JPH02286099A - 液相又は乾式相検定系におけるアスコルビン酸妨害低減剤及びそれに関する方法 - Google Patents

液相又は乾式相検定系におけるアスコルビン酸妨害低減剤及びそれに関する方法

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JPH02286099A JP2095234A JP9523490A JPH02286099A JP H02286099 A JPH02286099 A JP H02286099A JP 2095234 A JP2095234 A JP 2095234A JP 9523490 A JP9523490 A JP 9523490A JP H02286099 A JPH02286099 A JP H02286099A
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の背景 星１１ｊυ幻１分里 本発明は、−船釣に、多数の液相及び乾式相検定系、特
に、体液中の潜血、コレステロール、トリグリセリド、
尿酸等を測定するために用いられる従来の検定のような
オキシダーゼ−ペルオキシダーゼ組み合わせ反応に基づ
く検定系においてアスコルビン酸妨害を排除し得る掃去
剤（スカベンジャー）系に関する。さらに、特異的には
本発明は、アスコルビン酸塩が検定試薬系を妨害する以
前に尿のような分析試料中のアスコルビン酸塩（アスコ
ルビン酸のイオン形態）を迅速且つ選択的に酸化する物
質に関する。
１米五肢ｌ アスコルビン酸の最も一般的形態は１通常ビタミンＣと
呼ばれている。このビタミンは重要な栄養素であって、
果物及び野菜のような多数の天然食物中に見出される。
ビタミンＣは合成も可能であり、したがって食品添加物
として、又は錠剤形態で用いることができる。
ビタミンＣの健康上の利点が知られてかなりの期間を経
ている。１００年以上ｎｉ１、このビタミンを豊富に含
んだ食物を摂らなければ長い航海の間に重い病気に罹る
ことを船乗り達は発見した。ｆｉ近の医学研究から、ビ
タミンＣの大量投与が普通の風邪の治療に効（可能性が
あることが示唆されている。結果的に、ビタミンＣはが
なリボビエラーな栄養分であり、したがって、ポピユラ
ーな食品添加物及びビタミン丸剤等のポピユラーな成分
である。
しかしながら、人体は、概して、身体の短期間の需要に
見合った程度にビタミンＣを吸収するにすぎない、ビタ
ミンは体内では一般に貯蔵されず、過剰のビタミンＣは
通常、身体の泌尿器系によって処理される。その結果、
ビタミンＣは医学的分析等に用いられる尿試料中に普通
に見出される。
尿分析は現代健康管理の重要な一部であって、患者の生
理学的状態に関する実体的知識は、グルコース、潜血、
コレステロール、トリグリセリド、又は尿酸のような尿
中成分を監視することによって得られる。しかしながら
、多数の一般に公知の尿検定系は、アスコルビン酸によ
り何らかの副作用を受ける。
アスコルビン酸塩は、検定の試薬系を妨害する還元剤で
ある。多（の検定は、酸化剤の存在により指示薬が還元
状態から酸化状態まで変わるにつれて色を変える酸化還
元指示薬系を用いている。一般の検定においては、試料
中の分析物の量に比例して酸化還元指示薬の酸化を引き
起こすように試薬系が作られている。還元剤として、ア
スコルビン酸塩はこのような系を妨害することがある。
しかしながら、アスコルビン酸塩は酸化可能であって、
それが検定系を妨害する前にアスコルビン酸塩を酸化す
ればアスコルビン酸塩は還元剤として作用することがで
きず、したがって妨害を起こすことはない。
アスコルビン酸を酸化するための多数の系が公知である
。　Ｐｅｃｈｔ、　１．等°ゴｈｅ　Ｃｏｐｐｅｒ−Ｐ
ｏｌｙ−Ｌ−Ｈｉｓｔｉｄｉｎｅ　Ｃｏｍｐｌｅｘ：　
１．　Ｔｈｅ　ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＥｆｆｅｃ
ｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｐｏ１ｙｅｌｅｃｔｒａｌｙｔｅ　
ｏｎ　ｔｈｅ　０ｘｉｄａｓｅＡｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ
　Ｃｏｐｐｅｒ　Ｉｏｎｓ　　＠−ポリーＬ−ヒスチジ
ン錯体：１．銅イオンのオキシダーゼ活性に及ぼすポリ
電解質の環境効力”、［Ｊ、　Ａｍ、　Ｃｈｅｗ。
Ｓａｃ、、　８９　：　１５８７．　　（１９６８１１
は、酸素及び銅触媒によってアスコルビン酸塩を酸化す
ることができることを示している。さらに、ポリヒスチ
ジン（ＰＬＨ）は、アスコルビン酸塩のような負に荷電
した中性の基質に対する銅（１１）の触媒効率を増強す
ることが示されている。
Ｖｅｎｇｅｒｏｖａ、　Ｎ、Ａ、、　Ｋｉｒｓｈ、　Ｙ
、Ｅ、及びＫａｂａｎｏｖ。
Ｖ、Ａ、、　”Ｔｈｅ　ａｓｃｏｒｂａｔｅ−ｏｘｉｄ
ａｓｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆｔｈｅ　Ｃｕ”−ｐｏ
ｌｙ−４−ｖｉｎｙｌｐｙｒｉｄｉｎｅ　ｃｏｍｐｌｅ
ｘａｌｋｙｌａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｂｒｏｍｏａｃｅｔ
ｉｃ　ａｃｉｄブロモ酢酸でアルキル化されるＣｕ″１
−ポリ−４−ビニルピリジン複合体のアスコルビン酸塩
−オキシダーゼ活性１°［Ｖｙｓｏｋｏｍｏｌ、　５ｏ
ｙｅｄ、、　Ａ１３．　Ｎｏ、１１．　ｐｐ。
２５０９−２５１７　（１９７１１（翻訳に、Ａ、　Ａ
１１ｅｎ）］は、］ポリー４−ビニルピリジのカルボキ
シメチル誘導体の合成方法を示し、さらに、銅（ＩＩ）
ポリマー錯体が銅イオンだけに関してアスコルビン酸塩
酸化活性を増大させることを示している。
ヒスタミン−ラテックスを合成し得ること、またＣｕ５
Ｏ，に添加して錯体−ラテックス−ヒスタミン−銅（Ｉ
Ｉ）を作ることをできることも公知である。錯体はＭｉ
ｃｈａｅｌｉｓ−Ｍｅｎｔｅｎ触媒としてはたらき、さ
らにアスコルビン酸の酸化のための触媒として安定且つ
再使用可能であることが判明している。−射的には、　
Ｓｕｎ、　Ｚ、、　Ｊａｎ、　Ｃ，、及びＫｅｔａｎｏ
、　Ｈ，、”５ｔｕｄｉｕｓ　ｏｎ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎ
ａｌ　Ｌａｔｉｃｅｓ：ＣａｔａＬｙｔｉｃ　Ｅｆｆｅ
ｃｔｓ　ｏｆ　Ｈｉｓｔａｍｉｎｅ−ｃｏｎｔａｉｎｉ
ｎｇＰｏｌｙｍｅｒ−１ａｔｅｘ−ｃｏｐｐｅｒ　（Ｉ
Ｉ　）　Ｃｏｌ１ｐｌｅｘ　ｏｎ　ｔｈｅＯｘｉｄａｔ
ｉｏｎ　ｏｆ　Ａｓｃｏｒｂｉｃ　Ａｃｌｄ機能性ラテ
ックスに関する研究：アルコルビン酸の酸化に及ぼすヒ
スタミン含有ポリマー−ラテックス−銅（ＩＩ）　８１
体の触媒作用”　Ａｌａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ、　
１９：　９８４−９８７＋１９８６１　］　を参照され
たい。
アスコルビン酸は、銅（ＩＩ）とポリ−４−ビニル−ピ
リジンの錯体によって触媒されて分子酸素で酸化される
ことも公知である。その機序は、銅（ＩＩ）とアスコル
ビン酸陰イオンとの相互作用で銅（１）イオンを得るも
のである。触媒作用の今一つの段階は１分子酸素による
銅（１）の酸化である。−射的には、５ｋｕｒｌａｔｏ
ｒ、　Ｙ、１．等、（ゴｈｅＭｅｃｈｐｎｉｓｍ　ｏｆ
　Ａｓｃｏｒｂｉｃ　Ａｃ１ｄ　０ｘｉｄａｔｉｏｎ　
ｂｙ　Ｃｕ（ＩＩ　）　−ｐｏｌｙ−４−ｖｉｎｙｌ−
Ｐｙｒｉｄｉｎｅ　Ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ　ＩＲ（ＩＩ）
−ポリ−４−ビニルピリジン錯体によるアスコルビン酸
の酸化機序″Ｅｕｒｏｐｅａｎ　ＰｏｌｙｍｅｒＪｏｕ
ｒｎａｌ、　１５：　８１１〜８１５　（１９７９）］
　を参照されたい。
さらに、欧州特許第００３７０５６号明細書には、アス
コルビン酸を含む還元剤による妨害を回避するために診
断法にヨウ素酸塩を用いることが示されている。米国特
許第４．２８８．５４１号明細書（Ｍｅｇｅｒｓ、　”
Ａｓｃｏｒｂａｔｅ　ＲｅｓｉｓｔａｎｔＣｏｍｐｏｓ
ｉｔｉｏｎ　　Ｔｅ５ｔ　　Ｄｅｖｉｃｅ　　ａｎｄ　
　Ｍｅｔｈｏｄ　　ｆｏｒＤｅｔｅｃｔｉｎｇ　ａ　Ｃ
ｏｍｐｏｎｅｎｔ　ｉｎ　Ｌｉｑｕｉｄ　Ｔｅ５ｔ　Ｓ
ａｍｐｌｅ液体試験試液体試験試料出のためのアスコル
ビン酸塩耐性組成物試験の装置及び方法“）には、尿中
グルコースに対する試験装置におけるアスコルビン酸の
除去のための掃去剤系として第二水銀イオン錯体を使用
することが開示されている。
上記参考文献の多（は、Ｃｕ”をＣｕ”に還元すること
によるアスコルビン酸塩の酸化に関する。しかしながら
、Ｃｕ″１も還元剤であり、したがって、非酸化アスコ
ルビン酸塩と同様に、検定を妨害するａ　Ｖｅｎｇｅｒ
ｏｖａの文献では、酸素を用いてＣｕ’、’をＣｕ　”
に再酸化している。しかしながら、酸素は室温で気体で
あるために、非常に不便な試薬である。さらに、上記文
献で考察されたアスコルビン酸塩酸化物質はすべて、水
及び有機溶媒に不溶性である。そのままでは、薄膜上に
均質皮膜としてそれらの物質を適用することは非常に難
しく、したがってそれらは従来の浸漬−読取り試薬試験
ストリップ系のような乾式試薬系には適していないと考
えられる。さらに、先行技術による物質は、従来の酸化
還元指示薬系に対する望ましくない妨害を防止するに十
分な程度にアスコルビン酸塩を除去（掃去）するに十分
な反応性を有してはいない。
それゆえに、望ましくないアスコルビン酸塩妨害を防止
するに十分な程度にアスコルビン酸塩を酸化（掃去）す
るために検定系に用いることができる物質を提供するこ
とが本発明の目的である。
さらに本発明の目的は、従来の「浸漬−読取りｊ試薬試
験ストリップに組み込むことができるアスコルビン酸塩
掃去剤系を提供することである。
本発明の他の目的及び特徴は、以下の明細書を読めば、
当業者には自明となるであろう。
ｌ肚Ωｌ刀 本発明は、検定系、特にオキシダーゼとペルオキシダー
ゼを組み合わせた反応に基づく検定機構におけるアスコ
ルビン酸妨害の排除を目的にするものである。試料中に
アスコルビン酸が存在する場合、それは還元剤として作
用し、検定試薬系を妨害する０本発明はアスコルビン酸
塩を迅速に酸化することによりこの妨害を排除し、それ
によってアスコルビン酸塩が望ましくない還元剤として
作用するのを防止するｍ　Ｃｕ　＋２と結合した水溶性
ポリマー並びにクロム酸塩、過酸化物、又はＮ−八日誘
導体のような有機又は無機酸化体よりなる二重酸化体系
を用いてアルコルビン酸塩を酸化する０本発明は驚（は
ど選択的であって、−船釣にそれ自体、検定試薬系を妨
害しない。
さらに１本発明は、速く且つ効率が良いために伝統的な
「浸漬−読取り１試薬試験ストリツプ系のような簡便な
体裁に組み込むことができる。
゛な　　　の１　な！ 本発明は、それ自体、いかなる重大な検定妨害をも引き
起こすことなく、多くの検定系に対するアスコルビン酸
塩妨害を排除する二重酸化体系に関する。酸化体■は、
Ｃｕ　＋２と結合する水溶性ポリマーである（水溶性の
高いポリマーであるほど、本発明に用いるには好ましい
）、ポリマー−Ｃｕ”！Ｉｆ体は、好ましくは、Ｃｕ’
″２と結合した場合、水溶液中で均質ゲル状錯体となる
のが好ましい。
最も好ましい銅−配位子錯体（酸化体Ｉ）は。
Ｃｕ　＋２と錯形成したヒスタミン又はピリジン配位子
よりなり、上記銅−配位子錯体は、式：Ｃ式中、 ｎ　ｌ＝Ｏ〜３ ｎ　ｘ　：１〜３ Ｒｔ　”イミダゾリル又はピリジル Ｒｚ　＝　Ｈ又はカルボキシル又はアルコキシＲ，＝Ｈ
又はカルボキシル又はアルコキシＸ　、　＝−Ｏ−又ハ
ーＮＲ４−に：コテＲ−１；ｔＨ又は炭素＃ｔｌ〜６の
低級アルキル）、又はＨＸｔ＝Ｈ又はカルボキシル Ｘ　、＝−ＣＯＮＨ−又は−（ＣＨ＊ｌｎｍ−Ｎ　Ｈ−
（ここでｎｌは０〜３）である］ もしくは、 Ｃ式中。
ｎ　ａ　＋　ｎ　ｍ及びｎ　ａ　＝　１〜３Ｒ，＝イミ
ダゾリル又はピリジル である） の水溶性ポリマー骨格を有する。
第二の酸化体（酸化体１１）は、無機酸化体、有機過酸
化物、又は有機Ｎ−ハロ誘導体あり得る。無機酸化体の
例としては、クロム酸塩、臭素酸塩、ヨウ素酸塩、第二
水銀、タリウム（ＩＩＩ）、セリウム（ＩＶ）、及びマ
ンガン（■１化合物が挙げられるが、この場合、クロム
酸塩、臭素酸塩及びヨウ素酸塩が最も好ましい、有機過
酸化物の例としては、ジイソプロピルベンゼンジヒドロ
ペルオキシド（＋）ｎＤＩｌ）、ジイソプロピルベンゼ
ンモノヒドロベル１キシド、フェニルシクロヘキザンヒ
ドロベルオキシド、ｐ−（ｕ−ヒドロペルオキシイソプ
ロピル）安息香酸、ｐ−（ブロモイソプロピル）ベンゼ
ンヒドロペルオキシド、及びｐ−（Ｕ−ヒドロキシ−α
′−ヒドロベルオギシイソブロビル）ベンゼンが挙げら
れるが、この１ｓ合、ＤｎＤＩｌが最も好ましい。有機
Ｎ−八へ化合物の例としては、！−八へベンゾ！・リア
ゾールある。
酸化体ＩのＣｕ”ポリマー複合体はアスコルビン酸塩に
よって選択的に還元されてＣｕ＋２となり、酸化体１１
は連続的且つ選択的に銅（１）をＣｕ”形態に再酸化１
−る、どちらの酸化体も単独では尿中に一般的に予測さ
れる最高濃度レベル、即ち２００ｒａｇ／ｄｉ　（又は
ｌｌａ＋Ｍ）のアスコルビン酸塩を有効番こ酸化するの
に十分な反応イ１トを提供しないけれども、酸化体の併
用により、２００ｒａｇ／ｄ１以上の濃度のアスコルビ
ン酸塩を用いた場合でさ＾、多くの検定系においてアス
コルビン酸塩妨害を有効に排除することができる。
酸化体ＩＩは、還元型Ｃｕ（Ｉ）：ポリマーをその本来
のＣｕ（ＩＩ）：ポリマーに再循環させるために用いら
れるので、酸化体ＩＩはアスコルビン酸の存在量を上回
る量で存在する必要がある。
理論的には、Ｃｕ（ＩＩ）：ポリマーは、酸化体１［が
過剰に存在する限りは、すべてのアルコルビン酸を酸化
するために、触媒量（アスコルビン酸と等モル以下）で
存在してもよい、実際、アスコルビン酸の酸化速度は酸
化体ｌ及び酸化体ＩＩの両方の濃度に比例する。酸化体
Ｉと酸化体Ｈの濃度の実際の上限は、溶解性束縛又は競
争性酸反応によって決定される。
酸化体■対酸化体ＩＩの好ましい比は、１：ｌ〜１０：
１の範囲特に約２：ｌである。
−船釣に、これらの試薬を固相に適用するには、酸化体
Ｉは水溶液で、酸化体ＩＩは非水系の別の工程で適用す
る。
本発明のアスコルビン酸塩掃去系は特殊である０本シス
テムは、検定試薬系、特に検定の酸化還元指示薬系に副
作用を及ぼさず、あるいは検定又は試料中に見出される
いかなる酵素をも阻害することなく、アスコルビン酸を
掃去できる。
本系は、また、迅速でもある。酸化速度は溶液又は固相
で十分に迅速であるので、グルコースのような目的の分
析物質に対する検定の発色反応も相対的に迅速であり、
また酸化反応に基づいてもいるにもかかわらず、アスコ
ルビン酸妨害を除去するに際しては、本系は有効である
。
水溶性ポリマーは、二つの部分から成る。第一の部分は
： （１）　Ｇａｎｔｒｅｚ”　　（ポリ［メチル−ビニル
エーテル／マレイン酸］） （ＧａｎｔｒｅｚはＧＡＦ　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ　
＊　ニューヨーク、ニューヨーク州の製品の登録商法で
ある）の加水分解型 ｃｕｓ ＨＯＯＣＣ００Ｈ （２）ポリアクリル酸　　　　（ＣＨ，−ＣＨ）０ＯＨ （３）ポリアスパラギン酸　　　　Ｏ ■ （ＣＩ−Ｃ−ＭＨｌ ＣＨＩＣＯＯＨ のような水溶性ポリマー骨格である。
第二の部分は、イミダゾール、ピリジン又は２．２′−
ビピリジンのよりなＣｕに配位するのに必要な配位子で
ある。
ポリマー−ＣｕＳ　　のＡ （１）ポリ［２−カルボキシ−１−（２−イミダゾール
−４′−イル−エチル）カルバモイル−３−メトキシ−
ブチレン／１，２−ジカルボキシ−３−メトキシブチレ
ン］　（ヒスタミン−Ｇａｎｔｒｅｚｌ アルゴン雰囲気下で、Ｇａｎｔｒｅｚ　　ＡＮ−１１９
ｆ１′（１２，４８ｇ、８０　ｍｍｏｌｅの無水物、分
子量＝１９　、　　ＯＯＱ　、　ＧＡＦ　Ｃｏｒｐｏｒ
ａｔｉｏｎ　、ニューヨーク、ニューヨーク州）を、６
５℃の油浴中で２００−の無水ＤＭＦに溶解した０次い
で、２００−の無水ＤＭＦに溶解したヒスタミン（８，
８８ｇ、８０　ｏｎｏｌｅ　、　Ａｌｄｒｉｃｈ　Ｃｈ
ｅｍｉｃａｌＣＯ，、Ｉｎｃ、、　　ミルウォーキー、
ウィスコンシン州、米国）、及びトリエチルアミン（１
１，１２−１８０ｗａｎ＋ｏｊｅ　、　Ａｌｄｒｉｃｈ
　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏｍｐａｎｙ。
Ｉｎｃ、ｌの溶液を２５分間にわたって滴下した０次い
で、反応混合物を６５℃の油浴中で２０時間攪拌し、４
００−の水を加えて、その結果中じた混合液を約５時間
撹拌した０次いでその反応混合液を水浴中で室温に冷却
し、ｐＨ（９，６）を３ＮＨＣβを用いて６．４に調整
した。この時点で。
褐色ゴム状物質が分離した。上澄を傾瀉し、ゴム状物質
を水で２回迅速に洗浄し、次いでアセトンと混合して、
室温で２０時間放置した。ゴム状物質を凝固させ、細粉
に粉砕し、ＴＨＦ及びアセトンで十分に洗浄して、その
後、真空乾燥し、１３．５ｇのベージュ色固体を得た（
収率６３％） Ｉ　Ｒ（ＫＢｒ）　Ｃｍ−’：　３４５０　：　２９０
０　；１７０２；１６５０：１５７２：１４５３：１３
８４　：　１０８７　：　６９５゜分析値：ｘ＝９０％
、ｙ＝ｔｏ％、又はヒスタミン／Ｃｏｏｔ（＝４５１５
５で算出、Ｃ１５３、５４：Ｈ，６，３７：Ｎ、１４．
６６実測値：Ｃ，５３，２５，［（１，６，４８：Ｎ、
１４．６４゜ Ｃｕ−ヒスタミン−Ｇａｎｔｒｅｚ　　”１００−の水
に溶解したヒスタミン−Ｇａｎｔｒｅｚ（４ｇ、約１５
ｇｍｏｌｅ）の溶液に、１５−の０．５Ｍ　　ＣｕＳＯ
４溶液（７、５ｍｍｏｌｅｌを加えた。直ちに青色沈澱
物が析出した。　、ｉ　ｏ分間混合した後、固体を濾過
し、１００−の水で炉液が無色になるまで（約３回）洗
浄した６次いで、固体を１００−の水に再懸濁し、凍結
乾燥して、水溶液に非常に容易に懸濁可能な青色固体３
ｇを得た。
（２）ポリ［Ｎβ−（２−イミダゾール−４′−イル−
エチル）−アスパラギン／Ｎβ−（３−カルボキシプロ
ピル）−アスパラギン］　（ヒスタミン−ポリアスパラ
ギン酸） アルゴン雰囲気下で、ヒスタミン（３，４２ｇ、３０　
、９９　ｎ＋ｍｏ１．　Ａｌｄｒｉｃｈ　Ｃｈｅｍｉｃ
ａｌ　Ｃｏａ＋ｐａｎｙＩｎｃ、　ｌ、４−アミノ酪酸
（３，１８ｇ、３０．９ｍｍｏ７ｅ・、Ａｌｄｒｉｃｈ
　Ｃｈｅ＋５ｉｃａｌ　Ｃｏｍｐａｎｙ、　Ｉｎｃ、）
及びトリエチルアミン（４，３ｄ、３０　、９　ｍａ＋
ｏｌｅｌを４０−の水及び３ＯＮｌのＤＭＦに溶解した
０次いで、３０−の無水ＤＭＦに溶解したポリコハク酸
イミド（３ｇ、　３０．９ｓ＋５ｏｊｅ　、平均分子量
；３０．０００）の温溶液を加え、その結果中じた反応
混合液を室温で２０時間攪拌した６次いで、反応混合液
を３日間、３．８リツトルの水に対して透析し、その間
、新鮮な水に１日３回取り換えた０次に、ポリマー溶液
を濃縮して、ハチミツ色のゴム状残渣を得た。これをＴ
ＨＦ中で数回すりつぶして、２．７ｇのベージュ色固体
を得た。
約１ｇの粗ヒスタミンーポリアスパラギン酸を３−の水
に溶解し、その溶液のｐＨ（７，４）を３Ｎ　　ＨＣβ
で５．４に調整した。その溶液をＢｉｏ−ゲルＰ　６　
Ｄ　Ｇ　（Ｂｉｏ−Ｒａｄ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ
、リッチモンド、カリフォルニア州、米国）カラム（２
，５ｘ６０ｃｍ）上に載せて、水で溶出した。ＴＬＣで
、指示されたとおり（ＣＩ−ＩＣ氾、７Ｍ　ｅ　ＯＨ／
　Ｎ　Ｈｓ　、　　５０　／　４０　／　４、ｖ　／　
ｖ　／Ｖ、その後工２噴ｉｔ）に、ポリマーのみを含有
する画分な合し、凍結乾燥して、０．７ｇのベージュ色
固体を得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−’：　３４００　（ｂｒ）：１６
３０　：１５２０　；　１３８０ 分析値：Ｍ、ｌ／２ｌ−１ｔ　Ｏで算出（この場合、ｘ
＝５１％又はヒスタミン／Ｃ００Ｈ＝５１／４９；Ｃ１
４７，５８；Ｈ１６，１５；Ｎ、　　１９．　８３ 実測値：Ｃ１４７，６３：Ｈ１５，９０，Ｎ。
２０、　１３゜ Ｃｕ−ヒスタミンポリアスパラギン　　Ａ２０ｎ＋１４
のＣｕＳＯ４及び４０ｍＭヒスタミン−ボリア・スバラ
ギン酸溶液を混合して、Ｃｕ−ビスタミンーボリアスパ
ラギン酸複合体を調製した。
（３）ポリ［Ｎ−（２−イミダゾール−４″イル−エチ
ル）アクリルアミド／−アクリル酸Ｊ（ヒスタミン−ポ
リアクリル酸） ＤＩ４Ｆ／ＴＥＡ／ＤＣＣ ２）ヒスタミン アルゴン雰囲気下で、ポリアクリル酸 （２，５２ｇ、３５ｍｍｏｌｅ　、平均分子量＝２、　
０００、　Ａｌｄｒｉｃｈ　　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　　Ｃ
ｏｍｐａｎｙ、　　Ｉｎｃ、）を７５−の温無水ＤＭＦ
に溶解した。その溶液を室温に冷却し、次いで１２−の
無水ＤＭＦに溶解したＮ−ヒドロキシスクシンイミド（
２，６ｇ、４　５ｇｅｓｏｌｅ　　、　　Ａｌｄｒｉｃ
ｈ　　Ｃｈｅ＋＊１ｃａｌ　　Ｃｏｍｐａｎｙ、　　Ｉ
ｎｃ、）の溶液、１２−の無水ＤＭＦに溶解した１、３
−ジシクロへキシルカルボジイミド（４，６５ｇ、４５
ｍｍｏｌｅ　、　Ａｌｄｒｉｃｈ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　
Ｃｏｍｐａｎｙ、　Ｉｎｃｌの溶液、及びトリエチルア
ミン（４，８５−％３５−ｓｏｌｅ）を加え、その結果
生じた反応混合液を室温で２２時間撹拌した。析出した
大量の尿素を清適して、ＮＯＳ活性化ポリアクリル酸の
極淡黄色溶液を得た。
アルゴン雰囲気下で、５０−の無水ＤＭＦに溶解したヒ
スタミン（２，５ｇ、２２．５ｍｍｏｌｅ　、　Ａｌｄ
ｒｉｃｈ　Ｃｈｅ＋ｍ１ｃａｌ　Ｃｏａ＋ｐａｎｙ、　
Ｉｎｃｌの溶液にＮＯ５活性化ポリアクリル酸の溶液を
１０分間にわたって滴下し、その結果生じた反応混合液
を室温で２２時間撹拌した１次いで、６０−の水を加え
、その混合液を５時間撹拌し、ｐＨを３ＮＨＣＲで中性
に調整し、その溶液を濃縮して粘性の液体を得た８等容
積のアセトン付加するとゴム状物質が析出したが、上澄
を傾瀉し、残渣を水で迅速に２回洗浄した６次いでゴム
状物質をアセトン中で２回すりつぶし、硬質固体を得、
これを細粉に粉砕して、アセトン及びＴＨＦで洗浄し、
粗ヒスタミンーポリアクリル酸の白色固体を得た。
粗ヒスタミンーポリアクリル酸を、５−の水に溶解し、
次いでそれをＢｉｏ−ゲルＰ８ＤＧ（Ｂｉｏ−Ｒａｄ　
Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）カラム（２，５Ｘ６０Ｃ１
１）上に載せ、水で溶出することにより精製した。ＴＬ
Ｃ１’、指示される（ＣＨＣＪ２．／Ｍ　ｅ　ＯＨ／　
Ｎ　Ｈｓ　、　５０　／　４０　／　４、ｖ　／　ｖ　
／Ｖ：その後Ｉ８噴霧）、とおりにポリマーのみを含有
する画分な合し、凍結乾燥して、０．５ｇの白色固体を
得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−’：　３４２６　：１６３７　；
１５６２：１５４６：１４０３ 分析値：Ｍ、１／１０　　Ｈ，Ｏで算出、コノ場合ｘ＝
３５９６．又ハヒスタミン／Ｃｏｏｌ−１＝３５／６５
．Ｃ，５３，３９；）Ｉ、６．３０・Ｎ、１３．８１゜ 実測値：Ｃ，５３，５４：Ｈ２Ｓ、４１；Ｎ、１４．２
１゜ Ｃｕ−ヒスタミンーボ１アク１ル　　Ａ２０ａ＋ＭのＣ
ｕ　Ｓ　Ｏ４及び４０ｍＭのビスタミンーポリアクリル
酸溶液を混合して、Ｃｕ−ヒスタミン−ポリアクリル酸
複合体を調製した。
（４）ポリ［２−カルボキシ−３−メトキシー１−（ピ
リド−４−イル−メチル）−カルバモイルブチレン／１
．２−ジカルボキシ−３−メトキシブチレン］　（ピリ
ジン−Ｇａｎｔｒｅｚｌアルゴン雰囲気下で、Ｇａｎｔ
ｒｅｚ　ＡＮ−１１９”（６，２４ｇ、４０　ａ＋ｍｏ
ｌｅ　、分子量＝１９．０００、ＧＡＦ　Ｃｏｐｏｒａ
ｔｉｏｎ、ニューヨーク）を４０℃でｌＯ−の無水ＤＭ
Ｆに溶解した０次いで、トリエチルアミン（５，６ｄ、
４０　ｓ＠ｏｌｅ）を加えた１次に、１００−の無水Ｄ
ＭＦに溶解した４−アミノメチルビリジン（４，３２ｇ
、４９ｍ５ｏｌｅ　、　Ａｌｄｒｉｃｈ　Ｃｈｅｍｉｃ
ａｌ　Ｃｏｏ＋ｐａｎｙ、　Ｉｎｃ、）の溶液を、１２
分間にわたり滴下し、その結果生じた反応混合液を４０
℃で２０時間撹拌した。水（１１０ｉＪ）を加え、その
混合液を３時間攪拌した。混合液のｐＨ（８，８）をａ
ＮＨＣβで４．９に調整した。大量のゴム状物質が析出
した。上澄を側温し、塊状物を水で２回迅速にすすいだ
０次いでゴム状物質をアセトンとＴＨＦの混液中ですり
つぶし、真空乾燥して、４．２６ｇの白色固体を得た。
分析値：ｘ＝７６％、又はピリジン／Ｃ００Ｈ＝　３８
／６２で算出、Ｃ１５７，２２：Ｈ２Ｓ、０５；Ｎ、８
．７Ｂ。
実測値：Ｃ１５７，５６：Ｈ２Ｓ、１４：Ｎ。
８．５５゜ Ｃｕ−ビＩジン−Ｇａｎｔｒｅｚ ２５−の水に溶解したピリジン−Ｇａｎｔｒｅｚ（Ｉｇ
、４　ａｍ＋ｏｌｅｌの溶液に、４−の０．５ＭＣｕ５
Ｏ、溶液を加えた。数分間混合後、混合液を炉遇し、水
で数回洗浄し、３０−の水に再懸濁し、凍結乾燥して、
水溶液に容易に懸濁可能な青色固体１．４ｇを得た。
実施例 ！胤旦ユ ポリマー混合物を非孔性プラスチック担体上に湿式流延
しその後水浴凝固し、次いで乾燥することによって得ら
れる微孔性ポリウレタンシートを調製することにより、
試薬マトリックスを生成した。微孔性ポリウレタンは以
下の溶液で構成された： ３、２％ ０、９％ ５、３％ ４、３％ １８、２％ ０、４％ ＫＢＨ６７２ポリウレタン Ｄｒａｌｏｎ　Ｕ Ｍｏｗｉｌｉｔｈ ＫＰＫ　Ｐｔ　１４４陽イオンポリウレタン分散液 Ｔａ１ｋｕｓｉ　ＡＴＩ ジメチルホルムアミドに溶解した ドデシルベンゼンスルホン酸塩 懸濁液を、ローラー法で、ナイフを用いてＨｏ５ｔａｐ
ｈａｎ　（ポリエチレンテレフタレート）上に流延した
。その物質を水浴に通し、５０℃で乾燥した。その結果
生じたポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）上のポリ
ウレタンシートは、したがって微孔性となる。
ｌ−メトキシ−２−プロパツールに溶解した１００園Ｍ
（ミリモル）の３．３″、５．５′テトラメチルベンジ
ジン（ＴＭＢ）及び５０ｍＭのＡｅｒｏｓｏｌ　ＯＴか
ら成る溶液を、Ｍａｙｅｒロッドを用いて、被覆剤とし
てマトリックスに適用した。５０℃で１０分間乾燥後、
マトリックスを、０．２Ｍリン酸塩（ｐＨ７，０）に溶
解した１０ｍｇ／ｌ１１１のペルオキシダーゼ、５１１
ｇ／−グルコースオキシダーゼ、及び１％トリトンｆｌ
″ｘ−ｔｏｏから成る第二溶液で処理した。マトリック
スを５０℃で１０分間乾燥した最後に、０．２Ｍリン酸
塩（ｐＨ７，０）に溶解した２０ｍＭ　　Ｃｕ５Ｏ，，
４０ｍＭヒスタミン−ＧＡＮＴＲＥＺ　、及び２０ｍＭ
クロム酸カリウムよりなる溶液をマトリックスに塗布し
、そのマトリックスを５０℃で１０分間乾燥した。試薬
処理マトリックスを両面接着剤で裏打ちし、０．５セン
チメートル幅のリボンに切断し、白色ポリスチレン裏張
りの縁に貼布し、細長く切って、個々の試薬ストリップ
を得た。
掃去剤層の有効性を調べるために、異なった量の掃去剤
を有する系の間で比較を行なった。先ず、試薬ストリッ
プを、０．２０．４０．６０．８０又はｌｏＯｍｇ／ｄ
１グルコースを含有する尿標準液中に浸漬し、６０秒後
に、４００〜７０００ＩＩ（ナノメーター）で迅速スキ
ャナーを用いてパッド反射率を測定した。６６０ｎｍ（
最大反射率変化の波長）での反射率測定値を用いて、６
６０ｎ−でのに／Ｓ対グルコース濃度（ａ＋ｇ／ｄ１）
の標準曲線を作成した０次いで、ストリップを、１００
ｍｇ／ｄｌのグルコース、及び５０．１００又は２００
ＩＩＩｇ／ｄＩのいずれかの濃度のアスコルビン酸とを
含有する尿標準液中に浸漬した。６０秒後読取り時点の
パッド反射率測定値を用いて、グルコース標準曲線から
グルコースレベルを読み取ることにより、アスコルビン
酸を含有するそれらの尿に関して観察されるグルコース
割合を決定した。
Ｋ／Ｓ比は、着色剤層の光散乱特性を説明するために意
図されているＫｕｂｅｌｋａ−Ｍｕｎｋモデルから得ら
れる。−射的に、成分着色剤のに／Ｓ比は濃度の一関数
である。
Ｋｕｂｅｌｋａ−Ｍｕｎｋ理論によれば：２　Ｒ” （式中、 Ｒ″は、非常に厚いため、それ以上厚みが増すと反射率
を変えることができない層の反射率であり； には、吸収係数であって、基礎層での吸収による基本層
光束の両分の測定値であり： Ｓは、散乱係数であって、その方向を逆転させることに
より失なわれる光束の両分である。）表■の結果は、掃
去剤系用いない場合に比して、掃去剤系が存在する場合
には、試験結果の精度が劇的に改良されることを示す、
さらに１表Ｉは、ヒスタミン−ポリアクリル酸及びヒス
タミン−ポリアスパラギン酸を含む、いくつかのヒスタ
ミン誘導性ポリマーは有効に使用可能であることを示す
。
触媒として銅（ＩＩ）−ヒスタミン−Ｇａｎｔｒｅｚを
使用する系における共酸化体としてシイツブＯビルベン
ゼンジヒドロペルオキシド（ＤＢＤＨ）を用いて実験を
実施した。試薬ストリップを下記のように調製し、尿中
グルコースに対する発色反応及びアスコルビン酸による
妨害に対する耐性に関して試験した。
出発マトリックスは、非孔性ポリカーボネート裏打によ
って担持された微孔性ポリウレタンシートから成ってい
た。
Ｍａｙｅｒロッドコーティング法を用いて、マトリック
スを試薬で処理した。
第一の適用コーティング溶液は、以下のものから成って
いた： ！：ｊｌ■良凰方 ペルオキシダーゼ グルコースオキシダーゼ ０．５Ｍリン酸塩（ｐＨ７，０） Ｔｒｉｔｏｎ　Ｘ−１００ ＦＤ＆ＣＹｅｌｌｏｗ　＃５ １ｇ１グラム） ０．５ｇ ０ｄ １ｇ ０．０１　ｇ １０〇− マトリックスを５０℃で１０分間乾燥した６次いで、マ
トリックスを同一技法を用いて以下のものから成る第二
適用溶液で処理した： ■＝１■旧支綴方 ３．３°、５．５“−テトラメグ・ルベンジジン　　２
．４ｇ＾ｅｒｏｓｏｌ　Ｏ’ｌ’　　　　　　　　　　
　　　　２．２　ｇｌ−メトキシ−２−プロパツール　
　　　９０　ｇ１０〇− マトリックスを５０℃で１０分間乾燥した。７トリツク
スを微孔質ポリウレタン面を外にして両面接着剤で裏打
ちし、白色ポリスチレン裏地の一端に接着して０．５セ
ンチメ一トル幅のリボンに切断して、細長く切り１個々
の試薬ストリップを得た。
試薬ストリップは、実施例１に記載したと同様に評価し
た。
下記の表Ｉ■の結果は、Ｄ　Ｂ　Ｉ）　Ｉｆ　＋　Ｃｕ
　（ＩＩ　）　−ヒスタミン−Ｇａｎｔｒｅｚを含むス
トリップな掃去剤系を含まないものと比較した場合、試
験結果の精度が改良されることを示す。
シクロヘキシルベンゼンヒドロペルオキシド（ＣＩＩＩ
）、及びイソプロピル安息香酸ヒドロペルオキシド（１
０１１）を含むその他のヒドロペルオキシドを用いて、
同様の実験を行なった。これらは、固相において同様に
有効であった。
川 アスコルビン酸の酸化に対する触媒としての銅（ＩＩ）
−ピリジン−ＧａｎＬｒｅｚの有効性を液体試験で測定
し、銅（ＩＩ）−ヒスタミン−〇１ｎＬｒｅｚに関して
観察した場合と比較した。
銅口鳳）−ヒスタミン−ＧａｎＬｒｅｚ又は銅（１１）
−ピリジン−Ｇａｎｌ；ｒｅｚのストック試料を、１ｙ
ｄｕ）蒸留水に５９．Ｇｏ＋ｇの凍結乾燥粉末を懸濁し
て調製した。これにより、１００ｍＭの銅（１１）及び
２００ｓ＋Ｍのヒスタミン又はピリジンを含む懸濁液を
生じた。
本実験に用いた（ｌのストック溶液は、０．５Ｍリン酸
ナトリウム緩ｌｉ液（ｐＨ７、０）　、　０．　１Ｍク
ロム酸カリウム、２　、０００ｏ＋ｇ／ａ’のグルコー
ス４Ｍ　Ｑ’！液、及び蒸留水に溶解した１０％アスコ
ルビン酸液であった。
掃去前糸によるアスコルビン酸妨害の排除に関する試験
は、１２Ｘ７５ｍｍガラス試験管内で実行した０反応混
合液の成分を表Ｉｌ＋に記載のｍ及び順序で試験管に加
えた。アスコルビン酸を加えて１０秒後に、試験混合液
中にＣ−３’ｌ’ｌＸ（１（ＭＨｅｓ　Ｉｎｃ、、　Ｅ
ｌｋｌ＋ａｔｆ、インデイアナ州、米国）の試験ストリ
ップを浸漬して、アスコルビン酸の有無を測定した。同
時に、アスコルビン酸を掃去するためのいかなる試薬も
含有しないグルコース試験ストリップを用いて、ｌ　Ｏ
Ｏｓａｇ／　ｄｌグルコースの存在を検出する能力を調
べた。したがって、１０秒間のインキュベーション期間
中にアスコルビン酸が除去された場合は、ストリップは
直ちに反応し、青く発色する。
アスコルビン酸が存在している場合は、試験ストリップ
は全く発色しないか、あるいは遅れて発色するのみであ
る。
表１ｖの結果は、Ｃｕ（ＩＩ）−ヒスタミン−ＧａｎＬ
ｒｅｚ＋クロム酸カリウム又はＣｕ（１１）−ピリジン
−ＧｏｕＬｒｅｚ＋クロ′ム酸カリウムがグルコースに
関する試験前にアスコルビン酸を除去する際に等しく有
効であることを示す、他方、Ｃｕ（ＩＩ）−配位子−Ｇ
ｏｎＬｒｅｚ触媒か又は共酸化体のいずれかを欠く場合
は、グルコース試験ストリップ上でＣ−５１’ＩＸ＠は
陽性であって、発色は認められない（かもしくは長時間
放置の場合にのみ発色する）。
叛−旦 銅ボリマー系： 緩衝液ニリン酸塩、０．４Ｍ、　ｐＨ７グルコース：　
１００ｍｇ／ａ アスコルビン酸：　ｌ　ＯＯｙａｇ／ｄｉ酸化体２：Ｋ
ｔＣｒＯｎ、２．５ｍＭ “□酸化体ｌの濃度：１２．５ｍＭ 葭止１１ 銅（Ｉり一ヒスタミンーＧａｎｔｒｅｚ銅（１■）−ピ
リジン−Ｇａｎｔｒｅｚ艮息五 十÷÷◆ ÷÷十÷ 酸化体なし　　　　　　　　　　　　　　　÷十〇前記
のＶｅｎｇｃｒｏｖ、　Ｋｒ１ｓｈ及びＫａｂａｎｏｖ
の手法に従って調製。
寒ＪＵＬ土 実施例３におけると同様の実験方法を用いて、尿中グル
コースに関する試験に先立ってアスコルビン酸妨害を排
除するための共酸化体としてのいくつかの異なるヒドロ
ペルオキシド、並びに銅（ＴＩ）−ヒスタミン−Ｇａｎ
ｔｒｅｚの有効性を実証した。エタノールに溶解した、
１００ｓｉ４レベルのシクロヘキシルベンゼンヒドロペ
ルオキシド（ＣＢＨ）、ジイソプロピルベンゼンジヒド
ロペルオキシド（ＤＢＤ）ｌ）　、イソプロピル安息香
酸ヒドロペルオキシド（ＩＢＨ）、又はバラブロモイソ
プロピルベンゼンヒドロペルオキシド（Ｂ　Ｉ　ＰＢＨ
）を含有するストック溶液を調製した１反応混合液の成
分を、添付の表Ｖに記載の量及び順序で１２Ｘ７５ｍｍ
試験管に加えた。アスコルビン酸を加えて１０秒後に、
Ｃ−５ＴＩＸ・を用いてアスコルビン酸の有無を調べ、
前記同様、グルコース試験ストリップを用いてグルコー
スを検出した。
表Ｖの結果は、銅（ＩＩ　）−ヒスタミン−Ｇａｎｔｒ
ｅｚ　＋　１０　ｍＨのＣＢＩＩ、ＤＢＤＨ又はＢ　Ｉ
　Ｐ　Ｂ　Ｈが１０秒以内に１００ｍｇ／ｄ１のアスコ
ルビン酸を除去するのに有効であることを示す。
ヒドロペルオキシドは、単独（触媒として銅（１１）−
ヒスタミン−Ｇａｎｔｒｅｚを加えない場合）では、効
力がない。
衷施■二 定 酸化体ＩＩのアスコルビン酸掃去剤としての反応性を液
体検定でスクリーニングした。その−船釣手順は、以下
のとおりである： １、酸化体を、１２Ｘ７５ｍｍ試験管中で緩衝液と混合
した。
２、グルコース及びアスコルビン酸溶液を加え、混合液
を約ｌＯ秒間混合した。
３、次いで、グルコースストリップ［それぞれ緩衝液中
に１００禦Ｍ、３００単位／−及び５００単位／ｄのＭ
ＥＳ　（４−モルフォリンエタンスルホン酸）を含む溶
液を含浸し、’ｒ　Ｍ　Ｂ　、グルコースオキシダーゼ
、及びペルオキシダーゼを含有する。　ｐｌｔ６　；紙
：引１ａｔｓａｎ　５４　］を混合液に浸漬し、発色速
度を記録した。
４、対照は、酸化体又はグルコース又はアスコルビン酸
が存在しない状態で実行した。
表−ｌ 緩衝液ニリン酸塩、０．４Ｍ％ｐＨ７ グルコース：　ｌ　００ｍｇ１ｄｌ アスコルビン酸：　１００ｍｇ／ｄ１ 酸化体Ｉ：銅（１１）−ヒスタミン−Ｇａｎｔｒｅｚ　
：１２．５ｍ１４ 酸化体ｌの溶解性：不溶性、均質 濃度 漿止体１　　　　　ｍＭ 艮に襄二 十＋ ＋＋＋＋ ＋＋ ＋＋＋＋ ÷÷÷÷ ＋＋＋＋６ ÷十奪 ＋＋＋＋６ １ｒ ＫａＣｒＯ＜ Ｔｈ　（ＮＯｌｌ　。
ＢｒＯｓ Ｃｅ（ＳＯ４１２ ｏｇ［ｏｓＬ ＭｎＯ。
ＤＢＤ）Ｉ 十十◆÷ 十十条 ａ、銅（ＩＩ）−ヒスタミン−Ｇａｎｔｒｅｚが存在し
ない状態で対照・反応を続継させた。その反応度は陰性
で、０．単独ではアスコルビン酸妨害を除去するに十分
な活性は得られないことを示す。
ｂ、混合後１０秒以内に反応度を測定した。
Ｃ，＋＋＋＋は、グルコース試験ストリップの反応度が
、アスコルビン酸を含まない対照液に浸漬した場合に観
察されるものと等しいことを意味する。
ｄ、＋＋＋は、反応度がわずかに低いことを意味する。
ｅ、＋＋は、＋＋＋より低い活性を意味する。
ｆ１反応度は室温での５分間のインキュページ日ンの後
に測定した。
夾施胴ユ 種々の濃度の酸化体Ｉ及び酸化体Ｈの例。
実施例５におけると同じ手順で行った。
緩衝液ニリン酸塩、０．４Ｍ、　ｐＨ７グルコース：１
００ｍｇ／ｄ！ アスコルビン酸：　ｌ　００ｍｇ／ｄ！酸化体ｌ二銅（
ＩＩ）−ヒスタミン−Ｇａｎｔｒｅｚ１２．５　　　　
　　　　　ＤＩＩＤｌｌ　　　　　　　　５　　　　　
　　＋＋＋＋１２．５　　　　　　　　　ＤＢＤｌｌ　
　　　　　　１０　　　　　　＋＋＋＋１２．５　　　
　　　　　　０口０■　　　　　　　　２０　　　　　
　　◆令舎舎ｌＯに５ｃｒ０４　　　　５　　　　　　
＋＋＋＋１２．５　　　　　　　　ＫｓＣｒＯ＜　　　
　　　１．５　　　　　十十＋１２、５　　　　　　　
　Ｋ＝ＣｒＯｎ　　　　　　２．５　　　　　＋＋＋＋
２０　　　　　　　　　　ＫｓＣｒ（Ｌ　　　　　　２
０　　　　　　＋÷◆◆本発明は、前記特許請求の範囲
によって定義される。前記考察は、特許請求の範囲を理
解し、その請求項により定義される本発明の多数の可能
な実施態様を理解する手助けとして示しただけである０
本発明を定義づける限定は請求の範囲に明白に記されて
おり、前記考察に示されているものは、そこにさらに限
定を提供するよう意図されてはいない。

Claims (4)

    【特許請求の範囲】
  1. （１）アスコルビン酸塩掃去剤系であって；Ｃｕ＾＋＾
    ２と錯形成して銅／配位子錯体を生成する水溶性ポリマ
    ーよりなる第一の酸化体；及び 無機酸化体、有機過酸化物又は有機Ｎ−ハロ誘導体より
    なる第二の酸化体 を包含する系。
  2. （２）第二酸化体がさらに、クロム酸塩、臭素酸塩、ヨ
    ウ素酸塩、タリウム（III）化合物、セリウム（IV）化
    合物、第二水銀化合物、マンガン（III）化合物、ジイ
    ソプロピルベンゼンジヒドロペルオキシド（ＤＢＤＨ）
    、フェニルシクロヘキサンヒドロペルオキシド、ｐ−（
    ａ−ヒドロペルオキシイソプロピル）安息香酸、ｐ−（
    ブロモイソプロピル）ベンゼンヒドロペルオキシド、ｐ
    −（ａ−ヒドロキシ−ａ′−ヒドロペルオキシイソプロ
    ピル）ベンゼン、又は１−ハロベンゾトリアゾールを包
    含する請求項１記載の系。
  3. （３）試薬系におけるアスコルビン酸塩の掃去方法であ
    って； Ｃｕ＾＋＾２と錯形成して銅／配位子複合体を生成する
    水溶性ポリマーよりなる第一酸化体を無機酸化体、有機
    過酸化物又は有機Ｎ−ハロ誘導体から成る第二酸化体と
    合し、その結果生じる混合物を試薬系と合する工程より
    なる方法。
  4. （４）第二酸化体がさらに、クロム酸塩、臭素酸塩、ヨ
    ウ素酸塩、タリウム（III）化合物、セリウム（IV）化
    合物、第二水銀化合物、マンガン（III）化合物、ジイ
    ソプロピルベンゼンジヒドロペルオキシド（ＤＢＤＨ）
    、フェニルシクロヘキサンヒドロペルオキシド、ｐ−（
    α−ヒドロペルオキシイソプロピル）安息香酸、ｐ−（
    ブロモイソプロピル）ベンゼンヒドロペルオキシド、ｐ
    −（α−ヒドロキシ−α′−ヒドロペルオキシイソプロ
    ピル）ベンゼン、又は１−ハロベンゾトリアゾールを包
    含する請求項１記載の方法。
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