aromatisants, agents d'amélioration du goût, colorants, etc.

Exemple

Dans un pot en poterie émettant un rayon infra-rouge lointain de 4 à 14 micromètres, on a chargé des germes de riz, du soja, du son de riz, du hatomugi (orge perlée) et du blé, à raison de 1 partie de chacune de ces matières, et on a chauffé à une température de 90 à 96°C, pendant 3 heures, en agitant lentement pour éviter de brûler. Ensuite, on a ajouté du koji en quantité correspondant à 3% de la quantité totale, pour incubation à une température de 36 à 40°C pendant 72 heures, et on a réduit ensuite la matière incubée à l'état de poudre fine au moyen d'un concasseur. En outre, on a broyé au concasseur, une matière première constituée des cinq sortes de céréales mentionnées ci-dessus, n'ayant subi ni chauffage, ni incubation, de manière à obtenir des poudres fines en quantités identiques. D'autre part, on a chauffé du sésame de la même façon que les matériaux énumérés ci-dessus et, après broyage au concasseur, on a effectué un pressage pour obtenir une huile de pâte de sésame.

On a ensuite mélangé 28,1 parties en poids de l'huile de pâte de sésame avec 48,9 parties en poids d'une huile de sésame du commerce, et on a ajouté au mélange ainsi obtenu 11,5 parties en poids de la poudre fine chauffée et incubée et 11,5 parties en poids de la poudre fine non traitée, et l'on a agité le mélange ainsi formé afin de l'homogénéiser. On a laissé mûrir à 28°C, pendant une semaine, le mélange ainsi obtenu, puis encapsuler dans de la gelatine de façon à constituer une préparation huileuse.

Résultat obtenu:

[I] Essai in vitro

(1) En vue de la détermination in vitro de l'aptitude à parvenir au site huileux et à la pénétration à ces endroits, on a ajouté la préparation huileuse obtenue selon l'exemple décrit ci-dessus à un système réactionnel TBA (acide thiobarbiturique) dans lequel on a fait réagir un acide gras insaturé huileux (acide décosahexaenoïque) avec de l'oxygène réactif engendré par des rayons ultraviolets et on a produit des peroxydes de lipide et mesuré le degré d'inhibition de la production de peroxyde de lipide.

Plus précisément, on a ajouté 1,8 mg/ml de l'échantillon d'essai de la préparation huileuse selon l'invention à 0,1 cm3 d'acide décosahexaenoïque dilué cent fois et mesuré la production de peroxyde de lipide au moyen de la réaction TBA. Dans la réaction TBA, on a mélangé 0,2 ml de dodécylsulfate de sodium à 7%, 2 ml de HCL 0,1 N et 0,3 ml d'acide phosphotinstique, on a ajouté au mélange 1,8 mg/ ml de l'échantillon d'essai, ajouté 1 ml d'un réactif dans lequel 0,67% de TBA on été mélangés à de l'acide acétique en proportion 1:1, et l'on a effectué la mesure avec excitation à 515 nm et émission à 553 nm au moyen d'un spectrophotomètre de fluorescence.

A titre d'exemple comparatif utilisant la substance nutritive botanique selon le brevet japonais No 1 366 268 (exemple comparatif 1 ) et la composition antioxydante décrite dans la demande de brevet japonais publiée avant examen No 63-79 834 (exemple comparatif 2), on a effectué des mesures de la même manière. Les résultats sont indiqués au Tableau 1.

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TABLEAU 1

Echantillon d'essai Moyenne

(valeur pour 6 minutes)

Témoin UV+) 461 ± 62

Préparation huileuse selon l'invention (1.8 mg/ml) 121 ± 13 ***

Exemple comparatif 1 (1.8 mg/ml) 271 ± 34 **

Exemple comparatif 2 (1.8 mg/ml) 358 ± 45 *

UV+: Rayonnement ultraviolet *: 0.01 < P < 0.05 (par rapport au témoin) **: P < 0.01 (par rapport au témoin) ***: P < 0.0001 (par rapport au témoin)

Résultat d'essai

Bien qu'aucun des échantillons d'essai n'inhibe, de manière importante, la production des peroxydes de lipide (substances réactives TBA) à partir de l'acide gras insaturé (acide décosahexaenoïque) par irradiation, par le rayonnement ultraviolet CO2), la préparation huileuse selon l'invention, tout particulièrement, inhibe de manière remarquable cette production (P < 0.0001). Ce résultat vient appuyer le fait que la préparation huileuse selon l'invention a une activité de substance antioxydante supérieure ainsi qu'une aptitude supérieure à la pénétration à l'intérieur des cellules affectées par une maladie que les préparations classiques (exemples comparatifs 1 et 2).

(2) On a préparé une substance antioxydante [3,4-3H2] dans laquelle la substance antioxydante à faible masse moléculaire contenue dans la préparation huileuse selon l'invention a été marquée avec un isotope (3H); on a ajouté cette substance à du tissu humain, dans un tube à essai, et on a mesuré la valeur de comptage (cpm) de PH2] liée aux membranes cellulaires de ce tissu, en utilisant un compteur à scintillation. Ceci a permis d'effectuer une mesure de l'aptitude à parvenir à la membrane cellulaire (l'activité en thymidine tritiée marquée était de 2 CI/mM).

On a également effectué les mêmes essais pour les exemples comparatifs 1 et 2. Les résultats sont indiqués au Tableau 2. Comme il ressort du Tableau 2, la préparation huileuse selon l'invention présente l'affinité la plus élevée avec la membrane cellulaire, par rapport aux substances des exemples comparatifs 1 et 2.

TABLEAU 2

Echantillon d'essai Valeurs de comptage d'incorporation (cpm)

Témoin 15643 cpm/103 cellules

Préparation huileuse selon l'invention (1.8 mg/ml) 56372 cpm/103 cellules

Exemple comparatif 1 (1.8 mg/ml) 33451 cpm/103 cellules

Exemple comparatif 2 (1.8 mg/ml) 30567 cpm/103 cellules

(3) La préparation huileuse selon l'invention a été soumise à un traitement aux ultrasons et ajoutée à un système engendrant de l'oxygène réactif (neutrophile et xanthinexanthine oxydase), tel que la valeur de la concentration résultant de la transformation dans l'organisme vivant s'établissait à 1,6 mg/ml; et on a mesuré les valeurs correspondant à trois type d'oxygènes réactifs (O2-, H2O2 et OH ) pour comparaison avec le cas où il n'y a pas d'addition (témoin). La concentration de transformation dans l'organisme vivant est une quantité que l'on suppose exister dans le sang lors de l'absorption d'une dose normale journalière (9 g dans le cas de la préparation huileuse de l'invention) dans un organisme vivant.

Les méthodes de mesure pour les trois types d'oxygènes réactifs sont les suivantes.

Pour O2-, on a utilisé la méthode selon laquelle on mesure la quantité de réduction de ferri-cytochro-me C by 02~, à une longueur d'onde de 550 nm, avec un spectrophotomètre Beckman, et convertie dans la quantité correspondante de O2".

Compte tenu du fait que H2O2 diminue la fluorescence engendrée par la scopolétine en présence de Peroxydase, en utilisant la scopolétine et la Peroxydase, on a mesuré le degré de diminution de fluorescence de la scopolétine en utilisant un spectrophotomètre de fluorescence fabriqué par Hitachi Ltd., avec une longueur d'onde d'excitation de 370 nm et une longueur d'onde d'émission de 460 nm.

Pour OH-, en utilisant le principe que la réaction de l'acide-céto-méthiol-butylique (KMB) réagit avec

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OH- pour engendrer de Péthylène à l'état gazeux, on a mis en œuvre la méthode selon laquelle la valeur de la quantité d'éthylène gazeux a été mesurée par Chromatographie en phase gazeuse au moyen d'un appareil fabriqué par Hitachi Ltd., de façon à la convertir en quantité de OH". On a également effectué les mêmes essais pour les exemples comparatifs 1 et 2.

Les résultats sont indiqués au Tableau 3.

TABLEAU 3

Echantillon d'essai

Oxygène réactif

02-

H2O2

OH-

Témoin

1,582 nmole

485 pmole

854 pmole

Préparation huileuse (1.8 mg/ml)

0,589 nmole

161 pmole

283 pmole

Exemple comparatif 1 (1.8 mg/ml)

1,28 nmole

403 pmole

707 pmole

Exemple comparatif 2 (1.8 mg/ml)

0,231 nmole

538 pmole

108 pmole

Résultat des essais

L'effet antioxydant de la préparation huileuse selon l'invention était légèrement inférieur à celui de la substance de l'exemple comparatif 2. Toutefois, l'effet antioxydant observé était plus fort que celui de la substance selon l'exemple comparatif 1. Il ressort cependant des Tableaux 1 et 2 ci-dessus que la substance selon l'exemple comparatif 2 a une teneur plus faible en substance huileuse, de sorte qu'il a une aptitude médiocre à parvenir aux cellules affectées d'une maladie.

Par conséquent, si l'on porte un jugement d'ensemble, la préparation huileuse selon l'invention, dans laquelle l'effet antioxydant est élevé et l'aptitude à la pénétration à l'intérieur des cellules dans une partie malade est la plus grande, doit être considérée comme le meilleur agent antioxydant.

[Il] Essais clinioues

On a étudié l'effet thérapeutique sur 96 patients souffrant de maladies auto-immunes, et de maladies affectant le collagène, telles que Parthro-rhumatisme, l'hématosténose, la névrite, l'hépatocirrhose, le Chloasma, les tâches de rousseur, etc. qui ont, jusqu'à présent, résisté ou empiré lors du traitement par un médicament faisant partie des antiphlogistiques non-stéroïdiens, des stéroïdes et la composition antioxydante selon l'exemple comparatif 2. Les résultats sont indiqués au Tableau 4.

TABLEAU 4

Echantillons d'essai

Préparation huileuse selon l'invention

Exemple comparatif 1

Exemple comparatif 2

Maladie

(1.8 mg/ml)

(1.8 mg/ml)

(1.8 mg/ml)

ARTHRO-RHUMATISME CHRONIQUE

13/18 (72%)

0/7 (0%)

4/14 (28%)

ANGIITE

3/5 (60%)

0/3 (0%)

1/4 (25%)

SCLEROME SYSTEMIQUE PROGRESSIF

9/12 (75%)

2/10 (20%)

6/12 (50%)

DERMATOMYSITE

6/8 (75%)

2/12 (16%)

6/13 (46%)

THROMBOPHLEBITE

2/3 (66%)

0/4 (0%)

1/5 (20%)

MALADIE DE BUERGER

6/8 (75%)

0/3 (0%)

3/6 (50%)

MALADIE DE REYNAUD

10/12 (83%)

3/8 (37%)

7/12 (58%)

VARICOSE

8/11 (72%)

4/9 (44%)

11/15 (73%)

DERMATO-ULCERE OPINIATRE

3/5 (60%)

1/5 (20%)

2/6 (33%)

CHLOASMA, TACHES DE ROUSSEUR

11/14 (78%)

4/12 (33%)

17/2 (68%)

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Claims (8)

Revendications

1. Procédé d'obtention d'une préparation huileuse, caractérisé en ce qu'il comprend les opérations suivantes: chauffage d'une matière première à base de céréales, comprenant des germes de riz et/ou des germes de blé et des graines de soja, à une température n'excédant pas 100°C;

réduction de la matière, ainsi chauffée, à l'état de poudre fine; adjonction d'Aspergillus oryzae à la matière pulvérulente ainsi obtenue et incubation de cette dernière; et adjonction de la matière ainsi incubée à un mélange d'huiles comprenant une huile pâteuse, obtenue par chauffage de sésame à une température n'excédant pas 100°C, et une huile obtenue à partir de sésame brut, la proportion de ce mélange d'huiles par rapport à la quantité totale de poudre fine et de mélange d'huiles étant de 60 à 95%, en poids.

2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on ajoute une matière première à base de céréales, comprenant des germes de riz et/ou des germes de blé et des graines de soja, cette matière étant réduite à l'état de poudre fine, mais sans chauffage ni incubation.

3. Procédé selon la revendication 1 ou la revendication 2, caractérisé en ce que ladite matière première à base de céréales, soumise ou non au chauffage, contient, outre les germes de riz et/ou de blé et les graines de soja, au moins une substance choisie parmi le son de riz, l'orge perlée et le blé.

4. Procédé selon l'une des revendications 1, 2 ou 3, caractérisé en ce que l'on effectue le chauffage de la matière première à base de céréales par exposition à un rayonnement infrarouge lointain ayant une longueur d'onde de 4 à 14 (im.

5. Procédé selon l'une des revendications 1, 2 ou 3, caractérisé en ce que l'incubation de la matière première à base de céréales est effectuée à une température de 20 à 36°C, pendant une durée de 2 à 6 jours à partir du traitement de chauffage.

6. Procédé selon l'une des revendications 1, 2 ou 3, caractérisé en ce que l'adjonction de la poudre fine au mélange d'huiles est effectuée de façon à ce que cette poudre subisse une maturation à une température de 20 à 35°C pendant 3 à 30 jours.

7. Préparation huileuse obtenue par le procédé selon l'une des revendications 1 à 6.

8. Préparation selon la revendication 7, sous forme encapsulée appropriée à l'administration, par voie orale, en tant que médicament ou aliment diététique.

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