JPH0224836B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は、ヒスチジンのイミダゾール基を保護
することによるペプチドの製造法またはその塩に
関する。 ヒスチジンを含むペプチドを合成するに当つて
は、イミダゾール基が中性付近で解離して弱い塩
基性を示すため、種々の技術的に困難な問題、た
とえば、縮合時のイミダゾール基へのアシル化、
縮合後の精製の困難さ、ラセミ化のしやすさなど
を起こすことが多く、その有用な保護基が望まれ
ていた。 該保護基としては、α−アミノ保護基と選択的
に切断できることが望ましく、トリフルオロ酢酸
処理、あるいは接触還元に安定であり、かつ緩和
な方法で除去できるものが望ましい。 従来からの保護基としては、ベンジル基、カル
ボベンゾキシ基等が知られているが、これらは接
触還元で除去されるため、従つてα−アミノ保護
基としてはカルボベンゾキシ基を用いることがで
きない欠点がある。接触還元、トリフルオロ酢酸
処理の両者に安定な保護基としては、従来よりパ
ラトルエンスルホニル基が知られているが、この
保護基は、意外にも塩基性条件では非常に不安定
で、酸処理したあとの中和操作時（たとえばトリ
エチルアミンで中和する時）に、かなりの割合で
その保護基の脱離が認められることが多い。この
種の保護基を改良した保護基としては、４−メト
キシベンゼンスルホニル基が、最近知られている
が、この保護基の場合においても、塩基性条件下
における安定性は不十分である。本発明者らは
種々の置換ベンゼンスルホニル型の保護基を検討
した結果、４−メトキシ−２，３，６−トリメチ
ルベンゼンスルホニル基が、接触還元、トリフル
オロ酢酸処理、トリエチルアミン等の塩基性条件
下で十分安定であり、かつ、緩和な酸処理によつ
て、除去できることを見い出し、さらに研究した
結果、本発明を完成した。 すなわち、本発明は、ヒスチジンを有するペプ
チドの製造にあたり、ヒスチジンのイミダゾール
基を、４−メトキシ−２，３，６−トリメチルベ
ンゼンスルホニル基で保護し、ペプチド縮合した
のち、該保護基を酸または１−ヒドロキシベンゾ
トリアゾールで脱離せしめることを特徴とするペ
プチドの製造法である。 本発明においては、一般式 〔式中、Ｒは水素またはα−アミノ基の保護基
を、４−メトキシ−２，３，６−トリメチルベン
ゼンスルホニル基は（Ａ）環の１または３位のい
ずれかのＮに結合していることを表わす〕で示さ
れるヒスチジン誘導体およびその塩が用いられ
る。 本発明で用いられる４−メトキシ−２，３，６
−トリメチルベンゼンスルホニル基は新規な保護
基であり、通常、ハロゲニドの形で使用に供せら
れ、たとえば参考例１の方法で製造される。 本発明において、４−メトキシ−２，３，６−
トリメチルベンゼンスルホニル基で保護されたイ
ミダゾール基を有するヒスチジンは、たとえば次
の常套手段で製造できる。すなわち、４−メトキ
シ−２，３，６−トリメチルベンゼンスルホニル
ハライド、好ましくはクロライドと、α−アミノ
基を保護したヒスチジンを、反応させることによ
り製造できる。この反応は、たとえば、約−10°
〜＋50℃の範囲の適宜の温度で、溶媒（たとえ
ば、水、含水テトラヒドロフラン、含水ジオキサ
ン、含水アセトン、含水アセトニトリル、含水ジ
メチルホルムアミド）を使用して実施してもよ
い。塩基としては、種々の塩基を用いることがで
きるが、その中でも、炭酸水素ナトリウム、炭酸
ナトリウム、トリエチルアミン等が好ましい。α
−アミノ基の保護基としては、公知の保護基、た
とえば、カルボベンゾキシ基、ｐ−ニトロベンジ
ルオキシカルボニル基、ｐ−メトキシベンジルオ
キシカルボニル基、ｔ−ブトキシカルボニル基、
ｔ−アミロキシカルボニル基、９−フルオレニル
メトキシカルボニル基、イソニコチニルオキシカ
ルボニル基、ｏ−ニトロフエニルスルフエニル
基、２−（ｐ−ビフエニル）イソプロピルオキシ
カルボニル基などが使用でき、そのなかでも、ヒ
スチジンのα−アミノ基をカルボベンゾキシ基ま
たは、ｔ−ブトキシカルボニル基で保護したもの
が有利に用いられ、ジシクロヘキシルアミン、シ
クロヘキシルアミン、ナトリウムなどの塩として
ペプチド縮合に供せられる。 このようにして得られる４−メトキシ−２，
３，６−トリメチルベンゼンスルホニル基で保護
されたイミダゾール基を有するヒスチジンは、該
アミノ酸残基を有するペプチド縮合反応に常套手
段により、極めて有利に使用しうる。この常套手
段としては、例えばM.Bodansky及びM.A.
Ondetti著、ペプチド・シンセシス（Peptide
Synthesis）、Inter science，New York，1966
年；F.M.Finn及びK.Hofmann著 ザ・プロテイ
ンズ（The Proteins）、第２巻、H.Neurath，R.
L.Hiee編集、Academic Press Inc.New York，
1976年；泉屋信夫他著“ペプチド合成”丸善(株)
1975年などに記載された方法、たとえばアジド
法、クロライド法、酸無水物法、混酸無水物法、
DCC法、活性エステル法、ウツドワード試薬Ｋ
を用いる方法、カルボジイミダゾール法、酸化還
元法、DCC／HONB法などが挙げられる。 ところで、ペプチド縮合をするためには、α−
アミノ保護基がｔ−ブトキシカルボニル基の場合
にはトリフルオロ酢酸等で酸処理したのち、トリ
エチルアミン等の塩基による中和が必要である
が、従来、良く用いられているパラトルエンスル
ホニル基は、上記の塩基性条件下では、極めて不
安定であり、又、パラメトキシベンゼンスルホニ
ル基においても、その安定性は不十分である。こ
れに比べて、４−メトキシ−２，３，６−トリメ
チルベンゼンスルホニル基は、後述の実施例にも
示す通り極めて安定であり、その有用性は極めて
高い。 次に、ペプチド縮合後、本発明の保護基を、酸
または１−ヒドロキシベンゾトリアゾールによつ
て除去する。 酸による脱離方法としては、無水弗化水素、メ
タンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸
等の公知の酸処理方法が適用できる。さらに、本
発明方法の場合には、新しい酸処理方法として、
少量のメタンスルホン酸を含有するトリフルオロ
酢酸またはトリフルオロ酢酸が有利に使用でき、
特にチオアニソール、アニソールまたはジメチル
スルフイドの存在下で行なうと、脱離作用が有利
に進行する。 以上に述べたごとく、本発明の保護基は、接触
還元、トリフルオロ酢酸等の酸に対して安定であ
り、かつ、トリエチルアミン等の塩基に対しても
安定であるなど、従来のイミダゾール基の保護基
には認められない特徴を有している。 次に、本発明を参考例および実施例をあげて、
さらに詳しく説明する。なお、本明細書において
はアミノ酸、ペプチド、保護基、活性基等に関
し、IUPAC−IUB commission on Biological
Nomenclatureに基づく略号あるいは当該分野に
おける慣用略号で表示する場合がある。それらを
以下に例示する。Trp：トリプトフアン；Lys：
リジン；His：ヒスチジン；Arg：アルギニン；
Ser：セリン；Gly：グリシン；Ala：アラニン；
Pro：プロリン；Thr：スレオニン；Gln：グル
タミン；Val：バリン；Leu：ロイシン；Ile：イ
ソロイシン；Met：メチオニン；Tyr：チロシン
（以上、特に表示のない場合はアミノ酸はＬ体を
さすものとする。但しGlyを除く）；Ｚ：カルボ
ベンゾキシ；Boc：ｔ−ブトキシカルボニル；
OBu^t：ｔ−ブチルエステル；HONBおよび
ONB：Ｎ−ハイドロキシ−５−ノルボルネン−
２，３−ジカルボキシイミドおよびそのエステ
ル；HOBt：Ｎ−ハイドロキシベンヅトリアゾー
ル；DCC：Ｎ，N′−ジシクロヘキシルカルボジ
イミド；DCU：Ｎ，N′−ジシクロヘキシルウレ
ア；Mbs：４−メトキシベンゼンスルホニル：
Pme：ペンタメチルベンゼンスルホニル；Mtr：
４−メトキシ−２，３，６−トリメチルベンゼン
スルホニル；CHA：シクロヘキシルアミン；
DCHA：ジシクロヘキシルアミン；DMF：ジメ
チルホルムアミド；TEA：トリエチルアミン；
また本明細書に示す薄層クロマトグラフイーの展
開溶媒は、Rf¹：クロロホルム−メタノール−酢
酸（９：１：0.5）；Rf²：酢酸エチル−ピリジン
−酢酸−水（60：20：６：10）；Rf³：クロロホ
ルム−メタノール−水（７：３：0.5）；Rf⁴：ｎ
−ブタノール−ピリジン−酢酸−水（30：20：
６：24）である。 参考例 １ (1) ２，３，５−トリメチルアニソールの合成 ２，３，５−トリメチルフエノール10ｇ、沃化
メチル10.4mlをジメチルスルフオキシド100mlに
とかし、氷冷し、これに、60％油性水素化ナトリ
ウム5.6ｇを加え、10時間かきまぜた。これに水
を加えたのち、エーテルで抽出し、エーテル層は
水洗し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を
留去して、油状物を得た。収量12.9ｇ（定量的）。 (2) ４−メトキシ−２，３，６−トリメチルベン
ゼンスルフオニルクロリドの合成 ２，３，５−トリメチルアニソール4.5ｇを、
塩化メチレン500mlにとかし、−5゜〜−10℃に冷却
したのち、クロルスルフオン酸6.0mlを含む塩化
メチレン溶液400mlを滴下した。その後、室温に
までもどし、５％炭酸水素ナトリウム水を含む氷
上にあけた。塩化メチレン層は水洗したのち、無
水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を留去した
のち、ｎ−ヘキサンより結晶として、ろ取した。
収量5.0ｇ（67.0％） 融点 56−58℃ 元素分析 C₁₀H₁₃O₃SClとして 計算値：Ｃ 48.29；Ｈ 5.27；Ｓ 12.89 ；Cl 14.26 実験値：Ｃ 48.42；Ｈ 5.21；Ｓ 12.61 ；Cl 14.25 参考例 ２ BOC−His（Mbs）−OH・DCHAの製造 BOC−His−OH1.50ｇを水10ml、アセトン10
mlの混合液にとかし、氷冷した。これに
TEA1.65mlを加えたのち、激しくかきまぜなが
ら、Mbs−Cl1.21ｇをアセトンにとかした液10ml
を滴下し、室温で１時間撹拌した。クエン酸を加
えたのち、アセトンを留去し、酢酸エチルで抽出
し、無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥した。
DCHA 1.06mlを加えて、溶媒を留去したのち、
残留油状物を冷蔵庫内で一夜放置すると結晶化す
るので、エーテルを加えて、これをろ取した。収
量 2.65ｇ（74.0％） 融点 146−147℃ 〔α〕²³ _D＋21.0゜（Ｃ＝0.93、メタノール） 元素分析 C₃₀H₄₆O₇N₄Sとして 計算値：Ｃ 59.38；Ｈ 7.64；Ｎ 9.23 ；Ｓ 5.29 実験値：Ｃ 59.16；Ｈ 7.70；Ｎ 8.95 ；Ｓ 5.28 参考例 ３ BOC−His（Mtr）−OH・DCHAの製造 BOC−His−OH5.11ｇを水30ml、アセトン30
mlの混合液にとかし、氷冷した。これに
TEA5.60ml１を加えたのち、激しくかきまぜな
がら、Mtr−Cl4.97ｇをアセトンにとかした液30
mlを滴下し、そのまゝ２時間かきまぜた。アセト
ンを留去したのちクエン酸酸性として、酢酸エチ
ルで抽出し、無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥し
た。DCHA3.60mlを加えたのち、溶媒を留去し、
残留油状物を冷蔵庫内で一夜放置すると、結晶化
するのでエーテルを加えて再結晶として、これを
ろ取した。収量7.80ｇ（60.1％）融点 136−137
℃ 〔α〕²³ _D＋18.8゜（Ｃ＝1.01、メタノール）、Rf¹0.63 元素分析 C₂₁H₂₉O₇N₃S・C₁₂H₂₃Nとして 計算値：Ｃ 61.08；Ｈ 8.08；Ｎ 8.64 ；Ｓ 4.94 実験値：Ｃ 61.19；Ｈ 8.05；Ｎ 8.89 ；Ｓ 4.73 参考例 ４ Ｚ−His（Mtr）−OH・DCHAの製造 Ｚ−His−OH2.90ｇを水15ml、アセトン15ml
の混合液にとかし氷冷した。これにTEA2.80ml
を加えたのち激しくかきまぜながら、Mtr−
Cl2.49ｇをアセトンにとかした液15mlを滴下し、
そのまゝ約１時間かきまぜた。アセトンを留去し
たのち、クエン酸酸性として、酢酸エチルで抽出
し、無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥した。
DCHA2mlを加えたのち、溶媒を留去し、エーテ
ルを加えて結晶後これをろ取した。 収量 4.10ｇ（60.0％）、融点149−150℃ 〔α〕²⁴ _D＋14.7゜（Ｃ＝0.87、メタノール）、 Rf¹ 0.62 元素分析 C₂₄H₂₇O₇N₃S・C₁₂H₂₃Nとして 計算値：Ｃ 63.32；Ｈ 7.38；Ｎ 8.21 ；Ｓ 4.07 実験値：Ｃ 62.94；Ｈ 7.11；Ｎ 8.11 ；Ｓ 4.80 試験例 ４−メトキシ−２，３，６−トリメチル
ベンゼンスルホニル基（Mtr）と４−メトキシベ
ンゼンスルホニル基（Mbs）、パラトルエンスル
ホニル基（Tos）の塩基性条件下での安定性の比
較 BOC−His（Mtr）−OH・DCHA，BOC−His
（Mbs）−OH・DCHA，BOC−His（Tos）−
OH・DCHAを各100mgを取り、0.5N−トリエチ
ルアミンを含む50％含水メタノールにとかし、26
℃で一定時間放置したのち、高速液体クロマトグ
ラフイーを用いて残存する原料を定量した。別表
に示すごとく、Mtr基は他の保護基（Mbs，
Tos）に比較して、はるかに安定であり、その有
用性を確認することができた。

【表】 参考例 ５ Ｈ−His（Mtr）−OHの製造 Ｚ−His（Mtr）−OH・DCHA3.4ｇを酢酸エチ
ル100mlにケンダクしたのち1N−硫酸６mlを加え
てさらに、水を加えてふりまぜたのち、無水硫酸
ナトリウムで乾燥した。溶媒を留去したのち、メ
タノール100mlにとかし、接触還元し、溶媒を留
去すると結晶が析出するので、エーテルを加え
て、これをろ取した。収量1.80ｇ（98.3％） 融点 162−164℃ 〔α〕²³ _D−27.1゜（Ｃ＝1.01、酢酸）、Rf²0.35 元素分析 C₁₆H₂₀O₅N₃S・１／3H₂Oとして 計算値：Ｃ 51.60；Ｈ 5.55；Ｎ 11.28 ；Ｓ 8.61 実験値：Ｃ 51.76；Ｈ 5.63；Ｎ 11.08 ；Ｓ 8.63 実施例 １ 鳥GRP（ガストリン・リリージング・ペプチド
の製造 (1) BOC−Leu−MetNH₂の製造 BOC−MetNH₂（10.3ｇ）に4N−HCl／酢酸40
mlを加えたのち、振りまぜると結晶が析出するの
でエーテルを加えて、これをろ取し、乾燥した。
これをDMF200mlにとかし、氷冷し、TEA7.0ml
を加えて中和した。これにBOC−Leu−ONB
（BOC−Leu−OH8.0ｇ，HONB6.85ｇ，
DCC7.83ｇより調製する）を加えて、一夜かきま
ぜた。溶媒を留去したのち酢酸エチルにとかし、
重曹水、クエン酸水で洗浄したのち、無水硫酸ナ
トリウムを用いて乾燥した。溶媒を留去すると結
晶が析出するので、エーテルを加えて、これをろ
取し、メタノール−エーテルより再結晶した。収
量10.8ｇ（86.3％） 融点 152−154℃、〔α〕²³ _D−34.2゜（Ｃ＝1.03，
DMF）、Rf¹0.65 元素分析 C₁₆H₃₁O₄N₃Sとして 計算値：Ｃ 53.15；Ｈ 8.64；Ｎ 11.63 ；Ｓ 8.87 実験値：Ｃ 53.56；Ｈ 8.72；Ｎ 11.47 ；Ｓ 8.92 (2) BOC His（Mtr）OH・DCHAの製造 BOC−His OH5.11ｇを水30ml、セトン30mlの
混合液にとかし、氷冷した。これに、TEA5.6ml
を加えたのち、Mtr−Cl4.97ｇのアセトン溶液30
mlを加え、２時間かきまぜた。アセトンを減圧留
去したのち、クエン酸酸性として酢酸エチルで抽
出し、水洗したのち、無水硫酸ナトリウムを用い
て乾燥した。溶媒を留去したのち、少量の酢酸エ
チルにとかし、DCHA3.6mlを加え、溶媒を留去
して冷蔵庫内で一夜放置した。析出した結晶にエ
ーテルを加えて、これをろ取した。収量7.80ｇ
（60.1％） 融点 136−137℃、〔α〕²³ _D＋18.8゜（ｃ＝1.01、
メタノール）、Rf¹0.63 元素分析 C₃₃H₅₂O₇N₄Sとして 計算値：Ｃ 61.08；Ｈ 8.08；Ｎ 8.64 ；Ｓ 4.94 実験値：Ｃ 61.19；Ｈ 8.05；Ｎ 8.89 ；Ｓ 4.73 (3) BOC−His（Mtr）−Leu−MetNH₂の製造 BOC−Leu−MetNH₂10.0ｇに、4N−HCl／酢
酸30mlを加え、室温で20分間放置したのちエーテ
ルを加えて沈澱としてろ取し乾燥した。一方
BOC−His（Mtr）OH・DCHA16.0ｇを、酢酸エ
チルに懸濁し、1N−硫酸27mlを加えて分液し、
無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥した。溶媒を留
去したのち、アセトニトリル100mlにとかし、
HONB5.0ｇを加えて氷冷し、DCC5.8ｇを加え
て、一夜反応したのち、析出するDCUをろ去し
た。先に調製したアミン成分をDMF100mlにとか
し、TEA4.6mlで中和したのち、活性エステルを
加えて、６時間かきまぜた。溶媒を留去したの
ち、酢酸エチルに転溶し、重曹水、クエン酸水、
水の順に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し
た。溶媒を留去したのち、エーテルを加えて粉末
としてろ取した。 収量 15.1ｇ（86.0％） 融点 129−131℃、〔α〕²³ _D−13.8゜（ｃ＝0.87，
DMF）、Rf¹0.64 元素分析 C₃₂H₅₀O₈N₆S₂として 計算値：Ｃ 54.06；Ｈ 7.09；Ｎ 11.82 ；Ｓ 9.02 実験値：Ｃ 54.69；Ｈ 7.39；Ｎ 11.97 ；Ｓ 8.39 (4) Ｚ−Val−Gly−OBu^tの製造 Ｚ−Gly−OBu^t12.0ｇをメタノール中接触還元
したのち溶媒を留去し、DMFにとかし氷冷した。
これに、Ｚ−Val−OH8.80ｇ，HONB7.20ｇ，
DCC8.24ｇを加え、一夜かきまぜた。析出した
DCUをろ去したのち残留物を酢酸エチルにとか
し、重曹水、クエン酸水で洗浄したのち、無水硫
酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を留去し、残留物
に石油ベンジンを加えて結晶としてろ取したの
ち、酢酸エチル−石油ベンジンより再結晶した。
収量11.1ｇ（87.0％） 融点 141℃，〔α〕²³ _D−2.1゜（ｃ＝1.16，DMF）、
Rf¹0.80 元素分析 C₁₉H₂₈O₅N₂として 計算値：Ｃ 62.62；Ｈ 7.74；Ｎ 7.69 実験値：Ｃ 62.49；Ｈ 7.60；Ｎ 7.72 (5) Ｚ−Ala−Val−Gly−OBu^tの製造 Ｚ−Val−Gly−OBu^t10.0ｇをメタノール中、
接触還元したのち、DMF100mlにとかし、Ｚ−
Ala−OH5.7ｇ，HONB4.1ｇを加え、氷冷した。
これにDCC6.2ｇを加えて、一夜かきまぜた。析
出したDCUをろ去し、溶媒を留去すると、結晶
が析出するので、酢酸エチルを加えて、結晶をろ
取し、よく洗浄した。 収量 10.5ｇ（96.4％） 融点 184−185℃，〔α〕²³ _D−7.8゜（ｃ＝1.06，
DMF）、Rf¹0.67 元素分析 C₂₂H₃₃O₆N₃として 計算値：Ｃ 60.67；Ｈ 7.64；Ｎ 9.65 実験値：Ｃ 60.93；Ｈ 7.86；Ｎ 9.77 (6) Ｚ−Trp（Mtr）−Ala−Val−Gly−OBu^tの
製造 Ｚ−Ala−Val−Gly−OBu^t5.0ｇをメタノール
中、接触還元したのち、溶媒を留去し、DMF100
mlにとかした。これに、Ｚ−Trp（Mtr）OH6.34
ｇ，HOBT1.86ｇを加えて氷冷し、DCC2.85ｇを
加え、一夜かきまぜた。析出したDCUをろ去し、
溶媒を留去したのち、少量のｎ−ブタノールを含
む酢酸エチルで抽出し重曹水で洗浄したのち、無
水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を留去し、エ
ーテルを加えて沈澱としてろ取したのち、メタノ
ール−酢酸エチル−エーテルより結晶として、こ
れをろ取した。 収量 8.80ｇ（96.6％） 融点 154−155℃，〔α〕²³ _D−22.7゜（ｃ＝0.88，
DMF）、Rf¹0.68 元素分析 C₄₃H₅₆O₁₀N₅Sとして 計算値：Ｃ 61.85；Ｈ 6.76；Ｎ 8.39 ；Ｓ 3.84 実験値：Ｃ 62.06；Ｈ 7.01；Ｎ 8.58 ；Ｓ 3.58 (7) BOC−His（Mtr）−Trp（Mtr）−Ala−Val−
Gly−OBu^tの製造 Ｚ−Trp（Mtr）−Ala−Val−GlyOBu^t8.0ｇを
DMF−メタノール中、接触還元したのち、メタ
ノールを留去した。これにBOC−His（Mtr）OH
（BOC−His（Mtr）OH・DCHA6.22ｇより調
製）、HONB1.90ｇを加えて氷冷したのち、
DCC2.18ｇを加え、一夜かきまぜた。析出した
DCUをろ去したのち、溶媒を留去し、エーテル
を加えて、沈澱としてろ取した。これをメタノー
ル、酢酸エチル、エーテルの混合液で洗浄した。
収量10.2ｇ（92.5％） 融点 202−204℃，〔α〕²³ _D−16.1゜（ｃ＝1.18，
DMF）、Rf¹0.68 元素分析 C₅₆H₇₇O₁₄N₈S₂として 計算値：Ｃ 58.46；Ｈ 6.75；Ｎ 9.74 ；Ｓ 5.57 実験値：Ｃ 58.32；Ｈ 6.54；Ｎ 9.58 ；Ｓ 5.51 (8) BOC−Ser−His（Mtr）−Trp（Mtr）−Ala−
Val−GlyOHの製造 BOC−His（Mtr）−Trp（Mtr）−Ala−Val−
GlyOBu^t4.0ｇにTFA30mlを加え、室温で50分間
振りまぜたのち、TFAを留去し、エーテルを加
えて、沈澱としろ取し、乾燥した。一方BOC−
Ser−OH0.76ｇ，HONB0.72ｇをアセトニトリル
20mlにとかし、氷冷しこれにDCC0.83ｇを加えて
４時間かきまぜた。先に調製したアミン成分を
DMF50mlにとかし、TEA1.0mlを加えて中和し
たのち、活性エステルを加えて、一夜かきまぜ
た。溶媒を留去したのち、少量の酢酸を加えて、
さらに水を加えて沈澱としてろ取した。これを
DMF−水より再沈でんした。収量 3.60ｇ（85.0
％） 融点 148−152℃，〔α〕²³ _D−16.4゜（ｃ＝1.09，
DMF） 元素分析 C₅₅H₇₄O₁₆N₉S₂・2H₂Oとして 計算値：Ｃ 54.26；Ｈ 6.46；Ｎ 10.36 ；Ｓ 5.27 実験値：Ｃ 54.58；Ｈ 6.33；Ｎ 10.82 ；Ｓ 5.51 (9) Ｚ−Arg（Pme）−Gly−OBu^tの製造 Ｚ−Gly・OBu^t13ｇをメタノール300ml中、接
触還元したのち、溶媒を留去し、残留物を
DMF200mlにとかした。これに、Ｚ−Arg（Pme）
OH〔Ｚ−Arg（Pme）OH・CHA20ｇより調製〕
を加え、氷冷し、HOBT5.4ｇ，DCC8.2ｇを加え
て一夜かきまぜた。析出したDCUをろ去したの
ち、溶媒を留去し、残留物を酢酸エチルにとかし
た。これを、重曹水、クエン酸水で洗浄したの
ち、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を留去
したのち、石油ベンジンを加えて粉末としてろ取
した。収量19.8ｇ（95.0％） 融点 55−60℃，〔α〕²³ _D＋0.2゜（ｃ＝0.88，
DMF）、Rf¹0.62 元素分析 C₃₁H₄₅O₇N₅Sとして 計算値：Ｃ 58.93；Ｈ 7.18；Ｎ 11.09 ；Ｓ 5.08 実験値：Ｃ 58.96；Ｈ 7.01；Ｎ 10.67 ；Ｓ 5.05 (10) Ｚ−Tyr−Pro−OBu^tの製造 Ｚ−Pro OBu^t15.0ｇをメタノール300mlにとか
し接触還元したのち、溶媒を留去し、DMF400ml
にとかした。これにＺ−Tyr−OH（Ｚ−Tyr−
OH・DCHA 20.0ｇより調製）、HOBT6.75ｇを
加えて氷冷し、さらにDCC 10.4ｇを加えて、一
夜かきまぜた。析出したDCUをろ去し、溶媒を
留去したのち、酢酸エチルにとかし、重曹水、ク
エン酸水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し
た。溶媒を留去したのち、シリカゲルのカラム
（7.5×９cm）に付し、１％（MeOH／クロロホル
ムで溶出し、目的物の分画を集め、濃縮したの
ち、石油ベンジンを加えて粉末としてろ取した。
収量15.4ｇ（82.2％） 〔α〕²³ _D−39.9゜（ｃ＝0.83，DMF）Rf¹0.62 元素分析 C₂₆H₃₂O₆N₂・1/2H₂Oとして 計算値：Ｃ 65.39；Ｈ 6.97；Ｎ 5.87 実験値：Ｃ 65.70；Ｈ 6.93；Ｎ 5.66 (11) Ｚ−Ile−Tyr−Pro−OBu^t Ｚ−Tyr−Pro−OBu^t15.2ｇをメタノール300
mlにとかし、接触還元したのち、溶媒を留去し、
残留物をDMF200mlにとかした。これにＺ−
IleOH8.0ｇ，HONB6.5ｇを加え氷冷したのち、
DCC7.4ｇを加えて、一夜かきまぜた。少量のＮ，
Ｎ−ジメチルプロパンジアミンを加えたのち、
DCUをろ去し、溶媒を減圧で留去した。残留物
を酢酸エチルにとかしたのち、重曹水、クエン酸
水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶
媒を留去すると結晶が析出するので、石油ベンジ
ンを加えて、これをろ取したのち、メタノール、
エーテル、石油ベンジンより再結晶した。収量
10.9ｇ（62.5％） 融点 177−178℃，〔α〕²³ _D−38.3゜（ｃ＝1.11，
DMF）、Rf¹0.62 元素分析 C₃₂H₄₃O₇N₃として 計算値：Ｃ 66.07；Ｈ 7.45；Ｎ 7.22 実験値：Ｃ 66.07；Ｈ 7.74；Ｎ 7.19 (12) Ｚ−Ile−Try−Pro−OHの製造 Ｚ−Ile−Tyr−Pro OBu^t6.0ｇにTFA60mlを
加え、室温で１時間ふりまぜたのち、留去し、残
留物を酢酸エチルにとかし、水洗したのち無水硫
酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を留去したのちエ
ーテルを加えて粉末として、ろ取した。 収量 5.10ｇ（94.2％） 融点 72−74℃，〔α〕²³ _D−25.2゜（ｃ＝1.01，
DMF）、Rf¹0.44 元素分析 C₂₈H₃₅O₇N₃として 計算値：Ｃ 63.98；Ｈ 6.71；Ｎ 7.99 実験値：Ｃ 63.75；Ｈ 6.67；Ｎ 7.84 (13) Ｚ−Ile−Tyr−Pro−Arg（Pme）−
GlyOBu^tの製造 Ｚ−Arg（Pme）−Gly−OBu^t7.58ｇをメタノー
ル300mlにとかし、1N−塩酸12mlを加えたのち、
接触還元した。溶媒を留去したのち残留物を
DMF100mlにとかし、氷冷して、TEA2.00mlを
加えて中和した。これに、Ｚ−Ile−Tyr−Pro−
OH5.78ｇ，HOBT2.23ｇ，DCC3.40ｇを加えて、
一夜かきまぜた。析出したDCUをろ去したのち、
溶媒を留去し、残留物を酢酸エチルにとかした。
これを、重曹水、クエン酸水で洗浄し、無水硫酸
ナトリウムで乾燥した。溶媒を留去し、残留物を
シリカゲルのカラム（5.5×10cm）に付し、２％
MeOH／クロロホルムで溶出し、目的物の分画
を集め濃縮したのち、エーテルを加えて、粉末と
してろ取した。 収量 7.20ｇ（62.2％） 融点 110−112℃，〔α〕²³ _D−28.3゜（ｃ＝1.19，
DMF）、Rf¹0.59 元素分析 C₅₁H₇₂O₁₁N₈S・H₂Oとして 計算値：Ｃ 59.85；Ｈ 7.29；Ｎ 10.93；Ｓ
3.13 実験値：Ｃ 60.16；Ｈ 7.56；Ｎ 10.95；Ｓ
2.98 (14) Ｚ−Lys（Mtr）−Ile−Tyr−Pro−Arg
（Pme）−GlyOBu^tの製造 Ｚ−Ile−Tyr−Pro−Arg（Pme）−Gly−OBu^t
7.0ｇをメタノール350mlにとかし、1N−塩酸７
mlを加えて、接触還元した。溶媒を留去したの
ち、残留物をDMFを200mlにとかし、氷冷し、
TEA1.0mlを加えて中和した。これに、Ｚ−Lys
（Mtr）−OH〔Ｚ−Lys（Mtr）OH・DCHA4.74ｇ
より調製〕、HOBT120ｇ，DCC1.80ｇを加えて、
一夜かきまぜた。析出したDCUをろ去し残留物
を酢酸エチルにとかした。これを重曹水、クエン
酸水で洗浄したのち、無水硫酸ナトリウムで乾燥
した。溶媒を留去し、エーテルを加えて粉末とし
たのち、酢酸エーテル−エーテルより２回再沈澱
した。収量8.40ｇ（87.5％） 融点 116〜118℃，〔α〕²³ _D−19.9゜（ｃ＝1.05，
DMF）、Rf¹0.59 元素分析 C₆₆H₉₆O₁₅N₁₀S₂として 計算値：Ｃ 59.44；Ｈ 7.26；Ｎ 10.50 ；Ｓ 4.81 実験値：Ｃ 59.10；Ｈ 7.44；Ｎ 10.46 ；Ｓ 4.98 (15) Ｚ−Thr−Lys（Mtr）−Ile−Tyr−Pro−
Arg（Pme）−Gly−OBu^tの製造 Ｚ−Lys（Mtr）−Ile−Tyr−Pro−Arg（Pme）
−GlyOBu^t7.50ｇをメタノール350ml中、接触還
元したのち、溶媒を留去し、これをDMF100mlに
とかした。これに、Ｚ−Thr−OH1.49ｇ，
HONB1.51ｇを加えて、氷冷したのち、DCC1.73
ｇを加えて一夜かきまぜた。少量のＮ，Ｎ−ジメ
チルプロパンジアミンを加え、DCUをろ去した
のち、溶媒を留去し、残留物を少量のｎ−ブタノ
ールを含む酢酸エチルにとかした。これを重曹水
で洗浄したのち、水洗し無水硫酸ナトリウムで乾
燥した。溶媒を留去し、残留物にエーテルを加え
て、粉末としたのち、これを、ろ取した。収量
8.0ｇ（99.2％） 融点 122−124℃，〔α〕²³ _D−25.5゜（ｃ＝0.82，
DMF）、Rf¹0.59 元素分析 C₇₀H₁₀₃O₁₇N₁₁S₂として 計算値：Ｃ 58.60；Ｈ 7.24；Ｎ 10.74；Ｓ
4.47 実験値：Ｃ 58.61；Ｈ 7.29；Ｎ 10.47；Ｓ
4.02 (16) BOC−Leu−Thr−Lys（Mtr）−Ile−Tyr−
Pro−Arg（Pme）−GlyOBu^tの製造 Ｚ−Thr−Lys（Mtr）−Ile−Tyr−Pro−Arg
（Pme）−GlyOBu^t7.5ｇをメタノール350mlにとか
し、パラトルエンスルホン酸0.99ｇを加えて、接
触還元したのち、溶媒を留去した。これを
DMF100mlにとかし、氷冷し、TEA0.74mlを加
えて中和した。これに、BOC−Leu−OH1.37ｇ，
HONB1.41ｇ，DCC1.62ｇを加えて一夜かきまぜ
た。DCUをろ去し、溶媒を留去したのち、酢酸
エチルにとかし、重曹水、クエン酸水で洗浄し無
水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を留去したの
ち、エーテルを加えて、粉末としてろ取した。収
量7.55ｇ（95.4％） 融点 136−138℃，〔α〕²³ _D−26.6゜（ｃ＝1.00，
DMF）、Rf¹0.59 元素分析 C₇₃H₁₁₆O₁₈N₁₂S₂・H₂Oとして 計算値：Ｃ 57.23；Ｈ 7.76；Ｎ 10.97 ；Ｓ 4.19 実験値：Ｃ 57.53；Ｈ 8.12；Ｎ 10.65 ；Ｓ 3.90 (17) BOC−Ala−Leu−Thr−Lys（Mtr）−Ile−
Tyr−Pro−Arg（Pme）−Gly−OHの製造 BOC−Leu−Thr−Lys（Mtr）−Ile−Tyr−Pro
−Arg（Pme）−Gly−OBu^t4.20ｇにTFA40mlを加
え、室温で60分間ふりまぜたのち溶媒を留去し、
エーテルを加えて粉末としてろ取し、乾燥した。
これをDMF50mlにとかし、氷冷し、TEA0.80ml
を加えた。これに、BOC−Ala−ONB（BOC−
Ala−OH0.52ｇ，HONB0.54ｇ，DCC0.62ｇよ
り調製）を加えて、一夜かきまぜた。少量のＮ，
Ｎ−ジメチルプロパンジアミンを加えて溶媒を留
去したのち、酢酸水を加えて沈澱としてろ取し
た。これを、含水メタノールで再沈澱した。収量
3.60ｇ（88.1％） 融点 128−130℃，〔α〕²³ _D−32.9゜（ｃ＝0.98，
DMF），Rf¹0.40 元素分析 C₇₂H₁₁₃O₁₉N₁₃S₂・2H₂Oとして 計算値：Ｃ 55.26；Ｈ 7.54；Ｎ 11.64 ；Ｓ 4.10 実験値：Ｃ 55.02；Ｈ 6.89；Ｎ 11.38 ；Ｓ 3.77 (18) Ｚ−Ser−ProOBu^tの製造 Ｚ−Pro−OBu^t11.0ｇをメタノール300mlにと
かし、接触還元したのち、溶媒を留去し、
DMF200mlにとかした。これにＺ−Ser−OH7.2
ｇ，HOBT4.90ｇ，DCC7.50ｇを加えて、一夜か
きまぜた。析出したDCUをろ去し、溶媒を留去
し、残留物を酢酸エチルにとかした。これを、重
曹水、クエン酸水で洗浄したのち、無水硫酸ナト
リウムで乾燥した。溶媒を留去し、石油ベンジン
を加えて、結晶としてろ取したのち、酢酸エチル
−エーテルより再結晶した。 収量 9.50ｇ（67.2％） 融点 126−127℃，〔α〕²³ _D−50.9゜（ｃ＝0.95，
DMF）、Rf¹0.65 元素分析 C₂₀H₂₈O₆N₂として 計算値：Ｃ 61.21；Ｈ 7.19；Ｎ 7.14 実験値：Ｃ 61.45；Ｈ 7.16；Ｎ 7.31 (19) Ｚ−Gly−Ser−Pro−OBu^tの製造 Ｚ−Ser−Pro−OBu^t10.0ｇをメタノール300ml
にとかし、接触還元したのち、溶媒を留去し、
DMF300mlにとかした。これにＺ−Gly−OH5.06
ｇ，HONB5.13ｇを加えて氷冷したのち、
DCC5.89ｇを加えて、一夜かきまぜた。少量の
Ｎ，Ｎ−ジメチルプロパンジアミンを加えたの
ち、DCUをろ去し、溶媒を留去した。残留物を
酢酸エチルにとかし、重曹水、クエン酸水で洗浄
し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を留去
し、石油ベンジンを加えて結晶としてろ取したの
ち、エーテルで再結晶した。収量7.70ｇ（72.1
％） 融点 96−98℃，〔α〕²³ _D−53.4゜（ｃ＝1.05，
DMF）、Rf¹0.61 元素分析 C₂₂H₃₁O₇N₃として 計算値：Ｃ 58.78；Ｈ 6.95；Ｎ 9.35 実験値：Ｃ 58.86；Ｈ 7.04；Ｎ 9.46 (20) Ｚ−Gly−Gly−Ser−Pro−OBu^tの製造 Ｚ−Gly−Ser−Pro−OBu^t7.0ｇをメタノール
200mlにとかし、接触還元したのち、溶媒を留去
し、残留物をDMF100mlにとかした。これにＺ−
Gly−OH3.0ｇ，HONB3.10ｇを加えて氷冷した
のち、DCC3.60ｇを加えて一夜かきまぜた。少量
のＮ，Ｎ−ジメチルプロパンジアミンを加えたの
ち、DCUをろ去し、溶媒を留去した。残留物を
酢酸エチルにとかし、飽和食塩水で洗浄したの
ち、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を留去
しエーテルを加えて結晶としたのちろ取し、酢酸
エチルで再結晶した。収量5.70ｇ（78.5％） 融点 129−130℃，〔α〕²³ _D−47.0゜（ｃ＝0.81，
DMF）、Rf¹0.47 元素分析 C₂₄H₃₄O₈N₄として 計算値：Ｃ 56.90；Ｈ 6.77；Ｎ 11.06 実験値：Ｃ 56.75；Ｈ 6.68；Ｎ 10.90 (21) Ｚ−Gln−Pro−OBu^tの製造 Ｚ−Pro−OBu^t16.2ｇをメタノール350mlにと
かし、接触還元したのち溶媒を留去し、DMF200
mlにとかした。これにＺ−Gln−OH12.4ｇ，
HOBT7.16ｇを加えて、氷冷し、DCC10.9ｇを加
えて一夜かきまぜた。析出したDCUをろ去し、
溶媒を留去したのち、酢酸エチルにとかし、重曹
水、クエン酸水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで
乾燥した。溶媒を留去したのち、石油ベンジンを
加えて結晶としてこれをろ取し、酢酸エチル−石
油ベンジンより再結晶した。 収量 15.8ｇ（82.5％） 融点 106−107℃，〔α〕²³ _D−51.2゜（ｃ＝1.06，
DMF）、Rf¹0.62 元素分析 C₂₂H₃₁O₆N₃として 計算値：Ｃ 60.95；Ｈ 7.21；Ｎ 9.69 実験値：Ｃ 60.95；Ｈ 7.36；Ｎ 9.41 (22) Ｚ−Leu−Gln−Pro−OBu^tの製造 Ｚ−Gln−Pro−OBu^t8.0ｇ、パラトルエンスル
ホン酸3.51ｇをメタノール300mlにとかし接触還
元したのち、溶媒を留去した。残留物をDMF200
mlにとかしたのち氷冷し、TEA2.6mlを加えて中
和した。これにＺ−LeuOH（Ｚ−Leu−OH・
DCHA8.24ｇより調製）、HONB4.00ｇ，
DCC4.60ｇを加えて一夜かきまぜた。少量のＮ，
Ｎ−ジメチルプロパンジアミンを加えたのち
DCUをろ去し、溶媒を留去した。残留物を酢酸
エチルにとかし、重曹水、クエン酸水で洗浄し、
無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を留去し結
晶を析出させたのち、石油ベンジンを加えて、こ
れをろ取し、酢酸エチル−石油ベンジンで再結晶
した。収量7.70ｇ（76.3％） 融点 62−64℃，〔α〕²³ _D−51.7゜（ｃ＝1.11，
DMF）、Rf¹0.61 元素分析 C₂₈H₄₂O₇N₄として 計算値：Ｃ 61.52；Ｈ 7.75；Ｎ 10.25 実験値：Ｃ 61.19；Ｈ 7.75；Ｎ 10.11 (23) BOC−Pro−Leu−Gln−Pro−OBu^tの製造 Ｚ−Leu−Gln−Pro−OBu^t7.0ｇを、メタノー
ル300mlにとかし、接触還元したのち、溶媒を留
去し、残留物をDMF100mlにとかした。これに
BOC−ProOH2.42ｇ，HONB2.76ｇを加えて氷
冷したのち、DCC3.17ｇを加えて、一夜かきまぜ
た。少量のＮ，Ｎ−ジメチルプロパンジアミンを
加えたのち、DCUをろ去し、溶媒を留去し、酢
酸エチルにとかした。これを、重曹水、クエン酸
水で洗浄したのち、無水硫酸ナトリウムで乾燥し
た。溶媒を留去したのち、エーテル−石油ベンジ
ンより粉末として、ろ取した。収量6.50ｇ（83.3
％） 融点 74−76℃，〔α〕²³ _D−76.3゜（ｃ＝1.19，
DMF）、Rf¹0.60 元素分析 C₃₀H₅₁O₈N₅として 計算値：Ｃ 59.05；Ｈ 8.43；Ｎ 11.49 実験値：Ｃ 58.89；Ｈ 8.12；Ｎ 11.08 (24) BOC−Ala−Pro−Leu−Gln−Pro−OHの
製造 BOC−Pro−Leu−Gln−Pro−OBu^t6.0ｇに
TFA60mlを加え、室温で60分間ふりまぜたのち、
溶媒を留去し、残留物にエーテルを加えて粉末と
して、ろ取し乾燥した。これをDMF100mlにとか
し氷冷し、TEA2.80mlを加えたのち、BOC−Ala
−ONB（BOC−Ala−OH1.95ｇ，HONB2.07ｇ，
DCC2.38ｇより調製）を加えて一夜かきまぜた。
溶媒を留去したのち、少量の酢酸を加え、次いで
エーテルを加えて粉末としてろ取した。これをク
ロロホルムにとかし、シリカゲルのカラム（5.5
×８cm）に付し、５％メタノール／クロロホルム
で溶出し、目的物の分画を取り、濃縮したのち、
エーテルを加えて粉末としてろ取した。収量4.50
ｇ（73.2％） 融点 124−128℃，〔α〕²³ _D−82.1゜（ｃ＝1.04，
DMF）、Rf¹0.18 元素分析 C₂₉H₄₈O₉N₆として 計算値：Ｃ 55.75；Ｈ 7.74；Ｎ 13.45 実験値：Ｃ 55.38；Ｈ 7.65；Ｎ 13.21 (25) BOC−Ala−Pro−Leu−Gln−Pro−Gly−
Gly−Ser−Pro−OBu^tの製造 Ｚ−Gly−Gly−Ser−Pro−OBu^t2.23ｇをメタ
ノール100mlにとかし接触還元したのち、溶媒を
留去し、残留物をDMF50mlにとかした。これに
BOC−Ala−Pro−Leu−Gln−Pro−OH2.50ｇ，
HONB0.90ｇを加えて氷冷し、さらにDCC1.03ｇ
を加えて一夜かきまぜた。析出したDCUをろ去
したのち溶媒を留去し、これを少量のｎ−BuOH
を含む酢酸エチルにとかし、飽和食塩水で洗浄し
たのち無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を留
去したのち、エーテルを加えて粉末としてろ取し
た。収量3.85ｇ（98.3％） 融点 100−105℃，〔α〕²³ _D−74.0゜（ｃ＝0.92，
DMF）、Rf¹0.19 元素分析 C₄₅H₇₄O₁₄N₁₀・H₂Oとして 計算値：Ｃ 54.20；Ｈ 7.68；Ｎ 14.05 実験値：Ｃ 54.01；Ｈ 7.45；Ｎ 13.44 (26) BOC−Ala−Pro−Leu−Gln−Pro−Gly−
Gly−Ser−Pro−OHの製造 BOC−Ala−Pro−Leu−Gln−Pro−Gly−Gly
−Ser−Pro−OBu^t1.0ｇにTFA10mlを加え、室
温で１時間ふりまぜたのち溶媒を留去し、エーテ
ルを加えて粉末としてろ取した。これをDMF10
mlにとかし、氷冷したのちTEA0.46mlを加え、
次にBOC−OH0.27ｇを加えて４時間かきまぜ
た。溶媒を留去したのち、酢酸1.5mlを加え、エ
ーテルを加えて粉末としてろ取した。これをメタ
ノール−エーテルより再沈澱した。収量0.87ｇ
（92.4％） 融点141−145℃，〔α〕²³ _D−72.9゜（ｃ＝0.98，
DMF）、Rf³0.29 元素分析 C₄₁H₆₆O₁₄N₁₀・3H₂Oとして 計算値：Ｃ 50.40；Ｈ 7.43；Ｎ 14.34 実験値：Ｃ 50.16；Ｈ 6.76；Ｎ 14.11 (27) BOC−Ser−His（Mtr）−Trp（Mtr）−Ala
−Val−Gly−His（Mtr）−Leu−Met−NH₂の
製造 BOC−His（Mtr）−Leu−MetNH₂3.97ｇに
TFA40mlを加え、室温で10分間ふりまぜたのち、
1.3N−塩酸4.1mlを加えて溶媒を留去し、エーテ
ルを加えて粉末としてろ取し、乾燥した。これを
DMF40mlにとかし、氷冷し、TEA0.86mlを加
え、次いでBOC−Ser−His（Mtr）−Trp（Mtr）−
Ala−Val−Gly−OH5.50ｇ，HONB1.0ｇ，
DCC1.15ｇを加え一夜かきまぜた。析出した
DCUをろ去し、溶媒を留去したのち、水を加え
て、粉末としてろ取した。次いでこれを含水エタ
ールで洗浄した。 収量 7.35ｇ（88.9％） 融点 192−193℃，〔α〕²³ _D−12.5゜（ｃ＝1.05，
DMF）、Rf¹0.50 元素分析 C₈₂H₁₁₄O₂₁N₁₅S₄として 計算値：Ｃ 55.51；Ｈ 6.48；Ｎ 11.84 ；Ｓ 7.23 実験値：Ｃ 55.56；Ｈ 6.74；Ｎ 11.83 ；Ｓ 6.55 (28) BOC−Ser−His−Trp（Mtr）−Ala−Val
−Gly−His−Leu−Met−NH₂の製造 BOC−Ser−His（Mtr）−Trp（Mtr）−Ala−
Val−Gly−His（Mtr）−Leu−Met−NH₂3.0ｇを
DMF15mlにとかし、HOBT2.30ｇを加えて30分
間処理したのち、溶媒を留去し、エーテルを加え
て粉末としてろ取した。収量2.15ｇ（92.5％） 融点 191−193℃，〔α〕²³ _D−18.8゜（ｃ＝0.94，
DMF）、Rf³0.64 元素分析 C₆₂H₉₀O₁₅N₁₅S₂・H₂Oとして 計算値：Ｃ 54.45；Ｈ 6.78；Ｎ 15.36 ；Ｓ 4.69 実験値：Ｃ 53.92；Ｈ 6.43；Ｎ 15.80 ；Ｓ 4.34 (29) BOC−Ala−Leu−Thr−Lys（Mtr）−Ile−
Tyr−Pro−Arg（Pme）−Gly−Ser−His−
Trp（Mtr）−Ala−Val−Gly−His−Leu−Met
−NH₂の製造 BOC−Ser−His−Trp（Mtr）−Ala−Val−
Gly−His−Leu−MetNH₂2.0ｇにTFA20mlを加
え、室温で15分間処理したのち留去し、エーテル
を加えて粉末としてろ取し、乾燥した。これを
DMF5mlにとかし、TEA1.24mlを加えてよくか
きまぜたのち、エーテルを加えて沈澱させ、粉末
としてろ取した。これをエーテル20mlにとかし、
BOC−Ala−Leu−Thr−Lys（Mtr）−Ile−Tyr−
Pro−Arg（Pme）−Gly−OH1.78ｇ，HONB0.41
ｇを加えたのち氷冷し、DCC0.47ｇを加えて一夜
かきまぜた。溶媒を留去したのち、エタノール−
酢酸エチルを加えて粉末としてろ取したのち、熱
エタノールで洗浄した。 収量 3.30ｇ（99.7％） 融点 222−223℃（分解），〔α〕²³ _D−22.8゜（ｃ
＝
1.02，DMF）、Rf³0.67 元素分析 C₁₂₉H₁₉₃O₃₁N₂₈S₄・8H₂Oとして 計算値：Ｃ 53.34；Ｈ 7.25；Ｎ 13.50 ；Ｓ 4.42 実験値：Ｃ 53.35；Ｈ 6.98；Ｎ 12.91 ；Ｓ 4.58 (30) BOC−Ala−Pro−Leu−Gln−Pro−Gly−
Gly−Ser−Pro−Ala−Leu−Thr−Lys（Mtr）
−Ile−Tyr−Pro−Arg（Pme）Gly−Ser−His
（Mtr）−Trp（Mtr）−Ala−Val−Gly−His−
Leu−Met−NH₂の製造 BOC−Ala−Leu−Thr−Lys（Mtr）−Ile−Tyr
−Pro−Arg（Pme）−Gly−Ser−His−Trp
（Mtr）−Ala−Val−Gly−His−Leu−Met−
NH₂500mgに、TFA5mlを加え、ふりまぜたのち、
留去し、エーテルを加えて粉末としてろ取した。
これをDMF1mlにとかし、TEA0.2mlを加えて、
よくかきまぜたのち、エーテルを加えて粉末とし
てろ取した。これを、DMF5mlにとかし、BOC
−Ala−Pro−Leu−Gln−Pro−Gly−Gly−Ser
−Pro−OH217mg，HOBT50mgを加えたのち氷
冷し、DCC160mgを加えて一夜かきまぜた。析出
したDCUをろ去したのち、溶媒を留去し、残留
物に酢酸エチルを加えて粉末としてろ取した。こ
れをDMF−メタノールにとかし約30分間加熱し
たのち、メタノールを留去し、残留物に酢酸エチ
ルを加えて粉末としてろ取した。次いでこれをメ
タノール水で洗浄した。収量480mg（72.2％） 融点 203−208℃（分解），〔α〕²³ _D−35.2゜（ｃ
＝
0.93，DMF）、Rf³0.66 元素分析 C₁₆₅H₂₄₉O₄₂N₃₈S₄・6H₂Oとして 計算値：Ｃ 53.95；Ｈ 7.16；Ｎ 14.49 ；Ｓ 3.49 実験値：Ｃ 54.08；Ｈ 6.87；Ｎ 14.19 ；Ｓ ３，43 (31) Ｈ−Ala−Pro−Leu−Gln−Pro−Gly−
Gly−Ser−Pro−Ala−Leu−Thr−Lys−Ile
−Tyr−Pro−Arg−Gly−Ser−His−Trp−
Ala−Val−Gly−His−Leu−Met−NH₂（鳥
GRP）の製造 BOC−Ala−Pro−Leu−Gln−Pro−Gly−Gly
−Ser−Pro−Ala−Leu−Thr−Lys（Mtr）−Ile
−Tyr−Pro−Arg（Pme）−Gly−Ser−His−
Trp（Mtr）−Ala−Val−Gly−His−Leu−Met−
NH₂100mgに0.3Mメタンスルホン酸／TFA−チ
オアニソール（９：１）８mlを加え、室温で２時
間ふりまぜたのち、酢酸アンモニア100mgを加え
て、TFAを留去し、エーテルを加えて粉末とし
てろ取した。これを、少量の1N酢酸水にとかし、
セフアデツクスＧ−25のカラム（2.2×120cm）に
付した。1N−酢酸で溶出し170ml−270mlの分画
を取り、凍結乾燥したのち、少量の水にとかし
Amberlite IRA410（１×10cm）のカラムを通し
たのち、カルボキシメチルセルロースのカラム
（2.2×17cm）に付した。水（400ml）−0.4M酢酸
アンモニア水（400ml）の線型勾配法で溶出し、
335〜365mlの分画を集めて凍結乾燥した。収量28
mg（35％）。 〔α〕²² _D−102.2゜（ｃ＝0.32，１％酢酸）Rf⁴0.39 アミノ酸分析値（４％チオグリコール酸／6N
塩酸加水分解）：Lys1.00(1)；His1.73(2)；Arg1.04
(1)；Trp0.67(1)；Thr1.06(1)；Ser1.77(2)；Glu1.11
(1)；Pro4.20(4)；Gly4.23(4)；Ala3.19(3)；Val1.06
(1)；Met1.02(1)；Ile0.96(1)；Leu3.04(3)；Tyr1.00
(1)（平均回収率73.7％）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ ヒスチジンを有するペプチドの製造にあた
   り、ヒスチジンのイミダゾール基を、４−メトキ
   シ−２，３，６−トリメチルベンゼンスルホニル
   基で保護し、ペプチド縮合したのち、該保護基を
   酸または１−ヒドロキシベンゾトリアゾールで脱
   離せしめることを特徴とするペプチドの製造法。 ２ 酸としてトリフルオロ酢酸を用いる特許請求
   の範囲第１項記載の製造法。 ３ チオアニソールまたはジメチルスルフイドの
   存在下で保護器を脱離せしめる特許請求の範囲第
   １項または第２項記載の製造法。