JPH0415234B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 この発明は、式（）： で表わされるクラバラン酸、その医薬的に受容な
塩およびそのエステルの新規な製造方法に関す
る。英国特許番号第1508977号は、過されたブ
ロス中のクラバラン酸陰イオンを、陰イオン交換
樹脂に吸着させ、電解質で溶離し、得られた溶液
を脱塩し、その脱塩溶液をさらに陰イオン交換樹
脂で処理し、電解質でクロマトグラフイー的に溶
離し、得られた溶液を脱塩した後、溶剤を除去し
てクラバラン酸の塩が得られることを特に開示し
ている。この方法を用いると、純物質が許容しう
る収量で得られるが、樹脂カラムを使用するの
は、かなりの投資を伴ない、かつ大規模な生産の
操業を制限するのでわずかな樹脂しか使わない別
の有効な方法が望まれていた。また、英国特許第
1543563号は、クラバラン酸リチウムの沈澱操作
を経て、クラバラン酸塩を製造する方法を開示し
ている。

高純度に得られたクラバラン酸のｔ−ブチルア
ミン塩が、クラバラン酸を製造する際の有用な中
間体であることが、見出されたのである。この塩
は、ベルギー特許第862211号に開示されたが、医
薬製剤に適する成分として開示されているだけで
ある。

この発明は、クラバラン酸のｔ−ブチルアミン
塩を、クラバラン酸その医薬的に受容な塩または
エステルに変換することからなる、クラバラン
酸、その医薬的に受容な塩又はエステルの製法を
提供するものである。

別の観点から、この発明は、 () 有機溶媒中の不純なクラバラン酸を、ｔ−
ブチルアミンと接触させ、 () 生成したクラバラン酸のｔ−ブチルアミン
塩を単離し、 () 次いで、生成したｔ−ブチルアミン塩を、
クラバラン酸、その医薬的に受容な塩またはエ
ステルに変換する ことからなるクラバラン酸、その医薬的に受容な
塩又はエステルの精製法を提供する。

この発明の方法により作製されたクラバラン酸
の医薬的に受容な塩又はエステルは、参照のため
に示した英国特許第1508977号および同第1508978
号明細書に記載のものと同じものである。

特に適切な塩としては、医薬的に受容な、アル
カリ金属塩およびアルカリ土類金属塩、例えばナ
トリウム、カリウム、カルシウムおよびマグネシ
ウム塩が挙げられる。これらの塩のうち、ナトリ
ウムおよびカリウム塩が最も適切であり、カリウ
ム塩が好ましい。

適切なエステルとしては、水添分解のような化
学的方法又は生物学的方法により、脱離しうるも
ので、その結果クラバラン酸又はその塩を提供す
るものが挙げられる。

カルボン酸としては、副式(a)、(b)、(c)又は(d)の
基でエステル化されているものが適切である。

式中、R¹は水素原子又は炭素数３までのアル
キル、アルケニル若しくはアルキニル基；R²は
水素原子又はメチル基；R³フエニル基であるか、
またはフツ素、塩素、臭素、ニトロ基、メチル基
もしくはメトキシ基で置換されたフエニル基；
R⁴は水素原子またはフエニル基であるか、又は
フツ素、塩素、臭素、ニトロ基、メチル基もしく
はメトキシ基で置換されたフエニル基；R⁵は水
素原子またはメチル基；R⁶は炭素数１〜４のア
ルキル基、フエニル基もしくは炭素数１〜４のア
ルコキシ基又はR⁵とR⁶が結合してフタリジル、
ジメチルフタリジル、もしくはジメトキシフタリ
ジル基を形成してもよい；そしてR⁷は、炭素数
１〜４のアルキル、フエニル、クロロフエニルま
たはニトロフエニル基；又はCHR¹R²がフエナシ
ルもしくはブロモフエナシル基である。

R¹は水素原子又はメチル、エチル、ビニルも
しくはエステル基；R²は水素原子；R³はフエニ
ル、ｐ−プロモフエニル、ｐ−メトキシフエニル
又はｐ−ニトロフエニル基；R⁴は水素原子；R⁶
はメチル、ｔ−ブチルもしくはエトキシ基である
か、又はR⁵と結合しているのがそれぞれ好適で
ある。

副式(a)としての好ましい基としては、メチルお
よびエチル基が挙げられる。

副式(b)としての好ましい基としては、ベンジル
およびｐ−ニトロベンジル基で挙げられる。

副式(c)としての好ましい基としては、アセトキ
シメチル、ピバロイルオキシメチル、α−エトキ
シカルボニルオキシメチル、およびフタリジル基
が挙げられる。

副式(d)としての好ましい基は、メトキシメチル
基である。

この方法に使用する不純なクラバラン酸物質源
としては、いずれのクラバラン酸産生微生物でも
よく、かような微生物を使用した醗酵で得た母液
を、溶剤抽出の前に、例えば、英国特許第
1508977号明細書に記載のごとき通常の方法で処
理してもよい。

クラバラン酸のｔ−ブチルアミン塩は、ｔ−ブ
チルアミン（２−アミノ−２−メチルプロパン）
とクラバラン酸とを接触させて、得られる。これ
は、不純クラバラン酸の有機溶剤溶液に、ｔ−ブ
チルアミンの有機溶剤液を加えて行なうのが便利
である。

クラバラン酸の有機溶剤溶液は、酸性にされた
クラバラン酸水溶液から抽出して得られる。抽出
前の水溶液のPHは１〜３の範囲が好ましい。抽出
は、５℃〜15℃の温度で行なうのが好ましい。そ
の水溶液はクラバラン酸を少なくとも約25mg／ml
含有すべきであり、最良の結果を得るためには、
約100mg／ml含有するのが好ましい。抽出用の酸
性水溶液は、クラバラン酸イオンを、醗酵ブロス
から陰イオン交換樹脂に吸着させ、そのクラバラ
ン酸イオンを電解質水溶液で溶離し、任意に脱塩
し、得られた水溶液を酸性にすることにより、簡
便に得ることができる。

不純なクラバラン酸をｔ−ブチルアミンに接触
させるための適切な有機溶剤としては、式
（）： （式中、R⁸は炭素数１〜６のアルキル基または
炭素数１〜６のアルコキシ基；R⁹は炭素数１〜
６のアルキル基） で示される化合物が挙げられる。さらに適切な溶
剤として、テトラヒドロフランおよびジオキサン
のようなエーテル類が挙げられる。それらの溶剤
の混合物もまた、この発明に含まれる。

有機溶剤は、酸性水溶液から直接抽出するのに
使用しうるものがより適切であり、酢酸エチル、
酢酸メチル、酢酸プロピル、酢酸ｎ−ブチル、メ
チルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、テ
トラヒドロフランおよびこれらの混合溶剤からな
る群から選ばれたものであればよい。これらのう
ち最も適切なものは、メチルイソブチルケトン、
メチルエチルケトンおよび酢酸エチルである。混
合溶剤として適切なものは、メチルエチルケト
ン／メチルイソブチルケトンおよびテトラヒドロ
フラン／メチルイソブチルケトンである。好まし
い溶剤は、酢酸エチルである。

ｔ−ブチルアミンの適当な溶剤としては、アセ
トン、酢酸エチル、メチルイソブチルケトンおよ
びメチルエチルケトンが挙げられる。これらのう
ちアセトンが好ましい。

溶剤又は混合溶剤中に少量の水が存在しても、
この方法の実施は可能であることが見出された。
一般に、０〜7v／ｖ％の水が存在してもよく、
4v／ｖ％以下が好ましい。しかしながら、クラ
バラン酸溶液は、乾燥される（例えば、硫酸マグ
ネシウムにより）のがより適切である。

通常、１当量またはそれよりもわずかに過剰の
ｔ−ブチルアミンが、クラバラン酸塩の作成に用
いられる。これらの溶液は、通常撹拌しながら
徐々に混合され、添加が完了後、しばらく撹拌さ
れる。その後、所望のクラバラン酸のｔ−ブチル
アミン塩を単離することができる。この方法によ
つて、クラバラン酸のｔ−ブチルアミン塩は、ほ
とんど、またはすべての不純物から分離される。
例えば、遠心分離してから、上澄液を除去するよ
うな通常の方法によつて行なわれる。

この発明の一つの好ましい実施態様として、ク
ラバラン酸のｔ−ブチルアミン塩はアセトン溶媒
化物として用いられる。このアセトン溶媒化物
は、これまで知られているクラバラン酸ｔ−ブチ
ルアミン塩（例えば、ベルギー特許第862211号参
照）に比較して、有利な安定性と純度とを有して
いる。この溶媒化物は、高純度で安定な結晶状化
合物として容易に単離できるため、この発明に特
に有用である。

従つて、この発明は、クラバラン酸ｔ−ブチル
アミン塩のアセトン溶媒化物をも提供するもので
ある。

アセトンの存在下、クラバラン酸ｔ−ブチルア
ミン塩は、ヘミ又はモノ溶媒化レベルで結合した
アセトンから成るアセトン溶媒化物として沈澱す
る。単離および／又は乾燥を通して、いくらかの
アセトンは、溶媒化力が高くないため消失する
が、生成物中のアセトンの量は重要ではなく通常
17w／ｗ％までで変化する。（すなわちモノ溶媒
化までである）。我々は、溶媒化物中のアセトン
の百分率は２％〜９％であるのが適切であり、４
％〜８％がより適切で、約７％であるのが好まし
いことを見出した。また、有機溶剤、例えば、メ
チルイソブチルケトン又は酢酸エチルで洗浄する
ことにより、溶媒化物中のアセトンの百分率が大
きく減少することも見出した。しかしながら、減
圧下で含有アセトンを除去することは困難であ
り、これは一つの明らかな化合物が存在すること
を示している。このアセトン溶媒化物は、有機溶
剤中のクラバラン酸を、アセトン存在下でｔ−ブ
チルアミンと接触させて形成される。通常、クラ
バラン酸を含む溶液を、少なくとも同容量のアセ
トン、およびｔ−ブチルアミンと混合することに
より、塩が沈澱する。ｔ−ブチルアミンのアセト
ン溶液とクラバラン酸の有機溶剤溶液とを混合す
るのが好ましい。好適な有機溶剤としては、酢酸
エチル、テトラヒドロフラン、メチルエチルケト
ン、メチルイソブチルケトンおよびこれらの混合
溶剤が挙げられ、中でも酢酸エチルが好ましい。
所望のアセトン溶媒化物を形成させるためには、
有機溶剤：アセトンの比が、混合後約１：１であ
るのが好ましい。

はじめに作成したアセトン溶媒化物を再結晶さ
せるのは、不純物の度合をより一層減少させるの
に、しばしば有利である。再結晶のための通常の
溶剤は、水性アセトンである。このような再結晶
は、通常の方法、例えば、溶媒化物を水に溶解
し、少量のアセトンで処理し、過し、次いで、
より多量のアセトンで処理し、任意に撹拌およ
び／又は冷却して再結晶生成物を得る方法により
行なう。

任意にアセトン溶媒化物の形である、クラバラ
ン酸のｔ−ブチルアミン塩は、イオン置換又はエ
ステル化反応によつて、クラバラン酸、その医薬
的に受容な塩又はエステルに変換される。

上記イオン置換は、イオン交換樹脂を使つて、
例えばナトリウム、カリウム又はカルシウム形態
の陽イオン交換樹脂層に、ｔ−ブチルアミン塩溶
液を通加させることによつて行なつてもよい。適
切な陽イオン交換樹脂として、アンバーライト
IR120およびそれと均等の樹脂が挙げられる。場
合によつては、イオン置換はｔ−ブチルアミン陽
イオンを、塩基、例えば、医薬的に受容なアルカ
リもしくはアルカリ土類金属の炭酸塩、重炭酸塩
もしくは水酸化物又は有機カルボン酸の塩、例え
ば式（）： R¹⁰−CO₂H （） ［式中、R¹⁰は、例えば炭素数１〜20、好ましく
は１〜８のアルキル基である。］ で表わされる脂肪酸（アルカン酸）の塩で複分解
することによつて行なわれる。適切な塩としては
例えば、酢酸塩、プロピオン酸塩、エチルヘキサ
ン酸塩が挙げられ、２−エチルヘキサン酸カリウ
ム塩および２−エチルヘキサン酸ナトリウム塩が
好ましい。

エステル化の適切な方法としては、 (a) クラバラン酸のｔ−ブチルアミン塩と、式Ｑ
−R¹¹（式中Ｑは容易に置換しうる基であり、
R¹¹は有機基である。）の化合物との反応、 (b) クラバラン酸のｔ−ブチルアミン塩とアルコ
ール又はチオールとの、カルボジイミドのよう
な縮合促進剤の存在下での反応、および (c) クラバラン酸のｔ−ブチルアミン塩とジアゾ
化合物との反応 が挙げられる。

もちろん前述の方法は、ｔ−ブチルアミン塩が
まずクラバラン酸又は他の塩に変換され、続いて
所望のエステルに変換されるという態様を含むこ
とは明白である。

さらに、エステル化方法の詳細は、英国特許第
1508977号および同第1508978号明細書に記載され
ている。

この発明によれば、クラバラン酸の塩およびエ
ステルが、英国特許第1508977号および同第
1543563号明細書の方法よりも、より容易に高純
度物として得られる。例えば、好ましい生成物の
一つであるクラバラン酸カリウムは、該特許の方
法により結晶体として作られるが、これらの結晶
は微小結晶である。しかしながらこの発明によれ
ば、明確な針状晶の、又は中央のくびれた板状晶
（すなわち蝶形）の大きな結晶で純粋なクラバラ
ン酸カリウムが得られる。

次にこの発明を実施例により説明する。

実施例 １ 公知の方法で得た、粗クラバラン酸を含有する
酢酸エチル抽出物（68、分析値は24.75mg／ml）
を、硫酸マグネシウム（1.7Kg）と共に10分間撹
拌した。これに炭素〔1.7Kg、ノリツトGSX
（Norrit GSX）〕を加え、混合物をさらに10分間
撹拌した。このスラリー状物を目の細かい帆布フ
イルター（ヌツツエフイルター）を通して吸引
過した後、酢酸エチル（10）で洗浄した。合し
た液と洗浄液（計71）は、乾燥酢酸エチル中
23.7mg／mlのクラバラン酸を含有していた。これ
にアセトン（71）を加え、次にｔ−ブチルアミ
ン（1.13）のアセトン（5.6）溶液を、30分
間かけて加えた。この混合物を、60分間撹拌し、
固型生成物を遠心分離して分離し、アセトンで洗
浄し（２回×10）、最後に流動床乾燥器で乾燥
（常温下）して、クラバラン酸ｔ−ブチルアミン
塩のアセトン溶媒化物（2.25Kg）を得、分析によ
れば遊離酸は65.8％であり、クラバラン酸ｔ−ブ
チルアミン塩のアセトン溶媒化物としては、97％
であつた。純品としての収率は88％であつた。

IR：（ヌジオールムル）1780（β−ラクタムカル
ボニル基）、1708（溶媒化アセトン）および1695
cm^-1（ｃ＝ｃ）。

比較のため、上記試料に遊離のアセトンを加える
と、遊離アセトンに対応する1721cm^-1の吸収が生
じ、溶媒化していないクラバラン酸のｔ−ブチル
アミン塩は、1708cm^-1に吸収を示さない。

実施例 ２ クラバラン酸ｔ−ブチルアミン塩のアセトン溶
媒化物の再結晶 実施例１で生成した試料を、常温で水に溶解
し、20w／ｖ％溶液（クラバラン酸イオン基準）
を得た。アセトン（８容）を約10分間かけて加
え、得られた溶液を過した。この液に、さら
にアセトン（32容）を、30分間かけて加え、得た
混合物を、０〜５℃に冷却しながら、さらに２時
間撹拌した。沈澱物を取し、流動床乾燥器で乾
燥して、クラバラン酸ｔ−ブチルアミン塩のアセ
トン溶媒化物を得た。（分析によれば、66％が遊
離酸で、クラバラン酸ｔ−ブチルアミン塩のアセ
トン溶媒化物としては99.7％であつた。

また純品としての収率は85％であつた。）（この
実施例の生成物は、出発物質よりも約１〜２％高
純度であつた。） 実施例 ３ クラバラン酸ｔ−ブチルアミン塩のアセトン溶
媒化物（2.55Kg）を、水（1.4）を含む20℃の
イソプロパノール（68）に溶解した。この溶液
を、インライン・フイルター（in−line filter）
で過し、イソプロパノール（２）で洗浄し
た。これに、エチルヘキサン酸カリウム含有イソ
プロパノール（1.4当量、２規定溶液6.1）を、
20分間かけて加えた。得られた混合物を常温で30
分間撹拌し、０〜５℃で２時間冷却した。生成物
を目の細かい帆布フイルター（ヌツツエフイルタ
ー）で、窒素パージをしながら吸引集し、イソ
プロパノール（10）およびアセトン（10）で
洗浄した。次いでこの生成物を、常温減圧下にて
乾燥して、クラバラン酸カリウム（1.8Kg）を得
た。（分析によれば、83.2％の純度であり、純品
としての収率は89％であつた。） 実施例 ４ クラバラン酸ｔ−ブチルアミン塩（溶媒化して
いない）（28.7ｇ、純遊離酸として69.8％）を、
水（10〜40ml）を含有する20℃のイソプロパノー
ル（760ml）に溶解した。この溶液を過し、さ
らにイソプロパノール（25ml）で洗浄した。次に
エチルヘキサン酸カリウムを含有するイソプロパ
ノール（２規定溶液71ml、1.4当量）を15分かけ
て加えた。得られた混合物を常温で30分間撹拌
し、次に０〜５℃で２時間冷却した。生成物を
集し、イソプロパノール（100ml）およびアセト
ン（100ml）で洗浄した。次に生成物を、常温減
圧下で乾燥して、クラバラン酸カリウム（20.5
ｇ、81.2％）を得、収率は83.0％であつた。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ クラバラン酸のｔ−ブチルアミン塩をクラバ
   ラン酸、その医薬的に受容な塩またはエステルに
   変換することを特徴とするクラバラン酸、その医
   薬的に受容な塩またはエステルの製法。 ２ クラバラン酸のｔ−ブチルアミン塩が、イオ
   ン置換によつてクラバラン酸に変換される特許請
   求の範囲第１項記載の方法。 ３ クラバラン酸のｔ−ブチルアミン塩が、クラ
   バラン酸の医薬的に受容なエステルを形成すべく
   エステル化される特許請求の範囲第１項記載の方
   法。 ４ クラバラン酸のｔ−ブチルアミン塩が、複分
   解法でクラバラン酸の医薬的に受容な塩に変換さ
   れる特許請求の範囲第１項記載の方法。 ５ クラバラン酸のｔ−ブチルアミン塩が、クラ
   バラン酸ｔ−ブチルアミン塩のアセトン溶媒化物
   の形態である特許請求の範囲第１〜４項の何れか
   １つに記載の方法。 ６ 生成するクラバラン酸が、その医薬的に受容
   なアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩の形
   態である特許請求の範囲第１項または第４項記載
   の方法。 ７ 生成するクラバラン酸が、そのナトリウム塩
   又はカリウム塩の形態である特許請求の範囲第６
   項記載の方法。 ８ クラバラン酸のｔ−ブチルアミン塩が、不純
   なクラバラン酸の溶液をｔ−ブチルアミンと接触
   させ、単離したものである特許請求の範囲第１項
   記載の方法。 ９ 不純なクラバラン酸の溶液が、酢酸エチル、
   酢酸メチル、酢酸プロピル、酢酸ｎ−ブチル、メ
   チルエチルケトン、アセトン、メチルイソブチル
   ケトン、テトラヒドロフラン及びこれら溶媒の混
   合物からなる群から選ばれた溶媒を含有する特許
   請求の範囲第８項記載の方法。 １０ 溶媒が酢酸エチルである特許請求の範囲第
   ９項記載の方法。 １１ クラバラン酸のｔ−ブチルアミン塩が、医
   薬的に受容なアルカリ金属もしくはアルカリ土類
   金属の炭酸塩、重炭酸塩もしくは水酸化物である
   か、又は有機カルボン酸の塩と処理される特許請
   求の範囲第１項記載の方法。