ES2400049T3 - Derivados de epotilona modificados en 12,13 - Google Patents

Abstract

Un compuesto de Fórmulas en las que Q es G se selecciona de entre el grupo que consiste en alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heterociclo, W es O o NR16; X es O, S, CHR17 o H, R18; Y se selecciona de entre el grupo que consiste en O, H, H, H, OR22, OR23, OR23; NOR24, H, NOR25, H, NR26R27;NHNR28R29, H, NHNR30R31 y CHR32; en las que OR23, OR23 pueden ser un cetal cíclico; B1 y B2 se seleccionan de entre el grupo que consiste en H, OR33, OCOR34, OCONR35R36, NR37R38 yNR39CONR40R41; D se selecciona de entre el grupo que consiste en NR42R43 y heterociclo; M es NR44; R1, R2, R3 y R4 se seleccionan de entre H y alquilo inferior; R5, R8, R9, R10 y R11 se seleccionan de entre el grupo que consiste en H, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilosustituido, cicloalquilo, heterociclo o heterociclo sustituido; R17, R18, R22 y R23 se seleccionan de entre el grupo que consiste en H, alquilo y alquilo sustituido;R24, R25, R26, R28, R30, R32, R33, R34, R35, R36, R37, R39, R40, R41, R42, R51, R52, R53 y R61 se seleccionan de entre elgrupo que consiste en H, alquilo, alquilo sustituido, arilo y arilo sustituido.

Description

Derivados de epotilona modificados en 12,13 La presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula

G se selecciona de entre el grupo que consiste en alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heterociclo,

W es O o NR16; 20 X es O, S, ChR17 o H, R18;

Y se selecciona de entre el grupo que consiste en O, H, H, H, OR22, OR23, OR23; NOR24, H, NOR25, H, NR26R27; NHNR28R29, H, NHNR30R31, o CHR32; en la que OR23, OR23 pueden ser un cetal cíclico; B1 y B2 se seleccionan de entre el grupo que consiste en H, OR33, OCOR34, OCONR35R36, NR37R38 o

NR39CONR40R41;

25 D se selecciona de entre el grupo que consiste en NR42R43 y heterociclo; M es NR44; R1, R2, R3 y R4 se seleccionan de entre H y alquilo inferior; R5, R8, R9, R10 y R11 se seleccionan de entre el grupo que consiste en H, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo

sustituido, cicloalquilo, heterociclo o heterociclo sustituido; 30 R17, R18, R22 y R23 se seleccionan de entre el grupo que consiste en H, alquilo y alquilo sustituido;

R24, R25, R26, R28, R30, R32, R33, R34, R35, R36, R37, R39, R40, R41, R42, R51, R52, R53 y R61 se seleccionan de entre el grupo que consiste en H, alquilo, alquilo sustituido, arilo o arilo sustituido; R12, R16, R27, R29, R31, R38 y R43 se seleccionan de entre el grupo que consiste en H, alquilo, alquilo sustituido,

arilo sustituido, cicloalquilo, heterociclo, R51C=O, R52OC=O, R53SO2, hidroxi, O-alquilo u O-alquilo sustituido, 35 cuando X es O entonces R16 no es R51C=O, R52OC=O ni R53SO2; y en el que R44 es amino o

y cualquier sal, solvato o hidrato de los mismos;

en la que el término “alquilo” se refiere a grupos hidrocarburo no sustituidos, de 1 a 20 átomos de carbono, de cadena lineal o ramificada,

la expresión “alquilo inferior” se refiere a grupos alquilo no sustituidos, de 1 a 4 átomos de carbono;

la expresión “alquilo sustituido” se refiere a un grupo alquilo sustituido por uno a cuatro sustituyentes, seleccionados de entre halo, fenilo, fenilo sustituido, heterociclo, trifluorometilo, trifluorometoxi, hidroxi, alcoxi, cicloalcoxi, heterocicloalcoxi, oxo, alcanoilo, ariloxi, alcanoiloxi, amino, alquilamino, arilamino, aralquilamino, cicloalquilamino, heterocicloamino, aminas disustituidas en la que los dos sustituyentes amino se seleccionan de entre alquilo, arilo o aralquilo, alcanoilamino, aroilamino, aralkanoilamino, alcanoilamino sustituido, arilamino sustituido, aralcanoilamino sustituido, tiol, alquiltio, ariltio, aralquiltio, cicloalquiltio, heterociclotio, alquiltiono, ariltiono, aralquiltiono, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, aralquilsulfonilo, sulfonamido, sulfonamido sustituido, nitro, ciano, carboxi, carbamilo, carbamilo sustituido, alcoxicarbonilo, arilo, arilo sustituido, guanidino y heterociclos; donde se indica anteriormente el sustituyente es sustituido además, será sustituido con halógeno, alquilo, alcoxi, arilo o aralquilo;

el término "arilo" se refiere a grupos hidrocarburo aromáticos monocíclicos o bicíclicos, que tienen de 6 a 12 átomos de carbono en la porción del anillo, que pueden estar sustituidos;

el término "aralquilo" se refiere a un grupo arilo unido directamente a través de un grupo alquilo;

el término "arilo sustituido" se refiere a un grupo arilo sustituido con uno a cuatro sustituyentes seleccionados de entre alquilo, alquilo sustituido, halo, trifluorometoxi, trifluorometilo, hidroxi, alcoxi, cicloalquiloxi, heterociclooxi, alcanoilo, alcanoiloxi, amino, alquilamino, aralquilamino, cicloalquilamino, heterocicloamino, dialquilamino, alcanoilamino, tiol, alquiltio, cicloalquiltio, heterociclotio, ureido, nitro, ciano, carboxi, carboxialquilo, carbamilo, alcoxicarbonilo, alquiltiono, ariltiono, alquilsulfonilo, sulfonamido y ariloxi; el sustituyente puede estar sustituido adicionalmente por halo, hidroxi, alquilo, alcoxi, arilo, alquilo sustituido o aralquilo;

el término “cicloalquilo” se refiere a sistemas anillo de hidrocarburo cíclico, saturado, opcionalmente sustituido, que contiene de 1 a 3 anillos y de 3 a 7 átomos de carbono por anillo, que además puede estar fusionado con un anillo carbocíclico C3-C7 insaturado; los sustituyentes incluyen uno o más grupos alquilo, tal como se ha descrito anteriormente, o uno o más grupos descritos anteriormente como sustituyentes alquilo;

los términos “heterociclo” y “heterocíclico” y “heterociclo” se refieren a un grupo cíclico aromático o no aromático, completamente saturado o insaturado, opcionalmente sustituido, que es un sistema anillo monocíclico de 4 a 7 miembros, bicíclico de 7 a 11 miembros o tricíclico de 10 a 15 miembros, que tiene al menos un heteroátomo en al menos un anillo que contiene un átomo de carbono, conteniendo cada grupo heterocíclico un heteroátomo que puede tener 1, 2 ó 3 heteroátomos seleccionados de entre átomos de nitrógeno, átomos de oxígeno y átomos de azufre, donde los heteroátomos de nitrógeno y azufre pueden estar también oxidados opcionalmente y los heteroátomos de nitrógeno pueden estar también cuaternizados opcionalmente, el grupo heterocíclico puede estar fijado a cualquier heteroátomo o átomo de carbono, y en el que el sustituyente es uno o más grupos alquilo, tal como se ha descrito anteriormente o uno o más grupos descritos anteriormente como sustituyentes alquilo o epóxidos o azidirinas.

Antecedentes de la invención

Las epotilonas son compuestos macrólidos que encuentran utilidad en el campo farmacéutico. Por ejemplo, se ha encontrado que las epotilonas A y B que tienen las estructuras:

ejercen efectos estabilizadores de microtúbulos similares a TAXOL y, por lo tanto, actividad citotóxica contra células que proliferan rápidamente, tales como, células tumorales u otra enfermedad celular hiperproliferativa, véase Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 1996, 35, No. 13/14.

El documento WO 97/19086 se refiere a derivados de epotilona y al uso de los mismos.

El documento DE 41 38 042 A se refiere a epotilonas, procedimientos de producción de las mismas, así como a composiciones que contienen las mismas.

Nicolau et al. divulgan epotilonas diseñadas, síntesis combinatoria, propiedades del conjunto tubulina y acción citotóxica contra la células tumorales resistentes a taxol (véase Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 1997, 36, No. 19).

El documento WO 99/02514 se refiere a derivados de epotilona, procedimientos de preparación de los derivados de epotilona y sus intermedios.

El documento WO 98/25929 divulga epotilona A, epotilona B, análogos de epotilona, bibliotecas de análogos de epotilona y procedimientos de producción de dichos compuestos usando químicas en fase sólida y en fase gaseosa.

Nicolau et al. se refieren a la síntesis y propiedades biológicas de C12,13-ciclopropil-epotilona A y epotilonas relacionadas (véase Current Biology, 1998, 5, No. 7).

Descripción detallada de la invención

A continuación, se enumeran las definiciones de diversos términos usados para describir la presente invención. Estas definiciones se aplican a los términos tal como se usan a lo largo de la presente memoria, a menos que se limite en casos específicos, ya sea individualmente o como parte de un grupo más grande.

El término "alquilo" se refiere a grupos hidrocarburo, de cadena lineal o ramificada, no sustituidos, de 1 a 20 átomos de carbono, preferentemente de 1 a 7 átomos de carbono. La expresión "alquilo inferior" se refiere a grupos alquilo no sustituidos de 1 a 4 átomos de carbono.

La expresión "alquilo sustituido" se refiere a un grupo alquilo sustituido, por ejemplo, por uno a cuatro sustituyentes, tales como halo, fenilo, fenilo sustituido, heterociclo, trifluorometilo, trifluorometoxi, hidroxi, alcoxi, cicloalquioxi, heterocicloxi, oxo, alcanoilo, ariloxi, alcanoiloxi, amino, alquilamino, arilamino, aralquilamino, cicloalquilamino, heterocicloamino, aminas disustituidas, en las que los 2 sustituyentes amino se seleccionan de entre alquilo, arilo o aralquilo, alcanoilamino, aroilamino, aralcanoilamino, alcanoilamino sustituido, arilamino sustituido, aralcanoilamino sustituido, tiol, alquiltio, ariltio, aralquiltio, cicloalquiltio, heterociclotio, alquiltiono, ariltiono, aralquiltiono, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, aralquilsulfonilo, sulfonamido (por ejemplo, SO2NH2), sulfonamido sustituido, nitro, ciano, carboxi, carbamilo (por ejemplo, CONH2), carbamilo sustituido (por ejemplo, CONH alquilo, CONH arilo, aralquilo CONH o casos en los que hay dos sustituyentes en el nitrógeno seleccionados de alquilo, arilo o aralquilo), alcoxicarbonilo, arilo, arilo sustituido, guanidino y heterociclos, tales como, indolilo, imidazolilo, furilo, tienilo, tiazolilo, pirrolidilo, piridilo, pirimidilo y similares. Donde se indica anteriormente, donde el sustituyente está además sustituido, estará sustituido con halógeno, alquilo, alcoxi, arilo o aralquilo.

El término "halógeno" o "halo" se refiere a flúor, cloro, bromo y yodo.

El término "arilo" se refiere a grupos hidrocarburo aromáticos monocíclicos o bicíclicos, que tienen de 6 a 12 átomos de carbono en la porción del anillo, tales como grupos fenilo, naftilo, bifenilo y difenilo, cada uno de los cuales puede estar sustituido.

El término "aralquilo" se refiere a un grupo arilo unido directamente a través de un grupo alquilo, tal como bencilo.

La expresión "arilo sustituido" se refiere a un grupo arilo sustituido, por ejemplo, por uno a cuatro sustituyentes tales como alquilo; alquilo sustituido, halo, trifluorometoxi, trifluorometilo, hidroxi, alcoxi, cicloalquiloxi, heterociclooxi, alcanoilo, alcanoiloxi, amino, alquilamino, aralquilamino, cicloalquilamino, heterocicloamino, dialquilamino, alcanoilamino, tiol, alquiltio, cicloalquiltio, heterociclotio, ureido, nitro, ciano, carboxi, carboxialquilo, carbamilo, alcoxicarbonilo, alquiltiono, ariltiono, alquilsulfonilo, sulfonamido, ariloxi y similares. El sustituyente puede estar sustituido adicionalmente por halo, hidroxi, alquilo, alcoxi, arilo, arilo sustituido, alquilo sustituido o aralquilo.

El término "cicloalquilo" se refiere a sistemas de anillos de hidrocarburos cíclicos, saturados, opcionalmente sustituidos, que contienen preferentemente 1 a 3 anillos y de 3 a 7 carbonos por anillo que pueden estar además fusionados con un anillo carbocíclico C3-C7 insaturado. Los grupos ejemplares incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclooctilo, ciclodecilo, ciclododecilo y adamantilo. Los sustituyentes ejemplares incluyen uno o más grupos alquilo, tal como se ha descrito anteriormente, o uno o más grupos descritos anteriormente como sustituyentes alquilo.

Los términos "heterociclo" y "heterocíclico" se refieren a un grupo cíclico, opcionalmente sustituido, completamente saturado o insaturado, aromático o no aromático, por ejemplo, que es un sistema anillo monocíclico de 4 a 7 miembros, bicíclico de 7 a 11 miembros o tricíclico de 10 a 15 miembros, que tiene al menos un heteroátomo en al menos un anillo que contiene átomos de carbono. Cada anillo del grupo heterocíclico que contiene un heteroátomo puede tener 1, 2 ó 3 heteroátomos seleccionados de entre átomos de nitrógeno, átomos de oxígeno y átomos de azufre, donde los heteroátomos nitrógeno y azufre pueden estar también opcionalmente oxidados y los heteroátomos de nitrógeno pueden estar también opcionalmente cuaternizados. El grupo heterocíclico puede estar unido a cualquier heteroátomo

o átomo de carbono.

Los ejemplos de grupos heterocíclicos monocíclicos incluyen pirrolidinilo, pirrolilo, indolilo, pirazolilo, oxetanilo, pirazolinilo, imidazolilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, oxazolilo, oxazolidinilo, isoxazolinilo, isoxazolilo, tiazolilo, tiadiazolilo, tiazolidinilo, isotiazolilo, isotiazolidinilo, furilo, tetrahidrofurilo, tienilo, oxadiazolilo, piperidinilo, piperazinilo, 2oxopiperazinilo, 2-oxopiperidinilo, 2-oxopirrolidinilo, 2-oxazepinilo, azepinilo, 4 piperidonilo, piridilo, N-oxo-piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, tetrahidropiranilo, tetrahidrotiopiranilo, tetrahidrotiopiranilo sulfona, morfolinilo, tiomorfolinilo, sulfóxido de tiomorfolinilo, sulfona, 1,3-dioxolano y tetrahicloro-1, 1-dioxotienilo, dioxanilo, isotiazolidinilo, tietanilo, tiiranilo, triazinilo y triazolilo y similares.

Los ejemplos de grupos heterocíclicos bicíclicos incluyen benzotiazolilo, benzoxazolilo, benzotienilo, quinuclidinilo, quinolinilo, quinolinil-N-óxido, tetrahidroisoquinolinilo, isoquinolinilo, bencimidazolilo, benzopiranilo, indolizinilo, benzofurilo, cromonilo, cumarinilo, cinnolinilo, quinoxalinilo, indazolilo, pirrolopiridilo, furopiridinilo (tal como furo-[2,3-c] piridinilo, furo [3,1-b] piridinilo] o furo [2,3-b] piridinilo), dihidroisoindolilo, dihidroquinazolinilo (tal como 3,4-dihidro-4-oxo- quinazolinilo), bencisotiazolilo, bencisoxazolilo, benzodiazinilo, benzofurazanilo, benzotiopiranilo, benzotriazolilo, benzpirazolilo, dihidrobenzofurilo, dihidrobenzotienilo, dihidrobenzotiopiranilo, dihidrobenzotiopiranilo sulfona, dihidrobenzopiranilo, indolinilo, isocromanilo, isoindolinilo, naftiridinilo, ftalazinilo, piperonilo, purinilo, piridopiridilo, quinazolinilo, tetrahidroquinolinilo, tienofurilo, tienopiridilo, tienotienilo y similares.

Los sustituyentes ejemplares incluyen uno o más grupos alquilo, tal como se ha descrito anteriormente, o uno o más grupos descritos anteriormente como sustituyentes alquilo. También se incluyen heterociclos más pequeños, tales como, epóxidos y aziridinas.

El término "heteroátomos" incluirá oxígeno, azufre y nitrógeno.

Los compuestos de Fórmulas I y II pueden formar sales con metales alcalinos tales como sodio, potasio y litio, con metales alcalinotérreos tales como calcio y magnesio, con bases orgánicas tales como diciclohexilamina, tributilamina, piridina y aminoácidos tales como arginina, lisina y similares. Dichas sales pueden obtenerse, por ejemplo, mediante el intercambio de los protones del ácido carboxílico, si contienen un ácido carboxílico, en compuestos de Fórmulas I y II con el ión deseado en un medio en el que la sal se precipite o en un medio acuoso seguido por evaporación. Pueden formarse tras sales, tal como conocen las personas con conocimientos en la materia.

Los compuestos de Fórmulas I y II forman sales con una diversidad de ácidos orgánicos e inorgánicos. Tales sales incluyen las formadas con cloruro de hidrógeno, bromuro de hidrógeno, ácido metanosulfónico, ácido hidroxietanosulfónico, ácido sulfúrico, ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido maleico, ácido bencenosulfónico, ácido toluenosulfónico y otros varios (por ejemplo, nitratos, fosfatos, boratos, tartratos, citratos, succinatos, benzoatos, ascorbatos, salicilatos y similares). Dichas sales se forman por reacción de un compuesto de Fórmulas I y II en una cantidad equivalente del ácido en un medio en el que la sal precipite o en un medio acuoso seguido de evaporación.

Además, se forman zwitteriones ("sales internas").

Los compuestos de Fórmulas I y II pueden tener también formas de profármaco. Cualquier compuesto que será convertido in vivo para proporcionar el agente bioactivo (es decir, el compuesto de Fórmulas I y II) es un profármaco.

Por ejemplo, los compuestos de Fórmulas I y II pueden formar una fracción éster carboxilato. Los ésteres de carboxilato se forman, de manera conveniente, esterificando cualquiera de las funcionalidades ácido carboxílico encontradas en la estructura o estructuras anillo divulgadas.

Varias formas de profármacos son bien conocidas en la técnica. Para ejemplos de dichos derivados de profármacos, véase:

a) Design of Prodrugs, edited by H. Bundgaard, (Elsevier, 1985) and Methods in Enzymology, Vol.42, p. 309-396, editado por K. Widder, et al. (Acamedic Press, 1985);

b) A Textbook of Drug Design and Development, editado por Krosgaard-Larsen y H. Bundgaard, Capítulo 5, "Design and Application of Prodrugs", by H. Bundgaard, p. 113-191 (1991);

c) H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8, 1-38 (1992);

d) H. Bundgaard, et al., Journal of Pharmaceutical Sciences, 77, 285 (1988); y

e) N. Kakeya, et al., Chem Phar Bull, 32, 692 (1984).

Debería entenderse además que los solvatos (por ejemplo, hidratos) de los compuestos de Fórmulas I y II también están dentro del alcance de la presente invención. Los procedimientos de solvatación son conocidos, en general, en la técnica.

Uso y utilidad

Los compuestos de Fórmulas I y II son agentes estabilizantes de microtúbulos. De esta manera, son útiles en el tratamiento de una diversidad de cánceres, incluyendo (pero sin limitarse a) los siguientes;

− carcinoma, incluyendo el de vejiga, mama, colon, riñón, hígado, pulmón, ovario, páncreas, estómago, cuello del útero, tiroides y piel, incluyendo carcinoma de células escamosas;

− tumores hematopoyéticos de linaje linfoide, incluyendo leucemia, leucemia linfocítica aguda, leucemia linfoblástica aguda, linfoma de células B, linfoma de células T, linfoma de Hodgkins, linfoma no Hodgkins, linfoma de células pilosas y linfoma de Burketts;

− tumores hematopoyéticos de linaje mieloide, incluyendo leucemias mielógenas agudas y crónicas y leucemia promielocítica;

− tumores de origen mesenquimal, incluyendo fibrosarcoma y rabdomiosarcoma;

− otros tumores, incluyendo melanoma, seminoma, tetratocarcinoma, neuroblastoma y glioma;

− tumores del sistema nervioso central y periférico, incluyendo astrocitoma, neuroblastoma, glioma y schwannomas;

− tumores de origen mesenquimal, incluyendo fibrosarcoma, rabdomioscaroma y osteosarcoma; y

− otros tumores, incluyendo melanoma, xenoderma pigmentoso, ceratoactantoma, seminoma, cáncer folicular de tiroides y teratocarcinoma.

Los compuestos de Fórmulas I y II pueden inhibir también la angiogénesis tumoral, afectando de esta manera al crecimiento de los tumores. Dichas propiedades anti-angiogénesis de los compuestos de Fórmulas I y II pueden ser útiles también en el tratamiento de ciertas formas de ceguera relacionadas con la vascularización de la retina, artritis, especialmente artritis inflamatoria, esclerosis múltiple, restinosis y psoriasis.

Los compuestos de Fórmulas I y II pueden inducir o inhibir la apoptosis, un proceso de muerte celular fisiológica crítico para el desarrollo normal y la homeostasis. Las alteraciones de las vías apoptóticas contribuyen a la patogénesis de una diversidad de enfermedades humanas. Los compuestos de Fórmulas I y II, como moduladores de la apoptosis, serán útiles en el tratamiento de una diversidad de enfermedades humanas con aberraciones en la apoptosis incluyendo cáncer (particularmente, pero no limitado a linfomas foliculares, carcinomas con mutaciones de p53, tumores de mama, próstata y ovario dependientes de hormonas, y lesiones precancerosas, tales como poliposis adenomatosa familiar), infecciones virales (incluyendo, pero sin limitarse a, herpesvirus, poxvirus, virus de Epstein-Barr, virus Sindbis y adenovirus), enfermedades autoinmunes (incluyendo, pero sin limitarse a, lupus eritematoso sistémico, glomerulonefritis mediada por complejos inmunes, artritis reumatoide, psoriasis, enfermedades inflamatorias del intestino y diabetes mellitus autoinmune), trastornos neurodegenerativos (incluyendo, pero sin limitarse a, enfermedad de Alzheimer, demencia relacionada con SIDA, enfermedad de Parkinson, esclerosis lateral amiotrófica, retinitis pigmentosa, atrofia muscular espinal y degeneración cerebelosa), SIDA, síndromes mielodisplásicos, anemia aplásica, infartos de miocardio asociados con lesión isquémica, lesión por apoplejía y reperfusión, arritmia, aterosclerosis, enfermedades hepáticas inducidas por toxinas o inducidas por alcohol, enfermedades hematológicas (incluyendo, pero sin limitarse a, anemia crónica y anemia aplásica), enfermedades degenerativas del sistema musculoesquelético

5 (incluyendo, pero sin limitarse a, osteoporosis y artritis), rinosinusitis sensible a la aspirina, fibrosis quística, esclerosis múltiple, enfermedades renales y dolor por cáncer.

Los compuestos de la presente invención son útiles también en combinación con agentes antí-cáncer y citotóxicos y tratamientos conocidos, incluyendo radiación. Si se formulan como una dosis fija, dichos productos de combinación emplean los compuestos de la presente invención dentro del intervalo de dosificación descrito a continuación y el otro

10 agente farmacéuticamente activo dentro de su intervalo de dosificación aprobado. Los compuestos de Fórmulas I y II se puede usar secuencialmente con agentes y tratamientos anticancerígenos o citotóxicos, incluyendo radiación, cuando una formulación de combinación es inapropiada. Especialmente útiles son las combinaciones de fármacos citotóxicos en las que el segundo fármaco elegido actúa en una fase diferente del ciclo celular, por ejemplo, Fase S, que los presentes compuestos de Fórmulas I y II que ejercen sus efectos en la fase G2-M.

15 Los presentes compuestos pueden existir como múltiples ópticos, geométricos y estereoisómeros. La totalidad de dichos isómeros y sus mezclas en la forma racémica están incluidos dentro de la presente invención.

Los compuestos de la presente invención se pueden formular con un vehículo o diluyente farmacéutico para la administración oral, intravenosa o subcutánea. La composición farmacéutica se puede formular de una manera clásica usando vehículos, diluyentes y aditivos sólidos o líquidos apropiados al modo de administración deseado. Por vía oral,

20 los compuestos pueden ser administrados en forma de comprimidos, cápsulas, gránulos, polvos y similares. Los compuestos se administran en un intervalo de dosificación de aproximadamente 0,05 a 200 mg/kg/día, preferentemente menos de 100 mg/kg/día, en una sola dosis o en 2 a 4 dosis divididas.

Procedimientos de Preparación

Los compuestos de Fórmulas I y II se preparan mediante los siguientes esquemas.

Los compuestos de Fórmula I en la que X es O, W es O, y Q es un grupo aziridina (es decir, M es NR44) pueden ser preparados tal como se indica en el Esquema 1.

Los compuestos de Fórmula 1A pueden obtenerse a partir de un proceso de fermentación (véase Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 1996, 35, No. 13/14). Un compuesto de Fórmula 1B, en la que P1 es un grupo protector de oxígeno, tal como 10 trietilsililo, puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 1A por procedimientos conocidos (véase, por ejemplo: Corey, EJ; Venkateswarlu, A., J. Am. Chem. Soc., (1972) 94, 6190). Los compuestos de Fórmula 1C y 1D se preparan por tratamiento con una azida, tal como azida de sodio, en disolventes polares tales como DMF. Un compuesto de Fórmula 1E puede ser preparado a partir de compuestos de Fórmulas 1C y 1D mediante la reacción de Staudinger (véase, por ejemplo: Ittah, Y., et al, J. Org. Chem., (1978) 43, 4271). Un compuesto de Fórmula 1F en la

15 que R44 no es H puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 1E usando procedimientos conocidos en la técnica. La desprotección de un compuesto de Fórmula 1F, por ejemplo cuando P1 es un grupo trietilsililo, usando fluoruro de hidrógeno en acetonitrilo o fluoruro de tetra-n-butilamonio en THF proporciona un compuesto de Fórmula I (1G) en la que X es O, W es O, Q es un grupo aziridina (M es NR44), y R1, R2, R3, R4 y R5 se definen tal como se ha descrito anteriormente.

De manera alternativa,, un compuesto de Fórmula 1E puede ser preparado tal como se muestra en el Esquema 2. Un compuesto de Fórmula 2A, en la que P1 es un grupo protector de oxígeno tal como trietilsililo, puede ser preparado a 35 partir de un compuesto de Fórmula 1B por reacción de tungsteno (VI) y cloruro de n-butil-litio (véase, por ejemplo: Sharpless, KB, et al., J. Am. Chem. Soc., (1972) 94, 6538) en THF. Un compuesto de Fórmula 2B puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 2A por adición de un grupo N-toluenosulfonamida según el procedimiento de Evans (es decir, Evans, D.A., et al., J. Org. Chem., (1991) 56, 6744). La desprotección de un compuesto de Fórmula 2B usando yoduro de samario en THF/1,3-dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2(1H)-pirimidinona proporciona un compuesto de

40 Fórmula 1E (véase, por ejemplo: Vedejs, E., et al., J. Org. Chem., (1994) 59, 1602). Además, un compuesto de Fórmula 1B puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 2A por oxidación (véase, por ejemplo: Balog, A., et al, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., (1996) 35, 2801).

Los compuestos de Fórmula I en la que X es O, W es O, y Q es un tiirano (es decir, M es S) pueden ser preparados tal como se indica en el Esquema 3. Un compuesto de la fórmula 4A puede ser preparado a partir de un compuesto de 15 Fórmula 1B usando tiocianato de potasio en solución alcohólica (véase, por ejemplo: Culvenor, CCJ, et al, J. Chem. Soc., (1946) 1050). La desprotección de un compuesto de Fórmula 4A, por ejemplo cuando P1 es un grupo trietilsililo, usando fluoruro de hidrógeno en acetonitrilo o fluoruro de tetra-n-butilamonio en THF proporciona un compuesto de Fórmula I (4B) en la que X es O, W es O, Q es un grupo tiirano (es decir, M es S), y R1, R2, R3, R4 y R5 se definen tal como se ha descrito anteriormente. La oxidación suave de un compuesto de Fórmula 4A usando una cantidad

20 estequiométrica o en exceso de ácido 3-cloroperoxibenzoico proporciona compuestos de Fórmula I en la que

M es un grupo S=O o SO2, respectivamente.

Los compuestos de Fórmula I en la que X es O, W es O, y Q es un oxetano pueden ser preparados tal como se indica en el Esquema 4. Un compuesto de Fórmula 5A puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 1B, en la que R5 es un grupo metilo, usando litio 2,2,6,6-tetrametilpiperidida y cloruro de dietilaluminio en benceno (véase, por ejemplo: Paquette, LA, et al., J. Org. Chem., (1990) 55, 1589). Un compuesto de Fórmula 5B puede ser preparado a 5 partir de un compuesto de Fórmula 5A por hidroboración y oxidación (véase, por ejemplo: Uzarewicz, A., et al, Rocz. Chem., (1977) 51, 723). Un compuesto de Fórmula 5C puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 5B por tratamiento con p-toluensulfonilo (TsCl) en piridina. Un compuesto de Fórmula 5D puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 5C por una reacción intramolecular de Williamson según el procedimiento de Moulines (es decir, Moulines, BJ, Leclercq, D., Picard, P., Synthesis, (1981) 550). La desprotección de un compuesto de Fórmula 5D,

10 por ejemplo cuando P1 es un grupo trietilsililo, usando fluoruro de hidrógeno en acetonitrilo o fluoruro de tetra-nbutilamonio en THF proporciona un compuesto de Fórmula I (5E) en la que X es 0, W es O, Q es un grupo oxetano y R1, R2, R3, R4 y R5 se definen tal como se ha descrito anteriormente.

De manera alternativa, los compuestos de Fórmula I en la que Q es un oxetano pueden ser preparados tal como se

35 indica en el Esquema 5. Los compuestos de Fórmula 6B y 6C pueden ser preparados a partir de un compuesto de Fórmula 2A por reacción Paterno-Büchi de un compuesto carbonilo de Fórmula 6A (véase, por ejemplo: Arnold, D.R., et al, Org. Photochem. Synth. (1971) 1, 51). La desprotección de compuestos de Fórmula 6B y 6C, por ejemplo cuando P1 es un grupo trietilsililo, usando fluoruro de hidrógeno en acetonitrilo o fluoruro de tetra-n-butilamonio en THF proporciona un compuesto de Fórmula I (6D y 6E) en la que X es O, W es O, Q es un grupo oxetano y R1, R2, R3, R4 y

40 R5 se definen tal como se ha descrito anteriormente.

Los compuestos de Fórmula I en la que X es 0, W es O, y Q es un ciclobutano (es decir, L es CR14R15) pueden ser preparados tal como se indica en el Esquema 6. Los compuestos de Fórmula 7B y 7C pueden ser preparados a partir de un compuesto de Fórmula 2A por [2+2] cicloadición de un compuesto sustituido con ceteno de Fórmula 7A (véase, por ejemplo: Krapcho, AP, J. Org. Chem., (1966) 31, 2030). La desprotección de compuestos de Fórmula 7B y 7C, por

25 ejemplo cuando P1 es un grupo trietilsililo, usando fluoruro de hidrógeno en acetonitrilo o fluoruro de tetra-n-butilamonio en THF proporciona un compuesto de Fórmula I (7D y 7E) en la que X es O, W es 0, Q es un grupo ciclobutano, y R1, R2, R3, R4 y R5 se definen tal como se ha descrito anteriormente.

Los compuestos de Fórmula I en la que X es O, W es O, y Q es un heterociclo de anillo de 5 miembros pueden ser

20 preparados tal como se describe en el Esquema 7. Los compuestos de Fórmula 8A y 8B pueden ser preparados a partir de un compuesto de Fórmula 1B, en la que R5 es un hidrógeno, por reacción de bromuro de magnesio dietil eterato en diclorometano. Los compuestos de Fórmula 8C y 8D pueden ser preparados a partir de compuestos de Fórmula 8A y 8B por oxidación de clorocromato de piridinio en diclorometano (véase, por ejemplo: White, JD, et al, J. Org. Chem., (1995) 12, 3600). Los compuestos de Fórmula 8F y 8G pueden ser preparados a partir de compuestos de

25 Fórmula 8C y 8D por adición de una tioamida sustituida de Fórmula 8E (véase, por ejemplo: Cauvin, P. Compt. Rend., (1973) 276C, 1453). La desprotección de compuestos de Fórmula 8F y 8G, por ejemplo cuando P1 es un grupo trietilsililo, usando fluoruro de hidrógeno en acetonitrilo o fluoruro de tetra-n-butilamonio en THF proporciona un compuesto de Fórmula I (8H y 8I) en la que X es O, W es O, Q es un heterociclo de 5 miembros, y R1, R2, R3, R4 y R5 se definen tal como se ha descrito anteriormente.

Los compuestos de Fórmula I en la que X es O, W es O, y Q es un heterociclo de anillo de 6 miembros pueden ser

preparados tal como se indica en el Esquema 8. Los compuestos de Fórmula 9B y 9C pueden ser preparados a partir

de compuestos de Fórmula 8C y 8D por reacción de dietil zinc en THF con un aceptor de Michael de Fórmula 9A según 15 el procedimiento de Hansen (es decir, Hansen, MM, et al., Organometallics, (1987) 6, 2069). Los compuestos de

Fórmula 9D y 9E pueden ser preparados a partir de compuestos de Fórmula 9B y 9C por adición de hidroxilamina en

etanol (véase, por ejemplo: Chemistry of Heterocyclic Compounds, Wiley: Nueva York, 1974, vol. 14, Partes 1-5). La

desprotección de compuestos de Fórmula 9D y 9E, por ejemplo cuando P1 es un grupo trietilsililo, usando fluoruro de

hidrógeno en acetonitrilo o fluoruro de tetra-n-butilamonio en THF proporciona un compuesto de Fórmula I (9F y 9G) en 20 la que X es O, W es O, Q es un heterociclo de 6 miembros y R1, R2, R3, R4 y R5 se definen tal como se ha descrito

anteriormente.

Un compuesto de Fórmula 10G que se usa para la preparación de compuestos de Fórmula I en la que X es O, W es O y G es tal como se ha definido anteriormente, puede ser preparado tal como se indica en el Esquema 9. La desprotección de un compuesto de Fórmula 2A, por ejemplo cuando P1 es un grupo trietilsililo, usando fluoruro de hidrógeno en acetonitrilo o fluoruro de tetra-n-butilamonio en THF proporciona un compuesto de Fórmula 10A. Un compuesto de Fórmula 10B puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 10A por hidrólisis mediada por esterasa de hígado de cerdo (véase, por ejemplo: Ohno, M., et al, Tetrahedron, (1984) 40, 145). Un compuesto de

Fórmula 10C puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 10B por reacción de (trimetilsilil) diazometano

en metanol y tolueno (véase, por ejemplo: Hashimoto, N., et al, Chem. Ber. Pharm. Bull., (1981) 1397). Un compuesto

de Fórmula 10D puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 10C por adición de t-butildimetilsililtriflato y

5 2,6-lutidina en diclorometano (véase, por ejemplo: Askin, D., et al, J. Org. Chem., (1987) 52, 622). Un compuesto de

Fórmula 10E puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 10D por reacción de AD-mix-alfa según el

procedimiento de Sharpless (es decir, Sharpless, KB, et al., J. Org. Chem., (1992) 57, 2768). Los compuestos de

Fórmula 10F y 10G pueden ser preparados a partir de un compuesto de Fórmula 10E por escisión oxidativa con

tetraacetato de plomo en acetato de etilo (véase, por ejemplo: CA Bunton en KB Wiberg, ed, la oxidación in Organic 10 Chemistry, Parte A, Academic Press, Nueva. York, 1965, p. 367). De manera alternativa,, un compuesto de Fórmula

10G puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 10D por ozonolisis.

Los compuestos de Fórmula I en la que X es O, W es O y G es una olefina 1,2-disustituida pueden ser preparados tal como se describe en el Esquema 10. Un compuesto de Fórmula 11C puede ser preparado a partir del compuesto de Fórmula 11A y 11B usando la olefinación estándar de Wittig, conocida en la técnica (véase, por ejemplo: Meng, D., et al, J. Org. Chem., (1996) 61, 7999). Un compuesto de Fórmula 11D puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 11C por adición de un reactivo de alilo, tal como bromuro de alilmagnesio (Hoffmann, RW Angew. Chem. Int. Ed., Engl., (1982) 21, 555). Un compuesto de Fórmula 11E, en la que P2 es un grupo trietilsililo, puede ser preparado a

partir de un compuesto de Fórmula 11D por reacción de cloruro de trietilsililo en DMF según el procedimiento de Corey (véase, por ejemplo: Corey, EJ; Venkateswarlu, A., J. Am. Chem. Soc., (1972) 94, 6190). Un compuesto de Fórmula 11F puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 11E por reacción de AD-mix-alfa según el procedimiento de Sharpless (es decir, Sharpless, KB, et al., J. Org. Chem., (1992) 57, 2768). Un compuesto de 5 Fórmula 11G puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 11F por la escisión oxidativa con tetraacetato de plomo en acetato de etilo (véase, por ejemplo: CA Bunton en KB Wiberg, ed, la oxidación in Organic Chemistry, Parte A, Academic Press, Nueva York., 1965, p.367). Un compuesto de Fórmula 11H puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 11I usando un agente reductor tal como borohidruro de sodio en metanol. Un compuesto de Fórmula 11I puede ser preparado a partir de un compuesto con una fórmula 11H por reacción de yodo, imidazol y 10 trifenilfosfina en tolueno. Un compuesto de Fórmula 11J puede ser preparado a partir del compuesto de Fórmula 11I por reacción de trifenilfosfina en acetonitrilo bajo reflujo. Un compuesto de Fórmula 11K puede ser preparado a partir de compuestos de Fórmula 11J y 10G usando olefinación estándar de Wittig (véase, por ejemplo: Bestmann, KH, et al, Chem. Ber. Ber. (1979) 112, 1923). Un compuesto de Fórmula 11L puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 11K por desprotección selectiva usando AcOH en THF. Un compuesto de Fórmula 11M puede ser preparado 15 a partir de un compuesto de Fórmula 11L por reacción de LiOH en t-butanol y agua. Un compuesto de Fórmula 11P puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 11M usando reactivos de acoplamiento de macrolactonization típicos, tales como 2,4,6-triclorobenzoílo, trietilamina y 4-dimetilaminopiridina (Véase, por ejemplo:. Inanaga, J., et al, Bull. Chem. Soc. Jpn., (1979) 52, 1989). Un compuesto de Fórmula 11Q puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 11P por reacción de 1,1,1-trifluoroacetona según el procedimiento de Yang (Yang, D., et

20 al., J. Org. Chem., (1995) 60, 3887). Un compuesto de Fórmula I (11R) en la que X es O, W es O, G es una olefina 1,2disustituido y R1, R2, R3, R4 y R5 se definen tal como se ha descrito anteriormente, puede ser preparado a partir de compuestos de Fórmula 11P y 11Q tal como se describe en los Esquemas 1-9.

Los compuestos de Fórmula I en la que X es O, W es O, y G es una N,N-amina sustituida, tal como se ha definido

anteriormente, pueden ser preparados tal como se describe en el Esquema 11. Un compuesto de Fórmula 12A puede

ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 11R por adición de grupos protectores de oxígeno (P1), tal como un 40 t-butildimetilisililo, con procedimientos conocidos en la técnica, seguido por ozonolisis en diclorometano. La aminación

reductora del compuesto de Fórmula 12A con un compuesto de Fórmula 12B usando reactivos estándar, tales como

triacetoxiborohidruro de sodio en ácido acético/diclorometano proporciona un compuesto de Fórmula 12C. La

desprotección de un compuesto de Fórmula 12C, por ejemplo cuando P1 es un grupo t-butildimetilsililo, usando fluoruro

de hidrógeno en acetonitrilo o fluoruro de tetra-n-butilamonio en THF proporciona un compuesto de Fórmula I (12D) en 45 la que X es O, W es O, G es N,N-disustituido amina (es decir, D es NR42R43) y R1, R2, R3, R4 y R5 se definen tal como

se ha descrito anteriormente.

Los compuestos de Fórmula I en la que X es O, W es O, y G es un N,N-amida sustituida tal como se ha definido anteriormente, pueden ser preparados tal como se describe en el Esquema 12. Un compuesto de Fórmula 13 puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula I en el que G es 1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil) etenilo por protección 25 con cloruro de trietilsililo (P1 es trietilsililo) en DMF usando procedimientos conocidos en la técnica seguido por ozonolisis en diclorometano. Un compuesto de Fórmula 13 puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 13C por reacción de bis (trimetilsilil) amida de litio en THF seguido por adición de clorotrimetilsilano para inactivar el enolato de litio intermedio (véase, por ejemplo: House, HO, et al, J.. Org. Chem., (1971) 36, 2361). Un compuesto de Fórmula 13C puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 13B por ozonolisis. Un compuesto de Fórmula

30 13E puede ser preparado a partir de compuestos de Fórmula 13C y 13D por agentes de acoplamiento de enlace amida estándares (es decir, DCC, BOP, EDC/HOBT, PyBrOP). La desprotección de un compuesto de Fórmula 13E, por ejemplo cuando P1 es un grupo trietilsililo, usando fluoruro de hidrógeno en acetonitrilo o fluoruro de tetra-n-butilamonio en THF proporciona un compuesto de Fórmula I (13F) en la que X es O, W es O, G es amida N,N-disustituida y R1, R2, R3, R4 y R5 se definen tal como se ha descrito anteriormente.

35 Tal como se muestra en el Esquema 13, los compuestos de Fórmula I en la que W es NR16 pueden ser preparados a partir de compuestos de Fórmula I en la que W es O. Un compuesto de Fórmula 14A puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 11R por reacción de azida de sodio y tetrakis (trifenilfosfina) paladio en THF/agua. La reducción de un compuesto de Fórmula 14A usando catalizador de Adam (PtO2) o una trialquilfosfina en etanol proporciona un compuesto de Fórmula 14B. Una ciclación intramolecular del compuesto de Fórmula 14B usando difenilfosforilazida y bicarbonato de sodio o 1-hidroxibenzotriazol y 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida en DMF proporciona un compuesto de Fórmula I (14C), en la que W es NR16 (R16 es H).

35 Los compuestos de Fórmula II pueden ser preparados a partir de un compuesto de Fórmula I, en la que B1 y B2 son grupos hidroxilo, tal como se muestra en el Esquema 14. Un compuesto de Fórmula 15A puede ser preparado a partir de compuestos de Fórmula I por adición de grupos formilo usando condiciones estándar, tales como ácido fórmico, trietilamina, anhídrido acético en diclorometano. La eliminación de un compuesto de Fórmula 15A usando 1,8diazabiciclo [5.4.0] undec-7-eno en diclorometano proporciona un compuesto de Fórmula 15B. La desprotección de un

40 compuesto de Fórmula 15B usando amoníaco en metanol proporciona un compuesto de Fórmula II (15C).

Tal como se muestra en el Esquema 15, los compuestos de Fórmula I en la que X es S o dihidrógeno pueden ser

10 preparados a partir de compuestos de Fórmula I en la que X es O. Un compuesto de Fórmula 16A, en la que X es S, puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula I en la que X es O por reacción de cloruro de trietilsililo (P1) con procedimientos conocidos en la técnica, seguido por la reacción del reactivo de Lawesson en tolueno (véase, por ejemplo: Nicolaou, KC, et al, J. Amer. Chem. Soc., (1990) 112. 6263). La reducción de un compuesto de Fórmula I (16A) usando hidruro de trifenilestaño y 2,2'azobisisobutironitrilo en benceno, seguido por desprotección usando

15 procedimientos estándar tal como ácido acético en THF (véase, por ejemplo: Nicolaou, KC, et al, Chem. Ber. Comm., (1995) 1583) proporciona un compuesto de Fórmula I (16B), en la que X es dihidrógeno.

30 De manera alternativa, tal como se muestra en el Esquema 16, los compuestos de Fórmula I en la que X es H, R18 pueden ser preparados a partir de compuestos de Fórmula I en la que X es O. Un compuesto de Fórmula 17A puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula I por reacción de cloruro de trietilsililo en DMF usando procedimientos estándar conocidos en la técnica. Un compuesto de Fórmula 17B puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 17A por reacción de hidruro de diisobutilaluminio seguido por anhídrido acético según el

35 procedimiento de Dahanukar (es decir, Dahanukar, VH, et al., J. Org. Chem. (1996) 61, 8317). La reacción de un compuesto de Fórmula 17B con dialquilzinc, (R18)2Zn, en diclorometano según el procedimiento de Rychnovsky (Rychnovsky, SD, et. Al., J. Org. Chem. (1997) 62, 6460) proporciona un compuesto de Fórmula 17C. La desprotección de un compuesto de Fórmula 17C, por ejemplo cuando P1 es un grupo trietilsililo, usando fluoruro de hidrógeno en acetonitrilo o fluoruro de tetra-n-butilamonio en THF proporciona un compuesto de Fórmula I (17D) en la que X es H,

40 R18 y R1, R2, R4 R3 y R5 se definen tal como se ha descrito anteriormente.

Los grupos hidroxilo de un compuesto de Fórmula I, tal como 1A (en la que R1-4 son metilo y R6 es 2-metil-4-tiazolilo),

pueden estar opcionalmente protegidos tal como, por ejemplo, éteres de trietilsililo usando procedimientos conocidos 25 en la técnica. Un compuesto de Fórmula 18B en la que X es halógeno, puede ser preparado a partir de un compuesto

de Fórmula 18A por tratamiento con ciertas sales de haluro de metal, tales como bromuro de magnesio. Un compuesto

de Fórmula 18C puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 18B por tratamiento con una sal de azida

metálica tal como azida de litio. Un compuesto de Fórmula 18D puede ser preparado a partir de un compuesto de

Fórmula 18C por reacción de Mitsunobu usando, por ejemplo, trifenilfosfina y un ácido carboxílico tal como ácido 430 nitrobenzoico. Un compuesto de Fórmula 18E puede ser preparado a partir de un compuesto de Fórmula 18D por

hidrólisis o amoniolisis del grupo éster usando, por ejemplo, una solución de amoniaco en metanol. Opcionalmente, un

compuesto de Fórmula 18E en la que P1 es un grupo protector de oxígeno, tal como trietilsililo, puede ser desprotegido

usando ácido trifluoroacético en diclorometano, u otros procedimientos conocidos en la técnica. La reducción del grupo

azido y subsiguiente ciclización de un compuesto de Fórmula 18E con un agente reductor, tal como una triaril-o 35 trialquilfosfina proporciona un compuesto de Fórmula I, tal como 18F (en la que R1-4 son metilo y R6 es 2-metil-4

tiazolil).

De manera alternativa, un compuesto de Fórmula 18E en la que P1 es un grupo protector de oxígeno, puede ser convertido en un cloruro de alquil o aril sulfonilo. La reducción del grupo azido y subsiguiente ciclización de un compuesto de Fórmula 19A usando un agente reductor, tal como hidrógeno o triaril-o trialquilfosfina, y con catalizador de Lindlar (Pd, CaCo3/Pb) proporciona un compuesto de Fórmula I tal como 18F (en la que R1-4 son metilo y R6 es 2metil-4-tiazolil).

De manera alternativa, un compuesto de Fórmula 18C en la que P1 es un grupo protector de oxígeno, puede ser convertido en un compuesto de Fórmula 20A en la que X es un halógeno por tratamiento con, por ejemplo, trifenilfosfina y un tetrahaluro de carbono. La reducción del grupo azido y subsiguiente ciclización de un compuesto de Fórmula 20A usando un agente reductor, tal como hidrógeno o triaril- o trialquilfosfina, y con catalizador de Lindlar (Pd, CaCO3/Pb) proporciona un compuesto de Fórmula I, tal como 18F (en la que R1-4 son metilo y R6 es 2-metil-4-tiazolil).

35 La evaluación in vitro de la actividad biológica de los compuestos de Fórmula I y II se realizó tal como se indica a continuación:

Polimerización in vitro de tubulina

Se preparó tubulina de cerebro bovino sometida a dos ciclo (2X) siguiendo el procedimiento de Williams y Lee (véase Williams, R.C., Jr., y Lee, J.C. Preparation of tubulin from brain. Methods in Enzymology 85, Pt. D: 376-385, 1982) y se 40 almacenó en nitrógeno líquido antes de su uso. La cuantificación de la potencia de la polimerización de tubulina se

realizó siguiendo un procedimiento modificado de Swindell et al., (véase Swindell, C.S., Krauss, N.E., Horwitz, S.B., y Ringel, I. Biologically active taxol analogues with deleted A-ring side chain substituents and variable C-2’ configurations.

J. Med. Chem. 34: 1176-1184, 1991). Estas modificaciones, en parte, resultan en la expresión de la potencia de polimerización de tubulina como una concentración efectiva para cualquier compuesto determinado. Para este 5 procedimiento, diferentes concentraciones de compuesto en tampón de polimerización (0,1 M MES, 1 mM EGTA, 0,5 mM de MgCl2, pH 6,6) se añaden a la tubulina en tampón de polimerización a 37ºC en pozos de microcubeta de un espectrofotómetro Beckman (Beckman Instruments) Modelo DU 7400 UV. Se usan una concentración final de proteína de microtúbulos de 1,0 mg/ml y una concentración de compuesto de generalmente 2,5, 5,0 y 10 μM. Las pendientes iniciales del cambio de DO medidas cada 10 segundos se calcularon mediante el programa que acompaña al 10 instrumento después de los tiempos inicial y final de la región lineal que abarca al menos 3 puntos de tiempo fueron definidos manualmente. Bajo estas condiciones, las variaciones lineales fueron generalmente <10-6, las pendientes variaron de 0,03 a 0,002 unidades de absorbancia/minuto, y la absorbancia máxima fue de 0,15 unidades de absorbancia. La concentración efectiva (EC0,01) se define como la concentración interpolada capaz de inducir una pendiente inicial de 0,01 OD/minuto y se calcula usando la fórmula: EC0,01 = concentración/pendiente. Los valores

15 EC0,01 se expresan como la media con desviación estándar obtenida de 3 concentraciones diferentes. Los valores EC0,01 para los compuestos en la presente invención están incluidos en el intervalo de 0,01-1000 μM.

Citotoxicidad (in vitro)

La citotoxicidad se evaluó en células HCT-116 de carcinoma de colon humano mediante un ensayo MTS (3-(4,5dimetiltiazol-2-il) -5-(3-carboximetoxifenil) -2-(4-sulfenilo)-2H-tetrazolio, sal interna) tal como se informó en T.L. Riss, et. 20 al Comparison of MTT, XTT, and a novel tetrazolium compound MTS for in vitro proliferation and chemosensitivity assays", Mol. Biol. Cell 3 (Suppl.):184a, 1992. Las células se sembraron en placas a 4.000 células/pocillo en placas de microtitulación de 96 pocillos y 24 horas más tarde se añadieron los fármacos y se diluyeron en serie. Las células se incubaron a 37ºC durante 72 horas, momento en el que se añadió el colorante de tetrazolio, MTS a 333 μg/ml (concentración final), en combinación con el agente de acoplamiento de electrones metosulfato de fenazina a 25 μM 25 (concentración final). Una enzima deshidrogenasa en células vivas reduce el MTS a una forma que absorbe luz a 492 nm que puede cuantificarse espectrofotométricamente. Cuanto mayor es la absorbancia mayor es el número de células vivas. Los resultados se expresan como valores CI50, que es la concentración de fármaco requerida para inhibir la proliferación celular (es decir, absorbancia a 450 nm) al 50% de la de las células de control sin tratar. Los valores de IC50 para los compuestos de la presente invención se encuentran en el intervalo de 0,01 a 1.000 nM. Como

30 compuestos preferentes, están los compuestos de Fórmulas I y II en las que

Q es

G es

X es O o S e Y es O.

Los más preferentes son los compuestos de Fórmulas I y II en las que Q es G es

Los ejemplos siguientes ilustran la presente invención. Ejemplo 1 (Ejemplo de referencia)

[1S-[1R*,3R*(E),7R*;10S*;11R*,12R*,16S*]]-7,11-dihidrozi-8,8,10,12 tetrametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil)etenil]-4oxa-17-azabiciclo [14.1.0]heptadecano-5,9-diona.

A. [1R-[1R*,3S*(E),7S*,10R,*11S*,12S*,16S*]]-7,11-dihidroxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2(2-metil-4-tiazolil)etenil]25 4,17-dioxabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona. [12,13-epi epotilona A]

A una solución de epotilona C (100 mg, 0,21 mmol) en CH3CN (2,5 ml) y 0,0004 M Na2EDTA (1,5 ml) a 0ºC se añadió CF3COCH3 en exceso (1 ml) seguido de 2KHSO5. KHSO4. K2SO4 (peroximonosulfato de potasio) (325 mg, 0,53 mmol) y NaHCO3 (75 mg, 0,89 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 35 minutos y después se trató con sulfuro de dimetilo (0,50 ml) y agua (3,75 ml). La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente, se extrajo con EtOAc (4

30 x 10 ml), se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El residuo se sometió a cromatografía con 55% EtOAc/hexanos para obtener epotilona A (59 mg, 57%) y el compuesto A (30 mg, 29%) como un sólido blanco. m/z: 494 (M+H)+.

B. [4S-[4R*,7S*,8R*,9R*,13S*,14S*,16R*(E)]]-13-azido-4,8,14-trihidroxi-5,5,7,9-tetrametil-16-[1-metil-2(2-metil-4-tiazolil) etenil]-1-oxaciclohexadecano-2,6-diona.

A una solución de Compuesto A (30 mg, 0,06 mmol) en EtOH (2,5 ml) se añadió NaN3 (24 mg, 0,36 mmol) y NH4Cl (2

35 mg, 0,04 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 60ºC durante 2 días. La reacción se concentró, y el residuo se sometió a cromatografía con 60% EtOAc/hexanos para obtener el Compuesto B (19 mg, 59%) como un aceite incoloro. m/z: 537 (M+H)+.

C. [1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-dihidroxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2(2-metil-4-tiazolil)etenil]-4oxa-17-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona.

40 A una solución de Compuesto B (19 mg, 0,035 mmol) en THF (1,5 ml) se añadió PPH3 (12 mg, 0,047 mmol), y la mezcla de reacción se calentó a 60ºC durante 14 horas. La reacción se concentró, y el residuo se sometió a cromatografía con MeOH/EtOAc/Et3N (1:9:0,3) para obtener el compuesto del título (11 mg, 62%) como un sólido blanco. m/z: 493 (M+H)+.

Ejemplo 2 (Ejemplo de referencia)

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-17-Formil-7,11-dihidroxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2-(2-metil-415 tiazolil)etenil]-4-oxa-17-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona.

A una solución de epotilona 1C (2 mg, 0,004 mmol) en acetona (0,2 ml) a 0ºC se añadió 4-formil-2-metil-1,3,4tiadiazolin-5-tiona (1 mg, 0,006 mmol), y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora (véase, por ejemplo: Yazawa, H.: Goto, S. Tetrahedron Lett, (1985) 26, 3.703 a 3.706). La reacción se concentró, y el residuo se sometió a cromatografía con 65% EtOAc/hexanos para obtener el compuesto del título (0,8 mg, 38%) como una película blanca.

20 m/z: 521 (M+H)+.

Ejemplo 3 (Ejemplo de referencia)

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-dihidroxi-8,8,10,12-tetrametil-3-{1-metil-2(2-metil-4-tiazolil)etenil]-430 oxa-17-tiabiciclo[14.1.0)heptadecano-5,9-diona.

El compuesto 1A (50 mg, 0,1 mmol) y tiocicanato de amonio (25 mg, 0,33 mmol) se disolvieron en acetonitrilo (1,5 ml) y se calentó en un vial sellado a 120ºC durante 30 minutos. La mezcla de reacción se separó mediante HPLC (C18, 45% acetonitrilo/55% 50 mM tampón acetato de amonio, pH 6,8, con detección UV a 254 nM) para obtener el compuesto del título (11 mg, 21%). m/z: 553 (M+H)+.

Ejemplo 4 (Ejemplo de referencia)

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-17-[dimetilamino)acetil]-7,11-dihidroxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2(210 metil-4-tiazolil)etenil]-4-oxa-17-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona.

A una solución de compuesto 1C (10 mg, 0,020 mmol) y N,N-dimetilglicina (2,3 mg, 0,022 mmol) en cloruro de metileno (0,20 ml) se añadió una cantidad catalítica de DMAP seguido por la adición de DCC (8,3 mg, 0,040 mmol) a ºC. La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 18 h en atmósfera de Ar. La mezcla se purificó directamente mediante cromatografía flash (tapón SiO2 corto, 0-2% de metanol/cloroformo elución de

15 gradiente), y a continuación se purificó mediante HPLC de fase inversa (YMC S-5 ODS 10 x 250 mm, A-95% de agua, 5% de MeCN, B = 95% MeCN, 5% de agua, 0-100% B/40 minutos/gradiente, velocidad de flujo = 3ml/minutos, tiempo de retención = 29 minutos) para obtener 3 mg del compuesto del título (26%) como un liofilizado blanco junto con 4 mg de material de partida (40%). FABHRMS m/z 578.3287 (C30H47N3O6S requiere 577,3186).

Ejemplo 5 (Ejemplo de referencia)

[1S-[1 R*,3R*(E),7R*,10S*,11 R*,12R*,16S*]]-7,11-dihidroxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil)etenil]-17(3-metil-1-oxobutil)-4-oxa-17-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona.

A una solución de compuesto 1C (10 mg, 0,020 mmol) y trietilamina (10 μl, 0,080 mmol) en cloruro de metileno (0,20 ml) se añadió cloruro de isovalerilo (3,0 μl, 0,024 mmol) a 0ºC. La mezcla de reacción se calentó a temperatura

30 ambiente y se agitó durante 1 h en atmósfera de Ar. La mezcla se diluyó con cloruro de metileno (5 ml) y se inactivó con bicarbonato de sodio acuoso saturado (1 ml) a 0ºC. La capa orgánica se recogió, se secó sobre sulfato de sodio, y se concentró. El residuo aceitoso se purificó mediante cromatografía flash (SiO2, 4,5 x 30 cm, elución en gradiente 2550% de EtOAc-hexanos) para obtener el compuesto del título (6 mg, 51%) como un sólido blanco. FABHRMS m/z 577.3343 (C31H48N2O6S, requiere 576,3233).

35 Ejemplo 6 (Ejemplo de referencia) [1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-dihidroxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil)etenil]-17(metilsulfonil)-4-oxa-17-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona.

A una solución de compuesto 1C (10 mg, 0,020 mmol) y piridina (8 μl, 0,10 mmol) en cloruro de metileno (0,20 ml) en atmósfera de Ar se añadió cloruro de metanosulfonilo (1,6 μl, 0,021 mmol) a -15ºC. La mezcla de reacción se mantuvo

5 a -15ºC y se agitó durante 30 minutos. La mezcla se diluyó con cloruro de metileno (5 ml) y se inactivó con bicarbonato de sodio acuoso saturado (1 ml) a 0ºC. La capa orgánica se recogió, se secó sobre sulfato de sodio y se concentró. El residuo aceitoso se purificó mediante cromatografía flash (SiO2, 4,5 x 30 cm, elución en gradiente 25-50% de EtOAchexanos) para obtener el compuesto del título (6 mg, 52%) como un sólido blanco. FABHRMS m/z 571,2525 (C27H42N2O7S2 requiere 570,2433).

10 Ejemplo 7

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-N-Etil-7,11-dihidroxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil) etenil]-5,9-dioxo-4-oxa-17-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-17-carboxamida.

20 A una solución de compuesto 1C (10 mg, 0,020 mmol) en EtOAc (0,20 ml) se añadió isocianato de etilo (1,9 μl, 0,024 mmol) a 0ºC en atmósfera de Ar. La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 30 minutos. La mezcla se purificó directamente mediante cromatografía flash (SiO2, 4,5 x 30 cm, elución gradiente 0-3% de metanol-cloroformo) para obtener el compuesto del título (5,5 mg, 66%) como un sólido blanco. FABHRMS m/z564.3367 (C29H45N3O6S, requiere 563,3029).

25 Ejemplo 8 (Ejemplo de referencia)

[1S-[1 R*,3R*(E),7R*,10S*,11 R*,12R*,16S*]]-7,11-dihidroxi-8,8,10,12,17-pentametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil) etenil]-4-oxa-17-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona

A una solución de compuesto 1C (10 mg, 0,020 mmol) en THF (0,20 ml) en atmósfera de Ar se añadió esponja de protones (0,05 M solución en THF, 4,2 μl, 0,021 mmol) seguido de sulfato de dimetilo (2,8 μl, 0,030 mmol) a -10ºC. La mezcla de reacción se agitó durante la noche a 4ºC. La mezcla se purificó directamente mediante cromatografía flash (SiO2, 4,5 x 30 cm, elución gradiente 0-3% de metanol-cloroformo) para obtener el compuesto del título (5,0 mg, 40%) como un sólido blanco. FABHRMS m/z 507.2888 (C27H42N2O5S, requiere 506,2814).

Ejemplo 9 (Ejemplo de referencia)

1,1-dimetiletil éster de ácido [1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-dihidroxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2(2-metil-4-tiazolil) etenil]-5,9-dioxo-4-oxa-17-azabiciclo[14,1.0]heptadecano-17-carboxílico.

Se añadió di-tert-butilo (0,008 mmol, 1,8 mg) al Compuesto 1C (0,004 mmol, 2 mg) y trietilamina (0,0048 mmol, 0,0007 ml) en THF (0,15 ml) a temperatura ambiente. Después de 30 minutos, la reacción se concentró y se purificó mediante cromatografía flash (50% EtOAc/hexanos) para obtener el compuesto del título como un aceite claro (1,8 mg). (M+H)+

593.

Ejemplo 10 (Ejemplo de referencia)

[1S-[1R*,3R*(E),10S*,11R*,12R*,16S*]]-11-hidroxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil)etenil]-4,18dioxabiciclo[14.2.0]octadec-6(E)-eno-5,9-diona

A. [1S-[1R*,3R*(E),10S*,11R*,12R*,16S*]]-11-hidroxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil)etenil]-4,1730 dioxabiciclo[14.1.0]heptadec-6(E)-eno-5,9-diona

Se añadió HCO2H (22,7 mmol, 0,85 ml) a una solución de epotilona B (4,5 mmol, 2,3 g), NEt3 (45,3 mmol, 6,3 ml) y N,N-dimetilaminopiridina (10 mmol, 1,2 g) en CH2Cl2 (100 ml) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se enfrió a -15ºC y se añadió gota a gota (CH3CO)2O (22,7 mmol, 2,1 ml). La reacción se mantuvo a -15ºC durante 15 minutos y, a continuación, a temperatura ambiente durante 30 minutos. La reacción se inactivó con tampón a pH 7 (100 ml) y se 35 extrajo con CH2Cl2 (3x100 ml). La fase orgánica combinada se lavó con HCl 1 N (100 ml), NaHCO3 saturado (100 ml), se secó sobre Na2SO4, y se concentró para obtener el bis-formato de epotilona B como un sólido blanco, que se pasó a la siguiente etapa sin purificación adicional. Se añadió, gota a gota, 1,8-diazabiciclo [5.4.0] undec-7-eno (44,7 mmol, 6,7 ml) al bis-formato crudo en CH2Cl2 (125 ml) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó durante 1 hora, se inactivó con tampón a pH 4 (200 ml) y se extrajo con CH2Cl2 (3x200 ml). La fase orgánica combinada se lavó

40 con NaHCO3 saturado (200 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró para obtener un aceite viscoso que se recogió en MeOH (95 ml) y se trató con NH3 (solución 2M en MeOH, 21,9 mmol, 11 ml). La mezcla de reacción se mantuvo a temperatura ambiente durante 4 horas, se concentró y se purificó mediante cromatografía flash (60% EtOAc/hexanos a EtOAc puro) para obtener el Compuesto A como un sólido blanco (2,05 g, 92% para 3 pasos). (M+H)+ 490.

B. [1S-[1R*,3R*(E),10S*,11R*,12R*,16S*]]-11-trietilsililoxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil)etenil]-4,17dioxabiciclo[14.1.0]heptadec-6(E)-eno-5,9-diona

Se añadió Et3SiCl (10,8 mmol, 1,8 ml) al Compuesto A (1,08 mmol, 529 mg), N,N-diisopropiletilamina (16,2 mmol, 2,8 ml) y N,N-dimetilaminopiridina (1,08 mmol, 132 mg) en CH2Cl2 (10 ml) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se calentó después a 45ºC durante 12 horas, se inactivó con tampón a pH 4 (50 ml), se extrajo con CH2Cl2 (3x25 ml), se secó sobre Na2SO4, se concentró y se purificó mediante cromatografía flash (hexanos a 20% EtOAc/hexanos) para obtener el Compuesto B como un sólido blanco (590 mg). (M+H)+ 604.

C. [7R,8S,9S,14S,16S(E)]-14-hidroxi-13-hidroximetil-8-trietilsililoxi-5,5,7,9-tetrametil-16-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil) etenil]-1-oxa-3(E)-ciclohexadeceno-2,6-diona.

Se añadió gota a gota dietilaluminio-2,2,6,6-tetrametilpiperidida [1,5 ml de solución 0,28 M en benceno mantenida a 0ºC, 0,42 mmol, preparada mediante el procedimiento de Paquette, L.A. et. al. J. Org. Chem. 1990, 55, 1589; adición escalonada de n-BuLi (1,1 mmol ó 0,68 ml de solución 1,6 M en hexanos) y cloruro de dietilaluminio (1,1 mmol, 1,1 ml de solución 1,0 M en hexanos) a 2,2,6,6 -tetrametilpiperidina (1,1 mmol, 0,15 ml) en benceno (2,0 ml) a 0ºC] durante 20 minutos al Compuesto B (0,18 mmol, 109 mg) en benceno (2,0 ml) a 0ºC. La mezcla de reacción se inactivó con NH4Cl saturado (8 ml), se extrajo con CH2Cl2 (3x10 ml), se secó sobre Na2SO4, se concentró y se purificó mediante cromatografía flash (25% EtOAc/hexanos) para obtener alcohol 13,14-alílico como un aceite claro (70 mg, 64%). (M+H)+ 604. Se añadió, gota a gota, BH3. THF (0,35 mmol, 0,35 ml de solución 1,0 M en THF) al intermedio alcohol 13,14-alílico en THF (4,0 ml) a -78ºC. La mezcla de reacción se agitó a -78ºC durante 10 minutos, a continuación, se transfirió a un baño de 0ºC. Después de 4,6 horas, la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos, se diluyó con THF/EtOH (4,0 ml), se enfrió rápidamente mediante adición escalonada de tampón de fosfato de pH 7 (4,0 ml) y 30% H2O2 solución acuosa (4,0 ml). La mezcla de reacción resultante se agitó a temperatura ambiente durante 17 horas, se extrajo con CH2Cl2 (3x10 ml), se secó sobre Na2SO4, se concentró y se purificó mediante cromatografía flash (60-75% EtOAc/hexanos) para obtener el Compuesto C como un aceite claro (51,2 mg, mezcla 2:1 de diastereoisómeros 13R/13S). (M+H)+ 622.

D. [7R,8S,9S,13R,14S,16S(E)]-14-hidroxi-13-p-toluenesulfoniloximetil-8-trietilsililoxi-5,5,7,9-tetrametil-16-[1-metil-2-(2metil-4-tiazolil)etenil]-1-oxa-3(E)-ciclohexadeceno-2,6-diona

Se añadió p-toluensulfonilo (0,1 mmol, 19 mg) al Compuesto C (31 mg, 2:1 (trans:cis), 0,05 mmol) y piridina (0,25 mmol, 0,02 ml) en CH2Cl2 (1,0 ml) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se calentó a 35ºC durante 16 horas, a continuación, se añadieron cloruro de p-toluensulfonilo adicional (0,1 mmol, 19 mg) y piridina (0,25 mmol, 0,02 ml). Después de 4 horas, la reacción se inactivó con tampón a pH 4 (20 ml), se extrajo con CH2Cl2 (3x10 ml), se secó sobre Na2SO4, se concentró y se purificó mediante cromatografía flash (30% a 60% EtOAc/hexanos) para obtener tosilato, como un aceite claro (22,3 mg, 13R/13S = 2) y material de partida sin reaccionar (3,8 mg). Los isómeros 13S y 13R (Compuesto D) se separaron mediante cromatografía flash (Et2O puro). (M+H)+ 776 para ambos isómeros.

E. [1S-[1R*,3R*(E),1 OS*,11 R*,12R*,16S*]]-11-trietilsililoxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil)etenil]4,18-dioxabiciclo[14.2.0]octadec-6(E)-eno-5,9-diona

Se añadió NaH (60% en nujol, una pizca, > 0,053 mmol) al Compuesto D (41 mg, 0,053 mmol) en DMF (1,0 ml) a temperatura ambiente. Después de 20 minutos, la reacción se inactivó con solución saturada de NH4Cl (10 ml), se extrajo con CH2Cl2 (3x50 ml), se secó sobre Na2SO4, se concentró y se purificó mediante cromatografía flash (10% a 30% EtOAc/hexanos) para obtener el Compuesto E, como se un aceite claro (11,3 mg). (M+H)+ 604.

F. [1S-[1R*,3R*(E),10S*,11R*,12R*,16S*]]-11-hidroxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil)etenil]-4,18dioxabiciclo[14.2.0]octadec-6(E)-eno-5,9-diona.

Se añadió ácido trifluoroacético (1 ml de solución al 20% en CH2Cl2) al Compuesto E (0,011 mmol, 6,5 mg) en CH2Cl2 (1 ml) a -20ºC. Después de 20 minutos, la mezcla de reacción se inactivó con solución saturada NaHCO3 (1 ml), se extrajo con CH2Cl2 (3x10 ml), se secó sobre Na2SO4, se concentró y se purificó mediante cromatografía flash (20% a 60% EtOAc/hexanos con 1% de trietilamina) para obtener el compuesto del título, como un sólido blanco (4,3 mg). (M+H)+ 490.

Ejemplo 11 (Ejemplo de referencia)

[5S-[5R*(E),9R*,12S*,13R*,14R*]]-4,9,10,13,14,15,16,17-octahidro-9,13-dihidroxi-2,10,10,12,14-pentametil-5-[1-metil-2(2-metil-4-tiazolil)etenil]-5h-oxaciclohexadecino[5,4-d]tiazole-7,11(8h,12h)-diona

A. [1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-bistrietilsililoxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil) etenil]-4,17-dioxabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona.

Se añadió Et3SiCl (4,15 mmol, 0,7 ml) a epotilona A (4,2 mmol, 205 mg), N,N-diisopropiletilamina (6,2 mmol, 1,1 ml) e imidazol (2,1 mmol, 141 mg) en DMF (5 ml) a temperatura ambiente. A continuación, la mezcla de reacción se calentó a 40ºC durante 15,5 horas. Se añadieron N,N-diisopropiletilamina (4,2 mmol, 0,720 ml) y Et3SiCl (2,1 mmol, 0,35 ml) adicionales y la reacción se calentó a 60ºC. Después de 48 horas, la mezcla de reacción se concentró y se purificó mediante cromatografía flash (5 a 10% EtOAc/hexanos) para obtener el Compuesto A como un aceite claro (264mg). (M+H)+ 722.

B. [4S-[4R*,7S*,8R*,9R*,13S*,14S*,16R*(E)]-14-bromo-13-hidroxi-4,8-bistrietilsililoxi-5,5,7,9-tetrametil-16-[1-metil-2-(2metil-4-tiazolil)etenil]-1-oxaciclohexadecano-2,6-diona.

Se añadieron MgBR2. OEt2 (9,7 mmol, 2,5 g) al Compuesto A (6,45 mmol, 4,66 g) en CH2Cl2 (80 ml) a -78ºC. Después de 2 horas, la mezcla de reacción se calentó a 50ºC y se añadió MgBR2. OEt2 adicional (9,7 mmol, 2,5 g). La mezcla de reacción se calentó de nuevo a -30ºC y se mantuvo durante 1 hora, y a continuación se calentó a -20ºC, donde se añadió MgBR2. OEt2 adicional (6,45 mmol, 1,7 g). Después de 1 hora, la mezcla de reacción se inactivó con tampón fosfato pH 7 (20 ml), se extrajo con CH2Cl2 (3x100 ml),), se secó sobre Na2SO4, se concentró y se purificó mediante cromatografía flash (30% EtOAc/hexanos) para obtener el Compuesto B como un sólido blanco (2,95 g). (M+H)+ 802.

C. [4S-[4R*-,7S*-,8R*-,9R*,13S*,14S*,16R*(E)]-14-bromo-4,8-bistrietilsililoxi-5,5,7,9-tetrametil-16-[1-metil-2-(2-metil-4tiazolil)etenil]-1-oxaciclohexadecano-2,6,13-triona.

Se añadió clorocromato de piridinio (1,48 mmol, 320 mg) al compuesto B (0,37 mmol, 300 mg), piridina (3,7 mmol, 0,3 ml) y una pequeña cantidad de tamices moleculares 4A triturados en CH2Cl2 (3 ml). Después de 5 horas, la mezcla de reacción se diluyó con CH2Cl2 (50 ml), se filtró a través de un lecho corto de gel de sílice, se concentró y se purificó mediante cromatografía flash (5% EtOAc/hexanos) para obtener el Compuesto C como un sólido blanco (273 mg). (M+H)+ 800.

D. [5S-[5R*(E),9R*,125*,13R*,14R*]]-4,9,10,13,14,15,16,17-octahidro-9,13-bistrietilsililoxi-2,10,10,12,14-pentametil-5-[1metil-2-(2-metil-4-tiazolil)etenil]-5h-oxaciclohexadecino[5,4-d]tiazole-7,11(8h,12h)-diona

Se añadió tioacetamida (0,03 mmol, 2,3 mg) al Compuesto C (0,015 mmol, 12 mg) y N,N-diisopropiletilamina (0,038 mmol, 0,006 ml) en etanol (0,3 ml). La mezcla de reacción se calentó a 80ºC durante 24 horas. La mezcla de reacción se concentró y se purificó mediante cromatografía flash (50% a 75% EtOAc/hexanos) para obtener un intermedio hidroxitiazolina (4,6 mg, 39%). (M+H)+ 795.

Se añadieron escalonadamente cloruro de metanosulfonilo (0,01 mmol, 0,0008 ml) y trietilamina (0,04 mmol, 0,006 ml) al intermedio hidroxitiazolina (0,005 mmol, 4,2 mg) en CH2Cl2 (0,175 ml) a 0ºC. A continuación, el matraz de reacción se retiró del baño de hielo y se agitó a temperatura ambiente durante 5 horas, se concentró y se purificó mediante cromatografía flash (18% EtOAc/hexanos) para obtener el Compuesto D (1,2 mg). (M+H)+ 777.

E. [5S-[5R*(E),9R*,12S*,13R*,14R*]]-4,9,10,13,14,15,16,17-octahidro-9,13-dihidroxi-2,10,10,12,14-pentametil-5-[1metil-2-(2-metil-4-tiaziolil)etenil]-5h-oxaciclohexadecino[5,4-d]tiazole-7,11(8h,12h)-diona

CH2Cl2 (0,150 ml) a 0ºC. Después de 20 minutos, la mezcla de reacción se concentró y se purificó mediante cromatografía flash (80% EtOAc/hexanos) para obtener el compuesto del título (1,8 mg). (M+H)+ 549.

Ejemplo 12 (Ejemplo de referencia)

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,10S*,12R*,16S*]]-7,11-dihidroxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil)etenil]-4oxa-17-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona.

A. [1S-[1R*,3R*(E),7R*,105*,11S*,12R*,16S*]]-7,11-bistrietilsililoxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil) etenil]-4,17-dioxabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona.

Se añadió Et3SiCl (25 ml, 149 mmol) a epotilona A (10,39 g, 21 mmol), N,N-diisopropiletilamina (55 ml, 315 mmol) e imidazol (7,15 g, 105 mmol,) en DMF (75 ml) a 25ºC. A continuación, la mezcla de reacción se calentó a 55ºC durante 6,5 horas y se concentró a vacío. El residuo se diluyó con CH2Cl2 (100 ml) y los extractos orgánicos se lavaron con NaCHO3 (30 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró en vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía flash (SiO2, 5,0 x 30 cm, elución en gradiente hexanos a 15% EtOAc/hexanos) para obtener el Compuesto A como un sólido blanco (15,1 g,> 95%). MS (ESI +): (M+H)+ 722.

B. [4S-[4R*,7S*,8R*,9R*,13S*,14S*,16R*(E)]-14-bromo-13-hidroxi-4,8-bistrietitsililoxi-5,5,7,9-tetrametil-16-[1-metil-2-(2metil-4-tiazolil)etenil]-1-oxaciclohexadecano-2,6-diona.

A una solución del compuesto A (2,0 g, 2,8 mmol) en CH3Cl3 (30 ml) a -20ºC en atmósfera de Ar se añadió MgBR2. OEt2 (3 x 1,1 g, 12 mmol total) en tres porciones cada dos horas mientras se mantenía una temperatura interna entre 15 y -5ºC. Después de 7 h, la mezcla de reacción se inactivó con tampón fosfato pH 7 (40 ml) y salmuera (40 ml), se extrajo cuidadosamente con EtOAc (3 x 10 ml), se secó (Na2SO4) y se concentró en vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía flash (SiO2, 4,5 x 25 cm, elución en gradiente 10-20% EtOAc/hexanos) para obtener el Compuesto B como un sólido blanco g [1,0, 45% (67% basado en 0,6 g de material de partida recuperado; se detectó <2% del regioisómero C13-OH/C12-Br). MS (ESI+): (M+H)+ 802.

C. [4S-[4R*,7S*,8R*,9R*,13S*,14R*,16R*(E)]-14-azido-4,8-bistrietilsililoxi-13-hidroxi-5,5,7,9-tetrametil-16-[1-metil-2-(2metil-4-tiazolil)etenil]-1-oxaciclohexadecano-2,6,diona.

A una solución del compuesto B (0,17 g, 0,21 mmol) en DMF (2 ml) en atmósfera de Ar se añadió azida sódica (0,14 mg, 2,1 mmol) y la suspensión resultante se calentó a 43ºC. Después de 36 h, el disolvente se eliminó en vacío y el residuo se purificó directamente mediante cromatografía flash (SiO2, 2,5 x 15 cm, elución en gradiente 10-20% EtOAc/hexanos) para obtener el Compuesto C (0,14 g, 88%) como una espuma blanca. MS (ESI+): (M+H)+ 765

D. [4S-[4R*,7S*,8R*,9R*,13R*,14R*,16R*(E)]-14-azido-4,8-bistrietilsililoxi-13-(4-nitrobenzoiloxi)-5,5,7,9-tetrametil-16-[1metil-2-(2-metil-4-tiazolil)etenil]-1-oxaciclohexadecano-2,6-diona.

A una solución del compuesto C (0,10 mg, 0,13 mmol) en THF en atmósfera de Ar se añadió secuencialmente ácido 4nitrobenzoico (55 mg, 0,33 mmol), trifenilfosfina (86 mg, 0,33 mmol y azodicarboxilato de dietilo (52 ml, 0,33 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 25ºC durante 1,5 h, se concentró en vacío y el residuo se purificó mediante cromatografía flash (SiO2, 2,5 x 10 cm, elución en gradiente 10-20% EtOAc/hexanos) para obtener el Compuesto D (0,10 g, 85%) como una espuma blanca. MS (ESI)+: 914,6 (M+H)+

E. [4S-[4R*,7S*,8R*,9R*,13R*,14R*,16R*(E)]-14-azido-4,8-bistrietilsililoxi-13-hidroxi-5,5,7,9-tetrametil-16-[1-metil-2-(2metil-4-tiazolil)etenil]-1-oxaciclohexadecano-2,6-diona.

El compuesto D (0,10 mg, 0,11 mmol) se trató con amoníaco 2,0 M en metanol (1 ml) a 25ºC en atmósfera de Ar durante 4 h. El disolvente se eliminó en vacío y el residuo se purificó directamente mediante cromatografía flash (SiO2, 1,5 x 10 cm, elución en gradiente 10-30% EtOAc/hexanos) para obtener el Compuesto E (50 mg, 60%) como una

espuma blanca. MS (ESI)+: 763,3 (M-H) -.

F-[4S-[4R*,7S*,8R*,9R*,13R*,14R*,16R*(E)]]-14-azido-4,8-13-trihidroxi-5,5,7,9-tetrametil-16-[1-metil-2-(2-metil-4tiazolil)etenil]-1-oxaciclohexadecano-2,6-diona

El compuesto E (15 mg, 0,20 mmol) se trató con 20% de ácido trifluoroacético en cloruro de metileno (0,2 ml) a 0ºC en atmósfera de Ar durante 10 minutos. La mezcla de reacción se concentró bajo una corriente constante de nitrógeno a 0ºC y el residuo se purificó directamente mediante cromatografía flash (SiO2, 1 x 5 cm, elución en gradiente 0-5% de MeOH/CHCl3) para obtener el Compuesto F (9 mg, 86%) como una película. MS (ESI)+: 537,3 (M-H) -.

G. [1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7-11-dihidroxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil)etenil]4-oxa-17-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona

A una solución de Compuesto F (9 mg, 17 μmol) en THF (0,2 ml) en atmósfera de Ar se añadió trifenilfosfina (18 mg, 67 μmol). La mezcla de reacción se calentó a 45ºC durante 4 h, y el disolvente se eliminó bajo un flujo constante de nitrógeno. El residuo se purificó mediante cromatografía radial (1 mm SiO2, rotor GF, elución en gradiente 2-10% MeOH/CHCl3) para obtener el compuesto del título (4 mg, 50%) como una película.

Ejemplo 13 (Ejemplo de referencia)

[1S-[1R*,3R*-(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16R*]]-7,11-dihidroxi-8,8,10,12,16-pentametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4tiazolil)etenil]-4-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona

A. [4S-[4R*,7S*,8R*,9R*,16R*(E)]]-4,8-dihidrogi-5,5,7,9,13-pentametil-16-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil)etenil]-1-oxa-13(Z)ciclohexadeceno-2,6-diona. [epotilona D]

A THF anhidro (5 ml) a -78ºC en atmósfera de argón se añadió WCl6 (198 mg, 0,5 mmol) seguido por nBuLi (0,625 ml de solución 1,6 M en hexanos, 1,0 mmol). La reacción se dejó calentar a temperatura ambiente durante un período de 20 minutos. Se retiró una alícuota (0,50 ml, 0,05 mmol) del reactivo de tungsteno y se añadió a epotilona B (9,0 mg, 0,018 mmol) en atmósfera de argón y la reacción se agitó durante 15 minutos y, a continuación, se inactivó mediante la adición de NaHCO3 saturado (1 ml). La reacción se extrajo con EtOAc (3 x 1 ml). Los extractos combinados se secaron (Na2SO4), y se filtraron. Los volátiles se eliminaron en vacío. El residuo se sometió a cromatografía con 35% EtOAc/hexanos para obtener el compuesto A (7,0 mg, 0,014 mmol) con un rendimiento del 80%. m/z: 492,3 (M+H)+.

B. [4S-[4R*,75*,8R*,9R*,16R*(E)]]-4,8-bistrietilsililoxi-5,5,7,9,13-pentametil-16-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil)etenil]-hga13(Z)-ciclohexadeceno-2,6-diona. [bis-trietilsilil epotilona D]

A una solución del compuesto A (30 mg, 0,061 mmol) en CH2Cl2 anhidro (1,25 ml) en atmósfera de argón se añadió N,N-diisopropiletilamina (0,16 ml, 0,92 mmol, 15 eq) seguido por cloruro de trietisililo (0,10 ml, 0,61 ml, 10 eq). La mezcla de reacción se agitó durante 18 horas. La mezcla de reacción se enfrió a 0ºC y, a continuación, se añadió 2,6lutidina (0,021 ml, 0,18 mmol, 3 eq) seguido por trietilsililtrifluorometanosulfonato (0,056 ml, 0,24 mmol, 4 eq). La reacción se agitó durante 0,5 horas y, a continuación, se vertió en una mezcla 1:1 de H2O/ NaHCO3 saturado (1 ml) y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 1 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron (Na2SO4), se filtró, y los volátiles se eliminaron. El residuo se sometió a cromatografía con 1% Et2O/ CH2Cl2 para obtener 35 mg del compuesto B (80% de rendimiento) como un vidrio claro. m/z: 720,5 (M+H)+.

C. [1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16R*]]-7,11-dihidroxi-8,8,10,12,16-pentametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil) etenil]-4-oxabiciclo[14:1.0]heptadecano-5,9-diona

A una solución de dietilzinc (0,24 ml de 1,0 M en heptano, 0,24 mmol, 5 eq) en 1,2-dicloroetano (1,5 ml) a -15ºC en atmósfera de argón se le añadió cloroyodometano (0,035 ml, 0,48 mmol, 10 eq) y la mezcla se agitó durante 10 minutos. Se añadió lentamente una solución del compuesto B (35 mg, 0,048 mmol) en 1,2-dicloroetano (0,40 ml), y la mezcla de reacción se agitó durante 1,5 horas. La reacción se inactivó mediante la adición de NH4Cl saturado (1,5 ml) y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 2 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron (Na2SO4), se filtraron y los volátiles se

eliminaron en vacío. Al residuo se le añadió 15% ácido trifluoroacético/CH2Cl2 (0,50 ml) y la reacción se agitó durante 15 minutos. Los volátiles se eliminaron bajo una corriente de aire y el residuo se sometió a cromatografía con 70% EtOAc/hexanos para obtener 2,2 mg de Compuesto C (10% de rendimiento-dos etapas) como una película blanca; m/z: 506,3 (M+H)+.

De manera alternativa,, se añadió hidróxido de sodio (0,3 ml de solución al 50% en H2O) al compuesto 1B (109 mg, 0,15 mmol), PhCH2 (CH3CH2)3NCl (0,7 mg, 0,002 mmol) y EtOH (0,03 ml) en CHBR3 (1,0 ml). La mezcla resultante se calentó a 40ºC durante 2 horas. La mezcla de reacción de color pardo se diluyó con H2O (30 ml), se extrajo con CH2Cl2 (3x30 ml), se secó sobre Na2SO4, se concentró y se purificó mediante cromatografía flash (gradiente escalonado: 5 a 25% Et2O/hexanos) para obtener un intermedio dibromociclopropano como un aceite de color marrón claro (40 mg, rendimiento 30%). (M+H)+ 892,3

Se añadió Bu3SnH (3,4 mmol, 0,91 ml) al intermedio dibromociclopropano (0,34 mmol, 305 mg) y 2,2azobisisobutironitrilo (0,034 mmol, 6 mg) en hexanos (7,0 ml). La mezcla de reacción se calentó a 70ºC durante 5 horas. La reacción se concentró y se purificó mediante cromatografía flash (gradiente escalonado: hexanos a 20% Et2O/hexanos) para obtener un intermedio ciclopropano reducido como una película clara (228 mg, 91%). (M+H)+ 734,7.

El ciclopropano intermedio anterior (0,31 mmol, 228 mg) se disolvió en CF3CO2H/CH2Cl2 (20% solución en volumen, 10 ml) y se agitó a -15ºC durante 1,5 horas. La mezcla de reacción se concentró y se purificó mediante cromatografía flash (70% EtOAc/hexanos) para obtener el compuesto C como un aceite claro (111 mg, 71%). (M+H)+ 506,3. 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) d 7,04 (s, 1H), 6,64 (s, 1H), 5,16 (dd, J = 8,0, 3,4 Hz, 1H), 4,17 (dd, J = 9,5, 2,8 Hz, 1H), 3,79-3,83 (m, 1H), 3,23 (dq, J = 6,7, 4,5 Hz, 1H), 2,79 (s, 3H), 2,52 (dd, J = 15,1, 9,7 Hz, 1H), 2,41 (dd, J = 15,2, 2,9 Hz, 1H), 1,982,02 (m, 1H), 2,00 (s, 3H), 1,63-1,73 (m, 1H), 1,40-1,58 (m, 5H), 1,36 (s, 3H), 1,20 a 1,33 (m, 1H), 1,11-1,17 (m, 1H), 1,15 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,08 (s, 3H), 0,96 (d, J = 7,0 Hz, 3H), 0,94 (s, 3H), 0,40-0,54 (m, 1H), 0,37 (dd, J = 8,8, 4,1 Hz, 1H),-0,14-(-0,10) (m, 1H).

D. [1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16R*]]-7,11-dihidroxi. 8,8,10,12,16-pentametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil) etenil]-4-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona

Una suspensión del compuesto C (26 mg, 51 mmol) y azida de sodio (6,7 mg, 0,10 mmol) en una mezcla de THF-H2O (2:1, 1,0 ml) se desgasificó durante 15 minutos con nitrógeno. A esta mezcla se le añadió una cantidad catalítica (12 mg, 10 mmol) de tetrakis (trifenilfosfina) paladio (0) en atmósfera de Ar. La mezcla de reacción se calentó a 45ºC durante 1 hora y se enfrió a 25ºC.

La solución homogénea de color amarillo se trató directamente con una solución 1,0 M de trimetilfosfina en THF (0,11 ml, 0,11 mmol) a 25ºC y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente.

A continuación, la mezcla que contenía aminoácido se diluyó con MeCN-DMF (12:1, 1,9 ml), se enfrió a 0ºC y se trató con 1-hidroxibenzotriazol hidrato (7,0 mg, 51 mmol) seguido de clorhidrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodimida (25 mg, 0,13 mmol). La mezcla de reacción se calentó gradualmente a 25ºC, se agitó durante 3 horas, se diluyó con H2O (5 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 5 ml). Los extractos orgánicos se lavaron con H2O (8 ml), solución acuosa saturada de NaHCO3 (2 x 8 ml) y NaCl acuoso saturado (8 ml). Los extractos orgánicos se secaron (Na2SO4) y se concentraron en vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía radial (1 mm SiO2 rotor, 2% de MeOH-CHCl3) para obtener el compuesto del título (película, 3,0 mg, 12% de rendimiento global), junto con una pequeña cantidad de un diastereoisómero (proporción 5:1 según 1H RMN). (M+H)+ 505,4

Ejemplo 14 (Ejemplo de referencia)

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-17-dichloro-7,11-dihidroxi-8,8,10,12,16-pentametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4tiazolil)etenil]-4-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona

A. [1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-dihidroxi-8,8,10,12,16-pentametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil) etenil]-4-aza-17-oxabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona

Una suspensión de epotilona B (5,06 g, 9,97 mmol) y azida de sodio (0,777 g, 12,0 mmol) en una mezcla de THF-H2O (5:1, 96 ml) se desgasificó durante 15-20 minutos con nitrógeno y, a continuación, se trató con una cantidad catalítica (1,2 g, 0,997 mmol) de tetrakis (trifenilfosfina) paladio (0) en atmósfera de Ar. La mezcla de reacción se calentó a 45ºC durante 20 minutos y se enfrió a 25ºC.

La solución homogénea de color amarillo brillante resultante se trató directamente con una solución 1,0 M de trimetilfosfina en THF (24,9 ml, 24,9 mmol) a 25ºC y la mezcla de reacción se agitó durante 1-2 horas a temperatura ambiente.

La mezcla que contenía aminoácido se diluyó con MeCN-DMF (20:1, 450 ml), se enfrió a 0ºC y se trató con hidrato de 1-hidroxibenzotriazol (1,35 g, 9,97 mmol) seguido de clorhidrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodimida (4,78 g, 24,9 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 25ºC, se agitó durante 12 horas y se extrajo con EtOAc (4 x 200 ml). Los extractos orgánicos se lavaron con H2O (400 ml), NaHCO3 acuoso saturado (400 ml) y NaCl acuoso saturado (400 ml). Los extractos orgánicos se secaron (Na2SO4) y se concentró en vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía flash (SiO2, 5,0 x 25 cm, 2% MeOH-CHCl3) y, a continuación, HPLC (YMC S-15 ODS columna 50 x 500 mm, de 38 a 95% MeCN/H2O, gradiente (40 minutos), tasa de flujo 50 ml/minutos). Las fracciones apropiadas se concentraron en vacío y el residuo se liofilizó a partir de acetonitrilo acuoso para obtener el compuesto A (0,998 g, 20%), como un liofilizado blanco. MS (ESI+): 507,2 (M+H)+; MS (ESI -): 505,4 (M-H) -.

B. [4S-[4R*,7S*,8R*,9R*,16R*(E)]]-4,8-dihidroxi-5,5,7,9,13-pentametil-16-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil)etenil]-1-aza-13(Z)ciclohexadeceno-2,6-diona

Se añadió cloruro de tungsteno (1,98 g, 5,00 mmol) en una porción a THF enfriado previamente (50 ml) a -78ºC, y la mezcla resultante se agitó durante 5 minutos. Se añadió n-BuLi (1,6 M en hexanos, 6,25 ml, 10,0 mmol) a la suspensión, que se mantuvo a -78ºC durante 10 minutos, a continuación, se calentó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Después de 30 minutos adicionales a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se añadió al compuesto A (0,351 g, 0,690 mmol) mediante una jeringa. Después de 15 minutos, la mezcla de reacción se enfrió a 0ºC, se diluyó con acetato de etilo (10 ml), y se desactivó con bicarbonato de sodio saturado (15 ml). La mezcla de reacción se extrajo con acetato de etilo (5 x 20 ml), se secó sobre sulfato de sodio, se concentró y se purificó mediante HPLC de fase inversa (solvente A = 5:95, acetonitrilo: H2O, disolvente B = 95:5, acetonitrilo: H2O; gradiente: 40-100% de disolvente B durante 40 minutos; tasa de flujo: 40 ml/minutos, columna 50X500 mm YMC ODS S-15) para obtener el compuesto B (0,164 g, 36%) como un sólido blanco. (M+H)+ 491,3

C. [4S-[4R*,7S*,8R*,9R*,16R*(E)]]-4,8-bis(t-butildimetilsililoxi)-5,5,7,9,13-pentametil-16-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil) etenil]-1-aza-13(Z)-ciclohexadeceno-2,6-diona

A una solución del compuesto B (19 mg, 0,039 mmol) en CH2Cl2 (1,5 ml) a 0ºC se añadió lutidina (0,023 ml, 0,20 mmol). Esto fue seguido por la adición de trifluorometanosulfonato de tert-butildimetilsililo (0,045 ml, 0,20 mmol) durante 2 horas. La mezcla de reacción se vertió en NaHCO3 saturado (2 ml) y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 2 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron (Na2SO4), se filtró y se concentró. El residuo se sometió a cromatografía con 20% EtOAc/hexanos para obtener el compuesto C (19 mg, 68%) como un sólido blanco. (M+H)+ 719

D. 1S-[1R*;3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-17-dichloro.7;11-bis(t-butildimetilsifiloxi)-8,8,10,12,16-pentametil-3-[1metil-2-(2-metil-4-tiazolil)etenil]-4-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona

A una solución del compuesto C (9,6 mg, 0,013 mmol) en CHCl3 (0,10 ml) se añadió cloruro de benciltrietilamonio (0,00026 mmol, <1 mg), EtOH (0,002 ml) y 50% NaOH (ac) (0,015 ml, 0,29 mmol). La mezcla de reacción se agitó vigorosamente durante 2 horas y, a continuación, se cromatografió directamente (15% EtOAc/hexanos) para obtener el compuesto D (2,4 mg, 22%) como un aceite claro. (M+H)+ 801

E. 1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-17-dichloro-7,11-dihidroxi-8,8,10,12,16-pentametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4tiazolil)etenil]-4-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona

Al compuesto D (2,2 mg, 0,0027 mmol) a -15ºC se añadió 20% ácido trifluoroacético/CH2Cl2 (0,20 ml). La mezcla de reacción se calentó a 0ºC y se agitó durante 2 horas. Los volátiles se eliminaron bajo una corriente de aire y el residuo se sometió a cromatografía con 60% EtOAc/hexanos para obtener el compuesto del título (1,2 mg, 75%) como un sólido blanco. (M+H)+ 573

Ejemplo 15 (Ejemplo de referencia)

Los siguientes compuestos se prepararon mediante los procedimientos descritos anteriormente:

Fenil éster de ácido[1 S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-dihidroxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2-(2metil-4-tiazolil)etenil]-5,9-dioxo-4-oxa-17-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-17-carboxílico, (M+H)+ 613;

5 Fenilmetil éster de ácido [1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-dihidroxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil2-(2-metil-4-tiazolil)etenil]-5,9-dioxo-4-oxa-17-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-17-carboxílico, (M+H)+ 627;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-dihidroici-N,N,8,8,10,12-hexametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4tiazolil)etenil]-5,9-dioxo-4-oxa-17-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-17-sulfonamida, (M+H)+ 600;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-dihidroxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2-(2-metil-410 tiazolil)etenil]-17-(2-tienilsulfonil)-4-oxa-17-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona, (M+H)+ 639;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-dihidroxi-8,8,10,12-tetrametil-17-[(1-metil-1h-imidazol-4il)sulfonil]-3-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil)etenil]-4-oxa-17-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona, (M+H)+ 637;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-dihidroxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil) etenil]-17-(propilsulfonil)-4-oxa-17-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona, (M+H)+ 599;

15 [1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-17-acetil-7,11-dihidroxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4tiazolil)etenil]-4-oxa-17-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona, (M+H)+ 535;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-17-benzoil-7,11-dihidroxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4tiazolil)etenil]-4-oxa-17-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona, (M+H)+ 597;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-dihidroxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2-(2-metil-420 tiazolil)etenil]-17-(2-tienilcarbonil)-4-oxa-17-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona, (M+H)+ 603;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-dihidroxi-17-(metoxiacetil)-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2-(2metil-4-tiazolil)etenil]-4-oxa-17-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona, (M+H)+ 565;

[1 S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-17-(2-oxopropanoil)-7,11-dihidroxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2(2-metil-4-tiazolil)etenil]-4-oxa-17-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona, (M+H)+ 561; y

25 Etil éster de ácido [1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-dihidroxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2-(2metil-4-tiazolil)etenil]-5,9-dioxo-4-oxa-17-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-17-carboxílico, (M+H)+ 565.

Claims (12)

1. REIVINDICACIONES

   1. Un compuesto de Fórmulas

   en las que Q es

   G se selecciona de entre el grupo que consiste en alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heterociclo,

   20 W es O o NR16;

   X es O, S, CHR17 o H, R18;

   Y se selecciona de entre el grupo que consiste en O, H, H, H, OR22, OR23, OR23; NOR24, H, NOR25, H, NR26R27;

   NHNR28R29, H, NHNR30R31 y CHR32; en las que OR23, OR23 pueden ser un cetal cíclico; B1 y B2 se seleccionan de entre el grupo que consiste en H, OR33, OCOR34, OCONR35R36, NR37R38 y

   25 NR39CONR40R41;

   D se selecciona de entre el grupo que consiste en NR42R43 y heterociclo;

   M es NR44;

   R1, R2, R3 y R4 se seleccionan de entre H y alquilo inferior;

   R5, R8, R9, R10 y R11 se seleccionan de entre el grupo que consiste en H, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo

   30 sustituido, cicloalquilo, heterociclo o heterociclo sustituido;

   R17, R18, R22 y R23 se seleccionan de entre el grupo que consiste en H, alquilo y alquilo sustituido;

   R24, R25, R26, R28, R30, R32, R33, R34, R35, R36, R37, R39, R40, R41, R42, R51, R52, R53 y R61 se seleccionan de entre el

   grupo que consiste en H, alquilo, alquilo sustituido, arilo y arilo sustituido;

   R12, R16, R27, R29, R31, R38 y R43 se seleccionan de entre el grupo que consiste en H, alquilo, alquilo sustituido, 35 arilo sustituido, cicloalquilo, heterociclo, R51C=O, R52OC=O, R53SO2, hidroxi, O-alquilo u O-alquilo sustituido,

   cuando X es O, entonces R16 no es R51C=O, R52OC=O ni R53SO2; y en el que R44 es amino o

   y cualquier sal, solvato o hidrato del mismo;

   en las que el término “alquilo” se refiere a grupos hidrocarburo no sustituidos, de 1 a 20 átomos de carbono, de cadena lineal o ramificada,

   la expresión “alquilo inferior” se refiere a grupos alquilo no sustituidos, de 1 a 4 átomos de carbono;

   la expresión “alquilo sustituido” se refiere a un grupo alquilo sustituido por uno a cuatro sustituyentes, seleccionados de entre halo, fenilo, fenilo sustituido, heterociclo, trifluorometilo, trifluorometoxi, hidroxi, alcoxi, cicloalcoxi, heterocicloalcoxi, oxo, alcanoilo, ariloxi, alcanoiloxi, amino, alquilamino, arilamino, aralquilamino, cicloalquilamino, heterocicloamino, aminas disustituidas en la que los dos sustituyentes amino se seleccionan de entre alquilo, arilo o aralquilo, alcanoilamino, aroilamino, aralkanoilamino, alcanoilamino sustituido, arilamino sustituido, aralcanoilamino sustituido, tiol, alquiltio, ariltio, aralquiltio, cicloalquiltio, heterociclotio, alquiltiono, ariltiono, aralquiltiono, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, aralquilsulfonilo, sulfonamido, sulfonamido sustituido, nitro, ciano, carboxi, carbamilo, carbamilo sustituido, alcoxicarbonilo, arilo, arilo sustituido, guanidino y heterociclos; donde se indica anteriormente “en el que el sustituyente es sustituido adicionalmente” será sustituido con halógeno, alquilo, alcoxi, arilo y aralquilo;

   el término "arilo" se refiere a grupos hidrocarburo aromáticos monocíclicos o bicíclicos, que tienen de 6 a 12 átomos de carbono en la porción del anillo, que pueden estar sustituidos;

   el término "aralquilo" se refiere a un grupo arilo unido directamente a través de un grupo alquilo;

   el término "arilo sustituido" se refiere a un grupo arilo sustituido con uno a cuatro sustituyentes seleccionados de entre alquilo, alquilo sustituido, halo, trifluorometoxi, trifluorometilo, hidroxi, alcoxi, cicloalquiloxi, heterociclooxi, alcanoilo, alcanoiloxi, amino, alquilamino, aralquilamino, cicloalquilamino, heterocicloamino, dialquilamino, alcanoilamino, tiol, alquiltio, cicloalquiltio, heterociclotio, ureido, nitro, ciano, carboxi, carboxialquilo, carbamilo, alcoxicarbonilo, alquiltiono, ariltiono, alquilsulfonilo, sulfonamido y ariloxi; el sustituyente puede estar sustituido adicionalmente por halo, hidroxi, alquilo, alcoxi, arilo, alquilo sustituido o aralquilo;

   el término “cicloalquilo” se refiere a sistemas anillo hidrocarburo cíclicos, saturados, opcionalmente sustituidos, que contienen de 1 a 3 anillos y de 3 a 7 átomos de carbono por anillo, que además pueden estar fusionados con un anillo carbocíclico C3-C7 insaturado; los sustituyentes incluyen uno o más grupos alquilo, tal como se ha descrito anteriormente, o uno o más grupos descritos anteriormente como sustituyentes alquilo;

   los términos “heterociclo” y “heterocíclico” y “heterociclo” se refieren a un grupo cíclico aromático o no aromático, completamente saturado o insaturado, opcionalmente sustituido, que es un sistema anillo monocíclico de 4 a 7 miembros, bicíclico de 7 a 11 miembros o tricíclico de 10 a 15 miembros, que tiene al menos un heteroátomo en al menos un anillo que contiene un átomo de carbono, en el que cada anillo del grupo heterocíclico que contiene un heteroátomo puede tener 1, 2 ó 3 heteroátomos seleccionados de entre átomos de nitrógeno, átomos de oxígeno y átomos de azufre, donde los heteroátomos de nitrógeno y azufre pueden estar también oxidados opcionalmente y los heteroátomos de nitrógeno pueden estar también cuaternizados opcionalmente, el grupo heterocíclico puede estar fijado a cualquier heteroátomo o átomo de carbono, y en el que el sustituyente es uno o más grupos alquilo, tal como se ha descrito anteriormente o uno o más grupos descritos anteriormente como sustituyentes alquilo o epóxidos o azidirinas.
2. 2. Compuesto según la reivindicación 1, en el que

   G es

   X es O o S

   e Y es O.

3. 3.

   Compuesto según la reivindicación 1, que es:

   [1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-N-etil-7,11-dihidroxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4tiazolil)etenil]-5,9-dioxo-4-oxa-17-azabiciclo[14.1.0]heptadecano-17-carboxamida

4. 4.

   Una composición farmacéutica que comprende un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3.

5. 5.

   Uso de un compuesto según se ha definido en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, para la preparación de una composición farmacéutica para el tratamiento del cáncer.

6. 6.

   Un compuesto según se ha definido en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, para su uso en el tratamiento del cáncer.

7. 7.

   Uso de un compuesto según se ha definido en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, para la preparación de una composición farmacéutica para inhibir la angiogénesis tumoral o para tratar ceguera relacionada con vascularización de la retina, artritis, esclerosis múltiple, restinosis o psoriasis.

8. 8.

   Uso de un compuesto según se ha definido en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, para la preparación de una composición farmacéutica para inhibir la apoptosis o para tratar infecciones virales, enfermedades autoinmunes, trastornos neurodegenerativos, SIDA, síndromes mielodisplásicos, anemia aplásica, infartos de miocardio asociados con lesión isquémica, apoplejía, lesión por reperfusión, arritmia, aterosclerosis, enfermedades hepáticas inducidas por toxinas o inducidas por alcohol, enfermedades hematológicas, enfermedades degenerativas del sistema musculoesquelético, rinosinusitis sensible a la aspirina, fibrosis quística, esclerosis múltiple, enfermedades renales o dolor por cáncer.

9. 9.

   Uso según la reivindicación 8, en el que el trastorno degenerativo es la enfermedad de Alzheimer.

10. 10.

    Un compuesto según se ha definido en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, para su uso en la inhibición de angiogénesis tumoral o en el tratamiento de ceguera relacionada con la vascularización de retina, artritis, esclerosis múltiple, restinosis o psoriasis.

11. 11.

    Un compuesto según se ha definido en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, para su uso en la inhibición de apoptosis o en el tratamiento de infecciones virales, enfermedades autoinmunes, trastornos neurodegenerativos, SIDA, síndromes mielodisplásicos, anemia aplásica, infartos de miocardio asociados con lesión isquémica, apoplejía, lesión por reperfusión, arritmia, aterosclerosis, enfermedades hepáticas inducidas por toxinas o inducidas por alcohol, enfermedades hematológicas, enfermedades degenerativas del sistema musculoesquelético, rinosinusitis sensible a la aspirina, fibrosis quística, esclerosis múltiple, enfermedades renales o dolor por cáncer.

12. 12.

    Compuesto para su uso según la reivindicación 11, en el que el trastorno degenerativo es la enfermedad de Alzheimer.