ES2274372T3 - Uso de antisepticos en la fabricacion de un preparado farmaceutico para la prevencion o el tratamiento de inflamaciones en el interior del cuerpo humano. - Google Patents

Abstract

Uso de por lo menos un agente antiséptico combinado con un portador en partí- culas que comprende por lo menos uno de entre un preparado liposomal, un pre- parado de microesferas, un preparado de nanopartículas, un preparado de Partí- culas Porosas Grandes o un preparado de moléculas con recubrimiento poliméri- co por láser pulsado, en la fabricación de un preparado farmacéutico para la pre- vención o el tratamiento de inflamaciones en el interior del cuerpo humano o ani- mal, en el que el interior consta de aquellas partes del cuerpo confinadas por la piel, excluyendo el oído, las áreas de la piel externas y las cavidades que van desde la boca pasando por el tracto gastrointestinal hasta los órganos excretores y desde la nariz hasta el pulmón.

Description

Uso de antisépticos en la fabricación de un preparado farmacéutico para la prevención o el tratamiento de inflamaciones en el interior del cuerpo humano.

La presente invención se refiere al uso de por lo menos un agente antiséptico combinado con un portador en partículas que comprende por lo menos uno de entre un preparado liposomal, un preparado de microesferas, un preparado de nanopartículas, un preparado de Partículas Porosas grandes o un preparado de moléculas con recubrimiento polimérico por láser pulsado, en la fabricación de un preparado farmacéutico en el interior del cuerpo humano o animal. Los preparados se aplican específicamente a huesos, órganos, articulaciones, tejido muscular, membranas mucosas y tejidos epiteliales no queratinizados de tipo mucosa que forman partes interiores del cuerpo de los humanos y los animales. Especialmente, la invención se refiere a la prevención o tratamiento de infecciones en articulaciones tales como la rodilla, la articulación de la cadera, la articulación del hombro y el codo.

Para el tratamiento tópico de enfermedades infecciosas se conoce una pluralidad de diferentes agentes antibióticos y antisépticos. Un inconveniente decisivo de los agentes antibióticos es que las bacterias infectivas presentan resistencias primarias, y pueden adquirir resistencias secundarias, contra estos agentes. Además, los antibióticos con bastante frecuencia conllevan a la sensibilización del paciente. El uso de, por ejemplo, antisépticos liberadores de halógenos, tales como povidona yodada, conocida también como polividona yodada o PVP yodada, es decir, el complejo poli(1-vinil-2-pirrolidin-2-ona)-yodo, puede prevenir resistencias. Además, los agentes antisépticos son mucho más raramente alergénicos comparados con los antibióticos.

Actualmente, las enfermedades infecciosas de las partes interiores del cuerpo se tratan en general con antibióticos. Esta situación conduce a las complicaciones que son conocidas para los expertos. Por ejemplo, los pacientes que padecen inflamación crónica de articulaciones, tales como la rodilla o el codo, son tratados frecuentemente con antibióticos para aliviar los síntomas. No obstante, esto con frecuencia simplemente conlleva resistencias de las bacterias que son responsables de los síntomas. Muchas enfermedades son provocadas por virus y contra ellos, los antibióticos no son eficaces. Estos pacientes no se curan de las infecciones.

En nuestra patente anterior EP 0 639 373 se da a conocer el uso de agentes antisépticos y/o promotores de la curación de heridas para aplicación externa a humanos y animales. Específicamente, en dicho documento se presentan preparados liposomales de PVP yodada que son aplicables tópicamente a las partes externas del ojo. En general, estos preparados toman la forma de una crema, un ungüento, una loción, un gel o una formulación en gotas.

El documento WO 99/60998 da a conocer un proceso para la fabricación de un preparado farmacéutico para la aplicación de agentes antiinflamatorios, especialmente antisépticos y/o agentes que favorecen la curación de heridas en el tracto respiratorio superior y/o el oído, en la que el preparado contiene por lo menos uno de dichos agentes combinado con un portador en partículas.

Los liposomas son portadores bien conocidos para los fármacos y por ello la aplicación de medicamentos en forma liposomal ha sido tema de investigación durante bastante tiempo. El estudio "Pulmonary delivery of liposomes" (H. Schreier, en "Journal of Controlled Release", 24, 1993, págs. 209 a 223) proporciona una visión general en relación a la administración (pulmonar) de fármacos encapsulados en liposomas (en la terapia contra el asma). En dicho estudio se presentan la caracterización fisicoquímica de aerosoles con liposomas y también sus aplicaciones terapéuticas al tracto respiratorio. Entre los fármacos que se han investigado para la administración pulmonar a través de liposomas se incluyen, por ejemplo, agentes anticancerígenos, péptidos, enzimas, compuestos antiasmáticos y antialérgicos y, tal como se ha mencionado anteriormente, también antibióticos. H. Schreier también ha descrito, en "Formulation and in vitro performance of liposome powder aerosols" (S.T.P. Pharma Sciences 4, 1994, p.3S-44), la formulación de aerosoles con liposomas o aerosoles usando polvo de liposomas, por ejemplo un inhalador de polvo seco.

Aunque, especialmente en el tracto respiratorio inferior o para aplicación externa, se ha prestado cierta atención durante bastante tiempo a los liposomas como portadores de fármacos, parece que no existe ninguna técnica anterior referente a liposomas y otros partículados como portadores de agentes antisépticos o que favorecen la curación de heridas para aplicaciones en el interior del cuerpo, especialmente en articulaciones.

De hecho, en la técnica parece existir una marcada renuencia a la aplicación de desinfectantes en partes interiores del cuerpo, excepto tal vez en casos extremos de complicaciones sépticas potencialmente mortales. En general, parece que se prefieren los preparados antibióticos, incluso a la vista de sus inconvenientes antes discutidos.

Un objetivo de la presente invención es proporcionar un preparado antiséptico bien tolerado, fácilmente aplicable y que opcionalmente favorece la curación de heridas, la cual proporcione una liberación prolongada y un efecto tópico prolongado del agente activo en el interior del cuerpo, especialmente en articulaciones, tales como la rodilla, la articulación de la cadera, el codo, la articulación del hombro, etcétera.

Según la invención, este objetivo se alcanza por cuanto el preparado comprende por lo menos un agente antiséptico y que opcionalmente favorece la curación de heridas en la forma de un preparado portador en partículas, tal como se define en la reivindicación independiente 1.

Las reivindicaciones dependientes definen otras realizaciones ventajosas de la invención.

La invención se fundamenta en el hecho sorprendente de que los portadores en partículas, especialmente liposomas, son altamente adecuados como portadores para agentes antisépticos, especialmente para la povidona yodada, y opcionalmente para agentes que favorecen la curación de las heridas, para su aplicación a partes interiores del cuerpo, especialmente articulaciones.

Los preparados según la presente invención permiten una liberación prolongada del agente o agentes, y proporcionan una actividad extendida y tópica en el lugar deseado de acción mediante la interacción con superficies celulares.

En el contexto de la invención, se considera que el interior del cuerpo incluye de forma general aquellas partes del cuerpo que están confinadas por la piel, excluyendo las áreas de piel externas y las cavidades a las que se puede acceder libremente desde el exterior, básicamente aquellas que van desde la boca pasando por el tracto gastrointestinal hasta los órganos excretores, y aquellas que van desde la nariz al pulmón.

En el contexto de la presente invención, se entiende que los agentes antisépticos incluyen aquellos agentes desinfectantes que son farmacéuticamente aceptables y adecuados para el tratamiento del interior del cuerpo humano o animal en la medida que se puedan formular según la invención.

Más específicamente, los agentes antisépticos incluyen entre otros compuestos liberadores de oxígeno y halógenos; compuestos metálicos, por ejemplo, compuestos de plata y mercurio, desinfectantes orgánicos incluyendo entre otros compuestos liberadores de formaldehído, alcoholes, fenoles incluyendo alquil- y arilfenoles así como fenoles halogenados, quinolinas y acridinas, hexahidropirimidinas, compuestos amónicos cuaternarios y sales de iminio, y guanidinas.

Los agentes curadores de heridas comprenden agentes que favorecen la granulación y la epitelización tales como dexpantenol, alantoínas, azulenos, taninos, y compuestos del tipo vitamina B.

La invención se basa, en otro de sus aspectos, en un hecho adicional sorprendente e inesperado. Es bien sabido en la técnica que la formación de tejidos corporales nuevos puede provocar problemas. De este modo, se sabe que la reparación del tejido corporal puede estar acompañada por la formación de tejido cicatricial, lo cual puede ser perjudicial funcional y/o estéticamente, o por lo menos no deseable. La hiperqueratosis y la proliferación no controlada de tejido pueden generar perjuicios serios, conllevando a disfunciones, y por supuesto también puede ser no deseable estéticamente. Después de infecciones e inflamaciones, el recrecimiento o curación del tejido puede generar neoplasias e intercrecimiento. Así es bien sabido en la técnica que en la curación de enfermedades, la remodelación apropiada del tejido no solamente es deseable, sino de hecho necesaria.

Llegado este punto se ha encontrado sorprendentemente que el uso de agentes antisépticos, de forma individual o en combinación con otros de dichos agentes, conduce a una formación marcadamente menor de tejido corporal no deseable en el transcurso de la reparación tisular y de otros procesos de crecimiento del tejido. De este modo, se reduce la formación de tejidos cicatriciales, en la piel aunque también en mucosas y en otros tejidos, tales como los tejidos musculares o de órganos internos. La hiperqueratosis se puede suprimir totalmente, y también se reduce altamente el intercrecimiento, o la formación de neoplasias en la curación de enfermedades infecciosas.

Uno de los objetivos alcanzados por la invención hace referencia por lo tanto a una reparación tisular mejorada en el cuerpo. La invención alcanza esto mediante la aplicación de agentes antisépticos, en forma de un preparado portador en partículas según se define en la reivindicación independiente.

En general, la preparación antiséptica y que opcionalmente favorece la curación de heridas se administrará a la parte interior del cuerpo a tratar a través de métodos invasivos, especialmente mediante la inyección del preparado portador en partículas, o mediante la aplicación del preparado respectivo después de una etapa quirúrgica que proporcione acceso al lugar de tratamiento. Por ejemplo, se puede realizar un preparado liposomal cargando liposomas con PVP yodada según un procedimiento convencional. La naturaleza o constitución de los liposomas no es crítica. El preparado liposomal descrito, por ejemplo, en el documento EP 0 639 373 se puede administrar mediante inyección. La descripción del documento EP 0 639 373 se incorpora a título de referencia.

Aparentemente los preparados según esta invención no solamente contienen el agente activo, tal como povidona yodada, encapsulado en el portador en partículas, especialmente en liposomas. Parece que además hay cierta cantidad de agente el cual no está contenido en el interior del portador. Con frecuencia, los preparados según la invención muestran un marcado efecto inicial el cual se observa además de la liberación prolongada, más lenta, del agente activo desde el portador. Este efecto se observa especialmente cuando el portador comprende liposomas. Sin pretender limitarse a ninguna explicación teórica, actualmente se asume que además del agente activo encapsulado en el interior de los liposomas, hay parte del agente activo en la parte exterior de dichos liposomas, y probablemente ligado de forma indefinida a las superficies exteriores de los liposomas. Esto podría ser debido a la asociación de moléculas del agente activo a la membrana liposomal, o podría ser debido a que las moléculas del agente activo forman una capa sobre la superficie liposomal, recubriendo dicha capa parcialmente o incluso totalmente el liposoma de forma externa. Se puede influir en el tipo y la magnitud del efecto inicial del agente, por ejemplo, mediante la elección de los parámetros de la concentración.

De este modo, los preparados inflamatorios antisépticos según esta invención posibilitan que se alcancen efectos que no pueden ser proporcionados por los preparados habituales.

Los agentes antisépticos preferidos comprenden las sustancias farmacéuticas bien conocidas que proporcionan un efecto rápido, un amplio intervalo de actividad, una baja toxicidad sistémica y una buena compatibilidad tisular. Los mismos se pueden seleccionar, por ejemplo, de entre el grupo que comprende compuestos metálicos, compuestos fenólicos, detergentes, yodo y compuestos de yodo. Un agente antiséptico específicamente preferido es la povidona yodada.

Los agentes preferidos que favorecen la curación de heridas comprenden sustancias que han sido descritas en la literatura para dicha aplicación. Entre los preferidos de estos agentes se incluyen sustancias conocidas por favorecer la epitelización. Las mismas incluyen vitaminas, específicamente del grupo de las vitaminas B, alantoína, algunos azulenos, etcétera.

En realizaciones preferidas, los preparados de la invención que contienen agentes antisépticos y que opcionalmente favorecen la curación de heridas pueden comprender otros agentes tales como agentes anestésicos. Los preparados de la invención también pueden contener otros agentes habituales, incluyendo adyuvantes y aditivos, antioxidantes, agentes conservadores o agentes formadores de consistencia tales como aditivos reguladores de la viscosidad, emulsionantes, etcétera.

En el contexto de la invención se pueden utilizar las sustancias anfifílicas conocidas en general en la técnica anterior por formar membranas liposomales siempre que las mismas sean farmacéuticamente aceptables para la aplicación deseada. Actualmente, se prefieren sistemas formadores de liposomas que comprendan lecitina. Dichos sistemas pueden comprender lecitina de semilla de soja hidrogenada además de colesterol y succinato disódico-hexahidratado; actualmente se prefiere específicamente el uso de lecitina de semilla de soja hidrogenada como el único agente formador de membrana.

En el contexto de la invención se pueden usar en general los métodos conocidos de la técnica anterior para formar estructuras liposomales. Ampliamente, estos métodos comprenden la agitación mecánica de una mezcla adecuada que contenga la sustancia formadora de la membrana y agua o una disolución acuosa. En la formación de un tamaño de liposomas sustancialmente uniforme se prefiere la filtración a través de membranas adecuadas.

El tamaño de los liposomas puede variar dentro de un amplio intervalo, en general entre aproximadamente 1 y aproximadamente 20.000 nm. Se prefieren liposomas con diámetros entre 50 y 4.000 nm y actualmente los más preferidos son los liposomas de hasta aproximadamente 1.000 nm. Para disoluciones, puede que sean más adecuados diámetros medios más pequeños.

Cuando se usen portadores en partículas alternativos, los mismos en general se preparan tal como se sabe en la técnica. De este modo, se realizan microesferas las cuales se usan para administrar una gama muy amplia de agentes terapéuticos o cosméticos, tal como se describe por ejemplo en el documento WO 95/15118.

En algunos casos se pueden usar nanopartículas, siempre que en las mismas se pueda cargar una cantidad suficiente de agente activo y se puedan administrar según la presente invención. Se pueden preparar según los métodos conocidos en la técnica, tal como, por ejemplo, el descrito por Heyder (GSF München) en "Drugs delivered to the lung", Abstracts IV, Hilton Head Island Conference, mayo de 1998.

Para la formación de preparados en partículas según la presente invención también son adecuados métodos que usen un aparato de deposición por láser pulsado (PLD) y un objetivo polimérico para aplicar recubrimientos a fármacos en polvo en un proceso no acuoso corto. Los mismos han sido descritos, por ejemplo, por Talton et al., "Novel Coating Method for Improved Dry Delivery", Univ. de Florida UF 1887 (1998).

Otro sistema de administración adecuado emplea "Partículas Porosas Grandes" tal como da a conocer David A. Edwards et al. en "Large Porous Particles for Pulmonary Drug Delivery" (Science, 20. Junio de 1997, Vol. 275, págs. 1868 a 1871).

En general, las concentraciones en el preparado, los tamaños de las partículas, las cargas de los agentes activos, etcétera, se seleccionarán para dichos portadores alternativos para que se correspondan básicamente con los parámetros discutidos en el presente documento con respecto a los preparados liposomales. La selección y obtención de dichos parámetros basándose, entre otros aspectos, en una experimentación directa están adecuadamente dentro de la pericia de un especialista ordinario experimentado en esta materia.

Un uso en la actualidad altamente preferido, de los preparados liposomales de la invención está en el tratamiento local de infecciones de articulaciones, tales como las articulaciones de rodilla, cadera, codo y hombro, especialmente cuando los preparados liposomales contienen povidona yodada. Además en esta indicación, los preparados antisépticos de la invención, especialmente aquellos que contienen PVP yodada, tienen la gran ventaja de provocar resistencias y conllevan muchas menos reacciones alérgicas, al mismo tiempo que permiten una terapia muy rentable con un amplio espectro del efecto. Un preparado liposomal de povidona yodada según la presente invención es, por ejemplo, efectivo contra los virus. Este efecto no lo proporcionan los agentes antibióticos. Además, un preparado liposomal de un agente microbicida tal como la povidona yodada proporciona una liberación prolongada del agente desde los liposomas. Esto conduce a un efecto ampliado de la sustancia antimicrobiana, y por lo tanto a una aplicación menos frecuente, en comparación con los preparados habituales de disoluciones antisépticas.

La presente invención es también útil en el tratamiento de enfermedades infecciosas o para aliviar enfermedades tales como infecciones por VIH las cuales vienen acompañadas de infecciones oportunistas. Además los pacientes que tienen una supresión del sistema inmunitario, por ejemplo, después de transplantes de órganos, se pueden tratar según la invención. En particular, la bronquitis aguda y crónica, neumonía, bronquiectasia, fibrosis quística, difteria, tuberculosis se pueden tratar con el preparado de povidona yodada según la invención.

Otro uso altamente preferido es la reparación tisular, especialmente en la remodelación tisular funcional y estética.

Los preparados según la presente invención pueden adoptar una variedad de formas, incluyendo disoluciones, dispersiones, atomizadores y geles. En ocasiones las formas sólidas pueden ser útiles o incluso ventajosas, aunque en general son menos preferidas que las formas líquidas.

En general, la cantidad de agentes activos en un preparado de la invención quedará determinada, por un lado, por el efecto deseado y, por otro lado, por la capacidad portadora del preparado portador para el agente.

En términos generales, una disolución o dispersión de agente activo en un preparado portador de la invención puede tener una concentración comprendida en un intervalo entre el límite inferior de efectividad del agente y el límite de solubilidad o dispersabilidad del agente en el disolvente, dispersante, atomizado o gel respectivo.

Más específicamente, para un antiséptico tal como la povidona yodada, una disolución o dispersión en un preparado portador de la invención, especialmente cuando el portador sea un preparado liposomal, puede contener entre 0,1 y 10 g de agente en 100 g de preparación. Dicho preparado contendrá entonces típicamente entre 1 y 5 g de sustancia formadora de membrana liposomal, especialmente lecitina, por 100 g de preparado.

Se prefiere especialmente un preparado inyectable, el cual comprende hasta un 10% de povidona yodada (con un contenido del 10% de yodo) en una dispersión liposomal en suero fisiológico.

Las características y ventajas de la presente invención se pondrán de manifiesto más detalladamente a partir de la consiguiente descripción de realizaciones preferidas. En estas realizaciones las cuales incluyen un mejor modo, como agente antiséptico se ejemplifica la povidona yodada y como portador se eligen liposomas. No obstante, esto no debería interpretarse como una restricción de la presente invención a la povidona yodada, y/o a los liposomas como portador, aunque específicamente se prefieren dichos preparados.

Un método preferido para producir los liposomas de la invención se pueden describir en general de la manera siguiente:

Los componentes formadores de la membrana lipídica, por ejemplo, la lecitina, se disuelven en un disolvente adecuado tal como el cloroformo o en una mezcla 2:1 de metanol y cloroformo y se filtran bajo condiciones de esterilidad. A continuación, se produce una película lipídica sobre un sustrato estéril de gran superficie, tal como perlas de vidrio, mediante evaporación controlada del disolvente. En algunos casos, puede ser suficiente con formar la película sobre la superficie interna del recipiente usado en la evaporación de disolvente, sin usar un sustrato específico para aumentar la superficie.

Se prepara un sistema acuoso a partir de componentes electrolíticos y de los agentes activos (uno o más) a incorporar en el preparado liposomal. Dicho sistema acuoso puede comprender, por ejemplo, 10 mmol/l de hidrógeno fosfato de sodio y un 0,9% de cloruro sódico, con un ph 7,4; el sistema acuoso comprenderá además por lo menos la cantidad deseada del agente activo, el cual en los ejemplos de las realizaciones es povidona yodada. Con frecuencia, el sistema acuoso comprenderá una cantidad en exceso de agente o agentes.

En general los liposomas se forman agitando dicho sistema acuoso en presencia de dicha película formada por los componentes lipídicos. En esta fase, se pueden añadir otros aditivos para mejorar la formación de los liposomas; por ejemplo, se puede añadir colato sódico. En la formación de los liposomas también puede influir la acción mecánica tal como una filtración a presión a través de, por ejemplo, membranas de policarbonato, o una centrifugación. En general, la dispersión liposomal en bruto se lavará, por ejemplo, con una disolución electrolítica como la usada en el preparado de la disolución antes descrita del agente activo.

Cuando se han obtenido liposomas con la distribución del tamaño requerido y se han lavado, se pueden volver a dispersar en una disolución electrolítica como la ya descrita, que con frecuencia también comprende azúcares tales como sacarosa o un sustituto adecuado del azúcar. La dispersión se puede criodesecar, y se puede liofilizar. Antes de su uso, ésta se puede reconstituir mediante la adición de agua y una agitación mecánica adecuada a la temperatura de transición del componente lipídico, la cual para la lecitina de semilla de soja hidrogenada es, por ejemplo, 55ºC.

En los siguientes Ejemplos se usó lecitina de semilla de soja hidrogenada (EPIKURON (TM) 200 SH obtenible de Lukas Meyer, Alemania o PHOSPOLIPON (TM) 90 H obtenible de Nattermann Phospholipid GmbH, Alemania). No obstante, en lugar de las anteriores se pueden usar otras sustancias formadoras de membranas liposomales farmacéuticamente aceptables, y a partir de los aspectos descritos en la técnica anterior las personas expertas en la materia encontrarán facilidad para seleccionar sistemas para la formación de liposomas alternativos adecuados.

Ejemplo de Realización I

En un matraz de vidrio de 1.000 ml, provisto de perlas de vidrio para aumentar la superficie, se disolvieron 51,9 mg de colesterol y 213 mg de lecitina de semilla de soja hidrogenada en una cantidad suficiente de una mezcla de metanol y cloroformo en una relación 2:1. A continuación el disolvente se evaporó al vacío hasta que se formó una película sobre la superficie interna del matraz y sobre las perlas de vidrio.

Por separado se disolvieron 2,4 g de PVP yodada (que contenía aproximadamente un 10% de yodo disponible) en 12 ml de agua.

Nuevamente en un recipiente aparte, se disolvieron 8,77 g de cloruro sódico y 1,78 g de Na_{2}HPO_{4}.2H_{2}O en 400 ml de agua. Se añadió más agua hasta llegar a un volumen total de 980 ml, y a continuación, se añadieron 12 ml 1N de ácido clorhídrico para ajustar el pH a 7,4. Seguidamente, esta disolución se rellenó con agua hasta exactamente
1.000 ml.

En un cuarto recipiente, se disolvieron 900 mg de sacarosa y 57 mg de succinato disódico en 12 ml de agua.

A continuación, la disolución de PVP yodada se añadió a la película lipídica en el matraz y la mezcla se agitó hasta que se disolvió la película. La formulación liposomal resultante se separó de los lípidos hidratados en el matraz. El producto se centrifugó y se descartó el líquido sobrenadante. Se añadió la disolución de sacarosa hasta completar 12 ml y el producto se centrifugó nuevamente. Después de esto se descartó otra vez el líquido sobrenadante. En esta fase, se podría usar una etapa adicional de lavado, usando la disolución de sacarosa o la disolución tampón de cloruro sódico.

Después de la última etapa de centrifugación y del descarte del sobrenadante, se añadió la disolución tampón de cloruro sódico hasta completar 12 ml, y los liposomas se distribuyeron homogéneamente en su interior. A continuación, el producto se distribuyó en viales que contenían cada uno de ellos 2 ml de dispersión liposomal, y seguidamente los viales se sometieron a una etapa de criodesecación.

Después de la criodesecación, cada vial comprendía aproximadamente 40 mg de sólidos.

El método del Ejemplo de la Realización I tiene un inconveniente menor por cuanto la disolución de PVP yodada usada, debido al porcentaje elevado de sólidos, es bastante viscosa y por lo tanto más difícil de manipular.

Ejemplo de Realización II

En un matraz de 2.000 ml provisto de perlas de vidrio para aumentar la superficie, se disolvieron 173 mg de lecitina de semilla de soja hidrogenada y 90 mg de succinato disódico en aproximadamente 60 ml de una mezcla de metanol/cloroformo en una relación 2:1. El disolvente se eliminó al vacío hasta que se formó una película.

Se disolvieron 4 g de PVP yodada (10% de yodo disponible) en 40 ml de la disolución tampón de cloruro sódico descrita en el Ejemplo de la Realización I, y se añadió a la película lipídica en el matraz. A continuación, el matraz se agitó hasta que se disolvió la película y se formaron liposomas.

El producto se centrifugó y el líquido sobrenadante se descartó.

Al pellet liposomal producido de esta manera, se le añadió más disolución tampón de cloruro sódico hasta completar 40 ml, y se repitió la etapa de centrifugación. Nuevamente se descartó el sobrenadante. En esta fase, esta etapa de lavado se podría repetir cuando sea necesario.

Después de la etapa final de centrifugación y decantación, a los liposomas precipitados se le añadió nuevamente la disolución tampón de cloruro sódico hasta completar 40 ml. Seguidamente, la dispersión homogénea se distribuyó en viales, conteniendo cada vial aproximadamente 2 ml de dispersión liposomal, y a continuación los viales se sometieron a una etapa de criodesecación. Esto produjo aproximadamente 200 mg de sólidos criodesecados por vial.

A partir de los sólidos criodesecados de los Ejemplos I y II, se realizaron otros preparados tal como se describe en los subsiguientes Ejemplos de Realizaciones e Informes de Pruebas.

Tal como el correspondiente al Ejemplo de la Realización I, el método antes descrito usa una etapa de hidratación después de la formación de la película en presencia de disolventes orgánicos y apunta a tasas de inclusión del 5 hasta el 15%. En general, estos métodos producen liposomas bastantes grandes y con frecuencia multilamelares.

Los métodos antes descritos se pueden modificar con una etapa de filtración a alta presión a través de una membrana adecuada tal como una membrana de policarbonato después de que se hayan formado los liposomas en bruto o después de cualquiera de las etapas sucesivas de lavado o directamente usando una homogeneización a alta presión. Esto produce liposomas mucho más pequeños, unilamelares, con cantidades incrementadas de agente encapsulado.

En lugar de la homogeneización a alta presión, se pueden utilizar otros métodos de la técnica anterior conocidos por proporcionar liposomas de tamaño uniforme pequeños.

Ejemplo de Realización III

Se preparó una dispersión inyectable a partir de 10 g de liposomas de lecitina de semilla de soja hidrogenada/PVP yodada según se describe en el Ejemplo de Realización II; los mismos se mezclaron con suero fisiológico hasta completar 100 g.

Se prevén modificaciones adicionales de las realizaciones antes descritas.

De este modo, la dispersión del Ejemplo de Realización III puede tener un contenido adicional de un agente conocido por favorecer la curación de heridas, tal como la alantoína. Dicho agente se añadirá en una concentración farmacéuticamente útil, en el caso de la alantoína en el intervalo de entre 0,1 y 0,5 g por 100 g de dispersión. El agente curativo de heridas se puede incorporar en el suero fisiológico, en cuyo caso quedará en gran medida por fuera de los liposomas. No obstante, el mismo se puede incorporar de forma parcial o en su mayoría en los liposomas, en cuyo caso se añadirá en una fase adecuada correspondiente del método de preparación de los liposomas.

También es posible preparar realizaciones similares a las antes descritas, las cuales comprenden un agente capaz de favorecer la curación de heridas en lugar del agente antiséptico, y no además del mismo, tal como, por ejemplo, la povidona yodada dada a conocer en los anteriores Ejemplos de Realizaciones. No obstante, actualmente se prefiere el uso de un agente que favorece la curación de heridas (si es el caso) además de un agente antiséptico.

Prueba I

Esta fue una prueba in vitro del efecto bactericida proporcionado por un preparado liposomal de povidona yodada de la invención. La prueba se basó en el ensayo de suspensión cuantitativo descrito en "Richtlinien der Deutschen Gesellschaft für Hygiene und Mikrobiologie", 1989. En esta prueba, se usa el agente bactericida para matar staphylococcus aureus (ATCC 29213), uno de los problemas principales en la higiene hospitalaria.

El preparado liposomal usado fue la del Ejemplo de Realización I. En tiempos de contacto diferentes entre 1 y 120 minutos, se determinó la concentración mínima del preparado en agua que era capaz de matar los staphilococci.

Los resultados se muestran en la Tabla I.

TABLA I

Tiempo de Contacto (Minutos)	Concentración Bactericida
1, 2, 3, 4	\geq 0.060%
5, 30, 60	\geq 0,015%
120	\geq 0,007%

Los resultados muestran que con tiempos de contacto breves (entre 1 y 4 minutos) la concentración bactericida es tan bajo como el 0,06% y que con tiempos de contacto largos (120 minutos) la concentración bactericida puede ser tan bajo como 0,007%.

Prueba II

La actividad virucida y clamidiacida de la PVP yodada liposomal ha sido estudiada, en cultivos celulares, por Wutzler et al., 9th European Congress for Clinic Microbiology and Infection Diseases, Berlín, Marzo de 1999. En los cultivos celulares, la PVP yodada liposomal es altamente efectiva contra el virus herpes símplex tipo 1 y el adenovirus tipo 8, mientras que los experimentos de citotoxicidad de largo plazo indicaron que la forma liposomal es tolerada mejor que la PVP yodada acuosa por la mayoría de líneas celulares probadas. La PVP yodada en forma liposomal no es genotóxica.

Prueba III

Se comparó un preparado liposomal de hidrogel de PVP yodada al 3% con un ungüento de PVP yodado al 3%, en la que el agente activo no estaba en forma liposomal. El agente se aplicó a cultivos in vitro estandarizados de piel de rata y explantes peritoneales, como una tabla de pruebas para la compatibilidad tisular de la piel y los antiinfecciosos para heridas.

Se estudió la tasa de crecimiento de los explantes cultivados después de 30 minutos de exposición e incubación con una sustancia de prueba.

Nuevamente, los resultados mostraron claramente la tolerancia sustancialmente mejorada del preparado liposomal, en términos de tasa de crecimiento peritoneal y tasa de crecimiento de piel.

Con el ungüento, la tasa de crecimiento peritoneal alcanzó el 85%, y la tasa de crecimiento de piel alcanzó el 90%; con la formulación de hidrogel liposomal, la tasa de crecimiento peritoneal fue del 96%, y la tasa de crecimiento de piel fue del 108%; estos valores deben compararse con los valores del 100% correspondientes a una prueba de control usando como agente una disolución de Ringer.

Prueba IV

En un estudio no publicado, se estudiaron los efectos de la povidona yodada en forma no liposomal sobre cartílago articular adulto.

Se diseccionaron huesos sesamoideos entre 2 y 4 horas después del sacrificio a partir de articulaciones metacarpofalángicas bovinas de animales adultos en condiciones de asepsia. El cartílago de los huesos sesamoideos de un animal específico es uniforme con respecto a la síntesis de glicosaminoglicanos, el contenido de glicosaminoglicanos, y la composición de proteoglicanos. Cada grupo experimental constaba de ocho huesos sesamoideos del mismo animal. Los huesos sesamoideos se lavaron en 10 ml de una disolución de Ringer estéril fría durante 10 minutos, se incubaron respectivamente en 10 ml de una disolución de Ringer estéril (control), PVP yodada, o diluciones de PVP yodada con disolución de Ringer (1:10, 1:100, o 1:1000) a 37ºC durante 10 minutos en una atmósfera humidificada del 5% de CO_{2} en aire, y subsiguientemente se lavaron de nuevo durante 5 x 5 minutos en 10 ml de la disolución de Ringer en cada uno de los casos. Después de la incubación de cada hueso sesamoideo tratado previamente durante 24 horas a 37ºC en 10 ml de medio Ham F-12, complementado con antibióticos, se sacaron cuidadosamente tapones de cartílago de 2,8 mm de diámetro y seguidamente los mismos se extrajeron de una manera escalonada. Los medios de cultivo de los huesos sesamoideos y los extractos de los tapones de cartílago se usaron para la caracterización cuantitativa y cualitativa de los proteoglicanos y la COMP (proteína de matriz oligomérica del cartílago), ya que una liberación aumentada de fragmentos de estos constituyentes de la matriz del cartílago equivale a una ruta catabólica.

Un tratamiento de 10 minutos de los huesos sesamoideos con PVP yodada sin diluir o diluida no induce ninguna fragmentación proteolítica aumentada de los constituyentes de la matriz del cartílago investigados, en comparación con los experimentos de control de la disolución de Ringer. Esto significa que no había actividades destructivas en el cartílago después de la exposición a la PVP yodada.

Esto muestra la tolerancia deseada del material cartilaginoso de la articulación a la PVP yodada incluso en forma no liposomal. Tal como se sabe a partir de las otras pruebas antes expuestas, los preparados liposomales son incluso mejor tolerados que los preparados de PVP yodada no liposomales. De este modo, se espera que los preparados liposomales o, dicho de otra manera, de agentes "portados", de la invención sean en general mejor tolerados que los preparados de agentes correspondientes "no portados".

Claims (18)

1. Uso de por lo menos un agente antiséptico combinado con un portador en partículas que comprende por lo menos uno de entre un preparado liposomal, un preparado de microesferas, un preparado de nanopartículas, un preparado de Partículas Porosas Grandes o un preparado de moléculas con recubrimiento polimérico por láser pulsado, en la fabricación de un preparado farmacéutico para la prevención o el tratamiento de inflamaciones en el interior del cuerpo humano o animal, en el que el interior consta de aquellas partes del cuerpo confinadas por la piel, excluyendo el oído, las áreas de la piel externas y las cavidades que van desde la boca pasando por el tracto gastrointestinal hasta los órganos excretores y desde la nariz hasta el pulmón.

2. Uso según la reivindicación 1,

caracterizado porque el agente antiséptico se selecciona de entre compuestos liberadores de oxígeno y halógenos; compuestos metálicos, tales como compuestos de plata y mercurio; desinfectantes orgánicos incluyendo entre otros compuestos liberadores de formaldehído, alcoholes, fenoles incluyendo alquil- y arilfenoles así como fenoles halogenados, quinolinas y acridinas, hexahidropirimidinas, compuestos amónicos cuaternarios y sales de iminio, y guanidinas.

3. Uso según la reivindicación 2,

caracterizado porque el agente antiséptico se selecciona de entre el grupo que comprende compuestos metálicos tales como compuestos de mercurio, derivados del fenol tales como timol, eugenol y hexaclorofeno, yodo y complejos de yodo.

4. Uso según la reivindicación 3,

caracterizado porque el agente antiséptico es PVP yodada.

5. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores,

caracterizado porque el preparado contiene además por lo menos un agente que favorece la curación de las heridas.

6. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores,

caracterizado porque las partículas del portador tienen un tamaño comprendido en el intervalo entre aproximadamente 20 y aproximadamente 20.000 nm.

7. Uso según la reivindicación 6,

caracterizado porque las partículas del portador tienen un tamaño comprendido en el intervalo entre aproximadamente 50 y aproximadamente 4.000 nm.

8. Uso según la reivindicación 6,

caracterizado porque las partículas del portador tienen un tamaño de entre 500 y 2.500 nm.

9. Uso según la reivindicación 6,

caracterizado porque las partículas del portador tienen un tamaño de hasta 1.000 nm.

10. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores,

caracterizado porque el preparado del portador, especialmente liposomas, libera el agente durante un periodo de tiempo prolongado, preferentemente un periodo de tiempo prolongado de varias horas de duración.

11. Uso según la reivindicación 10,

caracterizado porque el preparado del portador, especialmente liposomas, libera el agente a aproximadamente la misma tasa de liberación durante el periodo de tiempo de liberación.

12. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores,

caracterizado porque el preparado comprende adicionalmente por lo menos un agente activo anestésico.

13. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores,

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caracterizado porque el preparado contiene aditivos y adyuvantes tales como agentes conservadores, antioxidantes y aditivos formadores de consistencia.

14. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, siendo el preparado en forma de una disolución o dispersión que comprende el portador cargado con el agente activo, especialmente en forma de liposomas, preferentemente en forma de un preparado farmacéutico líquido.

15. Uso según la reivindicación 14, siendo el preparado en forma de un preparado farmacéutico de suero fisiológico inyectable.

16. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, siendo el preparado en forma de una formulación de disolución o dispersión farmacéutica, la cual comprende:

a)

liposomas que comprenden entre un 1 y un 5% en peso de una sustancia formadora de membranas liposomales farmacéuticamente aceptable preferentemente lecitina; y

b)

entre un 0,1 y un 10% en peso de un agente antiséptico, tal como PVP yodada.

17. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el preparado es adecuado para el tratamiento de enfermedades infecciosas o para aliviar enfermedades que son acompañadas por infecciones oportunistas o una supresión del sistema inmunitario.

18. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 16, en el que el preparado es adecuado para el tratamiento de infecciones agudas y crónicas de articulaciones, especialmente las articulaciones de rodilla, cadera, codo y hombro.