ES2257748T3

ES2257748T3 - Compuestos y composiciones con cadenas laterales que contienen hidrogeno no basicas.

Info

Publication number: ES2257748T3
Application number: ES96303912T
Authority: ES
Inventors: Jeffrey Alan Dodge; Charles David Jones; James Patrick Sluka; Kristin Sue Marron; Mark Gregory Stocksdale
Original assignee: Eli Lilly and Co
Current assignee: Eli Lilly and Co
Priority date: 1995-06-07
Filing date: 1996-05-30
Publication date: 2006-08-01
Anticipated expiration: 2016-05-30
Also published as: ATE318804T1; CA2178183A1; DE69635852D1; DE69635852T2; JPH09118677A; US6444688B1; EP0747376A1; EP0747376B1

Abstract

LA PRESENTE INVENCION SUMINISTRA COMPUESTOS CON CADENAS LATERALES NO BASICAS QUE CONTIENEN NITROGENO. LA PRESENTE INVENCION TAMBIEN SUMINISTRA COMPOSICIONES FARMACEUTICAS QUE CONTIENEN DICHOS COMPUESTOS, CONTENIENDO OPCIONALMENTE ESTROGENO O PROGESTINA, Y EL USO DE TALES COMPUESTOS, SOLOS, O EN COMBINACION CON ESTROGENO O PROGESTINA, PARA ALIVIAR LOS SINTOMAS DE POSMENOPAUSICOS, PARTICULARMENTE OSTEOPOROSIS, CONDICIONES CARDIOVASCULARES PATOLOGICAS RELACIONADAS, Y CANCER DEPENDIENTE DE LOS ESTROGENOS. LA PRESENTE INVENCION ADEMAS SUMINISTRA EL USO DE LOS COMPUESTOS DE LA PRESENTE INVENCION PARA INHIBIR LA ENFERMEDAD FIBROIDE UTERINA Y ENDOMETRIOSIS EN LAS MUJERES Y PROLIFERACION DE CELULAS NUSCULARES LISAS AORTALES, PARTICULARMENTE LA REESTENOSIS, EN LOS HUMANOS.

Description

Compuestos y composiciones con cadenas laterales que contienen hidrógeno no básicas.

Esta invención se refiere a los campos de la química farmacéutica y orgánica y proporciona compuestos novedosos de benzotiofeno con cadenas laterales no básicas que contienen nitrógeno, que son útiles para el tratamiento de las diversas indicaciones médicas asociadas con el síndrome posmenopáusico, y enfermedad fibroide uterina, endometriosis y proliferación celular del músculo liso aórtico. La invención además se refiere a composiciones farmacéuticas de los compuestos de la presente invención.

El "síndrome posmenopáusico" es un término usado para describir diversas afecciones patológicas que afectan frecuentemente a las mujeres que han entrado en, o completado, la metamorfosis fisiológica conocida como menopausia. Aunque se contemplan numerosas patologías mediante el uso de este término, tres efectos principales del síndrome posmenopáusico son el origen de la mayor preocupación médica a largo plazo: la osteoporosis, efectos cardiovasculares tales como hiperlipidemia y cáncer dependiente de estrógenos, particularmente cáncer de mama y uterino.

La osteoporosis describe un grupo de enfermedades que proceden de diversas etiologías, pero que se caracterizan por una pérdida neta de masa ósea por unidad de volumen. La consecuencia de esta pérdida de masa ósea y la fractura de hueso resultante es la incapacidad del esqueleto de proporcionar un soporte estructural adecuado para el cuerpo.

Uno de los tipos más comunes de osteoporosis es la asociada con la menopausia. La mayoría de las mujeres pierden de aproximadamente un 20% a aproximadamente un 60% de la masa ósea en el compartimento trabecular del hueso dentro de un período de 3 a 6 años después del cese de los menstruos. Esta pérdida rápida generalmente está asociada con un aumento de la resorción y formación ósea. Sin embargo, el ciclo de resorción es dominante y el resultado es una pérdida neta de masa ósea. La osteoporosis es una enfermedad común y grave entre las mujeres posmenopáusi-
cas.

Hay un número estimado de 25 millones de mujeres, solo en los Estados Unidos, que sufren esta enfermedad. Los resultados de la osteoporosis son personalmente perjudiciales y también suponen una gran pérdida económica debido a su cronicidad y a la necesidad de un apoyo extenso y a largo plazo (hospitalización y asistencia médica doméstica) por las secuelas de la enfermedad. Esto es particularmente cierto en los pacientes de mayor edad. Adicionalmente, aunque la osteoporosis no se considera en general un trastorno amenazador para la vida, una tasa de mortalidad del 20% al 30% está relacionada con fracturas de cadera en mujeres de edad avanzada. Un gran porcentaje de esta tasa de mortalidad puede estar asociado directamente con la osteoporosis posmenopáusica.

El tejido más vulnerable del hueso para los efectos de la osteoporosis posmenopáusica es el hueso trabecular. Este tejido con frecuencia se denomina hueso esponjoso o canceloso y está particularmente concentrado cerca de los extremos del hueso (cerca de las articulaciones) y en las vértebras de la columna vertebral. El tejido trabecular se caracteriza por pequeñas estructuras osteoides que están interconectadas entre sí, así como por un tejido cortical denso y más sólido que constituye la superficie externa y la diáfisis central del hueso. Esta red interconectada de trabéculas proporciona un soporte lateral a la estructura cortical externa y es crítica para la resistencia biomecánica de la estructura global.

En la osteoporosis posmenopáusica, es, principalmente, la resorción neta y la pérdida de las trabéculas lo que conduce al defecto y a la fractura de hueso. En vista de la pérdida de las trabéculas en las mujeres posmenopáusicas, no es sorprendente que las fracturas más comunes sean las asociadas con huesos que son muy dependientes del soporte trabecular, por ejemplo, las vértebras, el cuello de los huesos que soportan peso tal como el fémur y el antebrazo. De hecho, la fractura de cadera, las fracturas de Colles y las fracturas de aplastamiento de vértebras son marcas auténticas de osteoporosis posmenopáusica.

En este momento, el único procedimiento generalmente aceptado para el tratamiento de la osteoporosis posmenopáusica es el tratamiento de reposición de estrógenos. Aunque esta terapia es generalmente satisfactoria, la conformidad del paciente con la terapia es baja principalmente porque el tratamiento con estrógenos produce a menudo efectos secundarios indeseables.

Antes de la menopausia, la mayoría de las mujeres tienen menos incidencia de enfermedades cardiovasculares que los hombres de edad similar. Después de la menopausia, sin embargo, la proporción de enfermedades cardiovasculares en mujeres aumenta lentamente hasta igualarse con la proporción vista en hombres. Esta pérdida de protección se ha asociado a la pérdida de estrógenos y, en particular, a la pérdida de la capacidad de los estrógenos para regular los niveles de lípidos en suero. La naturaleza de la capacidad de los estrógenos para regular los lípidos en suero no se comprende bien, pero la evidencia hasta la fecha indica que los estrógenos pueden regular positivamente los receptores de los lípidos de baja densidad (LDL) en el hígado para eliminar el exceso de colesterol. Adicionalmente, los estrógenos parecen tener algún efecto sobre la biosíntesis del colesterol y otros efectos beneficiosos sobre la salud cardiovascular.

Se ha publicado en la bibliografía que las mujeres posmenopáusicas que tienen una terapia de reposición de estrógenos experimentan una vuelta de las concentraciones de lípidos en suero a aquellas iguales a las del estado premenopáusico. Así, los estrógenos podrían parecer un tratamiento razonable para esta afección. Sin embargo, los efectos secundarios de la terapia de reposición de estrógenos no son aceptables para muchas mujeres, limitando así el uso de esta terapia. Una terapia ideal para esta afección podría ser un agente que pudiera regular el nivel de lípidos en suero como lo hacen los estrógenos, pero que careciera de los efectos secundarios y de los riesgos asociados con la terapia de estrógenos.

La tercera patología principal asociada con el síndrome posmenopáusico es el cáncer de mama dependiente de estrógenos y, en un menor grado, cánceres de otros órganos dependientes de estrógenos, particularmente el útero. Aunque tales neoplasmas no están limitados solamente a las mujeres posmenopáusicas, son más abundantes en la población posmenopáusica de mayor edad. La quimioterapia actual de estos cánceres se ha basado en gran medida en el uso de compuestos antiestrogénicos, tales como, por ejemplo, tamoxifeno. Aunque tales agonistas-antagonistas mixtos tienen efectos beneficiosos en el tratamiento de estos cánceres, y los efectos secundarios de los estrógenos son tolerables en situaciones agudas amenazadoras para la vida, no son ideales. Por ejemplo, estos agentes pueden tener efectos estimuladores sobre ciertas poblaciones de células cancerígenas en el útero debido a sus propiedades estrogénicas (agonistas) y, por lo tanto, pueden ser contraproducentes en algunos casos. Una mejor terapia para el tratamiento de estos cánceres sería un agente que fuera un compuesto anti-estrogénico que tenga propiedades agonistas de los estrógenos despreciables o nulas sobre los tejidos reproductores.

En respuesta a la clara necesidad de nuevos agentes farmacéuticos que sean capaces de aliviar los síntomas de, entre otros, el síndrome posmenopáusico, la presente invención proporciona nuevos compuestos, composiciones farmacéuticas de los mismos, y procedimientos de usar tales compuestos para el tratamiento de síndrome postmenopáusico y otras afecciones patológicas relacionadas con estrógenos tales como aquellas mencionadas más adelante. La reducción de densidad y masa óseas que lleva a la osteoporosis que tiene lugar más raramente en hombres también está vinculada a la pérdida de regulación hormonal y es, por lo tanto, también una diana para terapia de acuerdo con el compuesto y los procedimientos de la invención actual.

La fibrosis uterina es un problema clínico antiguo y siempre presente que tiene una diversidad de nombres incluyendo enfermedad fibroide uterina, hipertrofia uterina, liomiomata uterina, hipertrofia de miometrio, fibrosis uterina y metritis fibrótica. Esencialmente, la fibrosis uterina es una afección en la que hay una deposición inapropiada de tejido fibroide sobre la pared del útero.

Esta afección es una causa de dismenorrea e infertilidad en las mujeres. La causa exacta de esta afección se entiende mal pero la evidencia sugiere que es una respuesta inapropiada de tejido fibroide a los estrógenos. Tal afección se ha producido en conejos mediante la administración diaria de estrógenos durante 3 meses. En cobayas, la afección se ha producido mediante la administración diaria de estrógenos durante cuatro meses. Adicionalmente, en ratas, los estrógenos provocan una hipertrofia similar.

El tratamiento más común de la fibrosis uterina incluye procedimientos quirúrgicos costosos y que algunas veces son una fuente de complicaciones tales como la formación de adherencias abdominales e infecciones. En algunas pacientes, la cirugía inicial es sólo un tratamiento temporal y los fibroides vuelven a crecer. En estos casos, se realiza una histerectomía que termina eficazmente con los fibroides pero también con la vida reproductora de la paciente. Además, pueden administrarse antagonistas de la hormona de liberación de gonadotropina, sin embargo su uso está moderado por el hecho de que pueden producir osteoporosis.

La endometriosis es una afección de dismenorrea grave, que va acompañada por dolor fuerte, hemorragias en las masas endometriales o en la cavidad peritoneal y con frecuencia conduce a la infertilidad. La causa de los síntomas de esta afección parecen ser crecimientos endometriales ectópicos que responden inapropiadamente al control hormonal normal y que están localizados en tejidos inapropiados. A causa de las localizaciones inapropiadas del crecimiento endometrial, el tejido parece iniciar unas respuestas locales semejantes a las inflamatorias provocando la infiltración de macrófagos y una cascada de acontecimientos que conducen a la iniciación de la respuesta dolorosa. La etiología exacta de esta enfermedad no se entiende bien y su tratamiento por terapia hormonal es diverso, está poco definido y está marcado por numerosos efectos secundarios indeseados y quizás peligrosos.

Uno de los tratamientos de esta enfermedad es el uso de una baja dosis de estrógenos para reprimir el crecimiento endometrial a través de un efecto de retroalimentación negativa sobre la liberación central de la gonadotropina y sobre la posterior producción de estrógenos por los ovarios; sin embargo, algunas veces es necesario usar una terapia continua de estrógenos para controlar los síntomas. Este uso de estrógenos puede conducir con frecuencia a efectos secundarios indeseables e incluso al riesgo de cáncer de endometrio.

Otro tratamiento consiste en la administración continua de progestinas que induce una amenorrea y mediante la represión de la producción de estrógenos por los ovarios, puede provocar regresiones de los crecimientos endometriales. El uso de una terapia crónica con progestina con frecuencia va acompañado por los efectos secundarios desagradables sobre el SNC de las progestinas y a menudo produce infertilidad debido a la represión de la función ovárica.

Un tercer tratamiento consiste en la administración de andrógenos débiles, que son eficaces en el control de la endometriosis; sin embargo, inducen efectos de masculinización graves. Varios de estos tratamientos para la endometriosis también han estado implicados en la aparición de un grado leve de pérdida ósea con una terapia continuada. Por lo tanto, son deseables nuevos procedimientos para tratar la endometriosis.

La proliferación de células del músculo liso aórtico juega un papel importante en enfermedades tales como la aterosclerosis y la restenosis. Se ha demostrado que la restenosis vascular después de una angioplastia coronaria transluminal percutánea (PTCA) es una respuesta tisular caracterizada por una fase temprana y una fase tardía. La fase temprana que se produce en un período de horas a días después de la PTCA es debida a trombosis con algunos vasoespasmos mientras que la fase tardía parece estar dominada por una proliferación y migración excesiva de las células del músculo liso aórtico. En esta enfermedad, el aumento de la motilidad celular y la colonización por tales células musculares y macrófagos contribuye significativamente a la patogénesis de la enfermedad. La excesiva proliferación y migración de las células del músculo liso aórtico vascular puede ser el mecanismo principal para la reoclusión de las arterias coronarias después de la PTCA, aterectomía, angioplastia láser y cirugía de injerto de desviación arterial. Véase "Intimal Proliferation of Smooth Muscle Cells as an Explanation for Recurrent Coronary Artery Stenosis after Percutaneous Transluminal Coronary Angioplasty", Austin et al., Journal of the American College of Cardiology, 8: 369-375 (agosto, 1985).

La restenosis vascular sigue siendo una complicación importante a largo plazo, que sigue a la intervención quirúrgica de las arterias bloqueadas mediante angioplastia coronaria transluminal percutánea (PTCA), aterectomía, angioplastia láser y cirugía de injerto de desviación arterial. En aproximadamente un 35% de los pacientes sometidos a PTCA, se produce reoclusión en un período de 6 meses después del procedimiento. Las estrategias actuales para tratar la restenosis vascular incluyen la intervención mecánica mediante dispositivos tales como tubos reemplazables o terapias farmacológicas que incluyen heparina, heparina de bajo peso molecular, cumarina, aspirina, aceites de pescado, antagonistas del calcio, esteroides y prostaciclina. Estas estrategias han fallado al frenar la velocidad de reoclusión y han sido ineficaces para el tratamiento y prevención de la restenosis vascular. Véase "Prevention of Restenosis after Percutaneous Transluminal Coronary Angioplasty: The Search for a ``Magic Bullet''", Hermans et al., American Heart Journal, 122: 171-187 (julio de 1991).

En la patogénesis de la restenosis, se produce una proliferación y migración excesiva de células como resultado de los factores del crecimiento producidos por constituyentes celulares de la sangre y de la pared del vaso arterial dañado, factores los cuales median la proliferación de las células del músculo liso en la restenosis vascular.

Los agentes que inhiben la proliferación y/o la migración de las células del músculo liso aórtico son útiles en el tratamiento y prevención de la restenosis. La presente invención proporciona el uso de compuestos como inhibidores de la proliferación de células del músculo liso aórtico y, por lo tanto, como inhibidores de la restenosis.

El documento WO 95/10513 se refiere a derivados de benzotiofeno como agonistas de estrógenos los cuales son útiles para tratar síndromes y enfermedades causadas por deficiencia de estrógenos. El documento EP-0617030 se refiere a derivados sulfonato y carbamato de 3-aroilbenceno[b]tiofenos los cuales son útiles para inhibir pérdida de hueso, disminuir niveles de colesterol de suero y tratar terapéuticamente carcinoma de mama y útero en mamíferos dependientes de hormonas.

La presente invención proporciona compuestos con cadenas que contienen laterales no básicas que contienen nitrógeno de fórmula I

1

en la que

R^{1} y R^{2}, independientemente, son H, OH, O(alquil(C_{1}-C_{6})), O-C(O)-alquil(C_{1}-C_{6}), O-C(O)-O(alquil(C_{1}-C_{6})), O-C(O)-Ar, O-C(O)-O-Ar, O-SO_{2}-(alquil(C_{4}-C_{6})), cloro, fluoro, o bromo;

V es S, O, o CH_{2}CH_{2};

W es CHOH, C(O), o CH_{2};

X es (CH_{2})_{n}, o (CH_{2})_{m}C(O);

R^{3} y R^{4} son cada uno, independientemente, H, alquilo(C_{1}-C_{6}), C(O)-alquil(C_{1}-C_{6}), C(O)-NH-alquil(C_{1}-C_{6}), C(O)-Ar, o conjuntamente con el nitrógeno al cual están unidos formando 1-pirrolidinilo, 1-piperidinilo, o una imida de 5- ó 6- miembros o amida cíclica;

m es 1 ó 2;

n es 1, 2, ó 3; y

Ar es fenilo opcionalmente sustituido;

dado que al menos uno de X, R^{3}, y R^{4} contiene un grupo funcional carbonilo.

Compuestos de la invención actual pueden tener un centro asimétrico. Así, tales compuestos pueden tener una configuración R- o S-, o una mezcla del mismo. Todos los isómeros tales se consideran parte de esta invención.

La presente invención también proporciona composiciones farmacéuticas que contienen compuestos de fórmula I, que contienen opcionalmente estrógeno o progestina, y el uso de tales compuestos, solos, o en combinación con estrógeno o progestina, para aliviar los síntomas de la sintomatología postmenopáusica, particularmente osteoporosis, afecciones cardiovasculares patológicas relacionadas, y cáncer dependiente de estrógenos. Como se usa en el presente documento, el término "estrógeno" incluye compuestos esteroides que tienen actividad estrogénica tal como, por ejemplo, 17b-estradiol, estrona, estrógeno conjugado (por ejemplo, Premarina®), estrógeno equino, 17-a-etinil estradiol, y similares. Como se usa en el presente documento, el término "progestina" incluye compuestos que tienen actividad progestacional tal como, por ejemplo, progesterona, noretidrinel, norgestrel, acetato de megastrol, noretindrona, y similares.

La presente invención proporciona adicionalmente el uso de los compuestos de la presente invención para inhibir enfermedad fibroide uterina y endometriosis en mujeres y proliferación de células del músculo liso aórtico, particularmente restenosis, en humanos.

Los términos generales usados en la descripción de los compuestos de la presente invención llevan sus significados usuales. Por ejemplo, "alquilo(C_{1}-C_{4})" se refiere a cadenas alifáticas de 1 a 4 átomos de carbono que incluyen metilo, etilo, isopropilo, butilo, n-butilo, y similares; y "alquilo(C_{1}-C_{6})" comprende los grupos incluidos en la definición de "alquilo(C_{1}-C_{4})" además de grupos tales como pentilo, iopentilo, hexilo, isohexilo y similares. "Alquilo(C_{4}-C_{6})" se refiere a cadenas alifáticas de 4 a 6 átomos de carbono que incluyen butilo, n-butilo, pentilo, isopentilo, hexilo, isohexilo, y similares.

El término "fenilo sustituido" se refiere a un grupo fenilo que tiene uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consta de alquilo(C_{1}-C_{4}), alcoxi(C_{1}-C_{5}), hidroxi, nitro, cloro, fluoro, o tri(cloro o fluoro)metilo. "Alcoxi(C_{1}-C_{5})" representa a un grupo alquilo(C_{1}-C_{5}) unido a través de un puente de oxígeno tal como, por ejemplo, metoxi, etoxi, n-propoxi, isopropoxi, y similares.

Debería entenderse que como se usa en el presente documento, las referencias a estructuras de alquilo y alcoxi incluyen también grupos cicloalquilo y cicloalcoxi donde el número de carbonos en la estructura es al menos 3.

Adicionalmente, se entiende que "imida" indica una estructura heterocíclica en la que un átomo de nitrógeno es adyacente a dos grupos funcionales carbonilo. Se entiende que una "amida" es una estructura que tiene un átomo de nitrógeno adyacente a un grupo funcional carbonilo individual, tal amida puede ser cíclica.

Los compuestos preferidos de la invención incluyen compuestos de fórmula I donde cualquiera o todas de las siguientes reivindicaciones aplican: V es S; W es C(O); y X es (CH_{2})_{2} o CH_{2}C(O), especialmente (CH_{2})_{2}. Los compuestos especialmente preferidos de fórmula I son aquellos en los que todas las limitaciones precedentes se aplican.

Otros compuestos preferidos de fórmula I incluyen aquellos compuestos en los que R^{1} y R^{2} son OH, O-C(O)-alquil(C_{1}-C_{6}), O-C(O)-O(alquil(C_{1}-C_{6})), O-C(O)-Ar, o O-C(O)-O-Ar, especialmente OH o OCH_{3}. De estos, los compuestos en los que R^{1} y R^{2} son el mismo que otro se prefieren particularmente.

Ciertos grupos R^{3} y R^{4} también demuestran características preferibles. Por ejemplo, aquellos compuestos de fórmula I en los que R^{3} y R^{4} conjuntamente con el nitrógeno al cual están unidos forman 1-pirrolidinilo, 1-piperidinilo, o una imida de 5- ó 6- miembros o amida cíclica. Un subgrupo preferido adicional de los compuestos preferidos 1-pirrolidinilo, 1-piperidinilo, imida, o amida cíclica incluye aquellos compuestos en los que R^{1} y R^{2} son OH u OCH_{3}.

Los compuestos más especialmente preferidos de fórmula I incluyen aquellos que tienen todas las limitaciones mencionadas, es decir, compuestos en los que V es S; W es C(O); X es (CH_{2})_{2} o CH_{2}C(O), especialmente (CH_{2})_{2}; R^{1} y R^{2} son OH, O-C(O)-alquil(C_{1}-C_{6}), O-C(O)-O(alquil(C_{1}-C_{6})), O-C(O)-Ar, y O-C(O)-O-Ar, especialmente OH o OCH_{3}, particularmente en el que R^{1} y R^{2} son el mismo como cualquier otro, y R^{3} y R^{4}, conjuntamente con el nitrógeno al cual se han unido forman 1-pirrolidinilo, 1-piperidinilo, o una imida o amida cíclica de 5- ó 6- miembros.

Los compuestos preferidos de fórmula I se limitan a aquellos en los que al menos un grupo funcional carbonilo se presenta en una posición adyacente al nitrógeno en la cadena lateral 3-. Es decir, al menos uno de X, R^{3}, y R^{4} debe contener un grupo funcional carbonilo.

Los procedimientos preferidos de esta invención obviamente incluyen aquellos en los que se usan los compuestos preferidos.

Los compuestos de la presente invención son derivados de benzo[b]tiofeno el cual se denomina y numera de acuerdo con el Ring Index, The American Chemical Society, como sigue.

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En los procedimientos para preparar los compuestos de la presente invención el material de partida es generalmente un precursor de la fórmula a continuación, la cual se puede preparar por medio de procedimientos conocidos.

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Típicamente, los dos grupos hidroxi están protegidos mediante grupos protectores hidroxi conocidos que son capaces de resistir acilación bajo condiciones de Friedel-Crafts estándar y reducción subsiguiente mediante un agente reductor fuerte. Los grupos protectores hidroxi preferidos son alquilo(C_{1}-C_{4}), y se prefiere especialmente metilo. Véanse, por ejemplo, Patentes de los Estados Unidos N^{os}.: 4.133.814; 4.380.635; y 4.418.068, J. W. Barton "Protective Groups in Organic Chemistry", J. G. W. McOmie (ed.), Plenum Pres, Nueva York, NY, 1973, capítulo 2, y T. W. Green, "Protective Groups in Organic Synthesis", John Wiley and Sons, Nueva York, NY, 1981, capítulo 7.

Tras preparación del precursor protegido deseado, el precursor se acila, usando condiciones estándar Friedel-Crafts, de acuerdo con procedimientos de acilación discutidos en las patentes de los Estados Unidos anteriormente incorporadas.

Todos los reactivos obtenidos a partir de fuentes comerciales se usaron sin purificación adicional a menos que se indique otra cosa. Se midieron RMN-^{1}H y RMN-^{13}C como se indica a 300 y 75 MHz respectivamente. Los cambios químicos de RMN-^{1}H se notificaron como valores d en ppm relativos al disolvente de RMN empleado. Las constantes de emparejamientos de RMN-^{1}H se comunican en Hertz (Hz) y se refieren a multiplicidades aparentes. La multiplicidad se indica como sigue: s (singlete), d (doblete), t (triplete), c (cuartete), m (multiplete), comp (complejo), s (amplio), y ap (aparente). La cromatografía en columna se llevó a cabo de acuerdo al procedimiento de Still y col. (Still, W. C.; Kahn, M.; Mitra, A. J. Org. Chem. 1978, 43: 2923) a menos que se indique lo contrario con gel de sílice EM Science (malla 230-400 ASTM). La cromatografía radial se llevó a cabo en un Cromatotron (Harrison Research) usando placas de 1, 2, ó 4 mm de grosor. Todas las reacciones sensibles al aire o humedad se llevaron a cabo bajo una atmósfera de nitrógeno o argón en cristalería rigurosamente seca. En todos los casos, las concentraciones se llevaron a cabo bajo presión reducida con un evaporador rotatorio.

Cuatro vías generales de síntesis, las cuales se usan para preparar compuestos de la presente invención, se destacan más adelante, en las que R^{1} y R^{2} son como se definen anteriormente.

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Ruta general nº 1

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Ruta general nº 2

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Ruta general nº 3

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Ruta general nº 4

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Los compuestos de la presente invención en los cuales W es CHOH se preparan siguiendo desprotección de dietanoato de sodio por disolución en un disolvente adecuado y reacción con un agente reductor, tal como, por ejemplo, hidruro de litio aluminio, bajo un gas inerte tal como nitrógeno.

La cantidad de agente reductor usado en esta reacción es una cantidad suficiente para reducir el grupo carbonilo a un grupo alcohólico a un grupo alcohólico (CHOH). Generalmente, se usa un exceso del agente reductor por equivalente del sustrato.

Los disolventes adecuados incluyen cualquier disolvente o mezcla de disolventes que permanecerá inerte bajo condiciones reductoras, tales como, por ejemplo, éter dietílico, dioxano, y tetrahidrofurano (THF). Se prefiere la forma anhidro de estos disolventes, y se prefiere especialmente el THF anhidro.

La temperatura empleada en esta etapa es aquella que es suficiente para llevar a cabo completación de la reducción de reacción. La temperatura ambiente, en el intervalo de aproximadamente 17ºC a aproximadamente 25ºC, generalmente es adecuada.

La longitud temporal para esta etapa es aquella cantidad necesaria para que la reacción tenga lugar. Típicamente, esta reacción lleva de aproximadamente 1 a aproximadamente 20 horas. El tiempo óptimo se puede determinar realizando un seguimiento del progreso de la reacción por medio de técnicas cromatográficas convencionales.

Un compuesto de la presente invención en los que W es CHOH se puede reducir adicionalmente para proporcionar compuestos en los que W es metileno por medio de procedimientos estándar. Esto se lleva a cabo suspendiendo el compuesto en un disolvente apropiado y enfriando bajo un gas inerte tal como nitrógeno. A esta suspensión se añade un agente reductor trialquilsilano apropiado, preferiblemente trietilsililo, y una ácido prótico razonablemente fuerte tal como ácido clorhídrico, ácido trifluoroacético, y similares.

Los disolventes adecuados pueden ser cualquier disolvente o mezcla de disolventes que permanece inerte bajo las condiciones de reacción empleadas en el procedimiento. Por ejemplo, se pueden usar los disolventes alcanos halogenados, tales como diclorometano y 1,2-dicloroetano, así como haloaromáticos tales como clorobenceno y similares. De estos, se prefiere diclorometano.

La temperatura empleada en esta etapa es aquella la cual es suficiente para llevar a cabo completación del presente procedimiento de reducción. Típicamente, la reacción se enfría a aproximadamente 0ºC y la disolución de reacción se mantiene en hielo hasta que la reacción se completa; sin embargo, la temperatura ambiente también es satisfactoria. En general, esta reacción se completa en menos de tres horas, y el progreso de la reacción se puede controlar por medio de técnicas estándar. El producto de esta reacción se extrae y purifica por medio de técnicas estándar.

Alternativamente, las cetonas del tipo mostrado en la vía general #1 previas a alquilación se pueden reducir al compuesto en el que W es metileno. En este procedimiento, los grupos protectores hidroxi R^{1} y R^{2}, los cuales son preferiblemente metilo, se eliminan opcionalmente, y el compuesto protegido o desprotegido se hace reaccionar con un agente reductor tal como hidruro de litio aluminio en presencia de un disolvente inerte que tiene un punto de ebullición en el intervalo de aproximadamente 150ºC a aproximadamente 200ºC. Mientras cada etapa de este procedimiento se lleva a cabo preferiblemente en recipientes separados, es posible llevar a cabo cada etapa del presente procedimiento en el mismo recipiente.

La cantidad de agente reductor usado en esta reacción es una cantidad suficiente para reducir el grupo carbonilo a un grupo metileno. Generalmente, se usa un exceso del agente reductor por equivalente del sustrato.

El disolvente usado en el presente procedimiento se requiere para tener un punto de fusión relativamente alto, en el intervalo de aproximadamente 150ºC a aproximadamente 20ºC, como se representa por disolventes tales como, por ejemplo, n-propilbenceno, diglima (1,1'-oxibis[2-metoxietano]), y anisol, y aluminio rojo (bis(hidruro de 2-metoxietoxialuminio) sódico), los cuales se usan también como el agente reductor. Cuando los sustituyentes R^{1} y R^{2} de compuestos de la presente invención son grupos protectores hidroxi, n-propilbenceno es el disolvente preferido. Cuando tales grupos protectores se eliminan opcionalmente primero previamente a su reducción, el reactivo preferido es aluminio rojo.

La temperatura usada en esta reacción es aquella la cual es suficiente para completar la reacción de reducción. Preferiblemente, la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante aproximadamente 15 minutos a aproximadamente 6 horas, y se dejó calentar a temperatura ambiente. Cuando R^{1} y R^{2} son grupos protectores hidroxi, se añadió una pequeña cantidad de agua desionizada a la mezcla seguida por la adición de una pequeña alícuota de de hidróxido sódico al 15%. Cuando R^{1} y R^{2} son OH, la reacción se desactiva cuidadosamente con exceso de ácido clorhídrico 1,0 N. La cantidad óptima de tiempo para llevar acabo estas reacciones, típicamente de aproximadamente 10 minutos a aproxi-
madamente 3 horas, se puede determinar monitorizando el progreso de la reacción por medio de técnicas estándar.

Tras la siguiente reducción de W a CHOH o CH_{2}, los grupos apropiados se pueden añadir como se describe previamente.

Cuando un grupo O-C(O)-alquil(C_{1}-C_{6}) u O-C(O)-Ar se desea en R_{1} y R_{2}, un compuesto dihidroxi de fórmula I, II, o III se hace reaccionar con un agente tal como cloruro de acilo, bromuro, cianuro, o azida, o con un anhídrido apropiado o anhídrido mixto. Las reacciones se llevan a cabo convenientemente en un disolvente básico tal como piridina, lutidina, quinolina o isoquinolina, o en un disolvente de amina terciaria, tal como trietilamina, tributilamina, metilpiperidina, y similares. La reacción también se lleva a cabo en un disolvente inerte tal como acetato de etilo, dimetilformamida, dimetilsulfóxido, dioxano, dimetoxietano, acetonitrilo, acetona, metiletilcetona, y similares, al cual se ha añadido al menos un equivalente de un desoxidante ácido tal como una amina terciaria. Si se desea, se pueden usar los catalizadores de acilación tales como 4-diaminopiridina o 4-pirolidinopiridina. Véase, por ejemplo, Haslam, y col., Tetrahedron, 36: 2409-2433 (1980).

Las reacciones de acilación las cuales proporcionan los grupos R^{1} y R^{2} anteriormente mencionados se llevan a cabo a temperaturas moderadas en el intervalo de aproximadamente 25ºC a aproximadamente 100ºC, frecuentemente bajo una atmósfera inerte tal como gas nitrógeno. Sin embargo, la temperatura ambiente es usualmente adecuada para la reacción a llevar a cabo.

Tales acilaciones del grupo hidroxi también se pueden llevar a cabo formando un éster activo de los ácidos carboxílicos apropiados en disolventes orgánicos inertes o por calor. Se usan catalizadores ácidos tales como ácido sulfúrico, ácido polifosfórico, ácido metanosulfónico, y similares.

Los grupos R^{1} y R^{2} anteriormente mencionados se pueden proporcionar también mediante un éster activo del ácido apropiado, tal como los ésteres formados mediante reactivos conocidos tales como diciclohexicarbodiimida, acilimidazoles, nitrofenoles, pentaclorofenoles, N-hidroxisuccinimida, y 1-hidroxibenzotriazol. Véase, por ejemplo, Bull. Chem. Soc. Japan, 38: 1979 (1965), y Chem. Ber., 788 y 2024 (1970).

Cada una de las técnicas anteriores que proporciona grupos O-C(O)-alquil(C_{1}-C_{6}) y O-C(O)-Ar se llevan a cabo en disolventes como se discute anteriormente. Estas técnicas, las cuales no producen un producto ácido en el curso de la reacción, por supuesto, no necesitan el uso de un desoxidante ácido en la mezcla de reacción.

Cuando se desea un compuesto en el cual R^{1} y R^{2} son SO_{2}-alquil(C_{4}-C_{6}), un compuesto dihidroxi se hace reaccionar con, por ejemplo, un derivado del ácido sulfónico apropiado tal como una sal cloruro de sulfonilo, bromuro de sulfonilo o amoniuro de sulfonilo, como se enseña por King y Monoir, J. Am. Chem. Soc., 97: 2566-2567 (1975). El compuesto dihidroxi también se puede hacer reaccionar con el anhídrido de sulfonilo apropiado. Tales reacciones se llevan a cabo bajo condiciones tales como se explican anteriormente en la discusión de reacción con haluros ácidos y similares.

Se pueden preparar compuestos de fórmula I tales que R^{1} y R^{2} son grupos protectores biológicos diferentes o, preferiblemente, el mismo grupo protector biológico. Los grupos protectores preferidos incluyen OCH_{3}, O-C(O)-C(CH_{3})_{3}, O-C(O)-C_{6}H_{5}, y O-SO_{2}-(CH_{2})_{3}-CH_{3}.

El término "grupos protectores biológicos" se refiere a aquellos sustituyentes R^{1} y R^{2} los cuales retrasan, se oponen a, o prohíben eliminación de tales grupos en un sistema biológico tal como, por ejemplo, que siga la administración a un humano de un compuesto de la presente invención que contiene los grupos R^{1} y R^{2} anteriormente descritos. Tales compuestos también son útiles para los procedimientos descritos en el presente documento, especialmente cuando W es CH_{2}.

Las siguientes preparaciones y ejemplos se presentan para ilustrar adicionalmente la preparación y uso de compuestos de la presente invención. No se desea que la invención se limite en alcance por razón de cualquiera de las siguientes preparaciones y ejemplos. Los números de los compuestos corresponden a aquellos dados en la tabla 1.

Preparación 1

Preparación de compuesto 1:

8

Se disolvió cloruro de p-anisoilo (1,54 g, 9,00 mmol, Aldrich Chemical Company) en CH_{2}Cl_{2} anhidro (100 ml). Se añadió a esta solución agitada 6-metoxifenil-2-(4-metoxifenil)-benzo[b]tiofeno (1,62 g, 6,00 mmol) preparado por el procedimiento de Jones et al. (J. Med. Chem. 1984, 27:1057). La mezcla resultante se enfrió hasta 0ºC y se añadió AlCl_{3} (1,20 g, 9,00 mmol) en pequeñas porciones durante un período de cinco minutos. Después de una hora la mezcla de reacción se vertió en agua helada (150 ml) y se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (3 x 75 ml). Las fases orgánicas se reunieron y se lavaron con NaOH 1N (30 ml), aguar (25 ml) y salmuera (25 ml). Las fases orgánica se secaron a continuación sobre MgSO_{4}. Después de eliminar el disolvente, el producto bruto resultante se sometió a cromatografía sobre una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo:hexanos; 3:7) dando 2,253 g (93%) de un sólido amarillo claro. El producto se purificó posteriormente por recristalización en acetona/metanol proporcionando 2,109 g (87%) de compuesto 1.

IR (CHCl_{3}) n_{max} 3020, 3015, 2970, 2940, 2840, 1600, 1475, 1253, 1218, 1167; RMN de ^{1}H (300 MHz, DMSO d_{6}) d 7,64-7,69 (m, 3H), 7,29-7,32 (m, 3H), 6,86-7,00 (m, 5H), 3,83 (s, 3H) 3,76 (s, 3H).

RMN de ^{13}C (75,489 MHz, DMSO d_{6}) d 192, 163,61, 159,47, 157,35, 141, 139,36, 133,17, 131,81, 130, 129,63, 125,17, 123,26, 115,00, 114,35, 114,07, 105,11, 55,49, 55,13; FD^{+}-MS para C_{24}H_{20}O_{4}S = 404. Análisis elemental C_{24}H_{20}O_{4}S-Calculado: C, 71,27; H, 4,98; S, 7,93; O, 15,82; Encontrado: C, 71,50; H, 5,00; S, 7,98; O, 15,77.

Preparación 2

Preparación de compuesto 2:

9

Se disolvió el compuesto 1 (0,405 g, 1,00 mmol) en 2 ml de DMF seco. Se añadieron a esta solución agitada 3,0 ml de etanotioato sódico 0,50 M (NaEtS) en DMF. La temperatura de reacción se incrementó hasta 80ºC durante cuatro horas. La reacción se diluyó con acetato de etilo (10 ml), y se añadió agua (10 ml). La mezcla se neutralizó con HCl 1N y se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 ml). Los extractos orgánicos se reunieron, se lavaron con salmuera (4 x 20 ml), se secaron sobre MgSO_{4} y se evaporaron a presión reducida dando un sólido amarillo pálido. El sólido se purificó posteriormente por cromatografía radial (placa de 2 mm, disolvente de elución acetato de etilo al 5%/CH_{2}Cl_{2}). El rendimiento de compuesto 2 como un sólido amarillo espumoso fue 0,307 g (79%).

IR (CHCl_{3}) n_{max} 3585, 3265, 3022, 3012, 2970, 2940, 2840, 1602, 1476, 1254, 1163; RMN de ^{1}H (CDCl_{3}) d 7,70-7,73 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 7,52-7,55 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,31-7,34 (m, 3H), 6,94-6,98 (dd, 1H, J = 9,0 Hz, J = 2,4 Hz), 6,73-6,76 (d, 2H, J = 8,7 Hz), 6,66-6,69 (d, 2H, J = 9,1 Hz), 3,88 (s, 3H), 3,74 (s, 3H); RMN de ^{13}C (CDCl_{3}) d 192,92, 159,95, 158,58, 156,47, 141,91, 138,89, 132,71, 131,67, 129,16, 129,09, 128,85, 124,72, 122,82, 114,27, 113,70, 112,95, 103,39, 54,49, 54,08; FD^{+}-MS para C_{23}H_{18}O_{4}S = 390. Análisis elemental C_{23}H_{18}O_{4}S-Calculado: C, 70,75; H, 4,65; Encontrado: C, 70,93; H, 4,56.

Ejemplo 1

Preparación de compuesto 11:

10

Se disolvió el compuesto 2 (3,0 g, 7,69 mmol) en DMF (100 ml) y se calentó hasta 70ºC. Se añadió a esta solución agitada K_{2}CO_{3} (10,6 g, 76,8 mmol) seguido por N,N-dimetil cloroacetamida (3,74 g, 30,8 mmol). La mezcla de reacción se calentó hasta 100ºC y se dejó agitar durante 24 horas. El disolvente se eliminó a presión reducida y la mezcla resultante se disolvió en MeOH y se filtraron las sales. La mezcla de reacción bruta se recristalizó en H_{2}O/metanol (2:1) dando 2,81 g (77%) de compuesto 11 como producto.

RMN de ^{1}H (CDCl_{3}) d 7,90 (d, 2H, J = 9,7 Hz), 7,65 (d, 1H, J = 9,7 Hz), 7,45 (d, 2H, J = 9,7 Hz), 7,43 (s, 1H), 7,08 (dd, 1H, J = 9,7 Hz), 6,93 (d, 2H, J = 9,7 Hz), 6,87 (d, 2H, J = 9,7 Hz), 4,78 (s, 2H), 4,00 (s, 3H), 3,87 (s, 3H), 3,16 (s, 3H), 3,08 (s, 3H); FD^{+}-MS = 475; Análisis elemental C_{27}H_{25}NO_{5}S-Calculado: C, 68,19; H, 5,30; N, 2,94; Encontrado: C, 68,46; H, 5,18; N, 2,99.

Preparación 3

Preparación de compuesto 27:

11

Se añadió K_{2}CO_{3} (5,3 g, 38,4 mmol) seguido por bromoacetato de metilo (8 ml, 84,5 mmol) a una solución de fenol. Se añadió compuesto 2 (5,0 g, 12,8 mmol) agitando en DMF a temperatura ambiente. La solución se calentó hasta 80ºC durante 1 hora y luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se vertió en salmuera/acetato de etilo (300 ml, 1:1). La mezcla se extrajo con acetato de etilo (3 x 100 ml) y los extractos orgánicos reunidos se lavaron concienzudamente con salmuera, se secaron (MgSO_{4}) y se filtraron. La concentración proporcionó un jarabe amarillo que se secó posteriormente a presión reducida proporcionando 5,33 g (90%) de 27 como un sólido cristalino blanco que se usó sin purificación adicional.

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RMN de ^{1}H (CDCl_{3}) d 7,78 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 7,51 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,30-7,35 (m, 3H), 6,96 (dd, J =9,0, 2,3 Hz, 1H), 6,72-6,78 (solapamiento d, 4H), 4,62 (s, 2H), 3,90 (s, 3H), 3,80 (s, 3H), 3,74 (s, 3H).

Ejemplo 2

Preparación de compuesto 7:

12

La reacción del compuesto 27 (0,42 g, 0,91 mmol), piperidin-clorhidrato (0,56 mg, 4,58 mmol) y Al(CH_{3})_{3} (2,29 ml, 4,58 mmol) proporcionó 0,42 g (90%) de compuesto 7 como una espuma color castaño.

RMN de ^{1}H (CDCl_{3}) d 7,79 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 7,52 (d, J =8,8 Hz, 1H), 7,30-7,35 (m, 3H), 6,96 (dd, J = 9,0 Hz, 2,9 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 6,78 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 4,66 (s, 2H), 3,90 (s, 3H), 3,75 (s, 3H), 3,53 (t, J = 4,2 Hz, 2H), 3,42 (t, J = 4,2 Hz, 2H), 1,49-1,69 (serie de m, 6H); IR (CHCl_{3}) 1639 cm^{-1}; FD^{+}-MS 515 (M^{+}).

Preparación 4

Preparación de compuesto 28:

13

Se añadió K_{2}CO_{3} (2,07 g, 15,0 mmol) seguido por 1,2-dibromoetano (10 ml) al compuesto 2 (3,90 g, 10,0 mmol), agitando en metil etil cetona (25 ml). La solución se llevó a reflujo y se mantuvo a esta temperatura durante 18 horas. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente, se filtró y se concentró. La purificación del residuo bruto por cromatografía en columna ultrarrápida (8 cm X 15 cm gel de sílice, acetato de etilo al 50% en hexanos) proporcionó el compuesto 28 como un sólido amarillo 4,32 g (87%).

RMN de ^{1}H (CDCl_{3}) d 7,75-7,78 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 7,52-7,55 (d, 1H, J = 8,9 Hz), 7,31-7,35 (m, 3H), 6,94-6,98 (dd, 1H, J = 8,9 Hz, J = 2,3 Hz), 6,74-6,78 (m, 4H); IR (CHCl_{3}) 3030, 3015, 2965, 2942, 2835, 1601, 1475,1253, 1240, 1167 cm^{-1}; FD^{+}-MS 496 (Br79), 498 (Br81); Análisis elemental C_{25}H_{21}BrO_{4}S-Calculado: C, 60,37; H, 4,26; Br, 16,07; Encontrado: C, 60,22; H, 4,54; Br, 16,20.

Preparación 5

Preparación de compuesto 29:

14

Se agitaron en DMF durante 144 horas, seguido por calentamiento hasta 80ºC durante 1 hora el compuesto 28 (0,5 g, 1,0 mmol) y azida de sodio (0,12 g, 2,0 mmol). El disolvente se eliminó a presión reducida y el residuo se sometió a cromatografía en columna sobre gel de sílice usando acetato de etilo/hexanos (1:1), proporcionando 0,41 g (89%) de compuesto 29.

RMN de ^{1}H (DMSO-d_{6}) d 7,64-7,66 (m, 3H), 7,28-7,33 (m, 3H), 6,85-6,99 (m, 5H), 4,15-4,18 (m, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,65 (s, 3H), 3,60-3,63 (m, 2H); FD^{+}-MS para C_{25}H_{21}N_{3}O_{4}S = 459; Análisis elemental C_{25}H_{21}N_{3}O_{4}S-Calculado: C, 65,35; H, 4,61; N, 9,14; Encontrado: C, 65,55; H, 4,79; N, 9,17.

Preparación 6

Preparación de compuesto 30:

15

Se sometió a hidrogenación a temperatura ambiente durante 24 horas el compuesto 29 (11,1 g, 24,2 mmol) en 50 ml de THF y 85 ml de etanol, con 1,5 g de paladio al 5% sobre carbón. La mezcla de reacción se filtró, se concentró y se recristalizó en acetato de etilo/hexano proporcionando 6,06 g (58%) de compuesto 30. Se preparó la sal HCl de una alícuota para caracterización físico química.

IR (KBr) n_{max} 3418, 2937, 2836, 1634, 1598, 1574, 1531, 1498, 1473, 1438, 1350, 1294, 1251, 1167, 1112, 1046, 1025, 830; RMN de ^{1}H (DMSO-d_{6}) d 8,22-8,23 (s ancho,2H), 7,64-7,61 (t, 3H), 7,28-7,31 (d, 3H), 4,19-4,20 (m, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,69 (s, 3H), 3,15-3,17 (m, 2H); FD^{+}-MS para C_{25}H_{24}ClNO_{4}S = 433; Análisis elemental C_{25}H_{24}ClNO_{4}S-Calculado: C, 63,89; H, 5,15; N, 2,98; Encontrado: C, 63,80; H, 5,11; N, 2,83.

Ejemplo 3

Preparación de compuesto 17:

16

Se agitó en 75 ml de agua a temperatura ambiente durante 18 horas el compuesto 30 (1,0 g, 2,3 mmol), cloruro de benzoilo (0,35 g, 2,5 mmol) e hidróxido sódico (0,1 g, 2,5 mmol). El producto se extrajo con acetato de etilo, se secó sobre sulfato sódico, se concentró y se sometió a cromatografía sobre gel de sílice usando acetato gradiente de acetato de etilo/metanol, proporcionando 1,03 g (83%) de compuesto 17.

RMN de ^{1}H (DMSO-d_{6}) d 8,63 (m, 1H), 7,80-7,82 (m, 1H), 7,63-7,68 (m, 3H), 7,40-7,49 (m, 3H), 7,26-7,31 (m, 4H), 6,85-6,98 (m, 5H), 4,19-4,20 (m, 2H), 3,15-3,17 (m, 2H); FD^{+}-MS para C_{32}H_{27}NO_{5}S = 537; Análisis elemental C_{32}H_{27}NO_{5}S-Calculado: C, 71,49; H, 5,06; N, 2,60; Encontrado: C, 71,72; H, 5,12; N, 2,62.

Los siguientes compuestos, para los cuales se muestran los datos físicos, se pueden preparar de una forma análoga a los procedimientos detallados en los ejemplos anteriores.

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Ejemplo 4

Compuesto 3:

17

RMN de ^{1}H (DMSO-d_{6}) d 9,78 (s, 1H),9,72 (s, 1H), 7,66 (d, 2H, J = 10 Hz), 7,34 (s, 1H), 7,26 (d, 1H, J = 10 Hz), 7,18 (d, 2H, J = 10 Hz), 6,91 (d, 2H, J = 10 Hz), 6,84 (dd, 1H, J = 10 Hz), 6,66 (d, 2H, J = 10 Hz), 4,12 (t, 2H, J = 8 Hz), 3,58 (t, 2H, J = 8 Hz), 2,16 (s ancho,2H), 1,64 (s ancho,4H); EI MS para C_{28}H_{25}NO_{5}S = 487 (M*); Análisis elemental C_{28}H_{25}NO_{5}S-Calculado: C, 68,98; H, 5,17; N, 2,87; Encontrado: C, 69,08; H, 5,08; N, 2,69.

Ejemplo 5

Compuesto 4:

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18

RMN de ^{1}H (CDCl_{3}) d 7,77 (d, 2H, J = 10 Hz), 7,53 (d, 1H, J = 10 Hz), 7,35 (m, 3H), 6,96 (dd, 1H, J = 10 Hz, J = 3 Hz), 6,75 (dd, 4H, J = 10 Hz, J = 3 Hz), 4,16 (t, 2H, J = 8 Hz), 3,89 (s, 3H), 3,74 (s, 3H), 3,68 (t, 2H, J = 8 Hz), 3,45 (s ancho, 2H), 2,34 (s ancho,2H), 1,88 (s ancho, 4H); FD MS para C_{30}H_{29}NO_{5}S = 515 (M*); Análisis elemental C_{30}H_{29}NO_{5}S-Calculado: C, 69,88; H, 5,67; N, 2,72; Encontrado: C, 69,71; H, 5,67; N, 2,73.

Ejemplo 6

Compuesto 5:

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19

RMN de ^{1}H (CDCl_{3}) d 7,74 (d, 2H, J = 9,7 Hz), 7,53 (d, 1H, J = 9,7 Hz), 7,33 (m, 3H), 6,97 (dd, 1H, J = 9,7 Hz), 6,77 (d, 2H, J = 9,7 Hz), 6,73 (d, 2H, J = 9,7 Hz), 4,12 (t, 2H, J = 9,7 Hz), 3,9 (m, 5H), 2,75 (s, 3H), 2,67 (s, 4H); FD+ MS=515.

Ejemplo 7

Compuesto 6:

20

IR (KBr) n_{max} 3228, 2973, 1659, 1597, 1537, 1499, 1467, 1420, 1359, 1258, 1165, 1116, 1037, 908, 835, 807, 540; RMN de ^{1}H (DMSO d_{6}) d 9,75 (s, 1H), 9,71 (s, 1H), 7,56-7,62 (m, 3H), 7,21-7,32 (m, 2H), 6,84-6,91 (d, 2H, J = 6,3 Hz), 6,66-6,84 (d, 2H), 4,07-4,09 (t, 2H, J = 5,3 Hz), 3,47-3,48 (t, 2H, J = 5,3 Hz), 2,47-2,48 (t, 2H), 2,12-2,18 (m, 2H), 1,84-1,87 (m, 2H); FD+ MS para C_{27}H_{23}NO_{5}S=473; Análisis elemental C_{27}H_{23}NO_{5}S-Calculado: C, 68,48; H, 4,90; N, 2,96; Encontrado: C, 68,21; H, 5,13; N, 2,99.

Ejemplo 8

Compuesto 8:

21

RMN de ^{1}H (acetona-d_{6}) d 8,68 (s ancho,2H), 7,71 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,33-7,40 (m, 2H), 7,26 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 6,82-6,94 (m, 3H), 6,73 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 4,53 (s, 2H), 3,51 (t, J = 4,0 Hz, 2H), 3,36 (t, J = 4,1 Hz, 2H), 1,71-1,90 (serie de m, 4H), IR (CHCl_{3}) 3307 (b), 1645 cm^{-1}; FD^{+}-MS 473 (M^{+}).

Ejemplo 9

Compuesto 9:

22

RMN de ^{1}H (acetona-d_{6}) d 8,68 (s ancho,1H), 8,60 (s ancho,1H), 7,70 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 7,35- 7,41 (m, 2H), 7,27 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 6,84-6,95 (m, 3H), 6,73 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 4,81 (s, 2H), 3,47 (t, J = 4,1 Hz, 4H), 1,43-1,67 (serie de m, 6H), IR (CHCl_{3}) 3300 (b), 1639 cm^{-1}; FD^{+}-MS 487 (M^{+}); Análisis elemental C_{28}H_{25}NO_{5}S-Calculado: C, 68,98; H, 5,17; N, 2,87; Encontrado: C, 67,50; H, 5,43; N, 2,84.

Ejemplo 10

Compuesto 10:

23

RMN de ^{1}H (DMSO-d_{6}) d 9,81 (s, 1H), 9,73 (s, 1H), 7,64 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 7,33 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,15-7,25 (m, 3H), 6,82-6,91 (m, 3H), 6,69 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 4,85 (s, 2H), 3,20-3,35 (m, 5H), 1,5-1,57 (serie de m, 4H), 0,81-0,92 (m, 3H); IR (CHCl_{3}) 3300 (b), 1625 cm^{-1}; FD^{+}-MS 489 (M^{+}); Análisis elemental C_{28}H_{27}NO_{5}S-Calculado: C, 68,69; H, 5,56; N, 2,86; Encontrado: C, 67,75; H, 5,49; N, 2,88.

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Ejemplo 11

Compuesto 12:

24

RMN de ^{1}H (MeOD d_{4}) d 7,71 (d, 2H, J = 9,0 Hz), 7,4 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 7,26 (s, 1H), 7,20 (d, 2H, J = 9,0 Hz), 6,87 (m, 2H), 6,42 (d, 2H, J = 9,0 Hz), 3,05 (s, 3H), 2,96 (s, 3H); FD^{+}-MS = 447; Análisis elemental C_{25}H_{21}NO_{5}S-Calculado: C, 67,10; H, 4,73; N, 3,13; Encontrado: C, 67,32; H, 4,94; N, 2,99.

Ejemplo 12

Compuesto 13:

25

RMN de ^{1}H (MeOD d_{4}) d 7,68 (d, 2H, J = 9,0 Hz), 7,41 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 7,26 (s, 1H), 7,18 (d, 2H, J = 9,0 Hz), 6,86 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 6,80 (d, 2H, J = 9,0 Hz), 6,63 (d, 2H, J = 9,0 Hz), 4,15 (t, 2H, J = 6 Hz), 3,84 (t, 2H, J = 6 Hz), 2,62 (s, 4H); FD^{+}-MS = 487; Análisis elemental C_{27}H_{21}NO_{6}S-Calculado: C, 66,52; H, 4,34; N, 2,87; Encontrado: C, 66,65; H, 4,55; N, 2,83.

Ejemplo 13

Compuesto 15:

26

RMN de ^{1}H (CDCl_{3}) d 7,56-7,82 (t, 2H, J = 5,8 Hz), 7,33-7,36 (t, 2H, J = 2,9 Hz), 6,97-6,98 (m, 1H), 6,73-6,80 (m, 4H), 4,08-4,14 (m, 2H), 3,89-3,92 (d, 3H, J = 8,5 Hz), 3,76-3,78 (d, 3H, J = 8,7 Hz), 3,64-3,70 (m, 2H), 3,51-3,58 (m, 2H), 2,38-2,43 (m, 2H), 2,03-2,08 (m, 2H); FD^{+}-MS para C_{29}H_{27}NO_{5}S = 501.

Ejemplo 14

Compuesto 18:

27

IR (KBr) n_{max} 3311, 2953, 1637, 1597, 1538, 1502, 1468, 1422, 1358, 1309, 1258, 1166, 1113, 1038, 907, 836; RMN de ^{1}H (DMSO d_{6}) d 9,68-9,73 (d, 2H), 8,63 (m, 1H), 7,76-7,81 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 7,61-7,64 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 7,38-7,48 (m, 2H), 7,30 (s, 1H), 7,12-7,20 (m, 4H), 6,91-6,93 (m, 2H, J = 7,0 Hz), 6,81-6,82 (m, 1H), 6,62-6,64 (d, 2H, J = 6,6 Hz), 4,11-4,13 (m, 2H), 3,56-3,60 (m, 2H); FD^{+}-MS para C_{30}H_{23}NO_{5}S = 5409; Análisis elemental C_{30}H_{23}NO_{5}S-Calculado: C, 70,71; H, 4,55; N, 2,75; Encontrado: C, 70,67; H, 4,66; N, 2,68.

Ejemplo 15

Compuesto 19:

28

IR (KBr) n_{max} 3375, 2932, 2856, 1598, 1539, 1506, 1468, 1422, 1354, 1306, 1258, 1166, 1113, 1035, 907, 836, 647, 620; RMN de ^{1}H (DMSO d_{6}) d 9,70 (s ancho,2H), 7,61-7,64 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 7,50 (s, 1H), 7,21-7,24 (d, 1H), 7,13-7,19 (d, 2H), 6,76-6,98 (m, 3H), 6,61-6,63 (d, 2H, J = 7,7 Hz), 3,40-3,45 (m, 2H), 2,81-2,84 (m, 2H), 0,85-1,81 (m, 11H); FD^{+}-MS para C_{31}H_{31}NO_{5}S = 529; Análisis elemental C_{31}H_{31}NO_{5}S-Calculado: C, 70,30; H, 5,90; N, 2,64; Encontrado: C, 70,43; H, 6,10; N, 2,55.

Ejemplo 16

Compuesto 20:

29

IR (KBr) n_{max} 3363, 2931, 2854, 1598, 1565, 1503, 1468, 1422, 1357, 1315, 1255, 1166, 1038, 908, 836, 808, 672; RMN de ^{1}H (DMSO d_{6}) d 9,70-9,75 (d, 2H), 7,62-7,65 (d, 2H, J = 7,9 Hz), 7,31 (s, 1H), 7,21-7,24 (d, 1H), 7,13-7,16 (d, 2H, J = 8,2 Hz), 6,88-6,91 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 6,81-6,84 (d, 1H), 6,64-6,66 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 3,96-3,99 (m, 2H), 3,30 (m, 2H), 1,28-1,60 (m, 5H), 0,96-1,27 (m, 6H); FD^{+}-MS para C_{30}H_{30}N_{2}O_{5}S = 530; Análisis elemental C_{30}H_{30}N_{2}O_{5}S-Calculado: C, 67,91; H, 5,70; N, 5,28; Encontrado: C, 68,12; H, 5,99; N, 5,39.

Ejemplo 17

Compuesto 21:

30

RMN de ^{1}H (DMSO d_{6}) d 9,70 (s, 2H), 7,60-7,65 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 7,50 (s, 1H), 7,14-7,22 (m, 2H), 6,80-7,00 (m, 4H), 6,62-6,66 (m, 2H), 4,01-4,04 (m, 2H), 3,50-3,70 (m, 2H), 1,40-1,78 (m, 5H), 1,01-1,39 (m, 6H); FD^{+}-MS para C_{30}H_{29}NO_{5}S = 519.

Ejemplo 18

Compuesto 26:

31

RMN de ^{1}H (DMSO d_{6}) d 9,75 (d, 2H) 7,62-7,65 (d, 2H), 7,31 (d, 1H), 7,16-7,19 (d, 2H), 6,83-6,91 (m, 4H), 6,66-6,68 (m, 2H), 3,97-3,99 (m, 2H), 3,59-3,81 (m, 2H), 1,77 (s, 3H); FD^{+}-MS para C_{25}H_{21}NO_{5}S = 447.

Los compuestos de fórmula I de la presente invención son útiles para aliviar los síntomas del síndrome postmenopáusico, en particular osteoporosis, enfermedades cardiovasculares asociadas, en particular hiperlipidemia; y cáncer dependiente de estrógenos, en particular carcinoma de mama y de útero dependiente de estrógenos. El término "aliviar" se define para que incluya el tratamiento profiláctico de una persona que tiene riesgo de sufrir uno o más síntomas o estados patológicos de síndrome postmenopáusico, mantener bajo control tales síntomas o estados patológicos y tratar los síntomas o estados patológicos existentes, cuando sea apropiado.

Los compuestos de la presente invención también son eficaces para inhibir enfermedad fibroide uterina y endometriosis en mujeres y proliferación de células del músculo liso en seres humanos. Los siguientes ejemplos de ensayos biológicos no limitantes ilustran los procedimientos de la presente invención.

I. Preparación General para Modelo en Ratas Postmenopáusicas

En los ejemplos que ilustran los procedimientos, se usó un modelo postmenopáusico en el cual se determinaron los efectos de diferentes tratamientos en diversos parámetros biológicos, incluyendo la concentración de colesterol en el suero, peso uterino, actividad peroxidasa eosinofílica, proliferación de células MCF-7, y densidad ósea.

Se obtuvieron ratas Sprage-Dawley hembra de setenta y cinco días de edad (peso que varía de 200 a 225 g) de Charles River Laboratories (Portage, MI). Los animales bien se ovariectomizaron bilateralmente (OVX) o bien se expusieron a un procedimiento quirúrgico falso (Intactas) en Charles River Laboratories, y después se enviaron después de una semana. Tras llegar, se albergaron en jaulas de mano metálicas en grupos de 3 ó 4 por jaula y tienen acceso a voluntad a comida (contenido de calcio aproximadamente 0,5%) y agua durante una semana. La temperatura ambiente se mantuvo a 22,2º \pm 1,7ºC con una humedad relativa mínima de 40%. El fotoperiodo en la habitación fue de 12 horas de luz y 12 horas de oscuridad.

II. Pauta de Dosificación de Cuatro Días

Después de una semana de periodo de aclimatación (por lo tanto, dos semanas después de la OVX), se inició la dosificación diaria con compuesto de ensayo. 17-etinil-estradiol (EE_{2}) (Sigma Chemical Co., San Luís, MO), una forma oralmente disponible de estrógeno, o el compuesto de ensayo se dio oralmente, a menos que se establezca lo contrario, como una suspensión en carboximetilcelulosa al 1% o se disolvió en ciclodextrina al 20%. Los animales se dosificaron oralmente durante cuatro días. Tras la pauta de dosificación, los animales se pesaron y anestesiaron con una mezcla ketamina:xilazina (2:1, v:v). Se recogió una muestra de sangre mediante punción cardiaca. Los animales se sacrificaron después mediante asfixia con CO_{2}, el útero se eliminó a través de una incisión medial, y se determinó el peso uterino en húmedo.

A. Análisis de Colesterol

Las muestras de sangre se dejaron coagular a temperatura ambiente durante 2 horas, y se obtuvo suero tras centrifugación durante 10 minutos a 3000 rpm. Se determinó el colesterol en suero usando un ensayo de colesterol de alta resolución de Boehringer Mannheim Diagnostics. Brevemente se oxidó el colesterol a colest-4-en-3-ona y peróxido de hidrógeno. El peróxido de hidrógeno se hizo reaccionar después con fenol y 4-aminofenazona en presencia de peroxidasa para producir una tinción imina de p-quinona, la cual se leyó espectrofotométricamente a 500 nm. El ensayo entero se automatizó usando una Biomek Automated Workstation.

B. Ensayo de Peroxidasa Uterina Eosinofílica (EPO)

Los úteros se mantuvieron a 4ºC hasta el tiempo de análisis enzimático. Los úteros se homogeneizaron después en 50 volúmenes de tampón Tris 50 mM (pH-8,0) que contiene Tritón X-100 al 0,005%. Tras la adición de peróxido de hidrógeno al 0,01% y o-fenilendiamina 10 mM (concentraciones finales) en tampón Tris, se controló mediante seguimiento el incremento en absorbancia durante un minuto a 450 nm. La presencia de eosinófilos en el útero, como se mide mediante ensayo de la actividad peroxidasa eosinofílica, es una indicación de actividad estrogénica de un compuesto. La velocidad máxima de un intervalo de 15 segundos se determinó durante la parte inicial, lineal de la curva de reacción.

C. Resultados

Los datos presentados en la tabla 1 más adelante muestran resultados comparativos entre ratas control ovariectomizadas, ratas tratadas con EE_{2}, y ratas tratadas con ciertos compuestos de la presente invención. Aunque EE_{2} causa un decrecimiento en colesterol en suero cuando se administra oralmente a 0,1 mg/kg/día, también ejerce una acción estimuladora marcada en el útero tal que el peso uterino de ratas tratadas con EE_{2} fue sustancialmente mayor que el peso uterino de animales de ensayo ovariectomizados. La respuesta uterina a estrógeno se reconoce bien en la técnica.

En contraste, los compuestos de la presente invención reducen sustancialmente colesterol en suero comparados a los animales control ovariectomizados sin el incremento general de peso uterino que está asociado con compuestos de estrógeno conocidos en la técnica. Este beneficio de reducción de colesterol de suero sin afectar adversamente peso uterino es bastante raro y deseable.

Como se expresa en los datos a continuación, la estrogenicidad también se valoró evaluando la respuesta adversa de infiltración eosinofílica en el útero. Los compuestos de la presente invención no causan un incremento en el número de eosinófilos observados en la capa estromal de ratas ovariectomizadas, o en casos raros un incremento sólo a las concentraciones más altas probadas, como se mide mediante ensayo de actividad peroxidasa eosinofílica, mientras EE_{2} causó un incremento sustancial, esperado en infiltración eosinofílica.

Los datos presentados en la tabla 1 reflejan la respuesta de 5 a 6 ratas por tratamiento.

TABLA 1

Compuesto	Dosis	Peso Uterino	EPO uterino	Colesterol sérico
	(mg/kg)	(% de incremento	(Vmáx.)	(% de reducción
		respecto a OVX)		respecto a OVX)
Etinilestradiol	0,1	235,2*	120,0*	89,6*
3	0,1	13,3	8,0	38,1*
	1	17,8	7,8	45,8*
	10	57,6*	8,9	72,4*
6	0,1	-9	3,6	33,6*
	1	15,4	1,4	52,4*
	10	40,3*	3,7	67,5*
7	0,1	-0,5	5,2	3,4
	1	-16,2	3,7	14,6
	10	8,4	4,7	-41,9*
8	0,1	-4,7	3,6	17,4
	1	25,6*	6,1	69,6*
	10	61,7*	39,1	70,3*
8	0,01	-22,9	3,5	27,2
	0,1	-12,6	4,4	25,8
	1	-11,5	3,7	39,4*
	10	-1,3	3,7	64,5*
9	0,1	-10,0	2,8	4,2
	1	6,5	3,6	22,0
	10	51,7*	32	74,3*
10	0,1	1,5	4,3	-40,0*
	1	-6,7	3,1	19,1
	10	38,0*	17,0	67,1*

TABLA 1 (continuación)

Compuesto	Dosis	Peso Uterino	EPO uterino	Colesterol sérico
	(mg/kg)	(% de incremento	(Vmáx.)	(% de reducción
		respecto a OVX)		respecto a OVX)
12	0,1	-7,7	3,7	27,8*
	1	15,4	6,7	48,2*
	10	60,7*	122,3*	71,2*
13	0,1	22,2	1,9	37,6*
	1	7,2	1,7	12,6
	10	-4,0	2,5	30,1*
18	0,1	16,1	3,2	-10,8
	1	25,7	3,6	-12,2
	10	12,6	3,6	12,8
19	0,1	7	5,4	14,5
	1	-25,5*	3,7	20,1
	10	47,0*	29,3*	52,2*
20	0,1	-29,9	3,0	-27,2
	1	-27,4	2,5	-6,0
	10	-32,7	2,9	-15,4
21	0,1	-5,5	3,1	9,3
	1	-11,5	2,6	0,5
	10	8,6	2,4	24,0*
26	0,1	-17,5	1,3	15,8
	1	-28,6*	0,7	19,0
	10	25,8*	13,6	32,8
*indica que el valor es significativamente diferente del control de OVX

Además de los beneficios demostrados de los compuestos de la presente invención, especialmente cuando se compara con estradiol, los datos anteriores demuestran claramente que estos compuestos no son imitadores de estrógenos. Además, no se observaron efectos toxicológicos deletéreos (supervivencia) con tratamiento mediante uno cualquiera de los compuestos de la presente invención.

III. Pauta de Dosificación de Treinta y Cinco Días

Tras el procedimiento de Preparación General descrito anteriormente, las ratas se trataron diariamente durante 35 días (6 ratas por grupo de tratamiento) y se sacrificaron mediante decapitación en el día 36º. El periodo de tiempo del día 35 es suficiente para permitir efecto máximo sobre densidad óptica, medido como se describe en el presente documento. En el momento del sacrificio, los úteros se eliminaron, se diseccionaron fuera de tejidos extraños y los contenidos fluidos se expelieron antes de la determinación del peso en húmedo con el fin de confirmar la deficiencia en estrógenos asociada con ovariectomía completa. El peso uterino se redujo rutinariamente aproximadamente un 75% en respuesta a ovariectomía. Los úteros se situaron después en formalina tamponada neutral al 10% para permitir subsiguentes análisis histológicos.

A. Ensayo de Densidad Ósea

Las tibias derechas se escinden y analizaron en la metáfisis distal a un 1 ml del surco patelar con absorciometría de fotones individual. Los resultados de las medidas del densitómetro representan un cálculo de densidad ósea como una función del contenido mineral óseo y de la anchura del hueso.

De acuerdo con los procedimientos anteriormente destacados, los compuestos de la presente invención y EE_{2} en hidroxipropil-b-ciclodextrina al 20% se administraron oralmente a los animales de ensayo.

B. Resultados

La ovariectomía en los animales de ensayo acusó una reducción significativa en la densidad de la tibia comparada con controles intactos, tratados con vehículo. EE_{2} administrada oralmente previene esta pérdida, pero el riesgo de la estimulación uterina con este tratamiento está siempre presente.

Los compuestos de la presente invención también previenen pérdida ósea en una manera general, dependiente de dosis. De acuerdo con ello, los compuestos de la presente son útiles para el tratamiento del síndrome postmenopáusico, particularmente osteoporosis.

IV. Ensayo de Proliferación MCF-7

Las células de adenocarcinoma MCF-7 (ATCC HBT 22) se mantuvieron en MEM (medio esencial mínimo, libre de rojo fenol, Sigma, San Luís, MO) suplementado con suero fetal bovino (FBS) al 10% (V/V), L-glutamina (2 mM), piruvato de sodio (1 mM), HEPES {(N-[2-hidroxietil]piperazina-N'-[2-ácido etanosulfónico] 10 mM}, aminoácidos no esenciales e insulina bovina (1 \mug/ml) (medio de mantenimiento). Diez días antes del ensayo, las células MCF-7 se cambiaron a medio de mantenimiento suplementado con suero fetal bovino destinado en carbón activo recubierto de dextrano al 10% (medio de ensayo DCC-FBS) en lugar de FBS al 10% para reducir reservas internas de esteroides. Las células MCF-7 se eliminaron a partir de matraces de mantenimiento que usan medio de disociación de células (HBSS libre de Ca^{++}/Mg^{++} (libre de rojo fenol) suplementado con HEPES 10 mM y EDTA 2 mM). Las células se lavaron dos veces con medio de ensayo y se ajustaron a 80.000 células/ml. Se añadieron aproximadamente 100 ml (8.000 células) a pocillos de microcultivo de fondo plano (Costar 3596) e incubado a 37ºC en un incubador humidificado al 5% de CO_{2} durante 48 horas para permitir adherencia celular y equlibración después de transferir. Las diluciones seriadas de fármacos o DMSO como un control de diluyente se prepararon en medio de ensayo y se transfirieron 50 ml a microcultivos por triplicado seguidos por 50 ml de medio de ensayo para un volumen final de 200 ml. Después de 48 horas adicionales a 37ºC en un incubador humidificado con CO_{2} al 5%, los microcultivos se sometieron a un pulso con timidina tritiada (1 uCi/pocillo) durante 4 horas. Los cultivos se terminaron congelando a -70ºC durante 24 horas seguidas por fusión y recogida de microcultivos. Las muestras se contaron mediante centelleo líquido. Los resultados en la tabla 2 a continuación muestran la DE_{50} para ciertos compuestos de la presente invención.

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TABLA 2

Compuestos	DE_{50} (nm)
3	600
7	>1000
8	10
9	10
10	50
13	>1000
18	500
19	0,1
20	0,1

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V. Inhibición de Tumores Mamarios Inducidos por DMBA

Los tumores mamarios dependientes de estrógenos se producen en ratas hembra Sprage-Dawley las cuales se compran de Harlan Industries, Indianápolis, Indiana. A aproximadamente 55 días de edad, las ratas recibieron un suministro oral único de 20 mg de 7,12-dimetilbenz[a]antraceno (DMBA). Aproximadamente 6 semanas después de la administración de DMBA, las glándulas mamarias se palparon a intervalos semanales en busca de la aparición de los tumores. Dondequiera que aparezcan uno o más tumores, los diámetros más largo y más corto de cada tumor se midieron con un calibrador métrico, las medidas se registran, y ese animal se selecciona para experimentación. Se hace un intento para distribuir uniformemente los diversos tamaños de tumores en los grupos tratados y control tales que los tumores de talla media se distribuyen equivalentemente en grupos de ensayo. Los grupos control y los grupos de ensayo para cada experimento contienen de 5 a 9 animales.

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Los compuestos de la invención actual se administran bien a través de inyecciones intraperitoneales en goma arábiga al 2%, u oralmente. Los compuestos administrados oralmente bien se disuelven o bien se suspenden en 0,2 ml de aceite de maíz. Cada tratamiento, que incluye tratamientos de control con goma arábiga y aceite de maíz, se administra una vez al día a cada animal de ensayo. Después de la medida inicial del tumor y la selección de animales de ensayo, los tumores se miden cada semana mediante el procedimiento mencionado anteriormente. El tratamiento y medidas de animales continúa durante 3 a 5 semanas tiempo al cual se determinan las áreas finales de los tumores. Para cada tratamiento con compuesto y control, se determina el cambio en el área media del tumor.

VI. Procedimientos de Ensayo de Fibrosis Uterina

Ensayo 1

Se administra un compuesto de la presente invención a entre 3 y 20 mujeres que tienen fibrosis uterina. La cantidad de compuesto administrada es de 0,1 a 1000 mg/día, y el periodo de administración es 3 meses.

Las mujeres se observan durante el periodo de administración, y hasta 3 meses después de la discontinuidad de administración, para efectos sobre fibrosis uterina.

Ensayo 2

Se usa el mismo procedimiento como en el ensayo 1, excepto que el periodo de administración es 6 meses.

Ensayo 3

Se usa el mismo procedimiento que en el ensayo 1, excepto en el periodo de administración que es 1 año.

Ensayo 4

A. Inducción de tumores fibroides en cobaya

La estimulación con estrógenos prolongada se usa para inducir leiomiomata en cobayas hembras sexualmente maduras. Los animales se administran con estradiol 3-5 veces por semana mediante la inyección durante 2-4 meses o hasta que aparecen los tumores. Se administran diariamente tratamientos constituidos por un compuesto de la invención o vehículo durante 3-16 semanas y después los animales son sacrificados y los úteros recogidos y analizados en busca de regresión del tumor.

B. Implantación de tejido fibroide uterino en ratones atímicos

El tejido de leiomiomas humanos está implantado dentro de la cavidad peritoneal y/o miometrio uterino de ratones atímicos, hembras, castradas, sexualmente maduras. Se suministra estrógeno exógeno para inducir crecimiento del tejido explantado. En algunos casos, las células tumorales recogidas se cultivan in vitro antes de implantación. El tratamiento que consta de un compuesto de la presente invención o vehículo se suministra mediante lavado gástrico en una base diaria durante 3-16 semanas y los implantes se retiran y miden en busca de crecimiento o regresión. En el momento del sacrificio, los úteros se recogen para valorar el estado del órgano.

Ensayo 5

Se recoge y mantiene tejido de tumores fibroides uterinos humanos, in vitro, como cultivos no transformados primarios. Las muestras quirúrgicas se hacen pasar a través de una malla o tamiz estéril, o alternativamente se desgarra aparte del tejido circundante para producir una suspensión de células aisladas. Las células se mantienen en medios que contienen suero y antibiótico al 10%. Se determinan las velocidades de crecimiento en presencia o ausencia de estrógenos. Las células se ensayan en su capacidad para producir componente del complemento C3 y su respuesta a factores de crecimiento y hormona del crecimiento. Los cultivos in vitro se ensayan para comprobar su respuesta proliferativa después del tratamiento con progestinas, GnRH, un compuesto de la presente invención y vehículo. Los niveles de receptores de hormonas esteroideas, se evalúan semanalmente para determinar si las características importantes de las células se mantienen in vitro. Se utiliza el tejido de 5-25 pacientes.

La actividad en al menos uno de los ensayos anteriores indica que los compuestos de la presente invención son de potencial en el tratamiento de la fibrosis uterina.

VII. Procedimiento de Ensayo de Endometriosis

En los ensayos 1 y 2, pueden examinarse los efectos de la administración de los compuestos de la presente invención durante 14 días y 21 días sobre el crecimiento del tejido endometrial explantado.

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Ensayo 1

Se usan de doce a treinta ratas hembra adultas, de la cepa CD, como animales de ensayo. Se dividen en tres grupos de igual número. Se controla el ciclo de estro de todos los animales. En el día del proestro, se lleva a cabo cirugía en cada hembra. A las hembras de cada grupo, se les retira el cuerno uterino izquierdo, se secciona en pequeños cuadrados y los cuadrados se suturan de forma poco precisa en diversos sitios adyacentes al flujo sanguíneo mesentérico. Además, en las hembras del Grupo 2 se retiran los ovarios.

En el día después de la cirugía, los animales de los Grupos 1 y 2 reciben inyecciones intraperitoneales de agua durante 14 días, mientras que los animales del Grupo 3 reciben inyecciones intraperitoneales de 1,0 mg de un compuesto de la presente invención por kilogramo de peso corporal durante el mismo período. Después de 14 días de tratamiento, cada hembra se sacrifica y se retiran y se preparan para un examen histológico los explantes endometriales, las cápsulas suprarrenales, el resto del útero y los ovarios, donde sea aplicable. Los ovarios y las cápsulas suprarrenales se pesan.

Ensayo 2

Se usan de doce a treinta ratas hembras adultas de la cepa CD como animales de ensayo. Se dividen en dos grupos iguales. Se controla el ciclo estro de todos los animales. En el día del proestro, se lleva a cabo cirugía en cada hembra. A las hembras de cada grupo, se les extrae el cuerno uterino izquierdo, se secciona en pequeños cuadrados y los cuadrados se suturan de forma poco precisa en diversos sitios adyacentes al flujo sanguíneo mesentérico.

Aproximadamente 50 días después de la cirugía, los animales asignados al Grupo 1 reciben inyecciones intraperitoneales de agua durante 21 días, mientras que los animales del Grupo 2 reciben inyecciones intraperitoneales de 1,0 mg de un compuesto de la presente invención por kilogramo de peso corporal durante el mismo período. Después de 21 días de tratamiento, cada hembra se sacrifica, se extraen los explantes endometriales y las cápsulas suprarrenales y se pesan. Los explantes se miden como una indicación del crecimiento. Se controlan los ciclos estro.

Ensayo 3

A. Inducción Quirúrgica de Endometriosis

Se usan autoinjertos de tejido endometrial para inducir la endometriosis en ratas y/o conejos. Los animales hembra en madurez reproductora se someten a ooforectomía bilateral, y se suministran estrógenos exógenamente proporcionando así un nivel constante y específico de hormona. Se implanta tejido endometrial autólogo en el peritoneo de 5-150 animales y se suministran estrógenos para inducir el crecimiento del tejido explantado. El tratamiento que consta de un compuesto de la presente invención se suministra por lavado de estómago en una base diaria durante 3-16 semanas, y los implantes se retiran y se miden para comprobar el crecimiento o la regresión. En el momento del sacrificio, se recoge el cuerno intacto del útero para evaluar el estado del endometrio.

B. Implantación de tejido endometrial humano en ratones atímicos

Se implanta tejido procedente de lesiones endometriales humanas en el peritoneo de ratones atímicos, sexualmente maduros, castrados, hembra. Se suministran estrógenos exógenos para inducir el crecimiento del tejido explantado. En algunos casos, las células endometriales recogidas se cultivan in vitro antes de la implantación. Se suministra un tratamiento que consta de un compuesto de la presente invención mediante lavado de estómago en una base diaria durante 3-16 semanas, los implantes se retiran y se miden para comprobar el crecimiento o la regresión. En el momento del sacrificio, los úteros se recogen para evaluar el estado del endometrio intacto.

Ensayo 4

Se recoge tejido de lesiones endometriales humanas y se mantiene in vitro como cultivos no transformados primarios. Se presionan muestras quirúrgicas a través de una malla o tamiz estéril, o alternativamente se desgarran del tejido circundante para producir una sola suspensión celular. Las células se mantienen en medio que contiene un 10% de suero y antibiótico. Se determinan las velocidades de crecimiento en presencia y en ausencia de estrógenos. Las células se ensayan para comprobar su capacidad para producir el componente C3 del complemento y su respuesta a factores del crecimiento y a hormona del crecimiento. Los cultivos in vitro se evalúan con respecto a su respuesta proliferativa después del tratamiento con progestinas, GnRH, un compuesto de la invención, y vehículo. Se valoran semanalmente los niveles de receptores de hormonas esteroideas para determinar si se mantienen las características importantes de las células in vitro. Se utiliza el tejido de 5-25 pacientes.

La actividad en cualquiera de los ensayos anteriores indica que los compuestos de la presente invención son útiles en el tratamiento de la endometriosis.

VIII. Procedimiento de Ensayo de la Inhibición de la Proliferación/Restenosis de Células del Músculo Liso Aórtico

Los compuestos de la presente invención tienen capacidad para inhibir la proliferación de las células del músculo liso aórtico. Esto puede demostrarse usando células de músculo liso cultivadas derivadas de aorta de conejo, determinándose la proliferación mediante la medición de la síntesis de DNA. Las células se obtienen por el procedimiento de explante que se describe en Ross, J. of Cell Bio. 50: 172 (1971). Las células se cultivan en placas de microvaloración de 96 pocillos durante cinco días. Los cultivos se hacen confluentes y se detiene el crecimiento. Después las células se transfieren a medio de Eagle Modificado de Dulbecco (DMEM) que contiene plasma pobre en plaquetas del 0,5 al 2%, L-glutamina 2 mM, 100 U/ml de penicilina, 100 mg/ml de estreptomicina, 1 mC/ml de ^{3}H-timidina, 20 ng/ml de factor del crecimiento procedente de plaquetas y concentraciones variables de los presentes compuestos. Se prepara una solución madre de los compuestos en dimetilsulfóxido y después se diluye a una concentración apropiada (0,01-30 mM) en el medio de ensayo anterior. Después, las células se incuban a 37ºC durante 24 horas bajo 5% de CO_{2}/95% de aire. Al final del período de 24 horas, las células se fijan en metanol. Después se determina la incorporación de ^{3}H-timidina en el DNA por recuento de centelleo como se describe en Bonin, et al., Exp. Cell Res. 181: 475-482
(1989).

La inhibición de la proliferación celular del músculo liso aórtico mediante los compuestos de la presente invención se demuestra adicionalmente determinando sus efectos sobre las células que crecen exponencialmente. Se siembran células del músculo liso de aorta de conejo en placas de cultivo de tejidos de 12 pocillos en DMEM que contiene suero bovino fetal al 10%, L-glutamina 2 mM, 100 U/ml de penicilina y 100 \mug/ml de estreptomicina. Después de 24 horas, las células se unen y el medio se reemplaza por DMEM que contiene suero al 10%, L-glutamina 2 mM, 100 U/ml de penicilina, 100 \mug/ml de estreptomicina y las concentraciones deseadas de los compuestos. Las células se dejan crecer durante cuatro días. Las células se tratan con tripsina y se determina el número de células de cada cultivo mediante recuento usando un contador ZM-Coulter.

La actividad de los ensayos anteriores indica que los compuestos de la presente invención son de uso potencial en el tratamiento de la restenosis.

Terapia de Combinación

La presente invención también proporciona un procedimiento para aliviar el síndrome posmenopáusico en mujeres, que comprende el procedimiento mencionado anteriormente usando compuestos de la presente invención y que además comprende la administración a una mujer de una cantidad eficaz de estrógeno o progestina. Estos tratamientos son particularmente útiles para tratar la osteoporosis y reducir el colesterol en suero debido a que el paciente recibirá las ventajas de cada compuesto farmacéutico mientras que los compuestos de la presente invención deberían inhibir los efectos secundarios indeseables de estrógeno y progestina. La actividad de estos tratamientos de combinación en cualquiera de los ensayos posmenopáusicos, supra, indica que los tratamientos de combinación son útiles para aliviar los síntomas del síndrome posmenopáusico en mujeres.

Diversas formas de estrógenos y progestina están disponibles comercialmente. Los agentes basados en estrógenos incluyen, por ejemplo, etenil estrógeno (0,01-0,03 mg/día), mestranol (0,05-0,15 mg/día) y hormonas estrogénicas conjugadas tales como Premarin® (Wyeth-Ayerst; 0,3-2,5 mg/día). Los agentes basados en progestina incluyen, por ejemplo, medroxiprogesterona, tal como Provera® (Upjohn; 2,5-10 mg/día), noretilnodrel (1,0-10,0 mg/día) y noretindrona (0,5-2,0 mg/día). Un compuesto preferido basado en estrógenos es Premarina y el noretilnodrel y la noretindrona son agentes basados en progestina preferidos.

El procedimiento de administración de cada agente basado en estrógenos y basado en progestina es consistente con el que se conoce en la técnica. Para la mayoría de los procedimientos de la presente invención, los compuestos de la presente invención se administran de forma continua, de 1 a 3 veces al día. Sin embargo, puede ser especialmente útil una terapia cíclica en el tratamiento de la endometriosis o puede usarse de forma precisa durante ataques dolorosos de la enfermedad. En el caso de la restenosis, la terapia puede limitarse a intervalos cortos (1-6 meses) después de procedimientos médicos tales como la angioplastia.

Como se usa en el presente documento, el término "cantidad eficaz" significa una cantidad de compuesto de la presente invención que es capaz de aliviar los síntomas de los diversos trastornos patológicos descritos en este documento. La dosis específica de un compuesto administrado de acuerdo con esta invención, por supuesto, se determinará por las circunstancias particulares que rodean al caso incluyendo, por ejemplo, el compuesto administrado, la ruta de administración, el estado del paciente y la afección patológica a tratar. Una dosis diaria típica contendrá un nivel de dosificación no tóxico de aproximadamente 5 mg a aproximadamente 600 mg/día de un compuesto de la presente invención. Las dosis diarias preferidas serán generalmente de 15 mg a aproximadamente 80 mg/día.

Los compuestos de esta invención se pueden administrar mediante una diversidad de vías incluyendo las vías oral, rectal, transdérmica, subcutánea, intravenosa, intramuscular e intranasal. Estos compuestos preferiblemente se formulan antes de la administración, cuya selección se decidirá por el médico correspondiente. Así, otro aspecto de la presente invención es una composición farmacéutica que comprende una cantidad eficaz de un compuesto de la invención actual que contiene opcionalmente una cantidad eficaz de estrógeno o progestina y un vehículo, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable.

Los ingredientes activos totales en tales formulaciones comprenden del 0,1% al 99,9% en peso de la formulación. Por "farmacéuticamente aceptable" se entiende que el vehículo, el diluyente, los excipientes y la sal deben ser compatibles con los otros ingredientes de la formulación y no perjudiciales para el receptor de la misma.

Las formulaciones farmacéuticas de la presente invención pueden preparase mediante procedimientos conocidos en la técnica usando ingredientes bien conocidos y fácilmente adquiribles. Por ejemplo, los compuestos de la invención actual, con o sin un compuesto de estrógeno o progestina, pueden formularse con excipientes, diluyentes o vehículos comunes y conformarse en comprimidos, cápsulas, suspensiones, polvos y similares. Los ejemplos de excipientes, diluyentes y vehículos que son adecuados para tales formulaciones incluyen los siguientes: cargas y diluyentes tales como almidón, azúcares, manitol y derivados silícicos; agentes aglutinantes tales como carboximetilcelulosa y otros derivados de celulosa, alginatos, gelatina y polivinilpirrolidona; agentes humectantes tales como glicerol; agentes disgregantes tales como carbonato cálcico y bicarbonato sódico; agentes para retrasar la disolución tales como parafina; aceleradores de la resorción tales como compuestos de amonio cuaternario; agentes activos de superficie tales como alcohol cetílico, monoestearato de glicerol; vehículos de adsorción tales como caolín y bentonita; y lubricantes tales como talco, calcio y estearato de magnesio, y polietilglicoles sólidos.

Los compuestos también pueden formularse en forma de elixires y disoluciones para la administración oral conveniente o como disoluciones apropiadas para la administración parenteral, por ejemplo, mediante las vías intramuscular, subcutánea o intravenosa. Adicionalmente, los compuestos se adecúan bien a la formulación como formas de dosificación de liberación sostenida y similares. Las formulaciones pueden constituirse de tal forma que liberen el ingrediente activo sólo o preferiblemente en una localización fisiológica particular, posiblemente durante un período de tiempo. Los recubrimientos, envueltas y matrices protectoras pueden fabricarse, por ejemplo, a partir de sustancias poliméricas o ceras.

Los compuestos de la presente invención, solos o en combinación con un agente farmacéutico de la presente invención, se administrarán generalmente en una formulación conveniente.

Formulaciones

En las formulaciones que se muestran a continuación, "ingrediente activo" significa un compuesto de fórmula I, II o III.

Formulación 1

Cápsulas de Gelatina

Se preparan cápsulas de gelatina dura usando lo siguiente:

Ingrediente	Cantidad (mg/cápsula)
Ingrediente activo	0,1-1000
Almidón, NF	0-650
Polvo fluido de almidón	0-650
Fluido de silicona a 0,00035 m^{2}/s (350 centistokes)	0-15

La formulación anterior puede cambiarse de acuerdo con las variaciones razonables proporcionadas.

Se prepara una formulación de comprimido usando los ingredientes que se muestran a continuación:

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Formulación 2

Comprimidos

Ingrediente	Cantidad (mg/comprimido)
Ingrediente activo	2,5-1000
Celulosa, microcristalina	200-650
Dióxido de silicio, de pirólisis	10-650
Ácido esteárico	5-15

Los componentes se mezclan y se comprimen para formar comprimidos.

Alternativamente, comprimidos que contienen, cada uno, de 2,5 a 1000 mg de ingrediente activo se elaboran como sigue:

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Formulación 3

Comprimidos

Ingrediente	Cantidad (mg/comprimido)
Ingrediente activo	25-1000
Almidón	45
Celulosa, microcristalina	35
Polivinilpirrolidona (como una solución al 10% en agua)	4
Carboximetilcelulosa sódica	4,5
Estearato de magnesio	0,5
Talco	1

El ingrediente activo, el almidón, y la celulosa se pasan a través de un tamiz de malla U.S. Nº. 45 y se mezclan minuciosamente. La solución de polivinilpirrolidona se mezcla con los polvos resultantes los cuales después se pasan a través de un tamiz de malla U.S. Nº. 14. Los gránulos así producidos se secan a 50-60ºC y se pasan a través de un tamiz de malla U.S. Nº. 18. A continuación, el carboximetilalmidón sódico, el estearato de magnesio y el talco, previamente pasados a través de un tamiz U.S. Nº. 60, se añaden a los gránulos los cuales, después de la mezcla, se comprimen en una máquina de fabricar comprimidos para obtener comprimidos.

Se preparan suspensiones que contienen cada una de 0,1 a 1000 mg de medicamento por 5 ml de dosis como sigue:

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Formulación 4

Suspensiones

Ingrediente	Cantidad (mg/5 ml)
Ingrediente activo	0,1-1000 mg
Carboximetilcelulosa sódica	50 mg
Jarabe	1,25 mg
Solución de ácido benzoico	0,10 ml
Aromatizante	c.s.
Colorante	c.s.
Agua purificada, c.s.p.	5 ml

El medicamento se pasa a través de un tamiz de malla U.S. Nº. 45 y se mezcla con la carboximetilcelulosa sódica y el jarabe para formar una pasta homogénea. La disolución de ácido benzoico, el aromatizante y el colorante se diluyen con algo del agua y se añaden, con agitación. A continuación, se añade suficiente agua para producir el volumen requerido.

Se prepara una solución de aerosol que contiene los siguientes ingredientes:

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Formulación 5

Aerosol

Ingrediente	Cantidad (% en peso)
Ingrediente activo	0,25
Etanol	25,75
Propulsor 22 (Clorodifluorometano)	70,00

El ingrediente activo se mezcla con etanol y la mezcla se añade a una parte del propulsor 22, se enfría a 30ºC, y se transfiere a un dispositivo de carga. La cantidad requerida después se suministra a un recipiente de acero inoxidable y se diluye con el resto del propulsor. Después se ajustan unidades de válvula al recipiente.

Se preparan supositorios como se indica a continuación:

Formulación 6

Supositorios

Ingrediente	Cantidad (mg/supositorio)
Ingrediente activo	250
Glicéridos de ácidos grasos saturados	2.000

El ingrediente activo se pasa a través de un tamiz de malla U.S. Nº. 60 y se suspende en los glicéridos de ácidos grasos saturados previamente fundidos usando el calor mínimo necesario. Después la mezcla se vierte en un molde de supositorios con una capacidad nominal de 2 g y se deja enfriar.

Se prepara una formulación intravenosa como se indica a continuación:

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Formulación 7

Disolución intravenosa

Ingrediente	Cantidad
Ingrediente activo	50 mg
Solución salina isotónica	1.000 ml

La disolución de los ingredientes anteriores se administra por vía intravenosa a un paciente a una velocidad de 1 ml por minuto.

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Formulación 8

Cápsula de Combinación I

Ingrediente	Cantidad (mg/cápsula)
Ingrediente activo	50
Premarina	1
Avicel pH 101	50
Almidón 1500	117,50
Aceite de silicio	2
Tween 80	0,50
Cab-O-sil	0,25

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Formulación 9

Cápsula de Combinación II

Ingrediente	Cantidad (mg/cápsula)
Ingrediente activo	50
Noretilnodrel	5
Avicel pH 101	82,50
Almidón 1500	90
Aceite de silicio	2
Tween 80	0,50

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Formulación 10

Comprimido de Combinación

Ingrediente	Cantidad (mg/cápsula)
Ingrediente activo	50
Premarina	1
Almidón de maíz NF	50
Povidona, K29-32	6
Avicel pH 101	41,50
Avicel pH 102	136,50
Crospovidona XL10	2,50
Estearato de magnesio	0,50
Cab-O-Sil	0,50

Claims

1. Un compuesto con cadenas laterales no básicas que contienen nitrógeno de fórmula I

32

en la que

V es S, O, o CH_{2}CH_{2};

W es CHOH, C(O), o CH_{2};

X es (CH_{2})_{n}, o (CH_{2})_{m}C(O);

alquilo también incluye cicloalquilo donde el número de carbonos en la estructura es al menos 3;

m es 1 ó 2;

n es 1, 2, ó 3; y

Ar es fenilo opcionalmente sustituido;

con la condición de que al menos uno de X, R^{3}, y R^{4} contiene un grupo funcional carbonilo.

2. El compuesto de la reivindicación 1 en el que V es S.

3. El compuesto de la reivindicación 1 en el que W es C(O).

4. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con las reivindicaciones 1-3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y opcionalmente una cantidad efectiva de estrógeno o progestina, en combinación con un vehículo, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable.

5. Un compuesto de fórmula I como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para usar en aliviar los síntomas del síndrome postmenopáusico.

6. Un compuesto de fórmula I como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para usar en aliviar los síntomas de la afección patológica del síndrome postmenopáusico de osteoporosis.

7. Un compuesto de fórmula I como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para usar en aliviar los síntomas de la afección patológica del síndrome postmenopáusico relacionada con una enfermedad cardiovascular.

8. Un compuesto de fórmula I como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para usar en aliviar los síntomas de una enfermedad cardiovascular relacionada con hiperlipidemia.

9. Un compuesto de fórmula I como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para usar en aliviar los síntomas de la afección patológica del síndrome postmenopáusico de cáncer dependiente de estrógenos.

10. Un compuesto de fórmula I como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para usar en aliviar los síntomas de cáncer de mama o uterino.

11. Un compuesto de fórmula I como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para usar en aliviar los síntomas de enfermedad fibroide uterina.

12. Un compuesto de fórmula I como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para usar en aliviar los síntomas de endometriosis.

13. Un compuesto de fórmula I como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para usar en aliviar los síntomas de proliferación celular del músculo liso aórtico.

14. Un compuesto de fórmula I como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para usar en aliviar los síntomas de restenosis.