JPH0156754B2 - - Google Patents
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- JPH0156754B2 JPH0156754B2 JP60223750A JP22375085A JPH0156754B2 JP H0156754 B2 JPH0156754 B2 JP H0156754B2 JP 60223750 A JP60223750 A JP 60223750A JP 22375085 A JP22375085 A JP 22375085A JP H0156754 B2 JPH0156754 B2 JP H0156754B2
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- JP
- Japan
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- film
- chitosan
- antibacterial
- producing
- product
- Prior art date
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- Food Preservation Except Freezing, Refrigeration, And Drying (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Apparatus For Disinfection Or Sterilisation (AREA)
- Coating Of Shaped Articles Made Of Macromolecular Substances (AREA)
Description
〔産業上の利用性〕
本発明は、抗菌性および抗カビ性を有するフイ
ルムまたはシートに関し、詳しくは、フイルムま
たはシートにより包装された内容物における細菌
またはカビの生育および増殖を阻止しうるフイル
ムまたはシートに関する。 本発明のフイルムまたはシートは食品、化粧
品、医療材料またはその他の細菌およびカビが生
育しまたは増殖しうる物品または材料の包装また
は保存に利用することができる。 〔技術の背景および従来技術の説明〕 食品、化粧品または医療材料などの微生物の栄
養源となりうる物質を含むものは、微生物の生育
に適する条件に置かれると、その中に、細菌また
はカビなどの微生物が生育したり、増殖したりし
て、微生物の繁殖による損害を受け易い。 このような微生物による損害を避けるために、
これまでは、滅菌したプラスチツクスフイルムま
たはシートに、滅菌した材料または製品を包装す
るか、あるいは包装後に滅菌をしたり、また塩化
ビニリデン樹脂のラツプフイルムによつて、材料
または製品を密着して包装し、それによつて微生
物に対する空気の供給を勾断することが行なわれ
ている。しかしながら、これらの方法は、包装を
開い後は、その開口から細菌またはカビなどの微
生物に汚染されることが多いので、必ずしも充分
なものではない。 また食品、化粧品または医療材料に、安息香
酸、デヒドロ酢酸、ソルビン酸またはパラオキシ
安息香酸などの防腐保存料を加えて、プラスチツ
クスフイルムまたはシートにより包装することも
広く行なわれているが、これらの防腐保存料に
は、人体に対する安全性が充分でないものがあ
り、その使用を制限する傾向が強くなつている。 一方、キトサンは、エビやカニなどの甲殻類の
殻に含まれるキチンを脱アセチル化して得られる
多糖類であつて、β−１，４結合によりＤ−グル
コサミンが直鎖状に結合した多糖類であり、キト
サンを分解して得られる低重合度のキトサンも知
られている。キトサンを分解する方法には、塩酸
による加水分解法、亜硝酸による酸化分解法、過
酸化水素による酸化分解法および塩素による酸化
分解法などの化学的な方法、および酵素（キトサ
ナーゼ）による方法があり、キトサナーゼを生産
する微生物として、バチルスＲ−４、〔トミナガ
およびツジサカ：ビオヒミカ・エ・ビオフイジ
カ・アクタ（Y.Tominaga＆Y.Tsujisaka：
Biochimica et Biophysica Acta）第410巻、第
145−155頁（1957年）〕、ペニシリウム・イスラン
デイクム〔デイー・エム・フエントン等：ジヤー
ナル・オブ・ジエネラル・ミクロバイオロジー
（D.M.Fenton et al：Journal of General
Microbiology）第126巻、第151−165頁（1981
年）〕、バチルス99−５（堀内：日本農芸化学会、
昭和59年度大会、講演要旨集、第550頁）、ストレ
プトマイセスNo.６〔ジエイ・エス・プライス等：
ジヤーナル・オブ・バクテリオロジー（J.S.
Price et al：Journal of Bacteriology）第124
巻、第1574−1584頁（1975年）〕、ストレプトマイ
セス・グリセウス〔オオタカラ他：キチン・キト
サン・アンド・リレイテツド・エンザイムス
（A.Ohtakara et al：Chitin、Chitosan and
Related Enzymes）第147−160頁（1985年）ア
カデミツク・プレス〕およびバチルスNo.７−Ｍ
（特願昭60−120673号）があり、β−１，４−結
合グルコサミンにおける重合度が３〜７の低重合
度のキトサンのオリゴマーがフザリウム・ソラニ
（Fusarium solani）に対する抗カビ性を有する
ことも知られている。〔デイー・エフ・ケンド
ラ・アンド・エル・エー・ハドウイガー：エクス
ペリメンタル・マイコロジー（D.F.Kendra＆L.
A.Hadwiger：Experimental Mycology）第８
巻、第276−281頁（1984年）〕 他方において、プラスチツクスフイルムは、薄
くて丈夫であり、透湿性がほとんどなく、また通
気性も非常に小さく、さらに軟らかく、包装材料
として非常に優れたものであるが、印刷適性が皆
無に近い材料であるために、プラスチツクフイル
ムに印刷を行なうために、その表面の特性を変え
るために、放電加工あるいは酸化剤による処理な
どの表面加工が行なわれている。 本発明者の一人は、ポリマーについて永年研究
を続けているが、本発明者の他の一人が提供した
キトサンおよびキトサン分解物がプラスチツクス
フイルムに付着しうるという意外なことを見出
し、この知見に基づいて本発明に到達した。 〔発明の目的および発明の要約〕 本発明の目的は、抗菌性および抗カビ性の有す
るフイルムを提供することにあり、詳しくは、包
装の内容物における細菌およびカビの発生を抑止
しうるフイルムを提供することにあり、さらに詳
しくは、これらのフイルムを簡便に製造しうる方
法を提供することにある。 本発明は、フイルムに、キトサンを120mg・Ｄ
−グルコサミン／１ｇ・キトサンよりも多くない
生成還元糖量にまで分解したキトサン軽度分解物
を付着することからなる抗菌性および抗カビ性の
有するフイルムの製造法である。 フイルムの表面へのキトサン軽度分解物の付着
が、成形直後のフイルムに行なわれることが好ま
しく、またキトサン軽度分解物は、粉末状あるい
は溶液状であつてもよい。キトサン軽度分解物
は、バチルス（Bacillus sp.）No.７−Ｍ（微工研
菌寄第8139号）により生産されたキトサナーゼに
よつて分解されたものであることが好ましい。ま
たキトサン軽度分解物の製造に使用されるキトサ
ンは、脱アセチル化度が50〜100％のものである
ことが好ましい。 フイルムに対するキトサン軽度分解物の付着
は、凹版印刷法によつて行なうこともでき、キト
サン軽度分解物を付着するフイルムの表面に、放
電加工による親水化処理または強酸化剤による表
面処理をしておくこともでき、プラスチツクスフ
イルムにおけるプラスチツクスは、ポリエチレ
ン、ポリプロピレン、塩化ビニル樹脂または塩化
ビニリデン樹脂を使用することができる。 〔発明の具体的な説明〕 本発明において使用するキトサン軽度分解物
は、キチンの脱アセチル化物のキトサンを分解し
て得られる低分子化物である。キトサンの分解
は、公知の化学的方法またはキトサナーゼによる
酵素分解法のいずれによることもできるが、バチ
ルスNo.７−Ｍ（微工研菌寄第8139号）により生産
されたキトサナーゼによつて分解するのが好まし
く、その原料キトサンは、脱アセチル化度が50〜
100％のものを使用する。 キトサン軽度分解物をキトサナーゼによつて製
造するには、先ずキトサンを酸水溶液に溶解して
キトサン溶液を調製し、予め反応温度においてプ
レインキユベートし、これに、予め反応温度にお
いてプレインキユベートしたキトサナーゼ溶液を
加え、30〜80℃（好ましくは40℃前後）の反応温
度においてキトサンをキトサナーゼによつて分解
する。反応液のPHはキトサナーゼの作用PHにより
異なるが、通常３〜９（好ましくは６前後）であ
る。原料のキトサンとしてコロイダルキトサンを
使用する場合は、これを水に懸濁したものであつ
てもよい。キトサン溶液の調製に使用する酸は、
キトサンを溶解しうるものであれば、いかなるも
のであつても、これを使用することができるが、
塩酸または硝酸の希薄溶液、ギ酸、酢酸、グルタ
ミン酸またはアスコルピン酸を使用するのが好ま
しい。 キトサンの分解の程度は、温度、PHおよび反応
時間の反応条件によつて変化するから、予備実験
において所望の分解度を得るのに必要な反応条件
を求め、これによるのが好ましい。キトサンの分
解度を、反応生成物の生成還元糖量（mg・Ｄ−グ
ルコサミン／１ｇ・キトサン）によつて求めるの
が簡便で、通常、生成還元糖量が120mg・Ｄ−グ
ルコサミン／１ｇ・キトサンよりも多くない程度
にするのが好ましい。 キトサンの分解は、バチルス（Bacillus sp.）
No.７−Ｍ（微工研菌寄第8139号）により生産され
たキトサナーゼによつて行なうのが好ましい。 バチルスNo.７−Ｍは、長崎県南高来群小浜町雲
仙の原生沼の土壌によりキチンまたはキトサンを
唯一の炭素源とする培地に生育しうる細菌として
分離されたバチルス（Bacillus sp.）No.７株を親
株として、この親株をＮ−メチル−N′−ニトロ
ソ−Ｎ−ニトロソグアニジン（NTG）で処理し
て突然変異を誘発させ、得られたストレプトマイ
シン耐性の変異株の中から、高活性のキトサナー
ゼを生産しうるものとして分離された変異株であ
つて、微工研菌寄第8139号（FERM Ｐ−8139）
として通商産業省微生物工業技術研究所に寄託さ
れている。 バチルスNo.７−Ｍの菌学的性質は以下に示され
る。 Ａ 細胞の形態 (1) 細胞の形および大きさ：短桿菌、 （肉汁および肉汁寒天斜面培養、37℃、24
〜72時間の培養） (2) 細胞の多形性の有無：無し、 (3) 運動性の有無：有り、 （肉汁寒天半流動高層穿刺培養） (4) 胞子の有無：有り、内生胞子および裸の胞
子、球状、 〔ドーナー（Dorner）の染色法およびウ
イツツ（Witz）変法〕 (5) グラム染色性：陽性、 〔肉汁寒天斜面培養、37℃、18時間、ヒユ
ツカー（Hucker）の変法により染色〕 Ｂ 各培地における生育状態 (1) 肉汁寒天平板培養（37℃、24〜168時間）：
糸状の周縁を有する円形で、隆起した乳白色
のコロニーを形成する。コロニーの表面は凹
凸でやや光択があり、半透明である。時間の
経過とともに盛上つてくる。色素は生産しな
い。 (2) 肉汁寒天斜面培養（37℃、24〜168時間）：
拡布状に盛上つた乳白色のコロニーを形成す
る。コロニーは凸円形の隆起があり、光択が
ある。生育は良好で、時間とともに拡がつて
くる。色素は生産しない。 (3) 肉汁液体培養（37℃、24〜168時間）：表面
に膜を形成しない。時間とともに全体的に濁
つてくる。底部に絮状（顆粒状）の沈デンが
形成され、徐々に多くなつてくる。 (4) 肉汁ゼラチン穿刺培養（25℃、24〜168時
間）： 穿刺線に沿つて生育し、液化する。表面お
よび内部は漏状に生育し、液化する。液化
部分は白濁する。 (5) リトマスミルク（37℃、24〜168時間）： ２日後から上部が少しずつ液化し、４日目
には色は完全に変色し、酸性となつた。凝固
はしない。時間の経過とともに、液化は進
み、半透明になつた。 Ｃ 生理学的性質 (1) 硝酸塩の還元：− （硝酸塩肉汁培地、37℃、24〜120時間） (2) 脱窒反応：− （形らの方法、発酵管を使用、37℃、24
〜120時間） (3) MRテスト：＋ （37℃、24〜168時間） (4) VPテスト（アセチルメチルカルビノール
生成試験：＋ （37℃、24〜168時間） (5) インドールの生成：− （37℃、24〜168時間） (6) 硫化水素の生成：− （TSI寒天法、37℃、24〜168時間） (7) デン粉の加水分解：＋ （37℃、24〜168時間） (8) クエン酸の利用 （コーザーの培地、37℃、24〜168時間）：
− （クリステンセンの培地、37℃、24〜168
時間）：＋ (9) 無機窒素源の利用（37℃、24〜168時間） 硝酸塩：未定、 アンモニウム塩：未定、 (10) 色素の生成 （マンニツト・酵母エキス寒天斜面培
地）：− 〔キング（King）Ａ寒天斜面培地〕：− (11) 蛍光の有無：無し (12) ウレアーゼ：＋ （クリステンセン−ウレア寒天培地、37
℃、24〜168時間） (13) オキシダーゼ：＋ 肉汁寒天培地、37℃、24〜48時間） (14) カタラーゼ：＋ （肉汁寒天培地、37℃、24〜48時間） (15) 生育の範囲：（肉汁寒天培地） 温度：未定、 PH：５〜10、 添加食塩濃度：未定、 (16) 酸素に対する態度：好気性 （１％グルコース肉汁高層寒天培地、37
℃、24〜72時間） (17) ０−Ｆテスト〔ヒユー−ライフソン
（Hugh−leifson）法、37℃、Ｄ−グルコー
ス〕：発酵的に酸を生成する。 （fermentative） (18) 糖類からの酸およびガスの生成の有無
（37℃、24〜168時間）： 糖 類 酸 ガス Ｄ−グルコース ＋ − Ｄ−マンノース − − Ｄ−ガラクトース − − Ｄ−フラクトース ＋ − Ｌ−アラビノース − − Ｄ−キシロース − − Ｄ−ソルビツト − − Ｄ−マンニツト − − イノシツト − − マルトース ＋ − サツカロース ＋ − ラクトース − − デン粉 ＋ − セルロース − − グリセリン − − 以上の菌学的性質について、バージエイス・マ
ニユアル・オブ・デターミネイテイブ・バクテリ
オロジー（Bergey′s Manual of Determinative
Bacteriology）の第８版（1974年）を検索した
ところ、No.７−Ｍ株はバチルス（Bacillus）属に
属するのが相当であることがわかつた。 バチルスNo.７−Ｍにより生産されたキトサナー
ゼの酵素化学的性質は以下に示すとおりである。 (1) 作用： キトサンに作用し、分子の内部鎖から任意に
β−１，４結合を分解して主としてキトサンオ
リゴ糖（GlcN）o（ｎ＝２〜８）（２量体〜８量
体）を生成する。キトサンオリゴ糖は高速液体
クロマトグラフイーを用いてキトサン分解液か
ら分離することができる。この分解液における
キトサンの分解度は約45％である。カルボキシ
メチルセルロース（CMC）にも作用し、ある
程度はこれを分解するが、キチンには全く作用
しない。 (2) 作用温度範囲および最適作用温度： 可溶性キトサンを基質とした場合、80℃まで
作用し、最適作用温度は50℃である。 PH6.0において10分間反応させた場合の温度
と比活性の関係を第１図に示す。 (3) 作用PH範囲および最適PH： PH３〜９の範囲において作用し、最適PHはPH
６である。 １％可溶性キトサン１mlに各PHの緩衝液２ml
および酵素液１mlを加えた反応液を37℃におい
て10分間反応させた場合のPHと酵素の比活性の
関係を第２図に示す。 (4) 熱安定性： 50℃における15分間の保温まで、ほぼ安定
で、60℃における15分間の加熱により、酵素の
約40％が失活し、70℃における15分間の加熱に
より、完全に失活した。 温度と比活性の関係を第３図に示す。 (5) PH安定性： 0.1M緩衝液中で30℃において２時間放置し
た後、残存する酵素活性を測定したが、PH５〜
11の範囲において安定であつた。PH10〜11にお
いて安定であることは、バチルスNo.７−Ｍによ
り生産されたキトサナーゼの大きな特徴の一つ
である。PHと比活性の関係を第４図に示す。 (6) 阻害剤： バチルスNo.７−Ｍにより生産されたキトサナ
ーゼは、１×10-3Mの終濃度のHgCl2、PbCl2、
AgNO3、およびPCMBの存在によりほぼ100
％が阻害された。 (7) 基質特異性： 種々の基質を使用し、基質の終濃度を0.25％
とした時に、酵素反応液４ml当り酵素蛋白質１
mgによつて１時間後に遊離する全還元糖とヘキ
ソサミンの量（mg／mg蛋白質／時）を測定し
た。その結果が第１表に示される。
ルムまたはシートに関し、詳しくは、フイルムま
たはシートにより包装された内容物における細菌
またはカビの生育および増殖を阻止しうるフイル
ムまたはシートに関する。 本発明のフイルムまたはシートは食品、化粧
品、医療材料またはその他の細菌およびカビが生
育しまたは増殖しうる物品または材料の包装また
は保存に利用することができる。 〔技術の背景および従来技術の説明〕 食品、化粧品または医療材料などの微生物の栄
養源となりうる物質を含むものは、微生物の生育
に適する条件に置かれると、その中に、細菌また
はカビなどの微生物が生育したり、増殖したりし
て、微生物の繁殖による損害を受け易い。 このような微生物による損害を避けるために、
これまでは、滅菌したプラスチツクスフイルムま
たはシートに、滅菌した材料または製品を包装す
るか、あるいは包装後に滅菌をしたり、また塩化
ビニリデン樹脂のラツプフイルムによつて、材料
または製品を密着して包装し、それによつて微生
物に対する空気の供給を勾断することが行なわれ
ている。しかしながら、これらの方法は、包装を
開い後は、その開口から細菌またはカビなどの微
生物に汚染されることが多いので、必ずしも充分
なものではない。 また食品、化粧品または医療材料に、安息香
酸、デヒドロ酢酸、ソルビン酸またはパラオキシ
安息香酸などの防腐保存料を加えて、プラスチツ
クスフイルムまたはシートにより包装することも
広く行なわれているが、これらの防腐保存料に
は、人体に対する安全性が充分でないものがあ
り、その使用を制限する傾向が強くなつている。 一方、キトサンは、エビやカニなどの甲殻類の
殻に含まれるキチンを脱アセチル化して得られる
多糖類であつて、β−１，４結合によりＤ−グル
コサミンが直鎖状に結合した多糖類であり、キト
サンを分解して得られる低重合度のキトサンも知
られている。キトサンを分解する方法には、塩酸
による加水分解法、亜硝酸による酸化分解法、過
酸化水素による酸化分解法および塩素による酸化
分解法などの化学的な方法、および酵素（キトサ
ナーゼ）による方法があり、キトサナーゼを生産
する微生物として、バチルスＲ−４、〔トミナガ
およびツジサカ：ビオヒミカ・エ・ビオフイジ
カ・アクタ（Y.Tominaga＆Y.Tsujisaka：
Biochimica et Biophysica Acta）第410巻、第
145−155頁（1957年）〕、ペニシリウム・イスラン
デイクム〔デイー・エム・フエントン等：ジヤー
ナル・オブ・ジエネラル・ミクロバイオロジー
（D.M.Fenton et al：Journal of General
Microbiology）第126巻、第151−165頁（1981
年）〕、バチルス99−５（堀内：日本農芸化学会、
昭和59年度大会、講演要旨集、第550頁）、ストレ
プトマイセスNo.６〔ジエイ・エス・プライス等：
ジヤーナル・オブ・バクテリオロジー（J.S.
Price et al：Journal of Bacteriology）第124
巻、第1574−1584頁（1975年）〕、ストレプトマイ
セス・グリセウス〔オオタカラ他：キチン・キト
サン・アンド・リレイテツド・エンザイムス
（A.Ohtakara et al：Chitin、Chitosan and
Related Enzymes）第147−160頁（1985年）ア
カデミツク・プレス〕およびバチルスNo.７−Ｍ
（特願昭60−120673号）があり、β−１，４−結
合グルコサミンにおける重合度が３〜７の低重合
度のキトサンのオリゴマーがフザリウム・ソラニ
（Fusarium solani）に対する抗カビ性を有する
ことも知られている。〔デイー・エフ・ケンド
ラ・アンド・エル・エー・ハドウイガー：エクス
ペリメンタル・マイコロジー（D.F.Kendra＆L.
A.Hadwiger：Experimental Mycology）第８
巻、第276−281頁（1984年）〕 他方において、プラスチツクスフイルムは、薄
くて丈夫であり、透湿性がほとんどなく、また通
気性も非常に小さく、さらに軟らかく、包装材料
として非常に優れたものであるが、印刷適性が皆
無に近い材料であるために、プラスチツクフイル
ムに印刷を行なうために、その表面の特性を変え
るために、放電加工あるいは酸化剤による処理な
どの表面加工が行なわれている。 本発明者の一人は、ポリマーについて永年研究
を続けているが、本発明者の他の一人が提供した
キトサンおよびキトサン分解物がプラスチツクス
フイルムに付着しうるという意外なことを見出
し、この知見に基づいて本発明に到達した。 〔発明の目的および発明の要約〕 本発明の目的は、抗菌性および抗カビ性の有す
るフイルムを提供することにあり、詳しくは、包
装の内容物における細菌およびカビの発生を抑止
しうるフイルムを提供することにあり、さらに詳
しくは、これらのフイルムを簡便に製造しうる方
法を提供することにある。 本発明は、フイルムに、キトサンを120mg・Ｄ
−グルコサミン／１ｇ・キトサンよりも多くない
生成還元糖量にまで分解したキトサン軽度分解物
を付着することからなる抗菌性および抗カビ性の
有するフイルムの製造法である。 フイルムの表面へのキトサン軽度分解物の付着
が、成形直後のフイルムに行なわれることが好ま
しく、またキトサン軽度分解物は、粉末状あるい
は溶液状であつてもよい。キトサン軽度分解物
は、バチルス（Bacillus sp.）No.７−Ｍ（微工研
菌寄第8139号）により生産されたキトサナーゼに
よつて分解されたものであることが好ましい。ま
たキトサン軽度分解物の製造に使用されるキトサ
ンは、脱アセチル化度が50〜100％のものである
ことが好ましい。 フイルムに対するキトサン軽度分解物の付着
は、凹版印刷法によつて行なうこともでき、キト
サン軽度分解物を付着するフイルムの表面に、放
電加工による親水化処理または強酸化剤による表
面処理をしておくこともでき、プラスチツクスフ
イルムにおけるプラスチツクスは、ポリエチレ
ン、ポリプロピレン、塩化ビニル樹脂または塩化
ビニリデン樹脂を使用することができる。 〔発明の具体的な説明〕 本発明において使用するキトサン軽度分解物
は、キチンの脱アセチル化物のキトサンを分解し
て得られる低分子化物である。キトサンの分解
は、公知の化学的方法またはキトサナーゼによる
酵素分解法のいずれによることもできるが、バチ
ルスNo.７−Ｍ（微工研菌寄第8139号）により生産
されたキトサナーゼによつて分解するのが好まし
く、その原料キトサンは、脱アセチル化度が50〜
100％のものを使用する。 キトサン軽度分解物をキトサナーゼによつて製
造するには、先ずキトサンを酸水溶液に溶解して
キトサン溶液を調製し、予め反応温度においてプ
レインキユベートし、これに、予め反応温度にお
いてプレインキユベートしたキトサナーゼ溶液を
加え、30〜80℃（好ましくは40℃前後）の反応温
度においてキトサンをキトサナーゼによつて分解
する。反応液のPHはキトサナーゼの作用PHにより
異なるが、通常３〜９（好ましくは６前後）であ
る。原料のキトサンとしてコロイダルキトサンを
使用する場合は、これを水に懸濁したものであつ
てもよい。キトサン溶液の調製に使用する酸は、
キトサンを溶解しうるものであれば、いかなるも
のであつても、これを使用することができるが、
塩酸または硝酸の希薄溶液、ギ酸、酢酸、グルタ
ミン酸またはアスコルピン酸を使用するのが好ま
しい。 キトサンの分解の程度は、温度、PHおよび反応
時間の反応条件によつて変化するから、予備実験
において所望の分解度を得るのに必要な反応条件
を求め、これによるのが好ましい。キトサンの分
解度を、反応生成物の生成還元糖量（mg・Ｄ−グ
ルコサミン／１ｇ・キトサン）によつて求めるの
が簡便で、通常、生成還元糖量が120mg・Ｄ−グ
ルコサミン／１ｇ・キトサンよりも多くない程度
にするのが好ましい。 キトサンの分解は、バチルス（Bacillus sp.）
No.７−Ｍ（微工研菌寄第8139号）により生産され
たキトサナーゼによつて行なうのが好ましい。 バチルスNo.７−Ｍは、長崎県南高来群小浜町雲
仙の原生沼の土壌によりキチンまたはキトサンを
唯一の炭素源とする培地に生育しうる細菌として
分離されたバチルス（Bacillus sp.）No.７株を親
株として、この親株をＮ−メチル−N′−ニトロ
ソ−Ｎ−ニトロソグアニジン（NTG）で処理し
て突然変異を誘発させ、得られたストレプトマイ
シン耐性の変異株の中から、高活性のキトサナー
ゼを生産しうるものとして分離された変異株であ
つて、微工研菌寄第8139号（FERM Ｐ−8139）
として通商産業省微生物工業技術研究所に寄託さ
れている。 バチルスNo.７−Ｍの菌学的性質は以下に示され
る。 Ａ 細胞の形態 (1) 細胞の形および大きさ：短桿菌、 （肉汁および肉汁寒天斜面培養、37℃、24
〜72時間の培養） (2) 細胞の多形性の有無：無し、 (3) 運動性の有無：有り、 （肉汁寒天半流動高層穿刺培養） (4) 胞子の有無：有り、内生胞子および裸の胞
子、球状、 〔ドーナー（Dorner）の染色法およびウ
イツツ（Witz）変法〕 (5) グラム染色性：陽性、 〔肉汁寒天斜面培養、37℃、18時間、ヒユ
ツカー（Hucker）の変法により染色〕 Ｂ 各培地における生育状態 (1) 肉汁寒天平板培養（37℃、24〜168時間）：
糸状の周縁を有する円形で、隆起した乳白色
のコロニーを形成する。コロニーの表面は凹
凸でやや光択があり、半透明である。時間の
経過とともに盛上つてくる。色素は生産しな
い。 (2) 肉汁寒天斜面培養（37℃、24〜168時間）：
拡布状に盛上つた乳白色のコロニーを形成す
る。コロニーは凸円形の隆起があり、光択が
ある。生育は良好で、時間とともに拡がつて
くる。色素は生産しない。 (3) 肉汁液体培養（37℃、24〜168時間）：表面
に膜を形成しない。時間とともに全体的に濁
つてくる。底部に絮状（顆粒状）の沈デンが
形成され、徐々に多くなつてくる。 (4) 肉汁ゼラチン穿刺培養（25℃、24〜168時
間）： 穿刺線に沿つて生育し、液化する。表面お
よび内部は漏状に生育し、液化する。液化
部分は白濁する。 (5) リトマスミルク（37℃、24〜168時間）： ２日後から上部が少しずつ液化し、４日目
には色は完全に変色し、酸性となつた。凝固
はしない。時間の経過とともに、液化は進
み、半透明になつた。 Ｃ 生理学的性質 (1) 硝酸塩の還元：− （硝酸塩肉汁培地、37℃、24〜120時間） (2) 脱窒反応：− （形らの方法、発酵管を使用、37℃、24
〜120時間） (3) MRテスト：＋ （37℃、24〜168時間） (4) VPテスト（アセチルメチルカルビノール
生成試験：＋ （37℃、24〜168時間） (5) インドールの生成：− （37℃、24〜168時間） (6) 硫化水素の生成：− （TSI寒天法、37℃、24〜168時間） (7) デン粉の加水分解：＋ （37℃、24〜168時間） (8) クエン酸の利用 （コーザーの培地、37℃、24〜168時間）：
− （クリステンセンの培地、37℃、24〜168
時間）：＋ (9) 無機窒素源の利用（37℃、24〜168時間） 硝酸塩：未定、 アンモニウム塩：未定、 (10) 色素の生成 （マンニツト・酵母エキス寒天斜面培
地）：− 〔キング（King）Ａ寒天斜面培地〕：− (11) 蛍光の有無：無し (12) ウレアーゼ：＋ （クリステンセン−ウレア寒天培地、37
℃、24〜168時間） (13) オキシダーゼ：＋ 肉汁寒天培地、37℃、24〜48時間） (14) カタラーゼ：＋ （肉汁寒天培地、37℃、24〜48時間） (15) 生育の範囲：（肉汁寒天培地） 温度：未定、 PH：５〜10、 添加食塩濃度：未定、 (16) 酸素に対する態度：好気性 （１％グルコース肉汁高層寒天培地、37
℃、24〜72時間） (17) ０−Ｆテスト〔ヒユー−ライフソン
（Hugh−leifson）法、37℃、Ｄ−グルコー
ス〕：発酵的に酸を生成する。 （fermentative） (18) 糖類からの酸およびガスの生成の有無
（37℃、24〜168時間）： 糖 類 酸 ガス Ｄ−グルコース ＋ − Ｄ−マンノース − − Ｄ−ガラクトース − − Ｄ−フラクトース ＋ − Ｌ−アラビノース − − Ｄ−キシロース − − Ｄ−ソルビツト − − Ｄ−マンニツト − − イノシツト − − マルトース ＋ − サツカロース ＋ − ラクトース − − デン粉 ＋ − セルロース − − グリセリン − − 以上の菌学的性質について、バージエイス・マ
ニユアル・オブ・デターミネイテイブ・バクテリ
オロジー（Bergey′s Manual of Determinative
Bacteriology）の第８版（1974年）を検索した
ところ、No.７−Ｍ株はバチルス（Bacillus）属に
属するのが相当であることがわかつた。 バチルスNo.７−Ｍにより生産されたキトサナー
ゼの酵素化学的性質は以下に示すとおりである。 (1) 作用： キトサンに作用し、分子の内部鎖から任意に
β−１，４結合を分解して主としてキトサンオ
リゴ糖（GlcN）o（ｎ＝２〜８）（２量体〜８量
体）を生成する。キトサンオリゴ糖は高速液体
クロマトグラフイーを用いてキトサン分解液か
ら分離することができる。この分解液における
キトサンの分解度は約45％である。カルボキシ
メチルセルロース（CMC）にも作用し、ある
程度はこれを分解するが、キチンには全く作用
しない。 (2) 作用温度範囲および最適作用温度： 可溶性キトサンを基質とした場合、80℃まで
作用し、最適作用温度は50℃である。 PH6.0において10分間反応させた場合の温度
と比活性の関係を第１図に示す。 (3) 作用PH範囲および最適PH： PH３〜９の範囲において作用し、最適PHはPH
６である。 １％可溶性キトサン１mlに各PHの緩衝液２ml
および酵素液１mlを加えた反応液を37℃におい
て10分間反応させた場合のPHと酵素の比活性の
関係を第２図に示す。 (4) 熱安定性： 50℃における15分間の保温まで、ほぼ安定
で、60℃における15分間の加熱により、酵素の
約40％が失活し、70℃における15分間の加熱に
より、完全に失活した。 温度と比活性の関係を第３図に示す。 (5) PH安定性： 0.1M緩衝液中で30℃において２時間放置し
た後、残存する酵素活性を測定したが、PH５〜
11の範囲において安定であつた。PH10〜11にお
いて安定であることは、バチルスNo.７−Ｍによ
り生産されたキトサナーゼの大きな特徴の一つ
である。PHと比活性の関係を第４図に示す。 (6) 阻害剤： バチルスNo.７−Ｍにより生産されたキトサナ
ーゼは、１×10-3Mの終濃度のHgCl2、PbCl2、
AgNO3、およびPCMBの存在によりほぼ100
％が阻害された。 (7) 基質特異性： 種々の基質を使用し、基質の終濃度を0.25％
とした時に、酵素反応液４ml当り酵素蛋白質１
mgによつて１時間後に遊離する全還元糖とヘキ
ソサミンの量（mg／mg蛋白質／時）を測定し
た。その結果が第１表に示される。
【表】
本発明によつて製造されたフイルムは、フイル
ム自体が抗菌性および抗カビ性を有するだけでな
く、これにより包装された内容物における細菌お
よびカビの生育および増殖を抑制し、それによつ
て包装製品を長期間保存することができる。そし
てその細菌およびカビの生育および増殖を抑制す
る効果は、持続的であるから、包装製品を開封し
た後でも、その内容物に細菌およびカビの発生す
ることがない。 さらに、キトサン軽度分解物は、古くから食用
に供されていたキチンに由来するものであつて、
人畜に有害なものではない。 本発明におけるキトサン軽度分解物は、キトサ
ナーゼにより分解されたものであるから、不純物
の混入の少ないものである。 以下において本発明を参考例および実施例によ
つてさらに詳しく説明する。 参考例 １ （種培養の調製） 250ml容三角フラスコに、酵母エキス0.8％、ペ
プトン0.4％、肉エキス0.2％、コロイダルキトサ
ン0.5％を含む液体培地（PH：7.2）50mlを入れ、
常法により殺菌した後、これに予め液体培養した
バチルス（Bacillus sp.）No.７−Ｍ（FERM Ｐ−
8139）を接種し、30℃において、１日間振とう培
養した。 （酵素生産用培養液の調製） ５容三角フラスコ２本に、上記と同一の組成
の液体培地をそれぞれ１ずつ入れ、常法により
殺菌した後、これを上記で得られた種培養液40ml
を接種し、30℃において、４日間振とう培養し
た。培養液を6000r.p.mにおいて遠心分離して、
菌体を除去し、得られた上澄液のキトサナーゼの
活性を前記の酵素力価の測定法によつて測定し
た。上澄液１ml当り0.99単位であつた。 （酵素液の精製） 上記で得られた上澄液を混合し、得られた混合
液1.81に固体硫安1015ｇ（硫安80％飽和に相当
する）を加え、濾過し、得られた沈デン物を蒸留
水に溶解し、177mlとした。この酵素液を蒸留水、
引き続いて、0.02Mリン酸緩衝液（PH：6.0）に
対して透析した後、得られた酵素液を、予め
0.02Mリン酸緩衝液で平衝化したCM−セフアデ
ツクスＣ−50を充填したカラム〔2.6cm（径）×45
cm（長さ）〕に流しキトサナーゼを吸着させた。
ほとんどの不純蛋白質は素通り区分に集まつてい
た。このカラムを0.02Mリン酸緩衝液350mlで洗
浄した後、０〜0.5Mの塩化ナトリウムで直線的
濃度勾配により酵素蛋白質を溶出した。 次にキトサナーゼ活性を示した第218〜240のフ
ラクシヨンを合し、これをダイアフローメンブレ
ンフイルターPM−10（アミコン社製品）を用い
た限外濾過装置で17倍に濃縮し、この濃縮液に、
セフアデツクスＧ−100を用いるゲル濾過を行な
つた。 このゲル濾過のキトサナーゼ活性を示した第50
〜63のフラクシヨンを合し、再びCM−セフアデ
ツクスＣ−50によるカラムクロマトグラフイーを
行なつた。前回と同じ条件で酵素を吸着し、０〜
0.5Mの塩化ナトリウムで直線的濃度勾配により
酵素蛋白質を溶出した。 このカラムクロマトグラフイーにおいて２〜
42unit／mlのキトサナーゼ活性を示すフラクシヨ
ンが得られた。 参考例 ２ （キトサン軽度分解物の調製） 200ml容三角フラスコにキトサン（脱アセチル
化度：99％）１ｇを入れ、これに蒸留水50mlを加
え、さらに1M酢酸９mlを加え、充分に撹拌して
溶解した。これに1M酢酸ナトリウム水溶液を加
えて、PHを6.0に調整した後、蒸留水を加えて、
全量を100mlにした。参考例１で得たキトサナー
ゼ溶液に蒸留水を加えて、キトサナーゼ活性を
0.5unit／mlに調整し、得られたキトサナーゼ溶
液２mlを前記で得たキトサン溶液に加え、反応液
を37℃のインキユベーターに入れ、37℃において
３時間反応させた後、反応液の入つた三角フラス
コを沸とう浴に浸漬し、５分間煮沸して、反応を
停止し、キトサン軽度分解物溶液を得た。 このキトサン軽度分解物溶液のシヤーレス
（Shales）変法〔テイー・イモト：アグリカルチ
ユラル・バイオロジカル・ケミストリ（T.
Imoto：Agricultural Biological Chemistry）
第35巻 第1154−1156頁（1971年）〕による生成
還元糖量は８mg・Ｄ−グルコサミン／１ｇ・キト
サンであつた。 参考例 ３ （キトサン軽度分解物の試料の調製） (1) キトサン分解物Ａの試料の調製 キトサン１ｇに蒸留水50mlを加え、これに
1M酢酸９mlを加え、充分に撹拌して溶解し、
これに1M酢酸ナトリウム水溶液を加えて、PH
を6.0に調整した後、蒸留水を加えて、全量を
100mlにして、１％キトサン溶液を調製した。 １％キトサン溶液５mlを試験管に取り、これ
に参考例１で得たキトサナーゼ溶液を水で希釈
して30unit／mlの活性としたキトサナーゼ溶液
0.1mlを加え、37℃のインキユベーターにおい
て３時間反応した後、試験管を沸とう浴に浸漬
し、５分間沸とうして、反応を停止し、キトサ
ン分解物Ａを調製した。 キトサン分解物Ａの生成還元糖量（mg・Ｄ−
グルコサミン／１ｇ・キトサン）をシヤーレス
（shales）変法〔テイー・イモト：アグリカル
チユラル・バイオロジカル・ケミストリ（T.
Imoto：Agricultural Biological Chemistry）
第35巻 第1154−1156頁（1971年）〕により測
定したところ、590mg・Ｄ−グルコサミン／１
ｇ・キトサンであつた。 (2) キトサン分解物Ｂの試料の調製 キトサナーゼ溶液として、5unit／mlの活性
としたキトサナーゼ溶液を使用し、(1)と同様に
して、260mg・Ｄ−グルコサミン／１ｇ・キト
サンの生成還元糖量のキトサン分解物Ｂの試料
を調製した。 (3) キトサン分解物Ｃの試料の調製 キトサナーゼ溶液として、3unit／mlの活性
としたキトサナーゼ溶液を使用し、(1)と同様に
して、120mg・Ｄ−グルコサミン／１ｇ・キト
サンの生成還元糖量のキトサン分解物Ｃの試料
を調製した。 (4) キトサン分解物Ｄの試料の調製 キトサナーゼ溶液として、1unit／mlの活性
としたキトサナーゼ溶液を使用し、(1)と同様に
して、40mg・Ｄ−グルコサミン／１ｇ・キトサ
ンの生成還元糖量のキトサン分解物Ｄの試料を
調製した。 (5) キトサン分解物Ｅの試料の調製 キトサナーゼ溶液として、0.5unit／mlの活
性としたキトサナーゼ溶液を使用し、(1)と同様
にして、８mg・Ｄ−グルコサミン／１ｇ・キト
サンの生成還元糖量のキトサン分解物Ｅの試料
を調製した。 (6) キトサン分解物Ｆの試料の調製 キトサナーゼ溶液として、0.05unit／mlの活
性としたキトサナーゼ溶液を使用し、(1)と同様
にして、６mg・Ｄ−グルコサミン／１ｇ・キト
サンの生成還元糖量のキトサン分解物Ｆの試料
を調製した。 (7) キトサンの試料の調製 キトサナーゼ溶液の代りに、0.05M酢酸緩衝
液（PH：6.0）を使用し、(1)と同様にして、４
mg・Ｄ−グルコサミン／１ｇ・キトサンの生成
還元糖量のキトサンの試料を調製した。 試験例 エシエリヒア・コリの増殖に対するキトサンお
よびキトサン分解物の影響について試験を行なつ
た。 (1) 試料の調製 (1‐1) 試料（６−Ａ）の調製 試験例１のブイヨン培地（肉エキス：１
％、ペプトン：１％および塩化ナトリウム
0.5％）8.9mlに、適当に希釈した参考例３の
キトサン分解物Ａの試料１mlを加え、キトサ
ン分解物Ａの最終濃度が0.004％の試料（６
−Ａ）を調製した。 (1‐2) 試料（６−Ｂ）の調製 キトサン分解物として、参考例３のキトサ
ン分解物Ｂの試料を使用し、（１−１）と同
様にして、キトサン分解物Ｂの最終濃度が
0.004％の試料（６−Ｂ）を調製した。 (1‐3) 試料（６−Ｃ）の調製 キトサン分解物として、参考例３のキトサ
ン分解物Ｃの試料を使用し、（１−１）と同
様にして、キトサン分解物Ｃの最終濃度が
0.004％の試料（６−Ｃ）を調製した。 (1‐4) 試料（６−Ｄ）の調製 キトサン分解物として、参考例３のキトサ
ン分解物Ｄの試料を使用し、（１−１）と同
様にして、キトサン分解物Ｄの最終濃度が
0.004％の試料（６−Ｄ）を調製した。 (1‐5) 試料（６−Ｅ）の調製 キトサン分解物として、参考例３のキトサ
ン分解物Ｅの試料を使用し、（１−１）と同
様にして、キトサン分解物Ｅの最終濃度が
0.004％の試料（６−Ｅ）を調製した。 (1‐6) 試料（６−Ｆ）の調製 キトサン分解物として、参考例３のキトサ
ン分解物Ｆの試料を使用し、（１−１）と同
様にして、キトサン分解物Ｆの最終濃度が
0.004％の試料（６−Ｆ）を調製した。 (1‐7) 試料（６−Ｇ）の調製 キトサン分解物Ａの試料の代りに、参考例
３のキトサンの試料を使用し、（１−１）と
同様にして、キトサンの最終濃度が0.004％
の試料（６−Ｇ）を調製した。 (1‐8) 対照試料の調製 （１−１）のブイヨン培地8.9mlに参考例
３の(1)試料の調製に使用した溶媒１mlを加
え、対照試料を調製した。 (2) 試験方法 エシエリヒア・コリの培養物0.1mlをそれぞ
れの試料に接種し、30℃において24時間振とう
培養を行ない、混濁の生成を観察し、混濁を生
じたものを（＋）とし、混濁を生じなかつたも
のを（−）とした。混濁を生じたものは、エシ
エリヒア・コリの増殖を示し、混濁を生じなか
つたものはエシエリヒア・コリの増殖しなかつ
たことを示す。 (3) 試験の結果 試験の結果は第２表に示すとおりであつた。
ム自体が抗菌性および抗カビ性を有するだけでな
く、これにより包装された内容物における細菌お
よびカビの生育および増殖を抑制し、それによつ
て包装製品を長期間保存することができる。そし
てその細菌およびカビの生育および増殖を抑制す
る効果は、持続的であるから、包装製品を開封し
た後でも、その内容物に細菌およびカビの発生す
ることがない。 さらに、キトサン軽度分解物は、古くから食用
に供されていたキチンに由来するものであつて、
人畜に有害なものではない。 本発明におけるキトサン軽度分解物は、キトサ
ナーゼにより分解されたものであるから、不純物
の混入の少ないものである。 以下において本発明を参考例および実施例によ
つてさらに詳しく説明する。 参考例 １ （種培養の調製） 250ml容三角フラスコに、酵母エキス0.8％、ペ
プトン0.4％、肉エキス0.2％、コロイダルキトサ
ン0.5％を含む液体培地（PH：7.2）50mlを入れ、
常法により殺菌した後、これに予め液体培養した
バチルス（Bacillus sp.）No.７−Ｍ（FERM Ｐ−
8139）を接種し、30℃において、１日間振とう培
養した。 （酵素生産用培養液の調製） ５容三角フラスコ２本に、上記と同一の組成
の液体培地をそれぞれ１ずつ入れ、常法により
殺菌した後、これを上記で得られた種培養液40ml
を接種し、30℃において、４日間振とう培養し
た。培養液を6000r.p.mにおいて遠心分離して、
菌体を除去し、得られた上澄液のキトサナーゼの
活性を前記の酵素力価の測定法によつて測定し
た。上澄液１ml当り0.99単位であつた。 （酵素液の精製） 上記で得られた上澄液を混合し、得られた混合
液1.81に固体硫安1015ｇ（硫安80％飽和に相当
する）を加え、濾過し、得られた沈デン物を蒸留
水に溶解し、177mlとした。この酵素液を蒸留水、
引き続いて、0.02Mリン酸緩衝液（PH：6.0）に
対して透析した後、得られた酵素液を、予め
0.02Mリン酸緩衝液で平衝化したCM−セフアデ
ツクスＣ−50を充填したカラム〔2.6cm（径）×45
cm（長さ）〕に流しキトサナーゼを吸着させた。
ほとんどの不純蛋白質は素通り区分に集まつてい
た。このカラムを0.02Mリン酸緩衝液350mlで洗
浄した後、０〜0.5Mの塩化ナトリウムで直線的
濃度勾配により酵素蛋白質を溶出した。 次にキトサナーゼ活性を示した第218〜240のフ
ラクシヨンを合し、これをダイアフローメンブレ
ンフイルターPM−10（アミコン社製品）を用い
た限外濾過装置で17倍に濃縮し、この濃縮液に、
セフアデツクスＧ−100を用いるゲル濾過を行な
つた。 このゲル濾過のキトサナーゼ活性を示した第50
〜63のフラクシヨンを合し、再びCM−セフアデ
ツクスＣ−50によるカラムクロマトグラフイーを
行なつた。前回と同じ条件で酵素を吸着し、０〜
0.5Mの塩化ナトリウムで直線的濃度勾配により
酵素蛋白質を溶出した。 このカラムクロマトグラフイーにおいて２〜
42unit／mlのキトサナーゼ活性を示すフラクシヨ
ンが得られた。 参考例 ２ （キトサン軽度分解物の調製） 200ml容三角フラスコにキトサン（脱アセチル
化度：99％）１ｇを入れ、これに蒸留水50mlを加
え、さらに1M酢酸９mlを加え、充分に撹拌して
溶解した。これに1M酢酸ナトリウム水溶液を加
えて、PHを6.0に調整した後、蒸留水を加えて、
全量を100mlにした。参考例１で得たキトサナー
ゼ溶液に蒸留水を加えて、キトサナーゼ活性を
0.5unit／mlに調整し、得られたキトサナーゼ溶
液２mlを前記で得たキトサン溶液に加え、反応液
を37℃のインキユベーターに入れ、37℃において
３時間反応させた後、反応液の入つた三角フラス
コを沸とう浴に浸漬し、５分間煮沸して、反応を
停止し、キトサン軽度分解物溶液を得た。 このキトサン軽度分解物溶液のシヤーレス
（Shales）変法〔テイー・イモト：アグリカルチ
ユラル・バイオロジカル・ケミストリ（T.
Imoto：Agricultural Biological Chemistry）
第35巻 第1154−1156頁（1971年）〕による生成
還元糖量は８mg・Ｄ−グルコサミン／１ｇ・キト
サンであつた。 参考例 ３ （キトサン軽度分解物の試料の調製） (1) キトサン分解物Ａの試料の調製 キトサン１ｇに蒸留水50mlを加え、これに
1M酢酸９mlを加え、充分に撹拌して溶解し、
これに1M酢酸ナトリウム水溶液を加えて、PH
を6.0に調整した後、蒸留水を加えて、全量を
100mlにして、１％キトサン溶液を調製した。 １％キトサン溶液５mlを試験管に取り、これ
に参考例１で得たキトサナーゼ溶液を水で希釈
して30unit／mlの活性としたキトサナーゼ溶液
0.1mlを加え、37℃のインキユベーターにおい
て３時間反応した後、試験管を沸とう浴に浸漬
し、５分間沸とうして、反応を停止し、キトサ
ン分解物Ａを調製した。 キトサン分解物Ａの生成還元糖量（mg・Ｄ−
グルコサミン／１ｇ・キトサン）をシヤーレス
（shales）変法〔テイー・イモト：アグリカル
チユラル・バイオロジカル・ケミストリ（T.
Imoto：Agricultural Biological Chemistry）
第35巻 第1154−1156頁（1971年）〕により測
定したところ、590mg・Ｄ−グルコサミン／１
ｇ・キトサンであつた。 (2) キトサン分解物Ｂの試料の調製 キトサナーゼ溶液として、5unit／mlの活性
としたキトサナーゼ溶液を使用し、(1)と同様に
して、260mg・Ｄ−グルコサミン／１ｇ・キト
サンの生成還元糖量のキトサン分解物Ｂの試料
を調製した。 (3) キトサン分解物Ｃの試料の調製 キトサナーゼ溶液として、3unit／mlの活性
としたキトサナーゼ溶液を使用し、(1)と同様に
して、120mg・Ｄ−グルコサミン／１ｇ・キト
サンの生成還元糖量のキトサン分解物Ｃの試料
を調製した。 (4) キトサン分解物Ｄの試料の調製 キトサナーゼ溶液として、1unit／mlの活性
としたキトサナーゼ溶液を使用し、(1)と同様に
して、40mg・Ｄ−グルコサミン／１ｇ・キトサ
ンの生成還元糖量のキトサン分解物Ｄの試料を
調製した。 (5) キトサン分解物Ｅの試料の調製 キトサナーゼ溶液として、0.5unit／mlの活
性としたキトサナーゼ溶液を使用し、(1)と同様
にして、８mg・Ｄ−グルコサミン／１ｇ・キト
サンの生成還元糖量のキトサン分解物Ｅの試料
を調製した。 (6) キトサン分解物Ｆの試料の調製 キトサナーゼ溶液として、0.05unit／mlの活
性としたキトサナーゼ溶液を使用し、(1)と同様
にして、６mg・Ｄ−グルコサミン／１ｇ・キト
サンの生成還元糖量のキトサン分解物Ｆの試料
を調製した。 (7) キトサンの試料の調製 キトサナーゼ溶液の代りに、0.05M酢酸緩衝
液（PH：6.0）を使用し、(1)と同様にして、４
mg・Ｄ−グルコサミン／１ｇ・キトサンの生成
還元糖量のキトサンの試料を調製した。 試験例 エシエリヒア・コリの増殖に対するキトサンお
よびキトサン分解物の影響について試験を行なつ
た。 (1) 試料の調製 (1‐1) 試料（６−Ａ）の調製 試験例１のブイヨン培地（肉エキス：１
％、ペプトン：１％および塩化ナトリウム
0.5％）8.9mlに、適当に希釈した参考例３の
キトサン分解物Ａの試料１mlを加え、キトサ
ン分解物Ａの最終濃度が0.004％の試料（６
−Ａ）を調製した。 (1‐2) 試料（６−Ｂ）の調製 キトサン分解物として、参考例３のキトサ
ン分解物Ｂの試料を使用し、（１−１）と同
様にして、キトサン分解物Ｂの最終濃度が
0.004％の試料（６−Ｂ）を調製した。 (1‐3) 試料（６−Ｃ）の調製 キトサン分解物として、参考例３のキトサ
ン分解物Ｃの試料を使用し、（１−１）と同
様にして、キトサン分解物Ｃの最終濃度が
0.004％の試料（６−Ｃ）を調製した。 (1‐4) 試料（６−Ｄ）の調製 キトサン分解物として、参考例３のキトサ
ン分解物Ｄの試料を使用し、（１−１）と同
様にして、キトサン分解物Ｄの最終濃度が
0.004％の試料（６−Ｄ）を調製した。 (1‐5) 試料（６−Ｅ）の調製 キトサン分解物として、参考例３のキトサ
ン分解物Ｅの試料を使用し、（１−１）と同
様にして、キトサン分解物Ｅの最終濃度が
0.004％の試料（６−Ｅ）を調製した。 (1‐6) 試料（６−Ｆ）の調製 キトサン分解物として、参考例３のキトサ
ン分解物Ｆの試料を使用し、（１−１）と同
様にして、キトサン分解物Ｆの最終濃度が
0.004％の試料（６−Ｆ）を調製した。 (1‐7) 試料（６−Ｇ）の調製 キトサン分解物Ａの試料の代りに、参考例
３のキトサンの試料を使用し、（１−１）と
同様にして、キトサンの最終濃度が0.004％
の試料（６−Ｇ）を調製した。 (1‐8) 対照試料の調製 （１−１）のブイヨン培地8.9mlに参考例
３の(1)試料の調製に使用した溶媒１mlを加
え、対照試料を調製した。 (2) 試験方法 エシエリヒア・コリの培養物0.1mlをそれぞ
れの試料に接種し、30℃において24時間振とう
培養を行ない、混濁の生成を観察し、混濁を生
じたものを（＋）とし、混濁を生じなかつたも
のを（−）とした。混濁を生じたものは、エシ
エリヒア・コリの増殖を示し、混濁を生じなか
つたものはエシエリヒア・コリの増殖しなかつ
たことを示す。 (3) 試験の結果 試験の結果は第２表に示すとおりであつた。
【表】
【表】
第２表によると、キトサン分解物Ｃ、Ｄ、
Ｅ、Ｆ、およびキトサンの試料がエシエリヒ
ア・コリの増殖を抑制するから、キトサンを
120mg．Ｄ−グルコサミン／１ｇ・キトサンよ
りも多くない生成還元糖量にまで分解したキト
サン軽度分解物が優れた抗菌性および抗カビ性
を有することがわかる。 実施例 １ キトサン軽度分解物の粉末をプラスチツクスフ
イルム面にふりかけて抗菌性および抗カビ性を有
するフイルムを調製した。 塩化ビニル樹脂（商品名：カネビニルS1001、
鍾渕化学社製品）100重量部、ジオクチルフタレ
ート（商品名：DOP、三建化工社製品）25重量
部、熱安定剤（商品名：FD−８、昭島化学社製
品）１重量部およびステアリン酸（滑剤）0.3重
量部の混合物を160℃の加熱ロールにおいて５分
間混練した後、カレンダーロールによつて、175
℃において加熱圧延して、厚さ0.05mmの塩化ビニ
ル樹脂フイルムを成形した。カレンダーロールと
冷却ロールの中間で、参考例２で得られたキトサ
ン軽度分解物溶液を噴霧乾燥して得られたキトサ
ン軽度分解物の粉末を、粉ふり装置（電磁石によ
り振動しながら粉体を散布する装置）より１m2当
り0.5ｇの割合で、塩化ビニル樹脂フイルムに散
布しながら塩化ビニル樹脂フイルムを冷却し、巻
取ロールに巻取つた。このフイルムには、１m2当
り0.5ｇのキトサン軽度分解物が付着していた。 この塩化ビニル樹脂フイルムを使用し、その内
面にキトサン軽度分解物が付着した袋（10cm×10
cm）を製作した。 これとは別に、肉エキス10ｇ、ペプトン10ｇお
よび塩化ナトリウム５ｇを蒸留水に溶解し、PHを
6.0に調整した後、蒸留水を加え、全量を1000ml
にして、ブイヨン培地を調製した。 このブイヨン培地10mlを先に製作したキトサン
軽度分解物の付着した塩化ビニル樹脂フイルムの
袋に取り、滅菌した後、エシエリヒア・コリ
（Escherichia coli）を接種し、30℃において24
時間培養した。 前記の塩化ビニル樹脂フイルムの袋の製作にお
いて、キトサン軽度分解物の粉末を散布せずに成
形した塩化ビニル樹脂フイルムの袋を、対照試料
として製作し、前記と同様にして、エシエリヒ
ア・コリを接種し、培養した。 培養後の塩化ビニル樹脂フイルムの袋の中のブ
イヨン培地における濁りの発生を肉眼で観察し
た。 対照試料では、総べてのブイヨン培地に濁りが
発生して、エシエリヒア・コリが生育し、増殖し
ていたのに対して、キトサン軽度分解物が付着し
た実施例１の塩化ビニル樹脂フイルムの袋では、
総べてのブイヨン培地に濁りが発生しておらず、
エシエリヒア・コリの生育および増殖がなかつ
た。 実施例 ２ キトサン軽度分解物の溶液をプラスチツクスフ
イルム面にスプレーして、抗菌性および抗カビ性
を有するフイルムを調製した。 ポリエチレン樹脂（商品名：スミカセンＬ、住
友化学社製品）を押出機に供給し、Ｔダイより押
出して、厚さ0.03mmのポリエチレンフイルムを成
形し、Ｔダイと冷却ロールの中間において、参考
例２で得られたキトサン軽度分解物の溶液をポリ
エチレンフイルムの上面に５ｇ／m2の割合でスプ
レーした後、80℃の温風をポリエチレンフイルム
面に吹き付けて、キトサン軽度分解物が0.2ｇ／
m2の量において付着したポリエチレンフイルムを
得た。 このポリエチレンフイルムを使用し、キトサン
軽度分解物が内面に付着した袋（10cm×10cm）を
製作した。 前記のポリエチレンフイルムの袋の製作におい
て、キトサン軽度分解物の溶液をスプレーせずに
成形したポリエチレンフイルムを使用し、キトサ
ン軽度分解物の付着していないポリエチレンフイ
ルムの袋を、対照試料として製作した。 これらの袋を使用し、実施例１と同様にして、
ブイヨン培地におけるエシエリヒア・コリの生育
および増殖の試験を行ない、それぞれの袋の中の
ブイヨン培地における濁りの発生を肉眼で観察
し、実施例２のキトサン軽度分解物の付着したポ
リエチレンフイルムを使用した袋では、エシエリ
ヒア・コリの生育および増殖が見られなかつたの
に対して、対照試料の袋では、エシエリヒア・コ
リの生育および増殖が観察された。 実施例 ３ キトサン軽度分解物の溶液を、凹版印刷法によ
つてプラスチツクスフイルム面に付着し、抗菌性
および抗カビ性を有するフイルムを調製した。 参考例２で得られたキトサン軽度分解物の溶液
100mlに15％ポリビニルアルコール水溶液〔商品
名：デンカポールB20、電気化学工業(株)製品〕20
mlを加えて、溶液の粘度を10000cp（20℃）に調
製し、キトサン軽度分解物の印刷用溶液を得た。 実施例１の塩化ビニル樹脂フイルムの成形にお
いて、カレンダーロールと冷却ロールの間におけ
るキトサン軽度分解物の粉末の散布を行なうこと
なく、塩化ビニル樹脂フイルムを成形し、キトサ
ン軽度分解物が付着していない塩化ビニル樹脂フ
イルムを調製し、これを幅10cmおよび長さ５ｍに
裁断し、グラビア印刷機において、前に調製した
キトサン軽度分解物の印刷用溶液を塩化ビニル樹
脂フイルムの裁断片の表面に印刷した後、80℃の
温風を印刷面に吹き付け、キトサン軽度分解物が
0.5ｇ／m2の量において付着した塩化ビニル樹脂
フイルムを得た。 この塩化ビニル樹脂フイルムおよびキトサン軽
度分解物が付着していない塩化ビニル樹脂フイル
ムを使用し、実施例１と同様にして、エシエリヒ
ア・コリの生育および増殖を試験し、実施例１と
同様に、キトサン軽度分解物の付着しない塩化ビ
ニル樹脂フイルムの対照試料では、エシエリヒ
ア・コリの生育および増殖が見られたのに対し、
キトサン軽度分解物の付着した実施例３の試料で
は、エシエリヒア・コリの生育および増殖が観察
されなかつたという結果を得た。 参考例 ３ （コラーゲンフイルムの調製） 牛皮の真皮コラーゲンを水酸化カルシウムの飽
和溶液に２日間浸漬して、コラーゲン以外のもの
を除去した後、塩酸を加えて、中和した。中和後
の真皮を１〜２cm2に細切した後、PH３の塩酸に浸
漬して、コラーゲンを膨潤し、これを機械的に粉
細して、個々のコラーゲン繊維にまでほぐした。
この液のコラーゲン濃度を３％に調節した後、よ
く混合して、脱泡し、コラーゲンフイルム製造原
液を調製した。 この原液を環状ノズルを有する押出機より飽和
食塩水の凝固液に押し出して、固化し、円筒状の
フイルムを１％アンモニア水で中和した後、水洗
して、コラーゲンフイルムを調製した。 実施例 ４ １％グリセリン水溶液に、参考例２のキトサン
軽度分解物を0.1％の濃度に溶解し、このキトサ
ン軽度分解物溶液に、参考例３で得た円筒状のコ
ラーゲンフイルムに浸漬した後、コラーゲンフイ
ルムを引き上げ、円筒状のコラーゲンフイルム内
に空気を吹き込み、乾燥して、キトサン軽度分解
物が0.1ｇ／m2の量において付着したコラーゲン
フイルムを得た。 このキトサン軽度分解物の付着したコラーゲン
フイルムと参考例３のコラーゲンフイルムについ
て抗菌性および抗カビ性の試験を行なつた。 参考例３のコラーゲンフイルムでは、細菌およ
びカビの生育および増殖が認められたが、実施例
４のキトサン軽度分解物の付着したコラーゲンフ
イルムでは、細菌およびカビの生育および増殖は
認められなかつた。 実施例 ５ 参考例３で得た円筒状のコラーゲンフイルム
に、実施例４と同様にして得たキトサン軽度分解
物の0.5％溶液を霧吹きによつて吹き付けた後に、
風乾して、キトサン軽度分解物が0.2ｇ／m2の量
において付着したコラーゲンフイルムを得た。 このキトサン軽度分解物の付着したコラーゲン
フイルムと参考例３のコラーゲンフイルムについ
て抗菌性および抗カビ性の試験を行なつたが、実
施例５のキトサン軽度分解物の付着したコラーゲ
ンフイルムには、抗菌性および抗カビ性が認めら
れた。
Ｅ、Ｆ、およびキトサンの試料がエシエリヒ
ア・コリの増殖を抑制するから、キトサンを
120mg．Ｄ−グルコサミン／１ｇ・キトサンよ
りも多くない生成還元糖量にまで分解したキト
サン軽度分解物が優れた抗菌性および抗カビ性
を有することがわかる。 実施例 １ キトサン軽度分解物の粉末をプラスチツクスフ
イルム面にふりかけて抗菌性および抗カビ性を有
するフイルムを調製した。 塩化ビニル樹脂（商品名：カネビニルS1001、
鍾渕化学社製品）100重量部、ジオクチルフタレ
ート（商品名：DOP、三建化工社製品）25重量
部、熱安定剤（商品名：FD−８、昭島化学社製
品）１重量部およびステアリン酸（滑剤）0.3重
量部の混合物を160℃の加熱ロールにおいて５分
間混練した後、カレンダーロールによつて、175
℃において加熱圧延して、厚さ0.05mmの塩化ビニ
ル樹脂フイルムを成形した。カレンダーロールと
冷却ロールの中間で、参考例２で得られたキトサ
ン軽度分解物溶液を噴霧乾燥して得られたキトサ
ン軽度分解物の粉末を、粉ふり装置（電磁石によ
り振動しながら粉体を散布する装置）より１m2当
り0.5ｇの割合で、塩化ビニル樹脂フイルムに散
布しながら塩化ビニル樹脂フイルムを冷却し、巻
取ロールに巻取つた。このフイルムには、１m2当
り0.5ｇのキトサン軽度分解物が付着していた。 この塩化ビニル樹脂フイルムを使用し、その内
面にキトサン軽度分解物が付着した袋（10cm×10
cm）を製作した。 これとは別に、肉エキス10ｇ、ペプトン10ｇお
よび塩化ナトリウム５ｇを蒸留水に溶解し、PHを
6.0に調整した後、蒸留水を加え、全量を1000ml
にして、ブイヨン培地を調製した。 このブイヨン培地10mlを先に製作したキトサン
軽度分解物の付着した塩化ビニル樹脂フイルムの
袋に取り、滅菌した後、エシエリヒア・コリ
（Escherichia coli）を接種し、30℃において24
時間培養した。 前記の塩化ビニル樹脂フイルムの袋の製作にお
いて、キトサン軽度分解物の粉末を散布せずに成
形した塩化ビニル樹脂フイルムの袋を、対照試料
として製作し、前記と同様にして、エシエリヒ
ア・コリを接種し、培養した。 培養後の塩化ビニル樹脂フイルムの袋の中のブ
イヨン培地における濁りの発生を肉眼で観察し
た。 対照試料では、総べてのブイヨン培地に濁りが
発生して、エシエリヒア・コリが生育し、増殖し
ていたのに対して、キトサン軽度分解物が付着し
た実施例１の塩化ビニル樹脂フイルムの袋では、
総べてのブイヨン培地に濁りが発生しておらず、
エシエリヒア・コリの生育および増殖がなかつ
た。 実施例 ２ キトサン軽度分解物の溶液をプラスチツクスフ
イルム面にスプレーして、抗菌性および抗カビ性
を有するフイルムを調製した。 ポリエチレン樹脂（商品名：スミカセンＬ、住
友化学社製品）を押出機に供給し、Ｔダイより押
出して、厚さ0.03mmのポリエチレンフイルムを成
形し、Ｔダイと冷却ロールの中間において、参考
例２で得られたキトサン軽度分解物の溶液をポリ
エチレンフイルムの上面に５ｇ／m2の割合でスプ
レーした後、80℃の温風をポリエチレンフイルム
面に吹き付けて、キトサン軽度分解物が0.2ｇ／
m2の量において付着したポリエチレンフイルムを
得た。 このポリエチレンフイルムを使用し、キトサン
軽度分解物が内面に付着した袋（10cm×10cm）を
製作した。 前記のポリエチレンフイルムの袋の製作におい
て、キトサン軽度分解物の溶液をスプレーせずに
成形したポリエチレンフイルムを使用し、キトサ
ン軽度分解物の付着していないポリエチレンフイ
ルムの袋を、対照試料として製作した。 これらの袋を使用し、実施例１と同様にして、
ブイヨン培地におけるエシエリヒア・コリの生育
および増殖の試験を行ない、それぞれの袋の中の
ブイヨン培地における濁りの発生を肉眼で観察
し、実施例２のキトサン軽度分解物の付着したポ
リエチレンフイルムを使用した袋では、エシエリ
ヒア・コリの生育および増殖が見られなかつたの
に対して、対照試料の袋では、エシエリヒア・コ
リの生育および増殖が観察された。 実施例 ３ キトサン軽度分解物の溶液を、凹版印刷法によ
つてプラスチツクスフイルム面に付着し、抗菌性
および抗カビ性を有するフイルムを調製した。 参考例２で得られたキトサン軽度分解物の溶液
100mlに15％ポリビニルアルコール水溶液〔商品
名：デンカポールB20、電気化学工業(株)製品〕20
mlを加えて、溶液の粘度を10000cp（20℃）に調
製し、キトサン軽度分解物の印刷用溶液を得た。 実施例１の塩化ビニル樹脂フイルムの成形にお
いて、カレンダーロールと冷却ロールの間におけ
るキトサン軽度分解物の粉末の散布を行なうこと
なく、塩化ビニル樹脂フイルムを成形し、キトサ
ン軽度分解物が付着していない塩化ビニル樹脂フ
イルムを調製し、これを幅10cmおよび長さ５ｍに
裁断し、グラビア印刷機において、前に調製した
キトサン軽度分解物の印刷用溶液を塩化ビニル樹
脂フイルムの裁断片の表面に印刷した後、80℃の
温風を印刷面に吹き付け、キトサン軽度分解物が
0.5ｇ／m2の量において付着した塩化ビニル樹脂
フイルムを得た。 この塩化ビニル樹脂フイルムおよびキトサン軽
度分解物が付着していない塩化ビニル樹脂フイル
ムを使用し、実施例１と同様にして、エシエリヒ
ア・コリの生育および増殖を試験し、実施例１と
同様に、キトサン軽度分解物の付着しない塩化ビ
ニル樹脂フイルムの対照試料では、エシエリヒ
ア・コリの生育および増殖が見られたのに対し、
キトサン軽度分解物の付着した実施例３の試料で
は、エシエリヒア・コリの生育および増殖が観察
されなかつたという結果を得た。 参考例 ３ （コラーゲンフイルムの調製） 牛皮の真皮コラーゲンを水酸化カルシウムの飽
和溶液に２日間浸漬して、コラーゲン以外のもの
を除去した後、塩酸を加えて、中和した。中和後
の真皮を１〜２cm2に細切した後、PH３の塩酸に浸
漬して、コラーゲンを膨潤し、これを機械的に粉
細して、個々のコラーゲン繊維にまでほぐした。
この液のコラーゲン濃度を３％に調節した後、よ
く混合して、脱泡し、コラーゲンフイルム製造原
液を調製した。 この原液を環状ノズルを有する押出機より飽和
食塩水の凝固液に押し出して、固化し、円筒状の
フイルムを１％アンモニア水で中和した後、水洗
して、コラーゲンフイルムを調製した。 実施例 ４ １％グリセリン水溶液に、参考例２のキトサン
軽度分解物を0.1％の濃度に溶解し、このキトサ
ン軽度分解物溶液に、参考例３で得た円筒状のコ
ラーゲンフイルムに浸漬した後、コラーゲンフイ
ルムを引き上げ、円筒状のコラーゲンフイルム内
に空気を吹き込み、乾燥して、キトサン軽度分解
物が0.1ｇ／m2の量において付着したコラーゲン
フイルムを得た。 このキトサン軽度分解物の付着したコラーゲン
フイルムと参考例３のコラーゲンフイルムについ
て抗菌性および抗カビ性の試験を行なつた。 参考例３のコラーゲンフイルムでは、細菌およ
びカビの生育および増殖が認められたが、実施例
４のキトサン軽度分解物の付着したコラーゲンフ
イルムでは、細菌およびカビの生育および増殖は
認められなかつた。 実施例 ５ 参考例３で得た円筒状のコラーゲンフイルム
に、実施例４と同様にして得たキトサン軽度分解
物の0.5％溶液を霧吹きによつて吹き付けた後に、
風乾して、キトサン軽度分解物が0.2ｇ／m2の量
において付着したコラーゲンフイルムを得た。 このキトサン軽度分解物の付着したコラーゲン
フイルムと参考例３のコラーゲンフイルムについ
て抗菌性および抗カビ性の試験を行なつたが、実
施例５のキトサン軽度分解物の付着したコラーゲ
ンフイルムには、抗菌性および抗カビ性が認めら
れた。
第１図は、バチルスNo.７−Ｍにより生産された
キトサナーゼにおける温度と比活性の関係を示す
図表、第２図は、バチルスNo.７−Ｍにより生産さ
れたキトサナーゼにおけるPHと比活性の関係を示
す図表、第３図は、バチルスNo.７−Ｍにより生産
されたキトサナーゼにおける温度と比活性の関係
を示す図表、第４図は、バチルスNo.７−Ｍにより
生産されたキトサナーゼにおけるPHと比活性の関
係を示す図表、第５図は、バチルスNo.７−Ｍによ
り生産されたキトサナーゼの電気泳動法による分
子量を示す図表、そして第６図は、バチルスNo.７
−Ｍにより生産されたキトサナーゼのゲル濾過法
による分子量を示す図表である。
キトサナーゼにおける温度と比活性の関係を示す
図表、第２図は、バチルスNo.７−Ｍにより生産さ
れたキトサナーゼにおけるPHと比活性の関係を示
す図表、第３図は、バチルスNo.７−Ｍにより生産
されたキトサナーゼにおける温度と比活性の関係
を示す図表、第４図は、バチルスNo.７−Ｍにより
生産されたキトサナーゼにおけるPHと比活性の関
係を示す図表、第５図は、バチルスNo.７−Ｍによ
り生産されたキトサナーゼの電気泳動法による分
子量を示す図表、そして第６図は、バチルスNo.７
−Ｍにより生産されたキトサナーゼのゲル濾過法
による分子量を示す図表である。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ フイルムに、キトサンを120mg・Ｄ−グルコ
サミン／１ｇ・キトサンよりも多くない生成還元
糖量にまで分解したキトサン軽度分解物を付着す
ることを特徴とする抗菌性および抗カビ性を有す
るフイルムの製造法。 ２ フイルムが、成形直後のものであることを特
徴とする特許請求の範囲第１項に記載の抗菌性お
よび抗カビ性を有するフイルムの製造法。 ３ キトサン軽度分解物が、粉末状のものである
ことを特徴とする特許請求の範囲第１項または第
２項に記載の抗菌性および抗カビ性を有するフイ
ルムの製造法。 ４ キトサン軽度分解物が、溶液状のものである
ことを特徴とする特許請求の範囲第１項または第
２項に記載の抗菌性および抗カビ性を有するフイ
ルムの製造法。 ５ キトサン軽度分解物の付着が、凹版印刷法に
より行なわれることを特徴とする特許請求の範囲
第１項または第２項に記載の抗菌性および抗カビ
性を有するフイルムの製造法。 ６ キトサン軽度分解物が、バチルスNo.７−Ｍ
（微工研菌寄第8139号）により生産されたキトサ
ナーゼによるキトサンの分解によつて得られたも
のであることを特徴とする特許請求の範囲第１項
ないし第５項のいずれかに記載の抗菌性および抗
カビ性を有するフイルムの製造法。 ７ フイルムが、放電加工による親水化処理をし
たものであることを特徴とする特許請求の範囲第
４項ないし第６項のいずれかに記載の抗菌性およ
び抗カビ性を有するフイルムの製造法。 ８ フイルムが、強酸化剤による表面処理をした
ものであることを特徴とする特許請求の範囲第４
項ないし第６項のいずれかに記載の抗菌性および
抗カビ性を有するフイルムの製造法。 ９ フイルムが、プラスチツクフイルムであつ
て、塩化ビニル樹脂フイルム、ポリエチレンフイ
ルム、ポリプロピレンフイルムおよび塩化ビニリ
デン樹脂フイルムからなる群より選択されたもの
であることを特徴とする特許請求の範囲第１項な
いし第８項のいずれかに記載の抗菌性および抗カ
ビ性を有するフイルムの製造法。 １０ フイルムが、コラーゲンフイルムであるこ
とを特徴とする特許請求の範囲第１項ないし第８
項のいずれかに記載の抗菌性および抗カビ性を有
するフイルムの製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60223750A JPS6283875A (ja) | 1985-10-09 | 1985-10-09 | 抗菌性および抗カビ性を有するフイルムの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60223750A JPS6283875A (ja) | 1985-10-09 | 1985-10-09 | 抗菌性および抗カビ性を有するフイルムの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6283875A JPS6283875A (ja) | 1987-04-17 |
| JPH0156754B2 true JPH0156754B2 (ja) | 1989-12-01 |
Family
ID=16803117
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60223750A Granted JPS6283875A (ja) | 1985-10-09 | 1985-10-09 | 抗菌性および抗カビ性を有するフイルムの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6283875A (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NZ232512A (en) * | 1989-02-21 | 1993-09-27 | Viskase Corp | Compositions and firms containing antibacterial agents, methods of treating foodstuffs therewith |
-
1985
- 1985-10-09 JP JP60223750A patent/JPS6283875A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6283875A (ja) | 1987-04-17 |
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