CZ291378B6 - Pseudopeptidové sloučeniny jako antitrombotické látky, farmaceutické prostředky obsahující tyto sloučeniny a meziprodukty - Google Patents

Abstract

Pseudopeptidové sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém A znamená atom vodíku, amidinovou nebo substituovanou amidinovou skupinu, R znamená atom vodíku, alkylovou skupinu, arylovou skupinu nebo aralkylovou skupinu, m je 1 až 5, n je 0 až 6 a p je 1 až 4, přičemž B a Z mají řadu významů specifikovaných v popisu. Tyto sloučeniny projevují antitrombotickou účinnost. Do rozsahu řešení rovněž náleží farmaceutický prostředek k léčení nebo prevenci trombózy obsahující účinné množství této sloučeniny. Rovněž do rozsahu řešení náleží meziprodukty vhodné k přípravě těchto sloučenin.ŕ

Description

Oblast techniky

Vynález se týká azacykloalkvlalkanoylpeptidů a -pseudopeptidů, látek s antitrombotickou účinností, které zabraňují shlukování krevních destiček a tvorbě trombů u savců, dále farmaceutických prostředků obsahujících tyto sloučeniny a meziproduktů používaných při přípravě těchto sloučenin. Výše uvedené sloučeniny jsou použitelné při prevenci i léčbě trombotických stavů v souvislosti s onemocněními, jako je infarkt myokardu, mrtvičný záchvat, periferální arteriální onemocnění a roztroušená intravaskulámí koagulace.

Dosavadní stav techniky

Hemostáza, tedy biochemie krevní srážlivosti, je mimořádně složitý komplex, kdy normální krevní oběh a tělní tkáně spontánním způsobem zastavují krvácení poškozených krevních cév. Účinná hemostáza zahrnuje společnou součinnost vaskulámích, destičkových i plasmatických faktorů, jakož i kontrolních mechanismů, aby se předešlo nadměrnému krvácení. Nedostatek, selhání nebo nadměmost kterékoli z těchto složek může vést k hemoragickým nebo trombotickým důsledkům.

Shlukování krevních destiček, jejich rozptýlení a shlukování na extracelulámích matricích jsou hlavními příčinami tvorby trombů. Tyto příhody jsou zprostředkovávány skupinou adhezivních glykoproteinů, například fibrinogenu, fibronektinu a von Willebrandova faktoru. Fibrinogen je kofaktorem shlukování krevních destiček, zatímco fibronektin podporuje spojování krevních destiček a reakce jejich rozptylování, von Willebrandův faktor je důležitý z hlediska spojování krevních destiček i jejich rozptylování do subendotheliálních matricí. Vazná místa pro fibrinogen, fibronektin a von Willebrandův faktor jsou umístěna na proteinovém komplexu membrány krevních destiček, což je známo pod označením glykoprotein Ilb/IIIa.

Adhezivní glykoproteiny, jako je fibrinogen, se nevážou na normální zbylé krevní destičky. Ovšem, je-li krevní destička aktivována agonistickým činidlem, jako je trombin nebo adenosindifosfát, pak se tvar destičky změní, snad za tvorby vazného místa GPIIb/IIIa, jež je přístupné fibrinogenu. Sloučeniny spadající do rozsahu tohoto vynálezu blokují fibrinogenové receptory, takže znemožňují shlukování krevních destiček s následnou tvorbou trombů, a pokud se podávají ve formě farmaceutických přípravků obsahujících tyto sloučeniny, pak jsou použitelné při prevenci i léčbě trombogenických onemocnění, jako je infarkt myokardu, mrtvice, periferální arteriální onemocnění a rozptýlená intravaskulámí koagulace.

Podle dosavadního stavu techniky bylo zjištěno, že přítomnost Arg-Gly-Asp (RGD) je nutná ve fibrinogenu, fibronektinu a von Willebrandově faktoru při jejich interakcích s receptory buněčného povrchu (viz Ruoslahti E., Pierschbacher, Cell, 44, 517 - 78. 1986). Zdá se, že při spojování krevních destiček hrají důležitou roli rovněž dvě jiné další sekvence aminokyselin, a sice hlavně sekvence Gly-Pro-Arg a dodekapeptid His-His-Leu-Gly-Gly-Ala-Lys-Gln-AlaGly-Asp-Val. Ukázalo se, že malé syntetické peptidy obsahující RGD nebo dodekapeptid se vážou na receptory GPIIb/IIIa a tím inhibují navázání fibrinogenu, fibronektinu a von Willebrandova faktoru, jakož i inhibují vůbec shlukování aktivovaných krevních destiček, viz Plow a kol., Proč. Nati. Acad. Sci. USA 82, 8057 - 61, 1985; Ruggeri a kol., Proč. Nati. Acad. Sci. USA 1986, 5708 - 12, Ginsberg a kol., J. Biol. Chem. 280, 3931 - 36 (1985) a Gartner a kol., J. Biol. Chem. 260, 11.89194, 1987).

Z dosavadního stavu techniky je známo, že indolylové deriváty, obsahující guanidinoalkanoyla guanidinoalkenoylaspartylové části jsou inhibitory shlukování krevních destiček, viz Tjoeng a kol., patenty US 5 037 808 a 4 879 313.

V patentu US 4 992 463 (Tjoeng a kol.), z 12. 02. 1991, se obecně uvádí, že se řada aryla aralkylguanidinalkylpeptidů jako mimetických sloučenin projevuje účinnost při inhibování shlukování krevních destiček, přičemž konkrétně se zde popisuje řada mono- adimethoxyfenylpeptidomimetických sloučenin a bifenylalkylpeptidomimetických sloučenin.

V patentu US 4 857 508 (Adams a kol.), z 15. 08. 1989, se obecně uvádí, že řada guanidinalkylpeptidových derivátů obsahujících koncové aralkylové substituenty vykazuje účinnost při inhibování shlukování krevních destiček, přičemž se zde konkrétně uvádí řada O-methyltyrosinových, bifenylových a naftylových derivátů, obsahujících koncové amidové funkční skupiny.

V publikaci Haverstick D. M. a kol. Blood66, č. 4, 946-952 (1986) se uvádí, že určitý počet syntetických peptidů, včetně Arg-Glu-Asp-Ser a Gly-Arg-Gly-Asp-Ser je schopen inhibovat shlukování krevních destiček vyvolané trombinem.

V publikaci Plow E. F. a kol. Proč. Nati. Acad. Sci. USA 79, 3711 - 3715 (1982) se uvádí, že tetrapeptid glycyl-L-propyl-L-arginyl-L-prolin inhibuje vázání fibrinogenu a lidské krevní destičky.

Rovněž je známo z dosavadního stavu techniky, že tetra-, penta- a hexapeptidové deriváty, obsahující sekvenci -Arg-Gly-Asp-jsou vhodné jako antitrombotické přípravky.

V patentu US 4 683 291 (Zimmermann a kol.), z 28. 07. 1987, se uvádí, že řada peptidů se šesti až čtyřiceti aminokyselinami obsahujících sekvenci -Arg-Gly-Asp-, jsou inhibitory shlukování krevních destiček.

V evropské zveřejněné patentové přihlášky EPO 319 506 ze 07. 06. 1989 je známo, že řada tetra-, penta- a hexa-peptidových derivátů obsahujících sekvenci -Arg-Gly-Asp- patří rovněž do skupiny inhibitorů shlukování krevních destiček.

Analogy cyklických peptidů obsahující sekvenci Gly-Asp- jsou uváděny jako fibrinogenní receptory a jejich antagonisty v patentu US 5 023 233.

Rovněž jsou z dosavadního stavu techniky známy peptidy a pseudopeptidy obsahující amino-, guanidino-, imidizaloyl- a/nebo amidinoalkanoyl a -alkenoylové části, které jsou prezentovány jako antitrombotická činidla, což rovněž potvrzuje patent US 4 952 562 a v mezinárodní zveřejněná patentová přihláška WO 91/04746 z 26. 09. 1990, jejichž autoiy jsou stejní autoři jako u předmětného vynálezu.

Peptidy a pseudopeptidy, obsahující amino- a guanidinalkyl- a alkenylbenzoylové, fenylalkanoylové a fenylalkenoylové části jsou uváděny jako antitrombická činidla v mezinárodní zveřejněné patentové přihlášce PCT/U891/02471 z 11.04.1990, zveřejněné pod číslem WO 92/13117 z 20. 10. 1992, jejímiž autoiyjsou stejní autoři jako u předmětného vynálezu.

Alkanoyl- a substituované alkanoylazacykloalkylformylderiváty kyseliny asparagové jsou popisovány jako inhibitory shlukování krevních destiček v patentu US 5 053 392 z 01. 12. 1989, jejímiž autory jsou stejní autoři jako u předmětného vynálezu.

N-Substituované azacykloalkylkarbonylcyklické deriváty kyseliny aminoacylasparagové jsou uváděny jako antitrombická činidla v patentu US 5 064 014 z 05. 04. 1990, jejímiž autory jsou stejní autoři jako u předmětného vynálezu. Jako antitrombotická činidla jsou uváděny i deriváty

-2CZ 291378 B6 kyseliny azacykloalkylformylglycylasparagové, viz patent US 5 051 405 z 10. 10. 1989, jejímiž autory jsou stejní autoři jako u předmětného vynálezu.

Ve zveřejněné evropské patentové přihlášce EP 0 479 481 z 08. 04. 1992 se popisují azacykloalkylalkanoylglycyl-asparagylaminokyseliny jako antagonisty receptoru fibrinogenu.

Ve zveřejněné evropské patentové přihlášce EP 0 478 362 z 01.04. 1992 jsou popisovány jako antagonisty receptoru fibrinogenu azacykloalkylalkanoylpeptidyl-[3-alaniny.

Podstata vynálezu

Předmětný vynález se týká azacykloalkylalkanoylpeptidů a pseudopeptidů, které inhibují shlukování krevních destiček a tím i předcházejí tvorbě trombů.

Tyto pseudopeptidové sloučeniny podle předmětného vynálezu mají obecný vzorec I:

ch₂cooh ve kterém:

(I)

A znamená atom vodíku, amidinovou skupinu nebo substituovanou amidinovou skupinu,

B znamená alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, alkylarylovou skupinu nebo alkylaralkylovou skupinu,

Z znamená skupinu obecného vzorce

ve kterém:

E znamená atom vodíku nebo spolu s F tvoří čtyřčlenný, pětičlenný, šestičlenný nebo sedmičlenný azacykloalkanový kruh,

F znamená α-uhlíkový postranní řetězec v přírodě se vyskytující α-aminokyseliny, atom vodíku, alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, substituovanou arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, substituovanou aralkylovou skupinu, heterocyklylovou skupinu, substituovanou heterocyklylovou skupinu, heterocyklylalkylovou skupinu, substituovanou heterocyklylalkylovou skupinu, nebo spolu s E tvoří čtyřčlenný, pětičlenný, šestičlenný nebo sedmičlenný azacykloalkanový kruh,

G znamená alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, substituovanou arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, substituovanou aralkylovou skupinu, heterocyklylovou skupinu, substituovanou heterocyklylovou skupinu, heterocyklylalkylovou skupinu, substituovanou heterocyklylalkylovou skupinu vzorce OR¹ nebo NR*R², kde R¹ a R² znamenají navzájem na sobě nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, alkylarylovou skupinu nebo alkylaralkylovou skupinu, r je 0 nebo 1,

R znamená atom vodíku, alkylovou skupinu, arylovou skupinu nebo aralkylovou skupinu, m je 1 až 5, n je 0 až 6, a

P je 1 až 4, přičemž termín alkylová skupina, samostatně nebo v kombinaci, znamená alkylovou skupinu obsahující 1 až 20 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina, samostatně nebo v kombinaci, znamená cykloalkylovou skupinu obsahující 3 až 10 atomů uhlíku, aryl, samostatně nebo v kombinaci, znamená fenylovou skupinu nebo naftylovou skupinu, heterocyklylovou skupinou, samostatně nebo v kombinaci, se míní čtyřčlenný až patnáctičlenný monocyklický nebo multicyklický kruhový systém, ve kterém jeden nebo více atomů v kruhu znamená jiný prvek než uhlík vybraný ze skupiny zahrnující dusík, kyslík a síru, substituovaná amidinová skupina může být N-substituovaná na jednom nebo obou atomech dusíku jedním nebo více substituenty vybranými ze souboru zahrnujícího alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu a aralkylovou skupinu, ve kterých alkylová, cykloalkylová a arylová skupina samostatně nebo ve složených skupinách mají stejný význam jako je uvedeno shora, arylová skupina může být substituovaná substituenty vybranými ze skupiny zahrnující alkylovou skupinu, alkenylovou skupinu, alkinylovou skupinu, arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu, aryloxyskupinu, aralkoxyskupinu, hydroxyalkylovou skupinu, acylovou skupinu, formylovou skupinu, karboxyskupinu, alkenoylovou skupinu, aroylovou skupinu, halogeny, nitroskupinu, trihalogenmethylovou skupinu, kyanoskupinu, alkoxykarbonylovou skupinu, aryloxykarbonylovou skupinu, aralkoxykarbonylovou skupinu, acylaminovou skupinu, aroylaminovou skupinu, karbamoylovou skupinu, alkylkarbamoylovou skupinu, dialkylkarbamoylovou skupinu, arylkarbamoylovou skupinu, aralkylkarbamoylovou skupinu, alkylsulfonylovou skupinu, alkylsulfínylovou skupinu, arylsulfonylovou skupinu, arylsulfinylovou skupinu, aralkylsulfonylovou skupinu, aralkylsulfinylovou skupinu a skupinu -NR_aR_b, ve které R_a a R_b jsou nezávisle vybrány ze souboru zahrnujícího vodík, alkylovou skupinu, arylovou skupinu a aralkylovou skupinu, přičemž alkylové a arylové skupiny mají stejný výše uvedený význam, a substituenty heterocyklylové skupiny jsou stejné jako u arylové skupiny,

-4CZ 291378 B6 jakož i odpovídající farmaceuticky přijatelné soli.

Výhodné jsou podle vynálezu pseudopeptidové sloučeniny výše uvedeného obecného vzorce I, ve kterém:

F znamená atom vodíku, alkylovou skupinu, hydroxymethylovou skupinu, 1-hydroxyethylovou skupinu, merkaptomethylovou skupinu, 2-methylthioethylovou skupinu, karboxymethylovou skupinu, 2-karboxyethylovou skupinu, 4-aminobutylovou skupinu, 3-guanidinopropylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, substituovanou arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, substituovanou aralkylovou skupinu, heterocyklylovou skupinu, substituovanou heterocyklylovou skupinu, heterocyklylalkylovou skupinu, substituovanou heterocyklylalkylovou skupinu, nebo spolu s E tvoří čtyř-, pěti-, šesti- nebo sedmičlenný azacykloalkanový kruh, stou podmínkou, že heterocyklylalkylová skupina má jiný význam než indol-3-ylmethylová skupina, přičemž alkylová, cykloalkylová, arylová a heterocyklylová skupina samostatně nebo ve složených skupinách mají stejný význam jako je uvedeno shora.

Z této skupiny jsou výhodné pseudopeptidové sloučeniny ve kterých:

F znamená atom vodíku, alkylovou skupinu, hydroxymethylovou skupinu, 1-hydroxyethylovou skupinu, merkaptomethylovou skupinu, 2-methylthioethylovou skupinu, karboxymethylovou skupinu, 2-karboxyethylovou skupinu, 4-aminobutylovou skupinu, 3-guanidinopropylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, substituovanou arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, substituovanou aralkylovou skupinu, nebo spolu s E tvoří čtyř-, pěti—, šesti- nebo sedmičlenný azacykloalkanový kruh, přičemž alkylová, cykloalkylová, arylová skupina a substituovaná arylová skupina samostatně nebo ve složených skupinách mají stejný význam jako je uvedeno shora.

Z této užší skupiny jsou výhodné pseudopeptidové sloučeniny, ve kterých:

F znamená atom vodíku, alkylovou skupinu, hydroxymethylovou skupinu, 1-hydroxyethylovou skupinu, merkaptomethylovou skupinu, 2-methylthioethylovou skupinu, karboxymethylovou skupinu, 2-karboxyethylovou skupinu, 4-aminobutylovou skupinu, 3-guanidinopropylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, nebo spolu s E tvoří čtyř-, pěti-, šesti- nebo sedmičlenný azacykloalkanový kruh, přičemž alkylová a cykloalkylová skupina samostatně nebo ve složených skupinách mají stejný význam jako je uvedeno shora.

Z této užší podskupiny jsou výhodné pseudopeptidové sloučeniny, ve kterých:

B znamená alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu nebo alkylcykloalkylalkylovou skupinu, přičemž alkylová a cykloalkylová skupina samostatně nebo ve složených skupinách mají stejný význam jako je uvedeno výše v souvislosti se sloučeninami obecného vzorce I.

-5CZ 291378 B6

Podle vynálezu jsou rovněž výhodné pseudopeptidové sloučeniny obecného vzorce II:

J

CH2COOH (II) ve kterém:

A znamená atom vodíku nebo amidinovou skupinu,

B znamená alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, alkylarylovou skupinu nebo alkylaralkylovou skupinu,

J znamená atom vodíku, alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, substituovanou arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, substituovanou aralkylovou skupinu,

L znamená skupinu vzorce OR¹ nebo NR*R², kde R¹ a R² navzájem na sobě nezávisle znamenají atom vodíku, alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, alkylarylovou skupinu nebo alkylaralkylovou skupinu, m je 1 až 5, n je 2 až 6, p je 1 nebo 2, přičemž alkylová, cykloalkylová, arylová a substituovaná arylová skupina samostatně nebo ve složených skupinách mají stejný význam jako je uvedeno výše v souvislosti se sloučeninami obecného vzorce I, a farmaceuticky přijatelné soli odvozené od těchto sloučenin.

Z této skupiny jsou výhodné pseudopeptidové sloučeniny uvedeného obecného vzorce II, ve kterém:

A znamená atom vodíku,

B znamená alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu nebo alkylcykloalkylalkylovou skupinu,

J znamená atom vodíku, alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu nebo alkylcykloalkylalkylovou skupinu m je 3 a

-6CZ 291378 B6 n je 3 nebo 4, přičemž alkylová a cykloalkylová skupina samostatně nebo ve složených skupinách mají stejný význam jako je uvedeno shora u obecného vzorce I.

Z této užší skupiny jsou rovněž výhodné pseudopeptidové sloučeniny obecného vzorce II, ve kterém:

A znamená atom vodíku,

B znamená alkylovou skupinu,

J znamená alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu nebo cykloalkylalkylovou skupinu,

R¹ a R² znamenají navzájem na sobě nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, m je 3 a n je 3 nebo 4, a

P je 1, přičemž alkylová a cykloalkylová skupina samostatně nebo ve složených skupinách mají stejný význam jako je uvedeno u obecného vzorce 1.

Rovněž jsou podle vynálezu ze skupiny sloučenin obecného vzorce II výhodné pseudopeptidové sloučeniny kterými jsou konkrétně:

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-valin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-D-valin,

N-[N-[N-(3-(piperidinX-yl)-propanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-valin,

N-[N-[N-(5-(piperidin-4-yl)-pentanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-valin,

N-[N-[N-(4-(pip^eridin-4-yl)-butanoyl}-N-ethylglycyl]asparaginyl]-L-a-cyklohexylglycin,

N-[N-[N-(4-(P>P^er>din-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-p-cyklohexylalanin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-norleucin,

N-[N-[N-(4-(piperidin—4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-L-a-(2,2-dimethyl)prop-3-yl-glycin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyI)-N-ethylglycyl]asparaginyi]-L-[3-cis-dekahydronaft2-ylalanin, kyselina N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl}-butanoyl)-N-ethylglycyl]-asparaginyl]-a-aminocyklohexankarboxylová,

N-[N-[N-(4-(pip^eridin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-P-cyklohexyl-D-alanin,

N-[N-[N-(4-(piperidin^-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-p-dekahydronaft-l-ylalanin,

N-[N-[N-(4-(piperidin—4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-p-cyklooktylalanin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-[3-adamant-l-ylalanin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-[3-(4-cyklohexyl)-cyklohexylalanin,

N-[N-[N-(4-(piperidin^-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-[3-cykloheptylalanin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-a-cyklohexylpropylglycin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-|3-cyklooktylmethylalanin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4~yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-3-cyklopentylalanin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethyIglycyl]asparaginyl]-L-P-dekahydronaft-l-ylalanin, nebo

N-[N-[N-(4-(piperidin^l-yl)-butanoyl)-N-ethylglycy]]asparaginyl]-L-a-(2-cyklohexylethyl)-glycin, nebo farmaceuticky přijatelné soli odvozené od těchto sloučenin.

Rovněž jsou podle vy nálezu výhodné pseudopeptidové sloučeniny výše uvedeného obecného vzorce II, kterými jsou konkrétně:

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl}-N-ethylglycyl]asparaginyl]fenylalanin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-P-(l,2,3,4)-tetrahydronaft-5-ylalanin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-L-[J-naft-l-ylalanin, nebo

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-L-p-naft-2-ylalanin, nebo farmaceuticky přijatelné soli odvozené od těchto sloučenin.

Rovněž jsou podle vynálezu výhodné pseudopeptidové sloučeniny výše uvedeného obecného vzorce II, kterými jsou konkrétně:

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-L-(3-cyklohexylalaninamid,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-p-cyklooktylalaninamid,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-[3-cyklohexylmethylalaninamid, nebo

-8CZ 291378 B6

N-[N-[N-(4-(piperidin^-yl)butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]“P-cyklohexylalaninethylamid, nebo farmaceuticky přijatelné soli odvozené od těchto sloučenin.

Podle vy nálezu jsou dále výhodné konkrétně další pseudopeptidové sloučeniny:

ethylester N-[N-[N-(4-(piperidin^4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]-asparaginyl]-L-p-cyklohexylalaninu, ethylester N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]-asparaginyl]-[3-cyklohexylmethylalaninu, nebo kyselina 3-adamant-l-ylpropyl-N-[N-(4-(piperidin-4-yl)butanoyl)-N-ethylglycyl]-asparagová, nebo farmaceuticky přijatelné soli odvozené od těchto sloučenin.

Dalšími výhodnými pseudopeptidovými sloučeninami výše uvedeného obecného vzorce I podle vynálezu jsou konkrétně:

2-cyklohexyl-N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]-asparaginyl]-ethylamin, nebo

N-[N-[N-(4-(piperidin^l-yl)butanoyl)-N-ethylglycyl]-asparaginyl]-a-cyklohexylmethylethanolamin, nebo farmaceuticky přijatelné soli odvozené od těchto sloučenin.

Do rozsahu předmětného vynálezu rovněž náleží farmaceutický prostředek, který obsahuje antitromboticky účinné množství pseudopeptidové sloučeniny výše uvedeného obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelné soli a farmaceuticky přijatelnou nosičovou látku.

Do rozsahu předmětného vynálezu rovněž náleží farmaceutický prostředek k léčbě trombózy, který obsahuje antitromboticky účinné množství pseudopeptidové sloučeniny výše uvedeného obecného vzorce II nebo její farmaceuticky přijatelné soli a farmaceuticky přijatelnou nosičovou látku.

Do rozsahu předmětného vynálezu rovněž náleží farmaceutický prostředek k prevenci trombózy, který obsahuje antitromboticky účinné množství pseudopeptidové sloučeniny výše uvedeného obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelné soli a farmaceuticky přijatelnou nosičovou látku.

Do rozsahu předmětného vynálezu rovněž náleží farmaceutický prostředek k prevenci trombózy, který obsahuje antitromboticky účinné množství pseudopeptidové sloučeniny výše uvedeného obecného vzorce II nebo její farmaceuticky přijatelné soli a farmaceuticky přijatelnou nosičovou látku.

-9CZ 291378 B6

Do rozsahu předmětného vynálezu rovněž náleží pseudopeptidové sloučeniny obecného vzorce III:

(III) ve kterém:

B znamená alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu alkylcykloalkylalkylovou, arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, alkylarylovou skupinu nebo alkylaralkylovou skupinu,

E' znamená atom vodíku nebo tvoří spolu s F' čtyř-, pěti-, šesti- nebo sedmičlenný azacykloalkanový kruh, nebo jeho chráněný analog nebo prekurzorové substituenty pro takový kruh,

F' znamená α-uhlíkový postranní řetězec v přírodě se vyskytující α-aminokyseliny, atom vodíku, alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, substituovanou arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, substituovanou aralkylovou skupinu, heterocyklylovou skupinu, substituovanou heterocyklylovou skupinu, heterocyklylalkylovou skupinu, substituovanou heterocyklylalkylovou skupinu, nebo tvoří spolu s E' čtyř-, pěti-, šesti- nebo sedmičlenný azacykloalkanový kruh, nebo jeho chráněný analog nebo prekurzorové substituenty pro takový kruh,

G' znamená alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, substituovanou arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, substituovanou aralkylovou skupinu, heterocyklylovou skupinu, substituovanou heterocyklylovou skupinu, heterocyklylalkylovou skupinu, substituovanou heterocyklylalkylovou skupinu, skupinu OR¹ nebo NR R², kde R¹ a R² znamenají navzájem na sobě nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, alkylarylovou skupinu nebo alkylaralkylovou skupinu, nebo její chráněný analog nebo prekurzorové substituenty pro takový kruh, r je 0 nebo 1, p je 1 až 4, a

P₂ je aminokyselinová chránící skupina, přičemž alkylová, cykloalkylová, arylová skupina, heterocyklylová skupina, substituovaná arylová skupina a substituovaná heterocyklylová skupina, samostatně nebo ve složených skupinách, mají stejný význam jako je uvedeno v nároku 1, představující meziprodukt pro přípravu sloučenin výše definovaného obecného vzorce I.

-10CZ 291378 B6

Jako meziprodukty jsou dále výhodné pseudopeptidové sloučeniny ve kterých:

B znamená alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, alkylarylovou skupinu nebo alkylaralkylovou skupinu,

E' znamená atom vodíku nebo jeho chráněný analog nebo jeho prekurzorové substituenty,

F' znamená atom vodíku, alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, substituovanou arylovou skupinu, aralkylovou nebo substituovanou aralkylovou skupinu, nebo odpovídající chráněný analog nebo prekurzorové substituenty pro takový kruh,

G' znamená skupinu OR¹ nebo NR^², kde R¹ a R² znamenají navzájem na sobě nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, alkylarylovou skupinu nebo alkylaralkylovou skupinu, r je 1 a p je 1 nebo 2, přičemž alkylová, cykloalkylová, arylová skupina a substituovaná arylová skupina, samostatně nebo ve složených skupinách, mají stejný význam jako je uvedeno v souvislosti se sloučeninami obecného vzorce I.

Sloučeniny podle předmětného vynálezu jsou zřetelně lepší než dosud známé látky, neboť tyto sloučeniny výše uvedeného obecného vzorce I mají delší antitrombotickou účinnost, což bylo pozorováno při jejich perorálním podávání.

V textu předmětného vynálezu byly použity některé termíny, které mají tyto dále uvedené významy, pokud není výslovně uvedeno jinak:

Amidino znamená skupinu vzorce - C = NH

I nh₂ pokud je tato skupina substituovaná, tedy N-substituovaná na jednom z dusíkových atomů nebo na obou, pak substituentem může být jedna skupina nebo více skupin vybraných ze souboru zahrnujícího alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu a aralkylovou skupinu.

Výraz „alkylová skupina“ znamená alifatickou uhlovodíkovou skupinu, s přímým nebo větveným řetězcem s jedním až asi 20 atomy uhlíku. Termín rozvětvený řetězec znamená, že na přímý alkylový řetězec je navázána nižší alkylová skupina, jako je například methylová skupina, ethylová skupina nebo propylová skupina. Výhodnými přímými nebo rozvětvenými alkylovými skupinami jsou nižší skupiny, tedy skupina s jedním až asi deseti atomy uhlíku. Nejvýhodnějšími nižšími alkylovými skupinami jsou skupiny s jedním až asi šesti atomy uhlíku.

Výraz „cykloalkylová skupina“ značí nasycenou karbocyklickou skupinu s jedním či více kruhy obsahující asi tři až asi deset atomů uhlíku. Jako výhodné cykloalkylové skupiny lze uvést

-11 CZ 291378 B6 cyklopropylovou skupinu, cyklobutylovou skupinu, cyklopentylovou skupinu, cyklohexylovou skupinu, cykloheptylovou skupinu a dekahydronaftylovou skupinu.

„Cykloalkylalkylová skupina“ znamená alkylovou skupinu substituovanou cykloalkylovou skupinou. Výhodnými cykloalkylalkylovými skupinami jsou cyklopentylmethylová skupina, cyklohexylmethylová skupina, cyklohexylethylová skupina, dekahydronaft-l-yl-methylová skupina a dekahydronaft-2-ylmethylová skupina.

„Alkylcykloalkylová skupina“ znamená cykloalkylovou skupinu substituovanou alkylovým zbytkem. Jako příklady alkylcykloalkylových skupin je možno uvést 1-, 2-, 3-, nebo 4-methylnebo -ethylcyklohexylovou skupinu.

„Alkylcykloalkylalkylová skupina“ znamená alkylovou skupinu substituovanou alkylcykloalkylovým zbytkem. Jako příklady těchto alkylcykloalkylalkylových skupin je možno uvést skupinu 1-, 2-, 3-, nebo 4-methyl- nebo -ethylcyklohexylmethylovou skupinu nebo 1-, 2-, 3-, nebo 4-methyl- nebo -ethylcyklohexylethylovou skupinu.

„Azacykloalkan“ znamená nasycený alifatický kruh, obsahující atom dusíku. Výhodnou azacykloalkanovou skupinou je pyrrolidinový kruh nebo piperidinový kruh.

Mezi „v přírodě se vyskytující α-aminokyseliny“ patří glycin, alanin, valin, leucin, izoleucin, serin, threonin, fenylalanin, tyrosin, tryptofan, cystein, methionin, prolin, hydroxyprolin, kyselina asparagová, asparagin, glutamin, kyselina glutamová, histidin, arginin, omithin a lysin.

„Postranní řetězec na α-uhlíku v přírodě se vyskytující a-aminokyseliny“ znamená část, která představuje substituent na α-uhlíku v přírodě se vyskytující a-aminokyseliny. Jako příklad těchto postranních řetězců na α-uhlíku v přírodě se vyskytujících a-aminokyselin je možno uvést izopropylovou skupinu, methylovou skupinu a karboxymethylovou skupinu v případě valinu, alanínu resp. kyseliny asparagové.

Výrazem „aryl“ se míní fenylová skupina nebo naftylová skupina.

„Substituovanou arylovou skupinou“ se míní fenylová nebo naftylová skupina, které jsou substituovány jedním nebo více substituenty arylové skupiny, které mohou být stejné nebo rozdílné, přičemž tímto termínem „substituenty arylové skupiny“ se míní alkylové skupiny, alkenylové skupiny, alkinylové skupiny, arylové skupiny, aralkylové skupiny, hydroxylová skupina, alkoxylové skupiny, aryloxylové skupiny, aralkoxylové skupiny, hydroxyalkylové skupiny, acylové skupiny, formylová skupina, karboxylová skupina, alkanoylová skupina, aroylová skupina, halogeny, nitroskupina, trihalogenethylové skupiny, kyanoskupina, alkoxykarbonylové skupiny, aryloxykarbonylové skupiny, aralkoxykarbonylové skupiny, acylaminoskupiny, aroylaminoskupiny, karbamoylová skupina, alkylkarbamoylové skupiny, dialkylkarbamoylové skupiny, arylkarbamoylové skupiny, aralkylkarbamoylové skupiny, alkylsulfonylové skupiny, alkylsulfínylové skupiny, arylsulfonylové skupiny, arylsulfinylové skupiny, aralkylsulfonylové skupiny, aralkylsulfinylové skupiny nebo skupiny obecného vzorce -NR_aR_b, kde R_a a Rb znamenají vzájemně nezávisle vodík, alkylovou skupinu, arylovou skupinu nebo aralkylovou skupinu.

Výraz „aralkylová skupina“ znamená alkylovou skupinu substituovanou arylovým zbytkem. Mezi výhodné aralkylové skupiny tohoto typu patří benzylová skupina, naft-l-ylmethylová skupina, naft-2-ylmethylová skupina a fenethylová skupina.

Substituovanou aralkylovou skupinou je míněna aralkylová skupina substituovaná na arylové části jedním nebo více substituenty arylové skupiny.

-12CZ 291378 B6

Termínem „heterocyklylová skupina“ se míní čtyř až asi patnáctičlenný monocyklický nebo multicyklický kruhový systém, kde jeden nebo více z atomů v kruhu je jiný než uhlík, například dusík, kyslík nebo síra. Jako výhodné heterocyklylové skupiny je možno označit pyridylovou skupinu, pyrimidylovou skupinu a pyrrolidylovou skupinu.

Termín „substituovaná heterocyklylová skupina“ značí heterocyklylovou skupinu substituovanou jedním nebo více substituenty arylové skupiny.

Termín „heterocyklylalkylová skupina“ a „substituovaná heterocyklylalkylová skupina“ znamená alkylovou skupinu substituovanou heterocyklylovou skupinou, případně substituovanou heterocyklylovou skupinou.

Výhodnou skupinu sloučenin podle tohoto vynálezu tvoří sloučeniny obecného vzorce I, kde F znamená vodík, alkylovou skupinu, hydroxymethylovou skupinu, 1-hydroxyethylovou skupinu, merkaptomethylovou skupinu, 2-methylthioethylovou skupinu, karboxymethylovou skupinu, 2-karboxyethylovou skupinu, 4-aminobutylovou skupinu, 3-guanidinopropylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, substituovanou arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, substituovanou aralkylovou skupinu, heterocyklylovou skupinu, substituovanou heterocyklylovou skupinu, heterocykh lalkylovou skupinu, substituovanou heterocyklylalkylovou skupinu, nebo v kombinaci s E tvoří čtyř-, pěti-, šesti- nebo sedmičlenný azacykloalkanový kruh, s podmínkou, že heterocyklylalkylová skupina není indol-3-methylová skupina.

Ještě výhodnější skupinu sloučenin podle tohoto vynálezu z výhodných látek obecného vzorce I představují sloučeniny, ve kterých F znamená vodík, alkylovou skupinu, hydroxymethylovou skupinu, 1-hydroxyethylovou skupinu, merkaptomethylovou skupinu, 2-methylthioethylovou skupinu, karboxymethylovou skupinu, 2-karboxyethylovou skupinu, 4-aminobutylovou skupinu, 3-guanidinopropylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, substituovanou arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, substituovanou aralkylovou skupinu, nebo v kombinaci s E tvoří čtyř-, pěti-, šesti- anebo sedmičlenný azacykloalkanový kruh.

A ještě výhodnější skupinu tvoří látky podle tohoto vynálezu z výhodných sloučenin obecného vzorce I tvoří sloučeniny, ve kterých F znamená vodík, alkylovou skupinu, hydroxymethylovou skupinu, 1-hydroxyethylovou skupinu, merkaptomethylovou skupinu, 2-methylthioethylovou skupinu, karboxymethylovou skupinu, 2-karboxyethylovou skupinu, 4-aminobutylovou skupinu, 3-guanidinopropylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, nebo v kombinaci s E tvoří čtyř-, pěti- šesti nebo sedmičlenný azacykloalkanový kruh.

Nejvýhodnější skupinu sloučenin podle předmětného vynálezu představují sloučeniny z dříve popsaných sloučenin, ve kterých B znamená alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu nebo alkylcykloalkylalkylovou skupinu.

- 13CZ 291378 B6

Speciální skupinu sloučenin podle předmětného vynálezu představují, jak již bylo uvedeno, sloučeniny obecného vzorce II:

J

CH2COOH (II) ve kterém mají A, B, J, L, m, n, p stejný význam, jako bylo uvedeno shora v souvislosti se sloučeninami obecného vzorce II, a farmaceuticky přijatelné soli odvozené od těchto sloučenin.

Jako reprezentativní příklady těchto výhodných sloučenin obecného vzorce II podle vynálezu je možno uvést následující sloučeniny:

N- {N- {N-[4-(piperidin-4-y l)-butanoy l]-N-ethy lglycy 1} asparaginy 1} -val in,

N-{N-{N-[4-(piperidin—4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl}-D-valin,

N-{N-{N-[3-(piperidin-4-yl)-propanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl}-valin,

N-{N-{N-[5-(piperidin-4-yl)-pentanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl}-valin,

N-{N-{N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl}-L-a-cyklohexylglycin,

N-{N-{N-[4-(piperidin-4-yl}-butanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl}-p-cyklohexylalanin,

N-{N-{N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl}-norleucin,

N-[N-{N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl-L-a-(2,2-dimethyl)prop-3-yl}-glycin,

N-(N-{N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl}-L-(3-dekahydronaft-lyl-alanin,

N-{N-{N-[4-(piperidin-4—yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl}-L-a-(2-cyklohexylethyl}—glycin,

N-{N-{N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl}-fenylalanin,

N-{N-{N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl}-L-p-naft-l-ylalanin,

N-{N-{N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl}-L-P-naft-2-yIalanin,

N-{N-{N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl}-L-P-cyklohexylalanylamid, ethylester N-{N-{N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}-asparaginyl}-L~3-cyklohexylalaninu,

- 14CZ 291378 B6

2- cyklohexyl-N-{N-{N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}-asparaginyl}-ethylamin,

N-{N-{N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl}-L-p-cis-dekahydronaft-2-ylalanin,

3- adamant-l-ylpropyl-N-{N-[4-(piperidin-4-yl)butanoyl]-N-ethylglycyl}-aspartát, kyselina N-{N-{N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}-asparaginyl}-a-aminocyklohexankarboxylová,

N-{N-{N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl}-p-cyklohexyl-D-a!anin,

N-{N-{N-[4-(piperidin^l-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl)-[3-dekahydronaft-l-ylalanin,

N-{N-{N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl}-f}-cyklohexylalanylethylamid,

N-{N-{N-[4-(piperidin^l-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl}-p-cyklooktylalanin,

N-{N-{N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl}-a-cyklohexylmethylethanolamid,

N-{N-{N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl}-p-cyklohexylmethylalanylamid,

N-{N-{N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl}-P-adamant-l-ylalanin,

N-{N-{N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycy!}asparaginyl}-p-(l,2,3,4)-tetrahydronaft-5-ylalanin,

N-{N-{N-[(4-piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl}-|3-(4-cyklohexyl)cyklohexylalanin,

N-{N-{N-[4-(piperidin^l-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl}-p-cykloheptylalanin,

N-{N-{N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl}-|3-cyklooktylalanylamid,

N-{N-{N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyi}-a-cyklohexylpropylglycin,

N-{N-{N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl}-P-cyklooktylmethylalanin,

N-{N-{N-[4-(piperidin^l-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}asparaginyl}-P-cyklopentylalanin, a ethylester N-{N-{N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}-asparaginyl}-p-cyklohexylmethylalaninu, jakož i jejich odpovídající farmaceuticky vhodné soli.

-15CZ 291378 B6

Sloučeniny podle tohoto vynálezu obsahují asymetrická centra a tato asymetrická centra mohou být nezávisle v poloze konfigurace R nebo S. Do rozsahu předmětného vynálezu náleží jak individuální stereoizomery tak i jejich směsi.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu se mohou používat ve formě volných bází nebo kyselin nebo ve formě jejich farmaceuticky vhodných solí. Všechny tyto formy spadají do rozsahu tohoto vynálezu.

Pokud je sloučenina podle tohoto vynálezu substituována bazickou částí, potom je možno 10 připravit adiční soli s kyselinami, které jsou jednoduše pohodlnější formou k použití. V praxi to znamená použít soli v převážné míře z volných bazických forem. Mezi kyseliny, které lze použít pro přípravu adičních solí s kyselinami, je možno s výhodou zařadit takové kyseliny, které v kombinaci s volnou bází představují farmaceuticky přijatelnou formu soli, to znamená že anion takové soli je netoxický vůči organizmu savce ve farmaceuticky podávané dávce soli, přičemž 15 přínosné antitrombické vlastnosti vlastní báze nejsou rušeny či dotčeny vedlejšími účinky, které by bylo možno připsat tomuto aniontu. I když je třeba pokládat za výhodné farmaceuticky přijatelné soli uvedených bazických sloučenin, mohou být jako zdroj volné bazické formy použity všechny adiční soli s kyselinami, dokonce i v případech, kdy tato konkrétní sůl jako taková je požadována pouze jako meziprodukt, jako je tomu například v případech, kdy tato sůl 20 je připravována pouze pro účely čištění a identifikace nebo kdy je použita jako meziprodukt k přípravě farmaceuticky přijatelné soli postupy iontové výměny. Farmaceuticky přijatelné soli, které náleží do rozsahu tohoto vynálezu, jsou odvozeny od dále uvedených kyselin: anorganických, jako je například kyselina chlorovodíková, sírová, fosforečná a sulfamová, nebo organických, jako je kyselina octová, citrónová, mléčná, vinná, malonová, methansulfonová, 25 ethansulfonová, benzensulfonová, p-toluensulfonová, cyklohexylsulfamová, chinová apod. Mezi odpovídající adiční soli kyselin patří tedy hydrochloridy, sírany, fosforečnany, sulfamáty, acetáty, vínany, mléčnany, malonany, methansulfonáty, ethansulfonáty, benzensulfonáty, p-toluensulfonáty, cyklohexylsulfamáty, jakož i soli kyseliny citrónové a chinové.

Adiční soli kyselin odvozených od sloučenin podle tohoto vynálezu se připravují buď rozpuštěním volné báze ve vodném nebo vodně-alkoholickém roztoku, nebo i jiných rozpouštědlech obsahujících vhodnou kyselinu v odpovídajícím množství a izolováním soli zahuštěním roztoku, nebo reakcí volné báze s kyselinou v organickém rozpouštědle a v takovém případě se sůl buď vyloučí přímo, neboje možno ji izolovat zahuštěním roztoku.

Pokud je sloučenina podle tohoto vynálezu substituována acidickou částí, potom je možno připravit adiční soli s bázemi, které jsou jednoduše pohodlnější formou pro použití. V praxi použití formy soli znamená použití této acidické formy. Mezi báze, kterých lze použít k přípravě adičních solí s bázemi, je možno zařadit takové báze, které tvoří v kombinaci s volnými 40 kyselinami farmaceuticky přijatelné soli, to znamená soli, jejichž kation není toxický vůči organizmu zvířat ve farmaceutických dávkách těchto solí, přičemž přínosné antitrombické vlastnosti vlastní volné kyseliny nejsou rušeny či dotčeny vedlejšími účinky, které by bylo možno připsat tomuto kationtu. Farmaceuticky přijatelné soli v rozsahu tohoto vynálezu jsou takové soli, které je možno připravit použitím těchto dále uvedených bazických látek: hydroxid sodný, 45 hydroxid draselný, hydroxid vápenatý, hydroxid hlinitý, hydroxid lithný, hydroxid hořečnatý, hydroxid zinečnatý, amoniak, ethylendiamin, N-methylglykamin, lysin, arginin, omithin, cholin, Ν,Ν'-dibenzylethyldiamin, chlorprokain, diethanolamin, prokain, N-benzylfenylethylamin, diethylamin, piperazin, tris(hydroxymethyl)aminomethan, tetramethylamoniumhydroxid a podobně.

Kovové soli sloučenin podle tohoto vynálezu je možno připravit použitím volné kyselé formy sloučeniny podle tohoto vynálezu, na kterou se působí hydroxidem, uhličitanem či jinou reaktivní sloučeninou zvoleného kovu ve vodném rozpouštědle. Tímto vodným rozpouštědlem může být buď voda, nebo směs vody s organickým rozpouštědlem, s výhodou s alkoholem, jako je 55 methanol nebo ethanol, s ketonem, jako je aceton, s etherem alifatické povahy, jako je například

-16CZ 291378 B6 tetrahydrofuran nebo s esterem, jako je například ethylester kyseliny octové. Tyto reakce se provádějí obvykle za teploty místnosti, ale mohou se provést v případě potřeby při zahřívání.

Aminové soli, představující deriváty sloučenin podle předmětného vynálezu, se mohou připravit za použití aminu ve vodném roztoku z volné kyselé formy sloučeniny podle vynálezu. Vhodným vodným roztokem je přitom voda nebo směsi vody s alkoholy, jako je například methanol nebo ethanol, s ethery, jako je například tetrahydrofuran, s nitrily jako je třeba acetonitril, s ketony, jako je například aceton. Podobným způsobem je možno připravit soli aminokyselin.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu se připravují podle reakčního schématu, kteiý je blíže popsán dále, neboje možno tyto sloučeniny připravit za použití postupů, které jsou jinak obecně známé z dosavadního stavu techniky. Výchozí sloučeniny používané k přípravě sloučenin podle tohoto vynálezu jsou buď látkami známými nebo běžně obchodně dostupnými, nebo se tyto látky dají připravit běžně známými postupy podle dosavadního stavu techniky nebo je možno použít specifických reakčních schémat, která jsou uvedena v dalším textu.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu je možno snadno připravit za použití běžných peptidových syntéz v pevné nebo kapalné fázi, a sice za použití výchozích látek a/nebo snadno dostupných meziproduktů získaných přímo od výrobců, jako je Aldrich nebo Sigma (H. Paulsen, G. Merz, V. Wichart „Solid-Phase Synthesis of O-Glycopeptide Sequences“, Angew. Chem. Int. Edit. 27 (1988), H. Mergier, R. Tanner, J. Gosteli a P. Grogg „Peptide Synthesis by a Combination ofSolid-Phase and Solution Methods: „A New Věry Acid-Labile Anchor Group for the Solid-Phase Synthesis of Fully Protected Fragments, Tetrahydr. Letters 29, 4005, 1988), R. B. Merrifield, „Solid Phase Peptide Synthesis After 25 Years, The Design and Synthesis of Antagonists ofGlucagon“, Macromol. Chem. Macromol. Symp. 19, 31 (1988).

Výhodný postup přípravy sloučenin podle tohoto vynálezu prováděný v roztoku, je znázorněn na následujícím schématu č. I.

-17CZ 291378 B6

Schéma I

O

II

Ρη —NH—CH—C—OH I

CH,—C—O II o

E’ F’ kondenzace ------------->

O E’ F’ li I I P.—NH—CH—C—N—CH

I ch₂^-op₂ o

odstranění chránících skupin

O

II + P₃—N—(CH₂)p—C—OH

B

1) kondenzace

2) odstranění chránících skupin

Η—N—(CH,) I

B

II

O E’ F’ II

CH,—C-OP, II

- 18CZ 291378 B6

1) kondenzace

2) odstranění chránících skupin

-------------------------------->

(C(R)2)m	0	0 E	0
	0
			II	il	II 1	II
N--		(CH2) n	-C—N—(CH2)p-		—NH—CH—C—N—CH 1 1	-c

ch₂cooh f

kde

A, Β, E, F, G, R, m, n, p a r mají stejné významy, jako bylo uvedeno shora, a

A', E', F', G' a R' znamenají odpovídajícím způsobem A, E, F, G a R nebojsou to jejich chráněné analogy nebo jejich prekurzorové substituenty, a

Pi, P₂ a P₃ znamenají skupiny chránící aminokyselinu.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou obecně dostupné počáteční kondenzací vhodné aminokyseliny a dalšího vhodného meziproduktu se skupinou Z, kde Z má stejný význam jako bylo uvedeno shora, jež obsahuje volnou primární nebo sekundární aminoskupinu stím, že kondenzace proběhne na části svolnou karboxylovou skupinou chráněného derivátu kyseliny 15 asparagové.

Funkční skupiny kyseliny asparagové a kterákoli funkční skupina na části Z prekurzoru, pokud se nemají zúčastnit kondenzace, se chrání chránícími skupinami nezbytnými k blokování těchto skupin tak, aby se tak předešlo nežádoucím vedlejším reakcím během tohoto kondenzačního 20 postupu, jako je tomu v případě derivátů aminokyselin a derivátů azacykloalkylalkanových, použitých v dalších reakčních stupních. Mezi tyto blokující neboli chránicí skupiny je možno zařadit Ν-α-terc-butyl-oxykarbonylovou skupinu (BOC), benzyloxykarbonylovou skupinu (OBZ), benzylovou skupinu, methylovou skupinu, terc-butylovou skupinu, 9-fluorenylmethyloxykarbonylovou skupinu (FMOC), 2-(trimethylsilyl)ethylovou skupinu a 4-methoxy-2,3,6-tri25 methylbenzensulfonylovou skupinu.

Za výhodný chráněný derivát kyseliny asparagové je možno označit BOC β-benzylester kyseliny asparagové. Kondenzaci je možno provést metodami všeobecně známými z dosavadního stavu

-19CZ 291378 B6 techniky. Výhodnou variantou provádění kondenzační reakce je kombinování aminu a karboxylové kyseliny ve vhodném aprotickém organickém rozpouštědle, jako je například methylenchlorid nebo dimethylformamid (DMF), a sice za přítomnosti vhodného kondenzačního činidla. Takovýmto výhodným činidlem je izopropylester kyseliny chlormravenčí, přičemž reakce probíhá v přítomnosti N-methylpiperidinu. Dalším výhodným kondenzačním činidlem je hydrochlorid l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu (EDC), který je použit v přítomnosti 1-hydroxybenzotriazolu (HOBT) a triethylaminu. Dalším výhodným kondenzačním činidlem je chlorid kyseliny bis-(2-oxo-3-oxazolidinyl)-fosfonové (BOP-C1), který je použit v přítomnosti triethylaminu.

Takto získaný výsledný produkt s chránícími skupinami se selektivně zbaví těchto chránících skupin běžně známými postupy z dosavadního stavu techniky, takže se tím získá N-koncový volný amin části kyseliny asparagové. Výhodným postupem odstraňování BOC skupiny je reakce s kyselinou trifluoroctovou v aprotickém organickém rozpouštědle, jako je například methylenchlorid.

Takto získaný výsledný produkt zbavený chránících skupin se pak použije při kondenzaci sN-chráněným a N-substituovaným derivátem glycinu nebo β-alaninu, který má volnou karboxylovou skupinu. Získaný produkt se potom zbaví N-chránicích skupin. V dalším postupu se takto získaný volný amin kondenzuje s vhodně chráněnou kyselinou azacykloalkylalkanovou, přičemž získaný produkt se zbaví chránících skupin známými postupy a získá se tak konečný produkt.

Podle dalšího výhodného postupu se mohou sloučeniny podle tohoto vynálezu připravovat postupy v pevné fázi, přičemž se použije běžně známých metod z dosavadního stavu techniky. Při provádění tohoto postupu v pevné fázi se C-koncový zbytek váže na karboxylovou části na nerozpustnou pryskyřici, například se může tento zbytek vázat jako ester p-alkoxybenzylalkoholové pryskyřice. Při dalším postupu, který je podobný postupu ve fázi roztoku, se přidá chráněná aminokyselina nebo další jiný zbytek najednou, přičemž dojde k vytvoření úplné sekvence na pryskyřici. Sloučenina se potom zbaví chránících skupin a uvolní se z pryskyřice použitím běžných postupů, přičemž se takto získá konečná požadovaná sloučenina.

V průběhu přípravy sloučenin podle tohoto vynálezu nebo jejich odpovídajících meziproduktů může vhodné nebo dokonce to může být nezbytné předejít vedlejším reakcím mezi chemicky aktivními substituenty, a to jinými, než jsou na v přírodě se vyskytujících nebo na jiných aminokyselinách. Takové substituenty je možno chránit běžnými chránícími skupinami, které lze potom možno podle potřeby odstranit nebo zachovat v molekule, přičemž se použije běžně známých postupů podle dosavadního stavu techniky, takže se tak získají konečné žádoucí produkty či meziprodukty, viz např. publikace Green „Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, New York, 1981. Selektivní chránění nebo selektivní odstranění chránících skupin může být nutné nebo vhodné při konverzi nebo odstranění stávajících substituentů, nebo aby bylo možno provést následnou reakci vedoucí k získání požadovaného konečného produktu.

Příklady provedení vynálezu

Vynález bude v dalším blíže vysvětlen s pomocí konkrétních příkladů provedení, které jsou ovšem pouze ilustrativní a nijak neomezují rozsah tohoto vynálezu. Pokud to nebude výslovně uvedeno, pak α-aminokyseliny, které mohou mít chirální α-uhlíkový atom mají konfiguraci L.

Pokud není uvedeno jinak, pak uvedené údaje hmotnostní spektrální analýzy byly provedeny metodou „Low Resolution Fast Atom Bombardment“ na přístroji VG 7OSE a „vypočtené“ hodnoty jsou (M+H)⁺. Hodnoty nukleární magnetické resonance byly pořízeny na přístroji Brucker 300 v prostředí D₂O. Mžiková chromatografie byla prováděna na silikagelu. Vysoko

-20CZ 291378 B6 účinná kapalinová chromatografie (HPLC) byla prováděna na koloně DynamaxóO Ξ, 8μ C-18 s reverzními fázemi.

Příklad 1

N-[N-[N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]-asparaginyl]-p-cyklohexylamin

HN

COOH

A. V 50 ml methanolu se rozpustí 1,12 g β-cyklohexylalaninu a roztokem se probublává 15 minut plynný chlorovodík. Roztok se dále zahustí ve vakuu, azeotropně se destiluje s toluenem a získá se tak ve formě soli chlorovodíkové kyseliny methylester β-cyklohexyl-Lalaninu.

B. Roztok 1,27 g β-benzylesteru kyseliny Ν-α-terc-butyloxykarbonyl-L-asparagové v 20 ml methylenchloridu se ochladí na 0 °C a po přidání 0,48 ml N-methylpiperidinu se dále přidává 3,94 ml izopropylesteru kyseliny chlormravenčí. Získaný roztok se míchá asi 2 minuty při 0 °C, přidá se 0,88 g hydrochloridu methylesteru β-cyklohexyl-L-alaninu, teplota roztoku se nechá vystoupit na teplotu místnosti a směs se míchá po dobu noci. Po zahuštění roztoku ve vakuu se zbytek rozděluje mezi 200 ml ethylesteru kyseliny octové a 50 ml IN roztoku kyseliny chlorovodíkové, organická vrstva se promyje IN roztokem chlorovodíkové kyseliny, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, solankou a po vysušení bezvodým síranem sodným a filtrací se zahuštěním filtrátu ve vakuu a získá methylester N-a-benzyloxykarbonyl-L-asparaginyl((3-benzylester)-|3-cyklohexyl-L-alaninu.

C. V prostředí 15 ml methylenchloridu se rozpustí 2,01 g právě získané sloučeniny, roztok se ochladí na 0 °C a během asi minuty se přidává 5 ml kyseliny trifluoroctové, roztok se potom dále míchá 2 hodiny při 0 °C, zahustí se ve vakuu a zbytek se rozpustí v ethylesteru kyseliny octové. Získaný roztok se promývá nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, až podíly z promývání reagují alkalicky. Organický roztok se promyje dále solankou, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým, a po filtraci se zahuštěním filtrátu ve vakuu získá methylester L-asparaginyl-|3-benzylesteru-(3-cyklohexyl-L-alaninu.

D. Za použití v podstatě téhož kondenzačního postupu, jako v příkladu 1 B zde výše, s následným odstraněním chránících skupin jako v příkladu 1 C zde výše, se připraví methylester N-ethylglycyl-L-asparaginyl-p-benzylesteru-L-P-cyklohexyl-L-alaninu z methylesteru Lasparaginyl-p_benzylesteru-p-cyklohexyl-L-alaninu a N-a-terc.-butyloxykarbonyl-N-ethylglycinu.

E. V prostředí 100 ml kyseliny octové se smíchá 10 g kyseliny 4-pyridinoctové a 1,0 g oxidu platičitého, a směs se protřepává asi 18 hodin v atmosféře vodíku 340 KPa. Po filtraci se čirý roztok zahustí ve vakuu, zbytek se azeotropně vydestiluje s toluenem a získá se tak kyselina 2-(piperidin-4-yl)-octová.

F. Roztok 11,0 g kyseliny 2-(piperidin-4-yl)-octové v 200 ml 1 N vodného roztoku hydroxidu sodného se ochladí na 0 °C, přikapává se roztok 18,0g di-terc-butylesteru kyseliny uhličité

-21 CZ 291378 B6 v 100 ml tetrahydrofuranu, teplota reakční směsi se nechá vystoupit na teplotu místnosti a reakční směs se míchá pak 18 hodin. Tetrahydrofuran se vydestiluje ve vakuu, zbytek se rozpustí ve vodě, roztok se promyje ethylesterem kyseliny octové, vrstva ethylesteru kyseliny octové se smísí s vodnou vrstvou a vše se okyselí přidáním IN roztoku kyseliny chlorovodíkové. Organický podíl se oddělí, vodná vrstva se extrahuje do ethylesteru kyseliny octové, spojený organický roztok se promyje vodou a solankou, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým a po filtraci se zahuštěním filtrátu ve vakuu získá kyselina N-a-terc-butyloxykarbonyl-2-(piperidin-4-yl)octová.

G. V 150 ml tetrahydrofuranu se rozpustí 15,8 g kyseliny N-a-terc-butyloxykarbonyl-2(piperidin-4-yl)-octové, přikapává se 70 ml 1M roztoku boranu v tetrahydrofuranu. roztok se míchá asi 20 hodin za teploty místnosti a potom se přikapává 200 ml IN roztoku hydroxidu sodného. Tetrahydrofuran se dále vydestiluje ve vakuu, vodný zbytek se extrahuje do ethylesteru kyseliny octové, roztok v tomto rozpouštědle se promyje vodou, vysuší se bezvodým síranem sodným, filtruje, a zahuštěním filtrátu ve vakuu se takto získá N-a-terc-butyloxykarbonyl-2(piperidin-4-yl)-ethanol.

H. Roztok 11,8 g oxalylchloridu v 180 ml methylenchloridu se vychladí na -78 °C, přikapává se 8,9 ml dimethylsulfoxidu, reakční směs se míchá při -78 °C asi 3 minuty a v průběhu asi 10 minut se pomalu přidává roztok 14,3 g N-a-terc-butyloxykarbonyl-2-(piperidin-4-yl)ethanolu v 250 ml methylenchloridu. Dále se roztok míchá asi hodinu, během asi 15 minut se přidává 21,6 g N-methylmorfolinu, reakční směs se nechá vytemperovat na teplotu místnosti a potom se asi po 30 minutách přidá 68,6 g methylesteru kyseliny (trifenylfosforanyliden)octové. Získaný roztok se míchá za teploty místnosti asi 18 hodin a po zahuštění ve vakuu se zbytek rozpustí v ethylesteru kyseliny octové. Získaný roztok se promyje vodou, 5% roztokem kyseliny chlorovodíkové, 5% roztokem chlornanu sodného, vodou, solankou, vysuší se bezvodým síranem sodným a po filtraci se zahuštěním filtrátu ve vakuu izoluje methylester kyseliny 4-(N-a-terc-butyloxykarbonylpiperidin-4-yl)-trans-krotonové.

I. V 200 ml methanolu se rozpustí ll,6g methylesteru kyseliny 4-(N-a-terc-butyloxykarbonyl-piperidin-4-yl)-trans-krotonové, přidají se 3 g 10% palladia na uhlí a pod vodíkem se reakční směs protřepává 18 hodin za tlaku 340 KPa. Po filtraci se k filtrátu přidá čerstvý katalyzátor, hydrogenace se opakuje, směs se filtruje a zahuštěním filtrátu se izoluje methylester kyseliny 4-(N-a-t-butyloxykarbonyl-piperidin-4-yl)-máselné.

J. Ve směsi 100 ml IN vodného roztoku hydroxidu sodného a 200 ml methanolu se rozpustí 10,1 g methylesteru kyseliny 4-(N-a-terc-butyloxykarbonyl-piperidin-4-yl)-máselné a takto připravená reakční směs se míchá 18 hodin za teploty místnosti. Po zahuštění ve vakuu se zbytek zředí vodou, vodný podíl se promyje etherem, dále se vodný podíl okyselí přidáním 5% roztoku kyseliny chlorovodíkové, okyselená směs se extrahuje do ethylesteru kyseliny octové, organický roztok se potom promyje vodou, solankou, vysuší se bezvodým síranem sodným a po filtraci se zahuštěním filtrátu ve vakuu izoluje kyselina 4-(N-a-terc-butyloxykarbonyl-piperidin-4-yl)máselná.

K. Roztok 0,91 g právě uvedené kyseliny v 50 ml methylenchloridu se ochladí na 0 °C, přidá se 0,86 g chloridu kyseliny bis-(2-oxo-3-oxazolidinyl)-fosfinové s 0,47 ml triethylaminu a získaná směs se míchá 10 minut při 0 °C. Dále se přidá roztok 1,52 g methylesteru N-ethylglycyl-Lasparaginyl(P-benzylesteru)-L-p-cyklohexyl-L-alaninu v nejmenším možném množství methylenchloridu a během asi 15 minut se přikapává roztok 0,47 ml triethylaminu v methylenchloridu. Hodinu se reakční směs míchá za chlazení na 0 °C, potom 18 hodin za teploty místnosti, zahustí se ve vakuu a zbytek se zředí přidáním ethylesteru kyseliny octové. Organický roztok se promyje IN roztokem kyseliny chlorovodíkové, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, solankou a po vysušení bezvodým síranem hořečnatým, s následující filtrací, se filtrát zahustí ve vakuu. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií za

-22CZ 291378 B6 eluování 60% ethylesteru kyseliny octové v hexanu a získá se tak methylester N-[N-[N-[4-(N-a-terc-butyloxakarbonyl-piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl([3-benzylesteru)]-n-cyklohexylalaninu.

L. V 40 ml methanolu se rozpustí 1,79 g methylesteru N-[N-[N-[4-(N-a-terc-butyloxykarbonyl)-piperidin^l-yl]-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl([3-benzylester)-p-cyklohexylalaninu, přidá se k roztoku 0,25 g 10% palladia na uhlí, a směs se protřepává v atmosféře vodíku 340 KPa po 18 hodin. Po filtraci vrstvou celitu se filtrát zahustí ve vakuu a získá se tím methylester N-{N-{N-[4-N-a-terc-butyloxykarbonyl-piperidin^l-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl}-asparaginyl-p-cyklohexylalaninu, který se rozpustí v 20 ml methanolu a po přidání 10 ml IN vodného roztoku hydroxidu sodného se reakční směs míchá za teploty místnosti 4 hodiny. Dále se zředí vodou (25 ml), roztok se okyselí přidáním IN roztoku kyseliny chlorovodíkové na pH 2, vše se extrahuje třemi podíly po 100 ml ethylesteru kyseliny octové, roztok v tomto rozpouštědle se po vysušení bezvodým síranem horečnatý m a filtraci zahustí ve vakuu a získá se tak N-{N-{N-[4-(N-a-terc-butyloxykarbonyl-piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycy 1 }-asparaginy 1} -β-cyklohexy lalan in.

M. Roztok 1,39 g N-[N-[N-[4-(N-a-terc-butyloxykarbonyl]-piperidin-4-yl]-butanoyl]-Nethylglycyl]-asparaginyl-3-cyklohexylalaninu v 15 ml methylenchloridu se ochladí na 0 °C, a po přidání 5 ml kyseliny trifluoroctové se roztok míchá 2,5 hodin při 0 °C. Po dalším zahuštění reakční směsi ve vakuu se zbytek zředí vodou, zmrazí a lyofilizuje. Zbytek se čistí reversní vysokotlakovou kapalinovou chromatografií za eluování gradientem 40% až 80% methanolu ve vodě s obsahem 0,1 % kyseliny trifluoroctové. Odpovídající vhodné frakce se potom spojí a lyofilizováním se získá sůl N-[N-[N-(4-piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]-asparaginyl]-P_cyklohexylalaninu s kyselinou trifluoroctovou, mol. hmotnost vyp. 525, nal. 525.

NMR: δ = 4,58- 4,48 (m, 1H), 4,35 -4,22 (m, 1H), 3,88 (s, 2H), 3,32 (q, 2H), 3,28 -3,10 (m, 2H), 2,88 - 2,60 (m, 4H), 2,33 (t, 2H), 1,85 - 1,80 (m, 2H), 1,62 - 1,35 (m, 1 OH), 1,30 - 1,06 (m, 6H), 1,04-0,85 (m, 8H).

Za použití v podstatě postupu z příkladu 1 lze připravit tyto dále uváděné sloučeniny za využití vhodných výchozích látek.

Příklad 2

N-[N-[N-[4-(Piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl]valin

COOH

Mol. hmotnost, vyp. 471, nal. 471

NMR, 5 = 4,15 -4,05 (m, 2H), 3,90 (s, 2H), 3,30 (q,2H), 3,30- 3,15 (m, 2H), 2,90-2,60 (m,4H), 2,33 (t, 2H), 2,05 (q, 1H), 1,85- 1,72 (m, 2H), 1,55- 1,35 (m, 3H), 1,30-1,08 (m, 4H), 1,02 (t, 3H), 0,70 (d, 6H).

-23 CZ 291378 B6

Příklad 3

N-[N-[N-[4-(Piperidin-4-yl)-N-ethylglycyl]-asparaginyl]fenyl]alanin

Mol. hmotnost, vyp. 519, nal. 519

NMR. 5 = 7,20-6,95 (m, 5H), 4,55 - 4,35 (m, 2H), 3,73 (s, 2H), 3,30 -2,40 (m, 10H), 2,25 (t, 2H), 1,75 - 1,60 (m, 2H), 1,45 - 1,25 (m, 3H), 1,20 - 0,97 (m, 4H), 0,92 (t, 3H).

Příklad 4

N-[N-[N-[4-(Piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl]-D-valin

Mol. hmotnost, vyp.: 471, nal. 471

NMR, 5 = 4,10- 3,98 (m, 2H), 3,85 (s, 2H), 3,28 (q, 2H), 3,23-3,10 (m, 2H), 2,82 -2,58 (m,4H), 2,28 (t, 2H), 2,02 (q, 1H), 1,80 -1,65 (m, 2H), 1,50- 1,28 (m, 3H), 1,25-1,00 (m, 4H), 0,95 (t, 3H), 0,78 - 0,85 (m, 6J).

Příklad 5

N-[N-[N-[4-(Piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl]-L-a-2,2-dimethyl]25 prop-3-yl-glycin

Mol. hmotnost, vyp. 499, nal. 499

-24CZ 291378 B6

NMR, δ = 4,63- 4,65 (m, 1H), 4,30- 4,20 (m, 1H), 3.68 (s, 2H), 3.33 (q. 2H), 3,30- 3,15 (m, 2H), 2,88 - 2,60 (m, 4H), 2,35 (t, 2H), 1,85 - 1,75 (m. 2H), 1,73 - 1.35 (m. 5H), 1,30-1,08 (m, 4H), 1,03 (t, 3H), 0,78 (s, 9H).

Příklad 6

N-[N-[N-[4-(Piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl]norleucin

Mol. hmotnost, vyp. 485, nal. 485

NMR, 5 = 4,58-4,50 (m, 1H), 4,20 - 4,10 (m, 1H), 3,85 (s, 2H), 3.32 (q, 2H), 3,25-3,10 (m, 2H), 2,85 - 2,55 (m, 4H), 2,30 (t, 2H), 1,82 - 1,50 (m, 4H), 1,50 - 1,30 (m, 3H), 1,28 - 1,05 (m, 8H), 0,98 (t, 3H), 0,75 - 0,80 (m, 3H).

Příklad 7

N-[N-[N-[4-(Piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl]-L-(3-naft-l-yl-alanin

Mol. hmotnost, vyp. 569, nal. 569

NMR δ = 8,00 - 7,15 (m, 7H), 4,60 - 4,45 (m, 2H), 3,71 (s, 2H), 3,65 - 3,50 (m, 2H), 3,40 - 2,98 (m, 4H), 2,70 - 2,42 (m, 4H), 2,21 (t, 2H), 1,70 - 1,45 (m, 2H), 1,40 - 0,96 (m, 7H), 0,92 (t, 3H).

Příklad 8

N-[N-[N-[4-(Piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl]-L-|3-naft-2-yl-alanin

-25CZ 291378 B6

Mol. hmot., vyp. 509, nal. 509

NMR, δ = 7,65 - 7,03 (m, 7H), 4,60-4,46 (m, 2H), 3,41 (s, 2H), 3,20 - 3,01 (m, 3H), 3,00-2,71 (m, 3H), 2,68 - 2,40 (m, 4H), 1,98 (t, 2H), 1,88 - 1,42 (m, 3H), 1,25 - 0,85 (m, 6H), 0,71 (t, 3H).

Příklad 9

N-[N-[N-[3-(Piperidin-4-yl)-propanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl]valin

COOH

Mol. hmotn., vyp. 547, nal. 457

NMR, δ = 4,62 (m, 2H), 3,90 (s, 2H), 3,33 (m, 4H), 2,66 (m, 4H), 2,37 (t, 2H), 2,18 (m, 1H), 2,03 (m, 1H), 1,78 (m, 2H), 1,44 (m, 2H), 1,20 (m, 2H), 1,00 (m, 3H), 0,78 (d, 6H).

Příklad 10

N-[N-[N-[5-(Piperidin-4-yl)-pentanoyl]ethylglycyl]asparaginyl]valin

COOH

Hmotn., vyp. 486, nal. 485

NMR, δ = 4,20 - 4,05 (m, 2H), 3,92 (s, 2H), 3,33 (m, 2H), 3,28 -3,15 (m, 2H), 2,90 -2,61 (m,4H), 2,34 (t, 2H), 2,08 (m, 1H), 1,85 - 1,70 (m, 2H), 1,55-1,32 (m, 3H), 1,30-1,12 (m, 6H), 1,06 (t, 3H), 0,81 (d, 6H).

-26CZ 291378 B6

Příklad 11

EthylesterN-[N-[N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl]-L-P-cyklohexylalaninu

A. V 75 ml absolutního ethanolu se rozpustí 1,5 g β-cyklohexylalaninu a během 10 až 15 minut se do roztoku přikapává 1,1 ml thionylchloridu za chlazení na 0°C. Teplota reakční směsi se nechá vystoupit na teplotu místnosti, za této se reakční směs míchá asi 18 hodin, následuje zahuštění ve vakuu s azeotropní destilací s toluenem, a zbytek se rozpustí v ethylesteru kyseliny octové. Tento roztok se promyje vodou, IN roztokem hydroxidu sodného, znovu vodou, solankou a po vysušení bezvodým síranem sodným a filtraci se filtrát zahustí ve vakuu. Získá se tím ethylester β-cyklohexylalaninu,

B. Za použití v podstatě postupů z příkladů 1B až 1M, s tím, že se vynechá ve stupni 1L hydrolýza vodným roztokem hydroxidu sodného, se získá očekávaný produkt.

Mol. hmotn., vyp. 553, nal. 553

NMR, δ = 4,4 (1H, m), 4,1 (4H, q), 4,0 (2H, d), 3,2 - 3,5 (5H, m), 2,7 - 3,0 (5H, m), 2,4 (2H, t),

2,2 (1H, m), 1,9 (2H, d), 1,4-1,7 (7H, ml), 0,7 - 1,4 (18, m).

Příklad 12

Amid N-[N-[N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl]-L-P-cyklohexylalaninu

A. V prostředí 100 ml tetrahydrofuranu se rozpustí 2,0 gN-a-terc-butyloxykarbonyl-p-cyklohexylalaninu a 1,03 ml triethylaminu a po ochlazení na -20 °C se k roztoku přidá 1,06 ml izobutylesteru kyseliny mravenčí a reakční směs se míchá 30 minut za chlazení na -20 °C. Po přidání 20 ml nasyceného roztoku amoniaku v methanolu, se teplota roztoku nechá vystoupit na 20 °C, za této teploty se reakční směs míchá 18 hodin, roztok se potom zahustí ve vakuu a zbytek se rozpustí v ethylesteru kyseliny octové. Tento roztok se promyje vodou, 5% roztokem kyseliny chlorovodíkové, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodou, solankou a vysuší se bezvodým síranem sodným. Po filtraci se zahuštěním filtrátu získá amid výše uvedeného složení.

-27CZ 291378 B6

Β. V 100 ml ethylesteru kyseliny octové se rozpustí 2,0 g získaného amidu, roztokem se probublává plynný chlorovodík a roztok se dále míchá 18 hodin za teploty místnosti. Po zahuštění ve vakuu a dvojí azeotropní destilaci s toluenem, se jako zbytek izoluje hydrochlorid amidu β-cyklohexylalaninu.

C. V podstatě za použití postupů z příkladů 1B až 1M s opomenutím hydrolýzy vodným roztokem hydroxidu sodného v příkladu IL se získá očekávaný produkt.

Hmotn., vyp. 524, nal. 524

NMR, δ = 8,4 (1H, d), 8,1 (1H. d), 4,2 (2H, q), 4,1 (1H, s), 3,9 (4H, q), 3,4 (2H, q), 3,3 (4H, d), 2,8 - 3,0 (6H, m), 2,4 (2H, t), 2.2 (1H, m), 1,8 (4H, d), 1,4 - 1,7 (7H, m), 0,7 - 1,3 (10H, m).

Příklad 13

N-[N-[N-[4-(Piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl]-a-cyklohexylglycin

A. Roztok 1,0 g hydrochloridu methylesterů α-fenylglycinu v 25 ml tetrahydrofuranu se ochladí na 0 °C, přidá se 1,38 ml triethylaminu, dále pak roztok 1,08 g di-terc-butylesteru kyseliny uhličité v 25 ml tetrahydrofuranu, teplota reakční směsi se nechá vystoupit na 20 °C a za této teploty se reakční směs míchá 18 hodin. Roztok se potom zahustí, zbytek se rozpustí v 200 ml ethylesteru kyseliny octové, organický roztok se promyje IN roztokem kyseliny chlorovodíkové, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, solankou a po vysušení bezvodým síranem hořečnatým se filtrát zahustí ve vakuu. Výsledkem je N-a-terc-butyloxykarbonyl-a-fenylglycin ve formě methylesterů.

B. 1,2 g tohoto methylesterů ze stupně A se rozpustí v 50 ml methanolu za přidání 1 ml kyseliny octové, přidá se 0,80 g 5% rhodia na hliníkovém prášku a reakční směs se hydrogenuje 18 hodin za tlaku 340 MPa. Po filtraci a zahuštění ve vakuu se zbytek rozpustí v ethylesteru kyseliny octové, tento roztok se promyje vodou, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, a po filtraci se zahuštěním filtrátu získá takto methylester N-a-terc-butyloxykarbonylα-cyklohexy Iglyc inu.

C. Použitím postupů v podstatě dle příkladu 1B až 1M se získá očekávaný produkt.

Mol. hmotn., vyp. 511, nal. 511

NMR, δ = 4,62- 4,65 (1H, m), 4,06 (2H, m), 3,85 (2H, s), 3,30 (2H, q), 3,23-3,10 (2H, m), 2,65 - 2,55 (4H, m), 2,30 (2H, 1), 1,63- 1,60 (3H, m), 1,59 - 1,32 (8H, m), 1,30 - 0,75 (12H, m).

-28CZ 291378 B6

Příklad 14

N-[N-[N-[4-(Piperidin^l-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl]-L-p-dekahydronaft-lyl-alanin

A. Za teploty místnosti se 2 hodiny míchá roztok 2,0 g p-(l-naftyl)-alaninu v methanolu, nasyceném plynným chlorovodíkem. Roztok se potom zahustí ve vakuu a po dvojnásobné azeotropní destilaci zbytku s toluenem se zbytek suspenduje v methylenchloridu, přidá se 1,02 ml N-methylmorfolinu a směs se ochladí na 0 °C. Po přidání 2,02 g di-terc-butylesteru kyseliny uhličité a 0,8 g 4-dimethylaminopyridinu se teplota nechá vystoupit na 20 °C, za této teploty se reakční směs míchá 2 hodiny, promyje se 5% roztokem kyseliny chlorovodíkové, vodou, vysuší se bezvodým síranem sodným, a po filtraci se zahuštěním filtrátu získá methylester N-a-tercbutyloxykarbony 1-β-( 1 -nafty l)-alaninu.

B. Z tohoto produktu se 2 g smíchají v prostředí 50 ml methanolu za přítomnosti 1,0 ml kyseliny octové s 1,0 g 5% rhodia na uhlíkovém prášku a reakční směs se hydrogenuje 18 hodin při 340 MPa. Po filtraci a zahuštění filtrátu ve vakuu se zbytek rozpustí v ethylesteru kyseliny octové, získaný roztok se promyje vodou, 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného, znovu vodou, potom solankou a vysuší se bezvodým síranem sodným. Po filtraci se zahuštěním filtrátu ve vakuu získá takto methylester L-|3-dehydronaft-l-yl-alaninu.

C. Za použití postupů z příkladů 1 B až 1M se připraví očekávaný produkt.

Mol. hmotn., vyp. 579, nal. 579

NMR: δ = 4,1-4,3 (m, 1H), 3,8-4,1 (m, 2H), 2,6-2,9 (m,4H), 2,3 (m, 1H), 2,0 (m, 1H), 1,8 (d,3H), 0,5-1,6 (m, 33H).

Příklad 15

2-Cyklohexyl-N-[N-[N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]-asparaginyl]ethylamin

-29CZ 291378 B6

A. Roztok 2,0 g 2-fenylethylaminu v methylenchloridu se ochladí na 0 °C, po přidání 4,0 g di-terc-butylesteru kyseliny uhličité a 0,4 g 4-dimethylaminopyridinu se teplota roztoku nechá vystoupit na 20 °C a reakční směs se pak míchá za teploty místnosti asi 18 hodin. Roztok se promyje použitím 5% roztoku kyseliny chlorovodíkové, vody, a po filtraci se zahuštěním izoluje N-a-terc-butyloxykarbonyl-2-fenylethylamin.

B. Z této látky se 3,1 g v prostředí 40 ml methanolu s obsahem 1,0 ml kyseliny octové za přítomnosti 1,1 g 5% rhodia na hliníkovém prášku hydrogenuje 20 hodin za tlaku 400 KPa. Směs se potom filtruje, filtrát se zahustí ve vakuu a zbytek se rozpustí v ethylesteru kyseliny octové. Organický roztok se promyje vodou, 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného, znovu vodou, solankou a vysuší se bezvodým síranem sodným. Po filtraci se zahuštěním filtrátu ve vakuu získá N-a-terc-butyloxykarbonyl-2-cyklohexylethylamin.

C. Za použití postupů z příkladů IB až 1M za vypuštění hydrolýzy vodným roztokem hydroxidu sodného z příkladu 1L se získá očekávaný produkt.

Mol. hmotn., vyp. 481, nal. 481

NMR, δ = 3,9 (s, 2H), 3,35 (d, 4H), 3,25 (d, 4H), 2,6 - 2,9 (m, 8H), 2,35 (t, 2H), 2,15 (t, 1H), 1,8 (4H, d), 1,4-1,7 (m, 7H), 0,9 - 1,3 (m, 12H), 0,7 (t, 2H).

Příklad 16

N-[N-[N-[4-(Piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]-asparaginyl]-L-a-(2-cyklohexylethyl)-glycin

A. Za použití v podstatě postupu z příkladu 13 A zde výše, se připraví z L-homofenylalaninu methylester N-a-terc-butyloxykarbonyl-a-(2-fenylethyl)-glycinu.

B. Za použití v podstatě postupu dle příkladu 14 B zde výše, se připraví zvýše uvedeného methylesteru methylester N-a-terc-butyloxykarbonyl-a-(2-cyklohexylethyl)-glycinu.

C. Za použití postupů z příkladů IB až 1M se získá očekávaný připravovaný produkt.

Mol. hmotn., vyp. 539, nal. 539

NMR: 8 = 4,60- 4,55 (m, 1H), 4,20- 4,08 (m, 1H), 3,85 (s, 2H), 3,29 (q, 2H), 3,25-3,12 (m, 2H), 2,64 - 2,55 (m, 4H), 2,29 (t, 2H), 1,83 - 1,65 (m, 2H), 1,63 - 1,32 (m, 10H), 1,28 - 0,81 (m, 13 H), 0,79-0,56 (m, 2H).

Za použití v podstatě postupů, jak byly popsány ve výše uvedených příkladech, byly připraveny z odpovídajících vhodných výchozích látek tyto další sloučeniny.

-30CZ 291378 B6

Příklad 17

N-[N-[N-[4-(Piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl]-L-Ú-cis-dekahydronaft2-yl-alanin

Mol. hmotn., vyp. 579, nal. 579

NMR, δ = 4,7 (m, 1H), 4,3 (m, 1H), 4,1 (d, 2H), 3,3 - 3,7 (m, 5H), 2,6 - 2,8 (m, 5H), 2,5 (t, 2H),

2,3 (t, 1H), 1,9 (d, 2H), 1,3-1,8 (m, 14H), 0,9 - 1,3 (m, 14H), 0,7 - 0,8 (m, 3H).

Příklad 18

3-Adamant-l-ylpropyl-N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycylasparagová kyselina

Mol. hmotn., vyp. 548, nal. 548

NMR, δ = 4,65 - 4,50 (m, 1H), 4,05-3,85 (m, 4H), 3,35-3,15 (m,4H), 2,90 - 2,50 (m, 4H), 2,30 (t,2H), 2,18 (t, 1H), 1,94 (d, 2H), 1,85- 1,35 (m, 20H), 1,32-1,12 (m, 4H), 1,10-0,90 (m, 5H).

Příklad 19

N-[N-[N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl]-a-aminocyklohexankarboxyíová kyselina

-31 CZ 291378 B6

COOH

Mol. hmotn., vyp. 497, nal. 497

NMR, 5 = 4,60-4,65 (m, IH), 4,05 (s, IH), 3,90 (s, IH), 3,30 (q, 2H), 3,25-3,12 (m, 2H), 2,85-2,55 (m, 4H), 2,35 (t, IH), 2,11 (t, IH), 1,90-1,70 (m, 4H), 1,68 - 1,55 (m, 2H),

1,53 - 1,32 (m, 6H), 1,30 - 1,08 (m, 7H), 1,05 - 1,85 (m, 3H).

Příklad 20

N-[N-[N-[4-(Piperidin—4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl]-(3-cyklohexyl-D-alanin

Hmotn. spektrum, vyp. 525, nal. 525

NMR: 6 = 4,60-4,55 (m, IH), 4,32- 4,20 (m, IH), 4,05 (s, IH), 3,85 (s, IH), 3,32 (q,2H), 3,25-3,12 (m,2H), 2,85- 2,60 (m, 4H), 2,32 (t, IH), 2,12 (t, IH), 1,85 - 1,68 (m, 2H),

1,60 - 1,32 (m, 1 OH), 1,28 - 0,60 (m, 13 H).

Příklad 21

N-[N-[N-[4-(Piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl-P-dekahydronaftalenyl-lalanin

Hmotn. spektrum, vyp. 579, nal. 579

-32CZ 291378 B6

NMR: δ = 4,1 - 4,3 (1H, m), 3,8-4,1 (2H, m), 3,1 - 3,4 (4H, m), 2,6 - 2,9 (4H, m), 2,3 (1H, m), 2,0 (1H, m), 1,8 (3H, d), 0,5 - 1,6 (33H, m).

Příklad 22

N-[N-[N-[4-(Piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl]-3-cyklohexylalanylethylamid

Hmotn. spektrum, vyp. 552, nal. 552

NMR: 6 = 4,65-4,45 (m, 1H), 4,20-4,06 (m, 1H), 4,05-3,85 (m, 2H), 3,40- 3,25 (m, 2H), 3,29 -3,15 (m, 2H), 3,10- 2,90 (m, 2H), 2,88 - 2,55 (m, 4H), 2,40 - 2,25 (m, 1H), 2,20 - 2,05 (m, 1 Η), 1,85 - 1,70 (m, 2H), 1,60 - 1,32 (m, 9H), 1,30 - 0,62 (m, 17H).

Příklad 23

N-[N-[N-[4-(Piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl]-[3-cyklooktylalanin

Hmotn. spektrum, vyp. 553, nal. 553

NMR: δ = 4,1 - 4,3 (1H, m), 3,5 - 4,1 (2H, m), 3,1 - 3,4 (4H, m), 2,6 - 2,9 (4H, m), 2,3 (1H, m), 2,0 (1H, m), 1,8 (2H, d), 0,5 - 1,8 (31 H, m).

-33CZ 291378 B6

Příklad 24

N-[N-[N-[4-(Piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycylasparaginyl]-a-cyklohexylmethylethanolamin

Hmotn. spektrum, vyp. 511, nal. 511

NMR: 5 = 4,60 - 4,45 (m, 1H), 4,10 - 3,75 (m, 3H), 3,45 - 3,15 (m, 6H), 2,90 - 2,60 (m, 4H), 2,35 (t, 1H), 2,00-2,08 (m, 1H), 1,88 - 1,75 (m, 2H), 1,62- 1,35 (m, 8H), 1,30- 1,08 (m, 7H), 1,10-0,60 (m, 8H).

Příklad 25

Amid N-[N-[N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl]-p-cyklohexylmethylalaninu

Hmotn. spektrum, vyp. 538, nal. 538

NMR: 5 = 4,60-4,50 (m, 1H), 4,15 - 4,00 (m, 1H), 4,00 - 3,80 (m, 2H), 3,35 (q, 2H),

3,30 -3,15 (m, 2H), 2,90 -2,62 (m,4H), 2,35 (t, 1H), 2,15 (t, 1H), 1,88 -1,76 (m, 2H),

1,65 - 1,40 (m, 9H), 1,30- 0,88 (m, 14H), 0,85 - 0,65 (m, 2H).

-34CZ 291378 B6

Příklad 26

N-[N-[N-[4-(Piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl]-p-adamant-l-ylalanin

Hmotn. spektrum, vyp. 577, nal. 577

NMR: 5 = 4,5- 4,1 (lH,m), 4,1- 4,2 (lH,m), 3,8 (2H, d), 3,2 (2H, q), 3,1- 3,1 (6H, m),

2,4 - 2,98 (5H, m), 2,3 (1H, m), 2,0 (1H, m), 1,8 (4H, m), 1,2 - 1,7 (18 H, m), 1,0-1,2 (6H, m), 0,8-1,0 (3H, m).

Příklad 27

N-[N-[N-[4-(Piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl]-p-l,2,3,4-tetrahydronaft5-ylalanin

Molek. spektrum, vyp. 573, nal. 573

NMR, 5 = 6,9 (d,4H), 4,7 (m, 1H), 4,3 (m, 1H), 4,1 (d, 2H), 3,3-3,7 (m, 6H), 2,6-3,1 (m, 12 H), 2,5 (t, 2H), 2,3 (t, 1H), 1,9 (d, 2H), 1,2 - 1,8 (m, 16 H), 1,1 (t, 2H), 1,0 (t, 2H).

-35CZ 291378 B6

Příklad 28

N-[N-[N-[4-(Piperidin-4-yl)-butanoyI]-N-ethylgtycyl]asparaginyl]-[3-(4-cyklohexyl)-cyklohexylalanin

Molek. spektrum, vyp. 607, nal. 607

NMR, δ = 4,2 - 4,3 (1H, m), 3,9 - 4,1 (2H, m), 3,1-3,4 (5H, m), 2,6 - 2,8 (5H, m), 2,3 (1H, m), 2,0 (1H, m), 1,8 (3H, d), 0,9 - 1,6 (32H. m), 0,7 - 0,8 (3H, m).

Příklad 29

N-[N-[N-[4-(Piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl]-[3-cykloheptyIalanin

Hmotn. spektrum, vyp. 539, nal. 539

NMR, 5 = 4,60- 4,55 (m, 1H), 4,35- 4,25 (m, 1H), 4,08 (s, 1H), 3,92 (s, 1H), 3,25 (q,2H),

3,33- 3,20 (m, 2H), 2,90- 2,60 (m, 4H), 2,35 (t, 1H), 2,18 (t, 1H), 1,90-1,75 (m, 2H), 1,70 - 1,10 (m, 22H), 1,10- 0,85 (m, 3H).

-36CZ 291378 B6

Příklad 30

AmidN-[N-[N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl]-p-cyklooktyl· alaninu

Hmotn. spektrum, vyp. 551, nal. 561

NMR: 5 = 4,45 (dd, 1H, H-12), 4,18 (m, 1H, H-14), 3,89 (d, 1H, H-l 1, 3,69 (d, 1H, H-l 1), 3,31 (q, 2H, H-9), 8,18 (dt, 2H, H-la), 2,74 (dt, 2H, Hle), 2,65 (dd, 2H, H-13), 2,25 (t,2H,H-8), 10 1,85 - 1,10 (m, 26 H, H-3 až H-7 a H-15 až H-23), 1,06 (t, 3H, H-IO).

Příklad 31

N-[N-[N-[4-(Piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl]-a-cyklohexylpropyl-

Hmotn. spektrum, vyp. 553, nal. 553

NMR, 5 = 4,70-4,60 (m, 1H), 4,30- 4,15 (m, 1H), 4,10 (s, 1H), 3,95 (s, 1H), 3,35 (q,2H), 3,35- 3,20 (m, 2H), 2,90-2,60 (m, 4H), 2,40 (t, 1H), 2,15 (t, 1H), 1,90 -1,75 (m, 2H), 1,75 - 1,45 (m, 1 OH), 1,35 - 1,15 (m, 8H), 1,12- 0,90 (m, 9H), 0,85 - 0,60 (m, 2H).

-37CZ 291378 B6

Příklad 32

N-[N-[N-[4-(Piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl]-|3-cyklooktylmethylalanin

Hmotn. spektrum, vyp. 567, nal. 567

NMR: 8 = 4,05-4,15 (m, 1H, 14), 3,75-4,00 (m, 2H, 11 až 18), 3,10- 3,30 (m, 4H, 19 a 26 eq), 2,50 - 2,60 (m, 4H, 15 a 26 ax), 2,05 - 2,25 (m, 2H, 21), 0,75 - 1,75 (m. 31H, 1-10, 20 a 22-25).

Příklad 33

N-[N-[N-[4-(Piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl]-cyklopentylalanin

Hmotn. spektrum, vyp. 511, nal. 511

NMR: δ = 4,7 (m, 1H), 4,3 (m, 1H), 4,1 (d, 2H), 3,3 - 3,7 (m, 5H), 2,8 (t, 2H), 2,7 (m, 3H), 2,5 (t, 2H), 2,3 (t, 1H), 1,9 (d, 2H), 1,0 - 1,8 (m, 18).

-38CZ 291378 B6

Příklad 34

Ethylester N-[N-[N-[4-(piperidin-4-yl)-butanoyl]-N-ethylglycyl]asparaginyl]-|3-cyklohexylmethylalaninu

Hmotn. spektrum, vyp. 567, nal. 567

NMR: 6 = 4,30 - 4,10 (m, IH), 4,10- 3,80 (m, 3H), 3,25 (q, 2H), 3,30- 3,15 (m, 2H), 2,90 - 2,60 (m, 4H), 2,40 - 2,10 (t, 2H), 1,90 - 1,70 (m, 2H), 1,65 - 1,40 (m, 1 OH), 1,35 - 0,85 (m, 18H), 0,85-0,60 (m, 2H).

Sloučeniny podle tohoto vynálezu inhibují shlukování krevních destiček tím, že znemožňují fibrinogenu vázat se na aktivované destičky a další adhezivní glykoproteiny, které jsou zahrnuty do sféry shlukování krevních destiček a vzniku krevních chuchvalečků. Jsou tedy použitelné a vhodné při prevenci i léčbě trombózy v souvislosti s některými stavy onemocnění, jako je infarkt myokardu, mrtvičný záchvat, periferální arteriové onemocnění a roztroušená intravaskulámí koagulace u lidí i dalších savců.

Sloučeniny dle tohoto vynálezu lze podávat orálně nebo parenterálně při prevenci nebo léčbě stavů onemocnění v souvislosti s trombózou.

Tyto sloučeniny lze upravovat pro podávání jakýmkoli vhodným způsobem a vynález zahrnuje farmaceutické přípravky s obsahem nejméně jedné sloučeniny dle tohoto vynálezu, uzpůsobené k použití v lékařství nebo veterině. Takové přípravky lze formulovat běžnými postupy za použití jednoho či více farmaceuticky vhodného nosiče či plniva, ty zahrnují ředidla nebo další pomocné látky, sterilní vodná prostředí a různá netoxická organická rozpouštědla. Sloučeniny lze upravovat do formy tablet, kapslí, pastilek, prášků, vodných suspenzí či roztoků, roztoků pro injekční účely, elixírů, sirupů atd., a tyto prostředky mohou obsahovat jedno či více přídatných činidel ze skupiny, kterou tvoří sladidla, příchutě, barviva a konzervační činidla se zřetelem na přípravu farmaceuticky způsobilého přípravku.

Ten či onen nosič a poměr látky inhibující shlukování krevních destiček a trombů k nosiči se stanoví dle rozpustnosti a chemických vlastností sloučenin s přihlédnutím ke zvolené cestě podávání a běžné farmaceutické praxi. Tak například při výrobě tablet se dají použít excipienty, jako je laktóza, sodná sůl kyseliny citrónové, uhličitan vápenatý a fosforečnan vápenatý, dále četné desintegrační prostředky, jako je škrob, alginové kyseliny a některé křemičitany spolu s kluznými činidly jako je hořečnatá sůl kyseliny stearové, sodná sůl kyseliny laurylsírové a talek. V případě kapslí patří mezi nejvhodnější farmaceutické nosiče laktóza a vysokomolekulámí polyethylenglykoly. Pro přípravu vodných suspenzí k orálnímu použití lze nosič emulgovat neboje možno použít suspendující látky. Z ředidel lze použít ethanol, propylenglykol, glycerol a chloroform nebo jejich kombinace či další materiály.

Pro parenterální podávání se mohou použít roztoky nebo suspenze předmětných sloučenin v sezamovém nebo podzemnicovém oleji, nebo vodné roztoky obsahující propylenglykol, jakož

-39CZ 291378 B6 sterilní vodné roztoky rozpustných, farmaceuticky přijatelných solí. Pro intramuskulární a subkutánní injekce jsou zvláště vhodné roztoky solí sloučenin podle tohoto vynálezu. Vodné roztoky, zahrnuje v to roztoky solí v čisté destilované vodě, jsou vhodné i pro intravenózní injekce, pochopitelně za předpokladu vhodné úpravy hodnoty pH, pufrování a izotonické úpravy za přidání dostatečného množství solanky nebo glukózy s následným sterilizováním zahříváním nebo mikrofiltračně.

Dávkovači systém při provádění léčení podle tohoto vynálezu má zajišťovat maximum terapeutické odezvy až do dosažení zlepšení za podávání minimálních dávek, které jsou nutné k dosažení úlevy. Obecně může orální dávka kolísat od asi 0,1 mg/kg do asi 100 mg/kg, s výhodou mezi 0,1 mg/kg až 20 mg/kg, nej výhodněji od asi 1 mg/kg do asi 20 mg/kg. Při intravenózní aplikaci jde o dávku od asi 0,1 pg/kg do asi 100 pg/kg, s výhodou mezi asi 0,1 pg/kg do asi 50 pg/kg, to se zřetelem na situaci, kdy se volí vhodná odpovídající dávka v tom či onom specifickém případě s tím, že nutno vzít v úvahu hmotnost pacienta, obecný stav jeho zdraví, věk a všechny další faktory, které mohou vzniknout jako odezva na lék. Látku lze podávat orálně jednou až čtyřikrát denně, s výhodou jednou až dvakrát.

Dále uvedené farmakologické testy zhodnocují inhibiční účinnost sloučenin podle tohoto vynálezu na shlukování krevních destiček, vyvolané fibrinogenem, na fibrinogenovou vazbu na krevní destičky, stimulované tromby, jakož i na inhibování shlukování krevních destiček indukované ADP ex-vivo. Výsledky těchto testů jsou porovnány s inhibičními vlastnostmi sloučenin podle tohoto vynálezu in vivo.

Test shlukování krevních destiček se zakládá na popisu v Blood 66 (4) 946-952 (1985). Test navázání fibrinogenu je v podstatě shodný s oním dle Ruggeri Z. M. a spol., Proč. Nati. Acad. Sci. USA 83, 5708-5712 (1988) a Plow E. F. se spol., Proč. Nati. Acad. Sci., USA 82, 8057-8061 (1985). Inhibování shlukování krevních destiček, indukované ex vivo ADP, se zakládá na pozorování Zuckera „Platelet Aggregation Measured by the Photometric Method“ v „Methods in Enzymology 169, 117-133 (1989).

Test shlukování krevních destiček

Příprava vazebně-aktivovaných destiček

Krevní destičky byly izolovány z lidských koncentrátů destiček za použití postupu gelové filtrace, viz Marguerie G. A. a spol., J. Biol. Chem. 254, 5357-5363 (1979) a Ruggeri Z. M. se spol., J. Clin. Invest. 72, 1-12 (1983). Destičky byly suspendovány v koncentraci . 10⁶ buněk/ml. V modifikovaném Tyrodeově pufru, prostém vápníku s obsahem 127mM chloridu sodného, 2mM chloridu hořečnatého a 0,42mM Na₂HPO₄, dále 1 l,9mM hydrogenuhličitanu sodného, 2,9mM chloridu draselného, 5,5mM glukosy, lOmM HEPES, to za hodnoty pH 7,35 a 0,35% albuminu z lidského séra (nadále HSA). Tyto promyté destičky byly aktivovány přidáním lidského α-trombinu v konečné koncentraci 2 jednotky/ml, což bylo následováno inhibitorem trombinu 1-2581 za konečné koncentrace 40 μΜ. K aktivovaným destičkám byl přidán paraformaldehyd v konečné koncentraci 0,50 % s následným inkubováním 30 minut za teploty místnosti. Pevně aktivované destičky byly soustředěny odstředěním (650 x g, 15 minut). Shluky destiček byly promyty čtyřikrát výše zmíněným Tyrodeovým pufrem s 0,35% albuminem z lidského séra, a resuspendovány ve stejném pufru v množství 2 . 10⁸ buněk/ml.

Test shlukování destiček

Pevně aktivované destičky se inkubují za použití zvolené dávky sloučeniny, jež se testuje minutu na inhibování shlukování destiček a toto shlukování se iniciuje přidáváním lidského fibrinogenu do koncové koncentrace 250 pg/ml. Ke sledování shlukování krevních destiček se využije „Platelet Aggregation Profiler Model PAP-4“. Míra inhibování shlukování se vyjádří jako % rychlosti agregace při pozorování bez inhibitoru. Hodnota IC50, tj. množství inhibitoru, jehož

-40CZ 291378 B6 je třeba ke snížení shlukování a rychlosti shlukování na 50 %, se potom propočte pro každou sloučeninu, viz např. Plow E. F. a spol., Proč. Nati. Acad. Sci., USA 82, 8057-8061 (1985).

Test vazby fibrinogenu

Destičky se zbaví složek plazmatu promytím albuminem technikou s gradientem hustoty, viz Walsh P. N. a spol., J. Harmatol. 1977, 281-296, spíše v modifikovaném pojetí, viz Trapari-Lombardo V. a spol., J. Clin. Invest 76, 1950-1956 (1985); to v každé experimentální směsi destiček v modifikovaném Tyrodeově pufru, viz Ruggeri Z. M. a spol., J. Clin. Invest 72, 1-12 (1983) se destičky stimulují lidským a-trombinem 10 min. při 22-25 °C (3,125.10¹¹ destiček na litr a trombin za 0,1 NIH jednotek na ml). Potom se přidává hirudin po 5 minut v 25násobném nadbytku (jednotka na jednotku) před přidáním fibrinogenu, značeného ¹²⁵I a látka se testuje. Po těchto přídavcích je konečný počet destiček ve směsi 7 . 10¹‘/litr. Po dalším inkubování 30 minut při 22-25 °C se volné vazby oddělí odstředěním 50 μΐ směsi 4 minuty za použití 300 μΐ 20% roztoku sacharózy a 12 OOOxg. Destičky se potom oddělí od zbytku směsi ke stanovení radioaktivity, jež je vázána na destičky. Nespecifické vázání se změří ve směsích, obsahujících neznačený ligand. Analyzují-li se vazné křivky Scatchardovou analýzou, odvodí se tak nespecifické vázání jako zřejmý parametr z vazné izotermy počítačovým programem, viz Munson P. U., Methods Enzymol. 92, 542-576 (1983).

Ke stanovení koncentrace každé inhibiční sloučeniny, jež je nutná k inhibování z 50 % vázání fibrinogenu na trombinem stimulované krevní destičky (IC₅₀), byla každá sloučenina testována za šesti či více koncentrací fibrinogenem, značeným ¹²⁵I za dodržení 0,176 μπιοΐ/litr (60 pg/ml). Hodnota IC₅₀ byla odvozena nanášením zbylé fibrinogenové vazby proti logaritmu koncentrace sloučenin ve vzorku.

Inhibování shlukování krevních destiček, indukované ADP ex-vivo

Pokusný protokol

Kontrolní vzorky krve byly získány 5 až 10 minut před podáváním testované látky od jakýchkoli psů (míšenců všeho druhu) o hmotnosti 10 až 20 kg. Sloučeniny byly podány přímo do žaludku, buď vodným nálevem, nebo orálně pomocí želatinové kapsle. Vzorky krve po 5 ml byly odebírány v intervalech 20 minut, pak za 3, 6, 12 a 24 hodin. Každý vzorek krve byl získán z žíly na hlavě venovou punkcí přímo do injekční stříkačky z umělé hmoty, obsahující 1 díl 3,8% roztoku trisodné soli kyseliny citrónové na 9 dílů vody.

Ex-vivo shlukování krevních destiček

Vzorky krve se potom odstřeďují 10 minut (1000 otáček za minutu), tím se získá plazma obohacená destičkami; po jejich odstranění se vzorek odstřeďuje dalších 10 minut (2000 otáček za minutu) a získá se tím plazma chudá na destičky. Výpočet destiček v tomto vzorku se provede použitím „Coulter Counter, Coulter Electronics, Hlalesh, Fl“. Je-li koncentrace destiček v obohacené frakci nad 300 000 destiček/μΐ, pak se tato frakce zředí chudou frakcí tak, aby počet destiček činil právě 300 000/μ1. Alikvotní podíly po 250 μΐ se potom vnesou do silikonovaných skleněných zkumavek 7,25 na 55 mm (Bio/Data Corp., Horsham, PA) a po přidání epinefrinu (konečná koncentrace 1 μΜ) následuje inkubování minutu při 37 °C. Dále se přidá stimulátor shlukování destiček, totiž ADP v koncentraci 10 μΜ, a shlukování destiček se sleduje spektrofotometricky za použití aggregometru, propouštějícím světlo (Light transmission Aggregometer, Bio/Data Platelet Aggregation Profiler, Model PAP-4, Bio/Data Corp., Horsham, PA). Pro testovanou sloučeninu se míry změny (pokles) propustnosti světla a maximální propustnost světly (maximum shlukování) zaznamenávají dvojmo. Údaje o shlukování destiček jsou zaznamenávány jako percentuální pokles sklonu nebo maximální shlukování ve srovnání s údaji

-41 CZ 291378 B6 z kontrolních vzorků plazmy bohaté na destičky, které byly pořízeny z krevních vzorků před podáváním testované sloučeniny.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu se vyznačují patrnou účinností při právě uvedených testech a jsou proto pokládány za použitelné a vhodné při prevenci i léčbě trombózy ve spojitosti s některými stavy onemocnění. Antitrombotická účinnost na shlukování krevních destiček psů při provedení ex vivo je předpokladem i pro takovou účinnost u lidí, viz např. Catalfamo J. L., Dodds W. Jean „Isolation of Platelets from Laboratory Animals, Methods Enzymol. 169, Part A, 27 (1989). Výsledky testování sloučenin podle tohoto vynálezu použitím výše uvedených postupů jsou v následujících tabulkách. Pro srovnání jsou tam rovněž výsledky dosažené použitím 4-4-(piperidyl)-butanoyl-glycylasparaginyltryptofanu, tedy látky, jež je předmětem evr. pat. přihl. EP 0479.481.

Inhibování shlukování krevních destiček, indukované ADP ex-vivo

Sloučenina Inhibování Dávka přiklad č. shlukování (mg/kg) fixovaných destiček

2	0,027	10
3	0,064	10
9	0,77
1	0.026	5
4	0.72	10
6	0,130	10
5	0,082	10
11	0,084	5
12	0,097	5
7	0,110	5
8	0.068	5
15	0,072	5
14	0,019	5
13		5
17	0,096
18	0,104
19	3,41
20	1,37
21	0,055
22	0,09
23	0,078
24	0,129
25	0,046
26	0,029
27	0,119
28	0,048
29	0,032
30	0,07
31	0,053
32	0,052
33	0,047
34	0,074
Látka z evr. pat. přihl. EP 0479481	0,047	5

pod 20 % Inhibování shlukování destiček ex vivo po orální podání za hodin

12 24

90 40	60 pod 20	pod 20
100	100	100	88	42
90	50	pod 20
80	20
100	90	35
100	100	60	37
100	100	100	98	50
30	pod 20
30	pod 20
35	18
100	100	100	100	95
100	100	25

Odborník z oboru snadno vyhodnotí, že tento vynález je dobře uzpůsoben k dosažení předmětu jakož i výhod, jak jsou zde uváděny. Sloučeniny, přípravky a popisované způsoby jsou zde uváděny jako příklady výhodných provedení, případně jako příkladné vůbec a není zde úmysl omezovati jimi jakkoli rozsah tohoto vynálezu. Obměny a další použití jsou odborníkům jasné a Ojsou zahrnuty do rozsahu tohoto vynálezu ve smyslu připojených patentových nároků.

Claims (21)

1. Pseudopeptidové sloučenina obecného vzorce I:

R-

0 0 0 II ll II n C —N— | -(CH₂) —c—NH- -CH—C—Z I 1 B CH₂COOH

(I), ve kterém:

10 A znamená atom vodíku, amidinovou skupinu nebo substituovanou amidinovou skupinu,

B znamená alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, alkylarylovou skupinu nebo alkylaralkylovou skupinu,

Z znamená skupinu obecného vzorce

NCH

II

EF ve kterém:

20 E znamená atom vodíku nebo spolu s F tvoří čtyřčlenný, pětičlenný, šestičlenný nebo sedmičlenný azacykloalkanový kruh,

F znamená α-uhlíkový postranní řetězec v přírodě se vyskytující α-aminokyseíiny, atom vodíku, alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcyklo25 alkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, substituovanou arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, substituovanou aralkylovou skupinu, heterocyklylovou skupinu, substituovanou heterocyklylovou skupinu, heterocyklylalkylovou skupinu, substituovanou heterocyklylalkylovou skupinu, nebo spolu s E tvoří čtyřčlenný, pětičlenný, šestičlenný nebo sedmičlenný azacykloalkanový kruh,

G znamená alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, substituovanou arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, substituovanou aralkylovou skupinu, heterocyklylovou skupinu, substituovanou heterocyklylovou skupinu, heterocyklylalkylovou skupinu, substituova35 nou heterocyklylalkylovou skupinu, skupinu vzorce OR¹ nebo NR*R², kde R¹ a R² znamenají navzájem na sobě nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, alkylarylovou skupinu nebo alkylaralkylovou skupinu,

-43CZ 291378 B6 r je 0 nebo 1,

R znamená atom vodíku, alkylovou skupinu, arylovou skupinu nebo aralkylovou skupinu, m je 1 až 5, n je 0 až 6, a

P jel až4, přičemž termín alkylová skupina, samostatně nebo v kombinaci, znamená alkylovou skupinu obsahující 1 až 20 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina, samostatně nebo v kombinaci, znamená cykloalkylovou skupinu obsahující 3 až 10 atomů uhlíku, aryl, samostatně nebo v kombinaci, znamená fenylovou skupinu nebo naftylovou skupinu, heterocyklylovou skupinou, samostatně nebo v kombinaci, se míní čtyřčlenný až patnáctičlenný monocyklický nebo multicyklický kruhový systém, ve kterém jeden nebo více atomů v kruhu znamená jiný prvek než uhlík vybraný ze skupiny zahrnující dusík, kyslík a síru, substituovaná amidinová skupina může být N-substituovaná na jednom nebo obou atomech dusíku jedním nebo více substituenty vybranými ze souboru zahrnujícího alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu a aralkylovou skupinu, ve kterých alkylová, cykloalkylová a arylová skupina samostatně nebo ve složených skupinách mají stejný význam jako je uvedeno shora, aiylová skupina může být substituovaná substituenty vybranými ze skupiny zahrnující alkylovou skupinu, alkenylovou skupinu, alkinylovou skupinu, arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu, aryloxyskupinu, aralkoxyskupinu, hydroxyalkylovou skupinu, acylovou skupinu, formylovou skupinu, karboxyskupinu, alkenoylovou skupinu, aroylovou skupinu, halogeny, nitroskupinu, trihalogenmethylovou skupinu, kyanoskupinu, alkoxykarbonylovou skupinu, aryloxykarbonylovou skupinu, aralkoxykarbonylovou skupinu, acylaminovou skupinu, aroylaminovou skupinu, karbamoylovou skupinu, alkylkarbamoylovou skupinu, dialkylkarbamoylovou skupinu, arylkarbamoylovou skupinu, aralkylkarbamoylovou skupinu, alkylsulfonylovou skupinu, alkylsulfinylovou skupinu, arylsulfonylovou skupinu, arylsulfinylovou skupinu, aralkylsulfonylovou skupinu, aralkylsulfinylovou skupinu a skupinu -NR_aR_b, ve které R_a a Rb jsou nezávisle vybrány ze souboru zahrnujícího vodík, alkylovou skupinu, arylovou skupinu a aralkylovou skupinu, přičemž alkylové a arylové skupiny mají stejný výše uvedený význam, a substituenty heterocyklylové skupiny jsou stejné jako u arylové skupiny, jakož i odpovídající farmaceuticky přijatelné soli.

2. Pseudopeptidové sloučenina podle nároku 1, ve které:

F znamená atom vodíku, alkylovou skupinu, hydroxymethylovou skupinu, 1-hydroxyethylovou skupinu, merkaptomethylovou skupinu, 2-methylthioethylovou skupinu, karboxymethylovou skupinu, 2-karboxyethylovou skupinu, 4-aminobutylovou skupinu, 3-guanidinopropylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, ary lovou skupinu, substituovanou arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, substituovanou aralkylovou skupinu, heterocyklylovou skupinu,

-44CZ 291378 B6 substituovanou heterocyklylovou skupinu, heterocyklylalkylovou skupinu, substituovanou heterocyklylalkylovou skupinu, nebo spolu s E tvoří čtyř-, pěti-, šesti- nebo sedmičlenný azacykloalkanový kruh, stou podmínkou, že heterocyklylalkylová skupina má jiný význam než indol-3-ylmethylová skupina, přičemž alkylová, cykloalkylová, arylová a heterocyklylová skupina samostatně nebo ve složených skupinách mají stejný význam jako je uvedeno v nároku 1.

3. Pseudopeptidová sloučenina podle nároku 2, ve které:

F znamená atom vodíku, alkylovou skupinu, hydroxymethylovou skupinu, 1-hydroxyethylovou skupinu, merkaptomethylovou skupinu, 2-methylthioethylovou skupinu, karboxymethylovou skupinu, 2-karboxyethylovou skupinu, 4-aminobutylovou skupinu, 3-guanidinopropylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, substituovanou arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, substituovanou aralkylovou skupinu, nebo spolu s E tvoří čtyř-, pěti—, šesti- nebo sedmičlenný azacykloalkanový kruh, přičemž alkylová, cykloalkylová, arylová skupina a substituovaná arylová skupina samostatně nebo ve složených skupinách mají stejný význam jako je uvedeno v nároku 1.

4. Pseudopeptidová sloučenina podle nároku 3, ve které:

F znamená atom vodíku, alkylovou skupinu, hydroxymethylovou skupinu, 1-hydroxyethylovou skupinu, merkaptomethylovou skupinu, 2-methylthioethylovou skupinu, karboxymethylovou skupinu, 2-karboxyethylovou skupinu, 4-aminobutylovou skupinu, 3-guanidinopropylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, nebo spolu s E tvoří čtyř-, pěti-, šesti- nebo sedmičlenný azacykloalkanový kruh, přičemž alkylová a cykloalkylová skupina samostatně nebo ve složených skupinách mají stejný význam jako je uvedeno v nároku 1.

5. Pseudopeptidová sloučenina podle nároku 4, ve které:

B znamená alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu nebo alkylcykloalkylalkylovou skupinu, přičemž alkylová a cykloalkylová skupina samostatně nebo ve složených skupinách mají stejný význam jako je uvedeno v nároku 1.

6. Pseudopeptidová sloučenina podle nároku 1, obecného vzorce II:

—NH—CH—C—NH—CH—C—L I I ch₂cooh j (II), ve kterém:

A znamená atom vodíku nebo amidinovou skupinu,

-45CZ 291378 B6

B znamená alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, alkylarylovou skupinu nebo alkylaralkylovou skupinu,

J znamená atom vodíku, alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, substituovanou arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, substituovanou aralkylovou skupinu,

L znamená skupinu vzorce OR¹ nebo NR^², kde R¹ a R² navzájem na sobě nezávisle znamenají atom vodíku, alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, alkylarylovou skupinu nebo alkylaralkylovou skupinu, m je 1 až 5, n je 2 nebo 6, p je 1 nebo 2, přičemž alkylová, cykloalkylová, arylová a substituovaná arylová skupina samostatně nebo ve složených skupinách mají stejný význam jako je uvedeno v nároku 1, a farmaceuticky přijatelné soli odvozené od těchto sloučenin.

7. Pseudopeptidová sloučenina podle nároku 6, ve které:

A znamená atom vodíku,

B znamená alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu nebo alkylcykloalkylalkylovou skupinu,

J znamená atom vodíku, alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu nebo alkylcykloalkylalkylovou skupinu, m je 3 a n je 3 nebo 4, přičemž alkylová a cykloalkylová skupina samostatně nebo ve složených skupinách mají stejný význam jako je uvedeno v nároku 1.

8. Pseudopeptidová sloučenina podle nároku 7, ve které:

A znamená atom vodíku,

B znamená alkylovou skupinu,

J znamená alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu nebo cykloalkylalkylovou skupinu,

R¹ a R² znamenají navzájem na sobě nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, m je 3 a n je 3 nebo 4, a

-46CZ 291378 B6

P je 1, přičemž alkylová a cykloalkylová skupina samostatně nebo ve složených skupinách mají stejný význam, jako je uvedeno v nároku 1.

9. Pseudopeptidová sloučenina podle nároku 7, kterou je:

N-[N-[N-(4-(piperidin^l-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-valin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-D-valin,

N-[N-[N-(3-(piperidin^l-yl)-propanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-valin,

N-[N-[N-(5-(piperidin-4-yl)-pentanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-valin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-L-a-cyklohexylglycin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-|3-cyklohexylalanin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-norleucin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-L-a-(2,2-dimethyl)prop-3-yl-glycin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-L-|3-cis-dekahydronaft2-ylalanin, kyselina N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-a-aminocyklohexankarboxylová,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyI)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-P-cyklohexyl-r>-alanin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-P-dekahydronaft-l-ylalanin,

N-[N-[N-(4-(piperidin—4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-3-€yklooktylalanin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-[3-adamant-l-ylalanin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-p-(4-cyklohexyl)-cyklohexylalanin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-p-cykloheptylalanin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-a-cyklohexylpropylglycin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-[3-cyklooktylmethylalanin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoy))-N-ethylglycyl]asparaginyl]-P-cyklopentylalanin,

-47CZ 291378 B6

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-L-p-dekahydronaft-l-ylalanin, nebo

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-L-a-(2-cyklohexylethyl)-glycin, nebo farmaceuticky přijatelné soli odvozené od těchto sloučenin.

10. Pseudopeptidová sloučenina podle nároku 7, kterou je:

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]fenylalanin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-|3-( 1,2,3,4)-tetrahydronaft-5-ylalanin,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-L-|3-naft-l-ylalanin, nebo

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl}-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-L-p-naft-2-ylalanin, nebo farmaceuticky přijatelné soli odvozené od těchto sloučenin.

11. Pseudopeptidová sloučenina podle nároku 7, kterou je:

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-L-[3-cyklohexylalaninamid,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethy]glycyl]asparaginyl]-|3-cyklooktylalaninamid,

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl}-N-ethylglycyl]asparaginyl]-[3-cyklohexylmethylalaninamid, nebo

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-|3-cykÍohexylalaninethylamid, nebo farmaceuticky přijatelné soli odvozené od těchto sloučenin.

12. Pseudopeptidová sloučenina podle nároku 6, kterou je:

ethylester N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]asparaginyl]-Lβ-cyklohexylalaninu, ethylester N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-(3-cyklohexylmethylalaninu, nebo kyselina 3-adamant-l-ylpropyl-N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]-asparagová,

-48CZ 291378 B6 nebo farmaceuticky přijatelné soli odvozené od těchto sloučenin.

13. Pseudopeptidová sloučenina podle nároku 1, kterou je:

2~cyklohexyl-N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]ethylamin, nebo

N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)-butanoyl)-N-ethylglycyl]asparaginyl]-a-cyklohexylmethylethanolamin, nebo farmaceuticky přijatelné soli odvozené od těchto sloučenin.

14. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje antitromboticky účinné množství pseudopeptidové sloučeniny podle nároku 1 nebo její farmaceuticky přijatelné soli a farmaceuticky přijatelnou nosičovou látku.

15. Farmaceutický prostředek k léčbě trombózy, vyznačující se tím, že obsahuje antitromboticky účinné množství pseudopeptidové sloučeniny podle nároku 6 nebo její farmaceuticky přijatelné soli a farmaceuticky přijatelnou nosičovou látku.

16. Farmaceutický prostředek kprevenci trombózy, vyznačující se tím, že obsahuje antitromboticky účinné množství pseudopeptidové sloučeniny podle nároku 1 nebo její farmaceuticky přijatelné soli a farmaceuticky přijatelnou nosičovou látku.

17. Farmaceutický prostředek kprevenci trombózy, vyznačující se tím, že obsahuje antitromboticky účinné množství pseudopeptidové sloučeniny podle nároku 6 nebo její farmaceuticky přijatelné soli a farmaceuticky přijatelnou nosičovou látku.

18. Farmaceutický prostředek kléčbě či prevenci trombózy, vyznačující se tím, že obsahuje účinné množství antitromboticky působící pseudopeptidové sloučeniny podle nároků 10 až 12 nebo farmaceuticky přijatelné soli těchto sloučenin a farmaceuticky přijatelnou nosičovou látku.

19. Farmaceutický prostředek k léčbě nebo prevenci trombózy, v y z n a č uj í c í se tím, že obsahuje antitromboticky účinné množství pseudopeptidové sloučeniny podle nároku 13 nebo její farmaceuticky přijatelné soli a farmaceuticky přijatelnou nosičovou látku.

20. Pseudopeptidová sloučenina obecného vzorce III:

O O E’ O II μ 1 II h—n—(CH₂)_p—Ο- —NH—CH—C~ | —N— -CH— I - c Ι B CH₉ 1 1 F’ 1 c=o | OP₂

---G’ r

(III) ve kterém:

-49CZ 291378 B6

B znamená alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alky 1cykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou, arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, alkylarylovou skupinu nebo alkylaralkylovou skupinu,

5 E' znamená atom vodíku nebo tvoří spolu s F' čtyř-, pěti-, šesti- nebo sedmičlenný azacykloalkanový kruh, nebo jeho chráněný analog nebo prekurzorové substituenty' pro takový kruh,

F' znamená α-uhlíkový postranní řetězec v přírodě se vyskytující α-aminokyseliny, atom vodíku, alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloío alkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, substituovanou arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, substituovanou aralkylovou skupinu, heterocyklylovou skupinu, substituovanou heterocyklylovou skupinu, heterocyklylalkylovou skupinu, substituovanou heterocyklylalkylovou skupinu, nebo tvoří spolu s E' čtyř-, pěti-, šesti- nebo sedmičlenný azacvkloalkanový kruh, nebo jeho chráněný analog nebo prekurzorové substituenty pro takový 15 kruh,

G' znamená alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, substituovanou arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, substituovanou aralkylovou skupinu, heterocyklylovou 20 skupinu, substituovanou heterocyklylovou skupinu, heterocyklylalkylovou skupinu, substituovanou heterocyklylalkylovou skupinu, skupinu OR¹ nebo NR*R², kde R¹ a R² znamenají navzájem na sobě nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, alkylarylovou skupinu nebo alkylaralkylovou skupinu, nebo její chráněný 25 analog nebo prekurzorové substituenty pro takový kruh, r je 0 nebol, p je 1 až 4, a

P₂ je aminokyselinová chránící skupina, přičemž alkylová, cykloalkylová, arylová skupina, heterocyklylová skupina, substituovaná arylová skupina a substituovaná heterocyklylová skupina, samostatně nebo ve složených 35 skupinách, mají stejný význam jako je uvedeno v nároku 1, jako meziprodukt pro přípravu sloučenin podle nároku 1.

21. Pseudopeptidová sloučenina podle nároku 20, ve které:

B znamená alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, alkylarylovou skupinu nebo alkylaralkylovou skupinu,

45 E' znamená atom vodíku nebo jeho chráněný analog nebo jeho prekurzorové substituenty,

F' znamená atom vodíku, alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcykloalkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, substituovanou arylovou skupinu, aralkylovou nebo substituovanou aralkylovou skupinu, nebo 50 odpovídající chráněný analog nebo prekurzorové substituenty pro takový kruh,

G' znamená skupinu OR¹ nebo NR^², kde R¹ a R² znamenají navzájem na sobě nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, alkylcyklo

-50CZ 291378 B6 alkylovou skupinu, alkylcykloalkylalkylovou skupinu, arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, alkylarylovou skupinu nebo alkylaralkylovou skupinu, r je 1 a p je 1 nebo 2, přičemž alkylová, cykloalkylová, arylová skupina a substituovaná arylová skupina, samostatně nebo ve složených skupinách, mají stejný význam jako je uvedeno v nároku 1.