JPH0153039B2 - - Google Patents
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- JPH0153039B2 JPH0153039B2 JP56146879A JP14687981A JPH0153039B2 JP H0153039 B2 JPH0153039 B2 JP H0153039B2 JP 56146879 A JP56146879 A JP 56146879A JP 14687981 A JP14687981 A JP 14687981A JP H0153039 B2 JPH0153039 B2 JP H0153039B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- propynylcyclopentenolone
- ester
- optically active
- culture
- carboxylic acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
本発明は下記式（）でしめされる（±）−４
−ヒドロキシ−３−メチル−２−2′−プロピニル
−２−シクロペンテノンの生化学的光学分割法に
関する。さらに詳しくは、アルスロバクター属、
シユードモナス属、アクロモバクター属、アルカ
リゲネス属またはトリコデルマ属に属する微生物
が生産するエステラーゼを（±）−４−ヒドロキ
シ−３−メチル−２−2′−プロピニル−２−シク
ロペンテノンの有機カルボン酸（炭素数１〜18個
の飽和または不飽和のカルボン酸）エステルに作
用させて不斉加水分解して、光学純度の高い光学
活性４−ヒドロキシ−３−メチル−２−2′−プロ
ピニル−２−シクロペンテノンとその対掌体のエ
ステルを得る工業的に有利な４−ヒドロキシ−３
−メチル−２−2′−プロピニル−２−シクロペン
テノンの生化学的光学分割法に関する。 本発明の対象である４−ヒドロキシ−３−メチ
ル−２−2′−プロピニル−２−シクロペンテノン
（以後、これをプロピニルシクロペンテノロンと
略称する。）は、優れた殺虫活性を有するいわゆ
る合成ピレスロイドと呼ばれる一群のエステル化
合物の重要なアルコール成分の１つとして知られ
ている。 例えば該プロピニルシクロペンテノロンの２，
２，３，３−チトラメチルシクロプロパンカルボ
ン酸とのエステルである下記式（）で示される
化合物は極めて強いノツクダウン効力および致死
効力を有する優れた殺虫剤である（特公昭50−
15843号公報）。 プロピニルシクロペンテノロンは４位に不斉炭
素を有するために２種の光学異性体が存在し通常
これらのエステルとしての活性は大きく異なる。
例えば上記式（）で示されるエステルにおいて
は（＋）−プロピニルシクロペンテノロンのエス
テルは対応する（−）−プロピニルシクロペンテ
ノロンのエステルに比し、その殺虫効力は数倍優
れている。従つて通常の製造法により得られる
（±）−プロピニルシクロペンテノロンを工業的に
も有利に光学分割する技術が望まれている。 光学活性プロピニルシクロペンテノロンを製造
する方法としては、（±）−プロピニルシクロペン
テノロンをフタル酸の半エステルとし、次いでこ
れを光学活性アミンを反応させ、光学活性プロピ
ニルシクロペンテノロンのジアステレオマー塩を
生成させ、これを分離し、使用したアミンと半エ
ステルとして回収し、得られた半エステルを加水
分解することにより光学活性プロピニルシクロペ
ンテノロンを得る方法が知られている（特開昭56
−2929号公報）。しかし、この方法は通算収率が
低いこと、複雑な工程を必要とすること、および
高価な光学活性試薬を必要とすることなどの点
で、必ずしも充分な方法とは言い難い。 本発明者らはこれらの諸問題点を克服し工業的
にもより有利な（±）−プロピニルシクロペンテ
ノロンの光学分割法を確立すべく研究を重ねた結
果、アルスロバクター属、シユードモナス属、ア
クロモバクター属、アルカリゲネス属またはトリ
コデルマ属に属する微生物が生産するエステラー
ゼを（±）−プロピニルシクロペンテノロンの有
機カルボン酸（炭素数１〜18個の飽和または不飽
和の有機カルボン酸）エステルに作用させること
により光学純度の高い光学活性プロピニルシクロ
ペンテノロンとその対掌体のエステルが得られる
ことを見い出し、これに種々の検討を加え本発明
を完成するに至つた。次に本発明を詳細に説明す
る。本発明方法において原料として使用される
（±）−プロピニルシクロペンテノロンの有機カル
ボン酸（炭素数１〜18個の飽和の有機カルボン
酸）エステルの製造は、エステル製造の常法、例
えば（±）−プロピニルシクロペンテノロンに有
機カルボン酸の無水物を反応させる方法あるいは
有機カルボン酸クロライドを有機塩基の存在下で
反応させることなどにより容易に製造することが
できる。 本発明で使用されるエステラーゼを生産する微
生物としては、アルスロバクター属、シユードモ
ナス属、アクロモバクター属、アルカリゲネス属
またはトリコデルマ属に属する微生物であつてリ
パーゼを含む広義のエステラーゼを生産する微生
物である。 これらの各属に属する代表的な菌株名を下記に
例示するが、本発明の微生物はこれらの例示限定
されるものではない。 (1) アルスロバクター・シンプレツクス
（Arthrobacter simplex） IFO 3530 (2) シユードモナス・フルオレツセンス
（Psecudomonas fluorescens） IFO 3081 (3) アルカリゲネス・フエーカリス
（Alcaligenes faecalis） IFO 12669 (4) トリコデルマ・ビリデ（Trichoderma
viride） IFO 4847 これらの菌株はいずれもAmerican Type
Culture Collection（ATCC）または大阪市の財
団法人醗酵研究所（IFO）に保存され、これらの
保存機関より入手することができる。 上記微生物の培養は、通常常法に従つて液体培
養を行なうことにより培養液を得る。例えば滅菌
した液体培地〔かび類、酵母類用には麦芽エキ
ス・酵母エキス培地（水１にペプトン5.0ｇ、
グルコース10.0ｇ、麦芽エキス3.0ｇ、酵母エキ
ス3.0ｇを溶解し、PH6.5とする）、細菌類用には
加糖ブイヨン培地（水１にグルコース10.0ｇ、
ペプトン5.0ｇ、肉エキス5.0ｇ、NaCl3.0ｇを溶
解しPH7.2とする）〕に微生物を接種し、通常20〜
40℃で１〜３日間往復振盪培養を行なう。また必
要に応じて固体培養を行つてもよい。 また、これらの微生物起源のエステラーゼのな
かには市販されているものがあり、容易に入手す
ることができる。市販エステラーゼの具体例とし
てはシユードモナス属のリパーゼ（天野製薬製）、
アルカリゲネス属のリパーゼ（リパーゼPL（各糖
産業製））、アクロモバクター属のリパーゼ（リパ
ーゼAL（各糖産業製））、アルスロバクター属のリ
パーゼ（リパーゼ合同BSL（合同酒精製））など
が挙げられる。 本発明方法を実施するに際し、（±）−プロピニ
ルシクロペンテノロンの有機カルボン酸（炭素数
１〜18個の飽和または不飽和のカルボン酸）エス
テルの不斉加水分解は、上記微生物を培養した培
養液、培養液から分離した菌体、エステラーゼを
含有する培養濾液、あるいは各種酵素分離法によ
つて菌体または培養濾液から分離した粗製エステ
ラーゼ、精製エステラーゼおよびエステラーゼ含
有抽出液または濃縮液と（±）−プロピニルシク
ロペンテノロンの有機カルボン酸エステルを混合
し、撹拌または振盪することにより行われる。ま
た、固定化菌体あるいは固定化エステラーゼも使
用することもできる。 （±）−プロピニルシクロペンテノロンの有機
カルボン酸エステルの不斉加水分解を行なう条件
としては、反応温度は10〜70℃が適当であり、好
熱菌の培養液または好熱菌の培養により得られた
耐熱性エステラーゼでは50〜65℃中温菌の培養液
または特に耐熱性を有しないエステラーゼでは20
〜50℃が好ましい。 反応時間は通常３〜48時間であるが、反応温度
を高めたり酵素量を増加させるなどにより反応時
間の短縮も可能である。 反応中のPHは好アルカリ性菌の培養液のアルカ
リ性エステラーゼではPH８〜11、好アルカリ性で
ない微生物の培養液や耐アルカリ性を有しないエ
ステラーゼではPH５〜８が好ましい。また、加水
分解によつて生成する有機カルボン酸を中和し、
反応中のPHを一定に保つために緩衝液の使用が好
ましく、リン酸ナトリウム、リン酸カリウムなど
の無機酸塩の緩衝液、酢酸ナトリウム、クエン酸
ナトリウムなどの有機酸塩の緩衝液を使用するこ
とができる。 基質である（±）−プロピニルシクロペンテノ
ロンの有機カルボン酸エステルの使用濃度は反応
液に対し１〜50wt％であり、好ましくは５〜
25wt％である。 次に、このようにして不斉加水分解反応を行つ
た後、遊離した光学活性プロピニルシクロペンテ
ノロンと未反応の対掌体エステルを分離回収す
る。この分離回収に際しては水蒸気蒸留、溶媒抽
出、分別蒸留、カラムクロマトグラフイーなどの
操作を適宜採用することができる。例えば反応液
を水蒸気蒸留し留生物をエーテル抽出するかある
いは直接反応液をエーテル、酢酸エチル、ベンゼ
ンなどの有機溶媒で抽出し、この抽出物を分別蒸
留し光学活性プロピニルシクロペンテノロンとそ
の対掌体のエステルを分離取得するか、または抽
出物をシリカゲルのカラムクロマトグラフイーに
かけ、例えばトルエン−酢酸エチル（５：１）溶
液で溶出することにより、先ず光学活性プロピニ
ルシクロペンテノロンの有機カルボン酸エステル
が分離され、次いでトルエン−酢酸エチル（２：
１）溶液で溶出を行なうことによりその対掌体の
遊離のプロピニルシクロペンテノロンが分離され
る。 また、以上のようにして分離された光学活性プ
ロピニルシクロペンテノロンのエステルは、さら
に脱アシル化することにより容易に光学活性プロ
ピニルシクロペンテノロンに導くことができる。
脱アシル化の方法としては例えばプロピニルシク
ロペンテノロンの有機カルボン酸エステルに水お
よび当量の炭酸水素ナトリウムを加え、次いで10
％HClを加え、PH５に調製した後、８時間攪拌下
に還流を行なうと容易にプロピニルシクロペンテ
ノロンが分離される。 以上、詳細に説明したように本発明方法による
（±）−プロピニルシクロペンテノロンの光学分割
は従来知られている有機合成化学的光学分割法に
比べ工程が簡略であり、また高価な光学活性試薬
を必要としないので経済的に有利である。 さらに得られる光学活性プロピニルシクロペン
テノロンの収率、光学純度が高く工業的に極めて
有利である。 次に、本発明を実施例によつてさらに詳細に説
明するが、本発明はこれによつて限定されるもの
ではない。 実施例 １〜４ （±）−プロピニルシクロペンテノロンの酢酸
エステル1.0ｇと表１に記載した各エステラーゼ
20mgを緩衝液（PH7.0、McIlvaine緩衝液またはPH
9.5、0.2M濃度のNa2CO3−NaHCO3緩衝液）10
mlに加え、30℃で攪拌子を用いて激しく撹拌しつ
つ反応させた。24時間反応を行なつた後、反応物
を酢酸エチルで抽出した。抽出液をガスクロマト
グラフイー（５％DEGS、1.1ｍ、180℃）で分析
し、プロピニルシクロペンテノロンの酢酸エステ
ルとプロピニルシクロペンテノロンのピーク面積
比より加水分解率を算出し下記の結果を得た。抽
出液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフ
イーにかけ、トルエン−酢酸エチル（５：１）溶
液で溶出を行ない未反応のプロピニルシクロペン
テノロンの酢酸エステルを分離取得し、さらにト
ルエン−酢酸エチル（２：１）溶液で溶出し、遊
離プロピニルシクロペンテノロンを取得した。 ここで得られた遊離プロピニルシクロペンテノ
ロンのうち10mgをトルエン１mlに溶解し、ピリジ
ン0.2ml、（−）−α−メトキシ−α−トリフルオ
ロメチルフエニル酢酸クロライド（（−）−
MTPAクロライド）45mgを加え、一時間加熱還
留しプロピニルシクロペンテノロンの（−）−
MTPAジアステレオマーとし、ガスクロマトグ
ラフイー（シリコンDCQF−１、30mキヤピラリ
ーカラム、180℃）で光学異性体分析を行ない、
（＋）−プロピニルシクロペンテノロンのジアステ
レオマーと（−）−プロピニルシクロペンテノロ
ンのジアステレオマーのピーク面積比より遊離プ
ロピニルシクロペンテノロンの光学異性体型およ
び光学純度を求めた。 一方、カラムクロマトグラフイーの操作により
得られた未反応エステルに水５ml、エステルと当
量の炭酸水素ナトリウムを加え、さらに10％HCl
水を加えPH５に調整した後、８時間攪拌下に還留
し脱アシル化を行なつた。反応液を冷却後酢酸エ
チル、水および食塩を加え抽出し、溶媒を留去後
得られた油状物をシリカゲルカラムクロマトグラ
フイーにかけトルエン−酢酸エチル（２：１）溶
液で溶出し、光学活性プロピニルシクロペンテノ
ロンを分離取得した。 このプロピニルシクロペンテノロンを上記と同
様にしてガスクロマトグラフイーにて光学異性体
比を分析し未反応エステルの光学異性体型および
光学純度を求めた。結果を表１に示す。
−ヒドロキシ−３−メチル−２−2′−プロピニル
−２−シクロペンテノンの生化学的光学分割法に
関する。さらに詳しくは、アルスロバクター属、
シユードモナス属、アクロモバクター属、アルカ
リゲネス属またはトリコデルマ属に属する微生物
が生産するエステラーゼを（±）−４−ヒドロキ
シ−３−メチル−２−2′−プロピニル−２−シク
ロペンテノンの有機カルボン酸（炭素数１〜18個
の飽和または不飽和のカルボン酸）エステルに作
用させて不斉加水分解して、光学純度の高い光学
活性４−ヒドロキシ−３−メチル−２−2′−プロ
ピニル−２−シクロペンテノンとその対掌体のエ
ステルを得る工業的に有利な４−ヒドロキシ−３
−メチル−２−2′−プロピニル−２−シクロペン
テノンの生化学的光学分割法に関する。 本発明の対象である４−ヒドロキシ−３−メチ
ル−２−2′−プロピニル−２−シクロペンテノン
（以後、これをプロピニルシクロペンテノロンと
略称する。）は、優れた殺虫活性を有するいわゆ
る合成ピレスロイドと呼ばれる一群のエステル化
合物の重要なアルコール成分の１つとして知られ
ている。 例えば該プロピニルシクロペンテノロンの２，
２，３，３−チトラメチルシクロプロパンカルボ
ン酸とのエステルである下記式（）で示される
化合物は極めて強いノツクダウン効力および致死
効力を有する優れた殺虫剤である（特公昭50−
15843号公報）。 プロピニルシクロペンテノロンは４位に不斉炭
素を有するために２種の光学異性体が存在し通常
これらのエステルとしての活性は大きく異なる。
例えば上記式（）で示されるエステルにおいて
は（＋）−プロピニルシクロペンテノロンのエス
テルは対応する（−）−プロピニルシクロペンテ
ノロンのエステルに比し、その殺虫効力は数倍優
れている。従つて通常の製造法により得られる
（±）−プロピニルシクロペンテノロンを工業的に
も有利に光学分割する技術が望まれている。 光学活性プロピニルシクロペンテノロンを製造
する方法としては、（±）−プロピニルシクロペン
テノロンをフタル酸の半エステルとし、次いでこ
れを光学活性アミンを反応させ、光学活性プロピ
ニルシクロペンテノロンのジアステレオマー塩を
生成させ、これを分離し、使用したアミンと半エ
ステルとして回収し、得られた半エステルを加水
分解することにより光学活性プロピニルシクロペ
ンテノロンを得る方法が知られている（特開昭56
−2929号公報）。しかし、この方法は通算収率が
低いこと、複雑な工程を必要とすること、および
高価な光学活性試薬を必要とすることなどの点
で、必ずしも充分な方法とは言い難い。 本発明者らはこれらの諸問題点を克服し工業的
にもより有利な（±）−プロピニルシクロペンテ
ノロンの光学分割法を確立すべく研究を重ねた結
果、アルスロバクター属、シユードモナス属、ア
クロモバクター属、アルカリゲネス属またはトリ
コデルマ属に属する微生物が生産するエステラー
ゼを（±）−プロピニルシクロペンテノロンの有
機カルボン酸（炭素数１〜18個の飽和または不飽
和の有機カルボン酸）エステルに作用させること
により光学純度の高い光学活性プロピニルシクロ
ペンテノロンとその対掌体のエステルが得られる
ことを見い出し、これに種々の検討を加え本発明
を完成するに至つた。次に本発明を詳細に説明す
る。本発明方法において原料として使用される
（±）−プロピニルシクロペンテノロンの有機カル
ボン酸（炭素数１〜18個の飽和の有機カルボン
酸）エステルの製造は、エステル製造の常法、例
えば（±）−プロピニルシクロペンテノロンに有
機カルボン酸の無水物を反応させる方法あるいは
有機カルボン酸クロライドを有機塩基の存在下で
反応させることなどにより容易に製造することが
できる。 本発明で使用されるエステラーゼを生産する微
生物としては、アルスロバクター属、シユードモ
ナス属、アクロモバクター属、アルカリゲネス属
またはトリコデルマ属に属する微生物であつてリ
パーゼを含む広義のエステラーゼを生産する微生
物である。 これらの各属に属する代表的な菌株名を下記に
例示するが、本発明の微生物はこれらの例示限定
されるものではない。 (1) アルスロバクター・シンプレツクス
（Arthrobacter simplex） IFO 3530 (2) シユードモナス・フルオレツセンス
（Psecudomonas fluorescens） IFO 3081 (3) アルカリゲネス・フエーカリス
（Alcaligenes faecalis） IFO 12669 (4) トリコデルマ・ビリデ（Trichoderma
viride） IFO 4847 これらの菌株はいずれもAmerican Type
Culture Collection（ATCC）または大阪市の財
団法人醗酵研究所（IFO）に保存され、これらの
保存機関より入手することができる。 上記微生物の培養は、通常常法に従つて液体培
養を行なうことにより培養液を得る。例えば滅菌
した液体培地〔かび類、酵母類用には麦芽エキ
ス・酵母エキス培地（水１にペプトン5.0ｇ、
グルコース10.0ｇ、麦芽エキス3.0ｇ、酵母エキ
ス3.0ｇを溶解し、PH6.5とする）、細菌類用には
加糖ブイヨン培地（水１にグルコース10.0ｇ、
ペプトン5.0ｇ、肉エキス5.0ｇ、NaCl3.0ｇを溶
解しPH7.2とする）〕に微生物を接種し、通常20〜
40℃で１〜３日間往復振盪培養を行なう。また必
要に応じて固体培養を行つてもよい。 また、これらの微生物起源のエステラーゼのな
かには市販されているものがあり、容易に入手す
ることができる。市販エステラーゼの具体例とし
てはシユードモナス属のリパーゼ（天野製薬製）、
アルカリゲネス属のリパーゼ（リパーゼPL（各糖
産業製））、アクロモバクター属のリパーゼ（リパ
ーゼAL（各糖産業製））、アルスロバクター属のリ
パーゼ（リパーゼ合同BSL（合同酒精製））など
が挙げられる。 本発明方法を実施するに際し、（±）−プロピニ
ルシクロペンテノロンの有機カルボン酸（炭素数
１〜18個の飽和または不飽和のカルボン酸）エス
テルの不斉加水分解は、上記微生物を培養した培
養液、培養液から分離した菌体、エステラーゼを
含有する培養濾液、あるいは各種酵素分離法によ
つて菌体または培養濾液から分離した粗製エステ
ラーゼ、精製エステラーゼおよびエステラーゼ含
有抽出液または濃縮液と（±）−プロピニルシク
ロペンテノロンの有機カルボン酸エステルを混合
し、撹拌または振盪することにより行われる。ま
た、固定化菌体あるいは固定化エステラーゼも使
用することもできる。 （±）−プロピニルシクロペンテノロンの有機
カルボン酸エステルの不斉加水分解を行なう条件
としては、反応温度は10〜70℃が適当であり、好
熱菌の培養液または好熱菌の培養により得られた
耐熱性エステラーゼでは50〜65℃中温菌の培養液
または特に耐熱性を有しないエステラーゼでは20
〜50℃が好ましい。 反応時間は通常３〜48時間であるが、反応温度
を高めたり酵素量を増加させるなどにより反応時
間の短縮も可能である。 反応中のPHは好アルカリ性菌の培養液のアルカ
リ性エステラーゼではPH８〜11、好アルカリ性で
ない微生物の培養液や耐アルカリ性を有しないエ
ステラーゼではPH５〜８が好ましい。また、加水
分解によつて生成する有機カルボン酸を中和し、
反応中のPHを一定に保つために緩衝液の使用が好
ましく、リン酸ナトリウム、リン酸カリウムなど
の無機酸塩の緩衝液、酢酸ナトリウム、クエン酸
ナトリウムなどの有機酸塩の緩衝液を使用するこ
とができる。 基質である（±）−プロピニルシクロペンテノ
ロンの有機カルボン酸エステルの使用濃度は反応
液に対し１〜50wt％であり、好ましくは５〜
25wt％である。 次に、このようにして不斉加水分解反応を行つ
た後、遊離した光学活性プロピニルシクロペンテ
ノロンと未反応の対掌体エステルを分離回収す
る。この分離回収に際しては水蒸気蒸留、溶媒抽
出、分別蒸留、カラムクロマトグラフイーなどの
操作を適宜採用することができる。例えば反応液
を水蒸気蒸留し留生物をエーテル抽出するかある
いは直接反応液をエーテル、酢酸エチル、ベンゼ
ンなどの有機溶媒で抽出し、この抽出物を分別蒸
留し光学活性プロピニルシクロペンテノロンとそ
の対掌体のエステルを分離取得するか、または抽
出物をシリカゲルのカラムクロマトグラフイーに
かけ、例えばトルエン−酢酸エチル（５：１）溶
液で溶出することにより、先ず光学活性プロピニ
ルシクロペンテノロンの有機カルボン酸エステル
が分離され、次いでトルエン−酢酸エチル（２：
１）溶液で溶出を行なうことによりその対掌体の
遊離のプロピニルシクロペンテノロンが分離され
る。 また、以上のようにして分離された光学活性プ
ロピニルシクロペンテノロンのエステルは、さら
に脱アシル化することにより容易に光学活性プロ
ピニルシクロペンテノロンに導くことができる。
脱アシル化の方法としては例えばプロピニルシク
ロペンテノロンの有機カルボン酸エステルに水お
よび当量の炭酸水素ナトリウムを加え、次いで10
％HClを加え、PH５に調製した後、８時間攪拌下
に還流を行なうと容易にプロピニルシクロペンテ
ノロンが分離される。 以上、詳細に説明したように本発明方法による
（±）−プロピニルシクロペンテノロンの光学分割
は従来知られている有機合成化学的光学分割法に
比べ工程が簡略であり、また高価な光学活性試薬
を必要としないので経済的に有利である。 さらに得られる光学活性プロピニルシクロペン
テノロンの収率、光学純度が高く工業的に極めて
有利である。 次に、本発明を実施例によつてさらに詳細に説
明するが、本発明はこれによつて限定されるもの
ではない。 実施例 １〜４ （±）−プロピニルシクロペンテノロンの酢酸
エステル1.0ｇと表１に記載した各エステラーゼ
20mgを緩衝液（PH7.0、McIlvaine緩衝液またはPH
9.5、0.2M濃度のNa2CO3−NaHCO3緩衝液）10
mlに加え、30℃で攪拌子を用いて激しく撹拌しつ
つ反応させた。24時間反応を行なつた後、反応物
を酢酸エチルで抽出した。抽出液をガスクロマト
グラフイー（５％DEGS、1.1ｍ、180℃）で分析
し、プロピニルシクロペンテノロンの酢酸エステ
ルとプロピニルシクロペンテノロンのピーク面積
比より加水分解率を算出し下記の結果を得た。抽
出液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフ
イーにかけ、トルエン−酢酸エチル（５：１）溶
液で溶出を行ない未反応のプロピニルシクロペン
テノロンの酢酸エステルを分離取得し、さらにト
ルエン−酢酸エチル（２：１）溶液で溶出し、遊
離プロピニルシクロペンテノロンを取得した。 ここで得られた遊離プロピニルシクロペンテノ
ロンのうち10mgをトルエン１mlに溶解し、ピリジ
ン0.2ml、（−）−α−メトキシ−α−トリフルオ
ロメチルフエニル酢酸クロライド（（−）−
MTPAクロライド）45mgを加え、一時間加熱還
留しプロピニルシクロペンテノロンの（−）−
MTPAジアステレオマーとし、ガスクロマトグ
ラフイー（シリコンDCQF−１、30mキヤピラリ
ーカラム、180℃）で光学異性体分析を行ない、
（＋）−プロピニルシクロペンテノロンのジアステ
レオマーと（−）−プロピニルシクロペンテノロ
ンのジアステレオマーのピーク面積比より遊離プ
ロピニルシクロペンテノロンの光学異性体型およ
び光学純度を求めた。 一方、カラムクロマトグラフイーの操作により
得られた未反応エステルに水５ml、エステルと当
量の炭酸水素ナトリウムを加え、さらに10％HCl
水を加えPH５に調整した後、８時間攪拌下に還留
し脱アシル化を行なつた。反応液を冷却後酢酸エ
チル、水および食塩を加え抽出し、溶媒を留去後
得られた油状物をシリカゲルカラムクロマトグラ
フイーにかけトルエン−酢酸エチル（２：１）溶
液で溶出し、光学活性プロピニルシクロペンテノ
ロンを分離取得した。 このプロピニルシクロペンテノロンを上記と同
様にしてガスクロマトグラフイーにて光学異性体
比を分析し未反応エステルの光学異性体型および
光学純度を求めた。結果を表１に示す。
【表】
実施例 ５〜７
（±）−プロピニルシクロペンテノロンのカプ
リン酸エステル0.65ｇと表２に記載した各エステ
ラーゼ10mgを緩衝液５mlに加え、30℃で攪拌子を
用いて激しく攪拌しつつ24時間反応させた。以
後、実施例１〜４と同様の操作を行ない表２の結
果を得た。
リン酸エステル0.65ｇと表２に記載した各エステ
ラーゼ10mgを緩衝液５mlに加え、30℃で攪拌子を
用いて激しく攪拌しつつ24時間反応させた。以
後、実施例１〜４と同様の操作を行ない表２の結
果を得た。
【表】
実施例 ８〜９
500ml肩付フラスコに液体培地〔カビ類、酵母
類用（実施例９）には麦芽エキス、酵母エキス培
地（水１にペプトン5.0ｇグルコース10.0ｇ麦
芽エキス3.0ｇ、酵母エキス3.0ｇを溶解し、PH6.5
とする。）細菌類用（実施例８）には加糖ブイヨ
ン培地（水１にグルコース10.0ｇ、ペプトン
5.0ｇ、肉エキス5.0ｇ、NaCl3.0ｇを溶解し、PH
7.2とする。）〕100mlを入れて殺菌した後、表４に
記載した各微生物を斜面培養から２白金耳接種
し、30℃で48時間往復振盪培養した。次いでこの
培養液に（±）−プロピニルシクロペンテノロン
の酢酸エステル７ｇを加え、30℃で24時間往復振
盪した後、反応液を水蒸気蒸留し、留出物をエー
テル抽出した。抽出物を濃縮し、実施例１〜４と
同様のカラムクロマトグラフイー操作により遊離
プロピニルシクロペンテノロンを取得した。この
遊離プロピニルシクロペンテノロンを実施例１〜
４と同様の操作により光学異性体分析した。その
結果を表３に示す。
類用（実施例９）には麦芽エキス、酵母エキス培
地（水１にペプトン5.0ｇグルコース10.0ｇ麦
芽エキス3.0ｇ、酵母エキス3.0ｇを溶解し、PH6.5
とする。）細菌類用（実施例８）には加糖ブイヨ
ン培地（水１にグルコース10.0ｇ、ペプトン
5.0ｇ、肉エキス5.0ｇ、NaCl3.0ｇを溶解し、PH
7.2とする。）〕100mlを入れて殺菌した後、表４に
記載した各微生物を斜面培養から２白金耳接種
し、30℃で48時間往復振盪培養した。次いでこの
培養液に（±）−プロピニルシクロペンテノロン
の酢酸エステル７ｇを加え、30℃で24時間往復振
盪した後、反応液を水蒸気蒸留し、留出物をエー
テル抽出した。抽出物を濃縮し、実施例１〜４と
同様のカラムクロマトグラフイー操作により遊離
プロピニルシクロペンテノロンを取得した。この
遊離プロピニルシクロペンテノロンを実施例１〜
４と同様の操作により光学異性体分析した。その
結果を表３に示す。
【表】
実施例 10
実施例９と同様の方法で調製したトリコデル
マ・ビリデIFO4847の培養液１を濾過して培養
濾液を得た。この培養濾液30mlを３倍に濃縮し、
（±）−プロピニルシクロペンテノロンのギ酸エス
テル1.5ｇを加え、30℃で攪拌子を用いて激しく
攪拌しつつ30時間反応させた。以後実施例１〜４
と同様の操作を行ない表４の結果を得た。
マ・ビリデIFO4847の培養液１を濾過して培養
濾液を得た。この培養濾液30mlを３倍に濃縮し、
（±）−プロピニルシクロペンテノロンのギ酸エス
テル1.5ｇを加え、30℃で攪拌子を用いて激しく
攪拌しつつ30時間反応させた。以後実施例１〜４
と同様の操作を行ない表４の結果を得た。
Claims (1)
- １ アルスロバクター属、シユードモナス属、ア
クロモバクター属、アルカリゲネス属またはトリ
コデルマ属に属する微生物が生産するエステラー
ゼを（±）−４−ヒドロキシ−３−メチル−２−
2′−プロピニル−２−シクロペンテノンの有機カ
ルボン酸（炭素数１〜18個の飽和または不飽和の
カルボン酸）エステルに作用させて、これを不斉
加水分解して、光学活性な４−ヒドロキシ−３−
メチル−２−2′−プロピニル−２−シクロペンテ
ノンとその対掌体のエステルに分割することを特
徴とする（±）−４−ヒドロキシ−３−メチル−
２−2′−プロピニル−２−シクロペンテノンの生
化学的光学分割法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14687981A JPS5847495A (ja) | 1981-09-16 | 1981-09-16 | シクロペンテノロン誘導体の生化学的光学分割法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14687981A JPS5847495A (ja) | 1981-09-16 | 1981-09-16 | シクロペンテノロン誘導体の生化学的光学分割法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5847495A JPS5847495A (ja) | 1983-03-19 |
| JPH0153039B2 true JPH0153039B2 (ja) | 1989-11-10 |
Family
ID=15417628
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP14687981A Granted JPS5847495A (ja) | 1981-09-16 | 1981-09-16 | シクロペンテノロン誘導体の生化学的光学分割法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5847495A (ja) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3474546D1 (en) * | 1983-02-03 | 1988-11-17 | Sumitomo Chemical Co | Optically active 4-hydroxy-2-cyclopentenones, and their production |
| EP0149674B1 (en) * | 1983-03-18 | 1988-08-10 | Sumitomo Chemical Company, Limited | Process for biochemical optical resulution of cyclopentenolone derivative |
| EP0122779B1 (en) * | 1983-04-19 | 1986-07-23 | Sumitomo Chemical Company, Limited | Production of optically active cyclopentenolones |
| EP0127386B1 (en) * | 1983-05-25 | 1987-08-05 | Sumitomo Chemical Company, Limited | Process for producing optically active cyclopentenolones |
| JPH064035B2 (ja) * | 1983-07-05 | 1994-01-19 | 住友化学工業株式会社 | シクロペンテノン誘導体の分離法 |
| JPS61215342A (ja) * | 1985-03-19 | 1986-09-25 | Sumitomo Chem Co Ltd | 光学活性４−ヒドロキシ−２−置換−２−シクロペンテノンの製造法 |
| DE3638760A1 (de) * | 1986-11-13 | 1988-05-26 | Schering Ag | Verfahren zur herstellung von optisch aktiven bicyclo(3.3.0)octandioncarbonsaeureestern |
| JPH06125788A (ja) * | 1992-05-29 | 1994-05-10 | Kureha Chem Ind Co Ltd | 光学活性１，２−ジオール誘導体の製造方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS562929A (en) * | 1979-06-21 | 1981-01-13 | Sumitomo Chem Co Ltd | Preparation of optically active cyclopentenolone |
-
1981
- 1981-09-16 JP JP14687981A patent/JPS5847495A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5847495A (ja) | 1983-03-19 |
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