ES2233635T3 - Sales dobles de acido fumarico con una carnitina y un aminoacido y suplementos alimentarios, suplementos dieteticos y farmacos que los contienen. - Google Patents

Sales dobles de acido fumarico con una carnitina y un aminoacido y suplementos alimentarios, suplementos dieteticos y farmacos que los contienen.

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ES2233635T3 ES01934310T ES01934310T ES2233635T3 ES 2233635 T3 ES2233635 T3 ES 2233635T3 ES 01934310 T ES01934310 T ES 01934310T ES 01934310 T ES01934310 T ES 01934310T ES 2233635 T3 ES2233635 T3 ES 2233635T3
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Abstract

Un fumarato de fórmula (I): (I) en la que: R es hidrógeno o isovalerilo y [A+] es un aminoácido cargado positivamente del grupo constituido por creatina, ornitina, lisina, arginina e histidina.

Description

Sales dobles de ácido fumárico con una carnitina y un aminoácido y suplementos alimentarios, suplementos dietéticos y fármacos que los contienen.
La presente invención se refiere a sales dobles estables y no higroscópicas de ácido fumárico (en adelante "fumaratos dobles") con una "carnitina", en la que por "carnitina" se quiere indicar L-carnitina o isovaleril-L-carnitina, y un aminoácido. La invención se refiere también a suplementos alimentarios, suplementos dietéticos, nutracéuticos y fármacos que contienen dichos fumaratos dobles.
El ácido fumárico [ácido (E)-2-butenodioico] exhibe aplicaciones interesantes tanto en el campo nutricional como terapéutico.
Se utiliza como sustituto tanto de ácido tartárico, que puede causar efectos secundarios gastrointestinales desagradables debido a sus efectos laxantes en la preparación de bebidas y levaduras en polvo, como de ácido cítrico en bebidas de frutas.
El efecto cardioprotector del ácido fumárico se ha evaluado en corazón de rata perfundido (La Plante et al., "Effects and metabolism of fumarate in the perfused rat heart. A ^{13}C mass isotopomer study", Am. J. Physiol. 272: E74-E82, 1997) y en miocardio inmaduro (Pearl et al., "Fumarate enriched blood cardioplegia results in complete functional recovery of immature myocardium" Ann. Thorac. Surg. 57: 1636-1641, 1993).
Además, el ácido fumárico es un "ácido farmacológicamente aceptable": sus sales están comprendidas de hecho en la lista de "sales comercialmente disponibles aprobadas por la FDA" publicada por ejemplo en el Journal of Pharmaceutical Sciences, vol. 66, nº 1, (1977), páginas 1-19.
La conversión de fármacos en sus formas de sal respectivas farmacológicamente aceptables es un medio ampliamente utilizado para optimizar las formas de administración o ciertas propiedades de los fármacos, tales como estabilidad, higroscopicidad, fluidibilidad y similares.
Tanto el fumarato ácido de L-carnitina como el fumarato ácido de isovalerilo son compuestos conocidos. (El ácido fumárico es un ácido dicarboxílico: en los fumaratos ácidos anteriormente citados, sólo está salificado uno de los dos grupos carboxílicos).
El fumarato ácido de L-carnitina, cuya preparación y propiedades fisicoquímicas se dan a conocer por ejemplo en la patente de EE.UU. 4.602.039, se ha desarrollado para superar los complejos problemas de almacenamiento y procesamiento debidos a la higroscopicidad de la sal interna de L-carnitina. El fumarato ácido de L-carnitina es de hecho muy estable y, sin provocar efectos secundarios gastrointestinales, muestra un perfil de resistencia a la humedad aún mejor que el del tartrato de L-carnitina, una sal no higroscópica adicional que se desarrolló también para superar la higroscopicidad de la L-carnitina.
Sin embargo, el tartrato tiene la ventaja de que ambos grupos carboxílicos están salificados con L-carnitina, y en consecuencia contiene un porcentaje mayor de L-carnitina (68% frente a 58%).
También el fumarato ácido de isovaleril-L-carnitina, cuya preparación se da a conocer en la patente de EE.UU. 5.227.518, es un compuesto estable dotado de una considerable resistencia a la humedad.
Todos los esfuerzos realizados para salificar también el grupo carboxílico libre de fumaratos ácidos en los que el otro grupo carboxílico está salificado con L-carnitina o isovaleril-L-carnitina han fracasado hasta la fecha. Por ejemplo, el intento de preparar fumarato de L-carnitina (concretamente la sal neutra que tendría la ventaja de un porcentaje muy alto de L-carnitina, aproximadamente 73,5% frente a 68% en el tartrato y 58% en el fumarato ácido) da como resultado una sustancia altamente higroscópica que consiste probablemente en una mezcla de fumarato ácido de L-carnitina y sal interna de L-carnitina. Es esta última la que confiere una alta higroscopicidad al producto final en conjun-
to.
Ocurren fracasos similares si se realiza el intento de salificar el grupo carboxílico libre de fumaratos ácidos con alcanoil-L-carnitinas, tales como acetil- y propionil-L-carnitinas.
Es un objeto de la presente invención proporcionar fumaratos dobles estables no higroscópicos en los que se salifica uno de los grupos carboxílicos del ácido fumárico con L-carnitina o isovaleril-L-carnitina, y el otro grupo ácido carboxílico se salifica también con un compuesto dotado de propiedades nutricionales, dietéticas o terapéuticas útiles.
Por lo tanto, resulta evidente que la utilidad de las sales de la presente invención se encuentra no sólo en su carencia de higroscopicidad y alta estabilidad, sino también en la medida en que ambos restos catiónicos contribuyen a la eficacia nutricional, energética y/o terapéutica de la sal en conjunto. La eficacia anteriormente citada de esta nueva sal no ha de atribuirse, por lo tanto, exclusivamente a los restos "carnitina" de la sal.
El objeto anteriormente citado se consigue mediante los fumaratos dobles de L-carnitina o isovaleril-L-carnitina y un aminoácido que tienen la fórmula (I):
1
en la que: R es hidrógeno o isovalerilo; y
[A^{+}] es un aminoácido cargado positivamente del grupo constituido por creatina, ornitina, lisina, arginina e histidina.
Los siguientes compuestos de fórmula (I) han de considerarse abarcados específicamente por la presente invención:
- fumarato de L-carnitina y creatina;
- fumarato de isovaleril-L-carnitina y creatina;
- fumarato de L-carnitina y ornitina;
- fumarato de isovaleril-L-carnitina y ornitina;
- fumarato de L-carnitina y lisina;
- fumarato de isovaleril-L-carnitina y lisina;
- fumarato de L-carnitina y arginina;
- fumarato de isovaleril-L-carnitina y arginina;
- fumarato de L-carnitina e histidina; y
- fumarato de isovaleril-L-carnitina e histidina.
La lisina, arginina e histidina son aminoácidos que aparecen en proteínas, concretamente son tres de los veinte aminoácidos que se obtienen mediante la hidrólisis controlada de proteínas de origen natural (véase, por ejemplo, J. David Rawn, Biochemistry, capítulo 3 "Amino acids and the primary structure of proteins"; McGraw-Hill, 1990).
Aunque para ilustrar la eficacia nutricional y terapéutica de los aminoácidos se hace referencia general a la conspicuamente vasta bibliografía publicada hasta la fecha sobre esta materia (véase, por ejemplo. F. Fidanza y G. Liguori, "Nutrizione umana", capítulo 3: "Le proteine", Casa Editrice Libraria Idelson, 1995; y I. Goldberg (Ed.), "Functional Foods", capítulo 12, "Amino acids, peptides and proteins", Chapman & Hall. Inc. 1994), se considera útil dirigirse brevemente al tema de creatina y ornitina con vistas a su peculiar papel fisiológico.
La creatina es un aminoácido presente en cantidades considerables en el tejido de músculo esquelético de vertebrados, en el que aproximadamente 2/3 del mismo aparece en forma de fosfato de creatina.
La creatina se sintetiza principalmente en el hígado y riñones a partir de tres aminoácidos: glicina que proporciona el esqueleto de carbono, arginina que libera el grupo amidino y metionina que libera el grupo metilo. La creatina se excreta con la orina en forma de creatinina. La creatina puede tomarse con la dieta, puesto que está presente principalmente en la carne. Sin embargo, para tomar 10 g/día de creatina, deberían tomarse 2,5 kg de carne. El suministro exógeno y la biosíntesis endógena deben compensar el recambio diario de creatina en creatinina, que en un sujeto masculino de 70 kg puede estimarse en aproximadamente 2 g.
El papel fisiológico de la creatina es extremadamente importante: principalmente en el músculo esquelético, pero también en el cerebro, hígado y riñones, la creatina -al captar reversiblemente los grupos fosfato de ATP- desempeña el papel de reserva de radicales fosfato ricos en energía. Esta reacción es críticamente importante puesto que el ATP no puede almacenarse en tejidos en exceso de un umbral muy limitado. Es el fosfato de creatina, cuyo contenido en tejidos es cinco veces el del ATP, el que proporciona el suministro de grupos fosfato. Después de un ejercicio físico moderadamente fatigoso, el fosfato de creatina presente en el músculo esquelético se reduce en una cantidad bastante más relevante que el ATP, mostrando así que el fosfato de creatina refosforila el ADP a medida que el ATP se desfosforila.
Cuando la velocidad de producción metabólica de ATP supera la utilización de ATP, esto da como resultado la formación de fosfato de creatina. El fosfato de creatina es, por lo tanto, una reserva de energía disponible inmediatamente, adecuada para contrarrestar las demandas de energía que superen la velocidad de síntesis de ATP en procesos de fosforilación metabólica.
La creatina se toma principalmente por atletas y deportistas en la medida en que aumenta la musculatura esquelética si su toma está acompañada por ejercicio físico duradero. La toma de creatina da como resultado una reducción de la grasa, mientras que potencia el músculo esquelético. Recientes investigaciones han mostrado que la toma combinada de creatina y carbohidratos potencia los efectos de la creatina debido a la producción de insulina que se estimula por los azúcares simples, lo que desempeña probablemente un papel en la exportación de creatina a células musculares.
La ornitina, un aminoácido no proteogénico, es un homólogo inferior de la lisina y un intermedio importante en el ciclo de biosíntesis de urea, en el que se sintetiza mediante transguanidización de arginina. La ornitina puede convertirse también en ácido glutámico.
Los fumaratos de fórmula (I) cumplen completamente el objeto de la presente invención en la medida en que son no sólo compuestos estables no higroscópicos que se prestan favorablemente a la preparación de formas de presentación sólidas que son las preferidas para nutracéuticos y suplementos nutricionales y dietéticos, sino que también combinan en sales sencillas las actividades fisiológicas complementarias de una "carnitina" y de los aminoácidos anteriormente citados.
Por ejemplo, aquellos fumaratos que combinan creatina y una "carnitina" sinérgicamente en un solo compuesto, estimulan por un lado la producción de energía en los miocitos, particularmente en fibras musculares de tipo I, permitiendo que importantes portadores de energía (los ácidos grasos) entren en la mitocondria y, por otro lado, estimulan el ATP formado mediante la respiración celular (fosforilación oxidativa) para dejar el mismo orgánulo. El ATP proporciona la energía mecánica necesaria para la contracción muscular.
Los siguientes ejemplos no limitantes ilustran la preparación y propiedades fisicoquímicas de algunos compuestos de la presente invención.
Ejemplo 1 Fumarato de L-carnitina y creatina (BS/231)
2
Se disolvieron 14,9 g (0,1 mol) de creatina monohidratada y 16,1 g (0,1 mol) de sal interna de L-carnitina en 500 ml de agua.
Se añadieron 11,6 g (0,1 mol) de ácido fumárico con agitación a la solución resultante. Después de la disolución completa, se añadió isobutanol y se destiló la mezcla a vacío a 40ºC. Se recogió el residuo que se obtuvo con acetona y se dejó la mezcla con agitación durante algunas horas.
Se filtró después la mezcla a vacío y se secó el sólido así obtenido en una estufa termostática a 30ºC durante una noche. Se obtuvieron 40,5 g de fumarato de L-carnitina y creatina en forma de un sólido cristalino blanco que probó ser no higroscópico y de gusto agradable.
Rendimiento: 96%.
P.f.= 134ºC (desc.).
K.F.= 0,7%
[\alpha]^{20}_{D}= -10,7 (c = 1% de H_{2}O)
pH = 5,5 (c = 1% de H_{2}O)
Relación:
L-carnitina: 40%
Creatina 32%
Ácido fumárico 28%
Análisis elemental: \hskip0.5cm %C %H %N
Calculado \hskip1.7cm 44,22 6,67 13,75
Encontrado \hskip1.5cm 44,01 6,59 13,68
RMN: D_{2}O \delta = 6,6 (2H, s, 3); 4,6-4,4 (1H, m, 100 ); 3,9 (2H, s, N-CH_{2}-COOH); 3,4-3,3 (2H, d, N-CH_{2}-CH); 3,2 (9H, s, (CH_{3})_{3}-N); 2,9 (3H, s, N-CH_{3}); 2,5-2,4 (2H, d, CH_{2}-COOH).
HPLC:
Columna: Hypersil APS-2 (5 \mum) 200 x 4,6
Temperatura: 30ºC
Fase móvil: CH_{3}CN/H_{2}O + KH_{2}PO_{4} 0,05 M/CH_{3}CN (65-35 v/v)
pH: 4,7 con H_{3}PO_{4}
Caudal: 0,7 ml/min
T_{R}: ácido fumárico 12,5; creatina 7,4; L-carnitina 10,8.
Ejemplo 2 Fumarato de isovaleril-L-carnitina y creatina (BS/232)
4
Se disolvieron 14,9 g (0,1 mol) de creatina monohidratada y 24,5 g (0,1 mol) de sal interna de isovaleril-L-carnitina en 500 ml de agua.
Se añadieron 11,6 g (0,1 mol) de ácido fumárico con agitación a la solución resultante. Después de la disolución completa, se añadió isobutanol y se destiló la mezcla a vacío a 40ºC. Se recogió el residuo así obtenido con acetona y se dejó la mezcla resultante con agitación durante varias horas.
Se filtró después la mezcla a vacío y se secó el sólido así obtenido en una estufa termostática a 30ºC durante una noche. Se obtuvieron 47,2 g de fumarato de isovaleril-L-carnitina y creatina en forma de un sólido blanco cristalino que probó ser no higroscópico y pudo cristalizarse con 95% de etanol.
Rendimiento: 97%.
P.F.: 125-127ºC (desc.).
K.F.: 0,5%
[\alpha]^{20}_{D}= -8 (c = 1% de H_{2}O)
pH = 5,3 (c = 1% de H_{2}O)
Análisis elemental: \hskip0.5cm %C %H %N
Calculado: \hskip1.7cm 48,9 7,13 11,4
Encontrado: \hskip1.5cm 48,7 7,11 10,98
RMN: D_{2}O \delta = 6,6 (2H, s, 5); 4,6-4,4 (1H, m, 101 ); 3,9 (2H, s, N-CH_{2}-COOH); 3,4-3,3 (2H, d, N-CH_{2}-CH); 3,2 (9H, s, (CH_{3})_{3}-N); 2,9 (3H, s, N-CH_{3}); 2,5-2,4 (2H, d, CH_{2}-COOH); 2,4-2,2 (2H, d, CH_{2}-6); 2,2-1,9 (1H, m, 6); 1-0,8 (6H, d, 7).
HPLC:
Columna: Hypersil APS-2 (5 \mum) 200 x 4,6
Temperatura: 30ºC
Fase móvil: CH_{3}CN/H_{2}O + KH_{2}PO_{4} 0,05M/CH_{3}CN (65-35 v/v)
pH: 4,7 con H_{3}PO_{4}
Caudal: 0,7 ml/min
\lambda: 205 nm
T_{R}: ácido fumárico 12,5; creatina 7,4; isovaleril-L-carnitina 6,3.
Relación:
Isovaleril-L-carnitina 50%
Creatina 27%
Ácido fumárico 23%.
Ejemplo 3 Fumarato de L-carnitina y L-ornitina (BS/238)
\vskip1.000000\baselineskip
8
\vskip1.000000\baselineskip
Se disolvieron 8 g (0,05 mol) de sal interna de L-carnitina, 5,8 g (0,05 mol) de ácido fumárico y 6,6 g de L-ornitina en 7,5 ml de agua a 60ºC, y se vertió lentamente la masa transparente espesa en una solución de acetona (800 ml) con agitación mecánica vigorosa. Precipitó un sólido, que se separó por filtración y se secó. Se obtuvieron 17 g del compuesto del título en forma de un sólido blanco no higroscópico.
Rendimiento: 92%.
P.f.: 185-187ºC (desc.).
K.F: 0,9%
[\alpha]^{20}_{D} = -7,5 (c=1% de H_{2}O)
pH = 4,7
RMN: D_{2}O = 6,6 (2H, s, CH = CH); 4,6-4,4 (1H, m, -CH-); 3,8-3,6 (1H, t, -CH-NH_{2}); 3,4-3,3 (2H, d, N-CH_{2}); 3,2 (9H, s, (CH_{3})_{3}); 3-2,9 (2H, t, CH_{2}-NH_{2}); 2,6-2,5 (2H, d, -CH_{2}-COOH); 2-1,8 (2H, m, CH_{2}-CH_{2}-NH_{2}); 1,8-1,6 (2H, c, CH_{2}-CH_{2}-CH).
HPLC:
Columna: Hypersil APS-2 (5 \mum) 200 x 4,6
Temperatura: 30ºC
Fase móvil: CH_{3}CN/H_{2}O + KH_{2}PO_{4} 0,05M/CH_{3}CN (65-35 v/v)
pH: 4,7 con H_{3}PO_{4}
Caudal: 0,7 ml/min
T_{R}: ácido fumárico 12,5; L-carnitina 10,8; L-ornitina 9.
Relación:
Ácido fumárico 28,3%
L-carnitina 39,4%
L-ornitina 32,3%.
Ejemplo 4 Fumarato de L-carnitina y lisina/fumarato de isovaleril-L-carnitina (BS/239, BS/240)
Siguiendo los procedimientos de los ejemplos 1 a 2 y sustituyendo 0,1 moles de lisina por 0,1 moles de creatina monohidratada, se prepararon fumarato de L-carnitina y lisina y, respectivamente, fumarato de isovaleril-L-carnitina y lisina en forma de compuestos blancos no higroscópicos.
En la siguiente Tabla 1, se muestran el aumento de peso (%) y la apariencia de algunos compuestos de la presente invención en comparación con sales internas de L-carnitina e isovaleril-L-carnitina y creatina anhidra después de exposición de los compuestos a una humedad relativa de 60 \pm 5% a 25ºC, durante 24 horas.
Referencia: Pharmaeuropa, noviembre de 1996.
TABLA 1
Compuesto % de aumento en peso Apariencia
Sal interna de L-carnitina 19 Delicuescente
Sal interna de isovaleril-L-carnitina 20 Delicuescente
Creatina anhidra 3 Fluido
Compuesto del ej. 1 (BS/231) 0,18 Sin variación
Compuesto del ej. 2 (BS/232) 0,19 Sin variación
Compuesto del ej. 3 (BS/238) 0,16 Sin variación
La preparación de composiciones que contienen al menos uno de los fumaratos dobles de fórmula (I) será fácilmente evidente para cualquier experto en la tecnología farmacéutica o farmacia.
Las composiciones pueden contener adicionalmente otros ingredientes tales como antioxidantes, coenzimas y sustancias minerales y pueden aparecer en forma de comprimidos, comprimidos masticables, píldoras, trociscos, pastillas masticables, cápsulas, gránulos o polvos.
En una forma de dosificación unitaria, pueden contener una cantidad de un fumarato de fórmula (I) que proporciona 50-2.000, preferiblemente 100-1.000, mg de L-carnitina o isovaleril-L-carnitina en forma de sal interna.

Claims (8)

1. Un fumarato de fórmula (I):
9
en la que: R es hidrógeno o isovalerilo y [A^{+}] es un aminoácido cargado positivamente del grupo constituido por creatina, ornitina, lisina, arginina e histidina.
2. El fumarato de la reivindicación 1, seleccionado del grupo constituido por:
- fumarato de L-carnitina y creatina;
- fumarato de isovaleril-L-carnitina y creatina;
- fumarato de L-carnitina y ornitina;
- fumarato de isovaleril-L-carnitina y ornitina;
- fumarato de L-carnitina y lisina;
- fumarato de isovaleril-L-carnitina y lisina;
- fumarato de L-carnitina y arginina;
- fumarato de isovaleril-L-carnitina y arginina;
- fumarato de L-carnitina e histidina; y
- fumarato de isovaleril-L-carnitina e histidina
3. Una composición que comprende un fumarato de fórmula general (I) según las reivindicaciones 1-2 como principio activo y un excipiente farmacológicamente aceptable.
4. La composición de la reivindicación 3, que comprende adicionalmente uno o más ingredientes seleccionados de antioxidantes, coenzimas y minerales.
5. Las composiciones de las reivindicaciones 3 ó 4, en forma de comprimidos, comprimidos masticables, píldoras, trociscos, pastillas masticables, cápsulas, gránulos o polvos.
6. La composición de las reivindicaciones 3-5, en forma de dosificación unitaria, que comprende como ingrediente activo un fumarato de fórmula (I) que contiene 50-2.000, preferiblemente 100-1.000 mg de L-carnitina o isovaleril-L-carnitina en forma de sal interna.
7. La composición de las reivindicaciones 3-6, para uso humano como suplemento alimentario, suplemento dietético o fármaco.
8. La composición de las reivindicaciones 3-5, para uso veterinario como suplemento para piensos.
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