ES2279523T3 - Nuevo uso terapeutico de la l-carnitina o sus derivados acilados. - Google Patents

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Abstract

SE DESCUBRE EL USO TERAPEUTICO DE AMINOACIDOS BASICOS, AMINOACIDOS BASICOS ACILADOS Y SUS SALES FARMACOLOGICAMENTE ACEPTABLES PARA LA PREPARACION DE UN MEDICAMENTO PARA LA PROFILAXIS DE ENFERMEDADES O EL TRATAMIENTO TERAPEUTICO DE TRASTORNOS CELULARES ACOMPAÑADOS POR NIVELES ELEVADOS DE CERAMIDAS.

Description

Nuevo uso terapéutico de la L-carnitina o sus derivados acilados.
La presente invención se refiere a un nuevo uso terapéutico de L-carnitina o derivados de acil-L-carnitina y sales farmacológicamente aceptables de los mismos para la profilaxis de enfermedades o el tratamiento terapéutico de alteraciones celulares acompañadas de altos niveles de ceramida.
La ceramida es la molécula básica de la estructura de los esfingolípidos y el metabolismo de los mismos. Todos los esfingolípidos contienen ceramida como componente hidrófilo principal, y se originan a partir de la ceramida mediante rutas biosintéticas que principalmente modifican la posición 1-hidroxi de la misma. A su vez, los esfingolípidos juegan un importante papel en la transducción de la señal a través de la membrana celular.
La ceramida juega un importante papel en la transducción de la señal a través de la membrana celular. Las moléculas capaces de actuar sobre los receptores intracelulares (es decir, el calcitriol) o los receptores transmembranales [es decir, el interferón \gamma (LFN-\gamma), la interleucina-1 (IL-1) y el factor de crecimiento nervioso (NGF)] hidrolizan la esfingomielina dando ceramida. La ceramida activa fosfatasas y cinasas de proteínas y, desde un punto de vista biológico, induce la apoptosis celular, el crecimiento y la diferenciación de las células, modula la expresión de las ciclooxigenasas y las fosfolipasas y la activación de los factores nucleares kB (NFkB) [Kuno, K. y col., J. Leukoc, Blol., 56 (5): 542-7; Cifone, M. G. y col., J. Exp. Med., 180 (4): 1547-52: Kolesnick R., Mal. Chem. Neuropathol., 21 (2-3):
287-97; Jarvis, W. D. y col., Proc. Natl. Acad. Sci. EE.UU., 91 (1): 73-7; Obeid, L. M. y col., Science, 259 (5102): 1769-71].
Ahora se ha descubierto que variaciones en la concentración o en el metabolismo de la ceramida contribuyen a la patogenia de numerosas enfermedades o contribuyen a inducir alteraciones celulares metabólicas. Desafortunadamente, hasta la fecha, no existen procedimientos para reducir los niveles de ceramida in vivo.
Consecuentemente, un objeto de esta invención es proporcionar un nuevo uso de L-carnitina y de acil-L-carnitinas y sus sales farmacológicamente aceptables para reducir los niveles de ceramida in vivo.
Un segundo objeto de la presente invención es proporcionar un nuevo uso de L-carnitina y de acil-L-carnitinas y sus sales farmacológicamente aceptables para la profilaxis de enfermedades o el tratamiento terapéutico de alteraciones celulares acompañadas por altos niveles de ceramida.
Se ha descubierto de hecho que la administración de altas dosis de L-carnitina y de acil-L-carnitinas y sales farmacológicamente aceptables de las mismas reduce los niveles de ceramida, y dichos compuestos pueden usarse por tanto para el tratamiento de enfermedades caracterizadas por altos niveles de ceramida.
En particular, se ha descubierto que pueden usarse carnitina o derivados acilados de la misma, y sales farmacológicamente aceptables de los mismos, para el tratamiento de enfermedades caracterizadas por altos niveles de ceramida.
Según la invención, se proporciona un nuevo uso de L-carnitina y de acil-L-carnitinas y sales farmacológicamente aceptables de las mismas para disminuir los niveles de ceramida in vivo.
Estos compuestos están disponibles comercialmente. Estos compuestos pueden usarse como una sal interna o como sales farmacéuticamente aceptables.
También pueden usarse en la presente invención derivados acilados de la L-carnitina. Puede usarse acil C_{2-6}-L-carnitina que sean lineales o ramificadas. Estos ácidos son conocidos por los farmacólogos y por los expertos en la técnica farmacéutica. Los grupos acilo particularmente preferidos son acetilo, propionilo, butirilo, valerilo e isovalerilo.
Pueden formarse sales farmacéuticas adecuadas entre los anteriores aminoácidos básicos y cualquier anión convencional tal como cloruro, bromuro, yoduro o un aspartato ácido tal como aspartato, un citrato ácido tal como citrato, un tartrato ácido tal como tartrato, un fosfato ácido tal como fosfato, un fumarato ácido, un glicofosfato tal como glucofosfato, lactato ácido, maleato ácido, orotato; oxalato ácido, particularmente ácido oxálico; un sulfato, particularmente preferiblemente sulfato, tricloroacetato, trifluoroacetato y metansulfonato.
Algunos ejemplos de enfermedades o alteraciones caracterizadas por elevados niveles de ceramida incluyen enfermedades inflamatorias del intestino, coagulación intravascular difusa, fiebre, hepatoesplenomegalia asociada con enfermedades hepáticas inflamatorias o metabólicas, endomiocarditis, trombosis capilar, meningoencefalitis debida a agentes infecciosos, transplante de órganos, artritis reumatoide y enfermedades del tejido conectivo, y enfermedades autoinmunes, hipertiroidismo, lesiones por radiaciones y/o agentes quimioterapéuticos, y síndrome de fatiga
crónica.
Dado que el uso de algunos fármacos también puede inducir altos niveles de ceramida, la presente invención también contempla disminuir los niveles de ceramida en los pacientes tratados con tales fármacos. Por ejemplo, puede coadministrarse un aminoácido básico según la presente invención con corticosteroides (tales como dexametasona), agentes antiinflamatorios (tales como indometacina), agentes antivirales (tales como interferón), agentes inmunodepresores (tales como ciclosporina), agentes quimioterapéuticos (tales como adriamicina), agentes inmunoestimulantes (tales como inmunoglobulinas y vacunas) y agentes endocrinos (tales como metimazol) para evitar un aumento en los niveles de ceramida.
Los niveles normales de ceramidas en pacientes sanos dependen de la edad, la talla y el peso del individuo, pero en general están en el intervalo de de 5 a 50 picomoles/10^{6} células (preferiblemente, linfocitos de sangre periférica). Niveles mayores de 50 picomoles/10^{6} células se consideran niveles altos. El uso de aminoácidos básicos, aminoácidos básicos acilados y sales farmacológicamente aceptables de los mismos de la presente invención reduce dichos altos niveles en al menos un 25%.
En general, se administra L-carnitina o un derivado acilado de la misma, según la presente invención a unas concentraciones que reducen los niveles de ceramida en al menos un 25%. Adecuadamente, este resultado se consigue administrando desde 50 mg hasta aproximadamente 15 g/día de aminoácidos básicos por vía oral o parenteral. Preferiblemente, deberían administrarse altos niveles de esta L-carnitina o un derivado acilo de la misma, es decir, >1 g por día, >2 g por día; particularmente preferiblemente, 4-10 g por día.
La monitorización de los niveles de ceramida puede realizarse bien directamente monitorizando los niveles de ceramida en una célula (tal como un linfocito), o indirectamente monitorizando las concentraciones de un metabolito de ceramida en una célula. Preferiblemente, los niveles de ceramida del paciente son monitorizados tanto antes como después de la administración de L-carnitina o un derivado acilado de la misma, con objeto de evaluar la magnitud de la reducción. La monitorización puede comenzar en cualquier momento después de la administración, pero adecuadamente comienza después de 3 horas para asegurar unos resultados precisos. La monitorización puede continuarse indefinidamente.
Los niveles de ceramida pueden medirse directamente aislando linfocitos sanguíneos periféricos del paciente. A continuación las células se centrifugan para eliminar el sobrenadante, y los lípidos se eliminan del sedimento celular. La fase orgánica que contiene la ceramida puede analizarse usando el "ensayo de DAG cinasa" para fosforilar la ceramida, que después se pone de manifiesto mediante una autorradiografía [Cifone, M. G. y col., J. Exp. Med., 180 (4): 1547-52].
Habiendo descrito de forma general esta invención, puede obtenerse una comprensión adicional con referencia a ciertos ejemplos específicos que se proporcionan en este documento con propósitos meramente ilustrativos, y que no pretenden ser limitantes salvo que se indique lo contrario.
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Ejemplo 1
Se aislaron linfocitos de sangre periférica según metodologías clásicas. Las células se incubaron con L-carnitina (200 mcg/ml) o con isovaleril-L-carnitina durante 30 min a 37ºC, y a continuación con un anticuerpo monoclonal anti-Fas durante otros 30 min. Entonces las células se centrifugaron, eliminando el sobrenadante, y el sedimento celular se deslipidizó. La fase orgánica (que contenía la ceramida) se analizó con el "ensayo de DAG cinasa" para fosforilar la ceramida, que posteriormente se puso de manifiesto mediante una autorradiografía.
Los resultados se indican a continuación en la Tabla 1.
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TABLA 1
Ceramida (picomoles por 10^{6} células)
Control 20
Control + anticuerpo anti-Fas 81,6
Control + anticuerpo anti-Fas + L-camitina (100 mcg/ml) 7,3
Control + anticuerpo anti-Fas + isovaleril-L-carnitina (50 mcg/ml) 8,6
Control + anticuerpo anti-Fas + isovaleril-L-carnitina (100 mcg/ml) 7,3
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Se sabe que las células estimuladas adecuadamente (es decir, con Fas-L, interleucina-1, etc.) producen ceramida. Se empleó un anticuerpo anti-Fas para aumentar la producción de ceramida desde un valor basal (20 picomoles por 10^{6} células) hasta 81,6 picomoles por 10^{6} células.
Se demuestra por tanto que L-carnitina e isovaleril-L-carnitina inhiben la síntesis de ceramida in vitro.
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Ejemplo 2
Dos pacientes afectados por una neuromiopatía sintomática (síndrome de fatiga crónica) se trataron con 3 g por día de L-carnitina por vía oral durante dos meses.
Se midió la ceramida muscular antes y después de la administración.
Los resultados se indican a continuación en la Tabla 2.
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TABLA 2
Ceramida antes del tratamiento Ceramida después del tratamiento
(picomoles por mg de proteínas) (picomoles por mg de proteínas)
Paciente 1 76 28
Paciente 2 142 46
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Ejemplo 3
Cuatro pacientes afectos de hipertiroidismo que habían sido tratados con metimazol (15 mg por vía oral, diariamente) durante más de ocho meses, fueron tratados durante 4 semanas con 8 g por día de L-carnitina por vía oral.
La ceramida asociada a los linfocitos se determinó antes y después del tratamiento.
Los resultados se muestran en la Tabla 3 que sigue.
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TABLA 3
Ceramida antes del tratamiento Ceramida después del tratamiento
(picomoles/10^{6} células) (picomoles/10^{6} células)
Paciente 1 73 26
Paciente 2 45 27
Paciente 3 111 36
Paciente 4 69 18
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Ejemplo 4
Tres pacientes con hepatoesplenomegalia debida a una hepatitis vírica de tipo C se trataron con un bolo de 4 g de L-carnitina por vía intravenosa.
La ceramida asociada a los linfocitos se determinó antes y 3 y 48 horas después de la infusión.
Los resultados se muestran en la Tabla 4 que sigue.
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TABLA 4
Ceramida del paciente 1 Ceramida del paciente 2 Ceramida del paciente 3
(picomoles/10^{6} células) (picomoles/10^{6} células) (picomoles/10^{6} células)
Antes del tratamiento 65 77 79
Después de 3 h 12 32 24
Después de 48 h 31 21 23
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Se aprecia que la administración de un bolo de L-carnitina inhibió el aumento de los niveles de ceramida ya 3 horas después de la infusión. El efecto permanece al menos durante dos días.
Ejemplo 5
(No forma parte de la invención)
Cuatro pacientes afectados de catabolismo proteico y una disminución lipídica como consecuencia de una infección tuberculosa se trataron durante dos semanas con 8 g por día de L-carnitina por vía parenteral.
La ceramida asociada a los linfocitos sanguíneos periféricos se determinó antes y después del tratamiento.
Los resultados se muestran en la Tabla 5 que sigue.
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TABLA 5
Ceramida antes del tratamiento Ceramida después del tratamiento
(picomoles/10^{6} células) (picomoles/10^{6} células)
Paciente 1 127 59
Paciente 2 265 77
Paciente 3 301 152
Paciente 4 78 54

Claims (3)

1. Uso de L-carnitina o una acil-L-carnitina, en la que el acilo se elige del grupo que comprende por acetilo, propionilo, butirilo, valerilo e isovalerilo o una sal farmacológicamente aceptable de los mismos, para producir un medicamento para la profilaxis o el tratamiento terapéutico de enfermedades o alteraciones celulares caracterizadas por altos niveles de ceramida, comprendiendo dichas enfermedades o alteraciones enfermedades inflamatorias del intestino, coagulación intravascular difusa, trombosis capilar, meningoencefalitis debida a agentes infecciosos, enfermedades del tejido conectivo y lesiones por radiaciones.
2. El uso de la reivindicación 1, en el que el aminoácido básico, el aminoácido básico acilado, L-carnitina, la acil-L-carnitina o la sal farmacológicamente aceptable de los mismos, se coadministran con corticosteroides, agentes antiinflamatorios, agentes antivirales, inmunodepresores, agentes citostáticos e inmunoestimulantes.
3. Uso de isovaleril-L-carnitina para producir un medicamento para la profilaxis o el tratamiento terapéutico de enfermedades o alteraciones celulares provocadas por altos niveles de ceramida, comprendiendo dichas enfermedades o alteraciones enfermedades inflamatorias del intestino, coagulación intravascular difusa, fiebre, hepatoesplenomegalia asociada con enfermedades hepáticas inflamatorias o metabólicas, endomiocarditis, trombosis capilar, meningoencefalitis debida a agentes infecciosos, alteraciones inducidas por un transplante de órganos, artritis reumatoide y enfermedades del tejido conectivo, enfermedades autoinmunes, hipertiroidismo, lesiones por radiaciones y/o agentes quimioterapéuticos, y síndrome de fatiga crónica.
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