ES2584053T3 - Métodos y composiciones para la unión de células y cultivo en sustratos planos - Google Patents

Métodos y composiciones para la unión de células y cultivo en sustratos planos Download PDF

Info

Publication number
ES2584053T3
ES2584053T3 ES09764380.3T ES09764380T ES2584053T3 ES 2584053 T3 ES2584053 T3 ES 2584053T3 ES 09764380 T ES09764380 T ES 09764380T ES 2584053 T3 ES2584053 T3 ES 2584053T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
cells
cell
pluripotent stem
stem cells
culture
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES09764380.3T
Other languages
English (en)
Inventor
Ya Xiong Chen
Benjamin Fryer
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Janssen Biotech Inc
Original Assignee
Janssen Biotech Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=41510797&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=ES2584053(T3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Janssen Biotech Inc filed Critical Janssen Biotech Inc
Application granted granted Critical
Publication of ES2584053T3 publication Critical patent/ES2584053T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0603—Embryonic cells ; Embryoid bodies
    • C12N5/0606—Pluripotent embryonic cells, e.g. embryonic stem cells [ES]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/70—Enzymes
    • C12N2501/72—Transferases [EC 2.]
    • C12N2501/727—Kinases (EC 2.7.)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/999—Small molecules not provided for elsewhere
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2533/00—Supports or coatings for cell culture, characterised by material
    • C12N2533/30—Synthetic polymers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2533/00—Supports or coatings for cell culture, characterised by material
    • C12N2533/50—Proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2533/00—Supports or coatings for cell culture, characterised by material
    • C12N2533/70—Polysaccharides
    • C12N2533/78—Cellulose
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2533/00—Supports or coatings for cell culture, characterised by material
    • C12N2533/90—Substrates of biological origin, e.g. extracellular matrix, decellularised tissue

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)

Abstract

Un método para unir células madre pluripotentes a un sustrato plano que contiene hasta alrededor del 12% de N, de al menos alrededor del 12% de O a al menos alrededor del 55% de O, un ángulo de contacto de alrededor de 18 grados a alrededor de 32 grados, y que carece de una capa adsorbida y una capa de células de alimentación, que comprende los pasos de: a. usar una suspensión obtenida de células madre pluripotentes, y b. añadir la suspensión de células al sustrato plano y permitir que las células se unan.

Description

imagen1
imagen2
imagen3
imagen4
imagen5
imagen6
5
15
25
35
45
55
65
célula coloca la célula dentro de un esquema hereditario de desarrollo y diferenciación. Un marcador específico del linaje se refiere a una característica asociada específicamente con el fenotipo de las células de un linaje de interés y puede usarse para evaluar la diferenciación de una célula no comprometida con el linaje de interés.
"Superficie" como se usa en la presente se refiere a la capa más exterior de las moléculas de un recipiente
o matriz de sustrato sólido pretendida para el uso en el cultivo o análisis celular. La composición elemental, la rugosidad, y la humectabilidad de la superficie pueden analizarse por Espectroscopia de Fotoelectrones por Rayos X (XPS), Microscopía de Fuerza Atómica (AFM), y medición del ángulo de contacto, respectivamente.
Se usan varios términos para describir células en cultivo. "Mantenimiento" se refiere generalmente a células colocadas en un medio de crecimiento bajo condiciones que facilitan el crecimiento y/o división celular que puede o no puede resultar en una población de células mayor. "Pase" se refiere al proceso de retirar las células de un recipiente de cultivo y colocarlas en un segundo recipiente de cultivo bajo condiciones que facilitan el crecimiento y/o división celular.
Una población específica de células, o una línea celular, es referida algunas veces o caracterizada por el número de veces que ha sido pasada. Por ejemplo, una población celular cultivada que ha sido pasada diez veces puede ser referida como un cultivo P10. El cultivo primario, es decir el primer cultivo después del aislamiento de las células del tejido, se designa P0. Después del primer subcultivo, las células se describen como un cultivo secundario (P1 o pase 1). Después del segundo subcultivo, las células se vuelven un cultivo terciario (P2 o pase 2), y así. Se entenderá por los expertos en la técnica que puede haber muchas duplicaciones de la población durante el periodo de pase; por lo tanto el número de duplicaciones de población de un cultivo es mayor que el número de pases. La expansión de las células (es decir, el número de duplicaciones de población) durante el periodo entre el paso depende de muchos factores, incluyendo pero no limitado a, la densidad del sembrado, sustrato, medio, condiciones de crecimiento, y el tiempo entre el pase.
Sustratos planos de la Presente Invención
Los sustratos planos adecuados para el uso en la presente invención pueden estar compuestos de cualquier material que sea capaz de proporcionar un apoyo en el que se puedan unir células pluripotentes. Por ejemplo, el sustrato plano puede estar comprendido de policarbonato. Alternativamente, el sustrato plano puede estar comprendido de tereftalato de polietileno (PETE). Alternativamente, el sustrato plano puede estar comprendido de nylon. Alternativamente, el sustrato plano puede estar comprendido de acetato de celulosa. Alternativamente, el sustrato plano puede estar comprendido de un éster de celulosa mixto. Ejemplos de sustratos planos adecuados para el uso de la presente invención pueden encontrarse en la Tabla 1.
La presente invención se refiere a métodos para la unión, cultivo y diferenciación de células madre pluripotentes a un sustrato plano que contiene hasta alrededor del 12% de N, de al menos alrededor del 12% de O a al menos alrededor del 55% de O, un ángulo de contacto de alrededor de 18 grados a alrededor de 32 grados, y que carece de una capa adsorbida y una capa de células de alimentación. El sustrato plano que contiene de al menos alrededor del 8% de N a al menos alrededor del 12% de N, y de al menos alrededor del 12% de O a al menos alrededor de 55% de O puede ser una superficie fibrosa rugosa o, alternativamente, una superficie lisa.
En una realización, la presente invención proporciona un método para unir células madre pluripotentes a un sustrato plano que contiene hasta alrededor del 12% de N, de al menos alrededor del 12% de O a al menos alrededor del 55% de O, un ángulo de contacto de alrededor de 18 grados a alrededor de 32 grados, y que carece de una capa adsorbida y una capa de células de alimentación, que comprende los pasos de:
a. Obtener una suspensión de células madre pluripotentes, y
b). Añadir la suspensión celular al sustrato plano y permitir que se unan las células.
En una realización, las células madre pluripotentes se mantienen en el cultivo después de que las células se unan a la superficie. En una realización, las células madre pluripotentes se diferencian en el sustrato plano después de que las células se unan a la superficie.
En una realización, la unión de las células madre pluripotentes a un sustrato plano que contiene hasta alrededor del 12% de N, de al menos alrededor del 12% de O a al menos alrededor del 55% de O, un ángulo de contacto de alrededor de 18 grados a alrededor de 32 grados, y que carece de una capa adsorbida y una capa de células de alimentación se potencia tratando las células con un compuesto capaz de inhibir la actividad de la Rho quinasa. El compuesto capaz de inhibir la Rho quinasa puede eliminarse de las células después de que se hayan unido.
El compuesto capaz de inhibir la Rho quinasa se selecciona del grupo consistente de: Y-27632, Fasudil, H1152 e Hidroxifasudil.
imagen7
imagen8
5
15
25
35
45
55
65
En una realización alternativa, las células madre pluripotentes se propagan en el cultivo y después se tratan de una manera que promueve su diferenciación en otro tipo de célula. El otro tipo de célula puede ser una célula que expresa marcadores característicos del linaje endodermo definitivo. Alternativamente, el tipo de célula puede ser una célula que expresa marcadores característicos del linaje endodermo pancreático. Alternativamente, el tipo de célula puede ser una célula que expresa marcadores característicos del linaje endocrino pancreático. Alternativamente, el tipo de célula puede ser una célula que expresa marcadores característicos del linaje de células β.
Las células madre pluripotentes tratadas de acuerdo con los métodos de la presente invención pueden diferenciarse en una variedad de otros tipos de células por cualquier medio adecuado en la técnica.
Por ejemplo, las células madre pluripotentes tratadas de acuerdo con los métodos de la presente invención pueden diferenciarse en células neurales, células cardiacas, hepatocitos y similares.
Por ejemplo, las células madre pluripotentes tratadas de acuerdo con los métodos de la presente invención pueden diferenciarse en progenitores neurales y cardiomiocitos de acuerdo con los métodos descritos en la WO2007030870.
En otro ejemplo, las células madre pluripotentes tratadas de acuerdo con los métodos de la presente invención pueden diferenciarse en hepatocitos de acuerdo con los métodos descritos en la patente US 6.458.589.
Por ejemplo, las células madre pluripotentes pueden diferenciarse en células que expresan marcadores característicos del linaje endodermo definitivo de acuerdo con los métodos descritos en D’Amour et al., Nature Biotechnol. 23:1534-1541, 2005.
Por ejemplo, las células madre pluripotentes pueden diferenciarse en células que expresan marcadores característicos del linaje endodermo definitivo de acuerdo con los métodos descritos en Shinozaki et al., Development 131:1651-1662, 2004.
Por ejemplo, las células madre pluripotentes pueden diferenciarse en células que expresan marcadores característicos del linaje endodermo definitivo de acuerdo con los métodos descritos en McLean et al., Stem Cells 25:29-38, 2007.
Por ejemplo, las células madre pluripotentes pueden diferenciarse en células que expresan marcadores característicos del linaje endodermo definitivo de acuerdo con los métodos descritos en D’Amour et al., Nature Biotechnol. 24:1392-1401, 2006.
Los marcadores característicos del linaje endodermo definitivo se seleccionan del grupo consistente de SOX17, GATA4, HNF3 beta, GSC, CER1, Nodal, FGF8, Brachyury, proteína homeobox tipo Mix, FGF4 CD48, eomesodermina (EOMES), DKK4, FGF17, GATA6, CXCR4, C-Kit, CD99 y OTX2. Para su uso en la presente invención es adecuada una célula que expresa al menos uno de los marcadores característicos del linaje endodermo definitivo. En un aspecto de la presente invención, una célula que expresa marcadores característicos del linaje endodermo definitivo es una célula precursora de línea primitiva. En un aspecto alternativo, una célula que expresa marcadores característicos del linaje endodermo definitivo es una célula del mesendodermo. en un aspecto alternativo, una célula que expresa marcadores característicos del linaje endodermo definitivo es una célula del endodermo definitivo.
Por ejemplo, las células madre pluripotentes pueden diferenciarse en células que expresan marcadores característicos del linaje endodermo pancreático de acuerdo con los métodos descritos en D’Amour et al., Nature Biotechnol. 24:1392-1401, 2006.
Los marcadores característicos del linaje endodermo pancreático se selecciona del grupo consistente de PDX1, HNF1 beta, PTF1 alfa, HNF6, HB9 y PROX1. Para su uso en la presente invención es adecuada una célula que expresa al menos uno de los marcadores característicos del linaje endodermo pancreático. En un aspecto de la presente invención, una célula que expresa marcadores característicos del linaje endodermo pancreático es una célula del endodermo pancreático.
Las células madre pluripotentes pueden diferenciarse en células que expresan marcadores característicos del linaje endocrino pancreático por cualquier método de la técnica.
Por ejemplo, las células madre pluripotentes pueden diferenciarse en células que expresan marcadores característicos del linaje endodermo endocrino de acuerdo con los métodos descritos en D’Amour et al., Nature Biotechnol. 24:1392-1401, 2006.
Los marcadores característicos del linaje endocrino pancreático se seleccionan del grupo consistente de
imagen9
imagen10
imagen11
imagen12
5
15
25
35
45
55
65
Ejemplo 12: Propiedades Físicas de los Sustratos Planos de la Presente Invención
Se determinó la química de superficie en los sustratos planos de la presente invención. Las Tablas 7-10 representan el análisis por Espectroscopia de Fotoelectrones de rayos X (XPS) y el ángulo de contacto. Para la XPS, se usó una profundidad de análisis de aproximadamente 50-100 Å. Típicamente, el 95% de la señal se origina desde dentro de esta profundidad.
Las membranas 1-3 contenían concentraciones similares de oxígeno, carbono (principalmente como C-O y C-(C,H), probablemente O-C-O), y nitrógeno (como NO3, NO2 y posiblemente C-N, y R4-N+). La membrana 3 también contenía concentraciones de traza de NA+ y SOX y una concentración más alta de C-(C,H). La membrana 4 contenía C-(C,H), C-(O,N), y (O,N)-C=O y posiblemente una traza de sodio. La membrana 5 contenía principalmente C-O y también C-(C,H) y O-C-O y/o O-C=O. También se detectaron concentraciones de traza de Na+ y SOx. Las membranas 6-11 contenían C-(C,H), C-O, O-C=O, C-N, CO3, p-p*, y concentraciones de traza de R4-N+, SOx, y o Na+ o Cr3+ . La superficie de la membrana 6 puede también contener una concentración de traza de cloro. Las concentraciones de traza de cromo se detectaron sólo en las membranas 10 y 11, mientras que el Na+ se detectó en las membranas 6-9. La superficie de la membrana 12 contenía C-(C,H), C-O, O-C=O, y pi-pi+ consistente con PET. También se detectaron concentraciones de traza de nitrógeno y sodio.
La Figura 11 muestra las micrografías electrónicas de barrido de los sustratos planos de la presente invención. Se observaron dos tipos de morfologías. Uno tipo estaba caracterizado por una red abierta de fibras. El segundo tipo estaba caracterizado por una lámina lisa con orificios circulares dispersados a través de la superficie.
La Tabla 10 muestra las mediciones del ángulo de contacto de las superficies de la presente invención. Las superficies 1 a 5 tenían mediciones del ángulo de contacto de alrededor de 18º a alrededor de 32º . Las células madre pluripotentes no requerían la presencia de un inhibidor de la actividad de la Rho quinasa para unirse a las superficies 1-5.
Las superficies 6 a 12 tenían mediciones del ángulo de contacto mayores de 32º. Las células madre pluripotentes requerían de la presencia de un inhibidor de la Rho quinasa para unirse a estas superficies.
Ejemplo 13: Unión de Células Madre Pluripotentes a un Sustrato Plano que consiste de una Poliamina.
El sustrato plano consistente de poliamina se fabricó de acuerdo con los métodos descritos en la US6743273 y Schindler M et al, Biomaterials 26(28): 5624-5631; 2005. El sustrato plano está disponible comercialmente, vendido bajo la marca ULTRAWEB™. las superficies sintéticas ULTRAWEB™ están compuestas de nanofibras de poliamida electrohiladas orientadas aleatoriamente con un diámetro de fibra medio de 280 nm. La distribución del tamaño de fibra está entre 200 y 400 nm. La primera ULTRAWEB™ probada tenía una superficie ligeramente hidrófila (catálogo #3870XX1) mientras que la segunda superficie, superficie (catálogo #3871XX!) era ligeramente hidrófila y estaba recubierta con un material de poliamina que proporcionaba las nanofibras con un grupo de amina libre para una carga positiva neta. Ambas superficies son altamente efectivas en la absorción de proteínas a través de interacciones hidrófobas. En la Figura 12 se muestran micrografías electrónicas de barrido de 5 micras de resolución y de ampliación 10.000X. Sin embargo, las células de la línea de células madre embrionarias humanas H1 fueron incapaces de unirse a cualquiera de las superficies ULTRAWEB™ probadas.
Ejemplo de Referencia 14: El Efecto del uso del Medio Definido en la Unión de Células Madre Pluripotentes con los Sustratos Planos de la Presente Invención.
Las células de la línea de células madre embrionarias humanas H1 se sembraron en los siguientes sustratos planos: Membrana 1 (éster de celulosa mixta), Membrana 4 (nylon), Membrana 5 (acetato de celulosa) y nitrocelulosa. Las células se sembraron a una dilución 1:3 en el medio definido mTESR™ y se cultivaron durante 24 horas. Los cultivos paralelos en medio acondicionado con MEF se incluyeron como controles. El cultivo de las células en mTESR™ no afecto a la capacidad de las células de unirse con las superficies planas. Las células fueron capaces de unirse a las membranas 1, 4 y 5, y nitrocelulosa. La membrana que mostró el mayor enlace de células usando mTESR™ fue la membrana 4, seguida por la Membrana , que fue igual que la de nitrocelulosa, seguida por la Membrana 1.
imagen13
Tabla 2: Expresión de los marcadores de superficie celular asociados con la pluripotencia de la línea de células madre embrionarias humanas H1 después de propagarse en membranas de ésteres de celulosa mixta durante 3 pases, como se determina por citometría de flujo
Marcadores de Superficie
Pordentaje de células positivas
Tra1-60
98.4%
Tra1-81
98.8%
SSEA-3
97.5%
SSEA-4
98.1%
Tabla 3: Protocolo para tratar células madre embrionarias humanas para inducir la diferenciación en células productoras de insulina
25
35
45
55
Tiempo
Tratamiento
2 días
Medio DMEM-F 12 2% Albúmina de Suero Bovino Libre de Ácidos Grasos (FAF-BSA) 100 nanogramos por mililitro ActivinA 20 nanogramos por mililitro Wnt3A
2 días
Medio DMEM-F 12 2% Albúmina de Suero Bovino Libre de Ácidos Grasos (FAF-BSA) 100 nanogramos por mililitro ActivinA
3 días
Medio DMEM-F 12 2% BSA 20 nanogramos por mililitro FGF7 250 nanomoles Cyclopamine-KAAD
4 días
Medio DMEM-F 12 1% de suplemento de B27 20 nanogramos por mililitro FGF7 250 nanomoles Cyclopamine-KAAD 2 micromoles Retinal Acid (RA) 100 nanogramos por mililitro Noggin
3 días
Medio DMEM-F 12 1% de suplemento de B27 1 micromoles ALK5 inhibitor 2 100 nanogramos por mililitro Noggin 100 nanogramos por mililitro Netrin-4 50 nanogramos por mililitro Exendin-4 1micromoles DAPT
7 días
Medio DMEM-F 12 1% de suplemento de B27 1 micromoles inhibidor 2 de ALK5
7 días
Medio DMEM-F 12 1% de suplemento de B27
imagen14
Tabla 8: Concentraciones (en %) de Grupos Funcionales de Carbono
5
15
25
Tabla 9: Concentraciones (en %) de Grupos Funcionales de Nitrógeno
C-(C,H)
C-(O,N) O-C-O / O-C=O CO3 pi-pi*
Muestra
B.E. Átomos% B.E. Átomos% B.E. Átomos% B.E. Átomos% B.E. Átomos%
1
284.8 2.3 287.0 29.7 288.4 7.3 - - - -
2
284.8 1.7 287.1 30.0 288.5 6.5 - - - -
3
284.8 7.6 287.0 27.1 288.4 6.6 - - - -
4
284.8 51.8 285.9 12.9 287.7 11.2 - - - -
5
284.8 14.9 286.3 28.8 288.5 15.8 - - - -
6
284.8 55.5 286.1 18.2 287.6 2.8 290.9 4.2 292.4 1.3
7
284.8 56.5 286.4 13.6 288.3 1.4 290.4 2.8 291.3 4.7
8
284.8 55.8 286.1 17.4 287.5 2.8 290.8 4.1 292.1 2.1
9
284.8 54.1 286.4 13.0 288.5 2.1 290.4 3.1 291.2 4.9
10
284.8 52.5 286.3 13.6 288.6 3.4 290.6 4.2 291.9 2.6
11
284.8 60.8 286.4 11.7 288.6 0.2? 290.7 4.8 292.0 2.8
12
284.8 39.2 286.4 15.5 288.8 13.2 290.5 0.5? 291.6 1.9
35
45
55
C-N
R4-N+ NO2 NO3
Muestra
B.E. Átomos% B.E. Átomos% B.E. Átomos% B.E. Átomos%
1
400.0 0.1? 401.6 0.1? 404.5 0.5 407.5 8.1
2
- - - - 404.6 0.4 407.5 9.2
3
400.0 0.1? 401.7 0.1? 404.4 0.4 407.4 7.8
4
400.0 11.9 - - - - - -
5
- - - - - - - -
6
400.0 3.5 - - - - - -
7
400.0 0.4 401.7 0.3 406.1 0.1? - -
8
400.0 2.9 401.8 0.1? - - 408.3 0.1?
9
400.0 0.6 401.7 0.4 405.8 0.1? - -
10
400.0 2.1 401.5 0.8 - - - -
11
400.0 0.2? 401.8 0.4 - - - -
12
400.0 0.1? 401.7 0.1? - - - -
5
15
25

Tabla 10: Mediciones del ángulo de contacto de las placas de la presente invención
Lectura del Angulo de Contacto Agua (°)
Lectura del Angulo de Contacto (°)
Número de muestra
1 2 3 Media 1 2 3 Media Comentarios
1
110.9 - - 110.9 18.32 - - 18.32
2
55.4 59.96 60.44 58.6 28.13 - - 28.13
3
25.54 19.79 - 22.67 29.76 25.53 - 27.65
4
29.36 31.24 32.89 31.16 31.09 25.88 - 28.49
5
- - - - - - - - No se puede medir
6
90.42 - - - 32.07 - - 32.07
7
63.59 - - - 49.49 - - 49.49
8 brillo
58.8 - - 58.8 41.29 - - 41.29 La muestra tenía apariencia brillante
8 mate
72.69 - - 72.69 43.3 - - 43.3 La muestra tenía apariencia mate
9
71.89 - - 71.89 33.82 - - 33.82
10
- - - - - - - - No se puede medir
11
- - - - - - - - No se puede medir
12
76.96 65.187 - 71.07 46.31 - - 46.31 -
Aunque se han ilustrado los varios aspectos de la invención anteriores en referencia a los ejemplos y realizaciones preferidas, se apreciará que el alcance de la invención se define no sólo por la descripción anterior si 35 no por las siguientes reivindicaciones interpretadas apropiadamente bajo los principios de la ley de patentes.
45
55

Claims (1)

  1. imagen1
ES09764380.3T 2008-11-20 2009-11-19 Métodos y composiciones para la unión de células y cultivo en sustratos planos Active ES2584053T3 (es)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US11645208P 2008-11-20 2008-11-20
US116452P 2008-11-20
PCT/US2009/065067 WO2010059778A1 (en) 2008-11-20 2009-11-19 Methods and compositions for cell attachment and cultivation on planar substrates

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2584053T3 true ES2584053T3 (es) 2016-09-23

Family

ID=41510797

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES09764380.3T Active ES2584053T3 (es) 2008-11-20 2009-11-19 Métodos y composiciones para la unión de células y cultivo en sustratos planos

Country Status (14)

Country Link
US (2) US9969973B2 (es)
EP (1) EP2366022B1 (es)
JP (1) JP5719305B2 (es)
KR (1) KR101687344B1 (es)
CN (1) CN102257132B (es)
AU (2) AU2009316583B2 (es)
BR (1) BRPI0921996A2 (es)
CA (1) CA2744227C (es)
ES (1) ES2584053T3 (es)
MX (1) MX2011005289A (es)
PL (1) PL2366022T3 (es)
RU (1) RU2547925C2 (es)
WO (1) WO2010059778A1 (es)
ZA (1) ZA201104507B (es)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9345486B2 (en) 2009-03-16 2016-05-24 University Of Washington Nanofibrous conduits for nerve regeneration
GB2504996A (en) * 2012-08-17 2014-02-19 Univ Keele Embryonic stem cell culture method
FI125965B (en) 2012-09-25 2016-04-29 Upm Kymmene Corp Three-dimensional cell culture
CN103031270A (zh) * 2013-01-05 2013-04-10 绍兴文理学院 胆管上皮细胞的高效扩增和培养方法
CN120796168A (zh) 2013-06-11 2025-10-17 哈佛学院校长同事会 SC-β细胞以及用于产生其的组合物和方法
CN107614678B (zh) 2014-12-18 2021-04-30 哈佛学院校长同事会 干细胞来源的β细胞的产生方法及其使用方法
EP3234110B1 (en) 2014-12-18 2024-02-28 President and Fellows of Harvard College METHODS FOR GENERATING STEM CELL-DERIVED ß CELLS AND USES THEREOF
WO2016100898A1 (en) 2014-12-18 2016-06-23 President And Fellows Of Harvard College Serum-free in vitro directed differentiation protocol for generating stem cell-derived b cells and uses thereof
EP3710021A4 (en) 2017-11-15 2021-08-11 Semma Therapeutics, Inc. ISLAND CELL MANUFACTURING COMPOSITIONS AND METHOD OF USE
WO2019102593A1 (ja) * 2017-11-24 2019-05-31 株式会社Ihi 細胞培養装置
WO2020033879A1 (en) 2018-08-10 2020-02-13 Semma Therapeutics, Inc. Stem cell derived islet differentiation
CN119410579B (zh) * 2024-12-02 2026-03-17 中国医学科学院输血研究所 一种培养nk细胞的方法及应用

Family Cites Families (251)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3209652A (en) * 1961-03-30 1965-10-05 Burgsmueller Karl Thread whirling method
AT326803B (de) * 1968-08-26 1975-12-29 Binder Fa G Maschenware sowie verfahren zur herstellung derselben
US3935067A (en) * 1974-11-22 1976-01-27 Wyo-Ben Products, Inc. Inorganic support for culture media
CA1201400A (en) 1982-04-16 1986-03-04 Joel L. Williams Chemically specific surfaces for influencing cell activity during culture
US4499802A (en) * 1982-09-29 1985-02-19 Container Graphics Corporation Rotary cutting die with scrap ejection
US4537773A (en) * 1983-12-05 1985-08-27 E. I. Du Pont De Nemours And Company α-Aminoboronic acid derivatives
US4557264A (en) * 1984-04-09 1985-12-10 Ethicon Inc. Surgical filament from polypropylene blended with polyethylene
US5215893A (en) * 1985-10-03 1993-06-01 Genentech, Inc. Nucleic acid encoding the ba chain prodomains of inhibin and method for synthesizing polypeptides using such nucleic acid
US5089396A (en) * 1985-10-03 1992-02-18 Genentech, Inc. Nucleic acid encoding β chain prodomains of inhibin and method for synthesizing polypeptides using such nucleic acid
US4737578A (en) * 1986-02-10 1988-04-12 The Salk Institute For Biological Studies Human inhibin
US5863531A (en) * 1986-04-18 1999-01-26 Advanced Tissue Sciences, Inc. In vitro preparation of tubular tissue structures by stromal cell culture on a three-dimensional framework
US5804178A (en) * 1986-11-20 1998-09-08 Massachusetts Institute Of Technology Implantation of cell-matrix structure adjacent mesentery, omentum or peritoneum tissue
US5567612A (en) * 1986-11-20 1996-10-22 Massachusetts Institute Of Technology Genitourinary cell-matrix structure for implantation into a human and a method of making
CA1340581C (en) * 1986-11-20 1999-06-08 Joseph P. Vacanti Chimeric neomorphogenesis of organs by controlled cellular implantation using artificial matrices
NZ229354A (en) 1988-07-01 1990-09-26 Becton Dickinson Co Treating polymer surfaces with a gas plasma and then applying a layer of endothelial cells to the surface
EP0363125A3 (en) 1988-10-03 1990-08-16 Hana Biologics Inc. Proliferated pancreatic endocrine cell product and process
US5837539A (en) * 1990-11-16 1998-11-17 Osiris Therapeutics, Inc. Monoclonal antibodies for human mesenchymal stem cells
US5795965A (en) 1991-04-25 1998-08-18 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Reshaped human to human interleukin-6 receptor
US5449383A (en) * 1992-03-18 1995-09-12 Chatelier; Ronald C. Cell growth substrates
GB9206861D0 (en) * 1992-03-28 1992-05-13 Univ Manchester Wound healing and treatment of fibrotic disorders
CA2114282A1 (en) * 1993-01-28 1994-07-29 Lothar Schilder Multi-layered implant
JP3525221B2 (ja) 1993-02-17 2004-05-10 味の素株式会社 免疫抑制剤
AU687386B2 (en) 1993-04-08 1998-02-26 Human Cell Cultures, Inc. Cell culturing method and medium
US5523226A (en) * 1993-05-14 1996-06-04 Biotechnology Research And Development Corp. Transgenic swine compositions and methods
GB9310557D0 (en) * 1993-05-21 1993-07-07 Smithkline Beecham Plc Novel process and apparatus
TW257671B (es) * 1993-11-19 1995-09-21 Ciba Geigy
US6001647A (en) * 1994-04-28 1999-12-14 Ixion Biotechnology, Inc. In vitro growth of functional islets of Langerhans and in vivo uses thereof
US5834308A (en) * 1994-04-28 1998-11-10 University Of Florida Research Foundation, Inc. In vitro growth of functional islets of Langerhans
US6703017B1 (en) * 1994-04-28 2004-03-09 Ixion Biotechnology, Inc. Reversal of insulin-dependent diabetes by islet-producing stem cells, islet progenitor cells and islet-like structures
US6083903A (en) * 1994-10-28 2000-07-04 Leukosite, Inc. Boronic ester and acid compounds, synthesis and uses
EP0800829B2 (en) 1994-12-29 2012-07-25 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Use of a pm-1 antibody or of a mh 166 antibody for enhancing the anti-tumor effect of cisplatin or carboplatin
US5843780A (en) * 1995-01-20 1998-12-01 Wisconsin Alumni Research Foundation Primate embryonic stem cells
US5718922A (en) * 1995-05-31 1998-02-17 Schepens Eye Research Institute, Inc. Intravitreal microsphere drug delivery and method of preparation
US5908782A (en) * 1995-06-05 1999-06-01 Osiris Therapeutics, Inc. Chemically defined medium for human mesenchymal stem cells
US5681561A (en) 1995-06-07 1997-10-28 Life Medical Sciences, Inc. Compositions and methods for improving autologous fat grafting
US5965583A (en) 1997-04-24 1999-10-12 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Substituted imidazoles useful in the treatment of inflammatory disease
DE69837491T2 (de) * 1997-07-03 2008-01-17 Osiris Therapeutics, Inc. Menschliche mesenchymale stammzellen aus peripherem blut
PT1015576E (pt) * 1997-09-16 2005-09-30 Egea Biosciences Llc Metodo para a sintese quimica completa e montagem de genes e de genomas
US6670127B2 (en) * 1997-09-16 2003-12-30 Egea Biosciences, Inc. Method for assembly of a polynucleotide encoding a target polypeptide
CA2307807C (en) * 1997-10-23 2008-09-02 Andrea G. Bodnar Methods and materials for the growth of primate-derived primordial stem cells in feeder-free culture
US6372779B1 (en) * 1997-12-29 2002-04-16 Ortho Pharmaceutical Corporation Anti-inflammatory compounds
US6328960B1 (en) * 1998-03-18 2001-12-11 Osiris Therapeutics, Inc. Mesenchymal stem cells for prevention and treatment of immune responses in transplantation
MY132496A (en) * 1998-05-11 2007-10-31 Vertex Pharma Inhibitors of p38
US6413773B1 (en) 1998-06-01 2002-07-02 The Regents Of The University Of California Phosphatidylinositol 3-kinase inhibitors as stimulators of endocrine differentiation
US6667176B1 (en) * 2000-01-11 2003-12-23 Geron Corporation cDNA libraries reflecting gene expression during growth and differentiation of human pluripotent stem cells
US7410798B2 (en) 2001-01-10 2008-08-12 Geron Corporation Culture system for rapid expansion of human embryonic stem cells
US6610540B1 (en) 1998-11-18 2003-08-26 California Institute Of Technology Low oxygen culturing of central nervous system progenitor cells
US6413556B1 (en) * 1999-01-08 2002-07-02 Sky High, Llc Aqueous anti-apoptotic compositions
EP1144597A2 (en) * 1999-01-21 2001-10-17 Vitro Diagnostics, Inc. Immortalized cell lines and methods of making the same
US6815203B1 (en) * 1999-06-23 2004-11-09 Joslin Diabetes Center, Inc. Methods of making pancreatic islet cells
US6306424B1 (en) * 1999-06-30 2001-10-23 Ethicon, Inc. Foam composite for the repair or regeneration of tissue
US6333029B1 (en) * 1999-06-30 2001-12-25 Ethicon, Inc. Porous tissue scaffoldings for the repair of regeneration of tissue
AU7719300A (en) 1999-09-27 2001-04-30 Ixion Biotechnology, Inc. Reversal of insulin-dependent diabetes by islet-producing stem cells, islet progenitor cells and islet-like structures
US6685936B2 (en) * 1999-10-12 2004-02-03 Osiris Therapeutics, Inc. Suppressor cells induced by culture with mesenchymal stem cells for treatment of immune responses in transplantation
US20030082155A1 (en) 1999-12-06 2003-05-01 Habener Joel F. Stem cells of the islets of langerhans and their use in treating diabetes mellitus
AU778155B2 (en) * 1999-12-13 2004-11-18 Scripps Research Institute, The Markers for identification and isolation of pancreatic islet alpha and beta cell progenitors
US7439064B2 (en) * 2000-03-09 2008-10-21 Wicell Research Institute, Inc. Cultivation of human embryonic stem cells in the absence of feeder cells or without conditioned medium
US7005252B1 (en) * 2000-03-09 2006-02-28 Wisconsin Alumni Research Foundation Serum free cultivation of primate embryonic stem cells
US6436704B1 (en) * 2000-04-10 2002-08-20 Raven Biotechnologies, Inc. Human pancreatic epithelial progenitor cells and methods of isolation and use thereof
US6458589B1 (en) * 2000-04-27 2002-10-01 Geron Corporation Hepatocyte lineage cells derived from pluripotent stem cells
EP1302534A4 (en) * 2000-06-26 2004-06-16 Renomedix Inst Inc CELL FRACTION WITH CELLS WHICH ARE ABLE TO DIFFERENTIATE IN NERVOUS CELLS
CN100525768C (zh) * 2000-10-23 2009-08-12 史密丝克莱恩比彻姆公司 新化合物
ATE301661T1 (de) 2000-12-08 2005-08-15 Ortho Mcneil Pharm Inc Makroheterocyclische verbindungen als kinase inhibitoren
BR0116468A (pt) 2000-12-08 2004-06-29 Ortho Mcneil Pharm Inc Compostos de pirrolina substituìda por indazolila como inibidores de cinase
US6599323B2 (en) * 2000-12-21 2003-07-29 Ethicon, Inc. Reinforced tissue implants and methods of manufacture and use
EP1366148A2 (en) * 2001-01-24 2003-12-03 THE GOVERNMENT OF THE UNITED STATES OF AMERICA, represented by THE DEPARTMENT OF HEALTH & HUMAN SERVICES Differentiation of stem cells to pancreatic endocrine cells
ES2571219T3 (es) * 2001-01-25 2024-09-23 The United States Of America Represented By The Sec Dep Of Health And Human Services Formulación de compuestos de ácido borónico
US6656488B2 (en) * 2001-04-11 2003-12-02 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Bioabsorbable bag containing bioabsorbable materials of different bioabsorption rates for tissue engineering
WO2002086107A2 (en) 2001-04-19 2002-10-31 DeveloGen Aktiengesellschaft für entwicklungsbiologische Forschung A method for differentiating stem cells into insulin-producing cells
CN100516204C (zh) 2001-04-24 2009-07-22 味之素株式会社 干细胞及其分离方法
EP1393066A4 (en) 2001-05-15 2006-01-25 Rappaport Family Inst For Res INSULIN-PRODUCING CELLS DERIVED FROM HUMAN EMBRYONIC STEM CELLS
US6626950B2 (en) * 2001-06-28 2003-09-30 Ethicon, Inc. Composite scaffold with post anchor for the repair and regeneration of tissue
KR100418195B1 (ko) 2001-07-05 2004-02-11 주식회사 우리기술 전력케이블의 다중절연진단장치 및 그 방법
GB0117583D0 (en) * 2001-07-19 2001-09-12 Astrazeneca Ab Novel compounds
WO2003014313A2 (en) * 2001-08-06 2003-02-20 Bresagen, Ltd. Alternative compositions and methods for the culture of stem cells
US6617152B2 (en) * 2001-09-04 2003-09-09 Corning Inc Method for creating a cell growth surface on a polymeric substrate
EP1298201A1 (en) 2001-09-27 2003-04-02 Cardion AG Process for the production of cells exhibiting an islet-beta-cell-like state
CA2463914A1 (en) * 2001-10-18 2003-04-24 Ixion Biotechnology, Inc. Conversion of liver stem and progenitor cells to pancreatic functional cells
EP1442115B9 (en) 2001-11-15 2009-12-16 Children's Medical Center Corporation Methods of isolation, expansion and differentiation of fetal stem cells from chorionic villus, amniotic fluid, and placenta and therapeutic uses thereof
KR100930139B1 (ko) * 2001-12-07 2009-12-07 사이토리 테라퓨틱스, 인크. 처리된 리포애스퍼레이트 세포로 환자를 치료하기 위한시스템 및 방법
IL162131A0 (en) 2001-12-07 2005-11-20 Geron Corp Islet cells from human embryonic stem cells
AU2002218893A1 (en) 2001-12-21 2003-07-09 Thromb-X Nv Compositions for the in vitro derivation and culture of embryonic stem (es) cell lines with germline transmission capability
JP2005512593A (ja) 2001-12-28 2005-05-12 セルアーティス アーベー 多能性のヒト胚盤胞由来幹細胞株の樹立方法
US20030162290A1 (en) 2002-01-25 2003-08-28 Kazutomo Inoue Method for inducing differentiation of embryonic stem cells into functioning cells
US20030180268A1 (en) 2002-02-05 2003-09-25 Anthony Atala Tissue engineered construct for supplementing or replacing a damaged organ
US20050208029A1 (en) * 2002-04-17 2005-09-22 Akihiro Umezawa Method of forming pancreatic beta cells from mesenchymal cells
US20040161419A1 (en) * 2002-04-19 2004-08-19 Strom Stephen C. Placental stem cells and uses thereof
WO2003095452A1 (en) 2002-05-08 2003-11-20 Janssen Pharmaceutica N.V. Substituted pyrroline kinase inhibitors
US20060003446A1 (en) * 2002-05-17 2006-01-05 Gordon Keller Mesoderm and definitive endoderm cell populations
WO2003102171A1 (en) 2002-05-28 2003-12-11 Becton, Dickinson And Company Expansion and transdifferentiation of human acinar cells
EP1513830A1 (en) * 2002-06-05 2005-03-16 Janssen Pharmaceutica N.V. Bisindolyl-maleimid derivatives as kinase inhibitors
GB0212976D0 (en) 2002-06-06 2002-07-17 Tonejet Corp Pty Ltd Ejection method and apparatus
CN1171991C (zh) 2002-07-08 2004-10-20 徐如祥 人神经干细胞的培养方法
US6877147B2 (en) * 2002-07-22 2005-04-05 Broadcom Corporation Technique to assess timing delay by use of layout quality analyzer comparison
US7838290B2 (en) * 2002-07-25 2010-11-23 The Scripps Research Institute Hematopoietic stem cells and methods of treatment of neovascular eye diseases therewith
JP2005534345A (ja) 2002-07-29 2005-11-17 エス セル インターナショナル ピーティーイー リミテッド インスリン陽性、グルコース応答性細胞の分化のための多段階方法
WO2004016747A2 (en) 2002-08-14 2004-02-26 University Of Florida Bone marrow cell differentiation
JP2005537803A (ja) 2002-09-06 2005-12-15 アムサイト インコーポレーティッド Ｃｄ５６陽性ヒト成体膵臓内分泌前駆細胞
US9969977B2 (en) * 2002-09-20 2018-05-15 Garnet Biotherapeutics Cell populations which co-express CD49c and CD90
US20040062753A1 (en) * 2002-09-27 2004-04-01 Alireza Rezania Composite scaffolds seeded with mammalian cells
US20040078090A1 (en) * 2002-10-18 2004-04-22 Francois Binette Biocompatible scaffolds with tissue fragments
WO2004044158A2 (en) 2002-11-08 2004-05-27 The Johns Hopkins University Human embryonic stem cell cultures, and compositions and methods for growing same
US7144999B2 (en) * 2002-11-23 2006-12-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of hypoxia-inducible factor 1 alpha expression
US20060040385A1 (en) 2002-12-05 2006-02-23 Technion Research & Development Foundation Ltd. Cultured human pancreatic islets, and uses thereof
AU2003303071B2 (en) 2002-12-16 2009-04-23 Technion Research & Development Foundation Ltd. Methods of preparing feeder cells-free, xeno-free human embryonic stem cells and stem cell cultures prepared using same
RU2359671C2 (ru) 2003-01-29 2009-06-27 Такеда Фармасьютикал Компани Лимитед Способ получения препарата с покрытием
EP1588708A4 (en) 2003-01-29 2006-03-01 Takeda Pharmaceutical METHOD FOR PRODUCING COATED PREPARATION
US20070155661A1 (en) 2003-02-14 2007-07-05 The Board Of Trustees Of The Leland Standord Junior University Methods and compositions for modulating the development of stem cells
US20070154981A1 (en) 2003-02-14 2007-07-05 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Insulin-producing cells derived from stem cells
WO2004087885A2 (en) 2003-03-27 2004-10-14 Ixion Biotechnology, Inc. Method for transdifferentiation of non-pancreatic stem cells to the pancreatic pathway
US20060194315A1 (en) * 2003-03-31 2006-08-31 Condie Brian G Compositions and methods for the control, differentiaton and/or manipulation of pluripotent cells through a gamma-secretase signaling pathway
US20090203141A1 (en) 2003-05-15 2009-08-13 Shi-Lung Lin Generation of tumor-free embryonic stem-like pluripotent cells using inducible recombinant RNA agents
WO2005001080A2 (en) * 2003-06-27 2005-01-06 Ethicon, Incorporated Postpartum-derived cells for use in treatment of disease of the heart and circulatory system
IL161903A0 (en) 2003-07-17 2005-11-20 Gamida Cell Ltd Ex vivo progenitor and stem cell expansion for usein the treatment of disease of endodermally- deri ved organs
ITRM20030395A1 (it) 2003-08-12 2005-02-13 Istituto Naz Per Le Malattie Infettive Lazz Terreno di coltura per il mantenimento, la proliferazione e il differenziamento di cellule di mammifero.
US7569385B2 (en) * 2003-08-14 2009-08-04 The Regents Of The University Of California Multipotent amniotic fetal stem cells
US7157275B2 (en) 2003-08-15 2007-01-02 Becton, Dickinson And Company Peptides for enhanced cell attachment and growth
CA2536067A1 (en) 2003-08-27 2005-03-10 Stemcells California, Inc. Enriched pancreatic stem cell and progenitor cell populations, and methods for identifying, isolating and enriching for these populations
WO2005058301A1 (en) 2003-12-17 2005-06-30 Allergan, Inc. Methods for treating retinoid responsive disorders using selective inhibitors of cyp26a and cyp26b
US20060030042A1 (en) * 2003-12-19 2006-02-09 Ali Brivanlou Maintenance of embryonic stem cells by the GSK-3 inhibitor 6-bromoindirubin-3'-oxime
CN103898047B (zh) 2003-12-23 2020-03-03 维亚希特公司 定形内胚层
US7625753B2 (en) * 2003-12-23 2009-12-01 Cythera, Inc. Expansion of definitive endoderm cells
CN109628371B (zh) 2003-12-23 2021-02-19 维亚希特公司 定形内胚层
US20050266554A1 (en) * 2004-04-27 2005-12-01 D Amour Kevin A PDX1 expressing endoderm
WO2005065354A2 (en) * 2003-12-31 2005-07-21 The Burnham Institute Defined media for pluripotent stem cell culture
TWI334443B (en) * 2003-12-31 2010-12-11 Ind Tech Res Inst Method of single cell culture of undifferentiated human embryonic stem cells
US20080241107A1 (en) 2004-01-23 2008-10-02 Copland Iii John A Methods and Compositions For Preparing Pancreatic Insulin Secreting Cells
US7794704B2 (en) 2004-01-23 2010-09-14 Advanced Cell Technology, Inc. Methods for producing enriched populations of human retinal pigment epithelium cells for treatment of retinal degeneration
GB2441530B (en) 2004-02-12 2009-09-23 Univ Newcastle Stem Cells
JP4901471B2 (ja) 2004-02-19 2012-03-21 国立大学法人京都大学 体細胞核初期化物質のスクリーニング方法
CA2581424A1 (en) 2004-03-09 2005-09-22 Gang Xu Methods for generating insulin-producing cells
JP2007528226A (ja) 2004-03-10 2007-10-11 リージェンツ オブ ザ ユニヴァーシティ オブ カリフォルニア 胚幹細胞の増殖用組成物および方法
KR101178786B1 (ko) 2004-03-23 2012-09-07 다이이찌 산쿄 가부시키가이샤 다능성 줄기세포의 증식 방법
WO2005097980A2 (en) 2004-03-26 2005-10-20 Geron Corporation New protocols for making hepatocytes from embryonic stem cells
AU2005230832B2 (en) 2004-04-01 2010-11-11 Wisconsin Alumni Research Foundation Differentiation of stem cells to endoderm and pancreatic lineage
CN103103158B (zh) 2004-04-27 2016-08-03 韦尔赛特公司 细胞培养基
AU2005272078B2 (en) 2004-07-09 2011-04-14 Viacyte, Inc. Methods for identifying factors for differentiating definitive endoderm
US8187878B2 (en) 2004-08-13 2012-05-29 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Methods for increasing definitive endoderm differentiation of pluripotent human embryonic stem cells with PI-3 kinase inhibitors
WO2006026473A2 (en) 2004-08-25 2006-03-09 University Of Georgia Research Foundation, Inc. METHODS AND COMPOSITIONS UTILIZING MYC AND GSK3ß TO MANIPULATE THE PLURIPOTENCY OF EMBRYONIC STEM CELLS
DE102004043256B4 (de) 2004-09-07 2013-09-19 Rheinische Friedrich-Wilhelms-Universität Bonn Skalierbarer Prozess zur Kultivierung undifferenzierter Stammzellen in Suspension
ATE549395T1 (de) 2004-09-08 2012-03-15 Wisconsin Alumni Res Found Medium und kultur von embryonalen stammzellen
AU2005282414C1 (en) 2004-09-08 2011-04-07 Wisconsin Alumni Research Foundation Culturing human embryonic stem cells
US7273756B2 (en) * 2004-10-01 2007-09-25 Isto Technologies, Inc. Method for chondrocyte expansion with phenotype retention
JP2008538276A (ja) 2005-01-28 2008-10-23 ノヴァセラ・リミテッド 胚幹細胞培養のための方法
WO2006083782A2 (en) 2005-01-31 2006-08-10 Es Cell International Pte Ltd. Directed differentiation of embryonic stem cells and uses thereof
WO2006088867A2 (en) 2005-02-15 2006-08-24 Medistem Laboratories, Incorporated Method for expansion of stem cells
AU2006218359A1 (en) 2005-03-04 2006-09-08 John O'neil Adult pancreatic derived stromal cells
GB0505970D0 (en) 2005-03-23 2005-04-27 Univ Edinburgh Culture medium containing kinase inhibitor, and uses thereof
WO2006113470A2 (en) 2005-04-15 2006-10-26 Geron Corporation Cancer treatment by combined inhibition of proteasome and telomerase activities
CN100425694C (zh) 2005-04-15 2008-10-15 北京大学 诱导胚胎干细胞向胰腺细胞分化的方法
WO2006114098A2 (en) 2005-04-26 2006-11-02 Aarhus Universitet Biocompatible material for surgical implants and cell guiding tissue culture surfaces
JP5092124B2 (ja) 2005-05-24 2012-12-05 国立大学法人 熊本大学 Ｅｓ細胞の分化誘導方法
AU2006202209B2 (en) 2005-05-27 2011-04-14 Lifescan, Inc. Amniotic fluid derived cells
EP1899344A1 (en) 2005-06-10 2008-03-19 Irm, Llc Compounds that maintain pluripotency of embryonic stem cells
WO2006138433A2 (en) 2005-06-14 2006-12-28 The Regents Of The University Of California Induction of cell differentiation by class i bhlh polypeptides
US20080199959A1 (en) 2005-06-21 2008-08-21 Ge Healthcare Bio-Sciences Ab Method For Cell Culture
JP5560391B2 (ja) 2005-06-22 2014-07-23 アステリアス バイオセラピューティクス インコーポレイテッド ヒト胚性幹細胞の懸濁培養法
US8778919B2 (en) 2005-06-30 2014-07-15 Janssen Pharmaceutica Nv Cyclic anilino—pyridinotriazines
GB2443370A (en) 2005-07-29 2008-04-30 Australian Stem Cell Ct Ltd Compositions and methods for growth of pluripotent cells
US20080194021A1 (en) 2005-07-29 2008-08-14 Mays Robert W Use of a Gsk-3 Inhibitor to Maintain Potency of Culture Cells
WO2007025234A2 (en) 2005-08-26 2007-03-01 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Generation of pancreatic endocrine cells from primary duct cell cultures and methods of use for treatment of diabetes
EP1962719A4 (en) 2005-08-29 2011-05-04 Technion Res And Dev Of Foundation Ltd MEDIA FOR BREEDING STEM CELLS
EP1937801A1 (en) 2005-09-02 2008-07-02 Agency for Science, Technology and Research Method of deriving mesenchymal stem cells
GB2444686B (en) 2005-09-12 2010-08-25 Es Cell Int Pte Ltd Differentiation of pluripotent stem cells using p38 MAPK inhibitors or prostaglandins
CN101310012B (zh) 2005-10-14 2012-05-09 明尼苏达大学董事会 非胚胎干细胞分化成具有胰腺表型的细胞
WO2007051038A2 (en) 2005-10-27 2007-05-03 Cythera, Inc. Pdx1-expressing dorsal and ventral foregut endoderm
US8048999B2 (en) 2005-12-13 2011-11-01 Kyoto University Nuclear reprogramming factor
WO2007082963A1 (es) 2006-01-18 2007-07-26 Fundación Instituto Valenciano De Infertilidad Líneas de células madre embrionarias humanas y métodos para usar las mismas
SG170021A1 (en) 2006-02-23 2011-04-29 Novocell Inc Compositions and methods useful for culturing differentiable cells
US7695965B2 (en) 2006-03-02 2010-04-13 Cythera, Inc. Methods of producing pancreatic hormones
JP6110048B2 (ja) 2006-03-02 2017-04-05 ヴィアサイト，インコーポレイテッド 内分泌前駆細胞、膵臓ホルモン発現細胞及びそれらの製造方法
AU2007244675A1 (en) 2006-04-28 2007-11-08 Lifescan, Inc. Differentiation of human embryonic stem cells
US8741643B2 (en) 2006-04-28 2014-06-03 Lifescan, Inc. Differentiation of pluripotent stem cells to definitive endoderm lineage
US8685730B2 (en) 2006-05-02 2014-04-01 Wisconsin Alumni Research Foundation Methods and devices for differentiating pluripotent stem cells into cells of the pancreatic lineage
SE534150C2 (sv) 2006-05-02 2011-05-10 Wisconsin Alumni Res Found Förfarande för differentiering av stamceller till celler av den endodermala och pankreatiska utvecklingslinjen
US7964402B2 (en) 2006-05-25 2011-06-21 Sanford-Burnham Medical Research Institute Methods for culture and production of single cell populations of human embryonic stem cells
US20090298169A1 (en) 2006-06-02 2009-12-03 The University Of Georgia Research Foundation Pancreatic and Liver Endoderm Cells and Tissue by Differentiation of Definitive Endoderm Cells Obtained from Human Embryonic Stems
CN101541953A (zh) 2006-06-02 2009-09-23 佐治亚大学研究基金会 通过从人胚胎干细胞获得的定形内胚层细胞的分化得到胰和肝内胚层细胞及组织
US8415153B2 (en) 2006-06-19 2013-04-09 Geron Corporation Differentiation and enrichment of islet-like cells from human pluripotent stem cells
CN100494359C (zh) 2006-06-23 2009-06-03 中日友好医院 神经干细胞三维立体培养体外扩增的方法
CA2893679C (en) 2006-06-26 2018-10-30 Lifescan, Inc. Conditioned medium for pluripotent stem cell culture
US20080003676A1 (en) 2006-06-26 2008-01-03 Millipore Corporation Growth of embryonic stem cells
WO2008004990A2 (en) 2006-07-06 2008-01-10 Es Cell International Pte Ltd Method for stem cell culture and cells derived therefrom
AU2007277364B2 (en) 2006-07-26 2010-08-12 Viacyte, Inc. Methods of producing pancreatic hormones
DK3441459T3 (da) 2006-08-02 2021-06-07 Technion Res & Dev Foundation Fremgangsmåder til ekspansion af embryonale stamceller i en suspensionskultur
KR101331510B1 (ko) 2006-08-30 2013-11-20 재단법인서울대학교산학협력재단 저농도의 포도당을 함유하는 인간 배아줄기세포용 배지조성물 및 이를 이용한 인간 배아 줄기세포로부터 인슐린생산 세포 또는 세포괴로 분화시키는 방법, 그리고그로부터 유도된 인슐린 생산 세포 또는 세포괴
JP2008099662A (ja) * 2006-09-22 2008-05-01 Institute Of Physical & Chemical Research 幹細胞の培養方法
US20080091234A1 (en) 2006-09-26 2008-04-17 Kladakis Stephanie M Method for modifying a medical implant surface for promoting tissue growth
WO2008048647A1 (en) 2006-10-17 2008-04-24 Cythera, Inc. Modulation of the phosphatidylinositol-3-kinase pathway in the differentiation of human embryonic stem cells
BRPI0718310A2 (pt) 2006-10-17 2013-11-19 Stiefel Laboratories Metabólitos de talarozol
CA2666789C (en) 2006-10-18 2016-11-22 Yong Zhao Embryonic-like stem cells derived from adult human peripheral blood and methods of use
RU2323252C1 (ru) * 2006-10-25 2008-04-27 Антонина Ивановна Колесникова Способ культивирования мезенхимальных стволовых клеток человека ex vivo
EP2088190A4 (en) 2006-11-09 2011-01-05 Japan Government METHOD FOR THE CULTURE AND PASSING OF AN EMBRYONAL PRIMATIVE STEM CELL AND METHOD FOR INDUCING THE DIFFERENTIATION OF THE EMBRYONAL STEM CELL
WO2008086005A1 (en) 2007-01-09 2008-07-17 University Of South Florida Compositions including triciribine and bortezomib and derivatives thereof and methods of use thereof
CA2676044C (en) 2007-01-30 2019-10-22 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Early mesoderm cells, a stable population of mesendoderm cells that has utility for generation of endoderm and mesoderm lineages and multipotent migratory cells (mmc)
GB0703188D0 (en) 2007-02-19 2007-03-28 Roger Land Building Large scale production of stem cells
US20090053182A1 (en) 2007-05-25 2009-02-26 Medistem Laboratories, Inc. Endometrial stem cells and methods of making and using same
WO2009006422A1 (en) 2007-06-29 2009-01-08 Stem Cell Products, Inc. Automated method and apparatus for embryonic stem cell culture
EP3957716A1 (en) 2007-07-18 2022-02-23 Janssen Biotech, Inc. Differentiation of human embryonic stem cells
EP2584034B8 (en) 2007-07-31 2017-12-06 Lifescan, Inc. Pluripotent stem cell differentiation by using human feeder cells
DK2185693T3 (da) 2007-07-31 2019-09-23 Lifescan Inc Differentiering af humane embryoniske stamceller
MX2010002179A (es) 2007-08-24 2010-04-27 Stichting Het Nl Kanker I Composicion para el tratamiento de enfermedades neoplasicas.
WO2009061442A1 (en) 2007-11-06 2009-05-14 Children's Medical Center Corporation Method to produce induced pluripotent stem (ips) cells form non-embryonic human cells
CA2954431C (en) 2007-11-27 2021-08-24 Lifescan, Inc. Differentiation of human embryonic stem cells to pancreatic cells
SG154367A1 (en) 2008-01-31 2009-08-28 Es Cell Int Pte Ltd Method of differentiating stem cells
WO2009096049A1 (ja) 2008-02-01 2009-08-06 Kyoto University 人工多能性幹細胞由来分化細胞
US20100330677A1 (en) 2008-02-11 2010-12-30 Cambridge Enterprise Limited Improved Reprogramming of Mammalian Cells, and Cells Obtained
JP5733986B2 (ja) * 2008-02-21 2015-06-10 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド 細胞の付着、培養、及び剥離のための方法、表面改質されたプレート、並びに組成物
WO2009110215A1 (ja) 2008-03-03 2009-09-11 独立行政法人 科学技術振興機構 繊毛細胞の分化誘導方法
JP2011514169A (ja) 2008-03-17 2011-05-06 エージェンシー フォー サイエンス，テクノロジー アンド リサーチ 幹細胞培養のためのマイクロキャリア
RU2359030C1 (ru) 2008-03-19 2009-06-20 Общество С Ограниченной Ответственностью "Лаборатория Клеточных Технологий" Способ получения эндотелиальных клеток из эмбриональных стволовых клеток человека (варианты)
AU2008355123B2 (en) 2008-04-21 2014-12-04 Viacyte, Inc. Methods for purifying endoderm and pancreatic endoderm cells derived from human embryonic stem cells
US8338170B2 (en) 2008-04-21 2012-12-25 Viacyte, Inc. Methods for purifying endoderm and pancreatic endoderm cells derived from human embryonic stem cells
US8728812B2 (en) 2008-04-22 2014-05-20 President And Fellows Of Harvard College Compositions and methods for promoting the generation of PDX1+ pancreatic cells
US7939322B2 (en) 2008-04-24 2011-05-10 Centocor Ortho Biotech Inc. Cells expressing pluripotency markers and expressing markers characteristic of the definitive endoderm
US8623648B2 (en) 2008-04-24 2014-01-07 Janssen Biotech, Inc. Treatment of pluripotent cells
EP2297319B1 (en) 2008-06-03 2015-10-07 Viacyte, Inc. Growth factors for production of definitive endoderm
US20090298178A1 (en) 2008-06-03 2009-12-03 D Amour Kevin Allen Growth factors for production of definitive endoderm
DE102008032236A1 (de) 2008-06-30 2010-04-01 Eberhard-Karls-Universität Tübingen Isolierung und/oder Identifizierung von Stammzellen mit adipozytärem, chondrozytärem und pankreatischem Differenzierungspotential
EP2942392B1 (en) 2008-06-30 2018-10-03 Janssen Biotech, Inc. Differentiation of pluripotent stem cells
US20100028307A1 (en) 2008-07-31 2010-02-04 O'neil John J Pluripotent stem cell differentiation
WO2010022395A2 (en) 2008-08-22 2010-02-25 President And Fellows Of Harvard College Methods of reprogramming cells
US9234178B2 (en) 2008-10-31 2016-01-12 Janssen Biotech, Inc. Differentiation of human pluripotent stem cells
EP2350265B1 (en) 2008-10-31 2019-04-17 Janssen Biotech, Inc. Differentiation of human embryonic stem cells to the pancreatic endocrine lineage
US8008075B2 (en) 2008-11-04 2011-08-30 Viacyte, Inc. Stem cell aggregate suspension compositions and methods of differentiation thereof
JP5390624B2 (ja) 2008-11-04 2014-01-15 バイアサイト インク 幹細胞集合体懸濁液組成物、その分化方法
JP2012508584A (ja) 2008-11-14 2012-04-12 ヴィアサイト，インコーポレイテッド ヒト多能性幹細胞由来膵臓細胞のカプセル化
KR101774546B1 (ko) 2008-11-20 2017-09-04 얀센 바이오테크 인코포레이티드 마이크로-캐리어 상의 만능 줄기 세포 배양
ES2633935T3 (es) 2008-12-05 2017-09-26 Inserm - Institut National De La Santé Et De La Recherche Médicale Método y medio para la diferenciación neural de células pluripotentes
CN103952372B (zh) 2009-07-20 2016-10-05 詹森生物科技公司 人胚胎干细胞的分化
CN102482643B (zh) 2009-07-20 2016-06-29 詹森生物科技公司 人胚胎干细胞的分化
PL2494035T3 (pl) 2009-10-29 2018-07-31 Janssen Biotech, Inc. Pluripotencjalne komórki macierzyste
FI20096288A0 (fi) 2009-12-04 2009-12-04 Kristiina Rajala Formulations and methods for culturing stem cells
SG10201408552YA (en) 2009-12-23 2015-02-27 Janssen Biotech Inc Differentiation of human embryonic stem cells
CN102712902B (zh) 2009-12-23 2019-01-08 詹森生物科技公司 人胚胎干细胞的分化
SG10201501513TA (en) 2010-03-02 2015-04-29 Univ Singapore Culture additives to boost stem cell proliferation and differentiation response
CN102959076B (zh) 2010-03-31 2015-09-16 斯克里普斯研究所 重编程细胞
EP2563908B1 (en) 2010-04-25 2019-01-09 Icahn School of Medicine at Mount Sinai Generation of anterior foregut endoderm from pluripotent cells
RU2587634C2 (ru) 2010-05-12 2016-06-20 Янссен Байотек, Инк. Дифференцирование эмбриональных стволовых клеток человека
US9279103B2 (en) 2010-08-05 2016-03-08 Wisconsin Alumni Research Foundation Simplified basic media for human pluripotent cell culture
CN103154237B (zh) 2010-08-31 2016-03-16 詹森生物科技公司 多能干细胞的分化
MY177150A (en) 2011-02-28 2020-09-08 Stempeutics Res Malaysia Sdn Bhd Isolation and expansion of adult stem cells, their therapeutic composition and uses thereof
US20130274184A1 (en) 2011-10-11 2013-10-17 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Er stress relievers in beta cell protection
WO2013055397A1 (en) 2011-10-14 2013-04-18 Children's Medical Center Corporation Inhibition and enhancement of reprogramming by chromatin modifying enzymes
FI2794857T3 (fi) 2011-12-22 2026-03-25 Janssen Biotech Inc Ihmisen alkion kantasolujen erilaistaminen yksittäisiksi hormonaalisiksi insuliinipositiivisiksi soluiksi
US10519422B2 (en) 2012-02-29 2019-12-31 Riken Method of producing human retinal pigment epithelial cells
EP3450544A1 (en) 2012-06-08 2019-03-06 Janssen Biotech, Inc. Differentiation of human embryonic stem cells into pancreatic endodrine cells
CN104903440B (zh) 2012-09-03 2018-04-06 诺和诺德股份有限公司 使用小分子从多能干细胞产生胰内胚层
DK2938723T3 (da) 2012-12-31 2023-02-20 Janssen Biotech Inc Differentiering af humane embryonale stamceller til pancreatiske endokrine celler under anvendelse af hb9-regulatorer
US8859286B2 (en) 2013-03-14 2014-10-14 Viacyte, Inc. In vitro differentiation of pluripotent stem cells to pancreatic endoderm cells (PEC) and endocrine cells
CA2906643A1 (en) 2013-03-15 2014-09-25 The Jackson Laboratory Isolation of non-embryonic stem cells and uses thereof

Also Published As

Publication number Publication date
CN102257132A (zh) 2011-11-23
AU2009316583A1 (en) 2010-05-27
EP2366022A1 (en) 2011-09-21
AU2009316583B2 (en) 2016-04-21
JP2012509086A (ja) 2012-04-19
ZA201104507B (en) 2018-11-28
AU2016206314A1 (en) 2016-08-04
US20100124783A1 (en) 2010-05-20
EP2366022B1 (en) 2016-04-27
AU2016206314B2 (en) 2018-03-01
HK1162191A1 (zh) 2012-08-24
WO2010059778A1 (en) 2010-05-27
US20180258387A1 (en) 2018-09-13
RU2011124902A (ru) 2012-12-27
BRPI0921996A2 (pt) 2015-08-18
CN102257132B (zh) 2014-09-03
JP5719305B2 (ja) 2015-05-13
PL2366022T3 (pl) 2016-11-30
US9969973B2 (en) 2018-05-15
RU2547925C2 (ru) 2015-04-10
CA2744227C (en) 2018-10-02
MX2011005289A (es) 2011-06-01
KR101687344B1 (ko) 2016-12-16
CA2744227A1 (en) 2010-05-27
KR20110089426A (ko) 2011-08-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2584053T3 (es) Métodos y composiciones para la unión de células y cultivo en sustratos planos
ES2939233T3 (es) Generación de células madre pluripotentes humanas derivadas de células beta funcionales que muestran una respiración mitocondrial dependiente de la glucosa y respuesta a la secreción de insulina en dos fases
RU2555538C2 (ru) Культура плюрипотентных стволовых клеток на микроносителях
JP6718431B2 (ja) 中脳ドーパミン作動性ニューロンの生産およびその使用方法
JP6013196B2 (ja) 多能性幹細胞から誘導した細胞を精製するための方法
JP5922147B2 (ja) 多能性幹細胞に由来するインスリン産生細胞
US20230248779A1 (en) Methods for differentiating and purifying pancreatic endocrine cells
US20120003736A1 (en) Methods for culturing undifferentiated cells using sustained release compositions
WO2013106677A1 (en) Isolated human lung progenitor cells and uses thereof
US20230332102A1 (en) Method for inducing differentiation of pluripotent stem cells into ectodermal, mesodermal, and endodermal cells
CA3049847A1 (en) Isolation of human lung progenitors derived from pluripotent stem cells
Oliver-De la Cruz et al. Neural stem cells from mammalian brain: Isolation protocols and maintenance conditions
AU2011342732B2 (en) Insulin producing cells derived from pluripotent stem cells
Maldonado Regulation of the Mechanical Niche to Guide Human Pluripotent Stem Cell Behaviors
Maldonado Regulation of the Mechanical Niche to Guide Pluripotent Stem Cell Behaviors
AU2017276263A1 (en) Methods for purifying cells derived from pluripotent stem cells
HK1162191B (en) Methods and compositions for cell attachment and cultivation on planar substrates