JPH0146519B2

JPH0146519B2 -

Info

Publication number: JPH0146519B2
Application number: JP59270606A
Authority: JP
Inventors: Dei Sutajio Jobanni; Horitei Binsenzo; Marugoneri Andorea; De Ruka Jobanna; Materatsutsui Mario
Original assignee: HORIFUARUMA SpA
Current assignee: HORIFUARUMA SpA
Priority date: 1983-12-23
Filing date: 1984-12-21
Publication date: 1989-10-09
Also published as: IT1172391B; IT8349574A0; JPS60156700A; DE3477383D1; EP0148133A2; US4619916A; EP0148133A3; EP0148133B1

Description

【発明の詳細な説明】

（産業上の利用分野）本発明はNH₂−末端酸としてピログルタミン
酸、COOH―末端酸としてトリプトフアンおよ
びこの末端酸に結合した第３アミノ酸が存在する
ことを特徴とする、左旋性アミノ酸から作られる
新規トリペプチド化合物に関する。本発明はこの化合物の製造法、同含有医薬組成
物および血圧低下剤としての使用に関する。（従来の技術および解決しようとする課題）中枢神経系の神経伝達物質としておよび視床下
部レベルで放出因子として作用する多くのペプチ
ドがNH₂−末端アミノ酸として環化グルタミン
酸（ｐ−GLU）の存在により特徴づけられるこ
とは文献上公知である。例えば、すべての高等動物に存在するニユーロ
テンシン、13アミノ酸ペプチドは初期配列：ｐ−
GLU−LEU−TYR……を有する。黄体形成ホル
モンの放出因子は初期配列：ｐ−GLU−HIS−
TRP……により特徴があるデカペプチドである。
チロトロピンの放出因子は構造ｐ−GLU−HIS
−PRO−NH₂のトリペプチドである。ヒトのガ
ストリンは初期配列：ｐ−GLU−GLY−PRO…
…を有する17アミノ酸ペプチドである。水陸両生
動物の皮膚又は蛇毒から抽出した薬理学的に活性
なペプチドに関する研究は、これらの物質の多く
がNH₂−末端アミノ酸としてｐ−GLUの存在に
特徴があるという興味ある知見をもたらした。実
際、フアサレミン、ヘレンドイシン、セルレイ
ン、ゼノプシン、ラナテンシンおよびボンベシン
はNH₂−末端酸としてｐ−GLUを有するnasalレ
ベルで活性な小ペプチドである。一方、Ondetti
（Biochemistry10，4033（1971）およびKato
（Biochemistry10，972（1971））の研究によれば、
蛇毒から15のペプチドを同定し、その全ては
NH₂−末端アミノ酸としてｐ−GLUを有する。
Kato（Esperientia22，49（1966））もいくつかの
蛇毒にトリペプチド：ｐ−GLU−ASN−TRPお
よびｐ−GLU−GLN−TRPがあることを記述し
ているが、薬理活性は記述してない。仮令それが多くの薬理活性ペプチドに共通な特
徴であるにせよ、NH₂−末端アミノ酸としてｐ
−GLUが存在することは特別な生理学的効果と
は相関関係はない。（課題を解決するための手段） NH₂−末端酸としてピログルタミン酸および
COOH−末端酸としてトリプトフアンならびに
その低級アルキルトリプトフアンエステルを有す
るいくつかのトリペプチドは降圧剤および鎮痛剤
として機能しうることを見出した。本発明に係る化合物は式pGLU−Ｘ−TRP−
OR （式中、Ｒは水素、メチルまたはエチルを示す
ことができ、ＸはGLY，VAL，GLU，ASP，
SER，ALA，ILE，LEU，PRO，LYSおよび
AGRを示す、但しGLU＝グルタミン酸、LYS＝
リジン、PRO＝プロリン、ASP＝アスパラギン
酸、ARG＝アルギニン、GLY＝グリシン、SER
＝セリン、ALA＝アラニン、ILE＝イソロイシ
ン、TRP＝トリプトフアン）にて表される。本発明によれば、化合物式pGLU−Ｘ−TRP
−ORの製造法は次の工程からなる。ａ pGLUまたはTRPを上記Ｘに相当するＬ−
アミノ酸と液相縮合反応させ、それぞれ保護さ
れたpGLU−ＸまたはTRP−Ｘジペプチドを
得、ｂ pGLU−Ｘの保護基をアジドに転換するか、
あるいはTRP−Ｘから保護基を除き、ｃ上記ｂ）工程の生成物をTRPまたはpGLU
と液相縮合反応させ、各成分がペプチド結合に
より結合しかつ保護基のついたトリペプチド
pGLU−Ｘ−TRPを得、ついでｄ pGLU−Ｘ−TRPの保護基を除きそして得
られたトリベプチドを回収する。保護基は望ましくない反応からアミノ酸の選択
基を保護する様に導入されるものである。これら
の基は反応終了時に容易に除くことができなけれ
ばならない。カルボキシル官能基の保護基の例と
しては、メチル、エチル、ベンジル、ｐ−ニトロ
ベンジルがある。本発明方法はトリプトフアンの
低級アルキルエステル特にこのペプチドのメチル
又はエチルトリプトフアンエステルを供する。ア
ミン官能基の保護基の例には、ベンジルオキシカ
ルボニル、ｔ−ブトキシカルボニルおよびトリク
ロロアセチルがある。これらの保護基を導入・脱
離する技術は当業者には広く知られている。本発明方法は液相でなわれる。特に望ましい溶
媒はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（DMF）で
ある。本発明の目的はまた化合物ｐ−GLU−Ｘ−
TRP−OR又はその低級アルキルトリプトフアン
エステルを含有する医薬組成物、および降圧剤お
よび鎮痛剤としてのこれらの組成物の利用にあ
る。発明の詳細な記述各化合物の製造例は以下に示す。例１ｐ−GLU−GLY−TRPの合成ジメチルホルムアミド（DMF）に溶解したピ
ログルタミン酸のＯ−ペンタクロロフエニルエス
テル（ｎ−GLU−Ｏ−PCP）１ｇに撹拌下、
DMFと0.5mlのEt₃Nに溶解したグリシンメチル
エステル塩酸塩（GLY−OMe−HCl）0.326ｇを
加える。生成した混合物を室温で24時間撹拌する。シリ
カゲルで精製して、ジペプチドｐ−GLU−GLY
−OMe0.339ｇを得る。これを過量のヒドラジン
水和物と反応させ、結晶後、0.258ｇのヒドラジ
ン誘導体ｐ−GLU−GLY−NH−NH₂を得る。
相当するアジドｐ−GLU−GLYN₃はイソペンチ
ルナイトライト20℃／30分反応させて製造する。
ついでこれを室温で24時間撹拌して、DMFと
0.15mlEt₃N中トリプトフアンメチルエステル塩
酸塩0.304ｇとその場で反応させる。シリカゲル
カラムで精製して、保護されたトリペプチドｐ−
GLU−GLY−TRP−OMe0.361ｇを得た。塩基
性溶液で温和に加水分解して、0.283ｇのｐ−
GLU−GLY−TRPを得た。組成：理論値Ｃ＝58.27 Ｈ＝5.41 Ｎ＝15.03 実測値Ｃ＝58.01 Ｈ＝5.22 Ｎ＝15.09 融点：262℃ 例２ｐ−GLU−VAL−TRPの合成 DMFと0.5mlEt₃Nに溶解したバリンメチルエ
ステル塩酸塩（VAL−OMe−HCl）0.436ｇを撹
拌下ｐ−GLU−OPCP1ｇに加える。室温で24時
間撹拌を続ける。シリカゲルで精製して、ジペプ
チドｐ−GLU−VAL−OMe0.392ｇを得た。こ
れをヒドラジン水和物と反応させ、結晶化させた
後、ヒドラジン誘導体ｐ−GLU−VAL−NH−
NH₂・0.303ｇを得た。相当するアジドはこの化
合物を亜硝酸イソペンチルと20℃／30分反応させ
て製造した。ついで生成物にDMFと0.15mlEt₃N
中トリプトフアンメチルエステル塩酸塩（TRP
−OMe・HCl）0.293ｇを加え、混合物を室温で
24時間撹拌した。シリカゲルで精製して、保護さ
れたトリペプチドｐ−GLU−VAL−TRP−
OMe0.366ｇを得た。塩基性条件下温和に加水分
解した後、遊離トリペプチドｐ−GLU−VAL−
TRP0.293ｇを得た。組成：理論値Ｃ＝60.86 Ｈ＝6.32 Ｎ＝13.51 実測値Ｃ＝60.96 Ｈ＝6.41 Ｎ＝13.42 融点：265℃ 例３ｐ−GLU−GLU−TRPの合成トリプトフアンメチルエステル塩酸塩（TRP
−OMe・HCl）１ｇをDMFに溶かし、0.4mlの
Et₃Nを加え、30分撹拌した。ついでこの溶液を
−10℃に冷却し、順次1.322ｇのＺ−GLU−
（Bu^t）₅−OH（Ｚ＝カルボベンゾオキシ、Bu^t＝第
３級ブチル）DMF溶液、0.530ｇのヒドロキシベ
ンゾトリアゾール（HOBT）および1.238ｇのジ
シクロヘキシルカルボジイミド（DCCI）で処理
した。これを最初の３時間−10℃に保持し、つい
で室温で更に28時間保持した。シリカゲルで精製
して、保持ジペプチドＺ−GLU−（Bu^t）₅−TRP
−OMe1.266ｇを得た。室温、大気圧下／２時間５％Pd／Ｃで50％
ACOH中水素化して、ブロツクされていないジ
ペプチドの酢酸塩を得、それを撹拌下DMF中イ
ソ−Pr₂EtNで30分間処理脱塩した。精製してジ
ペプチドH₂N−GLU（Bu^t）₅−TRP−OMe0.886
ｇを得た。これをDMFに溶解し、DMF中pGLU
−OPCP0.804ｇを加え、室温で34時間撹拌した。
保護されたトリペプチドpGLU−GLU−（Bu^t）₅
−TRP−OMe0.625ｇを得た。トリフロロ酢酸
（TFA）で処理して、５位のカルボキシル基を遊
離した。温和な塩基加水分解によつて、遊離トリ
ペプチドpGLU−GLU−TRP0.432ｇを得た。組成：理論値Ｃ＝56.75 Ｈ＝5.44 Ｎ＝12.61 実測値Ｃ＝56.88 Ｈ＝5.42 Ｎ＝12.65 融点：168℃ 例４ pGLU−ASP−TRPの合成 DMF中トリプトフアンメチルエステル塩酸塩
（TRP−OMe・HCl）１ｇにEt₃N0.4mlを加え、
30分撹拌した。ついでこの溶液を−10℃に冷却
し、順次DMF中Ｚ−Asp（Bu^t）₄−OH1.270ｇ、
HOBT0.530ｇおよびDCCI1.238ｇで処理した。
生成混合物を−10℃／３時間、ついで室温で更に
24時間保つた。シリカゲルで精製して、保護ジペ
プチドＺ−Asp（Bu^t）₄−TRP−OMe1.295ｇを得
た。室温、大気圧下２時間５％Pd／Ｃにより50
％AcOMにおいて水素化し、遊離ジペプチドの
酢酸塩を得、それを撹拌下DMF中イソ−Pr₂EtN
で30分処理脱塩した。精製して、保護ジペプチド
H₂N−ASP（Bu^t）₄−TRP−OMe0.869ｇを得た。
これをDMFに溶解し、DMF中pGLU−
OPCP0.820ｇで処理し、この混合物を室温で36
時間撹拌した。保護トリペプチドpGLU−ASP
（Bu^t）₄−TRP−OMe0.653ｇを得た。TFAで処
理して、アスパラギン酸ののベータ位のカルボキ
シルを遊離した。温和な塩基性の加水分解により
トリペプチドpGLU−ASP−TRP0.468ｇを得た。組成：理論値Ｃ＝55.81 Ｈ＝5.15 Ｎ＝13.01 実測値Ｃ＝55.90 Ｈ＝5.20 Ｎ＝12.98 融点：232℃ 例５ pGLU−SER−TRPの合成 DMF中トリプトフアンメチルエステル塩酸塩
（TRP−OMe・HCl）１ｇにEt₃N0.4mlを加え、
30分間撹拌した。ついでこの溶液を−10℃に冷却
し、順次Ｎ−Ｚ−Ｏ（Bu^t）−SER（予めそのジシ
クロヘキシルアンモニウム塩から遊離させた）
1.158ｇおよびHOBT0.530ｇで処理した。30分撹
拌させた後、混合物をDCCI1.240ｇで処理した。生成混合物を−10℃／３時間保ち、ついで室温
で更に27時間保つた。精製して、保護ジペプチド
Ｎ−Ｚ−Ｏ（Bu^t）−SER−TRP−OMe1.051ｇを
得た。室温、大気圧下／２時間で５％Pd／Ｃに
より50％AcOH中加水分解して、ジペプチドの酢
酸塩を得、これを撹拌下30分DMF中イソ−
Pr₂EtNで処理して脱塩した。保護ジペプチドH₂N−Ｏ（Bu^t）−SER−TRP
−OMe0.680ｇを得た。これをDMFに溶解し、
DMF中pGLU−OPCP0.684ｇで処理し、混合物
を室温／40時間撹拌した。精製して、保護トリペ
プチドpGLU−Ｏ（Bu^t）−SER−TRP−
OMe0.534ｇを得た。TFAで処理して、セリンの
ヒドロキシ基を遊離した。温和な塩基性加水分解
により、トリペプチドpGLU−SER−TRP0.373
ｇを得た。組成：理論値Ｃ＝56.71 Ｈ＝5.51 Ｎ＝13.92 実測値Ｃ＝56.78 Ｈ＝5.55 Ｎ＝13.85 融点：248℃ 例６ pGLU−ALA−TRPの合成 DMF中pGLU−OPCP12に撹拌下DMFおよび
Et₃N0.5mlに溶解したアラニンメチルエステル塩
酸塩（ALA−OMe−HCl）0.363ｇを加えた。混
合物を室温／24時間撹拌した。精製により、ジペ
プチドpGLU−ALA−OMe0.335ｇを得、ついで
これを過剰のヒドラジン水和物と反応させ、化合
物pGLU−ALA−NH−NH₂0.280ｇを得た。相
当するアジドpGLU−ALA−N₃は−20℃／30分
イソペンチルナイトライトと反応させて製造し
た。生成物をその場でDMFおよびEt₃N0.14ml中
トリプトフアンメチルエステル塩酸塩（TRP−
OMe−HCl）0.311ｇと反応させ、混合物を室温
で24時間撹拌した。精製により、保護トリペプチ
ドpGLU−ALA−TRP−OMe0.365ｇを得、温和
な塩基性加水分解により、遊離トリペプチド
pGLU−ALA−TRP0.272ｇを得た。組成：理論値Ｃ＝59.06 Ｈ＝5.74 Ｎ＝14.50 実測値Ｃ＝59.20 Ｈ＝5.75 Ｎ＝14.48 融点：268℃ 例７ pGLU−ASN−TRPの合成 DMF中TRP−OMe−HCl1ｇにPH7.5までイソ
−Pr₂EtNをついでDMF中Ｎ−Boc−ASN−
ONP（Boc＝ｔ−ブチルオキシカルボニル）を加
え、生成混合物を室温で23時間撹拌した。精製し
て、保護ジペプチドＮ−Boc−ASN−TRP−
OMe0.985ｇを得、これを室温で20分過剰のTFA
で処理した。真空で過剰のTFAを除き、ペプチ
ド塩をDMFに溶解し、イソ−Pr₂EtNでPH7.5に
調整した。生成溶液を−10℃にし、DMF中
pGLU−OPCP0.836ｇで処理した。混合物を−10
℃で最初の３時間激しく撹拌し、ついで室温で次
の19時間撹拌した。精製して、保護トリペプチド
pGLU−ASN−TRP−OMe0.540ｇを得、温和な
塩基性加水分解により、遊離のトリペプチド
pGLU−ASN−TRP0.398ｇを得た。組成：理論値Ｃ＝55.94 Ｈ＝5.40 Ｎ＝16.30 実測値Ｃ＝56.00 Ｈ＝5.45 Ｎ＝16.22 融点：215℃ 例８ pGLU−GLN−TRPの合成 DMF中TRP−OMe−HCl1ｇにPH7.5までイソ
−Pr₂EtNを加え、ついでDMF中Ｎ−Boc−GLU
−ONP0.967ｇを加え、生成混合物を室温で20寺
間撹拌した。精製して、ジペプチドＮ−BoC−
GLN−TRP−OMe1.227ｇを得、これを過剰の
TFAで室温／20分処理した。真空下過剰のTFA
を除き、ペプチド塩をDMF中に溶解し、イソ−
Pr₂EtNでPH7.5に調整した。生成溶液を−10℃に
し、DMF中pGLU−OPCP1.013ｇで処理した。
混合物を−10℃で初め３時間激しく撹拌し、つい
で室温で更に18時間撹拌した。精製により、保護
トリペプチドpGLU−GLN−TRP−OMe0.737ｇ
を得、温和な塩基加水分解により、遊離トリペプ
チドpGLU−GLN−TRP0.583ｇを得た。組成：理論値Ｃ＝56.88 Ｈ＝5.68 Ｎ＝15.79 実測値Ｃ＝56.98 Ｈ＝5.74 Ｎ＝15.65 融点：205℃ 例９ pGLU−ILE−TRPの合成 DMF中pGLU−OPCP1ｇに撹拌下DMFおよび
0.5mlのEt₃Nに溶解したILE−OMe・HCl0.472ｇ
を加え、生成混合物を室温で24時間撹拌した。精
製により、ジペプチドpGLU−ILE−OMe0.404
ｇを得、これを過剰のヒドラジン水和物で処理
し、結晶後化合物pGLU−ILE−NH−NH₂を得
た。相当するアジドは−20℃／30分イソペンチル
ナイトライトと反応させて製造した。このアジド
をその場でDMFおよび0.15mlのEt₃N中TRP−
OMe・HCl0.306ｇと反応させた。精製して、保
護トリペプチドpGLU−ILE−TRP−OMe0.392
ｇを得、温和な塩基加水分解により、遊離のトリ
ペプチドpGLU−ILE.TRP0.296ｇを得た。組成：理論値Ｃ＝60.56 Ｈ＝6.77 Ｎ＝13.45 実測値Ｃ＝60.75 Ｈ＝6.85 Ｎ＝13.34 融点：252℃ 例 10 pGLU−LEU−TRPの合成 DMF中pGLU−OPCP1ｇに、DMFおよび0.5
mlEt₃N中LEU−OMe−HCl0.472ｇを撹拌下加
え、生成混合物を室温で24時間撹拌した。精製し
て、ジペプチドpGLU−LEU−OMe0.387ｇを
得、これを過剰のヒドラジン水和物で処理し、ヒ
ドラジン誘導体pGLU−LEU−NH−NH₂を得
た。相当するアジドは−20℃／30分間イソペンチ
ルナイトライトで反応調製した。このアジドをそ
の場でDMFおよび0.15mlEt₃N中TRP−OMe−
HCl0.280ｇと反応させ、室温で24時間撹拌した。
精製して、保護トリペプチドpGLU−LEU−
TRP−OMe0.334ｇを得、温和な塩基加水分解に
より、遊離のトリペプチドpGLU−LEU−
TRP0.258ｇを得た。組成：理論値Ｃ＝60.56 Ｈ＝6.77 Ｎ＝13.45 実測値Ｃ＝60.89 Ｈ＝6.83 Ｎ＝13.55 融点：250℃ 例 11 pGLU−PRO−TRPの合成 DMF中pGLU−OPCP1ｇに、DMFおよび0.5
mlEt₃Nに溶解したPRO−OMe・HCl0.439ｇを撹
拌下加え、生成混合物を室温で24時間撹拌した。
精製して、ジペプチドpGLU−PRO−OMe0.325
ｇを得、これを過剰のヒドラジン水和物で処理
し、化合物pGLU−PRO−NH−NH₂を得た。相
当するアジドは−20℃／30分イソペンチルナイト
ライトで反応調製した。このアジドはその場で
DMFおよび0.15mlEt₃N中TRP−OMe・
HCl0.267ｇと反応させ、室温で24時間撹拌した。
精製して、保護トリペプチドpGLU−PRO−
TRP−OMeを得、温和な塩基加水分解により遊
離のトリペプチドpGLU−PRO−TRP0.301ｇを
得た。組成：理論値Ｃ＝61.16 Ｈ＝5.86 Ｎ＝13.58 実測値Ｃ＝61.18 Ｈ＝5.83 Ｎ＝13.46 融点：255℃ 例 12 pGLU−LYS−TRPの合成 DMF中TRP−OMe・HCl1ｇにPH7.5までイソ
−Pr₂EtNを、ついでDMF中Ｎ−Boc−Ｎ−Ｚ−
リジン−ONP（ONP＝オルソニトロフエニル）
1.963ｇを加え、生成混合物を室温／20時間撹拌
した。精製して、保護ジペプチド1.319ｇを得、
室温で20分間過剰のTFAで処理した。過剰の
TFAを真空下除去し、ペプチド塩をDMFに溶解
し、イソ−Pr₂EtNでPH7.5に調整した。生成溶液
を−10℃にし、DMF中pGLU−OPCP0.884ｇで
処理した。混合物を最初３時間−10℃で、ついで
室温で更に19時間激しく撹拌した。精製して、保
護トリペプチド0.870ｇを得、室温／大気圧下２
時間５％Pd／ｃにより50％AcOH中水素化した。
温和な塩基加水分解により、遊離のトリペプチド
pGLU−LYS−TRP0.524ｇを得た。組成：理論値Ｃ＝59.58 Ｈ＝6.59 Ｎ＝15.78 実測値Ｃ＝59.40 Ｈ＝6.40 Ｎ＝15.65 融点：228℃ 例 13 pGLU−ARG−TRPに合成 DMFおよび0.4mlEt₃N中TRP−OMe・HCl1ｇ
を30分撹拌し、−10℃に冷却し、ついで1.252ｇ
Boc−Ｎ−ニトロ−アルギニン、0.530ｇHOBT
および1.24ｇDCCIを撹拌下加えた。生成混合物
を−10℃／４時間激しく撹拌しかつ室温で27時間
撹拌した。保護ジペプチド1.225ｇを単離し、室
温で20分間過剰のTFAで処理した。真空下過剰
のTFAを除き、遊離ジペプチドをDMFに入れ
た。生成溶液を撹拌下pGLU−OPCP1ｇで処理
し、室温で40時間撹拌した。精製して、ブロツク
したトリペプチド0.630ｇを得、室温で大気圧下
２時間５％Pd／ｃにより50％AcOHにて処理し
た。温和な塩基加水分解により、pGLU−ARG
−TRPトリペプチド0.394ｇを得た。組成：理論値Ｃ＝56.04 Ｈ＝6.20 Ｎ＝20.79 実測値Ｃ＝56.15 Ｈ＝6.10 Ｎ＝20.65 融点：202℃ 例 14 pGLU−LEU−TRP−OEtの合成 DMF中pGLU−OPCP1ｇに撹拌下DMFおよび
0.5mlのEt₃Nに溶解したLEU−OMe・HCl0.480
ｇを加えた。生成混合物を室温で24時間撹拌し
た。精製して、ジペプチドpGLU−LEU.
OMe302mgを得、これを過剰のヒドラジン水和物
と反応させ、ヒドラジン誘導体pGLU−LEU−
NH−NH₂を得た。相当するアジドは−20℃で30
分イソペンチルナイトライトと反応調製した。こ
のアジドをDMFおよび0.15mlEt₃N中TRP−
OEt・HCl250mgで処理し、室温で24時間撹拌し
た。精製して、ブロツクしたトリペプチドpGLU
−LEU−TRP−OEt0.274ｇを得た。組成：理論値Ｃ＝62.15 Ｈ＝7.25 Ｎ＝12.60 実測値Ｃ＝62.28 Ｈ＝7.29 Ｎ＝12.51 融点：180℃ 薬理活性本発明化合物の薬理効果を測定するために、動
物試験を行なつた。本化合物の降圧効果体重220〜250ｇの雄CDチヤールスリバーラツ
トを使い、エチルウレタン（1.75ｇ／Kg腹腔内）
で麻砕した。気管を切開（incannulation）した
後、右頚動脈を取り出し、カニユーレにより圧力
測定装置に接続した。取り出した左頚動脈は電磁
フラシメーターにより流れを測定するのに使つ
た。記録した他のパラメーターはdp／dt、ECG
（心電図）、BPM（脈摶／分）である。すべての値
は８チヤンネルヒユーレツトパツカードポリグラ
フに記録した。トリペプチドを0.9％NaClに溶かし、右大腿静
脈に注射した。結果は次表の通りであるが、薬を投与して得ら
れた最小と最大圧力の低下を示す。

【表】例 15 pGLU−GLU−TRPによるアデノシンの相乗
作用アデノシンの血液動態効果を有する合成ペプチ
ドの干渉は上記の方法を使つて示した。静脈に
0.15mg／Kgの割合で注射した結果、この物質は短
期の降圧効果を示した。この場合、本発明の化合
物はpGLU−−GLU−TRPであつた。結果：静脈に0.1mg／Kgの割合でpGLU−GLU
−TRPを投与、アデノシン投与前15分、降圧効
果を増し永続化した。例 16 アデノシンとpGLU−ASN−TRPの相乗作用トリペプチドpGLU−ASN−TRPは上記方法
を使つて試験した。結果：アデノシン投与15分前、0.1mg／Kgで静脈
に注射した時、この化合物は降圧効果を増大永続
化させた。例 17 pGLU−ASN−TRPの鎮静活性この活性は苦悶試験（苦病起因剤として３％酢
酸溶液使用）腹腔内注射（0.1ml／10ｇ）により
評価した。実験は体重18〜24ｇの80匹の雌スイス
アルビノマウスを使つて行ない、３時間断食し、
各区20匹に分けた。１対照、0.9％NaClで処理、２試験トリペプチド（10mg／Kg腹腔内）で処理
したもの、３アデノシン（２mg／Kg腹腔内）で処理したも
の、４トリペプチド（10mg／Kg腹腔内）とアデノシ
ン（２mg／／Kg腹腔内）で処理したもの。１群と２群では、物質を酢酸40分前に投与し
た。３群では、アデノシンは酢酸10分前に投与し
た。４群では、アデノシンはトリペプチド30分後
および酢酸10分前に投与した。酢酸を接種した
後、動物はプラステイツクケージ中５匹の群で入
れ、そして20分観察した。この時間に動物がねじ
曲げた数を記録した。対照に対し処理動物のねじ
曲げ数の平均減少により、試験物質の鎮痛作用を
計算した。結果：アデノシン単独は20％の鎮痛活性を示し
た。トリペプチドpGLU−ASN−TRPは25％の
鎮痛活性を示した。アデノシンとトリペプチドの
併用は付加効果を示した。本発明の化合物は少なくとも治療用量の範囲で
は、特に毒性効果はなかつた。動物体においてこ
れらの化合物は容易に生理的物質（Ｌ−アミノ酸
出発物質）に転換しうるから、このことは論理的
である。医薬調合品の形で治療有効量を臨床使用するこ
とができる。本発明の医薬調合品は医薬的に適合
可能な担体および／又は賦形剤と併用して経口投
与例えば多分耐胃液処方で甘味入り錠剤、カプセ
ル、粉体、ドロツプ又はシロツプ、又は注射可能
な溶液の形で非経口投与に使用することができ
る。上記投与用量（純粋化合物について）は以下
の通りが望ましい。ａ経口150〜300mg、ｂ筋肉内20〜40mg、ｃ静脈内４〜９mg。次の例は非限定処方例である。ライオフイレートアンプル：20mgペプチド 50mgマニストール２mg塩化プトリウム溶媒アンプル：２ml蒸留水。

Claims

【特許請求の範囲】１式pGLU−Ｘ−TRP−OR （式中、Ｒは水素、メチルまたはエチルを示す
ことができ、ＸはGLY，VAL，GLU，ASP，
SER，ALA，PRO，LYS，ARG，ILEまたは
LEUを示す）を有するＬ−アミノ酸からなるト
リペプチド。２式pGLU−Ｘ−TRP−OR （式中、Ｒは水素、メチルまたはエチルを示す
ことができ、ＸはGLY，VAL，GLU，ASP，
SER，ALA，ILE，LEU，PRO，LYSおよび
ARGを示す）を有するＬ−アミノ酸からなるト
リペプチド化合物の製造法において、ａ pGLUまたはTRPを上記Ｘに相当するＬ−
アミノ酸と液相縮合反応させ、それぞれ保護さ
れたpGLU−ＸまたはTRP−Ｘジペプチドを
得、ｂ pGLU−Ｘの保護基をアジドに転換するか、
あるいはTRP−Ｘから保護基を除き、ｃ上記ｂ）工程の生成物をTRPまたはpGLU
と液相縮合反応させ、各成分がペプチド結合に
より結合しかつ保護基のついたトリペプチド
pGLU−Ｘ−TRPを得、ついでｄ pGLU−Ｘ−TRPの保護基を除きそして得
られたトリペプチドを回収することを特徴とす
る、上記化合物の製造法。３式pGLU−Ｘ−TRP−OR （式中、Ｒは水素、メチルまたはエチルを示す
ことができ、ＸはGLY，VAL，GLU，ASP，
SER，ALA，ILE，LEU，PRO，LYSおよび
ARGを示す）を有するＬ−アミノ酸から形成さ
れたトリペプチド化合物からなる血圧低下剤。