CZ289955B6 - Stabilizační médium pro alfa-GST v moči a způsob jeho stanovení metodou enzymové imunoanalýzy - Google Patents
Stabilizační médium pro alfa-GST v moči a způsob jeho stanovení metodou enzymové imunoanalýzy Download PDFInfo
- Publication number
- CZ289955B6 CZ289955B6 CZ19971173A CZ117397A CZ289955B6 CZ 289955 B6 CZ289955 B6 CZ 289955B6 CZ 19971173 A CZ19971173 A CZ 19971173A CZ 117397 A CZ117397 A CZ 117397A CZ 289955 B6 CZ289955 B6 CZ 289955B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- alpha
- gst
- stabilizing medium
- stabilizing
- medium according
- Prior art date
Links
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 title claims abstract description 19
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 title claims abstract description 19
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 title claims description 43
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 7
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 title description 3
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims abstract description 25
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 claims abstract description 15
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 claims abstract description 15
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 13
- -1 alkali metal salt Chemical class 0.000 claims abstract description 13
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims abstract description 12
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 claims abstract description 8
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 claims abstract description 8
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 claims abstract description 8
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 claims abstract description 7
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 claims abstract description 7
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 claims abstract description 7
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 claims abstract description 7
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 claims abstract description 6
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 claims abstract description 6
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims abstract description 6
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 claims abstract description 5
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 4
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 15
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 13
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 claims description 12
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 11
- 102100030497 Cytochrome c Human genes 0.000 claims description 8
- 108010075031 Cytochromes c Proteins 0.000 claims description 8
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims description 7
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 3
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 claims description 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 claims description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 claims 1
- 108010039627 Aprotinin Proteins 0.000 abstract description 3
- 229960004405 aprotinin Drugs 0.000 abstract description 3
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 abstract description 3
- 108010052832 Cytochromes Proteins 0.000 abstract description 2
- 102000018832 Cytochromes Human genes 0.000 abstract description 2
- 230000003019 stabilising effect Effects 0.000 abstract 2
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 abstract 1
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 abstract 1
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 abstract 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 abstract 1
- 239000000413 hydrolysate Substances 0.000 abstract 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 7
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 6
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 6
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 4
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 4
- 229960004906 thiomersal Drugs 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 3
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 3
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 2
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 2
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 235000012730 carminic acid Nutrition 0.000 description 2
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- YXOGSLZKOVPUMH-UHFFFAOYSA-N ethene;phenol Chemical compound C=C.OC1=CC=CC=C1 YXOGSLZKOVPUMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 2
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 2
- 229920000056 polyoxyethylene ether Polymers 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 230000004850 protein–protein interaction Effects 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- WSWCOQWTEOXDQX-MQQKCMAXSA-N sorbic acid group Chemical class C(\C=C\C=C\C)(=O)O WSWCOQWTEOXDQX-MQQKCMAXSA-N 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 2
- BHNQPLPANNDEGL-UHFFFAOYSA-N 2-(4-octylphenoxy)ethanol Chemical compound CCCCCCCCC1=CC=C(OCCO)C=C1 BHNQPLPANNDEGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000003918 Acute Kidney Tubular Necrosis Diseases 0.000 description 1
- 208000037157 Azotemia Diseases 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000005720 Glutathione transferase Human genes 0.000 description 1
- 108010070675 Glutathione transferase Proteins 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108700020962 Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 101710162629 Trypsin inhibitor Proteins 0.000 description 1
- 229940122618 Trypsin inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 229940019748 antifibrinolytic proteinase inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- SFNALCNOMXIBKG-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol monododecyl ether Chemical compound CCCCCCCCCCCCOCCO SFNALCNOMXIBKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HXQVQGWHFRNKMS-UHFFFAOYSA-M ethylmercurithiosalicylic acid Chemical compound CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C(O)=O HXQVQGWHFRNKMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 150000002191 fatty alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 150000003278 haem Chemical group 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 210000000885 nephron Anatomy 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 229920001515 polyalkylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- UEUXEKPTXMALOB-UHFFFAOYSA-J tetrasodium;2-[2-[bis(carboxylatomethyl)amino]ethyl-(carboxylatomethyl)amino]acetate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CC([O-])=O UEUXEKPTXMALOB-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 239000002753 trypsin inhibitor Substances 0.000 description 1
- 210000005239 tubule Anatomy 0.000 description 1
- 208000009852 uremia Diseases 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/544—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being organic
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/1085—Transferases (2.) transferring alkyl or aryl groups other than methyl groups (2.5)
- C12N9/1088—Glutathione transferase (2.5.1.18)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/96—Stabilising an enzyme by forming an adduct or a composition; Forming enzyme conjugates
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/573—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for enzymes or isoenzymes
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Stabiliza n m dium pro alfa-GST v mo i obsahuje stabilizuj c mno stv neenzymov b lkoviny, nap°. sm s stejn ho mno stv bovinn ho s rov ho albuminu a hydrolyzovan elatiny, chelatizuj c inidlo a pufr, p°i em hodnota pH m dia je od 7,0 do 7,5. M dium zabra uje ztr t imunologick aktivity alfa-GST p°i skladov n vzork mo i p°i teplot -20 .degree.C a zlep uje imunoreaktivitu alfa-GST, je-li p°id no ke vzork m mo i, kter byly p°echodn skladov ny p°i teplot 2 a 8 .degree.C po dobu maxim ln 2 hodiny. Stanoven alfa-GST zahrnuje kontaktov n vzorku mo i, o et°en ho stabiliza n m m diem s nerozpustnou formou anti-alfa-GST-IgG, ur en mno stv v zan ho alfa-GST kontaktov n m s enzymem zna en²m anti-alfa-GST-IgG a m °en aktivity zna kuj c ho enzymu.\
Description
Oblast techniky
Vynález se týká stabilizačního média pro alfa-glutathion-S-transferázu (alfa-GST) v moči a způsob stanovení alfa-GST metodou enzymové imunoanalýzy s jeho použitím.
Dosavadní stav techniky
Glutathiontransferázy (GST) jsou enzymy, které se nachází ve velmi proměnlivém množství v lidských tkáních. Tyto enzymy jsou rozděleny do tří hlavních tříd, označovaných alfa, pí a mí. Vlastnosti enzymů v jednotlivých třídách jsou vzájemně poměrně odlišné.
Alfa-GST se nachází v tubulámí oblasti ledvin a je uvolňován do moči i u zdravých jedinců, jak bylo potvrzeno enzymovou imunoanalýzou a „western blot“ analýzou. (Campbell, J. H. a kol. (1961) Cancer (Philadelphia), 67, 1 608-1 613). Jakýkoliv zásah, který poškodí oblast tubulů může způsobit uvolnění alfa-GST do moči, což vede ke zvýšení jeho obsahu v moči nad normální úroveň. Zvýšení hladiny alfa-GST v moči tedy může být výsledkem poškození tubulámí oblasti ledvin. (Sherman, R. A. a kol. (1985) Uremia Investigation, 8,111-115). Práce z poslední doby ukázaly, že cis-platina způsobuje poškození tubulámí oblasti ledvin u krys „Wistar“, které je spojeno se zvýšenou aktivitou alfa-GST v moči a se snížením volného sérového kreatininu (Stojanov, M. a kol. (1994) Clin. Chem., 14, 1 125), u lidí vede akutní nekróza tubulů a imunologický šok při transplantaci ledviny k prudkému nárůstu hladiny jak alfa-GST, tak pí-GST (Sundberg, A. G. M. akol. (1964)Nephron 67, 308-316).
Možnost použití moči jako vzorku tělesné tekutiny pro detekci a stanovení hladiny enzymu, která charakterizuje stupeň poškození ledvin, zvláště určité oblasti ledvin, je velikou výhodou zvláště proti, že získávání tělního vzorku není invazivní. To je obecně velmi důležité, neboť požadavek na stanovení alfa-GST bývá u vážně nemocných pacientů, u kterých je minimalizace jakéhokoliv zbytečného traumatu velice žádoucí.
Dosud je pro stanovení alfa-GST v moči používána radioimunoanalýza, přinášející průvodní nevýhody, vyplývající z použití látek, značených radioaktivním izotopem.
Často není možné po určitou dobu, např. po několik dnů po odebrání vzorku moči, provádět požadované stanovení alfa-GST v moči. Tehdy je nutno skladovat vzorky moči při velmi nízké teplotě, zpravidla okolo -20 °C. Bylo však zjištěno, že u takto skladovaných vzorků dochází ke ztrátě imunoreaktivity a tím k nízké citlivosti imunoanalýzy. Tato ztráta imunoreaktivity je s největší pravděpodobností výsledkem denaturace enzymu při fázovém přechodu mrznutí - tání.
Z toho vyplývá potřeba nalézt médium, umožňující skladování vzorků moči pro stanovení alfa-GST imunoanalýzou při teplotách okolo -20 °C bez podstatné ztráty imunoreaktivity alfa-GST.
Podstata vynálezu
Vynález poskytuje stabilizační médium pro alfa-GST v moči, které zahrnuje neenzymovou bílkovinu, chelatizující činidlo a pufr, takže médium má pH v rozmezí od 7,0 do 7,5, přičemž médium účinně zabraňuje ztrátě imunologické aktivity alfa-GST.
Stabilizační médium podle vynálezu může být použito ke skladování vzorků moči při teplotě okolo -20 °C, aniž by došlo ke snížení imunoreaktivity. Mimoto bylo zjištěno, že stabilizační médium podle vynálezu zlepšuje imunoreaktivitu čerstvé moči, která byla před analýzou přechodně skladována při 2 až 8 °C po dobu nejvýše 2 hodin.
Neenzymová bílkovina je přechodně albumin.
Albumin může být směsí albuminu a hydrolyzovaného albuminu. Vhodným hydrolyzovaným albuminem je hydrolyzovaná želatina. Takové želatinové hydrolyzáty jsou komerčně dostupné 10 například od Sigma Chemicals (Code G-0262, vyrobeno enzymaticky).
Zvlášť výhodným albuminem (nehydrolyzovaným) je sériový albumin, zvláště albumin bovinního séra (BSA).
Výhodnou směsí sérového albuminu a hydrolyzovaného albuminu je směs stejného množství hmot./obj. bovinního sérového albuminu a hydrolyzátu želatiny.
Koncentrace neenzymové bílkoviny je výhodně v rozmezí 5 — 15 % hmotn./obj., zvláště okolo 10 % hmotn./obj.
Chelatizující činidlo je výsledně sůl alkalického kovu a EDTA.
Stabilizační médium výhodně obsahuje sůl v koncentraci mezi 4 až 5 % hmotn./obj. Zvlášť výhodnými solemi jsou soli alkalických kovů, především chlorid sodný.
Zavedení soli jako je chlorid sodný pomáhá při rozpouštění albuminu a/nebo albuminového hydrolyzátu nebo jiných použitých neenzymových bílkovin a současně žádoucím způsobem stabilizuje vlastnosti roztoku.
Ačkoliv není požadováno jakékoli teoretické vysvětlení vynálezu, je zřejmé, že sůl může působit ve smyslu minimalizace „pozadí“ testu, tzn. minimalizace nespecifického vázání.
S výhodou je označeným enzymem peroxidázam, především peroxidáza křenu selského HRP.
Jiným výhodným peroxidázovým konjugátem je biotinizovaný avidin (obsahující streptavidin) peroxidáza komplex, který může být použit s konjugátem specifická protilátka-biotin za účelem zesílení enzymové imunoanalýzy konvenčním způsobem. Při takovém enzymoimulogickém stanovení je nerozpuštěný antigen zakotven na pevné protilátce a navázán je konjugátu specifická protilátka-biotin, který je zase přivázán k biotinizovanému avidin/streptavidin-peroxidáza 40 komplexu, j ehož peroxidázová aktivita j e měřena.
Dále je přednostně k enzymové imunoanalýze použit konjugát specifické protilátky anti-alfaGST IgG-HRP ve formě, stabilní v roztoku, který zahrnuje stabilizační médium, obsahující stabilizující množství cytochromu c, sérového albuminu, povrchově aktivní látky, polyolu 45 a pufru, takže pH tohoto média je přibližně 6,5 a konečná koncentrace polyolu je mezi 5 až 15 % obj.
Cytochrom c je přednostně obsažen v množství od 0,02 do 2 % hmotn./obj. Zatímco koncentrace cytochromu c může být zvýšena nad 2 % hmotn./obj. bez podstatného ovlivnění stabilizace, 50 snížení jeho koncentrace pod 0,02 % hmotn./obj. má za následek snížení stabilizačního účinku.
Cytochromem c je zde myšlen cytochrom, ve kterém jsou mezi postranními řetězci hemové části molekuly a bílkovinou kovalentní vazby.
-2CZ 289955 B6
Stabilizující bílkovinou je přednostně sérový albumin, který je přítomen v množství 0,5 až 2 % hmotn./obj.
Zvláště vhodným sérovým albuminem je albumin bovinního séra (BSA). Zatímco množství BSA může být podobně jako v případě cytochromu c zvýšeno nad 2 % hmotn./obj. bez podstatného ovlivnění stabilizace, snížení jeho koncentrace pod 0,5 % hmotn./obj. má za následek snížení stabilizačního účinku.
Sérový albumin může být nahrazen jinou stabilizační bílkovinou, např. fetálním telecím sérem, které je bohaté na BSA.
Povrchově aktivní látkou je přednostně neionogenní tenzid vybraný z esterů polyoxyetylenu a mastných kyselin, z esterů polyoxyetylenu a kyseliny sorbové, z polyoxyetylenalkoholů a polyoxyetylenizoalkoholů, z etérů a esterů polyoxyetylenu, z polyoxyetylenu-p-t-oktylfenolů nebo kondenzátů oktylfenolu a ethylenoxidu, z kondenzátů etylenoxidu s mastnými alkoholy, polyoxyetylennonylfenolů a směsí polyalkylenových glykolů nebo jejich směsí.
Zvlášť výhodné neionogenní tenzidy obsahují: estery polyetylénu a kyseliny sorbové prodávané pod obchodní značkou „Tween“, zvláště polyoxyetylensorbitanmonolaurát nebo „Tween 20“, ale také „Tween 60“ a „Tween 80“: polyoxyetylenétery prodávané pod obchodní známkou „Triton“, jako je „Triton X100, TritonXl 14, triton XI10E“ a „Triton N101“ a „Brij“, oktylfenyletylenoxid kondenzát prodávaný pod obchodní známkou, „Nonidet P40, kondenzáty etylenoxidu a mastných alkoholů prodávané pod obchodní známkou „Lubrol“, zvláště „Lubrol PX“ a směs 1 hmotn. dílu polyetylenglykolu a 4 hmotn. dílů polypropylenglykolu prodávaná pod obchodní známkou „Synperonic F108“.
Mimořádně výhodnou povrchově aktivní látkou je „Synperonic F108“.
Polyol stabilizuje interakce bílkovina-bílkovina. Výhodnými polyoly jsou glukózám glycerol, mannitol, sorbitol a sacharóza nebo jejich směsi. Zvláště výhodným polyolem je glycerol v celkové koncentraci okolo 10 % obj.
Zvláště výhodným pufrem je fosforečná sůl.
Stabilizační médium pro anti-alfa-GST IgG-HRP konjugát může také obsahovat další aditiva v závislosti na povaze konjugátu, např. různá protimikrobiální a konverzační činidla, inhibitory proteinázy, činidla, která stabilizují vzájemné reakce bílkovina-bílkovina, antioxidanty a barviva, která usnadňují identifikaci.
Vhodná konverzační činidla zahrnují konzervovadla s obsahem merkurothiolátu, známého také jako thiomersal nebo thiomerosal.
Vhodným inhibitorem proteinázy je například inhibitor trypsinu, např. aprotinin.
Vhodným barvivém je karmínové barvivo.
-3CZ 289955 B6
Příklady provedení vynálezu
Vynález je dále ilustrován následujícími příklady.
Nejvýhodnější způsob provedení vynálezu
Příklad 1
Stabilizační médium pro alfa-GST v moči složek:
složka
HEPES
Na2EDTA chlorid sodný BSA hydrolyzát želatiny aprotinin thiomersal azid sodný hodnotou pH 7,3 bylo připraveno z následujících
0,5 M mM
4,5 % hmotn./obj.
% hmotn./obj.
% hmotn./obj.
g/ml
0,01 % hmotn./obj.
0,05 % hmotn./obj.
Všechny výše uvedené složky byly vneseny do deionizované vody o objemu 80 % konečného 15 množství a pH bylo upraveno hydroxidem sodným na hodnotu 7,3. Roztok byl doplněn deionizovanou vodou na konečný objem. V případě, kdy je přidáván BSA a hydrolyzát želatiny je důležité, aby tyto látky byly vnášeny odděleně a je třeba věnovat pozornost tomu, aby první složka byla před přídavkem druhé úplně rozpuštěna.
Takto připravené stabilizační médium se použije pro stabilizaci alfa-GST v moči přidáním jednoho dílu média ke čtyřem dílům moči (1/5 zředění), mírně se zamíchá a zmrazí se při teplotě -20 °C nebo se před analýzou skladuje přechodně při 2 až 8 °C maximálně 2 hodiny.
Příklad 2
Stabilizační médium pro anti-alfa-GST IgG-HRP konjugát o hodnotě pH 6,5 bylo připraveno z následujících složek:
| složka | množství |
| NaCl | 8,000 g |
| NaH2PO4.2H2O | 0,260 g |
| Na2HPO4.2H2O | 1,425 g |
| cytochrom c | 0,250 g |
| Synperonic F108 | 10,000 g |
| BSA | 10,000 g |
| fetální telecí sérum | 25,000 ml |
| thiomersal | 0,100 g |
| gentamicin | 0,100 g |
| karmínové barvivo | 0,930 g |
| koncentrovaná HC1 (nastavení pH) | proměnlivé |
| deioniz. voda (doplnění do 1000 ml) | proměnlivé |
-4CZ 289955 B6
700 ml deionizované vody bylo vneseno do skleněného zásobníku a přidán NaCl, NaH2PO4.2H2O, Na2HPO4.2H2O a thiomersal. Směs byla míchána do rozpouštění všech složek. Potom byl k roztoku přidán Synperonic F108 s následujícím mícháním do rozpuštění tenzidu. Poté bylo zkontrolováno pH roztoku a 5M roztokem HC1 upraveno na hodnotu 6,5. K takto 5 upravenému roztoku byl přidán BSA, po jeho rozpuštění dále fetální telecí sérum s následujícím mícháním až do jeho rozpuštění. Poté byl přidán gentamicin, cytochrom c, karmínové barvivo a roztok byl míchán do rozpuštění těchto tří složek. Opět bylo zkontrolováno pH roztoku a popřípadě upraveno na hodnotu 6,5. Objem roztoku byl doplněn na 1 000 ml a byl zfiltrován přes 0,2 pm filtr, čímž byl připraven ke skladování. Před použitím se k devíti dílům směsi přidá ιό jeden díl glycerolu.
Příklad 3
Stabilita anti-alfa-GST IgG-HRP konjugátu, která je průběžně k dispozici v lyofilizované formě v soupravě pro enzymovou imunoanalýzu fy Biotrin Intemational Ltd. pod obchodní značkou „Nephkit“, byla zkoumána se stabilizačním médiem, připraveným podle příkladu 2. „Nephkit“ test zahrnuje způsob kvantitativního určení alfa-GST v moči a může být průkazným pro poškození tubulámí oblasti ledviny.
Byla zjištěna 100% stabilita i u desetinásobné koncentrace když byl konjugát skladován po hodin při pokojové teplotě ve stabilizačním médiu podle příkladu 2.
Příklad 4
Použití stabilizačního média podle příkladu 1 pro stabilizaci alfa-GST v moči při skladování při -20 °C.
Bylo analyzováno devět vzorků moči (samčí a samičí) se zaměřením na obsah alfa-GST pomocí soupravy „Nephkit“ pro enzymovou imunoanalýzu, produkované fy Biotrin Intemational Ltd, Mount Merrion, County Dublin, Irsko. Výsledky jsou uvedeny ve sloupci 2 tabulky 1.
Poté byly vzorky rozděleny, k jedné sérii bylo přidáno stabilizační médium, připravené podle 35 příkladu 1 (-20 °C (SM)), ke druhé sérii stabilizační médium přidáno nebylo (-20 °C).
Vzorky byly temperovány při -20 °C po dobu tří dnů, potom byly analyzovány pomocí testu „Nephkit“.
Bylo zjištěno že hodnoty, získané u vzorků, skladovaných při teplotě -20 °C ve stabilizačním médiu byly v těsné korekci s hodnotami původních čerstvých vzorků (4 °C). Naopak všechny vzorky, zmražené bez stabilizačního média, vykazovaly úbytek alfa-GST imunoreaktivity. Jak bylo uvedeno výše, tato ztráta imunoreaktivity je s největší pravděpodobností výsledkem denaturace, indukované přechodem mrznutí-tání.
-5CZ 289955 B6
Tabulka 1
Příklad 5
Stabilizace vzorků moči, obohacených alfa-GST
Dva vzorky moči A a B byly obohaceny do pěti různých úrovní alfa-GST (10,25,50,100 a 500 ng/ml) a potom skladovány v přítomnosti stabilizačního média podle příkladu 1 dva dny při teplotě 4 °C a -20 °C. Výsledky jsou uvedeny v tabulce 2 a 3.
Z obsahu tabulek 2 a 3 vyplývá, že přítomnost stabilizačního média chrání alfa-GST před ztrátou 15 imunologické aktivity, což prokázala použitá enzymová imunoanalýza.
Tabulka 2
| vzorek | teplota skladování 4 °C alfa-GST (ng/ml) | teplota skladov. -20 °C (SM) alfa-GST (ng/ml) |
| A: 500 | 191,1 | 507,8 |
| A: 100 | 57,22 | 103,2 |
| A: 50 | 29,48 | 47,11 |
| A: 25 | 15,35 | 25,9 |
| A: 10 | 7,71 | 11,82 |
Tabulka 3
| vzorek | teplota skladování 4 °C alfa-GST (ng/ml) | teplota skladov. -20 °C (SM) alfa-GST (ng/ml) |
| B: 500 | 49,30 | 467,8 |
| B: 100 | 37,30 | 88,95 |
| B: 50 | 17,52 | 45,23 |
| B: 25 | 8,63 | 21,12 |
| B: 10 | 3,40 | 8,26 |
Příklad 6
Byly připraveny dva vzorky označené C 200 a D 200, obsahující 200 ng/ml alfa-GST a přídavek stabilizačního média podle příkladu 1.
-6CZ 289955 B6
Oba vzorky byly potom rozděleny a takto získané části vzorků byly skladovány při teplotě 4 °C a-20 °C.
Po skladování po dva dny byl každý ze vzorků testován při různém zředění (1/40 až 1/320) rozpouštědlem, používaným v „Nephkit“ testu podle příkladu 4. Výsledky jsou uvedeny v tabulkách 4 a 5.
Z výsledků uvedených v tabulkách 4 a 5 vyplývá, že stupeň zředění vzorku nemá vliv na stanoveni alfa-GST a že skladování při teplotě -20 °C je překvapivě lepší než skladování při 4 °C.
Tabulka 4
| vzorek | teplota skladování 4 °C alfa-GST (ng/ml) | teplota skladov. -20 °C (SM) alfa-GST (ng/ml) |
| C 200 (1/40) | 106 | 175 |
| (1/80) | 109 | 185 |
| (1/160) | 104 | 188 |
| (1/320) | 111 | 180 |
Tabulka 5
| vzorek | teplota skladování 4 °C alfa-GST (ng/ml) | teplota skladov. -20 °C (SM) alfa-GST (ng/ml) |
| D 200 (1/40) | 141 | 183 |
| (1/80) | 141 | 183 |
| (1/160) | 134 | 180 |
| (1/320) | 128 | 187 |
PATENTOVÉ NÁROKY
Claims (17)
1. Stabilizační médium pro alfa-GST v moči, vyznačující se tím, že obsahuje stabilizující množství neenzymové bílkoviny, chelatizující činidlo a pufr, má hodnotu pH v rozmezí od 7,0 do 7,5, přičemž médium zabraňuje ztrátě imunologické aktivity alfa-GST.
2. Stabilizační médium podle nároku 1, vyznačující se tím, že neenzymovou bílkovinou je albumin.
3. Stabilizační médium podle nároku 1 nebo 2, vyznačující se tím, že neenzymovou bílkovinou je směs albuminu a hydrolyzovaného albuminu.
4. Stabilizační médium podle nároku 3, vyznačující se tím, že směs je směsí sérového albuminu a hydrolyzovaného albuminu.
5. Stabilizační médium podle nároku 3 nebo 4, v y z n a č u j í c í se t í m, že směs je směsí stejného množství hmotn,/obj. bovinního sérového albuminu a hydrolyzátu želatiny.
6. Stabilizační médium podle jednoho z předchozích nároků 1 až 5, vyznačující se t í m , že koncentrace neenzymové bílkoviny je okolo 10 % hmotn./obj.
7. Stabilizační médium podle jednoho z předchozích nároků 1 až 6, vyznačující se 5 t í m, že chelatizující činidlo je sůl alkalického kovu a EDTA.
8. Stabilizační médium podle nároku 7, vyznačující se tím, že koncentrace soli je 4 až 5 % hmotn./obj.
10 9. Stabilizační médium podle nároku 8, vyznačující setím, že sůl je solí alkalického kovu.
10. Stabilizační médium podle nároku 8 nebo 9, vyznačující se tím, že solí je chlorid sodný.
11. Stabilizační médium podle jednoho z předcházej ících nároků lažlO, vyznačující se t í m, že dále obsahuje inhibitor proteinázy.
12. Stabilizační médium podle jednoho z předcházejících nároků lažll,vyznačující se 20 t í m , že pufr je obojetný pufr.
13. Stabilizační médium podle nároku 12, vyznačující se tím, že pufrem je HEPES.
14. Stabilizační médium podle jednoho z předcházejících nároků lažl3, vyznačující se 25 t í m , že pH pufru má hodnotu 7,3.
15. Způsob kvantitativního stanovení alfa-GST v moči, který zahrnuje kontaktování vzorku moči s nerozpustnou formou anti-alfa-GST IgG, kde vzorek moči byl ošetřen stabilizačním médiem podle jednoho z nároků lažl 4, vyznačující se tím, že se stanovuje množství
30 alfa-GST, vázaného k anti-alfa-GST IgG kontaktováním vázaného alfa-GST s enzymem značeným anti-alfa-GST IgG, a měřením aktivity značkujícího enzymu.
16. Způsob podle nároku 15, vyznačující se tím, že značkujícím enzymem je peroxidáza.
17. Způsob podle nároku 16, vyznačující se tím, že peroxidázou je peroxidáza křenu selského.
18. Způsob podle nároku 17, vyznačující se tím, že konjugát peroxidáza-IgG je ve 40 formě, stabilní v roztoku, stabilizační médium zahrnuje stabilizující množství cytochromu c a stabilizující množství sérového albuminu, povrchově aktivní látku, polyol a pufr, má hodnotu pH okolo 6,5 a konečná koncentrace polyolu je 5 až 15 % obj.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ19971173A CZ289955B6 (cs) | 1994-10-17 | 1994-10-17 | Stabilizační médium pro alfa-GST v moči a způsob jeho stanovení metodou enzymové imunoanalýzy |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ19971173A CZ289955B6 (cs) | 1994-10-17 | 1994-10-17 | Stabilizační médium pro alfa-GST v moči a způsob jeho stanovení metodou enzymové imunoanalýzy |
| PCT/IE1994/000050 WO1996012191A1 (en) | 1994-10-17 | 1994-10-17 | STABILISING MEDIUM FOR αGST IN URINE FOR USE IN AN ENZYME IMMUNOASSAY |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ117397A3 CZ117397A3 (en) | 1997-09-17 |
| CZ289955B6 true CZ289955B6 (cs) | 2002-05-15 |
Family
ID=11042488
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ19971173A CZ289955B6 (cs) | 1994-10-17 | 1994-10-17 | Stabilizační médium pro alfa-GST v moči a způsob jeho stanovení metodou enzymové imunoanalýzy |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6071706A (cs) |
| EP (1) | EP0787300B1 (cs) |
| JP (1) | JPH10507269A (cs) |
| KR (1) | KR970706497A (cs) |
| AU (1) | AU690144B2 (cs) |
| CZ (1) | CZ289955B6 (cs) |
| DE (1) | DE69415560T2 (cs) |
| FI (1) | FI971580A7 (cs) |
| HU (1) | HUT78059A (cs) |
| NO (1) | NO971641L (cs) |
| NZ (1) | NZ274245A (cs) |
| PL (1) | PL176625B1 (cs) |
| RU (1) | RU2142136C1 (cs) |
| WO (1) | WO1996012191A1 (cs) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0949507A4 (en) * | 1996-12-26 | 2000-03-22 | Fuji Yakuhin Kogyo Kk | AGENTS FOR TREATING URINE SAMPLES |
| US6977140B1 (en) | 1998-09-29 | 2005-12-20 | Organ Recovery Systems, Inc. | Method for maintaining and/or restoring viability of organs |
| US6492103B1 (en) | 2000-01-31 | 2002-12-10 | Organ Recovery Systems, Inc. | System for organ and tissue preservation and hypothermic blood substitution |
| GB0023057D0 (en) | 2000-09-20 | 2000-11-01 | Randox Lab Ltd | Liquid reagent |
| CN100434515C (zh) * | 2005-12-23 | 2008-11-19 | 上海复星长征医学科学有限公司 | 酶复合稳定剂 |
| JP5515740B2 (ja) | 2007-09-27 | 2014-06-11 | 国立大学法人 新潟大学 | 尿中タンパク質定量用の尿前処理剤、尿前処理方法、及び尿中タンパク質定量方法。 |
| MX2014001468A (es) * | 2011-08-11 | 2014-06-04 | Otsuka Pharma Co Ltd | Metodo para el pretratamiento de una muestra biologica que contiene una proteina. |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4273756A (en) * | 1978-07-28 | 1981-06-16 | Abbott Laboratories | Immunoassay for class specific antibodies |
| JPH025763A (ja) * | 1989-04-10 | 1990-01-10 | Kayaba Ind Co Ltd | 可変型油圧モータ |
| US5278316A (en) * | 1989-06-29 | 1994-01-11 | Warner-Lambert Company | N-substituted cycloalkyl and polycycloalkyl alpha-substituted Trp-Phe- and phenethylamine derivatives |
| JPH0425763A (ja) * | 1990-05-21 | 1992-01-29 | Maruko Seiyaku Kk | グルタチオンＳ―トランスフェラーゼπの定量方法および診断のための試薬 |
| US5264419A (en) * | 1990-08-31 | 1993-11-23 | Warner-Lambert Company | N-substituted cycloalkyl and polycycloalkyl α-substituted TRP derivatives |
| US5217868A (en) * | 1992-05-01 | 1993-06-08 | Syncor Limited | Measurement of an enzyme marker as an aid to diagnosis of liver transplant rejection |
| JP3029376B2 (ja) * | 1994-07-15 | 2000-04-04 | 株式会社東芝 | プライオリティエンコ−ダ |
| US5817497A (en) * | 1996-11-26 | 1998-10-06 | Incyte Pharmaceuticals | Glutathione s-transferase |
| US5874248A (en) * | 1997-08-21 | 1999-02-23 | Incyte Pharmaceuticals, Inc. | Glutathione S-transferase homolog |
-
1994
- 1994-10-17 FI FI971580A patent/FI971580A7/fi unknown
- 1994-10-17 AU AU78219/94A patent/AU690144B2/en not_active Ceased
- 1994-10-17 EP EP94929002A patent/EP0787300B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-10-17 WO PCT/IE1994/000050 patent/WO1996012191A1/en not_active Ceased
- 1994-10-17 HU HU9901091A patent/HUT78059A/hu unknown
- 1994-10-17 CZ CZ19971173A patent/CZ289955B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1994-10-17 KR KR1019970701871A patent/KR970706497A/ko not_active Withdrawn
- 1994-10-17 JP JP8513079A patent/JPH10507269A/ja active Pending
- 1994-10-17 RU RU97107455A patent/RU2142136C1/ru active
- 1994-10-17 US US08/817,696 patent/US6071706A/en not_active Expired - Fee Related
- 1994-10-17 DE DE69415560T patent/DE69415560T2/de not_active Expired - Fee Related
-
1997
- 1997-04-10 NO NO971641A patent/NO971641L/no not_active Application Discontinuation
- 1997-04-17 NZ NZ274245A patent/NZ274245A/en unknown
- 1997-04-17 PL PL94319969A patent/PL176625B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE69415560T2 (de) | 1999-06-24 |
| RU2142136C1 (ru) | 1999-11-27 |
| FI971580L (fi) | 1997-04-15 |
| KR970706497A (ko) | 1997-11-03 |
| DE69415560D1 (de) | 1999-02-04 |
| PL176625B1 (pl) | 1999-07-30 |
| PL319969A1 (en) | 1997-09-01 |
| AU7821994A (en) | 1996-05-06 |
| WO1996012191A1 (en) | 1996-04-25 |
| JPH10507269A (ja) | 1998-07-14 |
| AU690144B2 (en) | 1998-04-23 |
| FI971580A0 (fi) | 1997-04-15 |
| NO971641D0 (no) | 1997-04-10 |
| FI971580A7 (fi) | 1997-04-15 |
| HUT78059A (hu) | 1999-07-28 |
| EP0787300B1 (en) | 1998-12-23 |
| CZ117397A3 (en) | 1997-09-17 |
| EP0787300A1 (en) | 1997-08-06 |
| US6071706A (en) | 2000-06-06 |
| NZ274245A (en) | 1998-11-25 |
| NO971641L (no) | 1997-04-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Upadhya et al. | Evidence of a role for matrix metalloproteinases in cold preservation injury of the liver in humans and in the rat | |
| JP5422108B2 (ja) | ヘムタンパク質の安定化方法及び保存溶液 | |
| US4919889A (en) | Sample collection and transport fluid composition | |
| RU2142136C1 (ru) | СТАБИЛИЗИРУЮЩАЯ СРЕДА ДЛЯ α-GST В МОЧЕ И СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОЛИЧЕСТВА α-GST В МОЧЕ | |
| US4448882A (en) | Stabilized peroxidase compositions | |
| EP2031390B1 (en) | Stabilizing agent and blocking agent | |
| JP4039590B2 (ja) | ヘモグロビン試料の安定化 | |
| JP4392486B2 (ja) | ハプトグロビンの分析方法 | |
| Lorenz et al. | Problems in the assay of histamine release by gelatin: o-Phthaldialdehyde-induced fluorescence, inhibition of histamine methyltransferase and H1-receptor antagonism by Haemaccel | |
| Geisert et al. | Characterization and proteolytic activity of a cathepsin L-like polypeptide in endometrium and uterine flushings of cycling, pregnant and steroid-treated ovariectomized gilts | |
| Balldin et al. | Influence of Plasma Protease Inhibitors and Trasylol on Trypsin-Induced Bradykinin-Release in vitro and in vivo: Protease Inhibitors and Trypsin-Induced Bradykinin Release | |
| JP2003014768A (ja) | ヘムタンパク質の安定化方法および保存溶液 | |
| JP2009258081A (ja) | ミオグロビン含有水溶液 | |
| CA2202773A1 (en) | Stabilising medium for .alpha.gst in urine for use in an enzyme immunoassay | |
| EP0110722B1 (en) | A heat-stable aqueous solution of human urine kallikrein | |
| JP2000352565A (ja) | 尿検体中のアナライトの安定化方法およびこれに用いる保存剤 | |
| JPH09224942A (ja) | ヒトヘモグロビンの安定化方法 | |
| US20200377572A1 (en) | Method for stabilizing hemoglobin-haptoglobin complex and a preservation solution for preserving specimens containing hemoglobin | |
| JPH1160600A (ja) | 尿中ミオグロビンの安定化方法、安定化剤およびこれを応用した免疫学的測定方法 | |
| JP2001249132A (ja) | ヘムタンパク質の安定化方法 | |
| CN1164279A (zh) | 用于酶免疫测定检测尿中的αGST的稳定化介质 | |
| Backman et al. | The excretion of carbonic anhydrase isozymes CAI and CAII in the urine of apparently healthy subjects and in patients with kidney disease | |
| Petersson et al. | Characterization of immunoreactive trypsinogen activation peptide in urine in acute pancreatitis | |
| IE860696L (en) | Preparing stable natural matrices | |
| Scopes | Maintenance of active enzymes |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20021017 |
|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20041017 |