JPH04249770A - 癌診断剤 - Google Patents
癌診断剤Info
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- JPH04249770A JPH04249770A JP41854490A JP41854490A JPH04249770A JP H04249770 A JPH04249770 A JP H04249770A JP 41854490 A JP41854490 A JP 41854490A JP 41854490 A JP41854490 A JP 41854490A JP H04249770 A JPH04249770 A JP H04249770A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、癌の新規な診断剤に関
するものであり、特に早期癌の発見を可能とするもので
あって、医学上の検査、診断分野において大きな貢献が
期待できるものである。
するものであり、特に早期癌の発見を可能とするもので
あって、医学上の検査、診断分野において大きな貢献が
期待できるものである。
【０００２】
【従来の技術】従来癌の血清学的診断は、主として血中
の腫瘍マーカーと総称される物質を測定することによっ
てなされていた。腫瘍マーカーとしては、癌胎児性抗原
（Ｃａｒｃｉｎｏｅｍｂｒｙｏｎｉｃ Ａｎｔｉｇｅ
ｎ，ＣＥＡ）、α−フェトプロテイン（ＡＦＰ）、ＣＡ
１９−９、前立腺酸性フォスファターゼ等が知られてい
る。これら腫瘍マーカーは、癌種による陽性率に差はあ
るものの一般的に腫瘍の増大とともに血中濃度が上昇す
る。従って癌の治療効果のモニタリングや予後の診断な
どに利用されてきた。しかしこれらの腫瘍マーカーが血
中に検出されるのは癌がかなり成長した段階であり、癌
発生の初期段階、いわゆる早期癌においてこれらの腫瘍
マーカーを検出することは全く困難であった。すなわち
治癒確率の極めて高い早期癌のスクリーニングには役に
立たなかったのである。
の腫瘍マーカーと総称される物質を測定することによっ
てなされていた。腫瘍マーカーとしては、癌胎児性抗原
（Ｃａｒｃｉｎｏｅｍｂｒｙｏｎｉｃ Ａｎｔｉｇｅ
ｎ，ＣＥＡ）、α−フェトプロテイン（ＡＦＰ）、ＣＡ
１９−９、前立腺酸性フォスファターゼ等が知られてい
る。これら腫瘍マーカーは、癌種による陽性率に差はあ
るものの一般的に腫瘍の増大とともに血中濃度が上昇す
る。従って癌の治療効果のモニタリングや予後の診断な
どに利用されてきた。しかしこれらの腫瘍マーカーが血
中に検出されるのは癌がかなり成長した段階であり、癌
発生の初期段階、いわゆる早期癌においてこれらの腫瘍
マーカーを検出することは全く困難であった。すなわち
治癒確率の極めて高い早期癌のスクリーニングには役に
立たなかったのである。
【０００３】例えば現在知られているサンドイッチ法Ｃ
ＥＡ測定キットでは、ＣＥＡ ０．５ｎｇ／ｍｌ〜１
０００ｎｇ／ｍｌの測定しか可能でなく（日本臨▲しょ
う▼、３４〔６〕（１９７６）、ｐ１２７４−１２７９
）、極低濃度のＣＥＡを測定することはできず、早期癌
の発見には至らなかったのである。
ＥＡ測定キットでは、ＣＥＡ ０．５ｎｇ／ｍｌ〜１
０００ｎｇ／ｍｌの測定しか可能でなく（日本臨▲しょ
う▼、３４〔６〕（１９７６）、ｐ１２７４−１２７９
）、極低濃度のＣＥＡを測定することはできず、早期癌
の発見には至らなかったのである。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、早期
癌の発見につながる真に有効な癌の血清学的診断に有用
なシステムを新たに開発することである。
癌の発見につながる真に有効な癌の血清学的診断に有用
なシステムを新たに開発することである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】このような現状に鑑み、
本発明者らは、早期癌が発見できる血清学的診断システ
ムを新たに開発するために鋭意研究した結果、腫瘍マー
カーの一つであるＣＥＡに対する自己抗体が早期癌に於
て出現することを見いだし、そして更にその抗ＣＥＡ自
己抗体を効率的且つ正確に測定する方法も確立し、ここ
に本発明を完成させるに至った。
本発明者らは、早期癌が発見できる血清学的診断システ
ムを新たに開発するために鋭意研究した結果、腫瘍マー
カーの一つであるＣＥＡに対する自己抗体が早期癌に於
て出現することを見いだし、そして更にその抗ＣＥＡ自
己抗体を効率的且つ正確に測定する方法も確立し、ここ
に本発明を完成させるに至った。
【０００６】すなわち本発明は、ＣＥＡに対する自己抗
体を測定しもって癌の早期診断を行うことをその基本的
技術思想とするものであって、具体的には癌診断のため
の抗ＣＥＡ自己抗体測定用試薬、つまり癌診断剤に関す
るものである。以下、本発明を詳細に説明する。
体を測定しもって癌の早期診断を行うことをその基本的
技術思想とするものであって、具体的には癌診断のため
の抗ＣＥＡ自己抗体測定用試薬、つまり癌診断剤に関す
るものである。以下、本発明を詳細に説明する。
【０００７】本発明に係る癌診断剤は、抗ＣＥＡ自己抗
体を測定しうる薬剤（系）をすべて包含するものである
が、ＣＥＡに対する自己抗体の測定は、酵素免疫測定法
（ＥＩＡ）、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、蛍光イ
ムノアッセイ（ＦＩＡ）、発光イムノアッセイ等の既存
の高感度イムノアッセイに用いられている技術がすべて
応用でき、したがってこれらのアッセイに使用される薬
剤（系）は、すべて本発明に係る癌診断剤として利用す
ることができる。
体を測定しうる薬剤（系）をすべて包含するものである
が、ＣＥＡに対する自己抗体の測定は、酵素免疫測定法
（ＥＩＡ）、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、蛍光イ
ムノアッセイ（ＦＩＡ）、発光イムノアッセイ等の既存
の高感度イムノアッセイに用いられている技術がすべて
応用でき、したがってこれらのアッセイに使用される薬
剤（系）は、すべて本発明に係る癌診断剤として利用す
ることができる。
【０００８】抗ＣＥＡ自己抗体を測定する方法としては
、例えば次の方法が挙げられる。
、例えば次の方法が挙げられる。
【０００９】〔サンドイッチ法〕固相固定化ＣＥＡに検
体中の抗ＣＥＡ自己抗体を反応せしめ、固相上に生成し
た複合体に、更にトレーサー標識ＣＥＡを反応させるか
、またはビオチン結合ＣＥＡとアビジン結合トレーサー
を同時にまたは時間をずらして反応させ、固相ＣＥＡ−
自己抗体−トレーサー標識ＣＥＡのサンドイッチ複合体
を形成させ、固相上のトレーサーを測定し、抗ＣＥＡ自
己抗体を測定する方法。
体中の抗ＣＥＡ自己抗体を反応せしめ、固相上に生成し
た複合体に、更にトレーサー標識ＣＥＡを反応させるか
、またはビオチン結合ＣＥＡとアビジン結合トレーサー
を同時にまたは時間をずらして反応させ、固相ＣＥＡ−
自己抗体−トレーサー標識ＣＥＡのサンドイッチ複合体
を形成させ、固相上のトレーサーを測定し、抗ＣＥＡ自
己抗体を測定する方法。
【００１０】〔第二抗体法〕固相固定化ＣＥＡ及び検体
中の抗ＣＥＡ自己抗体を反応せしめ、固相上に生成した
複合体に、更にトレーサー標識抗ヒトイムノグロブリン
抗体（標識第二抗体）を反応させ、固相上にＣＥＡ−自
己抗体−第二抗体の複合物を形成させ、固相上のトレー
サーを測定し、抗ＣＥＡ自己抗体を測定する方法。
中の抗ＣＥＡ自己抗体を反応せしめ、固相上に生成した
複合体に、更にトレーサー標識抗ヒトイムノグロブリン
抗体（標識第二抗体）を反応させ、固相上にＣＥＡ−自
己抗体−第二抗体の複合物を形成させ、固相上のトレー
サーを測定し、抗ＣＥＡ自己抗体を測定する方法。
【００１１】〔競合法〕固相固定化ＣＥＡに対し検体中
の抗ＣＥＡ自己抗体とトレーサー標識抗ＣＥＡ抗体を競
合的に反応させ、固相上のトレーサーを測定し、抗ＣＥ
Ａ自己抗体を測定する方法。
の抗ＣＥＡ自己抗体とトレーサー標識抗ＣＥＡ抗体を競
合的に反応させ、固相上のトレーサーを測定し、抗ＣＥ
Ａ自己抗体を測定する方法。
【００１２】〔沈澱法〕トレーサー標識ＣＥＡと検体中
の抗ＣＥＡ自己抗体を反応させた後、ポリエチレングリ
コールを用いて生成した複合体を沈澱させ、沈澱物中又
は上清中のトレーサーを測定し、抗ＣＥＡ自己抗体を測
定する方法。
の抗ＣＥＡ自己抗体を反応させた後、ポリエチレングリ
コールを用いて生成した複合体を沈澱させ、沈澱物中又
は上清中のトレーサーを測定し、抗ＣＥＡ自己抗体を測
定する方法。
【００１３】上記した各方法において、トレーサーとし
ては、酵素（ペルオキシダーゼ、β−ガラクトシダーゼ
、グルコースオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、
Ｇ−６−Ｐデヒドロゲナーゼ等）、アイソトープ（１２
５Ｉ、１３１Ｉ等）、蛍光物質（フルオレセイン、ＦＩ
ＴＣ、ローダミン等）、発光物質（フェリチン、ルシフ
ェリン、ルミノール等）、その他常用される標識剤がす
べて自由に使用できる。
ては、酵素（ペルオキシダーゼ、β−ガラクトシダーゼ
、グルコースオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、
Ｇ−６−Ｐデヒドロゲナーゼ等）、アイソトープ（１２
５Ｉ、１３１Ｉ等）、蛍光物質（フルオレセイン、ＦＩ
ＴＣ、ローダミン等）、発光物質（フェリチン、ルシフ
ェリン、ルミノール等）、その他常用される標識剤がす
べて自由に使用できる。
【００１４】ＣＥＡを固定する固相としては、従来用い
られているポリスチレンビーズ、プレート、ラテックス
粒子、磁性微粒子などが使用可能であり、材質や形状に
は何等制限はない。固定する方法も物理吸着法、共有結
合法、ビオチン−アビジン結合利用、抗原抗体反応利用
することなど既知の方法をすべて利用することが可能で
ある。また、トレーサー標識ＣＥＡやトレーサー標識抗
体などの調製もアミノ基やチオール基を利用した化学結
合法やビオチン−アビジン結合を利用した標識法などの
既存の技術を適宜自由に利用することができる。
られているポリスチレンビーズ、プレート、ラテックス
粒子、磁性微粒子などが使用可能であり、材質や形状に
は何等制限はない。固定する方法も物理吸着法、共有結
合法、ビオチン−アビジン結合利用、抗原抗体反応利用
することなど既知の方法をすべて利用することが可能で
ある。また、トレーサー標識ＣＥＡやトレーサー標識抗
体などの調製もアミノ基やチオール基を利用した化学結
合法やビオチン−アビジン結合を利用した標識法などの
既存の技術を適宜自由に利用することができる。
【００１５】サンドイッチ法では、固相固定化ＣＥＡと
検体及びトレーサー標識ＣＥＡを同時にまたは時間をず
らし、インキュベーションする。この反応時間は用いる
固相や、トレーサーの種類に依存するが、通常数分から
数時間を要する。またトレーサーはＣＥＡに直接標識し
てもよいが、トレーサーが酵素などの場合は標識操作の
簡単なビオチンで標識したビオチン−ＣＥＡを用いるこ
ともできる。この場合固相固定化ＣＥＡ、検体、ビオチ
ン結合ＣＥＡ及びアビジン結合トレーサー（酵素）を同
時にまたは時間をずらしてインキュベーションする。時
間をずらす場合は、途中に未反応物を除去するいわゆる
ＢＦ分離操作を行なうことが好ましい。最終的に、固相
ＣＥＡ−自己抗体−ビオチン標識ＣＥＡ−アビジン結合
トレーサー（酵素）複合体が得られる。トレーサーの測
定法はその種類によって異なるが、既存の方法を利用で
き、活性や強度の程度は検体中の自己抗体の存在量に比
例するので、適当なコントロール検体や標準液を同時測
定することによって、自己抗体を測定できる。本法は比
較的高感度で自己抗体が測定でき、最も好ましい方法で
ある。
検体及びトレーサー標識ＣＥＡを同時にまたは時間をず
らし、インキュベーションする。この反応時間は用いる
固相や、トレーサーの種類に依存するが、通常数分から
数時間を要する。またトレーサーはＣＥＡに直接標識し
てもよいが、トレーサーが酵素などの場合は標識操作の
簡単なビオチンで標識したビオチン−ＣＥＡを用いるこ
ともできる。この場合固相固定化ＣＥＡ、検体、ビオチ
ン結合ＣＥＡ及びアビジン結合トレーサー（酵素）を同
時にまたは時間をずらしてインキュベーションする。時
間をずらす場合は、途中に未反応物を除去するいわゆる
ＢＦ分離操作を行なうことが好ましい。最終的に、固相
ＣＥＡ−自己抗体−ビオチン標識ＣＥＡ−アビジン結合
トレーサー（酵素）複合体が得られる。トレーサーの測
定法はその種類によって異なるが、既存の方法を利用で
き、活性や強度の程度は検体中の自己抗体の存在量に比
例するので、適当なコントロール検体や標準液を同時測
定することによって、自己抗体を測定できる。本法は比
較的高感度で自己抗体が測定でき、最も好ましい方法で
ある。
【００１６】第二抗体法では、固相固定化ＣＥＡと検体
をインキュベーションし、洗浄によるＢＦ分離後、トレ
ーサー標識抗ヒトイムノグロブリン抗体を反応させる。 このとき用いる抗ヒトイムノグロブリン抗体は種々動物
由来のポリクローナル抗体かまたはマウスその他動物の
モノクローナル抗体を使用する。反応時間やトレーサー
の測定法はサンドイッチ法と同様である。
をインキュベーションし、洗浄によるＢＦ分離後、トレ
ーサー標識抗ヒトイムノグロブリン抗体を反応させる。 このとき用いる抗ヒトイムノグロブリン抗体は種々動物
由来のポリクローナル抗体かまたはマウスその他動物の
モノクローナル抗体を使用する。反応時間やトレーサー
の測定法はサンドイッチ法と同様である。
【００１７】競合法では固相固定化ＣＥＡと検体及びト
レーサー標識抗ＣＥＡ抗体を同時にまたは時間をずらし
てインキュベーションし、反応させる。トレーサー標識
抗体は検体中の自己抗体と競合的に固定化ＣＥＡと反応
し、その固相に結合する量は検体中の自己抗体量に反比
例する。トレーサー標識に使用する抗体は動物由来のポ
リクローナル抗体が好ましい。
レーサー標識抗ＣＥＡ抗体を同時にまたは時間をずらし
てインキュベーションし、反応させる。トレーサー標識
抗体は検体中の自己抗体と競合的に固定化ＣＥＡと反応
し、その固相に結合する量は検体中の自己抗体量に反比
例する。トレーサー標識に使用する抗体は動物由来のポ
リクローナル抗体が好ましい。
【００１８】沈澱法においては、検体とトレーサー標識
ＣＥＡをインキュベーションし、自己抗体−トレーサー
標識ＣＥＡ複合体を生成せしめ、その後ポリエチレング
リコール（ＰＥＧ）その他既知の沈澱剤を反応系に加え
、生成した複合体を沈澱させる。上清と沈澱物を遠心分
離し、沈澱物中または上清中のトレーサーを測定する。 沈澱物中のトレーサー量は検体中の自己抗体に比例する
。
ＣＥＡをインキュベーションし、自己抗体−トレーサー
標識ＣＥＡ複合体を生成せしめ、その後ポリエチレング
リコール（ＰＥＧ）その他既知の沈澱剤を反応系に加え
、生成した複合体を沈澱させる。上清と沈澱物を遠心分
離し、沈澱物中または上清中のトレーサーを測定する。 沈澱物中のトレーサー量は検体中の自己抗体に比例する
。
【００１９】本発明に係る診断剤は、イムノアッセイ用
キット調製の常法にしたがい、適宜容易に各薬剤を分注
したり、プレートや試験管を用意したり、バッファー液
や酵素基質液を更に用意したり、用時調製用の場合は凍
結乾燥した所定薬剤に希釈ないし溶解用の水（バッファ
ー、生理的食塩水等）を更に用意し、更に対照血清（血
漿）等を用意して、所望するキットにしておくと実用上
特に有効である。
キット調製の常法にしたがい、適宜容易に各薬剤を分注
したり、プレートや試験管を用意したり、バッファー液
や酵素基質液を更に用意したり、用時調製用の場合は凍
結乾燥した所定薬剤に希釈ないし溶解用の水（バッファ
ー、生理的食塩水等）を更に用意し、更に対照血清（血
漿）等を用意して、所望するキットにしておくと実用上
特に有効である。
【００２０】例えばサンドイッチ法による診断剤キット
の内容としては、ＣＥＡ固定化ポリスチレンボールを収
容した試験管、リン酸バッファー、血清希釈剤、トレー
サー標識ＣＥＡ溶液、酵素結合体、酵素基質等が挙げら
れ、これらを適宜包装してキットとして販売すればよい
。
の内容としては、ＣＥＡ固定化ポリスチレンボールを収
容した試験管、リン酸バッファー、血清希釈剤、トレー
サー標識ＣＥＡ溶液、酵素結合体、酵素基質等が挙げら
れ、これらを適宜包装してキットとして販売すればよい
。
【００２１】
【実施例】以下に、本発明に係る診断剤を用いて癌の診
断を目的とした血清、血漿その他体外にとり出した各種
検体中の抗ＣＥＡ自己抗体の測定についての実施例及び
参考例について述べるが、これらは、本発明を更に詳細
に説明することを目的とするものであって、本発明はこ
れらの実施例のみに限定されるものではない。
断を目的とした血清、血漿その他体外にとり出した各種
検体中の抗ＣＥＡ自己抗体の測定についての実施例及び
参考例について述べるが、これらは、本発明を更に詳細
に説明することを目的とするものであって、本発明はこ
れらの実施例のみに限定されるものではない。
【００２２】
【実施例１ サンドイッチ法による抗ＣＥＡ自己抗体
測定】検体２５μｌ、リン酸緩衝液（ｐＨ７．３、０．
１Ｍ ＮａＣｌ、０．５％ウシ血清アルブミン含有）
２００μｌ、ＣＥＡ固定化ポリスチレンボール（ＰＳＢ
）１個を試験管中にて、３７℃、２ｈｒインキュベーシ
ョンした。ＰＳＢを３ｍｌの蒸留水で３回洗浄した後、
ビオチン標識ＣＥＡ溶液２００μｌを加え３７℃、１時
間反応させた。蒸留水で３回洗浄後、アビジン結合ペル
オキシダーゼ２００μｌを加え更に３７℃、１ｈｒ反応
させ、前回と同様に洗浄した。２，２’−アジノービス
−３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸（ＡＢ
ＴＳ）と過酸化水素からなる発色液５００μｌを加え、
室温で１ｈｒ酵素反応を行なった後、１％蓚酸を加え反
応を停止させた。４２０ｎｍに於ける吸光度を測定し、
検体中の抗ＣＥＡ自己抗体を測定した。結果を表１に示
す。
測定】検体２５μｌ、リン酸緩衝液（ｐＨ７．３、０．
１Ｍ ＮａＣｌ、０．５％ウシ血清アルブミン含有）
２００μｌ、ＣＥＡ固定化ポリスチレンボール（ＰＳＢ
）１個を試験管中にて、３７℃、２ｈｒインキュベーシ
ョンした。ＰＳＢを３ｍｌの蒸留水で３回洗浄した後、
ビオチン標識ＣＥＡ溶液２００μｌを加え３７℃、１時
間反応させた。蒸留水で３回洗浄後、アビジン結合ペル
オキシダーゼ２００μｌを加え更に３７℃、１ｈｒ反応
させ、前回と同様に洗浄した。２，２’−アジノービス
−３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸（ＡＢ
ＴＳ）と過酸化水素からなる発色液５００μｌを加え、
室温で１ｈｒ酵素反応を行なった後、１％蓚酸を加え反
応を停止させた。４２０ｎｍに於ける吸光度を測定し、
検体中の抗ＣＥＡ自己抗体を測定した。結果を表１に示
す。
【００２３】
【表１】
【００２４】
【実施例２ 第二抗体法による抗ＣＥＡ自己抗体測定
】検体２５μｌ及びＣＥＡ固定化ＰＳＢ１個を３７℃、
２ｈｒ反応させ、３ｍｌの蒸留水を用いて洗浄を３回行
なった。ペルオキシダーゼ標識ウサギ抗ヒトイムノグロ
ブリン抗体液２００μｌを加え、３７℃、１ｈｒ反応さ
せた後、同様に洗浄した。実施例１と同様に酵素反応を
行い、吸光度を測定して、検体中の自己抗体を測定した
。 結果を表１に示す。
】検体２５μｌ及びＣＥＡ固定化ＰＳＢ１個を３７℃、
２ｈｒ反応させ、３ｍｌの蒸留水を用いて洗浄を３回行
なった。ペルオキシダーゼ標識ウサギ抗ヒトイムノグロ
ブリン抗体液２００μｌを加え、３７℃、１ｈｒ反応さ
せた後、同様に洗浄した。実施例１と同様に酵素反応を
行い、吸光度を測定して、検体中の自己抗体を測定した
。 結果を表１に示す。
【００２５】
【実施例３ 競合法による抗ＣＥＡ自己抗体測定法】
適切に希釈した検体１００μｌ、ペルオキシダーゼ標識
ウサギ抗ＣＥＡ抗体３００μｌ及びＣＥＡ固定化ＰＳＢ
１個を３７℃、２ｈｒインキュベーションし、洗浄後実
施例１と同様の操作で検体中の抗ＣＥＡ自己抗体を測定
した。結果を表１に示す。
適切に希釈した検体１００μｌ、ペルオキシダーゼ標識
ウサギ抗ＣＥＡ抗体３００μｌ及びＣＥＡ固定化ＰＳＢ
１個を３７℃、２ｈｒインキュベーションし、洗浄後実
施例１と同様の操作で検体中の抗ＣＥＡ自己抗体を測定
した。結果を表１に示す。
【００２６】
【実施例４ 沈澱法による抗ＣＥＡ自己抗体測定】検
体５０μｌ、１２５Ｉ標識ＣＥＡ溶液５０μｌ及び０．
０１Ｍ酢酸アンモニウム（ｐＨ６．８）１５０μｌを４
℃、一夜インキュベーションした。２５％ポリエチレン
グリコール２５０μｌ加え、３０００ｒｐｍ、２０分遠
心分離し、総放射活性に対する沈澱の放射能活性比（％
）を測定した。結果を表１に示す。
体５０μｌ、１２５Ｉ標識ＣＥＡ溶液５０μｌ及び０．
０１Ｍ酢酸アンモニウム（ｐＨ６．８）１５０μｌを４
℃、一夜インキュベーションした。２５％ポリエチレン
グリコール２５０μｌ加え、３０００ｒｐｍ、２０分遠
心分離し、総放射活性に対する沈澱の放射能活性比（％
）を測定した。結果を表１に示す。
【００２７】
【参考例１ サンドイッチＥＩＡ法によるＣＥＡの測
定】検体５０μｌ、ペルオキシダーゼ標識ウサギ抗ＣＥ
Ａ抗体液３００μｌ及び抗ＣＥＡモノクローナル抗体固
定化ＰＳＢ１個を３７℃、２ｈｒインキュベーションし
、蒸留水２ｍｌを用いて３回洗浄した。実施例１と同様
に発色液を加え酵素反応を行い、吸光度を測定した。 標準ＣＥＡによる検量線から検体のＣＥＡ濃度を読みと
った。結果を表１に示す。
定】検体５０μｌ、ペルオキシダーゼ標識ウサギ抗ＣＥ
Ａ抗体液３００μｌ及び抗ＣＥＡモノクローナル抗体固
定化ＰＳＢ１個を３７℃、２ｈｒインキュベーションし
、蒸留水２ｍｌを用いて３回洗浄した。実施例１と同様
に発色液を加え酵素反応を行い、吸光度を測定した。 標準ＣＥＡによる検量線から検体のＣＥＡ濃度を読みと
った。結果を表１に示す。
【００２８】表１の結果から明らかなように、本発明を
利用する癌診断法によれば従来広く用いられているＣＥ
Ａ濃度が正常値レベルの早期胃癌例を感度良く検出出来
ることが確認された。
利用する癌診断法によれば従来広く用いられているＣＥ
Ａ濃度が正常値レベルの早期胃癌例を感度良く検出出来
ることが確認された。
【００２９】
【発明の効果】従来の腫瘍マーカーは、かなりステージ
の進んだ癌患者血中でしか検出できず、早期癌の発見に
は無力であった。しかし本発明によれば、血中のＣＥＡ
に対する自己抗体を測定することによって比較的早期の
癌の存在を発見することが可能となった。従来の生理学
的検査や血清学的検査で困難であった早期癌の発見が本
発明によってなされることの意義は極めて大きい。
の進んだ癌患者血中でしか検出できず、早期癌の発見に
は無力であった。しかし本発明によれば、血中のＣＥＡ
に対する自己抗体を測定することによって比較的早期の
癌の存在を発見することが可能となった。従来の生理学
的検査や血清学的検査で困難であった早期癌の発見が本
発明によってなされることの意義は極めて大きい。
Claims (7)
- 【請求項１】 癌胎児性抗原（ＣＥＡ）に対する自己
抗体を測定する薬剤からなることを特徴とする癌診断剤
。 - 【請求項２】 該薬剤が固定化ＣＥＡ及びトレーサー
標識ＣＥＡからなり、サンドイッチ法にしたがって抗Ｃ
ＥＡ自己抗体を測定するものであることを特徴とする請
求項１の癌診断剤。 - 【請求項３】 該薬剤が固定化ＣＥＡ及びトレーサー
標識抗ＣＥＡ抗体からなり、競合法にしたがって抗ＣＥ
Ａ自己抗体を測定するものであることを特徴とする請求
項１の癌診断剤。 - 【請求項４】 トレーサー標識ＣＥＡにかえてビチオ
ン結合ＣＥＡとアビジン結合トレーサーを用いてなるこ
とを特徴とする請求項２の癌診断剤。 - 【請求項５】 該薬剤が固定化ＣＥＡ及びトレーサー
標識抗ヒトイムノグロブリン抗体からなり、第二抗体法
にしたがって抗ＣＥＡ自己抗体を測定するものであるこ
とを特徴とする請求項１の癌診断剤。 - 【請求項６】 該薬剤がトレーサー標識ＣＥＡ及び沈
澱剤からなり、沈澱法にしたがって抗ＣＥＡ自己抗体を
測定するものであることを特徴とする請求項１の癌診断
剤。 - 【請求項７】 トレーサーが酵素、アイソトープ、蛍
光物質、発光物質から選択されるものであること、を特
徴とする請求項１〜５のいずれか１項に記載の癌診断剤
。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP41854490A JP2931111B2 (ja) | 1990-12-28 | 1990-12-28 | 癌診断剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP41854490A JP2931111B2 (ja) | 1990-12-28 | 1990-12-28 | 癌診断剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04249770A true JPH04249770A (ja) | 1992-09-04 |
| JP2931111B2 JP2931111B2 (ja) | 1999-08-09 |
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ID=18526372
Family Applications (1)
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|---|---|---|---|
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| JP (1) | JP2931111B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103472229A (zh) * | 2013-09-17 | 2013-12-25 | 武汉生之源生物科技有限公司 | 一种癌胚抗原磁微粒化学发光免疫分析检测试剂盒及其检测方法 |
| WO2024180169A1 (en) * | 2023-03-02 | 2024-09-06 | Carcimun Biotech Gmbh | Means and methods for diagnosing cancer and/or an acute inflammatory disease |
-
1990
- 1990-12-28 JP JP41854490A patent/JP2931111B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103472229A (zh) * | 2013-09-17 | 2013-12-25 | 武汉生之源生物科技有限公司 | 一种癌胚抗原磁微粒化学发光免疫分析检测试剂盒及其检测方法 |
| WO2024180169A1 (en) * | 2023-03-02 | 2024-09-06 | Carcimun Biotech Gmbh | Means and methods for diagnosing cancer and/or an acute inflammatory disease |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2931111B2 (ja) | 1999-08-09 |
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