JPH0335796A - 環状デプシペプチド物質およびその製造法、ならびにそれを含有する駆虫剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は、駆虫活性を有する新規化合物、およびその製
造法、ならびに駆虫剤に関する。

従来の技術 従来、微生物の生産する生理活性物質は数多く知られて
いるが９本発明による環状デプシペプチド物質であるＰ
Ｆ１０２２物質と理化学的性状が一致する化合物は知ら
れていない。また駆虫活性を有する化合物は多数知られ
ているが、微生物の生産物で駆虫活性を有する物質とし
ては、デストマイシンＡ、ハイグロマイシンＢ、アベル
メクチン等が挙げられるがその数はきわめて少ない。

発明が解決しようとする課題 一般に、寄生虫病と呼ばれる病気は動物宿主に寄生虫が
寄生することによって起こり２人間および動物の健康な
らびに農業に甚大な被害を及ぼす。

従って新規な駆虫活性物質の出現は常に求められている
。本発明者らは、駆虫作用を有する新規な化合物を提供
するとともに、その有利な製造法を確立し、該有効物質
を含有する駆虫剤を提供することによって、これを解決
しようとするものである。

課題を解決するための手段 本発明者らは、上述の期待に応えるべく、駆虫活性を有
する物質の探索を続けていｔ；ところ、カビに属する菌
株の培養物中に駆虫活性を有する物質が生産されている
ことを見出し、有効物質を単離し、その理化学性状を確
定することにより１本発明を完成した。

ＰＦ１０２２物質は下記の特性を有する。

（１）色および形状：無色結晶 （２）融点：　１０４〜１０６℃ （３）分子式”　５２Ｈ７６Ｎ４０１２（４）元素分析
： 計算値　Ｃ６５−８０，Ｈ８，０７，Ｎ５．９０　（％
）実験値　Ｃ６５，４６，Ｈ８，２５，Ｎ６．ｌＯ（％
）（５）マススペクトル（Ｅｌ−ＭＳ）　　：　ｍ／ｚ
　９４８　（Ｍ＋）（６）比旋光度：［ａ］Ｐ　　１０
２°（ｃ　Ｏ，１，メタノール） （７）紫外部吸収スペクトル：第１図に示す。

（８）赤外部吸収スペクトル：第２図に示す。

（９）１ＨＮＭＲスペクトル：第３図に示す。

（１０）　１３ＣＮＭＲスペクトル：第４図に示す。

（１１）溶解性：メタノール、酢酸エチル、アセトン、
クロロホルム、ジメチルスルホキシドに溶け。

水に溶けない。

（１２）塩基性、酸性、中性の区別：中性物質また１本
発明に係る環状デプシペプチド物質の化学構造式は、下
式（１）で示される事が分かった。

式（Ｉ）で示される環状デグシベプチド物質は公知の化
学的な合成方法によって製造することは可能であるが、
以下にその製造法の一態様として。

カビに属するＰＦ１０２２物質生産菌を培養し。

その培養物からＰＦ１０２２物質を採取する方法を記載
する。

本発明に使用する微生物ＰＦ１０２２株は１９８８午に
、茨城県下で採取した植物より新たに分離したカビの一
種で、その菌学的性状は次の通りである。

ＰＦＩ０２２株の菌学的性状 ポテト・デキストロース寒天（ＰＤＡ）　、ポテト・キ
ャロット寒天（ＰＣＡ）　、麦芽エキス寒天（ＭＥＡ）
　。

およびオートミール寒天（ＯＡ）の４種類の培地上。

２５℃でよく生育し、７日間でベトリ皿全面（〉８５曲
）が白色綿毛状菌糸でおおわれる。集落の裏面は最初白
色ないし淡黄色で、３週間径度培養すると径２〜３ｍｍ
の黒褐色斑点を生ずるが９分生子などの特徴的形態は観
察出来なかった。顕著な可溶性色素は生成しない。ｐＨ
５〜７での成育は良好である。

ツアペック・ドックス寒天（ＣｚＡ）　、三浦寒天（Ｌ
ｃＡ）　、およびコーンミール寒天（ＣＭＡ）の各培地
上、２５°Ｃでの成育は悪く、７日間で径１０”２０ｍ
ａ＋程度の白色綿毛様の集落どなる。分生子などの形戊
は認められなかった。３７℃では生育せず、　１５°０
ではＰＣＡ、　ＰＤＡ、　ＭＥＡ、　ＯＡで３５〜５０
ｍｍ程度に生育し。

その培養性状は２５℃の場合とほぼ同様であった。

素糸天上に滅苗した稲ワラ、バナナの葉、カーネーショ
ンの葉などを置いて植菌し、２５℃で１ケ月間観察しｌ
；が、この場合も分生子の形成など特徴的な形態は認め
られなかった。

従って２本苗株を無胞子不完全菌ＰＦ１０２２株と呼称
することにした。

なお１本菌株は工業技術院微生物工業技術研究所に微工
研菌寄第１０５０４号（ＦＥＲＭ　　Ｐ−１０５０４）
として寄託されていたが、現在は微工研条寄第２６７１
号（ＦＥＲＭ　　ＢＰ−２６７１）として寄託されてい
る。

ＰＦ１０２２株は他のカビに見られるように。

その性状が変化しやすい。例えば、この株に由来する突
然変異株（自然発生または誘発性）、形質接合体または
遺伝子組替え体であっても、ＰＦＩ０２２物質を生産す
るものは全て本発明に使用できる。本発明の方法では、
前記の菌を通常の微生物が利用しうる栄養物を含有する
培地で培養する。

栄養源としては、従来カビの培養に利用されている公知
のものが使用できる。

ＰＦ１０２２株の培養法 例えば、炭素源として、グルコース、シュクロース、水
あめ、デキストリン、澱粉、グリセロール、糖みつ、動
・植物油等を使用しうる。また窒素源として、大豆粕、
小麦胚芽、コーンステイープリカー、綿実粕、肉エキス
、ペプトン、酵母エキス、硫酸アンモニウム、硝酸ソー
ダ、尿素等を使用しうる。その他、必要に応じ、ナトリ
ウム。

カリクム、カルシウム、マグネシウム、コバルト。

塩素、燐酸、硫酸、およびその他のイオンを生成するこ
とができる無機塩類を添加することは有効である。また
菌の発育を助け、ＰＦ１０２２物質の生産を促進するよ
うな有機および無機物を適当に添加することができる。

培養法としては、好気的条件での培養法、特に深部培養
法が最も適している。培養に適当な温度は１５〜３０℃
であるが、多くの場合２６°Ｃ付近で培養する。ＰＦ１
０２２物質の生産は培地や培養条件により異なるが、振
盪培養、タンク培養のいずれにおいても通常２〜ｌＯ日
の間でその蓄積が最高に達する。培養中のＰＦ１０２２
物質の蓄積量が最高になった時に培養を停止し、培養液
から目的物質を単離精製する。

ＰＦ１０２２物質の精製法 本発明によってえられるＰＦ１０２２物質の培養物から
の採取に当たっては、その性状を利用した通常の分離手
段２例えば、溶剤抽出法、イオン交換樹脂法、吸着まＩ
；は分配カラムクロマト法。

ゲルろ適法、透析法、沈澱法等を単独でまたは適宜組合
わせて用いることができる。例えば、ＰＦｌ　０２２物
質は、培養曹体中からはアセトン−水またはメタノール
−水で抽出される。また、培養液中に蓄積されたＰＦ１
０２２物質は合成吸着剤であるダイヤイオンＨＰ−２０
（三菱化成社製）等に吸着される。また、水と混ざらな
い有機溶剤９例えば、ブタノール、酢酸エチル等で抽出
すればＰＦ１０２２物質は有機溶剤層に抽出される。

ＰＦ１０２２物質をさらに精製するには、シリカゲル（
フコ−ゲルＣ−２００，和光純薬工業社製等）、アルミ
ナ等の吸着剤やセファデックスＬＨ−２０（ファルマシ
ア社製）等のゲル濾過剤を用いるクロマトグラフィーを
行うとよい。また逆相高速液体クロマトグラフィーも有
効な手法である。

本発明の第３の要旨は、ＰＦ１０２２物質を有効成分と
して含有する駆虫剤を提供することにある。

ＰＦ１０２２物質を駆虫剤として適用しようとする動物
は豚、牛、馬、兎、羊、山羊、鶏、アヒル、七面鳥、二
十日ネズミ、大黒ネズミ９モルモット、サル、犬、猫、
小鳥等の家畜、家禽、実験動物、ベット等を挙げること
ができる。また。

これらの動物の寄生虫としては０例えば、牛、羊の捻転
青虫、オステルターグ胃虫１毛円虫、クーパー線虫、腸
結節虫、双ロ吸虫、ベネデイン条虫。

肺虫、肝蛭等、豚の回虫、Ｗ！虫、腸結節虫等、犬の回
虫、鉤虫、鞭虫、糸状虫等、猫の回虫、マンソン裂頭条
虫等、鶏の回虫１毛様虫、盲腸虫等がある。また、ヒト
の回虫、焼去、鈎虫（ズビニ鈎虫、セイロン鈎虫、アメ
リカ鈎虫）、東洋毛様線虫、糞線虫、′Ｍ虫などが知ら
れている。

ＰＦ１０２２物質は寄生虫感染症の治療および予防のた
めに用いることができる。治療のための投与方法は、経
口的または非経口的な方法がある。

経口的に投与する場合は、液状の製剤を胃カテーテル等
の器具を用いて強制的に投与する方法１通常の飼料また
は飲料水に混合して投与する方法。

あるいは１通常の経口投与に適した剤型１例えば錠剤、
カプセル剤、ベレット剤、巨丸剤、粉剤あるいは軟カプ
セル剤等で投与する方法がある。非経口的に投与する場
合は、ビーナツツ油、大豆油等の非水溶性処方、グリセ
ロール、ポリエチレングリコ−°ル等の水溶性処方を注
射などにより皮下。

筋肉内、静脈内、腹腔内等に投与する。また、寄生虫の
予防のための投与方法は８通常用いられている飼料に混
合して経口的に投与するのが一般的である。投与期間は
予防の場合制限が無いが８通常肉用鶏では約２ケ月、豚
では５ケ月で十分であることか多い。

ＰＦ１０２２物質の投与量は対象動物及び寄生虫の種類
、あるいは投与方法により黒なる。例えば、鶏の回虫を
駆除するＩ；めに液状製剤を胃カテーテルを用いて経口
的に投与する場合はＯ−０５ｍｇ／ｋｇ以上、好ましく
は０．２ないし３　ｍｇ／ｋｇを投与する。また、予防
のための投与量は飼料中１　ｐｐｒｎ以上１．好ましく
は５〜１０ｐｐＩ１１の濃度で連続的に投与する。

また、ＰＦ１０２２物質を液体担体に溶解または、懸濁
した場合には、動物の皮下、または筋肉内等に注射によ
り、非経口的に投与することができる。非経口投与する
場合は、ビーナツツ油、大豆油のような植物油類を用い
た非水性処方が使用され、またグリセロール、ポリエチ
レングリコールのような水溶性賦形剤を用いた水性非経
口処方も使用される。これらの処方は、一般に、ＰＦＩ
０２２物質を０．１−１０重量％含有する。非経口投与
における用量は、１日ｉたり、　０．０１ｍｇ／ｋｇ以
上。

好ましくは、　０．１”　ｌｏｍｇ／ｋｇの範囲で使用
される。

本ＰＦ１０２２物質をマウスに３０Ｏｎ＋ｇ／ｋｇを経
口投与しても平常の体重増加を示し、その他の異常も認
められず２本物質がきわめて低毒性であることを示して
いる。又１本ＰＦ１０２２物質のエイムス試験、及び哺
乳動物細胞染色体異常試験は。

共に陰性で変異原性にも問題がないことが証明されてい
る。

衷凰１ 以下に本発明の実施例を示すが、これらは単なる一例で
あって本発明を限定するものではない。

ここに例示しなかった多くの変法あるいは修飾手段を用
いうろことは勿論のことである。

実施例１ 種培地として、澱粉１．０％、グルコース１．０％。

綿実粕０．５％、小麦胚芽０．５％、大豆粕０．５％、
酵母エキス０．５％、！酸マグネシウム（７水塩）０．
１％、炭酸カルシウム０．２％、および塩化ナトリウム
０．２％の組成からなる培地を用いた。

また、生産培地として、水あめ３．０％、大豆油１．０
％、小麦胚芽０，８％、大豆粕１．０％、乾燥酵母１．
０％、炭酸カルシウム０．３％、硫酸マグネシウム（７
水塩）０．２％および塩化ナトリウム０．２％の組成か
らなる培地を用いた。

なお、殺菌前ｐＨはすべてｐＨ７，０に調節して使用し
Ｉ；。

前記の種培地２０ｍＱを分注した１００１容三角フラス
コを１２０℃で１５分間殺菌し、これに不完全曹ＰＦ１
０２２株（ＦＥＲＭ　　Ｐ−１０５０４）の斜面寒天培
養の２〜３白金耳を接種し、２６℃で７日間振Ｗ１培養
し、第１種培養とした。次いで１種培地８０ｍＱを分注
した５００ＩＩ１１２容三角フラスコを１２０’Ｏで１
５分間殺菌し、前記第１種培＊４ｔｎＱを接種し、２−
６°ｃで２日間振盪培養し、これを第２種培養とした。

予め１２０℃で３０分間殺菌した３５Ｌの生産培地を含
む５０Ｌ容ジヤー・ファーメンタ−２基に、前記の第２
種培養をフラスコ５本分接種し、２６℃で５日間通気（
２０Ｌ／分）、撹拌（初期２５０ｒｐｍ、　６５時間以
降４００ｒｐｍ）培養した。

培養終了後、濾過助剤として珪藻土を加えて濾過した。

得られた菌体を含む固型物に、６０％アセトン水（６２
Ｌ）を加え、１時間撹拌後菌体を濾別して抽出液を得た
。菌体抽出液は、減圧下でアセトンを留去して１１．７
Ｌの濃縮液を得た。この濃縮液から酢酸エチル（２３Ｌ
）でＰＦ１０２２物質を抽出し。

酢酸エチル層を濃縮すると油状物質（１９，８ｇ　）が
得られた。この油状物質をシリカゲルカラム（ワコーゲ
ル　ｃ−２００，２５０ｇ）の上部にのせ、クロロホル
ム（２Ｌ）およびクロロホルム−メタノールの混合溶媒
（１００：　１，１．５Ｌ）で展開するクロマトグラフ
ィーを行った。ＰＦ１０２２物質を含む両分を濃縮乾固
すると褐色の油状物質（４，２５ｇ）が得られた。得ら
れた粗ＰＦ１０２２物質を更に。

メタノールを展開溶媒とするセファデックスＬＨ−２０
（ＩＬ）のカラムクロマトグラフィーを行って精製する
と淡黄色の粉末（５９４ｍｇ）が得られた。

この淡黄色粉末１００＋ｎｇをアセトニトリル−水の混
合溶媒（８５：　１５）を展開溶媒とする高速液体クロ
マトグラフィー（ＹＭＣ，Ｄ−ＯＤＳ−５，流速５■ｌ
／分）により精製し、ＰＦ１０２２物質を含む両分（保
持時間４２分）の溶媒を留去すると無色粉末（６５，５
ｍｇ）が得られた。この粉末を、　０．５ｍｇ、のアセ
トンに溶解後５ｍｄのヘキサンを加え室温に一晩静置し
たところ、ＰＦ１０２２物質の無色柱状結晶（２４，９
ｍｇ）が得られた。

実施例２ 糞検査により、鶏回虫の感染が確認された鶏回虫人工感
染鶏を１群３羽に群別して使用した。ＰＦ１０２２物質
の投与量は０．２ｍｇ／ｋｇから３　ｍｇ／ｋｇまでの
５段階とし、無投与対照群を含めて、６群。

計１８羽を試験に供した。

ＰＦ１０２２物質の投与に際しては、各鶏毎の体重から
正確に計算した投与量を、カルボキシメチルセルローズ
を混合した水に懸濁させて、胃ゾンデを用いて一回経口
投与した。投与後、毎日各部毎に排出虫体数を数え、７
日後に、各部を解剖して腸管内残留虫体数を数え、排虫
率を算出した。

また、各部について投与直前の体重と７ＥＩ後の体重と
を測定し増俸率を算出した。

上記試験結果は第１表に示す通りであり、ＰＦ１０２２
物質は、　０．２＋＋＋ｇ／ｋｇの投与量で駆虫活性を
示し、投与量を増すに従い駆虫効果は上昇し、３ｍｇ／
ｋｇで排虫率はぼ１００％を示すという強い駆虫活性物
質である。さらに本物質は、排虫率１００％を示す投与
量においても、増俸率は、無投薬対照のものと同等であ
り、きわめて安全性の高い物質である。

第１表 ＦＩ ０２２物質投与による鶏回虫駆虫試験 実施例３ 糞便検査により１豚回虫（Ａｓｃａｒｉｓ　ｓｕｕｍ）
の感染が確認された豚にＰＦ１０２２物質を経口投与し
て駆虫効果を観察した実施例を示す。

ＰＦ１０２２物質は５ｍｇ／ｋｇ、　ｌｏｍｇ／ｋｇの
１回。

及び、　１．２５ｍｇ／ｋｇ、　２．５ｍｇ／ｋｇ、　
５ｍｇ／ｋｇの１日１回２日間連続投与とし１．所要量
の原末を少量の通常の飼料に添加して与えられた。投薬
後、毎日排出虫体を数え、糞便中の回虫卵ＥＰＧ　（糞
便１ｇ中の虫卵数）を調べた。そして、投薬開始から１
週間後に解剖して腸管内の残存虫体数を数えた。

結果は第２表に示す通りであった。１．２５ｍｇ／ｋｇ
の２日間投与で駆虫活性を示し、　２．５ｍｇ／ｋｇの
２日間投与、　５ｍｇ／ｋｇ、　ｌｏｍｇ／ｋｇの１回
投与では５０％前後からそれ以上の排去率を示した。そ
して、５ｍｇ／ｋｇの２日間投与では１００％の排去率
を示した。

このようにＰＦ１０２２物質は豚回虫に対して強い駆虫
効果が認められた。

第２表 ＰＦ１０２２物質の豚回虫に対する駆虫効果１．２５　
　　１８００　　１００　　　　２　　　　４３３．３ 糞便検査により、豚鞭虫（Ｔｒｉｃｈｕｒｉｓ　５ｕｉ
ｓ）の感染が確認された豚にＰＦ１０２２物質を経口投
与して駆虫効果を観察した実施例を示す。

ＰＦ１０２２物質は１ｍｇ／ｋｇ、　５ｍｇ／ｋｇ、　
１０ｍｇ／ｋｇの１回、及び、　２．５ｍｇ／ｋｇ、　
５ｍｇ／ｋｇの１１３１回２日間連続投与とし、所要量
の原末を少量の通常の飼料に添加して与えられた。投薬
後、毎日金側の糞便中の鞭虫卵のＥＰＧを調べ、また、
そのうち３例においては排去を数えた。そして、投薬開
始から１週間後に金側解剖して腸管内の残存虫体数を数
えた。

結果は第３表に示す通りであった。ｌ　ｍｇ／ｋｇ　１
回投与でわずかに駆虫活性を示し、　５　ｍｇ／ｋｇ　
１回投与では排風率８０％前後から１００％、　１０ｍ
ｇ／ｋｇ１回投与と５　ｍｇ／ｋｇ　２日間投与では残
存虫体がＯで排去率１００％、　２．５ｍｇ／ｋｇ　２
日間投与では１例が残存虫体１．他の１例は残存虫体０
であった。

このようにＰＦ１０２２物質は豚鞭虫に対して強い駆虫
効果が認められた。

第３表　ＰＦ１０２２物質の豚鞭虫に対する駆虫効果１
回 ８００ ５００ １６００ ２００ ５００ 一本 ００ ００ ９６．１ ７８．８ ４．０ ２回 １００　　　　０ ２１００　　　　０ ３０００　　　　０ １００ １　　１００ 本ニーはデータ無し 実施例５ 糞便検査により、猫回虫（Ｔｏｘｏｃａｒａ　ｃａｔｉ
）の感染が確認された猫１２頭にＰＦ１０２２物質を１
同経口投与して駆虫効果を観察した実施例を示す。

感染猫１２ｊＪを１群４頭の３群に分け、それぞれＱ、
２ｍｇ／ｋｇ投与群、　　ｌ　ｍｇ／ｋｇ投与群、　５
　ｍｇ／ｋｇ投与群とした。ＰＦ１０２２物質は所要量
の原末を少量の通常の飼料に添加して与えられた。観察
項目は投薬後７日間の排去数と７日後の解剖時点の残存
虫体数とした。

結果は第４表に示す通りであった。０．２ｍｇ／ｋｇで
も４例中３例が排風率１００％であり、　５　ｍｇ／ｋ
ｇでは金側が排風率１００％であった。

このようにＰＦ１０２２物質は猫回虫に対して強い駆虫
効果が認められた。

第 ４ 表 ＦＩ ０２２物質の猫回虫に対する駆虫効果 投薬量（ｍｇ／ｋｇ） 排去数 残虫数 排風率（％） ５　　　　　　　　　　２　　　　　０５　　　　　　
　　　　２　　　　　０５　　　　　　　　　　２　　
　　　０１５０ １　　　　　　　　　　　４　　　　　　０１　　　　
　　　　　　３　　　　　　０２８０ ！　　　　　　　　　　　　４　　　　　　１０．２　
　　　　　　　　２　　　　　　００．２　　　　　　
　　　　７　　　　　　００．２　　　　　　　　　４
　　　　　　００．２　　　　　　　　　　１　　　　
　　１実施例６ 糞便検査により、猫鉤虫（Ａｎｃｙｌｏｓｔｏｍａ　ｂ
ｕｂａｅｆｏｒｍｅ）の感染が確認された猫１２頭にＰ
Ｆ１０２２物質を１同経口投与して駆虫効果を観察した
実施例を示す。

感染猫１２頭を１群４頭の３群に分け、それぞれ０．２
ｍｇ／ｋｇ投与群、　　ｌ　ｍｇ／ｋｇ投与群、　５　
ＩＩＩｇ／ｋｇ投与群とした。ＰＦ１０２２物質は所要
量の原末を少量の通常の飼料に添加して与えられた。観
察項目は投薬後７日間の排去数と７日後の解剖時点の残
存虫体数とした。

結果は第５表に示す通りであった。０．２ｍｇ／ｋｇで
は１例で排去率１００％であった。投与量を増すとそれ
につれて排風率も増大し、　５　ｍｇ／ｋｇでは金側が
排去率ｌＯＯ％であった。

このようにＰＦ１０２２物質は猫鉤虫に対して強い駆虫
効果が認められた。

第５表　　ＰＦ１０２２物質の猫鉤虫に対する駆虫効果
投薬量（ｍｇ／ｋｇ） 排去数　　　残虫数　　　排風率（％）０ ０ ０ ８０ ３ ００ ６８ ５５　　　　　　　１ ６２．５ ００ ８７．５ ９８．２ ５９．９ ＳＯ，Ｏ ３１，４ ００ 実施例７ 第４胃に寄生するオステルターグ胃虫（Ｏｓｔｅｒｔａ
ｇｉａ　ｃｉｒｃｕｍｃｉｎｃｔａ）及び、小腸に寄生
する毛様線虫（Ｔｒｉｃｏｓｔｒｏｎｇｙｌｕｓ　ｃｏ
ｌｕｂｒｉｆｏｒｍｉｓ）を人工的に混合感染させた羊
２４頭にＰＦ１０２２物質を経口投与して駆虫効果を観
察しＩ；実施例を示す。

感染羊２４頭をｌ詳６頭の４群に分け、それぞれ１ｍｇ
／ｋｇ投与群、　５　ｍｇ／ｋｇ投与群、　１０ｍｇ／
ｋｇ投与群、及び、感染対照群とした。ＰＦ１０２２物
質は０．５％ＣＭＧに懸濁して胃カテーテルを用いて投
与された。観察項目は投薬前の糞便１ｇ中の寄生虫虫卵
数（ＥＰＧ）と投薬口径のＥＰＧ、そして、投薬７日後
に解剖した際の第４胃内及び腸管内の残存虫体数とした
。

結果は第６表に示す通りであった。各々の数値は６頭の
平均値で示した。ｌＱｍｇ／ｋｇ投与群では第４胃内お
よび腸管内残存虫体数は感染対照群に比べて半分程度で
あった。

このようにＰＦＩ０２２物質は毛様線虫に対して駆虫効
果が認められた。

第６表 ＰＦ１０２２物質の羊消化管内線虫に対する駆虫効果０
　　　　２１４８　　　３１０３　　　　５４３３０４
５０ 糞便検査により、いわゆる消化管内線虫（捻転青虫、オ
ステルターグ胃虫１毛様線虫、クーペリア等）の感染が
確認された牛３頭にＰＦ１０２２物質を経口投与して駆
虫効果を観察した実施例を示す。

ＰＦ１０２２物質は５　ｍｇ／ｋｇ　１回と１２．５ｍ
ｇ／ｋｇ１日１回２日間投与とし、水に懸濁して胃カテ
ーテルを用いて投与された。投薬前３日間と投薬後７日
間毎日糞便中の寄生虫虫卵数（Ｅ　Ｐ　Ｇ）を数え　す
こ。

結−果は第７表に示す通りであった。５　ｍｇ／ｋｇ投
与ではばらつきはあるが徐々にＥＰＧが減少する傾向を
示しＩ；。

１２．５ｍｇ／ｋｇ　２８間投与では２日目の投与の翌
日に投薬前の１／２程度のＥＰＧとなった。

二のようにＰＦ１０２２物質は消化管内線虫に対して駆
虫効果が認められた。

第７表 ＰＦ１０２２物質の牛消化管内線虫に対する駆虫効深糞
便検査により、馬回虫（Ｐａｒａｓｃａｒｉｓ　ｅｑｕ
ｏｒｕｍ）と円虫類（Ｓｔｒｏｎｇｙｌｕｓ　ｓｐｐ、
）の感染が確認された馬１頭にＰＦ１０２２物質を経口
投与して駆虫効果を観察した実施例を示す。

ＰＦ１０２２物質は水に懸濁して胃カテーテルを用いて
１日目に５ｍｇ／ｋｇ、　２日目に２．５ｍｇ／ｋｇ投
与された。回虫２円虫とも投薬開始から１週間毎口糞便
１ｇ中の寄生虫虫卵数（Ｅ　Ｐ　Ｇ）を数え。

排去数も数えた。なお１円虫は糞便１００ｇ中の排去数
を数えた。

結果は第８表に示す通りであった。ＥＰＧは投薬２日目
から減少し、その翌日には激減した。

回虫においては投薬２日目とその翌日に排風が観察され
、それ以後は排風がなかった。円虫においては投薬２日
目において糞便１００ｇ中に８２の排風が観察され、そ
れ以降はＯであった。

このようにＰＦ１０２２物質は馬回虫と円虫類に対して
強い駆虫効果が認められた。

第８表 ＰＦ１０２２物質の馬回虫および円虫類に対する駆虫効
果−：投薬せず 実施例１Ｏ 糞便検査により、鶏回虫（Ａｓｃａｒｉｄｉａ　ｇａｌ
ｌｉ）の感染が確認された鶏９羽にＰＦ　１０２２物質
を飼料添加で投与して駆虫効果を観察した実施例を示す
。

鶏を１９３羽の３群に分け、それぞれ１　ｐｐｒｎｐｐ
ｍ添加群ｐｍ添加群、　１０ｐｐｍ添加群とした。ＰＦ
Ｉ０２２物質を添加した飼料は３週間にわたって鶏に与
えられた。糞便中の虫卵は１週間に１回観察し、排風は
毎日数えた。投与終了後、鶏を解剖して残存虫体数を数
えた。

結果は第９表に示す通りであった。ｌ　ｐｐｍ添加群で
は２例でわずかに排風が認められ、５ｐｐｍ添加群では
投薬開始から２週間後には糞便中の虫卵は金側０となっ
たが残存虫体が認められた。１０ｐｐｍ添加群では２例
において排去率１００％であった。

このようにＰＦ１０２２物質は飼料添加によっても鶏回
虫に対して強い駆虫効果が認められた。

第９表　ＰＦ１０２２物質飼料添加による鶏回虫に対す
る駆虫効果太１１影ｌ 牛の第４胃から採取した捻転青虫（Ｈａｅｍｏｎｃｈｕ
ｓｃｏｎｔｏｒｔｕｓ）を試験管内で遊泳させ、そこへ
ＰＦ１０２２物質を添加して駆虫活性を観察した１例を
示す。

調整した培養液を４本の試験管に分注して３９〜４０℃
に加温しておき、牛の第４胃から採取した捻転青虫をそ
れぞれ３から５隻入れて遊泳させた。

そこへＰＦ１０２２物質の所定量を少量のジメチルスル
ホキシドに溶解したものを滴下混和し、捻転青虫の動き
を観察した。ＰＦ１０２２物質は培養液中の最終濃度で
それぞれ２ｐｐｍ、　８ｐｐｍ、　４０ｐｐｍとなるよ
うに調整した。なお、１本はジメチルスルホキシドのみ
滴下し対照とした。

結果はＰＦ１０２２物質４０ｐｐｍでは１０分、８ｐｐ
ｍでも１５分＋　２ｐｐｍでは２５分で運動が停止した
。ジメチルスルホキシドのみ滴下した対照では運動は弱
くはなるが１時間経過しても運動性が認められた。

このことからＰＦ１０２２物質は捻転青虫に対して強い
麻痺作用があることが認められた。

【図面の簡単な説明】

第１図：ＰＦ１０２２物質のメタノール中（１００μｇ
／１ｆｆ）での紫外部吸収スペクトルを示す。 第２図：ＰＦ１０２２物質の臭化カリウム錠での赤外部
吸収スペクトルを示す。 第３図：ＰＦ１０２２物質の重クロロホルム溶液中での
４００Ｍ　　水素核核磁気共鳴スペクトルを示す。 第４図：ＰＦ１０２２物質の重クロロホルム溶液中での
１００Ｍ　　炭素核核磁気共鳴スペクトルを示す。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、下記の式（ I ）で示される環状デプシペプチド物
   質 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） ２、下記の特性を有するＰＦ１０２２物質 （１）色および形状：無色結晶 （２）融点：１０４〜１０６℃ （３）分子式：Ｃ＿５＿２Ｈ＿７＿６Ｎ＿４Ｏ＿１＿２
   （４）元素分析： 計算値Ｃ６５．８０，Ｈ８．０７，Ｎ５．９０（％）実
   験値Ｃ６５．４６，Ｈ８．２５，Ｎ６．１０（％）（５
   ）マススペクトル（ＥＩ−ＭＳ）：ｍ／ｚ９４８（Ｍ＾
   ＋）（６）比旋光度：［ａ］＾２＾２＿Ｄ−１０２°（
   Ｃ０．１，メタノール） （７）紫外部吸収スペクトル：第１図に示す。 （８）赤外部吸収スペクトル：第２図に示す。 （９）＾１ＨＮＭＲスペクトル：第３図に示す。 （１０）＾１＾３ＣＮＭＲスペクトル：第４図に示す。 （１１）溶解性：メタノール、酢酸エチル、アセトン、
   クロロホルム、ジメチルスルホキシドに溶け、水に溶け
   ない。 （１２）塩基性、酸性、中性の区別：中性物質３、カビ
   に属するＰＦ１０２２物質生産菌を培養し、その培養物
   からＰＦ１０２２物質を採取することを特徴とするＰＦ
   １０２２物質の製造法。 ４、有効成分としてＰＦ１０２２物質を含有する駆虫剤
   。