ES2332606T3 - Hidrazinocarbonil-tieno(2,3-c)-pirazoles, procedimiento de preparacion, composiciones que los contienen y utilizacion. - Google Patents
Hidrazinocarbonil-tieno(2,3-c)-pirazoles, procedimiento de preparacion, composiciones que los contienen y utilizacion. Download PDFInfo
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Abstract
Producto, caracterizado porque responde a la fórmula general (I) siguiente: **(Ver fórmula)** en la que: (i) R1 se selecciona independientemente del grupo constituido por -NHCO(R2), -NHCONH(R2), -NHCOO(R2), en el que R2 se selecciona independientemente del grupo constituido por -H, -alquilo(C1-C24), -cicloalquilo(C3-C9), -cicloalquileno(C 3-C 9), heterocicloalquilo, heterocicloalquileno, arilo, heteroarilo, -alquil(C 1-C 4)-arilo, -alquil(C 1- C 6)-heteroarilo, -aril-alquilo(C 1-C 8), -heteroaril-alquilo(C 1-C 6), sustituidos opcionalmente; (ii) Cada uno de R3, R4, y R5 se selecciona independientemente del grupo constituido por -H, -alquilo(C1-C8), -alquil(C1-C6)-arilo, -alquil(C1-C6)-heteroarilo, -arilo, -heteroarilo, sustituidos opcionalmente, o bien [(R3 y R4) o (R3 y R5)] se unen entre sí para formar un heterociclo mono o bicíclico, saturado o insaturado, que comprende de 2 a 10 eslabones carbonados y de 1 a 5 heteroátomos elegidos entre N, O, y S, sustituido opcionalmente, o para formar un grupo N=CH. arilo, estando dicho arilo sustituido opcionalmente.
Description
Hidrazinocarbonil-tieno[2,3-c]pirazoles,
procedimiento de preparación, composiciones que los contienen y
utilización.
La presente invención se refiere principalmente
a
hidrazinocarbonil-tieno[2,3-c]pirazoles
sustituidos, a su procedimiento de preparación, a las composiciones
que los contienen, y a su utilización como medicamento.
Más particularmente, y según un primer aspecto,
la invención se refiere a
hidrazinocarbonil-tieno[2,3-c]pirazoles
sustituidos, útiles como agentes anticancerosos.
Los
1H-tieno[2,3-c]pirazoles
son conocidos por WO 04/013146 y WO 03/101968. Estos productos se
presentan como inhibidores de numerosas proteínas quinasas. Sin
embargo, la administración de dichos productos a pacientes puede
inducir efectos secundarios importantes, debido a su amplio espectro
de acción. Así, se investiga la obtención de inhibidores
específicos de una selección de proteínas, principalmente
quinasas.
Contra toda previsión, se ha encontrado que es
posible obtener inhibidores de la quinasa Aurora 2 (Aurora A) y de
algunas otras quinasas útiles en oncología, mediante
hidrazinocarbonil-1H-tieno[2,3-c]pirazoles
sustituidos.
Estos productos responden a la fórmula general
(I) siguiente:
en la
que:
(i) R1 se selecciona independientemente del
grupo constituido por -NHCO(R2),
-NHCONH(R2), -NHCOO(R2), en el que R2 se selecciona
independientemente del grupo constituido por -H,
-alquilo(C_{1}-C_{24}),
-cicloalquilo(C_{3}-C_{9}),
-cicloalquileno(C_{3}-C_{9}), heterocicloalquilo, heterocicloalquileno, arilo, heteroarilo, -alquil(C_{1}-C_{6})-arilo, -alquil(C_{1}-C_{6})-heteroarilo, -aril-alquilo(C_{1}-C_{6}), -heteroaril-alquilo(C1-C6), sustituidos opcionalmente;
-cicloalquileno(C_{3}-C_{9}), heterocicloalquilo, heterocicloalquileno, arilo, heteroarilo, -alquil(C_{1}-C_{6})-arilo, -alquil(C_{1}-C_{6})-heteroarilo, -aril-alquilo(C_{1}-C_{6}), -heteroaril-alquilo(C1-C6), sustituidos opcionalmente;
(ii) Cada uno de R3, R4, y R5 se selecciona
independientemente del grupo constituido por H,
-alquilo(C_{1}-C_{6}),
-alquil(C_{1}-C_{6})-arilo, -alquil(C_{1}-C_{6})-heteroarilo, -arilo, -heteroarilo, sustituidos opcionalmente, o bien [(R3 y R4) o (R3 y R5)] se unen entre sí para formar un heterociclo mono o bicíclico, saturado o insaturado, que comprende de 2 a 10 eslabones carbonados y de 1 a 5 heteroátomos elegidos entre N, O, y S, sustituido opcionalmente, o para formar un grupo N=CH-arilo, estando dicho arilo sustituido opcionalmente.
-alquil(C_{1}-C_{6})-arilo, -alquil(C_{1}-C_{6})-heteroarilo, -arilo, -heteroarilo, sustituidos opcionalmente, o bien [(R3 y R4) o (R3 y R5)] se unen entre sí para formar un heterociclo mono o bicíclico, saturado o insaturado, que comprende de 2 a 10 eslabones carbonados y de 1 a 5 heteroátomos elegidos entre N, O, y S, sustituido opcionalmente, o para formar un grupo N=CH-arilo, estando dicho arilo sustituido opcionalmente.
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En el marco de la invención, y salvo mención
diferente en el texto, se entiende por:
- halógeno: flúor, cloro, bromo o
yodo.
- alquilo: un sustituyente alifático
saturado lineal o ramificado, que comprende de 1 a 12 átomos de
carbono. A título de ejemplos, se pueden citar los grupos metilo,
etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, tercbutilo, pentilo,
1-metilbutilo, 2-metilbutilo,
3-metilbutilo, 1,1-dimetilpropilo,
1,2-dimetilpropilo,
2,2-dimetil-propilo,
1-etilpropilo, hexilo,
1-metilpentilo, 2-metilpentilo,
1-etil-butilo,
2-etilbutilo, 3,3-dimetilbutilo,
heptilo, 1-etilpentilo, etc;
- alquileno: un sustituyente alquilo
tal como se ha definido anteriormente, que es divalente. A título de
ejemplo, se pueden citar los grupos metileno (-CH_{2}-) o
dimetileno (-CH_{2}-CH_{2}-), etilenilo,
1-metiletilenilo,
prop-1-enilo,
prop-2-enilo,
Z-1-metilprop-1-enilo,
E-1-metilprop-1-enilo,
Z-1,2-dimetil-prop-1-enilo,
E-1,2-dimetilprop-1-enilo,
but-1,3-dienilo,
1-metilidenil-prop-2-enilo,
Z-2-metilbut-1,3-dienilo,
E-2-metilbut-1,3-dienilo,
2-metil-1-metilidenilprop-2-enilo,
undec-1-enilo y
undec-10-enilo, etc;
- arilo: un sustituyente aromático
mono o policíclico que tiene de 6 a 14 átomos de carbono. A título
de ejemplos, se pueden citar los grupos fenilo,
naft-1-ilo,
naft-2-ilo,
antracen-9-ilo,
1,2,3,4-tetrahidronaft-5-ilo,
1,2,3,4-tetrahidronaft-6-ilo,
etc;
- Cicloalquilo: un sustituyente
alquilo tal como se ha definido anteriormente, que comprende de 3 a
12 átomos de carbono y que es cíclico. A título de ejemplos, se
pueden citar los sustituyentes ciclopropilo, ciclobutilo,
ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclopentadienilo, ciclohexilo,
ciclohexenilo, cicloheptilo; biciclo[2.2.1]heptilo,
ciclooctilo, biciclo[2.2.2]octilo, adamantilo,
perhidronaftilo, etc;
- heteroátomo: un átomo de nitrógeno,
de oxígeno o de azufre;
- Heteroarilo: un sustituyente
aromático mono o policíclico que comprende de 5-12
eslabones y que comprende de 1 a 4 heteroátomos tales como se han
definido anteriormente. A título de ejemplos, se pueden citar los
sustituyentes pirrol-1-ilo,
pirrol2-ilo, pirrol3-ilo, furilo,
tienilo, imidazolilo, pirazolilo, oxazolilo, tiazolilo,
isoxazolilo, isotiazolilo, 1,2,4-triazolilo,
oxadiazolilo, tiadiazolilo, tetrazolilo, piridilo, pirimidilo,
pirazinilo, 1,3,5-triazinilo, indolilo,
benzo[b]furilo, benzo[b]tienilo,
indazolilo, bencimidazolilo, azaindolilo, quinoleilo,
isoquinoleilo, carbazolilo, acridilo, etc;
- heterociclilo: un sustituyente
hidrocarbonado cíclico saturado o parcialmente insaturado que
comprende de 5 a 13 eslabones y que comprende de 1 a 4 heteroátomos
tales como se han definido anteriormente. Preferentemente, el
sustituyente hidrocarbonado cíclico saturado o parcialmente
insaturado será monocíclico y comprenderá 4 ó 5 átomos de carbono y
1 a 3 heteroátomos. A título de ejemplos, se pueden citar los
sustituyentes piperidinilo, azetidinilo, piperazinilo, morfolinilo,
oxazepinilo, pirrolidinilo, diazepinilo, etc;
- alcoxi: un sustituyente de fórmula
-O-alquilo en el que el grupo alquilo es
tal como se ha definido anteriormente.
- sustituido: un sustituyente
diferente de H, por ejemplo halógeno, alquilo, arilo; heteroarilo,
cicloalquilo, heterociclilo, alquileno, alquinilo, OH,
O-alquilo, O-alquileno,
O-arilo, O-heteroarilo, SH,
S-alquilo, S-arilo,
S(O_{2})H,
S(O_{2})-alquilo,
S(O_{2})-arilo, SO_{3}H,
SO_{3}-alquilo, SO_{3}-arilo,
CHO, C(O)-alquilo,
C(O)-arilo, C(O)OH,
C(O)O-alquilo,
C(O)O-arilo,
OC(O)-alquilo,
OC(O)-arilo, C(O)NH_{2},
C(O)NH-arilo, C(O)NHR7,
C(O)NR7R8,
-alquilo(C_{1}-C_{3})-arilo,
-alquilo(C_{1}-C_{3})-heteroarilo,
-alquilo(C_{1}-C_{3})-heterociclilo,
-alquilo(C_{1}-C_{3})-cicloalquilo,
NR7R8, en el que los ciclos están sustituidos opcionalmente con uno
o varios sustituyentes del grupo halógeno,
alquilo(C_{1}-C_{3}), alcoxi, y en el que
R7 y R8 se seleccionan independientemente del grupo constituido por
H, alquilo, arilo, heteroarilo, cicloalquilo, heterociclilo,
alquilo-N[alquilo(C_{1}-C_{6})]_{2},
-C(O)-alquilo,
-C(O)-arilo. Preferentemente en el grupo R2
el término "sustituido" designa un sustituyente halógeno,
alquilo(C_{1}-C_{6}), arilo, heteroarilo,
cicloalquilo, heterociclilo, alquileno, alquinilo, OH,
O-alquilo, O-alquileno, NR7R8, en el
que los ciclos están sustituidos opcionalmente con uno o varios
sustituyentes del grupo halógeno,
alquilo(C_{1}-C_{3}), alcoxi, y en el
que R7 y R8 se seleccionan independientemente del grupo constituido
por hidrógeno, alquilo(C_{0}-C_{3}),
fenilo, heteroarilo, cicloalquilo, heterociclilo,
alquilo(C_{1}-C_{3})-N[alquilo(C_{0}-C_{3})]_{2}.
Preferentemente cuando [(R3 y R4) o (R3 y R5)] se unen entre sí
para formar un ciclo o un grupo N=CH-arilo, el
término "sustituido" designa uno o varios sustituyentes del
grupo halógeno, -alquilo(C_{1}-C_{6}),
-alquilo(C_{0}-C_{6})-alcoxi
- C_{0}: un enlace covalente o
-H.
- Por convención para
-alquil(C_{1}-C_{6})-arilo:
la conexión al resto de la molécula se realiza a nivel del grupo
alquilo. Inversamente para
-Aril-alquilo(C_{1}-C_{6}),
la conexión se realiza a nivel del grupo arilo.
- Por proteínas JNK se entiende las
proteínas JNK1, 2 y 3.
\vskip1.000000\baselineskip
Entre los valores preferidos de R1 se elige
NHCO(R2); en el que R2 se elige, preferentemente, entre
arilo, heteroarilo y
aril-alquilo(C_{1}-C_{6}),
sustituido opcionalmente.
\vskip1.000000\baselineskip
La invención tiene muy particularmente por
objeto los productos de fórmula (I) que responden a la fórmula
(I'):
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
en la
que:
- Cada uno de los grupos R3, R4, y R5
son tales como se han definido anteriormente y,
- R6 se elige entre el grupo
constituido por halógeno,
alquilo(C_{1}-C_{3})-NR_{7}R_{8},
alcoxi(C_{1}-C_{6}),
alquilo(C_{0}-C_{3})-heterociclo,
alquilo(C_{0}-C_{3})-arilo,
alquilo(C_{0}-C_{3})-heteroarilo,
alquilo(C_{0}-C_{3})-cicloalquilo,
en el que los ciclos están opcionalmente sustituidos con uno o
varios sustituyentes
alquilo(C_{1}-C_{3}), halógeno, alcoxi, y
en el que R_{7} y R_{8} se seleccionan independientemente del
grupo constituido por -H,
alquilo(C_{0}-C_{3}), arilo,
alquilo(C_{1}-C_{3})-N-[alquilo(C_{0}-C_{3})]_{2}.
\vskip1.000000\baselineskip
Más particularmente el grupo R6 está en posición
3 ó 4 en el fenilo al que se une.
Más particularmente, R6 según la presente
invención es
-alquilo(C_{0}-C_{3})-heterociclo,
estando dicho heterociclo él mismo sustituido opcionalmente con uno
o varios sustituyentes
alquilo(C_{1}-C_{3}), halógeno,
alcoxi.
Más particularmente, R3 se elige ventajosamente
entre arilo, heteroarilo,
-alquil(C_{1}-C_{6})-arilo
o
-alquil(C_{1}-C_{6})-heteroarilo,
sustituido opcionalmente, preferentemente entre fenilo, piridilo,
indolilo, bencimidazolilo, pirazolilo, y pirrolilo, sustituido
opcionalmente.
Más particularmente, R4 se elige ventajosamente
entre H o alquilo, principalmente
-alquilo(C_{1}-C_{6}). Muy
particularmente R4 es H, metilo, o etilo.
Más particularmente, R5 se elige ventajosamente
entre H o alquilo, principalmente
-alquilo(C_{1}-C_{6}).
Más particularmente, R3 y R4 forman con el
nitrógeno al que están unidos, un heterociclo de 5 a 6 eslabones
que contiene además llegado el caso un átomo de N, O, o S,
sustituido opcionalmente, muy particularmente piperidina o
pirrolidina, sustituida opcionalmente.
Más generalmente, y en el contexto de la
invención, un arilo preferido es fenilo, y un heteroarilo preferido
se elige entre piridilo, indolilo, bencimidazolilo, pirazolilo,
tienilo y pirrolilo, sustituido opcionalmente.
\vskip1.000000\baselineskip
Los productos ilustrativos de la invención según
su primer aspecto pueden elegirse entre:
5-(N'-Fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-metoxi-benzamida,
5-(N'-Metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-metoxi-benzamida,
N-[5-(N'-Ciclohexil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-metoxi-benzamida,
N-[5-(N'-Bencil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-metoxi-benzamida,
N-{5-[N'-(2-Etil-fenil)-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-metoxi-benzamida,
N-{5-[N'-(2-Fluoro-fenil)-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-metoxi-benzamida,
4-Metoxi-N-[5-(N'-o-tolil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida,
N-[5-(N'-Metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-morfolin-4-ilmetil-benzamida,
4-Bromo-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida,
N-[5-(N'-Metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzamida,
4-(3,5-Dimetil-piperazin-1-ilmetil)-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida,
4-(3,5-Dimetil-piperazin-1-ilmetil)-N-[5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida,
4-(4-Metil-perhidro-1,4-diazepin-1-ilmetil)-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida,
4-(4-Metil-perhidro-1,4-diazepin-1-ilmetil)-N-[5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida,
N-[5-(N'-Metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-piperazin-1-ilmetil-benzamida,
N-{5-[N'-(4-Cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-piperazin-1-ilmetil-benzamida,
N-[5-(N'-Metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(3-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzamida,
N-{5-[N'-(4-Cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-(3-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzamida,
4-Dietilaminometil-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida;
trifluoro-acetato,
N-{5-[N'-(4-Cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-dietilaminometil-benzamida,
N-[5-(N'-Metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-3-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzamida,
N-[5-(N'-(4-Cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-3-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzamida,
N-[5-(N'-Metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-piperidin-1-ilmetil-benzamida,
N-[5-(N'-(4-Cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-piperidin-1-ilmetil-benzamida,
N-[5-(N'-Metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-pirrolidin-1-ilmetil-benzamida,
N-[5-(N'-(4-Cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-pirrolidin-1-ilmetil-benzamida,
4-Azetidin-1-ilmetil-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida,
4-{[(2-Dimetilamino-etil)-metil-amino]-metil}-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida,
N-{5-[N'-(4-Cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-{[(2-dimetilamino-etil)-metil-amino]-metil}-benzamida,
N-[5-(N'-Metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-perhidro-1,4-oxazepin-4-ilmetil-benzamida,
N-{5-[N'-(4-Cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-perhidro-1,4-oxazepin-4-ilmetil-benzamida,
N-[5-(N'-Metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-3-morfolin-4-ilmetil-benzamida,
N-{5-[N'-(4-Cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-3-morfolin-4-ilmetil-benzamida,
4-[(2-Dietilamino-etilamino)-metil]-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida,
N-{5-[N'-(4-Cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-[(2-dietilamino-etilamino)-metil]-benzamida,
4-[(Metil-fenil-amino)-metil]-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida,
4-[(Diisopropilamino)-metil]-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida;
trifluoroacetato,
N-[5-(N'-Bencil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-metoxi-benzamida,
4-Metoxi-N-[5-(N'-piridin-2-il-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida,
N-{5-[N'-(4-Cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
N-[5-(N'-Bencil-N'-metil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
N-(Piperidin-1-il)-3-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzoilamino]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-5-carboxamida,
N-[5-(N'-Bencil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
N-[5-(N'-Etil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
N-[5-(N'-Bencil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
N-[5-(N'-Metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
N-{5-[N'-(4-Cloro-fenil)-N'-ciclobutilmetil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
N-{5-[N'-Etil-N'-(4-fluoro-fenil)-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
N-{(5-[N'-(4-Fluoro-fenil)-N'-(2-metoxi-etil)-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
N-[5-(N'-Etil-N'-o-tolil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
N-[5-(N'-Etil-N'-m-tolil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
N-[5-(N'-Etil-N'-m-tolil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
N-{5-[N'-(4-Fluoro-fenil)-N'-isobutil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
N-{5-[N'-(3-Bromo-fenil)-N'-etil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
6-(4-Metil-[1,4]diazepan-1-il)-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-nicotinamida,
N-[5-(Benciliden-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
N-[5-(N'-Metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(2-morfolin-4-il-etoxi)-benzamida,
4-(4-metil-[1,4]diazepan-1-il)-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida.
\vskip1.000000\baselineskip
Los productos según la invención pueden
presentarse en forma no quiral, racémica, enriquecida en un
estereoisómero o enriquecida en un enantiómero; y opcionalmente
están salificados.
Según un segundo aspecto, la invención tiene por
objeto un procedimiento de preparación de los productos según su
primer aspecto.
\vskip1.000000\baselineskip
En particular la invención se refiere a un
procedimiento de preparación de un producto de fórmula general (I)
siguiente:
en la que R1 es NHCO(R2), y
en el que R3, R4 y R5 son tales como se han definido anteriormente,
obteniéndose dicho producto de fórmula general (I)
por:
(i) acoplamiento entre (i-a) un
ácido de fórmula general (X) siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
en la que R1 es tal como se ha
definido anteriormente, y en el que PG es un grupo protector de la
función NH libre intracíclica del núcleo
tieno[2,3-c]pirazol,
y
(i-b) una hidrazina
(R3)(R4)N-NH(R5) en la que R3, R4 y R5
son tales como se han definido anteriormente, en presencia de un
agente de acoplamiento y en presencia de una base tal como una amina
terciaria o un carbonato de un metal alcalino; después
(ii) escisión de PG.
\vskip1.000000\baselineskip
El producto de fórmula general (X) puede
obtenerse por saponificación de la función éster del núcleo tiofeno
de un producto de fórmula general (IX):
en el que R1 es tal como se ha
definido
anteriormente.
\vskip1.000000\baselineskip
El producto de fórmula general (IX) puede
obtenerse por acoplamiento entre:
(i) un producto de fórmula general (IIa)
siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
en la que Alquilo es tal como se ha
definido anteriormente, y en la que PG es un grupo protector de la
función NH libre intracíclica del núcleo
tieno[2,3-c]pirazol,
y
(ii) un producto de fórmula general
(R2)CONH_{2}, en presencia:
- -
- de un catalizador tal como yoduro de cobre (I),
- -
- de una amina tal como trans-1,2-diaminociclohexano, trans-1,2-bis(metilamino)ciclohexano o, preferentemente N,N'-dimetil-1,2-diaminoetano, y
- -
- de una base tal como fosfato tripotásico o carbonato de cesio.
\vskip1.000000\baselineskip
El producto de fórmula general (IIa) puede
obtenerse por reacción entre un mercaptoacetato de alquilo
Alquil-OCO-CH_{2}-SH,
en presencia de una base tal como carbonato de sodio y un compuesto
(IIIa):
en el que PG es tal como se ha
definido
anteriormente:
El producto de fórmula general (IIIa) puede
obtenerse por (i) formilación de
3,4,5-tribromo-pirazol para la
obtención de
3,5-dibromo-4-formil-pirazol
(III), y (ii) protección de la función amino intracíclica de (III)
por la introducción del grupo protector PG.
El grupo protector PG puede introducirse
por:
(i) reacción con etilvinil éter en presencia de
un ácido tal como ácido clorhídrico, para la obtención de un grupo
PG = 1-etoxi-etilo, en un disolvente
inerte tal como tolueno, o;
(ii) reacción con
di-terc-butildicarbonato en
presencia de una base tal como trietilamina, piridina, o
N,N-dimetilamino-piridina, para la
obtención de un grupo PG =
terc-butiloxicarbonilo, en un disolvente
inerte tal como diclorometano.
Según un tercer aspecto, la invención se refiere
a una composición farmacéutica que comprende un producto según su
primer aspecto, en combinación con un excipiente farmacéuticamente
aceptable.
Según un cuarto aspecto, la invención tiene por
objeto la utilización de un producto según su primer aspecto, para
la fabricación de un medicamento útil para tratar un estado
patológico, en particular el cáncer.
Según una variante del cuarto aspecto, la
invención tiene por objeto la utilización de un producto según su
primer aspecto, para la fabricación de un medicamento útil para
tratar un estado patológico elegido entre psoriasis, glaucoma,
leucemias, enfermedades asociadas con el sistema nervioso central,
inflamaciones, y enfermedades asociadas con una desrregulación de
las proteínas JNK.
Los compuestos de fórmula (I) pueden prepararse
a partir de los compuestos de fórmula general (II), según el
esquema de síntesis general siguiente:
Las reacciones (a) y (d) pueden efectuarse
cuando R1 representa NHCO(R2) en el que R2 tiene el mismo
significado que anteriormente en presencia de una amida del tipo
(R2)CONH_{2}, de yoduro de cobre (I), de una amina tal
como
trans-1,2-diaminociclohexano,
trans-1,2-bis(metilamino)ciclohexano
o, - y éste es uno de los aspectos de la
invención -, N,N'-dimetil-1,2-diaminoetano, y de una base tal como fosfato tripotásico o carbonato de cesio en un disolvente inerte tal como dioxano a una temperatura comprendida entre 20^{0}C y la temperatura de ebullición del medio de reacción, según los métodos generales descritos por S. L. BUCHWALD et al., J. Am. Chem. Soc., 2002, 124, 7421; J. Am. Chem. Soc., 2001, 123, 7727.
invención -, N,N'-dimetil-1,2-diaminoetano, y de una base tal como fosfato tripotásico o carbonato de cesio en un disolvente inerte tal como dioxano a una temperatura comprendida entre 20^{0}C y la temperatura de ebullición del medio de reacción, según los métodos generales descritos por S. L. BUCHWALD et al., J. Am. Chem. Soc., 2002, 124, 7421; J. Am. Chem. Soc., 2001, 123, 7727.
Las reacciones (b) y (c) pueden efectuarse en
presencia de un derivado del tipo
(R3)(R4)NN(R5)H en el que R3, R4, R5 tienen el
mismo significado que anteriormente y de trimetilaluminio en un
disolvente tal como tolueno o dimetilformamida a una temperatura
comprendida entre 0ºC y la temperatura de ebullición del medio de
reacción.
La reacción (e) se efectúa generalmente según
los métodos habituales que no afectan al resto de la molécula,
principalmente por aplicaciones de los métodos descritos por T. W.
Greene y P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis (2ª
ed.), A. Wiley - Interscience Publication
(1991), o por Mc Omie, Protective Groups in Organic Chemistry,
Plenum Press (1973) o por Bradford P. Mundy y Michael G. Ellerd,
Name Reactions and Reagents in Organic Synthesis, A. Wiley
- Interscience Publication (1988). La reacción
(e) puede efectuarse por ejemplo en medio básico, en presencia de
hidróxido de potasio o hidróxido de sodio, en un disolvente inerte
tal como una mezcla de tetrahidrofurano, agua y de un alcohol
(etanol o metanol preferentemente) o bien de un alcohol sólo
(etanol o metanol preferentemente), a una temperatura comprendida
entre 20ºC y la temperatura de ebullición del medio de reacción,
preferentemente a la temperatura de reflujo del medio de
reacción.
La reacción (f) se efectúa preferentemente en
presencia de un derivado del tipo R3R4NNR5H en el que R3, R4, R5
tienen el mismo significado que anteriormente y de un agente de
activación del tipo tetrafluoroborato de
O-(1H-benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio
(TBTU) por ejemplo, en presencia de una base (trietilamina o
diisopropiletilamina por ejemplo) en un disolvente inerte
(acetonitrilo o dimetilformamida por ejemplo) a una temperatura
comprendida entre 0ºC y la temperatura de ebullición del medio, o
según los métodos muy conocidos de acoplamiento de la química
peptídica (M. BODANSZKY et al., Principles of Peptide
Synthesis, Spinger-Verlag, Nueva York, NY, 1984,
9-58) o de la formación de una amida.
Alternativamente, la reacción (f) puede efectuarse generalmente
según los métodos habituales que no afectan al resto de la molécula,
principalmente por aplicaciones de los métodos descritos por
Bradford P. Mundy y Michael G. Ellerd, Name Reactions and Reagents
in Organic Synthesis,
A. Wiley - Interscience Publication (1988). Por ejemplo la reacción (f) puede efectuarse bajo atmósfera inerte (por ejemplo bajo nitrógeno o bajo argón) en presencia de cloruro de oxalilo, en un disolvente inerte tal como diclorometano, a una temperatura comprendida entre 20ºC y la temperatura de ebullición del medio de reacción, preferentemente a una temperatura cercana a 20ºC o bien en presencia de cloruro de sulfinilo, en un disolvente inerte tal como cloroformo, a una temperatura comprendida entre 20ºC y la temperatura de ebullición del medio de reacción, preferentemente a la temperatura de reflujo del medio de reacción, seguido de una reacción en presencia de un derivado del tipo R3R4NNR5H en el que R3, R4, R5 tienen el mismo significado que anteriormente y de una base tal como trietilamina o piridina, en un disolvente inerte tal como dimetilformamida, a una temperatura comprendida entre 20ºC y la temperatura de ebullición del medio de reacción.
A. Wiley - Interscience Publication (1988). Por ejemplo la reacción (f) puede efectuarse bajo atmósfera inerte (por ejemplo bajo nitrógeno o bajo argón) en presencia de cloruro de oxalilo, en un disolvente inerte tal como diclorometano, a una temperatura comprendida entre 20ºC y la temperatura de ebullición del medio de reacción, preferentemente a una temperatura cercana a 20ºC o bien en presencia de cloruro de sulfinilo, en un disolvente inerte tal como cloroformo, a una temperatura comprendida entre 20ºC y la temperatura de ebullición del medio de reacción, preferentemente a la temperatura de reflujo del medio de reacción, seguido de una reacción en presencia de un derivado del tipo R3R4NNR5H en el que R3, R4, R5 tienen el mismo significado que anteriormente y de una base tal como trietilamina o piridina, en un disolvente inerte tal como dimetilformamida, a una temperatura comprendida entre 20ºC y la temperatura de ebullición del medio de reacción.
La reacción de desprotección (g) puede
efectuarse (cuando PG representa un grupo
1-etoxi-etilo) en presencia de un
ácido mineral tal como ácido clorhídrico, en un disolvente tal como
tetrahidrofurano o agua, a una temperatura comprendida entre 20ºC y
la temperatura de ebullición del medio de reacción, o también según
los métodos muy conocidos de desprotección de la función amino (T.
W. GREENE et al. en Protective Groups in Organic Synthesis,
tercera edición, 1999, Wiley-Interscience.
Los compuestos de fórmula general (IIa) pueden
prepararse a partir de
3,4,5-tribromo-pirazol, según el
esquema de síntesis general siguiente:
La reacción (a) puede efectuarse en presencia de
una órganolitio tal como
n-butil-litio, en presencia de
dimetilformamida, en un disolvente inerte tal como éter dietílico o
tetrahidrofurano a una temperatura comprendida entre
-78ºC y la temperatura ambiente.
La reacción de protección (b) puede efectuarse
en presencia de etilvinil éter, en presencia de una cantidad
catalítica de un ácido tal como ácido clorhídrico, en un disolvente
inerte tal como tolueno a una temperatura comprendida entre 20ºC y
la temperatura de ebullición del medio de reacción o según los
métodos muy conocidos de protección de la función amino (T. W.
GREENE et al. en Protective Groups in Organic Synthesis,
tercera edición, 1999, Wiley-Interscience).
La reacción (c) puede efectuarse en presencia de
mercaptoacetato de etilo, en presencia de una base tal como
carbonato de sodio, en un disolvente inerte tal como un alcohol
(etanol preferentemente) a una temperatura comprendida entre 20ºC y
la temperatura de ebullición del medio de reacción.
Alternativamente, cuando R1 representa
NHCO(R2) en el que R2 tiene el mismo significado que
anteriormente, los compuestos de fórmula (I) pueden prepararse a
partir de los compuestos de fórmula general (XIV), según el esquema
de síntesis general siguiente:
La reacción de protección (a) puede efectuarse
(cuando PG representa un grupo
terc-butiloxicarbonilo) mediante
di-terc-butildicarbonato en
presencia de una base tal como trietilamina o piridina y
opcionalmente en presencia de
N,N-dimetilamino-piridina, en un
disolvente inerte (diclorometano por ejemplo) a una temperatura
comprendida entre -10ºC y la temperatura de ebullición
del medio de reacción, o bien (cuando PG representa un grupo
1-etoxi-etilo) en presencia de
etilvinil éter, en presencia de una cantidad catalítica de un ácido
tal como ácido clorhídrico, en un disolvente inerte tal como tolueno
a una temperatura comprendida entre 20ºC y la temperatura de
ebullición del medio de reacción, o según los métodos muy conocidos
de protección de la función amino (T. W. GREENE et al. en
Protective Groups in Organic Synthesis, tercera edición, 1999,
Wiley-Interscience).
La reacción (b) puede efectuarse:
- mediante un cloruro de ácido
(R2)C(O)Cl en el que R2 tiene el mismo
significado que anteriormente en presencia de una base como
trietilamina, piridina, diisopropiletilamina, carbonato de potasio o
de sodio, en un disolvente inerte (dimetilformamida,
tetrahidrofurano por ejemplo) o en la misma base orgánica a una
temperatura comprendida entre 0ºC y la temperatura de ebullición
del medio de reacción (G. DAIDONE et al, Heterocycles, 1996,
43(11), 2385).
- mediante un anhídrido
((R2)CO)_{2}O en el que R2 tiene el mismo
significado que anteriormente en un disolvente inerte
(dimetilformamida, tetrahidrofurano, diclorometano por ejemplo) o en
el mismo anhídrido a una temperatura comprendida entre 0ºC y la
temperatura de ebullición del medio de reacción (F. ALBERICIO,
Synth. Commun., 2001, 31(2), 225, G. PROCTER, Tetrahedron,
1995, 51 (47), 12837).
- mediante un ácido
(R2)C(O)OH en el que R2 tiene el mismo
significado que anteriormente en presencia de un agente de
activación tal como hexafluorofosfato de
O-(7-aza-benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio
(HATU) en presencia de una base (piridina, diisopropiletilamina o
trietilamina por ejemplo) en un disolvente inerte (dimetilformamida
por ejemplo) a una temperatura comprendida entre 0ºC y la
temperatura de ebullición del medio de reacción, o según los
métodos muy conocidos de acoplamiento de la química peptídica (M.
BODANSZKY et al., Principles of Peptide Synthesis,
Spinger-Verleg, Nueva York, NY, 1984,
9-58) o de la formación de una amida.
\vskip1.000000\baselineskip
La reacción (c) se efectúa generalmente según
los métodos habituales que no afectan al resto de la molécula,
principalmente por aplicaciones de los métodos descritos por T. W.
Greene y P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis (2ª
ed.), A. Wiley - Interscience Publication
(1991), o por Mc Omie, Protective Groups in Organic Chemistry,
Plenum Press (1973) o por Bradford P. Mundy y Michael G. Ellerd,
Name Reactions and Reagents in Organic Synthesis, A. Wiley
- Interscience Publication (1988). La reacción
(c) puede efectuarse por ejemplo en medio básico, en presencia de
hidróxido de potasio o hidróxido de sodio, en un disolvente inerte
tal como una mezcla de tetrahidrofurano, agua y de un alcohol
(etanol o metanol preferentemente) o bien de un alcohol sólo
(etanol o metanol preferentemente), a una temperatura comprendida
entre 20ºC y la temperatura de ebullición del medio de reacción,
preferentemente a la temperatura de reflujo del medio de
reacción.
La reacción (d) se efectúa preferentemente en
presencia de un derivado del tipo R3R4NNR5H en el que R3, R4, R5
tienen el mismo significado que anteriormente y de un agente de
activación del tipo tetrafluoroborato de
O-(1H-benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio
(TBTU) por ejemplo, en presencia de una base (trietilamina o
diisopropiletilamina por ejemplo) en un disolvente inerte
(acetonitrilo o dimetilformamida por ejemplo) a una temperatura
comprendida entre 0ºC y la temperatura de ebullición del medio, o
según los métodos muy conocidos de acoplamiento de la química
peptídica (M. BODANSZKY et al., Principles of Peptide
Synthesis, Spinger-Verlag, Nueva York, NY, 1984,
9-58) o de la formación de una amida.
Alternativamente, la reacción (d) puede efectuarse generalmente
según los métodos habituales que no afectan al resto de la molécula,
principalmente por aplicaciones de los métodos descritos por
Bradford P. Mundy y Michael G. Ellerd, Name Reactions and Reagents
in Organic Synthesis,
A. Wiley - Interscience Publication (1988). Por ejemplo la reacción (d) puede efectuarse bajo atmósfera inerte (por ejemplo bajo nitrógeno o bajo argón) en presencia de cloruro de oxalilo, en un disolvente inerte tal como diclorometano, a una temperatura comprendida entre 20ºC y la temperatura de ebullición del medio de reacción, preferentemente a una temperatura cercana a 20ºC o bien en presencia de cloruro de sulfinilo, en un disolvente inerte tal como cloroformo, a una temperatura comprendida entre 20ºC y la temperatura de ebullición del medio de reacción, preferentemente a la temperatura de reflujo del medio de reacción, seguido de una reacción en presencia de un derivado del tipo R3R4NNR5H en el que R3, R4, R5 tienen el mismo significado que anteriormente y de una base tal como trietilamina o piridina, en un disolvente inerte tal como dimetilformamida, a una temperatura comprendida entre 20ºC y la temperatura de ebullición del medio de reacción.
A. Wiley - Interscience Publication (1988). Por ejemplo la reacción (d) puede efectuarse bajo atmósfera inerte (por ejemplo bajo nitrógeno o bajo argón) en presencia de cloruro de oxalilo, en un disolvente inerte tal como diclorometano, a una temperatura comprendida entre 20ºC y la temperatura de ebullición del medio de reacción, preferentemente a una temperatura cercana a 20ºC o bien en presencia de cloruro de sulfinilo, en un disolvente inerte tal como cloroformo, a una temperatura comprendida entre 20ºC y la temperatura de ebullición del medio de reacción, preferentemente a la temperatura de reflujo del medio de reacción, seguido de una reacción en presencia de un derivado del tipo R3R4NNR5H en el que R3, R4, R5 tienen el mismo significado que anteriormente y de una base tal como trietilamina o piridina, en un disolvente inerte tal como dimetilformamida, a una temperatura comprendida entre 20ºC y la temperatura de ebullición del medio de reacción.
La reacción de desprotección (e) puede
efectuarse (cuando PG representa un grupo
terc-butiloxicarbonilo) en presencia de
yodotrimetilsilano, o en medio ácido (ácido trifluoroacético o ácido
clorhídrico en un disolvente tal como diclorometano o dioxano por
ejemplo) a una temperatura comprendida entre 0ºC y la temperatura de
ebullición del medio de reacción, o en medio básico (carbonato de
potasio en un disolvente tal como un alcohol (metanol
preferentemente) a una temperatura comprendida entre 0ºC y la
temperatura de ebullición del medio de reacción y opcionalmente
bajo irradiación de microondas) o en medio neutro en un disolvente
tal como un alcohol (metanol preferentemente) bajo irradiación de
microondas; o bien (cuando PG representa un grupo
1-etoxi-etilo) en presencia de un
ácido mineral tal como ácido clorhídrico, en un disolvente tal como
tetrahidrofurano o agua, a una temperatura comprendida entre 20ºC y
la temperatura de ebullición del medio de reacción, o también según
los métodos muy conocidos de desprotección de la función amino (T.
W. GREENE et al. en Protective Groups in Organic Synthesis,
tercera edición, 1999, Wiley-Interscience.
\newpage
Los compuestos de fórmula general (XVa) pueden
prepararse a partir de
3-amino-4-ciano-5-metilsulfaniltiofen-2-carboxilato
de etilo, según el esquema de síntesis general siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
La reacción (a) puede efectuarse en presencia de
nitrito de isopentilo y de Cu(II), en un disolvente inerte
tal como dimetilformamida a una temperatura comprendida entre 20ºC y
la temperatura de ebullición del medio de reac-
ción.
ción.
La reacción de oxidación (b) puede efectuarse en
presencia de ácido
3-cloro-peroxibenzoico, en un
disolvente inerte tal como diclorometano a una temperatura
comprendida entre -20ºC y la temperatura ambiente.
La reacción (c) puede efectuarse en presencia de
hidrazina, en un disolvente inerte tal como un alcohol (etanol
preferentemente) a una temperatura comprendida entre 20ºC y la
temperatura de ebullición del medio de reac-
ción.
ción.
La reacción de ciclación (d) puede efectuarse en
presencia de un ácido mineral tal como ácido clorhídrico
concentrado o ácido sulfúrico concentrado, en un disolvente inerte
tal como un alcohol (etanol preferentemente) a una temperatura
comprendida entre 20ºC y la temperatura de ebullición del medio de
reacción.
La reacción de protección (e) puede efectuarse
(cuando PG representa un grupo
terc-butiloxicarbonilo) mediante
di-terc-butildicarbonato en
presencia de una base tal como trietilamina o piridina y
opcionalmente en presencia de
N,N-dimetilamino-piridina, en un
disolvente inerte (diclorometano por ejemplo) a una temperatura
comprendida entre -10ºC y la temperatura de ebullición
del medio de reacción, o bien (cuando PG representa un grupo
1-etoxi-etilo) en presencia de
etilvinil éter, en presencia de una cantidad catalítica de un ácido
tal como ácido clorhídrico, en un disolvente inerte tal como tolueno
a una temperatura comprendida entre 20ºC y la temperatura de
ebullición del medio de reacción, o según los métodos muy conocidos
de protección de la función amino (T. W. GREENE et al. en
Protective Groups in Organic Synthesis, tercera edición, 1999,
Wiley-Interscience).
La síntesis de
3-amino-4-ciano-5-metilsulfanil-tiofen-2-carboxilato
de etilo está descrita en Synthesis 2003,
735.
735.
\newpage
Alternativamente, cuando R1 representa
NHCO(R2) en el que R2 tiene el mismo significado que
anteriormente, los compuestos de fórmula (I) pueden prepararse a
partir de los compuestos de fórmula general (XIV), según el esquema
de síntesis general siguiente:
La reacción (a) puede efectuarse en presencia de
un derivado del tipo (R3)(R4)NN(R5)H en el que
R3, R4, R5 tienen el mismo significado que anteriormente y de
trimetilaluminio en un disolvente tal como tolueno o
dimetilformamida a una temperatura comprendida entre 0ºC y la
temperatura de ebullición del medio de reacción.
La reacción de protección (b) puede efectuarse
(cuando PG representa un grupo
terc-butiloxicarbonilo) mediante
di-terc-butildicarbonato en
presencia de una base tal como trietilamina o piridina y
opcionalmente en presencia de
N,N-dimetilamino-piridina, en un
disolvente inerte (diclorometano por ejemplo) a una temperatura
comprendida entre -10ºC y la temperatura de ebullición
del medio de reacción, o bien (cuando PG representa un grupo
1-etoxi-etilo) en presencia de
etilvinil éter, en presencia de una cantidad catalítica de un ácido
tal como ácido clorhídrico, en un disolvente inerte tal como tolueno
a una temperatura comprendida entre 20ºC y la temperatura de
ebullición del medio de reacción, o según los métodos muy conocidos
de protección de la función amino (T. W. GREENE et al. en
Protective Groups in Organic Synthesis, tercera edición, 1999,
Wiley-Interscience).
La reacción (c) puede efectuarse:
- mediante un cloruro de ácido
(R2)C(O)Cl en el que R2 tiene el mismo
significado que anteriormente en presencia de una base como
trietilamina, piridina, diisopropiletilamina, carbonato de potasio o
de sodio, en un disolvente inerte (dimetilformamida,
tetrahidrofurano por ejemplo) o en la misma base orgánica a una
temperatura comprendida entre 0ºC y la temperatura de ebullición
del medio de reacción (G. DAIDONE et al, Heterocycles, 1996,
43(11), 2385).
- mediante un anhídrido
((R2)CO)_{2}O en el que R2 tiene el mismo
significado que anteriormente en un disolvente inerte
(dimetilformamida, tetrahidrofurano, diclorometano por ejemplo) o en
el mismo anhídrido a una temperatura comprendida entre 0ºC y la
temperatura de ebullición del medio de reacción (F. ALBERICIO,
Synth. Commun., 2001, 31(2), 225, G. PROCTER, Tetrahedron,
1995, 51 (47), 12837).
- mediante un ácido
(R2)C(O)OH en el que R2 tiene el mismo
significado que anteriormente en presencia de un agente de
activación tal como hexafluorofosfato de
O-(7-aza-benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio
(HATU) en presencia de una base (piridina, diisopropiletilamina o
trietilamina por ejemplo) en un disolvente inerte (dimetilformamida
por ejemplo) a una temperatura comprendida entre 0ºC y la
temperatura de ebullición del medio de reacción, o según los
métodos muy conocidos de acoplamiento de la química peptídica (M.
BODANSZKY et al., Principles of Peptide Synthesis,
Spinger-Verleg, Nueva York, NY, 1984,
9-58) o de la formación de una amida.
La reacción de desprotección (d) puede
efectuarse (cuando PG representa un grupo
terc-butiloxicarbonilo) en presencia de
yodotrimetilsilano, o en medio ácido (ácido trifluoroacético o ácido
clorhídrico en un disolvente tal como diclorometano o dioxano por
ejemplo) a una temperatura comprendida entre 0ºC y la temperatura de
ebullición del medio de reacción, o en medio básico (carbonato de
potasio en un disolvente tal como un alcohol (metanol
preferentemente) a una temperatura comprendida entre 0ºC y la
temperatura de ebullición del medio de reacción y opcionalmente
bajo irradiación de microondas) o en medio neutro en un disolvente
tal como un alcohol (metanol preferentemente) bajo irradiación de
microondas; o bien (cuando PG representa un grupo
1-etoxi-etilo) en presencia de un
ácido mineral tal como ácido clorhídrico, en un disolvente tal como
tetrahidrofurano o agua, a una temperatura comprendida entre 20ºC y
la temperatura de ebullición del medio de reacción, o también según
los métodos muy conocidos de desprotección de la función amino (T.
W. GREENE et al. en Protective Groups in Organic Synthesis,
tercera edición, 1999, Wiley-Interscience.
Alternativamente, cuando R1 representa
NHCO(R2) en el que R2 tiene el mismo significado que
anteriormente, los compuestos de fórmula (XVI) pueden prepararse a
partir de los compuestos de fórmula general (XI), según el esquema
de síntesis general siguiente:
La reacción (a) puede efectuarse en presencia de
un derivado del tipo (R3)(R4)NN(R5)H en el que
R3, R4, R5 tienen el mismo significado que anteriormente y de
trimetilaluminio en un disolvente tal como tolueno o
dimetilformamida a una temperatura comprendida entre 0ºC y la
temperatura de ebullición del medio de reacción.
La reacción de oxidación (b) puede efectuarse en
presencia de oxona® (peroximonosulfato de potasio) o de ácido
3-cloro-peroxibenzoico, en un
disolvente inerte tal como una mezcla de tetrahidrofurano o de
dimetilformamida y agua en el primer caso o diclorometano en el
segundo caso, a una temperatura comprendida entre -20ºC y
la temperatura ambiente.
La reacción (c) puede efectuarse en presencia de
hidrazina, en un disolvente inerte tal como un alcohol (etanol
preferentemente) a una temperatura comprendida entre 20ºC y la
temperatura de ebullición del medio de reacción.
La reacción de ciclación (d) puede efectuarse en
presencia de un ácido mineral tal como ácido clorhídrico
concentrado o ácido sulfúrico concentrado, en un disolvente inerte
tal como un alcohol (etanol preferentemente) a una temperatura
comprendida entre 20ºC y la temperatura de ebullición del medio de
reacción.
Los compuestos de fórmula (Ib) en los que R1
representa NHCO(R2) en el que R2 representa un grupo fenilo
sustituido con un grupo del tipo -CH2NR6R7,
seleccionándose independientemente R6 y R7 del grupo constituido por
-H, alquilo(C1-C6), arilo,
heteroarilo,
-alquil(C1-C6)-arilo,
-alquil(C1-C6)-heteroarilo,
sustituidos opcionalmente, o bien estando (R6 y R7) unidos entre sí
para formar un heterociclo mono o bicíclico, saturado o insaturado,
que comprende de 2 a 10 eslabones y de 1 a 5 heteroátomos elegidos
entre N, O, y S, pueden prepararse a partir de los compuestos de
fórmula general (IVb), según el esquema de síntesis general
siguiente:
La reacción (a) puede efectuarse en presencia de
una amina del tipo HNR6R7, en presencia de una sal tal como yoduro
de tetrabutilamonio en un disolvente inerte tal como
dimetilformamida, a una temperatura comprendida entre 20ºC y la
temperatura de ebullición del medio de reacción.
La reacción de desprotección (b) puede
efectuarse (cuando PG representa un grupo
terc-butiloxicarbonilo) en presencia de
yodotrimetilsilano, o en medio ácido (ácido trifluoroacético o ácido
clorhídrico en un disolvente tal como diclorometano o dioxano por
ejemplo) a una temperatura comprendida entre 0ºC y la temperatura de
ebullición del medio de reacción, o en medio básico (carbonato de
potasio en un disolvente tal como un alcohol (metanol
preferentemente) a una temperatura comprendida entre 0ºC y la
temperatura de ebullición del medio de reacción y opcionalmente
bajo irradiación de microondas) o en medio neutro en un disolvente
tal como un alcohol (metanol preferentemente) bajo irradiación de
microondas; o bien (cuando PG representa un grupo
1-etoxi-etilo) en presencia de un
ácido mineral tal como ácido clorhídrico, en un disolvente tal como
tetrahidrofurano o agua, a una temperatura comprendida entre 20ºC y
la temperatura de ebullición del medio de reacción, o también según
los métodos muy conocidos de desprotección de la función amino (T.
W. GREENE et al. en Protective Groups in Organic Synthesis,
tercera edición, 1999, Wiley-Interscience.
Los derivados del tipo
(R3)(R4)NN(R5)H en los que R3 representa un
grupo Arilo y más particularmente un grupo fenilo sustituido, R4
representa un grupo alquilo, R5 representa un átomo de hidrógeno,
pueden prepararse a partir de los compuestos de fórmula general
(XXI), según el esquema de síntesis general siguiente:
La reacción (a) puede efectuarse en presencia de
una base tal como un órganolitio, en presencia de un halogenuro de
alquilo, en un disolvente inerte tal como tetrahidrofurano, a una
temperatura comprendida entre -80ºC y 25ºC.
La reacción de escisión (b) puede efectuarse en
presencia de un ácido mineral tal como ácido clorhídrico, en un
disolvente inerte tal como tetrahidrofurano, a una temperatura
comprendida entre 25ºC y la temperatura de ebullición del medio de
reacción.
Los compuestos de fórmula general (XXI) en los
que Y y Z representan independientemente y más particularmente un
átomo de hidrógeno, o un grupo halógeno o alquilo, pueden prepararse
a partir de los compuestos de fórmula general (XXIII), según el
esquema de síntesis general siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
La reacción (a) puede efectuarse en presencia de
benzofenona, en presencia de un ácido mineral tal como ácido
sulfúrico o ácido clorhídrico, en un disolvente inerte tal como un
alcohol, etanol preferentemente, a una temperatura comprendida
entre 25ºC y la temperatura de ebullición del medio de reacción.
Alternativamente, los compuestos de fórmula
general (XXI) en los que Y y Z representan independientemente y más
particularmente un átomo de hidrógeno, o un grupo halógeno o
alquilo, pueden prepararse a partir de los compuestos de fórmula
general (XXIV), según el esquema de síntesis general siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
La reacción (a) puede efectuarse en presencia de
bencidriliden-hidrazina, de un compuesto de fórmula
general (XXIV) en el que Y y Z representan independientemente y más
particularmente un átomo de hidrógeno, o un grupo halógeno o
alquilo y en el que Hal representa más particularmente un átomo de
bromo o de cloro, de un derivado de paladio (II) tal como diacetato
de paladio (II), de un ligando fosfino, de una base tal como sosa,
en un disolvente inerte tal como un alcohol (alcohol
terc-amílico preferentemente) a una
temperatura comprendida entre 20ºC y la temperatura de ebullición
del medio de reacción, según los métodos generales descritos por
J.-M. CAMPAGNE et al., Tetrahedron, 2002, 58, 2041.
El experto en la técnica entenderá que, para
poner en práctica los procedimientos según la invención que se han
descrito anteriormente, puede ser necesario introducir grupos
protectores de las funciones amino y carboxilo con el fin de evitar
reacciones secundarias. Estos grupos son los que se pueden eliminar
sin afectar al resto de la molécula. Como ejemplos de grupos
protectores de la función amino, se pueden citar
1-etoxi-etilo que puede eliminarse
en presencia de un ácido mineral tal como ácido clorhídrico (en un
disolvente tal como tetrahidrofurano o agua por ejemplo), carbamato
de terc-butilo que puede eliminarse mediante
yodotrimetilsilano o en medio ácido (ácido trifluoroacético, o
ácido clorhídrico en un disolvente tal como diclorometano o dioxano
por ejemplo), carbamato de bencilo que puede eliminarse en
presencia de hidrógeno o en presencia de una mezcla de un tiol
(bencenotiol por ejemplo) y de un ácido de Lewis (eterato de
trifluoruro de boro por ejemplo), acetilo que puede eliminarse en
medio ácido (ácido clorhídrico por ejemplo), benzoilo que puede
eliminarse en medio ácido (ácido clorhídrico por ejemplo),
2-trimetilsilanil-etoximetilo que
puede eliminarse en presencia de fluoruro de tetrabutilamonio o en
medio ácido por ejemplo (ácido clorhídrico por ejemplo). Como grupos
protectores de la función carboxilo, se pueden citar los ésteres
(metoximetiléster, benciléster, metiléster por ejemplo) que pueden
eliminarse por los métodos descritos por T. W. GREENE et al.
en Protective Groups in Organic Synthesis, tercera edición, 1999,
Wiley-Interscience.
Los compuestos de fórmula (I) se aíslan y pueden
purificarse por los métodos conocidos habituales, por ejemplo por
cristalización, cromatografía o extracción.
Los enantiómeros, diastereoisómeros de los
compuestos de fórmula (I) forman parte igualmente de la
invención.
Los compuestos de fórmula (I) que contienen un
resto básico pueden transformarse opcionalmente en sales de adición
con una sal mineral u orgánica por acción de dicho ácido en un
disolvente orgánico tal como un alcohol, una cetona, un éter o un
disolvente clorado.
Los compuestos de fórmula (I) que contienen un
resto ácido pueden transformarse opcionalmente en sales metálicas o
en sales de adición con bases nitrogenadas según métodos conocidos
per se. Estas sales pueden obtenerse por acción de una base
metálica (por ejemplo, alcalina o alcalinotérrea), amoniaco, una
amina o una sal de amina sobre un compuesto de fórmula (I), en un
disolvente. La sal formada se separa por los métodos habituales.
Estas sales forman parte igualmente de la
invención.
Cuando un producto según la invención presenta
al menos una función básica libre, se pueden preparar sales
farmacéuticamente aceptables por reacción de dicho producto y un
ácido mineral u orgánico. Las sales farmacéuticamente aceptables
incluyen los cloruros, nitratos, sulfatos, hidrógenosulfatos,
pirosulfatos, bisulfatos, sulfitos, bisulfitos, fosfatos,
monohidrógenofosfatos, dihidrógenofosfatos, metafosfatos,
pirofosfatos, acetatos, propionatos, acrilatos,
4-hidroxibutiratos, caprilatos, caproatos,
decanoatos, oxalatos, malonatos, succinatos, glutaratos, adipatos,
pimelatos, maleatos, fumaratos, citratos, tartratos, lactatos,
fenilacetatos, mandelatos, sebacatos, suberatos, benzoatos,
ftalatos, metanosulfonatos, propanosulfonatos, xilenosulfonatos,
salicilatos, cinamatos, glutamatos, aspartatos, glucuronatos,
galacturonatos.
Cuando un producto según la invención presenta
al menos una función ácido libre, se pueden preparar sales
farmacéuticamente aceptables por reacción de dicho producto y una
base mineral u orgánica. Las bases farmacéuticamente aceptables
incluyen hidróxidos de cationes de metales alcalinos o
alcalinotérreos tales como Li, Na, K, Mg, Ca, compuestos aminados
básicos tales como amoniaco, arginina, lisina, histidina,
piperidina, morfolina, piperacina, trietilamina.
La invención se describe igualmente por los
ejemplos siguientes, que se proporcionan para ilustrar la
invención.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
1
En un matraz de 20 mL bajo argón se introducen
sucesivamente ácido
1-(1-etoxi-etil)-3-(4-metoxi-benzoilamino)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-5-carboxílico
(0,3 g, 0,77 mmoles), tetrafluoroborato de
O-(1H-benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio
(TBTU) (0,247 g, 0,77 mmoles, 1 eq), dimetilformamida (3,85 mL) y
fenilhidrazina (0,151 mL, 1,54 mmoles, 2 eq). A la mezcla de
reacción se añade trietilamina (0,322 mL, 2,31 mmoles, 3 eq). La
mezcla se agita a una temperatura cercana a 60ºC durante 15 horas.
El disolvente se evapora en vacío y el aceite residual se diluye con
15 mL de acetato de etilo y 10 mL de agua. La fase acuosa se aísla
y se acidifica a pH 4-5 antes de extraerla con
acetato de etilo (3 x 15 mL). Las fases orgánicas juntas se secan
sobre sulfato de magnesio y se concentran a sequedad bajo presión
reducida. El resto se purifica mediante cromatografía flash en gel
de sílice utilizando como eluyente una mezcla 1: 1 acetato de
etilo/heptano. El producto obtenido en forma de aceite (0,310 g,
84%, Rf = 0,47 (1:9 MeOH/diclorometano)) se pone sin más
purificación en 5 mL de tetrahidrofurano y 2,5 mL de ácido
clorhídrico 2,5 N. La mezcla de reacción se calienta a una
temperatura cercana a 50ºC durante 2 horas y se enfría a
temperatura ambiente. A la mezcla se añaden 15 mL de agua. Se forma
un precipitado. El tetrahidrofurano se evapora y la fase acuosa se
neutraliza con NaOH 5N. El precipitado formado se filtra y se lava
con agua. El sólido beige se seca en una estufa a una temperatura
cercana a 60ºC en vacío. El sólido seco se disuelve en acetona y se
precipita con heptano. La
5-(N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-metoxi-benzamida
así obtenida (86 mg, 33%) posee una pureza del 95%. Rdt global =
28%. RMN ^{1}H (400 MHz, (CD_{3})_{2}SO d_{6},
\delta en ppm): 3,85 (s, 3H); 6,72 (t ancho, J = 7,5 Hz, 1 H);
6,76 (d ancho, J = 8,0 Hz, 2H) ; 7,05 (d ancho, J = 8,0 Hz, 2H);
7,15 (t ancho, J = 7,5 Hz, 2H); 7,85 (s ancho, 1 H); 8,09 (d ancho,
J = 8,0 Hz, 2H); 8,19 (s ancho, 1 H); 10,45 (m ancho, 1 H); 11,0 (m
ancho, 1 H); 12,9 (m ancho, 1 H). LC/MS: m = 407, ES m/z = 408
MH^{+}
\vskip1.000000\baselineskip
En un matraz de 500 mL bajo argón se introducen
3-bromo-1-(1-etoxi-etil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-5-carboxilato
de etilo (10 g, 28 mmoles),
4-metoxi-benzamida (7,39 g, 48
mmoles, 1,7 eq), yoduro de cobre (I) (0,548 g, 2,88 mmoles, 0,1
eq), fosfato tripotásico (18,34 g, 86 mmoles, 3 eq) previamente
pulverizado, y 180 mL de dioxano anhidro previamente desgaseado con
argón. A esta suspensión se añaden con jeringa 0,306 mL (2,88
mmoles, 0,1 eq) de N,N-dimetiletilendiamina. La
mezcla de reacción se calienta a una temperatura cercana a 110ºC
durante un periodo de 24 horas. El dioxano se evapora en vacío y el
resto se diluye con acetato de etilo (300 mL) y 150 mL de agua. La
fase orgánica se lava 1 vez con 100 mL de agua, se seca sobre
sulfato de magnesio y se concentra a sequedad bajo presión
reducida. El resto se purifica mediante cromatografía en gel de
sílice utilizando como eluyente una mezcla acetato de etilo/heptano
(1: 1). El aceite amarillo claro obtenido después de la
purificación corresponde a
1-(1-etoxi-etil)-3-(4-metoxi-benzoilamino)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-5-carboxilato
de etilo (7,41 g, 64%). Las fases acuosas juntas se acidifican con
ácido clorhídrico 5N hasta un pH=5-6. Aparece un
precipitado que se extrae con (2 x 100 mL) de acetato de etilo. La
fase orgánica se seca a su vez sobre sulfato de magnesio y se
concentra a sequedad bajo presión reducida. El sólido blanco
obtenido después de la evaporación se tritura en una mezcla
heptano/éter dietílico (1:1). Después de filtrar, se obtiene ácido
1-(1-etoxi-etil)-3-(4-metoxi-benzoilamino)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-5-carboxílico
en forma de un sólido blanco (1,27 g, 11%). El
1-(1-etoxi-etil)-3-(4-metoxi-benzoilamino)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-5-carboxilato
de etilo se somete a una saponificación utilizando 50 mL de
tetrahidrofurano y 20 mL de hidróxido de sodio 5N a una temperatura
cercana a 50ºC durante 5 horas. El tetrahidrofurano se evapora, la
fase acuosa se diluye con 150 mL de agua y el pH se ajusta a
3-4 con ácido clorhídrico 5N. El precipitado blanco
obtenido se filtra y se lava con agua y se seca en vacío a una
temperatura cercana a 60ºC. Se obtienen así 7,04 g de ácido
1-(1-etoxi-etil)-3-(4-metoxi-benzoilamino)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-5-carboxílico
al 98% que se utiliza directamente en la etapa siguiente.
\vskip1.000000\baselineskip
En 50 mL de etanol bajo atmósfera de argón a una
temperatura cercana a 20ºC, se introducen con agitación 1,19 g
(3,81 mmoles) de
3,5-dibromo-1-(1-etoxi-etil)-1H-pirazol-4-carboxaldehído,
y se añaden 0,4 g (3,81 mmoles) de carbonato de sodio y 0,42 mL
(3,81 mmoles) de 2-mercaptoacetato de etilo. La
mezcla de reacción se lleva a reflujo durante 2 horas y se
concentra a sequedad bajo presión reducida (2,7 kPa). El resto se
recoge en 60 mL de agua y 60 mL de diclorometano y se decanta. La
fase orgánica se seca sobre sulfato de magnesio y se concentra a
sequedad bajo presión reducida (2,7 kPa). Se obtienen así 1,17 g de
3-bromo-1-(1-etoxi-etil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-5-carboxilato
de etilo en forma de un aceite amarillo claro que cristaliza
proporcionando cristales crema que funden a 69ºC.
\vskip1.000000\baselineskip
En 30 mL de tolueno a una temperatura cercana a
20ºC, se introducen con agitación 1 g (3,94 mmoles) de
3,5-dibromo-1H-pirazol-4-carboxaldehído,
1,5 mL (16 mmoles) de etilvinil éter y 3 gotas de ácido
clorhídrico concentrado 12N. La mezcla de reacción se agita durante
15 horas a una temperatura cercana a 20ºC, se vierten 1,5 mL (16
mmoles) de etilvinil éter y la agitación se continúa durante 15
horas a una temperatura cercana a 20ºC. La mezcla de reacción se
diluye con 20 mL de tolueno y se lava 2 veces con 30 mL de una
disolución saturada de hidrógenocarbonato de sodio. La fase
orgánica se seca sobre sulfato de magnesio y se concentra a sequedad
bajo presión reducida (2,7 kPa) para proporcionar 1,19 g de
3,5-dibromo-1-(1-etoxi-etil)-1H-pirazol-4-carboxaldehído
en forma de un aceite
amarillo.
amarillo.
Espectro R.M.N. ^{1}H (300 MHz,
(CD_{3})_{2}SO d6, \delta en ppm): 1,10 (t, J = 7,5 Hz:
3H); 1,64 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 3,31 (mt: 1H); 3,51 (mt: 1H); 5,88
(q, J = 6,5 Hz: 1H); 9,73 (s: 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
En 1.500 mL de éter dietílico a una temperatura
cercana a 20ºC y bajo atmósfera de argón, se introducen con
agitación 81,7 g (0,268 moles) de
3,4,5-tribromopirazol. La mezcla se enfría a una
temperatura cercana a -78ºC, y se vierten gota a gota
335 mL (0,536 moles) de una disolución de
n-butil-litio 1,6 M en hexano
en 3 h 15. La mezcla de reacción se agita durante 1,5 horas a una
temperatura cercana a -75ºC, y se vierten gota a gota
100 mL (1,34 moles) de dimetilformamida manteniendo la temperatura
inferior a -70ºC. Se deja con agitación durante 2 horas
a una temperatura cercana a -75ºC, y durante 15 horas a
una temperatura cercana a 20ºC. El medio de reacción se enfría en
un baño de hielo-agua y se vierten 1.000 mL de agua.
Después de decantar, la fase acuosa se extrae con 500 mL de éter
dietílico y 3 veces con 500 mL de acetato de etilo. La fase acuosa
se acidifica con una disolución de ácido cítrico a pH=3 (se observa
la formación de un precipitado) y se extrae 2 veces con 1.000 mL de
éter dietílico. La fase orgánica se seca sobre sulfato de magnesio,
se concentra a sequedad bajo presión reducida (2,7 kPa) y el sólido
amarillo obtenido se recoge con 300 mL de agua y se agita durante 2
horas a una temperatura cercana a 20ºC. La mezcla se filtra y el
sólido se lava 2 veces con 50 mL de agua, se seca en una campana
ventilada y se seca bajo presión reducida (2,7 kPa) a una
temperatura cercana a 40ºC. Se obtienen así 51,3 g de
3,5-dibromo-1H-pirazol-4-carboxaldehído
en forma de un polvo amarillo que funde a 173ºC.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
2
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
La
5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-metoxi-benzamida
se prepara según el ejemplo 1. Rdt = 36%; RMN ^{1}H (300 MHz,
(CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en ppm): 3,17 (s, 3H);
3,85 (s, 3H); 6,77 (t ancho, J = 7,5 Hz, 1H); 6,82 (d ancho, J = 8,5
Hz, 2H); 7,07 (d ancho, J = 8,0 Hz, 2H); 7,22 (t ancho, J = 8,0 Hz,
2H); 8,07 (d ancho, J = 8,5 Hz, 2H); 8,17 (s ancho, 1 H); 10,75 (m
ancho, 1 H); 11,0 (m extendido, 1 H); 12,9 (m extendido, 1 H).LC/MS
m = 421, IE m/z = 421 M^{+}-, m/z = 300(M
- C_{8}H_{7}O_{2})^{+}, m/z =
135C_{8}H_{7}O_{2} ^{+}
\newpage
Ejemplo
3
La
N-[5-(N'-ciclohexil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-metoxi-benzamida
se prepara según el ejemplo 1. Rdt = 11%. RMN ^{1}H (400 MHz,
(CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en ppm): 1,01 a 1,26
(m, 5H); 1,55 (m, 1 H); de 1,63 a 1,90 (m, 4H); 2,73 (m, 1 H); 3,85
(s, 3H); 4,84 (m, 1 H); 7,06 (d ancho, J = 8,5 Hz, 2H); 8,02 (s
ancho, 1H); 8,07 (d ancho, J = 8,5 Hz, 2H); 10,05 (s ancho, 1 H);
10,9 (s ancho, 1 H); 12,85 (s ancho, 1H). LC/MS: m = 413; ES m/z =
414 MH^{+}
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
4
La
N-[5-(N'-bencil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-metoxi-benzamida
se prepara según el ejemplo 1. Rdt = 7%. SM: ES m/z=498 MH+. RMN
^{1}H (400 MHz, (CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en
ppm): 3,85 (s, 3H); 4,75 (s ancho, 2H); 6,75 (t ancho, J = 7,5 Hz, 1
H); 6,92 (d ancho, J = 8,5 Hz, 2H); 7,07 (d ancho, J = 8,5 Hz, 2H);
de 7,15 a 7,28 (m, 3H); 7,34 (t ancho, J = 7,5 Hz, 2H); 7,49 (d
ancho, J = 7,5 Hz, 2H); 8,07 (d ancho, J = 8,5 Hz, 2H); 8,17 (s
ancho, 1 H); 10,85 (s ancho, 1 H); 11,05 (m extendido, 1 H); de
12,75 a 13,1 (m muy extendido, 1 H). LC/MS: m = 497; ES m/z = 498
MH^{+}
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Ejemplo
5
La
N-{5-[N'-(2-etil-fenil)-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-metoxi-benzamida
se prepara según el ejemplo 1. Rdt = 60%. SM: ES m/z=436 MH+. RMN
^{1}H (400 MHz, (CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en
ppm): 1,19 (t, J = 7,5 Hz, 3H); 2,59 (q, J=7,5 Hz, 2H); 3,85 (s,
3H); de 6,68 a 6,77 (m, 2H); de 6,98 a 7,11 (m, 4H); 7,26 (s ancho,
1H); 8,08 (d ancho, J = 8,5 Hz, 2H); 8,19 (s ancho, 1 H); 10,5 (m
extendido, 1H); de 10,7 a 11,3 (m muy extendido, 1 H); de 12,5 a
13,2 (m muy extendido, 1 H). LC/MS: m = 435, ES m/z = 436
MH^{+}
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Ejemplo
6
La
N-{5-[N'-(2-fluoro-fenil)-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-metoxi-benzamida
se prepara según el ejemplo 1. Rdt = 65%. RMN ^{1}H (400 MHz,
(CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en ppm): 3,85 (s, 3H);
6,73 (m, 1 H); 6,82 (t ancho, J = 8,0 Hz, 1 H); de 6,96 a 7,13 (m,
4H); 7,78 (s ancho, 1 H); 8,09 (d ancho, J = 8,5 Hz, 2H); 8,21 (s
ancho, 1 H); 10,5 (s ancho, 1H); 11,0 (s ancho, 1 H); 12,9 (s ancho,
1 H). LC/MS: m = 425, IC m/z = 426 MH^{+}
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Ejemplo
7
La
4-metoxi-N-[5-(N'-o-tolil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida
se prepara según el ejemplo 1. Rdt = 70%. RMN ^{1}H (400 MHz,
(CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en ppm): 2,19 (s, 3H);
3,85 (s, 3H); de 6,63 a 6,74 (m, 2H); 7,02 (m ancho, 2H); 7,08 (d
ancho, J = 8,5 Hz, 2H); 7,25 (s ancho, 1 H); 8,08 (d ancho, J = 8,5
Hz, 2H); 8,19 (s ancho, 1 H); 10,5 (m extendido, 1H); de 10,7 a 11,5
(m muy extendido, 1H); de 12,3 a 13,3 (m muy extendido, 1H). LC/MS:
m = 421, ES m/z = 422 MH^{+}
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Ejemplo
8
A una disolución de 0,09 g (154 \mumoles) de
5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-3-(4-morfolin-4-ilmetil-benzoilamino)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en 5 mL de metanol en un tubo
para horno microondas, se añaden 21 mg (154 \mumoles) de
carbonato de potasio. El tubo se tapa y la mezcla de reacción se
irradia a una temperatura cercana a 180ºC durante 3 minutos. La
mezcla de reacción se concentra a sequedad en vacío (0,6 kPa) a una
temperatura cercana a 30ºC. El resto se purifica mediante
cromatografía en un cartucho de gel de sílice de 25 g
(0,015-0,040 mm) eluyendo con una mezcla
diclorometano/metanol (99/1 en volúmenes, después 98/2 y finalmente
97/3) con un caudal de 10 mL/min. Las fracciones que contienen el
producto esperado se juntan y se concentran a sequedad bajo presión
reducida (1,0 kPa) a una temperatura cercana a 30ºC. El resto se
recoge en 10 mL de éter diisopropílico, se tritura y se reconcentra
a sequedad. El sólido obtenido se seca en estufa en vacío (0,01 kPa)
a una temperatura cercana a 60ºC. Se obtienen así 40 mg de
N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-morfolin-4-ilmetil-benzamida
en forma de un sólido blanco hueso que funde a 242ºC.
SM-EI: 490(+)=M(+).
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A una disolución de 0,27 g (0,70 mmoles) de
3-amino-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en 20 mL de tetrahidrofurano
bajo argón, se añaden 193 mg (1,39 mmoles) de carbonato de potasio,
seguidos de 240 mg (0,87 mmoles) de cloruro de
4-morfolin-4-ilmetil-benzoilo;
hidrocloruro. La mezcla de reacción se agita a una temperatura
cercana a 25ºC durante 2 horas, y después a reflujo durante 4 horas.
La mezcla de reacción se enfría a una temperatura cercana a 25ºC, y
se trata con 40 mL de agua helada. La mezcla se extrae
sucesivamente con 60 mL, y después 2 veces con 40 mL de acetato de
etilo. Las fases orgánicas se juntan, se lavan 2 veces con 40 mL de
disolución salina concentrada saturada, se secan sobre sulfato de
magnesio, se filtran y se concentran a sequedad en vacío (2 kPa) a
una temperatura cercana a 40ºC. El resto se purifica mediante
cromatografía en un cartucho de gel de sílice de 25 g
(0,015-0,040 mm) eluyendo sucesivamente con
diclorometano puro, después con mezclas diclorometano/metanol (99/1
en volúmenes, después 98,5/1,5, 98/2 y finalmente 97/3) con un
caudal de 10 mL/min. Las fracciones que contienen el producto
esperado se juntan y se concentran a sequedad bajo presión reducida
(0,6 kPa) a una temperatura cercana a 30ºC. Se obtienen así 0,1 g
de
N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-morfolin-4-ilmetil-benzamida
en forma de un sólido blanco hueso que funde a 190ºC.
El cloruro de
4-morfolin-4-ilmetil-benzoilo;
hidrocloruro puede prepararse según las patentes EEUU 4.623.486 A
(1986) y WO 9008128 A1.
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A una suspensión de 1,19 g (4,14 mmoles) de
N'-metil-N'-fenil-(3-amino-1H-tieno[2,3-c]pirazol)-5-carbo-hidrazida
en 35 mL de diclorometano bajo argón, se añaden 0,58 mL (4,14
mmoles) de trietilamina. La mezcla de reacción se agita a una
temperatura cercana a 25ºC durante 15 minutos, y se añaden 61 mg
(0,50 mmoles) de
4-dimetilamino-piridina. La mezcla
de reacción se enfría a una temperatura cercana a 0ºC, y se añade
gota a gota una disolución de 0,90 g (4,14 mmoles) de
di-terc-butil-carbonato
en 15 mL de diclorometano. La mezcla de reacción se agita a una
temperatura cercana a 0ºC durante una hora, y a una temperatura
cercana a 25ºC durante 3 horas. Se trata con 50 mL de agua, se
agita a una temperatura cercana a 25ºC y se decanta. La fase acuosa
se extrae dos veces con 30 mL de diclorometano. Las fases orgánicas
se juntan, se lavan con agua hasta pH neutro (2 veces con 50 mL),
se secan sobre sulfato de magnesio, se filtran y se concentran a
sequedad en vacío (2 kPa) a una temperatura cercana a 30ºC. El
resto se purifica mediante cromatografía en un cartucho de gel de
sílice de 70 g (0,015-0,040 mm) eluyendo con una
mezcla diclorometano/metanol (98/2 en volúmenes), con un caudal de
20 mL/min. Las fracciones que contienen el producto esperado se
juntan y se concentran a sequedad bajo presión reducida (2 kPa) a
una temperatura cercana a 30ºC. Se obtienen así 0,38 g de
3-amino-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en forma de un sólido beige
que funde a 195ºC.
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A una disolución de 3,9 mL (32,0 mmoles) de
1-metil-1-fenil-hidrazina
en 180 mL de tolueno a una temperatura cercana a 25ºC y bajo
argón, se añaden gota a gota 17,3 mL (34,5 mmoles) de disolución de
trimetilaluminio 2M en tolueno manteniendo la temperatura inferior
o igual a 25ºC. La mezcla de reacción se agita a una temperatura
cercana a 25ºC durante 1 hora, y se añaden mediante espátulas 2,7 g
(11,8 mmoles) de
3-amino-1H-tieno[2,3-c]pirazol)-5-carboxilato
de etilo. La mezcla de reacción se calienta a reflujo durante 16
horas, se enfría a una temperatura cercana a 25ºC y se trata con
200 mL de una disolución de ácido cítrico al 10%. La mezcla se agita
a una temperatura cercana a 25ºC durante 30 minutos, se añaden 200
mL de acetato de etilo y la mezcla se decanta. La fase acuosa se
extrae dos veces con 150 mL de acetato de etilo. Los extractos
orgánicos se juntan, se lavan con agua hasta un pH cercano a 6, se
secan sobre sulfato de magnesio, se filtran y se concentran a
sequedad en vacío (2 kPa) a una temperatura cercana a 30ºC. El
resto se purifica mediante cromatografía en una columna de gel de
sílice de 200 g (0,020-0,040 mm) previamente
neutralizada mediante elución de una mezcla de diclorometano y
trietilamina (1 volumen muerto), seguido de elución con
diclorometano puro (4 volúmenes muertos). Los productos se eluyen
sucesivamente con mezclas diclorometano/metanol (95/5 y 90/10 en
volúmenes). Las fracciones que contienen el producto esperado se
juntan y se concentran a sequedad bajo presión reducida (2 kPa) a
una temperatura cercana a 40ºC. El resto se recoge en 40 mL de éter
diisopropílico, se tritura y se filtra sobre vidrio sinterizado. El
sólido obtenido se seca en vacío. Se obtienen así 1,5 g de
N'-metil-N'-fenil-(3-amino-1H-tieno[2,3-c]pirazol)-5-carbo-hidrazida
en forma de un polvo beige que funde a 186ºC.
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Una suspensión de 16,4 g (0,063 moles) de
4-ciano-5-metilsulfonil-tiofen-2-carboxilato
de etilo en 160 mL de etanol absoluto se calienta a reflujo hasta
la disolución, y se añade gota a gota una disolución de 6,2 mL
(0,126 moles) de hidrato de hidrazina en 40 mL de etanol absoluto.
La mezcla de reacción se agita a reflujo durante 2 horas, se añaden
gota a gota 4,6 mL (0,094 moles) de hidrato de hidrazina y la
agitación a reflujo se continúa durante dos horas. Después de
enfriar a una temperatura cercana a 25ºC, la mezcla se concentra a
sequedad en vacío (2 kPa) a una temperatura cercana a 40ºC. El resto
se recoge en 200 mL de etanol y se añade una disolución de 13,2 mL
(0,158 moles) de ácido clorhídrico 12 N con agitación a una
temperatura cercana a 25ºC. La mezcla de reacción se agita a una
temperatura cercana a 25ºC durante 4 horas y se vierte lentamente
en 500 mL de una disolución saturada de hidrógenocarbonato de sodio
previamente enfriada a 10ºC. Después de agitar durante 30 minutos,
la mezcla se extrae 3 veces con 600 mL de acetato de etilo. Los
extractos orgánicos se juntan, se lavan 2 veces con 300 mL de
disolución salina concentrada saturada, se secan sobre sulfato de
magnesio, se filtran y se concentran a sequedad en vacío (2 kPa) a
una temperatura cercana a 40ºC. El resto se purifica mediante
cromatografía en una columna de gel de sílice de 500 g
(0,020-0,045 mm) eluyendo con acetato de etilo
puro. Las fracciones que contienen el producto esperado se juntan y
se concentran a sequedad bajo presión reducida (2 kPa) a una
temperatura cercana a 40ºC. Se obtienen así 3,4 g de
3-amino-1H-tieno[2,3-c]pirazol)-5-carboxilato
de etilo en forma de un polvo marrón que se utiliza directamente en
la etapa siguiente. SM-EI: 211 (+)=M(+).
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A una disolución de 42,5 g (0,187 moles) de
4-ciano-5-metilsulfanil-tiofen-2-carboxilato
de etilo en 500 mL de diclorometano mantenida a una temperatura
cercana a -5ºC, se añade gota a gota en 2 horas una
disolución de 92,3 g (0,374 moles) de ácido
3-cloro-peroxibenzoico en 1 L de
diclorometano manteniendo una temperatura cercana a
-5ºC. La mezcla de reacción se agita a una temperatura
cercana a -5ºC durante 1 hora y se agita a una
temperatura cercana a 25ºC durante 18 horas. Se enfría en un baño de
hielo y se trata con 750 mL de una disolución saturada de
hidrógenocarbonato de sodio y 250 mL de diclorometano. Después de 30
minutos de agitación, la mezcla se filtra sobre vidrio sinterizado
y el sólido se lava 2 veces con 100 mL de diclorometano. Después
de decantar el filtrado, la fase acuosa se extrae con 500 mL de
diclorometano. Los extractos orgánicos se juntan, se lavan 2 veces
con 1 L de disolución salina concentrada saturada, se secan sobre
sulfato de sodio, se filtran y se concentran a sequedad en vacío
(1,5 kPa) a una temperatura cercana a 45ºC. El resto se recristaliza
en 200 mL de etanol. El precipitado se filtra sobre vidrio
sinterizado, se lava con 100 mL de etanol, se filtra con succión y
se seca en un desecador en vacío (2 kPa). Se obtienen así 37 g de
4-ciano-5-metilsulfonil-tiofen-2-carboxilato
de etilo en forma de un polvo cristalino amarillo claro que funde a
110ºC.
\vskip1.000000\baselineskip
Una disolución de 50 g (0,21 moles) de
3-amino-4-ciano-5-metilsulfanil-tiofen-2-carboxilato
de etilo en 500 mL de dimetilformamida bajo atmósfera de argón se
calienta a una temperatura cercana a 60ºC, y se introduce con
agitación una disolución de 71,1 mL (0,45 moles) de isopentilnitrito
en 100 mL de dimetilformamida manteniendo la temperatura entre 65 y
70ºC. La mezcla de reacción se agita a una temperatura cercana a
60ºC durante 2,5 horas, se enfría a una temperatura cercana a 25ºC
y se agita durante 1 hora. La mezcla se trata con 1 L de agua
helada y se agita a una temperatura cercana a 0ºC durante 1 hora. El
precipitado obtenido se filtra y se lava sucesivamente 3 veces con
200 mL de agua y 3 veces con 200 mL de éter de petróleo. Se obtienen
así, después de secar bajo presión reducida, 40,5 g (86%) de
4-ciano-5-metilsulfanil-tiofen-2-carboxilato
de etilo en forma de un polvo cristalino amarillo que funde a
100ºC. SM-CI(NH3): 245(+)=(M+NH4)(+).
\vskip1.000000\baselineskip
El
3-amino-4-ciano-5-metilsulfanil-tiofen-2-carboxilato
de etilo puede prepararse por adaptación del método descrito en
Synthesis 2003, 735 a partir de 89,5 g de
2-[bis-(metilsulfanil)metilen]malononitrilo y
reemplazando el carbonato de potasio por trietilamina. Se obtienen,
después de secar, 120,5 g (95%) de
3-amino-4-ciano-5-metilsulfanil-tiofen-2-carboxilato
de etilo bruto en forma de un polvo rosa que funde a 149ºC.
\vskip1.000000\baselineskip
El
2-[bis-(metilsulfanil)metilen]malononitrilo puede
prepararse según J. Med. Chem. 2003, 46, 1229 o bien según Synth.
Commun. 2003, 33, 3989.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
9
A una disolución de 0,04 g (70 \mumoles) de
3-(4-bromo-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en 3 mL de metanol en un tubo
para horno microondas, se añaden 14,5 mg (105 \mumoles) de
carbonato de potasio. El tubo se tapa y la mezcla de reacción se
irradia a una temperatura cercana a 180ºC durante 3 minutos. La
mezcla de reacción se concentra a sequedad en vacío (2 kPa) a una
temperatura cercana a 35ºC. El resto se recoge en diclorometano y
después en una mezcla de 1 mL de metanol, 4 mL de agua y 10 mL de
acetato de etilo. Después de decantar, la fase orgánica se lava 2
veces con 3 mL de agua, se seca sobre sulfato de magnesio, se
filtra y se concentra a sequedad en vacío (2 kPa) a una temperatura
cercana a 35ºC. El resto se recoge en éter diisopropílico, se
filtra sobre vidrio sinterizado, se filtra con succión y se seca en
estufa en vacío (0,01 kPa) a una temperatura cercana a 40ºC. El
resto se purifica mediante cromatografía en una columna de gel de
sílice de 15 g (0,015-0,040 mm) eluyendo con una
mezcla diclorometano/metanol (99/1 en volúmenes, después 98/2 y
finalmente 97/3) con un caudal de 20 mL/min. Las fracciones que
contienen el producto esperado se juntan y se concentran a sequedad
bajo presión reducida (2 kPa) a una temperatura cercana a 35ºC. Se
obtienen así 18 mg de
4-bromo-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida
en forma de un sólido amarillo claro que funde a 172ºC.
LC-MS-DAD-ELSD:
468(-)/...=(M-H)(-)/...; 470(+)/...=(M+H)(+)/... (1
Br presente).
\vskip1.000000\baselineskip
A una disolución de 0,27 g (0,70 mmoles) de
3-amino-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en 20 mL de tetrahidrofurano
bajo argón, se añaden 169 mg (1,22 mmoles) de carbonato de potasio,
seguidos de 191 mg (0,87 mmoles) de cloruro de
4-bromo-benzoilo. La mezcla de
reacción se agita a reflujo durante 2 horas. La mezcla de reacción
se enfría a una temperatura cercana a 25ºC, y se trata con 40 mL de
agua helada. La mezcla se extrae sucesivamente con 60 mL, y después
2 veces con 40 mL de acetato de etilo. Las fases orgánicas se
juntan, se lavan 2 veces con 40 mL de disolución salina concentrada
saturada, se secan sobre sulfato de magnesio, se filtran y se
concentran a sequedad en vacío (2 kPa) a una temperatura cercana a
35ºC. El resto se purifica mediante cromatografía en un cartucho de
gel de sílice de 25 g (0,015-0,040 mm) eluyendo
sucesivamente con mezclas diclorometano/metanol (99/1 en volúmenes,
después 98/2), con un caudal de 13 mL/min. Las fracciones que
contienen el producto esperado se juntan y se concentran a sequedad
bajo presión reducida (2 kPa) a una temperatura cercana a 35ºC. Se
obtienen así 0,04 g de
3-(4-bromo-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en forma de un sólido blanco
que funde a 192ºC.
El
3-amino-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo se describe en el ejemplo
8.
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Ejemplo
10
Una disolución de 0,14 g (232 \mumoles) de
5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-3-[4-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzoilamino]-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en 8 mL de metanol se
introduce en un tubo para horno microondas. El tubo se tapa y la
mezcla de reacción se irradia a una temperatura cercana a 100ºC
durante 20 minutos, y 2 veces de 15 minutos adicionales. La mezcla
de reacción se concentra a sequedad en vacío (2 kPa) a una
temperatura cercana a 35ºC. El resto se recoge en 15 mL de éter
diisopropílico, se tritura, se filtra sobre vidrio sinterizado, se
lava 2 veces con 5 mL de éter diisopropílico, se filtra con succión
y se seca en estufa en vacío (0,01 kPa) a una temperatura cercana
a 60ºC. Se obtienen así 78 mg de
N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzamida
en forma de un sólido blanco hueso que funde a 246ºC.
LC-MS-DAD-ELSD:
504(+)=(M+H)(+); 502(-)=(M-H)(-).
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A una disolución de 0,30 g (0,77 mmoles) de
3-amino-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en 16 mL de piridina bajo
argón, se añaden 391 mg (1,55 mmoles) de cloruro de
4-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzoilo;
hidrocloruro. La mezcla de reacción se agita a una temperatura
cercana a 25ºC durante 16 horas, se añaden 294 mg (1,16 mmoles) de
cloruro de
4-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzoilo
y la agitación se continúa durante 5 horas. La mezcla de reacción
se enfría a una temperatura cercana a 10ºC, y se trata con 50 mL de
agua. La mezcla se extrae 2 veces con 100 mL de acetato de etilo.
Las fases orgánicas se juntan, se lavan con agua hasta pH neutro,
se secan sobre sulfato de magnesio, se filtran y se concentran a
sequedad en vacío (3 kPa) a una temperatura cercana a 30ºC. El
resto se purifica mediante cromatografía en un cartucho de gel de
sílice de 25 g (0,015-0,040 mm) eluyendo
sucesivamente con mezclas diclorometano/metanol (98/2 en volúmenes,
después 97/3, después 96/4 y finalmente 95/5) con un caudal de 15
mL/min. Las fracciones que contienen el producto esperado se juntan
y se concentran a sequedad bajo presión reducida (3 kPa) a una
temperatura cercana a 30ºC. Se obtienen así 0,14 g de
5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-3-[4-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzoilamino]-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en forma de un sólido blanco
hueso que funde a 218ºC.
El
3-amino-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo se describe en el ejemplo 8.
El cloruro de
4-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzoilo
puede prepararse según la patente WO 03066613 A1.
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Ejemplos 11a y
11b
A una disolución de 290 mg (0,54 mmoles) de una
mezcla aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en 6 mL de dimetilformamida
bajo argón, se añaden 40 mg (108 \mumoles) de yoduro de
tetrabutilamonio, seguidos de 184 mg (1,61 mmoles) de
cis-2,6-dimetilpiperacina. La
mezcla de reacción se agita a una temperatura cercana a 25ºC
durante 3 horas y se vierte en una mezcla de hielo, de acetato de
etilo y de n-heptano. La mezcla se filtra sobre
vidrio sinterizado, se filtra con succión y se seca al aire. El
sólido obtenido se disuelve en 5 mL de metanol y la disolución se
introduce en un tubo para horno microondas. El tubo se tapa y la
mezcla de reacción se irradia a una temperatura cercana a 100ºC 3
veces durante 10 minutos. La mezcla de reacción se concentra a
sequedad en vacío (2 kPa) a una temperatura cercana a 40ºC. El resto
se purifica mediante LC/MS preparativa (condiciones B'). Se
obtienen así 130 mg de
4-(3,5-dimetil-piperazin-1-ilmetil)-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida
en forma de un polvo amarillo que funde entre 192 y 202ºC.
LC-MS-DAD-ELSD:
518(+)=(M+H)(+).
Se aíslan de la misma manera 49 mg de
4-(3,5-dimetil-piperazin-1-ilmetil)-N-[5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida
en forma de un polvo amarillo claro que funde a 212ºC. RMN ^{1}H
(300 MHz, (CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en ppm): Se
trata de la sal de la estructura esperada con 1,18 (d, J = 6,5 Hz,
6H); 2,11 (t ancho, J = 12,5Hz, 2H); 3,00 (d ancho, J = 12,5Hz,
2H); 3,17 (s, 3H); 3,33 (m ancho, 2H); 3,73 (m parcialmente
enmascarado, 2H); 6,82 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 7,25 (d, J = 9,0 Hz,
2H); 7,50 (d, J = 8,0 Hz, 2H); 8,08 (d, J = 8,0 Hz, 2H); 8,16 (s,
1H); 8,20 (m extendido parcialmente enmascarado, 2H); 8,92 (m
extendido, 1H); 10,8 (s, 1 H); 11,2 (s, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
A una disolución de 0,39 g (1,0 mmol) de una
mezcla aproximadamente 70:30 de
3-amino-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-amino-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en 25 mL de tetrahidrofurano
bajo argón, se añaden 276 mg (2,0 mmoles) de carbonato de potasio,
seguidos de 2,0 mL (2,0 mmoles) de una disolución 1M de cloruro de
4-(clorometil)benzoilo en tetrahidrofurano. La mezcla de
reacción se agita a reflujo durante 2 horas, se enfría a una
temperatura cercana a 25ºC y se agita durante 16 horas. Se vierte
en agua helada y se extrae 2 veces con 25 mL de acetato de etilo.
Las fases orgánicas se juntan, se lavan con disolución salina
concentrada saturada, se secan sobre sulfato de magnesio, se
filtran y se concentran a sequedad en vacío (2 kPa) a una
temperatura cercana a 40ºC. El resto se purifica mediante
cromatografía en un cartucho de gel de sílice de 25 g
(0,015-0,040 mm) eluyendo con una mezcla
diclorometano/metanol (98/2 en volúmenes) con un caudal de 10
mL/min. Las fracciones que contienen el producto esperado se juntan
y se concentran a sequedad bajo presión reducida (2 kPa) a una
temperatura cercana a 40ºC. El resto se repurifica mediante
cromatografía en un cartucho de gel de sílice de 90 g
(0,015-0,040 mm) eluyendo con una mezcla
diclorometano/metanol (98/2 en volúmenes) con un caudal de 10
mL/min. Las fracciones que contienen el producto esperado se juntan
y se concentran a sequedad bajo presión reducida (2 kPa) a una
temperatura cercana a 40ºC. Se obtienen así 422 mg de una mezcla
aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en forma de una espuma
naranja.
LC-MS-DAD-ELSD y
SM-EI-CI: mezcla de la estructura
esperada (aproximadamente 70%;M.W=539/..) y análogo esperado
diclorado (aproximadamente 30%; M.W=573/...). RMN ^{1}H (400 MHz,
(CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en ppm): mezcla de
confórmeros aproximadamente 80% - 20% con
1,55 (s, 1,8H); 1,64 (s, 7,2H); 3,18 (s, 2,4H); 3,20 (s, 0,6H); 4,85
(s, 2H); 6,78 (t, J = 7,5 Hz, 0,8H); 6,83 (d, J = 8,0 Hz, 1,6H);
6,97 (t, J = 8,0 Hz, 0,2H); 7,03 (d, J = 8,0 Hz, 0,4H); 7,22 (t, J
= 8,0 Hz, 1,6H); 7,32 (t, J = 8,0 Hz, 0,4H); 7,60 (d, J = 8,0 Hz,
2H); 8,11 (d, J = 8,0 Hz, 2H); 8,27 (s, 0,2H); 8,32 (s, 0,8H); 9,90
(s, 0,2H); 10,95 (s, 0,8H); 11,7 (s, 0,2H); 11,8 (s, 0,8H).
\vskip1.000000\baselineskip
A una suspensión de 14 g (48,7 mmoles) de una
mezcla de
N'-metil-N'-fenil-(3-amino-1H-tieno[2,3-c]pirazol)-5-carbo-hidrazida
(mayoritario) y de
3-amino-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo (minoritario) en 500 mL de
diclorometano bajo argón, se añaden 1,19 g (9,74 mmoles) de
4-(dimetilamino)-piridina y 7,4 mL (53,6 mmoles) de
trietilamina. La mezcla de reacción se enfría a una temperatura
cercana a 0ºC, y se añade gota a gota en 1 hora una disolución de
8,5 g (39,0 mmoles) de
di-terc-butil-dicarbonato
en 200 mL de diclorometano. La mezcla de reacción se agita a una
temperatura cercana a 0ºC durante una hora, se vuelve a calentar a
una temperatura cercana a 25ºC y se concentra a sequedad en vacío (2
kPa) a una temperatura cercana a 40ºC. El resto se purifica
mediante cromatografía en una columna de gel de sílice de 500 g
(0,020-0,040 mm) eluyendo con diclorometano puro, y
después con una mezcla diclorometano/metanol (99/1 en volúmenes).
Las fracciones que contienen el producto esperado se juntan y se
concentran a sequedad bajo presión reducida (2 kPa) a una
temperatura cercana a 40ºC. El resto se repurifica mediante
cromatografía en un cartucho de gel de sílice de 400 g
(0,020-0,040 mm) eluyendo con una mezcla
diclorometano/tetrahidrofurano (98/2 en volúmenes). Las fracciones
que contienen el producto esperado se juntan y se concentran a
sequedad bajo presión reducida (2 kPa) a una temperatura cercana a
40ºC. Se obtienen así 7,0 g de una mezcla aproximadamente 70:30 de
3-amino-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-amino-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en forma de un sólido beige.
LC-MS-DAD-ELSD
mezcla que contiene la estructura esperada (pureza estimada 70%):
388(+)=(M+H)(+).
\vskip1.000000\baselineskip
A una disolución de 29,6 g (45,2 mmoles) de
mezcla de
N'-metil-N'-fenil-(4-ciano-5-metanosulfinil-tiofen)-2-carbo-hidrazida
(mayoritario), de
N'-metil-N'-fenil-(4-ciano-5-metanosulfonil-tiofen)-2-carbo-hidrazida
(minoritario), de
N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-(4-ciano-5-metanosulfinil-tiofen)-2-carbo-hidrazida
(minoritario) y de
N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-(4-ciano-5-metanosulfonil-tiofen)-2-carbo-hidrazida
(minoritario) en 900 mL de etanol bajo argón, se añaden 650 mL
(650 mmoles) de una disolución 1M de hidrazina en tetrahidrofurano
en 20 minutos. La mezcla de reacción se calienta a una temperatura
cercana a 50ºC durante 16 horas, se enfría a una temperatura
cercana a 25ºC y se concentra a sequedad en vacío (2 kPa) a una
temperatura cercana a 40ºC. El resto se recoge en 1 L de etanol y
se añade una disolución de 20 mL (240 mmoles) de ácido clorhídrico
12 N con agitación a una temperatura cercana a 25ºC. La mezcla de
reacción se agita a una temperatura cercana a 25ºC durante 1,75
horas y se añaden 20 mL (240 mmoles) de ácido clorhídrico 12 N. La
mezcla de reacción se agita a una temperatura cercana a 25ºC
durante 1,5 horas, se filtra y el sólido se lava dos veces con 200
mL de etanol. El filtrado se concentra a sequedad en vacío (2 kPa) a
una temperatura cercana a 40ºC. El resto se purifica mediante
cromatografía en una columna de gel de sílice de 500 g
(0,020-0,040 mm) eluyendo con una mezcla
diclorometano/metanol (90/10 en volúmenes), y después con una mezcla
diclorometano/metanol/amoniaco 28% (77/20/3 en volúmenes). Las
fracciones que contienen el producto esperado se juntan y se
concentran a sequedad bajo presión reducida (2 kPa) a una
temperatura cercana a 40ºC. El resto se recoge en 200 mL de acetato
de etilo y se recristaliza. El sólido obtenido se filtra, se filtra
con succión y se seca en un desecador en vacío. Los licores madre
se concentran a sequedad en vacío (2 kPa) a una temperatura cercana
a 40ºC. El resto se purifica mediante cromatografía en una columna
de gel de sílice (0,020-0,040 mm) eluyendo con una
mezcla diclorometano/metanol/amoniaco 28% (77/20/3 en volúmenes).
Las fracciones que contienen el producto esperado se juntan y se
concentran a sequedad bajo presión reducida (2 kPa) a una
temperatura cercana a 40ºC. El resto se recoge en acetato de etilo,
se tritura y se vuelve a concentrar a sequedad en las mismas
condiciones. Se obtienen así en total 14 g de
N'-metil-N'-fenil-(3-amino-1H-tieno[2,3-c]pirazol)-5-carbo-hidrazida
(mayoritario) y de
N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-(3-amino-1H-tieno[2,3-c]pirazol)-5-carbo-hidrazida
(minoritario) en forma de una espuma marrón que se utiliza
directamente en la etapa siguiente.
\vskip1.000000\baselineskip
A una disolución de 27,4 g (90,3 mmoles) de
N'-metil-N'-fenil-(4-ciano-5-metilsulfanil-tiofen)-2-carbo-hidrazida
en 1,0 L de tetrahidrofurano bajo argón, se añaden 83,3 g (135,5
mmoles) de oxona® (peroximonosulfato de potasio) en 5 minutos,
seguido de 100 mL de agua. La mezcla de reacción se agita a una
temperatura cercana a 25ºC durante 2,5 horas y se filtra sobre
sulfato de magnesio. El sólido se lava dos veces con
tetrahidrofurano y el filtrado se concentra a sequedad en vacío (2
kPa) a una temperatura cercana a 40ºC. El resto se recoge en 500 mL
de acetato de etilo, se decanta y la fase acuosa se extrae con 500
mL de acetato de etilo. Las fases orgánicas se juntan, se secan
sobre sulfato de magnesio, se filtran y se concentran a sequedad en
vacío (2 kPa) a una temperatura cercana a 40ºC. Se obtienen así
29,4 g de una mezcla de
N'-metil-N'-fenil-(4-ciano-5-metanosulfinil-tiofen)-2-carbo-hidrazida
(mayoritario), de
N'-metil-N'-fenil-(4-ciano-5-metanosulfonil-tiofen)-2-carbo-hidrazida
(minoritario), de
N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-(4-ciano-5-metanosulfinil-tiofen)-2-carbo-hidrazida
(minoritario) y de
N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-(4-ciano-5-metanosulfonil-tiofen)-2-carbo-hidrazida
(minoritario) en forma de una espuma marrón que se utiliza
directamente en la etapa siguiente. LC/MS: 4 picos TR=3,11 min.
M+H^{+}: 320,06; TR=3,33 min.
M+H^{+}: 353,99 (1 CI); TR=3,53 min.
M+H^{+}: 336,04; TR=3,88 min. M+H^{+}: 369,97 (1 CI).
\vskip1.000000\baselineskip
A una disolución de 24,6 mL (200,6 mmoles) de
1-metil-1-fenil-hidrazina
en 300 mL de tolueno a una temperatura cercana a 25ºC y bajo
argón, se añaden 100,3 mL (200,6 mmoles) de disolución de
trimetilaluminio 2M en tolueno, diluida en 600 mL de tolueno,
manteniendo la temperatura inferior o igual a 25ºC. La mezcla de
reacción se agita a una temperatura cercana a 25ºC, y se añaden
mediante espátulas 39,3 g (172,9 mmoles) de
4-ciano-5-metilsulfanil-tiofen-2-carboxilato
de etilo. La mezcla de reacción se calienta a una temperatura
cercana a 80ºC durante 4 horas, se enfría a una temperatura cercana
a 25ºC y se agita durante 16 horas. Se enfría a una temperatura
cercana a 0ºC y se añade 1 L de ácido clorhídrico 1N. La suspensión
resultante se agita a una temperatura cercana a 10ºC durante una
hora y se filtra. El precipitado se filtra con succión, se seca en
una campana ventilada durante 2,5 días y se seca en un desecador en
vacío (2 kPa) durante 4 horas. El filtrado se decanta y la fase
acuosa se extrae con 500 mL de acetato de etilo. Las fases
orgánicas se juntan, se lavan con 500 mL de disolución salina
concentrada saturada, se secan sobre sulfato de magnesio, se
filtran y se concentran a sequedad en vacío (2 kPa) a una
temperatura cercana a 40ºC. Se obtienen así 29,1 g de
N'-metil-N'-fenil-(4-ciano-5-metilsulfanil-tiofen)-2-carbo-hidrazida
en forma de un polvo ocre. SM-EI: 303(+)=M(+).
El
4-ciano-5-metilsulfanil-tiofen-2-carboxilato
de etilo se describe en el ejemplo 8.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplos 12a y
12b
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
A una disolución de 200 mg (0,37 mmoles) de una
mezcla aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en 6 mL de dimetilformamida
bajo argón, se añaden 27 mg (74 \mumoles) de yoduro de
tetrabutilamonio, seguidos de 138 \muL (1,11 mmoles) de
N-metil-homopiperazina. La mezcla de
reacción se agita a una temperatura cercana a 25ºC durante 16 horas
y se trata con hielo. Se extrae con acetato de etilo y 2 veces con
diclorometano. Los extractos orgánicos se juntan y se concentran a
sequedad en vacío (2 kPa) a una temperatura cercana a 40ºC. El
resto se disuelve en 3 mL de metanol y la disolución se introduce en
un tubo para horno microondas. El tubo se tapa y la mezcla de
reacción se irradia a una temperatura cercana a 100ºC durante 30
minutos. La mezcla de reacción se concentra a sequedad en vacío (2
kPa) a una temperatura cercana a 40ºC. El resto se purifica
mediante LC/MS preparativa (1 inyección: condiciones B'; 3
inyecciones: condiciones B). Se obtienen así 53 mg de
4-(4-metil-perhidro-1,4-diazepin-1-ilmetil)-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida
en forma de un polvo amarillo.
LC-MS-DAD-ELSD:
516(-)=(M-H)(-); 518(+)=(M+H)(+).
Se aíslan de la misma manera 20 mg de
4-(4-metil-perhidro-1,4-diazepin-1-ilmetil)-N-[5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida
en forma de un polvo amarillo claro que funde a 162ºC. RMN ^{1}H
(300 MHz, (CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en ppm): Se
trata de la sal de la estructura esperada con 2,08 (m ancho, 2H);
2,84 (s, 3H); 3,18 (s, 3H); de 2,93 a 4,51 (m parcialmente
enmascarado, 10H); 6,82 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 7,24 (d, J = 9,0 Hz,
2H); 7,63 (d ancho, J = 8,0 Hz, 2H); 8,14 (d, J = 8,0 Hz, 2H); 8,17
(s, 1 H); 8,22 (m extendido parcialmente enmascarado, 1 H); 10,0 (m
muy extendido, 1H); 10,8 (s, 1H); 11,3 (s, 1 H).
La mezcla aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo se describe en el ejemplo
11.
\newpage
Ejemplos 13a y
13b
A una disolución de 200 mg (0,37 mmoles) de una
mezcla aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en 6 mL de dimetilformamida
bajo argón, se añaden 27 mg (74 \mumoles) de yoduro de
tetrabutilamonio, seguidos de 96 mg (1,11 mmoles) de piperazina. La
mezcla de reacción se agita a una temperatura cercana a 25ºC
durante 16 horas y se trata con hielo. Se extrae con acetato de
etilo y 2 veces con diclorometano. Los extractos orgánicos se
juntan y se concentran a sequedad en vacío (2 kPa) a una temperatura
cercana a 40ºC. El resto se disuelve en 3 mL de metanol y la
disolución se introduce en un tubo para horno microondas. El tubo
se tapa y la mezcla de reacción se irradia a una temperatura cercana
a 100ºC 2 veces durante 30 minutos. La mezcla de reacción se
concentra a sequedad en vacío (2 kPa) a una temperatura cercana a
40ºC. El resto se purifica mediante LC/MS preparativa (condiciones
B). Se obtienen así 83 mg de
N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-piperazin-1-ilmetil-benzamida
en forma de un polvo amarillo que funde a 176ºC.
LC-MS-DAD-ELSD:
490(+)=M(+H)(+).
Se aíslan de la misma manera 34 mg de
N-{5-[N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-piperazin-1-ilmetil-benzamida
en forma de un polvo naranja que funde a 180ºC.
LC-MS-DAD-ELSD:
524(+)/...=(M+H)(+)/...(1 Cl)
La mezcla aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo se describe en el ejemplo
11.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplos 14a y
14b
A una disolución de 200 mg (0,37 mmoles) de una
mezcla aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en 6 mL de dimetilformamida
bajo argón, se añaden 27 mg (74 \mumoles) de yoduro de
tetrabutilamonio, seguidos de 111 mg (1,11 mmoles) de
2-metil-piperazina. La mezcla de
reacción se agita a una temperatura cercana a 25ºC durante 16 horas
y se trata con hielo. Se extrae con acetato de etilo y 2 veces con
diclorometano. Los extractos orgánicos se juntan y se concentran a
sequedad en vacío (2 kPa) a una temperatura cercana a 40ºC. El
resto se disuelve en 3 mL de metanol y la disolución se introduce en
un tubo para horno microondas. El tubo se tapa y la mezcla de
reacción se irradia a una temperatura cercana a 100ºC durante 30
minutos. La mezcla de reacción se concentra a sequedad en vacío (2
kPa) a una temperatura cercana a 40ºC. El resto se purifica
mediante cromatografía en un cartucho de gel de sílice de 12 g
(0,035-0,060 mm) eluyendo en primer lugar con un
gradiente de una mezcla diclorometano/metanol (100/0 a 98/2 en
volúmenes), y con una mezcla diclorometano/metanol/amoniaco al 28%
(12/3/0,5 en volúmenes) con un caudal de 20 mL/min. Las fracciones
que contienen el producto esperado se juntan y se concentran a
sequedad bajo presión reducida (2 kPa) a una temperatura cercana a
40ºC. El resto se purifica mediante LC/MS preparativa (condiciones
B). Se obtienen así 85 mg de
N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(3-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzamida
en forma de un polvo amarillo que funde de 176 a 186ºC.
LC-MS-DAD-ELSD:
504(+)=(M+H)(+).
Se aíslan de la misma manera 8 mg de
N-{5-[N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-(3-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzamida
en forma de un sólido amarillo claro que funde de 189 a 195ºC.
LC-MS-DAD-ELSD:
538(+)/...=(M+H)(+)/...(1 Cl)
La mezcla aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo se describe en el ejemplo
11.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplos 15a y
15b
A una disolución de 100 mg (0,19 mmoles) de una
mezcla aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en 1,5 mL de
dimetilformamida bajo argón, se añaden 14 mg (37 \mumoles) de
yoduro de tetrabutilamonio, una suspensión de 61 mg (0,56 mmoles)
de hidrocloruro de dietilamina y 77 mg (0,56 mmoles) de carbonato
de potasio en 1,5 mL de dimetilformamida. La mezcla de reacción se
agita a una temperatura cercana a 25ºC durante 80 horas y se trata
con hielo. Se extrae 2 veces con una mezcla 50/50 (v/v) de acetato
de etilo y heptano. Los extractos orgánicos se juntan, se secan
sobre sulfato de magnesio y se concentran a sequedad en vacío (2
kPa) a una temperatura cercana a 40ºC. El resto se disuelve en 5 mL
de metanol y la disolución se introduce en un tubo para horno
microondas. El tubo se tapa y la mezcla de reacción se irradia a una
temperatura cercana a 100ºC durante 30 minutos. La mezcla de
reacción se concentra a sequedad en vacío (2 kPa) a una temperatura
cercana a 40ºC. El resto se purifica mediante LC/MS preparativa
(condiciones B). Se obtienen así 40 mg de
4-dietilaminometil-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida;
trifluoro-acetato en forma de un polvo amarillo que
funde de 158 a 170ºC. RMN ^{1}H (300 MHz,
(CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en ppm): observación de
una mezcla 80%-20% de confórmeros con 1,25 (t, J = 7,0 Hz, 6H); 3,11
(m, 4H); 3,18 (s, 3H); 4,41 (d, J = 5,5 Hz, 2H); 6,77 (t, J = 7,5
Hz, 0,8H); 6,82 (d, J = 8,0 Hz, 1,6H); 6,94 (t, J = 7,5 Hz, 0,2H);
7,02 (d, J = 8,0 Hz, 0,4H); 7,22 (t, J = 8,0 Hz, 1,8H); 7,31 (t, J =
8,0 Hz, 0,2H); 7,69 (d ancho, J = 8,0 Hz, 2H); 8,17 (d parcialmente
enmascarado, J = 8,0 Hz, 2H); 8,18 (s, 1H); 9,51 (m extendido, 1
H); 9,71 (s, 0,2H); 10,75 (s, 0,8H); 11,25 (s ancho, 0,2H); 11,35 (s
ancho, 0,8H); 13,0 (m muy extendido, 1H).
Se aíslan de la misma manera 14 mg de
N-{5-[N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-dietilaminometil-benzamida
en forma de un sólido amarillo claro que funde de 170 a 178ºC.
LC-MS-DAD-ELSD:
511(+)/... =(M+H)(+)/... (1 Cl).
La mezcla aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo se describe en el ejemplo
11.
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Ejemplos 16a y
16b
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Una disolución de 0,07 g (116 \mumoles) de una
mezcla aproximadamente 70:30 de
5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-3-[3-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzoilamino]-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-3-[3-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzoilamino]-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en 4 mL de metanol se
introduce en un tubo para horno microondas. El tubo se tapa y la
mezcla de reacción se irradia a una temperatura cercana a 100ºC
durante 30 minutos. La mezcla de reacción se concentra a sequedad
en vacío (2 kPa) a una temperatura cercana a 40ºC. El resto se
purifica mediante LC/MS preparativa (condiciones B). Se obtienen
así 70 mg de
N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-3-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzamida
en forma de un polvo amarillo que funde de 149 a 156ºC.
LC-MS-DAD-ELSD:
502(-)=(M-H)(-); 504(+)=(IVI+H)(+).
Se aíslan de la misma manera 29 mg de
N-[5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-3-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzamida
en forma de un polvo amarillo claro que funde de 149 a 159ºC. RMN
^{1}H (400 MHz, (CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en
ppm): 2,43 (m extendido parcialmente enmascarado, 2H); 2,79 (s, 3H);
3,03 (m extendido, 2H); 3,17 (s, 3H); de 3,25 a 3,88 (m parcialmente
enmascarado, 4H); 3,74 (s ancho, 2H); 6,82 (d, J = 9,0 Hz, 2H);
7,25 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 7,54 (t, J = 8,0 Hz, 1 H); 7,57 (d, J=8,0
Hz, 1 H); 8,01 (d parcialmente enmascarado, J = 8,0 Hz, 1 H); 8,02
(s, 1 H); 8,18 (s, 1H); 9,50 (m muy extendido, 1 H); 10,8 (s, 1 H);
11,25 (s, 1 H).
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
A una disolución de 0,20 g (0,52 mmoles) de una
mezcla aproximadamente 70:30 de
3-amino-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-amino-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en 15 mL de tetrahidrofurano
bajo argón, se añaden 143 mg (1,03 mmoles) de carbonato de potasio
y 261 mg (1,03 mmoles) de cloruro de
3-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzoilo;
hidrocloruro. La mezcla de reacción se agita a una temperatura
cercana a 25ºC durante 16 horas, y después a reflujo durante 3
horas. Se añaden 261 mg (1,03 mmoles) de cloruro de
3-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzoilo;
hidrocloruro y la agitación se continúa a reflujo durante 4 horas y
a una temperatura cercana a 25ºC durante 16 horas. Se añaden 143 mg
(1,03 mmoles) de carbonato de potasio y la agitación se continúa a
reflujo durante 4 horas y a una temperatura cercana a 25ºC durante
16 horas. La mezcla de reacción se enfría a una temperatura cercana
a 25ºC, y se vierte sobre agua helada. La mezcla se extrae con
acetato de etilo. Las fases orgánicas se juntan, se secan sobre
sulfato de magnesio, se filtran y se concentran a sequedad en vacío
(2 kPa) a una temperatura cercana a 40ºC. El resto se purifica
mediante cromatografía en un cartucho de gel de sílice de 70 g
(0,015-0,040 mm) eluyendo con mezclas
diclorometano/metanol (95/5 y 99/1 en volúmenes) con un caudal de 40
mL/min. Las fracciones que contienen el producto esperado se juntan
y se concentran a sequedad bajo presión reducida (2 kPa) a una
temperatura cercana a 40ºC. Se obtienen así 0,07 g de una mezcla
aproximadamente 70:30 de
5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-3-[3-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzoilamino]-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-3-[3-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzoilamino]-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en forma de un polvo blanco
que se utiliza directamente en la etapa siguiente.
LC-MS-DAD-ELSD:
producto mayoritario 604(+)=(M+H)(+);
602(-)=(M-H)(-).
La mezcla aproximadamente 70:30 de
3-amino-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-amino-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo se describe en el ejemplo 11.
El cloruro de
3-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzoilo;
hidrocloruro puede prepararse según la patente WO 03066613 A1.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplos 17a y
17b
A una disolución de 200 mg (0,37 mmoles) de una
mezcla aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en 6 mL de dimetilformamida
bajo argón, se añaden 27 mg (74 \mumoles) de yoduro de
tetrabutilamonio y 110 \muL (1,11 mmoles) de piperidina. La
mezcla de reacción se agita a una temperatura cercana a 25ºC
durante 16 horas y se vierte en hielo. Se extrae 2 veces con una
mezcla 50/50 de acetato de etilo y heptano. Los extractos orgánicos
se juntan, se secan sobre sulfato de magnesio y se concentran a
sequedad en vacío (2 kPa) a una temperatura cercana a 40ºC. El
resto se disuelve en 4 mL de metanol y la disolución se introduce
en un tubo para horno microondas. El tubo se tapa y la mezcla de
reacción se irradia a una temperatura cercana a 100ºC durante 30
minutos. La mezcla de reacción se concentra a sequedad en vacío (2
kPa) a una temperatura cercana a 40ºC. El resto se purifica
mediante LC/MS preparativa (condiciones B). Se obtienen así 75 mg de
N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-piperidin-1-ilmetil-benzamida
en forma de un polvo amarillo que funde de 170 a 182ºC.
LC-MS-DAD-ELSD:
487(-)=(M-H)(-); 489(+)=(M+H)(+).
Se aíslan de la misma manera 5 mg de
N-[5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-piperidin-1-ilmetil-benzamida
en forma de un polvo amarillo claro.
LC-MS-DAD-ELSD:
523(+)/....=(M+H)(+)/...(1 Cl).
La mezcla aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo se describe en el ejemplo
11.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplos 18a y
18b
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
A una disolución de 200 mg (0,37 mmoles) de una
mezcla aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en 6 mL de dimetilformamida
bajo argón, se añaden 27 mg (74 \mumoles) de yoduro de
tetrabutilamonio y 93 \muL (1,11 mmoles) de pirrolidina. La
mezcla de reacción se agita a una temperatura cercana a 25ºC
durante 16 horas y se vierte en hielo. Se extrae 2 veces con una
mezcla 50/50 de acetato de etilo y heptano. Los extractos orgánicos
se juntan, se secan sobre sulfato de magnesio y se concentran a
sequedad en vacío (2 kPa) a una temperatura cercana a 40ºC. El
resto se disuelve en 4 mL de metanol y la disolución se introduce
en un tubo para horno microondas. El tubo se tapa y la mezcla de
reacción se irradia a una temperatura cercana a 100ºC durante 30
minutos. La mezcla de reacción se concentra a sequedad en vacío (2
kPa) a una temperatura cercana a 40ºC. El resto se purifica
mediante LC/MS preparativa (condiciones B). Se obtienen así 25 mg de
N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-pirrolidin-1-ilmetil-benzamida
en forma de un polvo amarillo que funde de 172 a 178ºC.
LC-MS-DAD-ELSD:
475(+)=(M+H)(+).
Se aíslan de la misma manera 18 mg de
N-[5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-pirrolidin-1-ilmetil-benzamida
en forma de un polvo amarillo claro que funde de 170 a 179ºC.
RMN ^{1}H (400 MHz, (CD_{3})_{2}SO
d_{6}, \delta en ppm): Se trata de la sal de la estructura
esperada con 1,87 (m, 2H); 2,05 (m, 2H); 3,13 (m, 2H); 3,18 (s,
3H); 3,40 (m, 2H); 4,45 (d, J = 4,5 Hz, 2H); 6,82 (d, J = 9,0 Hz,
2H); 7,25 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 7,68 (d, J = 8,0 Hz, 2H); 8,16 (d, J
= 8,0 Hz, 2H); 8,18 (s, 1H); 9,85 (m extendido, 1H); 10,85 (s, 1 H);
11,35 (s ancho, 1H); 13,0 (m muy extendido, 1H).
La mezcla aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo se describe en el ejemplo
11.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
19
\vskip1.000000\baselineskip
A una disolución de 200 mg (0,37 mmoles) de una
mezcla aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en 6 mL de dimetilformamida
bajo argón, se añaden 27 mg (74 \mumoles) de yoduro de
tetrabutilamonio y 75 \muL (1,11 mmoles) de azetidina. La mezcla
de reacción se agita a una temperatura cercana a 25ºC durante 16
horas y se vierte en hielo. Se extrae 2 veces con una mezcla 50/50
de acetato de etilo y heptano. Los extractos orgánicos se juntan,
se secan sobre sulfato de magnesio y se concentran a sequedad en
vacío (2 kPa) a una temperatura cercana a 40ºC. El resto se
disuelve en 4 mL de metanol y la disolución se introduce en un tubo
para horno microondas. El tubo se tapa y la mezcla de reacción se
irradia a una temperatura cercana a 100ºC durante 30 minutos. La
mezcla de reacción se concentra a sequedad en vacío (2 kPa) a una
temperatura cercana a 40ºC. El resto se purifica mediante LC/MS
preparativa (condiciones B). Se obtienen así 3 mg de
4-azetidin-1-ilmetil-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida
en forma de un polvo amarillo que funde de 155 a 160ºC.
LC-MS-DAD-ELSD: 461
(+)=(M+H)(+).
La mezcla aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo se describe en el ejemplo
11.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplos 20a y
20b
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
A una disolución de 200 mg (0,37 mmoles) de una
mezcla aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en 6 mL de dimetilformamida
bajo argón, se añaden 27 mg (74 \mumoles) de yoduro de
tetrabutilamonio y 144 \muL (1,11 mmoles) de
N,N,N'-trimetiletilendiamina. La mezcla de reacción
se agita a una temperatura cercana a 25ºC durante 16 horas y se
vierte en hielo. Se extrae 2 veces con una mezcla 50/50 de acetato
de etilo y heptano. Los extractos orgánicos se juntan, se secan
sobre sulfato de magnesio y se concentran a sequedad en vacío (2
kPa) a una temperatura cercana a 40ºC. El resto se disuelve en 4 mL
de metanol y la disolución se introduce en un tubo para horno
microondas. El tubo se tapa y la mezcla de reacción se irradia a una
temperatura cercana a 100ºC durante 30 minutos. La mezcla de
reacción se concentra a sequedad en vacío (2 kPa) a una temperatura
cercana a 40ºC. El resto se purifica mediante LC/MS preparativa
(condiciones B). Se obtienen así 40 mg de
4-{[(2-dimetilamino-etil)-metil-amino]-metil}-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida
en forma de un polvo amarillo.
LC-MS-DAD-ELSD:
506(+)=(M+H)(+).
Se aíslan de la misma manera 26 mg de
N-{5-[N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-{[(2-dimetilamino-etil)-metil-amino]-metil}-benzamida
en forma de una resina incolora. RMN ^{1}H (400 MHz,
(CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en ppm): 2,44 (m
extendido parcialmente enmascarado, 7H); 2,82 (s, 6H); 3,17 (s, 3H);
3,37 (m ancho, 2H); 6,82 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 7,25 (d, J = 9,0 Hz,
2H); 7,60 (d ancho, J = 8,0 Hz, 2H); 8,12 (d, J = 8,0 Hz, 2H); 8,18
(s, 1 H); 10,85 (s, 1 H); 11,25 (s ancho, 1 H); 13,0 (m muy
extendido, 1H).
La mezcla aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo se describe en el ejemplo
11.
\newpage
Ejemplos 21a y
21b
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
A una disolución de 200 mg (0,37 mmoles) de una
mezcla aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en 6 mL de dimetilformamida
bajo argón, se añaden sucesivamente 27 mg (74 \mumoles) de yoduro
de tetrabutilamonio, 153 mg (1,11 mmoles) de hidrocloruro de
homomorfolina y 153 mg (1,11 mmoles) de carbonato de potasio. La
mezcla de reacción se agita a una temperatura cercana a 25ºC durante
16 horas y se vierte en hielo. Se extrae 2 veces con una mezcla
50/50 de acetato de etilo y heptano. Los extractos orgánicos se
juntan, se secan sobre sulfato de magnesio y se concentran a
sequedad en vacío (2 kPa) a una temperatura cercana a 40ºC. El
resto se disuelve en 4 mL de metanol y la disolución se introduce en
un tubo para horno microondas. El tubo se tapa y la mezcla de
reacción se irradia a una temperatura cercana a 100ºC durante 30
minutos. La mezcla de reacción se concentra a sequedad en vacío (2
kPa) a una temperatura cercana a 40ºC. El resto se purifica
mediante LC/MS preparativa (condiciones B). Se obtienen así 34 mg de
N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-perhidro-1,4-oxazepin-4-ilmetil-benzamida
en forma de un polvo amarillo que funde de 174 a 179ºC.
LC-MS-DAD-ELSD:
505(+)=(M+H)(+). Se aíslan de la misma manera 38 mg de
N-{5-[N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-perhidro-1,4-oxazepin-4-ilmetil-benzamida
en forma de un polvo amarillo. RMN ^{1}H (400 MHz,
(CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en ppm): Se trata de la
sal de la estructura esperada con 2,08 (m, 2H); de 3,13 a 4,07 (m,
8H); 3,18 (s, 3H); 4,50 (s ancho, 2H); 6,82 (d, J = 9,0 Hz, 2H);
7,25 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 7,70 (d ancho, J = 8,0 Hz, 2H); 8,17 (d
parcialmente enmascarado, J = 8,0 Hz, 2H); 8,18 (s, 1H); 9,75 (m
extendido, 1H); 10,85 (s, 1 H); 11,3 (s, 1 H); 12,95 (m muy
extendido, 1 H).
La mezcla aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo se describe en el ejemplo
11.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplos 22a y
22b
Una disolución de 257 mg (0,44 mmoles) de una
mezcla aproximadamente 70:30 de
5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-3-(3-morfolin-4-ilmetil-benzoilamino)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-3-(3-morfolin-4-ilmetil-benzoilamino)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en 4 mL de metanol se
introduce en un tubo para horno microondas. El tubo se tapa y la
mezcla de reacción se irradia a una temperatura cercana a 100ºC
durante 30 minutos. La mezcla de reacción se concentra a sequedad
en vacío (2 kPa) a una temperatura cercana a 40ºC. El resto se
purifica mediante LC/MS preparativa (condiciones B). Se obtienen
así 105 mg de
N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-3-morfolin-4-ilmetil-benzamida
en forma de un polvo amarillo que funde de 168 a 178ºC. RMN ^{1}H
(400 MHz, (CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en ppm):
observación de la sal de la estructura esperada con una mezcla
80%-20% de confórmeros tal que: 3,16 (m ancho parcialmente
enmascarado, 2H); 3,18 (s, 3H); 3,32 (m ancho, 2H); 3,63 (m ancho,
2H); 3,98 (m, 2H); 4,44 (s ancho, 2H); 6,77 (t, J = 7,5 Hz, 0,8H);
6,82 (d, J = 8,0 Hz, 1,6H); 6,94 (t, J = 8,0 Hz, 0,2H); 7,02 (d, J
= 8,0 Hz, 0,4H); 7,22 (t, J = 8,0 Hz, 1, 6H); 7,31 (d, J = 8,0 Hz,
0,4H); 7,66 (t, J = 8,0 Hz, 1 H); 7,74 (d, J=8,5 Hz, 1 H); 8,15 (m,
3H); 9,70 (s, 0,2H); 10,0 (m extendido, 1 H); 10,75 (s, 0,8H);
11,25 (s, 0,2H); 11,35 (s, 0,8H); 12,95 (m muy extendido, 1 H).
Se aíslan de la misma manera 34 mg de
N-{5-[N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-3-morfolin-4-ilmetil-benzamida
en forma de un polvo amarillo. RMN ^{1}H (400 MHz,
(CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en ppm): Se trata de
una sal de la estructura esperada con 3,07 a 3,55 (m parcialmente
enmascarado, 4H); 3,18 (s, 3H); 3,63 (t ancho, J = 12,5 Hz, 2H);
3,99 (d ancho, J = 12,5 Hz, 2H); 4,44 (s ancho, 2H); 6,82 (d, J =
9,0 Hz, 2H) ; 7,25 (d, J = 9,0 Hz, 2H); de 7,60 a 7,76 (m, 2H);
8,17 (m, 3H); 9,90 (m extendido, 1 H); 10,8 (s, 1 H); 11,3 (s
ancho, 1 H); 13,0 (m muy extendido, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
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\vskip1.000000\baselineskip
A una disolución de 0,20 g (0,52 mmoles) de una
mezcla aproximadamente 70:30 de
3-amino-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-amino-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en 15 mL de tetrahidrofurano
bajo argón, se añaden 214 mg (1,55 mmoles) de carbonato de potasio
y 285 mg (1,03 mmoles) de cloruro de
3-(morfolin-1-ilmetil)-benzoilo;
hidrocloruro. La mezcla de reacción se agita a una temperatura
cercana a 25ºC durante 16 horas y se vierte en agua helada. La
mezcla se extrae con acetato de etilo. Las fases orgánicas se
juntan, se secan sobre sulfato de magnesio, se filtran y se
concentran a sequedad en vacío (2 kPa) a una temperatura cercana a
40ºC. El resto se purifica mediante cromatografía en un cartucho de
gel de sílice de 30 g (0,015-0,040 mm) eluyendo con
diclorometano puro, y después con una mezcla diclorometano/metanol
(90/10 en volúmenes). Las fracciones que contienen los productos
esperados se juntan y se concentran a sequedad bajo presión
reducida (2 kPa) a una temperatura cercana a 40ºC. Se obtienen así
257 mg de una mezcla aproximadamente 70:30 de
5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-3-(3-morfolin-4-ilmetil-benzoilamino)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-3-(3-morfolin-4-ilmetil-benzoilamino)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en forma de una espuma
amarilla que se utiliza directamente en la etapa siguiente.
La mezcla aproximadamente 70:30 de
3-amino-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-amino-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo se describe en el ejemplo 11.
El cloruro de
3-(morfolin-1-ilmetil)-benzoilo;
hidrocloruro puede prepararse según la patente WO 9008128 A1.
\newpage
Ejemplos 23a y
23b
A una disolución de 200 mg (0,37 mmoles) de una
mezcla aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en 6 mL de dimetilformamida
bajo argón, se añaden sucesivamente 27 mg (74 \mumoles) de yoduro
de tetrabutilamonio, 156 \muL (1,11 mmoles) de
N,N-dietiletilendiamina y 153 mg (1,11 mmoles) de
carbonato de potasio. La mezcla de reacción se agita a una
temperatura cercana a 25ºC durante 16 horas y se vierte en hielo.
Se extrae 2 veces con una mezcla 50/50 de acetato de etilo y
heptano. Los extractos orgánicos se juntan, se secan sobre sulfato
de magnesio y se concentran a sequedad en vacío (2 kPa) a una
temperatura cercana a 40ºC. El resto se disuelve en 4 mL de metanol
y la disolución se introduce en un tubo para horno microondas. El
tubo se tapa y la mezcla de reacción se irradia a una temperatura
cercana a 100ºC durante 30 minutos. La mezcla de reacción se
concentra a sequedad en vacío (2 kPa) a una temperatura cercana a
40ºC. El resto se purifica mediante LC/MS preparativa (condiciones
B). Las fracciones que contienen los productos esperados se juntan
y se concentran a sequedad bajo presión reducida (2 kPa) a una
temperatura cercana a 40ºC. El resto se repurifica mediante
cromatografía en un cartucho de gel de sílice de 4 g
(0,035-0,060 mm) eluyendo con una mezcla
diclorometano/metanol y después con una mezcla de diclorometano y de
metanol/amoniaco al 28% (85/15 en volúmenes). Las fracciones que
contienen los productos esperados se juntan y se concentran a
sequedad bajo presión reducida (2 kPa) a una temperatura cercana a
40ºC. Se obtienen así 8 mg de
4-[(2-dietilamino-etilamino)-metil]-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida
en forma de un polvo amarillo claro que funde de 143 a 150ºC.
LC-MS-DAD-ELSD:
520(+)/...=(M+H)(+)/...(1 Cl).
Se aíslan de la misma manera 10 mg de
N-{5-[N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-[(2-dietilamino-etilamino)-metil]-benzamida
en forma de un polvo amarillo. RMN'H (400 MHz,
(CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en ppm): Se trata de la sal de la estructura esperada con 1,21 (t ancho, J = 7,0 Hz, 6H); 3,18 (s, 3H); 3,20 (m extendido parcialmente enmascarado, 6H); de 3,29 a 3,54 (m enmascarado, 2H); 4,31 (m ancho, 2H); 6,82 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 7,25 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 7,64 (d ancho, J = 8,0 Hz, 2H); 8,16 (d, J = 8,0 Hz, 2H); 8,19 (s, 1 H); 9,20 (m extendido, 2H); 10,85 (s, 1 H); 11,3 (s ancho, 1 H); 13,0 (m muy extendido, 1H).
(CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en ppm): Se trata de la sal de la estructura esperada con 1,21 (t ancho, J = 7,0 Hz, 6H); 3,18 (s, 3H); 3,20 (m extendido parcialmente enmascarado, 6H); de 3,29 a 3,54 (m enmascarado, 2H); 4,31 (m ancho, 2H); 6,82 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 7,25 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 7,64 (d ancho, J = 8,0 Hz, 2H); 8,16 (d, J = 8,0 Hz, 2H); 8,19 (s, 1 H); 9,20 (m extendido, 2H); 10,85 (s, 1 H); 11,3 (s ancho, 1 H); 13,0 (m muy extendido, 1H).
La mezcla aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo se describe en el ejemplo
11.
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Ejemplo
24
A una disolución de 200 mg (0,37 mmoles) de una
mezcla aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en 6 mL de dimetilformamida
bajo argón, se añaden sucesivamente 27 mg (74 \mumoles) de yoduro
de tetrabutilamonio, y 121 \muL (1,11 mmoles) de
N-metilanilina. La mezcla de reacción se agita a
una temperatura cercana a 25ºC durante 15 días y se vierte en hielo.
Se extrae 2 veces con una mezcla 50/50 de acetato de etilo y
heptano. Los extractos orgánicos se juntan, se lavan con disolución
salina concentrada saturada, se secan sobre sulfato de magnesio y
se concentran a sequedad en vacío (2 kPa) a una temperatura cercana
a 40ºC. El resto se disuelve en 4 mL de metanol y la disolución se
introduce en un tubo para horno microondas. El tubo se tapa y la
mezcla de reacción se irradia a una temperatura cercana a 100ºC
durante 30 minutos. La mezcla de reacción se concentra a sequedad
en vacío (2 kPa) a una temperatura cercana a 40ºC. El resto se
purifica mediante cromatografía en un cartucho de gel de sílice de
15 g (0,015-0,040 mm) eluyendo con diclorometano
puro y con una mezcla diclorometano/metanol/amoniaco al 28%
(12/3/0,5 en volúmenes) con un caudal de 10 mL/min. Las fracciones
que contienen el producto esperado se juntan y se concentran a
sequedad bajo presión reducida (2 kPa) a una temperatura cercana a
40ºC. El resto se purifica mediante LC/MS preparativa (condiciones
B). Se obtienen así 11 mg de
4-[(metil-fenil-amino)-metil]-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida
en forma de un polvo beige que funde a 242ºC.
LC-MS-DAD-ELSD:
511(+)=(M+H)(+).
La mezcla aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo se describe en el ejemplo
11.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
25
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
A una disolución de 200 mg (0,37 mmoles) de una
mezcla aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo en 6 mL de dimetilformamida
bajo argón, se añaden sucesivamente 27 mg (74 \mumoles) de yoduro
de tetrabutilamonio y 156 \muL (1,11 mmoles) de diisopropilamina.
La mezcla de reacción se agita a una temperatura cercana a 25ºC
durante 9 días, se añaden 220 \muL (1,56 mmoles) de
diisopropilamina y la mezcla de reacción se agita a una temperatura
cercana a 25ºC durante 6 días. Se vierte en hielo y se extrae 2
veces con una mezcla 50/50 de acetato de etilo y heptano. Los
extractos orgánicos se juntan, se lavan con disolución salina
concentrada saturada, se secan sobre sulfato de magnesio y se
concentran a sequedad en vacío (2 kPa) a una temperatura cercana a
40ºC. El resto se disuelve en 4 mL de metanol y la disolución se
introduce en un tubo para horno microondas. El tubo se tapa y la
mezcla de reacción se irradia a una temperatura cercana a 100ºC
durante 30 minutos. La mezcla de reacción se concentra a sequedad en
vacío (2 kPa) a una temperatura cercana a 40ºC. El resto se
purifica mediante LC/MS preparativa (condiciones B). Se obtienen así
10 mg de
4-[(diisopropilamino)-metil]-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida;
trifluoroacetato en forma de un polvo beige que funde de 170 a
182ºC. RMN ^{1}H (400 MHz, (CD_{3})_{2}SO d_{6},
\delta en ppm): para este lote, todas las señales son anchas con
1,27 a 1,42 (m, 12H); 3,18 (s, 3H); 3,70 (m, 2H); 4,48 (s, 2H); de
6,71 a 6,88 (m, 3H); 7,22 (t, J = 8,0 Hz, 2H); 7,70 (m, 2H); 8,17
(m, 3H); 8,55 (s, 1 H); 10,75 (s, 1 H); 11,3 (s, 1 H); 13,05 (s, 1
H).
La mezcla aproximadamente 70:30 de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo y de
3-(4-clorometil-benzoilamino)-5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-tieno[2,3-c]pirazol-1-carboxilato
de terc-butilo se describe en el ejemplo
11.
\newpage
Ejemplo
26
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La
N-[5-(N'-bencil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-metoxi-benzamida
se prepara siguiendo el ejemplo 1. Rdt = 3%. SM: ES m/z=422 MH+
pico base. RMN ^{1}H (400 MHz, (CD_{3})_{2}SO d_{6},
\delta en ppm): 3,85 (s, 3H); 3,98 (s, 2H); 7,06 (d, J = 8,5 Hz,
2H); 7,26 (t, J = 7,5 Hz, 1 H); 7,33 (t, J = 7,5 Hz, 2H); 7,38 (d,
J = 7,5 Hz, 2H); 7,94 (s ancho, 1 H); 8,05 (d, J = 8,5 Hz, 2H);
10,15 (s, 1 H); 10,95 (m extendido, 1H); 12,85 (m muy extendido,
1H).
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Ejemplo
27
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
La
4-metoxi-N-[5-(N'-piridin-2-il-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida
se prepara siguiendo el ejemplo 1. Rdt = 56%. SM: IE m/z=408 M+.
m/z=300 (M-C5H6N3)+ m/z=135 C8H7O2+ pico base. RMN
^{1}H (400 MHz, (CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en
ppm): 3,85 (s, 3H); 6,63 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 6,71 (m, 1H); 7,07 (d
ancho, J = 8,5 Hz, 2H); 7,54 (m, 1H); de 8,03 a 8,12 (m, 3H); 8,20
(s, 1 H); 8,44 (s, 1 H); 10,5 (s, 1H); 11,0 (s, 1H); 12,9 (s,
1H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
28
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\vskip1.000000\baselineskip
En un matraz de 20 mL seco bajo argón, se
introducen
1-(1-etoxi-etil)-3-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzoilamino]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-5-carboxilato
de etilo (0,5 g, 1,03 mmoles, 1 eq) y tolueno (5 mL). La suspensión
se agita a una temperatura cercana a 0ºC, y se añade gota a gota
una disolución de trimetilaluminio (1,54 mL, 3 eq) para evitar
subidas de la temperatura. Una vez ha terminado la adición, se deja
con agitación durante 30 min a una temperatura cercana a 25ºC, y se
añade una disolución de
N-(4-cloro-fenil)-N-metil-hidrazina
(0,480 g, 3,09 mmoles, 3 eq). La mezcla de reacción se calienta a
una temperatura cercana a 50ºC hasta la desaparición total del
producto de partida. Después de 2 h 30, se deja que vuelva a una
temperatura cercana a 25ºC, y se diluye la mezcla con acetato de
etilo. Se le añaden algunas gotas de fosfato monopotásico hasta la
finalización de la liberación gaseosa, y se deja con agitación
durante 1 hora. Se evapora el disolvente y el resto se disuelve en
una mezcla de diclorometano y de metanol. Se pone esta disolución
directamente en gel de sílice para purificación mediante
cromatografía eluyendo al principio con una mezcla
metanol/diclorometano (10/90 en volúmenes). Intermedio etoxietilo:
LC/MS RT = 3,41 min.; M+H+ 596,1,
M-H-594,2. Después de evaporar, el
sólido obtenido se pone directamente en 5 mL de tetrahidrofurano y
2 mL de ácido clorhídrico 5N a una temperatura cercana a 50ºC. Se
obtiene así la
N-{5-[N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida
(119 mg, 22% para las dos etapas). MS: ES m/z=524 MH+ pico base.
RMN ^{1}H (400 MHz, (CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta
en ppm): 2,23 (s, 3H); 2,44 (m, 4H); 3,17 (s, 3H); de 3,25 a 3,33 (m
parcialmente enmascarado, 4H); 6,82 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 7,00 (d
ancho, J = 9,0 Hz, 2H); 7,24 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 7,97 (d ancho, J
= 9,0 Hz, 2H); 8,16 (s, 1 H); 10,8 (s, 1 H); 10,9 (m extendido, 1
H); 12,9 (m extendido, 1 H).
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
En un matraz de 500 mL bajo argón se pone
3-bromo-1-(1-etoxi-etil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-5-carboxilato
de etilo (10,9 g, 31 mmoles),
4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida
(9 g, 41 mmoles, 1,3 eq), yoduro de cobre (I) (0,601 g, 3,1 mmoles,
0,1 eq), fosfato tripotásico (20,1 g, 94 mmoles, 3 eq) previamente
pulverizado, y 70 mL de dioxano anhidro previamente desgaseado con
argón. A esta suspensión se añade con jeringa
N,N'-dimetiletilendiamina (0,336 mL, 3,16 mmoles,
0,1 eq). La mezcla de reacción se calienta a una temperatura cercana
a 110ºC durante un periodo de 24 horas. El dioxano se evapora en
vacío y el resto se diluye con acetato de etilo (300 mL) y 150 mL
de agua. La fase orgánica se lava con 100 mL de agua, se seca sobre
sulfato de magnesio y se concentra a sequedad bajo presión
reducida. El resto se purifica mediante cromatografía en gel de
sílice utilizando como eluyente de partida una mezcla
diclorometano/metanol (90/10 en volúmenes). Se obtiene así
1-(1-etoxi-etil)-3-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzoilamino]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-5-carboxilato
de etilo (4,05 g, 27%) en forma de un aceite amarillo claro que se
utiliza directamente en la etapa siguiente.
El
3-bromo-1-(1-etoxi-etil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-5-carboxilato
de etilo se describe en el ejemplo 1.
\vskip1.000000\baselineskip
Se pone la
N'-bencidriliden-N-(4-cloro-fenil)-N-metil-hidrazina
(1,5 g, 4,68 mmoles) en 20 mL de tetrahidrofurano con agitación.
Se le añaden 5 mL de ácido clorhídrico 5N y se deja la disolución
con agitación a una temperatura cercana a 50ºC durante 16 horas. Se
neutraliza la fase acuosa con sosa 5N y se extrae con acetato de
etilo. El aceite obtenido después de la extracción se purifica
mediante cromatografía en gel de sílice utilizando como eluyente de
partida una mezcla acetato de etilo/heptano (10/90 en volúmenes). Se
obtiene así la
N-(4-cloro-fenil)-N-metil-hidrazina
en forma de un aceite amarillo claro, 0,53 g (72%). (Rf = 0,48,
AcOEt/heptano 20/80 (v/v)).
\vskip1.000000\baselineskip
En un matraz de 20 mL previamente secado bajo
argón se introducen
N-bencidriliden-N'-(4-cloro-fenil)-hidrazina
(0,2 g, 0,65 mmoles, 1 eq) y 3,2 mL de tetrahidrofurano. La
disolución se enfría a una temperatura cercana a -10ºC y
se añade una disolución 0,5 M de
hexametilbis-sililamiduro de potasio (1,43 mL, 1,1
eq). La disolución se oscurece, se deja con agitación a esta
temperatura durante 30 min y se añade una disolución de yoduro de
metilo en metil terc-butiléter (0,49 mL, 1,5
eq). Se deja que la mezcla vuelva a una temperatura cercana a 25ºC
y se deja con agitación durante 4 horas. Después de tratamiento con
hidrógenocarbonato de sodio, se extrae con acetato de etilo. Los
extractos orgánicos se juntan, se secan sobre sulfato de magnesio, y
se concentran a sequedad en vacío. El aceite residual se purifica
mediante cromatografía en gel de sílice utilizando como eluyente
una mezcla acetato de etilo/heptano (10/90 en volúmenes). La
N'-bencidriliden-N-(4-cloro-fenil)-N-metil-hidrazina
se obtiene con un rendimiento del 96% en forma de un sólido
amarillo que se utiliza directamente en la etapa siguiente.
\vskip1.000000\baselineskip
En un matraz de 500 mL, se ponen 260 mL de
2-metil-2-butanol
que se desgasea con argón durante 30 minutos. Una vez ha finalizado
la desgasificación, se ponen en un matraz anexo seco bajo argón 60
mL de
2-metil-2-butanol,
diacetato de paladio (II) (0,857 g, 1,27 mmoles, 0,025 eq) y el
ligando MePHOS (0,928 g, 2,55 mmoles, 0,05 eq). Se deja con
agitación durante 30 minutos a una temperatura cercana a 25ºC. Por
otro lado, en el matraz de 500 mL, se añaden
1,4-diclorobenceno (7,49 g, 1 eq) y sosa en polvo
(2,85 g, 1,4 eq). El catalizador se transfiere al matraz de 500 mL
que se calienta a una temperatura cercana a 100ºC. Se finaliza
mediante la adición de bencidriliden-hidrazina (10
g, 50,9 mmoles, 1 eq). Se deja con agitación la suspensión
resultante que cambia de color rápidamente (rojo oscuro) hasta la
desaparición total del halogenuro. Se evapora el disolvente a
sequedad y se recoge el resto con diclorometano. El sólido se filtra
sobre Celite®, y se lava abundantemente con diclorometano. La fase
orgánica se lava con una disolución saturada de cloruro de amonio,
se seca sobre sulfato de magnesio y se concentra a sequedad en
vacío. El resto se purifica mediante cromatografía en una columna
de gel de sílice utilizando como eluyente de partida una mezcla
acetato de etilo/heptano (10/90 en volúmenes). Se obtiene así la
N-bencidriliden-N'-(4-cloro-fenil)-hidrazina
(85%) en forma de un sólido amarillo (Rf = 0,35, AcOEt/Heptano
25/75 (v/v)).
\vskip1.000000\baselineskip
En un matraz de 250 mL, se introducen
4-fluorobenzonitrilo (12 g, 99 mmoles, 1 eq) y 100
mL de DMF. A esta disolución, se añade N-metil
piperazina (16 mL, 1,6 eq, 123 mmoles). La disolución naranja se
calienta a una temperatura cercana a 90ºC durante 15 horas. Se
evapora el disolvente a sequedad y se diluye el resto con 500 mL de
éter dietílico. La disolución se lava con una disolución de
hidrógenocarbonato de sodio (2 x 100 mL) y con una disolución
saturada de cloruro de sodio (100 mL). Después de evaporar, se
utiliza el
4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzonitrilo
(sólido naranja, 10 g, 77%) sin más purificación en la etapa
siguiente de hidrólisis. Se añade a una temperatura cercana a 0ºC
sobre una disolución de ácido sulfúrico al 98% (25 mL) y 5 mL de
agua. Se calienta la disolución púrpura a una temperatura cercana a
100ºC durante 8 horas. La disolución se enfría y se hidroliza
vertiéndola en hielo. El pH se ajusta a 9-10 con
sosa en pastillas. El precipitado obtenido se filtra y se lava
abundantemente con agua y con tetrahidrofurano que solubiliza
parcialmente el producto. Se decanta el agua. Después de evaporar a
sequedad la fase orgánica, se obtiene un sólido que se purifica
mediante cromatografía en gel de sílice utilizando como eluyente
una mezcla metanol/diclorometano (15/85 en volúmenes). Se obtiene
así
4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida
(8,7 g, 80%) en forma de un sólido blanco que se utiliza
directamente en la etapa siguiente.
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Ejemplo
29
\vskip1.000000\baselineskip
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La
N-(2-Metoximetil-pirrolidin-1-il)-3-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzoilamino]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-5-carboxamida
se prepara siguiendo el ejemplo 28. LC/MS intermedio etoxietilo RT
= 2,62 min., M+H+ 571,1, M-H- 568,1;
Producto final: Rdt = 33%. MS: ES m/z=498 MH+ pico base. RMN
^{1}H (400 MHz, (CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en
ppm): 1,58 (m, 1 H); de 1,70 a 1,87 (m, 2H); 2,00 (m, 1 H); 2,25 (s,
3H); 2,48 (m parcialmente enmascarado, 4H); 2,86 (m ancho, 1 H); de
2,98 a 3,36 (m extendido, 3H); 3,21 (s, 3H); 3,32 (m, 4H); 3,46 (m,
1H); 6,98 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 7,96 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 8,05 (s
ancho 1H).
\newpage
Ejemplo
30
La
N-[5-(N'-bencil-N'-metil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida
se prepara siguiendo el ejemplo 28. LC/MS intermedio etoxietilo RT
= 3,19 min., M+H+ 576,1, M-H- 574,2.
Producto final: Rdt = 16%. MS: ES m/z=504 MH+ pico base. RMN
^{1}H (400 MHz, (CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en
ppm): las señales del espectro son anchas con una mezcla de
rotámeros 60%-40%: 2,36 (s, 3H); de 2,54 a 2,72 (m, 7H); 3,36 (m
parcialmente enmascarado, 4H); 3,89 (s, 1,2H); 3,98 (s, 0,8H); 7,02
(d, J = 8,5 Hz, 2H); de 7,16 a 7,45 (m, 5H); 7,89 (s, 0,6H); 7,99
(d, J = 8,5 Hz, 2H); 8,08 (s, 0,4H); 8,85 (s, 0,4H); 9,58 (s, 0,6
H); 9,70 (m extendido, 0,4H); 10,7 (m extendido, 0,6H); 12,65 (m
extendido, 0,4H); 12,85 (m extendido, 0,6H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
31
La
N-(piperidin-1-il)-3-[4-(4-Metil-piperazin-1-il)-benzoilamino]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-5-carboxamida
se prepara siguiendo el ejemplo 28. LC/MS intermedio etoxietilo RT
= 2,97 min., M+H+ 540,4, M-H- 538,2.
Producto final: Rdt = 38%. SM: ES m/z=468 MH+
m/z-234,8 (M + 2H)2+/2 pico base. RMN ^{1}H
(400 MHz, (CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en ppm): 1,55
(m ancho, 2H); 1,88 (m ancho, 4H); 2,87 (s, 3H); de 3,05 a 3,21 (m,
4H); de 3,43 a 3,59 (m, 6H); de 4,02 a 4,10 (m, 2H); 7,10 (d, J =
9,0 Hz, 2H); 8,04 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 8,27 (s, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
32
\newpage
La
N-[5-(N'-bencil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida
se prepara siguiendo el ejemplo 28. LC/MS intermedio etoxietilo RT
= 3,10, MH+ 562,3, MH- 560,2. Producto final: Rdt = 13%.
SM: ES m/z=490 MH+ pico base. RMN ^{1}H (400 MHz,
(CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en ppm): 2,23 (s, 3H);
2,44 (m, 4H); 3,30 (m parcialmente enmascarado, 4H); 3,97 (d, J =
5,0 Hz, 2H); 5,37 (m, 1 H); 7,00 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 7,25 (t, J =
7,5 Hz, 1 H); 7,33 (t, J = 7,5 Hz, 2H); 7,38 (d, J = 7,5 Hz, 2H);
de 7,92 a 7,98 (m, 3H); 10,1 (d, J = 5,0 Hz, 1H); 10,8 (m muy
extendido, 1 H); 12,9 (m muy extendido, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
33
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
La
N-[5-(N'-etil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida
se prepara siguiendo el ejemplo 28. LC/MS intermedio etoxietilo: RT
= 3,25 min., M+H+ 576,3, M-H- 574,1.
Producto final: Rdt = 28%. SM: ES m/z=504 MH+ pico base. RMN
^{1}H (400 MHz, (CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en
ppm): 1,18 (t, J = 7,0 Hz, 3H); 2,21 (s, 3H); 2,43 (m, 4H); 3,31 (m
parcialmente enmascarado, 4H); 3,53 (q, J=7,0 Hz, 2H); 6,74 (t, J =
7,5 Hz, 1H); 6,82 (d, J = 7,5 Hz, 2H); 7,01 (d ancho, J = 8,5 Hz,
2H); 7,21 (t, J = 7,5 Hz, 2H); 7,98 (d ancho, J = 8,5 Hz, 2H); 8,22
(s, 1H); 10, 55 (s, 1H); 10,85 (m extendido, 1 H); 12,9 (m
extendido, 1 H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
34
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
La
N-[5-(N'-bencil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida
se prepara siguiendo el ejemplo 28. LC/MS intermedio etoxietilo: RT
= 3,68 min., M+H+ 638,5. Producto final: Rdt = 8%. SM: ES m/z=566
MH+ pico base. RMN ^{1}H (400 MHz, (CD_{3})_{2}SO
d_{6}, \delta en ppm): todas las señales del espectro son anchas
con 2,32 (s, 3H); 2,59 (m, 4H); 3,35 (m parcialmente enmascarado,
4H); 4,75 (s, 2H); 6,75 (t, J= 7,5 Hz, 1 H); 6,81 (d, J = 8,5 Hz,
2H); 7,02 (d, J = 8,5 Hz, 2H); de 7,11 a 7,38 (m, 5H); 7,49 (d, J =
8,5 Hz, 2H); 7,98 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 8,17 (s, 1 H); 10,8 (s, 1
H); 10,9 (m extendido, 1 H); 12,95 (m extendido, 1 H).
\newpage
Ejemplo
35
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
La
N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida
se prepara siguiendo el ejemplo 28. LC/MS intermedio etoxietilo: RT
= 2,74 min., M+H+ 561,0. Producto final: Rdt = 22%. SM: ES m/z=490
MH+ pico base. RMN ^{1}H (400 MHz, (CD_{3})_{2}SO
d_{6}, \delta en ppm): todas las señales del espectro son anchas
con 2,32 (s, 3H); 2,59 (m, 4H); 3,35 (m parcialmente enmascarado,
4H); 4,75 (s, 2H); 6,75 (t, J= 7,5 Hz, 1 H); 6,81 (d, J = 8,5 Hz,
2H); 7,02 (d, J = 8,5 Hz, 2H); de 7,11 a 7,38 (m, 5H); 7,49 (d, J =
8,5 Hz, 2H); 7,98 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 8,17 (s, 1 H); 10,8 (s, 1
H); 10,9 (m extendido, 1 H); 12,95 (m extendido, 1 H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
36
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
La
N-{5-[N'-(4-cloro-fenil)-N'-ciclobutilmetil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida
se prepara siguiendo el ejemplo 28. LC/MS intermedio: etoxietilo RT
= 4,20 min., M+H+ 650,1, M-H- 648,1.
Producto final: Rdt = 2%. MS: ES m/z=578 MH+ pico base. RMN ^{1}H
(400 MHz, (CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en ppm): De
1,71 a 1,88 (m, 3H); 2,03 (m, 1 H); 2,63 (m, 1 H); 2,85 (s, 3H);
3,14 (m ancho, 4H); de 3,47 a 3,56 (m parcialmente enmascarado,
2H); 3,51 (d, J = 7,0 Hz, 2H); 4,07 (m ancho, 2H); 6,83 (d, J = 9,0
Hz, 2H); 7,11 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 7,22 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 8,04
(d, J = 9,0 Hz, 2H); 8,20 (s, 1H); 10,05 (m extendido, 1 H); 10,6
(s, 1 H); 10,95 (m extendido, 1H); 12,9 (m extendido, 1 H).
\vskip1.000000\baselineskip
La
N-(4-Cloro-fenil)-N-ciclobutilmetil-hidrazina
se prepara siguiendo el ejemplo 28
Rdt. (2 etapas), 0,65 g (63%). Rf = 0,43,
(AcOEt/heptano 30/70 (v/v)).
\vskip1.000000\baselineskip
Rf = 0,77, (AcOEt/heptano 30/70 (v/v))
(desprotección inmediata). La
N-bencidriliden-N'-(4-cloro-fenil)-hidrazina
se describe en el ejemplo 28.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
37
La
N-{5-[N'-etil-N'-(4-fluoro-fenil)-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida
se prepara siguiendo el ejemplo 28. LC/MS intermedio etoxietilo RT
= 3,20 min., M+H+ 594,2, M-H- 592,3.
Producto final: Rdt = 16%. MS: ES m/z=522 MH+ pico base. RMN
^{1}H (400 MHz, (CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en
ppm): observación de una mezcla de rotámeros 80%-20%: 1,16 (t, J =
7,0 Hz, 2,4H); 1,31 (t, J = 7,0 Hz, 0,6H); 2,87 (s, 3H); de 3,02 a
3,20 (m, 4H); de 3,35 a 3,59 (m parcialmente enmascarado, 2H); 3,50
(q parcialmente enmascarado, J = 7,0 Hz, 1,6H); 4,08 (m, 2H); 4,30
(q, J=7,0 Hz, 0,4H); 6,83 (dd, J = 4,5 y 9,0 Hz, 1,6H); de 7,00 a
7,17 (m, 4,4H); 8,03 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 8,17 (s, 0,2H); 8,21 (s,
0,8H); 9,67 (s, 0,2H); 9,77 (m extendido, 1 H); 10,55 (s, 0,8H);
10,95 (m, 1 H); 12,9 (m muy extendido, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
La
N-Etil-N-(4-fluoro-fenil)-hidrazina
se prepara siguiendo el ejemplo 28 Aceite amarillo claro, 0,32 g
(30%).
\vskip1.000000\baselineskip
La
N'-Bencidriliden-N-etil-N-(4-fluoro-fenil)-hidrazina
se prepara siguiendo el ejemplo 28.
Sólido naranja, 1,9 g (86%), Rf = 0,64
(AcOEt/heptano 20/80 (v/v)).
\vskip1.000000\baselineskip
La
N-Bencidriliden-N'-(4-fluoro-fenil)-hidrazina
se prepara siguiendo el ejemplo 28.
Sólido amarillo, rendimiento 54% (Rf = 0,33,
AcOEt/Heptano 10/90 (v/v)), LC/MS MH+ 291,1, MH-
289,2.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
38
La
N-{5-[N'-(4-fluoro-fenil)-N'-(2-metoxi-etil)-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida
se prepara siguiendo el ejemplo 28. Rdt = 45%. MS: ES m/z=552 MH+
pico base., RMN ^{1}H (400 MHz, (CD_{3})_{2}SO
d_{6}, \delta en ppm): 2,23 (s, 3H); 2,44 (m, 4H); 3,27 (s, 3H);
de 3,28 a 3,31 (m, 4H); 3,58 (m, 2H); 3,64 (m, 2H); 6,83 (dd, J =
4,5 y 9,0 Hz, 2H); de 6,98 a 7,06 (m, 4H); 7,98 (d, J = 8,5 Hz, 2H);
8,21 (s ancho, 1 H); 10,7 (s, 1 H); 10,9 (m extendido, 1 H); 12,9
(m extendido, 1 H).
\vskip1.000000\baselineskip
La
N-(4-Fluoro-fenil)-N-(2-metoxi-etil)-hidrazina
se prepara siguiendo el ejemplo 28.
0,57 g (60%). Rf = 0,10 (AcOEt/heptano 20/80
(v/v)), LC/MS RT = 4,18, MH 183,3.
\vskip1.000000\baselineskip
La
N'-Bencidriliden-N-(4-fluoro-fenil)-N-(2-metoxi-etil)-hidrazina
se prepara siguiendo el ejemplo 28.
1,2 g (66%). Rf = 0,26 (AcOEt/heptano 10/90
(v/v)). La
N-bencidriliden-N'-(4-fluoro-fenil)-hidrazina
se describe en el ejemplo 37.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
39
La
N-[5-(N'-etil-N'-o-tolil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida
se prepara siguiendo el ejemplo 28. Rdt = 14%; MS: ES m/z=518 MH+
pico base. RMN ^{1}H (400 MHz, (CD_{3})_{2}SO d_{6},
\delta en ppm): 1,15 (t, J = 7,0 Hz, 3H); 2,23 (s, 3H); 2,29 (s,
3H); 2,44 (m, 4H); de 3,23 a 3,33 (m parcialmente enmascarado, 6H);
6,96 (t, J = 7,5 Hz, 1H); 7,00 (d, J = 9,0 Hz, 2H); de 7,12 a 7,17
(m, 2H); 7,29 (d, J=8,0 Hz, 1 H); 7,98 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 8,12 (s,
1 H); 10,2 (s, 1H); 11,0 (m extendido, 1 H); 12,9 (m muy extendido,
1H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
40
La
N-[5-(N'-etil-N'-m-tolil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida
se prepara siguiendo el ejemplo 28. Rdt = 18%. MS: ES m/z=518 MH+
pico base. RMN ^{1}H (400 MHz, (CD_{3})_{2}SO d_{6},
\delta en ppm): observación de una mezcla de rotámeros 80%-20%:
1,16 (t, J = 7,0 Hz, 3H); 2,22 (s, 3H); 2,24 (s, 2,4H); 2,28 (s,
0,6H); 2,44 (m, 4H); de 3,25 a 3,35 (m enmascarado, 4H); 3,52 (q,
J=7,0 Hz, 2H); 6,57 (d, J = 7,5 Hz, 0,8H); de 6,59 a 6,66 (m, 1,
6H); 6,73 (d, J = 7,5 Hz, 0,2H); de 6,81 a 6,87 (m, 0,4H); 7,00 (d,
J = 9,0 Hz, 2H); 7,08 (t, J = 7,5 Hz, 0,8H); 7,17 (t, J = 7,5 Hz,
0,2H); 7,99 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 8,16 (s, 0,2H); 8,22 (0,8H); 9,62
(m extendido, 0,2H); 10,5 (s, 0,8H); 11,1 (m extendido, 1H); 12,9
(m extendido, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
41
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
La
N-[5-(N'-etil-N'-m-tolil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida
se prepara siguiendo el ejemplo 28. Rdt = 3%. SM: ES m/z=518 MH+
pico base. RMN ^{1}H (400 MHz, (CD_{3})_{2}SO d_{6},
\delta en ppm): 1,15 (t, J = 7,0 Hz, 3H); 2,20 (s, 3H); 2,23 (s,
3H); 2,45 (m, 4H); de 3,20 a 3,41 (m enmascarado, 4H); 3,49 (q,
J=7,0 Hz, 2H); 6,73 (d, J = 9,0 Hz, 2H); de 6,96 a 7,04 (m, 4H);
7,99 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 8,21 (s, 1 H); 10,45 (s, 1 H); 11,25 (m
extendido, 1 H); 13,1 (m extendido, 1 H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
42
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
La
N-{5-[N'-(4-fluoro-fenil)-N'-isobutil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida
se prepara siguiendo el ejemplo 28. Rdt = 59%, SM: ES m/z=550 MH+
pico base. RMN ^{1}H (400 MHz, (CD_{3})_{2}SO d_{6},
\delta en ppm): 0,97 (d, J = 6,5 Hz, 6H); 1,91 (m, 1H); 2,22 (s,
3H); 2,44 (m, 4H); de 3,24 a 3,34 (m parcialmente enmascarado, 6H);
6,81 (dd, J = 4,5 y 9,0 Hz, 2H); de 6,98 a 7,06 (m, 4H); 7,98 (d, J
= 9,0 Hz, 2H); 8,21 (s, 1 H); 10,6 (s, 1 H); 11,0 (m extendido, 1
H); 13,0 (m extendido, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
La
N-(4-Fluoro-fenil)-N-isobutil-hidrazina
se prepara siguiendo el ejemplo 28.
Aceite incoloro, 0,62 g (82%). Rf = 0,34
(AcOEt/heptano 20/80 (v/v)), LC/MS RT = 2,48 min.
\vskip1.000000\baselineskip
La
N'-Bencidriliden-N-(4-fluoro-fenil)-N-isobutil-hidrazina
se prepara siguiendo el ejemplo 28.
Sólido amarillo, 1,51 g (44%). Rf= 0,52
(acetona/heptano 3/97 (v/v)), LC/MS RT= 6,03 min., sin ionización.
La
N-bencidriliden-N'-(4-fluoro-fenil)-hidrazina
se describe en el ejemplo 37.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
43
La
N-{5-[N'-(3-bromo-fenil)-N'-etil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il)-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida
se prepara siguiendo el ejemplo 28. Rdt = 5%. SM: ES m/z=582 MH+
pico base. RMN ^{1}H (400 MHz, (CD_{3})_{2}SO d_{6},
\delta en ppm): 1,16 (t, J = 7,0 Hz, 3H); 2,22 (s, 3H); 2,44 (m,
4H); de 3,26 a 3,34 (m parcialmente enmascarado, 4H); 3,54 (q, J =
7,0 Hz, 2H); 6,82 (dd, J=2,0 y 8,0 Hz, 1 H); 6,89 (dd, J = 2,0 y 8,0
Hz, 1H); 6,92 (t, J = 2,5 Hz, 1 H); 7,01 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 7,16
(t, J = 8,5 Hz, 1H); 7,98 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 8,24 (s, 1H); 10,7
(s, 1H); 10,95 (m extendido, 1H); 12,95 (m extendido, 1 H).
\vskip1.000000\baselineskip
La
N-(3-Bromo-fenil)-N-etil-hidrazina
se prepara siguiendo el ejemplo 28. Aceite incoloro, 2,80 g,
cuantitativo. LC/MS RT = 2,70.
\vskip1.000000\baselineskip
La
N'-Bencidriliden-N-(3-bromo-fenil)-N-etil-hidrazina
se prepara siguiendo el ejemplo 28.
Sólido naranja, 13,5 g (80%). Rf = 0,46
(Et_{2}O/heptano 3/97 (v/v)).
\vskip1.000000\baselineskip
En un matraz de 250 mL, se pone el hidrocloruro
de
(3-bromo-fenil)-hidrazina
(10 g, 44 mmoles, 1 eq), benzofenona (8,14 g, 44 mmoles, 1eq), y
etanol (100 mL). Se añaden 2 mL de ácido sulfúrico concentrado. La
suspensión resultante se calienta a una temperatura cercana a 80ºC.
Después de 30 min a esta temperatura, la suspensión se convierte en
una disolución. Se agita a esta temperatura durante 18 horas, y se
concentra la disolución al 95%. El resto se diluye con acetato de
etilo y se lava con una disolución de hidrógenocarbonato de sodio.
Después de secar sobre sulfato de magnesio, la disolución se
concentra y el resto se purifica mediante cromatografía en una
columna de gel de sílice utilizando como eluyente una mezcla
éter/heptano (3/97 en volúmenes). Se obtienen así 15 g (95%) de
N-bencidriliden-N'-(3-bromo-fenil)-hidrazina.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
44
\vskip1.000000\baselineskip
La
6-(4-metil-[1,4]diazepan-1-il)-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-nicotinamida
se prepara siguiendo el ejemplo 28. MS: ES m/z=505 MH+ pico base.
RMN ^{1}H (400 MHz, (CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta
en ppm): 1,89 (m, 2H); 2,26 (s, 3H); 2,47 (m parcialmente
enmascarado, 2H); 2,61 (m, 2H); 3,17 (s, 3H); 3,67 (t, J = 6,0 Hz,
2H); 3,80 (m, 2H); 6,71 (d, J=9,0 Hz, 1 H); 6,76 (t, J = 7,5 Hz,
1H); 6,82 (d, J = 8,0 Hz, 2H); 7,22 (m, 2H); 8,15 (dd parcialmente
enmascarado, J = 2,5 y 9,0 Hz, 1H); 8,16 (s, 1H); 8,80 (d, J=2,5
Hz, 1 H); 10,75 (s, 1 H); 11,0 (m extendido, 1 H); 12,9 (m,
extendido, 1 H).
\vskip1.000000\baselineskip
En un matraz de 100 mL, se introducen
4-fluorobenzonitrilo (5 g, 41 mmoles, 1 eq) y 35 mL
de dimetilformamida. A esta disolución, se añade
N-metil homopiperazina (5,18 g, 45 mmoles, 1,1 eq).
La disolución se calienta a una temperatura cercana a 90ºC durante
36 horas, y el disolvente se evapora a sequedad. El resto se diluye
con 150 mL de acetato de etilo y 30 mL de agua. La fase acuosa se
extrae con acetato de etilo y las fases orgánicas juntas se secan
sobre sulfato de magnesio. Después de evaporar, se purifica el
aceite residual mediante cromatografía en una columna de gel de
sílice utilizando como eluyente un gradiente 0
- 10% metanol/diclorometano (Rf = 0,2,
metanol/diclorometano 10/90 (v/v)). El
4-(4-metil-[1,4]diazepan-1-il)-benzonitrilo
(sólido amarillo) se pone directamente en una mezcla de 20 mL de
ácido sulfúrico al 98% y de 2 mL de agua. Esta disolución naranja
se calienta a una temperatura cercana a 100ºC durante 18 horas, se
enfría y se hidroliza vertiéndola sobre hielo. El pH se ajusta a
9-10 con sosa en pastillas. El precipitado amarillo
obtenido se filtra y se lava abundantemente con agua y se seca en
vacío. Se obtiene así
4-(4-metil-[1,4]diazepan-1-il)-benzamida
(3,7 g, 38%) en forma de un sólido amarillo que se utiliza
directamente en la etapa siguiente.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
45
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
En un matraz de 5 mL seco bajo argón, se pone
N-(5-hidrazinocarbonil-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il)-4-(4-metil-piperazin-1-il)benzamida
(0,150 g, 0,318 mmoles, 1 eq), etanol (1 mL) y con jeringa
benzaldehído (0,048 mL, 0,47 mmoles, 1,3 eq). Se añaden a la
suspensión dos gotas de ácido clorhídrico 5N. La mezcla de reacción
se agita a una temperatura cercana a 50ºC durante 3 horas, el
disolvente se evapora y el resto se pone directamente en una columna
de gel de sílice neutralizada. La elución se realiza con una mezcla
metanol/diclorometano (10/90 en volúmenes). El producto obtenido se
añade directamente a una mezcla de 1 mL de tetrahidrofurano y 0,5 mL
de ácido clorhídrico 5N. El precipitado obtenido se filtra, se lava
con agua y se seca. La
N-[5-(benciliden-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida
se obtiene en forma de un sólido blanco (0,029 g, 16%). MS: ES
m/z=488 MH+ pico base. RMN ^{1}H (400 MHz,
(CD_{3})_{2}SO de, \delta en ppm): 2,53 (s parcialmente
enmascarado, 3H); 2,87 (m, 4H); 3,47 (m, 4H); 7,03 (d, J = 9,0 Hz,
2H); de 7,39 a 7,49 (m, 3H); 7,79 (d, J = 7,5 Hz, 2H); 8,01 (d, J =
9,0 Hz, 2H); 8,28 (s, 1 H); 8,39 (s, 1 H).
\vskip1.000000\baselineskip
En un matraz de 15 mL, se introducen
3-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzoilamino]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-5-carboxilato
de etilo (0,5 g, 1,03 mmoles, 1 eq), etanol (2 mL) y se añade una
disolución 1 M de hidrazina (3,09 mL, 3,09 mmoles) así como 2 mL de
hidrazina monohidrato. La mezcla de reacción se agita a reflujo
durante 5 horas, el disolvente se evapora y el resto se recoge en
agua. El precipitado blanco se filtra, se lava con agua y se seca a
una temperatura cercana a 80ºC en vacío. Se obtiene así
N-(5-hidrazinocarbonil-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il)-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida
(0,15 g, 49%), Rf = 0,32 (metanol/diclorometano 10/90 (v/v)), que
se utiliza directamente en la etapa siguiente. El
3-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzoilamino]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-5-carboxilato
de etilo puede obtenerse por desprotección de
1-(1-etoxi-etil)-3-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzoilamino]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-5-carboxilato
de etilo según el ejemplo 28.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
46
La
N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(2-morfolin-4-il-etoxi)-benzamida
se prepara siguiendo el ejemplo 28. (intermedio etoxietilo: LC/MS
RT = 3,10 min., MH+ 593,5). La purificación del intermedio se
realiza en gel de sílice utilizando como eluyente una mezcla
metanol/diclorometano (10/90 en volúmenes). El tratamiento de la
etapa de desprotección se efectúa de la manera siguiente: la mezcla
de reacción se trata con agua y se extrae con 5 mL de acetato de
etilo. La fase acuosa se basifica con sosa 5N y se extrae de nuevo
con acetato de etilo (2 x 5 mL). Esta fase orgánica se seca sobre
sulfato de magnesio y se concentra a sequedad. El sólido amarillo
obtenido se tritura con heptano. Después de filtrar el sólido, éste
se seca en vacío para proporcionar
N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(2-morfolin-4-il-etoxi)-benzamida,
0,192 g (40% para dos etapas). SM: ES m/z=521 MH+ pico base. RMN
^{1}H (400 MHz, (CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en
ppm): 2,48 (m parcialmente enmascarado, 4H); 2,72 (t, J = 6,0 Hz,
2H); 3,17 (s, 3H); 3,58 (m, 4H); 4,18 (t, J = 6,0 Hz, 2H); 6,76 (t,
J = 7,5 Hz, 1H); 6,82 (d, J = 8,5 Hz, 2H); de 7,00 a 7,10 (m, 3H);
7,22 (t ancho, J = 8,0 Hz, 2H); 8,05 (d ancho, J = 8,5 Hz, 2H); 8,16
(s ancho, 1 H); 10,75 (s ancho, 1 H); 10,9 (m muy extendido, 1 H);
12,9 (m muy extendido, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
En un matraz de 250 mL, se introducen carbonato
de potasio (15,1 g, 109 mmoles, 3 eq), acetonitrilo (73 mL) y
4-hidroxi-benzamida (5 g, 36,5
mmoles, 1 eq). La suspensión se agita durante 30 min antes de la
adición del hidrocloruro de
4-(2-cloro-etil)-morfolina
(8,82 g, 47 mmoles, 1,3 eq). A esta suspensión se añaden 10 mL de
dimetilformamida y la mezcla se agita a una temperatura cercana a
40ºC durante 16 horas. Se evapora el disolvente, se diluye con agua
y se extrae con diclorometano. La fase acuosa se acidifica con ácido
clorhídrico 5N y se vuelve a extraer con diclorometano. Los fases
orgánicas se combinan, se secan sobre sulfato de magnesio, y se
concentran a sequedad en vacío. Se obtiene así
4-(2-morfolin-4-il-etoxi)-benzamida
2,17 g (23%) en forma de un sólido blanco que se utiliza
directamente en la etapa siguiente.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
47
La
4-(4-metil-[1,4]diazepan-1-il)-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida
se prepara siguiendo el ejemplo 28. SM: IE m/z=503 M+. m/z=382 (M
- C7H9N2)+ m/z=217 C12H15N3O+. pico base. RMN
^{1}H (400 MHz, (CD_{3})_{2}SO d_{6}, \delta en
ppm): 1,90 (m, 2H); 2,26 (s, 3H); 2,45 (m, 2H); 2,62 (m, 2H); 3,17
(s, 3H); 3,52 (t, J = 6,0 Hz, 2H); 3,59 (m, 2H); de 6,73 a 6,79 (m,
3H); 6,82 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,21 (t, J = 7;5 Hz, 2H); 7,94 (d,
J = 8,5 Hz, 2H); 8,16 (s, 1 H); 10,7 (s, 1 H); 10,8 (m extendido, 1
H); 12,9 (m extendido, 1 H). La
4-(4-metil-[1,4]diazepan-1-il)-benzamida
se describe en el ejemplo 44.
\vskip1.000000\baselineskip
Los análisis LC/MS se realizaron utilizando un
instrumento Micromass modelo LCT conectado a un instrumento HP
1100. La abundancia de los productos se midió mediante un detector
de red de diodos HP G1315A en un intervalo de longitud de onda de
200-600 nm y un detector para la dispersión de la
luz Sedex 65. La adquisición de los espectros de masas se realizó
en un intervalo de 180 a 800 unidades de masa atómica. Los datos se
analizaron utilizando el programa Micromass MassLynx. La separación
se efectuó en una columna Hypersil Gold de Thermo C18, 50x3 mm,
partículas de 3 \mum eluyendo con un gradiente lineal de 5 a 95%
de acetonitrilo que contiene 0,1% (v/v) de ácido fórmico en agua
que contiene 0,1% (v/v) de ácido fórmico en 5 min con un caudal de
0,8 mL/min. El tiempo total de análisis, incluyendo el periodo de
reequilibrio de la columna, es de 7 min. Los espectros de MS se
realizaron mediante electropulverización (ES^{+/}ES^{-}) en un
instrumento Platform II (Micromass). Se describen los principales
iones observados.
\vskip1.000000\baselineskip
Los productos pueden purificarse por LC/MS
utilizando un sistema Waters FractionsLynx compuesto por una bomba
de gradiente Waters modelo 600, una bomba de regeneración Waters
modelo 515, una bomba de dilución Waters Reagent Manager, un
inyector automático Waters modelo 2700, dos válvulas Rheodyne modelo
LabPro, un detector de red de diodos Waters modelo 996, un
espectrómetro de masas Waters modelo ZMD y un colector de fracciones
Gilson modelo 204. El sistema está controlado por el programa
informático Waters FractionLynx. Antes de la purificación, las
muestras se preparan de la manera siguiente: cada muestra se
solubiliza en dimetilsulfóxido a una concentración cercana a 60
mg/mL y se inyecta a razón de 1 mL por inyección.
\vskip1.000000\baselineskip
Método
A
La separación se efectúa alternativamente en dos
columnas Waters Symmetry (C_{18}, 5 \muM, 19 x 50 mm), estando
una columna en curso de regeneración mediante una mezcla
agua/acetonitrilo 95/5 (v/v) que contiene 0,07% (v/v) de ácido
trifluoroacético, mientras que la otra columna estaba en curso de
separación. La elución de las columnas se realiza utilizando un
gradiente lineal en 11 minutos de 20 a 95% de acetonitrilo que
contiene 0,07% (v/v) de ácido trifluoroacético en agua que contiene
0,07% (v/v) de ácido trifluoroacético, con un caudal de 10 mL/min.
A la salida de la columna de separación el flujo del disolvente se
divide por un sistema LC Packing Accurate: una milésima del
efluente se diluye con metanol con un caudal de 0,5 mL/mn y se
envía hacia los detectores, a razón de 75% hacia el detector de red
de diodos y los 25% restantes hacia el espectrómetro de masa. El
resto del efluente (999/1.000) se envía hacia el colector de
fracciones donde se elimina el flujo mientras que la masa del
producto esperado no se detecte por el programa FractionLynx. Se
proporcionan las fórmulas moleculares de los productos esperados al
programa FractionLynx que pone en marcha la recogida del producto
cuando la señal de masa detectada corresponde al ión
[M+H]^{+} y/o al [M+Na]^{+}. En ciertos casos,
dependiendo de los resultados analíticos por LC/MS, cuando se ha
detectado un ión intenso correspondiente a [M+2H]^{++}, se
proporciona también al programa FractionLynx el valor
correspondiente a la mitad de la masa molecular calculada (PM/2).
En estas condiciones, también se pone en marcha la recogida cuando
se detectan la señal de masa del ión [M+2H]^{++} y/o
[M+Na+H]^{++}. Los productos se recogen en tubos de vidrio
tarados. Tras ser recogidos, se evaporan los disolventes en
evaporadores centrífugos Savant AES 2000 o Genevac HT8 y las masas
de los productos se determinan pesando los tubos tras la evaporación
de los disolventes. Alternativamente, los disolventes se evaporan a
sequedad en un evaporador giratorio en vacío (2 kPa) a una
temperatura cercana a 40ºC. Cada producto obtenido se analiza por
LC/MS.
\vskip1.000000\baselineskip
Método
A'
La separación se efectúa de la misma manera que
el método A, la elución de las columnas se efectúa con un gradiente
lineal en 11 minutos de 5 a 95% de acetonitrilo que contiene 0,07%
(v/v) de ácido trifluoroacético en agua que contiene 0,07% (v/v) de
ácido trifluoroacético, con un caudal de 10 mL/min.
\vskip1.000000\baselineskip
Método
B
La separación se efectúa en una columna Waters
SunFire (C_{18}, 5 \muM, 30x100 mm), La elución se realiza
utilizando un gradiente lineal en 11 minutos de 5 a 95% de
acetonitrilo que contiene 0,07% (v/v) de ácido trifluoroacético en
agua que contiene 0,07% (v/v) de ácido trifluoroacético, con un
caudal de 30 mL/min. A la salida de la columna de separación, el
flujo del disolvente se divide por un sistema LC Packing Accurate:
una diezmilésima del efluente se diluye con metanol con un caudal de
1 mL/mn y se envía hacia los detectores, a razón de 75% hacia el
detector de red de diodos, y los 25% restantes hacia el
espectrómetro de masa. El resto del efluente (9.999/10.000) se
envía hacia el colector de fracciones donde se elimina el flujo
mientras que la masa del producto esperado no se detecte por el
programa FractionLynx. Se proporcionan las fórmulas moleculares de
los productos esperados al programa FractionLynx que pone en marcha
la recogida del producto cuando la señal de masa detectada
corresponde al ión [M+H]^{+} y/o al [M+Na]^{+}. En
ciertos casos, dependiendo de los resultados de LC/MS analítica,
cuando se ha detectado un ión intenso correspondiente a
[M+2H]^{++}, se proporciona también al programa
FractionLynx el valor correspondiente a la mitad de la masa
molecular calculada (PM/2). En estas condiciones, también se pone en
marcha la recogida cuando se detectan la señal de masa del ión
[M+2H]^{++} y/o [M+Na+H]^{++}. Los productos se
recogen en tubos de vidrio. Después de la recogida, los disolventes
se evaporan, en un evaporador centrífugo Jouan RC1010.
Alternativamente, los disolventes se evaporan a sequedad en un
evaporador giratorio en vacío (2 kPa) a una temperatura cercana a
40ºC. Cada producto obtenido se analiza por LC/MS.
Los restos secos se recogen con metanol y se
evaporan de nuevo dando lugar a los productos secos en forma de
polvo.
\vskip1.000000\baselineskip
Método
B'
La separación se efectúa de la misma manera que
el método B, la elución de las columnas se efectúa con un gradiente
lineal en 11 minutos de 10 a 95% de acetonitrilo que contiene 0,07%
(v/v) de ácido trifluoroacético en agua que contiene 0,07% (v/v) de
ácido trifluoroacético, con un caudal de 30 mL/min.
Los productos según la invención pueden estar en
forma no quiral, o racémica, o enriquecida en un estereoisómero, o
enriquecida en un enantiómero; y opcionalmente pueden estar
salificados.
Un producto según la invención podrá utilizarse
para la fabricación de un medicamento útil para tratar un estado
patológico, en particular un cáncer.
La presente invención también se refiere a las
composiciones terapéuticas que contienen un compuesto según la
invención, en asociación con un excipiente farmacéuticamente
aceptable según el modo de administración elegido. La composición
farmacéutica puede presentarse en forma sólida, líquida o de
liposomas.
Entre las composiciones sólidas pueden citarse
los polvos, las cápsulas, los comprimidos. Entre las formas orales
también se pueden incluir las formas sólidas protegidas frente al
medio ácido del estómago. Los soportes utilizados para las formas
sólidas están constituidos principalmente por soportes minerales
como fosfatos, carbonatos o soportes orgánicos como lactosa,
celulosas, almidón o polímeros. Las formas líquidas están
constituidas por disoluciones, suspensiones o dispersiones.
Contienen como soporte dispersivo bien agua, bien un disolvente
orgánico (etanol, NMP u otros) o mezclas de agentes tensioactivos y
disolventes o de agentes complejantes y disolventes.
Las formas líquidas serán preferentemente
inyectables y, por ello, tendrán una formulación aceptable para
dicha utilización.
Las vías aceptables de administración por
inyección incluyen las vías intravenosa, intraperitoneal,
intramuscular y subcutánea, prefiriéndose la vía intravenosa.
La dosis administrada de los compuestos de la
invención será adaptada por el medico en función de la vía de
administración del paciente y del estado de este último.
\vskip1.000000\baselineskip
Los compuestos de la presente invención pueden
administrarse solos o mezclados con otros compuestos anticancerosos.
Entre las posibles asociaciones se pueden citar:
- \bullet
- los agentes alquilantes y principalmente ciclofosfamida, melfalán, ifosfamida, clorambucilo, busulfán, tiotepa, prednimustina, carmustina, lomustina, semustina, esteptozotocina, decarbazina, temozolomida, procarbazina y hexametilmelamina
- \bullet
- los derivados del platino como principalmente cisplatino, carboplatino u oxaliplatino
- \bullet
- los agentes antibióticos como principalmente bleomicina, mitomicina, dactinomicina
- \bullet
- los agentes antimicrotubulares como principalmente vinblastina, vincristina, vindesina, vinorelbina, taxoides (paclitaxel y docetaxel)
- \bullet
- las antraciclinas como principalmente doxorrubicina, daunorrubicina, idarrubicina, epirrubicina, mitoxantrona, losoxantrona
- \bullet
- los agentes inhibidores de las topoisomerasas de los grupos I y II tales como etopósido, tenipósido, amsacrina, irinotecán, topotecán y tomudex
- \bullet
- las fluoropirimidinas tales como 5-fluorouracilo, UFT, floxuridina
- \bullet
- los análogos de citidina tales como la 5-azacitidina, citarabina, gemcitabina, 6-mercaptomurina, 6-tioguanina
- \bullet
- los análogos de adenosina tales como pentostatina, citarabina o fosfato de fludarabina
- \bullet
- el metotrexato y el ácido folínico
- \bullet
- las enzimas y diversos compuestos tales como L-asparaginasa, hidroxiurea, ácido trans-retinoico, suramina, dexrazoxano, amifostina, herceptina así como las hormonas estrógenas, andrógenas
- \bullet
- los agentes antivasculares tales como los derivados de combretastatina o de colchicina y sus profármacos.
\vskip1.000000\baselineskip
Es posible igualmente asociar a los compuestos
de la presente invención un tratamiento con radiaciones. Estos
tratamientos se pueden administrar de manera simultánea, separada o
secuencial. El médico adaptará el tratamiento en función de la
enfermedad a tratar.
La progresión del ciclo celular está dirigida
frecuentemente por las quinasas dependientes de ciclina (CDK) que
se activan por una interacción con proteínas que pertenecen a la
familia de las ciclinas, activación que termina por la
fosforilación de sustratos y finalmente por la división celular.
Además, los inhibidores endógenos de las CDK que se activan
(familia de INK4 y de KIP/CIP) regulan de manera negativa la
actividad de las CDK. El crecimiento de las células normales se
debe a un equilibrio entre los activadores de las CDK (las ciclinas)
y los inhibidores endógenos de las CDK. En numerosos tipos de
cánceres, se ha descrito la expresión o la actividad aberrante de
varios de estos reguladores del ciclo celular.
La ciclina E activa la quinasa Cdk2 que actúa
entonces para fosforilar la proteína pRb (proteína del
retinoblastoma) que resulta en una acción en la división celular
irreversible y una transición hacia la fase S (PL Toogood,
Medicinal Research Reviews (2001), 21(6);
487-498. La quinasa CDK2 y puede que CDK3 son
necesarias para la progresión en la fase G1 y la entrada en la fase
S. Durante la formación del complejo con la ciclina E, mantienen la
hiperfosforilación de pRb para facilitar la progresión de la fase G1
a la fase S. En los complejos con la Ciclina A, CDK2 juega un papel
en la inactivación de E2F y es necesaria para la realización de la
fase S (TD. Davies et al. (2001) Structure 9,
389-3).
El complejo CDK1/ciclina B regula la progresión
del ciclo celular entre la fase G2 y la fase M. La regulación
negativa del complejo CDK/Ciclina B impide a las células normales
entrar en la fase S hasta que la fase G2 se haya completado
correctamente y completamente. (K.K. Roy y E.A. Sausville Current
Pharmaceutical Design, 2001, 7,1669-1687.
Existe un nivel de regulación de la actividad de
las CDK. Los activadores de quinasas dependientes de ciclina (CAK)
tienen una acción positiva de regulación de las CDK. CAK fosforila
las CDK en el resto treonina para rendir la enzima diana totalmente
activa.
La presencia de defectos en las moléculas que
intervienen en el ciclo celular supone la activación de las CDK y
la progresión del ciclo, siendo normal querer inhibir la actividad
de las enzimas CDK para bloquear el crecimiento celular de las
células cancerosas.
Numerosas proteínas implicadas en la segregación
de los cromosomas y en el ensamblaje del huso se han identificado
en la levadura y en drosophila. La desorganización de estas
proteínas conduce a la no segregación de los cromosomas y a husos
monopolares o desorganizados. Entre estas proteínas, determinadas
quinasas, como Aurora y Ipl1, que provienen respectivamente
de drosophila y de S. cerevisiae, son necesarias para la
segregación de los cromosomas y la separación del centrosoma. Un
análogo humano de Ipl1 de levadura se ha clonado y caracterizado
recientemente por diferentes laboratorios. Esta quinasa, denominada
Aurora 2, STK15 o BTAK pertenece a la familia de las quinasas de
serina/treonina. Bischoff et al. han mostrado que Aurora 2 es
un oncogén, y que está amplificada en los cánceres colorrectales
humanos (EMBO J, 1998, 17, 3052-3065). Ésta también
se ha ejemplificado en los cánceres que implican tumores
epiteliales tales como cáncer de mama.
Tie-2 (TEK) es un miembro
de una familia de receptores con tirosina quinasa, específico de las
células endoteliales. Tie2 es el primer receptor con actividad
tirosina quinasa del que se conoce a la vez el agonista
(angiopoyetina 1 o Ang1) que estimula la autofosforilación del
receptor y la señalización celular [S.
Davis et al (1996) Cell 87,
1161-1169] y el antagonista (angiopoyetina 2
o Ang2) [P.C. Maisonpierre et al. (1997) Science 277,
55-60]. La angiopoyetina 1 puede tener un efecto
sinérgico con VEGF en los últimos estadios de la
neo-angiogénesis [AsaharaT. Circ. Res.(1998)
233-240]. Los experimentos de inactivación génica y
las manipulaciones transgénicas de la expresión de Tie2 o de Ang1
dan lugar a animales que presentan defectos en la vascularización
[D.J. Dumont et al (1994) Genes Dev. 8,
1897-1909 y C. Suri (1996) Cell 87,
1171-1180]. La unión de Ang1 a su receptor
da lugar a la autofosforilación del dominio quinasa de Tie2 que es
esencial para la neovascularización así como para el reclutamiento
y la interacción de los vasos con los pericitos y las células
musculares lisas; estos fenómenos contribuyen a la maduración y a la
estabilidad de los vasos recién formados [P.C. Maisonpierre et
al (1997) Science 277, 55-60]. Lin et
al (1997) J. Clin. invest. 100, 8: 2072-2078
y Lin P. (1998) PNAS 95, 8829-8834, han
mostrado una inhibición del crecimiento y de la vascularización
tumoral, así como una disminución de las metástasis de pulmón,
durante las infecciones adenovirales o inyecciones del dominio
extracelular de Tie-2 (Tek) en modelos de
xenoinjertos de tumor de mama y melanoma.
Los inhibidores de Tie2 se pueden utilizar en
situaciones en las que se produce una neovascularización de manera
inapropiada (es decir, en retinopatía diabética, inflamación
crónica, psoriasis, sarcoma de Kaposi, neovascularización crónica
debida a degeneración macular, artritis reumatoide, hemoangioma
infantil y cánceres).
FAK es una tirosina quinasa
citoplasmática que juega un papel importante en la transducción de
la señal transmitida por las integrinas, familia de receptores
heterodiméricos de la adhesión celular. FAK y las integrinas se
colocalizan en estructuras de la perimembrana denominadas placas de
adherencia. Se ha mostrado en numerosos tipos celulares que la
activación de FAK así como su fosforilación en restos tirosina y en
particular su autofosforilación en la tirosina 397, eran
dependientes de la unión de las integrinas a sus ligandos
extracelulares y, por lo tanto, inducidas durante la adhesión
celular [Kornberg L, et al. J. Biol. Chem. 267(33):
23439-442, (1992)]. La autofosforilación en la
tirosina 397 de FAK representa un lugar de unión para otra tirosina
quinasa, Src, mediante su dominio SH2 [Schaller et al. Mol.
Cell. Biol. 14:1680-1688. 1994; Xing et al.
Mol. Cell. Biol. 5:413-421. 1994]. Src puede
entonces fosforilar FAK en la tirosina 925, incorporando así la
proteína adaptadora Grb2 e induciendo en determinadas células la
activación de la vía ras y MAP Quinasa implicada en el control de
la proliferación celular [Schlaepfer et al. Nature; 372:
786-791. 1994; Schlaepfer et al. Prog.
Biophy. Mol. Biol. 71:435-478. 1999; Schlaepfer y
Hunter, J. Biol. Chem. 272:13189-13195. 1997]. La
activación de FAK también puede inducir la vía de señalización jun
quinasa NH2-terminal (JNK) y resultar en la
progresión de las células hacia la fase G1 del ciclo celular [Oktay
et al., J. Cell. Biol.145:1461-1469. 1999].
La fosfatidilinositol 3-OH-quinasa
(PI3-quinasa) se une también a FAK en la tirosina
397 y esta interacción podría ser necesaria para la activación de
la PI3-quinasa [Chen y Guan, Proc. Nat. Acad. Sci.
USA. 91: 10148-10152, 1994; Ling et al. J.
Cell. Biochem. 73:533-544. 1999]. El complejo
FAK/Src fosforila diferentes sustratos como la paxilina y p130CAS
en los fibroblastos [Vuori et al. Mol. Cell. Biol. 16:
2606-2613, 1996].
Los resultados de numerosos estudios sostienen
la hipótesis de que los inhibidores de FAK podrían ser útiles en el
tratamiento del cáncer. Los estudios han sugerido que FAK puede
jugar un papel importante en la proliferación y/o la supervivencia
celular in vitro. Por ejemplo, en las células CHO, algunos
autores han demostrado que la sobreexpresión de p125FAK da lugar a
una aceleración de la transición G1 a S, sugiriendo que p125FAK
favorece la proliferación celular [Zhao J.-H et al. J. Cell
Biol.143:1997-2008. 1998]. Otros autores han
mostrado que las células tumorales tratadas con oligonucleótidos
anti-sentido de FAK pierden su adhesión y entran en
apoptosis (Xu et al, Cell Growth Differ.
4:413-418. 1996). También se ha demostrado que FAK
promueve la migración de las células in vitro. Así, los
fibroblastos deficientes en la expresión de FAK (ratón con
inactivación génica para FAK) presentan una morfología redondeada y
deficiencias en la migración celular en respuesta a señales
quimiotácticas y estos defectos se suprimen mediante una reexpresión
de FAK [D. J. Sieg et al., J. Cell Science. 112:
2677-91. 1999]. La sobreexpresión del dominio
C-terminal de FAK (FRNK) bloquea el estiramiento de
las células adherentes y reduce la migración celular in vitro
[Richardson A. y Parsons J. T. Nature. 380:
538-540. 1996]. La sobreexpresión de FAK en las
células CHO, COS o en células de astrocitoma humano favorece la
migración de las células. La implicación de FAK en la promoción de
la proliferación y de la migración de las células en numerosos
tipos celulares in vitro, sugiere el papel potencial de FAK
en los procesos neoplásicos. Un estudio reciente ha demostrado
efectivamente el aumento de la proliferación de las células
tumorales in vivo después de la inducción de la expresión de
FAK en células de astrocitoma humano [Cary L. A. et al. J.
Cell Sci. 109:1787-94. 1996; Wang D et al. J.
Cell Sci. 113:4221-4230. 2000]. Además, estudios
inmunohistoquímicos de biopsias humanas han demostrado que FAK
estaba sobreexpresada en los cánceres de próstata, mama, tiroides,
colon, melanoma, cerebro y pulmón, estando el nivel de expresión de
FAK directamente correlacionado con los tumores que presentan el
fenotipo más agresivo [Weiner T. M. et al. Lancet.
342(8878):1024-1025. 1993 Owens et
al. Cancer Research. 55: 2752-2755. 1995; Maung
K. et al. Oncogene. 18: 6824-6828. 1999; Wang
D et al. J. Cell Sci. 113:4221-4230.
2000].
KDR (Kinase Insert Domain Receptor),
también llamado VEGF-R2 (Vascular Endothelial Growth
Factor Receptor 2), se expresa únicamente en las células
endoteliales. Este receptor se fija al factor de crecimiento
angiogénico VEGF, y ejerce así de mediador de una señal
transduccional a través de la activación de su dominio quinasa
intracelular. La inhibición directa de la actividad quinasa de
VEGF-R2 permite reducir el fenómeno de angiogénesis
en presencia de VEGF exógeno (Vascular Endothelial Growth Factor:
factor de crecimiento vascular endotelial) (Strawn et al.,
Cancer Research, 1996, vol. 56, p.3540-3545). Este
proceso se ha demostrado principalmente mediante mutantes
VEGF-R2 (Millauer et al., Cancer Research,
1996, vol. 56, p.1615-1620). El receptor
VEGF-R2 no parece tener ninguna otra función en
adultos aparte de la vinculada a la actividad angiogénica de VEGF.
Consecuentemente, un inhibidor selectivo de la actividad quinasa de
VEGF-R2 debería demostrar poca toxicidad.
Además de este papel fundamental en el proceso
dinámico angiogénico, los resultados recientes sugieren que la
expresión de VEGF contribuye a la supervivencia de las células
tumorales después de la quimioterapia y de la radioterapia,
subrayando la sinergia potencial de los inhibidores de KDR con otros
agentes (Lee et al. Cancer Research, 2000, vol. 60,
p.5565-5570).
\vskip1.000000\baselineskip
El efecto inhibidor de los compuestos frente a
las quinasas Aurora 1 y Aurora 2 se determina mediante un ensayo
enzimático utilizando una detección de radiactividad.
La actividad quinasa de Aurora 1 y Aurora 2 se
evalúa mediante la fosforilación del sustrato
Numa-histidina en presencia de ATP marcado
radiactivamente ([^{33}P]ATP) utilizando placas de 96
pocillos Flash plate en las que el quelato de níquel está fijado a
la superficie de la microplaca. La cantidad de fosfato ^{33}P
incorporada al sustrato NuMA es proporcional a la actividad de la
enzima Aurora 1 o Aurora 2.
Las proteínas se producen en el laboratorio de
producción de proteínas del grupo
Sanofi-Aventis.
Aurora 1: complejo recombinante
Aurora-B/INCENP-C3, purificado hasta
aproximadamente el 50% cuyo extremo N-terminal de
Aurora-B se ha marcado con histidina.
Aurora 2: proteína recombinante completa que
comprende una cola de histidina en el extremo
N-terminal, se ha expresado en E. coli y se
ha purificado como máximo un 82%.
NuMA (proteína Nuclear que se asocia con el
aparato mitótico): fragmento de 424 aminoácidos, expresado en E.
coli cuyo extremo N-terminal se ha marcado con
histidina y se utilizó como sustrato para las dos enzimas
Aurora.
Las microplacas utilizadas son las placas
Flash-Plate, 96 pocillos, quelato de níquel (Perkin
Elmer, modelo SMP107).
Los productos a evaluar se incuban en un volumen
de reacción de 100 \mul por pocillo, en presencia de 10 nM de
Aurora 1 o Aurora 2, 500 nM de sustrato NuMA en un tampón compuesto
por 50 mM de Tris/HCl (pH 7,5), NaCl 50 mM, MgCl2 5 mM
(Aurora-B) o MgCl2 10 mM (Aurora-A)
y 1 mM de DTT, a 37ºC.
En cada pocillo, se distribuyen 80 \mul del
tampón de incubación enzima/sustrato y 10 \mul del producto a
evaluar, en concentraciones variables. La reacción se inicia
mediante la adición de 1 \muM de ATP final que contiene 0,2
\muCi de [^{33}P]ATP (10 \mul). Después de 30 minutos
de incubación, la reacción se para por la simple eliminación del
tampón de reacción y cada pocillo se lava dos veces con 300 \mul
de tampón Tris/HCl. La radiactividad se mide en cada pocillo
mediante un contador de centelleo, modelo Packard, Top count.
La actividad enzimática control de Aurora se
expresa en número de cuentas por minuto obtenido a los 30 minutos
después de restar el ruido de fondo (mezcla de reacción que no
contiene enzima). La evaluación de los diversos productos ensayados
se expresa en porcentaje de inhibición de la actividad Aurora
respecto al control.
Se utilizan dos baculovirus recombinantes que
contienen las secuencias humanas que codifican respectivamente CDK2
y la CiclinaE (ésta última contiene una etiqueta
hexa-histidina en el extremo C terminal) para
co-infectar células de insecto Sf21. Dos a tres
días después del inicio de la co-infección, las
células se recogen mediante centrifugación y se conservan a
-40ºC hasta su utilización. Después de descongelar y de
lisar las células mecánicamente, se purifica el complejo presente
en el sobrenadante del lisado mediante cromatografía de afinidad
sobre Níquel (IMAC), y se conserva a -80ºC.
Se utiliza un formato en placas de 96 pocillos
recubiertos con estreptavidina para ensayar la actividad de los
compuestos sobre la actividad quinasa de CDK2/Ciclina E.
Para realizar este ensayo, se solubiliza el
sustrato peptídico biotinilado, fragmento de la proteína pRb,
(biotinil-SACPLNLPLQNNHTAADMYLSPVRSPKKKGSTTR-OH),
a la concentración 1 mM en el tampón quinasa
(HEPES/NaOH 50 mM, NaCl 1 mM, MgCl_{2} 5 mM, pH 7,5) con el fin de constituir una disolución madre que se conserva a -20ºC en forma de alicuotas de 110 \mul. El día del experimento, se descongela una alicuota de esta disolución y se diluye en tampón quinasa que contiene 1 mM de Ditiotreitol y se añade inmediatamente tampón con el fin de obtener una concentración 14,3 \muM. Se añaden 70 \mul de esta disolución a cada pocillo de la Flashplate con el fin de obtener una concentración final del sustrato de 10 \muM cuando la reacción enzimática se realiza en un volumen final de medio de reacción de 100 \mul (véase a continuación).
(HEPES/NaOH 50 mM, NaCl 1 mM, MgCl_{2} 5 mM, pH 7,5) con el fin de constituir una disolución madre que se conserva a -20ºC en forma de alicuotas de 110 \mul. El día del experimento, se descongela una alicuota de esta disolución y se diluye en tampón quinasa que contiene 1 mM de Ditiotreitol y se añade inmediatamente tampón con el fin de obtener una concentración 14,3 \muM. Se añaden 70 \mul de esta disolución a cada pocillo de la Flashplate con el fin de obtener una concentración final del sustrato de 10 \muM cuando la reacción enzimática se realiza en un volumen final de medio de reacción de 100 \mul (véase a continuación).
Las diluciones intermedias de inhibidores
(productos de la invención) a diferentes concentraciones se preparan
en DMSO a partir de disoluciones madre 10 mM en tubos
independientes. De esta manera, se realizan diluciones 1.000
\muM, 333,3 \muM, 111,1 \muM, 37,03 \muM, 12,35 \muM, 4,11
\muM y 1,37 \muM. Se transfiere un \mul de cada una de estas
disoluciones (ó 1 \mul de DMSO para los controles) a los pocillos
de la placa de ensayo.
A cada pocillo, se añaden 19 \mul de una
disolución de una mezcla de trifosfato de adenosina (ATP) y
ATPy^{33}P en el tampón quinasa a la concentración 5,26 \muM de
ATP total y de 52,6 \muCi/ml de ^{33}P. La reacción enzimática
se inicia mediante la adición de 10 \mul por pocillo de una
disolución de CDK2/Ciclina E 200 nM en el tampón quinasa que
contiene 1 mM de ditiotreitol (ó 10 \mul de tampón quinasa que
contiene 1 mM de ditiotreitol para los blancos de la reacción).
Después de la adición de cada uno de los
reactivos, el volumen final de cada pocillo es 100 \mul, la
concentración final del sustrato es 10 \muM, las concentraciones
finales de los inhibidores son 10 \muM, 3,33 \muM, 1,11 \muM,
0,37 \muM, 0,123 \muM, 0,041 \muM y 0,014 \muM (según la
concentración de la dilución intermedia), la concentración final de
ATP es 1 \muM, la cantidad final de ^{33}P es 1 \muCi/pocillo,
y la concentración final del complejo CDK2/Ciclina E es 20 nM.
Después de la adición de todos los reactivos, la
placa de ensayo se incuba a 30ºC con agitación orbital a 650
rpm.
Cuando se termina la incubación, la placa se
lava tres veces con 300 \mul por pocillo de PBS (Phosphate
Buffered Saline, pH=7,4 sin calcio ni magnesio, referencia
10010-015, Gibco BRL). La incorporación de ^{33}P
en el péptido se cuantifica mediante contaje por centelleo con un
contador Packard Topcount.NXT. La actividad inhibidora de los
productos de la invención se evalúa midiendo la concentración del
inhibidor que produce una disminución de la actividad enzimática
del 50% (CI50).
La secuencia codificante de Tie2 humano que
corresponde a los aminoácidos del dominio intracelular
776-1124 se generó por PCR utilizando el ADNc
aislado de placenta humana como modelo. Esta secuencia se introdujo
en un vector de expresión baculovirus pFastBacGT en forma de
proteína de fusión GST.
El efecto inhibidor de las moléculas se
determina en un ensayo de fosforilación de PLC por Tie2 en presencia
de GST-Tie2 purificado hasta aproximadamente 80% de
homogeneidad. El sustrato se compone de los fragmentos
SH2-SH3 de la PLC expresada en forma de proteína de
fusión GST.
La actividad quinasa de Tie2 se mide en un
tampón MOPS 20 mM pH 7,2, que contiene MgCl_{2} 10 mM, MnCl_{2}
10 mM, DTT 1 mM, glicerofosfato 10 mM. En una placa de 96 pocillos
FlashPlate mantenida sobre hielo, se deposita una mezcla de
reacción compuesta por 70 \mul de tampón quinasa que contiene 100
ng de enzima GST-Tie2 por pocillo. A continuación,
se añaden 10 \mul de la molécula a ensayar diluida en DMSO a una
concentración de 10% como máximo. Para una concentración dada, cada
medida se efectúa por cuadruplicado. La reacción se inicia
añadiendo 20 \mul de disolución que contiene 2 \mug de
GST-PLC, 2 \muM de ATP frío y 1 \muCi de
^{33}P[ATP]. Después de 1 hora de incubación a 37ºC, la
reacción se detiene añadiendo 1 volumen (100 \mul) de EDTA 200
mM. Después de eliminar el tampón de incubación, los pocillos se
lavan tres veces con 300 \mul de PBS. La radiactividad se mide en
un MicroBeta1450 Wallac.
La inhibición de la actividad Tie2 se calcula y
expresa en porcentaje de inhibición respecto de la actividad
control determinada en ausencia de compuesto.
La actividad de los productos se determinó
midiendo la inhibición de la actividad de Aurora 1, Aurora 2, CDK2
y Tie2. Los resultados se proporcionan en la tabla 1, siguiente
(CI50, nM):
Claims (28)
1. Producto, caracterizado porque
responde a la fórmula general (I) siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
en la
que:
(i) R1 se selecciona independientemente del
grupo constituido por -NHCO(R2),
-NHCONH(R2), -NHCOO(R2), en el que R2 se selecciona
independientemente del grupo constituido por -H,
-alquilo(C_{1}-C_{24}),
-cicloalquilo(C_{3}-C_{9}),
-cicloalquileno(C_{3}-C_{9}), heterocicloalquilo, heterocicloalquileno, arilo, heteroarilo, -alquil(C_{1}-C_{4})-arilo, -alquil(C_{1}-C_{6})-heteroarilo, -aril-alquilo(C_{1}-C_{8}), -heteroaril-alquilo(C_{1}-C_{6}), sustituidos opcionalmente;
-cicloalquileno(C_{3}-C_{9}), heterocicloalquilo, heterocicloalquileno, arilo, heteroarilo, -alquil(C_{1}-C_{4})-arilo, -alquil(C_{1}-C_{6})-heteroarilo, -aril-alquilo(C_{1}-C_{8}), -heteroaril-alquilo(C_{1}-C_{6}), sustituidos opcionalmente;
(ii) Cada uno de R3, R4, y R5 se selecciona
independientemente del grupo constituido por -H,
-alquilo(C_{1}-C_{8}),
-alquil(C_{1}-C_{6})-arilo,
-alquil(C_{1}-C_{6})-heteroarilo,
-arilo, -heteroarilo, sustituidos opcionalmente,
o bien [(R3 y R4) o (R3 y R5)] se unen entre sí
para formar un heterociclo mono o bicíclico, saturado o insaturado,
que comprende de 2 a 10 eslabones carbonados y de 1 a 5 heteroátomos
elegidos entre N, O, y S, sustituido opcionalmente, o para formar
un grupo N=CH. arilo, estando dicho arilo sustituido
opcionalmente.
2. Producto según la reivindicación 1,
caracterizado porque R5 es H.
3. Producto según la reivindicación 1,
caracterizado porque R4 es H.
4. Producto según la reivindicación 1,
caracterizado porque R4 es metilo o etilo.
5. Producto según la reivindicación 1,
caracterizado porque R3 y R4 forman con el nitrógeno al que
están unidos, un heterociclo de 5 a 6 eslabones que contiene además
llegado el caso un átomo de N, O, o S, sustituidos
opcionalmente.
6. Producto según la reivindicación 1,
caracterizado porque R1 es NHCO(R2), siendo R2 tal
como se ha definido en la reivindicación 1.
7. Producto según la reivindicación 1,
caracterizado porque R3 es arilo o heteroarilo,
-alquil(C1-C6)-arilo
o
-alquil(C1-C6)-heteroarilo,
sustituido opcionalmente.
8. Producto según una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 7, caracterizado porque responde a la
fórmula (I'):
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
en la
que:
- Cada uno de los grupos R3, R4, y R5
son tales como se han definido en las reivindicaciones 1 a 7,
- R6 se elige entre el grupo
constituido por halógeno,
alquilo(C_{1}-C_{3})-NR_{7}R_{8},
alcoxi(C_{1}-C_{6}),
alquilo(C_{0}-C_{3})-heterociclo,
alquilo(C_{0}-C_{3})-arilo,
alquilo(C_{0}-C_{3})-heteroarilo,
alquilo(C_{0}-C_{3})-cicloalquilo,
en el que los ciclos están sustituidos opcionalmente con uno o
varios sustituyentes
alquilo(C_{1}-C_{3}), halógeno, alcoxi, y
en el que R_{7} y R_{8} se seleccionan independientemente del
grupo constituido por -H,
alquilo(C_{0}-C_{3}), arilo,
alquilo(C_{1}-C_{3})-N-[alquilo(C_{0}-C_{3})]_{2}.
9. Producto según la reivindicación 8,
caracterizado porque R_{6} está en posición 3 ó 4.
10. Producto según la reivindicación 9,
caracterizado porque R6 es
alquilo(C_{0}-C_{3})-heterociclo,
estando dicho heterociclo sustituido opcionalmente con uno o varios
sustituyentes alquilo(C_{1}-C_{3}),
halógeno, alcoxi.
11. Producto según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 9, caracterizado porque arilo y
heteroarilo se eligen cada uno independientemente entre fenilo,
piridilo, indolilo, bencimidazolilo, pirazolilo, tienilo y
pirrolilo, sustituido opcionalmente.
12. Producto según la reivindicación 1,
caracterizado porque se elige entre
5-(N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-metoxi-benzamida
5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-metoxi-benzamida,
N-[5-(N'-Ciclohexil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-metoxi-benzamida,
N-[5-(N'-Bencil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-metoxi-benzamida,
N-{5-[N'-(2-Etil-fenil)-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-metoxi-benzamida,
N-[5-[N'-(2-Fluoro-fenil)-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il)-4-metoxi-benzamida,
4-Metoxi-N-[6-N'-o-tolil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida.
N-[5-(N'-Metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-morfolin-4-ilmetil-benzamida,
4-Bromo-N-[5-{N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida,
N-[5-(N'-Metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzamida,
4-(3,5-Dimetil-piperazin-ilmetil)-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida,
4-(3,5-Dimetil-piperazin-1-ilmetil)-N-[5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida,
4-(4-Metil-perhidro-1,4-diazepin-1-ilmetil)-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida,
4-(4-Metil-perhidro-1,4-diazepin-1-ilmetil)-N-[5-(N'-(4-cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida,
N-5-(N'-[Metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]]pirazol-3-il]-4-piperazin-1-ilmetil-benzamida,
N-[5-[N'-(4-Cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-piperazin-1-ilmetil-benzamida,
N-[5-(N'-Metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(3-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzamida,
N-{5-[N'-(4-Cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-(3-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzamida,
4-Dietilaminometil-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]benzamida:
trifluoro-acetato,
N-[5-[N'-(4-Clorofenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-dietilaminometil-benzamida,
N-[5-(N'-Metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-3-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzamida.
N-[5-(N'-(4-Cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-3-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benzamida,
N-[5-(N'-Metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-piperidin-1-ilmetil-benzamida,
N-[5-(N'-(4-Cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-piperidin-1-ilmetil-benzamida,
N-[5-(N'-Metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-pirrolidin-1-ilmetil-benzamida,
N-[5-(N'-(4-Cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-pirrolidin-1-ilmetil-benzamida,
4-Azetidin-1-ilmetil-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3,c]pirazol-3-il]benzamida,
4-{[(2-Dimetilamino-etil)-metil-amino]-metil}-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida,
N-{5-[N'-(4-Cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-{[(2-dimetilamino-etil)-metil-amino]-metil}-benzamida,
N-[5-(N'-Metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-perhidro-1,4-oxazepin-4-ilmetil-benzamida,
N-{5-[N'-(4-Cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-perhidro-1,4oxazepin-4-ilmetil-benzamida,
N-[5-(N'-Metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-3-morfolin-4-ilmetil-benzamida,
N-{5-[N'-(4-Cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-3-morfolin-4-ilmetil-benzamida,
4-[(2-Dietilamino-etilamino)-metil]-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida,
N-{5-[N'-(4-Cloro-fenil)-N'-metil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-[(2-dietilamino-etilamino)-metil]-benzamida,
4-[(Metil-fenil-amino)-metil]N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida.
4-[(Diisopropilamino)-metil]-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida;
trifluoroacetato,
N-[5-(N'-Bencil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-metoxi-benzamida,
4-Metoxi-N-[5-(N'-piridin-2-il-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida,
N-[5-[N'(4-Cloro-fenil)-metil-hidrazinocarbonil]-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
N-[5-(N'-Bencil-N'-metil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
N-(Piperidin-1-il)-3-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzoilamino]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-5-carboxamida,
N-[5-(N'-Bencil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
N-[5-(N'-Etil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
N-[5-(N'-Bencil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida.
N-(5-(N'-Metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
N-{5-[N'-(4-Cloro-fenil)-N'-ciclobutilmetil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
N-{5-[N'-Etil-N'-(4-fluoro-fenil)hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
\newpage
N-{5-[N'-(4-Fluoro-fenil)-N'-(2-metoxi-etil)-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il)-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
N-[5-(N'-Etil-N'-o-tolil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
N-[5-N'-Etil-N'-m-tolil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
N-[5-(N'-Etil-N'-m-tolil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
N-{5-[N'-(4-Fluro-fenil)-N'-isobutil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il}-4-(4-metil-piperazin-1-il)benzamida,
N-{5-[N'-(3-Bromo-fenil)-N'-etil-hidrazinocarbonil]-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
6-(4-Metil-[1,4]diazepan-1-il)-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-nicotinamida,
N-[5-(Benciliden-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida,
N-[5-(N'-Metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-4-(2-morfolin-4-il-etoxi)-benzamida,
4-(4-metil-[1,4]diazepan-1-il)-N-[5-(N'-metil-N'-fenil-hidrazinocarbonil)-1H-tieno[2,3-c]pirazol-3-il]-benzamida.
13. Producto según una cualquiera de las
reivindicaciones anteriores, caracterizado porque está en
forma:
1) no quiral, o
2) racemica, o
3) enriquecida en un estereoisómero, o
4) enriquecida en un enantiómero;
y porque opcionalmente está salificado.
14. Procedimiento de preparación de un producto
de fórmula general (1) siguiente:
en la que R1 es NHCO(R2), y
en el que R3, R4 y R5 son tales como se han definido anteriormente,
obteniéndose dicho producto de fórmula general (I)
por:
(i) acoplamiento entre (4) un ácido de fórmula
general (X) siguiente:
en la que R1 es tal como se ha
definido anteriormente, y en el que PG es un grupo protector de la
función NH libre intracíclica del núcleo
tieno[2,3-c]pirazol,
y
(I-b) una hidrazina
(R3)(R4)N-NH(R5) en la que R3, R4 y R5
son tales como se han definido anteriormente, en presencia de un
agente de acoplamiento y en presencia de una base tal como una amina
terciaria o un carbonato de un metal alcalino; después
(ii) escisión de PG.
15. Procedimiento de preparación de un producto
de fórmula general (X) según la reivindicación 14,
caracterizado porque se obtiene por saponificación de la
función éster del núcleo tiofeno de un producto de fórmula general
(IX):
en el que R1 es tal como se ha
definido
anteriormente.
16. Procedimiento de preparación de un producto
de fórmula general (IX) según la reivindicación 15,
caracterizado porque se obtiene por acoplamiento entre:
(i) un producto de fórmula general (IIa)
siguiente:
en la que Alquilo es tal como se ha
definido anteriormente, y en la que PG es un grupo protector de la
función NH libre intracíclica del núcleo
tieno[2,3-c]pirazol,
y
(ii) un producto de fórmula general
(R2)CONH_{2}, en presencia:
- de un catalizador tal como yoduro
de cobre (I),
- de una amina tal como
trans-1,2-diaminociclohexano,
trans-1,2-bis(metilamino)ciclohexano
o, preferentemente
N,N'-dimetil-1,2-diaminoetano,
y
- de una base tal como fosfato
tripotásico o carbonato de cesio.
17. Procedimiento de preparación de un producto
de fórmula general (IIa) según la reivindicación 16,
caracterizado porque se obtiene por reacción entre un
mercaptoacetato de alquilo
Alquil-OCO-CH_{2}-SH,
en presencia de una base tal como carbonato de sodio y un compuesto
(IIIa):
en el que PG es tal como se ha
definido
anteriormente.
18. Procedimiento de preparación de un producto
de fórmula general (IIIa) según la reivindicación 17,
caracterizado porque se obtiene por (I) formilación de
3,4,5-tribromo-pirazol para la
obtención de
3,5-dibromo-4-formil-pirazol
(III), y (II) protección de la función amino Intracíclica de (III)
por la introducción del grupo protector pG.
19. Procedimiento según la reivindicación 18,
caracterizado porque el grupo protector PG se introduce
por:
(i) reacción con etilvinil éter en presencia de
un ácido tal como ácido clorhídrico, para la obtención de un grupo
PG = 1-etoxi-etilo, en un disolvente
inerte tal como tolueno, o;
(ii) reacción con
di-terc-butildicarbonato en
presencia de una base tal como trietilamina, piridina, o
N,N-dimetilamino-piridina, para la
obtención de un grupo PG = terc-butiloxicarbonilo,
en un disolvente inerte tal como diclorometano.
20. Composición farmacéutica que comprende un
producto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, en
combinación con un excipiente farmacéuticamente aceptable.
21. Utilización de un producto según una
cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, para la fabricación de
un medicamento útil para tratar un estado patológico, en particular
cáncer.
22. Utilización de un producto según una
cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, para la fabricación de
un medicamento útil para tratar un estado patológico elegido entre
psoriasis, glaucoma, leucemias, enfermedades asociadas con el
sistema nervioso central, inflamaciones, y enfermedades asociadas
con una desrregulación de las proteínas JNK.
23. Producto, caracterizado porque
responde a la fórmula general (XVI) siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
en la que R3, R4 y R5 son tales
como se han definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a
7.
24. Producto, caracterizado porque
responde a la fórmula general (XVII) siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
en la que R3, R4, R5 son tales como
se han definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 y PG es
un grupo
protector.
25. Producto, caracterizado porque
responde a la fórmula general (XVIII) siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
en la que R3, R4, R5 son tales como
se han definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a
7.
\newpage
26. Producto, caracterizado porque
responde a la fórmula general (XIX) siguiente:
en la que R3, R4, R5 son tales como
se han definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a
7.
27. Producto, caracterizado porque
responde a la fórmula general (XX) siguiente:
en la que R3, R4, R5 son tales como
se han definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a
7.
28. Producto, caracterizado porque
responde a la fórmula general (IVb) siguiente:
en la que R3, R4, R5 son tales como
se han definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 y PG es
un grupo
protector.
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