JPH01130792A - トリメチルアミン類の除去方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は、トリメチルアミンおよび／またはトリメチル
アミン塩（以下、両者を総称して　トリメチルアミン類
　と記すこともある）を含有する液中のトリメチルアミ
ン類を除去する方法に関し、さらに詳細には、トリメチ
ルアミン類を含有する液中のトリメチルアミン類を、細
菌を使用して除去する方法に係わる。

〔従来の技術、発明が解決しようとする問題点〕トリメ
チルアミンは、トリメチルアミン製造工場からの排液の
中に含有されており、また、溶媒として広く使用されて
いるテトラメチルアンモニウム化合物およびトリメチル
エチルアンモニウム化合物などのそれぞれの分解産物と
して、化学工場などからの排液に含有されている。しか
して、トリメチルアミンを含有するこれらの排液は、有
害であり、環境衛生上、無害化処理を施してから放流し
なければならないが、従来の活性汚泥処理によってはこ
のような排液を無害化できなかった。

トリメチルアミン類は、安定で、分解され難い物質であ
るが、この物質を効率よく資化乃至分解し得る微生物を
見出すことができれば、この微生物を用いてトリメチル
アミン類を含有する排液を効率よく無害化することが可
能となる。

〔問題点を解決するための手段、作用〕本発明者らは、
自然界を広く探索した結果、トリメチルアミン類を旺盛
に資化し得るか、乃至は、強力に分解し得る微生物を見
出し、この微生物を使用する本発明を完成した。

すなわち、本発明は、　　トリメチルアミンおよび／ま
たはトリメチルアミン塩を含有する液と、メチロバチル
ス属、プロトモナス属、メチロバクテリウム属、キサン
トバクタ−属、メチロファーガ属、アースロバク汐−属
およびミコバクテリウム属のいずれかの属に属し、トリ
メチルアミンおよび／またはトリメチルアミン塩を資化
２分解し得る細菌の菌体および／または該細菌の菌体処
理物とを接触させて、該液中のトリメチルアミンおよび
／またはトリメチルアミン塩を分解、除去することを特
徴とするトリメチルアミン類の除去方法である。

本発明に用いられる細菌は、メチロバチルス属、プロト
モナス属、メチロバクテリウム属、キサントバクタ−属
、メチロファーガ属、アースロバクター属およびミコバ
クテリウム属のいずれかの属に属し、トリメチルアミン
類を資化１分解し得る能力を有する菌株であればよく、
特に制限はない。

メチロバチルス属に属する細菌の代表的な菌種としては
、たとえば、メチロバチルス　グリコゲネスがある。こ
の属およびこの菌種は、ヨーデイ（Ｙｏｒｄｙ）　とラ
イ−バー（Ｗｅａｖｅｒ）とにより　１９７７年、ＡＴ
ＣＣ２９４７５（、＝　ＪＣＭ　２８５０・ＮＣＩＢ　
１１３７５）の１菌株について設立された（Ｊ、ＲｏＹ
ｏｒｄｙ　＆　Ｔ、Ｌ、Ｗｅａｖｅｒ：“Ｉｎｔ、Ｊ、
５ｙｓｔ、Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、”　２７．２４７〜２
５５　（１９７７）　）ものであるが、１９８６年、浦
上と駒形とにより、メチロバチルス属およびメチロバチ
ルス　グリコゲネスについて訂正が行なわれ（Ｔｅｉｚ
ｉ　Ｕｒａｋａｍｉ　＆Ｋａｚｕｏ　　Ｋｏｍａｇａｔ
ａ：”Ｉｎｔ、Ｊ、５ｙｓｔ、Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、　
　　３６＋　　　５０２〜５１１　（１９８６））　、
アクロモバクタ−属、メタノモナス属、メチロモナス属
、プロタミノバクタ−属およびシュードモナス属のそれ
ぞれに属するいくつかの菌種が、このメチロバチルス　
グリコゲネスに含まれることになった。

また、さらに、浦上および駒形の分類じＪ　、　Ｇｅｎ
　。

八ｐｐ１．Ｍｊｃｒｏｂｉｏ１．”３２．３１７〜３４
１　（１９８６）および“Ｊ。

Ｇｅｎ、Ａｐｐｌ、Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、”３３．１３
５〜１６５　（１９８６）　）によれば、アエロモナス
属、コリネバクテリウム属、メチロモナス属およびシュ
ードモナス属のそれぞれに属するいくつかがメチロバチ
ルス　グリコゲネスとして同定されている。

トリメチルアミン類を資化９分解する菌株の代表例とし
ては、メタノモナス　メチロポラＡＴＣＣ２１３６９、
同ＡＴＣＣ２１８５２，同へＴＣＣ２１９５Ｂ、同ＡＴ
ＣＣ２１９６３、メタノモナス　メチロボラ　サブエス
ピー　チアミノフィラ＾ＴＣＣ２１３７０，アクロモバ
クタ−メタノミガスＡＴＣＣ２１２７５，同ＡＴＣＣ２
１４５２゜同ＡＴＣＣ２１５９１，メチロモナス　メタ
ノリカＮＲＲＬ　Ｂ−５４５８，１０タミノバクター　
キャンディダスＡＴＣＣ２１３７２，プロタミノバクタ
−チアミノファーガスＡＴＣＣ２１３７１，同ＡＴＣＣ
２１９５７，シュードモナス　インスエタＡＴＣＣ２１
４５３，同　ＡＴＣＣ２１９６２、シュードモナス　メ
タノリカＡＴＣＣ２１９６０、シュードモナス　メチロ
トロファＮＣｌＢ１０５０８、同　ＮＣＩ［ｌ　１０５
１４．同　ＮＣＩ［ｌ　１０５１５．　　メチロモナス
　メタツカタラレスリカ　微工研菌寄第４０３７号、メ
チロモナス　メタノフラクトリカ　微工研菌寄第４０４
２号、同　微工研菌寄第４０４３号、メチロモナス　エ
スペクシー　微工研菌寄第２６６１号。

同　微工研菌寄第２６６２号、同　微工研菌寄第２６６
３号、シュードモナス　メチロニカ　微工研菌寄第２２
４７号、シュードモナス　メタノミガス　微工研菌寄第
２１８２号、アエロモナス　メタノコラ　微工研菌寄第
２８０９号、アエロモナス　メタノフィラム微工研菌寄
第２８０８号、シュードモナス　インアウディタ　微工
研菌寄・第１６９２号、同　微工研菌寄第１６９３号、
同　微工研菌寄第１６９４号ならびにメチロモナス　プ
ロバス　微工研菌寄第３１９３号などがある。

現在では、これらの菌株は、いずれも、前記の浦上およ
び駒形の分類によりメチロバチルス属に属する細菌であ
るとされている。

プロトモナス属に属する菌種の代表例として、プロトモ
ナス　エクストロクエンスがある。この属およびこの菌
種は、浦上および駒形により、１９８４年に設立され（
Ｔｅｉｚｉ　Ｕｒａｋａｍｉ　＆　Ｋａｚｕｏ　Ｋｏｍ
ａｇａｔａ。

”Ｉｎｔ、Ｊ、５ｙｓｔ、Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、”　３
４．１８８〜２０１．　（１９８４）　〕、ミコプラナ
属、プロタミノバクタ−属、シュードモナス属およびチ
オバチルス属のいくつかの菌種が、このプロトモナス　
エクストロクエンスに属することとされている。

トリメチルアミン類を資化９分解する代表的な菌株とし
ては、たとえば、シュードモナス　ロゼア　ＮＣＩＢ　
１０６０４．同ＮＣＩＢ　１０６１０．同ＮＣｌＢ１０
６１２、　　シュードモナス　メタノリカＮＲＲＬ　Ｂ
−３４４９゜プロタミノバクタ−メタノリカ　微工研菌
寄第４８９７号などがある。これらの菌株も前記の浦上
と駒形の分類によれば、プロトモナス属に属する細菌で
ある。

また、本発明者らが土壌から分離したプロトモナス　エ
クストロクエンスＴｌ−１５（微工研菌寄第９４６６号
）がある。

プロトモナス　エクストロクエンスＴ１１−１５の苗字
的性質を以下に示す。

１、形態 メタノール含有液体培地およびメタノール含有寒天培地
のそれぞれで３０°Ｃで３日間培養した。

■　直桿菌　幅０．９〜１．２．１７Ｉ１１　　長さ１
．５〜４−■　集団、単細胞または双細胞となる。

■　運動性あり。極鞭毛を有する。

■　胞子の有無　　　　　　　生産されない。

■　ダラム染色　　　　　　　陰性。

■　抗酸性　　　　　　　　　陰性。

■　細胞外粘着物　　　　　　生産されない。

２、次の各培地における生育状態 （特に断らなければ３０°Ｃで３日間の培養）■　肉汁
寒天平板培地 コロニーの形態および性状： 外形−円形、大きさ一２〜３ｍｍ。

隆起−半球形、構造−均質、表面−平滑。

辺縁−金縁で滑らか５色−赤色またはピンク色、透明度
−不透明、硬度−バター質。

■　メタノール含有寒天平板培地 肉汁寒天平板培地におけると同じ。

■　肉汁寒天斜面培地 接種線に一様に旺盛に生育する。

コロニーの形態および性状： 隆起−中程度１表面−平滑１辺縁−滑らか。

色−赤色またはピンク色、透明度−不透明。

硬度−バター質。

■　メタノール含有寒天斜面培地 肉汁寒天斜面培地におけると同じ。

■　肉汁液体培地 全体に弱く生育する。沈殿あり。菌環を形成しない。

■　ペプトン水液体培地 全体に弱く生育する。沈殿あり。菌環を形成しない。

■　メタノール含有液体培地 全体に生育する。沈殿あり。菌環を形成しない。

■　肉汁寒天穿刺培養 小乳頭状に一様に生育する。培地表面では、直径２〜４
ｍｍ位の円状に生育する。

■　メタノール含有寒天穿刺培養 小乳頭状に一様に生育する。培地表面では、直径２〜４
ｍｍ位の円状に生育する。

［相］　肉汁ゼラチン高層培養 ２０°Ｃで１０日間培養。

菌の生育は認められるが、ゼラチンは液化されない。

■　リドマスミルク ３０″Ｃで４週間培養。

菌の生育は認められるが、アルカリは生産されない。

３、生理学的性質 ■　硝酸塩の還元　　硝酸塩を亜硝酸塩に弱（還元する
。

■　ＭＲテスト　　　　　　　陰性・ ■　ＶＰテスト　　　　　　　陰性。

■　インドールの生成　　　　陰性。

■　硫化水素の生成　　　　　陰性。

■　でん粉の加水分解　　　　陰性。

■　くえん酸の利用（コーザＫｏｓｅｒ培地とクリステ
ンセンＣｈｒｉｓ　ｔｅｎｓｅｎ培地を併用）利用しな
い。

■　窒素源の利用 アンモニウム塩、硝酸塩、尿素およびペプトンを窒素源
としてそれぞれ利用する。

■　色素の生成 赤色の非水溶性色素を菌体中に生成する。

［相］　ウレアーゼ　　　　　　　陽性。

■　カタラーゼ　　　　　　　陽性。

＠　アンモ・ニアの生成　　　　生成する。

■　生育の範囲 ｐＨ５〜９の範囲で生育する。ｐｔ＋　６〜８の範囲が
好ましい。

温度５〜３５°Ｃで生育する。２５〜３２°Ｃが好まし
い。

［相］　酸素に対する態度　　　　好気性。

■　オキシダーゼ　　　　　　陰性。

［相］　Ｏ−Ｆテスト（ヒユー　ライフソン　Ｈｕｇｈ
Ｌｅｉｆｓｏｎ法による） 糖を酸化的に分解するが、醗酵的に分解しない・　　　
　　　　　　　　　（以下余白）■　糖類の資化性なら
びに酸の生成およびガスの生成 資化性：資化して、分解する。

■　糖類以外の炭素源の資化性 ［相］　耐塩性 ３ｗｔχＮａＣ１含有培地で生育しない。

Φ　ビタミン要求性 ビタミンを絶対的に要求しない。

０　脱窒反応　　　　　　　　陰性。

＠ＧＣ（グアニン＋シトシン）含量 ６７　、３ｍｏ　１χ ■　主要な菌体脂肪酸組成 モノ不飽和脂肪酸　　　　ＣＩａｌｌ ［相］　主要なヒドロキシ酸 ３−ヒドロキシ酸　　　　Ｃｒａｌ。

＠　キノン・タイプ　　　　　ユビキノンＱ１゜［相］
　分離源　　　　　　　　　土壌。

この菌株は、その菌学的性質のうち、極鞭毛を有し、赤
色コロニーを形成するダラム陰性のメタノール資化性菌
であり、ＧＣ含量が６７．３ｍｏｌχ、モノ不飽和脂肪
酸Ｃ１１ｌｉｌを主要な菌体脂肪酸組成とし、３−ヒド
ロキシ酸Ｃ１４，。を主要なヒドロキシ酸とし、かつ、
キノン・タイプがユビキノンＱ　ｌ。

であることから、浦上および駒形の分類（ＴｅｉｚｉＵ
ｒａｋａｍｉ　＆　Ｋａｚｕｏ　Ｋｏｍａｇａｔａ＋”
Ｉｎｔ、Ｊ、５ｙｓｔ、Ｂａｃｔｅｒｆｏｌ、”旦、１
８８〜２０１　（１９８４））のグループ２のメタノー
ル資化性細菌に属する細菌であり、プロトモナスエクス
トロクエンスに属する微生物と同定される。

なお、１９８５年に、ボースフィールド（Ｂｏｕｓｆｉ
ｅｌｄ）とグリーン（Ｇｒｅｅｎ）　とは、この菌種は
、メチロバクテリウムＭｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕ
ｍ属に属する菌種であり、メチロバクテリウム　エクス
トロクエンスＭｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｅｘ
ｔｏｒｑｕｅｎｓとすべきであると提案している〔“Ｉ
ｎｔ、Ｊ、５ｙｓｔ、Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、”　３５＋
　２０９（１９８５）　）。

このように、プロトモナス　エクストロクエンスは、メ
チロバクテリウム　エクストロクエンスとも称され、そ
の分類学的名称は、現在の処、流動的であって確定して
いないが、本発明では、以下、プロトモナス　エクスト
ロクエンスと一応記することにする。

なお、前記の浦上および駒形の論文に記載されている菌
株のうち、プロトモナス　エクストロクエンスＴＫ　０
００１　（＝ＮＧＩＢ　９３９９．　　シュードモナス
エクストロクエンス）、　同ＴＫ　０００３（・八ＴＣ
Ｃ８４５７＝ＤＳＭ　１３４０・ＩＡＭ　１０８１・Ｉ
Ｐｏ　３７０Ｂ・ＮＣＩＢ　２８７９．プロタミノバク
タ−ルーバー、同ＴＫ　０００４　（＝＾ＴＣＣ１４７
１８＝ＤＳＭ　１３３８＝ＮＣＩＢ　９１３３＝　Ｐｅ
ｅｌ　＆　Ｑｕａｌｅ　ＡＭ　１．　　シュードモナス
　エスピー）などの菌株が、トリメチルアミン類を旺盛
に資化１分解することができる。

メチロバクテリウム属に属する菌株の代表例としては、
メチロバクテリウム　オルガノフィラムＡＴＣＣ２７８
８６がある。

キサントバクタ−属に属する菌株の代表例としては、キ
サントバクタ−オートトロフィカスＤＳＭ　４３１．　
　同　ＤＳＭ　５９７およびキサントバクターフラバス
ＮＣＩＢ　１００７１がある。

メチロファーガ属に属する菌株の代表例としては、メチ
ロファーガ　サラシカＮＣＭＢ　２１６２．同ＡＴＣＣ
３３１４５およびメチロファーガ　エスピー　微工研菌
寄第３６２２号がある。メチロファーガ　エスピー　微
工研菌寄第３６２２号は、メチロモナス　サラシカとし
て寄託されたが、現在では、浦上および駒形の分類〔Ｊ
、Ｇｅｎ、Ａｐｐ１．Ｍｉｃｒｏｂｉｏ１．”　３２＋
　３１７〜３４１　（１９８６）　　および“Ｊ、Ｇｅ
ｎ、Ａｐｐｌ、Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、”憩、１３５〜１
６５　（１９８７））により、メチロファーガ属に属す
る菌株とされている。

アースロバクター属に属する菌株の代表例として、アー
スロバタター　グロビホルミスＪＣＭ　１３３２（８八
ＴＣＣ８０１０＝ＮＣＩＢ　８９０７・ＩＰＯ１２１３
７）および同ＩＦ０１２４３８がある。

ミコバクテリウム属に属する菌株の代表例としては、本
発明者らが土壌から分離したミコバクテリウム　メタノ
リカＰ−２３（微工研菌寄第８８２５号）。

同　Ｐ−７０（微工研菌寄第９４６４号）、　同ＴＨ−
３０（微工研菌寄第９４６５号）および同ＴＨ−３５（
微工研菌寄第９４９７号）などがある。

これらの菌株の菌学的性質を以下に示す。

１、形態 肉汁液体培地および肉汁寒天培地のそれぞれで３０″Ｃ
で３日間培養した。

■　通常は、短桿菌。　幅０．５〜Ｏ，ｈ＋ｎ　　長さ
１〜３．ｍ、　ｖ型の分裂細胞が認められる。

■　運動性　　　　　　　　　なし。

■　胞子の有無　　　　　　　生産されない。

■　ダラム染色　　　　　　　陽性。

■　抗酸性　　　　　　　　　陽性。

２、次の各培地における生育状態 （特に断らなければ３７°Ｃで３日間の培養）■　肉汁
寒天平板培地 中程度の生育を示す。

コロニーの形態および性状： 外形−円形、大きさ一２〜３ｍｍ。

隆起−半球形、構造−均質、表面−粗面。

辺縁−波状１色−黄白色で光沢なし。

透明度−不透明、硬度−バター質。

■　メタノール含有寒天平板培地 肉汁寒天平板培地におけると同じ。

■　肉汁寒天斜面培地 接種線に一７様に旺盛に生育する。

コロニーの形態および性状： 隆起−中程度９表面−粗面２辺縁−波状。

色−黄白色で光沢なし、透明度−不透明。

硬度−バター質。

■　メタノール含有寒天斜面培地 肉汁寒天斜面培地におけると同じ。

■　肉汁液体培地 白クリーム色の菌環を形成する。また、皮膜を形成する
。

■　ペプトン水液体培地 肉汁液体培地におけると同じ。

■　メタノール含有液体培地 旺盛に生育する。白クリーム色の菌環を形成する。また
、皮膜を形成する。

■　肉汁ゼラチン穿刺培養 ２０°Ｃで４週間培養。

生育する。しかし、ゼラチンを液化しない。

■　リドマスミルク ３７°Ｃで４週間培養。

生育し、培養液はアルカリ性に変化（ｐＨ６，８→ｐｉ
ｔ　６．８）するが、ペプトン化しない。

［相］　１χ小川培地 旺盛に生育する。コロニーの性状はスムースである。

■　ＨＡ培地（塩酸ヒドロキシルアミン５００ｐｉｒ／
’ｍｌｌ添加１χ小川培地） ３７°Ｃで５日間培養。

Ｐ−２３，Ｐ−７０は旺盛に生育する。

ＴＨ−３０，ＴＩ（−３５は弱く生育する。

＠　　ＰＡＳ培地（パラアミノサリチル酸ナトリウム２
　ｍｇ　／　ｍＲ添加１χ小川培地）３７°Ｃで７日間
培養。

旺盛に生育し、培地が黒変する。

ただし、Ｐ−２３のみは、培地を黒変させない。

■　ピクリン酸培地（０，２χピクリン酸添加変法Ｓａ
ｕ　ｔｏｎ寒天培地） ３７°Ｃで２週間培養。

旺盛に生育し、培地が赤褐色となる。

ただし、Ｐ〜２３のみは、培地が赤褐色にならない。

ｏ　ＰＮＢ培地（パラニトロ安息香酸５００μｇ７ｍｌ
添加１′！小川培地） ３７°Ｃで７日間培養。

旺盛に生育する。

［相］　ＥＢ培地（エタンブトール５ｕｇ／ｗｄｌ添加
１２小川培地） ３７°Ｃで７日間培養。

旺盛に生育する。

３、生理学的性質 ■　硝酸塩の還元　　硝酸塩を亜硝酸塩に還元する。

■　ＭＲテスト　　　　　　　陰性。

■　ＶＰテスト　　　　　　　陰性。

■　インドールの生成　　　　陰性。

■　硫化水素の生成　　　　　陽性。

■　でん粉の加水分解　　　　陰性。

■　窒素源の利用 アンモニウム塩、硝酸塩、尿素およびペプトンを窒素源
としてそれぞれ利用する。

■　色素の生成　　　　　　　生成しない。

■　ウレアーゼ　　　　　　　陽性。

［相］　カタラーゼ　　　　　　　陽性。

■　アンモニアの生成　　　　生成する。

＠　脱窒反応　　　　　　　　陰性。

［相］　オキシダーゼ　　　　　　陰性。

００−Ｆテスト（ヒユー　ライフソン　ＨｕｇｈＬｅｉ
ｆｓｏｎ法による）　　　陰性。

■　生育の範囲 ｐＨ５〜９の範囲で生育する。ｐＨ６〜８の範囲が好ま
しい。

温度５°Ｃ１４３°Ｃでは生育しない。温度１０〜４０
”Ｃが好ましい。

［相］　酸素に対する態度　　　　好気性。

Ｃ以下余白） ＠　　ｔＪ！Ｊｌ’ｌｉの資化性ならびに酸の生成（ａ
）資化性 ＋（リ　：弱いが頁イじする。

（ｂ）酸の生成 ＋（ｗ）　　：弱いが生成する。

■　キＪ！類以外の炭素源の資化性 ■　耐塩性 ３ｗｔχＮａｃｌ含有培地で旺盛に生育する。

６ｗｔχＮａＣ１含有培地では旺盛に生育しない。

［相］　ビタミン要求性 ビターミンを絶対的に要求しない。

■　光発色試験　　　　　　　陰性。

■　暗発色試験　　　　　　　陰性。

０　ツイーン８０水解試験 Ｐ−２３，Ｐ−７０陰性。

ＴＨ−３０、Ｔ１１−３５　　　　　　　弱陽性。

Ｏミコール酸の含有　　　　陽性。

［相］　ＧＣ（グアニン＋シトシン）含量Ｐ−２３６７
，２ｍｏｌχ Ｐ−７０　　　　　　　　　　６７．２ｍｏｌχＴｔｌ
−３０６６，０ｍｏ１％ ＴＨ−３５６６，４ｍｏｌχ ［相］　主要な菌体脂肪酸組成 直鎖脂肪酸　　　　　　　Ｃｌ６１゜ モノ不飽和脂肪酸　　　　ＣＩ＆！１１　Ｃ＋ａ＋＋１
０メチル脂肪酸　　　　　１０−ｍｅ　ｔｈｙ　ｌ　Ｃ
Ｉｑ　＋。

０　キノン・タイプ　　　　　メナキノンＭＫ−９（Ｈ
２）［相］　細胞壁の構造 ｍｅｓｏ−ジアミノピメリン酸を含有する。

＠　分離源　　　　　　　　　土壌。

「バーシーズ　マニュアル　オブ　システマテイック　
バクテリオロジー（”Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ　Ｍａｎｕａｌ
　ｏｆＳｙｓｔｅｍａｔｉｃ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇ
ｙ″第２巻１編集者　スニース（Ｓｎｅａ　ｔｈ）　＋
マイアー（Ｍａ　ｉｒ）　ｌシャープ（Ｓｈａｒｐｅ）
およびホルト（Ｂｏｌｔ）　　：ウィリアムズ　アンド
ウィルキンス（Ｗｉｌｌｉａｍｓ　＆　Ｗｉｌｋｉｎｓ
）社、　（１９８６）　：１によると、これらの菌株は
、桿菌であり、運動性がなく、ダラム陽性であり、抗酸
性であり、ミコール酸を含有し、好気的であるところか
ら、ミコバクテリウム属に属する細菌であると判断した
。

このことは、さらに、ＧＣ含量、菌体脂肪酸組成、キノ
ン・タイプおよび細胞壁の構造などの諸点からも支持さ
れる。

さらに、これらの菌株は、本発明者の１人のなした発明
に基づいてなされた特許出願（特願昭６ｌ−１５１５６
５）に開示されたミコバクテリウム　メタノリカと酷似
しており、ミコバクテリウム　メタノリカと同定された
。

本発明において、菌学的性質を調べるための実験方法は
、「バージイズ　マニュアル　オプ　システマテインク
　バクテリオロジー〔”Ｂｅｒｇｅｙ’　ｓＭａｎｕａ
ｌ　ｏｆ　ＳｙＳｔｅｍａｔｉｃ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ
ｏｇｙ”第１巻編集者　クリーブ（Ｋｒｉｅｇ）および
ホルト（Ｈｏｌｔ）：ウィリアムズ　アンド　ゥィルキ
ンス（Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆　Ｗｉｌｋｉｎｓ）社、（１
９８４））　Ｊ　、前記の「バーシーズ　マニュアル　
オブ　システマティック　バクテリオロジー″Ｂｅｒｇ
ｅｙ’ｓ　Ｍａｎｕａｌ　ｏｆ　Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ
　Ｂａｃｔ−ｅｒｉｏｌｏｇｙ”第２巻」、医科学研究
所学友会場「細菌学実習提要、　（１９５８）および長
谷用　武治　編著「微生物の分類と同定Ｊ　（１９７５
）に準拠した。

メタノール含有寒天平板培地およびメタノール含有寒天
斜面培地は次の如くにして調製された。

すなわち、（ＮＨａ）ｚｓＯ４３ｇ、　ＫＨ２ＰＯ４１
，４ｇ、　ＮａｚＨＰＯｎ２．１　ｇ　、　ＭｇＳＯ４
’７ＨｚＯＯ，２ｇ　、ＣａＣ１ｚ・２Ｈｚ０３０ｍｇ
。

ＦｅＣ６１１５０ｔ’　ＸＨ２Ｏ３０”ｇ＋　Ｍ託１２
°４１１２０５ｍｇ、　Ｚｎ５Ｏａ°７Ｈ７Ｈ２Ｏ５，
Ｃｕ５Ｏｎ’５Ｈｚ００．５ｍｇおよび酵母エキス０．
２ｇを純水１２に溶解し、ｐｉ（を７．１に調整した後
、さらに寒天１５ｇ＃を添加し、これを加温溶解した後
、これにメタノール８ｇ／ｌを添加し、次いで、ｌ　ｋ
ｇ　／　ＣＴＩＩ　Ｇで２０分間殺菌した。

メタノール含有液体培地としては、前記のメタノール含
有寒天平板培地およびメタノール含有寒天斜面培地の組
成において、寒天を添加しない培地を用いた。

なお、トリメチルアミンを含有する水溶液は、アルカリ
性であるため、細菌がトリメチルアミンを効率よく資化
１分解するためには、この水溶液のｐＨを、たとえば、
塩酸および硫酸のような酸性物質によってほぼ中性にす
ることが好ましい。この水溶液のｐＨを中性に調整する
ことにより、トリメチルアミンは、たとえば、トリメチ
ルアミン塩酸塩およびトリメチルアミン硫酸塩のような
トリメチルアミン塩に変化せしめられ、細菌によって一
層資化１分解され易くなるために、この水溶液中のトリ
メチルアミンが一層容易に除去されるものと推察される
。

トリメチルアミン類を含有する液（以下　被処理液　と
記すこともある）を無害化するためには、被処理液に各
種の栄養成分を添加して、これを培地として、前記の各
属に属し、トリメチルアミン類を資化２分解し得る細菌
Ｃ以下　本細菌　と記す）を培養するとの方法がある。

すなわち、被処理液に添加される栄養成分は、使用され
る本細菌が資化し得る物質であればよく、特に制限はな
く、炭素源、窒素源、無機成分およびその他の成分があ
る。

炭素源としては、被処理液中のトリメチルアミン類のみ
でもよいが、使用される本細菌が資化し得る他の炭素源
−たとえば、グルコース、フラクトースおよびガラクト
ースなどの糖類、Ｄ−ソルビトールおよびＤ−マンニト
ールなどの＊唐アルコール類ならびにモノメチルアミン
などのアルキルアミン類などを併用することもできる。

窒素源としては、たとえば、アンモニウム塩および硝酸
塩などの無機窒素化合物および／またはたとえば、尿素
、コーン・ステイープ・リカー、カゼイン、ペプトンお
よび肉エキスなどの有機窒素含有物が用いられる。

なお、トリメチルアミン類は、窒素化合物であるので、
他の窒素源を特に添加しなくても、本細菌はいずれも充
分に生育、増殖し、トリメチメチルアミン類を資化９分
解することができる。

また、無機成分としては、たとえば、カルシウム塩、マ
グネシウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩、りん酸塩、
マンガン塩、亜鉛塩、鉄塩、銅塩、モリブデン塩、コバ
ルト塩、はう素化合物およびよう素化合物などが用いら
れる。

さらにビタミンなどの栄養物質を要求する菌株を使用す
る場合には、その菌株が要求する栄養物質を添加する。

被処理液中のトリメチルアミン類の濃度は、使用された
本細菌が資化９分解できるような濃度であればよく、特
に制限はないが、通常は、トリメチルアミンとして１ｗ
ｔ％以下が好ましく、０．５ｗｔ％以下が特に好ましい
。

ミコバクテリウム　メタノリカに属する菌株のなかには
、トリメチルアミン類に対する耐性が特に大きい苗株が
存在するが、このような菌株を使用する場合には、被処
理液中のトリメチルアミン類の濃度の上限は、トリメチ
ルアミンとして５ｗｔχ程度であってもよく、好ましく
は、３ｗｔχ程度であってもよい。

培養条件は、使用される細菌が生育、増殖できる条件で
あればよいが、一般には、たとえば、温度は５〜４５°
Ｃ１好ましくは、１０〜４０°Ｃとされ、ｐＨは６〜８
、好ましくは、６．５〜７．５とされる。

このような条件で好気的に培養を行なう。

また、培養液の溶存酸素濃度は、本細菌が生育。

増殖できるような溶存酸素濃度であればよく、特に制限
はないが、通常は、０．５〜２０ｐｐｍ程度とされる。

このような溶存酸素濃度とするためには、通気ガス量を
調節したり、撹拌したり、通気ガスとして酸素ガスまた
は酸素と空気との混合ガスを使用したり−、また、培養
槽内の圧力を高めるなどの手段が採用される。

本細菌の生育、増殖が比較的悪くなり、トリメチルアミ
ン類除去１分解の効率が相対的に低下するが、これらの
条件をはずして培養することを妨げない。

また、培養方式は、回分培養、連続培養または半連続培
養のいずれでもよい。

窒素源として、アンモニウム塩またはアルキルアミン塩
を使用した場合には、培養期間中に、アンモニアが菌体
生産のために消費されて培養液のｐＨが低下する。この
場合には、培養液のｐＨを所定の値に保つために、アン
モニア、苛性カリおよび苛性ソーダなどのアルカリを添
加するが、アンモニアを添加することが好ましい。

前記のような被処理液を培地として本細菌を培養するこ
とにより、この被処理液を無害化するとの方法の他に、
予め培養された本細菌の菌体ならびに本細菌の菌体処理
物−たとえば、本細菌の菌体を含有する培養液、本細菌
の菌体の破砕物および本細菌の菌体を合成樹脂などで固
定化した固定化菌体−（これらを総称して、以下　菌体
類　と記することもある）などを被処理液に接触させる
こともできる。

たとえば、（イ）菌体類を被処理液に添加する（口）前
記の菌体、培養液および菌体の破砕物などが混入された
活性汚泥と被処理液とを接触させるおよび（ハ）固定化
菌体が充填されたカラム中を被処理液を通過させるなど
の方法がある。

なお、トリメチルアミン類を含有している排液には、他
の物質も含有している場合が多いので、このような排液
の処理には、他の物質を分解し得る菌株を本細菌ととも
に併用することができ、かつ、好ましい。

処理終了後、被処理液中のトリメチルアミンの濃度が許
容濃度以下になった処理済の液は、そのまま、または、
必要に応じて菌体および／または菌体処理物を除去した
後、放流される。

〔実施例〕

実施例によって、本発明をさらに具体的に説明する。な
お、本発明は、実施例に限定されるものではない。

実施例１ 純水ｌＩ２．あたり、（ＮＨ４）ｚｓＯ４３ｇ　、ＫＨ
ｚＰＯｎ　１．４ｇ　。

ＮａｚｌｌＰＯ４２，１ｇ　、　ＭｇＳＯ４°７ｔ（ｚ
ｏ　０．２ｇ　、　ＣａＣ１ｚ’２１１ｚＯ３０ｍｇ、
　ＦｅＣ６１１５０ｔ’　ＸＨｚＯ３Ｑｍｇ、　ＭｎＣ
１ｚ°４Ｈ２０５ｍｇ、　Ｚｎ５Ｏａ・７１１ｚＯ５ｍ
ｇ　、　ＣｕＳＯ４°５ｏ２ｏ　Ｑ、５ｍｇ、酵母エキ
ス０．２ｇおよびトリメチルアミン塩酸塩２．４ｇを添
加しｐＨ７，１に調整した培地に、種々の菌株を接種し
、３０°Ｃで１４日間培養を行なって、各菌株について
トリメチルアミン類の資化性を調べた。結果を第１表に
示す。

第１表に示すように、各菌株は、いずれもトリメチルア
ミン塩酸塩を資化１分解した。

（以下余白） 第１表（そのｌ） 第１表（その２） 第１表（その３） 第１表（その４） 実施例２ 純水１２あたり、（ＮＨ４）２Ｓ０４３ｇ、　ＫＨｚＰ
Ｏｎ　１．４ｇ。

ＮａｔｌＩＰＯｎ　２．１ｇ＋　ＭｇＳＯ４°７■ｇ０
０．２ｇ　、　ＣａＣｌ２°２＋１．０３０ｍｇ、　Ｆ
ｅＣＪｓＯｔ・ＸＨｚＯ３０ｍｇ、　ＭｎＣ１ｇ’４）
１ｇ０５ｍｇ、　ＺｎＳＯ４’７Ｈｚ０５ｍｇ、　Ｃｕ
ＳＯ４’５Ｈｚ００．５ｍｇおよび酵母エキス０．２ｇ
を添加し、ｐＨ７，１に調整された培地を基礎培地とし
、これに、１０−ｔχ　トリメチルアミン水溶液に塩酸
を添加してｐ１１７．０に調整された液を、トリメｆル
アー、７濃度が０．１５ｗｔＬ　０．３ｗｔ！、　０，
５ｗｔ！、　１ｗｔＬ　１．５ｗｔχ、　２ｗｔχ、　
３ｗｔχ＋　５ｉｖｔ！および７ｗｔχとなるように添
加して、培地を作成した。これらの培地のそれぞれに、
各菌株を接種して、３０°Ｃで７日間培養した。

結果を第２表に示す。この結果によれば、プロトモナス
　エクストロクエンスおよびアースロバタター　グロビ
ホルミスのそれぞれの菌株は、トリメチルアミン濃度０
．５ｉｖｔ％以下でトリメチルアミン類を資化１分解し
た。

一方、ミコバクテリウム　メタノリカに属する４菌株は
、いずれも、トリメチルアミン濃度５ｗｔ２以下でもメ
チルアミン類を資化１分解した。

また、これらの４菌株は、３ｗｔ％以下では特に旺盛に
資化１分解した。　　　　（以下余白）第２表（その１
） （以下余白） 第２表（その２） （以下余白） 実施例３ 純水１！あたり、（ＮＨｎ）ｚｓＯ４３ｇ、　ＫＩＩｚ
ＰＯ４１，４ｇ。

ＮａｚＨＰＯａ　２．１ｇ　１Ｍｇ５Ｏｎ’７ＨｚＯ０
，２ｇ　、　ＣａＣ１ｚ・２Ｈｚ０３０ｍｇ、　ＦｅＣ
Ｊ５０ｙ’Ｘｔ１２０３０ｍｇ、　ＭｎＣ１ｚ’４Ｈｚ
０５ｍｇ、　Ｚｎ５（Ｉｓ’７ｔｌｚ０５ｍｇ、　Ｃｕ
５Ｏｎ’５ＨｚＯ０，５１ｎｇｌ酵母エキス０．２ｇお
よび１０−Ｌχトリメチルアミン水溶液に塩酸を添加し
てｐ）Ｉ　７．０に調整された液５０ｍ２を添加して、
ｐｔ＋　７．１に調整された培地２００ｍｆｆ１を１１
容三角フラスコに入れ、１２０°Ｃで２０分間殺菌した
。

この培地に、前記と同様な培地で予め培養して得られた
ミコバクテリウム、メタノリカＴｌ１−３０の前培養液
（菌体濃度　０Ｄ６１０．、　３．０）をＩｖｏｌχと
なるように接種して、３０°Ｃで４４時間培養し、得ら
れた培養液の菌体濃度（ＯＤ、、。、、５として表示）
および培養液のｐＨは、それぞれ、４．０および５．０
であった。また、培養上澄液中にはトリメチルアミン類
は検出されなかった。

なお、世代時間は、約５時間であった。

実施例４ トリメチルアミンを２ｗｔχ含有し、ｐＨ１３，０の工
場排液に、実施例２における基礎培地の組成から（ＮＨ
４）　ｔｓＯａを除いた培地組成となるように栄養成分
を添加し、さらにｐＨ７，０に調整した液１１に、実施
例３と同様な培地で予め培養して得られた前培養液から
分離されたミコバクテリウム　メタノリカＴｌ−３０の
菌体１ｇを懸濁させて、通気および撹拌しながら、培養
液のｐＨおよび液温を、それぞれ、７．０および３０°
Ｃに保った。

この工場排液中のトリメチルアミン類が検出されなくな
るまでには約３０時間要した。

なお、前記の各実施例において、液中のトリメチルアミ
ンの分析は、東洋曹達（Ｔｏｙｏ　５ｏｄａ）イオンク
ロマトグラフィーで行なった。

ポンプ：　Ｔｏｙｏ　５ｏｄａ　ＣＣＰＤ検出器：　Ｔ
ｏｙｏ　５ｏｄａ　ＣＭ−８０００カラム：　ＴＳＫｇ
ｅｌ　ＩＣ−Ｃａｔｉｏｎ　（Ｔｏｙｏ　５ｏｄａ）〔
発明の効果〕 本発明により、安定で分解され難く、有害な物質である
トリメチルアミン類を効率よく分解、除去することが可
能となり、以て、トリメチルアミン類を含有する有害な
排液を効率よく無害化することができ、環境衛生保全上
の価値は極めて高い。

特許出願人　三菱瓦斯化学株式会社 代表者長野　和吉

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. トリメチルアミンおよび／またはトリメチルアミン塩を
   含有する液と、メチロバチルス属、プロトモナス属、メ
   チロバクテリウム属、キサントバクター属、メチロファ
   ーガ属、アースロバクター属およびミコバクテリウム属
   のいずれかの属に属し、トリメチルアミンおよび／また
   はトリメチルアミン塩を資化、分解し得る細菌の菌体お
   よび／または該細菌の菌体処理物とを接触させて、該液
   中のトリメチルアミンおよび／またはトリメチルアミン
   塩を分解、除去することを特徴とするトリメチルアミン
   類の除去方法。