JPH0344332A - 低粘度、高濃度サーファクタント懸濁液 - Google Patents
低粘度、高濃度サーファクタント懸濁液Info
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- JPH0344332A JPH0344332A JP2176092A JP17609290A JPH0344332A JP H0344332 A JPH0344332 A JP H0344332A JP 2176092 A JP2176092 A JP 2176092A JP 17609290 A JP17609290 A JP 17609290A JP H0344332 A JPH0344332 A JP H0344332A
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- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/785—Alveolar surfactant peptides; Pulmonary surfactant peptides
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- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は気道疾患の置換療法に用いる低粘度、高濃度サ
ーファクタント懸濁液及びこれの製造方法に関する。こ
のサーファクタントは単離された天然の肺サーファクタ
ントから得られたリン脂質、中性脂質及びサーファクタ
ント−会合疎水性蛋白質の界面活性凝集体である。しか
し、また、このサーファクタントは合成源から得てもよ
く、この場合合成脂質及び任意の組み換え型蛋白質から
構成される。
ーファクタント懸濁液及びこれの製造方法に関する。こ
のサーファクタントは単離された天然の肺サーファクタ
ントから得られたリン脂質、中性脂質及びサーファクタ
ント−会合疎水性蛋白質の界面活性凝集体である。しか
し、また、このサーファクタントは合成源から得てもよ
く、この場合合成脂質及び任意の組み換え型蛋白質から
構成される。
肺サーファクタントの欠乏は未熟児の呼吸窮迫症候群の
主要原因であると認識されている（ＡｖｅｒｙＭＥ＋
Ｍｅａｄ Ｊ、 ５ｕｒｆａｃｅ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅ
ｓ ｉｎ ｒｅｌａｔｉｏｎｔｏ ａｔｅｌｅｃｔａｓ
ｉｓ ａｎｄ ｈｙａｌｉｎｅ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｄ
ｔｓｅａｓｅ。
主要原因であると認識されている（ＡｖｅｒｙＭＥ＋
Ｍｅａｄ Ｊ、 ５ｕｒｆａｃｅ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅ
ｓ ｉｎ ｒｅｌａｔｉｏｎｔｏ ａｔｅｌｅｃｔａｓ
ｉｓ ａｎｄ ｈｙａｌｉｎｅ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｄ
ｔｓｅａｓｅ。
Ａｍｅｒ Ｊ Ｄｉｓ Ｃｈｉｌｄ ９７ ： ５１７
−５２３ （１９５９））。
−５２３ （１９５９））。
天然サーファクタントを用いる置換療法の価値は実験研
究及び臨床研究によって知られている（Ｖａｎ Ｇｏｌ
ｄｅ、 ＬＭＧ＋ Ｂａｔｅｎｂｕｒｇ ＪＪ、 Ｒｏ
ｂｅｒｔｓｏｎ Ｂ。
究及び臨床研究によって知られている（Ｖａｎ Ｇｏｌ
ｄｅ、 ＬＭＧ＋ Ｂａｔｅｎｂｕｒｇ ＪＪ、 Ｒｏ
ｂｅｒｔｓｏｎ Ｂ。
Ｔｈｅ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ５ｕｒｆａｃｔａｎｔ
ｓｙｓＬｅｍ＝ ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌａｓｐｅｃｔ
ｓ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ５１ｇｎ１ｆｉｃ
ａｎｃｅ、 ＰｈｙｓｉｏｌＲｅｖ ６８：３７４−
４５５ （１９８８）、Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ Ｂ、Ｌ
ａｃｈｍａｎｎ Ｂ、Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｅｖａ
ｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ５ｕｒｆａｃｔａｎｔｓ
ｆｏｒ ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔｔｈｅｒａｐｙ、
Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｌ□ｕｎｇ Ｒｅ５ｅ
ａｒｃｈ １４ ：２７０−３１０ （１９８Ｂ））
。使用するサーファクタントの活性を考慮し、あるいは
著者らの判断によって、５０〜２００■／ｋｇの個体投
与量を気管内ルートで滴下した。大人の呼吸窮迫症候群
疾患は未熟児の呼吸窮迫症候群疾患と一定の類似性を有
する。多数の科学者は、サーファクタント置換が致死率
が高いこの疾患に治療のチャンスを与えるという意見を
有している（Ｌａｃｈｍａｎｎ Ｂ。
ｓｙｓＬｅｍ＝ ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌａｓｐｅｃｔ
ｓ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ５１ｇｎ１ｆｉｃ
ａｎｃｅ、 ＰｈｙｓｉｏｌＲｅｖ ６８：３７４−
４５５ （１９８８）、Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ Ｂ、Ｌ
ａｃｈｍａｎｎ Ｂ、Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｅｖａ
ｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ５ｕｒｆａｃｔａｎｔｓ
ｆｏｒ ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔｔｈｅｒａｐｙ、
Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｌ□ｕｎｇ Ｒｅ５ｅ
ａｒｃｈ １４ ：２７０−３１０ （１９８Ｂ））
。使用するサーファクタントの活性を考慮し、あるいは
著者らの判断によって、５０〜２００■／ｋｇの個体投
与量を気管内ルートで滴下した。大人の呼吸窮迫症候群
疾患は未熟児の呼吸窮迫症候群疾患と一定の類似性を有
する。多数の科学者は、サーファクタント置換が致死率
が高いこの疾患に治療のチャンスを与えるという意見を
有している（Ｌａｃｈｍａｎｎ Ｂ。
５ｕｒｆａｃｔａｎｔ ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ ｉｎ
ａｃｕｔｅ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｆａｉｌｕｒｅ
： Ａｎｉｍａｌ ５ｔｕｄｉｅｓ ａｎｄ ｆｉｒｓ
ｔ ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓ、 ｉｎ Ｂ、 Ｌ
ａｃｈｍａｎｎ ｅｄ、： Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔｒｅ
ｐｌａｃｅｍｅｎｔ ｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ ｎｅｏｎ
ａｔａｌ ａｎｄ ａｄｕｌｔｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ
ｄｉｓｔｒｅｓｓ ｓｙｎｄｒｏｍｅ、 Ｓｐｒｉｎ
ｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、 Ｂｅｒｌｉｎ １９８８ ｐ
ｐ２１２ ２２３ ）。
ａｃｕｔｅ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｆａｉｌｕｒｅ
： Ａｎｉｍａｌ ５ｔｕｄｉｅｓ ａｎｄ ｆｉｒｓ
ｔ ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓ、 ｉｎ Ｂ、 Ｌ
ａｃｈｍａｎｎ ｅｄ、： Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔｒｅ
ｐｌａｃｅｍｅｎｔ ｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ ｎｅｏｎ
ａｔａｌ ａｎｄ ａｄｕｌｔｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ
ｄｉｓｔｒｅｓｓ ｓｙｎｄｒｏｍｅ、 Ｓｐｒｉｎ
ｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、 Ｂｅｒｌｉｎ １９８８ ｐ
ｐ２１２ ２２３ ）。
この治療方法においては、４００■／ｋｇまでの高投与
量が提唱されている（Ｌａｃｈｍａｎｎ Ｂ。
量が提唱されている（Ｌａｃｈｍａｎｎ Ｂ。
５ｕｒｆａｃｔａｎｔ ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ ｉ
ｎ ａｃｕｔｅ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｆａｉｌｕｒ
ｅ： Ａｎｉｍａｌ ５ｔｕｄｉｅｓ ａｎｄ
ｆｉｒｓｔ ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓ＋
ｉｎ Ｂ、Ｌａｃｈｎ＋ａｎｎ ｅｄ、： Ｓｕ
ｒｆａｃｔａｎｔｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ ｔｈｅｒ
ａｐｙ ｉｎ ｎｅｏｎａｔａｌ ａｎｄ ａ
ｄｕｌｔｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｄｉｓｔｒｅｓｓ
ｓｙｎｄｒｏｍｅ、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ
＋ Ｂｅｒｌｉｎ １９８８ ｐｐ ２１２−２２３
； ＳｐｒａｇｇＲＧ、Ｒｉｃｈｗａｎｎ Ｐ、
Ｇ１１ｌａｒｄ Ｎ、Ｍｅｒｒｉｔｔ ＴＡ、Ｔｈｅｆ
ｕｔｕｒｅ ｆｏｒ ５ｕｒｆａｃｔａｎｔ ｔｈ
ｅｒａｐｙ ｏｆ ｔｈｅ ａｄｕｌｔｒｅｓｐｉｒ
ａｔｏｒｙ ｄｉｓｔｒｅｓｓ ｓｙｎｄｒｏｍｅ、
ｉｎ Ｂ。
ｎ ａｃｕｔｅ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｆａｉｌｕｒ
ｅ： Ａｎｉｍａｌ ５ｔｕｄｉｅｓ ａｎｄ
ｆｉｒｓｔ ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓ＋
ｉｎ Ｂ、Ｌａｃｈｎ＋ａｎｎ ｅｄ、： Ｓｕ
ｒｆａｃｔａｎｔｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ ｔｈｅｒ
ａｐｙ ｉｎ ｎｅｏｎａｔａｌ ａｎｄ ａ
ｄｕｌｔｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｄｉｓｔｒｅｓｓ
ｓｙｎｄｒｏｍｅ、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ
＋ Ｂｅｒｌｉｎ １９８８ ｐｐ ２１２−２２３
； ＳｐｒａｇｇＲＧ、Ｒｉｃｈｗａｎｎ Ｐ、
Ｇ１１ｌａｒｄ Ｎ、Ｍｅｒｒｉｔｔ ＴＡ、Ｔｈｅｆ
ｕｔｕｒｅ ｆｏｒ ５ｕｒｆａｃｔａｎｔ ｔｈ
ｅｒａｐｙ ｏｆ ｔｈｅ ａｄｕｌｔｒｅｓｐｉｒ
ａｔｏｒｙ ｄｉｓｔｒｅｓｓ ｓｙｎｄｒｏｍｅ、
ｉｎ Ｂ。
Ｌａｃｈｍａｎｎ ｅｄ、： ５ｕｒｆａｃｔａｎｔ
ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ ｔｈｅｒａｐｙｉｎ ｎｅｏ
ｎａｔａｌ ａｎｄ ａｄｕｌｔ ｒｅｓｐｉｒａｔｏ
ｒｙ ４ｉｓｔｒｅｓｓｓｙｎｄｒｏｍｅ、Ｓｐｒｉｎ
ｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｂｅｒｌｉｎ １９８８１）
ｐ２０３−２１１） 。
ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ ｔｈｅｒａｐｙｉｎ ｎｅｏ
ｎａｔａｌ ａｎｄ ａｄｕｌｔ ｒｅｓｐｉｒａｔｏ
ｒｙ ４ｉｓｔｒｅｓｓｓｙｎｄｒｏｍｅ、Ｓｐｒｉｎ
ｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｂｅｒｌｉｎ １９８８１）
ｐ２０３−２１１） 。
これら全ての適用において、患者の肺に多量の液体を入
れることが問題となっている。エンホーニング（Ｅｎｈ
ｏｒｎｉｎｇ）は未熟児患者を２５ｍｇ／ｍｆｆ１の懸
濁液状態の１００■／ ｋｇのサーファクタントで治療
した。このことは、彼が体重１ ｋｇにつき４ｍｌの液
体を投与したことを意味する（ＥｎｈｏｒｎｉｎｇＧ、
５ｈｅｎｎａｎ Ａ＋ Ｐｏ５ｓｖａａｙｅｒ Ｆ、
Ｄｕｎｎ Ｍ、 Ｃｈｅｎ ＣＰ＋Ｍｉｌｌｉｇａｎ
Ｊ、Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ｏｆ ｎｅｏｎａｔ
ａｌｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｄｔｓｔｒｅｓｓ ｓｙ
ｎｄｒｏｍｅ ｂｙ ｔｒａｃｈｅａｌｉｎｓｔｉｌ
ｌａｔｉｏｎｏｆｓｕｒｆａｃｔａｎｔ：八ｒａｎｄｏ
ｍｉｚｅｄｃｌｉｎｉｃａｌ ｔｒｉａｌ、Ｐｅｄｔ
ａｔｒｉｃｓ ７６ ： １ ４５ １５３（
１９８５））、ロバートソン（Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ ）
は８０■／ｌｌ１１の比較的に高い濃度の′Ｍ、濁液を
２００■／ｋｇの単一投与量で投与した（Ｎｏａｃｋ
Ｇ。
れることが問題となっている。エンホーニング（Ｅｎｈ
ｏｒｎｉｎｇ）は未熟児患者を２５ｍｇ／ｍｆｆ１の懸
濁液状態の１００■／ ｋｇのサーファクタントで治療
した。このことは、彼が体重１ ｋｇにつき４ｍｌの液
体を投与したことを意味する（ＥｎｈｏｒｎｉｎｇＧ、
５ｈｅｎｎａｎ Ａ＋ Ｐｏ５ｓｖａａｙｅｒ Ｆ、
Ｄｕｎｎ Ｍ、 Ｃｈｅｎ ＣＰ＋Ｍｉｌｌｉｇａｎ
Ｊ、Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ｏｆ ｎｅｏｎａｔ
ａｌｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｄｔｓｔｒｅｓｓ ｓｙ
ｎｄｒｏｍｅ ｂｙ ｔｒａｃｈｅａｌｉｎｓｔｉｌ
ｌａｔｉｏｎｏｆｓｕｒｆａｃｔａｎｔ：八ｒａｎｄｏ
ｍｉｚｅｄｃｌｉｎｉｃａｌ ｔｒｉａｌ、Ｐｅｄｔ
ａｔｒｉｃｓ ７６ ： １ ４５ １５３（
１９８５））、ロバートソン（Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ ）
は８０■／ｌｌ１１の比較的に高い濃度の′Ｍ、濁液を
２００■／ｋｇの単一投与量で投与した（Ｎｏａｃｋ
Ｇ。
Ｂｅｒｇｒｅｎ Ｐ、 Ｃｕｒｓｔｅｄｔ Ｔ、 Ｇｒ
ｏｓｓ＋５ａｎｎ Ｇ、 Ｈｅｒｉｎ Ｐ＋Ｍｏｒｔｅ
ｎｓｓｏｎ Ｗ、 Ｎｉ１ｓｓｏｎ Ｒ，Ｒｏｂｅｒｔ
ｓｏｎ Ｂ、 ５ｅｖｅｒｅｎｅｏｎａｔａｌ ｒｅｓ
ｐｉｒａｔｏｒｙ ｄｉｓｔｒｅｓｓ ｓｙｎｄｒｏｍ
ｅｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ １ｓｏｌａｔｅ
ｄ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄｆｒａｃｔｔｏｎ ｏｆ
ｎａｔｕｒａｌ ５ｕｒｆａｃｔａｎｔ、 Ａｃｔａ
ＰａｅｄｉａｔｒＳｃａｎｄ ７６：６９７−７０５
（１９８７））、このことは２．５ ｍ１ｌ−／ｋｇ
の投与量で投与されたことを意味する。最も高い濃度の
ものは、モーレイ（Ｍｏｒｌｅｙ）によって使用され、
この場合合成サーファクタントが用いられている（Ｔｈ
ｅ ｃｅｎｔｒｅｓｔｕｄｙ ｇｒｏｕｐ、 丁ｅ
ｎ ｃｅｎｔｒｅ ｔｒｉａｌ ｏｆ ａｒｔ
ｉｆｉｃｉａｌｓｕｆａｃｔａｎｔ （ａｒｔｉｆｉ
ｃｉａｌ ｌｕｎｇ ｅｘｐａｎｄｉｎｇｃｏｍｐｏｕ
ｎｄ） ｉｎ ｖｅｒｙ ｐｒｅｍａｔｕｒｅ ｂａｂ
ｉｅｓ、 ＢｒｉｔｉｓｈＭｅｄＪ ２９４：９９１
９９６ （１９８７）） 。
ｏｓｓ＋５ａｎｎ Ｇ、 Ｈｅｒｉｎ Ｐ＋Ｍｏｒｔｅ
ｎｓｓｏｎ Ｗ、 Ｎｉ１ｓｓｏｎ Ｒ，Ｒｏｂｅｒｔ
ｓｏｎ Ｂ、 ５ｅｖｅｒｅｎｅｏｎａｔａｌ ｒｅｓ
ｐｉｒａｔｏｒｙ ｄｉｓｔｒｅｓｓ ｓｙｎｄｒｏｍ
ｅｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ １ｓｏｌａｔｅ
ｄ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄｆｒａｃｔｔｏｎ ｏｆ
ｎａｔｕｒａｌ ５ｕｒｆａｃｔａｎｔ、 Ａｃｔａ
ＰａｅｄｉａｔｒＳｃａｎｄ ７６：６９７−７０５
（１９８７））、このことは２．５ ｍ１ｌ−／ｋｇ
の投与量で投与されたことを意味する。最も高い濃度の
ものは、モーレイ（Ｍｏｒｌｅｙ）によって使用され、
この場合合成サーファクタントが用いられている（Ｔｈ
ｅ ｃｅｎｔｒｅｓｔｕｄｙ ｇｒｏｕｐ、 丁ｅ
ｎ ｃｅｎｔｒｅ ｔｒｉａｌ ｏｆ ａｒｔ
ｉｆｉｃｉａｌｓｕｆａｃｔａｎｔ （ａｒｔｉｆｉ
ｃｉａｌ ｌｕｎｇ ｅｘｐａｎｄｉｎｇｃｏｍｐｏｕ
ｎｄ） ｉｎ ｖｅｒｙ ｐｒｅｍａｔｕｒｅ ｂａｂ
ｉｅｓ、 ＢｒｉｔｉｓｈＭｅｄＪ ２９４：９９１
９９６ （１９８７）） 。
１００ｍｇ／ｋｇが１００ ｍｇ／ ｔｅｌ結晶懸濁液
の状態で与えられた。２４時間以内に４００■／ ｋｇ
までが要求された。牛の肺から単離された天然サーファ
クタントから得られた、リン脂質、中性脂質及びサーフ
ァクタント−会合疎水性蛋白質の界面活性組み合わせか
らなるサーファクタント（以下ｒＳＦ−ＲＩ ＩＪと
いう。）を用いることにより、比較的有利な状態が得ら
れた。４０ ｍｇ／ ｍ ｉｔ懸濁液として５０■／
ｋｇが与えられた。これは、患者が１．２ｍｊ２／ｋｇ
の容量を与えられたことを意味する。
の状態で与えられた。２４時間以内に４００■／ ｋｇ
までが要求された。牛の肺から単離された天然サーファ
クタントから得られた、リン脂質、中性脂質及びサーフ
ァクタント−会合疎水性蛋白質の界面活性組み合わせか
らなるサーファクタント（以下ｒＳＦ−ＲＩ ＩＪと
いう。）を用いることにより、比較的有利な状態が得ら
れた。４０ ｍｇ／ ｍ ｉｔ懸濁液として５０■／
ｋｇが与えられた。これは、患者が１．２ｍｊ２／ｋｇ
の容量を与えられたことを意味する。
もし、これらの条件を大人の治療に移行させると、４０
ｑｒ／Ｉｌ＋４！懸濁液として与えられる２００■／
ｋｇの投与量であれば、体重７０ｋｇの患者に気管内ル
ートによって３５０ａ＋ｊ！を滴下して与えなければな
らないことを意味する。この計算は、サーファクタント
をできるだけ濃縮することが望ましいことを示している
。しかし、この要望には、６０■／ｓｊ！より高い濃度
のサーファクタント懸濁液は高粘度を有するという限界
がある。高粘度であれば、サーファクタントの投与及び
運搬において問題を引き起こし、呼吸気管の抵抗を高め
てしまう、ロバートソン（Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ ）は豚
の肺から得られたサーファクタントから中性脂質を分離
することによって、８０Ｑｒ／ｍｊ？の濃度を達成した
。（Ｎｏａｃｋ Ｇ、 Ｂｅｒｇｒｅｎ Ｐ、 Ｃｕｒ
ｓｔｅｄｔ Ｔ、 ＧｒｏｓｓｍａｎｎＧ、 Ｈｅｒｉ
ｎ Ｐ＋ Ｍｏｒｔｅｎｓｓｏｎ Ｈ，Ｎｉ１ｓｓｏｎ
ＲＩＲｏｂｅｒｔｓｏｎＢ、 ５ｅｖｅｒｅ ｎｅｏ
ｎａｔａｌ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｄｉｓｔｒｅｓ
ｓｓｙｎｄｒｏｍｅ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈ
ｅ １ｓｏｌａｔｅｄ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄｆｒ
ａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｎａｔｕｒａｌ ５ｕｒｆａｃｔ
ａｎｔ、 Ａｃｔａ ＰａｅｄｉａｔｒＳｃａｎｄ ７
６＋６９７−７０５ （１９８７））、モーレイ（Ｍｏ
ｒｌｅｙ ）は１００［／ ｍｊ２（７）合成脂質の結
晶子懸濁液を使用した（ Ｂｒ１ｔｉｓｈ Ｍｅｄ Ｊ
２９４ ：９９１−９９６ （１９８７））、彼は
氷冷した懸濁化剤を用いなければならないという犠牲を
払って、この高濃度を得た。
ｑｒ／Ｉｌ＋４！懸濁液として与えられる２００■／
ｋｇの投与量であれば、体重７０ｋｇの患者に気管内ル
ートによって３５０ａ＋ｊ！を滴下して与えなければな
らないことを意味する。この計算は、サーファクタント
をできるだけ濃縮することが望ましいことを示している
。しかし、この要望には、６０■／ｓｊ！より高い濃度
のサーファクタント懸濁液は高粘度を有するという限界
がある。高粘度であれば、サーファクタントの投与及び
運搬において問題を引き起こし、呼吸気管の抵抗を高め
てしまう、ロバートソン（Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ ）は豚
の肺から得られたサーファクタントから中性脂質を分離
することによって、８０Ｑｒ／ｍｊ？の濃度を達成した
。（Ｎｏａｃｋ Ｇ、 Ｂｅｒｇｒｅｎ Ｐ、 Ｃｕｒ
ｓｔｅｄｔ Ｔ、 ＧｒｏｓｓｍａｎｎＧ、 Ｈｅｒｉ
ｎ Ｐ＋ Ｍｏｒｔｅｎｓｓｏｎ Ｈ，Ｎｉ１ｓｓｏｎ
ＲＩＲｏｂｅｒｔｓｏｎＢ、 ５ｅｖｅｒｅ ｎｅｏ
ｎａｔａｌ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｄｉｓｔｒｅｓ
ｓｓｙｎｄｒｏｍｅ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈ
ｅ １ｓｏｌａｔｅｄ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄｆｒ
ａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｎａｔｕｒａｌ ５ｕｒｆａｃｔ
ａｎｔ、 Ａｃｔａ ＰａｅｄｉａｔｒＳｃａｎｄ ７
６＋６９７−７０５ （１９８７））、モーレイ（Ｍｏ
ｒｌｅｙ ）は１００［／ ｍｊ２（７）合成脂質の結
晶子懸濁液を使用した（ Ｂｒ１ｔｉｓｈ Ｍｅｄ Ｊ
２９４ ：９９１−９９６ （１９８７））、彼は
氷冷した懸濁化剤を用いなければならないという犠牲を
払って、この高濃度を得た。
６０■／ｌｌ１１より多いサーファクタントを含ませ、
かつ、数時間周囲温度で貯蔵する場合においてさえ、下
記要件を満たすことを条件として、懸濁液の粘度が３０
ａ＋Ｐａｓより下にとどまることが驚くべきことに見
い出された。
かつ、数時間周囲温度で貯蔵する場合においてさえ、下
記要件を満たすことを条件として、懸濁液の粘度が３０
ａ＋Ｐａｓより下にとどまることが驚くべきことに見
い出された。
ａ）使用するサーファクタント脂質／蛋白質が、有機的
に抽出可能なリン脂質につき２５ ｍｍｏｌ／ｍｏｌよ
り多い、好ましくは４０ ｎ＋＋ａｏｌ ／ｍｏｌより
多い結合Ｃａ”・及び／又はＭ ｇ２＋イオンを含むこ
と、 ｂ）懸濁化剤が少なくともｌ ｍｍｏｌ ／ ｊ！ 、
好ましくは２．５〜３．５ ｍｍｏｌ ／ ｌのＣａ”
及び／又はＭ ｇ ” ”イオンを含むこと、及びＣ）
同時に、懸濁化剤が少なくとも３３ ｍｍｏｌ／ｌ、
好ましくは６０”ｌ ５０ ｍｍｏｌ／Ｊの塩化ナトリ
ウムを含むこと。
に抽出可能なリン脂質につき２５ ｍｍｏｌ／ｍｏｌよ
り多い、好ましくは４０ ｎ＋＋ａｏｌ ／ｍｏｌより
多い結合Ｃａ”・及び／又はＭ ｇ２＋イオンを含むこ
と、 ｂ）懸濁化剤が少なくともｌ ｍｍｏｌ ／ ｊ！ 、
好ましくは２．５〜３．５ ｍｍｏｌ ／ ｌのＣａ”
及び／又はＭ ｇ ” ”イオンを含むこと、及びＣ）
同時に、懸濁化剤が少なくとも３３ ｍｍｏｌ／ｌ、
好ましくは６０”ｌ ５０ ｍｍｏｌ／Ｊの塩化ナトリ
ウムを含むこと。
一般的に、水が懸濁化剤として用いられる。もし６、上
記要件のうち一つでも欠けるならば、あるいは上記要件
のうち一つでも低過ぎる濃度で存在するならば、そのよ
うにして得られた懸濁液の粘度は周囲温度で急激に増大
する。もし、全ての３つの要件が具備されれば、周囲温
度においてさえも１２時間以上安定である高濃度の低粘
度サーファクタントを、小胞凍結乾燥体からでさえ調製
することができる。このようなサーファクタント懸濁液
は、非常に高いサーファクタント含量においてさえ気道
の抵抗を危険なほど増加しないし、かつ、気道疾患の置
換療法に最も適合する。この種のサーファクタント懸濁
液は、肺に水を入れ過ぎたり、あるいは例えば粘度の増
加によって他のいずれの悪影響を及ぼすことなく、サー
ファクタントを高投与量で気管内ルートによって導入で
きる。
記要件のうち一つでも欠けるならば、あるいは上記要件
のうち一つでも低過ぎる濃度で存在するならば、そのよ
うにして得られた懸濁液の粘度は周囲温度で急激に増大
する。もし、全ての３つの要件が具備されれば、周囲温
度においてさえも１２時間以上安定である高濃度の低粘
度サーファクタントを、小胞凍結乾燥体からでさえ調製
することができる。このようなサーファクタント懸濁液
は、非常に高いサーファクタント含量においてさえ気道
の抵抗を危険なほど増加しないし、かつ、気道疾患の置
換療法に最も適合する。この種のサーファクタント懸濁
液は、肺に水を入れ過ぎたり、あるいは例えば粘度の増
加によって他のいずれの悪影響を及ぼすことなく、サー
ファクタントを高投与量で気管内ルートによって導入で
きる。
これまでに知られているサーファクタント！！！濁液が
１ ｒａｌあたり６０■のサーファクタント濃度におい
てさえ高い粘性を有するのに対して、本発明の方法を用
いれば２００■／ｒｍｌの濃度の％Ｊ、Ｓ液を調製する
ことが可能である。例えば、治療のためには、１５０■
／ｍβのサーファクタント濃度の懸濁液が特に適当であ
る。所望であれば、本発明の懸濁液を本発明による懸濁
化剤で希釈することにより、より低い粘度のサーファク
タント懸濁液を容易に得ることができる。畜牛や豚の肺
の洗浄液から有機的に抽出可能なリン脂質を単離した後
、これらリン脂質にＣａ”＋及び／又はＭｇ Ｚ＋イオ
ンを帯電させることは、例えば、水性相をクロロホルム
で抽出する際に該水性相に過剰量のＣａ”又はＭｇｚ＋
イオンを与えることによって行われる。
１ ｒａｌあたり６０■のサーファクタント濃度におい
てさえ高い粘性を有するのに対して、本発明の方法を用
いれば２００■／ｒｍｌの濃度の％Ｊ、Ｓ液を調製する
ことが可能である。例えば、治療のためには、１５０■
／ｍβのサーファクタント濃度の懸濁液が特に適当であ
る。所望であれば、本発明の懸濁液を本発明による懸濁
化剤で希釈することにより、より低い粘度のサーファク
タント懸濁液を容易に得ることができる。畜牛や豚の肺
の洗浄液から有機的に抽出可能なリン脂質を単離した後
、これらリン脂質にＣａ”＋及び／又はＭｇ Ｚ＋イオ
ンを帯電させることは、例えば、水性相をクロロホルム
で抽出する際に該水性相に過剰量のＣａ”又はＭｇｚ＋
イオンを与えることによって行われる。
調製方法に依存して、リン脂ｆｆ１ｍｏｌにつき約７０
ｍｍｏｌのＣａ”又はＭ ｇ ” ２＋というＣａ”
又はＭ ｇ ” ”イオンの上限がある。リン脂質混合
物又はリン脂質／蛋白質混合物が、バッチＢ（表１）の
リン脂質／蛋白質混合物１ｍｏｌにつき１３ｍｍｏｌの
Ｃａ”のようにあまりにも低過ぎるＣａｚ′″又はＭ
ｇ ｔ＋イオンの帯電を有するならば、引き続いてこの
バッチを有機溶液中の不十分なＣａ２＋又はＭｇｈイオ
ンで帯電させることができる。これは、例えば、メタノ
ールに溶解させたＣａＣＡ、を添加することによりなさ
れる。一般に、全ての公知の乾燥脂質にＣａ”＋及び／
又はＭｇ！＋イオンを帯電させて、低粘度の懸濁液を調
製することができるということができる。
ｍｍｏｌのＣａ”又はＭ ｇ ” ２＋というＣａ”
又はＭ ｇ ” ”イオンの上限がある。リン脂質混合
物又はリン脂質／蛋白質混合物が、バッチＢ（表１）の
リン脂質／蛋白質混合物１ｍｏｌにつき１３ｍｍｏｌの
Ｃａ”のようにあまりにも低過ぎるＣａｚ′″又はＭ
ｇ ｔ＋イオンの帯電を有するならば、引き続いてこの
バッチを有機溶液中の不十分なＣａ２＋又はＭｇｈイオ
ンで帯電させることができる。これは、例えば、メタノ
ールに溶解させたＣａＣＡ、を添加することによりなさ
れる。一般に、全ての公知の乾燥脂質にＣａ”＋及び／
又はＭｇ！＋イオンを帯電させて、低粘度の懸濁液を調
製することができるということができる。
このカルシウム及びマグネシウムは可溶性のカルシウム
及びマグネシウム塩の状態で供給される。
及びマグネシウム塩の状態で供給される。
この目的のためには塩化カルシウム又は塩化マグネシウ
ムを用いるのが好ましい。しかし、硫酸カルシウム又は
マグネシウム、硝酸カルシウム、乳酸カルシウム、ソル
ビン酸カルシウム、アスコルビン酸カルシウム、グルコ
ン酸カルシウム、ラクトグルコン酸カルシウム、クエン
酸水素マグネシウム、グルタミン酸二水素マグネシウム
又はクエン酸マグネシウム等の他の生理学的に許容な水
溶性カルシウム及び／又はマグネシウム塩をも用いるこ
とができる。
ムを用いるのが好ましい。しかし、硫酸カルシウム又は
マグネシウム、硝酸カルシウム、乳酸カルシウム、ソル
ビン酸カルシウム、アスコルビン酸カルシウム、グルコ
ン酸カルシウム、ラクトグルコン酸カルシウム、クエン
酸水素マグネシウム、グルタミン酸二水素マグネシウム
又はクエン酸マグネシウム等の他の生理学的に許容な水
溶性カルシウム及び／又はマグネシウム塩をも用いるこ
とができる。
低粘土、高濃度サーファクタント懸濁液のための出発生
成物を構成するサーファクタント物質は、Ｙｕ ｅｔ
ａｌ、 （Ｌｉｐｉｄｓ １８ ： ５２２ ５２
９（１９８３））記載の方法に従って調製される。
成物を構成するサーファクタント物質は、Ｙｕ ｅｔ
ａｌ、 （Ｌｉｐｉｄｓ １８ ： ５２２ ５２
９（１９８３））記載の方法に従って調製される。
この方法からの実質的な逸脱は、全工程にわたってカル
シウム又はマグネシウムを含む溶媒又は懸濁化剤を使用
することである。畜牛の肺を３ｍｍｏｌ／ｌのＣａ”及
び／又はＭ ｇ ２＋イオンを含む食塩溶液で洗浄する
。このサーファクタントを６〜１２ ｍｓ＋ｏｌ ／
ＩｔのＣａ”及び／又はＭ ｇ ２−イオン、好ましく
はＣａ”イオンを含む溶液から遠心分離する。１．０５
〜１．１５ｇ／＊１の密度でグルコースを用いる密度勾
配遠心法による精製を、再び３〜８１Ｉｏｌ／ｌのＣａ
”＋及び／又はＭ ｇ ” ”イオンの存在下に行う、
この精製に引き続いて、さらに、３〜１０ ｍｍｏｌ
／ｌ、好ましくは６ ｎｕｗｏｌ ／ １のＣａ”
及び／又はＭ ｇ ” ”イオンを含む水性相を用いて
、Ｂｌｉｇｈ ａｎｄ Ｄｙｅｒ （ｃｆ、 Ｃａｎ、
Ｊ、 Ｂｉｏｃｈｅｍ。
シウム又はマグネシウムを含む溶媒又は懸濁化剤を使用
することである。畜牛の肺を３ｍｍｏｌ／ｌのＣａ”及
び／又はＭ ｇ ２＋イオンを含む食塩溶液で洗浄する
。このサーファクタントを６〜１２ ｍｓ＋ｏｌ ／
ＩｔのＣａ”及び／又はＭ ｇ ２−イオン、好ましく
はＣａ”イオンを含む溶液から遠心分離する。１．０５
〜１．１５ｇ／＊１の密度でグルコースを用いる密度勾
配遠心法による精製を、再び３〜８１Ｉｏｌ／ｌのＣａ
”＋及び／又はＭ ｇ ” ”イオンの存在下に行う、
この精製に引き続いて、さらに、３〜１０ ｍｍｏｌ
／ｌ、好ましくは６ ｎｕｗｏｌ ／ １のＣａ”
及び／又はＭ ｇ ” ”イオンを含む水性相を用いて
、Ｂｌｉｇｈ ａｎｄ Ｄｙｅｒ （ｃｆ、 Ｃａｎ、
Ｊ、 Ｂｉｏｃｈｅｍ。
Ｐｈｙｓｉｏｌ、 ３工：９１１−９１７ （１９５
９））の方法に従ってクロロホルム、メタノール及び水
系への分配により、精製を行う。次いで、この有機相を
周囲温度で減圧蒸発により濃縮し、残留物を乾燥し、最
終的に粉砕する。あるいは、また、この有機相を凍結乾
燥してもよい。この場合、得られる生成物はより長期間
（冷蔵温度において少なくとも３年間）の貯蔵において
安定である。このようにして得られた微粉砕された乾燥
脂質を、所望の脂質濃度が得られるまで、本発明の量の
食塩及びＣａ”及び／又はＭｇ”塩を含む水性溶液中に
激しい振盪によって懸濁する。この方法により調製した
懸濁液もまた冷蔵温度において数日間貯蔵することがで
き、必要に応じて気管内ルートによって投与することが
できる。
９））の方法に従ってクロロホルム、メタノール及び水
系への分配により、精製を行う。次いで、この有機相を
周囲温度で減圧蒸発により濃縮し、残留物を乾燥し、最
終的に粉砕する。あるいは、また、この有機相を凍結乾
燥してもよい。この場合、得られる生成物はより長期間
（冷蔵温度において少なくとも３年間）の貯蔵において
安定である。このようにして得られた微粉砕された乾燥
脂質を、所望の脂質濃度が得られるまで、本発明の量の
食塩及びＣａ”及び／又はＭｇ”塩を含む水性溶液中に
激しい振盪によって懸濁する。この方法により調製した
懸濁液もまた冷蔵温度において数日間貯蔵することがで
き、必要に応じて気管内ルートによって投与することが
できる。
この懸濁化剤はｌｌ１ｌｌｌｌＯ１／ｌより多くの、好
ましくは２．５〜３．５ ｎｕｗｏｌ ／ ｌのＣａ”
及び／又はＭ１＋イオン、並びに３３ ｍｍｏｌ ／
ｅ−、好ましくは１５ ｍｍｏｌ／ ｌより多く、かつ
、１５０ ｍｍｏｌ／ｌ未満の食塩を含むべきである。
ましくは２．５〜３．５ ｎｕｗｏｌ ／ ｌのＣａ”
及び／又はＭ１＋イオン、並びに３３ ｍｍｏｌ ／
ｅ−、好ましくは１５ ｍｍｏｌ／ ｌより多く、かつ
、１５０ ｍｍｏｌ／ｌ未満の食塩を含むべきである。
これから行うテストのために、豚の肺の洗浄液から得ら
れた抽出サーファクタントを出発物質（以下ｒＳＦ−Ｒ
Ｉ ＩＪという）として用いた。
れた抽出サーファクタントを出発物質（以下ｒＳＦ−Ｒ
Ｉ ＩＪという）として用いた。
使用する方法は、Ｙｕ ｅｔ ａｔ、 （Ｙｕ Ｓ＋
Ｈａｒｄｉｎｇ ＰＧＲ＋Ｓｃｈｍｉｔｈ Ｎ、 Ｐｏ
ｓｓｍａｙｅｒ Ｆ、 Ｂｏｖｉｎｅ ｐｕｌｍｏｎａ
ｒｙｓｕｒｆａｃｔａｎｔ： ｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｏ
ｎ＋ｐｏｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｈｙｓｉｃａｌｐｒ
ｏｐｅｒｔｉｅｓ、 Ｌｉｐｉｄｓ １８ ； ５２
２−５２９（１９８３））の方法を本質的に改変または
改良したものである。この方法からの主たる逸脱は、全
工程にわたってカルシウム−含有溶媒を使用することで
ある。畜牛の肺の洗浄を食塩溶液を用いて行い、洗浄液
体を６ ｍ５ｏｌ ／ ｌのカルシウム含量（Ｃａ（Ｊ
、使用）に調整した。このサーファクタントを９ ｎｕ
ｗｏｌ ／ Ｉｔのカルシウムを含む溶液から遠心分離
した。グルコース密度勾配法を用いた精製を６ ｍｍｏ
ｌ ／ ｌのカルシウムの存在下行った。
Ｈａｒｄｉｎｇ ＰＧＲ＋Ｓｃｈｍｉｔｈ Ｎ、 Ｐｏ
ｓｓｍａｙｅｒ Ｆ、 Ｂｏｖｉｎｅ ｐｕｌｍｏｎａ
ｒｙｓｕｒｆａｃｔａｎｔ： ｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｏ
ｎ＋ｐｏｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｈｙｓｉｃａｌｐｒ
ｏｐｅｒｔｉｅｓ、 Ｌｉｐｉｄｓ １８ ； ５２
２−５２９（１９８３））の方法を本質的に改変または
改良したものである。この方法からの主たる逸脱は、全
工程にわたってカルシウム−含有溶媒を使用することで
ある。畜牛の肺の洗浄を食塩溶液を用いて行い、洗浄液
体を６ ｍ５ｏｌ ／ ｌのカルシウム含量（Ｃａ（Ｊ
、使用）に調整した。このサーファクタントを９ ｎｕ
ｗｏｌ ／ Ｉｔのカルシウムを含む溶液から遠心分離
した。グルコース密度勾配法を用いた精製を６ ｍｍｏ
ｌ ／ ｌのカルシウムの存在下行った。
最も重要な工程は、６ ｗｏｏｌ ／ ｌの塩化カルシ
ウムを含んだ水性相を用いて、精製をＢｌｉｇｈ ａｎ
ｄＤｙｅｒ （Ｃａｎ、 Ｊ、 Ｂｉｏｃｈｅｍ、 Ｐ
ｈｙｓｔｏｌ、 ３７ ： ９１１９１３ （１９５
９））に従い、クロロホルム／メタノール／水系への分
配により行ったことである。
ウムを含んだ水性相を用いて、精製をＢｌｉｇｈ ａｎ
ｄＤｙｅｒ （Ｃａｎ、 Ｊ、 Ｂｉｏｃｈｅｍ、 Ｐ
ｈｙｓｔｏｌ、 ３７ ： ９１１９１３ （１９５
９））に従い、クロロホルム／メタノール／水系への分
配により行ったことである。
相分離を行った後、有機相を周囲温度でロータリーエバ
ポレーターを用いて蒸発乾固し、次いで減圧乾燥した。
ポレーターを用いて蒸発乾固し、次いで減圧乾燥した。
可能であれば、カールフィッシャー法による水分含量は
３％より低くすべきである。
３％より低くすべきである。
この物質をふるいにかけて約１６０μｍの粒子サイズに
まで小さくした。
まで小さくした。
テストのために、この微粉砕された乾燥液体を、多量の
水中に種々の量の塩化カルシウム及び塩化ナトリウムを
含む水性溶液に、激しく振盪させて懸濁した。
水中に種々の量の塩化カルシウム及び塩化ナトリウムを
含む水性溶液に、激しく振盪させて懸濁した。
特定期間周囲温度に貯蔵した後のこれらの懸濁液の粘度
は細管粘度計を用いて決定した。使用さ、れた方法は、
（Ｗｅｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ、 ｉｎ Ｗｉｅｎｅｒ
Ｍｅｄｉｚｉｎｉｓｃｈｅ Ｗｏｃｈｅｎｓｃｈｒｉｆ
ｔ ５ｕｐｐ１． ３３ ： ７−１２ （１９７５）
ａｎｄ １ｌｅｌｌｅｒ ｉｎ ”Ｖｉｓｋｏｓｉｍ
ｅｔｒｉｅｉｎｈｏｍｏｇｅｎｅｒ Ｆ］Ｕｓｓｉｇｋ
ｅｉｔ’ｅｎ”、 Ｄｕｓｔｒｉ ＶｅｒｌａｇＭＵｎ
ｃｈｅｎ、 ｐｐ ２１−４１ ）に記載の細管粘度計
による測定の改変方法であった。次に簡単な説明を行う
。シリンジ内に含ませたサンプルを定められた一定速度
で計量細管を通して押し込む。不均一性もまた検出する
ことができる。剪断速度は既知であり一定である。検量
用オイルを用いて検量線を作成する。細管の前面の圧力
によって粘度を測定し、ペンレコーダーを用いて連続的
に記録する。
は細管粘度計を用いて決定した。使用さ、れた方法は、
（Ｗｅｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ、 ｉｎ Ｗｉｅｎｅｒ
Ｍｅｄｉｚｉｎｉｓｃｈｅ Ｗｏｃｈｅｎｓｃｈｒｉｆ
ｔ ５ｕｐｐ１． ３３ ： ７−１２ （１９７５）
ａｎｄ １ｌｅｌｌｅｒ ｉｎ ”Ｖｉｓｋｏｓｉｍ
ｅｔｒｉｅｉｎｈｏｍｏｇｅｎｅｒ Ｆ］Ｕｓｓｉｇｋ
ｅｉｔ’ｅｎ”、 Ｄｕｓｔｒｉ ＶｅｒｌａｇＭＵｎ
ｃｈｅｎ、 ｐｐ ２１−４１ ）に記載の細管粘度計
による測定の改変方法であった。次に簡単な説明を行う
。シリンジ内に含ませたサンプルを定められた一定速度
で計量細管を通して押し込む。不均一性もまた検出する
ことができる。剪断速度は既知であり一定である。検量
用オイルを用いて検量線を作成する。細管の前面の圧力
によって粘度を測定し、ペンレコーダーを用いて連続的
に記録する。
テスト期間の終了近くに、いくつかの懸濁液は超音波エ
ネルギーを用いて小胞懸濁液に変換された（ブランソン
（Ｂｒａｎｓｏｎ）超音波装置、マイクロチップ、２０
ワツト、２分／ｍｌ、氷水冷却）。
ネルギーを用いて小胞懸濁液に変換された（ブランソン
（Ｂｒａｎｓｏｎ）超音波装置、マイクロチップ、２０
ワツト、２分／ｍｌ、氷水冷却）。
また、凍結乾燥溶液を振盪することによって調製した懸
濁液又は小胞分散液についても調べた。
濁液又は小胞分散液についても調べた。
必要であれば超音波エネルギーを使用してサーファクタ
ントを約４０ｍｇ／ｍｊ！の濃度となるように多量の水
に分散し、又は約４０〜２５０ ｍｇ／ｒｎｌの濃度と
なるようにｔ−ブタノール等の他の適当な溶媒中に分散
した。次いで、懸濁液又は溶液を凍結乾燥した。生成し
たケーキを粉砕し、得られた粉末を再び処理した。
ントを約４０ｍｇ／ｍｊ！の濃度となるように多量の水
に分散し、又は約４０〜２５０ ｍｇ／ｒｎｌの濃度と
なるようにｔ−ブタノール等の他の適当な溶媒中に分散
した。次いで、懸濁液又は溶液を凍結乾燥した。生成し
たケーキを粉砕し、得られた粉末を再び処理した。
また、別の５Ｆ−ＲＩ １の調製方法もテストに含ま
れている。サーファクタントバッチＢ（第１表を参照）
を、塩化カルシウムを洗浄媒体に添加せずに調製した。
れている。サーファクタントバッチＢ（第１表を参照）
を、塩化カルシウムを洗浄媒体に添加せずに調製した。
適当な希釈サーファクタント懸濁液を約３０００℃でア
セチレン炎で燃焼させた後（Ｚｅｉｓｓ Ｆ Ｌ６）
、カルシウムを原子吸光分光分析法により測定した。こ
れらの温度では、蛋白質マトリックスに結合したカルシ
ウムでさえ解離し、正確に測定される。
セチレン炎で燃焼させた後（Ｚｅｉｓｓ Ｆ Ｌ６）
、カルシウムを原子吸光分光分析法により測定した。こ
れらの温度では、蛋白質マトリックスに結合したカルシ
ウムでさえ解離し、正確に測定される。
未熟なウサギ胎児に対するサーファクタント懸濁液の相
対的な有効性は対照標準との比較により決定された。投
与量−活性曲線を試験バッチ及び対照標準について３投
与量づつプロットした（第２図を参照）、−数的に知ら
れている統計的な標準（共変動の分析）を用いることに
より、本発明のＣａ ｔ ＊イオンを含む高濃度懸濁液
の効果は、同様の投与量における低濃度の小胞分散液と
はそれほど顕著には違わないことが示された。
対的な有効性は対照標準との比較により決定された。投
与量−活性曲線を試験バッチ及び対照標準について３投
与量づつプロットした（第２図を参照）、−数的に知ら
れている統計的な標準（共変動の分析）を用いることに
より、本発明のＣａ ｔ ＊イオンを含む高濃度懸濁液
の効果は、同様の投与量における低濃度の小胞分散液と
はそれほど顕著には違わないことが示された。
耀玉反込道亀
５Ｆ−Ｒ１１の代表的なバッチのカルシウム含量を表１
に示す。
に示す。
この結果は、記述された製造方法に対応するすべてのパ
ンチが、脂質抽出ホスフェートにつき４０ ｍｍｏｌ、
／ｓｏｌより多い量の結合カルシウムを含むことを示し
ている。一方、カルシウムを添加しないで調製したバッ
チ（Ｂ）は１３ ｍ１ｌｏｌ／ｍｏｌだけの結合カルシ
ウムを含む。これは、結果として、抽出された肺のサー
ファクタント中の１６ｍｍｏ１１０＋ｏｌを超えないカ
ルシウム含量値の範囲内である＊ （Ｗｅｂｅｒ Ｍ
Ｊ＋ Ｐｏｓｓｍａｙｅｒ Ｆ、 Ｃａｌｃｉｕｍｉｎ
ｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｉｎ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ５
ｕｒｆａｃｔａｎｔ、 ＢｉｏｃｈｉｍＢｉｏｐｈｙｓ
Ａｃｔａ ７０６ ： ８３−９１ （１９８４
） ）後に示されるように、これらの結合カルシウムの
高含量は５Ｆ−Ｒ１１の性質にとって非常に重要である
。
ンチが、脂質抽出ホスフェートにつき４０ ｍｍｏｌ、
／ｓｏｌより多い量の結合カルシウムを含むことを示し
ている。一方、カルシウムを添加しないで調製したバッ
チ（Ｂ）は１３ ｍ１ｌｏｌ／ｍｏｌだけの結合カルシ
ウムを含む。これは、結果として、抽出された肺のサー
ファクタント中の１６ｍｍｏ１１０＋ｏｌを超えないカ
ルシウム含量値の範囲内である＊ （Ｗｅｂｅｒ Ｍ
Ｊ＋ Ｐｏｓｓｍａｙｅｒ Ｆ、 Ｃａｌｃｉｕｍｉｎ
ｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｉｎ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ５
ｕｒｆａｃｔａｎｔ、 ＢｉｏｃｈｉｍＢｉｏｐｈｙｓ
Ａｃｔａ ７０６ ： ８３−９１ （１９８４
） ）後に示されるように、これらの結合カルシウムの
高含量は５Ｆ−Ｒ１１の性質にとって非常に重要である
。
また、表■及び第１図は新たに調製されたサーファクタ
ント懸濁液の粘度に関する経時テストの結果をも含む、
カルシウムに乏しい、即ち、従来のサーファクタント（
Ｂ）を７５ ｍａｍｏｌ ／ １の食塩及び３ ｍｍｏ
ｌ ／ ｌの塩化カルシウムの溶液に懸濁したとき、粘
度は周囲温度で迅速に増加し、わずか３０分後には１５
０ ｍＰａ５を超えていた。このことは、このサーファ
クタント懸濁液がクリーム状の稠度を有していたことを
意味する。この懸濁液は気管内で臨床的に用いることが
できない。
ント懸濁液の粘度に関する経時テストの結果をも含む、
カルシウムに乏しい、即ち、従来のサーファクタント（
Ｂ）を７５ ｍａｍｏｌ ／ １の食塩及び３ ｍｍｏ
ｌ ／ ｌの塩化カルシウムの溶液に懸濁したとき、粘
度は周囲温度で迅速に増加し、わずか３０分後には１５
０ ｍＰａ５を超えていた。このことは、このサーファ
クタント懸濁液がクリーム状の稠度を有していたことを
意味する。この懸濁液は気管内で臨床的に用いることが
できない。
また、高含量の結合カルシウムを含むサーファクタント
（Ａ、Ａ’及びＣ）を３ ｍｍｏｌ ／ １の塩化カル
シウムを含む溶液に懸濁させたときも、粘度は非常に迅
速に増加した（表１のＡＩを参照）。
（Ａ、Ａ’及びＣ）を３ ｍｍｏｌ ／ １の塩化カル
シウムを含む溶液に懸濁させたときも、粘度は非常に迅
速に増加した（表１のＡＩを参照）。
７５ ｍｍｏｌ ／ ｌの食塩溶液に懸濁した場合にお
いてさえ、周囲温度に９０分間貯蔵後粘度は約１５０ｍ
Ｐａ５に達した（表１のＡ２及びＣ１を参照）。
いてさえ、周囲温度に９０分間貯蔵後粘度は約１５０ｍ
Ｐａ５に達した（表１のＡ２及びＣ１を参照）。
７５ ｍｍｏｌ／ ｌの食塩及び１ｍｍｏ１７１の塩化
カルシウムの溶液の懸濁液の粘度は、ゆるやかで少なく
増加した（表１のＡ３を参照）。
カルシウムの溶液の懸濁液の粘度は、ゆるやかで少なく
増加した（表１のＡ３を参照）。
カルシウムに冨むサーファクタントを７５ ｍｍｏｌ／
ｌの食塩及び３ ｍｍｏｌ ／ ｌの塩化カルシウムの
溶液に懸濁させることにより、非常に満足すべき結果が
得られた。この場合、長期の貯蔵後においてさえ、粘度
は２５ ｍＰａ５を超えなかった（表１のＡ’、Ａ’及
びＣ！を参照）。カルシウムに冨むサーファクタント凍
結乾燥体を７５ ｍｍｏｌ ／ １の食塩及び３ ｍｍ
ｏｌ ／ｌの塩化カルシウムの溶液に懸濁させることに
よって、類似の結果が得られている（バンチＣ）。ここ
で再び、周囲温度で１６時間という長期の貯蔵後におい
てさえ、粘度は２５ ｓ＋Ｐａｓを超えなかった。ただ
、超音波エネルギーを適用した場合にのみ、粘度は２２
０ｖａＰａｓにまで増加した。
ｌの食塩及び３ ｍｍｏｌ ／ ｌの塩化カルシウムの
溶液に懸濁させることにより、非常に満足すべき結果が
得られた。この場合、長期の貯蔵後においてさえ、粘度
は２５ ｍＰａ５を超えなかった（表１のＡ’、Ａ’及
びＣ！を参照）。カルシウムに冨むサーファクタント凍
結乾燥体を７５ ｍｍｏｌ ／ １の食塩及び３ ｍｍ
ｏｌ ／ｌの塩化カルシウムの溶液に懸濁させることに
よって、類似の結果が得られている（バンチＣ）。ここ
で再び、周囲温度で１６時間という長期の貯蔵後におい
てさえ、粘度は２５ ｓ＋Ｐａｓを超えなかった。ただ
、超音波エネルギーを適用した場合にのみ、粘度は２２
０ｖａＰａｓにまで増加した。
１２ ｍｍｏｌ ／ ｌという非生理的に高いＣａ含量
及び７５ ｎｕ＋＋ｏｌ ／ ｌのＮａＣＩｔを有する
溶液のＣａに乏しい脂質（Ｂ）の懸濁液の粘度はよりゆ
るやかで少なく増加した。しかし、１２０分後には５
Ｑ ｍＰａ５の値が得られた。Ａ、Ａ’又はＣを３ｗｌ
１ｏｌ／ＪｔのＣａ含有溶液に懸濁させたと仮定した場
合、得られる最終濃度（％Ｊ、濁化剤及び脂質中のＣａ
”＋含量の総計）が同じ値となるように、１２ｍ５＋ｏ
ｌ／ｌの濃度を計算した。懸濁化剤中のＣａ含量を高く
するという変化はその結果により不利に作用し、企図さ
れる生体内での用途に使用することはできない、という
のは、非生理的に高いＣａ濃度を懸濁化剤に用いると゛
、気管支収縮を誘発するおそれがあるからである。
及び７５ ｎｕ＋＋ｏｌ ／ ｌのＮａＣＩｔを有する
溶液のＣａに乏しい脂質（Ｂ）の懸濁液の粘度はよりゆ
るやかで少なく増加した。しかし、１２０分後には５
Ｑ ｍＰａ５の値が得られた。Ａ、Ａ’又はＣを３ｗｌ
１ｏｌ／ＪｔのＣａ含有溶液に懸濁させたと仮定した場
合、得られる最終濃度（％Ｊ、濁化剤及び脂質中のＣａ
”＋含量の総計）が同じ値となるように、１２ｍ５＋ｏ
ｌ／ｌの濃度を計算した。懸濁化剤中のＣａ含量を高く
するという変化はその結果により不利に作用し、企図さ
れる生体内での用途に使用することはできない、という
のは、非生理的に高いＣａ濃度を懸濁化剤に用いると゛
、気管支収縮を誘発するおそれがあるからである。
この結果は、驚くべきことに、高濃度であるにもかかわ
らず低粘度のサーファクタント懸濁液を得るためには、
３つの要因が必須であることを示している。使用するサ
ーファクタント脂質／蛋白質配合物が有機的に抽出した
リン脂質につき高含量の、好ましくは２５ ｍｍｏｌ
／ ｌより多い結合カルシウムを有さなければならない
。懸濁化剤はその中に溶解したＮａＣｌ及びＣａＣｌ
、の両方を、好ましくはそれぞれ７５ ｍｍｏｌ／ １
及び３ ｍｍｏｌ／ （１の濃度で含まなければならな
い。表１のテストは、３つの要因のうち一つでも欠けれ
ば、周囲温度における懸濁化剤の粘度は、短時間のうち
に急激に増加することを示す。しかし、すべての３つの
要因が維持された場合、周囲温度においてさえ１２時間
以上の間安定である高濃度でかつ低粘度のサーファクタ
ントを、小胞凍結乾燥体からでさえ調製することができ
る。この種類のサーファクタント懸濁液は治療のために
適当である。また、第１図は添加塩を含む場合及び含ま
ない場合、並びにサーファクタントに結合した及び懸濁
化剤に溶解したＣａ ２ ＋ 濃度を変えた場合の、１
５０■ｌｔｅ＆のサーファクタントを有する懸濁液の粘
度曲線を示す。
らず低粘度のサーファクタント懸濁液を得るためには、
３つの要因が必須であることを示している。使用するサ
ーファクタント脂質／蛋白質配合物が有機的に抽出した
リン脂質につき高含量の、好ましくは２５ ｍｍｏｌ
／ ｌより多い結合カルシウムを有さなければならない
。懸濁化剤はその中に溶解したＮａＣｌ及びＣａＣｌ
、の両方を、好ましくはそれぞれ７５ ｍｍｏｌ／ １
及び３ ｍｍｏｌ／ （１の濃度で含まなければならな
い。表１のテストは、３つの要因のうち一つでも欠けれ
ば、周囲温度における懸濁化剤の粘度は、短時間のうち
に急激に増加することを示す。しかし、すべての３つの
要因が維持された場合、周囲温度においてさえ１２時間
以上の間安定である高濃度でかつ低粘度のサーファクタ
ントを、小胞凍結乾燥体からでさえ調製することができ
る。この種類のサーファクタント懸濁液は治療のために
適当である。また、第１図は添加塩を含む場合及び含ま
ない場合、並びにサーファクタントに結合した及び懸濁
化剤に溶解したＣａ ２ ＋ 濃度を変えた場合の、１
５０■ｌｔｅ＆のサーファクタントを有する懸濁液の粘
度曲線を示す。
呼吸生理機能に関するサーファクタントの有効性を未熟
なウサギ胎児を用いて調べることができる。（Ｒｏｂｅ
ｒｔｓｏｎ Ｂ、 Ｌａｃｈｍａｎｎ Ｂ、＋ Ｅｘｐ
ｅｒｉｍｅｎｔａｌｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ５ｕ
ｒｆａｃｔａｎｔｓ ｆｏｒ ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ
ｔｈｅｒａｐｙ、 Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｌｕｎ
ｇ Ｒｅ５ｅａｒｃｈ上土、２７０−３１０ （１９
８８））、これらの未熟な肺を有する動物には、サーフ
ァクタントを用いる置換療法後、呼吸させて酸素を送り
込んだ。同腹子からの動物の２つのバッチを直接比較す
ることによって、相対的効力、即ち、同じ効果を得るた
めの量を定めた。この動物実験モデルにおいて、懸濁化
剤に約３開ｏ１／ｌのシ農度のカルシウムを添加するこ
とは有効性の程度に全く影響を及ぼさないことが見い出
された（第２図）。相対的効力は変化しなかった。
なウサギ胎児を用いて調べることができる。（Ｒｏｂｅ
ｒｔｓｏｎ Ｂ、 Ｌａｃｈｍａｎｎ Ｂ、＋ Ｅｘｐ
ｅｒｉｍｅｎｔａｌｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ５ｕ
ｒｆａｃｔａｎｔｓ ｆｏｒ ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ
ｔｈｅｒａｐｙ、 Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｌｕｎ
ｇ Ｒｅ５ｅａｒｃｈ上土、２７０−３１０ （１９
８８））、これらの未熟な肺を有する動物には、サーフ
ァクタントを用いる置換療法後、呼吸させて酸素を送り
込んだ。同腹子からの動物の２つのバッチを直接比較す
ることによって、相対的効力、即ち、同じ効果を得るた
めの量を定めた。この動物実験モデルにおいて、懸濁化
剤に約３開ｏ１／ｌのシ農度のカルシウムを添加するこ
とは有効性の程度に全く影響を及ぼさないことが見い出
された（第２図）。相対的効力は変化しなかった。
第１図において、各々の曲線は粘度（ｍＰａ５ ）の経
時（分）変化を示す。各々の曲線は以下に示す一連のテ
ストに関係づけられる。
時（分）変化を示す。各々の曲線は以下に示す一連のテ
ストに関係づけられる。
→ト 高濃度の結合Ｃａ２＋、懸濁媒体は３１１ｅｏ
１のＣａ”＋を含むがＮａＣ１を含まない。
１のＣａ”＋を含むがＮａＣ１を含まない。
一ト 高濃度の結合Ｃａ” 、懸濁媒体は７５ｍｍｏ
１のＮａＣｌを含むがＣａ ｔ ＊を含まない。
１のＮａＣｌを含むがＣａ ｔ ＊を含まない。
Ｉト 高濃度の結合Ｃａ Ｚ ＋、懸濁媒体は１ｍｍｏ
ｌのＣａ”及び７５ ｍｍｏｌのＮａＣ１２を含む。
ｌのＣａ”及び７５ ｍｍｏｌのＮａＣ１２を含む。
一◇−高濃度の結合Ｃａ”°、懸濁媒体は３ｍ＋＊ｏ
１のＣａ”及び７５ ｍｍｏｌのＮａＣ１を含む。
１のＣａ”及び７５ ｍｍｏｌのＮａＣ１を含む。
−い 低濃度の結合Ｃａ” 、懸濁媒体は３ｍｍｏｌの
Ｃａ”＋及び７５ ｍ＋ａｏｌのＮａＣ１を含む。
Ｃａ”＋及び７５ ｍ＋ａｏｌのＮａＣ１を含む。
十 低濃度の結合Ｃａ”°、懸濁媒体は１２ｎｖ＋ｏｌ
のＣａ２＋及び７５ ｍｍｏｌのＮａＣ１を含む。
のＣａ２＋及び７５ ｍｍｏｌのＮａＣ１を含む。
第２図においては、懸濁媒体に３ 間０１ ／ ｌの濃
度範囲のカルシウムを添加することは、未熟なウサギ胎
児についての有効性の程度に影響を及ぼさないことを示
している。連続線は塩化カルシウムがない場合を示すの
に対し、点線は３ ｍｍｏｌ ／ｌのＣａ”イオン（Ｃ
ａ（Ｊｔの状！４Ｍ）が存在する場合を示す。測定され
た効力は、投与量対数値を変化させた場合の３ ＫＰａ
呼吸圧力で得られた一回の呼吸量として示されている。
度範囲のカルシウムを添加することは、未熟なウサギ胎
児についての有効性の程度に影響を及ぼさないことを示
している。連続線は塩化カルシウムがない場合を示すの
に対し、点線は３ ｍｍｏｌ ／ｌのＣａ”イオン（Ｃ
ａ（Ｊｔの状！４Ｍ）が存在する場合を示す。測定され
た効力は、投与量対数値を変化させた場合の３ ＫＰａ
呼吸圧力で得られた一回の呼吸量として示されている。
以下の実施例は、本発明のいくつかの懸濁液の調製を述
べている。
べている。
失崖斑上
畜牛の肺から有機溶媒で抽出して得られたサーファクタ
ントを用いた。このサーファクタントは約８８％のリン
脂質、４％のコレステロール、１％のサーファクタント
−会合疎水性蛋白質、０．６％の遊離脂肪酸、トリグリ
セリド及び結合カルシウムから構成されていた。このリ
ン脂質の平均相対分子質量は約７６０Ｄであった。この
物質は水に不溶であるがクロロホルム等の非極性溶媒に
容易に溶解する黄色の非晶粉末であった。これは振盪に
よりあるいは超音波エネルギーを用いて、水中に懸濁さ
せることができる。５重量％以上の濃度の懸濁液は視覚
的に粘稠である。調製、単離及び仕上げは追加的にＣａ
１ ＋イオンを導入させて、Ｌｉｐｉｄｓ １８：５
２２−５２９ （１９８３）に記載の方法に従って行
った０次いで、必要に応じて、例えばメタノールに溶解
した計算量の塩化カルシウムをクロロホルム等の有機溶
媒に溶解したサーファクタントに添加することにより、
所望のカルシウム含量に修正することができる。
ントを用いた。このサーファクタントは約８８％のリン
脂質、４％のコレステロール、１％のサーファクタント
−会合疎水性蛋白質、０．６％の遊離脂肪酸、トリグリ
セリド及び結合カルシウムから構成されていた。このリ
ン脂質の平均相対分子質量は約７６０Ｄであった。この
物質は水に不溶であるがクロロホルム等の非極性溶媒に
容易に溶解する黄色の非晶粉末であった。これは振盪に
よりあるいは超音波エネルギーを用いて、水中に懸濁さ
せることができる。５重量％以上の濃度の懸濁液は視覚
的に粘稠である。調製、単離及び仕上げは追加的にＣａ
１ ＋イオンを導入させて、Ｌｉｐｉｄｓ １８：５
２２−５２９ （１９８３）に記載の方法に従って行
った０次いで、必要に応じて、例えばメタノールに溶解
した計算量の塩化カルシウムをクロロホルム等の有機溶
媒に溶解したサーファクタントに添加することにより、
所望のカルシウム含量に修正することができる。
１．５ｇの前述の微粉砕されふるい分けされたサーファ
クタント、又はｔ−ブタノールもしくはシクロヘキサン
に溶解したサーファクタントを凍結乾燥することにより
得られる物質を、８．５ｍＪの懸濁化剤、好ましくは７
５ ｍｎ＋ｏｌ ／ ｌの食塩及び３ ｍａ＋ｏｌ ／
ｌの塩化カルシウムを含む食塩溶液に、好ましくは注
射用バイアル中で混合した。この懸濁液をサイズ１の注
射用カニユーレ（２０Ｇ）を備えた注射用シリンジに引
き揚げ、次いでサイズ１８のカニユーレ（２６Ｇ）を通
してバイアルに再び注射した。薄いカニユーレを通して
の懸濁液のバイアルへの出し入れは、懸濁液が塊を有し
ないことを確保するための単なる安全対策に過ぎない。
クタント、又はｔ−ブタノールもしくはシクロヘキサン
に溶解したサーファクタントを凍結乾燥することにより
得られる物質を、８．５ｍＪの懸濁化剤、好ましくは７
５ ｍｎ＋ｏｌ ／ ｌの食塩及び３ ｍａ＋ｏｌ ／
ｌの塩化カルシウムを含む食塩溶液に、好ましくは注
射用バイアル中で混合した。この懸濁液をサイズ１の注
射用カニユーレ（２０Ｇ）を備えた注射用シリンジに引
き揚げ、次いでサイズ１８のカニユーレ（２６Ｇ）を通
してバイアルに再び注射した。薄いカニユーレを通して
の懸濁液のバイアルへの出し入れは、懸濁液が塊を有し
ないことを確保するための単なる安全対策に過ぎない。
犬ｍ
２．５ｇの微粉砕され、ふるい分けされたサーファクタ
ントを１５０ ｍｍｏｌ ／ｌの食塩及び３．５ｇａｏ
ｌ／ｌのの塩化カルシウムを含む７．５ｍ／の懸濁化剤
（食塩溶液）と混ぜた。その後の工程は実施例１と同様
に行った。
ントを１５０ ｍｍｏｌ ／ｌの食塩及び３．５ｇａｏ
ｌ／ｌのの塩化カルシウムを含む７．５ｍ／の懸濁化剤
（食塩溶液）と混ぜた。その後の工程は実施例１と同様
に行った。
第１図はサーファクタント懸濁液の粘度の経時変化を表
わす。 第２図は懸濁媒体にカルシウムを添加した場合としない
場合のウサギ胎児についての効力の比較を表わす。 第１図 時間（分）
わす。 第２図は懸濁媒体にカルシウムを添加した場合としない
場合のウサギ胎児についての効力の比較を表わす。 第１図 時間（分）
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 （１）ａ）使用するサーファクタント脂質／蛋白質が、
有機的に抽出可能なリン脂質１ｍｏｌにつき２５ｍｍｏ
ｌより多い該サーファクタント脂質／蛋白質に結合した
カルシウム及び／又はマグネシウムイオンを含み、 ｂ）懸濁化剤が少なくとも１ｍｍｏｌ／ｌのカルシウム
及び／又はマグネシウムイオンを含み、及び ｃ）同時に該懸濁化剤が少なくとも３３ｍｍｏｌ／ｌの
食塩を含む ことを特徴とする気道疾患の置換療法のための低粘度、
高濃度サーファクタント懸濁液。（２）使用するサーフ
ァクタント脂質／蛋白質が有機的に抽出可能なリン脂質
１ｍｏｌにつき４０〜７０ｍｍｏｌの結合カルシウム及
び／又はマグネシウムイオンを含み、かつ、懸濁化剤が
２．５〜３．５ｍｍｏｌ／ｌのカルシウム及び／又はマ
グネシウムイオン及び６０〜１５０ｍｍｏｌ／ｌの塩化
ナトリウムを含むことを特徴とする請求項（１）記載の
サーファクタント懸濁液。 （３）懸濁化剤である水が７５ｍｍｏｌ／ｌの塩化ナト
リウムを含むことを特徴とする請求項（１）又は（２）
記載のサーファクタント懸濁液。 （４）サーファクタント脂質蛋白質及び懸濁化剤が必要
量の塩化ナトリウムの他にＣａ＾２＾＋イオンのみを含
むことを特徴とする請求項（１）、（２）又は（３）記
載のサーファクタント懸濁液。 （５）低粘度、高濃度サーファクタント懸濁液の製造方
法において、畜牛の肺を食塩水で洗浄し、該洗浄液を３
ｍｍｏｌ／ｌのカルシウム又はマグネシウム含量となる
ように調整し、サーファクタントを６〜１２ｍｍｏｌ／
ｌのＣａ＾２＾＋又はＭｇ＾２＾＋イオンを含む溶液か
ら遠心分離し、第１の精製を３〜８ｍｍｏｌ／ｌのＣａ
＾２＾＋又はＭｇ＾２＾＋イオンの存在下グルコース密
度勾配法によって行い、第２の精製を３〜８ｍｍｏｌ／
ｌのＣａ＾２＾＋及び／又はＭｇ＾２＾＋を含む水性相
を用いて有機溶媒／アルコール／水を含む系に分配する
ことによって行い、次いで有機相を取り除いて残留液を
乾燥して微粉砕し、及びこのようにして得られた微粉砕
した乾燥脂質を、少なくとも１ｍｍｏｌ／ｌのＣａ＾２
＾＋及び／又はＭｇ＾２＾＋イオン及び少なくとも３３
ｍｍｏｌ／ｌの食塩を含む水性溶液に懸濁することを特
徴とする上記製造方法。 （６）クロロホルム／メタノール／水を含む系における
分配を、３〜８ｍｍｏｌ／ｌのＣａ＾２＾＋及び／又は
Ｍｇ＾２＾＋イオンを含む水性相を用いて行い、次いで
有機相を分離し、残留液を乾燥して微粉砕し、微粉砕し
た乾燥脂質を２．５〜３．５ｍｍｏｌ／ｌのＣａ＾２＾
＋及び／又はＭｇ＾２＾＋イオン及び６０〜１５０ｍｍ
ｏｌ／ｌの塩化ナトリウムを含む水性溶液に懸濁するこ
とを特徴とする請求項（５）記載の方法。 （７）有機相を分離し、必要に応じてのみ乾燥残留物を
Ｃａ＾２＾＋及び／又はＭｇ＾２＾＋イオン及び食塩を
含む水性溶液に懸濁することを特徴とする請求項（５）
記載の方法。 （８）Ｃａ＾２＾＋及び／又はＭｇ＾２＾＋イオンで帯
電したサーファクタントを有機溶媒の除去とともに凍結
乾燥し、この生成物をＣａ＾２＾＋及び／又はＭｇ＾２
＾＋イオン及び食塩を含む水性溶液中に懸濁することを
特徴とする請求項（５）又は（７）記載の方法。 （９）高粘度の懸濁液を本発明の懸濁化剤で希釈するこ
とによって、サーファクタント懸濁液により低い粘度を
付与せしめることを特徴とする請求項（５）記載の方法
。 （１０）その後に、Ｃａ及び／又はＭｇ塩をアルコール
溶液に添加することによってサーファクタント中のＣａ
＾２＾＋及び／又はＭｇ＾２＾＋含量を調整することを
特徴とする請求項（５）又は（６）記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3921954A DE3921954A1 (de) | 1989-07-04 | 1989-07-04 | Niedrig-viskose, hochkonzentrierte surfactant-suspension |
| DE3921954.2 | 1989-07-04 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0344332A true JPH0344332A (ja) | 1991-02-26 |
| JP3103582B2 JP3103582B2 (ja) | 2000-10-30 |
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ID=6384269
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP02176092A Expired - Fee Related JP3103582B2 (ja) | 1989-07-04 | 1990-07-03 | 低粘度、高濃度サーファクタント懸濁液 |
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|---|---|
| US (1) | US5552161A (ja) |
| EP (1) | EP0406732B1 (ja) |
| JP (1) | JP3103582B2 (ja) |
| KR (1) | KR0162642B1 (ja) |
| AT (1) | ATE122891T1 (ja) |
| AU (1) | AU623538B2 (ja) |
| CA (1) | CA2020209C (ja) |
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| DE (2) | DE3921954A1 (ja) |
| DK (1) | DK0406732T3 (ja) |
| ES (1) | ES2072940T3 (ja) |
| FI (1) | FI95655C (ja) |
| HK (1) | HK1000277A1 (ja) |
| HU (1) | HU205004B (ja) |
| IE (1) | IE68448B1 (ja) |
| IL (1) | IL94961A (ja) |
| NO (1) | NO180620C (ja) |
| NZ (2) | NZ242869A (ja) |
| PH (1) | PH30232A (ja) |
| PL (1) | PL164434B1 (ja) |
| PT (1) | PT94574B (ja) |
| RU (1) | RU2077880C1 (ja) |
| UA (1) | UA26313A (ja) |
| ZA (1) | ZA905182B (ja) |
Cited By (1)
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|---|---|---|---|---|
| WO2006121064A1 (ja) * | 2005-05-11 | 2006-11-16 | Yamasa Corporation | 肺サーファクタント蛋白質の安定化法 |
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| DE4418936A1 (de) * | 1994-05-31 | 1996-02-08 | Byk Gulden Lomberg Chem Fab | Polypeptid |
| US6129934A (en) * | 1995-06-07 | 2000-10-10 | Ony, Inc. | Modification of animal lung surfactant for treating respiratory disease due to lung surfactant deficiency or dysfunction |
| US6172203B1 (en) * | 1996-02-07 | 2001-01-09 | Alfredo Adolfo Hager | Method for extracting and purifying pulmonary surfactant |
| US7053176B1 (en) | 1999-09-16 | 2006-05-30 | Altana Pharma Ag | Combination of C1-INH and lung surfactant for the treatment of respiratory disorders |
| EP1249244A1 (en) | 2001-04-13 | 2002-10-16 | Universiteit Gent | Therapeutic compositions for the treatment of a disease modulated by the G-actin / F-actin equilibrium, especially a respiratory tract disease |
| AU2002338882B2 (en) | 2001-10-11 | 2008-04-03 | Fraunhofer-Gesellschaft Zur Foerderung Der Angewandten Forschung E.V. | Novel use of pulmonary surfactant |
| US8337815B2 (en) * | 2004-12-23 | 2012-12-25 | Discovery Laboratories, Inc. | Pulmonary surfactant formulations |
| US8048043B2 (en) * | 2007-06-08 | 2011-11-01 | Chiesi Farmaceutici S. P. A. | Method of administration of a pulmonary surfactant |
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| EP0110498B2 (en) * | 1982-11-22 | 1991-09-18 | Teijin Limited | Artificial lung surfactant and remedy for respiratory distress syndrome containing it as active principle |
| JPS59164724A (ja) * | 1983-03-10 | 1984-09-17 | Tokyo Tanabe Co Ltd | サ−フアクタント及びそれを含有する呼吸窮迫症候群治療剤 |
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| IT1203873B (it) * | 1987-04-08 | 1989-02-23 | Chiesi Farma Spa | Composizioni farmaceutiche che lo surfattante polmonare naturale, contengono. metodo di preparazione e |
-
1989
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1990
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