JPH01175991A

JPH01175991A - ジデオキシイノシンの精製方法

Info

Publication number: JPH01175991A
Application number: JP33617187A
Authority: JP
Inventors: Toshiya Tanabe; 田辺　俊哉; Masaru Otani; 勝大谷; Masayuki Arai; 正之荒井; Toshihide Yugawa; 湯川　利秀
Original assignee: Ajinomoto Co Inc
Current assignee: Ajinomoto Co Inc
Priority date: 1987-12-29
Filing date: 1987-12-29
Publication date: 1989-07-12
Anticipated expiration: 2011-03-13
Also published as: JPH0826020B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分封〕本発明は、合Ｗ、法により生産された、又はそれ由来の
２　？３　／−ジデオキシイノシン（以下、　ＤＤＩと
略丁。）の新規精製方法に関するものである。ＤＤＩは
抗ウイルス剤等医薬品として使用されるものである。

〔従来の技衝〕

従来のＤＤＩの製造方法としては、ヌクレオシド類の２
′位またｔｉ３’位の脱酸素反応が行われてｈる（　Ｃ
ｈｅｗ　Ｐｈａｒｍ　Ｂｕｌｌ　、　２２．１２８（１
９７４））が以下の理由により、報告例は少ない。

■　反応に先立ち保蒋基を導入しなけｆｉはならない。

■　２′位、３′位は室体障害が大きく、反応が起きに
くい。

まへ別法として２　Ｉｓ　／−ソデオキシアデノシン（
以下、ＤＤＡと略す、）をｉ科にして酵素を利用したｒ
アミネーシ、ン罠よる方法も報告はれている　（Ｂｉｏ
ｅｈｉｍ　　Ｂｌｏｐｈｓ　　Ａｅｔａ５６６（２）２
５９（１９７９ン）。

しかし、原料となるＤＤＡも上記理由により製造が難し
くｒアミネーシ、ンによる方法も報告は少ない。

この為、単１ｌｉ１精尖についても液体又は薄層クセマ
ドグラフィーによる分取が実施されている程度で工業的
に利用できる精製技術は未だ確立していなかった。

Ｍｏｆｆａｔｔらの方法（Ｊ＊Ａｍ＠ｒａＣｈ＠ｍＪｏ
ｅ、、９５　。

４０２５（１９７３））に従い、イノシンを原料とし、
２′位、３′位の脱酸素反応を行った場合、反応液中に
は、不純物として、副生物である２′−デオキシイノシ
ン（以下、２’−ＤＩと略す。）３′−デオキシイノシ
ン（以下、３’−ＤＩと略す。）の他、未反応原料のイ
ノシン（以下、Ｉｎｏと略す、）、分解生成物であるヒ
ーキサンチン（以下ｓ　）Ｉｙｐと略″ｆ、　）が含ま
れる。

この反応液からＤＤＩを取得する際、晶析法では上記不
純物の溶解度が１よい為にｒ）ＤＩ結晶中に不純物が混
入してしまう。また、ＤＤＩ自身が酸性域で分解し易い
為イオン交換樹脂による分離方法も困轟であった。

〔発明が解決しようとする問題点〕

上記の欠点を解消するような工業的に優れたＤＤＩ　ｆ
）精製方法の開発がｇｌまれでいる。

〔間４点を解決するための手段〕本発明考らは、前記問題点を解決すべく、鋭意検討した
結果、合成反応終了後のＤＤＩまたはそれ由来の未精製
ＤＤＩ　　を例えは水溶液として非極性多孔ｑｍ脂処理
することにより、ＤＤＩをＨ４Ｆ　ｅＩｎｏ　、　２’
−ＤＩ　、　３’−ＤＩ等の不Ｍ４物と分離できること
を見出し、これらの発見に基づいて本発明を完れ由来の
未精製ＤＤＩＯ稍爬に際し、ＤＤＩを非極性多孔質樹脂
に吸着せしめることを％徴とするＤＤＩのｎ裏方法であ
る。

本発明の出発物質に用いるＤＤＩは、合成法由来のもの
で不純物として少なくともＨＩＰ　ｅ　Ｉｎｏ　。

、拳２’−ＤＩ　、　３’−ＤＩ若干の副生成する核酸類の
うち、いずれかを含有するものである。ま念、水溶液と
して使用する場合の溶液のＤＤＩ濃度は、　ＤＤＩの溶
解度以下であれば制限されるものではない。

次に、ここで用いる非極性多孔質樹脂は、例えはその母
体が、スチレンーソビニルベンゼン糸の共重合体又は、
その籾導体例えばこれにハロゲン化し高比重化したポリ
マーである物質であれ、いずれも使用可能である０例え
ば、ダイヤイオン）（Ｐシリーズ、ＳＰシリーズ（以上
、三菱化成工業）。

ＸＡＤ−４（ｏ−ｂ　＃　７：／　ト−ハース社）、０
Ｃ１０３１（バイエル社）等が利用できるが、その他の
非極性多孔質樹脂であっても同等の性質を有するもので
あればいずれでありても良り、特に高比重化した５Ｐ２
０７（三菱化成工業）がＤＤＩ溶液をフィードした時に
樹脂が浮上したりすることなく、操作性が良い点で逼し
てｈる。

非極性多孔質樹脂とＤＤＸ溶徹との接液方法鉱、パッチ
式とカラム式があるが、カラム式の万が操作上簡便で好
ましい。

カラムへの通次速度は、特に制限はなく、通常８Ｖ−０
，！Ｓ　〜４．０、好ましくは５Ｖ＝１〜２８度がよい
。

カラムにフィードするＤＤＩ溶液の体積負荷量はＤＤＩ
溶液の濃度によって異なり、同時にＤＤＩの樹脂負荷ｔ
　（ｆ！／ｌ−ｎ　）は５〜３０９／１−Ｒ１好ましく
はｌＯ〜２０１１／ｌ−Ｒが分離性及び経済性の点で適
している。

カラムへの接液温度については、１０〜５０℃であれば
特に制限されない。この温度ではＤＤＩと濃縮液中の不
純物）（ｙｐ　ｅ　Ｉれｏ　、　２’−ＤＩ　、　３’
−ＤＩとの分離性の相違は殆んどない。

次に、カラムからのＤＤＩ溶離方法に関して記述する。

溶離剤は、世級脂肪族アルコール水溶液が適している。

例えは、メチルアルコール、エチルアルコール、イソプ
ロピルアルコール等の水溶液である。溶離速度は、通常
の５Ｖ＝１〜２８度が良い。

実際の非極性多孔質樹脂を用いた精製操作は次のように
すると良い。すなわち、当該樹脂を充填したカラムにＰ
Ｈｖ！４整を行ったＤＤＩ反応液全一定慧フイード後、
直ちに低濃度アルコール水溶液を用いてＩ（ｙｐ　ｓ　
Ｉｎｏ　＠　２’ＤＩ　＠　３’−ＤＩ　ｆ溶離し、次
にアルコール水溶液の濃度を上げることにより、ＤＤＩ
を溶離する。

このＤＤＩ画分ｔ−ｐＨＰｓ４整後濃縮し、晶析後、冷
却することにより高純度のＤＤＩを分取することができ
る。

〔実施例〕

以下、実施例により本発明の詳細な説明する。

実施例５１Ｍｅ　ｆ　ｆ　ａ　ｔ　ｔらの方法（Ｊ　＠　Ａｍ＠ｒ
、Ｃｈ＠ｍ、Ｓｏａ、、９５゜４０２５（１９７３））
に従い、Ｉｎｏ３０．０ｇを出発厘料として、反応せし
め、ＤＤＩ　２．９９を含む混合溶ｉを得念。

このＤＤＩ含有溶液を３００−迄濃縮後、非極性多孔質
吸着樹脂５ｐ２０７（三菱化成工業（櫟）製ン２９０ｄ
（カラムφＸＬ＝３０■×４１０■）にＳ徊２でフィー
ド後、５％エチルアルコール水溶ｇｓｓｏ。

−で溶１した（ＳＶ−２）＊（画分−１とする）。次に
、２０％エチルアルコール水溶櫃１１００−で溶ｍｒ行
ツタ（ＳＶ＝２）ｅ（ｉｉ！ｉ＋分−２トＹる）。以上
の樹脂操作は液温３０℃で行った。

谷画分’ｔｆｆ体クロマトグラフィー分析により、測定
した結果、両分−１に＃ｉ３’−Ｉ）Ｉ　、　２’−Ｄ
Ｉ　、Ｈ）ＦＰ等の不純物が検出でれ（各回収率：９５
慢、９５慢、９９％）、両分−２にはＤＤＩが検出され
た（回収率６５％）。

両分−２をＩＮＮａｏＨで−＝８＆０で調整後濃縮しＤ
ＤＩｔ−晶析槽、１０℃迄冷却し、高純度（９９，８％
）のＤＤＩ結畠１．１ｇをＰ取した。

実施例１７実施例舊１と同様の方法で取得したＤＤＩ含有溶液３０
（ｌｄを非極性多孔質吸着樹脂５Ｐ２０７（三菱化成工
業（株）製）　２９０ｊ（カラムφＸＬ−３０諷Ｘ４１
０鴫）に５Ｖ−２でフィード後、３％イソプロピルアル
コール水溶ｇ、５２００−で溶離し几（ＳＶ−２）、Ｃ
画分−１とする）０次に、２０チイソデロビルアルコー
ル水溶液８４０−で溶離を行った（ＳＶ−２）、（画分
−２とする）。すべての樹脂処理は液温３０℃で行りた
。

各両分を液体クロマトグラフィー分析により、測定した
れｉ朱、画分−１には３’−ＤＩ　、　２’−ＤＩ　＊
　Ｈｙｐ等の不純物が検出され（各回収率９５％、９６
％。

９９％）、両分−２には、ＤＤＫが検出された。

（回収率６０９６）。

画分−２七ｌＮＮａＯＨによりｐＨ−８，０に調整後濃
縮しＤＤＩ七晶析後、１０℃迄酎卸耐高純度（９９，９
％）のＤＤＩ結晶１．０ｇ七戸取した。

〔発明の効果〕

そｎ由来のＤＤＩを効率的に分離精製でき、工業化への
道が太めに期待されるものである。

特許出、ヴ入　味の素株式会社

Claims

【特許請求の範囲】

（１）合成法により生産された、またはそれ由来の２′
，３′−ジデオキシイノシンを精製するに際し、２′，
３′−ジデオキシイノシンを非極性多孔質樹脂に吸着せ
しめることを特徴とする２′，３′−ジデオキシイノシ
ンの精製方法。
（２）被精製物が不純物として、ヒポキサンチン、イノ
シン、２′−デオキシイノシン及び３′−デオキシイノ
シンの少なくとも一種を含有することを特徴とする特許
請求の範囲第（１）項記載の方法。
（３）非極性多孔質樹脂がスチレンジビニルベンゼン系
の共重合体、又はその誘導体を含有するものである特許
請求の範囲第（１）項記載の方法。