JPS60156700A - トリペプチド化合物、その製造法および医薬組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はＮＨ２−末端酸としてピログルタミン酸、Ｃ０
０Ｈ−末端酸としてトリプトファンおよびこの末端酸に
結合した第３アミノ酸が存在することを特徴とする、左
旋□性アミノ酸がら作られる新規トリペプチド化合物に
関する。

本発明はこの化合物の、製造法、同含有医薬組成物およ
び血圧降下剤および鎮痛剤として使用に関する。

ｍと１里 中枢神経系の神経伝達物質としておよび視床下部レベル
で放出因子として作用する多くのペプチドがＮＨ−末端
アミノ酸として環化グルタミン酸（ｐ−ＧＬＵ）の存在
により特徴づけられることは文献上公知である。

例えば、すべての高等動物に存在す、るニューロテンシ
ン、１３アミノ酸ペプチドは初期配列：ｐ−ＧＬＵ−Ｌ
ＥＵ−ＴＹＲ・・・・・・を有する。黄体形成率、ルモ
ンの、放出因子は初期配列：ｐ−ＧＬＵ□−Ｈｌｓ−Ｔ
ＲＰ・・・・・・により特徴があるデ、カペプチドであ
る。チロトロピンの放出因子は構造′ｐ　ＧＬＵ−８１
８ＰＲＯＮＨ２のトリペプチドである。ヒ１７のガス、
、トリノは初期配列：ｐ−ＧＬＵ−ＧＬＹ−ＰＲＯ・・
・・・・を有する１７ア・ミノ酸ペプチドである。水陸
両生動物の皮膚又は□蛇毒から抽出した薬理学的に活性
なペプチドに関する研究は、これらの物質の多くがＮ１
−１２−末端アミノ酸としてｐ−ＧＬＵの存在に特徴が
あると□いう興味ある知見をもたらした。実際、フイサ
レミン、ヘレドイシン、セルレイン、ゼノプシン、ラナ
テンシンおよびボンベシンはＮＨ２−末端酸としてｐ−
ＧＬＵを有するｎａｓａｌレベルで活性な′：・小ベプ
ヂドである。一方、Ｏｎｄｅｔｔｉ（Ｂｉｏｃｈｅｍｉ
ｓｔｒｙｌｏ、４０３３　（１９７１））およびＫａｔ
Ｏ（：Ｂｉｏｃｈｅｓｉｓｔｒｙ　１０　、９７２　（
１９７１））の研究によれば、蛇毒か５１５のペプチド
を同定し、そ、・・の全てはＮＨ２−末端アミノ酸とし
てｐ−Ｇ、ＬＬｌｌを有する。にａｔｏ　（Ｅｓｐｅｒ
ｉｅｎｔｉａ　ｚ２．４９（１９６６））もいくつかの
蛇毒にトリペプチド：ｐ−ＧＬＵ−ＡＳＮ−ＴＲＰおよ
びｐ−ＧＬＵ−ＧＬＮ−ＴＲＰがあることを記述してい
るが、薬１　理活性は記述してない。

板金それが多くの薬理活性ペプチドに共・通な特徴であ
るにせよ、ＮＨ，２−末端アミノ酸と（てｐ−ＧＬＵが
存在することは特別な生理学的効果□　とは相関関係は
ない＝ ・　：・　１豆！員Ｉ ＮＨ２−末端酸としてピログルタミン酸およびＣ００Ｈ
−末端酸としてトリプトファンならびにその低級アルキ
ルトリプトファンエステルを有す□るいくつかのトリペ
プチドは降圧剤および鎮痛剤として機能しうることを見
出した。

本発明に係る化合物は式Ａ−Ｘ−８ （式中、Ａと８は互いに異なり、各アミノ酸から、誘導
された基の形のｐ−ＧＬＵか又はＴＲＰであり、）ｌ：
ＧＬＹ、ＶＡＬ、、ＧＬＵ、ＡＳＰ。

ＳＥＲ，ＡＬＡｌＡＳＮ、ＧＬＮ、ＩＬＥ。

ｔ、ＥＵ、ＰＲＯ，ＬＹＳおよびＡＲＧから誘導された
基である：但しＧＬＵ−グルタミン酸、ＬＹＳ＝リジン
、ＰＲＯ−プロリン、ＡＳＰ−アスパラギン酸、ＡＲＧ
−フルギニン、ＧＬＹ−グリシン、ＧＬＮ−グルタミン
、５ＥＲ−セリン、ＡＬＡ＝アラニン、ＡＳＮ＝アスパ
ラギン、ＩＬＥ−イソ０イシン、ＴＲＰ−トリプトファ
ン、ｐ−ＧＬＵ＝ピログルタミン酸、ＬＥＵ＝（］イシ
ン、ＶＡＬ＝バリン）に表わされる。

これらの１５のペプチドの内、Ｘ−ＡＳＮおよびＸ＝Ｇ
ＬＮであるものは文献上公知であるが、薬理活性は知ら
れていない。他の１３のペプチドは新規化合物である。

本発明によれば、化合物Ａ−Ｘ−８の製造法は次の工程
から成る。

ａ）　液相縮合により、Ａが上記した通りである左旋性
アミノ酸を、Ｘが上記した通りである左旋性アミノ酸Ｘ
と反応させ、ＡとＸの保護基により保護されたジペプチ
ドＡ−Ｘを得る様に保護し、 ｂ）　ＡがＴＲＰＴ−ある場合、Ａ−Ｘ保ｍ基を除き、
そしてＡがｐ−ＧＬＵである場合、Ａ−Ｘ保護基をアジ
ドに転換し、 Ｃ）　液相縮合により、前記ｂ）工程の生成物と８（上
記した通り）とを反応させて、各基がペプチド結合によ
り互いに結合しているトリペプチドＡ−Ｘ−８を得るよ
うに保護し、そしてｄ）Ａ−Ｘ−８から保護基を除き、
得られたトリペプチドを回収する。

保護基は望ましくない反応からアミノ酸の選択基を保護
する様に導入されるものである。これらの基は反応終了
時に容易に除くことができなければならない。カルボキ
シル官能基の保護基の例としては、メチル、エチル、ベ
ンジル、ｐ−ニトロベンジルがある。本発明方法はトリ
プトファンの低級アルキルエステル特にこのペプチドの
メチル又はエチルトリプトファンエステルを供する。ア
ミン官能基の保護基の例には、ベンジルオキシカルボニ
ル、ｔ−ブトキシカルボニルおよびトリクロロアセチル
がある。これらの保護基を導入・脱離する技術は当業者
には広く知られている。

本発明方法は液相で行なわれる。特に望ましい溶媒はＮ
、Ｎ−ジメチル・ホルムアミド（ＤＭＦ）である。

本発明の目的−また化合物Ａ−Ｘ−８又はその低級アル
キルトリプトファンエステルを含有する医薬組成物、お
よび降圧剤および鎮痛剤としてのこれらの組成物の利用
にある。

１１東１鳳皇呈１ 各化合物の製造例は以下に示す。

例１ −ＧＬＵ−ＧＬＹ−ＴＲＰのＡ ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）に溶解したピログルタ
ミン酸のＯ−ペンタクロロフェニルニス：チル（ｎ−Ｇ
ＬＵ−０−ＰＯＰ）・１９に攪拌下、ＤＭＦと０．５ａ
ｅのＥｔ３Ｎに溶解したグリシン・メチルエステル塩酸
塩（ＧＬＹ−ＯＭｅ−ＨＣＩ）０．３２６ｇを加える。

生成した混合物を室温で２４時ｔｍｎｉ拝する。シリカ
ゲルで精製して、ジペプチドｐ−ＧＬＵ−Ｇ’ＬＹ−Ｏ
Ｍｅ０．３３９９を得る。これを過量のヒドラジン水和
物と反応させ、結晶後、０．２５８９のヒドラジン誘導
体ｐ−ＧＬｕ−ＧＬＹ−ＮＨ−ＮＨ２を得る。相当する
アジドｐ＝ＧＬＵ−Ｇｌ、ＹＮ３はイソペンチルナイト
ライド２０℃／３０分反応させて製造・する。ついでこ
れを室温で２４時間攪拌して、ＤＭＦと０．１５ａｅＥ
ｔ３Ｎ中トリプトフアンメチルエステル塩酸１１０．３
０４ｇとその場で反応させる。

シリカゲルカラムで精製して、保護されたトリペプチド
ｐ−ＧＬＵ−ＧＬＹ−ＴＲＰ−ＯＭｅＯ，３６１９を得
た。塩基性溶液で温和に加水分解して、０．２８３９の
ｐ−ＧＬＵ−ＧＬＹ−ＴＲＰを得た。

組成：理論１１　Ｇ−５８，２７８−５，４１Ｎ−１５
，０３ 実測値　Ｃ−５８，０１８−５，２２ Ｎ−１５，０９ 融点：２６２℃ 例２ −ＧＬＵ−ＶＡＬ−ＴＲＰの ＤＭＦと０．５ｓ！Ｅｔ３Ｎに溶解したバリンメｆ　）
Ｌｔ　Ｉ　ステル７２２　酸塩（ＶＡＬ−ＯＭｅ−ＨＣ
Ｊ）０．４３６９を攪拌下ｐ−ＧＬＵ−ＯＰＣＰ１　ｇ
に加える。室温で２４時間攪拌を続ける。シリカゲルで
精製して、ジペプチドｐ−ＧＬＵ−ＶＡＬ−ＯＭｅＯ，
３９２ＳＦを得た。これをヒドラジン水和物と反応させ
、結晶化させた後、ヒドラジン誘導体ｐ　ＧＬＵ　ＶＡ
Ｌ　ＮＨＮＨ２・０．３０３ｇを得た。相当するアジド
はこの化合物を亜硝酸イソペンチルと２０℃／３０分反
応させて製造した。ついで生成物にＤＭＦと０．１５＃
ＩｅＥｔａＮ中トリプトフアンメチルエステル塩酸塩（
ＴＲＰ−ＯＭｅ　−ＨＣｊｌ）０．２９３ｇを加え、混
合物を室温で２４時間攪拌した。シリカゲルで精製して
、保護されたトリペプチドｐ−ＧＬＬＩ−ＶＡＬ−ＴＲ
Ｐ−ＯＭｅｏ、３６６ｇを得た。塩基性条件下温和に加
水分解しに後、遊離トリペプチドｐ−ＧＬＵ−ＶＡＬ−
ＴＲＰｏ、２９３ｇを得た。

組成：理論値　Ｃ＝６０．８６　１７１−６．３２Ｎ＝
１３．５１ 実測値　Ｃ−６６，９６８＝６．４１ Ｎ＝１３．４２ 融点＝２６５℃ 例３　： ｐ−Ｇ　Ｌ　Ｕ　−Ｇ　Ｌ　Ｕ−Ｔ　ＲＰの合トリプト
ファンメチルエステル塩酸塩（ＴＲＰ　′−ＯＭｅ　−
ＨＣＪ）１（ＪをＤＭＦに溶かし、０、４ａｄ！のＥｔ
３Ｎを加え、３０分攪拌した。ついでこの溶液を一１０
℃に冷却し、順次１．３２２ｇのＺ−ＧＬＬＪ−（Ｂｕ
　）５−ＯＨ＜２−カルボベンゾキシ、Ｂｕ　＝第３級
ブチル）ＤＭＦ溶液、０．５３（ｌのヒドロキシベンゾ
トリアゾール（ＨＯＢＴ）および１．２３８ＳＦのジシ
クロへキシルカルボジイミド（ＤＣＣＩ）で処理した。

これを最初の３時間−１０℃に保持し、ついで室温で更
に２８時間保持した。シリカゲルで精製して、保持ジペ
プチドＺ−ＧＬＵ−（Ｂｕ　）５−ＴＲＰ−ＯＭｅｌ、
２６６ｙを得た。

室温、大気圧下／２時間５％Ｐｄ／Ｃで５０％ＡＣＯＨ
中水素化して、ブロックされてないジベプチ□ドの酢酸
塩をｉ、それを攪拌下ＤＭＦ中イソ二Ｐｉ’ンＥｔＮで
３０分間処理説脱塩た。精製し□　てジペプチドＨ’　
Ｎ−、ＧＬ［Ｊ’（Ｂ’ｕ、　）　ｓ、−ＴＲＰ二ＯＭ
ｅＯ，ｅａｓｇを得た。これをＤＭＦに溶解し、ＤＭＦ
中口Ｇｃｕ＝ｏｐｃｐ０．８０４ｇを加え、□室温で３
４時間攪拌した。

１１されたトリペプチドｐ・ＧＬＵ−ＧＬＵ二（Ｂｕ　
）５−ＴＲＰ−（＞Ｍｅ’０．６２５ｔを得□た。トリ
フ０口酢酸（ＴＥＡ）で処理して、５位のカルボキシル
基を遊離した。・温和な塩基加水分解によって、遊離ト
リペプチドｐＧＬＵ−ＧＬＵ−ＴＲＰｏ、４３２９を得
た。　□ 組成二理論値　Ｃ−５６，７５８＝５．４４Ｎ＝１２１
６１ 実測値　Ｃ＝５６．８８　８＝５．４２Ｎ＝１２．６５
　’ 融点：１６８℃ 例４ Ｌ東口ＬＵ冒Ｕ辷」」±Ｊ」１ ＤＭＦ中トリプトファンメチルエステル・塩、酸塩（Ｔ
ＲＰ−ＯＭｅ　−ＨＣＪ）１ｇにＥｔ３Ｎ０．４ｍを加
え、３０分攪拌した。ついでこの溶液を一１０℃に冷却
し、順次ＤＭＦ中Ｚ−ＡＳｐ（Ｂｕ”）４’　”　Ｏ’
）１１．’　２７ｏｇ、　ｔ−ｔｏｅ”ｒＯ，５３（ｌ
およびＤＣＣｌｌ、２３８９で処理した。生成混合物を
一り０℃／３時間、ついで室温で更に２４時間保った。

シリカゲルで精製して、を 保護ジペプチドＺ−Ａｓｐ（Ｂｕ　）４−ＴＲＰ−ＯＭ
ｅｌ、２９５ｇｔｌ？だ。室温、大気圧下２　、□時ｌ
１５％Ｐｄ／・Ｃにより５０％Ａｃ０Ｍにおいて攪拌下
ＤＭＦ中イソ−Ｐｒ　ＥｔＮで３０分処理　イ水素化し
、遊離ジペプチドの酢酸塩を得、それを　脱塩した。精
製して、保護ジペプチドＨ２Ｎ−□ＡＳＰ　・（Ｂｕ”
）ａ’　ＴＲＰ　ＯＭｅｏ、８６９９を得た。これをＤ
ＭＦに溶解し、ＤＭＦ中ｐＧＬＵ−ＯＰＣＰＯ１８２０
ｇで処理し、この混合物を室温で３６ＷＪＩＩ！攪拌し
た。保護トリペプチドｐＧＬＵＬＡＳＰ　（Ｂｕ’　）
　−ＴＲＰ−ＯＭｅ０．６５３９を得た。ＴＥＡで処理
しで、アスパラギン酸のベータ位のカルボキシルを遊離
−した。温和な塩基性の加水分解によりトリペプチドｐ
ＧＬＵ−ＡＳＰ−ＴＲＰ０．４６８ｇを得た。

組成：理論値　Ｃ＝５５．８１　８＝５．１５Ｎ＝１３
．０１ 実測値　Ｃ＝５５．９０　８＝５．２ＯＮ＝１２．９８ 融点：２３２℃ 例５ ｐ　Ｇ　Ｌ　Ｕ　−Ｓ　Ｅ　Ｒ−Ｔ　ＲＰの合゛ＤＭＦ
中トリプトファンメチルエステル塩酸塩（ＴＲＰ−ＯＭ
ｅ−ＨＣｌ）１９にＥｔ３ＮＯ，４ｄを加え、３０分攪
拌した。ついでこの溶液を一１０℃に冷却し、順次Ｎ−
Ｚ−０（Ｂｕｔ）−３，ＥＲ（予めそのジシクロヘキシ
ルアンモニウム塩から遊離させた）１．１５８ｇおよび
ＨＯ８Ｔ０．５３０ｇで処理した。３０分攪拌させた後
、混合物をＤＣＣｌｌ、２４０ｇで処理しｌこ　。

生成混合物を一り０℃／３時間保ち、ついで室温で更に
２７時間保った。精製して、保護ジペプチドＮ−Ｚ−＝
Ｏ（Ｂｕ’　）−８ＥＲ−ＴＲＰ−ＯＭｅｉｌ、０５１
ｇを得た。室温、大気圧下／２時間で５％Ｐｄ／Ｃによ
り５０％ＡＣＯＨ中加水分解して、ジペプチドの酢酸塩
を得、これを攪拌下３０分ＤＭＦ中イソ−Ｐｒ２ＥｔＮ
で処理して脱塩した。

保護ジペプチドＨ２Ｎ　Ｏ（、Ｂｕ　）　ＳＥＲ−ＴＲ
Ｐ−ＯＭｅｏ、６８（ｌを得た。これをＤＭＦに溶解し
、ＤＭＦ中ｐＧＬＵ−ＯＰＣＰＯ０６・８４ＳＦで処理
し、混合物を室温／４０時間攪拌した。精製して、保護
トリペプチドｐＧＬＵ−〇　（Ｂｕ’　）−８ＥＲ−Ｔ
ＲＰ−ＯＭｅＯ，５３４ｇを得た。ＴＦＡで処理して、
セリンのヒドロキシ基を遊離した。温和な塩基性加水分
解により、トリペプチドｐＧ　Ｌ　Ｕ　−Ｓ　Ｅ　Ｒ−
ＴＲＰｏ、３７３ｇを得た。

組成：理論値　Ｃ＝５６．７１　Ｈ＝５．５１Ｎ＝１３
．９２ 実測値　Ｃ＝５６．７８　８＝５．５５Ｎ＝１３．８５ 融点：２４８℃ 例６ ５・　ＧＬＵ−Ａ　Ａ−ＴＲＰのへ゛ ＤＭＦ中ｐＧＬＵ−ＯＰＣＰ１２に攪拌下ＤＭＦおよび
Ｅｔ３Ｎｏ、・５Ｉｄに溶解したアラニンメチルエステ
ル塩酸塩（ＡＬＡ＝ＯＭｅ−ＨＣＪ）０．３６３ＳＦを
加えた。混合物を寧温／′２４時間攪拌した。精製によ
り、ジペプチド’　ＯＧＬＵ−ＡＬＡ−ＯＭｅＯ，、，
３３５ｇを得、ついでこれを過剰のヒドラジン水和物と
反応、さヰ、化合物ｐＧＬＵ＝ＡＬＡ−ＮＨ−ＮＨ２，
０，２８０ｇを得た。・相当するアジドｐＧＬＬｌ−″
ＡＬＡ−Ｎ３は一２０℃７．３００分イソペンチルナ（
イトライトと反応させて製造（た。生成物をその・、場
でＤＭＦおよびＥｔ３Ｎｏ、１４ａｄ！中トリプトフア
ンメチルエステル塩酸塩（ＴＲＰ−ＯＭ、＠−Ｈ’ＣＪ
）０．３１１ｇと反応させ、混合物を空温で２４時間攪
拌した。精製により、保護トリペプチドｐＱＬＵ−ＡＬ
Ａ ・０．３６５１ｉＦｅ”“１′±１″′″１７ｊＣ−ｋ
ｍ”°゛。

遊離、トリペプチドｐＧＬＵ−ＡＬＡ−ＴＲＰ０．２７
２ＳＦを得た。

組成：理論値　Ｃ＝５９．０６　８＝５．７４Ｎ＝１４
．５０ 実測値　Ｃ＝５９．２０　Ｈ＝５．７５Ｎ＝１４．４８ 融点：　−２６８℃　。

例７ 見旦上現二」」は１　’ニーー ＤＭＦ中ＴＲＰ−９Ｍｅ−ＨＣＪ！　１’ｊにｐＨ−７
１，５までイソＴｐ、ｒ２Ｅ、ｔＮをライＮ−Ｂｏｃ−
ＡＳ、Ｎ−０ＮＰ　（Ｂｏｃ＝ｔ−ブチ　、。

ルオキシカルボニル）を加え、生成混合物を室温　□で
２゛３時間攪拌し勾。精製して、保護、ジペプ、チド　
１Ｎ−Ｂｏｃ−ＡＳＮ−ＴＲＰ−ＯＭｅｏ、９８５、ｇ
を得、これを室温で２０分過剰の１−　Ｆ　Ａで処理　
・した。真空で過剰のＴＥＡを除き、ペプチド塩を　ｉ
ＤＭＦに溶解し、イソ−Ｐｒ２ＥｔＮｔ’ｐｕ７．５ア
スパラギン酸のベータ位のカルボキシルを遊離−した。

温和な塩基性の加水分解によりトリペプチドｐＧＬＵ−
ＡＳＰ−ＴＲＰ０．４６８ＳＦを得た。

組成：理論値　Ｃ＝５５．８１　Ｈ＝５．１５Ｎ＝１３
．０１ 実測値　Ｃ＝５５．９０　Ｈ＝５．２ＯＮ＝１２゜９８ 融点：２３２℃ 例５ ｐ　Ｇ　Ｌ　Ｕ　−Ｓ　Ｅ　Ｒ−Ｔ　ＲＰの合成りＭＦ
中トリプトファンメチルエステル塩酸塩（ＴＲＰ−ＯＭ
ｅ−ＨＣｊり１ｇにＥｔ３ＮＯ，４ａｄ！を加え、３０
分攪拌した。つ、いでこの溶液を一１０℃に冷却し、順
次Ｎ−Ｚ−０（Ｂｕｔ）−３ＥＲ（予めそのジシクロヘ
キシルアンモニウム塩から遊離させた）１．１５８ｇお
よび１」０ＢＴ０．５３０ｇで処理した。３０分攪拌さ
せた後、混合物をＤＣＣｌｌ、２４０９で処理しｌこ　
。

生成混合物を一り０℃／３時間保ち、ついで室温で更に
２７時間保った。精製して、保護ジペプチドＮ−Ｚ−０
（Ｂｕｔ）　−８ＥＲ−ＴＲＰ−ＯＭｅｌ、０５１ｇを
得た。室温、大気圧下／２時間で５％Ｐｄ／Ｃにより５
０％ＡｃＯＨ中加水分解して、ジペプチドの酢酸塩を得
、これを攪拌下３０分ＤＭＦ中イソ−Ｐｒ２ＥｔＮで処
理して脱塩した。

保護ジペプチドＨＮ−０（Ｂｕｌ）−８ＥＲ−１”ＲＰ
−ＯＭｅＯ，６８（ｌを得た。これをＤＭＦに溶解し、
ＤＭＦ中ｐＧＬＵ−ＯＰＣＰＯ０６・８４ｇで処理し、
混合物を室温／４０時間攪拌した。精製して、保護トリ
ペプチドｐＧＬＵ−Ｏ（Ｂｕ’　）−８ＥＲ−ＴＲＰ−
ＯＭｅＯ，５３４ＳＦを得た。ＴＦＡで処理して、セリ
ンのヒドロキシ基を遊離した。温和な塩基性加水分解に
より、トリペプチドｐＧ　Ｌ　Ｕ　−Ｓ　Ｅ　Ｒ−ＴＲ
Ｐｏ、３７３７を得た。

組成：理論値　Ｃ＝５６．７１　Ｈ＝５．５１Ｎ＝１３
．９２ 実測値　Ｃ＝５６．７８　８＝６．５５Ｎ−１３，８５
。

融点：２４８℃　・ 例６ 、・ＧＬＵ−ＡＬＡ−ＴＲＲの４゛ ＤＭＦ中ｐＧＬＵ−ＯＰＣＰ１２に攪拌下ＤＭＦおよび
Ｅｔ３Ｎｏ、５ａｅに溶解したアラニンメチルエステル
塩酸塩（ＡＬＡ二〇Ｍ６！−ＨＣｊ）０．３６３ＳＦを
加えた。混合物を室温／′２４時間攪拌した。精製によ
り、ジペプチドｐＧＬＵ−ＡＬＡ−ＯＭｅＱ、３３５ｇ
を得、ついでこれを過剰のヒドラジン水和物と反応させ
、□　化合物ｐＧ　Ｌ　ＬＪ　−Ａ　Ｌ　Ａ　−Ｎ　Ｈ
，７、ＮＨ２０，２８０ｇを得た。・、相当するアジ下
ｐＧＬＬＪ−ＡＬＡ・−Ｎ３は一り０℃／３０分イソベ
ンチルナ（イトライトと反応させて製造し、た。生成物
をその璽場でＤＭＦおよびＥｔ３Ｎ０．１４ａｔｅ中ト
リプトフアンメチルエステル塩酸塩（ＴＲＰ−ＯＭｅ−
ＨＣＪ）０．３１１７と反応させ、混合物を室温で２４
Ｎ間攪拌した。精製により、保護トリペプチドＤＧＬＵ
−ＡＬＡ７ＴＲＰ−ＯＭｅｏ、３６５ＳＦを得、温和な
塩基性加水分解により、遊離トリペプチドＩ）　Ｇ　Ｌ
　Ｕ　’−Ａ　Ｌ　Ａ　−Ｔ　ＲＰ。

０．２７２９を得々。

組成：理論値　Ｃ＝５９．０６　Ｈ＝５．７４Ｎ＝１４
．５０ 実測値　Ｃ＝５９．２０　Ｈ＝５．７５Ｎ＝１４．４８ 融点：　−２６８℃ 例７ ｐＧ−ＬＬＪ−ＡＳＮ−ＴＲＰの合 ＤＭＦ中ＴＲＰ−ＯＭｅ−ＨＣＪｔ　１　’ＪにｐＨ。

７８．５ま墾イソｐｒ　ＥｔＮを Ｎ−Ｂ、ｏｃ−ＡＳＮ−ＯＮＰ　（Ｂｏｃ＝ｔ−ブチル
オキシカルボニル）を加え、生成混合物を室温で２゛３
時間、攪拌した。精製して、保護ジペプチドＮ−１Ｎ−
１３ｏｃ−ＡＳＮ−ＴＲＰ−Ｏ，９８５，９を得１、こ
れを室温で２０分過剰のＴＦＡで処理した。真空で過剰
のＴＦＡを除き、ペプチド塩をＤＭＦに溶解し、イソ−
Ｐ　ｒ　２　Ｅ　ｔ　Ｎ　Ｆ　ｐＨ７−、５実測値　Ｃ
＝６０．８９　８＝６．８３Ｎ＝１３．５５ 融点：２５０℃ 例１１ ＧＬＵ−ＰＲＯ−ＴＲＰの合゛ ＤＭＦ中ｐＧＬＬＪ−ＯＰＣＰｌ　ｇに、ＤＭＦおよび
０．５ｍｌ！Ｅｔ３Ｎに溶解したＰＲＯ−ＯＭｅ・ＨＣ
Ｊ！０．４３９ＳＦを攪拌下加え、生成混合物を室温で
２４時間攪拌した。精製して、ジペプチドＩ）ＧＬＵ−
ＰＲＯ−ＯＭｅＯ，３２５９を得、これを過剰のヒドラ
ジン水和物で処理し、化合物ｐＧＬＵ−ＰＲＯ−ＮＨ−
ＮＨ２を得た。相当するアジドは一り０℃／３０分イソ
ペンチルナイトライドで反応調製した。このアジドはそ
の場でＤＭＦおよび０．１５ｓｌｅＥｉ３Ｎ中ＴＲＰ−
ｏｖｅ−ｔ−ｔｃｌｏ、２６７９と反応ｇせ、室温で２
４時間攪拌した。精製して、保護トリペプチドｐＧＬＵ
−ＰＲＯ−ＴＲＰ−ＯＭｅを得、温和なｊ！ＡＭ加水分
解により遊離のトリペプチドｐＧＬＵ−ＰＲＯ−ＴＲＰ
０．３０１ｇを得た。

組成：理論値　Ｃ＝６１．１６　８＝５．８６Ｎ＝１３
．　５８ 実測値　Ｃ＝６１．１８　８＝５．８３Ｎ＝１３．　４
６ 融点：２５５℃ 例１２ ＧＬＵ−ＬＹＳ−ＴＲＰ（ＤＡ ＤＭＦ中ＴＲＰ−ＯＭｅ　−ＨＣｌ２　Ｉ　ＳＦにｐＨ
７，５までイｖ−Ｐｒ２ＥｔＮを、ついでＤＭＦ中Ｎ−
ＢＯＣ−Ｎ−Ｚ−リジン−〇ＮＰ　（ＯＮＰ＝オルソニ
トロフェニル）１．９６３ＳＦを加え、生成混合物を室
温７２０時間攪拌した。精製して、保護ジペプチド１．
３１９９を得、室温で２０分間過剰のＴＦＡで処理した
。過剰のＴＦＡを真空上除去し、ペプチド塩をＤＭＦに
溶解し、イソ−Ｐｒ２ＥｔＮでＤＨ７，５に調整した。

生成溶液を一１０℃にし、ＤＭＦ中ｐＧＬＵ−ＯＰＣＰ
　−０，８８４ＳＦで処理した。混合物を最初３時間−
ｉｏ’ｃ′で、ついで室温で更に１９時間激しく攪拌し
た。精製して、保護トリペプチド０．８７０９を得、室
温／大気圧下２時間５％Ｐｄ／Ｃによ′□す５０％Ａｃ
ＯＨ中水素化した。温和なｍ基加水分解により、遊離の
トリペプチドｐ　Ｇ　Ｌ　Ｌｌ　−’Ｌ　Ｙ　Ｓ′−’
Ｔ’　Ｒ’　Ｐ　０．５２・４ｇを遺だ。

組成：：理論値　Ｃ＝５９．５８　８＝６．５・９Ｎ＝
１５．７８ ′□　実測値　ｃ＝５９．４ｏ　）−１＝６．４ＯＮ＝
１５．　６５ 融点：２２８℃ ：＠′１３′ ｐＧＬＵ−ＡＲＧ−ＴＲＰ′の合成　・ＤＭＦおよび０
．４ｊｄ！Ｅｔ　Ｎ中ＴＲＰ−・’Ｏ’ｖｅ・トＩＣＪ
Ｉ　１９を３０分攪拌し、−１０℃に冷却し、ついで１
．２５２５ＦＢｏｃ−Ｎ−二・トロ５−ニア□ルギニン
、０．５３０ｇＨＯＢＴおよび１．２４ｇＤＣＣＩを攪
拌下加えた。生成混合物側−１０℃／４時間激しく攪、
拌しかつ室温で２７□’　ｕｔｈｒＪ！ｉｍ拌した。保
護ジペプチド１．２２５９を単離し、室温で２０分間過
剰のＴＦＡで処理した。

真空上過剰のＴＦＡを除き、遊離ジペプチドをＤＭＦに
入れ、た。生成溶液を攪拌下ｐＧＬＵ−ＯＰＣＰＩ　Ｓ
Ｆで処理し、室温で４０時間攪拌した。

精製して、ブロックしたトリペプチド０．６００９を得
、室温で大気圧下２時＠５％Ｐｄ／ｃにより５０％ＡＣ
ＯＨにて処理した。温和な塩基加水　・分解により、ｐ
ＧＬＵ−ＡＲＧ−ＴＲＰ”ｔ−ジペプチド０．３９４９
を得た。

組成：理論値　Ｃ＝５６．０４　８＝６．２ＯＮ−２０
，７９ 実測値　Ｇ＝５６．１５　８＝６．１ＯＮ＝２０．６５ 融点＝２０２℃ 例１４ 厄匡止ユ月と工旺二匹ユＬ」− ＤＭＦ中ｐＧＬＵ−ＯＰＣＰｌｇに攪拌下ＤＭＦ・およ
び０．５ａｅのＥｔ３Ｎに溶解したＬＥＬＪ・＝ＯＭｅ
−ＨＣＪ！０．４８０ｇ＋加えた。　二生成混合物を室
温で２４時間攪拌した。精製して、ジペプチドｐＧＬＬ
Ｉ−ＬＥＬＪ−ＯＭｅ３０２ｍｇを得、これを過剰のヒ
ドラジン水和物と反応させ、ヒドラジン誘導体ｐＧＬＵ
−ＬＥＬＪ−ＮＨ−ＮＨ２を得た。相当するアジドは一
２０℃で３０分イソペンチルナイトライドと反応調製し
た。こノアシトをＤＭＦおよび０．１５ａｅＥｔ３Ｎ中
ＴＲＰ−ＯＥ　ｔ−ＨＣｊ！　２５０＃ｌｆｆで処理し
、室温で２４時間攪拌した。精製して、ブロックしたト
リペプチドｐＧＬＵ−ＬＥＬＪ−ＴＲＰ−ＯＥｔＯ，２
７４ｇを得た。

組成：理論値　Ｃ＝６２．１５　８＝７．２５Ｎ＝１２
．６０ 実測値　Ｃ＝６２．２８　Ｈ＝７．２９Ｎ＝１２．５１ 融点：１８０℃ 丸凰益１ 本発明化合物の薬理効果を測定するために、動物試験を
行なった。

本化合物の降圧効果 体重２２０〜２５０ｇの雄ＣＤチャールスリバーラット
を使い、エチルウレタン（１，７，５ｇ／Ｋｙｍ腔内）
で麻酔した。気、管を切開（１ｎｃａｎｎｕｌａｔｉｏ
ｎ　）　Ｌ／だ後、右頚動脈を取り出し、カニユーレに
より圧力測定装置に接続した。取り出した左頚動脈は電
磁ブラシメーターにより流れを測定するのに使った。記
録した他のパラメーターはｄ　ｐ／ｄｔ１ＥＧＧ　（心
電図）、ＢＰＭ（脈搏／分）である。すべての、値は８
チヤンネルヒユーレツトバツカートポリグラフに記録し
た。

トリペプチドを０．９％ＮａＣｊ！に溶かし、右大腿静
脈に注射した。

結果は次表の通りであるが、薬を投与して得られた最・
小と最大圧力の低下を示す。

２　ｑ／　Ｋｇの用量における・ペプチドとその誘導体
の降圧効果　□ 化　合　物　Δ最小値　へ」」フ仁値 （嗣Ｈ（１）　（ｓ＋１ｌｏ）、 ＥＩＧＬＵ−ＧＬＹ−ＴＲＰ　３５　２５ｐＧＬＵ−Ｇ
Ｌｕ−ＴＩＰ　１０　２０ｐＧＬＵ−ＡＳＰ−ＴＲＰ　
１０　１０ｐＧＬＵ−３ＥＲ−ＴＲＰ　３５　４５−　
ｐＧＬＵ−＾Ｌ＾−ＴＲＰ　２０　１０ＥＩＧＬＵ−Ａ
ＳトＴＲＰ　２０　３５　。

ＤｃＬｕ−ＧｔＮ−ＴＲｐ　１　０　２０　′ｐＧＬＬ
ｌ−ＬＥＤ−ＴＲＰ　３０　３０＋１ＧＬＵ−ＬＹＳ−
ＴＲＰ　２５　３５ｐＧＬＵ−＾ＲＧ−ＴＲＰ　１５　
２５ｐＧＬＵ−ＬＥＵ−ＴＲＰ−ＯＥｔ　２０　３０ｐ
ＧＬＵ−ＩＬＥ−ＴＲＰ−ＯＥｔ　２５　３０例１５　
、。

アデノシン゛の血、液動態効果を有する合成ベプ、チド
の干渉は上記の方法を使って示した。静−に０．１５■
／幻の、割合で注射した結果、この物質は短期の降圧効
果、を示した。この場合、本発明の　；化合物はｐＧＬ
Ｕ７ＧＬＵ−ＴＲＰであった。

結果：静脈に０．１Ｎ／に９の割合でｐ　Ｇ　Ｌ　Ｕ　
７　”ＧＬＵ−ＴＲＰを投与、アデノシン投与前１巨分
、降圧効果を増し永続化した。

例１６　・ アデノシンとｐＧＬＵ−ＡＳＮ−’Ｔ　ＲＰの　乗１月 トリペプチドｐＧＬＵ−ＡＳＮ−ＴＲＰは上記　□方法
を使って試験した。

結果：アデノシン投与１５分前、０．１■／幻で静脈に
注射した時、この化合物は降圧効果を増大永続化させた
。　。

例１・７　・。

ＬＵ−ＡＳＮ−ＴＲＰの　静活性 この活性は苦悶試験（苦痛起因剤として３％酢酸溶液使
用）腹腔的注射（０，１ａｄ！／１（１）により評価し
た。実験は体重１８〜２４９の８０匹の雌スイスアルピ
ノマウスを使って行ない、３時間断食し、各区２０匹に
分けた。

１）対照、０．９％ＮａＣ１で処理、 ２）試験トリペプチド（１０４１１９／Ｎｙ腹腔内）で
処理したもの、 ３）　アデノシン（２＃！ｆＦ／Ｋｇ腹腔内）で処理し
たもの、 ４）トリペプチド（１０■／都腹腔内）とアデノシン（
２■／Ｋｇ腹腔内）で処理したもの。

１群と２群では、物質を酢１４０分前に投与した。３群
では、アデノシンは酢酸１０分前に投与した。４群では
、アデノシンはトリペプチド３０分後および酢酸１０分
前に投与した。酢酸を接種した後、動物はプラスティッ
クグー９９５匹の群で入れ、そして２０分観察した。こ
の時間に動物がねじ曲げた数を記録した。対照に対し処
理動物のねじ曲げ数の平均減少により、試験物質の鎮痛
作用を計算した。

結果：アデノシン単独は２０％の鎮痛活性を示した。ト
リペプチドｐＧＬＵ−ＡＳＮ−ＴＲＰは２５％の鎮痛活
性を示した。アデノシンとトリペプチドの併用は付加効
果を示した。

本発明の化合物は少なくとも治療用量の範囲では、特に
毒性効果はなかった。動物体においてこれらの化合物は
容易に生理的物質（し−ア□ミノ酸出発物質）に転換し
うるから、このことは論理的である。

医薬調合品の形で治療有効量を臨床使用することができ
る。本発明の医薬調合品は医薬的に適合可能な担体およ
び／又は賦形剤と併用して経ロ投−与例えば多分耐胃液
処方で甘味入り錠剤、カプセル、粉体、ドロップ又はシ
ロップ、又は注射可能な溶液の形で非経口投与に使用す
ることができる。

上記投与用量（純粋化合物について）は以下の通りが望
ましい。

ａ）　経口１５０〜３００■、 ｂ）筋肉内２０〜４０１Ｉ！Ｆ、 Ｃ）静脈内４〜９■。

次の例は非限定処方例である。

ライオフイレート アンプル：　２０ＩＩｇペプチド ５０■マニストール ２ｑ塩化プトリウム 溶媒アンプル：　２ｄ蒸留水 代理人　浅　村　皓

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 °（１）　式　Ａ−Ｘ−８ （式中、Ａと８は互いに異なり１、Ｄ−ＧＬＵ又はＴＲ
   Ｐ基であり、Ｘはペプチド結合によりＡとＢ□゛と結合
   したＧＬＹ、ＶＡＩ　ＧＬＬＪｌＡＳＰ。 ＳＥ、ＲｌＡＬＡＳ　ＰＲＯ，ＬＹＳ、ＡＲＧ。 ・ＩＬＥ、ＬＥＵから選択されるアミノ酸誘導基である
   ）を有する左旋性アミノ酸により生成される、実質的に
   純粋形のトリペプチド化合物。・（り　式　Ａ−Ｘ−８ （式中、Ａと８は互いに異なり、ｐ−ＧＬＵ又は”　Ｔ
   　Ｒ’Ｐ基であり、Ｘはペプチド結合によりＡと８に結
   合したＧＬＹ、ＶＡＬ、ＧＬＵ、ＡＳＰ。 ＳＥＲ，ＡＬＡ、ＡＳＮＪ　ＧＬＮｌｌＬＥ。 ■ＬＥ（Ｊ＝　ＰＲＯ，ＬＹＳおよびＡＲＧから選択さ
   れたアミノ酸誘導基である）を有する左旋性アミノ酸に
   より生成・されるトリペプチド化合物の低級アルキルト
   リプトファンエステル。 （３）　低級アルキルは・メチル又はエチルである、特
   許請求の範囲第２項記載の化合物。 （４）　式　Ａ−Ｘ−８・ （式中、Ａと８は互いに異なり、ｐ−ＧＬＵ又はＴＲＰ
   から誘導された基であり、Ｘはペプチド結合によりＡと
   ８に結合したＧＬＹ、ＶＡＬ。 ＧＬＵ、ＡＳＰ、ＳＥＲ，ＡＬＡ、ＡＳＮ。 ＧＬＮ、ＩＬＥ、ＬＥＵ、ＰＲＯｌＬＹＳおよびＡＲＧ
   から選ばれたアミノ酸から誘導された基である）を有す
   る左旋性アミノ酸により形成されたトリペプチド化合物
   の製造法において、ａ）　Ｊ″Ｉｉｌ！Ｌ″″Ａ＆：［
   ｔ６＆１１！７Ａ／ｌ１ｕｌｌｌ　ト縮合により、上記
   したＸに相当する左旋性アミノ酸と反応して、ＡとＸの
   保ＩＩＩにより保護されているジペプチドＡ−Ｘを得、 ｂ）ＡＳＴＲＰの場合、保１１基を除き、モしてＡがｐ
   −ＧＬＵの場合、八−父の保護基をアジドに転換し、 Ｃ）　上記ｂ）工程の生成物を液相縮合により、上記の
   ８に相当するアミノ酸と反応させ、各成分が互いにペプ
   チド結、合に４より結合しているトリペプチドＡ−Ｘ−
   Ｂｅｌ＃、そしてこれに保護基を、供し、ついで ｄ）Ａ−Ｘ−８の保護基を除き、生成したトリペプチド
   を回収する工程を含むことを特徴とする、上記方法。 （５）　式　Ａ−Ｘ−８ （式中、Ａと８は互いに異なり、ｐ−ＧＬＵ又はＴＲＰ
   から誘導した基であり、Ｘはペプチド結合によりＡとＢ
   に結合したＧＬＹ、ＶＡＬ、ＧＬＵ。 ＡＳＰ、５ＥＲＳＡＬＡ、ＡＳＮｌＧＬＮｌｌＬＥ、Ｌ
   ＥＵ、ＰＲＯ，ＬＹＳおよびＡＲＧから選んだアミノ酸
   誘導基である）を有する左旋性アミノ酸から形成したト
   リペプチド、又はその低級アルキルトリプトファンエス
   テルから成る血圧降下剤および鎮痛−０ （６）特許請求の範囲第５項に記載した降圧剤と鎮痛剤
   の治療有効量ならびに医薬的に適合可能な担１・体およ
   び／又は佐薬を含む、医薬組成物。